JP2002275194A

JP2002275194A - 新規ｆｏ−６９７９−ｍ０物質、ｆｏ−６９７９−ｍ１物質、ｆｏ−６９７９−ｍ２物質、ｆｏ−６９７９−ｍ３物質及びｆｏ−６９７９−ｍ４物質並びにそれらの製造法

Info

Publication number: JP2002275194A
Application number: JP2001080388A
Authority: JP
Inventors: Satoshi Omura; 智大村; Hiroshi Koda; 洋供田
Original assignee: Japan Society for Promotion of Science; Kitasato Gakuen Foundation; Japan Society For Promotion of Machine Industry
Current assignee: Japan Society for Promotion of Science; Kitasato Gakuen Foundation; Japan Society For Promotion of Machine Industry
Priority date: 2001-03-21
Filing date: 2001-03-21
Publication date: 2002-09-25
Also published as: US20030195146A1; WO2002074792A1; US7192742B2

Abstract

(57)【要約】【課題】アシルコエンザイムＡコレステロールアシル
転移酵素阻害活性を有するＦＯ−６９７９−Ｍ０、−Ｍ
１、−Ｍ２、−Ｍ３及び−Ｍ４物質並びにそれらの製造
法である。【解決手段】ＦＯ−６９７９−Ｍ０、−Ｍ１、−Ｍ
２、−Ｍ３及び−Ｍ４物質を生産する能力を有する微生
物を培地に培養し、培養液中に該ＦＯ−６９７９−Ｍ
０、−Ｍ１、−Ｍ２、−Ｍ３及び−Ｍ４物質を蓄積せし
め、該培養物からＦＯ−６９７９−Ｍ０、−Ｍ１、−Ｍ
２、−Ｍ３及び−Ｍ４物質を採取する。【効果】本物質は毒性が低くアシルコエンザイムＡコ
レステロールアシル転移酵素を特異的に阻害することか
ら、ヒトのコレステロール蓄積に起因する疾病の予防お
よび治療に有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明はアシルコエンザイム
Ａコレステロールアシル転移酵素阻害作用を有する新規
ＦＯ−６９７９−Ｍ０物質、ＦＯ−６９７９−Ｍ１物
質、ＦＯ−６９７９−Ｍ２物質、ＦＯ−６９７９−Ｍ３
物質及びＦＯ−６９７９−Ｍ４物質並びにそれらの製造
法に関する。

【０００２】

【従来の技術】近年、食生活の向上に伴い成人の高脂血
症や動脈硬化などコレステロール蓄積に起因する症状が
現代病として問題視されている。コレステロールはアシ
ルコエンザイムＡのアシル基転移によりコレステロール
エステルとなり、細胞内および血中リポ蛋白に蓄積され
る。このアシル基転移反応を触媒する酵素がアシルコエ
ンザイムＡコレステロールアシル転移酵素であり、コレ
ステロールの腸管からの吸収、肝臓でのリポタンパク質
生成および冠動脈における泡末細胞の形成に深くかかわ
っている（Ｓｌｉｓｋｏｖｉｃ，Ｄ．Ｒ．とＷｈｉｔ
ｅ，Ａ．Ｄ．ＴｒｅｎｄＰｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１２
巻、１９４〜１９９頁、１９９１年）。従って、アシル
コエンザイムＡコレステロールアシル転移酵素を阻害す
る物質は、かかる疾病に有効であることが推察される。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】このような作用機構に
基づく医薬品の開発が望まれており、かかる実情におい
て、アシルコエンザイムＡコレステロールアシル転移酵
素阻害活性を有する物質を提供することは、高脂血症や
それに基づく動脈硬化などの成人病の新しい予防および
治療法を提供するものであり有用なことである。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、微生物の
生産する代謝産物について研究を続けた結果、土壌から
分離したＦＯ−６９７９株の培養中にアシルコエンザイ
ムＡコレステロールアシル転移酵素阻害活性を有する物
質が産生されることを既に見出し、該物質をＦＯ−６９
７９物質と命名し、該物質を特願平１１−２７９１９５
号公報に開示されるＦＯ−６９７９物質およびその製造
法として既に出願を行った。

