JP2024520861A - 遺伝性ヘモクロマトーシスの治療のためのヘプシジン模倣体 - Google Patents

Abstract

本開示は、遺伝性ヘモクロマトーシスなどの鉄過剰症の治療及び／又は予防のための方法を提供する。【選択図】図１

Description

関連出願
本出願は、２０２１年６月１４日に出願された米国仮特許出願第６３／２１０，４５３号、２０２１年１０月４日に出願された米国仮特許出願第６３／２５２，００１号、及び２０２２年６月７日に出願された米国仮特許出願第６３／３４９，８４１号に対する優先権を主張し、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。

配列表
本出願は、ＥＦＳ－Ｗｅｂを介して電子的に出願されており、．ｔｘｔ形式の電子的に提出された配列表を含む。．ｔｘｔファイルには、２０２２年６月１３日に作成され、２４キロバイトのサイズであるＰＲＴＨ＿０７０＿０２ＷＯ＿ＳＴ２５．ｔｘｔという名称の配列表が含まれる。この．ｔｘｔファイルに含まれる配列表は、本明細書の一部であり、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

本開示は、とりわけ、遺伝性ヘモクロマトーシスなどの鉄過剰症の治療及び／又は予防のための方法に関する。

鉄は、細胞分裂から酸素輸送までの多くの細胞及び生物の活動において重要な役割を果たしている（例えば、Ｃａｓｕ， Ｃ．ｅｔ ａｌ．， Ｂｌｏｏｄ ２０１８；１３１（１６）：１７９０－１７９４を参照）。しかし、過剰な鉄は、毒性の活性酸素種（ｒｅａｃｔｉｖｅ ｏｘｙｇｅｎ ｓｐｅｃｉｅｓ、ＲＯＳ）の形成を促進し、これらは、ＤＮＡ、タンパク質、及び脂質膜を損傷し、臓器の機能不全又は不全につながる可能性があり、ヒト及び他の脊椎動物は、鉄の吸収及び臓器分布を最適化するための調節系を進化させてきた。しかし、残念なことに、鉄恒常性のいくつかの遺伝的又は後天性の障害は、鉄の吸収又は分布を調節せず、臓器損傷を引き起こし、関連する罹患率及び死亡率を伴う、重篤な感染症又は炎症の状態を作り出す。

ヘプシジンは、血漿鉄濃度及び鉄貯蔵量に比例して主に肝臓で生成される２５アミノ酸ペプチドホルモンである。ヘプシジンは、鉄の吸収、リサイクル、及び貯蔵に関与する細胞の表面上に発現する唯一の知られている鉄排出体であるフェロポーチン－１に結合し、分解するため、鉄恒常性の主要調節因子である。

様々な疾患及び障害における鉄恒常性の中心的な役割を考慮して、鉄レベル（例えば、赤血球及び臓器中の）を調節することができる薬剤が治療薬として開発されている。しかし、例えば遺伝性ヘモクロマトーシスの治療のため、鉄恒常性を回復させるために鉄調節剤を使用する方法に対する必要性が依然として存在する。本発明は、この必要性に対処する。

本開示は、ヒト、例えば遺伝性ヘモクロマトーシスを有するヒトにおいて鉄恒常性を回復させるヘプシジン模倣体の方法、臨床的な有効投与量、及び投与レジメンを提供する。特定の実施形態では、本方法は、例えば遺伝性ヘモクロマトーシス（ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙ ｈｅｍｏｃｈｒｏｍａｔｏｓｉｓ、ＨＨ）を含む鉄過剰症及び障害などの、鉄恒常性の調節不全に関連する疾患及び障害の治療における有効性に関連する薬力学的マーカーを調節する。特定の実施形態では、本明細書に開示される投与量、投与レジメン、及び方法は、遺伝性ヘモクロマトーシス、遺伝性ヘモクロマトーシス関節症、又は遺伝性ヘモクロマトーシス関節症に関連する関節痛を治療するために使用される。

一態様では、本開示は、ヒト対象における鉄過剰症、例えばＨＨを治療する方法を提供し、本方法は、化合物２５などのヘプシジン模倣体の有効量を対象に提供することを含む。特定の実施形態では、対象は、遺伝性ヘモクロマトーシスと診断されている。特定の実施形態では、対象は、本明細書に開示される治療の前に、瀉血治療を受けているか、又は必要とする。特定の実施形態では、対象は、第１の期間に第１の有効量、及び第２の期間に第２の有効量を投与される。特定の実施形態では、対象は、第３の期間又はそれ以降の期間に、第３の有効量又はそれ以降の有効量を投与される。特定の実施形態では、第１の期間中の投与頻度と第２の期間中の投与頻度とは、同じであるか、又は異なる。特定の実施形態では、第３の期間又はそれ以降の期間中の投与頻度は、各々、第１及び第２の期間、並びに互いの投与頻度と同じであるか、又は異なる。特定の実施形態では、各期間は、独立して、約１週間、約２週間、約４週間、約１か月、約２か月、約４か月、約６か月、又は約１年を含む。特定の実施形態では、投与量及び又は投与頻度は、本明細書に開示されるパラメータを達成するように、治療期間後の対象の血清鉄及び／又はＴＳＡＴ飽和レベルを試験した後に変更される。

関連する態様では、本開示は、ヒト対象において遺伝性ヘモクロマトーシス関節症又は遺伝性ヘモクロマトーシス関節症に関連する関節痛を治療する方法を提供し、本方法は、有効量のヘプシジン模倣体を対象に投与することを含む。特定の実施形態では、有効量は、約５ｍｇ～約４０ｍｇの範囲の用量を含み、任意選択で、対象は、治療過程にわたって異なる期間中に異なる用量を投与される。いくつかの実施形態では、ヘプシジン模倣体は、化合物２５である。特定の実施形態では、有効用量は、治療された患者のＴＳＡＴ％が４５％以下又は４０％以下に低減される結果をもたらす用量である。

本明細書に開示される方法の特定の実施形態では、ヘプシジン模倣体の有効量は、治療過程中の少なくとも一部の期間で、約１０ｍｇ～約４０ｍｇである。特定の実施形態では、ヘプシジン模倣体の有効量は、治療過程中の少なくとも一部の期間に、１週間に約１回又は１週間に約２回対象に投与される。いくつかの実施形態では、対象は、治療過程中の少なくとも一部の期間に、１週間に約２回、約１０ｍｇ～約１５ｍｇ、約１５ｍｇ～約２０ｍｇ、又は約１０ｍｇ～約２０ｍｇのヘプシジン模倣体を投与され、別の実施形態では、対象は、治療過程中の少なくとも一部の期間に、１週間に約１回、約２０ｍｇ～約３０ｍｇ、約２０ｍｇ～約４０ｍｇ、又は約３０ｍｇ～約４０ｍｇのヘプシジン模倣体を投与される。特定の実施形態では、対象は、治療過程中の少なくとも一部の期間に、１週間に約２回、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、約９ｍｇ、約１０ｍｇ、約１１ｍｇ、約１２ｍｇ、約１３ｍｇ、約１４ｍｇ、約１５ｍｇ、約１６ｍｇ、約１７ｍｇ、約１８ｍｇ、約１９ｍｇ、約２０ｍｇ、約２１ｍｇ、約２２ｍｇ、約２３ｍｇ、約２４ｍｇ、又は約２５ｍｇのヘプシジン模倣体を投与される。特定の実施形態では、対象は、治療過程中の少なくとも一部の期間に、１週間に約２回、約１５ｍｇ、約１６ｍｇ、約１７ｍｇ、約１８ｍｇ、約１９ｍｇ、約２０ｍｇ、約２１ｍｇ、約２２ｍｇ、約２３ｍｇ、約２４ｍｇ、約２５ｍｇ、約２６ｍｇ、約２７ｍｇ、約２８ｍｇ、約２９ｍｇ、約３０ｍｇ、約３１ｍｇ、約３２ｍｇ、約３３ｍｇ、約３４ｍｇ、約３５ｍｇ、約３６ｍｇ、約３７ｍｇ、約３８ｍｇ、約３９ｍｇ、約４０ｍｇ、約４１ｍｇ、約４２ｍｇ、約４３ｍｇ、約４４ｍｇ、又は約４５ｍｇのヘプシジン模倣体を投与される。特定の実施形態では、ヘプシジン模倣体は、皮下投与される。

本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態では、本方法は、対象のＴＳＡＴレベルが、約５０％未満のＴＳＡＴ（％）、又は約４５％未満のＴＳＡＴ（％）、又は約４０％未満のＴＳＡＴ（％）、又は３５％未満のＴＳＡＴ、又は３０％未満のＴＳＡＴに低減される結果をもたらす。いくつかの実施形態では、本方法は、対象の血清鉄レベルが約１５０ｕｇ／ｄＬ未満に低減されることをもたらす。いくつかの実施形態では、本方法は、対象の肝鉄濃度が実質的に維持される、例えば著しく変化しないという結果をもたらす。いくつかの実施形態では、本方法は、対象の血清フェリチン及び血清トランスフェリンのレベル又は濃度が実質的に維持される、例えば著しく変化しないという結果をもたらす。いくつかの実施形態では、本方法は、心理的転帰及び／又は身体的転帰が改善された対象をもたらす。特定の実施形態では、対象は、治療前に少なくとも６か月間、任意選択で１か月当たり０．２５回～１回の瀉血の瀉血頻度で、瀉血を受け、特定の実施形態では、治療中に、対象は、任意選択で１か月当たり０．１回未満、０．０５回未満、又は瀉血なしの瀉血頻度で、実質的により少ない瀉血を必要としたか、又は瀉血を必要としなかった。開示される方法の特定の実施形態では、対象は、本明細書に開示される治療方法の過程中に、低減された瀉血治療を必要とするか、又は瀉血治療を必要としない。例えば、本明細書に開示される治療過程を受けている対象は、本明細書に開示される治療過程にわたって、１か月当たりに瀉血を必要としなくてもよく、又は１か月当たりに１回以下の瀉血を必要としてもよい。特定の実施形態では、本明細書に開示される治療過程を受けている対象は、本開示によるヘプシジン模倣体を用いた治療の前に受けていたものよりも少ない瀉血を必要とし得る。特定の実施形態では、本開示による治療は、１か月当たりの瀉血数の少なくとも２５％、少なくとも５０％、又は少なくとも７５％の低減をもたらす。特定の実施形態では、本明細書に開示される治療過程は、少なくとも１２週間、少なくとも２４週間、少なくとも６か月、少なくとも１年間、少なくとも２年間、少なくとも５年間、又はそれ以上であってもよい。

本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態では、ヘプシジン模倣体は、本明細書に開示される式Ｉ～ＶＩＩＩのいずれか１つのペプチドを含む。特定の実施形態では、ペプチドは、以下の配列又は構造のうちの１つを含むか、又はそれからなる：
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＩＣＩＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣ－ＮＨ_２（化合物１、配列番号１）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物２、配列番号２）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＥＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物３、配列番号３）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＫＧＷＡＣＫ－ＮＨ_２（化合物４、配列番号４）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫＫ－ＮＨ_２（化合物５、配列番号５）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＶＣＨＲＰＫＧＣＹＲＲＶＣＲ－ＮＨ_２（化合物６、配列番号６）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ（Ｋ（ＰＥＧ８））ＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物７、配列番号７）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ（Ｋ（ＰＥＧ８））ＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物８、配列番号８）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＩＣＩＦＧＰＲＳ（Ｋ（ＰＥＧ８））ＧＷＶＣ－ＮＨ_２（化合物９、配列番号９）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＩＣＩＦＧＰＲＳ（Ｋ（ＰＥＧ４））ＧＷＶＣ－ＮＨ_２（化合物１０、配列番号１０）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＲＧＷＶＣ（Ｋ（ＰＥＧ８））－ＮＨ_２（化合物１１、配列番号１１）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＲＧＷＶＣ（Ｋ（ＰＥＧ４））－ＮＨ_２（化合物１２、配列番号１２）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＲＧＷＶＣ（Ｋ（ＰＥＧ２））－ＮＨ_２（化合物１３、配列番号１３）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ（Ｋ（Ｐａｌｍ））ＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物１４、配列番号１４）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ）Ｋ（Ｐａｌｍ））ＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物１５、配列番号１５）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰ（Ｋ（Ｐａｌｍ））ＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物１６、配列番号１６）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳ（Ｋ（Ｐａｌｍ））ＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物１７、配列番号１７）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣ（Ｋ（Ｐａｌｍ））ＮＨ_２（化合物１８、配列番号１８）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））ＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物１９、配列番号１９）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））ＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物２０、配列番号２０）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））ＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物２１、配列番号２１）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））ＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物２２、配列番号２２）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））－ＮＨ_２（化合物２３、配列番号２３）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣ（Ｋ（ＰＥＧ８））－ＮＨ_２（化合物２４、配列番号２４）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＦＥＰＲＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物２５、配列番号２５）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ－Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ）－ＰＲＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物２６、配列番号２６）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物２７、配列番号２７）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＳＫＧＷＥＣＫ－ＮＨ_２（化合物２８、配列番号２８）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物２９、配列番号２９）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＣＫ－ＮＨ_２（化合物３０、配列番号３０）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫＧＣＫ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））－ＮＨ_２（化合物３１、配列番号３１）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ－Ｋ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ）－ＦＥＰＲＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物３２、配列番号３２）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫ（Ｆ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ））ＰＲＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物３３、配列番号３３）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰ（Ｋ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ））ＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物３４、配列番号３４）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳ（Ｋ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ））ＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物３５、配列番号３５）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫ（Ｋ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ））ＣＫ－ＮＨ_２（化合物３６、配列番号３６）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫＧＣ（Ｋ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ））Ｋ－ＮＨ_２（化合物３７、配列番号３７）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫＧＣ（Ｋ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ））－ＮＨ_２（化合物３８、配列番号３８）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ（Ｋ（ＰＥＧ１１－Ｐａｌｍ））ＰＲＳＫ［Ｓａｒ］ＣＫ－ＮＨ_２（化合物３９、配列番号３９）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ－ＮＨ_２（化合物４０、配列番号４０）、
Ｈｙ－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ－ＮＨ_２（化合物４１、配列番号４１）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦ－ＮＨ_２（化合物４２、配列番号４２）、
Ｈｙ－ＤＴＨＦＰＣＩＩＫＦ－ＮＨ_２（化合物４３、配列番号４３）、
イソ吉草酸－ＤＴＫＦＰＣＩＩＦ－ＮＨ_２（化合物４４、配列番号４４）、又は
Ｈｙ－ＤＴＫＦＰＣＩＩＦ－ＮＨ_２（化合物４５、配列番号４５）。

本明細書に開示される方法のいずれかの特定の実施形態では、ＴＳＡＴ％レベル及び／又は血清鉄レベルの低減は、薬剤を用いた治療後の最大の低減であり、他の実施形態では、ＴＳＡＴ％レベル及び／又は血清鉄レベルの低減は、対象への投与後の薬剤のトラフレベルで観察される低減である。いくつかの実施形態では、ＴＳＡＴ％は、試験された時点で、約４５％以下、約４０％以下、約３０％以下、約２０％以下、約１５％以下、約１０％以下、約１０％～約４０％、約５％～約２０％、又は約１０％～約２０％に低減される。いくつかの実施形態では、血清鉄は、試験された時点で、約１５０マイクログラム／ｄＬ以下、約１００マイクログラム／ｄＬ以下、約７５マイクログラム／ｄＬ以下、約６００マイクログラム／ｄＬ以下に低減される。いくつかの実施形態では、ＴＳＡＴ％レベル及び／又は血清鉄レベルは、正常で健康なボランティアで観察されるレベルの９０％未満、８０％未満、７０％未満、６０％未満、又は５０％未満のレベルに低減される。

本明細書に開示される方法のいずれかの様々な実施形態では、例えば化合物２５などのヘプシジン模倣ペプチドなどの薬剤は、塩形態として、及び／又は医薬組成物で対象に提供され、特定の実施形態では、非経口的に、例えば皮下に提供される。

