JP2022544600A

JP2022544600A - ナタマイシン及び少なくとも１種の殺虫剤を含む抗真菌組成物

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Publication number: JP2022544600A
Application number: JP2022509656A
Authority: JP
Inventors: デルクリーケン、ヴィルヘルムスマリアファン
Original assignee: セラディスパテントビー．ブイ．
Priority date: 2019-08-13
Filing date: 2020-08-13
Publication date: 2022-10-19
Anticipated expiration: 2040-08-13
Also published as: JP7699576B2; CN114286622A; WO2021029770A1; BR112022002508A2; EP4013226A1; US20220256856A1

Abstract

本発明は、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する少なくとも１種の殺虫剤を含む組成物に関する。本発明はさらに、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する少なくとも１種の殺虫剤を含む上記組成物を、好ましくは植物又は植物部分を保護するため、農作植物の生長及び／又は収量を向上するため、並びに土壌及び／又は成長基質を保護するために、使用する方法に関する。

Description

本発明は、植物及び植物部分の真菌性疾患（fungal disease）をコントロールし、植物の発育及び収量を改善するための組成物に関する。

植物は、世界中の作物に甚大な損失を与える様々な植物病原性真菌により攻撃を受け得る。また、真菌の増殖は、栄養分の損失、異臭の形成、及び組織の破壊を引き起こし、加工後の品質低下を招くことがある。多くの場合、真菌感染症は圃場で発生し、その後、条件が好ましい場合には保管中に菌が増殖し、例えば、穀物、種子、球根、種芋、果物、及び野菜等のポストハーベストロスや、朝食用シリアル、ジュース、又はカットフルーツ等の加工食品におけるカビ発生が生じる。

土壌中、（種子、球根及び苗等の農作物部分上の）圃場、（例えば、穀物、野菜及び果物上の）収穫後の植物病原性真菌(Phytopathogenic fungi)は、一般的に殺菌剤(fungicides)、特に合成殺菌剤によって防除されている。しかし、多くの殺菌剤は、繰り返し使用されることにより年を追うごとにその活性を失い、耐性菌が発生してしまう。この現象は、発売されて間もない新しい殺菌剤でも起こっており、例えば、ストロビルリン系殺菌剤に影響を与える点突然変異(point mutation)が関連菌で発生した。より一般的には、アゾール系殺菌剤に対するZymoseptoria triticiの抵抗性の発現のように、病原体集団が徐々に感受性を失うように、抵抗性が徐々に発現する。抵抗性の発達は、常に、処理回数の増加、並びにより多くの量及び／又は２種以上の殺菌剤の散布をもたらすことになる。

現在市販されている殺菌剤の多くは、例えば水源を汚染したり、非標的生物に好ましくない影響を与える等により、自然の生態系を破壊するものとなっている。また、環境汚染だけでなく、人間の健康問題、特に労働者の安全性についても重要な問題となっている。さらに、農産物を消費する際に、有害な殺菌剤が残留基準を超えて高いレベルで残留していることは、深刻な問題である。消費者と政府規制当局の懸念は高まり、ＥＵ、米国、日本及びその他多くの国々で規制が強化されるに至っている。

多くの市販殺菌剤が入手可能であり、広く使用されているにもかかわらず、ほぼ全ての作物及び収穫された農産物に真菌が発生していると結論づけることができる。また、農業分野では、現在使用されている有害な合成殺菌剤に代わる、環境にやさしい代替剤の必要性が高いと結論づけることができる。

何十年もの間、ポリエンマクロライド系抗真菌剤ナタマイシン(natamycin)は、主にチーズ及び乾燥発酵ソーセージ等の食品のカビ発生を防ぐために使用されてきた。ナタマイシンは１９５７年に初めて報告され、ストレプトマイセス属の菌（例えば、Streptomyces natalensis）を用いた発酵によって生産される。現在、この天然抗菌剤(antimicrobial)は、食品添加物として世界中で広く使用されている。

ナタマイシンは、長い間安全に使用されてきた歴史があり、さらに重要なことは、これまで耐性菌が自然界で発見されていない。長年にわたり、多くの農業用途においてナタマイシンを使用する可能性を記述した文献が発表されている。しかし、農業におけるナタマイシンの商業的使用にはほとんど至っていないことが観察される。これは、使用前に常に精製されるナタマイシンの価格が、農業用途、特に圃場での使用には高いという事実によるものと思われる。

農業における真菌対策及び経済的損失低減のための自然な解決策、特に農業における商業利用を可能し得る、ナタマイシンの効能の向上が求められている。

本発明は、ナタマイシンと、昆虫及び線虫（nematode）の神経系及び／又は筋肉組織に干渉する少なくとも１種の殺虫剤(insecticide)と、を含む抗真菌組成物を提供する。上記少なくとも１種の殺虫剤は、文献"IRAC Mode of Action Classification Scheme" (June 2019; version 9.3)に記載のサブグループ２、３、４、６及び／又は２８に属するものであることが好ましい。

しかし、ジョウゴグモ(funnel spider)ペプチドと呼ばれる生物殺虫剤、又は「ＳＰＥＡＲ生物殺虫剤」はその例外となり得る。このペプチドは、ニコチン性アセチルコリン受容体を標的とすると考えられており、最近、新規な「神経・筋肉」作用様式を有することが発見された。このジョウゴグモペプチドは、昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤として含まれる可能性のある、新規なクラス３２に挿入された。

昆虫の神経又は筋肉の作用を撹乱する殺虫剤は、病原性菌類に対するナタマイシンの効力を増強することがわかった。このナタマイシンの効力の増強は、成長調節、昆虫中腸の微生物攪乱、エネルギー代謝（呼吸）、又は不明若しくは非特異的な作用機序等のその他の作用機序を有する殺虫剤と併用した場合にはこれまでは見つかっていなかった（"IRAC Mode of Action Classification Scheme" (June 2019; version 9.3)参照）。

ナタマイシン等のポリエン系殺菌剤は、細胞膜、特に真菌膜ステロールと相互作用することが報告されている。ナタマイシンの作用機序は他のポリエン系殺菌剤とは異なることが報告されているが、ナタマイシンが真菌の主要なステロールであるエルゴステロールと相互作用し、それによって膜流動性及び膜結合酵素の機能を調節するという報告もある(te Welscher et al., 2008. J Biol Chem 283: 6393-6401)。エルゴステロールは、真菌の細胞膜において最も豊富なステロールであり、膜の透過性と流動性を調節する（Douglas and Konopka, 2014. Annu Rev Microbiol 68: 377-393）。

理論に縛られることはないが、昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤のグループによるナタマイシンの活性の著しい刺激は、真菌又は真菌の芽胞において、これらの殺虫剤が細胞膜及び／又は受容体に影響を与え、その細胞膜及び／又は受容体がナタマイシンに対してより脆弱になるというメカニズムに基づいていると考えられる。これらの脆弱な膜においては、ナタマイシンは細胞膜のエルゴステロールにより効果的に干渉することが可能である。その結果、菌類による胞子及び菌糸の発生は、ナタマイシンによってより効果的に阻害される。

プロピコナゾール(propiconazole)等の「トリアゾール」は、エルゴステロールの合成を阻害することが指摘されている。そのため、「トリアゾール系殺菌剤」は細胞膜の成分とは直接干渉しないため、トリアゾール化合物が、サブグループ２、３、４、６及び／又は２８の殺虫剤との相乗効果を発揮する可能性は低い。

本発明に係る抗真菌組成物は、好ましくは、１％～９８％（ｗ／ｗ）のナタマイシン（好ましくは６％～６０％（ｗ／ｗ）のナタマイシン）、及び１％～９９％（ｗ／ｗ）（好ましくは５～５０％（ｗ／ｗ））の上記少なくとも１種の殺虫剤を含む。サブグループ２、３、４、６及び／又は２８の上記少なくとも１種の殺虫剤に対するナタマイシンの比率は、１：１～１：５０００（ｗ／ｗ）であることが好ましい。

本発明に係る好ましい抗真菌組成物は、ナタマイシンと、フィプロニル(fipronil)、λ－シハロトリン(lambda-cyhalothrin)、アセタミプリド(acetamiprid)、クロチアニジン(clothianidin)、イミダクロプリド(imidacloprid)、チアクロプリド(thiacloprid)、チアメトキサム(thiamethoxam)、アバメクチン(abamectin)及びクロラントラニリプロール(chlorantraniliprole)からなる少なくとも１種の殺虫剤と、を含む。本発明に係るさらに好ましい抗真菌組成物は、フィプロニル、λ－シハロトリン、アセタミプリド、クロチアニジン、イミダクロプリド、チアクロプリド、チアメトキサム、アバメクチン及びクロラントラニリプロールからの少なくとも２種の殺虫剤を含む。

本発明に係る抗真菌組成物は、農業的に許容可能な担体をさらに含んでもよい。

本発明に係る抗真菌組成物は、水性又は油性組成物であることが好ましい。

一実施形態において、本発明に係る抗真菌組成物におけるナタマイシンは、発酵生物によってバイオマスを発酵させることによって製造される。

本発明に係る抗真菌組成物におけるナタマイシンは、好ましくは、例えば粉砕によって、０．５～３μｍの平均粒子径（体積粒子径）に分画される。

本発明に係る抗真菌組成物は、好ましくは、相対量が１：２～６０：１（ｗ／ｗ）のポリアニオン（リグニン化合物等）とポリカチオン（キトサン又はポリ－アリルアミン等）との不溶性高分子電解質複合体をさらに含有する。

本発明はさらに、本発明に係る抗真菌組成物を準備すること、及び上記組成物を農作植物又は植物部分に付与することを含む、農作植物又は植物部分を保護する方法を提供する。好ましい植物部分は、種子、球根、果実又は野菜である。

本発明はさらに、本発明に係る組成物を準備すること、及び植物を上記組成物と接触させることを含む、農作植物の生長及び／又は収量を向上する方法を提供する。

本発明はさらに、土壌及び／又は成長基質(growth substrate)を保護する方法であって、上記土壌及び／又は成長基質に本発明に係る組成物を付与することを含む、上記方法を提供する。好ましい成長基質は、キノコ成長基質（mushroom growth substrate）である。

本発明に係る好ましい方法では、抗真菌組成物は、未希釈で、又は水溶液若しくは油で最大１０^６倍に希釈して使用される。抗真菌組成物は、未希釈で、又は組成物を種子に付与する前に水溶液で最大１００倍に希釈して使用してもよい。抗真菌組成物は、植物、植物部分、土壌及び／又は成長基質に付与する前に、水溶液又は油中で好ましくは１０～１０^６倍に希釈されてもよい。

本発明はさらに、真菌から植物、植物部分、土壌及び／又は成長基質を保護するための、本発明に係る抗真菌組成物の使用を提供する。

＜定義＞
本明細書で使用する場合、「懸濁液濃縮物」という用語は、使用前に水で希釈することを意図した、液体中の固体粒子の懸濁液を意味する。

本明細書で使用する場合、「可溶性液体」という用語は、使用前に水で希釈することを意図した、液体中の溶液を意味する。上記液体は、水性液体又は非水性液体、例えば、キシレン若しくはケロシン等の石油系溶媒であってもよい。

