JP2017522278A

JP2017522278A - ω−３及びレスベラトロールを含む固体処方物

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Publication number: JP2017522278A
Application number: JP2016570875A
Authority: JP
Inventors: ジュゼッペジャンニーニ，; モーゼサンタニエッロ，
Original assignee: Sigma Tau Industrie Farmaceutiche Riunite SpA
Current assignee: Sigma Tau Industrie Farmaceutiche Riunite SpA
Priority date: 2014-06-04
Filing date: 2015-03-26
Publication date: 2017-08-10
Also published as: US20170112791A1; MX369782B; CN106456587A; PL2952180T3; EP2952180B1; ES2615630T3; EP2952180A1; CA2943021A1; UA119174C2; EA201692399A1; AU2015271278A1; CN106456587B; PT2952180T; MX2016013189A; WO2015185239A1; SI2952180T1; EA032762B1

Abstract

本願は、不活性基材に吸着されたω−３多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＰＵＦＡ）又はそれらのアルキルエステル及びレスベラトロールを含む固体組成物であって、ω−３の残存率が２５℃で６か月後に少なくとも９６％である固体組成物の発明に関する。本発明による組成物は、フードサプリメント又は脂質代謝障害及び血小板凝集の増大に起因する心臓血管疾患；アテローム性動脈硬化症、癌、炎症性関節疾患、喘息、糖尿病、老人性認知症及び変性眼疾患からなる群より選択されるフリーラジカルに起因する損傷；並びに／若しくはウイルス性疾患を予防若しくは治療するための薬剤として処方できる。

Description

（発明の分野）
本発明は、不活性基材に吸着されたω−３多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＰＵＦＡ）及びレスベラトロール又はレスベラトロール含有天然抽出物を含み、室温で６か月間安定を維持する固体組成物に関する。

特に、本発明は、脂質代謝障害及び血小板凝集の増大に起因する心臓血管疾患、フリーラジカルに起因する損傷及び／又はウイルス性疾患の予防又は治療に使用するための安定な上記固体組成物に関する。

（発明の背景）
異常な脂質代謝に関連する心臓血管疾患は、先進工業国において非常に多発している。例えば、イタリアでは、２０１１年４月に発表された世界保健機関のデータによると、イタリアにおける心臓血管疾患による死亡者数は、死亡者数全体の１８．６５％に達していた。コレステロールと冠状動脈性心臓疾患との関係についての本発明者らの認識は、過去数年にわたって行われた疫学的研究に由来する。これらの研究において、重篤な冠状動脈アテローム性動脈硬化症及び冠状動脈性心臓疾患の発症は、血清コレステロールレベルと密接に関係しているという結論に至った［Breuer, H.W.M.; European Cardiology, 2005; 1-6（非特許文献１）］。

血小板は、心臓血管疾患において重要な役割を果たすが、十分に認識されていないことが多い。例えば、血小板の正常な応答は凝集促進刺激の増大又は抗凝集物質の減少のいずれかによって変化して、血小板の活性化／凝集が増大した病態をもたらすことがあり、この病態は、慢性（例えば、永続的な狭心症）及び急性（例えば、急性心筋梗塞）双方の心臓血管疾患状態で起こる。さらに、血小板の凝集過剰は、冠状動脈性疾患の危険因子（例えば、喫煙、高血圧及び高コレステロール血症）とも関連する。最終的に、上記疾患状態の治療における抗血小板療法の範囲を拡大すると、心臓血管疾患の病因において血小板が果たす極めて重要な役割がさらに強調される。最近発表された論文には、ホメオスタシスの維持における血小板の正常な生理学的役割、心臓血管疾患において血小板機能障害の一因となる病態生理学的プロセス、並びに抗血小板療法の関連する役割及び恩恵の包括的な概要が示されている［Kottke-Marchant K.: Cleveland Clinic Journal of Medicine; 2009 Apr; 76(1): 1-7（非特許文献２）］。

人類を悩ます変性疾患の多くは有害なフリーラジカル反応を原因とするという証拠が蓄積されている。これらの疾患としては、アテローム性動脈硬化症、癌、炎症性関節疾患、喘息、糖尿病、老人性認知症及び変性眼疾患が挙げられる。生物学的老化のプロセスもまた、フリーラジカルによるものである。フリーラジカルによる細胞への損傷のほとんどは、酸素フリーラジカル、又はより一般的には活性化酸素種（ＡＯＳ）が関与する。活性化酸素種には、フリーラジカルのみならず、一重項酸素及び過酸化水素などの非ラジカル種も含まれる。ＡＯＳは、遺伝物質を損傷し、細胞膜で脂質過酸化反応を引き起こして、膜結合酵素を不活性化することがある。我々の食餌（食事）に抗酸化剤を補充することは、より健康的な高齢者人口を確保するために必要である［Aust. N. Z. J Ophthalmol. 1995 Feb; 23(1): 3-7（非特許文献３）］。