５ｍｇ／ｋｇの化合物２５を用いたＨＨマウスの治療後の様々な組織における血清鉄レベル、血清フェリチンレベル、及び総鉄を示すグラフを提供する。 低鉄食（図２Ａ）又は正常鉄食（図２Ｂ）後の化合物２５を用いた治療後のＨＨマウスの肝臓における非ヘム鉄レベルを示すグラフである。 ヘプシジン模倣体を用いた遺伝性ヘモクロマトーシス（ＨＨ）の治療のための第２相研究デザインの概要を示す。 瀉血頻度における化合物２５を用いた治療の効果を示す。図４Ａは、ヘプシジン模倣体を用いた治療の前及び後のＨＨ患者の瀉血治療を示すチャートである。図４Ｂは、化合物２５を用いた治療後の瀉血治療の低減を示すグラフである。 ヘプシジン模倣体を用いた治療後の経時的なＨＨ患者におけるＴＳＡＴレベルを示すグラフを提供する。図５Ａは、個々の患者の治療過程にわたるＴＳＡＴレベルを示す。図５Ｂについて、左のグラフでは、ベースラインのトランスフェリン飽和度（％）は４５．００００であり、化合物２５後は３０．３９４８である。右のグラフでは、ベースラインのトランスフェリン飽和度（％）は４５．００００であり、化合物２５後は３６．２５００である。 治療前のＨＨ患者における血清鉄レベル及びヘプシジン模倣体を用いた治療後の平均血清鉄レベルを示すグラフを提供する。右のグラフでは、ベースラインは２５．５４５４であり、化合物２５後は１７．６５９１である。 ヘプシジン模倣体を用いた治療後の血清鉄及びＴＳＡＴの用量依存的低減及び濃度依存的低減を示すグラフを提供する。 ヘプシジン模倣体を用いた治療前及び治療後のＨＨ患者における血清フェリチンレベル及び血清トランスフェリンレベルを示すグラフを提供する。左上のグラフでは、ベースラインは８２．３４３１であり、化合物２５後は８５．０１２６である。左下のグラフでは、ベースラインは８２．３４３１であり、化合物２５後は１１４．４７７５である。右上のグラフでは、ベースラインは２．２８６９であり、化合物２５後は２．４５３１である。右下のグラフでは、ベースラインは２．２８６９であり、化合物２５後は２．４１６９である。 ヘプシジン模倣体を用いた治療前及び治療後のＨＨ患者における肝鉄含量を示すグラフを提供する。 ヘプシジン模倣体を用いた治療後のＨＨ患者報告結果の概要である。日常役割機能（精神）及び日常役割機能（身体）で最も内側の点はスクリーニングに対応し、日常役割機能（精神）及び日常役割機能（身体）で最も外側の点は化合物２５治療後に対応する。 各対象に投与される化合物２５の投与量を示すダイアグラムである。 化合物２５の指示用量の投与後６日間にわたるトランスフェリン飽和度（％）を示すグラフである。 化合物２５のＨＨ患者への投与のベースライン及び２４週間後、並びにβ－サラセミア輸血依存性二次鉄過剰患者におけるベースライン及び４週間後及び８週間後のＴＳＴ（％）及びＭＣＨＣ（ｇ／ｄＬ）を示すグラフを含む。 化合物２５を用いた６か月間の治療後のＨＨ患者における結果を示すグラフを含む。

本開示は、遺伝性ヘモクロマトーシス（ＨＨ）などの鉄調節不全に関連する疾患及び障害の治療に有用なヘプシジン模倣体の治療有効投与量及び投与レジメンを特定する。特定の実施形態では、本明細書に開示される方法は、遺伝性ヘモクロマトーシスを治療するために化合物２５を使用して実施される。

定義及び命名法
本明細書に別段の定義がない限り、本出願で使用される科学用語及び技術用語は、当業者によって一般に理解される意味を有するものとする。概して、本明細書に記載の化学、分子生物学、細胞及びがん生物学、免疫学、微生物学、薬理学、並びにタンパク質及び核酸化学に関連して使用される命名法、並びにそれらの技術は、当技術分野でよく知られており、一般に使用されている。

本明細書で使用される場合、以下の用語は、別段の指定がない限り、それらに帰属する意味を有する。

本明細書を通して、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という単語又は「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」若しくは「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などの変型は、示された整数（若しくは構成要素）又は整数（若しくは構成要素）の群を含むことを意味するが、任意の他の整数（若しくは構成要素）又は整数（若しくは構成要素）の群も除外するものではないと理解されるであろう。

単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈が別途明確に指示しない限り、複数を含む。

「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」という用語は、「含むが、これらに限定されない（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｂｕｔ ｎｏｔ ｌｉｍｉｔｅｄ ｔｏ）」を意味するために使用される。「含む」及び「含むが、これらに限定されない」は、互換的に使用される。

「患者」、「対象」、及び「個体」という用語は、互換的に使用され得、ヒト又は非ヒト動物のいずれかを指し得る。これらの用語には、ヒト、霊長類、家畜動物（例えば、ウシ、ブタ）、コンパニオン動物（例えば、イヌ、ネコ）、及び齧歯類（例えば、マウス及びラット）などの哺乳類が含まれる。「哺乳類」という用語は、ヒト、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ハムスター、モルモット、ウサギ、家畜などの任意の哺乳類種を指す。

「ペプチド」という用語は、本明細書で使用される場合、ペプチド結合によって一緒に結合された２つ以上のアミノ酸の配列を広範に指す。この用語が、特定の長さのアミノ酸のポリマーを暗示するものでもなければ、ポリペプチドが組換え技術、化学合成若しくは酵素合成を使用して生成されるか、又は天然に存在するかどうかを意味する又は区別するようにも意図されていないことを理解されたい。

「ヘプシジン模倣体」という用語は、本明細書で使用される場合、ヘプシジン又はその機能的領域と共通する１つ以上の構造的特徴及び／又は機能的活性を含むペプチド単量体及びペプチド二量体を広範に指す。特定の実施形態では、へプシジン模倣体には、ヘプシジンと実質的なアミノ酸配列同一性を共有するペプチド、例えば、野生型ヘプシジン、例えばヒトヘプシジンのアミノ酸配列と比較して、１つ以上のアミノ酸の挿入、欠失、又は置換を含むペプチドが含まれる。特定の実施形態では、へプシジン模倣体は、例えば、別の化合物へのコンジュゲートなどの１つ以上の追加の修飾を含む。本明細書に開示される任意のペプチド単量体又はペプチド二量体は、「ヘプシジン模倣体」という用語に包含される。いくつかの実施形態では、ヘプシジン模倣体は、ヘプシジンの１つ以上の機能的活性を有する。

「アミノ酸」又は「任意のアミノ酸」という用語は、本明細書で使用される場合、天然に存在するアミノ酸（例えば、ａ－アミノ酸）、非天然（ｕｎｎａｔｕｒａｌ）アミノ酸、修飾アミノ酸、及び非天然（ｎｏｎ－ｎａｔｕｒａｌ）アミノ酸を含む、ありとあらゆるアミノ酸を指す。これには、Ｄ－アミノ酸及びＬ－アミノ酸の両方が含まれる。天然アミノ酸には、自然界で見られるもの、例えば、組み合わさってペプチド鎖になり多様なタンパク質の構成要素を形成する２３個のアミノ酸などが含まれる。これらは主にＬ立体異性体であるが、細菌エンベロープ及びいくつかの抗生物質ではわずかな数のＤ－アミノ酸が発生する。「非標準」の天然アミノ酸は、ピロリシン（メタン生成生物及び他の真核生物中に見られる）、セレノシステイン（多くの非真核生物に存在し、ほとんどの真核生物にも存在する）、及びＮ－ホルミルメチオニン（細菌、ミトコンドリア及び葉緑体中の開始コドンＡＵＧによってコードされる）である。「非天然（ｕｎｎａｔｕｒａｌ）」又は「非天然（ｎｏｎ－ｎａｔｕｒａｌ）」アミノ酸は、天然に存在するか、又は化学的に合成されるかのいずれかの非タンパク質生成アミノ酸（すなわち、天然にコードされていないか、又は遺伝子コード中に見られないアミノ酸）である。１４０を超える天然アミノ酸が知られており、数千のより多くの組み合わせが可能である。「非天然（ｕｎｎａｔｕｒａｌ）」アミノ酸の例としては、β－アミノ酸（β^３及びβ^２）、ホモ－アミノ酸、プロリン及びピルビン酸誘導体、３置換アラニン誘導体、グリシン誘導体、環置換フェニルアラニン及びチロシン誘導体、直鎖状コアアミノ酸、ジアミノ酸、Ｄ－アミノ酸、並びにＮ－メチルアミノ酸が挙げられる。非天然（ｕｎｎａｔｕｒａｌ）アミノ酸又は非天然（ｎｏｎ－ｎａｔｕｒａｌ）アミノ酸には、修飾アミノ酸も含まれる。「修飾」アミノ酸には、アミノ酸には天然に存在しない基、複数の基、又は化学的部分を含むように化学修飾されたアミノ酸（例えば、天然アミノ酸）が含まれる。

当業者には明らかであるように、本明細書に開示されるペプチド配列は、左から右に向かって示されており、配列の左端がペプチドのＮ末端であり、配列の右端がペプチドのＣ末端である。本明細書に開示される配列の中には、配列のアミノ末端（Ｎ末端）に「Ｈｙ」部分、及び配列のカルボキシ末端（Ｃ末端）に「－ＯＨ」部分又は「－ＮＨ_２」部分のいずれかを組み込んだ配列がある。そのような場合、別段で示されていない限り、問題となっている配列のＮ末端における「Ｈｙ」部分は、Ｎ末端における遊離一級又は二級アミノ基の存在に対応する水素原子を指し、配列のＣ末端における「－ＯＨ」又は「－ＮＨ_２」部分は、それぞれ、Ｃ末端におけるアミド（ＣＯＮＨ_２）基の存在に対応するヒドロキシ基又はアミノ基を指す。本発明の各配列では、Ｃ末端「－ＯＨ」部分は、Ｃ末端「－ＮＨ_２」部分で置換されてもよく、その逆もまた同様である。アミノ末端又はカルボキシ末端における部分は、特にアミノ末端又はカルボキシ末端がリンカー又は別の化学的部分、例えばＰＥＧ部分に結合している状況において、結合、例えば共有結合であり得ることが更に理解される。

「ＮＨ_２」という用語は、本明細書で使用される場合、ポリペプチドのアミノ末端に存在する遊離アミノ基を指す。「ＯＨ」という用語は、本明細書で使用される場合、ペプチドのカルボキシ末端に存在する遊離カルボキシ基を指す。更に、「Ａｃ」という用語は、本明細書で使用される場合、ポリペプチドのＣ末端又はＮ末端のアシル化によるアセチル保護を指す。

「カルボキシ」という用語は、本明細書で使用される場合、－ＣＯ_２Ｈを指す。

ほとんどの場合には、本明細書で使用される天然に存在するアミノアシル残基及び天然に存在しないアミノアシル残基の名称は、“Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ ｏｆ α－Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄｓ（Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ，１９７４）”Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１４（２），（１９７５）に記載のように有機化学命名法に関するＩＵＰＡＣ委員会及び生化学命名法に関するＩＵＰＡＣ－ＩＵＢ委員会によって提案されている命名規則に従う。本明細書及び添付の特許請求の範囲で用いられるアミノ酸及びアミノアシル残基の名称及び略称がそれらの提案と異なる範囲では、それらは読者に対して明確にされるであろう。本発明を説明するのに有用ないくつかの略称は、次の表１で以下に定義される。

本明細書を通して、天然に存在するアミノ酸がそれらの完全名称（例えば、アラニン、アルギニンなど）で言及されない限り、それらは、それらの従来の３文字の略称又は単一文字の略称（例えば、アラニンの場合、Ａｌａ又はＡ、アルギニンの場合、Ａｒｇ又はＲ、など）で表される。あまり一般的ではないアミノ酸又は天然に存在しないアミノ酸の場合、それらが完全名称（例えば、サルコシン、オルニチンなど）で言及されない限り、Ｓａｒ又はＳａｒｃ（サルコシン、すなわち、Ｎ－メチルグリシン）、Ａｉｂ（α－アミノイソ酪酸）、Ｄａｂａ（２，４－ジアミノブタン酸）、Ｄａｐａ（２，３－ジアミノプロパン酸）、γ－Ｇｌｕ（γ－グルタミン酸）、ｐＧｌｕ（ピログルタミン酸）、Ｇａｂａ（γ－アミノブタン酸）、β－Ｐｒｏ（ピロリジン－３－カルボン酸）、８Ａｄｏ（８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸）、Ａｂｕ（４－アミノ酪酸）、ｂｈＰｒｏ（β－ホモ－プロリン）、ｂｈＰｈｅ（β－ホモ－Ｌ－フェニルアラニン）、ｂｈＡｓｐ（β－ホモ－アスパラギン酸］）、Ｄｐａ（β，βジフェニルアラニン）、Ｉｄａ（イミノ二酢酸）、ｈＣｙｓ（ホモシステイン）、及びｂｈＤｐａ（β－ホモ－β，β－ジフェニルアラニン）を含む、頻繁に用いられている３文字コード又は４文字コードがそれらの残基に用いられる。

更に、Ｒ１は、全ての配列において、イソ吉草酸又は同等物で置換され得る。本発明のペプチドが、酸性化合物、例えば、イソ吉草酸、イソ酪酸、吉草酸などにコンジュゲートされるいくつかの実施形態では、そのようなコンジュゲーションの存在は、酸形態で言及される。したがって、例えば、決して限定されるものではないが、イソバレロイルに言及することによってペプチドへのイソ吉草酸のコンジュゲーションを示す代わりに、いくつかの実施形態では、本出願は、そのようなコンジュゲーションをイソ吉草酸として言及してもよい。

「Ｌ－アミノ酸」という用語は、本明細書で使用される場合、ペプチドの「Ｌ」異性体形態を指し、逆に、「Ｄ－アミノ酸」という用語は、ペプチドの「Ｄ」異性体形態を指す。特定の実施形態では、本明細書に記載のアミノ酸残基は、「Ｌ」異性体形態であるが、所望の官能基がペプチドによって保持される限り、「Ｄ」異性体形態の残基を任意のＬ－アミノ酸残基に置換することができる。

別段で示されていない限り、キラル中心を有する問題となっている天然アミノ酸及び非天然アミノ酸のＬ異性体形態が言及される。適切な場合、アミノ酸のＤ異性体形態は、従来の３文字コードの前の接頭辞「Ｄ」によって従来の様式で示される（例えば、Ｄａｓｐ、（Ｄ）Ａｓｐ又はＤ－Ａｓｐ；Ｄｐｈｅ、（Ｄ）Ｐｈｅ又はＤ－Ｐｈｅ）。

「二量体」という用語は、本明細書で使用される場合、２つ以上の単量体サブユニットを含むペプチドを広範に指す。特定の二量体は、２つのＤＲＰを含む。本発明の二量体には、ホモ二量体及びヘテロ二量体が含まれる。二量体の単量体サブユニットは、そのＣ末端又はＮ末端で連結されていてもよく、又は内部アミノ酸残基を介して連結されていてもよい。二量体の単量体サブユニットは、各々、同じ部位を介して連結されていてもよく、又は各々異なる部位（例えば、Ｃ末端、Ｎ末端、又は内部部位）を介して連結されていてもよい。

本明細書で使用される場合、本明細書に開示される特定のペプチド配列との関連において、丸括弧、例えば（＿＿）は、側鎖のコンジュゲーションを表し、角括弧、例えば［＿＿］は、非天然アミノ酸置換又はアミノ酸及びコンジュゲートされた側鎖を表す。概して、リンカーがペプチド配列のＮ末端に示される場合、それは、ペプチドが別のペプチドと二量体化され、リンカーが２つのペプチドのＮ末端に結合していることを示す。概して、リンカーがペプチド配列又は構造のＣ末端に示される場合、それは、ペプチドが別のペプチドと二量体化され、リンカーが２つのペプチドのＣ末端に結合していることを示す。

「環化」という用語は、本明細書で使用される場合、ポリペプチド分子の一部がポリペプチド分子の別の部分に連結して、例えばジスルフィド架橋又は他の類似の結合を形成することによって、閉環を形成するようになる反応を指す。

「サブユニット」という用語は、本明細書で使用される場合、結合して二量体ペプチド組成物を形成する一対のポリペプチド単量体のうちの１つを指す。

「リンカー部分」という用語は、本明細書で使用される場合、２つのペプチド単量体サブユニットを一緒に連結又は結合して二量体を形成することができる化学構造を広範に指す。

本発明の文脈での「溶媒和物」という用語は、溶質（例えば、本発明によるヘプシジン類似体又はその薬学的に許容される塩）と溶媒との間に形成される定義された化学量論の複合体を指す。この関連での溶媒は、例えば、水、エタノール、又は別の薬学的に許容される、典型的には小分子の有機種（酢酸又は乳酸などであるが、これらに限定されない）であり得る。問題となっている溶媒が水である場合、そのような溶媒和物は、通常、水和物と称される。

