JP2003252772A

JP2003252772A - 加齢に伴う代謝異常症の予防・改善・治療剤

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Publication number: JP2003252772A
Application number: JP2002057986A
Authority: JP
Inventors: Hiroshi Tanaka; 博田中; Yasuyuki Seto; 泰幸瀬戸; Shiyuki Tejima; 珠紀手島; Shigeru Fujiwara; 茂藤原; Toshiro Suzuki; 登志郎鈴木; Masanori Hosokawa; 昌則細川
Original assignee: Snow Brand Milk Products Co Ltd
Current assignee: Snow Brand Milk Products Co Ltd
Priority date: 2002-03-04
Filing date: 2002-03-04
Publication date: 2003-09-10

Abstract

(57)【要約】【課題】加齢に伴って発生する代謝異常症の予防
・改善・治療剤及び／または加齢に伴って発生する代謝
異常症の予防・改善・治療作用を有する飲食品の提供。【解決手段】ラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillu
s gasseri）に属する乳酸菌を培養して得られる培養物
及び／または菌体を有効成分とする代謝以上症の予防・
改善・治療剤、さらにこのような有効成分を含有してな
る代謝異常症の予防・改善・治療作用を有する飲食品を
調製する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、加齢に伴って発生
する代謝異常症の予防・改善・治療剤及び／または加齢
に伴って発生する代謝異常症の予防・改善・治療作用を
有する飲食品に関する。

【０００２】

【従来の技術】老化は生物にとって避けることのできな
い生命現象である。老化の原因として種々の要因が仮説
として挙げられている。例えば、細胞レベルではプログ
ラム説や、エラー破綻説等がある。いずれの説をとって
も、細胞内に生じた老化機構による変化が生体全般の老
化現象にどのような形で関連しているか不明である。し
かし、それらの変化が中枢的な細胞群で生じ、全般に波
及効果を及ぼすという考え方や、末梢的に個々の細胞で
生じた変化が影響し合って全般的に老化現象に反映する
という考え方もある。これらの変化を老化という現象の
指標とするために種々の指標が提案されているが、まだ
確定的な指標はない。近年、加齢に伴って発生する種々
の代謝障害、代謝異常症、あるいは機能障害を改善する
ことで、寿命の延長が実現され、ひいては種々の老化指
標が低下するといわれている。欧米化された食生活の定
着に伴い、加齢に伴う日本人の代謝異常は変化してい
る。

【０００３】近年特に問題となっている加齢にともなっ
て発生する代謝異常が原因と考えられる各種疾患として
は、肥満による高脂血症・脳内アミロイド蓄積を伴う老
人性痴呆・免疫異常・腸管機能低下・腸内微生物の交代
に由来する大腸がん・尿毒症などの腎臓機能障害等であ
る。肥満には種々の原因が挙げられるが、食餌療法や運
動療法以上の効果を示す抜本的な治療策は見出されてい
ない。これまで食餌療法以外に加齢に伴う体脂肪の蓄積
抑制剤としては、バラ科植物の果実又はエッセンスを投
与する方法（特開平８−198768号公報）、そば粉由来の
組成物を投与する方法（特開平９−183735号公報）、プ
ロシアニジンを投与する方法（特開平９−291039号公
報）、冬瓜果皮と茄子果皮を投与する方法（特開平11-1
64668号公報）、特定の脂肪酸を投与してエネルギー代
謝効率を変える方法（特開2001−286268号公報）等さま
ざまな方法や剤が提案されている。しかし、本発明で以
下に説明する腸内定着性を有するラクトバチルス・ガセ
リによる脂肪蓄積を抑制させるような提案はない。老人
性痴呆には脳血管性痴呆とアルツハイマー型痴呆の２タ
イプがあるが、特に近年になり脳内アミロイドの蓄積
（アミロイドーシス）を伴うアルツハイマー型痴呆の発
生が増加している。アミロイドの蓄積症（アミロイドー
シス）を抑制する物質としては、アミロイドβ蛋白質を
投与する方法（特表平６−507585号公報）、アミロイド
蛋白質の断片を投与する方法（特表平11−500462号公
報）、アニオンで置換された特定構造を有する糖組成物
を投与する方法（特表2001−513569号公報）等が提案さ
れている。しかし、本発明で以下に説明する腸内定着性
を有するラクトバチルス・ガセリによる脳内アミロイド
蓄積症を抑制させるような提案はない。

