JP2004531562A - ２−置換１，２，３，４−テトラヒドロキノリンおよびその誘導体、組成物ならびに方法 - Google Patents

Abstract

本発明は、式(Ｉ)：
【化１】

で示される新規な２−置換 １,２,３,４−テトラヒドロキノリン−6−オールおよびその誘導体；必要に応じてエストロゲンまたはプロゲスチンと併用するその医薬組成物；エストロゲン欠乏に関連する疾患の抑制方法；および内因性エストロゲンに対する異常な生理反応に関連する疾患の抑制方法を提供する。

Description

【背景技術】
【０００１】
本発明は、２−置換 １,２,３,４−テトラヒドロキノリンおよびその誘導体、該化合物を含む組成物、選択的エストロゲン受容体モジュレーターとしてのその使用ならびに骨量損失、心臓血管疾患および乳がんや子宮がんの抑制におけるその使用に関する。
生涯のうちの生殖性から非生殖性段階への移行である閉経は、月経の停止を特徴とし、平均５０歳で起こる。閉経後状態は、循環する性ホルモンのレベルの変化を特徴とし、そのうちで最も劇的なものは、１７β−エストラジオールの血漿レベルが閉経前の値の１０％以下まで低下することである。臨床的および疫学的研究から、閉経後状態が、多くの慢性疾患、著しい骨粗鬆症および心臓血管疾患にとって重要な危険因子であることが明らかにされている。現在の女性の寿命が約８０年であるという事実から見て、女性は、その生命の約１／３を閉経後の段階において過ごす。このことは、女性の健康における閉経後状態の慢性的影響に対する可能性が、今日、平均余命が著しく短かった世紀の変わり目における可能性よりも大きいことを意味する。
【０００２】
骨粗鬆症は、単位体積当りの骨密度の正味の損失を特徴とする疾患の一群を表す。この骨量損失およびその結果として生じる骨折の結果は、身体に対する適切な構造的支持を必要とする骨格の障害である。閉経後骨粗鬆症の影響に対して最も脆弱な骨組織は、骨梁である。この組織は、しばしばスポンジまたは海綿骨と呼ばれ、特に、骨の末端近く（関節の近く）および脊椎に集中している。小柱組織は、互いに内部接続する小さい類骨組織構造ならびに骨の外部表面および中心軸を形成するより硬く緻密な皮質組織を特徴とする。小柱の内部接続網状組織は、外部の皮質構造に横方向の支持を与え、全構造の生体力学的強度にとって極めて重要である。
【０００３】
月経の停止に続いて、大部分の女性は、３〜６年以内に骨の小柱区画の骨量の約２０％〜約６０％を失う。この急速な損失は、一般に、骨吸収および形成の増加に関連している。しかし、吸収サイクルの方が、主たるものであり、結果として骨量の正味損失が生じる。
閉経後骨粗鬆症では、それは、第１に、骨の衰弱および骨折をもたらす小柱の正味の再吸収および損失である。閉経後の小柱の損失を考慮すると、大部分の普通の骨折が、たとえば、脊椎、頚部および大腿および前腕などの重量荷担骨といったような小柱の支持に対する依存性が高い骨に関連するものであるということは驚くことではない。実際、股関節骨折、コリーズ骨折および脊椎粉砕骨折が、閉経後骨粗鬆症の顕著な特徴である。
【０００４】
合衆国だけで推定２５百万人の女性がこのような疾患に苦しんでいる。骨粗鬆症の結果は個人的に有害であり、その慢性化および広範囲かつ長期間のサポートの必要性（入院および在宅療養）により、大きな経済的損失の原因でもある。これは、高齢の患者において特に当てはまる。さらに、骨粗鬆症は、一般に生命にかかわる身体状態であると考えられていないが、高齢女性の股関節骨折には２０％〜３０％の死亡率が結びついている。この死亡率の高いパーセンテージを閉経後骨粗鬆症に直接関連させることができる。
【０００５】
心臓血管疾患は、女性の死亡の主たる原因である。男性と比較して、閉経後の女性は、相対的に心臓血管疾患から保護されている；しかし、この保護は、閉経後、徐々に失われてゆく。血清脂質を調節するエストロゲンの能力は、十分には理解されていないが、証拠により、エストロゲンが肝臓において過剰のコレステロールを除去するように働く低密度脂質（ＬＤＬ）受容体をアップレギュレートできるということが示される。さらに、エストロゲンが、コレステロールの生合成において何らかの効果をもつこと、および心臓血管の健康において他の有利な効果をもつことがわかっている。
【０００６】
現在のところ、一般に容認された、エストロゲンレベルの低下に由来する閉経後状態において生じる疾患の治療方法は、エストロゲン置換療法である。この療法は、いわゆる無対立エストロゲン置換療法(ＥＲＴ)措置におけるエストロゲン単独の投与という形、あるいはいわゆるホルモン置換療法(ＨＲＴ)措置におけるエストロゲンとプロゲスチンの併用投与という形をとる。しかし、乳房および子宮における副作用とかかわらなければならない閉経後の女性においては、エストロゲンの慢性投与に関連する大きな不利点がある。ＥＲＴを受けている女性は、使用の３〜６年後に、非使用者の３〜６倍の比率で子宮内膜癌になる；ＥＲＴを１０年間受けると、危険率の比は１０倍に増加する。
【０００７】
ＥＲＴのこれらの悪影響に対抗するために、プロゲスチンが子宮の刺激を制限するように作用し、それによって子宮ガンの危険率を低下させるので、併用ホルモン置換療法(ＨＲＴ)におけるエストロゲンとプロゲスチンの併用投与が採用される。
エストロゲン療法のこれらの既知の、予測あるいは懸念される不利点のために、慢性エストロゲン置換療法の処方および患者のコンプライアンスは、乏しいままである。合衆国では、ＥＲＴまたはＨＲＴが処方されている閉経後の女性のうち、１年を越えて療法を継続しているのは、４０％より少ないことが推定されている。
【０００８】
結果として、理想的は薬理学的プロフィールをもつ閉経後療法薬の開発が必要である：たとえば、乳房および子宮においてエストロゲンの副作用を生み出すことなく、骨格組織および心臓血管系においてエストロゲンの有利な効果を生み出す作用薬。このようなエストロゲンプロフィールをもっている作用薬は、エストロゲンが副作用を生み出す組織を迂回するかまたは組織において作用しなくなると同時に、特定の組織におけるエストロゲン欠乏の影響を覆すであろう。用語「選択的エストロゲン受容体モジュレーター」または「SERM」は、この組織選択的プロフィールを有するような化合物に適用されている。SERMは、乳房または子宮などの生殖組織におけるエストロゲンアンタゴニズムおよび／または最小(すなわち、臨床的に問題にならない)アゴニズムとともに、骨、肝臓などの１つまたはそれ以上の所望の標的組織におけるエストロゲンアゴニズムを生じる化合物として定義される。
【発明の概要】
【０００９】
本発明は、式：
【化１】

［式中、
R1は、−H、−OH、−O(C1−C4アルキル)、−OCOC6H5、−OCO(C1−C6アルキル)または−OSO2(C2−C6アルキル)；
R2およびR³はそれぞれ独立して、−H、−OH、−O(C1−C4アルキル)、−OCOC6H5、−OCO(C1−C6アルキル)、−OSO2(C2−C6アルキル)またはハロ；
R4は、1−ピペリジニル、1−ピロリジニル、メチル−1−ピロリジニル、ジメチル−1−ピロリジニル、4−モルホリノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジイソプロピルアミノまたは1−ヘキサメチレンイミノ；
nは、1、2または3；
Xは、−C(O)−または−CH₂−；および
Yは、−O−、−S−、−NH−、−NMe−または−CH₂−である］
の化合物またはそのエナンチオマーもしくは医薬的に許容しうる塩を提供する。
【００１０】
本発明の第２の態様において、本発明は、単独またはエストロゲンもしくはプロゲスチンと組み合わせて、治療有効量の式(Ｉ)の化合物および医薬的に許容しうる担体を含む医薬組成物を提供する。
本発明の別の態様において、本発明は、骨粗鬆症などの骨損失；高血圧、血栓症および低下血清コレステロールなどの心臓血管疾患といったようなエストロゲン欠乏の症状を軽減するための本発明化合物を用いる医療方法を提供する。
本発明の医療方法の別の態様において、本発明化合物は、子宮筋腫疾患または子宮線維症、子宮内膜症およびエストロゲン依存性ガンといったような内因性エストロゲンに対する異常な生理反応に関連する疾患状態の治療に用いられる。
【発明の詳細な記載】
【００１１】
本命最初に記載する化合物の記述に用いる一般的用語は、それらの通常の意味をもつ。たとえば、「C1−C6アルキル」は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、n−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシル、イソヘキシルなどの炭素原子数１〜６の直鎖または分枝脂肪族鎖を意味する。同様に、「C1−C4アルキル」は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、n−ブチルなどの炭素原子数１〜４の直鎖または分枝脂肪族鎖を意味する。同様に、用語「C1−C4アルコキシ」は、メトキシ、エトキシ、n−プロポキシ、イソプロポキシなどの酸素原子を介して結合したC1−C4アルキル基を意味する。
用語「NMe」は、メチルアミノを意味する。
用語「ハロ」は、ブロモ、クロロ、フルオロおよびヨードを意味する。
【００１２】
本明細書で用いる用語「立体異性体」は、同じ結合によって結合する同じ原子で構成されているが、互換性のない異なる三次元構造をもつ化合物を意味する。三次元構造は、立体配置と呼ばれる。本明細書で用いる用語「エナンチオマー」は、その分子が互いに重ね合わせることができない鏡像である２つの立体異性体を意味する。用語「キラル中心」は、４つの異なる基と結合する炭素原子を意味する。本明細書で用いる用語「ジアステレオマー」は、エナンチオマーでない立体異性体を意味する。さらに、１つのキラル中心のみにおいて異なる立体配置をもつ２つのジアステレオマーは、「エピマー」と称する。用語「ラセミ化合物」、「ラセミ混合物」または「ラセミ修飾」は、エナンチオマーの等部分の混合物を意味する。
【００１３】
本明細書で用いる用語「エナンチオマー濃縮」は、他方と比較した場合の１つのエナンチオマー量の増加を意味する。達成されたエナンチオマー濃縮を表現する簡便な方法は、以下の方程式：
【数１】

［式中、E¹は、第１のエナンチオマーの量であり、E²は、第２のエナンチオマーの量である］
を用いて見出されるエナンチオマー過剰または「ee」の概念である。したがって、ラセミ混合物中に存在するように、もし、２つのエナンチオマーの最初の比率が５０：５０であり、最終比率７０：３０を生じるのに十分なエナンチオマー濃縮が達成されるならば、最初のエナンチオマーに関するeeは４０％である。しかし、最終比率が９０：１０であるならば、第１のエナンチオマーに関するeeは８０％である。９０％以上のeeが好ましく、９５％以上のeeがより好ましく、９９％以上のeeが特により好ましい。エナンチオマー濃縮は、ガスクロマトグラフィーまたはキラルカラムを用いる高性能液体クロマトグラフィーなどの標準の技術および手順を用いて、当業者によって容易に決定される。適切なキラルカラム、溶離液およびエナンチオマー対の分離を達成するのに必要な条件の選択は、当業者の司式の範囲内である。さらに、J．Jacquesら、「Enantiomers 、 Racemates 、 and Resolutions」、John Wiley and Sons、Inc.、1981、およびE.L．ElielおよびS.H.Wilen,「Stereochemistry of Organic Compounds」、(Wiley−Interscience 1994)および欧州特許出願No．EP−A−838448、published April 29、1998に開示されたような公知の技術および手順を用いる当業者によって、式(Ｉ)の化合物の特別の立体異性体およびエナンチオマーを製造することができる。分割の例として、再結晶技術あるいはキラルクロマトグラフィーが挙げられる。
【００１４】
いくつかの本発明化合物は、１つまたはそれ以上のキラル中心を有し、種々の立体異性体配置で存在することができる。これらのキラル中心の結果として、本発明化合物は、ラセミ化合物、エナンチオマー混合物および個々のエナンチオマーならびにジアステレオマーおよびジアステレオマー混合物として存在する。このようなラセミ化合物、エナンチオマーおよびジアステレオマーのすべてが、本発明の範囲に包含される。
【００１５】
用語「R」および「S」は、本明細書では、有機化学において、キラル中心の特定の立体配置を示すのに通例用いられる意味で用いる。用語「R」(rectus＝右)は、結合に従って見た場合に、時計回りの関係の基優先度（最高から、次の最低へ）をもつキラル中心の立体配置が、最低の優先度の基に向かうことを意味する。用語「S」(sinister＝左)は、結合に従って見た場合に、反時計回りの関係の基優先度（最高から、次の最低へ）をもつキラル中心の立体配置が、最低の優先度の基に向かうことを意味する。基の優先度は、それらの原子番号に基づいている（原子番号が小さくなるように）。優先度の部分的リストおよび立体化学についての議論が、「Nomenclature of Organic Compounds：Principles and Practice」、(J.H．Fletcherら編、1974)、pages 103−120に記載されている。
【００１６】
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【化２】