ω−３多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＰＵＦＡ）は、心臓血管事象（心血管系イベント）の予防における有益な効果が実証されており［Aarsetoey H. et al.; Cardiology Research and Practice, Volume 2012: 1-16（非特許文献４）］、この効果は、おそらく抗炎症性、抗血栓性及び抗不整脈性機構によるものである［Sethi S. et al.; Blood 2002: 100: -1340-6（非特許文献５）; Billman GE, et al.; Circulation 3 1999: 99: 2452-7（非特許文献６）］。脂質低下効果が最初に発見されたので、これらの薬物は当初、脂質異常症の治療のために用いられていたが、後に、抗炎症性、抗血栓性、抗アテローム硬化性及び抗不整脈性効果が見出された。ＧＩＳＳＩ−予防試験（GISSI-Prevention trial）［Lancet 1999 354: 447-55（非特許文献７）］は、心筋梗塞後症候群患者におけるｎ−３ＰＵＦＡの効能及び耐性（tolerability）を実証した最初の試験であった。文献証拠によると、現在ｎ−３ＰＵＦＡは、虚血性心臓病及び突然心臓死（ＳＣＤ）の一次的及び二次的予防に必要とされている［Mori TA, Beilin L J. Long-chain omega-3 fatty acids, blood lipids and cardiovascular risk reduction. Curr. Opin. Lipidol. 2001; 12: 11-7（非特許文献８）］。

Nutrition and Dietary Supplements, 2011 September 14;: 93-100（非特許文献９）には、心臓血管疾患の予防におけるｎ−３系多価不飽和脂肪酸の役割が記載されている。

レスベラトロール（ｔｒａｎｓ−３，４’，５，−トリヒドロキシスチルベン）は、黒ブドウの皮に存在するポリフェノール分子である。レスベラトロールは、心臓保護効果を有し、血小板凝集の阻害剤として作用することが知られている［Szmitko PE, et al. Circulation January 2005, 111 (2) p10-11（非特許文献１０）；Das DK, et al. “Resveratrol in cardioprotection: a therapeutic promise of alternative medicine”. Mol. Interv., 2006, 6 (1): 36-47（非特許文献１１）］。レスベラトロールは、抗酸化剤及び皮膚保護剤としても作用する［Afaq, Farrukh et al. “Botanical antioxidants in the prevention of photocarcinogenesis and photoaging”; Experimental Dermatology, 2006, 15 (9): 678-84（非特許文献１２）］。レスベラトロールは赤ワインの主成分の一つであり、赤ワインの公知の有益な特性に関連して、近年集中的に研究されている［Life Sci., 71, 2145-52, 2002（非特許文献１３）］。多数の研究によってレスベラトロールの抗発癌活性が実証されており、その作用機序は以下のように分類することができる：炎症及び発癌プロセスに関与する種々の遺伝子の発現を調節可能な転写因子ＮＦ−κＢの活性化の阻害［Lancet, 341, 1103-1104, 1993（非特許文献１４）；Science, 275, 218.220, 1997（非特許文献１５）；Proc. Natl. Acad. Sc., 94, 14138-14143, 1997（非特許文献１６）；Life Science, 61, 2103-2110, 1997（非特許文献１７）；Brit. J. Pharm., 126, 673-680, 1999（非特許文献１８）；J. Imm., 164, 6509-6519, 2000（非特許文献１９）］；プロテインキナーゼＣ［Biochemistry., 38, 13244-13251, 1999（非特許文献２０）］、リボヌクレオチドレダクターゼ［FEBS Lett., 421, 277-279, 1998（非特許文献２１）］及び哺乳類上皮細胞中のシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）［Ann. N.Y. Acad. Sci, 889, 214-223, 1999（非特許文献２２）；Carcinogenesis., 21, 959-963, 2000（非特許文献２３）］を含む種々のタンパク質の阻害；カスパーゼ２、３、６及び９の活性化［FASEB J., 1613-1615, 2000（非特許文献２４）］；及び公知の腫瘍抑制因子であるｐ５３遺伝子の調節［Cancer Research, 59, 5892-5895, 1999（非特許文献２５）；Clin. Biochem., 34, 415-420, 2001（非特許文献２６）］。

Free Radic. Res., 33, 105-114, 2000（非特許文献２７）には、レスベラトロールの抗酸化活性並びにレスベラトロールが細胞内酸化的ストレスを引き起こす種々の物質及び／又は状態によってもたらされる損傷効果を相殺できることが記載されている。

ＥＰ１５６７１３７Ｂ１（特許文献１）には、インフルエンザウイルス感染を治療するためにレスベラトロールを使用することが記載されている。

ＷＯ２０１１／１６１５０１（特許文献２）には、有効成分が水に不溶又は難溶であり、及び／又は不耐熱性であり、及び／又は不快な感覚刺激性を有する、粉末又は顆粒形態の固体組成物が記載されている。記載されている方法は、トリグリセリド、ポリオキシエチレンソルビタンエステル及びアスコルビン酸パルミテートを含む脂質マトリックスへの分散である。

