JP2016516762A - 炎症性障害の治療 - Google Patents

Abstract

本発明は、炎症性障害の治療において使用するためのナリジクス酸およびナリジクス酸のアナログを提供する。

Description

本発明は、炎症性障害を治療するためのナリジクス酸およびアナログの使用に関する。

免疫駆動性炎症事象は多数の慢性炎症性疾患の重大な原因であるが、長期の炎症は組織破壊を誘発することがあり、結果として罹患した器官の多大な損傷および結果としての障害を生じさせることがある。多くの場合、これらの疾患の正確な病因は不明である。これらの疾患には、疾患の正確な原因となる特徴は解明されていないが炎症性および組織破壊性態様が身体の独自の組織に向けられた不適切な免疫応答の結果であることが公知である自己免疫疾患が含まれる。状態には、複数の器官に関係する状態、例えば全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）および強皮症が含まれる。他のタイプの自己免疫疾患は、特定の組織または器官、例えば筋骨格組織（例、関節リウマチ、強直性脊椎炎）、消化管（例えば、クローン（Ｃｒｏｈｎ’ｓ）病および潰瘍性大腸炎）、中枢神経系（例えば、アルツハイマー（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ）病、多発性硬化症、運動ニューロン疾患、パーキンソン（Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ）病および慢性疲労症候群）、膵臓β細胞（例えば、インスリン依存性真性糖尿病）、副腎（例えば、アジソン（Ａｄｄｉｓｏｎ’ｓ）病）、腎臓（例えば、グッドパスチャー（Ｇｏｏｄｐａｓｔｕｒｅ’ｓ）症候群、ＩｇＡ腎症、間質性腎炎）、外分泌腺（例えば、シェーグレン（Ｓｊｏｇｒｅｎ’ｓ）症候群および自己免疫性膵炎）、皮膚（例えば、乾癬およびアトピー性皮膚炎）および肺（例えば、喘息）に関係する可能性がある。

さらに、病因がある程度同定されている慢性炎症性疾患が存在する。これらはさらに広範囲にわたる組織／器官の破壊を示すことがあり、例えば変形性関節症、歯周疾患、糖尿病性腎症、慢性閉塞性肺疾患、アテローム性動脈硬化症、移植片対宿主病、慢性骨盤内炎症性疾患、子宮内膜症、慢性肝炎および結核症などの状態が含まれる。これらの状態は、先進国世界および開発途上世界両方における疾病の主要原因であり、多くの場合に最新療法による治療を不十分にしか受けていない。例えば、皮膚構造の炎症（皮膚炎）は、酒さ性座瘡、尋常性座瘡、アレルギー性接触皮膚炎、血管性浮腫、アトピー性皮膚炎、水疱性類天疱瘡、皮膚薬物反応、多形性紅斑、紅斑性狼瘡、光線過敏性皮膚炎、乾癬、乾癬性関節炎、強皮症および蕁麻疹を含む一連の一般的な状態である。気道の疾患、例えば喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）および特発性肺性線維症（ＩＰＦ）および消化管の炎症性疾患、例えばクローン病および潰瘍性大腸炎もまた集団における疾病の重大な原因を表す。これらの疾患は、幅広い数々の療法を使用して治療されるが、それらの多くは極めて重篤な副作用を有する。

炎症駆動性状態に対する最新治療には、（あるとすれば）中和抗体、細胞毒物薬、コルチコステロイド剤、免疫抑制剤、抗ヒスタミン剤および抗ムスカリン剤が含まれる。これらの治療には、不便な投与経路およびコンプライアンスの問題を引き起こす重篤な副作用が関連していることが多い。

新規な効果的および安全な治療が必要とされている。
アネキシン−Ａ１（リポコルチン−１）は、１９７０年代後半に初めて記述された３６ｋＤａのタンパク質である。アネキシン−Ａ１は、多数の細胞型において見いだされており、外因性および内因性グルココルチコステロイド剤の抗炎症活性を調節する際に重要な役割を果たすことが公知である。アネキシン−Ａ１はステロイド剤の抗炎症活性を強化し、ステロイド剤はアネキシン−Ａ１ノックアウトマウスでの動物炎症モデルにおいて無効であるが、アネキシン−Ａ１自体は動物炎症モデルにおいて有効である（Ｐｅｒｒｅｔｔｉ Ｍ．ａｎｄ Ｄａｌｌｉ Ｊ．Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ（２００９）１５８，ｐ９３６−９４６）。

不活性アネキシン−Ａ１は、グルココルチコイド受容体刺激の核作用によって細胞内に放出される。不活性アネキシン−Ａ１は、細胞膜へ移行し、プロテインキナーゼＣによってリン酸化されて抗炎症性タンパク質として放出される。ホスファターゼＰＰ２Ａは、直接脱リン酸化によるアネキシン−Ａ１の抗炎症活性の不活性化およびプロテインキナーゼＣの不活性化の原因となる（Ｙａｚｉｄ Ｓ．ｅｔ ａｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｐｏｒｔｓ（２０１０）６２，ｐ５１１−５１７）。ＰＰ２Ａの阻害剤は強力な抗炎症剤を提供するであろうと仮定されている。

本発明は、炎症性疾患の治療におけるナリジクス酸およびナリジクス酸のアナログの使用に関する。

驚くべきことに、ナリジクス酸（Ｉ）およびナリジクス酸の一部のアナログが炎症状態を治療することに有効であることを見出した。

ナリジクス酸および一部のアナログは、内因性アネキシン−Ａ１の抗炎症活性を強化することによるホスファターゼＰＰ２Ａの強力な阻害剤であることを見出した。ナリジクス酸は、腎経路によって急速に排泄され、このため不良な全身性薬物動態を有するので、尿路感染症を治療するために最も頻回に使用される抗生物質である。典型的には、この薬剤は抗菌活性を達成するためには経口投与経路による１日４回の治療を必要とする。