は、頁の平面から前へ突き出す結合を意味する。
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【化３】

は、頁の平面から後ろへ突き出す結を意味する。
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【化４】

は、立体化学が限定されない結合を意味する。
本明細書で用いる用語「エストロゲン」は、たとえば、17β−エストラジオール、エストロン、結合型エストロゲン(プレマリン(登録商標))、ウマエストロゲン 17a−エチニルエストラジオールなどのエストロゲン様活性をもつステロイド化合物を含む。本明細書で用いる用語「プロゲスチン」は、たとえば、プロゲステロン、ノルエチルノドレル、ノンゲストレル、酢酸メゲウストロール、ノルエチンドロンなどのプロゲステロン様活性をもつ化合物を含む。
【００１７】
本発明の好ましい化合物は、Yが−O−である式(Ｉ)の化合物である。
特定のR3およびR4基もまた好ましい特徴を示す。たとえば、R4が1−ピロリジニル、1−ヘキサメチレンイミノまたは1−ピペリジニルである式(Ｉ)の化合物が好ましい。好ましい1−ピロリジニル、1−ヘキサメチレンイミノまたは1−ピペリジニル化合物のさらに好ましいサブグループは、R1、R2およびR³がそれぞれ独立して、−H、−OHまたは−OCH3である化合物を含む。
特に好ましい式(Ｉ)の化合物は、すべての前述の限定を有する化合物、すなわち、Yが−O−；R1、R2およびR³がそれぞれ独立して、−H、−OHまたは−OCH3、特に、R1およびR2が−OHで、R³が−H、またはR¹およびR³が−OHで、R²が−H；およびR4が1−ピロリジニルまたは1−ピペリジニルである化合物を含む。
【００１８】
式(Ｉ)の化合物の遊離塩基または酸型を本発明方法に用いることができるが、医薬的に許容しうる塩型を製造し、使用するのが好ましい。したがって、本発明方法に用いる化合物は、広範な種類の有機酸および無機酸ならびに塩基と医薬的に許容しうる酸または塩基付加塩を形成し、製薬化学において用いられることが多い生理的に許容しうる塩を含む。このような塩もまた本発明の一部である。このような塩を形成するのに用いる典型的な無機酸として、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸、次リン酸などが挙げられる。脂肪族モノおよびジカルボン酸、フェニル置換アルカン酸、ヒドロキシアルカン酸およびヒドロキシアルカンジオン酸、芳香族酸、脂肪族酸および芳香族スルホン酸などの有機酸から誘導される塩を用いることもできる。したがって、このような医薬的に許容しうる塩として、酢酸塩、フェニル酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、アクリル酸塩、アスコルビン酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、o−アセトキシ安息香酸塩、ナフタレン−2−安息香酸塩、臭化物、イソ酪酸塩、フェニル酪酸塩、b−ヒドロキシ酪酸塩、ブチン−1,4−ジオン酸塩、ヘキシン−1,4−ジオン酸塩、カプリン酸塩、カプリル酸塩、塩化物、桂皮酸塩、クエン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グリコール酸塩、ヘプタン塩、馬尿酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メタンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、イソニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、フタル酸塩、テレフタル酸塩、リン酸塩、一水素リン酸塩、二水素リン酸塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、プロピオレート、プロピオン酸塩、フェニルプロピオン酸塩、サリチル酸塩、セバシン酸塩、スクシン酸塩、スベリン酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、ピロ硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、スルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、p−ブロモフェニルスルホン酸塩、クロロベンゼンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、2−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフタレン−1−スルホン酸塩、ナフタレン−2−スルホン酸塩、p−トルエンスルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、酒石酸塩などが挙げられる。好ましい塩は、塩酸塩およびシュウ酸塩である。
【００１９】
医薬的に許容しうる付加塩を形成するのに用いる典型的な塩基は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、アルカリ炭酸塩または重炭酸塩、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウムなどである。さらに、たとえば、トリエチルアミン、ジメチルアミン、i−プロピルアミンといったようなアルキルアミンなどの有機塩基を用いて付加塩を形成してもよい。
医薬的に許容しうる酸または塩基付加塩は、典型的に、式(Ｉ)の化合物と等モルまたは過剰量の酸または塩基との反応によって形成される。反応物は、一般に、ジエチルエーテルまたは酢酸エチルなどの相互溶媒中で合わせる。通常、塩が約１時間〜１０日間以内に溶液から沈殿し、濾過によって単離するか、または溶媒を慣例の手段で取り除くことができる。
【００２０】
本発明の範囲に入ることを企図される化合物の特別の例として、以下の化合物およびその医薬的に許容しうる塩が挙げられるが、これらに限定されるものではない：
[6−メトキシ−2−(4−メトキシフェニル)−3,4−ジヒドロ−2H−キノリン−1−イル]−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)フェニル]メタノン；
(6−メトキシ−2−フェニル−3,4−ジヒドロ−2H−キノリン−1−イル)−[4−2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)フェニル]メタノン；
[6−ヒドロキシ−2−(4−ヒドロキシフェニル)−3,4−ジヒドロ−2H−キノリン−1−イル]−[4−2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)フェニル]メタノン；
(6−ヒドロキシ−2−フェニル−3,4−ジヒドロ−2H−キノリン−1−イル)−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)フェニル]メタノン；
6−メトキシ−2−フェニル−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン；
6−メトキシ−2−フェニル−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン；
2−(4−ヒドロキシフェニル)−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン−6−オール；
2−フェニル−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン−6−オール；
6−メトキシ−2−(4−メトキシフェニル)−1−[4−(2−ピロリジン−1−イル−エトキシ)ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン；
6−メトキシ−2−(3−メトキシフェニル)−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロ−キノリン；および
2−(3−ヒドロキシフェニル)−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロ−キノリン−6−オール；および
2−(4−ヒドロキシフェニル)−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン−6−オール。
【００２１】
式(Ｉ)の化合物は、公知の手順および技術を用いることによって製造され、当業者によって理解されることができる。Xが−C(O)−で、Yが−O−である式(Ｉ)の化合物を製造するための一般的合成反応工程式を反応工程式Ａに記載する（他に特記しない限り、すべての置換基は、前述のとおりである）。
【化５】

【００２２】
反応工程式Ａにおいて、R^1a、R^2aおよびR^3aはそれぞれ独立して、−H、−OHまたは−OPg(ここで、Pgはヒドロキシ保護基)；およびAは下記により詳しく定義する適当な活性化基である。式(1a)、(1b)、(2)、(3)、以下参照において、Pg保護基R^1a、R^2aおよびR^3aは、T．Greeneら in Chapter 3 of 「Protective Groups in Organic Synthesis,」 Second Edition、John Wiley & Sons、Inc.、New York、1991、pp.143−170によって教示された型のフェノール保護基である。好ましい保護基は、アルキルエーテル基であり、メチルが特に好ましい。
【００２３】
反応工程式Ａのステップ1において、式(2)の化合物である2−フェニルキノリンは、グリニャール条件下、式(1a)のR^1a−置換キノリンをR^2a、R^3a−置換フェニルリチウムと反応させるか、またはR^1a−置換キノリン−N−オキシド(1b)をR^2a、R^3a−置換フェニルマグネシウムハライドと反応させるかのいずれかによって製造することができる。
グリニャール反応および有機リチウム化合物を用いる反応は、Gilmanら、J ． Am ． Chem ． Soc ．68、2017(1946)； Gilman and Gainer、J ． Am ． Chem 。 Soc ．69、887(1947)；およびComins、D.L.、Brown、J.D.、Tetrahedron Lett ．27、4549(1986)によって教示される型の反応である。
【００２４】
たとえば、R^1a−置換キノリン−N−オキシド(1b)を、約−90℃〜約−50℃の温度範囲にて、より好ましくは約−78℃にて、クロロギ酸メチルと反応させる。反応は、典型的には、無水テトラヒドロフランなどの適当な非プロトン性有機溶媒中、無水条件下で行う。R^1a−置換キノリン−N−オキシド(1b)およびクロロギ酸メチルが、およそ等モル量で反応ゾーン内に存在するのが好ましい。いずれかの反応物がわずかに過剰であっても反応にとって問題はない。約20分〜約5時間反応を進める。次いで、実質的に等モル量のR^2a、R^3a−置換フェニルマグネシウムハライドを加える。次いで、たとえば、重炭酸ナトリウムまたはメタノールなどのプロトン源を加えて反応を停止する。当業界で公知の技術にしたがって、溶媒を除去し、得られる混合物を抽出し、濃縮し、精製する。
【００２５】
適当な式(1a)のR^1a−置換キノリンおよび適当なR^1a−置換キノリン−N−オキシド(1b)は市販のものを入手するか、または当業界で公知の技術および手順によって製造する。
さらに、適当なR^2a、R^3a−置換フェニルリチウムおよびR^2a、R^3a−置換フェニルマグネシウムハライドは市販のものを入手するか、または当業界で公知の技術および手順によって製造する。たとえば、適当なR^2a、R^3a−置換フェニルの溶液を、約5分〜約30分の時間範囲、より好ましくは約15分；約−90℃〜約−50℃の温度範囲、より好ましくは約−78℃にて、n−ブチルリチウムまたはt−ブチルリチウムなどの有機リチウム化合物、より好ましくはt−ブチルリチウムと反応させる。有機リチウム化合物は、使用したR^2a、R^3a−置換フェニルのモル当り約1.0〜1.1当量で存在する。より好ましくは約等モル量で存在する。反応は、典型的には、テトラヒドロフランなどの適当な非プロトン有機溶媒中、無水条件下で行う
【００２６】
反応工程式Ａのステップ2において、式(3)の2−フェニル−1,2,3,4−テトラヒドロキノリンを、式(2)の2−フェニルキノリンを還元することによって製造することができる。たとえば、式(2)の2−フェニルキノリンを、無水エタノールなどの適当なアルコール溶媒に溶解する。次いで、金属ナトリウムを加え、反応物を室温まで冷却する。次いで、反応混合物を水で希釈し、塩化メチレン、酢酸エチルまたはクロロホルムなどの適当な有機溶媒で抽出する。次いで、抽出物を合わせ、水および食塩水で洗浄し、有機層を分離し、乾燥し、溶媒を真空蒸発して、式(3)の2−フェニル−1,2,3,4−テトラヒドロキノリンを得、さらに精製することなく用いる。
【００２７】
別法として、NoseおよびKudo、Chem ． Pharm ． Bull ．36、1529(1988)に記載の方法に類似した方法において、塩化ニッケル触媒およびメタノール中の水素化ホウ素ナトリウムを用いて、式(2)の2−フェニルキノリンの還元を達成することができる。
反応工程式Ａのステップ3において、式(3)の2−フェニル−1,2,3,4−テトラヒドロキノリンを化合物(4)の置換ベンゾイル誘導体でアミド化することによって、式(5)の1,2−ジ置換−1,2,3,4−テトラヒドロキノリンを製造することができる。
たとえば、式(3)の2−フェニル−1,2,3,4−テトラヒドロキノリンを、1〜1.1モル当量の構造(4)の適当な酸誘導体とそのハライド、無水物または混合無水物として反応させる。反応は、テトラヒドロフラン、ジクロロメタン、アセトン、酢酸エチル、トルエンまたはジエチルエーテルなどの適当な溶媒中で行う。反応は、N−メチルモルホリン、炭酸ナトリウム、トリエチルアミン、N,N−ジイソプロピルエチルアミン、炭酸カリウムまたは重炭酸ナトリウムなどの塩基の存在下で行う。反応は、一般に、−78℃〜周囲温度の温度で行う。一般に、反応には、1〜24時間が必要である。抽出、蒸発、トリチュレート、クロマトグラフィーおよび再結晶などの当業界で公知の技術によって、生成物(5)を単離および精製することができる。
【００２８】
ここに記載するように、U.S．Pat．No．5,962,475(これは全体を参考文献として本発明に援用される）の記載と類似の方法によって、適当な式(4)の化合物を、その適当な安息香酸誘導体から製造することができる。式(4)の化合物の適当な安息香酸誘導体は、U.S．Pat．No．4,418,068、U.S．Pat．No．5,631,369およびU.S．Pat．No．5,852,193に記載されている(これらは全体を参考文献として本発明に援用される)。
式(4)の化合物において、アミド化反応を行うために酸を活性化するための活性化基Aは、当業界で公知のグループから選ばれ、フッ化物、塩化物および臭化物などの酸ハライド；C1−C6アルカン酸、C1−C6アルキルスルホン酸、アリールスルホン酸、C1−C6アルキルスルホン酸、過フッ化C1−C6 アルカン酸、C1−C6アルキルカルボン酸、アリールカルボン酸などの混合酸無水物が挙げられる。好ましい式(4)の化合物は、Aがハロゲン、最も好ましくは塩素である化合物である。
【００２９】
Xが−C(O)−であり、Yが−S−、−CH₂−、−NH−または−NMe−である式(Ｉ)の化合物の製造のための一般的な合成反応工程式は、 U.S．Pat．No．5,962,475に類似の方法が記載されており、反応工程式Ｂにおいて、さらに記載する（他に特記しない限り、すべての置換基は、前述のとおりである）。
【化６】