特許出願ＷＯ２０１１／１２０５３０（特許文献３）には、多孔質二酸化ケイ素と、魚油のうち薬学的油を多く含んでいてもよい放出増強剤（release enhancing agent）とを含む固体の多孔質不活性担体組成物が開示されている。ｎ−３ＰＵＦＡと１又は複数の有効成分とを組み合わせて含む組成物の調製例は、ＥＰ２５１７６９７（特許文献４）に記載されている。特に、ｎ−３ＰＵＦＡのアルキルエステル中に１又は複数のスタチンを含むマイクロカプセル懸濁液であって、スタチンが、胃腸液（gastrointestinal medium）中で容易に崩壊可能な高分子膜でｎ−３ＰＵＦＡのアルキルエステルとの接触から隔離されている懸濁液が記載されている。

レスベラトロールとｎ−３ＰＵＦＡとを含む組成物の調製に有用な、当該分野で公知の方法のほとんどは、時間も費用もかかるマイクロカプセル化又はコーティングプロセスを含む。これらの研究は、レスベラトロールを単回投与で油相内に適切に送達する方法を見出すことに焦点を当てている。

当該分野において、ｎ−３ＰＵＦＡ及びレスベラトロールを含み、ｎ−３ＰＵＦＡが室温で６か月間まで安定である固体組成物は知られていない。

ほとんどの場合に乾燥抽出物であるか又はｎ−３ＰＵＦＡ中に不溶である多様な（multiple）栄養補助食品（nutraceuticals）を組み合わせる処方物の調製について、固体形態でｎ−３ＰＵＦＡを含む処方物が有する効果を考慮すると、簡単かつ迅速で経済的に有利な方法によってｎ−３ＰＵＦＡの分解を防ぐ組成物の調製方法を見出すことの必要性がますます顕著になってきている。

ＥＰ１５６７１３７Ｂ１ＷＯ２０１１／１６１５０１ＷＯ２０１１／１２０５３０ＥＰ２５１７６９７

European Cardiology, 2005; 1-6 Cleveland Clinic Journal of Medicine; 2009 Apr; 76(1): 1-7 J Ophthalmol. 1995 Feb; 23(1): 3-7 Cardiology Research and Practice, Volume 2012: 1-16 Blood 2002: 100: -1340-6 Circulation 3 1999: 99: 2452-7 Lancet 1999 354: 447-55 Curr. Opin. Lipidol. 2001; 12: 11-7 Nutrition and Dietary Supplements, 2011 September 14;: 93-100 Circulation January 2005, 111 (2) p10-11 Mol. Interv., 2006, 6 (1): 36-47 Experimental Dermatology, 2006, 15 (9): 678-84 Life Sci., 71, 2145-52, 2002 Lancet, 341, 1103-1104, 1993 Science, 275, 218.220, 1997 Proc. Natl. Acad. Sc., 94, 14138-14143, 1997 Life Science, 61, 2103-2110, 1997 Brit. J. Pharm., 126, 673-680, 1999 J. Imm., 164, 6509-6519, 2000 Biochemistry., 38, 13244-13251, 1999 FEBS Lett., 421, 277-279, 1998 Ann. N.Y. Acad. Sci, 889, 214-223, 1999 Carcinogenesis., 21, 959-963, 2000 FASEB J., 1613-1615, 2000 Cancer Research, 59, 5892-5895, 1999 Clin. Biochem., 34, 415-420, 2001 Free Radic. Res., 33, 105-114, 2000

（発明の説明）
驚くべきことに、今般、ｎ−３ＰＵＦＡを不活性基材に吸着すると、適切な量のレスベラトロール又はレスベラトロール含有天然抽出物の添加により、室温で少なくとも６か月間処方物が安定性を示すことが見出された。

従って、本発明の目的は、メタケイ酸アルミン酸マグネシウムの微小超軽量顆粒（fine ultra-light granule）又はシリカ担体からなる群より選択される不活性基材に吸着されたω−３多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＰＵＦＡ）及びレスベラトロールを含む固体組成物であって、ｎ−３ＰＵＦＡの残存率（回収率（recovery））が、２５℃、６０％ＲＨで６か月後に少なくとも９６％；３０℃、６０％ＲＨで３か月後に少なくとも９５％；及び４０℃、７０％ＲＨで３か月後に少なくとも９０％である固体組成物である。

本発明の一実施形態において、ω−３多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＰＵＦＡ）は、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）又はそれらのアルキルエステル及びその混合物からなる群より選択され、アルキルエステルは、エチルエステル、メチルエステル及びプロピルエステルからなる群より選択される。

本発明のさらなる実施形態において、ω−３多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＰＵＦＡ）は、ＥＰＡ及びＤＨＡの含有量が脂肪酸総重量に対して７５重量％〜９５重量％、好ましくは少なくとも８５重量％である脂肪酸の混合物であり、ｎ−３ＰＵＦＡの総含有量は、脂肪酸総重量に対して少なくとも９０重量％であり、かつエイコサペンタエン酸とドコサヘキサエン酸との比が０．５〜２である。

本発明の他の実施形態において、ω−３多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＰＵＦＡ）は、ＥＰＡエチルエステル及びＤＨＡエチルエステルを０．９〜１．５の比で含む混合物であり、脂肪酸総重量に対して、ＥＰＡエチルエステルの含有量が４０〜５１重量％であり、かつＤＨＡエチルエステルの含有量が３４〜４５重量％である。