【０００５】本発明者らは、本ＦＯ−６９７９株の代謝
産物産物についてさらに研究を続けた結果、ＦＯ−６９
７９株の培養物中に新たにアシルコエンザイムＡコレス
テロールアシル転移酵素阻害活性物質を有する物質が産
生されることを見出した。次いで、該培養物から該アシ
ルコエンザイムＡコレステロールアシル転移酵素阻害活
性物質を分離精製した結果、このような化学構造を有す
る物質は従来まったく知られていないことから、本物質
をＦＯ−６９７９−Ｍ０物質、ＦＯ−６９７９−Ｍ１物
質、ＦＯ−６９７９−Ｍ２物質、ＦＯ−６９７９−Ｍ３
物質及びＦＯ−６９７９−Ｍ４物質（以下、ＦＯ−６９
７９−Ｍ０、−Ｍ１、−Ｍ２、−Ｍ３及び−Ｍ４物質と
呼称することもある）と称することにした。本発明は、
かかる知見に基づいて完成されたものであって、下記式
［Ｉ］

【０００６】

【化６】で表される化合物である新規ＦＯ−６９７９−Ｍ０物質
に関するものである。

【０００７】本発明はさらに、ボーベリア属に属し、Ｆ
Ｏ−６９７９−Ｍ０物質を生産する能力を有する微生物
を培地に培養し、培養液中にＦＯ−６９７９−Ｍ０物質
を蓄積せしめ、該培養物からＦＯ−６９７９−Ｍ０物質
を採取する新規ＦＯ−６９７９−Ｍ０物質の製造法に関
するものである。本発明はさらに、下記式［ＩＩ］

【０００８】

【化７】で表される化合物である新規ＦＯ−６９７９−Ｍ１物質
に関するものである。

【０００９】本発明はさらに、ボーベリア属に属し、Ｆ
Ｏ−６９７９−Ｍ１物質を生産する能力を有する微生物
を培地に培養し、培養液中にＦＯ−６９７９−Ｍ１物質
を蓄積せしめ、該培養物からＦＯ−６９７９−Ｍ１物質
を採取する新規ＦＯ−６９７９−Ｍ１物質の製造法に関
するものである。本発明はさらに、下記式［ＩＩＩ］

【００１０】

【化８】で表される化合物である新規ＦＯ−６９７９−Ｍ２物質
に関するものである。

【００１１】本発明はさらに、ボーベリア属に属し、Ｆ
Ｏ−６９７９−Ｍ２物質を生産する能力を有する微生物
を培地に培養し、培養液中にＦＯ−６９７９−Ｍ２物質
を蓄積せしめ、該培養物からＦＯ−６９７９−Ｍ２物質
を採取する新規ＦＯ−６９７９−Ｍ２物質の製造法に関
するものである。本発明はさらに、下記式［ＩＶ］

【００１２】

【化９】で表される化合物である新規ＦＯ−６９７９−Ｍ３物質
に関するものである。

【００１３】本発明はさらに、ボーベリア属に属し、Ｆ
Ｏ−６９７９−Ｍ３物質を生産する能力を有する微生物
を培地に培養し、培養液中にＦＯ−６９７９−Ｍ３物質
を蓄積せしめ、該培養物からＦＯ−６９７９−Ｍ３物質
を採取する新規ＦＯ−６９７９−Ｍ３物質の製造法に関
するものである。本発明はさらに、下記式［Ｖ］

【００１４】

【化１０】で表される化合物である新規ＦＯ−６９７９−Ｍ４物質
に関するものである。

【００１５】本発明はさらに、ボーベリア属に属し、Ｆ
Ｏ−６９７９−Ｍ４物質を生産する能力を有する微生物
を培地に培養し、培養液中にＦＯ−６９７９−Ｍ４物質
を蓄積せしめ、該培養物からＦＯ−６９７９−Ｍ４物質
を採取する新規ＦＯ−６９７９−Ｍ４物質の製造法に関
するものである。

【００１６】前記のＦＯ−６９７９−Ｍ０、−Ｍ１、−
Ｍ２、−Ｍ３及び−Ｍ４物質を生産する能力を有する微
生物（以下、「ＦＯ−６９７９物質生産菌」と称する）
は、ボーベリア属に属するが、例えば本発明者らが土壌
から分離したボーベリアエスピー（Ｂｅａｕｖｅｒｉ
ａｓｐ．）ＦＯ−６９７９株は、本発明において最も
有効に使用される菌株の一例である。本ＦＯ−６９７９
株の菌学的性状を示すと以下の通りである。

