JP2021504370A

JP2021504370A - 肝疾患を治療するためのｆｘｒ作動薬

Info

Publication number: JP2021504370A
Application number: JP2020528867A
Authority: JP
Inventors: バッドマン，マイケル; ブラス，クリフフォード; ラフィテ，ブライアン
Original assignee: ノバルティスアーゲー
Priority date: 2017-11-30
Filing date: 2018-11-28
Publication date: 2021-02-15
Also published as: CA3081656A1; IL274747A; AU2018376904A1; RU2020121222A3; MX2020005557A; TW201936189A; US20190161483A1; CN111356458A; AU2018376904B2; EP3716977A1; WO2019106550A1; US20210361638A1; KR20200094175A; RU2020121222A

Abstract

本発明は、特に肝疾患を治療又は予防するため、特定用量のトロピフェキソールを用いてファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）の活性を調節するための方法を提供する。

Description

本発明は、ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）によって媒介される肝臓状態を、ＦＸＲ作動薬、例えばトロピフェキソールを治療有効量で用いることにより治療又は予防するための新規なレジメン、並びにかかるレジメンを含む方法、使用、組成物に関する。

ＦＸＲアゴニズムは、胆汁うっ滞性障害（Ｎｅｖｅｎｓｅｔａｌ．，Ｊ．Ｈｅｐａｔｏｌ．６０（１ＳＵＰＰＬ．１）：３４７Ａ−３４８Ａ（２０１４））、胆汁酸吸収不良下痢（Ｗａｌｔｅｒｓｅｔａｌ．，ＡｌｉｍｅｎｔＰｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．４１（１）：５４−６４（２０１４））及び非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ；Ｎｅｕｓｃｈｗａｎｄｅｒ−Ｔｅｔｒｉｅｔａｌ２０１５）を有する対象において臨床的有用性を示している。

ＯＣＡと略され、ＩＮＴ−７４７としても公知であるオベチコール酸（６α−エチル−ケノデオキシコール酸）は、天然胆汁酸ケノデオキシコール酸に対する類似体である、胆汁酸由来のＦＸＲ作動薬である。臨床試験では、ＯＣＡは、原発性胆汁肝硬変（ＰＢＣ）及び非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）対象の双方において有効性を示したが、ＯＣＡ治療はそう痒の増強に関連することがある。ＯＣＡは、ＰＢＣ対象又はＮＡＳＨ対象において、５ｍｇ〜５０ｍｇの間の用量で試験された。ＦＬＩＮＴ試験では、３５％のＯＣＡ治療患者は、１９％のプラセボ治療患者と比べて、線維症における改善を示したが、ＮＡＳＨの回復において、プラセボと比べての有意な変化は認められなかった。さらに、そう痒は、ＯＣＡ治療患者（２３％）において、プラセボ治療患者（６％）と比べてより一般的であった。

有効であり、より限定された副作用を伴う可能性がある、ＦＸＲによって媒介される肝臓状態に対する新たな処置及び治療法がいまだ求められている。

本発明は、ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）によって媒介される状態、特に肝疾患を治療する、予防する、又は寛解させる方法であって、式（Ｉ）

（即ち、２−［３−（｛５−シクロプロピル−３−［２−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−１，２−オキサゾール−４−イル｝メトキシ）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−４−フルオロ−１，３−ベンゾチアゾール−６−カルボン酸）のＦＸＲ作動薬、その立体異性体、鏡像異性体、薬学的に許容できる塩又はアミノ酸コンジュゲート、例えば、遊離形態での式（ＩＩ）

（即ち、２−［（１Ｒ，３ｒ，５Ｓ）−３−（｛５−シクロプロピル−３−［２−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−１，２−オキサゾール−４−イル｝メトキシ）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−イル］−４−フルオロ−１，３−ベンゾチアゾール−６−カルボン酸）のＦＸＲ作動薬（本明細書中で化合物Ａと定義される、又はトロピフェキソール）、又はその薬学的に許容できる塩若しくはアミノ酸コンジュゲートを治療有効量でそれを必要とする対象に投与することを含む、方法に関する。

本発明は、ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）によって媒介される肝疾患及び障害を治療又は予防するための、トロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲート、例えば、トロピフェキソールのグリシンコンジュゲート、タウリンコンジュゲート又はアシルグルクロニドコンジュゲートの新たな投与計画、並びにかかる新たな投与計画の使用及びかかる新たな投与計画を実施するのに適した医薬組成物をさらに提供する。かかる新たな投与計画は、ヒトにおけるファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）によって媒介される肝疾患及び障害を治療又は予防するための有効且つ十分な耐容性があるレジメンである。ＯＣＡと比べて、本明細書で開示される非胆汁酸ＦＸＲ作動薬、例えばトロピフェキソールは、約３００倍より強力であり、ＦＧＲ５効果を伴わないことから、それを必要とする患者に投与されるとき、より高い特異性を有する。

式（Ｉ）の化合物（例えばトロピフェキソール）は、非胆汁酸由来のＦＸＲ作動薬である。それらは国際公開第２０１２／０８７５１９号パンフレットに記載されている。非胆汁酸由来のＦＸＲ作動薬は、ＦＸＲ標的に対するより高い効力、より高い特異性と、胆汁酸代謝のプロセスを受けない吸収、分布、代謝及び排泄プロセスといった利点を有する。

本発明の様々な（列挙される）実施形態が本明細書に記載される。本開示のさらなる実施形態を提供するため、各実施形態中で具体化される特徴が他の具体的特徴と組み合わせてもよいことは理解されるであろう

実施形態１：ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）によって媒介される状態を治療又は予防するための治療レジメンであって、式（Ｉ）のＦＸＲ作動薬、その立体異性体、鏡像異性体、薬学的に許容できる塩又はそのアミノ酸コンジュゲート、例えばトロピフェキソールを、例えばその遊離形態又はアミノ酸コンジュゲートで、約１４０μｇ〜約２５０μｇ、約１４０μｇ〜約２００μｇの用量（例えば１日量）で投与することを含む、治療レジメン。かかる用量は、毎日又は１日２回の投与に対応するものであってもよい。

実施形態２：ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）によって媒介される状態を治療又は予防するための治療レジメンであって、トロピフェキソールを、例えばその遊離形態又はアミノ酸コンジュゲートで、約１４０μｇ、約１５０μｇ、約１６０μｇ、約１７０μｇ、約１８０μｇ、約１９０μｇ、約２００μｇ、約２１０μｇ、約２２０μｇ、約２３０μｇ、約２４０μｇ又は約２５０μｇの用量で投与することを含む、治療レジメン。かかる用量は、毎日投与（例えば１日量）に対応するものであってもよい。かかる用量は、毎日又は１日２回に対応するものであってもよい。

実施形態３：ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）によって媒介される状態、例えば肝臓又は腸疾患を治療又は予防するための治療レジメンであって、トロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートを約１４０μｇの用量で、例えば毎日又は１日２回、例えば毎日、投与することを含む、治療レジメン。

実施形態４：ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）によって媒介される状態、例えば肝臓又は腸疾患を治療又は予防するための治療レジメンであって、トロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートを約１４０μｇ又は約２００μｇの用量で、例えば毎日又は１日２回、例えば毎日、投与することを含む、治療レジメン。

実施形態５：ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）によって媒介される状態、例えば肝臓又は腸疾患を治療又は予防するための治療レジメンであって、トロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートを約２００μｇの１日量で、例えば毎日又は１日２回、例えば毎日、投与することを含む、治療レジメン。

実施形態６：ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）によって媒介される状態、例えば肝臓又は腸疾患を治療又は予防するための治療レジメンであって、トロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートを約２５０μｇの１日量で、例えば毎日又は１日２回、例えば毎日、投与することを含む、治療レジメン。

実施形態７：ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）によって媒介される状態を治療又は予防するための薬剤の製造におけるトロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートの使用において、トロピフェキソールは、約１４０μｇ〜約２５０μｇ、約１４０μｇ〜約２００μｇの用量（例えば１日量）で投与されるべきである。かかる用量は、毎日投与（１日量）又は１日２回投与、例えば毎日投与に対応するものであってもよい。