本発明の他の実施形態において、不活性基材は、Ｎｅｕｓｉｌｉｎ（ノイシリン）（登録商標）ＵＳ２及びＳＹＬＯＩＤ（サイロイド）（登録商標）ＸＤＰから選択される。

本発明のさらなる目的は、メタケイ酸アルミン酸マグネシウムの微小超軽量顆粒又はシリカ担体からなる群より選択される不活性基材に吸着されたω−３多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＰＵＦＡ）及びレスベラトロールを含む固体組成物であって、ω−３の残存率が、ダイエタリーサプリメント（健康食品）若しくは栄養補助食品（dietary or nutritional supplement）又は経口投与用薬剤の形態において、２５℃で６か月後に少なくとも９６％；３０℃で３か月後に少なくとも９５％；又は４０℃で３か月後に少なくとも９０％である固体組成物である。

本発明のさらなる実施形態において、前記組成物中のω−３多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＰＵＦＡ）の量は、０．５〜１．０ｇ、好ましくは０．８〜０．９ｇ、より好ましくは０．９ｇである。

本発明のさらなる目的は、ω−３多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＰＵＦＡ）とレスベラトロールとの比が０．０１〜０．１、好ましくは０．０２である前記組成物である。

本発明のさらなる実施形態によると、前記組成物は、さらに、１若しくは複数のビタミン、１若しくは複数のミネラル、１若しくは複数の補酵素、１若しくは複数の抗酸化剤及び／又は１若しくは複数の植物抽出物を含んでもよい。

本発明のさらなる実施形態によると、前記組成物は、さらに、少なくとも１つの薬学的に許容可能なベヒクル又は賦形剤を含む。

本発明のさらなる目的は、経口投与のために、腸溶性コーティング剤を必要に応じて含む軟ゼラチンカプセルによってカプセル化されることを特徴とする前記組成物である。

本発明のさらなる目的は、脂質代謝障害及び／若しくは血小板凝集の増大に起因する心臓血管疾患；アテローム性動脈硬化症、癌、炎症性関節疾患、喘息、糖尿病、老人性認知症及び変性眼疾患からなる群より選択されるフリーラジカルに起因する損傷；並びに／又はウイルス性疾患の予防又は治療に使用するための前記組成物である。

本発明による使用に適した医薬組成物は、一般に、当該分野の専門家によって容易に選択可能な、少なくとも１つの薬学的に許容可能なベヒクル及び／又は１つの希釈剤及び／又は１つの界面活性剤及び／又は１つの増粘剤及び／又は１つの結合剤及び／又は１つの滑沢剤及び／又は１つの着香剤及び／又は１つの着色剤及び／又は１つの安定化剤を含む。

本発明の組成物は、慣用の補助剤（adjuvant）、担体、希釈剤又は賦形剤とともに、固体医薬組成物及びその単位剤形の形態で含まれてもよい。このような医薬組成物は、錠剤若しくは充填したカプセル剤などの固体として、すべて経口用途に用いられてもよい。経口投与用組成物は、バルク懸濁剤又はバルク散剤の形態をとっていてもよい。しかし、通常、組成物は、正確な投薬を容易にするために単位投薬形態（単位剤形）で与えられる。

用語「単位投薬形態」とは、ヒト被験体及び他の動物に対する単位投薬量として適切な物理的に別々の（分離した）単位をいい、各単位は、所望の治療効果を得るために計算された所定量の有効物質と、適切な薬学的賦形剤とを含む。

さらなる材料並びにプロセス技術などは、Remington’s Pharmaceutical Sciences, 20th Edition, 2000, Merck Publishing Company, Easton, Pennsylvaniaの第５部（Part 5）に記載されている。この文献は、参照することにより本明細書に組み入れられる。

本発明による組成物は、フードサプリメント（food supplement）又はダイエタリーサプリメント（dietary supplement）として処方されてもよく、これらは本発明のさらなる目的を構成する。

本発明による組成物は、当該分野において公知であって臨床実務においてすでに使用されている有効成分を含む。従って、このような有効成分は、以前から販売されており、かつヒト又は動物への投与に適したグレードの製品であるので、非常に調達しやすい。

レスベラトロール（３，５，４’−トリヒドロキシ−ｔｒａｎｓ−スチルベン）は、スチルベノイドであり、天然フェノールの一種であり、細菌又は真菌などの病原体から攻撃を受けているときにいくつかの植物によって天然に産生されるフィトアレキシンである。

用語「ω−３多価不飽和脂肪酸」（本明細書において、「ｎ−３ＰＵＦＡ」と略される）とは、長鎖多価不飽和脂肪酸、一般的には、Ｃ_１６〜Ｃ_２４鎖（特にＣ_２０〜Ｃ_２２鎖）を有する長鎖多価不飽和脂肪酸のファミリーをいう。ω−３多価不飽和脂肪酸は、ｎ−３位（すなわち、脂肪酸のメチル末端から第３番目の結合）に炭素−炭素二重結合を共通に有する。天然に見出される最も一般的なω−３多価不飽和脂肪酸の例を、それぞれの名前とともに以下の表に示す。

