JP2017052790A - ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームを含む医薬組成物 - Google Patents

Abstract

【課題】ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームを含む医薬組成物を提供すること。
【解決手段】医薬組成物はｓＰＬＡ２加水分解性リポソームを含み、ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームは、２０〜４５％（モル／モル％）のアニオン性脂質と、３〜６％（モル／モル％）のポリマーがコンジュゲートされた脂質と、４０〜７５％（モル／モル％）の中性脂質と、アントラサイクリン、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、ピコプラチン、ドキソルビシン、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、エクシスリンド、シスレチノイン酸、スリンダク硫化物、メトトレキセート、ブレオマイシンおよびビンクリスチンからなる群から選択される低分子の抗腫瘍物質と、を含む。
【選択図】 図１

Description

本発明は、リポソーム系薬物送達システムおよび同システムの治療における使用に関する。

薬物送達用のリポソーム
リポソームは、１９８０年代に薬物送達ビヒクル／システムとして開発された微小な球体である。最初のリポソームに基づく薬剤は、１９９０年代に商業的用途について承認された。

リポソームは、薬物など様々な化合物を運搬するために使用可能な３つの別個のコンパートメント、すなわち：内部の水性コンパートメント；疎水性の二分子層；ならびに内葉および外葉の極性相間、を有している。封入される化合物の化学的性質に応じて、該化合物はいずれかのコンパートメントに局在化することになる。

リポソームは、過形成および血管透過性増大、またリンパ排液異常のような、固形腫瘍の病態生理学的特徴を使用することにより、腫瘍組織を受動的に標的化することから、有望な薬物送達システムと考えられている。これらの特徴はナノ粒子の血管外遊出を促進し、またリポソームはＥＰＲ効果（ｅｎｈａｎｃｅｄ ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔ）のためより長い間組織内に保持されうる。

薬物送達ビヒクルとしてのリポソームの特性は、リポソームの表面電荷、透過性、溶解度、安定性などに強く依存し、これらはリポソーム組成物中に含まれる脂質によって著しく影響を受ける。さらに、リポソーム内に封入される薬物は、安定なリポソーム製剤の調製において考慮すべきさらなる要件を必要とする場合がある。

安全性および薬効に関して考察するには、リポソーム製剤がその特性を維持すること、すなわち調製時から投与まで安定を維持することが必要である。更に、薬物が特異的に放出される標的部位にそのような製剤が到達するまで、該製剤は、治療される対象者内の輸送の間、損傷を受けないことが望ましい。

負に帯電したリポソームの治療的使用は、リポソーム製品を用いて治療された患者に見られる非ＩｇＥ依存性過敏性反応を引き起こす可能性がある。これらの副作用は補体活性化によるアナフィラトキシン産生の結果であると思われる。

ＰＥＧ化リポソーム製剤の繰り返し投与は、場合により、血中クリアランスの加速（Ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ Ｂｌｏｏｄ Ｃｌｅａｒａｎｃｅ）（ＡＢＣ現象）を生じて、初回投与と比較すると血流からの迅速なクリアランスをもたらし、かつこれに対応する肝臓および脾臓における蓄積を増大させてきた。ＡＢＣ現象は、リポソームが蓄積した臓器内における封入化合物の意図せぬ放出を引き起こす可能性がある。さらに、リポソームが意図した部位に蓄積するのを妨げる可能性があるので、ＡＢＣ現象は一般に望ましくない。

リポソームのための様々な標的化戦略、例えば抗体のような細胞特異的リガンドへの結合については既に記載がある。
ｓＰＬＡ２加水分解性リポソーム
別の手法は、がん組織中、および炎症部位においても、分泌型ホスホリパーゼＡ２（ｓＰＬＡ２）のレベルが高いことに基づいて示唆されてきた。基本的概念は、ｓＰＬＡ２により加水分解可能なリポソームを調製可能であること、およびｓＰＬＡ２による加水分解がリポソーム内に封入された薬物の放出をもたらすことである。さらに、ｓＰＬＡ２加水分解の生成物であるリゾ脂質（ｌｙｓｏｌｉｐｉｄ）および脂肪酸は、細胞による薬物の取込み増加をもたらす細胞膜の透過化剤として作用する。がん組織中および炎症部位ではｓＰＬＡ２レベルが高いので、ｓＰＬＡ２活性化リポソームを使用して、封入された薬物をそのような部位へ優先的に送達することが可能である。

多くの文献にｓＰＬＡ２活性化リポソームが記載されているが、治療適用についてはこれまで記載されてこなかった。
特許文献１には、モノエーテルリゾリン脂質のプロドラッグを含んでなるｓＰＬＡ２活性化リポソームについて記載されている。この文献には、追加の生物活性化合物の封入についても記載されている。しかしながら、記載されたリポソームの治療的使用は開示されていなかった。

特許文献２は、ｓＰＬＡ２によって活性化されるエーテルリゾ脂質のプロドラッグの投与について、哺乳類の皮膚組織または皮下組織における細胞外ｓＰＬＡ２の局所的増大を伴う疾患または症状の治療のための、脂質を用いる薬物送達システムの使用を示唆している。該システムはいわゆるエッジ活性化合物（ｅｄｇｅ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｕｎｄ）をさらに含んでいた。この文献はヒトのような哺乳動物への局所適用は開示しなかった。従って、記載されたリポソームの治療的使用は開示されていなかった。

特許文献３は、リーシュマニア症、トリパノソーマ症、マラリア、赤痢アメーバ症（Ｅｎｔａｂｏｅｂａ，Ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａｓｉｓ）および「東洋肝吸虫クロモルキス・シネンシス（Ｏｒｉｅｎｔａｌ ｌｉｖｅｒ ｆｌｕｋｅ ｃｈｌｏｍｏｒｃｈｉｓ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）」から選択された寄生虫感染の治療または予防のための、脂質を用いた薬物送達システムの使用を示唆したが、該システムはｓＰＬＡ２によって活性化される脂質誘導体の形のプロドラッグを含んでなるものである。このリポソームはさらなる生物活性化合物を含有することができる。言及された感染症の実際の治療は実証されず、リポソームがヒトのような哺乳動物に投与されることもなかった。

特許文献４および特許文献５にもｓＰＬＡ２活性化リポソームについて記載されているが、医学的治療の開示を伴うものではなかった。
アンドレセン（Ａｎｄｒｅｓｅｎ）ら、２００５ａ（Ａｎｄｒｅｓｅｎ ＴＬ，２００５）は、ｓＰＬＡ２によるがん組織中におけるリポソーム系のプロドラッグおよび薬物の活性化および放出の誘発について議論している。特に、著者らは、ＭＴ−３乳がん異種移植片マウスモデルにおいて腫瘍増殖阻害を示す実験のデータを開示した。ｓＰＬＡ２分解性リポソーム（ＤＳＰＣ／ＤＳＰＧ／ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２０００、個々の脂質の量は示されていない）に封入されたシスプラチンは、対応量の遊離シスプラチンと比較して高い腫瘍増殖阻害を示した。著者らはさらに、ｉｎ ｖｉｔｒｏの実験において、シスプラチンが装荷されたｓＰＬＡ２分解性リポソームは、恐らくは加水分解生成物であるリゾ脂質および脂肪酸の付加的な膜かく乱作用が原因で、遊離シスプラチンよりも細胞毒性が高いことを示した。この作用は、シスプラチンが膜を貫通して拡散し細胞内標的部位に到達するのを促進するのに有用であることも考えられる。この作用がｓＰＬＡ２活性化リポソームの有害な副作用をもたらす可能性があるかどうかは議論されなかった。

アンドレセン（Ａｎｄｒｅｓｅｎ）ら、２００５ｂ（Ａｎｄｒｅｓｅｎ ＴＬ Ｊ．Ｓ．，２００５）も、ＭＴ−３乳がん異種移植片マウスモデルにおいて腫瘍増殖阻害を示す実験のデータを開示している。

上記に議論された参照文献を考慮しても、ｓＰＬＡ２活性化リポソームが治療的に使用されうるかどうかは明らかではない。該リポソームは、例えば、その一般に負の電荷ゆえにＲＥＳの細胞によって急速にクリアランスされる可能性がある。さらに、単純に治療的使用には漏出性が高すぎる可能性もある。極めて予測困難な別のパラメータはｓＰＬＡ２リポソームの毒性である。言及したように、ｓＰＬＡ２による加水分解の生成物であるリゾ脂質および脂肪酸は、例えば細胞膜の透過化によって、意図せぬ副作用をもたらす可能性がある。さらに、ｓＰＬＡ２が腫瘍内以外の部位に高いレベルで存在する場合、意図せぬ部位での薬物放出が起きる可能性がある。そのような意図せぬ薬物放出が有害な影響を有して、ｓＰＬＡ２活性化リポソームの治療的使用を妨げる可能性がある。意図せぬ部位での薬物放出は、その部位における予想外の高いｓＰＬＡ２レベルによって引き起こされる可能性がある。

負に帯電したリポソームの治療的使用は、リポソーム製品を用いて治療された患者に見られる非ＩｇＥ依存性過敏性反応を伴うことが考えられる。これらの反応は補体活性化によるアナフィラトキシン産生の結果であると考えられている。

ＰＥＧ化リポソーム製剤の繰り返し投与は、場合によっては加速された血中クリアランス（Ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ Ｂｌｏｏｄ Ｃｌｅａｒａｎｃｅ）（ＡＢＣ現象）を生じて、初回投与と比較して血流からの迅速なクリアランスをもたらし、かつこれに対応する肝臓および脾臓における蓄積を増大させてきた。ＡＢＣ現象は、リポソームが蓄積した臓器内における封入化合物の意図せぬ放出を経過する可能性がある。