本明細書で使用する場合、「サスポエマルジョン(suspo emulsion)」という用語は、使用前に水で希釈することを意図した、エマルジョンの形態で油相と組み合わせた水中の固体粒子の懸濁液を意味する。

本明細書で使用する場合、「分散液濃縮物」という用語は、使用前に水で希釈することを意図した、液体中の固形粒子の分散液を意味する。

本明細書で使用する場合、「水分散性顆粒」という用語は、懸濁液又は溶液等の分散液を形成する水に分散可能である顆粒形態の製剤を意味する。

本明細書で使用する場合、「水和剤(wettable powder)」という用語は、使用前に水又は別の液体と混合することを意図した粉末製剤を意味する。

本明細書で使用する場合、「水スラリー化紛(water slurriable powder)」という用語は、使用前に水中でのスラリーとされる粉末製剤を意味する。

本明細書で使用する場合、「界面活性剤」という用語は、イオン性又は非イオン性の界面活性剤を意味する。界面活性剤の例としては、アルキル末端キャップ化エトキシレートグリコール、アルキル末端キャップ化アルキルブロックアルコキシレートグリコール、ジアルキルスルホサクシネート、リン酸エステル、アルキルスルホネート、アルキルアリールスルホネート、トリステリルフェノールアルコキシレート、天然若しくは合成脂肪酸アルコキシレート、天然若しくは合成の脂肪アルコールアルコキシレート、アルコキシル化アルコール（ｎ－ブチルアルコールポリグリコールエーテル等）、ブロックコポリマー（エチレンオキシド－プロピレンオキシドブロックコポリマー及びエチレンオキシド－ブチレンオキシドブロックコポリマー等）、又はそれらの組合せが挙げられる。

本明細書で使用する場合、「生物活性の向上」という用語は、活性成分の治癒、予防及び／又は持続性能の向上を意味する。

本明細書で使用する場合、「植物部分(plant part)」という用語は、単一細胞、細胞塊、及び植物組織（組織培養物を含む）を指す。植物部分の例としては、限定されないものの、花粉、子房、葉、胚、根、根端、葯、花、果実、シュート、穂木、台木、種子、プロトプラスト(protoplast)、及びカルス(calli)等が挙げられ、好ましくは種子が挙げられる。

＜抗真菌組成物＞
本発明は、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経性及び／又は筋肉系に干渉する少なくとも１種の差駐在を含む抗真菌組成物を提供する。上記少なくとも１種の殺虫剤は、サブグループ２（ＧＡＢＡゲート型塩化物チャネルブロッカー(GABA-gated chloride channel blocker)）、サブグループ３（ナトリウムチャネル調節因子）、サブグループ４（ニコチン性アセチルコリン受容体の競合調節因子）、サブグループ６（グルタミン酸ゲート型塩化物チャネルのアロステリック調節因子）及び／又はサブグループ２８（ライノジン受容体調節因子）であることが好ましく、これらのサブグループは文献"IRAC Mode of Action Classification Scheme" (June 2019; version 9.3)に記載されている。上記殺虫剤の１つ又は複数とナタマイシンとの組み合わせにより、驚くべきことに、上記ナタマイシンの生物活性、すなわちナタマイシンの殺菌活性が向上することが判明した。

好ましい殺虫剤は、ＧＡＢＡゲート型塩化物チャネルブロッカーである。ＧＡＢＡゲート型塩化物チャネルブロッカーは、昆虫の神経系に作用すると考えられている。好ましいＧＡＢＡゲート型塩化物チャネルブロッカーは、シクロジエン系、有機塩素系及び／又はフェニルピラゾール系である。好ましいＧＡＢＡゲート型塩化物チャネルブロッカーは、フィプロニル（（±）－５－アミノ－１－（２，６－ジクロロ－α，α，α－トリフルオロ－ｐ－トリル）－４－トリフルオロメチル・スルフィニルピラゾール－３－カルボニトリル）である。

好ましい殺虫剤は、ナトリウムチャネル調節因子(sodium channel modulator)である。ナトリウムチャネル調節因子は、昆虫の神経系に作用すると考えられている。好ましいナトリウムチャネル調節因子は、ピレスロイド(pyrethroid)及び／又はピレトリン(pyrethrin)である。好ましいナトリウムチャネル調節因子は、シハロトリン(cyhalothrin)（［シアノ（３－フェノキシフェニル）メチル］－３－［（Ｚ）－２－クロロ－３，３，３－トリフルオロプロペン－１－ニル］－２，２－ジメチルシクロプロパン－１－カルボキシレート）である。好ましくは、λ－シハロトリン（［（Ｒ）－シアノ（３－フェノキシフェニル）メチル］（１Ｓ，３Ｓ）－３－［（Ｚ）－２－クロロ－３，３－トリフルオロプロペン－１－ニル］－２，２－ジメチルシクロプロパン－１－カルボキシレート）である。

好ましい殺虫剤は、ニコチン性アセチルコリン受容体の競合的調節因子である。ニコチン性アセチルコリン受容体競合調節因子は、昆虫の神経系に作用すると考えられている。好ましいニコチン性アセチルコリン受容体競合調節因子は、ネオニコチノイドである。好ましいニコチン性アセチルコリン受容体競合調節剤は、アセタミプリド(acetamiprid)（Ｎ－［（６－クロロピリジン－３－イル）メチル］－Ｎ’－シアノ－Ｎ－メチルエタナミド）、イミダクロプリド(imidacloprid)（Ｎ－［１－［（６－クロロピリジン－３－イル）メチル］－４，５－ジヒドロイミダゾール－２－イル］ニトラミド、チアクロプリド(thiacloprid)（［３－［（６－クロロピリジン－３－イル）メチル］－１，３－チアゾリジン－２－イリデン］シアナミド）、及び／又はチアメトキサム(thiamethoxam)（Ｎ－［３－［（２－クロロ－１，３－チアゾール－５－イル）メチル］－５－メチル－１，３，５－オキサジアジナン－４－イリデン］ニトラミド）である。

好ましい殺虫剤は、グルタミン酸ゲート型塩化物チャネルのアロステリック調節因子である。グルタミン酸ゲート型塩化物チャネルのアロステリック調節因子は、昆虫の神経系に作用すると考えられている。好ましいグルタミン酸ゲート型塩化物チャネルのアロステリック調節因子は、アベルメクチン(avermectin)及び／又はミルベマイシン(milbemycin)である。グルタミン酸ゲート型塩化物チャネルの好ましいアロステリック調節因子は、アバメクチン(abamectin)（（１’Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，４’Ｓ，６Ｓ，８’Ｒ，１０’Ｅ，１２’Ｓ，１３’Ｓ，１４’Ｅ，１６’Ｅ，２０’Ｒ，２１’Ｒ，２４’Ｓ）－２－ブタン－２－イル－２１’,２４’－ジヒドロキシ－１２’－［（２Ｒ,４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－５－［（２Ｓ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－５－ヒドロキシ－４－メトキシ－６－メチロキサン－２－イル］オキシ－４－メトキシ－６－メチロキサン－２－イル］オキシ－３,１１’，１３’，２２’－テトラメチルスピロ［２，３－ジヒドロピラン－６,６’－３,７,１９－トリオキサテトラシクロ［１５．６．１.１４，８.０２０，２４］ペンタコサ－１０,１４,１６,２２－テトラエン］－２’－オン；（１’Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，４’Ｓ，６Ｓ，８’Ｒ，１０’Ｅ，１２’Ｓ，１３’Ｓ，１４’Ｅ，１６’Ｅ，２０’Ｒ，２１’Ｒ，２４’Ｓ）－２１’，２４’－ジヒドロキシ－１２’－［（２Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－５－［（２Ｓ，４Ｓ，５Ｓ, ６Ｓ）－５－ヒドロキシ－４－メトキシ－６－メチロキサン－２－イル］オキシ－４－メトキシ－６－メチロキサン－２－イル］オキシ－３,１１’，１３’，２２’－テトラメチル－２－プロパン－２－イルスピロ［２，３－ジヒドロピラン－６,６’－３,７,１９－トリオキサテトラシクロ［１５.６．１.１４，８.０２０，２４］ペンタコサ－１０,１４,１６,２２－テトラエン］－２’－オン）、エマメクチン安息香酸塩(emamectin benzoate)（［（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，６Ｓ）－６－［（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，６Ｒ）－６－［（１’Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，４’Ｓ，６Ｓ，８’Ｒ，１０’Ｅ，１２’Ｓ，１３’Ｓ，１４’Ｅ,１６’Ｅ，２０’Ｒ，２１’Ｒ，２４’Ｓ）－２－［（２Ｓ）－ブタン－２－イル］－２１’，２４’－ジヒドロキシ－３,１１’，１３’，２２’－テトラメチル－２’－オキソスピロ［２，３－ジヒドロピラン－６,６’－３,７,１９－トリオキサテトラシクロ［１５. ６．１.１４，８. ０２０，２４］ペンタコサ－１０,１４,１６,２２－テトラエン］－１２’－イル］オキシ－４－メトキシ－２－メチロキサン－３－イル］オキシ－４－メトキシ－２－メチロキサン－３－イル］－メチルアザニウム；ベンゾエート）、れぴめくちん(lepimectin)（［（１Ｒ，４Ｓ，５’Ｓ，６Ｒ，６’Ｒ,８Ｒ，１０Ｅ,１２Ｒ，１３Ｓ，１４Ｅ,１６Ｅ，２０Ｒ,２１Ｒ，２４Ｓ）－６’－エチル－２１,２４－ジヒドロキシ－５’，１１，１３，２２－テトラメチル－２－オキソスピロ［３，７，１９－トリオキサテトラシクロ［１５.６．１.１４，８．０２０，２４］ペンタコサ－１０,１４,１６,２２－テトラエン－６,２’－オキサン］－１２－イル］（２Ｚ）－２－メトキシイミノ－２－フェニルアセテート)、及び／又はミルベメクチン(milbemectin)（（１Ｒ，４Ｓ，５’Ｓ，６Ｒ，６’Ｒ,８Ｒ，１０Ｅ,１３Ｒ，１４Ｅ,１６Ｅ，２０Ｒ,２１Ｒ，２４Ｓ）－２１,２４－ジヒドロキシ－５’，６’，１１，１３，２２－ペンタメチルスピロ［３，７，１９－トリオキサテトラシクロ［１５．６.１．１４,８．０２０,２４］ペンタコサ－１０,１４,１６,２２－テトラエン－６,２’－オキサン］－２－オン）である。

好ましい殺虫剤は、リアノジン(ryanodine)受容体調節因子である。リアノジン受容体調節因子は、昆虫の神経系に作用すると考えられている。好ましいリアノジン受容体調節因子は、ジアミドである。好ましいジアミドは、クロラントラニリプロール(chlorantraniliprole)（５－ブロモ－Ｎ－［４－クロロ－２－メチル－６－（メチルカルバモイル）フェニル］－２－（３－クロロピリジン－２－イル）ピラゾール－３－カルボキサミド）である。

