JP2017095419A

JP2017095419A - トリアリールメタン組成物，眼膜染色のための染色組成物

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Publication number: JP2017095419A
Application number: JP2015231303A
Authority: JP
Inventors: 誠 ▲高▼萩; Makoto Takahagi; 展弘芳賀; Nobuhiro Haga; 敦詞井上; Atsushi Inoue
Original assignee: Helios Co Ltd Japan
Current assignee: Helios Co Ltd Japan
Priority date: 2015-11-27
Filing date: 2015-11-27
Publication date: 2017-06-01
Anticipated expiration: 2035-11-27
Also published as: CA3005714A1; WO2017090349A1; US20230025076A1; CA3005714C; EP3381475A4; CN108289968A; HK1254472A1; US11534505B2; IL259418B; JP5987102B1; US20180264142A1; IL259418B2; EP3381475A1; IL259418A

Abstract

【課題】製剤の物性の変動を抑えたブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）含有製剤及びブリリアントブル−Ｇの製造方法の提供。【解決手段】トリアリールメタン誘導体又はその薬学的に許容される塩はブリリアントブル−Ｇ又はその薬学的に許容される塩と，ブリリアントブル−Ｇの位置異性体又はその薬学的に許容される塩を含み，ブリリアントブル−Ｇ及びブリリアントブル−Ｇの薬学的に許容される塩のいずれか又は両方を，ブリリアントブル−Ｇ，ブリリアントブル−Ｇの薬学的に許容される塩，ブリリアントブル−Ｇの位置異性体，及びブリリアントブル−Ｇの位置異性体の薬学的に許容される塩の合計中，９０〜１００重量％含む組成物。エチル−ｍ−トリルアミンをベンジル化試薬と反応させた後，三酸化硫黄又は硫酸を作用させてベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得て，ブリリアントブル−Ｇ又はその薬学的に許容される塩を得る製造方法。【選択図】なし

Description

本発明は，純度の高いブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ），その製造方法，及び物性が安定した眼膜染色のための染色組成物に関する。

特許第４２００２２２号公報には，ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）を含む眼膜除去を行う際の眼膜染色のための染色組成物が開示されている。この染色組成物は，欧州においても薬事承認が得られ，薬剤として製造販売されている。この製剤は，極めて優れた染色能を有しており，眼科治療の向上に多大な貢献をもたらしている。米国特許第６０５７１６０号明細書には，ＢＢＧの製造方法が開示されている。

特許第４２００２２２号公報米国特許第６０５７１６０号明細書

特許第４２００２２２号公報では，市販のＢＢＧ又はそのナトリウム塩が用いられている。実際の製剤の物性が変動することがありうるという問題があった。

上記の問題を検討した結果，本発明者は，市販のＢＢＧ又はその薬学的に許容される塩（以下単に「塩」ともいう）は，ＢＢＧの誘導体を含んでおり，ＢＢＧは多くとも５０％〜６０％しか含まれていないことを見出した。すなわち従来の合成方法に基づいてＢＢＧを製造及び精製した場合，ＢＢＧ誘導体が含まれ，ＢＢＧ又はその塩は多くとも５０％〜６０％しか含まれない。本発明者は，実際の製剤の物性が変動する理由が，ＢＢＧの誘導体の割合が変動することに起因することを突き止め，その上でＢＢＧ又はその塩の含有量が極めて高くなるＢＢＧの製造方法を見出した。本発明は，基本的には，上記の知見に基づくものである。

すなわち，本発明の第１の側面は，トリアリールメタン誘導体，その薬学的に許容される塩を含むトリアリールメタン組成物に関する。トリアリールメタン誘導体は，ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩と，ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）の位置異性体又はその薬学的に許容される塩を含む。そして，ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）及びブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）の薬学的に許容される塩のいずれか又は両方を，「ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ），ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）の薬学的に許容される塩，ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）の位置異性体，及びブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）の位置異性体の薬学的に許容される塩」の合計中，９０重量％以上１００重量％以下含む。ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）の位置異性体とは，ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）に含まれる環に付加する置換基の位置が異なる化合物を意味する。上記の組成物は，水や生理食塩水などの薬学的に許容される溶媒や担体を適宜含んでもよい。

すなわち，本発明の第１の側面をより詳細に説明すると，式（１）〜（３）で示されるトリアリールメタン誘導体，その薬学的に許容される塩を少なくとも１つ含むトリアリールメタン組成物に関する。
そして，式（１）で示されるブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩を，
式（１）〜（３）で示されるトリアリールメタン誘導体，その薬学的に許容される塩中，９０重量％以上１００重量％以下含む。

上記の組成物は，眼膜除去を行う際の眼膜染色のための染色組成物として好ましく用いられる。すなわち，その眼膜除去を行う際の眼膜染色のための染色組成物は，式（１）〜（３）で示されるトリアリールメタン誘導体，その薬学的に許容される塩を少なくとも１つ含む。そして，式（１）で示されるブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩を，式（１）〜（３）で示されるトリアリールメタン誘導体，その薬学的に許容される塩中，９０重量％以上１００重量％以下含む。

本発明の第２の側面は，上記のように存在することが知られていなかった位置異性体を効果的に取り除くことができるブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩の製造方法に関する。この方法は，
式Ａ１で示されるエチル−ｍ−トリルアミン（ｅｔｈｙｌ−ｍ−ｔｏｌｙｌ−ａｍｉｎｅ）をベンジル化試薬と反応させ，式Ａ２で示される化合物を得るベンジル化工程と，
式Ａ２で示される化合物に三酸化硫黄又は硫酸を作用させ，
式Ａ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る工程と，
式Ａ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体から，式（１）で示されるブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩を得る工程と，
を含む。

（上記式中Ｘ^１１は，水素原子，水酸基，アルカリ金属原子で水素原子が置換された水酸基，アルカリ金属原子又はハロゲン原子を示し，Ｘ^１２は，水素原子，水酸基，アルカリ金属原子で水素原子が置換された水酸基，アルカリ金属原子又はハロゲン原子を示す。）

第２の側面の別の態様は，
式Ｂ１で示されるエチル−ｍ−トリルアミン（ｅｔｈｙｌ−ｍ−ｔｏｌｙｌ−ａｍｉｎｅ）を，ハロゲン原子が付加したベンジル化試薬と反応させ，式Ｂ２で示されるハロゲン化化合物を得る工程と，
式Ｂ２で示されるハロゲン化化合物のハロゲン原子を置換して，式Ｂ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る工程と，
式Ｂ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体とアルカリを反応させ，式Ｂ４で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る工程と，
式Ｂ４で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体から，式１で示されるブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩を得る工程と，
を含む，
ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩の製造方法に関する。

（上記式中Ｘ^２１は，ハロゲン原子を示し，Ｘ^２２は，ハロゲン原子を示し，Ｘ^３は，水素原子，水酸基，アルカリ金属原子で水素原子が置換された水酸基，アルカリ金属原子又はハロゲン原子を示す。）

この方法は，
式Ｂ２で示されるハロゲン化化合物のハロゲン原子を置換して，式Ｂ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る工程は，
式Ｂ２で示されるハロゲン化化合物に硫化物を作用させ，式Ｂ２−１で示される化合物を得る工程と，
式Ｂ２−１で示される化合物に求電子試薬ＳＯ_２Ｃｌ_２を作用させ，式Ｂ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体であってＸ^２が塩素原子であるものを得る工程を含むものが好ましい。

（上記式においてＲ^２１は，フェニル基又はベンジル基であるか，メチル基，エチル基，水酸基，ハロゲン原子で置換されてもよいフェニル基又はベンジル基を示す。

この方法は，式Ｂ２で示されるハロゲン化化合物のハロゲン原子を置換して，式Ｂ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る工程が，
式Ｂ２で示されるハロゲン化化合物とグリニャ−ル試薬を作用させ，ＳＯ_２を作用させた後に，ハロゲンイオンと作用させることで，式Ｂ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る工程であるものが好ましい。