【０００４】加齢に伴う腎臓機能低下は、老化による糸
球体の機能低下やメサンジュウム細胞の機能低下、ある
いは老廃物・IgAの蓄積など種々の原因が挙げられてい
る。加齢に伴う腎臓機能の低下を抑制するために、IGF-
1またはIGF-3を投与する方法、IPレセプター作動薬を投
与する方法（特開2000−191523号公報）等、新規な治療
剤や治療方法が提案されている。しかし、本発明で以下
に説明する腸内定着性を有するラクトバチルス・ガセリ
による腎臓機能や代謝の低下を抑制させるような提案は
ない。上記の疾患はいずれも高齢者の思考や行動を大幅
に制限するものであり、その結果、高齢者の生活の質
（クオリティー・オブ・ライフ：QOL）を低下させてい
る。これらの疾患の症状を改善するための治療薬は種々
提案され実用化されているが、高齢者のQOLを抜本的に
改善するものではない。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、ヒト腸
管内に定着性を有する乳酸菌の研究を行っていたとこ
ろ、腸管内定着性を有する乳酸菌、特にラクトバチルス
・ガセリ（Lactobacillusgasseri)に属する乳酸菌を培
養して得られる培養物及び／または菌体を投与すると、
これらの微生物は腸管内に定着することによって宿主に
作用し、実験動物においては顕著な寿命延長をもたらす
ことを見出した。さらに研究を進めた結果、ラクトバチ
ルス・ガセリ（Lactobacillus gasseri)を加齢動物に投
与すると、腸管内に定着したラクトバチルス・ガセリ
（Lactobacillus gasseri)が宿主に作用して、加齢に伴
う代謝異常を改善し、腎臓機能の低下や悪化を抑制し、
肥満の原因となる脂質代謝を改善し、さらに脳内アミロ
イドの蓄積を抑制するという驚くべき効果を有すること
を見出した。その結果、加齢に伴うQOLは明らかに向上
することを見出し、本発明を完成するに到った。従って
本発明は、ラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillus ga
sseri)に属する乳酸菌を培養して得られる培養物及び／
または菌体を有効成分とする代謝異常症の予防・改善・
治療剤を提供することを課題とする。さらにまた本発明
は、ラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillus gasseri)
に属する乳酸菌を培養して得られる培養物及び／または
菌体を添加した加齢に伴う代謝異常症の予防・改善・治
療作用を有する飲食品を提供することを課題とする。

【０００６】本発明者らは、従来から種々の発酵乳の研
究を行っていたところ、これらの発酵乳から分離された
乳酸菌やヒト由来の乳酸菌の中で特にラクトバチルス・
ガセリ（Lactobacillus gasseri)が従来に見られない高
いヒト腸管内定着性を有していることを見出し、さらに
このラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillus gasseri)
が、従来知られていなかった腸管定着性によって加齢に
伴う代謝異常を改善し、その結果、腎臓機能の低下や悪
化を抑制し、肥満の原因となる脂質の蓄積を低下させ、
さらに脳内アミロイドの蓄積を抑制し、寿命を延長させ
ることを見出し、上記課題の解決に成功した。

【０００７】

【発明を解決するための手段】本発明は、ラクトバチル
ス・ガセリ（Lactobacillus gasseri)に属する乳酸菌を
培養して得られる培養物及び／または菌体を有効成分と
する加齢に伴う代謝異常症の予防・改善・治療剤に関す
る。また本発明は、このような有効成分を添加した加齢
に伴う代謝異常症の予防・改善・治療作用を有する飲食
品に関する。即ち本発明は、特許請求範囲に記載した下
記の構成からなる発明である。

【０００８】（１）ラクトバチルス・ガセリ（Lactobac
illus gasseri)に属する乳酸菌を培養して得られる培養
物及び／または菌体を有効成分とする代謝異常症の予防
・改善・治療剤。（２）ラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillus gasser
i)に属する乳酸菌がヒト腸管内定着性を有するラクトバ
チルス・ガセリ（Lactobacillus gasseri)である（１）
記載の代謝異常症の予防・改善・治療剤。（３）代謝異常症が腎臓機能異常症、脳内アミロイドー
シス、脂質代謝異常症である（１）または（２）記載の
代謝異常症の予防・改善・治療剤。（４）ラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillus gasser
i)に属する乳酸菌を培養して得られる培養物が発酵乳で
ある（１）〜（３）のいずれかに記載の代謝異常症の予
防・改善・治療剤。（５）ラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillus gasser
i)に属する乳酸菌がラクトバチルス・ガセリ（Lactobac
illus gasseri)・SBT2055（FERM P-15535）である
（１）〜（４）のいずれかに記載の代謝異常症の予防・
改善・治療剤。（６）ラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillus gasser
i)に属する乳酸菌を培養して得られる培養物及び／また
は菌体を添加した代謝異常症の予防・改善・治療作用を
有する飲食品。