【００３０】
求核芳香族置換反応に関与するための式(6)の化合物における脱離基Lは、当業界で公知のグループから選ばれる(J．March、「Advanced Organic Chemistry,」 3rd Edition、John Wiley & Sons、New York、1985、p．587を参照)。適当な脱離基として、フルオロ、クロロ、ブロモ、ニトロ、(低級アルキル)フェニルスルホニル、(低級アルキル)スルホニル、フェニルスルホニル、アジド、トリアルキルアンモニウム、フェノキシ、アルコキシ、チオアルコキシおよびアミノが挙げられる。
本発明のために、好ましい脱離基として、フルオロ、クロロ、ブロモ、ニトロ、(低級アルキル)フェニルスルホニルおよび低級アルキルスルホニルが挙げられ、フルオロ、ブロモおよびニトロが最も好ましい。
【００３１】
式(6)の化合物において、活性化基Aは、反応工程式Ａにおいて式(4)の化合物に対して定義したとおりである。
反応工程式Ｂのステップ1において、式(3)の2−フェニル−1,2,3,4−テトラヒドロキノリンを、反応工程式Ａのステップ3において記載した手順にしたがって、式(6)の活性化ベンゾイル誘導体でアミド化することによって、2−(L−置換フェニル)−1,2,3,4−テトラヒドロフラン(7)を製造することができる。
反応工程式Ｂのステップ2において、アミド化反応から得られる生成物(7)を、次に、R⁴およびnが前記と同意義である式(8)の化合物と反応させる。式(8a)の化合物においてY’が−SHである場合、非プロトン溶媒中、強塩基の存在下で、２つの試薬を混合することによって、(7)と(8a)との反応を行う。適当な強塩基として、アルキルリチウム、アルカリ金属アミドまたは水素化リチウム、カリウムまたはナトリウムなどの金属水素化物または水素化リチウムアルミニウムもしくは水素化ナトリウムアルミニウムが挙げられる。
適当な極性非プロトン溶媒として、N,N−ジメチル−ホルムアミド、N−メチル ピロリジノン、N,N’−ジメチルプロピルウレア、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフランなどが挙げられる。
【００３２】
別法として、極性非プロトン性溶媒中、強塩基との反応によってスルフヒドリル化合物(8a)を別々に対応するアニオンに変換することができ、次いで、得られるアニオンを化合物(7)と反応させる。
Y’が−NH2である場合（化合物(8b)）、好ましい反応条件は、約120℃の温度にてアルミナに吸着させた相転移試薬18−クラウン−6および37％フッ化カリウムの存在下、ジメチルスルホキシド中で(7)と(8b)を反応させることを含む。
【００３３】
反応工程式Ａのステップ3における化合物(3)と(4)、または反応工程式Ｂのステップ2における化合物(7)と(8)とのアクリル化反応に続いて、得られる生成物(5)または(9)の保護基を、その脱保護類縁体を生成する当業界で教示される方法によって、除去することができる(脱保護試薬および反応条件については、前述した本明細書の引用文献であるT．Greeneらを参照)。R^1a、R^2aおよび／またはR^3aが好ましい保護基メチルである場合、アルカリ金属エタンチオレートの使用によるか(G．I．Fetruellら、Tetrahedron Letters、1327(1970)； idem．Aust．J．Chem.、25：1719(1972)および A．S．Kendeら、Tetrahedron Letters、22：1779(1981)を参照)、または約−80℃〜20℃における塩化メチレン中の6〜12時間の三臭化ホウ素(J．F．W．McOmieら、Org．Syn. 、 Coll．Volume V、412(1973))もしくは約80℃〜85℃の温度における塩化エチレン中のBBr3・S(CH3)2(P．G．Williardら、Tetrahedron Letters、21：3731(1981))のいずれかの使用によるか、のいずれかにおいてメチル基の脱保護的除去を行うことができる。
【００３４】
Xが−CH₂−である本発明化合物は、反応工程式Ｃに記載の手順にしたがって製造される。反応工程式Ｃにおいて、すべての置換基は、他に特記しない限り、前記と同意義である。
【化７】

【００３５】
Xが−CH₂−である本発明化合物は、適当な溶媒、好ましくは無水テトラヒドロフランに式(5)または(9)の化合物を溶解し、窒素などの不活性ガス下、たとえば、水素化リチウムアンモニウムなどの還元剤と反応させることによって製造される。抽出、トリチュレーション、クロマトグラフィーおよび再結晶などの当業界で公知の技術によって、還元生成物(10)を単離し、精製することができる。
R1、R2および／またはR³において、−OC(O)(C1−C6アルキル)または−OC(O)C₆H₅基が望ましい場合、式(Ｉ)のモノ−、ジ−またはトリヒドロキシ化合物を塩化、臭化、シアン化もしくはアジ化アシルなどの作用剤または適当な無水物もしくは混合無水物と反応させる。ピリジン、ルチジン、キノリンもしくはイソキノリンなどの塩基性溶媒中またはトリエチルアミン、トリブチルアミン、メチルピペリジンなどの第３級アミン溶媒中で反応を行うのが簡便である。反応は、少なくとも１当量の第３級アミンなどの酸スカベンジャーを加えた酢酸エチル、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ジオキサン、ジメトキシエタン、アセトニトリル、アセトン、メチルエチルケトンなどの不活性溶媒中で行うこともできる。要すれば、4−ジメチルアミノピリジンまたは4−ピロリジノピリジンなどのアシル化触媒を用いてもよい。たとえば、Haslamら、Tetrahedron、36:2409−2433(1980)を参照。
【００３６】
前述のR1、R2および／またはR³基を提供するアシル化反応は、しばしば窒素ガスなどの不活性雰囲気下、約−25℃〜約100℃の範囲の中程度の温度で行う。しかし、この反応には、通常、周囲温度が適切である。
このようなヒドロキシ基のアシル化は、不活性溶媒中もしくはそのままで、適当なカルボン酸の酸触媒反応によって行うこともできる。硫酸、ポリリン酸、メタンスルホン酸などの酸触媒を用いる。
ジシクロヘキシルカルボジイミド、アシルイミダゾール、ニトロフェノール、ペンタクロロフェノール、N−ヒドロキシスクシンイミドおよび1−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾールなどの公知の試薬によって形成されるエステルなどの適当な酸の活性エステルを形成することによって、前述のR1、R2および／またはR³基を提供することもできる。たとえば、Bull ． Chem ． Soc ． Japan、38:1979(1965)およびChem ． Ber.、788および2024(1970)などを参照。
【００３７】
R1、R2および／またはR³が−OSO2(C4−C6アルキル)である化合物が望ましい場合、KingおよびMonoir、J ． Am ． Chem ． Soc.、97:2566−2567(1975)から教示されるように、適当な出発モノ−、ジ−またはトリヒドロキシ化合物を、たとえば、塩化スルホニル、臭化スルホニルまたはスルホニルアンモニウム塩などの適当なスルホン酸の誘導体と反応させる。モノ−、ジ−またはトリヒドロキシ化合物は、適当なスルホン酸無水物と反応させることもできる。このような反応は、酸ハライドなどとの反応についての議論において先に説明したような条件下で行う。
R1、R2および／またはR³が、異なる生物学的保護基であるか、または好ましくは同じ生物学的保護基であるように式(Ｉ)の化合物を製造することができる。好ましい保護基として、−CH3、−C(O)C(CH3)3、−C(O)C6H5および−SO2(CH2)3CH3が挙げられる。
【実施例】
【００３８】
すべての反応は、窒素雰囲気下で行う。すべての溶媒は、ＡＣＳグレードであり、供給されたままで用いる。すべての試薬は市販のものを購入し、特記しない限り、さらに精製することなく用いる。ＬＣＭＳデータは、35℃にて、Hewlett Packard 1100シリーズで記録する。用いる方法は、Waters Symmetry C18 2.1ｘ50mmカラムにて、2分間にわたって5％アセトニトリル−95％水(0.05％ TFA)〜95％アセトニトリル−5％水(0.05％ TFA)、3分間保持である。¹H NMRスペクトルは、特記しない限り、CDCl₃中、Varian 400分光光度計で400 MHzにて記録する(δ7.26)。
【００３９】
製造例１
6−メトキシ−2−(4−メトキシ−フェニル)−キノリン
【化８】

500 mLの丸底フラスコに6−メトキシキノリン−N−オキシド(8g、0.04566 mol)を入れ、窒素下に置く。次いで、固体を無水THF(100mL)に溶解し、ドライアイス／アセトン浴にて−78℃に冷却すると、幾らかの溶解した固体が沈殿を形成し始める。滴下ロートから、クロロギ酸メチル(4.4ml、0.05694 mol)を滴下する。滴下後10分で浴を取り外し、20分後に再び取り付ける。次いで、0.5 M臭化アニシルマグネシウム(112 mL、0.0560 mol)を滴下する。添加後、浴を取り外し、反応物を室温まで暖める。5％重炭酸ナトリウム溶液を加えて反応を停止する。THFを減圧除去し、得られる混合物を水で希釈し、塩化メチレンで抽出する。抽出物を集め、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮する。祖生成物をフラッシュクロマトグラフィー(2−5％ EtOAc/ジクロロメタン)によって精製して、所望生成物6.30g(52％)を得る。¹H NMR:δ8.03−8.11(m、4H)、7.78(d、J＝8.8 Hz、1H)、7.37(dd、J＝9 Hz、3Hz、1H)、7.03−7.07(m、3H)、3.94(s、1H)、3.88(s、1H)。LCMS：2.188分、266(M+)。
【００４０】
製造例２
6−メトキシ−2−フェニル−キノリン
【化９】

フェニルマグネシウムブロミドを用い、製造例１と同様の方法で、6−メトキシ−2−フェニルキノリンを製造する。¹H NMR：δ8.07−8.15(m、4H)、7.84(d、J＝8.8 Hz、1H)、7.50−7.54(m、2H)、7.42−7.46(m、1H)、7.39(dd、J＝9 Hz、3 Hz、1H)、7.10(d、J＝2.4 Hz、1H)、3.95(s、3H)。
【００４１】
製造例３
6−メトキシ−2−(4−メトキシフェニル)−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン
【化１０】

