JP2004137239A

JP2004137239A - Soil disease control agent and soil disease control method

Info

Publication number: JP2004137239A
Application number: JP2002305907A
Authority: JP
Inventors: Masami Mochizuki; 望月　正己
Original assignee: Idemitsu Kosan Co Ltd; Bio Oriented Technology Research Advancement Institution; Sasaki Co Ltd
Current assignee: Idemitsu Kosan Co Ltd; Bio Oriented Technology Research Advancement Institution; Sasaki Co Ltd
Priority date: 2002-10-21
Filing date: 2002-10-21
Publication date: 2004-05-13

Abstract

【課題】安全性が高く、かつ自然に悪影響を及ぼすことなく、かつ実用上、より高い土壌病害防除効果を維持・発揮し得る土壌病害防除剤および土壌病害を防除する方法を提供する。
【解決手段】トリコデルマ属に属する微生物の培養物と、これらの微生物の栄養源と、抗菌物質とを含有する土壌病害防除剤、ならびに、これら土壌病害防除剤を植物を栽培する土壌あるいは植物の苗または種子あるいは種イモに施用して土壌病害を防除する方法
【選択図】　なし[PROBLEMS] To provide a soil disease controlling agent and a method for controlling soil diseases, which are highly safe, can maintain and exhibit a higher soil disease controlling effect in practical use without adversely affecting nature and practically.
SOLUTION: A culture of microorganisms belonging to the genus Trichoderma, a soil disease controlling agent containing a nutrient source of these microorganisms and an antibacterial substance, and a soil or plant seedling for cultivating a plant using the soil disease controlling agent. Or a method to control soil diseases by applying to seeds or seeds [selection diagram] None