シスプラチンを用いる治療
遊離シスプラチン製剤はいくつかの重大な副作用を有している。最も重要なものを以下に列挙する。

腎毒性−シスプラチンの主な用量制限毒性は用量相関的および蓄積的な腎不全である。静脈内水分補給を伴う６〜８時間注入を用いたシスプラチンの投与が、腎毒性を低減するために使用されてきた。しかしながら、腎毒性はこれらの手順を利用した後もなお生じる場合がある。

耳毒性−耳毒性は、シスプラチン５０ｍｇ／ｍ２の単回投与で治療された患者の最大３１％に観察されており、耳鳴または高周波領域（４，０００〜８，０００Ｈｚ）における聴力損失のうち少なくともいずれか一方によって明らかになる。耳毒性作用はシスプラチンの最大血漿中濃度と関連する可能性がある。

血液関係−シスプラチン治療を受けた患者の２５％〜３０％に骨髄抑制が生じる。白血球減少症および血小板減少症はより高用量（＞５０ｍｇ／ｍ２）においてより明白である。白血球減少症および血小板減少症とほぼ同じ頻度で貧血が生じる。

胃腸関係−シスプラチン治療を受けたほとんどすべての患者に著しい悪心嘔吐が生じ、あまりに重篤なため該薬物を中止しなければならないこともある。悪心嘔吐は、通常は治療後１〜４時間以内に始まり、最大２４時間持続する。

血清電解質異常−低マグネシウム血症、低カルシウム血症、低ナトリウム血症、低カリウム血症、および低リン酸血症がシスプラチン治療を受けた患者に生じることが報告されており、恐らく腎尿細管障害と関係している。

神経毒性−神経毒性は通常は末梢神経障害を特徴とする。神経障害は通常、長期治療（４〜７か月）の後に生じるが；神経症状は単回投与の後に生じることが報告されている。
肝毒性−ビリルビンと同様に肝酵素（特にＳＧＯＴ）の一時的上昇が、推奨用量のシスプラチン投与に関係することが報告されている。

国際公開公報第０１５８９１０号パンフレット 国際公開公報第０１７６５５５号パンフレット 国際公開公報第０１７６５５６号パンフレット 国際公開公報第０６０４８０１７号パンフレット 国際公開公報第０７１０７１６１号パンフレット

したがって、遊離シスプラチンを使用する治療は多くの潜在的な副作用を有しており、副作用のリスクが低減されたシスプラチン製剤が必要とされている。

上述の課題を解決するために、請求項１に記載の発明は、ヒトにおけるがんを治療するための医薬組成物において、医薬組成物はｓＰＬＡ２加水分解性リポソームを含み、ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームは、２０〜４５％（モル／モル％）のアニオン性脂質と、３〜６％（モル／モル％）のポリマーがコンジュゲートされた脂質と、４０〜７５％（モル／モル％）の中性脂質と、アントラサイクリン、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、ピコプラチン、ドキソルビシン、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、エクシスリンド、シスレチノイン酸、スリンダク硫化物、メトトレキセート、ブレオマイシンおよびビンクリスチンからなる群から選択される低分子の抗腫瘍物質と、を含む、医薬組成物を提供する。

第１の態様では、本発明は医学的使用のためのｓＰＬＡ加水分解性リポソームを提供する。ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームは、好ましくは低分子抗腫瘍物質のような治療薬を含んでなる。

本発明の他の態様は、治療薬の副作用を低減する方法、例えば治療薬の腎毒性、神経毒性および胃腸毒性を低減する方法に関する。
本発明のさらに別の態様は、治療薬の治療効果を延長する方法に関する。

以上、本発明によれば、ヒトにおけるがんを治療するための医薬組成物であって、ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームを含む医薬組成物が提供できた。

ＭＴ−３（ヒト乳がん）異種移植片に対するＬｉＰｌａＣｉｓの有効性を示す図。指数関数的に増殖している腫瘍を備えたヌードマウスを、４ｍｇ／ｋｇのシスプラチンまたはＬｉＰｌａＣｉｓで毎週１回治療した。対照群は（生理食塩水）で治療した。シスプラチン治療群および生理食塩水治療群は３回注射したが、ＬｉＰｌａＣｉｓ治療群のマウスは、毒性のため２回だけ注射した。詳細については実施例２を参照のこと。 ラット（ＢｒｌＨａｎ：ＷＩＳＴ＠ｍｏｌ（ＧＡＬＡＳ））（１つの治療につき３匹）に、３ｍｇ／ｋｇのシスプラチンまたはＬｉＰｌａｃｉｓを注射し、血液を表示された時点で採取した。酸消化の後、血漿分画をプラチナ含量についてＩＣＰ−ＭＳを使用して分析した。詳細については実施例２を参照のこと。 ＭＴ−３異種移植片を担持しているヌードマウスにおける薬物動態および体内分布を示す図。指数関数的に増殖するＭＴ−３腫瘍を備えたヌードマウス（１つの治療の各時点につき３匹）に、単回用量のシスプラチンまたはＬｉＰｌａＣｉｓ（３ｍｇ／ｋｇ）を注射した。採血の後、マウスを表示された時点で屠殺し、腫瘍および臓器を解剖、洗浄、および急速凍結した。酸消化の後、プラチナ含量をＩＣＰ−ＭＳによって計測した。詳細については実施例４を参照のこと。 ＭＴ−３異種移植片を担持しているヌードマウスにおける薬物動態および体内分布を示す図。指数関数的に増殖するＭＴ−３腫瘍を備えたヌードマウス（１つの治療の各時点につき３匹）に、単回用量のシスプラチンまたはＬｉＰｌａＣｉｓ（３ｍｇ／ｋｇ）を注射した。採血の後、マウスを表示された時点で屠殺し、腫瘍および臓器を解剖、洗浄、および急速凍結した。酸消化の後、プラチナ含量をＩＣＰ−ＭＳによって計測した。詳細については実施例４を参照のこと。 ＭＴ−３異種移植片を担持しているヌードマウスにおける薬物動態および体内分布を示す図。指数関数的に増殖するＭＴ−３腫瘍を備えたヌードマウス（１つの治療の各時点につき３匹）に、単回用量のシスプラチンまたはＬｉＰｌａＣｉｓ（３ｍｇ／ｋｇ）を注射した。採血の後、マウスを表示された時点で屠殺し、腫瘍および臓器を解剖、洗浄、および急速凍結した。酸消化の後、プラチナ含量をＩＣＰ−ＭＳによって計測した。詳細については実施例４を参照のこと。 ＭＴ−３異種移植片を担持しているヌードマウスにおける薬物動態および体内分布を示す図。指数関数的に増殖するＭＴ−３腫瘍を備えたヌードマウス（１つの治療の各時点につき３匹）に、単回用量のシスプラチンまたはＬｉＰｌａＣｉｓ（３ｍｇ／ｋｇ）を注射した。採血の後、マウスを表示された時点で屠殺し、腫瘍および臓器を解剖、洗浄、および急速凍結した。酸消化の後、プラチナ含量をＩＣＰ−ＭＳによって計測した。詳細については実施例４を参照のこと。 ＭＴ−３異種移植片を担持しているヌードマウスにおける薬物動態および体内分布を示す図。指数関数的に増殖するＭＴ−３腫瘍を備えたヌードマウス（１つの治療の各時点につき３匹）に、単回用量のシスプラチンまたはＬｉＰｌａＣｉｓ（３ｍｇ／ｋｇ）を注射した。採血の後、マウスを表示された時点で屠殺し、腫瘍および臓器を解剖、洗浄、および急速凍結した。酸消化の後、プラチナ含量をＩＣＰ‐ＭＳによって計測した。詳細については実施例４を参照のこと。 ＬｉＰｌａＣｉｓ投与後の時間の関数としての血中シスプラチン濃度を示す図。詳細については実施例６を参照のこと。 ＬｉＰｌａＣｉｓ投与後の時間の関数としての血中シスプラチン濃度を示す図。詳細については実施例６を参照のこと。 ＬｉＰｌａＣｉｓ投与後の時間の関数としての血中シスプラチン濃度を示す図。詳細については実施例６を参照のこと。 ＬｉＰｌａＣｉｓ投与後の時間の関数としての血中シスプラチン濃度を示す図。詳細については実施例６を参照のこと。 ＬｉＰｌａＣｉｓ投与量の関数としての血中シスプラチン濃度を示す図。詳細については実施例６を参照のこと。 ＬｉＰｌａＣｉｓ投与量の関数としての血中シスプラチン濃度を示す図。詳細については実施例６を参照のこと。 ＬｉＰｌａＣｉｓ投与量の関数としての血中シスプラチン濃度を示す図。詳細については実施例６を参照のこと。 第１相試験データの概要を示す図。詳細については実施例６を参照のこと。 第１相試験データの詳細を示す図。ＷＢＣ ＷＢＣ〜白血球、ＡＮＣ〜絶対好中球数、ＰＬＴ〜血小板、Ｈｇｂ〜ヘモグロビン、Ｎａｕ〜悪心、Ｖｏｍ〜嘔吐、Ｄｉａ〜下痢。詳細については実施例６を参照のこと。 第１相試験データの詳細を示す図。ＷＢＣ ＷＢＣ〜白血球、ＡＮＣ〜絶対好中球数、ＰＬＴ〜血小板、Ｈｇｂ〜ヘモグロビン、Ｎａｕ〜悪心、Ｖｏｍ〜嘔吐、Ｄｉａ〜下痢。詳細については実施例６を参照のこと。 第１相試験データの詳細を示す図。ＷＢＣ ＷＢＣ〜白血球、ＡＮＣ〜絶対好中球数、ＰＬＴ〜血小板、Ｈｇｂ〜ヘモグロビン、Ｎａｕ〜悪心、Ｖｏｍ〜嘔吐、Ｄｉａ〜下痢。詳細については実施例６を参照のこと。 第１相試験データの詳細を示す図。ＷＢＣ ＷＢＣ〜白血球、ＡＮＣ〜絶対好中球数、ＰＬＴ〜血小板、Ｈｇｂ〜ヘモグロビン、Ｎａｕ〜悪心、Ｖｏｍ〜嘔吐、Ｄｉａ〜下痢。詳細については実施例６を参照のこと。 第１相試験データの詳細を示す図。ＷＢＣ ＷＢＣ〜白血球、ＡＮＣ〜絶対好中球数、ＰＬＴ〜血小板、Ｈｇｂ〜ヘモグロビン、Ｎａｕ〜悪心、Ｖｏｍ〜嘔吐、Ｄｉａ〜下痢。詳細については実施例６を参照のこと。

