JP2004509152A

JP2004509152A - 放射性金属標識分子のプロキレート剤

Info

Publication number: JP2004509152A
Application number: JP2002528305A
Authority: JP
Inventors: メシェ　ヘルムート　エル．; アイゼンウインナー　クラウス; パウエル　ピア
Original assignee: ユニバーシティ　ホスピタル
Priority date: 2000-05-12
Filing date: 2001-05-11
Publication date: 2004-03-25
Also published as: AU2001277488B2; DE60104421T2; WO2002024235A2; ATE271396T1; US20060233704A1; EP1289571B1; ES2221903T3; AU7748801A; EP1289571A2; WO2002024235A3; DE60104421D1

Abstract

生物活性分子を放射性金属によって標識するキレート化合物であって：一般式（ａ）を有し、両方のＹ基は図示されるトランスかシスのいずれかの配向であり；エフェクター分子Ａは例えばペプチド特にオクトレオチド、ＣＣＫ、サブスタンスＰ、又はガストリン、若しくはたんぱく質特に抗体又は酵素、若しくは糖、若しくは例えばドキソルビシンのような放射線増感剤であり；Ｒは水素、Ｃ_１〜Ｃ_３アルキル又はアルコールであり；Ｘはスペーサ特に（ＣＨ_２）_ｎ−Ｘ’で当該ｎは１〜１０でＸ’はＣＯＯＨ、ＮＨ_２、ＳＨ、ＯＨ又はハロゲンを特にＢｒ、Ｉ又はＣｌとするＯ−ハロゲン、若しくは構造式（ｂ）又は構造式（ｃ）であってＹはＣＯＯ⁻、ＣＨ_２ＣＯＮＨ_２、又はＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨであり、任意に放射性金属錯体とする。

Description

【０００１】
【発明が属する技術分野】
本願発明は、放射性金属標識のために生物活性ペプチドと結合する新規な二官能価のプロキレート剤の便宜的な合成、及び調整することができる放射性金属標識されたペプチドに関し、それら新規のプロキレート剤の使用にも関する。
【０００２】
【従来の技術】
ＤＯＴＡ（１，４，７，１０−テトラキス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０テトラアザシクロ　ドデカン）及びその誘導体化合物は、種々のジ−及び三価の金属イオンに対して非常に安定に適合するものとして、生物医学的用途における重要なクラスのキレート剤と同等である。Ｇｄ（ＤＯＴＡ）^−１は重要なＭＲＩ（磁気共鳴映像法）における造影剤であって、二官能価化して放射免疫における治療で用いられる。
【０００３】
先端分野においては、キレート剤を共役させた生物活性ペプチドを放射性金属によって標識して、種々の分野における診断や腫瘍核における治療に用いられる。固相、液相ペプチドの合成手順と適合するプロキレート剤（脱保護によりキレート剤になる化合物）が便利で収率の高い合成のために重要である。今までのところ、そのようなプロキレート剤は利用可能ではない。
【０００４】
【非特許文献１】
化学報告（ＣｈｅｍｉｓｃｈｅＢｅｒｉｃｈｔｅ），１９２７年，６０，２１９７−２２０５
【０００５】
【非特許文献２】
アームストロング　エー．他（Ａｒｍｓｔｒｏｎｇ，Ａ．ｅｔａｌ），テトラヘドロン　レターズ（ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．），１９８８年，２９，２４８３−２４８６
【０００６】
【非特許文献３】
アンドレ他（Ａｎｄｒｅｅｔａｌ．），化学ヨーロッパジャーナル（Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．），１９９９年，５，２９７７−２９８２
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
従って本願発明の目的は、固相、液相ペプチドの合成手順と適合する新規クラスのプロキレート剤を提供することあって、当該プロキレート剤は、ペプチドのような生物活性エフェクター分子と結合させるために用いることができる。
【０００８】
本願発明により、ＤＯＴＡ、ＴＲＩＴＡ、ＴＥＴＡ、若しくは４ではなく５又は６のＮ原子からなる構造を基部とする二官能価大環状のシントン（プロキレート剤）が提供され、当該シントンは特異的に保護され、ルイス強酸の放射性金属によって標識するために固相ペプチドの合成手順に適合する。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
本願発明は放射性金属標識のためのポリアザ大環状化合物に関し、Ｎ_ｎ系であり、当該ｎは４、５又は６で可変の環の大きさであり、生物活性エフェクター分子中のアミノファンクションと結合するために当該Ｎ原子の少なくとも１つがフリーのカルボキシレートと置換される一方で、全てのＮ原子は保護側鎖を持っている。生物活性エフェクター分子の結合の後、保護側鎖は脱保護することができ標識のためのキレート機能を曝すことができる。
【００１０】
本願発明の特定の化合物は一般式：
【化３】