500 mLの丸底フラスコに、製造例１の化合物(3g、0.01131 mol)および無水エタノール(150 mL)を入れる。混合物を窒素下に置き、還流する。TLC(30％ EtOAc／ヘキサン)により出発物質がなくなったことが決定するまで、金属ナトリウムペレットを定期的に加える。反応物を室温まで冷却し、水で希釈し、塩化メチレンで抽出する。次いで、抽出物を合わせ、水および食塩水で洗浄する。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥する。溶媒を減圧除去して、3.05g(100％)の金色油状物を得る。精製を必要としない。¹H NMR：δ7.32(app.d、J＝8.4 Hz、2H)、6.89(app.d、J＝8.8 Hz、2H)、6.61−6.65(m、2H)、6.49(d、J＝8.4 Hz、1H)、4.31(dd、J＝10 Hz、2.8 Hz、1H)、3.81(s、3H)、3.75(s、3H)、2.90−2.99(m、1H)、2.73(dt、J＝16.4 Hz、4.6 Hz、1H)、2.04−2.10(m、1H)、1.91−2.01(m、1H)。
【００４２】
製造例４
6−メトキシ−2−フェニル−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン
【化１１】

6−メトキシ−2−フェニル キノリンを用い、製造例３と同様の方法で、6−メトキシ−2−フェニル−1,2,3,4−テトラヒドロ−キノリンを製造する。¹H NMR：δ7.28−7.43(m、5H)、6.63−6.67(m、2H)、6.52(d、J＝8.8 Hz、1H)、4.38(dd、J＝9.0 Hz、3.0 Hz、1H)、3.76(s、3H)、2.91−3.00(m、1H)、2.74(dt、J＝16.8 Hz、4.6 Hz、1H)、2.09−2.15(m、1H)、1.95−2.05(m、1H)。
【００４３】
製造例５
4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンゾイルクロリド・塩酸塩
【化１２】

500mLの丸底フラスコに、4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−安息香酸・塩酸塩(25g、0.08748mol)および塩化チオニル(150mL、2.0564mol)を入れる。混合物を15分間還流すると、溶液が透明になる。反応物を室温まで冷却し、過剰の塩化チオニルを除去して、定量的収量の所望化合物を得る。¹H NMR:δ8.08(app.d、J＝8.8 Hz、2H)、6.99(app.d、J＝9.2 Hz、2H)、4.71(t、J＝4.6 Hz、2H)、3.65(d、J＝12 Hz、2H)、3.43(quart.、J＝4.6 Hz、2H)、2.76−2.85(m、2H)、2.22−2.32(m、2H)、1.87−1.94(m、3H)、1.37−1.49(m、1H)。
【００４４】
実施例１
[6−メトキシ−2−(4−メトキシフェニル)−3,4−ジヒドロ−2H−キノリン−1−イル]−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)フェニル]メタノン
【化１３】

250 mLの丸底フラスコに、製造例３の化合物(3.05g、0.01132 mol)、4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンゾイルクロリド・塩酸塩(4.5g、0.01479 mol)、ジクロロメタン(125 mL)およびトリエチルアミン(10 mL、0.07175)を入れる。攪拌溶液を窒素下に置き、出発物質がなくなるまでLC/MSに付す。反応物を飽和炭酸ナトリウム溶液、水および食塩水で洗浄する。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮する。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー(0−5％ MeOH/ジクロロメタン)によって精製して、5.33g(92％)の標記生成物を得る。¹H NMR:δ 7.21(d、J＝8.8 Hz、2H)、7.14(app.d、J＝8.4 Hz、2H)、6.79(app.d、J＝8.8 Hz、2H)、6.70(app.d、J＝8.8 Hz、4H)、6.50(dd、J＝8.4 Hz、2.4 Hz、1H)、5.62(app.t、J＝7.6 Hz、1H)、4.06(t、J＝6 Hz、2H)、3.75(s、3H)、2.74(t、J＝6 Hz、2H)、2.57−2.80(m、3H)、2.49(s、4H)、1.92−2.02(m、1H)、1.59(quint．J＝5.6 Hz、4H)、1.40−1.46(m、2H)。LCMS：2.247分、501(M+)。
【００４５】
実施例２
(6−メトキシ−2−フェニル−3,4−ジヒドロ−2H−キノリン−1−イル)−[4−2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)フェニル]メタノン
【化１４】

250mLの丸底フラスコに、製造例４の化合物(3.05g、0.01274mol)、4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンゾイルクロリド・塩酸塩(4.65g、0.01529mol)、ジクロロメタン(100mL)およびトリエチルアミン(10mL、0.07175mol)を入れる。反応物を窒素下、一夜攪拌する。反応は不完全である。4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンゾイルクロリド・塩酸塩(3g、0.009861mol)およびトリエチルアミン(10mL、0.07175mol)を加え、反応物を還流する。反応物を飽和重炭酸ナトリウム溶液、水および食塩水で洗浄する。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥する。溶液を濃縮し、粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー(0−5％ メタノール/ジクロロメタン)によって単離する。生成物には、〜33％の4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−安息香酸メチルエステルが分離できない不純物として含まれる[LC/MS：1.815 分、264(M+)]。生成物はこれ以上精製しない。¹H NMR:δ7.16−7.27(m、7H)、6.70(app.d、J＝8.4 Hz、4H)、6.51(dd、J＝8.6 Hz、2.6 Hz、1H)、5.66(t、J＝7 Hz、1H)、4.07(t、J＝5.8 Hz、2H)、3.75(s、3H)、2.61−2.81(m、5H)、2.50(s、4H)、1.94−2.03(m、1H)、1.57−1.64(m、4H)、1.40−1.49(m、2H)。LCMS：2.253分、471(M+)。
【００４６】
実施例３
[6−ヒドロキシ−2−(4−ヒドロキシフェニル)−3,4−ジヒドロ−2H−キノリン−1−イル]−[4−2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)フェニル]メタノン
【化１５】

25mlの丸底フラスコに、実施例１の化合物(41.3mg、0.0824mmol)およびジクロロメタン(10mL)を入れる。溶液を0℃に冷却し、1.0Mの三臭化ホウ素(0.50mL、0.50mmol)を加える。反応物を室温まで暖める。反応物をLCMSに付す。反応物を0℃に冷却した後、等量の三臭化ホウ素を再び加える。LCMSにより反応の完了が示されるまで、数時間にわたって、このことを3回以上行う。反応物をメタノールで中和し、溶媒を除去する。残渣に酢酸エチルを加え、水で洗浄する。水層を酢酸エチルで数回抽出する。溶媒を濃縮し、逆層HPLCによって物質を精製する。10.6mの量がTFA塩として得られる。¹H NMR [CD₃OD(δ 3.30)]:δ7.22(d、J＝8.4 Hz、2H)、7.02(d、J＝8.8 Hz、2H)、6.88(d、J＝8.4 Hz、2H)、6.65−6.78(m、4H)、6.30−6.36(m、1H)、5.45−5.49(broad s、1H)、 4.33(t、J＝4.6 Hz、2H)、3.60(d、J＝12.4 Hz、2H)、3.53(t、J＝4.6 Hz、2H)、3.00−3.10(m、2H)、2.60−2.80(m、4H)、1.70−2.00(m、5H)、1.45−1.60(m、1H)。LCMS：2.131分、473(M+)。
【００４７】
実施例４
(6−ヒドロキシ−2−フェニル−3,4−ジヒドロ−2H−キノリン−1−イル)−[4−2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)フェニル]メタノン
【化１６】

ジクロロメタン(1ml)中の実施例２の化合物(10mg、0.02125mmol)の溶液に、室温にて三臭化ホウ素(0.20ml、0.20mmol)を滴下する。反応物を30分間攪拌すると、TLCにより出発物質が残っていないことが示される。混合物をジクロロメタンで希釈し、飽和重炭酸ナトリウム溶液、水および食塩水で洗浄する。次いで、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー(100％酢酸エチル)により精製して、生成物7.9mg(81％)を得る。¹H NMR δ7.13−7.27(m、7H)、6.52−6.60(m、4H)、6.24(dd、J＝10 Hz、2Hz、1H)、5.61(t、J＝9Hz、1H)4.00−4.10(m、2H)、2.76−2.83(m、1H)、2.43−2.74(m、8H)、1.82−1.93(broad m、1H)、1.58−1.67(broad m、4H)、1.39−1.49(broad m、2H)。LCMS：2.321分、457(M+)。
【００４８】
実施例５
6−メトキシ−2−フェニル−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン・塩酸塩
【化１７】

250mlの丸底フラスコに、無水THF中の75mL実施例１の化合物(5.22g、0.01043mol)を入れ、次いで、LiAlH₄₍0.80g、0.02108)を加える。次いで、反応混合物を15分間還流する。LC/MSにより、出発物質の消費が確認される。反応物を冷却し、氷を加えて反応を停止する。固体を濾去し、濾液を濃縮する。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー(0−5％ MeOH/ジクロロメタン)により精製する。生成物溶出液を集め、溶媒を減圧除去して、油状物を得る。油状物にエーテルを加え、過剰の1.0M HClエーテル溶液を加える。生成物の塩酸塩が沈殿し、これを濾過により集める。固体をエーテルおよびヘキサンで洗浄する。1.5571g(30.7％)を得る。¹H NMR [CD₃OD(δ 3.30)]:δ6.60−7.53(broad m、11H)、4.60−4.23(m、2H)、4.40(s、2H)、3.84(s、6H)、3.58−3.64(m、6H)、3.09(t、J＝12 Hz、4H)、2.40−2.61(broad s、1H)、1.80−2.01(m、5H)、1.50−1.60(m、1H)。LCMS：2.421分、487(M+)。
【００４９】
実施例６
6−メトキシ−2−フェニル−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン・塩酸塩
【化１８】

実施例２の化合物を用い、実施例５と同様の方法で、6−メトキシ−2−フェニル−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン・塩酸塩を製造する。¹H NMR [CD₃OD(δ 3.30)]:δ6.50−7.90(broad m、12H)、4.40(t、J＝4.8 Hz、2H)、3.68−4.00(broad s、2H)、3.56−3.64(m、6H)、3.30(s、3H)、3.08(t、J＝11 Hz、4H)、2.35−2.74(broad s、1H)、1.80−1.98(m、5H)、1.30−1.60(m、1H)。LCMS：2.446分、457(M+)。
【００５０】
実施例７
2−(4−ヒドロキシ−フェニル)−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン−6−オール
【化１９】

100の丸底フラスコに、実施例５の化合物(1.5571g、0.003200 mol)およびジクロロメタン30mlを入れる。溶液を窒素下に置き、0℃に冷却した後、三臭化ホウ素(1.5ml、0.01587mol)を加える。反応の完了をLC/MSによって確認する。メタノールおよび飽和重炭酸ナトリウム溶液を加えて反応を停止し、メタノールの1％ジクロロメタン溶液で抽出する。抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、シリカゲルに予備吸着させる。次いで、物質をフラッシュクロマトグラフィー(0−5％メタノール/ジクロロメタン)により精製する。固体を除去して、赤／橙色固体を得る。固体をアセトニトリルで洗浄すると、大部分の赤色が消える。704.2mg(50％)を得る。¹H NMR [CD₃OD(δ3.30)]:δ7.09(d、J＝8.8 Hz、2H)、6.98(d、J＝8.8、2H)、6.82(d、J＝8.4 Hz、2H)、6.69(d、J＝8.8 Hz、2H)、6.38−6.45(m、3H)、4.45−4.50(m、2H)、4.02−4.10(m、3H)、2.76(t、J＝5.6 Hz、2H)、2.52−2.55(m、6H)、2.11−2.19(m、1H)、1.95−2.01(m、1H)、1.63(quint.、J＝5.6 Hz、4H)、1.48(app.d、J＝4.8 Hz、2H)。LCMS：2.032分、459(M+)。
【００５１】
実施例８
2−フェニル−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン−6−オール
【化２０】

実施例６の化合物を用い、実施例７と同様の方法で、2−フェニル−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン−6−オールを製造する。¹H NMR [CD₃OD(δ3.30)]:δ7.25−7.28(m、2H)、7.16−7.21(m、3H)、7.10(d、J＝8.4 Hz、2H)、6.83(d、J＝8.4 Hz、2H)、6.41−6.46(m、3H)、4.50−4.56(m、2H)、4.03−4.10(m、3H)、3.28−3.31(m、1H)、2.45−2.55(m、6H)、2.17−2.25(m、1H)、2.01−2.06(m、1H)、2.76(t、J＝5.6 Hz、2H)、1.63(quint.、J＝5.7 Hz、4H)、1.48(app.d、J＝4.8 Hz、2H)。LCMS：2.287分、443(M+)。
【００５２】
製造例６
1−(4−ベンジルオキシ−ベンジル)−6−メトキシ−2−(4−メトキシ−フェニル)−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン
【化２１】