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、土壌病害防除剤および土壌病害防除方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、堆肥等有機質肥料使用量の低下や、収益性のよい作物の連作により栽培植物の土壌病害が多発しており、これらの多くは土壌病原性微生物が関与していると言われている。このような土壌病害の原因となる土壌病原微生物から栽培植物を保護するために、従来は、メチルブロマイド等の化合物を用いた化学的な土壌消毒が広く行われてきた。しかし、これらの化合物の持つ殺菌力は強力であるため、それらの化合物を用いて土壌消毒を行うと、土壌病害を引き起こす土壌病原微生物を殺すだけでなく、土壌に含まれる有用微生物群までも殺してしまう。このように土壌中の微生物を壊滅させてしまうと、土壌消毒の効力が消滅した後に病原性微生物が土壌に混入してきた場合に、その病原性微生物の大増殖を招くという問題があった。また、メチルブロマイド等の化合物は何れも人体に対する毒性が強く、危険性が伴うという問題もあった。さらに、メチルブロマイドはオゾン層の破壊など環境に悪影響を与えるとして２００５年に使用の全廃が予定されている。したがって、メチルブロマイド等の化合物に代わる安全性が高くかつ環境負荷の少ない土壌消毒剤が求められていた。
【０００３】
そこで、近年、栽培植物を各種土壌病害から保護する方法として、安全性、環境面、効果の持続性を考慮して、各種土壌病害を引き起こす病原体と拮抗する微生物を用いて病虫害を予防する方法が広く用いられるようになった。そのような方法として、グリオクラディウム属に属する菌の培養物を用いて土壌病害を防除する方法が提案されている（例えば、特許文献１および特許文献２参照。）。また、土壌病害に拮抗作用を有するグリオトキシン（Ｇｌｉｏｔｏｘｉｎ）の生産能を有するグリオクラディウム・ビレンス（トリコデルマ・ビレンス）Ｇ２菌株（ＦＥＲＭ　Ｐ−１７３８１）の培養物を含有する土壌病害防除剤および該菌株の培養物に増量剤と栄養源を混合してなる土壌病害防除剤、およびこれらの土壌病害防除剤を土壌に混和して土壌病害を防除する方法を提案している（特許文献３参照。）。この土壌病害防除剤および土壌病害を防除する方法は、栄養源を混和することにより、比較的早期から土壌病害防除効果を発揮し、また、比較的長期に渡って安定的に土壌病害防除効果を示す。しかし、トリコデルマ属に属する菌だけでなく、土着の微生物も、該土壌病害防除剤に含まれる栄養源を資化するため、トリコデルマ属に属する菌が該土壌病害防除剤に含まれる栄養源を十分には活用できていないという問題点があった。そこで、トリコデルマ属に属する菌が該土壌病害防除剤に含まれる栄養源を十分に活用し、より高い土壌病害防除効果を維持・発揮し得る土壌病害防除剤および土壌病害防除方法が求められていた。
【０００４】
【特許文献１】
特開平８−５３３１７号公報
【特許文献２】
特開平１０−１７４２２号公報
【特許文献３】
特開２００２−５３４１４号公報
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、上記観点からなされたものであり、安全性が高く、かつ自然に悪影響を及ぼすことなく、かつ実用上、より高い土壌病害防除効果を維持・発揮し得る土壌病害防除剤および土壌病害を防除する方法を提供することを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記の課題を解決するために鋭意検討を重ねた結果、トリコデルマ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）属に属する微生物の培養物に、これらの微生物の栄養源と、抗菌物質とを含有させることにより、上記の目的を達成し得ることを見い出し、これらの知見に基づいて、本発明を完成するに至った。
【０００７】
すなわち、本発明の要旨は以下の通りである。
【０００８】
（１）トリコデルマ属に属する微生物の培養物と、これらの微生物の栄養源と、抗菌物質とを含有する土壌病害防除剤。
【０００９】
（２）抗菌物質が、土着の微生物に対して、トリコデルマ属に属する微生物に対するより高い効果を奏する抗菌物質である（１）に記載の土壌病害防除剤。
【００１０】
（３）栄養源が、籾殻、フスマ、カニ殻、エビ殻、オキアミ微粉末、米糠、小麦粉、トウモロコシ穂軸、落花生殻、骨粉、魚粉、粕粉、鋸屑、木粉、炭、くん炭、バーク炭、籾殻くん炭、草木灰、ピートモス、草炭、乾燥畜糞、活性炭、油粕、脱脂大豆粉、全脂大豆粉、グルコース、硫酸アンモニウム、尿素の群から選択される少なくとも１種の栄養源である（１）または（２）に記載の土壌病害防除剤。
【００１１】
（４）トリコデルマ属に属する微生物が、トリコデルマ・ビレンス種に属する微生物、トリコデルマ・ビリデ種に属する微生物、および、トリコデルマ・ハルジアナム種に属する微生物から選ばれる少なくとも１種類の微生物である（１）〜（３）のいずれかに記載の土壌病害防除剤。
【００１２】
（５）トリコデルマ属に属する微生物が、トリコデルマ・ビレンスＧｖ０９２８菌株［ＦＥＲＭ　Ｐ−１８９２７］、トリコデルマ・ビレンスＧｖ１００１菌株［ＦＥＲＭ　Ｐ−１８９２８］、トリコデルマ・ビレンスＡＴＣＣ５２１９９菌株、トリコデルマ・ビリデＮＢＲＣ６７９０菌株、および、トリコデルマ・ハルジアナムＡＴＣＣ　ＭＹＡ−１１７５菌株から選ばれる少なくとも１種類の微生物である（１）〜（３）のいずれかに記載の土壌病害防除剤。
【００１３】
（６）土壌病害が、糸状菌、細菌、微生物媒介ウィルスにより発生する土壌病害である（１）〜（５）のいずれかに記載の土壌病害防除剤。
【００１４】
（７）植物を栽培する土壌、あるいは植物の苗または種子、あるいは種イモに、（１）〜（６）のいずれかに記載の土壌病害防除剤を施用することを特徴とする植物の土壌病害を防除する方法。
【００１５】
（８）土壌が、植物の植え付け前の本圃土壌または育苗土壌である（７）に記載の植物の土壌病害を防除する方法。
【００１６】
【発明の実施の形態】
以下、本発明を詳細に説明する。
【００１７】
本発明の土壌病害防除剤は、トリコデルマ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）属に属する微生物の培養物と、これらの微生物の栄養源と、抗菌物質とを含有する土壌病害防除剤である。
【００１８】
本発明に用いるトリコデルマ属に属する微生物としては、トリコデルマ・ビレンス（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ　ｖｉｒｅｎｓ）種に属する微生物、トリコデルマ・ビリデ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ　ｖｉｒｉｄｅ）種に属する微生物、および、トリコデルマ・ハルジアナム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ　ｈａｒｚｉａｎｕｍ）種に属する微生物が好ましい。また、トリコデルマ・ビレンス種に属する微生物としては、特に、トリコデルマ・ビレンスＧｖ０９２８菌株［ＦＥＲＭ　Ｐ−１８９２７］、トリコデルマ・ビレンスＧｖ１００１菌株［ＦＥＲＭ　Ｐ−１８９２８］、または、ＡＴＣＣ５２１９９菌株が好ましい。また、トリコデルマ・ビリデに属する微生物としては、特に、トリコデルマ・ビリデＮＢＲＣ６７９０菌株が好ましい。また、トリコデルマ・ハルジアナム種に属する微生物としては、特に、トリコデルマ・ハルジアナムＡＴＣＣ　ＭＹＡ−１１７５菌株が好ましい。
【００１９】
トリコデルマ・ビレンスＧｖ０９２８菌株およびＧｖ１００１菌株は、２００２年７月９日より、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターにそれぞれ受託番号ＦＥＲＭ　Ｐ−１８９２７、ＦＥＲＭ　Ｐ−１８９２８で寄託されている。トリコデルマ・ハルジアナムＡＴＣＣ　ＭＹＡ−１１７５菌株は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（アメリカ合衆国　ヴァージニア州　２０１１０−２２０９　マナサス　１０８０１　ユニバーシティブルバード）から、また、トリコデルマ・ビリデＮＢＲＣ６７９０菌株は、生物遺伝資源センター（ＮＢＲＣ：千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８）からそれぞれ入手できる。
【００２０】
トリコデルマ属に属する微生物は、通常の微生物の培養方法と同様の方法により培養することができる。すなわち、往復動式振盪培養、ジャーファーメンター培養などによる液体培養法や、固体培養法によることができる。この培養に用いる培地成分としては、特に制約はなく、炭素源としてグルコース、シュークロース、糖蜜などの糖類、クエン酸などの有機酸類、グリセリンなどのアルコール類、また窒素源としてアンモニア、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウムなどのアンモニウム塩や硝酸塩が用いられる。また、有機窒素源としては、酵母エキス、コーン・スティープ・リカー、肉エキス、小麦胚芽、ポリペプトン、大豆粉などが用いられる。さらに、無機塩類としては、リン酸、塩化カリウム、塩化カルシウム、硫酸マンガン、硫酸第１鉄などを用いることができる。
【００２１】
トリコデルマ属に属する微生物の培養は、通気攪拌や振盪培養などの好気的条件下で行われる液体培養や固体培養が望ましい。また、培養温度は、１０〜３７℃の範囲が好ましく、１５〜３２℃がより好ましい。培養期間は、１〜１４日間、好ましくは２〜７日間である。さらに、大量培養する場合には、タンク培養などの通常の液体培養でもよいし、また、フスマや大麦粒などの植物由来の固体成分、糖類や窒素源を含浸させた多孔質体などを用いた固体培養を採用してもよい。また、本発明に用いるトリコデルマ属に属する微生物の菌体は、土壌病害防除剤の製品としての保存性の観点から、胞子であることが好ましい。したがって、トリコデルマ属に属する微生物を胞子化させるため、培養の終期において、培地の組成、培地のｐＨ、培養温度、培養湿度、培養する際の酸素濃度などの培養条件を、その胞子形成条件に適合させるように調製することが好ましい。
【００２２】
培養で得られた培養物は、そのまま用いることもできるが、培養物を培地と共に粉砕または細断して用いてもよい。また、培養物中の培地から菌体をかき取って用いてもよいし、この培養物を遠心分離することにより菌体を分離して用いてもよい。さらに、上記のように回収した培養物の粉砕物や菌体は、自然乾燥、噴霧乾燥、凍結乾燥などにより乾燥粉末として用いるのがよい。この乾燥粉末は、水分含有量が２０重量％以下であるものが好ましく、粒径は５ｍｍ以下であるものが好ましい。
【００２３】
トリコデルマ属に属する微生物の培養物は、製剤中に含まれるトリコデルマ属に属する微生物の菌体濃度が、そのコロニー形成単位として、通常１×１０^２〜１×１０^１０　ｃｆｕ／ｇ、好ましくは１×１０^３〜１×１０^９　ｃｆｕ／ｇ、さらに好ましくは５×１０^３〜１×１０^８　ｃｆｕ／ｇとなるように製剤に含有させることができる。
【００２４】
本発明に用いる微生物の栄養源としては、トリコデルマ属に属する微生物の栄養源となるものであれば特に制限はないが、籾殻、フスマ、カニ殻、エビ殻、オキアミ微粉末、米糠、小麦粉、トウモロコシ穂軸、落花生殻、骨粉、魚粉、粕粉、鋸屑、木粉、炭、くん炭、バーク炭、籾殻くん炭、草木灰、ピートモス、草炭、乾燥畜糞、活性炭、油粕、脱脂大豆粉、全脂大豆粉、グルコース、硫酸アンモニウム、尿素の群から選択される少なくとも１種類の栄養源が好適に用いられる。この栄養源は、水分含有量が１５質量％以下であり、かつ、粒径が２ｍｍ以下のものが、トリコデルマ属に属する微生物の培養物との均一な混合物を得るという観点から、好適に用いることができる。
【００２５】
本発明に用いる微生物の栄養源は、トリコデルマ属に属する微生物の培養物成分に対する栄養源の重量比が、通常１：０．１〜１：１０００、好ましくは、１：１〜１：２００となるように製剤に含有させることができる。
【００２６】
本発明の土壌病害防除剤に用いる抗菌物質としては、シュードモナス属、バシラス属、または、アスペルギルス属に属する微生物などの土着の微生物に対して、トリコデルマ属に属する微生物に対するより高い効果を奏する抗菌物質であれば特に制限はなく、例えば、従来より、抗菌剤、保存料、防腐剤などとして一般に知られている物質を用いることができる。
【００２７】
そのような抗菌物質として、例えば、レモンセントティーツリーオイル、ティーツリーオイル、ヒノキチオール、ひば精油、ひのき精油、安息香酸、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、デヒドロ酢酸、デヒドロ酢酸ナトリウム、パラオキシ安息香酸イソブチルエステル、パラオキシ安息香酸ブチルエステル、パラオキシ安息香酸プロピルエステル、パラオキシ安息香酸イソプロピルエステル、パラオキシ安息香酸エチルエステル、プロピオン酸、プロピオン酸カルシウム、プロピオン酸ナトリウム、ε−ポリリジン、ピマノール、または、ピマノールパウダーなどを好適に用いることができる。
【００２８】
本発明の土壌病害防除剤に含有させる抗菌物質の量は、本願発明の土壌病害防除剤としての効果を損なわない範囲であれば特に制限はないが、製剤全体に対して、好ましくは０．０００１〜５重量％、より好ましくは０．００１〜０．５重量％とすることができる。
【００２９】
なお、本明細書における土着の微生物とは、本発明の土壌病害防除剤を施用する土壌、あるいは、本発明の土壌病害防除剤を施用した植物の苗または種子を植える土壌、あるいは、本発明の土壌病害防除剤を施用した種イモを植える土壌に存在する微生物をいう。
【００３０】
また、本発明の土壌病害防除剤には、トリコデルマ属に属する微生物の培養物およびそれらの微生物の栄養源および抗菌物質の他に、増量剤、ｐＨ調製剤などを含有させることができる。
【００３１】
増量剤としては、特に制限はないが、カオリンクレー、パイロフェライトクレー、ベントナイト、ジークライト、モンモリロナイト、珪藻土、合成含水酸化珪素、酸性白土、タルク類、粘土、セラミック、石英、セリサイト、バーミキュライト、パーライト、大谷石、アンスラ石、石灰石、石炭灰、ゼオライト、アタパルジャイトなどの鉱物質微粉末などが好適に用いられる。
【００３２】
土壌病害防除剤中の増量剤は、トリコデルマ属に属する微生物の培養物成分に対する増量剤の重量比が、１：０〜１：２００、好ましくは、１：０〜１：２０となるように含有させることができる。
【００３３】
ｐＨ調製剤としては、本発明の土壌病害防除剤の効用を損なわない限り、特に制限はないが、乳酸ナトリウム、乳酸、プロピオン酸、クエン酸、ＤＬ−リンゴ酸などが好適に用いられる。
【００３４】
また、土壌病害防除剤中のｐＨ調製剤の濃度については、特に制限はないが、０．００１〜１０％とするのが好ましく、０．０１〜０．５％とするのがより好ましい。
【００３５】
本発明の土壌病害防除剤の剤形としては、特に制限はなく、粉状のままでもよいし、粒子状に製剤することにより、土壌にすき込み易い形態としてもよい。また、微生物の培養物と栄養源との混和物に、液体担体を加えて粒状化したものを用いてもよい。
【００３６】
液体担体としては、特に制限はないが、水、大豆油、菜種油、コーン油などの植物油、液体動物油、ポリビニルアルコールやポリビニルピロリドン、ポリアクリル酸などの水溶性高分子化合物が好適に用いられる。
【００３７】
さらに、必要に応じて、デンプンの加水分解物やＤ−ソルビトール、ラクトース、マルチトース、ＣＭＣなどの可溶性増量剤、カゼインやゼラチン、アラビアゴム、アルギン酸、ベントナイトなどの固着剤や分散剤、プロピレングリコールやエチレングリコールなどの凍結防止剤、キサンタンガムなどの天然多糖類やポリアクリル酸などの増粘剤を用いてもよい。
【００３８】
本発明の土壌病害防除剤の使用方法については、特に制限はないが、例えば、土壌病害防除剤を、作物の播種、苗または種イモの植え付け前の本圃土壌に混和して用いてもよく、あるいは、作物の播種または苗を移植する前の育苗土壌に混和して用いてもよい。また、圃場に均一に散布後、耕運機などを用いて土壌へ鋤き込んで用いてもよく、あるいは、植物の種や種イモの表面に直接塗布して用いてもよく、あるいは、種、苗または種イモの植え穴に施用して用いてもよく、あるいは、種、苗または種イモなどの植え付け畝に筋状に施用して用いてもよい。
【００３９】
また、この土壌病害防除剤の施用量は、特に制限はないが、本圃土壌１０アール当たり、５０〜５００リットルとすることができる。
【００４０】
本発明の土壌病害防除剤は、糸状菌、細菌、微生物媒介ウィルスによって、植物の地下部に発生する土壌病害の防除に有効に作用する。これらの土壌病害の中でも、例えば、イネ科に属するコウライ芝のラージパッチ、ベントグラスのブラウンパッチおよびダラースポット、アブラナ科に属するブロッコリーの根こぶ病、ハクサイの根こぶ病、キャベツの苗立枯病および菌核病、ダイコンの萎黄病、ユリ科に属するネギの白絹病および萎凋病、タマネギの灰色腐敗病、アカザ科に属するホウレンソウの株腐病、立枯病および萎凋病、ヤマノイモ科に属するナガイモの褐色腐敗病、ナデシコ科に属するカーネーションの萎凋病、セリ科に属するパセリの萎凋病、キク科に属するレタスの根腐病、ナス科に属するトマトの萎凋病、根腐萎凋病、褐色根腐病および半身萎凋病、ナスの半身萎凋病、ジャガイモのそうか病、ウリ科に属するスイカのつる枯れ病、メロンのつる割病および黒点根腐病、ヒルガオ科に属するサツマイモの紫紋羽病、サトイモ科に属するコンニャクの根腐病、バラ科に属するイチゴの萎黄病、ナシの白紋羽病などの土壌病害に特に有効に作用する。
【００４１】
【実施例】
以下、本発明を実施例によりさらに具体的に説明する。
【００４２】
【実施例１】
表１に記載された１１種類の疎水性抗菌物質を用意し、それぞれの疎水性抗菌物質について１重量％、０．５重量％、０．２５重量％、０．１２５重量％、０．０６２５重量％、０．０３１３重量％のエタノール溶液を作製した。作製したそれぞれのサンプルを、直径８ｍｍのそれぞれの厚手ペーパーディスクに３０μｌ滴下し、抗菌物質入りのペーパーディスクを作製した。その一方で、ポテトデキストロース培地中に凍結保存されているトリコデルマ・ビレンスＧｖ０９２８菌株の種菌を、ポテトデキストロース寒天培地（ＰＤＡ）の中央に植菌し、３日間２８℃で培養した。培養により生じたＧｖ０９２８菌株の菌叢の縁から、直径８ｍｍのコルクポーラーを用いて菌叢ディスクを切り出し、新しいＰＤＡの中央に菌叢を下に向けて植菌した。つぎに、先に作製した抗菌物質入りのペーパーディスクを菌叢から２０ｍｍ離してのせた。２８℃で３日間培養し、ペーパーディスク周辺における阻止円の形成の有無を観察した。その結果を表１に示した。
【００４３】
【表１】

