JP2022508015A - 抗αｖβ８抗体、組成物及びその使用 - Google Patents

Abstract

本発明は、αｖβ８インテグリンに特異的に結合する抗体及びその抗原結合断片に関する。本発明は、抗体の使用及び関連する使用方法を含む。

Description

関連する出願
この出願は、米国出願62/728,688（出願日：2018年9月7日）及び62/890,945（出願日：2019年8月23日）の優先権を主張し、それぞれの内容は、その全体が本明細書に含まれる。
配列表
この明細書は、2019年9月5日に提出した配列表をさらに含む。37 C.F.R. § 1.52(e)(5)に従い、前記配列表は、ファイル名PC72413A_SequenceListing_ST25.txtの184,211バイトのテキストファイルで、2019年9月3日に作成した。電子文書として提出した配列表は、明細書に記載の範囲を超えず、新規事項を含まない。
共同研究の当事者
現在の特許請求の範囲に記載した発明は、共同研究契約に基づいて以下の当事者によって、又は以下の当事者に代わって行われた。共同研究契約は、特許請求の範囲に記載した発明が行われた日又はそれ以前に有効で、特許請求の範囲に記載した発明は、共同研究契約の範囲内の活動の結果として行われた。共同研究契約の当事者は、カリフォルニア大学サンフランシスコ校を代表する理事及びファイザー社である。

技術分野
本発明は、αｖβ８インテグリンに特異的に結合する抗体及びその抗原結合断片、並びにその組成物、方法及び使用に関する。

トランスフォーミング増殖因子β（ＴＧＦβ）は、適応免疫及び自然免疫の強力な抑制因子で、制御性Ｔ細胞による免疫抑制の重要なメディエータである。ＴＧＦβは、顆粒球性炎症の誘導によって腫瘍の進行を促進するＴｈ１７細胞の誘導に必要で、腫瘍細胞の上皮から間質への形質転換を促進し、一部の充実性腫瘍からの免疫細胞の排除に寄与する可能性のある線維性腫瘍間質の分泌と蓄積を促進する。このため、ＴＧＦβの阻害は、特にいわゆる「免疫排除」腫瘍（“immune-excluded” tumors）に対する補助免疫療法として検討されてきた（Gorelik et al. Nat. Med. 7:1118-1122, 2001；Tauriello et al. Nature 554:538-543, 2018；Mariathasan et al. Nature 554:544-548, 2018；Dodagatta et al. J Immunother Cancer. 7: 62. 2019；US Patent No. 10,167,334）。しかし、ＴＧＦβは生体の恒常性に重要な役割を果たしているので、全身においてＴＧＦβシグナル伝達を標的とすることには、望ましくない副作用のために多くの難題がある（Hata and Akhurst Nat. Rev. Drug Dev. 11, 791-811, 2012；Akhurst et al. Cold Spring Harbor Perspectives. 10, 2017；Flavell et al. Nat. Rev. Immunol. 10:554-567, 2010）。

チェックポイント阻害と組み合わせたＴＧＦβシグナル伝達の阻害は、放射線療法又はワクチン療法への反応を増強することが可能であることを、以前の研究は示した（Vanpouille-Box et al. Cancer Res. 75:2232-2242, 2015；Terabe et al. OncoImmunology 6(5):e1308616, 2017）。in vivoでのＴＧＦβ活性は、いくつかのメカニズムを介して調節される。例えば、ＴＧＦβは、切断された潜在型関連ペプチド（ＬＡＰ）ドメインが活性なＴＧＦβ成熟ペプチドを包む、不活性又は潜在型の複合体として分泌される。潜在型ＴＧＦβは、潜在型ＴＧＦβ結合タンパク質（ＬＴＢＰ）を介して細胞外マトリックスと共有結合できるか、ＧＡＲＰ（Glycoprotein-A Repetitions Predominant Protein）によって細胞表面に表示される。初期のin vitroのデータは、ＴＧＦβの潜在型複合体が、高温、酸性及び各種プロテアーゼによって活性化する可能性があることを示したが（Annes et al. J Cell Sci. 116:217-24, 2003）、これらのメカニズムのin vivoにおける重要性は決定されていない。

潜在型ＴＧＦβの活性化におけるαｖインテグリンファミリー、特にαｖβ１、αｖβ６及びαｖβ８の役割が示されている。インテグリンαｖβ８は、ＩＴＧαＶ及びＩＴＧβ８サブユニットからなる膜貫通型の非共有結合ヘテロダイマーである。αｖβ８の発現はαｖインテグリンの中でも独特で、樹状細胞、制御性Ｔ細胞、腫瘍関連マクロファージなどの免疫細胞における発現は、能動免疫応答の調節におけるＴＧＦβの活性化因子として考えられてきている。樹状細胞（ＤＣ）におけるαｖβ８の発現は、Ｔ細胞刺激中のＴＧＦβ産生のメディエータとして機能し、免疫応答中のＴｈ１分化を犠牲にして、Ｔｒｅｇ及びＴｈ１７細胞の分化と成熟に強力に影響する。ＤＣ又は全ての白血球でＩｔｇｂ８がノックアウトされたマウスでは、ＴＧＦβに依存する抗原特異的Ｔｈ１７細胞の誘導が劇的に阻害され、多発性硬化症（実験的自己免疫性脳脊髄炎）及びアレルギー性喘息などの自己免疫の特定の前臨床モデルにおいて、臓器の機能障害が生じる（Travis et al. Nature. 449(7160):361-5, 2007；Melton et al. J Clin. Invest. 120(12):4436-44, 2010）。

ＴＧＦβは、腫瘍への免疫抑制細胞の分化と動員の両者において、また、免疫が抑制された腫瘍微小環境に寄与する腫瘍の内因性因子として役割を果たす。一部のがんでは、ＴＧＦβは、血管新生、転移、上皮間葉転換、そして、おそらく最も重要なこととして、浸潤性免疫細胞の抑制を含む腫瘍微小環境の多くの点に影響を与えることにより、腫瘍を促進する可能性がある。

したがって、腫瘍微小環境におけるＴＧＦβの顕著な役割及び全身においてＴＧＦβシグナル伝達を標的とすることに関連する多くの難題（Hata and Akhurst Nat. Rev. Drug Dev. 11, 791-811, 2012；Akhurst et al. Cold Spring Harbor Perspectives 10, 2017；Flavell et al. Nat. Rev. Immunol. 10:554-567, 2010）を考慮して、αｖβ８依存性の潜在型ＴＧＦβ活性化の選択的な阻害に対する戦略を開発する必要がある。

本明細書では、αｖβ８インテグリン（本明細書では「ＡＶＢ８」、「αｖβ８」又は「ａｖｂ８」ともいう）（例．ヒト、マウス、カニクイザル及び／又はラットのαｖβ８インテグリン）に特異的に結合する抗体（例．ヒト化抗体及びキメラ抗体）及びその抗原結合断片について開示する。ある態様では、抗体及びその抗原結合断片はαｖβ８インテグリンに結合し、そして最終的に、例えば、腫瘍又は腫瘍微小環境におけるＴＧＦβ（例．ＴＧＦβ１及びＴＧＦβ３）のシグナル伝達を低下する。

成熟ＴＧＦβは、潜在型関連ペプチド（ＬＡＰ）ドメインとの複合体として不活性又は潜在的な形で存在する。αｖβ８インテグリンがＬＡＰに結合すると、活性なＴＧＦβ（例．ＴＧＦβ１及びＴＧＦβ３）が放出される。αｖβ８インテグリンとＬＡＰの結合を減少させると、活性なＴＧＦβの放出を防ぐことができ、それによってＴＧＦβのシグナル伝達が減少する。ＴＧＦβは、例えば、腫瘍微小環境では免疫抑制効果を示すことが知られており、したがって、本発明の抗体によるＴＧＦβ活性及び／又はシグナル伝達の低下は、免疫応答、例えば、in vivoでの抗腫瘍応答の活性化をもたらす可能性がある。

免疫細胞（例．樹状細胞、制御性Ｔ細胞、腫瘍関連マクロファージ）及び腫瘍細胞におけるαｖβ８インテグリンの発現の制限のため、本発明の抗体は、ＴＧＦβシグナル伝達のより標的化された非全身的な減少をもたらす可能性がある。したがって、本発明の抗体及びその抗原結合断片は、免疫系及び／又は腫瘍微小環境におけるＴＧＦβ活性に対してより選択的な拮抗を可能にし、それにより、対象における抗腫瘍免疫応答を増強する。明細書に記載されたある態様では、αｖβ８インテグリンに対する抗体は、例えば、扁平上皮癌、乳癌及び／又は結腸癌を含むいくつかのがんの動物モデルにおいて、単独で、又は、他のチェックポイント阻害剤のモジュレーター（例．ＰＤ-１、ＰＤ-Ｌ１、ＣＴＬＡ-４の阻害剤、４-１ＢＢのアゴニスト）のような免疫調節剤若しくは抗がん療法（例．放射線療法）と組み合わせて、増殖抑制及び／又は完全な腫瘍退縮を引き起こすことが示されている。

したがって、ある態様では、本明細書は、αｖβ８インテグリンと高い親和性及び特異性で結合する抗体及びその抗原結合断片、抗体及びその抗原結合断片をコードする核酸、発現ベクター、宿主細胞並びにこれらの製造方法を開示する。ある態様では、抗体及びその抗原結合断片は、エフェクター機能が変化（例．抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）の減少及び／又は補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）の減少）している。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体及びその抗原結合断片は、それらが由来するマウスハイブリドーマ抗体及びその抗原結合断片と比較して、αｖβ８インテグリンに対する結合親和性が増強している。本発明のヒト化抗αｖβ８インテグリン抗体及びその抗原結合断片は、癌性障害（例．充実性腫瘍及び軟部腫瘍）などの障害を治療、予防及び／又は診断するために、単独で、又は他の薬剤若しくは治療方法（例．免疫修飾物質又は抗がん療法）と組み合わせて使用することができる。したがって、αｖβ８インテグリンを検出するための組成物及び方法、並びに抗αｖβ８インテグリン抗体及びその抗原結合断片を使用してがんを含むさまざまな障害を治療する方法を開示する。

当業者は、本明細書に記載された発明の特定の態様と同等の多くのものを、認識し、又は、通常の実験のみによって確認することができる。そのような同等物は、以下の実施の態様（Ｅ）に含まれることが意図されている。

Ｅ１ αｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、前記抗体又はその抗原結合断片は、以下のi.～xix.の少なくとも１つの特性：
i. その全体が本明細書に組み込まれ、例えば、本明細書の配列番号２０～３３及び７１～７６で示されるアミノ酸配列について確認する米国特許第9,969,804号に記載されたマウス抗体ADWA11のＫＤよりも小さい、例えば約５３６ｐＭ未満（例．１、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、３７０、４００、４５０、５００、５１０、５２０、５３０、５３１、５３２、５３３、５３４又は５３５ｐＭ）の、ヒトαｖβ８インテグリンに対する結合親和性（ＫＤ）；
ii. ２００ｐＭ以下（例．１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、１８０、１９０又は２００ｐＭ）のヒトαｖβ８インテグリン、例えば精製ヒトαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
iii １００ｐＭ以下である精製ヒトαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
iv. マウス抗体ADWA11のＫＤよりも小さい、例えば約４８９ｐＭ未満（例．１、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、３７０、４００、４５０、４６０、４７０、４８０、４８５、４８６、４８７又は４８８ｐＭ）の、マウスαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
v. ７０．８±１９．９ｐＭである精製マウスαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
vi. マウス抗体ADWA11のＫＤよりも小さい、例えば５０７ｐＭ未満（例．１、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、３７０、４００、４５０、５００、５０１、５０２、５０３、５０４、５０５又は５０６ｐＭ）の、カニクイザルαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
vii. １００ｐＭ以下である精製カニクイザルαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
viii. 約１６０ｐＭであるラットαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
ix. 例えばBiacore親和性アッセイにより求めた、例えば１００ｐＭ未満（例．１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９５又は９８ｐＭ）のＫＤである、ヒト、カニクイザル、マウス及びラットのαｖβ８インテグリンの少なくとも２つ、３つ又は全てに対してほぼ同等の親和性；
x. マウス抗体ADWA11よりも小さい、例えば、１８３ｐＭ未満（例．１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１７５、１８０、１８１又は１８２ｐＭ）のＴＧＦβトランス活性化阻害のＩＣ５０；
xi. 約１９９±９３．６ｐＭであるＵ２５１細胞におけるＴＧＦβトランス活性化阻害のＩＣ５０；
xii. 約１００ｐＭ～約３００ｐＭであるＴＧＦβトランス活性化阻害のＩＣ５０；
xiii. 約１２６±３４ｐＭ（例．約５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１１５、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０又は１９０ｐＭ）であるＵ２５１細胞に対するＥＣ５０；
xiv. 約２５６±１１５ｐＭ（例．約１２０、１４０、１６０、１８０、２００、２２０、２４０、２６０、２８０、２９０、３００、３２０、３４０、３６０、３８０、４００ｐＭ）であるＵ２５１細胞に対するＥＣ５０；
xv. 約８０ｐＭ～約４００ｐＭであるＵ２５１細胞に対するＥＣ５０；
xvi. 約１１５ｐＭであるＣ８-Ｓ細胞に対するＥＣ５０；
xvii. 約１４５±２３．７ｐＭであるＣ８-Ｓ細胞に対するＥＣ５０；
xviii. 約１１０ｐＭ～約１８０ｐＭであるＣ８-Ｓ細胞に対するＥＣ５０；
xix. 以下のa～iから選択される少なくとも１つのヒト薬物動態（ＰＫ）パラメーターの予測値
a 約０．１２～０．１５ｍＬ／ｈ／ｋｇである中央コンパートメントからのクリアランス（ＣＬ）；
b 約０．１５～０．５１ｍＬ／ｈ／ｋｇであるコンパートメント間分配クリアランス（ＣＬＦ）；
c 約３６～３９ｍＬ／ｋｇである中央コンパートメントの分布容積（Ｖ１）；
d 約２１～３３ｍＬ／ｋｇである周辺コンパートメントの分布容積（Ｖ２）；及び／又は
e 約１２日である半減期（ｔ_１／２）；
f 約１５～１７日である半減期（ｔ_１／２）；又は
i ヒトＦｃγ受容体又はＣ１ｑへの検出可能な結合の不在、
を有する、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２ 前記ヒトαｖβ８インテグリンに対するＫＤは、マウス抗体ADWA11のＫＤよりも小さく、例えば５３６ｐＭ未満（例．１、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、３７０、４００、４５０、５００、５１０、５２０、５３０、５３１、５３２、５３３、５３４又は５３５ｐＭ）である、態様Ｅ１に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ３ 前記ヒトαｖβ８インテグリン、例えば精製ヒトαｖβ８インテグリンに対するＫＤは、１００ｐＭ以下（例．１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０又は１００ｐＭ）である、態様Ｅ１又はＥ２に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ４ 前記マウスαｖβ８インテグリンに対するＫＤは、マウス抗体ADWA11のＫＤよりも小さく、例えば４８９ｐＭ未満（例．１、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、３７０、４００、４５０、４６０、４７０、４８０、４８５、４８６、４８７又は４８８ｐＭ）である、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ５ 前記マウスαｖβ８インテグリンに対するＫＤは約７０．８±１９．９ｐＭである、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ６ 前記カニクイザルαｖβ８インテグリンに対するＫＤは、マウス抗体ADWA11のＫＤよりも小さく、例えば５０７ｐＭ未満（例．１、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、３７０、４００、４５０、５００、５０１、５０２、５０３、５０４、５０５又は５０６ｐＭ）である、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ７ 前記カニクイザルαｖβ８インテグリンに対するＫＤは１００ｐＭ未満である、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ８ 前記ラットαｖβ８インテグリンに対するＫＤは約１６０ｐＭである、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ９ 前記単離された抗体又はその抗原結合断片は、例えばBiacore親和性アッセイにより求めた、例えば１００ｐＭ未満（例．１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９５ｐＭ）のＫＤである、ヒト、カニクイザル、マウス及びラットのαｖβ８インテグリンの少なくとも２つ、３つ又は全てに対してほぼ同等の親和性を示す、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１０ 前記単離された抗体又はその抗原結合断片は、例えばBiacore親和性アッセイにより求めた、例えば１００ｐＭ未満（例．１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９５又は９８ｐＭ）のＫＤである、ヒト、カニクイザル、マウス及びラットのαｖβ８インテグリンの少なくとも２つ、３つ又は全てに対してほぼ同等の親和性を示す、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。

Ｅ１１ 前記ＴＧＦβトランス活性化阻害のＩＣ５０は、マウス抗体ADWA11よりも小さい、例えば、１８３ｐＭ未満（例．１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１７５、１８０、１８１又は１８２ｐＭ）である、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１２ 前記Ｕ２５１細胞におけるＴＧＦβトランス活性化阻害のＩＣ５０は約１９９±９３．６ｐＭである、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１３ 前記ＴＧＦβトランス活性化阻害のＩＣ５０は約１００ｐＭ～約３００ｐＭである、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１４ 前記Ｕ２５１細胞に対するＥＣ５０は１２６ｐＭ（±３４ｐＭ、標準偏差）である、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１５ 前記Ｕ２５１細胞に対するＥＣ５０は２５６ｐＭ（±１１５ｐＭ、標準偏差）である、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１６ 前記Ｕ２５１細胞に対するＥＣ５０は約１００ｐＭ～約４００ｐＭである、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１７ 前記Ｃ８-Ｓ細胞に対するＥＣ５０は約１１５ｐＭである、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１８ 前記Ｃ８-Ｓ細胞に対するＥＣ５０は約１４５±２３．７ｐＭである、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１９ 前記Ｃ８-Ｓ細胞に対するＥＣ５０は約１１０ｐＭ～約１８０ｐＭである、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２０ 以下の(i)～(v)から成る群から選択される少なくとも１つのヒト薬物動態（ＰＫ）パラメーターの予測値
(i) 約０．１２～０．１５ｍＬ／ｈ／ｋｇである中央コンパートメントからのクリアランス（ＣＬ）；
(ii) 約０．１５～０．５１ｍＬ／ｈ／ｋｇであるコンパートメント間分配クリアランス（ＣＬＦ）；
(iii) 約３６～３９ｍＬ／ｋｇである中央コンパートメントの分布容積（Ｖ１）；
(iv) 約２１～３３ｍＬ／ｋｇである周辺コンパートメントの分布容積（Ｖ２）；及び／又は
(v) 約１２～１７日である半減期（ｔ_１／２）
を有する、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。

Ｅ２１ 単離された抗体又はその抗原結合断片は、ヒトＦｃγ受容体又はＣ１ｑへの検出可能な結合を示さない、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２２ 前記抗体又はその抗原結合断片は、さらに、以下の(i)～(xvii)の少なくとも１つの特性：
(i) αｖβ８インテグリン（例えば、ヒト、マウス、カニクイザル及び／又はラットのαｖβ８インテグリン）に特異的に結合する；
(ii) αｖβ８インテグリンと潜伏関連ペプチド（ＬＡＰ）の相互作用を減少する；
(iii) ＴＧＦ-βシグナル伝達を低減する；
(iv) １０ｎＭ以下のＩＣ５０でαｖβ８インテグリンによるＴＧＦβ活性化を効果的に阻止する；
(v) 非ヒト霊長類（ＮＨＰ）オルソログに対する同等のＫｄ（５倍以内）を有する；
(vi) ヒトαｖβ８と選択的に結合するが、αｖβ８のホモログ（例．αｖβ１、αｖβ３、αｖβ５及びαｖβ６）との結合は検出可能ではない；
(vii) 単独で、又は、免疫調節剤（例．ＰＤ-１、ＰＤ-Ｌ１、ＣＴＬＡ-４の阻害剤のようなチェックポイント阻害剤のモジュレーター、又は、４-１ＢＢのような刺激分子のアゴニスト）と組み合わせて、がんの動物モデルにおいて増殖抑制及び／又は完全な腫瘍退縮を引き起こす；
(viii) 放射線療法のような抗がん治療と組み合わせて、がんの動物モデルにおいて、増殖抑制及び／又は完全な腫瘍退縮を引き起こす；
(ix) 同系腫瘍移植モデルにおいて、単独で、又は免疫調節剤（例、ＰＤ-１、ＰＤ-Ｌ１又はＣＴＬＡ-４の阻害）と組み合わせて、例えば、１０ｍｇ／ｋｇ以下を投与した場合に、腫瘍増殖を少なくとも６０％減少する；
(x) 対象に投与した場合、１つ以上の免疫調節剤（例．ＰＤ-１、ＰＤ-Ｌ１又はＣＴＬＡ-４のアンタゴニストのようなチェックポイント阻害剤のアンタゴニスト、又は、４-１ＢＢアゴニストのような免疫応答の活性化因子）の存在下で抗腫瘍反応を増加させる；
(xi) 腫瘍モデルにおいてαｖβ８インテグリンの発現にかかわらず有効である；
(xii) 腫瘍微小環境においてＣＤ８＋ＧｚｍＢ＋Ｔ細胞を増加させる；
(xiii) 例えば扁平上皮癌、乳癌及び／又は結腸癌の同系モデルにおいて、チェックポイント阻害剤のアンタゴニスト（例．抗ＰＤ-１又は抗ＰＤ-Ｌ１抗体）と共に用いた場合、腫瘍増殖を減少、例えば少なくとも８０％を超えて減少する；
(xiv) カプランマイヤー分析による、対象の全生存期間の統計的に有意な改善を示す；
(xv) 熱安定性に優れる；
(xvi) 高濃度でほとんど凝集しない；及び
(xvii) 大規模な製造条件下で再現性のある発現及び純度を示すことが可能である；
を有する、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２３ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
(i) 配列番号８若しくは１４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号９若しくは１５で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号１０若しくは１６で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号１１若しくは１７で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号１２若しくは１８で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号１３若しくは１９で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３、又は
(ii) 配列番号８若しくは１４で示されるアミノ酸配列と比較して、アミノ酸が少なくとも１つ変化（例．置換、欠失又は付加、例．保存的置換）しているが、変化は２、３若しくは４以下であるＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号９若しくは１５で示されるアミノ酸配列と比較して、アミノ酸が少なくとも１つ変化（例．置換、欠失又は付加、例．保存的置換）しているが、変化は２、３若しくは４以下であるＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号１０若しくは１６で示されるアミノ酸配列と比較して、アミノ酸が少なくとも１つ変化（例．置換、欠失又は付加、例．保存的置換）しているが、変化は２、３若しくは４以下であるＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号１１若しくは１７で示されるアミノ酸配列と比較して、アミノ酸が少なくとも１つ変化（例．置換、欠失又は付加、例．保存的置換）しているが、変化は２、３若しくは４以下であるＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号１２若しくは１８で示されるアミノ酸配列と比較して、アミノ酸が少なくとも１つ変化（例．置換、欠失又は付加、例．保存的置換）しているが、変化は２、３若しくは４以下であるＣＤＲ-Ｌ２、
配列番号１３若しくは１９で示されるアミノ酸配列と比較して、アミノ酸が少なくとも１つ変化（例．置換、欠失又は付加、例．保存的置換）しているが、変化は２、３若しくは４以下であるＣＤＲ-Ｌ３、
（任意に、前記ＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２、ＣＤＲ-Ｈ３、ＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２又はＣＤＲ-Ｌ３のいずれも、
(a) それぞれ、配列番号２２、２３、２４、２５、２６及び２７、
(b) それぞれ、配列番号２８、２９、３０、３１、３２及び３３、
(c) それぞれ、配列番号２２、２３、２４、７１、７２及び７３、又は
(d) それぞれ、配列番号２８、２９、３０、７４、７５及び７６
で示されるアミノ酸配列を含まない）
から選択される重鎖可変領域（例．Ｈ１、Ｈ２又はＨ３）の１つ、２つ若しくは３つのＣＤＲ、及び／又は軽鎖可変領域（例．Ｌ１、Ｌ２又はＬ３）の１つ、２つ若しくは３つのＣＤＲを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。

前記抗体又はその抗原結合断片は、必要に応じて本明細書に記載の実施の形態（例．Ｅ１～Ｅ２３）のいずれかと組み合わせて、以下の性質、特徴及び実施の形態の１つ以上を有する。

Ｅ２４ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
(i) 配列番号８で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号９で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号１０で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号１１で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号１２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２及び
配列番号１３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３、又は
(ii) 配列番号８で示されるアミノ酸配列と比較して、アミノ酸が少なくとも１つ変化（例．置換、欠失又は付加、例．保存的置換）しているが、変化は２、３若しくは４以下であるＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号９で示されるアミノ酸配列と比較して、アミノ酸が少なくとも１つ変化（例．置換、欠失又は付加、例．保存的置換）しているが、変化は２、３若しくは４以下であるＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号１０で示されるアミノ酸配列と比較して、アミノ酸が少なくともつ変化（例．置換、欠失又は付加、例．保存的置換）しているが、変化は２、３若しくは４以下であるＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号１１で示されるアミノ酸配列と比較して、アミノ酸が少なくとも１つ変化（例．置換、欠失又は付加、例．保存的置換）しているが、変化は２、３若しくは４以下であるＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号１２で示されるアミノ酸配列と比較して、アミノ酸が少なくとも１つ変化（例．置換、欠失又は付加、例．保存的置換）しているが、変化は２、３若しくは４以下であるＣＤＲ-Ｌ２、
配列番号１３で示されるアミノ酸配列と比較して、アミノ酸が少なくとも１つ変化（例．置換、欠失又は付加、例．保存的置換）しているが、変化は２、３若しくは４以下であるＣＤＲ-Ｌ３、
（任意に、前記ＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２、ＣＤＲ-Ｈ３、ＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２又はＣＤＲ-Ｌ３のいずれも、
(a) それぞれ、配列番号２２、２３、２４、２５、２６及び２７、又は
(b) それぞれ、配列番号２２、２３、２４、７１、７２及び７３
で示されるアミノ酸配列を含まない）
から選択される重鎖可変領域（例．Ｈ１、Ｈ２又はＨ３）の１つ、２つ若しくは３つのＣＤＲ、及び／又は軽鎖可変領域（例．Ｌ１、Ｌ２又はＬ３）の１つ、２つ若しくは３つのＣＤＲを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２５ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号９で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号１１で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号１２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号１３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
から選択される重鎖可変領域（例．Ｈ１、Ｈ２又はＨ３）の１つ、２つ若しくは３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）、及び／又は軽鎖可変領域（例．Ｌ１、Ｌ２又はＬ３）の１つ、２つ若しくは３つのＣＤＲを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２６ 配列番号８で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号９で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、及び
配列番号１０で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３
を含む、態様Ｅ２４又はＥ２５に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２７ 配列番号１１で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号１２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び、
配列番号１３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含む、態様Ｅ２４～Ｅ２６のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２８ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号８で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号９で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号１０で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号１１で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号１２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号１３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２９ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
アミノ酸配列ＤＹＹＭＮ（配列番号８）を含むＣＤＲ-Ｈ１；
アミノ酸配列ＷＩＤＰＤＸ_１ＧＮＴＩＹＸ_２ＰＫＦＱＧ（Ｘ_１は、アミノ酸、Ｎ以外のアミノ酸、Ｎの保存的置換、Ｎ又はＱのいずれか、Ｘ_２は、アミノ酸、Ｄ以外のアミノ酸、Ｄの保存的置換、Ｄ又はＥのいずれかである）（配列番号１３１）を含むＣＤＲ-Ｈ２；
アミノ酸配列ＲＬＬＭＤＹ（配列番号１０）を含むＣＤＲ-Ｈ３；
アミノ酸配列ＲＳＴＫＳＬＸ_３ＨＦＮＧＮＴＹＬＦ（Ｘ_３は、アミノ酸、Ｌ以外のアミノ酸、Ｌの保存的置換、Ｌ又はＳのいずれかである）（配列番号１３２）を含むＣＤＲ-Ｌ１；
アミノ酸配列ＹＹＭＳＸ_４ＬＡＳ（Ｘ_４は、アミノ酸、Ｎ以外のアミノ酸、Ｎの保存的置換、Ｎ又はＳのいずれかである）（配列番号１３３）を含むＣＤＲ-Ｌ２；及び／又は
アミノ酸配列Ｘ_５ＱＳＬＥＹＰＦＴ（Ｘ_５は、アミノ酸、Ｍ以外のアミノ酸、Ｍの保存的置換、Ｍ又はＱのいずれかである）（配列番号１３４）を含むＣＤＲ-Ｌ３；
（例えば、前記ＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２、ＣＤＲ-Ｈ３、ＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３は、それぞれ配列番号２２、２３、２４、２５、２６及び２７、又は、それぞれ配列番号２２、２３、２４、７１、７２及び７３で示されるアミノ酸配列を含まない）
から選択される重鎖可変領域（例．Ｈ１、Ｈ２又はＨ３）の１つ、２つ若しくは３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）、及び／又は軽鎖可変領域（例．Ｌ１、Ｌ２又はＬ３）の１つ、２つ若しくは３つのＣＤＲを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ３０ Ｘ_１はＱであり、かつ、Ｘ_２はＥである、態様Ｅ２９に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。

Ｅ３１ Ｘ_３はＳである、態様Ｅ２９又はＥ３０に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ３２ Ｘ_４はＳである、態様Ｅ２９～Ｅ３１のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ３３ Ｘ_５はＱである、態様Ｅ２９～Ｅ３２のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ３４ Ｘ_１はＱであり、Ｘ_２はＥであり、Ｘ_３はＳであり、かつ、Ｘ_５はＱである、態様Ｅ２９に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ３５ Ｘ_１はＱであり、Ｘ_２はＥであり、かつ、Ｘ_３はＳである、態様Ｅ２９に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ３６ Ｘ_１はＱであり、Ｘ_２はＥであり、Ｘ_３はＳであり、Ｘ_４はＳであり、かつ、Ｘ_５はＱである、態様Ｅ２９に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ３７ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
アミノ酸配列ＤＹＹＭＮ（配列番号８）を含むＣＤＲ-Ｈ１；
アミノ酸配列ＷＩＤＰＤＸ_１ＧＸ_２ＴＩＹＸ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｇ（Ｘ_１は、アミノ酸、Ｎ以外のアミノ酸、Ｎの保存的置換、Ｎ又はＱのいずれか、Ｘ_２は、アミノ酸、Ｎ以外のアミノ酸、Ｎの保存的置換、Ｎ又はＱのいずれか、Ｘ_３は、アミノ酸、Ｄ以外のアミノ酸、Ｄの保存的置換、Ｄ又はＥのいずれか、Ｘ_４は、アミノ酸、Ｐ以外のアミノ酸、Ｐの保存的置換、Ｐ、Ｑ、Ｄ又はＡのいずれか、Ｘ_５は、アミノ酸、Ｋ以外のアミノ酸、Ｋの保存的置換、Ｋ、Ｓ又はＡのいずれか、Ｘ_６は、アミノ酸、Ｆ以外のアミノ酸、Ｆの保存的置換、Ｆ又はＶのいずれか、Ｘ_７は、アミノ酸、Ｑ以外のアミノ酸、Ｑの保存的置換、Ｑ又はＫのいずれかである）（配列番号１６７）を含むＣＤＲ-Ｈ２；
アミノ酸配列ＲＬＬＭＤＹ（配列番号１０）を含むＣＤＲ-Ｈ３；
アミノ酸配列ＲＳＴＫＳＸ_８Ｘ_９ＨＦＮＧＮＸ_１０ＹＬＦ（Ｘ_８は、アミノ酸、Ｌ以外のアミノ酸、Ｌの保存的置換、Ｌ又はＩのいずれか、Ｘ_９は、アミノ酸、Ｌ以外のアミノ酸、Ｌの保存的置換、Ｌ又はＳのいずれか、Ｘ_１０は、アミノ酸、Ｔ以外のアミノ酸、Ｔの保存的置換、Ｔ又はＳのいずれかである）（配列番号１６８）を含むＣＤＲ-Ｌ１；
アミノ酸配列ＹＸ_１１Ｘ_１２ＳＸ_１３ＬＸ_１４Ｓ（Ｘ_１１は、アミノ酸、Ｙ以外のアミノ酸、Ｙの保存的置換、Ｙ又はＡのいずれか、Ｘ_１２は、アミノ酸、Ｍ以外のアミノ酸、Ｍの保存的置換、Ｍ又はＡのいずれか、Ｘ_１３は、アミノ酸、Ｎ以外のアミノ酸、Ｎの保存的置換、Ｎ又はＳのいずれか、Ｘ_１４は、アミノ酸、Ａ以外のアミノ酸、Ａの保存的置換、Ａ又はＱのいずれかである）（配列番号１６９）を含むＣＤＲ-Ｌ２；及び／又は
アミノ酸配列Ｘ_１５ＱＳＸ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８ＰＸ_１９Ｔ（Ｘ_１５は、アミノ酸、Ｍ以外のアミノ酸、Ｍの保存的置換、Ｍ又はＱのいずれか、Ｘ_１６は、アミノ酸、Ｌ以外のアミノ酸、Ｌの保存的置換、Ｌ又はＹのいずれか、Ｘ_１７は、アミノ酸、Ｅ以外のアミノ酸、Ｅの保存的置換、Ｅ又はＳのいずれか、Ｘ_１８は、アミノ酸、Ｙ以外のアミノ酸、Ｙの保存的置換、Ｙ又はＴのいずれか、Ｘ_１９は、アミノ酸、Ｆ以外のアミノ酸、Ｆの保存的置換、Ｆ、Ｌ又はＷのいずれかである）（配列番号１７０）を含むＣＤＲ-Ｌ３；
（例えば、前記ＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２、ＣＤＲ-Ｈ３、ＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３は、それぞれ配列番号２２、２３、２４、２５、２６及び２７、又は、それぞれ配列番号２２、２３、２４、７１、７２及び７３で示されるアミノ酸配列を含まず、任意に、
Ｘ_１はＱ、Ｘ_２はＮ、Ｘ_３はＥ、Ｘ_４はＰ、Ｘ_５はＫ、Ｘ_６はＦ及びＸ_７はＱであり、
Ｘ_８はＬ、Ｘ_９はＳ及びＸ_１０はＴであり、
Ｘ_１１はＹ、Ｘ_１２はＭ、Ｘ_１３はＳ及びＸ_１４はＡであり、並びに／又は、
Ｘ_１５はＱ、Ｘ_１６はＬ、Ｘ_１７はＥ、Ｘ_１８はＹ及びＸ_１９はＦである）
から選択される重鎖可変領域（例．Ｈ１、Ｈ２又はＨ３）の１つ、２つ若しくは３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）、及び／又は軽鎖可変領域（例．Ｌ１、Ｌ２又はＬ３）の１つ、２つ若しくは３つのＣＤＲを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ３８ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
アミノ酸配列ＤＹＹＭＮ（配列番号８）を含むＣＤＲ-Ｈ１；
アミノ酸配列ＷＩＤＰＤＸ_１ＧＮＴＩＹＸ_２ＰＫＸ_３ＱＧ（Ｘ_１は、アミノ酸、Ｎ以外のアミノ酸、Ｎの保存的置換、Ｎ又はＱのいずれか、Ｘ_２は、アミノ酸、Ｄ以外のアミノ酸、Ｄの保存的置換、Ｄ又はＥのいずれか、Ｘ_３は、アミノ酸、Ｆ以外のアミノ酸、Ｆの保存的置換、Ｆ又はＶのいずれかである）（配列番号１７１）を含むＣＤＲ-Ｈ２；
アミノ酸配列ＲＬＬＭＤＹ（配列番号１０）を含むＣＤＲ-Ｈ３；
アミノ酸配列ＲＳＴＫＳＬＸ_４ＨＦＮＧＮＴＹＬＦ（Ｘ_４は、アミノ酸、Ｌ以外のアミノ酸、Ｌの保存的置換、Ｌ又はＳのいずれかである）（配列番号１７２）を含むＣＤＲ-Ｌ１；
アミノ酸配列ＹＹＸ_５ＳＸ_６ＬＡＳ（Ｘ_５は、アミノ酸、Ｍ以外のアミノ酸、Ｍの保存的置換、Ｍ又はＡのいずれか、Ｘ_６は、アミノ酸、Ｎ以外のアミノ酸、Ｎの保存的置換、Ｎ又はＳのいずれかである）（配列番号１７３）を含むＣＤＲ-Ｌ２；及び／又は
アミノ酸配列Ｘ_７ＱＳＸ_８ＥＹＰＦＴ（Ｘ_７は、アミノ酸、Ｍ以外のアミノ酸、Ｍの保存的置換、Ｍ又はＱのいずれか、Ｘ_８は、アミノ酸、Ｌ以外のアミノ酸、Ｌの保存的置換、Ｌ又はＹのいずれかである）（配列番号１７４）を含むＣＤＲ-Ｌ３；
（例えば、前記ＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２、ＣＤＲ-Ｈ３、ＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３は、それぞれ配列番号２２、２３、２４、２５、２６及び２７、又は、それぞれ配列番号２２、２３、２４、７１、７２及び７３で示されるアミノ酸配列を含まず、任意に、
Ｘ_１はＱ、Ｘ_２はＥ及びＸ_３はＦであり、
Ｘ_４はＳであり、
Ｘ_５はＭ及びＸ_６はＳであり、並びに／又は、
Ｘ_７はＱ及びＸ_８はＬである）
から選択される重鎖可変領域（例．Ｈ１、Ｈ２又はＨ３）の１つ、２つ若しくは３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）、及び／又は軽鎖可変領域（例．Ｌ１、Ｌ２又はＬ３）の１つ、２つ若しくは３つのＣＤＲを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ３９ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号６で示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域のKabatの定義によるＣＤＲ配列の１つ、２つ又は３つを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ４０ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号７で示されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域のKabatの定義によるＣＤＲ配列の１つ、２つ又は３つを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。

Ｅ４１ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号６で示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域のKabatの定義によるＣＤＲ配列の１つ、２つ又は３つ、及び、配列番号７で示されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域のKabatの定義によるＣＤＲ-Ｌ１配列の１つ、２つ又は３つを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ４２ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号１８９、１９０又は１９１で示される核酸配列によってコードされたポリペプチドのKabatの定義によるＣＤＲ配列の１つ、２つ又は３つを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ４３ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号１８５又は１８６で示される核酸配列によってコードされたポリペプチドのKabatの定義によるＣＤＲ配列の１つ、２つ又は３つを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ４４ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号１８９、１９０又は１９１で示される核酸配列によってコードされたポリペプチドのKabatの定義によるＣＤＲ配列の１つ、２つ又は３つ、及び、配列番号１８５又は１８６で示される核酸配列によってコードされたポリペプチドのKabatの定義によるＣＤＲ配列の１つ、２つ又は３つを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ４５ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
(i) 配列番号１４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号１５で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号１６で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号１７で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号１８で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２及び
配列番号１９で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３；又は
(ii) 配列番号１４で示されるアミノ酸配列と比較して、アミノ酸が少なくとも１つ変化（例．置換、欠失又は付加、例．保存的置換）しているが、変化は２、３若しくは４以下であるＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号１５で示されるアミノ酸配列と比較して、アミノ酸が少なくとも１つ変化（例．置換、欠失又は付加、例．保存的置換）しているが、変化は２、３若しくは４以下であるＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号１６で示されるアミノ酸配列と比較して、アミノ酸が少なくとも１つ変化（例．置換、欠失又は付加、例．保存的置換）しているが、変化は２、３若しくは４以下であるＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号１７で示されるアミノ酸配列と比較して、アミノ酸が少なくとも１つ変化（例．置換、欠失又は付加、例．保存的置換）しているが、変化は２、３若しくは４以下であるＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号１８で示されるアミノ酸配列と比較して、アミノ酸が少なくとも１つ変化（例．置換、欠失又は付加、例．保存的置換）しているが、変化は２、３若しくは４以下であるＣＤＲ-Ｌ２、若しくは
配列番号１９で示されるアミノ酸配列と比較して、アミノ酸が少なくとも１つ変化（例．置換、欠失又は付加、例．保存的置換）しているが、変化は２、３若しくは４以下であるＣＤＲ-Ｌ３、
（任意に、前記ＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２、ＣＤＲ-Ｈ３、ＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２若しくはＣＤＲ-Ｌ３のいずれも、
(a) それぞれ、配列番号２８、２９、３０、３１、３２及び３３、又は
(b) それぞれ、配列番号２８、２９、３０、７４、７５及び７６
で示されるアミノ酸配列を含まない）
から選択される１つ、２つ又は３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ４６ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号１５で示されるアミノ酸配列を含む相補性決定領域（ＣＤＲ）-Ｈ２、
配列番号１７で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、及び
配列番号１８で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２
から選択される１つ、２つ又は３つのＣＤＲを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ４７ 配列番号１４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号１５で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、及び
配列番号１６で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３
を含む、態様Ｅ４５又はＥ４６に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ４８ 配列番号１７で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号１８で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号１９で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含む、態様Ｅ４５～Ｅ４７のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ４９ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号１４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号１５で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号１６で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号１７で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号１８で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号１９で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ５０ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
アミノ酸配列ＧＦＮＩＫＤＹＹＭＮ（配列番号１４）を含むＣＤＲ-Ｈ１；
アミノ酸配列ＷＩＤＰＤＸ_１ＧＮ（Ｘ_１は、アミノ酸、Ｎ以外のアミノ酸、Ｎの保存的置換、Ｎ又はＱのいずれかである）（配列番号１３５）を含むＣＤＲ-Ｈ２；
アミノ酸配列ＲＬＬＭＤＹ（配列番号１６）を含むＣＤＲ-Ｈ３；
アミノ酸配列ＳＴＫＳＬＸ_２ＨＦＮＧＮＴＹＬ（Ｘ_２は、アミノ酸、Ｌ以外のアミノ酸、Ｌの保存的置換、Ｌ又はＳのいずれかである）（配列番号１３６）を含むＣＤＲ-Ｌ１；
アミノ酸配列ＹＹＭＳＸ_３（Ｘ_３は、アミノ酸、Ｎ以外のアミノ酸、Ｎの保存的置換、Ｎ又はＳのいずれかである）（配列番号１３７）を含むＣＤＲ-Ｌ２；及び
アミノ酸配列ＱＳＬＥＹＰＦＴ（配列番号１９）を含むＣＤＲ-Ｌ３；
（例えば、前記ＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２、ＣＤＲ-Ｈ３、ＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３は、それぞれ配列番号２８、２９、３０、３１、３２及び３３、又は、それぞれ配列番号２８、２９、３０、７４、７５及び７６で示されるアミノ酸配列を含まない）
を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。

Ｅ５１ Ｘ_１はＱであり、Ｘ_２はＳであり、かつ、Ｘ_３はＳである、態様Ｅ５０に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ５２ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
アミノ酸配列ＧＦＮＩＸ_１ＤＹＹＭＮ（Ｘ_１は、アミノ酸、Ｋ以外のアミノ酸、Ｋの保存的置換、Ｋ又はＡのいずれかである）（配列番号１７５）を含むＣＤＲ-Ｈ１；
アミノ酸配列ＷＩＤＰＤＸ_２ＧＸ_３（Ｘ_２は、アミノ酸、Ｎ以外のアミノ酸、Ｎの保存的置換、Ｎ又はＱのいずれか、Ｘ_３は、アミノ酸、Ｎ以外のアミノ酸、Ｎの保存的置換、Ｎ又はＱのいずれかである）（配列番号１７６）を含むＣＤＲ-Ｈ２；
アミノ酸配列ＲＬＬＭＤＹ（配列番号１６）を含むＣＤＲ-Ｈ３；
アミノ酸配列ＳＴＫＳＸ_４Ｘ_５ＨＦＮＧＮＸ_６ＹＬ（Ｘ_４は、アミノ酸、Ｌ以外のアミノ酸、Ｌの保存的置換、Ｌ又はＩのいずれか、Ｘ_５は、アミノ酸、Ｌ以外のアミノ酸、Ｌの保存的置換、Ｌ又はＳのいずれか、Ｘ_６は、アミノ酸、Ｔ以外のアミノ酸、Ｔの保存的置換、Ｔ又はＳのいずれかである）（配列番号１７７）を含むＣＤＲ-Ｌ１；
アミノ酸配列ＹＸ_７Ｘ_８ＳＸ_９（Ｘ_７は、アミノ酸、Ｙ以外のアミノ酸、Ｙの保存的置換、Ｙ又はＡのいずれか、Ｘ_８は、アミノ酸、Ｍ以外のアミノ酸、Ｍの保存的置換、Ｍ又はＡのいずれか、Ｘ_９は、アミノ酸、Ｎ以外のアミノ酸、Ｎの保存的置換、Ｎ又はＳのいずれかである）（配列番号１７８）を含むＣＤＲ-Ｌ２；及び
アミノ酸配列ＱＳＸ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２ＰＸ_１３Ｔ（Ｘ_１０は、アミノ酸、Ｌ以外のアミノ酸、Ｌの保存的置換、Ｌ又はＹのいずれか、Ｘ_１１は、アミノ酸、Ｅ以外のアミノ酸、Ｅの保存的置換、Ｅ又はＳのいずれか、Ｘ_１２は、アミノ酸、Ｙ以外のアミノ酸、Ｙの保存的置換、Ｙ又はＴのいずれか、Ｘ_１３は、アミノ酸、Ｆ以外のアミノ酸、Ｆの保存的置換、Ｆ、Ｌ又はＷのいずれかである）（配列番号１９７）を含むＣＤＲ-Ｌ３；
（例えば、前記ＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２、ＣＤＲ-Ｈ３、ＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３は、それぞれ配列番号２８、２９、３０、３１、３２及び３３、又は、それぞれ配列番号２８、２９、３０、７４、７５及び７６で示されるアミノ酸配列を含まず、任意に、
Ｘ_１はＱ、Ｘ_２はＮ、Ｘ_３はＥ、Ｘ_４はＰ、Ｘ_５はＫ、Ｘ_６はＦ及びＸ_７はＱであり、
Ｘ_８はＬ、Ｘ_９はＳ及びＸ_１０はＴであり、
Ｘ_１１はＹ、Ｘ_１２はＭ、Ｘ_１３はＳ及びＸ_１４はＡであり、並びに／又は、
Ｘ_１５はＱ、Ｘ_１６はＬ、Ｘ_１７はＥ、Ｘ_１８はＹ及びＸ_１９はＦである）
単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ５３ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
アミノ酸配列ＧＦＮＩＫＤＹＹＭＮ（配列番号１４）を含むＣＤＲ-Ｈ１；
アミノ酸配列ＷＩＤＰＤＸ_１ＧＮ（Ｘ_１は、アミノ酸、Ｎ以外のアミノ酸、Ｎの保存的置換、Ｎ又はＱのいずれかである）（配列番号１３５）を含むＣＤＲ-Ｈ２；
アミノ酸配列ＲＬＬＭＤＹ（配列番号１６）を含むＣＤＲ-Ｈ３；
アミノ酸配列ＳＴＫＳＬＸ_２ＨＦＮＧＮＴＹＬ（Ｘ_２は、アミノ酸、Ｌ以外のアミノ酸、Ｌの保存的置換、Ｌ又はＳのいずれかである）（配列番号１３６）を含むＣＤＲ-Ｌ１；
アミノ酸配列ＹＹＸ_３ＳＸ_４（Ｘ_３は、アミノ酸、Ｍ以外のアミノ酸、Ｍの保存的置換、Ｍ又はＡのいずれか、Ｘ_４は、アミノ酸、Ｎ以外のアミノ酸、Ｎの保存的置換、Ｎ又はＳのいずれかである）（配列番号１７９）を含むＣＤＲ-Ｌ２；及び
アミノ酸配列ＱＳＸ_５ＥＹＰＦＴ（Ｘ_５は、アミノ酸、Ｌ以外のアミノ酸、Ｌの保存的置換、Ｌ又はＹのいずれかである）（配列番号１８０）を含むＣＤＲ-Ｌ３
（例えば、前記ＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２、ＣＤＲ-Ｈ３、ＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３は、それぞれ配列番号２８、２９、３０、３１、３２及び３３、又は、それぞれ配列番号２８、２９、３０、７４、７５及び７６で示されるアミノ酸配列を含まず、任意に、
Ｘ_１はＱであり、
Ｘ_２はＳであり、
Ｘ_３はＭ及びＸ_４はＳであり、並びに／又は、
Ｘ_５はＬである）
単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ５４ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号６で示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域のChothiaの定義によるＣＤＲ配列の１つ、２つ又は３つを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ５５ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号７で示されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域のChothiaの定義によるＣＤＲ配列の１つ、２つ又は３つを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ５６ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号６で示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域のChothiaの定義によるＣＤＲ配列の１つ、２つ又は３つ、及び、配列番号７で示されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域のChothiaの定義によるＣＤＲ-Ｌ１配列の１つ、２つ又は３つを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ５７ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号１８９、１９０又は１９１で示される核酸配列によってコードされたポリペプチドのChothiaの定義によるＣＤＲ配列の１つ、２つ又は３つを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ５８ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号１８５又は１８６で示される核酸配列によってコードされたポリペプチドのChothiaの定義によるＣＤＲ配列の１つ、２つ又は３つを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ５９ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号１８９、１９０又は１９１で示される核酸配列によってコードされたポリペプチドのChothiaの定義によるＣＤＲ配列の１つ、２つ又は３つ、及び、配列番号１８５又は１８６で示される核酸配列によってコードされたポリペプチドのChothiaの定義によるＣＤＲ配列の１つ、２つ又は３つを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。

Ｅ６０ 前記抗体は、配列番号６、３４～４６、８８～９１又は９３のいずれか１つで示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域のＶＨフレームワーク領域と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％又は好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４の１つ、２つ、３つ又は４つ）を含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ６１ 前記抗体は、配列番号７、４７～６９又は９２のいずれか１つで示されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域のＶＬフレームワーク領域と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％又は好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４の１つ、２つ、３つ又は４つ）を含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ６２ 前記抗体は、IGHV3-07、IGHV1-46、IGHV3-23、IGHV3-30、IGHV1-69又はIGHV3-48の生殖細胞系列のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４の１つ、２つ、３つ又は４つ）を含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ６３ 前記抗体は、IGKV1-39、IGKV2-28、IGKV2-30、IGKV4-1又はIGKV3-11の生殖細胞系列のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４の１つ、２つ、３つ又は４つ）を含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ６４ 前記抗体は、配列番号６、３４～４６、８８～９１又は９３のいずれか１つで示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域のＶＨフレームワーク領域に１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２又は２３個の置換を含むアミノ酸配列を含むＶＨフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４の１つ、２つ、３つ又は４つ）を含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ６５ 前記抗体は、配列番号７、４７～６９又は９２のいずれか１つで示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域のＶＨフレームワーク領域に１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２又は２３個の置換を含むアミノ酸配列を含むＶＨフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４の１つ、２つ、３つ又は４つ）を含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ６６ 前記抗体は、IGHV3-07、IGHV1-46、IGHV3-23、IGHV3-30、IGHV1-69又はIGHV3-48の生殖細胞系列のアミノ酸配列に１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２又は２３個の置換を含むアミノ酸配列を含むＶＨフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４の１つ、２つ、３つ又は４つ）を含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ６７ 前記抗体は、IGKV1-39、IGKV2-28、IGKV2-30、IGKV4-1又はIGKV3-11の生殖細胞系列のアミノ酸配列に１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２又は２３個の置換を含むアミノ酸配列を含むＶＨフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４の１つ、２つ、３つ又は４つ）を含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ６８ ＥＵナンバリング（例えば、米国特許第5,624,821号参照）によるＥ２３３、Ｅ３１８、Ｋ３２０及びＲ３２２位に１つ以上の置換（例．Ｅ２３３Ｐ、Ｅ３１８Ａ、Ｋ３２０Ａ及びＲ３２２Ａ）を含むマウスＩｇＧ１のＦｃ領域、例えば、Ｅ２３３Ｐ、Ｅ３１８Ａ、Ｋ３２０Ａ及びびＲ３２２Ａ置換の１つ以上を含むマウスＩｇＧ１のＦｃ領域を含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ６９ ＥＵナンバリングによるＬ２３４、Ｌ２３５及びＧ２３７位に１つ以上の置換（例．Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＧ２３７Ａ）を含むヒトＩｇＧ１のＦｃ領域、例えば、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＧ２３７Ａ置換の１つ以上を含むヒトＩｇＧ１のＦｃ領域を含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ７０ 前記抗体は、IGHV3-07、IGHV1-46、IGHV3-23、IGHV3-30、IGHV1-69又はIGHV3-48の生殖細胞系列のＶＨアミノ酸配列の変異体を含むＶＨ領域をさらに含み、前記ＶＨ領域は、配列番号１２７で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、Ｔ２８、Ｆ２９、Ａ４９、Ｒ７２、Ｎ７４、Ａ７５及び／又はＬ７９位に１つ以上の置換（例．Ｔ２８Ｎ、Ｆ２９Ｉ、Ａ４９Ｇ、Ｒ７２Ａ、Ｎ７４Ｔ、Ａ７５Ｓ及びＬ７９Ａから選択される１つ以上の置換）を含み、場合によっては、前記ＶＨ領域は、
(i) Ｔ２８Ｎ及びＦ２９Ｉ；
(ii) Ｔ２８Ｎ、Ｆ２９Ｉ及びＲ７２Ａ；
(iii) Ｔ２８Ｎ、Ｆ２９Ｉ、Ｒ７２Ａ、Ａ４９Ｇ及びＬ７９Ａ；
(iv) Ｔ２８Ｎ、Ｆ２９Ｉ、Ｒ７２Ａ、Ｎ７４Ｔ及びＡ７５Ｓ；又は
(v) Ｔ２８Ｎ、Ｆ２９Ｉ、Ｒ７２Ａ、Ａ４９Ｇ、Ｌ７９Ａ、Ｎ７４Ｔ及びＡ７５Ｓ、
（ここで、(i)～(v)は配列番号１２７で示されるアミノ酸配列によるナンバリングである）の置換を含み、場合によっては、前記ＶＨ領域は、配列番号１２７で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、Ｔ２８Ｎ、Ｆ２９Ｉ、Ｒ７２Ａ、Ａ４９Ｇ、Ｌ７９Ａ、Ｎ７４Ｔ及びＡ７５Ｓの置換を含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。

Ｅ７１ 前記抗体は、配列番号１２７で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、
(a) ２８位のＡｓｎ、
(b) ２９位のＩｌｅ、
(c) ４９位のＧｌｙ、
(d) ７２位のＡｌａ、
(e) ７４位のＴｈｒ、
(f) ７５位のＳｅｒ、及び
(g) ７９位のＡｌａ
の１つ以上（例．２、３、４、５、６又は全て）を含むＶＨ領域をさらに含み、場合によっては、前記ＶＨ領域は、配列番号１２７で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、
(i) ２８位のＡｓｎ及び２９位のＩｌｅ、
(ii) ２８位のＡｓｎ、２９位のＩｌｅ及び７２位のＡｌａ、
(iii) ２８位のＡｓｎ、２９位のＩｌｅ、７２位のＡｌａ、４９位のＧｌｙ及び７９位のＡｌａ、
(iv) ２８位のＡｓｎ、２９位のＩｌｅ、７２位のＡｌａ、７４位のＴｈｒ及び７５位のＳｅｒ、又は
(v) ２８位のＡｓｎ、２９位のＩｌｅ、７２位のＡｌａ、４９位のＧｌｙ、７９位のＡｌａ、７４位のＴｈｒ及び７５位のＳｅｒ
を含み、場合によっては、
前記ＶＨ領域は、配列番号１２７で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、２８位のＡｓｎ、２９位のＩｌｅ、７２位のＡｌａ、４９位のＧｌｙ、７９位のＡｌａ、７４位のＴｈｒ、７５位のＳｅｒを含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ７２ 前記抗体は、IGKV1-39、IGKV2-28、IGKV2-30、IGKV4-1又はIGKV3-11の生殖細胞系列のＶＬアミノ酸配列の変異体を含むＶＬ領域をさらに含み、前記ＶＨ領域は、配列番号１２８で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、Ｙ３６及び／又はＬ４６位に１つ以上の置換（例．Ｙ３６Ｆ及び／又はＬ４６Ｒ）を含み、
場合によっては、前記ＶＬ領域は、
(i) Ｌ４６Ｒ又は
(ii) Ｌ４６Ｒ及びＹ３６Ｆ
（ここで、(i)、(ii)は配列番号１２８で示されるアミノ酸配列によるナンバリングである）の置換を含み、場合によっては、前記ＶＬ領域は、配列番号１２８で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、Ｌ４６Ｒ置換を含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ７３ 前記抗体は、配列番号１２８で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、
(a) ３６位のＴｙｒ、
(b) ４６位のＬｅｕ
の一方又は両者を含むＶＬ領域をさらに含み、場合によっては、前記ＶＬ領域は、配列番号１２８で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、
(i) ４６位のＬｅｕ、又は
(ii) ４６位のＬｅｕ及び３６位のＴｙｒ
を含み、場合によっては、
前記ＶＬ領域は、配列番号１２８で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで４６位のＬｅｕを含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ７４ 先行する態様のいずれか一つの、１つ以上のＣＤＲを含む、ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、前記１つ以上のＣＤＲは、アミノ酸が少なくとも１つ変化（例．置換、欠失又は付加、例．保存的置換）しているが、変化は２、３若しくは４以下であり、前記ＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２、ＣＤＲ-Ｈ３、ＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３は、それぞれ配列番号２２、２３、２４、２５、２６及び２７、それぞれ配列番号２２、２３、２４、７１、７２及び７３、それぞれ配列番号２８、２９、３０、３１、３２及び３３、又は、それぞれ配列番号２８、２９、３０、７４、７５及び７６で示されるアミノ酸配列を含まない、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ７５ 表１に示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域をさらに含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ７６ 表１に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域をさらに含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ７７ 配列番号６、３４～４６、８８～９１又は９３で示されるアミノ酸配列のいずれか一つと少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ７８ 配列番号６で示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む、態様Ｅ７７に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ７９ 配列番号７、４７～６９又は９２で示されるアミノ酸配列のいずれか一つと少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ８０ 配列番号７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％（例．１００％）の配列同一性を有するＶＬ領域を含む、態様Ｅ７９に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。

Ｅ８１ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号６、３４～４６、８８～９１又は９３で示されるアミノ酸配列のいずれか一つと少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ８２ 配列番号６で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％（例．１００％）の配列同一性を有するＶＨ領域を含む、態様Ｅ８１に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ８３ 配列番号７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％（例．１００％）の配列同一性を有するＶＬ領域を含む、態様Ｅ８１又はＥ８２に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ８４ 配列番号６で示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む、態様Ｅ８１に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ８５ 配列番号７で示されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含む、態様Ｅ８４に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ８６ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号７、４７～６９又は９２で示されるアミノ酸配列のいずれか一つと少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ８７ 配列番号７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％（例．１００％）の配列同一性を有するＶＬ領域を含む、態様Ｅ８６に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ８８ 配列番号６で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％（例．１００％）の配列同一性を有するＶＨ領域を含む、態様Ｅ８６又はＥ８７に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ８９ 配列番号７、４７～６９又は９２から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含む、態様Ｅ８６に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ９０ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号３９で示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含み、前記配列番号３９で示されるアミノ酸配列の１つ以上のアミノ酸残基は、Ｋ３０Ａ、Ｎ５５Ｑ、Ｎ５７Ｑ、Ｄ６１Ｅ、Ｐ６２Ａ、Ｋ６３Ａ及びＦ６４Ｖから選択される１つ以上のアミノ酸置換を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。

Ｅ９１ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号３９で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、
(a) ３０位のＡｌａ
(b) ５５位のＧｌｎ
(c) ５７位のＧｌｎ
(d) ６１位のＧｌｕ
(e) ６２位のＡｌａ
(f) ６３位のＡｌａ、及び
(g) ６４位のＶａｌ
の少なくとも１つを含むＶＨ領域を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ９２ 前記配列番号３９で示されるアミノ酸配列は、
(i) Ｎ５５Ｑ及びＤ６１Ｅ、又は
(ii) Ｎ５５Ｑ、Ｄ６１Ｅ及びＦ６４Ｖ
を含み、場合によっては、前記配列番号３９で示されるアミノ酸配列は、Ｎ５５Ｑ及びＤ６１Ｅ置換を含む、態様Ｅ９０に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ９３ 前記ＶＨ領域は、配列番号３９で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで
(i) ５５位のＧｌｎ及び６１位のＧｌｕ、又は
(ii) ５５位のＧｌｎ、６１位のＧｌｕ及び６４位のＶａｌ
を含み、場合によっては、前記ＶＨ領域は、配列番号３９で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで５５位のＧｌｎ及び６１位のＧｌｕを含む、態様Ｅ９１に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ９４ 配列番号４７で示されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域をさらに含み、前記配列番号４７で示されるアミノ酸配列の１つ以上のアミノ酸残基は、Ｌ３０Ｓ、Ｙ５５Ａ、Ｍ５６Ａ、Ｎ５８Ｓ、Ａ６０Ｑ、Ｍ９４Ｑ、Ｌ９７Ｙ、Ｆ１０１Ｌ、Ｆ１０１Ｗ及びＱ１０５Ｇから選択される１つ以上のアミノ酸置換を含み、場合によっては、前記配列番号４７で示されるアミノ酸配列の１つ以上のアミノ酸残基は、Ｌ３０Ｓ、Ｍ５６Ａ、Ｎ５８Ｓ、Ｍ９４Ｑ、Ｌ９７Ｙ及びＱ１０５Ｇから選択される１つ以上のアミノ酸置換を含む、態様Ｅ９０又はＥ９２に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ９５ 配列番号４７で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、
(a) ３０位のＳｅｒ、
(b) ５５位のＡｌａ、
(c) ５６位のＡｌａ、
(d) ５８位のＳｅｒ、
(e) ６０位のＧｌｎ、
(f) ９４位のＧｌｎ、
(g) ９７位のＴｙｒ、
(h) １０１位のＬｅｕ、
(i) １０１位のＴｒｐ、及び
(j) １０５位のＧｌｙ、
の少なくとも１つを含むＶＬ領域を含み、場合によっては、前記ＶＬ領域は、
(a) ３０位のＳｅｒ、
(b) ５６位のＡｌａ、
(c) ５８位のＳｅｒ、
(d) ９４位のＧｌｎ、
(e) ９７位のＴｙｒ、及び
(f) １０５位のＧｌｙ、
の少なくとも１つを含む、態様Ｅ９１又はＥ９３に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ９６ 前記配列番号４７で示されるアミノ酸配列は、Ｌ３０Ｓ、Ｍ５６Ａ、Ｎ５８Ｓ、Ｍ９４Ｑ、Ｌ９７Ｙ及び／又はＱ１０５Ｇ置換を含む、態様Ｅ９４に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ９７ 前記ＶＬ領域は、配列番号４７で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、３０位のＳｅｒ、５６位のＡｌａ、５８位のＳｅｒ、９４位のＧｌｎ、９７位のＴｙｒ及び／又は１０５位のＧｌｙを含む、態様Ｅ９５に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ９８ 前記配列番号４７で示されるアミノ酸配列は、Ｌ３０Ｓ、Ｎ５８Ｓ、Ｍ９４Ｑ及び／又はＱ１０５Ｇ置換を含み、場合によっては、前記配列番号４７で示されるアミノ酸配列は、Ｌ３０Ｓ、Ｎ５８Ｓ、Ｍ９４Ｑ及びＱ１０５Ｇ置換の全てを含む、態様Ｅ９４に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ９９ 前記ＶＬ領域は、配列番号４７で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、３０位のＳｅｒ、５８位のＳｅｒ、９４位のＧｌｎ及び／又は１０５位のＧｌｙを含み、場合によっては、前記ＶＬ領域は、３０位のＳｅｒ、５８位のＳｅｒ、９４位のＧｌｎ、１０５位のＧｌｙの全てを含む、態様Ｅ９５に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１００ 前記配列番号３９で示されるアミノ酸配列は、Ｎ５５Ｑ及びＤ６１Ｅ置換を含み、前記配列番号３９で示されるアミノ酸配列は、Ｌ３０Ｓ、Ｎ５８Ｓ、Ｍ９４Ｑ及びＱ１０５Ｇ置換を含む、態様Ｅ９４に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。

Ｅ１０１ 前記ＶＨ領域は、配列番号３９で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、５５位のＧｌｎ及び６１位のＧｌｕを含み、前記ＶＨ領域は、配列番号４７で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、３０位のＳｅｒ、５８位のＳｅｒ、９４位のＧｌｎ、１０５位のＧｌｙを含む、態様Ｅ９５に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１０２ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号４７で示されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含み、前記配列番号４７で示されるアミノ酸配列の１つ以上のアミノ酸残基は、Ｌ３０Ｓ、Ｙ５５Ａ、Ｍ５６Ａ、Ｎ５８Ｓ、Ａ６０Ｑ、Ｍ９４Ｑ、Ｌ９７Ｙ、Ｆ１０１Ｌ、Ｆ１０１Ｗ及びＱ１０５Ｇから選択される１つ以上のアミノ酸置換、又はそれらの組合せ（例．Ｌ３０Ｓ、Ｍ５６Ａ、Ｎ５８Ｓ、Ｍ９４Ｑ、Ｌ９７Ｙ及びＱ１０５Ｇの全て）を含み、場合によっては、前記配列番号４７で示されるアミノ酸配列の１つ以上のアミノ酸残基は、Ｌ３０Ｓ、Ｍ５６Ａ、Ｎ５８Ｓ、Ｍ９４Ｑ、Ｌ９７Ｙ及びＱ１０５Ｇから選択される１つ以上のアミノ酸置換を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１０３ 前記配列番号４７で示されるアミノ酸配列は、Ｌ３０Ｓ、Ｎ５８Ｓ、Ｍ９４Ｑ及び／又はＱ１０５Ｇ置換を含む、態様Ｅ１０２に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１０４ 配列番号３９で示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域をさらに含み、前記配列番号３９で示されるアミノ酸配列は、Ｋ３０Ａ、Ｎ５５Ｑ、Ｎ５７Ｑ、Ｄ６１Ｅ、Ｐ６２Ａ、Ｋ６３Ａ及びＦ６４Ｖからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸置換、又はそれらの組合せを含む、態様Ｅ１０２に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１０５ 前記配列番号３９で示されるアミノ酸配列は、Ｎ５５Ｑ及びＤ６１Ｅ置換を含む、態様Ｅ１０４に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１０６ 配列番号２又は３で示されるアミノ酸配列のいずれか一つと少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖を含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１０７ 配列番号５で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖をさらに含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１０８ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号６で示されるアミノ酸配列に含まれる含む重鎖可変領域及び配列番号７で示されるアミノ酸配列に含まれる軽鎖可変領域含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１０９ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号２又は３で示されるアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号５で示されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１１０ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
(a) 配列番号５で示されるアミノ酸配列を含む軽鎖、及び
(b) Ｃ末端にリジン残基を有しているか、又は有していない配列番号３で示されるアミノ酸配列を含む重鎖
を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。

Ｅ１１１ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124917であるプラスミドの挿入物がコードするアミノ酸配列を含む重鎖、及び、ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124918であるプラスミドの挿入物がコードするアミノ酸配列を含む軽鎖、又はこれらの両者を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１１２ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号２又は３で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％（例．１００％）の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖を含み、場合によっては、前記重鎖は配列番号２で示されるアミノ酸配列を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１１３ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号５で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％（例．１００％）の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、場合によっては、前記軽鎖は配列番号５で示されるアミノ酸配列を含み、場合によっては、前記単離された抗体又はその抗原結合断片は、配列番号２で示されるアミノ酸配列を含む重鎖をさらに含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１１４ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号２で示されるアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号５で示されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１１５ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、配列番号３で示されるアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号５で示されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１１６ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号２４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号２５で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号２６で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号２７で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
前記抗体は、配列番号６、３４～４６、８８～９１若しくは９３のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＶＨ領域のＶＨフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４の１つ、２つ、３つ又は４つ全て）に対して少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列、又は、ＶＨフレームワーク領域全体（ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３及びＦＲ４を含む）のアミノ酸配列の少なくとも１つであるが２０未満の変化、例えば、アミノ酸の置換又は欠失を有するアミノ酸配列を含む、ＶＨフレームワーク領域をさらに含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１１７ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号２４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号２５で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号２６で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号２７で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
前記抗体は、配列番号７、４７～６９若しくは９２のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＶＬ領域のＶＬフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４）に対して少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列、又は、ＶＬフレームワーク領域全体（ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３及びＦＲ４を含む）のアミノ酸配列の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、１０、１５であるが２０未満の変化、例えば、アミノ酸の置換又は欠失を有するアミノ酸配列を含む、ＶＬフレームワーク領域をさらに含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１１８ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号２４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号２５で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号２６で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号２７で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
前記抗体は、IGHV3-07、IGHV1-46、IGHV3-23、IGHV3-30、IGHV1-69若しくはIGHV3-48の生殖細胞系列のアミノ酸配列のＶＨフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４）に対して少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列、又は、ＶＨフレームワーク領域全体（ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３及びＦＲ４を含む）のアミノ酸配列の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、１０、１５であるが２０未満の変化、例えば、アミノ酸の置換又は欠失を有するアミノ酸配列を含む、ＶＨフレームワーク領域を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１１９ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号２４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号２５で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号２６で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号２７で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
前記抗体は、IGHV3-07、IGHV1-46、IGHV3-23、IGHV3-30、IGHV1-69又はIGHV3-48の生殖細胞系列のＶＨアミノ酸配列の変異体を含むＶＨ領域を含み、
前記ＶＨ領域は、配列番号１２７で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、Ｔ２８、Ｆ２９、Ａ４９、Ｒ７１、Ｎ７３、Ａ７４及び／又はＬ７８位に１つ以上の置換（例．Ｔ２８Ｎ、Ｆ２９Ｉ、Ａ４９Ｇ、Ｒ７２Ａ、Ｎ７４Ｔ、Ａ７５Ｓ及びＬ７９Ａから選択される１つ以上の置換）を含み、場合によっては、前記ＶＨ領域は、
(i) Ｔ２８Ｎ及びＦ２９Ｉ；
(ii) Ｔ２８Ｎ、Ｆ２９Ｉ及びＲ７２Ａ；
(iii) Ｔ２８Ｎ、Ｆ２９Ｉ、Ｒ７２Ａ、Ａ４９Ｇ及びＬ７９Ａ；
(iv) Ｔ２８Ｎ、Ｆ２９Ｉ、Ｒ７２Ａ、Ｎ７４Ｔ及びＡ７５Ｓ；又は
(v) Ｔ２８Ｎ、Ｆ２９Ｉ、Ｒ７２Ａ、Ａ４９Ｇ、Ｌ７９Ａ、Ｎ７４Ｔ及びＡ７５Ｓ
（ここで、(i)～(v)は配列番号１２７で示されるアミノ酸配列によるナンバリングである）の置換を含み、場合によっては、前記ＶＨ領域は、配列番号１２７で示されるアミノ酸配列による番号が付けで、Ｔ２８Ｎ、Ｆ２９Ｉ、Ｒ７２Ａ、Ａ４９Ｇ、Ｌ７９Ａ、Ｎ７４Ｔ及びＡ７５Ｓの置換を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１２０ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号２４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号２５で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号２６で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号２７で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
前記抗体は、配列番号１２７で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、
(a) ２８位のＡｓｎ、
(b) ２９位のＩｌｅ、
(c) ４９位のＧｌｙ、
(d) ７２位のＡｌａ、
(e) ７４位のＴｈｒ
(f) ７５位のＳｅｒ、及び
(g) ７９位のＡｌａ
の１つ以上（例．２、３、４、５、６又は全て）を含むＶＨ領域をさらに含み、場合によっては、前記ＶＨ領域は、配列番号１２７で示されるアミノ酸配列による番号が付けで、
(i) ２８位のＡｓｎ及び２９位のＩｌｅ、
(ii) ２８位のＡｓｎ、２９位のＩｌｅ及び７２位のＡｌａ、
(iii) ２８位のＡｓｎ、２９位のＩｌｅ、７２位のＡｌａ、４９位のＧｌｙ及び７９位のＡｌａ、
(iv) ２８位のＡｓｎ、２９位のＩｌｅ、７２位のＡｌａ、７４位のＴｈｒ及び７５位のＳｅｒ、又は
(v) ２８位のＡｓｎ、２９位のＩｌｅ、７２位のＡｌａ、４９位のＧｌｙ、７９位のＡｌａ、７４位のＴｈｒ及び７５位のＳｅｒ
を含み、場合によっては、前記ＶＨ領域は、配列番号１２７で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、２８位のＡｓｎ、２９位のＩｌｅ、７２位のＡｌａ、４９位のＧｌｙ、７９位のＡｌａ、７４位のＴｈｒ、７５位のＳｅｒを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。

