JP2023501334A

JP2023501334A - 自己炎症性疾患の処置

Info

Publication number: JP2023501334A
Application number: JP2022525955A
Authority: JP
Inventors: クーパー，マシュー; オーネイル，ルーク
Original assignee: インフレイゾームリミテッド
Priority date: 2019-11-07
Filing date: 2020-11-06
Publication date: 2023-01-18
Also published as: CN114599356A; EP4054564A1; WO2021089782A1; US20220409585A1

Abstract

本発明は、クリオピリン関連周期熱症候群（ＣＡＰＳ）、腫瘍壊死因子受容体関連周期性症候群（ＴＲＡＰＳ）、高免疫グロブリンＤ症候群（ＨＩＤＳ）／メバロン酸キナーゼ欠損症（ＭＫＤ）、家族性地中海熱（ＦＭＦ）、ベーチェット病、壊疽性膿皮症、全身型若年性特発性関節炎（ｓＪＩＡ）、シュニッツラー症候群、または化膿性汗腺炎などの自己炎症性疾患の処置または予防における使用のための、式（Ｉ）の化合物に関する。TIFF2023501334000007.tif39165【選択図】図１Ａおよび１Ｂ

Description

本発明は、クリオピリン関連周期熱症候群（ＣＡＰＳ）、腫瘍壊死因子受容体関連周期性症候群（ＴＲＡＰＳ）、高免疫グロブリンＤ症候群（ＨＩＤＳ）／メバロン酸キナーゼ欠損症（ＭＫＤ）、家族性地中海熱（ＦＭＦ）、ベーチェット病、壊疽性膿皮症、全身型若年性特発性関節炎（ｓＪＩＡ）、シュニッツラー症候群、または化膿性汗腺炎などの自己炎症性疾患の処置または予防における使用のための、式（Ｉ）：