最も好ましい長鎖多価不飽和脂肪酸は、ａｌｌ−ｃｉｓ−５，８，１１，１４，１７−エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）及びａｌｌ−ｃｉｓ−４，７，１０，１３，１６，１９−ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）である。

好ましくは、本発明によるｎ−３ＰＵＦＡは、ＥＰＡ及びＤＨＡを高含有量で含む脂肪酸の混合物であり、例えば、ＥＰＡ及びＤＨＡの含有量は、脂肪酸総重量を基にして、２５重量％よりも高く、好ましくは約３０重量％〜約１００重量％、特に約７５重量％〜９５重量％、及びより好ましくは少なくとも８５重量％である。好ましくは、本発明によるｎ−３ＰＵＦＡの総含有量は、脂肪酸総重量を基にして、少なくとも９０重量％のｎ−３ＰＵＦＡを有する脂肪酸の混合物である。

本明細書において用いられる用語「ＰＵＦＡ」及び「ｎ−３ＰＵＦＡ」には、対応するそれらのＣ_１〜Ｃ_３アルキルエステル（好ましくは、エチルエステル）及び／又はそれらの薬学的に許容可能な塩基［水酸化ナトリウム、リシン（リジン）、アルギニン又はアミノアルコール（コリンなど）など］との塩を包含することが意図される。本発明の組成物は、経口的に投与され、特に、軟ゼラチンカプセル剤の形態で投与される。単位用量は、一般的に、ω−３系の多価不飽和脂肪酸を１００〜１０００ｍｇ、好ましくは５００〜１０００ｍｇ又は３００〜５００ｍｇ含み、総用量は、通常、１日当たり約０．１〜３．０ｇ、好ましくは１日当たり０．３〜２．０ｇ、最も好ましくは１日当たり１．０ｇである。

有効成分として上記仕様（specification）を満たし、かつ本発明に従って使用できる具体的なｎ−３ＰＵＦＡ含有薬剤は、すでに販売されており入手可能である。

製品のこの量は、所望の血中濃度に達するために、１日数回に分けた用量の形態で、又は好ましくは単回用量として投与されてもよい。当然のことながら、臨床医は、患者の状態、年齢及び体重に応じて、投与されるべき製品（又は他の治療剤との混合物）の量を変更してもよい。

他の種類の経口投与用処方物（例えば、多価不飽和脂肪酸を固体支持体に吸着した硬カプセル剤又は錠剤）もまた、本発明の目的に適している。

欧州薬局方２０００（European Pharmacopoiea 2000 (EuPh. 2000)）に説明される組成物は、９０重量％よりも多いか又は９０重量％と等しい量のω−３多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＰＵＦＡ）又は多価不飽和脂肪酸エチルエステルを含み、その８０重量％よりも多いか又は８０重量％と等しい量は、ＥＰＡエチルエステル及びＤＨＡエチルエステルの混合物に相当し、本発明の目的にも適している。

ＥＰＡとＤＨＡとの最も好ましい比は、約０．６〜１．１／１．３〜１．８；特に、０．９〜１．５である。

好ましくは、脂肪酸総重量に対して、ＥＰＡ（エチルエステルとして）の含有量は４０〜５１重量％であり、ＤＨＡ（エチルエステルとして）の含有量は３４〜４５重量％である。

Ｎｅｕｓｉｌｉｎ（登録商標）Ｕ．Ｓ．−２（化学式Ａｌ_２Ｏ_３・ＭｇＯ・１．７ＳｉＯ_２・ｘＨ_２Ｏ、ＣＡＳ番号１２５１１−３１−０８）は、メタケイ酸アルミン酸マグネシウムの微小超軽量顆粒であり、医薬品の品質を向上させる多機能賦形剤として許容される。Ｎｅｕｓｉｌｉｎ（登録商標）Ｕ．Ｓ．−２は、大きな表面積と多孔性の性質とに起因して、大量の油又は水を吸着して、高品質錠剤に機械的に圧縮成形（compacted）できる。

ＳＹＬＯＩＤ（登録商標）ＸＤＰシリカ担体は、液体を、自由流動固体（free flowing solids）、特に、油活性物質（oily actives）及び脂質ベースの系に変換するために設計された最適化メソ細孔材料（optimized mesoporous material）である。吸収能、密度及び放出のバランスは、液体−固体処方物におけるＡＰＩ（Active Pharmaceutical Ingredient：医薬品有効成分）の充填及び脱着を増大でき、脂質ベースの薬物送達系及びＡＰＩを固体剤形のための自由流動粉末へ変形させることを簡素化できる。

本発明の他の実施形態において、組成物は単位剤形（形態）を有し、この単位剤形において、有効成分は、単一の薬学的剤形中に存在し、特に、不活性支持体に吸着されている。本発明による組成物は、必要に応じて、有効成分とともに、少なくとも１つの薬学的に許容可能なベヒクル又は賦形剤を含む。

