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JP2023552812A - Ｐｓｍａおよびエフェクタ細胞抗原を標的とする腫瘍活性化抗体に関連する組成物ならびに方法 - Google Patents

Ｐｓｍａおよびエフェクタ細胞抗原を標的とする腫瘍活性化抗体に関連する組成物ならびに方法 Download PDF

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JP2023552812A
JP2023552812A JP2023534888A JP2023534888A JP2023552812A JP 2023552812 A JP2023552812 A JP 2023552812A JP 2023534888 A JP2023534888 A JP 2023534888A JP 2023534888 A JP2023534888 A JP 2023534888A JP 2023552812 A JP2023552812 A JP 2023552812A
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complex
seq
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キャンベル，デイビッド
アール． ディライモンド，トーマス
Original Assignee
ジャナックス セラピューティクス，インク．
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Abstract

本明細書では、ＣＤ３、その医薬組成物、および核酸などのＰＳＭＡおよびエフェクタ細胞抗原に選択的に結合する多特異性抗体、ならびにそれを作製かつ発見するための方法が、提供される。【選択図】図１Ａ

Description

関連出願への相互参照
本出願は、２０２０年１２月９日出願の米国仮特許出願第６３／１２３，３２９号、および２０２１年５月１２日出願の米国仮特許出願第６３／１８７，６９９号に基づく利益を主張し、これら出願はそれぞれ全体を参照することで本明細書に援用される。
配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩフォーマットで電子的に提出され、参照により本明細書で援用される配列表を含んでいる。２０２１年１１月３０日に作製された当該ＡＳＣＩＩのコピーは、名称５２４２６－７３０＿６０１＿ＳＬ．ｔｘｔ、サイズ３２１，０６７バイトである。
本明細書中の特定の実施形態では、式Ｉ：
Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉ）
による単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、式中、Ａ１は、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子を含み、Ｐ１は、Ａ１に結合するペプチドを含み、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含み、Ｈ１は、半減期延長分子を含み、Ａ２は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子を含む、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体が開示される。いくつかの実施形態では、第１の抗原認識分子は、抗体または抗体フラグメントを含む。いくつかの実施形態では、第１の抗原認識分子は、ヒトまたはヒト化である抗体または抗体フラグメントを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１は、第１の抗原認識分子のＮ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２は、第１の抗原認識分子のＣ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ｌ１は、第１の抗原認識分子のＣ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２は、第１の抗原認識分子のＮ末端に結合される。いくつかの実施形態では、抗体または抗体フラグメントは、単鎖可変フラグメント、単一ドメイン抗体、またはＦａｂフラグメントを含む。いくつかの実施形態では、Ａ１は、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは、ｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドおよびｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、Ａ１は単一ドメイン抗体である、いくつかの実施形態では、抗体または抗体フラグメントは、ラクダ科由来単一ドメイン抗体の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）、重鎖可変ドメイン（ＶＨドメイン）、軽鎖可変ドメイン（ＶＬドメイン）、または可変ドメイン（ＶＨＨ）を含む。いくつかの実施形態では、Ａ１は、抗ＣＤ３ｅ単鎖可変フラグメントを含む。いくつかの実施形態では、Ａ１は、ＣＤ３発現細胞上でＣＤ３に対して１μＭ以下のＫＤ結合を有する抗ＣＤ３ｅ単鎖可変フラグメントを含む。いくつかの実施形態では、エフェクタ細胞抗原は、ＣＤ３を含む。いくつかの実施形態では、Ａ１は、それぞれがヒトＣＤ３に特異的に結合可能である可変軽鎖および可変重鎖を含む。いくつかの実施形態では、Ａ１は、ムロモナブ－ＣＤ３（ＯＫＴ３）、オテリキシズマブ（ＴＲＸ４）、テプリズマブ（ＭＧＡ０３１）、ビシリズマブ（Ｎｕｖｉｏｎ）、ＳＰ３４、Ｘ３５、ＶＩＴ３、ＢＭＡ０３０（ＢＷ２６４／５６）、ＣＬＢ－Ｔ３／３、ＣＲＩＳ７、ＹＴＨ１２．５、Ｆ１１１－４０９、ＣＬＢ－Ｔ３．４．２、ＴＲ－６６、ＷＴ３２、ＳＰｖ－Ｔ３ｂ、１１Ｄ８、ＸＩＩＩ－１４１、ＸＩＩＩ－４６、ＸＩＩＩ－８７、１２Ｆ６、Ｔ３／ＲＷ２－８Ｃ８、Ｔ３／ＲＷ２－４Ｂ６、ＯＫＴ３Ｄ、Ｍ－Ｔ３０１、ＳＭＣ２、Ｆ１０１．０１、ＵＣＨＴ－１、ＷＴ－３１、１５８６５、１５８６５ｖ１２、１５８６５ｖ１６、および１５８６５ｖ１９からなる群から選択される相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼによって切断される場合、式Ｉのポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、エフェクタ細胞に結合する。いくつかの実施形態では、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼによって切断され、Ａ１がエフェクタ細胞に結合する場合、式Ｉのポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、エフェクタ細胞に結合する。いくつかの実施形態では、エフェクタ細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、Ａ１は、エフェクタ細胞上のＴＣＲ－ＣＤ３複合体の一部であるポリペプチドに結合する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＣＤ３複合体の一部であるポリペプチドは、ヒトＣＤ３εである。いくつかの実施形態では、エフェクタ細胞抗原はＣＤ３を含み、ｓｃＦＶは、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、ｓｃＦＶのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３は、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号１、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号２、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号３を含み、ｓｃＦＶは、ＣＤＲとしてＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３を含み、ｓｃＦＶのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３は、ＬＣ－ＣＤＲ１では配列番号４、ＬＣ－ＣＤＲ２では配列番号５、およびＬＣ－ＣＤＲ３では配列番号６を含む。いくつかの実施形態では、エフェクタ細胞抗原はＣＤ３を含み、ｓｃＦｖは、配列番号７によるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第２の抗原認識分子は、抗体または抗体フラグメントを含む。いくつかの実施形態では、抗体またはその抗体フラグメントは、単鎖可変フラグメント、単一ドメイン抗体、またはＦａｂを含む。いくつかの実施形態では、抗体またはその抗体フラグメントは、ラクダ科由来単一ドメイン抗体の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）、重鎖可変ドメイン（ＶＨドメイン）、軽鎖可変ドメイン（ＶＬドメイン）、または可変ドメイン（ＶＨＨ）を含む。いくつかの実施形態では、抗体またはその抗体フラグメントは、ヒト化またはヒトである。いくつかの実施形態では、Ａ２は、Ｆａｂである。いくつかの実施形態では、Ｆａｂは、（ａ）Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドおよび（ｂ）Ｆａｂ重鎖ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂは、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、ＦａｂのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３は、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号８、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号９、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号１０を含み、Ｆａｂは、ＣＤＲとしてＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３を含み、ＦａｂのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３は、ＬＣ－ＣＤＲ１では配列番号１１、ＬＣ－ＣＤＲ２では配列番号１２、およびＬＣ－ＣＤＲ３では配列番号１３を含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドは、配列番号１４によるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ重鎖ポリペプチドは、配列番号１５によるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドは、Ａ１の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）のＣ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドは、Ａ１の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）のＣ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドは、Ａ１の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）のＮ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドは、Ａ１の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）のＮ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドは、Ａ１のｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドに結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドは、Ａ１のｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドに結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドは、Ａ１のｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドに結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドは、Ａ１のｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドに結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２は、Ｐ２およびＬ２をさらに含み、Ｐ２は、Ａ２に結合するペプチドを含み、Ｌ２は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、式Ｉａ：
Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）
によるものである。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドは、Ａ１のｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドに結合され、Ｌ２は、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドに結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドは、Ａ１のｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドに結合され、Ｌ２は、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドに結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドは、Ａ１のｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドに結合され、Ｌ２は、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドに結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドは、Ａ１のｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドに結合され、Ｌ２は、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドに結合される。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、エフェクタ細胞抗原へのＡ１の結合を損なう。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、イオン相互作用、静電的相互作用、疎水的相互作用、Ｐｉ－スタッキング相互作用、およびＨ結合相互作用、またはそれらの組合せによりＡ１に結合される。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、エフェクタ細胞抗原に対して７０％未満の配列相同性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ２は、ＰＳＭＡへのＡ２の結合を損なう。いくつかの実施形態では、Ｐ２は、イオン相互作用、静電的相互作用、疎水的相互作用、Ｐｉ－スタッキング相互作用、およびＨ結合相互作用、またはそれらの組合せによりＡ２に結合される。いくつかの実施形態では、Ｐ２は、抗原結合部位またはその付近でＡ２に結合される。いくつかの実施形態では、Ｐ２は、ＰＳＭＡに対して７０％未満の配列相同性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ１またはＰ２は、長さが少なくとも１０アミノ酸のペプチド配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１またはＰ２は、長さが少なくとも１０アミノ酸かつ２０アミノ酸以下のペプチド配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１またはＰ２は、長さが少なくとも１６アミノ酸のペプチド配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１またはＰ２は、長さが４０アミノ酸以下のペプチド配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１またはＰ２は、少なくとも２つのシステインアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１またはＰ２は、環状ペプチドまたは直鎖ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１またはＰ２は、環状ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１またはＰ２は、直鎖ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、少なくとも２つのシステインアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、配列番号１６～１９または７８のうちのいずれか１つによるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１は、Ａ１のＮ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ｌ１は、Ａ１のＣ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ｌ２は、Ａ２のＮ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ｌ２は、Ａ２のＣ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ｌ１またはＬ２は、少なくとも５～５０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ１またはＬ２は、少なくとも１０～３０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ１またはＬ２は、少なくとも１０のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ１またはＬ２は、少なくとも１８のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ１またはＬ２は、少なくとも２６のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ１またはＬ２は、（Ｇ２Ｓ）ｎを含む式を有しており、式中、ｎは１～３の整数である（配列番号１１８）。いくつかの実施形態では、Ｌ１は、（Ｇ２Ｓ）ｎ、（ＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５０）、（ＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５１）、（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５２）、および（ＧＳＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５３）からなる群から選択される式を有しており、式中、ｎは少なくとも１の整数である。いくつかの実施形態では、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断され、それによりＡ１がエフェクタ細胞抗原に曝される場合、Ｐ１はＡ１から結合解除されるようになる。いくつかの実施形態では、Ｌ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断され、それによりＡ２がＰＳＭＡに曝される場合、Ｐ２はＡ２から結合解除されるようになる。いくつかの実施形態では、腫瘍特異的プロテアーゼは、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）、セリンプロテアーゼ、システインプロテアーゼ、トレオニンプロテアーゼ、およびアスパラギン酸プロテアーゼからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、マトリックスメタロプロテアーゼは、ＭＭＰ２、ＭＭＰ７、ＭＭＰ９、ＭＭＰ１３、またはＭＭＰ１４を含む。いくつかの実施形態では、セリンプロテアーゼは、マトリプターゼ（ＭＴＳＰ１）、ウロキナーゼ、またはヘプシンを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１またはＬ２は、ウロキナーゼ切断可能アミノ酸配列、マトリプターゼ切断可能アミノ酸配列、マトリックスメタロプロテアーゼ切断可能アミノ酸配列、またはレグマイン切断可能アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１またはＬ２は、配列番号２３によるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１またはＬ２は、配列番号２０～４９のうちのいずれか１つによるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１またはＬ２は、リンカー２５（ＩＳＳＧＬＬＳＧＲＳＤＡＧ）（配列番号４５）、リンカー２６（ＡＡＧＬＬＡＰＰＧＧＬＳＧＲＳＤＡＧ）（配列番号４６）、リンカー２７（ＳＰＬＧＬＳＧＲＳＤＡＧ）（配列番号４７）、もしくはリンカー２８（ＬＳＧＲＳＤＡＧＳＰＬＧＬＡＧ）（配列番号４８）のアミノ酸配列、または、リンカー２５、リンカー２６、リンカー２７、もしくはリンカー２８のアミノ酸配列に対し１、２、もしくは３つのアミノ酸置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１は、ポリマーを含む。いくつかの実施形態では、ポリマーは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である。いくつかの実施形態では、Ｈ１は、アルブミンを含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１は、Ｆｃドメインを含む。いくつかの実施形態では、アルブミンは、血清アルブミンである。いくつかの実施形態では、アルブミンは、ヒト血清アルブミンである。いくつかの実施形態では、Ｈ１は、ポリペプチド、リガンド、または小分子を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチド、リガンド、または小分子は、血清タンパク質もしくはそのフラグメント、循環免疫グロブリンもしくはそのフラグメント、またはＣＤ３５／ＣＲ１に結合する。いくつかの実施形態では、血清タンパク質は、チロキシン結合タンパク質、トランスサイレチン、ａ１－酸性糖タンパク質（ａ １－ａｃｉｄ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ）、トランスフェリン、トランスフェリン受容体もしくはそのトランスフェリン結合部分、フィブリノゲン、またはアルブミンを含む。いくつかの実施形態では、循環免疫グロブリン分子は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ｓｌｇＡ、ＩｇＭ、またはＩｇＤを含む。いくつかの実施形態では、血清タンパク質は、アルブミンである。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、単一ドメイン抗体、単鎖可変フラグメント、またはＦａｂを含む。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、アルブミンに結合する単一ドメイン抗体を含む。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、ヒト抗体またはヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、６４５ｇＨ１ｇＬ１である。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、６４５ｄｓｇＨ５ｇＬ４である。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、２３－１３－Ａ０１－ｓｃ０２である。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、Ａ１０ｍ３またはそのフラグメントである。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、ＤＯＭ７ｒ－３１である。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、ＤＯＭ７ｈ－１１－１５である。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、Ａｌｂ－１、Ａｌｂ－８、またはＡｌｂ－２３である。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、１０Ｅである。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、単一ドメイン抗体のＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３は、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号５４、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号５５、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号５６を含む。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、単一ドメイン抗体のＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３は、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号５８、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号５９、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号６０を含む。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、ＳＡ２１である。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、修飾アミノ酸、非天然アミノ酸、非天然の修飾アミノ酸、またはそれらの組合せを含む。いくつかの実施形態では、修飾アミノ酸または非天然の修飾アミノ酸は、翻訳後修飾を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１は、Ｐ１にＨ１を接続する連結部分（Ｌ３）を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、少なくとも５～５０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、少なくとも１０～３０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、少なくとも１０のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、少なくとも１８のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、少なくとも２６のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、（Ｇ２Ｓ）ｎ、（ＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５０）、（ＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５１）、（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５２）、および（ＧＳＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５３）からなる群から選択される式を有しており、式中、ｎは少なくとも１の整数である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、配列番号２２によるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６２～７７に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７２に対して少なくとも９５％の配列同一性
を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７３に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６２および配列番号６３に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６４および配列番号６５に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６６および配列番号６７に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６８および配列番号６９に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７０および配列番号７１に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７２および配列番号７３に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７４および配列番号７５に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７６および配列番号７７に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
本明細書中の特定の実施形態では、（ａ）本明細書中に開示される単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体と、（ｂ）薬学的に許容可能な賦形剤とを含む医薬組成物が開示される。
本明細書中の特定の実施形態では、本明細書中に記載のポリペプチドまたはポリペプチド複合体をコードする単離された組換え核酸分子が開示される。
本明細書中の特定の実施形態では、式ＩＩ：
Ｌ１ａ－Ｐ１ａ－Ｈ１ａ（式ＩＩ）
による単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、式中、Ｌ１ａは、切断されない場合に、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子にＰ１ａを接続する、腫瘍特異的プロテアーゼにより切断された連結部分を含み、第１の抗原認識分子は、ＰＳＭＡに結合する第２の抗原認識分子に接続され、Ｐ１ａは、Ｌ１ａが切断されない場合に、第１の抗原認識分子に結合するペプチドを含み、Ｈ１ａは、半減期延長分子を含む、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体が開示される。いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、Ｌ１ａが切断されない場合、エフェクタ細胞抗原への第１の抗原認識分子の結合を損なう。いくつかの実施形態では、第１の抗原認識分子は、抗体または抗体フラグメントを含む。いくつかの実施形態では、エフェクタ細胞抗原は、抗ＣＤ３エフェクタ細胞抗原である。いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、エフェクタ細胞抗原に対して７０％未満の配列相同性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、長さが少なくとも１０アミノ酸のペプチド配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、長さが少なくとも１０アミノ酸かつ２０アミノ酸以下のペプチド配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、長さが少なくとも１６アミノ酸のペプチド配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、長さが４０アミノ酸以下のペプチド配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、少なくとも２つのシステインアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、環状ペプチドまたは直鎖ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、環状ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、直鎖ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、配列番号１６～１９のうちのいずれか１つからなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１ａは、ポリマーを含む。いくつかの実施形態では、ポリマーは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である。いくつかの実施形態では、Ｈ１ａは、アルブミンを含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１ａは、Ｆｃドメインを含む。いくつかの実施形態では、アルブミンは、血清アルブミンである。いくつかの実施形態では、アルブミンは、ヒト血清アルブミンである。いくつかの実施形態では、Ｈ１ａは、ポリペプチド、リガンド、または小分子を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチド、リガンド、または小分子は、血清タンパク質もしくはそのフラグメント、循環免疫グロブリンもしくはそのフラグメント、またはＣＤ３５／ＣＲ１に結合する。いくつかの実施形態では、血清タンパク質は、チロキシン結合タンパク質、トランスサイレチン、ａ１－酸性糖タンパク質、トランスフェリン、トランスフェリン受容体もしくはそのトランスフェリン結合部分、フィブリノゲン、またはアルブミンを含む。いくつかの実施形態では、循環免疫グロブリン分子は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ｓｌｇＡ、ＩｇＭ、またはＩｇＤを含む。いくつかの実施形態では、血清タンパク質は、アルブミンである。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、単一ドメイン抗体、単鎖可変フラグメント、またはＦａｂを含む。いくつかの実施形態では、抗体は、アルブミンに結合する単一ドメイン抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒト抗体またはヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、６４５ｇＨ１ｇＬ１である。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、６４５ｄｓｇＨ５ｇＬ４である。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、２３－１３－Ａ０１－ｓｃ０２である。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、Ａ１０ｍ３またはそのフラグメントである。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、ＤＯＭ７ｒ－３１である。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、ＤＯＭ７ｈ－１１－１５である。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、Ａｌｂ－１、Ａｌｂ－８、またはＡｌｂ－２３である。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、１０Ｅである。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、単一ドメイン抗体のＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３は、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号５４、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号５５、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号５６を含む。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、単一ドメイン抗体のＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３は、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号５８、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号５９、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号６０を含む。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、ＳＡ２１である。いくつかの実施形態では、Ｈ１ａは、Ｐ１ａにＨ１ａを接続する連結部分（Ｌ１ａ）を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１ａは、少なくとも５～５０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ１ａは、少なくとも１０～３０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ１ａは、少なくとも１０のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ１ａは、少なくとも１８のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ１ａは、少なくとも２６のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ１ａは、（Ｇ２Ｓ）ｎ、（ＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５０）、（ＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５１）、（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５２）、および（ＧＳＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５３）からなる群から選択される式を有しており、式中、ｎは少なくとも１の整数である。いくつかの実施形態では、Ｌ１ａは、配列番号２３によるアミノ酸配列を含む。本明細書中のいくつかの実施形態では、立体構成１：
による構造配置を含むポリペプチド複合体であって、ポリペプチド複合体は、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含む単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、エフェクタ細胞抗原へのｓｃＦｖの結合を損なうペプチドをさらに含んでおり、ペプチドは、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分によりｓｃＦｖの重鎖可変ドメインに連結されており、ペプチドは半減期延長分子をさらに含んでいる、ｓｃＦＶと、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂまたはＦａｂ’であって、ＦａｂまたはＦａｂ’は、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド鎖およびＦａｂ重鎖ポリペプチド鎖を含んでおり、Ｆａｂ重鎖ポリペプチド鎖は、ｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインのＣ末端に連結される、ＦａｂまたはＦａｂ’とを含んでいる、ポリペプチド複合体が開示される。本明細書中のいくつかの実施形態では、立体構成２：
による構造配置を含むポリペプチド複合体であって、ポリペプチド複合体は、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含む単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、エフェクタ細胞抗原へのｓｃＦｖの結合を損なうペプチドをさらに含んでおり、ペプチドは、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分によりｓｃＦｖの重鎖可変ドメインのＮ末端に連結されており、ペプチドは半減期延長分子をさらに含んでいる、ｓｃＦＶと、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂまたはＦａｂ’であって、ＦａｂまたはＦａｂ’は、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド鎖およびＦａｂ重鎖ポリペプチド鎖を含んでおり、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド鎖は、ｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインのＣ末端に連結される、ＦａｂまたはＦａｂ’とを含んでいる、ポリペプチド複合体が開示される。
参照による援用
本明細書で言及される刊行物、特許、および特許出願はすべて、あたかも個々の刊行物、特許、または特許出願がそれぞれ参照により援用されるように具体的かつ個々に示されるのと同じ程度にまで、参照により本明細書に援用される。
本開示の新規な特徴は、とりわけ添付の特許請求の範囲により説明される。本開示の特徴と利点は、本開示の原理が利用される例示的な実施形態および添付の図面を説明する、以下の詳細な説明を参照することによりさらに良く理解されるであろう。
正常な配向にある本開示のポリペプチド複合体を例示する図である。 反転された配向にある本開示のポリペプチド複合体を例示する図である。 本開示のいくつかのポリペプチド複合体におけるＰＳＭＡ結合の滴定データを例示する図である。 本開示のいくつかのポリペプチド複合体におけるＰＳＭＡ結合の滴定データを例示する図である。 本開示のいくつかのポリペプチド複合体におけるＰＳＭＡ結合の滴定データを例示する図である。 本開示のいくつかのポリペプチド複合体におけるＣＤ３ε結合の滴定データを例示する図である。 本開示のいくつかのポリペプチド複合体におけるＣＤ３ε結合の滴定データを例示する図である。 本開示のいくつかのポリペプチド複合体におけるＣＤ３ε結合の滴定データを例示する図である。 ＰＣ１またはＰＣ２で処置された２２Ｒｖ１腫瘍細胞の細胞生存率データを例示する図である。 ＰＣ１、ＰＣ５、またはＰＣ５で処理したＭＴＳＰ１により処置された２２Ｒｖ１腫瘍細胞の細胞生存率データを例示する図である。 ＰＣ２、ＭＴＳＰ１処理がある場合もしくはそうでない場合のＰＣ４、またはＭＴＳＰ１処理がある場合もしくはそうでない場合のＰＣ６で処置された２２Ｒｖ１腫瘍細胞の細胞生存率データを例示する図である。 ＰＣ１またはＰＣ２で処置されたＬＮＣａＰ腫瘍細胞の細胞生存率データを例示する図である。 ＰＣ２、ＰＣ４、またはＰＣ４で処理したＭＴＳＰ１により処置されたＬＮＣａＰ腫瘍細胞の細胞生存率データを例示する図である。 ポリペプチド複合体がＣＤ８＋Ｔ細胞の存在下で２２Ｒｖ１腫瘍細胞の死滅を媒介したことを例示する図である。 ポリペプチド複合体がＣＤ８＋Ｔ細胞の存在下で２２Ｒｖ１腫瘍細胞の死滅を媒介したことを例示する図である。 単回ＩＶボーラス注射後のカニクイザルのポリペプチド（ＰＳＭＡ ＴＣＥ）薬物動態を例示する図である。 単回ＩＶボーラス注射後のカニクイザルのポリペプチド（ＰＳＭＡ ＴＲＡＣＴｒｓ）薬物動態を例示する図である。 ＰＳＭＡ ＴＣＥの単回ＩＶボーラス後のカニクイザルのサイトカイン放出を例示する図である。 ＰＳＭＡポリペプチドＴＲＡＣＴｒ複合体の単回ＩＶボーラス後のカニクイザルのサイトカイン放出を例示する図である。 ＰＳＭＡ ＴＲＡＣＴＲの単回ＩＶボーラス後のカニクイザルのサイトカイン放出を例示する図である。 ＰＳＭＡ ＴＣＥの単回ＩＶボーラス後のカニクイザルの血清肝酵素を例示する図である。 ＰＳＭＡポリペプチドＴＲＡＣＴｒ複合体の単回ＩＶボーラス後のカニクイザルの血清肝酵素を例示する図である。 ＥＬＩＳＡにより測定されたときの、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチド－Ａおよびペプチド－Ｂのアラニンスキャニングペプチド（ａｌａｎｉｎｅ ｓｃａｎｎｉｎｇ ｐｅｐｔｉｄｅｓ）による抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ結合を例示する図である。 ＥＬＩＳＡにより測定されたときの、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチド－Ａおよびペプチド－Ｂのアラニンスキャニングペプチドによる抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ結合を例示する図である。 ＥＬＩＳＡにより測定されたときの、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチド－Ａおよびペプチド－Ｂのアラニンスキャニングペプチドによる抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ結合を例示する図である。 ＥＬＩＳＡにより測定されたときの、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチド－Ａおよびペプチド－Ｂのアラニンスキャニングペプチドによる抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ結合を例示する図である。 ＥＬＩＳＡにより測定されたときの、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチド－Ａおよびペプチド－Ｂのアラニンスキャニングペプチドによる抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ結合を例示する図である。 ＥＬＩＳＡにより測定されたときの、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチド－Ａおよびペプチド－Ｂのアラニンスキャニングペプチドによる抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ結合を例示する図である。 ＥＬＩＳＡにより測定されたときの、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチド－Ａおよびペプチド－ＢのアラニンスキャニングペプチドによるＣＤ３への抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ結合の阻害を例示する図である。 ＥＬＩＳＡにより測定されたときの、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチド－Ａおよびペプチド－ＢのアラニンスキャニングペプチドによるＣＤ３への抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ結合の阻害を例示する図である。 ＥＬＩＳＡにより測定されたときの、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチド－Ａおよびペプチド－ＢのアラニンスキャニングペプチドによるＣＤ３への抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ結合の阻害を例示する図である。 ＥＬＩＳＡにより測定されたときの、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチド－Ａおよびペプチド－ＢのアラニンスキャニングペプチドによるＣＤ３への抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ結合の阻害を例示する図である。 ＥＬＩＳＡにより測定されたときの、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチド－Ａおよびペプチド－ＢのアラニンスキャニングペプチドによるＣＤ３への抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ結合の阻害を例示する図である。 ＥＬＩＳＡにより測定されたときの、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチド－Ａおよびペプチド－ＢのアラニンスキャニングペプチドによるＣＤ３への抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ結合の阻害を例示する図である。 ＥＬＩＳＡにより測定されたときの、最適化された抗ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチド－Ｂの配列により抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ結合を例示する図である。 ＥＬＩＳＡにより測定されたときの、最適化された抗ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチド－Ｂの配列により抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ結合を例示する図である。 ＥＬＩＳＡにより測定されたときの、最適化された抗ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチド－Ｂの配列によりＣＤ３への抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ結合の阻害を例示する図である。 ＥＬＩＳＡにより測定されたときの、最適化された抗ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチド－Ｂの配列によりＣＤ３への抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ結合の阻害を例示する図である。 ＷｅｂＬｏｇｏ３．７．４を用いて生成される最適化された抗ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチド－Ｂの配列のコア配列モチーフを例示する図である。