−：阻止円形成
＋：阻止円無し
また、表２に記載された７種の水溶性抗菌物質を用意し、それぞれの抗菌物質を１重量％、０．５重量％、０．２５重量％、０．１２５重量％、０．０６２５重量％、０．０３１３重量％含むポテトデキストロース液体培地をそれぞれ作製した。安息香酸ナトリウムとソルビン酸カリウムは、１Ｎ　ＨＣｌでｐＨを５に調製した。上記と同様に作製したトリコデルマ・ビレンスＧｖ０９２８菌株の菌叢ディスクを、抗菌物質を含むポテトデキストロース液体培地に植菌し、２８℃で３日間培養後、トリコデルマ菌の増殖の有無を観察した。その結果を表２に示した。
【００４４】
【表２】

＋：増殖
−：増殖阻害有り
【００４５】
【実施例２〜９、比較例１〜８】
（１）トリコデルマ属に属する微生物の培養
ポテトデキストロース培地中に凍結保存されているＧｖ０９２８菌株の種菌を、ポテトデキストロース培地を用いて、２日間、２８℃で培養した。培養担体としてオオムギ麦粒１００ｋｇを用い、このオオムギ麦粒にＧｖ０９２８菌株の培養液と滅菌水を合わせたものを１００リットル加え、均一になるように混合した。ついで、縦５０ｃｍ、横５０ｃｍ、深さ６ｃｍのトレー１０個に上記の培養液を加えたオオムギ麦粒を、厚さが５ｃｍになるように入れた。このトレーの上面には、通気口を有する蓋をして、２８℃で１０日間培養した。この培養期間中は、光が当たる条件において培養し、培養開始から３日目に担体全体をかき混ぜた。培養の終了後、培養物を乾燥トレーに移しかえて、厚さ１ｃｍ程度に薄く広げ、表面を濾紙で覆って、３０〜３５℃の乾燥器で水分含有量が１０重量％以下になるまで乾燥した。ついで、乾燥した培養物を砕き、Ｇｖ０９２８菌株培養物を得た。この培養物における菌濃度は、そのコロニー形成単位において、３．３×１０^９　ｃｆｕ／ｇの培養物であった。
【００４６】
トリコデルマ・ビレンスＧｖ１００１菌株を用いて、上記と同様にして、その培養物を得た。これらの培養物における菌濃度は、そのコロニー形成単位において、２．５×１０^９　ｃｆｕ／ｇの培養物であった。
【００４７】
トリコデルマ・ビレンスＡＴＣＣ５２１９９菌株、トリコデルマ・ビリデ６７９０菌株、およびトリコデルマ・ハルジアナムＡＴＣＣ　ＭＹＡ−１１７５菌株を用いて、オオムギ麦粒を１ｋｇ、それぞれの菌株の培養液と滅菌水を合わせたもの１リットルを用いた以外は、上記と同様の方法により、それぞれの培養物を得た。これら培養物における菌濃度は、そのコロニー形成単位において、おのおの１．８×１０^９　ｃｆｕ／ｇの培養物、２．１×１０^９　ｃｆｕ／ｇの培養物、および３．１×１０^９　ｃｆｕ／ｇの培養物であった。
（２）製剤への抗菌物質添加による病害防除効果の向上
前述のトリコデルマ・ビレンスＧｖ０９２８菌株の培養物に、栄養源として大豆油およびフスマを、重量比において、１：１０：８９となるようにそれぞれ配合し、製剤を作製した。この製剤に、パラオキシ安息香酸イソブチルエステルとソルビン酸を、表３に示した濃度加えた。ソルビン酸を加えた製剤には、ｐＨを調節するために、ＤＬ−リンゴ酸を０．９％加えた。このとき、製剤における菌濃度は、そのコロニー形成単位において、１．０×１０^７　ｃｆｕ／ｇ〜３．０×１０^７ｃｆｕ／ｇであった。製剤への抗菌物質添加による病害防除効果を確認するため、人工気象器を用いて苗立枯試験を行った。ＪＡくみあい園芸用育苗培土げんきくん１号、１リットルに、苗立枯病の病原菌であるＲｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ　ｓｏｌａｎｉ　ＵＲｓ９０６１（日本植物防疫協会研究所からの分譲株）のフスマ培養物を０．５％（ｗ／ｖ）混合することにより汚染培土を作製した。この汚染培土に、製剤を０．１％（ｗ／ｖ）混合した。さらに、水を１００ｍｌ加えて混合後、２５℃暗条件で培養した。３日間培養後、１２８穴セルトレーより切り出した７２穴セルトレーに汚染土壌をつめ、キャベツの種（品種：ＹＲあおば甘藍）を１セル当たり１粒播種した。これを、２５℃、１２時間明条件（１０，０００Ｌｘ）、１２時間暗条件で栽培した。１０日間培養後、立枯本数（発芽前立枯本数＋発芽後立枯本数）を調査した。立枯本数を播種数（７２粒）で割った値を発病度とした。試験は３反復で行った。防除価は次の式により算出した。
【００４８】