実施形態８：ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）によって媒介される状態を治療又は予防するための薬剤の製造におけるトロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートの使用において、トロピフェキソールは、約１４０μｇ、約１５０μｇ、約１６０μｇ、約１７０μｇ、約１８０μｇ、約１９０μｇ、約２００μｇ、約２１０μｇ、約２２０μｇ、約２３０μｇ、約２４０μｇ又は約２５０μｇの用量で投与されるべきである。かかる用量は、毎日投与（例えば１日量）又は毎日若しくは１日２回投与、例えば毎日投与に対応するものであってもよい。

実施形態９：ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）によって媒介される状態を治療又は予防するための薬剤の製造におけるトロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートの使用において、トロピフェキソールは、約１４０μｇ／日〜約２５０μｇ／日、約１４０μｇ／日〜約２００μｇ／日の用量で投与されるべきである。

実施形態１０：ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）によって媒介される状態を治療又は予防するための薬剤の製造におけるトロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートの使用において、トロピフェキソールは、約１４０μｇ、約１５０μｇ、約１６０μｇ、約１７０μｇ、約１８０μｇ、約１９０μｇ、約２００μｇ、約２１０μｇ、約２２０μｇ、約２３０μｇ、約２４０μｇ又は約２５０μｇの用量で投与されるべきである。かかる用量は、毎日投与（例えば１日量）又は１日２回投与に対応するものであってもよい。

実施形態１１：ＦＸＲによって媒介される状態の治療又は予防における使用を意図した、例えばその遊離形態又はアミノ酸コンジュゲートでのトロピフェキソールにおいて、トロピフェキソールは、約１４０μｇ〜約２５０μｇ、約１４０μｇ〜約２００μｇの用量（例えば１日量）で投与されるべきであり、またＦＸＲによって媒介される前記状態は、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、薬剤誘発性胆管損傷、胆石、肝硬変、アルコール誘発性肝硬変、嚢胞性線維症、胆管閉塞、胆石症、肝線維症である。

実施形態１２：ＦＸＲによって媒介される状態の治療又は予防における使用を意図した、例えばその遊離形態又はアミノ酸コンジュゲートでのトロピフェキソールにおいて、トロピフェキソールは、約１４０μｇ、約１５０μｇ、約１６０μｇ、約１７０μｇ、約１８０μｇ、約１９０μｇ、約２００μｇ、約２１０μｇ、約２２０μｇ、約２３０μｇ、約２４０μｇ又は約２５０μｇの用量で投与されるべきである。かかる用量は、毎日投与（例えば１日量）に対応するものであってもよい。かかる用量は、１日２回投与に対応するものであってもよい。

実施形態１３：実施形態１〜１２のいずれか１つに記載のトロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートの使用において、ＦＸＲによって媒介される状態は、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、薬剤誘発性胆管損傷、胆石、肝硬変、アルコール誘発性肝硬変、嚢胞性線維症、胆管閉塞、胆石症、肝線維症である。

実施形態１４：実施形態１〜１２のいずれか１つに記載のトロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートの使用において、ＦＸＲによって媒介される状態は、ＮＡＦＬＤ又はＮＡＳＨである。

実施形態１５：ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）によって媒介される状態を、それを患っている対象において治療又は予防するための方法であって、トロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートを対象に投与することを含み；ここでロピフェキソールが、約１４０μｇ〜約２５０μｇ、約１４０μｇ〜約２００μｇの１日量で投与されるべきである、方法。

実施形態１６：ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）によって媒介される状態を、それを患っている対象において治療又は予防するための方法であって、トロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートを対象に投与することを含み；ここでトロピフェキソールが、約１４０μｇ／日〜約２５０μｇ／日、約１４０μｇ／日〜約２００μｇ／日の用量で投与されるべきである、方法。

実施形態１７：ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）によって媒介される状態を、それを患っている対象において治療又は予防するための方法であって、トロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートを対象に投与することを含み；ここでトロピフェキソールが、約１４０μｇ／日、約１５０μｇ／日、約１６０μｇ／日、約１７０μｇ／日、約１８０μｇ／日、約１９０μｇ／日、約２００μｇ／日、約２１０μｇ／日、約２２０μｇ／日、約２３０μｇ／日、約２４０μｇ／日又は約２５０μｇ／日の用量で投与されるべきである、方法。

実施形態１８：実施形態１〜１６のいずれか１つに記載のファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）によって媒介される状態を治療又は予防するための方法であって、該状態が、慢性肝疾患、例えば、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、薬剤誘発性胆管損傷、胆石、肝硬変、アルコール誘発性肝硬変、嚢胞性線維症、胆管閉塞、胆石症、又は肝線維症などである、方法。

実施形態１９：慢性肝疾患を、それを患っている対象において治療又は予防するための方法であって、トロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートを、約１４０μｇ〜約２５０μｇ、約１４０μｇ〜約２００μｇの用量（例えば１日量）で対象に投与することを含む、方法。

実施形態２０：慢性肝疾患を、それを患っている対象において治療又は予防するための方法であって、トロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートを、約１４０μｇ、約１５０μｇ、約１６０μｇ、約１７０μｇ、約１８０μｇ、約１９０μｇ、約２００μｇ、約２１０μｇ、約２２０μｇ、約２３０μｇ、約２４０μｇ又は約２５０μｇの用量で対象に投与することを含む、方法。かかる用量は、毎日投与（例えば１日量）に対応するものであってもよい。かかる用量は、１日１回又は１日２回投与に対応するものであってもよい。

実施形態２１：非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、薬剤誘発性胆管損傷、胆石、肝硬変、アルコール誘発性肝硬変、嚢胞性線維症、胆管閉塞、胆石症及び肝線維症から選択される肝疾患又は障害を治療又は予防するための、実施形態１９又は２０に記載の方法。

実施形態２２：ＮＡＳＨを治療又は予防するための実施形態１９又は２０に記載の方法。

実施形態２３：実施形態１〜２２のいずれか１つに記載の、ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）によって媒介される状態、例えば慢性肝疾患を、それを患っている対象において治療又は予防するための使用、トロピフェキソール、又は方法において、トロピフェキソールは、３か月〜生涯、例えば６か月〜生涯、例えば１年〜生涯の期間、例えば３か月〜１年、例えば６か月〜生涯の期間、例えば、３か月、６か月若しくは１年の期間、又は生涯にわたり投与されるべきである。

実施形態２４：非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、薬剤誘発性胆管損傷、胆石、肝硬変、アルコール誘発性肝硬変、嚢胞性線維症、胆管閉塞、胆石症及び肝線維症から選択される肝疾患又は障害を治療又は予防するための、実施形態１〜２３のいずれか１つに記載の使用、トロピフェキソール、又は方法。

実施形態２５：非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）を治療又は予防するための、実施形態１〜２３のいずれか１つに記載の使用、トロピフェキソール、又は方法において、ＮＡＳＨは軽度〜中等度であり、線維症レベルはＦ２〜Ｆ３である。

実施形態２６：非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）を治療又は予防するための、実施形態１〜２３のいずれか１つに記載の使用、トロピフェキソール、又は方法において、ＮＡＳＨは、トロピフェキソールによる治療開始前２年以内に得られた肝生検に基づいて確認され（生検で確認されたＮＡＳＨとも称される）、且つＮＡＳＨは、軽度〜中等度であり、線維症レベルはＦ２〜Ｆ３である。

実施形態２７：非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）を治療又は予防するための、実施形態１〜２３のいずれか１つに記載の使用、トロピフェキソール、又は方法において、ＮＡＳＨの存在は、
ｉ）実施形態１〜２３のいずれか１つに記載のＦＸＲ作動薬による治療前２年以内に得られた肝生検に基づくＮＡＳＨの組織学的証拠に加えて、ＮＡＳＨに合致する診断、Ｆ１、Ｆ２若しくはＦ３の線維症レベル、他の慢性肝疾患が診断されていないこと、及びＡＬＴ≧６０ＩＵ／Ｌ（男性）若しくは≧４０ＩＵ／Ｌ（女性）、の１つにより、又は
ｉｉ）
−ＡＬＴ≧６０ＩＵ／Ｌ（男性）若しくは≧４０ＩＵ／Ｌ（女性）、及び
−（アジア系以外の自己同定された人種の患者において）ＢＭＩ≧２７ｋｇ／ｍ２若しくは（自己同定されたアジア系人種の患者において）≧２３ｋｇ／ｍ２、及び
−２型糖尿病の、ＨｂＡ１Ｃ≧６．５％若しくは２型糖尿病用の薬剤療法のいずれかを有することによる診断
の３つすべての存在に基づくＮＡＳＨの表現型診断により、
実証されている。