を有している。
【００１１】
そのような化合物は例えば、１−（１−カルボキシ−３−カルボｔｅｒｔブトキシプロピル）−４，７，１０（カルボｔｅｒｔブトキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（ＤＯＴＡＧＡ（ｔＢｕ）４）である。
【００１２】
本願発明の化合物は、以下のようにして調製される。相当するアミノ酸から始まって、α−ブロモ−誘導体が合成される。この誘導体は互いに直交するように保護されている（ｔＢｕ、Ｂｚｌ）。このアルキル化剤は、サイクレン、サイクラム等と１：１の付加で反応して、続いてブロモ酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルによってトリアルキル化され、Ｈ_２／Ｐｄによって接触水素化される。
【００１３】
このシントンは単官能であり、ペプチドのＮ−末端と結合するフリーのカルボキシレートを持ち様々な生体分子と結合し、脱保護の後には当業者に知られている多数の放射性金属によって標識され得る。
【００１４】
本願発明はさらには特に生物活性分子を放射性金属標識する化合物であって一般式：
【化４】

を有するキレート化合物で、両方のＹ基の配向は図示されるトランス又はシスのいずれかとすることができ；エフェクター分子Ａは例えばペプチド特にオクトレオチド、ＣＣＫ、サブスタンスＰ又はガストリン、若しくはタンパク質特に抗体又は酵素、若しくは糖、若しくはドキソルビシンのような放射線増感剤；Ｒは水素、Ｃ_１〜Ｃ_３アルキル、又はアルコール；Ｘは、スペーサ特に（ＣＨ_２）_ｎ−Ｘ’で当該ｎは１〜１０でＸ’はＣＯＯＨ、ＮＨ_２、ＳＨ、ＯＨ又は特にハロゲンをＢｒ、Ｉ、又はＣｌとするＯ−ハロゲン、若しくはＸは構造式：
【化５】