Ｅ１２１ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号２４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号２５で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号２６で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号２７で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
前記抗体は、IGKV1-39、IGKV2-28、IGKV2-30、IGKV4-1又はIGKV3-11の生殖細胞系列のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列、又は、ＶＬフレームワーク領域全体（ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３及びＦＲ４を含む）のアミノ酸配列の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、１０、１５であるが２０未満の変化、例えば、アミノ酸の置換又は欠失を有するアミノ酸配列を含む、ＶＬフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４）を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１２２ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号２４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号２５で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号２６で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号２７で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
前記抗体は、IGKV1-39、IGKV2-28、IGKV2-30、IGKV4-1又はIGKV3-11の生殖細胞系列のVLアミノ酸配列の変異体を含むＶＬ領域を含み、前記ＶＬ領域は、配列番号１２８で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、Ｙ３６及び／又はＬ４６位に１つ以上の置換（例．Ｙ３６Ｆ及び／又はＬ４６Ｒ）を含み、場合によっては、前記ＶＨ領域は、
(i) Ｌ４６Ｒ、又は
(ii) Ｌ４６Ｒ及びＹ３６Ｆ
（ここで、(i)及び(ii)は配列番号１２８で示されるアミノ酸配列によるナンバリングである）の置換を含み、場合によっては、前記ＶＨ領域は、配列番号１２８で示されるアミノ酸配列による番号が付けで、Ｌ４６Ｒの置換を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１２３ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号２４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号２５で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号２６で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号２７で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
前記抗体は、配列番号１２８で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、
(a) ３６位のＴｙｒ及び
(b) ４６位のＬｅｕ
の一方又は両者を含むＶＬ領域を含み、場合によっては、前記ＶＬ領域は、配列番号１２８で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、
(i) ４６位のＬｅｕ、又は
(ii) ４６位のＬｅｕ及び３６位のＴｙｒ
を含み、場合によっては、前記ＶＬ領域は、配列番号１２８で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで４６位のＬｅｕを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１２４ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号２４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号２５で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号２６で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号２７で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
Ｅｕナンバリング（例．表１に示したヒトＩｇＧ１のＦｃに対応）によるＥ２３３、Ｅ３１８、Ｋ３２０及びＲ３２２位に１つ以上の置換（例．Ｅ２３３Ｐ、Ｅ３１８Ａ、Ｋ３２０Ａ及びＲ３２２Ａ）を含むマウスＩｇＧ１のＦｃ領域をさらに含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１２５ 前記マウスＩｇＧ１のＦｃ領域は、Ｅｕナンバリング（例．表１に示したヒトＩｇＧ１のＦｃに対応）によるＥ２３３Ｐ、Ｅ３１８Ａ、Ｋ３２０Ａ及びＲ３２２Ａ置換を含む、態様Ｅ１２４に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１２６ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号２４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号２５で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号２６で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号２７で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
Ｅｕナンバリング（例．表１に示したヒトＩｇＧ１のＦｃに対応）によるＬ２３４、Ｌ２３５及びＧ２３７位に１つ以上の置換（例．Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＧ２３７Ａ）を含むヒトＩｇＧ１のＦｃ領域をさらに含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１２７ 前記ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域は、Ｅｕナンバリング（例．表１に示したヒトＩｇＧ１のＦｃに対応）による前記Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＧ２３７Ａ置換を含む、態様Ｅ１２６に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１２８ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号２４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号７１で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号７２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号７３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
前記抗体は、配列番号６、３４～４６、８８～９１若しくは９３のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＶＨ領域のＶＨフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４の１つ、２つ、３つ又は４つ）に対して少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、ＶＨフレームワーク領域をさらに含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１２９ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号２４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号７１で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号７２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号７３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
前記抗体は、配列番号７、４７～６９又は９２のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＶＬ領域のＶＬフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４の１つ、２つ、３つ又は４つ）に対して少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％又は好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、ＶＬフレームワーク領域をさらに含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１３０ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号２４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号７１で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号７２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号７３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
前記抗体は、IGHV3-07、IGHV1-46、IGHV3-23、IGHV3-30、IGHV1-69若しくはIGHV3-48の生殖細胞系列のアミノ酸配列のＶＨフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４の１つ、２つ、３つ又は４つ）に対して少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨフレームワーク領域をさらに含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。

Ｅ１３１ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号２４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号７１で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号７２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号７３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
前記抗体は、IGKV1-39、IGKV2-28、IGKV2-30、IGKV4-1又はIGKV3-11の生殖細胞系列のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、ＶＬフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４の１つ、２つ、３つ又は４つ）をさらに含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１３２ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号２４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号７１で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号７２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号７３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
Ｅｕナンバリング（例．表１に示したヒトＩｇＧ１のＦｃに対応）によるＥ２３３、Ｅ３１８、Ｋ３２０及びＲ３２２位に１つ以上の置換（例．Ｅ２３３Ｐ、Ｅ３１８Ａ、Ｋ３２０Ａ及びＲ３２２Ａ）を含むマウスＩｇＧ１のＦｃ領域をさらに含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１３３ 前記マウスＩｇＧ１のＦｃ領域は、Ｅｕナンバリング（例．表１に示したヒトＩｇＧ１のＦｃに対応）によるＥ２３３Ｐ、Ｅ３１８Ａ、Ｋ３２０Ａ及びＲ３２２Ａ置換を含む、態様Ｅ１３２に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１３４ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号２４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号７１で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号７２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号７３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
Ｅｕナンバリング（例．表１に示したヒトＩｇＧ１のＦｃに対応）によるＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＧ２３７Ａ置換を含むヒトＩｇＧ１のＦｃ領域を含む、
単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１３５ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２８で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２９で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号３０で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号３１で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号３２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号３３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
前記抗体は、配列番号６、３４～４６、８８～９１又は９３のいずれか１つで示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域のＶＨフレームワーク領域と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％又は好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４の１つ、２つ、３つ又は４つ）をさらに含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１３６ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２８で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２９で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号３０で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号７４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号７５で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号７６で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
前記抗体は、配列番号６、３４～４６、８８～９１又は９３のいずれか１つで示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域のＶＨフレームワーク領域と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％又は好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４の１つ、２つ、３つ又は４つ）をさらに含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１３７ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２８で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２９で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号３０で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号３１で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号３２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号３３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
前記抗体は、配列番号７、４７～６９又は９２のいずれか１つで示されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域のＶＬフレームワーク領域と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％又は好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４の１つ、２つ、３つ又は４つ）さらにを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１３８ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２８で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２９で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号３０で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号３１で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号３２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号３３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
前記抗体は、IGHV3-07、IGHV1-46、IGHV3-23、IGHV3-30、IGHV1-69又はIGHV3-48の生殖細胞系列のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４の１つ、２つ、３つ又は４つ）をさらに含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１３９ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２８で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２９で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号３０で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号３１で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号３２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号３３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
前記抗体は、IGKV1-39、IGKV2-28、IGKV2-30、IGKV4-1又はIGKV3-11の生殖細胞系列のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬフレームワーク領域（例．ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４の１つ、２つ、３つ又は４つ）をさらに含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１４０ 単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
配列番号２８で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、
配列番号２９で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２、
配列番号３０で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３、
配列番号３１で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、
配列番号３２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２、及び
配列番号３３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３
を含み、
Ｅｕナンバリング（例．表１に示したヒトＩｇＧ１のＦｃに対応）によるＬ２３４、Ｌ２３５及びＧ２３７位に１つ以上の置換（例．Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＧ２３７Ａ）を含むヒトＩｇＧ１のＦｃ領域を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。

Ｅ１４１ 前記ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域は、Ｅｕナンバリング（例．表１に示したヒトＩｇＧ１のＦｃに対応）によるＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＧ２３７Ａ置換を含む、態様Ｅ１４０に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１４２ 前記抗体は多重特異性抗体（例．二重特異性抗体）である、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１４３ 前記抗体は多価抗体（例．二価抗体）である、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１４４ 前記抗体は、ヒト化抗体、ヒト抗体、マウス抗体、キメラ抗体又はラクダ抗体である、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１４５ αｖβ８インテグリンに特異的に結合し、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含む単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
前記ＶＨ領域及びＶＬ領域は、
(i) それぞれ、配列番号６及び７で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(ii) それぞれ、配列番号３４及び６５で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(iii) それぞれ、配列番号３４及び６２で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(iv) それぞれ、配列番号３４及び６６で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(v) それぞれ、配列番号３４及び６３で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(vi) それぞれ、配列番号３４及び６４で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(vii) それぞれ、配列番号３７及び６５で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(viii) それぞれ、配列番号３７及び６２で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(ix) それぞれ、配列番号３７及び６６で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(x) それぞれ、配列番号３７及び６３で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xi) それぞれ、配列番号３７及び６４で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xii) それぞれ、配列番号３６及び６５で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xiii) それぞれ、配列番号３６及び６２で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xiv) それぞれ、配列番号３６及び６６で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xv) それぞれ、配列番号３６及び６３で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xvi) それぞれ、配列番号３６及び６４で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xvii) それぞれ、配列番号３５及び６５で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xviii) それぞれ、配列番号３５及び６２で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xix) それぞれ、配列番号３５及び６６で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xx) それぞれ、配列番号３５及び６３で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xxi) それぞれ、配列番号３５及び６４で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xxii) それぞれ、配列番号３８及び６５で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xxiii) それぞれ、配列番号３８及び６２で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xxiv) それぞれ、配列番号３８及び６６で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xxv) それぞれ、配列番号３８及び６３で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xxvi) それぞれ、配列番号３８及び６４で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xxvii) それぞれ、配列番号２０及び２１で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xxviii) それぞれ、配列番号８８及び４７で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xxix) それぞれ、配列番号８９及び４７で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xxx) それぞれ、配列番号９０及び４７で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xxxi) それぞれ、配列番号９０及び９２で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xxxii) それぞれ、配列番号３９及び４７で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xxxiii) それぞれ、配列番号６及び６７で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xxxiv) それぞれ、配列番号６及び６８で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xxxv) それぞれ、配列番号６及び６９で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xxxvi) それぞれ、配列番号９３及び６７で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xxxvii) それぞれ、配列番号９３及び６８で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；
(xxxviii) それぞれ、配列番号９３及び６９で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列、又は
(xxxix) それぞれ、配列番号９３及び７で示されるアミノ酸配列、又はこれと少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは好ましくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含み、場合によっては、前記ＶＨ領域及びＶＬ領域は、
(i) それぞれ、配列番号６及び７；
(ii) それぞれ、配列番号３４及び６５；
(iii) それぞれ、配列番号３４及び６２；
(iv) それぞれ、配列番号３４及び６６；
(v) それぞれ、配列番号３４及び６３；
(vi) それぞれ、配列番号３４及び６４；
(vii) それぞれ、配列番号３７及び６５；
(viii) それぞれ、配列番号３７及び６２；
(ix) それぞれ、配列番号３７及び６６；
(x) それぞれ、配列番号３７及び６３；
(xi) それぞれ、配列番号３７及び６４；
(xii) それぞれ、配列番号３６及び６５；
(xiii) それぞれ、配列番号３６及び６２；
(xiv) それぞれ、配列番号３６及び６６；
(xv) それぞれ、配列番号３６及び６３；
(xvi) それぞれ、配列番号３６及び６４；
(xvii) それぞれ、配列番号３５及び６５；
(xviii) それぞれ、配列番号３５及び６２；
(xix) それぞれ、配列番号３５及び６６；
(xx) それぞれ、配列番号３５及び６３；
(xxi) それぞれ、配列番号３５及び６４；
(xxii) それぞれ、配列番号３８及び６５；
(xxiii) それぞれ、配列番号３８及び６２；
(xxiv) それぞれ、配列番号３８及び６６；
(xxv) それぞれ、配列番号３８及び６３；
(xxvi) それぞれ、配列番号３８及び６４；
(xxvii) それぞれ、配列番号２０及び２１；
(xxviii) それぞれ、配列番号８８及び４７；
(xxix) それぞれ、配列番号８９及び４７；
(xxx) それぞれ、配列番号９０及び４７；
(xxxi) それぞれ、配列番号９０及び９２；
(xxxii) それぞれ、配列番号３９及び４７；
(xxxiii) それぞれ、配列番号６及び６７；
(xxxiv) それぞれ、配列番号６及び６８；
(xxxv) それぞれ、配列番号６及び６９；
(xxxvi) それぞれ、配列番号９３及び６７；
(xxxvii) それぞれ、配列番号９３及び６８；
(xxxviii) それぞれ、配列番号９３及び６９、又は
(xxxix) それぞれ、配列番号９３及び７
で示されるアミノ酸配列を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１４６ 例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ及びＩｇＥの重鎖定常領域から選択される重鎖定常領域（Ｆｃ）を含むか、又は有する、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１４７ 前記抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４又はそれらの変異体から選択されるアイソタイプに属する、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１４８ 前記抗体はＩｇＧ１又はＩｇＧ２（例．ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ２）の重鎖定常領域を含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１４９ ヒトＩｇＧ１の重鎖定常領域を含むか、又は有する、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１５０ 例えば、κ鎖又はλ鎖の軽鎖定常領域から選択される軽鎖定常領域を含むか、又は有する、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。

Ｅ１５１ κ鎖軽鎖（例．ヒトのκ鎖軽鎖）の定常領域を含むか、又は有する、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１５２ エフェクター細胞機能を低下させるために改変したヒンジ領域を有する重鎖のＦｃ領域を含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１５３ 抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）活性及び／又は補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）活性が低下した、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１５４ 例えば、ヒトＩｇＧ１と比較して、ＥＵナンバリングによるＬ２３４、Ｌ２３５又はＧ２３７位の少なくとも１つが置換されたヒンジ領域を含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１５５ ＥＵナンバリングによるＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＧ２３７Ａから選択される少なくとも１つの置換を有するヒトＩｇＧ１のＦｃ領域を含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１５６ アミノ酸配列ＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＡＰ（配列番号１２６）を含むヒンジ領域を有する、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１５７ 免疫原性Ｔ細胞エピトープを除去するように改変されている、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１５８ 配列番号４７で示されるアミノ酸配列によるナンバリングで、Ｌ３０Ｓ、Ｎ５８Ｓ、Ｍ５６Ａ、Ｍ９４Ｑ、Ｌ９７Ｙ及びＱ１０５Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの置換を含むＶＬを含む、態様Ｅ１５７に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１５９ 前記抗体又はその抗原結合断片は、以下の(i)～(xii)の少なくとも１つの特性：
(i) マウス抗体ADWA11よりも小さい、例えばＫＤが約５３６ｐＭ未満の、ヒトαｖβ８インテグリンに対する結合親和性（ＫＤ）；
(ii) １００ｐＭ以下である精製ヒトαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
(iii) １００ｐＭ未満であるマウスαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
(iv) １００ｐＭ未満であるカニクイザルαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
(v) 約１６０ｐＭであるラットαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
(vi) 例えば、Biacore親和性アッセイにより求めた１００ｐＭ未満のＫＤである、ヒト、カニクイザル、マウス及びラットのαｖβ８インテグリンの少なくとも２つ、３つ又は全てに対してほぼ同等の親和性；
(vii) １８３ｐＭ未満であるＴＧＦβトランス活性化阻害のＩＣ５０；
(viii) 約１００ｐＭ～約３００ｐＭであるＵ２５１細胞におけるＴＧＦβトランス活性化阻害のＩＣ５０；
(ix) 約１００ｐＭ～約４００ｐＭであるＵ２５１細胞に対するＥＣ５０；
(x) 約１１０ｐＭ～約１８０ｐＭであるＣ８-Ｓ細胞に対するＥＣ５０；
(xi) 以下のa～eから選択される少なくとも１つのヒト薬物動態（ＰＫ）パラメーターの予測値
a 約０．１２～０．１５ｍＬ／ｈ／ｋｇである中央コンパートメント（CL）からの栗アランス；
b 約０．１５～０．５１ｍＬ／ｈ／ｋｇであるコンパートメント間分配クリアランス（ＣＬＦ）；
c 約３６～３９ｍＬ／ｋｇである中央コンパートメントの分布容積（Ｖ１）；
d 約２１～３３ｍＬ／ｋｇである周辺コンパートメントの分布容積（Ｖ２）；及び／又は
e 約１２～１７日である半減期（ｔ_１／２）；及び
(xii) ヒトＦｃγ受容体又はＣ１ｑへの検出可能な結合の不在
を有する、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１６０ 前記抗体又はその抗原結合断片は、以下の少なくとも１つの特性：
(i) αｖβ８インテグリンに特異的に結合するが、他のインテグリンとは結合しない；
(ii) αｖβ８インテグリンと潜伏関連ペプチド（ＬＡＰ）の相互作用を減少する；
(iii) ＴＧＦ-βシグナル伝達を低減する；
(iv) １０ｎＭ以下のＩＣ５０でαｖβ８インテグリンによるＴＧＦβ活性化を効果的に阻止する；
(v) 非ヒト霊長類（ＮＨＰ）オルソログに対する同等のＫｄ（５倍以内）を有する；
(vi) ヒトαｖβ８と選択的に結合するが、αｖβ８のホモログ（例．αｖβ１、αｖβ３、αｖβ５及びαｖβ６）との結合は検出可能ではない；
(vii) 単独で、又は、免疫調節剤（例．ＰＤ-１、ＰＤ-Ｌ１、ＣＴＬＡ-４の阻害剤のようなチェックポイント阻害剤のモジュレーター、又は、４-１ＢＢのような刺激分子のアゴニスト）と組み合わせて、ヒト又は、例えば、扁平上皮癌、乳癌及び結腸癌から選択されるがんの動物モデルにおいて増殖抑制及び／又は完全な腫瘍退縮を引き起こす；
(i) 放射線療法のような抗がん治療と組み合わせて、がんの動物モデルにおいて、増殖抑制及び／又は完全な腫瘍退縮を引き起こす；
(ii) 同系腫瘍移植モデルにおいて、単独で、又は免疫調節剤（例、ＰＤ-１、ＰＤ-Ｌ１又はＣＴＬＡ-４の阻害）と組み合わせて、例えば、１０ｍｇ／ｋｇ以下を投与した場合に、腫瘍増殖を少なくとも６０％減少する；
(iii) 対象（例．マウス又はヒト）に投与した場合、１つ以上の免疫調節剤（例．ＰＤ-１、ＰＤ-Ｌ１又はＣＴＬＡ-４のアンタゴニストのような、チェックポイント阻害剤のアンタゴニスト若しくはチェックポイント活性化剤のアゴニスト、又は、４-１ＢＢアゴニストのような免疫応答の活性化因子）の存在下で抗腫瘍反応を増加させる；
(iv) 腫瘍モデルにおいてαｖβ８インテグリンの発現にかかわらず有効である；
(v) 腫瘍微小環境において、例えば単独で、ＣＤ８＋ＧｚｍＢ＋Ｔ細胞を増加させることができる；
(vi) 例えば扁平上皮癌、乳癌及び／又は結腸癌の同系モデルにおいて、チェックポイント阻害剤のアンタゴニスト（例．抗ＰＤ-１又は抗ＰＤ-Ｌ１抗体）と共に用いた場合、腫瘍増殖を減少、例えば少なくとも８０％を超えて減少する；
(i) カプランマイヤー分析による、対象の全生存期間の統計的に有意な改善を示す；
(ii) 熱安定性に優れる；
(iii) 高濃度でほとんど凝集しない；及び
(iv) 大規模な製造条件下で再現性のある発現及び純度を示すことが可能である；
を有する、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。

Ｅ１６１ 前記抗体又はその抗原結合断片は、以下の(i)～(xvi)の少なくとも１つの特性：
(i) マウス抗体ADWA11のＫＤよりも小さい、例えばＫＤが約５３６ｐＭ未満の、ヒトαｖβ８インテグリンに対する結合親和性（ＫＤ）；
(ii) １００ｐＭ以下である精製ヒトαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
(iii) １００ｐＭ未満であるマウスαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
(iv) １００ｐＭ未満であるカニクイザルαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
(v) 約１６０ｐＭであるラットαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
(vi) 例えば、Biacore親和性アッセイにより求めた１００ｐＭ未満のＫＤである、ヒト、カニクイザル、マウス及びラットのαｖβ８インテグリンの少なくとも２つ、３つ又は全てに対してほぼ同等の親和性；
(vii) １８３ｐＭ未満であるＴＧＦβトランス活性化阻害のＩＣ５０；
(viii) 約１００ｐＭ～約３００ｐＭであるＵ２５１細胞におけるＴＧＦβトランス活性化阻害のＩＣ５０；
(ix) 約１２６ｐＭ（±３４ｐＭ、標準偏差）であるＵ２５１細胞に対するＥＣ５０；
(x) 約２５６ｐＭ（±１１５ｐＭ、標準偏差）であるＵ２５１細胞に対するＥＣ５０；
(xi) 約８０ｐＭ～約４００ｐＭであるＵ２５１細胞に対するＥＣ５０；
(xii) 約１１５ｐＭであるＣ８-Ｓ細胞に対するＥＣ５０；
(xiii) 約１４５ｐＭ（±２３．７ｐＭ、標準偏差）であるＣ８-Ｓ細胞に対するＥＣ５０；
(xiv) 約１１０ｐＭ～約１８０ｐＭ、標準偏差）であるＣ８-Ｓ細胞に対するＥＣ５０；
(xv) 以下のa～eから選択される少なくとも１つのヒト薬物動態（ＰＫ）パラメーターの予測値
a 約０．１２～０．１５ｍＬ／ｈ／ｋｇである中央コンパートメントからのクリアランス（ＣＬ）；
b 約０．１５～０．５１ｍＬ／ｈ／ｋｇであるコンパートメント間分配クリアランス（ＣＬＦ）；
c 約３６～３９ｍＬ／ｋｇである中央コンパートメントの分布容積（Ｖ１）；
d 約２１～３３ｍＬ／ｋｇである周辺コンパートメントの分布容積（Ｖ２）；及び／又は
e 約１２～１７日である半減期（ｔ_１／２）；及び
(xvi) ヒトＦｃγ受容体又はＣ１ｑへの検出可能な結合の不在
を有する、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１６２ 精製されたヒトαｖβ８インテグリンでは、１００ｐＭ以下のＫ_Ｄでヒトαｖβ８インテグリンに結合する、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１６３ ヒトαｖβ８インテグリンに５３６ｐＭ未満のＫ_Ｄで結合する、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１６４ １８３ｐＭ未満のＩＣ５０でＴＧＦβの活性化を阻害する、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１６５ １００ｐＭ～約３００ｐＭのＩＣ５０でＴＧＦβの活性化を阻害する、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１６６ Ｕ２５１細胞において１９９±９３．６ｐＭのＩＣ５０でＴＧＦβの活性化を阻害する、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ１６７ 先行する態様のいずれか一つに記載の抗体又はその抗原結合断片及び薬学的に許容される担体又は賦形剤を含む医薬組成物。
Ｅ１６８ 態様Ｅ１～Ｅ１６６のいずれか一つに記載の抗体又はその抗原結合断片をコードする核酸。
Ｅ１６９ (i) 配列番号１、１８３、１８９若しくは１９１で示される核酸配列と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは１００％の配列同一性を有し、重鎖をコードする核酸配列；
(ii) 配列番号１９０で示される核酸配列と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは１００％の配列同一性を有し、重鎖の可変領域をコードする核酸配列；
(iii) 配列番号１９２で示される核酸配列と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは１００％の配列同一性を有し、重鎖の定常領域をコードする核酸配列；又は
(iv) ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124917であるプラスミドの挿入物の核酸配列と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは１００％の配列同一性を有する核酸配列、を含む核酸。
Ｅ１７０ (i) 配列番号４若しくは１８５で示される核酸配列と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは１００％の配列同一性を有し、軽鎖をコードする核酸配列；
(ii) 配列番号１８６で示される核酸配列と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは１００％の配列同一性を有し、軽鎖の可変領域をコードする核酸配列；
（iii） 配列番号１９４で示される拡散配列と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは１００％の配列同一性を有し、軽鎖の定常領域をコードする核酸配列；又は
(iv) ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124918であるプラスミドの挿入物の核酸配列で示される核酸配列と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは１００％の配列同一性を有する核酸配列、を含む核酸。

Ｅ１７１ 配列番号１又は１８３で示される核酸配列と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％又は１００％の配列同一性を有する核酸配列、及び、配列番号４で示される核酸配列と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％又は１００％の配列同一性を有する核酸配列を含む核酸。
Ｅ１７２ 配列番号１８９又は１９１で示される核酸配列と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％又は１００％の配列同一性を有する核酸配列、及び、配列番号１８５で示される核酸配列と少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％又は１００％の配列同一性を有する核酸配列を含む核酸。
Ｅ１７３ 態様Ｅ１６８～Ｅ１７２のいずれか一つに記載の核酸を含むベクター。
Ｅ１７４ 態様Ｅ１６８～Ｅ１７２のいずれか一つに記載の核酸又は態様Ｅ１７３に記載のベクターを含む宿主細胞。
Ｅ１７５ 前記宿主細胞は、哺乳類細胞、例えばヒト細胞である、態様Ｅ１７４に記載の宿主細胞。
Ｅ１７６ 前記宿主細胞は、ＣＨＯ細胞、ＣＯＳ細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＮＳ０細胞、ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）細胞又はＳｐ２．０細胞である、態様Ｅ１７５に記載の宿主細胞。
Ｅ１７７ ヒトαｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片を製造する方法であって、態様Ｅ１７４～Ｅ１７６のいずれか一つに記載の宿主細胞が前記抗体又は抗原結合断片を発現する条件で前記宿主細胞を培養することを含む、方法。
Ｅ１７８ 前記抗体又はその抗原結合断片を単離することをさらに含む、態様Ｅ１７７に記載の方法。
Ｅ１７９ それを必要とする対象におけるＴＧＦβシグナル伝達を低減する方法であって、前記方法は、それを必要とする対象に、治療有効量の態様Ｅ１～Ｅ１６６のいずれか一つに記載の抗体若しくはその抗原結合断片又は態様Ｅ１６７に記載の医薬組成物を投与することを含む、方法。
Ｅ１８０ それを必要とする対象におけるαｖβ８インテグリンの活性を低下させる方法であって、前記方法は、それを必要とする対象に、治療有効量の態様Ｅ１～Ｅ１６６のいずれか一つに記載の抗体若しくはその抗原結合断片又は態様Ｅ１６７に記載の医薬組成物を投与することを含む、方法。

Ｅ１８１ 異常な（例．増加した）ＴＧＦβシグナル伝達に関連する、又はそれが仲介する疾患、障害又は状態を治療する方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量の態様Ｅ１～Ｅ１６６のいずれか一つに記載の抗体若しくはその抗原結合断片又は態様Ｅ１６７に記載の医薬組成物を投与することを含む、方法。
Ｅ１８２ 対象において抗腫瘍反応を誘発する方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量の態様Ｅ１～Ｅ１６６のいずれか一つに記載の抗体若しくはその抗原結合断片又は態様Ｅ１６７に記載の医薬組成物を投与することを含み、任意に、前記抗体又はその抗原結合断片は第２の治療と組み合わせて投与され、任意に、前記抗体又はその抗原結合断片の投与と前記第２の治療は、同時に、逐次に、又は別々に行われ、任意に、
(i) 前記抗体若しくはその抗原結合断片は前記第２の治療の前に投与され、又は
(ii) 前記抗体若しくはその抗原結合断片は前記第２の治療の後で投与される、方法。
Ｅ１８３ 対象におけるαｖβ８インテグリンの活性を低下させるのに使用するための、態様Ｅ１～Ｅ１６６のいずれか一つに記載の抗体若しくはその抗原結合断片又は態様Ｅ１６７に記載の医薬組成物。
Ｅ１８４ がんを治療する方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量の態様Ｅ１～Ｅ１６６のいずれか一つに記載の抗体若しくはその抗原結合断片又は態様Ｅ１６７に記載の医薬組成物を投与することを含む方法。
Ｅ１８５ 前記抗体又はその抗原結合断片は、以下の(i)～(xvii)の少なくとも１つの特性：
(i) αｖβ８インテグリン（例えば、ヒト、マウス、カニクイザル及び／又はラットのαｖβ８インテグリン）に特異的に結合する；
(ii) αｖβ８インテグリンと潜伏関連ペプチド（ＬＡＰ）の相互作用を減少する；
(iii) ＴＧＦ-βシグナル伝達を低減する；
(iv) １０ｎＭ以下のＩＣ５０でαｖβ８インテグリンによるＴＧＦβ活性化を阻止する；
(v) 非ヒト霊長類（ＮＨＰ）オルソログに対する同等のＫｄ（５倍以内）を有する；
(vi) ヒトαｖβ８と選択的に結合するが、αｖβ８のホモログ（例．αｖβ１、αｖβ３、αｖβ５及びαｖβ６）との結合は検出可能ではない；
(vii) 単独で、又は、免疫調節剤（例．ＰＤ-１、ＣＴＬＡ-４の阻害剤のようなチェックポイント阻害剤のモジュレーター、又は、４-１ＢＢのような刺激分子のアゴニスト）と組み合わせて、例えば、扁平上皮癌、乳癌及び結腸癌から選択されるがんの動物モデルにおいて増殖抑制及び／又は完全な腫瘍退縮を引き起こす；
(viii) 放射線療法のような抗がん治療と組み合わせて、がんの動物モデルにおいて、増殖抑制及び／又は完全な腫瘍退縮を引き起こす；
(ix) 同系腫瘍移植モデルにおいて、例えば、１０ｍｇ／ｋｇ以下を投与した場合に、腫瘍増殖を少なくとも６０％減少する；
(x) 対象（例．マウス又はヒト）に投与した場合、１つ以上の免疫調節剤（例．ＰＤ-１又はＣＴＬＡ-４のアンタゴニストのようなチェックポイント阻害剤のアンタゴニスト、又は、４-１ＢＢアゴニストのような免疫応答の活性化因子）の存在下で抗腫瘍反応を増加させる；
(xi) 腫瘍モデルにおいてαｖβ８インテグリンの発現にかかわらず有効である；
(xii) 腫瘍微小環境において、例えば単独で、ＣＤ８＋ＧｚｍＢ＋Ｔ細胞を増加するのに十分である；
(xiii) 例えば扁平上皮癌、乳癌及び／又は結腸癌の同系モデルにおいて、チェックポイント阻害剤のアンタゴニスト（例．抗ＰＤ-１又は抗ＰＤ-Ｌ１抗体）と共に用いた場合、腫瘍増殖を少なくとも８０％減少する；
(xiv) カプランマイヤー分析による、対象（例．ヒト又はマウス）の全生存期間の統計的に有意な改善を示す；
(xv) 熱安定性に優れる；
(xvi) 高濃度でほとんど凝集しない；並びに
(xvii) 大規模な製造条件下で再現性のある発現及び純度を示すことが可能である；
を有する、態様Ｅ１８４に記載の方法。
Ｅ１８６ 前記抗体又はその抗原結合断片は、以下の(i)～(xvii)の少なくとも１つの特性：
(i) マウス抗体ADWA11のＫＤよりも小さい、例えばＫＤが約５３６ｐＭ未満の、ヒトαｖβ８インテグリンに対する結合親和性（ＫＤ）；
(ii) １００ｐＭ以下である精製ヒトαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
(iii) １００ｐＭ未満であるマウスαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
(iv) １００ｐＭ未満であるカニクイザルαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
(v) 約１６０ｐＭであるラットαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
(vi) 例えば、Biacore親和性アッセイにより求めた１００ｐＭ未満のＫＤである、ヒト、カニクイザル、マウス及びラットのαｖβ８インテグリンの少なくとも２つ、３つ又は全てに対してほぼ同等の親和性；
(vii) １８３ｐＭ未満であるＴＧＦβトランス活性化阻害のＩＣ５０；
(viii) 約１９９±９３．６ｐＭであるＵ２５１細胞におけるＴＧＦβトランス活性化阻害のＩＣ５０；
(ix) 約１００ｐＭ～約３００ｐＭであるＴＧＦβトランス活性化阻害のＩＣ５０；
(x) 約１２６ｐＭ（±３４ｐＭ、標準偏差）であるＵ２５１細胞に対するＥＣ５０；
(xi) 約２５６ｐＭ（±１１５ｐＭ、標準偏差）であるＵ２５１細胞に対するＥＣ５０；
(xii) 約８０ｐＭ～約４００ｐＭであるＵ２５１細胞に対するＥＣ５０；
(xiii) 約１１５ｐＭであるＣ８-Ｓ細胞に対するＥＣ５０；
(xiv) 約１４５ｐＭ（±２３．７ｐＭ、標準偏差）であるＣ８-Ｓ細胞に対するＥＣ５０；
(xv) 約１１０ｐＭ～約１８０ｐＭ、標準偏差）であるＣ８-Ｓ細胞に対するＥＣ５０；
(xvi) 以下のa.～e.から選択される少なくとも１つのヒト薬物動態（ＰＫ）パラメーターの予測値
a. 約０．１２～０．１５ｍＬ／ｈ／ｋｇである中央コンパートメントからのクリアランス（ＣＬ）；
b. 約０．１５～０．５１ｍＬ／ｈ／ｋｇであるコンパートメント間分配クリアランス（ＣＬＦ）；
c. 約３６～３９ｍＬ／ｋｇである中央コンパートメントの分布容積（Ｖ１）；
d. 約２１～３３ｍＬ／ｋｇである周辺コンパートメントの分布容積（Ｖ２）；及び／又は
e. 約１５～１７日である半減期（ｔ_１／２）；並びに
(xvii) ヒトＦｃγ受容体又はＣ１ｑへの検出可能な結合の不在、
を有する、態様Ｅ１８４又はＥ１８５に記載の方法。
Ｅ１８７ 前記抗体又はその抗原結合断片は態様Ｅ１～Ｅ１６６のいずれか一つのものである、態様Ｅ１８４～Ｅ１８６のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ１８８ 前記抗体又はその抗原結合断片は、ＣＤ４５＋細胞、ＣＤ３＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞及び／又はグランザイムＢ発現細胞の浸潤を増加させるのに十分な量で投与される、態様Ｅ１８４～Ｅ１８７のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ１８９ 前記抗体又はその抗原結合断片は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の浸潤を増加させるのに十分な量で投与される、態様Ｅ１８４～Ｅ１８８のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ１９０ 前記抗体又はその抗原結合断片は、ＣＤ８＋Ｔ細胞においてグランザイムＢの発現を増加させるのに十分な量で投与される、態様Ｅ１８４～Ｅ１８９のいずれか一つに記載の方法。

Ｅ１９１ 前記抗体又はその抗原結合断片は、Ｌｙ６Ｇの発現が上昇した炎症性マクロファージの蓄積を増加させるのに十分な量で投与される、態様Ｅ１８４～Ｅ１９０のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ１９２ 前記抗体又はその抗原結合断片は、ＣＤ４５＋ＣＤ１１ｂ＋ＣＤ１１ｃ－Ｌｙ６Ｇ－Ｌｙ６Ｃ^高ＣＤ２０６^低炎症性マクロファージの蓄積を増加させるのに十分な量で投与される、態様Ｅ１８４～Ｅ１９１のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ１９３ 前記抗体又はその抗原結合断片は、第２の治療の反応を高めるのに十分な量で投与される、態様Ｅ１８４～Ｅ１９２のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ１９４ 動物の腫瘍モデルに投与した場合の前記抗体又はその抗原結合断片の有効性は、腫瘍モデルにおけるαｖβ８インテグリンの発現に依存しない、態様Ｅ１８４～Ｅ１９３のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ１９５ 前記抗体又はその抗原結合断片の投与は、第２の治療と組み合わせて行う、態様Ｅ１８４～Ｅ１９４のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ１９６ 前記第２の治療は、抗癌療法、例えば化学療法剤のような細胞毒性剤若しくは細胞増殖抑制剤、ホルモン治療、ワクチン、及び／又は免疫療法を含む、態様Ｅ１９５に記載の方法。
Ｅ１９７ 前記第２の治療は、手術、放射線療法、凍結手術及び／又は温熱療法であるか、それらを含む、態様Ｅ１９５又はＥ１９６に記載の方法。
Ｅ１９８ 前記第２の治療は、免疫チェックポイント分子のモジュレーター（例．阻害剤又はアゴニスト）を含み、任意に、前記第２の治療は、ＰＤ-１、ＰＤ-Ｌ１、４-１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＴＬＡ-４、ＰＤ-Ｌ２、ＴＩＭ-３、ＬＡＧ-３、ＶＩＳＴＡ、ＣＤ１６０、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、２Ｂ４、ＴＧＦβ、ＬＡＩＲ１及びそれらの組合せからなる群から選択される免疫チェックポイント分子のモジュレーターであるか、それを含む、態様Ｅ１９５～Ｅ１９７のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ１９９ 前記免疫チェックポイント分子の阻害剤は、ＰＤ-１、ＰＤ-Ｌ１、ＣＴＬＡ-４、ＰＤ-Ｌ２、ＴＩＭ-３、ＬＡＧ-３、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、２Ｂ４、ＴＧＦβ又はＬＡＩＲ１の阻害剤である、態様Ｅ１９８に記載の方法。
Ｅ２００ 前記免疫チェックポイント分子の阻害剤は、ＰＤ-１の阻害剤、例えばＰＤ-１に対する抗体である、態様Ｅ１９９に記載の方法。

Ｅ２０１ 免疫チェックポイント分子の阻害剤は、ＣＴＬＡ-４の阻害剤、例えば、ＣＴＬＡ-４に対する抗体又は可溶性ＣＴＬＡ-４融合物である、態様Ｅ１９９に記載の方法。
Ｅ２０２ 前記第２の治療は、共刺激分子のアゴニストを含む、態様Ｅ１９５～Ｅ２０１のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ２０３ 前記共刺激分子は、４-１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ２、ＣＤ２７、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ-１、ＬＦＡ-１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０、ＣＤ１６０又はＢ７-Ｈ３の少なくとも１つから選択される、態様Ｅ２０２に記載の方法。
Ｅ２０４ 前記共刺激分子のアゴニストは４-１ＢＢのアゴニストである、態様Ｅ２０２に記載の方法。
Ｅ２０５ 前記第２の治療は、ＰＡＲＰ１の阻害剤（例．オラパリブ、ルカパリブ、ニラパリブ、ベリパリブ、イニパリブ、タラゾパリブ、3-アミノベンズアミド、CEP 9722、E7016、BSI-201、KU-0059436、AG014699、MK-4827又はBGB-290）を含む、態様Ｅ１９５～Ｅ２０４のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ２０６ 前記がんは、充実性腫瘍、血液がん（例．白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫のような骨髄腫）及び転移性の病変からなる群から選択される、態様Ｅ１８４～Ｅ２０５のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ２０７ 前記がんは充実性腫瘍である、態様Ｅ２０６に記載の方法。
Ｅ２０８ 前記がんは充実性腫瘍であり、悪性腫瘍、例えば、肉腫及び癌腫、例えば、肺（例．非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ））、乳房、卵巣、リンパ球、胃腸（例．結腸）、肛門、生殖器及び泌尿生殖器（例．腎臓、尿路、膀胱、前立腺）、咽頭、ＣＮＳ（例．脳、神経又はグリア細胞）、頭頸部（例．頭頚部の扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ））、皮膚（例．進行性メラノーマのようなメラノーマ）、膵臓、結腸、直腸、腎臓（例．腎細胞癌）、肝臓に影響を与えるものなど、さまざまな器官の腺癌、小腸癌及び食道癌、胃食道癌、甲状腺がん、並びに子宮頸癌から選択される、態様Ｅ２０６又はＥ２０７に記載の方法。
Ｅ２０９ 前記がんはリンパ増殖性疾患（例．移植後リンパ増殖性疾患）、血液がん、Ｔ細胞リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫又は白血病（例．骨髄性白血病又はリンパ性白血病）である、態様Ｅ１８４～Ｅ２０８のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ２１０ 前記がんは、初期の、中期の、後期の、又は転移性のがんである、態様Ｅ１８４～Ｅ２０９のいずれか一つに記載の方法。

Ｅ２１１ 前記がんは、腎細胞癌、卵巣癌及び頭頚部の扁平上皮癌からなる群から選択される、態様Ｅ１８４～Ｅ２１０のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ２１２ チェックポイント分子の阻害剤、例えば、ＰＤ-１、ＰＤ-Ｌ１又はＣＴＬＡ-４の阻害剤を投与することをさらに含む、態様Ｅ２１１に記載の方法。
Ｅ２１３ 前記ＰＤ-１の阻害剤がアベルマブではない、態様Ｅ２１２に記載の方法。
Ｅ２１４ 前記がんは腎細胞癌（ＲＣＣ）のような腎臓癌である、態様Ｅ２１１又はＥ２１２に記載の方法。
Ｅ２１５ 前記がんは、転移性ＲＣＣ、明細胞型腎細胞癌（ｃｃＲＣＣ）、非明細胞型腎細胞癌（ｎｃＲＣＣ）及びハイリスク腎細胞癌からなる群から選択される腎臓癌である、態様Ｅ２１４に記載の方法。
Ｅ２１６ 前記抗体又はその抗原結合断片を一次治療又は二次治療として投与する、態様Ｅ２１５に記載の方法。
Ｅ２１７ 前記抗体又はその抗原結合断片を一次治療として投与する、態様Ｅ１８４～Ｅ２１６のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ２１８ 前記抗体又はその抗原結合断片を二次治療として投与する、態様Ｅ１８４～Ｅ２１６のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ２１９ 前記がんは卵巣癌である、態様Ｅ１８４～Ｅ２１２のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ２２０ 前記二次治療はＰＡＲＰ１の阻害剤（例．オラパリブ、ルカパリブ、ニラパリブ、ベリパリブ、イニパリブ、タラゾパリブ、3-アミノベンズアミド、CEP 9722、E7016、BSI-201、KU-0059436、AG014699、MK-4827又はBGB-290）である、態様Ｅ２１９に記載の方法。

Ｅ２２１ 前記抗体又はその抗原結合断片を二次治療として投与し、任意に、前記対象がプラチナ耐性である、態様Ｅ２１９に記載の方法。
Ｅ２２２ 前記抗体又はその抗原結合断片を二次治療として投与する、態様Ｅ２１９に記載の方法。
Ｅ２２３ 前記がんは頭頚部の扁平上皮癌である、態様Ｅ１８４～Ｅ２２２のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ２２４ 前記方法が放射線療法をさらに含む、態様Ｅ２２３に記載の方法。
Ｅ２２５ 前記がんは、プラチナ耐性のがん及び／又は再発したがんである、態様Ｅ２２３又は２２４に記載の方法。
Ｅ２２６ 前記対象はヒトである、態様Ｅ１７９～Ｅ２２５のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ２２７ 前記抗体若しくはその抗原結合断片又は医薬組成物を静脈内に投与する、態様Ｅ１７９～Ｅ２２６のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ２２８ 前記抗体若しくはその抗原結合断片又は医薬組成物を皮下に投与する、態様Ｅ１７９～Ｅ２２７のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ２２９ 前記抗体若しくはその抗原結合断片又は医薬組成物を、およそ、週に２回、週に１回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、５週間に１回、６週間に１回、７週間に１回、８週間に１回、９週間に１回、１０週間に１回、月に２回、月に１回、２か月に１回、３か月に１回、４か月に１回、５か月に１回、６か月に一回、７か月に１回、８か月に１回、９か月に１回、１０か月に１回、１１か月に１回、又は１２か月に１回、投与する、態様Ｅ１７９～Ｅ２２８のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ２３０ 前記抗体又はその抗原結合断片を２週間ごとに例えば最大で１２回（例．最大で１０、８、６、５、４又は３回）投与する、態様Ｅ１７９～Ｅ２２９のいずれか一つに記載の方法。

Ｅ２３１ 各投与は５～１０ｍｇ／ｋｇ（例．５、６、７、８、９又は１０ｍｇ／ｋｇ）の前記抗体又はその抗原結合断片を含む、態様Ｅ２３０に記載の方法。
Ｅ２３２ 各投与は約７ｍｇ／ｋｇを含む、態様Ｅ２３１に記載の方法。
Ｅ２３３ 前記抗体又はその抗原結合断片を４週間ごとに例えば最大で６回（例．最大で６、５、４、３、２又は１回）投与する、態様Ｅ１７９～Ｅ２２９のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ２３４ 各投与は１０～１５ｍｇ／ｋｇ（例．１０、１１、１２、１３、１４又は１５ｍｇ／ｋｇ）の前記抗体又はその抗原結合断片を含む、態様Ｅ２３３に記載の方法。
Ｅ２３５ 各投与は約１２ｍｇ／ｋｇを含む、態様Ｅ２３４に記載の方法。
Ｅ２３６ 試料、組織又は細胞を態様Ｅ１～Ｅ１６６のいずれか一つに記載の抗体若しくはその抗原結合断片又は態様Ｅ１６７に記載の医薬組成物と接触させて、前記抗体を検出することを含む、前記抗体を使用して前記試料、組織又は細胞中のαｖβ８インテグリン（例えば、ヒトαｖβ８インテグリン）を検出する方法。
Ｅ２３７ 態様Ｅ１～Ｅ１６６のいずれか一つに記載の抗体若しくはその抗原結合断片又は態様Ｅ１６７に記載の医薬組成物を含むキット。
Ｅ２３８ 医薬として、例えば、明細書に記載の方法の態様において使用するための、態様Ｅ１～Ｅ１６６のいずれか一つに記載の抗体若しくはその抗原結合断片又は態様Ｅ１６７に記載の医薬組成物。
Ｅ２３９ αｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、前記抗体又は断片は、
(a) 配列番号１１で示されるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域１（ＣＤＲ-Ｌ１）；配列番号１２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２；配列番号１３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３；配列番号８で示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１（ＣＤＲ-Ｈ１）；配列番号９で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２及び配列番号１０で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３を含む抗体又はその抗原結合断片；
(b) 配列番号１７で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１；配列番号１８で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２；配列番号１９で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３；配列番号１４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１；配列番号１５で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２及び配列番号１６で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３を含む抗体又はその抗原結合断片；
(c) ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124918であるプラスミドの挿入物がコードするアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）領域、及び、ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124917であるプラスミドの挿入物がコードするアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
(d) 配列番号７で示されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域、及び配列番号６で示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
(e) 配列番号６２～６６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域、及び配列番号３４～３８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
(f) 配列番号４７及び９２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域、並びに配列番号３９及び８８～９１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
(g) 配列番号７及び６７～６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域、並びに配列番号６及び９３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
(h) 配列番号７、４７～６９及び９２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域、並びに配列番号６、３４～４６、８８～９１及び９３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
(i) 配列番号５で示されるアミノ酸配列を含む軽鎖（ＬＣ）領域及び配列番号２で示されるアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
(j) 配列番号５で示されるアミノ酸配列を含むＬＣ領域及び配列番号３で示されるアミノ酸配列を含むＨＣ領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
(k) 配列番号１２３で示されるアミノ酸配列を含むＬＣ領域及び配列番号１２４又は１８２で示されるアミノ酸配列を含むＨＣ領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
(l) 配列番号１８６で示される核酸配列によってコードされたＶＬ領域、及び配列番号１９０で示される核酸配列によってコードされたＶＨ領域を含む抗体又はその抗原結合断片；及び
(m) 配列番号１８５で示される核酸配列によってコードされたＬＣ領域、及び配列番号１８９又は１９１で示される核酸配列によってコードされたＨＣ領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
からなる群から選択される少なくとも一つの抗体又は断片である、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２４０ 配列番号７で示されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域、及び配列番号６で示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む、態様Ｅ２３９に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。

Ｅ２４１ 配列番号７で示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＶＬ領域、及び配列番号６で示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む、態様Ｅ２３９又はＥ２４０に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２４２ 配列番号５で示されるアミノ酸配列を含むＬＣ領域及び配列番号２又は３で示されるアミノ酸配列を含むＨＣ領域を含む、態様Ｅ２３９に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２４３ 配列番号５で示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＬＣ領域、及び配列番号２又は３で示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＨＣ領域を含む、態様Ｅ２３９又はＥ２４２に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２４４ αｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、前記抗体又はその断片は、配列番号６、３４～４６、８８～９１及び９３からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域、並びに／又は配列番号７、４７～６９及び９２からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２４５ αｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、前記抗体又はその断片は、
(i) 配列番号２若しくは３で示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む抗体のＨＣ領域；及び／又は
(ii) 配列番号５で示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む抗体のＬＣ領域を含む、
単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２４６ αｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体であって、配列番号５で示されるアミノ酸配列からなるＬＣ、及び配列番号２又は３で示されるアミノ酸配列からなるＨＣを含む、単離された抗体。
Ｅ２４７ αｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体であって、
配列番号７で示されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域のＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３を含む抗体のＶＬ領域；並びに
配列番号６で示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域のＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２及びＣＤＲ-Ｈ３を含む抗体のＶＬ領域を含む、
単離された抗体。
Ｅ２４８ 配列番号１８１又は１８４で示されるアミノ酸配列を含む抗体の重鎖定常領域及び配列番号８３で示されるアミノ酸配列を含む抗体の軽鎖定常領域を含む、態様Ｅ２４７に記載の単離された抗体。
Ｅ２４９ αｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体であって、
a) 配列番号７で示されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域の第１、第２及び第３のＣＤＲを含む抗体のＶＬ領域；
配列番号６で示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域の第１、第２及び第３のＣＤＲを含む抗体のＶＨ領域；
配列番号８３で示されるアミノ酸配列を含む抗体の軽鎖定常（ＣＬ）領域；並びに
配列番号１８１若しくは１８４で示されるアミノ酸配列を含む抗体の重鎖定常（ＣＨ）領域；
b) 配列番号７で示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む抗体のＶＬ領域、及び配列番号６で示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む抗体のＶＨ領域；又は
c) 配列番号５で示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む抗体のＬＣ領域、及び配列番号２若しくは３で示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む抗体のＨＣ領域
を含む抗体。
Ｅ２５０ αｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124917である挿入物がコードするアミノ酸配列を含む抗体のＶＨ、及び、ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124918である挿入物がコードするアミノ酸配列を含む抗体のＶＬを含む、抗体又はその抗原結合断片。

Ｅ２５１ αｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、前記抗体又は断片は、以下のa.～l.の少なくとも１つの特性：
a. マウス抗体ADWA11のＫＤよりも小さい、例えば約５３６ｐＭ未満の、ヒトαｖβ８インテグリンに対する結合親和性（ＫＤ）；
b. 約１００ｐＭ以下であるヒトαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
c. マウス抗体ADWA11のＫＤよりも小さい、例えば約４８９ｐＭ未満の、マウスαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
d. 約１００ｐＭ未満であるマウスαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
e. マウス抗体ADWA11のＫＤよりも小さい、例えば約５０７ｐＭ未満の、カニクイザルαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
f. 約１００ｐＭ以下であるカニクイザルαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
g. 約１６０ｐＭであるラットαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
h. 例えば、Biacore親和性アッセイにより求めた約１００ｐＭ未満のＫＤである、ヒト、カニクイザル、マウス及びラットのαｖβ８インテグリンの少なくとも２つ、３つ又は全てに対してほぼ同等の親和性；
i. 約１００ｐＭ～約３００ｐＭであるＴＧＦβトランス活性化阻害のＩＣ５０；
j. Ｕ２５１細胞に対する約１００ｐＭ～約４００ｐＭのＥＣ３０；
k. 約１１０ｐＭ～約１８０ｐＭであるＣ８-Ｓ細胞に対するＥＣ５０；並びに
l. 以下のi.～iv.から選択される少なくとも１つのヒト薬物動態（ＰＫ）パラメーターの予測値
i. 約０．１２ｍＬ／ｈ／ｋｇである中央コンパートメントからのクリアランス（ＣＬ）；
ii. 約０．５１ｍＬ／ｈ／ｋｇであるコンパートメント間分配クリアランス（ＣＬＦ）；
iii. 約３６ｍＬ／ｋｇである中央コンパートメントの分布容積（Ｖ１）；
iv. 約３３ｍＬ／ｋｇである周辺コンパートメントの分布容積（Ｖ２）；
v. 約１５～１７日である半減期（ｔ_１／２）；及び
vi. ヒトＦｃγ受容体又はＣ１ｑへの検出可能な結合の不在
を有する、抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２５２ KabatのＥｕナンバリングによるＬ２３４、Ｌ２３５及びＧ２３７位に１つ以上の置換（例．Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＧ２３７Ａの１つ以上）を含むヒトＩｇＧ１のＦｃ領域を含む、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２５３ 前記抗体は、ヒト化抗体、ヒト抗体、マウス抗体、キメラ抗体又はラクダ抗体である、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２５４ 前記抗体の重鎖のアイソタイプは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４若しくはそのバリアントから選択され、及び／又は、前記軽鎖定常領域はκ鎖若しくはλ鎖から選択される、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２５５ 前記抗体の重鎖のアイソタイプはＩｇＧ１であり、及び／又は、前記軽鎖定常領域はκ軽鎖である、先行する態様のいずれか一つに記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２５６ 態様Ｅ２４２に記載の抗体又はその抗原結合断片とαｖβ８インテグリンとの結合に競合する抗体又はその抗原結合断片。
Ｅ２５７ 先行する態様のいずれか一つに記載の抗体又はその抗原結合断片及び薬学的に許容される担体又は賦形剤を含む医薬組成物。
Ｅ２５８ i) 配列番号２で示されるアミノ酸配列によってコードされる抗体重鎖、及び配列番号５で示されるアミノ酸配列によってコードされる抗体軽鎖を含む抗体若しくはその抗原結合断片、ii) 配列番号３で示されるアミノ酸配列によってコードされる抗体重鎖、及び配列番号５で示されるアミノ酸配列によってコードされる抗体軽鎖を含む抗体若しくはその抗原結合断片、又は iii) これらの両者を含む、態様Ｅ２５７に記載の薬学的組成物。
Ｅ２５９ 態様Ｅ２３９～Ｅ２５６のいずれか一つに記載の抗体又はその抗原結合断片をコードする単離された核酸。
Ｅ２６０ 前記単離された核酸は、前記抗体又はその抗原結合断片のＶＨ領域、ＶＬ領域又はこれらの両者をコードし、前記核酸は、配列番号１９０で示される核酸配列、配列番号１８６で示される核酸配列又はこれらの両者を含む、態様Ｅ２５９に記載の単離された核酸。

Ｅ２６１ 前記単離された核酸は、前記抗体又はその抗原結合断片の重鎖定常領域、軽鎖定常領域又はこれらの両者をコードし、前記核酸は、配列番号１９２若しくは１９３で示される核酸配列、配列番号１９４で示される核酸配列又はこれらの両者を含む、態様Ｅ２５９に記載の単離された核酸。
Ｅ２６２ 前記単離された核酸は、前記抗体又はその抗原結合断片のＨＣ、ＬＣ又はこれらの両者をコードし、前記核酸は、配列番号１８９若しくは１９０で示される核酸配列、配列番号１８５で示される核酸配列又はこれらの両者を含む、態様Ｅ２５９に記載の単離された核酸。
Ｅ２６３ 前記単離された核酸は、ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124917であるプラスミドの挿入物の核酸配列、ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124918であるプラスミドの挿入物の核酸配列、又はこれらの両者を含む、態様Ｅ２５９に記載の単離された核酸。
Ｅ２６４ 前記単離された核酸は、配列番号１８９若しくは配列番号１９１に対して少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは１００％の配列同一性を有する核酸配列、配列番号１８５に対して少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは１００％の配列同一性を有する核酸配列、又はこれらの両者を含む、態様Ｅ２５９に記載の単離された核酸。
Ｅ２６５ 態様Ｅ２５９～Ｅ２６４のいずれか一つに記載の核酸を含むベクター。
Ｅ２６６ 態様Ｅ２５９～Ｅ２６４のいずれか一項に記載の核酸又は態様Ｅ２６５に記載のベクターを含む宿主細胞。
Ｅ２６７ 前記宿主細胞は、ＣＨＯ細胞、ＣＯＳ細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＮＳ０細胞、ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）細胞及びＳｐ２．０細胞から成る群から選択される哺乳類細胞である、態様Ｅ２６５に記載の宿主細胞。
Ｅ２６８ 態様Ｅ２６６に記載の宿主細胞が抗体又は断片を発現し、かつ前記抗体又は断片を単離する条件で、前記宿主細胞を培養することを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片を製造する方法。
Ｅ２６９ それを必要とする対象におけるαｖβ８インテグリンの活性を低下させる方法であって、前記方法は、前記対象に、治療有効量の態様Ｅ２３９～Ｅ２５６のいずれか一つの抗体若しくはその抗原結合断片又は態様Ｅ２５７若しくはＥ２５８の医薬組成物を投与することを含む、方法。
Ｅ２７０ 癌を治療する方法であって、それを必要とする対象に治療有効量の態様Ｅ２３９～Ｅ２５６のいずれか一つに記載の抗体若しくはその抗原結合断片又は態様Ｅ２５７若しくはＥ２５８に記載の医薬組成物を投与することを含む、方法。

Ｅ２７１ さらに、細胞毒性剤、細胞増殖抑制剤、化学療法剤、ホルモン治療、ワクチン、免疫療法、手術、放射線、冷凍手術、温熱療法又はそれらの組合せを適用する、態様Ｅ２７０に記載の方法。
Ｅ２７２ 前記適用は、治療有効量の前記抗体若しくはその抗原結合断片又は前記医薬の組合せの投与と、同時、逐次、又は別々である、態様Ｅ２７１に記載の方法。
Ｅ２７３ 前記免疫療法は、抗ＰＤ-１抗体、抗ＰＤ-Ｌ１抗体、抗ＰＤ-Ｌ２抗体、抗ＣＴＬＡ-４抗体、可溶性ＣＴＬＡ-４融合タンパク質及びその組合せからなる群から選択される免疫チェックポイント分子のモジュレーターを含み、ここで、前記抗ＰＤ-Ｌ１抗体はアベルマブではない、態様Ｅ２７１に記載の方法。
Ｅ２７４ 前記がんは、頭頚部の扁平上皮癌、明細胞又は乳頭状腎細胞癌、卵巣癌、卵管癌、原発性腹膜癌、胃癌、胃食道接合部の癌、食道癌、肺の扁平上皮癌、膵管腺癌、胆管癌、子宮癌、メラノーマ、尿路上皮癌及びこれらの組合せからなる群から選択される、態様Ｅ２７０～Ｅ２７３のいずれか一つに記載の方法。
Ｅ２７５ 試料、組織又は細胞を態様Ｅ２３９～Ｅ２５６のいずれか一つに記載の抗体又はその抗原結合断片と接触させて、前記抗体又はその抗原結合断片を検出することを含む、前記抗体又はその抗原結合断片を使用して前記試料、組織又は細胞中のαｖβ８インテグリンを検出する方法。
Ｅ２７６ 態様Ｅ２３９～Ｅ２５６のいずれか一つに記載の抗体若しくは断片又はＥ２５７若しくはＥ２５８に記載の医薬組成物、及び任意に態様Ｅ２７３に記載のモジュレーターを含むキット。
Ｅ２７７ 癌の治療のために、それを必要とする対象におけるαｖβ８インテグリンの活性を低下させるのに使用するための、態様Ｅ２３９～Ｅ２５６のいずれか一つに記載の抗体若しくはその抗原結合断片又は態様Ｅ２５７若しくは２５８に記載の医薬組成物。
Ｅ２７８ がんの治療に使用するための態様Ｅ２３９～Ｅ２５６のいずれか一つに記載の抗体若しくはその抗原結合断片又は態様Ｅ２５７若しくはＥ２５８に記載の医薬組成物であって、任意に、前記抗体若しくはその抗原結合断片又は前記医薬組成物は、免疫療法と併用して、同時に、逐次に、又は別々に投与され、前記併用は、任意に相乗的な治療効果を提供する、抗体若しくはその抗原結合断片又は医薬組成物。
Ｅ２７９ 前記がんは、頭頚部の扁平上皮癌、明細胞又は乳頭状腎細胞癌、卵巣癌、卵管癌、原発性腹膜癌、胃癌、胃食道接合部の癌、食道癌、肺の扁平上皮癌、膵管腺癌、胆管癌、子宮癌、メラノーマ、尿路上皮癌及びこれらの組合せからなる群から選択され、任意に、抗体若しくはその抗原結合断片、又は医薬組成物若しくは医薬の組合せは、免疫療法又は放射線療法と共に行われる、態様Ｅ２７８に記載の使用のための抗体若しくはその抗原結合断片又は医薬組成物。
Ｅ２８０ 癌の治療のための、態様Ｅ２３９～Ｅ２５６のいずれか一つに記載の抗体若しくはその抗原結合断片又は態様Ｅ２５７若しくはＥ２５８に記載の医薬組成物の使用。

Ｅ２８１ 癌を治療する医薬の製造における、態様Ｅ２３９～Ｅ２５６のいずれか一つに記載の抗体若しくはその抗原結合断片又は態様Ｅ２５７若しくはＥ２５８に記載の医薬組成物の使用。
Ｅ２８２ それを必要とする対象に、治療有効量の (i) αｖβ８インテグリンに特異的に結合する抗体又はその抗原結合断片、及び (ii) 抗ＰＤ-１、抗ＰＤ-Ｌ１又は抗ＰＤ-Ｌ２免疫チェックポイント分子のモジュレーターを投与することを含む、がんの治療方法。
Ｅ２８３ 前記がんが扁平上皮癌である、態様Ｅ２８２に記載の方法。
Ｅ２８４ 前記がんが乳癌又は結腸癌である、態様Ｅ２８２に記載の方法。
Ｅ２８５ 前記モジュレーターが、抗ＰＤ-１抗体、抗ＰＤ-Ｌ１抗体及び抗ＰＤ-Ｌ２抗体からなる群から選択される、態様Ｅ２８２～Ｅ２８４のいずれか一つに記載の方法。

上記発明の概要及び以下の詳細な説明は、添付した図面と併せて読むとよく理解できる。本発明を説明するために以下に図面の態様を示すが、本発明は示されている正確な配置及び手段には限定されないことを理解されたい。