の化合物に関する。

ＮＬＲＰ３は、腫瘍壊死因子受容体関連周期性症候群（ＴＲＡＰＳ）、高免疫グロブリンＤ症候群（ＨＩＤＳ）／メバロン酸キナーゼ欠損症（ＭＫＤ）、および家族性地中海熱（ＦＭＦ）（Ｃｏｏｋｅｔａｌ．，ＥｕｒＪＩｍｍｕｎｏｌ，４０：５９５－６５３，２０１０；Ｔｉｍｅｒｍａｎｅｔａｌ．，ＪＣｌｉｎＲｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ，１９（８）：４５２－４５３，２０１３；およびＯｚｙｉｌｍａｚｅｔａｌ．，ＩｎｔＪＩｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ，４６：２３２－２４０，２０１９）、ベーチェット病（Ｍａｓｔｅｒｓ，ＣｌｉｎＩｍｍｕｎｏｌ，１４７（３）：２２３－２２８，２０１３；Ｋｉｍｅｔａｌ．，ＪＩｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，１２：ａｒｔｉｃｌｅ４１，２０１５；およびＹｕｋｓｅｌｅｔａｌ．，ＩｎｔＩｍｍｕｎｏｌ，２６（２）：７１－８１，２０１４）、壊疽性膿皮症（Ｍａｒｚａｎｏｅｔａｌ．，ＢｒｉｔｉｓｈＪｏｕｒｎａｌｏｆＤｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，１７５（５）：８８２－８９１，２０１６）、全身型若年性特発性関節炎（ｓＪＩＡ）（Ｎｉｒｍａｌａｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＯｐｉｎｉｏｎｉｎＲｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ，２６（５）：５４３－５５２，２０１４；Ｙａｎｇｅｔａｌ．，ＳｃａｎｄｉｎａｖｉａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＲｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ，４３（２）：１４６－１５２，２０１４；およびＭｅｊｂｒｉｅｔａｌ．，ＰｅｄｉａｔｒｉｃＤｒｕｇｓ，２２：２５１－２６２，２０２０）、シュニッツラー症候群（ｄｅＫｏｎｉｎｇｅｔａｌ．，ＪＡｌｌｅｒｇｙＣｌｉｎＩｍｍｕｎｏｌ，１３５（２）：５６１－５６４，２０１５；およびＣｏｒｃｏｒａｎｅｔａｌ．，ＷｅｌｌｃｏｍｅＯｐｅｎＲｅｓｅａｒｃｈ，５：２４７，２０２０）、および化膿性汗腺炎（Ａｌｉｋｈａｎｅｔａｌ．，ＪＡｍＡｃａｄＤｅｒｍａｔｏｌ，６０（４）：５３９－６１，２００９；Ｌｉｍａｅｔａｌ．，ＢｒｉｔｉｓｈＪｏｕｒｎａｌｏｆＤｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，１７４：５１４－５２１，２０１６；およびＳｈａｈｅｔａｌ．，ＩｎｆｌａｍｍＲｅｓ，６６：９３１－９４５，２０１７）を含む、多数の自己炎症性疾患に関連づけられている。特にＮＬＲＰ３の変異が、ＣＡＰＳとして知られる一連の希少の自己炎症性疾患を担うことが見出されている（Ｏｚａｋｉｅｔａｌ．，ＪＩｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎＲｅｓｅａｒｃｈ，８：１５－２７，２０１５；Ｓｃｈｒｏｄｅｒｅｔａｌ．，Ｃｅｌｌ，１４０：８２１－８３２，２０１０；およびＭｅｎｕｅｔａｌ．，ＣｌｉｎｉｃａｌａｎｄＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１６６：１－１５，２０１１）。クリオピリン関連自己炎症性症候群とも呼ばれるクリオピリン関連周期熱症候群（ＣＡＰＳ）は、同じ遺伝子の欠損に関係する３種の疾患：新生児期発症多臓器系炎症性疾患（ＮＯＭＩＤ）、マックル・ウェルズ症候群（ＭＷＳ）および家族性寒冷自己炎症性症候群（ＦＣＡＳ）である。これらの疾患の差異は、それらの重症度および関与する臓器にある。ＮＬＲＰ３の異常な活性が、ＣＡＰＳの病因である。先に挙げられた他の疾患は、ＮＬＲＰ３遺伝子の変異により臨床的に診断されないが、周期熱の出現およびそれらのＩＬ－１阻害剤への応答性を含む臨床表現型により、それらは自己炎症性疾患の群に分類される。例えばＦＭＦ（Ｊｅｒｕｅｔａｌ．，Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ＆Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ，５４（２）：５０８－５１４，２００６）、シュニッツラー症候群（ｄｅＫｏｎｉｎｇｅｔａｌ．，ｊＡｌｌｅｒｇｙＣｌｉｎＩｍｍｕｎｏｌ，１３５（２）：５６１－５６４，２０１５）およびベーチェット病（Ｙｕｋｓｅｌｅｔａｌ．，ＩｎｔＩｍｍｕｎｏｌ，２６（２）：７１－８１，２０１４）によく似た状態と診断された患者が、ＮＬＲＰ３中に変異を有することを示す証拠も存在する（ｈｔｔｐｓ：／／ｉｎｆｅｖｅｒｓ．ｕｍａｉ－ｍｏｎｔｐｅｌｌｉｅｒ．ｆｒ／ｗｅｂ／）。

本発明は、式（Ｉ）の化合物が自己炎症性疾患、特にＣＡＰＳの処置において、最も特別には経口経路を介する処置において特に効果的である、という発見に一部基づく。

本発明の第一の態様において、自己炎症性疾患の処置または予防における使用のための、式（Ｉ）：

の化合物またはその医薬的に許容できる塩が提供される。

一実施形態において、自己炎症性疾患は、クリオピリン関連周期熱症候群（ＣＡＰＳ）である。一実施形態において、クリオピリン関連周期熱症候群は、マックル・ウェルズ症候群（ＭＷＳ）である。別の実施形態において、クリオピリン関連周期熱症候群は、家族性寒冷自己炎症性症候群（ＦＣＡＳ）である。別の実施形態において、クリオピリン関連周期熱症候群は、新生児期発症多臓器系炎症性疾患（ＮＯＭＩＤ）である。