ナリジクス酸もしくはナリジクス酸アナログまたはそれらの医薬上許容される塩の使用は、例えば上述した炎症性疾患であるがそれらに限定されない炎症性疾患の治療において有効であることを見出した。
そこで、本発明によると、ナリジクス酸およびナリジクス酸のアナログは、炎症性疾患を治療するために使用できる。

ナリジクス酸によるヒトマスト細胞からのヒスタミン正味放出率（％）の阻害を表す図である。 ナリジクス酸によるヒトマスト細胞からのプロスタグランジンＤ２放出の阻害を表す図である。 ナリジクス酸の濃度増加に応答したヒトマスト細胞からのアネキシン−Ａ１の放出を表す図である。 喘息のマウスモデルにおける鼻腔内経路を介して投与されるナリジクス酸によるオボアルブミン誘導性ＢＡＬＦ好酸球数の阻害を表す図である。 喘息のオボアルブミン誘導性マウスモデルにおけるナリジクス酸による全ＢＡＬＦ細胞数の好酸球率の阻害を表す図である。

ナリジクス酸（Ｉ）またはナリジクス酸の医薬上許容される塩の投与は、ある範囲の炎症状態の治療のために有用である。

本発明のまた別の態様によると、一般式（ＩＩ）：

（式中、
ＸおよびＸ_１は、独立してＣＨまたはＮを表す；
Ｘ_２は、Ｃ（Ｒ_２）またはＮを表す；
Ｘ_４は、Ｃ（Ｒ_４）またはＮを表す；
Ｒ_１は、Ｈ、ＣＦ_３、ＣＯＮＨ_２、ＣＮ、ハロゲン、ＮＨ_２、ＮＨ−アルキル、アルキル、シクロアルキルまたはフェニルを表し、１つ以上のＲ_６で置換されていてもよい；Ｒ_１は、Ｒ_２とともに環の一部を形成してもよい；

Ｒ_２は、Ｈ、ＣＦ_３、ＣＯＮＨ_２、ＣＮ、ハロゲン、ＮＨ_２、アルキル、Ｏ−アルキルまたはＳ−アルキルである；Ｒ_２は、Ｒ_１とともに環の一部を形成してもよく、この環は、Ｃ、Ｎ、ＳおよびＯから選択される１個以上の原子を含有する５員もしくは６員の飽和もしくは不飽和環である；

Ｒ_３は、Ｈ、ＣＦ_３、ＣＯＮＨ_２、ＣＮ、ハロゲン、ＮＨ_２、アルキル、Ｏ−アルキル、ピリジル、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルを表し、１つ以上のＲ_６で置換されていてもよい；Ｒ_３は、Ｒ_４とともに環の一部を形成してもよい；

Ｒ_４は、Ｈ、ＦまたはＯ−アルキルである；Ｒ_４は、Ｒ_３とともに環の一部を形成してもよく；この環は、Ｃ、Ｎ、ＳおよびＯから選択される１個以上の原子を含有する５員の飽和もしくは不飽和環である；

Ｒ_５は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、アルキル、Ｏ−アルキルまたはＮＨ_２である；
Ｒ_６は、Ｆ、アルキル、ＮＨ_２、ＮＨ−アルキル、ＣＨ_２ＮＨ_２またはＯＨである）の化合物またはそれらの医薬上許容される塩は、炎症状態の治療または予防のために使用できる。

場合により、Ｒ_１、Ｒ_２およびＲ_３は、独立してＣＦ_３、ＣＯＮＨ_２、ＣＮ、ハロゲンまたはＮＨ_２であってよい。

アルキルは、１〜１０個の炭素原子、好ましくは１〜６個の炭素原子、より好ましくは１〜３個の炭素原子を有する直鎖状もしくは分岐鎖状アルキル基を意味する。アルキルの好ましい例は、メチル、エチル、ｎ−プロピルおよびイソプロピルである。

シクロアルキルは、３〜１４個の炭素原子および０個の環状ヘテロ原子を有し、ならびに単環もしくは、縮合環系、架橋環系およびスピロ環系を含む複数の環を有する飽和もしくは部分飽和環式基であって、シクロアルキルはＣＦ_３、ＣＯＮＨ_２、ＣＮ、ハロゲン、ＮＨ_２、ＮＨ−アルキル、アルキル、シクロアルキルまたはフェニルから選択される１つ以上の置換基によって置換されていてもよい飽和もしくは部分飽和環式基を意味する。

ヘテロシクロアルキルは、１〜１４個の炭素原子および窒素、硫黄または酸素から選択される１〜６個のヘテロ原子を有し、ならびに単環もしくは、縮合環系、架橋環系およびスピロ環系を含む複数の環を有する、飽和もしくは部分飽和環式基であって、シクロアルキルはＣＦ_３、ＣＯＮＨ_２、ＣＮ、ハロゲン、ＮＨ_２、ＮＨ−アルキル、アルキル、シクロアルキルおよびフェニルから選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよい飽和もしくは部分飽和環式基を意味する。ヘテロシクロアルキルの好ましい例は、ピペリジン、ピペラジンおよびピロリジンである。

言及できる本発明の実施形態には、シクロアルキルおよび／またはヘテロシクロアルキルが未置換である実施形態が含まれる。

当業者であれば、本明細書での治療についての言及は、確定された状態の予防ならびに治療にまで及ぶことを理解するであろう。

式（ＩＩ）の化合物には、一部の公知のキノロン系抗生物質が含まれる。キノロン系抗生物質は、広域スペクトル抗生物質であることが公知である。キノロン系抗生物質は化学療法殺菌薬であり、細菌性ＤＮＡが巻き戻しおよび複製するのを防止することによって機能する。公知のキノロン系抗生物質には：
第一世代：シノキサシン、フルメキン、オキソリン酸、ピロミド酸、ピペミド酸、ロソキサシン
第二世代：シプロフロキサシン、エノキサシン、フレロキサシン、ロメフロキサシン、ナジフロキサシン、ノルフロキサシン、オフロキサシン、ペフロキサシン、ルフロキサシン
第三世代：バロフロキサシン、グレパフロキサシン、レボフロキサシン、パズフロキサシン、スパルフロキサシン、テマフロキサシ、トスフロキサシン
第四世代：クリナフロキサシン、ガチフロキサシン、ゲミフロキサシン、モキシフロキサシン、シタフロキサシン、トロバフロキサシン、プルリフロキサシン
開発中：ガレノキサシン、デラフロキサシン
獣医学的使用：ダノフロキサシン、ジフロキサシン、エンロフロキサシン、イバフロキサシン、マルボフロキサシン、オルビフロキサシン、サラフロキサシンが含まれる。