で示される分子であって、ＹはＣＯＯ⁻、ＣＨ_２ＣＯＮＨ_２又はＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨである。
【００１５】
原則として、本願発明は具体的な組合せが記載されていようがいまいが、上記の置換基の可能なすべての組合わせに関する。
【００１６】
別の天然又は非天然アミノ酸、例えば保護システイン等を用いるために、Ｎ_４系の代わりにＮ_５又はＮ_６系で構成することができる。天然及び非天然アミノ酸のリストは当業者に知られている。
【００１７】
新規のＤＯＴＡを基部とする二官能価のプロキレート剤の一つは、１−（１−カルボキシ−３−カルボｔｅｒｔブトキシプロピル）−４，７，１０（カルボｔｅｒｔブトキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（ＤＯＴＡＧＡ（ｔＢｕ）４（６ｄ））であり、ここではモデル化合物としての役割を果たす。本願発明のその他の化合物はアナログ態様で作成される点が留意されるべきである。本願発明は６ｄの化合物みに限られるのではない。
【００１８】
本願発明の別の具体例は表３に記載されている。
【００１９】
６ｄの５つの合成ステップは実施例に示されている。これは全収率で約２０％である。固相での生物活性ペプチドに対する６ｄの結合はＣＣＫ−Ｂ（コレサイトキニン）アナログを用いた例示である。
【００２０】
ここで示されるのは、生物活性ペプチドのＮ−末端、別の有用な生物医学的な用途におけるアミノファンクションに結合する互いに直交するように保護された二官能価のプロキレート剤についての合成ステップである。ＤＯＴＡ−誘導のキレート剤は安定且つ効率的な金属イオンとの結合、及び生体分子結合の機能に加えて、４つの完全なカルボン酸を備えた大環状のテトラアザシクロドデカン環であるべきである。
【００２１】
【発明の実施の形態】
方策（ストラテジー）には、サイクレン（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン）のモノアルキル化のため、直交することによって保護されているブロモアルキルジカルボン酸ジエステルの合成を含んでいる。化合物６（ｎ＝１、２）の合成は、ホルムバーグ（非特許文献１）に類似した方法の後、ｔｅｒｔ−ブチルトリクロロ−アセトイミデート（ＴＢＴＡ）を試薬（非特許文献２）として用いたｔｅｒｔ−ブチル化の方法を用いた、商業上利用可能なアスパラギン（１ｂ）又はグルタミン酸−４−（５）ベンジルエステル（１ｄ）から始まる５ステップの工程よりなる（スキーム１）。
【００２２】
不可欠なステップであるサイクレンのモノアルキル化において、ブロモアルキルジカルボン酸ジエステル（３ａ−ｄ）を用いたことによって大きく異なる収率を示す（表１）。
表１
異なるブロモジカルボキシル酸エステルによるモノアルキル化における収率
【表１】

【００２３】
スキーム１：
α−ブロモコハク酸−１−ｔｅｒｔブチルエステル−４−ベンジルエステル（３ｂ）及びα−ブロモグルタル酸−１−ｔｅｒｔブチルエステル−５−ベンジルエステル（３ｄ）の合成である。
【化６】

【００２４】
近年の研究（非特許文献３）によると、方策（ストラテジー）は金属を保護基として用いることである。この研究において、コハク酸−ジ−ｔｅｒｔブチルエステル（３ｃ）を誘導する試みがなされると共に、モノアルキル化については主産物が脱離生成物フマル酸−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルであって収率５％以下であることがわかった。興味深いことに類似のジフェニルメチルジエステル（３ａ）は高いモノアルキル化収率を生じさせ、離脱がごく僅かである。同種の２−ブロモグルタル−１−ｔｅｒｔブチル−５−ベンジルエステル（３ｄ）については離脱生成物が全くなく、それは明かにπ共役が形成されないからである。
【００２５】
残った窒素は、３つの等価なブロモアセチル酸ｔｅｒｔブチルエステルを用いてＣＨＣｌ_３／Ｋ_２ＣＯ_３中でアルキル化される。
【００２６】
【化７】