一実施形態において、自己炎症性疾患は、腫瘍壊死因子受容体関連周期性症候群（ＴＲＡＰＳ）、高免疫グロブリンＤ症候群（ＨＩＤＳ）／メバロン酸キナーゼ欠損症（ＭＫＤ）、家族性地中海熱（ＦＭＦ）、ベーチェット病、壊疽性膿皮症、全身型若年性特発性関節炎（ｓＪＩＡ）、シュニッツラー症候群、または化膿性汗腺炎である。

一実施形態において、処置または予防は、炎症の処置または予防を含む。典型的には、炎症の処置または予防は、ＮＬＲＰ３阻害を介して実現される。本明細書で用いられる用語「ＮＬＲＰ３阻害」は、ＮＬＲＰ３の活性レベルの完全な、または部分的な低減を指し、例えば活性ＮＬＲＰ３の阻害および／またはＮＬＲＰ３活性化の阻害を包含する。

一実施形態において、処置または予防は、化合物またはその塩の経口投与を含む。さらなる実施形態において、処置または予防は、化合物またはその塩の１日２回の経口投与を含む。さらなる実施形態において、処置または予防は、２～４ｍｇ／ｋｇ／用量の用量で、または３～３．６ｍｇ／ｋｇ／用量の用量で、または約３．３ｍｇ／ｋｇ／用量の用量での化合物またはその塩の経口投与を含む。さらなる実施形態において、処置または予防は、２～４ｍｇ／ｋｇ／用量の用量で、または３～３．６ｍｇ／ｋｇ／用量の用量で、または約３．３ｍｇ／ｋｇ／用量での用量での化合物またはその塩の１日２回の経口投与を含む。

一実施形態において、化合物または塩は、一ナトリウム塩などの、ナトリウム塩である。一実施形態において、化合物または塩は、一水和物である。一実施形態において、化合物または塩は、結晶性である。一実施形態において、化合物または塩は、結晶性一ナトリウム一水和物塩である。一実施形態において、結晶性一ナトリウム一水和物塩は、４．３°２θ、８．７°２θ、および２０．６°２θ（全て±０．２°２θ）にピークを含むＸＲＰＤスペクトルを有する。一実施形態において、結晶性一ナトリウム一水和物塩は、ＸＲＰＤスペクトルを有し、その中の１０個の最も強いピークは、４．３°２θ、６．２°２θ、６．７°２θ、７．３°２θ、８．７°２θ、９．０°２θ、１２．１°２θ、１５．８°２θ、１６．５°２θ、１８．０°２θ、１８．１°２θ、２０．６°２θ、２１．６°２θ、および２４．５°２θ（全て±０．２°２θ）から選択される２θ値を有する５個以上のピークを含む。ＸＲＰＤスペクトルは、全体として参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１９／２０６８７１号に記載された通り得られてよい。

一実施形態において、結晶性一ナトリウム一水和物塩は、全体として参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１９／２０６８７１号に記載される通りである。一実施形態において、結晶性一ナトリウム一水和物塩は、全体として参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１９／２０６８７１号に記載される多形体を有する。一実施形態において、結晶性一ナトリウム一水和物塩は、全体として参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１９／２０６８７１号に記載される方法に従って調製される。

典型的には、本発明の第一の態様の任意の実施形態により、処置または予防は、化合物またはその塩を患者に投与することを含む。患者は、任意のヒトまたは他の動物であってよい。典型的には患者は、哺乳動物、より典型的にはヒトまたはウシ、ブタ、ラム、ヒツジ、ヤギ、ウマ、ネコ、イヌ、ウサギ、マウスなどの家畜哺乳動物である。最も典型的には患者は、ヒトである。

本発明の第二の態様において、医薬的に許容できる賦形剤と、本発明の第一の態様の化合物または塩とを含む医薬組成物が提供される。一実施形態において、医薬組成物は、経口投与に適する。