多特異性抗体は、２つ以上の抗体に由来する異なる結合特異性の利益を単一の組成物へと組み合わせる。Ｔ細胞を癌に再び方向付けるための多特異性抗体は、前臨床試験と臨床試験の両方で有望であると示されている。この手法は、腫瘍関連抗原またはマーカに対する抗体の１つの抗原相互作用部分の結合に左右されるが、別の抗原相互作用部分は、細胞毒性活性を引き起こす分化抗原群３（ＣＤ３）などのＴ細胞上のエフェクタ細胞抗原に結合することができる。
このような腫瘍関連抗原の１つは、ＰＳＭＡである。前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）は、グルタメートカルボキシペプチダーゼＩＩ（ＧＣＰＩＩ）、Ｎ－アセチル－Ｌ－アスパルチル－Ｌ－グルタメートペプチダーゼＩ（ＮＡＡＬＡＤａｓｅ Ｉ）、またはＮＡＡＧペプチダーゼとしても知られており、ヒトにおいてＦＯＬＨ１（葉酸のヒドロラーゼ１）遺伝子によってコードされる酵素である。ＰＳＭＡは、膜に存在する亜鉛金属酵素である。この酵素の大半は、細胞外液腔に存在する。ヒトＰＳＭＡは、大半の他の組織のおよそ１００倍超で、前立腺において高度に発現される。一部の前立腺癌では、ＰＳＭＡは２番目に最もアップレギュレートされた遺伝子産物であり、非癌性前立腺細胞のレベルよりも８～１２倍上回っている。
Ｔ細胞エンゲージャ（ＴＣＥ）治療には、細胞治療ではないことを含めいくつかの利益があり、このため、キメラ抗原受容体Ｔ細胞（ＣＡＲ Ｔ細胞）治療に対抗する既製の治療として提示することができる。ＴＣＥ治療は血液癌に対する有力な抗腫瘍活性を呈してきたが、固形腫瘍を処置するためのＴＣＥの開発は、先行ＴＣＥ技術に対する制限、すなわち、（ｉ）サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）を生じさせる免疫系の過剰活性化、（ｉｉ）オンターゲットの健康な組織毒性、および（ｉｉｉ）短い半減期を生じさせる組織薬物動態学（ＰＫ）の不良が原因で、困難に直面している。ＣＲＳは、Ｔ細胞の全身活性化から発生し、インターロイキン６（ＩＬ－６）などの炎症性サイトカインを、生命を脅かすほどに上昇させるおそれがある。用量制限毒性や死亡を生じさせる重度の急性ＣＲＳは、不十分な臨床試験で癌患者を処置するために他のプラットフォームを用いて開発されたＴ細胞エンゲージャの投与に際して、観察されている。この毒性は、安全に投与可能であるＴ細胞エンゲージャの最大血中濃度を制限する。Ｔ細胞エンゲージャの有効性も、オンターゲットの健康な組織毒性が原因で制限されている。腫瘍特異的（ｔｕｍｏｒ－ｓｐｅｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ）な活性化のために設計されていないプラットフォームを用いて開発されたＴ細胞エンゲージャは、臨床試験差し止めとなり、健康な組織中で標的発現をもたらした。Ｔ細胞エンゲージャは、短い半減期によっても制限される。Ｔ細胞エンゲージャは、その短い曝露半減期が原因で身体から速やかに排泄されると、投与後速やかにサ治療量以下のレベルに到達する。このため、短い半減期の困難を克服し、かつ身体中で薬物の治療レベルを維持するために、ブリナツモマブなどのＴ細胞エンゲージャが、典型的に低用量で持続注入ポンプにより数週間にわたり投与される。連続投薬レジメンは、患者に対する大きな負担を呈する。
Ｔ細胞エンゲージャの有効性に関連するこれらの困難を克服するために、本明細書中には、エフェクタ細胞抗原およびＰＳＭＡに選択的に結合する結合領域を含むポリペプチドまたはポリペプチド複合体が記載され、これにおいて、結合ドメインの１つまたは複数は腫瘍微小環境中で選択的に活性化され、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、半減期延長分子を含む。このような修飾により、ＣＲＳおよびオンターゲットの健康な組織毒性のリスクが軽減し、活性化前の血流および血清半減期の安定性が改善する。本明細書中に記載のポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、低レベルの標的発現で活性を有しており、容易に製造される。
いくつかの実施形態では、本明細書中に記載のポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、癌を処置する方法に使用される。いくつかの実施形態では、癌は、ＰＳＭＡを発現する細胞を有している。いくつかの実施形態では、本明細書中に記載のポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、前立腺癌を処置する方法に使用される。いくつかの実施形態では、前立腺癌は、転移性去勢抵抗性前立腺癌（ｍＣＲＰＣ）である。前立腺癌は、男性において世界第２位の癌であり、米国だけでも３００万を超える男性が前立腺癌を患い生活している。初期の診断および有効な治療は、大半の前立腺癌患者が約９８パーセントの平均５年生存率の予後を有していることを意味する。しかし、前立腺癌患者の推計６パーセントが転移性疾患を発症し、約３０パーセントの５年生存率に関係している。２０２０年、米国では推計３３，０００人が前立腺癌により亡くなっている。
いくつかの例では、本明細書中に記載のポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、固形腫瘍癌を処置するために使用される。いくつかの実施形態では、癌は、肺、乳房（例えば、ＨＥＲ２＋、ＥＲ／ＰＲ＋、ＴＮＢＣ）、子宮頚部、卵巣、大腸、膵臓、または胃の癌である。いくつかの実施形態は、癌を処置する方法であって、癌の処置を必要とする対象に、式Ｉ：
Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉ）
による単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を投与する工程を含み、
式中、Ａ１は、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子を含み、Ｐ１は、Ａ１に結合するペプチドを含み、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含み、Ｈ１は、半減期延長分子を含み、Ａ２は、ＰＳＭＡに結合する別の抗原認識分子を含む、方法である。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式Ｉ：
Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉ）
による単離されたペプチドまたはペプチド複合体であって、
式中、Ａ１は、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子を含み、Ｐ１は、Ａ１に結合するペプチドを含み、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含み、Ｈ１は、半減期延長分子を含み、Ａ２は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子を含む、単離されたペプチドまたはペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式Ｉ：
Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉ）
による単離されたペプチドまたはペプチド複合体であって、
式中、Ａ１は、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子であり、Ｐ１は、Ａ１に結合するペプチドであり、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分であり、Ｈ１は、半減期延長分子であり、Ａ２は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子である、単離されたペプチドまたはペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式Ｉ：
Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉ）
を含む単離されたペプチドまたはペプチド複合体であって、
式中、Ａ１は、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子を含み、Ｐ１は、Ａ１に結合するペプチドを含み、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含み、Ｈ１は、半減期延長分子を含み、Ａ２は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子を含む、単離されたペプチドまたはペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式Ｉ：
Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉ）
を含む単離されたペプチドまたはペプチド複合体であって、
式中、Ａ１は、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子であり、Ｐ１は、Ａ１に結合するペプチドであり、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分であり、Ｈ１は、半減期延長分子であり、Ａ２は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子である、単離されたペプチドまたはペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式Ｉ：
Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉ）
による単離されたペプチドまたはペプチド複合体であって、
式中、Ａ１は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第１の抗原認識分子を含み、Ｐ１は、Ａ１に結合するペプチドを含み、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含み、Ｈ１は、半減期延長分子を含み、Ａ２は、エフェクタ細胞抗原に結合する第２の抗原認識分子を含む、単離されたペプチドまたはペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式Ｉ：
Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉ）
による単離されたペプチドまたはペプチド複合体であって、
式中、Ａ１は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第１の抗原認識分子であり、Ｐ１は、Ａ１に結合するペプチドであり、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分であり、Ｈ１は、半減期延長分子であり、Ａ２は、エフェクタ細胞抗原に結合する第２の抗原認識分子である、単離されたペプチドまたはペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式Ｉ：
Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉ）
を含む単離されたペプチドまたはペプチド複合体であって、
式中、Ａ１は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第１の抗原認識分子を含み、Ｐ１は、Ａ１に結合するペプチドを含み、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含み、Ｈ１は、半減期延長分子を含み、Ａ２は、エフェクタ細胞抗原に結合する第２の抗原認識分子を含む、単離されたペプチドまたはペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式Ｉ：
Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉ）
を含む単離されたペプチドまたはペプチド複合体であって、
式中、Ａ１は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第１の抗原認識分子であり、Ｐ１は、Ａ１に結合するペプチドであり、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分であり、Ｈ１は、半減期延長分子であり、Ａ２は、エフェクタ細胞抗原に結合する第２の抗原認識分子である、単離されたペプチドまたはペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式Ｉａ：
Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）
による単離されたペプチドまたはペプチド複合体であって、
式中、Ａ２は、Ｐ２およびＬ２をさらに含み、Ｐ２は、Ａ２に結合するペプチドを含み、Ｌ２は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含む、単離されたペプチドまたはペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式Ｉａ：
Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）
による単離されたペプチドまたはペプチド複合体であって、
式中、Ａ２は、Ｐ２およびＬ２をさらに含み、Ｐ２は、Ａ２に結合するペプチドであり、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分である、単離されたペプチドまたはペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式Ｉａ：
Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）
を含む単離されたペプチドまたはペプチド複合体であって、
式中、Ａ２は、Ｐ２およびＬ２をさらに含み、Ｐ２は、Ａ２に結合するペプチドを含み、Ｌ２は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含む、単離されたペプチドまたはペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式Ｉａ：
Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）
を含む単離されたペプチドまたはペプチド複合体であって、
式中、Ａ２は、Ｐ２およびＬ２をさらに含み、Ｐ２は、Ａ２に結合するペプチドであり、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分である、単離されたペプチドまたはペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式ＩＩ：
Ｌ１ａ－Ｐ１ａ－Ｈ１ａ（式ＩＩ）
による単離されたペプチドまたはペプチド複合体であって、
式中、Ｌ１ａは、切断されない場合に、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子にＰ１ａを接続する、腫瘍特異的プロテアーゼにより切断された連結部分を含み、第１の抗原認識分子は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子に接続され、Ｐ１ａは、Ｌ１ａが切断されない場合に、第１の抗原認識分子に結合するペプチドを含み、Ｈ１ａは、半減期延長分子を含む、単離されたペプチドまたはペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式ＩＩ：
Ｌ１ａ－Ｐ１ａ－Ｈ１ａ（式ＩＩ）
を含む単離されたペプチドまたはペプチド複合体であって、
式中、Ｌ１ａは、切断されない場合に、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子にＰ１ａを接続する、腫瘍特異的プロテアーゼにより切断された連結部分を含み、第１の抗原認識分子は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子に接続され、Ｐ１ａは、Ｌ１ａが切断されない場合に、第１の抗原認識分子に結合するペプチドを含み、Ｈ１ａは、半減期延長分子を含む、単離されたペプチドまたはペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式ＩＩ：
Ｌ１ａ－Ｐ１ａ－Ｈ１ａ（式ＩＩ）
による単離されたペプチドまたはペプチド複合体であって、
式中、Ｌ１ａは、切断されない場合に、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子にＰ１ａを接続する、腫瘍特異的プロテアーゼにより切断された連結部分であり、第１の抗原認識分子は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子に接続され、Ｐ１ａは、Ｌ１ａが切断されない場合に、第１の抗原認識分子に結合するペプチドであり、Ｈ１ａは、半減期延長分子である、単離されたペプチドまたはペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式ＩＩ：
Ｌ１ａ－Ｐ１ａ－Ｈ１ａ（式ＩＩ）
を含む単離されたペプチドまたはペプチド複合体であって、
式中、Ｌ１ａは、切断されない場合に、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子にＰ１ａを接続する、腫瘍特異的プロテアーゼにより切断された連結部分であり、第１の抗原認識分子は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子に接続され、Ｐ１ａは、Ｌ１ａが切断されない場合に、第１の抗原認識分子に結合するペプチドであり、Ｈ１ａは、半減期延長分子である、単離されたペプチドまたはペプチド複合体が開示される。
第１の抗原認識分子（Ａ１）
本明細書中のいくつかの実施形態では、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、第１の抗原認識分子がエフェクタ細胞抗原に結合し、第２の抗原認識分子がＰＳＭＡに結合する、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体が開示される
いくつかの実施形態では、エフェクタ細胞抗原は、ＣＤ３を含む。いくつかの実施形態では、Ａ１は、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子を含む。
いくつかの実施形態では、Ａ１は、抗体または抗体フラグメントを含む。いくつかの実施形態では、Ａ１は、ヒトまたはヒト化である抗体または抗体フラグメントを含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１は、抗体または抗体フラグメントのＮ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ｌ１は、抗体または抗体フラグメントのＮ末端に結合され、Ａ２は、抗体または抗体フラグメントの他のＮ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２は、抗体または抗体フラグメントのＣ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ｌ１は、抗体または抗体フラグメントのＣ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２は、抗体または抗体フラグメントのＮ末端に結合される。いくつかの実施形態では、抗体または抗体フラグメントは、単鎖可変フラグメント、単一ドメイン抗体、またはＦａｂフラグメントを含む。いくつかの実施形態では、Ａ１は、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは、ｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドおよびｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、Ａ１は、単一ドメイン抗体である。いくつかの実施形態では、Ａ１は、それぞれがヒトＣＤ３に特異的に結合可能である可変軽鎖および可変重鎖を含む。いくつかの実施形態では、エフェクタ細胞抗原は、ＣＤ３を含む。いくつかの実施形態では、Ａ１は、抗ＣＤ３ｅ単鎖可変フラグメントを含む。いくつかの実施形態では、Ａ１は、ＣＤ３発現細胞上でＣＤ３に対して１μＭ以下のＫＤ結合を有する抗ＣＤ３ｅ単鎖可変フラグメントを含む。いくつかの実施形態では、Ａ１は、ムロモナブ－ＣＤ３（ＯＫＴ３）、オテリキシズマブ（ＴＲＸ４）、テプリズマブ（ＭＧＡ０３１）、ビシリズマブ（Ｎｕｖｉｏｎ）、ＳＰ３４、Ｘ３５、ＶＩＴ３、ＢＭＡ０３０（ＢＷ２６４／５６）、ＣＬＢ－Ｔ３／３、ＣＲＩＳ７、ＹＴＨ１２．５、Ｆ１１１－４０９、ＣＬＢ－Ｔ３．４．２、ＴＲ－６６、ＷＴ３２、ＳＰｖ－Ｔ３ｂ、１１Ｄ８、ＸＩＩＩ－１４１、ＸＩＩＩ－４６、ＸＩＩＩ－８７、１２Ｆ６、Ｔ３／ＲＷ２－８Ｃ８、Ｔ３／ＲＷ２－４Ｂ６、ＯＫＴ３Ｄ、Ｍ－Ｔ３０１、ＳＭＣ２、Ｆ１０１．０１、ＵＣＨＴ－１、ＷＴ－３１、１５８６５、１５８６５ｖ１２、１５８６５ｖ１６、および１５８６５ｖ１９からなる群から選択される相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。
いくつかの実施形態では、Ａ１は、ＰＳＭＡに結合する第１の抗原認識分子を含む。いくつかの実施形態では、Ａ１は、それぞれがヒトＰＳＭＡに特異的に結合可能である可変軽鎖および可変重鎖を含む。
いくつかの実施形態では、ＣＤ３に結合するｓｃＦｖは、ｓｃＦｖ軽鎖可変ドメインおよびｓｃＦｖ重鎖可変ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖ重鎖可変ドメインは、表１に開示される少なくとも１、２、もしくは３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）、またはそれに対し実質的に同一の配列（例えば、少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有する配列）を含む。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖ軽鎖可変ドメインは、表１に開示される少なくとも１、２、もしくは３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）、またはそれに対し実質的に同一の配列（例えば、少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有する配列）を含む。
いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖ重鎖可変ドメインは、表１に開示される少なくとも１、２、もしくは３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）、またはそれに対し実質的に同一の配列（例えば、少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有する配列）を含み、ｓｃＦｖ軽鎖可変ドメインは、表１に開示される少なくとも１、２、もしくは３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）、またはそれに対し実質的に同一の配列（例えば、少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有する配列）を含む。
いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖ重鎖可変ドメインは、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、ｓｃＦｖ重鎖可変ドメインのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３は、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号１、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号２、ＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号３を含み、ＣＤＲは、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、またはＨＣ－ＣＤＲ３のうち少なくとも１つに０～２個のアミノ酸修飾を含む。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖ軽鎖可変ドメインは、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３を含み、ｓｃＦｖ軽鎖可変ドメインのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３は、ＬＣ－ＣＤＲ１では配列番号４、ＬＣ－ＣＤＲ２では配列番号５、ＬＣ－ＣＤＲ３では配列番号６を含み、ＣＤＲは、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、またはＬＣ－ＣＤＲ３のうち少なくとも１つに０～２個のアミノ酸修飾を含む。
いくつかの実施形態では、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼによって切断される場合、式Ｉのポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、エフェクタ細胞に結合する。いくつかの実施形態では、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼによって切断され、Ａ１がエフェクタ細胞に結合する場合、式Ｉのポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、エフェクタ細胞に結合する。いくつかの実施形態では、エフェクタ細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、Ａ１は、エフェクタ細胞上のＴＣＲ－ＣＤ３複合体の一部であるポリペプチドに結合する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＣＤ３複合体の一部であるポリペプチドは、ヒトＣＤ３εである。いくつかの実施形態では、エフェクタ細胞抗原はＣＤ３を含み、ｓｃＦＶは、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、ｓｃＦＶのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３は、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号１、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号２、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号３を含み、ｓｃＦＶは、ＣＤＲとしてＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３を含み、ｓｃＦＶのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３は、ＬＣ－ＣＤＲ１では配列番号４、ＬＣ－ＣＤＲ２では配列番号５、およびＬＣ－ＣＤＲ３では配列番号６を含む。いくつかの実施形態では、エフェクタ細胞抗原はＣＤ３を含み、ｓｃＦｖは、配列番号７によるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、エフェクタ細胞抗原はＣＤ３を含み、Ａ１は、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ａ１のＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３は、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号１、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号２、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号３を含み、Ａ１は、ＣＤＲとしてＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３を含み、Ａ１のＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３は、ＬＣ－ＣＤＲ１では配列番号４、ＬＣ－ＣＤＲ２では配列番号５、およびＬＣ－ＣＤＲ３では配列番号６を含む。いくつかの実施形態では、エフェクタ細胞抗原はＣＤ３を含み、Ａ１は、配列番号７によるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ａ１は、配列番号７によるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ａ１は、配列番号７に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ａ１は、配列番号７に対して少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ａ１は、配列番号７に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ａ１は、配列番号７に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ａ１は、配列番号７に対して少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｐ１もＬ１も有していない単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも８倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも１０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも１５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも２０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも２５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも３０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも３５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも４０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも４５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも５０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも５５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも６０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも６５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも７０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも７５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも８０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも８５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも９０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも９５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも１００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも１２０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも１０００倍高い。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも８倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも１０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも１５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも２０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも２５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも３０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも３５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも４０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも４５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも５０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも５５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも６０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも６５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも７０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも７５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも８０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも８５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも９０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも９５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも１００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも１２０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも１０００倍高い。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｐ１もＬ１も有していない単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇している。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも２０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも３０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも４０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも５０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも６０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも７０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも８０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも９０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１０００倍高い。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇している。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも２０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも３０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも４０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも５０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも６０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも７０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも８０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも９０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１０００倍高い。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｐ１もＬ１も有していない単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇している。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも２０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも３０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも４０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも５０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも６０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも７０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも８０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも９０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１もＬ１も有していないポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１０００倍高い。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇している。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも２０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも３０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも４０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも５０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも６０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも７０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも８０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも９０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されているポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１０００倍高い。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａの単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも１０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも５０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも７５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも１００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも１２０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも２００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも３００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも４００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも５００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも６００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも７００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも８００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも９００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも１０００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも１００００倍高い。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも１０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも５０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも７５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも１００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも１２０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも２００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも３００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも４００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも５００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも６００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも７００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも８００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも９００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも１０００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が弱く、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の腫瘍細胞抗原に対する結合親和性と比較して少なくとも１００００倍高い。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａの単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇している。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも５０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも７５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも２００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも３００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも４００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも５００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも６００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも７００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも８００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも９００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１０００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、ＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＩＦＮγ放出Ｔ細胞活性化アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１００００倍高い。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が上昇している。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも５０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも７５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも２００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも３００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも４００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも５００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも６００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも７００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも８００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも９００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１０００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１００００倍高い。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇している。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも５０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体の形態のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも７５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも２００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも３００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも４００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも５００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも６００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも７００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも８００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも９００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１０００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｐ１、Ｌ１、Ｐ２、またはＬ２を有していない単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１００００倍高い。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して、腫瘍細胞抗原に対する結合親和性が上昇している。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも５０倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも７５倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも２００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも３００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも４００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも５００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも６００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも７００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも８００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも９００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１０００倍高い。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）は、Ｔ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０が上昇しており、Ｌ１とＬ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断されている式Ｉａのポリペプチドまたはポリペプチド複合体のＴ細胞溶解アッセイにおけるＥＣ５０と比較して少なくとも１００００倍高い。