図１Ａは、マウスハイブリドーマ抗体ADWA11（mADWA11、ADWA11又はハイブリドーマ マウスADWA11、配列番号２０）、ヒト化ADWA11 VH05-2/VK01(2.4)抗体（huADWA11-2.4、ADWA11 2.4又はヒト化ADWA11-2.4；配列番号６）及びIGHV3-07生殖系列の配列（IMGT又はDP-54；配列番号１９５）の重鎖可変領域のアミノ酸配列を比較する配列アラインメントを示す。下線が引かれたアミノ酸残基は、KabatによるＣＤＲ配列である。 図１Ｂは、マウスハイブリドーマ抗体ADWA11（mADWA11、ADWA11又はハイブリドーマ マウスADWA11、配列番号２１）、ヒト化ADWA11 VH05-2/VK01(2.4)抗体（huADWA11-2.4、ADWA11 2.4又はヒト化ADWA11-2.4；配列番号７）及びIGKV1-39生殖系列の配列（IMGT又はDPK-9；配列番号１９６）の軽鎖可変領域のアミノ酸配列を比較する配列アラインメントを示す。下線が引かれたアミノ酸残基は、KabatによるＣＤＲ配列である。 図２は、ＥＬＩＳＡによる、ヒトインテグリンαｖβ３（AVB3）及びαｖβ６（AVB6）に対するマウスハイブリドーマ抗体ADWA2及びADWA11の結合特異性を比較する代表的な図である。ADWA2及びADWA11はインテグリンαｖβ３（AVB3）及びαｖβ６（AVB6）には結合しなかったが、対照であるαＶ結合抗体（「AlphaV mAb」）はαｖβ３及びαｖβ６に結合した。 図３Ａは、ＥＬＩＳＡによる、マウスハイブリドーマADWA11抗体がヒトαｖβ８に結合したことを示す代表的な図である。 図３Ｂは、ＥＬＩＳＡによる、ヒト化抗体ADWA11 VH05/VK01(2.4)がヒトαｖβ８に結合したことを示す代表的な図である。 図４Ａは、ＥＬＩＳＡによる、元のヒト化ADWA11_VH05/VK01（ADWAVH_1.5及びADWAVL_1.1）抗体と比較した、重鎖可変領域にＫ３０Ａ、Ｎ５５Ｑ、Ｎ５７Ｑ、Ｄ６１Ｅ、Ｐ６２Ａ又はＫ６３Ａアミノ酸置換を有するADWA11 VH05/VK01のＦａｂの、ヒトαｖβ８に対する結合親和性を示す代表的な図である。重鎖可変領域にＫ３０Ａ、Ｎ５５Ｑ、Ｎ５７Ｑ、Ｄ６１Ｅ、Ｐ６２Ａ又はＫ６３Ａアミノ酸置換を有するＦａｂは、ヒトαｖβ８に対する結合親和性を保持した。 図４Ｂは、ＥＬＩＳＡによる、元のADWA11 VH05-2/VK01抗体と比較した、アミノ酸置換を重鎖可変領域（例．Ｆ６４Ｖ）又は軽鎖可変領域（例．Ｌ３０Ｓ、Ｙ５５Ａ、Ａ６０Ｑ、Ｍ９４Ｑ、Ｌ９７Ｙ、Ｆ１０１Ｌ、Ｆ１０１Ｗ又はＱ１０５Ｇ）のいずれかに有するADWA11 VH05-2/VK01のＦａｂの、ヒトαｖβ８に対する結合親和性を示す代表的な図である。軽鎖可変領域にＹ５５Ａ、Ａ６０Ｑ、Ｆ１０１Ｌ又はＦ１０１Ｗアミノ酸置換を有するＦａｂは、ヒト化ADWA11 VH05-2/VK01抗体と比較して、ヒトαｖβ８に対する結合親和性が低下した。実験した他のＦａｂは、ヒトαｖβ８に対する結合親和性を保持していた。 図４Ｃは、ＥＬＩＳＡによる、元の抗体（元のVH05-2_VK01）と比較した、表５に示すアミノ酸置換の組合せを有するADWA11 VH05-2/VK01 Fab（VH05-2/VK01(2.1) (ADWA11 2.1)、VH05-2/VK01(2.2) (ADWA 2.2)、VH05-2/VK01(2.3) (ADWA 2.3)、VH05-2/VK01(2.4)(ADWA 2.4)、VH05-2(F64V)/VK01(2.1)、VH05-2(F64V)/VK01(2.3)及びVH05-2(F64V)/VK01(2.4)）の、ヒトαｖβ８に対する結合親和性を示す代表的な図である。測定した各Ｆａｂは、ヒトαｖβ８に対する結合親和性を保持していた。 図５は、Biacoreによる、ヒトインテグリンαｖβ３（avb3）及びαｖβ６（avb6）に対する、マウスハイブリドーマADWA11（MsADWA11又はmADWA11）、ヒト化ADWA11 VH05-1/VK01（ADWA11 5-1_1）及びADWA11 VH05-2/VK01（ADWA11 5-2_1）の結合特異性を比較する代表的な図である。ADWA11抗体はインテグリンαｖβ３（avb3）及びαｖβ６（avb6）とは結合しなかったが、対照αＶ結合抗体（抗av）はαｖβ３及びαｖβ６の両者と結合した。 図６Ａは、ハイブリドーマADWA11（MsADWA11）Fabのヒトαｖβ８へのBiacore結合トレースを示す。図６Ｂは、ヒト化ADWA11_5-2 2.4 Fab（ADWA11 VH05-2/VK01(2.4) Fab又はADWA11 2.4Fab）のヒトαｖβ８へのBiacore結合トレースを示す。 図６Ｃは、ヒト化ADWA11 Fab（ADWA11は本明細書ではADWA11 5-2 2.4、ADWA11 2.4及びADWA11 VH05-2/VK01(2.4)ともいう）は、元のマウス抗体（MsADWA11）のＦａｂと比較して、ヒトαｖβ８に対する親和性及び種間反応性を保持していることBiacoreにより示す表を示す。ADWA11 5-2 2.4は、ヒト、カニクイザル、マウス及びラットのαｖβ８に対して同等の親和性を示し、ＫＤは２００ｐＭ未満であった。元のマウス抗体は、ヒト、カニクイザル及びマウスαｖβ８に対して同等の親和性を示し、ＫＤは４８９～５３６ｐＭであった。 図７Ａは、重鎖可変領域（例．Ｆ６４Ｖ）又は軽鎖可変領域（例．Ｌ３０Ｓ、Ｍ９４Ｑ、Ｌ９７Ｙ、Ｆ１０１Ｌ又はＱ１０５Ｇ）のいずれかに単一のアミノ酸置換を有するADWA11 VH05-2/VK01（元の）Ｆａｂ（ADWA11）の、Ｕ２５１細胞結合データを比較する代表的な図である。軽鎖可変領域にＦ１０１Ｌ酸置換を有するＦａｂは、元の抗体と比較して、Ｕ２５１細胞（ヒトαｖβ８）への結合が低下した。実験した他のＦａｂはＵ２５１細胞（ヒトαｖβ８）への結合を保持した。 図７Ｂは、軽鎖可変領域（例．Ｍ５６Ａ又はＮ５８Ｓ）に単一のアミノ酸置換を有するADWA11 VH05-2/VK01（元の）Ｆａｂ（ADWA11）の、Ｕ２５１細胞結合データを比較する代表的な図である。Ｍ５６Ａ及びＮ５８Ｓ Ｆａｂは、Ｕ２５１細胞（ヒトαｖβ８）への結合を保持した。 図７Ｃは、表５に示す2.1、2.2、2.3、2.4、2.1(F64V)、2.3(F64V)及び2.4(F64V)という名称のアミノ酸置換の組合せを有するADWA11 VH05-2/VK01 Fab（ADWA11）のＵ２５１細胞結合データを、元の抗体と比較を示す代表的な図である。実験した各Ｆａｂは、固定されたＵ２５１細胞への結合を保持した。 図８は、Ｕ２５１細胞に対する抗体ADWA11mIgG_4mut及びADWA11 VH05/VK01の結合親和性を比較する代表的な図である。 図９Ａは、ADWA11 VH05-2/VK01、ADWA11_VH05-2/VK01(2.1)及びADWA11_VH05-2/VK01(2.4)とＵ２５１（ヒト神経膠芽腫）又はＣ８-Ｓ（マウス星状細胞）への結合を示す代表的な図である。ADWA11 VH05-2/VK01(2.1)及びADWA11 VH05-2/VK01(2.4)抗体は、Ｕ２５１（ヒトａｖｂ８）及びＣ８-Ｓ（マウスａｖｂ８）への結合を保持した。 図９Ｂは、ADWA11 VH05-2/VK01(2.4)のようなインテグリンに特異的な抗体のαｖβ３、αｖβ５、αｖβ６及びαｖβ８を発現するＨＥＫ細胞への結合を示す代表的な図である。ADWA11 VH05-2/VK01(2.4)はαｖβ８を発現するＨＥＫ細胞と飽和結合し、αｖβ３、αｖβ５、αｖβ６を発現する細胞とは結合しない。これらの結果は、ADWA11 VH05-2/VK01(2.4)のヒトαｖβ８への特異的結合を示す。 同上。 同上。 図１０Ａは、Ｕ２５１細胞におけるＴＧＦβのトランス活性化に対する、マウスハイブリドーマADWA11（ｍＦａｂ）とヒト化ADWA11 Fab: ADWA11 VH01/VK01、ADWA11 VH02/VK01、ADWA11 VH02/VK02、ADWA11 VH05/VK02及びADWA11 VH05/VK01の影響を比較する代表的な図である。Ｕ２５１トランス活性化アッセイにおけるTGFβ活性化阻止に関し、ADWA11 Fab（ｍＦａｂ）と比較して、VH01/VK01、VH02/VK01及びVH02/VK02 Fabは活性を低下させ、VH05/VK01は活性を保持し、VH05/VK02は改善された活性を示した。 図１０Ｂは、Ｕ２５１細胞におけるＴＧＦβのトランス活性化に対する、重鎖可変領域（例．Ｆ６４Ｖ）又は軽鎖可変領域（例．Ｌ３０Ｓ、Ｍ９４Ｑ、Ｌ９７Ｙ、Ｆ１０１Ｌ、Ｆ１０１Ｗ又はＱ１０５Ｇ）のいずれかにアミノ酸置換を有するADWA11 VH05-2/VK01 Fabの影響を比較する代表的な図である。軽鎖可変領域にＦ１０１Ｌ又はＦ１０１Ｗの単一アミノ酸置換を有するＦａｂは、元のヒト化ADWA11 VH05-2/VK01 Fabと比較して、ＴＧＦβトランス活性化に対する効果が低下した。実験を行った他のＦａｂは、ＴＧＦβトランス活性化アッセイにおいて活性を保持した。 図１０Ｃは、表５において、2.1、2.2、2.3、2.4、2.1(F64V)、2.3(F64V)及び2.4(F64V)と称されるアミノ酸置換の組合せを含むアミノ酸置換を有するADWA11 VH05-2/VK01 Fabの効果を比較する代表的な図である。VH02-2/VK01(2.3)及びVH05-2(F64V)/VK01(2.3) Fabは、元のADWA11 VH05-2/VK01 Fabと比較して、ＴＧＦβトランス活性化に対する効果が低下した。実験を行った他のＦａｂは、ＴＧＦβトランス活性化アッセイにおいて活性を保持した。 図１０Ｄは、重鎖可変領域（例．Ｆ６４Ｖ）又は軽鎖可変領域（例．Ｌ３０Ｓ、Ｍ９４Ｑ、Ｌ９７Ｙ、Ｑ１０５Ｇ、Ｍ５６Ａ又はＮ５８Ｓ）に示したアミノ酸置換を有するADWA11 VH05-2/VK01 Fab（元の抗体）の効果を比較する代表的な図である。試験したＦａｂは、元のADWA11 VH05-2/VK01 Fabと比較して、ＴＧＦβトランス活性化アッセイにおいて活性を保持した。 図１０Ｅは、Ｕ２５１細胞におけるＴＧＦβのトランス活性化に対する、ヒト化ADWA11 VH05/VK01、VH05/VK01-D61E (VH05-1/VK01)及びVH05/VK01-N55Q-D61E (VH05-2/VK01) IgGの影響を示す代表的な図である。試験した抗体は、ＴＧＦβトランス活性化アッセイにおいて活性を保持した。 図１０Ｆは、アイソタイプ対照抗体と比較した、Ｕ２５１細胞（左）及びＣ８-Ｓ細胞（右）におけるＴＧＦβトランス活性化に対するADWA11_VH05-2_VK01(2.4)の影響を示す代表的な図である。追加の実験により、Ｕ２５１細胞を用いたＴＧＦβトランス活性化アッセイにおけるADWA11 VH05-2/VK01(2.4)のＩＣ５０が１９９±９３．６ｐＭ（平均±標準偏差）であることが示された。 図１１は、表１に示す陽性対照ペプチドと比較した、さまざまなADWA11 VH05-2VK01 ＣＤＲペプチドのレスポンダー（免疫原性）の割合を示す代表的な図である。ペプチドの免疫原性スコアを使用して、免疫原性のリスクが低減される可能性のあるＣＤＲ配列を選択した。 図１２Ａは、ＥＭＴ６乳癌モデルにおける抗αｖβ８処置（ADWA11）、抗ＰＤ-１抗体処置（PD-1、RMP1-14）、mIgG1_4mutアイソタイプ処置（2B8）及びラットIgG2aアイソタイプ処置（2A3）の組合せの有効性を示す代表的な図である。腫瘍の増殖は、週に３回、デジタルノギスを使用して測定し、腫瘍体積（長さ×幅×幅×０．５）として算出した。各処置群の平均腫瘍体積±ＳＥＭを、各群で８／１０未満のマウスが残るまでプロットした。生存は１０００ｍｍ^３に達するまでの時間と定義した。抗ＰＤ-１とADWA11の組合せは、腫瘍の増殖を抑制し、全生存期間を実験した他の組合せよりも大幅に改善した。 図１２Ｂの上部は、ＥＭＴ６乳癌モデルにおける単剤療法としての１、３、１０及び２０ｍｇ／ｋｇでの抗αｖβ８抗体（ADWA11）及びアイソタイプコントロール（mIgG1_4mutアイソタイプ（2B8））の有効性を示す代表的な図である。ＥＭＴ６乳癌モデルにおける、１、３、１０及び２０ｍｇ／ｋｇの抗αｖβ８抗体ADWA11と抗ＰＤ-１抗体（RMP1-14、１０ｍｇ／ｋｇ）の組合せ並びにラットIgG2aアイソタイプ（2A3）も示す。実験の０、４及び８日目にマウスを抗体で処置し、腫瘍の増殖は、週に３回、デジタルノギスを使用して測定し、腫瘍体積（長さ×幅×幅×０．５）として算出した。 図１３は、ＥＭＴ６腫瘍モデルにおける抗αｖβ８（ADWA11）、抗４１ＢＢ（MAB9371）、抗ＣＴＬ４（9D9）、mIgG1_4mutアイソタイプ（2B8）、及びラットＩｇＧ２ａアイソタイプ（2A3）処置の組合せの有効性を示す代表的な図である。腫瘍増殖は、デジタルノギスを使用して週に３回測定し、腫瘍体積（長さ×幅×幅×０．５）として算出し、各処置群の平均腫瘍体積±ＳＥＭを、各群に残るマウスが８／１０未満になるまでプロットし、生存率は１０００ｍｍ^３に達するまでの時間として定義した。抗４-１ＢＢとADWA11の組合せ又は抗ＣＬＴＡ４とADWA11の組合せによる処置は、実験した他の組合せよりも腫瘍増殖を抑制し、全生存期間を大幅に改善した。 図１４Ａは、ＣＴ２６腫瘍モデルにおいて、アイソタイプ対照と放射線処置の組合せ（mIgG4mut（2B8）＋５Ｇｙ放射線群）と比較して、腫瘍増殖を抑制し、全生存期間を大幅に改善した抗αｖβ８抗体と放射線処置の組合せ（ADWA11＋５Ｇｙ放射線群）を示す代表的な図である。腫瘍の増殖は、デジタルノギスを使用して週に３回測定し、腫瘍の体積（長さ×幅×幅×０．５）として算出し、各処置群の平均腫瘍体積±ＳＥＭをプロットし、生存率は１０００ｍｍ^３に達するまでの時間として定義した。^＊ｐ＜０．０５（対処置なし）、^＊＊Ｐ＜０．０５（対放射線＋２Ｂ８） 同上。 同上。 図１４Ｂ上は、０日目、４日目、及び８日目に１０ｍｇ／ｋｇのアイソタイプ対照（Control）又はADWA11抗体（Anti-ITGαVβ8）で処置したマウスから１２日目に採取したＣＴ２６腫瘍組織におけるＣＤ４５、ＣＤ８及びグランザイムＢを発現する細胞の密度を示す、ｎ＝６；ｐ＝Ｐ-値。下は、アイソタイプ対照（Isotype）、ADWA11抗体（Anti-ITGαVβ8）、５Ｇｙの腫瘍標的放射線と組み合わせたアイソタイプ、又は５Ｇｙの腫瘍標的放射線と組み合わせたADWA11抗体の最初の１０ｍｇ／ｋｇ投与の１２日後に採取した腫瘍組織におけるＣＤ４５、ＣＤ８、グランザイムＢ及びＩＦＮγの遺伝子の発現を示す。抗体は実験の１日目、４日目及び８日目に静脈内に投与し、放射線は実験の５日目に照射した。各処置群は５匹のマウスを含んだ；平均値及びその標準偏差もグラフに示した。 図１５は、ＥＭＴ６腫瘍モデルにおけるＣＤ４５（総リンパ球及び骨髄細胞）、ＣＤ３（総Ｔ細胞）、ＣＤ４ Ｔ細胞、ＣＤ８ Ｔ細胞及びグランザイムＢ（活性化ＣＤ８及びＮＫ細胞）の密度のＩＨＣ分析を示す代表的な図である。ADWA11(2.4)（ADWA11 VH05-2/VK01(2.4)）による処置は、分析した全ての細胞型の密度を増加させた。一群あたりｎ＝１０、両側Ｔ検定によるｐ値を図に表示。 図１６Ａは、ＣＣＫ１６８腫瘍モデルの処置レジメンを示す図である。４処置群に対する腫瘍細胞の移植及び抗体の腹腔内（ｉ．ｐ．）注射のスケジュールを示す。図１６Ｂは、ＣＣＫ１６８腫瘍モデルにおける腫瘍体積２０００ｍｍ^３を生存カットオフとした場合の代表的なカプランマイヤー生存曲線である。一群あたりｎ＝１０。^＊＊ｐ＜０．０１（ログランクMantel-Cox検定）。図１６Ｃは、図１６Ｂに示す腫瘍の増殖曲線を示す代表的な図である。腫瘍が２０００ｍｍ^３以上となった場合又は広範な潰瘍が観察された場合、４５日のエンドポイントの前にマウスを安楽死させた。抗ＰＤ-１抗体とADWA11処置の組合せは、抗ＰＤ-１抗体、ADWA11若しくはアイソタイプ対照単独による処置の場合、又は個々の効果を単に足し合わせた場合よりも、腫瘍増殖を相乗的に抑制し、全生存期間を大幅に改善した。示したデータは３回の独立した実験の代表である。 図１７Ａは、腫瘍浸潤単球、マクロファージ及び樹状細胞を同定するためのゲーティング戦略を示す。単一の生細胞を、最初にＬｙ６Ｇ、ＳｉｇｌｅｃＦ、ＣＤ９０及びＢ２２０を含むダンプゲートでゲーティングし、好中球、好酸球、リンパ球及びＢ細胞を排除した。次に、陰性染色細胞をフローサイトメトリーによって分析し、ゲーティングした。マクロファージはＣＤ４５＋、ＣＤ１１ｂ＋、ＣＤ６４^高、Ｆ４／８０^高として識別され、樹状細胞はＣＤ４５＋、ＣＤ１１ｂ＋、Ｆ４／８０－、ＣＤ６４－、ＭＨＣＩＩ^高、ＣＤ１１ｃ^高として識別された。マクロファージのポピュレーションのうち、免疫刺激性マクロファージはＬｙ６Ｃ^高、ＣＤ２０６^低として識別され、免疫抑制性マクロファージはＬｙ６Ｃ^低、ＣＤ２０６^高として識別された。ダンプチャネルはＬｙ６Ｇ＋、ＳｉｇｌｅｃＦ＋、ＣＤ９０．２＋、Ｂ２２０＋であった。 図１７Ｂは、図１７Ａに記載された非凝集腫瘍における多色フローサイトメトリーパネルの一部として分析されたインテグリンαｖβ８の細胞表面染色を示す代表的な図である。ＣＣＫ１６８腫瘍モデルにおけるＦＭＯ（fluorescence minus one）コントロール染色及びADWA11抗体染色を示す代表的なフローサイトメトリー。Ｎ＝４腫瘍。 同上。 図１８Ａは、ＣＣＫ１６８から単離したＣＤ４５陰性細胞上のADWA11染色を示す代表的な図である。単一の生細胞をＣＤ４５の存在に関して分析した。ＣＣＫ１６８腫瘍モデルにおいて、ＣＤ４５陰性細胞の４％は、ADWA11抗体によるαｖβ８発現が陽性であった。図１８Ｂは、ＣＣＫ１６８、ＣＴ２６及びＥＭＴ６細胞株におけるαｖβ８の発現を示す。単一生細胞を、アイソタイプ抗体及び抗αｖβ８（ADWA11）染色抗体を使用するフローサイトメトリーによってαｖβ８発現について分析した。αｖβ８発現は、ＣＣＫ１６８及びＥＭＴ６細胞株で検出されたが、ＣＴ２６細胞株では検出されなかった。 図１９Ａは、対照抗体、抗ＰＤ-１、ADWA11、又は抗ＰＤ-１とADWA11の組合せで処置されたＣＣＫ１６８腫瘍を有するマウスの腫瘍内ＣＤ８＋Ｔ細胞の総数を示す代表的な図である。全てのＣＤ４５＋細胞のＣＤ４及びＣＤ８発現の代表的なフローサイトメトリーを、各群における各マウスのＣＤ８＋細胞数とＣＤ４５＋細胞の比率とともに示す。 同上。 同上。 図１９Ｂは、抗ＣＤ８及びＤＡＰＩで染色した、各処置群のマウスから採取したＣＣＫ１６８腫瘍切片の代表的な免疫蛍光顕微鏡写真を示す。スケールバー：５０μｍ。 図１９Ｃは、ＣＤ８発現でゲートした細胞におけるグランザイムＢの細胞内染色を示す代表的なフローサイトメトリーを、各群における各マウスで検出可能なグランザイムＢを発現するＣＤ８＋細胞の割合とともに示す。 同上。 同上。 図１９Ｄは、ＣＤ４５＋Ｌｙ６Ｇ－ＣＤ１１ｂ＋ＣＤ６４^高Ｆ４／８０^高でゲートした細胞の免疫刺激性マクロファージ（Ｌｙ６ｃ^高、ＣＤ２０６^高）及び免疫抑制性マクロファージ（ＣＤ２０６^高、Ｌｙ６ｃ^低）を示す代表的なフローサイトメトリーを示す。マクロファージのポピュレーションのうち、免疫刺激性マクロファージはＬｙ６Ｃ^高ＣＤ２０６^低として識別され、免疫抑制性マクロファージはＬｙ６Ｃ^低ＣＤ２０６^高として識別された。グラフ中のデータは平均±ＳＥＭ、一群あたりｎ＝１０。一方向ＡＮＯＶＡで、^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１。 同上。 同上。 図２０は、ＣＣＫ１６８腫瘍微小環境におけるＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞のADWA11染色を示す代表的な図である。単一の生ＣＤ４５＋細胞をＣＤ４及びＣＤ８でゲートし、ADWA11で染色した。４つ各処置群からのマウスの代表的なプロットを示す。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 図２１Ａは、ＣＤ８＋Ｔ細胞の免疫枯渇を示す代表的な図である。顕微鏡写真は、抗ＣＤ８枯渇抗体又はアイソタイプ対照抗体による前処置の有無にかかわらず、組合せ抗ＰＤ-１／ADWA11処置後に単離されたＣＣＫ１６８腫瘍におけるＤＡＰＩと抗ＣＤ８の対比免疫染色を示す。 図２１Ｂは、ADWA11／抗ＰＤ-１併用処置の２４時間前に抗ＣＤ８枯渇抗体又はアイソタイプ対照抗体で前処置したＣＣＫ１６８腫瘍の平均腫瘍増殖曲線を示す代表的な図である。 図２１Ｃは、抗ＣＤ８枯渇抗体又はアイソタイプ対照抗体のいずれかで１日前に前処置された、ADWA11／抗ＰＤ-１併用処置後のＣＣＫ１６８腫瘍を有するマウスの生存を示す代表的な図である。データは生存率として報告、一群あたりｎ＝１０。^＊＊ｐ＜０．０１（ログランクMantel-Cox検定）。 図２２Ａは、ADWA-11又は対照抗体で処置され、マクロファージを検出するためのＣＤ８に対する抗体、Ｆ４／８０に対する抗体、及びＴＧＦβシグナル伝達（ｐＳ３）を検出するためのホスホ-ＳＭＡＤ３に対する抗体で染色したマウスから得たＣＣＫ１６８腫瘍を示す代表的な図である。低パワーの統合された画像及びｐＳＭＡＤ３のみを示す画像を左側に、拡大した統合画像と四角で囲まれた領域の各単一抗体の画像を右側に示す。 図２２Ｂは、対照及びADWA11処置マウスにおけるｐＳｍａｄ３（ｐＳ３）染色密度の定量化を示す代表的な図である。ADWA11処置は、ＣＣＫ１６８腫瘍のｐＳｍａｄ３密度を減少した。 図２３Ａは、３０種のヒトのがんでのインテグリン-β８ ｍＲＮＡ発現に関するＴＣＧＡ（The Cancer Genome Atlas）から得たデータを示す代表的な図である。それぞれの点は、個々の腫瘍サンプルを表す。この図に示されている結果は、TCGA Research Networkが作成したデータに基づく。 図２３Ｂは、新鮮で匿名化された卵巣癌及び腎細胞癌をばらばらにした細胞を、成熟単球（ＣＤ１６＋単球）、腫瘍関連マクロファージ（ＣＤ１４＋マクロファージ）、２種の樹状細胞から得た単球（ＢＣＤＡ１＋ｍｏＤＣ及びＢＣＤＡ３＋ｍｏＤＣ）又は好酸球でゲートし、αｖβ８の発現のために染色したフローサイトメトリーデータを示す代表的な図である。対照として正常な扁桃腺の組織も分析した。ゲーティング戦略を図２３Ｃに示す；ｎ＝２、腫瘍の種類ごと。 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 図２３Ｃは、ヒト腫瘍生検サンプルのゲーティング戦略を示す代表的な図である。単一のＣＤ４５＋生細胞は、顆粒球を除去するためにＳＳＣ-Ａ（ｈｉ）でゲートした。ＳＳＣ-Ａ（ｌｏ）はＨＬＡ-ＤＲ＋ＣＤ３－でゲートし、ＣＤ１４及びＣＤ１６で染色した。ＣＤ１４＋ＣＤ１６＋はＣＤ１６＋単球とした。ＣＤ１６－細胞はさらにＣＤ１１ｃで染色した。ＣＤ１４＋ＣＤ１１ｃ＋細胞をさらにＣＤ１ｃ及びＣＤ１４１で染色した。ＣＤ１ｃ＋ＣＤ１４１－はＣＤ１ｃ＋ＭｏＤＣとした。ＣＤ１４１＋ＣＤ１ｃ－はＣＤ１４１＋ＭｏＤＣとした。ＣＤ１ｃ－ＣＤ１４１－細胞をさらにＣＤ６４で染色し、ＣＤ６４＋ポピュレーションをＣＤ１４＋ＴＡＭとした。 同上。 図２４Ａは、０．０１～１０ｍｇ／ｍｌのADWA11の濃度で行ったＴＭＬＣ細胞共培養バイオアッセイの結果を示す代表的な図である。ＴＧＦβ活性を、ＰＡＩ-１ルシフェラーゼレポーター活性に基づく相対的なルシフェラーゼユニットとして報告。各ADWA11の用量あたりｎ＝３、３回の実験。 図２４Ｂは、０．００１～１０ｍｇ／ｍｌのADWA-11の存在下、ＴＧＦβ１の潜在型関連ペプチド（ＬＡＰ）でコーティングしたペトリ皿で行った細胞接着アッセイの結果を示す代表的な図である。接着細胞をクリスタルバイオレットで染色し、接着を５９５ｎｍでの吸光度として表した。各ADWA11の用量あたりｎ＝３、３回の実験。 図２４Ｃは、インテグリンαｖβ３、αｖβ５、αｖβ６、及びαｖβ８に対する抗体が、これらのインテグリンを発現しない野生型結腸癌細胞、ＳＷ-４８０、又はβ３（SW-itgb3）、β６（SW-itgb6）若しくはβ８（SW-itgb8）を発現するようにトランスフェクトされたＳＷ-４８０細胞のフローサイトメトリーに使用されたことを示す代表的な図である。試験した各抗体及び細胞型について、代表的なフローサイトメトリープロットを示す。 図２５Ａは、ＴＧ３２マウスの静脈内に０．１、０．３及び３ｍｇ／ｋｇのADWA11(2.4)を投与した場合の、２コンパートメント非線形薬物動態モデルを示す代表的な図である。円：実測値。線：モデルにフィット。 図２５Ｂは、ＴＧ３２マウスの静脈内に３ｍｇ／ｋｇのADWA11 2.4を投与した場合の、２コンパートメント薬物動態モデルを示す代表的な図である。円：実測値。線：モデルにフィット。 図２６は、それぞれ、４、４０及び１００ｍｇ／ｋｇで静脈内単回ボーラス投与後のカニクイザルにおけるADWA11 2.4の２コンパートメント薬物動態を示す代表的な図である。円：実測値。線：モデルにフィット。 図２７Ａ及び２７Ｂは、２８日ごとに合計３回の投与で１２ｍｇ／ｋｇ及び１４日ごとに合計３回の投与で７ｍｇ／ｋｇというヒトADWA112.4の薬物動態の予測を示す代表的な図である。ＣＰは予測される血漿濃度；ＣＡＶＧはＣ_ａｖｇ又は平均血漿濃度；Ｒｏｄｅｎｔ ＮＯＡＥＬは、げっ歯類の無毒性量のＣ_ａｖｇ：ＮＨＰ ＮＯＡＥＬは、ヒト以外の霊長類の無毒性量のＣ_ａｖｇである。 同上。 図２８は、ＣＣＫ１６８腫瘍モデルにおける腫瘍体積２０００ｍｍ^３を生存カットオフとした場合のカプランマイヤー生存曲線を示す代表的な図である。処置群は、アイソタイプ対照、抗ＰＤ-１抗体、ADWA11_4mut及び抗ＰＤ-１抗体、並びにADWA11_4mutの組合せであった。抗ＰＤ-１抗体とADWA11_4mut処置の組合せは、抗ＰＤ-１抗体、ADWA11_4mut若しくはアイソタイプ対照単独による処置、又は併用処置の予想される相加効果よりも大幅に、全生存期間を相乗的に改善した。 図２９Ａは、皮下にＣＴ２６細胞が移植され、アイソタイプ対照抗体、抗ＰＤ-１、ADWA11_4mut又は抗ＰＤ-１とADWA11_4mutの組合せで処置され、５日目の５Ｇｙの放射線が照射されたマウスについて、その生存曲線を示す代表的な図であり、また、図２９Ｂは、腫瘍増殖曲線を示す代表的な図である。アイソタイプ対照抗体で処置したマウスの一群は放射線を照射しなかった。データは生存率として報告、一群あたりｎ＝１０。^＊＊＊ｐ＜０．００１、^＊＊＊＊ｐ＜０．０００１（ログランクMantel-Cox検定）。図２９Ｃは、処置開始後５０日間生存したマウスに対する腫瘍の再チャレンジを示す代表的な図である。放射線照射と組み合わせた免疫処置の開始５１日後に、ＣＴ２６から回復したマウスの元の腫瘍移植部位の反対側の脇腹にＣＴ２６細胞を移植した。対照マウスは放射線を照射されておらず、これまで腫瘍細胞に曝露されていなかった。再チャレンジしたマウスを３０日間追跡した。対照、ｎ＝１０；ＲＴと抗ＰＤ-１、ｎ＝３；ＲＴとADWA11_mut、ｎ＝５；ＲＴとADWA11_mutと抗ＰＤ-１、ｎ＝７。 図３０Ａは、アイソタイプ対照抗体、ADWA11_4mut、４-１ＢＢ、抗ＣＴＬＡ-４、抗ＰＤ-１、又はADWA-11_4mutと４-１ＢＢ、抗ＣＴＬＡ-４若しくは抗ＰＤ-１の組合せによる処置後にＥＭＴ６細胞を同所移植したマウスについて、その生存曲線を示す代表的な図であり、また、図３０Ｂは、増殖曲線を示す代表的な図である。データは生存率として報告、一群あたりｎ＝１０。^＊＊＊＊ｐ＜０．０００１（ログランクMantel-Cox検定）。図３０Ｃは、抗ＣＴＬＡ-４又は４-１ＢＢの活性化因子で処置されたマウスの生存曲線を示す代表的な図である。 図３０Ｄは、抗ＣＴＬＡ-４又は４-１ＢＢの活性化因子で処置されたマウスの増殖曲線を示す代表的な図である。図３０Ｅは、ADWA-11_4mutと抗ＣＴＬＡ-４の相乗的組合せ、又はADWA-11_4mutと４-１ＢＢの活性化因子の相乗的組合せによる処置後に、腫瘍の完全退縮を伴って５０日間生存したマウスにおける腫瘍の再チャレンジの結果を示す代表的な図である。対照マウスはこれまで腫瘍に曝露されていなかった。再チャレンジしたマウスを３０日間追跡した。対照、ｎ＝５；ADWA-11_4mutと抗ＣＴＬＡ-４、ｎ＝６；ADWA-11_4mutと４-１ＢＢ、ｎ＝５。 図３１Ａは、ＣＤ８ａ特異的taqmanプローブ及びグランザイムＢ特異的taqmanプローブを用いたＭＣ３８腫瘍組織におけるｍＲＮＡの発現分析を示す。腫瘍組織を、各投与量でのアイソタイプ対照又はADWA11 2.4抗体の最初の投与の１２日後に得た。実験の１日目、５日目及び９日目に静脈内に投与し、各処置群に５匹のマウスが含まれた。^＊＝ｐ-値＜０．０５。 図３１Ｂは、アイソタイプ（１０ｍｇ／ｋｇ）、ADWA11 2.4（１０ｍｇ／ｋｇ）、抗ＰＤ-１抗体（RMP1-14、1０ｍｇ／ｋｇ）及びADWA11 2.4（１０ｍｇ／ｋｇ）と抗ＰＤ-１抗体（RMP1-14、１０ｍｇ／ｋｇ）の組合せでマウスを処置した、ＭＣ３８腫瘍モデルにおける腫瘍増殖率を示す代表的な図である。さらに、用量０．０３、０．３、３及び３０ｍｇ／ｋｇのADWA11抗体（抗ＩＴＧＡＶＢ８（ADWA11_mIgG_4mut））と１０ｍｇ／ｋｇの抗ＰＤ-１抗体（RMP1-14）と組み合わせて処置したマウスにおけるＭＣ３８腫瘍の腫瘍増殖率を示す代表的な図も示す。全ての図について、抗体は実験の１、５及び９日目に投与した。

詳細な説明

本明細書では、αｖβ８インテグリン（例．ヒトαｖβ８インテグリン）に特異的に結合する抗体及びその抗原結合断片を開示し、さらに、αｖβ８インテグリン活性（例．ＴＧＦβの活性化、ＴＧＦβ産生の媒介、制御性Ｔ細胞及びＴｈ１７細胞の調節）若しくはそのＴＧＦβ１及びＴＧＦβ３との相互作用、又は活性ＴＧＦβの放出に拮抗する抗体を開示する。抗αｖβ８インテグリン抗体の製造方法、抗αｖβ８インテグリン抗体を含む組成物、及び抗αｖβ８インテグリン抗体の使用方法を提供する。ある態様では、αｖβ８インテグリン（例．ヒトαｖβ８インテグリン）に結合する、組換え、例えばヒト化抗体を提供する。ある態様では、αｖβ８インテグリンに結合する抗体を形成することができるヒト化抗体の重鎖及び軽鎖も提供する。ある態様では、１つ以上の特定の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含むヒト化抗体、重鎖及び軽鎖を提供する。ある態様では、ヒト化抗αｖβ８インテグリン抗体は、エフェクター機能が変化している。ある態様では、本発明の抗体は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）活性及び／又は補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）活性のみが低下している。

αｖβ８インテグリン（例．ヒトαｖβ８インテグリン）に結合する抗体又はその抗原結合断片をコードするポリヌクレオチドを提供する。抗体の重鎖又は軽鎖をコードするポリヌクレオチドも提供する。ヒト化抗体を含む抗αｖβ８インテグリン抗体を発現する宿主細胞を提供する。ヒト化抗体を含む抗αｖβ８インテグリン抗体を使用する治療方法を提供する。

ヒト化抗体を含む抗αｖβ８インテグリン抗体及びその抗原結合断片は、ＴＧＦβシグナルの異常な（例．増加した）伝達によって引き起こされる、及び／又は、関連する、疾患、障害又は状態の予防、治療及び／又は改善に使用することができる。そのような疾患、障害又は状態には癌（例．ＴＧＦβシグナル伝達が異常な（例．増加した）癌細胞の増殖の制御）が含まれる。

特定の理論に拘束されることを望むものではないが、成熟ＴＧＦβは、潜在型関連ペプチド（ＬＡＰ）ドメインとの複合体として不活性又は潜在的な形で存在する。αｖβ８インテグリンがＬＡＰに結合すると、活性なＴＧＦβ（例．ＴＧＦβ１及びＴＧＦβ３）が放出される。αｖβ８インテグリンとＬＡＰの結合を減少させると、活性なＴＧＦβの放出を防ぐことができ、それによってＴＧＦβシグナル伝達が減少する。ＴＧＦβは、例えば、腫瘍微小環境では免疫抑制効果を示すことが知られており、したがって、本発明の抗体によるＴＧＦβ活性及び／又はシグナル伝達の低下は、免疫応答、例えば、in vivoでの抗腫瘍応答の活性化をもたらす可能性がある。したがって、本発明の抗体及びその抗原結合断片は、免疫系及び／又は腫瘍微小環境におけるＴＧＦβ活性の選択的な拮抗を可能にし、それゆえ、対象における抗腫瘍免疫応答を増強する。本明細書の実施例に記載されたいくつかの態様では、αｖβ８インテグリンに対する抗体及びその抗原結合断片は、扁平上皮癌、乳癌及び結腸癌を含むいくつかのがんの動物モデルにおいて、単独で、又は、他のチェックポイント阻害剤のモジュレーター（例．ＰＤ-１、ＰＤ-Ｌ１、ＣＴＬＡ-４の阻害剤、４-１ＢＢのアゴニスト）のような免疫調節剤若しくは抗癌療法（例．放射線療法）と組み合わせて、増殖抑制及び／又は完全な腫瘍退縮を引き起こすことが示されている。したがって、例えば、腎細胞癌（ＲＣＣ）、卵巣癌、又は頭頸部扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮ）から選択される充実性腫瘍のようながんの予防、治療及び／又は改善において、単独で、又は第２の治療と組み合わせて、ヒト化抗体を含む抗αｖβ８インテグリン抗体及びその抗原結合断片を使用することができる。

この明細書で使用する項目見出しは、内容を一見して理解できるようにするためのもので、記述されている事項を制限するものとして解釈されるべきではない。

特許出願、特許及びGenbank受託番号を含む、本明細書で引用する全ての参考文献は、その全体が本明細書に組み込まれることを、個々の文献が具体的かつ個別に示しているかのように、本明細書に含まれる。

本明細書に記載又は引用されている技術及び方法は、概してよく理解されており、例えば、Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual 3rd. edition (2001) Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.；CURRENT PROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY (F. M. Ausubel, et al. eds., (2003))；the series METHODS IN ENZYMOLOGY (Academic Press, Inc.): PCR 2: A PRACTICAL APPROACH (M. J. MacPherson, B. D. Hames and G. R. Taylor eds. (1995)), Harlow and Lane, eds. (1988)；ANTIBODIES, A LABORATORY MANUAL, and ANIMAL CELL CULTURE (R. I. Freshney, ed. (1987))；Oligonucleotide Synthesis (M. J. Gait, ed., 1984)；Methods in Molecular Biology, Humana Press；Cell Biology: A Laboratory Notebook (J. E. Cellis, ed., 1998) Academic Press；Animal Cell Culture (R. I. Freshney), ed., 1987)；Introduction to Cell and Tissue Culture (J. P. Mather and P. E. Roberts, 1998) Plenum Press；Cell and Tissue Culture Laboratory Procedures (A. Doyle, J. B. Griffiths, and D. G. Newell, eds., 1993-8) J. Wiley and Sons；Handbook of Experimental Immunology (D. M. Weir and C. C. Blackwell, eds.)；Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells (J. M. Miller and M. P. Calos, eds., 1987)；PCR: The Polymerase Chain Reaction, (Mullis et al., eds., 1994)；Current Protocols in Immunology (J. E. Coligan et al., eds., 1991)；Short Protocols in Molecular Biology (Wiley and Sons, 1999)；Immunobiology (C. A. Janeway and P. Travers, 1997)；Antibodies (P. Finch, 1997)；Antibodies: A Practical Approach (D. Catty., ed., IRL Press, 1988-1989)；Monoclonal Antibodies: A Practical Approach (P. Shepherd and C. Dean, eds., Oxford University Press, 2000)；Using Antibodies: A Laboratory Manual (E. Harlow and D. Lane (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1999))；The Antibodies (M. Zanetti and J. D. Capra, eds., Harwood Academic Publishers, 1995)；及びCancer: Principles and Practice of Oncology (V. T. DeVita et al., eds., J.B. Lippincott Company, 1993)並びにこれらの最新版に記載された広く利用されている事項など、当業者による従来の方法が一般的に適用される。

Ｉ．定義
本発明は、発明の例示的な態様の詳細な説明及び実施例を参照することによって、より容易に理解することができる。

特に定義しない限り、本明細書で使用する全ての技術用語及び科学的な用語は、本発明の技術分野の当業者が一般的に理解しているのと同じ意味である。矛盾する場合は、この明細書の定義が優先される。

さらに、文脈上特に必要がなく、また、明示されていない限り、単数形の用語は複数のものを含むものとし、また、複数形の用語は単数のものを含むものとする。

本明細書に記載された発明の側面及び態様には、「からなる」及び／又は「本質的にからなる」側面及び態様を含むことが理解される。この明細書では、単数形「a」、「an」及び「the」は、特に明記しない限り、複数を含む。

この出願では、当業者が明示的に述べ、又は理解しない限り、「又は」は、「及び／又は」を意味する。多数項従属請求項では、「又は」は、先行する１つ以上の独立形式請求項又は従属形式請求項を指す。

「約」又は「およそ」は、測定可能な数値では、示された値と、示された値の実験誤差（例．平均の９５％信頼区間）又は示された値の１０％以内のいずれか大きい方を指す。数値範囲には、範囲を定義する数値が含まれる。

本発明における数値範囲及びパラメーターは近似値であるが、特定の実施例に示す数値は、可能な限り正確に報告している。ただし、数値には、本質的に、それぞれの実測値に基づく標準偏差に起因するエラーが含まれている。さらに、本明細書に記載の全ての範囲は、そこに含まれるあらゆるサブ範囲を包含するものと理解される。例えば、「１～１０」という範囲には、最小値１と最大値１０の間の（及びそれを含む）全てのサブ範囲；つまり、最小値が１以上（例．１～６．１）で始まり、最大値が１０以下（例．５．５～１０）で終わる全てのサブ範囲、が含まれると見なす必要がある。

本明細書及び特許請求の範囲において、単語「含む（comprise）」又はそのバリエーションであるcomprises若しくはcomprisingなどは、記載された完全体又はそのグループを含むことを意味するが、他の完全体又はグループを除外しない。文脈上特に必要がない限り、単数形の用語は複数のものも含むものとし、また、複数形の用語は単数のものも含むものとする。用語「例（e.g.）」又は「例えば（for example）」に続いて示される例示は、網羅的又は限定的なものではない。

実施の形態が用語「含む（comprising）」により本明細書に記載されている場合は、用語「からなる（consisting of）」及び／又は「本質的にからなる（consisting essentially of）」で記載される類似の実施の形態も提供されることが理解される。

本発明の態様又は実施の形態が、マーカシュグループ又は代わりのグループで記述されている場合、本発明は、全体としてリストされたグループ全体のみならず、グループの各メンバーを個別に、また、メイングループの全ての可能なサブグループのみならず、１つ以上のグループメンバーが存在しないメイングループも包含する。本発明は、特許請求の範囲に記載された発明におけるグループメンバーのいずれか１以上の明示的な除外も想定している。

本明細書で使用される用語は、特定の実施の形態を説明することのみを目的としており、限定することを意図するものではないことを理解されたい。この明細書及び特許請求の範囲では、以下の意味を有すると定義されたいいくつかの用語を参照する。

用語「単離された分子」（分子が、例えば、ポリペプチド、ポリヌクレオチド、又は抗体若しくはその断片である場合）は、その起源又は派生源のために、(1) 天然の状態ではそれに付随する天然に関連する成分とは関連付けられていない分子、(2) 同じ種の他の分子を実質的に含まない分子、(3) 異なる種の細胞で発現される分子、(4) 自然界では発生しない分子である。したがって、化学的に合成された分子、又はそれが天然に由来する細胞とは異なる細胞系で発現された分子は、その天然に関連する成分から「単離」される。分子は、当該技術分野で周知の精製技術を用いて単離することにより、天然に関連する成分を実質的に含まないようにすることができる。分子の純度又は均一性は、当該技術分野で周知の手段によって分析することができる。例えば、ポリペプチドサンプルの純度は、ポリアクリルアミドゲル電気泳動及びゲルの染色により分析でき、当該技術分野における周知技術を使用してポリペプチドを視覚化することができる。特定の目的のためには、ＨＰＬＣ又は精製に関する技術分野における周知の他の手段により、高度に分離することができる。

この明細書では、「実質的に純粋」は、対象種が、存在する主要な種（すなわち、モルベースで、それは組成物中の他の個々の種よりも豊富である）であり、好ましくは、実質的に精製された画分が組成物であって、そこでは、対象種（例．抗体又は受容体を含む、糖タンパク質）が、存在する全ての高分子種の少なくとも約５０パーセント（モルベース）を含むことを意味する。一般に、実質的に純粋な組成物は、組成物中に存在する全ての高分子種の約８０％以上、より好ましくは約８５％、９０％、９５％、及び９９％以上を含む。最も好ましくは、対象種は、組成物が単一の高分子種から本質的になる基本的な均質性（従来の検出方法では、組成物中の汚染種を検出することはできない）まで精製される。ある態様では、実質的に純粋な材料は、少なくとも５０％純粋（すなわち、汚染物質を含まない）、より好ましくは少なくとも９０％純粋、より好ましくは少なくとも９５％純粋、さらにより好ましくは少なくとも９８％純粋、最も好ましくは少なくとも９９％純粋である。

当該技術分野において知られているように、用語「同一性」は、配列を比較することによって決まる、２つ以上のポリペプチド分子又は２つ以上の核酸分子の配列間の関係を指す。当該技術分野において、「同一性」はまた、場合によっては、ヌクレオチド又はアミノ酸配列のストリング間の一致によって決まる、ポリペプチド又は核酸分子の配列の間の配列関連性の程度を意味する。「同一性」は、コンピュータープログラムの特定の数学的モデル（すなわち、アルゴリズム）によって対処されたギャップアラインメントを有する２つ以上の配列間の完全な一致の割合を求める。

用語「類似性」は、同一性と概念する関連ではあるものの、「同一性」とは対照的に、完全な一致と保守的な置換の一致の両者を含む類似性の尺度を指す。保存的な置換は、核酸分子ではなくポリペプチドに適用されるので、類似性は、ポリペプチド配列の比較のみを扱う。２つのポリペプチド配列が、例えば、２０個の同一のアミノ酸のうちの１０個が同一で、残りは全て非保存的置換である場合、同一性と類似性の割合はいずれも５０％となる。同じ例で、保守的な置換が５個ある場合、同一性は５０％のままであるが、類似性は７５％（２０のうち１５）となる。したがって、保存的な置換が存在する場合、２つのポリペプチド配列間の類似性は、それらの配列間の同一性の割合よりも高くなる。

本発明のポリペプチド又は抗体の「断片」又は「部分」は、トランケーション、例えばポリペプチドのＮ末端及び／又はＣ末端から１つ以上のアミノ酸を除去することによって調製してもよい。この方法で、最大１０個、最大２０個、最大３０個、最大４０個以上のアミノ酸をＮ末端及び／又はＣ末端から除去することができる。内部の１つ以上の除去によって断片を調製してもよい。

変異体抗体は、上記の特定の配列及び断片からの１個、２個、３個、４個、５個、最大１０個、最大２０個、最大３０個又はそれ以上のアミノ酸の置換及び／又は欠失及び／又は付加を含んでいてもよい。「欠失」変異体は、個々のアミノ酸の削除、２、３、４又は５アミノ酸などのアミノ酸の小グループの削除、又は特定のアミノ酸ドメイン又は他の特徴の欠失など、より大きなアミノ酸領域の欠失を含んでいてもよい。「挿入」変異体は、個々のアミノ酸の挿入、２、３、４又は５アミノ酸などのアミノ酸の小グループの挿入、又は特定のアミノ酸ドメイン又は他の特徴の挿入など、より大きなアミノ酸領域の挿入を含んでいてもよい。「置換」変異体は、好ましくは、１つ以上のアミノ酸を同じ数のアミノ酸で置換し、保存的なアミノ酸置換を行うことを含む。例えば、アミノ酸は、同様の特性を有する代わりのアミノ酸、例えば、別の塩基性アミノ酸、別の酸性アミノ酸、別の中性アミノ酸、別の荷電アミノ酸、別の親水性アミノ酸、別の疎水性アミノ酸、別の極性アミノ酸、別の芳香族アミノ酸又は別の脂肪族アミノ酸で置換してもよい。

置換変異体は、抗体分子の少なくとも１つのアミノ酸残基が除去され、そこに別の残基が挿入されている。置換変異誘発に最も関心のある部位は超可変領域を含むが、フレームワークの変更も考えられる。保守的な置換は、「保守的な置換」という見出しの下で以下に示す。そのような置換が生物活性を変化させる場合、以下に示す、又はアミノ酸のクラスに関して以下にさらに説明するように、より実質的な変化、「例示的な置換」と呼ばれるものを導入して、生成物をスクリーニングしてもよい。

抗体の生物学的特性の実質的な変更は、(a) 例えば、βシート若しくはらせん構造として、置換の領域におけるポリペプチド骨格の構造、(b) 標的部位での分子の電荷若しくは疎水性、又は (c) 側鎖の大部分、の維持に対する効果が大幅に異なる置換を選択することによって達成される。天然に存在する残基は、一般的な側鎖の特性に基づいて以下のグループに分けられる：
非極性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
電荷のない極性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
酸性（負に帯電）：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
塩基性（正に帯電）：Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
鎖の配向に影響を与える残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；及び
芳香性：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ。

非保守的な置換は、これらのグループの１つのアミノ酸を別のアミノ酸と交換することによって行われる。

例えば、行われる可能性のある１つの置換は、化学的に反応性であり得る抗体中の１つ以上のシステインを、限定されるものではないが、アラニン又はセリンなどの別の残基に変更することです。例えば、非標準的な（例．好ましくない、又は一般的ではない）システインの置換があり得る。置換は、可変ドメインのＣＤＲ若しくはフレームワーク領域、又は抗体の定常領域で行うことができる。ある態様では、システインは標準的（例．好ましい、又は最も一般的）である。抗体の適切なコンフォメーションの維持に関与しないシステイン残基も、分子の酸化安定性を改善し、異常な架橋を防ぐために、一般にセリンで置換することができる。反対に、特に抗体がＦｖ断片のような抗体断片である場合、システイン結合を抗体に添加して、その安定性を改善することができる。

「抗体」は、免疫グロブリン分子の可変領域に位置する少なくとも１つの抗原認識部位を介して、炭水化物、ポリヌクレオチド、脂質、ポリペプチドなどの標的に特異的に結合することができる免疫グロブリン分子である。この明細書では、この用語は、インタクトなポリクローナル抗体又はモノクローナル抗体だけでなく、外で特定しない限り、特異的結合についてインタクトな抗体と競合するその抗原結合断片、抗原結合断片を含む融合タンパク質、及び抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子の改変された構成も含む。抗原結合断片は、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆｄ、Ｆｖ、ドメイン抗体（ｄＡｂｓ、例．サメ抗体及びラクダ抗体）、相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む断片、一本鎖可変断片抗体（ｓｃＦｖ）、マキシボディ、ミニボディ、イントラボディ、、ダイアボディ、トライアボディ、テトラボディ、ｖ-ＮＡＲ及びｂｉｓ-ｓｃＦｖ、並びにポリペプチドへの特異的抗原結合を与えるのに十分な免疫グロブリンの少なくとも一部を含むポリペプチドを含む。

抗体には、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ（又はそのサブクラス）などの任意のクラスの抗体が含まれ、抗体は特定のクラスである必要はない。抗体の重鎖（ＨＣ）定常領域のアミノ酸配列に応じて、免疫グロブリンは異なるクラスに割り当てることができる。免疫グロブリンには、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭの５つの主要なクラスがあり、これらのいくつかは、さらにサブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ_１、ＩｇＧ_２、ＩｇＧ_３、ＩｇＧ_４、ＩｇＡ_１及びＩｇＡ_２に分類することができる。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常領域は、それぞれα、δ、ε、γ及びμと呼ばれている。異なるクラスの免疫グロブリンのサブユニット構造と三次元構成はよく知られている。

抗体の「抗原結合部分」又は「抗原結合断片」（又は単に「抗体部分」）という用語は、本明細書中で互換的に使用される場合、抗原（例．αｖβ８インテグリン）に特異的に結合する能力を保持する抗体の１つ以上の断片を指す。抗体の抗原結合機能は、完全長抗体の断片によって実行できることが示されている。抗体の「抗原結合断片」という用語に含まれる結合断片の例には、(i) Ｆａｂ断片、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ及びＣＨ１ドメインからなる一価断片、(ii) Ｆ（ａｂ’）_２断片、ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片、(iii) ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片、(iv) 抗体の一本鎖のＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖ断片、(v) ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ward et al., (1989) Nature 341:544-546）、並びに (vi) 単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）、ジスルフィド結合Ｆｖ（ｄｓＦｖ）、及び抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体及びイントラボディが含まれる。さらに、Ｆｖ断片の２つのドメインであるＶＬとＶＨは別々の遺伝子によってコードされているが、それらは、組換え法を使用して、ＶＬ領域とＶＨ領域が対になって一価分子を形成する単一のタンパク質鎖としてそれらを作ることを可能にする合成リンカーによって結合することができる（一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られている；例えば、Bird et al., Science 242:423-426 (1988)及びHuston et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883 (1988)参照）。このような一本鎖抗体も、抗体の「抗原結合断片」という用語に含まれることを意図している。ダイアボディなどの他の形態の一本鎖抗体も含まれる。ダイアボディは、ＶＨ及びＶＬドメインが単一のポリペプチド鎖上にある二価の二重特異性抗体であるが、同じ鎖上の２つのドメイン間でペアリングを可能にするにはリンカーが短すぎるので、ドメインは別の鎖の相補的ドメインとペアリングし、２つの抗原結合部位が形成される（例えば、Holliger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448 (1993)；Poljak et al., 1994, Structure 2:1121-1123参照）。

抗体は、ヒト、サル、ブタ、馬、ウサギ、犬、猫、マウス等、又は鳥（例．鶏など）、魚（例．サメ）、ラクダ（例．ラマ）等の他の動物を含む任意の哺乳動物に由来してもよい。

抗体の「可変領域」は、単独で又は組み合わせて、抗体軽鎖（ＶＬ）の可変領域又は抗体重鎖（ＶＨ）の可変領域を指す。当該技術分野において知られているように、重鎖及び軽鎖の可変領域は、それぞれ、超可変領域（ＨＶＲ）としても知られる３つの「相補性決定領域（ＣＤＲ）」によって接続された４つのフレームワーク領域（ＦＲ）からなり、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する。可変領域の変異体が望まれる場合、特に、ＣＤＲ領域の外側（すなわち、フレームワーク領域内）のアミノ酸残基の置換では、適切なアミノ酸置換、好ましくは保存的アミノ酸置換は、当該可変領域を、当該可変領域と同じ標準的なクラスのＣＤＲ１及びＣＤＲ２配列を含む他の抗体の可変領域と比較することによって同定することができる（Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196(4): 901-917, 1987）。

ある態様では、ＣＤＲの明確な描写及び抗体の結合部位を含む残基の同定は、抗体の構造を解明すること、及び／又は抗体－リガンド複合体の構造を解明することによって達成される。ある態様では、これは、Ｘ線結晶学などの当業者に知られているさまざまな技術によって達成することができる。ある態様では、ＣＤＲ領域を特定又は概要を知るために、さまざまな分析方法を使用することができる。このような方法の例には、Kabat定義、Chothia定義、ＡｂＭ定義、接触点による定義及びコンフォメーションによる定義が含まれるが、これらに限定されるものではない。

ＣＤＲを形成するアミノ酸残基のナンバリングについて、当該技術分野にはいくつかの方法がある。Kabatのナンバリング法は抗体の残基にナンバリングするための標準で、通常、ＣＤＲを識別するためにも用いられる。例えば、Johnson & Wu, 2000, Nucleic Acids Res., 28: 214-8を参照。Chothia定義はKabat定義に似ているが、Chothia定義は特定の構造ループ領域の位置を考慮に入れている。例えば、Chothia et al., 1986, J. Mol. Biol., 196: 901-17；Chothia et al., 1989, Nature, 342: 877-83を参照。ＡｂＭ定義では、抗体構造をモデル化するOxford Molecular Groupが作成したコンピュータープログラムの統合ツールを使用する。例えば、Martin et al., 1989, Proc Natl Acad Sci (USA), 86:9268-9272；“AbM（登録商標）, A Computer Program for Modeling Variable Regions of Antibodies,” Oxford, UK; Oxford Molecular, Ltdを参照。ＡｂＭ定義は、知識ベースとSamudrala et al., 1999, “Ab Initio Protein Structure Prediction Using a Combined Hierarchical Approach,” in PROTEINS, Structure, Function and Genetics Suppl., 3:194-198に記載されているようなab initio法の組合せを使用して、一次配列から抗体の三次構造をモデル化する。

接触点による定義は、利用可能な複雑な結晶構造の分析に基づく。例えば、MacCallum et al., 1996, J. Mol. Biol., 5:732-45を参照。本明細書においてＣＤＲの「コンフォメーションによる定義」と呼ぶ別のアプローチでは、ＣＤＲの位置は、抗原結合にエンタルピー的寄与をする残基として特定されることがある。例えば、Makabe et al., 2008, Journal of Biological Chemistry, 283:1156-1166を参照。特定の残基又は残基のグループが抗原結合に著しい影響を与えないという予測又は実験結果に照らして、短縮又は延長することができるにもかかわらず、さらに別のＣＤＲ境界定義は、上記のアプローチの１つに厳密には従わない場合があるが、それでも、KabatのＣＤＲの少なくとも一部と重複する。この明細書では、ＣＤＲは、アプローチの組合せを含む、当該技術分野において公知のアプローチによって定義されるＣＤＲを指してもよい。本明細書で使用される方法は、これらのアプローチに従って定義されたＣＤＲを利用してもよい。複数のＣＤＲを含む任意の態様について、ＣＤＲは、Kabat、Chothia、拡張、ＡｂＭ、接触点及び／又はコンフォメーションの定義のいずれかに従って定義されてもよい。

この明細書において、抗体又はそれが特異的に結合する抗原についての「接触残基」は、同族の抗体／抗原に存在するアミノ酸残基の重原子（すなわち、水素以外）の４Å以内にある少なくとも１つの重原子を含む抗体／抗原に存在するアミノ酸残基を指す。

「フレームワーク」（ＦＲ）残基は、ＣＤＲ残基以外の抗体可変ドメイン残基である。ＶＨ又はＶＬドメインフレームワークは、以下の構造：
ＦＲ１－ＣＤＲ１－ＦＲ２－ＣＤＲ２－ＦＲ３－ＣＤＲ３－ＦＲ４
のＣＤＲが点在する、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３及びＦＲ４の４つのフレームワークサブ領域を含む。

可変ドメインの残基は、通常、抗体の重鎖可変ドメイン又は軽鎖可変ドメインに対するナンバリングを提供するKabatの方法に従ってナンバリングされる。Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MDを参照。このナンバリングを用いると、実際の線形アミノ酸配列は、可変ドメインのＦＲ又はＣＤＲの短縮又は挿入に対応する、より少ない、又は追加のアミノ酸を含んでいてもよい。例えば、重鎖可変ドメインは、Ｈ２の残基５２の後に単一のアミノ酸挿入物（Kabatによれは残基５２ａ）を含んでいてもよく、そして重鎖ＦＲ残基８２の後に挿入された残基（例．Kabatによれば残基８２ａ、８２ｂ及び８２ｃ）を含んでいてもよい。残基のカバットによるナンバリングは、抗体の配列と「標準的な」カバットナンバリングされた配列との相同領域でのアラインメントによって、特定の抗体について決定することができる。Kabatナンバリングを割り当てるためのさまざまなアルゴリズムが利用可能である。Abysisのバージョン2.3.3（www.abysis.org）で提供されたアルゴリズムを使用して、可変領域ＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２、ＣＤＲ-Ｌ３、ＣＤＲ-Ｈ２及びＣＤＲ-Ｈ３にKabatナンバリングを割り当てることができ、そして、ＡｂＭ定義をＣＤＲ-Ｈ１に使用することができる。

この明細書では、「モノクローナル抗体」は、実質的に均質な抗体の集団から得られた抗体を指し、すなわち、集団を構成する個々の抗体は、少量で存在し得る可能性のある自然発生突然変異を除いて同一である。モノクローナル抗体は非常に特異的で、単一の抗原部位に対して向けられている。さらに、通常、異なる決定基（エピトープ）に対して向けられた異なる抗体を含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対して向けられている。修飾語「モノクローナル」は、実質的に均一な抗体集団から得ることができる抗体の特徴を示し、特定の方法による抗体の産生を必要とすると解釈されるべきではない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、Kohler and Milstein, 1975, Nature 256:495によって最初に発表されたハイブリドーマ法によって作製してもよく、又は米国特許第4,816,567号に記載されたような組換えＤＮＡ法によって作製してもよい。また、モノクローナル抗体は、例えば、McCafferty et al., 1990, Nature 348:552-554に記載された技術を使用して生成されたファージライブラリーから単離してもよい。この明細書では、「ヒト化」抗体は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小限の配列を含む、キメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖又はそれらの断片（Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２又は抗体の他の抗原結合サブ配列等）である非ヒト（例．マウス）抗体の形態を指す。好ましくは、ヒト化抗体は、レシピエントのＣＤＲからの残基が、所望の特異性、親和性及び能力を有するマウス、ラット又はウサギなどの非ヒト種のＣＤＲからの残基（ドナー抗体）によって置き換えられるヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。ヒト化抗体は、レシピエント抗体にも、インポートされたＣＤＲ又はフレームワーク配列にも見られないが、抗体の性能をさらに洗練及び最適化するために含まれる残基を含んでいてもよい。

本発明の抗体又はその抗原結合断片は、親和性成熟されてもよい。例えば、親和性成熟抗体は、当該技術分野における公知の手順（Marks et al., 1992, Bio/Technology, 10:`9-783；Barbas et al., 1994, Proc Nat. Acad. Sci, USA 91:3809-3813；Schier et al., 1995, Gene, 169:147-155；Yelton et al., 1995, J. Immunol., 155:1994-2004；Jackson et al., 1995, J. Immunol., 154(7):3310-9；Hawkins et al., 1992, J. Mol. Biol., 226:889-896及び国際公開第2004/058184号）で調製することができる。

「ヒト抗体」は、ヒトが産生する抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体、及び／又は本明細書に記載のヒト抗体を調製するための技術により製造された抗体である。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を除いている。

用語「キメラ抗体」は、可変領域の配列がマウス抗体に由来し、定常領域の配列がヒト抗体に由来する又はその逆といったように、可変領域の配列がある種に由来し、定常領域の配列が別の種に由来する抗体を指すことを意図している。この用語は、ある種のある個体（例．第１のマウス）のＶ領域及び同じ種の別の個体（例．第２のマウス）の定常領域を含む抗体も包含する。

用語「抗原（Ａｇ）」は、免疫担当脊椎動物を免疫してＡｇを認識する抗体（Ａｂ）を産生するため、又は発現ライブラリー（例．ファージ、酵母又はリボソームディスプレイライブラリーなど）をスクリーニングするために用いる分子を指す。本明細書では、Ａｇはより広義で、一般に、Ａｂによって特異的に認識される標的分子を含むことを意図し、したがって、Ａｂを得るための免疫化工程又はＡｂを選択するためのライブラリースクリーニングで使用する分子の断片又は模倣物を含む。したがって、αｖβ８インテグリンに結合する本発明の抗体に関し、哺乳類に由来する完全長αｖβ８インテグリン（例：ヒト、サル、マウス、ラットのαｖβ８インテグリン）の単量体及びその二量体、三量体等といった多量体、並びにαｖβ８インテグリンのトランケート（truncate）体及び他の変異体は、抗原と呼ばれる。

一般に、用語「エピトープ」は、抗体が特異的に結合する抗原（例．タンパク質、核酸、炭水化物又は脂質等）の区域又は領域、すなわち、抗体と物理的に接触する区域又は領域を指す。したがって、用語「エピトープ」は、抗体の抗原結合領域の１つ以上で認識され、結合することができる分子の一部分を指す。通常、エピトープは、「抗体又はその抗原結合部分」（Ａｂ）とその対応する抗原との間の分子間相互作用の文脈で定義される。エピトープは、アミノ酸や糖側鎖といった分子の表面の基で構成されていることが多く、特定の3次元構造特性と特定の電荷特性を有する。ある態様では、エピトープはタンパク質エピトープであり得る。タンパク質エピトープは、線形又はコンフォメーショナルである可能性がある。線形エピトープでは、タンパク質と相互作用する分子（抗体など）の間の全ての相互作用部位が、タンパク質の一次アミノ酸配列に沿って線形に生じる。「非線形エピトープ」又は「コンフォメーショナルエピトープ」は、エピトープに特異的な抗体が結合する抗原タンパク質内の非隣接ポリペプチド（又はアミノ酸）を含む。本明細書において用語「免疫原性エピトープ」は、当該技術分野における周知の任意の方法、例えば従来のイムノアッセイによって確認されるように、抗体が特異的に結合できる抗原の一部分として定義される。あるいは、発明の過程における抗体の生成及び特徴の確認で、望ましいエピトープに関する情報が解明されてもよい。この情報から、同じエピトープへの結合について抗体を競合的にスクリーニングすることが可能である。これを達成するためのアプローチは、αｖβ８インテグリンへの結合について、互いに競合又は交差競合する抗体、例えば、抗原への結合で競合する抗体を見つけるために、競合及び交差競合実験を行うことである。

エピトープに「優先的に結合する」又は「特異的に結合する」（本明細書中で互換的に使用される）抗体は、当該技術分野において十分に理解されている用語であり、そのような特異的又は優先的結合を決定する方法も当該技術分野において周知である。分子は、別の細胞又は物質よりも特定の細胞又は物質と、より頻繁に、より迅速に、より長い持続時間及び／又はより高い親和性で反応又は会合する場合、当該分子は「特異的結合」又は「優先的結合」を示すといわれる。抗体は、別の物質に結合するよりも、高い親和性、高い結合力、より容易に及び／又はより長い持続時間で結合する場合、標的に「特異的に結合する」又は「優先的に結合する」。また、抗体は、サンプル内の別の物質に結合するよりも、標的に対してより高い親和性、高い結合力、より容易に及び／又はより長い持続時間で結合する場合、標的に「特異的に結合する」又は「優先的に結合する」。例えば、他のαｖβ８インテグリンエピトープ又は非αｖβ８インテグリンエピトープに結合するよりも、αｖβ８インテグリンエピトープに特異的又は優先的に結合する抗体は、より高い親和性、高い結合力、より容易に及び／又はより長い持続時間でこのエピトープに結合する抗体である。この定義を読むことにより、例えば、第１の標的に特異的又は優先的に結合する抗体（又は部分若しくはエピトープ）が、第２の標的に特異的又は優先的に結合してもよく、また、しなくてもよいことも理解できる。したがって、「特異的結合」又は「優先的結合」は、必ずしも排他的結合を必要としない（それを含むことができるが）。必ずしもそうとは限らないが、一般に、結合への言及は優先的な結合を意味する。「特異的結合」又は「優先的結合」は、特定の分子を認識して結合するが、サンプル中の他の分子を実質的に認識又は結合しない化合物、例えば、タンパク質、核酸、抗体などを含む。例えば、サンプル内の同族のリガンド又は結合パートナー（例．αｖβ８インテグリンに結合する抗αｖβ８インテグリン抗体）を認識して結合するが、サンプル内の他の分子を実質的に認識又は結合しない抗体又はペプチド受容体は、その同族のリガンド又は結合パートナーに特異的に結合する。したがって、特定のアッセイ条件では、指定された結合部分（例．抗体若しくはその抗原結合断片又は受容体若しくはそのリガンド結合部分）は特定の標的分子に優先的に結合し、サンプル中に存在する他の成分に有意な量で結合しない。

目的の分子に特異的に結合する抗体又はペプチドを選択するために、さまざまなアッセイを行うことができる。例えば、固相ＥＬＩＳＡ免疫アッセイ、免疫沈降、Biacore（登録商標）（GE Healthcare、Piscataway、NJ）、KinExA、蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）、Octet（登録商標）（ForteBio、Inc.、Menlo Park、CA）及びウエスタンブロット分析は、抗原と特異的に反応する抗体若しくはその抗原結合断片、又は同族のリガンド若しくは結合パートナーと特異的に結合する受容体若しくはそのリガンド結合部分を同定するために使用してもよい多くのアッセイの一つである。通常、特定の又は選択的な反応は、バックグラウンド信号又はノイズの少なくとも２倍、より一般的にはバックグラウンドの１０倍以上、さらにより一般的にはバックグラウンドの５０倍以上、より一般的にはバックグラウンドの１００倍以上、その上一般的にはバックグラウンドの５００倍以上、さらにより一般的にはバックグラウンドの１０００倍以上、及びさらにより一般的にはバックグラウンドの１０，０００倍以上になる。さらに、平衡解離定数（ＫＤ）が、１μＭ以下、好ましくは１００ｎＭ以下、より好ましくは１０ｎＭ以下、さらにより好ましくは１００ｐＭ以下、その上より好ましくは１０ｐＭ以下、及びさらにより好ましくは１ｐＭ以下の場合、抗体は抗原に「特異的に結合する」と言われている。ある態様では、平衡解離定数（ＫＤ）が７ｎＭ以下の場合、抗体は抗原に「特異的に結合する」と言われている。

用語「結合親和性」は、本明細書では、例えば抗体又はその断片と抗原のような２つの分子の間の非共有結合相互作用の強さの尺度として使用される。用語「結合親和性」は、一価の相互作用（固有の活性）を説明するために使用される。

さらに、αｖβ８インテグリン発現細胞に対する抗αｖβ８インテグリン抗体の結合親和性を測定するために、細胞結合実験を行って見かけの親和性を求めることができる。標的を発現する細胞に結合する抗体の見かけの親和性は、フローサイトメトリーによる抗原結合集団の幾何平均蛍光強度（ｇＭＦＩ）の定量化で得た平衡結合滴定曲線のＥＣ_５０として計算することができる。

２つの分子、例えば、抗体又はその断片及び抗原の間の、一価の相互作用に基づく結合親和性は、解離定数（Ｋ_Ｄ）を求めることによって定量化することができる。次に、Ｋ_Ｄは、例えば、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）法（Biacore）により、複合体の会合及び解離の平衡定数を測定することによって求めることができる。一価複合体の会合及び解離に対応する速度定数は、それぞれ、会合速度定数ｋ_ａ（又はｋ_ｏｎ）及び解離速度定数ｋ_ｄ（又はｋ_ｏｆｆ）と呼ばれる。Ｋ_Ｄは、
式 Ｋ_Ｄ＝ｋ_ｄ／ｋ_ａ で表される。解離定数の値は、周知の方法で直接決定することができ、複雑な混合物であっても、例えば、Caceci et al. (1984, Byte 9: 340-362)に記載の方法によって計算することができる。例えば、Ｋ_Ｄは、Wong & Lohman (1993, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 5428-5432)に記載されているダブルフィルターのニトロセルロースフィルター結合アッセイによって求めてもよい。標的抗原に対する抗体のようなリガンドの結合能力を評価するための他の標準的なアッセイは、当該技術分野において公知であって、例えば、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット、ＲＩＡ及びフローサイトメトリー分析、並びにこの明細書で例示されている他のアッセイが含まれる。抗体の結合の平衡定数及び結合親和性は、例えば、Biacore（登録商標）システム又はＫｉｎＥｘＡを用いる表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）のような当該技術分野において公知の標準的なアッセイによっても評価することができる。

他の方法で標的に結合する別の抗体又は可溶性受容体のような、その標的の別のリガンドによる標的の結合と、抗原に対する抗体の結合を比較する競合的結合アッセイを実施することができる。５０％阻害する濃度はＫ_ｉとして知られている。理想的な条件では、Ｋ_ｉはＫ_Ｄに等しい。Ｋ_ｉの値は決してＫ_Ｄを下回らないので、好都合にも、Ｋ_Ｄの上限を得るためＫ_ｉの測定によって置き換えることができる。

上述した定義に従って、例えば、ある抗原に対する異なる抗体の結合親和性の比較のような、異なる分子間の相互作用に関する結合親和性は、個々の抗体／抗原複合体のＫ_Ｄ値の比較で行ってもよい。抗体又は他の結合パートナーのＫ_Ｄ値は、当該技術分野において十分に確立された方法で求めることができる。Ｋ_Ｄを求めるための１つの方法は、表面プラズモン共鳴を使用する方法であり、典型的には、Biacore（登録商標）システムなどのバイオセンサーシステムを使用する。

同様に、相互作用の特異性は、例えば抗体と抗原の間の特定の相互作用のような関心のある相互作用のＫ_Ｄ値を、例えばαｖβ８インテグリンに結合しないことが知られている対照抗体といった関心のない相互作用のＫ_Ｄ値と比較することによって評価することができる。

標的に特異的に結合する抗体は、高い親和性でその標的に結合する可能性があり、すなわち、上述したように小さなＫ_Ｄを示す可能性があり、他の非標的分子には、より低い親和性で結合する可能性がある。例えば、抗体は、１×１０^－６Ｍ以上、より好ましくは１×１０^－５Ｍ以上、より好ましくは１×１０^－４Ｍ以上、より好ましくは１×１０^－３Ｍ以上、さらにより好ましくは１×１０^－２Ｍ以上のＫ_Ｄで非標的分子に結合する可能性がある。本発明の抗体は、好ましくは、別の非αｖβ８インテグリン分子への結合に対する親和性よりも、少なくとも２倍、１０倍、５０倍、１００倍、２００倍、５００倍、１,０００倍若しくは１０,０００倍又はそれ以上の親和性で標的に結合することができる。