本発明の組成物は、１％～９８％（ｗ／ｗ）のナタマイシン、好ましくは６％～６０％（ｗ／ｗ）のナタマイシンを含むことが好ましい。本発明の組成物は、上記少なくとも1種の殺虫剤を１％～９９％（ｗ／ｗ）、好ましくは５～５０％（ｗ／ｗ）含むことが好ましい。本発明の原液組成物は、１％～９８％（ｗ／ｗ）のナタマイシン、好ましくは６％～６０％（ｗ／ｗ）のナタマイシンと、１％～９０％（ｗ／ｗ）、好ましくは５％～５０％（ｗ／ｗ）の上記少なくとも1種の殺虫剤と、を含むことが好ましい。

サブグループ２，３，４，６及び／又は２８（ＩＲＡＣ作用機序分類体系参照）の殺虫剤とナタマイシンの殺菌活性との相乗効果は、広い範囲の殺虫剤濃度において認められる。これは、殺虫剤が菌類の細胞膜のタンパク質に影響を与え、この膜がナタマイシンに対してより脆弱になるためであると考えられる。その結果、胞子及び菌糸の発生がナタマイシンによってより効果的に阻害される。

組成物は、ナタマイシン：殺虫剤の比（ｗ／ｗ）により特徴付けられることが好ましい。殺虫剤はそれ自体でより高い濃度で殺菌活性を持ち始めるため、上記少なくとも1種の殺虫剤の上限範囲を決定することは困難であることに注意が必要である。実験からは、上記殺虫剤の上限範囲が存在しない可能性が示唆されている。実施例では、ナタマイシンの殺菌活性に関する相乗効果が、１：２５００、さらには１：７５２０（ｗ／ｗ）（ナタマイシン：殺虫剤）の比率で観察され得ることを示されている。ナタマイシンとサブグループ２、３、４、６及び／又は２８の殺虫剤との好ましい比率、好ましくはナタマイシンとフィプロニル、λ－シハロトリン、アセタミプリド、クロチアニジン、イミダクロプリド、チアクロプド、チアメトキサム、アバメクチン及びクロラントリプロールから選択される少なくとも1種の殺虫剤との比率は、したがって（ナタマイシン：殺虫剤）１：１（ｗ/ｗ）と１：１０，０００（ｗ／ｗ）であり、例えば、１：２～１：２５０、例えば１：５０～１：１００である。好ましい比率は、１：２、１：３、１：４及び１：５を含む。

種子及び土壌への適用については、上記比率は、好ましくは（ナタマイシン：殺虫剤）１：１～１：１００（ｗ／ｗ）であることは、当業者には理解されよう。この理由は、殺虫剤による保護が胚まで、好ましくは苗の段階まで延長されるように、種子を多量の殺虫剤で処理する必要性があるからである。

本発明の組成物は、例えばＤｙｎｏｍｉｌｌ（登録商標）等のビーズミルを用いて、好ましくは粉砕することにより、分画されていることが好ましい。ナタマイシンの体積基準平均粒子径は、０．２μｍ～１０μｍ、好ましくは０．５μｍ～５μｍ、より好ましくは０．５μｍ～２μｍであることが好ましい。本発明に係る組成物の体積基準平均粒子径を決定する方法は、当業者に公知である。例えば、Hukkanen and Braatz, 2003. Sensors and Actuators B 96: 451-459では、前方光散乱及び超音波消光を含む、組成物の平均粒子径を決定するために使用することができる様々な方法が論じられている。好ましい方法は、例えば、Analysette 22-MicroTec plus レーザー粒子径測定機（Fritsch, Idar-Oberstein, Germany）を用いたレーザー回折分析に基づくものである。

本発明に係る抗真菌性組成物は、細胞物質（cellular matter）を含んでいてもよい。本発明に係る組成物中の上記ナタマイシンは、発酵生物によるバイオマスの発酵によって生産されたものであることが好ましく、組成物中に存在する細胞物質は、上記ナタマイシン生産発酵生物からのものである。上記ナタマイシン産生発酵生物としては、例えば、ストレプトマイセス・ナタレンシス（Streptomyces natalensis）及びストレプトマイセス・ギルヴォスポレウス（Streptomyces gilvosporeus）等が挙げられる。

上記細胞物質は、好ましくは、ナタマイシン産生菌の残骸である化合物、又はナタマイシン産生菌が排泄する化合物を含む。このような化合物の例としては、ナタマイシン生産菌の細胞膜と細胞壁とを含む菌体エンベロープの化合物が挙げられる。このような化合物には、リン脂質及び糖脂質等のリン脂質が含まれ、水酸化ナトリウムの添加等の加水分解により、Ｃ１６～Ｃ１８脂肪酸等の脂肪酸となる。

ストレプトマイセス・ナタレンシス及びストレプトマイセス・ギルヴォスポレウス等の発酵菌によりバイオマスを発酵させてナタマイシンを製造する方法は、当該技術分野において既知である。生産されたナタマイシンをバイオマスのバルクから分離して精製する方法は、当該技術分野において既知である。例えば、バイオマスの崩壊は、生産生物の全ての細胞の溶解及び破壊をもたらす可能性がある。得られたナタマイシンを含むブロスを濾過して濾過ケーキを得てもよく、その後、アルコール（好ましくはメタノール及び／又はエタノール）で処理してバイオマスを崩壊させ、ナタマイシンの少なくとも一部分を溶解させる。必要であれば、ナタマイシンを可溶化するためにｐＨを上昇させてもよい。その後の中和により、ナタマイシンの少なくとも一部が沈殿するであろう。

本発明の組成物は、好ましくは、水性若しくは非水性（好ましくは油性）の、使用前に例えば水又は油等の適切な希釈剤で希釈されてもよい濃縮ストック組成物、又は水性若しくは非水性の即使用可能な組成物である。

本発明の組成物は、土壌処理のために、又は、種子粉衣（seed dressing）又は種子コーティング（seed coating）等の種子処理材、コーティング乳剤（例えば、圃場の果物用又は植物用）、果物（例えば、パイナップル、オレンジ又はリンゴ）に付与されるワックス、圃場の植物（例えば、バナナ）にスプレーして適用されるオイルを調製するために使用することができる。本発明の組成物はまた、農産物の浸漬、噴霧又は浸漬用の組成物を調製するために使用可能な（例えば顆粒剤、粉末及び／又は錠剤等の）濃縮乾燥組成物も含む。

本発明の抗真菌剤組成物は、懸濁液濃縮物（ＳＣ）、水分散性顆粒（ＷＧ）、水和剤（wettable powder）（ＷＰ）、サスポエマルジョン（suspo emulsion）（油性）（ＳＥ）、油分散液（ＯＤ）、分散濃縮物（ＤＣ）、乾燥粉末種子処理組成物（ＤＳ）、水スラリー化粉（water slurriable powder）（ＷＳ）、流動性種子処理組成物（ＦＳ）、水分散性顆粒種子処理組成物（ＷＧ）、サスポエマルジョン（ＳＥ）、又は可溶性液剤（soluble liquid）（ＳＬ）であることが好ましい。

本発明の抗真菌組成物は、参照により本明細書に組み込まれる公開国際特許出願ＷＯ２０１３／１３３７０６号に記載されているようなポリアニオンとポリカチオンとの高分子電解質複合体、又は当技術分野で既知の他のカプセル化技術、例えば本発明の組成物がカプセル化されているリポソーム、脂質構造体又は例えば酵母の空細胞から構成されることが好ましい。

上記高分子電解質複合体は、強い静電結合を形成する相反する電荷を有する高分子電解質（ポリアニオンとポリカチオンと）の複合体であり、上記高分子電解質複合体は、上記高分子電解質複合体である。上記高分子電解質複合体は、不溶性の複合体である。この複合体のみでは抗菌効果はない。高分子電解質複合体は、粘着性を有し、極性部（帯電部）と無極性部を含む。複合体中の芳香族部位は、例えばナタマイシン等の抗菌性化合物と親和性を有する場合がある。高分子電解質複合体の粘着性との組み合わせにより、農業、園芸、キノコ栽培に使用するために、抗菌化合物が最適に土壌に沈着・付着されることになる。

高分子電解質複合体は、リグニン化合物（例えば、リグノスルホン酸、フミン酸、コンドロイチン硫酸、及びポリ（アクリル酸））等のポリアニオンと、キトサン、ε－ポリ（Ｌ）リジン、及びポリ－アリルアミン等のポリカチオンからなり、その相対量は１：２～６０：１（ｗ／ｗ）、より好ましくは１：１～５０：１、より好ましくは２：１～３０：１、例えば、約２：１、約５：１、約１０：１、約１５：１、約２０：１、約２５：１、及び約３０：１（ｗ／ｗ）である。高分子電解質複合体中のポリアニオン（好ましくはリグニン化合物）とポリカチオン（好ましくはキトサン）の相対量は、約５：１（ｗ／ｗ）であることが最も好ましい。

高分子電解質複合体は、本発明の組成物中に５～８００ｇ／ｌの濃度、より好ましくは５０～５００ｇ／ｌの濃度、最も好ましくは７５～２５０ｇ／ｌの濃度で存在することが好ましい。

本発明に係る抗真菌組成物は、1種又は複数種の農学的に許容可能な担体をさらに含んでいてもよい。上記農学的に許容可能な担体は、安定剤、湿潤剤、分散剤、凍結防止剤、消泡剤及び／又は増粘剤であるか、又はそれを含むことが好ましい。少量の1種又は複数種の農学的に許容可能な担体の添加により、本発明に係る組成物の安定性及び／又は効力等のパラメータが影響を受けること、好ましくは改善することが可能である。少量の1種以上の農学的に許容可能な担体の添加は、本発明に係る組成物の安定性、効能及び／又は耐雨性を増強させることが好ましい。

安定剤が存在する場合、クエン酸、酢酸等のカルボン酸、及び／又はドデシルベンゼンスルホン酸、オルトリン酸ドデシルベンゼンスルホン酸、及びそれらの好適な塩から選択されることが好ましい。本発明の組成物はまた、２種以上の異なる安定剤を含んでいてもよい。安定剤は、０％から最大１０％（ｗ／ｖ）、より好ましくは０．０１％から最大５％（ｗ／ｖ）、より好ましくは０．０２％から最大１％（ｗ／ｖ）、より好ましくは約０．０５％（ｗ/ｖ）の量で存在することが好ましい。

湿潤剤は、好ましくは、ジオクチルスクシネート、ポリオキシエチレン／ポリプロピレン、及びトリステアリルスルホネート／ホスフェートから選択されることが好ましい。本発明の組成物はまた、２種以上の異なる湿潤剤を含んでいてもよい。湿潤剤は、０％から最大１０％（ｗ／ｖ）、より好ましくは０．０１％から最大５％（ｗ／ｖ）、より好ましくは０．０２％から最大１％（ｗ／ｖ）、より好ましくは約０．０５％（ｗ／ｖ）の量で存在することが好ましい。