本発明者らは、ｓＰＬＡ２加水分解性リポソーム（本明細書中ではｓＰＬＡ２活性化リポソームとも呼ばれる）を用いてｉｎ ｖｉｖｏでの試験を行なった。シスプラチンが装荷されたｓＰＬＡ２加水分解性リポソーム（本明細書中ではＬｉＰｌａＣｉｓとも呼ばれる）が腫瘍マウスモデルに投与されると、多くの場合、遊離シスプラチンの投与に比べて高い有効性が観察された。しかしながら、有効性の増大には、多くの場合、マウスの死亡をもたらす高い毒性も伴った。

にもかかわらず、本発明者らは進行した腫瘍または難治性の腫瘍を有する患者においてｓＰＬＡ２加水分解性リポソーム中に封入されたシスプラチンの第１相用量増加試験を開始した。この試験の主要評価項目は、ｓＰＬＡ２加水分解性リポソーム中に封入されたシスプラチン（ＬｉＰｌａＣｉｓとも呼ばれる）の安全性および忍容性であった。

この試験の主な結論は次のとおりであった：
・ＬｉＰｌａＣｉｓは臨床的に適切な用量において忍容可能な毒性プロファイルを有している。

・ＬｉＰｌａＣｉｓは遊離シスプラチンの投与と少なくとも同じ用量のシスプラチンの投与を可能とするが、これは非臨床データを考慮すれば驚くべきことである。
・ＬｉＰｌａＣｉｓは、遊離シスプラチンの投与と比較して、一般にシスプラチンの用量を制限する腎毒性を低減した。

・ＬｉＰｌａＣｉｓは、遊離シスプラチンの投与と比較して悪心嘔吐を低減した。
・３週間毎に投与されるＬｉＰｌａＣｉｓのＭＴＤ（最大耐用量）は治療サイクル当たり８０ｍｇを上回ることがわかったが、これは動物実験から予測されるＭＴＤを考慮すれば驚くべきことである。

・３週間毎に投与されるＬｉＰｌａＣｉｓのＲＤ（推奨用量）は治療サイクル当たり８０ｍｇまたはそれ以上と決定された。
・ＬｉＰｌａＣｉｓは、遊離シスプラチンの投与では必要とされる水分補給をしないで投与可能である。ＬｉＰｌａＣｉｓは外来患者においても原則として投与可能である。

特に、ＬｉＰｌａＣｉｓは悪心、下痢、嘔吐、貧血、神経病、腎毒性および耳毒性の点で遊離シスプラチン製剤と比較して優れた安全性および忍容性プロファイルを有していた。

したがって本発明は、ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームの医学的使用を利用可能とし、かつ本発明の最も広い態様においては、治療、好ましくはヒトの治療において使用するためのｓＰＬＡ２加水分解性リポソームを提供する。

ｓＰＬＡ２加水分解性リポソーム
本発明による治療において使用するためのｓＰＬＡ２加水分解性リポソームは、以降の実施形態においてより詳細に定義される。その最も広い実施形態では、ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームという用語は、生理学的条件下、特にがん組織中において加水分解可能なリポソームを指す。好ましくは、ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームは２０％〜４５％（ｍｏｌ／ｍｏｌ）のアニオン性脂質を含んでなる。アニオン性脂質の含量は、ｓＰＬＡ２を介したリポソームの脂質加水分解速度のようなリポソームの重要な特徴に影響し、またリポソームに対する免疫応答にも影響する。

アニオン性脂質の含量が増大するにつれて、ｓＰＬＡ_２による脂質加水分解（および薬物の放出）の速度も増大する。適度な加水分解速度は、２０％〜４５％のアニオン性脂質含量によって達成されうることが実証された。したがって１つの実施形態では、アニオン性脂質の含量は少なくとも２０％である。別の実施形態では、アニオン性脂質の含量は４５％以下である。さらに別の実施形態では、リポソームのアニオン性脂質含量は、２０％〜４５％、２５％〜４５％、２８％〜４２％、３０％〜４０％、３２％〜３８％、および３４％〜３６％からなる群から選択される。

上述のように、リポソームに対する免疫応答もアニオン性脂質の含量によって影響を受ける。したがって、体内におけるリポソームのクリアランス率は、リポソーム中のアニオン性脂質の含量をあるレベルより下に維持することにより低減される可能性があり、本発明者らは、リポソーム中のアニオン性脂質の含量を使用してｓＰＬＡ_２の加水分解速度と細網内皮系によるクリアランスとの間のバランスを取ることができることを認めた。

好ましくは、アニオン性脂質はリン脂質であり、また好ましくは、リン脂質は、ＰＩ（ホスファチジルイノシトール）、ＰＳ（ホスファチジルセリン）、ＤＰＧ（ビスホスファチジルグリセロール）、ＰＡ（ホスファチジン酸）、ＰＥＯＨ（ホスファチジルアルコール）、およびＰＧ（ホスファチジルグリセロール）から成る群から選択される。より好ましくは、アニオン性リン脂質はＰＧである。好ましくは、脂質はステアロイル鎖を含んでなる。したがって、好ましくはＰＧはＤＳＰＧなどである。

親水性ポリマー
好ましい実施形態では、本発明で使用されるｓＰＬＡ２加水分解性リポソームは、ＰＥＧ［ポリ（エチレングリコール）］、ＰＡｃＭ［ポリ（Ｎ−アクリロイルモルホリン）］、ＰＶＰ［ポリ（ビニルピロリドン）］、ＰＬＡ［ポリ（ラクチド）］、ＰＧ［ポリ（グリコリド）］、ＰＯＺＯ［ポリ（２−メチル−２−オキサゾリン）］、ＰＶＡ［ポリ（ビニルアルコール）］、ＨＰＭＣ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、ＰＥＯ［ポリ（エチレンオキシド）］、キトサン［ポリ（Ｄ−グルコサミン）］、ＰＡＡ［ポリ（アミノ酸）］、ポリＨＥＭＡ［ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリラート）］およびこれらのコポリマー、から成る群から選択された親水性ポリマーをさらに含んでなる。

最も好ましくは、ポリマーは１００Ｄａ〜１０ｋＤａの分子量を有するＰＥＧである。特に好ましいのは、２〜５ｋＤａのサイズのＰＥＧ（ＰＥＧ２０００〜ＰＥＧ５０００）であり、最も好ましいのはＰＥＧ２０００である。

リポソーム上へのポリマーの組み入れは当業者には良く知られており、恐らくは細網内皮系によるクリアランスを低減することにより、血流中のリポソームの半減期を延長するために使用可能である。さらに、ポリマーの組み入れはｓＰＬＡ２加水分解に影響を及ぼす。

好ましくは、ポリマーはホスファチジル（ｐｈｏｓｐａｔｉｄｙｌ）エタノールアミンの頭基にコンジュゲートされる。別の選択肢は、セラミド（この脂質がｓＰＬＡ_２によって加水分解不能であっても）へのコンジュゲートである。ポリマーがホスファチジル（ｐｈｏｓｐａｔｉｄｙｌ）エタノールアミンにコンジュゲートされると負電荷が導入され、従ってＤＳＰＥ−ＰＥＧは（ＤＳＰＥが中性脂質とされているのに反して）アニオン性脂質と見なされる。ポリマーがコンジュゲートされた脂質は、少なくとも２％の量で存在することが好ましい。より好ましくは、その量は少なくとも５％かつ最大１５％（ｍｏｌ／ｍｏｌ）である。さらにより好ましくは、ポリマーがコンジュゲートされた脂質の量は少なくとも３％かつ最大６％である。アニオン性リン脂質および≦２．５％のＤＳＰＥ−ＰＥＧ２０００を含有しているリポソームは、カルシウムの存在下で凝集する傾向が高まった。これは、通常は高粘着性ゲルの形成によって観察されうる。アニオン性リン脂質および＞７．５％のＤＳＰＥ−ＰＥＧ２０００を含有しているリポソームは、該リポソームの沈殿または相分離を引き起こす。

リポソーム中の中性荷電脂質成分
好ましくは、本発明で使用されるリポソームは、ＰＣ（ホスファチジルコリン）およびＰＥ（ホスファチジルエタノールアミン）を含んでなる双性イオン性リン脂質から成る群から選択された非荷電リン脂質も含んでなる。最も好ましくは、双性イオン性リン脂質はＰＣである。

アニオン性リン脂質とは対照的に、双性イオン性リン脂質は、リポソーム中の電荷中性のｓＰＬＡ_２加水分解性脂質成分としての役割を果たす。同じリポソーム中で双性イオン性およびアニオン性のリン脂質を組み合わせることにより、十分に高いｓＰＬＡ_２加水分解と低い血中クリアランス速度の両方に適合する所望の表面電荷密度となるように調節することが可能である。

リポソーム中の双性イオン性リン脂質の量は、好ましくは４０％〜７５％であり、より好ましくは５０〜７０％である。
好ましくは、脂質（アニオン性脂質、中性脂質およびポリマーにコンジュゲートした脂質）はステアロイル鎖を含んでなる。したがって、好ましくはＰＧはＤＳＰＧであり、ＰＥは好ましくはＤＳＰＥなどである。