本発明の第三の態様において、それを必要とする患者における自己炎症性疾患の処置または予防のための方法であって、式（Ｉ）：

の化合物またはその医薬的に許容できる塩の治療的または予防的に効果的な量を、それを必要とする患者に投与することを含む、方法が提供される。

一実施形態において、処置または予防は、炎症の処置または予防を含む。典型的には炎症の処置または予防は、ＮＬＲＰ３阻害を介して実現される。

一実施形態において、化合物または塩は、一ナトリウム塩などの、ナトリウム塩である。一実施形態において、化合物または塩は、一水和物である。一実施形態において、化合物または塩は、結晶性である。一実施形態において、化合物または塩は、結晶性一ナトリウム一水和物塩である。一実施形態において、結晶性一ナトリウム一水和物塩は、４．３°２θ、８．７°２θ、および２０．６°２θ（全て±０．２°２θ）にピークを含むＸＲＰＤスペクトルを有する。一実施形態において、結晶性一ナトリウム一水和物塩は、ＸＲＰＤスペクトルを有し、その中の１０個の最も強いピークは、４．３°２θ、６．２°２θ、６．７°２θ、７．３°２θ、８．７°２θ、９．０°２θ、１２．１°２θ、１５．８°２θ、１６．５°２θ、１８．０°２θ、１８．１°２θ、２０．６°２θ、２１．６°２θ、および２４．５°２θ（全て±０．２°２θ）から選択される２θ値を有する５個以上のピークを含む。ＸＲＰＤスペクトルは、全体として参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１９／２０６８７１号に記載された通り得られてもよい。

本発明の第三の態様の任意の実施形態により、患者は、任意のヒトまたは他の動物であってよい。典型的には患者は、哺乳動物、より典型的にはヒトまたはウシ、ブタ、ラム、ヒツジ、ヤギ、ウマ、ネコ、イヌ、ウサギ、マウスなどの家畜哺乳動物である。最も典型的には患者は、ヒトである。

実験

図１Ａは、実施例１のマックル・ウェルズマウスの生存率を示し、図１Ｂは、体重増加を示す。図１Ａは、実施例１のマックル・ウェルズマウスの生存率を示し、図１Ｂは、体重増加を示す。３時間の化合物（Ｉ）の存在下でのＬＰＳでプライミングされた（１時間）ＣＡＰＳ患者ＰＢＭＣの上清中のＥＬＩＳＡによるＩＬ－１β定量。ｎ＝１９名の患者。データは、平均およびＳＥＭを表す。一元配置分散分析と、それに続くダネット多重比較検定により、ｎｓ＝有意でない、^＊Ｐ＜０．０５、^＊＊Ｐ＜０．０１、^＊＊＊Ｐ＜０．００１、および^＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１。３時間の化合物（Ｉ）の存在下でのＬＰＳでプライミングされた（１時間）（Ａ）ＭＷＳ、（Ｂ）ＦＣＡＳおよび（Ｃ）ＮＯＭＩＤ患者ＰＢＭＣの上清中のＥＬＩＳＡによるＩＬ－１β定量。ＭＷＳｎ＝１２、ＦＣＡＳｎ＝６、ＮＯＭＩＤｎ＝１。データは、平均およびＳＥＭを表す。一元配置分散分析と、それに続くダネット多重比較検定により、ｎｓ＝有意でない、^＊Ｐ＜０．０５、^＊＊Ｐ＜０．０１、^＊＊＊Ｐ＜０．００１、および^＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１。３時間の化合物（Ｉ）の存在下でのＬＰＳでプライミングされた（１時間）（Ａ）ＭＷＳ、（Ｂ）ＦＣＡＳおよび（Ｃ）ＮＯＭＩＤ患者ＰＢＭＣの上清中のＥＬＩＳＡによるＩＬ－１β定量。ＭＷＳｎ＝１２、ＦＣＡＳｎ＝６、ＮＯＭＩＤｎ＝１。データは、平均およびＳＥＭを表す。一元配置分散分析と、それに続くダネット多重比較検定により、ｎｓ＝有意でない、^＊Ｐ＜０．０５、^＊＊Ｐ＜０．０１、^＊＊＊Ｐ＜０．００１、および^＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１。３時間の化合物（Ｉ）の存在下でのＬＰＳでプライミングされた（１時間）（Ａ）ＭＷＳ、（Ｂ）ＦＣＡＳおよび（Ｃ）ＮＯＭＩＤ患者ＰＢＭＣの上清中のＥＬＩＳＡによるＩＬ－１β定量。ＭＷＳｎ＝１２、ＦＣＡＳｎ＝６、ＮＯＭＩＤｎ＝１。データは、平均およびＳＥＭを表す。一元配置分散分析と、それに続くダネット多重比較検定により、ｎｓ＝有意でない、^＊Ｐ＜０．０５、^＊＊Ｐ＜０．０１、^＊＊＊Ｐ＜０．００１、および^＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１。３時間の化合物（Ｉ）の存在下でのＬＰＳでプライミングされた（１時間）シュニッツラー症候群患者ＰＢＭＣの上清中のＥＬＩＳＡによるＩＬ－１β定量。ｎ＝３。データは、平均およびＳＥＭを表す。ｎｓ＝有意でない。図５Ａは、実施例３の臨床尺度の結果を示し、図５Ｂは、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）の結果を示す。図５Ａは、実施例３の臨床尺度の結果を示し、図５Ｂは、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）の結果を示す。