その結果を表３に示した。
【００４９】
【表３】

表３の結果から分かるように、抗菌物質の添加により、トリコデルマ・ビレンスＧｖ０９２８菌株の増殖を阻害しない濃度で防除価が向上した。
【００５０】
この時の、土壌中におけるトリコデルマ・ビレンスＧｖ０９２８菌株の菌数変動を明らかにするため、１０日間培養した後の培土中の菌数を、選択培地（脱イオン水１リットル当たりＣａ（ＮＯ_３）_２、１．００ｇ：　ＫＮＯ_３、０．２６ｇ：　ＭｇＳＯ_４・７Ｈ_２Ｏ、０．２６ｇ：　ＫＨ_２ＰＯ_４、０．１２ｇ：　ＣａＣｌ_２・２Ｈ_２Ｏ、１．００ｇ：　無水クエン酸、０．０５ｇ：　シュークロース、２．００ｇ：　オーレオマイシン、１．００ｇ：　キャプタン水和剤、０．０２５ｇ：　ロニラン水和剤、０．００５ｇ：　寒天、２０ｇ：　ｐＨ４）を用いて測定した。その結果を表３に示した。防除価が向上している製剤では、トリコデルマ・ビレンスＧｖ０９２８菌株の菌数が増加している。このＧｖ０９２８菌株の菌数の増加は、抗菌物質の添加により、製剤に含まれる栄養源が土着の微生物に資化されることを防ぎ、これによりＧｖ０９２８菌株が製剤に含まれる栄養源を十分活用することができるようになったためであると考えられる。
【００５１】
【実施例１０〜２５、比較例１０〜２５】
前述のトリコデルマ・ビレンスＧｖ０９２８菌株に大豆油とフスマを配合した製剤に、表４に示した抗菌物質をそれぞれ加え、前述の苗立枯試験を行った。このとき、製剤における菌濃度は、そのコロニー形成単位において、１．０×１０^７　ｃｆｕ／ｇ〜３．０×１０^７　ｃｆｕ／ｇの培養物であった。結果を表４に示した。
【００５２】
【表４】

表４の結果から分かるように、抗菌物質の添加により、トリコデルマ・ビレンスＧｖ０９２８菌株の防除価が向上した。
【００５３】
【実施例２６〜３３、比較例２６〜３１】
前述のトリコデルマ・ビレンスＧｖ１００１菌株の培養物、トリコデルマ・ビレンスＡＴＣＣ５２１９９菌株の培養物に栄養源として大豆油およびフスマを、重量比において、１：１０：８９になるようにそれぞれ配合し、製剤を作製した。これらの製剤に表５に示した抗菌物質をそれぞれ加え、前述の苗立枯試験を行った。ソルビン酸を加えた製剤には、ｐＨを調節するために、ＤＬ−リンゴ酸を０．９％加えた。このとき、製剤における菌濃度は、そのコロニー形成単位において、１．０×１０^７　ｃｆｕ／ｇ〜３．０×１０^７　ｃｆｕ／ｇの培養物であった。結果を表５に示した。
【００５４】
【表５】

表５の結果から分かるように、抗菌物質の添加により、トリコデルマ・ビレンスＧｖ１００１菌株およびＡＴＣＣ５２１９９菌株の防除価が向上した。
【００５５】
【実施例３４〜３７、比較例３２〜３６】
前述のトリコデルマ・ビリデＮＢＲＣ６７９０菌株の培養物に、栄養源として大豆油およびフスマを、重量比において、１：１０：８９になるようにそれぞれ配合し、製剤を作製した。ソルビン酸を加えた製剤には、ｐＨを調節するために、ＤＬ−リンゴ酸を０．９％加えた。これらの製剤に表６に示した抗菌物質をそれぞれ加え、前述の苗立枯試験を行った。このとき、製剤における菌濃度は、そのコロニー形成単位において、１．０×１０^７　ｃｆｕ／ｇ〜３．０×１０^７　ｃｆｕ／ｇの培養物であった。結果を表６に示した。
【００５６】
【表６】

表６の結果から分かるように、抗菌物質の添加により、トリコデルマ・ビリデＮＢＲＣ６７９０菌株の防除価が向上した。
【００５７】
【実施例３８〜４１、比較例３７〜４１】
前述のトリコデルマ・ハルジアナムＡＴＣＣ　ＭＹＡ−１１７５菌株の培養物に、栄養源として大豆油およびフスマを、重量比において、１：１０：８９になるようにそれぞれ配合し、製剤を作製した。ソルビン酸を加えた製剤には、ｐＨを調節するために、ＤＬ−リンゴ酸を０．９％加えた。これらの製剤に表７に示した抗菌物質をそれぞれ加え、前述の苗立枯試験を行った。このとき、製剤における菌濃度は、そのコロニー形成単位において、１．０×１０^７　ｃｆｕ／ｇ〜３．０×１０^７　ｃｆｕ／ｇの培養物であった。結果を表７に示した。
【００５８】
【表７】

表７の結果から分かるように、抗菌物質の添加により、トリコデルマ・ハルジアナムＡＴＣＣ　ＭＹＡ−１１７５菌株の防除価が向上した。
【００５９】
【実施例４２〜４５、比較例４２〜４６】
トリコデルマ・ビレンスＧｖ０９２８菌株の培養物に、栄養源として大豆油およびフスマを、重量比において、１：１０：８９になるようにそれぞれ配合し、製剤を作製した。これらの製剤に表８に示した抗菌物質をそれぞれ加えた。ソルビン酸を加えた製剤には、ｐＨを調節するために、ＤＬ−リンゴ酸を０．９％加えた。このとき、製剤における菌濃度は、そのコロニー形成単位において、１．０×１０^７　ｃｆｕ／ｇ〜３．０×１０^７　ｃｆｕ／ｇの培養物であった。セルトレーに園芸用培土である「与作Ｎ１５」（チッソ旭肥料（株）製品）をつめ、ネギ（品種：吉蔵）を播種し、温室で育苗した。前作で白絹病が発生した農家の畑の汚染土壌を採取し、内寸６０ｃｍ×１６ｃｍ×２０ｃｍ（深さ）のプランターにつめた。このプランターにおのおのの製剤を１０ａ当たり１００リットルになるように混和した。また、コントロールとして製剤を一切添加処理していないものも用意した。前述したように育苗したネギの苗を、プランター当たり１０本移植し、最低温度２３℃に設定した温室内で育苗管理した。移植してから８週間後に発病株率を調査した。試験は３反復で行った。防除価は以下の式により算出した。
【００６０】

ここで算出した防除価を表８に示す。
【００６１】
【表８】

表８の結果から分かるように、抗菌物質の添加により、トリコデルマ・ビレンスＧｖ０９２８菌株の防除価が向上した。
【００６２】
【実施例４６〜４９、比較例４７〜５１】
前述のトリコデルマ・ビレンスＧｖ０９２８菌株の培養物に、栄養源として栄養源として大豆油およびフスマを、重量比において、１：１０：８９になるようにそれぞれ配合し、製剤を作製した。これらの製剤に表９に示した抗菌物質をそれぞれ加えた。ソルビン酸を加えた製剤には、ｐＨを調節するために、ＤＬ−リンゴ酸を０．９％加えた。このとき、製剤における菌濃度は、そのコロニー形成単位において、１．０×１０^７　ｃｆｕ／ｇ〜３．０×１０^７　ｃｆｕ／ｇの培養物であった。ＪＡくみあい園芸用育苗培土、げんきくん１号に、ホウレンソウ萎凋病の病原菌であるＦｕｓａｒｉｕｍ　ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ　ｆ．　ｓｐ．　ｓｐｉｎａｃｉａｅのフスマ培養物を２．０％（ｗ／ｖ）混合することにより汚染培土を作製した。この汚染培土を、内寸６０ｃｍ×１６ｃｍ×２０ｃｍ（深さ）のプランターにつめ、おのおのの製剤を、１０ａ当たり１００リットルになるように混和した。ホウレンソウの種（品種：おかめ）をプランターあたり１０粒播種し、最低温度を２３℃に設定した温室内で育苗管理した。また、コントロールとして、土壌病害防除剤例を一切添加処理していないものも用意した。播種してから４週間後に、累積発病株率を求めた。試験は３反復で行った。防除価は以下の式により算出した。
【００６３】