本発明によれば，ＢＢＧ又はその塩の含有率が高く，その結果物性の変動が生じにくいトリアリールメタン組成物を提供できる。

本発明によれば，ＢＢＧ又はその塩の含有率が高く，物性の変動が生じにくい，眼膜除去を行う際の眼膜染色のための染色組成物を提供できる。

本発明によれば，ＢＢＧ又はその塩の含有率が高いＢＢＧの製造方法を提供できる。

以下，本発明を実施するための形態について説明する。本発明は，以下に説明する形態に限定されるものではなく，以下の形態から当業者が自明な範囲で適宜修正したものも含む。

トリアリールメタン組成物
本発明のトリアリールメタン組成物は，式（１）〜（３）で示されるトリアリールメタン誘導体，その薬学的に許容される塩を少なくとも１つ含む。

式（１）〜（３）で示されるトリアリールメタン誘導体のうち式（１）で示されるものはブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）である。そして，式（２）及び（３）で示されるトリアリールメタン誘導体は，ＢＢＧを製造する際に，従来多く含まれ，ＢＢＧと区別されなかった化合物である。これらの化合物は，ＢＢＧの異性体であり分子量がＢＢＧと同じである。このため，これらの異性体は，合成されたＢＢＧを精製する際にも分離されなかったものと考えられる。また，これらの異性体が混合されたトリアリールメタン組成物からＢＢＧのみを抽出することは難しい。本発明は，式（１）で示されるブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩を，式（１）〜（３）で示されるトリアリールメタン誘導体，その薬学的に許容される塩中，９０重量％以上１００重量％以下含む。

上記式（１）〜（３）は，例えば水溶液中で，電離している状態の式（１）〜（３）で示されるトリアリールメタン誘導体を示している。本発明は，電離していない状態の式（１）〜（３）で示されるトリアリールメタン誘導体を含んでいてもよい。式（１）で示される化合物は，ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）であり，ＢＢＧは，Ｎ−エチル−Ｎ−［４−［［４−［Ｎ−エチル−Ｎ−(３−ソジオスルホベンジル)アミノ]−２−メチルフェニル][４-[(４−エトキシフェニル)アミノ]フェニル]メチレン]−３−メチル−２,５−シクロヘキサジエン−１−イリデン]-３-スルホナトベンゼンメタンアミニウムともよばれる。式（２）及び（３）で示される化合物は，ＢＢＧの位置異性体である。

この組成物のうち好ましいものは，式（１）で示されるブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩を，式（１）〜（３）で示されるトリアリールメタン誘導体，その薬学的に許容される塩中，９０重量％以上９９．９９重量％以下含むものであり，９０重量％以上９９．９重量％以下含むものでもよく，９０重量％以上９９重量％以下含むものでもよく，９０重量％以上９８重量％以下含むものでもよく，９０重量％以上９７重量％以下含むものでもよく，９０重量％以上９５重量％以下含むものでもよく，
９１重量％以上９９．９９重量％以下含むものであり，９１重量％以上９９．９重量％以下含むものでもよく，９１重量％以上９９重量％以下含むものでもよく，９１重量％以上９８重量％以下含むものでもよく，９１重量％以上９７重量％以下含むものでもよく，９１重量％以上９５重量％以下含むものでもよく，
９２重量％以上９９．９９重量％以下含むものであり，９２重量％以上９９．９重量％以下含むものでもよく，９２重量％以上９９重量％以下含むものでもよく，９２重量％以上９８重量％以下含むものでもよく，９２重量％以上９７重量％以下含むものでもよく，９２重量％以上９５重量％以下含むものでもよく，
９３重量％以上９９．９９重量％以下含むものであり，９３重量％以上９９．９重量％以下含むものでもよく，９３重量％以上９９重量％以下含むものでもよく，９３重量％以上９８重量％以下含むものでもよく，９３重量％以上９７重量％以下含むものでもよく，９３重量％以上９５重量％以下含むものでもよく，
９５重量％以上９９．９９重量％以下含むものであり，９５重量％以上９９．９重量％以下含むものでもよく，９５重量％以上９９重量％以下含むものでもよく，９５重量％以上９８重量％以下含むものでもよく，９５重量％以上９７重量％以下含むものでもよい。

式（１）で示されるブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩は，たとえば水溶液中では電離しており，その際の化学式は（１）とは異なるものも存在する。しかし，それらの形態は，当業者にとって自明であり，電離しているものや電離していないもの，も当然式（１）で示されるＢＢＧ又はその塩に含まれる。さらに，ＢＢＧ又はその塩は，溶媒和物となる場合がありうる（例えば水和物）このような形態のものも，実質的には水溶液中でＢＢＧ又はその塩とおなじ挙動を示すため，式（１）で示されるＢＢＧ又はその塩に含まれる。

薬理学的に許容される塩の例は，無機塩基，アンモニア，有機塩基，無機酸，有機酸，塩基性有機酸，ハロゲンイオン等から成る塩，及び分子内塩を含む。無機塩基の例はアルカリ金属（Ｎａ，Ｋ等）及びアルカリ土類金属（Ｃａ，Ｍｇ等）を含む。有機塩基の例はトリメチルアミン，トリエチルアミン，コリン，プロカイン，エタノ−ルアミン等を含む。無機酸の例は，塩酸，臭化水素酸，硫酸，硝酸，及びリン酸等を含む。有機酸の例はｐ−トルエンスルホン酸，メタンスルホン酸，蟻酸，トリフルオロ酢酸及びマレイン酸等を含む。塩基性アミノ酸の例はリジン，アルギニン，オルニチン，ヒスチジン等を含む。

眼膜除去を行う際の眼膜染色のための染色組成物
上記のトリアリールメタン組成物は，眼膜除去を行う際の眼膜染色のための染色組成物の有効成分として用いることができる。すなわち，特許文献１に開示される通り，ＢＢＧ又はその塩は，眼膜除去を行う際の眼膜染色のための染色組成物の有効成分（染料）として有効である。

本発明の好ましい態様の一つによれば，染色組成物は，黄斑円孔，高度近視性（ｈｙｍｙｏｐｉｃ）黄斑円孔による網膜剥離，網膜上膜，増殖性の糖尿病性網膜症，糖尿病性黄斑浮腫，増殖性硝子体網膜症，過熟白内障及び先天性白内障のように特異的な白内障といった硝子体網膜疾患，及び分層角膜移植等，眼球の疾患の眼科手術において外科的アジュバントとして利用できる。本発明の染色組成物に従えば，識別し難い眼膜をより明確に確認し，外科手術中の安全性を向上させることができる。

本発明のより好ましい態様においては，染色組成物は眼膜，より好ましくは，内境界膜又は前嚢の染色に用いることができる。

また，本発明の態様の一つによれば，本発明の染色組成物は薬理学的に許容される担体と組み合わせて用いることができる。溶解液及び薬品粉末との一式として，あるいは注射器中に満たされた溶液の形として，及びヒアルロン酸と組み合わせてゲル状溶液として調合できる。最も好ましくは，溶液として調合されるが，必ずしもこれに限定されない。

本発明の態様の一つによれば，前記染色組成物は薬学的に許容される溶液として調合されるが，必ずしもこれに限定されない。これはＢＢＧの直接かつ容易に眼内洗浄液に溶解され，またシリンジフィルタ−によって滅菌できるという特性による。

更に，本発明の態様の一つによれば，前記染色組成物は眼内灌流液，平衡塩類溶液（ＢＳＳ），生理食塩水，あるいは最も好ましくは，眼内灌流液（眼内洗浄液）であるＯＰＥＧＵＡＲＤ−ＭＡ（千寿製薬株式会社，大阪府，日本）に溶解した溶液として調合できる。しかしながら，必ずしもこの形式に限定されない。