分散剤が存在する場合、Ｍｏｒｗｅｔ（登録商標）Ｄ４２５、リグニンスルホン酸塩、アルキルポリサッカライド、スチレンアクリルポリマー、アクリルコポリマー、及びエトキシル化トリスチレンフェノールリン酸（例えばポリエトキシル化リン酸（polyethoxylated fosforic acid））から選択されることが好ましい。本発明の組成物はまた、２種以上の異なる分散剤を含んでいてもよい。分散剤は、０％から最大１０％（ｗ／ｖ）、より好ましくは０．０１％から最大５％（ｗ／ｖ）、より好ましくは０．０２％から最大１％（ｗ／ｖ）、より好ましくは約０．０５％（ｗ／ｖ）の量で存在することが好ましい。

凍結防止剤は、存在する場合、グリセリン、エチレングリコール、ヘキシレングリコール、及びプロピレングリコールから選択されることが好ましい。本発明の組成物はまた、２種以上の異なる凍結防止剤を含んでいてもよい。凍結防止剤は、０％から最大１０％（ｗ／ｖ）、より好ましくは０．０１％から最大５％（ｗ／ｖ）、より好ましくは０．０２％から最大１％（ｗ／ｖ）、より好ましくは約０．０５％（ｗ／ｖ）の量で存在することが好ましい。

消泡剤は、存在する場合、ポリメチルシロキサン、ポリジメチルシロキサン、シメチコンオクタノール、及びシリコーンオイルから選択されることが好ましい。本発明の組成物はまた、２種以上の異なる発泡防止剤を含んでいてもよい。消泡剤は、０％から最大１０％（ｗ／ｖ）、より好ましくは０．０５％から最大５％（ｗ／ｖ）、より好ましくは０．１％から最大１％（ｗ／ｖ）、より好ましくは約０．０５％（ｗ／ｖ）の量で存在することが好ましい。

増粘剤が存在する場合、寒天、アルギン酸、アルギン酸塩、カラギーナン、ゲランガム、キサンタンガム、スクシノグリカンガム（succinoglycan gum）、グアーガム、アセチル化アジピン酸架橋デンプン（acetylated distarch adipate）、アセチル化酸化デンプン（acetylated oxidised starch）、アラビノガラクタン（arabinogalactan）、エチルセルロース、メチルセルロース、ローカストビーンガム（locust bean gum）、オクテニルコハク酸デンプンナトリウム、及びクエン酸トリエチルから選択することが好ましい。また、本発明の組成物は、２種以上の異なる増粘剤を含んでいてもよい。増粘剤は、０％から最大１０％（ｗ／ｖ）、より好ましくは０．０１％から最大５％（ｗ／ｖ）、より好ましくは０．０２％から最大１％（ｗ／ｖ）、より好ましくは約０．０５％（ｗ／ｖ）の量で存在することが好ましい。

本発明に係る組成物は、高濃度のナタマイシン、及び上記少なくとも1種の殺虫剤を最大約３０％（ｗ／ｖ）含む安定した水性懸濁液を提供し、当該水性懸濁液は、農学的に許容可能な担体としての比較的低量のアジュバントの存在下で、上記ナタマイシンの市販の製剤と比較して、向上した殺菌活性を有する。

いくつかの実施形態では、組成物は、緩衝剤、酸味料、及び漂流防止剤、顔料、安全剤、及び保存料等の1つ又は複数の物理的安定剤及び／又は添加剤をさらに含む。

＜使用方法＞
本発明はさらに、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する少なくとも１種の殺虫剤を準備すること、並びに、農作植物又は農作植物部分が十分な量の上記ナタマイシン及び少なくとも１種の殺虫剤と接触するように、上記ナタマイシン及び少なくとも１種の殺虫剤を農作植物又は農作植物部分へ付与することを含む、農作植物又は農作植物部分を保護する方法を提供する。

農作植物又は農作植物部分を保護するための好ましい方法は、本発明に係る組成物を準備することと、農作植物又は農作植物部分が十分な量の上記組成物と接触するように、上記組成物を農作植物又は植物部分に付与することと、を含む。

上記方法は、植物又は植物部分を真菌（好ましくはカビ）から保護するためのものであることが好ましい。

本明細書で使用する場合、「植物」及び「作物」という用語は、いずれも、食用、衣料用、家畜飼料用、バイオ燃料用、医薬用、又はその他の用途用に栽培される植物、樹木、又は菌類（fungus））を意味する。

上記植物部位は、葉、茎、種子、球根、花球、種芋、根、塊茎、果実及び／又は野菜であることが好ましく、最も好ましくは種子、球根、果実又は野菜である。

本発明はさらに、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する少なくとも１種の殺虫剤を準備すること、及び、上記ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する少なくとも１種の殺虫剤を植物に接触させることを含む、農作植物の成長及び／又は収量を向上する方法を提供する。

農作植物の成長及び／又は収量を向上するための好ましい方法は、本発明に係る組成物を準備することと、上記組成物を植物に接触させることと、を含む。

ナタマイシンと、昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する少なくとも１種の殺虫剤と、を含む組成物（好ましくは本発明の組成物）は、多くの異なる方法で適用することが可能である。例えば、上記の組成物（単数又は複数）は、以下のようにして適用することが可能である：（１）任意選択的にワックス又は油等の担体を用いて、畑又は温室で植物に散布する；（２）種子、球根、又は種芋を浸す；（３）例えば土壌を介して、植物部分（種子又は根系等）に添加する；（４）種子コーティング（seed coating）又は種子粉衣（seed dressing）を介して植物部分（種子、種芋又は球根等）に添加する；（５）種子が植えられるか若しくは発芽するか、及び／又は植物又はキノコが発生する土壌又は成長基質に添加する；（６）例えば温室又は畑において、付与する水又は水やりシステムに加える；（７）例えばディッピング又はスプレーによって、球根、種子、穀物、大豆、花、果物、野菜又は植物等の収穫した植物部分を処理する。

本発明の組成物は、希釈することなく、又は希釈した後に付与することが可能である。通常、本発明の組成物は、水性又は油性の希釈液を介して、粉衣、コーティング又はワックスを介して付与されるであろう。本発明に係る組成物は、未希釈であるか、又は、希釈されていることが好ましい。本発明に係る組成物は、種子処理については最大１０倍又は１００倍に希釈されることが好ましい。本発明に係る組成物は、本発明の方法における他の用途については、水溶液中又は油中で最大１０倍から１０^６倍まで希釈されることが好ましい。用途によって異なる処理を必要とする場合があるので、本発明の組成物の必要量は用途ごとに異なることは容易に理解されるであろう。しかしながら、一般的に、製品（例えば、成長基質、土壌、種子、球根、畑の植物又は収穫された果実）を処理するために必要な、例えば浸漬又は噴霧懸濁液等のすぐに使える組成物の量は、ナタマイシン１０～１００，０００ｐｐｍ、より好ましくはナタマイシン３０～５０，０００ｐｐｍ、最も好ましくはナタマイシン５０～５，０００ｐｐｍであろう。

土壌若しくは生育培地中、植物上、又は収穫された植物部分上のナタマイシンの最終量は、異なる方法で表すことができる。１つ目の例として、例えば種子粉衣（seed dressing）又は種子コーティングを介して付与される、例えば種子上のナタマイシンの量は、種子１ｋｇ当たりナタマイシンが０．０１～２０．０ｇ、より好ましくは種子１ｋｇ当たりナタマイシンが０．０５～５．０ｇ、最も好ましくは種子１ｋｇ当たりナタマイシンが０．１～２．０ｇである。

２つ目の例として、花卉球根（flower bulbs）、種芋、タマネギ、リンゴ、ナシ、バナナ、及びパイナップル等の製品に浸漬又は噴霧するための本発明の組成物は、一般的に０．０１ｇ／１～１００ｇ／ｌ、好ましくは０．０３ｇ／ｌ～５０ｇ／ｌ、最も好ましくは０．０５ｇ／ｌ～５ｇ／ｌのナタマイシンを含むであろう。

花卉球根、種芋、タマネギ、リンゴ、ナシ、バナナ、及びパイナップル等の製品を処理した後、当該製品上のナタマイシンの量は典型的には、０．０１～２０．０ｍｇ／ｄｍ^２であり、好ましくは０．１～１０．０ｍｇ／ｄｍ^２である。

キノコ成長基質等の成長基質を処理する場合、１回の噴霧処理で、成長基質１ｍ^２あたり０．０１～５．０ｇのナタマイシンが、より好ましくは成長基質１ｍ^２あたり０．０２～１．０ｇのナタマイシンが添加される。

（例えば野菜又は観葉植物が栽培されている）土壌を処理する場合、１ｍ^２あたり０．０１～５．０ｇのナタマイシンが付与され（好ましくは土壌の表層に混合され）、より好ましくは１ｍ^２あたり０．１～１．０ｇのナタマイシンが付与される。圃場の作物に散布する場合、典型的な投与量は１ヘクタール当たり１～５０００ｇのナタマイシン、より好ましくは１ヘクタール当たり５０～２０００ｇのナタマイシンである。しかしながら、バナナ等の作物の場合、ナタマイシンの好ましい投与量は、１ヘクタール当たり５～５００ｇ、より好ましくは１０～１００ｇである。

ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する少なくとも１種の殺虫剤（好ましくは本発明の組成物）は、任意の好適な時期に、任意の好適な方法を用いて、成長培地、土壌、植物又は植物部分に、例えば、（例えば、種子、球根、種芋、切り花若しくは若草の）植付け前、植付け中若しくは植付け後に；果物、野菜、実又は花卉球根の畑での成長中、収穫後又は貯蔵中に、添加することが可能である。

本発明の一態様は、ナタマイシンの生物活性を高めるための、昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する少なくとも１種の殺虫剤の使用を提供する。本発明に係る上記使用により、上記ナタマイシンの付与頻度の低減及び／又は上記ナタマイシンの生物学的活性の増加が可能となり得る。

本発明の一態様は、植物、植物部分、又は土壌に存在するナタマイシンの生物活性を高めるための、昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する少なくとも１種の殺虫剤の適用を提供する。上記殺虫剤は、上記ナタマイシンの生物学的活性を増加させることが可能である。上記少なくとも１つの殺虫剤は、文献"IRAC Mode of Action Classification Scheme" (June 2019; version 9.3)に記載のサブグループ２（ＧＡＢＡゲート型塩化物チャネルブロッカー）、サブグループ３（ナトリウムチャネル調節剤）、サブグループ４（ニコチン性アセチルコリン受容体の競合調節剤）、サブグループ６（グルタミン酸ゲート型塩化物チャネルのアロステリック調節剤）、及び／又はサブグループ２８（ライノジン受容体調節剤）に属するものであることが好ましい。

「付与頻度の低減」及び「生物学的活性の増加」という用語は、少なくとも１種の殺虫剤を含まないナタマイシンの付与頻度と比較した場合に、１０％以上、好ましくは３０％以上低減された付与頻度を指し得る。

上記低減された付与頻度は、付与頻度が、１ヘクタールあたり活性成分５ｍｇ（ａ．ｉ．）～２．５ｋｇａ．ｉ．／ｈａ、好ましくは１ｇａ.ｉ.／ｈａ～２ｋｇａ．ｉ．／ｈａ、例えば１００～７５０ｇａ．ｉ．／ｈａ（頻度が６００ｇａ．ｉ．／ｈａ、頻度が５００ｇａ．ｉ．／ｈａ、頻度が４００ｇａ．ｉ．／ｈａ、頻度が３００ｇａ．ｉ．／ｈａ、頻度が２００ｇａ．ｉ．／ｈａ、及び１００ｇａ．ｉ．／ｈａが含まれる）であることを指し得る。