【００１７】１．形態的性質本菌株は、バレイショ・ブドウ糖寒天培地、コーン・ミ
ール寒天培地、麦芽汁寒天培地、三浦寒天培地などで良
好に生育し、分生子の着生も良好である。また、イース
トエキストラクト・ソルブルスターチ寒天培地での生育
は良好であるが、分生子の着生は観察されなかった。コ
ーン・ミール寒天培地に生育したコロニーを顕微鏡で観
察すると、菌糸は透明で隔壁を有している。分生子柄は
基底菌糸より直接、あるいは短い枝から生じる。分生子
柄の基部は球状あるいはフラスコ状に膨らんで大きさ
２．０〜３．３×２．５〜３．７μｍとなる。先端は細
く伸長し、分生子形成にしたがってジグザグ状になり、
長さ１２〜２０μｍとなる。分生子は分生子柄の小突起
（約１μｍ）上に出芽形成し、球形あるいは、幅広い楕
円形でときに基部はとがり、無色で大きさ１．８〜２．
５×２．５〜３．３μｍである。

【００１８】２．各種培地上での培養性状本菌株を各種寒天培地上で２５℃、１４日間培養した場
合の肉眼的に観察した結果は下記に示すとおりである。
なお、下記の培地において、菌核または菌核様の構造は
形成されない。

【００１９】 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 培地培地上の生育状態コロニー表コロニー裏可溶性（コロニーの直径）面の色調面の色調色素 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ バレイショ・ブドウ糖寒天培地良好（４０ｍｍ）白色淡黄白色無し羊毛状、周辺一部隆起、周辺平滑 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ コーン・ミール寒天培地良好（５４ｍｍ）白色淡黄白色〜無し羊毛状、平坦、薄橙色周辺乱糸状 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 麦芽汁寒天培地良好（３２ｍｍ）白色薄茶色無し羊毛状、中央隆起、周辺平滑 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 三浦寒天培地良好（６０ｍｍ）白色白色無し粉状、平坦、周辺平滑 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ イーストエクストラクト・ソルブルスターチ寒天培地良好（５３ｍｍ）白色淡黄白色〜無しビロード状、隆起、薄橙色周辺平滑 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

【００２０】３．生理的、生態的性状（１）最適生育条件本菌株の最適生育条件は、ｐＨ４〜７、温度１５〜３０
℃である。（２）生育範囲本菌株の生育範囲は、ｐＨ４〜１０、温度１１〜３２℃
である。（３）好気性、嫌気性の区別好気性

【００２１】以上のように、本菌株ＦＯ−６９７９株の
形態的特徴、培養性状および生理的性状に基づき、既知
菌種との比較を試みた結果、本菌株はボーベリア（Ｂｅ
ａｕｖｅｒｉａ）属に属する一菌株と同定し、ボーベリ
アエスピーＦＯ−６９７９と命名した。なお、本菌
株はボーベリアエスピーＦＯ−６９７９（Ｂｅａｕ
ｖｅｒｉａｓｐ．ＦＯ−６９７９）として、茨城県つ
くば市東１丁目１番３号に所在する工業技術院生命工学
工業技術研究所に平成１０年３月１８日にＦＥＲＭＰ
−１６７１６として寄託されている。

【００２２】本発明で使用されるＦＯ−６９７９物質生
産菌としては、前述のボーベリアエスピー（Ｂｅａｕｖ
ｅｒｉａｓｐ．）ＦＯ−６９７９菌株が好ましい例と
して挙げられるが、菌の一般的性状として菌学上の性状
は極めて変異し易く、一定したものではなく、自然的に
あるいは通常行われる紫外線照射または変異誘導体、例
えばＮ−メチル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジ
ン、エチルメタンスルホネート等を用いる人工的変異手
段により変異することは周知の事実であり、このような
人工的変異株は勿論、自然変異株も含め、ボーベリア属
に属し、ＦＯ−６９７９−Ｍ０、−Ｍ１、−Ｍ２、−Ｍ
３及び−Ｍ４物質を生産する能力を有する菌株はすべて
本発明に使用することができる。また、細胞融合、遺伝
子操作などの細胞工学的に変異させた菌株も含め、ボー
ベリア属に属し、ＦＯ−６９７９−Ｍ０、−Ｍ１、−Ｍ
２、−Ｍ３及び−Ｍ４物質を生産する菌株は、全て本発
明において使用することができる。