実施形態２８：最大で５００μｇ／日の最大総用量の経口投与に適した、約１４０μｇ、約１５０μｇ、約１６０μｇ、約１７０μｇ、約１８０μｇ、約１９０μｇ、約２００μｇ、約２１０μｇ、約２２０μｇ、約２３０μｇ、約２４０μｇ又は約２５０μｇのトロピフェキソールを含む単位剤形医薬組成物。かかる単位剤形組成物は、液体、錠剤、カプセル剤から選択される形態であってもよい。さらにこれらの単位剤形組成物は、慢性肝疾患、例えば、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、薬剤誘発性胆管損傷、胆石、肝硬変、アルコール誘発性肝硬変、嚢胞性線維症、胆管閉塞、胆石症、肝線維症の治療における使用、例えば非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）の治療における使用、例えば非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）表現型の治療における使用が意図される。

実施形態２９：実施形態１〜２７のいずれか１つに記載の使用、トロピフェキソール、又は方法において、実施形態２８の医薬単位剤形は、空腹状態のヒトに投与される、例として、水以外の最初の飲料の少なくとも３０分前、及び当日の最初の食事の少なくとも６０分前の空腹状態での投与が挙げられる。

実施形態３０：実施形態１〜２７のいずれか１つに記載の使用、トロピフェキソール、又は方法において、実施形態２８の医薬単位剤形は、肝機能障害を有するヒトに投与され、ここでトロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートは、肝機能障害を有しないヒトに投与される用量と比べて低減された用量で投与される。かかる肝機能障害は、例えばＣｈｉｌｄ−Ｐｕｇｈシステム：軽度（Ｃｈｉｌｄ−ＰｕｇｈＡ）、中等度（Ｃｈｉｌｄ−ＰｕｇｈＢ）、重度（Ｃｈｉｌｄ−ＰｕｇｈＣ）により分類されてもよい。

発明の詳細な説明
定義
本明細書を解釈することを意図して、以下の定義が適用されることになり、適切である限り、単数で用いられる用語は複数も含むことになる、又はその逆もいえる。

本明細書で用いられるとき、数値ｘに関する用語「約」は、文脈上特に断りのない限り、＋／−１０％を意味する。

本明細書で用いられるとき、用語「ＦＸＲ作動薬」は、ＦＸＲに直接的に結合し、その活性を上方制御する薬剤を指す。

本明細書で用いられるとき、用語「薬学的に許容できる」は、活性成分の生物学的活性の有効性に干渉しない非毒性材料を意味する。

本明細書で用いられるとき、用語「アミノ酸コンジュゲート」は、任意の好適なアミノ酸との式（Ｉ）の化合物のコンジュゲートを指す。好ましくは、式（Ｉ）の化合物のかかる好適なアミノ酸コンジュゲートは、胆汁又は腸管液中での増強された完全性のさらなる利点を有することになる。好適なアミノ酸として、限定はされないが、グリシン、タウリン及びアシルグルクロニドが挙げられる。したがって、本発明は、式（Ｉ）の化合物のグリシン、タウリン及びアシルグルクロニドコンジュゲート、例えば、トロピフェキソールのグリシン、タウリン及びアシルグルクロニドコンジュゲートを包含する。

本明細書で用いられるとき、用語「対象（ｓｕｂｊｅｃｔ）」又は「対象（ｓｕｂｊｅｃｔ）」は、ヒトを指す。

本明細書で用いられるとき、疾患又は障害と組み合わせた用語「治療する（ｔｒｅａｔ）」、「治療する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」又は「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、一実施形態では、疾患又は障害を寛解すること（即ち、疾患又はその臨床症状の少なくとも１つの発生を緩徐化又は停止又は低減すること）を指す。別の実施形態では、「治療する（ｔｒｅａｔ）」、「治療する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」又は「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、患者によって識別可能でない場合を含む、少なくとも１つの物理パラメータを軽減又は寛解することを指す。さらに別の実施形態では、「治療する（ｔｒｅａｔ）」、「治療する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」又は「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、身体的に（例えば、識別可能な症状の安定化）、生理的に（例えば、身体的パラメータの安定化）、又は双方のいずれかで疾患又は障害を調節することを指す。例えば状態の症状に関連する用語「軽減する」又は「軽減」は、本明細書で用いられるとき、患者における状態の症状の頻度及び増幅の少なくとも１つを低減することを指す。一実施形態では、用語「治療のための方法（ｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」又は「治療するための方法（ｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｒｅａｔｉｎｇ）」は、本明細書で用いられるとき、「治療するための方法（ｍｅｔｈｏｄｔｏｔｒｅａｔ）」を指す。

本明細書で用いられるとき、用語「治療有効量」は、本発明の化合物、例えば式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容できる塩、例えばトロピフェキソールの、前述の効果を達成するのに十分である量を指す。したがって、ＦＸＲによって媒介される状態の治療又は予防のために用いられる、式（Ｉ）のＦＸＲ作動薬、その立体異性体、鏡像異性体、薬学的に許容できる塩又はそのアミノ酸コンジュゲート、例えばトロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートの治療有効量は、ＦＸＲによって媒介される状態の治療又は予防にとって十分な量となる。

「治療レジメン」は、疾病の治療のパターン、例えば疾患又は障害の治療中に用いられる投与のパターンを意味する。

本明細書で用いられるとき、対象は、かかる対象がかかる治療から生物学的に、医学的に又は生活の質において利益を得るような場合、治療「を必要とする」。

本明細書で用いられるとき、用語「肝疾患又は障害」は、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、薬剤誘発性胆管損傷、胆石、肝硬変、アルコール誘発性肝硬変、嚢胞性線維症、胆管閉塞、胆石症及び肝線維症の１つ、複数、又はすべてを包含する。

本明細書で用いられるとき、ＮＡＳＨ表現型又は表現型ＮＡＳＨは、肝臓のＡＬＴ／ＡＳＴ上昇及び脂肪浸潤とともに、メタボリックシンドロームのいくつかの特徴（肥満、２型糖尿病）の組み合わせを用いて説明することができる。

本明細書で用いられるとき、線維症は、文献中に記載されるスコアリングシステムを用いてステージ分類可能であり、例えば米国において最も一般的に用いられるものは、Ｋｎｏｄｅｌｌ組織学的活性指標（０〜４）、Ｂａｔｔｓ−Ｌｕｄｗｉｇステージ（０〜４）及びＳｃｈｅｕｅｒ（０〜４）（３〜５）であり、欧州ではＭＥＴＡＶＩＲスキーム（０〜４）である。ステージ０〜４のＫｎｏｄｅｌｌ及びＭＥＴＡＶＩＲスコアの線維症では、ステージ４が肝硬変である一方で、０〜６のＩｓｈａｋスコアの線維症の場合、５が不完全又は早期肝硬変であり、６が確立された肝硬変である。

本明細書で用いられるとき、ＮＡＳは、ＮＡＦＬＤ活動性スコアであり、患者における治療応答及び疾患進行を判断するために用いられる半定量装置として説明することが可能である。本明細書で用いられるとき、「治療有効量」は、式（Ｉ）の化合物、その立体異性体、鏡像異性体、その薬学的に許容できる塩又はそのアミノ酸コンジュゲート、例えばトロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲート、例えばトロピフェキソールの、障害又は反復性障害を治療する、予防する、治癒させる、遅延させる、その重症度を低減する、その少なくとも１つの症状を寛解させる、又は対象の寿命をかかる治療の不在下で期待される寿命よりも延ばすときの対象（ヒト対象など）への単回又は複数回用量投与時に有効である量を指す。

トロピフェキソールが、ＡＮＩＴ誘発性胆汁うっ滞ラットにおける血清生化学パラメータ、肝損傷、及び線維症を改善することを示す。トロピフェキソールが、ＳＴＡＭモデルにおけるＮＡＳＨ様症状を寛解することを示し：ＮＡＦＬＤ活動性スコア、肝臓トリグリセリド、並びにシリウスレッド陽性領域及び血漿コレステロールレベルが有意に低下した。トロピフェキソールがＮＡＳＨの食餌駆動性インスリン抵抗性モデルにおいて線維症を回復させることを示す。