「薬学的に許容される塩」という用語は、本明細書で使用される場合、水溶性若しくは油溶性又は分散性であり、過度の毒性、刺激、及びアレルギー反応がなく疾患の治療に好適であり、合理的な利益／リスク比に相応し、かつそれらの意図される使用に有効である、本発明のペプチド又は化合物の塩又は双性イオン形態を表す。この塩は、化合物の最終単離及び精製中に調製することができるか、又はアミノ基を好適な酸と反応させることによって別個に調製することができる。代表的な酸付加塩としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、カンファースルホン酸塩、ジグルコン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２－ヒドロキシエタンスルホン酸塩（イセチオン酸塩）、乳酸塩、マレイン酸塩、メシレンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフチレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３－フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トリクロロ酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、リン酸塩、グルタミン酸塩、重炭酸塩、パラ－トルエンスルホン酸塩、及びウンデカン酸塩が挙げられる。また、本発明の化合物中のアミノ基は、メチル、エチル、プロピル、及びブチルの塩化物、臭化物、及びヨウ化物；硫酸ジメチル、硫酸ジエチル、硫酸ジブチル、及び硫酸ジアミル；デシル、ラウリル、ミリスチル、及びステリルの塩化物、臭化物、及びヨウ化物；並びに臭化ベンジル及び臭化フェネチルで四級化することができる。治療的に許容される付加塩を形成するために用いることができる酸の例としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸、及びリン酸などの無機酸、並びにシュウ酸、マレイン酸、コハク酸、及びクエン酸などの有機酸が挙げられる。薬学的に許容される塩は、好適には、例えば、酸付加塩及び塩基性塩から選択される塩であり得る。酸付加塩の例としては、塩化塩、クエン酸塩、及び酢酸塩が挙げられる。塩基性塩の例としては、カチオンが、ナトリウムイオン又はカリウムイオンなどのアルカリ金属カチオン、カルシウムイオン又はマグネシウムイオンなどのアルカリ土類金属カチオン、並びにＮ（Ｒ１）（Ｒ２）（Ｒ３）（Ｒ４）＋（ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、独立して、典型的には、水素、任意選択で置換されたＣ１－６アルキル、又は任意選択で置換されたＣ２－６アルケニルを表す）タイプのイオンなどの置換アンモニウムイオンから選択される塩が挙げられる。関連するＣ１－６アルキル基の例としては、メチル基、エチル基、１－プロピル基及び２－プロピル基が挙げられる。可能な関連性のあるＣ２－６アルケニル基の例としては、エテニル、１－プロペニル及び２－プロペニルが挙げられる。薬学的に許容される塩の他の例は、“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ”，１７ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａｌｆｏｎｓｏ Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ（Ｅｄ．），Ｍａｒｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，ＵＳＡ，１９８５（及びそのより最近の版）、“Ｅｎｃｙｃｌｏｐａｅｄｉａ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ”，３ｒｄ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊａｍｅｓ Ｓｗａｒｂｒｉｃｋ（Ｅｄ．），Ｉｎｆｏｒｍａ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ＵＳＡ（Ｉｎｃ．），ＮＹ，ＵＳＡ，２００７、及びＪ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．６６：２（１９７７）に記載されている。また、好適な塩に関する総説については、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ Ｕｓｅ ｂｙ Ｓｔａｈｌ ａｎｄ Ｗｅｒｍｕｔｈ（Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ，２００２）を参照されたい。他の好適な塩基塩は、非毒性塩を形成する塩基から形成される。代表的な例としては、アルミニウム塩、アルギニン塩、ベンザチン塩、カルシウム塩、コリン塩、ジエチルアミン塩、ジオールアミン塩、グリシン塩、リジン塩、マグネシウム塩、メグルミン塩、オラミン塩、カリウム塩、ナトリウム塩、トロメタミン塩、及び亜鉛塩が挙げられる。酸及び塩基のヘミ塩（Ｈｅｍｉｓａｌｔ）、例えばヘミ硫酸塩及びヘミカルシウム塩も形成され得る。

「アルキル」という用語は、直鎖状又は分枝状、非環状又は環状の、１～２４個の炭素原子を含む飽和脂肪族炭化水素を含む。代表的な飽和直鎖アルキルとしては、メチル、エチル、ｎ－プロピル、ｎ－ブチル、ｎ－ペンチル、ｎ－ヘキシルなどが挙げられるが、これらに限定されず、飽和分岐状アルキルとしては、イソプロピル、ｓｅｃ－ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、イソペンチルなどが挙げられるが、これらに限定されない。代表的な飽和環状アルキルとしては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどが挙げられるが、これらに限定されず、不飽和環状アルキルとしては、シクロペンテニル、シクロヘキセニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。

本明細書で使用される場合、「治療有効量」の本発明のペプチドアゴニストは、本明細書に記載の疾患及び障害（例えば、鉄代謝疾患）のうちのいずれかを含むが、これらに限定されない、ヘプシジン関連疾患を治療するのに十分な量のペプチドアゴニストを記載することを意図する。特定の実施形態では、治療有効量は、任意の医学的治療に適用可能な所望の利益／リスク比を達成する。

ヘプシジン模倣体の使用方法
ヘプシジンは、主要な鉄輸送体フェロポーチンを標的とし、その内部移行及びその後の分解を引き起こす。ヘプシジン調節は、細胞機能に必要な十分な鉄を提供するのに重要であるのと同時に、鉄毒性を防止するのにも重要である。遺伝性ヘモクロマトーシス（ＨＨ）では、食事からの鉄の過剰吸収は、一次鉄過剰につながる。トランスフェリンが飽和しているこれらの鉄過剰条件下で（例えば、トランスフェリン飽和度（Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ ＳＡＴｕｒａｔｉｏｎ、ＴＳＡＴ）％＞８０％）、過剰な鉄沈着は、臓器障害をもたらし得る。更に、不安定な鉄の存在は、全体的な全身鉄毒性を増加させる。本開示は、遺伝性ヘモクロマトーシスなどの鉄過剰に関連する疾患及び障害の治療のための、治療効果を有するヘプシジン模倣体を投与する方法及び使用する方法を特定する。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される方法は、調節不全鉄レベルに関連する疾患又は障害（例えば、鉄代謝の疾患又は障害、鉄過剰に関連する疾患又は障害、及び異常なヘプシジン活性又は発現に関連する疾患又は障害）の予防、阻害、又は治療に適用される。特定の実施形態では、疾患又は障害は、鉄代謝の疾患、例えば、鉄過剰症又は鉄代謝の別の障害などである。

特定の実施形態では、鉄代謝の疾患は、ヘモクロマトーシス、例えば、遺伝性ヘモクロマトーシス、ＨＦＥ変異ヘモクロマトーシス、フェロポーチン変異ヘモクロマトーシス、トランスフェリン受容体２変異ヘモクロマトーシス、ヘモジュベリン変異ヘモクロマトーシス、ヘプシジン変異ヘモクロマトーシス、若年性ヘモクロマトーシス、又は新生児ヘモクロマトーシスなどである。特定の実施形態では、疾患は、遺伝性ヘモクロマトーシス（ＨＨ）である。特定の実施形態では、疾患は、瀉血を必要とするＨＨ、例えば維持段階のＨＨである。

特定の実施形態では、疾患又は障害は、関節症に関連するＨＨ、又はＨＨ関連関節症である。慢性関節症は、ＨＨ患者の３７～８０％で発生する。これらの場合、関節痛は、疾患の早期兆候であり得、多くの場合、ＨＨの最初の診断の原因である。これは、Ｘ線及び／又はＭＲＩ撮像によって行われてもよく、しばしば、検証された関節痛及び／又は機能スコアリング計器の結果と組み合わされてもよい。特定の実施形態では、関節症は、年齢、フェリチン、及びＴＳＡＴレベルの上昇と関連し得る。ＨＨの鉄蓄積は、酸化ストレスの増加、基質代謝の乱れ、及び軟骨変性と関連している可能性があり、これは変形性関節症に類似した関節症の発症に寄与しうる。持続性関節症は、特にＨＨ患者の最大１６％が関節置換手術を受けるため、生活の質を低下させ、高い医療利用及び関連するコストをもたらす可能性がある。例えば、Ｗｈａｌｅｎ，Ｎ．“Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ Ｓａｔｕｒａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｔｈｅ Ａｒｔｈｒｏｐａｔｈｙ ｏｆ Ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙ Ｈｅｍｏｃｈｒｏｍａｔｏｓｉｓ”２０１７；Ｎｇｕｙｅｎ，Ｃ．“Ｂｏｎｅ ａｎｄ ｊｏｉｎｔ ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙ ｈｅｍｏｃｈｒｏｍａｔｏｓｉｓ：ａ ｃｒｏｓｓ－ｓｅｃｔｉｏｎａｌ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ９３ ｐａｔｉｅｎｔｓ”２０２０；Ｃａｒｒｏｌｌ，ＧＪ．“Ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙ Ｈｅｍｏｃｈｒｏｍａｔｏｓｉｓ ｉｓ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄ ｂｙ ａ ｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ ｄｅｆｉｎａｂｌｅ ａｒｔｈｒｏｐａｔｈｙ ｔｈａｔ ｃｏｒｒｅｌａｔｅ ｗｉｔｈ ｉｒｏｎ ｌｏａｄ”２０１１；Ｋａｒｉｍ，Ａ．“Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｄｉｓｒｕｐｔｅｄ ｉｒｏｎ ｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ａｒｔｈｒｏｐａｔｈｙ”２０２２；及びＢｕｒｔｏｎ，ＬＨ．“Ｓｙｓｔｅｍｉｃ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃ ｉｒｏｎ ｃｈｅｌａｔｏｒ ｒｅｄｕｃｅｓ ｃａｒｔｉｌａｇｅ ｌｅｓｉｏｎ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｉｎ ｔｈｅ Ｄｕｎｋｉｎ－Ｈａｒｔｌｅｙ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｐｒｉｍａｒｙ ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ”２０２２を参照されたい。

一態様では、本開示は、ヒト対象において、鉄過剰症、例えばＨＨ、関節症に関連するＨＨ、又はＨＨ関連関節症を治療する方法を提供し、本方法は、化合物２５などの本明細書に開示されるものを含むがこれに限定されない、ヘプシジン模倣体の有効量を対象に提供することを含む。特定の実施形態では、ヘプシジン模倣体は、皮下に提供される。特定の実施形態では、対象は、遺伝性ヘモクロマトーシスと診断されている。特定の実施形態では、対象は、本明細書に開示される治療の前に、瀉血治療を受けているか、又は必要とする。特定の実施形態では、開示される方法によるヘプシジン模倣体を用いた治療の前に、対象は、１年当たり少なくとも３回、少なくとも４回、少なくとも５回、又は少なくとも６回の瀉血治療を受けていた。特定の実施形態では、対象は、１年当たり約５回～約６回の瀉血を受けていた。特定の実施形態では、対象のＨＨは維持段階にあり、対象は、１週間当たり１回未満、例えば、１か月当たり約１回、又は２～４か月毎に約１回、瀉血によって治療されている。特定の実施形態では、対象は、ＨＨを確認しており、１か月当たり約０．２５回～１回の瀉血頻度で、本開示による治療の前の少なくとも３か月間又は少なくとも６か月間、安定的な瀉血を受けていた。特定の実施形態では、対象は、臨床的に意義のある検査所見の異常を有さず、及び／又は鉄キレート療法若しくは赤血球アフェレシス（ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔａｐｈｅｒｅｓｉｓ）を受けていない。特定の実施形態では、患者は、例えば、経時的に複数の瀉血により蓄積された針刺しに起因する静脈アクセスの問題のために、瀉血が困難である。特定の実施形態では、対象は鉄欠乏性貧血を有し、特定の実施形態では、対象は針恐怖症である。

特定の実施形態では、ヘプシジン模倣体、例えば化合物２５の有効量は、約１ｍｇ～約１００ｍｇ、又は約１０ｍｇ～約８０ｍｇである。特定の実施形態では、ヘプシジン模倣体、例えば化合物２５の有効量は、約５ｍｇ～約８０ｍｇ、又は約１０ｍｇ～約８０ｍｇである。特定の実施形態では、ヘプシジン模倣体、例えば化合物２５の有効量は、約１０ｍｇ～約４０ｍｇ、又は約５ｍｇ～約５０ｍｇである。特定の実施形態では、ヘプシジン模倣体、例えば化合物２５の有効量は、約１０ｍｇ～約４０ｍｇ、又は約５ｍｇ～約５０ｍｇである。特定の実施形態では、ヘプシジン模倣体の有効量は、１週間に約１回又は１週間に約２回対象に投与される。いくつかの実施形態では、対象は、１週間に約２回、約１０ｍｇ～約２０ｍｇ、約１０ｍｇ～約１５ｍｇ、又は約１５ｍｇ～約２０ｍｇのヘプシジン模倣体を投与され、別の実施形態では、対象は、１週間に約１回、約２０ｍｇ～約３０ｍｇ、約２０ｍｇ～約４０ｍｇ、又は約３０ｍｇ～約４０ｍｇのヘプシジン模倣体を投与される。特定の実施形態では、対象は、１週間に約２回、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、約９ｍｇ、約１０ｍｇ、約１１ｍｇ、約１２ｍｇ、約１３ｍｇ、約１４ｍｇ、約１５ｍｇ、約１６ｍｇ、約１７ｍｇ、約１８ｍｇ、約１９ｍｇ、約２０ｍｇ、約２１ｍｇ、約２２ｍｇ、約２３ｍｇ、約２４ｍｇ、又は約２５ｍｇのヘプシジン模倣体を投与される。特定の実施形態では、対象は、１週間に約２回、約１５ｍｇ、約１６ｍｇ、約１７ｍｇ、約１８ｍｇ、約１９ｍｇ、約２０ｍｇ、約２１ｍｇ、約２２ｍｇ、約２３ｍｇ、約２４ｍｇ、約２５ｍｇ、約２６ｍｇ、約２７ｍｇ、約２８ｍｇ、約２９ｍｇ、約３０ｍｇ、約３１ｍｇ、約３２ｍｇ、約３３ｍｇ、約３４ｍｇ、約３５ｍｇ、約３６ｍｇ、約３７ｍｇ、約３８ｍｇ、約３９ｍｇ、約４０ｍｇ、約４１ｍｇ、約４２ｍｇ、約４３ｍｇ、約４４ｍｇ、又は約４５ｍｇのヘプシジン模倣体を投与される。特定の実施形態では、ヘプシジン模倣体は、皮下投与される。特定の実施形態では、ヘプシジン模倣体は、化合物２５である。特定の実施形態では、対象に投与される量は、治療過程にわたって変化し得る。

実施形態では、本方法は、対象におけるトランスフェリン飽和度（ＴＳＡＴ）レベル及び／又は血清鉄レベル及び／又は平均赤血球ヘモグロビン濃度（ｍｅａｎ ｃｏｒｐｕｓｃｕｌａｒ ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ、ＭＣＨＣ）レベルを、少なくとも３０％、少なくとも４０％、又は少なくとも６０％低減させる。いくつかの実施形態では、有効量は、対象のトランスフェリン飽和度（ＴＳＡＴ）レベル及び／又は血清鉄を、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、又は少なくとも９０％低減させる。特定の実施形態では、ＴＳＡＴ％及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルは、約４０％～約９０％、約５０％～約９０％、又は５０％～７５％低減される。いくつかの実施形態では、ＴＳＡＴ％レベル及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルは、同じ哺乳類タイプの正常で健康なボランティアで観察されるレベルの９０％未満、８０％未満、７０％未満、６０％未満、又は５０％未満のレベルに低減される。特定の実施形態では、ＴＳＡＴ％レベル及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルの低減は、薬剤を用いた治療後の対象で観察される最大の低減であり、他の実施形態では、ＴＳＡＴ％レベル及び／又は血清鉄レベルの低減は、対象への投与後の薬剤のトラフレベルで観察される低減である。いくつかの実施形態では、ＴＳＡＴ％レベル及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルの低減は、例えば複数の対象において、観察される平均低減である。

いくつかの実施形態では、対象のＴＳＡＴレベルは、６０％以下のＴＳＡＴ、５０％以下のＴＳＡＴ、４５％以下のＴＳＡＴ、４０％以下のＴＳＡＴ、３０％以下のＴＳＡＴ、２０％以下のＴＳＡＴ、又は１０％以下のＴＳＡＴに低減される。 特定の実施形態では、対象のＴＳＡＴレベルは、４５％以下のＴＳＡＴ、又は４０％以下のＴＳＡＴに低減される。 特定の実施形態では、対象のＴＳＡＴレベルは、４０％以下のＴＳＡＴ、又は３５％以下のＴＳＡＴに低減される。 特定の実施形態では、ＴＳＡＴレベルは、約２０％のＴＳＡＴ～約５０％のＴＳＡＴ、例えば、約２５％のＴＳＡＴ～約４０％のＴＳＡＴに低減される。特定の実施形態では、ＴＳＡＴ％及び／又は血清鉄レベルは、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも４０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、又は少なくとも９０％低減される。特定の実施形態では、ＴＳＡＴ％値は、約０％～約６０％、約０％～約４０％、約１０％～約４０％、約１０％～約３０％、約１０％～約２０％、約２０％～約６０％、約２０％～約４０％、又は約２０％～約３０％に低減される。いくつかの実施形態では、ＴＳＡＴ％は、試験された時点で、５０％以下のＴＳＡＴ、４５％以下のＴＳＡＴ、４０％以下のＴＳＡＴ、３５％以下のＴＳＡＴ、３０％以下のＴＳＡＴ、２０％以下のＴＳＡＴ、１５％以下のＴＳＡＴ、１０％以下のＴＳＡＴ、約１０％のＴＳＡＴ～約４５％のＴＳＡＴ、約５％のＴＳＡＴ～約２０％のＴＳＡＴ、又は約１０％のＴＳＡＴ～約２０％のＴＳＡＴに低減される。いくつかの実施形態では、ＴＳＡＴ％レベル及び／又は血清鉄レベルは、同じ哺乳類タイプの正常で健康なボランティアで観察されるレベルの９０％未満、８０％未満、７０％未満、６０％未満、又は５０％未満のレベルに低減される。