更に，本発明の染色組成物の態様の一つによれば，浸透圧が２９８ｍＯｓｍ近傍であることが好ましい。この態様によれば，本発明の染色組成物は生理食塩水に等しい浸透圧である。以前ＩＣＧによる網膜色素上皮の障害はその溶液の低浸透圧性に由来する可能性があることが報告されていた。これに関連して，本発明の一つの態様における染色組成物は，網膜色素上皮において浸透圧の差により起こる障害といった，細胞膨張あるいは脱水症状に関する組織障害（細胞脱落あるいは細胞死等）を引き起こさないという点において，優れた効果を有する。

本発明の好ましい態様の一つにおいては，本発明の染色組成物は中性のｐＨ，すなわち，ｐＨ＝７．４近傍のｐＨを示すことが望ましい。

この側面の剤に関連して，患者の目にこの剤を投与し，眼膜を染色し，染色した眼膜を除去する方法が提供される。この方法はＢＢＧ又はその塩を含む染色組成物を調整するステップと予め規定された濃度の染色組成物を用いて眼膜を染色するステップと，染色された眼膜を除去するステップとを含む。すなわち，この側面の剤は，眼科手術のための外科的アジュバントとして利用できる。本発明の好ましい態様の一つとして，前記眼科手術は哺乳類の眼球に対して施行され，より好ましくは，ヒトの眼球に対して施行される。

更に，本発明の態様の一つにおいて，前記染色組成物及び／あるいはそれを利用する染色法は眼科手術の一部として適切に用いられる。本発明の好ましい態様により，先述の眼科疾患手術は黄斑円孔，近視性黄斑円孔による網膜剥離，網膜上膜，増殖性糖尿病網膜症，糖尿病性黄斑浮腫，増殖性硝子体網膜症，成熟白内障及び先天性白内障等の特異的白内障，及び分層角膜移植等の治療に行われる外科手術であり，最も好ましくは，硝子体−網膜疾患（特に黄斑円孔及び網膜上膜（ＥＲＭＳ））及び白内障に対して行われるものである。

この側面の剤に関連して，眼科疾患の治療のための染色組成物の製造するためのＢＢＧ又はその塩の使用をも提供できる。特に，本発明は，眼膜除去のための染色組成物を製造するためのＢＢＧ又はその塩の使用をも提供できる。

次に，本発明の剤におけるＢＢＧの投与量について説明する。本発明の薬剤は，ＢＢＧを０．１−１０ｍｇ／ｍｌ，好ましくは０．１−１．０ｍｇ／ｍｌの濃度，最も好ましくは０．１−０．２５ｍｇ／ｍｌの濃度で含有することが望ましい。染色組成物中のＢＢＧは０．２５ｍｇ／ｍｌの低濃度で充分な染色作用を得ることができる。

本発明の薬剤の剤型は特に限定されない。剤型の例は注射剤である。また，先に説明した特許文献に開示された剤型とすることで，眼内に局所投与することができる。注射剤を製造するためには，公知の担体（水等）と有効成分を混合して，シリンジに封入すればよい。剤型の製造方法は，公知の方法を適宜用いることができる。

本発明の神経保護剤は，経口投与されてもよい。この場合，公知の担体に有効成分であるＢＢＧ又はその塩を混合し，打錠機で打錠することで製剤化できる。

本発明の薬剤が，染色組成物として利用される場合は，施術個所に適量を投与すればよい。たとえば，注射剤である本発明の剤を１ｃｃ以上１ｍｌ以下投与すればよい。本発明の薬剤を神経保護剤又は抗炎症剤として用いる場合は，たとえば１日当たり１回〜３回を所定期間投与すればよい。

ＢＢＧ又はその塩の製造方法（基本合成スキ−ム）
次に，ＢＢＧ又はその塩の製造方法を説明する。この基本となるＢＢＧ又はその塩の製造方法は，以下の３つの工程をこの順に含む。これらの工程の前後には，別の工程が含まれてもよい。
式Ａ１で示されるエチル−ｍ−トリルアミン（ｅｔｈｙｌ−ｍ−ｔｏｌｙｌ−ａｍｉｎｅ）をベンジル化試薬と反応させ，式Ａ２で示される化合物を得る（ベンジル化工程）。
式Ａ２で示される化合物に三酸化硫黄又は硫酸を作用させ，式Ａ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る。
式Ａ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体から，式（１）で示されるブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩を得る。

上記式中Ｘ^１１は，水素原子，水酸基，アルカリ金属原子で水素原子が置換された水酸基，アルカリ金属原子又はハロゲン原子を示す。Ｘ^１１の好ましい例は，水素原子である。アルカリ金属原子で水素原子が置換された水酸基は，例えば，−ＯＮａのように，水酸基の水素原子がアルカリ金属により置換された基を意味する。アルカリ金属の例は，Ｎａ及びＫである。ハロゲン原子の例は，Ｆ，Ｃｌ，Ｂｒ及びＩである。

上記式中Ｘ^１２は，水素原子，水酸基，アルカリ金属原子で水素原子が置換された水酸基，アルカリ金属原子又はハロゲン原子を示す。Ｘ^１２の好ましい例は，水素原子又はナトリウム原子である。

式Ａ１で示されるエチル−ｍ−トリルアミン（ｅｔｈｙｌ−ｍ−ｔｏｌｙｌ−ａｍｉｎｅ）をベンジル化試薬と反応させ，式Ａ２で示される化合物を得る工程

この工程は，たとえば，希ガス雰囲気下，アルカリ性にした有機溶媒中にＡ１で示される化合物を加え，ハロゲン原子が付加したベンジル化試薬を攪拌しつつ滴下し，攪拌状態を維持すればよい。希ガスの例はアルゴンである。有機溶媒の例は，アセトニトリルなどの極性溶媒である。アルカリ化剤の例は，炭酸カリウムである。反応は１０℃以上３５℃以下（例えば室温下）に行えばよい。攪拌時間の例は，１時間以上１日以下である。反応は通常気圧下に行えばよい。

アルカリ化剤は，例えば，Ａ１で示される化合物の半分のモル数以上２倍のモル数以下を用いればよい。ハロゲン原子が付加したベンジル化試薬は，ベンジル化試薬のうち水素原子がハロゲン原子に置換されている化合物を意味する。ハロゲン原子が付加したベンジル化試薬の例は，臭化ベンジル，塩化ベンジル，及びフッ化ベンジルである。ハロゲン原子が付加したベンジル化試薬は，例えば，Ａ１で示される化合物の半分のモル数以上２倍のモル数以下を用いればよい。

式Ａ２で示される化合物に三酸化硫黄又は硫酸を作用させ，式Ａ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る工程

この工程は，先の工程で得られたＡ２で示される化合物に対して，例えば，氷冷下，三酸化硫黄又は硫酸を作用させ，式Ａ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る工程である。三酸化硫黄として，発煙硫酸を用いてもよい。具体的に説明すると，Ａ２で示される化合物を氷冷下，濃硫酸で溶液を希釈する。その後，氷冷下，発煙硫酸を時間をかけて滴下する。その後，室温又は湯浴中（例えば１００℃）にて，攪拌し，反応を進行させる。滴下時間の例は，５分以上１時間以下である。攪拌時間の例は，２時間以上１日以下である。

攪拌後，適宜アルカリ（例えば，水酸化ナトリウムや炭酸水素ナトリウム）を攪拌しつつ滴下し，適宜乾燥させることで，Ａ３で示される化合物の塩（例えば，Ｘ^１２がナトリウムのもの）を得ることができる。