抗体に関して本明細書で使用する用語「競合する」は、一次抗体又はその抗原結合断片とその同族エピトープとの結合が、二次抗体又はその抗原結合断片の不存在下での一次抗体と比較して、二次抗体の存在下で検出可能に減少するように、一次抗体が二次抗体と十分に類似した方法でエピトープに結合することを意味する。二次抗体のそのエピトープへの結合も一次抗体の存在下で検出可能に減少することは、当てはまる可能性があるが、その必要はない。すなわち、一次抗体は、二次抗体がそのエピトープへの一次抗体の結合を阻害することなく、そのエピトープへの二次抗体の結合を阻害することができる。しかしながら、各抗体が他の抗体とその同族のエピトープ又はリガンドとの結合を検出可能に阻害する場合、程度の差はあれ、抗体はそれぞれのエピトープの結合について互いに「交差競合」すると言われる。競合抗体と交差競合抗体の両方が本発明に含まれる。そのような競合又は交差競合が発生するメカニズム（例．立体障害、コンフォメーション変、又は共通のエピトープ若しくはその一部への結合）に関係なく、当業者は、本明細書の記載に基づいて、そのような競合及び／又は交差競合抗体が包含され、本明細書に記載の方法に有用であることを理解する。

２つの抗体が互いに競合するかどうかを判断するのに、標準的な競合アッセイを使用してもよい。抗体競合の適切なアッセイの１つは、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）テクノロジー、典型的には通常はバイオセンサーシステ（例えば、BIACORE（登録商標）システム）を使用して相互作用の程度を測定することができるBiacoreテクノロジーの使用を含む。例えば、ある抗体の第２の抗体の結合を阻害する能力を求めるためにin vitro競合結合阻害アッセイにおいてＳＰＲを使用することができる。抗体競合を測定するための別のアッセイは、ＥＬＩＳＡベースの方法である。

さらに、競合に基づいて抗体を「ビニング」するためのハイスループットの方法は国際公開第2003/48731号に記載されている。ある抗体（又は断片）が別の抗体（又は断片）のαｖβ８インテグリンへの結合を減少させる場合、競合が存在する。例えば、異なる抗体を順次添加することによって、順次結合競合アッセイを行ってもよい。飽和に近い結合に到達するために、一次抗体を追加してもよい。次いで、二次抗体を追加する。αｖβ８インテグリンへの二次抗体の結合が検出されない場合、又はαｖβ８インテグリンへの二次抗体の結合が一次抗体の非存在下での並行アッセイ（この値を１００％とする）と比較して大幅に減少する場合（例．少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％ 、又は少なくとも約９０％減少）、２つの抗体は互いに競合していると見なされる。

さらに、抗体の潜在的なエピトープを検討するために、ヒトとマウスのαｖβ８インテグリンタンパク質の間のドメイン交換による代表的な抗体エピトープビニングアッセイを実施例９に示す。少なくとも２つの抗体の標的への結合を相互に決定するために使用することができる当該技術分野において知られている非常にさまざまなアッセイがあり、そのようなアッセイは本明細書に含まれることを、本明細書の記載も参考にして、当業者は理解する。

抗αｖβ８インテグリン抗体は、当該技術分野における周知の方法によってその特徴を明らかにしてもよい。例えば、１つの方法は、結合するエピトープを特定する方法、つまり「エピトープマッピング」である。タンパク質上のエピトープの位置をマッピングし、特徴を明らかにする当該技術分野において公知の多くの方法があり、例えば、Harlow and Lane, Using Antibodies, a Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, 1999の１１章に記載されているような、抗体－抗原複合体の結晶構造の解明、競合アッセイ、遺伝子断片発現アッセイ及び合成ペプチドベースのアッセイが含まれる。また、例えば、エピトープマッピングにより、抗αｖβ８インテグリン抗体が結合する配列を決定することができる。エピトープマッピングは、例えば、Pepscan Systems (Edelhertweg 15, 8219 PH Lelystad, The Netherlands)といった、さまざまな手段が市販されている。エピトープは、線形エピトープ、すなわち、アミノ酸の単一のストレッチ（stretch）に含まれるか、必ずしも単一のストレッチに含まれるとは限らない、アミノ酸の三次元相互作用によって形成されるコンフォメーショナルエピトープである可能性がある。さまざまな長さ（例．少なくとも４～６アミノ酸長）のペプチドを単離又は合成（例．組換え）し、抗αｖβ８インテグリン抗体との結合アッセイに使用することができる。

さらに、αｖβ８インテグリン配列（例．ヒトαｖβ８インテグリン配列）の重複ペプチドを用いて抗体との結合を確認する体系的なスクリーニングで、抗αｖβ８インテグリン抗体が結合するエピトープを決定することができる。遺伝子断片発現アッセイでは、αｖβ８インテグリンをコードするオープンリーディングフレームをランダムに又は特定の遺伝子構築によって断片化し、αｖβ８インテグリンを発現する断片と試験する抗体との反応性を確認する。遺伝子断片は、例えば、ＰＣＲによって生成され、次いで、放射性アミノ酸の存在下、in vitroで転写され、タンパク質に翻訳される。そして、放射性標識されたαｖβ８インテグリン断片への抗体の結合は、免疫沈降及びゲル電気泳動により決定される。

特定のエピトープは、ファージ粒子（ファージライブラリー）又は酵母（酵母ディスプレイ）の表面に表示されるランダムペプチド配列の大きなライブラリーを用いて特定することもできる。あるいは、重複するペプチド断片で定義されたライブラリーを用いる単純な結合アッセイにより、抗体との結合を試験することができる。また、例えば、抗原の突然変異誘発、ドメインスワッピング実験及びアラニンスキャニング突然変異誘発を行い、エピトープとの結合に求められる、十分な、及び／又は必須の残基を同定することができる。例えば、アラニンスキャニング突然変異誘発実験は、αｖβ８インテグリンポリペプチドのさまざまな残基がアラニンで置き換えられた突然変異体αｖβ８インテグリンを使用する。抗体の変異体αｖβ８インテグリンへの結合を検討することにより、抗体結合における特定のαｖβ８インテグリン残基の重要性を評価することができる。

抗αｖβ８インテグリン抗体が他の抗体と同じエピトープに結合する場合、抗αｖβ８インテグリン抗体の特徴を明らかにするために使用することができるさらに別の方法は、同じ抗原に結合することが知られている他の抗体、すなわちαｖβ８インテグリン上のさまざまな断片、との競合アッセイを使用して決定することである。競合アッセイは当業者において周知である。

さらに、特定の抗体－抗原結合ペアのエピトープは、さまざまな実験的及び計算的エピトープマッピングにより、詳細なレベルで定義し、その特徴を明らかにすることができる。この実験方法は、突然変異誘発、Ｘ線結晶学、核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法、水素／重水素交換質量分析（Ｈ／Ｄ－ＭＳ）及び当該技術分野において周知のさまざまな競合結合法を含む。それぞれの方法は独自の原理によるため、エピトープの説明は、それを決定した方法と密接に関連する。したがって、ある抗体－抗原ペアのエピトープは、用いるエピトープマッピングの手法に応じて異なって定義される。

最も詳細なレベルでは、ＡｇとＡｂの間で相互作用するエピトープは、Ａｇ－Ａｂ相互作用における原子の接触に関する空間座標、及び結合熱力学への相対的な寄与によって定まる可能性がある。より詳細でないレベルでは、エピトープは、Ａｇ－Ａｂ相互作用における原子の接触に関する空間座標によってその特徴を明らかにすることがでる。さらに詳細でないレベルでは、エピトープは、そこに含まれるアミノ酸残基についての特定の基準、例えばＡｂ及びＡｇ中の原子（例えば、重い、すなわち、非水素原子）の間の距離によって特徴付けることができる。さらに詳細でないレベルでは、エピトープは、例えば他の抗体との競合結合といったその機能により特徴付けることができる。エピトープは、別のアミノ酸による置換（例．アラニンスキャニング）がＡｂ－Ａｇ間の相互作用の特徴を変化させるアミノ酸残基を含むものとしてより一般的に特定することもできる。

用いるエピトープマッピングの方法に応じてさまざまなレベルでエピトープの説明と定義が得られるという事実から、異なるレベルで、同じＡｇ上の異なるＡｂが認識するエピトープの比較を行うことができる。

例えばＸ線構造から決定したアミノ酸レベルのエピトープは、それらが同じアミノ酸残基のセットを含む場合、同一であると言われる。少なくとも１つのアミノ酸をエピトープが共有する場合、エピトープは重なり合うと言われる。エピトープがアミノ酸残基を共有しない場合、エピトープは分離している（固有である）と言われる。

対応する抗体の結合が互いに排他的である場合、すなわち、一方の抗体による結合が他方の抗体による同時又は連続する結合を除外する場合、競合結合を特徴とするエピトープは重複していると言われる。抗原が対応する２つの抗体と同時に結合することが可能な場合、エピトープは分離している（固有である）と言われる。

用語「パラトープ」の定義は、上述した「エピトープ」の定義から、視点を逆にすることによって導き出される。したがって、用語「パラトープ」は、抗原に特異的に結合する抗体上の区域又は領域を指し、すなわち、「接触」として抗原（αｖβ８インテグリン、又はその一部）と接触する抗体上のアミノ酸残基が本明細書中で定義される。

ある抗体－抗原ペアのエピトープ及びパラトープは、通常の方法で特定してもよい。例えば、エピトープの一般的な位置は、異なる断片又は変異体αｖβ８インテグリンポリペプチドと結合する抗体の能力を評価することによって求めてもよい。抗体と接触するαｖβ８インテグリン内の特定のアミノ酸（エピトープ）及びαｖβ８インテグリンと接触する抗体中の特定のアミノ酸（パラトープ）は、実施例に記載されているような通常の方法で決定してもよい。例えば、抗体と標的分子を組み合わせてもよく、抗体－抗原複合体を結晶化させてもよい。複合体の結晶構造を決定して、抗体とその標的との間の相互作用の部位を特定してもよい。

本発明の抗体は、本明細書に具体的に記載されている抗体とαｖβ８インテグリン（例．ヒトαｖβ８インテグリン）の同じエピトープ又はドメインに結合してもよい。そのような同定の目的で使用できる分析及びアッセイは、実施例１～２６に記載の生物活性アッセイにおいて、目的の抗体とαｖβ８インテグリン受容体との間のαｖβ８インテグリンの結合の競合を評価するアッセイを含む。

抗体又はその抗原結合断片は、本明細書に記載のαｖβ８インテグリン（例えば、ヒトαｖβ８インテグリン）への結合について、本発明の別の抗体と競合又は交差競合する能力を有していてもよい。例えば、本発明の抗体は、αｖβ８インテグリン、又は本明細書に記載された抗体に結合するαｖβ８インテグリンの適切な断片若しくは変異体との結合について、本明細書に記載された抗体と競合又は交差競合してもよい。

すなわち、αｖβ８インテグリンへの結合について一次抗体と二次抗体が競合するが、二次抗体が最初にαｖβ８インテグリンに結合する部位では競合しない場合、二次抗体と「競合する」と見なされる（一方向の競合ともいう）。どの抗体が最初にαｖβ８インテグリンに結合するかとは関係なく、抗体が別の抗体と競合する場合、抗体はαｖβ８インテグリンへの結合について他の抗体と「交差競合」する。そのような競合又は交差競合抗体は、標準的な結合アッセイにおいて本発明の既知の抗体と競合/交差競合するそれらの能力に基づいて同定することができる。例えば、競合－交差競合を実証するために、Biacore（登録商標）システムを使用するＳＰＲ、ＥＬＩＳＡアッセイ又はフローサイトメトリーを使用してもよい。このような競合－交差競合は、２つの抗体が同一の、重複する、又は類似するエピトープに結合することを示唆するかもしれない。

したがって、本発明の抗体は、標的分子上の結合部位について試験する抗体が参照抗体と競合／交差競合することができるか否かを検討する結合アッセイを含む方法によって同定してもよい。競合的結合アッセイを実施する方法は、本明細書に記載されており、及び／又は当該技術分野において周知である。例えば、それらは、抗体が標的分子に結合することができる条件で、本発明の参照抗体を標的分子に結合することを含むことができる。次に、抗体／標的複合体を試験／二次抗体に曝露することができ、試験抗体が本発明の参照抗体を抗体／標的複合体から置き換えることができる程度を評価することができる。別の方法では、抗体の結合を可能にする条件で、試験抗体を標的分子と接触させることを含むことができ、次いで、その標的分子に結合することができる本発明の参照抗体を追加し、本発明の参照抗体が抗体/標的複合体から試験抗体を置き換えることができる程度、又は同時に標的に結合することができる（すなわち、非競合抗体）程度を評価する。

本発明の参照抗体が標的に結合することを阻害する試験抗体の能力は、試験抗体が当該標的への結合について本発明の参照抗体と競合する可能性があること、したがって、試験抗体は、本発明の参照抗体と同じ、又は実質的に同じ、αｖβ８インテグリンタンパク質上のエピトープ又は領域に結合することを示す。そのような方法において本発明の参照抗体と競合すると特定された試験抗体も、本発明の抗体である。試験抗体が本発明の参照抗体と同じ領域でαｖβ８インテグリンに結合することができ、本発明の参照抗体と競合することができるという事実は、試験抗体が本発明の抗体と同じ結合部位でリガンドとして作用する可能性があり、したがって、試験抗体が参照抗体の作用を模倣している可能性があり、したがって、それは本発明の抗体であることを示唆する。これは、本明細書において詳しく記載されているアッセイにより、試験抗体の存在下でのαｖβ８インテグリンの活性を、同じ条件下での参照抗体の存在下でのαｖβ８インテグリンの活性と比較することによって確認することができる。

本発明の参照抗体又はその抗原結合断片は、αｖβ８インテグリンに結合する能力を保持する、例えば表１に示された抗体のような本明細書に記載の抗体及びその変異体又はその断片であってもよい。

本明細書で説明するように、特異的結合は、抗体の標的ではない分子への結合を参考に評価してもよい。この比較は、抗体が標的及び別の分子に結合する能力を比較することにより行ってもよい。この比較は、Ｋ_Ｄ又はＫ_ｉの評価で述べたように行ってもよい。この比較で使用する他の分子は、標的分子ではない分子であってもよい。好ましくは、他の分子は標的分子と同一ではない。好ましくは、標的分子は断片化されていない。

特異的結合を決定するために使用する他の分子は、構造又は機能において標的とは無関係であってもよい。例えば、他の分子は、環境内の無関係な材料又は付随する材料であってもよい。

特異的結合を決定するために使用する他の分子は、例えばαｖβ８インテグリン（例．ヒトαｖβ８インテグリン）のような標的分子と同じin vivo経路に関与する別の分子であってもよい。本発明の抗体がそのような別の分子よりもαｖβ８インテグリンに対する特異性を有することを確実にすることにより、望ましくないin vivo交差反応性を回避してもよい。

本発明の抗体は、標的分子に関係する分子に結合する能力を保持していてもよい。

あるいは、本発明の抗体は特定の標的分子に対する特異性を有していてもよい。例えば、それは、本明細書に記載された標的分子に結合してもよく、結合しなくてもよく、又は本明細書に記載された異なる標的分子に著しく低下した親和性で結合してもよい。例えば、標的として完全長の成熟ヒトαｖβ８インテグリンを使用してもよいが、当該標的に結合する抗体は、例えば他の哺乳動物αｖβ８インテグリンなどの他の種に由来するαｖβ８インテグリンタンパク質に結合できない可能性があってもよく、又は低い親和性で結合するかもしれない。ある態様では、抗体はヒト及びマウスのαｖβ８インテグリンに結合する。

「Ｆｃ融合」タンパク質は、１つ以上のポリペプチドがＦｃポリペプチドに作動可能に連結しているタンパク質である。Ｆｃ融合は、免疫グロブリンのＦｃ領域と融合パートナーを結合する。

「天然配列Ｆｃ領域」は、野生型Ｆｃ領域のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。「変異型Ｆｃ領域」は、少なくとも１つのアミノ酸の修飾に基づき天然配列Ｆｃ領域のアミノ酸配列とは異なるが、天然配列Ｆｃ領域の少なくとも１つのエフェクター機能を保持しているアミノ酸配列を含む。好ましくは、変異体Ｆｃ領域は、天然配列Ｆｃ領域又は元のポリペプチドのＦｃ領域と比較して、少なくとも１つのアミノ酸置換、例えば、約１～約１０のアミノ酸置換、そして好ましくは、天然配列Ｆｃ領域又は元のポリペプチドのＦｃ領域に約１～約５のアミノ酸置換を有する。ここで、変異体Ｆｃ領域は、好ましくは、天然配列Ｆｃ領域及び／又は元のポリペプチドのＦｃ領域と少なくとも約８０％の配列同一性、そして、最も好ましくは、それと少なくとも約９０％の配列同一性、より好ましくは、それと少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％の配列同一性を有する。

当該技術分野において知られているように、抗体の「定常領域」は、単独で又は組み合わせて、抗体軽鎖の定常領域又は抗体重鎖の定常領域を指す。

本明細書中で互換的に使用される用語「ＩｇＧＦｃ領域」、「Ｆｃ領域」、「Ｆｃドメイン」及び「Ｆｃ」は、ＩｇＧ分子のパパイン消化によって得ることができる結晶化可能断片に関係するＩｇＧ分子の一部分を指す。本明細書において、これらの用語は、最初の定常領域免疫グロブリンドメインを除く抗体の定常領域に関し、さらにその領域の一部分に関する。したがって、Ｆｃは、ＩｇＡ、ＩｇＤ及びＩｇＧの最後の２つの定常領域免疫グロブリンドメイン、ＩｇＥ及びＩｇＭの最後の３つの定常領域免疫グロブリンドメイン、並びにこれらのドメイン又はその一部分の可撓性のあるヒンジＮ末端を指す。ＩｇＡ及びＩｇＭでは、ＦｃはＪ鎖を含んでいてもよい。ＩｇＧでは、Ｆｃは免疫グロブリンドメインＣγ２及びＣγ３と、Ｃγ１とＣγ２の間のヒンジを含む。Ｆｃ領域の境界は変化する可能性があり、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は通常、そのＣ末端に残基Ｃ２２６又はＰ２３０を含むように定義され、そのナンバリングは、Kabat et al., 1991.に記載されたEdelman et al., 1969, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 63(1):78-85のＥｕインデックスに従う。通常、Ｆｃドメインは、ヒトＩｇＧ１定常ドメインのおよそ２３６番目のアミノ酸残基からおよそ４４７番目のアミノ酸残基を含む。代表的なヒト野生型ＩｇＧ１ Ｆｃドメインのアミノ酸配列を、配列番号８１及び配列番号８２（任意に末端リジン（Ｋ）残基を含む）に示す。Ｆｃポリペプチドは、単独でこの領域、又は抗体若しくはその抗原結合断片、若しくはＦｃ融合タンパク質との関連でこの領域を指してもよい。

重鎖定常ドメインは、Ｆｃ領域を含み、ＩｇＧ重鎖のＣＨ１ドメイン及びヒンジ、並びにＣＨ２及びＣＨ３（並びに、場合により、ＩｇＡ及びＩｇＥのＣＨ４）ドメインをさらに含む。

「機能的Ｆｃ領域」は、天然配列Ｆｃ領域の少なくとも１つのエフェクター機能を有する。代表的な「エフェクター機能」には、Ｃ１ｑ結合補体依存性細胞毒性；Ｆｃ受容体結合；抗体依存性細胞傷害；食作用；細胞表面受容体（例．Ｂ細胞受容体）のダウンレギュレーションなどが含まれる。そのようなエフェクター機能は、一般に、Ｆｃ領域と結合ドメイン（例．抗体の可変ドメイン又はその抗原結合断片）の結合を必要とし、抗体のエフェクター機能を確認するために当該技術分野において公知のさまざまなアッセイを使用して評価することができる。

「天然配列Ｆｃ領域」は、野生型Ｆｃ領域のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。天然配列ヒトＦｃ領域には、天然配列ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ領域（非Ａ及びＡアロタイプ）；天然配列ヒトＩｇＧ２ Ｆｃ領域；天然配列ヒトＩｇＧ３ Ｆｃ領域；及び天然配列ヒトＩｇＧ４ Ｆｃ領域、並びにその天然に存在する変異体が含まれる。

「変異型Ｆｃ領域」は、少なくとも１つのアミノ酸の修飾に基づき天然配列Ｆｃ領域のアミノ酸配列とは異なるアミノ酸配列を含む。

「Ｆｃ受容体」又は「ＦｃＲ」は、抗体のＦｃ領域に結合する受容体を示す。ある態様では、ＦｃγＲは天然のヒトＦｃＲである。ある態様では、ＦｃＲは、ＩｇＧ抗体（γ受容体）に結合し、受容体サブクラスＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ及びＦｃγＲＩＩＩと、それらの対立遺伝子変異体及び選択的スプライシング体を含む。ＦｃγＲＩＩ受容体には、ＦｃγＲＩＩＡ（活性化受容体）及びＦｃγＲＩＩＢ（阻害受容体）が含まれ、これらは主にその細胞質ドメインにおいて異なっている類似のアミノ酸配列を有する。活性化受容体ＦｃγＲＩＩＡは、その細胞質ドメインに免疫受容体活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）を含み、阻害受容体ＦｃγＲＩＩＢは、その細胞質ドメインに免疫受容体抑制性チロシンモチーフ（ＩＴＩＭ）を含む（例えばDaeron, Annu. Rev. Immunol. 15:203-234 (1997)参照）。ＦｃＲは、例えば、Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol 9:457-92 (1991)；Capel et al., Immunomethods 4:25-34 (1994)及びde Haas et al., J. Lab. Clin. Med. 126:330-41 (1995)に総説が示されている。将来特定されるものを含む他のＦｃＲも、本明細書では用語「ＦｃＲ」に含まれる。

用語「Ｆｃ受容体」又は「ＦｃＲ」は、母体のＩｇＧの胎児への移行（Guyer et al., J. Immunol. 117:587 (1976)及びKim et al., J. Immunol. 24:249 (1994)）と、免疫グロブリンの恒常性の調節に関与する新生児受容体であるＦｃＲｎも含む。ＦｃＲｎへの結合を測定する方法は公知である（例えばGhetie and Ward., Immunol. Today 18(12):592-598 (1997)；Ghetie et al., Nature Biotechnology, 15(7):637- 640 (1997)；Hinton et al., J. Biol. Chem. 279(8):6213-6216 (2004)；国際公開第2004/92219号(Hinton et al.)参照）。

「エフェクター機能」とは、抗体のＦｃ領域に起因する生物活性を指し、抗体のアイソタイプによって異なる。抗体のエフェクター機能の例には、Ｃｌｑ結合及び補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、Ｆｃ受容体結合、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、食作用、細胞表面受容体（例．Ｂ細胞受容体）のダウンレギュレーション及びＢ細胞の活性化がある。

「ヒトエフェクター細胞」は、１つ以上のＦｃＲを発現し、エフェクター機能を実行する白血球である。ある態様では、細胞は少なくともＦｃγＲＩＩＩを発現し、ＡＤＣＣエフェクター機能を発揮する。ＡＤＣＣを実現するヒト白血球の例には、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、単球、マクロファージ、細胞傷害性Ｔ細胞及び好中球がある。エフェクター細胞は、例えば血液のような天然の供給源から単離してもよい。

「抗体依存性細胞傷害」又は「ＡＤＣＣ」は、特定の細胞傷害性細胞（例．ＮＫ細胞、好中球及びマクロファージ）に存在するＦｃ受容体（ＦｃＲ）に結合した分泌型Ｉｇがこれらの細胞傷害性エフェクター細胞とともに抗原を提示する標的細胞に特異的に結合し、続いて細胞毒素で標的細胞を殺すことを可能にする細胞傷害の形態を指す。ＡＤＣＣを発揮する一次細胞であるＮＫ細胞はＦｃγＲＩＩＩのみを発現する一方、単球はＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ及びＦｃγＲＩＩＩを発現する。造血細胞におけるＦｃＲの発現は、Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol 9:457-92 (1991)の４６ページ、表３にまとめられている。目的の分子のＡＤＣＣ活性を確認するために、米国特許第5,500,362号、第5,821,337号又は第6,737,056号（Presta）に記載のin vitroでのＡＤＣＣアッセイを行うことができる。このアッセイが有効なエフェクター細胞には、ＰＢＭＣ及びＮＫ細胞が含まれる。あるいは、又はこれに加えて、目的の分子のＡＤＣＣ活性は、in vivoで、例えば、Clynes et al., Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 95:652-656 (1998)に記載された動物モデルによ確認してもよい。Ｆｃ領域のアミノ酸配列が変更され、ＡＤＣＣ活性が増加又は減少した抗体は、例えば、米国特許第7,923,538号及び第7,994,290号に記載されている。

「増強されたＡＤＣＣ活性」を有する抗体は、元の抗体と比較して、in vitro又はin vivoでＡＤＣＣ活性を発揮するのにより効果的な抗体を指し、アッセイで使用する抗体と元の抗体の量が本質的に同じである場合、そのような抗体と元の抗体は、少なくとも１つの構造的側面において異なる。ある態様では、抗体及び元の抗体のアミノ酸配列は同一であるが、抗体はアフコシル化されており元の抗体はフコシル化されている。ある態様では、ＡＤＣＣ活性は、本明細書に記載されたin vitroのＡＤＣＣアッセイにより測定するが、例えば、動物モデル等におけるＡＤＣＣ活性を測定するための他のアッセイ又は方法が考えられる。ある態様では、ＡＤＣＣ活性が増強された抗体は、ＦｃγＲＩＩＩＡに対する親和性が増強されている。

「変化した」ＦｃＲ結合親和性又はＡＤＣＣ活性を有する抗体は、元の抗体と比較して、ＦｃＲ結合活性及び／又はＡＤＣＣ活性が増強又は減少した抗体であり、抗体と元の抗体は、少なくとも１つの構造的側面において異なる。ＦｃＲへの「増加した結合を示す」抗体は、元の抗体よりも優れた親和性で少なくとも１つのＦｃＲに結合する。ＦｃＲへの「結合の低下を示す」抗体は、元の抗体よりも低い親和性で少なくとも１つのＦｃＲに結合する。ＦｃＲへの結合の低下を示す抗体は、ＦｃＲへの容易に感知できる結合をほとんど又は全く有していない可能性があり、例えば、ＦｃＲへの結合が、天然配列ＩｇＧ Ｆｃ領域と比較して、０～２０％である。

「ＦｃγＲＩＩＩＡに対する増強された親和性」は、元の抗体よりもＦｃγＲＩＩＩＡ（場合によってはＣＤ１６ａともいう）に対してより高い親和性を有する抗体を指し、抗体と元の抗体は、少なくとも１つの構造的側面において異なる。

「グリコフォーム」は、さまざまな炭水化物単位の結合を含む複雑なオリゴ糖構造を指す。このような構造は、例えば、Essentials of Glycobiology Varki et al., eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY (1999)に記載されており、標準的な糖鎖生物学の総説も提供されている。そのようなグリコフォームには、Ｇ２、Ｇ１、Ｇ０、Ｇ-１及びＧ-２が含まれるが、これに限定されるものではない（例えば国際公開第99/22764号参照）。

「グリコシル化パターン」は、タンパク質に共有結合する炭水化物単位（例．グリコフォーム）のパターン、及びグリコフォームがタンパク質のペプチド骨格、より具体的には、免疫グロブリンタンパク質に共有結合する部位として定義される。

「補体依存性細胞毒性」又は「ＣＤＣ」は、補体の存在下における標的細胞の溶解を指す。古典的補体経路の活性化は、補体系の最初の成分（Ｃｌｑ）が（適切なサブクラスの）抗原に結合している抗体に結合することによって開始する。補体活性化を確認するために、例えば、Gazzano-Santoro et al., J. Immunol. Methods 202: 163 (1996)に記載されているＣＤＣアッセイを行うことができる。Ｆｃ領域のアミノ酸配列が変更され、Ｃｌｑ結合能が増加又は減少した抗体は、例えば、米国特許第6, 194,551号、第7,923,538号、第7,994,290号及び国際公開第1999/51642号に記載されている。例えば、Idusogie et al., J. も参照。

本明細書において、用語「野生型アミノ酸」、「野生型ＩｇＧ」、「野生型抗体」又は「野生型ｍＡｂ」は、ある種の集団（例．ヒト、マウス、ラット、細胞など）内で自然に発生するアミノ酸又は核酸の配列を指す。

本明細書において、用語「αｖβ８インテグリン」は、一般に、αインテグリンサブユニット（例えば、配列番号７７で示されるアミノ酸配列を含む、ＩＴＧＡＶのような、インテグリンα-Ｖサブユニットなど）及びβインテグリンサブユニット（例えば、配列番号７８で示されるアミノ酸配列を含む、ＩＴＧＢ８のような、インテグリンβ８サブユニットなど）を含むタンパク質の複合体を指す。本明細書において、「ヒトαｖβ８インテグリン」は、一般に、例えば、配列番号７７で示されるアミノ酸配列を含むヒトＩＴＧＡＶαサブユニット、及び、例えば、配列番号７８で示されるアミノ酸配列を含むヒトＩＴＧＢ８βサブユニットを含むようなαｖβ８インテグリンを指す。本明細書において、「マウスαｖβ８インテグリン」又は「マウスαｖβ８インテグリン」は、一般に、例えば、配列番号７９で示されるアミノ酸配列を含むマウスＩＴＧＡＶαサブユニット、及び、例えば、配列番号８０で示されるアミノ酸配列を含むマウスＩＴＧＢ８βサブユニットを含むようなαｖβ８インテグリンを指す。用語αｖβ８インテグリンは、典型的には、ヒト、カニクイザル、ラット、ウサギ及びマウスを含むが、これらには限定されないαｖβ８インテグリンホモログ及びオルソログを含む。本明細書において、「αｖβ８インテグリン」は、典型的には、哺乳動物のαｖβ８インテグリン、例えば、ヒト、ラット、マウス、非ヒト霊長類、ウシ、ヒツジ又はブタのαｖβ８インテグリン（例．ヒト、ラット、マウス、非ヒト霊長類、ウシ、ヒツジ又はブタのインテグリンα－Ｖサブユニット及びインテグリンβ８サブユニットを含む）を指す。インテグリンα-Ｖサブユニットの非限定的で代表的な例には、ヒト（例．Genbank受託番号P06756.2、配列番号７７を参照）、カニクイザル（例．配列番号８４を参照）及びマウス（例．配列番号７９を参照）のαｖβ８インテグリンが含まれる。インテグリンβ８サブユニットの非限定的で代表的な例には、ヒト（例．Genbank受託番号P26012.1、配列番号７８を参照）、カニクイザル（例．配列番号８５を参照）及びマウス（例．配列番号８０を参照）のαｖβ８インテグリンが含まれる。用語「αｖβ８インテグリン」は、そのようなαｖβ８インテグリンサブユニット分子の断片、変異体、アイソフォーム及び他の相同体も含む。変異型αｖβ８インテグリン分子は、一般に、例えば、本明細書に記載されたαｖβ８インテグリンリガンドに結合する能力、受容体媒介活性を誘導する能力、及び、本発明の抗体又はその抗原結合断片に結合する又は結合しない能力など、天然に存在するαｖβ８インテグリンと同じタイプの活性を有することを特徴とする。

ＴＧＦβ及びＬＡＰの代表的なアミノ酸及びヌクレオチド配列は当該技術分野において公知である。例えば、ＴＧＦβ１及びＬＡＰ（例．ヒト配列UniProt受託番号P01137）を含む前駆体ポリペプチドは、ＬＡＰに対応するUniProt受託番号P01137の約アミノ酸３０～２７８に、ヒトＴＧＦβ１に対応するUniProt受託番号Ｐ０１１３７の約アミノ酸２７９～３９０に翻訳後処理される。同様に、ＴＧＦβ３及びＬＡＰ（例．ヒト配列UniProt受託番号P10600）を含む前駆体ポリペプチドは、ＬＡＰに対応するUniProt受託番号P10600の約アミノ酸２４～３００に、ヒトＴＧＦβ３に対応するUniProt受託番号P10600の約アミノ酸３０１～４１２に翻訳後処理される。

αｖβ８インテグリンは、その表面に、１以上、２以上、３以上、４以上、５以上、６以上、７以上、８以上、９以上、１０以上、１２以上又は１５以上のアクセス可能な残基を含んでいてもよい。標的分子は、αｖβ８インテグリンの公知のエピトープを含んでいてもよい。

本明細書中で略述しているように、抗体分子のある位置を変更することができる。本明細書中で「位置」又は「・・・位」とは、タンパク質の配列における場所を意味する。位置には、最初から順に、又は確立された形式に従ってナンバリングすることができ、例えば、ＥＵインデックス及びKabatインデックスが、抗体のアミノ酸残基のナンバリングに使用できる。例えば、位置２９７はヒト抗体ＩｇＧ１の位置である。対応する位置は、上述したように、一般に他の配列とのアラインメントにより決定する。

本明細書において「残基」とは、タンパク質中の位置とその位置のアミノ酸を意味する。例えば、アスパラギン２９７（Ａｓｎ２９７、Ｎ２９７）は、ヒト抗体ＩｇＧ１の残基である。

当該技術分野において知られているように、本明細書中で交換可能に使用される「ポリヌクレオチド」又は「核酸」は、任意の長さのヌクレオチドの鎖を指し、ＤＮＡ及びＲＮＡを含む。ヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、修飾ヌクレオチド若しくは塩基、及び／若しくはそれらの類似体、又はＤＮＡ若しくはＲＮＡポリメラーゼによって鎖に組み込むことができる基質であり得る。ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチド及びその類似体などの修飾ヌクレオチドを含んでいてもよい。存在する場合、ヌクレオチド構造への修飾は、鎖の結合の前又は後に行われてもよい。ヌクレオチドの配列は、非ヌクレオチド成分によって中断されてもよい。ポリヌクレオチドは、標識成分との結合などによって、重合後にさらに修飾されてもよい。他の修飾の形式には、例えば、「キャップ」、１つ以上の天然に存在するヌクレオチドの類似体による置換、例えば、非荷電結合（例．メチルホスホネート、ホスホトリエステル、ホスホアミデート、カルバメート等）及び荷電結合（例．ホスホロチオエート、ホスホロジチオエート等）を有するもの、例えば、タンパク質（例．ヌクレアーゼ、毒素、抗体、シグナルペプチド、ポリ-L-リジン等）などのペンダント部分を含むもの、インターカレーター（例．アクリジン、ソラレン等）を含むもの、キレート剤（例．金属、放射性金属、ホウ素、酸化金属等）を含むもの、アルキル化剤を含むもの、修飾された結合を有するもの（例．核酸のαアノマー等）のようなヌクレオチド間修飾、並びに未修飾形態のポリヌクレオチドが含まれる。さらに、糖に通常存在するヒドロキシル基のいずれかを、例えば、ホスホン酸基、リン酸基で置換してもよく、標準的な保護基で保護してもよく、活性化して別のヌクレオチドに結合させてもよく、又は固体支持体に結合させてもよい。５’及び３’末端のＯＨは、リン酸化するか、アミン又は１～２０個の炭素原子を有する有機キャッピング基で置換することができる。他のヒドロキシルも、標準的な保護基に誘導体化してもよい。ポリヌクレオチドは、当該技術分野において一般に知られている、例えば、2'-O-メチル-、2'-O-アリル、2'-フルオロ-又は2'-アジド-リボース、炭素環式糖類似体、α-又はβ-アノマー、アラビノース、キシロース又はリキソースなどのエピマー、ピラノース、フラノース、セドヘプツロース、非環式類似体、及びメチルリボシドなどの脱塩基ヌクレオシド類似体を含む類似の形態のリボース又はデオキシリボースを含むことができる。１つ以上のホスホジエステル結合は、別の連結基によって置換してもよい。別の連結基には、リン酸が、Ｐ(Ｏ)Ｓ（チオエート）、Ｐ(Ｓ)Ｓ（ジチオエート）、(Ｏ)ＮＲ_２（アミデート）、Ｐ(Ｏ)Ｒ、Ｐ(Ｏ)ＯＲ’、ＣＯ又はＣＨ_２（ホルムアセタール）（ここで、各Ｒ又はＲ’は、独立して、水素原子又は場合によってエーテル（－Ｏ－）結合、アリール、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル若しくはアラルジルを含む置換若しくは非置換アルキル（Ｃ１～２０）である。）で置換された態様が含まれるが、これらに限定されるものではない。ポリヌクレオチドの全ての結合が同一である必要はない。この説明は、ＲＮＡ及びＤＮＡを含む、本明細書において言及する全てのポリヌクレオチドに適用される。

本明細書において、「ベクター」は、宿主細胞において１つ以上の目的の遺伝子又は配列を送達することができ、好ましくは、発現することができる構築物を意味する。ベクターの例には、ウイルスベクター、裸のＤＮＡ又はＲＮＡ発現ベクター、プラスミド、コスミド又はファージベクター、カチオン性縮合剤に結合したＤＮＡ又はＲＮＡ発現ベクター、リポソームに含まれたＤＮＡ又はＲＮＡ発現ベクター、及びプロデューサー細胞などの特定の真核細胞を含むが、これらに限定されるものではない。

「宿主細胞」には、ポリヌクレオチド挿入物を組み込むためのベクターのレシピエントとなる可能性がある、又はレシピエントである個々の細胞又は細胞培養物を含む。宿主細胞には単一の宿主細胞の子孫を含み、この子孫は、自然、偶発的又は意図的な突然変異のために、必ずしも元の細胞と完全に（形態又はゲノムＤＮＡの相補性が）同一ではなくてもよい。宿主細胞は、本発明のポリヌクレオチドによりin vivoでトランスフェクト及び／又は形質転換された細胞を含む。

宿主細胞は、原核細胞又は真核細胞であってもよい。代表的な真核細胞には、霊長類又は非霊長類の動物細胞などの哺乳類細胞、酵母などの真菌細胞、植物細胞及び昆虫細胞を含む。

細胞培養及びタンパク質又はポリペプチドの発現に感受性のある宿主細胞を、本発明において利用してもよい。ある態様では、宿主細胞は哺乳類である。発現のための宿主として利用可能な哺乳動物細胞株は当該技術分野において周知で、アメリカンタイプカルチャーコレクション（ＡＴＣＣ）から入手可能な多くの不死化細胞株を含む。非限定的で代表的な哺乳動物細胞には、ＮＳ０細胞、ＨＥＫ２９３及びチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、並びに、例えば、２９３-６Ｅ及びＣＨＯ ＤＧ４４細胞、ＣＨＯ ＤＸＢ１１並びにポテリジェント（登録商標）ＣＨＯＫ１ＳＶ細胞（BioWa/Lonza、Allendale、NJ）のようなそれらの誘導体が含まれるが、これに限定されるものではない。哺乳類の宿主細胞には、ヒト頸部癌細胞（ＨｅＬａ、ATCC CCL 2）、ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ、ATCC CCL 10）、サル腎臓細胞（ＣＯＳ）及びヒト肝細胞癌細胞（例．Ｈｅｐ Ｇ２）も含まれるが、これらに限定されるものではない。本発明で使用してもよい哺乳動物細胞の他の非限定的な例には、ヒト網膜芽細胞（ＰＥＲ.Ｃ６（登録商標）；CruCell、Leiden、The Netherlands）、ＳＶ４０によって形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株（ＣＯＳ-７、ATCC CRL 1651）、浮遊培養で増殖させるサブクローン化されたヒト胎児腎臓株２９３（ＨＥＫ ２９３）又は２９３細胞（Graham et al., 1977, J. Gen Virol. 36:59）; マウスセルトリ細胞（ＴＭ４、Mather, 1980, Biol. Reprod. 23:243-251）; サル腎臓細胞（ＣＶ１ ATCC CCL 70）、アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ-７６、ATCC CRL-1 587）犬腎臓細胞（ＭＤＣＫ、ATCC CCL 34）、バッファローラット肝細胞（ＢＲＬ ３Ａ、ATCC CRL 1442）、ヒト肺細胞（Ｗ１３８、ATCC CCL 75）、ヒト肝細胞（Ｈｅｐ Ｇ２、HB 8065）、マウス乳腺腫瘍（MMT 060562、ATCC CCL51）、ＴＲ１細胞（Mather et al., 1982, Annals N.Y. Acad. Sci. 383:44-68）、ＭＲＣ ５細胞、ＦＳ４細胞ヒト肝癌株（Ｈｅｐ Ｇ２）、及び、ＢＡＬＢ／ｃマウス骨髄腫株（ＮＳ０／１、ECACC No：85110503）、ＮＳ０細胞及びＳｐ２／０細胞が含まれるが、これらに限定されるものではない多数の骨髄腫細胞株が含まれる。

さらに、ポリペプチド又はタンパク質を発現する商業的及び非商業的に利用可能な細胞株を、本発明で利用することができる。細胞株が異なれば、栄養要件も異なる可能性があり、並びに／又は、最適な増殖及びポリペプチド若しくはタンパク質の発現のために異なる培養条件が必要になる場合があり、必要に応じて条件を変更することができることを当業者は理解するであろう。

本発明は、昆虫細胞系、酵母発現系、又はＣＨＯ細胞を含むがこれには限定されない哺乳動物細胞系における発現系など、目的のタンパク質の産生において当該技術分野において公知の、又は本明細書に記載された真核生物発現系を含む。

本明細書において「発現制御配列」とは、核酸の転写を管理する核酸配列を意味する。発現制御配列は、構成的又は誘導性プロモーターなどのプロモーター、又はエンハンサーであり得る。発現制御配列は、転写される核酸配列に作動可能に連結している。

本明細書中で互換的に使用される用語「リーダーペプチド」、「リーダー配列」、「リーダーシグナル配列」、「シグナル配列」は、任意の核酸配列、又はそれによってコードされるアミノ酸配列を意味し、核酸分子の５’末端及び／又はポリペプチドのＮ末端又はその近くに存在してもよく、存在する場合、細胞からのポリペプチドの分泌を含むがこれには限定されないオルガネラへのポリペプチドの輸送を実現してもよい。そのようなリーダー配列には、例えば、ＡＴＧＧＧＡＴＧＧＡＧＣＴＧＴＡＴＣＡＴＣＣＴＣＴＴＣＴＴＧＧＴＡＧＣＡＡＣＡＧＣＴＡＣＡＧＧＣＧＴＧＣＡＣＴＣＣ（配列番号１８７）のような核酸配列が含まれるが、これには限定されず、また、ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳ（配列番号１８８）のような、それによってコードされるアミノ酸配列が含まれるが、これには限定されない。本発明は、ポリペプチドの所望の細胞小器官、例えば小胞体への輸送をもたらし、及び／又はポリペプチドを細胞から分泌することができる、当該技術分野において公知の、又は同定されるべき、リーダーシグナル（核酸及びアミノ酸配列）を含む。一般に、シグナルペプチドは成熟ポリペプチドから除去されるか、及び／又は成熟ポリペプチド中に存在しない。

本明細書において「治療」又は「処置」は、有益な又は望ましい臨床結果を得るためのアプローチである。本発明の目的では、有益な又は望ましい臨床結果は、生存率の改善（死亡率の低下）、疾患における炎症反応の低減、組織線維化の低減、病変の外観の改善、病巣の局部への限定、疾患による損傷の程度の低下、疾患の期間の減少、及び／又は疾患に関連する症状の数、程度若しくは期間の減少のうちの１つ以上を含むが、これらに限定されるものではない。この用語は、疾患の症状、合併症若しくは生化学的兆候の発症を予防又は遅延させ、症状を軽減するか、又は、疾患、状態若しくは障害のさらなる発症を阻止若しくは阻害するための本発明の化合物又は薬剤の投与を含む。治療は、予防（疾患の発症を予防若しくは遅延させるため、又はその臨床的症状若しくは無症状の発現を予防するため）、又は疾患発現後の症状の治療的抑制若しくは緩和であってもよい。ある態様では、疾患、状態又は障害はがんである。

本明細書において、用語「がん」は、組織病理学的なタイプ又は浸潤の段階に関係なく、全ての癌性増殖若しくは発癌過程、転移性組織、又は悪性に形質転換した細胞、組織若しくは器官を含むことを意味する。癌性障害の例は、充実性腫瘍、血液がん、軟部組織腫瘍及び転移性病変を含むが、これらに限定されるものではない。充実性腫瘍の例は、肝臓、肺、乳房、リンパ系、胃腸（例．結腸）、泌尿生殖器（例．腎臓、尿路上皮細胞）、前立腺、咽頭に影響を与える臓器など、さまざまな臓器系の悪性腫瘍、例えば肉腫及び癌腫（腺癌及び扁平上皮癌を含む）を含む。腺癌は、ほとんどの結腸癌、直腸癌、腎細胞癌、肝臓癌、肺の非小細胞癌、小腸の癌及び食道の癌などの悪性腫瘍を含む。扁平上皮癌は、肺、食道、皮膚、頭頸部領域、口腔、肛門及び子宮頸部などの悪性腫瘍を含む。ある態様では、がんはメラノーマ、例えば進行黒色腫である。前述のがんの転移性病変は、本発明の方法及び組成物を使用して治療することもできる。本明細書に記載された抗体分子を使用して、その増殖を治療する、例えば減少させることができる代表的な癌は、免疫療法に応答する癌を含む。

「改善する」とは、抗αｖβ８インテグリン抗体を投与しない場合と比較して、１つ以上の症状が軽減又は改良することを意味する。「改善」には、症状の持続期間の短縮又は減少も含む。

本明細書において、薬物、化合物又は医薬組成物の「有効投与量」又は「有効量」は、１つ以上の有益な又は望ましい結果に影響を与えるのに十分な量である。より特定の側面では、有効量は、がんのような疾患の症状を予防、緩和又は改善し、及び／又は治療されている対象の生存を延長する。予防的使用の場合、有益な又は望ましい結果は、リスクの排除若しくは低減、重症度の軽減、又は、疾患の生化学的、組織学的及び／若しくは行動的症状、その合併症、並びに疾患の発症中に現れる中間の病理学的表現型を含む疾患の発症の遅延を含む。治療用途の場合、有益な又は望ましい結果は、αｖβ８インテグリンを介した疾患、障害若しくは状態の１つ以上の症状の軽減、疾患の治療に必要な他の薬剤の投与量の削減、別の薬剤の効果の増強、及び／又は疾患の進行の遅延などの臨床結果を含む。有効な投与量は、１回以上の投与で行うことができる。本発明の目的のために、薬物、化合物又は医薬組成物の有効投与量は、直接的又は間接的に予防的又は治療的処置を達成するのに十分な量である。臨床の文脈で理解されるように、薬物、化合物又は医薬組成物の有効量は、別の薬物、化合物又は医薬組成物と組み合わせて達成しても、達成しなくてもよい。したがって、「有効投与量」は、１つ以上の治療薬を投与する状況で考慮されてもよく、望ましい結果が１つ以上の他の薬剤と組み合わせることにより達成される可能性があるか、又は達成される場合、単一の薬剤は有効量で投与されていると見なすことができる。

抗体又はその抗原結合断片は、１つ以上の治療（例．本明細書では「第２の療法」と呼ぶ）と組み合わせて投与することができる。「組み合わせて」とは、治療又は治療薬を同時に投与し、及び／又は一緒に送達するように処方しなければならないことを意味するものではないが、これらの送達方法は本明細書に記載の範囲内である。抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、１つ以上の他の追加の治療又は治療薬の適用と同時に、前に、又は後に投与することができる。抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片、及び第２の療法、例えば、他の薬剤又は治療方法は、任意の順序で適用することができる。一般に、各薬剤は、その薬剤について決められたされた用量及び／又はスケジュールで投与される。この組み合わせで利用される追加の治療薬は、単一の組成物で一緒に投与されるか、又は異なる組成物で別々に投与されてもよいことがさらに理解されるであろう。ある態様では、組み合わせて使用する量は個別に使用する量よりも低くなる。

「相乗的組合せ」又は「相乗的に」作用する組合せは、個々の治療の単なる相加効果と比較した場合に予測することができない増加した効果を示す組合せである。

「個体」又は「対象」は、哺乳動物、より好ましくはヒトである。哺乳動物は、家畜（例えば、牛、豚、馬、鶏など）、スポーツ動物、ペット、霊長類、馬、犬、猫、マウス及びラットを含むが、これらに限定されるものではない。ある態様では、個人は、その受容体に結合するαｖβ８インテグリン及びそれによって媒介されるシグナル伝達によって実現されるか又は関連する疾患、障害又は状態のリスクにさらされている。ある態様では、対象は本明細書に記載されるような障害又は状態、例えば、がんを有する。

本明細書において、「薬学的に許容される担体」又は「薬学的に許容される賦形剤」は、有効成分と組み合わせた場合に、有効成分が生物活性を保持することを可能にし、対象の免疫系と反応性しない材料を含む。この例は、リン酸緩衝生理食塩水、水、ｏ／ｗエマルジョンなどのエマルジョン、及びさまざまな湿潤剤のような標準的な薬学的担体があるが、これらに限定されるものではない。エアロゾル又は非経口投与において好ましい希釈剤は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）又は通常の（０．９％）生理食塩水である。そのような担体を含む組成物は、従来公知の方法（例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th edition, A. Gennaro, ed., Mack Publishing Co., Easton, PA, 1990及びRemington, The Science and Practice of Pharmacy 20th Ed. Mack Publishing, 2000参照）によって製造される。

代表的な方法及び材料を明細書に記載したが、本明細書に記載されているものと類似又は同等の方法及び材料も、本発明の実施又は試験に使用することができる。材料、方法及び実施例は単なる例示であって、限定することを意図したものではない。

ＩＩ．抗ΑＶΒ８インテグリン抗体
本発明は、αｖβ８インテグリンに結合する抗体及びその抗原結合断片に関する。好ましくは、当該抗体はαｖβ８インテグリンと特異的に結合する、すなわち、αｖβ８インテグリンと結合するが、他のαｖインテグリン（例．αｖβ３インテグリン、αｖβ５インテグリン及びαｖβ６インテグリン）とは検出可能に結合しないか、又はより低い親和性で結合する。本発明はさらに、エフェクター機能が変化した抗αｖβ８インテグリン抗体に関する。ある態様では、エフェクター機能の変化はＡＤＣＣの減少である。ある態様では、エフェクター機能の変化はＣＤＣの減少である。本発明は、また、そのような抗体を含む組成物、並びに治療的及び製薬的使用を含むそのような抗体の使用に関する。

ある態様では、本明細書は、その全体が本明細書に組み込まれる米国特許第9,969,804号に開示され、本明細書では、例えば、配列番号２０～３３及び７１～７６に記載されたマウスハイブリドーマ抗体ADWA-11（ADWA11、mADWA11、mADWA-11ともいう）に由来するが同一ではない、軽鎖の配列又はその断片、及び重鎖又はその断片を有する抗体を含む組成物（医薬組成物を含む）を提供する。

本発明において有用な抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体断片（例．Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆｖ、Ｆｃなど）、キメラ抗体、二重特異性抗体、ヘテロコンジュゲート抗体、単鎖（ＳｃＦｖ）、その変異体、抗体断片を含む融合タンパク質（例．ドメイン抗体）、ヒト化抗体、並びに抗体のグリコシル化変異体、抗体のアミノ酸配列変異体及び共有結合によって修飾された抗体を含む、必要な特異性の抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子の他の改変体を含むことがある。抗体は、マウス、ラット、ヒト又はその他の起源（キメラ又はヒト化抗体を含む）であってもよい。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体はモノクローナル抗体である。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体はヒト又はヒト化抗体である。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体はキメラ抗体である。

本発明の抗αｖβ８インテグリン抗体は、当該技術分野において知られている方法で製造することができる。ヒト及びマウス抗体を産生するための一般的な技術は、当該技術分野で知られており、及び／又は本明細書に記載されている。

最初の同定に続いて、候補の抗αｖβ８インテグリン抗体の活性は、当該生物活性を試みることが知られているバイオアッセイによってさらに確認及び改良することができる。ある態様では、候補の抗αｖβ８インテグリン抗体の特徴を明らかにするために、in vitro細胞アッセイをさらに行う。例えば、当該候補を直接スクリーニングするための、バイオアッセイ行うことができる。抗αｖβ８インテグリン抗体を特定し、その特徴を明らかにするためのいくつかの方法を、実施例に詳細に記載する。

以下の表１は、例えば、本明細書に記載の、マウス、キメラ及びヒト化抗αｖβ８インテグリン抗体のアミノ酸及びヌクレオチド配列の概要である。重鎖及び軽鎖のＣＤＲのアミノ酸及びヌクレオチド配列、重鎖及び軽鎖の可変領域のアミノ酸及びヌクレオチド配列、並びに重鎖及び軽鎖のアミノ酸及びヌクレオチド配列をこの表に示す。一般に、特に明記しない限り、本発明の抗αｖβ８インテグリン抗体は、表１に示す１つ以上のKabatのＣＤＲ及び／又はChothiaの超可変ループの組合せを含んでもよい。ある態様では、本発明の抗αｖβ８インテグリン抗体は、表１に示す１つ以上のＶＨ配列及び／又はＶＬ配列の組合せを含んでもよい。ある態様では、本発明の抗αｖβ８インテグリン抗体は表１に示す１つ以上のフレームワーク領域（例．ＦＲ１、Ｆｒ２、ＦＲ３及びＦＲ４）の組合せを含んでもよい。表１に示されるように、ＶＨ配列及びＶＬ配列は、通常、アミノ末端からカルボキシ末端に、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順序で、３つのＣＤＲ及び４つのＦＲを含むことが一般に理解できる。

ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体が重鎖のＣ末端にリジン（Ｋ）残基を含む場合（例えば、ヒトＩｇＧ１重鎖は末端リジンを含む）、当業者は、当該リジン残基が切り取られ、Ｃ末端にリジン残基を欠く重鎖を有する抗体が生じる可能性があることを理解するであろう。さらに、抗体重鎖は、リジンをコードしていない核酸を使用して製造してもよい。したがって、ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体は通常は存在する末端リジンが存在しない重鎖を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１１～１３、１７～１９、２５～２７、３１～３３又は７１～７６の少なくとも一つで示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号８～１０、１４～１６、２２～２４又は２８～３０の少なくとも一つで示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２及びＣＤＲ-Ｈ３を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号７で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３、並びに、配列番号６で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２及びＣＤＲ-Ｈ３を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号７で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３、並びに、配列番号２０で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２及びＣＤＲ-Ｈ３を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号７で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３、並びに、配列番号３４～４６、８８～９１又は９３の少なくとも一つで示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２及びＣＤＲ-Ｈ３を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号２１で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３、並びに、配列番号６で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２及びＣＤＲ-Ｈ３を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号４７～６９又は９２の少なくとも一つで示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３、並びに、配列番号６で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２及びＣＤＲ-Ｈ３を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号５で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３、並びに、配列番号２で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２及びＣＤＲ-Ｈ３を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号５で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３、並びに、配列番号３で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２及びＣＤＲ-Ｈ３を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号５で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３、並びに、配列番号１２４又は１８２で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２及びＣＤＲ-Ｈ３を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１２３で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３、並びに、配列番号１２４又は１８２で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２及びＣＤＲ-Ｈ３を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１２３で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３、並びに、配列番号２又は３で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２及びＣＤＲ-Ｈ３を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124918であるプラスミドの挿入物がコードするアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124917であるプラスミドの挿入物がコードするアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２及びＣＤＲ-Ｈ３を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124918であるプラスミドの挿入物がコードするアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３、並びに、ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124917であるプラスミドの挿入物がコードするアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２及びＣＤＲ-Ｈ３を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124918であるプラスミドの挿入物がコードするアミノ酸配列に含まれる軽鎖可変領域を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124917であるプラスミドの挿入物がコードするアミノ酸配列に含まれる重鎖可変領域を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１１で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｌ１、配列番号１２で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｌ２、配列番号１３で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｌ３、配列番号８で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｈ１、配列番号９で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｈ２、及び配列番号１０で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｈ３を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１７で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｌ１、配列番号１８で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｌ２、配列番号１９で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｌ３、配列番号１４で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｈ１、配列番号１５で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｈ２、及び配列番号１６で示されるアミノ酸配列に含まれるＣＤＲ-Ｈ３を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号６、３４～４６、８８～９１及び９３のいずれか一つ（例．配列番号６）で示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列に含まれるＶＨを含んでいてもよい。ＶＨは、配列番号６、３４～４６、８８～９１及び９３のいずれか一つ（例．配列番号６）で示されるアミノ酸配列と少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％同一であるアミノ酸配列を含んでいてもよい。ＶＨは、配列番号６、３４～４６、８８～９１及び９３のいずれか一つ（例．配列番号６）で示されるアミノ酸配列を含んでいてもよい。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号６で示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列に含まれるＶＨを含んでいてもよい。ＶＨは、配列番号６で示されるアミノ酸配列と少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％同一であるアミノ酸配列を含んでいてもよい。ＶＨは、配列番号６で示されるアミノ酸配列を含んでいてもよい。ある態様では、抗体又はその抗原結合断片は配列番号６で示されるアミノ酸配列に含まれる含むＶＨを含む。ある態様では、抗体又はその抗原結合断片は配列番号６で示されるアミノ酸配列からなるＶＨを含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号７、４７～６９及び９２のいずれか一つ（例．配列番号７）で示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列に含まれるＶＬを含んでいてもよい。ＶＬは、配列番号７、４７～６９及び９２のいずれか一つ（例．配列番号７）で示されるアミノ酸配列と少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％同一であるアミノ酸配列を含んでいてもよい。ＶＬは、配列番号７、４７～６９及び９２のいずれか一つ（例．配列番号７）で示されるアミノ酸配列を含んでいてもよい。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号７で示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列に含まれるＶＬを含んでいてもよい。ＶＬは、配列番号７で示されるアミノ酸配列と少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％同一であるアミノ酸配列を含んでいてもよい。ＶＬは、配列番号７で示されるアミノ酸配列を含んでいてもよい。ある態様では、抗体又はその抗原結合断片は配列番号７で示されるアミノ酸配列に含まれるＶＬを含む。ある態様では、抗体又はその抗原結合断片は配列番号７で示されるアミノ酸配列からなるＶＬを含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号６、３４～４６、８８～９１及び９３のいずれか一つ（例．配列番号６）で示されるアミノ酸配列に含まれるＶＨを含み、さらに、ＩｇＧ１定常ドメイン（例．配列番号８１、８２、１８１又は１８４のいずれか一つで示されるアミノ酸配列に含まれるＩｇＧ１定常ドメイン）を含む重鎖を含んでいてもよい。ある側面では、抗体又は抗原結合断片、バリアントは、前記重鎖の全長に対して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４若しくは１５の保存的若しくは非保存的置換、並びに／又は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４若しくは１５の付加及び／若しくは欠失を含む。さらなる側面では、バリアントは、前記重鎖の全長と、少なくとも６５％、少なくとも７５％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性を共有し、前記抗体又は抗原結合断片はαｖβ８インテグリンに特異的に結合する。

ある態様では、抗体又はその抗原結合断片は配列番号６で示されるアミノ酸配列に含まれるＶＨを含む重鎖を含み、さらに、配列番号１８１又は１８４で示されるアミノ酸配列に含まれるＩｇＧ１の定常ドメインを含む。ある態様では、抗体又はその抗原結合断片は配列番号６で示されるアミノ酸配列からなるＶＨを含み、さらに、配列番号１８１又は配列番号１８４で示されるアミノ酸配列からなるＩｇＧ１定常ドメインを含む。ある態様では、抗体はエフェクター機能を有していない。さらに別の態様では、抗体分子は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ及びＩｇＥの重鎖定常領域；特に、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４の（例．ヒト）重鎖定常領域から選択された重鎖定常領域を有する。別の態様では、抗体分子は、例えば、（例えば、配列番号８３で示されるアミノ酸配列によってコードされる）κ又はλ（例．ヒト）軽鎖定常領域から選択される軽鎖定常領域を有する。抗体の特性を修正する（例．Ｆｃ受容体との結合、抗体のグリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能及び／又は補体機能の１つ以上を増加又は減少させる）ために、定常領域を変化、例えば突然変異することができる。ある態様では、抗体はエフェクター機能を有し、補体を固定できる。別の態様では、抗体はエフェクター細胞を動員せず、補体を固定しない。別の態様では、抗体はＦｃ受容体に結合する能力が低下しているか、結合する能力がない。例えば、それは、Ｆｃ受容体への結合をサポートしない（例．Ｆｃ受容体結合領域が突然変異又は欠失している）アイソタイプ、サブタイプ、断片又は他の突然変異体である。

抗体の定常領域を変化させる方法は当該技術分野において知られている。機能が変化した抗体、例えば、細胞上のＦｃＲや補体のＣ１成分などのエフェクターリガンドに対する親和性が変化した抗体は、抗体の定常部分の少なくとも１つのアミノ酸残基を別の残基で置き換えることによって得ることができる。（例えば欧州特許出願公開第388151号、米国特許第5,624,821号及び第5,648,260号参照、これらの全ての内容は本明細書に含まれる。）マウス又は他の種に適用した場に免疫グロブリンの機能を低下又は排除する同様の変化を説明することができる。

ある態様では、抗体又はその抗原結合断片は配列番号７、４７～６９及び９２のいずれか一つ（例．配列番号７）で示されるアミノ酸配列に含まれるＶＬを含み、さらに、配列番号８３で示されるアミノ酸配列に含まれるκ定常ドメインを含む軽鎖を含む。ある態様では、抗体又はその抗原結合断片は配列番号７で示されるアミノ酸配列からなるＶＬを含み、さらに、配列番号８３で示されるアミノ酸配列からなるκ定常ドメインを含む軽鎖を含む。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号２で示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一であるアミノ酸配列に含まれる重鎖（ＨＣ）を含む。ある態様では、抗体又はその抗原結合断片は配列番号２で示されるアミノ酸配列に含まれるＨＣを含む。ある態様では、抗体又はその抗原結合断片は配列番号２で示されるアミノ酸配列からなるＨＣを含む。ある態様では、抗体はエフェクター機能を有していない。

ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号３で示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一であるアミノ酸配列に含まれる重鎖（ＨＣ）を含む。ある態様では、抗体又はその抗原結合断片は配列番号３で示されるアミノ酸配列に含まれるＨＣを含む。ある態様では、抗体又はその抗原結合断片は配列番号３で示されるアミノ酸配列からなるＨＣを含む。ある態様では、抗体はエフェクター機能を有していない。ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号５で示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一であるアミノ酸配列に含まれる軽鎖（ＬＣ）を含む。ある態様では、抗体又はその抗原結合断片は配列番号５で示されるアミノ酸配列に含まれるＬＣを含む。ある態様では、抗体又はその抗原結合断片は配列番号５で示されるアミノ酸配列からなるＬＣを含む、ある態様では、抗体はエフェクター機能を有していない。

生殖細胞系列の置換
ある態様では、抗体又はその抗原結合断片は、(i) 以下の重鎖のＣＤＲ配列：配列番号２２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、配列番号２３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２及び配列番号２４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３；並びに／又は、(ii) 以下の軽鎖のＣＤＲ配列：配列番号２５若しくは７１で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、配列番号２６若しくは７２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２及び配列番号２７若しくは７３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３を含む。ある態様では、抗体又はその抗原結合断片は、(i) 以下の重鎖のＣＤＲ配列：配列番号２８で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１、配列番号２９で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２及び配列番号３０で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３；並びに／又は、(ii) 以下の軽鎖のＣＤＲ配列：配列番号３１若しくは７４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１、配列番号３２若しくは７５で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２及び配列番号３３若しくは７６で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３を含む。これらはマウスのＣＤＲであり、好ましくは、ヒトＶＨ及びＶＬドメインに移植されるか、別の方法で追加される。多種多様なヒト生殖系列配列をアクセプターとして使用することができ、ヒトで使用するために非ヒト抗体を「ヒト化」する方法は、この技術分野において広く知られており、また、本明細書にも記載されている。したがって、当業者は、上記マウスＣＤＲ配列をヒトＶドメインアミノ酸配列に配置できることを理解するであろう。その際、元のマウス（すなわち、ドナー）抗体の抗体結合活性及び他の望ましい特性を維持するために、ヒト生殖細胞系列配列が、一般に変更される。ＣＤＲ及びフレームワーク領域（ＦＷ）は、以下のように操作できる。

ある態様では、ＣＤＲ-Ｌ１では、配列番号２５、３１、７１又は７４で示されるアミノ酸配列に対して、１１以下、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、２以下又は１以下の置換が行われる。ある態様では、ＣＤＲ-Ｌ２では、配列番号２６、３２、７２又は７５で示されるアミノ酸配列に対して、６以下、５以下、４以下、３以下、２以下又は１以下の置換が行われる。ある態様では、ＣＤＲ-Ｌ３では、配列番号２７、３３、７３又は７６で示されるアミノ酸配列に対して、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、２以下又は１以下の置換が行われる。ある態様では、ＣＤＲ-Ｈ１では、配列番号２２又は２８で示されるアミノ酸配列に対して、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、２以下又は１以下の置換が行われる。ある態様では、ＣＤＲ-Ｈ２では、配列番号２３又は２９で示されるアミノ酸配列に対して、１７以下、１６以下、１５以下、１４以下、１３以下、１２以下、１１以下、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、２以下又は１以下の置換が行われる。ある態様では、ＣＤＲ-Ｈ３では、配列番号２４又は３０で示されるアミノ酸配列に対して、１２以下、１１以下、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、２以下又は１以下の置換が行われる。ある態様では、置換により、結合親和性（Ｋ_Ｄ）値が１０００倍を超えて、１００倍を超えて又は１０倍、変化することはない。ある態様では、置換は表１による保存的置換である。

ある態様では、置換は、例えば米国特許出願公開第2017/0073395号及びTownsend et al., 2015, Proc. Nat. Acad. Sci. USA 112(50):15354-15359に記載されているように、（ドナー）ＣＤＲ残基を対応するヒト生殖細胞系列（アクセプター）残基に置き換えて、ヒトのアミノ酸配列を増やし、抗体の免疫原性を潜在的に低下させるヒト生殖細胞系列置換である。

抗体ＣＤＲにヒト生殖細胞系列の残基を導入する方法及びライブラリーは、米国特許出願公開第2017/0073395号及びTownsend et al., 2015, Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 112(50):15354-15359 に詳しく記載されており、両者は、その全体が本明細書に含まれる。

抗体又はその抗原結合断片は、ヒト生殖細胞系列ＶＨフレームワーク配列を含むＶＨフレームワークを含んでいてもよい。ＶＨフレームワーク配列は、ヒトＶＨ３生殖細胞系列、ＶＨ１生殖細胞系列、ＶＨ５生殖細胞系列又はＶＨ４生殖細胞系列に由来することができる。好ましいヒト生殖細胞系列重鎖フレームワークは、ＶＨ１、ＶＨ３又はＶＨ５生殖細胞系列に由来するフレームワークである。例えば、以下の生殖細胞系列のＶＨフレームワークを使用することができる：IGHV3-07、IGHV1-46、IGHV3-23、IGHV3-30、IGHV1-69又はIGHV3-48（名称はＩＭＧＴ生殖細胞系列の定義に基づく）。好ましいヒト生殖細胞系列軽鎖フレームワークは、ＶΚ又はＶλ生殖細胞系列に由来するフレームワークである。例えば、以下の生殖細胞系列のＶＬフレームワークを使用することができる：IGKV1-39、IGKV2-28、IGKV2-30、IGKV4-1又はIGKV3-11（名称はＩＭＧＴ生殖細胞系列の定義に基づく）。あるいは、又はさらに、フレームワーク配列は、ヒトＶλ１コンセンサス配列、ＶΚ１コンセンサス配列、ＶΚ２コンセンサス配列、ＶΚ３コンセンサス配列、ＶＨ３生殖細胞系列コンセンサス配列、ＶＨ１生殖細胞系列コンセンサス配列、ＶＨ５生殖細胞系列コンセンサス配列又はＶＨ４生殖細胞系列コンセンサス配列のフレームワークのような、ヒト生殖細胞系列コンセンサスフレームワーク配列であってもよい。ヒト生殖細胞系列フレームワークの配列は、Ｖ-ｂａｓｅ、ＩＭＧＴ、ＮＣＢＩ、Ａｂｙｓｉｓなどのさまざまな公開データベースから入手できる。

抗体又はその抗原結合断片は、ヒト生殖細胞系列ＶＬフレームワーク配列を含むＶＬフレームワークを含んでいてもよい。ＶＬフレームワークは、それが由来する生殖細胞系列と機能的及び構造的類似性を保持する、１つ以上のアミノ酸の置換、付加又は欠失を含んでいてもよい。ある側面では、ＶＬフレームワークは、ヒト生殖細胞系列ＶＬフレームワーク配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％又は１００％同一である。ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、ヒト生殖細胞系列ＶＬフレームワーク配列に対して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０アミノ酸の置換、付加又は欠失を含むＶＬフレームワークを含む。ある側面では、この１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０アミノ酸の置換、付加又は削除は、フレームワーク領域のみに生じる。ある側面では、同一性（％）は、本明細書においてＣＤＲと特定する部分を除くＶＬとの類似性に基づく。

ヒト生殖細胞系列ＶＬフレームワークはDPK9のフレームワークであってもよい（ＩＭＧＴ名：IGKV1-39、例．配列番号１２８）。ヒト生殖細胞系列ＶＬフレームワークはIGKV2-28のフレームワークであってもよい。ヒト生殖細胞系列ＶＬフレームワークはDPK18のフレームワークであってもよい（ＩＭＧＴ名：IGKV2-30）。ヒト生殖細胞系列ＶＬフレームワークはDPK24のフレームワークであってもよい（ＩＭＧＴ名：IGKV4-1）。ヒト生殖細胞系列ＶＬフレームワークはHK102_V1のフレームワークであってもよい（ＩＭＧＴ名：IGKV1-5）。ヒト生殖細胞系列ＶＬフレームワークはVg_38Kのフレームワークであってもよい（ＩＭＧＴ名：IGKV3-11）。ヒト生殖細胞系列ＶＬフレームワークは、ヒトＶλコンセンサス配列のフレームワークであってもよい。ヒト生殖細胞系列ＶＬフレームワークは、ヒトＶλ１コンセンサス配列のフレームワークであってもよい。ヒト生殖細胞系列ＶＬフレームワークは、ヒトＶλ３コンセンサス配列のフレームワークであってもよい。ヒト生殖細胞系列ＶＬフレームワークは、ヒトＶΚコンセンサス配列のフレームワークであってもよい。ヒト生殖細胞系列ＶＬフレームワークは、ヒトＶΚ１コンセンサス配列のフレームワークであってもよい。ヒト生殖細胞系列ＶＬフレームワークは、ヒトＶΚ２コンセンサス配列のフレームワークであってもよい。ヒト生殖細胞系列ＶＬフレームワークは、ヒトＶΚ３コンセンサス配列のフレームワークであってもよい。