本発明において使用するための式（ＩＩ）の化合物には、上述の公知のキノロン系抗生物質および新規な化合物、例えば以下の化合物が含まれる（がそれらに限定されない）。

本発明において使用するための化合物には、塩、例えばナトリウム、カリウム、アンモニウム、エチレンジアミン、アルギニン、ジエチルアミン、ピペラジンもしくはＮ−メチルグルカミド塩が含まれるが、さらにまたそれらの代謝産物およびプロドラッグにまで及ぶと理解されている。最も適切には、遊離酸もしくは塩が使用される。

本発明において使用するための化合物、またはそれらの医薬上許容される塩はキラルであってよく、本発明は、式（ＩＩ）の任意のジアステレオマーおよびエナンチオマーを含むことは理解されるであろう。さらに、本発明は、式（Ｉ）および／または式（ＩＩ）の化合物の任意の同位体誘導体を含むことも理解されるであろう。

疑念を回避するために、式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物は、それらの天然もしくは非天然同位体形の何れかにある既定の原子を含有していてよい。この点において、言及できる本発明の実施形態には：
ａ）式（Ｉ）および／または式（ＩＩ）の化合物は、同位体濃縮されていない、または化合物の何れかの原子に関して標識されていない実施形態；および
ｂ）式（Ｉ）および／または式（ＩＩ）の化合物は、同位体濃縮されている、または化合物の１つ以上の原子に関して標識されている、実施形態が含まれる。

本明細書での「同位体誘導体」に関する言及は、これら２つの実施形態の２番目に関する。本発明の特定の実施形態では、式（Ｉ）および／または式（ＩＩ）の化合物は、同位体濃縮されている、または（化合物の１つ以上の原子に関して）１つ以上の安定性同位体で標識されている。そこで、言及できる本発明の化合物には、例えば、同位体濃縮されている、または例えばジュウテリウムなどの１つ以上の原子で標識されている式（Ｉ）および／または式（ＩＩ）の化合物が含まれる。

式（ＩＩ）の化合物の好ましい例には、シノキサシン、フルメキン、オキソリン酸、ピロミド酸、ピペミド酸およびロソキサシンが含まれる。

本発明によるナリジクス酸もしくは式（ＩＩ）の化合物またはそれらの医薬上許容される塩は：複数の器官に関係する自己免疫疾患、例えば全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）および強皮症、特定の組織もしくは器官、例えば筋骨格組織（例えば、関節リウマチ、強直性脊椎炎）、消化管（例えば、クローン病および潰瘍性大腸炎）、中枢神経系（例えば、アルツハイマー病、多発性硬化症、運動ニューロン疾患、パーキンソン病および慢性疲労症候群）、膵臓β細胞（例えば、インスリン依存性真性糖尿病）、副腎（例えば、アジソン病）、腎臓（例えば、グッドパスチャー症候群、ＩｇＡ腎症、間質性腎炎）、外分泌腺（例えば、シェーグレン症候群および自己免疫性膵炎）、皮膚（例えば、乾癬およびアトピー性皮膚炎）および肺（例えば、喘息）；慢性炎症性疾患、例えば変形性関節症、歯周疾患、糖尿病性腎症、慢性閉塞性肺疾患、アテローム性動脈硬化症、移植片対宿主病、慢性骨盤内炎症性疾患、子宮内膜症、慢性肝炎および結核症；ＩｇＥ媒介性（Ｉ型）過敏症、例えば鼻炎、喘息、アナフィラキシーおよび皮膚炎などを含むがそれらに限定されない炎症性疾患を治療するために使用される。皮膚炎の状態には、光線性角化症、酒さ性座瘡、尋常性座瘡、アレルギー性接触皮膚炎、血管性浮腫、アトピー性皮膚炎、水疱性類天疱瘡、皮膚薬物反応、多形性紅斑、紅斑性狼瘡、光線過敏性皮膚炎、乾癬、乾癬性関節炎、強皮症および蕁麻疹が含まれる。眼の状態、例えば糖尿病性網膜症、黄斑変性、脈絡膜新血管膜、類嚢胞黄斑浮腫、黄斑部網膜上膜形成症、黄斑円孔、ドライアイ、ブドウ膜炎および結膜炎もまた治療されてよい。特に、ナリジクス酸もしくは式（ＩＩ）のアナログまたはそれらの医薬上許容される塩は、慢性変性疾患、例えば関節リウマチ、変形性関節症または骨粗鬆症；慢性脱髄疾患、例えば多発性硬化症；呼吸器疾患、例えば喘息または慢性閉塞性肺疾患；炎症性腸疾患、例えば潰瘍性大腸炎またはクローン病；皮膚学的状態、例えば乾癬、強皮症またはアトピー性皮膚炎；歯科疾患、例えば歯周病または歯肉炎；糖尿病性腎症；ループス腎炎；ＩｇＡ腎症；糸球体腎炎；全身性エリテマトーデス；移植片対宿主病；加齢黄斑変性、結膜炎、糖尿病性網膜症、脈絡膜新血管膜、類嚢胞黄斑浮腫、黄斑部網膜上膜形成症、黄斑円孔、ドライアイまたはブドウ膜炎を含む眼科学的状態を治療するために使用される。