第２の抗原認識分子（Ａ２）
いくつかの実施形態では、Ａ２は、抗体または抗体フラグメントを含む。いくつかの実施形態では、抗体またはその抗体フラグメントは、単鎖可変フラグメント、単一ドメイン抗体、Ｆａｂ、またはＦａｂ’を含む。いくつかの実施形態では、抗体またはその抗体フラグメントは、ラクダ科由来単一ドメイン抗体の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）、重鎖可変ドメイン（ＶＨドメイン）、軽鎖可変ドメイン（ＶＬドメイン）、または可変ドメイン（ＶＨＨ）を含む。いくつかの実施形態では、抗体またはその抗体フラグメントは、ヒト化またはヒトである。いくつかの実施形態では、Ａ２は、ＦａｂまたはＦａｂ’である。いくつかの実施形態では、ＦａｂまたはＦａｂ’は、（ａ）Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドおよび（ｂ）Ｆａｂ重鎖ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、抗体またはその抗体フラグメントは、ＰＳＭＡ結合領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＰＳＭＡに結合する抗原結合フラグメント（Ｆａｂ）またはＦａｂ’は、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド鎖およびＦａｂ重鎖ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドは、Ｆａｂ軽鎖可変ドメインを含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ重鎖ポリペプチドは、Ｆａｂ重鎖可変ドメインを含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ重鎖可変ドメインは、表２に開示される少なくとも１、２、もしくは３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）、またはそれに対し実質的に同一の配列（例えば、少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有する配列）を含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ軽鎖可変ドメインは、表２に開示される少なくとも１、２、もしくは３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）、またはそれに対し実質的に同一の配列（例えば、少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有する配列）を含む。
いくつかの実施形態では、Ｆａｂ重鎖可変ドメインは、表２に開示される少なくとも１、２、もしくは３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）、またはそれに対し実質的に同一の配列（例えば、少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有する配列）を含み、Ｆａｂ軽鎖可変ドメインは、表２に開示される少なくとも１、２、もしくは３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）、またはそれに対し実質的に同一の配列（例えば、少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有する配列）を含む。
いくつかの実施形態では、Ｆａｂは、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、ＦａｂのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３は、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号８、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号９、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号１０を含み、Ｆａｂは、ＣＤＲとしてＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３を含み、ＦａｂのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３は、ＬＣ－ＣＤＲ１では配列番号１１、ＬＣ－ＣＤＲ２では配列番号１２、およびＬＣ－ＣＤＲ３では配列番号１３を含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂは、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、ＦａｂのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３は、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号８、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号９、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号１０を含み、ＣＤＲは、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、またはＨＣ－ＣＤＲ３のうち少なくとも１つに０～２個のアミノ酸修飾を含み、Ｆａｂは、ＣＤＲとしてＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３を含み、ＦａｂのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３は、ＬＣ－ＣＤＲ１では配列番号１１、ＬＣ－ＣＤＲ２では配列番号１２、およびＬＣ－ＣＤＲ３では配列番号１３を含み、ＣＤＲは、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、またはＬＣ－ＣＤＲ３のうち少なくとも１つに０～２個のアミノ酸修飾を含む。
いくつかの実施形態では、Ａ２は、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ａ２のＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３は、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号８、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号９、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号１０を含み、Ａ２は、ＣＤＲとしてＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３を含み、Ａ２のＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３は、ＬＣ－ＣＤＲ１では配列番号１１、ＬＣ－ＣＤＲ２では配列番号１２、およびＬＣ－ＣＤＲ３では配列番号１３を含む。いくつかの実施形態では、Ａ２は、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ａ２のＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３は、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号８、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号９、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号１０を含み、ＣＤＲは、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、またはＨＣ－ＣＤＲ３のうち少なくとも１つに０～２個のアミノ酸修飾を含み、Ａ２は、ＣＤＲとしてＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３を含み、Ａ２のＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３は、ＬＣ－ＣＤＲ１では配列番号１１、ＬＣ－ＣＤＲ２では配列番号１２、およびＬＣ－ＣＤＲ３では配列番号１３を含み、ＣＤＲは、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、またはＬＣ－ＣＤＲ３のうち少なくとも１つに０～２個のアミノ酸修飾を含む。
いくつかの実施形態では、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドは、配列番号１４によるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドは、配列番号１４に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドは、配列番号１４に対して少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドは、配列番号１４に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドは、配列番号１４に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドは、配列番号１４に対して少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｆａｂ重鎖ポリペプチドは、配列番号１５によるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ重鎖ポリペプチドは、配列番号１５に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ重鎖ポリペプチドは、配列番号１５に対して少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ重鎖ポリペプチドは、配列番号１５に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ重鎖ポリペプチドは、配列番号１５に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ重鎖ポリペプチドは、配列番号１５に対して少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドは、Ａ１の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）のＣ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドは、Ａ１の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）のＣ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドは、Ａ１の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）のＮ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドは、Ａ１の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）のＮ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドは、Ａ１のｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドに結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドは、Ａ１のｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドに結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドは、Ａ１のｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドに結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドは、Ａ１のｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドに結合される。
いくつかの実施形態では、Ａ２は、Ｐ２およびＬ２をさらに含み、Ｐ２は、Ａ２に結合するペプチドを含み、Ｌ２は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含む。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドは、Ａ１のｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドに結合され、Ｌ２は、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドに結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドは、Ａ１のｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドに結合され、Ｌ２は、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドに結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドは、Ａ１のｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドに結合され、Ｌ２は、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドに結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドは、Ａ１のｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドに結合され、Ｌ２は、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドに結合される。
いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドは、Ａ１のｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドに結合され、Ｌ２は、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドに結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドは、Ａ１のｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドに結合され、Ｌ２は、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドに結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドは、Ａ１のｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドに結合され、Ｌ２は、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドに結合される。いくつかの実施形態では、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドは、Ａ１のｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドに結合され、Ｌ２は、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドに結合される。
ペプチド（Ｐ１、Ｐ２、およびＰ１ａ）
いくつかの実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、またはＰ１ａは、表３に開示される配列、またはそれに対し実質的に同一の配列（例えば、０、１、または２個のアミノ酸修飾を有する配列）を含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ１は、第１の標的抗原へのＡ１の結合を損なう。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、エフェクタ細胞抗原へのＡ１の結合を損なう。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、イオン相互作用、静電的相互作用、疎水的相互作用、Ｐｉ－スタッキング相互作用、およびＨ結合相互作用、またはそれらの組合せによりＡ１に結合される。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、抗原結合部位またはその付近でＡ１に結合される。いくつかの実施形態では、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断され、それによりＡ１がエフェクタ細胞抗原に曝される場合、Ｐ１はＡ１から結合解除されるようになる。いくつかの実施形態では、プロテアーゼは、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）またはセリンプロテアーゼを含む。いくつかの実施形態では、マトリックスメタロプロテアーゼは、ＭＭＰ２、ＭＭＰ７、ＭＭＰ９、ＭＭＰ１３、またはＭＭＰ１４を含む。いくつかの実施形態では、セリンプロテアーゼは、マトリプターゼ（ＭＴＳＰ１）、ウロキナーゼ、またはヘプシンを含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、エフェクタ細胞抗原に対して７０％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、エフェクタ細胞抗原に対して７５％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、エフェクタ細胞抗原に対して８０％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、エフェクタ細胞抗原に対して８５％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、エフェクタ細胞抗原に対して９０％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、エフェクタ細胞抗原に対して９５％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、エフェクタ細胞抗原に対して９８％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、エフェクタ細胞抗原に対して９９％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、エフェクタ細胞抗原に対して１０％未満の配列同一性を共有するｄｅ ｎｏｖｏアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、配列番号１６～１９のうちのいずれか１つによるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、配列番号１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、配列番号１７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、配列番号１８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、配列番号１９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、配列番号７８のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ１は、Ｚ１－Ｚ２－Ｃ－Ｚ４－Ｐ－Ｚ６－Ｚ７－Ｚ８－Ｚ９－Ｚ１０－Ｚ１１－Ｚ１２－Ｃ－Ｚ１４によるアミノ酸配列を含み、Ｚ１は、Ｄ、Ｙ、Ｆ、Ｉ、Ｎ、Ｖ、Ｈ、Ｌ、Ａ、Ｔ、Ｓ、およびＰから選択され、Ｚ２は、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｆ、Ｉ、Ｎ、Ａ、Ｖ、Ｈ、Ｔ、およびＳから選択され、Ｚ４は、ＧおよびＷから選択され、Ｚ６は、Ｅ、Ｄ、Ｖ、およびＰから選択され、Ｚ７は、Ｗ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｇ、Ｍ、Ｉ、およびＹから選択され、Ｚ８は、Ｅ、Ｄ、Ｐ、およびＱから選択され、Ｚ９は、Ｅ、Ｄ、Ｙ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｐ、Ｌ、およびＱから選択され、Ｚ１０は、Ｓ、Ｄ、Ｙ、Ｔ、Ｉ、Ｆ、Ｖ、Ｎ、Ａ、Ｐ、Ｌ、およびＨから選択され、Ｚ１１は、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、Ｔ、Ｎ、Ｓ、Ｄ、Ａ、およびＨから選択され、Ｚ１２は、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｎ、Ｔ、Ｐ、Ｓ、およびＨから選択され、Ｚ１４は、Ｄ、Ｙ、Ｎ、Ｆ、Ｉ、Ｐ、Ｖ、Ａ、Ｔ、Ｈ、Ｌ、およびＳから選択される。いくつかの実施形態では、Ｚ１は、Ｄ、Ｙ、Ｆ、Ｉ、およびＮから選択され、Ｚ２は、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｆ、Ｉ、およびＮから選択され、Ｚ４は、ＧおよびＷから選択され、Ｚ６は、ＥおよびＤから選択され、Ｚ７は、Ｗ、Ｌ、Ｆ、およびＶから選択され、Ｚ８は、ＥおよびＤから選択され、Ｚ９は、Ｅ、Ｄ、Ｙ、およびＶから選択され、Ｚ１０は、Ｓ、Ｄ、Ｙ、Ｔ、およびＩから選択され、Ｚ１１は、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、およびＴから選択され、Ｚ１２は、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ａ、およびＮから選択され、Ｚ１４は、Ｄ、Ｙ、Ｎ、Ｆ、Ｉ、およびＰから選択される。いくつかの実施形態では、Ｚ１は、Ｄ、Ｙ、およびＦから選択され、Ｚ２は、Ｄ、Ｙ、Ｌ、およびＦから選択され、Ｚ４は、ＧおよびＷから選択され、Ｚ６は、ＥおよびＤから選択され、Ｚ７は、Ｗ、Ｌ、およびＦから選択され、Ｚ８は、ＥおよびＤから選択され、Ｚ９は、ＥおよびＤから選択され、Ｚ１０は、Ｓ、Ｄ、およびＹから選択され、Ｚ１１は、Ｉ、Ｙ、およびＦから選択され、Ｚ１２は、Ｆ、Ｄ、Ｙ、およびＬから選択され、Ｚ１４は、Ｄ、Ｙ、およびＮから選択される。
いくつかの実施形態では、Ｐ１は、Ｕ１－Ｕ２－Ｃ－Ｕ４－Ｐ－Ｕ６－Ｕ７－Ｕ８－Ｕ９－Ｕ１０－Ｕ１１－Ｕ１２－Ｃ－Ｕ１４によるアミノ酸配列を含み、Ｕ１は、Ｄ、Ｙ、Ｆ、Ｉ、Ｎ、Ｖ、Ｈ、Ｌ、Ａ、Ｔ、Ｓ、およびＰから選択され、Ｕ２は、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｆ、Ｉ、Ｎ、Ａ、Ｖ、Ｈ、Ｔ、およびＳから選択され、Ｕ４は、ＧおよびＷから選択され、Ｕ６は、Ｅ、Ｄ、Ｖ、およびＰから選択され、Ｕ７は、Ｗ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｇ、Ｍ、Ｉ、およびＹから選択され、Ｕ８は、Ｅ、Ｄ、Ｐ、およびＱから選択され、Ｕ９は、Ｅ、Ｄ、Ｙ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｐ、Ｌ、およびＱから選択され、Ｕ１０は、Ｓ、Ｄ、Ｙ、Ｔ、Ｉ、Ｆ、Ｖ、Ｎ、Ａ、Ｐ、Ｌ、およびＨから選択され、Ｕ１１は、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、Ｔ、Ｎ、Ｓ、Ｄ、Ａ、およびＨから選択され、Ｕ１２は、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｎ、Ｔ、Ｐ、Ｓ、Ｇ、およびＨから選択され、Ｕ１４は、Ｄ、Ｙ、Ｎ、Ｆ、Ｉ、Ｐ、Ｖ、Ａ、Ｔ、Ｈ、Ｌ、Ｍ、およびＳから選択される。いくつかの実施形態では、Ｕ１は、Ｄ、Ｙ、Ｆ、Ｉ、Ｖ、およびＮから選択され、Ｕ２は、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｆ、Ｉ、およびＮから選択され、Ｕ４は、ＧおよびＷから選択され、Ｕ６は、ＥおよびＤから選択され、Ｕ７は、Ｗ、Ｌ、Ｆ、Ｇ、およびＶから選択され、Ｕ８は、ＥおよびＤから選択され、Ｕ９は、Ｅ、Ｄ、Ｙ、およびＶから選択され、Ｕ１０は、Ｓ、Ｄ、Ｙ、Ｔ、およびＩから選択され、Ｕ１１は、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、およびＴから選択され、Ｕ１２は、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、およびＮから選択され、Ｕ１４は、Ｄ、Ｙ、Ｎ、Ｆ、Ｉ、Ｍ、およびＰから選択される。いくつかの実施形態では、Ｕ１は、Ｄ、Ｙ、Ｖ、およびＦから選択され、Ｕ２は、Ｄ、Ｙ、Ｌ、およびＦから選択され、Ｕ４は、ＧおよびＷから選択され、Ｕ６は、ＥおよびＤから選択され、Ｕ７は、Ｗ、Ｌ、Ｇ、およびＦから選択され、Ｕ８は、ＥおよびＤから選択され、Ｕ９は、ＥおよびＤから選択され、Ｕ１０は、Ｓ、Ｄ、Ｔ、およびＹから選択され、Ｕ１１は、Ｉ、Ｙ、Ｖ、Ｌ、およびＦから選択され、Ｕ１２は、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｇ、Ａ、およびＬから選択され、Ｕ１４は、Ｄ、Ｙ、Ｍ、およびＮから選択される。
いくつかの実施形態では、Ｐ１は、配列番号７９～１０５のうちのいずれか１つによるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、表２０の配列のうちのいずれか１つによるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１は、配列番号１０６～１１７のうちのいずれか１つによるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ１は、配列番号１８によるアミノ酸配列、または、配列番号１８に対して１、２、もしくは３つのアミノ酸置換、付加、もしくは欠失を有するペプチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ１は、配列番号１９によるアミノ酸配列、または、配列番号１９に対して１、２、もしくは３つのアミノ酸置換、付加、もしくは欠失を有するペプチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ１は、配列番号１１６によるアミノ酸配列、または、配列番号１１６に対して１、２、もしくは３つのアミノ酸置換、付加、もしくは欠失を有するペプチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ１は、配列番号１８によるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ１は、配列番号１９によるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ１は、配列番号１１６によるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ２は、第２の標的抗原へのＡ２の結合を損なう。いくつかの実施形態では、Ｐ２は、ＰＳＭＡへのＡ２の結合を損なう。いくつかの実施形態では、Ｐ２は、イオン相互作用、静電的相互作用、疎水的相互作用、Ｐｉ－スタッキング相互作用、およびＨ結合相互作用、またはそれらの組合せによりＡ２に結合される。いくつかの実施形態では、Ｐ２は、抗原結合部位またはその付近でＡ２に結合される。いくつかの実施形態では、Ｌ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断され、それによりＡ２がＰＳＭＡに曝される場合、Ｐ２はＡ２から結合解除されるようになる。いくつかの実施形態では、プロテアーゼは、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）またはセリンプロテアーゼを含む。いくつかの実施形態では、マトリックスメタロプロテアーゼは、ＭＭＰ２、ＭＭＰ７、ＭＭＰ９、ＭＭＰ１３、またはＭＭＰ１４を含む。いくつかの実施形態では、セリンプロテアーゼは、マトリプターゼ（ＭＴＳＰ１）、ウロキナーゼ、またはヘプシンを含む。いくつかの実施形態では、Ｐ２は、ＰＳＭＡに対して７０％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ２は、ＰＳＭＡに対して７５％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ２は、ＰＳＭＡに対して８０％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ２は、ＰＳＭＡに対して８５％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ２は、ＰＳＭＡに対して９０％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ２は、ＰＳＭＡに対して９５％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ２は、ＰＳＭＡに対して９８％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ２は、ＰＳＭＡに対して９９％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ２は、ＰＳＭＡに対して１０％未満の配列同一性を共有するｄｅ ｎｏｖｏアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、Ｌ１ａが切断されない場合、標的抗原への第１の抗原認識分子の結合を損なう。いくつかの実施形態では、抗原認識分子は、抗体または抗体フラグメントを含む。いくつかの実施形態では、標的抗原は、抗ＣＤ３エフェクタ細胞抗原である。いくつかの実施形態では、標的抗原は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）である。いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、標的抗原に対して７０％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、標的抗原に対して７５％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、標的抗原に対して８０％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、標的抗原に対して８５％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、標的抗原に対して９０％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、標的抗原に対して９５％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、標的抗原に対して９８％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、標的抗原に対して９９％未満の配列同一性を有している。いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、第２の標的抗原に対して１０％未満の配列同一性を共有するｄｅ ｎｏｖｏアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、Ｚ１－Ｚ２－Ｃ－Ｚ４－Ｐ－Ｚ６－Ｚ７－Ｚ８－Ｚ９－Ｚ１０－Ｚ１１－Ｚ１２－Ｃ－Ｚ１４によるアミノ酸配列を含み、Ｚ１は、Ｄ、Ｙ、Ｆ、Ｉ、Ｎ、Ｖ、Ｈ、Ｌ、Ａ、Ｔ、Ｓ、およびＰから選択され、Ｚ２は、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｆ、Ｉ、Ｎ、Ａ、Ｖ、Ｈ、Ｔ、およびＳから選択され、Ｚ４は、ＧおよびＷから選択され、Ｚ６は、Ｅ、Ｄ、Ｖ、およびＰから選択され、Ｚ７は、Ｗ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｇ、Ｍ、Ｉ、およびＹから選択され、Ｚ８は、Ｅ、Ｄ、Ｐ、およびＱから選択され、Ｚ９は、Ｅ、Ｄ、Ｙ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｐ、Ｌ、およびＱから選択され、Ｚ１０は、Ｓ、Ｄ、Ｙ、Ｔ、Ｉ、Ｆ、Ｖ、Ｎ、Ａ、Ｐ、Ｌ、およびＨから選択され、Ｚ１１は、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、Ｔ、Ｎ、Ｓ、Ｄ、Ａ、およびＨから選択され、Ｚ１２は、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｎ、Ｔ、Ｐ、Ｓ、およびＨから選択され、Ｚ１４は、Ｄ、Ｙ、Ｎ、Ｆ、Ｉ、Ｐ、Ｖ、Ａ、Ｔ、Ｈ、Ｌ、およびＳから選択される。いくつかの実施形態では、Ｚ１は、Ｄ、Ｙ、Ｆ、Ｉ、およびＮから選択され、Ｚ２は、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｆ、Ｉ、およびＮから選択され、Ｚ４は、ＧおよびＷから選択され、Ｚ６は、ＥおよびＤから選択され、Ｚ７は、Ｗ、Ｌ、Ｆ、およびＶから選択され、Ｚ８は、ＥおよびＤから選択され、Ｚ９は、Ｅ、Ｄ、Ｙ、およびＶから選択され、Ｚ１０は、Ｓ、Ｄ、Ｙ、Ｔ、およびＩから選択され、Ｚ１１は、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、およびＴから選択され、Ｚ１２は、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ａ、およびＮから選択され、Ｚ１４は、Ｄ、Ｙ、Ｎ、Ｆ、Ｉ、およびＰから選択される。いくつかの実施形態では、Ｚ１は、Ｄ、Ｙ、およびＦから選択され、Ｚ２は、Ｄ、Ｙ、Ｌ、およびＦから選択され、Ｚ４は、ＧおよびＷから選択され、Ｚ６は、ＥおよびＤから選択され、Ｚ７は、Ｗ、Ｌ、およびＦから選択され、Ｚ８は、ＥおよびＤから選択され、Ｚ９は、ＥおよびＤから選択され、Ｚ１０は、Ｓ、Ｄ、およびＹから選択され、Ｚ１１は、Ｉ、Ｙ、およびＦから選択され、Ｚ１２は、Ｆ、Ｄ、Ｙ、およびＬから選択され、Ｚ１４は、Ｄ、Ｙ、およびＮから選択される。
いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、Ｕ１－Ｕ２－Ｃ－Ｕ４－Ｐ－Ｕ６－Ｕ７－Ｕ８－Ｕ９－Ｕ１０－Ｕ１１－Ｕ１２－Ｃ－Ｕ１４によるアミノ酸配列を含み、Ｕ１は、Ｄ、Ｙ、Ｆ、Ｉ、Ｎ、Ｖ、Ｈ、Ｌ、Ａ、Ｔ、Ｓ、およびＰから選択され、Ｕ２は、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｆ、Ｉ、Ｎ、Ａ、Ｖ、Ｈ、Ｔ、およびＳから選択され、Ｕ４は、ＧおよびＷから選択され、Ｕ６は、Ｅ、Ｄ、Ｖ、およびＰから選択され、Ｕ７は、Ｗ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｇ、Ｍ、Ｉ、およびＹから選択され、Ｕ８は、Ｅ、Ｄ、Ｐ、およびＱから選択され、Ｕ９は、Ｅ、Ｄ、Ｙ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｐ、Ｌ、およびＱから選択され、Ｕ１０は、Ｓ、Ｄ、Ｙ、Ｔ、Ｉ、Ｆ、Ｖ、Ｎ、Ａ、Ｐ、Ｌ、およびＨから選択され、Ｕ１１は、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、Ｔ、Ｎ、Ｓ、Ｄ、Ａ、およびＨから選択され、Ｕ１２は、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｎ、Ｔ、Ｐ、Ｓ、Ｇ、およびＨから選択され、Ｕ１４は、Ｄ、Ｙ、Ｎ、Ｆ、Ｉ、Ｐ、Ｖ、Ａ、Ｔ、Ｈ、Ｌ、Ｍ、およびＳから選択される。いくつかの実施形態では、Ｕ１は、Ｄ、Ｙ、Ｆ、Ｉ、Ｖ、およびＮから選択され、Ｕ２は、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｆ、Ｉ、およびＮから選択され、Ｕ４は、ＧおよびＷから選択され、Ｕ６は、ＥおよびＤから選択され、Ｕ７は、Ｗ、Ｌ、Ｆ、Ｇ、およびＶから選択され、Ｕ８は、ＥおよびＤから選択され、Ｕ９は、Ｅ、Ｄ、Ｙ、およびＶから選択され、Ｕ１０は、Ｓ、Ｄ、Ｙ、Ｔ、およびＩから選択され、Ｕ１１は、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、およびＴから選択され、Ｕ１２は、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、およびＮから選択され、Ｕ１４は、Ｄ、Ｙ、Ｎ、Ｆ、Ｉ、Ｍ、およびＰから選択される。いくつかの実施形態では、Ｕ１は、Ｄ、Ｙ、Ｖ、およびＦから選択され、Ｕ２は、Ｄ、Ｙ、Ｌ、およびＦから選択され、Ｕ４は、ＧおよびＷから選択され、Ｕ６は、ＥおよびＤから選択され、Ｕ７は、Ｗ、Ｌ、Ｇ、およびＦから選択され、Ｕ８は、ＥおよびＤから選択され、Ｕ９は、ＥおよびＤから選択され、Ｕ１０は、Ｓ、Ｄ、Ｔ、およびＹから選択され、Ｕ１１は、Ｉ、Ｙ、Ｖ、Ｌ、およびＦから選択され、Ｕ１２は、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｇ、Ａ、およびＬから選択され、Ｕ１４は、Ｄ、Ｙ、Ｍ、およびＮから選択される。
いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、配列番号７９～１０５のうちのいずれか１つによるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、表２０の配列のうちのいずれか１つによるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、配列番号１０６～１１７のうちのいずれか１つによるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、配列番号１８によるアミノ酸配列、または、配列番号１８に対して１、２、もしくは３つのアミノ酸置換、付加、もしくは欠失を有するペプチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、配列番号１９によるアミノ酸配列、または、配列番号１９に対して１、２、もしくは３つのアミノ酸置換、付加、もしくは欠失を有するペプチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、配列番号１１６によるアミノ酸配列、または、配列番号１１６に対して１、２、もしくは３つのアミノ酸置換、付加、もしくは欠失を有するペプチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、配列番号１８によるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、配列番号１９によるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ１ａは、配列番号１１６によるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、またはＰ１ａは、長さが少なくとも５アミノ酸のペプチド配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、またはＰ１ａは、長さが少なくとも６アミノ酸のペプチド配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、またはＰ１ａは、長さが少なくとも１０アミノ酸のペプチド配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、またはＰ１ａは、長さが少なくとも１０アミノ酸かつ２０アミノ酸以下のペプチド配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、またはＰ１ａは、長さが少なくとも１６アミノ酸のペプチド配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、またはＰ１ａは、長さが４０アミノ酸以下のペプチド配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、またはＰ１ａは、少なくとも２つのシステインアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、またはＰ１ａは、環状ペプチドまたは直鎖ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、またはＰ１ａは、環状ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、またはＰ１ａは、直鎖ペプチドを含む。
いくつかの実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、もしくはＰ１ａ、またはＰ１、Ｐ２、およびＰ１ａは、修飾アミノ酸、非天然アミノ酸、非天然の修飾アミノ酸、またはそれらの組合せを含む。いくつかの実施形態では、修飾アミノ酸または非天然の修飾アミノ酸は、翻訳後修飾を含む。いくつかの実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、もしくはＰ１ａ、またはＰ１、Ｐ２、およびＰ１ａは、アセチル化、アシル化、ＡＤＰリボシル化、アミド化、フラビンの共有結合、ヘム部分の共有結合、ヌクレオチドもしくはヌクレオチド誘導体の共有結合、脂質もしくは脂質誘導体の共有結合、ホスファチジルイノシトールの共有結合、架橋、環化、ジスルフィド結合形成、脱メチル化、共有結合架橋の形成、シスチンの形成、ピログルタメートの形成、ホルミル化、ガンマカルボキシル化、グリコシル化、ＧＰＩアンカー形成、ヒドロキシル化、ヨウ素化、メチル化、ミリストイル化、酸化、タンパク質分解処理、リン酸化、プレニル化、ラセミ化、セレノイル化、硫酸化、アルギニル化などアミノ酸のタンパク質への転移ＲＮＡ媒介型付加、およびユビキチン化を含むがこれらに限定されない修飾を含む。修飾は、ペプチド骨格、アミノ酸側鎖、および終点を含む、Ｐ１、Ｐ２、もしくはＰ１ａ、またはＰ１、Ｐ２、およびＰ１ａに対するあらゆる場所で行われる。
いくつかの実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、またはＰ１ａはアルブミンまたはアルブミンフラグメントを含まない。いくつかの実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、またはＰ１ａは、アルブミン結合ドメインを含まない。
連結部分（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、およびＬ１ａ）
いくつかの実施形態では、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、またはＬ１ａは、少なくとも５～５０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、またはＬ１ａは、少なくとも１０～３０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、またはＬ１ａは、少なくとも１０のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、またはＬ１ａは、少なくとも１８のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、またはＬ１ａは、少なくとも２６のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、またはＬ１ａは、（Ｇ２Ｓ）ｎを含む式を有しており、式中、ｎは１～３の整数である（配列番号１１８）。いくつかの実施形態では、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、またはＬ１ａは、（Ｇ２Ｓ）ｎを含む式を有しており、式中、ｎは少なくとも１の整数である。いくつかの実施形態では、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、またはＬ１ａは、（Ｇ２Ｓ）ｎ、（ＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５０）、（ＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５１）、（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５２）、および（ＧＳＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５３）からなる群から選択される式を有しており、式中、ｎは少なくとも１の整数である。いくつかの実施形態では、腫瘍特異的プロテアーゼは、メタロプロテアーゼ、セリンプロテアーゼ、システインプロテアーゼ、トレオニンプロテアーゼ、およびアスパラギン酸プロテアーゼからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、またはＬ１ａは、ウロキナーゼ切断可能アミノ酸配列、マトリプターゼ切断可能アミノ酸配列、レグマイン切断可能アミノ酸配列、またはマトリックスメタロプロテアーゼ切断可能アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、マトリックスメタロプロテアーゼは、ＭＭＰ２、ＭＭＰ７、ＭＭＰ９、ＭＭＰ１３、またはＭＭＰ１４を含む。いくつかの実施形態では、セリンプロテアーゼは、マトリプターゼ（ＭＴＳＰ１）、ウロキナーゼ、またはヘプシンを含む。
いくつかの実施形態では、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、またはＬ１ａは、表４に開示される配列、またはそれに対し実質的に同一の配列（例えば、０、１、または２個のアミノ酸修飾を有する配列）を含む。