ある側面では、ＶＬフレームワークは、DPK9（配列番号１２８）である。他の同様のフレームワーク領域は、例えば、DPK-9のＦＷ領域に対してそれぞれ９９、９７、９７、９６、８０、７６、６６、９７、９７、９６、７６及び７４％の同一性並びに共通の構造的特徴（Kabatによるナンバリング）(A) ＣＤＲの直下の残基（バーニアゾーン（Vernier Zone））：Ｌ２、Ｌ４、Ｌ３５、Ｌ３６、Ｌ４６、Ｌ４７、Ｌ４８、Ｌ４９、Ｌ６４、Ｌ６６、Ｌ６８、Ｌ６９、Ｌ７１、(B) ＶＨ／ＶＬ鎖パッキング残基：Ｌ３６、Ｌ３８、Ｌ４４、Ｌ４６、Ｌ８７、及び (C) 標準的な（canonical）ＣＤＲ構造支持残基：Ｌ２、Ｌ４８、Ｌ６４、Ｌ７１における１つ以下のアミノ酸の相違を含んでいてもよい例えばIGKV2-28、IGKV2-30、IGKV4-1又はIGKV3-11を含む、配列番号１１～１３及び１７～１９で示されるアミノ酸配列のＣＤＲを含み、配列番号７、４７～６９及び９２で示されるＶＬのアミノ酸配列で特定されるＣＤＲを含む本発明の有利な抗体を送達するとも予測される（Lo, “Antibody Humanization by CDR Grafting”, (2004) Antibody Engineering, Vol. 248, Methods in Molecular Biology pp 135-159及びO’Brien and Jones, “Humanization of Monoclonal Antibodies by CDR Grafting”, (2003) Recombinant Antibodies for Cancer Therapy, Vol. 207, Methods in Molecular Biology pp 81-100参照）。特に好ましいのは、DPK9とそれぞれ９９、９７、９７、９６、８０、７６、６６％の同一性を共有するIGKV2-28、IGKV2-30、IGKV4-1又はIGKV3-11のフレームワーク領域であり、これらの共通する構造的特徴にアミノ酸の違いはない。ある側面では、同一性（％）は、本明細書においてＣＤＲと特定する部分を除くＶＬとの類似性に基づく。

抗体又はその抗原結合断片はヒト生殖細胞系列ＶＨフレームワーク配列を含むＶＨフレームワークを含んでいてもよい。ＶＨフレームワークは、それが由来する生殖細胞系列と機能的及び構造的類似性を保持する、１つ以上のアミノ酸の置換、付加又は欠失を含んでいてもよい。ある側面では、ＶＨフレームワークは、ヒト生殖細胞系列ＶＨフレームワーク配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％又は１００％同一である。ある側面では、抗体又はその抗原結合断片は、ヒト生殖細胞系列ＶＨフレームワーク配列に対して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０アミノ酸の置換、付加又は欠失を含むＶＬフレームワークを含む。ある側面では、この１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０アミノ酸の置換、付加又は削除は、フレームワーク領域のみに生じる。ある側面では、同一性（％）は、本明細書においてＣＤＲと特定する部分を除くＶＨとの類似性に基づく。

ヒト生殖細胞系列ＶＨフレームワークは、例えば、IGHV3-07（DP-54ともいう）、IGHV1-46、IGHV3-23、IGHV3-30、IGHV1-69又はIGHV3-48のフレームワークであってもよい。ヒト生殖細胞系列ＶＨフレームワークは、ヒトＶＨ生殖細胞系列コンセンサス配列のフレームワークであってもよい。ヒト生殖細胞系列ＶＨフレームワークは、ヒトＶＨ３生殖細胞系列コンセンサス配列のフレームワークであってもよい。ヒト生殖細胞系列ＶＨフレームワークは、ヒトＶＨ５生殖細胞系列コンセンサス配列のフレームワークであってもよい。ヒト生殖細胞系列ＶＨフレームワークは、ヒトＶＨ１生殖細胞系列コンセンサス配列のフレームワークであってもよい。ヒト生殖細胞系列ＶＨフレームワークは、ヒトＶＨ４生殖細胞系列コンセンサス配列のフレームワークであってもよい。

ある側面では、ＶＨフレームワークは、IGHV3-07（配列番号１２７）である。他の同様のフレームワーク領域は、例えば、DP-54のＦＷ領域に対してそれぞれ９３、９２、９２、９９、９７、９７、９６、９６、９４、９４、９３、９２％の同一性並びに共通の構造的特徴（Kabatによるナンバリング）(A) ＣＤＲの直下の残基（バーニアゾーン（Vernier Zone））：Ｈ２、Ｈ４７、Ｈ４８及びＨ４９、Ｈ６７、Ｈ６９、Ｈ７１、Ｈ７３、Ｈ９３、Ｈ９４、(B) ＶＨ／ＶＬ鎖パッキング残基：Ｈ３７、Ｈ３９、Ｈ４５、Ｈ４７、Ｈ９１、Ｈ９３、並びに (C) 標準的な（canonical）ＣＤＲ構造支持残基：Ｈ２４、Ｈ７１、Ｈ９４における１つ以下のアミノ酸の相違を含んでいてもよいIGHV3-07、IGHV1-46、IGHV3-23、IGHV3-30、IGHV1-69又はIGHV3-48を含む、配列番号８～１０及び１４～１６で示されるアミノ酸配列のＣＤＲを含み、配列番号６、３４～４６、８８～９１及び９３で示されるＶＨのアミノ酸配列で特定されるＣＤＲを含む本発明の有利な抗体を送達するとも予測される（Lo 2004及びO’Brien and Jones 2003参照）。DP-54とそれぞれ９３、９２及び９２％の同一性を共有するDP-50、IGHV3-30*09、IGHV3-30*15のフレームワーク領域が例示され、これらの共通する構造的特徴にアミノ酸の違いはない。ある側面では、同一性（％）は、本明細書においてＣＤＲと特定する部分を除くＶＨとの類似性に基づく。

ある態様では、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片は、(i) 配列番号６で示されるアミノ酸配列と、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％若しくは１００％同一であるアミノ酸配列を含むＶＨを含み、及び／又は、(ii) 配列番号７で示されるアミノ酸配列と、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも６６％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも７６％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％若しくは１００％同一であるアミノ酸配列を含むＶＨを含む。これらのＶＬ配列及びＶＨ配列の組合せも、本発明に含まれる。

ある態様では、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片は、(i) 配列番号２若しくは３で示されるアミノ酸配列と、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％若しくは１００％同一であるアミノ酸配列を含むＨＣを含み、及び／又は、(ii) 配列番号５で示されるアミノ酸配列と、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％若しくは１００％同一であるアミノ酸配列を含むＬＣを含む。これらのＨＣ配列及びＬＣ配列の組合せも、本発明に含まれる。

ある態様では、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片は、Ｆｃドメインを含む。Ｆｃドメインは、ＩｇＡ（例．ＩｇＡ_１又はＩｇＡ_２）、ＩｇＧ、ＩｇＥ又はＩｇＧ（例．ＩｇＧ_１、ＩｇＧ_２、ＩｇＧ_３又はＩｇＧ_４）に由来する。

本発明は、さらに、ヒトαｖβ８インテグリンへの結合について潜在型関連ペプチド（ＬＡＰ）と競合する抗体又はその抗原結合断片を提供する。例えば、抗体又はその抗原結合断片とヒトαｖβ８インテグリンの結合がその後のＬＡＰとヒトαｖβ８インテグリンの結合を妨げる場合、抗体又はその抗原結合断片はＬＡＰとヒトαｖβ８インテグリンとの結合について競合する。

本発明によって提供される抗体及び抗原結合断片は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体断片（例．Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆｖ、Ｆｃなど）、キメラ抗体、二重特異性抗体、ヘテロコンジュゲート抗体、単鎖（ＳｃＦｖ）、その変異体、抗体断片を含む融合タンパク質、ドメイン抗体（ｄＡｂ）、ヒト化抗体、並びに抗体のグリコシル化変異体、抗体のアミノ酸配列変異体及び共有結合によって修飾された抗体を含む、必要な特異性の抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子の他の改変体を含む。抗体及び抗原結合断片は、マウス、ラット、ヒト又はその他の起源（キメラ又はヒト化抗体を含む）であってもよい。ある態様では、抗体はモノクローナル抗体である。ある態様では、抗体は、キメラ、ヒト化又はヒト抗体である。ある態様では、抗体はヒト抗体である。ある態様では、抗体はヒト化抗体である。

抗αｖβ８インテグリン抗体の生物活性
αｖβ８インテグリンのエピトープに結合することに加え、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、生物活性を媒介することができる。すなわち、本発明は、αｖβ８インテグリンに特異的に結合し、
(i) αｖβ８インテグリン（例えば、ヒト、マウス、カニクイザル及び／若しくはラットのαｖβ８インテグリン）に特異的に結合する；
(ii) αｖβ８インテグリンと潜在型関連ペプチド（ＬＡＰ）の相互作用を減少する；
(iii) ＴＧＦ-βシグナル伝達を低下させる；
(iv) １０ｎＭ以下のＩＣ５０でαｖβ８インテグリンによるＴＧＦβ活性化を効果的に阻止する；
(v) 非ヒト霊長類（ＮＨＰ）オルソログに対する同等のＫｄ（５倍以内）を有する；
(vi) ヒトαｖβ８と選択的に結合するが、αｖβ８のホモログ（例．αｖβ１、αｖβ３、αｖβ５及びαｖβ６）との結合は検出可能ではない；
(vii) 単独で、若しくは、免疫調節剤（例．ＰＤ-１、ＰＤ-Ｌ１、ＣＴＬＡ-４の阻害剤のようなチェックポイント阻害剤のモジュレーター、又は、４-１ＢＢのような刺激分子のアゴニスト）と組み合わせて、扁平上皮癌、乳癌、結腸癌から選択される癌の動物モデルにおいて増殖抑制及び／若しくは完全な腫瘍退縮を引き起こす；
(viii) 放射線療法のような抗がん治療と組み合わせて、がんの動物モデルにおいて、増殖抑制及び／若しくは完全な腫瘍退縮を引き起こす；
(ix) 同系腫瘍移植モデルにおいて、例えば、１０ｍｇ／ｋｇ以下を投与した場合に、腫瘍増殖を少なくとも６０％減少する；
(x) マウス若しくはヒトのような対象に投与した場合、１つ以上の免疫調節剤（例．ＰＤ-１、ＰＤ-Ｌ１若しくはＣＴＬＡ-４のアンタゴニストのような、チェックポイント阻害剤のアンタゴニスト若しくはチェックポイント活性化剤のアゴニスト、又は、４-１ＢＢアゴニストのような免疫応答の活性化因子）の存在下で抗腫瘍反応を増加させる；
(xi) 腫瘍モデルにおいてαｖβ８インテグリンの発現にかかわらず有効である；
(xii) 例えば単剤療法として、腫瘍微小環境においてＣＤ８＋ＧｚｍＢ＋Ｔ細胞を増加させる；
(xiii) 例えば扁平上皮癌、乳癌及び／若しくは結腸癌の同系モデルにおいて、チェックポイント阻害剤（例．抗ＰＤ-１又は抗ＰＤ-Ｌ１抗体）のアンタゴニストと共に用いた場合、腫瘍増殖を減少、例えば少なくとも８０％を超えて減少する；
(xiv) マウス若しくはヒトのような対象の、カプランマイヤー分析による全生存期間の統計的に有意な改善を示す；
(xv) 高度な熱安定性や高濃度での最小限の凝集など、適切な配合特性を示す；又は
(xvi) 大規模な製造条件下で再現性のある発現及び純度を示すことが可能である；
から選択される少なくとも１つの検出可能な活性を媒介する単離された抗体又はその抗原結合断片を含む。

ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、以下の特性：
i. マウス抗体ADWA11のＫＤよりも低い、例えば約５３６ｐＭ（例．１、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、３７０、４００、４５０、５００、５１０、５２０、５３０、５３１、５３２、５３３、５３４又は５３５ｐＭ）未満の、ヒトαｖβ８インテグリンに対する結合親和性；
ii. 例えば精製ヒトαｖβ８インテグリンに対する１００ｐＭ以下
（例．１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０又は１００ｐＭ）であるＫＤ；
iii. マウス抗体ADWA11のＫＤよりも小さい、例えば約４８９ｐＭ未満（例．１、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、３７０、４００、４５０、４６０、４７０、４８０、４８５、４８６、４８７又は４８８ｐＭ）の、マウスαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
iv. マウス抗体ADWA11のＫＤよりも小さい、例えば５０７ｐＭ未満（例．１、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、３７０、４００、４５０、５００、５０１、５０２、５０３、５０４、５０５又は５０６ｐＭ）の、カニクイザルαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
v. 約１６０ｐＭであるラットαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
vi. 例えばBiacore親和性アッセイにより求めた、例えば１００ｐＭ未満（例．１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０又は９５ｐＭ）のＫＤである、ヒト、カニクイザル、マウス及びラットのαｖβ８インテグリンの少なくとも２つ、３つ又は全てに対してほぼ同等の親和性；
vii. マウス抗体ADWA11よりも小さい、例えば、１８３ｐＭ未満（例．１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１７５、１８０、１８１又は１８２ｐＭ）のＴＧＦβトランス活性化阻害のＩＣ５０；
viii. 約１００、１２０、１４０、１６０、１８０、２００、２２０、２４０、２６０、２８０、３００、３２０又は３４０ｐＭであるＵ２５１細胞におけるＴＧＦβトランス活性化阻害のＩＣ５０；
ix. Ｕ２５１細胞に対する約１２６ｐＭ（±３４ｐＭ、標準偏差）のＥＣ５０；
x. Ｕ２５１細胞に対する約２５６ｐＭ（±１１５ｐＭ、標準偏差）のＥＣ５０；
xi. Ｃ８-Ｓ細胞に対する約１１５ｐＭのＥＣ５０；
xii. Ｃ８-Ｓ細胞に対する約１４５ｐＭ（±２３．７ｐＭ、標準偏差）のＥＣ５０；
xiii. 以下のa～eから選択される少なくとも１つのヒト薬物動態（ＰＫ）パラメーターの予測値
a 中央コンパートメント（ＣＬ）からのクリアランスが約０．１２～０．１５ｍＬ／ｈ／ｋｇ；
b コンパートメント間分配クリアランス（ＣＬＦ）が約０．１５～０．５１ｍＬ／ｈ／ｋｇ；
c 中央コンパートメント（Ｖ１）の分布容積が約３６～３９ｍＬ／ｋｇ；
d 周辺コンパートメント（Ｖ２）の分布容積が約２１～３３ｍＬ／ｋｇ；及び／又は
e 半減期（ｔ_１／２）が約１２～１７日；又は
xiv. ヒトＦｃγ受容体又はＣ１ｑへの検出可能な結合を示さない
の少なくとも一つを有する。

ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、αｖβ８インテグリン＋細胞（例．αｖβ８インテグリンを発現する細胞）に高い見かけの親和性で結合する。標的タンパク質（例．αｖβ８インテグリン）を発現する細胞に結合する抗体を検出するために、見かけの親和性結合を、フローサイトメトリーを使用して評価することができる。αｖβ８インテグリンをコードする核酸により、前記細胞を一過性又は安定的にトランスフェクトすることができる。あるいは、前記細胞は、表面にαｖβ８インテグリンを自然に発現する細胞である可能性がある。αｖβ８インテグリン＋細胞の供給源にかかわらず、抗体の細胞への結合は、当該技術分野で認められているさまざまな方法を使用して容易に評価することができる。抗体又はその抗原結合断片は、ヒトαｖβ８インテグリン、カニクイザルαｖβ８インテグリン、マウスαｖβ８インテグリン、ラットαｖβ８インテグリンに結合する。

本発明は、αｖβ８インテグリンに特異的に結合し、αｖβ８インテグリンによって媒介される活性（例．αｖβ８インテグリンと潜在型関連ペプチド（ＬＡＰ）の相互作用を阻害することによって媒介することができるＴＧＦβシグナル伝達）に拮抗する抗体又はその抗原結合断片を含む。ＴＧＦβシグナル伝達によって媒介される活性の阻害を決定するための当該技術分野で知られている多くのアッセイがある。そのようなアッセイの１つは、ＴＧＦβ経路のトランス活性化アッセイである。当該アッセイの１つの例においては、ルシフェラーゼレポーターを使用して、ＴＧＦβシグナル伝達及びＴＧＦβ経路活性化のマーカーとして機能するＳＭＡＤの発現をモニターする。したがって、抗体の存在下又は非存在下で発現するＳＭＡＤの量を測定することにより、抗αｖβ８インテグリン抗体の、αｖβ８インテグリンに結合し、かつ、（例えば、αｖβ８インテグリンとＬＡＰの相互作用を阻害することによって）ＴＧＦβシグナル伝達の効果に拮抗する能力を評価する。好ましくは、抗体は、約１ｐＭ、約２ｐＭ、約３ｐＭ、約４ｐＭ、約５ｐＭ、約６ｐＭ、約７ｐＭ、約８ｐＭ、約９ｐＭ、約１０ｐＭ、約２０ｐＭ、約３０ｐＭ、約４０ｐＭ、約５０ｐＭ、約６０ｐＭ、約７０ｐＭ、約８０ｐＭ、約９０ｐＭ、約１００ｐＭ、約１２５ｐＭ、約１５０ｐＭ、約１７５ｐＭ、約２００ｐＭ、約２２５ｐＭ、約２５０ｐＭ、約２７５ｐＭ、約３００ｐＭ、約４００ｐＭ又は約５００ｐＭのＥＣ５０（例えば、約１ｐＭ～約１００ｐＭのＥＣ５０、例えば、約１ｐＭ～約２００ｐＭのＥＣ５０、例えば、約１ｐＭ～約３００ｐＭのＥＣ５０、例えば、約１ｐＭ～約４００ｐＭのＥＣ５０、例えば、約１ｐＭ～約５００ｐＭのＥＣ５０）で、ルシフェラーゼの用量依存的な減少を媒介することができる。より好ましくは、抗体又はその抗原結合断片は、約１００ｐＭのＥＣ５０（例．約５ｐＭ～約１７５ｐＭのＥＣ５０、例．約２５ｐＭ～約１７５ｐＭのＥＣ５０、例．約１００ｐＭ、約１０５ｐＭ、約１１０ｐＭ、約１１５ｐＭ、約１２０ｐＭ、約１２５ｐＭ、約１３０ｐＭ、約１３５ｐＭ、約１４０ｐＭ、約１４５ｐＭ、約１５０ｐＭ、約１５５ｐＭ、約１６０ｐＭ、約１６５ｐＭ、約１７０ｐＭ又は約１７５ｐＭのＥＣ５０）でＴＧＦβシグナル伝達（例．ＴＧＦβトランス活性化、例．ＳＭＡＤによるＴＧＦβトランス活性化）を阻害する。ある態様では、抗体又はその抗原結合断片は、約５ｎＭ未満のＥＣ５０（例．約０．００１、０．０１、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．１、５．５、６、７、８、９、１０、１５、２０又は２５ｎＭ未満）でＴＧＦβシグナル伝達（例．ＴＧＦβトランス活性化、例．ＳＭＡＤによるＴＧＦβトランス活性化）を阻害する。ある態様では、抗体又はその抗原結合断片は、約５ｎＭのＥＣ５０（例．約０．００１、０．０１、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．１、５．５、６、７、８、９、１０、１５、２０又は２５ｎＭ）でＴＧＦβシグナル伝達（例．ＴＧＦβトランス活性化、例．ＳＭＡＤによるＴＧＦβトランス活性化）を阻害する。

ある態様では、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片は、約１４５±２３．７ｐＭのＥＣ５０でＴＧＦβシグナル伝達を阻害する。ある態様では、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片は、約１４５±２３．７ｐＭのＥＣ５０でＣ８－ＳのＴＧＦβシグナル伝達を阻害する。ある態様では、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片は、約１１０ｐＭ～約１８０ｐＭのＥＣ５０でＣ８－Ｓ細胞のＴＧＦβシグナル伝達を阻害する。

ある態様では、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片は、約２５６±１１５ｐＭのＥＣ５０でＴＧＦβシグナル伝達を阻害する。ある態様では、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片は、約２５６±１１５ｐＭのＥＣ５０でＵ２５１細胞のＴＧＦβシグナル伝達を阻害する。ある態様では、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片は、約８０ｐＭ～約４００ｐＭのＥＣ５０でＵ２５１細胞のＴＧＦβシグナル伝達を阻害する。

本発明は、ヒトαｖβ８インテグリンに結合するが、ヒトタンパク質αｖβ３インテグリン、αｖβ５インテグリン又はαｖβ６インテグリンに検出可能に結合しない抗体又はその抗原結合断片を包含する。

ＩＩＩ．抗αｖβ８インテグリン抗体の発現と産生
抗αｖβ８インテグリン抗体をコードする核酸
本発明は、抗体断片及び修飾抗体を含む本明細書に記載の抗体をコードするポリヌクレオチドも提供する。本発明は、本明細書に記載のポリヌクレオチドの製造方法も提供する。当該技術分野における公知の手順によってポリヌクレオチドを製造し、発現させることができる。

所望の抗体、定義された抗体断片又はその抗原結合断片の配列、及びこれらの抗体又はその断片をコードする核酸の配列は、標準的な配列決定技術により決定することができる。所望の抗体、定義された抗体断片又はその抗原結合断片をコードする核酸の配列は、組換えによる製造及び特徴付けのためにさまざまなベクター（クローニングベクター、発現ベクターなど）に挿入してもよい。重鎖、定義された抗体断片又は重鎖の抗原結合断片をコードする核酸、及び、軽鎖、定義された抗体断片又は軽鎖の抗原結合断片をコードする核酸を、同じベクター又は異なるベクターにクローニングすることができる。

上記のアミノ酸配列をコードするポリヌクレオチドは、本明細書に開示された本発明の抗体又はその抗原結合断片のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％、より好ましくは１００％同一のアミノ酸配列をコードする。

ある態様では、本発明は、配列番号２、３及び５～７６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む１つ以上のタンパク質をコードするポリヌクレオチド（例．配列番号１、４、１８３、１８５、１８６、１８９、１９０又は１９１で示される配列を含むポリヌクレオチド）、又は配列番号２、３、５～７６、８８～９３、１２３、１２４及び１８２で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％、より好ましくは１００％同一であるアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を提供する。

本発明は、配列番号１、１８３、１８９若しくは１９１のうちの１つ以上として示される核酸配列を含み、抗体重鎖をコードするポリヌクレオチド、又は、配列番号１、１８３、１８９若しくは１９１と、少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％同一であり、抗体重鎖をコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドを提供する。

本発明は、配列番号４若しくは１８５のうちの１つ以上として示される核酸配列を含み、抗体軽鎖をコードするポリヌクレオチド、又は、配列番号４若しくは１８５と、少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％同一であり、抗体軽鎖をコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドを提供する。

本発明は、配列番号１９０で示される核酸配列を含み、抗体重鎖の可変領域をコードするポリヌクレオチド、又は、配列番号１９０と、少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％同一であり、抗体重鎖の可変領域をコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドを提供する。

本発明は、配列番号１８６で示される核酸配列を含み、抗体軽鎖の可変領域をコードするポリヌクレオチド、又は、配列番号１８６と、少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％同一であり、抗体軽鎖の可変領域をコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドを提供する。

本発明は、配列番号１９２若しくは１９３で示される核酸配列を含み、抗体重鎖の定常領域をコードするポリヌクレオチド、又は、配列番号１９２若しくは１９３と、少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％同一であり、抗体重鎖の定常領域をコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドを提供する。

本発明は、配列番号１９４で示される核酸配列を含み、抗体軽鎖の定常領域をコードするポリヌクレオチド、又は、配列番号１９４と、少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％同一であり、抗体軽鎖の定常領域をコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドを提供する。

本発明は、配列番号１８９で示される核酸配列を含むポリヌクレオチドを提供する。本発明は、配列番号１９０で示される核酸配列を含むポリヌクレオチドを提供する。本発明は、配列番号１８５で示される核酸配列を含むポリヌクレオチドを提供する。

本発明は、ＡＴＣＣに寄託され、受託番号がPTA-124917であるプラスミド又は受託番号がPTA-124918であるプラスミドのいずれか一方又は両方のＤＮＡ挿入物の核酸配列を含むポリヌクレオチドを提供する。

本発明は、ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124917であるプラスミド中、及び／又は受託番号がPTA-124918であるプラスミド中の挿入物の核酸配列を含むポリヌクレオチドを提供する。

本発明は、配列番号１、１８３及び４で示される１つ以上の核酸分子を含む細胞を提供する。

本発明は、配列番号１８５、１８９及び１９０で示される１つ以上の核酸分子を含む細胞を提供する。

別の側面では、本発明は、抗αｖβ８インテグリン抗体（例．抗ヒトαｖβ８インテグリン抗体）をコードするポリヌクレオチド及びその変異体を提供し、ここで、前記変異体ポリヌクレオチドは、本明細書に開示される特定の核酸配列に対して、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８７％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する。これらの数値は限定を意味するものではなく、記載した数値の増加は、開示の一部として具体的に想定されている。

本発明は、本明細書に記載の核酸分子によってコードされるポリペプチドを提供する。

ある態様では、ＶＨ及びＶＬドメイン若しくはその抗原結合断片、又は完全長のＨＣ若しくはＬＣは、別々のポリヌクレオチドによってコードされている。あるいは、ＶＨ及びＶＬ若しくはその抗原結合断片、又はＨＣ若しくはＬＣは、単一のポリヌクレオチドによってコードされている。

このような配列に相補的なポリヌクレオチドも本発明の開示に含まれる。ポリヌクレオチドは、一本鎖（コード鎖又はアンチセンス鎖）又は二本鎖であってもよく、ＤＮＡ（ゲノム、ｃＤＮＡ又は合成）又はＲＮＡ分子であってもよい。ＲＮＡ分子には、イントロンを含みＤＮＡ分子に１対１で対応するＨｎＲＮＡ分子と、イントロンを含まないｍＲＮＡ分子が含まれる。追加のコード配列又は非コード配列は、本開示のポリヌクレオチド内に存在してもよいし、存在しなくてもよく、かつ、ポリヌクレオチドは、他の分子及び／又は支持材料に連結されていてもよいし、連結されていなくてもよい。

ポリヌクレオチドは、天然の配列（すなわち、抗体又はその断片をコードする内因性配列）を含んでいてもよく、また、ポリヌクレオチドはそのような配列の変異体を含んでいてもよい。ポリヌクレオチド変異体は、コードされたポリペプチドの免疫反応性が天然の免疫反応性分子と比較して減少しないように、１つ以上の置換、付加、欠失及び／又は挿入を含む。コードされたポリペプチドの免疫反応性の影響は、一般に、本明細書に記載のように評価することができる。変異体は、天然の抗体又はその断片をコードするポリヌクレオチド配列に対して、ある態様では少なくとも約７０％の、ある態様では少なくとも約８０％の、ある態様では少なくとも約９０％の、ある態様では少なくとも約９５％の、同一性を示す。これらの数値は限定を意味するものではなく、記載した数値の増加は、開示の一部として具体的に想定されている。

２つのポリヌクレオチド配列又は２つのポリペプチド配列は、２つの配列中のヌクレオチド又はアミノ酸の配列が、以下に記載するように最も多く対応するように整列した場合に同じであれば、「同一」という。２つの配列の比較は、通常、比較ウィンドウに配列を並べ、配列類似性の局所領域を特定・比較することによって行う。ここで、「比較ウィンドウ」とは、２つの配列を最適に整列した後、配列を同じ連続した数の参照配列と比較する少なくとも約２０、通常は３０～約７５又は４０～約５０の連続するヌクレオチド又はアミノ酸のセグメントを指す。

配列の最適なアラインメントは、バイオインフォマティクスソフトウェア（DNASTAR（登録商標）, Inc., Madison, WI）のLasergene（登録商標）スイートのMegAlign（登録商標）プログラムのデフォルトのパラメーターを使用して行ってもよい。このプログラムは、以下の文献に記載のいくつかのアライメントスキームを具体化している：Dayhoff, M.O., 1978, A model of evolutionary change in proteins - Matrices for detecting distant relationships。In Dayhoff, M.O. (ed.) Atlas of Protein Sequence and Structure, National Biomedical Research Foundation, Washington DC Vol. 5, Suppl. 3, pp. 345-358；Hein J., 1990, Unified Approach to Alignment and Phylogenes pp. 626-645 Methods in Enzymology vol. 183, Academic Press, Inc., San Diego, CA；Higgins, D.G. and Sharp, P.M., 1989, CABIOS 5:151-153；Myers, E.W. and Muller W., 1988, CABIOS 4:11-17；Robinson, E.D., 1971, Comb. Theor. 11:105；Santou, N., Nes, M., 1987, Mol. Biol. Evol. 4:406-425；Sneath, P.H.A. and Sokal, R.R., 1973, Numerical Taxonomy the Principles and Practice of Numerical Taxonomy, Freeman Press, San Francisco, CA；Wilbur, W.J. and Lipman, D.J., 1983, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 80:726-730。

ある態様では、「配列同一性のパーセンテージ」は、最適に整列された２つの配列を少なくとも２０残基のウィンドウで比較することによって決定され、ここで、比較ウィンドウ内のポリヌクレオチド配列又はポリペプチド配列は、参照配列（付加又は欠失を有さない）と比較して２０％以下、通常は５～１５％又は１０～１２％の付加又は欠失（ギャップ）を含んでいてもよい。上記パーセンテージは、両者の配列で核酸塩基又はアミノ酸残基が一致する位置の数を求め、その数を参照配列の総数（つまり、ウィンドウサイズ）で割り、１００を掛けて、配列同一性のパーセンテージを算出する。あるいは、変異体は、天然の遺伝子、その一部分又はその相補体と実質的に相同であってもよい。そのようなポリヌクレオチドの変異体は、天然の抗体（又は相補的配列）をコードする天然に存在するＤＮＡ配列と、適度にストリンジェントな条件下で、ハイブリダイズすることができる。

適切な「適度にストリンジェントな条件」には、５×ＳＳＣ、０．５％ＳＤＳ、１．０ｍＭ ＥＤＴＡ（ｐＨ８．０）溶液による予備洗浄、５０℃～６５℃で５× ＳＳＣによる一晩のハイブリダイズ、続いて、０．１％ＳＤＳを含む２×ＳＳＣ、０．５×ＳＳＣ及び０．２×ＳＳＣそれぞれによる、６５℃で２０分間、２回の洗浄を含む。

本明細書において、「高度にストリンジェントな条件」又は「高いストリンジェンシー条件」は、(1) 高温及び低イオン強度での洗浄、例えば、５０℃で、０．０１５Ｍ塩化ナトリウム／０．００１５Ｍクエン酸ナトリウム／０．１％ドデシル硫酸ナトリウムを使用する洗浄、(2) ホルムアミドなどの変性剤を使用するハイブリダイゼーション、例えば、４２℃で、５０％（v/v）ホルムアミドと、０．１％ウシ血清アルブミン／０．１％フィコール／０．１％ポリビニルピロリドン／５０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．５）、７５０ｍＭ塩化ナトリウム、７５ｍＭのクエン酸ナトリウムを使用するハイブリダイゼーション、又は、(3) ４２℃で、５０％ホルムアミド、５×ＳＳＣ（０．７５Ｍ塩化ナトリウム、０．０７５Ｍクエン酸ナトリウム）、５０ｍＭリン酸ナトリウム（ｐＨ６．８）、０．１％ピロリン酸ナトリウム、５×デンハルト溶液、超音波処理したサケ精子ＤＮＡ（５０μｇ／ｍＬ）０．１％ＳＤＳ及び１０％デキストラン硫酸塩を使用するもので、０．２×ＳＳＣ（塩化ナトリウム／クエン酸ナトリウム）による４２℃、及び５０％ホルムアミドによる５５℃での洗浄と、ＥＤＴＡを含む０．１×ＳＳＣによる高ストリンジェンシー洗浄を行うものである。当業者は、プローブの長さなどの要因に対応するために、必要に応じて、温度、イオン強度などを調整する方法を認識する。

遺伝コドンの縮重のため、本明細書に記載されたポリペプチドをコードするさまざまなヌクレオチド配列が存在することを当業者は認識するであろう。これらのポリヌクレオチドのいくつかは、野生型の遺伝子のヌクレオチド配列との相同性は小さい。にもかかわらず、本明細書では、使用されるコドンの違いで変化するポリヌクレオチドも具体的に意図している。さらに、本明細書で提供されるポリヌクレオチド配列を含む遺伝子の対立遺伝子は、本発明の範囲内の事項である。対立遺伝子は、ヌクレオチドの欠失、付加及び／又は置換といった１つ以上の変異又は改変の結果として変化すた内因性の遺伝子である。得られたｍＲＮＡ及びタンパク質は、構造又は機能が変化している可能性があるが、そうである必要はない。対立遺伝子は、標準的な技術（ハイブリダイゼーション、増幅、及び／又はデータベース配列との比較など）を使用して特定することができる。

本明細書のポリヌクレオチドは、化学合成、組換え又はＰＣＲにより得ることができる。化学的にポリヌクレオチドを合成する方法は当該技術分野において周知の事項であり、本明細書で詳しく説明する必要はない。当業者は、所望のＤＮＡ配列を製造するために、本明細書において提供される配列及び市販のＤＮＡシンセサイザーによって提供される配列を使用することができる。

組換えによりポリヌクレオチドを製造するために、本明細書でさらに説明するように、所望の配列を含むポリヌクレオチドを適切なベクターに挿入することができ、次いで、複製及び増幅のために、ベクターを適切な宿主細胞に導入することができる。ポリヌクレオチドは、当該技術分野において公知の手段によって宿主細胞に挿入してもよい。細胞は、直接取り込み、エンドサイトーシス、トランスフェクション、Ｆ因子接合又はエレクトロポレーションによって外因性ポリヌクレオチドを導入することにより、形質転換する。導入後、外因性ポリヌクレオチドは、非組み込みベクター（プラスミドなど）として細胞内に維持されてもよく、また、宿主細胞のゲノムに組み込まれてもよい。そのように増幅されたポリヌクレオチドは、当該技術分野において周知の方法で宿主細胞から単離することができる。例えばSambrook et al., 1989参照。

あるいは、ＰＣＲはＤＮＡ配列の複製を可能にする。ＰＣＲ技術は当該技術分野において周知であり、米国特許第4,683,195号、第4,800,159号、第4,754,065号及び第4,683,202号、並びにPCR: The Polymerase Chain Reaction, Mullis et al. eds., Birkauswer Press, Boston, 1994.に記載されている。

単離されたＤＮＡを適切なベクターで使用し、適切な宿主細胞に挿入することによって、ＲＮＡを得ることができる。細胞が複製し、ＤＮＡがＲＮＡに転写されると、次いで、例えば、Sambrook et al., 1989に記載されているような当業者に周知の方法で、ＲＮＡを単離することができる。

ある態様では、第１のベクターは重鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、第２のベクターは軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含む。ある態様では、第１のベクター及び第２のベクターは、同様の量（モル量又は質量等）で宿主細胞にトランスフェクトされる。ある態様では、第１のベクター及び第２のベクターは、５：１～１：５のモル比又は質量比で宿主細胞にトランスフェクトされる。ある態様では、重鎖をコードするベクター及び軽鎖をコードするベクターの重量比は１：１～１：５が使用される。ある態様では、重鎖をコードするベクター及び軽鎖をコードするベクターの重量比は１：２が使用される。

ベクター
ある態様では、ＣＨＯ細胞、ＣＨＯ由来細胞又はＮＳＯ細胞におけるポリペプチドの発現に最適化されたベクターが選択される。例えば、Running Deer et al., Biotechnol. Prog. 20:880-889 (2004)に、そのようなベクターが例示されている。

適切なクローニングベクター及び発現ベクターは、プロモーター、エンハンサー及び他の転写調節配列など、さまざまな成分を含むことができる。ベクターは、異なるベクターへの抗体可変ドメインのその後のクローニングを可能にするように構築されてもよい。適切なクローニングベクターは、標準的な技術によって構築してもよく、又は当該技術分野で利用可能な多数のクローニングベクターから選択してもよい。選択されるクローニングベクターは、使用する宿主細胞によって異なる場合があるが、有用なクローニングベクターは、一般に自己複製能を有し、特定の制限酵素の標的部位を１箇所を有していてもよく、及び／又は当該ベクターを含むクローンの選択に使用できるマーカー遺伝子を有していてもよい。適切な例には、プラスミド及び細菌ウイルス、例えば、ｐＵＣ１８、ｐＵＣ１９、Bluescript（例．ｐＢＳ ＳＫ＋）及びその誘導体、ｍｐ１８、ｍｐ１９、ｐＢＲ３２２、ｐＭＢ９、ＣｏｌＥ１、ｐＣＲ１、ＲＰ４、ファージＤＮＡ、並びに、ｐＳＡ３及びｐＡＴ２８のようなシャトルベクターが含まれる。これらのベクター及び他の多くのクローニングベクターは、BioRad、Strategene、Invitrogenなどの販売元から入手できる。さらに、発現ベクターが提供される。発現ベクターは、一般に、本明細書に開示されたポリヌクレオチドを含む複製可能なポリヌクレオチド構築物である。発現ベクターは、エピソームとして、又は染色体ＤＮＡの不可欠な部分として、宿主細胞内で複製可能でなければならないことが示唆される。適切な発現ベクターには、プラスミド、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、レトロウイルスを含むウイルスベクター、コスミド、及び国際公開第87/04462号に開示されている発現ベクターが含まれるが、これらに限定されるものではない。ベクター成分は、一般に、以下の成分：シグナル配列、複製起点、１つ以上のマーカー遺伝子、適切な転写制御要素（プロモーター、エンハンサー、ターミネーター）の１つ以上を含んでいてもよいが、これらに限定されるものではない。発現（すなわち、翻訳）のために、通常、リボソーム結合部位、翻訳開始部位及び終止コドンなどの１つ以上の翻訳制御要素も必要である。

目的のポリヌクレオチドを含むベクター、及び／又はポリヌクレオチド自体は、エレクトロポレーション、塩化カルシウム、塩化ルビジウム、リン酸カルシウム、ＤＥＡＥデキストラン又は他の物質を用いるトランスフェクション、微小粒子衝撃法、リポフェクション、及び感染（例．ベクターがワクシニアウイルスなどの感染性病原体である場合）を含む適切な手段のいずれかにより、宿主細胞に導入することができる。ベクター又はポリヌクレオチドの導入は、多くの場合、宿主細胞の特徴に依存する。

宿主細胞
抗体又はその抗原結合断片は、適切な宿主細胞を使用して組換えで製造してもよい。抗体又はその抗原結合断片をコードする核酸は、発現ベクターにクローン化することができ、次いで、当該ベクターは大腸菌、酵母、昆虫細胞、サルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞又は骨髄腫細胞などの宿主細胞に導入することができ、当該宿主細胞は他の免疫グロブリンタンパク質を産生せず、組み換えられた抗体を合成する。好ましい宿主細胞には、当該技術分野で周知の多くの細胞の中で、ＣＨＯ細胞、ヒト胎児腎臓ＨＥＫ-２９３細胞又はＳｐ２．０細胞を含む。抗体断片は、完全長抗体のタンパク質分解若しくは他の分解により、組換えにより、又は化学合成により製造することができる。抗体のポリペプチド断片、特に約５０アミノ酸までのより短いポリペプチドは、化学合成により、簡便に製造することができる。タンパク質及びペプチドの化学合成法は当該技術分野において公知であり、また、製造の外注が可能である。

さまざまな態様において、抗αｖβ８インテグリン重鎖及び／又は抗αｖβ８インテグリン軽鎖は、細菌細胞などの原核細胞中で、真菌細胞（酵母など）、植物細胞、昆虫細胞、哺乳類細胞などの真核細胞中で発現させてもよい。そのような発現は、例えば、当該技術分野におい公知の手順で行うことができる。ポリペプチドの発現に使用することができる代表な真核細胞には、ＣＯＳ７細胞を含むＣＯＳ細胞、２９３-６Ｅ細胞を含む２９３細胞、ＣＨＯ-Ｓ、DG44.Lecl3 ＣＨＯ細胞及びＦＵＴ８ ＣＨＯ細胞を含むＣＨＯ細胞、ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）細胞（Crucell）並びにＮＳＯ細胞が含まれるが、これらに限定されるものではない。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン重鎖及び／又は抗αｖβ８インテグリン軽鎖は酵母中で発現させてもよい。例えば米国特許出願公開第2006/0270045号を参照。ある態様では、特定の真核生物宿主細胞は、抗αｖβ８インテグリン重鎖及び／又は抗αｖβ８インテグリン軽鎖に所望の翻訳後修飾を行う能力に基づいて選択される。例えば、ある態様では、ＣＨＯ細胞は、２９３細胞よりも、よりシアル化されたポリペプチドを産生する。

所望の宿主細胞への１つ以上の核酸の導入は、リン酸カルシウムによるトランスフェクション、ＤＥＡＥ－デキストラン媒介トランスフェクション、カチオン性脂質媒介トランスフェクション、エレクトロポレーション、形質導入、感染などを含むが、これらには限定されない任意の方法で行うことができる。代表的な方法は、例えば、Sambrook et al., Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 3rd ed. Cold Spring Harbor Laboratory Press (2001)に記載されている。核酸は、任意の適切な方法により、所望の宿主細胞に一過性で又は安定的にトランスフェクトしてもよい。

抗αｖβ８インテグリン抗体は、任意の適切な方法によって精製することができる。そのような方法には、親和性マトリックス又は疎水性相互作用クロマトグラフィーの使用が含まれるが、これらに限定されるものではない。適切な親和性リガンドには、抗体定常領域に結合するリガンドが含まれる。例えば、プロテインＡ、プロテインＧ、プロテインＡ／Ｇ又は抗体アフィニティーカラムは、定常領域に結合し、抗αｖβ８インテグリン抗体を精製するために使用することができる。疎水性相互作用クロマトグラフィー、例えば、ブチルカラム又はフェニルカラムも、ポリペプチドの精製に適しているかもしれない。ポリペプチドを精製する多くの方法が当該技術分野において知られている。

ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体は無細胞系で産生される。代表的な無細胞系は、例えば、Sitaraman et al., Methods Mol. Biol. 498: 229-44 (2009)；Spirin, Trends Biotechnol. 22: 538-45 (2004)；Endo et al., Biotechnol. Adv. 21: 695-713 (2003)に記載されている。

ＩＶ． 使用及び治療
治療用途
ある側面では、本発明は、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を用いαｖβ８インテグリン活性を阻害するための治療方法を提供し、当該治療方法は、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を含む治療有効量の医薬組成物を投与することを含む。治療される障害は、αｖβ８インテグリンの活性又はシグナル伝達を除去し、阻害し、又は低下させることにより、改善、緩和、阻害又は予防される疾患又は状態である。特に、ヒト化抗体及びキメラ抗体を含む本発明の抗αｖβ８インテグリン抗体は、対象における（例えば腫瘍微小環境内の）異常な（例．増加した）αｖβ８インテグリン活性及び／若しくはＴＧＦβシグナル伝達によって引き起こされる、並びに／若しくは、関連する、疾患、障害又は状態の、予防、治療及び／又は緩和に使用することができる。ある態様では、疾患、障害又は状態は、呼吸器の状態（例．喘息）、線維症又は貧血を含む。ある態様では、病気、障害又は状態は、ワクチンで治療又は予防可能である。

ある側面では、本発明は、例えば、樹状細胞、Ｔ制御性細胞、腫瘍関連マクロファージ及び／又は腫瘍自体の細胞を含む、腫瘍微小環境内の細胞におけるαｖβ８依存性の潜在型ＴＧＦβの活性化を選択的に阻害する方法を提供する。特定の理論に拘束されるものではないが、本発明の抗αｖβ８インテグリン抗体の投与によって生じる免疫系及び／又は腫瘍微小環境内でのＴＧＦβ活性化のより正確で選択的な拮抗作用は、ＴＧＦβの広範な恒常性に影響を与えることなく、対象の抗腫瘍免疫応答に寄与する可能性がある。ＴＧＦβの広範な恒常性に影響を与えない対象内でのそのような抗腫瘍免疫応答は、全身性のＴＧＦβ阻害よりも安全性及び治療上の利点があることが期待されるかもしれない。

本明細書に記載の方法は、対象における（例えば腫瘍微小環境内の）ＴＧＦβ活性（例．ＴＧＦβ腫瘍促進活性）を低下させるために使用してもよい。腫瘍微小環境内での血管新生、転移、上皮間葉転換及び／又は浸潤性免疫細胞（例えば、腫瘍浸潤性のリンパ球（例．Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、肥満細胞、好酸球及び好塩基球））の抑制に影響を与えるＴＧＦβ活性は、治療有効量の本発明の抗αｖβ８インテグリン抗体を対象（例．癌に罹患した対象）に投与することによって低下させることができる。

場合によっては、癌に罹患した対象に抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を投与すると、対象から得た腫瘍サンプル（例．充実性腫瘍のサンプル）中の、例えば、ＣＤ４５総リンパ球及び骨髄細胞、ＣＤ３ Ｔ細胞、ＣＤ４ Ｔ細胞、ＣＤ８ Ｔ細胞並びにグランザイムＢ発現細胞（例．活性化ＣＤ８及びＮＫ細胞）といった浸潤性免疫細胞の量（例．免疫組織化学（ＩＨＣ）分析で求めた密度）が増加する。浸潤性免疫細胞の量（例．密度）の増加は、例えば、参照腫瘍サンプル（例．同じ対象又は類似の癌を有する異なる対象から得た、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片の投与（例えば、最初の投与又はその後の投与）の前に得た腫瘍サンプル）と、癌に罹患した対象から得た腫瘍サンプル（例．充実性腫瘍のサンプル）の、免疫組織化学（ＩＨＣ）分析による浸潤性免疫細胞の量（例．密度）の比較で決定してもよい。

ある側面では、本発明は、癌性腫瘍の増殖を阻害又は低減する、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を使用するin vivoでの対象の治療に関する。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片によりin vivoで処置される対象は、原発性のがん、例えば局所進行がんに罹患している。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片によりin vivoで処置される対象は、再発性のがん、例えば転移性のがんに罹患している。

ある側面では、本発明は、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を使用する、αｖβ８インテグリン、インテグリンβ８（ＩＴＧβ８）及び／又はインテグリンαＶ（ＩＴＧαＶ）を発現する癌又は腫瘍に罹患した対象のin vivoでの処置に関する。ある態様では、αｖβ８、β８インテグリン及び／又はαＶインテグリンの発現はタンパク質の発現である。ある態様では、αｖβ８、β８インテグリン及び／又はαＶインテグリンの発現はｍＲＮＡの発現である。ある態様では、αｖβ８、β８インテグリン及び／又はαＶインテグリンの発現は、正常な組織若しくはサンプル、対照の組織若しくはサンプル、処置前の組織若しくはサンプル、及び／又は処置後の組織若しくはサンプルにおける、αｖβ８、β８インテグリン及び／又はαＶインテグリンの発現量と比較して増加している。ある態様では、αｖβ８、β８インテグリン及び／又はαＶインテグリンの相対的な発現量を決定するために使用される組織又はサンプルは、癌若しくは腫瘍に罹患した対象から、同じタイプの癌若しくは腫瘍に罹患した別の対象から、異なるタイプの癌若しくは腫瘍に罹患した別の対象から、又は、癌若しくは腫瘍に罹患していない対象から得てもよい。

ある態様では、αｖβ８、β８インテグリン及び／又はαＶインテグリンのｍＲＮＡの発現は、正常な組織若しくはサンプル、対照の組織若しくはサンプル、処置前の組織若しくはサンプル、及び／又は処置後の組織若しくはサンプルにおける、αｖβ８、β８インテグリン及び／又はαＶインテグリンの発現量と比較して増加している。ある態様では、αｖβ８、β８インテグリン及び／又はαＶインテグリンのｍＲＮＡの発現は、正常な組織若しくはサンプル、対照の組織若しくはサンプル、処置前の組織若しくはサンプル、及び／又は処置後の組織若しくはサンプルにおける、αｖβ８、β８インテグリン及び／又はαＶインテグリンのｍＲＮＡの発現量と比較して、約５％、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約１００％、約１５０％、約２００％、約３００％、約４００％、約５００％増加する。

癌性腫瘍の増殖を阻害するために、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を単独で（例．単剤療法として）使用してもよい。あるいは、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を、（例えば、がん又は感染性の）標準的な治療法、別の抗体若しくはその抗原結合断片、免疫調節剤（例．共刺激分子の活性化因子又は抑制性分子の阻害剤）、ワクチン（例．治療用癌ワクチン）又は他の形態の細胞免疫療法の１つ以上と組み合わせて使用してもよい。

したがって、ある態様では、本発明は、本明細書に記載の治療有効量の抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を対象に投与することを含む、対象における腫瘍細胞の増殖を阻害する方法を提供する。

ある態様では、これらの方法は、in vivoでのがんの治療に適している。免疫を増強するため、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を、目的の抗原と一緒に投与することができる。抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を１つ以上の薬剤と組み合わせて投与する場合、抗体と薬剤は、同時に又はいずれか一方を先に投与することができる。

別の側面では、対象を治療する方法、例えば、対象における過剰増殖の状態又は障害（例．がん）、例えば、充実性腫瘍、血液がん、軟部組織腫瘍又は転移性の病変、を低減又は改善する方法が提供される。この方法は、本明細書に記載の１つ以上の抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を、単独で、又は他の薬剤若しくは治療法と組み合わせて、対象に投与することを含む。ある態様では、本発明の抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、治療歴のない対象に対する一次治療として、又は、例えばがんの再発若しくは進行後の二次治療として投与することができる。

本明細書に記載の抗体分子を使用して、その増殖を処置、例えば、低減することができる代表的ながんは、通常、免疫療法に応答するがんを含む。治療するがんの非限定的な例は、メラノーマ（例．転移性悪性黒色腫、皮膚の黒色腫）、腎細胞癌（ＲＣＣ）（例．明細胞癌、乳頭状細胞癌）、前立腺癌（例．ホルモン抵抗性前立腺腺癌）、乳癌、卵巣癌（例．上皮性卵巣癌、卵管癌又は原発性腹膜がん）、頭頚部のがん（例．頭頚部の扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮ）、結腸癌、食道癌（例．腺がん及び扁平上皮癌）、胃癌（例．胃及び胃食道接合部の腺癌）、膵臓癌（例．膵管腺癌）、胆管癌（例．胆管細胞癌）、子宮内膜癌（例．子宮体部（内膜）の癌）、尿路上皮癌及び肺癌（例．非小細胞肺癌、扁平上皮癌）である。さらに、本明細書に記載の抗体分子を使用して難治性又は再発性の悪性腫瘍を治療することができる。

治療できる他の癌の例は、骨のがん、皮膚又は目の悪性黒色腫、直腸癌、肛門癌、精巣がん、子宮頸癌、膣癌、外陰癌、メルケル細胞癌、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、小腸の癌、内分泌系のがん、甲状腺のがん、上皮小体のがん、副腎のがん、軟部組織の肉腫、尿道の癌、陰茎の癌、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ球性白血病を含む慢性又は急性白血病、小児の充実性腫瘍、リンパ球性リンパ腫、膀胱の癌、多発性骨髄腫、骨髄異形成、腎臓又は尿管の癌、腎盂癌、中枢神経系（CNS）の新生物、原発性ＣＮＳリンパ腫、腫瘍血管新生、脊髄腫瘍、脳幹グリオーマ、下垂体腺腫、カポジ肉腫、類表皮癌、扁平上皮癌、Ｔ細胞リンパ腫、アスベストによって誘発されたものを含む環境的に誘発された癌（例．中皮腫）、及びこれらのがんの組合せである。ある態様では、がんは腎細胞癌、卵巣癌、頭頚部の扁平上皮癌及び皮膚癌（例．進行性メラノーマのようなメラノーマ）から選択される。

場合によっては、がんは、充実性腫瘍、血液がん（例．白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫のような骨髄腫）及び転移性の病変からなる群から選択される。がんは、充実性腫瘍、例えば、悪性腫瘍、例えば、肉腫及び癌腫、例えば、肺（例．非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ））、肺、乳房、卵巣、リンパ球、胃腸（例．結腸）、肛門、生殖器及び泌尿生殖器（例．腎臓、尿路、膀胱、前立腺）、咽頭、ＣＮＳ（例．脳、神経又はグリア細胞）、頭頸部（例．頭頚部の扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ））、皮膚（例．進行性メラノーマのようなメラノーマ）、膵臓、結腸、直腸、腎臓（例．腎細胞癌）、肝臓に影響を与えるものなど、さまざまな器官の腺癌、小腸癌及び食道癌、胃-食道癌、甲状腺がん、並びに子宮頸癌のような充実性腫瘍であってもよい。場合によっては、がんはリンパ増殖性疾患（例．移植後リンパ増殖性疾患）、血液がん、Ｔ細胞リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫又は白血病（例．骨髄性白血病又はリンパ性白血病）であってもよい。場合によっては、がんは、初期の、中期の、後期の、又は転移性のがんである。ある特定の場合、がんは腎細胞癌、卵巣癌又は頭頚部の扁平上皮癌である。

別の態様では、がんは、血液悪性腫瘍又は白血病若しくはリンパ腫を含むが、これらには限定されないがんである。例えば、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、例えば、Ｂ細胞型急性リンパ性白血病（「ＢＡＬＬ」）、Ｔ細胞急性リンパ性白血病（「ＴＡＬＬ」）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）を含むが、これらには限定されない急性白血病；例えば、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）を含むが、これらには限定されない１つ以上の慢性白血病；例えば、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞性Ｂ細胞リンパ腫、ろ胞性リンパ腫、有毛細胞白血病、小細胞性又は大細胞性ろ胞性リンパ腫、悪性リンパ増殖性疾患、ＭＡＬＴリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、辺縁層リンパ腫、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群、非ホジキンリンパ腫、形質芽細胞リンパ腫、形質細胞様樹状細胞腫瘍、ワルデンストレームマクログロブリン血症及び無能な骨髄性血液細胞の産生（又は異形成）によって結び付けられた血液学的状態の多様なコレクションである「前白血病」等を含むが、これらには限定されない他の血液の癌又は血液学的状態、を含むがこれらに限定されないがん及び悪性腫瘍を治療するために使用することができる。

ある態様では、がんは、肺癌（例．非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）（例．扁平上皮及び／又は非扁平上皮性のＮＳＣＬＣ又はＮＳＣＬＣ腺癌））、メラノーマ（例．進行性メラノーマ）、皮膚の扁平上皮癌（皮膚ＳＣＣ）（例．転移性の皮膚ＳＣＣ）、腎臓癌（例．明細胞型腎細胞癌のような腎細胞癌）、肝臓癌、骨髄腫（例．多発性骨髄腫）、前立腺癌、乳癌（例．エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体又はＨｅｒ２／ｎｅｕの１つ、２つ又は全てを発現しない乳癌、例．トリプルネガティブ乳癌）、結腸直腸癌、膵臓癌、頭頚部のがん（例．頭頚部の扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、肛門癌、胃-食道癌、甲状腺がん、頸部のがん、リンパ増殖性疾患（例．移植後リンパ増殖性疾患）、血液がん、Ｔ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫又は白血病（例．骨髄性白血病）から選択される。

別の態様では、がんは、癌種（例．進行した又は転移性の癌）、メラノーマ又は非小細胞肺癌のような肺癌から選択される。

ある態様では、がんは非小細胞肺癌のような肺癌である。

別の態様では、がんは進行性前立腺癌のような前立腺癌である。

さらに別の態様では、がんは多発性骨髄腫のような骨髄腫である。

さらに別の態様では、がんは腎細胞癌（ＲＣＣ）（例．転移性のＲＣＣ又は明細胞型腎細胞癌）のような腎臓癌である。

ある態様では、がんは皮膚のがん（例．進行性メラノーマのようなメラノーマ、例．進行性の皮膚の扁平上皮癌のような皮膚の扁平上皮癌）である。

ある態様では、がんは、例えば、進行性メラノーマのようなメラノーマである。ある態様では、がんは他の治療法では応答しない進行性又は切除不能なメラノーマである。

ある態様では、がんは腎細胞癌（ＲＣＣ）のような腎臓癌である。場合によっては、腎臓がんは転移性ＲＣＣ、明細胞型腎細胞癌（ｃｃＲＣＣ）、又は非明細胞型腎細胞癌（ｎｃＲＣＣ）である。場合によっては、がんがＲＣＣ、例えばｃｃＲＣＣの場合、本発明の抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、１次治療又は２次治療として投与することができる。

ある態様では、がんが卵巣癌の場合、本発明の抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、プラチナ抵抗性の患者に対する２次治療として投与することができる。

ある態様では、がんはプラチナ抵抗性及び／又は再発がんである。

本明細書に開示した方法及び組成物は、上述したがんに関連する転移性の病変を治療するために有用である。

併用療法
腫瘍は、さまざまなメカニズムで宿主の免疫監視機構を回避する。腫瘍が発現する免疫抑制性タンパク質の不活性化によって、これらのメカニズムの多くが排除される可能性がある。このようなタンパク質には、とりわけ、ＴＧＦ-β（Kehrl, J. et al. (1986) J. Exp. Med. 163: 1037-1050）、ＩＬ１０（Howard, M. & O'Garra, A. (1992) Immunology Today 13: 198-200）及びＦａｓリガンド（Hahne, M. et al. (1996) Science 274: 1363-1365）が含まれる。免疫抑制性タンパク質の効果を打ち消し、宿主による腫瘍免疫応答を促進するために、これらのタンパク質に対する抗体又はその抗原結合断片を、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片と組み合わせて使用してもよい。

本明細書に開示された抗体又は抗原結合断片は、例えば、細胞毒性薬、放射性同位元素、若しくはタンパク質毒素若しくはウイルスタンパク質のようなタンパク質といった、第２の薬剤に結合した形態で使用することができ、又はこれらの薬剤と結合しない形態で使用することができる。この方法には、抗体分子を、単独で又は細胞毒性薬に結合させて、そのような治療を必要とする対象に投与することを含む。抗体分子は、治療薬、放射性同位元素、植物、真菌、細菌由来の分子、生物学的タンパク質（例．タンパク質毒素）若しくは生物学的粒子（例．例えばウイルスコートタンパク質を介する組換えウイルス）、又はそれらの混合物といった細胞毒性部分のようなさまざまな治療薬の送達に使用することができる。

ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は他の治療法と組み合わせて使用することができ、個別の治療法の単なる相加効果よりも大きな、予測することができない相乗的な治療効果を得る。例えば、併用療法は、１つ以上の追加の治療薬（例．１つ以上の抗癌剤、細胞毒性若しくは細胞増殖抑制剤、ホルモン治療、ワクチン、及び／又は他の免疫治療）と同時処方された、及び／又は同時投与された本発明の組成物を含むことができる。別の態様では、抗体分子は、手術、放射線照射、凍結手術及び／又は温熱療法を含む他の治療法と組み合わせて投与される。そのような相乗的併用療法は、治療薬の投与量を減少させることができ、したがって、単剤での治療法の毒性又は合併症を回避することができる。

ある態様では、本明細書に記載された方法及び組成物は、１つ以上の他の抗体分子、化学療法、他の抗癌療法（例．標的抗癌療法又は腫瘍溶解薬）、細胞毒性剤、免疫治療（例．サイトカイン）、外科的及び／又は放射線治療と組み合わせて投与する。組み合わせて投与することができる代表的な細胞毒性剤には、抗微小管剤、トポイソメラーゼ阻害剤、代謝拮抗剤、有糸分裂阻害剤、アルキル化剤、アントラサイクリン、ビンカアルカロイド、インターカレート剤、シグナル伝達を阻止することができる薬剤、アポトーシスを促進する薬剤、プロテオソーム阻害剤及び放射線照射（例．局所又は全身）が含まれる。

あるいは、又は前述の組合せと組み合わせて、本明細書に記載の方法及び組成物は、１つ以上の免疫調節剤（例．共刺激分子の活性化因子又は抑制性分子の阻害剤）、ワクチン（例．治療用癌ワクチン）若しくは他の形態の細胞免疫療法、又は前述の組合せと共に投与することができる。

抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片の代表的かつ非限定的な相乗的組合せ及び使用には、以下のものが含まれる。

ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、共刺激分子又は抑制性分子の調節剤（例．共阻害リガンド又は受容体）と組み合わせて投与される。

ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、共刺激分子の調節剤（例．アゴニスト）と組み合わせて投与される。ある態様では、共刺激分子のアゴニストは、４-１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ２、ＣＤ２７、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ-１、ＬＦＡ-１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０、ＣＤ１６０又はＢ７-Ｈ３のアゴニスト（例．アゴニスト抗体若しくはその抗原結合断片又は可溶性融合物）から選択される。

別の態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、例えば、共刺激分子（例．４-１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＣＤ２８、ＣＤ２７、ＩＣＯＳ及びＧＩＴＲの共刺激ドメインを含む陽性シグナルに関連するアゴニスト又は調節剤）のような免疫調節剤と組み合わせて使用される。

代表的なＧＩＴＲ調節剤には、米国特許第6,111,090号、欧州特許第090505(B1)号、米国特許第8,586,023号、国際公開第2010/003118号及び国際公開第2011/090754号に記載のＧＩＴＲ融合タンパク質、又は、例えば、米国特許第7,025,962号、欧州特許第1947183(B1)号、米国特許第7,812,135号、第8,388,967号、第8,591,886号、欧州特許第1866339号、国際公開第2011/028683号、第2013/039954号、第2005/007190号、第2007/133822、第2005/055808号、第99/40196号、第2001/03720号、第99/20758号、第2006/083289号、第2005/115451号、米国特許第7,618,632号及び国際公開第2011/051726号に記載の抗ＧＩＴＲ抗体といった、ＧＩＴＲ融合タンパク質及び抗ＧＩＴＲ抗体（例．二価抗ＧＩＴＲ抗体）が含まれる。

ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、免疫チェックポイント分子の抑制性分子の阻害剤と組み合わせて投与する。「免疫チェックポイント」という用語は、ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞の細胞表面の分子を意味することを当業者は理解するであろう。これらの分子は、抗腫瘍免疫応答を下方調節又は阻害する「ブレーキ」として効果的に働くことができる。免疫チェックポイント分子には、免疫細胞を直接阻害する、プログラム細胞死１（ＰＤ-１）、細胞傷害性Ｔリンパ球抗原４（ＣＴＬＡ-４）、Ｂ７Ｈ１、Ｂ７Ｈ４、ＯＸ－４０、ＣＤ１３７、ＣＤ４０、ＬＡＧ-３及びＴＩＭ-３が含まれるが、これらに限定されるものではない。本発明の方法において有用な免疫チェックポイント阻害剤として作用することができる免疫療法剤には、ＰＤ-１、ＰＤ-Ｌ１、ＰＤ-Ｌ２、ＣＴＬＡ-４、ＴＩＭ-３、ＬＡＧ-３、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、ＣＤ１６０、２Ｂ４、ＣＥＡＣＡＭ及び／又はＴＧＦβの阻害剤が含まれるが、これらに限定されるものではない。抑制性分子の阻害は、ＤＮＡ、ＲＮＡ又はタンパク質レベルでの阻害によって行うことができる。ある態様では、抑制性核酸（例．ｄｓＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ又はｓｈＲＮＡ）を使用して、抑制性分子の発現を阻害することができる。別の態様では、抑制性シグナルの阻害剤は、抑制性分子に結合するポリペプチド（例．可溶性リガンド）又は抗体若しくはその抗原結合断片である。

ある態様では、阻害剤は、可溶性リガンド（例．ＣＴＬＡ-４－Ｉｇ又はＴＩＭ-３－Ｉｇ）又はＰＤ-１、ＰＤ-Ｌ１、ＰＤ-Ｌ２若しくはＣＴＬＡ-４に結合する抗体若しくは抗体断片である。例えば、抗ＰＤ-１抗体分子は、例えば、がん（例．転移性黒色腫のようなメラノーマ、非小細胞肺癌のような肺癌又は前立腺癌から選択されるがん）を治療するために、抗ＣＴＬＡ-４抗体（例．イピリムマブ）と組み合わせて投与することができる。代表的な抗ＣＴＬＡ-４抗体には、トレメリムマブ（ファイザー社から入手可能なＩｇＧ２モノクローナル抗体、旧名：チシリムマブ、ＣＰ-６７５,２０６）及びイピリムマブ（ＣＴＬＡ-４抗体、別名ＭＤＸ-０１０、ＣＡＳ番号477202-00-9）が含まれる。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、ＢＲＡＦ阻害剤（例．ベムラフェニブ又はダブラフェニブ）の存在下又は不存在下、抗ＣＴＬＡ-４抗体（例．イピリムマブ）と共に、治療後、例えばメラノーマの治療後に投与する。抗ＣＴＬＡ-４抗体（例．イピリムマブ）の用量は、例えば、約３ｍｇ／ｋｇである。

宿主の免疫応答性を活性化するために使用してもよい他の抗体は、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片と組み合わせて用いることができる。これには、その機能と抗原提示能を活性化する樹状細胞の表面の分子が含まれる。抗ＣＤ４０抗体は、効果的にＴ細胞のヘルパー活性の代わりとなり（Ridge, J. et al. (1998) Nature 393: 474-478）、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片と組み合わせて用いることができる。ＣＴＬＡ-４（例．米国特許第5,811,097号）、ＯＸ-４０（Weinberg, A. et al. (2000) Immunol 164: 2160-2169）、４-１ＢＢ（Melero, I. et al. (1997) Nature Medicine 3: 682-685）、ＩＣＯＳ（Hutloff, A. et al. (1999) Nature 397: 262-266）などのＴ細胞の共刺激分子に対する抗体も、Ｔ細胞の活性化を上昇させる可能性がある。

ある態様では、本明細書に記載の抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を、１つ以上の当該技術分野において知られているＰＤ-１、ＰＤ-Ｌ１及び／又はＰＤ-Ｌ２の阻害剤と組み合わせて投与する。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を、以前に免疫チェックポイント阻害剤（例．抗ＰＤ-１、抗ＰＤ-Ｌ１及び／若しくは抗ＰＤ－Ｌ２抗体、又はそれらの抗原結合断片）で処置されたことがない対象に、免疫チェックポイント阻害剤と同時に投与する。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を、以前に免疫チェックポイント阻害剤（例．抗ＰＤ-１、抗ＰＤ-Ｌ１及び／若しくは抗ＰＤ－Ｌ２抗体、又はそれらの抗原結合断片）で処置され、がん又は腫瘍が進行（例．局所的に進行、転移）した対象に、免疫チェックポイント阻害剤と同時に投与する。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、２８日周期で隔週（例．２週間ごと）投与し、免疫チェックポイント阻害剤は、４週ごとで、２８日周期の１日目に投与する。ある態様では、がん又は腫瘍に罹患した対象に対して、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、２８日周期で隔週投与し、免疫チェックポイント阻害剤（例．抗ＰＤ-１、抗ＰＤ-Ｌ１及び／若しくは抗ＰＤ－Ｌ２抗体、又はそれらの抗原結合断片）は４週ごとで、２８日周期の１日目に投与する。ある態様では、免疫チェックポイント阻害剤は、国際公開第2016/092419号に記載の抗ＰＤ-１抗体又はその抗原結合断片（例．RN888（別名、PF-06801591又はササンリマブ））である。ある態様では、がん又は腫瘍は、頭部又は頚部の扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮ）のような扁平上皮癌、腎細胞癌（ＲＣＣ）、乳癌又は結腸癌である。

ＰＤ-１、ＰＤ-Ｌ１及び／又はＰＤ-Ｌ２の阻害剤は、抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質又はオリゴペプチドであってもよい。ある態様では、抗ＰＤ-１抗体は、MDX-1106、Merck 3475又はCT-011から選択される。ある態様では、抗ＰＤ-１抗体は、ニボルマブ／オプジーボ（登録商標）、ペムブロリズマブ／キイトルーダ（登録商標）、スパルタリズマブ、ピジリズマブ、チスレリズマブ、AMP-224、AMP-514、セミプリマブ又はササンリマブ（RN888、mAb7、PF-06801591）である。ある態様では、抗ＰＤ-Ｌ１抗体は、MEDI4736、MPDL3280A（YW243.55.s70）、BMS-936559（MDX-1105）、アテゾリズマブ／テセントリク（登録商標）、デュルバルマブ／イミフィンジ（登録商標）又はアベルマブ／バベンチオ（登録商標）である。ある態様では、抗ＰＤ-Ｌ１抗体は、アベルマブではない。ある態様では、抗ＰＤ-１抗体は国際公開2016/092419号に記載されており、mAb7（別名：RN888、PF-06801591又はササンリマブ）を含むがこれには限定されない。

ある態様では、ＰＤ-１阻害剤は定常領域（例えば、免疫グロブリン配列のＦｃ領域）に融合したイムノアドヘシン（例えば、ＰＤ-Ｌ１又はＰＤ-Ｌ２の細胞外又はＰＤ-１結合部分を含むイムノアドヘシン）である。ある態様では、ＰＤ-１阻害剤はＡＭＰ-２２４である。ある態様では、ＰＤ-Ｌ１阻害剤は抗ＰＤ-Ｌ１抗体である。ある態様では、抗ＰＤ-Ｌ１結合アンタゴニストは、YW243.55.s70（MPDL3280A、アテゾリズマブとしても知られている）、MEDI-4736、MSB-0010718C又はMDX-1105から選択される。BMS-936559としても知られているMDX-1105は、国際公開2007/005874号に記載されている抗ＰＤ-Ｌ１抗体である。抗体YW243.55.s70（別名：MPDL3280A。重鎖及び軽鎖の可変領域配列を、それぞれ配列番号２０及び２１に示す）は、国際公開第2010/077634に記載されている抗ＰＤ-Ｌ１である。