炎症性疾患の治療では、局所投与によるナリジクス酸およびナリジクス酸のアナログを使用することが有益な場合がある。局所的に使用する場合は、本発明の化合物は：特定の組織または器官、例えば消化管（例えば、クローン病および潰瘍性大腸炎）、皮膚（例えば、乾癬およびアトピー性皮膚炎）および肺に関係する自己免疫疾患；慢性炎症性疾患、例えば慢性閉塞性肺疾患および過敏症、例えば鼻炎、喘息、アナフィラキシーおよび皮膚炎を含むがそれらに限定されない炎症性疾患を治療するために使用される。皮膚炎の状態には、光線性角化症、酒さ性座瘡、尋常性座瘡、アレルギー性接触皮膚炎、血管性浮腫、アトピー性皮膚炎、水疱性類天疱瘡、皮膚薬物反応、多形性紅斑、紅斑性狼瘡、光線過敏性皮膚炎、乾癬、乾癬性関節炎、強皮症および蕁麻疹が含まれる。特に、本発明の化合物は、呼吸器疾患、例えば喘息または慢性閉塞性肺疾患；炎症性腸疾患、例えば潰瘍性大腸炎またはクローン病；皮膚の状態、例えば乾癬、強皮症またはアトピー性皮膚炎および歯科疾患、例えば歯肉炎および歯周疾患を治療するために使用される。

ナリジクス酸もしくは式（ＩＩ）の化合物またはそれらの塩は、本発明によると、患者にまた別の治療薬が投与される場合に、または本発明の化合物が他の治療薬と組み合わせて提供される場合に使用されてよいが、このとき治療薬はコルチコステロイド剤（例には、コルチゾール、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、ジヒドロコルチゾン、フルドロコルチゾン、プレドニゾン、３５プレドニゾロン、デフラザコート、フルニソリド、ベコナーゼ、メチルプレドニゾロン、トリアムシノロン、ベタメタゾンおよびデキサメタゾンが含まれる）、細胞毒性薬、疾患修飾性抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）（例にはアズルフィジン、アウロチオマレイン酸塩、ブシラミン、クロラムブシル、シクロホスファミド、レフルノミド、メトトレキセート、ミゾリビン、ペニシラミンおよびスルファサラジンが含まれる）、免疫抑制剤（例には、アザチオプリン、シクロスポリン、ミコフェノレートが含まれる）、ＣＯＸ阻害剤（例にはアセクロフェナク、アセメタシン、アルコフェナク、アルミノプロフェン、アロキシピリン、アムフェナク、アミノフェナゾン、アントラフェニン、アスピリン、アザプロパゾン、ベノリレート、ベノキサプロフェン、ベンジダミン、ブチブフェン、セレコキシブ、クロルテノキサシン、サリチル酸コリン、クロメタシン、デキスケトプロフェン、ジクロフェナク、ジフルニサル、エモルファゾン、エピリゾール、エトドラク、フェクロブゾン、フェルビナク、フェンブフェン、フェンクロフェナク、フルルビプロフェン、グラフェニン、サリチル酸ヒドキシルエチル、イブプロフェン、インドメタシン、インドプロフェン、ケトプロフェン、ケトロラク、ラクチルフェネチジン、ロキソプロフェン、メフェナム酸、メタミゾール、モフェブタゾン、モフェゾラク、ナブメトン、マプロキセン、ニフェナゾン、オキサメタシン、フェナセチン、ピペブゾン、プラノプロフェン、プロピフェナゾン、プロクアゾン、ロフェコキシブ、サリチルアミド、サルサレート、スリンダク、スプロフェン、チアラミド、チノリジン、トルフェナム酸、ゾメピラクが含まれる）、中和抗体（例には、エタネルセプトおよびインフリキシマブが含まれる）、抗生物質（例にはドキシサイクリンおよびミノサイクリンが含まれる）から選択される。

ナリジクス酸もしくは式（ＩＩ）の化合物またはそれらの医薬上許容される塩を疼痛療法のために使用される薬物と組み合わせて使用することは有益であることが多いであろう。そのような別の薬物は、鎮静剤または非鎮静剤、例えばバクロフェンまたは神経因性疼痛剤、例えばガバペンチンであってよい。使用されてよい他の化合物には：非ステロイド抗炎症薬（例えば、アセトアミノフェン、アセチルサリチル酸、ナプロキセン）、麻薬性鎮痛剤、局所麻酔薬、ＮＭＤＡアンタゴニスト、神経弛緩剤、抗痙攣薬、鎮痙薬、抗うつ薬または筋弛緩剤が含まれる。

本発明の化合物の抗炎症活性は、実施例において記載するように、インビトロまたはインビボアッセイにおいて適切に特徴付けることができる。ＩｇＥが抗原投与されたヒトマスト細胞から放出されたヒスタミン（実施例１）およびＰＧＤ２（実施例２）は、どちらも用量依存法でナリジクス酸治療によって阻害される。さらに、アネキシン−Ａ１の放出（実施例３）は、ナリジクス酸による治療によって用量依存法で増加する。

本発明の化合物の抗炎症活性は、それらの抗菌活性とは関連しておらず、それらの抗炎症作用はナリジクス酸もしくは式（ＩＩ）のアナログの非抗菌濃度で観察することができる。そこで、本発明のまた別の態様によると、ナリジクス酸（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）のアナログまたはそれらの医薬上許容される塩は、ナリジクス酸もしくはそのアナログまたはそれらの塩の量、用量または濃度が実質的な抗生物質活性を有していない場合に炎症状態の治療または予防において使用することができる。細菌感染症が疾患の構成要素を表さない状況では、ナリジクス酸もしくは式（ＩＩ）のアナログまたはそれらの医薬上許容される塩の抗生物質用量未満の使用は、菌耐性の生成を導く可能性がある抗菌活性への不必要な曝露を回避するであろう。