本発明の実質的な効果及び予期せぬ効果を実証するために、本発明は、以下の実施例に従って実施されるが、これらの例に限定されない。

（発明の詳細な説明）
（実施例）
（材料及び方法）
本発明のために、以下の材料を用いた：
・ω−３多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＰＵＦＡ）は、多価不飽和脂肪酸エチルエステルの混合物であって、ＥＰＡ及びＤＨＡの含有量が８５％よりも高く、ＥＰＡ／ＤＨＡ比が０．９〜１．５であり、Pronova（ノルウェー）によって供給された製品である；
・レスベラトロールは、Royalmount Pharma（カナダ、モントリオール）によって供給される；
・商品名Ｎｅｕｓｉｌｉｎ（登録商標）としても公知の使用したメタケイ酸アルミン酸マグネシウムは、富士化学工業（株）（日本）によって供給される；
・α−トコフェロールは、Sigma-Aldrich s.r.l.（イタリア、ミラノ）によって供給される；
・ＳｙｌｏｉｄＸＤＰは、Grace Performance Chemicals（ドイツ、ヴォルムス）によって供給される；
・補酵素Ｑ１０は、Sigma-Aldrich s.r.l.（イタリア、ミラノ）によって供給される；
・アスコルビン酸パルミテートは、Sigma-Aldrich s.r.l.（イタリア、ミラノ）によって供給される；
・リポ酸は、Sigma-Aldrich s.r.l.（イタリア、ミラノ）によって供給される；
・アスコルビン酸は、Sigma-Aldrich s.r.l.（イタリア、ミラノ）によって供給される；
・ヒドロキシチロソールは、Probeltebio（スペイン、ムルシア）によって供給される；
・エピガロカテキンは、Sigma-Aldrich s.r.l.（イタリア、ミラノ）によって供給される。

（安定性分析）
処方物を３つの群に分け、それぞれ、２５℃、６０％ＲＨ（相対湿度）で３か月及び６か月間、３０℃、６０％ＲＨで３か月及び６か月間、又は４０℃、７０％ＲＨで３か月及び６か月間放置した。

ＨＰＬＣ分析は、処方物の安定性を評価するために実施された分析であった。この分析は、Column Symmetry C-18 4.6x150mm、溶離液としてＣＨ_３ＣＮ／ＣＨ_３ＯＨ／Ｈ_２Ｏ４５／４５／１０の溶液、流速１ｍｌ／分、及びMass spectrometry Detector（質量分析検出器）を用いて実施した。検出されたＥＰＡ及びＤＨＡの量の百分率を、重量％として表す。

他の安定性試験も実施した。

放射線及び高温によって誘発した自動酸化後の安定性分析を、以下の手順に従って実施した。

・放射線によって誘発した自動酸化：１００ｍｇ量の処方物を直径５ｃｍのペトリ皿に撒き、光源から１２ｃｍの距離に置いて２４時間光に曝露する。光源は、３００〜６４０ｎｍの発光スペクトルを有し、４４０、４９０、５４０、５９０及び６１０ｎｍでピークを有する１３Ｗランプによって構成される。この試験を２２℃、６０％ＲＨで実施する。

・高温によって誘発した自動酸化：１００ｍｇ量の処方物を琥珀製容器に入れ、６０℃のストーブ中に１か月間置く。

（処方物１）
・ｎ−３ＰＵＦＡ：５．０ｇ
・ＮｅｕｓｉｌｉｎＵ．Ｓ．−２：５．０ｇ

ｎ−３ＰＵＦＡをＮｅｕｓｉｌｉｎＵ．Ｓ．−２に少しずつ添加し、手動でよく混合して均質な固体を得た。安定性試験を、１、３及び６か月間、上記のように２５℃で６０％ＲＨ、３０℃で６０％ＲＨ及び４０℃で７０％ＲＨにて行う。

得られた結果を表１にまとめる。

ω−３の分解の阻害を評価するために、処方物１に天然の抗酸化剤を添加して、他の処方物を調製した。

放射線によって誘発した自動酸化後に実施された安定性試験の結果を、表２に要約する。

高温によって誘発した１か月間の自動酸化後に実施された安定性試験の結果を、表３に要約する。

これらの予備的な安定性試験の後、抗酸化剤として補酵素Ｑ１０、α−トコフェロール及びレスベラトロールを用いる他の処方物を調製した。

（処方物２）
・ｎ−３ＰＵＦＡ：４．９ｇ
・α−トコフェロール：０．１ｇ
・ＮｅｕｓｉｌｉｎＵ．Ｓ．−２：５．０ｇ

α−トコフェロールをｎ−３ＰＵＦＡに添加し、この溶液を、６００ｒｐｍで３時間、２２℃、６０％ＲＨで機械的に攪拌しながら放置したところ、透明な溶液が認められた。次いで、この溶液を、ＮｅｕｓｉｌｉｎＵ．Ｓ．−２に少しずつ添加し、手動でよく混合して均質な固体を得た。

