JP2017505778A

JP2017505778A - ペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体

Info

Publication number: JP2017505778A
Application number: JP2016549327A
Authority: JP
Inventors: ヨルジョン，ボン; シクバング，ソン; ジユ，ミン; スキム，ミョン; ウクジョン，ミン; ファジョン，イン; スキム，ヨン
Original assignee: ヒューメディックスカンパニー，リミテッド
Priority date: 2014-01-29
Filing date: 2015-01-28
Publication date: 2017-02-23
Also published as: EP3101025A1; WO2015115796A1; EP3101025A4; KR20150090855A; CN106170490A; KR20160105745A; KR101701382B1; US20170000715A1

Abstract

本発明は、ペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体及びそれを含むしわ改善及び老化防止用組成物に関する。本発明に係るペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体は、水に対する溶解度や安定性が改善され、優れたビタミンＤの供給源としてしわ改善及び老化防止用化粧料組成物、薬剤学的組成物、健康機能食品などに効果的に使用できる。

Description

本発明は、ペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体に係り、より詳しくは、安定性や溶解度が増加し、体内で加水分解してビタミンＤを供給するペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体及びそれを含むしわ改善及び老化防止用組成物に関する。

ビタミンＤの主要形態としては、ビタミンＤ_２（エルゴカルシフェロール）とビタミンＤ_３（コレカルシフェロール、化合物Ｂ）があり、これら２種の物質は、肝臓や腎臓で代謝を受けることで活性型（カルシトリオール、化合物Ｃ）に転換されるようになる。７−デヒドロコレステロール（７−ｄｅｈｙｄｒｏｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ：７−ＤＨＣ、化合物Ａ）は、ビタミンＤ_３のプロビタミン（ｐｒｏｖｉｔａｍｉｎ）形態であって、太陽光によってビタミンＤ_３に転換される。

ビタミンＤ_３は、一般にカルシウムの吸収を刺激して骨の密度を強化させる働きをすることで骨粗鬆症患者の治療剤として用いられており、また、年寄りや日照量が不足な北緯度地域の居住者らに対する補充剤として用いられている。

ビタミンＤの前駆物質として知られた７−デヒドロコレステロールは、強力な皮膚老化抑制機能や抗酸化効能及び紫外線防御効果を持っており、機能性化粧品の素材として活用されている［参照：韓国公開特許第２００１−０００２２８１号］。また、米国公開特許第２０１３−００１７２３４号では、骨の生成と関連のあるＣｏｌ-１、ＡＬＰ、ＯＳＸ、ＯＣ、ＢＭＰ−２、ＩＬ−５などの複数の因子を発現させ、関節治療医薬品としての可能性を示したことがあり、さらに、韓国登録特許第１０−０５６８６００号では、臨床実験を通じて毛髪の保護効果にも優れることが報告されている。

したがって、表皮層に持続的に７−デヒドロコレステロールを補充することで、紫外線の吸収遮断や老化防止は勿論のこと、コレカルシフェロールの産生を増加させ、骨粗鬆症の予防や異常角質による乾癬及びアトピー性皮膚炎のような皮膚疾患を予防することができるという機能が期待される。

しかし、７−デヒドロコレステロールは、皮膚以外では非常に不安定なものであって光によって複数の物質に転換され、該変換体は副作用はないものの、ビタミンＤ_３への転換が非常に難しくなる。また、皮膚以外の場所では、７−デヒドロコレステロールがピロカルシフェロールやルミステロール、イソピロカルシフェロールに転換され、活性が劣るという問題点がある。

このような問題点を解決するために、米国特許第５,３４２,８３３号では、新規な物性を持つ新規コレカルシフェロール、すなわち活性型ビタミンＤ誘導体を皮膚疾患や乾癬治療に用いた例を示しており、また、米国特許第５,７４７,４７８号では、酸化マグネシウムとクエン酸ナトリウムを用いて活性化したコレカルシフェロールを安定化させた例を示している。

しかし、７−デヒドロコレステロールに対する安定化研究は非常に不十分な点が多く、その理由は、７−デヒドロコレステロールが紫外線や温度によって別の物質に転移し易く、且つ空気中の酸素と反応して変性を示すという構造的な短所を持っているからである。

また、上述したように、既存の特許では剤形的に７−デヒドロコレステロールの安定化に関する内容だけが報告されているか、または活性型であるコレカルシフェロールに関する研究だけを報告されており、７−デヒドロコレステロールを合成的に安定化させた例は未だ報告されたことがない。

韓国公開特許第２００１-０００２２８１号米国公開特許第２０１３-００１７２３４号韓国登録特許第１０-０５６８６００号米国特許第５,３４２,８３３号米国特許第５,７４７,４７８号

本発明者らは、前記した７−デヒドロコレステロールの問題点である化学的な不安定性、紫外線、温度及び空気との接触による不安定性や水に対する難溶性の問題を改善するために、鋭意研究・検討を重ねた結果、７−デヒドロコレステロールをポリエチレングリコールにコンジュゲート化して、有機溶媒または水溶液に対する溶解度を増加させると共に、皮膚内細胞への伝達効果を増加させ、且つ物性の改善による効能の増大を誘導することで、溶解度が改善し且つ長期間の保管にも安定性を保持することができることを見出し、本発明を完成するに至った。

したがって、本発明の目的は、溶解度や安定性が向上したペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体を提供することである。

本発明の他の目的は、前記ペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体を含むしわ改善及び老化防止用組成物を提供することである。

本発明の一実施の形態は、下記の化学式Ｉで表されるペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体に関する。

前記式中、
Ｒは、水素又はＣ_１−Ｃ_６のアルキル基を示し、
Ｇは、−ＸＣＯＣＨ_２（ＣＨ_２）_ｍＣＯ−、−ＸＣＨ_２（ＣＨ_２）_ｍＣＯ−、−ＸＣＯＮＨＣＹＣＯ−、−ＸＣＯＣＹＮＨＣＯ（ＣＨ_２）_ｍＣＨ_２ＣＯ−又は−ＸＣＨ_２（ＣＨ_２）_ｍＣＯＮＨＣＹＣＯ−を示し、
Ｘは、Ｏ、ＮＨ又はＳを示し、
Ｙは、水素、Ｃ_１−Ｃ_６のアルキル基、（ＣＨ_２）_ｍ’ＣＨ_２ＮＨＣＯ（ＣＨ_２）_ｍＣＨ_２（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｎＯＲ、（ＣＨ_２）_ｍ’ＣＨ_２ＮＨＣＯＣＨ_２（ＣＨ_２）_ｍＣＯ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｎＯＲ又は（ＣＨ_２）_ｍ’ＣＨ_２ＮＨＣＯＣＨ_２（ＣＨ_２）_ｍＣＯ−ＤＨＣを示し、
ｎは、１〜７００の整数、好ましくは、３〜２００の整数を示し、
ｍ及びｍ’は、それぞれ独立して１〜３の整数、好ましくは１を示す。

本明細書で用いられるＣ_１−Ｃ_６のアルキル基とは、炭素数１〜６個で構成された直鎖状又は分岐状炭化水素を意味し、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシルなどが含まれるが、必ずしもこれらに限定されるものではない。

本発明の一実施の形態に係るペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体は、下記の化学式１Ａで表される化合物であってよい。

前記式中、
Ｒは、水素又はＣ_１−Ｃ_６のアルキル基を示し、
Ｘは、Ｏ又はＮＨを示し、
ｎは、１〜７００の整数、好ましくは３〜２００の整数を示し、
ｍは、１〜３の整数、好ましくは１を示す。
本発明の一実施の形態に係るペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体は、下記の化学式１Ｂで表される化合物であってよい。

前記式中、
Ｒは、水素又はＣ_１−Ｃ_６のアルキル基を示し、
ｎは、１〜７００の整数、好ましくは３〜２００の整数を示し、
ｍは、１〜３の整数、好ましくは１を示す。

本発明の一実施の形態に係るペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体は、下記の化学式２Ａで表される化合物であってよい。

前記式中、
Ｒは、水素又はＣ_１−Ｃ_６のアルキル基を示し、
Ｘは、Ｏ又はＮＨを示し、
ｎは、１〜７００の整数、好ましくは３〜２００の整数を示し、
Ｙ_１は、Ｃ_１−Ｃ_６のアルキル基を示す。

本発明の一実施の形態に係るペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体は、下記の化学式２Ｂで表される化合物であってよい。

前記式中、
Ｒは、水素又はＣ_１−Ｃ_６のアルキル基を示し、
Ｘは、Ｏ又はＮＨを示し、
ｎは、１〜７００の整数、好ましくは３〜２００の整数を示し、
ｍは、１〜３の整数、好ましくは１を示し、
Ｙ_１は、Ｃ_１−Ｃ_６のアルキル基を示す。

本発明の一実施の形態に係るペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体は、下記の化学式２Ｃで表される化合物であってよい。

前記式中、
Ｒは、水素又はＣ_１−Ｃ_６のアルキル基を示し、
ｎは、１〜７００の整数、好ましくは３〜２００の整数を示し、
ｍは、１〜３の整数、好ましくは１を示し、
Ｙ_１は、Ｃ_１−Ｃ_６のアルキル基を示す。

本発明の一実施の形態に係るペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体は、下記の化学式２Ｄで表される化合物であってよい。