この工程では，Ａ３で示される化合物をセシウム塩化することで，純度を上げて，異性体の含有量を軽減することが好ましい。Ａ３で示される化合物をセシウム塩化するためには，例えば，式Ａ３で示される化合物とセシウム化合物（例えば炭酸セシウム）とを反応させればよい。

式Ａ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体から，式（１）で示されるブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩を得る工程

式Ａ３で示される化合物から，ＢＢＧ又はその塩を得るためには，例えば以下の工程を行えばよい。
まず，式Ａ３で示される化合物を下記式Ａ３−１で示される化合物を介して２つ結合する。

上記式中Ｘ^１３は，ハロゲン原子を示す。Ｘ^１３の好ましい例は，塩素原子又は臭素原子である。

上記の工程では，式Ａ３で示される化合物２モルと，式Ａ３−１で示される化合物１モルとを反応させる工程である。このため，式Ａ３で示される化合物と式Ａ３−１で示される化合物の割合はおよそ２：１（２／１）であることが好ましく，１．５以上２．５以下でもよいし，１．８以上２．２以下でもよい。

上記の工程は，アルコール溶媒中にて行うことが極めて望ましい。アルコールの例は，メタノール，エタノール及びブタノールであり，好ましいアルコールは（希釈）エタノールである。この工程は，酸性化剤を用いて溶液を酸性（例えば，ｐＨ０．３以上１以下）とした状況下において反応を行うことが望ましい。酸性化剤の例は，塩酸，濃塩酸，濃硫酸，及び濃硝酸である。これらの中では塩酸又は濃塩酸が好ましい。式Ａ３−１で示される化合物を滴下した後，１００℃以上１４０℃以下の状況で１０時間以上２００時間以下攪拌を行うことが好ましい。反応液を１５℃以上３５℃以下（たとえば室温）に戻した後に，アルカリを添加する。アルカリの例は水酸化ナトリウム水溶液である。アルカリを添加し，ｐＨが０．５以上１．５以下となるように調整する。得られた析出物を精製することで，Ａ４の結晶を得ることができる。

次に，式Ａ４で示される化合物から反応性の高い式Ａ５で示される化合物を得る。

上記式中Ｘ^１２’は，アルカリ金属原子を示す。Ｘ^１２’の好ましい例は，カリウム原子，又はナトリウム原子である。

この工程は，酸性の極性溶媒を用いて，式Ａ４で示される化合物に酸化剤を作用させればよい。極性溶媒の例は，アセトニトリルと水の混合溶媒である。溶媒の酸性度の例は，ｐＨ１．５以上３以下である。酸化剤の例は，ＣＡＮである。この工程は，後述する実施例を参考にして適宜条件を調整すればよい。

次に，式Ａ５で示される化合物にパラ−フェネチジンを作用させ，式Ａ６で示されるＢＢＧを得る。

式Ａ５で示される化合物とパラ−フェネチジンとは，１：１で反応するため式Ａ５で示される化合物とパラ−フェネチジンとはおよそ１（１／１）の割合であればよく，０．８以上１．２以下でもよく，０．９以上１．１以下でもよい。

このようにして得られるＢＢＧ又はその塩は，適宜精製することで，異性体の混合割合が低いＢＢＧ又はその塩を得ることができる、

ＢＢＧ又はその塩の製造方法（プランＣ−１及びＣ−２）
次に，ＢＢＧ又はその塩を製造するための上記とは別の例を説明する。
この方法は，式Ｂ１で示されるエチル−ｍ−トリルアミン（ｅｔｈｙｌ−ｍ−ｔｏｌｙｌ−ａｍｉｎｅ）を，ハロゲン原子が付加したベンジル化試薬と反応させ，式Ｂ２で示されるハロゲン化化合物を得る工程と，
式Ｂ２で示されるハロゲン化化合物のハロゲン原子を置換して，式Ｂ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る工程と，
式Ｂ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体とアルカリを反応させ，式Ｂ４で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る工程と，
式Ｂ４で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体から，式１で示されるブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩を得る工程と，
を含む。

式Ｂ４で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体から，式１で示されるブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩を得る工程は，先に説明した式Ａ３で示される化合物から，式１で示されるブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩を得る工程と同様である。

上記式中Ｘ^２１は，ハロゲン原子を示す。Ｘ^２１の好ましい例は，塩素原子又は臭素原子であり，臭素原子が好ましい。
Ｘ^２２は，ハロゲン原子を示。Ｘ^２２の好ましい例は，塩素原子又は臭素原子であり，塩素原子が好ましい。
Ｘ^３３は，水素原子，水酸基，アルカリ金属原子で水素原子が置換された水酸基，アルカリ金属原子又はハロゲン原子を示す。Ｘ^２３の好ましい例は，水素原子又はナトリウム塩である。

式Ｂ１で示されるエチル−ｍ−トリルアミン（ｅｔｈｙｌ−ｍ−ｔｏｌｙｌ−ａｍｉｎｅ）を，ハロゲン原子が付加したベンジル化試薬と反応させ，式Ｂ２で示されるハロゲン化化合物を得る工程

この工程は，実施例２においてその具体例が開示されている。ハロゲン原子が付加したベンジル化試薬の例は，Ｘ^２１−Ｐｈ−ＣＨ_２−Ｘ^２１１で示される化合物である。基Ｘ^２１−は，基−ＣＨ_２−Ｘ^２１１のメタ位置に存在するものが好ましい。Ｐｈはベンゼン環を意味する。Ｘ^２１は，先に定義をしたものと同様であり，Ｘ^２１１は，Ｘ^２１と同一でも異なってもよく，ハロゲン原子を示す。式Ｂ１で示される化合物（これは式Ａ１で示される化合物と同じ）と，ハロゲン原子が付加したベンジル化試薬とは，１：１で反応するため式Ｂ１で示される化合物とハロゲン原子が付加したベンジル化試薬とはおよそ１（１／１）の割合であればよく，０．８以上１．２以下でもよく，０．９以上１．１以下でもよい。

式Ｂ２で示されるハロゲン化化合物のハロゲン原子を置換して，式Ｂ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る工程

この工程は，以下に説明するように主に２つの系統を採用できる。１つの系統は，
式Ｂ２で示されるハロゲン化化合物に硫化物を作用させ，式Ｂ２−１で示される化合物を得る工程と，
式Ｂ２−１で示される化合物に求電子試薬ＳＯ_２Ｃｌ_２を作用させ，式Ｂ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体であってＸ^２が塩素原子であるものを得る工程を含む。

上記式においてＲ^２１は，フェニル基又はベンジル基であるか，メチル基，エチル基，水酸基，ハロゲン原子で置換されてもよいフェニル基又はベンジル基を示す。Ｒ^２１の好ましい例は，ベンジル基である。

式Ｂ２で示されるハロゲン化化合物に硫化物を作用させ，式Ｂ２−１で示される化合物を得る工程における硫化物の例は，式ＨＳＲ^２１で示される化合物である。この工程は塩基の存在下において行ってもよい。

式Ｂ２−１で示される化合物に求電子試薬ＳＯ_２Ｃｌ_２を作用させ，式Ｂ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体であってＸ^２が塩素原子であるものを得る工程は，酸の存在下に行ってもよい。

式Ｂ２で示されるハロゲン化化合物のハロゲン原子を置換して，式Ｂ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る２つめの系統は，
（２）式Ｂ２で示されるハロゲン化化合物とグリニャ−ル試薬を作用させ，ＳＯ_２を作用させた後に，ハロゲンイオンと作用させることで，式Ｂ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る工程である。ハロゲンイオンは，例えば，Ｎ−クロロスクシンイミドに由来する塩化物イオンである。この工程は，実施例３において説明されているものであり，実施例３に基づいて適宜調整すればよい。

式Ｂ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体とアルカリを反応させ，式Ｂ４で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る工程