エーテルリン脂質
リン脂質のうちの一部またはすべてがエーテルリン脂質であってもよい。
したがって、リン脂質は該リン脂質のグリセロール骨格のｓｎ−１位にエステル結合の代わりにエーテル結合を有することができる。ｓＰＬＡ_２がこの特定の種類のリン脂質を加水分解するとモノエーテルリゾリン脂質が生じ、これらは例えばがん細胞に対して有毒である。すなわち、エーテルリン脂質はモノエーテルリゾリン脂質のプロドラッグと見なしてもよく、本発明のリポソームは、そのようなプロドラッグがｓＰＬＡ_２加水分解によって活性化される場であるがん細胞のｓＰＬＡ_２増強環境に、該プロドラッグを送達するために使用することができる。エーテルリン脂質は欧州特許第１２５４１４３号明細書および国際公開公報第２００６／０４８０１７号パンフレットに記載されており、前記文献の内容は参照により本願に組込まれる。

１つの実施形態では、本発明で使用されるようなｓＰＬＡ２活性化リポソームはエーテルリン脂質を含まない。
その他のプロドラッグ
ｓＰＬＡ_２によって脂質から放出されてリゾ脂質を作出する部分が薬物であってもよい。したがって、以降にさらに概説されるように、リポソームは、モノエーテルリゾ脂質のプロドラッグ、ｓＰＬＡ_２によって脂質から放出されるプロドラッグ、および他の治療薬を含んでなることができる。

１つの実施形態では、本発明で使用されるようなｓＰＬＡ２活性化リポソームは、ｓＰＬＡ２によって脂質から放出されるプロドラッグを含まない。
安定化剤
リポソームは、該リポソーム中に膜成分としてコレステロールを組み入れることにより安定化されてもよい。しかしながら、リポソーム中の大量のコレステロールはｓＰＬＡ_２による加水分解に悪影響を及ぼし、したがってリポソームは最大でも１０％までしかコレステロールを含まないことが好ましい。さらにより好ましくは、リポソームは、コレステロールを１％未満、０．１％未満しか含まないか、またはコレステロールを全く含まない。

リポソームを構成している脂質のアルキル鎖長は、最適なＰＬＡ_２加水分解速度、および封入される化合物の該リポソームからの漏出を最小限とするために調節可能である。好ましくは、アルキル鎖はＣ１８またはＣ１６の飽和鎖である。

使用されるリポソームは２価カチオンへの曝露により安定化されてもよい。
上述のように、リポソームは、モノエーテルリゾ脂質のプロドラッグ、またはｓＰＬＡ_２により脂質から放出されてリゾ脂質を作出する部分のプロドラッグのうち少なくともいずれかを含んでなることができる。

好ましい実施形態では、リポソームは、モノエーテルリゾリン脂質のプロドラッグでもモノエーテルリゾリン脂質でもない、治療薬（薬物）のような生物活性化合物を含んでなる。リポソームは、モノエーテルリゾリン脂質のプロドラッグと治療薬とを含んでなる場合もある。好ましい生物活性化合物は、小分子、ペプチド、タンパク質、ならびにプラスミドおよびオリゴヌクレオチドのような核酸である。好ましい種類のタンパク質は抗体であり、より好ましくはモノクローナル抗体である。好ましいオリゴヌクレオチドは、アプタマー、アンチセンスオリゴヌクレオチド、マイクロＲＮＡおよびｓｉＲＮＡである。特に興味深い化合物の種類は、低分子の抗腫瘍物質、例えばアントラサイクリン（ａｎｔｈｒａｃｙｃｌｉｎ）誘導体、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、ドキソルビシン、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、エクシスリンド、シスレチノイン酸、スリンダク硫化物、メトトレキセート、ブレオマイシンおよびビンクリスチンである。より具体的な好ましい抗腫瘍物質は、プラチナ系抗腫瘍物質、すなわちシスプラチン、オキサリプラチン、ピコプラチンおよびカルボプラチンである。特に興味深い別の種類の化合物は抗生物質および抗真菌剤であり、さらに別の種類はステロイド剤および非ステロイド剤（ｎｏｎ−ｓｔｅｒｅｏｉｄ）のような抗炎症剤である。

治療薬は、内部の水性コンパートメント；疎水性の二分子層；または内葉および外葉の極性相間に位置することができる。好ましくは、治療薬はリポソーム内に封入される、すなわち内部の水性コンパートメントに存在する。

別の実施形態では、リポソームは診断薬を含んでなる。「診断薬」とは、標的組織の位置特定または疾患もしくは状態の診断のうち少なくともいずれかを支援する作用物質を意味する。非限定的な例としては、造影剤、微粒子、放射性作用物質、標的特異的作用物質、例えば該疾患または状態のうち少なくともいずれかに関連したマーカーに特異的に結合する作用物質などが考えられる。当業者には明らかなことであるが、いくつかの実施形態では、本発明は、リポソームが少なくとも１つの薬物のほかに診断薬も含んでなるリポソーム製剤に関する。

本発明のリポソームの物理化学的特徴
リポソームは単層であっても多層であってもよい。最も好ましくは、リポソームは単層である。リポソームの直径は、５０〜４００ｎｍ、好ましくは８０〜１６０ｎｍ、最も好ましくは９０〜１２０ｎｍであるべきである。

好ましくは、本発明の第２の態様のリポソーム製剤の多分散性指数（ＰＤＩ）は０．２を上回るべきではなく、より好ましくは０．１０以下である。この範囲のＰＤＩ値は、製剤中の比較的狭い粒度分布を表している。

上記から明らかとなるように、リポソームを構成する脂質のうち少なくとも１つが、リポソーム内にある場合にｓＰＬＡ_２の基質であることが好ましい。
１つの実施形態では、リポソームは、ｓｎ−２位の代わりにｓｎ−３位においてｓＰＬＡ_２によって加水分解される脂質を含んでなる。そのような非天然の脂質および非天然の脂質を含んでなるリポソームは、国際公開公報第２００６／０４８０１７号パンフレットに開示されており、前記文献の内容は参照により本願に組込まれる。

最も好ましい実施形態では、本発明で使用されるリポソームは、７０％のＤＳＰＣ、２５％のＤＳＰＧおよび５％のＤＳＰＥ−ＰＥＧを含んでなる。
治療薬がシスプラチンである場合、リポソームの内部は好ましくは０．９％のＮａＣｌを含んでなり、外部の緩衝液は１０ｍＭリン酸緩衝液、ｐＨ６．５、１ｍＭＮａＣｌおよび１０％スクロースを含んでなる。

医学的使用
好ましい実施形態では、ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームは、注射（非経口投与）、例えば皮下、筋肉内、腹腔内、静脈内、および髄腔内経路によって投与される。好ましい経路はボーラス注射または点滴の形式の静脈内投与である。

上述のように、リポソームは様々な治療薬を含んでなることができる。しかしながら、好ましい作用薬は低分子の抗腫瘍物質（本明細書中では抗新生物薬、細胞毒性薬または細胞増殖抑制剤とも呼ばれる）である。シスプラチンはこれらの化合物のうちの１つであり、ｓＰＬＡ２加水分解性リポソーム内に封入されたシスプラチンを治療的に使用可能であるという実証は、ｓＰＬＡ２加水分解性リポソーム内に封入された他の抗新生物薬も治療的に使用可能であること、すなわち、該抗新生物薬は、意図せぬ部位において、抗新生物薬を封入しているｓＰＬＡ２加水分解性リポソームの治療的使用に対して不利益となる濃度ではｓＰＬＡ２加水分解性リポソームから放出されないであろうことを示している。

好ましい実施形態では、治療薬を含んでなるｓＰＬＡ２加水分解性リポソームの投与は、遊離状態の治療薬の投与と比較して、該治療薬の低用量での投与を可能にする。これはいくつかの理由から可能である。第１に、治療薬のリポソーム封入は該治療薬の半減期を延長する。第２に、ｓＰＬＡ２加水分解の標的化作用により、ｓＰＬＡ２レベルが高い部位、例えば腫瘍において高濃度の遊離状態の治療薬がもたらされる。

別の好ましい実施形態では、治療薬を含んでなるｓＰＬＡ２加水分解性リポソームの投与は、遊離状態の治療薬の投与と比較して、該治療薬の高用量での投与を可能にする。これはｓＰＬＡ２加水分解性リポソームの標的化作用から可能であり、また、例えばｓＰＬＡ２加水分解性リポソーム内に封入されたシスプラチンが遊離シスプラチンと比較して腎毒性が低いことによっても分かる。

ＬｉＰｌａＣｉｓについて、ラットおよびマウスにおけるいくつかの非臨床的毒性試験において検討がなされた。これらの試験の全体的な目的は、この２つの動物種において単回投与および複数回投与の両方の最大耐用量（ＭＴＤ）を測定することであった。これらの試験は、医薬品の安全性に関する非臨床試験の実施基準（ＧＬＰ）に従って行なわれた。これらの試験では、上記２つの動物種はＬｉＰｌａＣｉｓに対して同程度の感受性であることが見出され、またＦＤＡのルール（参照文献：「産業界のためのガイダンス．薬物を成人健常被検者に初めて投与する臨床試験における最大安全初期量の算定法について（Ｇｕｉｄａｎｃｅ ｆｏｒ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ．Ｅｓｔｉｍａｔｉｎｇ ｔｈｅ Ｍａｘｉｍｕｍ Ｓａｆｅ Ｓｔａｒｔｉｎｇ Ｄｏｓｅ ｉｎ Ｉｎｉｔｉａｌ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｔｒｉａｌｓ ｆｏｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ｉｎ Ａｄｕｌｔ Ｈｅａｌｔｈｙ Ｖｏｌｕｎｔｅｅｒｓ）」、ＦＤＡ、２００５年７月）の適用により、ヒトでの相当する最大耐用量は治療サイクル当たり３０ｍｇであることが予測される。したがって、治療サイクルあたり８０ｍｇ以上のヒトＭＴＤは驚異的である。