本発明に係る抗真菌組成物は、園芸、農業、及び林業において遭遇する害虫の防除に好適である。抗真菌組成物は、通常感受性及び抵抗性の害虫種に対して、また発生の全段階若しくは個々の段階において活性である。使用に先立って、本発明に係る抗真菌組成物を含む組成物を、水に溶解若しくは分散させるか、又は水で希釈し、０．００１～１０ｗ／ｖ％の生物活性ナタマイシンを含む水性組成物を準備することが好ましい。必要に応じて、粘着剤等の農学的に許容可能な担体が、希釈された水性組成物に添加される。

本発明に係る組成物は、植物、植物部分又は土壌に接触させる前に、ナタマイシンを０．０００１～１０％（ｗ／ｖ）含むように、水性溶媒（好ましくは水）で２～５０００倍、好ましくは約２００倍に希釈されることが好ましい。

農業害虫を防除するために、本発明は、植物又は植物の一部を病原体から保護するための、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは、ナタマイシン及び少なくとも１種の殺虫剤を含む本発明に係る組成物）の使用を提供する。この効果を達成するために、上記植物若しくは植物の一部、又は土壌を、上記ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは、本明細書で上述したような希釈水性組成物を含む、上記組成物）と接触させる。上記ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは上記組成物）は、例えば、食物／飼料作物（樹木果物、野菜作物、畑作物、ブドウ、観賞植物、及び芝草ファーム（sod farm）を含む）のうどんこ病及びボツリヌス菌感染を制御するために使用される。さらに、例えば、そうか病（common sacab）、リンゴそうか病（apple scab）、及びジャガイモの黒星病（black scab on potatoes）、ナシそうか病（pear scab）、及び粉状そうか病（powdery scab）等のそうか病（scab）、モモの灰星病（brown rot）、カラント及びグーズベリーの葉斑、フザリウム病（Fusarium diseases）、ピーナッツ葉斑、並びにバラのべと病（mildew）等の制御にも使用される。その他の使用法としては、温室栽培の花卉類、家庭菜園、住宅の芝生の保護等が挙げられる。さらに、上記ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは、希釈水性組成物を含む上記組成物）は、分離した種子、果物、ナッツ、野菜及び／又は花に接触させてもよい。

本発明はさらに、植物又は植物部分を病原体から保護する方法であって、上記植物又は上記植物部分を、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは、ナタマイシン、並びに神経系及び筋肉系殺虫剤（好ましくは、文献“IRAC Mode of Action Classification Scheme” (June 2019; version 9.3)に記載のサブグループ２、３、４、６及び／又は２８に属する殺虫剤）を含む本発明に係る水性希釈組成物）と接触させることを含む、上記方法を提供する。

本発明はさらに、植物又は植物の一部における病原体の存在を予防、低減及び／又は排除する方法であって、上記植物又は上記植物の一部を、ナタマイシン、並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは本発明に係る水性組成物）と接触させることを含む、上記方法を提供する。

上記使用及び上記方法のために、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは、希釈水性組成物を含む上記組成物）は、植物又はその一部に噴霧されることが好ましい。自動散布システムの使用を含む散布用途は、人件費を削減し、費用対効果に優れていることが知られている。当業者によく知られている方法及び装置をそのために使用することができる。ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは、希釈水性組成物を含む上記組成物）は、感染の危険性が高い場合、定期的に噴霧することができる。感染のリスクが低い場合、当業者に知られているように、散布間隔はより長くてもよい。

植物又はその一部を、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは本発明の組成物）と接触させるのに適した他の方法もまた、本発明の一部である。これらは、浸漬、散水、浸漬、ダンプタンクへの導入、気化、霧化、燻蒸、塗装、ブラシ、霧吹き、散布、発泡、散布、包装、コーティング（例えば、ワックス又は静電気による手段）などが挙げられるが、これらに限定されるわけではない。さらに、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは、希釈水性組成物を含む本発明の組成物）を土壌に注入してもよい。

例えば、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくはナタマイシン及び本発明に係る少なくとも1種の殺虫剤を含む希釈水性組成物）で植物及びその一部を被覆してもよく、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは、本発明に係る希釈水性組成物）で、植物又はその一部を浸漬することにより、植物又はその一部を病原体から保護するか、及び／又は、植物若しくは植物の一部条の病原体の存在を防止、低減及び／又は排除してもよい。

ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは本発明に係る組成物、又はその希釈物）で被覆される植物の好ましい部分は、種子である。ナタマイシン、並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは本発明に係る組成物、又はその希釈物）で被覆される植物のさらに好ましい部位は、果実である。好ましくは、例えば、オレンジ、マンダリン、ライム等の柑橘類、リンゴ、ナシ等のナシ状果（pome fruit）、アーモンド、アプリコット、サクランボ、ダムソン（damson）、ネクタリン、トマト、スイカ等の核果（stone fruit）、バナナ、マンゴー、ライチ、ミカン等のトロピカルフルーツ等の収穫後のフルーツである。好ましい果物は、オレンジ等の柑橘類及び／又はバナナ等のトロピカルフルーツである。

本発明はさらに、植物又はその増殖材料上の病原性真菌によって引き起こされる病気を制御する方法を提供し、この方法は、植物又はその増殖材料を、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは、水性希釈組成物を含む本発明に係る組成物）と接触させることを含む。

また、本発明は、（ｉ）害虫又はその遺伝子座（locus）、（ｉｉ）植物又はその遺伝子座若しくは繁殖材料、（ｉｉｉ）土壌、及び／又は（ｉｖ）害虫の侵入を防止したい場所に、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは、ナタマイシン及び少なくとも１種の殺虫剤を含む本発明の組成物）を接触させて、害虫を駆除する方法も提供する。

また、本発明は、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは本明細書に記載の組成物）を植物又は土壌に付与することを含む、害虫駆除の改善方法を提供する。

また、本発明は、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは本発明の組成物又はその希釈物）を植物、植物部分又は土壌に付与することを含む、植物、植物部分又は土壌に対するナタマイシンの防除効果を持続させる方法を提供する。

いくつかの実施形態において、標的は、植物、植物部分、土壌又は成長基質である。いくつかの実施形態では、標的は、菌類である。

また、本発明は、植物、その遺伝子座又はその繁殖材料を、有効量のナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは、ナタマイシン及び少なくとも１種の殺虫剤を含む本発明に係る組成物）と接触させることを含む、病原性真菌により引き起こされる植物病の予防、治療又は持続処理による害虫を制御する方法を提供する。

ナタマイシン及び少なくとも１種の殺虫剤を含む本発明によって記載された組成物は、健康な植物又は病気の植物に付与してよい。記載された組成物は、作物、種子、球根、繁殖材料、又は観賞用種を含むがこれらに限定されない様々な植物に使用することが可能である。

本発明は、植物又はその繁殖材料上の病原性真菌によって引き起こされる病気を防除する方法であって、植物、その遺伝子座又はその繁殖材料を、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは、ナタマイシン及び少なくとも１種の殺虫剤を含む本発明に係る組成物）と接触させることを含む、上記方法を提供する。

いくつかの実施形態において、真菌は、コムギの葉枯病（Leaf Blotch）（Mycosphaerella graminicola；アナモルフ：Septoria tritici）、コムギの赤さび病（Brown Rust）（Puccinia triticina）、黄さび病（Stripe Rust）（Puccinia striiformis f. sp. tritici）、りんごそうか病（scab of apple）（Venturia inaequalis）、トウモロコシ火ぶくれ病（Blister Smut）（Ustilago maydis）、ブドウうどんこ病（Powdery Mildew）（Uncinula necator）、オオムギ雲形病（Barley scald）（Rhynchosporium secalis）、イネのいもち病（Blast of Rice）（Magnaporthe grisea）、ダイズのさび病（Rust of Soybean）（Phakopsora pachyrhizi）、コムギの穎斑病（Glume Blotch of Wheat）（Leptosphaeria nodorum）、コムギのうどんこ病（Powdery Mildew of Wheat）（Blumeria graminis f. sp.tritici）、オオムギのうどんこ病（Powdery Mildew of Barley）（Blumeria graminis f. sp. hordei）、ウリ類のうどんこ病（Powdery Mildew of Cucurbits）（Erysiphe cichoracearum）、ウリ類の炭疽病（Anthracnose of Cucurbits）（Glomerella lagenarium）、ビートの葉斑病（Leaf Spot of Beet）（Cercospora beticola）、トマトの早枯病（Early Blight of Tomato）（Alternaria solani）、及びオオムギの網班病（Net Blotch of Barley）（Pyrenophora teres）のうちの１つである。

いくつかの実施形態では、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは、ナタマイシン及び少なくとも１種の殺虫剤を含む本発明に係る組成物）は、害虫を制御するために有効な頻度で付与される。いくつかの実施形態では、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは、ナタマイシン及び少なくとも１種の殺虫剤を含む本発明に係る組成物）を、害虫の侵入を防止するために有効な頻度で付与する。いくつかの実施形態では、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤（好ましくは、ナタマイシン及び少なくとも１種の殺虫剤を含む本発明に係る組成物）は、害虫の侵入を治癒するために有効な頻度で付与される。

いくつかの実施形態において、本発明の方法は、害虫の侵入を防止するために有効である。いくつかの実施形態において、本発明の方法は、害虫の蔓延を治癒するために有効である。いくつかの実施形態において、本方法は、ナタマイシンの殺虫活性を増加させるために有効である。いくつかの実施形態では、本方法は、ナタマイシンの殺虫効果を延長させるために有効である。

いくつかの実施形態において、本発明の方法は、ナタマイシンの半最大有効濃度（ＥＣ５０）を減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、本方法は、ＥＣ５０を１０％以上減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、本方法は、ＥＣ５０を２５％以上減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、本方法は、ＥＣ５０を３５％以上減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、本方法は、ＥＣ５０を５０％以上減少させるのに有効である。

いくつかの実施形態において、本発明の方法は、ナタマイシンのＬＣ５０を減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、本方法は、ＬＣ５０を１０％以上減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、本方法は、ＬＣ５０２５％以上減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、本方法は、ＬＣ５０を５０％以上減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、本方法は、ＬＣ５０を７５％以上減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、本方法は、ＬＣ５０を９０％以上減少させるのに有効である。

いくつかの実施形態において、本発明の方法は、ナタマイシンのＬＣ９０を減少させるのに有効である。いくつかの実施形態において、本方法は、ＬＣ９０を１０％以上減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、本方法は、ＬＣ９０を２５％以上減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、本方法は、ＬＣ９０を５０％以上減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、本方法は、ＬＣ９０を７５％以上減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、本方法は、ＬＣ９０を９０％以上減少させるのに有効である。