特定の実施形態では、血清鉄レベルは、約０ｕＭ～約３０ｕＭ、約０ｕＭ～約５ｕＭ、約０ｕＭ～約２０ｕＭ、約０ｕＭ～約１５ｕＭ、約０ｕＭ～約１０ｕＭ、又は約０ｕＭ～約５ｕＭに低減される。特定の実施形態では、対象の血清鉄レベルは、２０ｕｍｏｌ／Ｌ以下、１８ｕｍｏｌ／Ｌ以下、１６ｕｍｏｌ／Ｌ以下、１４ｕｍｏｌ／Ｌ以下、１２ｕｍｏｌ／Ｌ以下、１０ｕｍｏｌ／Ｌ以下、８ｕｍｏｌ／Ｌ以下、６ｕｍｏｌ／Ｌ以下、又は４ｕｍｏｌ／Ｌ以下に低減される。 いくつかの実施形態では、対象の血清鉄レベルは、約２ｕｍｏｌ／Ｌ～約１００ｕｍｏｌ／Ｌ、例えば、２～約１０ｕｍｏｌ／Ｌ、又は約１０ｕｍｏｌ／Ｌ～約５０ｕｍｏｌ／Ｌ、又は約１０ｕｍｏｌ／Ｌ～約３０ｕｍｏｌ／Ｌに低減される。いくつかの実施形態では、対象の血清鉄レベルは、約２ｕｍｏｌ／Ｌ～約１００ｕｍｏｌ／Ｌ、例えば、２～約１０ｕｍｏｌ／Ｌ、又は約１０ｕｍｏｌ／Ｌ～約５０ｕｍｏｌ／Ｌ、又は約１０ｕｍｏｌ／Ｌ～約３０ｕｍｏｌ／Ｌに低減される。いくつかの実施形態では、対象の血清鉄レベルは、約５０ｍｃｇ／ｄＬ～約２００ｍｃｇ／ｄＬ、又は約６０ｍｃｇ／ｄＬ～約１７０ｍｃｇ／ｄＬに低減される。特定の実施形態では、血清鉄レベルは、約１５０ｕｇ／ｄＬ未満、約１００ｕｇ／ｄＬ未満、又は約７５ｕｇ／ｄＬ未満に低減される。

いくつかの実施形態では、対象のＭＣＨＣレベルは、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも４０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、又は少なくとも９０％低減される。特定の実施形態では、ＭＣＨＣ値（ｇ／ｄＬ）は、約３５未満、約３４未満、約３３未満、約３２未満、約３１未満、約３０未満、又は約２９未満に低減される。

実施形態では、本方法は、対象におけるトランスフェリン飽和度（ＴＳＡＴ）レベル及び／又は血清鉄及び／又はＭＣＨＣレベルを、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、又は少なくとも６０％低減する。いくつかの実施形態では、有効量は、対象のトランスフェリン飽和度（ＴＳＡＴ）レベル及び／又は血清鉄及び／又はＭＣＨＣレベルを、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、又は少なくとも９０％低減する。特定の実施形態では、ＴＳＡＴ％及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルは、約４０％～約９０％、約５０％～約９０％、又は５０％～７５％低減される。いくつかの実施形態では、ＴＳＡＴ％レベル及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルは、同じ哺乳類タイプの正常で健康なボランティアで観察されるレベルの９０％未満、８０％未満、７０％未満、６０％未満、又は５０％未満のレベルに低減される。特定の実施形態では、ＴＳＡＴ％レベル及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルの低減は、薬剤を用いた治療後の対象で観察される最大の低減であり、他の実施形態では、ＴＳＡＴ％レベル及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルの低減の低減は、対象への投与後の薬剤のトラフレベルで観察される低減である。いくつかの実施形態では、ＴＳＡＴ％レベル及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルの低減は、例えば複数の対象において、観察される平均低減である。

いくつかの実施形態では、ＴＳＡＴ％レベル及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルは、同じ哺乳類タイプの正常で健康なボランティアで観察されるレベルの２００％未満、１５０％未満、１００Ｔ未満、９０％未満、８０％未満、７０％未満、６０％未満、又は５０％未満のレベルに低減される。

特定の実施形態では、ヘプシジン模倣体、例えば化合物２５を用いた治療後、ＨＨ患者は、４５％以下若しくは４０％以下のＴＳＡＴレベル、１５０ｕｇ／ｄＬ未満、１００ｕｇ／ｄＬ未満、若しくは７５ｕｇ／ｄＬ未満の血清鉄レベル、及び／又は３５ｇ／ｄＬ未満若しくは３０ｇ／ｄＬ未満のＭＣＨＣレベルを呈する。特定の実施形態では、これらのレベルは、ヘプシジン模倣体のトラフ濃度で、例えば最終投与から約７日後に生じる。

特定の実施形態では、対象のトランスフェリン飽和度（ＴＳＡＴ）レベル及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルの低減は、ヘプシジン模倣体の投与後、少なくとも１日間、少なくとも２日間、少なくとも３日間、少なくとも４日間、少なくとも５日間、少なくとも６日間、又は少なくとも１週間発生する。特定の実施形態では、対象は、例えば単回用量として又はある期間にわたって、１週間に約２回、又は１週間に約１回、ヘプシジン模倣体を提供される。特定の実施形態では、対象のトランスフェリン飽和度（ＴＳＡＴ）レベル及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルの低減は、投与後から少なくとも１日間、少なくとも２日間、少なくとも３日間、又は少なくとも４日間、少なくとも５０％、又は少なくとも６０％、又は少なくとも８０％である。特定の実施形態では、ＴＳＡＴ及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣの低減は、治療過程にわたって維持され、治療過程は、例えば、少なくとも２か月間、少なくとも４か月間、少なくとも６か月間、少なくとも１年間、少なくとも２年間、少なくとも３年間又はそれ以上で、１週間に１回又は１週間に２回であってもよい。特定の実施形態では、対象に対する投与レジメンは、治療過程全体を通して変化し得るが、特定の実施形態では、ヘプシジン模倣体（例えば、化合物２５）の投与は、治療過程にわたって１週間に約１回又は１週間に約２回起こり、投与量は、１投与当たり約５ｍｇ～約４０ｍｇ、又は約１０ｍｇ～約４０ｍｇである。特定の実施形態では、対象は、治療過程の異なる期間の間に、異なる投与量（同じ頻度又は異なる頻度で）、又は異なる頻度で同じ投与量を投与されるが、特定の実施形態では、治療過程全体を通しての頻度は、１週間当たり約１回又は２回であり、投与される各投与量は、約５ｍｇ～約４０ｍｇの範囲内である。いくつかの実施形態では、薬剤は、本明細書に開示されるヘプシジン模倣ペプチド、例えば、式Ｉ～ＶＩＩＩのうちのいずれか１つ又は化合物１～３４のうちのいずれか（例えば化合物２５）のペプチドである。特定の実施形態では、対象のトランスフェリン飽和度（ＴＳＡＴ）レベル及び／又は血清鉄レベルの低減は、少なくとも１日間で、少なくとも６０％である。

特定の実施形態では、対象は、開示される方法に従って、ヘプシジン模倣体、例えば化合物２５を用いた治療後に、より少ない瀉血を必要とする。いくつかの実施形態では、対象は、本開示による治療中に、１か月当たり０．１回未満の瀉血、又は１か月当たり０．０５回未満の瀉血を必要とする。

一実施形態では、本方法は、ＨＨを有する対象を治療することを含み、治療前に、対象は、有効量のヘプシジン模倣体、例えば化合物２５を対象に投与することによって、少なくとも６か月間、１か月当たり０．２５回～１．０回の安定的な瀉血頻度にある。特定の実施形態では、対象は、約５～約２０ｍｇ（例えば、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ又は約２０ｍｇ）のヘプシジン模倣体を１週間に２回投与され、及び／又は約１０～約４０ｍｇ（例えば、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ又は約４０ｍｇ）のヘプシジン模倣体を１週間に１回投与される。特定の実施形態では、対象は、異なる期間の間に異なる頻度で異なる投与量を投与される。特定の実施形態では、対象は、ヘプシジン模倣体を、少なくとも１か月間、少なくとも２か月間、少なくとも４か月間、少なくとも６か月間、又は少なくとも１年間投与される。特定の実施形態では、対象の瀉血頻度は、治療過程にわたって、１か月当たり０．１回未満の瀉血、又は１か月当たり０．０５回未満の瀉血まで低減される。

特定の実施形態では、対象は、例えばＸ線、ＭＲＩ、関節痛、及び／又は機能スコアリング計器の使用などの、例えば当技術分野で利用可能な方法によって決定される、治療後の改善された関節症を有する。

特定の実施形態では、対象は、治療後に、低減された酸化ストレス、低減された乱れた基質代謝、及び／又は低減された軟骨変性を有する。

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法は、低減された循環トランスフェリン飽和度（ＴＳＡＴ）及び／若しくは低減された毒性非トランスフェリン結合鉄（ｎｏｎ－ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ ｂｏｕｎｄ ｉｒｏｎ、ＮＴＢＩ）、並びに／又は臓器、例えば肝臓、膵臓、心臓及び骨などにおける低減された鉄蓄積を有する対象をもたらす。

治療しない場合、鉄過剰は、肝腫大、糖尿病、皮膚の色素過剰、心筋症、拡張機能障害、心不全、肝硬変などを引き起こす可能性がある。特定の実施形態では、本明細書に開示される治療方法は、ＨＨなどの鉄過剰に関連するこれらの症状又は病態のいずれかを低減、軽減、又は改善する。

特定の実施形態では、本方法は、ヘプシジン模倣体を用いた治療の前及び／又は後の対象におけるＴＳＡＴレベル及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルを決定することを更に含む。特定の実施形態では、対象は、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、又は少なくとも８０％のＴＳＡＴ及び／又は血清鉄及び／又はＭＣＨＣの低減を有し、薬剤を提供される。特定の実施形態では、本方法は、対象に薬剤を提供する前及び／又は後の対象におけるＴＳＡＴ％レベルを測定することを含み、いくつかの実施形態では、本方法は、追加の薬剤を対象に提供して、低減されたＴＳＡＴ％レベル、例えば、４５％以下のＴＳＡＴ又は４０％以下のＴＳＡＴを達成又は維持することを含む。特定の実施形態では、薬剤は、本明細書に開示されるもののうちのいずれかであり、例えば、式Ｉ～ＶＩＩＩのうちのいずれか１つ又は化合物１～３４のうちのいずれか（例えば化合物２５）のペプチドなどのプシジン模倣ペプチドである。

いくつかの実施形態では、本方法は、ヘプシジン模倣体を対象に投与する前及び後の対象におけるＴＳＡＴ％及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルを決定することと、次いで、対象のＴＳＡＴ％及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルが、ヘプシジン模倣体の投与後に所望のレベルに低減されたかどうかを決定することとを含む。いくつかの実施形態では、対象は、ＴＳＡＴ％及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルが所望のレベルに低減されるまで、増加する量のヘプシジン模倣体を与えられる。いくつかの実施形態では、対象は、治療過程にわたって（及び潜在的に異なる頻度で、例えば、１週間に１回及び／又は１週間に２回）、複数の異なる用量のヘプシジン模倣体を与えられ、ＴＳＡＴ％及び／又は血清鉄レベルを所望のレベルに低減するために必要な最小又は適切な用量及び／又は濃度を特定するために、並びに／又は、対象のＴＳＡＴ％及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルを所望のレベルに維持するためには対象をどの程度の頻度で治療すべきかを特定するために、対象のＴＳＡＴ％及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルは、治療過程中の様々な時点で監視される。特定の実施形態では、本方法は、ヘプシジン模倣体を対象に投与する前及び／又は後の対象におけるＴＳＡＴ％レベルを測定することを含み、いくつかの実施形態では、本方法は、追加のヘプシジン模倣体を対象に提供して、低減されたＴＳＡＴ％レベル、例えば、４５％以下のＴＳＡＴを達成又は維持することを含む。特定の実施形態では、ヘプシジン模倣体は、式Ｉ～ＶＩＩＩのうちのいずれか１つ又は化合物１～３４のうちのいずれか（例えば化合物２５）のペプチドである。

特定の実施形態では、本開示は、ＨＨ、関節症に関連するＨＨ、又はＨＨ関連関節症を治療する方法を提供し、本方法は、
ａ）ＨＨ、例えば、瀉血依存性ＨＨ、関節症に関連するＨＨ、又はＨＨ関連関節症と診断された対象に、約５～約２５ｍｇ（任意選択で１０ｍｇ又は２０ｍｇ）の本明細書に開示されるヘプシジン模倣体、例えば化合物２５を皮下投与することと、
ｂ）任意選択でトラフ薬物レベルで、例えばステップａ）から約７日後、ステップａ）後の対象のＴＳＡＴ％を決定することと、
ｃ）対象のＴＳＡＴ％が、約４０％超又は約４５％超である場合、
（ｉ）対象に、増加させた量のヘプシジン模倣体を、例えば、約２０ｍｇ～約８０ｍｇ、任意選択で約２０ｍｇ又は約４０ｍｇ、約週１回又は約週２回のスケジュールで皮下投与することと、又は
（ｉｉ）対象に、同じ量又は増加させた量のヘプシジン模倣体を、例えば、約１０ｍｇ又は約２０ｍｇ又は約４０ｍｇ、増加させた投与スケジュールで、例えば約週２回、皮下投与することと、を含む。
特定の実施形態では、本方法は、対象のＴＳＡＴ％レベルを、例えば初回の毎週投与から約７日後に、監視することと、ＴＳＡＴ％が４０％超又は４５％超である場合に、用量を増加させるか又は投与頻度を増加させることによって、投与を調整することと、を含む。本方法は、対象の血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルを決定及び／又は監視することと、投与の量又は頻度をいずれか又は両方に基づいて調整することと、を更に含んでもよい。

本明細書に開示される方法のいずれかの様々な実施形態では、ＴＳＡＴ％レベル及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルは、パーセンテージで低減されるか、又は、例えば治療有効薬剤又は投与レジメンと関連付けられるために、特定のＴＳＡＴ％レベル又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベル以下に低減される。特定の実施形態では、ＴＳＡＴ％レベル及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルの低減は、一定の期間、例えば、１２時間、１日間、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、又は１週間、維持される。理解され得るように、これらのレベルのいずれかの低減パーセンテージは、例えば、ＴＳＡＴ％レベル及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルを監視して患者のための投与又は投与レジメンを決定する場合には、特定の患者における低減パーセンテージであり得、又はＴＳＡＴ％レベル及び／又は血清鉄レベル及び／又はＭＣＨＣレベルの低減パーセンテージは、所定の値（例えば、特定の患者集団に関連する、平均（ａｖｅｒａｇｅ）若しくは平均（ｍｅａｎ）ＴＳＡＴ％レベル、又は血清鉄レベル、又はＭＣＨＣレベル）と比較した低減であり得る。特定の実施形態では、ＴＳＡＴ％の低減は、正常で健康なボランティアと比較した低減である。

血清鉄は、比色分析を含む様々な方法によって測定することができる。ＴＳＡＴは、血清中の鉄が実際に占めるトランスフェリン鉄結合能のパーセンテージを表す。これは、血清鉄に１００を掛け、総鉄結合能で割って計算される（Ｃｏｙｎｅ．Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ６９：５４－５８）。

ヘプシジン模倣体
本明細書に開示される方法は、化合物２５などの本明細書に記載されるものを含むがこれらに限定されない、様々なヘプシジン模倣体を実施することができる。特定の実施形態では、薬剤は、例えば、様々な組織に鉄を一時的に隔離又は再分配すること、及び／又は食物からの鉄の更なる吸収を防止することによって、血清鉄レベルを調節する。いくつかの実施形態では、鉄隔離化合物は、鉄の排出を防止する。様々な実施形態では、薬剤は、様々な組織／臓器における血清鉄レベル及び／又は鉄の負荷若しくは分布に影響を及ぼす。本開示は、本明細書に開示される薬剤のいずれかにおける薬学的に許容される塩及び溶媒和物に更に関することが理解される。

特定の実施形態では、ヘプシジン模倣体は、以下のいずれかに記載されている。米国特許のＵＳ９，８２２，１５７及びＵＳ１０，０３０，０６１は、ヘプシジン類似体及び鉄過剰症（遺伝性ヘモクロマトーシス及び鉄負荷貧血を含む）を治療するためのそれらの使用を記載しており、ＰＣＴ出願公開のＷＯ１５２００９１６は、追加のヘプシジン類似体及び鉄過剰症を治療するためのそれらの使用を記載しており、ＰＣＴ出願公開のＷＯ１７１１７４１１は、インビボ半減期が改善された追加のヘプシジン類似体、及び鉄過剰症を治療するためのそれらの使用を記載しており、ＰＣＴ出願公開のＷＯ１８０４８９４４は、追加のヘプシジン類似体、及び対象における鉄過剰症の治療予防のためのそれらの使用、及び／又は対象における血清鉄レベルの低減を記載しており、ＰＣＴ出願公開のＷＯ１８１２８８２８は、ヘモクロマトーシスなどの鉄過剰症、サラセミアなどの鉄負荷貧血、及び非効果的又は増強された赤血球生成に関連する疾患の予防及び治療を含む、追加のヘプシジン類似体及びヘプシジン関連障害を治療するためのそれらの使用を記載しており、ＰＣＴ出願公開のＷＯ１７０６８０８９は、追加のヘプシジン類似体（フェロポーチン阻害剤）、並びにサラセミア及びヘモクロマトーシスを治療するためのそれらの使用を記載しており、又は米国特許のＵＳ９３１５５４５は、追加の新規類似体、及び鉄代謝の疾患、ベータサラセミア、ヘモクロマトーシス、鉄負荷貧血、アルコール性肝疾患、又は慢性Ｃ型肝炎を治療するためのそれらの使用を記載している。