ここで算出した防除価を表９に示す。
【００６４】
【表９】

表９の結果から分かるように、抗菌物質の添加により、トリコデルマ・ビレンスＧｖ０９２８菌株の防除価が向上した。
【００６５】
【実施例５０〜５３、比較例５２〜５６】
前述のトリコデルマ・ビレンスＧｖ０９２８菌株の培養物に、栄養源として栄養源として大豆油およびフスマを、重量比において、１：１０：８９になるようにそれぞれ配合し、製剤を作製した。これらの製剤に表１０に示した抗菌物質をそれぞれ加えた。ソルビン酸を加えた製剤には、ｐＨを調節するために、ＤＬ−リンゴ酸を０．９％加えた。このとき、製剤における菌濃度は、そのコロニー形成単位において、１．０×１０^７　ｃｆｕ／ｇ〜３．０×１０^７　ｃｆｕ／ｇ　ｇの培養物であった。
【００６６】
１０ａの圃場にそうか病に罹病したジャガイモの皮を鍬き込み、春、秋２回ジャガイモを栽培することにより、そうか病汚染圃場を作製した。試験区は１区１．４ｍ×１．４ｍ、３連制で行った。製剤を１０ａ当たり、おのおの１００リットルになるように試験区に混和した。また、コントロールとして製剤を一切添加処理していない試験区も用意した。種ジャガイモ（品種：ニシユタカ）を１区当たり６株植え付けた。種ジャガイモの植え付けから３ヶ月後に掘り取り、その塊茎部へのジャガイモそうか病の罹病の状況を調査し、罹病芋率を算出した。防除価は以下の式により算出した。
【００６７】