本発明を実施するモード
肝線維症は、ＰＢＣ及びＮＡＳＨなどの進行性肝疾患の主要な特徴である。特に、線維症は、全体及び肝臓関連の罹患率及び死亡率に関連することから、ＮＡＦＬＤ及びＮＡＳＨにおける予後を危険にする。現在、肝線維症に対して認可された直接的な抗線維症療法がないことから、線維症の回復は、ＮＡＳＨ疾患の状況下で主な要求が満たされないままである。これに関連して、本発明者は、３つの異なる慢性肝疾患モデルにおける用量依存的様式でのコラーゲン沈着の減少によって確認された通り、トロピフェキソールが肝線維症を有意に低減したことを見出している。さらに、トロピフェキソールのより高い（国際公開第２０１７１４５０４１号パンフレットに開示されたトロピフェキソール用量よりも高い）曝露レベルを評価する前臨床試験によると、（インビトロ及びインビボ双方で）より高いＦＸＲの活性化が可能であることが示され、ＦＸＲ活性化のレベル上昇により、より高い有効性がもたらされることが示唆される。ＮＡＳＨマウスモデルでは、用量増加により、ＮＡＦＬＤ活動性スコアの低下が得られ、線維症が低減された。約１４０μｇ〜約２５０μｇの用量（例えば、２００μｇで８０ｎｇ^＊時間／ｍＬ）のトロピフェキソールで治療される場合、肝細胞肥大は、ＮＡＳＨ患者におけるレベルを十分に上回る曝露での動物モデル（例えば、イヌの雄及び雌各々における８９８及び５０７ｎｇ^＊時間／ｍＬの平均ＡＵＣ０〜２４時間）に限り、有害であった。例えば、１４０μｇ及び２００μｇ用量で、ＮＡＳＨ患者の約８０％及び９５％が、ＡＵＣ＞４０ｎｇ^＊時間／ｍＬを達成することがある。したがって、約１４０μｇ〜約２５０μｇでの用量のトロピフェキソールは、慢性肝疾患、例えば非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）の治療にとって有利であり；さらに、約１４０μｇ〜約２５０μｇの用量でのトロピフェキソールは、患者に投与されるとき、安全且つ有効な治療をもたらす。

ベースラインからの組織学的改善によって評価されるとき、軽度〜中等度ＮＡＳＨ及びＦ２／Ｆ３線維症を有する患者に投与されるときの約１４０μｇ〜約２５０μｇの用量のトロピフェキソールは、約５０％の患者が肝線維症の改善（少なくとも１ステージ）を有するとともにＮＡＦＬＤ活動性スコア（ＮＡＳ）の悪化を伴わない、又は約３０％の患者がＮＡＳＨの回復を有する（ＮＡＳが０又は１）とともに肝線維症の悪化を伴わないことを示す。

ベースラインからの組織学的改善によって評価されるとき、軽度〜中等度ＮＡＳＨ及びＦ２／Ｆ３線維症を有する患者に投与されるときの約１４０μｇ〜約２５０μｇの用量のトロピフェキソールは、約５０％以上の患者における肝酵素の正常化を示す。

ベースラインからの組織学的改善によって評価されるとき、軽度〜中等度ＮＡＳＨ及びＦ２／Ｆ３線維症を有する患者に投与されるときの約１４０μｇ〜約２５０μｇの用量のトロピフェキソールは、肝脂肪の減少（例えば３０％の相対的減少；例えば５％の絶対的減少）を示す。

ベースラインからの組織学的改善によって評価されるとき、軽度〜中等度ＮＡＳＨ及びＦ２／Ｆ３線維症を有する患者に投与されるときの約１４０μｇ〜約２５０μｇの用量のトロピフェキソールは、ＮＡＳＨＰＲＯ又は５−Ｄそう痒又はビジュアルアナログスケール（ＶＡＳ）によって判断されるとき、有意なそう痒の転帰を示さない。５−Ｄは、経時的変化を検出できるように、慢性そう痒を有する患者において検証されているそう痒の信頼できる多次元的尺度である。

ＦＸＲ作動薬、例えばトロピフェキソールは、肝疾患及び障害を治療、寛解、又は予防するため、インビトロ、生体外で用いられてもよい、又は医薬組成物中に組み込まれ、インビボで個体（例えばヒト対象）に投与されてもよい。医薬組成物は、その意図される投与経路に適合するように製剤化されることになる（例えば、経口組成物は、一般に不活性希釈剤又は食用担体を含む）。投与経路の他の非限定例として、非経口（例えば静脈内）、皮内、皮下、経口（例えば吸入）、経皮（局所）、経粘膜、及び直腸投与が挙げられる。意図される各経路に適合する医薬組成物は、当該技術分野で周知である。式（Ｉ）のＦＸＲ作動薬、例えばトロピフェキソールを含む例示的な医薬組成物が、国際公開第２０１２／０８７５１９号パンフレットに記載されている。

投与頻度は、２回／日、１回／日、又は２日ごと、例えば１日１回であってもよい。いくつかの実施形態では、投与頻度は、２回／日である。投与頻度は、特に治療レジメンの段階に依存することになる。

いくつかの実施形態では、投与計画は、約１４０μｇ〜約２５０μｇのトロピフェキソールが経口的に送達される、例えば約１４０μｇ〜約２００μｇが経口的に送達されるような投与を含む。かかる用量は、毎日投与（１日量）、又は１日２回投与又は２日ごとの投与、例えば毎日投与に対応するものであってもよい。

いくつかの実施形態では、投与計画は、約１４０μｇ〜約２５０μｇの範囲内の用量が経口的に送達される、例えば約１４０μｇ〜約２００μｇの範囲内の用量が経口的に送達されるようなトロピフェキソールの投与を含む。かかる用量は、毎日投与（１日量）、又は１日２回投与又は２日ごとの投与、例えば毎日投与に対応するものであってもよい。

いくつかの実施形態では、投与計画は、用量として、約１４０μｇが経口的に送達される、約１５０μｇが経口的に送達される、約１６０μｇが経口的に送達される、約１７０μｇが経口的に送達される、約１８０μｇが経口的に送達される、約１９０μｇが経口的に送達される、約２００μｇが経口的に送達される、約２１０μｇが経口的に送達される、約２２０μｇが経口的に送達される、約２３０μｇが経口的に送達される、約２４０μｇが経口的に送達される、又は約２５０μｇが経口的に送達されるようなトロピフェキソールの投与を含む。かかる用量は、経口投与に対応するものであってもよい。

いくつかの実施形態では、投与計画は、約１４０μｇ／日〜約２５０μｇ／日、約１４０μｇ／日〜約２００μｇ／日の範囲内の用量でのトロピフェキソールの投与を含む。

いくつかの実施形態では、投与計画は、１日２回の約１４０μｇ、１日２回の約１５０μｇ、１日２回の約１６０μｇ、１日２回の約１７０μｇ、１日２回の約１８０μｇ、１日２回の約１９０μｇ、１日２回の約２００μｇ、１日２回の約２１０μｇ、１日２回の約２２０μｇ、１日２回の約２３０μｇ、１日２回の約２４０μｇ、又は１日２回の約２５０μｇといった用量でのトロピフェキソールの投与を含む。かかるレジメンは、経口的に送達されてもよい。

本明細書中、上で定義されるように、肝疾患又は障害を治療又は予防する方法であって、トロピフェキソールを約１４０μｇ／日〜約２５０μｇ／日、約１４０μｇ／日〜約２００μｇ／日の用量でそれを必要とする対象に投与することを含む、方法が本明細書で開示される。

本明細書中、上で定義されるように、肝疾患又は障害を治療又は予防する方法であって、トロピフェキソールを約１４０μｇ、約１５０μｇ、約１６０μｇ、約１７０μｇ、約１８０μｇ、約１９０μｇ、約２００μｇ、約２１０μｇ、約２２０μｇ、約２３０μｇ、約２４０μｇ又は約２５０μｇでそれを必要とする対象に投与することを含む、方法が本明細書で開示される。いくつかの実施形態では、かかる用量は、毎日、例えば経口的に投与される。いくつかの実施形態では、かかる用量は、経口的に、例えば毎日、投与される。