【０００９】

【発明の実施の形態】本発明は、上記した課題を解決す
るためになされたものであって、本発明者らは、目的と
する乳酸菌をスクリーニングするに際し、次のような基
準を新たに設定し目的に合致する株を選定した。すなわ
ち、本発明者らは、発酵乳やヒト由来の数多くのラクト
バチルス・ガセリのうち、胃酸耐性が高い、低ｐＨ条件
下での生育が良好である、ヒト腸管へ高い定着性を示
す、ヒト腸管細胞親和性を示す、胆汁酸耐性がある、腸
管内に定着することによって加齢に伴う種々の代謝異常
を予防・改善・治療する効果を有する、食品に適用した
際に生残性が高く、香味、物性も優れている等々の条件
を設定し、菌株の選定につき鋭意研究を重ねた。本条件
によってスクリーニングした結果、これらの条件に合致
する菌株として以下菌株を選択することができた。な
お、この菌株は、下記の寄託番号により独立行政法人産
業技術総合研究所特許微生物寄託センターに寄託されて
いる。

【００１０】菌株ラクトハ゛チルス・カ゛セリ Lactobacillus gasseri SBT2055 FERM
P-15535 この菌株は、ヒト腸管細胞に高い親和性を有し、経口で
投与した時、生存して腸管内に到達することができ長期
間腸管内に常在することが可能であり、腸管内生育する
ことで宿主に作用し加齢に伴う代謝異常を予防・改善・
治療する。体外から投与したラクトバチルス・ガセリに
（Lactobacillus gasseri)属する乳酸菌が腸内に定着
し、このような生理効果を示すことは全く知られておら
ず、本発明者らによって始めて明らかにされた。

【００１１】さらに本発明では、上記寄託菌株に限らず
ヒトや発酵乳から分離されるラクトバチルス・ガセリ
（Lactobacillus gasseri)であって、上記の作用を示す
ものであれば、いずれのものでも使用できる。次にこれ
らの乳酸菌の培養方法を記す。本発明のラクトバチルス
・ガセリ（Lactobacillus gasseri)の培地には、乳培地
または乳成分を含む培地、これを含まない半合成培地
等、種々の培地を用いることができる。このような培地
としては、脱脂乳を還元して加熱殺菌した還元脱脂乳培
地を例示することができる。培養法は、静置培養または
ｐＨを一定にコントロールした中和培養で行うが、菌が
良好に生育する条件であれば特に培養法に制限はない。

【００１２】本発明は、上述のようにして得られる培養
物及び／または菌体を有効成分とする。また乾燥した粉
末を有効成分としてもよい。これらの乾燥は凍結乾燥で
行なうことが菌体を変質させることなく乾燥することが
できるので好ましい。これらの有効成分は経口摂取する
ことが望ましい。また、これらの粉末は乳糖等の適当な
賦形剤と混合し、粉剤、錠剤、丸剤、カプセル剤または
粒剤等として経口投与することができる。投与量は、投
与対象者の症状、年齢等を考慮してそれぞれ個別に適宜
決定されるが、通常成人１日当たり乾燥物として0.5〜1
0ｇであり、これを１日数回に分けて投与するとよい。
特に好ましくは、それぞれの株を生菌として、成人一人
当たり10⁸〜10¹²cfu／日投与することで本発明の目的と
する効果を発揮させることが可能となる。このようにし
て摂取することによって腸管内に定着し所望の効果を発
揮する。

【００１３】また、本発明の有効成分は、飲食品の製造
工程中に原料に添加してもよい。飲食品としてはどのよ
うな飲食品でもよく、その例として、乳飲料、発酵乳、
果汁飲料、ゼリー、キャンディー、乳製品、マヨネーズ
等の卵加工品、バターケーキ等の菓子パン類等の食品を
挙げることができる。但し、本発明の特性として乳酸菌
が生存した状態で腸管に定着することが必要であり、過
度の加熱を避けることが好ましい。また、マイクロカプ
セル等の従来技術を採用して、加熱を避ける手段を講じ
てもよい。さらにまた、本発明における飲食品は、前述
したラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillus gasseri)
の菌株を使用して乳酸発酵を行なって製造されたヨーグ
ルト等であっても良い。以下に本発明に用いる乳酸菌株
として、ラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillus gass
eri)・SBT2055(LG2055)を用いた試験例を示し、菌学的
性質及びインビトロ、インビボによる効果を具体的に説
明する。しかし、本発明はこの記載内容に限定されるも
のではない。