MDX-1106-04、ONO-4538又はBMS-936558としても知られるMDX-1106は、国際公開第2006/121168に記載されている抗ＰＤ-１体である。MK-3475又はSCH-900475としても知られるMerck3745は、国際公開第2009/114335に記載されている抗ＰＤ-１抗体である。ピジリズマブ（CT-011；Cure Tech）は、ＰＤ-１に結合するヒト化ＩｇＧ１ｋモノクローナル抗体である。ピジリズマブ及び他のヒト化抗ＰＤ-１モノクローナル抗体は、国際公開第2009/101611に記載されている。別の態様では，抗ＰＤ-１抗体はペムブロリズマブである。ペムブロリズマブ（商品名キイトルーダ、旧名：ランブロリズマブ、MK-3475）は、例えば、Hamid, O. et al. (2013) New England Journal of Medicine 369 (2): 134-44に記載されている。AMP-224（Ｂ７-ＤＣＩｇ；Amplimmune；例えば、国際公開第2010/027827号及び2011/066342号に記載）は、ＰＤ-１とＢ７-Ｈ１の相互作用を阻止する、ＰＤ-Ｌ２とＦｃが融合した可溶性の受容体である。他の抗ＰＤ-１抗体には、AMP-514（Amplimmune）、とりわけ、例えば、米国特許第8,609,089号、米国特許出願公開第2010/028330号及び／又は第2012/0114649号に記載されている抗ＰＤ-１抗体が含まれる。

ある態様では、抗ＰＤ-１抗体はMDX-1106である。MDX-1106の別名には、MDX-1106-04、ONO-4538、BMS-936558又はニボルマブがある。ある態様では、抗ＰＤ-１抗体はニボルマブ（CASレジストリー番号：946414-94-4）である。ニボルマブ（別名：BMS-936558又はMDX1106；Bristol-Myers Squibb）は、ＰＤ-１を特異的にブロックする完全ヒトＩｇＧ４モノクローナル抗体である。ニボルマブ（clone 5C4）及びＰＤ-１に特異的に結合する他のヒトモノクローナル抗体は、米国特許第8,008,449号及び国際公開第2006/121168号に記載されている。ランブロリズマブ（別名：ペムブロリズマブ又はMK03475；Merck）は、ＰＤ-１に結合するヒト化ＩｇＧ４モノクローナル抗体である。ペムブロリズマブ及び他のヒト化抗ＰＤ-１抗体は、米国特許第8,354,509号及び国際公開第2009/114335号に記載されている。MDPL3280A（Genentech／Roche）は、ＰＤ-Ｌ１に結合するヒトＦｃ最適化ＩｇＧ１モノクローナル抗体である。MDPL3280A（別名：YW243.55.s70）及び他のＰＤ-Ｌ１に対するヒトモノクローナル抗体は米国特許第7,943,743号及び米国特許出願公開第2012/0039906号に記載されている。YW243.55.s70の配列（重鎖及び軽鎖の可変領域を配列番号20及び21に示す）は、国際公開第2010/077634号及び米国特許第8,217,149号にも記載されている。MDX-1105（別名：BMS-936559）及び他の抗ＰＤ-Ｌ１結合剤は国際公開第2007/005874号に記載されている。

別の態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を、例えば、インターロイキン-２１、インターロイキン-２、インターロイキン-１２又はインターロイキン-１５のようなサイトカインと組み合わせて投与する。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片と本明細書に記載のサイトカインとの組合せは、癌、例えば、本明細書に記載の癌（例．充実性腫瘍又はメラノーマ）の治療に使用する。

この明細書に記載の全ての方法において、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、サイトカイン療法（例：インターフェロン、ＧＭ-ＣＳＦ、Ｇ-ＣＳＦ、ＩＬ２、ＩＬ２１）などの他の免疫療法、又は腫瘍抗原の提示を強化する二重特異性抗体療法（例えば、Holliger (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448；Poljak (1994) Structure 2:1121-1123参照）と組み合わせることができる。

抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片と組み合わせて使用することができる代表的な免疫調節剤には、例えば、アフツズマブ（Roche（登録商標））、ペグフィルグラスチム（Neulasta（登録商標））；レナリドミド（CC-5013、Revlimid（登録商標））；サリドマイド（Thalomid（登録商標））、アクチミド（CC4047）；ＩＬ２１又はＩＲＸ-２（インターロイキン１、インターロイキン２、及びインターフェロンγを含むヒトサイトカインの混合物、CAS 951209-71-5、IRX Therapeutics）のようなサイトカインが含まれるが、これらに限定されるものではない。

ある態様では、がんが卵巣癌で、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片をＰＡＲＰ１阻害剤（例．オラパリブ、ルカパリブ、ニラパリブ、ベリパリブ、イニパリブ、タラゾパリブ、3-アミノベンズアミド、CEP 9722、E7016、BSI-201、KU-0059436、AG014699、MK-4827又はBGB-290）と組み合わせて投与する。

ある態様では、がんは頭頚部のがん、例えば頭頚部の扁平上皮癌である。ある態様では、放射線療法と組み合わせて抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を投与する。

診断用途
例えば診断のために、本発明の抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を使用して、サンプル中のαｖβ８インテグリン又はαｖβ８インテグリンを発現する細胞を検出及び／又は測定してもよい。例えば、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその断片を使用して、αｖβ８インテグリンの異常な発現（例．過剰発現、過少発現、発現の欠如等）を特徴とする状態又は疾患を診断してもよい。代表的なαｖβ８インテグリンの診断アッセイは、例えば、患者から得たサンプルを、本発明の抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片と接触させることを含んでいてもよく、ここで、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、検出可能な標識又はレポーター分子で標識されている。

ある側面では、本発明は、in vitro（例えば、癌性組織の組織生検のような生物学的サンプル）又はin vivo（例えば、対象のin vivoイメージング）でαｖβ８インテグリンタンパク質の存在を検出するための診断方法を提供する。この方法は、(i) サンプルを本明細書に記載された抗体若しくはその抗原結合断片と接触させること、又は、任意に、対象に抗体若しくはその抗原結合断片を投与すること、(ii) 対照となるサンプル（例．血漿、組織、生検のような対照となる生物学的サンプル又は対照となる対象）のような参照サンプルに接触すること、(iii) 前記抗体若しくはその抗原結合断片と、前記サンプル若しくは対象、又は前記対照となるサンプル若しくは対象との間の複合体の形成を検出することを含み、ここで、前記対照となるサンプル又は対象の複合体の形成と、前記サンプル又は対象の複合体の形成の差、例えば、統計的に有意な差は、前記サンプル中のαｖβ８インテグリンの存在を示す。抗体分子を検出可能な物質で直接的又は間接的に標識して、結合した抗体又は結合していない抗体の検出を容易にすることができる。適切な検出可能な物質には、上述し、また、以下でより詳細に説明する、さまざまな酵素、補欠分子族、蛍光物質、発光物質及び放射性物質を含む。

用語「サンプル」は、ポリペプチドの検出のためのサンプルを指し、細胞、細胞溶解物、細胞のタンパク質若しくは膜抽出物、体液、又は組織サンプルを含む。

抗体分子とαｖβ８インテグリンと複合体形成は、αｖβ８インテグリン抗原に結合した結合分子又は非結合分子のいずれかを測定又は視覚化することによって検出することができる。従来の検出アッセイ、例えば、酵素免疫吸着法（ＥＬＩＳＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）又は免疫組織化学法を使用することができる。抗体又はその抗原結合断片の標識に代えて、サンプル中のαｖβ８インテグリンの存在を、検出可能な物質で標識された標準と標識されていない抗体分子を用いる競合イムノアッセイによって検出することができる。この方法では、生物学的サンプル、標識された標準及び抗体又はその抗原結合断片を組み合わせて、標識されていない結合分子に結合した標識された標準の量を測定する。サンプル中のαｖβ８インテグリンの量は、抗体又はその抗原結合断片に結合した標識された標準の量に反比例する。

Ｖ 組成物
本明細書は、本発明の抗αｖβ８インテグリン抗体をその有効量で含む医薬組成物も提供する。本明細書では、そのような組成物の例及び処方の方法も説明する。ある態様では、前記組成物は、１つ以上の抗αｖβ８インテグリン抗体を含む。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体はαｖβ８インテグリン（例．ヒト、マウス、カニクイザル又はラットのαｖβ８インテグリン）を認識する。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体はヒト化抗体である。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体はキメラ抗体である。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体は、抗体が媒介する溶解又はＡＤＣＣのような所望の免疫応答を誘発することができる定常領域を含む。

本明細書の組成物は、凍結乾燥製剤又は水溶液の形態で、薬学的に許容される担体、賦形剤、又は安定剤をさらに含むことができる。

本明細書において、「薬学的に許容される担体」又は「薬学的に許容される賦形剤」は、有効成分と組み合わせた場合に、有効成分が生物活性を保持することを可能にし、対象の免疫系と反応性しない材料を含む。この例は、リン酸緩衝生理食塩水、水、ｏ／ｗエマルジョンなどのエマルジョン、及びさまざまな湿潤剤のような標準的な薬学的担体があるが、これらに限定されるものではない。エアロゾル又は非経口投与において好ましい希釈剤は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）又は通常の（０．９％）生理食塩水である。そのような担体を含む組成物は、従来公知の方法（例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th edition, A. Gennaro, ed., Mack Publishing Co., Easton, PA, 1990及びRemington, The Science and Practice of Pharmacy, 20th Ed., Mack Publishing, 2000参照）によって製造する。

許容される担体、賦形剤又は安定剤は、投与量及び濃度でレシピエントに無毒であり、リン酸塩、クエン酸塩及び他の有機酸などの緩衝液；アスコルビン酸、メチオニンを含む抗酸化剤；保存剤（例．オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド；ヘキサメトニウムクロリド；ベンザルコニウムクロリド、ベンゼトニウムクロリド；フェノール、ブチル又はベンジルアルコール；メチル又はプロピルパラベンなどのアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；3-ペンタノール；及びm-クレゾール）；低分子量（約１０残基未満）のポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、又はリジンなどのアミノ酸；グルコース、マンノース又はデキストランを含む、単糖、二糖及び他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート剤；ショ糖、マンニトール、トレハロース又はソルビトールなどの糖；ナトリウムなどの塩を形成するカウンターイオン；金属錯体（例．Ｚｎ-タンパク質複合体）；及び／又はTWEEN（登録商標）、PLURONICS（登録商標）又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤を含んでいてもよい。本明細書では、薬学的に許容される賦形剤についてさらに説明する。

抗αｖβ８インテグリン抗体及びその組成物は、薬剤の有効性を増強及び／又は補完するのに役に立つ追加の治療薬（例．免疫チェックポイント分子の阻害剤）を含む、他の薬剤と組み合わせて使用することもできる。

本明細書は、本明細書に記載された抗体をコードするポリヌクレオチドを含む組成物であって、それが医薬組成物である場合を含む組成物も供する。ある態様では、前記組成物は、本明細書に記載された抗体をコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターを含む。ある態様では、組成物は、配列番号１又は４で示されるポリヌクレオチドのいずれか又は両者を含む。ある態様では、組成物は、配列番号１８３又は４で示されるポリヌクレオチドのいずれか又は両者を含む。ある態様では、組成物は、配列番号１８５又は１８９で示されるポリヌクレオチドのいずれか又は両者を含む。ある態様では、組成物は、配列番号１８５又は１９１で示されるポリヌクレオチドのいずれか又は両者を含む。

別の側面では、前記ポリヌクレオチドは、本明細書に記載された抗体のＶＨ、ＶＬ、及び／又はＶＨ及びＶＬの両者をコードすることができる。すなわち、前記組成物は、本明細書に記載された抗体又はその抗原結合断片をコードする単一又は複数のポリヌクレオチドを含む。

本明細書に記載された医薬化合物は、１つ以上の薬学的に許容される塩を含んでいてもよい。そのような塩の例には、酸付加塩及び塩基付加塩がある。酸付加塩は、塩酸、硝酸、リン酸、硫酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、リン酸などの非毒性無機酸に由来するもの、及び、脂肪族モノ及びジカルボン酸、フェニル置換アルカン酸、ヒドロキシアルカン酸、芳香族酸、脂肪族及び芳香族スルホン酸などの非毒性有機酸に由来するものを含む。塩基付加塩は、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウムなどのアルカリ土類金属に由来するもの、N,N'-ジベンジルエチレンジアミン、N-メチルグルカミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、プロカインなどの非毒性有機アミンに由来するものを含む。

本明細書に記載された医薬組成物は、薬学的に許容される抗酸化剤も含んでいてもよい。薬学的に許容される抗酸化剤の例には、(1) アスコルビン酸、システイン塩酸塩、硫酸水素ナトリウム、二亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなどの水溶性抗酸化剤；(2) パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、α-トコフェロールなどの油溶性抗酸化剤；及び(3) クエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸などの金属キレート剤がある。

本明細書に記載された医薬組成物で使用してもよい適切な水性及び非水性の担体の例には、水、エタノール、ポリオール（グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等）及びそれらの適切な混合物、オリーブ油などの植物油、並びにオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステルがある。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティング材料の使用により、分散液の場合には必要な粒子サイズを維持することにより、そして、界面活性剤の使用により、維持することができる。

これらの組成物は、保存剤、湿潤剤、乳化剤及び分散剤などの補助剤も含んでいてもよい。滅菌操作、及び、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸などさまざまな抗菌剤・抗真菌剤を配合することにより、微生物の存在を確実に防止してもよい。糖、塩化ナトリウムなどの等張剤を組成物に配合することも望ましいかもしれない。さらに、モノステアリン酸アルミニウムやゼラチンなどの吸収を遅らせる薬剤の配合により、注射可能な剤形の持続的吸収を行ってもよい。

医薬組成物は、通常、製造及び保管の際に無菌かつ安定でなければならない。組成物は、溶液、マイクロエマルジョン、リポソーム、又は高濃度の薬物に適した他の規則正しい構造として処方することができる。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例．グリセロール、プロピレングリコール及び液体のポリエチレングリコールなど）及びそれらの適切な混合物を含む溶媒又は分散媒体であってもよい。適切な流動性は、例えば、レシチンなどによるコーティングにより、分散の場合は必要な粒子サイズを維持することにより、及び界面活性剤の使用により、維持することができる。多くの場合、糖、多価アルコール（例．マンニトール、ソルビトール）又は塩化ナトリウムといった等張剤を組成物に含めることが適切である。吸収を遅らせる薬剤、例えば、モノステアリン酸塩及びゼラチンを組成物に配合することにより、注射可能な組成物を持続的に吸収させることができる。

滅菌注射液は、必要な量の活性化合物と適切な溶媒を上述した成分の１つ又は組合せと共に混合し、必要に応じて滅菌精密濾過することによって調製することができる。

一般に、分散液は、基本的な分散媒と上述した必要な他の成分を含む滅菌ビヒクルを、活性化合物と混合することによって調製する。滅菌注射液を調製するための滅菌粉末の場合、好ましい調製方法は、事前に滅菌濾過した溶液から有効成分と所望の追加成分の粉末を得ることができる真空乾燥及び冷凍乾燥（凍結乾燥）である。

本発明の医薬組成物は、眼への投与に適した剤形で調製し、包装し、又は販売してもよい。そのような製剤は、例えば、水性又は油性の液体担体中に有効成分の０．１％～１．０％（w/w）の溶液又は懸濁液を含む点眼薬の形態であってもよい。そのような点眼薬は、緩衝剤、塩、又は１つ以上の本明細書に記載の追加成分をさらに含んでいてもよい。眼に投与可能な他の有用な製剤には、微結晶形態の有効成分又はリポソーム調製物中の有効成分を含むものがある。

本明細書において、「追加成分」は、以下の１つ以上が含まれるが、これらに限定されるものではない：賦形剤；界面活性剤；分散剤；不活性希釈剤；造粒及び崩壊剤；結合剤；潤滑剤；甘味料；香料；着色剤；保存剤；ゼラチンなどの生理学的に分解可能な組成物；水性のビヒクル及び溶媒；油性のビヒクル及び溶剤；懸濁剤；分散剤又は湿潤剤；乳化剤、粘滑剤；緩衝剤；塩；増粘剤；フィラー；乳化剤；抗酸化剤；抗生物質；抗真菌剤；安定剤；及び薬学的に許容されるポリマー又は疎水性材料。本明細書に記載された医薬組成物に含まれてもよい他の「追加成分」は、当該技術分野において公知で、例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, Genaro, ed., Mack Publishing Co., Easton, PA (1985)に記載されており、これは本明細書に組み込まれる。

ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、１ｍＬの緩衝化水溶液に１００ｍｇの抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を含むバイアルとして製剤化される。

ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、約０．１ｍｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬ、約２ｍｇ／ｍＬ、約３ｍｇ／ｍＬ、約４ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ、又はある態様では約１０ｍｇ／ｍＬ、又はある態様では約１５ｍｇ／ｍＬ、又はある態様では約２０ｍｇ／ｍＬ、又はある態様では約２５ｍｇ／ｍＬ、又はある態様では約５０ｍｇ／ｍＬ、又はある態様では約１００ｍｇ／ｍＬの抗体及び５％デキストロースを含む滅菌水溶液として静脈投与用製剤の形態で投与される。ある態様では、静脈投与用製剤は、５％デキストロースに０．１ｍｇ／ｍＬ～１５ｍｇ／ｍＬの抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を含む滅菌水溶液である。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、酢酸ナトリウム、ポリソルベート８０及び塩化ナトリウムを含むｐＨが約５～６の組成物として製剤化される。ある態様では、静脈投与用製剤は、５又は１０ｍｇ／ｍＬの抗体、２０ｍＭの酢酸ナトリウム、０．２ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０及び１４０ｍＭの塩化ナトリウムを含むｐＨ５．５の滅菌水溶液である。さらに、抗体又はその抗原結合断片を含む溶液は、他の多くの化合物、ヒスチジン、マンニトール、スクロース、トレハロース、グリシン、ポリ（エチレン）グリコール、ＥＤＴＡ、メチオニン、及びその組合せ、並びに関連する技術分野において公知の他の多くの化合物を含むことができる。

ある態様では、本発明の医薬組成物は以下の成分を含む：ｐＨ５．８で、５０ｍｇ／ｍＬの本発明の抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片、２０ｍＭのヒスチジン、８．５％のスクロース、０．０２％のポリソルベート８０、０．００５％のＥＤＴＡ；別の態様では、本発明の医薬組成物は、以下の成分を含む：ｐＨ５．８で、１００ｍｇ／ｍＬの本発明の抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片、１０ｍＭのヒスチジン、５％のスクロース、０．０１％のポリソルベート８０。この組成物は、液体製剤又は凍結乾燥粉末として提供してもよい。前記粉末を元の体積で再構成する場合、組成物は同じ組成となる。あるいは、粉末は半分の体積で再構成してもよく、その場合、組成物は、ｐＨ５．８で、１００ｍｇの本発明の抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片、２０ｍＭのヒスチジン、１０％のスクロース、及び０．０２％のポリソルベート８０を含む。

ある態様では、抗体製剤の用量の一部を静脈内に急速に投与し、残りを点滴で投与する。例えば、０．０１ｍｇ／ｋｇの抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を静脈内に急速に投与し、残りの用量を静脈内注射によって投与してもよい。所定用量の抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を、例えば、１時間半から２時間から５時間かけて投与してもよい。

例えば小分子である治療薬に関し、当該技術分野においてよく知られているように、それは、生理学的に許容されるエステル、又は、生理学的に許容される陽イオン若しくは陰イオンとの組合せなどの生理学的に許容される塩の形態で医薬組成物中に存在することができる。

本明細書に記載された医薬組成物の製剤は、薬学の分野において公知の方法、又は今後開発される方法で製造してもよい。一般に、そのような調製方法は、有効成分を担体又は１つ以上の他の成分と組合せ、次いで、必要であるか、又は望まれる場合、組成物を所望の単回又は複数回の投与単位に成形又は包装する工程を含む。

ある態様では、本明細書に記載された組成物は、エンドトキシン及び／又は関連する発熱性物質を実質的に含まない、パイロジェンフリーの製剤である。エンドトキシンは、微生物の内部に閉じ込められ、微生物が分解し、又は死ぬときに放出される毒素を含む。発熱性物質は、細菌や他の微生物の外膜に由来する発熱性の熱安定性物質（糖タンパク質）を含む。これらの物質は、人間に投与した場合、発熱、低血圧及びショックを引き起こす可能性がある。潜在的な有害作用のため、静脈内に投与する医薬の溶液から、たとえ少量であっても、エンドトキシンを除去することは有利である。食品医薬品局（「ＦＤＡ」）は、静脈内に投与する薬物では、上限を、１時間以内に投与する体重１ｋｇ、１用量当たり５エンドトキシン単位（ＥＵ）と設定した（米国薬局方、Pharmacopeial Forum 26 (1):223 (2000)）。治療用タンパク質の投与量が体重１ｋｇ当たり数百又は数千ｍｇである場合、たとえ微量のエンドトキシンであっても、除去することは有利である。ある態様では、組成物中のエンドトキシン及び発熱性物質の量は、１０ＥＵ／ｍｇ未満、５ＥＵ／ｍｇ未満、１ＥＵ／ｍｇ未満、０．１ＥＵ／ｍｇ未満、０．０１ＥＵ／ｍｇ未満又は０．００１ＥＵ／ｍｇ未満である。別の態様では、組成物中のエンドトキシン及び発熱性物質の量は、約１０ＥＵ／ｍｇ、約５ＥＵ／ｍｇ未満、約１ＥＵ／ｍｇ未満、約０．１ＥＵ／ｍｇ未満、約０．０１ＥＵ／ｍｇ未満又は約０．００１ＥＵ／ｍｇ未満である。

ある態様では、本明細書では、経口で、非経口で、筋肉内に、鼻腔内に、膣に、直腸に、舌に、舌下に、頬側に、頬内に、静脈内に、皮膚に、皮下に、又は経皮で組成物を投与することを含む。

別の態様では、本明細書では、外科手術、化学療法、ホルモン療法、生物学的療法、免疫療法又は放射線療法などの他の治療法と組み合わせて組成物を投与することも含む。

ＶＩ． 投与方法
本明細書に記載された抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を含む医薬又は滅菌組成物を製造するために、抗体を薬学的に許容される担体又は賦形剤と混合する。治療薬及び診断薬の製剤は、生理学的に許容される担体、賦形剤又は安定剤を、例えば、凍結乾燥粉末、スラリー、水溶液、ローション又は懸濁液の形態で混合することによって製造することができる（例えばHardman, et al. (2001) Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, McGraw-Hill, New York, N.Y.；Gennaro (2000) Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Lippincott, Williams, and Wilkins, New York, N. Y.；Avis, et al. (eds.) (1993) Pharmaceutical Dosage Forms: Parenteral Medications, Marcel Dekker, NY；Lieberman, et al. (eds.) (1990) Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Marcel Dekker, NY；Lieberman, et al. (eds.) (1990) Pharmaceutical Dosage Forms: Disperse Systems, Marcel Dekker, NY；Weiner and Kotkoskie (2000) Excipient Toxicity and Safety, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y.を参照）。

治療薬の投与計画の選択は、薬剤の血清又は組織中の回転率、症状の程度、薬剤の免疫原性及び生体中の標的細胞へのアクセスし易さを含むいくつかの要因に依存する。ある態様では、投与計画は、許容可能なの副作用の程度と一致して、患者に送達される治療薬の量を最大化する。したがって、送達される生物学的製剤の量は、薬剤と治療対象の状態に部分的に依存する。適切な用量の抗体、サイトカイン及び低分子を選択するためのガイダンスが利用できる（例えばWawrzynczak, 1996, Antibody Therapy, Bios Scientific Pub. Ltd, Oxfordshire, UK; Kresina (ed.), 1991, Monoclonal Antibodies, Cytokines and Arthritis, Marcel Dekker, New York, N.Y.；Bach (ed.),1993, Monoclonal Antibodies and Peptide Therapy in Autoimmune Diseases, Marcel Dekker, New York, N. Y.；Baert, et al., 2003, New Engl. J. Med. 348:601-608；Milgrom, et al., 1999, New Engl. J. Med. 341:1966-1973；Slamon, et al., 2001, New Engl. J. Med. 344:783-792；Beniaminovitz, et al., 2000, New Engl. J. Med. 342:613-619；Ghosh, et al., 2003, New Engl. J. Med. 348:24-32; Lipsky, et al., 2000, New Engl. J. Med. 343:1594-1602を参照）。

適切な投与量は、例えば、治療に影響を与える又は治療に影響を与えると予測されることが当該技術分野において知られている又は疑われる、パラメーター又は因子を使用して臨床医によって決定される。一般に、投与量は、最適用量よりも幾分少ない量で開始し、その後、副作用と比較して所望の効果又は最適な効果が達成されるまで、少しずつ増加させる。重要な診断手段には、炎症のような症状の診断又は産生される炎症性サイトカイン量の測定が含まれる。

本明細書に記載された医薬組成物中の有効成分の実際の投与量は、患者に毒性を与えることなく、特定の患者、組成物及び投与方法で所望の治療を達成する量となるように変化させることができる。投与量は、使用する組成物又はそのエステル、塩若しくはアミドの活性、投与経路、投与のタイミング、使用する化合物の排泄率、治療期間、組成物と組み合わせて使用する他の薬物、化合物及び／又は材料、治療を受けている患者の年齢、性別、体重、症状、一般的な健康状態及び以前の病歴、並びに医学の分野で周知の要因など、さまざまな薬物動態に関する要因に依存する。

本明細書に記載された抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を含む組成物は、連続注入により、又は、例えば、１日間隔、１週間間隔若しくは週に１～７回の間隔で投与することができる。静脈内に、皮下に、局所に、経口で、経鼻で、直腸に、筋肉内に、脳内に又は吸入によって投与してもよい。特定の投与方法は、重大な副作用を回避する最大用量又は頻度を含む。一週当たりの総投与量は、少なくとも０．０５μｇ／ｋｇ体重、少なくとも０．２μｇ／ｋｇ、少なくとも０．５μｇ／ｋｇ、少なくとも１μｇ／ｋｇ、少なくとも１０μｇ／ｋｇ、少なくとも１００μｇ／ｋｇ、少なくとも０．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２５ｍｇ／ｋｇ、又は少なくとも５０ｍｇ／ｋｇであってもよい（例えばYang, et al., 2003, New Engl. J. Med. 349:427-434；Herold, et al., 2002, New Engl. J. Med. 346:1692-1698；Liu, et al., 1999, J. Neurol. Neurosurg. Psych. 67:451-456；Portielji, et al., 2003, Cancer. Immunol. Immunother. 52: 133-144参照）。投与量は少なくとも１５μｇ、少なくとも２０μｇ、少なくとも２５μｇ、少なくとも３０μｇ、少なくとも３５μｇ、少なくとも４０μｇ、少なくとも４５μｇ、少なくとも５０μｇ、少なくとも５５μｇ、少なくとも６０μｇ、少なくとも６５μｇ、少なくとも７０μｇ、少なくとも７５μｇ、少なくとも８０μｇ、少なくとも８５μｇ、少なくとも９０μｇ、少なくとも９５μｇ、又は少なくとも１００μｇであってもよい。対象に投与する回数は、少なくとも１回、２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回、１１回若しくは１２回、又はそれ以上であってもよい。

本明細書に記載された抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片では、患者に投与する投与量は、患者の体重１ｋｇ当たり０．０００１ｍｇ～１００ｍｇであってもよい。投与量は、患者の体重１ｋｇ当たり０．０００１ｍｇ～２０ｍｇ、０．０００１ｍｇ～１０ｍｇ、０．０００１ｍｇ～５ｍｇ、０．０００１～２ｍｇ、０．０００１～１ｍｇ、０．０００１ｍｇ～０．７５ｍｇ、０．０００１ｍｇ～０．５ｍｇ、０．０００１ｍｇ～０．２５ｍｇ、０．０００１～０．１５ｍｇ、０．０００１～０．１０ｍｇ、０．００１～０．５ｍｇ、０．０１～０．２５ｍｇ又は０．０１～０．１０ｍｇであってもよい。ある態様では、必要とする患者に投与する抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片の量は、患者の体重１ｋｇ当たり約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ、約２ｍｇ／ｋｇ又は約３．０ｍｇ／ｋｇである。ある態様では、必要とする患者に投与する抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片の量は、患者の体重１ｋｇ当たり約０．４ｍｇ／ｋｇ、約４ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ又は約１００ｍｇ／ｋｇである。

ある態様では、必要とする患者に投与する抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片の１４日毎の量は、患者の体重１ｋｇ当たり約１ｍｇ～約１２ｍｇである。ある態様では、必要とする患者に投与する抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片の１４日毎の量は、患者の体重１ｋｇ当たり約２ｍｇである。ある態様では、必要とする患者に投与する抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片の１４日毎の量は、患者の体重１ｋｇ当たり約７ｍｇである。

ある態様では、必要とする患者に投与する抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片の２８日毎の量は、患者の体重１ｋｇ当たり約１ｍｇ～約２０ｍｇである。ある態様では、必要とする患者に投与する抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片の２８日毎の量は、患者の体重１ｋｇ当たり約４ｍｇである。ある態様では、必要とする患者に投与する抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片の２８日毎の量は、患者の体重１ｋｇ当たり約１２ｍｇである。

抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片の投与量は、キログラム（ｋｇ）での患者の体重にｍｇ／ｋｇ単位の投与量を乗じて計算することができる。本明細書に記載された抗体の投与量は、患者の体重１ｋｇ当たり１５０μｇ以下、１２５μｇ以下、１００μｇ以下、９５μｇ以下、９０μｇ以下、８５μｇ以下、８０μｇ以下、７５μｇ以下、７０μｇ以下、６５μｇ以下、６０μｇ以下、５５μｇ以下、５０μｇ以下、４５μｇ以下、４０μｇ以下、３５μｇ以下、３０μｇ以下、２５μｇ以下、２０μｇ以下、１５μｇ以下、１０μｇ以下、５μｇ以下、２．５μｇ以下、２μｇ以下、１．５μｇ以下、１μｇ以下、０．５μｇ以下又は０．１μｇ以下であってもよい。

本明細書に記載された抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片の単位用量は、０．１ｍｇ～２００ｍｇ、０．１ｍｇ～１７５ｍｇ、０．１ｍｇ～１５０ｍｇ、０．１ｍｇ～１２５ｍｇ、０．１ｍｇ～１００ｍｇ，０．１ｍｇ～７５ｍｇ、０．１ｍｇ～５０ｍｇ、０．１ｍｇ～３０ｍｇ、０．１ｍｇ～２０ｍｇ、０．１ｍｇ～１５ｍｇ、０．１ｍｇ～１２ｍｇ、０．１ｍｇ～１０ｍｇ、０．１ｍｇ～８ｍｇ、０．１ｍｇ～７ｍｇ、０．１ｍｇ～５ｍｇ、０．１～２．５ｍｇ、０．２５ｍｇ～２０ｍｇ、０．２５～１５ｍｇ、０．２５～１２ｍｇ、０．２～１０ｍｇ、０．２５～８ｍｇ、０．２５ｍｇ～７ｍｇ、０．２５ｍｇ～５ｍｇ、０．５ｍｇ～２．５ｍｇ、１ｍｇ～２０ｍｇ、１ｍｇ～１５ｍｇ、１ｍｇ～１２ｍｇ、１ｍｇ～１０ｍｇ、１ｍｇ～８ｍｇ、１ｍｇ～７ｍｇ、１ｍｇ～５ｍｇ又は１ｍｇ～２．５ｍｇであってもよい。ある態様では、本明細書に記載された抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、約１００ｍｇ、約３００ｍｇ、約５００ｍｇ、約６００ｍｇ、約８００ｍｇ、約１２００ｍｇ、約１４００ｍｇ又は約１６００ｍｇの単位用量で投与される。

本明細書に記載された抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片の投与量は、対象において少なくとも０．１μｇ／ｍＬ、少なくとも０．５μｇ／ｍＬ、少なくとも１μｇ／ｍＬ、少なくとも２μｇ／ｍＬ、少なくとも５μｇ／ｍＬ、少なくとも６μｇ／ｍＬ、少なくとも１０μｇ／ｍＬ、少なくとも１５μｇ／ｍＬ、少なくとも２０μｇ／ｍＬ、少なくとも２５μｇ／ｍＬ、少なくとも５０μｇ／ｍＬ、少なくとも１００μｇ／ｍＬ、少なくとも１２５μｇ／ｍＬ、少なくとも１５０μｇ／ｍＬ、少なくとも１７５μｇ／ｍＬ、少なくとも２００μｇ／ｍＬ、少なくとも２２５μｇ／ｍＬ、少なくとも２５０μｇ／ｍＬ、少なくとも２７５μｇ／ｍＬ、少なくとも３００μｇ／ｍＬ、少なくとも３２５μｇ／ｍＬ、少なくとも３５０μｇ／ｍＬ、少なくとも３７５μｇ／ｍＬ又は少なくとも４００μｇ／ｍＬの血清力価を達成することができる。あるいは、本明細書に記載された抗体の投与量は、対象において少なくとも０．１μｇ／ｍＬ、少なくとも０．５μｇ／ｍＬ、少なくとも１μｇ／ｍＬ，少なくとも２μｇ／ｍＬ、少なくとも５μｇ／ｍＬ、少なくとも６μｇ／ｍＬ、少なくとも１０μｇ／ｍＬ、少なくとも１５μｇ／ｍＬ、少なくとも２０μｇ／ｍＬ、少なくとも２５μｇ／ｍＬ、少なくとも５０μｇ／ｍＬ、少なくとも１００μｇ／ｍＬ、少なくとも１２５μｇ／ｍＬ、少なくとも１５０μｇ／ｍＬ、少なくとも１７５μｇ／ｍＬ、少なくとも２００μｇ／ｍＬ、少なくとも２２５μｇ／ｍＬ、少なくとも２５０μｇ／ｍＬ、少なくとも２７５μｇ／ｍＬ、少なくとも３００μｇ／ｍＬ、少なくとも３２５μｇ／ｍＬ、少なくとも３５０μｇ／ｍＬ、少なくとも３７５μｇ／ｍＬ又は少なくとも４００μｇ／ｍの血清力価を達成することができる。

本明細書に記載された抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片の投与は繰り返してもよく、投与は少なくとも１日、２日、３日、５日、１０日、１５日、３０日、４５日、２ヶ月、７５日、３ヶ月又は少なくとも６か月間隔であってもよい。

特定の患者の有効量は、患者の症状、患者の健康状態、投与方法及び投与量、並びに副作用の程度などの要因によって変化してもよい（例えば、Maynard, et al., 1996, A Handbook of SOPs for Good Clinical Practice, Interpharm Press, Boca Raton, FIa.；Dent, 2001, Good Laboratory and Good Clinical Practice, Urch Publ, London, UK参照）。

投与経路は、例えば、局所若しくは皮膚への適用、静脈内、腹腔内、脳内、筋肉内、眼内、動脈内、脳脊髄内、病変内への注射若しくは注入、又は持続放出系若しくはインプラントであってもよい（例えばSidman et al., 1983, Biopolymers 22:547-556；Langer, et al., 1981, J. Biomed. Mater. Res. 15: 167-277；Langer, 1982, Chem. Tech. 12:98-105；Epstein, et al., 1985, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82:3688-3692；Hwang, et al., 1980, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4030-4034；米国特許第6,350466号及び第6,316,024号参照）。ある態様では、本明細書に記載された抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は静脈内に投与される。ある態様では、本明細書に記載された抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は皮下に投与される。

必要に応じて、組成物は、可溶化剤、及び、注射部位の痛みを和らげるためのリドカインなどの局所麻酔薬を含んでいてもよい。さらに、例えば、吸入器又はネブライザーを使用し、エアロゾル化剤による製剤化によって、肺に投与することもできる。例えば、米国特許第6,019,968号、第5,985,320号、第5,985,309号、第5,934,272号、第5,874,064号、第5,855,913号、第5,290,540号及び第4,880,078号、並びに国際公開第92/19244号、第97/32572号、第97/44013号、第98/31346号並びに第99/66903号を参照。これらの特許は、その全体が本明細書に組み込まれる。ある態様では、本明細書に記載された抗αｖβ８抗体若しくはその抗原結合断片又は組成物は、Alkermes AIR（登録商標）（Alkermes, Inc.、Cambridge、Mass.）肺薬物送達技術を使用して投与する。

本明細書に記載された組成物は、当該技術分野において公知の方法により、１つ以上の投与経路で投与してもよい。当業者であれば理解するように、投与経路及び／又は投与方法は、望ましい結果に応じて異なる。本明細書に記載された抗体の選択された投与経路は、静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内、皮下、脊髄内、又は、例えば注射若しくは注入による他の非経口の投与経路を含む。非経口の投与は、経腸投与及び局所投与以外の投与であってもよく、通常は注射によるもので、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、被膜内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、クチクラ下、関節内、被膜下、くも膜下、脊髄内、硬膜外及び胸骨内への注射及び注入が含まれるが、これらに限定されるものではない。あるいは、本明細書に記載された組成物は、例えば、鼻腔内、経口、膣、直腸、舌下又は局所への、局所、表皮又は粘膜投与経路などの非経口経路により投与することができる。

本明細書に記載された抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を制御放出系又は持続放出系として投与する場合、これを達成するためにポンプを使用するしてもよい（Langer、上掲； Sefton, 1987, CRC Crit. Ref. Biomed. Eng. 14:20; Buchwald et al., 1980, Surgery 88:501；Saudek et al., 1989, N. Engl. J. Med. 321:514参照）。

本明細書に記載された治療薬の制御放出又は持続放出を達成するために、ポリマー材料を使用することができる（例えば、Medical Applications of Controlled Release, Langer and Wise (eds.), CRC Pres., Boca Raton, FL. (1974)；Controlled Drug Bioavailability, Drug Product Design and Performance, Smolen and Ball (eds.), Wiley, New York (1984)；Ranger and Peppas, 1983, J., Macromol. ScL Rev. Macromol. Chem. 23:61参照；Levy et al., 1985, Science 11 225:190；During et al., 19Z9, Ann. Neurol. 25:351；Howard et al., 1989, J. Neurosurg. 71: 105も参照）；米国特許第5,679,377号、第5,916,597号、第5,912,015号、第5,989,463号、第5,128,326号；国際公開第99/15154号及び第99/20253号。持続放出製剤で使用するポリマーには、ポリ(2-ヒドロキシエチルメタクリレート)、ポリ(メチルメタクリレート)、ポリ(アクリル酸)、ポリ(エチレン-co-ビニルアセテート)、ポリ(メタクリル酸)、ポリグリコリド（ＰＬＧ）、ポリ無水物、ポリ(N-ビニルピロリドン)、ポリビニルアルコール、ポリアクリルアミド、ポリエチレン グリコール、ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリラクチド-co-グリコリド（ＰＬＧＡ）及びポリオルトエステルが例示されるが、これらに限定されるものではない。ある態様では、持続放出製剤において使用するポリマーは、不活性で、浸出する不純物がなく、保管時に安定で、無菌で、生分解性である。制御放出系又は持続放出系は、予防又は治療標的の近くに配置することができるので、全身投与を行う際の投与量に対して、僅かの量の投与ですむ。（例えば、Goodson, in Medical Applications of Controlled Release, 上掲, vol. 2, pp. 115-138 (1984)を参照）。

制御放出系は、Langer, 1990, Science 249:1527-1533の総説に記載されている。１つ以上の本明細書に記載された抗体又はその複合体を含む持続放出製剤を製造するために、当業者に公知の技術を使用することができる。例えば米国特許第4,526,938号、国際公開第91/05548号、第96/20698号、Ning et al., 1996, “Intratumoral Radioimmunotheraphy of a Human Colon Cancer Xenograft Using a Sustained-Release Gel,” Radiotherapy and Oncology 59:179-189, Song et al., 1995, “Antibody Mediated Lung Targeting of Long-Circulating Emulsions,” PDA Journal of Pharmaceutical Science and Technology 50:372-397, Cleek et al., 1997, “Biodegradable Polymeric Carriers for a bFGF Antibody for Cardiovascular Application,” Pro. Ml. Symp. Control. Rel. Bioact. Mater. 24:853-854及びLam et al., 1997, “Microencapsulation of Recombinant Humanized Monoclonal Antibody for Local Delivery,” Proc. Ml. Symp. Control Rel. Bioact. Mater. 24:759-160参照。これらの特許は、その全体が本明細書に組み込まれる。

本明細書に記載された抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を局所投与する場合、軟膏、クリーム、経皮パッチ、ローション、ゲル、シャンプー、スプレー、エアロゾル、溶液、乳濁液又は当業者に周知の他の剤形として製剤化することができる。例えばRemington's Pharmaceutical Sciences and Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, 19th ed., Mack Pub. Co., Easton, Pa. (1995)参照。噴霧が不可能な局所投与製剤の場合、通常、局所投与可能で、場合によっては水よりも大きい動的粘度の、担体又は１つ以上の賦形剤を含む粘稠から半固体又は固体の形態が用いられる。例えば、浸透圧などのさまざまな特性に影響を与えるために、必要に応じて滅菌され、又は補助剤（例．保存剤、安定剤、湿潤剤、緩衝液又は塩）と混合された溶液、懸濁液、乳濁液、クリーム、軟膏、粉末、リニメント、油薬（salves）などが、適切な製剤には含まれるが、これらに限定されるものではない。他の適切な局所剤形には、有効成分が、場合によっては、固体又は液体の不活性担体と組み合わせて、加圧された揮発性物質（例：フレオンなどの噴射剤）と混合され、又はスクイズボトルに詰められた、噴霧可能なエアゾールが含まれる。必要に応じて、医薬組成物及び剤形に保湿剤又は湿潤剤を配合することもできる。そのような追加の成分の例は、当該技術分野において周知である。

抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を含む組成物を鼻腔内に投与する場合、エアゾール、スプレー、ミスト又は液滴として製剤化することができる。特に、本発明の予防薬又は治療薬は、適切な噴射剤（例．ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素又は他の適切なガス）を用い、加圧パック又はネブライザーからのエアゾールのスプレーとして簡便に送達することができる。加圧エアロゾルの場合、投与用量は、一定量を送達するためのバルブを用いることによって決定することができる。吸入器又は散布器で使用するための（例えば、ゼラチンで構成される）カプセル及びカートリッジは、化合物の粉末混合物と、ラクトース又はデンプンなどの適切な粉末とを含むように製剤化することができる。

例えば、免疫チェックポイント分子、サイトカイン、ステロイド、化学療法剤、抗生物質のような追加の治療薬の同時投与、又は放射線療法との同時治療の方法は、当該技術分野において周知である（例えばHardman, et al. (eds.) (2001) Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th ed., McGraw-Hill, New York, N.Y.；Poole and Peterson (eds.) (2001) Pharmacotherapeutics for Advanced Practice: A Practical Approach, Lippincott, Williams and Wilkins, Phila., Pa.；Chabner and Longo (eds.) (2001) Cancer Chemotherapy and Biotherapy, Lippincott, Williams and Wilkins, Phila., Pa.参照）。

有効量の治療薬は、症状を少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも約３０％、少なくとも４０％又は少なくとも５０％減少させるかもしれない。

本明細書に記載された抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片と組み合わせて投与することができる治療法（例．予防薬又は治療薬）と、上記抗体の投与の間隔は、５分未満、３０分未満、１時間、約１時間、約１～約２時間、約２時間～約３時間、約３時間～約４時間、約４時間～約５時間、約５時間～約６時間、約６時間～約７時間、約７時間～約８時間、約８時間～約９時間、約９時間～約１０時間、約１０時間～約１１時間、約１１時間～約１２時間、約１２時間～１８時間、１８時間～２４時間、２４時間～３６時間、３６時間～４８時間、４８時間～５２時間、５２時間～６０時間、６０時間～７２時間、７２時間～８４時間、８４時間～９６時間又は９６時間～１２０時間であってもよい。２つ以上の治療法は、１回の通院で行ってもよい。

抗体分子を投与する方法は当該技術分野において公知で、以下に記載されている。用いる分子の適切な投与量は、対象の年齢及び体重、並びに用いる特定の薬物に依存する。抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片の投与量及び治療レジメンは、当業者が決定することができる。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、約１～３０ｍｇ／ｋｇ、例えば、約５～２５ｍｇ／ｋｇ、約１０～２０ｍｇ／ｋｇ、約１０～約１４ｍｇ／ｋｇ、約５～９ｍｇ／ｋｇ、約７ｍｇ／ｋｇ又は約１２ｍｇ／ｋｇの用量を注射（例．皮下又は静脈内）で投与する。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、約１ｍｇ／ｋｇ、約２ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ、約４ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約６ｍｇ／ｋｇ、約７ｍｇ／ｋｇ、約８ｍｇ／ｋｇ、約９ｍｇ／ｋｇ又は１０ｍｇ／ｋｇ、約１１ｍｇ／ｋｇ、約１２ｍｇ／ｋｇ、約１３ｍｇ／ｋｇ、約１４ｍｇ／ｋｇ、約１５ｍｇ／ｋｇ、約１６ｍｇ／ｋｇ、約１７ｍｇ／ｋｇ、約１８ｍｇ／ｋｇ、約１９ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ又は約４０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、約１～５ｍｇ／ｋｇ、約５～１０ｍｇ／ｋｇ又は約１０～１５ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、約０．５～２、２～４、２～５、２～６、２～７、２～８、２～９、２～１０、２～１５、５～１５又は５～２０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。

投薬のスケジュールは、例えば、週に１回から、２、３、４、５又は６週間に１回まで変化することができる。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、約１０～２０ｍｇ／ｋｇ（例．約７ｍｇ／ｋｇ又は約１２ｍｇ／ｋｇ）の用量で隔週（例．２週ごと又は隔週）投与する。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、約１０～２０ｍｇ／ｋｇ（例．約７ｍｇ／ｋｇ又は約１２ｍｇ／ｋｇ）の用量で月に１回（例．４週ごと）投与する。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体若しくはその抗原結合断片又はこれを含む医薬組成物は静脈内に投与する。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体若しくはその抗原結合断片又はこれを含む医薬組成物は皮下に投与する。

ある態様では、本明細書に記載された抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、隔週で静脈内又は皮下に投与する。ある態様では、本明細書に記載された抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片は、約１００ｍｇ、約３００ｍｇ、約８００ｍｇ、約１２００ｍｇ又は約１６００ｍｇの単位用量を隔週で静脈内又は皮下に投与する。ある態様では、本明細書に記載された抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片が、約１００ｍｇ、約３００ｍｇ、約８００ｍｇ、約１２００ｍｇ又は約１６００ｍｇの単位用量で対象の静脈内に隔週で投与され、抗ＰＤ-１阻害剤が４週間ごとに投与される。ある態様では、抗ＰＤ-１阻害剤は３００ｍｇの単位用量で皮下投与される抗体である。ある態様では、抗ＰＤ-１阻害剤は国際公開第2016/092419号に記載されている抗ＰＤ-１抗体（例．mAb7、別名：RN888、PF-06801591又はササンリマブ）である。

ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体若しくはその抗原結合断片又はこれを含む医薬組成物を、およそ、週二回、週に１回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、５週間に１回、６週間に１回、７週間に１回、８週間に１回、９週間に１回、１０週間に１回、月に２回、月に１回、２か月に１回、３か月に１回、４か月に１回、５か月に１回、半年に一回、７か月に１回、８か月に１回、９か月に１回、１０か月に１回、１１か月に１回、又は１２か月に１回、投与する。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体若しくはその抗原結合断片又はこれを含む医薬組成物は、２週間ごとに、例えば最大１２回（例．最大で１０、８、６、５、４又は３回）投与する。ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体若しくはその抗原結合断片又はこれを含む医薬組成物は、４週間ごとに、例えば最大１２回（例．最大で１０、８、６、５、４又は３回）投与する。

ある態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片の各投与は、５～１０ｍｇ／ｋｇ（例．５、６、７、８、９又は１０ｍｇ／ｋｇ）の抗体又はその抗原結合断片を含み、例えば、各投与は、約７ｍｇ／ｋｇを含む。

ある態様では、抗体又はその抗原結合断片は、４週間ごとに、例えば最大６回（例．最大で６、５、４、３、２又は１回）投与する。

別の態様では、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片の各投与は、１０～１５ｍｇ／ｋｇ（例．１０、１１、１２、１３、１４又は１５ｍｇ／ｋｇ）の抗体又はその抗原結合断片を含み、例えば、各投与は、約１２ｍｇ／ｋｇを含む。

本明細書に記載された抗αｖβ８抗体又はその抗原結合断片の投与と他の治療法は周期的に行ってもよい。周期的な治療は、一定期間の第１の治療（例．最初の予防薬又は治療薬）、続いて一定期間の第２の治療（例．第２の予防薬又は治療薬）、続いて場合によっては、一定期間の第３の治療例．予防薬又は治療薬）などを含み、治療の１つに対する耐性の発生を低減し、治療の１つによる副作用を回避若しくは低減し、及び／又は治療の有効性を改善するために、この一連の治療、すなわち、サイクルを繰り返す。

ある態様では、本明細書に記載された抗αｖβ８抗体又はその抗原結合断片は、in vivoでの適切な分布を確実にするために処方することができる。例えば、血液脳関門（ＢＢＢ）は、多くの親水性の高い化合物を通過させない。本明細書に記載された治療用化合物が（必要に応じて）ＢＢＢを通過することを確保するために、例えば、リポソーム中に処方することができる。リポソームの製造方法について、例えば米国特許第4,522,811号、第5,374,548号及び第5,399,331号を参照。リポソームは、特定の細胞又は器官に選択的に輸送するための１つ以上の部位を含んでいてもよく、これは薬物送達の標的化を増強する（例えば、V.V. Ranade, 1989, J. Clin. Pharmacol. 29:685参照）。代表的な標的化部位は、葉酸又はビオチン（例えば米国特許第5,416,016号参照）；マンノシド（Umezawa et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 153: 1038）；抗体（P. G. Bloeman et al., 1995, FEBS Lett. 357: 140；M. Owais et al., 1995, Antimicrob. Agents Chemother. 39: 180）; サーファクタントタンパク質Ａ受容体（Briscoe et al. (1995) Am. J. Physiol. 1233: 134）；ｐｌ２０（Schreier et al. (1994) J. Biol. Chem. 269:9090）を含む；K. Keinanen; M.L. Laukkanen, 1994, FEBS Lett. 346:123；Killion; Fidler, 1994; Immunomethods 4:273も参照。

本明細書は、本発明の抗αｖβ８抗体又はその抗原結合断片を含む医薬組成物を、それを必要とする対象に、単独で又は他の治療法と組み合わせて投与するプロトコルを提供する。本発明の併用療法における薬剤（例．予防薬又は治療薬）は、対象に同時に又は連続して投与することができる。本発明の併用療法における薬剤（例．予防薬又は治療薬）は、周期的に投与することができる。

本発明の併用療法における薬剤（例．予防薬又は治療薬）は、対象に同時に投与することができる。用語「同時」は、正確に同時に治療を投与することに限定されず、むしろ、本明細書に記載された抗体又はそのコンジュゲートが他の治療法と一緒に作用して、他の方法で投与された場合よりも増加した利益を提供できるように、本明細書に記載された抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を含む医薬組成物が、連続して、かつ時間間隔内で対象に投与されることを意味する。例えば、各治療薬は、対象に同時に、又は任意の順序で連続して投与することができる；しかし、同時に投与しない場合、所望の治療的又は予防的効果を得るために、十分に近い時間内に投与するべきである。各治療薬は、適切な形態及び適切な経路で、対象に別々に投与することができる。さまざまな態様において、薬剤（例．予防薬又は治療薬）は、対象に１５分未満で、３０分未満で、１時間未満の間隔で、約１時間間隔で、約１～約２時間間隔で、約２～約３時間間隔で、約３～約４時間間隔で、約４～約５時間間隔で、約５～約６時間間隔で、約６～約７時間間隔で、約７～約８時間間隔で、約８～約９時間間隔で、約９～約１０時間間隔で、約１０～約１１時間間隔で、約１１～約１２時間間隔で、２４時間間隔で、４８時間間隔で、７２時間間隔で、又は１週間間隔で投与する。別の態様では、２つ以上の治療薬（例．予防薬又は治療薬）は１回の診察訪問中に投与する。

併用療法の予防薬又は治療薬は、同じ医薬組成物で対象に投与することができる。又は、併用療法の予防薬又は治療薬は、別々の医薬組成物で対象に同時に投与することができる。予防薬又は治療薬は、同じ又は異なる投与経路で対象に投与してもよい。

ＶＩＩ． キット
本明細書は、本発明の抗体のいずれか又は全てを含むキットも提供する。本明細書に記載されたキットは、本明細書に記載の抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を含む１つ以上の容器、及び本明細書に記載の方法に従って使用するための説明書を含む。一般に、この説明書は、上述した治療的処置のための抗体の投与の説明を含む。ある態様では、キットは単回投与単位を製造するために提供されている。ある態様では、キットは乾燥したタンパク質を含有する第１の容器と水性製剤を含有する第２の容器を含むことができる。ある態様では、単室及び多室のプレフィルドシリンジ（例．液体注射器及びリオシリンジ）のようなアプリケーターを含むキットが含まれる。

抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片の使用に関する説明書は、一般に、当該治療のための投薬量、投薬スケジュール及び投与経路についての情報を含む。容器は、一回用量用、大口用（例．複数回用量用）又は半回用量用であってもよい。本明細書に記載されたキットの説明書は、通常、ラベルに書かれているか、添付されている（例。キットに含まれている紙のシート）が、コンピューターで読み取る形式（例：磁気媒体又は光学媒体に記録された説明書）も許容される。

本明細書のキットは、適切な包装の中にある。適切な包装には、バイアル、ボトル、ジャー、可撓性の包装（例．密封されたマイラーバック又はビニール袋）などが含まれるが、これらに限定されるものではない。吸入器、経鼻投与装置（例．噴霧器）などの特定の装置又はミニポンプのような注入装置と組み合わせて使用するための包装物も考えられる。キットは滅菌アクセスポートを有していてもよい。（例えば、容器は、皮下注射用の針で貫通可能なストッパーを有している、静脈内投与溶液用のバッグ又はバイアルであってもよい。）容器は滅菌アクセスポートを有していてもよい。（例えば、容器は、皮下注射用の針で貫通可能なストッパーを有している、静脈内投与溶液用のバッグ又はバイアルであってもよい。）組成物中の少なくとも１つの活性剤は、本明細書に記載された抗αｖβ８インテグリン抗体である。容器は、さらに、本明細書に記載の追加の治療薬を含んでいてもよい。

キットは、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、スパルタリズマブ、ピジリズマブ、チスレリズマブ、セミプリマブ、ササンリマブ（mAb7、RN888、PD-06801591）、AMP-224、AMP-514などであるが、これらには限定されない少なくとも１つの抗ＰＤ-１抗体をさらに含んでいてもよい。

キットは、任意に、緩衝液や解釈情報などの要素を含んでいてもよい。通常、キットは、容器と、容器上又は容器内のラベル又は添付文書を含む。

本明細書は、本発明の抗体又はその抗原結合断片のいずれか又は全てを含む診断用キットも提供する。診断用キットは、例えば、サンプル中のαｖβ８インテグリンを検出するのに有用である。ある態様では、診断用キットを使用して、αｖβ８インテグリンが媒介する疾患、障害若しくは状態、又はαｖβ８インテグリンが欠損する疾患、障害若しくは状態を発症する可能性がある潜在的な疾患、障害又は状態を有する個体を特定することができる。ある態様では、診断用キットを使用して、αｖβ８インテグリンが媒介する疾患、又はαｖβ８インテグリンが欠損する疾患、障害若しくは状態が疑われる個体におけるαｖβ８インテグリンの存在及び／又は量を検出することができる。

本明細書に記載された診断用キットは、本明細書に記載された抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片を含む１つ以上の容器、及び本明細書に記載の方法に従って使用するための説明書を含む。一般に、この説明書は、αｖβ８インテグリンが媒介する疾患、又はαｖβ８インテグリンが欠損する疾患、障害若しくは状態の危険性がある、又は疑いがある個体におけるαｖβ８インテグリンの存在を検出するための抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片の使用についての説明を含む。ある態様では、代表的な診断用キットは、例えば、抗αｖβ８インテグリン抗体又はその抗原結合断片、陰性対照、陽性対照などの試薬、及びキットの使用説明書を含むものとすることができる。

ＶＩＩＩ． 等価物
これまでの説明及び以下の実施例は、本発明の特定の実施の態様を詳述し、本発明者らが考えるベストモードを説明する。しかし、どれほど詳しく文章で説明したとしても、本発明はさまざまな方法で実施される可能性があり、また、本発明は、特許請求の範囲及びその等価物に従って解釈されるべきであることが理解されるであろう。

さまざまな用途、方法、キット及び組成物に言及して本発明を説明してきたが、本明細書における開示及び特許請求の範囲の記載から逸脱することなく、さまざまな変更や修正を行うことができることが理解されるであろう。以下の実施例は、本明細書における開示をよりよく説明するために示すものであり、本明細書における開示の範囲を限定することを意図するものではない。本明細書では代表的な実施の形態について説明してきたが、当業者は、これらの代表的な実施の形態のさまざまな変形及び修正が過度の実験なしに可能であることを容易に理解するであろう。そのような全ての変形及び修正は、本発明の範囲内である。

特許、特許出願、論文、教科書などを含む本明細書で引用した全ての参考文献、及びそこで引用された参考文献は、それらがまだ組み込まれていない範囲で、その全体が本明細書に組み込まれる。定義された用語、用語の使用法、説明された技術などを含むがこれらに限定されない事項が、１つ以上の組み込まれた文献及び類似の資料とこの明細書で異なるか矛盾する場合、この明細書を優先する。

ＩＸ． 一般的な技術
本発明は、変化する可能性のある特定の合成方法に限定されないことを理解されたい。本明細書において特に定義しない限り、本発明で使用する科学的及び技術的な用語は、当業者によって一般的に理解される意味を有する。さらに、文脈上特段の必要がない限り、単数形は複数形を含み、複数形は単数形を含む。一般に、本明細書に記載された細胞及び組織の培養、分子生物学、免疫学、微生物学、遺伝学並びにタンパク質及び核酸の化学及びハイブリダイゼーションに関する命名法と技術は、当該技術分野において周知で、一般的に使用されているものである。

本発明の実施は、他に示されない限り、当該技術分野の範囲内の分子生物学（組換え技術を含む）、微生物学、細胞生物学、生化学及び免疫学の従来の技術で行う。そのような技術は、Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition (Sambrook et al., 1989) Cold Spring Harbor Press；Oligonucleotide Synthesis (M.J. Gait, ed., 1984)；Methods in Molecular Biology, Humana Press；Cell Biology: A Laboratory Notebook (J.E. Cellis, ed., 1998) Academic Press；Animal Cell Culture (R.I. Freshney, ed., 1987)；Introduction to Cell and Tissue Culture (J.P. Mather and P.E. Roberts, 1998) Plenum Press；Cell and Tissue Culture: Laboratory Procedures (A. Doyle, J.B. Griffiths, and D.G. Newell, eds., 1993-1998) J. Wiley and Sons；Methods in Enzymology (Academic Press, Inc.)；Handbook of Experimental Immunology (D.M. Weir and C.C. Blackwell, eds.)；Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells (J.M. Miller and M.P. Calos, eds., 1987)；Current Protocols in Molecular Biology (F.M. Ausubel et al., eds., 1987)；PCR: The Polymerase Chain Reaction, (Mullis et al., eds., 1994)；Current Protocols in Immunology (J.E. Coligan et al., eds., 1991)；Sambrook and Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd. ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY (2001)；Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, NY (2002)；Harlow and Lane Using Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY (1998)；Coligan et al., Short Protocols in Protein Science, John Wiley & Sons, NY (2003)；Short Protocols in Molecular Biology (Wiley and Sons, 1999)；Immunobiology (C.A. Janeway and P. Travers, 1997)；Antibodies (P. Finch, 1997)；Antibodies: a practical approach (D. Catty., ed., IRL Press, 1988-1989)；Monoclonal antibodies: a practical approach (P. Shepherd and C. Dean, eds., Oxford University Press, 2000)；Using antibodies: a laboratory manual (E. Harlow and D. Lane (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1999)；The Antibodies (M. Zanetti and J.D. Capra, eds., Harwood Academic Publishers, 1995)などの文献において十分に説明されている。

酵素反応及び精製技術は、当該技術分野において一般的に行われているように、又は本明細書に記載されているように、製造業者の指示に従って行われる。本明細書に記載された分析化学、生化学、免疫学、分子生物学、合成有機化学及び医薬品化に関する命名法、並びに実験手順及び技術は、当該技術分野において周知で、一般的に使用されているものである。化学合成、化学分析、医薬品調製、処方、送達及び患者の処置では標準的な技術を使用する。

Ｘ． 生物学的寄託
本発明の代表的な材料は、2018年2月13日に、アメリカンタイプカルチャーコレクション（ＡＴＣＣ）（10801 University Boulevard, Manassas, Va. 20110-2209, USA）に寄託した。ＡＴＣＣ受託番号がPTA-124917であるベクターADWA11 VH05-02 -VHは、抗体ADWA11 2.4（別名：VH05-2_VK01(2.4)及びADWA11 5-2 2.4）の重鎖可変領域をコードするＤＮＡインサートを含む。ＡＴＣＣ受託番号がPTA-124918であるベクターADWA11 VK2.4 -VLは、抗体ADWA11 2.4（別名：VH05-2_VK01(2.4)及びADWA11 5-2 2.4）の重鎖可変領域をコードするＤＮＡインサートを含む。

寄託は、特許手続上の微生物の寄託の国際的承認に関するブダペスト条約及び規制（ブダペスト条約）の規定に基づいて行った。これにより、寄託日から３０年間、寄託物の生存が保証される。寄託物は、ブダペスト条約の条件に基づき、関連する米国特許の発行、又は米国特許出願若しくは外国特許出願の公開のいずれか早い時点から、寄託物の子孫の公衆に対する永続的かつ無制限の利用を保証し、米国特許法第１２２条及び同条に基づく規則（米国特許規則第１．１４、特に886 OG638）に従って米国特許商標庁長官がその権利を有すると決定した子孫の利用可能性を保証するファイザー社とＡＴＣＣの間の合意に従って、ＡＴＣＣが利用可能とする。

本願の所有者は、寄託材料を適切な条件で培養した場合に、死滅した、失われた、又は破壊された場合、当該材料は通知に応じて直ちに別のものと交換することに同意した。寄託材料の利用可能性は、特許法に従って政府の権限で付与された権利に違反して発明を実施するためのライセンスとして解釈されるべきではない。

以下の実験の例を参照することにより、本発明をさらに詳細に説明する。これらの実施例は、説明のみを目的として記載しており、特に明記しない限り、本発明を限定することを意図するものではない。したがって、本発明は、決して、以下の例に限定されると解釈すべきではなく、むしろ、本明細書の教示の結果として明らかになる全ての変形を含むと解釈すべきである。

実施例１ 抗αｖβ８インテグリン マウスハイブリドーマ抗体の製造
ヒトαｖβ８インテグリンに対するマウスハイブリドーマ抗体を、米国特許第9,969,804号に概括的に記載された方法によって製造した。なお、この米国特許は、その全体が本明細書に組み込まれる。

簡潔に説明すると、出生後の生存を可能とするために非近交系（outbred）ＣＤ１マウスと交配したインテグリンβ８ノックアウトマウスを、許容可能な力価の抗αｖβ８抗体を得るまで、２週間ごとにマウス１匹あたり５０μｇの組換えヒトαｖβ８インテグリン（R&D Systems、4135-AV-050）で免疫した。次に、免疫したマウスの血清を固相イムノアッセイによってスクリーニングし、ハイブリドーマを得るためのマウスを同定した。

さらに、インテグリンαｖβ８、αｖβ３又はαｖβ６を発現するＳＷ４８０細胞を陰性対象として使用するフローサイトメトリーにより、得られたハイブリドーマが産生する抗体の特徴を明らかにした。Ｓｗ４８０細胞は、通常、αｖβ５を除くαｖインテグリンを発現しない。マウスハイブリドーマ抗体であるADWA-11（単に、ADWA11ともいう）を特定し、この抗体の特異性を確認するために、標識したADWA-11又はαｖβ５（Alula）、αｖβ３（Axum-2）若しくはαｖβ６（10D5）に対する抗体を使用して、各細胞株のフローサイトメトリーを実施した（Su et al., Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 36:377-386, 2007; Su et al., Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 185: 58-66, 2012; Huang et al., J. Cell Sci. 111 (Pt 15): 2189-2195）。

１μｇ／ｍｌのＴＧＦβ１のＬＡＰをコーティングしたシャーレ上でインテグリンαｖβ８を発現するＵ２５１細胞を使用して、細胞接着アッセイも行った。（Kueng et al., Anal. Biochem. 182: 16-19, 1989）。ホタルルシフェラーゼの発現を駆動するＰＡＩ－１プロモーターのＴＧＦβ感受性部位を発現するミンク肺上皮細胞を利用するＴＭＬＣルシフェラーゼアッセイによって、ＴＧＦβ活性の阻害を測定した。（Abe et al., Anal. Biochem. 216:276-284, 1994）。本明細書に記載されているように一般的に行われるハイブリドーマのスクリーニングに基づいて、さらなる検討のために、マウスハイブリドーマ抗体ADWA-11を選択した。

実施例２ 抗αｖβ８インテグリン マウスハイブリドーマ抗体のヒト化
米国特許第9,969,804号明細書に開示され、例えば、本明細書の配列番号２０～３３及び７１～７６に示されるアミノ酸配列を有するマウスハイブリドーマ抗体ADWA-11について、マウスのＣＤＲ配列を、軽鎖の生殖系列フレームワークIGKV2-28、IGKV2-30、IGKV4-1、IGKV1-39（本明細書ではＤＰＫ９ともいう）及びIGKV3-11、並びに重鎖の生殖系列フレームワークIGHV3-7（本明細書ではＤＰ５４ともいう）、IGHV3-23、IGHV3-30、IGHV1-69及びIGHV3-48（例えばＩＭＧＴデータベースを参照）を含む表１に示されたさまざまなヒト生殖系列フレームワークに移植することによってヒト化した。

本明細書中で「ヒト化ADWA-11」というヒト化抗体は、IGKV1-39（例．ＤＰＫ９）軽鎖の生殖系列フレームワーク及びIGHV3-7（例．ＤＰ５４）重鎖の生殖系列フレームワークが移植された、配列番号２０～３３及び７１～７６で示されるアミノ酸配列中の６つのマウスＣＤＲ配列を含む。以下の表１．１及び１．２に示すように、他の生殖系列フレームワークも試みた。

マウスハイブリドーマ抗体ADWA-11（ハイブリドーマmADWA-11、mADWA11という）の重鎖可変領域と軽鎖可変領域のアミノ酸配列を比較するアラインメント、ヒト化ADWA-11抗体（huADWA11-2.4）並びにIGHV3-07及びIGKV1-39生殖系列の配列を、図１Ａ及び１Ｂに示す。下線が引かれたアミノ酸残基はKabatによるＣＤＲ配列で、太字のアミノ酸残基はChothiaによるＣＤＲ配列である。

実施例３ ヒト化抗αｖβ８インテグリン抗体へのフレームワーク変異の導入
マウスハイブリドーマ抗体ADWA11と比較して、ヒト化ADWA-11抗体のαｖβ８インテグリンに対する結合親和性を改善するために、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）に表２に示すフレームワーク置換を有するいくつかのバリアントを製造した。この実施例の重鎖残基のナンバリングは、配列番号１２７で示されるアミノ酸配列による。この実施例の軽鎖残基のナンバリングは、配列番号１２８で示されるアミノ酸配列による。

表２に示したフレームワーク置換のさまざまなセットを組み合わせることにより、ヒト化ADWA11抗体のバリアントを製造した。ＶＨとしてADWA11 VH01、ADWA11 VH02、ADWA11 VH03、ADWA11 VH04又はADWA11 VH05、ＶＬとしてADWA11 VK01又はADWA11 VK02の組合せを有する抗体を得た。

本明細書に概括的に記載されているように、ヒト化ADWA11抗体バリアントであるADWA11 VH01/VK01、ADWA11 VH02/VK01、ADWA11 VH03/VK01、ADWA11 VH03/VK02及びADWA11 VH05/VK01を製造し、検討した。

ADWA11 VH01/VK01と命名されたヒト化ADWA11抗体バリアントは、ＶＨにＴ２８Ｎ及びＦ２９Ｉ置換（配列番号８８）を有し、ＶＬにＬ４６Ｒ置換（配列番号４７）を有した。

ヒト化ADWA11抗体バリアントのADWA11 VH02/VK01は、ＶＨにＴ２８Ｎ、Ｆ２９Ｉ及びＲ７２Ａ置換（配列番号８９）を有し、ＶＬにＬ４６Ｒ置換（配列番号４７）を有した。

ヒト化ADWA11抗体バリアントのADWA11 VH03/VK01は、ＶＨにＴ２８Ｎ、Ｆ２９Ｉ、Ｒ７２Ａ、Ａ４９Ｇ及びＬ７９Ａ置換（配列番号９０）を有し、ＶＬにＬ４６Ｒ置換（配列番号４７）を有した。

ヒト化ADWA11抗体バリアントのADWA11 VH03/VK02は、ＶＨにＴ２８Ｎ、Ｆ２９Ｉ、Ｒ７２Ａ、Ａ４９Ｇ及びＬ７９Ａ置換（配列番号９０）を有し、ＶＬにＬ４６Ｒ及びＹ３６Ｆ置換（配列番号９２）を有した。

ヒト化ADWA11抗体バリアントのADWA11 VH05/VK01は、ＶＨにＴ２８Ｎ、Ｆ２９Ｉ、Ｒ７２Ａ、Ａ４９Ｇ、Ｌ７９Ａ、Ｎ７４Ｔ及びＡ７５Ｓ置換（配列番号３９）を有し、ＶＬにＬ４６Ｒ置換（配列番号４７）を有した。