トロピフェキソールが約１４０μｇ、約１５０μｇ、約１６０μｇ、約１７０μｇ、約１８０μｇ、約１９０μｇ、約２００μｇ、約２１０μｇ、約２２０μｇ、約２３０μｇ、約２４０μｇ又は約２５０μｇからなる群から選択される用量で投与されるべきであることが特徴づけられた、本明細書中、上で定義されるような、肝疾患又は障害の治療又は予防における使用を意図した、式（Ｉ）のＦＸＲ作動薬、立体異性体、鏡像異性体、それらの薬学的に許容できる塩又はそれらのアミノ酸コンジュゲート、例えばトロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートが本明細書で開示される。かかる用量は、毎日、１日２回又は２日ごと、例えば毎日、投与されてもよい。かかる用量は、経口的に投与されてもよい。

いくつかの実施形態では、本明細書中、上で定義されるような、肝疾患又は障害の治療又は予防における使用を意図した、トロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲート、例えばトロピフェキソールが開示され、ここでトロピフェキソールは、約１４０μｇ、約２００μｇ又は約２５０μｇからなる群から選択される１日量で投与されるべきである。

いくつかの実施形態では、本明細書中、上で定義されるような、肝疾患又は障害の治療又は予防における使用を意図した、式（Ｉ）のＦＸＲ作動薬、立体異性体、鏡像異性体、それらの薬学的に許容できる塩又はそれらのアミノ酸コンジュゲート、例えばトロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートが開示され、ここで前記ＦＸＲ作動薬は、１日２回、約１４０μｇ、約２００μｇ又は約２５０μｇからなる群から選択される用量で投与されるべきである。

いくつかの実施形態では、本明細書中、上で定義されるような、肝疾患又は障害の治療又は予防における使用を意図した、トロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートが開示され、ここでトロピフェキソールは、約１４０μｇ、約１５０μｇ、約１６０μｇ、約１７０μｇ、約１８０μｇ、約１９０μｇ、約２００μｇ、約２１０μｇ、約２２０μｇ、約２３０μｇ、約２４０μｇ又は約２５０μｇからなる群から選択される用量で２日ごとに投与されるべきである。

いくつかの実施形態では、本明細書中、上で定義されるような、肝疾患又は障害の治療又は予防における使用を意図した、式（Ｉ）のＦＸＲ作動薬、立体異性体、鏡像異性体、それらの薬学的に許容できる塩又はそれらのアミノ酸コンジュゲート、例えばトロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートが開示され、ここでトロピフェキソールは、約１４０μｇ又は約２００μｇの１日量で投与されるべきである。

いくつかの実施形態では、トロピフェキソールが、約１４０μｇの１日量、約２００μｇの１日量、約２５０μｇの１日量で提供される。

いくつかの実施形態では、慢性肝疾患、例えば、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、薬剤誘発性胆管損傷、胆石、肝硬変、アルコール誘発性肝硬変、嚢胞性線維症、胆管閉塞、胆石症、肝線維症の治療における使用を意図して、例えば、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）の治療における使用を意図して、又はＮＡＳＨ表現型の治療における使用を意図して、トロピフェキソールが、約１５０μｇ、約１６０μｇ、約１７０μｇ、約１８０μｇ、約１９０μｇ、約２００μｇ、約２１０μｇ、約２２０μｇ、約２３０μｇ、約２４０μｇ又は約２５０μｇの１日量で提供される。

いくつかの実施形態では、最大で１００μｇ／日の最大総用量の経口投与に適した、約１４０μｇ、約１５０μｇ、約１６０μｇ、約１７０μｇ、約１８０μｇ、約１９０μｇ、約２００μｇ、約２１０μｇ、約２２０μｇ、約２３０μｇ、約２４０μｇ又は約２５０μｇのトロピフェキソールを含む単位剤形医薬組成物が提供される。かかる剤形は、液体、錠剤、カプセル剤から選択される。剤形は、慢性肝疾患、例えば非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、薬剤誘発性胆管損傷、胆石、肝硬変、アルコール誘発性肝硬変、嚢胞性線維症、胆管閉塞、胆石症、肝線維症の治療における使用が意図される、例えば非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）の治療における使用が意図される。

いくつかの実施形態では、慢性肝疾患、例えば非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の治療における使用を意図して、トロピフェキソールが、約１０μｇの１日量、約３０μｇの１日量、約６０μｇの１日量、又は約１２０μｇの１日量で提供される。

いくつかの実施形態では、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）の治療における使用を意図して、トロピフェキソールが、約１４０μｇの１日量、約２００μｇの１日量又は約２５０μｇの１日量で提供される。

いくつかの実施形態では、水以外の最初の飲料の少なくとも３０分前、及び当日の最初の食事の少なくとも６０分前、朝の空腹状態でのトロピフェキソールの１日１回投与が提供される。

いくつかの実施形態では、水以外の最初の飲料の少なくとも３０分前、及び当日の最初の食事の少なくとも６０分前、朝の空腹状態で、例えば、約１４０μｇ、約１５０μｇ、約１６０μｇ、約１７０μｇ、約１８０μｇ、約１９０μｇ、約２００μｇ、約２１０μｇ、約２２０μｇ、約２３０μｇ、約２４０μｇ又は約２５０μｇの量でのトロピフェキソールの１日１回投与が提供される。

いくつかの実施形態では、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）の１日１回の治療における使用を意図して、トロピフェキソールが、約１４０μｇ、約１５０μｇ、約１６０μｇ、約１７０μｇ、約１８０μｇ、約１９０μｇ、約２００μｇ、約２１０μｇ、約２２０μｇ、約２３０μｇ、約２４０μｇ又は約２５０μｇの１日量で提供され、且つトロピフェキソールは、水以外の最初の飲料の少なくとも３０分前、及び当日の最初の食事の少なくとも６０分前、朝の空腹状態で投与されるべきである。

いくつかの実施形態では、上記実施形態のいずれかに従う使用、トロピフェキソール又は方法が提供され、上記実施形態の医薬単位剤形が、肝機能障害を有するヒトに投与され、ここでトロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲートは、肝機能障害を有しないヒトに投与される用量と比べて減少した用量で投与される。かかる肝機能障害は、例えば、Ｃｈｉｌｄ−Ｐｕｇｈシステム：軽度（Ｃｈｉｌｄ−ＰｕｇｈＡ）、中等度（Ｃｈｉｌｄ−ＰｕｇｈＢ）、重度（Ｃｈｉｌｄ−ＰｕｇｈＣ）によって分類されてもよい。肝障害の分類のための最も確立された手法は、現在、Ｃｈｉｌｄ−Ｐｕｇｈシステムである。肝障害対象における用量の減少が検討されている。

いくつかの実施形態では、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）の治療における使用を意図して、トロピフェキソールが、約１４０μｇの１日量、約２００μｇの１日量又は約２５０μｇの１日量で提供され、ここで上記用量は、肝障害対象において、肝機能障害を有しないヒトに投与される用量と比べて約半分まで減少する。

肝障害対象において、本明細書中、上で定義されるように、肝疾患又は障害を治療又は予防する方法であって、トロピフェキソールを、約７０μｇ／日〜約１２０μｇ／日、約７０μｇ／日〜約１００μｇ／日の用量で、それを必要とするような対象に投与することを含む、方法が本明細書で開示される。

肝疾患又は障害を治療するためのキット
本明細書中、上で定義されるように、肝疾患又は障害を治療するための、トロピフェキソールを提供するのに有用なキットが本明細書に提供される。かかるキットは、トロピフェキソール若しくはそのアミノ酸コンジュゲート又はトロピフェキソールを含む医薬組成物を含んでもよい。加えて、かかるキットは、トロピフェキソール（例えば固体組成物）を投与するための手段及び使用説明書を含んでもよい。