前記式中、
Ｒは、水素又はＣ_１−Ｃ_６のアルキル基を示し、
Ｘは、Ｏ又はＮＨを示し、
ｎは、１〜７００の整数、好ましくは３〜２００の整数を示し、
ｍ及びｍ’は、それぞれ独立して１〜３の整数、好ましくは１を示す。

本発明の一実施の形態に係るペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体は、下記の化学式２Ｅで表される化合物であってよい。

本発明の一実施の形態に係るペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体は、下記の化学式２Ｆで表される化合物であってよい。

本発明の一実施の形態に係るペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体は、下記の化学式２Ｇで表される化合物であってよい。

本発明に係るペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体は、下記の反応式１〜５に表した方法によって製造されていてよい。下記の反応式に表した方法は本発明において代表的に用いられた方法を例示したものに過ぎず、単位操作の順序、反応試薬、反応条件などは、場合によって種々に適宜変更することができる。

反応式１

前記反応式中、
Ｒ、Ｘ、ｎ、及びｍは、化学式Ｉにおけるそれぞれの定義と同一である。

前記反応式１によれば、前記化学式４で表される化合物と化学式５で表される化合物をそれぞれ化学式７ａで表される化合物又は化学式６で表される化合物と縮合反応させて前記化学式１Ａで表されるペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体を製造することができる。また、前記化学式４で表される化合物を化学式７ｂで表される化合物と縮合反応させて前記化学式１Ｂで表されるペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体を製造することができる。

前記化学式５で表される化合物と化学式７ａで表される化合物は、それぞれ化学式４で表される化合物又は化学式６で表される化合物に酸無水物を反応させて製造し、化学式７ｂで表される化合物は、ＸがＯである化学式６で表される化合物を出発物質として公知の方法で製造するか、商業的に購買することができる［参考文献：Ｊ.Ｍ. Ｈａｒｒｉｓｅｔ.ａｌ、ＡｄｖａｎｃｅｄＤｒｕｇＤｅｌｉｖｅｒｙＲｅｖｉｅｗｓ、２００２、５４、４５９-４７６］。

また、化学式６で表される化合物は、商業的に購買するか、または公知の方法で製造することができる［参考文献：ＳａｎｄｌｅｒａｎｄＫａｒｏ、ＰｏｌｙｍｅｒＳｙｎｔｈｅｓｉｓ、ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ、ＮｅｗＹｏｒｋ、Ｖｏｌ．３、ｐａｇｅｓ１３８-１６１］。

反応式２

前記反応式中、
Ｒ、Ｘ、ｎ、及びｍは、化学式Ｉにおける定義とそれぞれ同一であり、
Ｚ_ｂ及びＺ_ｃは保護基を示し、
Ｙ_１は、水素、Ｃ_１−Ｃ_６のアルキル基又はアミノ酸残基を示す。

前記反応式２によれば、前記化学式６で表される化合物を活性化して得られた前記化学式８で表される化合物と前記化学式９で表される化合物とを反応させて前記化学式１０で表されるポリエチレングリコール誘導体を製造することができる。また、前記化学式１０で表される化合物を前記化学式４で表される化合物と縮合反応させて前記化学式２Ａで表されるペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体を製造することができる。

また、前記化学式６で表される化合物を化学式１２で表される化合物と縮合反応させて前記化学式１３で表される化合物を得ることができる。次いで、前記化学式１３で表される化合物の脱保護反応によって前記化学式１４で表される化合物を収得し、前記化学式１４で表される化合物を前記化学式５で表される化合物と縮合反応させて前記化学式２Ｂで表されるペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体を得ることができる。

また、場合によっては、化学式１１で表される化合物のような保護基で置換されている化合物を選択して用い、Ｙ_１がアミノ酸残基である場合、必要に応じて保護基で置換するか遊離基として用いることができる。

反応式３

前記反応式中、
Ｒ、ｎ、及びｍは、化学式Ｉにおけるそれぞれの定義と同一であり、
Ｌは、ハロゲン、コハク酸イミド又はイミダゾールを示し、
Ｙ_１は、水素、Ｃ_１−Ｃ_６のアルキル基又はアミノ酸残基を示す。

前記反応式３によれば、前記化学式７ｂで表される化合物を活性化して得られた前記化学式１５ｂで表される化合物と前記化学式９で表される化合物とを反応させて前記化学式１６で表されるポリエチレングリコール誘導体を製造することができる。また、前記化学式１６で表される化合物を前記化学式４で表される化合物と縮合反応させて前記化学式２Ｃで表されるペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体を製造することができる。

反応式４

前記反応式中、
Ｒ、Ｘ、ｎ、ｍ、及びｍ’は、化学式Ｉにおけるそれぞれの定義と同一であり、
Ｌは、ハロゲン、コハク酸イミド又はイミダゾールを示し、
Ｚ_ａ及びＺ_ｂは、保護基を示す。

前記反応式４によれば、前記化学式６で表される化合物を、保護基で置換されているか又は遊離基の化学式１７で表される化合物と反応させて前記化学式１８で表される化合物を製造し、前記化学式１８で表される化合物を脱保護反応させて得られた化学式１９で表される化合物と化学式７ｂで表される化合物とを反応させて側鎖状のポリエチレングリコール誘導体である化学式２０で表される化合物を製造することができる。前記化学式２０で表される化合物を脱保護反応させて得られた化学式２１で表される化合物と化学式５で表される化合物とを縮合反応させて前記化学式２Ｄで表されるペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体を製造することができる。

反応式５

前記反応式中、
Ｒ、Ｘ、ｎ、ｍ、及びｍ’は、化学式Ｉにおけるそれぞれの定義と同一であり、
Ｚ_ａは、保護基を示す。

前記反応式５によれば、前記化学式８で表される化合物を、保護基で置換されているか又は遊離基の化学式２２で表される化合物と反応させて前記化学式２３で表される化合物を製造し、前記化学式２３で表される化合物の脱保護反応によって得られた化学式２４で表される化合物と前記化学式１５ｂで表される化合物とを反応させて前記化学式２５ｂで表される化合物を製造し、前記化学式２５ｂで表される化合物と前記化学式４で表される化合物とを縮合反応させて前記化学式２Ｅで表されるペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体を製造することができる。

また、前記化学式２４で表される化合物と前記化学式７ａで表される化合物を活性化して得られた前記化学式１５ａで表される化合物とを反応させて前記化学式２５ａで表される化合物を製造し、前記化学式２５ａで表される化合物と前記化学式４で表される化合物とを縮合反応させて前記化学式２Ｆで表されるペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体を製造することができる。

反応式６

前記反応式６によれば、前記化学式８で表される化合物を、保護基で置換されているか又は遊離基の化学式２２で表される化合物と反応させて前記化学式２３で表される化合物を製造し、前記化学式２３で表される化合物を前記化学式４で表される化合物と縮合反応させて得られた前記化学式２６で表される化合物を脱保護反応させて前記化学式２７の化合物を製造し、前記化学式２７で表される化合物と化学式５で表される化合物とを縮合反応させて前記化学式２Ｇで表されるペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体を製造することができる。

前記反応式における縮合反応は、溶媒中で縮合剤及び有機アミン触媒の存在下において行なうのが好ましい。

前記縮合剤としては、Ｎ,Ｎ,Ｎ’,Ｎ’−テトラメチル−（ベンゾトリアゾール−１−イル)ウロニウムテトラフルオロボラート（ＴＢＴＵ）、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチル−カルボジイミド（ＥＤＣ）、Ｎ,Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）、Ｎ,Ｎ‘−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）などを用いることができるが、必ずしもこれらに限定されるものではない。

また、有機アミン触媒としては、ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）などを用いることができるが、必ずしもこれらに限定されるものではない。

前記溶媒としては、無水有機溶媒、例えばジクロロメタン、ベンゼン、トルエン、テトラヒドロフラン、及びジエチルエーテルから選択された１種以上を用いることができるが、必ずしもこれらに限定されるものではない。また、水、緩衝溶液、またはアセトニトリル（Ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ）、ジメチルホルムアミド（Ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ）などの水に混じられる有機溶媒と水を併用することもできる。

前記反応は、冷却乃至加温された状態で進められていてもよい。

一方、前記保護基としては、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、ＣＢｚ、ｔＢｕＣＯ、Ｔｒｔ、Ｍｅ、Ｅｔなどを用いることができるが、必ずしもこれらに限定されるものではない。

また、前記脱保護反応は、有機溶媒中で酸又は塩基の存在下において行なうことができる。前記有機溶媒としては、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、メタノール（Ｍｅｔｈａｎｏｌ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）などを用いることができるが、必ずしもこれらに限定されるものではない。また、前記酸又は塩基としては、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、塩酸、硫酸、酢酸、ピペリジン、水酸化ナトリウムなどを用いることができるが、必ずしもこれらに限定されるものではない。

前記反応式３及び５における活性化離脱基の置換反応は、無水有機溶媒下において必要に応じて有機アミン触媒を用い、塩化チオニル（Ｔｈｉｏｎｙｌｃｈｌｏｒｉｄｅ）、塩化オキサリル（Ｏｘａｌｙｌｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド（Ｎ−Ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ）、カルボニルイミダゾール（Ｃａｒｂｏｎｙｌｄｉｉｍｉｄａｚｏｌｅ）などと反応させて行なうことができる。