ベンジルエステル基の脱保護がＨ２／Ｐｄ／Ｃによって行われる。
【化８】

【００２７】
５つのステップによる、１−（１−カルボキシ−３−カルボｔｅｒｔブトキシ−プロピル）−４，７，１０（カルボｔｅｒｔブトキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（ＤＯＴＡＧＡ（ｔＢｕ_４））（６ｄ）の全収率は約２０％であり、１−（１−カルボキシ−２−カルボｔｅｒｔブトキシエチル）−４，７，１０（カルボｔｅｒｔブトキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（ＤＯＴＡＳＡ（ｔＢｕ_４））（６ｂ）は僅か約２％であった。
【００２８】
６ｄの便宜な使用法は、ＨＡＴＵ（Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾル）−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−ウロニウムヘキサフルオロリン酸塩）をカップリング試薬として用いて、これをリンクアミド樹脂に結合させたＣＣＫ−ＢアナログＤ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｎｌｅ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＮＨ_２（７）にカップリングすることであることが実証された。脱保護の後、（１８時間、常温、ＴＦＡ：フェノール：チオアニソール：水　８５：５：５：５）ＤＯＴＡＧＡ−７は高収率で得られ他の放射性標識されたＣＣＫ−Ｂアナログと比較して高い特性を有している。
【００２９】
本願発明によって、このようにして新しいタイプのプロキレート剤が一般に見出され、特にプロキレート剤６ｄは、広範囲の金属放射性ペプチドの分野や、他の放射性標識された生体分子及びＭＲＩ造影剤に基づくＧｄ^３＋の合成において有用である。ＤＯＴＡＧＡは異なる放射性金属で標識することを考慮に入れることにより、診断上（^１１１Ｉｎ、^{６７／６８}Ｇａ）及び内科放射線医学用途（^９０Ｙ、^１７７Ｌｕ）の両方に用いることができる。
【００３０】
本願発明は後述の実施例において図面を用いて説明される。本願発明の化合物を調製するための合成経路は図１〜５に示されている。
【００３１】
【実施例】
（実施例１）１から２への反応における標準的な手順
６ｇ（２５．９ｍｍｏｌ）のＬ−グルタミン酸−５ベンジルエステル（１ｄ）及び９．１ｇ（８８．５ｍｍｏｌ）の臭化ナトリウムを４５ｍｌ臭化水素酸（４６ｍｍｏｌ）１Ｎ溶液に溶解して０℃に冷し、３．１７５ｇの亜硝酸ナトリウム（４６ｍｍｏｌ）を同じ分量（ｐｏｒｔｉｏｎｗｉｓｅ）で添加した。０℃で２時間攪拌して２．２５ｍｍｏｌ濃硫酸、続いてジエチルエーテルを添加した。
【００３２】
水相は３回ジエチルエーテルで抽出した。複合の有機相は４回かん水で抽出し、Ｎａ_２ＳＯ_４によって乾燥し、濃縮した。
【００３３】
粗精製物はクロマトグラフィー（シリカゲル６０；ヘキサン／ＥｔＯＡｃ　３：１から２：１）によって黄色いオイルとして精製して収率は４．８ｇ（６３％）であった。^１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、ＳｉＭｅ_４）：１０．１（１Ｈ、ＣＯＯＨ；７．３（ｍ、５Ｈ、Ａｒ）；５．１５（ｓ、２Ｈ、ＣＨ_２−Ｐｈ）；４．４（ｄｄ、^３Ｊ＝５．７、１Ｈ、ＣＨＢｒ）；２．６（ｔ、^３Ｊ＝６．８、２Ｈ、ＣＨ_２−ＣＯＯＢｚｌ）；２．５−２．