封入シスプラチンの好ましい用量は、３週間間隔で１治療サイクル当たり８０ｍｇ〜１２０ｍｇ、３週間間隔で１治療サイクル当たり１２０〜１６０ｍｇ、３週間間隔で１治療サイクル当たり１６０ｍｇ〜２００ｍｇ、３週間間隔で１治療サイクル当たり２００ｍｇ〜２４０ｍｇ、および３週間間隔で１治療サイクル当たり２４０ｍｇ〜３００ｍｇである。

治療薬の投与間の時間も、治療薬の用量の低減／増加の議論に従って調節可能である。したがって、１つの実施形態では、治療薬の投与間の時間は、遊離状態の治療薬の投与間の時間と比較して延長される。別の実施形態では、治療薬の投与間の時間は、遊離状態の治療薬の投与間の時間と比較して短縮される。治療薬がシスプラチンである場合、投与間の時間は、例えば３週間より長くてもよいし、３週間未満でもよい。

好ましくは、本発明に従って治療される疾患はがんまたは炎症であり、好ましくはがんである。
治療方法
本発明の第２の態様は、本発明の第１の態様に記載されるような有効量のｓＰＬＡ２加水分解性リポソームを、該リポソームを必要とする患者に投与することを含んでなる治療方法である。この態様の具体的な実施形態は本発明の第１の態様から明白となろう。

腎毒性を低減する方法
本発明の第３の態様は、治療薬の腎毒性を低減する方法であって、該治療薬をｓＰＬＡ２加水分解性リポソームの中に封入することを含んでなる方法である。好ましくは、治療薬はシスプラチンのような抗新生物薬であり、かつ好ましくは、治療薬は該治療薬を必要とする患者に投与される。他の実施形態は本発明の第１の態様から明白となろう。

神経毒性を低減する方法
本発明の第４の（ｆｏｒｔｈ）態様は、治療薬の神経毒性を低減する方法であって、該治療薬をｓＰＬＡ２加水分解性リポソームの中に封入することを含んでなる方法である。好ましくは、治療薬はシスプラチンのような抗新生物薬であり、かつ好ましくは、治療薬は該治療薬を必要とする患者に投与される。他の実施形態は本発明の第１の態様から明白となろう。

胃腸毒性を低減する方法
本発明の第５の態様は、治療薬の胃腸毒性を低減する方法であって、該治療薬をｓＰＬＡ２加水分解性リポソームの中に封入することを含んでなる方法である。好ましくは、治療薬はシスプラチンのような抗新生物薬であり、かつ好ましくは、治療薬は該治療薬を必要とする患者に投与される。他の実施形態は本発明の第１の態様から明白となろう。

治療効果を延長する方法
本発明の第６の態様は、治療薬の治療効果を延長する方法であって、該治療薬をｓＰＬＡ２加水分解性リポソームの中に封入することを含んでなる方法である。好ましくは、治療薬はシスプラチンのような抗新生物薬であり、かつ好ましくは、治療薬は該治療薬を必要とする患者に投与される。他の実施形態は本発明の第１の態様から明白となろう。

参照文献
アンドレセン ＴＬ（Ａｎｄｒｅｓｅｎ ＴＬ）、Ｊ．Ｓ．、２００５年、「リポソームを用いたがん治療における先進的戦略：能動的かつ腫瘍特異的な薬物放出の問題点および展望（Ａｄｖａｎｃｅｄ ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ ｉｎ ｌｉｐｏｓｏｍａｌ ｃａｎｃｅｒ ｔｈｅｒａｐｙ：ｐｒｏｂｌｅｍｓ ａｎｄ ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ａｃｔｉｖｅ ａｎｄ ｔｕｍｏｒ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｄｒｕｇ ｒｅｌｅａｓｅ．）」、Ｐｒｏｇ Ｌｉｐｉｄ Ｒｅｓ．，Ｊａｎ；４４（１）：６８−９７．Ｅｐｕｂ ２００５ Ｊａｎ ２２． アンドレセン ＴＬ（Ａｎｄｒｅｓｅｎ ＴＬ）、Ｊ．Ｓ．、２００５年、「分泌型ホスホリパーゼＡ２により誘発されるリポソーム系プロドラッグおよび薬物のがん組織における活性化および放出（Ｔｒｉｇｇｅｒｅｄ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ａｎｄ ｒｅｌｅａｓｅ ｏｆ ｌｉｐｏｓｏｍａｌ ｐｒｏｄｒｕｇｓ ａｎｄ ｄｒｕｇｓ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ ｔｉｓｓｕｅ ｂｙ ｓｅｃｒｅｔｏｒｙ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ Ａ２．）」、Ｃｕｒｒ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ，Ｏｃｔ；２（４）：３５３−６２．

実施例１：ｓＰＬＡ２リポソーム（ＬｉＰｌａＣｉｓ）の調製
脂質中間体を、次のリン脂質の混合物（７０／２５／５（ｍｏｌ％）のＤＳＰＣ／ＤＳＰＧ／ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２０００）の噴霧乾燥により調製する。脂質をメタノールおよびクロロホルムに溶解する。脂質中間体を、抗がん剤の水溶液中で撹拌しながら水和する。このステップでは、リポソームは形成されるが広範な粒度分布を有し、また単層リポソームと多層リポソームとの混合物である。狭い粒度分布および単層リポソームを備えた生成物を得るために、水和混合物を、適切な細孔径のポリカーボネートフィルタを通して押出す。封入されていない抗がん剤を除去するために混合物を精製する。多くの技術、例えば透析、ゲル濾過および限外濾過を利用可能である。数リットル以上の範囲の調製物については、限外濾過が推奨の方法である。非経口投与が意図される調製物は、例えば濾過滅菌法によって滅菌しなければならない。

実施例２：マウスにおける有効性
方法
雌のＮＭＲＩヌードマウス（６〜８週）に、ヒト乳がん細胞株ＭＴ−３の細胞１×１０^７個を左脇腹へ皮下接種した。指数関数的に増殖する腫瘍を担持しているマウスだけを試験用に選択した。腫瘍が７０〜８０ｍｍ３の大きさに達したら治療を開始した。動物には、腫瘍移植後１３日目を開始として、尾静脈への静脈内注射で１週間に１用量（４ｍｇ／ｋｇのシスプラチン（Ｐｌａｔｉｎｏｌ（Ｒ））、ＬｉＰｌａＣｉｓまたは生理食塩水）を投与した。腫瘍の増殖を、２つの直交する直径の計測により１週間に３回評価し、また腫瘍の増殖を、相対的な腫瘍容積の計算により、開始時の様々な大きさに関して標準化した。体重を、１週間に３回計測した。最初の注射の４日後に血液試料を得て、コールターカウンターにより白血球および血小板を概算した。

結果：
ＬｉＰｌａＣｉｓを、ヌードマウスにおけるＭＴ−３乳がん（ｂｒｅａｓｔ）異種移植片を使用した有効性試験においてシスプラチンおよび生理食塩水と比較した。シスプラチンおよびＬｉＰｌａＣｉｓを、４ｍｇ／ｋｇの用量で毎週投与した。毒性のため、シスプラチンおよび生理食塩水の３回と比較してＬｉＰｌａＣｉｓは２回だけ注射を施用した。ＬｉＰｌａＣｉｓは遊離状態のシスプラチンよりも有意に良好に腫瘍の増殖を抑制した（図１）。この作用は初回投与の１週間後には明白であり、対照群の腫瘍が大きいために実験が終了するまで持続した。ＬｉＰｌａＣｉｓ治療群では１匹のマウスが死亡した。

ＬｉＰｌａＣｉｓは、シスプラチンのより高いバイオアベイラビリティをもたらし、かつ、より有力な抗腫瘍効果を引き起こすようであるが、遊離状態のシスプラチンよりも強い、体重減少および血小板減少を含む副作用を有する。

実施例３：ラットにおける薬物動態
方法：
ラット（ＢｒｌＨａｎ：ＷＩＳＴ＠ｍｏｌ（ＧＡＬＡＳ））に３ｍｇ／ｋｇのシスプラチンまたはＬｉＰｌａＣｉｓを注射し、血液を採取してヘパリン処理チューブ（Ｍｉｃｒｏｖｅｔｔｅ（Ｒ）ＣＢ ３００ Ｓａｒｓｔｅｄ）に入れた。試料は、１０分から７２時間まで得た。各サンプリング時点で血液量２５０μｌを採取し、直ちに氷浴槽に入れ、遠心分離（３０００×ｇ、５分）して血漿分画を得た。血漿が入ったチューブを発送まで凍結し、その後ＨＣｌ／ＨＮＯ３／Ｈ２Ｏ２（６０／５／３５、容積％）中で消化してからＩＣＰ−ＭＳを使用してプラチナ分析した。

結果および結論：
この実験から、ＬｉＰｌａＣｉｓは、遊離シスプラチンの１５分間に対して約２０〜２３時間のＴ１／２を有する、長時間循環性のシスプラチンのリポソーム形態であることが明らかとなった。ＬｉＰｌａＣｉｓの曲線下面積（ＡＵＣ）はシスプラチンの少なくとも５０倍であった。図２を参照のこと。