いくつかの実施形態では、Ｌ１は、リンカー２５の配列（配列番号４５）を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１は、リンカー２６の配列（配列番号４６）を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１は、リンカー２７の配列（配列番号４７）を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１は、リンカー２８の配列（配列番号４８）を含む。
いくつかの実施形態では、Ｌ２は、リンカー２５の配列（配列番号４５）を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２は、リンカー２６の配列（配列番号４６）を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２は、リンカー２７の配列（配列番号４７）を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ２は、リンカー２８の配列（配列番号４８）を含む。
いくつかの実施形態では、Ｌ１は、Ａ１のＮ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ｌ１は、Ａ１のＣ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ｌ２は、Ａ２のＮ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ｌ２は、Ａ２のＣ末端に結合される。いくつかの実施形態では、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断され、それによりＡ１がエフェクタ細胞抗原に曝される場合、Ｐ１はＡ１から結合解除されるようになる。いくつかの実施形態では、Ｌ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断され、それによりＡ２がＰＳＭＡに曝される場合、Ｐ２はＡ２から結合解除されるようになる。
いくつかの実施形態では、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、またはＬ１ａは、修飾アミノ酸、非天然アミノ酸、非天然の修飾アミノ酸、またはそれらの組合せを含む。いくつかの実施形態では、修飾アミノ酸または非天然の修飾アミノ酸は、翻訳後修飾を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、またはＬ１ａは、アセチル化、アシル化、ＡＤＰリボシル化、アミド化、フラビンの共有結合、ヘム部分の共有結合、ヌクレオチドもしくはヌクレオチド誘導体の共有結合、脂質もしくは脂質誘導体の共有結合、ホスファチジルイノシトールの共有結合、架橋、環化、ジスルフィド結合形成、脱メチル化、共有結合架橋の形成、シスチンの形成、ピログルタメートの形成、ホルミル化、ガンマカルボキシル化、グリコシル化、ＧＰＩアンカー形成、ヒドロキシル化、ヨウ素化、メチル化、ミリストイル化、酸化、タンパク質分解処理、リン酸化、プレニル化、ラセミ化、セレノイル化、硫酸化、アルギニル化などアミノ酸のタンパク質への転移ＲＮＡ媒介型付加、およびユビキチン化を含むがこれらに限定されない修飾を含む。修飾は、ペプチド骨格、またはアミノ酸側鎖を含む、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、またはＬ１ａに対するあらゆる場所で行われる。
いくつかの実施形態では、切断可能リンカーは、プロテアーゼによって切断可能である。いくつかの実施形態では、プロテアーゼは、疾患状態の微小環境でない健康な組織または微小環境でのレベルと比して高レベルで、疾患状態の微小環境に存在する。いくつかの実施形態では、プロテアーゼは、腫瘍特異的プロテアーゼを含む。いくつかの実施形態では、プロテアーゼは、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）またはセリンプロテアーゼを含む。いくつかの実施形態では、マトリックスメタロプロテアーゼは、ＭＭＰ２、ＭＭＰ７、ＭＭＰ９、ＭＭＰ１３、またはＭＭＰ１４を含む。いくつかの実施形態では、マトリックスメタロプロテアーゼは、ＭＭＰ２、ＭＭＰ７、ＭＭＰ９、ＭＭＰ１３、およびＭＭＰ１４からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、マトリックスメタロプロテアーゼは、ＭＭＰ２を含む。いくつかの実施形態では、マトリックスメタロプロテアーゼは、ＭＭＰ７を含む。いくつかの実施形態では、マトリックスメタロプロテアーゼは、ＭＭＰ９を含む。いくつかの実施形態では、マトリックスメタロプロテアーゼは、ＭＭＰ１３を含む。いくつかの実施形態では、マトリックスメタロプロテアーゼは、ＭＭＰ１４を含む。いくつかの実施形態では、セリンプロテアーゼは、マトリプターゼ（ＭＴＳＰ１）、ウロキナーゼ、またはヘプシンを含む。いくつかの実施形態では、セリンプロテアーゼは、マトリプターゼ（ＭＴＳＰ１）、ウロキナーゼ、およびヘプシンからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、セリンプロテアーゼは、マトリプターゼ（ＭＴＳＰ１）を含む。いくつかの実施形態では、セリンプロテアーゼは、ウロキナーゼを含む。いくつかの実施形態では、セリンプロテアーゼは、ヘプシンを含む。いくつかの実施形態では、切断可能リンカーは、様々なプロテアーゼによって切断される。いくつかの実施形態では、切断可能リンカーは、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、または２０を超える様々なプロテアーゼにより切断される。
半減期延長分子（Ｈ１とＨ１ａ）
いくつかの実施形態では、Ｈ１は、エフェクタ細胞抗原へのＡ１結合を妨害しない。いくつかの実施形態では、Ｈ１は、Ｐ１にＨ１を接続する連結部分（Ｌ３）を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１ａは、エフェクタ細胞抗原への第１の抗原認識分子の結合を妨害しない。いくつかの実施形態では、Ｈ１ａは、Ｐ１ａにＨ１ａを接続する連結部分（Ｌ３）を含む。いくつかの実施形態では、半減期延長分子（Ｈ１またはＨ１ａ）は、抗原認識分子に対する結合親和性を有していない。いくつかの実施形態では、半減期延長分子（Ｈ１またはＨ１ａ）は、エフェクタ細胞抗原に対する結合親和性を有していない。いくつかの実施形態では、半減期延長分子（Ｈ１またはＨ１ａ）は、エフェクタ細胞抗原から抗原認識分子を遮蔽しない。いくつかの実施形態では、半減期延長分子（Ｈ１またはＨ１ａ）は、抗原認識分子に直接連結されない。
いくつかの実施形態では、Ｈ１またはＨ１ａは、表５に開示される配列、またはそれに対し実質的に同一の配列（例えば、少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有する配列）を含む。
いくつかの実施形態では、Ｈ１またはＨ１ａは、反復配列モチーフを有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１またはＨ１ａは、高度に順序付けられた二次構造を有するアミノ酸配列を含む。「高度に順序付けられた二次構造」は、本文脈で使用されるとき、Ｈ１またはＨ１ａのアミノ酸残基の少なくとも約５０％、約７０％、約８０％、もしくは約９０％が、分光測光法（例えば、「遠紫外線」スペクトル領域（１９０～２５０ｎｍ）の円偏光二色性分光法による）、および、Ｃｈｏｕ－ＦａｓｍａｎアルゴリズムやＧａｒｎｉｅｒ－Ｏｓｇｕｔｈｏｒｐｅ－Ｒｏｂｓｏｎ（「ＧＯＲ」）アルゴリズムなどのコンピュータプログラムまたはアルゴリズムを含むがこれらに限定されない手段によって測定または判定されたときに、二次構造に寄与していることを意味する。
いくつかの実施形態では、Ｈ１またはＨ１ａは、ポリマーを含む。いくつかの実施形態では、ポリマーは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である。いくつかの実施形態では、Ｈ１またはＨ１ａは、アルブミンを含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１またはＨ１ａは、Ｆｃドメインを含む。いくつかの実施形態では、アルブミンは、血清アルブミンである。いくつかの実施形態では、アルブミンは、ヒト血清アルブミンである。いくつかの実施形態では、Ｈ１またはＨ１ａは、ポリペプチド、リガンド、または小分子を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチド、リガンド、または小分子は、血清タンパク質もしくはそのフラグメント、循環免疫グロブリンもしくはそのフラグメント、またはＣＤ３５／ＣＲ１に結合する。いくつかの実施形態では、血清タンパク質は、チロキシン結合タンパク質、トランスサイレチン、ａ１－酸性糖タンパク質、トランスフェリン、トランスフェリン受容体もしくはそのトランスフェリン結合部分、フィブリノゲン、またはアルブミンを含む。いくつかの実施形態では、循環免疫グロブリン分子は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ｓｌｇＡ、ＩｇＭ、またはＩｇＤを含む。いくつかの実施形態では、血清タンパク質は、アルブミンである。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、単一ドメイン抗体、単鎖可変フラグメント、またはＦａｂを含む。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、アルブミンに結合する単一ドメイン抗体を含む。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、ヒト抗体またはヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、６４５ｇＨ１ｇＬ１、６４５ｄｓｇＨ５ｇＬ４、２３－１３－Ａ０１－ｓｃ０２、Ａ１０ｍ３またはそのフラグメント、ＤＯＭ７ｒ－３１、ＤＯＭ７ｈ－１１－１５、Ａｌｂ－１、Ａｌｂ－８、Ａｌｂ－２３、１０Ｇ、１０Ｅ、およびＳＡ２１からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、単一ドメイン抗体のＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３は、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号５４、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号５５、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号５６を含む。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、単一ドメイン抗体のＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３は、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号５４、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号５５、ＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号５６を含み、ＣＤＲは、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、またはＨＣ－ＣＤＲ３のうち少なくとも１つに０～２個のアミノ酸修飾を含む。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、単一ドメイン抗体のＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３は、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号５８、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号５９、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号６０を含む。いくつかの実施形態では、単一ドメイン抗体は、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、単一ドメイン抗体のＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３は、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号５８、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号５９、ＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号６０を含み、ＣＤＲは、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、またはＨＣ－ＣＤＲ３のうち少なくとも１つに０～２個のアミノ酸修飾を含む。
いくつかの実施形態では、Ｈ１は、配列番号５７によるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１は、配列番号５７に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１は、配列番号５７に対して少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１は、配列番号５７に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１は、配列番号５７に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１は、配列番号５７に対して少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｈ１ａは、配列番号５７によるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１ａは、配列番号５７に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１ａは、配列番号５７に対して少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１ａは、配列番号５７に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１ａは、配列番号５７に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１ａは、配列番号５７に対して少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｈ１は、配列番号６１によるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１は、配列番号６１に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１は、配列番号６１に対して少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１は、配列番号６１に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１は、配列番号６１に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１は、配列番号６１に対して少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｈ１ａは、配列番号６１によるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１ａは、配列番号６１に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１ａは、配列番号６１に対して少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１ａは、配列番号６１に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１ａは、配列番号６１に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１ａは、配列番号６１に対して少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｈ１もしくはＨ１ａ、またはＨ１およびＨ１ａは、修飾アミノ酸、非天然アミノ酸、非天然の修飾アミノ酸、またはそれらの組合せを含む。いくつかの実施形態では、修飾アミノ酸または非天然の修飾アミノ酸は、翻訳後修飾を含む。いくつかの実施形態では、Ｈ１もしくはＨ１ａ、またはＨ１およびＨ１ａは、アセチル化、アシル化、ＡＤＰリボシル化、アミド化、フラビンの共有結合、ヘム部分の共有結合、ヌクレオチドもしくはヌクレオチド誘導体の共有結合、脂質もしくは脂質誘導体の共有結合、ホスファチジルイノシトールの共有結合、架橋、環化、ジスルフィド結合形成、脱メチル化、共有結合架橋の形成、シスチンの形成、ピログルタメートの形成、ホルミル化、ガンマカルボキシル化、グリコシル化、ＧＰＩアンカー形成、ヒドロキシル化、ヨウ素化、メチル化、ミリストイル化、酸化、タンパク質分解処理、リン酸化、プレニル化、ラセミ化、セレノイル化、硫酸化、アルギニル化などアミノ酸のタンパク質への転移ＲＮＡ媒介型付加、およびユビキチン化を含むがこれらに限定されない修飾を含む。修飾は、ペプチド骨格、アミノ酸側鎖、および終端を含む、Ｈ１もしくはＨ１ａ、またはＨ１およびＨ１ａに対するあらゆる場所で行われる。
いくつかの実施形態では、Ｈ１は、Ｐ１にＨ１を接続する連結部分（Ｌ３）を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、少なくとも５～５０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、少なくとも１０～３０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、少なくとも１０のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、少なくとも１８のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、少なくとも２６のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、（Ｇ２Ｓ）ｎ、（ＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５０）、（ＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５１）、（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５２）、および（ＧＳＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５３）からなる群から選択される式を有しており、式中、ｎは少なくとも１の整数である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、配列番号２２によるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｈ１ａは、Ｐ１ａにＨ１ａを接続する連結部分（Ｌ１ａ）を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１ａは、少なくとも５～５０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ１ａは、少なくとも１０～３０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ１ａは、少なくとも１０のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ１ａは、少なくとも１８のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ１ａは、少なくとも２６のアミノ酸を有するペプチド配列である。いくつかの実施形態では、Ｌ１ａは、（Ｇ２Ｓ）ｎ、（ＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５０）、（ＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５１）、（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５２）、および（ＧＳＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５３）からなる群から選択される式を有しており、式中、ｎは少なくとも１の整数である。いくつかの実施形態では、Ｌ１ａは、配列番号２２によるアミノ酸配列を含む。
ＰＳＭＡおよびＣＤ３に結合する抗体
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、表６に開示されるアミノ酸配列、またはそれに対し実質的に同一の配列（例えば、少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有する配列）を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６２～７７のいずれか１つに対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７２に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７３に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６２および配列番号６３によるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６２および配列番号６３に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６２および配列番号６３に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６２および配列番号６３に対して少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６４および配列番号６５によるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６４および配列番号６５に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６４および配列番号６５に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６４および配列番号６５に対して少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６６および配列番号６７によるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６６および配列番号６７に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６６および配列番号６７に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６６および配列番号６７に対して少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６８および配列番号６９によるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６８および配列番号６９に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６８および配列番号６９に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号６８および配列番号６９に対して少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７０および配列番号７１によるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７０および配列番号７１に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７０および配列番号７１に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７０および配列番号７１に対して少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７２および配列番号７３によるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７２および配列番号７３に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７２および配列番号７３に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７２および配列番号７３に対して少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７４および配列番号７５によるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７４および配列番号７５に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７４および配列番号７５に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７４および配列番号７５に対して少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７６および配列番号７７によるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７６および配列番号７７に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７６および配列番号７７に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、配列番号７６および配列番号７７に対して少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、いくつかの実施形態では、表６に明記される配列を含む。いくつかの実施形態では、配列は、配列番号６２～７７のいずれか１つに対して少なくともまたは約７０％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を含む。いくつかの実施形態では、配列は、配列番号６２～７７のいずれか１つに対して少なくともまたは約９５％の配列同一性を含む。いくつかの実施形態では、配列は、配列番号６２～７７のいずれか１つに対して少なくともまたは約９７％の配列同一性を含む。いくつかの実施形態では、配列は、配列番号６２～７７のいずれか１つに対して少なくともまたは約９９％の配列同一性を含む。いくつかの実施形態では、配列は、配列番号６２～７７のいずれか１つに対して少なくともまたは約１００％の配列同一性を含む。いくつかの例では、配列は、配列番号６２、６５、６６、６９、７０、７３、７５、または７７のいずれか１つの、少なくともまたは約１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０個、または２１０個を超えるアミノ酸を有する少なくとも一部を含む。いくつかの例では、配列は、配列番号６３または６４のいずれか１つの、少なくともまたは約１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０個、または４５０個を超えるアミノ酸を有する少なくとも一部を含む。いくつかの例では、配列は、配列番号６７、６８、７１、７２、７４、または７６のいずれか１つの、少なくともまたは約１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、６００、６１０、６２０、６３０、６４０個、または６４０個を超えるアミノ酸を有する少なくとも一部を含む。
本明細書中で使用されるとき、配列に関する「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」という用語は、必要に応じて配列をアライメントしてギャップを導入した後、特定の配列中のアミノ酸残基と同一であり、最大の配列同一性パーセントを達成するが、配列同一性の一部として保存的置換は考慮しない、候補の配列中のアミノ酸残基の割合として定義される。アミノ酸配列同一性パーセントを判定する目的のアライメントは、例えば、ＥＭＢＯＳＳ ＭＡＴＣＨＥＲ、ＥＭＢＯＳＳ ＷＡＴＥＲ、ＥＭＢＯＳＳ ＳＴＲＥＴＣＨＥＲ、ＥＭＢＯＳＳ ＮＥＥＤＬＥ、ＥＭＢＯＳＳ ＬＡＬＩＧＮ、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮ、またはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）のソフトウェアなど、公的に利用可能なコンピュータソフトウェアを使用して、当業者が想到する範囲内の様々な方法で達成することができる。当業者は、比較されている配列の完全長を上回る最大の配列を達成するのに必要なあらゆるアルゴリズムを含め、アライメントを測定するために適切なパラメータを決定することができる。ＡＬＩＧＮ－２がアミノ酸配列比較に利用される状況では、所与のアミノ酸配列Ａに対する（ｔｏ，ｗｉｔｈ，ｏｒ ａｇａｉｎｓｔ）所与のアミノ酸配列Ｂのアミノ酸配列（あるいは、所与のアミノ酸配列Ｂに対する特定のアミノ酸配列同一性％を有するか含んでいる所与のアミノ酸配列Ａとして表すことができる）は、１００×分数Ｘ／Ｙとして算出され、式中、Ｘは、ＡおよびＢのプログラムのアライメントにおいて配列アライメントプログラムＡＬＩＧＮ－２により同一の一致としてスコア付けされるアミノ酸残基の数であり、Ｙは、Ｂにおけるアミノ酸残基の総数である。アミノ酸配列Ａの長さがアミノ酸配列Ｂの長さと等しくない場合、ＡとＢとのアミノ酸配列同一性％は、ＢとＡとのアミノ酸配列同一性％と等しくならないことが認識される。別段の定めのない限り、本明細書中で使用されるすべてのアミノ酸配列同一性％は、ＡＬＩＧＮ－２コンピュータプログラムを用いて直前の段落に記載されるように得られる。
本明細書中のいくつかの実施形態では、立体構成１：
による構造配置を含む単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、ポリペプチド複合体は、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含む単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、エフェクタ細胞抗原へのｓｃＦｖの結合を損なうペプチドをさらに含んでおり、ペプチドは、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分によりｓｃＦｖの重鎖可変ドメインに連結されており、ペプチドは半減期延長分子をさらに含んでいる、ｓｃＦＶと、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂまたはＦａｂ’であって、ＦａｂまたはＦａｂ’は、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド鎖およびＦａｂ重鎖ポリペプチド鎖を含んでおり、Ｆａｂ重鎖ポリペプチド鎖は、ｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインのＣ末端に連結される、ＦａｂまたはＦａｂ’とを含んでいる、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、立体構成２：
による構造配置を含む単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、ポリペプチド複合体は、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含む単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、エフェクタ細胞抗原へのｓｃＦｖの結合を損なうペプチドをさらに含んでおり、ペプチドは、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分によりｓｃＦｖの重鎖可変ドメインのＮ末端に連結されており、ペプチドは半減期延長分子をさらに含んでいる、ｓｃＦＶと、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂまたはＦａｂ’であって、ＦａｂまたはＦａｂ’は、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド鎖およびＦａｂ重鎖ポリペプチド鎖を含んでおり、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド鎖は、ｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインのＣ末端に連結される、ＦａｂまたはＦａｂ’とを含んでいる、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、立体構成３：
による構造配置を含む単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含む単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、エフェクタ細胞抗原へのｓｃＦｖの結合を損なうペプチド（Ｐ１）に連結されており、Ｐ１は、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分（Ｌ１）によりｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインのＮ末端に連結されており、Ｐ１は半減期延長分子にさらに連結されている、ｓｃＦＶと、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂであって、Ｆａｂは、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドおよびＦａｂ重鎖ポリペプチドを含み、Ｆａｂ重鎖ポリペプチドはｓｃＦｖの重鎖可変ドメインのＣ末端に連結され、Ｆａｂは、Ｐ２およびＬ２に連結され、Ｐ２は、ＰＳＭＡへのＦａｂの結合を損なうペプチドを含み、Ｌ２は、Ｐ２にＦａｂ軽鎖ポリペプチドを接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含む、Ｆａｂとを含んでいる、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、立体構成４：
による構造配置を含む単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含む単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、エフェクタ細胞抗原へのｓｃＦｖの結合を損なうペプチドに連結されており、ペプチドは、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分によりｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインに連結されており、ペプチドは半減期延長分子にさらに連結されている、ｓｃＦＶと、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂであって、Ｆａｂは、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド鎖およびＦａｂ重鎖ポリペプチド鎖を含んでおり、Ｆａｂ重鎖ポリペプチド鎖は、ｓｃＦｖの重鎖可変ドメインのＣ末端に連結される、Ｆａｂとを含んでいる、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、立体構成５：
による構造配置を含む単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含む単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、エフェクタ細胞抗原へのｓｃＦｖの結合を損なうペプチド（Ｐ１）に連結されており、Ｐ１は、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分によりｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインのＮ末端に連結されており、Ｐ１は半減期延長分子にさらに連結されている、ｓｃＦＶと、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂであって、Ｆａｂは、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドおよびＦａｂ重鎖ポリペプチドを含み、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドはｓｃＦｖの重鎖可変ドメインのＣ末端に連結され、Ｆａｂは、Ｐ２およびＬ２に連結され、Ｐ２は、ＰＳＭＡへのＦａｂの結合を損なうペプチドを含み、Ｌ２は、Ｐ２にＦａｂ重鎖ポリペプチドを接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含む、Ｆａｂとを含んでいる、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、立体構成６：
による構造配置を含む単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含む単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、エフェクタ細胞抗原へのｓｃＦｖの結合を損なうペプチドにさらに連結されており、ペプチドは、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分によりｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインのＮ末端に連結されており、ペプチドは半減期延長分子にさらに連結されている、ｓｃＦＶと、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂであって、Ｆａｂは、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド鎖およびＦａｂ重鎖ポリペプチド鎖を含んでおり、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド鎖は、ｓｃＦｖの重鎖可変ドメインのＣ末端に連結される、Ｆａｂとを含んでいる、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、立体構成７：
による構造配置を含む単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含む単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、エフェクタ細胞抗原へのｓｃＦｖの結合を損なうペプチド（Ｐ１）に連結されており、Ｐ１は、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分（Ｌ１）によりｓｃＦｖの重鎖可変ドメインのＮ末端に連結されており、Ｐ１は半減期延長分子にさらに連結されている、ｓｃＦＶと、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂであって、Ｆａｂは、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドおよびＦａｂ重鎖ポリペプチドを含み、Ｆａｂ重鎖ポリペプチドはｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインのＣ末端に連結され、Ｆａｂは、Ｐ２およびＬ２に連結され、Ｐ２は、ＰＳＭＡへのＦａｂの結合を損なうペプチドを含み、Ｌ２は、Ｐ２にＦａｂ軽鎖ポリペプチドを接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含む、Ｆａｂとを含んでいる、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、立体構成８：
による構造配置を含む単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含む単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、エフェクタ細胞抗原へのｓｃＦｖの結合を損なうペプチド（Ｐ１）に連結されており、Ｐ１は、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分（Ｌ１）によりｓｃＦｖの重鎖可変ドメインのＮ末端に連結されており、Ｐ１は半減期延長分子にさらに連結されている、ｓｃＦＶと、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂであって、Ｆａｂは、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドおよびＦａｂ重鎖ポリペプチドを含み、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドはｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインのＣ末端に連結され、Ｆａｂは、Ｐ２およびＬ２に連結され、Ｐ２は、ＰＳＭＡへのＦａｂの結合を損なうペプチドを含み、Ｌ２は、Ｐ２にＦａｂ重鎖ポリペプチドを接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含む、Ｆａｂとを含んでいる、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、立体構成９：
による構造配置を含む単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂであって、Ｆａｂは、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド、およびＦａｂ重鎖ポリペプチドを含み、Ｆａｂは、ＰＳＭＡへのＦａｂの結合を損なうペプチド（Ｐ１）に連結され、Ｐ１は、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分（Ｌ１）によりＦａｂ軽鎖ポリペプチドのＮ末端に連結され、Ｐ１は半減期延長分子にさらに連結されている、Ｆａｂと、エフェクタ細胞抗原に結合する単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含み、ｓｃＦｖの重鎖可変ドメインは、Ｆａｂ重鎖ポリペプチドのＮ末端に連結され、ｓｃＦｖは、Ｐ２およびＬ２に連結され、Ｐ２は、エフェクタ細胞抗原へのｓｃＦｖの結合を損なうペプチドを含み、Ｌ２は、Ｐ２にｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインを接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含む、ｓｃＦｖとを含んでいる、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、立体構成１０：
による構造配置を含む単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂであって、Ｆａｂは、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド、およびＦａｂ重鎖ポリペプチドを含み、Ｆａｂは、ＰＳＭＡへのＦａｂの結合を損なうペプチドに連結され、ペプチドは、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分（Ｌ１）によりＦａｂ軽鎖ポリペプチドのＮ末端に連結され、ペプチドは半減期延長分子にさらに連結されている、Ｆａｂと、エフェクタ細胞抗原に結合する単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含み、ｓｃＦｖの重鎖可変ドメインは、Ｆａｂ重鎖ポリペプチドのＮ末端に連結される、ｓｃＦｖとを含んでいる、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、立体構成１１：
による構造配置を含む単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂであって、Ｆａｂは、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド、およびＦａｂ重鎖ポリペプチドを含み、Ｆａｂは、ＰＳＭＡへのＦａｂの結合を損なうペプチド（Ｐ１）に連結され、Ｐ１は、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分（Ｌ１）によりＦａｂ重鎖ポリペプチドのＮ末端に連結され、Ｐ１は半減期延長分子にさらに連結されている、Ｆａｂと、エフェクタ細胞抗原に結合する単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含み、ｓｃＦｖの重鎖可変ドメインは、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドのＮ末端に連結され、ｓｃＦｖは、Ｐ２およびＬ２にさらに連結され、Ｐ２は、エフェクタ細胞抗原へのｓｃＦｖの結合を損なうペプチドを含み、Ｌ２は、Ｐ２にｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインを接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含む、ｓｃＦｖとを含んでいる、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、立体構成１２：
による構造配置を含む単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂであって、Ｆａｂは、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド、およびＦａｂ重鎖ポリペプチドを含み、Ｆａｂは、ＰＳＭＡへのＦａｂの結合を損なうペプチドに連結され、ペプチドは、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分（Ｌ１）によりＦａｂ重鎖ポリペプチドのＮ末端に連結され、ペプチドは半減期延長分子にさらに連結されている、Ｆａｂと、エフェクタ細胞抗原に結合する単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含み、ｓｃＦｖの重鎖可変ドメインは、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドのＮ末端に連結される、ｓｃＦｖとを含んでいる、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、立体構成１３：
による構造配置を含む単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂであって、Ｆａｂは、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドおよびＦａｂ重鎖ポリペプチドを含み、Ｆａｂは、ＰＳＭＡへのＦａｂの結合を損なうペプチド（Ｐ１）に連結され、Ｐ１は、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分（Ｌ１）によりＦａｂ軽鎖ポリペプチドのＮ末端に連結され、Ｐ１は半減期延長分子にさらに連結されている、Ｆａｂと、エフェクタ細胞抗原に結合する単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含み、ｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインは、Ｆａｂ重鎖ポリペプチドのＮ末端に連結され、ｓｃＦｖは、Ｐ２およびＬ２に連結され、Ｐ２は、エフェクタ細胞抗原へのｓｃＦｖの結合を損なうペプチドを含み、Ｌ２は、Ｐ２にｓｃＦｖの重鎖可変ドメインを接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含む、ｓｃＦｖとを含んでいる、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、立体構成１４：
による構造配置を含む単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂであって、Ｆａｂは、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド、およびＦａｂ重鎖ポリペプチドを含み、Ｆａｂは、ＰＳＭＡへのＦａｂの結合を損なうペプチドに連結され、ペプチドは、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分によりＦａｂ軽鎖ポリペプチドのＮ末端に連結され、ペプチドは半減期延長分子にさらに連結されている、Ｆａｂと、エフェクタ細胞抗原に結合する単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含み、ｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインは、Ｆａｂ重鎖ポリペプチドのＮ末端に連結される、ｓｃＦｖとを含んでいる、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、立体構成１５：