２（ｍ、２Ｈ、ＣＨＢｒ−ＣＨ_２−ＣＨ_２）；^１３Ｃ−ＮＭＲ（７５　ＭＨＺ、ＣＤＣｌ_３、ＳｉＭｅ_４）：１７４．５（ＣＯＯＨ）；１７１．９（ＣＯＯＢｚｌ）；１３５．５（ＣＨ_２Ｃ（Ａｒ））；１２８．６、１２８．４、１２８．３Ｃ（Ａｒ））；６６．８（Ｏ−ＣＨ_２−Ａｒ）；４４．１（ＨＣＢｒ）；３１．４（ＨＣＢｒ−ＣＨ_２）；２９．４（ＣＨ_２ＣＯＯＢｚｌ；ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ（強度）：３０２、３００（１２、［Ｍ］^＋）；９１（１００、［Ｂｚｌ］^＋）であった。
【００３４】
（実施例２）２から３への反応における標準的な手順
２０ｍｌＣＨＣｌ_３に４．８ｇ（１５．９ｍｍｏｌ）の２ｄを溶解したものに、６．２６ｍｌ（３４．１ｍｍｏｌ）のＴＢＴＡ（ｔｅｒｔ−ブチルトリクロロアセトイミデート）を２０ｍｌシクロヘキサンに溶解したものを２０分間以上かけて滴状添加した。添加の間、白い沈殿物が生成されるが、３．５ｍｌのＤＭＡ、続いて触媒として３２０μｌの三フッ化ホウ素エチルエーテルが添加してそれは溶解された。反応混合物は３日間室温（ＲＴ）で撹拌した。
【００３５】
当該混合物は、濃縮され残ったＤＭＡ相を３回ヘキサンで抽出した。ヘキサン相を蒸留して残滓をシリカゲル６０（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ　２０：１　後９：１）のクロマトグラフフィーにかけ、３．５ｇ（６１％）の無色の液体が得られた。^１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、ＳｉＭｅ_４）：７．４（ｍ、５Ｈ、Ａｒ）；５．１５（ｓ、２Ｈ、ＣＨ_２−Ｐｈ）；４．３５（ｄｄ、１Ｈ、ＣＨＢｒ）；２．６（ｔｄ、２Ｈ、ＣＨ_２−ＣＯＯＢｚｌ）；２．５−２．２（ｍ、２Ｈ、ＣＨＢｒ−ＣＨ_２−ＣＨ_２）；１．５（ｓ、９Ｈ、Ｃ（ＣＨ_３）_３）であった。^１３Ｃ−ＮＭＲ（７５　ＭＨＺ、ＣＤＣｌ_３、ＳｉＭｅ_４）：１７２．４　ＣＯＯＢｚｌ）；１６８．７（ＣＯＯｔＢｕ）；１３６．１（ＣＨ２Ｃ（Ａｒ））；１２９．０、１２８．８、１２８．７（Ｃ（Ａｒ））；８３．１（Ｃ（ＣＨ_３）_３）；６７．０（ＯＣＨ_２−Ａｒ）；４７．１（ＨＣＢｒ）；３２．０（ＨＣＢｒ−ＣＨ_２）；３０．１（ＣＨ_２ＣＯＯＢｚｌ）；２８．１（ＣＣＨ_３）_３）；ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ（強度）：３０２、３００（１８、［Ｍ−Ｃ_４Ｈ_９］^＋）；５７（１００、［Ｃ_４Ｈ_９］^＋）であった。
【００３６】
（実施例３）サイクレンのモノアルキル化の一般的な手順
８７０ｍｇ（２．４４ｍｍｏｌ）のα−ブロモグルタル酸−１−ｔｅｒｔ−ブチルエステル−５−ベンジルエステル（３ｄ）を含むＣＨＣｌ_３を、８８５ｍｇ（４．９ｍｍｏｌ）のサイクレンを含む４ｍｌＣＨＣｌ_３中に１時間かけて滴状添加した。混合物は常温で２日間攪拌し、褐色油として濃縮された。当該粗生成物はカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０；エタノール／ＮＨ_３　９５：５）によって精製し、収率９２０ｍｇ（８３％）の無色の液体が得られた。
【００３７】