特定の実施形態では、ヘプシジン模倣体は、式Ｉを含むか、又は式Ｉからなるペプチド：
Ｒ１－Ｘ－Ｙ－Ｒ２ （Ｉ）
又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、
式中、
Ｒ１は、水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ６－Ｃ１２アリール、Ｃ１－Ｃ２０アルカノイル、又はｐＧｌｕであり、
Ｒ２は、ＮＨ_２又はＯＨであり、
Ｘは、式ＩＩのアミノ酸配列であり、
Ｘ１－Ｘ２－Ｘ３－Ｘ４－Ｘ５－Ｘ６－Ｘ７－Ｘ８－Ｘ９－Ｘ１０ （ＩＩ）
式中、
Ｘ１は、Ａｓｐ、Ａｌａ、Ｉｄａ、ｐＧｌｕ、ｂｈＡｓｐ、Ｌｅｕ、Ｄ－Ａｓｐ、又は不存在であり、
Ｘ２は、Ｔｈｒ、Ａｌａ、又はＤ－Ｔｈｒであり、
Ｘ３は、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｄ－Ｈｉｓ、又はＬｙｓであり、
Ｘ４は、Ｐｈｅ、Ａｌａ、Ｄｐａ、又はＤ－Ｐｈｅであり、
Ｘ５は、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ｄ－Ｐｒｏ、又はｂｈＰｒｏであり、
Ｘ６は、Ｉｌｅ、Ｃｙｓ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｄ－Ｉｌｅ、又はＤ－Ｃｙｓであり、
Ｘ７は、Ｃｙｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｐｈｅ、Ｄ－Ｉｌｅ、又はＤ－Ｃｙｓであり、
Ｘ８は、Ｉｌｅ、Ａｒｇ、Ｐｈｅ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、又はＤ－Ｉｌｅであり、
Ｘ９は、Ｐｈｅ又はｂｈＰｈｅであり、
Ｘ１０は、Ｌｙｓ、Ｐｈｅ、又は不存在であり、
Ｙが不存在である場合、Ｘ７はＩｌｅであり、
Ｙは、式ＩＩＩのアミノ酸配列であり、
Ｙ１－Ｙ２－Ｙ３－Ｙ４－Ｙ５－Ｙ６－Ｙ７－Ｙ８－Ｙ９－Ｙ１０－Ｙ１１－Ｙ１２－Ｙ１３－Ｙ１４－Ｙ１５ （ＩＩＩ）
式中、
Ｙ１は、Ｇｌｙ、Ｃｙｓ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、Ｄ－Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ｓｅｒ、又は不存在であり、
Ｙ２は、Ｐｒｏ、Ａｌａ、Ｃｙｓ、Ｇｌｙ、又は不存在であり、
Ｙ３は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ａｌａ、Ｔｒｐ、又は不存在であり、
Ｙ４は、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、Ｇｌｙ、Ｔｒｐ、Ａｌａ、Ｈｉｓ、Ｔｙｒ、又は不存在であり、
Ｙ５は、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｒｇ、Ａｌａ、又は不存在であり、
Ｙ６は、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、Ｉｌｅ、Ａｌａ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、又は不存在であり、
Ｙ７は、Ｔｒｐ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、又は不存在であり、
Ｙ８は、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｇｌｙ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、Ａｓｐ、Ａｒｇ、又は不存在であり、
Ｙ９は、Ｃｙｓ、Ｔｙｒ、又は不存在であり、
Ｙ１０は、Ｍｅｔ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、又は不存在であり、
Ｙ１１は、Ａｒｇ、Ｍｅｔ、Ｃｙｓ、Ｌｙｓ、又は不存在であり、
Ｙ１２は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｌａ、又は不存在であり、
Ｙ１３は、Ａｒｇ、Ｃｙｓ、Ｌｙｓ、Ｖａｌ、又は不存在であり、
Ｙ１４は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｐｒｏ、Ｃｙｓ、Ｔｈｒ、又は不存在であり、
Ｙ１５は、Ｔｈｒ、Ａｒｇ、又は不存在であり、
式Ｉを含むペプチドは、任意選択で、Ｒ１、Ｘ、又はＹ上でＰＥＧ化され、
ペプチドのアミノ酸の側鎖は、任意選択で、親油性置換基又はポリマー部分にコンジュゲートされ、
Ｉｄａは、イミノ二酢酸であり、ｐＧｌｕは、ピログルタミン酸であり、ｂｈＡｓｐは、β－ホモアスパラギン酸であり、ｂｈＰｒｏは、β－ホモプロリンである。

特定の実施形態では、本明細書に開示されるペプチドのいずれかは、ペプチド中に存在する２つのＣｙｓアミノ酸残基間にジスルフィド結合を含み、例えば、ペプチド中の２つのシステイン残基のチオール基はジスルフィド結合を形成する。

特定の実施形態では、Ｒ１は、水素、イソ吉草酸、イソ酪酸又はアセチルである。

特定の実施形態では、Ｘは、式ＩＶのアミノ酸配列であり、
Ｘ１－Ｔｈｒ－Ｈｉｓ－Ｘ４－Ｘ５－Ｘ６－Ｘ７－Ｘ８－Ｐｈｅ－Ｘ１０（ＩＶ）
式中、
Ｘ１は、Ａｓｐ、Ｉｄａ、ｐＧｌｕ、ｂｈＡｓｐ、又は不存在であり、
Ｘ４は、Ｐｈｅ又はＤｐａであり、
Ｘ５は、Ｐｒｏ又はｂｈＰｒｏであり、
Ｘ６は、Ｉｌｅ、Ｃｙｓ、又はＡｒｇであり、
Ｘ７は、Ｃｙｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、又はＶａｌであり、
Ｘ８は、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｇｌｎ、又はＡｒｇであり、
Ｘ１０は、Ｌｙｓ又は不存在である。

特定の実施形態では、Ｘは、式Ｖのアミノ酸配列であり、
Ｘ１－Ｔｈｒ－Ｈｉｓ－Ｘ４－Ｘ５－Ｃｙｓ－Ｉｌｅ－Ｘ８－Ｐｈｅ－Ｘ１０（Ｖ）
式中、
Ｘ１は、Ａｓｐ、Ｉｄａ、ｐＧｌｕ、ｂｈＡｓｐ、又は不存在であり、
Ｘ４は、Ｐｈｅ又はＤｐａであり、
Ｘ５は、Ｐｒｏ又はｂｈＰｒｏであり、
Ｘ８は、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｇｌｎ又はＡｒｇであり、
Ｘ１０は、Ｌｙｓ又は不存在である。

特定の実施形態では、ペプチドは、式ＶＩ：
Ｒ^１－Ｘ－Ｙ－Ｒ^２ （ＶＩ）
又はその薬学的に許容される塩を含み、
式中、
Ｒ^１は、水素、イソ吉草酸、イソ酪酸、又はアセチルであり、
Ｒ^２は、ＮＨ_２又はＯＨであり、
Ｘは、式ＶＩＩのアミノ酸配列であり、
Ｘ１－Ｔｈｒ－Ｈｉｓ－Ｘ４－Ｘ５－Ｃｙｓ－Ｉｌｅ－Ｘ８－Ｐｈｅ－Ｘ１０（ＶＩＩ）
式中、
Ｘ１は、Ａｓｐ、Ｉｄａ、ｐＧｌｕ、ｂｈＡｓｐ、又は不存在であり、
Ｘ４は、Ｐｈｅ又はＤｐａであり、
Ｘ５は、Ｐｒｏ又はｂｈＰｒｏであり、
Ｘ８は、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｇｌｎ、又はＡｒｇであり、
Ｘ１０は、Ｌｙｓ又は不存在であり、
Ｙは、式ＶＩＩＩのアミノ酸配列であり、
Ｙ１－Ｐｒｏ－Ｙ３－Ｓｅｒ－Ｙ５－Ｙ６－Ｙ７－Ｙ８－Ｃｙｓ－Ｙ１０（ＶＩＩＩ）
式中、
Ｙ１は、Ｇｌｙ、Ｇｌｕ、Ｖａｌ、又はＬｙｓであり、
Ｙ３は、Ａｒｇ又はＬｙｓであり、
Ｙ５は、Ａｒｇ又はＬｙｓであり、
Ｙ６は、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、Ｉｌｅ、又はＡｒｇであり、
Ｙ７は、Ｔｒｐ又は不存在であり、
Ｙ８は、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、又は不存在であり、
Ｙ１０は、Ｌｙｓ又は不存在であり、
ペプチドは、２つのＣｙｓの間にジスルフィド結合を含み、
ペプチドは、任意選択で、Ｒ^１、Ｘ、又はＹ上でＰＥＧ化され、
ペプチドのアミノ酸の側鎖は、任意選択で、親油性置換基又はポリマー部分にコンジュゲートされ、
Ｉｄａは、イミノ二酢酸であり、ｐＧｌｕは、ピログルタミン酸であり、ｂｈＡｓｐは、β－ホモアスパラギン酸であり、ｂｈＰｒｏは、β－ホモプロリンである。

特定の実施形態では、ペプチドは、以下の配列のうちの１つを含むか、又はそれからなり、
ＤＴＨＦＰＩＣＩＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣ（配列番号４６）、
ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫ（配列番号４７）、
ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＥＰＲＳＫＧＷＶＣＫ（配列番号４８）、
ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＫＧＷＡＣＫ（配列番号４９）、
ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫＫ（配列番号５０）、
ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＶＣＨＲＰＫＧＣＹＲＲＶＣＲ（配列番号５１）、
ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫ（配列番号５２）、
ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＫＰＲＳＫＧＷＶＣＫ（配列番号５３）、
ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＲＧＷＶＣＫ（配列番号５４）、
ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＫＳＫＧＷＶＣＫ（配列番号５５）、
ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫＧＣＫ（配列番号５６）、
ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＫＳＫＧＷＥＣＫ（配列番号５７）、
ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫＫＣＫ（配列番号５８）、
ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫＧＣＫＫ（配列番号５９）、
ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＫＰＲＳＫＧＣＫ（配列番号６０）、
ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＫＳＫＧＣＫ（配列番号６１）、
ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ（配列番号６２）、
ＤＴＨＦＰＣＩＩＦ（配列番号６３）、又は
ＤＴＫＦＰＣＩＩＦ（配列番号６４）、
当該ペプチドは、任意選択で、Ｒ１、Ｘ、又はＹ上でＰＥＧ化され、
ペプチドのアミノ酸の側鎖は、任意選択で、親油性置換基又はポリマー部分にコンジュゲートされ、
ペプチドは、任意選択で、ペプチドの２つのＣｙｓアミノ酸残基の間にジスルフィド結合を含む。

特定の実施形態では、ペプチドは、以下の配列のうちの１つを含むか、又はそれからなり、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＩＣＩＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣ－ＮＨ_２（配列番号１）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（配列番号２）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＥＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（配列番号３）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＫＧＷＡＣＫ－ＮＨ_２（配列番号４）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫＫ－ＮＨ_２（配列番号５）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＶＣＨＲＰＫＧＣＹＲＲＶＣＲ－ＮＨ_２（配列番号６）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ（Ｋ（ＰＥＧ８））ＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（配列番号７）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ（Ｋ（ＰＥＧ８））ＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（配列番号８）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＩＣＩＦＧＰＲＳ（Ｋ（ＰＥＧ８））ＧＷＶＣ－ＮＨ_２（配列番号９）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＩＣＩＦＧＰＲＳ（Ｋ（ＰＥＧ４））ＧＷＶＣ－ＮＨ_２（配列番号１０）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＲＧＷＶＣ（Ｋ（ＰＥＧ８））－ＮＨ_２（配列番号１１）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＲＧＷＶＣ（Ｋ（ＰＥＧ４））－ＮＨ_２（配列番号１２）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＲＧＷＶＣ（Ｋ（ＰＥＧ２））－ＮＨ_２（配列番号１３）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ（Ｋ（Ｐａｌｍ））ＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（配列番号１４）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ）Ｋ（Ｐａｌｍ））ＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（配列番号１５）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰ（Ｋ（Ｐａｌｍ））ＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（配列番号１６）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳ（Ｋ（Ｐａｌｍ））ＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（配列番号１７）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣ（Ｋ（Ｐａｌｍ））ＮＨ_２（配列番号１８）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））ＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（配列番号１９）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））ＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（配列番号２０）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））ＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（配列番号２１）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））ＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（配列番号２２）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））－ＮＨ_２（配列番号２３）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣ（Ｋ（ＰＥＧ８））－ＮＨ_２（配列番号２４）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＦＥＰＲＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（配列番号２５）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ－Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ）－ＰＲＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（配列番号２６）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（配列番号２７）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＳＫＧＷＥＣＫ－ＮＨ_２（配列番号２８）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＧＣＫ－ＮＨ_２（配列番号２９）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＣＫ－ＮＨ_２（配列番号３０）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫＧＣＫ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））－ＮＨ_２（配列番号３１）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ－Ｋ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ）－ＦＥＰＲＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（配列番号３２）_、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫ（Ｆ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ））ＰＲＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（配列番号３３）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰ（Ｋ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ））ＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（配列番号３４）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳ（Ｋ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ））ＧＣＫ－ＮＨ_２（配列番号３５）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫ（Ｋ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ））ＣＫ－ＮＨ_２（配列番号３６）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫＧＣ（Ｋ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ））Ｋ－ＮＨ_２（配列番号３７）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫＧＣ（Ｋ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ））－ＮＨ_２（配列番号３８）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ（Ｋ（ＰＥＧ１１－Ｐａｌｍ））ＰＲＳＫ［Ｓａｒ］ＣＫ－ＮＨ_２（配列番号３９）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ－ＮＨ_２（配列番号４０）、
Ｈｙ－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ－ＮＨ_２（配列番号４１）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦ－ＮＨ_２（配列番号４２）、
Ｈｙ－ＤＴＨＦＰＣＩＩＫＦ－ＮＨ_２（配列番号４３）、
イソ吉草酸－ＤＴＫＦＰＣＩＩＦ－ＮＨ_２（配列番号４４）、又は
Ｈｙ－ＤＴＫＦＰＣＩＩＦ－ＮＨ_２（配列番号４５）、
任意選択で、ペプチドは、ペプチドの２つのＣｙｓアミノ酸残基の間にジスルフィド結合を含む_。

特定の実施形態では、ペプチドは、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））ＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（配列番号２０）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＦＥＰＲＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（配列番号２５）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＰＲＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（配列番号２６）、
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（配列番号２７）、及び
イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＧＣＫ－ＮＨ_２（配列番号２９）からなる群から選択され、
アミノ酸は、Ｌ－アミノ酸である。

ヘプシジン模倣体を含む本明細書に開示されるペプチドは、化学合成、組換えＤＮＡ法を使用する生合成又はインビトロ合成、及び固相合成を含む当技術分野で知られている方法を使用して生成されてもよい。例えば、参照により本明細書に組み込まれる、ＰＣＴ出願公開番号ＷＯ２０１４／１４５５６１及びＷＯ２０１５／２００９１６、Ｋｅｌｌｙ＆Ｗｉｎｋｌｅｒ（１９９０）Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄｓ， ｖｏｌ．１２，Ｊ．Ｋ．Ｓｅｔｌｏｗ ｅｄ．，Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ，ＮＹ，ｐｐ．１－１９、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ（１９６４）Ｊ Ａｍｅｒ Ｃｈｅｍ Ｓｏｃ ８５：２１４９、Ｈｏｕｇｈｔｅｎ（１９８５）ＰＮＡＳ ＵＳＡ ８２：５１３１－５１３５、及びＳｔｅｗａｒｔ＆Ｙｏｕｎｇ（１９８４）Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，２ｅｄ．Ｐｉｅｒｃｅ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬを参照されたい。本明細書に開示されるペプチドは、逆相高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、イオン交換若しくは免疫親和性クロマトグラフィー、濾過若しくはサイズ排除、又は電気泳動などの当技術分野で知られているタンパク質精製技術を使用して精製され得る。参照により本明細書に組み込まれる、Ｏｌｓｎｅｓ，Ｓ．ａｎｄ Ａ．Ｐｉｈｌ（１９７３）Ｂｉｏｃｈｅｍ．１２（１６）：３１２１－３１２６、及びＳｃｏｐｅｓ（１９８２）Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，ＮＹを参照されたい。あるいは、ペプチドは、当技術分野で知られている組換えＤＮＡ技術によって作製されてもよい。

特定の実施形態では、本明細書に開示されるペプチドは、ＰＥＧ化されてもよい。本明細書で使用される場合、「ポリエチレングリコール」又は「ＰＥＧ」は、一般式Ｈ－（Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ２）ｎ－ＯＨのポリエーテル化合物である。ＰＥＧは、それらの分子量に応じて、ポリエチレンオキシド（ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ ｏｘｉｄｅ、ＰＥＯ）又はポリオキシエチレン（ｐｏｌｙｏｘｙｅｔｈｙｌｅｎｅ、ＰＯＥ）としても知られている。ＰＥＧ、ＰＥＯ、又はＰＯＥは、本明細書で使用される場合、エチレンオキシドのオリゴマー又はポリマーを指す。これらの３つの名称は化学的に同義であるが、ＰＥＧは、２０，０００Ｄａ未満の分子量を有するオリゴマー及びポリマーを、ＰＥＯは、２０，０００Ｄａ超の分子量を有するポリマーを、ＰＯＥは、任意の分子量のポリマーを指す傾向がある。ＰＥＧ及びＰＥＯは、それらの分子量に応じて、液体又は低融点固体である。本開示を通して、これらの３つの名称は、区別することなく使用される。ＰＥＧは、エチレンオキシドの重合によって調製され、３００Ｄａ～１０，０００，０００Ｄａの広範な分子量にわたって市販されている。異なる分子量を有するＰＥＧ及びＰＥＯは、異なる用途で利用されており、鎖長効果に起因して異なる物理的特性（例えば、粘度）を有するが、それらの化学的特性はほぼ同一である。ＰＥＧ部分としては、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ＰＥＧのホモポリマー若しくはコポリマー、ＰＥＧのモノメチル置換ポリマー（ｍＰＥＧ）、又はポリオキシエチレングリセロール（ＰＯＧ）が挙げられる。例えば、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ ６８：１（１９９８）、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．６：１５０（１９９５）、及びＣｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔｈｅｒａｐ．Ｄｒｕｇ Ｃａｒｒｉｅｒ Ｓｙｓ．９：２４９（１９９２）を参照されたい。半減期延長の目的のために調製されるＰＥＧ、例えば、モノ－メトキシ末端ポリエチレングリコール（ｍＰＥＧ）などのモノ活性化アルコキシ末端ポリアルキレンオキシド（ＰＯＡ）も包含され、ビス活性化ポリエチレンオキシド（グリコール）又は他のＰＥＧ誘導体も企図される。好適なＰＥＧは、例えば、約２００Ｄａ～約４０，０００Ｄａ、又は約２００Ｄａ～約６０，０００Ｄａの範囲の重量で実質的に変化し、それらのいずれかが本開示の目的のために使用され得る。特定の実施形態では、２００Ｄａ～２，０００Ｄａ又は２００Ｄａ～５００Ｄａの分子量を有するＰＥＧが使用される。異なる形態のＰＥＧはまた、重合プロセスに使用される開始剤に応じて、使用されてもよく、一般的な開始剤は、単官能性メチルエーテルＰＥＧ、又はメトキシポリ（エチレングリコール）（略して、ｍＰＥＧ）である。低分子量ＰＥＧは、単分散、均一、又は個別と称される、純粋なオリゴマーとしても入手可能である。これらは、本開示の特定の実施形態で使用される。