本発明に係る前記化学式Ｉで表されるペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体は、７−デヒドロコレステロール（ＤＨＣ）に比べて、水溶液に対する溶解度が増加し、且つ光や熱に対する安定性が著しく改善した。

したがって、本発明に係る前記化学式Ｉで表されるペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体は、体内で加水分解してビタミンＤ前駆体である７−デヒドロコレステロールを供給することができるビタミンＤ前駆体の供給源として、しわ改善及び老化防止用化粧料組成物、薬剤学的組成物及び健康機能食品に効果的に用いることができる。

本発明の一実施の形態は、前記化学式Ｉで表されるペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体を含むしわ改善及び老化防止用化粧料組成物に関する。

本発明に係る化粧料組成物は、前記化学式Ｉで表されるペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体を有効成分として、約０．０００１〜１０重量％、好ましくは０．０１〜１重量％の範囲で含む。有効成分の含量はその使用目的に応じて適宜決めればよい。

本発明に係る化粧料組成物は、有効成分としての前記化学式Ｉで表されるペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体以外に、化粧料組成物に通常に用いられる成分、例えば抗酸化剤、安定化剤、溶解化剤、ビタミン、顔料、及び香料のような通常の補助剤、並びに担体を含む。

本発明に係る化粧料組成物は、当業界において通常に用いられる如何なる剤形への製造も可能であり、例えば、溶液、懸濁液、乳濁液、ペースト、ゲル、クリーム、パウダー、スプレーなどに剤形化することができる。

本発明の剤形がペースト、クリーム、またはゲルである場合は、担体成分として動物性油、植物性油、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコン、ベントナイト、シリカ、タルク、酸化亜鉛などが用いられていてよい。

本発明の剤形がパウダーまたはスプレーである場合は、担体成分としてラクトース、タルク、シリカ、アルミニウムヒドロキシド、カルシウムシリケート、ポリアミドパウダーなどが用いられていてよく、特にスプレーである場合は、更に、クロロフルオロヒドロカーボン、プロパン／ブタンまたはジメチルエーテルのような推進体を含むことができる。

本発明の剤形が溶液または乳濁液である場合は、担体成分として溶媒、溶解化剤または乳濁化剤、例えば水、エタノール、イソプロパノール、エチルカーボネート、エチルアセテート、ベンジルアルコール、ベンジルベンゾエート、プロピレングリコール、１,３−ブチルグリコールオイル、グリセロール脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール、ソルビタンの脂肪酸エステルなどが用いられていてよい。

本発明の剤形が懸濁液である場合は、担体成分として水、エタノール、またはプロピレングリコールのような液状の希釈剤、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールエステル、またはポリオキシエチレンソルビタンエステルのような懸濁剤、微小結晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天、トラガカントなどが用いられていてよい。

本発明に係る化粧料組成物は、スキン、ローション、クリーム、エッセンス、パック、ファウンデーション、メイクアップ化粧品、サンクリーム、ツーウェイケーキ、ペースパウダー、コンパクト、メーキャップベース、スキンカバー、アイシャドウ、リップスティック、リップグロス、リップフィックス、アイブローペンシルなどの化粧品に適用されていてよい。

本発明の一実施の形態は、前記化学式Ｉで表されるペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体を含むしわ改善及び老化防止用薬剤学的組成物に関する。

本発明に係る薬剤学的組成物は、経口的に（例えば、服用または吸入）または非経口的に（例えば、注射、経皮吸収、直腸投与）投与されてよく、注射は、例えば、静脈注射、皮下注射、筋肉内注射、または腹腔内注射であってよい。本発明に係る薬剤学的組成物は、投与経路によって、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤（ｆｉｎｅｓｕｂｔｉｌａｅ）、粉剤、舌下錠、座薬、軟膏、注射剤、乳濁液剤、懸濁液剤、シロップ剤、噴霧剤などに剤形化していてよい。前記各種の形態の本発明に係る薬剤学的組成物は、各剤形に通常に用いられる薬剤学的に許容できる担体（ｃａｒｒｉｅｒ）を用い、公知技術によって製造されていてよい。薬剤学的に許容できる担体の例は、賦形剤、結合剤、崩壊剤（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒａｔｉｎｇａｇｅｎｔ）、潤滑剤、防腐剤、抗酸化剤、等張化剤（ｉｓｏｔｏｎｉｃａｇｅｎｔ）、緩衝剤、被膜剤、甘味剤、溶解剤、基剤（ｂａｓｅ）、分散剤、湿潤剤、懸濁化剤、安定剤、着色剤などを含む。

本発明に係る薬剤学的組成物は、薬剤の形態によって異なるが、前記化学式Ｉで表されるペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体を約０．１〜１０重量％、好ましくは０．１〜１重量％の範囲で含む。

本発明に係る薬剤学的組成物の具体的な投与量は、治療対象の人を含む哺乳動物の種類、体重、性別、疾患の程度、医者の判断などによって異なっていてよい。好ましくは、経口投与の場合は、体重６０ｋｇの治療対象を基準に一日に５μｇ〜６０μｇの範囲で投与される。前記総一日投与量は、疾患の程度、医者の判断などによって一度にまたは複数回に分けて投与されていてよい。

本発明の一実施の形態は、前記化学式Ｉで表されるペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体を含むしわ改善及び老化防止用健康機能食品に関する。

本発明に係る健康機能食品の種類には特に制限がなく、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸濁液剤、エマルジョン、シロップ剤などの経口型製剤の形態であるか、またはキャンデー、お菓子、ガム、アイスクリーム、麺類、パン、飲料などの一般的な食品に添加されていてよい。

本発明に係る健康機能食品は、形態によって通常の方法にて充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、甘味剤、芳香剤、保存剤、界面活性剤、潤滑剤、賦形剤などの食品学的に許容できる担体を適宜用いて製造されていてよい。
前記健康機能食品の製造に際し、前記化学式Ｉで表されるペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体の含量は、健康機能食品の形態によって異なるが、約０．０００１〜１０重量％、好ましくは０．１〜１重量％の範囲の濃度である。

本発明に係るペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体は、水に対する溶解度や安定性が改善し、毒性低減効果を奏する。

この結果、本発明に係るペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体は、優れたビタミンＤの供給源として、しわ改善及び老化防止用化粧料組成物、薬剤学的組成物、健康機能食品などに効果的に用いることができる。

さらには、本発明に係るペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体は、生体内で多くの酵素によって活性ビタミンＤに転換され、抗酸化、しわ改善、美白などの生理活性を持続的に奏することができる。

実施例１の化合物（ＭＰ３５０ＤＨＣ）と７−デヒドロコレステロール（ＤＨＣ）との４０℃恒温条件での熱安定性を比べたグラフである。実施例１の化合物（ＭＰ３５０ＤＨＣ）と７−デヒドロコレステロール（ＤＨＣ）との７０℃恒温条件での熱安定性を比べたグラフである。実施例１の化合物（ＭＰ３５０ＤＨＣ）と７−デヒドロコレステロール（ＤＨＣ）との光安定性を比べたグラフである。

以下、実施例に基づいて本発明をより具体的に説明することにする。なお、これらの実施例は単に本発明を説明するためのものに過ぎず、本発明の範囲がこれらの実施例に限定されるものではないことは当業者にとって自明である。

実施例１：ｍＰＥＧ３５０−Ｓ−ＤＨＣエステル（Ｒはメチル基を示し、ＸはＯを示し、ｎは７．２５（平均）であり、ｍは１である化学式１Ａで表される化合物）の製造
実施例１-１：７−デヒドロコレステロールコハク酸（ｍが１である化学式５で表される化合物）の製造
化学式４で表される７−デヒドロコレステロール（ＤＨＣ）６．４５ｇ（１６．８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１２０ｍｌに溶解し、トリエチルアミン３．３９ｇ（３３．５ｍｍｏｌ）と４−ジメチルアミノピリジン０．８２ｇ（６．７ｍｍｏｌ）を添加した溶液に、無水コハク酸（ｍが１である化学式３で表される化合物）３．３５ｇ（３３．５ｍｍｏｌ）を添加し、室温で１２時間撹拌した。この反応溶液を３．５％塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、及び飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで処理し、ろ過し、減圧濃縮した後、エチルアセテートとヘキサン１：２の溶媒でシリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけて精製して、標題化合物７．２ｇを得た。
¹H NMR 400 MHz(CDCl₃) δ 5.59(dd, 1H), 5.41(dd, 1H), 4.75(m, 1H), 2.72(dt, 2H), 2.64(dt, 2H), 2.52(d, 1H), 2.39(t, 1H), 2.18-1.85(m, 6H), 1.82-1.50(m, 6H), 1.48-0.93(m, 11H), 0.97(s, 6H), 0.90(d, 3H), 0.89(d, 3H) 0.64(s, 3H)。