^１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、ＳｉＭｅ_４）：７．３５（ｍ、５Ｈ、Ａｒ）；５．１（ｓ、２Ｈ、ＣＨ_２−Ｐｈ）；３．２５（ｄｄ、１Ｈ、ＣＨＢｒ）；２．９−２．５（ｍ、１８Ｈ、ＮＣＨ_２、ＣＨ_２ＣＯＯＢｚｌ）；２．２−１．８５（ｍ、２Ｈ、ＣＨＮ−ＣＨ_２−ＣＨ_２）；１．４５（ｓ、９Ｈ、Ｃ（ＣＨ_３）_３）；^１３Ｃ−ＮＭＲ（７５ＭＨＺ、ＣＤＣｌ_３、ＳｉＭｅ_４）：１７３．１（ＣＯＯＢｚｌ）；１７１．５（ＣＯＯｔＢｕ）；１３５．８（ＣＨ_２Ｃ（Ａｒ））；１２８．５、１２８．３、１２８．２（Ｃ（Ａｒ））；８１．４（Ｃ（ＣＨ_３）_３）；６６．２（Ｏ−ＣＨ_２−Ａｒ）；６３．５（ＨＣＮＣＨ_２）；４８．８、４８．０，４６．５、４５．６（ＮＣＨ_２ＣＨ_２Ｎ）；３０．６（ＣＨ_２ＣＯＯＢｚｌ）；２８．２（Ｃ（ＣＨ_３）_３）；２４．５（ＨＣＮ−ＣＨ_２）；ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ：（強度）：４４９．３（５６、［Ｍ＋Ｈ］^＋；２４５．８（１００、［Ｍ＋ＣＨ_３ＣＮ＋２Ｈ］^＋＋）であった。
【００３８】
（実施例４）１−（１−カルボベンジロキシ−３−カルボｔｅｒｔブトキシ−プロピル）−４，７，１０−（カルボｔｅｒｔブトキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（５ｄ）の合成
１．１ｇ（５．６ｍｍｏｌ）ブロモ酢酸−ｔｅｒｔ−ブチルエステル、１．０２ｇ（２．２７ｍｍｏｌ）１−（１−カルボ−ベンジロキシ−３−カルボｔｅｒｔブトキシプロピル）１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（４ｄ）、及び２．６３ｇ（１９．１ｍｍｏｌ）乾燥炭酸カリウムを１０ｍｌの乾燥アセトニトリルに縣濁し、常温で１８時間攪拌し、セライトで漉し、エバポレートして乾燥した。
【００３９】
粗精製物はカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０；ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＥｔＯＨ　９：１の後ＥｔＯＨ／ＮＨ_３　９５：５）によって精製して収率１．３９（７３％）の黄色い油（５ｄ）を得た。^１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、ＳｉＭｅ_４）：７．３５（ｍ、５Ｈ、Ａｒ）；５．１（ｓ、２Ｈ、ＣＨ_２−Ｐｈ）；３．６−１．９（ｍ、２７Ｈ、ＣＨＮ、ＮＣＨ_２、ＣＨ_２ＣＯＯＢｚｌ、ＣＨＮＣＨ_２−ＣＨ_２、ＣＨ_２ＣＯＯＣ（ＣＨ_３）_３）；１．４５（ｓ、３６Ｈ、Ｃ（ＣＨ_３）_３）；^１３Ｃ−ＮＭＲ（７５　ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、ＳｉＭｅ_４）：１７４．６（ＣＯＯＢｚｌ）；１７２．９、１７２．８、１７２．６（ＣＯＯｔＢｕ）；１３５．６（ＣＨ_２Ｃ（Ａｒ））；１２８．５、１２８．３、１２８．２（Ｃ（Ａｒ））；８２．４、８１．８、８１．８（Ｃ（ＣＨ_３）_３）；６６．３（Ｏ−ＣＨ_２−Ａｒ）；５５．８、５５．７、５５．４、５２．６、５２．３、５０．３、４８．５、４８．１、４７．１、４４．３（１３Ｃ、ＨＣＮＣＨ_２、ＮＣＨ_２ＣＨ２_Ｎ、ＣＨ_２ＣＯＯｔＢｕ、ＣＨ_２ＣＯＯＢｚｌ）；（ＮＣＨＣＨ_２ＣＨ_２）；２８．０、２８．０、２７．８、２７．６（Ｃ（ＣＨ_３）_３）；ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ（強度）：８１３．６（２２、［Ｍ＋Ｎａ］^＋）；７９１．６（３８、［Ｍ＋Ｈ］^＋）；３９６．５（１００、［Ｍ＋２Ｈ］^＋＋）であった。
【００４０】
（実施例５）ＤＯＴＡＧＡ（ｔＢｕ）４（６ｄ）の合成