【００２３】本発明を実施するに当たっては、先ずボー
ベリア属に属するＦＯ−６９７９物質生産菌を培地に培
養することにより行われる。上記のＦＯ−６９７９−Ｍ
０、−Ｍ１、−Ｍ２、−Ｍ３及び−Ｍ４物質生産に適し
た栄養源としては、微生物が同化し得る炭素源、消化し
得る窒素源、さらに必要に応じて無機塩、ビタミン等を
含有させた栄養培地が使用される。炭素源としてはグル
コース、フラクトース、マルトース、ラクトース、ガラ
クトース、デキストリン、澱粉等の糖類、大豆油等の植
物性油脂類が単独または組み合わせて用いられる。

【００２４】窒素源としては、ペプトン、酵母エキス、
肉エキス、大豆粉、綿実粉、コーン・スチープ・リカ
ー、麦芽エキス、カゼイン、アミノ酸、尿素、アンモニ
ウム塩類、硝酸塩類等が単独または組み合わせて用いら
れる。その他必要に応じてリン酸塩、マグネシウム塩、
カルシウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩等の塩類、鉄
塩、マンガン塩、銅塩、コバルト塩、亜鉛塩などの重金
属塩類やビタミン類、その他本ＦＯ−６９７９−Ｍ０、
−Ｍ１、−Ｍ２、−Ｍ３及び−Ｍ４物質の生産に好適な
ものが適宜添加される。

【００２５】培養するに当たり、発泡の激しいときに
は、必要に応じて液体パラフイン、動物油、植物油、シ
リコン等、界面活性剤等の消泡剤を添加してもよい。上
記の培養は、上記の栄養源を含有すれば、培地は液体で
も固体でもよいが、通常は液体培地を用い、培養するの
がよい。少量生産の場合にはフラスコを用いる培養が好
適である。培養を大きなタンクで行う場合は、生産工程
において、菌の生育遅延を防止するため、はじめに比較
的少量の培地に生産菌を接種培養した後、次に培養物を
大きなタンクに移して、そこで生産培養するのが好まし
い。この場合、前培養に使用する培地および生産培養に
使用する培地の組成は、両者ともに同一であってもよい
し、必要があれば両者を変えてもよい。

【００２６】培養を通気攪拌条件で行う場合は、例えば
プロペラやその他機械による攪拌、ファメーターの回転
または振とう、ポンプ処理、空気の吹き込み等既知の方
法が適宜使用される。通気用の空気は滅菌したものを使
用する。培養温度は、本ＦＯ−６９７９物質生産菌が本
ＦＯ−６９７９−Ｍ０、−Ｍ１、−Ｍ２、−Ｍ３及び−
Ｍ４物質を生産する範囲内で適宜変更し得るが、通常は
２０〜３０℃、好ましくは２７℃前後で培養するのがよ
い。培養ｐＨは、通常は５〜８、好ましくは７前後で培
養するのがよい。培養時間は、培養条件によっても異な
るが、通常は５〜１０日程度である。

【００２７】このようにして得られたＦＯ−６９７９−
Ｍ０、−Ｍ１、−Ｍ２、−Ｍ３及び−Ｍ４物質は培養菌
体および培養ろ液に存在する。培養物から目的とするＦ
Ｏ−６９７９−Ｍ０、−Ｍ１、−Ｍ２、−Ｍ３及び−Ｍ
４物質を採取するには、全培養物をアセトン等の水混和
性有機溶媒で抽出し、抽出液を減圧下有機溶媒を留去
後、続いて残渣を酢酸エチル等の水不混和性有機溶媒で
抽出することによって行われる。上記の抽出法に加え、
脂溶性物質の採取に用いられる公知の方法、例えば吸着
クロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー、薄
層クロマトグラフィー、遠心向流分配クロマトグラフィ
ー、高速液体クロマトグラフィー等を適宜組み合わせ、
あるいは繰り返すことにより、ＦＯ−６９７９−Ｍ０、
−Ｍ１、−Ｍ２、−Ｍ３及び−Ｍ４物質を分離、精製す
ることができる。

【００２８】本発明によるＦＯ−６９７９−Ｍ０物質の
理化学的性状は次のとおりである。（１）性状：白色粉末（２）融点：２４４〜２４６℃ （３）分子式：Ｃ₂₂Ｈ₃₉Ｎ₃Ｏ₅ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／
ｚ）：４２６［Ｍ＋Ｈ］ ⁺、４４８［Ｍ＋Ｎａ］⁺；Ｈ
ＲＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）ＭＦ＋ＮａＣ₂₂Ｈ₃₉Ｎ₃Ｏ
₅Ｎａ計算値：４４８．２７８７３、実測値：４４
８．２７８７（４）分子量：４２５（高速原子衝撃質量分析による）（５）紫外部吸収スペクトル：λｍａｘ２０９ｎｍ（Ｃ
Ｈ₃ＯＨ、ｌｏｇ ε＝１８２１６）に極大吸収を有す
る