したがって、ａ）トロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲート、例えばトロピフェキソールを治療有効量で含む医薬組成物；ｂ）本明細書中、上で定義される通り、肝疾患又は障害を有する対象にトロピフェキソールを投与するための手段；及びｃ）使用説明書を含むキットであって、ここで医薬組成物が、トロピフェキソールを約１４０μｇ〜約２５０μｇ、約１４０μｇ〜約２００μｇの範囲内の用量（例えば１日量）で含む、キットが本明細書に開示される。

ａ）トロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲート、例えばトロピフェキソールを治療有効量で含む医薬組成物；ｂ）本明細書中、上で定義される通り、肝疾患又は障害を有する対象にトロピフェキソールを投与するための手段；及びｃ）使用説明書を含むキットであって、ここで医薬組成物が、約１４０μｇ、約１５０μｇ、約１６０μｇ、約１７０μｇ、約１８０μｇ、約１９０μｇ、約２００μｇ、約２１０μｇ、約２２０μｇ、約２３０μｇ、約２４０μｇ又は約２５０μｇからなる群から選択されるトロピフェキソールの用量のＦＸＲ作動薬分子を含む、キットも開示される。

別の実施形態では、トロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲート、例えばトロピフェキソールは、経腸的に；またより詳細には経口的に投与される。

特に指定がない限り、本発明の方法における使用を意図した化合物は、トロピフェキソール又はそのアミノ酸コンジュゲート、プロドラッグ、及び固有に形成された部分（例えば、多形物、溶媒和化合物及び／又は水和物）を指す。本明細書に示されるいずれかの式はまた、化合物の非標識形態及び同位体標識形態を表すように意図される。

実施例１
動物実験
実験プロトコルは、地方の動物実験委員会（ＡｎｉｍａｌＣａｒｅａｎｄＵｓｅＣｏｍｍｉｔｔｅｅ）によって認可され、動物保護法（ＡｎｉｍａｌＷｅｌｆａｒｅＡｃｔ）の規制及び米国規制（実験動物の管理と使用に関する指針（ＧｕｉｄｅｆｏｒｔｈｅＣａｒｅａｎｄＵｓｅｏｆＬａｂｏｒａｔｏｒｙＡｎｉｍａｌｓ））に準じた。成体雄ＷｉｓｔａｒＨａｎラット（ＣｈａｒｌｅｓＲｉｖｅｒＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）は１０．６週齢であり、約３００〜３７０ｇの体重に対して無作為化し、１日１回（ｑｄ）で１４日間、経口懸濁液でのトロピフェキソール（０．００３、０．０１、０．０３、０．１、０．３、１．０、及び３．０ｍｇ／ｋｇ）、ＯＣＡ（０．２４、１．２、６及び３０ｍｇ／ｋｇ）、又は媒体を胃管栄養針を用いて投与した。標的遺伝子発現及び血清バイオマーカーの分析のため、１４日目の最終投与後、トロピフェキソール治療ラットを１及び７時間目に屠殺し（ｎ＝３／時点）、且つＯＣＡ治療ラットを１、３、及び７時間目に屠殺した（ｎ＝３／時点）。

重度の胆汁うっ滞を誘発するため、体重が２００〜２２０ｇの８週齢の雄スプラーグドーリー（ＳＤ）ラット（ＣｈａｒｌｅｓＲｉｖｅｒＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）に、０．１％ α−ナフチル−イソチオシアネート（ＡＮＩＴ）を含有する加工したＰｉｃｏｌａｂｒｏｄｅｎｔｄｉｅｔ５０５３を与えた。３日目に始まり、トロピフェキソール（ＬＪＮ４５２）又はＯＣＡは各々、０．０３、０．３、及び１ｍｇ／ｋｇ（ラット６匹／群）又は１、５、及び２５ｍｇ／ｋｇ（ラット５匹／群）の用量での経口的胃管栄養を１日１回で５日間行った。ラットを最終投与後３〜５時間目に屠殺し、血液サンプルを心臓穿刺により収集し、胆汁うっ滞の血清バイオマーカー、即ち、アラニントランスアミナーゼ（ＡＬＴ）、アスパラギン酸トランスアミナーゼ（ＡＳＴ）、アルカリホスファターゼ（ＡＬＰ）、総ビリルビン、総ＢＡ、及びγグルタミルトランスペプチダーゼ（ＧＧＴ）を分析した。

ＳＴＡＭモデルにおけるさらなる実験を実施し、２日齢雄Ｃ５７Ｂｌ／６Ｊマウスにストレプトゾトシンを注射し、それらを４〜１２週目にかけて高脂肪食（ＨＦＤ）上に置いた（ＨＦＤ−３２；日本クレア株式会社、東京、日本）。９〜１２週目にかけて、ＳＴＡＭマウスに、トロピフェキソール（ＬＪＮ４５２）を０．０３、０．１、若しくは０．３ｍｇ／ｋｇで；ＯＣＡを２５ｍｇ／ｋｇで；又は対応する媒体を１日１回経口投与した。ヘマトキシリン及びエオシン（Ｈ＆Ｅ）染色切片を、予め定義した判定基準に従い、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）活動性スコア（ＮＡＳ）について評価した。肝臓の全脂質抽出物を単離し、トリグリセリドＥ試験（ＷａｋｏＰｕｒｅＣｈｅｍｉｃａｌＩｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｌｔｄ．、日本）を用いてトリグリセリドを測定した。

食餌誘発性ＮＡＳＨに対する別々のモデルを、Ｔｒｅｖａｓｋｉｓらによる説明のように開発した。約６週齢の雄Ｃ５７Ｂｌ６マウスを、高脂肪（４０％ｋｃａｌ；Ｐｒｉｍｅｘ）、高フルクトース（２２重量％）、及び高コレステロール（２重量％）食（ＲｅｓｅａｒｃｈＤｉｅｔｓＩｎｃ．，ＮｅｗＢｒｕｎｓｗｉｃｋ，ＮＪ、カタログ番号Ｄ０９１００３０１）上で２６週間維持し、ＮＡＳＨを誘発した。対照動物は、フルクトース又はコレステロールを有しない低脂肪食（１０％ｋｃａｌ）（ＲｅｓｅａｒｃｈＤｉｅｔｓ、カタログ番号Ｄ０９１００３０４）を受けた。２６週目から、動物に、トロピフェキソール（ＬＪＮ４５２）を０．０３、０．３、若しくは１．０ｍｇ／ｋｇ又はＯＣＡを２５ｍｇ／ｋｇ、１日１回で４週間経口投与した。コラーゲンＩ型α１（Ｃｏｌ１ａ１）及びメタロプロテイナーゼ１の組織阻害剤（Ｔｉｍｐ１）の遺伝子の発現をリアルタイム定量ＰＣＲにより分析した。

病理組織学
肝臓切片を４％パラホルムアルデヒドに４８時間固定し、病理組織学的解析用に輸送した。肝損傷及びコラーゲン沈着を各々、Ｈ＆Ｅ染色及びピクロシリウスレッド染色により評価した。食餌駆動性ＮＡＳＨモデルにおいて、肝臓切片をＭａｓｓｏｎトリクローム染色（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，ＳｔＬｏｕｉｓ，ＭＯ，ＵＳＡ）で、イオン化カルシウム結合アダプター分子１（ＩＢＡ１；Ｗａｋｏ、カタログ番号０１９−１９７４１）について染色した。画像の定量化を、Ａｐｅｒｉｏソフトウェア（Ａｐｅｒｉｏ，Ｉｎｃ．，Ｖｉｓｔａ，ＣＡ）を用いる陽性画素数アルゴリズムを用いて実施した。

結果
血清バイオマーカーのＡＳＴ、ＡＬＴ、総胆汁酸、総ビリルビン、及びＧＧＴが、媒体処置胆汁うっ滞（ＡＮＩＴ処置）動物において、媒体処置非胆汁うっ滞（対照）動物と比べて著しく上昇した（図１Ａ）。わずか０．３ｍｇ／ｋｇの用量でのトロピフェキソール治療により、ＡＳＴ、ＡＬＴ、総ＢＡ、総ビリルビン、及びＧＧＴレベルにおける著しい低下がもたらされた。さらに、１．０ｍｇ／ｋｇの用量で、大部分の胆汁うっ滞マーカーのレベルが、媒体処置ＡＮＩＴ対照と比べて有意に低下しただけでなく、媒体処置非胆汁うっ滞対照動物に対応するレベルまで正常化し、胆汁うっ滞の完全回復が示された。トロピフェキソールで治療した胆汁うっ滞ラットからの肝組織学によると、媒体処置胆汁うっ滞ラットからの肝臓に対して、胆管上皮の壊死、胆管過形成、及び門脈領域内での炎症細胞浸潤物の存在における用量依存性の改善が示された（図１Ｂ）。加えて、慢性的なＡＮＩＴ処置によるコラーゲン沈着及び肝線維症の誘発（図１Ｃ、上左パネル）は、用量依存的様式でのトロピフェキソールにより非常に低減される（図１Ｃ、右パネル）。コラーゲン沈着の定量により、媒体処置ＡＮＩＴ肝臓において線維症が増加し、用量依存的様式でのＬＪＮ４５２処置で有意に減少することが確認された（図１Ｄ）。