６００ｍｇ（０．７６ｍｍｏｌ）の５ｄをメタノールに溶解し、１ｍｌＨ_２Ｏに縣濁した３０ｍｇＰｄ／Ｃを添加した。
【００４１】
当該混合液は２日間水素添加し、セライトでろ過してエバポレーターで乾燥させた。当該粗生成物はシリカゲル６０（ＥｔＯＨ／ＮＨ_３　９５：５）によって４７０ｍｇ（８４．６％）の収率で白い固体を得た（６ｄ）。^１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、ＳｉＭｅ_４）：６．５（ｂｒ、１Ｈ、ＣＯＯＨ）；３．６−２．０（ｍ、２７Ｈ、ＣＨＮ、ＮＣＨ_２、ＣＨ_２ＣＯＯＨ、ＣＨＮ−ＣＨ_２−ＣＨ_２、ＣＨ_２ＣＯＯＣ（ＣＨ_３）_３）；１．４５（ｓ、３６Ｈ、Ｃ（ＣＨ_３）_３）；^１３Ｃ−ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、ＳｉＭｅ_４）：１７５．２（ＣＯＯＨ）；１７５．０、１７２．９、１７２．８、１７２．６（ＣＯＯｔＢｕ）；８２．４、８２．１、８１．９（Ｃ（ＣＨ_３）_３）；５５．８、６０．１（ＮＣＨＣＯＯｔＢｕ）；５５．９、５５．８、５５．６、５２．７、５２．６、５２．５、４８．６、４８．５、４８．２、４７．１、４４．３（１２Ｃ、ＮＣＨ_２ＣＨ_２Ｎ、ＣＨ_２ＣＯＯｔＢｕ、ＣＨ_２ＣＯＯＨ）；３３．４（ＮＣＨＣＨ_２ＣＨ_２）；２７．９、２７．８（Ｃ（ＣＨ_３）_３）；ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ（強度）：７２３．５（２７、［Ｍ＋Ｎａ］^＋）；７０１．５（６８、［Ｍ＋Ｈ］^＋）；３５１．４（１００、［Ｍ＋２Ｈ］^＋＋）であった。
【００４２】
（実施例６）ＤＯＴＡＧＡ−７の調製
カップリング試薬としてＨＡＴＵ（Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾル−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸）を用いて、化合物６ｄをリンクアミド樹脂に付着したＣＣＫ−ＢアナログＤ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｎｌｅ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＮＨ２（７）と結合させた。
【００４３】
脱保護の後、（１８時間、常温、ＴＦＡ：フェノール：チオアニソール：水　８５：５：５：５）ＤＯＴＡＧＡ−７は高収率で得られ、放射性標識されたＣＣＫ−Ｂアナログと比較して高い特性を表わした。
【００４４】
ＤＯＴＡＧＡ−ＣＣＫ−Ｂアナログのデータ（ＤＯＴＡＧＡ−７）は、以下の通りであった：１２．７ｍｇ、ＨＰＬＣ純度＞９５％、（＋）ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ（強度）：１４８６．１（４８、［Ｍ＋Ｈ］^＋）；７４３．７（６０、［Ｍ＋２Ｈ］^＋＋）；（−）ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ（強度）：１４８４．０（２８、［Ｍ＋Ｈ］⁻）；７４１．８（９０、［Ｍ＋２Ｈ］⁻⁻）であった。
【００４５】
（実施例７）生物学的特性
本願発明のプロキレート剤を生物学的活性分子として用いた場合に、これらの分子はその他の（プロ）キレート剤よりも優れた生物学的特性を有することがわかった。有利な点としては例えば下記の表２に示されるような優れたラベリング収率があった。
【００４６】
表２
【表２】