アルカリは，例えばＨＯＸ^２３で示される化合物である。アルカリの具体的な例は，水酸化ナトリウムである。

式Ａ１から式Ａ２（ＩｎｔＢＢＧ−０１からＩｎｔＢＢＧ−０２）の合成

アルゴン気流下，２ＬコルベンにＩｎｔＢＢＧ−０１：７６．１グラム（０．５６２９ｍｏｌ，ＴＣＩ），Ｋ_２ＣＯ_３: １１６．７グラム（０．８４４３ｍｍｏｌ），アセトニトリル（ＭｅＣＮ）：５６０ｍＬを仕込み，臭化ベンジル（ＢｎＢｒ）（ＴＣＩ）：１０５．９ｇ（０．６１９１ｍｏｌ）を１８℃にて添加後（発熱なし），室温で４時間撹拌した（徐々に反応熱がでて内温：２８℃まで上昇した）。

ＨＰＬＣにて反応を確認後，不溶物をろ別し，ろ液を減圧濃縮した（バス温：３５〜４５℃）。得られた濃縮残渣にＡｃＯＥｔ：１．２Ｌ，水：４００ｍＬを添加し，抽出した。得られた有機層を塩水（ｂｒｉｎｅ）：２００ｍＬで洗浄後，Ｎａ_２ＳＯ_４乾燥後，減圧濃縮（バス温：３５〜４５℃）した。

得られた残渣（１３８．２ｇ）をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（Ｎ６０シリカゲル１．１ｋg，ＣＨＣｌ_３／Ｈｅｐ＝１／２〜１／１０）で精製し，粗体のＩｎｔ. ＢＢＧ−０２：１２５．７ｇ（淡黄色オイル，９９．１%収率，ＬＣ８６.７％）を得た。

得られた粗体：１２５．７ｇを減圧蒸留精製に付し，Ｉｎｔ. ＢＢＧ−０２：９０．０５ｇ｛微黄色オイル，７１．０％収率，ＬＣ９８．５％，ｌｏｔ.１４０３３１１，ｂｐ.１４１．５〜１５４度（０．１３〜０．１５ｋＰａ）｝及び，Ｉｎｔ. ＢＢＧ−０２:２４．５１グラム｛微黄色オイル，１９．３％収率，ＬＣ９８．２％，ｌｏｔ.１４０３３１２，ｂｐ.１１５〜１４１．５℃（０．１５〜０．１７ｋＰａ）｝を得た。

式Ａ２から式Ａ３（ＩｎｔＢＢＧ−０２からＩｎｔＢＢＧ−０３）の合成

５００ｍＬナスフラスコにＩｎｔＢＢＧ−０２：３０．０ｇ（１３３．１ｍｍｏｌ，ＬＣ９８．５％，ｌｏｔ.１４０３３１１）を仕込み，氷冷下，濃硫酸：１３２ｍＬで希釈した（溶解熱大きい）。この溶液に対し，氷冷下，６０％発煙硫酸：２０．０ｍＬ（２９２．９ｍｍｏｌ）を１５分間かけて滴下した（反応熱は大きかった。）．滴下完了後，氷浴を外し，オイルバスにて，バス温：１００度で６時間撹拌した。

ＨＰＬＣにて反応完結を確認後，反応液を氷冷（５℃）後，氷：９００ｇに注加した。得られた混合液に対し，氷冷下，４８％ＮａＯＨａｑ.を慎重に加え，ｐＨ５に調整した（内部温度：５５℃以下，ｐＨメータ使用。反応熱大）。得られた懸濁液をＡｃＯＥｔ：３００ｍＬで洗浄し，水層を減圧濃縮した（バス温度：４５〜５５℃）。濃縮時には，トルエン：１Ｌ×2回，メタノール：１Ｌ×１回の共沸を行い，水を除去した。

得られた濃縮残渣にメタノール：１Ｌを添加，不溶物をろ別し，ろ液を減圧濃縮，乾燥し，粗体のＩｎｔ. ＢＢＧ−０３:４３．２ｇ（白色アモルファスパウダー，１０６．２％収率，ＬＣ７２．８％，異性体１７．６％，ｌｏｔ.１４０４０９）を得た。

粗体はシリカゲルカラム（Ｎ６０シリカゲル，アセトン／水＝１００:１）を通過しており，また，精製と濃縮を繰り返すうちに徐々に紫色に着色し，わずかに分解が見られた（アセトン，ＩＰＡ，ＭｅＯＨ等で溶解，濃縮を実施）。この粗体（淡紫色アモルファスパウダー，ＬＣ７０．６％，異性体１７．８％，ｌｏｔ.１４０４０９）をそのまま次の工程に用いた。

結晶化の検討
Ｉｎｔ. ＢＢＧ−０３は，精製効率が高くなかったため，精製効率を向上させることとした。ところで，Ｃａ,Ｂａ塩は無機塩だが水溶性が低いことが知られている。また，２価イオンとの塩は異性体間の物性差異が出やすいのではないかと考え，Ｃａを含む数種の塩基を添加し，水溶性が減少した結晶が得られないか検討した。様々な塩基を用いて結晶化を試みた結果，Ｉｎｔ. ＢＢＧ−０３をＣｓ塩化すると水溶性が減少した塩が得られることが分かった。また，Ｃｓ塩化の段階で異性体比率が向上することも分かった（異性体:１７．６％→１．１％）
Ｃｓ塩化の最適化：Ｈ_２Ｏ（基質×３５ｗ／ｖ），Ｃｓ_２ＣＯ_３（４．８当量），収率３５％
なお，収率向上を目的にＨ_２Ｏを減らした（基質×１５ｗ／ｖ）ところ，回収率は向上した（７７％）ものの，異性体が全く除去されなかった。

Ｃｓ塩の晶析検討：
ＭｅＯＨ／ＩＰＡ＝１／１０（×３５ｖ／ｗ）・回収率：８１％，異性体：１．１→０．５％
Ｈ_２Ｏ懸洗（×５ｖ／ｗ）・・・・・・・回収率：５０％，異性体:１７．６→３．３％
Ｈ_２Ｏ懸洗（×２．５ｖ／ｗ）・・・・・・回収率：８１％，異性体：３．３→０．３％

Ｉｎｔ. ＢＢＧ−０３をＣｓ塩化すると異性体が混在する事態を効果的に防ぐことができることがわかった。上記の例では，炭酸セシウムと水との混合物をＩｎｔ. ＢＢＧ−０３と作用させたが，セシウム塩を適宜調整したものをＩｎｔ. ＢＢＧ−０３と反応させ，Ｉｎｔ. ＢＢＧ−０３のセシウム化塩を得ればよい。

Ｉｎｔ.ＢＢＧ−０３のＣｓ塩化及びＩｎｔ.ＢＢＧ−０３−Ｃｓの精製

５Ｌ三角フラスコに粗体のＩｎｔＢＢＧ−０３: １１８．９ｇ（３８９．３３ｍｍｏｌ，ＬＣ６７．１％，異性体２０．２％，ｌｏｔ.１４０５１９及びＬＣ７０．６％，異性体１７．８％ｌｏｔ.１４０４０９），水：４．１Ｌ（基質重量×３５ｗ／ｖ），Ｃｓ_２ＣＯ_３:６０８．９ｇ（１．８６９ｍｏｌ）を仕込み，超音波撹拌，加温（４０℃）により均一な黒色溶液とした後，種晶（約５０ｍｇ）を添加し，２時間静置，放冷した。
結晶析出が見られないため，種晶（約５０ｍｇ）を更に添加し，氷冷，終夜成り行き静置した（１１時間）。