ＰＥＧは、異なる形状でも入手可能であり、分岐状ＰＥＧは、中心コア基から出る３～１０個のＰＥＧ鎖を有し、星状ＰＥＧは、中心コア基から出る１０～１００個のＰＥＧ鎖を有し、櫛状ＰＥＧは、ポリマー骨格上に通常グラフトされた複数のＰＥＧ鎖を有する。ＰＥＧは、直鎖状でもあり得る。ＰＥＧの名称にしばしば含まれる数字は、それらの平均分子量を示し（例えば、ｎ＝９のＰＥＧ）は、およそ４００ダルトンの平均分子量を有し、ＰＥＧ４００とラベル付けされるであろう。

本明細書で使用される場合、「ＰＥＧ化」は、本発明のペプチド阻害剤にＰＥＧ構造を共有結合する作用であり、そしてこれは「ＰＥＧ化ペプチド阻害剤」と呼ばれる。特定の実施形態では、ＰＥＧ化側鎖のＰＥＧは、約２００Ｄａ～約４０，０００Ｄａの分子量を有するＰＥＧである。

様々な実施形態では、薬剤は、１つ以上の薬学的に許容される希釈剤、担体、又は賦形剤を含む医薬組成物中に存在する。薬学的に許容される担体、希釈剤、又は賦形剤とは、任意のタイプの非毒性の固体、半固体、又は液体充填剤、希釈剤、封入材料、又は製剤補助剤を指す。「薬学的に許容される担体」という用語には、標準の医薬担体のうちのいずれかが含まれる。治療的使用のための薬学的に許容される担体は、薬学分野でよく知られており、例えば、“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ”，１７ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａｌｆｏｎｓｏ Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ（Ｅｄ．），Ｍａｒｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，ＵＳＡ，１９８５に記載されている。例えば、弱酸性又は生理的ｐＨの滅菌生理食塩水及びリン酸緩衝生理食塩水が使用され得る。好適なｐＨ緩衝剤は、例えば、リン酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（ＴＲＩＳ）、Ｎ－トリス（ヒドロキシメチル）メチル－３－アミノプロパンスルホン酸（ＴＡＰＳ）、重炭酸アンモニウム、ジエタノールアミン、ヒスチジン、アルギニン、リジン若しくは酢酸塩（例えば、酢酸ナトリウムとして）、又はそれらの混合物であり得る。この用語は、ヒトを含む動物に使用するために米国薬局方に列記されている任意の担体剤を更に包含する。

以下の実施例は、本発明の特定の具体的な実施形態を示す。別途詳細に記載した場合を除いて、以下の実施例は、当業者によく知られており、日常的な標準技術を使用して実施した。これらの実施例が例証のみを目的としており、本発明の条件又は範囲に関して完全に決定的であると主張するものではないことを理解されたい。したがって、それらは、本発明の範囲を限定するものとして決して解釈されるべきではない。
略称：
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド
ＮＭＰ：Ｎ－メチルピロリドン
ＨＢＴＵ：Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＡＴＵ：２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＤＣＣ：ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＮＨＳ：Ｎ－ヒドキシスクシンイミド
ＤＩＰＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン
ＥｔＯＨ：エタノール
Ｅｔ２Ｏ：ジエチルエーテル
Ｈｙ：水素
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＩＳ：トリイソプロピルシラン
ＡＣＮ：アセトニトリル
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＥＳＩ－ＭＳ：エレクトロスプレーイオン化質量分析
ＰＢＳ：リン酸緩衝生理食塩水
Ｂｏｃ：ｔ－ブトキシカルボニル
Ｆｍｏｃ：フルオレニルメチルオキシカルボニル
Ａｃｍ：アセトアミドメチル
ＩＶＡ：イソ吉草酸（又はイソバレリル）

Ｋ（ ）：本明細書に提供されるペプチド配列では、化合物又は化学基がリジン残基の直後の括弧内に提示されており、括弧内の化合物又は化学基は、リジン残基にコンジュゲートされた側鎖であると理解されたい。したがって、例えば、決して限定されるものではないが、Ｋ－［（ＰＥＧ８）］－は、ＰＥＧ８部分がこのリジンの側鎖にコンジュゲートされていることを示す。

Ｐａｌｍ：パルミチン酸（パルミトイル）のコンジュゲーションを示す。

本明細書で使用される場合、「Ｃ（）」は、特定のジスルフィド架橋に関与するシステイン残基を指す。例えば、ヘプシジンでは、４つのジスルフィド架橋があり、１つ目は２つのＣ（１）残基の間にあり、２つ目は２つのＣ（２）残基の間にあり、３つ目は２つのＣ（３）残基の間にあり、４つ目は２つのＣ（４）残基の間にある。したがって、いくつかの実施形態では、ヘプシジンの配列は、以下：
Ｈｙ－ＤＴＨＦＰＩＣ（１）ＩＦＣ（２）Ｃ（３）ＧＣ（２）Ｃ（４）ＨＲＳＫＣ（３）ＧＭＣ（４）Ｃ（１）ＫＴ－ＯＨ（配列番号６５）のように記述され、他のペプチドの配列も任意選択で同じ様式で記述され得る。

実施例１
ペプチド類似体の合成
別段で特定しない限り、以下で用いた試薬及び溶媒は、標準実験室試薬又は分析グレードで市販されているものであり、更に精製することなく使用した。

ペプチド固相合成の手順
本発明のペプチド類似体を、最適化された９－フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）固相ペプチド合成プロトコルを使用して化学的に合成した。Ｃ末端アミドについては、リンクアミド樹脂を使用したが、Ｃ末端酸を生成するためにＷａｎｇ樹脂及びトリチル樹脂も使用した。側鎖保護基は、以下のとおり、Ｇｌｕ、Ｔｈｒ、及びＴｙｒ：Ｏ－ｔブチル；Ｔｒｐ及びＬｙｓ：ｔ－Ｂｏｃ（ｔ－ブチルオキシカルボニル）；Ａｒｇ：Ｎ－ガンマ－２，２，４，６，７－ペンタメチルジヒドロベンゾフラン－５－スルホニル；Ｈｉｓ、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ：トリチルであった。選択的なジスルフィド架橋形成のために、Ａｃｍ（アセトアミドメチル）もＣｙｓ保護基として使用した。カップリングのために、ＤＭＦ中にＦｍｏｃアミノ酸、ＨＢＴＵ、及びＤＩＰＥＡ（１：１：１．１）を含有する４～１０倍過剰の溶液を、膨潤した樹脂に添加した［ＨＢＴＵ：Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート、ＤＩＰＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド］。ＨＡＴＵ（Ｏ－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３，－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）をＨＢＴＵの代わりに使用して、困難な領域におけるカップリング効率を改善した。Ｆｍｏｃ保護基の除去を、ＤＭＦ、ピペリジン（２：１）溶液で処理することにより達成した。

樹脂からのペプチド切断の手順
本発明のペプチド類似体（例えば、化合物２）の側鎖脱保護及び切断を、トリフルオロ酢酸、水、エタンジチオール、及びトリ－イソプロピルシラン（９０：５：２．５：２．５）を含有する溶液中で、乾燥樹脂を２～４時間撹拌することによって達成した。ＴＦＡ除去の後、氷冷ジエチルエーテルを使用してペプチドを沈殿させた。溶液を遠心分離し、エーテルをデカントし、続いて、第２のジエチルエーテル洗浄を行った。０．１％ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）を含有するアセトニトリル、水（１：１）溶液中にペプチドを溶解させ、得られた溶液を濾過した。エレクトロスプレーイオン化質量分析法（ＥＳＩ－ＭＳ）を用いて直鎖状ペプチドの質を評価した。

ペプチド精製の手順
本発明のペプチド（例えば、化合物２）の精製は、逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ－ＨＰＬＣ）を使用して達成した。分析は、Ｃ１８カラム（３μｍ、５０×２ｍｍ）を１ｍＬ／分の流量で使用して行った。直鎖状ペプチドの精製は、Ｃ１８カラム（５μｍ、２５０×２１．２ｍｍ）を用いた分取ＲＰ－ＨＰＬＣを２０ｍＬ／分の流量で使用して達成した。分離は、Ａ中の緩衝液Ｂの線形勾配を使用して達成した（緩衝液Ａ：０．０５％ＴＦＡ水溶液、緩衝液Ｂ：０．０４３％ＴＦＡ、９０％アセトニトリル水溶液）。

ペプチド酸化の手順。
方法Ａ（単一ジスルフィド酸化）。本発明の非保護ペプチドの酸化は、ＭｅＯＨ中のヨウ素（１ｍＬ当たり１ｍｇ）を溶液（ＡＣＮ：Ｈ_２Ｏ、７：３、０．５％ＴＦＡ）中のペプチドに滴下添加することによって達成した。２分間撹拌した後、溶液が透明になるまでアスコルビン酸を少量ずつ添加し、精製のために試料をＨＰＬＣに直ちに充填した。

方法Ｂ（２つのジスルフィドの選択的酸化）。２つ以上のジスルフィドが存在する場合、選択的酸化がしばしば実施された。遊離システインの酸化は、１ｍｇ／１０ｍＬのペプチドでｐＨ７．６のＮＨ_４ＣＯ_３溶液で達成した。２４時間撹拌した後で、精製の前に、溶液をＴＦＡでｐＨ３に酸性化し、続いて凍結乾燥した。次いで、得られた単一の酸化ペプチド（ＡＣＭ保護システインを含む）を、ヨウ素溶液を使用して酸化／選択的脱保護した。ペプチド（２ｍＬ当たり１ｍｇ）をＭｅＯＨ／Ｈ_２０に溶解し、反応溶媒に溶解した８０：２０ヨウ素を室温で反応物（最終濃度：５ｍｇ／ｍＬ）に添加した。溶液を７分間撹拌した後、溶液が透明になるまでアスコルビン酸を少量ずつ添加した。次いで、溶液をＨＰＬＣに直接充填した。

方法Ｃ（自然酸化）。２つ以上のジスルフィドが存在し、選択的酸化を行わない場合、自然酸化を行った。酸化及び還元されたグルタチオン（ペプチド／ＧＳＨ／ＧＳＳＧ、１：１００：１０モル比）（ペプチド：ＧＳＳＧ：ＧＳＨ、１：１０、１００）の存在下で、１００ｍＭのＮＨ４ＣＯ３（ｐＨ７．４）溶液を用いて自然酸化を達成した。２４時間撹拌した後で、ＲＰ－ＨＰＬＣ精製の前に、溶液をＴＦＡでｐＨ３に酸性化し、続いて凍結乾燥した。

二量体を生成するためのシステイン酸化の手順。本発明の非保護ペプチドの酸化は、ＭｅＯＨ中のヨウ素（１ｍＬ当たり１ｍｇ）を溶液（ＡＣＮ：Ｈ２Ｏ、７：３、０．５％ＴＦＡ）中のペプチドに滴下添加することによって達成した。２分間撹拌した後、溶液が透明になるまでアスコルビン酸を少量ずつ添加し、精製のために試料をＨＰＬＣに直ちに充填した。

二量体化の手順。
１当量（「ｅｑ」と略される）の酸を、０．１Ｍの最終濃度で、２．２当量のＮＭＰ（Ｎ－メチルピロリドン）中のＮ－ヒドキシスクシンイミド（ＮＨＳ）及びジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）の両方を用いて処理することによって、グリオキシル酸（ＤＩＧ）、ＩＤＡ、又はＦｍｏｃ－β－Ａｌａ－ＩＤＡを、Ｎ－ヒドキシスクシンイミドエステルとして予め活性化した。ＰＥＧ１３リンカー及びＰＥＧ２５リンカーについては、これらの化学物質を購入し、活性化スクシンイミドエステルとして予め形成した。約０．４当量の活性化エステルを、ＮＭＰ中のペプチド（１ｍｇ／ｍＬ）に少量ずつゆっくりと添加した。溶液を１０分間撹拌したままにした後、約０．０５当量のリンカーの２～３つの追加のアリコートをゆっくりと添加した。溶液を更に３時間撹拌したままにした後、溶媒を真空下で除去し、残渣を逆相ＨＰＬＣにより精製した。追加の逆相ＨＰＬＣ精製の前に、ＤＭＦ中の２０％ピペリジン中のペプチドを撹拌する追加のステップ（２×１０分）を実施した。

当業者は、ペプチド合成の標準的な方法が本発明の化合物を生成するのに使用され得ることを理解するであろう。

リンカーの活性化及び二量体化
以下に記載されるように、ペプチド単量体サブユニットを連結して、ヘプシジン類似体ペプチド二量体を形成した。

小規模のＤＩＧリンカー活性化手順：５ｍＬのＮＭＰを、ＩＤＡ二酸（３０４．２ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ、２５３．２ｍｇ、２．２当量、２．２ｍｍｏｌ）及び撹拌バーを含むガラスバイアルに添加した。混合物を室温で撹拌して、固体出発材料を完全に溶解した。次いで、Ｎ，Ｎ’－ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、４５３．９ｍｇ、２．２当量、２．２ｍｍｏｌ）を混合物に添加した。沈殿物は１０分以内に現れ、反応混合物を室温で一晩更に撹拌した。次いで、反応混合物を濾過して、沈殿したジシクロヘキシル尿素（ＤＣＵ）を除去した。活性化リンカーを、二量体化に使用する前に、密閉したバイアルに保持した。活性化リンカーの公称濃度は、およそ０．２０Ｍであった。

ＰＥＧリンカーを使用した二量体化については、予めの活性化ステップは関与しなかった。市販の予め活性化された二官能性ＰＥＧリンカーを使用した。

二量体化手順：２ｍＬの無水ＤＭＦを、ペプチド単量体（０．１ｍｍｏｌ）を含むバイアルに添加した。ペプチドのｐＨは、ＤＩＥＡで８～９に調整した。次いで、活性化リンカー（ＩＤＡ又はＰＥＧ１３、ＰＥＧ２５）（単量体に対して０．４８ｅｑ、０．０４８ｍｍｏｌ）を単量体溶液に添加した。反応混合物は、室温で１時間撹拌した。二量体化反応の完了は、分析ＨＰＬＣを使用して監視した。二量体化反応の完了にかかった時間は、リンカーに応じて異なった。反応の完了後、ペプチドを冷エーテル中で沈殿させ、遠心分離した。上清エーテル層は、廃棄した。沈殿ステップは、２回繰り返した。次いで、逆相ＨＰＬＣ（Ｌｕｎａ Ｃ１８支持体、１０ｕ、１００Ａ、移動相Ａ：０．１％ＴＦＡを含む水、移動相Ｂ：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル（ＡＣＮ）、１５％Ｂの勾配及び６０分間にわたって４５％Ｂに変化、流量１５ｍｌ／分）を使用して、粗製の二量体を精製した。次いで、純粋な生成物を含む画分を凍結乾燥機で凍結乾燥した。

半減期延長部分のコンジュゲーション
ペプチドのコンジュゲーションは樹脂上で行った。Ｌｙｓ（ｉｖＤｄｅ）を主要なアミノ酸として使用した。樹脂上にペプチドを構築した後、３×５分のＤＭＦ中の２％ヒドラジンを使用して、ｉｖＤｄｅ基の選択的脱保護を５分間行った。３時間のＨＢＴＵ、ＤＩＥＡ １～２当量を使用したリンカーの活性化及びアシル化、並びにＦｍｏｃ除去に続いて、脂質酸を用いた第２のアシル化により、コンジュゲートされたペプチドを得た。