50mLの丸底フラスコに、製造例３(165.0mg、0.6126mmol)の化合物、4−ベンジルオキシベンジルクロリド(299.0mg、1.285mmol)および無水THF(15mL)を入れ、窒素下に置く。この溶液に、1.0Mホスファジン−P₄t−ブチル 塩基(1M/ヘキサン溶液0.55ml、0.55mmol)を加える。2時間後、反応をTLC(ジクロロメタン)でチェックする。出発物質は存在しない。反応物をシリカゲルに予備吸着させ、生成物をフラッシュクロマトグラフィー(50−75％ ジクロロメタン/ヘキサン)により単離して、幾らかの少量不純物を含む287.3 mg(＞100％)の生成物を得る。¹H NMR:δ7.36−7.44(m、5H)、7.12(app.t、J＝8.8 Hz、4H)、6.90(app.d、J＝8.4 Hz、2H)、6.83(app.d、J＝8.4 Hz、2H)、6.61−6.40(m、2H)、6.49(d、J＝9.6 Hz、1H)、5.03(s、2H)、4.54−4.58(m、2H)、4.14(d、16.8 Hz、1H)、3.79(s、3H)、3.73(s、3H)、2.60−2.64(m、2H)、2.19〜2.27(m、1H)、2.01−2.06(m、1H)。LCMS：3.406分、466(M+)。
【００５３】
製造例７
4−[6−メトキシ−2−(4−メトキシフェニル)−3,4−ジヒドロ−2H−キノリン−1−イル−メチル]フェノール
【化２２】

25mlの丸底フラスコに、酢酸エチル(10ml)中の製造例６の化合物(287.3mg、0.6125mmol)を入れ、10％ Pd/C(86mg、0.0808mmol)を加える。混合物に窒素を10分間スパージする。次いで、混合物に水素を周期的にスパージし水素充填バルーンにて、一定の圧力下に維持する。LCMSにより、反応を3時間追跡する。次いで、反応物をセライトで濾過する。濾液から溶媒を除去して、57.1 mg(24.8％)の粗所望生成物を油状物で得る。生成物は精製しない。¹H NMR:δ7.08(t、J＝9 Hz、4H)、6.83(d、J＝8.4 Hz、2H)、6.75(d、J＝8.4 Hz、2H)、 6.65(s、2H)、6.40−6.60(m、1H)、4.72(s、1H)、4.42−4.68(m、2H)、3.79(s、3H)、3.60−3.80(broad m、3H)、2.60−2.65(m、2H)、2.20−2.30(m、1H)、2.00−2.05(m、1H)。LCMS：2.888分、376(M+)。
【００５４】
実施例９
6−メトキシ−2−(4−メトキシフェニル)−1−[4−(2−ピロリジン−1−イル−エトキシ)−ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン
【化２３】

50mLの丸底フラスコに、製造例７の化合物(57.1mg、0.1521mmol)、1−(2−クロロエチル)−ピロリジン・塩酸塩(85.2mg、0.5009mmol)、無水テトラヒドロフラン(20mL)および1.0Mホスファジン−P₄t−ブチル塩基を入れる。反応混合物を窒素下に置き、4時間加熱還流する。次いで、反応物を室温にて一夜(14時間)攪拌する。反応物をさらに2時間加熱還流する。反応混合物をシリカゲルに予備吸着させ、生成物をフラッシュクロマトグラフィー(5−10％ ジクロロメタン/ヘキサン)により分離して、幾らかの未知の不純物が混入した油状物を得る。この物質は、これ以上精製しない。部分¹H NMR:δ7.07−7.10(m、4H)、6.81−6.84(m、4H)、6.61−6.62(m、2H)、6.45−6.48(m、1H)、3.78(s、3H)、3.72(3H)。LCMS：2.462分、473(M+)。
【００５５】
実施例１０
2−(4−ヒドロキシフェニル)−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン−6−オール
【化２４】

50mL丸底フラスコにて、ジクロロメタン(15mL)に実施例９の化合物を溶解し、1.0M三臭化ホウ素(0.80mL、0.80mmol)を加える。出発物質が存在しなくなるまでLCMSによって追跡する。次いで、メタノールを加えて反応を停止する。次いで、混合物をシリカゲルに予備吸着させ、２回のフラッシュクロマトグラフィー(10−20％メタノール/ジクロロメタン)により分離する。最後にフラッシュクロマトグラフィー(アセトン、20％メタノール/ジクロロメタン)により、第３の精製を行う。次いで、逆相クロマトグラフィーにより、生成物を精製して、TFA塩として16.2mgを得る。部分¹H NMR [CD₃OD(δ 3.30)]：δ7.16(d、J＝8 Hz、2H)、6.97−7.01(m、2H)、6.94(d、J＝8.8 Hz、2H)、6.70(d、J＝8.8 Hz、2H)、6.38−6.49(m、3)、4.48−4.52(m、2H)、4.29(t、J＝4.8 Hz、2H)、4.02−4.07(m、1H)、3.65−3.77(m、2H)、3.63(t、J＝4.8 Hz、2H)、3.15−3.23(m、2H)、2.57−2.62(m、2H)、2.00−2.10(m、3H)、2.10−2.30(m、3)。LCMS：2.084分、445(M+)。
【００５６】
製造例８
6−メトキシ−2−(3−メトキシ−フェニル)−キノリン
【化２５】

THF(3 mL)中の6−メトキシキノリン−N−オキシド(175 mg、1.0 mmol)の溶液に、室温にてクロロギ酸メチル(77 μＬ、1.0 mmol)を加える。混合物を0℃に冷却し、3−メトキシフェニルマグネシウムブロミド(1M溶液2mL、2 mmol)を滴下する。混合物を室温に暖めながら16時間攪拌する。溶媒を減圧除去し、得られる残渣を水およびCH₂Cl₂に分配する。有機相を水および食塩水で洗浄し、乾燥（硫酸マグネシウム）し、濾過し、濃縮する。フラッシュクロマトグラフィー(0−20％ EtOAc/ヘキサン)により、6−メトキシ−2−(3−メトキシ−フェニル)−キノリン(123 mg、46％収率)を得る。
¹H NMR:δ3.90(s、3H)、3.92(s、3H)、6.97(app.d、1H)、7.08(s、2H)、7.38(m、2H)、7.65(d、1H)、7.71(app.s、1H)、7.81(d、1H)、8.10(m、2H)。
【００５７】
製造例９
6−メトキシ−2−(3−メトキシ−フェニル)−1,2,3,4−テトラヒドロ−キノリン
【化２６】

EtOH(3 mL)中の6−メトキシ−2−(3−メトキシ−フェニル)−キノリン(96 mg、0.36 mmol)の攪拌溶液に、0℃にてNiCl₂.6H₂O(86 mg、0.36 mmol)を加える。反応混合物を30分間攪拌した後、NaBH₄(55mg、1.45 mmol)を加える。混合物を室温に暖めながら16時間攪拌する。次いで、追加のNaBH₄(50 mg)を加え、3時間攪拌を継続する。溶媒を減圧除去し、得られる残渣を水およびCH₂Cl₂に分配する。有機相を水および食塩水で洗浄し、乾燥（硫酸マグネシウム）し、濾過し、濃縮する。フラッシュクロマトグラフィー(0−50％ EtOAc/ヘキサン)により、6−メトキシ−2−(3−メトキシ−フェニル)−1,2,3,4−テトラヒドロ−キノリンを得る。
¹H NMR:δ1.95(m、1H)、2.08(m、1H)、2.71(m、1H)、2.2.90(m、2H)、3.7s(s、3H)、3.81(s、3H)、4.34(dd、1H)、6.50(d、2H)、6.71(m、2H)、6.81(dd、1H)、6.95(m、2H)、7.25(m、1H)。
【００５８】
実施例１１
6−メトキシ−2−(3−メトキシ−フェニル)−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロ−キノリン
【化２７】

THF(1.5 mL)中の6−メトキシ−2−(3−メトキシ−フェニル)−1,2,3,4−テトラヒドロ−キノリン(20 mg、0.074 mmol)の溶液に、室温にて1−[2−(4−クロロメチル−フェノキシ)−エチル]−ピペリジン・塩酸塩(PCT Int. Appl. Publ. No. WO 99/19293)(43 mg、0.149 mmol)、次いで、ホスファゼンP1塩基(150 mg)を加える。混合物を60℃にて18時間加熱する。次いで、粗生成物シリカゲルカラムにロードし、0−100％ EtOAc/ヘキサンで溶離して、未知の副生成物が混入した6−メトキシ−2−(3−メトキシ−フェニル)−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロ−キノリンを得る。
部分¹H NMR:δ1.44(br.m)、1.63(br.m、4H)、2.51(br.m)、3.72(s、3H)、3.75(s、3H)、4.08(m)、4.58(m)、6.50(d)、6.63(m)、6.73(s)、6.78(d)、6.84(d)、6.88(d)、7.10(d)、7.2〜7.3(m)。
【００５９】
実施例１２
2−(3−ヒドロキシ−フェニル)−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロ−キノリン−6−オール
【化２８】