胆汁うっ滞バイオマーカーに対するＯＣＡの効果を試験するため、ＯＣＡの様々な用量（１、５、及び２５ｍｇ／ｋｇ）での並行試験を、ＡＮＩＴモデルを用いて実施した。血清生化学パラメータに対してＯＣＡとの混合効果が認められた。トロピフェキソールと異なり、ＯＣＡは、２５ｍｇ／ｋｇの用量で総ＢＡ及びビリルビンに限り有意な低下を示し、トロピフェキソールが胆汁うっ滞の疾患マーカーの低下に対してＯＣＡよりも有効であることが示された。

ＬＪＮ４５２での処置は、ＮＡＳスコアの３つの全成分（脂肪肝、小葉炎症、及び肝細胞の風船様腫大；図２Ａ）における減少に起因し、０．１及び０．３ｍｇ／ｋｇの用量でのＮＡＳにおける有意な低下を示した。脂肪肝の改善が、病理組織学及び肝トリグリセリドの減少により実証された（図２Ａ〜２Ｂ）。重要なことに、これらの変化がベースライン群と比べて認められ、ＮＡＳＨのベースラインからの退縮が示された（図２Ａ〜２Ｃ）。高濃度のＯＣＡ（２５ｍｇ／ｋｇ）は、肝トリグリセリドにおける有意な減少をもたらさなかったが、ＮＡＳにおいて減少傾向があり（Ｐ＞０．０５）、トロピフェキソールがＮＡＳＨ表現型をＯＣＡよりも有効に回復させることが示された。肝臓切片内部のシリウスレッド陽性領域の百分率は、ＳＴＡＭマウスにおいて正常なマウスと比べてより高く、線維症の存在が示された。トロピフェキソール処置マウスは、ＳＴＡＭに認められる特徴的な細胞周囲線維症の統計学的に有意な用量依存的減少を示した。加えて、トロピフェキソール処置マウスの線維症領域は、ベースライン群と比べて減少し（図２Ａ、２Ｃ）、トロピフェキソールによるＮＡＳＨの線維症表現型の完全回復が示された。

ＮＡＳＨを有する多数の個体が肥満及び糖尿病であることから、肥満のインスリン抵抗性ＮＡＳＨモデルにおけるトロピフェキソールの効果が評価されている。ＮＡＳＨは、マウスにおいて、高トランス脂肪、高フルクトース、及び高コレステロール食餌（ＡＭＬＮ食餌）を２６週間摂食させ、その後さらに４週間、化合物処置を行うことにより確立した。ＳＴＡＭモデルからの結果に一致して、トロピフェキソールは、ＮＡＳＨのこの食餌駆動性モデルにおける治療様式において、肝臓炎、脂肪肝、及び線維症を回復させた。肝損傷ＡＬＴ及びＡＳＴのマーカーは、ＮＡＳＨマウスにおいて、低脂肪食（１０％脂肪）を与えた対照動物と比べて上昇した。トロピフェキソール処置ＮＡＳＨマウスは、媒体処置対照と比べて、ＡＬＴ及びＡＳＴの用量依存的低下を示した（図３Ａ）。重要なことには、中用量レベルのトロピフェキソールは、ＡＬＴ及びＡＳＴレベルを対照動物の場合まで正常化した一方で、高用量は、ＡＬＴ／ＡＳＴをさらに大幅な範囲に低下させた（図３Ａ）。ＯＣＡは、ＡＬＴ及びＡＳＴレベルに対して統計学的に有意な効果を示さなかった。さらに、肝組織学分析によると、媒体処置ＮＡＳＨマウスにおいて見出された脂肪肝、風船様、及び炎症は、０．３及び０．９ｍｇ／ｋｇ用量群でのトロピフェキソールにより完全に回復することが示された（図３Ｂ）。トロピフェキソールによる脂肪肝の用量依存的低減は、肝トリグリセリドの定量化によりさらに確認された（図３Ｄ）。対照的に、高用量のＯＣＡ（２５ｍｇ／ｋｇ）は、脂肪肝及び炎症を低減することに対して軽微な効果を有するにすぎない。

脂肪肝に加えて、媒体処置ＮＡＳＨ群は、マクロファージ及びクッパー細胞（ＩＢＡ^＋細胞；図３Ｃ）の染色によって示される通り、有意な肝炎症を呈した。これらの群では、マクロファージは、ヒト及び齧歯類ＮＡＳＨ肝臓において以前に述べられた特徴的な冠様構造を形成する。興味深いことに、肝臓の冠様構造は、中用量及び高用量のトロピフェキソール処置ＮＡＳＨマウスの肝臓において完全に除去されたが、ＯＣＡ処置マウスにおいては完全に除去されなかった（図３Ｃ）。ＩＢＡ陽性染色の定量化により、０．３及び０．９ｍｇ／ｋｇのトロピフェキソール用量群の場合に対照食餌群と同レベルまで正常化され、トロピフェキソールによる炎症の低減がさらに確認された（図３Ｄ）。

先行試験に一致して、ＡＭＬＮ食餌は、ＮＡＳＨのこのモデルにおいて肝線維症を誘発した（図３Ｂ、３Ｄ）。トリクローム染色によると、トロピフェキソールが肝臓におけるコラーゲン沈着を、低脂肪食処置対照マウスの場合よりも低いレベルまでも、強力に抑止することが示された（図３Ｂ、３Ｄ）。組織学的知見に一致して、トロピフェキソールは、線維形成マーカーＣｏｌ１ａ１及びＴＩＭＰ１のｍＲＮＡレベルを劇的に低下させた。ＳＴＡＭ及びＡＭＬＮインビボ試験の双方が、一緒になって、トロピフェキソールが、肝臓の脂肪肝の低減並びに炎症及び線維症の回復を通じてＮＡＳＨを改善することを示す。

実施例２
ラットにおいて最大２６週間とイヌにおいて最大３９週間実施した経口胃管栄養毒性試験において、トロピフェキソールの安全性特性をさらに評価した。

ＮＡＳＨマウスモデルから得られたデータは、マウスにおける０．３ｍｇ／ｋｇの用量により、ＮＡＳＨ患者における毎日２００μｇでの予測曝露の約８０ｎｇ・時間／ｍｌよりも高い１２９ｎｇ^＊時間／ｍＬの曝露がもたらされることを示している。

より長期の動物毒性試験では、９０μｇの用量でのＮＡＳＨ患者における曝露が、ラットＮＯＡＥＬに対して１倍未満の安全性マージン（７０ｎｇ・時間／ｍｌの以前のキャップに対してやや１倍超の安全性マージン）を維持するが、イヌＮＯＡＥＬに対して２倍超の安全性マージンを維持することが確認されている。

実施例３
薬力学マーカーＦＧＦ１９がトロピフェキソール用量の最大３０００μｇまでの増加とともに上昇し続けることが示されている。用量が１０μｇ、３０μｇ、６０μｇ及び９０μｇのトロピフェキソールで治療したＮＡＳＨ患者における、ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＦＧＦ１９及びＧＧＴについての８週目のバイオマーカーデータを用いた探索的曝露−応答分析によると、ＡＵＣ＞４０ｎｇ^＊時間／ｍＬの曝露が最大のバイオマーカー応答、ひいてはより優れた治療効果をもたらすことが示されている。１４０μｇ及び２００μｇの用量で、ＮＡＳＨ患者の約８０％及び９５％がＡＵＣ＞４０ｎｇ^＊時間／ｍＬに達する。