実施例１－マウスでのインビボ
材料と方法
動物倫理
倫理審査による承認を、試験開始前にＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＱｕｅｅｎｓｌａｎｄＡｎｉｍａｌＥｔｈｉｃｓＣｏｍｍｉｔｔｅｅ（ＡＢＳ）から得た。プロトコルは全て、ＮＨＭＲＣ動物福祉ガイドラインに則っている。

ＭＷＳマウスモデルおよび腹腔内注射
マウスにおけるＮＬＲＰ３活性化変異を、少なくとも１０世代の間Ｃ５７ＢＬ／６に戻し交配した。ヘテロ接合体ＭＷＳ関連変異Ｎｌｒｐ３（Ａ３５０ＶｎｅｏＲ）マウスを、ホモ接合体ＬｙｓＭｃｒｅマウス（Ｂ６．１２９Ｐ２－Ｌｙｚ２^{ｔｍ１（ｃｒｅ）Ｉｆｏ}／Ｊ）と交配させた。ＮＬＲＰ３変異体×ＬｙｓＬ－Ｃｒｅの子孫にその後、出生後４日目（Ｐ４）に開始して２日ごとに、生理食塩水（ビヒクル）、ＭＣＣ９５０（３ｍｇ／ｋｇ）、または式（Ｉ）の化合物（３ｍｇ／ｋｇ）のいずれかを腹腔内注射した。可能ならば、同腹子の生理食塩水を注射されたマウスを、モデルの一貫性を確保するために各薬物処置実験と同時に含めた。各マウスの重量を、毎日記録し、投薬容量を、適宜調整し、死亡または福利的安楽死（ｗｅｌｆａｒｅｅｕｔｈａｎａｓｉａｓ）を、記録した。２２日目に依存として生存していたマウスを全て、安楽死させ、生存曲線を作成する目的で生存と記録した。

結果
図１Ａでは、予測通り、処置を受けていない対照Ａ３５０Ｖマウス（ｎ＝１３）（生理食塩水対照）の１００％が、１２日以内に死に至った。ＮＬＲＰ３の選択的阻害剤ＭＣＣ９５０（ＮＬＲＰ３の生物学的作用を試験する広範囲の科学団体で用いられる市販のツール化合物）の３ｍｇ／ｋｇで処置されたマウス（ｎ＝１４）は、Ａ３５０Ｖマウスの生存率改善をもたらした。この例では、約３０％のマウスが、２２日目まで生存した。しかし、３ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ）の化合物での新生仔マウスの処置（ｎ＝１１）は、完全な保護を与え、動物の１００％が、２２日目の試験終了時まで生存した。

健康状態の全般的改善はさらに、動物の体重増加により示され（図１Ｂ）、これは生存曲線で認められた傾向と酷似していた。式（Ｉ）の化合物により与えられた保護は、この群が経時的に最も多くの体重を着実に得たことにつながった。