ここで算出した防除価を表１０に示す。
【００６８】
【表１０】

表１０の結果から分かるように、抗菌物質の添加により、トリコデルマ・ビレンスＧｖ０９２８菌株の防除価が向上した。
【００６９】
【発明の効果】
本発明によれば、安全性が高く、かつ自然に悪影響を及ぼすことなく、かつ実用上、より高い土壌病害防除効果を維持・発揮し得る土壌病害防除剤および土壌病害を防除する方法を提供することができる。[0001]
TECHNICAL FIELD OF THE INVENTION
The present invention relates to a soil disease controlling agent and a soil disease controlling method.
[0002]
[Prior art]
In recent years, soil diseases of cultivated plants have frequently occurred due to a decrease in the amount of organic fertilizer such as compost and continuous cropping of profitable crops, and it is said that many of these are related to soil pathogenic microorganisms. Conventionally, in order to protect cultivated plants from soil pathogenic microorganisms that cause such soil diseases, chemical soil disinfection using compounds such as methyl bromide has been widely performed. However, because of the strong bactericidal activity of these compounds, soil disinfection using these compounds not only kills soil pathogenic microorganisms that cause soil diseases, but also kills useful microorganisms contained in the soil. Would. When microorganisms in soil are destroyed in this way, there is a problem that when pathogenic microorganisms enter the soil after the effectiveness of soil disinfection has been extinguished, large growth of the pathogenic microorganisms occurs. In addition, all compounds such as methyl bromide have a problem that they are highly toxic to the human body and involve risks. Furthermore, methyl bromide is scheduled to be completely abolished in 2005 as it has a negative impact on the environment such as destruction of the ozone layer. Therefore, there has been a demand for a soil disinfectant having a high safety and a low environmental load, which can replace compounds such as methyl bromide.
[0003]
Therefore, in recent years, as a method of protecting cultivated plants from various soil diseases, a method of preventing disease and insect damage using microorganisms that antagonize pathogens that cause various soil diseases in consideration of safety, environmental aspects, and sustainability of effects has been proposed. It has become widely used. As such a method, there has been proposed a method of controlling a soil disease using a culture of a bacterium belonging to the genus Gliocladium (for example, see Patent Literature 1 and Patent Literature 2). Further, a soil disease controlling agent comprising a culture of a Gliocladium virens (Trichoderma virens) G2 strain (FERM P-17381) capable of producing gliotoxin having an antagonistic effect on soil disease and A soil disease control agent obtained by mixing a bulking agent and a nutrient with a culture of a bacterial strain, and a method of mixing these soil disease control agents with soil to control soil disease have been proposed (see Patent Document 3). ). This soil disease controlling agent and the method for controlling soil disease can exert a soil disease controlling effect from a relatively early stage by mixing nutrients, and can stably maintain a soil disease controlling effect over a relatively long period. Show. However, not only bacteria belonging to the genus Trichoderma, but also indigenous microorganisms, assimilate nutrients contained in the soil disease control agent, so that bacteria belonging to the genus Trichoderma can sufficiently supply nutrients contained in the soil disease control agent. Had a problem that it could not be used. Therefore, there has been a demand for a soil disease controlling agent and a soil disease controlling method that enable bacteria belonging to the genus Trichoderma to make full use of the nutrients contained in the soil disease controlling agent and maintain and exhibit a higher soil disease controlling effect. .
[0004]
[Patent Document 1]
JP-A-8-53317
[Patent Document 2]
JP-A-10-17422
[Patent Document 3]
JP-A-2002-53414
[0005]
[Problems to be solved by the invention]
The present invention has been made from the above-mentioned viewpoints, has high safety, has no adverse effect on nature, and is practically capable of maintaining and exerting a higher soil disease controlling effect and a soil disease controlling agent and soil disease. An object of the present invention is to provide a method for controlling pests.
[0006]
[Means for Solving the Problems]
The present inventors have conducted intensive studies to solve the above-described problems, and as a result, by adding a nutrient source of these microorganisms and an antibacterial substance to a culture of microorganisms belonging to the genus Trichoderma. The inventors have found that the above objects can be achieved, and based on these findings, have completed the present invention.
[0007]
That is, the gist of the present invention is as follows.
[0008]
(1) A soil disease controlling agent containing a culture of microorganisms belonging to the genus Trichoderma, a nutrient source of these microorganisms, and an antibacterial substance.
[0009]
(2) The soil disease control agent according to (1), wherein the antibacterial substance is an antibacterial substance that exerts a higher effect on indigenous microorganisms against microorganisms belonging to the genus Trichoderma.
[0010]
(3) The nutrient source is rice husk, bran, crab husk, shrimp husk, krill fine powder, rice bran, flour, corn cob, peanut hull, bone meal, fish meal, meal powder, sawdust, wood flour, charcoal, charcoal, bark It is at least one nutrient selected from the group consisting of charcoal, rice husk charcoal, plant ash, peat moss, grass charcoal, dried animal dung, activated carbon, oil cake, defatted soy flour, full fat soy flour, glucose, ammonium sulfate, and urea (1) Or the soil disease controlling agent according to (2).
[0011]
(4) The microorganism belonging to the genus Trichoderma is at least one microorganism selected from microorganisms belonging to the species Trichoderma virens, microorganisms belonging to the species Trichoderma viride, and microorganisms belonging to the species Trichoderma harzianum (1) to (1). The soil disease controlling agent according to any one of 3).
[0012]
(5) The microorganisms belonging to the genus Trichoderma are Trichoderma virens Gv0928 strain [FERM P-18927], Trichoderma virens Gv1001 strain [FERM P-18928], Trichoderma virens ATCC 52199 strain, Trichoderma viride NBRC 6790 strain, and Trichoderma strain. The soil disease controlling agent according to any one of (1) to (3), which is at least one kind of microorganism selected from Harzianum ATCC MYA-1175 strain.
[0013]
(6) The soil disease controlling agent according to any one of (1) to (5), wherein the soil disease is a soil disease caused by a filamentous fungus, a bacterium, or a microorganism-borne virus.
[0014]
(7) A plant soil disease characterized by applying the soil disease controlling agent according to any one of (1) to (6) to soil for cultivating a plant, or a plant seedling or seed, or a seed potato. How to control.
[0015]
(8) The method for controlling a soil disease of a plant according to (7), wherein the soil is a main field soil or a seedling raising soil before planting.
[0016]
BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION
Hereinafter, the present invention will be described in detail.
[0017]
The soil disease controlling agent of the present invention is a soil disease controlling agent containing a culture of microorganisms belonging to the genus Trichoderma, a nutrient source of these microorganisms, and an antibacterial substance.
[0018]
The microorganisms belonging to the genus Trichoderma used in the present invention include microorganisms belonging to the species Trichoderma virens, microorganisms belonging to the species Trichoderma viride, and microorganisms belonging to the species Trichoderma harzianum belonging to the species Trichoderma harzianum. preferable. Further, as the microorganism belonging to the species Trichoderma virens, in particular, Trichoderma virens Gv0928 strain [FERM P-18927], Trichoderma virens Gv1001 strain [FERM P-18928], or ATCC 52199 strain is preferable. As the microorganism belonging to Trichoderma viride, Trichoderma viride NBRC 6790 strain is particularly preferable. In addition, as the microorganism belonging to the species Trichoderma harzianum, the strain Trichoderma harzianum ATCC MYA-1175 is particularly preferable.
[0019]
The Trichoderma virens strains Gv0928 and Gv1001 have been deposited on July 9, 2002 with the National Institute of Advanced Industrial Science and Technology, Patent Organism Depositary under the accession numbers FERM P-18927 and FERM P-18928, respectively. The Trichoderma harzianum ATCC MYA-1175 strain was obtained from the American Type Culture Collection (2011-10220 Manassas 10801 University Boulevard, Virginia, USA), and the Trichoderma viride NBRC 6790 strain was obtained from the National Center for Biological Resources (NBRC: Kisarazu, Chiba Prefecture). It can be obtained from Kazusa Kamachi 2-5-8).
[0020]
The microorganism belonging to the genus Trichoderma can be cultured by a method similar to a usual method for culturing microorganisms. That is, a liquid culture method using a reciprocating shaking culture, a jar fermenter culture, or the like, or a solid culture method can be used. The medium components used in this culture are not particularly limited, and sugars such as glucose, sucrose and molasses, organic acids such as citric acid, alcohols such as glycerin as carbon sources, and ammonia, ammonium sulfate, and ammonium chloride as nitrogen sources. And ammonium salts such as ammonium nitrate and nitrates. In addition, as an organic nitrogen source, yeast extract, corn steep liquor, meat extract, wheat germ, polypeptone, soybean powder, and the like are used. Further, as the inorganic salts, phosphoric acid, potassium chloride, calcium chloride, manganese sulfate, ferrous sulfate and the like can be used.
[0021]
The culture of microorganisms belonging to the genus Trichoderma is preferably liquid culture or solid culture performed under aerobic conditions such as aeration and shaking culture. The culture temperature is preferably in the range of 10 to 37 ° C, more preferably 15 to 32 ° C. The culture period is 1 to 14 days, preferably 2 to 7 days. Furthermore, in the case of mass culture, ordinary liquid culture such as tank culture may be used, or solid components derived from plants such as bran and barley grains, and a porous body impregnated with a saccharide or a nitrogen source may be used. Solid culture may be employed. In addition, the cells of the microorganism belonging to the genus Trichoderma used in the present invention are preferably spores from the viewpoint of preservability as a soil disease control product. Therefore, in order to sporulate microorganisms belonging to the genus Trichoderma, at the end of culture, the culture conditions such as the composition of the medium, the pH of the medium, the culture temperature, the culture humidity, and the oxygen concentration during the culture are adjusted to the sporulation conditions It is preferable to prepare so that
[0022]
The culture obtained by the culture can be used as it is, or the culture may be ground or shredded together with the medium. The cells may be used by scraping the cells from the medium in the culture, or the cells may be separated by centrifugation of the culture and used. Further, the pulverized material or cells of the culture collected as described above may be used as a dry powder by natural drying, spray drying, freeze drying, or the like. The dry powder preferably has a water content of 20% by weight or less, and preferably has a particle size of 5 mm or less.
[0023]
A culture of a microorganism belonging to the genus Trichoderma has a cell concentration of the microorganism belonging to the genus Trichoderma contained in the preparation that is usually 1 × 10 6 ² ~ 1 × 10 ¹⁰ cfu / g, preferably 1 × 10 ³ ~ 1 × 10 ⁹ cfu / g, more preferably 5 × 10 ³ ~ 1 × 10 ⁸ It can be included in the preparation so as to be cfu / g.
[0024]
The nutrient source of the microorganism used in the present invention is not particularly limited as long as it is a nutrient source of the microorganism belonging to the genus Trichoderma, but rice husk, bran, crab shell, shrimp shell, krill fine powder, rice bran, flour, corn COB, peanut hull, bone meal, fish meal, meal powder, sawdust, wood flour, charcoal, charcoal, bark charcoal, rice husk charcoal, plant ash, peat moss, grass charcoal, dried animal dung, activated carbon, oil cake, defatted soy flour, full fat soybean At least one nutrient selected from the group consisting of flour, glucose, ammonium sulfate and urea is preferably used. This nutrient is preferably used from the viewpoint that a water content of 15% by mass or less and a particle size of 2 mm or less obtains a uniform mixture with a culture of a microorganism belonging to the genus Trichoderma. Can be.
[0025]
In the nutrient source of the microorganism used in the present invention, the weight ratio of the nutrient to the culture component of the microorganism belonging to the genus Trichoderma is usually 1: 0.1 to 1: 1000, preferably 1: 1 to 1: 200. As described above.
[0026]
The antibacterial substance used in the soil disease control agent of the present invention includes pseudomonas, bacillus, or indigenous microorganisms such as those belonging to the genus Aspergillus, and antibacterial substances that exhibit a higher effect on microorganisms belonging to the genus Trichoderma. There is no particular limitation as long as it is present. For example, substances generally known as antibacterial agents, preservatives, preservatives and the like can be used.
[0027]
Examples of such antibacterial substances include, for example, lemon cent tea tree oil, tea tree oil, hinokitiol, hiba essential oil, hinoki essential oil, benzoic acid, sodium benzoate, sorbic acid, potassium sorbate, dehydroacetic acid, sodium dehydroacetate, paraoxybenzoate. Acid isobutyl ester, paraoxybenzoic acid butyl ester, paraoxybenzoic acid propyl ester, paraoxybenzoic acid isopropyl ester, paraoxybenzoic acid ethyl ester, propionic acid, calcium propionate, sodium propionate, ε-polylysine, pinanol, or pinanol powder Etc. can be suitably used.
[0028]
The amount of the antibacterial substance contained in the soil disease controlling agent of the present invention is not particularly limited as long as the effect as the soil disease controlling agent of the present invention is not impaired. To 5% by weight, more preferably 0.001 to 0.5% by weight.
[0029]
The indigenous microorganism in the present specification is soil to which the soil disease controlling agent of the present invention is applied, or soil for planting seedlings or seeds of a plant to which the soil disease controlling agent of the present invention is applied, or the present invention. It refers to microorganisms present in the soil where the seed potatoes to which the soil disease control agent has been applied are planted.
[0030]
The soil disease control agent of the present invention may contain a bulking agent, a pH adjuster, and the like, in addition to a culture of microorganisms belonging to the genus Trichoderma and a nutrient source and an antibacterial substance of those microorganisms.
[0031]
There is no particular limitation on the extender, but kaolin clay, pyroferrite clay, bentonite, siegrite, montmorillonite, diatomaceous earth, synthetic hydrous silicon oxide, acid clay, talc, clay, ceramic, quartz, sericite, vermiculite, perlite , Oya stone, anthraite, limestone, coal ash, zeolite, attapulgite and other mineral fine powders are preferably used.
[0032]
The extender in the soil disease control agent is contained such that the weight ratio of the extender to the culture component of the microorganism belonging to the genus Trichoderma is 1: 0 to 1: 200, preferably 1: 0 to 1:20. Can be done.
[0033]
The pH adjuster is not particularly limited as long as the utility of the soil disease controlling agent of the present invention is not impaired, but sodium lactate, lactic acid, propionic acid, citric acid, DL-malic acid and the like are preferably used.
[0034]
The concentration of the pH adjusting agent in the soil disease controlling agent is not particularly limited, but is preferably 0.001 to 10%, more preferably 0.01 to 0.5%.
[0035]
The dosage form of the soil disease controlling agent of the present invention is not particularly limited, and may be in a powder form, or may be in a form that is easily incorporated into soil by being formulated into particles. A mixture obtained by adding a liquid carrier to a mixture of a culture of a microorganism and a nutrient may be used.
[0036]
The liquid carrier is not particularly limited, but water, vegetable oils such as soybean oil, rapeseed oil, and corn oil, liquid animal oils, and water-soluble polymer compounds such as polyvinyl alcohol, polyvinylpyrrolidone, and polyacrylic acid are preferably used.
[0037]
Further, if necessary, starch hydrolyzate, D-sorbitol, lactose, maltose, soluble extenders such as CMC, casein and gelatin, gum arabic, alginic acid, fixing agents and dispersants such as bentonite, propylene glycol and ethylene Antifreezing agents such as glycol, natural polysaccharides such as xanthan gum, and thickeners such as polyacrylic acid may be used.
[0038]
The method for using the soil disease controlling agent of the present invention is not particularly limited.For example, a soil disease controlling agent may be used by mixing it in the field soil before sowing of a crop, seedling or seed potato, Alternatively, the seeds may be mixed with seedling soil before seeding or transplanting seedlings before use. Also, after evenly spraying on the field, it may be used by plowing it into the soil using a cultivator or the like, or may be used by directly applying it to the surface of plant seeds or seed potatoes. Alternatively, it may be used by applying it to a planting hole of a seed potato, or may be used by applying it in a streak shape to a planting ridge such as a seed, a seedling or a seed potato.
[0039]
The application rate of the soil disease controlling agent is not particularly limited, but may be 50 to 500 liters per 10 ares of the field soil.
[0040]
INDUSTRIAL APPLICABILITY The soil disease controlling agent of the present invention is effective for controlling soil diseases that occur in the underground part of plants by fungi, bacteria, and microorganism-borne viruses. Among these soil diseases, for example, large patches of black turf grass belonging to Poaceae, brown patches and dollar spots of bentgrass, root rot of broccoli belonging to Brassicaceae, root rot of Chinese cabbage, root rot of cabbage and Sclerotium disease, yellow rot of radish, white silk and wilt of leek belonging to the lily family, gray rot of onion, strain rot, spinach and wilt of spinach belonging to the family Akazaceae, yam belonging to the yam family Brown rot of carnation, wilt of carnation belonging to Papilionidae, wilt of parsley belonging to Aceraceae, root rot of lettuce belonging to Asteraceae, wilt of tomato belonging to solanaceae, root rot of brown rot, brown root rot Disease and half-body wilt, eggplant half-body wilt, potato scab, watermelon wilt disease belonging to Cucurbitaceae, vine disease of melon and Particularly effective against soil diseases such as spot root rot, purple root rot of sweet potato belonging to Convolvulaceae, root rot of konjac belonging to Araceae, yellow rot of strawberry belonging to Rosaceae, and white root rot of pear. I do.
[0041]
【Example】
Hereinafter, the present invention will be described more specifically with reference to examples.
[0042]
Embodiment 1
11 kinds of hydrophobic antibacterial substances shown in Table 1 were prepared, and 1% by weight, 0.5% by weight, 0.25% by weight, 0.125% by weight, and 0.0625% by weight of each hydrophobic antibacterial substance were prepared. %, 0.0313% by weight of an ethanol solution. 30 μl of each prepared sample was dropped on each thick paper disk having a diameter of 8 mm to prepare a paper disk containing an antibacterial substance. On the other hand, an inoculum of Trichoderma virens Gv0928 strain cryopreserved in a potato dextrose medium was inoculated into the center of a potato dextrose agar medium (PDA) and cultured at 28 ° C. for 3 days. A flora disk was cut out from the edge of the flora of the Gv0928 strain produced by the culture using a cork polar having a diameter of 8 mm, and the flora was inoculated in the center of a new PDA with the flora facing downward. Next, the paper disk containing the antibacterial substance prepared above was placed 20 mm away from the bacterial flora. After culturing at 28 ° C. for 3 days, the presence or absence of an inhibition circle around the paper disk was observed. The results are shown in Table 1.
[0043]
[Table 1]