実施例４：ヌードマウスにおけるＰＫ／ＢＤ
方法：
雌のＢＡＬＢ／ｃヌードマウス（６〜８週）に、ヒト乳がん細胞株ＭＴ−３の細胞１×１０^７個を左脇腹および右脇腹へ皮下接種した。指数関数的に増殖する腫瘍を担持しているマウスだけを試験用に選択した。腫瘍が少なくとも３００ｍｍ３の大きさに達したら単回投与を行った。動物には、尾静脈への静脈内注射により３ｍｇ／ｋｇのシスプラチン（Ｐｌａｔｉｎｏｌ（Ｒ））またはＬｉＰｌａＣｉｓ）を投与した。時点を、１、２４、４８、７２および１６８時間とした。血液試料（５００μｌ）を屠殺の直前に得てヘパリン処理チューブ（Ｍｉｃｒｏｖｅｔｔｅ（Ｒ）ＣＢ ３００ Ｓａｒｓｔｅｄ）に移し、遠心分離して凍結した。死後、腫瘍、臓器および組織（腎臓、肝臓、後肢の大腿四頭筋および脾臓）を解剖し、生理食塩水中で洗浄し、急速凍結した。血漿中および腫瘍／組織中のプラチナ濃度を測定するために、試料をＨＣｌ／ＨＮＯ３／Ｈ２Ｏ２（６０／５／３５、容積％）中で消化し、ＩＣＰ−ＭＳに供した。

結果：
血漿中のプラチナ分析から、ＬｉＰｌａＣｉｓが血清中に高濃度で存在し、その作用が少なくとも１週間持続することが示された。血清中のＬｉＰｌａＣｉｓのレベルは、どの時点においても遊離シスプラチンより一桁以上高かった。ＬｉＰｌａＣｉｓはまた、腫瘍内に、腫瘍量１ｍｇあたり最大約４μｇ蓄積し、対して遊離シスプラチンは腫瘍１ｍｇあたり約１μｇであった。肝臓内のプラチナ蓄積に有意差はなかった。腎臓ではＬｉＰｌａＣｉｓの中程度の蓄積があったが、ＬｉＰｌａＣｉｓ治療群の動物由来の脾臓では最高レベルのプラチナを計測することができた。図３〜７を参照のこと。

ＰＫ／ＢＤの結論：
ＬｉＰｌａＣｉｓは、長時間循環性のリポソーム形態のシスプラチンである。ＬｉＰｌａＣｉｓは腫瘍に蓄積し、さらに腎臓および脾臓にも蓄積する。シスプラチンは、腫瘍内微小環境においてＬｉＰｌａＣｉｓから放出されうる。

実施例５：腎毒性
シスプラチンの治療的投与を受けているヒトにおいて、シスプラチンの主な副作用および用量制限毒性は腎毒性である。本研究では、ラットにおいてシスプラチンの腎毒性をＬｉＰｌａＣｉｓの腎毒性と比較した。

方法
６〜７週齢で体重１４５〜１７５ｇのウィスター（Ｗｉｓｔａｒ）ラットの雄５匹および雌５匹の群に、３ｍｇ／ｋｇのシスプラチンまたは３ｍｇ／ｋｇのＬｉＰｌａＣｉｓのいずれかを静脈注射した。

注射の２日後に各群から雄２匹および雌２匹を屠殺し、注射の７日後に各群から雄１匹および雌１匹を屠殺し、注射の１４日後に各群から残りの雄２匹および雌２匹を屠殺した。該動物を肉眼的病理検査に供し、絶対的および相対的な腎臓重量の記録を行った。組織病理検査を、全ての動物の腎臓、膀胱および脾臓について実施した。

結果および結論
剖検では、腎臓重量は概ねＬｉＰｌａＣｉｓを用いた治療後でより高く、病理組織検査からは、ＬｉＰｌａＣｉｓを用いた治療が、多病巣性の好塩基性尿細管／壊死組織片ならびに広範な尿細管の空胞化および拡張という形の腎臓の変性変化の重症度を明白に低減したことが示された。ＬｉＰｌａＣｉｓを用いた治療はおそらく、シスプラチンと比較して、白色脾髄／動脈周囲鞘の細胞密度の減少をより低頻度とした。結論として、ＬｉＰｌａＣｉｓはラットにおけるシスプラチンの腎毒性を明白に低減した。

実施例６：進行した腫瘍または難治性の腫瘍を有する患者におけるＬｉＰｌａＣｉｓ（リポソーム系シスプラチン製剤）の安全性および忍容性を評価するための第Ｉ相用量増加試験
試験の概要
主目的：
１．３週間ごとに投与されるＬｉＰｌａＣｉｓの安全性および忍容性の評価
２．３週間ごとに投与されるＬｉＰｌａＣｉｓの最大耐用量（ＭＴＤ）および推奨用量（ＲＤ）の決定
副次的目的：
３．３週間ごとに投与されるＬｉＰｌａＣｉｓの薬物動態（ＰＫ）の評価
４．３週間ごとに投与されるＬｉＰｌａＣｉｓの治療有効性の評価
試験設計：
非盲検、非ランダム化用量増加試験
試験集団：
標準的治療に適さない固形腫瘍を有する被験者
患者数：
観察される毒性に依存するので、患者の正確な数は定義することができない。３〜６人の患者のコホートを、ＭＴＤに達するまで各用量レベルで治療することになる。ＭＴＤを算定するために３０人の患者が必要とされる可能性も予想される。

適格性
参加規準：
１．組織学的または細胞学的に実証された、標準的治療に対して抵抗性であるかまたは治癒的療法が存在しない局所進行性または転移性の固形腫瘍。

２．≧１８歳であること。
３．推定余命が≧３か月であること。
４．ＥＣＯＧのパフォーマンスステータスが０〜２であること。

５．先の治療の急性毒性から、グレード１以下まで回復していること：
６．患者がシスプラチン投与を受けてから≧６か月が経過していなければならない。
７．患者が何らかの治験薬の投与を受けてから≧４週間が経過していなければならない。

８．患者が何らかの放射線療法または細胞毒性薬もしくは生物学的作用物質での治療を受けてから≧４週間（マイトマイシンまたはニトロソウレアについては≧６週間）が経過していなければならない。生理学的投与量のコルチコステロイドを用いた治療および前立腺がんについてのＬＨＲＨアゴニストを用いたホルモン療法以外のホルモン療法は認められない。

９．何らかの先行する外科手術、輸血またはＧＭ−ＣＳＦを用いた治療から≧２週間が経過していなければならない。しかしながら、エリスロポエチンの現行使用は許容されるであろう。

１０．次の臨床検査値によって証拠づけられるような適切な状態であること：
ａ．好中球の絶対数（ＡＮＣ）≧１．５×１０９／Ｌ
ｂ．ヘモグロビンが少なくとも９ｇ／ｄｌ（５．６ｍｍｏｌ／Ｌ）である
ｃ．血小板≧１００×１０９／Ｌ
ｄ．アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）およびアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）≦２．５×ＵＬＮ；既知の肝転移の場合はＡＬＴおよびＡＳＴ≦５×ＵＬＮ
ｅ．血清ビリルビン≦１．５ＵＬＮ
ｆ．アルカリフォスファターゼ≦２．５×ＵＬＮ
ｇ．クレアチニンおよび血液尿素が正常範囲内にある、ただし、クレアチニン・クリアランスが正常範囲（コッククロフト・ゴールト式によって計算して＞６０ｍＬ／分）にある場合を除く（追記１を参照）
１１．患者（男性および女性）は、試験の間に有効な避妊方法を実行する意思がなければならない。

１２．患者または法定代理人は、本試験の研究上の性質を理解し、治療に先立って、独立した倫理委員会（ＩＥＣ）が承認した書面のインフォームド・コンセント書式に署名しなければならない。

除外規準は下記：
１．活動性の無制御な出血または出血性素因（例えば活動性消化性潰瘍性疾患）。
２．非経口または経口の抗生物質治療を必要とする何らかの活動性感染症。

３．ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）または肝炎ウイルスによる既知の感染。
４．活動性心疾患、例えば直前６か月以内の心筋梗塞もしくはうっ血性心不全、症候性冠動脈疾患、または現時点で薬物治療を必要としている症候性不整脈。

５．既知または疑わしい活動性の中枢神経系（ＣＮＳ）転移。（ＣＮＳ転移の治療完了後８週間安定な患者は適格である。）
６．自己免疫性疾患。

７．切迫性もしくは症候性の脊髄圧迫または脳軟膜転移癌。
８．先在の神経病を有する、すなわち、グレードが＞１の運動神経毒性または感覚神経毒性（米国国立がん研究所 有害事象に関する共通毒性規準（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃｏｍｍｏｎ Ｔｏｘｉｃｉｔｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓ）（ＮＣＩ ＣＴＣＡＥ）第３．０版による定義）、ただしがんによる異常を除く。

９．シスプラチンまたはリポソームに対する既知の過敏性を有する。
１０．外科手術または放射線療法のうち少なくともいずれかを含む任意の種類の即時の待期的療法を必要とする。

１１．妊娠中または授乳中の女性患者（試験参加登録前に妊娠テストで陽性結果）。
１２．プロトコール要件に従う意思がないかまたは従うことができない。
試験手順：
有害事象（ＡＥ）：治験薬のインフォームド・コンセントへの署名から治験薬の最終投与を受けた後３０日まで。重大なＡＥを含む関連ＡＥは、ベースラインに戻るかまたは≦グレード１と判定されるまで追跡する。

理学的検査、生命徴候、パフォーマンスステータス、血液化学、尿検査：ベースラインおよび各サイクルにおいて週１回。
血液学：ベースライン、サイクル１において週２回（ｂｉ−ｗｅｅｋｌｙ）および他のサイクルにおいて週１回。

薬物動態（ＰＫ）用サンプリング：血液サンプルおよび尿サンプルをＰＫ評価のために得るべきである。セクション６．４ 臨床試験手順（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ）を参照のこと。

腫瘍の評価：ベースラインおよび３サイクルごと。
試験の評価：
理学的検査によって測定されるような安全性、実験上の毒性、ならびに有害事象の出現率および重症度
安全性の評価：ＮＣＩの有害事象に関する共通毒性規準（ＣＴＣＡＥ）第３．０版、実験上の評価（生化学、血液学）、生命徴候、神経学的検査を含む理学的検査、ＥＣＯＧパフォーマンスステータスおよび体重。