３か月の安定性試験を、上記のように、２５℃、３０℃及び４０℃で行った。

得られた結果を表４にまとめる。

（処方物３）
・ｎ−３ＰＵＦＡ：４．９ｇ
・補酵素Ｑ１０：０．１ｇ
・ＮｅｕｓｉｌｉｎＵ．Ｓ．−２：５．０ｇ

補酵素Ｑ１０をｎ−３ＰＵＦＡに添加し、この溶液を、６００ｒｐｍで１時間、２２℃、６０％ＲＨで機械的に攪拌しながら放置したところ、透明な溶液が認められた。この溶液を、ＮｅｕｓｉｌｉｎＵ．Ｓ．−２に少しずつ添加し、手動でよく混合して均質な固体を得た。

得られた結果を表４にまとめる。

（処方物４）
・ＰＵＦＡ４．９ｇ
・レスベラトロール０．１ｇ
・ＮｅｕｓｉｌｉｎＵ．Ｓ．−２５．０ｇ

ｎ−３ＰＵＦＡをＮｅｕｓｉｌｉｎＵ．Ｓ．−２に少しずつ添加し、手動でよく混合して均質な固体を得た。

次いで、レスベラトロールを添加し、この処方物を再度よく混合して均質な固体を得た。

３か月の安定性試験を、上記のように、２５℃、３０℃及び４０℃で行った。得られた結果を表４にまとめる。

レスベラトロールの量と抗酸化効果との関係を評価するために、別の処方物を調製した。

（処方物５）
・ＰＵＦＡ：４．９グラム
・レスベラトロール：０．１２グラム
・ＮｅｕｓｉｌｉｎＵ．Ｓ．−２：５グラム

ｎ−３ＰＵＦＡをＮｅｕｓｉｌｉｎＵ．Ｓ．−２に少しずつ添加し、よく混合して均質な固体を得た。

次いで、レスベラトロールを添加し、この処方物を再度よく混合して均質な固体を得た。３か月及び６か月の安定性試験を、上記のように２５℃で行った。

得られた結果を表５にまとめる。

別の不活性固体支持体についても試験した。

（処方物６）
・ＰＵＦＡ：１．０ｇ
・ＳｙｌｏｉｄＸＤＰ：１．０ｇ

ｎ−３ＰＵＦＡをＳｙｌｏｉｄＸＤＰに少しずつ添加し、よく混合して均質な固体を得た。放射線及び高温によって誘発した自動酸化後に実施した安定性試験の結果を、表６に示す。

このケースにおいても、安定化効果を評価するために、レスベラトロールを含む処方物を調製した。

（処方物７）
・ＰＵＦＡ：０．５ｇ
・レスベラトロール：０．０１ｇ
・ＳｙｌｏｉｄＸＤＰ：０．５ｇ

ｎ−３ＰＵＦＡをＳｙｌｏｉｄＸＤＰに少しずつ添加し、よく混合して均質な固体を得た。次いで、レスベラトロールを添加し、この処方物を再度よく混合して均質な固体を得た。

放射線及び高温によって誘発した自動酸化後に実施した安定性試験の結果を、表６に要約する。

（結果の考察）
本発明において示されたデータから、レスベラトロールが、固体処方物中のω−３の分解に対して最善の安定化効果を示す天然の抗酸化剤であることが分かる。実際に、表１に示される結果からは、３か月後にはすでにＥＰＡ及びＤＨＡは有意に分解されていることが認められるが、最初の試験から、レスベラトロール、補酵素Ｑ１０、α−トコフェロール及びアスコルビン酸パルミテートは安定性を改善可能であることが明らかである。

しかし、表４のデータによって実証されるように、驚くべきことに、レスベラトロールは、ω−３を含む安定な固体処方物を長期間維持できる唯一の天然の抗酸化剤である。実際に、１％のレスベラトロールを含む処方物中のω−３の平均残存率は、４０℃、３か月後に９０％であるのに対し、１％のα−トコフェロールを含む処方物については、残存率はわずか４５％である。従って、レスベラトロールの抗酸化力は、α−トコフェロールの抗酸化力の２倍であると考えられ、この差異は統計学的に有意である。

さらなる効果は、抗酸化効果と使用したレスベラトロールの量との間の正比例関係によって示される。表５のデータから、レスベラトロールの量が１％から１．２％に増大すると、ｎ−３ＰＵＦＡの残存率は６か月後にも９６％で維持されることに言及できる。

さらに、本発明の組成物の調製方法は簡単であり、産業上の利用に特に適している。

血小板は、心臓血管疾患において重要な役割を果たすが、十分に認識されていないことが多い。例えば、血小板の正常な応答は凝集促進刺激の増大又は抗凝集物質の減少のいずれかによって変化して、血小板の活性化／凝集が増大した病態をもたらすことがあり、この病態は、慢性（例えば、永続的な狭心症）及び急性（例えば、急性心筋梗塞）双方の心臓血管疾患状態で起こる。さらに、血小板の凝集過剰は、冠状動脈性疾患の危険因子（例えば、喫煙、高血圧及び高コレステロール血症）とも関連する。最終的に、上記疾患状態の治療における抗血小板療法の範囲を拡大すると、心臓血管疾患の病因において血小板が果たす極めて重要な役割がさらに強調される。最近発表された論文には、ホメオスタシスの維持における血小板の正常な生理学的役割、心臓血管疾患において血小板機能障害の一因となる病態生理学的プロセス、並びに抗血小板療法の関連する役割及び恩恵の包括的な概要が示されている［Willoughby S, Holmes A, Loscalzo J Eur J Cardiovasc Nurs. 2002 Dec;1(4):273-88（非特許文献２）］。