による構造配置を含む単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂであって、Ｆａｂは、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドおよびＦａｂ重鎖ポリペプチドを含み、Ｆａｂは、ＰＳＭＡへのＦａｂの結合を損なう（Ｐ１）に連結され、Ｐ１は、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分（Ｌ１）によりＦａｂ重鎖ポリペプチドのＮ末端に連結され、Ｐ１は半減期延長分子にさらに連結されている、Ｆａｂと、エフェクタ細胞抗原に結合する単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含み、ｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインは、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドのＮ末端に連結され、ｓｃＦｖは、Ｐ２およびＬ２に連結され、Ｐ２は、エフェクタ細胞抗原へのｓｃＦｖの結合を損なうペプチドを含み、Ｌ２は、Ｐ２にｓｃＦｖの重鎖可変ドメインを接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含む、ｓｃＦｖとを含んでいる、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、立体構成１６：
による構造配置を含む単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂであって、Ｆａｂは、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド、およびＦａｂ重鎖ポリペプチドを含み、Ｆａｂは、ＰＳＭＡへのＦａｂの結合を損なうペプチドに連結され、ペプチドは、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分（Ｌ１）によりＦａｂ重鎖ポリペプチドのＮ末端に連結され、ペプチドは半減期延長分子にさらに連結されている、Ｆａｂと、エフェクタ細胞抗原に結合する単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含み、ｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインは、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドのＮ末端に連結される、ｓｃＦｖとを含んでいる、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体が開示される。
ポリペプチドまたはポリペプチド複合体をコードするポリヌクレオチド
本明細書中のいくつかの実施形態では、本明細書中に開示されるポリペプチドまたはポリペプチド複合体をコードする単離された組換え核酸分子が開示される。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、抗体または抗体フラグメントを含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、Ｆａｂおよび単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）を含む。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式Ｉ：
Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉ）
によるポリペプチドまたはポリペプチド複合体をコードする単離された組換え核酸分子であって、
式中、Ａ１は、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子を含み、Ｐ１は、Ａ１に結合するペプチドを含み、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含み、Ｈ１は、半減期延長分子を含み、Ａ２は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子を含む、単離された組換え核酸分子が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式Ｉ：
Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉ）
によるポリペプチドまたはポリペプチド複合体をコードする単離された組換え核酸分子であって、
式中、Ａ１は、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子であり、Ｐ１は、Ａ１に結合するペプチドであり、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分であり、Ｈ１は、半減期延長分子であり、Ａ２は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子である、単離された組換え核酸分子が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式Ｉ：
Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉ）
を含むポリペプチドまたはポリペプチド複合体をコードする単離された組換え核酸分子であって、
式中、Ａ１は、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子を含み、Ｐ１は、Ａ１に結合するペプチドを含み、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含み、Ｈ１は、半減期延長分子を含み、Ａ２は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子を含む、単離された組換え核酸分子が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式Ｉ：
Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉ）
を含むポリペプチドまたはポリペプチド複合体をコードする単離された組換え核酸分子であって、
式中、Ａ１は、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子であり、Ｐ１は、Ａ１に結合するペプチドであり、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分であり、Ｈ１は、半減期延長分子であり、Ａ２は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子である、単離された組換え核酸分子が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式Ｉａ：
Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）
によるポリペプチドまたはポリペプチド複合体をコードする単離された組換え核酸分子が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式ＩＩ：
Ｌ１ａ－Ｐ１ａ－Ｈ１ａ（式ＩＩ）
によるポリペプチドまたはポリペプチド複合体をコードする単離された組換え核酸分子であって、
式中、Ｌ１ａは、切断されない場合に、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子にＰ１ａを接続する、腫瘍特異的プロテアーゼにより切断された連結部分を含み、第１の抗原認識分子は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子に接続され、Ｐ１ａは、Ｌ１ａが切断されない場合に、第１の抗原認識分子に結合するペプチドを含み、Ｈ１ａは、半減期延長分子を含む、単離された組換え核酸分子が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式ＩＩ：
Ｌ１ａ－Ｐ１ａ－Ｈ１ａ（式ＩＩ）
を含むポリペプチドまたはポリペプチド複合体をコードする単離された組換え核酸分子であって、
式中、Ｌ１ａは、切断されない場合に、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子にＰ１ａを接続する、腫瘍特異的プロテアーゼにより切断された連結部分を含み、第１の抗原認識分子は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子に接続され、Ｐ１ａは、Ｌ１ａが切断されない場合に、第１の抗原認識分子に結合するペプチドを含み、Ｈ１ａは、半減期延長分子を含む、単離された組換え核酸分子が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式ＩＩ：
Ｌ１ａ－Ｐ１ａ－Ｈ１ａ（式ＩＩ）
によるポリペプチドまたはポリペプチド複合体をコードする単離された組換え核酸分子であって、
式中、Ｌ１ａは、切断されない場合に、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子にＰ１ａを接続する、腫瘍特異的プロテアーゼにより切断された連結部分であり、第１の抗原認識分子は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子に接続され、Ｐ１ａは、Ｌ１ａが切断されない場合に、第１の抗原認識分子に結合するペプチドであり、Ｈ１ａは、半減期延長分子である、単離された組換え核酸分子が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、式ＩＩ：
Ｌ１ａ－Ｐ１ａ－Ｈ１ａ（式ＩＩ）
を含むポリペプチドまたはポリペプチド複合体をコードする単離された組換え核酸分子であって、
式中、Ｌ１ａは、切断されない場合に、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子にＰ１ａを接続する、腫瘍特異的プロテアーゼにより切断された連結部分であり、第１の抗原認識分子は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子に接続され、Ｐ１ａは、Ｌ１ａが切断されない場合に、第１の抗原認識分子に結合するペプチドであり、Ｈ１ａは、半減期延長分子である、単離された組換え核酸分子が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、立体構成１：
による構造配置を含むポリペプチドまたはポリペプチド複合体をコードする単離された核酸分子であって、ポリペプチド複合体は、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含む単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、エフェクタ細胞抗原へのｓｃＦｖの結合を損なうペプチドをさらに含んでおり、ペプチドは、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分によりｓｃＦｖの重鎖可変ドメインに連結されており、ペプチドは半減期延長分子をさらに含んでいる、ｓｃＦＶと、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂまたはＦａｂ’であって、ＦａｂまたはＦａｂ’は、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド鎖およびＦａｂ重鎖ポリペプチド鎖を含んでおり、Ｆａｂ重鎖ポリペプチド鎖は、ｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインのＣ末端に連結される、ＦａｂまたはＦａｂ’とを含んでいる、単離された核酸分子が開示される。
本明細書中のいくつかの実施形態では、立体構成２：
による構造配置を含むポリペプチドまたはポリペプチド複合体をコードする単離された核酸分子であって、ポリペプチド複合体は、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含む単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、エフェクタ細胞抗原へのｓｃＦｖの結合を損なうペプチドをさらに含んでおり、ペプチドは、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分によりｓｃＦｖの重鎖可変ドメインのＮ末端に連結されており、ペプチドは半減期延長分子をさらに含んでいる、ｓｃＦＶと、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂまたはＦａｂ’であって、ＦａｂまたはＦａｂ’は、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド鎖およびＦａｂ重鎖ポリペプチド鎖を含んでおり、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド鎖は、ｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインのＣ末端に連結される、ＦａｂまたはＦａｂ’とを含んでいる、単離された核酸分子が開示される。
医薬組成物
本明細書中のいくつかの実施形態では、（ａ）本明細書中に開示されるポリペプチドまたはポリペプチド複合体と、（ｂ）薬学的に許容可能な賦形剤とを含む医薬組成物が開示される。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、（ａ）式Ｉ：
Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉ）
によるポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、
式中、Ａ１は、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子を含み、Ｐ１は、Ａ１に結合するペプチドを含み、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含み、Ｈ１は、半減期延長分子を含み、Ａ２は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子を含む、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体と、（ｂ）薬学的に許容可能な賦形剤とを含む。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、（ａ）式Ｉ：
Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉ）
によるポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、
式中、Ａ１は、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子であり、Ｐ１は、Ａ１に結合するペプチドであり、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分であり、Ｈ１は、半減期延長分子であり、Ａ２は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子である、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体と、（ｂ）薬学的に許容可能な賦形剤とを含む。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、（ａ）式Ｉ：
Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉ）
を含むポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、
式中、Ａ１は、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子を含み、Ｐ１は、Ａ１に結合するペプチドを含み、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含み、Ｈ１は、半減期延長分子を含み、Ａ２は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子を含む、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体と、（ｂ）薬学的に許容可能な賦形剤とを含む。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、（ａ）式Ｉ：
Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉ）
を含むポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、
式中、Ａ１は、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子であり、Ｐ１は、Ａ１に結合するペプチドであり、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分であり、Ｈ１は、半減期延長分子であり、Ａ２は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子である、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体と、（ｂ）薬学的に許容可能な賦形剤とを含む。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、（ａ）式Ｉａ：
Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１（式Ｉａ）
によるポリペプチドまたはポリペプチド複合体と、（ｂ）薬学的に許容可能な賦形剤とを含む。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、（ａ）式ＩＩ：
Ｌ１ａ－Ｐ１ａ－Ｈ１ａ（式ＩＩ）
によるポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、
式中、Ｌ１ａは、切断されない場合に、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子にＰ１ａを接続する、腫瘍特異的プロテアーゼにより切断された連結部分を含み、第１の抗原認識分子は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子に接続され、Ｐ１ａは、Ｌ１ａが切断されない場合に、第１の抗原認識分子に結合するペプチドを含み、Ｈ１ａは、半減期延長分子を含む、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体と、（ｂ）薬学的に許容可能な賦形剤とを含む。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、（ａ）式ＩＩ：
Ｌ１ａ－Ｐ１ａ－Ｈ１ａ（式ＩＩ）
を含むポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、
式中、Ｌ１ａは、切断されない場合に、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子にＰ１ａを接続する、腫瘍特異的プロテアーゼにより切断された連結部分を含み、第１の抗原認識分子は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子に接続され、Ｐ１ａは、Ｌ１ａが切断されない場合に、第１の抗原認識分子に結合するペプチドを含み、Ｈ１ａは、半減期延長分子を含む、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体と、（ｂ）薬学的に許容可能な賦形剤とを含む。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、（ａ）式ＩＩ：
Ｌ１ａ－Ｐ１ａ－Ｈ１ａ（式ＩＩ）
によるポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、
式中、Ｌ１ａは、切断されない場合に、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子にＰ１ａを接続する、腫瘍特異的プロテアーゼにより切断された連結部分であり、第１の抗原認識分子は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子に接続され、Ｐ１ａは、Ｌ１ａが切断されない場合に、第１の抗原認識分子に結合するペプチドであり、Ｈ１ａは、半減期延長分子である、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体と、（ｂ）薬学的に許容可能な賦形剤とを含む。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、（ａ）式ＩＩ：
Ｌ１ａ－Ｐ１ａ－Ｈ１ａ（式ＩＩ）
を含むポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、
式中、Ｌ１ａは、切断されない場合に、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子にＰ１ａを接続する、腫瘍特異的プロテアーゼにより切断された連結部分であり、第１の抗原認識分子は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子に接続され、Ｐ１ａは、Ｌ１ａが切断されない場合に、第１の抗原認識分子に結合するペプチドであり、Ｈ１ａは、半減期延長分子である、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体と、（ｂ）薬学的に許容可能な賦形剤とを含む。
本明細書中のいくつかの実施形態では、医薬組成物は、（ａ）立体構成１：
による構造配置を含むポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、ポリペプチド複合体は、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含む単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、エフェクタ細胞抗原へのｓｃＦｖの結合を損なうペプチドをさらに含んでおり、ペプチドは、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分によりｓｃＦｖの重鎖可変ドメインに連結されており、ペプチドは半減期延長分子をさらに含んでいる、ｓｃＦＶ、ならびに、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂまたはＦａｂ’であって、ＦａｂまたはＦａｂ’は、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド鎖およびＦａｂ重鎖ポリペプチド鎖を含んでおり、Ｆａｂ重鎖ポリペプチド鎖は、ｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインのＣ末端に連結される、ＦａｂまたはＦａｂ’を含む、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体と、（ｂ）薬学的に許容可能な賦形剤とを含む。
本明細書中のいくつかの実施形態では、医薬組成物は、（ａ）立体構成２：
による構造配置を含むポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、ポリペプチド複合体は、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含む単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、エフェクタ細胞抗原へのｓｃＦｖの結合を損なうペプチドをさらに含んでおり、ペプチドは、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分によりｓｃＦｖの重鎖可変ドメインのＮ末端に連結されており、ペプチドは半減期延長分子をさらに含んでいる、ｓｃＦＶ、なたびに、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂまたはＦａｂ’であって、ＦａｂまたはＦａｂ’は、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド鎖およびＦａｂ重鎖ポリペプチド鎖を含んでおり、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド鎖は、ｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインのＣ末端に連結される、ＦａｂまたはＦａｂ’を含む、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体と、（ｂ）薬学的に許容可能な賦形剤とを含む。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、検出可能な標識、治療剤、または薬物動態的修飾部分をさらに含む。いくつかの実施形態では、検出可能な標識は、蛍光標識、放射標識、酵素、核酸プローブ、または造影剤を含む。
対象への投与において、本明細書中に開示されるポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、１もしくは複数の薬学的に許容可能な担体または添加剤とともに医薬組成物に入れて提供されてもよい。「薬学的に許容可能な担体」という用語には、成分の生体活性の有効性に干渉せず、かつ投与対象である患者に対し毒性がないあらゆる担体が挙げられるが、これらに限定されない。好適な医薬担体の例は当該技術分野で周知であり、リン酸緩衝生理食塩水、水、油／水乳剤などの乳剤、様々な種類の湿潤剤、無菌液などが挙げられる。このような担体は、従来方法で製剤化することができ、好適な用量で対象に投与することができる。好ましくは、組成物は無菌である。これらの組成物は、保存料、乳化剤、および分散剤などのアジュバントをさらに含んでもよい。微生物の活動の防止は、種々の抗菌剤および抗真菌剤の封入体によって確保される場合がある。
医薬組成物は、（所望の投与方法に応じて）いずれかの好適な形態にあってもよい。医薬組成物は、単位剤形で、密封容器に入れて、およびキットの一部として提供される場合がある。このようなキットは、使用説明書を備えていてもよい。キットは、上述の単位剤形を複数含んでいてもよい。
医薬組成物は、非経口（例えば、皮下、筋肉内、または静脈内）経路を含むいずれかの適切な経路による投与に適している場合がある。かかる組成物は、例えば有効成分を滅菌条件下で担体または賦形剤と混合することにより、薬学の技術分野で公知のいずれかの方法によって調製されてもよい。
本開示の物質の投与量は、処置されることとなる疾患または障害、処置されることとなる個体の年齢および状態などによって広範囲で変動する場合があり、医師は、使用される適切な投与量を最終的に決定することになる。
処置方法
いくつかの実施形態は、癌の処置を必要とする対象の癌を処置する方法であって、本明細書に記載される単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を対象に投与する工程を含む方法である。いくつかの実施形態では、癌は、ＰＳＭＡを発現する細胞を有している。いくつかの例では、癌は、固形腫瘍癌である。いくつかの実施形態では、癌は、肺、乳房（例えば、ＨＥＲ２＋、ＥＲ／ＰＲ＋、ＴＮＢＣ）、子宮頚部、卵巣、大腸、膵臓、または胃の癌である。
いくつかの実施形態は、前立腺癌の処置を必要とする対象の前立腺癌を処置する方法であって、本明細書に記載される単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を対象に投与する工程を含む方法である。いくつかの実施形態は、転移性去勢抵抗性前立腺癌（ｍＣＲＰＣ）の処置を必要とする対象のｍＣＲＰＣを処置する方法であって、本明細書に記載される単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を対象に投与する工程を含む方法である。
本明細書中のいくつかの実施形態では、長期の半減期を含む単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体が記載される。いくつかの例では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体の半減期は、少なくともまたは約１２時間、２４時間、３６時間、４８時間、６０時間、７２時間、８４時間、９６時間、１００時間、１０８時間、１１９時間、１２０時間、１４０時間、１６０時間、１８０時間、２００時間、または２００時間超である。いくつかの例では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体の半減期は、約１２時間～約３００時間、約２０時間～約２８０時間、約４０時間～約２４０時間、約６０時間～約２００時間、または約８０時間～約１４０時間の範囲にある。
本明細書中のいくつかの実施形態では、週１回投与されるポリペプチドまたはポリペプチド複合体が記載される。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、静脈内、筋肉内、損傷内、局所、皮下、注入、または経口により週１回投与される。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、ボーラス注射により週１回投与される。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、持続注入によって毎週１回投与される。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、６０分以下の期間にわたる持続注入として対象に週１回投与される。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、６０分以下の期間にわたる持続静注として対象に週１回投与される。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、少なくとも１０分の期間にわたる持続静注として対象に週１回投与される。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、対象に週１回投与され、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体の半減期は、少なくとも３０時間である。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、対象に週１回投与され、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体の半減期は、少なくとも５０時間である。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、対象に週１回投与され、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体の半減期は、少なくとも６０時間である。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、対象に週１回投与され、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体の半減期は、少なくとも７０時間である。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、対象に週１回投与され、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体の半減期は、少なくとも８０時間である。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、対象に週１回投与され、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体の半減期は、少なくとも９０時間である。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、対象に週１回投与され、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体の半減期は、少なくとも１００時間である。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、対象に週１回投与され、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体の半減期は、少なくとも１１０時間である。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、対象に週１回投与され、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体の半減期は、少なくとも１１５時間である。いくつかの実施形態では、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体は、対象に週１回投与され、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体の半減期は、少なくとも１１９時間である。
ＰＳＭＡおよびＣＤ３に結合する抗体の産生
いくつかの実施形態では、本明細書中に記載のポリペプチド（例えば、抗体およびその結合フラグメント）は、ポリペプチド（例えば、抗体）の合成に有用であると当該技術分野で知られるいずれかの方法、具体的には化学合成または組換え発現によって産生され、好ましくは組換え発現技法によって産生される。
いくつかの例では、抗体またはその結合フラグメントは組換えにより発現され、抗体またはその結合フラグメントをコードする核酸は、化学合成されたオリゴヌクレオチド（例えば、Ｋｕｔｍｅｉｅｒらによる１９９４年の「ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ １７：２４２」に記載されるもの）から組み立てられ、抗体をコードする配列の複数部分を含有する重複オリゴヌクレオチドの合成、それらオリゴヌクレオチドのアニーリングおよびライゲーション、ならびにその後のライゲートされたオリゴヌクレオチドのＰＣＲ増幅を必要とする。
代替的に、抗体をコード化する核酸分子は、配列の３’および５’末端にハイブリダイズ可能な合成プライマーを用いたＰＣＲ増幅によって、または特定の遺伝子配列に特異的なオリゴヌクレオチドプローブを用いてクローンを作ることによって、好適な供給源（例えば、抗体ｃＤＮＡライブラリ、または免疫グロブリンを発現するいずれかの組織もしくは細胞から生成されたｃＤＮＡライブラリ）から任意選択で生成される。
いくつかの例では、抗体またはその結合フラグメントは、ポリクローナル抗体を生成するためにマウスなどの動物を免疫化することにより、またはより好ましくは、例えば、ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ（１９７５，Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５－４９７）に記載されるか、Ｋｏｚｂｏｒら（１９８３，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｔｏｄａｙ ４：７２）に記載されるか、もしくはＣｏｌｅら（１９８５ ｉｎ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．，７７～９６頁）に記載されるモノクローナル抗体を生成することにより、任意選択で生成される。代替的に、抗体の少なくともＦａｂ部分をコードするクローンが、特異性抗原に結合するＦａｂフラグメントのクローンに対してＦａｂ発現ライブラリをスクリーニングすることにより（例えば、Ｈｕｓｅらによる１９８９年のＳｃｉｅｎｃｅ ２４６：１２７５－１２８１に記載されるように）、または抗体ライブラリをスクリーニングすることにより（例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎらによる１９９１年のＮａｔｕｒｅ ３５２：６２４、Ｈａｎｅらによる１９９７年のＰｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９４：４９３７を参照）、任意選択で得られる。
いくつかの実施形態では、適切な生体活性のヒト抗体分子からの遺伝子とともに、適切な抗原特異性のマウス抗体分子からの遺伝子をスプライシングすることにより、「キメラ抗体」を産生するために開発された技法（Ｍｏｒｒｉｓｏｎらによる１９８４年のＰｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８１：８５１－８５５、Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒらによる１９８４年のＮａｔｕｒｅ ３１２：６０４－６０８、Ｔａｋｅｄａらによる１９８５年のＮａｔｕｒｅ ３１４：４５２－４５４）が、使用される。キメラ抗体は、マウスモノクローナル抗体に由来する可変領域、およびヒト免疫グロブリン定常領域を有するものなど、様々な部分が様々な動物種に由来する分子である。
いくつかの実施形態では、単鎖抗体の産生について記載される技法（米国特許第４，６９４，７７８号明細書、Ｂｉｒｄによる１９８８年のＳｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３－４２、Ｈｕｓｔｏｎらによる１９８８年のＰｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：５８７９－５８８３、およびＷａｒｄらによる１９８９年のＮａｔｕｒｅ ３３４：５４４－５４）は、単鎖抗体を産生するのに適している。単鎖抗体は、アミノ酸架橋を介してＦｖ部位の重鎖フラグメントおよび軽鎖フラグメントを連結させることにより形成されて、単鎖ポリペプチドをもたらす。大腸菌中の機能的Ｆｖフラグメントの組立てに関する技法も、任意選択で使用される（Ｓｋｅｒｒａらによる１９８８年のＳｃｉｅｎｃｅ ２４２：１０３８－１０４１）。
いくつかの実施形態では、抗体のヌクレオチド配列を含む発現ベクター、または抗体のヌクレオチド配列は、従来技術（例えば、エレクトロポレーション、リポソームトランスフェクション、およびリン酸カルシウム沈澱反応）によって宿主細胞に移動され、次いでトランスフェクトされた細胞は、抗体を生産するための従来技法によって培養される。特定の実施形態では、抗体の発現は、構成的プロモータ、誘導可能プロモータ、または組織特異的プロモータによって調節される。
いくつかの実施形態では、種々の宿主発現ベクター系が、本明細書中に記載の抗体またはその結合フラグメントを発現させるために利用される。このような宿主発現系は、抗体のコード配列を産生して後に精製するビヒクルを表すだけでなく、適切なヌクレオチドコード配列により形質転換またはトランスフェクトされた場合にｉｎ ｓｉｔｕで抗体またはその結合フラグメントを発現する細胞を表す。これらには、抗体またはその結合フラグメントのコード配列を含有する組換えバクテリオファージＤＮＡ、プラスミドＤＮＡ、またはコスミドＤＮＡ発現ベクターにより形質転換された細菌（例えば、大腸菌および枯草菌）などの微生物、抗体またはその結合フラグメントのコード配列を含有する組換え酵母菌発現ベクターにより形質転換された酵母菌（例えば、サッカロミケス・ピキア）、抗体またはその結合フラグメントのコード配列を含有する組換えウイルス発現ベクター（例えば、バキュロウイルス）に感染した昆虫細胞系、組換えウイルス発現ベクター（例えば、カリフラワー・モザイク・ウイルス（ＣａＭＶ）およびタバコ・モザイク・ウイルス（ＴＭＶ））に感染したか、または抗体もしくはその結合フラグメントのコード配列を含有する組換プラスミド発現ベクター（例えば、Ｔｉプラスミド）で形質転換された植物細胞系、あるいは、哺乳動物細胞のゲノム（例えば、メタロチオネインプロモータ）または哺乳動物ウイルス（例えば、アデノウイルス後期プロモータ、ワクシニアウイルス７．５Ｋプロモータ）に由来するプロモータを含有する組換え発現構築物を抱える哺乳動物細胞系（例えば、ＣＯＳ、ＣＨＯ、ＢＨ、２９３、２９３Ｔ、３Ｔ３細胞）が挙げられるが、これらに限定されない。
組換えタンパク質の長期にわたる高収量の産生では、安定した発現が好ましい。いくつかの例では、安定して抗体を発現する細胞株は、任意選択で操作される。ウイルスの複製開始点を包含する発現ベクターを使用するのではなく、宿主細胞は適切な発現調節要素（例えば、プロモータ、エンハンサ、配列、転写ターミネータ、ポリアデニル化部位など）および選択可能なマーカによって制御されたＤＮＡで形質転換される。外来性ＤＮＡの導入後、操作された細胞を富化培地中で１～２日間成長させた後、選択培地に切り替える。組換えプラスミド中の選択可能なマーカは、選択に対する耐性を与えて、細胞がプラスミドをそれらの染色体へ安定して統合し、クローン化されかつ細胞株へと拡張される焦点を形成するように成長することが可能になる。この方法は、抗体またはその結合フラグメントを発現する細胞株を操作するために有利に使用できる。
いくつかの例では、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ（Ｗｉｇｌｅｒらによる１９７７年のＣｅｌｌ １１：２２３）、ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＳｚｙｂａｌｓｋａとＳｚｙｂａｌｓｋｉによる１９２，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ４８：２０２）、およびアデニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（Ｌｏｗｙらによる１９８０年のＣｅｌｌ ２２：８１７）遺伝子を含むがこれらに限定されない多くの選択システムが使用され、それぞれｔｋ－、ｈｇｐｒｔ－、またはａｐｒｔ－細胞に利用される。また、代謝拮抗物質耐性（ａｎｔｉｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ）も、次の遺伝子：メトトレキサートに耐性を与えるｄｈｆｒ（Ｗｉｇｌｅｒらによる１９８０年のＰｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：３５７、Ｏ’Ｈａｒｅらによる１９８１年のＰｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７８：１５２７）、ミコフェノール酸に耐性を与えるｇｐｔ（ＭｕｌｌｉｇａｎとＢｅｒｇによる１９８１年のＰｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７８：２０７２）、アミノグリコシドＧ－４１８に耐性を与えるｎｅｏ（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｙ １２：４８８－５０５、ＷｕとＷｕによる１９９１年のＢｉｏｔｈｅｒａｐｙ ３：８７－９５、Ｔｏｌｓｔｏｓｈｅｖによる１９９３年のＡｎｎ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．３２：５７３－５９６、Ｍｕｌｌｉｇａｎによる１９９３年のＳｃｉｅｎｃｅ ２６０：９２６－９３２、およびＭｏｒｇａｎとＡｎｄｅｒｓｏｎによる１９９３年のＡｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．６２：１９１－２１７；Ｍａｙ １９９３，ＴＩＢ ＴＥＣＨ １１（５）：１５５－２１５）、およびヒグロマイシンに耐性を与えるｈｙｇｒｏ（Ｓａｎｔｅｒｒｅらによる１９８４年のＧｅｎｅ ３０：１４７）に対する選定基準として使用される。使用可能である組換えＤＮＡ技法の分野でよく知られている方法は、Ａｕｓｕｂｅｌら（編、１９９３年のＣｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，ＮＹ、Ｋｒｉｅｇｌｅｒによる１９９０年のＧｅｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｒ ａｎｄ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｓｔｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ，ＮＹ、Ｄｒａｃｏｐｏｌｉら（編）による１９９４年のＣｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，ＮＹ．の第１２章と第１３章、Ｃｏｌｂｅｒｒｅ－Ｇａｒａｐｉｎらによる１９８１年のＪ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５０：１）に記載されている。
いくつかの例では、抗体の発現レベルは、ベクター増幅により上昇する（論評に関しては、ＢｅｂｂｉｎｇｔｏｎとＨｅｎｔｓｃｈｅｌによる「ｔｈｅ ｕｓｅ ｏｆ ｖｅｃｔｏｒｓ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｇｅｎｅ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｌｏｎｅｄ ｇｅｎｅｓ ｉｎ ｍａｍｍａｌｉａｎ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ＤＮＡ ｃｌｏｎｉｎｇ」Ｖｏｌ．３．（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８７）を参照）。抗体を発現するベクター系中のマーカが増幅可能な場合、宿主細胞の培養物に存在する阻害剤のレベル上昇により、マーカ遺伝子のコピーの数が増加する。増幅された部位は抗体のヌクレオチド配列に関連しているため、抗体の産生も増加することになる（Ｃｒｏｕｓｅらによる１９８３年のＭｏｌ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．３：２５７）。
いくつかの例では、抗体の精製に関する分野で公知のいずれかの方法が、例えば、クロマトグラフィー（例えば、イオン交換、親和性、具体的にはプロテインＡの後の特異性抗原に対する親和性による、およびサイズカラムクロマトグラフィー（ｓｉｚｉｎｇ ｃｏｌｕｍｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ））、遠心分離、差分溶解性（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ）、またはタンパク質精製に関する他の標準技術によって使用される。
発現ベクター
いくつかの実施形態では、ベクターは、真核生物または原核生物いずれかの供給源に由来するあらゆる好適なベクターも含む。場合により、ベクターは、細菌（例えば、大腸菌）、昆虫、酵母菌（例えば、ピキア・パストリス）、藻類、または哺乳動物供給源から得られる。例示的な細菌ベクトルには、ｐＡＣＹＣ１７７、ｐＡＳＫ７５、ｐＢＡＤベクターシリーズ、ｐＢＡＤＭベクターシリーズ、ｐＥＴベクターシリーズ、ｐＥＴＭベクターシリーズ、ｐＧＥＸベクターシリーズ、ｐＨＡＴ、ｐＨＡＴ２、ｐＭａｌ－ｃ２、ｐＭａｌ－ｐ２、ｐＱＥベクターシリーズ、ｐＲＳＥＴ Ａ、ｐＲＳＥＴ Ｂ、ｐＲＳＥＴ Ｃ、ｐＴｒｃＨｉｓ２シリーズ、ｐＺＡ３１－Ｌｕｃ、ｐＺＥ２１－ＭＣＳ－１、ｐＦＬＡＧ ＡＴＳ、ｐＦＬＡＧ ＣＴＳ、ｐＦＬＡＧ ＭＡＣ、ｐＦＬＡＧ Ｓｈｉｆｔ－１２ｃ、ｐＴＡＣ－ＭＡＴ－１、ｐＦＬＡＧ ＣＴＣ、またはｐＴＡＣ－ＭＡＴ－２が挙げられる。
例示的な昆虫ベクターには、ｐＦａｓｔＢａｃ１、ｐＦａｓｔＢａｃ ＤＵＡＬ、ｐＦａｓｔＢａｃ ＥＴ、ｐＦａｓｔＢａｃ ＨＴａ、ｐＦａｓｔＢａｃ ＨＴｂ、ｐＦａｓｔＢａｃ ＨＴｃ、ｐＦａｓｔＢａｃ Ｍ３０ａ、ｐＦａｓｔＢａｃｔ Ｍ３０ｂ、ｐＦａｓｔＢａｃ、Ｍ３０ｃ、ｐＶＬ１３９２、ｐＶＬ１３９３、ｐＶＬ１３９３ Ｍ１０、ｐＶＬ１３９３ Ｍ１１、ｐＶＬ１３９３ Ｍ１２、ｐＰｏｌｈ－ＦＬＡＧ１もしくはｐＰｏｌｈ－ＭＡＴ ２などのＦＬＡＧベクター、またはｐＰｏｌｈ－ＭＡＴ１もしくはｐＰｏｌｈ－ＭＡＴ２などのＭＡＴベクターが挙げられる。
場合により、酵母菌ベクターには、Ｇａｔｅｗａｙ（登録商標）ｐＤＥＳＴ（商標）１４ベクター、Ｇａｔｅｗａｙ（登録商標）ｐＤＥＳＴ（商標）１５ベクター、Ｇａｔｅｗａｙ（登録商標）ｐＤＥＳＴ（商標）１７ベクター、Ｇａｔｅｗａｙ（登録商標）ｐＤＥＳＴ（商標）２４ベクター、Ｇａｔｅｗａｙ（登録商標）ｐＹＥＳ－ＤＥＳＴ５２ベクター、ｐＢＡＤ－ＤＥＳＴ４９ Ｇａｔｅｗａｙ（登録商標）デスティネーションベクター、ｐＡＯ８１５ピキアベクター、ｐＦＬＤ１ピキアパストリスベクター、ｐＧＡＰＺＡ，Ｂ，＆Ｃピキアパストリスベクター、ｐＰＩＣ３．５Ｋピキアベクター、ｐＰＩＣ６ Ａ，Ｂ，＆Ｃピキアベクター、ｐＰＩＣ９Ｋピキアベクター、ｐＴＥＦ１／Ｚｅｏ、ｐＹＥＳ２酵母菌ベクター、ｐＹＥＳ２／ＣＴ酵母菌ベクター、ｐＹＥＳ２／ＮＴ Ａ，Ｂ，＆Ｃ酵母菌ベクター、またはｐＹＥＳ３／ＣＴ酵母菌ベクターが挙げられる。
例示的な藻類ベクターには、ｐＣｈｌａｍｙ－４ベクターまたはＭＣＳベクターが挙げられる。
哺乳動物ベクターの例には、一時的発現ベクターまたは安定した発現ベクターが挙げられる。哺乳動物の一時的発現ベクターには、ｐＲＫ５、ｐ３ｘＦＬＡＧ－ＣＭＶ ８、ｐＦＬＡＧ－Ｍｙｃ－ＣＭＶ １９、ｐＦＬＡＧ－Ｍｙｃ－ＣＭＶ ２３、ｐＦＬＡＧ－ＣＭＶ ２、ｐＦＬＡＧ－ＣＭＶ ６ａ，ｂ，ｃ、ｐＦＬＡＧ－ＣＭＶ ５．１、ｐＦＬＡＧ－ＣＭＶ ５ａ，ｂ，ｃ、ｐ３ｘＦＬＡＧ－ＣＭＶ ７．１、ｐＦＬＡＧ－ＣＭＶ ２０、ｐ３ｘＦＬＡＧ－Ｍｙｃ－ＣＭＶ ２４、ｐＣＭＶ－ＦＬＡＧ－ＭＡＴ１、ｐＣＭＶ－ＦＬＡＧ－ＭＡＴ２、ｐＢＩＣＥＰ－ＣＭＶ ３、またはｈｐＢＩＣＥＰ－ＣＭＶ ４が挙げられる場合がある。哺乳動物の安定した発現ベクターには、ｐＦＬＡＧ－ＣＭＶ ３、ｐ３ｘＦＬＡＧ－ＣＭＶ ９、ｐ３ｘＦＬＡＧ－ＣＭＶ １３、ｐＦＬＡＧ－Ｍｙｃ－ＣＭＶ ２１、ｐ３ｘＦＬＡＧ－Ｍｙｃ－ＣＭＶ ２５、ｐＦＬＡＧ－ＣＭＶ ４、ｐ３ｘＦＬＡＧ－ＣＭＶ １０、ｐ３ｘＦＬＡＧ－ＣＭＶ １４、ｐＦＬＡＧ－Ｍｙｃ－ＣＭＶ ２２、ｐ３ｘＦＬＡＧ－Ｍｙｃ－ＣＭＶ ２６、ｐＢＩＣＥＰ－ＣＭＶ １、またはｐＢＩＣＥＰ－ＣＭＶ ２が挙げられる場合がある。