CH₂Cl₂中の6−メトキシ−2−(3−メトキシ−フェニル)−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロ−キノリン(18 mg、0.037 mmol)の溶液に、室温にて、AlCl₃(25 mg)、次いでプロパンチオール(50 μＬ)を加える。混合物を室温にて3時間攪拌し、次いで、メタノールを加えて反応を停止する。次いで、生成物をシリカゲルカラムにロードし、0−30％ MeOH/EtOAcで溶離して、33 mgの生成物を得る。次いで、逆相プレパラティブHPLCによって生成物をさらに精製して、2−(3−ヒドロキシ−フェニル)−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロ−キノリン−6−オールのトリフルオロ酢酸塩(9.8 mg、46％収率)を得る。
¹H NMR(CD₃OD):δ1.50(br.m、1H)、1.80(br.m、3H)、1.92(br.m、2H)、2.08(br.m、1H)、2.22(br.m、1H)2.58(br.s、2H)、3.03(br.t、2H)、3.5−3.6(m、4H)、 4.08(br.d、1H)、4.25(m、2H)、4.50(br.m、2H)、6.40(s、2H)、47(s、1H)、6.65(m、3H)、6.90(d、2H)、7.09(t、1H)、7.16(d、2H)。LCMS：2.17分、m/z＝459(M+H)⁺。
【００６０】
生物試験手順
一般的製造手順
ER結合アッセイ
１ウエル当り0.025 μCiの³H−エストラジオール(NEN #NET517、118 Ci/mmol、1 mCi/ml)、10 ng/ウエルのERアルファまたはERベータ受容体(PanVera)を用い、50mM Hepes、pH 7.5、1.5mM EDTA、150mM NaCl、10％グリセロール、1mg/ml 卵白アルブミンおよび5mM DTTを含む緩衝液中で競合的結合アッセイを行う。10種類の異なる濃度にて競合化合物を加える。1マイクロモルの17−B エストラジオールの存在下、非特異的結合を決定する。結合反応物(140マイクロリットル)を室温にて4時間インキュベートし、次いで、70マイクロリットルのcold DCC緩衝液を各反応物に加える(DCC緩衝液は、アッセイ緩衝液50ml当り、0.75gのチャコール(Sigma)および0.25gのデキストラン(Pharmacia)を含む)。プレートをオービタルシェーカーで4℃にて8分間混合する。次いで、プレートを3,000 rpmで4℃にて10分間遠心分離する。混合物の120マイクロリットルのアリコートを別の96ウエルの白色平底プレートに移し、Wallac Optiphase 「Hisafe 3」シンチレーション液175マイクロリットルを各ウエルに加える。プレートを密封し、オービタルシェーカーで激しく振とうする。2.5時間のインキュベーションの後、Wallac Microbetaカウンターでプレートを読む。データを用いて、10マイクロモルにおけるIC₅₀および阻害％を計算する。³H−エストラジオールに対するK_dは、ERアルファおよびERベータ受容体に対する飽和結合によって決定される。Cheng−Prusoffの方程式を用いて、化合物に対するIC₅₀値をK_iに変換し、飽和結合アッセイによってK_dを決定する。
【００６１】
イシカワアルカリホスファターゼアッセイ
イシカワヒト子宮内膜腫瘍細胞を、10％ウシ胎児血清(FBS)(V/V)、(Gibco BRL)を補足したMEM(最小必須培地、Earle’s塩およびL−グルタミン、Gibco BRL、Gaithersburg、MDを含む)中に維持する。アッセイの一日前に、成長培地を、5％デキストラン・コーテッド・チャコール ストリップト・ウシ胎児血清(DCC−FBS)(Hyclone、Logen、UT)、L−グルタミン(2mM)、MEM ピルビン酸ナトリウム(1 mM)、HEPES(N−[2−ヒドロキシエチル]ピペラジン−N’−[2−エタンスルホン酸] 2 mM)すべてGibco BRL製)を補足したアッセイ培地DMEM/F−12(3:1)(ダルベッコ変法イーグル培地：栄養混合物F−12、3:1混合物、フェノールレッド・フリー、Gibco BRL)に変更する。一夜インキュベーションした後。イシカワ細胞を、Ca⁺²およびMg⁺²を含まないダルベッコリン酸緩衝食塩水(1X)(D−PBS)(Gibco BRL)で濯ぎ、0.25％トリプシン/EDTA、フェノールレッドフリー(Gibco BRL)と3分間インキュベーションすることによってトリプシン処理する。細胞をアッセイ培地に再懸濁し、250,000細胞/mlに調整する。100μＬ中約25,000個の細胞を平底96ウエルマイクロ培養プレート(Costar 3596)に加え、5％ CO₂加湿インキュベーター中、37℃にて24時間インキュベートする。翌日、アッセイ培地にて化合物のシリーズ希釈物を調製する(アッセイにおける最終濃度の6倍にて)。アッセイは、アゴニストおよびアンタゴニストモードの二元モードで行う。アゴニストモードについては、プレートに25マイクロリットル/ウエルのアッセイ培地、次いで25マイクロリットル/ウエルの希釈化合物を入れる(最終濃度の6倍にて)。アンタゴニストモードについては、25マイクロリットル/ウエルの6nM E₂(β−エストラジオール、Sigma、St．Louis、MO)、次いで、25マイクロリットル/ウエルの希釈を入れる(最終濃度の6倍にて)。、5％ CO₂加湿インキュベーター中、37℃にてさらに48時間インキュベートした後、ウエルから培地を吸引し、100マイクロリットルの新鮮なアッセイ培地を各マイクロ培養物に加える。化合物のシリーズ希釈物を調製し、前述のように細胞に加える。5％ CO₂加湿インキュベーター中、37℃にてさらに72時間インキュベートした後、培地を除去し、プレートをダルベッコのリン酸緩衝食塩水(1X)(D−PBS)(Gibco BRL)で濯ぐことによりアッセイを停止する。プレートを5分間乾燥し、−70℃にて少なくとも1時間凍結させる。次いで、プレートをフリーザーから取り外し、室温で解凍する。各ウエルに、100マイクロリットルの1−Step(登録商標) PNPP(Pierce Chemical Company、Rockford、IL)を加える。20分間インキュベートした後、プレートを分光光度計で405nmにて読む。データを線形補間にフイットさせて、EC50(アゴニストモードについて)またはIC50(アンタゴニストモードについて)値を誘導する。アゴニストモードについて、各化合物の効力％を、タモキソフェンに対する反応に対して計算する。アンタゴニストモードについて、各化合物の効力％を、E2(1nM)単独に対して計算する。
【００６２】
MCF − 7 増殖アッセイ
MCF−7乳腺ガン細胞(ATCC HTB 22)を、10％ウシ胎児血清(FBS)(V/V)、L−グルタミン(2 mM)、ピルビン酸ナトリウム(1 mM)、HEPES((N−[2−ヒドロキシエチル]ピペラジン−N’−[2−エタンスルホン酸]10 mM}、非必須アミノ酸(0.1mM)およびペニシリンストレプトマイシン(1X)を補足したMEM(最小必須培地、フェノールレッドフリー、Gibco BRL)中で維持する。アッセイの7日前に、MCF−7細胞を、10％ FBSの代わりに10％デキストラン・コーテッド・チャコール ストリップト・ウシ胎児血清(DCC−FBS)アッセイ培地を補足する以外は維持培地と同じであるアッセイ培地に切り替える。10XトリプシンEDTA(フェノールレッドフリー、Gibco BRL)を用いてMCF−7細胞をフラスコから取り出し、(Ca++/Mg++フリーHBSS(フェノールレッドフリー)中1Xに希釈する。細胞を、アッセイ培地中、80,000細胞/mlに調整する。約8,000細胞(100マイクロリットル)を96ウエルのCytostar Tシンチレーションプレート(Amersham)の各ウエルに加え、5％ CO₂加湿インキュベーター中、37℃にて24時間インキュベートして、移動した後、細胞を付着させ、平衡化する。アッセイ培地中、最終所望濃度の４倍にて、薬物のシリース希釈物を調製する。薬物希釈物の50マイクロリットルのアリコート(最終アッセイ濃度の４倍にて)を複製ウエルに移し、次いで、アゴニストモードについては50マイクロリットルのアッセイ培地を加え、アンタゴニストモードについては50マイクロリットルの40pMのE2を加えて、最終体積を200マイクロリットルにする。アゴニストプレートのそれぞれについて、基底レベル(培地)および最大刺激レベル(1マイクロモルのE2における)を決定する。アンタゴニストプレートのそれぞれについて、基底レベル(培地)およびE2(10pM)単独コントロールを決定する。5％ CO₂加湿インキュベーター中、37℃にてさらに48時間インキュベートした後、0.01 μCiの¹⁴C−チミジン(52 mCi/mmol、50 μCi/μＬ、Amersham)を含む20マイクロリットルのアッセイ培地を各ウエルに加える。同じインキュベーターにおいてプレートを一夜インキュベートし、次いで、Wallac Microbeta カウンターで計数する。データを平均して、アンタゴニストモードについてIC50および1マイクロモル当りの阻害％を計算する。アゴニストモードについては、EC50および最大E2刺激パーセントおよび最大刺激濃度を計算する。
【００６３】
表