試験プロトコル
無作為化前２年以内の肝生検及びＡＬＴ上昇に基づくＮＡＳＨの組織学的証拠、又はＡＬＴ上昇、２型糖尿病若しくはＨｂＡ１ｃ上昇及びＢＭＩ増加に基づくＮＡＳＨの表現型診断のいずれか（いずれの場合も、ＭＲＩの中央読影で肝脂肪＞１０％を伴う）を有する成人男性及び女性患者。

ＮＡＳＨの診断：中央読影者による評価にとって十分な肝生検サンプルにより、スクリーニング期間中又は無作為化前６か月以内に得られた肝生検に基づくＮＡＳＨの組織学的証拠を確認するとともに、ＮＡＳＨに合致する診断、線維症レベルＦ２又はＦ３、及び他の慢性肝疾患が診断されていないこと、並びにＡＬＴ≧４３ＩＵ／Ｌ（男性）又は≧２８ＩＵ／Ｌ（女性）。

患者は、ベースライン訪問時に以下の３つの治療群の１つに、盲検様式で１：１：１の比で割り当てる。盲検を維持するため、プラセボカプセル剤を投与する。
アーム１：１４０μｇのトロピフェキソールで４８週間の１日１回（朝、空腹時）治療
アーム２：２００μｇのトロピフェキソールで４８週間の１日１回（朝、空腹時）治療
アーム３：マッチングプラセボで４８週間の１日１回（朝、空腹時）治療。

有効性評価：有効性変数の分析は、記述統計学及び反復測定ＡＮＣＯＶＡに基づき、図形表示によって支持する。有効性変数は：肝脂肪画分に対するＭＲＩ、肝機能試験、肝組織学、凝固試験、肝線維症のマーカー、ＮＡＦＬＤ線維症スコア、空腹時脂質、空腹時インスリン及びグルコース、可溶性バイオマーカーである。

実施例４
肝障害対象におけるＰＫ増加の潜在的規模をＯＣＡの肝障害試験結果と比べて予測するため、薬物動態モデル（ＰＢＰＫモデル及びｓｉｍＣＹＰモデル）を確立した。重度の障害患者において、ＰＢＰＫモデルではＡＵＣにおける１．５６倍の増加が予測され、ｓｉｍＣＹＰモデルではＡＵＣにおける２．０６倍の増加が予測された。したがって、肝障害対象における用量の低減が検討される。

肝障害のカテゴリー化にとって最も確立された手法は、Ｃｈｉｌｄ−Ｐｕｇｈシステムである。この試験は、肝障害の全部で３クラスを有する対象に注目する。

単回用量２００μｇのトロピフェキソールを、肝障害対象及びそれらにマッチした対応する健常者に投与する。肝障害対象の３つの全クラス及び健常対象を登録するが、クラスＡ及びＢ対象の半数に安全に投与されてからクラスＣ対象を登録する。試験を完了するために１群あたり少なくとも６名の評価可能対象を保証するため、十分な数として１８〜７０歳の男性及び女性対象を最大４８名登録する。

１グレード０：正常な意識、性格、神経学的検査、及び脳波。
グレード１：不穏、睡眠障害、過敏／興奮、振戦、手書きの障害、５サイクル／秒の波。
グレード２：嗜眠、時間の混乱、不適合、羽ばたき振戦、運動失調、遅い三相波。
グレード３：傾眠、昏迷、場所の混乱、活動亢進反射、硬直、より遅い波。
グレード４：覚醒できない昏睡、パーソナリティ／行動障害、除脳、遅い２〜３サイクル／秒のδ活性。
２腹水症は、判定基準：不在：腹水症の不在がマニュアル調査により検出可能であること、軽度：触診で疑わしい腹水症、中等度：腹水症が触診により検出可能であること、重度：穿刺の必要性、に従って類別され、薬学的治療に応答しない。

実施例５
ＦＬＩＧＨＴ−ＦＸＲ（ＮＣＴ０２８５５１６４）は、ＮＡＳＨ患者における安全性、耐容性及び有効性を評価するための３つの連続パートの適応設計を伴う第２相無作為化二重盲検プラセボ対照試験である。パートＡ及びＢにおける治療持続時間は１２週であった。集団は、歴史的生検又は表現型のいずれかに対して、肝脂肪、アラニントランスアミナーゼ（ＡＬＴ）上昇及びＮＡＳＨを有する患者１９８名（４７％が男性）を含んだ。パートＡ及びＢに共通する、治療群からのプールされた結果（プラセボ：４６；ＴＸＲ６０μｇ：３７；ＴＸＲ９０μｇ：８５）は、ＢＭＩサブグループの標的結合（線維芽細胞増殖因子−１９［ＦＧＦ１９］及び７−ヒドロキシ−４−コレステン−３−オン［Ｃ４］）について予め指定されたベースライン、ＡＬＴ、γ−グルタミルトランスアミナーゼ（ＧＧＴ）、肝脂肪（磁気共鳴画像法−プロトン密度脂肪画分［ＭＲＩ−ＰＤＦＦ］）及び安全性におけるベースラインからの変化において双方を評価した（下表を参照）。試験中、スタチンの開始はできなかった。

ＢＭＩサブグループにおける結果を、ＦＧＦ１９（６週目、投与前から投与後４時間の変化）を除き、ベースラインから１２週目にかけての百分率（％）変化の幾何平均として表中に示す。仮説試験を実施しなかったことから、Ｐ値は示さない。ＡＬＴ、ＧＧＴ及びＰＤＦＦに対するＴＸＲの効果は、ＢＭＩがより低いサブグループにおいてより明白であった。ＴＸＲは、十分な耐容性があり、（そう痒及び脂質を含む）臨床的関連性の安全性シグナルを伴わない。

両ＢＭＩサブグループにおいて、ＴＸＲの結果は、標的結合、抗炎症及び抗脂肪効果の証拠とともに、好ましい安全性及び耐容性を提示する。体重を基準としてより低い用量を投与したサブグループにおけるより低い応答の一貫した傾向により、生検に基づくパートＣにおいてより高いＴＸＲ用量（１４０及び２００μｇ／日）で試験することが支持され、それは安全性を脅かすことなく改善された有効性をもたらすことがある。

本明細書に記載の実施例及び実施形態があくまで例示目的であり、且つ当業者にそれを考慮した様々な修飾又は変更が示唆されることになり、本願の精神及び範囲、並びに貼付の特許請求の範囲の範囲内に含まれるべきであることは理解される。本明細書中に引用されるすべての出版物、特許、及び特許出願は、あらゆる目的でここで参照により援用される。

Claims

ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）によって媒介される状態、例えば肝疾患又は障害を治療又は予防するための薬剤の製造における、約１４０μｇ〜約２５０μｇの範囲内の用量で投与されるべきである、トロピフェキソールの使用。
前記疾患が、慢性肝疾患、例えば、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、薬剤誘発性胆管損傷、胆石、肝硬変、アルコール誘発性肝硬変、嚢胞性線維症、胆管閉塞、胆石症、肝線維症である、請求項１に記載の使用。
前記用量が、１日量である、請求項１又は２に記載の使用。
前記用量が、１日２回用量である、請求項１又は２に記載の使用。
前記用量が、２日ごとに投与されるべきである、請求項１又は２に記載の使用。
トロピフェキソールが、その遊離形態又はアミノ酸コンジュゲートである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の使用。
約１４０μｇ、約１５００μｇ、約１６０μｇ、約１７０μｇ、約１８０μｇ、約１９０μｇ、約２００μｇ約２１０μｇ、約２２０μｇ、約２３０μｇ、約２４０μｇ又は約２５０μｇの、最大で約５００μｇ／日の最大総用量の経口投与に適したトロピフェキソールを含む、単位剤形医薬組成物。
液体、錠剤、カプセル剤から選択される形態における、請求項７に記載の単位剤形医薬組成物。
慢性肝疾患、例えば、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、薬剤誘発性胆管損傷、胆石、肝硬変、アルコール誘発性肝硬変、嚢胞性線維症、胆管閉塞、胆石症、肝線維症の治療における使用を意図した、請求項７又は８に記載の単位剤形医薬組成物。
非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）の治療における使用を意図した、請求項９に記載の単位剤形医薬組成物。