【００１４】

【試験例】LG2055株の性状１．菌学的性状（１）菌形 LBS寒天平板培地を用いて37℃、48時間嫌気培養後の結
果を示す。形状：桿菌大きさ：0.5-1×3-4μm 連鎖したもの多数（２）グラム染色性陽性（３）コロニー形態形状：円形周縁：波状大きさ：直径2-3mm 色調：白色表面：円滑（４）芽胞形成陰性（５）ガス産生なし（６）運動性なし（７）カタラーゼ活性陰性（８）脱脂乳凝固性凝固（９）ゼラチン液化性なし（１０）硝酸塩還元性なし（１１）インドール産性なし（１２）硫化水素産性なし

【００１５】２．糖の発酵性市販の細菌同定用キット（アピ50CH、ビオメリュー社）
他にて糖の発酵性を検討した結果を以下に記載する。グリセロール − エリスリトール − D-アラビノース − L-アラビノース＋リボース − D−キシロース − L−キシロース − アド二トール − β−メチル−D−キシロシド − ガラクト-ス＋ D−グルコース＋ L-フルクト-ス＋ D-マンノース＋ L-ソルボース − ラムノース − ダルシトール − イノシトール − マンニトール − ソルビトール − α？メチルー D−マンノシド − α？メチルー D−グルコシド − N-アセチルーグルコサミン＋アミグダリン＋アルブチン＋エスクリン＋サリシン＋セロビオース＋マルトース＋ラクト-ス＋メリビオース − サッカロース＋トレハロース＋イヌリン − メレジトース − D-ラフィノース − アミドン − グリコーゲン − キシリトール − β？ゲンチオビオース＋ D-ツラノース − D-リキソース − D-タガトース＋ D-アラビトール − L-アラビトール − グルコネート − ２−ケトーグルコネート − ５−ケトーグルコネート − （＋は発酵性有りを示し、−は発酵性なしを示す。）

【００１６】上記の分類学的性状と糖の発酵性は、典型
的なラクトバチルス・アシドフィルス複合菌種（Lactob
acillus acidophilus complex）の性状を示した。

【００１７】次いで、以下の通りDNA相同性試験による
確認試験を実施した。 DNA相同性試験以下に記載したラクトバチルスの基準株、被験菌LG2055
株、そしてコントロールとして、大腸菌（Escherichi
a. coli）のDNAを抽出、精製した。 LG2055株のDNA同士の相同性を100％、LG2055株と大腸菌
とのDNA相同性を０％としたときの、LG2055株と各基準
株のDNA相同性をDNAハイブリダイゼーション法により検
討した。その結果、LG2055株はラクトバチルス・ガセリ
JCM1131株と90％以上の相同性を有していたため、LG205
5株はラクトバチルス・ガセリと同定された。

【００１８】胃酸耐性胃酸耐性試験は瀧口らの方法（腸内細菌学雑誌 14.11-1
8．2000）に従ってｐＨ2.0の人工胃液を調製し胃酸耐性
試験を行ったところLG2055株は３時間以上生残した。

【００１９】人工腸液耐性瀧口らの方法（腸内細菌学雑誌 14.11-18．2000）に従
って胆汁末を含む人工腸液を調製し、これに前記の人工
胃液処理を行ったLG2055株を加えて耐性を試験したとこ
ろ、20時間以上の生存性を示した。LG2055株は、消化管
を通過し、大腸まで生存して到達することが確認され
た。

【００２０】ヒトの腸管通過能と腸内定着性無脂乳固形9.5％、乳脂肪3.0％の乳にLG2055のスタータ
ーを４％接種して39度で４時間発酵させた発酵乳を健康
な成人ボランティア42名に４週間、毎日100ｇを１日１
回食させて腸内菌の変化を観察した。試験期間中は腸内
菌に影響のある食品やオリゴ糖、薬品の摂取を禁ずる以
外は自由に食事をさせて評価を行った。試験前は検出さ
れなかったLG2055株がすべての被験者から４週間後には
検出され、両株が高い腸管内定着性を有することがわか
った。

【００２１】動物試験Ａ.インビボでの実験動物の寿命に与える影響試験１．乳酸菌脱脂乳培養の調製 LG2055株を用いた。乳酸菌は、115℃、20分間の滅菌処
理をした0.5％酵母エキス（アサヒビール食品社製）添
加11.55％脱脂乳培地にて、37℃、16時間培養した。得
られた培養物は凍結乾燥後、乳鉢で粉砕した。