析出した固形物（綿毛状）を氷冷，内温：５〜７℃にて濾取，減圧乾燥して，粗体のＩｎｔ. ＢＢＧ−０３−Ｃｓ：９０．４ｇ（白色固体，５３．１%収率，ＬＣ９２．５％，異性体６．４％，ｌｏｔ.１４０５１９−ｃｒｕｄｅ）を得た（＊固体が容易に溶解するため，固体濾取時にはほとんど洗い込み，洗浄をしない）。

粗体のＩｎｔ. ＢＢＧ−０３−Ｃｓ：９０．４グラム（ＬＣ９２.５％，異性体６．４％）に水：２２５ｍＬを添加し，７５〜８０度で３０分撹拌した（ほぼ完溶）後，室温（１８℃）まで冷却，種晶を添加し，３０分撹拌した。

結晶析出が見られないため，氷浴で冷却すると固体が析出し，更に氷冷下1.5時間撹拌後，濾取，水洗：２７ｍＬ（×０．３ｖ／ｗ），減圧乾燥し，Ｉｎｔ. ＢＢＧ−０３−Ｃｓ：６８．１ｇ（白色固体，７５．６％回収率，ＬＣ９５．８％，異性体１．７％，ｌｏｔ.１４０５１９−１）を得た。

得られたＩｎｔ. ＢＢＧ−０３−Ｃｓ:６８．１グラム（ＬＣ９５．８％，異性体１．７％）を用いて上記と同様な水晶析を行い，Ｉｎｔ. ＢＢＧ−０３−Ｃｓ：５４．２ｇ（白色固体，79.7%回収率，ＬＣ９５．６％，異性体０．４１％，ｌｏｔ.１４０５１９−２）を得た。

式Ａ３から式Ａ４（ＩｎｔＢＢＧ−０３からＩｎｔＢＢＧ−０４）の合成

５００ｍＬナスフラスコに粗体のＩｎｔＢＢＧ−０３：１０．０ｇ（３２．７４ｍｍｏｌ，ＬＣ７０．６％，異性体１７．８％ｌｏｔ.１４０４０９），４−クロロベンズアルデヒド（ｃｈｌｏｒｏｂｅｎｚａｌｄｅｈｙｄｅ）: ２．３０ｇ（１６．３７ｍｍｏｌ），ＥｔＯＨ:６０ｍＬ，水:１８０ｍＬを添加し，濃塩酸を用いてｐＨを０．７に調整した。反応液をバス温：１２０℃で６９時間撹拌した。この工程においてエタノールなどのアルコールを溶媒に添加することが極めて望ましかった。

ＨＰＬＣにて反応確認後（ＳＭ:ＴＭ＝１:１１），反応液を室温に戻し，１ＭＮａＯＨａｑ.を用いてｐＨ１に調整した。ｐＨ調整後，反応液をバス温：６０℃に加熱し，６０℃にて析出物をろ取，水洗し，粗体のＩｎｔ. ＢＢＧ−０４:３．４８ｇ（白色固体，２８．９％収率，ＬＣ８９．０％，異性体４．４％）を得た。

得られた粗体のＩｎｔ. ＢＢＧ−０４:３．４８ｇにＥｔＯＨ／Ｈ_２Ｏ＝１／３混合液：３５ｍＬを添加，バス温度６０℃で１時間懸濁撹拌した。６０℃にて固体をろ取，水洗し，Ｉｎｔ. ＢＢＧ−０４:３．３４ｇ（白色固体，２７．８％収率，ＬＣ８９．２％，異性体５．５％）を得た。

得られた粗体のＩｎｔ. ＢＢＧ−０４:３．３４ｇにＥｔＯＨ／Ｈ_２Ｏ=１／３混合液：35ｍLを添加後，１ＭＨＣｌａｑでｐＨ１に調整した。混合液をバス温:６０℃で１時間懸濁撹拌後，６０℃にて固体をろ取，水洗し，Ｉｎｔ. ＢＢＧ−０４:３．３１ｇ（白色固体，２７．５％収率，ＬＣ９３．５％，異性体４．５％）を得た。

得られた粗体のＩｎｔ. ＢＢＧ−０４:３．３１ｇにＥｔＯＨ：３５ｍＬを添加し，バス温度６０℃で１時間懸濁撹拌した。６０℃にて固体をろ取，ＥｔＯＨ洗し，Ｉｎｔ. ＢＢＧ−０４：３．２４ｇ（白色固体，２７．０%収率，ＬＣ９３．３％，異性体４．５％，ｌｏｔ.１４０４２５）を得た。

この工程では，水で希釈した後に，冷却し，その後にろ過することで，収率が極めて上昇した。

式Ａ４から式Ａ５（ＩｎｔＢＢＧ−０４からＩｎｔＢＢＧ−０５）の合成

１００ｍＬナスフラスコにＩｎｔＢＢＧ−０４: ２．０グラム（２．７２７ｍｍｏｌ，ＬＣ９３．３％，異性体４．５％，ｌｏｔ.１４０４２５），ＭｅＣＮ：２０ｍＬ，ＨＣｌ／ＫＣｌ緩衝水溶液（ｐＨ１．８７）：１０ｍＬを添加し，ヘキサニトラトセリウム（ＩＩＩ）酸アンモニウム（ＣＡＮ）：３．８８グラム（７．０９ｍｍｏｌ），のＨＣｌ／ＫＣｌ緩衝水溶液（ｐＨ１．８７）：１０ｍＬ溶液を室温で５分かけて添加し，室温で１時間撹拌した。

ＨＰＬＣにて反応確認後，反応液を飽和Ｎａ_２ＳＯ_４水溶液：２００ｍＬ，ｎ−ＢｕＯＨ:２００ｍＬに注加し，抽出した。有機層を分離後，水層をｎ−ＢｕＯＨ:１００ｍＬで抽出し，有機層を分離した。得られた有機層をＮａ_２ＳＯ_４乾燥，減圧濃縮（バス温度：４０〜４５℃）した。

得られた濃縮残渣：２．８２ｇをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｎ６０シリカゲル：６０ｇ，ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３＝１／９→２／８→３／７→４／６，Ｎ６０シリカゲル：９ｇでまぶしチャージ）で精製し，Ｉｎｔ. ＢＢＧ−０５:１．１０グラム｛濃緑色固体，５３．５%収率，ＬＣ９７．２％（２５４ｎｍ），ＬＣ９８．８％（６００ｎｍ），異性体：ピーク分離せず，ｌｏｔ.１４０５０７−１｝及び，Ｉｎｔ. ＢＢＧ−０５:０．５グラム｛濃緑色固体，２４．３％収率，ＬＣ８１．０％（２５４ｎｍ），ＬＣ９１．９％（６００ｎｍ），異性体：ピーク分離せず，ｌｏｔ. １４０５０７−２｝を得た。

式Ａ５から式Ａ６（ＩｎｔＢＢＧ−０５からＩｎｔＢＢＧ−０６（クルードＢＢＧ））の合成

スクリュキャップ付き試験官にＩｎｔＢＢＧ−０５: １００ｍｇ（０．１３２７ｍｍｏｌ，ＬＣ９８．８％，異性体:ピーク分離せず，ｌｏｔ.１４０５０７−１），ｐ−フェネチジン（ｐｈｅｎｅｔｉｄｉｎｅ）: １９．１ｍｇ（０．１３９４ｍｍｏｌ），ｎ−ブタノール（ｎ−ＢｕＯＨ）:１ｍＬを室温で添加し，バス温：１０５℃で１５時間撹拌した。ＴＬＣにて原料が残存していたため，反応液を室温に戻し，ｐ−フェネチジン（ｐｈｅｎｅｔｉｄｉｎｅ）：３．６ｍｇ（０．０２６５４ｍｍｏｌ）を添加後，バス温：１０５℃で２時間撹拌した。ＴＬＣにて原料が残存していたため，更に反応液を室温に戻し，ｐ−フェネチジン（ｐｈｅｎｅｔｉｄｉｎｅ）: １８．２ｍｇ（０．１３２７ｍｍｏｌ）を添加後，バス温：１０５℃で２時間撹拌した。