【００２９】（６）赤外部吸収スペクトル（ＫＢｒ
錠）：νｍａｘ１５３５、１６３９、１６８３、１７２
４ｃｍ^-1に極大吸収を有する（７）比旋光度：［α］_D ²³＝−４４°（ｃ＝０．４
１、クロロホルム：メタノール＝２：１）（８）溶剤に対する溶解性：メタノール、ベンゼン、ク
ロロホルム、酢酸エチルに可溶。水、ヘキサンに難溶。（９）呈色反応：硫酸、リンモリブデン酸に陽性（１０）酸性、中性、塩基性の区別：中性物質

【００３０】（１１）¹Ｈ−プロトン核磁気共鳴スペク
トルの測定［ＸＬ−４００（バリアン社製）を用いて測
定し、溶媒は重クロロホルム：重メタノール＝１：
２］：図１に示すとおり（１２）¹³Ｃ−核磁気共鳴スペクトルの測定にはＸＬ−
４００（バリアン社製）を用いて測定し、溶媒は重クロ
ロホルム：重メタノール＝２：１を用いて測定した。そ
の測定結果は、１３．４、１４．６、１５．０、１８．
２、１８．４、１８．５、１８．７、２２．５、２７．
７、２９．１、３０．１、３０．４、３５．１、３５．
４、４９．２、６０．２、６２．１、７６．３、１６
９．０、１７１．４、１７１．８および１７１．９ｐｐ
ｍに２２本のシグナルを与えた。

【００３１】以上詳しく述べたように、本ＦＯ−６９７
９−Ｍ０物質の各種理化学的性状やスペクトルデータを
検討した結果、本ＦＯ−６９７９−Ｍ０物質は次の化学
構造であることが決定された。

【００３２】

【化１１】

【００３３】次に、本発明によるＦＯ−６９７９−Ｍ１
物質の理化学的性状は次のとおりである。（１）性状：白色粉末（２）融点：２４０〜２４２℃ （３）分子式：Ｃ₂₃Ｈ₄₁Ｎ₃Ｏ₅ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／
ｚ）：４４０［Ｍ＋Ｈ］ ⁺、４６２［Ｍ＋Ｎａ］⁺；Ｈ
ＲＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）ＭＦ＋ＮａＣ₂₃Ｈ₄₁Ｎ₃Ｏ
₅Ｎａ計算値：４６２．２９４３８、実測値：４６
２．２９４４（４）分子量：４３９（高速原子衝撃質量分析による）（５）紫外部吸収スペクトル：λｍａｘ２０８ｎｍ（Ｃ
Ｈ₃ＯＨ、ｌｏｇ ε＝２４１００）に極大吸収を有す
る

【００３４】（６）赤外部吸収スペクトル（ＫＢｒ
錠）：νｍａｘ１５３７、１６３９、１６８１、１７２
４ｃｍ^-1に極大吸収を有する（７）比旋光度：［α］_D ²³＝−３７°（ｃ＝０．５、
クロロホルム：メタノール＝２：１）（８）溶剤に対する溶解性：メタノール、ベンゼン、ク
ロロホルム、酢酸エチルに可溶。水、ヘキサンに難溶（９）呈色反応：硫酸、リンモリブデン酸に陽性（１０）酸性、中性、塩基性の区別：中性物質

【００３５】（１１）¹Ｈ−プロトン核磁気共鳴スペク
トルの測定［ＸＬ−４００（バリアン社製）を用いて測
定し、溶媒は重クロロホルム：重メタノール＝１：
２］：図２に示すとおり（１２）¹³Ｃ−核磁気共鳴スペクトルの測定にはＸＬ−
４００（バリアン社製）を用いて測定し、溶媒は重クロ
ロホルム：重メタノール＝１：２を用いて測定した。そ
の測定結果は、１０．５、１３．６、１４．３、１４．
７、１５．１、１８．７、１８．９、２３．０、２５．
９、２８．２、２９．６、２９．８、３０．５、３５．
７、３５．８、３７．０、４９．６、５９．５、７６．
８、１６９．６、１７２．１、１７２．３および１７
２．６ｐｐｍに２３本のシグナルを与えた。