本発明のさらなる態様によると、ナリジクス酸もしくは式（ＩＩ）の化合物またはそれらの医薬上許容される塩は、グルココルチコステロイド剤の抗炎症作用を強化するために使用できる。この活性は、適切なインビトロおよびインビボアッセイの使用によって証明されている。そこで本発明の化合物とステロイド剤との併用は、伝統的な治療量以下の、およびこのため大きく強化された抗炎症活性を備える有害ではない用量のステロイド剤の使用を可能にする。ナリジクス酸もしくは式（ＩＩ）の化合物またはそれらの医薬上許容される塩は、患者にさらに１種以上のグルココルチコステロイド剤が投与される場合、または本発明の化合物が１種以上のグルココルチコステロイド剤と組み合わせて提供される場合に、本発明によって使用されてよい。本発明において使用できるグルココルチコステロイド剤には、ベクロメタゾン、ベタメタゾン、ブデゾニド、コルチゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、フルチカゾン、メプレドニゾン、モメタゾン、パラメタゾンおよびプレドニゾロンが含まれるがそれらに限定されない。特に好ましいのは、デキサメタゾン、プレドニゾロン、コルチゾン、ジヒドロコルチゾンおよびヒドロコルチゾンと組み合わせた使用である。

本発明の化合物は、炎症状態を治療するための抗炎症剤として使用できる。一部の場合には、上述した疾患には、微生物感染症が付随する可能性がある。そのような感染症は、真菌性、ウイルス性または細菌性の場合がある。例えば喘息およびＣＯＰＤ両方の増悪には肺の同時感染症が結び付いている場合がある。例えばアトピー性皮膚炎などの皮膚炎症性疾患にはさらに局所感染症が結び付いている場合がある。本発明の化合物は、微生物感染症の存在下または非存在下で炎症を治療するために使用できる。微生物感染症が存在する場合、本発明の化合物は、患者に抗生物質もまた投与される場合、または本発明の化合物が抗生物質と組み合わせて投与される場合に使用されてよい。

本明細書に記載した化合物は、何らかの便宜的方法で投与するために調製されてよく、このため本発明はさらにナリジクス酸もしくは式（ＩＩ）のアナログまたはそれらの医薬上許容される塩を、所望であれば、１種以上の医薬上許容される希釈剤または担体と共に混合物中に含む医薬組成物もまた含んでいる。

任意の適切な投与経路を使用できる。例えば、経口、局所、非経口、眼内、経直腸、経膣、吸入、経口腔、舌下および鼻腔内送達経路の何れかが適切な場合がある。

局所投与のために適切な医薬組成物が好ましい。疾患の部位への活性薬剤を局所送達するための任意の適切な投与経路を使用できる。肺、皮膚または消化管への局所投与のために適切な組成物が特に好ましい。局所投与のための調製物の様々なタイプの例には、軟膏剤、ローション剤、クリーム剤、ゲル剤、フォーム剤、スプレー剤、エーロゾル剤、散剤、カプセル剤またはインヘラーまたは吸入器において使用するためのカートリッジ、滴剤、噴霧療法のための液剤／懸濁剤、坐剤、停留浣腸剤およびペッサリーが含まれる。

全身性投与のために適合するナリジクス酸もしくは式（ＩＩ）のアナログまたはそれらの医薬上許容される塩の医薬組成物は、本発明のまた別の態様を表す。経口医薬組成物が好ましい場合がある。経口投与のための調製物の様々なタイプの例には、カプセル剤、錠剤、ペレット剤および液体組成物が含まれる。非経口組成物もまた好ましい場合がある。

活性薬剤の用量は、状態の性質および程度、患者の年齢および状態ならびに当業者には公知の他の因子に依存するであろう。典型的な用量は、包含される調製物のタイプに依存して０．１〜１００ｍｇ、例えば１０〜１００ｍｇの有効成分である。好ましくは、用量は、１日１〜３回投与される。本発明の組成物中の活性薬剤の用量は、抗生物質活性を有することができる、または抗生物質用量未満の場合がある。好ましくは、活性薬剤は、実質的な抗生物質活性を有していない量で存在する。抗生物質活性は、ナリジクス酸もしくは式（ＩＩ）のアナログの濃度が感染症状態に関係している病原細菌の増殖に臨床的に重要な活性を有していないであろうことを意味する。感受性の細菌菌株については、これはおよそ１μｇ／ｍＬであろう。

組成物は、１種以上のステロイド剤および／または別の治療薬をさらに含んでいてよい。典型的には、ナリジクス酸もしくは式（ＩＩ）の化合物またはそれらの医薬上許容される塩および１種以上のステロイド剤を含む組成物は、本製剤の０．００１％〜５％（ｗｔ／ｗｔ）の範囲内のステロイド剤を含むことになる。好ましくは、ステロイド剤は通常、上述の本発明の化合物の相乗作用があるために製剤の１％（ｗｔ／ｗｔ）未満の治療量以下の用量で存在するが、特定用量は使用される特定のステロイドに依存することになる。例えば、ナリジクス酸が使用される場合、ナリジクス酸は、本組成物中に製剤の０．００１％〜５％（ｗｔ／ｗｔ）の範囲内で存在し、ステロイド剤は製剤の１％（ｗｔ／ｗｔ）未満の治療用量で存在する。

ナリジクス酸は、一般には例えば式（ＩＩ）などのナリジクス酸アナログの合成を可能にするいくつかの修飾に適した多段階合成経路を通して調製される。

本発明において使用するための式（ＩＩ）のナリジクス酸アナログは、下記のスキームに示した多段階合成手順によって調製されてよい。
この合成は、一般式（ＩＩＩ）の二置換ベンゼンまたはピリジン化合物から出発する環化によって進行する。

（式中、Ｒは、当業者に公知の任意の適切な基である）

出発物質は、次にＣａｍｐｓ環化を通して環化されて一般式（ＩＩＩａ）および（ＩＩＩｂ）を生じさせる。

式（ＩＩＩａ）の４−キノロン誘導体は、その後単離し、さらに反応させて例えば下記の４−キノロン誘導体を形成することができる。

式（ＩＩ）の化合物またはそれらの医薬上許容される塩の抗炎症活性は、ヒトマスト細胞からのヒスタミンまたはＰＤＧ_２の放出を阻害する能力またはアネキシン−Ａ１の放出を促進する能力を評価することによって決定できる。