治癒的処置の標準であるリロナセプトを上回る、このモデルにおける式（Ｉ）の化合物の優越性が、さらに実証される。Ｂｒｙｄｇｅｓら（Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，３０：８７５－８８７，２００９）により発表された試験では、出生後１～２日目に開始して１日おきにリロナセプトの皮下注射マウス形態であるｍＩＬ－１Ｔｒａｐで処置されたＮｌｒｐ３Ａ３５０Ｖ／＋／ＣｒｅＬマウスは、動物の１００％が約１７日目までに死に至った（Ｂｒｙｄｇｅｓｅｔａｌ．，２００９）。ヒトに典型的に投与される用量の最大６０倍の用量であるにもかかわらず、これは、処置を受けなかった対照マウス（全ての動物が約１４日目までに死に至った）より３日の生存延長しかもたらさなかった。

実施例２－ヒトでのエクスビボ
概要：サイトカイン放出の阻害に及ぼす式（Ｉ）の化合物のエクスビボ活性を、ＣＡＰＳおよびシュニッツラー症候群患者のＰＢＭＣで決定した。式（Ｉ）の化合物によるＩＬ－１β産生の阻害を、ＣＡＰＳ患者試料１９例およびシュニッツラー症候群患者試料３例において決定した。

プロトコル
血液の回集
全血４５ｍｌを、成人患者からリチウムヘパリン管（ＧｒｅｉｎｅｒＶＡＣＵＥＴＴＥ（登録商標）ＬＨＬｉｔｈｉｕｍＨｅｐａｒｉｎ）に収集し、患者の年齢および体重に適正な容量を、小児患者から収集した。献血に続き、血液試料を、室温で維持し、ＰＢＭＣを、献血の９０分以内に全血から単離した。

ＰＢＭＣ単離手順
１．血液を、収集試験管から５０ｍｌ試験管中にデカンテーションし、ＰＢＳで１：１希釈した。
２．２０ｍｌの希釈された血液を、Ｌｙｍｐｈｏｐｒｅｐ（商標）（ＳＴＥＭＣＥＬＬＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）１５ｍｌの上に層状に載せた。
３．試料を、４００ｇで２０分間、ブレーキＯＦＦで遠心分離した。
４．５ｍＬのＰＢＳ／血清層を、取り出し、ＥＬＩＳＡ用に－８０℃で貯蔵した。
５．残りのＰＢＳ／血清層の大部分を、取り出し廃棄し、約２ｍlのＰＢＳ／血清を残した。
６．ＰＢＭＣ層を、パスツールピペットを用いて取り出し、ＰＢＳで容量５０ｍｌに希釈した。
７．希釈されたＰＢＭＣ層を、３００ｇで１０分間、ブレーキＯＮで遠心分離した。
８．上清を、廃棄し、ペレットを、ＰＢＳ５０ｍｌ中に再懸濁した。
９．再懸濁したペレットを、２００ｇで１０分間、ブレーキＯＮで遠心分離して、血小板を取り出した。
１０．ＰＢＭＣを含有するペレットを、１０ｍｌの無血清ＲＰＭＩ（＋Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐ）の培地中に再懸濁した。
１１．細胞を、カウントした。血液４５ｍｌからの通常の採取量＝ＰＢＭＣ３０００万～８０００万個。
１２．細胞を、無血清ＲＰＭＩ（＋Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐ）中で１２ウェルプレートにおいて２×１０^６細胞／ｍｌで播種した。
１３．細胞を、実験の開始前に３７℃で２時間インキュベートした。

ＥＬＩＳＡによるタンパク質分析のためのＰＢＭＣアッセイ
１．１μｇ／ｍＬＬＰＳを、各ウェルに添加し、細胞を、３７℃で１時間インキュベートした。
２．培地を、無血清ＲＰＭＩ（＋Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐ）に交換した。
３．式（Ｉ）の化合物を、５０ｎＭまたは５００ｎＭで添加し、細胞を、３７℃で３時間インキュベートした。
４．上清を、採取し、ＥＬＩＳＡによるＩＬ－１β定量まで－８０℃で貯蔵した。

ＥＬＩＳＡアッセイによるＩＬ－１βの測定
実験の終了時に、上清を、製造業者の標準的手順に従いＥＬＩＳＡ（カタログ番号ＤＬＢ５０、Ｒ＆Ｄ）によるＩＬ－１βの定量のために、収集した。同日に分析されなかった試料を、－８０℃で保持した。