実施例１-２：ｍＰＥＧ３５０−Ｓ−ＤＨＣエステル（Ｒはメチル基を示し、ＸはＯを示し、ｎは７．２５（平均）であり、ｍは１である化学式１Ａで表される化合物）の製造
前記実施例１−１で収得した７−デヒドロコレステロールコハク酸（ｍが１である化学式５で表される化合物）１．１ｇ（２．３０ｍｍｏｌ）とｍＰＥＧ３５０−ＯＨ（Ｒがメチル基を示し、ｎが７．２５（平均）であり、ＸがＯを示す化学式６で表される化合物）０．８ｇ（２．３０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１０ｍｌに溶解し、４−ジメチルアミノピリジン０．４２ｇ（３．４４ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチル−カルボジイミド０．８８ｇ（４．５９ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた後、室温で１２時間撹拌した。反応溶液を１．０Ｎ塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで処理した後にろ過し、減圧濃縮し、真空乾燥して、標題化合物１．７７ｇを得た。
¹H NMR 400 MHz(CDCl₃) δ 5.59(dd, 1H), 5.40(dd, 1H), 4.74(m, 1H), 4.27(t, 2H), 3.72(t, 2H), 3.67(PEG backbone), 3.57(t, 2H), 3.40(s, 3H), 2.67(dt, 2H), 2.62(dt, 2H), 2.52(d, 1H), 2.38(t, 1H), 2.12-1.89(m, 6H), 1.75-1.53(m, 6H), 1.43-0.95(m, 11H), 0.97(s, 6H), 0.90(d, 3H), 0.88(d, 3H) 0.64(s, 3H)。

実施例２：ｍＰＥＧ２Ｋ−Ｓ−ＤＨＣエステル（Ｒはメチル基を示し、ＸはＯを示し、ｎは４４．３（平均）であり、ｍは１である化学式１Ａで表される化合物）の製造
前記実施例１−１で収得した７−デヒドロコレステロールコハク酸８２．８ｍｇ（０．２２ｍｍｏｌ）、ｍＰＥＧ２Ｋ−ＯＨ（Ｒがメチル基を示し、ｎが４４．３（平均）であり、ＸがＯを示す化学式６で表される化合物）４５２ｍｇ（０．２２ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン５ｍｌ、４−ジメチルアミノピリジン６５．７ｍｇ（０．５４ｍｍｏｌ）、及びＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチル−カルボジイミド１２３．８ｍｇ（０．６５ｍｍｏｌ）を用い、前記実施例１−２と同一の製造方法にて標題化合物４６２ｍｇを得た。
¹H NMR 400 MHz(CDCl₃) δ 5.57(m, 1H), 5.40(m, 1H), 4.72(m, 1H), 4.25(t, 2H), 3.83-3.45(PEG backbone), 3.38(s, 3H), 2.70-2.56(m, 5H), 2.48(dt, 1H), 2.38(dt, 1H), 2.12-1.89(m, 6H), 1.75-1.53(m, 6H), 1.43-0.95(m, 11H), 0.95(s, 6H), 0.88(d, 3H), 0.84(d, 3H) 0.62(s, 3H)。

実施例３：ｍＴｒＥＧ−Ｓ−ＤＨＣエステル（Ｒはメチル基を示し、ＸはＯを示し、ｎは３であり、ｍは１である化学式１Ａで表される化合物）の製造
化学式４で表される７−デヒドロコレステロール０．５４ｇ（１．４０ｍｍｏｌ）とメトキシトリエチレングリコールコハク酸（Ｒがメチル基を示し、ｎが３であり、Ｘが酸素を示し、ｍは１である化学式７ａで表される化合物；ｍＴｒＥＧ−ｓｕｃｃｉｎｉｃａｃｉｄ）０．３７ｇ（１．４０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン８ｍｌに溶解し、４−ジメチルアミノピリジン０．２６ｇ（２．１１ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチル−カルボジイミド０．６７ｇ（３．５１ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた後、室温で１２時間撹拌した。反応溶液を１．０Ｎ塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで処理した後にろ過し、減圧濃縮し、真空乾燥して、標題化合物０．６９ｇを得た。
¹H NMR 400 MHz(CDCl₃) δ 5.58(dd, 1H), 5.40(dd, 1H), 4.74(m, 1H), 4.28(t, 2H), 3.72(t, 2H), 3.68(m, 6H), 3.59(t, 2H), 3.40(s, 3H), 2.65(m, 4H), 2.52(dd, 1H), 2.39(t, 1H), 2.12-1.89(m, 6H), 1.75-1.53(m, 6H), 1.43-0.95(m, 11H), 0.97(s, 6H), 0.90(d, 3H), 0.88(d, 3H) 0.64(s, 3H)。

実施例４：ｍＰＥＧ３５０−Ｓ−ＤＨＣアミド（Ｒはメチル基を示し、ＸはＮＨを示し、ｎは７．２５（平均）であり、ｍは１である化学式１Ａで表される化合物）の製造
前記実施例１−１で収得した７−デヒドロコレステロールコハク酸３４６．２ｍｇ（０．７１４ｍｍｏｌ）とｍＰＥＧ３５０−ＮＨ_２（Ｒがメチル基を示し、ｎが７．２５（平均）であり、ＸがＮＨを示す化学式６で表される化合物；平均分子量３５０）２５０ｍｇ（０．７１４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン６ｍｌに溶解し、４−ジメチルアミノピリジン８７．３ｍｇ（０．７１４ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチル−カルボジイミド４１０．８ｇ（２．１４ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた後、室温で１２時間撹拌した。反応溶液を１．０Ｎ塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで処理した後にろ過し、減圧濃縮し、真空乾燥して標題化合物５０８ｍｇを得た。
¹H NMR 400 MHz(CDCl₃) δ 6.35(s, 1H), 5.57(dd, 1H), 5.39(dd, 1H), 4.72(m, 1H), 3.66(PEG back-bone), 3.47(t, 2H), 3.39(s, 3H), 2.65(dt, 2H), 2.48(d, 1H), 2.37(t, 1H), 2.08-1.89(m, 6H), 1.74-1.50(m, 6H), 1.42-0.96(m, 11H), 0.96(s, 6H), 0.88(d, 3H), 0.87(s, 3H), 0.63(s, 3H)。

実施例５：ｍＰＥＧ２Ｋ−Ｐ−ＤＨＣ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３（平均）であり、ｍは１である化学式１Ｂで表される化合物）の製造
化学式４で表される７−デヒドロコレステロール０．３２ｇ（０．８４ｍｍｏｌ）とｍＰＥＧ２Ｋ−プロピオン酸（Ｒがメチル基を示し、ｎが４４．３（平均）であり、ｍが１である化学式７ｂで表される化合物；平均分子量２,０００）１．６８ｇ（０．８４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１００ｍｌに溶解し、４−ジメチルアミノピリジン０．１５４ｇ（１．２６ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチル−カルボジイミド０．３２２ｇ（１．６８ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた後、室温で１２時間撹拌した。反応溶液を１．０Ｎ塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで処理した後にろ過し、減圧濃縮し、真空乾燥して、標題化合物１．５７ｇを得た。
¹H NMR 400 MHz(CDCl₃) δ 5.58(m, 1H), 5.40(m, 1H), 4.74(m, 1H), 3.84-3.47(PEG backbone), 3.39(s, 3H), 2.67(dt, 2H), 2.60(dt, 2H), 2.52(d, 1H), 2.38(t, 1H), 2.12-1.89(m, 6H), 1.75-1.53(m, 6H), 1.43-0.95(m, 11H), 0.96(s, 6H), 0.89(d, 3H), 0.87(d, 3H) 0.63(s, 3H)。

実施例６：ｍＰＥＧ２Ｋ−Ｏ−Ａ−ＤＨＣ（Ｒはメチル基を示し、ＸはＯを示し、ｎは４４．３（平均）であり、Ｙ_１はメチル基を示す化学式２Ａで表される化合物）の製造
実施例６−１：ｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＰＣ（Ｒがメチル基を示し、ＸがＯを示し、ｎは４４．３（平均）である化学式８で表される化合物）の製造
乾燥したｍＰＥＧ２Ｋ−ＯＨ（Ｒがメチル基を示し、ｎが４４．３（平均）であり、ＸがＯを示す化学式６で表される化合物）３０ｇ（１４．９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１２０ｍｌに溶解した溶液に、４−ニトロフェニルクロロフォーメート１２ｇ（５９．７ｍｍｏｌ）、ピリジン５．９ｍｌ（７４．６ｍｍｏｌ）を加え、室温で２０時間撹拌した。反応溶液を１Ｎ塩酸水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液のそれぞれ１５０ｍｌで順次洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで処理した後にろ過し、減圧濃縮した。生成された混合物をジエチルエーテルで沈殿して、白色固形の標題化合物３３．５ｇを得た。

実施例６−２：ｍＰＥＧ２Ｋ−Ａｌａ−ＯＨ（Ｒがメチル基を示し、ＸがＯを示し、ｎは４４．３（平均）であり、Ｙ_１はメチル基を示す化学式１０で表される化合物）の製造
前記実施例６−１で収得したｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＰＣ１６ｇ（７．２ｍｍｏｌ）をアセトニトリル１００ｍｌ、蒸留水６０ｍｌに溶解した溶液に、Ｈ−Ａｌａ−ＯＨ（Ｙ_１がメチル基を示す化学式９で表される化合物）１．９ｇ（２１．７ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン１．５ｍｌ（２１．７ｍｍｏｌ）を加え、室温で８時間撹拌した。反応溶液をジクロロメタン３００ｍｌで抽出し、１Ｎ塩酸水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液のそれぞれ３００ｍｌで順次洗浄した後、有機層を無水硫酸マグネシウムで処理し、ろ過し、減圧濃縮した。生成された混合物をジエチルエーテルで沈殿して、白色固形の標題化合物１８．８ｇ（３６．４ｍｍｏｌ）を得た。