【００３６】以上詳しく述べたように、本ＦＯ−６９７
９−Ｍ１物質の各種理化学的性状やスペクトルデータを
検討した結果、本ＦＯ−６９７９−Ｍ１物質は次の化学
構造であることが決定された。

【００３７】

【化１２】

【００３８】次に、本発明によるＦＯ−６９７９−Ｍ２
物質の理化学的性状は次のとおりである。（１）性状：白色粉末（２）融点：２４３〜２４６℃ （３）分子式：Ｃ₂₃Ｈ₄₁Ｎ₃Ｏ₅ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／
ｚ）：４４０［Ｍ＋Ｈ］ ⁺、４６２［Ｍ＋Ｎａ］⁺；Ｈ
ＲＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）ＭＦ＋ＨＣ₂₃Ｈ₄₂Ｎ ₃Ｏ₅
計算値：４４０．３１２４２、実測値：４４０．３１２
４（４）分子量：４３９（高速原子衝撃質量分析による）（５）紫外部吸収スペクトル：λｍａｘ２０９ｎｍ（Ｃ
Ｈ₃ＯＨ、ｌｏｇ ε＝１５０２７）に極大吸収を有す
る

【００３９】（６）赤外部吸収スペクトル（ＫＢｒ
錠）：νｍａｘ１５３７、１６３９、１６８１、１７２
４ｃｍ^-1に極大吸収を有する（７）比旋光度：［α］_D ²⁵＝−６５°（ｃ＝０．４
７、クロロホルム：メタノール＝２：１）（８）溶剤に対する溶解性：メタノール、ベンゼン、ク
ロロホルム、酢酸エチルに可溶。水、ヘキサンに難溶（９）呈色反応：硫酸、リンモリブデン酸に陽性（１０）酸性、中性、塩基性の区別：中性物質

【００４０】（１１）¹Ｈ−プロトン核磁気共鳴スペク
トル［ＸＬ−４００（バリアン社製）を用いて測定し、
溶媒は重クロロホルム：重メタノール＝１：２］：図３
に示すとおり（１２）¹³Ｃ−核磁気共鳴スペクトルの測定にはＸＬ−
４００（バリアン社製）を用いて測定し、溶媒は重クロ
ロホルム：重メタノール＝１：２を用いて測定した。そ
の測定結果は、１４．３、１５．６、１５．９、１９．
４、１９．６、２２．６、２２．６、２３．７、２５．
７、２９．０、３０．３、３０．４、３１．５、３６．
４、３６．６、４１．９、５０．２、５３．５、７７．
３、１７０．７、１７２．６、１７３．２および１７
３．２ｐｐｍに２３本のシグナルを与えた。

【００４１】以上詳しく述べたように、本ＦＯ−６９７
９−Ｍ２物質の各種理化学的性状やスペクトルデータを
検討した結果、本ＦＯ−６９７９−Ｍ２物質は次の化学
構造であることが決定された。

【００４２】

【化１３】

【００４３】次に本発明によるＦＯ−６９７９−Ｍ３物
質の理化学的性状は次のとおりである。（１）性状：白色粉末（２）融点：２４９〜２５１℃ （３）分子式：Ｃ₂₆Ｈ₃₉Ｎ₃Ｏ₅ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／
ｚ）：４７４［Ｍ＋Ｈ］ ⁺、４９６［Ｍ＋Ｎａ］⁺；Ｈ
ＲＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）ＭＦ＋ＨＣ₂₆Ｈ₄₀Ｎ ₃Ｏ₅
計算値：４７４．２９６７７、実測値：４７４．２９６
８（４）分子量：４７３（高速原子衝撃質量分析による）（５）紫外部吸収スペクトル：λｍａｘ２０９ｎｍ（Ｃ
Ｈ₃ＯＨ、ｌｏｇ ε＝２８０４４）に極大吸収を有す
る

【００４４】（６）赤外部吸収スペクトル（ＫＢｒ
錠）：νｍａｘ１５３７、１６３９、１６８７、１７２
６ｃｍ^-1に極大吸収を有する（７）比旋光度：［α］_D ²³＝−９．０°（ｃ＝０．２
０、クロロホルム：メタノール＝２：１）（８）溶剤に対する溶解性：メタノール、ベンゼン、ク
ロロホルム、酢酸エチルに可溶。水、ヘキサンに難溶（９）呈色反応：硫酸、リンモリブデン酸に陽性（１０）酸性、中性、塩基性の区別：中性物質