実施例２
遺伝性ヘモクロマトーシスマウスにおけるヘプシジン模倣ペプチドの薬力学
鉄及び他のマーカーを調節するヘプシジン模倣体の能力を、遺伝性ヘモクロマトーシス（ＨＨ）のマウスモデルで決定した。ＨＨマウス（１２９Ｓ－Ｈｊｖ^{ｔｍ１Ｎｃａ}／Ｊ）を、８週齢まで低鉄食（約２ｐｐｍの鉄）下で維持し、次いで、正常食（約２６０ｐｐｍの鉄）で５週間鉄負荷した。次いで、マウスを、正常鉄食下で化合物２５（２．５ｍｇ／ｋｇ、Ｑ２Ｄ）を用いて治療した。全ての測定は、最終投与から４８時間後（トラフ薬物レベルにおいて）であった。化合物２５は、遺伝性ヘモクロマトーシス（ＨＨ）マウスにおいて、鉄過剰条件下で、ＴＳＡＴ％の持続的な低減及び脾臓への鉄の再分布を引き起こした（図１）。鉄過剰のＨＨマウスでは、化合物２５（５ｍｇ／ｋｇ、Ｑ２Ｄ）の１２回投与後に、ＴＳＡＴ％は、トラフ薬物レベルで約１０％低減された。これには、フェリチンの低下、及び脾臓への鉄の再分布が伴った。肝臓、膵臓、及び腎臓において鉄蓄積が低減された。

ＨＨマウスでは、それほど重度でない鉄過剰条件下で、化合物２５で２週間治療した群において肝臓の鉄蓄積が防止された（図２Ａ及び図２Ｂ）。ＨＨマウスは、療法開始時に異なるレベルの鉄過剰を達成するために、低鉄食又は正常鉄食のいずれかで２週間維持することによって、異なるレベルまで鉄負荷された。次いで、マウスを、正常鉄食下で化合物２５（２．５ｍｇ／ｋｇ、Ｑ２Ｄ）を用いて治療した。臓器鉄濃度は、ＩＣＰ－ＭＳ法（総鉄）又は比色アッセイ（非ヘム鉄）によって評価した。統計分析：ダネットの多重比較を伴う一元配置ＡＮＯＶＡ又はウェルチ補正を伴うｔ検定。

図２Ａに示されるように、療法開始まで鉄蓄積を防止するために低鉄食で維持された「非疾患」マウスは、肝臓鉄の低減を示し、化合物２５が食事からの鉄の過剰吸収を防止して、したがって肝臓におけるＴＳＡＴ％及び鉄蓄積の上昇を防止することを証明している。図２Ｂに示されるように、部分的な鉄過剰を可能にするために、治療前の２週間、正常食を維持したマウスも、鉄肝臓の低減を示した。この場合、化合物２５は、肝臓での更なる鉄蓄積を防止した（ビヒクルと比較して）だけでなく、肝臓から離れて鉄を再分配した。

これらの研究は、高い鉄過剰状態（ＴＳＡＴ％＞９０％、重度の疾患）から開始して、脾臓マクロファージ（大量の鉄を貯蔵する機能を備えている）に鉄を閉じ込める結果としてのＴＳＡＴ％の低下が、臓器（例えば、膵臓、腎臓）における鉄蓄積の低減と関連することを証明している。それらはまた、トラフ薬物レベル、特に正常レベル未満のＴＳＡＴ％が、臨床的有効性の血清バイオマーカー（例えば、臓器の鉄過剰）であることも示している。

これらの研究は、ヘプシジン模倣ペプチド、例えば化合物２５を用いた治療が、例えば、脾臓マクロファージでの鉄の隔離を通して血清ＴＳＡＴ％及び不安定な鉄を低下させて、鉄負荷を防止及び逆転させることにより、一次鉄過剰及び二次鉄過剰のヘモクロマトーシス患者に潜在的に利益をもたらすことを示している。

実施例３
遺伝性ヘモクロマトーシス患者におけるヘプシジン模倣ペプチドの有効性
ＨＨ患者において臨床的有効性研究を実施した。対象は、最大２４週間、皮下の化合物２５を与えられた。対象は、皮下で１週間当たり１０ｍｇの初期用量で開始された。用量は、忍容性及び薬力学的マーカーＴＳＡＴに基づいて、１週間当たり２０ｍｇ、続いて、必要に応じて１週間当たり４０ｍｇ及び８０ｍｇに増加させた。更に、週２回の１０ｍｇ、２０ｍｇ、３０ｍｇ、及び４０ｍｇの皮下投与スケジュール（１日目及び４日目又は５日目のいずれかを試験した）。大多数の患者は、１週間当たり２０ｍｇ以下の用量を投与された。対象の安全性及び血中鉄パラメータ（血清鉄、血清フェリチン、トランスフェリン、及びＴＳＡＴ）を収集して、化合物２５の薬力学的効果を監視した。瀉血の必要性及びＱｏＬデータにおける効果（３６項目短形式健康調査（３６－Ｉｔｅｍ Ｓｈｏｒｔ Ｆｏｒｍ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｕｒｖｅｙ）［ＳＦ－３６］、及び変化の患者全般的印象（Ｐａｔｉｅｎｔ’ｓ Ｇｌｏｂａｌ Ｉｍｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｃｈａｎｇｅ）［ＰＧＩ－Ｃ］）も収集し、集計した。

個々の対象の用量及びスケジュールは、投与後の２つの時点で測定された薬力学（ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃ、ＰＤ）マーカーＴＳＡＴに基づいて決定した（投与の１日後にピークＰＤ効果において１回、トラフＰＤ効果において１回）。用量及びスケジュール調整の意図は、ＴＳＡＴ及び血清鉄レベルを低減することであった。必要に応じて、化合物２５の用量を、１０ｍｇから２０ｍｇに、及び必要に応じて、ＴＳＡＴが、投与の１日後のピークＰＤ効果及び化合物２５の次の投与前のトラフＰＤ効果において約４０％未満になるまで、３０ｍｇ、４０ｍｇ、及び８０ｍｇに順次毎週増加させた。投与は、１週間に１回又は１週間に２回であった。トラフＰＤ効果は、週１回の投与については化合物２５の投与の７日後（及び次の投与の前）に、又は週２回の投与については１週間において初回の投与の７日後に測定されたＴＳＡＴ値であった。週２回のレジメンについては、用量を少なくとも３日間隔（例えば、各週の１日目及び４日目又は５日目）で与えた。週２回の化合物２５用量は、週２回最大４０ｍｇまで増加させた。用量増加及び治療用量の特定を容易にするために、研究者らは、任意の用量調整のために対象がクリニックに来た日のＴＳＡＴ値を評価した。

患者は、少なくとも１か月当たり０．２５回の以前の瀉血頻度（例えば、過去１２か月間に少なくとも３回の瀉血、又は過去１５か月間に少なくとも４回の瀉血を受けた）、及び１か月当たり１回未満の瀉血頻度、１１．５ｇ／ｄＬ超のヘモグロビン、及び３００ｎｇ／ｍＬ未満の血清フェリチンをスクリーニング時（瀉血スクリーニングの前）に有した。
方法：この単一群、非盲検、用量設定第２相研究は、１か月当たり０．２５回～１回の瀉血頻度での治療の前に、少なくとも６か月間（ｍｏｓ）、記録された安定した瀉血（ｐｈｌ）を受けていた、確認されたＨＨを有する患者（ｐｔｓ）における皮下ヘプシジン模倣体（化合物２５）を調査した。臨床的に意義のある検査所見の異常を有する患者、及び鉄キレート療法又は赤血球アフェレシスを受けている患者は除外された。図３に概説されるように、患者は、トランスフェリン飽和度（ＴＳＡＴ）を４５％未満に維持するために個々に漸増された化合物２５用量を１週間に１回又は２回与えられ、６か月間追跡された。個々の用量を図１１に示す。評価項目には、ＴＳＡＴ、血清鉄、血清トランスフェリン及び血清フェリチン、フェリスキャンＭＲＩによって測定される肝鉄含量（ｌｉｖｅｒ ｉｒｏｎ ｃｏｎｔｅｎｔ、ＬＩＣ）、有害事象、並びに変化の患者全般的印象（ＰＧＩ－Ｃ）及び医学的転帰研究アンケートの短形式健康調査（ＳＦ－３６）に関する患者報告結果が含まれた。化合物２５は、緩衝水溶液中で製剤化した。
結果：１６人の患者（男性１０人／女性６人）が登録された。平均の年齢及び体重は、それぞれ６２．５歳及び８８．１ｋｇであった。ＬＩＣ値は、研究期間中の瀉血の最小限の使用で、研究前のレベルに維持された。研究前の６か月間では、研究中の０．０３ｐｈｂ／月と比較して、研究前の平均瀉血（ｐｈｌ）率は０．２７ｐｈｌ／月であった（ｐ＜０．０００１）。研究評価項目には、安全性、瀉血の低減、血清鉄、ＴＳＡＴ、トランスフェリン、フェリチン、ＭＲＩによる肝鉄含量、有害事象が含まれた。化合物２５は、治療期間中、大多数の対象において瀉血を排除することができた（図４Ａ及び図４Ｂ）。化合物２５を用いた治療はまた、平均ＴＳＡＴレベルの統計的に有意な低減を示した（図５Ａ及び図５Ｂ）。平均ベースラインＴＳＡＴは、研究中の３０．４％と比較して４５％であった（ｐ＝０．００２５）。ベースラインで４５％超のＴＳＡＴを有する特定の患者については、化合物２５を用いた治療は、瀉血ができなかった場合、ＴＳＡＴを４５％未満に、又は４５％近くに低減させた。化合物２５を用いた治療は、平均血清鉄の低減を更にもたらした（図６）。血清鉄は、研究前の２４．５μｍｏｌ／Ｌから、研究中に平均１７．７μｍｏｌ／ｍＬに低減し（ｐ＝０．００５９）、又はベースラインで１３７ｕｇ／ｄＬから、化合物２５を用いた治療後に９８．６ｕｇ／ｄＬに低減した。血清鉄及びＴＳＡＴにおいて用量依存的及び濃度依存的な低減があった（図７）。血清フェリチンレベル及び血清トランスフェリンレベルは、ベースラインから化合物２５を用いた治療後まで比較的一定に維持された（図８）。化合物２５を用いた治療は、ベースライン又は化合物２５を用いた治療後で統計的に有意な差なしに、肝鉄含量を維持した（図９）。ヘマトクリット、赤血球、白血球、又は血小板などの血液パラメータに顕著な変化はなかった。患者報告結果を決定し、化合物２５を用いた治療後のＳＦ－３６の日常役割機能（身体）サブコンポーネント及び日常役割機能（精神）サブコンポーネントに改善が認められた（図１０）。化合物２５は、概して良好な忍容性であった。全ての治療関連有害事象は、ＣＴＣＡＥグレード１又は２として特徴付けられた。

６か月間以上の安定的な研究前瀉血（１２か月当たり３回以上の瀉血又は１５か月当たり４回以上の瀉血を必要とする）を伴う鉄減少の維持段階にあるＨＨ患者１６人における６か月間の非盲検研究から得られた結果の概要を、図１４に示す。
結論：化合物２５は、血清鉄及びＴＳＡＴレベルの低減において薬理学的効果を証明した。これらの薬力学的効果は、瀉血の必要性の低減、ＬＩＣの制御、及び患者報告結果における臨床的に意義のある変化に対応していた。これらのデータは、化合物２５が瀉血の非存在下でＬＩＣを制御することを示している。化合物２５は、ＨＨを有する患者において良好な忍容性であった。これらのデータは、ＨＨの治療としての化合物２５及び他のヘプシジン模倣体を支持している。

実施例４
ヘプシジン模倣ペプチドの薬力学的制御
鉄は、正常な細胞機能の重要な成分であり、代謝の調節不全は、疾患の形成及び／又は進行に寄与する。化合物２５は、食事からの鉄の吸着を遮断し、血清鉄を脾臓マクロファージに迅速に再分布させることによって、体内の鉄貯蔵を制御する。化合物２５による鉄恒常性の回復は、健康な鉄貯蔵、鉄欠乏、及び組織鉄過剰を有する対象において証明された。

本実施例では、皮下投与された化合物の薬力学的制御を健康なボランティア及びＨＨ患者において調べた。

第１の研究では、健康なヒトボランティアに、プラセボ又は化合物２５の単回用量（１ｍｇ、３ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇ、４０ｍｇ、又は８０ｍｇ）を皮下投与した。対象の血清ＴＳＡＴレベルは、投与後６日間にわたる血清鉄貯蔵量の代用として決定し、対象の平均赤血球ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）レベルは、投与後６日間にわたる赤血球の完全性の代用として決定した。図１２に示されるように、対象は、１日未満でＴＳＡＴレベルの用量応答性の低減を示し、これは、次の５～６日間にわたって徐々に増加した。

第２の研究では、維持段階のＨＨ患者及び輸血依存性β－サラセミア患者に化合物２５を皮下投与し、それらのＴＳＡＴレベル及びＭＣＨＣレベルを、化合物２５投与の前及び化合物２５投与の２４週間後に決定した。図１３に示されるように、対象のＴＳＡＴレベル及びＭＣＨＣレベルは、治療後に低減された。

これらの研究は、ヒトにおける化合物２５の用量関連で一貫した薬力学的制御、並びに化合物２５を用いたＨＨ患者の治療後の血清鉄貯蔵及びＲＢＣ完全性の両方における改善を証明し、過剰な鉄によるＨＨ及び関節症を含むがこれらに限定されない、ＨＨを治療するために化合物２５及び他のヘプシジン模倣体を使用することを支持している。

本明細書中で言及され、及び／又は本出願データシートに列挙される上記の米国特許、米国特許出願公報、米国特許出願書、外国特許、外国特許出願書、及び非特許公報は全て、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。

前述から、本発明の具体的な実施形態が例証目的のために本明細書に説明されているが、本発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく、様々な修正が加えられてもよいことが理解されるであろう。

Claims (46)