結果
式（Ｉ）の化合物のデータは、エクスビボで刺激されたＰＢＭＣから提供される。データは、式（Ｉ）の化合物が活性ＮＬＲＰ３介在性疾患の患者において異常なＩＬ－１β産生をエクスビボで効果的に遮断し得る証拠を提供する。式（Ｉ）の化合物は、ＭＷＳ、ＦＣＡＳおよびＮＯＭＩＤ患者のＰＢＭＣにおいてＩＬ－１β産生を阻害するよう作用した（図２および３）。式（Ｉ）の化合物はまた、シュニッツラー症候群患者のＰＢＭＣにおいてＩＬ－１β産生の阻害の傾向を示した（図４）。

実施例３－ヒトでのインビボ
７０歳の男性ＣＡＰＳ患者を、化合物（Ｉ）で処置した。彼は、２０１０年にＣＡＰＳと診断された。彼の典型的症状は、発疹、発熱、疲労感、重度難聴、結膜炎、疼痛、および関節硬直であった。彼は、２０１０年からアナキンラで処置されており、それ以来ほとんど正常なＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）を有した。彼は、ＮＬＲＰ３の変異Ａｒｇ２６０Ｔｒｐを有することが見出された。彼は、子供３名および孫２名を有し、全員がＣＡＰＳに罹患している。

アナキンラの中止とそれに続くフレアの後、患者を、３．３ｍｇ／ｋｇ／用量で１日２回７日間経口的に処置した。処置は、忍容性が良好であった。患者は、９日後にアナキンラを再開した。

臨床尺度を、全３２ポイントまでの合計であるリッカート尺度（０＝なし、１＝極軽度、２＝軽度、３＝中等度、４＝重度）を利用して、皮膚疾患、関節痛、筋肉痛、頭痛／偏頭痛、結膜炎、疲労感および他の症状の連日の医師評定により記録した。臨床尺度は処置の２日以内に改善したことが、見出された（図５Ａ）。

Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）レベルを、測定した。ＣＲＰレベルは処置の２日以内に低減したことが、見出された（図５Ｂ）。

Claims

自己炎症性疾患の処置または予防における使用のための、式（Ｉ）：

の化合物またはその医薬的に許容できる塩。
前記自己炎症性疾患が、クリオピリン関連周期熱症候群（ＣＡＰＳ）である、請求項１に記載の使用のための化合物または塩。
前記クリオピリン関連周期熱症候群が、マックル・ウェルズ症候群（ＭＷＳ）である、請求項２に記載の使用のための化合物または塩。
前記クリオピリン関連周期熱症候群が、家族性寒冷自己炎症性症候群（ＦＣＡＳ）である、請求項２に記載の使用のための化合物または塩。
前記クリオピリン関連周期熱症候群が、新生児期発症多臓器系炎症性疾患（ＮＯＭＩＤ）である、請求項２に記載の使用のための化合物または塩。
前記自己炎症性疾患が、シュニッツラー症候群である、請求項１に記載の使用のための化合物または塩。
前記自己炎症性疾患が、腫瘍壊死因子受容体関連周期性症候群（ＴＲＡＰＳ）、高免疫グロブリンＤ症候群（ＨＩＤＳ）／メバロン酸キナーゼ欠損症（ＭＫＤ）、家族性地中海熱（ＦＭＦ）、ベーチェット病、壊疽性膿皮症、全身型若年性特発性関節炎（ｓＪＩＡ）、または化膿性汗腺炎である、請求項１に記載の使用のための化合物または塩。
前記処置または予防が、炎症の処置または予防を含む、いずれかの前記請求項に記載の使用のための化合物または塩。
前記処置または予防が、前記化合物または前記その塩の経口投与を含む、いずれかの前記請求項に記載の使用のための化合物または塩。
前記化合物または塩が、ナトリウム塩である、いずれかの前記請求項に記載の使用のための化合物または塩。
前記化合物または塩が、一ナトリウム塩である、いずれかの前記請求項に記載の使用のための化合物または塩。
前記化合物または塩が、一水和物である、いずれかの前記請求項に記載の使用のための化合物または塩。
前記化合物または塩が、結晶性である、いずれかの前記請求項に記載の使用のための化合物または塩。
前記化合物または塩が、結晶性一ナトリウム一水和物塩である、任意の前記請求項に記載の使用のための化合物または塩。
４．３°２θ、８．７°２θ、および２０．６°２θ（全て±０．２°２θ）にピークを含むＸＲＰＤスペクトルを有する、請求項１４に記載の使用のための化合物または塩。
ＸＲＰＤスペクトルを有しその中の１０個の最も強いピークが４．３°２θ、６．２°２θ、６．７°２θ、７．３°２θ、８．７°２θ、９．０°２θ、１２．１°２θ、１５．８°２θ、１６．５°２θ、１８．０°２θ、１８．１°２θ、２０．６°２θ、２１．６°２θ、および２４．５°２θ（全て±０．２°２θ）から選択される２θ値を有する５個以上のピークを含む、請求項１４または１５に記載の使用のための化合物または塩。
医薬的に許容できる賦形剤といずれかの前記請求項に記載の使用のための化合物または塩とを含む医薬組成物。
経口投与に適する、請求項１７に記載の医薬組成物。
それを必要とする患者における自己炎症性疾患の処置または予防のための方法であって、式（Ｉ）：