【００２２】２．試験飼料の調製表１にAIN-93M（オリエンタル酵母工業社製）に準拠し
た食餌組成を示した。この飼料に５％脱脂乳または上記
脱脂乳乳酸菌培養物を添加した。

【００２３】

【表１】

【００２４】３．試験動物５週齢の老化促進モデルであるSenescence-Accelerated
Mouse（SAM）P8系雌マウス（日本SLC社より入手）を
２群、各群30とした。AIN-93Mにて１週間予備飼育後、
上記の試験飼料で死亡するまで飼育した。この間、イオ
ン交換水及び飼料（７ｇから８ｇ以内で）は自由摂取さ
せた。

【００２５】４．体重測定飼育期間中、週１回体重を測定した。５週齢から60週齢
までの体重について分割区法による分散分析を行った。

【００２６】５．食餌摂取量測定法食餌摂取量は約４週間に１回測定した。予め秤量した飼
料を与え、翌日同時間帯に容器中にある餌残量を測定
し、１日当たりの食餌摂取量を算出した。

【００２７】６．フローラ解析新鮮な糞便を採取し、「嫌気性菌の分離と同定法」（菜
根出版）に記載されている光岡らの方法に準拠し、５週
齢（初発値）、３ヶ月齢、５ヶ月齢、７ヶ月齢、10ヶ月
齢、さらに12ヶ月齢において、腸内フローラ解析を行っ
た。得られたデータについては、分割区法による分散分
析を行った。

【００２８】Ｂ．老化指標に与える影響についての試験
（40週齢時の生体機能）１．乳酸菌脱脂乳培養物の調製前記Ａと同様にLG2055株を用いた。乳酸菌は、115℃、2
0分間の滅菌処理をした0.5％酵母エキス（アサヒビール
食品社製）添加11.55％脱脂乳培地にて、37℃、16時間
培養した。得られた培養物は凍結乾燥後、乳鉢で粉砕し
た。

【００２９】２．試験飼料前記と同様にAIN-93M（オリエンタル酵母工業社製）に
準拠した食餌を調整し、この飼料に５％脱脂乳または上
記脱脂乳乳酸菌培養物を添加した。

【００３０】３．実験動物５週齢のSAM P8系雌マウス（日本SLC社より入手）を２
群、各群10匹として用いた。AIN-93Mにて1週間予備飼育
後、上記の試験飼料で36週飼育した。この間、イオン交
換水及び飼料は自由摂取させた。40週齢まで飼育した
後、約16時間絶食させ、ネンブタール（大日本製薬社
製）麻酔下に開腹し、下大静脈採血によって屠殺した。

【００３１】４．体重測定飼育期間中、週1回体重を測定した。得られたデータに
ついては、分割区法による分散分析を行った。

【００３２】５．食餌摂取量測定法食餌摂取量の測定は、幼若時においては毎週、後に約１
ヶ月に１回（１週）の割合で測定した。予め秤量した飼
料を与え、翌日同時間帯に容器中にある餌残量を測定
し、１日当たりの食餌摂取量を算出した。

【００３３】６．代謝ケージ飼育期間中、４回代謝ケージにて飼育し、採尿、採糞を
行った。代謝ケージでの飼育は、14週齢、22週齢、29週
齢及び38週齢において行った。２日間の慣らし飼育の
後、３日目から４日目にかけて約24時間、糞便ならびに
尿を採取した。期間中は、飲料水、飼料摂取量ならびに
体重もモニターした。

【００３４】７．尿8-ヒドロキシデオキシグアノシンの
測定代謝ケージ飼育にて得られた尿について、8-OHDG測定用
ELISAキット（日本老化制御研究所製）を用いて測定し
た。

【００３５】８．脳内アミロイド蓄積量の測定屠殺直後に解剖し、大脳を摘出した。得られた大脳をプ
ロテインインヒビターミクスチャー（SIGMA社製）0.5％
添加PBSを用い、テフロン（登録商標）ホモジナイザー
にて均質化し、アミロイドベータ（1-42）測定キット
（免疫生物研究所製）を用いて測定した。

【００３６】９．後腹壁脂肪重量屠殺直後に解剖し、後腹壁脂肪を左右各々摘出し、精密
天秤METTLER AE240（日本シイベルヘグナー社製）にて
重量を測定した。

【００３７】１０．起立運動ならびに自発運動測定法 40週齢において、マウスの自発運動ならびに起立運動を
測定した。30分間におけるコイル間移動回数、ならびに
起立回数を計測した。計測には、実験動物運動量測定装
置（室町機械社製）を用いた。