1. ヒト対象において、遺伝性ヘモクロマトーシス、遺伝性ヘモクロマトーシス関節症、又は遺伝性ヘモクロマトーシス関節症に関連する関節痛を治療する方法であって、前記対象に有効量のヘプシジン模倣体を投与することを含み、前記有効量が、約５ｍｇ～約４０ｍｇの範囲の用量を含み、任意選択で、前記対象が、治療過程にわたって異なる期間中に異なる用量を投与される、方法。
2. 前記対象が、前記治療過程中の少なくとも一部の期間に、１週間に約１回又は１週間に約２回、前記有効量の前記ヘプシジン模倣体を投与される、請求項１に記載の方法。
3. 前記対象が、前記治療過程中の少なくとも一部の期間に、１週間に約２回、約５ｍｇ～約２０ｍｇの前記ヘプシジン模倣体を投与される、請求項２に記載の方法。
4. 前記対象が、前記治療過程中の少なくとも一部の期間に、１週間に約１回、約１０ｍｇ～約４０ｍｇの前記ヘプシジン模倣体を投与される、請求項２に記載の方法。
5. 前記有効量が、前記対象のトランスフェリン飽和度（ＴＳＡＴ）レベル及び／又は血清鉄レベルの低減を引き起こす、請求項１～４のいずれか一項に記載の方法。
6. 前記対象のＴＳＡＴレベルが、４５％未満に低減される、請求項５に記載の方法。
7. 前記対象のＴＳＡＴレベルが、４０％未満に低減される、請求項５に記載の方法。
8. 前記対象のＴＳＡＴレベルが、前記ヘプシジン模倣体を用いた前記治療過程にわたって４５％未満に維持され、任意選択で、前記治療過程が、少なくとも２４週間を含む、請求項６又は７に記載の方法。
9. ヘプシジン模倣体が、式Ｉを有するペプチド：
   Ｒ１－Ｘ－Ｙ－Ｒ２ （Ｉ）
   又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物であり、
   式中、
   Ｒ１が、水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ６－Ｃ１２アリール、Ｃ１－Ｃ２０アルカノイル、又はｐＧｌｕであり、
   Ｒ２が、ＮＨ_２又はＯＨであり、
   Ｘが、式ＩＩのアミノ酸配列であり、
   Ｘ１－Ｘ２－Ｘ３－Ｘ４－Ｘ５－Ｘ６－Ｘ７－Ｘ８－Ｘ９－Ｘ１０ （ＩＩ）
   式中、
   Ｘ１が、Ａｓｐ、Ａｌａ、Ｉｄａ、ｐＧｌｕ、ｂｈＡｓｐ、Ｌｅｕ、Ｄ－Ａｓｐ、又は不存在であり、
   Ｘ２が、Ｔｈｒ、Ａｌａ、又はＤ－Ｔｈｒであり、
   Ｘ３が、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｄ－Ｈｉｓ、又はＬｙｓであり、
   Ｘ４が、Ｐｈｅ、Ａｌａ、Ｄｐａ、又はＤ－Ｐｈｅであり、
   Ｘ５が、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ｄ－Ｐｒｏ、又はｂｈＰｒｏであり、
   Ｘ６が、Ｉｌｅ、Ｃｙｓ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｄ－Ｉｌｅ、又はＤ－Ｃｙｓであり、
   Ｘ７が、Ｃｙｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｐｈｅ、Ｄ－Ｉｌｅ、又はＤ－Ｃｙｓであり、
   Ｘ８が、Ｉｌｅ、Ａｒｇ、Ｐｈｅ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、又はＤ－Ｉｌｅであり、
   Ｘ９が、Ｐｈｅ又はｂｈＰｈｅであり、
   Ｘ１０が、Ｌｙｓ、Ｐｈｅ、又は不存在であり、
   Ｙが不存在である場合、Ｘ７はＩｌｅであり、
   Ｙが、式ＩＩＩのアミノ酸配列であり、
   Ｙ１－Ｙ２－Ｙ３－Ｙ４－Ｙ５－Ｙ６－Ｙ７－Ｙ８－Ｙ９－Ｙ１０－Ｙ１１－Ｙ１２－Ｙ１３－Ｙ１４－Ｙ１５ （ＩＩＩ）
   式中、
   Ｙ１が、Ｇｌｙ、Ｃｙｓ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、Ｄ－Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ｓｅｒ、又は不存在であり、
   Ｙ２が、Ｐｒｏ、Ａｌａ、Ｃｙｓ、Ｇｌｙ、又は不存在であり、
   Ｙ３が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ａｌａ、Ｔｒｐ、又は不存在であり、
   Ｙ４が、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、Ｇｌｙ、Ｔｒｐ、Ａｌａ、Ｈｉｓ、Ｔｙｒ、又は不存在であり、
   Ｙ５が、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｒｇ、Ａｌａ、又は不存在であり、
   Ｙ６が、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、Ｉｌｅ、Ａｌａ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、又は不存在であり、
   Ｙ７が、Ｔｒｐ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、又は不存在であり、
   Ｙ８が、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｇｌｙ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、Ａｓｐ、Ａｒｇ、又は不存在であり、
   Ｙ９が、Ｃｙｓ、Ｔｙｒ、又は不存在であり、
   Ｙ１０が、Ｍｅｔ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、又は不存在であり、
   Ｙ１１が、Ａｒｇ、Ｍｅｔ、Ｃｙｓ、Ｌｙｓ、又は不存在であり、
   Ｙ１２が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｌａ、又は不存在であり、
   Ｙ１３が、Ａｒｇ、Ｃｙｓ、Ｌｙｓ、Ｖａｌ、又は不存在であり、
   Ｙ１４が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｐｒｏ、Ｃｙｓ、Ｔｈｒ、又は不存在であり、
   Ｙ１５が、Ｔｈｒ、Ａｒｇ、又は不存在であり、
   前記式Ｉのペプチドが、任意選択で、Ｒ１、Ｘ、又はＹ上でＰＥＧ化され、
   前記ペプチドのアミノ酸の側鎖が、任意選択で、親油性置換基又はポリマー部分にコンジュゲートされ、
   前記式Ｉのペプチドが、任意選択で、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有し、
   Ｉｄａが、イミノ二酢酸であり、ｐＧｌｕが、ピログルタミン酸であり、ｂｈＡｓｐが、β－ホモアスパラギン酸であり、ｂｈＰｒｏが、β－ホモプロリンである、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。
10. Ｒ１が、水素、イソ吉草酸、イソ酪酸又はアセチルである、請求項９に記載の方法。
11. Ｘが、式ＩＶのアミノ酸配列であり、
    Ｘ１－Ｔｈｒ－Ｈｉｓ－Ｘ４－Ｘ５－Ｘ６－Ｘ７－Ｘ８－Ｐｈｅ－Ｘ１０ （ＩＶ）
    式中、
    Ｘ１が、Ａｓｐ、Ｉｄａ、ｐＧｌｕ、ｂｈＡｓｐ、又は不存在であり、
    Ｘ４が、Ｐｈｅ又はＤｐａであり、
    Ｘ５が、Ｐｒｏ又はｂｈＰｒｏであり、
    Ｘ６が、Ｉｌｅ、Ｃｙｓ、又はＡｒｇであり、
    Ｘ７が、Ｃｙｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、又はＶａｌであり、
    Ｘ８が、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｇｌｎ、又はＡｒｇであり、
    Ｘ１０が、Ｌｙｓ又は不存在である、請求項９又は１０に記載の方法。
12. Ｘが、式Ｖのアミノ酸配列であり、
    Ｘ１－Ｔｈｒ－Ｈｉｓ－Ｘ４－Ｘ５－Ｃｙｓ－Ｉｌｅ－Ｘ８－Ｐｈｅ－Ｘ１０ （Ｖ）
    式中、
    Ｘ１が、Ａｓｐ、Ｉｄａ、ｐＧｌｕ、ｂｈＡｓｐ、又は不存在であり、
    Ｘ４が、Ｐｈｅ又はＤｐａであり、
    Ｘ５が、Ｐｒｏ又はｂｈＰｒｏであり、
    Ｘ８が、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｇｌｎ又はＡｒｇであり、
    Ｘ１０が、Ｌｙｓ又は不存在である、請求項１０又は１１に記載の方法。
13. 前記ペプチドが、式ＶＩ：
    Ｒ^１－Ｘ－Ｙ－Ｒ^２ （ＶＩ）
    又はその薬学的に許容される塩を有し、式中、
    Ｒ^１が、水素、イソ吉草酸、イソ酪酸、又はアセチルであり、
    Ｒ^２が、ＮＨ_２又はＯＨであり、
    Ｘが、式ＶＩＩのアミノ酸配列であり、
    Ｘ１－Ｔｈｒ－Ｈｉｓ－Ｘ４－Ｘ５－Ｃｙｓ－Ｉｌｅ－Ｘ８－Ｐｈｅ－Ｘ１０ （ＶＩＩ）
    式中、
    Ｘ１が、Ａｓｐ、Ｉｄａ、ｐＧｌｕ、ｂｈＡｓｐ、又は不存在であり、
    Ｘ４が、Ｐｈｅ又はＤｐａであり、
    Ｘ５が、Ｐｒｏ又はｂｈＰｒｏであり、
    Ｘ８が、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｇｌｎ、又はＡｒｇであり、
    Ｘ１０が、Ｌｙｓ又は不存在であり、
    Ｙが、式ＶＩＩＩのアミノ酸配列であり、
    Ｙ１－Ｐｒｏ－Ｙ３－Ｓｅｒ－Ｙ５－Ｙ６－Ｙ７－Ｙ８－Ｃｙｓ－Ｙ１０ （ＶＩＩＩ）
    式中、
    Ｙ１が、Ｇｌｙ、Ｇｌｕ、Ｖａｌ、又はＬｙｓであり、
    Ｙ３が、Ａｒｇ又はＬｙｓであり、
    Ｙ５が、Ａｒｇ又はＬｙｓであり、
    Ｙ６が、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、Ｉｌｅ、又はＡｒｇであり、
    Ｙ７が、Ｔｒｐ又は不存在であり、
    Ｙ８が、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、又は不存在であり、
    Ｙ１０が、Ｌｙｓ又は不存在であり、
    前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有し、
    前記ペプチドが、任意選択で、Ｒ^１、Ｘ、又はＹ上でＰＥＧ化され、
    前記ペプチドのアミノ酸の側鎖が、任意選択で、親油性置換基又はポリマー部分にコンジュゲートされ、
    Ｉｄａが、イミノ二酢酸であり、ｐＧｌｕが、ピログルタミン酸であり、ｂｈＡｓｐが、β－ホモアスパラギン酸であり、ｂｈＰｒｏが、β－ホモプロリンである、請求項９に記載の方法。
14. 前記ペプチドが、以下の配列のうちの１つを有し、
    ＤＴＨＦＰＩＣＩＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣ（配列番号４６）、
    ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫ（配列番号４７）、
    ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＥＰＲＳＫＧＷＶＣＫ（配列番号４８）、
    ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＫＧＷＡＣＫ（配列番号４９）、
    ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫＫ（配列番号５０）、
    ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＶＣＨＲＰＫＧＣＹＲＲＶＣＲ（配列番号５１）、
    ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫ（配列番号５２）、
    ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＫＰＲＳＫＧＷＶＣＫ（配列番号５３）、
    ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＲＧＷＶＣＫ（配列番号５４）、
    ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＫＳＫＧＷＶＣＫ（配列番号５５）、
    ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫＧＣＫ（配列番号５６）、
    ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＫＳＫＧＷＥＣＫ（配列番号５７）、
    ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫＫＣＫ（配列番号５８）、
    ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫＧＣＫＫ（配列番号５９）、
    ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＫＰＲＳＫＧＣＫ（配列番号６０）、
    ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＫＳＫＧＣＫ（配列番号６１）、
    ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ （配列番号６２）、
    ＤＴＨＦＰＣＩＩＦ（配列番号６３）、又は
    ＤＴＫＦＰＣＩＩＦ（配列番号６４）、
    前記ペプチドが、任意選択で、Ｒ１、Ｘ、又はＹ上でＰＥＧ化され、
    前記ペプチドのアミノ酸の側鎖が、任意選択で、親油性置換基又はポリマー部分にコンジュゲートされる、請求項９～１３のいずれか一項に記載の方法。
15. 前記ペプチドが、以下の配列又は構造のうちの１つを有し、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＩＣＩＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣ－ＮＨ_２（化合物１、配列番号１）、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物２、配列番号２）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＥＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物３、配列番号３）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＫＧＷＡＣＫ－ＮＨ_２（化合物４、配列番号４）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫＫ－ＮＨ_２（化合物５、配列番号５）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＶＣＨＲＰＫＧＣＹＲＲＶＣＲ－ＮＨ_２（化合物６、配列番号６）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ（Ｋ（ＰＥＧ８））ＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物７、配列番号７）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ（Ｋ（ＰＥＧ８））ＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物８、配列番号８）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＩＣＩＦＧＰＲＳ（Ｋ（ＰＥＧ８））ＧＷＶＣ－ＮＨ_２（化合物９、配列番号９）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＩＣＩＦＧＰＲＳ（Ｋ（ＰＥＧ４））ＧＷＶＣ－ＮＨ_２（化合物１０、配列番号１０）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＲＧＷＶＣ（Ｋ（ＰＥＧ８））－ＮＨ_２（化合物１１、配列番号１１）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＲＧＷＶＣ（Ｋ（ＰＥＧ４））－ＮＨ_２（化合物１２、配列番号１２）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＲＧＷＶＣ（Ｋ（ＰＥＧ２））－ＮＨ_２（化合物１３、配列番号１３）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ（Ｋ（Ｐａｌｍ））ＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物１４、配列番号１４）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ）Ｋ（Ｐａｌｍ））ＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物１５、配列番号１５）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰ（Ｋ（Ｐａｌｍ））ＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物１６、配列番号１６）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳ（Ｋ（Ｐａｌｍ））ＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物１７、配列番号１７）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣ（Ｋ（Ｐａｌｍ））ＮＨ_２（化合物１８、配列番号１８）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））ＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物１９、配列番号１９）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））ＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物２０、配列番号２０）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））ＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物２１、配列番号２１）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））ＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物２２、配列番号２２）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））－ＮＨ_２（化合物２３、配列番号２３）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣ（Ｋ（ＰＥＧ８））－ＮＨ_２（化合物２４、配列番号２４）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＦＥＰＲＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物２５、配列番号２５）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ－Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ）－ＰＲＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物２６、配列番号２６）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物２７、配列番号２７）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＳＫＧＷＥＣＫ－ＮＨ_２（化合物２８、配列番号２８）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物２９、配列番号２９）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＣＫ－ＮＨ_２（化合物３０、配列番号３０）、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫＧＣＫ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））－ＮＨ_２（化合物３１、配列番号３１）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ－Ｋ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ）－ＦＥＰＲＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物３２、配列番号３２）_、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫ（Ｆ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ））ＰＲＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物３３、配列番号３３）、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰ（Ｋ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ））ＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物３４、配列番号３４）、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳ（Ｋ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ））ＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物３５、配列番号３５）、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫ（Ｋ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ））ＣＫ－ＮＨ_２（化合物３６、配列番号３６）、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫＧＣ（Ｋ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ））Ｋ－ＮＨ_２（化合物３７、配列番号３７）、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳＫＧＣ（Ｋ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ））－ＮＨ_２（化合物３８、配列番号３８）、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ（Ｋ（ＰＥＧ１１－Ｐａｌｍ））ＰＲＳＫ［Ｓａｒ］ＣＫ－ＮＨ_２（化合物３９、配列番号３９）、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ－ＮＨ_２（化合物４０、配列番号４０）、
    Ｈｙ－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ－ＮＨ_２（化合物４１、配列番号４１）、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦ－ＮＨ_２（化合物４２、配列番号４２）、
    Ｈｙ－ＤＴＨＦＰＣＩＩＫＦ－ＮＨ_２（化合物４３、配列番号４３）、
    イソ吉草酸－ＤＴＫＦＰＣＩＩＦ－ＮＨ_２（化合物４４、配列番号４４）、又は
    Ｈｙ－ＤＴＫＦＰＣＩＩＦ－ＮＨ_２（化合物４５、配列番号４５）、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９～１３のいずれか一項に記載の方法。
16. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物２、配列番号２）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
17. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＥＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物３、配列番号３）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
18. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ（Ｋ（ＰＥＧ８））ＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物７、配列番号７）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
19. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ（Ｋ（ＰＥＧ８））ＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物８、配列番号８）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
20. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＩＦＧＰＲＳＲＧＷＶＣ（Ｋ（ＰＥＧ８））－ＮＨ_２（化合物１１、配列番号１１）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
21. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ（Ｋ（Ｐａｌｍ））ＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物１４、配列番号１４）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
22. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ（Ｋ（Ｐａｌｍ））ＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物１５、配列番号１５）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
23. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰ（Ｋ（Ｐａｌｍ））ＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物１６、配列番号１６）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
24. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣ（Ｋ（Ｐａｌｍ））－ＮＨ_２（化合物１８、配列番号１８）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
25. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））ＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物１９、配列番号１９）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
26. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））ＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物２０、配列番号２０）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
27. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））ＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物２１、配列番号２１）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
28. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））ＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物２２、配列番号２２）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
29. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））－ＮＨ_２（化合物２３、配列番号２３）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
30. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＧＰＲＳＫＧＷＶＣ（Ｋ（ＰＥＧ８））－ＮＨ_２（化合物２４、配列番号２４）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
31. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＦＥＰＲＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物２５、配列番号２５）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
32. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＰＲＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物２６、配列番号２６）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
33. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物２７、配列番号２７）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
34. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物２８、配列番号２８）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
35. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ（Ｋ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ））ＦＥＰＲＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物３２、配列番号３２）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
36. 前記ペプチドが、イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰ（Ｋ（Ｄａｐａ－Ｐａｌｍ））ＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物３４、配列番号３４）であり、
    任意選択で、前記ペプチドが、２つのシステイン残基のチオール基の間に形成されたジスルフィド結合を有する、請求項９又は１０に記載の方法。
37. 前記ペプチドが、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ（Ｋ（ＰＥＧ３－Ｐａｌｍ））ＰＲＳＫＧＷＶＣＫ－ＮＨ_２（化合物２０、配列番号２０）、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＦＥＰＲＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物２５、配列番号２５）、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＰＲＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物２６、配列番号２６）、
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物２７、配列番号２７）、及び
    イソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩＫＦＥＰＲＳ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＧＣＫ－ＮＨ_２（化合物２８、配列番号２８）からなる群から選択され、
    前記アミノ酸が、Ｌ－アミノ酸である、請求項９又は１０に記載の方法。
38. 前記方法が、前記ヘプシジン模倣体が前記対象に投与される前及び後の前記対象において、ＴＳＡＴ及び／又は血清鉄レベルを測定することを含み、任意選択で、前記ＴＳＡＴレベルが、前記対象への投与後の前記ヘプシジン模倣体のトラフレベルで測定される、請求項１～３７のいずれか一項に記載の方法。
39. 前記ヘプシジン模倣体が、前記対象に皮下投与される、請求項１～３８のいずれか一項に記載の方法。
40. 前記対象が、治療前に少なくとも６か月間、任意選択で１か月当たり０．２５回～１回の瀉血の瀉血頻度で、瀉血を受けていた、請求項１～３９のいずれか一項に記載の方法。
41. 前記治療中、前記対象が、任意選択で１か月当たり０．１回未満、０．０５回未満、又は瀉血なしの瀉血頻度で、実質的により少ない瀉血を必要としたか、又は瀉血を必要としなかった、請求項４０に記載の方法。
42. ヒト対象において遺伝性ヘモクロマトーシスを治療する方法であって、前記対象に、有効量の以下の式を有する化合物２５：
    又はその薬学的に許容される塩を投与することを含み、前記有効量が、約５ｍｇ～約４０ｍｇの範囲の用量を含み、任意選択で、前記対象が、治療過程にわたって異なる期間中に異なる用量を投与される、方法。
43. ヒト対象において遺伝性ヘモクロマトーシスを治療する方法であって、前記対象に、有効量のイソ吉草酸－ＤＴＨＦＰＣＩ（Ｋ（ｉｓｏＧｌｕ－Ｐａｌｍ））ＦＥＰＲＳＫＧＣＫ－ＮＨ_２（配列番号２５）の配列を有するペプチド、又はその薬学的に許容される塩を投与することを含み、前記ペプチド中の２つのシステイン残基のチオール基が、任意選択でジスルフィド結合を形成し、前記有効量が、約５ｍｇ～約４０ｍｇの範囲の用量を含み、任意選択で、前記対象が、治療過程にわたって異なる期間中に異なる用量を投与される、方法。
44. ヒト対象において遺伝性ヘモクロマトーシス関節症又は遺伝性ヘモクロマトーシス関節症に関連する関節痛を治療する方法であって、有効量のヘプシジン模倣体を前記対象に投与することを含む、方法。
45. 前記有効量が、約５ｍｇ～約４０ｍｇの範囲の用量を含み、任意選択で、前記対象が、治療過程にわたって異なる期間中に異なる用量を投与される、請求項４４に記載の方法。
46. 前記ヘプシジン模倣体が、化合物２５である、請求項４４又は４５に記載の方法。