＊Aは、10マイクロモルにおける＜50％結合を意味する。
^†Bは、1マイクロモルにおける＜50％阻害を意味する。
^ａは、トリフルオロ酢酸(TFA)塩を意味する。
【００６４】
一般的ラット調製手順
75日齢(特記しない限り)の雌性スプラーグ・ドーリー・ラット(体重200〜225g)をCharles River Laboratories(Portage、MI)から入手する。実験動物は、Charles River Laboratoriesにおいて、両方の卵巣切除(OVX)か、または偽手術処置のいずれかを行い、次いで、1週間後に発送される。到着後、実験動物は、１ケージ当り、3または4匹ずつ金属製吊りケージで飼育し、食餌(カルシウム含量約0.5％)および水を1週間自由に摂取させる。室温は、最小相対湿度40％にて22.2℃±1.7℃に維持する。室内の光周期は、明期12時間および暗期12時間である。
投与計画組織採取：1週間の順化期間の後(したがって、OVXの2週間後)、式(Ｉ)の化合物(「F−I」)の毎日の投与を開始する。特記しない限り、1％カルボキシメチルセルロース懸濁液として、または20％シクロデキストリンに溶解して、17α−エチニルエストラジオールまたはF−Iを経口投与する。実験動物に4日間毎日投与する。投与計画にしたがって、実験動物の体重を量り、ケタミン：キシラジン(2:1、v:v)混合物で麻酔し、心臓穿刺により血液サンプルを採取する。次いで、CO_２で窒息させることによって実験動物を屠殺する。正中切開により子宮を切除し、湿潤子宮重量を測定する。17α−エチニルエストラジオールをSigma Chemical Co.、St．Louis、MOから入手する。
【００６５】
心臓血管疾患／高脂血症
上記血液サンプルを室温にて2時間凝固させ、3000rpmで10分間遠心分離して血清を得る。Boehringer Mannheim Diagnostics 高性能コレステロールアッセイを用いて血清コレステロールを決定する。要約すると、コレステロールを酸化して、コレスト−4−エン−3−オンと過酸化水素にする。次いで、過酸化水素を、ペルオキシダーゼの存在下、フェノールおよび4−アミノフェナゾンと反応させて、500 nmにて分光光度計で読むためのp−キノンイミン色素を製造する。次いで、標準曲線に対してコレステロール濃度を計算する。全アッセイは、Biomek Automated Workstationを用いて自動化される。
【００６６】
子宮好酸球ペルオキシダーゼ (EPO) アッセイ
酵素分析を行うまで、上記の子宮を4℃に維持する。次いで、0.005％ Triton X−100を含む50体積の50mM トリス緩衝液(pH8.0)中で子宮をホモジナイズする。トリス緩衝液中の0.01％過酸化水素および10mMのO−フェニレンジアミン(最終濃度)を加え、450nmにおける吸光度の増加を1分間モニターする。子宮における好酸球が存在すると、化合物のエストロゲン活性が現れる。反応曲線の最初の直線部分にかけて、15秒間隔の最大速度が決定される。
【００６７】
骨損失 ( 骨粗鬆症 ) テスト手順
前述の一般的調製手順にしたがって、ラット(１つの処置グループ当り6匹)を45日間毎日処置し、第36日に二酸化炭素窒息によって屠殺する。本明細書に記載するように測定すると最大の骨密度の減少に至るには35日間で十分であることがわかる。完全卵巣切除に関連するエストロゲン欠乏を確認するために、屠殺の時点で子宮を切除し、外来性の組織がない状態で解剖し、液体内容物を排出した後、湿潤重量を測定する。子宮重量は、通常、卵巣切除に応答して約７５％減少する。次いで、子宮を10％中性緩衝ホルマリンに入れ、続いて組織学的分析を行う。
右大腿骨を摘出し、発生するＸ線をデジタル化し、末端の骨幹端において画像解析プログラム(NIH image)によって分析する。これらの実験動物からの脛骨の隣接面も定量的コンピュータ断層撮影によって走査する。上記手順にしたがって、20％ヒドロキシプロピル β−シクロデキストリン中のF−Iまたはエチニルエストラジオール(EE₂)をテスト実験動物に経口投与する。F−Iは、エストロゲンまたはプロゲスチンと組み合わせて用いてもよい。
【００６８】
子宮線維症テスト手順
テスト１：子宮線維症を有する3〜20名の女性にF−Iを投与する。投与する化合物の量は、0.1〜1000mg/日であり、投与期間は3ヵ月である。子宮線維症における効果を投与期間中および投与停止後3ヶ月まで女性を観察する。
テスト２：投与期間が6ヵ月である以外は、テスト１と同じ手順を用いる。
テスト３：投与期間が1年である以外は、テスト１と同じ手順を用いる。
テスト４：持続性エストロゲン刺激を用いて、性的に成熟した雌性モルモットに平滑筋腫を誘発する。実験動物にエストラジオールを1週間に3〜5回、2ヶ月間または腫瘍が発生するまで投与する。F−Iまたはビヒクルを3〜16週間毎日投与し、次いで、実験動物を屠殺し、子宮を採取し、腫瘍の緩解について分析する。
テスト５：ヒト平滑筋腫からの組織を、性的に成熟した去勢された雌性ヌードマウスの腹腔および／または子宮筋層に移植する。外因性エストロゲンを与えて、外植された組織の成長を誘発する。場合によっては、採取した腫瘍細胞を移植前にインビトロで培養する。F−Iまたはビヒクルの処置を胃洗浄によって、3〜16週間毎日行い、移植片を除去し、成長または退行を測定する。屠殺時に、子宮を採取して、臓器の状態を評価する。
テスト６：ヒト子宮線維腫からの組織を採取し、インビトロにて、初代非形質転換培養物として維持する。外科的試料片を、滅菌メッシュまたは篩を介して押し付けるか、または別法として周囲の組織から離して細かく切って、単細胞懸濁物を作成する。細胞を、10％血清および抗生物質を含む培地に維持する。エストロゲンの存在下または不在下における成長速度を決定する。細胞を補体成分C3を産生する能力ならびに成長因子および成長ホルモンに対する反応についてアッセイする。インビトロにおいて、培養物をプロゲスチン、GnRH、F−Iおよびビヒクル処置後の増殖性反応について評価する。重要な細胞の特徴がインビトロで維持されるかどうかを決定するために、ステロイドホルモン受容体のレベルを週一回評価する。５〜２５人の患者からの組織を使用する。
テスト７：Fuchs−Youngら、「Inhibition of Estrogen−Stimulated Growth of Uterine Leiomyomas by Selective Estrogen Receptor Modulators」、Mol．Car.、17(3):151−159(1996)（これは全体を参考文献として本発明に援用される）の記載にしたがって、平滑筋腫誘発ELT細胞系のエストロゲン刺激性増殖を阻害するF−Iの能力を測定する。
【００６９】
子宮内膜症テスト手順
テスト１：１２〜１３匹の成体CD系雌性ラットをテスト動物として用いる。動物を数の等しい３つのグループに分割する。すべての動物の発情周期をモニターする。発情前期の当日に、各雌性動物に外科手術を行う。各グループの雌性動物の左の子宮角を切除し、小四角片に切断し、該四角片を腸間膜血流に隣接した種々の部位にゆるく縫合する。さらに、グループ２の雌性動物の卵巣を切除する。外科手術の翌日から、グループ１および２の動物には水の腹腔内注入を１４日間行い、グループ３の動物には1.0 mg／体重ｋｇのF−Iの腹腔内注入を１４日間行う。１４日間の処置後、各雌性動物を屠殺し、適用できる子宮内膜外植片、副腎、残っている子宮および卵巣を切除し、組織学的検査用に調製する。卵巣および副腎を秤量する。
テスト２：１２〜１３匹の成体CD系雌性ラットをテスト動物として用いる。動物を数の等しい２つのグループに分割する。すべての動物の発情周期をモニターする。発情前期の当日に、各雌性動物に外科手術を行う。各グループの雌性動物の左の子宮角を切除し、小四角片に切断し、該四角片を腸間膜血流に隣接した種々の部位にゆるく縫合する。外科手術の約５０日後に、グループ１の動物には水の腹腔内注入を２１日間行い、グループ２の動物には1.0 mg／体重ｋｇのF−Iの腹腔内注入を同じ継続期間行う。２１日間の処置後、各雌性動物を屠殺し、適用できる子宮内膜外植片および副腎を切除し、秤量する。外植片を成長の指標として測定する。発情周期をモニターする。
テスト３：子宮内膜組織のオートグラフを用いて、ラットおよび／またはウサギに子宮内膜症を誘発する。生殖的成熟度にある雌性動物の両側卵巣摘出を行い、エストロゲンを外来的に与えて、ホルモンを特定の一定レベルにする。自家移植した子宮内膜組織を５〜１５０匹の動物の腹膜に移植し、エストロゲンを与えて、外植組織の成長を引き起こす。毎日の胃洗浄を３〜１６週間行うことによって、本発明化合物の処置を行い、移植片を除去し、成長または退化を測定する。屠殺時に、そのままの子宮角を採取して、子宮内膜の状態を評価する。
テスト４：ヒト子宮内膜損傷からの組織を性的に成熟し、去勢した雌性ヌードマウスに移植する。外因性エストロゲンを与えて、外植組織の成長を引き起こす。移植前に、採取した子宮内膜細胞をインビトロで培養する場合もある。毎日の胃洗浄を３〜１６週間行うことによって、F−Iのの処置を行い、移植片を除去し、成長または退化を測定する。屠殺時に、そのままの子宮を採取して、そのままの子宮内膜の状態を評価する。
テスト５：ヒト子宮内膜損傷からの組織を採取し、インビトロにて、初代非形質転換培養物として維持する。外科的試験片を滅菌メッシュまたは篩を介して押し付けるか、または別法として、周囲の組織から離して細かく切って、単細胞懸濁物を作成する。細胞を、10％血清および抗生物質を含む培地に維持する。エストロゲンの存在または不在下における成長速度を決定する。補体成分C3を産生する能力ならびに成長因子および成長ホルモンに対する反応について細胞をアッセイする。インビトロにおいて、培養物をプロゲスチン、GnRH、F−Iおよびビヒクル処置後の増殖性反応について評価する。重要な細胞の特徴がインビトロで維持されるかどうかを決定するために、ステロイドホルモン受容体のレベルを週一回評価する。５〜２５人の患者からの組織を使用する。
【００７０】
エストロゲンとの併用による式 ( Ｉ ) の化合物の使用
閉経期前後および閉経後の女性は、たとえば、体のほてりなどの内因性エストロゲンの循環の減少に関連するマイナスの影響に対抗するために、ホルモン置換療法(HRT)を受けることが多い。しかし、HRTには、子宮および乳ガンといったような特定のガンの危険率の増加が伴っている。F−IをHRTに併用して用いるとこれらの危険を抑制することができる。
【００７１】
乳ガンの予防
本発明はまた、新たに乳ガンを発症する危険性があるレシピエントへのF−Iの投与に関する。本明細書で用いる用語「新た(de novo)」は、まず第一に、正常乳腺細胞がガン細胞または悪性細胞に形質転換または変態することの欠如を意味する。このような形質転換は、進化の過程を介して同じまたは娘細胞における段階において起こるか、または単一の極めて重要なイベントにおいて起こる。この新たな過程は、変態、コロニー形成またはすでに形質転換したかまたは悪性の細胞の初代腫瘍部位から新しい位置への拡散とは対照的である。
乳ガンを発症する特別な危険性のない個人とは、新たな乳ガンを発症するかもしれず、正常な危険率以上の該疾患の可能性の徴候あるいは疑いがなく、かつ該疾患に罹っているという診断をかつて受けたことがない者である。乳ガンの発症の一因となる最も大きな危険因子は、該疾患に罹患することの個人歴、またはたとえその存在の徴候がない緩和状態であるとしても、該疾患の早期の発生である。もう1つの危険因子は、該疾患の家族歴である。
発ガン物質N−ニトロソ−N−メチルウレアの投与によるラットにおける乳腺腫瘍の誘発は、乳ガンの研究にとって広く受け入れられている動物モデルであり、化学防御剤の効果を分析するのに適していることがわかっている。
【００７２】
２つの別の実験において、55日齢の雌性スプラーグ−ドーリーラットに、種々の量のF−I、(Z)−2−[4−(1,2−ジフェニル−1−ブテニル)フェノキシ]−N,N−ジメチルエタンアミン塩基(タモキシフェン塩基)またはコントロールを混合した食餌を自由に与える前に、1週間に50 mg／体重ｋｇのN−ニトロソ−N−メチルウレアの静脈内(実験１)または腹腔内(実験１)投与を行う。
実験１において、60 mg/kgの食餌および20 mg/kgの食餌の食餌投与量は、テスト動物にとって、およそ3および1 mg/体重kgに匹敵する投与量に相当する。
実験２において、20、6、2および0.6 mg/kgの食餌の食餌投与量は、テスト動物にとって、およそ1、0.3、0.1および0.03 mg/体重kgに匹敵する投与量に相当する。
毒性の徴候についてラットを観察し、週に一度秤量し、腫瘍形成を触診する。１３週後（実験１）または１８週後(実験２)にラットを屠殺し、腫瘍を確認し、検死解剖にて秤量する。
【００７３】
治療的使用方法および用量
本発明はまた、式(Ｉ)の化合物を用いる前述の方法を含み、必要に応じて、患者に有効量のエストロゲンまたはプロゲスチンを投与することを含む、エストロゲン欠乏に関連する疾患の抑制方法および内因性エストロゲンに対する異常な生理反応に関連する疾患の抑制方法を提供する。患者は、本発明化合物が望ましくないエストロゲンおよびプロゲスチンの副作用を抑制しながら、各医薬的作用剤の利点を受けるので、これらの処置は、骨粗鬆症の治療および血清コレステロールの低下に特に有用である。下記のいずれの閉経後テストにおいても、これらの併用処置の活性は、併用処置が女性における閉経後の症状を軽減するのに有用であることを示す。
【００７４】
種々の形態のエストロゲンおよびプロゲスチンが市販されている。エストロゲンベースの作用薬として、たとえば、エチニルエストロゲン(0.01〜0.03 mg/日)、メストラノール(0.05〜0.15 mg/日)およびプレマリン(登録商標)(Wyeth−Ayerst； 0.3〜2.5 mg/日)などの結合型エストロゲン性ホルモンが挙げられる。プロゲスチンベースの作用薬としては、たとえば、プロベラ(登録商標)(Upjohn； 2.5〜10 mg/日)などのメドロキシプロゲステロン、ノルエチルノドレル(1.0〜10.0 mg/日)およびノルエチンドロン(0.5〜2.0 mg/日)が挙げられる。好ましいエストロゲンベース化合物は、プレマリン(登録商標)であり、ノルエチルノドレルおよびノルエチンドロンが、好ましいプロゲスチンベース作用薬である。
【００７５】
エストロゲンおよびプロゲスチンベース作用薬それぞれの投与方法は、当業界で公知のものに一致する。本発明方法の大部分について、式(Ｉ)の化合物が、毎日１〜3回、継続的に投与される。しかし、周期的治療は、子宮内膜症の治療には特に有用であるが、あるいは疾患の痛みの発作が起きている間に急性手段として用いてもよい。再狭窄の場合、治療は、血管形成術などの医療処置後の短い(1〜6ヶ月)の間隔に限定される。
【００７６】
本明細書で用いる用語「患者」は、エストロゲン欠乏に関連する疾患を抑制することを必要とするか、あるいは内因性エストロゲンに対する異常な生理反応に関連する疾患を抑制することを必要とする温血動物または哺乳動物を意味する。当然のことながら、モルモット、イヌ、ネコ、ラット、マウス、ハムスターおよびヒトなどの霊長類が、該用語の意味の範囲内にある患者の例である。好ましい患者は、ヒトである。最も好ましい患者は、閉経後の人間の女性である。
【００７７】
本明細書で用いる用語「抑制する」は、予防、制止、抑止および進行もしくは重篤度の遅延化、停止または逆行ならびに食い止めおよび／または存在する特徴の治療といったような、その一般的に容認された意味を含むように定義される。本発明方法は、必要に応じて、医療的治療および／または予防的治療の両方を含む。
【００７８】
用語「エストロゲン欠乏」は、最適レベルのエストロゲンが欠けている状態を含意することを意味する。このレベルは、組織の機能に応じて、組織により異なる。したがって、エストロゲン欠乏が、エストロゲンの完全欠乏である場合もあり、また欠乏が、適切な組織機能にとってエストロゲンレベルが低すぎることを意味する場合もある。他の状態も原因となりうるが、人間の女性において、エストロゲン欠乏の２つの最も一般的な原因は閉経および卵巣切除である。エストロゲン欠乏は、骨粗鬆症ならびに高脂血症、大動脈の平滑筋細胞の増殖(再狭窄)、一酸化窒素の生成の減少(高血圧症)および酵素PAI−1(プラスミノーゲン活性化因子インヒビター−１)の生成の減少、すなわち血栓症などの心臓血管における影響といったような身体状態をもたらす。
【００７９】
尿失禁、膣の乾燥、自己免疫疾患の発生の増加および肌の張りの喪失などの閉経に関連する他の病変の軽減化または改善もまた、式(Ｉ)の化合物の投与によって達成される。
閉経後のエストロゲン欠乏に関連する身体状態の治療における有用性に加えて、本発明化合物はまた、閉経前および後の両方において、組織における内因性エストロゲンに対する不適当な反応に関連する疾患状態の治療に有用である。
組織における内因性エストロゲンに対する異常な細胞反応に関連する病的状態の1つの例は、エストロゲン依存性乳ガンである。エストロゲン依存性乳房腫瘍細胞は、エストロゲンの存在下に増殖し、この疾患の治療は、これらの細胞におけるエストロゲンのすべての活動を停止させることであった。
もう１つのエストロゲン依存性病変は、子宮線維症(子宮筋腫)である。本質的に、子宮線維症は、子宮壁において線維性組織の蓄積がある身体状態である。この状態は、女性の月経困難症および不妊症の原因である。この状態の正確な原因はよくわかっていないが、証拠によって、それが、エストロゲンに対する線維性組織の不適切な反応であることが示唆される。子宮線維症の最も一般的な治療は、費用もかかり、腹部癒着の形成や感染などの面倒な事態の原因となることもある外科的処置である。
【００８０】
この範疇に入るさらに別の疾患は、激しい痛み、子宮内膜または腹腔への出血を伴い、しばしば、不妊症をもたらす重篤な月経困難症の状態である子宮内膜症である。この状態の症状の原因は、ホルモンコントロールに対して不適切に反応する、不適切な組織に位置する異所性の子宮内膜成長であると思われる。
本明細書で用いる用語「治療有効量」は、本明細書に記載した種々の病的状態の症状を軽減することができる本発明化合物の量を意味する。本発明にしたがって投与される化合物の特定の用量は、もちろん、たとえば、投与される化合物、投与経路、患者の生命状態および治療される病変状態などの事例を取り巻く特定の状況によって決定される。本発明化合物のヒトに対する代表的な一日用量は、非毒性用量レベルである約1 mg〜約600 mg/日である。好ましい一日用量は、一般に、約15 mg〜約300 mg/日である。最も好ましい用量範囲は、10 mg、20 mg、30 mg、40 mg、50 mg、60 mg、70 mg、80 mg、90 mgおよび100 mgであり、一日１〜３回投与する。
【００８１】
本発明化合物は、経口、直腸、経皮、皮下、静脈内、筋肉内および鼻腔内といったような種々の経路で投与することができる。これらの化合物は、投与前に製剤されるのが好ましく、その選択は、主治医によって決定される。したがって、本発明の別の態様は、有効寮の式(Ｉ)の化合物またはその医薬的に許容しうる塩、必要に応じて、エストロゲンまたはプロゲスチンおよび医薬的に許容しうる担体、希釈剤または賦形剤を含む医薬組成物である。
このような製剤中の有効成分の総量は、製剤の0.1重量％〜99.9重量％である。「医薬的に許容しうる」とは、担体、希釈剤、賦形剤および塩が、他の製剤成分それぞれの作用に影響を及ぼしてはならず、そのレシピエントにとって有害であってはならないことを意味する。
【００８２】
本発明の医薬製剤は、周知であって容易に入手しうる成分を用い、当業界で公知の手順によって製造することができる。たとえば、式(Ｉ)の化合物をエストロゲンまたはプロゲスチン化合物と共に、あるいは無しで、通例の賦形剤、希釈剤または担体と製剤することができ、錠剤、カプセル剤、懸濁液剤、散剤などの剤形にすることができる。このような製剤に適した賦形剤、希釈剤および担体の例として、以下のものが挙げられる：デンプン、糖類、マンニトールおよびシリカ誘導体などの充填剤および増量剤；カルボキシメチルセルロースおよび他のセルロース誘導体、アルギン酸塩、ゼラチンおよびポリビニルピロリドンなどの結合剤；グリセロールなどの保湿剤；炭酸カルシウムおよび重炭酸ナトリウムなどの崩壊剤；パラフィンなどの溶解遅延剤；第四級アンモニウム化合物などの吸収促進剤；セチルアルコール、モノステアリン酸グリセロールなどの界面活性剤；カオリンおよびベントナイトなどの吸着性担体；およびタルク、ステアリン酸カルシウムならびにマグネシウムおよび固体ポリエチルグリコールなどの滑沢剤。
【００８３】
本発明化合物は、簡便な経口投与用のエリキシル剤または液剤として、またはたとえば、筋肉内、皮下または静脈内経路などの非経口投与に適した液剤としても製剤することができる。さらに、本発明化合物は、徐放性剤形などとしての製剤に適している。該製剤は、それらが、有効成分を単独で、または好ましくは特定の生理的位置において、あるいは、一定の時間をおいて放出するように構築することができる。コーティング、包膜および保護マトリックスは、たとえばポリマー物質またはワックスから製造することができる。
式(Ｉ)の化合物は、一般に、単独または本発明の医薬的作用剤と併用して、慣例の製剤において投与される。