αｖβ８インテグリンに対するADWA11 VH01/VK01、ADWA11 VH02/VK01、ADWA11 VH03/VK01、ADWA11 VH03/VK02及びADWA11 VH05/VK01のＦａｂの結合親和性を測定し、表３に示す。さらに、各抗体のＴＧＦ-β活性化を阻害するＩＣ５０値も測定し、表３に示す。

表３に示すように、ADWA11 VH03/VK01、ADWA11 VH03/VK02及びADWA11 VH05/VK01は、いずれも、αｖβ８インテグリンに対する結合親和性が、マウスハイブリドーマ抗体ADWA-11と比較して改善された。ADWA11 VH03/VK01（ＧＢＴ）及びADWA11 VH05/VK01は、マウスハイブリドーマ抗体ADWA-11のＫＤである５３６ｐＭの少なくとも５分の１の、１００ｐＭよりも小さなＫＤでαｖβ８インテグリンに結合した。また、ADWA11 VH03/VK01及びADWA11 VH05/VK01は、ＴＧＦ-βトランス活性化の阻害において、マウスハイブリドーマ抗体ADWA-11よりも低いＩＣ５０値を示した。

さらに、本明細書に概括的に記載されているように、ADWA11 VH05/VK01は、マウスハイブリドーマ抗体ADWA-11の活性、特異性及び交差反応性も保有していることが確認された。したがって、この実施例は、マウスハイブリドーマ抗体ADWA11と比較して、ヒト化ADWA-11抗体のαｖβ８インテグリンに対する結合親和性が改善したことを証明する。

実施例４ ヒト化ADWA11抗体のバリアントの最適化
表４に示された単一のアミノ酸置換を行った場合の、ヒト化抗体ADWA11 VH05/VK01の安定性を改善する能力及び／又は免疫原性を低下させる能力を検討した。この実施例の重鎖残基は、ADWA11 VH05（配列番号３９）のナンバリングによる。この実施例の軽鎖残基は、ADWA11 VK01（配列番号４７）のナンバリングによる。

重鎖の可変領域にＫ３０Ａ、Ｎ５５Ｑ、Ｎ５７Ｑ、Ｄ６１Ｅ又はＰ６２Ａを含み、軽鎖の可変領域にＬ３０Ｓ、Ｍ５６Ａ、Ｎ５８Ｓ、Ｍ９４Ｑ、Ｌ９７Ｙ又はＱ１０５Ｇを含む単一の置換は、元の抗体の活性を保持することが見いだされた（図４Ａ～４Ｂ）。さらに、表５に示されたさまざまな単一アミノ酸置換の組合せも検討し、Ｎ５５Ｑ及びＤ６１Ｅの二重変異、又はＮ５５Ｑ、Ｄ６１Ｅ及びＦ６４Ｖの三重変異を含む重鎖配列は、元の抗体の活性を保持することが見いだされた（図４Ｃ）。

より具体的には、ADWA11 2.1（2.1）、ADWA11 2.2（2.2）、ADWA11 2.3（2.3）及びADWA11 2.4（2.4）という名称の、表５に示されたアミノ酸置換の組合せを含むADWA11 VH05/VK01バリアントを製造した。ADWA11 VH05-2/VK01バリアントであるADWA11 2.1及びADWA11 2.4は、より好ましい発現特性及び活性を有することが示された。この実施例は、単一のアミノ酸置換がヒト化抗体ADWA11 VH05/VK01の安定性を改善し及び／又は免疫原性を低下したことを証明する。

実施例５ エフェクター機能がない抗αｖβ８抗体の製造
本発明の軽鎖可変領域及び重鎖可変領域を、表１に列挙されるように、免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）分子にサブクローニングすることにより、Ｆｃγ受容体との結合が低下し、エフェクター機能（例．抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）活性及び／又は補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）活性）が低下した抗αｖβ８インテグリン抗体を製造した。

エフェクター機能がないマウス抗体を製造するために、米国特許出願公開第2009/0155256号に概説されているように、マウスハイブリドーマ抗体ADWA-11の可変領域を、Ｅ２３３Ｐ、Ｅ３１８Ａ、Ｋ３２０Ａ及びＲ３２２Ａの１つのアミノ酸置換を有するマウスＩｇＧ１ Ｆｃ骨格にサブクローニングした。本明細書では、この抗体はADWA-11_4mut及びmIgG_4mutという。ADWA-11_4mutのマウスａｖＢ８への結合は、Ｃ８-Ｓマウス星状細胞（ＡＴＣＣ）を用いて行い、また、ＴＧＦＢ活性化の遮断は、Ｃ８－Ｓ細胞を用い、共培養ＴＭＬＣルシフェラーゼアッセイで測定した。

エフェクター機能がないヒト抗体を製造するために、ヒンジ領域が野生型ヒンジ領域のアミノ酸配列ＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰ（配列番号１２５）の代わりに、アミノ酸配列ＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＡＰ（配列番号１２６）を含むように、ヒト化抗体ADWA11 VH05VK01の可変領域を、ヒンジ領域にＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＧ２３７Ａの１つのアミノ酸置換を含むヒトＩｇＧ１ Ｆｃ骨格（例．本明細書に記載）にサブクローニングした。本明細書では、エフェクター機能がないこのヒトモノクローナル抗体は、hIgG_VH05VK01という。

hIgG_VH05VK01の軽鎖（配列番号１２３）及び重鎖（配列番号１２４）のさまざまな特徴を以下の配列で特定する。

上記ヒト化ADWA11 VH05VK01の軽鎖配列及び重鎖配列において、下線部はＤＲの配列であり；Ｎ-結合型グリコシル化コンセンサス配列部位は、重鎖のアミノ酸残基Ｎ２９５、Ｓ２９６及びＴ２９７であり；潜在的な切断部位は、重鎖のアミノ酸残基Ｄ５２及びＰ５３であり；潜在的な脱アミド化部位は、軽鎖のアミノ酸残基Ｎ３３、Ｇ３４、Ｎ３５及びＴ３６、並びに重鎖のアミノ酸残基Ｎ５７、Ｔ５８、Ｎ７７、Ｓ７８、Ｎ８４及びＳ８５であり；潜在的な異性化部位は、重鎖のアミノ酸残基Ｄ９０及びＴ９１であり；潜在的なメチオニン酸化部位は、軽鎖のアミノ酸残基Ｍ４及びＭ５６、並びに重鎖のＭ３４、Ｍ１０２及びＭ４２６であり；トリプルアラニン変異は、重鎖のアミノ酸残基Ａ２３２、Ａ２３３及びＡ２３５であり；ＣＤＲの外側の非ヒト残基は、軽鎖のアミノ酸残基Ｒ５１、並びに重鎖のＧ４９、Ａ７２、Ｔ７４、Ｓ７５及びＡ７９である。本実施例の重鎖残基及び軽鎖残基のナンバリングは、それぞれ、配列番号１２４及び配列番号１２３で示されるアミノ酸配列による。

実施例６ ＥＬＩＳＡによる抗αｖβ８インテグリン抗体の検討
ＥＬＩＳＡ法
ストレプトアビジン被覆ＥＬＩＳＡプレートに、ビオチン化ヒトαｖβ８インテグリン（濃度０．６μｇ／ｍｌのものを０μｌ）を捕捉した。ブロッキングし洗浄した後、抗体（例．マウス、キメラ又はヒト化抗体）を、各ウェルにさまざまな希釈率で添加し、室温で１時間インキュベートした。洗浄後、検出抗体である抗ヒトＩｇＧ-ＨＲＰを添加し、室温で１時間インキュベートした。洗浄後、酵素の基質（ＴＭＢ）を添加し、１０分間発色させた。０．１６Ｍ硫酸を添加して酵素反応を停止し、最終シグナル強度を４５０ｎｍで測定した。

結果
ヒトαｖβ８（ｈαｖβ８）インテグリンに結合することが確認されたマウスハイブリドーマ抗体を、ヒトαｖβ３インテグリン及びヒトαｖβ６インテグリンとの結合についてカウンタースクリーニングし、ｈαｖβ８に特異的に結合するマウス抗体を選択した。マウスハイブリドーマ抗体ADWA11はｈαｖβ８インテグリンに特異的で、インテグリンｈαｖβ３又はｈαｖβ６とは結合しなかった（図２）。ヒト化ADWA11抗体ADWA11 VH05/VK01は、マウスハイブリドーマ抗体ADWA11と比較して、αｖβ８インテグリンに対する親和性が実質的に改善した（図３Ａ～３Ｂ）。

表４及び５に示される単一の又は組み合わせたアミノ酸置換を有するADWA11 VH05/VK01である抗αｖβ８インテグリンＦａｂのｈαｖβ８インテグリンへの結合についても、ＥＬＩＳＡにより検討した（図４Ａ～４Ｃ）。図４Ａに示すように、重鎖可変領域にＫ３０Ａ、Ｎ５５Ｑ、Ｎ５７Ｑ、Ｄ６１Ｅ、Ｐ６２Ａ又はＫ６３Ａの１つの一アミノ酸置換を有するＦａｂは、ｈαｖβ８に対する結合親和性を保持した。図４Ｂに示すように、軽鎖可変領域にＹ５５Ａ、Ａ６０Ｑ、Ｆ１０１Ｌ又はＦ１０１Ｗの１つのアミノ酸置換を有するＦａｂは、元の抗体と比較して、ｈαｖβ８に対する結合親和性が低下した。図４Ｃに示すように、表５に示されるアミノ酸置換の組合せを有するＦａｂは、ｈαｖβ８に対する結合親和性を保持した。

この実施例は、ヒト化ADWA11抗体であるADWA11 VH05/VK01が、マウスハイブリドーマ抗体ADWA11と比較してαｖβ８インテグリンに対して実質的に改善された親和性を示し、１つのアミノ酸置換を有するいくつかのＦａｂがｈαｖβ８への結合を保持したことを証明する。

実施例７ Biacore（登録商標）による抗αｖβ８インテグリン抗体の検討
方法
ストレプトアビジンをコーティングしたBiacore（登録商標）チップ（GE Healthcare Life Sciences）にビオチン化した組換えαｖβ８インテグリンを捕捉し、さまざまなＦａｂ濃度で、Ｆａｂ断片の結合応答と時間の関係を測定した。カイネティクスカーブにフィッティングさせバックグラウンドを差し引いたBiacore（登録商標）センサーグラムを得た。

より具体的には、組換えαｖβ８インテグリン（例．R&D Systems）を、一級アミンを介してビオチン標識し、Biacore（登録商標）T200（GE Healthcare Life Sciences）を使用してセンサーチップＳＡに固定化した。Ｆａｂ結合実験を、０．０１Ｍ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、０．１５Ｍ ＮａＣｌ、１～２ｍＭ ＭｇＣｌ_２及び０．００５％(v/v) surfactant P20（ＨＢＳ-Ｐ）緩衝液を用い、流速３０μｌ／ｍｉｎ、２５℃で行った。さまざまなＦａｂの濃度で、会合を５～１０分、解離をさらに１５～２０分間観察した。各注入後、チップ表面をＩｇＧ溶出緩衝液（Thermo Fisher Scientific）で再生した。Biacore（登録商標）T200評価ソフトウェアを使用して、全てのデータを分析した。データは、緩衝液のみを注入し、インテグリンが捕捉されていないストレプトアビジンを有するフローセルを使用してデュアルバックグラウンドを差し引いた。少なくとも３回の実験で速度定数を得、その平均を報告した。

結果
さまざまな種のαｖβ８インテグリンに対する抗体の結合を検討した。マウスハイブリドーマADWA-11 Fab及びヒト化ADWA-11 VH05-2/VK01(2.4) Fabは、他の種のαｖβ８インテグリンと交差反応することが見いだされた。マウスハイブリドーマADWA-11 Fabは、ヒトαｖβ８インテグリン、カニクイザルαｖβ８インテグリン及びマウスαｖβ８インテグリンと交差反応した。ヒト化ADWA-11 VH05-2/VK01(2.4) Fabは、ヒトαｖβ８インテグリン、カニクイザルαｖβ８インテグリン及びマウスαｖβ８インテグリンと交差反応した。さらに、これらの抗体のインテグリンｈαｖβ３又はｈαｖβ６に結合する能力について検討した。これらの抗体はｈαｖβ８に特異的で、図５に示すように、Biacoreアッセイではインテグリンｈαｖβ３又はｈαｖβ６には結合しなかった。

表６に示した親和性の比較は、マウスハイブリドーマADWA-11 Fabとヒトαｖβ８インテグリン及びマウスαｖβ８インテグリンの結合ＫＤと比較して、ヒト化ADWA-11 Fabとヒトαｖβ８インテグリン及びマウスαｖβ８インテグリンの結合ＫＤが低いことを示す。より具体的には、マウスハイブリドーマADWA-11 FabのそれぞれのＫＤと比較して、ヒト化ADWA-11 Fabがヒトαｖβ８インテグリンに結合するＫＤは約２．５分の１で、マウスαｖβ８インテグリンに結合するＫＤは約３．５分の１であった。これらのデータは、ヒト化抗αｖβ８抗体の、マウスハイブリドーマ抗体に対する親和性の全体的かつ実質的な改善を示す（図６Ａ～６Ｂ及び表６）。

本明細書においてADWA-11 VH05-2/VK01(2.4)及びADWA11 5-2 2.4ともいうFab ADWA11 2.4、及び元のマウスＩｇＧの単量体ＫＤをするために、本明細書に概括的に記載されているように、組換えのヒト、カニクイザル、マウス及びラットαｖβ８を、Biacoreチップに固定化し、Ｆａｂのｋａ及びｋｄを測定した（表６）。ADWA11 2.4は、ヒト、カニクイザル、マウス及びラットのαｖβ８に対して同等の親和性を示し、ＫＤは２００ｐＭ未満であったが、ｋｄが非常に遅いため、ＫＤを正確に求めることができなかった。元のマウスＩｇＧは、ヒト、カニクイザル及びマウスαｖβ８に対して同等の親和性ＫＤ（４８９～５３６ｐＭ）を示した（ラットは試験していない）（図６Ｃ）。

追加のBiacore実験では、ADWA11 2.4の推定ＫＤは、ヒトαｖβ８及びカニクイザルαｖβ８では１００ｐＭ未満、マウスαｖβ８では７０．８±１９．９ｐＭ（平均±標準偏差）であった。

ADWA11 2.4の特異性を検討するために、組換えヒトαｖβ６及びαｖβ３をBiacoreチップに固定化し、ADWA11 2.4の元のマウスｍＡｂ及びヒト化ｍＡｂバリアントの結合を測定した。元のハイブリドーマｍＡｂ及びヒト化ｍＡｂはαｖβ３又はαｖβ６に結合しなかったが、別のBIAcore実験ではαｖβ８への結合が認められた。汎インテグリンαＶ抗体を使用して、Biacoreチップへのαｖβ３又はαｖβ６組換えタンパク質の固定化を示した。この実施例は、αｖβ８に対するヒト化抗体の特異性も証明する。

実施例８ 細胞結合アッセイによる抗αｖβ８インテグリン抗体の検討
方法
ｈｉＦＢＳを１０％添加したＭＥＭ中で培養したヒト神経膠芽腫Ｕ２５１（Sigma）又はＣ８-Ｓ（ATCC）細胞を使用して、細胞結合実験を行った。７０～９０％コンフルエントに増殖した細胞を０．０５％トリプシンで剥離し、２％ＢＳＡを含むＰＢＳで２回洗浄した。

ヒトαｖβ３、αｖβ５、αｖβ６、αｖβ８を過剰に発現するＨＥＫ２９３-Ｆ細胞を用いる細胞結合実験では、全長ヒトインテグリンβ３（受託番号NP_000203.2）、ヒトインテグリンβ５（受託番号NP_002204.2）、ヒトインテグリンβ６（受託番号NP_000879.2）又はヒトインテグリンβ８（受託番号NP_002205.1）を一時的に発現するＨＥＫ２９３-Ｆ細胞を、独自のベクター及びベンダーが提供するプロトコルを使用して製造した。４日後に細胞を回収し、インテグリンの発現を分析した。インテグリンαｖβ３、αｖβ５、αｖβ６、αｖβ８の発現を確認するために、100,000個の細胞を、LIVE/DEAD fixable cell stain（Invitrogen）を１：２０００で添加した市販の又は直接結合した独自の抗体中で３０分間インキュベートし、生細胞を分離した。細胞を５分間３００ｇでスピンダウンした。次いで、細胞を洗浄緩衝液（ＰＢＳ＋０．２％ＢＳＡ）で２回洗浄して過剰な非結合抗体を除去し、BD biosciencesのFortessaフローサイトメーターで分析した。

生細胞結合プロトコル： 100,000個の細胞を抗αｖβ８抗体又はヒトIgG1_3mutアイソタイプ抗体の段階希釈とともに氷上で３～４時間インキュベートした。細胞を５分間３００ｇでスピンダウンした。次いで、細胞を洗浄緩衝液（ＰＢＳ＋０．２％ＢＳＡ）で３回洗浄して過剰な非結合抗体を除去した。徹底的に洗浄した後、細胞をLIVE/DEAD fixable cell stain（Invitrogen）を１：１０００で添加したＦａｂ’２抗ヒトＦｃ-ＰＥ（Invitrogen）又はヤギＦａｂ’２抗マウス-ＡＰＣ（Jackson Labs）とインキュベートし、生細胞を分離した。全内容物を氷上で３０分間インキュベートした。洗浄後、FlowJo分析ソフトウェアを使用して、染色された細胞をBD biosciencesのFortessaフローサイトメーター（生細胞用にゲート）で分析した。各種抗体について、さまざまな抗体濃度における平均蛍光強度（ＭＦＩ）をプロットした。

固定化細胞結合プロトコル： 一例として、ＭＥＭ又は１０％ｈｉＦＢＳ中で培養したヒト神経膠芽腫Ｕ２５１（Sigma）を使用して、細胞結合実験を行った。７０～９０％コンフルエントに増殖した細胞を０．０５％トリプシンで剥離し、２％ＢＳＡを含むＰＢＳで２回洗浄した。Ｕ２５１（25,000細胞）をLIVE/DEAD fixable cell stain（Invitrogen）と１：２０００でインキュベートし、生細胞を分離した。細胞を５分間３００ｇでスピンダウンし、洗浄緩衝液（ＰＢＳ＋０．２％ＢＳＡ）で洗浄した後、２％パラホルムアルデヒドにより室温で１０分間固定した。固定化した細胞を洗浄緩衝液で２回洗浄した後、抗αｖβ８抗体の段階希釈を３７℃で１時間添加した。細胞を洗浄緩衝液で３回洗浄し、過剰な非結合抗体を除去した。徹底的に洗浄した後、Ｆａｂ’２抗ヒトＦｃ-ＰＥ（Invitrogen）又は抗ヒトκ軽鎖-ＡＰＣ（Invitrogen）検出抗体を１：１０００希釈で細胞に添加し、氷上で３０分間インキュベートした。洗浄後、FlowJo分析ソフトウェアを使用して、染色された細胞をBD biosciencesのFortessaフローサイトメーター（生細胞用にゲート）で分析した。各種抗体について、さまざまな抗体濃度における平均蛍光強度（ＭＦＩ）をプロットした。

結果
重鎖可変領域におけるＦ６４Ｖ置換、又は軽鎖可変領域におけるＬ３０Ｓ、Ｍ９４Ｑ、Ｌ９７Ｙ、Ｆ１０１Ｌ、Ｆ１０１Ｗ若しくはＱ１０５Ｇ置換のいずれかの単一アミノ酸置換を有するか、表５において２．１、２．２、２．３、２．４、２．１（Ｆ６４Ｖ）、２．２（Ｆ６４Ｖ）、２．３（Ｆ６４Ｖ）及び２．４（Ｆ６４Ｖ）という名称で示したアミノ酸置換の組合せを有するADWA11 VH05/VK01 Fabの、固定化Ｕ２５１細胞との結合データを得、元の抗体と比較した（図７Ａ～７Ｃ）。

抗体mIgG_4mut及びhIgG_VH05VK01（別名：ADWA11 2.4、実施例５で説明）のＵ２５１細胞との結合データも得た（図８）。Ｕ２５１細胞に対するmIgG_4mut及びhIgG_3mut_VH05VK01の見かけの親和性を以下の表７に示す。これらのデータは、hIgG_3mut_VH05VK01がmIgG_4mutと比較して高い親和性を有すると確認されたことを示す。

本明細書に概括的に記載された方法による細胞結合アッセイで、Ｕ２５１（ヒト神経膠芽腫）又はＣ８-Ｓ（マウス星状細胞）細胞に対するADWA11 2.4の見かけの親和性も検討した。簡潔に説明すると、細胞をADWA11 2.4の段階希釈液とともに氷上で４時間インキュベートし、結合した抗体を抗ヒトＰＥ二次抗体で検出し、フローサイトメトリーで分析した。ADWA11 2.4は、ヒトαｖβ８及びマウスαｖβ８を発現する細胞への飽和結合を示し、Ｕ２５１（ヒトαｖβ８）細胞結合アッセイの平均ＥＣ５０は１２６ｐｍで、標準偏差は±３４ｐＭであった（図９Ａ；ｎ＝３）。

さらなる実験では、ヒトＵ２５１細胞に結合するADWA11 VH05-2/VK01(2.4)のＥＣ５０は２５６±１１５ｐＭ（７回の実験の平均±標準偏差）で、マウスＣ８-Ｓ細胞では１４５±２３．７ｐＭ（４回の実験の平均±標準偏差）であることが確認された。

一過性に過剰発現したインテグリンβファミリーを用いたＨＥＫ２９３Ｆ細胞結合実験は、ADWA11 2.4がヒトαｖβ８を発現する細胞と特異的に結合するが、αｖβ３、αｖβ５又はαｖβ６には結合しないことを示す（図９Ｂ）。したがって、ADWA11 2.4は、元のマウス抗体ADWA11と比較して改善された特性を有し、ヒト化ADWA11 2.4はヒトに対する改善された潜在的な治療薬であることを示唆する。

実施例９ αｖβ８誘導ＴＧＦ-β活性化アッセイによる抗αｖβ８インテグリン抗体の検討
方法
Ｕ２５１-ＭＧ（Sigma）及びMv1Lu-SMAD-ルシフェラーゼレポーター細胞を使用して、ＴＧＦβ経路のトランス活性化に対する抗αｖβ８抗体の影響を測定した。一部の実験では、Ｕ２５１細胞の代わりにＣ８-Ｓマウス星状細胞を使用した。簡潔に説明すると、ミンク肺上皮細胞株ＭｖＬｕ１細胞（ATCC）に、感染多重度（ＭＯＩ）５０でCignal SMAD reporter（ｌｕｃ）レンチウイルス粒子（SABioscience）を形質導入した。SMADホタルルシフェラーゼを発現する細胞を、２μｇ／ｍＬのピューロマイシンを添加した完全増殖培地（ＭＥＭ、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、Ｌ-グルタミン、ペニシリン／ストレプトマイシン）で培養し、安定な細胞株を製造した。実験のために、Ｕ２５１細胞（活性炭処理ＦＢＳを２％含むＭＥＭ培地５０μＬ中に５０００細胞）を、底が透明で白い壁のＴＣ処理９６ウェルプレートの各ウェルに加え、３７℃で１時間インキュベートした。抗αｖβ８抗体、例えばＦＡＢ抗体の段階希釈を活性炭処理ＦＢＳを２％含むＭＥＭ培地で調製し、Ｕ２５１細胞を含むプレートにウェルあたり２５μｌ添加した。１時間のインキュベーション後、各ウェルにMv1Lu-SMAD-ルシフェラーゼレポーター細胞を添加し（２５μＬで５０００細胞／ウェル）、３７℃で１８時間インキュベーションした後、Bright Glo試薬（Promega）を使用して製造者が推奨するプロトコルでルシフェラーゼ活性を測定した。発光は、Envisionプレートリーダーを使用して積分時間１秒で測定した。

結果
Ｕ２５１細胞におけるαｖβ８誘導ＴＧＦ-βトランス活性化に対するさまざまな抗体の阻害活性を、ルシフェラーゼ活性の低下に基づいて測定した（図１０Ａ～１０Ｆ）。

図１０Ａは、実施例３に記載のとおりに製造した抗体の比較を示し、ADWA11 VH05/VK01（VH05-VK01 Fab）と元のマウスハイブリドーマ抗体ADWA11（mFab）との比較を含む。ＴＧＦ-βトランス活性化アッセイの見かけの親和性から測定されたＥＣ５０値は、元のマウスハイブリドーマ抗体ADWA11（mFab）の４．６ｎＭから、ADWA11 VH05/VK01（VH05-VK01 Fab）で１．３ｎＭに改善した。

Ｕ２５１細胞におけるＴＧＦβのトランス活性化に対する、ADWA11 VH05/VK01の重鎖可変領域又は軽鎖可変領域でのアミノ酸置換の影響も検討した（図１０Ｂ～１０Ｄ）。軽鎖可変領域にＦ１０１Ｌ又はＦ１０１Ｗの単一アミノ酸置換を有するＦａｂは、ADWA11 VH05/VK01 Fabと比較して、ＴＧＦβのトランス活性化が低下した。

Ｕ２５１細胞におけるαｖβ８誘導ＴＧＦ-βトランス活性化に対するヒト化ADWA-11 IgG分子の影響も、ルシフェラーゼ活性のアッセイにより比較した（図１０Ｅ）。これらのデータは、VH05/VK01－Ｄ６１Ｅ及び－Ｎ５５Ｑ－Ｄ６１ＥバリアントがＴＧＦβのトランス活性化において同等の効果を有することを示す。

ADWA11_VH05-2_VK01(2.4)（ADWA11 2.4）の効力を検討するために、ＴＧＦβ感受性ルシフェラーゼレポーター細胞系においてαｖβ８を内因的に発現する、ヒト細胞とマウス細胞の共培養システムを確立した。簡単に説明すると、Ｕ２５１（ヒト神経膠芽腫）細胞又はＣ８-Ｓ（マウス星状細胞）細胞に、感染多重度（ＭＯＩ）５０でCignal SMADレポーター（luc）レンチウイルス粒子（SABioscience）を安定的に形質導入したミンク肺上皮細胞（Mv1Lu）を播種した（Mv1Lu-Smad細胞）。Mv1Lu-Smad細胞は、Ｕ２５１細胞又はＣ８-Ｓ細胞が産生するＴＧＦβに応答し、αｖβ８機能の阻害はルシフェラーゼ活性の低下に基づいて測定することができる。図１０Ｆは、アイソタイプ陰性対照抗体と比較した、Ｕ２５１細胞及びＣ８-Ｓ細胞におけるＴＧＦβのトランス活性化に対するADWA11 2.4の影響を示す。

これらのデータは、ADWA11 2.4が、マウスADWA11モノクローナル抗体を含む他の抗体と比較して、αｖβ８誘導ＴＧＦ-βトランス活性化のより強力な阻害剤であることを証明する。ADWA11 VH05-2/VK01(2.4)のＵ２５１細胞におけるＴＧＦβトランス活性化アッセイのＩＣ５０は、１９９±９３．６ｐＭ（５回の実験における平均±標準偏差）であることを確認した。

実施例１０ 抗αｖβ８インテグリン抗体の免疫原性の検討
主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）に結合するペプチドの機能的重要性を、Ｔ細胞増殖アッセイにより検討した。ヘルパーＴ細胞で発現する膜貫通型糖タンパク質であるＣＤ４は、抗原提示細胞（ＡＰＣ）の表面にあるＭＨＣクラスＩＩ分子に結合したペプチドを認識する。この相互作用により、ヘルパーＴ細胞が増殖し免疫反応が生じる。Ｔ細胞の増殖を、カルボキシフルオレセイン スクシンイミジルエステル（ＣＦＳＥ）色素を含む個々の細胞の蛍光強度の減少によってモニターした。ProImmuneのREVEAL（登録商標）Immunogenicity System Ｔ細胞アッセイは、フローサイトメトリーを使用して、ＣＦＳＥ色素標識細胞の分裂を分析する。さまざまなドナーのＰＭＢＣをＣＦＳＥとインキュベートし、細胞内蛍光複合体を形成した。ＣＦＳＥの蛍光強度は、細胞が分裂する毎に半分になるので、細胞増殖の測定が可能となる。この信頼性と再現性のあるＣＦＳＥ標識Ｔ細胞アッセイは、ＭＨＣＩＩ提示ペプチド上の潜在的なＣＤ４－Ｔ細胞エピトープの決定に有用である。インフルエンザ／破傷風に由来するペプチド及びツベルクリン精製タンパク質誘導物質（ＰＰＤ）を、細胞増殖の陽性対照として使用した。

Ｔ細胞の増殖について、５１人のドナーのＰＢＭＣを用い、ＣＤＲを含む２９個のペプチドを試験した（表１、配列番号９４～１２２）。ＣＦＳＥ標識ＰＢＭＣを試験するペプチドとともに７日間インキュベートし、ＣＤ４＋Ｔ細胞の増殖をフローサイトメトリーでモニターした。最適化された分子に由来するペプチドのレスポンダーの数を、対応する生殖系列配列ペプチドのレスポンダーの数と比較した。

この実験では、既知のＭＨＣクラスＩＩエピトープを含む参照抗原を使用した。ツベルクリン精製タンパク質誘導物質（ＰＰＤ）は結核菌の誘導体で、最終濃度５μｇ／ｍｌで使用した。ＰＢＭＣドナーの約７０～１００％は、以前のワクチン接種の結果、すなわち記憶免疫反応により、このタンパク質に反応すると予想される。

キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）は強力なタンパク質免疫原であり、最終濃度０．２５ｍｇ／ｍｌで使用した。通常、ドナーの５０～８０％がこのタンパク質に反応すると予想され、これは、おそらくナイーブな免疫反応によって引き起こされる。

合成ペプチドＨＡは、インフルエンザＡ血球凝集素（ＰＫＹＶＫＱＮＴＬＫＬＡＴ、残基３０７～３１９２；配列番号１２９）に由来し、最終濃度５μＭで使用した。最大で５０％のドナーが反応することが期待される。合成ペプチドＴＴ（ＡＱＹＩＫＡＮＳＫＦＩＧＩＴＥＬ（配列番号１３０）、破傷風トキソイドに由来するＴＥＴ８３０修飾／ヘルパーＴエピトープ）はＴ細胞の活性化を誘導し、ワクチン接種においてヘルパーペプチドとして使用される普遍的なヒト破傷風毒素Ｔ細胞エピトープである。これは最終濃度５ｕＭで使用され、最大で４５％のドナーが応答すると予想された。

重鎖のＦ６４Ｖ置換（配列番号１０５）が免疫原性を増加させることを見いだした。５１人のドナーのＰＢＭＣのうち１１がＣＤ４＋Ｔ細胞増殖アッセイに反応し、対応する生殖細胞系列配列に感受性のあるドナーはいなかった。表８に示すように、Ｑ１０５Ｇ（配列番号１１１）、Ｌ３０Ｓ（配列番号１０６）、Ｍ９４Ｑ（配列番号１０７）及びＮ５８Ｓ（配列番号１１３）を含む他の置換は、それぞれ異なる程度で免疫原性を低下させることを見いだした。陽性対照ペプチドと比較した異なるＣＤＲペプチドのレスポンダーの割合を図１１に示す。

これらのデータは、ADWA11 2.4を含む本発明の抗体が、元のマウスｍＡｂ ADWA11と比較してＴ細胞応答が減少したことを示す。これらの結果は、ADWA11 2.4が、元のマウス抗体と比較して、ヒトに対する改善された潜在的な治療薬であることを示唆する。

実施例１１ ＥＭＴ６腫瘍モデルにおける抗ＰＤ-１療法の有効性を改善するαｖβ８の阻害
方法
この実験では、３×１０^５個のＥＭＴ６（ＡＴＣＣ）細胞をＢａｌｂ／ｃマウス（Charles River Laboratory）の第４乳腺脂肪パッド又は皮下に移植した。腫瘍が平均５０ｍｍ^３に達した後にマウスをランダムに分け、その後、処置を開始した。処置のために、４日ごとに合計３回、１０ｍｇ／ｋｇの2A3_rat IgG（２Ａ３；BioXcell）、抗ＰＤ-１抗体（ＰＤ-１；クローンRMP1-14、BioXcell）、2B8_mIgG1_4mut（２Ｂ８）又はADWA11_mIgG1_4mut（ADWA11）をマウスに静脈内注射した。増殖を監視するために腫瘍の長さと幅を測定し、体積（Ｖ）＝1/2×Ｌ×Ｗ^２（ここで、Ｌ（長さ）は腫瘍の最長径で、Ｗ（幅）はＬに垂直な長さである。）として求めた。腫瘍は、実験が終了するまで週に２～３回測定した。

結果
抗αｖβ８処置と抗ＰＤ-１処置の組合せ（ADWA11＋PD-1）は、抗ＰＤ-１又は抗αｖβ８単剤による処置群よりも相乗的かつ有意に腫瘍増殖を減少させ、生存率を改善した（図１２Ａ及び１２Ｂ）。

１０ｍｇ／ｋｇの単剤処置群では、ADWA11は１３日目に腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）が４７．１％となったが、このＴＧＩは一過性で、実験終了時に生存したマウスはいなかった（５１日目の生存率０％）。抗ＰＤ-１単剤処置は１４日目にＴＧＩが１５％で、実験終了時に生存したマウスはいなかった（５１日目の生存率０％）。これに対して、ADWA11（１０ｍｇ／ｋｇ用量群）と抗ＰＤ-１抗体の組合せは、１４日目にＴＧＩが９０．０％となり、実験終了時に６０％のマウスが生存した（５１日目の生存率６０％）。

これらの結果は、ADWA11 2.4を含むADWA11抗体が、ＰＤ-１の阻害剤（例．抗ＰＤ-１抗体）と組み合わせた場合に相乗的な治療効果を提供することを初めて証明する。これらのデータは、ADWA11 2.4が、ＰＤ-１阻害剤と組み合わせた場合に相乗的な治療的抗腫瘍反応を示すことが可能なヒトに対する潜在的な治療薬であることを示唆する。

実施例１２ ＥＭＴ６腫瘍モデルにおける４-１ＢＢ療法及び抗ＰＤ-１療法の有効性を改善するαｖβ８の阻害
方法
このＥＭＴ６腫瘍有効性実験では、１×１０^６個のＥＭＴ６（ＡＴＣＣ）細胞をＢａｌｂ／ｃマウス（Charles River Laboratory）の第４乳腺脂肪パッドに移植した。腫瘍が平均１００ｍｍ^３に達した後にマウスをランダムに分け、処置を開始した。４-１ＢＢ（MAB9371 R&D Systems、１ｍｇ／ｋｇ、０日及び４日目）、抗ＣＴＬＡ-４（クローン9D9 BioXcell、１０ｍｇ／ｋｇ、０日、４日及び８日目）、抗αｖβ８（ADWA11、１０ｍｇ／ｋｇ、０日、４日及び８日目）、2B8_mIgG_4mut（１０ｍｇ／ｋｇ、０日、４日及び８日目）、又は2A3_rat IgG（BioXcell、１０ｍｇ／ｋｇ、０日、４日及び８日目）をマウスに静脈内注射した。増殖を監視するために腫瘍の長さと幅を測定し、体積（Ｖ）＝1/2×Ｌ×Ｗ^２（ここで、Ｌ（長さ）は腫瘍の最長径で、Ｗ（幅）はＬに垂直な長さである。）として求めた。腫瘍は、実験が終了するまで週に２～３回測定した。

免疫組織化学（ＩＨＣ）分析： カスタムプロトコルとLeica Bond-max自動ＩＨＣ染色装置を使用した、ＣＤ８、ＣＤ４５及びグランザイムＢ発現用の厚さ４ｍｍのホルマリン固定パラフィン包埋（ＦＦＰＥ）腫瘍組織切片を調製した。Leica/Aperio AT2 whole slide digital scannerを用い、倍率設定を２０倍として画像を得た。Visiopharm 7.2ソフトウェアで作成しターゲットごとに最適化したカスタムアルゴリズムを用いて、画像を分析した。生存組織の細胞を計数し、生存組織面積によって正規化した。細胞密度を次の式により計算した：
細胞／μｍ^２＝（陽性細胞数／生存腫瘍面積（μｍ^２））^＊１×１０^６。
対象の密度の割合を次の式により計算した：
染色面積（μｍ^２）／生存腫瘍面積（μｍ^２）。

結果
抗αｖβ８（ADWA11）処置と抗４-１ＢＢ処置又は抗ＣＴＬＡ-４処置の組合せは、抗４-１ＢＢ、抗ＣＴＬＡ-４、又は抗αｖβ８単剤による処置群よりも有意かつ相乗的に腫瘍増殖を減少し、生存率を改善した（図１３）。

抗αｖβ８抗体で処置後の腫瘍浸潤細胞密度の変化を求めた（図１５）。ＣＤ４５（総リンパ球及び骨髄細胞）、ＣＤ３（総Ｔ細胞）、ＣＤ４ Ｔ細胞、ＣＤ８ Ｔ細胞及びグランザイムＢ（活性化ＣＤ８及びＮＫ細胞）染色の密度のＩＨＣ分析により、ＥＭＴ６腫瘍モデルにおけるリンパ球の量を定量化した。これらのデータは、抗αｖβ８単剤処置が総ＣＤ４５＋細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞及びＣＤ８＋Ｔ細胞の存在量を増加させ、グランザイムＢ発現細胞の密度を非常に有意に増加させたことを示した（一群あたりｎ＝１０）。

腫瘍組織におけるリンパ球の量を、アイソタイプ対照又はADWA11 (2.4)で処置したマウスの１１日目（０、３、６、９日目に抗体で処置）に分析した（図１５）。ADWA11 (2.4)処置により、腫瘍微小環境における総白血球（ＣＤ４５＋、１５４０±５５８対２４７０±４０７）、ＣＤ８ Ｔ細胞（ＣＤ８＋、７６．３±６２．７対１７０±７４．２）及び細胞傷害性細胞（％グランザイムＢ密度、１１．８±１１．０対１０６±３５．１）の密度が増加した（アイソタイプ対ADWA11 (2.4)処置後の、ｍｍ^２あたりの平均ＣＤ４５＋細胞数、平均ＣＤ８＋細胞数又は平均％グランザイムＢ染色面積±標準偏差）。

これらの結果は、ADWA11 2.4を含むADWA11抗体が、４-１ＢＢのアゴニスト（例．抗４-１ＢＢ抗体）と組み合わせた場合に相乗的な治療効果を提供することを初めて証明する。これらのデータは、ADWA11 2.4が、４-１ＢＢのアゴニストと組み合わせた場合に相乗的な治療的抗腫瘍反応を示すことが可能なヒトに対する潜在的な治療薬であることを示唆する。

これらの結果は、ADWA11 2.4を含むADWA11抗体が、ＣＴＬＡ-４の阻害剤（例．抗ＣＴＬＡ-４抗体）と組み合わせた場合に相乗的な治療効果を提供することも初めて証明する。これらのデータは、ADWA11 2.4が、ＣＴＬＡ-４の阻害剤と組み合わせた場合に相乗的な治療的抗腫瘍反応を示すことが可能なヒトに対する潜在的な治療薬であることを示唆する。

実施例１３ ＣＴ２６腫瘍モデルにおける放射線照射の有効性を改善するαｖβ８の阻害
方法
ＣＴ２６腫瘍有効性実験： ４×１０^５個のＣＴ２６（ＡＴＣＣ）細胞をＢａｌｂ／ｃマウス（Charles River Laboratory）の横腹の皮下に移植した。腫瘍が平均１００ｍｍ^３に達した後にマウスをランダムに分け、処置を開始した。４日ごとに合計３回、１０ｍｇ／ｋｇの2B8_mIgG1_4mut（インハウス）アイソタイプ対照又はADWA11_mIgG1_4mutをマウスに静脈内注射し、最初の注射の後、５日目に５Ｇｙの腫瘍を標的とする放射線を照射した。増殖を監視するために腫瘍の長さと幅を測定し、体積（Ｖ）＝1/2×Ｌ×Ｗ^２（ここで、Ｌ（長さ）は腫瘍の最長径で、Ｗ（幅）はＬに垂直な長さである。）として求めた。腫瘍は、実験が終了するまで週に２～３回測定した。

遺伝子発現のｑＰＣＲ分析： 腫瘍組織を集め、Omni Bead Ruptorを使用して、３０ｍｇの組織をRNeasy Plus MiniKitに付属の溶解緩衝液９００μＬ中でホモジナイズした。RNeasy Plus MiniKitを使用し、ベンダーが推奨するプロトコルで、ホモジナイズした腫瘍サンプルからＲＮＡを分離した。２μｇのtotal RNA and the High-capacity cDNA reverse transcription kitを使用し、ベンダーが推奨するプロトコルでｃＤＮＡを合成した。５０ｎｇのｃＤＮＡと遺伝子特異的taqmanプライマー、TaqMan Universal Master Mix IIを使用し、ベンダーが推奨するプロトコルで、遺伝子発現を分析した。ｑＰＣＲの実験にはViiA7 real-time qPCR systemを使用した。各サンプルの閾値サイクル（ＣＴ）を推奨される比較ＣＴ法により分析し、標的遺伝子の発現をアイソタイプ対照群と比較した処置群の変化の倍率として報告した。対応のない両側スチューデントのＴ検定により処置群をアイソタイプ対照群と比較し、有意性は０．０５未満であった。

免疫組織化学（ＩＨＣ）分析： カスタムプロトコルとLeica Bond-max自動ＩＨＣ染色装置を使用した、ＣＤ８、ＣＤ４５及びグランザイムＢ発現用の厚さ４ｍｍのホルマリン固定パラフィン包埋（ＦＦＰＥ）腫瘍組織切片を調製した。Leica/Aperio AT2 whole slide digital scannerを用い、倍率設定を２０倍として画像を得た。Visiopharm 7.2ソフトウェアで作成し、ターゲットごとに最適化したカスタムアルゴリズムを用いて画像を分析した。生存組織の細胞を計数し、生存組織面積によって正規化した。細胞密度を次の式により計算した：
細胞／μｍ^２＝（陽性細胞数／生存腫瘍面積（μｍ^２））^＊１×１０^６。

結果
抗αｖβ８抗体（ADWA11）処置と放射線照射の組合せは、放射線照射単独よりも有意に腫瘍増殖を減少し、生存率を改善した（図１４Ａ）。

ＣＴ２６の実験では、ADWA11抗体（抗ＩＴＧαＶβ８）単剤処置は１９日目にＴＧＩが６４．３％で、応答は一過性で、実験終了時に１０匹中１匹のマウスのみが生存した（５７日目の生存率１０％）。放射線照射単独（５日目に５グレイ（Ｇｙ））による腫瘍増殖阻害は５７．７％で（１８日目）、実験終了時に２０匹中１匹のマウスが生存した（５７日目の生存率５％）。これに対して、ADWA11の投与と放射線照射の組合せの腫瘍増殖阻害は８７．７％で（１９日目、１０ｍｇ／ｋｇのADWA11及び５Ｇｙの放射線）、実験終了時に１９匹中９匹のマウスが生存した（５７日目の生存率４７．４％）。

ＣＴ２６腫瘍モデルにおけるリンパ球の量に対するADWA11の効果を調査するために、アイソタイプ対照又はADWA11 VH05-2/VK01（抗ＩＴＧαＶβ８）で処置したマウスから１２日目（０、４、８日目に抗体で処置）に腫瘍組織を集め、リンパ球マーカーをＩＨＣで分析した（図１４Ｂ、上の図）。ADWA11 VH05-2/VK01による処置は、総ＣＤ４５＋白血球の密度を増加した；アイソタイプ：３６７±１２８、ADWA11 VH05-2/VK01：６９５±９４．８（ｍｍ^２あたりの平均細胞数±標準偏差）。ＣＤ８＋Ｔ細胞；アイソタイプ：１７３±７９．３、ADWA11 VH05-2/VK01：３７４±８０．４（ｍｍ^２あたりの平均細胞数±標準偏差）。腫瘍微小環境におけるグランザイムＢ発現細胞傷害性細胞；アイソタイプ：２６４±６５．５、ADWA11 VH05-2/VK01：５１４±９１．７（ｍｍ^２あたりの平均細胞数±標準偏差）。さらに、抗ADWA11処置と放射線照射の組合せは、腫瘍微小環境におけるＣＤ４５（３．８６±０．９７９）、ＣＤ８ａ（５．４５±３．５３）、グランザイムＢ（４．２１±１．０２）及びＩＦＮγ（５．５３±２．１３）のｍＲＮＡの発現量を増加した（倍率変化±標準偏差対アイソタイプ処置群）（図１４Ｂ、下の図）。

これらの実験は、抗ＩＴＧαＶβ８（ADWA11_mIgG1_4mut）による処置が腫瘍微小環境における活性化リンパ球を増加し、腫瘍を標的とする放射線と組み合わせて、腫瘍退縮と長期生存を引き起こすのに有効であることを証明する。

これらの結果は、ADWA11 2.4を含むADWA11抗体が、放射線療法と組み合わせた場合に相乗的な治療効果を提供することも初めて証明する。これらのデータは、ADWA11 2.4が放射線治療と組み合わせた場合に相乗的な治療的抗腫瘍反応を示すことが可能なヒトに対する潜在的な治療薬であることを示唆する。

実施例１４ 腫瘍免疫の新たな抑制因子及び腫瘍免疫療法の標的としてのインテグリンαｖβ８の検討
この実施例では、Ｉｔｇｂ８ノックアウトマウスを組換えαｖβ８で免疫することによって得た強力なαｖβ８ブロッキングモノクローナル抗体（ADWA-11）を使用して、このインテグリンの阻害による抗腫瘍免疫の促進の可能性を検討した。

非腫瘍組織では、αｖβ８インテグリンは神経上皮、線維芽細胞、樹状細胞及びＴ細胞で発現し、重要な免疫調節因子である潜在型トランスフォーミング成長因子β（ＴＧＦβ）を活性化することができる。本明細書で示すように、癌腫では、骨髄細胞がαｖβ８インテグリンを発現し、αｖβ８をブロックする強力なモノクローナル抗体（ADWA-11）は、特に他の免疫調節剤（抗ＰＤ-１、抗ＣＴＬＡ-４又は４-１ＢＢ）又は放射線療法と組み合わせた場合に、扁平上皮癌、乳癌及び結腸癌の同系モデルにおいて増殖抑制又は完全な腫瘍退縮を引き起こす。ADWA-11による処置は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の腫瘍浸潤及びグランザイムＢ発現を増加し、腫瘍に関連するマクロファージについて、抑制性のものに対する炎症誘発性のものの比率を高める。ヒト腫瘍の大半はＩＴＧＢ８ｍＲＮＡを発現し、本明細書で示すように、ヒト卵巣癌及び腎細胞癌の生検では、単球、マクロファージ及び樹状細胞の表面に多くのαｖβ８が発現している。これらの発見は、αｖβ８インテグリンが、がん免疫療法の有望な新しい標的であることを示す。

扁平上皮癌モデルにおけるADWA-11と抗ＰＤ-１の組合せによる効果的で相乗的な免疫療法
扁平上皮癌の同系腫瘍モデル（ＣＣＫ１６８細胞）を使用して、ADWA11単独又は抗ＰＤ-１抗体との併用の効果を検討した（図１６Ａ及び図２８）。ＦＶＢマウスの扁平上皮癌細胞株から化学的に誘導されたＣＣＫ１６８細胞を、１．５×１０^４細胞／マウスで、同系野生型ＦＶＢマウスの背外側右側腹部に皮下注射した。

１４日間腫瘍を成長させた。直径が少なくとも５ｍｍの腫瘍を有するマウスを使用し、studylogソフトウェアを使用して、腫瘍サイズに基づいて、異なる処置群間でマウスを最適に分布した。隔日でマウスの体重を測定し、トレーサブルなデジタルノギス（Fisher Scientific、#14-648-17）を用いて腫瘍サイズを測定した。腫瘍サイズが２０００ｍｍ^３以上となるか、又は、腫瘍部位に大きな潰瘍が生じた際に、マウスを安楽死させた。

マウスは、０日目と７日目にハイブリドーマ抗体ADWA11又はアイソタイプが一致する対照抗体で処置し、０、４及び８日目にマウス抗ＰＤ-１抗体（RMP1-14、BioXcell）又はそのアイソタイプが一致する対照抗体で処置した（０日目は処置の最初の日）。各群で適切な抗体及びアイソタイプ対照抗体である、ADWA11、抗ＰＤ-１抗体（RMP1-14、BioXcell）、（ADWA11に対する）対照抗体ADWA-21及び対照２Ａ３（BioXcell）を１０ｍｇ／ｋｇの用量で腹腔内に注射した。対照ADWA-21は、ヒトインテグリンβ８に結合するがマウスインテグリンβ８には結合しない。

ＣＣＫ１６８腫瘍は、抗ＰＤ-１抗体による処置では反応は最小限であったが、ADWA11単剤で処置したマウスでは１０匹中５匹で腫瘍の退縮を示した（図１６Ｂ～１６Ｃ）。マウスをハイブリドーマADWA11及び抗ＰＤ-１抗体（図１６Ｂ）又はADWA11_4mut_mIgG1抗体（図２８）で処置した場合、ADWA11と抗ＰＤ-１抗体の併用は、１０個中８個の腫瘍の完全退縮及び全生存期間の大幅な増加を誘発した。

腫瘍の退縮後最長で２年間、生存マウスを観察したところ、腫瘍の再増殖を示したものはなかった。併用処置後に完全退縮した２回の実験からの１３匹のマウス及びADWA11単剤処置後に完全退縮した３匹のマウスに、ＣＣＫ１６８細胞を１回又は２回再チャレンジしたところ、いずれのマウスも腫瘍の増殖が認められず、長期的な腫瘍免疫の獲得が示された。

これらの結果は、ADWA11 2.4を含むADWA11抗体を、例えば抗ＰＤ-１抗体のようなＰＤ-１阻害剤と組み合わせた場合、相乗的な治療効果が得られることを初めて証明する。これらのデータは、ADWA11 2.4は、ＰＤ-１阻害剤と組み合わせた場合、相乗的な治療的抗腫瘍反応を提供することが可能なヒトに対する潜在的な治療薬であることを示唆する。

表面インテグリンαｖβ８は腫瘍微小環境内の骨髄細胞に存在する
フローサイトメトリーを用いて、腫瘍のどの細胞型がαｖβ８ヘテロダイマーとして発現していると推定されるインテグリンβ８を発現しているかを特定した（図１７Ａ及び図１７Ｂ）。αｖβ８の発現は、ＣＣＫ１６８腫瘍内の８０％を超えるＣＤ４５＋ＣＤ１１ｂ＋Ｆ４／８０＋ＣＤ６４＋マクロファージ及び２０％未満のＣＤ４５＋ＣＤ１１ｂ＋Ｆ４／８０－ＣＤ６４－ＣＤ１１ｃ＋ＭＨＣＩＩ^高樹状細胞で容易に検出することができた。（図１７Ｂ）。αｖβ８は、初期浸潤性（炎症誘発性）のＬｙ６Ｃ＋細胞及び免疫抑制性ＣＤ２０６＋細胞を含む検討したマクロファージのサブポピュレーションで同様のレベルで発現した（図１７Ｂ）。αｖβ８はin vitroのＣＣＫ１６８腫瘍細胞でも発現した（図１８Ｂ）。in vivoのＣＤ４５－腫瘍及び間質細胞におけるαｖβ８の発現は低レベルであった（図１８Ａ）。腫瘍内Ｔ細胞ではαｖβ８の発現は認められなかった（図２０）。

動物
全ての動物実験は、カリフォルニア大学サンフランシスコ校及びファイザー社の動物実験委員会によって承認された手順に従って行った。使用した野生型ＦＶＢ／Ｎマウスは、Jackson Laboratories（ストック番号001800）から購入したか、このストックから我々が繁殖させたコロニーに由来する。野生型Ｂａｌｂ／ｃマウスはCharles River Laboratories（系統コード028）から購入した。

ヒト腫瘍の処理
全てのヒトのサンプルについて、全ての被験者からインフォームドコンセントを得、ＩＲＢ（審査委員会、Institutional Review Board）の承認に従って作業した。新鮮な組織は、癌の内部の免疫サブセットをプロファイリングするために開発・最適化された翻訳プラットフォームであるＵＣＳＦ免疫プロファイラー作業手順に従って収集・処理した。簡潔に述べると、手術室で組織を取得し、切除から４時間以内に実験室に運んだ。開発された標準的な手順に基づいて、組織を細かく切り刻み（塊が１ｍｍ未満）、酵素（３ｍｇ／ｍｌのコラゲナーゼＡ、５０Ｕ／ｍｌのＤＮａｓｅ Ｉ）で処理した。既知のサブセットの比例性と平均蛍光強度、及びαｖβ８発現を分析するために、サンプルをマルチプレックスフローサイトメトリー（６０色超）にかけた。全ての抗体は、BD Pharmingen、eBioscience、Invitrogen又はBioLegendから購入した。抗αｖβ８抗体は上述したように製造した。セルソーティングを含む全てのフローサイトメトリーは、特注のBD FACSAria Fusionフローサイトメーターを使用して行った。フローサイトメトリーデータの分析には、FlowJoを使用した。

フローサイトメトリーの手順
皮下の腫瘍は、剪刀と鈍的剥離を使用してマウスから分離した。２ｍｇ／ｍＬのコラゲナーゼＸＩ（Sigma C9407）、０．５ｍｇ／ｍｌのヒアルロニダーゼ（Sigma H3506）及び０．１ｍｇ／ｍＬのＤＮａｓｅ（Sigma DN25）の消化カクテルを含むＣ１０培地（RPMI 1640、ＨＥＰＥＳ １％、ペニシリン／ストレプトマイシン １Ｘ、ウシ胎児血清 １０％、ピルビン酸ナトリウム １ｍＭ、非必須アミノ酸 １Ｘ、β-メルカプトエタノール ０．４５％）が入ったペトリ皿に腫瘍を加えた。滅菌した剪刀で腫瘍を細かく切り刻んだ。得られた細胞のスラリーを５０ｍＬコニカルチューブに移し、腫瘍を細かく切り刻むために使用したペトリ皿を２ｍＬのＣ１０培地ですすぎ、残りの細胞を捕捉した。細胞をシェーカー内で２５５ｒｐｍで４５分間、３７℃でインキュベートした。インキュベーション終了後、１５ｍＬのＣ１０培地を消化された腫瘍細胞に加え、１５秒間穏やかにボルテックスした。細胞スラリーを１００μｍメッシュストレーナー（Falcon（登録商標） #352360）に通して、清浄な５０ｍＬコニカルチューブに加えた。細胞を４℃、２００ｇで５分間遠心分離することによりペレット化し、ＰＢＳで再構成した。細胞の計数は、Countless II FL hemocytometer（Life Technologies）を用いて行った。

単離された単一細胞調製物を、細胞表面染色及び細胞内染色に使用した。計数後、１０×１０^６個の細胞をＶ字型の９６ウェルプレートの各ウェルに移動して染色した。生死染色を、１：１０００のGhost Dye（登録商標）Violet 510（TONBO bioscience、#13-0870）を用いて、４℃で２０分間行った。Ｆｃ受容体及び非特異的結合は、抗ＣＤ１６／３０（eBioscience #14061）を４℃で１０分間作用させてブロックした。表面染色は４℃で２０分間行った。細胞内染色では、細胞をFix/Permバッファー（eBioscience #88-8824）中、室温で２０分間インキュベートした後、抗体カクテルを用いて細胞内サイトカインを４℃で２０分間染色した。染色の完了後、細胞をフローサイトメトリーバッファー（２％ＦＢＳを含むＰＢＳ、ペニシリン／ストレプトマイシン／グルタメート、ＥＤＴＡ ２ｍＭ）に移して分析した。

Ｔ細胞染色に使用する抗体：ICOS FITC（eBioscience#11-9949-80）、CD25 AF780（eBioscience#47-0251-82）、CD45.1 AF700（BioLegend#110723）、CD8 BV605（BioLegend#100743）、CD4 BV650（BioLegend#100546）、Ki-67 PE-Cy7（BD Biosciences#561283）、CTLA4 PE（BD Biosciences#553720）及びFoxP3 PB-e450（eBiosciences#48-5773-82）。

細胞内サイトカイン染色に使用する抗体：CD3 APC（eBioscience#17-0032-82）、NK1.1 APC-AF780（eBioscience#47-5941-80）、CD45.1 AF700（BioLegend#110723）、CD4 BV650（BioLegend#104729）、CD8 BV605（BioLegend#100546）、IFN-γ FITC（eBioscience#11-7311-82）、IL-17A PE-Cy7（BioLegend#506921）、グランザイムＢ ＰＥ（eBioscience#12-8898-82）、FasL PerCP-eFluor710（eBioscience#46-5911-82）及びFoxP3 PB-e450（eBioscience#48-5773-82）。

骨髄細胞染色に使用する抗体：Ly6G BV785（BioLegend#127645）、SiglecF BV785（BD Biosciences#740956）、CD90.2 BV785（BioLegend#10533）、B220 BV785（BioLegend#103246）、CD45.1 AF700（BioLegend#110724）、CD11b AF780（eBioscience#47-0112-82）、CD206 PerCP-Cy5.5（BioLegend#141716）、F4/80 PE（BioLegend#123109）、CD11c BV650（BioLegend#117339）、Ly6C BV605（BioLegend#128035）、MHC-II PB-e450（eBioscience#48-5321）、CD24 PE-Cy7（BioLegend#101822）、CD103 FITC（eBioscience#11-1031-82）、ADWA11 APC（実験室で結合させた）及びCD64 FITC（BioLegend#139316）。

ＮＫ細胞染色に使用する抗体：CD45.1 AF700（BioLegend#110724）、CD3 APC（eBioscience#17-0032-82）、NK1.1 APC-AF780（eBioscience#47-5941-80）、CD314-NKG2D PE（eBioscience#12-5882-82）、CD226-DNAM-1 PerCP-Cy5.5（BioLegend#128814）、CD335-NKp46 FITC（eBioscience#11-3351-82）、CD107a-LAMP-1 PE-Cy7（BioLegend#121620）及びCD49b eFluor450（eBioscience#48-5971-82）。

細胞刺激では、細胞は細胞表面染色及び細胞内染色の前に刺激した。２００μｌのＣ１０培地中の約３×１０^６細胞を丸底９６ウェルプレートの各ウェルに加え、５％ＣＯ_２の組織培養インキュベーター内で３７℃で一晩インキュベートした。刺激カクテル（イオノマイシン、ＰＭＡ、ブレフェルディン-Ａ及びモネンシン５００ｘ、Tombo #TNB4975-UL100）を細胞に加え、５％ＣＯ_２の組織培養インキュベーター内で３７℃で４時間インキュベートした。概説したように、細胞を染色のためにＶ底ウェルに移した。フローサイトメトリーはBD LSRFortessa（登録商標）（BD Biosciences）を用いて行い、FlowJo（登録商標）（Tree Star Inc.）で分析した。

ADWA11は、腫瘍浸潤を増加させ、細胞傷害性ＣＤ８＋Ｔ細胞の分化を促進し、抑制性マクロファージに対する炎症性単球の比率を上昇させる
（抗ＰＤ-１の有無にかかわらない）免疫浸潤に対するADWA11の影響も明らかにされた（Thomas et al., Cancer Cell 8:369-380, 2005；Wu et al., Cancer Immunol. Res. 2:487-500, 2014）。このモデルでの抗ＰＤ-１による処置は、腫瘍のＣＤ８＋Ｔ細胞の総数に影響を与えなかったが、ADWA11による処置は、ＣＤ８ Ｔ細胞の浸潤を劇的に増加させ、この影響は、切除された腫瘍を免疫染色することで最も顕著であった（図１９Ａ～１９Ｂ）。ADWA11は、グランザイムＢを発現するＣＤ８＋Ｔ細胞の割合も有意に増加したが（図１９Ｃ）、抗ＰＤ-１での処置では増加しなかった。炎症性の単球も宿主の免疫応答の腫瘍回避に寄与する。Ｌｙ６Ｃは炎症性の単球で発現し、Ｌｙ６Ｃの発現は腫瘍微小環境で抑制特性を有する腫瘍に関連したマクロファージで減少する（Franklin et al., Science 344:921-925, 2014；Movahedi et al., Cancer Res. 70:5728-5739）。ADWA11による処置がＣＤ４５＋ＣＤ１１ｂ＋ＣＤ１１ｃ－Ｌｙ６Ｇ－Ｌｙ６Ｃ^高ＣＤ２０６^高炎症性マクロファージの蓄積を特異的に増加させることが、骨髄性ポピュレーションのさらなる分類により示された（図１９Ｄ）（Ostuni et al., Trends Immunol. 36:229-239, 2015；Noy et al., Immunity 41:49-61, 2014）。分析した時点では、ＣＤ４＋Ｔ細胞数、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋制御性Ｔ細胞、又はＴ細胞サブセットによるインターフェロンγ発現に有意な影響を及ぼした処置はなく、Ｔ細胞サブセットでＩＬ１７の有意な発現を特定することはできなかった（データは示さない）。

免疫染色のために腫瘍を採取し、４％パラホルムアルデヒドを用いて４℃で一晩固定した。固定された腫瘍を４℃で３０％ショ糖溶液に一晩浸し、O.C.T.化合物（Tissue Tek（登録商標） #4583）に包埋し、１５μｍの凍結切片を作成した。凍結切片は前述の手順（Henderson et al., Nat. Med. 19:1617-1624, 2013；Rock et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 108:E1475-1483, 2011）で染色した。簡単に述べると、凍結切片を透過処理し、ＰＢＳ中の０．３％ Triton X-100及び３％ＢＳＡでブロックした。切片を一次抗体と室温で一晩インキュベートし、次いで、フルオロフォアが結合した一次及び二次抗体とインキュベートし、ProlongGold（Invitrogen）を使用してマウントした。

免疫染色に使用する抗体：ラット抗Ｆ４／８０（Alexa Fluor 647結合、Serotec、clone C1、1:100）、ウサギ抗リン酸化Ｓｍａｄ３（Epitomics、1880-1、1:100）、ラット抗ＣＤ８（Alexa Fluor 488-又は594-結合、Biolegend、clone 53-6.7、1:100)、Alexa Fluor 488-、555-又は 647-結合ロバ抗ラビット及び抗ラット（Invitrogen）。共焦点顕微鏡観察は、ZeissLSM780及びLSM5Pascal顕微鏡を用いて行った。

全ての定量化は、薄い（１エアリー単位；～１μｍ）光学的な切片を有する高解像度共焦点画像を使用して行った。画像はImageJソフトウェアを用いて分析した。各群には、少なくとも５匹の対照と５匹の処置（ADWA11）マウスのサンプルが含まれた。各組織切片の４つの画像（フィールドサイズ；４２５．１０×４２５．１０μｍ）を、同じ共焦点設定でランダムに撮影した。画像を同じしきい値に設定し、筋線維芽細胞の染色又はホスホ-Ｓｍａｄ３の領域を計算した。

ADWA11と抗ＰＤ-１の併用の有益な相乗効果は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の枯渇によって妨げられた
ADWA11による処置の最も劇的な効果がＣＤ８＋Ｔ細胞で認められたことから、ここでは、これらの細胞がADWA11の抗腫瘍活性を促進するかどうかを確認することが求められた。１０ｍｇ／ｋｇの抗ＣＤ８ａ（Bio X Cell（登録商標）、BE0004-1、Clone 53-6.72）抗体又は対照抗体を、０日目である処置の２４時間前に腹腔内注射し、ＣＣＫ１６８担癌マウスの細胞傷害性Ｔ細胞を枯渇させた。ADWA11（１０ｍｇ／ｋｇ）と抗ＰＤ-１（１０ｍｇ／ｋｇ）の組合せを、１、５及び９日目に注射した。本明細書に記載の方法による免疫染色は効果的にＣＤ８を枯渇し（図２１Ａ）、ADWA11及び抗ＰＤ-１の併用の有益な効果（例．生存及び腫瘍退縮）を完全に無効にした（図２１Ｂ～２１Ｃ）。

これらのデータは、ＣＤ８＋Ｔ細胞が、例えばADWA11のような抗ａｖｂ８を介した抗腫瘍効果において重要であることを示唆する。

活性なＴＧＦβシグナル伝達のマーカーであるｐＳｍａｄ３は、ＣＣＫ１６８腫瘍細胞及び腫瘍微小環境の細胞に存在し、ADWA11処置によってシグナル伝達が広範に阻害される
αｖβ８インテグリンのin vivoにおける最も特徴的な機能は潜在型ＴＧＦβの局所的活性化であることから、処置されていない腫瘍でどの細胞がＴＧＦβシグナル伝達の証拠を示したか、このシグナル伝達はADWA11による処置で阻害又は抑制されるかどうかを確認することが求められた。ＴＧＦβ受容体から活発にシグナル伝達しているＣＣＫ１６８腫瘍内の細胞を特定するために、細胞（ＣＤ８＋Ｔ細胞、Ｆ４／８０マクロファージ及びＣＤ１１ｃ樹状細胞）が活性ＴＧＦβに応答している証拠として、ＴＧＦβシグナル伝達の上位の段階であるリン酸化ＳＭＡＤ３に対する抗体を用いて免疫染色を行った。検討したＣＣＫ１６８腫瘍は、腫瘍全体にマクロファージの豊富なネットワークがあり（図２２Ａ）、入り込んだＤＣはごく少数であった。ｐＳＭＡＤ３は、腫瘍内、通常Ｆ４／８０＋マクロファージに隣接する細胞で容易に検出されたが、マクロファージ自体では検出されなかった。ＣＤ８＋Ｔ細胞は、未処置のマウスではまばらで、AWDA-11処置マウスの腫瘍ではかなり豊富であった。これらの細胞ではｐＳＭＡＤ３染色は観察されなかった。未処置の腫瘍では、腫瘍の微小環境全体で高レベルのｐＳＭＡＤ３が認められた；ｐＳＭＡＤ３染色はADWA11処置で広範に阻害された（図２２Ａ）。したがって、特定の理論に拘束されることを望むものではないが、これらのデータは、ある態様では、αｖβ８活性がこれらの腫瘍におけるＴＧＦβ活性化に不可欠であることを示しているが、αｖβ８によって活性化されたＴＧＦβの、ＣＤ８＋Ｔ細胞の蓄積、グランザイムＢの発現及びマクロファージサブセット分布への影響は間接的であるか、腫瘍微小環境外で発生することを示す。

エフェクター機能のないADWA11は、ＣＣＫ１６８扁平上皮癌モデル及びＣＴ２６腫瘍細胞で、腫瘍増殖を阻害し、全生存期間を改善し、持続的な抗腫瘍免疫を誘導する
最初の実験は、Ｆｃ受容体と相互作用する可能性のある天然のマウス抗体を用いて行った。そのため、ADWA11の抗腫瘍活性は、腫瘍細胞又は腫瘍浸潤マクロファージ又は樹状細胞の抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）活性に起因する可能性がある。ADWA11活性に対するＡＤＣＣの影響を特定するために、ADWA11_4mutと呼ばれるADWA11のＦｃ「エフェクター機能のない」組換え体を、エフェクター機能を無効にするためにマウス抗体のＩｇＧ１Ｆｃドメインに４つの置換を導入することによって調製した。これらの置換は、抗体がＦｃ受容体に結合することを完全に無効にすることが以前に示されていた（Alegre et al., J. Immunol. 148: 3461-3468, 1992；Hezareh et al., J. Virol. 75: 12161-12168, 2001）。ADWA11_4mutは、ＣＣＫ１６８モデルにおいて野生型抗体と同程度に効果的であった（図２８）。さらに、２つの同系腫瘍モデル（ＣＴ２６及びＥＭＴ６腫瘍モデル）を用い、ADWA11_4mut抗体の有効性を試験した。

前者は検出可能なαｖβ８発現を完全に欠くことから、ＣＣＫ１６８に加えてＣＴ２６細胞を選択した（図１８Ｂ）。ＣＴ２６マウス結腸癌細胞（ATCC CRL-2638（登録商標））を４×１０^５細胞／マウスで雌のＢａｌｂ／ｃマウス（Charles River Labs）の皮下側面に注射した。腫瘍は、５０～１００ｍｍ^３まで増殖させた。この実験では、ADWA11_4mut又はアイソタイプ対照2B8_mIgG_4mutを０、４、８、１２日目に注射し、抗ＰＤ-１抗体（RMP1-14、BioXcell）又はアイソタイプ対照2A3_rat IgG（BioXcell）を０、４、８日目に静脈内に注射した。全ての抗体の投与量は１０ｍｇ／ｋｇであった。５日目に、放射線照射を行わない対照群を除く全てのマウスに、腫瘍を標的とした線量５Ｇｙの放射線を被曝させた。腫瘍の増殖をデジタルノギスで週に２回測定し、体積（長さ×幅×幅×０．５）として報告した。再チャレンジ実験では、（最初の抗体の処置後）５１日目に、ＰＢＳ中の２．５×１０^５のＣＴ２６細胞を、完全に応答したマウスとナイーブマウスの反対側の側面に移植し、腫瘍の増殖を上述したように測定した。

両者のモデルにおいて、ADWA11_mut4は抗腫瘍応答を促進するのに効果的であり（図２８）、このことは、ADWA11を介した抗腫瘍活性にＡＤＣＣ機能は必要ではなかったことを示す。