いくつかの実施形態では、本発明の方法は、害虫、植物部分、植物、その遺伝子座、又はその繁殖材料に少なくとも１つの追加の農薬を付与することをさらに含む。上記追加の農薬は、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する殺虫剤と、タンク内で混和しても、又は順次付与してもよく、好ましくは、ナタマイシン及び少なくとも一つの殺虫剤を含む組成物と共に植物、植物部分、土壌又は生育基材に付与してよい。

限定するわけではないが、以下の実施例により本発明を説明する。

＜実施例＞
＜概要＞
［実験で使用するナタマイシン製剤］
ナタマイシンは、０ｐｐｍ（対照）、５０ｐｐｍ、１００ｐｐｍ及び２００ｐｐｍの濃度でリンゴに対して試験された。ナタマイシンは表１に示す通り製剤化した。

［実験で使用する殺虫剤製剤］
殺虫剤活性成分であるチアメトキサム（Thiamethoxam）（メルク社；３７９２４）、イミダクロプリド（Imidacloprid）（メルク社；３７８９４）、アバメクチン（Abamectin）（メルク社；３１７３２）、及びクロルピリホス（Chlorpyrifos）（メルク社；４５３９５）を表２に示す組成で製剤化した。

有効成分であるフィプロニル（Fipronil）、λ－シハロトリン（Lambda-Cyhalothrin）、α－シペルメトリン（alpha-Cypermethrin）、アセタミプリド（Acetamiprid）、エマメクチン安息香酸塩（Emamectin benzoate）、クロラントラニリプロール（Chlorantraniliprole）、フルベンジアミド（Flubendiamide）、フェノキシカルブ（Fenoxycarb）、バチルス・チューリンゲンシス（Bacillus thuringiensis）、クロルフェナピル（Chlorfenapyr）、及びアザジラクチン（Azadirachtin）は市販品を使用した（表３参照）。

［実施例において付与された殺虫剤の線量率］
実施例では、ナタマイシンを標準的な殺虫剤のラベル用量と組み合わせている。実施例で使用された殺虫剤有効成分の量は、表３に示されている。

［相乗効果の測定］
殺虫剤によるナタマイシンの抗真菌活性の刺激は相乗的であることが判明した例もある。コルビー式（Colby, 1967. Weeds 15: 20-22）は、２種以上の有効成分を含む組み合わせの抗真菌活性の期待値（Ｅｉｎ％）を算出するものである：

ここで、Ｘ及びＹはそれぞれ、個々の有効成分ｘ及びｙの観察された抗真菌活性（単位：％）である。組み合わせの観察された抗真菌活性（Ｏ％）がこの組み合わせの期待される抗真菌活性（Ｅ％）を超え、したがって相乗係数Ｏ／Eが＞１．０であれば、活性成分の組み合わせ適用により、相乗的抗真菌効果がもたらされることになる。

＜実施例１：人工感染植物組織でのナタマイシンの抗真菌活性に対する殺虫剤の有効性試験
［材料及び方法］
リンゴｃｖＥｌｓｔａｒは有機栽培由来のものであり、ＳＫＡＬ認証を取得している。ＳＫＡＬはオランダの半官半民の組織であり、オランダの有機栽培を管理している。

ボトリティス・シネレア（Botrytis cinerea）の胞子懸濁液として、１０^５個／ｍｌの胞子を含むものを使用する。

直径０．６ｃｍ、深さ最大０．５ｃｍのコルクボーラーで果皮を傷つけ、リンゴ果実１個につき２個の傷をつける。B. cinereaの新鮮な胞子懸濁液（約１０^５個／ｍｌ）を３０μｌ、各傷口にピペットで塗布する。その後、胞子懸濁液を３時間風乾させる。以下の表４及び表５に示すように、５０μｌのナタマイシン及び／又は殺虫剤を、各創傷にピペットで塗布する。

すべての果実は室温（２０℃）で保管される。傷は毎日検査し、１０日後に記録する。

すべての処理は６個のリンゴに対して行われ、それぞれ２個の傷がつき、１回の処理で１２個の傷がつくことになる。記録された抗真菌活性は、未処理の対照の腐敗表面積と比較して、１２個の傷で観察された腐敗の平均表面積の減少（％）である。

［結果］
結果を表４及び表５に示す。各文字は感染率（表面積）の違いを示し、Ａが最も高い感染面積であり、Ｂ、Ｃ、Ｄは感染面積が減少している（ＢはＡより有意に低く、ＣはＢより有意に低く、ＤはＣより有意に低い）。これらの結果から、殺虫剤はそれ自体では殺菌作用を持たないが、昆虫の神経又は筋肉系を介した作用機序である表４の殺虫剤は、リンゴ植物組織に対するナタマイシンの殺菌作用を刺激し、昆虫の神経又は筋肉系を介した作用機序ではない表５の殺虫剤は、この作用を持たないことが明らかである。

＜実施例２：殺虫剤併用及び非併用のナタマイシンの人工感染土壌の種子での病原性真菌に対する殺菌効果試験＞
［材料及び方法］
種子を、表２に記載の殺虫剤組成物の存在下又は非存在下で、表１に記載のナタマイシン製剤で被覆する。ダイズ種子を、人工的に感染させた土壌に入れる（方法は下記参照）。

土壌感染は、感染して死んだソルガム（Sorghum）種子を用いて土壌を培養することで得られる。このために、ソルガム種子を１００ｇと水１００ｍｌを５００ｍｌ容のビンに入れ、オートクレーブを２回かける（１２１℃、１５分、１５ｐｓｉ）。死んだソルガム種子は、フザリウム・グラミネアルムセグメント（直径６ｍｍのコルクボーラーでシャーレから切り出した新鮮なフザリウム・グラミネアルム菌糸で完全に成長した、５ｍｍの寒天上の高さを持つ円形セグメント）に感染させる。１０個のフザリウム・グラミネアラム（F. graminearum）寒天片を、１００ｍｌの水にオートクレーブした（死んだ）ソルガム種子を入れた５００ｍｌ容のビンに、２５℃で入れ、２週間培養する（１６時間昼光、８時間暗黒）。感染土壌を調製するために、土壌（Lentse potgrondタイプ821201030、Horticoopから購入）と砂（Wageningenのvan Leusden社の川砂）を１：１の混合物でプラグトレイ（トレイの寸法は５２ｃｍ×３０ｃｍ、直径５ｃｍ、深さ４．５ｃｍの４０個の丸いセル（modiform；Leusden、オランダ））に入れる。

F. graminearumのキャリアとなる感染したソルガム種子を、砂質土混合物を含む各プラグに３粒ずつ撒いた。トレイは温室（日照１６時間、昼温２０℃、夜温１８℃、湿度６０％）内に１週間放置する。

その後、ダイズ種子を７０％エタノールで洗浄し、水で十分に洗い流す。

ナタマイシン（種子１ｋｇあたり０．０６ｇ、０．１２ｇ又は０．２４ｇの有効成分）及び表示されている殺虫剤（投与量は表３参照）を３０ｍｌの水に懸濁又は溶解して、ユーザー溶液を調製する。次に、種子２５０ｇをロータリーコーターに投入し、ユーザー溶液を種子に塗布する。種子は、それぞれの溶液とともに４５秒間回転される。溶液は、ロータリーコーターの回転する円盤を通して、種子に均一に行き渡る。その後、種子をロータリーコーターから取り出し、２５℃の温度で１５分間乾燥機に入れる。

種子は、土壌と砂の混合物を含むプラグトレイのセル（栓）に２ｃｍの深さで播種し、１処理あたり２０粒、１セルあたり１粒とした。播種後１４日目に苗の出穂と品質評価を行う。

［結果］
表６及び表７に、昆虫の神経系又は筋肉系に活性を有する殺虫剤（表６）、又は昆虫の他の系に活性を有する殺虫剤（表７）とナタマイシンとの併用及び非併用による、ダイズ種子の発育品質への影響を示した。播種から１４日後に、健全な苗（非感染土壌におけるダイズ種子の発育と比較）、異常な苗（例えば、発育不良、変色した小さな植物、奇形の葉）及び枯れた種子の割合を決定している。表６及び表７の結果は、健全な苗の割合を表す。

［結果］
表６及び表７において、個々の文字は、健康な苗の割合の違いを示し、Ａは健康な苗の割合が最も低く、Ｂ、Ｃ、Ｄは健康な苗の割合が増加していることを示す（ＢはＡより有意に高く、ＣはＢより有意に高く、ＤはＣより有意に高い）。

これらの結果から、殺虫剤自体には殺菌力はないが、昆虫の神経系又は筋肉系を介した作用機序とする表６の殺虫剤は、ナタマイシンの種子に対する殺菌作用を刺激し、昆虫の神経系又は筋肉系を介した作用機序ではない表７の殺虫剤は、その作用を阻害しないことが明らかである。

＜実施例３：トウモロコシ種子の真菌による攻撃に対するナタマイシン及び殺虫剤の単独又は併用効果＞
［材料及び方法］
殺虫剤の投与量は表３に示すとおりである。トウモロコシ種子の処理方法は、実施例２のダイズ種子について記載した方法と同じである。播種から１４日後に、健康な苗（非感染土壌におけるトウモロコシ種子の発育と同等）、異常な苗（例えば、発育不良、変色した小さな植物、奇形の葉）及び死んだ種子の割合（％）が決定される。表８の結果は、健康な苗の割合を示す。

表８には、昆虫の神経系又は筋肉系に活性を有する殺虫剤とナタマイシンとを併用した場合の、トウモロコシ種子の発育品質への影響が示されている。

表８の結果から、神経又は筋肉組織を介して作用する殺虫剤は、それ自体では殺菌力を有しないが、トウモロコシ種子に対するナタマイシンの殺菌作用を刺激し、より健康な苗を得ることができることがわかる。

表９に、昆虫の神経系又は筋肉系に活性を有しない殺虫剤とナタマイシンとを併用処理したトウモロコシ種子の発育品質への影響を示す。

表９の結果から、神経系又は筋肉系を介した作用機序を有しない殺虫剤は、それ自体では殺菌活性を持たず、ナタマイシンの種子に対する殺菌作用を刺激しないことがわかる。

＜実施例４：ナタマイシン及びアバメクチン（昆虫の神経系に作用）の単独及び併用によるトウモロコシ種子での各種病原真菌の攻撃に対する影響
［材料及び方法］
方法は、実施例２の種子実験について述べたとおりである。フザリウム・グラミネアラム（Fusarium graminearum）を表１０に記載の病原性真菌に置き換えた。ナタマイシン及び殺虫剤組成物は、表１及び表２に示されている。

［結果］
表１０の結果から、神経又は筋肉系を介した作用機序を有する殺虫剤であるアバメクチンは、それ自体には殺菌作用はないが、種子の異なる真菌病原体に対するナタマイシンの殺菌作用を刺激して、より健康な苗が得られること分かる。

＜実施例５：ナタマイシン及びイミダクロプリド（昆虫の神経系に作用）の単独又は組み合わせによる、異なる種類の種子への影響＞
［材料及び方法］
テンサイ種子７５ｇ、芝草種子７５ｇ、及びトマト種子２５ｇを用いた以外は、実施例２に記載と同様に、人工感染土壌（Fusarium culmorum）に異なる種類の種子を植栽した。健康な苗木の割合（％）を、１４日間の培養後に評価する。