用量制限毒性（ＤＬＴ）によって決定されるようなＬｉＰｌａＣｉｓの最大耐用量および推奨用量。
臨床反応率は、ＲＥＣＩＳＴを使用してＸ線像上の規準によって決定されることになろう。

有効性の評価（適用可能な場合）：ＲＥＣＩＳＴによる全体的な腫瘍反応（ＣＲ、ＰＲ、ＳＤまたはＰＤ）。
試験の論理的根拠
用量およびスケジュールの選択の論理的根拠：
ヒトでの開始用量は、ＦＤＡの示唆する手法を使用して決定する（参照文献：産業界のためのガイダンス．薬物を成人健常被検者に初めて投与する臨床試験における最大安全初期量の算定法について（Ｇｕｉｄａｎｃｅ ｆｏｒ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ．Ｅｓｔｉｍａｔｉｎｇ ｔｈｅ Ｍａｘｉｍｕｍ Ｓａｆｅ Ｓｔａｒｔｉｎｇ Ｄｏｓｅ ｉｎ Ｉｎｉｔｉａｌ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｔｒｉａｌｓ ｆｏｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ｉｎ Ａｄｕｌｔ Ｈｅａｌｔｈｙ Ｖｏｌｕｎｔｅｅｒｓ）。ＦＤＡ、２００５年７月）。ラットのＭＴＤは３ｍｇ／ｋｇであり、ラットとヒトとの間の変換係数はＦＤＡのガイドラインに従って６．３である。これにより、ヒトの等価用量（ＨＥＤ）の０．５ｍｇ／ｋｇが得られる。

マウスのＭＴＤは６ｍｇ／ｋｇであり、マウスとヒトとの間の変換係数はＦＤＡのガイドラインに従って１２．３である。これにより、ヒトの等価用量（ＨＥＤ）の０．５ｍｇ／ｋｇが得られる。

したがって、ラットおよびマウスのＭＴＤがヒトの等価用量に変換されるとき、これら２つの動物種はＬｉＰｌａＣｉｓに曝露された時に同じ感度を有することが明らかである。

標準ヒト体重はガイドラインに従えば６０ｋｇであり、これは患者１人当たり３０ｍｇの用量に相当する（０．５ｍｇ／ｋｇ×６０ｋｇ＝３０ｍｇ）。安全係数３が適用されて、患者１人当たり１０ｍｇの開始用量が得られる。この用量は、健常者の体表面積を２ｍ２として、通常のシスプラチン製品の最も低い推奨用量（３〜４週ごとに一回量として投与される場合５０〜１００ｍｇ／ｍ２）の１／１０に相当する。

より高い安全係数（多くの場合１０）が使用されることが多いが、非臨床試験の知見は、ＬｉＰｌａＣｉｓの毒性はシスプラチンの本質的な毒性によって決まること、およびＬｉＰｌａＣｉｓは通常のシスプラチンと比較して毒性が低いことを示唆している。よって、被験者１人当たり１０ｍｇでの開始は十分に安全側にあるはずである。さらに、ＬｉＰｌａＣｉｓは完全に新しい薬物ではなく、極めてよく知られかつ広く用いられる薬物の新しい製剤であることに留意すべきである。

スケジュールおよび投与経路の論理的根拠：
リポソーム系シスプラチン製剤、例えばそれぞれアルザ・コーポレイション（ＡＬＺＡ Ｃｏｒｐ．）およびレギュロン・インコーポレイテッド（Ｒｅｇｕｌｏｎ Ｉｎｃ．）により開発されたＳＰＩ−０７７およびＬｉｐｏｐｌａｔｉｎの先の臨床第Ｉ相および第ＩＩ相試験では、薬物製品は主として３週間ごとに投与され、課された中間サイクル数は２〜４であった。これらの試験の一部においては、患者は合計６サイクルを受けることになっていた。

安全性および潜在的有効性の点で患者を最適に治療しうることを確実にするために、ＬｉＰｌａＣｉｓは、３週間ごとに最大３サイクルを、または調査者の見解で患者がさらなるサイクルから利益を得る場合はそれ以上のサイクルを、投与されることになる。

ＬｉＰｌａＣｉｓは、従来のシスプラチンのように点滴により静脈内投与されることになる。
試験についての説明
本試験は、進行がん患者におけるＬｉＰｌａＣｉｓの非盲検、用量増加、非ランダム化第Ｉ相試験である。

ＬｉＰｌａＣｉｓは、３週間ごとに最大３サイクル、調査者の判断において患者が治療から利益を得る場合かつ進行性の疾患または受け入れがたい毒性の証拠がない場合はそれ以上のサイクルで、投与されることになる。患者が治験に参加登録する場合、治験後に他の医療を利用することも検討されなければならない。

ＬｉＰｌａＣｉｓは、前の用量レベルから２０〜１００％増加して投与されることになる。ＭＴＤに達するために必要とされるレベルの数字は未知である。２０〜１００％の段階的用量増加は、調査者と治験依頼者との間で議論された後に毒性および薬物動態に基づいて行われることになる。

それぞれのコホートの最後の患者が初回サイクルを完了したならば、段階的用量増加について議論するために臨床（電話）検討会が組織されることになる。治験依頼者（リプラソーム・ファーマ（ＬｉＰｌａｓｏｍｅ Ｐｈａｒｍａ））との討議における同調査団は、ＬｉＰｌａＣｉｓの将来の第ＩＩ相試験で使用されるべきＭＴＤおよび推奨用量（ＲＤ）を決めることになる。

ＭＴＤは、３人または６人の患者のコホートにおいてＤＬＴを有する２人以上の患者での投薬計画ということになる。すべてのコホートについて完了し、かつＭＴＤが規定された後に；臨床検討会が組織されて、患者の結果を精査して次の用量を判断し、かつＬｉＰｌａＣｉｓのＲＤを決定することになろう。ＲＤは、通常はＭＴＤ（ＭＴＤ−１）を下回る用量レベルとなろう。ＲＤは、６人の患者のうち多くとも１人しか初回サイクルでＤＬＴを経験しない用量となる。

１用量レベル当たり３人の患者が登録され、患者の各コホートは３週間ごとに合計３サイクル以上、または疾患の進行もしくは受け入れがたい毒性が生じるまで、ＬｉＰｌａＣｉｓ投与を受けることになる（セクション６．５の用量制限毒性（ｄｏｓｅ−ｌｉｍｉｎｇ ｔｏｘｉｃｉｔｙ）の定義を参照）。コホート／用量レベルごとに、第２および第３の患者はそのコホートの第１の患者の初回サイクルの第１週の評価の後に同時に参加可能である。

点滴の持続時間は１時間となり、有害事象（例えば点滴反応）がより長い持続時間または点滴の一時停止を余儀なくする場合は３時間まで変更することも考えられる。
用量制限毒性（ＤＬＴ）が１コホート内の３人の患者のうち１人に生じれば、さらに３人の患者がそのレベルで治療を受けることになる。ＤＬＴが２／３または２／６の患者に生じた場合、次のより低い用量レベルが少なくとも患者６人に拡張されることになる。コホートの最後の患者は、次のより高い用量レベルへの増加が始まる前に３週間観察されることになる。

患者が毒性以外の理由で３週間以内に試験から外れる場合、患者はコホート内で交代することになる。
用量レベルの最後の患者は、後続の用量レベルの最初の患者が治療を受ける前に少なくとも３週間観察されなければならない。

制吐薬：
最初に、試験治療は予防的な鎮吐薬を使用せずに開始する。２人の患者が悪心または嘔吐のうち少なくともいずれかのグレード２以上を経験したら、次の制吐薬の予防的使用が問題の患者および残りの患者について導入される。
ステップ１：５−ＨＴ３アンタゴニスト（例えばグラニセトロン、オンダンセトロン）
ステップ２：第１日：グラニセトロン１ｍｇ（ｉｖ）およびデキサメタゾン１０ｍｇ（ｉｖ）、第２〜４日：デキサメタゾン６ｍｇ（経口）
ステップ３：第１日：アプレピタント１２５ｍｇ（経口）、グラニセトロン１ｍｇ（ｉｖ）、デキサメタゾン１０ｍｇ（ｉｖ）；第２〜３日：アプレピタント（ｐｒｅｐｉｔａｎｔ）８０ｍｇ（経口）、デキサメタゾン６ｍｇ（経口）；第４日：デキサメタゾン６ｍｇ（経口）。

患者がグレード２以上の悪心または嘔吐のうち少なくともいずれかを経験した場合、治療用制吐薬が投与されてもよく、例えばステップ０：メトクロプラミドである。再治療時には、この患者は調査者の判断で予防用制吐薬を投与されてもよい。制吐薬はエラスムス医療センター（Ｅｒａｓｍｕｓ ＭＣ）およびライデン大学医療センター（ＬＵＭＣ）の手順方法に従って投与されることになる。

水分補給：
水分補給は慣例的には使用されないであろう。
しかしながら、患者に腎毒性が観察されれば、事前水分補給および事後水分補給の両方がこの患者の残りのサイクルについて導入されることになる。水分補給は、治療前の４時間にわたる１０００ｍＬのグルコース２．５％／ＮａＣｌ ０．４５％、および治療後の８時間にわたる３０００ｍＬのグルコース２．５％／ＮａＣｌ ０．４５％で構成される。

ＭＴＤの定義に従い、腎毒性が３人または６人の患者のコホートの２人以上の患者に観察されるのであれば、事前水分補給および事後水分補給が残りの患者の残りのサイクルについて導入されることになる。