【００３８】１１．血漿分析約16時間絶食させた後、ネンブタール麻酔下にて、下大
静脈から全採血後、抗凝固剤処理（ヘパリン10単位／m
l）後、遠心分離により血漿を得た。その後、生化学自
動分析装置FDC5500（富士フィルムメディカル社製）を
用いて測定した。

【００３９】１２．糞便中IgAの測定代謝ケージ飼育にて得られた糞便について、遠心エバポ
レーターCVE-200D（EYELA社製）にて乾燥した後、重量
を測定し、プロテインインヒビター（SIGMA社製）0.5％
添加PBSを加え、糞便を0.05g／ml濃度に分散し、ホモジ
ナイザー（池本理化工業社製）にて均質化した。この分
散液を、４℃、15,000rpmにて10分間遠心し、上清をマ
ウスIgA測定に供した。マウスIgA測定用ELISAキット（B
ETHYL社製）を用いて測定した。

【００４０】１３．血球分析マウスを約16時間絶食させた後、ネンブタール麻酔下、
抗凝固剤処理（ヘパリン10単位／ml）をしたシリンジを
用い、下大静脈から全採血後、全自動血球計数器MEK−6
158（日本光電社製）を用いて測定した。

【００４１】１４． Th１／Th２細胞比の測定脾臓を摘出したのち無菌的につぶし、25mMHEPES-RPMIを
加えながら、脾臓細胞懸濁液を調製する。この脾臓細胞
懸濁液を定法に従い、セルストレイナーを通して単細胞
懸濁液とした。EPICS Application Note８の方法に従
い、脾臓リンパ球の細胞表面CD３、細胞内IL４、細胞内
INF-gammaの蛍光染色を行った。この後、Coulter EPICS
XL にて解析を行い、CD３陽性細胞比、Th１／Th２細胞
比を算出した。

【００４２】試験結果Ａ．インビボでの実験動物の寿命に与える影響について
の試験結果図１に実験に用いたマウスの寿命を示した。コントロー
ルに比べ本発明の発酵乳（LG2055）投与群が寿命延長に
効果を示すことが明らかになった。また体重増加曲線を
比較した場合（図２）も大きな相違は認められなかっ
た。

【００４３】Ｂ．老化指標に与える影響についての試験
結果表２に、12ヶ月齢に達するまでの腸内フローラ変化の解
析結果を示した。本発明の発酵乳（LG2055）投与群によ
る糞便内ビフィドバクテリウム属の有意な増加ならびに
レシチナーゼ陰性クロストリディウム属の著しい減少を
示した。両菌群共に時間依存性の変化が認められた。

【００４４】

【表２】

【００４５】本発明の発酵乳（LG2055）投与群では生活
齢に伴ってビフィドバクテリウム属の菌数が増加するこ
とが明らかになった（図３）。一方、クロストリディウ
ム属の菌数は、本発明の発酵乳（LG2055）投与群におい
て著しく低下することが確認された（図４）。

【００４６】図５に、実験期間を通して観察した尿の排
泄量の解析結果を示した。本発明の発酵乳（LG2055株）
投与群では、尿の排泄量が増加した。

【００４７】図６に、尿中に排泄される酸化マーカー
（8-OHDG）の排泄量を示した。代謝の盛んな時期には両
群とも排泄が盛んになるが、全試験期間を通して本発明
の発酵乳（LG2055株）投与群の排泄量が高いことが明か
となった。以上の尿排泄量と8-OHDG排泄量の測定結果か
ら、本発明の発酵乳（LG2055株含有）は、加齢に伴う腎
臓の機能の低下を予防・改善することが明らかとなっ
た。

【００４８】図７に、大脳のアミロイド蓄積量の測定結
果を示す。本発明の発酵乳（LG2055株）投与群におい
て、加齢に伴うアミロイド蓄積の抑制が確認され、アミ
ロイドーシスの予防・改善効果が確認できた。また、以
下に示す起立運動試験の結果と合わせて痴呆症の予防・
改善効果を確認できた。

【００４９】図８に、後腹壁脂肪蓄積量の比較結果を示
す。本発明の発酵乳（LG2055株）投与群において、著し
く低下することが確認され、加齢に伴う脂質代謝異常を
改善することが明かとなった。

【００５０】図９に、マウスの自発運動の観察結果を示
す。コントロール群で異常な動きが観察され、本発明の
発酵乳（LG2055株）投与群ではこのような異常な行動は
少なかった。本発明の発酵乳（LG2055株含有）により、
脳内アミロイド蓄積が低下し、加齢に伴う痴呆抑制に効
果があることが判明した。