［結果］
表１１の結果から、イミダクロプリドはそれ自体では殺菌作用を持たないが、異なる植物の種子に対するナタマイシンの殺菌作用を刺激し、より健康な苗をもたらすことが分かる。

＜実施例６：Fusarium culmorumに対するナタマイシンの効力に対するフィプロニルの影響＞
［実施例６～１９の材料及び方法］
１００ｍｌ容のＤｕｒａｎビン中でＣａｒｌ－Ｒｏｔｈ（Carl-Roth GmbH + Co. KG, Karlsruhe, Germany）のジャガイモデキストロース寒天（ＰＤＡ）３．９ｇと１００ｍｌの脱イオン水を混合し、Ｄｕｒａｎビンを１２０℃で１５分間オートクレーブすることにより、寒天培地を調製した。オートクレーブ処理後、溶液を４８℃のオーブンに約２時間入れて冷却した。その後、半液状のＰＤＡ溶液に表１２に規定されたナタマイシン及び／又は殺虫剤の投与量を注意深く混合した。Ｄｕｒａｎビン内の培地を、２５ｍｌ容血清ピペット（ＲＯＴＩＬＡＢＯ（登録商標）；Carl-Roth）を用いて、５枚のシャーレ（９０×１５ｍｍ）上に、１枚当たり２０ｍｌずつ分注した。各ナタマイシン処理及び／又は殺虫剤処理は５回に分けて行った。

十分に成長したシャーレを滅菌水で浸漬することにより、真菌胞子の懸濁液を調製した。真菌を削り取り、Ｍｉｒａｃｌｏｔｈ（孔径：２２～２５μｍ）（Merck KGaA, Darmstadt, Germany；カタログ番号：４７５８５５）で濾過した。血球計数装置で胞子数を数え、真菌懸濁液を１０^６個／ｍｌに調整した。その後、調製した胞子懸濁液５□ｌを寒天平板の中央部にピペッティングした。プレートを２５℃でインキュベートした。真菌の増殖の測定は、異なる時点でノギスを用いて行った。

この実施例では、ＩＲＡＣグループ２に属する活性成分であるフィプロニルを含むＢＡＳＦ社の製品ＲＥＧＥＮＴ（登録商標）を用いて、ナタマイシンとの相乗効果を検証した。使用した殺虫剤濃度「Ｎ」（下記参照）は、１００ｍｌのＰＤＡ寒天当たり０．９４ｇの殺虫剤製品であった。０．５Ｎは０．４７ｇである。ナタマイシン含有インキュベーションにおけるナタマイシンの濃度は１ｐｐｍであった。ナタマイシン：フィプロニルの比率は、１：７５２０（ｗ／ｗ）及び１：３７６０（ｗ／ｗ）であった。２５℃のストーブで７日間培養した後、効力を評価した。相乗効果の計算はコルビー方程式を用いて行った。

［結果］

＜実施例７：Fusarium culmorumに対するナタマイシン効力に対するλ－シハロトリンの影響＞
［材料及び方法］
実施例６を参照。この実施例では、ＩＲＡＣグループ３に属する活性成分であるλ－シハロトリンを含むSyngenta社の製品KARATE ZEON（登録商標）を使用した。

使用した殺虫剤濃度「Ｎ」（下記参照）は、１００ｍｌのＰＤＡ寒天に対して２０μｌの殺虫剤製剤を使用した。０．５Ｎは、１００ｍｌのＰＤＡ寒天に対して１０μｌである。

ナタマイシン含有培養物中のナタマイシン濃度は１ｐｐｍであった。ナタマイシン：λ－シハロトリンの比率は１：５０（ｗ／ｗ）及び１：２５（ｗ／ｗ）であった。２５℃のストーブで７日間培養した後に効力を評価した。

［結果］

＜実施例８：Alternaria solaniに対するナタマイシンの効力に及ぼすλ－シハロトリンの影響＞
［材料及び方法］
実施例６を参照。この実施例では、ＩＲＡＣグループ３に属する活性成分であるλ－シハロトリンを含むSyngentaの製品KARATE ZEON（登録商標）を使用した。

使用した殺虫剤濃度「Ｎ」（下記参照）は、１００ｍｌのＰＤＡ寒天に対して２５倍に水で希釈した殺虫剤溶液を５００μｌ使用した。２Ｎは、１００ｍｌのＰＤＡ寒天に対して、水中希釈した溶液を１０００μｌとした。５Ｎは、ＰＤＡ寒天１００ｍｌに対してKARATE ZEONの原液を１００μｌとした。

ナタマイシン含有培養物中のナタマイシン濃度は０．５ｐｐｍであった。ナタマイシン：λ－シハロトリンの比率は１：１００（ｗ／ｗ）、１：２００（ｗ／ｗ）、及び１：５００（ｗ／ｗ）であった。２５℃のストーブで４日間インキュベートした後に、効力を評価した。

［結果］

＜実施例９：Sclerotinia sclerotiorumに対するナタマイシンの効力に対するλ－シハロトリンの影響＞
［材料及び方法］
実施例６を参照。この実施例では、ＩＲＡＣグループ３に属する活性成分であるλ－シハロトリンを含むSyngenta社の製品KARATE ZEON（登録商標）を使用した。

使用した殺虫剤濃度「Ｎ」（下記参照）は、１００ｍｌのＰＤＡ寒天に対して２５倍に水で希釈した殺虫剤溶液を５００μｌ使用した。２Ｎは、１００ｍｌのＰＤＡ寒天培地あたり、水中希釈液を１０００μｌとした。５Ｎは、１００ｍｌのＰＤＡ寒天に１００μｌの原液を入れたものである。

［結果］

＜実施例１０：Botrytis cinereaに対するナタマイシンの効力に対するλ－シハロトリンの影響＞
［材料及び方法］
実施例６を参照。この実施例では、ＩＲＡＣグループ３に属する活性成分であるλ－シハロトリンを含むSyngenta社の製品KARATE ZEON（登録商標）を使用した。

使用した殺虫剤濃度「Ｎ」（下記参照）は、１００ｍｌのＰＤＡ寒天に対して２０μｌの殺虫剤製品を使用した。０．５Ｎは、１００ｍｌのＰＤＡ寒天あたり製品１０μｌとした。０．２５ＮはＰＤＡ寒天１００ｍｌに対してKARATE ZEONの原液を５μｌ、０．１２５ＮはＰＤＡ寒天１００ｍｌに対して殺虫剤を２．５μｌであった。

ナタマイシン含有培養物中のナタマイシン濃度は１ｐｐｍであった。ナタマイシン：λ－シハロトリンの比率は、１：１２．５（ｗ／ｗ）、１：２５（ｗ／ｗ）、及び１：５０（ｗ／ｗ）であった。２５℃のストーブで６日間培養した後に、効力を評価した。

［結果］

＜実施例１１：Fusarium graminerumに対するナタマイシンの効力に対するイミダクロプリドの影響＞
［材料及び方法］
実施例６を参照。この実施例では、ＩＲＡＣグループ４に属する殺虫活性成分であるイミダクロプリドを、表１７に示すような追加の化合物と共に配合した。

使用した殺虫剤濃度「Ｎ」（下記参照）は、１００ｍｌのＰＤＡ寒天に対して５μｌの殺虫剤製剤を使用した。０．５Ｎは、１００ｍｌのＰＤＡ寒天あたり２．５μｌの製剤である。ナタマイシン含有培養物中のナタマイシンの濃度は１ｐｐｍであった。ナタマイシン：イミダクロプリドの比率は１：２０（ｗ／ｗ）、及び１：１０（ｗ／ｗ）であった。２５℃のストーブで８日間及び１２日間培養した後、効力を評価した。

［結果］

＜実施例１２：Fusarium culmorumに対するナタマイシンの効力に対するチアメトキサムの影響＞
［材料及び方法］
実施例６を参照。この実施例では、ＩＲＡＣグループ４に属する活性成分であるチアメトキサムを水と混合し、１０００ｐｐｍの溶液とした。使用した殺虫剤濃度「Ｎ」（下記参照）は、１００ｍｌのＰＤＡ寒天に対して５ｍｌの殺虫剤溶液であった。２Ｎは、１００ｍｌのＰＤＡ寒天に対して１０ｍｌのチアメトキサム溶液である。

ナタマイシン含有培養物中のナタマイシン濃度は０．５ｐｍであった。ナタマイシン：チアメトキサムの比率は、１：１００（ｗ／ｗ）及び１：２００（ｗ／ｗ）であった。２５℃のストーブで４日間培養した後に、効力を評価した。

［結果］

＜実施例１３：Fusarium graminerumに対するナタマイシンの効力に対するアバメクチンの影響＞
［材料及び方法］
実施例６を参照。この実施例では、ＩＲＡＣグループ６に属する活性成分であるアバメクチンを含むSyngenta社の製品VERTIMEC（登録商標）を使用した。

使用した殺虫剤濃度「Ｎ」（下記参照）は、１００ｍｌのＰＤＡ寒天に対して７５μｌの殺虫剤製品を使用した。０．５Ｎは、１００ｍｌのＰＤＡ寒天に対して３７．５μｌの製品を使用した。

ナタマイシン含有培養物中のナタマイシン濃度は１ｐｐｍであった。ナタマイシン：アバメクチンの比率は、１：１３．５（ｗ／ｗ）及び１：６．７５（ｗ／ｗ）であった。２５℃のストーブで８日及び１２日間培養した後、効力を評価した。

［結果］

＜実施例１４：Fusarium graminerumに対するナタマイシンの効力に対するアバメクチンの影響＞
［材料及び方法］
実施例６を参照。この実施例では、ＩＲＡＣグループ６に属する活性成分であるアバメクチンを含有するSyngenta社の製品VERTIMEC（登録商標）を使用した。使用した殺虫剤濃度「Ｎ」（下記参照）は、１００ｍｌのＰＤＡ寒天当たり７５μｌの殺虫剤製品であった。０．５Ｎは、１００ｍｌのＰＤＡ寒天当たり３７．５μｌの製品である。ナタマイシン含有培養物中のナタマイシンの濃度は１ｐｐｍであった。ナタマイシン：アバメクチンの比率は、１：１３．５（ｗ／ｗ）及び１：６．７５（ｗ／ｗ）であった。２５℃のストーブの中で７日間培養した後、効力を評価した。

［結果］

＜実施例１５：Botrytis cinereaに対するクロラントラニリプロールのナタマイシンの効力に対する影響＞
［材料及び方法］
実施例６を参照。この実施例では、ＩＲＡＣグループ２８に属する活性成分であるクロラントラニリプロールを含むDupont社の製品CORAGEN（登録商標）を使用した。

使用した殺虫剤濃度「Ｎ」（下記参照）は、１００ｍｌのＰＤＡ寒天に対して１２５μｌの殺虫剤製剤を使用した。１００ｍｌのＰＤＡ寒天あたり、濃度０．２５Ｎは３１．２５μｌのコラーゲンを、０．５Ｎは６２．５μｌのコラーゲンを、２Ｎは２５０μｌのコラーゲンを、５Ｎは６２５μｌのコラーゲンを、１０Ｎは１２５０μｌのコラーゲン生成物を含有していた。