-: Blocking circle formation
+: No stopping circle
Further, seven kinds of water-soluble antibacterial substances shown in Table 2 were prepared, and each antibacterial substance was 1% by weight, 0.5% by weight, 0.25% by weight, 0.125% by weight, and 0.0625% by weight. % And 0.0313% by weight of potato dextrose liquid medium, respectively. Sodium benzoate and potassium sorbate were adjusted to pH 5 with 1N HCl. A microflora disk of Trichoderma virens Gv0928 strain prepared in the same manner as described above was inoculated into a potato dextrose liquid medium containing an antibacterial substance, and cultured at 28 ° C. for 3 days. The results are shown in Table 2.
[0044]
[Table 2]

+: Proliferation
-: Growth inhibition
[0045]
Examples 2 to 9, Comparative Examples 1 to 8
(1) Culture of microorganisms belonging to the genus Trichoderma
A seed strain of Gv0928 strain cryopreserved in a potato dextrose medium was cultured at 28 ° C. for 2 days using a potato dextrose medium. 100 kg of barley grains were used as a culture carrier, and 100 liters of a mixture of the culture solution of the Gv0928 strain and sterilized water was added to the barley grains and mixed uniformly. Then, barley grains obtained by adding the above-mentioned culture solution to 10 trays each having a length of 50 cm, a width of 50 cm, and a depth of 6 cm were placed so that the thickness became 5 cm. The upper surface of the tray was covered with a lid having a vent, and cultured at 28 ° C. for 10 days. During this culture period, the cells were cultured under light conditions, and the entire carrier was stirred on the third day from the start of the culture. After completion of the culture, transfer the culture to a drying tray, spread it thinly to a thickness of about 1 cm, cover the surface with filter paper, and dry it in a 30-35 ° C dryer until the water content becomes 10% by weight or less. did. Then, the dried culture was crushed to obtain a Gv0928 strain culture. The bacterial concentration in this culture was 3.3 × 10 ⁹ The culture was cfu / g.
[0046]
Using Trichoderma virens Gv1001 strain, a culture was obtained in the same manner as described above. The bacterial concentration in these cultures was 2.5 × 10 ⁹ The culture was cfu / g.
[0047]
Using Trichoderma virens ATCC 52199 strain, Trichoderma viride 6790 strain, and Trichoderma harzianum ATCC MYA-1175 strain, 1 kg of barley barley was used, except that 1 liter of the combined culture solution and sterilized water of each strain was used. Obtained the respective cultures in the same manner as described above. The bacterial concentration in these cultures was 1.8 × 10 ⁹ cfu / g culture, 2.1 x 10 ⁹ cfu / g culture, and 3.1 x 10 ⁹ The culture was cfu / g.
(2) Improvement of disease control effect by adding antibacterial substances to the preparation
A soybean oil and a bran as a nutrient source were respectively mixed with a culture of the aforementioned Trichoderma virens Gv0928 strain at a weight ratio of 1:10:89 to prepare a preparation. To this formulation, paraoxybenzoic acid isobutyl ester and sorbic acid were added at the concentrations shown in Table 3. To the formulation to which sorbic acid was added, DL-malic acid was added at 0.9% to adjust the pH. At this time, the bacterial concentration in the preparation was 1.0 × 10 ⁷ cfu / g-3.0 x 10 ⁷ cfu / g. In order to confirm the disease control effect by the addition of an antibacterial substance to the preparation, a seedling death test was performed using an artificial weather device. JA Kuumiai cultivation seedling cultivation seedlings Genki-kun No. 1 per liter, 0.5% (w / w) of a bran culture of Rhizoctonia solani URs9061 (a strain obtained from the Institute for Plant Protection from Japan), which is a causal fungus of seedling blight. v) Contaminated soil was prepared by mixing. The preparation was mixed with 0.1% (w / v) of the contaminated medium. Further, 100 ml of water was added and mixed, followed by culturing under dark conditions at 25 ° C. After culturing for 3 days, the contaminated soil was filled in a 72-well cell tray cut out from a 128-well cell tray, and one cabbage seed (cultivar: YR Aoba Kanai) was sowed per cell. This was cultivated under light conditions (10,000 Lx) and dark conditions for 12 hours at 25 ° C. for 12 hours. After culturing for 10 days, the number of dead plants (number of dead plants before germination + number of dead plants after germination) was examined. The value obtained by dividing the number of dead plants by the number of seeds (72 seeds) was defined as the disease severity. The test was performed in triplicate. The control value was calculated by the following formula.
[0048]

Table 3 shows the results.
[0049]
[Table 3]

As can be seen from the results in Table 3, the addition of the antibacterial substance improved the control value at a concentration that did not inhibit the growth of Trichoderma virens Gv0928 strain.
[0050]
At this time, in order to clarify the change in the number of bacteria of Trichoderma virens Gv0928 in the soil, the number of bacteria in the soil after culturing for 10 days was determined using a selective medium (Ca (NO / liter of deionized water per liter). ₃ ) ₂ 1.00 g: KNO ₃ , 0.26 g: MgSO ₄ ・ 7H ₂ O, 0.26 g: KH ₂ PO ₄ , 0.12 g: CaCl ₂ ・ 2H ₂ O, 1.00 g: citric anhydride, 0.05 g: sucrose, 2.00 g: aureomycin, 1.00 g: captan wettable powder, 0.025 g: lonirane wettable powder, 0.005 g: agar, 20 g : PH 4). Table 3 shows the results. In the preparation having an improved control value, the number of Trichoderma virens Gv0928 strain is increased. This increase in the number of Gv0928 strains prevents the nutrients contained in the formulation from being used by indigenous microorganisms by the addition of antibacterial substances, whereby the Gv0928 strain fully utilizes the nutrients contained in the formulation. It is thought that it became possible to do it.
[0051]
Examples 10 to 25, Comparative Examples 10 to 25
The antibacterial substances shown in Table 4 were added to a preparation obtained by mixing soybean oil and bran with the aforementioned Trichoderma virens strain Gv0928, and the above-described seedling death test was performed. At this time, the bacterial concentration in the preparation was 1.0 × 10 ⁷ cfu / g-3.0 x 10 ⁷ The culture was cfu / g. The results are shown in Table 4.
[0052]
[Table 4]

As can be seen from the results in Table 4, the control value of Trichoderma virens Gv0928 strain was improved by the addition of the antibacterial substance.
[0053]
Examples 26 to 33, Comparative examples 26 to 31
A soybean oil and a bran as nutrients were added to the culture of Trichoderma virens Gv1001 strain and the culture of Trichoderma virens ATCC 52199 strain, respectively, at a weight ratio of 1:10:89 to prepare formulations. . The antibacterial substances shown in Table 5 were respectively added to these preparations, and the above-described seedling death test was performed. To the formulation to which sorbic acid was added, DL-malic acid was added at 0.9% to adjust the pH. At this time, the bacterial concentration in the preparation was 1.0 × 10 ⁷ cfu / g-3.0 x 10 ⁷ The culture was cfu / g. Table 5 shows the results.
[0054]
[Table 5]