実施例６−３：ｍＰＥＧ２Ｋ−Ｏ−Ａ−ＤＨＣ（Ｒはメチル基を示し、ＸはＯを示し、ｎは４４．３（平均）であり、Ｙ_１はメチル基を示す化学式２Ａで表される化合物）の製造
化学式４で表される７−デヒドロコレステロール０．２ｇ（０．４８ｍｍｏｌ）と前記実施例６−２で収得したｍＰＥＧ２Ｋ−Ａｌａ−ＯＨ０．１０ｇ（０．２３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１００ｍｌに溶解し、４−ジメチルアミノピリジン０．１４ｇ（１．１４ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチル−カルボジイミド０．２ｇ（１．１４ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた後、室温で１２時間撹拌した。反応溶液を１．０Ｎ塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで処理した後にろ過し、減圧濃縮し、真空乾燥して、標題化合物１．０６ｇを得た。
¹H NMR 400 MHz(CDCl₃) δ 5.59(dd, 1H), 5.44(dd, 1H), 5.41(bs, 1H), 4.36(q, 1H), 4.22(t, 2H), 3.83(t, 2H), 3.77-3.52(PEG back-bone), 3.48(t, 2H), 3.39(s, 3H), 2.80(dt, 2H), 2.55(d, 2H), 2.41(d, 2H), 2.19-1.77(m, 6H), 1.74-1.52(m, 6H), 1.43-1.08(m, 11H), 0.96(s, 6H), 0.89(d, 3H), 0.88(d, 3H), 0.63(s, 3H)。

実施例７：ｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＨ−Ａ−ＤＨＣ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３（平均）であり、ＸはＮＨを示し、Ｙ_１はメチル基を示し、ｍは１である化学式２Ｂで表される化合物）の製造
実施例７−１：ｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＨ−Ａｌａ−Ｆｍｏｃ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３（平均）であり、ＸはＮＨを示し、Ｙ_１はメチル基を示し、Ｚ_ｂがＦｍｏｃを示す化学式１３で表される化合物）の製造
ｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＨ_２（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３であり、ＸがＮＨを示す化学式６で表される化合物）２８０ｍｇ（０．１４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ９４．６ｍｇ（０．７０ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン９０．５ｍｇ（０．７０ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）に溶解し１０分間撹拌して得た溶液に、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ（Ｚ_ｂがＦｍｏｃを示し、Ｙ_１がメチル基を示す化学式１２で表される化合物）２１８．０ｍｇ（０．７０ｍｍｏｌ）とＰｙＢＯＰ３６４．５ｍｇ（０．７０ｍｍｏｌ）を溶解し１０分間撹拌して得た溶液を入れ、室温で５時間撹拌した。反応溶液を１Ｎ塩酸水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液のそれぞれ１５０ｍｌで順次洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで処理した後にろ過し、減圧濃縮した。生成された混合物をジエチルエーテルで沈殿して、白色固形の標題化合物３０１．１ｍｇを得た。

実施例７-２：ｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＨ−Ａｌａ−Ｈ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４.３（平均）であり、ＸはＮＨを示し、Ｙ_１はメチル基を示す化学式１４で表される化合物）の製造
前記実施例７−１で収得したｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＨ−Ａｌａ−Ｆｍｏｃ３００ｍｇ（０．１３ｍｍｏｌ）をピペリジンが２５％含まれているＤＭＦ溶液６ｍｌに溶解し、室温で３時間撹拌した。反応溶液をジエチルエーテル１００ｍｌに入れ沈殿して、白色固体の標題化合物０．２６ｍｇを得た。

実施例７−３：ｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＨ−Ａ−ＤＨＣ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３（平均）であり、ＸはＮＨを示し、Ｙ_１はメチル基を示し、ｍは１である化学式２Ｂで表される化合物）の製造
前記実施例１−１で収得した７−デヒドロコレステロールコハク酸１２０ｍｇ（０．２４ｍｍｏｌ）とｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＨ−Ａｌａ−Ｈ２５０ｍｇ（０．１２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン５ｍｌに溶解し、４−ジメチルアミノピリジン１７．７ｍｇ（０．１４ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチル−カルボジイミド６９．５ｍｇ（０．３６ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた後、室温で１２時間撹拌した。反応溶液を１．０Ｎ塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで処理した後にろ過し、減圧濃縮し、真空乾燥して、標題化合物２８３ｍｇを得た。
¹H NMR 400 MHz(CDCl₃) δ 5.59(dd, 1H), 5.44(m, 3H), 4.33(q, 1H), 4.23(m, 1H), 3.66(PEG backbone), 3.48(t, 2H), 3.39(s, 3H), 2.72(dt, 2H), 2.64(dt, 2H), 2.52(d, 1H), 2.48(d, 3H), 2.39(t, 1H), 2.18-1.85(m, 6H), 1.82-1.50(m, 6H), 1.48-0.93(m, 11H), 0.97(s, 6H), 0.90(d, 3H), 0.89(d, 3H) 0.64(s, 3H)。

実施例８：ｍＰＥＧ２Ｋ−Ｐ−Ａｌａ−ＤＨＣ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３（平均）であり、ｍは１であり、Ｙ_１はメチル基を示す化学式２Ｃで表される化合物）の製造
実施例８−１：ｍＰＥＧ２Ｋ−Ｐ−ＮＨＳ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３（平均）であり、ｍは１であり、Ｌがコハク酸イミドを示す化学式１５ｂで表される化合物）の製造
ｍＰＥＧ−ＰＡ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３（平均）であり、ｍが１である化学式７ｂで表される化合物）１ｇ（０．４７６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン７ｍｌに溶解した溶液に、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド０．２７ｇ（２．３８ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド０．４５ｇ（２．３８ｍｍｏｌ）、ジメチルアミノピリジン０．１８ｇ（１．１９８ｍｍｏｌ）を加え、室温で５時間撹拌した。反応溶液をジクロロメタン１００ｍｌで抽出し、１Ｎ塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液のそれぞれ１００ｍｌで順次洗浄した後、有機層を無水硫酸マグネシウムで処理し、ろ過し、減圧濃縮した。生成された混合物をジエチルエーテルで沈殿して、白色固形の標題化合物０．９４ｇを得た。

実施例８−２：ｍＰＥＧ２Ｋ−Ｐ−Ａｌａ−ＯＨ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３（平均）であり、ｍは１であり、Ｙ_１はメチル基を示す化学式１６で表される化合物）の製造
前記実施例８−１で収得したｍＰＥＧ２Ｋ−Ｐ−ＮＨＳ４５０ｍｇ（０．２１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン５ｍｌに溶解した溶液を、Ｈ−Ａｌａ−ＯＨ９２．４ｍｇ（１．０４ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン１１５．５ｍｇ（１．１４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン２．５ｍｌとジメチルホルムアミド２．５ｍｌに溶解した溶液にゆっくり滴下し、室温で３時間撹拌した。反応溶液を１．０Ｎ塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで処理した後にろ過し、減圧濃縮し、真空乾燥して、標題化合物４７８ｍｇを得た。

実施例８−３：ｍＰＥＧ２Ｋ−Ｐ−Ａｌａ−ＤＨＣ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３（平均）であり、ｍは１であり、Ｙ_１はメチル基を示す化学式２Ｃで表される化合物）の製造
化学式４で表される７−デヒドロコレステロール９０．４ｍｇ（０．２４ｍｍｏｌ）と前記実施例８−２で収得したｍＰＥＧ２Ｋ−Ｐ−Ａｌａ−ＯＨ４２０ｍｇ（０．１９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１０ｍｌに溶解し、４−ジメチルアミノピリジン３５．９ｍｇ（０．２９ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチル−カルボジイミド９３．９ｍｇ（０．４９ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた後、室温で１２時間撹拌した。反応溶液を１．０Ｎ塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次に洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで処理した後にろ過し、減圧濃縮し、真空乾燥して、標題化合物４５７ｍｇを得た。
¹H NMR 400 MHz(CDCl₃) δ 5.59(dd, 1H), 5.44(m, 3H), 4.26(q, 1H), 4.23(m, 1H), 3.66(PEG backbone), 3.39(s, 3H), 2.60(t, 2H), 2.52(d, 1H), 2.39(t, 1H), 2.18-1.85(m, 6H), 1.82-1.50(m, 6H), 1.50(d, 3H), 1.48-0.93(m, 11H), 0.97(s, 6H), 0.90(d, 3H), 0.89(d, 3H) 0.64(s, 3H)。

実施例９：α−ｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＨ−γ−ｍＰＥＧ２Ｋ−Ｐ−Ｄａｂ−ＤＨＣ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３（平均）であり、ＸはＮＨを示し、ｍとｍ’はそれぞれ１である化学式２Ｄで表される化合物）の製造
実施例９−１：α−ｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＨ−Ｄａｂ（ｔＢｏｃ）−Ｆｍｏｃ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３（平均）であり、ＸはＮＨを示し、ｍ’は１であり、Ｚ_ａはｔＢｏｃ保護基を示し、Ｚ_ｂはＦｍｏｃ保護基を示す化学式１８で表される化合物）の製造
ｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＨ_２４００ｍｇ（０．２０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ１３５．２ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン１２９．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（ｔＢｏｃ）−ＯＨ（ｍ’は１であり、Ｚ_ａはｔＢｏｃ保護基を示し、Ｚ_ｂはＦｍｏｃ保護基を示す化学式１７で表される化合物）２６４．４ｍｇ（０．６０ｍｍｏｌ）とＰｙＢＯＰ５２０．６ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ４０ｍｌを用い、前記実施例７−１と同一の製造方法にて白色固形の標題化合物４７３ｍｇを得た。