Claims (46)

1. 式：
   

   

   ［式中、
   R1は、−H、−OH、−O(C1−C4アルキル)、−OCOC6H5、−OCO(C1−C6アルキル)または−OSO2(C2−C6アルキル)；
   R2およびR³はそれぞれ独立して、−H、−OH、−O(C1−C4アルキル)、−OCOC6H5、−OCO(C1−C6アルキル)、−OSO2(C2−C6アルキル)またはハロ；
   R4は、1−ピペリジニル、1−ピロリジニル、メチル−1−ピロリジニル、ジメチル−1−ピロリジニル、4−モルホリノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジイソプロピルアミノまたは1−ヘキサメチレンイミノ；
   nは、1、2または3；
   Xは、−C(O)−または−CH₂−；および
   Yは、−O−、−S−、−NH−、−NMe−または−CH₂−である］
   の化合物またはそのエナンチオマーもしくは医薬的に許容しうる塩。
2. Xが、−CH₂−である請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容しうる塩。
3. Yが、−O−である請求項２に記載の化合物またはその医薬的に許容しうる塩。
4. nが、2である請求項３に記載の化合物またはその医薬的に許容しうる塩。
5. R^１が、−OHである請求項４に記載の化合物またはその医薬的に許容しうる塩。
6. R⁴が、1−ピペリジニルである請求項５に記載の化合物またはその医薬的に許容しうる塩。
7. R²またはR³が、−OHである請求項３に記載の化合物またはその医薬的に許容しうる塩。
8. R²またはR³が、−OHである請求項５に記載の化合物またはその医薬的に許容しうる塩。
9. R²およびR³が、−Hである請求項６に記載の化合物またはその医薬的に許容しうる塩。
10. Xが、−C(O)−である請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容しうる塩。
11. Yが、−O−である請求項１０に記載の化合物またはその医薬的に許容しうる塩。
12. nが、2である請求項１１に記載の化合物またはその医薬的に許容しうる塩。
13. R¹が、−OHである請求項１２に記載の化合物またはその医薬的に許容しうる塩。
14. R⁴が、1−ピペリジニルである請求項１３に記載の化合物またはその医薬的に許容しうる塩。
15. R²またはR³が、−OHである請求項１１に記載の化合物またはその医薬的に許容しうる塩。
16. R²またはR³が、−OHである請求項１３に記載の化合物またはその医薬的に許容しうる塩。
17. R²およびR³が、−Hである請求項１４に記載の化合物またはその医薬的に許容しうる塩。
18. [6−メトキシ−2−(4−メトキシフェニル)−3,4−ジヒドロ−2H−キノリン−1−イル]−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)フェニル]メタノン；
    (6−メトキシ−2−フェニル−3,4−ジヒドロ−2H−キノリン−1−イル)−[4−2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)フェニル]メタノン；
    [6−ヒドロキシ−2−(4−ヒドロキシフェニル)−3,4−ジヒドロ−2H−キノリン−1−イル]−[4−2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)フェニル]メタノン；
    (6−ヒドロキシ−2−フェニル−3,4−ジヒドロ−2H−キノリン−1−イル)−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)フェニル]メタノン；
    6−メトキシ−2−フェニル−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン；
    6−メトキシ−2−フェニル−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン；
    2−(4−ヒドロキシフェニル)−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン−6−オール；
    2−フェニル−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン−6−オール；
    6−メトキシ−2−(4−メトキシフェニル)−1−[4−(2−ピロリジン−1−イル−エトキシ)ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン；
    2−(4−ヒドロキシフェニル)−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン−6−オール；
    6−メトキシ−2−(3−メトキシフェニル)−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロ−キノリン；および
    2−(3−ヒドロキシフェニル)−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロ−キノリン−6−オールから選ばれる請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容しうる塩。
19. 2−(4−ヒドロキシフェニル)−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロキノリン−6−オールである請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容しうる塩。
20. 2−(3−ヒドロキシフェニル)−1−[4−(2−ピペリジン−1−イル−エトキシ)−ベンジル]−1,2,3,4−テトラヒドロ−キノリン−6−オールである請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容しうる塩。
21. 請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容しうる塩、および必要に応じて有効量のエストロゲンまたはプロゲスチンを、医薬的に許容しうる担体、希釈剤または賦形剤と組み合わせて含む医薬組成物。
22. エストロゲン欠乏に関連する疾患の抑制方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式：
    

    

    ［式中、
    R1は、−H、−OH、−O(C1−C4アルキル)、−OCOC6H5、−OCO(C1−C6アルキル)または−OSO2(C2−C6アルキル)；
    R2およびR³はそれぞれ独立して、−H、−OH、−O(C1−C4アルキル)、−OCOC6H5、−OCO(C1−C6アルキル)、−OSO2(C2−C6アルキル)またはハロ；
    R4は、1−ピペリジニル、1−ピロリジニル、メチル−1−ピロリジニル、ジメチル−1−ピロリジニル、4−モルホリノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジイソプロピルアミノまたは1−ヘキサメチレンイミノ；
    nは、1、2または3；
    Xは、−C(O)−または−CH₂−；および
    Yは、−O−、−S−、−NH−、−NMe−または−CH₂−である］
    の化合物またはその医薬的に許容しうる塩を投与することを含む方法。
23. 患者がヒトである請求項２２に記載の方法。
24. ヒトが閉経後の女性である請求項２３に記載の方法。
25. 化合物を予防的に投与する請求項２２に記載の方法。
26. エストロゲン欠乏の症状が、骨損失である請求項２２に記載の方法。
27. 骨損失が、骨粗鬆症である請求項２２に記載の方法。
28. エストロゲン欠乏の症状が、心臓血管疾患である請求項２２に記載の方法。
29. 内因性エストロゲンに対する異常な生理反応に関連する疾患の抑制方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式：
    

    

    ［式中、
    R1は、−H、−OH、−O(C1−C4アルキル)、−OCOC6H5、−OCO(C1−C6アルキル)または−OSO2(C2−C6アルキル)；
    R2およびR³はそれぞれ独立して、−H、−OH、−O(C1−C4アルキル)、−OCOC6H5、−OCO(C1−C6アルキル)、−OSO2(C2−C6アルキル)またはハロ；
    R4は、1−ピペリジニル、1−ピロリジニル、メチル−1−ピロリジニル、ジメチル−1−ピロリジニル、4−モルホリノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジイソプロピルアミノまたは1−ヘキサメチレンイミノ；
    nは、1、2または3；
    Xは、−C(O)−または−CH₂−；および
    Yは、−O−、−S−、−NH−、−NMe−または−CH₂−である］
    の化合物またはその医薬的に許容しうる塩を投与することを含む方法。
30. 患者がヒトである請求項２９に記載の方法。
31. ヒトが閉経後の女性である請求項３０に記載の方法。
32. 化合物を予防的に投与する請求項２９に記載の方法。
33. 内因性エストロゲンに対する異常な生理反応に関連する疾患が、エストロゲン依存性ガンである請求項２９に記載の方法。
34. ガンが、乳ガンである請求項３３に記載の方法。
35. 内因性エストロゲンに対する異常な生理反応に関連する疾患が、子宮内膜症である請求項２９に記載の方法。
36. 内因性エストロゲンに対する異常な生理反応に関連する疾患が、子宮線維症である請求項２９に記載の方法。
37. 調合薬として使用するための請求項１〜２０のいずれかに記載の化合物。
38. エストロゲン欠乏に関連する疾患を抑制するための医薬の製造における、請求項１〜２０のいずれかに記載の化合物の使用。
39. エストロゲン欠乏の症状が、骨損失である請求項３８に記載の使用。
40. 骨損失が、骨粗鬆症である請求項３９に記載の使用。
41. エストロゲン欠乏の症状が、心臓血管疾患である請求項３８に記載の使用。
42. 内因性エストロゲンに対する異常な生理反応に関連する疾患を抑制するための医薬の製造における、請求項１〜２０のいずれかに記載の化合物の使用。
43. 疾患が、エストロゲン依存性ガンである請求項４２に記載の使用。
44. ガンが、乳ガンである請求項４３に記載の使用。
45. 疾患が、子宮内膜症である請求項４２に記載の使用。
46. 疾患が、子宮線維症である請求項４２に記載の使用。