いくつかの実例では、無細胞系は、細胞からの細胞質および／または核成分の混合物であって、ｉｎ ｖｉｔｒｏでの核酸合成に使用される。場合により、無細胞系は、原核細胞成分または真核細胞成分のいずれかを利用する。時に、核酸合成は、例えばショウジョウバエ細胞、ツメガエル卵、またはＨｅＬａ細胞を基とする無細胞系で得られる。例示的な無細胞系には、大腸菌Ｓ３０抽出系、大腸菌Ｔ７ Ｓ３０系、またはＰＵＲＥｘｐｒｅｓｓ（登録商標）が挙げられるが、これらに限定されない。
宿主細胞
いくつかの実施形態では、宿主細胞には、自然に得られた細胞または遺伝子組換えによる細胞など、あらゆる好適な細胞も挙げられる。いくつかの例では、宿主細胞は、生産宿主細胞である。いくつかの例では、宿主細胞は、真核細胞である。他の例では、宿主細胞は、原核細胞である。場合より、真核細胞は、真菌（例えば酵母菌）、動物細胞、または植物細胞を含む。場合により、原核細胞は、細菌細胞である。細菌細胞の例には、グラム陽性菌またはグラム陰性菌が挙げられる。時に、グラム陰性菌は、嫌気性菌、桿菌形、またはその両方である。
いくつかの例では、グラム陽性菌には、アクチノバクテリア、ファーミキューテス、またはテネリキューテスが挙げられる。場合により、グラム陰性菌には、アクウィフェクス門、デイノコッカス・サーマス門、フィブロバクター門－クロロビウム門／バクテロイデス門（ＦＣＢ群）、フゾバクテリウム門、ゲンマティモナス門、ニトロスピラ門、プランクトミケス門－ウェルコミクロビウム門／クラミジア門（ＰＶＣ群）、プロテオバクテリア門、スピロヘータ、またはシネルギステス門が挙げられる。他の細菌は、アキドバクテリウム門、クロロフレクサス門、クリシオゲネス門、シアノバクテリア門、デフェリバクター門、ディクティオグロムス門（Ｄｉｃｔｙｏｇｌｏｍｉ）、サーモデスルフォバクテリア門、またはテルモトガ門の可能性もある。細菌細胞は、大腸菌、ボツリヌス菌、または大腸菌（Ｃｏｌｉ ｂａｃｉｌｌｉ）の可能性もある。
例示的な原核生物の宿主細胞には、ＢＬ２１、Ｍａｃｈ１（商標）、ＤＨ１０Ｂ（商標）、ＴＯＰ１０、ＤＨ５α、ＤＨ１０Ｂａｃ（商標）、ＯｍｎｉＭａｘ（商標）、ＭｅｇａＸ（商標）、ＤＨ１２Ｓ（商標）、ＩＮＶ１１０、ＴＯＰ１０Ｆ’、ＩＮＶαＦ、ＴＯＰ１０／Ｐ３、ｃｃｄＢ Ｓｕｒｖｉｖａｌ、ＰＩＲ１、ＰＩＲ２、Ｓｔｂｌ２（商標）、Ｓｔｂｌ３（商標）、またはＳｔｂｌ４（商標）が挙げられるが、これらに限定されない。
いくつかの例では、動物細胞には、脊椎動物または無脊椎動物の細胞が挙げられる。場合により、動物細胞には、海洋無脊椎動物、魚類、昆虫、両生類、爬虫類、または哺乳動物の細胞が挙げられる。場合により、真菌細胞には、醸造酵母、パン酵母、またはワイン酵母などの酵母菌細胞が挙げられる。
真菌には、酵母菌、カビ、糸状菌、担子菌、または接合菌類などの子嚢菌が挙げられる。いくつかの例では、酵母菌には、子嚢菌門または担子菌門が挙げられる。場合により、子嚢菌門には、サッカロミケス亜門（真正酵母菌、例えばサッカロミケス・セレビシエ（パン酵母））またはタフリナ菌亜門（例えば、シゾサッカロミケス綱（分裂酵母））が挙げられる。場合により、担子菌門には、ハラタケ亜門（例えば、シロキクラゲ綱）またはサビキン亜門（例えば、ミクロボトリウム網（Ｍｉｃｒｏｂｏｔｒｙｏｍｙｃｅｔｅｓ））が挙げられる。
例示的な酵母菌または糸状菌には、例えば次の属：サッカロミケス属、シゾサッカロミケス属、カンジダ属、ピキア属、ハンゼヌラ属、クルイウェロマイセス属、チゴサッカロミケス属、ヤロウイア属、トリコスポロン属、ロドスポリジウム属（Ｒｈｏｄｏｓｐｏｒｉｄｉ）、アスペルギルス属、フザリウム属、またはトリコデルマ属が挙げられる。例示的な酵母菌または糸状菌には、例えば次の種：サッカロミケス・セレビシエ、シゾサッカロミセス・ポンベ、カンジダ・ユチリス、カンジダ・ボイジニ（Ｃａｎｄｉｄａ ｂｏｉｄｉｎｉ）、カンジダ・アルビカンス、カンジダ・トロピカリス、カンジダ・ステラトイデア、カンジダ・グラブラータ、カンジダ・クルセイ、カンジダ・パラシローシス、カンジダ・ギリエルモンディ、カンジダ・ビスワナティ、カンジダ・ルシタニエ、ロドトルラ・ムシラギノサ、ピキア・メタノリカ（Ｐｉｃｈｉａ ｍｅｔａｎｏｌｉｃａ）、ピキア・アングスタ（Ｐｉｃｈｉａ ａｎｇｕｓｔａ）、ピキア・パストリス、ピキア・アノマラ、ハンセヌラ・ポリモルファ、クルイベロマイセス・ラクティス、チゴサッカロミケス・ルーキシィ、ヤロウイア・リポリティカ、トリコスポロン・プルラン、ロドスポリジウム・トル－黒色アスペルギルス（Ｒｈｏｄｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ ｔｏｒｕ－Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）、アスペルギルス・ニデュランス、アスペルギルス・アワモリ、アスペルギルス・オリゼー、トリコデルマ・リーゼイ、ヤロウイア・リポリティカ、ブレタノミセス・ブルクセルレンシス、カンジダ・ステラータ、シゾサッカロミセス・ポンベ、トルラスポラ・デルブリュッキー、ジゴサッカロミセス・バイリ、クリプトコックス・ネオフォルマンス、クリプトコッカス・ガッティ、またはサッカロミケス・ブラウディが挙げられる。
例示的な酵母菌宿主細胞には、ＧＳ１１５、ＫＭ７１Ｈ、ＳＭＤ１１６８、ＳＭＤ１１６８Ｈ、およびＸ－３３などのピキア・パストリス酵母菌株、ならびにＩＮＶＳｃ１などのサッカロミケス・セレビシエ酵母菌株が挙げられるが、これらに限定されない。
いくつかの実例では、追加の動物細胞には、軟体動物、節足動物、環形動物、または海綿動物から得られる細胞が挙げられる。場合により、追加の動物細胞は、例えば霊長類、類人猿、ウマ、ウシ、ブタ、イヌ、ネコ、またはげっ歯類の哺乳動物細胞である。場合により、げっ歯動物には、マウス、ラット、ハムスター、アレチネズミ、ハムスター、チンチラ、ファンシーラット、またはモルモットが挙げられる。
例示的な哺乳動物宿主細胞には、２９３Ａ細胞株、２９３ＦＴ細胞株、２９３Ｆ細胞、２９３Ｈ細胞、ＣＨＯ ＤＧ４４細胞、ＣＨＯ－Ｓ細胞、ＣＨＯ－Ｋ１細胞、ＦＵＴ８ ＫＯ ＣＨＯＫ１、Ｅｘｐｉ２９３Ｆ（商標）細胞、Ｆｌｐ－Ｉｎ（商標）Ｔ－ＲＥｘ（商標）２９３細胞株、Ｆｌｐ－Ｉｎ（商標）－２９３細胞株、Ｆｌｐ－Ｉｎ（商標）－３Ｔ３細胞株、Ｆｌｐ－Ｉｎ（商標）－ＢＨＫ細胞株、Ｆｌｐ－Ｉｎ（商標）－ＣＨＯ細胞株、Ｆｌｐ－Ｉｎ（商標）－ＣＶ－１細胞株、Ｆｌｐ－Ｉｎ（商標）－Ｊｕｒｋａｔ細胞株、ＦｒｅｅＳｔｙｌｅ（商標）２９３－Ｆ細胞、ＦｒｅｅＳｔｙｌｅ（商標）ＣＨＯ－Ｓ細胞、ＧｒｉｐＴｉｔｅ（商標）２９３ ＭＳＲ細胞株、ＧＳ－ＣＨＯ細胞株、ＨｅｐａＲＧ（商標）細胞、Ｔ－ＲＥｘ（商標）Ｊｕｒｋａｔ細胞株、Ｐｅｒ．Ｃ６細胞、Ｔ－ＲＥｘ（商標）－２９３細胞株、Ｔ－ＲＥｘ（商標）－ＣＨＯ細胞株、およびＴ－ＲＥｘ（商標）－ＨｅＬａ細胞株が挙げられるが、これらに限定されない。
いくつかの例では、哺乳動物宿主細胞は、安定した細胞株、すなわち、目的の遺伝物質をそれ自体のゲノムに組み込んでいて、多世代の細胞分裂後に遺伝物質の産物の発現能を有している細胞株である。場合により、哺乳動物宿主細胞は、一過性の細胞株、すなわち、目的の遺伝物質をそれ自体のゲノムに組み込んでおらず、多世代の細胞分裂後に遺伝物質の産物の発現能を有していない細胞株である。
例示的な昆虫宿主細胞には、ショウジョウバエＳ２細胞、Ｓｆ９細胞、Ｓｆ２１細胞、Ｈｉｇｈ Ｆｉｖｅ（商標）細胞、およびｅｘｐｒｅｓＳＦ＋（登録商標）細胞が挙げられるが、これらに限定されない。
いくつかの例では、植物細胞には、藻類細胞が挙げられる。例示的な昆虫細胞株には、クラミドモナス・ラインハルティイ１３７ｃ、またはシネココッカス・エロンガタスＰＣ７９４２が挙げられる。
製造品
本発明の別の態様では、上述の障害の処置、予防、および／または診断に有用な材料を含有する製造品が提供される。本製造品は、容器、およびその容器上にあるか容器に付随しているラベルまたは添付文書を備えている。好適な容器には、例えば、ボトル、バイアル、シリンジ、ＩＶ溶液バッグなどが挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチックなどの様々な材料から形成されてよい。容器は、それ自体で、または、疾病を処置し、予防、かつ／もしくは診断するのに有効な別の組成物と組み合わせて１つの組成物を保持し、滅菌アクセスポートを有してもよい（例えば、容器は、皮下注射針が貫通可能な栓を有する静脈用注射液バッグまたはバイアルであってもよい）。組成物中の少なくとも１つの活性薬剤は、ＣＤ３に特異的に結合する第１の抗原結合部位、および本明細書中で定義されるＰＳＭＡに特異的に結合する第２の抗原結合部位を含む、二重特異性抗体である。
ラベルまたは添付文書は、選択した疾病を処置するために組成物が使用されることを示す。さらに、製造品は、（ａ）本発明の二重特異性抗体を含む組成物を中に包含した第１の容器、および（ｂ）細胞毒性またはその他の治療剤を含む組成物を中に包含した第２の容器を備えていてもよい。本発明のこの実施形態における製造品は、組成物が特定の疾病を処置するために使用可能であることを示す添付文書をさらに備えていてもよい。
代替的に、または付加的に、製造品は、制菌性の注射用蒸留水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リンゲル液、およびデキストロース溶液などの薬学的に許容可能な緩衝液を含む第２（または第３）の容器をさらに備えていてもよい。さらに、他の緩衝液、賦形剤、フィルタ、針、およびシリンジを含む、商業上とユーザの見地から望ましい他の材料を備えていてもよい。
特定の定義
本明細書中で使用される用語は、特定の事例のみを記述することを目的とし、限定することを意図していない。本明細書中で使用されるとき、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈上特に明記されていない限り、複数形も同様に含むことを意図している。さらに、「含むこと（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」、「有すること（ｈａｖｉｎｇ）」、「有する（ｈａｓ）」、「有する（ｗｉｔｈ）」、またはそれらの変形といった用語は、発明を実施するための形態および／または特許請求の範囲のいずれかで使用される程度で、「含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語と同様に包含されることを意図している。
「抗体」という用語は、最も広義の意味で使用され、抗原に結合可能な完全に組み立てられた抗体、抗体フラグメント、例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、単鎖抗体（ｓｃＦｖ）、ダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｉｅｓ）、抗体キメラ、ハイブリッド抗体、二重特異性抗体などを包含する。
「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」という用語は、抗体を結合させ、可変領域の残部よりも可変的であるエピトープに対し、構造上相補的である抗体の可変領域のセグメントである。したがって、ＣＤＲは超可変領域と称されることもある。可変領域は３つのＣＤＲを含む。ＣＤＲペプチドは、目的の抗体のＣＤＲをコード化する遺伝子を構築することにより得ることができる。このような遺伝子は、例えば、抗体産生細胞のＲＮＡから可変領域を合成するためにポリメラーゼ連鎖反応を使用することにより調製される。例えば、ＬａｒｒｉｃｋらによるＭｅｔｈｏｄｓ：Ａ Ｃｏｍｐａｎｉｏｎ ｔｏ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ ２：１０６（１９９１）、Ｃｏｕｒｔｅｎａｙ－Ｌｕｃｋによる「Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｍａｎｉｐｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ」，ｉｎ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ，Ｒｉｔｔｅｒら（編），１６６～１７９頁（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ １９９５）、およびＷａｒｄらによる「Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｍａｎｉｐｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ」，ｉｎ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｂｉｒｃｈら（編），１３７～１８５頁（Ｗｉｌｅｙ－Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．１９９５）を参照されたい。
「Ｆａｂ」という用語は、軽鎖の定常領域および重鎖の第１の定常領域（ＣＨ１）を含有するタンパク質を指す。Ｆａｂフラグメントは、抗体ヒンジ領域から１つまたは複数のシステインを含む重鎖ＣＨ１ドメインのカルボキシ末端にて少数の残基を添加することにより、Ｆａｂ’フラグメントと相違する。Ｆａｂ’－ＳＨは、本明細書中で、定常領域のシステイン残基が遊離チオール基を運ぶＦａｂ’に対する指定語である。Ｆａｂ’フラグメントは、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントの重鎖ジスルフィド架橋を縮小することにより生じる。抗体フラグメントの他の化学カップリングも公知である。
「単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）」は、１０～約２５アミノ酸の短いリンカーペプチドと接続される、抗体の重鎖（ＶＨ）および軽鎖（ＶＬ）の可変領域の融合タンパク質である。リンカーは、通常、柔軟性のためにグリシンが豊富であるほか、可溶性のためにセリンまたはトレオニンも豊富であり、ＶＨのＮ末端とＶＬのＣ末端、またはその逆を接続することができる。このタンパク質は、定常領域の除去およびリンカーの導入に関係なく、元の抗体の特異性を保持する。ｓｃＦｖ抗体は、例えば、Ｈｏｕｓｔｏｎ，Ｊ．Ｓ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌ．２０３（１９９１）４６－９６に記載されている。加えて、抗体フラグメントは、機能抗原結合部位へとＶＬドメインとともに組立て可能というＶＨドメインの特徴、またはＶＨドメインとともに組立て可能というＶＬドメインの特徴を有する単鎖ポリペプチドを含んでおり、それにより、完全長の抗体の抗原結合特性を提供する。
本開示の好ましい実施形態が本明細書中で示され、かつ記述されてきたが、当業者であれば、このような実施形態はほんの一例として提供されることが明白であろう。本開示から逸脱することなく、多数の変形、変更、および置換えが当業者により想到されるであろう。本明細書中に記載される本開示の実施形態に代わる種々の代案が本開示の実施に利用されてもよいことを理解されたい。以下の特許請求の範囲は本開示の範囲を定義するものであり、この特許請求の範囲とその等価物の範囲内の方法と構造はそれにより包含されることが、意図されている。
実施形態
実施形態１は、式Ｉ：Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１による単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、式中、Ａ１は、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子を含み、Ｐ１は、Ａ１に結合するペプチドを含み、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含み、Ｈ１は、半減期延長分子を含み、Ａ２は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子を含む、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２は、第１の抗原認識分子が、抗体または抗体フラグメントを含む、実施形態１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態３は、第１の抗原認識分子が、ヒトまたはヒト化である抗体または抗体フラグメントを含む、実施形態１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態４は、Ｌ１が、第１の抗原認識分子のＮ末端に結合される、実施形態１から３のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態５は、Ａ２が、第１の抗原認識分子のＣ末端に結合される、実施形態１から３のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態６は、Ｌ１が、第１の抗原認識分子のＣ末端に結合される、実施形態１から３のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態７は、Ａ２が、第１の抗原認識分子のＮ末端に結合される、実施形態１から３のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態８は、抗体または抗体フラグメントが、単鎖可変フラグメント、単一ドメイン抗体、またはＦａｂフラグメントを含む、実施形態２から７のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態９は、Ａ１が、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）である、実施形態８に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１０は、ｓｃＦｖが、ｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドおよびｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドを含む、実施形態９に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１１は、Ａ１が、単一ドメイン抗体である、実施形態８に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１２は、抗体または抗体フラグメントが、ラクダ科由来単一ドメイン抗体の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）、重鎖可変ドメイン（ＶＨドメイン）、軽鎖可変ドメイン（ＶＬドメイン）、または可変ドメイン（ＶＨＨ）を含む、実施形態８に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１３は、Ａ１が、抗ＣＤ３ｅ単鎖可変フラグメントを含む、実施形態１から１２のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１４は、Ａ１が、ＣＤ３発現細胞上でＣＤ３に対して１μＭ以下のＫＤ結合を有する抗ＣＤ３ｅ単鎖可変フラグメントを含む、実施形態１から１２のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１５は、エフェクタ細胞抗原がＣＤ３を含む、実施形態１から１４のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１６は、Ａ１が、それぞれがヒトＣＤ３に特異的に結合可能である可変軽鎖および可変重鎖を含む、実施形態１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１７は、Ａ１が、ムロモナブ－ＣＤ３（ＯＫＴ３）、オテリキシズマブ（ＴＲＸ４）、テプリズマブ（ＭＧＡ０３１）、ビシリズマブ（Ｎｕｖｉｏｎ）、ＳＰ３４、Ｘ３５、ＶＩＴ３、ＢＭＡ０３０（ＢＷ２６４／５６）、ＣＬＢ－Ｔ３／３、ＣＲＩＳ７、ＹＴＨ１２．５、Ｆ１１１－４０９、ＣＬＢ－Ｔ３．４．２、ＴＲ－６６、ＷＴ３２、ＳＰｖ－Ｔ３ｂ、１１Ｄ８、ＸＩＩＩ－１４１、ＸＩＩＩ－４６、ＸＩＩＩ－８７、１２Ｆ６、Ｔ３／ＲＷ２－８Ｃ８、Ｔ３／ＲＷ２－４Ｂ６、ＯＫＴ３Ｄ、Ｍ－Ｔ３０１、ＳＭＣ２、Ｆ１０１．０１、ＵＣＨＴ－１、ＷＴ－３１、１５８６５、１５８６５ｖ１２、１５８６５ｖ１６、および１５８６５ｖ１９からなる群から選択される相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む、実施形態１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１８は、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断される場合に、式Ｉのポリペプチドまたはポリペプチド複合体がエフェクタ細胞に結合する、実施形態１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１９は、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断され、Ａ１がエフェクタ細胞に結合する場合に、式Ｉのポリペプチドまたはポリペプチド複合体がエフェクタ細胞に結合する、実施形態１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２０は、エフェクタ細胞がＴ細胞である、実施形態１９に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２１は、Ａ１が、エフェクタ細胞上のＴＣＲ－ＣＤ３複合体の一部であるポリペプチドに結合する、実施形態１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２２は、ＴＣＲ－ＣＤ３複合体の一部であるポリペプチドが、ヒトＣＤ３εである、実施形態２１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２３は、エフェクタ細胞抗原がＣＤ３を含み、ｓｃＦＶが、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、ｓｃＦＶのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３が、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号１、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号２、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号３を含み、ｓｃＦＶが、ＣＤＲとしてＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３を含み、ｓｃＦＶのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３が、ＬＣ－ＣＤＲ１では配列番号４、ＬＣ－ＣＤＲ２では配列番号５、およびＬＣ－ＣＤＲ３では配列番号６を含む、実施形態１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２４は、エフェクタ細胞抗原がＣＤ３を含み、ｓｃＦｖが、配列番号７によるアミノ酸配列を含む、実施形態１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２５は、第２の抗原認識分子が、抗体または抗体フラグメントを含む、実施形態１から２４のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２６は、抗体または抗体フラグメントが、単鎖可変フラグメント、単一ドメイン抗体、またはＦａｂを含む、実施形態２５に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２７は、抗体またはその抗体フラグメントが、ラクダ科由来単一ドメイン抗体の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）、重鎖可変ドメイン（ＶＨドメイン）、軽鎖可変ドメイン（ＶＬドメイン）、または可変ドメイン（ＶＨＨ）を含む、実施形態２７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２８は、抗体またはその抗体フラグメントが、ヒトまたはヒト化である、実施形態２５に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２９は、Ａ２がＦａｂである、実施形態２６に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態３０は、Ｆａｂが、（ａ）Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドおよび（ｂ）Ｆａｂ重鎖ポリペプチドを含む、実施形態２９に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態３１は、Ｆａｂが、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、ＦａｂのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３が、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号８、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号９、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号１０を含み、Ｆａｂが、ＣＤＲとしてＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３を含み、ＦａｂのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３が、ＬＣ－ＣＤＲ１では配列番号１１、ＬＣ－ＣＤＲ２では配列番号１２、およびＬＣ－ＣＤＲ３では配列番号１３を含む、実施形態２９に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態３２は、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドが、配列番号１４によるアミノ酸配列を含む、実施形態３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態３３は、Ｆａｂ重鎖ポリペプチドが、配列番号１５によるアミノ酸配列を含む、実施形態３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態３４は、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドが、Ａ１の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）のＣ末端に結合される、実施形態３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態３５は、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドが、Ａ１の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）のＣ末端に結合される、実施形態３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態３６は、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドが、Ａ１の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）のＮ末端に結合される、実施形態３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態３７は、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドが、Ａ１の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）のＮ末端に結合される、実施形態３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態３８は、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドが、Ａ１のｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドに結合される、実施形態３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態３９は、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドが、Ａ１のｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドに結合される、実施形態３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態４０は、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドが、Ａ１のｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドに結合される、実施形態３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態４１は、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドが、Ａ１のｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドに結合される、実施形態３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態４２は、Ａ２が、Ｐ２およびＬ２をさらに含み、Ｐ２が、Ａ２に結合するペプチドを含み、Ｌ２が、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含む、実施形態１から４１のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態４３は、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体が、式Ｉａ：Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１によるものである、実施形態４２に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態４４は、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドが、Ａ１のｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドに結合され、Ｌ２が、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドに結合される、実施形態４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態４５は、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドが、Ａ１のｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドに結合され、Ｌ２が、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドに結合される、実施形態４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態４６は、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドが、Ａ１のｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドに結合され、Ｌ２が、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドに結合される、実施形態４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態４７は、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドが、Ａ１のｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドに結合され、Ｌ２が、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドに結合される、実施形態４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態４８は、Ｐ１が、エフェクタ細胞抗原へのＡ１の結合を損なう、実施形態１から４７のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態４９は、Ｐ１が、イオン相互作用、静電的相互作用、疎水的相互作用、Ｐｉ－スタッキング相互作用、もしくはＨ結合相互作用、またはそれらの組合せによりＡ１に結合される、実施形態１から４８のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態５０は、Ｐ１が、エフェクタ細胞抗原に対して７０％未満の配列相同性を有している、実施形態１から４８のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態５１は、Ｐ２が、ＰＳＭＡへのＡ２の結合を損なう、実施形態１から５０のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態５２は、Ｐ２が、イオン相互作用、静電的相互作用、疎水的相互作用、Ｐｉ－スタッキング相互作用、もしくはＨ結合相互作用、またはそれらの組合せによりＡ２に結合される、実施形態１から５０のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態５３は、Ｐ２が、抗原結合部位またはその付近でＡ２に結合される、実施形態１から５０のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態５４は、Ｐ２が、ＰＳＭＡに対して７０％未満の配列相同性を有している、実施形態１から５０のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態５５は、Ｐ１またはＰ２が、長さが少なくとも１０アミノ酸のペプチド配列を含む、実施形態１から５４のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態５６は、Ｐ１またはＰ２が、長さが少なくとも１０アミノ酸かつ長さが２０アミノ酸以下のペプチド配列を含む、実施形態１から５４のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態５７は、Ｐ１またはＰ２が、長さが少なくとも１６アミノ酸のペプチド配列を含む、実施形態１から５４のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態５８は、Ｐ１またはＰ２が、長さが４０アミノ酸以下のペプチド配列を含む、実施形態１から５４のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態５９は、Ｐ１またはＰ２が、少なくとも２つのシステインアミノ酸残基を含む、実施形態１から５４のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態６０は、Ｐ１またはＰ２が、環状ペプチドまたは直鎖ペプチドを含む、実施形態１から５４のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態６１は、Ｐ１またはＰ２が環状ペプチドを含む、実施形態１から５４のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態６２は、Ｐ１またはＰ２が直鎖ペプチドを含む、実施形態１から５４のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態６３は、Ｐ１が、少なくとも２つのシステインアミノ酸残基を含む、実施形態１から５４のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態６４は、Ｐ１が、配列番号１６～１９または７８のいずれか１つによるアミノ酸配列を含む、実施形態１から５４のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態６５は、Ｌ１がＡ１のＮ末端に結合される、実施形態１から６４のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態６６は、Ｌ１が、Ａ１のＣ末端に結合される、実施形態１から６４のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態６７は、Ｌ２が、Ａ２のＮ末端に結合される、実施形態１から６６のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態６８は、Ｌ２が、Ａ２のＣ末端に結合される、実施形態１から６６のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態６９は、Ｌ１またはＬ２が、少なくとも５～５０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である、実施形態１から６８のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態７０は、Ｌ１またはＬ２が、少なくとも１０～３０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である、実施形態１から６８のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態７１は、Ｌ１またはＬ２が、少なくとも１０のアミノ酸を有するペプチド配列である、実施形態１から６８のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態７２は、Ｌ１またはＬ２が、少なくとも１８のアミノ酸を有するペプチド配列である、実施形態１から６８のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態７３は、Ｌ１またはＬ２が、少なくとも２６のアミノ酸を有するペプチド配列である、実施形態１から６８のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態７４は、Ｌ１またはＬ２が、（Ｇ２Ｓ）ｎを含む式を有しており、式中、ｎが１～３の整数である（配列番号１１８）、実施形態１から６８のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態７５は、Ｌ１が、（Ｇ２Ｓ）ｎ、（ＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５０）、（ＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５１）、（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５２）、および（ＧＳＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５３）からなる群から選択される式を有しており、式中、ｎが少なくとも１の整数である、実施形態１から６８のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態７６は、Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断され、それによりＡ１がエフェクタ細胞抗原に曝される場合、Ｐ１がＡ１から結合解除されるようになる、実施形態１から６８のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態７７は、Ｌ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断され、それによりＡ２がＰＳＭＡに曝される場合、Ｐ２がＡ２から結合解除されるようになる、実施形態１から６８のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態７８は、腫瘍特異的プロテアーゼが、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）、セリンプロテアーゼ、システインプロテアーゼ、トレオニンプロテアーゼ、およびアスパラギン酸プロテアーゼからなる群から選択される、実施形態１から６８のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態７９は、マトリックスメタロプロテアーゼが、ＭＭＰ２、ＭＭＰ７、ＭＭＰ９、ＭＭＰ１３、またはＭＭＰ１４を含む、実施形態７８に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態８０は、セリンプロテアーゼが、マトリプターゼ（ＭＴＳＰ１）、ウロキナーゼ、またはヘプシンを含む、実施形態７８に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態８１は、Ｌ１またはＬ２が、ウロキナーゼ切断可能アミノ酸配列、マトリプターゼ切断可能アミノ酸配列、マトリックスメタロプロテアーゼ切断可能アミノ酸配列、またはレグマイン切断可能アミノ酸配列を含む、実施形態１から６８のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態８２は、Ｌ１またはＬ２が、配列番号２３によるアミノ酸配列を含む、実施形態１から６８のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態８３は、Ｌ１またはＬ２が、配列番号２０～４９または７８のいずれか１つによるアミノ酸配列を含む、実施形態１から６８のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態８４は、Ｌ１またはＬ２が、リンカー２５（ＩＳＳＧＬＬＳＧＲＳＤＡＧ）（配列番号４５）、リンカー２６（ＡＡＧＬＬＡＰＰＧＧＬＳＧＲＳＤＡＧ）（配列番号４６）、リンカー２７（ＳＰＬＧＬＳＧＲＳＤＡＧ）（配列番号４７）、もしくはリンカー２８（ＬＳＧＲＳＤＡＧＳＰＬＧＬＡＧ）（配列番号４８）のアミノ酸配列、または、リンカー２５、リンカー２６、リンカー２７、もしくはリンカー２８のアミノ酸配列に対し１、２、もしくは３つのアミノ酸置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１から６８のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態８５は、Ｈ１が環状ペプチドを含む、実施形態１から８３のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態８６は、ポリマーがポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含む、実施形態１から８３のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態８７は、Ｈ１がアルブミンを含む、実施形態１から８３のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態８８は、Ｈ１がＦｃドメインを含む、実施形態１から８３のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態８９は、アルブミンが血清アルブミンである、実施形態８７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態９０は、アルブミンがヒト血清アルブミンである、実施形態８７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態９１は、Ｈ１が、ポリペプチド、リガンド、または小分子を含む、実施形態１から８３のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態９２は、ポリペプチド、リガンド、または小分子が、血清タンパク質もしくはそのフラグメント、循環免疫グロブリンもしくはそのフラグメント、またはＣＤ３５／ＣＲ１に結合する、実施形態９１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態９３は、血清タンパク質が、チロキシン結合タンパク質、トランスサイレチン、ａ１－酸性糖タンパク質、トランスフェリン、トランスフェリン受容体もしくはそのトランスフェリン結合部分、フィブリノゲン、またはアルブミンを含む、実施形態８８に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態９４は、循環免疫グロブリン分子が、ＩｇＧｌ、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ｓｌｇＡ、ＩｇＭ、またはＩｇＤを含む、実施形態８８に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態９５は、血清タンパク質がアルブミンである、実施形態９２に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態９６は、ポリペプチドが抗体である、実施形態９１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態９７は、抗体が、単一ドメイン抗体、単鎖可変フラグメント、またはＦａｂを含む、実施形態９６に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態９８は、単一ドメイン抗体が、アルブミンに結合する単一ドメイン抗体を含む、実施形態９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態９９は、単一ドメイン抗体が、ヒト抗体またはヒト化抗体である、実施形態９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１００は、単一ドメイン抗体が６４５ｇＨ１ｇＬ１である、実施形態９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１０１は、単一ドメイン抗体が６４５ｄｓｇＨ５ｇＬ４である、実施形態９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１０２は、単一ドメイン抗体が２３－１３－Ａ０１－ｓｃ０２である、実施形態９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１０３は、単一ドメイン抗体が、Ａ１０ｍ３またはそのフラグメントである、実施形態９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１０４は、単一ドメイン抗体がＤＯＭ７ｒ－３１である、実施形態９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１０５は、単一ドメイン抗体がＤＯＭ７ｈ－１１－１５である、実施形態９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１０６は、単一ドメイン抗体が、Ａｌｂ－１、Ａｌｂ－８、またはＡｌｂ－２３である、実施形態９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１０７は、記単一ドメイン抗体が１０Ｅである、実施形態９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１０８は、単一ドメイン抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、単一ドメイン抗体のＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３が、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号５４、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号５５、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号５６を含む、実施形態９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１０９は、単一ドメイン抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、単一ドメイン抗体のＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３が、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号５８、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号５９、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号６０を含む、実施形態９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１１０は、単一ドメイン抗体がＳＡ２１である、実施形態９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１１１は、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体が、修飾アミノ酸、非天然アミノ酸、非天然の修飾アミノ酸、またはそれらの組合せを含む、実施形態１から１１０のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１１２は、修飾アミノ酸または非天然の修飾アミノ酸が、翻訳後修飾を含む、実施形態１１１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１１３は、Ｈ１が、Ｐ１にＨ１を接続する連結部分（Ｌ３）を含む、実施形態１から１１２のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１１４は、Ｌ３が、少なくとも５～５０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である、実施形態１１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１１５は、Ｌ３が、少なくとも１０～３０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である、実施形態１１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１１６は、Ｌ３が、少なくとも１０のアミノ酸を有するペプチド配列である、実施形態１１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１１７は、Ｌ３が、少なくとも１８のアミノ酸を有するペプチド配列である、実施形態１１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１１８は、Ｌ３が、少なくとも２６のアミノ酸を有するペプチド配列である、実施形態１１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１１９は、Ｌ３が、（Ｇ２Ｓ）ｎ、（ＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５０）、（ＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５１）、（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５２）、および（ＧＳＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５３）からなる群から選択される式を有しており、式中、ｎが少なくとも１の整数である、実施形態１１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１２０は、Ｌ３が、配列番号２２によるアミノ酸配列を含む、実施形態１１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１２１は、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体が、配列番号６２～７７に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１２２は、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体が、配列番号７２に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１２３は、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体が、配列番号７３に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１２４は、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体が、配列番号６２および配列番号６３に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１２５は、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体が、配列番号６４および配列番号６５に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１２６は、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体が、配列番号６６および配列番号６７に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１２７は、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体が、配列番号６８および配列番号６９に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１２８は、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体が、配列番号７０および配列番号７１に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１２９は、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体が、配列番号７２および配列番号７３に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１３０は、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体が、配列番号７４および配列番号７５に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１３１は、ポリペプチドまたはポリペプチド複合体が、配列番号７６および配列番号７７に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１３２は、（ａ）実施形態１から１３１のいずれか１つに記載のポリペプチドまたはポリペプチド複合体と、（ｂ）薬学的に許容可能な賦形剤とを含む医薬組成物を含む。