以下の実施例では本発明を具体的に例示する。
実施例

実施例１：ナリジクス酸によるヒトマスト細胞からのヒスタミン放出の阻害
手順：ヒト由来索状組織マスト細胞は下記の方法を使用して培養した。市販で入手できるＣＤ３４^＋幹細胞は、１００ｎｇ／ｍｌのヒトＳＣＦ、５０ｎｇ／ｍｌのＩＬ−６および１ｎｇ／ｍｌのＩＬ−３ならびに１００μｇ／ｍｌのペニシリン／ストレプトマイシン（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ社、英国ロンドン）が補給されたＳｔｅｍＳｐａｎ（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社、フランス国グルノーブル）無血清培地中で２週間培養した。８週間後、細胞は１０％のＦＣＳを含むＳｔｅｍＳｐａｎ中で培養した。細胞を毎週新規な培地中へ継代させた。マスト細胞形態の顕微鏡検査、ｃ−キットおよびＦｃＲε１染色（ＦＡＣＳによる）によって確証後に細胞を１１〜１８週間にわたる実験に使用した。薬物作用を評価するために、ナリジクス酸は、１０％のＦＣＳ培地中で培養した２×１０^５個のＣＤＭＣ（索状組織由来マスト細胞）のアリコートとともに５分間インキュベートした。

ヒスタミン放出の測定
市販で入手できる酵素イムノアッセイを使用して上清中に放出されたヒスタミンを検出および定量した（ＳＰＩ ｂｉｏ社、フランス国ストラスブール）。アッセイは、製造業者の標準手順にしたがって実施した。提供された試薬を使用して０．３９〜５０ｎＭの範囲にわたるヒスタミンの標準曲線を調製し、次に６０分間以内にマイクロプレートリーダーで光学密度を（４０５ｎｍで）読み取った。一部の場合には、ヒスタミンの総細胞含量は、抗原投与前の細胞の凍結融解法によって確定した。

これらの実験からの結果は図１に示した。データは、ナリジクス酸による炎症メディエーターであるヒスタミンの用量依存性阻害を明白に証明している。

実施例２：ナリジクス酸によるヒトマスト細胞からのプロスタグランジンＤ_２放出の阻害
ヒト索状組織由来マスト細胞は、実施例１に記載した方法を使用して培養した。

ＰＧＤ_２放出の測定
市販で入手できる酵素イムノアッセイ（Ｃａｙｍａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社、米国ミシガン州）を使用して、上清中に放出されたＰＧＤ_２を検出および定量した。アッセイは製造業者の標準手順にしたがって実施した。提供された試薬を使用して７８〜１０，０００ｐｇ／ｍＬの範囲にわたるＰＧＤ_２の標準曲線を調製し、次に６０分間以内にマイクロプレートリーダーで光学密度を（４０５ｎｍで）読み取った。

これらの実験からの結果は図２に示した。データは、ナリジクス酸による炎症性プロスタノイドＰＧＤ_２の用量依存性阻害を具体的に例示する。

実施例３：ナリジクス酸はヒトマスト細胞からのアネキシン−Ａ１（Ａｎｘ−Ａ１）の放出を促進する
ヒト索状組織由来マスト細胞は、実施例１に記載した方法を使用して培養した。
馴化培地中のＡｎｘ−Ａ１タンパク質レベルは、ＥＬＩＳＡによって決定した。手短には、９６ウエルの平底ＥＬＩＳＡプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ社、英国グロスターシャー）は、重炭酸塩バッファー（ｐＨ９．６）中の１μｇの抗Ａｎｘ−Ａ１ ｍＡｂ １Ｂを用いてコーティングし、４℃で一晩インキュベートした。重炭酸塩バッファー中で洗浄した後、コーティングされていない可能性がある部位は室温で１時間にわたり１％のＢＳＡを含有する１００μＬのＰＢＳを用いてブロックした。サンプルアリコート（１００μＬ）またはＡｎｘ−Ａ１標準溶液（ＰＢＳ中の０．１％のＴｗｅｅｎ−２０中で調製された；濃度は１０〜０．００１μｇ／ｍＬの範囲にわたる）を３７℃で１時間加えた。ＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎ−２０中での徹底的な洗浄後、１００μＬのポリクローナルウサギ抗ヒトＡｎｘ−Ａ１血清（Ｚｙｍｅｄ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社、英国ペイズリー；ＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎ−２０中で１：１，０００の比率で希釈）をアルカリホスファターゼ（１：１，０００；Ｓｉｇｍａ社）に共役結合したロバ抗ウサギＩｇＧとのインキュベーション前に加えた（３７℃で１時間）。１００μＬのｐ−ニトロフェニルホスフェート（重炭酸塩バッファー中で１ｍｇ／ｍＬ、ｐＨ９．６）の添加によって発色させた。吸光度はマイクロプレートリーダー（Ｔｉｔｅｒｔｅｋ（商標）、オーストリア国ウィーン）内で（６２０ｎｍの参照フィルターを用いて）４０５ｎｍで読み取った。試験サンプル中のＡｎｘ−Ａ１濃度は、標準曲線に対して読み取ってｎｇ／ｍｌとして表示した。