【００４５】（１１）¹Ｈ−プロトン核磁気共鳴スペク
トルの測定［ＸＬ−６００（バリアン社製）を用いて測
定し、溶媒は重クロロホルム：重メタノール＝４：
１］：図４に示すとおり（１２）¹³Ｃ−核磁気共鳴スペクトルの測定にはＸＬ−
６００（バリアン社製）を用いて測定し、溶媒は重クロ
ロホルム：重メタノール＝４：１を用いて測定した。そ
の測定結果は、１３．６、１４．６、１５．２、１８．
４、１８．６、２２．６、２９．２、３０．３、３０．
６、３５．３、３５．４、３５．７、４９．２、５６．
８、６０．３、７６．３、１２６．７、１２８．３（２
炭素分）、１２８．８（２炭素分）、１３６．２、１６
９．１、１７１．３、１７１．９および１８３．５ｐｐ
ｍに２４本（２６炭素分）のシグナルを与えた。

【００４６】以上詳しく述べたように、本ＦＯ−６９７
９−Ｍ３物質の各種理化学的性状やスペクトルデータを
検討した結果、本ＦＯ−６９７９−Ｍ３物質は次の化学
構造であることが決定された。

【００４７】

【化１４】

【００４８】次に本発明によるＦＯ−６９７９−Ｍ４物
質の理化学的性状は次のとおりである。（１）性状：白色粉末（２）融点：２４４〜２４６℃ （３）分子式：Ｃ₂₅Ｈ₄₅Ｎ₃Ｏ₅ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／
ｚ）：４６８［Ｍ＋Ｈ］ ⁺、４９０［Ｍ＋Ｎａ］⁺；Ｈ
ＲＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）ＭＦ＋ＨＣ₂₅Ｈ₄₆Ｎ ₃Ｏ₅
計算値：４６８．３４３７２、実測値：４６８．３４３
７（４）分子量：４６７（高速原子衝撃質量分析による）（５）紫外部吸収スペクトル：λｍａｘ２０７ｎｍ（Ｃ
Ｈ₃ＯＨ、ｌｏｇ ε＝２１４００）に極大吸収を有す
る

【００４９】（６）赤外部吸収スペクトル（ＫＢｒ
錠）：νｍａｘ１５３７、１６３９、１６８５、１７２
２ｃｍ^-1に極大吸収を有する（７）比旋光度：［α］_D ²⁸＝−４５°（ｃ＝０．３
０、クロロホルム：メタノール＝２：１）（８）溶剤に対する溶解性：メタノール、ベンゼン、ク
ロロホルム、酢酸エチルに可溶。水、ヘキサンに難溶（９）呈色反応：硫酸、リンモリブデン酸に陽性（１０）酸性、中性、塩基性の区別：中性物質

【００５０】（１１）¹Ｈ−プロトン核磁気共鳴スペク
トルの測定［ＸＬ−４００（バリアン社製）を用いて測
定し、溶媒は重クロロホルム：重メタノール＝１：
２］：図５に示すとおり（１２）¹³Ｃ−核磁気共鳴スペクトルの測定にはＸＬ−
４００（バリアン社製）を用いて測定し、溶媒は重クロ
ロホルム：重メタノール＝１：２を用いて測定した。そ
の測定結果は、１１．３、１４．３、１５．１、１５．
５、１５．９、１９．４、１９．６、２３．３、２６．
７、２８．２、２８．９、３０．４、３１．６、３２．
６、３６．５、３６．６、３７．８、５０．４、６０．
４、６２．８、７７．６、１７０．３、１７０．３、１
７３．１および１７３．４ｐｐｍに２５本のシグナルを
与えた。

【００５１】以上詳しく述べたように、本ＦＯ−６９７
９−Ｍ４物質の各種理化学的性状やスペクトルデータを
検討した結果、本ＦＯ−６９７９−Ｍ４物質は次の化学
構造であることが決定された。

【００５２】

【化１５】

【００５３】次に本発明のＦＯ−６９７９−Ｍ０、−Ｍ
１、−Ｍ２、−Ｍ３及び−Ｍ４物質（以下ＦＯ−６９７
９物質と総称する）のマウス由来アシルコエンザイムＡ
コレステロールアシル転移酵素に対する阻害作用につい
て説明する。アシルコエンザイムＡコレステロールアシ
ル転移酵素活性は、Ｕｅｌｍｅｎらの方法（Ｊ．Ｂｉｏ
ｌ．Ｃｈｅｍ．２７０巻、２６１９２〜２６２０１頁、
１９９５年）を一部改変して行った。酵素源としては、
マウス肝ミクロソーム由来の膜画分を用いた。マウス肝
は緩衝液Ａ［５０ｍＭトリス塩酸液（ｐＨ７．８）、１
ｍＭＥＤＴＡ及び１ｍＭフェニルメタンスルフォニル
フルオリド］中でポッター型ホモジナイザー（Ｔｏｋｙ
ｏ−ＲＩＫＯ社製）でホモジナイズする。