実施形態１３３は、実施形態１から１３１のいずれか１つに記載のポリペプチドまたはポリペプチド複合体をコードする、単離された組換え核酸分子を含む。
実施形態１３４は、式ＩＩ：Ｌ１ａ－Ｐ１ａ－Ｈ１ａによる単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、式中、Ｌ１ａは、切断されない場合に、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子にＰ１ａを接続する、腫瘍特異的プロテアーゼにより切断された連結部分を含み、第１の抗原認識分子は、ＰＳＭＡに結合する第２の抗原認識分子に接続され、Ｐ１ａは、Ｌ１ａが切断されない場合に、第１の抗原認識分子に結合するペプチドを含み、Ｈ１ａは、半減期延長分子を含む、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１３５は、Ｌ１ａが切断されない場合、Ｐ１ａが、エフェクタ細胞抗原への第１の抗原認識分子の結合を損なう、実施形態１３４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１３６は、第１の抗原認識分子が、抗体または抗体フラグメントを含む、実施形態１３４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１３７は、エフェクタ細胞抗原が抗ＣＤ３エフェクタ細胞抗原である、実施形態１３４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１３８は、Ｐ１ａがエフェクタ細胞抗原に対して７０％未満の配列相同性を有している、実施形態１３４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１３９は、Ｐ１ａが、長さが少なくとも１０アミノ酸のペプチド配列を含む、実施形態１３４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１４０は、Ｐ１ａが、長さが少なくとも１０アミノ酸かつ長さが２０アミノ酸以下のペプチド配列を含む、実施形態１３４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１４１は、Ｐ１ａが、長さが少なくとも１６アミノ酸のペプチド配列を含む、実施形態１３４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１４２は、Ｐ１ａが、長さが４０アミノ酸以下のペプチド配列を含む、実施形態１３４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１４３は、Ｐ１ａが、少なくとも２つのシステインアミノ酸残基を含む、実施形態１３４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１４４は、Ｐ１ａが、環状ペプチドまたは直鎖ペプチドを含む、実施形態１３４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１４５は、アルブミンが血清アルブミンである、実施形態１３４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１４６は、Ｐ１ａが直鎖ペプチドである、実施形態１３４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１４７は、Ｐ１ａが、配列番号１６～１９のいずれか１つからなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１３４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１４８は、Ｈ１ａがポリマーを含む、実施形態１３２から１４５のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１４９は、ポリマーがポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含む、実施形態１４８に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１５０は、Ｈ１ａがアルブミンを含む、実施形態１３４から１４７のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１５１は、Ｈ１ａがＦｃドメインを含む、実施形態１３４から１４７のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１５２は、アルブミンが血清アルブミンである、実施形態１５０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１５３は、アルブミンがヒト血清アルブミンである、実施形態１５２に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１５４は、Ｈ１ａが、ポリペプチド、リガンド、または小分子を含む、実施形態１３４から１４７のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１５５は、ポリペプチド、リガンド、または小分子が、血清タンパク質もしくはそのフラグメント、循環免疫グロブリンもしくはそのフラグメント、またはＣＤ３５／ＣＲ１に結合する、実施形態１５４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１５６は、血清タンパク質が、チロキシン結合タンパク質、トランスサイレチン、ａ１－酸性糖タンパク質、トランスフェリン、トランスフェリン受容体もしくはそのトランスフェリン結合部分、フィブリノゲン、またはアルブミンを含む、実施形態１５５に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１５７は、循環免疫グロブリン分子が、ＩｇＧｌ、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ｓｌｇＡ、ＩｇＭ、またはＩｇＤを含む、実施形態１５５に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１５８は、血清タンパク質がアルブミンである、実施形態１５３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１５９は、ポリペプチドが抗体である、実施形態１５４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１６０は、抗体が、単一ドメイン抗体、単鎖可変フラグメント、またはＦａｂを含む、実施形態１５９に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１６１は、単一ドメイン抗体が、アルブミンに結合する単一ドメイン抗体を含む、実施形態１５９に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１６２は、単一ドメイン抗体が、ヒト抗体またはヒト化抗体である、実施形態１５９に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１６３は、単一ドメイン抗体が６４５ｇＨ１ｇＬ１である、実施形態１６０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１６４は、単一ドメイン抗体が６４５ｄｓｇＨ５ｇＬ４である、実施形態１６０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１６５は、単一ドメイン抗体が２３－１３－Ａ０１－ｓｃ０２である、実施形態１６０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１６６は、単一ドメイン抗体が、Ａ１０ｍ３またはそのフラグメントである、実施形態１６０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１６７は、単一ドメイン抗体がＤＯＭ７ｒ－３１である、実施形態１６０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１６８は、単一ドメイン抗体がＤＯＭ７ｈ－１１－１５である、実施形態１６０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１６９は、単一ドメイン抗体が、Ａｌｂ－１、Ａｌｂ－８、またはＡｌｂ－２３である、実施形態１６０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１７０は、記単一ドメイン抗体が１０Ｅである、実施形態１６０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１７１は、単一ドメイン抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、単一ドメイン抗体のＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３が、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号５４、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号５５、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号５６を含む、実施形態１６０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１７２は、単一ドメイン抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、単一ドメイン抗体のＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３が、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号５８、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号５９、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号６０を含む、実施形態１５８に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１７３は、単一ドメイン抗体がＳＡ２１である、実施形態１６０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１７４は、Ｈ１ａが、Ｐ１ａにＨ１ａを接続する連結部分（Ｌ１ａ）を含む、実施形態１３４から１７３のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１７５は、Ｌ１ａが、少なくとも５～５０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である、実施形態１７４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１７６は、Ｌ１ａが、少なくとも１０～３０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である、実施形態１７４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１７７は、Ｌ１ａが、少なくとも１０のアミノ酸を有するペプチド配列である、実施形態１７４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１７８は、Ｌ１ａが、少なくとも１８のアミノ酸を有するペプチド配列である、実施形態１７４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１７９は、Ｌ１ａが、少なくとも２６のアミノ酸を有するペプチド配列である、実施形態１７４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１８０は、Ｌ１ａが、（Ｇ２Ｓ）ｎ、（ＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５０）、（ＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５１）、（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５２）、および（ＧＳＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５３）からなる群から選択される式を有しており、式中、ｎが少なくとも１の整数である、実施形態１７４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１８１は、Ｌ１ａが、配列番号２３によるアミノ酸配列を含む、実施形態１７４に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１８２は、Ｐ１ａが、Ｚ１－Ｚ２－Ｃ－Ｚ４－Ｐ－Ｚ６－Ｚ７－Ｚ８－Ｚ９－Ｚ１０－Ｚ１１－Ｚ１２－Ｃ－Ｚ１４によるアミノ酸配列を含み、Ｚ１が、Ｄ、Ｙ、Ｆ、Ｉ、Ｎ、Ｖ、Ｈ、Ｌ、Ａ、Ｔ、Ｓ、およびＰから選択され、Ｚ２が、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｆ、Ｉ、Ｎ、Ａ、Ｖ、Ｈ、Ｔ、およびＳから選択され、Ｚ４が、ＧおよびＷから選択され、Ｚ６が、Ｅ、Ｄ、Ｖ、およびＰから選択され、Ｚ７が、Ｗ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｇ、Ｍ、Ｉ、およびＹから選択され、Ｚ８が、Ｅ、Ｄ、Ｐ、およびＱから選択され、Ｚ９が、Ｅ、Ｄ、Ｙ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｐ、Ｌ、およびＱから選択され、Ｚ１０が、Ｓ、Ｄ、Ｙ、Ｔ、Ｉ、Ｆ、Ｖ、Ｎ、Ａ、Ｐ、Ｌ、およびＨから選択され、Ｚ１１が、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、Ｔ、Ｎ、Ｓ、Ｄ、Ａ、およびＨから選択され、Ｚ１２が、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｎ、Ｔ、Ｐ、Ｓ、およびＨから選択され、Ｚ１４が、Ｄ、Ｙ、Ｎ、Ｆ、Ｉ、Ｐ、Ｖ、Ａ、Ｔ、Ｈ、Ｌ、およびＳから選択される、実施形態１３４から１８１のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１８３は、Ｚ１が、Ｄ、Ｙ、Ｆ、Ｉ、およびＮから選択され、Ｚ２が、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｆ、Ｉ、およびＮから選択され、Ｚ４が、ＧおよびＷから選択され、Ｚ６が、ＥおよびＤから選択され、Ｚ７が、Ｗ、Ｌ、Ｆ、およびＶから選択され、Ｚ８が、ＥおよびＤから選択され、Ｚ９が、Ｅ、Ｄ、Ｙ、およびＶから選択され、Ｚ１０が、Ｓ、Ｄ、Ｙ、Ｔ、およびＩから選択され、Ｚ１１が、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、およびＴから選択され、Ｚ１２が、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ａ、およびＮから選択され、Ｚ１４が、Ｄ、Ｙ、Ｎ、Ｆ、Ｉ、およびＰから選択される、実施形態１８２に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１８４は、Ｚ１が、Ｄ、Ｙ、およびＦから選択され、Ｚ２が、Ｄ、Ｙ、Ｌ、およびＦから選択され、Ｚ４が、ＧおよびＷから選択され、Ｚ６が、ＥおよびＤから選択され、Ｚ７が、Ｗ、Ｌ、およびＦから選択され、Ｚ８が、ＥおよびＤから選択され、Ｚ９が、ＥおよびＤから選択され、Ｚ１０が、Ｓ、Ｄ、およびＹから選択され、Ｚ１１が、Ｉ、Ｙ、およびＦから選択され、Ｚ１２が、Ｆ、Ｄ、Ｙ、およびＬから選択され、Ｚ１４が、Ｄ、Ｙ、およびＮから選択される、実施形態１８２から１８３のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１８５は、Ｐ１ａが、Ｕ１－Ｕ２－Ｃ－Ｕ４－Ｐ－Ｕ６－Ｕ７－Ｕ８－Ｕ９－Ｕ１０－Ｕ１１－Ｕ１２－Ｃ－Ｕ１４によるアミノ酸配列を含み、Ｕ１が、Ｄ、Ｙ、Ｆ、Ｉ、Ｎ、Ｖ、Ｈ、Ｌ、Ａ、Ｔ、Ｓ、およびＰから選択され、Ｕ２が、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｆ、Ｉ、Ｎ、Ａ、Ｖ、Ｈ、Ｔ、およびＳから選択され、Ｕ４が、ＧおよびＷから選択され、Ｕ６が、Ｅ、Ｄ、Ｖ、およびＰから選択され、Ｕ７が、Ｗ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｇ、Ｍ、Ｉ、およびＹから選択され、Ｕ８が、Ｅ、Ｄ、Ｐ、およびＱから選択され、Ｕ９が、Ｅ、Ｄ、Ｙ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｐ、Ｌ、およびＱから選択され、Ｕ１０が、Ｓ、Ｄ、Ｙ、Ｔ、Ｉ、Ｆ、Ｖ、Ｎ、Ａ、Ｐ、Ｌ、およびＨから選択され、Ｕ１１が、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、Ｔ、Ｎ、Ｓ、Ｄ、Ａ、およびＨから選択され、Ｕ１２が、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｎ、Ｔ、Ｐ、Ｓ、Ｇ、およびＨから選択され、Ｕ１４が、Ｄ、Ｙ、Ｎ、Ｆ、Ｉ、Ｐ、Ｖ、Ａ、Ｔ、Ｈ、Ｌ、Ｍ、およびＳから選択される、実施形態１３４から１８１のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１８６は、Ｕ１が、Ｄ、Ｙ、Ｆ、Ｉ、Ｖ、およびＮから選択され、Ｕ２が、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｆ、Ｉ、およびＮから選択され、Ｕ４が、ＧおよびＷから選択され、Ｕ６が、ＥおよびＤから選択され、Ｕ７が、Ｗ、Ｌ、Ｆ、Ｇ、およびＶから選択され、Ｕ８が、ＥおよびＤから選択され、Ｕ９が、Ｅ、Ｄ、Ｙ、およびＶから選択され、Ｕ１０が、Ｓ、Ｄ、Ｙ、Ｔ、およびＩから選択され、Ｕ１１が、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、およびＴから選択され、Ｕ１２が、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、およびＮから選択され、Ｕ１４が、Ｄ、Ｙ、Ｎ、Ｆ、Ｉ、Ｍ、およびＰから選択される、実施形態１８５に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１８７は、Ｕ１が、Ｄ、Ｙ、Ｖ、およびＦから選択され、Ｕ２が、Ｄ、Ｙ、Ｌ、およびＦから選択され、Ｕ４が、ＧおよびＷから選択され、Ｕ６が、ＥおよびＤから選択され、Ｕ７が、Ｗ、Ｌ、Ｇ、およびＦから選択され、Ｕ８が、ＥおよびＤから選択され、Ｕ９が、ＥおよびＤから選択され、Ｕ１０が、Ｓ、Ｄ、Ｔ、およびＹから選択され、Ｕ１１が、Ｉ、Ｙ、Ｖ、Ｌ、およびＦから選択され、Ｕ１２が、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｇ、Ａ、およびＬから選択され、Ｕ１４が、Ｄ、Ｙ、Ｍ、およびＮから選択される、実施形態１８６に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１８８は、Ｐ１ａが、配列番号７９～１０５によるアミノ酸配列を含む、実施形態１３４から１８１および７０から８８のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１８９は、Ｐ１ａが、表２０の配列のいずれかによるアミノ酸配列を含む、実施形態１３４から１８１および７０から８８のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１９０は、Ｐ１ａが、配列番号１０６～１１７のいずれか１つによるアミノ酸配列を含む、実施形態１３４から１８１または１８９のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１９１は、Ｐ１ａが、配列番号１８によるアミノ酸配列、または、配列番号１８に対して１、２、もしくは３つのアミノ酸置換、付加、もしくは欠失を有するペプチド配列を含む、実施形態１３４から１８１のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１９２は、Ｐ１ａが、配列番号１９によるアミノ酸配列、または、配列番号１９に対して１、２、もしくは３つのアミノ酸置換、付加、もしくは欠失を有するペプチド配列を含む、実施形態１３４から１８７のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１９３は、Ｐ１ａが、配列番号１１６によるアミノ酸配列、または、配列番号１１６に対して１、２、もしくは３つのアミノ酸置換、付加、もしくは欠失を有するペプチド配列を含む、実施形態１３４から１８７のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１９４は、Ｐ１ａが、配列番号１８によるアミノ酸配列を含む、実施形態１９１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１９５は、Ｐ１ａが、配列番号１９によるアミノ酸配列を含む、実施形態１９２に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１９６は、Ｐ１ａが、配列番号１１６によるアミノ酸配列を含む、実施形態１９３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態１９７は、立体構成１：
による構造配置を含むポリペプチド複合体であって、ポリペプチド複合体は、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含む単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、エフェクタ細胞抗原へのｓｃＦｖの結合を損なうペプチドをさらに含んでおり、ペプチドは、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分によりｓｃＦｖの重鎖可変ドメインに連結されており、ペプチドは半減期延長分子をさらに含んでいる、ｓｃＦＶと、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂまたはＦａｂ’であって、ＦａｂまたはＦａｂ’は、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド鎖およびＦａｂ重鎖ポリペプチド鎖を含んでおり、Ｆａｂ重鎖ポリペプチド鎖は、ｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインのＣ末端に連結される、ＦａｂまたはＦａｂ’とを含む、ポリペプチド複合体を含む。
実施形態１９８は、立体構成２：
による構造配置を含むポリペプチド複合体であって、ポリペプチド複合体は、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含む単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であって、ｓｃＦｖは、エフェクタ細胞抗原へのｓｃＦｖの結合を損なうペプチドをさらに含んでおり、ペプチドは、腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分によりｓｃＦｖの重鎖可変ドメインのＮ末端に連結されており、ペプチドは半減期延長分子をさらに含んでいる、ｓｃＦＶと、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合するＦａｂまたはＦａｂ’であって、ＦａｂまたはＦａｂ’は、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド鎖およびＦａｂ重鎖ポリペプチド鎖を含んでおり、Ｆａｂ軽鎖ポリペプチド鎖は、ｓｃＦｖの軽鎖可変ドメインのＣ末端に連結される、ＦａｂまたはＦａｂ’とを含む、ポリペプチド複合体を含む。
実施形態１９９は、Ｐ１が、Ｚ１－Ｚ２－Ｃ－Ｚ４－Ｐ－Ｚ６－Ｚ７－Ｚ８－Ｚ９－Ｚ１０－Ｚ１１－Ｚ１２－Ｃ－Ｚ１４によるアミノ酸配列を含み、Ｚ１が、Ｄ、Ｙ、Ｆ、Ｉ、Ｎ、Ｖ、Ｈ、Ｌ、Ａ、Ｔ、Ｓ、およびＰから選択され、Ｚ２が、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｆ、Ｉ、Ｎ、Ａ、Ｖ、Ｈ、Ｔ、およびＳから選択され、Ｚ４が、ＧおよびＷから選択され、Ｚ６が、Ｅ、Ｄ、Ｖ、およびＰから選択され、Ｚ７が、Ｗ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｇ、Ｍ、Ｉ、およびＹから選択され、Ｚ８が、Ｅ、Ｄ、Ｐ、およびＱから選択され、Ｚ９が、Ｅ、Ｄ、Ｙ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｐ、Ｌ、およびＱから選択され、Ｚ１０が、Ｓ、Ｄ、Ｙ、Ｔ、Ｉ、Ｆ、Ｖ、Ｎ、Ａ、Ｐ、Ｌ、およびＨから選択され、Ｚ１１が、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、Ｔ、Ｎ、Ｓ、Ｄ、Ａ、およびＨから選択され、Ｚ１２が、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｎ、Ｔ、Ｐ、Ｓ、およびＨから選択され、Ｚ１４が、Ｄ、Ｙ、Ｎ、Ｆ、Ｉ、Ｐ、Ｖ、Ａ、Ｔ、Ｈ、Ｌ、およびＳから選択される、実施形態１から１３３のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２００は、Ｚ１が、Ｄ、Ｙ、Ｆ、Ｉ、およびＮから選択され、Ｚ２が、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｆ、Ｉ、およびＮから選択され、Ｚ４が、ＧおよびＷから選択され、Ｚ６が、ＥおよびＤから選択され、Ｚ７が、Ｗ、Ｌ、Ｆ、およびＶから選択され、Ｚ８が、ＥおよびＤから選択され、Ｚ９が、Ｅ、Ｄ、Ｙ、およびＶから選択され、Ｚ１０が、Ｓ、Ｄ、Ｙ、Ｔ、およびＩから選択され、Ｚ１１が、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、およびＴから選択され、Ｚ１２が、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ａ、およびＮから選択され、Ｚ１４が、Ｄ、Ｙ、Ｎ、Ｆ、Ｉ、およびＰから選択される、実施形態１９９に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２０１は、Ｚ１が、Ｄ、Ｙ、およびＦから選択され、Ｚ２が、Ｄ、Ｙ、Ｌ、およびＦから選択され、Ｚ４が、ＧおよびＷから選択され、Ｚ６が、ＥおよびＤから選択され、Ｚ７が、Ｗ、Ｌ、およびＦから選択され、Ｚ８が、ＥおよびＤから選択され、Ｚ９が、ＥおよびＤから選択され、Ｚ１０が、Ｓ、Ｄ、およびＹから選択され、Ｚ１１が、Ｉ、Ｙ、およびＦから選択され、Ｚ１２が、Ｆ、Ｄ、Ｙ、およびＬから選択され、Ｚ１４が、Ｄ、Ｙ、およびＮから選択される、実施形態１９９から２００のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２０２は、Ｐ１が、Ｕ１－Ｕ２－Ｃ－Ｕ４－Ｐ－Ｕ６－Ｕ７－Ｕ８－Ｕ９－Ｕ１０－Ｕ１１－Ｕ１２－Ｃ－Ｕ１４によるアミノ酸配列を含み、Ｕ１が、Ｄ、Ｙ、Ｆ、Ｉ、Ｎ、Ｖ、Ｈ、Ｌ、Ａ、Ｔ、Ｓ、およびＰから選択され、Ｕ２が、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｆ、Ｉ、Ｎ、Ａ、Ｖ、Ｈ、Ｔ、およびＳから選択され、Ｕ４が、ＧおよびＷから選択され、Ｕ６が、Ｅ、Ｄ、Ｖ、およびＰから選択され、Ｕ７が、Ｗ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｇ、Ｍ、Ｉ、およびＹから選択され、Ｕ８が、Ｅ、Ｄ、Ｐ、およびＱから選択され、Ｕ９が、Ｅ、Ｄ、Ｙ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｐ、Ｌ、およびＱから選択され、Ｕ１０が、Ｓ、Ｄ、Ｙ、Ｔ、Ｉ、Ｆ、Ｖ、Ｎ、Ａ、Ｐ、Ｌ、およびＨから選択され、Ｕ１１が、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、Ｔ、Ｎ、Ｓ、Ｄ、Ａ、およびＨから選択され、Ｕ１２が、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｎ、Ｔ、Ｐ、Ｓ、Ｇ、およびＨから選択され、Ｕ１４が、Ｄ、Ｙ、Ｎ、Ｆ、Ｉ、Ｐ、Ｖ、Ａ、Ｔ、Ｈ、Ｌ、Ｍ、およびＳから選択される、実施形態１から１３３のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２０３は、Ｕ１が、Ｄ、Ｙ、Ｆ、Ｉ、Ｖ、およびＮから選択され、Ｕ２が、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｆ、Ｉ、およびＮから選択され、Ｕ４が、ＧおよびＷから選択され、Ｕ６が、ＥおよびＤから選択され、Ｕ７が、Ｗ、Ｌ、Ｆ、Ｇ、およびＶから選択され、Ｕ８が、ＥおよびＤから選択され、Ｕ９が、Ｅ、Ｄ、Ｙ、およびＶから選択され、Ｕ１０が、Ｓ、Ｄ、Ｙ、Ｔ、およびＩから選択され、Ｕ１１が、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、およびＴから選択され、Ｕ１２が、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、およびＮから選択され、Ｕ１４が、Ｄ、Ｙ、Ｎ、Ｆ、Ｉ、Ｍ、およびＰから選択される、実施形態２０２に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２０４は、Ｕ１が、Ｄ、Ｙ、Ｖ、およびＦから選択され、Ｕ２が、Ｄ、Ｙ、Ｌ、およびＦから選択され、Ｕ４が、ＧおよびＷから選択され、Ｕ６が、ＥおよびＤから選択され、Ｕ７が、Ｗ、Ｌ、Ｇ、およびＦから選択され、Ｕ８が、ＥおよびＤから選択され、Ｕ９が、ＥおよびＤから選択され、Ｕ１０が、Ｓ、Ｄ、Ｔ、およびＹから選択され、Ｕ１１が、Ｉ、Ｙ、Ｖ、Ｌ、およびＦから選択され、Ｕ１２が、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｇ、Ａ、およびＬから選択され、Ｕ１４が、Ｄ、Ｙ、Ｍ、およびＮから選択される、実施形態２０３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２０５は、Ｐ１が、配列番号７９～１０５のいずれか１つによるアミノ酸配列を含む、実施形態１から１３３および２００から２０４のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２０６は、Ｐ１が、表２０の配列のいずれかによるアミノ酸配列を含む、実施形態１から１３３および２００から２０４のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２０７は、Ｐ１が、配列番号１０６～１１７のいずれか１つによるアミノ酸配列を含む、実施形態１から１３３または２０６のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２０８は、Ｐ１が、配列番号１８によるアミノ酸配列、または、配列番号１８に対して１、２、もしくは３つのアミノ酸置換、付加、もしくは欠失を有するペプチド配列を含む、実施形態１から１３３のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２０９は、Ｐ１が、配列番号１９によるアミノ酸配列、または、配列番号１９に対して１、２、もしくは３つのアミノ酸置換、付加、もしくは欠失を有するペプチド配列を含む、実施形態１から１３３、２００から２０４のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２１０は、Ｐ１が、配列番号１１６によるアミノ酸配列、または、配列番号１１６に対して１、２、もしくは３つのアミノ酸置換、付加、もしくは欠失を有するペプチド配列を含む、実施形態１から１３３、２００から２０４のいずれか１つに記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２１１は、Ｐ１が、配列番号１８によるアミノ酸配列を含む、実施形態２０８に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２１２は、Ｐ１が、配列番号１９によるアミノ酸配列を含む、実施形態２０９に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２１３は、Ｐ１が、配列番号１１６によるアミノ酸配列を含む、実施形態２１０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を含む。
実施形態２１４は、（ａ）実施形態１から２１３のいずれか１つに記載のポリペプチドまたはポリペプチド複合体と、（ｂ）薬学的に許容可能な賦形剤とを含む医薬組成物を含む。
実施形態２１５は、実施形態１から２１３のいずれか１つに記載のポリペプチドまたはポリペプチド複合体をコードする、単離された組換え核酸分子を含む。
実施形態２１６は、肺癌を処置する方法であって、肺癌の処置を必要とする対象に実施形態１から２１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を投与する工程を含む方法を含む。
実施形態２１７は、乳癌を処置する方法であって、乳癌の処置を必要とする対象に実施形態１から２１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を投与する工程を含む方法を含む。
実施形態２１８は、子宮頚癌を処置する方法であって、子宮頚癌の処置を必要とする対象に実施形態１から２１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を投与する工程を含む方法を含む。
実施形態２１９は、卵巣癌を処置する方法であって、卵巣癌の処置を必要とする対象に実施形態１から２１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を投与する工程を含む方法を含む。
実施形態２２０は、膵臓癌を処置する方法であって、膵臓癌の処置を必要とする対象に実施形態１から２１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を投与する工程を含む方法を含む。
実施形態２２１は、大腸癌を処置する方法であって、大腸癌の処置を必要とする対象に実施形態１から２１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を投与する工程を含む方法を含む。
実施形態２２２は、胃癌を処置する方法であって、胃癌の処置を必要とする対象に実施形態１から２１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を投与する工程を含む方法を含む。
実施形態２２３は、膵臓癌を処置する方法であって、膵臓癌の処置を必要とする対象に実施形態１から２１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を投与する工程を含む方法を含む。
実施形態２２４は、転移性去勢抵抗性前立腺癌を処置する方法であって、転移性去勢抵抗性前立腺癌の処置を必要とする対象に実施形態１から２１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体を投与する工程を含む方法を含む。
実施例１：ＰＳＭＡポリペプチド複合体の結合
表７のＰＳＭＡ－ＣＤ３ポリペプチド複合体を、ＰＳＭＡおよびＣＤ３εの結合について評価した。
表７のポリペプチド複合体分子を、標準の酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）の形式でＰＳＭＡのほかＣＤ３に対する結合能について評価した。ＰＳＭＡまたはＣＤ３のポリペプチド複合体結合を、プロテアーゼ処置の前後に測定した。簡潔に説明すると、ビオチン化抗原を、ニュートラアビジンを被覆させたプレート上で捕捉した。示される場合、ポリペプチド複合体分子を活性なマトリプターゼ（ＭＴＳＰ１）で処置した。次いで、緩衝液中で希釈されたポリペプチド複合体分子を、抗原を被覆させたプレートに添加した。標準のホースラディッシュペルオキシダーゼ共役二次抗体を用いて、結合されたポリペプチド複合体を検出した。５０％最大シグナル（ＥＣ５０）を達成するのに必要なポリペプチド複合体の濃度を、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍで算出した。
図２Ａ、図２Ｂ、および図２Ｃは、代表的なＰＳＭＡ結合のＥＬＩＳＡを示す。このデータを表８にまとめる。図３Ａ、図３Ｂ、および図３Ｃは、代表的なＣＤ３結合のＥＬＩＳＡを示す。このデータを表９にまとめる。ＰＣ３のマスクされた（ｍａｓｋｅｄ）ポリペプチド複合体のＥＣ５０は、プロテアーゼで処置したＰＣ３より約８倍高かった。ＰＣ５のマスクされたポリペプチド複合体のＥＣ５０は、プロテアーゼで処置したＰＣ３より約９５倍高かった。ＰＣ４とＰＣ６のマスクされたポリペプチド複合体のＥＣ５０は、プロテアーゼで処置したポリペプチド複合体よりもそれぞれ約１００倍と約２３０倍高かった。
実施例２：ポリペプチド複合体により媒介された腫瘍細胞毒性およびＴ細胞活性化
ポリペプチド複合体を、ＰＳＭＡ陽性腫瘍細胞株２２Ｒｖ１およびＬＮＣａＰを用いた機能的なｉｎ ｖｉｔｒｏ腫瘍細胞死滅アッセイにおいて評価した。腫瘍細胞がセンサの表面上に付着し、広がり、かつ拡大すると増加したセンサインピーダンス測定値（細胞インデックス（ｃｅｌｌ ｉｎｄｅｘ））に依存する、Ａｃｅａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓのリアルタイム・セル・アナライザを用いて、腫瘍細胞死滅を測定した。同様に、腫瘍細胞が死滅すると、インピーダンスは減少した。２５，０００個の腫瘍細胞をウェルごとに添加し、一晩かけて付着させた。翌日、ヒト血清補足培地中で７５，０００個のＣＤ８＋Ｔ細胞とともに滴定されたポリペプチド複合体を、ウェルに添加した。細胞インデックス測定値をさらに９６時間にわたり１０分毎に取得した。次いで、細胞インデックス×時間数（腫瘍細胞増殖の動力学）をポリペプチド複合体の濃度に対してプロットし、このとき腫瘍成長を５０％低下させるのに必要な濃度（ＩＣ５０）をＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍを用いて算出した。
２２Ｒｖ１腫瘍細胞株は、細胞毎に約３０００個のコピーのＰＳＭＡ密度を有している。図４は、ＰＣ１またはＰＣ２で処置された２２Ｒｖ１の代表的な生存度データを示す。このデータは表１０にまとめられ、ＰＣ２がＰＣ１より約１０００倍強力であることを示している。図５Ａおよび図５Ｂ、ならびに表１１および表１２は、マスクまたは切断されたポリペプチド複合体で処置された２２Ｒｖ１細胞の生存度データを示している。ＰＣ５のマスクされたポリペプチド複合体のＩＣ５０は、ＰＣ１のマスクされていないポリペプチド複合体の５０倍を超えているが、プロテアーゼによる処置によって、ＩＣ５０はＰＣ１のＩＣ５０未満に低下した。同様に、ＰＣ４とＰＣ６のマスクされたポリペプチド複合体のＩＣ５０は、それぞれＰＣ２の約１５０倍と２００倍であり、プロテアーゼによる処置によってともにＰＣ２の約１．７倍と２．５倍にレスキューされた。
ＬＮＣａＰ腫瘍細胞株は、細胞毎に約３５０，０００個のコピーのＰＳＭＡ密度を有している。図６は、ＬＮＣａＰの代表的な生存度データを示す。このデータは表１３にまとめられ、ＰＣ２がＰＣ１より約１００倍強力であることを示している。図７および表１４は、マスクまたは切断されたポリペプチド複合体で処置されたＬＮＣａＰ細胞の生存度データを示している。ＰＣ４のマスクされたポリペプチド複合体のＩＣ５０は、ＰＣ２のマスクされていないポリペプチド複合体の約３０倍であったが、プロテアーゼによる処置により、ＩＣ５０はマスクされていないポリペプチド複合体の約２．５倍にレスキューされた。
実施例３：ポリペプチド複合体により媒介された腫瘍細胞死滅
ポリペプチド複合体を、ＰＳＭＡ陽性腫瘍細胞株２２Ｒｖ１を用いた機能的なｉｎ ｖｉｔｒｏ腫瘍細胞死滅アッセイにおいて評価した。腫瘍細胞がセンサの表面上に付着し、広がり、かつ拡大すると増加したセンサインピーダンス測定値（細胞インデックス））に依存する、ＡｇｉｌｅｎｔのｘＣｅｌｌｉｇｅｎｃｅリアルタイム・セル・アナライザを用いて、腫瘍細胞死滅を測定した。同様に、腫瘍細胞が死滅すると、インピーダンスは減少した。１０，０００個の腫瘍細胞をウェルごとに添加し、９６ウェルＥ－プレート上で一晩かけて付着させた。翌日、ヒト血清補足培地中で３０，０００個のＣＤ８＋Ｔ細胞とともに滴定されたポリペプチド複合体を、ウェルに添加した。細胞インデックス測定値をさらに７２時間にわたり１０分毎に取得した。次いで、細胞インデックス×時間数（腫瘍細胞増殖の動力学）をポリペプチド複合体の濃度に対してプロットし、このとき腫瘍成長を５０％低下させるのに必要な濃度（ＩＣ５０）をＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを用いて算出した。データは図８Ａ～図８Ｂに見られる。
実施例４：カニクイザルにおけるポリペプチド複合体の薬物動態
カニクイザルにおけるポリペプチド分子の薬物動態および探索安全性を評価した。簡潔に説明すると、体重約３ｋｇのカニクイザルにポリペプチドをＩＶボーラスとして投与し、有害事象の徴候を毎日観察した。生存中に有害事象は観察されなかった。投与後、特定の時点で血液をＫ２ ＥＤＴＡ管に採取し、血漿へと処理した。血漿を分析まで冷凍保存した。血漿中のポリペプチド分子の濃度を、標準のＥＬＩＳＡ技術を介し、対照カニクイザル血漿で希釈した参照標準と比較して測定した。血漿中濃度曲線は、分布と排泄の段階を表す標準の２段階の指数方程式に適合した。薬物動態の適合により、ＰＳＭＡ ＴＣＥポリペプチド複合体では表１５、およびＰＳＭＡ ＴＲＡＣＴｒポリペプチド複合体では表１６に示すように、Ｃｍａｘ、半減期、分布容積、クリアランス、および７日間の曲線下面積（ＡＵＣ）の算出が可能となった。データは図９Ａ～図９Ｂに見られる。カニクイザルで測定された薬物動態により、ヒトに対する週１回の投与が裏付けられる。
実施例５：カニクイザルにおけるポリペプチド複合体のサイトカイン放出
カニクイザルに対するＩＶボーラスによるポリペプチド分子投与後のサイトカイン放出を評価した。簡潔に説明すると、体重約３ｋｇのカニクイザルにポリペプチドをＩＶボーラスとして投与し、有害事象の徴候を毎日観察した。生存中に有害事象は観察されなかった。投与後、特定の時点で血液をＫ２ ＥＤＴＡ管に採取し、血漿へと処理した。血漿を分析まで冷凍保存した。ＢＤ ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓの非ヒト霊長類サイトメトリックＴｈ１／Ｔｈ２ビーズアレイキットを製造業者の指示に従い用いて、血漿試料をサイトカインについて分析した。血漿中のインターフェロンγ、腫瘍壊死因子α、インターロイキン６、インターロイキン５、インターロイキン４、およびインターロイキン２のレベルを、ビーズアレイキットに設けられた参照標準と比較して算出した。データは図１０Ａ～図１０Ｃに見られる。
実施例６：カニクイザルにおけるポリペプチド複合体の毒性
カニクイザルに対するＩＶボーラスによるポリペプチド分子投与後の全身肝酵素を評価した。簡潔に説明すると、体重約３ｋｇのカニクイザルにポリペプチドをＩＶボーラスとして投与し、有害事象の徴候を毎日観察した。生存中に有害事象は観察されなかった。投与後、特定の時点で血液をＫ２ ＥＤＴＡ管に採取し、血漿へと処理した。血漿を分析まで冷凍保存した。血漿資料を、起こり得る肝毒性の徴候としての肝酵素アスパラギン酸トランスアミナーゼ（ＡＳＴ）およびアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）の存在について分析した。ＡＳＴ値とＡＬＴ値は、投与後に試験されたすべての時点において正常範囲内のままであり、肝毒性の欠如が示唆される。Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅの市販で入手可能なキットに設けられる指示に従い、ＡＳＴとＡＬＴを定量化した。ＡＳＴ値とＡＬＴ値を、製造業者の指示に従い陽性対照の参照標準と比較して算出した。データは図１１Ａ～図１１Ｂに見られる。
実施例７：最適化されたファージライブラリの構築－ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチド
ペプチド内の各個別の残基をアラニンへと変異させ、ＳＰ３４．１８５ ｓｃＦｖに対する結合と阻害を測定することにより、配列活性関係（ＳＡＲ：Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ）をペプチドＡおよびペプチドＢに対して確立させた。アラニン変異により結合と阻害が有意に弱まったペプチド残基は、変異が許容されなかった重要な残基であると認めることができる。アラニン変異のパフォーマンスが非変異配列と同様であったペプチド残基は、変異が確実に許容されなかった重要でない部位であると認めることができる。ペプチドＳＡＲを用いてＤＮＡオリゴライブラリを構築し、そこでは、各ペプチド配列内の重要な残基をコードするコドンの変異が最小限であり、重要でない残基をコードするコドンの変異は大きかった。得られたオリゴを、バクテリオファージのｐＩＩＩフィラメントへの融合を介してＳＡＲガイドペプチドを示すために使用されるバクテリオファージベクターへとクローニングした。次いで、関連するベクターを使用し、当該技術分野で標準の技法を用いた細菌中での増幅を介してファージ最適化ライブラリを産生した。