図３に示した結果は、ナリジクス酸の濃度増加に応答したヒトマスト細胞から放出された抗炎症性アネキシン−Ａ１の増加を強調している。

実施例４：喘息のマウスモデルにおいて肺に局所投与されたナリジクス酸
局所投与されたナリジクス酸の作用を喘息のマウスモデルにおいて試験した。１群８匹の雌性ＢＡＬＢ／ｃ系マウスは、試験の第１日および第１４日に腹腔内注射によってオボアルブミン（ＯＶＡ、１０ｍｇ）へ感作させた。第２０日、２１日、２２日および２３日に、動物は鼻腔内投与または５０μｌのリン酸緩衝食塩液（ＰＢＳ、非抗原投与群）のどちらかによって肺に投与される抗原投与量のオボアルブミン（５０μｇ）を受けた。ＯＶＡを抗原投与された動物は、さらに肺内へ吸入するための鼻腔内投与によって与えられたＰＢＳビヒクルまたはナリジクス酸（０．３ｍｇ／ｋｇ（体重））もまた受けた。これを第２１〜２３日の各オボアルブミン抗原投与の３０分前および６時間後、さらに最終抗原投与日と実験の終了日の間の日である第２４日に投与した。最終ＯＶＡ抗原投与の４８時間後、マウスは塩酸ケタミン（Ｎａｒｋｅｔａｎ、２ｍｇ／マウス）および塩酸キシラジン（Ｒｏｍｐｕｎ、０．０７ｍｇ／マウス）の組み合わせを用いて麻酔をかけ、頸動脈瀉血によって犠死させた。

気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬ）は下記のように入手した。気管挿管した。リン酸緩衝食塩液（ＰＢＳ）を洗浄液として使用し、３容積（０．４ｍｌ；０．３ｍｌ；０．３ｍｌ；計１ｍＬ）を静かに注入し、１ｍＬのＢＤシリンジを使用して連続３回の機会に抜去し、次にエッペンドルフチューブ（約１ｍｌ）中に入れた。
これらのバッチを次に机上型エッペンドルフ遠心機（５分／３，５００ｒｐｍ／４℃）中で遠心した。上清を除去し、細胞プラグは６００μｌのＰＢＳ中にボルテックスミキサー上で蓋を閉じたチューブの内容物を強力に攪拌することによって再懸濁させた。次に３００μｌの各懸濁液を取り出し、マーク付きのサンプルチャンバー内に入れた。フィルターカード（Ｓｈａｎｄｏｎフィルターカード、ブラウン、０．４ｍｌ以下のサンプルに使用するため、参照番号５９９１０２３）をサンプルチャンバーとマーク付き顕微鏡スライド（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｓｈａｎｄｏｎ Ｃｙｔｏｓｌｉｄｅ、被覆顕微鏡スライド、参照番号５９９１０５６）との間に予め組み立て、クリップを用いて一緒に固定し、指定の位置に遠心機の内側に直立位置で配置した。

血液分析装置（Ｓｙｓｍｅｘ ＸＴ−２０００ｉＶ）上で得られたＢＡＬＦからの細胞数。ＢＡＬＦ細胞数の統計学的比較は、マンホイットニー（Ｍａｎｎ Ｗｈｉｔｎｅｙ）検定を使用して実施した。

このモデルの重要な態様は、オボアルブミン感作への免疫学的応答によって誘導されたＢＡＬＦ内への好酸球動員の評価である。予想されたように、ＯＶＡが抗原投与されて鼻腔内ＰＢＳが投与された場合に感作した動物（ＯＶＡ／ＯＶＡ／ビヒクル）は、抗原投与されなかった動物（ＯＶＡ／ＰＢＳ）と比較してＢＡＬＦ内の好酸球数の顕著な増加を証明した。しかし、ナリジクス酸の鼻腔内投与（ＯＶＡ／ＯＶＡ／ナリジクス酸）は、抗原投与されたビヒクル処置動物（ＯＶＡ／ＯＶＡ／ビヒクル）と比較して総ＢＡＬＦ好酸球数の顕著で統計的有意な（ｐ＜０．０５）４７％の減少を生じさせた（図４）。さらに、総細胞数のうちの好酸球のパーセンテージもまたナリジクス酸対ビヒクル処置群において顕著におよび統計的有意に（ｐ＜０．０５）４４％減少した（図５）。

これらのデータは、喘息のモデルにおいて肺に局所投与された場合のナリジクス酸の有効性を証明しており、経口吸入により投与された場合にこの状態のための治療としての可能性があることを指示している。

Claims (18)

1. 炎症性障害の治療または予防において使用するための式（Ｉ）のナリジクス酸もしくはアナログまたはそれらの医薬上許容される塩。
   
2. 前記炎症性疾患は、呼吸器疾患、例えば喘息または慢性閉塞性肺疾患、慢性変性疾患、例えば関節リウマチ、変形性関節症または骨粗鬆症、皮膚病変、例えば、乾癬、強皮症またはアトピー性皮膚炎、慢性脱髄疾患、例えば多発性硬化症、炎症性腸疾患、例えば潰瘍性大腸炎またはクローン病、歯科疾患、例えば歯周病または歯肉炎、全身性エリテマトーデス、糖尿病性網膜症、ループス腎炎、ＩｇＡ腎症または糸球体腎炎、移植片対宿主病または眼科状態である、請求項１に記載の使用のための化合物。
3. 前記化合物は、局所送達のために調製される、請求項１または請求項２に記載の使用のための化合物。
4. 前記化合物は、皮膚、肺または消化管への局所送達のために調製される、請求項３に記載の使用のための化合物。
5. 前記化合物は、皮膚への局所送達のために調製され、前記状態は例えば乾癬、強皮症またはアトピー性皮膚炎などの皮膚の状態である、請求項１〜請求項４のいずれかに記載の使用のための化合物。
6. 前記化合物は、肺への局所送達のために調製され、前記状態は例えば喘息または慢性閉塞性肺疾患などの肺の状態である、請求項１〜請求項４のいずれかに記載の使用のための化合物。
7. 前記化合物は消化管への局所送達のために調製され、前記状態は例えば潰瘍性大腸炎またはクローン病などの炎症性の腸疾患である、請求項１〜請求項４のいずれかに記載の使用のための化合物。
8. 前記状態は、例えば歯周病または歯肉炎などの歯科疾患である、請求項１〜請求項４のいずれかに記載の使用のための化合物。
9. 前記化合物は、全身性送達のために調製される、請求項１または請求項２に記載の使用のための化合物。
10. 前記治療は、１つ以上のグルココルチコステロイド剤、例えばベクロメタゾン、ベタメタゾン、ブデソニド、コルチゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、フルチカゾン、メプレドニゾン、モメタゾン、パラメタゾンまたはプレドニゾロンも投与される患者への前記化合物の投与を含む、請求項１〜請求項９のいずれかに記載の使用のための化合物。
11. 前記治療は、抗血管新生性ペプチド、例えばアンジオスタチン；抗血管新生性ステロイド剤、例えば酢酸アネコルタブ；ＶＥＧＦまたはＦＧＦのモジュレーター、例えばザクティマ；眼使用のために調製された非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、例えばフルルビプロフェン、ジクロフェナクおよびケトロラク；グルココルチコステロイド剤、例えばメチルプレドニゾロン；ロイコトリエンモジュレーター、例えばジロイトン；抗ヒスタミン剤、例えばセチリジン、ロラチジン、ケトチフェンなど；および一般的サイトカイン／増殖因子調節剤、例えばシクロスポリンＡ、ホスホジエステラーゼ阻害剤などから選択される他の治療薬も投与される患者への前記化合物の投与を含む、請求項１〜請求項１０のいずれかに記載の使用のための化合物。
12. 前記活性薬剤および前記他の治療薬は、組み合わせて提供される、請求項１０または請求項１１に記載の使用のための化合物。
13. 炎症性疾患の治療または予防において使用するための式（Ｉ）のナリジクス酸もしくはアナログまたはそれらの医薬上許容される塩を含む医薬組成物。
    