【００５１】図10に、血糖値の測定結果を示す。本発明
の発酵乳（LG2055株）投与群により、加齢に伴う高血糖
の発生を抑制できた。

【００５２】図11に、脾臓ヘルパーＴ細胞レパートリー
の解析結果を示す。本発明の発酵乳（LG2055株）投与群
において、細胞性免疫機能の活性化が生じていることが
確認された。同時に脾臓内CD3陽性細胞比率（Ｔ細胞）
も高くなっていることが確認された。

【００５３】図12に、盲腸内容ｐＨ測定結果を示す。本
発明の発酵乳（LG2055投与群）により、腸内ｐＨを低下
させ、腸内代謝を改善することが確認された。

【００５４】図13に、糞便IgAの排泄量を示す。糞便IgA
の排泄量は、本発明の発酵乳（LG2055株）投与群におい
て抑制された。

【００５５】図14に、試験期間を通した飼料効率を示
す。試験期間を通した飼料効率は、本発明の発酵乳（LG
2055株）投与群が有意に高いことが確認された。一方、
図14から加齢による飼料効率のマイナス化が抑制されて
いることが判明した。この結果は、「元気に生きてぽく
っりなくなる」ことを立証するものであり、QOLの維持
・改善効果を確認することができた。

【００５６】

【実施例】１．乾燥粉末 LG2055株を10％還元脱脂乳培地（121℃、10分加熱）で
培養し、本培養物を凍結乾燥し粉末化し、本発明の予防
改善治療剤を調製した（Ａ）。

【００５７】２．発酵乳 LG2055株をMRS液体培地にて培養した。対数増殖期にあ
る各培養液を、0.35％の酵母エキスを添加した10％還元
脱脂乳（115℃、20分間滅菌）に１％接種し、個々マザ
ーカルチャーを作成した。これをヨーグルトミックス
（10％の還元脱脂乳を添加し、100℃にて10分間加熱し
たもの）に各2.5％添加して調製した。発酵は37℃で行
い、乳酸酸度0.85に到達した時点で冷却し、発酵を終了
させ、本発明の予防改善治療作用を有する発酵乳を調製
した（Ｂ）。

【００５８】３．製剤例１ LG2055株の液体培養物から対数増殖期にある菌体を４
℃、7,000 rpmで15分間遠心分離して滅菌水による洗浄
を行い、これを３回繰り返して洗浄菌体を得た。これを
凍結乾燥処理して菌体粉末を得た。この菌体粉末１部に
脱脂乳４部を混合し、この粉末を打錠機により１ｇずつ
定法により打錠して、菌体200ｍｇを含む錠剤を調製し
た。また、上記のLG2055株を含有する発酵乳を凍結乾燥
し、得られた粉末を用いて直接打錠した。

【００５９】４．カプセル化剤凍結乾燥粉末を散剤化した後、造粒により顆粒状とした
後、空カプセルに10mgづつ充填しカプセル剤とした。

【００６０】５．製剤例２ LG2055株をMRS液体培地（Difco社製）５Ｌに接種後、37
℃、18時間静置培養を行った。LG2055株を脱脂乳５Ｌに
接種後、37℃、18時間静置培養を行った。培養終了後、
7,000rpmで15分間遠心分離を行い、培養液の１／50量の
それぞれの濃縮菌体を得た。次いで、この濃縮菌体を脱
脂粉乳10重量％、グルタミン酸ソーダ１重量％を含む分
散媒と同量混合し、ｐＨ７に調整後、凍結乾燥を行っ
た。得られた凍結乾燥物を60メッシュのフルイで整粒化
し、凍結乾燥菌末を得た。第13改正日本薬局方解説書製
剤総則「散剤」の規定に準拠し、上記５で得られた凍結
乾燥菌末１ｇにラクトース（日局）400ｇ、バレイショ
デンプン（日局）600ｇを加えて均一に混合し、散剤を
製造した。

【００６１】６．製剤例３次の配合により錠剤を製造した。（１）LG2055株の脱脂粉乳培地における培養物の凍結乾
燥物50ｇ、（２）ラクトース90ｇ、（３）コーンスター
チ29ｇ、（４）ステアリン酸マグネシウム１ｇ、この混
合物を圧縮錠剤機により圧縮して、１錠あたり有効成分
を40ｍｇ含有する錠剤100個を製造した。

【００６２】７．製剤例４ LG2055株をホエー培地（0.5％酵母エキス、0.1％トリプ
チケースペプトン添加）で培養後遠心分離で菌体を回収
した。この培養物１ｇを乳糖５ｇと混合し顆粒状に成形
して顆粒剤を得た。