As can be seen from the results in Table 5, the control value of Trichoderma virens Gv1001 strain and ATCC52199 strain was improved by the addition of the antibacterial substance.
[0055]
Examples 34 to 37, Comparative Examples 32 to 36
A soybean oil and a bran were mixed as nutrients with the aforementioned culture of Trichoderma viride NBRC 6790 strain at a weight ratio of 1:10:89 to prepare a preparation. To the formulation to which sorbic acid was added, DL-malic acid was added at 0.9% to adjust the pH. The antibacterial substances shown in Table 6 were respectively added to these preparations, and the above-described seedling death test was performed. At this time, the bacterial concentration in the preparation was 1.0 × 10 ⁷ cfu / g-3.0 x 10 ⁷ The culture was cfu / g. The results are shown in Table 6.
[0056]
[Table 6]

As can be seen from the results in Table 6, the control value of Trichoderma viride NBRC 6790 strain was improved by the addition of the antibacterial substance.
[0057]
Examples 38-41, Comparative Examples 37-41
A soybean oil and a bran as a nutrient source were respectively blended with a culture of the aforementioned Trichoderma harzianum ATCC MYA-1175 strain at a weight ratio of 1:10:89 to prepare a preparation. To the formulation to which sorbic acid was added, DL-malic acid was added at 0.9% to adjust the pH. The antibacterial substances shown in Table 7 were respectively added to these preparations, and the above-described seedling death test was performed. At this time, the bacterial concentration in the preparation was 1.0 × 10 ⁷ cfu / g-3.0 x 10 ⁷ The culture was cfu / g. The results are shown in Table 7.
[0058]
[Table 7]

As can be seen from the results in Table 7, the control value of the Trichoderma harzianum ATCC MYA-1175 strain was improved by the addition of the antibacterial substance.
[0059]
Examples 42 to 45, Comparative Examples 42 to 46
A soybean oil and a bran as nutrients were mixed with a culture of Trichoderma virens Gv0928 strain at a weight ratio of 1:10:89 to prepare a preparation. The antimicrobial substances shown in Table 8 were added to these formulations, respectively. To the formulation to which sorbic acid was added, DL-malic acid was added at 0.9% to adjust the pH. At this time, the bacterial concentration in the preparation was 1.0 × 10 ⁷ cfu / g-3.0 x 10 ⁷ The culture was cfu / g. A horticultural cultivation soil "Yusaku N15" (product of Chisso Asahi Fertilizer Co., Ltd.) was filled in a cell tray, leek (variety: Yoshizura) was sowed, and seedlings were raised in a greenhouse. The contaminated soil from the field of the farmhouse in which the white silk disease occurred in the previous crop was collected and packed in a planter of 60 cm × 16 cm × 20 cm (depth). Each formulation was mixed in this planter so as to be 100 liters per 10a. As a control, a preparation to which no preparation was added was also prepared. The leek seedlings raised as described above were transplanted ten per planter, and the seedlings were managed in a greenhouse set at a minimum temperature of 23 ° C. Eight weeks after the transplantation, the disease rate was investigated. The test was performed in triplicate. The control value was calculated by the following formula.
[0060]

Table 8 shows the control values calculated here.
[0061]
[Table 8]

As can be seen from the results in Table 8, the control value of Trichoderma virens Gv0928 strain was improved by the addition of the antibacterial substance.
[0062]
Examples 46 to 49, Comparative examples 47 to 51
A soybean oil and a bran as a nutrient were mixed with a culture of the aforementioned Trichoderma virens Gv0928 strain at a weight ratio of 1:10:89 to prepare a formulation. The antimicrobial substances shown in Table 9 were added to these formulations, respectively. To the formulation to which sorbic acid was added, DL-malic acid was added at 0.9% to adjust the pH. At this time, the bacterial concentration in the preparation was 1.0 × 10 ⁷ cfu / g-3.0 x 10 ⁷ The culture was cfu / g. Genki-kun, a cultivation seedling for horticulture of JA Kumiai No. 1, was added to Fusarium oxysporum f. sp. A contaminated culture was prepared by mixing 2.0% (w / v) of a spinachia bran culture. This contaminated soil was packed in a planter having an inner size of 60 cm × 16 cm × 20 cm (depth), and each preparation was mixed so as to be 100 liters per 10a. Ten spinach seeds (variety: okame) were sowed per planter, and seedling management was performed in a greenhouse with a minimum temperature set at 23 ° C. As a control, a sample to which no treatment for a soil disease controlling agent was added was prepared. Four weeks after seeding, the cumulative disease rate was determined. The test was performed in triplicate. The control value was calculated by the following formula.
[0063]

Table 9 shows the control values calculated here.
[0064]
[Table 9]

As can be seen from the results in Table 9, the control value of Trichoderma virens Gv0928 strain was improved by the addition of the antibacterial substance.
[0065]
Examples 50 to 53, Comparative Examples 52 to 56
A soybean oil and a bran as a nutrient were mixed with a culture of the aforementioned Trichoderma virens Gv0928 strain at a weight ratio of 1:10:89 to prepare a formulation. The antibacterial substances shown in Table 10 were added to these preparations. To the formulation to which sorbic acid was added, DL-malic acid was added at 0.9% to adjust the pH. At this time, the bacterial concentration in the preparation was 1.0 × 10 ⁷ cfu / g-3.0 x 10 ⁷ cfu / g g culture.
[0066]
A scab disease-contaminated field was prepared by digging a potato skin infected with scab into the field of 10a and cultivating the potato twice in spring and fall. The test group was 1.4 mx 1.4 m in one group, and was performed in a triple system. The formulation was mixed into the test plots to make 100 liters per 10a. As a control, a test group to which no preparation was added was also prepared. Seed potatoes (variety: Nishiyutaka) were planted at 6 plants per section. Three months after planting of the seed potatoes, the potatoes were dug up, the condition of potato scab disease on the tubers was investigated, and the diseased potato rate was calculated. The control value was calculated by the following formula.
[0067]

Table 10 shows the control values calculated here.
[0068]
[Table 10]

As can be seen from the results in Table 10, the control value of Trichoderma virens Gv0928 strain was improved by the addition of the antibacterial substance.
[0069]
【The invention's effect】
According to the present invention, there is provided a soil disease controlling agent capable of maintaining and exhibiting a higher soil disease controlling effect with high safety, without adversely affecting nature, and in practical use, and a method for controlling soil diseases. be able to.

Claims

A soil disease control agent comprising a culture of microorganisms belonging to the genus Trichoderma, a nutrient source for these microorganisms, and an antibacterial substance.

The soil disease controlling agent according to claim 1, wherein the antibacterial substance is an antibacterial substance having a higher effect on an indigenous microorganism than a microorganism belonging to the genus Trichoderma.

Nutritional sources are chaff, bran, crab shell, shrimp shell, krill fine powder, rice bran, flour, corn cob, peanut hull, bone meal, fish meal, meal powder, sawdust, wood flour, charcoal, charcoal, bark charcoal, rice husk Claim 1 or 2 which is at least one nutrient source selected from the group consisting of fumigation coal, plant ash, peat moss, peat moss, dried animal droppings, activated carbon, oil cake, defatted soy flour, full fat soy flour, glucose, ammonium sulfate and urea. The soil disease controlling agent according to the above.

The microorganism belonging to the genus Trichoderma is a microorganism belonging to the species Trichoderma virens, a microorganism belonging to the species Trichoderma viride, and at least one microorganism selected from microorganisms belonging to the species Trichoderma harzianum. The soil disease controlling agent according to claim 1.

Microorganisms belonging to the genus Trichoderma include Trichoderma virens Gv0928 strain [FERM @ P-18927], Trichoderma virens Gv1001 strain [FERM @ P-18928], Trichoderma virens ATCC 52199 strain, Trichoderma viride NBRC 6790 strain, and Trichoderma Harmica A The soil disease controlling agent according to any one of claims 1 to 3, which is at least one kind of microorganism selected from -1175 strains.

The soil disease controlling agent according to any one of claims 1 to 5, wherein the soil disease is a soil disease caused by a filamentous fungus, a bacterium, or a microorganism-borne virus.

Controlling the soil disease of a plant characterized by applying the soil disease controlling agent according to any one of claims 1 to 6 to a soil for cultivating the plant, or a seedling or seed of the plant, or a seed potato. Method.

The method for controlling plant soil disease according to claim 7, wherein the soil is main field soil or seedling raising soil before planting.