実施例９−２：α−ｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＨ−Ｄａｂ−Ｆｍｏｃ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３（平均）であり、ＸはＮＨを示し、ｍ’は１であり、Ｚ_ｂはＦｍｏｃ保護基を示す化学式１９で表される化合物）の製造
前記実施例９−１で収得したα−ｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＨ−Ｄａｂ（ｔＢｏｃ）−Ｆｍｏｃ４５０ｍｇ（０．４７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン５ｍｌに溶解した溶液にトリフルオロ酢酸５ｍｌを加え、室温で３時間撹拌した。反応溶液にジクロロメタン５０ｍｌを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液のそれぞれ５０ｍｌで洗浄した後、有機層を無水硫酸マグネシウムで処理し、ろ過し、減圧濃縮した。生成された混合物をジエチルエーテルで沈殿して、白色固形の標題化合物４２８ｍｇを得た。

実施例９−３：α−ｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＨ−γ−ｍＰＥＧ２Ｋ−Ｐ−Ｄａｂ−Ｆｍｏｃ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３（平均）であり、ＸはＮＨを示し、ｍとｍ’はそれぞれ１であり、Ｚ_ｂがＦｍｏｃ保護基を示す化学式２０で表される化合物）の製造
前記実施例９−２で収得したα−ｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＨ−Ｄａｂ−Ｆｍｏｃ４２０ｍｇ（０．１８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン８ｍｌに溶解し、ｍＰＥＧ２Ｋ−ＰＡ３７４．９ｍｇ（０．１８ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン３３．２ｍｇ（０．２７ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチル−カルボジイミド６９．４ｍｇ（０．３６ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた後、室温で１２時間撹拌した。反応溶液を１．０Ｎ塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで処理した後にろ過し、減圧濃縮し、真空乾燥して、標題化合物７５０ｍｇを得た。

実施例９−４：α−ｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＨ−γ−ｍＰＥＧ２Ｋ−Ｐ−Ｄａｂ−Ｈ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３（平均）であり、ＸはＮＨを示し、ｍとｍ’はそれぞれ１である化学式２１で表される化合物）の製造
前記実施例９−３で収得したα−ｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＨ−γ−ｍＰＥＧ２Ｋ−Ｐ−Ｄａｂ−Ｆｍｏｃ７００ｍｇ（０．１６ｍｍｏｌ）をピペリジンが２５％含まれているＤＭＦ溶液１４ｍｌに溶解し、室温で３時間撹拌した。反応溶液をジエチルエーテル１００ｍｌに入れ沈殿して、白色固体の標題化合物６５１ｍｇを得た。

実施例９−５：α−ｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＨ−γ−ｍＰＥＧ２Ｋ−Ｐ−Ｄａｂ−ＤＨＣ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３（平均）であり、ＸはＮＨを示し、ｍとｍ’はそれぞれ１である化学式２Ｄで表される化合物）の製造
前記実施例１−１で収得した７−デヒドロコレステロールコハク酸６４．２ｍｇ（０．１３ｍｍｏｌ）と前記実施例９−４で収得したα−ｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＨ−γ−ｍＰＥＧ２Ｋ−Ｐ−Ｄａｂ−Ｈ５５０ｍｇ（０．１３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１０ｍｌに溶解し、４−ジメチルアミノピリジン２４．３ｍｇ（０．２０ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチル−カルボジイミド５０．８ｍｇ（０．２６ｍｍｏｌ）を用い、実施例７−３と同一の製造方法にて標題化合物５８７ｍｇを得た。
¹H NMR 400 MHz(CDCl₃) δ 5.74(m, 2H), 5.59(d, 1H), 5.44(m, 2H), 4.35(m, 1H), 4.23(m, 3H), 3.84-3.66(PEG back-bone), 3.57(m, 6H), 3.48(t, 2H), 3.39(s, 6H), 2.72(dt, 2H), 2.64(dt, 2H), 2.62(t, 2H), 2.53-2.39(m, 4H), 2.20-1.52(m, 16H), 1.41-1.06(m, 11H), 0.96(s, 6H), 0.89(d, 3H), 0.88(d, 3H), 0.63(s, 3H)。

実施例１０：α−ｍＰＥＧ２Ｋ−γ−ｍＰＥＧ２Ｋ−Ｐ−Ｄａｂ−ＤＨＣ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３（平均）であり、ＸはＯを示し、ｍとｍ’はそれぞれ１である化学式２Ｅで表される化合物）の製造
実施例１０−１：ｍＰＥＧ２Ｋ−Ｄａｂ（ｔＢｏｃ）−ＯＨ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３（平均）であり、ＸはＯを示し、ｍ’は１であり、Ｚ_ａがｔＢｏｃを示す化学式２３で表される化合物）の製造
前記実施例６−１で収得したｍＰＥＧ２Ｋ−ＮＰＣ２ｇ（０．９１ｍｍｏｌ）をアセトニトリル１５ｍｌ、蒸留水１０ｍｌに溶解した溶液にＨ−Ｄａｂ（ｔＢｏｃ）−ＯＨ（ｍ’は１であり、Ｚ_ａはｔＢｏｃを示す化学式２２で表される化合物）０．５９ｇ（２．７２ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン０．４６ｍｌ（２．７２ｍｍｏｌ）を用い、前記実施例６−２と同一の製造方法にて標題化合物１．６７ｇを得た。

実施例１０−２：ｍＰＥＧ２Ｋ−Ｄａｂ−ＯＨ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３（平均）であり、ＸはＯを示し、ｍ’は１である化学式２４で表される化合物）の製造
前記実施例１０−１で収得したｍＰＥＧ２Ｋ−Ｄａｂ（ｔＢｏｃ）−ＯＨ１ｇ（０．４７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１０ｍｌに溶解した溶液にトリフルオロ酢酸１０ｍｌ（０．１３ｍｍｏｌ）を加え、前記実施例９−２と同一の製造方法にて標題化合物０．７６ｇを得た。

実施例１０−３：α−ｍＰＥＧ２Ｋ−γ−ｍＰＥＧ２Ｋ−Ｐ−Ｄａｂ−ＯＨ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３（平均）であり、ＸはＯを示し、ｍとｍ’はそれぞれ１である化学式２５ｂで表される化合物）の製造
前記実施例１０−２で収得したｍＰＥＧ２Ｋ−Ｄａｂ−ＯＨ０．３４ｇ（０．１６ｍｍｏｌ）と実施例８−１で収得したｍＰＥＧ２Ｋ−Ｐ−ＮＨＳ０．３５ｇ（０．１６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン５ｍｌに溶解した溶液にトリエチルアミン８７μｌを加え、室温で１２時間撹拌した。反応溶液にジクロロメタン１００ｍｌを加え、１Ｎ塩酸水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液のそれぞれ１００ｍｌで順次洗浄した後、有機層を無水硫酸マグネシウムで処理し、ろ過し、減圧濃縮した。生成された混合物をジエチルエーテルで沈殿して、白色固形の標題化合物０．５４ｇを得た。

実施例１０−４：α−ｍＰＥＧ２Ｋ−γ−ｍＰＥＧ２Ｋ−Ｐ−Ｄａｂ−ＤＨＣ（Ｒはメチル基を示し、ｎは４４．３（平均）であり、ＸはＯを示し、ｍとｍ’はそれぞれ１である化学式２Ｅで表される化合物）の製造
化学式４で表される７−デヒドロコレステロール３８．０ｍｇ（０．０９８ｍｍｏｌ）と前記実施例１０−３で収得したα−ｍＰＥＧ２Ｋ−γ−ｍＰＥＧ２Ｋ−Ｐ−Ｄａｂ−ＯＨ０．１０ｇ（０．０４９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン５０ｍｌに溶解し、４−ジメチルアミノピリジン６．０ｍｇ（０．２４７ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチル−カルボジイミド９５ｍｇ（０．４９４ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた後、室温で１２時間撹拌した。反応溶液を１．０Ｎ塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで処理した後にろ過し、減圧濃縮し、真空乾燥して、標題化合物０．４８ｇを得た。
¹H NMR 400 MHz(CDCl₃) δ 6.85(bs, 1H), 5.74(m, 1H), 5.59(d, 1H), 5.32(d, 1H), 4.35(m, 1H), 4.23(m, 3H), 3.84-3.66(PEG back-bone), 3.49(t, 2H), 3.39(s, 6H), 2.53-2.39(m, 4H), 2.20-1.52(m, 8H), 1.41-1.06(m, 11H), 0.96(s, 6H), 0.89(d, 3H), 0.88(d, 3H), 0.63(s, 3H)。

実施例１１：α−ｍＰＥＧ５Ｋ−γ−ｍＰＥＧ５Ｋ−Ｓ−Ｄａｂ−ＤＨＣ（Ｒはメチル基を示し、ｎは１１３．０（平均）であり、ＸはＯを示し、ｍとｍ’はそれぞれ１である化学式２Ｆで表される化合物）の製造
実施例１１−１：ｍＰＥＧ５Ｋ−Ｓ−ＮＨＳ（Ｒはメチル基を示し、ｎは１１３．０（平均）であり、ＸはＯを示し、ｍは１であり、ＬはＮＨＳを示す化学式１５ａで表される化合物）の製造
ｍＰＥＧ５Ｋ−ＳＡ（Ｒはメチル基を示し、ｎは１１３．０（平均）であり、ＸはＯを示し、ｍは１である化学式７ａで表される化合物）１．０ｇ（０．２０ｍｍｏｌ）を用い、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド０．１６ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ジメチルアミノピリジン７３ｍｇ（０．６ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド０．２７ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン７ｍｌを入れ、前記実施例８−１と同一の製造方法にて白色固形の標題化合物０．９３ｇを得た。