14. 局所送達のために適切である、請求項１３に記載の使用のための医薬組成物。
15. 前記化合物は、ナリジクス酸またはその医薬上許容される塩である、請求項１〜請求項１４のいずれかに記載の使用のための化合物または使用のための医薬組成物。
16. 前記ナリジクス酸アナログは、式（ＩＩ）の化合物またはその医薬的に許容可能な塩である、請求項１〜請求項１５のいずれかに記載の使用のための化合物または使用のための医薬組成物。
    
    （式中、
    ＸおよびＸ_１は、独立してＣＨまたはＮを表す；
    Ｘ_２は、Ｃ（Ｒ_２）またはＮを表す；
    Ｘ_４は、Ｃ（Ｒ_４）またはＮを表す；
    Ｒ_１は、Ｈ、ＣＦ_３、ＣＯＮＨ_２、ＣＮ、ハロゲン、ＮＨ_２、ＮＨ−アルキル、アルキル、シクロアルキルまたはフェニルを表し、１つ以上のＲ_６で置換されていてもよい；Ｒ_１は、Ｒ_２とともに環の一部を形成してもよい；
    Ｒ_２は、Ｈ、ＣＦ_３、ＣＯＮＨ_２、ＣＮ、ハロゲン、ＮＨ_２、アルキル、Ｏ−アルキルまたはＳ−アルキルである；Ｒ_２は、Ｒ_１とともに環の一部を形成してもよい；
    Ｒ_３は、Ｈ、ＣＦ_３、ＣＯＮＨ_２、ＣＮ、ハロゲン、ＮＨ_２、アルキル、Ｏ−アルキル、ピリジル、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルを表し、１つ以上のＲ_６で置換されていてもよい；Ｒ_３は、Ｒ_４とともに環の一部を形成してよい；
    Ｒ_４は、Ｈ、ＦまたはＯ−アルキルである；Ｒ_４は、Ｒ_３とともに環の一部を形成してもよい；
    Ｒ_５は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、アルキル、Ｏ−アルキルまたはＮＨ_２である；
    Ｒ_６は、Ｆ、アルキル、ＮＨ_２、ＮＨ−アルキル、ＣＨ_２ＮＨ_２またはＯＨである）
17. 式（Ｉ）のナリジクス酸もしくは式（ＩＩ）のナリジクス酸アナログまたはそれらの医薬的に許容可能な塩の投与により炎症状態を治療または予防するための方法。
    
    
    （式中、
    ＸおよびＸ_１は、独立してＣＨまたはＮを表す；
    Ｘ_２は、Ｃ（Ｒ_２）またはＮを表す；
    Ｘ_４は、Ｃ（Ｒ_４）またはＮを表す；
    Ｒ_１は、Ｈ、ＣＦ_３、ＣＯＮＨ_２、ＣＮ、ハロゲン、ＮＨ_２、ＮＨ−アルキル、アルキル、シクロアルキルまたはフェニルを表し、１つ以上のＲ_６で置換されていてもよい；Ｒ_１は、Ｒ_２とともに環の一部を形成してもよい；、
    Ｒ_２は、Ｈ、ＣＦ_３、ＣＯＮＨ_２、ＣＮ、ハロゲン、ＮＨ_２、アルキル、Ｏ−アルキルまたはＳ−アルキルである；Ｒ_２は、Ｒ_１とともに環の一部を形成してもよい；
    Ｒ_３は、Ｈ、ＣＦ_３、ＣＯＮＨ_２、ＣＮ、ハロゲン、ＮＨ_２、アルキル、Ｏ−アルキル、ピリジル、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルを表し、１つ以上のＲ_６で置換されていてもよい；Ｒ_３は、Ｒ_４とともに環の一部を形成してもよい；
    Ｒ_４は、Ｈ、ＦまたはＯ−アルキルである；Ｒ_４は、Ｒ_３とともに環の一部を形成してもよい；
    Ｒ_５は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、アルキル、Ｏ−アルキルまたはＮＨ_２である；
    Ｒ_６は、Ｆ、アルキル、ＮＨ_２、ＮＨ−アルキル、ＣＨ_２ＮＨ_２またはＯＨである）
18. （Ｉ）もしくは（ＩＩ）またはそれらの医薬上許容される塩の量は、実質的抗菌活性を有していない、請求項１〜請求項１７のいずれかに記載の使用のための化合物、使用のための組成物または方法。