加えて、安定性が高い。^９０Ｙ−ＤＯＴＡＴＯＣ又は^９０Ｙ−ＤＯＴＡＧＡを３７℃でＤＴＰＡと反応させれば、^９０Ｙ−ＤＴＰＡが生成される。この反応の半減期はＤＯＴＡＴＯＣについては２３時間であって、ＤＯＴＡＧＡについては７９時間である。
【００４７】
表３は本願発明の化合物であるＹ−ＤＯＴＡ３ＴＯＣ及びＹ−ＤＯＴＡｔａ．１３ＴＯＣについての種々の生物学的特性を示している。放射性金属は図示していない。
【００４８】
表３
【表３】

【図面の簡単な説明】
【図１】
本願発明の化合物の調製するための合成経路である。
【図２】
本願発明の化合物の調製するための合成経路である。
【図３】
本願発明の化合物の調製するための合成経路である。
【図４】
本願発明の化合物の調製するための合成経路である。
【図５】
本願発明の化合物の調製するための合成経路である。

Claims

放射性金属標識のためのポリアザ大環状化合物であって、Ｎ_ｎ系であり、当該ｎは４、５又は６で可変の環の大きさであり、生物活性エフェクター分子中のアミノファンクションと結合するために少なくとも一つの前記Ｎ原子がフリーのカルボキシレート置換である一方で、全てのＮ原子が保護側鎖を有することを特徴とする化合物。
一般式：

を有する請求項１に記載の化合物。
１−（１−カルボキシ−３−カルボｔｅｒｔブトキシプロピル）−４，７，１０（カルボｔｅｒｔブトキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（ＤＯＴＡＧＡ（ｔＢｕ）４）である請求項１又は２に記載の化合物。
生物活性分子を放射性金属で標識するキレート化合物であって、一般式（ａ）

を有し、両方のＹ基の配向は図示されているトランス又はシスのいずれかであり；エフェクター分子Ａは、例えばペプチド特にオクトレオチド、ＣＣＫ、サブスタンスＰ又はガストリン、若しくはタンパク質特に抗体又は酵素、若しくは糖、若しくはドキソルビシンのような放射線増感剤であり；Ｒは水素、Ｃ_１〜Ｃ_３アルキル又はアルコールであり；Ｘは、スペーサ特に（ＣＨ_２）_ｎ−Ｘ’であって当該ｎは１〜１０でＸ’はＣＯＯＨ、ＮＨ_２、ＳＨ、ＯＨ又はハロゲンを特にＢｒ、Ｉ、ＣｌとするＯ−ハロゲン、若しくは構造式（ｂ）又は構造式（ｃ）で示される分子であってＹはＣＯＯ⁻、ＣＨ_２ＣＯＮＨ_２又はＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨであり、任意に放射性金属錯体としたことを特徴とする化合物。
Ｒは水素であり、ｎは１であり、Ｘ’はＣＯＯＨであり、ＹはＣＯＯ⁻であり、Ａは請求項３記載のＡである請求項４に記載の化合物。
Ｒは水素であり、ｎは１であり、Ｘ’はＣＯＯＨであり、ＹはＣＯＯ⁻であり、Ａはオクトレオチド又はオクトレオテートである請求項５に記載の化合物。
ＲはＣＯＯＨであり、ｎは１であり、Ｘ’はＣＯＯＨであり、ＹはＣＯＯ⁻であり、Ａは請求項３記載のＡである請求項４に記載の化合物。
ＲはＣＯＯＨであり、ｎは１であり、Ｘ’はＣＯＯＨであり、ＹはＣＯＯ⁻であり、Ａはオクトレオチド又はオクトレオテートである請求項７に記載の化合物。
ＤＯＴＡｔｙｒ^３オクトレオチド、ＤＯＴＡｔｙｒ^３オクトレオテート、ＤＯＴＡ３ｔｙｒ^３オクトレオチド、ＤＯＴＡ３ｔｙｒ^３オクトレオテート、ＤＯＴＡｔ３ｔｙｒ^３オクトレオチド、ＤＯＴＡｔａ．１３ｔｙｒ^３オクトレオテートからなるグループから選択される請求項４に記載の化合物。
請求項１乃至３のいずれかに記載の化合物を請求項４乃至９のいずれかに記載の化合物の調製に用いる方法。
放射性金属標識された生物活性分子の調製方法であって、
ａ）Ｎ原子及びフリーカルボキシレートの側鎖が保護された請求項１乃至３に記載の化合物を合成するステップと、
ｂ）生物活性分子をフリーのカルボキシレートに結合させるステップと、
ｃ）保護された側鎖を脱保護するステップと、
ｄ）キレート構造を標識して所望の放射性金属を得るステップと
からなることを特徴とする調製方法。
放射性金属で標識した化合物を診断又は治療用とする請求項４乃至９のいずれかに記載の化合物。
請求項４乃至９のいずれかに記載の化合物を放射性金属で標識して様々な病気の診断又は治療に用いる方法。
前記放射性金属標識が^９０Ｙである請求項１３に記載の方法。