ＴＬＣにて反応確認後，反応液に０．５ＭＨＣｌａｑ.：１０ｍＬを添加し，減圧濃縮した（ＩＰＡで移し替え，バス温：４０〜４５℃）。ナスコルに０．５ＭＨＣｌａｑ.:１０ｍＬを添加，超音波処理，スパーテルでの固体剥離を行い，固体をろ取，０．５ＭＨＣｌａｑ.洗浄した。得られた固体を減圧乾燥し，ｃｒｕｄｅＢＢＧ:８１．１ｍｇ（濃赤紫固体，７２．０%収率，ＬＣ８７．７％（６００ｎｍ），ｌｏｔ. １４０５１４）を得た。

式Ｂ１から式Ｂ２（ＩｎｔＢＢＧ−０１からＩｎｔＢＢＧ−０２５−１）の合成

３００ｍＬナスフラスコにＩｎｔＢＢＧ−０１: １３．３６グラム（９８．５５ｍｍｏｌ, ＴＣＩ），Ｋ_２ＣＯ_３: ２０．４２ｇ（１４７．８ｍｍｏｌ, ｗａｋｏ），ＭｅＣＮ:９８ｍＬを仕込み，室温でメタ−ブロモベンジルブロマイド（ｍ−ｂｒｏｍｏｂｅｎｚｙｌｂｒｏｍｉｄｅ）：２４．６３ｇ（９８．５５ｍｍｏｌ, ｗａｋｏ）を添加した後，８０℃で１時間撹拌した。

ＴＬＣにて反応確認後，不溶物をろ別し，ろ液を減圧濃縮した。濃縮残渣に水：２００ｍＬ，ＡｃＯＥｔ：２００ｍＬを添加，分液操作し，有機層を分離した。得られた有機層を塩水（ｂｒｉｎｅ）:１００ｍＬで洗浄，Ｎａ_２ＳＯ_４乾燥，減圧濃縮（バス温度：35〜45℃）した。

得られた濃縮残渣：３０．１９ｇをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｎ６０シリカゲル：９０ｇ，２０％ＡｃＯＥｔ／ヘプタン（ｈｅｐｔａｎｅ））で精製し，ＩｎｔＢＢＧ−０２５−１：２９．４０ｇ（淡黄色オイル，９７．８％収率，ＬＣ９６．８％，ｌｏｔ.１４０５２３）を得た。

式Ｂ２から式Ｂ２−１（ＩｎｔＢＢＧ−０２５−１からＩｎｔＢＢＧ−０２５−２）の合成

Ａｒ気流下，３００ｍＬコルベンにＩｎｔＢＢＧ−０２５−１: １０．４ｇ（３４．１８ｍｍｏｌ, ＬＣ９６．８％，ｌｏｔ. １４０５２３），ＤＩＰＥＡ: １１．８ｍＬ（６８．３６ｍｍｏｌ），脱水ジオキサン（ｄｉｏｘａｎｅ（脱水））：１００ｍＬを仕込み，室温で１０分間Ａｒバブリングした。反応液にベンジルメルカプタン（ｂｅｎｚｙｌｍｅｒｃａｐｔａｎ）:４．２１ｍＬ（３５．８９ｍｍｏｌ），キサントホス（Ｘａｎｔｏｐｈｏｓ）：９８９ｍｇ（１．７０９ｍｍｏｌ），Ｐｄ_２（ｄｂａ）３:７８２ｍｇ（０．８５４５ｍｍｏｌ）を順次加え，内温：９５度で１時間撹拌した。

ＨＰＬＣにて反応確認後，反応液を室温に戻し，ＡｃＯＥｔ:２００ｍＬを添加，不溶物をある程度溶解させた。反応液をセライト／シリカゲル＝５０ｇ／５０ｇ混合パッドで濾過，ＡｃＯＥｔ洗浄し，ろ液を減圧濃縮した（バス温度：３５〜４５℃）。

得られた濃縮残渣：１７．３８ｇをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｎ６０フラッシュシリカゲル：２００グラム，１％ＡｃＯＥｔ／ヘプタン（ｈｅｐｔａｎｅ））で精製し，Ｉｎｔ. ＢＢＧ−０２５−２:１２．６５ｇ（淡黄色オイル，１０６．５％収率，ＬＣ９６．８％，Ｌｏｔ．１４０５２７）を得た。

式Ｂ２−１から式Ｂ３（ＩｎｔＢＢＧ−０２５−２からＩｎｔＢＢＧ−０２５−３）の合成

スクリュキャップ付き試験官にＩｎｔＢＢＧ−０２５−２：４０８ｍｇ（１．１７４ｍｍｏｌ, ＬＣ９６．８％，ｌｏｔ. １４０５２７），ＡｃＯＨ:４ｍＬを仕込み１０℃に冷却した。反応液にＳＯ_２Ｃｌ_２:０．３８ｍＬ（４．６９６ｍｍｏｌ）のＡｃＯＨ:１．５ｍＬ溶液を１０℃，５分間かけて滴下し，同温度で３０分撹拌した。ＳＯ_２Ｃｌ_２をＡｃＯＨ溶液としてゆっくり加える事が重要であった。

ＨＰＬＣにて反応確認後，反応液を氷冷したｓａｔ. ＮａＨＣＯ_３ａｑ.:１００ｍＬに注加し，ＡｃＯＥｔ：１００ｍＬで抽出した。得られた有機層をｓａｔ. ＮａＨＣＯ_３ａｑ.:５０ｍＬで洗浄，Ｎａ２ＳＯ_４乾燥，減圧濃縮（バス温度：３５〜４５℃）し，粗体のＩｎｔ. ＢＢＧ−０２５−３:３２３ｍｇ（淡黄色オイル，８５．０％収率，ＬＣ９１．０％，ｌｏｔ. １４０５２８）を得た。

式Ｂ３から式Ｂ４（ＩｎｔＢＢＧ−０２５−３からＩｎｔＢＢＧ−０３−Ｎａ）の合成

１０ｍＬナスフラスコにＩｎｔＢＢＧ−０２５−３: ３０１ｍｇ（０．９３８７ｍｍｏｌ, ＬＣ９１．０％，ｌｏｔ. １４０５２８），ＴＨＦ:３ｍＬ，２ＭＮａＯＨａｑ.:0.94ｍＬ（１．８７８ｍｍｏｌ）を仕込み，５０℃で３０分撹拌した。

ＨＰＬＣにて反応確認後，反応液を減圧濃縮（バス温：４５〜５０℃）した。濃縮残渣をトルエン：１０ｍＬ×２回，メタノール：１０ｍＬ×１回共沸した後，メタノール１０ｍＬを添加，不溶物をろ別した。得られたろ液を濃縮乾固前に，ＭｅＯＨ／ＩＰＡ晶析（ＭｅＯＨで溶かし，一部濃縮，ＩＰＡ添加，一部濃縮を繰り返しＩＰＡに置換後，超音波を当て，固体を粉砕，０℃で３０分撹拌，ろ取）し，Ｉｎｔ. ＢＢＧ−０３−Ｎａ：153.7ｍｇ（白色固体，５０．０%収率，ＬＣ９０.３％，ｌｏｔ. １４０５２９−１）及び，母液濃縮物：２０４ｍｇ（白色アモルファス半固体，６６．４％収率，ＬＣ５９．６％，ｌｏｔ. １４０５２９−２）を得た。