ナタマイシン含有培養物中のおけるナタマイシンの濃度は１ｐｐｍであった。ナタマイシン：クロラントラニリプロールの比率は、１：６２．５（ｗ／ｗ）、１：１２５（ｗ／ｗ）、１：２５０（ｗ／ｗ）、１：５００（ｗ／ｗ）、１：１２５０（ｗ／ｗ）、及び１：２５００（ｗ／ｗ）であった。２５℃のストーブで４日及び５日間培養した後、効力を評価した。

＜実施例１６：Botrytis cinereaに対するナタマイシンの効力に対するヒドロペンの影響＞
［材料及び方法］
実施例６を参照。この実施例では、ＩＲＡＣグループ７に属する活性成分であるヒドロプレン（hydroprene）を含有する製品GENTROL（登録商標）IGR（Zoecon；Syngenta社）を使用した。

使用した殺虫剤濃度「Ｎ」（下記参照）は、５０ｍｌのＰＤＡ寒天に２．４９ｍｌのＧｅｎｔｒｏｌを５０ｍｌの水に溶かした溶液を３００μｌ添加したものを使用した。０．５Ｎ：１００ｍｌのＰＤＡ寒天に対して１５０μｌ、０．２５Ｎ：７５μｌの殺虫剤溶液殺虫剤製品を使用した。

ナタマイシン含有培養物中のナタマイシン濃度は１ｐｐｍであった。ナタマイシン：ヒドロプレンの比率は、１：３．４（ｗ／ｗ）、１：６．７５（ｗ／ｗ）、及び１：１３．５（ｗ／ｗ）であった。２５℃のストーブ中で４日間培養した後、効力を評価した。

［結果］

＜実施例１７：Fusarium culmorumに対するナタマイシンの効力に対するヒドロペンの影響＞
［材料及び方法］
実施例６を参照。この実施例では、活性成分であるヒドロプレンを含有する製品GENTROL（登録商標）ＩＧＲ（Zoecon；Syngenta社）を使用した。

ナタマイシン含有培養物中のナタマイシン濃度は１ｐｐｍであった。ナタマイシン：ヒドロプレンの比率は、１：３．４（ｗ／ｗ）、１：６．７５（ｗ／ｗ）、及び１：１３．５（ｗ／ｗ）であった。２５℃のストーブで５日間培養した後、効力を評価した。

［結果］

＜実施例１８：Fusarium graminerumに対するナタマイシンの効力に対するヒドロペンの影響＞
［材料及び方法］
実施例６を参照。この実施例では、ＩＲＡＣグループ７に属する活性成分であるヒドロプレンを含有する製品GENTROL（登録商標）ＩＧＲ（Zoecon；Syngenta社）を使用した。

使用した殺虫剤濃度「Ｎ」（下記参照）は、５０ｍｌのＰＤＡ寒天に２．４９ｍｌのＧｅｎｔｒｏｌを５０ｍｌの水に溶かした溶液を３００μｌ添加したものである。０．５Ｎ：１００ｍｌのＰＤＡ寒天に対して１５０μｌ、０．２５Ｎ：７５μｌの殺虫剤溶液殺虫剤製品を使用した。

［結果］

＜実施例１９：Fusarium graminerumに対するナタマイシンの効力に対するバチルス・チューゲンリンシスの影響＞
［材料及び方法］
実施例６を参照。この実施例では、ＩＲＡＣグループ１１に属する活性成分であるバチルス・チューゲンリンシス（１５．０００ＩＵ／ｍｇ（ＩＵ＝国際単位））を含む製品XENTARI（登録商標）（Bayer社）を使用した。

使用した殺虫剤濃度「Ｎ」（下記参照）は、ＰＤＡ寒天１００ｍｌにXENTARI製品３１．２５ｍｇを添加したものである。０．５Ｎ：１００ｍｌのＰＤＡ寒天に１５．６３ｍｇのXENTARI製品を添加した。

ナタマイシン含有培養物中のナタマイシン濃度は１ｐｐｍであった。ナタマイシン：バチルス・チューゲンリンシスの比率は、１：１５６．２５及び１：３１２．５（XENTARIの製品基準のｗ／ｗ）であった。２５℃のストーブで８日間培養した後、効力を評価した。

［結果］

＜実施例２０：Fusarium culmorumに対するナタマイシンの効力に対するクロルフェナピルの影響＞
［材料及び方法］
実施例６を参照。この実施例では、ＩＲＡＣグループ１３に属する活性成分であるクロルフェナピルを含有する製品SPECTRE（登録商標）（アダマ社）を使用した。

使用した殺虫剤濃度「Ｎ」（下記参照）は、１００ｍｌのＰＤＡ寒天に１ｍｌのＳｐｅｃｔｒｅ製品を添加したものである。ＰＤＡ寒天１００ｍｌに対して、０．５Ｎは０．５ｍｌ、０．２５Ｎは０．２５ｍｌのＳｐｅｃｔｒｅを添加したものである。

ナタマイシン含有培養物中のナタマイシン濃度は１ｐｐｍであった。ナタマイシン：クロルフェナピルの比率は、１：５３６（ｗ／ｗ）、１：１０７２（ｗ／ｗ）、及び１：２１４５（ｗ／ｗ）であった。２５℃のストーブで７日間培養した後、効力を評価した。

［結果］

＜実施例２１：Fusarium graminerumに対するナタマイシンの効力に対するアザジラクチンの影響＞
［材料及び方法］
実施例６を参照。この実施例では、まだ知られていないＩＲＡＣグループに属する活性成分であるアザジラクチンを含有する製品AZATIN（登録商標）（Certis社）（２１７ｇ／Ｌアザジラクチン（２６ｇ／Ｌのアザジラクチン－Ａの濃度となるように配合されている））を使用した。

使用した殺虫剤濃度「Ｎ」（下記参照）は、１００ｍｌのＰＤＡ寒天に３１μｌのアザチン製剤を添加した。０．５Ｎ：１００ｍｌのＰＤＡ寒天に３７．５μｌのアザチンを添加した。

ナタマイシン含有培養物中のナタマイシン濃度は１ｐｐｍであった。ナタマイシン：アザジラクチンの比率は、アザジラクチン－Ａを基準として、１：９．７５（ｗ／ｗ）及び１：１９．５（ｗ／ｗ）であった。２５℃のストーブで８日間培養した後、効力を評価した。

［結果］

＜実施例２２：Fusarium graminerumに対するナタマイシンの効力に対するエマメクチン安息香酸塩の影響＞
［材料及び方法］
実施例６を参照。この実施例では、ＩＲＡＣグループ６に属する活性成分であるエマメクチン安息香酸塩を含有する製品OPTIGARD（登録商標）ＣｏｃｋｒｏａｃｈｇｅｌＢａｉｔ、（Syngenta社）を使用した。使用した殺虫剤濃度「Ｎ」（下記参照）は、１００ｍｌのＰＤＡ寒天当たり２５０ｍｇの殺虫剤製品であった。０．５Ｎは、１００ｍｌのＰＤＡ寒天あたり１２５ｍｇの製品である。ナタマイシン含有培養物中のナタマイシンの濃度は０．２５ｐｐｍであった。ナタマイシン：エマメクチン安息香酸塩の比率は、１：１０及び１：５（ｗ／ｗ）であった。２５℃のストーブで３日間培養した後、効力を評価した。

［結果］

Claims

ナタマイシン、並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する少なくとも１種の殺虫剤を含む抗真菌組成物であって、
好ましくは、少なくとも１種の殺虫剤は文献"IRAC Mode of Action Classification Scheme" (version 9.3)」に記載のサブグループ２、３、４、６及び／又は２８に属する少なくとも１種の殺虫剤である、上記抗真菌組成物。
１％～９８％（ｗ／ｗ）のナタマイシン（好ましくは６％～６０％（ｗ／ｗ）のナタマイシン）、及び１％～９９％（ｗ／ｗ）（好ましくは５％～５０％（ｗ／ｗ））の前記少なくとも１種の殺虫剤を含む、請求項１に記載の抗真菌組成物。
前記少なくとも１種の殺虫剤に対するナタマイシンの比率が１：１～１：５０００（ｗ／ｗ）である、請求項１又は請求項２に記載の抗真菌組成物。
ナタマイシン、並びに、フィプロニル(fipronil)、λ－シハロトリン(lambda-cyhalothrin)、アセタミプリド(acetamiprid)、クロチアニジン(clothianidin)、イミダクロプリド(imidacloprid)、チアクロプリド(thiacloprid)、チアメトキサム(thiamethoxam)、アバメクチン(abamectin)及びクロラントラニリプロール(chlorantraniliprole)から選ばれる少なくとも１種の殺虫剤を含む、請求項１～請求項３のいずれか１項に記載の抗真菌組成物。
農学的に許容可能な担体をさらに含む、請求項１～請求項４のいずれか１項に記載の抗真菌組成物。
水性組成物又は油性組成物である、請求項１～請求項５のいずれか１項に記載の抗真菌組成物。
ナタマイシンが、０．５μｍ～３μｍの平均粒子径に粉砕されている、請求項１～請求項６のいずれか１項に記載の抗真菌組成物。
相対量が１：２～６０：１（ｗ／ｗ）のポリアニオン（リグニン化合物等）とポリカチオン（キトサン又はポリアリルアミン等）との不溶性高分子電解質複合体をさらに含有する、請求項１～請求項７のいずれか１項に記載の抗真菌組成物。
ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する少なくとも１種の殺虫剤、好ましくは請求項１～請求項８のいずれか１項に記載の組成物、を準備すること、及び
前記ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する前記少なくとも１種の殺虫剤、好ましくは前記組成物、を農作植物又は植物部分に付与すること、
を含む、農作植物又は植物部分を保護する方法。
前記植物部分が、種子、球根、果実又は野菜であり、好ましくは種子である、請求項９に記載の方法。
ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する少なくとも１種の殺虫剤、好ましくは請求項１～請求項８のいずれか１項に記載の組成物、を準備すること、及び
前記ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する前記少なくとも１種の殺虫剤、好ましくは前記組成物、を植物と接触させること、
を含む、農作植物の生長及び／又は収量を向上する方法。
土壌及び／又は成長基質に、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する少なくとも１種の殺虫剤、好ましくは請求項１～請求項８のいずれか１項に記載の組成物、を付与することを含む、土壌及び／又は成長基質を保護する方法。
前記成長基質が、キノコ成長基質（mushroom growth substrate）である、請求項１２に記載の方法。
前記組成物が、未希釈であるか、又は、前記組成物を植物、植物部分、土壌及び／又は成長基質に提供する前に、水溶液若しくは油で希釈されている、請求項１０～請求項１３のいずれか１項に記載の方法。
植物、植物部分、土壌及び／又は成長基質の真菌からの保護のための、ナタマイシン並びに昆虫及び線虫の神経系及び／又は筋肉系に干渉する少なくとも１種の殺虫剤、好ましくは請求項１～請求項８のいずれか１項に記載の組成物、の使用。