標準の酸素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）により、ペプチドをＳＰ３４．１８５ｓｃＦｖへの結合能について評価した。簡潔に説明すると、ビオチン化されたペプチドをニュートラアビジン被覆プレート上で捕捉し、ビオシチン続いて洗浄工程によりクエンチした。次いで、ＳＰ３４．１８５ｓｃＦｖを、ペプチドを捕捉したプレート上へと滴定した。次いで、プレートを洗浄し、第２のホースラディッシュペルオキシダーゼ抗体抱合体を用いてＳＰ３４．１８５ｓｃＦｖの結合を検出した。再び洗浄後、標準のＥＬＩＳＡ技法を用いてプレートを発達させ（ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ）、酸を用いて停止させた。５０％最大シグナルまたはＥＣ５０を達成するのに必要なＳＰ３４．１８５ｓｃＦｖの濃度を、Ｇｒａｐｈｐａｄ ｐｒｉｓｍを用いて算出した。データを図１２Ａ～図１２Ｆに示し、表１７Ａ～表１７Ｄにまとめる。ペプチドＡとペプチドＢにおけるＣＤ３アラニンスキャン（Ａｌａ Ｓｃａｎ）ペプチドのペプチド配列を、表１９に示す。
標準の酸素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）により、ペプチドをＳＰ３４．１８５ｓｃＦｖのＣＤ３ｅへの結合に対する阻害能について評価した。簡潔に説明すると、固定濃度のＳＰ３４．１８５ｓｃＦｖを、溶液中のペプチド濃度を変動させてインキュベートした。ＳＰ３４．１８５ｓｃＦｖおよびペプチドの溶液を１時間インキュベートしてから、ＣＤ３被覆プレートに添加した。結合を３０分間進行させた後、洗浄を行った。洗浄後、第２のホースラディッシュペルオキシダーゼ抗体抱合体を用いてＳＰ３４．１８５ｓｃＦｖを結合させた。再び洗浄後、標準のＥＬＩＳＡ技法を用いてプレートを発達させ、酸を用いて停止させた。ＳＰ３４．１８５ｓｃＦｖ ＣＤ３結合シグナルの５０％を阻害するのに必要なペプチドの濃度（ＩＣ５０）を、Ｇｒａｐｈｐａｄ ｐｒｉｓｍを用いて算出した。データを図１３Ａ～図１３Ｆに示し、表１８Ａ～表１８Ｄにまとめる。
実施例８：最適化されたファージライブラリの構築のパニング（Ｐａｎｎｉｎｇ）－ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチド
ファージ最適化ライブラリの完成後、ファージライブラリを、ＳＰ３４．１８５ｓｃＦｖ充填ビーズを用いてバイオパニングした。パニングを複数回実施し、このとき、バクテリオファージをＳＰ３４．１８５ｓｃＦｖ充填ビーズに結合させ、洗浄し、溶出し、増幅させた。固定濃度のＣＤ３、ペプチドＡ、またはペプチドＢを用いた各パニングの間、さらなる選択圧力を加えた。パニングの後、ファージに感染した細菌をプレートアウトし（ｐｌａｔｅｄ ｏｕｔ）、コロニーを９６ウェルのブロックへと取り上げた。次いで、クローンファージを増幅し、遠心分離により細菌細胞から分離した。ファージを含有する上清を、飽和濃度のＣＤ３の濃度の存在下と非存在下でのＳＰ３４．１８５ｓｃＦｖ被覆プレートに対する結合ＥＬＩＳＡにおいて試験した。結合シグナルがＣＤ３の存在下で減少した場合、ＳＰ３４．１８５ｓｃＦｖに結合可能なファージを配列分析のために選択した。
実施例９：パニングＥＬＩＳＡ－ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチド
クローンファージを粗製の上清として採取し、標準の酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）によるスクリーニングを行った。簡潔に説明すると、ＳＰ３４．１８５ｓｃＦｖを、ニュートラアビジンを被覆させたプレート上で捕捉した。クローンファージを添加する前に、ブロッキング緩衝液とＣＤ３、またはブロッキング緩衝液単独でウェルをインキュベートした。洗浄も吸引も行うことなく、クローンファージの上清をウェルに添加し、短時間のインキュベーションを行った。次いで、ウェルを洗浄し、続いて、ホースラディッシュペルオキシダーゼを抱合した抗Ｍ１３抗体を用いて結合されたファージの検出を行った。次いで、目的のクローンファージを配列分析に送った。
ＣＤ３ ｓｃＦｖペプチドＡライブラリのファージパニングの結果を表２０に示す。合成のために選択したペプチドの配列を表２１に示し、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖに対する結合（図１４Ａ～図１４Ｂ）、およびＣＤ３に対するＣＤ３ ｓｃＦｖ結合の阻害（図１５Ａ～図１５Ｂ）について評価した。図１６に示すコンセンサス配列を、表２０に示す配列すべてから算出し、ＷｅｂＬｏｇｏ３．７．４を用いて生成した。
本開示の好ましい実施形態が本明細書中で示され、かつ記述されてきたが、当業者であれば、このような実施形態はほんの一例として提供されることが明白であろう。本開示から逸脱することなく、多数の変形、変更、および置換えが当業者により想到されるであろう。本明細書中に記載される本開示の実施形態に代わる種々の代案が本開示の実施に利用されてもよいことを理解されたい。以下の特許請求の範囲は本開示の範囲を定義するものであり、この特許請求の範囲とその等価物の範囲内の方法と構造はそれにより包含されることが、意図されている。

Claims (148)

  1. 式Ｉ：Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１による単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体であって、式中、Ａ１は、エフェクタ細胞抗原に結合する第１の抗原認識分子を含み、Ｐ１は、Ａ１に結合するペプチドを含み、Ｌ１は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含み、Ｈ１は、半減期延長分子を含み、Ａ２は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合する第２の抗原認識分子を含む、単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  2. 前記第１の抗原認識分子が、抗体または抗体フラグメントを含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  3. 前記第１の抗原認識分子が、ヒトまたはヒト化である抗体または抗体フラグメントを含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  4. Ｌ１が、第１の抗原認識分子のＮ末端に結合される、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  5. Ａ２が、第１の抗原認識分子のＣ末端に結合される、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  6. Ｌ１が、第１の抗原認識分子のＣ末端に結合される、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  7. Ａ２が、第１の抗原認識分子のＮ末端に結合される、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  8. 前記抗体または抗体フラグメントが、単鎖可変フラグメント、単一ドメイン抗体、またはＦａｂフラグメントを含む、請求項２に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  9. Ａ１が、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）である、請求項８に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  10. 前記ｓｃＦｖが、ｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドおよびｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドを含む、請求項９に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  11. Ａ１が、単一ドメイン抗体である、請求項８に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  12. 前記抗体または抗体フラグメントが、ラクダ科由来単一ドメイン抗体の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）、重鎖可変ドメイン（ＶＨドメイン）、軽鎖可変ドメイン（ＶＬドメイン）、または可変ドメイン（ＶＨＨ）を含む、請求項８に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  13. Ａ１が、抗ＣＤ３ｅ単鎖可変フラグメントを含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  14. Ａ１が、ＣＤ３発現細胞上でＣＤ３に対して１μＭ以下のＫＤ結合を有する抗ＣＤ３ｅ単鎖可変フラグメントを含む、請求項１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  15. 前記エフェクタ細胞抗原がＣＤ３を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  16. Ａ１が、それぞれがヒトＣＤ３に特異的に結合可能である可変軽鎖および可変重鎖を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  17. Ａ１が、ムロモナブ－ＣＤ３（ＯＫＴ３）、オテリキシズマブ（ＴＲＸ４）、テプリズマブ（ＭＧＡ０３１）、ビシリズマブ（Ｎｕｖｉｏｎ）、ＳＰ３４、Ｘ３５、ＶＩＴ３、ＢＭＡ０３０（ＢＷ２６４／５６）、ＣＬＢ－Ｔ３／３、ＣＲＩＳ７、ＹＴＨ１２．５、Ｆ１１１－４０９、ＣＬＢ－Ｔ３．４．２、ＴＲ－６６、ＷＴ３２、ＳＰｖ－Ｔ３ｂ、１１Ｄ８、ＸＩＩＩ－１４１、ＸＩＩＩ－４６、ＸＩＩＩ－８７、１２Ｆ６、Ｔ３／ＲＷ２－８Ｃ８、Ｔ３／ＲＷ２－４Ｂ６、ＯＫＴ３Ｄ、Ｍ－Ｔ３０１、ＳＭＣ２、Ｆ１０１．０１、ＵＣＨＴ－１、ＷＴ－３１、１５８６５、１５８６５ｖ１２、１５８６５ｖ１６、および１５８６５ｖ１９からなる群から選択される相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  18. Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断される場合に、式Ｉのポリペプチドまたはポリペプチド複合体がエフェクタ細胞に結合する、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  19. Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断され、Ａ１がエフェクタ細胞に結合する場合に、式Ｉのポリペプチドまたはポリペプチド複合体がエフェクタ細胞に結合する、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  20. 前記エフェクタ細胞がＴ細胞である、請求項１９に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  21. Ａ１が、前記エフェクタ細胞上のＴＣＲ－ＣＤ３複合体の一部であるポリペプチドに結合する、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  22. 前記ＴＣＲ－ＣＤ３複合体の一部である前記ポリペプチドが、ヒトＣＤ３εである、請求項２１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  23. 前記エフェクタ細胞抗原がＣＤ３を含み、Ａ１が、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ａ１の前記ＨＣ－ＣＤＲ１、前記ＨＣ－ＣＤＲ２、および前記ＨＣ－ＣＤＲ３が、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号１、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号２、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号３を含み、Ａ１が、ＣＤＲとしてＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３を含み、Ａ１の前記ＬＣ－ＣＤＲ１、前記ＬＣ－ＣＤＲ２、および前記ＬＣ－ＣＤＲ３が、ＬＣ－ＣＤＲ１では配列番号４、ＬＣ－ＣＤＲ２では配列番号５、およびＬＣ－ＣＤＲ３では配列番号６を含む、請求項１０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  24. 前記エフェクタ細胞抗原がＣＤ３を含み、前記ｓｃＦｖが、配列番号７によるアミノ酸配列を含む、請求項９に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  25. 前記第２の抗原認識分子が、抗体または抗体フラグメントを含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  26. 前記抗体または抗体フラグメントが、単鎖可変フラグメント、単一ドメイン抗体、またはＦａｂを含む、請求項２５に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  27. 前記抗体または抗体フラグメントが、ラクダ科由来単一ドメイン抗体の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）、重鎖可変ドメイン（ＶＨドメイン）、軽鎖可変ドメイン（ＶＬドメイン）、または可変ドメイン（ＶＨＨ）を含む、請求項２５に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  28. 前記抗体または抗体フラグメントが、ヒトまたはヒト化である、請求項２５に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  29. Ａ２がＦａｂである、請求項１０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  30. 前記Ｆａｂが、（ａ）Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドおよび（ｂ）Ｆａｂ重鎖ポリペプチドを含む、請求項２９に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  31. Ａ２が、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ａ２の前記ＨＣ－ＣＤＲ１、前記ＨＣ－ＣＤＲ２、および前記ＨＣ－ＣＤＲ３が、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号８、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号９、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号１０を含み、Ａ２が、ＣＤＲとしてＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、およびＬＣ－ＣＤＲ３を含み、Ａ２の前記ＬＣ－ＣＤＲ１、前記ＬＣ－ＣＤＲ２、および前記ＬＣ－ＣＤＲ３が、ＬＣ－ＣＤＲ１では配列番号１１、ＬＣ－ＣＤＲ２では配列番号１２、およびＬＣ－ＣＤＲ３では配列番号１３を含む、請求項２９に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  32. 前記Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドが、配列番号１４によるアミノ酸配列を含む、請求項３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  33. 前記Ｆａｂ重鎖ポリペプチドが、配列番号１５によるアミノ酸配列を含む、請求項３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  34. Ａ２の前記Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドが、Ａ１の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）のＣ末端に結合される、請求項３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  35. Ａ２の前記Ｆａｂ重鎖ポリペプチドが、Ａ１の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）のＣ末端に結合される、請求項３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  36. Ａ２の前記Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドが、Ａ１の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）のＮ末端に結合される、請求項３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  37. Ａ２の前記Ｆａｂ重鎖ポリペプチドが、Ａ１の単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）のＮ末端に結合される、請求項３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  38. Ａ２の前記Ｆａｂ重鎖ポリペプチドが、Ａ１のｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドに結合される、請求項３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  39. Ａ２の前記Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドが、Ａ１のｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドに結合される、請求項３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  40. Ａ２の前記Ｆａｂ重鎖ポリペプチドが、Ａ１のｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドに結合される、請求項３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  41. Ａ２の前記Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドが、Ａ１のｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドに結合される、請求項３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  42. Ａ２が、Ｐ２およびＬ２をさらに含み、Ｐ２は、Ａ２に結合するペプチドを含み、Ｌ２は、Ｐ１にＡ１を接続するとともに腫瘍特異的プロテアーゼの基質である連結部分を含む、請求項３０に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  43. 式Ｉａ：Ｐ２－Ｌ２－Ａ２－Ａ１－Ｌ１－Ｐ１－Ｈ１によるものである、請求項４２に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  44. Ａ２の前記Ｆａｂ重鎖ポリペプチドが、Ａ１のｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドに結合され、Ｌ２が、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドに結合される、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  45. Ａ２の前記Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドが、Ａ１のｓｃＦｖ重鎖ポリペプチドに結合され、Ｌ２が、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドに結合される、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  46. Ａ２の前記Ｆａｂ重鎖ポリペプチドが、Ａ１のｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドに結合され、Ｌ２が、Ａ２のＦａｂ軽鎖ポリペプチドに結合される、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  47. Ａ２の前記Ｆａｂ軽鎖ポリペプチドが、Ａ１のｓｃＦｖ軽鎖ポリペプチドに結合され、Ｌ２が、Ａ２のＦａｂ重鎖ポリペプチドに結合される、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  48. Ｐ１が、前記エフェクタ細胞抗原へのＡ１の結合を損なう、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  49. Ｐ１が、イオン相互作用、静電的相互作用、疎水的相互作用、Ｐｉ－スタッキング相互作用、もしくはＨ結合相互作用、またはそれらの組合せによりＡ１に結合される、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  50. Ｐ１が前記エフェクタ細胞抗原に対して７０％未満の配列相同性を有している、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  51. Ｐ２が、ＰＳＭＡへのＡ２の結合を損なう、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  52. Ｐ２が、イオン相互作用、静電的相互作用、疎水的相互作用、Ｐｉ－スタッキング相互作用、もしくはＨ結合相互作用、またはそれらの組合せによりＡ２に結合される、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  53. Ｐ２が、抗原結合部位またはその付近でＡ２に結合される、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  54. Ｐ２がＰＳＭＡに対して７０％未満の配列相同性を有している、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  55. Ｐ１またはＰ２が、長さが少なくとも１０アミノ酸のペプチド配列を含む、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  56. Ｐ１またはＰ２が、長さが少なくとも１０アミノ酸かつ長さが２０アミノ酸以下のペプチド配列を含む、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  57. Ｐ１またはＰ２が、長さが少なくとも１６アミノ酸のペプチド配列を含む、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  58. Ｐ１またはＰ２が、長さが４０アミノ酸以下のペプチド配列を含む、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  59. Ｐ１またはＰ２が、少なくとも２つのシステインアミノ酸残基を含む、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  60. Ｐ１またはＰ２が、環状ペプチドまたは直鎖ペプチドを含む、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  61. Ｐ１またはＰ２が、環状ペプチドを含む、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  62. Ｐ１またはＰ２が、直鎖ペプチドを含む、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  63. Ｐ１が、少なくとも２つのシステインアミノ酸残基を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  64. Ｐ１が、配列番号１６～１９または７８のいずれか１つによるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  65. Ｌ１が、Ａ１のＮ末端に結合される、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  66. Ｌ１が、Ａ１のＣ末端に結合される、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  67. Ｌ２が、Ａ２のＮ末端に結合される、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  68. Ｌ２が、Ａ２のＣ末端に結合される、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  69. Ｌ１またはＬ２が、少なくとも５～５０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  70. Ｌ１またはＬ２が、少なくとも１０～３０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  71. Ｌ１またはＬ２が、少なくとも１０のアミノ酸を有するペプチド配列である、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  72. Ｌ１またはＬ２が、少なくとも１８のアミノ酸を有するペプチド配列である、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  73. Ｌ１またはＬ２が、少なくとも２６のアミノ酸を有するペプチド配列である、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  74. Ｌ１またはＬ２が、（Ｇ２Ｓ）ｎを含む式を有しており、式中、ｎは１～３の整数である（配列番号１１８）、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  75. Ｌ１が、（Ｇ２Ｓ）ｎ、（ＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５０）、（ＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５１）、（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５２）、および（ＧＳＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５３）からなる群から選択される式を有しており、式中、ｎは少なくとも１の整数である、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  76. Ｌ１が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断され、それによりＡ１が前記エフェクタ細胞抗原に曝される場合、Ｐ１がＡ１から結合解除されるようになる、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  77. Ｌ２が腫瘍特異的プロテアーゼにより切断され、それによりＡ２がＰＳＭＡに曝される場合、Ｐ２がＡ２から結合解除されるようになる、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  78. 前記腫瘍特異的プロテアーゼが、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）、セリンプロテアーゼ、システインプロテアーゼ、トレオニンプロテアーゼ、およびアスパラギン酸プロテアーゼからなる群から選択される、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  79. 前記マトリックスメタロプロテアーゼが、ＭＭＰ２、ＭＭＰ７、ＭＭＰ９、ＭＭＰ１３、またはＭＭＰ１４を含む、請求項７８に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  80. 前記セリンプロテアーゼが、マトリプターゼ（ＭＴＳＰ１）、ウロキナーゼ、またはヘプシンを含む、請求項７８に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  81. Ｌ１またはＬ２が、ウロキナーゼ切断可能アミノ酸配列、マトリプターゼ切断可能アミノ酸配列、マトリックスメタロプロテアーゼ切断可能アミノ酸配列、またはレグマイン切断可能アミノ酸配列を含む、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  82. Ｌ１またはＬ２が、配列番号２３によるアミノ酸配列を含む、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  83. Ｌ１またはＬ２が、配列番号２０～４９のいずれか１つによるアミノ酸配列を含む、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  84. Ｌ１またはＬ２が、リンカー２５（ＩＳＳＧＬＬＳＧＲＳＤＡＧ）（配列番号４５）、リンカー２６（ＡＡＧＬＬＡＰＰＧＧＬＳＧＲＳＤＡＧ）（配列番号４６）、リンカー２７（ＳＰＬＧＬＳＧＲＳＤＡＧ）（配列番号４７）、もしくはリンカー２８（ＬＳＧＲＳＤＡＧＳＰＬＧＬＡＧ）（配列番号４８）のアミノ酸配列、または、リンカー２５、リンカー２６、リンカー２７、もしくはリンカー２８のアミノ酸配列に対し１、２、もしくは３つのアミノ酸置換、付加、もしくは欠失を有するアミノ酸配列を含む、請求項４３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  85. Ｈ１がポリマーを含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  86. 前記ポリマーがポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  87. Ｈ１がアルブミンを含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  88. Ｈ１がＦｃドメインを含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  89. 前記アルブミンが血清アルブミンである、請求項８７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  90. 前記アルブミンがヒト血清アルブミンである、請求項８７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  91. Ｈ１が、ポリペプチド、リガンド、または小分子を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  92. 前記ポリペプチド、リガンド、または小分子が、血清タンパク質もしくはそのフラグメント、循環免疫グロブリンもしくはそのフラグメント、またはＣＤ３５／ＣＲ１に結合する、請求項９１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  93. 前記血清タンパク質が、チロキシン結合タンパク質、トランスサイレチン、ａ１－酸性糖タンパク質、トランスフェリン、トランスフェリン受容体もしくはそのトランスフェリン結合部分、フィブリノゲン、またはアルブミンを含む、請求項９２に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  94. 循環免疫グロブリン分子が、ＩｇＧｌ、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ｓｌｇＡ、ＩｇＭ、またはＩｇＤを含む、請求項９２に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  95. 前記血清タンパク質がアルブミンである、請求項９２に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  96. 前記ポリペプチドが抗体である、請求項９１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  97. 前記抗体が、単一ドメイン抗体、単鎖可変フラグメント、またはＦａｂを含む、請求項９６に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  98. 前記単一ドメイン抗体が、アルブミンに結合する単一ドメイン抗体を含む、請求項９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  99. 前記単一ドメイン抗体が、ヒト抗体またはヒト化抗体である、請求項９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  100. 前記単一ドメイン抗体が、６４５ｇＨ１ｇＬ１である、請求項９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  101. 前記単一ドメイン抗体が、６４５ｄｓｇＨ５ｇＬ４である、請求項９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  102. 前記単一ドメイン抗体が、２３－１３－Ａ０１－ｓｃ０２である、請求項９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  103. 前記単一ドメイン抗体が、Ａ１０ｍ３またはそのフラグメントである、請求項９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  104. 前記単一ドメイン抗体が、ＤＯＭ７ｒ－３１である、請求項９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  105. 前記単一ドメイン抗体が、ＤＯＭ７ｈ－１１－１５である、請求項９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  106. 前記単一ドメイン抗体が、Ａｌｂ－１、Ａｌｂ－８、またはＡｌｂ－２３である、請求項９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  107. 前記単一ドメイン抗体が、１０Ｅである、請求項９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  108. 前記単一ドメイン抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記単一ドメイン抗体の前記ＨＣ－ＣＤＲ１、前記ＨＣ－ＣＤＲ２、および前記ＨＣ－ＣＤＲ３が、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号５４、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号５５、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号５６を含む、請求項９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  109. 前記単一ドメイン抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）としてＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、およびＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記単一ドメイン抗体の前記ＨＣ－ＣＤＲ１、前記ＨＣ－ＣＤＲ２、および前記ＨＣ－ＣＤＲ３が、ＨＣ－ＣＤＲ１では配列番号５８、ＨＣ－ＣＤＲ２では配列番号５９、およびＨＣ－ＣＤＲ３では配列番号６０を含む、請求項９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  110. 前記単一ドメイン抗体が、ＳＡ２１である、請求項９７に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  111. 修飾アミノ酸、非天然アミノ酸、非天然の修飾アミノ酸、またはそれらの組合せを含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  112. 前記修飾アミノ酸または非天然の修飾アミノ酸が、翻訳後修飾を含む、請求項１１１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  113. Ｈ１が、Ｐ１にＨ１を接続する連結部分（Ｌ３）を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  114. Ｌ３が、少なくとも５～５０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である、請求項１１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  115. Ｌ３が、少なくとも１０～３０以下のアミノ酸を有するペプチド配列である、請求項１１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  116. Ｌ３が、少なくとも１０のアミノ酸を有するペプチド配列である、請求項１１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  117. Ｌ３が、少なくとも１８のアミノ酸を有するペプチド配列である、請求項１１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  118. Ｌ３が、少なくとも２６のアミノ酸を有するペプチド配列である、請求項１１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  119. Ｌ３が、（Ｇ２Ｓ）ｎ、（ＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５０）、（ＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５１）、（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号５２）、および（ＧＳＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５３）からなる群から選択される式を有しており、式中、ｎは少なくとも１の整数である、請求項１１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  120. Ｌ３が、配列番号２２によるアミノ酸配列を含む、請求項１１３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  121. 配列番号６２～７７のいずれか１つに対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  122. 配列番号７２に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  123. 配列番号７３に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  124. 配列番号６２および配列番号６３に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  125. 配列番号６４および配列番号６５に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  126. 配列番号６６および配列番号６７に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  127. 配列番号６８および配列番号６９に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  128. 配列番号７０および配列番号７１に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  129. 配列番号７２および配列番号７３に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  130. 配列番号７４および配列番号７５に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  131. 配列番号７６および配列番号７７に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  132. Ｐ１が、Ｚ１－Ｚ２－Ｃ－Ｚ４－Ｐ－Ｚ６－Ｚ７－Ｚ８－Ｚ９－Ｚ１０－Ｚ１１－Ｚ１２－Ｃ－Ｚ１４によるアミノ酸配列を含み、Ｚ１が、Ｄ、Ｙ、Ｆ、Ｉ、Ｎ、Ｖ、Ｈ、Ｌ、Ａ、Ｔ、Ｓ、およびＰから選択され、Ｚ２が、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｆ、Ｉ、Ｎ、Ａ、Ｖ、Ｈ、Ｔ、およびＳから選択され、Ｚ４が、ＧおよびＷから選択され、Ｚ６が、Ｅ、Ｄ、Ｖ、およびＰから選択され、Ｚ７が、Ｗ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｇ、Ｍ、Ｉ、およびＹから選択され、Ｚ８が、Ｅ、Ｄ、Ｐ、およびＱから選択され、Ｚ９が、Ｅ、Ｄ、Ｙ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｐ、Ｌ、およびＱから選択され、Ｚ１０が、Ｓ、Ｄ、Ｙ、Ｔ、Ｉ、Ｆ、Ｖ、Ｎ、Ａ、Ｐ、Ｌ、およびＨから選択され、Ｚ１１が、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、Ｔ、Ｎ、Ｓ、Ｄ、Ａ、およびＨから選択され、Ｚ１２が、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｎ、Ｔ、Ｐ、Ｓ、およびＨから選択され、Ｚ１４が、Ｄ、Ｙ、Ｎ、Ｆ、Ｉ、Ｐ、Ｖ、Ａ、Ｔ、Ｈ、Ｌ、およびＳから選択される、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  133. Ｚ１が、Ｄ、Ｙ、Ｆ、Ｉ、およびＮから選択され、Ｚ２が、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｆ、Ｉ、およびＮから選択され、Ｚ４が、ＧおよびＷから選択され、Ｚ６が、ＥおよびＤから選択され、Ｚ７が、Ｗ、Ｌ、Ｆ、およびＶから選択され、Ｚ８が、ＥおよびＤから選択され、Ｚ９が、Ｅ、Ｄ、Ｙ、およびＶから選択され、Ｚ１０が、Ｓ、Ｄ、Ｙ、Ｔ、およびＩから選択され、Ｚ１１が、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、およびＴから選択され、Ｚ１２が、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ａ、およびＮから選択され、Ｚ１４が、Ｄ、Ｙ、Ｎ、Ｆ、Ｉ、およびＰから選択される、請求項１３２に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  134. Ｚ１が、Ｄ、Ｙ、およびＦから選択され、Ｚ２が、Ｄ、Ｙ、Ｌ、およびＦから選択され、Ｚ４が、ＧおよびＷから選択され、Ｚ６が、ＥおよびＤから選択され、Ｚ７が、Ｗ、Ｌ、およびＦから選択され、Ｚ８が、ＥおよびＤから選択され、Ｚ９が、ＥおよびＤから選択され、Ｚ１０が、Ｓ、Ｄ、およびＹから選択され、Ｚ１１が、Ｉ、Ｙ、およびＦから選択され、Ｚ１２が、Ｆ、Ｄ、Ｙ、およびＬから選択され、Ｚ１４が、Ｄ、Ｙ、およびＮから選択される、請求項１３３に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  135. Ｐ１が、Ｕ１－Ｕ２－Ｃ－Ｕ４－Ｐ－Ｕ６－Ｕ７－Ｕ８－Ｕ９－Ｕ１０－Ｕ１１－Ｕ１２－Ｃ－Ｕ１４によるアミノ酸配列を含み、Ｕ１が、Ｄ、Ｙ、Ｆ、Ｉ、Ｎ、Ｖ、Ｈ、Ｌ、Ａ、Ｔ、Ｓ、およびＰから選択され、Ｕ２が、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｆ、Ｉ、Ｎ、Ａ、Ｖ、Ｈ、Ｔ、およびＳから選択され、Ｕ４が、ＧおよびＷから選択され、Ｕ６が、Ｅ、Ｄ、Ｖ、およびＰから選択され、Ｕ７が、Ｗ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｇ、Ｍ、Ｉ、およびＹから選択され、Ｕ８が、Ｅ、Ｄ、Ｐ、およびＱから選択され、Ｕ９が、Ｅ、Ｄ、Ｙ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｐ、Ｌ、およびＱから選択され、Ｕ１０が、Ｓ、Ｄ、Ｙ、Ｔ、Ｉ、Ｆ、Ｖ、Ｎ、Ａ、Ｐ、Ｌ、およびＨから選択され、Ｕ１１が、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、Ｔ、Ｎ、Ｓ、Ｄ、Ａ、およびＨから選択され、Ｕ１２が、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｎ、Ｔ、Ｐ、Ｓ、Ｇ、およびＨから選択され、Ｕ１４が、Ｄ、Ｙ、Ｎ、Ｆ、Ｉ、Ｐ、Ｖ、Ａ、Ｔ、Ｈ、Ｌ、Ｍ、およびＳから選択される、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  136. Ｕ１が、Ｄ、Ｙ、Ｆ、Ｉ、およびＮから選択され、Ｕ２が、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｆ、Ｉ、およびＮから選択され、Ｕ４が、ＧおよびＷから選択され、Ｕ６が、ＥおよびＤから選択され、Ｕ７が、Ｗ、Ｌ、Ｆ、Ｇ、およびＶから選択され、Ｕ８が、ＥおよびＤから選択され、Ｕ９が、Ｅ、Ｄ、Ｙ、およびＶから選択され、Ｕ１０が、Ｓ、Ｄ、Ｙ、Ｔ、およびＩから選択され、Ｕ１１が、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、およびＴから選択され、Ｕ１２が、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ａ、Ｇ、およびＮから選択され、Ｕ１４が、Ｄ、Ｙ、Ｎ、Ｆ、Ｉ、Ｍ、およびＰから選択される、請求項１３５に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  137. Ｕ１が、Ｄ、Ｙ、Ｖ、およびＦから選択され、Ｕ２が、Ｄ、Ｙ、Ｌ、およびＦから選択され、Ｕ４が、ＧおよびＷから選択され、Ｕ６が、ＥおよびＤから選択され、Ｕ７が、Ｗ、Ｌ、Ｇ、およびＦから選択され、Ｕ８が、ＥおよびＤから選択され、Ｕ９が、ＥおよびＤから選択され、Ｕ１０が、Ｓ、Ｄ、Ｔ、およびＹから選択され、Ｕ１１が、Ｉ、Ｙ、Ｖ、Ｌ、およびＦから選択され、Ｕ１２が、Ｆ、Ｄ、Ｙ、Ｇ、Ａ、およびＬから選択され、Ｕ１４が、Ｄ、Ｙ、Ｍ、およびＮから選択される、請求項１３６に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  138. Ｐ１が、配列番号７９～１０５のいずれか１つによるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  139. Ｐ１が、表２０の配列のうちいずれか１つによるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  140. Ｐ１が、配列番号１０６～１１７のいずれか１つによるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  141. Ｐ１が、配列番号１８によるアミノ酸配列、または、配列番号１８に対して１、２、もしくは３つのアミノ酸置換、付加、もしくは欠失を有するペプチド配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  142. Ｐ１が、配列番号１９によるアミノ酸配列、または、配列番号１９に対して１、２、もしくは３つのアミノ酸置換、付加、もしくは欠失を有するペプチド配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  143. Ｐ１が、配列番号１１６によるアミノ酸配列、または、配列番号１１６に対して１、２、もしくは３つのアミノ酸置換、付加、もしくは欠失を有するペプチド配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  144. Ｐ１が、配列番号１８によるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  145. Ｐ１が、配列番号１９によるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  146. Ｐ１が、配列番号１１６によるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体。
  147. （ａ）請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体と、（ｂ）薬学的に許容可能な賦形剤とを含む医薬組成物。
  148. 請求項１に記載の単離されたポリペプチドまたはポリペプチド複合体をコードする、単離された組換え核酸分子。
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