また，上記とは別に，ＩｎｔＢＢＧ−０２５−３:８７９ｍｇ（２．３１ｍｍｏｌ，純分９１．６％ｂｙＬＣ−ＭＳ，ｌｏｔ.１４０５２５）を用いて，同様に反応を行った。
ＨＰＬＣにて反応確認後，反応液を減圧濃縮（バス温：４５〜５０）した。濃縮残渣をメタノール：２０ｍＬ×３回共沸した後，メタノール１０ｍＬを添加，不溶物をろ別した。
得られたろ液を減圧濃縮，乾燥し，粗体のＩｎｔ. ＢＢＧ−０３−Ｎａ:７７６ｍｇ（白色固体，ｑｕａｎｔ, ＬＣ８８．０％，ｌｏｔ. １４０５２６）を得た。

式Ｂ２から式Ｂ３（ＩｎｔＢＢＧ−０２５−１からＩｎｔＢＢＧ−０２５−３）の合成

Ａｒ気流下，１００ｍＬコルベンにｉ−ＰｒＭｇＣｌ（１．０ＭｉｎＥｔ_２Ｏ）:１．６ｍＬ（１．６ｍｍｏｌ），ＴＨＦ（脱水）：２０ｍＬを仕込み，−７０℃に冷却した。反応液にｎ−ＢｕＬｉ（１．５５Ｍｉｎｎ−ヘキセン（ｈｅｘａｎｅ）:２．０６ｍＬ（３．２ｍｍｏｌ）を−７０℃で添加し，１０分間撹拌した。反応液に，ＩｎｔＢＢＧ−０２５−２: １．２１６ｇ（４．０ｍｍｏｌ, Ｃ，ｌｏｔ. １７４０５２２）のＴＨＦ（脱水）：５ｍＬ溶液を−７０℃で滴下し，−６０℃で１時間撹拌した。原料が残存したため，反応液にｉ−ＰｒＭｇＣｌ（１．０ＭｉｎＥｔ_２Ｏ）:０．３２ｍＬ（０．３２ｍｍｏｌ），ｎ−ＢｕＬｉ（１．５５Ｍｉｎｎ−ヘキセン（ｈｅｘａｎｅ）:０．４１ｍＬ（０．６４ｍｍｏｌ）を−６０℃で順次滴下し，−６０℃で１０分間撹拌した。

反応液に，ＳＯ_２（７．７ＭｉｎＴＨＦ）溶液：５．２ｍＬ（４０．０ｍｍｏｌ）を−６５℃にて滴下（内温：−６５→−５５℃）し，−６０℃で１．５時間撹拌した。

反応液にＮＣＳ:６５０ｍｇ（５．７６ｍｍｏｌ）を−６０℃にて添加し，−２０℃で３０分間撹拌後，自然昇温に任せ，−２０℃〜室温で１５時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳにて反応を確認後，水：１００ｍＬ及び，ＡｃＯＥｔ：１００ｍＬを添加し，抽出した。
得られた有機層を水：５０ｍＬ，塩水（ｂｒｉｎｅ）:５０ｍＬで洗浄，Ｎａ_２ＳＯ_４乾燥，減圧濃縮（バス温：３５〜４５℃）した。

得られた濃縮残渣：１．５０ｇをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｎ６０フラッシュシリカゲル：６０グラム，ＡｃＯＥｔ／ヘプタン（ｈｅｐｔａｎｅ）＝１／２０）で精製し，Ｉｎｔ. ＢＢＧ−０２５−３:８７９ｍｇ（淡黄色オイル，６７．９％収率，純分９１．６％ｂｙＬＣ−ＭＳ，ｌｏｔ. １４０５２５）を得た。

本発明は，化学及び医薬産業において利用されうる。

Claims

トリアリールメタン誘導体，又はその薬学的に許容される塩を含むトリアリールメタン組成物であって，
前記トリアリールメタン誘導体，又はその薬学的に許容される塩は，ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩と，ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）の位置異性体又はその薬学的に許容される塩を含み，
前記ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）及びブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）の薬学的に許容される塩のいずれか又は両方を，
ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ），ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）の薬学的に許容される塩，ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）の位置異性体，及びブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）の位置異性体の薬学的に許容される塩の合計中，９０重量％以上１００重量％以下含む，組成物。
式（１）〜（３）で示されるトリアリールメタン誘導体，その薬学的に許容される塩を少なくとも１つ含むトリアリールメタン組成物であって，
式（１）で示されるブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩を，
前記式（１）〜（３）で示されるトリアリールメタン誘導体，その薬学的に許容される塩中，９０重量％以上１００重量％以下含む，組成物。
式（１）〜（３）で示されるトリアリールメタン誘導体，その薬学的に許容される塩を少なくとも１つ含むトリアリールメタン組成物を含む，眼膜除去を行う際の眼膜染色のための染色組成物であって，
式（１）で示されるブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩を，
前記式（１）〜（３）で示されるトリアリールメタン誘導体，その薬学的に許容される塩中，９０重量％以上１００重量％以下含む，
染色組成物。
ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩の製造方法であって，
式Ａ１で示されるエチル−ｍ−トリルアミン（ｅｔｈｙｌ−ｍ−ｔｏｌｙｌ−ａｍｉｎｅ）をベンジル化試薬と反応させ，式Ａ２で示される化合物を得るベンジル化工程と，
式Ａ２で示される化合物に三酸化硫黄又は硫酸を作用させ，
式Ａ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る工程と，
式Ａ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体から，式（１）で示されるブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩を得る工程と，
を含む，
ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩の製造方法。

（上記式中Ｘ^１１は，水素原子，水酸基，アルカリ金属原子で水素原子が置換された水酸基，アルカリ金属原子又はハロゲン原子を示し，Ｘ^１２は，水素原子，水酸基，アルカリ金属原子で水素原子が置換された水酸基，アルカリ金属原子又はハロゲン原子を示す。）
ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩の製造方法であって，
式Ｂ１で示されるエチル−ｍ−トリルアミン（ｅｔｈｙｌ−ｍ−ｔｏｌｙｌ−ａｍｉｎｅ）を，ハロゲン原子が付加したベンジル化試薬と反応させ，式Ｂ２で示されるハロゲン化化合物を得る工程と，
式Ｂ２で示されるハロゲン化化合物のハロゲン原子を置換して，式Ｂ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る工程と，
式Ｂ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体とアルカリを反応させ，式Ｂ４で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る工程と，
式Ｂ４で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体から，式１で示されるブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩を得る工程と，
を含む，
ブリリアントブル−Ｇ（ＢＢＧ）又はその薬学的に許容される塩の製造方法。

（上記式中Ｘ^２１は，ハロゲン原子を示し，Ｘ^２２は，ハロゲン原子を示し，Ｘ^３は，水素原子，水酸基，アルカリ金属原子で水素原子が置換された水酸基，アルカリ金属原子又はハロゲン原子を示す。）
請求項５に記載の方法であって，
前記式Ｂ２で示されるハロゲン化化合物のハロゲン原子を置換して，式Ｂ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る工程は，
前記式Ｂ２で示されるハロゲン化化合物に硫化物を作用させ，式Ｂ２−１で示される化合物を得る工程と，
前記式Ｂ２−１で示される化合物に求電子試薬ＳＯ_２Ｃｌ_２を作用させ，式Ｂ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体であってＸ^２が塩素原子であるものを得る工程を含む，
方法。

（上記式においてＲ^２１は，フェニル基又はベンジル基であるか，メチル基，エチル基，水酸基，ハロゲン原子で置換されてもよいフェニル基又はベンジル基を示す。）
請求項５に記載の方法であって，
前記式Ｂ２で示されるハロゲン化化合物のハロゲン原子を置換して，式Ｂ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る工程は，
前記式Ｂ２で示されるハロゲン化化合物とグリニャ−ル試薬を作用させ，ＳＯ_２を作用させた後に，ハロゲンイオンと作用させることで，式Ｂ３で示されるベンジルエチル−ｍ−トリルアミン誘導体を得る工程である，
方法。