実施例１１−２：ｍＰＥＧ５Ｋ−Ｄａｂ（ｔＢｏｃ）−ＯＨ（Ｒはメチル基を示し、ｎは１１３．０（平均）であり、ＸはＯを示し、ｍ’は１であり、Ｚ_ａはｔＢｏｃを示す化学式２３で表される化合物）の製造
ｍＰＥＧ５Ｋ−ＮＰＣ２ｇ（０．３８４ｍｍｏｌ）をアセトニトリル１０ｍｌ、蒸留水１０ｍｌに溶解した溶液にＨ−Ｄａｂ（ｔＢｏｃ）−ＯＨ０．１７ｇ（０．７６８ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン０．２ｍｌ（１．１５ｍｍｏｌ）を加え、前記実施例１０−１と同一の製造方法にて標題化合物１．７ｇを得た。

実施例１１−３：ｍＰＥＧ５Ｋ−Ｄａｂ−ＯＨ（Ｒはメチル基を示し、ｎは１１３．０（平均）であり、ＸはＯを示し、ｍ’は１である化学式２４で表される化合物）の製造
前記実施例１１−２で収得したｍＰＥＧ５Ｋ−Ｄａｂ（ｔＢｏｃ）−ＯＨ１．３ｇ（０．２５４ｍｍｏｌ）、トリフルオロ酢酸１３ｍｌ、ジクロロメタン１３ｍｌを用い、実施例９−２と同一の製造方法にて標題化合物１．２ｇを得た。

実施例１１−４：α−ｍＰＥＧ５Ｋ−γ−ｍＰＥＧ５Ｋ−Ｓ−Ｄａｂ−ＯＨ（Ｒはメチル基を示し、ｎは１１３．０（平均）であり、ＸはＯを示し、ｍとｍ’はそれぞれ１である化学式２５ａで表される化合物）の製造
前記実施例１１−３で収得したｍＰＥＧ５Ｋ−Ｄａｂ−ＯＨ０．７９ｇ（０．１５ｍｍｏｌ）と前記実施例１１−１で収得したｍＰＥＧ５Ｋ−Ｓ−ＮＨＳ０．８ｇ（０．１５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１５ｍｌに溶解した溶液にトリエチルアミン０．１ｍｌを加え、室温で１２時間撹拌した。反応溶液にジクロロメタン５０ｍｌを加え、１Ｎ塩酸水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液のそれぞれ５０ｍｌで順次洗浄した後、有機層を無水硫酸マグネシウムで処理し、ろ過し、減圧濃縮した。生成された混合物をジエチルエーテルで沈殿して、白色固形の標題化合物１．３５ｇを得た。

実施例１１−５:α−ｍＰＥＧ５Ｋ−γ−ｍＰＥＧ５Ｋ−Ｓ−Ｄａｂ−ＤＨＣ（Ｒはメチル基を示し、ｎは１１３．０（平均）であり、ＸはＯを示し、ｍとｍ’はそれぞれ１である化学式２Ｆで表される化合物）の製造
化学式４で表される７−デヒドロコレステロール３８．０ｍｇ（０．０９８ｍｍｏｌ）と前記実施例１１−４で収得したα−ｍＰＥＧ５Ｋ−γ−ｍＰＥＧ５Ｋ−Ｓ−Ｄａｂ−ＯＨ０．５ｇ（０．０４９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１０ｍｌに溶解し、４−ジメチルアミノピリジン６．０ｍｇ（０．２４７ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチル−カルボジイミド９５ｍｇ（０．４９４ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた後、室温で１２時間撹拌した。反応溶液を１．０Ｎ塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで処理した後にろ過し、減圧濃縮し、真空乾燥して、標題化合物０．４９ｇを得た。
¹H NMR 400 MHz(CDCl₃) δ 6.79(bs, 1H), 5.69(m, 1H), 5.53(d, 1H), 5.30(d, 1H), 4.29(m, 1H), 4.17(m, 3H), 3.91-3.50(PEG backbone), 3.45(t, 4H), 3.34(t, 4H), 3.34(s, 6H), 2.55-2.48(m, 8H), 2.1-1.62(m, 14H), 1.42-1.14(m, 11H), 0.95(s, 6H), 0.84(d, 3H), 0.82(d, 3H), 0.59(s, 3H)。

実施例１２：α−ｍＰＥＧ３５０−γ−ＤＨＣ−Ｄａｂ−ＤＨＣ（Ｒはメチル基を示し、ｎは７．２５（平均）であり、ＸはＯを示し、ｍとｍ’はそれぞれ１である化学式２Ｇで表される化合物）の製造
実施例１２−１：ｍＰＥＧ３５０−ＮＰＣ（Ｒがメチル基を示し、ＸがＯを示し、ｎは７．２５（平均）である化学式８で表される化合物）の製造
乾燥したｍＰＥＧ３５０−ＯＨ（Ｒがメチル基を示し、ｎが７．２５（平均）であり、ＸがＯを示す化学式６で表される化合物）１５ｇ（４２．８６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン２００ｍｌに溶解した溶液に４−ニトロフェニルクロロフォーメート１２．９ｇ（６４．２９ｍｍｏｌ）、ピリジン５．０ｍｌ（６４．２９ｍｍｏｌ）を加え、室温で１６時間撹拌した。反応溶液を１Ｎ塩酸水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液のそれぞれ１５０ｍｌで順次洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで処理した後にろ過し、減圧濃縮した。生成された混合物をメタノールとジクロロメタンでシリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけて、無色オイル形態の標題化合物１８．８ｇを得た。

実施例１２−２：α−ｍＰＥＧ３５０−Ｄａｂ（ｔＢｏｃ）−ＯＨ（Ｒがメチル基を示し、ＸがＯを示し、ｎは７．２５（平均）であり、ｍ’は１であり、Ｚ_ａはｔＢｏｃ保護基を示す化学式２３で表される化合物）の製造
前記実施例１２−１で収得したｍＰＥＧ３５０−ＮＰＣ１．０ｇ（１．９４ｍｍｏｌ）をアセトニトリル２０ｍｌ、蒸留水２０ｍｌに溶解した溶液にＨ−Ｄａｂ（ｔＢｏｃ）−ＯＨ０．６４ｇ（２．９１ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン０．５０ｇ（３．８８ｍｍｏｌ）を用い、前記実施例６−２と同一の製造方法にて得た混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけて、標題化合物０．９８ｇを得た。

実施例１２−３：α−ｍＰＥＧ３５０−Ｄａｂ（ｔＢｏｃ）−ＤＨＣ（Ｒがメチル基を示し、ＸがＯを示し、ｎは７．２５（平均）であり、ｍ’は１であり、Ｚ_ａがｔＢｏｃ保護基を示す化学式２６で表される化合物）の製造
化学式４で表される７−デヒドロコレステロール５８２．６ｍｇ（０．０９８ｍｍｏｌ）と前記実施例１２−２で収得したα−ｍＰＥＧ３５０−Ｄａｂ（ｔＢｏｃ）−ＯＨ９００ｍｇ（１．５１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１０ｍｌに溶解し、４−ジメチルアミノピリジン２０８．２ｍｇ（１．７０ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチル−カルボジイミド４３５．５ｍｇ（２．２７ｍｍｏｌ）を用い、前記実施例６−３と同一の製造方法にて得た混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけて、標題化合物１．２３ｇを得た。

実施例１２−４：α−ｍＰＥＧ３５０−Ｄａｂ−ＤＨＣ（Ｒがメチル基を示し、ＸがＯを示し、ｎは７．２５（平均）であり、ｍ’は１である化学式２７で表される化合物）の製造
前記実施例１２−３で収得したα−ｍＰＥＧ３５０−Ｄａｂ（ｔＢｏｃ）−ＤＨＣ２５０ｍｇ（０．２６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン２．５ｍｌに溶解した溶液にトリフルオロ酢酸２．５ｍｌを加え、実施例９−２と同一の製造方法にて得た混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけて、標題化合物１９４ｍｇを得た。

実施例１２−５：α−ｍＰＥＧ３５０−γ−ＤＨＣ−Ｄａｂ−ＤＨＣ（Ｒはメチル基を示し、ｎは７.２５（平均）であり、ＸはＯを示し、ｍとｍ’はそれぞれ１である化学式２Ｇで表される化合物）の製造
前記実施例１−１で収得した７−デヒドロコレステロールコハク酸５６．３ｍｇ（０．１２ｍｍｏｌ）と前記実施例１２−４で収得したα−ｍＰＥＧ３５０−Ｄａｂ−ＤＨＣ１００ｍｇ（０．１２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン５ｍｌに溶解し、４−ジメチルアミノピリジン２１．３ｍｇ（０．１７ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチル−カルボジイミド４４．５ｍｇ（０．２３ｍｍｏｌ）を用い、実施例７−３と同一の製造方法にて標題化合物１４１ｍｇを得た。
¹H NMR 400 MHz(CDCl₃) δ 6.85(bs, 1H), 5.74(m, 1H), 5.59(d, 2H), 5.44(m, 2H), 4.35(t, 2H), 4.33(m, 2H), 4.22(m, 1H), 3.84-3.66(PEG back-bone), 3.39(s, 3H), 2.72(dt, 2H), 2.64(dt, 2H), 2.53-2.39(m, 6H), 2.23-1.51(m, 14H), 1.41-1.06(m, 22H), 0.97(s, 12H), 0.88(d, 6H), 0.87(d, 6H), 0.63(s, 6H)。