の化合物またはその医薬的に許容できる塩の治療的または予防的に効果的な量を前記それを必要とする患者に投与することを含む、方法。
前記自己炎症性疾患が、クリオピリン関連周期熱症候群（ＣＡＰＳ）である、請求項１９に記載の方法。
前記クリオピリン関連周期熱症候群が、マックル・ウェルズ症候群（ＭＷＳ）である、請求項２０に記載の方法。
前記クリオピリン関連周期熱症候群が、家族性寒冷自己炎症性症候群（ＦＣＡＳ）である、請求項２０に記載の方法。
前記クリオピリン関連周期熱症候群が、新生児期発症多臓器系炎症性疾患（ＮＯＭＩＤ）である、請求項２０に記載の方法。
前記自己炎症性疾患が、シュニッツラー症候群である、請求項１９に記載の方法。
前記自己炎症性疾患が、腫瘍壊死因子受容体関連周期性症候群（ＴＲＡＰＳ）、高免疫グロブリンＤ症候群（ＨＩＤＳ）／メバロン酸キナーゼ欠損症（ＭＫＤ）、家族性地中海熱（ＦＭＦ）、ベーチェット病、壊疽性膿皮症、全身型若年性特発性関節炎（ｓＪＩＡ）、または化膿性汗腺炎である、請求項１９に記載の方法。
前記処置または予防が、炎症の処置または予防を含む、請求項１９～２５のいずれか１項に記載の方法。
前記処置または予防が、前記化合物または前記その塩の経口投与を含む、請求項１９～２６のいずれか１項に記載の方法。
前記化合物または塩が、ナトリウム塩である、請求項１９～２７のいずれか１項に記載の方法。
前記化合物または塩が、一ナトリウム塩である、請求項１９～２８のいずれか１項に記載の方法。
前記化合物または塩が、一水和物である、請求項１９～２９のいずれか１項に記載の方法。
前記化合物または塩が、結晶性である、請求項１９～３０のいずれか１項に記載の方法。
前記化合物または塩が、結晶性一ナトリウム一水和物塩である、請求項１９～３１のいずれか１項に記載の方法。
前記結晶性一ナトリウム一水和物塩が、４．３°２θ、８．７°２θ、および２０．６°２θ（全て±０．２°２θ）にピークを含むＸＲＰＤスペクトルを有する、請求項３２に記載の方法。
前記結晶性一ナトリウム一水和物塩が、ＸＲＰＤスペクトルを有し、その中の１０個の最も強いピークが４．３°２θ、６．２°２θ、６．７°２θ、７．３°２θ、８．７°２θ、９．０°２θ、１２．１°２θ、１５．８°２θ、１６．５°２θ、１８．０°２θ、１８．１°２θ、２０．６°２θ、２１．６°２θ、および２４．５°２θ（全て±０．２°２θ）から選択される２θ値を有する５個以上のピークを含む、請求項３２または３３に記載の方法。