【００６３】８．LG2055を含む食品（１）飲料洗浄菌体の凍結乾燥粉末をLG2055株が各々10⁸個以上含
まれるように200 mlの牛乳と混合して、本発明の予防改
善治療剤入り飲料を得た。良好な風味を有していた。（２）醗酵乳 LG2055株をヨーグルトミックス（生乳に２％脱脂乳を添
加し、100℃、10分加熱した）に接種し、20℃で24時間
培養した。紙カップに充填し冷却後、ヨーグルトとした
製品中のLG2055株の生菌数濃度は、100ｇ当たり10⁸個以
上であった。

【００６４】（３）発酵バター発酵バター（ｗｔ／ｗｔ）乳脂肪９６．８％食塩１．２１．で得られた試料(Ａ) ２

【００６５】（４）バターケーキバターケーキ（ｗｔ／ｗｔ）バター２４％薄力粉２４砂糖２４全卵２４２．で得られた試料（Ｂ）４香料少々

【００６６】（５）マヨネーズマヨネーズ（ｗｔ／ｗｔ）サラダ油６５％卵黄１７食酢１０１．で得られた試料（Ａ）３香辛料４．４グルタミン酸モノナトリウム０．６

【００６７】

【発明の効果】本発明によれば、ラクトバチルス・ガセ
リ（Lactobacillus gasseri)に属する乳酸菌を培養して
得られる培養物及び／または菌体を有効成分とする代謝
異常症の予防・改善・治療剤と代謝異常症の予防・改善
・治療作用を有する飲食品を提供することができる。本
発明によって提供される代謝異常症の予防・改善・治療
剤は、毒性および副作用が極めて少なく、また、食品素
材としても有用である。

【図面の簡単な説明】

【図１】実験動物の寿命を示す。

【図２】体重増加曲線を示す。

【図３】糞便内ビフィドバクテリウム数を示す。

【図４】糞便内クロストリディウム数を示す。

【図５】尿排泄量の変化を示す。

【図６】尿中8-OHDG排泄量を示す。

【図７】脳内アミロイドの蓄積量を示す。

【図８】体重と後腹壁脂肪重量の相関関係解析図を示
す。

【図９】動物の自立起動運動測定結果を示す。

【図１０】血糖値の測定結果を示す。

【図１１】ヘルパーＴ細胞構成比率を示す。

【図１２】盲腸内ｐＨを示す。

【図１３】糞便内IgAの変動値を示す。

【図１４】飼料効率を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ２３Ｌ 2/52 Ａ６１Ｐ 3/00 Ａ６１Ｐ 3/00 13/12 13/12 25/28 25/28 Ａ２３Ｌ 2/00 Ｆ (72)発明者藤原茂埼玉県所鶴ヶ島市脚折1385−34 (72)発明者鈴木登志郎静岡県浜松市三方ヶ原町1187 (72)発明者細川昌則京都府京都市左京区聖護院川原町53 Ｆターム(参考） 4B017 LC03 LK21 LL09 LP05 4B018 LB08 LE01 MD86 ME14 MF13 4C087 AA01 AA02 AA03 BB39 BC56 MA02 MA52 NA14 ZA15 ZA81 ZC21 ZC33

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillus
gasseri)に属する乳酸菌を培養して得られる培養物及び
／または菌体を有効成分とする代謝異常症の予防・改善
・治療剤。
【請求項２】ラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillus
gasseri)に属する乳酸菌がヒト腸管内定着性を有するラ
クトバチルス・ガセリ（Lactobacillus gasseri)である
請求項１記載の代謝異常症の予防・改善・治療剤。
【請求項３】代謝異常症が腎臓機能異常症、脳内アミロ
イドーシス、脂質代謝異常症である請求項１または２記
載の代謝異常症の予防・改善・治療剤。
【請求項４】ラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillus
gasseri)に属する乳酸菌を培養して得られる培養物が発
酵乳である請求項１〜３のいずれかに記載の代謝異常症
の予防・改善・治療剤。
【請求項５】ラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillus
gasseri)に属する乳酸菌がラクトバチルス・ガセリ（La
ctobacillus gasseri)・SBT2055（以下LG2055という）
（FERM P-15535）である請求項１〜４のいずれかに記載
の代謝異常症の予防・改善・治療剤。
【請求項６】ラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillus
gasseri)に属する乳酸菌を培養して得られる培養物及び
／または菌体を添加した代謝異常症の予防・改善・治療
作用を有する飲食品。