前記実施例１〜１２で収得した本発明に係るペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体の化学構造式を下記の表１に表した。

実験例１：溶解度試験
蒸留水１００ｍｌに、実施例１及び実施例５の化合物と比較物質としての７−デヒドロコレステロールをそれぞれ１００ｍｇずつ入れ、常温で１時間程度撹拌した。溶解しないまで繰り返し続け、溶解しない物質はろ過して、前記化合物の飽和水溶液をそれぞれ調製した。

次いで、測量した空き容器（Ａ）に飽和水溶液を入れ、測量（Ｂ）した後、減圧濃縮し、真空乾燥して測量（Ｃ）を行い、下記の数式１にて溶解度を算出した。その結果を下記の表２に表した。

前記表２に見られるように、実施例１及び５で収得したペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体が７−デヒドロコレステロールよりも水に対する溶解度が著しく優れていることを確認した。

実験例２：熱安定性試験
前記実施例１の化合物をジメチルスルホキシドに１０ｍＭの濃度で溶解して溶液を調製した。比較物質としての７−デヒドロコレステロールをジメチルスルホキシドとメタノール（９：１）に１０ｍＭの濃度で溶解して溶液を調製した。調製した溶液をそれぞれ１．５ｍｌずつ分画して入れて光を遮断し、それぞれ４０℃、７０℃の恒温に放置し、一定時間後に回収した後、試験溶液をメタノールで希釈して検液濃度を１ｍＭにして、ＨＰＬＣで分析を行った。その結果を図１及び図２に示した。
ＨＰＬＣの分析条件は次のとおりである。
分析機器名：ＡｇｉｌｅｎｔＨＰＬＣ１２６０
カラム：Ｃ１８（１５０×４．６ｍｍ／５μｍ）
展開溶媒：アセトニトリル：メタノール＝６：４
カラム温度：３０℃
分解率（％）＝［Ｃｔ_ｘ／Ｃｔ_０］×１００（％）
Ｃｔ_０＝０時間の実施例１のピーク面積
Ｃｔ_ｘ＝Ｘ時間の実施例１のピーク面積
図１及び図２に示されるように、実施例１で収得したペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体が７−デヒドロコレステロールよりも熱に対する安定性に優れていることを確認した。

実験例３：光安定性試験
前記実施例１の化合物をジメチルスルホキシドに１０ｍＭの濃度で溶解して溶液を調製した。比較物質としての７−デヒドロコレステロールをジメチルスルホキシドとメタノール（９：１）に１０ｍＭの濃度で溶解して溶液を調製した。調製した溶液をプレートウェルに１５０μｌ分画し、ＵＶ（中波長、３１５ｎｍ、ｗｉｄｔｈ：１２ｃｍ）で照射した。一定時間後に回収し、メタノールで希釈して試験溶液を１ｍＭの濃度にして、ＨＰＬＣで分析を行った。その結果を図３に示した。
ＨＰＬＣの分析条件は次のとおりである。
分析機器名：ＡｇｉｌｅｎｔＨＰＬＣ１２６０
カラム：Ｃ１８（１５０×４．６ｍｍ／５μｍ）
展開溶媒：アセトニトリル：メタノール＝６：４
カラム温度：３０℃
分解率（％）＝［Ｃｔ_ｘ／Ｃｔ_０］×１００（％）
Ｃｔ_０＝０時間の実施例１のピーク面積
Ｃｔ_ｘ＝Ｘ時間の実施例１のピーク面積
図３に示されるように、実施例１で収得したペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体が７−デヒドロコレステロールよりも光に対する安定性に優れていることを確認した。

Claims

下記の化学式Ｉで表されるペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体。

前記式中、
Ｒは、水素又はＣ_１−Ｃ_６のアルキル基を示し、
Ｇは、−ＸＣＯＣＨ_２（ＣＨ_２）_ｍＣＯ−、−ＸＣＨ_２（ＣＨ_２）_ｍＣＯ−、−ＸＣＯＮＨＣＹＣＯ−、−ＸＣＯＣＹＮＨＣＯ（ＣＨ_２）_ｍＣＨ_２ＣＯ−又は−ＸＣＨ_２（ＣＨ_２）_ｍＣＯＮＨＣＹＣＯ−を示し、
Ｘは、Ｏ、ＮＨ又はＳを示し、
Ｙは、水素、Ｃ_１−Ｃ_６のアルキル基、（ＣＨ_２）_ｍ’ＣＨ_２ＮＨＣＯ（ＣＨ_２）_ｍＣＨ_２（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｎＯＲ、（ＣＨ_２）_ｍ’ＣＨ_２ＮＨＣＯＣＨ_２（ＣＨ_２）_ｍＣＯ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｎＯＲ又は（ＣＨ_２）_ｍ’ＣＨ_２ＮＨＣＯＣＨ_２（ＣＨ_２）_ｍＣＯ−ＤＨＣを示し、
ｎは、１〜７００の整数を示し、
ｍ及びｍ’は、それぞれ独立して１〜３の整数を示す。
下記の化学式１Ａで表される化合物である請求項１に記載のペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体。

前記式中、
Ｒは、水素又はＣ_１−Ｃ_６のアルキル基を示し、
Ｘは、Ｏ又はＮＨを示し、
ｎは、１〜７００の整数を示し、
ｍは、１〜３の整数を示す。
下記の化学式１Ｂで表される化合物である請求項１に記載のペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体。

前記式中、
Ｒは、水素又はＣ_１−Ｃ_６のアルキル基を示し、
ｎは、１〜７００の整数を示し、
ｍは、１〜３の整数を示す。
下記の化学式２Ａで表される化合物である請求項１に記載のペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体。

前記式中、
Ｒは、水素又はＣ_１−Ｃ_６のアルキル基を示し、
Ｘは、Ｏ又はＮＨを示し、
ｎは、１〜７００の整数を示し、
Ｙ_１は、Ｃ_１−Ｃ_６のアルキル基を示す。
下記の化学式２Ｂで表される化合物である請求項１に記載のペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体。

前記式中、
Ｒは、水素又はＣ_１−Ｃ_６のアルキル基を示し、
Ｘは、Ｏ又はＮＨを示し、
ｎは、１〜７００の整数を示し、
ｍは、１〜３の整数を示し、
Ｙ_１は、Ｃ_１−Ｃ_６のアルキル基を示す。
下記の化学式２Ｃで表される化合物である請求項１に記載のペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体。

前記式中、
Ｒは、水素又はＣ_１−Ｃ_６のアルキル基を示し、
ｎは、１〜７００の整数を示し、
ｍは、１〜３の整数を示し、
Ｙ_１は、Ｃ_１−Ｃ_６のアルキル基を示す。
下記の化学式２Ｄで表される化合物である請求項１に記載のペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体。

前記式中、
Ｒは、水素又はＣ_１−Ｃ_６のアルキル基を示し、
Ｘは、Ｏ又はＮＨを示し、
ｎは、１〜７００の整数を示し、
ｍ及びｍ’は、それぞれ独立して１〜３の整数を示す。
下記の化学式２Ｅで表される化合物である請求項１に記載のペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体。

前記式中、
Ｒは、水素又はＣ_１−Ｃ_６のアルキル基を示し、
Ｘは、Ｏ又はＮＨを示し、
ｎは、１〜７００の整数を示し、
ｍ及びｍ’は、それぞれ独立して１〜３の整数を示す。
下記の化学式２Ｆで表される化合物である請求項１に記載のペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体。

前記式中、
Ｒは、水素又はＣ_１−Ｃ_６のアルキル基を示し、
Ｘは、Ｏ又はＮＨを示し、
ｎは、１〜７００の整数を示し、
ｍ及びｍ’は、それぞれ独立して１〜３の整数を示す。
下記の化学式２Ｇで表される化合物である請求項１に記載のペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体。

前記式中、
Ｒは、水素又はＣ_１−Ｃ_６のアルキル基を示し、
Ｘは、Ｏ又はＮＨを示し、
ｎは、１〜７００の整数を示し、
ｍ及びｍ’は、それぞれ独立して１〜３の整数を示す。
ｎは、３〜２００の整数である請求項１〜１０の何れか一項に記載のペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体。
ｍ及びｍ’は１である請求項１、請求項７〜１０の何れか一項に記載のペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体。
ｍは１である請求項２、３、５、及び６の何れか一項に記載のペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体。
請求項１〜１０の何れか一項に記載のペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体を含むしわ改善及び老化防止用化粧料組成物。
請求項１〜１０の何れか一項に記載のペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体を含むしわ改善及び老化防止用薬剤学的組成物。
請求項１〜１０の何れか一項に記載のペグ化７−デヒドロコレステロール誘導体を含むしわ改善及び老化防止用健康機能食品。