European Cardiology, 2005; 1-6 Eur J Cardiovasc Nurs. 2002 Dec;1(4):273-88 J Ophthalmol. 1995 Feb; 23(1): 3-7 Cardiology Research and Practice, Volume 2012: 1-16 Blood 2002: 100: -1340-6 Circulation 3 1999: 99: 2452-7 Lancet 1999 354: 447-55 Curr. Opin. Lipidol. 2001; 12: 11-7 Nutrition and Dietary Supplements, 2011 September 14;: 93-100 Circulation January 2005, 111 (2) p10-11 Mol. Interv., 2006, 6 (1): 36-47 Experimental Dermatology, 2006, 15 (9): 678-84 Life Sci., 71, 2145-52, 2002 Lancet, 341, 1103-1104, 1993 Science, 275, 218.220, 1997 Proc. Natl. Acad. Sc., 94, 14138-14143, 1997 Life Science, 61, 2103-2110, 1997 Brit. J. Pharm., 126, 673-680, 1999 J. Imm., 164, 6509-6519, 2000 Biochemistry., 38, 13244-13251, 1999 FEBS Lett., 421, 277-279, 1998 Ann. N.Y. Acad. Sci, 889, 214-223, 1999 Carcinogenesis., 21, 959-963, 2000 FASEB J., 1613-1615, 2000 Cancer Research, 59, 5892-5895, 1999 Clin. Biochem., 34, 415-420, 2001 Free Radic. Res., 33, 105-114, 2000

Claims

メタケイ酸アルミン酸マグネシウムの微小超軽量顆粒及びシリカ担体からなる群より選択される不活性基材に吸着されたω−３多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＰＵＦＡ）及びレスベラトロールを含む固体組成物であって、２５℃で６か月後のｎ−３ＰＵＦＡの残存率が少なくとも９６重量％である固体組成物。
３０℃で３か月後のｎ−３ＰＵＦＡの残存率が、少なくとも９５重量％であることを特徴とする請求項１記載の組成物。
４０℃で３か月後のｎ−３ＰＵＦＡの残存率が、少なくとも９０重量％であることを特徴とする請求項１記載の組成物。
ω−３多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＰＵＦＡ）が、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸又はその混合物からなる群より選択されることを特徴とする請求項１記載の組成物。
エイコサペンタエン酸とドコサヘキサエン酸との比が０．５〜２であることを特徴とする請求項１記載の組成物。
ω−３多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＰＵＦＡ）の量が、０．５〜１．０ｇ、好ましくは０．８〜０．９ｇ、より好ましくは０．９ｇである請求項１記載の組成物。
ω−３多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＰＵＦＡ）が、ＥＰＡ及びＤＨＡの含有量が脂肪酸総重量に対して７５重量％〜９５重量％、好ましくは少なくとも８５重量％である脂肪酸の混合物であり、かつｎ−３ＰＵＦＡの総含有量が、脂肪酸総重量に対して少なくとも９０重量％であることを特徴とする請求項１記載の組成物。
ω−３多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＰＵＦＡ）が、ＥＰＡエチルエステル及びＤＨＡエチルエステルを０．９〜１．５の比で含む混合物であり、脂肪酸総重量に対して、ＥＰＡエチルエステルの含有量が４０〜５１重量％であり、かつＤＨＡエチルエステルの含有量が３４〜４５重量％である請求項１記載の組成物。
ω−３多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＰＵＦＡ）のアルキルエステルが、エチルエステル、メチルエステル、プロピルエステル又はその混合物からなる群より選択されることを特徴とする請求項１記載の組成物。
ω−３多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＰＵＦＡ）とレスベラトロールとの比が、０．０１〜０．１であり、好ましくは０．０２である、請求項１記載の組成物。
不活性基材が、Ｎｅｕｓｉｌｉｎ（登録商標）Ｕ．Ｓ．−２である請求項１記載の組成物。
ダイエタリーサプリメント又は経口投与用薬剤の形態である請求項１〜１１のいずれかに記載の組成物。
さらに、１若しくは複数のビタミン、１若しくは複数のミネラル、１若しくは複数の補酵素、１若しくは複数の抗酸化剤及び／又は１若しくは複数の植物抽出物、並びに／又は少なくとも１つの薬学的に許容可能なベヒクル若しくは賦形剤を含む請求項１〜１２のいずれかに記載の組成物。
経口投与のために、腸溶性コーティング剤を必要に応じて含む軟ゼラチンカプセルによってカプセル化されることを特徴とする請求項１〜１３のいずれかに記載の組成物。
脂質代謝障害及び血小板凝集の増大に起因する心臓血管疾患；アテローム性動脈硬化症、癌、炎症性関節疾患、喘息、糖尿病、老人性認知症及び変性眼疾患からなる群より選択されるフリーラジカルに起因する損傷；並びに／又はウイルス性疾患の予防又は治療に使用するための請求項１〜１４のいずれかに記載の組成物。