ADWA11は複数の癌腫モデルにおいて有効で、放射線療法と抗ＰＤ-１、抗ＣＴＬＡ-４及び４-１ＢＢ治療の効果を高める
他の充実性腫瘍モデルにおけるADWA11の有効性とADWA11が他の免疫調節処置の有益な効果を広範に増強できるかどうかについて確認した。この腫瘍は、放射線感受性であることが以前に示れ、in vitro、in vivoの両者でαｖβ８を発現せず、ＴＧＦβ受容体の小分子阻害剤に反応することが示されているので（Young et al., PloS One 11:e0157164, 2016）、ＣＴ２６に対する放射線処置の効果を増強するADWA11の能力も検討した。効果が最小限である放射線量に、ADWA11_4mut又は抗ＰＤ-１のいずれかを追加すると、マウスにおける腫瘍退縮及び全生存率が、それぞれ、５／９と３／１０の完全奏功で有意に増加した（図２９Ａ及び２９Ｂ）。興味深いことに、このモデルでは、ADWA11と抗ＰＤ-１の組合せは、組み合わせた効果がほとんどなく、このことは、チェックポイント阻害剤が存在しなくても、αｖβ８の阻害が効果的であるという新たな証拠を示す。単剤又は併用処置され、原発腫瘍が完全退縮した生存マウスに対し、最初の処置の少なくとも５１日後に、同じＣＴ２６腫瘍細胞を反対側に再チャレンジした。最小限の腫瘍増殖が、数匹のマウスの反対側の腫瘍で観察された。最初に増殖した全ての小さな腫瘍は、その後、完全退縮し、他の免疫調節剤について以前に報告されたように（Ascierto et al., J. Transl. Med. 15:205, 2017）、ある態様では、ADWA11による処置の成功は、長期的な抗腫瘍免疫につながる可能性があることを示している（図２９Ｃ）。退縮した原発腫瘍は、いずれも再増殖しなかった。

ADWA11_4mutは、ＥＭＴ６乳癌モデルにおいて有効で、抗ＣＴＬＡ-４及び抗４-１ＢＢの効果を高める
免疫を排除する腫瘍微小環境及びαｖβ８の発現が低レベルであるＥＭＴ６乳癌モデルを使用して、ADWA11_4mutと組み合わせた、抗ＰＤ-１、抗ＣＴＬＡ-４（近年、抗ＰＤ-１とは異なる分子メカニズムで機能することが示されている（Wei et al., Cell 170:1120-1133, 2017））又はＣＤ８＋Ｔ細胞で発現する共刺激受容体である４-１ＢＢ（Kang et al., Cancer Res. 2017）のアゴニストの効果を検討した。

ADWA11_4mutは、ＥＭＴ６腫瘍モデルでも試験した。１×１０^６のＥＭＴ６細胞（マウス上皮乳癌細胞株；ATCC、CRL2755（登録商標））を、メスＢａｌｂ／ｃマウス（Charles River Labs）の第４乳腺脂肪パッドに注入した。腫瘍を５０～１００ｍｍ^３まで増殖させた。抗体処置群にマウスをランダムに割り当て、実験者にはいずれが処置群であるかを知らせなかった。静脈内に、１０ｍｇ／ｋｇのADWA11_4mut又は１０ｍｇ／ｋｇのコントロール2B8_mIgG4mut、抗ＣＴＬＡ-４（9D9 BioXcell）又は１０ｍｇ／ｋｇのアイソタイプ対照E. tenella-mIgG2bを、０、４及び８日目に注射し、１ｍｇ／ｋｇの抗４-１ＢＢ（MAB9371、R&D systems）を０及び４日目に注射した。腫瘍の増殖をデジタルノギスで週に２回測定し、体積（長さ×幅×幅×０．５）として報告した。

抗ＰＤ-１、抗ＣＴＬＡ-４又は抗４-１ＢＢの単剤処置は有意な初期腫瘍退縮を示したが、抗４-１ＢＢ処置の１匹と抗ＰＤ-１処置の１匹のみが完全退縮を示した（図３０Ａ～Ｄ）。これに対して、抗ＰＤ-１、抗ＣＴＬＡ-４又は抗４-１ＢＢのいずれかと組み合わせてADWA11で処置したマウスの約７０％が、完全退縮、長期生存及び長期間の腫瘍免疫を示唆するＥＭＴ６腫瘍細胞の再チャレンジに対する耐性を示した（図３０Ｅ）。再チャレンジ実験では、（最初の抗体の処置後）５１日目に、１×１０^６のＥＭＴ６細胞を、完全に応答したマウスとナイーブマウスの反対側の周囲脂肪体に移植し、腫瘍の増殖を上述したように測定した。

これらのデータは、ADWA11 2.4を含むADWA11抗体を、ＰＤ-１又はＣＴＬＡ-４の阻害剤（例．ＰＤ-１又はＣＴＬＡ-４に結合し、それによってそれぞれＰＤ-１又はＣＴＬＡ-４の効果を阻害するアンタゴニスト抗体）及び／又は４-１ＢＢのアゴニスト（例．４-１ＢＢの生物活性を増加させるアゴニスト抗体）と組み合わせた場合、相乗的な治療効果が得られることを初めて証明する。これらのデータは、ADWA11 2.4は、ＰＤ-１やＣＴＬＡ-４などの阻害剤、又は４-１ＢＢなどのアゴニストと組み合わせた場合、相乗的な治療的抗腫瘍反応を提供することが可能なヒトに対する潜在的な治療薬であることを示唆する。

ヒト腫瘍におけるインテグリンαｖβ８遺伝子の発現と染色
ＩＴＧＢ８ ｍＲＮＡ発現に関するＴＣＧＡ（The Cancer Genome Atlas）の検索の結果、調査した３０種類の腫瘍で、ほぼ全てのヒト腫瘍が検出可能でロバストな量のＩＴＧＢ８ ｍＲＮＡを発現し、卵巣癌及び腎細胞癌で高度に発現していることが明らかになった（図２３Ａ）。全腫瘍溶解物におけるＩＴＧＢ８の発現は、浸潤性免疫細胞におけるαｖβ８の発現を反映している可能性がある。これを確認するために、マルチパネルフローサイトメトリーを行い、新たに採取し、ばらばらにしたヒト腫瘍の切除サンプル及び生検サンプルにおける単一細胞中のαｖβ８タンパク質の発現を検討した。２つのヒト卵巣癌及び２つの腎細胞癌の分析により、ＣＤ１６＋単球、ＣＤ１４＋腫瘍関連マクロファージ、並びにＢＣＤＡ１＋及びＢＣＤＡ３＋単球由来樹状細胞で発現する実質的なαｖβ８を示した（図２３Ｂ）。

考察
当業者が理解するように、ADWA11は、αｖβ８インテグリンの遮断に特異的なモノクローナル抗体であり、単独で用いた場合、効果的な抗腫瘍免疫治療剤である。例えば、ADWA11はＣＣＫ１６８皮膚扁平上皮癌で抗腫瘍活性を実証した。追加的又は代替的に、免疫調節剤（例．抗ＰＤ-１、抗ＣＴＬＡ-４及び抗４-１ＢＢ）又は放射線療法と組み合わせたADWA11は、３種のマウス系統における上皮癌の３つの同系同種移植モデルにおいて、強力で相乗的に増強された抗腫瘍活性を示した。ある態様では、αｖβ８の阻害は、腫瘍内のＣＤ８＋Ｔ細胞におけるグランザイムＢの発現に基づいて評価すると、腫瘍内のＣＤ８＋Ｔ細胞の数とその細胞傷害性への分化を増加した。ＣＤ８＋Ｔ細胞の枯渇はADWA11及び抗ＰＤ-１処置による抗腫瘍活性を妨げ、このことは、ある態様では、ＣＤ８ Ｔ細胞による腫瘍細胞殺傷の増強がADWA11の有効性に重要であることを示している。ＣＤ８＋Ｔ細胞に対する効果に加え、ADWA11は腫瘍微小環境における免疫刺激性単球の数を増加させた（Franklin et al., Science 344:921-925, 2014；Movahedi et al., Cancer Res. 70:5728-5739, 2010；Ostuni, Trends Immunol. 36: 229-239, 2015；Noy et al., Immunity 41:49-61, 2014）。免疫抑制マクロファージの数に相違はなかったが、これらのマクロファージは、樹状細胞とともに検出可能な高レベルのαｖβ８を発現した。検討した最初の腫瘍株であるＣＣＫ１６８細胞は、in vitroで著しい数のαｖβ８を発現したにもかかわらず、採取した腫瘍の非造血細胞のフローサイトメトリーでは、αｖβ８の発現はほとんど見られず、このことは、ある態様では、これらの悪性細胞がin vivoで腫瘍を形成した場合、発現が失われることを示している。それにもかかわらず、ADWA11の抗腫瘍活性が悪性細胞を直接標的とするＡＤＣＣに基づくという可能性は、検出可能なαｖβ８を発現しない細胞（すなわち、ＣＴ２６結腸癌細胞）におけるエフェクター機能のない組換えADWA11抗体を用いる実験を繰り返すことによって除外された。エフェクター機能のない抗体は、ＣＣＫ１６８、ＣＴ２６及びＥＭＴ６の腫瘍モデルで腫瘍増殖を抑制することができ、そのうちＣＴ２６ではαｖβ８の発現が認められない。さらに、ADWA11による短期間の処置は、長期的な腫瘍抑制及びその後の再チャレンジに対する抵抗性につながり、このことは、ある態様では、長期間の抗腫瘍免疫の誘導を示している。まとめると、これらのデータは、ある態様では、インテグリンαｖβ８の遮断が、自然免疫細胞又はＴ制御性細胞上のαｖβ８の遮断による腫瘍抑制を引き起こし、腫瘍に対する獲得免疫を強化することを示している。

樹状細胞、制御性Ｔ細胞、線維芽細胞、気道上皮細胞及び神経上皮に発現したαｖβ８によるＴＧＦβの活性化は以前に示されている（Travis et al., Nature 449:361-365, 2007；Melton et al., J. Clin. Invest. 120:4436-4444, 2010；Arnold et al., J. Neurosci. 32(4):1197-1206, 2012；Fenton et al., Mucosal Immunol. 10:624-634, 2017；Mu et al., J. Cell Biol. 157:493-507, 2002；Proctor et al., J. Neurosci. 25:9940-9948, 2005；Edwards et al., J. Immunol. 193:2843-2849, 2014）が、インテグリンαｖβ８発現の全範囲を明確にすることは、組織を染色する信頼できる試薬がないために制限されている。この実施例では、マウスの癌腫中の腫瘍関連マクロファージ及び樹状細胞が、αｖβ８の高い細胞表面染色を示す主要な細胞型であることを実証するために、フローサイトメトリーでインテグリンαｖβ８を検出することができる新たに開発された抗体を使用した。これは、ある態様では、これらの細胞型の１つ以上での発現が局所抗腫瘍免疫のαｖβ８を介した抑制に重要であることを示している。

この実施例では、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）を含むＴ細胞でのαｖβ８発現は検出されなかった。

インテグリン（αｖβ８を含む）によるＴＧＦβの活性化は空間的に厳しく制限されているので、αｖβ８発現細胞が直接接触する細胞に局所的にＴＧＦβを提示することを可能にする（Travis et al., Nature 449:361-365, 2007；Munger et al., Cell 96:319-328, 1999）。ＴＧＦβはエフェクターＴ細胞の活性を抑制することが報告されている。この実施例で示したように、ＣＤ８＋Ｔ細胞は、ADWA11で処置された腫瘍で増加し、グランザイムＢを発現する可能性が高く、ADWA11の保護効果を媒介するために重要である。ある態様では、自然免疫細胞におけるαｖβ８の抑制効果は、ＣＤ８ Ｔ細胞への活性ＴＧＦβの直接の提示によるものである。ｐＳＭＡＤ３の免疫染色は、ＣＤ８＋Ｔ細胞でのＴＧＦβシグナル伝達の証拠を明らかにしなかったが、非造血細胞（例．腫瘍細胞）では強力なシグナル伝達を示した。したがって、ある態様では、腫瘍細胞及び他の腫瘍に関連する非造血細胞（例．線維芽細胞）は、αｖβ８によって活性化されたＴＧＦβに応答し、局所腫瘍免疫を抑制する機能的に重要な細胞である。

この実施例に記載されるように、αｖβ８インテグリンは、複数のマウス及びヒト腫瘍の単球、マクロファージ及び樹状細胞において広く発現し、抗腫瘍免疫応答の強力なモジュレーターである。このインテグリンを標的とする単剤治療薬（例．ADWA11）は、一部の腫瘍において効果的である。さらに、有効性は、αｖβ８の阻害（例．ADWA11による処置）をチェックポイント阻害剤（例．抗ＰＤ-１又は抗ＣＴＬＡ-４）若しくは免疫活性化因子（例．抗４-１ＢＢ）と組み合わせることによって、又はαｖβ８単剤療法を放射線療法と組み合わせることによって、相乗的に増強する。まとめると、これらの結果は、αｖβ８インテグリンが腫瘍免疫療法の新しい標的であることを示している。

実施例１５ in vivoでのADWA11 2.4のさらなる検討
抗αｖβ８検討のための腫瘍モデルの概要
免疫担当マウスにおける同系腫瘍モデルを使用してin vivoでの有効性を検討した。ヒト化されたADWA11 2.4による暴露を制限する異種に対する強力な薬物反応のため、エフェクター機能のない元のマウスハイブリドーマ抗体ADWA11_4mutを使用して有効性の実験を行った。

ＥＭＴ６モデルにおける有効性
ＥＭＴ６腫瘍モデルによる実験は同所的（第４乳腺脂肪パッド）に行い、チェックポイント阻害剤の有無にかかわらず抗αｖβ８による処置を同時に行った。

Charles River Ｂａｌｂ／ｃマウス（一群あたりｎ＝１０）に、マウス一匹あたり３×１０^５個又は１×１０^６個のＥＭＴ６細胞を移植した。平均腫瘍体積が５０ｍｍ^３又は１００ｍｍ^３で処置を開始した。

全ての実験で、マウスの元の抗αｖβ８抗体ADWA11_4mutは、用量１０ｍｇ／ｋｇで４日に１回、合計３回、投与した。抗ＰＤ-１抗体（クローンRMP1-14、BioXcell）は、用量１０ｍｇ／ｋｇで４日に１回、合計３回、投与し、４-１ＢＢアゴニストｍＡｂ（クローンMAB9371、R&D systems）は、用量１ｍｇ／ｋｇで４日に１回、合計２回、投与し、抗ＣＴＬＡ-４（クローン9D9、BioXcell）は、用量１０ｍｇ／ｋｇで４日に１回、合計３回、投与した。

３×１０^５個の細胞を移植し、５０ｍｍ^３で処置を開始した場合、抗αｖβ８単剤では、約５０％の腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）（１０～２０日目）が認められた。しかし、１×１０^６個の細胞を移植し、１００ｍｍ^３で処置を開始した場合、抗αｖβ８単剤によるＴＧＩは認められなかった。抗αｖβ８単独による２つの実験の間のＴＧＩの違いは不明である；しかし、特定の理論に拘束されることを望むものではないが、１×１０^６個の細胞を移植した場合のこのモデルの急速な腫瘍増殖速度は、応答を制限したか、αｖβ８遮断による抗腫瘍応答を上回っていた可能性がある。重要なことに、抗αｖβ８は、抗ＰＤ-１（完全奏功数７／１０）、４-１ＢＢアゴニスト（完全奏功数５）及び抗ＣＴＬＡ-４（完全奏功数６）との大幅な相乗的治療効果を示し、単剤による処置及びアイソタイプ対照と比較して生存率が増加した。したがって、これらのデータは、ＥＭＴ６腫瘍モデルにおいてADWA11抗体が抗腫瘍応答を提供できることを示唆する。

抗ＣＴＬＡ-４又は４-１ＢＢアゴニスト単独は大幅な反応を示した（～５０％ＴＧＩ、８～２０日目）；しかし、反応は一過性で、最終的に腫瘍は反応を上回って増殖した。抗血管新生又は抗増殖反応と比較して、併用がＥＭＴ６腫瘍に対する反応をもたらしたことを実証するために、完全奏功を示したマウスに、（１回目の投与から）５１日目にＥＭＴ６腫瘍を再度移植し、薬物による処置は行わなかった。ＥＭＴ６腫瘍はこれまで腫瘍が移植されていないマウスでは急速に増殖したが、完全奏功のマウスでは急速に消失し、このことは、ある態様では、腫瘍細胞に対する細胞性免疫の発達、例えば直接腫瘍細胞死は、抗血管新生又は抗増殖によって媒介されないことを示す。

ＥＭＴ６腫瘍モデルにおけるリンパ球の定量
ＥＭＴ６腫瘍微小環境における抗αｖβ８処置の影響を調査するために、ＩＨＣにより、各種リンパ球を定量化した。簡単に説明すると、Charles River Ｂａｌｂ／ｃマウス（一群あたりｎ＝１０）に１×１０^６個のＥＭＴ６細胞を移植し、平均腫瘍体積１００ｍｍ^３で処置を開始した（０日目）。抗αｖβ８ADWA11 2.4抗体を用量１０ｍｇ／ｋｇで３日ごとに合計４回投与（例．０日、３日、６日及び９日目）し、１１日目（４回目の投与から４８時間後）に腫瘍を採取した。

ＣＤ４５（総リンパ球及び骨髄細胞）、ＣＤ３（総Ｔ細胞）、ＣＤ４ Ｔ細胞、ＣＤ８ Ｔ細胞及びグランザイムＢ（活性化ＣＤ８及びＮＫ細胞）染色の密度の免疫組織化学（ＩＨＣ）分析は、抗αｖβ８単剤による処置により、総ＣＤ４５、ＣＤ４ Ｔ細胞、ＣＤ８ Ｔ細胞が増加し、グランザイムＢ発現細胞の密度が非常に有意に増加したことを示した（一群あたりｎ＝１０）（図１５）。ＩＨＣデータは、ある態様では、ADWA11 2.4単剤による処置が、αｖβ８の予想される作用機序（ＭＯＡ）に一致して腫瘍微小環境を変化させるのに十分であることを示した。

ＣＴ２６モデルにおける有効性
αｖβ８の発現の欠如、抗ＰＤ-１処置の部分奏功、及びＴＧＦβ小分子阻害剤と最適量以下の放射線照射の相乗的ＴＧＩについて記述する文献に基づいて、ＣＴ２６モデルを選択した。放射線照射（ＲＴ）は、免疫学的細胞死及びαｖβ８がＴ細胞の分化と活性化に重要な役割を果たす可能性があるde novo ＤＣ-Ｔ細胞プライミングを誘導する能力のため、特に興味深い。簡単に説明すると、Charles River Ｂａｌｂ／ｃマウス（一群あたりｎ＝１０）の皮下に４ｅ５細胞を移植し、平均腫瘍体積１００ｍｍ^３で処置を開始した。

エフェクター機能のないマウス抗αｖβ８抗体ADWA11_4mutを用量１０ｍｇ／ｋｇで４日ごとに合計４回投与し、抗ＰＤ-１（クローンRMP1-14、BioXcell）を用量１０ｍｇ／ｋｇで４日ごとに合計３回投与し、ｍＡｂの初回投与から５日後に、５Ｇｙの腫瘍を標的とする放射線を照射した。抗αｖβ８とＲＴの併用によりＴＧＩが大幅に増加し、５／９マウスが完全奏功を示した。抗ＰＤ-１とＲＴの併用は、抗αｖβ８と比較してＴＧＩが低下し、３／１０マウスが完全奏功を示した。ＲＴ、抗αｖβ８及び抗ＰＤ-１の３つの組合せは、ＴＧＩが非常に大幅に増加し、７／１０マウスが完全奏功を示した。ＥＭＴ６による実験と同様に、完全奏功のマウスは、ＣＴ２６細胞の再移植に対して免疫を有した。

ＣＴ２６腫瘍浸潤細胞の免疫表現型
ＣＴ２６腫瘍微小環境における抗αｖβ８処置の影響を調査するために、フローサイトメトリーにより、各種リンパ球を定量化した。簡単に説明すると、Charles River Ｂａｌｂ／ｃマウス（一群あたりｎ＝６）の皮下に４ｅ５細胞を移植し、平均腫瘍体積１００ｍｍ^３で処置を開始した。抗αｖβ８ADWA11 2.4を用量１０ｍｇ／ｋｇ又は１ｍｇ／ｋｇで３日ごとに合計３回投与し、８日目（３回目の投与から４８時間後）に腫瘍を採取した。腫瘍を解離し、ＣｙＴＯＦサイトメトリーにより、リンパ球を定量化した。抗αｖβ８（１０及び１ｍｇ／ｋｇ）は、ＣＤ３ Ｔ細胞ゲートにおけるＣＤ８ Ｔ細胞を増加させた。さらに、ＣＤ８細胞は、活性化された表現型のマーカーであるグランザイムＢをより頻繁に発現した。

要約
まとめると、ＥＭＴ６及びＣＴ２６に対する有効性並びにＰＤに関する実験は、(1) 抗αｖβ８が複数のチェックポイント阻害剤に対する反応を相乗的に増加させる；(2) 抗αｖβ８の有効性は腫瘍細胞によるαｖβ８の発現に依存しない；(3) 抗αｖβ８ADWA11 2.4単独の処置は、腫瘍微小環境におけるＣＤ８＋ＧｚｍＢ＋Ｔ細胞を増加させるのに十分である、ことを証明する。

実施例１６ ヒトＦｃＲｎトランスジェニック（ＴＧ３２）マウスにおけるADWA11 2.4の薬物動態
線形薬物動態を示すＩｇＧ１及びＩｇＧ２ｍＡｂのヒト薬物動態を予測において、ＴＧ３２マウスモデルは、サルモデルと同程度優れていることが示されている。ADWA11 2.4の０．１、０．３又は３ｍｇ／ｋｇを、ＴＧ３２マウスの静脈に、単回、ボーラス投与した後の薬物動態を検討した。血清薬物濃度を測定した。図２５Ａ及び図２５Ｂに示されるように、抗体クリアランスが用量依存的に減少する明らかな傾向が認められた。これは、細胞表面の標的と相互作用するモノクローナル抗体において典型的で、標的受容体であるαｖβ８がクリアランスメカニズムとして作用できることを示した。そこで、２つの異なる薬物動態モデルを使用して、線形のクリアランス経路（通常のＦｃＲｎを介した抗体クリアランスメカニズム）と（αｖβ８を介する）非線形のクリアランス経路を説明した。線形クリアランスのパラメーターを推定するために、２コンパートメント母集団薬物動態モデルを使用して、３ｍｇ／ｋｇのデータのみをフィットした（図２５Ａ）。複数回投与における非線形クリアランスの薬物動態パラメーターを推定するために、２コンパートメント飽和モデル（Michaelis Menten）を使用して、全てのデータ（０．１、０．３、３ｍｇ／ｋｇ）をフィットした（図２５Ｂ）。推定された線形及び非線形の薬物動態パラメーターを、表１０及び１１に示した。線形の薬物動態パラメーターは、ＴＧ３２マウスにおいて通常のｍＡｂで認められる範囲内にある。

血清薬物動態に基づく標的を介した薬物動態（ＴＭＤＤ）と一致して、組織分布の実験では、複数の組織（標的結合の飽和による）、特に腎臓への薬物分布の用量依存的な減少も認められた。

実施例１７ 非ヒト霊長類（ＮＨＰ）における薬物動態
ＮＨＰ探索的毒性実験における４、４０又は１００ｍｇ／ｋｇでの複数回投与試験の初回投与後に、ADWA11 2.4の薬物動態を検討した。図２６に示すように、ADWA11 2.4の投与は標的を介した薬物動態（ＴＭＤＤ）における飽和範囲を超えているため、この用量の範囲内では線形であるように見える。２コンパートメント線形モデルを使用してデータをフィットし（図２６）、推定された薬物動態パラメーターを表１２に示した。得られたＣＬ及び分布量は通常のｍＡｂの範囲内であったが、半減期は通常の範囲の端にあるようである。特定の理論に拘束されることを望むものではないが、これは、投与後７日までしかサンプリングしていないことから、最終的なフェーズが明確ではない点に原因がある可能性が高い（ＥＴＳ研究デザインの限界）。

実施例１８ マウス代理抗体を単剤で投与した場合及び抗ＰＤ-１と同時に投与した場合の薬物動態
元の抗体（マウスＩｇＧ）の単回投与の薬物動態データを入手することはできなかったが、いくつかの有効性実験では、最大で４回、暴露を測定し、これは実験全体で一貫しているようである。元の抗体（マウスＩｇＧ）の曝露は、実験を行った用量の範囲（１、３及び１０ｍｇ／ｋｇ）内で線形であるように思われ、ヒト化抗体ADWA11 2.4について、ＴＧ３２マウスで推定された飽和ＴＭＤＤと一致している。２コンパートメント薬物動態モデルを用量反応ＥＭＴ６腫瘍モデルによる実験の曝露データにフィットさせ、ＴＧ３２マウスのヒト化抗体について上記で報告された値に他のパラメーターを固定し、ＣＬのみを推定した。これらの担癌マウスにおける元の抗体（マウスＩｇＧ）の推定ＣＬは０．７４ｍＬ／ｈｒ／ｋｇであった。

抗ＰＤ-１抗体の同時投与を繰り返した後では、マウス代理抗体の単独投与、又は対照ラットＩｇＧ ２Ａ３の同時投与の場合と比較して、元の抗体（マウスＩｇＧ）の曝露は約５～５０倍低いようである。異なる腫瘍モデル（ＣＴ２６及びＥＭＴ６）によるた別々の実験で、この現象が認められた。ＰＤ-１ノックアウトマウスで報告されているように、曝露が少ないのは、おそらく抗ＰＤ-１の存在下でＡＤＡ形成が増加するためである（Nishimura H et al., 1998, International Immunol. 10(10): 1563-72）。抗ＰＤ-１抗体（ペンブロリズマブ）による処置後のＡＤＡ形成の増加も報告されている。

実施例１９ ヒトＰＫ／暴露の予測
標的を介した薬物動態（ＴＭＤＤ）を飽和させる用量のADWA11 2.4のヒト薬物動態プロファイルを、ＴＧ３２マウスの線形薬物動態パラメーターのスケーリングによって予測した（表１３）。推定される線形ヒト薬物動態パラメーターを表１３に示す。さらに、プラットフォームＰＢＰＫモデルを用い、ＡＣ-ＳＩＮＳ結合の実測値（スコア＝２、セクション２．４）に基づいて、線形ヒトＣＬを０．１２ｍＬ／ｈｒ／ｋｇと予測した。ＮＨＰからのアロメトリースケーリングにより、線形ヒトＣＬを０．０８６ｍＬ／ｈｒ／ｋｇと予測した。これらのＣＬ値は、ＴＧ３２アロメトリースケーリングに基づく予測（０．１５ｍＬ／ｈｒ／ｋｇ）の２倍の範囲内にあり、ADW11 2.4は、ＴＭＤＤを飽和させる用量において、モノクローナル抗体に典型的な薬物動態プロファイルを有することをさらに裏付ける。

これらの結果は、ADWA11 2.4がヒトに対する有用な潜在的な治療抗体であることを示す。

雄のｈＦｃＲｎＴＧ３２マウス（１用量群につきｎ＝４又は８）及び雄のカニクイザル（１用量群につきｎ＝１）によって、追加のADWA11 (2.4)の単回、静脈内及び皮下への投与のＰＫ及び／又はＴＫの特徴を明らかにし、上述したヒトの薬物動態パラメーターを修正した。より具体的には、単回静脈内投与（ＴＧ３２マウス及びカニクイザルに、０．１、０．３及び３ｍｇ／ｋｇ）後、ADWA11 (2.4)のＰＫは、両者ともＣＬが用量依存的に減少する非線形で、これは飽和の標的を介した薬物動態と一致した。ADWA11 (2.4)のＰＫは、飽和クリアランスを超える用量では線形で、通常のヒトＩｇＧ１ｍＡｂと一致する。１０ｍｇ／ｋｇの皮下単回投与後の平均ＰＫ及びＴＫパラメーターでは、投与後２４０時間でＴ_ｍａｘが観察され、３ｍｇ／ｋｇの静脈内単回投与後の用量で正規化したＡＵＣ_ｉｎｆとの比較に基づいて、バイオアベイラビリティを約１００％と推定した。

ADWA11 (2.4)は、本明細書で以前に述べたよりも低い用量で用量依存的であると予想される。つまり、線形及び非線形のクリアランスを含むカニクイザルＰＫモデルのアロメトリースケーリングに基づいて、ADWA11 (2.4)のヒトのＰＫを予測した。修正したヒトＰＫパラメーターの予測値は以下のとおり：中央コンパートメントの分布容積は３６ｍＬ／ｋｇ、周辺コンパートメントの分布容積は３３ｍＬ／ｋｇ、中央コンパートメントからのクリアランス（線形ＣＬ）は０．１２ｍＬ／ｋｇ／ｈ、コンパートメント間クリアランスは０．５１ｍＬ／ｋｇ／ｈ、非線形除去の最大速度は０．４６μｇ／ｍＬ／ｈ、Ｋｍは非線形クリアランスの場合０．４２μｇ／ｍＬ。このモデルは、血漿濃度が１４μｇ／ｍＬを超えるとADWA11 (2.4)の非線形クリアランスが飽和する可能性があり、半減期は約１５～１７日であると予測する。

実施例２０ 薬物動態－薬力学の関係及び有効なヒト用量の予測
同系マウス腫瘍モデルで明確な暴露－ＴＧＩ応答がない場合、有効濃度を推定するための有効用量を１０ｍｇ／ｋｇと見なした。元の抗体（マウスＩｇＧ）の薬物動態モデルを使用して、平均濃度（Ｃ_ａｖｇ）を１２日目（用量１０ｍｇ／ｋｇで４日ごとに合計３回投与した実験の最後の投与から４日後）で１０７μｇ／ｍＬと推定した。同様に、わずかに高くなるものの、利用可能な暴露データから線形台形公式を使用してＡＵＣを計算することにより、Ｃ_ａｖｇ値を推定することができる。

ADWA11 2.4のこれらの有効濃度では、典型的な抗体の薬物動態が期待されるので、ヒトに対する用量の予測に、スケーリングされたＴＧ３２マウスパラメーター（表１３）を用いる２コンパートメント薬物動態モデルを使用した（Betts et al. MABS (2018) 1-14）。さらに、スケーリングされたＮＨＰ薬物動態パラメーターを使用して予測したヒトの用量は、ＴＧ３２マウスパラメーターを使用して予測したものと、わずか約２０％しか異ならない。Ｃ_ａｖｇと一致するように、１４日ごとに合計３回の投与では、有効なヒトの静脈への投与量は７ｍｇ／ｋｇと予測され、２８日ごとに合計３回の投与では１２ｍｇ／ｋｇと予測される（図２７Ａ～２７Ｂ）。用量は、特定の患者集団、臨床的適応症、並びに／又は臨床的な徴候及び症状に合わせて調整してもよい。

ADWA11 2.4のヒトの予測ＰＫは、カニクイザルからのアロメトリースケーリングと前臨床有効性研究の結果に基づいて洗練した。予測有効用量（Ｃ_ｅｆｆ）は、上述した２つのマウス腫瘍モデルによる実験での腫瘍増殖阻害に対する５０％有効濃度の１０倍に等しい血漿濃度として計算した。Ｃ_ｅｆｆは、全ての実験で１０～９８ｎＭの範囲にあると推定された；したがって、保守的手法により、１００ｎＭ（範囲の上限）をターゲットＣ_ｅｆｆとした。ヒトのADWA11 2.4の有効用量は、１４日ごとの静脈投与で約２ｍｇ／ｋｇ、又は、２８日ごとの静脈投与で約４ｍｇ／ｋｇと予測し、推定トラフ薬物濃度（１００ｎＭ）でＩＣ９０を超える腫瘍増殖阻害をカバーすると予測した。予測した有効用量での定常状態における予測Ｃ_ｍａｘ、Ｃ_ａｖｅ及びＣ_ｍｉｎは、１４日ごとの２ｍｇ／ｋｇの静脈投与では、それぞれ８４、４４及び２９μｇ／ｍＬで、２８日ごとの４ｍｇ／ｋｇの静脈投与では、それぞれ１３２、４５、及び２１μｇ／ｍＬである。ヒトの予測半減期は、予測した有効用量で約１５～１７日である。

これらの結果は、ADWA11 2.4が、商業的に実現可能な、かつ製造するのに合理的な量で投与できるという点において、ヒトに対する有用な潜在的な治療抗体であることを裏付ける。

実施例２１ ＣＤ-１マウスにおける反復投与毒性動態
毒性動態及び抗薬物抗体の検討は、ＧＬＰ反復投与毒性試験の一環として、ＣＤ-１マウス（ｎ＝３／性別／用量群）に、ADWA11 2.4を毎週、１０ｍｇ／ｋｇ／週で静脈内（ＩＶ）に、１００ｍｇ／ｋｇ／週で皮下（ＳＣ）に、２００ｍｇ／ｋｇ／週で静脈内に、合計４回投与した後に行った。

ビヒクル対照群から収集し分析した実験中のどの段階のサンプルにも、定量できるADWA11 2.4は存在しなかった。データの定性的レビューでは、全身曝露における安定的な性差は認められなかった（Ｃｍａｘ及びＡＵＣ１６８に基づく）ので、平均の毒性動態パラメーターは、ＣＤ-１マウスの雌雄両者からのデータを組み合わせて提示する（表１８）。

ＩＶ投与後、全身曝露は、１日目は、用量を増加させるとほぼ用量比例的に増加し、２２日目は用量に比例しない形式で用量の増加とともに増加した。平均蓄積率（ＡＵＣ_１６８、２２日目／１日目）は、１０ｍｇ／ｋｇ／週（ＩＶ）、１００ｍｇ／ｋｇ／週（ＳＣ）及び２００ｍｇ／ｋｇ／週（ＩＶ）で、それぞれ、３．０、０．６及び１．０であった。１００ｍｇ／ｋｇ／週（ＳＣ）及び２００ｍｇ／ｋｇ／週（ＩＶ）におけるの反復投与後の蓄積の欠如は、これらの用量群の動物におけるＡＤＡの存在に関連する可能性がある。

ADWA11 2.4に対するＡＤＡ誘導の全体的な発生率は２８％（５／１８動物）であった。ADWA11 2.4に対するＡＤＡ誘導の発生率は、ADWA11 2.4を、１０（ＩＶ）ｍｇ／ｋｇ／週で投与したＣＤ-１マウスでは０％（０／６動物）、１００（ＳＣ）ｍｇ／ｋｇ／週の投与では６７％（４／６動物）、２００（ＩＶ）ｍｇ／ｋｇ／週の投与では１７％（１／６動物）であった。一般に、ＡＤＡ陽性動物における曝露は、ＡＤＡ陰性動物と比較して同等かそれよりも低かった。

実施例２２ カニクイザルにおける反復投与毒性動態
毒性動態及び抗薬物抗体の検討は、ＧＬＰ反復投与毒性試験の一環として、カニクイザルに、ADWA11 2.4を毎週、８ｍｇ／ｋｇ／週で静脈内（ＩＶ）に、１００ｍｇ／ｋｇ／週で皮下（ＳＣ）に、２００ｍｇ／ｋｇ／週で静脈内に、合計５回投与した後に行った。

ビヒクル対照群から収集し分析した、実験中のどの段階のサンプル又は最初に投与する前に試験品を投与した群のサンプルのいずれにも、定量できるADWA11 2.4は存在しなかった。群間で全身曝露における明らかな性差がなかった（Ｃｍａｘ及びＡＵＣ１６８に基づく）ので、平均のＴＫパラメーターは、カニクイザルの雌雄両者からのデータを組み合わせて提示し、検討する（表１９）。

８（ＩＶ）、１００（ＳＣ）及び２００（ＩＶ）ｍｇ／ｋｇでの毎週の投与後、全身曝露は、１日目と２２日目の両者でほぼ用量比例的に増加し、蓄積率（２２日目／１日目）は約２．３～２．６であった。

ADWA11 2.4に対するＡＤＡ誘導の全体的な発生率は、全ての群で２８％（５／１８動物）であった。ADWA11 2.4に対するＡＤＡ誘導の発生率は、ADWA11 2.4を、８（ＩＶ）ｍｇ／ｋｇ／週で投与した動物では１７％（１／６）、１００（ＳＣ）ｍｇ／ｋｇ／週の投与では３３％（２／６）、２００（ＩＶ）ｍｇ／ｋｇ／週の投与では６７％（４／６）であった。一般に、曝露は、ＡＤＡ陽性動物とＡＤＡ陰性動物で概して類似していた。

実施例２３ マウス及びカニクイザルにおける非臨床毒物学
AWA11 2.4をマウス及びカニクイザルの静脈内（ＩＶ）及び皮下（ＳＣ）に、最大で１か月投与した。これらの実験で特定された標的臓器には、骨、脾臓及び臨床化学の変化が含まれていたが、この変化は有害とは見なされなかった。１か月の実験における無毒性量（ＮＯＡＥＬ）は、２００ｍｇ／ｋｇ／週ＩＶ（マウス；Ｃ_ｍａｘ及びＡＵＣ１６８は、それぞれ６５１０μｇ／ｍＬ及び２６７０００μｇ・ｈ／ｍＬ、カニクイザル；Ｃ_ｍａｘ及びＡＵＣ１６８は、１１，４００μｇ／ｍＬ及び１，１００，０００μｇ・ｈ／ｍＬ）であった。

単回投与毒性
ADWA11 2.4は、雌ＣＤ-１マウスの皮下に１０、３０又は１００ｍｇ／ｋｇの単回投与を行い、２週間の観察期間を経て忍容された。実験中に試験品に関連した所見は認められず、曲線下面積（ＡＵＣ）による平均全身曝露は、各用量に比例して増加した。１００ｍｇ／ｋｇの場合、平均Ｃ_ｍａｘ及びＡＵＣ１６８は、それぞれ、７９５μｇ／ｍＬと１４８，０００μ・ｈ／ｍＬであった。

反復投与毒性
実験１ 実験１では、雌のＣＤ-１マウスに対し、１、４、８、１１及び１４日目に、０、１、１０又は１００ｍｇ／ｋｇ／用量のＩＶボーラス投与によりADWA11 2.4を投与した。実験中死滅したマウスはおらず、全ての用量が忍容された。用量１００ｍｇ／ｋｇでは、対照の平均と比較して、臨床化学パラメーターに試験品に関連した相違が存在し、これには、低グルコース（０．７５倍）、高リン（１．３５倍）、グロブリン（１．０９倍）及び血中尿素窒素（１．１８倍）が含まれたが、関連する顕微鏡所見又は明確な用量の関係性（グルコース及びリン）はなかった。用量１０ｍｇ／ｋｇ以下では、臨床化学パラメーターの試験品に関連する相違は、対照の平均と比較して低グルコース（用量１０ｍｇ／ｋｇの場合のみで０．７７倍）と高リン（１．２６倍）が含まれた。平均全身曝露は、１日目と１１日目に用量の増加とともにほぼ用量比例的に増加した。最大投与量である用量１００ｍｇ／ｋｇでは、平均Ｃ_ｍａｘ及びＡＵＣ４８は、１１日目に４５１０μｇ／ｍＬ及び１２４，０００μｇ・ｈ／ｍＬであった。

実験２ 実験２では、カニクイザルに対し、週１回、１、８及び１４日目に、０、４、４０又は１００ｍｇ／ｋｇ／用量でＩＶボーラス投与によりADWA11 2.4を投与した。実験中死滅したサルはおらず、全ての用量が忍容された。試験品に関連する唯一の所見はＣＤ８＋ナイーブＴ細胞の減少で、用量１００ｍｇ／ｋｇの群の雌（ベースラインの０．２１倍）と雄（ベースラインの０．４４倍）で観察されたが、用量４又は４０ｍｇ／ｋｇの群では認められなかった。平均全身曝露は、１日目に用量の増加とともにほぼ用量比例的に増加した。最大投与量である用量１００ｍｇ／ｋｇでは、平均Ｃ_ｍａｘ及びＡＵＣ_１６８は、１日目に３５５０μｇ／ｍＬ及び１６２，０００μｇ・ｈ／ｍＬであった。

実験３ 実験３では、雄のカニクイザルに対し、ADWA11 2.4を、１日目に０．１、０．３又は３ｍｇ／ｋｇの用量でＩＶボーラス注射するか、１０ｍｇ／ｋｇでＳＣ注射した。続いて、１日目に０．１又は０．３ｍｇ／ｋｇをＩＶ投与した動物にも、８日目にそれぞれ３０又は１００ｍｇ／ｋｇをＳＣ注射した。全ての投与量／投与経路は忍容された。投与後２２日又は２９日の観察期間中、試験品に関連した所見（すなわち、臨床徴候、又は体重若しくは食物消費の変化）は認められなかった。注射部位に紅斑又は浮腫は認められなかった。

１日目の０．１、０．３及び３ｍｇ／ｋｇの単回ＩＶ投与後、全身の薬物曝露は、０．１～０．３ｍｇ／ｋｇでは用量に比例して増加し、０．３～３ｍｇ／ｋｇでは用量に比例するよりも多く増加した。１日目に１０ｍｇ／ｋｇを単回ＳＣ投与した後、又は８日目に３０ｍｇ／ｋｇと１００ｍｇ／ｋｇをＳＣ投与した後、全身の薬物曝露は用量に比例して増加した。用量３ｍｇ／ｋｇをＩＶ投与した場合に対するＳＣ投与のバイオアベイラビリティは、１０、３０及び１００ｍｇ／ｋｇでそれぞれ１０３％、７９％及び１００％であった。カニクイザルへの０．１、０．３若しくは３ｍｇ／ｋｇ（ＩＶ）、又は１０、３０若しくは１００ｍｇ／ｋｇ（ＳＣ）のADWA11 2.4の投与は忍容され、全身曝露は用量とともに増加した。

実験４ 実験４では、雄及び雌のＣＤ-１マウスのＩＶ及び／又はＳＣに、０（ＩＶ及びＳＣ）、１０（ＩＶ）、１００（ＳＣ）又は２００ｍｇ／ｋｇ／週（ＩＶ）で週１回、１か月間（合計５回）、ADWA11 2.4を投与した。試験品に関連する所見は、臨床化学の有害ではない変化、脾臓の免疫表現型及び脾臓の重量に限られた。

５日目に死亡が判明した１００（ＳＣ）ｍｇ／ｋｇ／週の雄１匹を除き、全ての動物は予定の剖検まで生き残った；この動物の死亡は試験品に関連しているとは見なされなかった。死後の自己消化はさまざまな臓器で観察され、２００（ＩＶ）ｍｇ／ｋｇ／週の群では、対応する対照と比較して、雄雌ともにグロビンが高く（１．１５～１．１６倍）、雌でＡＧ比が低く（０．８５倍）、雄で総タンパク質が高かった（１．１１倍）。ｍＡｂ試験品の投与は、全身のガンマグロブリン濃度を上昇させ、この血清タンパク質の変化に寄与した可能性がある。臨床化学パラメーターにおけるこの変化はその程度が小さく、関連する顕微鏡的又は巨視的な所見がないので、有害ではなかった。脾臓では、試験品に関連して、雌でＣＤ８＋Ｔ細胞の数が少なく（対照の平均の０．５２倍、０．６５倍及び０．６０倍）、雄で活性化マーカーＣＤ２５を発現するＣＤ４＋Ｔ細胞の割合が高い（対照の平均の１．６２倍、１．９０倍及び１．５２倍）ことが、それぞれ１０（ＩＶ）、１００（ＳＣ）及び２００（ＩＶ）ｍｇ／ｋｇ／週において３０日目に認められた。脾臓の絶対重量と（体重及び脳重量に対する）相対重量の平均は、２００（ＩＶ）ｍｇ／ｋｇ／週の雌において低かった（対象の０．８６～０．８８倍）。脾臓の重量が低い場合でも、肉眼又は顕微鏡による所見に相関するものはなかった。データの定性的レビューでは、Ｃ_ｍａｘ及びＡＵＣ_１６８に基づく、全身曝露における安定的な性差は認められなかった。全身曝露は、ＩＶ又はＳＣの用量の増加とともに増加した。反復投与後、曝露は１０ｍｇ／ｋｇ／週（ＩＶ）で増加し、１００（ＳＣ）ｍｇ／ｋｇ／週で減少し、２００（ＩＶ）ｍｇ／ｋｇ／週では変化しなかった。ADWA11 2.4に対する抗薬物抗体（ＡＤＡ）誘導の発生率は、１０（ＩＶ）では０％（０／６）、１００（ＳＣ）では６７％（４／６）、２００（ＩＶ）では１７％（１／６）であった。ADWA11 2.4の投与から１か月後の心臓又は皮膚に、ADWA11 2.4に関連する顕微鏡所見は認められなかった。

反復投与後、ＡＤＡ陽性動物における曝露は、ＡＤＡ陰性動物と比較して同等かそれよりもわずかに低かった。最大投与量である用量２００（ＩＶ）ｍｇ／ｋｇ／週は、どの用量でも有害な所見がないことに基づいて、無毒性量（ＮＯＡＥＬ）として特定され、その２２日目のＣ_ｍａｘは６，５１０μｇ／ｍＬで、ＡＵＣ_１６８は２６７，０００μｇ・ｈ／ｍＬであった。

実験５ 実験５では、カニクイザルのＩＶ及び／又はＳＣに、０（ＩＶ及びＳＣ）、８（ＩＶ）、２００（ＩＶ）又は１００ｍｇ／ｋｇ／週（ＳＣ）で、ADWA11 2.4を１か月間（合計５回）投与した。この実験では有害な試験品に関連する所見は認められなかった。有害ではない試験品に関連する所見は、雄の肋軟骨接合部における片側性の物理的異形成、並びに１００（ＳＣ）ｍｇ／ｋｇ／週の雌及び２００（ＩＶ）ｍｇ／ｋｇ／週の雌雄における血清タンパク質の変化（グロブリン（最大１．２９倍）、総タンパク質（最大１．１０倍）の増加、及び／又はアルブミン－グロブリン比の低下（～０．７５倍））であった。全身曝露は全用量群で雌雄類似しており（Ｃ_ｍａｘ及びＡＵＣ_１６８に基づく）、ＩＶ用量群の平均全身曝露は、１日目と２２日目に用量の増加とともにほぼ用量比例的に増加した。繰り返し投与後曝露は上昇した。ADWA11 2.4の投与から１か月後の心臓又は皮膚に、ADWA11 2.4に関連する顕微鏡所見は認められなかった。

ＡＤＡ誘導の発生率は、ADWA11 2.4の用量が８ｍｇ／ｋｇ／週（ＩＶ）の動物では１７％（１／６動物）、１００（ＳＣ）では３３％（２／６動物）、２００（ＩＶ）では６７％（４／６動物）であった；ADWA11 2.4に対するＡＤＡ誘導の発生率は、全ての群で３９％であった。血清曝露はＡＤＡ陽性動物とＡＤＡ陰性動物で概して類似していた。サルにおけるこの１か月の毒性試験において、ADWA11 2.4の週１回のＩＶ又はＳＣ投与後の生涯又は死後における有害所見の欠如に基づき、２００（ＩＶ）ｍｇ／ｋｇ／週をＮＯＡＥＬとして特定した。２００（ＩＶ）ｍｇ／ｋｇ／週で２２日目における平均Ｃｍａｘは１１，４００μｇ／ｍＬで、平均ＡＵＣ１６８は１，１００，０００μｇ・ｈ／ｍＬであった。

１か月の実験におけるＮＯＡＥＬは、マウスとカニクイザルの両方で、それぞれ２００ｍｇ／ｋｇ ＩＶであった（マウス；Ｃ_ｍａｘは６５１０μｇ／ｍＬ、ＡＵＣ_ｌａｓｔは２６７０００μｇ・ｈ／ｍＬ、カニクイザル；Ｃ_ｍａｘは１１，４００μｇ／ｍＬ、ＡＵＣ_ｌａｓｔは１００，０００μｇ・ｈ／ｍＬ）。

実施例２４ 補体タンパク質Ｃ１ｑ及びＦｃＲのin vitroでの結合
ADWA11 2.4が補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）及び抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を引き起こす可能性を、それぞれ、Ｃ１ｑ及びＦｃγ受容体（ＦｃγＲ）の結合を介するin vitroスクリーニングアッセイで検討した。ADWA11 2.4は、試験濃度（最大で３０μｇ／ｍＬ）ではＣ１ｑに結合しなかったため、ＣＤＣを誘発する可能性は低いと考えられる。試験を行った全てのＦｃγＲへのADWA11 2.4の結合は、陰性対照抗体への結合と比較して同等又はそれより低く、陽性対照抗体への結合と比較してより低かった。したがって、ADWA11 2.4はＡＤＣＣ活性を誘発する可能性は低いと考えられる。

実施例２５ in vitroでのサイトカイン放出アッセイ
８人のヒトの全血及びＰＢＭＣのサンプルを使用して、in vitroサイトカイン放出アッセイを行った。ADWA11 2.4とインキュベーションした後、ＴＮＦ、ＩＬ６又はＩＮＦγを放出した試験品は認められなかった。これらのデータは上述したマウス及びサルでの実験におけるADWA11 2.4投与後の血清サイトカインプロファイルの変化と一致する。

実施例２６ ＭＣ３８腫瘍モデルにおける抗ＰＤ-１療法の有効性のαｖβ８の阻害による改善
方法：
この実験では、ＭＣ３８マウス結腸癌細胞株は、１０％ウシ胎児血清、２ｍＭのグルタミン、１００単位／ｍＬのペニシリンＧナトリウム、１００μｇ／ｍＬの硫酸ストレプトマイシン及び２５μｇ／ｍＬゲンタマイシンを含むダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）で維持した。３７℃、５％ＣＯ_２及び９５％空気に設定した加湿インキュベーター内の組織培養フラスコで細胞を培養した。腫瘍移植の日に指数関数的に増殖中のＭＣ３８腫瘍細胞を採取し、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）に再懸濁した。各マウスの右脇腹の皮下（ｓｃ）に、懸濁液０．１ｍＬ中の５×１０^５個の細胞を移植した。平均体積が８０～１２０ｍｍ^３に近づいたときの増殖を監視するために、腫瘍の長さと幅を測定した。体積（Ｖ）＝1/2×Ｌ×Ｗ^２（ここで、Ｌ（長さ）は腫瘍の最長径で、Ｗ（幅）はＬに垂直な長さである）として求めた。実験の１日目に、群の平均腫瘍体積が１００ｍｍ^３となるように動物を７つの群（１群あたり１０匹）に分け、以下のように実験した。腫瘍の体積が１２００ｍｍ^３を超えるまで、腫瘍の測定値を週に２～３回記録した。

Omin Bead Ruptorを使用してRNeasy Plus MiniKitに付属の９００μＬの溶解バッファー中にホモジナイズした、３０ｍｇの採取した腫瘍組織の遺伝子発現の定量ＰＣＲ（ｑＰＣＲ）分析を行った。ホモジナイズした腫瘍サンプルのＲＮＡは、RNeasy Plus MiniKitを用いベンダー推奨のプロトコルにより分離した。ＲＮＡの濃度をEpoch BioTek分光光度計を使用して定量し、ｄｄＨ２０で２００ｎｇ／μＬに再懸濁した。２μｇの全ＲＮＡと大容量ｃＤＮＡ逆転写キットを使用して、ベンダー推奨のプロトコルによりｃＤＮＡを合成した。遺伝子発現を、５０ｎｇのｃＤＮＡと遺伝子特異的taqmanプライマーであるTaqMan Universal Master Mix IIを使用して、ベンダー推奨プロトコルにより分析した。ViiA7リアルタイムｑＰＣＲシステムをｑＰＣＲ実験に使用した。各サンプルの閾値サイクル（ＣＴ）を推奨の比較ＣＴ法により分析し、標的遺伝子の発現を、アイソタイプ対照群と比較した処置群の変化倍率として報告する。両側の対応のないスチューデントのＴ検定により処置群をアイソタイプ対照群と比較したところ、有意性は０．０５未満であった。

結果：
腫瘍リンパ球の量におけるαｖβ８遮断の効果を検討するために、アイソタイプ対照又はADWA11 VH05-2/VK01（ADWA 2.4）で処置したマウスから１２日目（１、５、９日目に抗体処置）に腫瘍組織を収集し、定量ＰＣＲによってリンパ球マーカーのｍＲＮＡ発現を分析した。ADWA11 VH05-2/VK01（ADWA 2.4）による処置は、腫瘍微小環境におけるＣＤ８ａ（２．６２±０．７６３）及びグランザイムＢ（５．７９±１．５５）の発現を増加させた（倍率変化±標準偏差、対アイソタイプ群、１０ｍｇ／ｋｇ処置群）（図３１Ａ）。これらのデータは、ADWA11 2.4抗体による処置が、腫瘍微小環境で腫瘍退縮に関与する活性化リンパ球の量を増加させることを示している。

ADWA11 2.4による処置の１５日目のＴＧＩは１８％であるのに対し、抗ＰＤ-１抗体（RMP1-14）による処置では１６日目に１０．３％のＴＧＩで、実験が終了したマウスはいなかった（３０日目の生存率０％）。一方、抗ＰＤ-１と組み合わせたADWA11 2.4は、１６日目に３５．８％のＴＧＩとなり、６０％のマウスで実験が終了した（３０日目の生存率％）（図３１Ｂ上部）。

これらの結果は、この実験で使用した抗体によって示されるように、抗ＰＤ-１及び抗αｖβ８の併用処置が予想外の相乗的抗腫瘍効果を提供することを実証している。これらのデータは、本発明の新規な抗αｖβ８抗体（例．ADWA11 2.4）と当該技術分野で周知の抗ＰＤ-１抗体との併用療法が、腫瘍治療の潜在的な新規な治療法を提供することを示す。

さまざまな用途、方法、キット及び組成物に言及して本発明を説明してきたが、本明細書における開示及び特許請求の範囲の記載から逸脱することなく、さまざまな変更や修正を行うことができることが理解されるであろう。以下の実施例は、本明細書における開示をよりよく説明するために示すもので、本明細書における開示の範囲を限定することを意図するものではない。本明細書では代表的な実施の形態について説明してきたが、当業者は、これらの代表的な実施の形態のさまざまな変形及び修正が過度の実験を行うことなく可能であることを容易に理解するであろう。そのような全ての変形及び修正は、本発明の範囲内である。

特許、特許出願、論文、教科書などを含む本明細書で引用した全ての参考文献、及びそこで引用された参考文献は、それらがまだ組み込まれていない範囲で、その全体が全ての目的のために本明細書に組み込まれる。定義された用語、用語の使用法、説明された技術などを含むがこれらに限定されない事項が、１つ以上の組み込まれた文献及び類似の資料とこの明細書で異なるか矛盾する場合、この明細書を優先する。

本発明の範囲又は精神から逸脱することなく、本発明においてさまざまな修正及び変形を行うことができることは当業者には明らかであろう。本発明の他の実施の形態は、本明細書を熟考と、本明細書に記載された発明の実践から当業者には明らかであろう。この明細書及び実施例は例示としてのみ見なされることが意図されており、真のこの発明の範囲及び精神は特許請求の範囲によって示されている。

Claims (47)

1. αｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、前記抗体又は断片は、
   (a) 配列番号１１で示されるアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域１（ＣＤＲ-Ｌ１）；配列番号１２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２；配列番号１３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３；配列番号８で示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１（ＣＤＲ-Ｈ１）；配列番号９で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２及び配列番号１０で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３を含む抗体又はその抗原結合断片；
   (b) 配列番号１７で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ１；配列番号１８で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ２；配列番号１９で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｌ３；配列番号１４で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ１；配列番号１５で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ２及び配列番号１６で示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ-Ｈ３を含む抗体又はその抗原結合断片；
   (c) ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124918であるプラスミドの挿入物がコードするアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）領域、及び、ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124917であるプラスミドの挿入物がコードするアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
   (d) 配列番号７で示されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域、及び配列番号６で示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
   (e) 配列番号６２～６６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域、及び配列番号３４～３８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
   (f) 配列番号４７及び９２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域、並びに配列番号３９及び８８～９１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
   (g) 配列番号７及び６７～６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域、並びに配列番号６及び９３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
   (h) 配列番号７、４７～６９及び９２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域、並びに配列番号６、３４～４６、８８～９１及び９３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
   (i) 配列番号５で示されるアミノ酸配列を含む軽鎖（ＬＣ）領域、及び配列番号２で示されるアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
   (j) 配列番号５で示されるアミノ酸配列を含むＬＣ領域、及び配列番号３で示されるアミノ酸配列を含むＨＣ領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
   (k) 配列番号１２３で示されるアミノ酸配列を含むＬＣ領域、及び配列番号１２４又は１８２で示されるアミノ酸配列を含むＨＣ領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
   (l) 配列番号１８６で示される核酸配列によってコードされたＶＬ領域、及び配列番号１９０で示される核酸配列によってコードされたＶＨ領域を含む抗体又はその抗原結合断片；並びに
   (m) 配列番号１８５で示される核酸配列によってコードされたＬＣ領域、及び配列番号１８９又は１９１で示される核酸配列によってコードされたＨＣ領域を含む抗体又はその抗原結合断片
   からなる群から選択される少なくとも一つの抗体又は断片である、
   単離された抗体又はその抗原結合断片。
2. 配列番号７で示されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域、及び配列番号６で示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む、請求項１に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
3. 配列番号７で示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＶＬ領域、及び配列番号６で示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む、請求項１又は２に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
4. 配列番号５で示されるアミノ酸配列を含むＬＣ領域、及び配列番号２又は３で示されるアミノ酸配列を含むＨＣ領域を含む、請求項１に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
5. 配列番号５で示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＬＣ領域、及び配列番号２又は３で示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＨＣ領域を含む、請求項１又は４に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
6. αｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、前記抗体又は断片は、配列番号６、３４～４６、８８～９１及び９３からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域、並びに／又は配列番号７、４７～６９及び９２からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含む、単離された抗体又はその抗原結合断片。
7. αｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、前記抗体又は断片は、
   (i) 配列番号２若しくは３で示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む抗体のＨＣ領域；及び／又は
   (ii) 配列番号５で示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む抗体のＬＣ領域を含む、
   単離された抗体又はその抗原結合断片。
8. αｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体であって、配列番号５で示されるアミノ酸配列からなるＬＣ、及び配列番号２又は３で示されるアミノ酸配列からなるＨＣを含む、
   単離された抗体。
9. αｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体であって、
   配列番号７で示されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域のＣＤＲ-Ｌ１、ＣＤＲ-Ｌ２及びＣＤＲ-Ｌ３を含む抗体のＶＬ領域；並びに
   配列番号６で示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域のＣＤＲ-Ｈ１、ＣＤＲ-Ｈ２及びＣＤＲ-Ｈ３を含む抗体のＶＬ領域を含む、
   単離された抗体。
10. 配列番号１８１又は１８４で示されるアミノ酸配列を含む抗体の重鎖定常領域及び配列番号８３で示されるアミノ酸配列を含む抗体の軽鎖定常領域を含む、請求項９に記載の単離された抗体
11. αｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体であって、
    a) 配列番号７で示されるアミノ酸配列を含むＶＬ領域の第１、第２及び第３のＣＤＲを含む抗体のＶＬ領域；
    配列番号６で示されるアミノ酸配列を含むＶＨ領域の第１、第２及び第３のＣＤＲを含む抗体のＶＨ領域；
    配列番号８３で示されるアミノ酸配列を含む抗体の軽鎖定常（ＣＬ）領域、並びに
    配列番号１８１若しくは１８４で示されるアミノ酸配列を含む抗体の重鎖定常（ＣＨ）領域；
    b) 配列番号７で示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む抗体のＶＬ領域、及び配列番号６で示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む抗体のＶＨ領域；又は
    c) 配列番号５で示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む抗体のＬＣ領域、及び配列番号２又は３で示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む抗体のＨＣ領域を含む、
    単離された抗体。
12. αｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、
    ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124917である挿入物がコードするアミノ酸配列を含む抗体のＶＨ、及び、ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124918である挿入物がコードするアミノ酸配列を含む抗体のＶＬを含む、
    単離された抗体又はその抗原結合断片
13. αｖβ８インテグリンに特異的に結合する単離された抗体又はその抗原結合断片であって、前記抗体又は断片は、以下のm.～x.の少なくとも１つの特性：
    m. マウス抗体ADWA11のＫＤよりも小さい、例えば約５３６ｐＭ未満の、ヒトαｖβ８インテグリンに対する結合親和性（ＫＤ）；
    n. 約１００ｐＭ以下であるヒトαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
    o. マウス抗体ADWA11のＫＤよりも小さい、例えば約４８９ｐＭ未満の、マウスαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
    p. 約１００ｐＭ未満であるマウスαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
    q. マウス抗体ADWA11のＫＤよりも小さい、例えば約５０７ｐＭ未満の、カニクイザルαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
    r. 約１００ｐＭ以下であるカニクイザルαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
    s. 約１６０ｐＭであるラットαｖβ８インテグリンに対するＫＤ；
    t. 例えば、Biacore親和性アッセイにより求めた約１００ｐＭ未満のＫＤである、ヒト、カニクイザル、マウス及びラットのαｖβ８インテグリンの少なくとも２つ、３つ又は全てに対してほぼ同等の親和性；
    u. 約１００ｐＭ～約３００ｐＭであるＴＧＦβトランス活性化阻害のＩＣ５０；
    v. Ｕ２５１細胞に対する約１００ｐＭ～約４００ｐＭのＥＣ３０；
    w. 約１１０ｐＭ～約１８０ｐＭであるＣ８-Ｓ細胞に対するＥＣ５０；並びに
    x. 以下のvii.～xii.から選択される少なくとも１つのヒト薬物動態（ＰＫ）パラメーターの予測値
    vii. 約０．１２ｍＬ／ｈ／ｋｇである中央コンパートメントからのクリアランス（ＣＬ）；
    viii. 約０．５１ｍＬ／ｈ／ｋｇであるコンパートメント間分配クリアランス（ＣＬＦ）；
    ix. 約３６ｍＬ／ｋｇである中央コンパートメントの分布容積（Ｖ１）；
    x. 約３３ｍＬ／ｋｇである周辺コンパートメントの分布容積（Ｖ２）；
    xi. 約１５～１７日である半減期（ｔ_１／２）；及び
    xii. ヒトＦｃγ受容体又はＣ１ｑへの検出可能な結合の不在
    を有する単離された抗体又はその抗原結合断片。
14. KabatのＥｕナンバリングによるＬ２３４、Ｌ２３５及びＧ２３７位に１つ以上の置換（例．Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＧ２３７Ａの１つ以上）を含むヒトＩｇＧ１のＦｃ領域を含む、先行する請求項のいずれか一項に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
15. 前記抗体は、ヒト化抗体、ヒト抗体、マウス抗体、キメラ抗体又はラクダ抗体である、先行する請求項のいずれか一項に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
16. 前記抗体の重鎖のアイソタイプは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４若しくはそのバリアントから選択され、及び／又は、前記軽鎖の定常領域はκ鎖若しくはλ鎖から選択される、先行する請求項のいずれか一項に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
17. 前記抗体の重鎖のアイソタイプはＩｇＧ１であり、及び／又は、前記軽鎖の定常領域はκ軽鎖である、先行する請求項のいずれか一項に記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
18. αｖβ８インテグリンとの結合において請求項４に記載の抗体又はその抗原結合断片と競合する抗体又はその抗原結合断片。
19. 先行する請求項のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片及び薬学的に許容される担体又は賦形剤を含む医薬組成物。
20. i) 配列番号２で示されるアミノ酸配列によってコードされる抗体重鎖、及び配列番号５で示されるアミノ酸配列によってコードされる抗体軽鎖を含む抗体若しくはその抗原結合断片、ii) 配列番号３で示されるアミノ酸配列によってコードされる抗体重鎖、及び配列番号５で示されるアミノ酸配列によってコードされる抗体軽鎖を含む抗体若しくはその抗原結合断片、又は iii) これらの両者、を含む、請求項１９に記載の医薬組成物。
21. 請求項１～１８のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片をコードする単離された核酸。
22. 前記単離された核酸は、前記抗体又はその抗原結合断片のＶＨ領域、ＶＬ領域又はこれらの両者をコードし、前記核酸は、配列番号１９０で示される核酸配列、配列番号１８６で示される核酸配列又はこれらの両者を含む、請求項２１に記載の単離された核酸。
23. 前記単離された核酸は、前記抗体又はその抗原結合断片の重鎖定常領域、軽鎖定常領域又はこれらの両者をコードし、前記核酸は、配列番号１９２若しくは１９３で示される核酸配列、配列番号１９４で示される核酸配列又はこれらの両者を含む、請求項２１に記載の単離された核酸。
24. 前記単離された核酸は、前記抗体又はその抗原結合断片のＨＣ、ＬＣ又はこれらの両者をコードし、前記核酸は、配列番号１８９若しくは１９０で示される核酸配列、配列番号１８５で示される核酸配列又はこれらの両者を含む、請求項２１に記載の単離された核酸。
25. 前記単離された核酸は、ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124917であるプラスミドの挿入物の核酸配列、ＡＴＣＣに寄託され受託番号がPTA-124918であるプラスミドの挿入物の核酸配列、又はこれらの両者を含む、請求項２１に記載の単離された核酸。
26. 前記単離された核酸は、配列番号１８９若しくは配列番号１９１に対して少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは１００％の配列同一性を有する核酸配列、配列番号１８５に対して少なくとも８０％、８５％、８７％、９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％若しくは１００％の配列同一性を有する核酸配列、又はこれらの両者、を含む、請求項２１に記載の単離された核酸。
27. 請求項２１～２６のいずれか一項に記載の核酸を含むベクター。
28. 請求項２１～２６のいずれか一項に記載の核酸又は請求項２７に記載のベクターを含む宿主細胞。
29. 前記宿主細胞は、ＣＨＯ細胞、ＣＯＳ細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＮＳ０細胞、ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）細胞及びＳｐ２．０細胞からなる群から選択される哺乳類細胞である、請求項２７に記載の宿主細胞。
30. 請求項２８に記載の宿主細胞が前記抗体又は断片を発現し、抗体又は断片を単離する条件下で、前記宿主細胞を培養することを含む、単離された抗体又はその抗原結合断片を製造する方法。
31. それを必要とする対象におけるαｖβ８インテグリンの活性を低下させる方法であって、前記方法は、前記対象に、治療有効量の請求項１～１８のいずれか一項に記載の抗体若しくはその抗原結合断片又は請求項１９若しくは２０に記載の医薬組成物を投与することを含む、方法。
32. がんを治療する方法であって、それを必要とする対象に治療有効量の請求項１～１８のいずれか一項に記載の抗体若しくはその抗原結合断片又は請求項１９若しくは２０に記載の医薬組成物を投与することを含む、方法。
33. さらに、細胞毒性剤、細胞増殖抑制剤、化学療法剤、ホルモン治療、ワクチン、免疫療法、手術、放射線、冷凍手術、温熱療法又はそれらの組合せを適用する、請求項３２に記載の方法。
34. 前記適用は、治療有効量の前記抗体若しくはその抗原結合断片又は前記医薬の組合せの投与と、同時、逐次、又は別々である、請求項３３に記載の方法。
35. 前記免疫療法は、抗ＰＤ-１抗体、抗ＰＤ-Ｌ１抗体、抗ＰＤ-Ｌ２抗体、抗ＣＴＬＡ-４抗体、可溶性ＣＴＬＡ-４融合タンパク質及びその組合せからなる群から選択される免疫チェックポイント分子のモジュレーターを含み、ここで、前記抗ＰＤ-Ｌ１抗体はアベルマブではない、請求項３３に記載の方法。
36. 前記がんは、頭頚部の扁平上皮癌、明細胞又は乳頭状腎細胞癌、卵巣癌、卵管癌、原発性腹膜癌、胃癌、胃食道接合部の癌、食道癌、肺の扁平上皮癌、膵管腺癌、胆管癌、子宮癌、メラノーマ、尿路上皮癌及びそれらの組合せからなる群から選択される、請求項３２～３５のいずれか一項に記載の方法。
37. 請求項１～１８に記載された抗体又はその抗原結合断片を使用して、試料、組織又は細胞中のαｖβ８インテグリンを検出する方法であって、前記試料、組織又は細胞と前記抗体又はその抗原結合断片を接触させること、及び前記抗体又はその抗原結合断片を検出することを含む、方法。
38. 請求項１～２０のいずれか一項に記載の抗体又は断片又は請求項１９若しくは２０に記載の医薬組成物、及び任意に請求項３５に記載のモジュレーターを含むキット。
39. がんの治療のために、それを必要とする対象におけるαｖβ８インテグリンの活性を低下させるのに使用するための、請求項１～１８のいずれか一項に記載の抗体若しくはその抗原結合断片又は請求項１９若しくは２０に記載の医薬組成物。
40. がんの治療に使用するための請求項１～１８のいずれか一項に記載の抗体若しくはその抗原結合断片又は請求項１９若しくは２０に記載の医薬組成物であって、任意に、前記抗体若しくはその抗原結合断片又は前記医薬組成物は、免疫療法と併用して、同時に、逐次に、又は別々に投与され、前記併用は、任意に相乗的な治療効果を提供する、抗体若しくはその抗原結合断片又は医薬組成物。
41. 前記がんは、頭頚部の扁平上皮癌、明細胞又は乳頭状腎細胞癌、卵巣癌、卵管癌、原発性腹膜癌、胃癌、胃食道接合部の癌、食道癌、肺の扁平上皮癌、膵管腺癌、胆管癌、子宮癌、メラノーマ、尿路上皮癌及びそれらの組合せからなる群から選択され、任意に、前記抗体若しくはその抗原結合断片又は前記医薬組成物若しくは医薬の組合せが、免疫療法又は放射線療法と共に使用される、請求項４０に記載の使用のための、抗体若しくはその抗原結合断片又は医薬組成物。
42. がんの治療のための、請求項１～１８のいずれか一項に記載の抗体若しくはその抗原結合断片又は請求項１９若しくは２０に記載の医薬組成物の使用。
43. がんを治療する医薬の製造における、請求項１～１８のいずれか一項に記載の抗体若しくはその抗原結合断片の使用。
44. それを必要とする対象に、治療有効量の (i) αｖβ８インテグリンに特異的に結合する抗体又はその抗原結合断片、及び (ii) 抗ＰＤ１、抗ＰＤ-Ｌ１又は抗ＰＤ-Ｌ２免疫チェックポイント分子のモジュレーターを投与することを含む、がんの治療方法。
45. 前記がんが扁平上皮癌である、請求項４４に記載の方法。
46. 前記がんが乳癌又は結腸癌である、請求項４４に記載の方法。
47. 前記モジュレーターが、抗ＰＤ１抗体、抗ＰＤ-Ｌ１抗体及び抗ＰＤ-Ｌ２抗体からなる群から選択される、請求項４４に記載の方法。

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