しかしながら、腎毒性が様々なコホートの異なる患者に観察される場合、これはさらなる水分補給の導入を始める理由でもあると考えられる。これは、調査者および治験依頼者との段階的用量増加テレビ会議の際に決定されることになる。

試験集団
本試験の対象となる集団は、組織学的または細胞学的に実証された、標準的治療に対して抵抗性であるかまたは治癒的療法が存在しない局所進行性または転移性の固形腫瘍を有する患者である。

患者の数
患者の正確な数は、観察される毒性に依存するので定義することはできない。ＬｉＰｌａＣｉｓの第ＩＩ相試験のためのＭＴＤおよび推奨用量が決定されるまで、３〜６人の患者のコホートが各コホートで治療されることになる。最大３０人の評価可能な患者が試験に参加して該試験の主要目的を満たすことが期待される。しかしながら、そうするために必要であれば、より多くの患者が登録されることになる。

参加に先立ち、患者はこの試験について書面のインフォームド・コンセントを示さなければならず、かつセクション３．３に列挙された選択基準すべてを満たさなければならない。インフォームド・コンセントに署名したが参加規準または除外規準のうち少なくともいずれかを満たさない患者は、スクリーニング不適格症例として定義される。同意したすべての患者について、調査者は、スクリーニング番号、患者のイニシャル、および（該当する場合は）スクリーニング不適格の理由を文書化するスクリーニング記録を維持することになっている。この記録の写しは調査者の試験ファイルに保持されなければならない。

第１相試験の結果
ＰＫ：
薬物動態学的データは、ＬｉＰｌａＣｉｓがシスプラチンの長時間循環製剤であることを確認する。下記が観察されている：
・観察されたＴ_１／２は、１時間未満であるシスプラチンのＴ_１／２と比較して、７８時間であること。図８〜１１を参照されたい。
・薬物動態プロファイルはＣｍａｘおよびＡＵＣの両方の点において線形である。図１２〜１４を参照のこと。
・尿中排泄はシスプラチンと比較して有意に変化している。尿は０時間から９６時間まで収集され、排泄は投与量の０〜２０％である。シスプラチン尿中排泄は３時間以内に９０％を上回る。

Ｔｏｘ：
治療サイクル当たり１２０ｍｇまでの用量で投与されたＬｉＰｌａＣｉｓは、腎毒性、耳毒性および神経毒性（ｎｅｕｒｏｔｉｘｉｃｉｔｙ）の兆候を示さない。さらに、悪心嘔吐の形の胃腸毒性は、ＬｉＰｌａＣｉｓを投与されている患者では報告されていない。図１５および図１６を参照のこと。

以下に、上記実施形態から把握できる技術思想を付記として記載する。
［付記１］
ヒトにおけるがんを治療するための医薬組成物において、前記医薬組成物はｓＰＬＡ２加水分解性リポソームを含み、前記ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームは、
２０〜４５％（モル／モル％）のアニオン性脂質と、
３〜６％（モル／モル％）のポリマーがコンジュゲートされた脂質と、
４０〜７５％（モル／モル％）の中性脂質と、
アントラサイクリン、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、ピコプラチン、ドキソルビシン、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、エクシスリンド、シスレチノイン酸、スリンダク硫化物、メトトレキセート、ブレオマイシンおよびビンクリスチンからなる群から選択される低分子の抗腫瘍物質と、
を含む、医薬組成物。
［付記２］
前記アニオン性脂質はＤＳＰＧであり、前記中性脂質はＤＳＰＣであり、前記ポリマーがコンジュゲートされた脂質はＤＳＰＥ−ＰＥＧである、付記１に記載の医薬組成物。
［付記３］
前記医薬組成物は、遊離状態の低分子の抗腫瘍物質を使用する場合と比較して腎毒性を低減する、付記１又は２に記載の医薬組成物。
［付記４］
前記医薬組成物は、遊離状態の低分子の抗腫瘍物質を使用する場合と比較して神経毒性を低減する、付記１乃至３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［付記５］
前記医薬組成物は、遊離状態の低分子の抗腫瘍物質を使用する場合と比較して胃腸毒性を低減する、付記１乃至４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［付記６］
前記低分子の抗腫瘍物質はシスプラチンである、付記１乃至５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［付記７］
前記医薬組成物は、ボーラス注射または点滴により静脈内に投与される、付記１乃至６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
［付記８］
がんを治療又は予防するための医薬品の製造におけるｓＰＬＡ２加水分解性リポソームの使用において、
前記ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームは、
２０〜４５％（モル／モル％）のアニオン性脂質と、
３〜６％（モル／モル％）のポリマーがコンジュゲートされた脂質と、
４０〜７５％（モル／モル％）の中性脂質と、
アントラサイクリン、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、ピコプラチン、ドキソルビシン、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、エクシスリンド、シスレチノイン酸、スリンダク硫化物、メトトレキセート、ブレオマイシンおよびビンクリスチンからなる群から選択される低分子の抗腫瘍物質と、
を含む、使用。
［付記９］
がんを治療又は予防するための医薬品であって腎毒性が低減されている医薬品の製造におけるｓＰＬＡ２加水分解性リポソームの使用において、
前記ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームは、
２０〜４５％（モル／モル％）のアニオン性脂質と、
３〜６％（モル／モル％）のポリマーがコンジュゲートされた脂質と、
４０〜７５％（モル／モル％）の中性脂質と、
アントラサイクリン、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、ピコプラチン、ドキソルビシン、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、エクシスリンド、シスレチノイン酸、スリンダク硫化物、メトトレキセート、ブレオマイシンおよびビンクリスチンからなる群から選択される低分子の抗腫瘍物質と、
を含む、使用。
［付記１０］
がんを治療又は予防するための医薬品であって神経毒性が低減されている医薬品の製造におけるｓＰＬＡ２加水分解性リポソームの使用において、
前記ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームは、
２０〜４５％（モル／モル％）のアニオン性脂質と、
３〜６％（モル／モル％）のポリマーがコンジュゲートされた脂質と、
４０〜７５％（モル／モル％）の中性脂質と、
アントラサイクリン、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、ピコプラチン、ドキソルビシン、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、エクシスリンド、シスレチノイン酸、スリンダク硫化物、メトトレキセート、ブレオマイシンおよびビンクリスチンからなる群から選択される低分子の抗腫瘍物質と、
を含む、使用。
［付記１１］
がんを治療又は予防するための医薬品であって胃腸毒性が低減されている医薬品の製造におけるｓＰＬＡ２加水分解性リポソームの使用において、
前記ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームは、
２０〜４５％（モル／モル％）のアニオン性脂質と、
３〜６％（モル／モル％）のポリマーがコンジュゲートされた脂質と、
４０〜７５％（モル／モル％）の中性脂質と、
アントラサイクリン、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、ピコプラチン、ドキソルビシン、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、エクシスリンド、シスレチノイン酸、スリンダク硫化物、メトトレキセート、ブレオマイシンおよびビンクリスチンからなる群から選択される低分子の抗腫瘍物質と、
を含む、使用。
［付記１２］
低分子の抗腫瘍物質の腎毒性を低減するための方法において、前記方法は、ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームに前記低分子の抗腫瘍物質を封入する工程を含み、前記ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームは、
２０〜４５％（モル／モル％）のアニオン性脂質と、
３〜６％（モル／モル％）のポリマーがコンジュゲートされた脂質と、
４０〜７５％（モル／モル％）の中性脂質と、
アントラサイクリン、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、ピコプラチン、ドキソルビシン、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、エクシスリンド、シスレチノイン酸、スリンダク硫化物、メトトレキセート、ブレオマイシンおよびビンクリスチンからなる群から選択される低分子の抗腫瘍物質と、
を含む方法。
［付記１３］
低分子の抗腫瘍物質の神経毒性を低減するための方法において、前記方法は、ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームに前記低分子の抗腫瘍物質を封入する工程を含み、前記ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームは、
２０〜４５％（モル／モル％）のアニオン性脂質と、
３〜６％（モル／モル％）のポリマーがコンジュゲートされた脂質と、
４０〜７５％（モル／モル％）の中性脂質と、
アントラサイクリン、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、ピコプラチン、ドキソルビシン、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、エクシスリンド、シスレチノイン酸、スリンダク硫化物、メトトレキセート、ブレオマイシンおよびビンクリスチンからなる群から選択される低分子の抗腫瘍物質と、
を含む方法。
［付記１４］
低分子の抗腫瘍物質の胃腸毒性を低減するための方法において、前記方法は、ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームに前記低分子の抗腫瘍物質を封入する工程を含み、前記ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームは、
２０〜４５％（モル／モル％）のアニオン性脂質と、
３〜６％（モル／モル％）のポリマーがコンジュゲートされた脂質と、
４０〜７５％（モル／モル％）の中性脂質と、
アントラサイクリン、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、ピコプラチン、ドキソルビシン、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、エクシスリンド、シスレチノイン酸、スリンダク硫化物、メトトレキセート、ブレオマイシンおよびビンクリスチンからなる群から選択される低分子の抗腫瘍物質と、
を含む方法。

Claims (1)

1. ヒトにおけるがんを治療するための医薬組成物において、前記医薬組成物はｓＰＬＡ２加水分解性リポソームを含み、前記ｓＰＬＡ２加水分解性リポソームは、
   ２０〜４５％（モル／モル％）のアニオン性脂質と、
   ３〜６％（モル／モル％）のポリマーがコンジュゲートされた脂質と、
   ４０〜７５％（モル／モル％）の中性脂質と、
   アントラサイクリン、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、ピコプラチン、ドキソルビシン、パクリタキセル、５−フルオロウラシル、エクシスリンド、シスレチノイン酸、スリンダク硫化物、メトトレキセート、ブレオマイシンおよびビンクリスチンからなる群から選択される低分子の抗腫瘍物質と、
   を含む、医薬組成物。