【００５４】これを１２０００×ｇで遠心した上清を１
０００００×ｇで超遠心した沈渣をミクロソーム画分と
し、この画分を５ｍｇ／ｍｌの蛋白質濃度となるように
緩衝液Ａで調製した。アシルコエンザイムＡコレステロ
ールアシル転移酵素活性の測定は、緩衝液Ａ中で酵素源
２００μｇ蛋白量、２００ｍＭ牛血清アルブミン、［１
−¹⁴Ｃ］オレオイルコエンザイムＡ（最終濃度１７０μ
Ｍ、０．０９μＣｉ）と各々のＦＯ−６９７９物質を加
え全量１００μｌとして、３７℃、１０分間、反応させ
た。

【００５５】次いでそこに、０．５ｍｌエタノールを加
えて反応を停止させ、１．５ｍｌヘキサンを加えてよく
攪拌した。ヘキサン層１ｍｌを乾固後、ＴＬＣ（シリカ
ゲルプレート、メルク社製、厚さ０．５ｍｍ）にスポッ
トし、石油エーテル／ジエチルエーテル／酢酸（９０：
１０：１、ｖ／ｖ）の溶媒で展開した。次に生成した［
¹⁴Ｃ］コレステリルオレートの量をラジオスキャナー
（アンビス社製）で定量した。その結果、ＦＯ−６９７
９物質（Ｍ０〜Ｍ４物質）のアシルコエンザイムＡコレ
ステロールアシル転移酵素活性を５０％阻害する濃度
（ＩＣ₅₀）は以下のとおり測定された。

【００５６】 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 化合物ＩＣ₅₀（μＭ） ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ ＦＯ−６９７９−Ｍ０＞５０ＦＯ−６９７９−Ｍ１＞５０ＦＯ−６９７９−Ｍ２５０ＦＯ−６９７９−Ｍ３４０ＦＯ−６９７９−Ｍ４５０ ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

【００５７】次に本発明のＦＯ−６９７９物質のマウス
腹腔マクロファージ内でのコレステリルエステル生成に
対する阻害作用について説明する。マウス腹腔マクロフ
ァージ内でのコレステリルエステル形成および油滴形成
は生田目らの方法（Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１２５巻、３
１９〜３２７頁、１９９９年）に従い行った。マウス腹
腔より単離したマクロファージを６．８％リポ蛋白質欠
乏血清を含むダルベッコ改変イーグル培地（６．８％Ｌ
ＰＤＳ−ＤＭＥＭ培地）に２．０×１０⁶ｃｅｌｌｓ／
ｍｌで懸濁して、４８穴マイクロプレート（Ｃｏｒｎｉ
ｎｇ社製）に０．２５ｍｌずつまく。

【００５８】次に５％炭酸ガスインキュベーター内で３
７℃で２時間培養を行った後、付着しない細胞をハンク
ス液（Ｈａｎｋｓ’ｓｏｌｕｔｉｏｎ）で洗浄すること
により除去する。洗浄後、６．８％ＬＰＤＳ−ＤＭＥＭ
培地で一時間培養した後、各々のＦＯ−６９７９物質
（２．５μｌメタノール溶液）、リポソーム［１０μｌ
の０．３Ｍグルコース中にホスファチジルコリン／ホス
ファチジルセリン／ジセチルホスフェート／コレステロ
ール＝１０：１０：２：１５（ｎｍｏｌ）の組成から構
成されている］及び［１−¹⁴Ｃ］オレイン酸（５μｌ、
０．０５μＣｉ、１ｎｍｏｌ）を添加し、さらに１４時
間培養した。

【００５９】培養後上清を除去し、細胞内中性脂質をヘ
キサン０．６ｍｌとイソプロパノール０．４ｍｌを加え
て２回抽出した。これを濃縮後、ＴＬＣ（シリカゲルプ
レート、メルク社製、厚さ０．５ｍｍ）にスポットし、
ヘキサン／ジエチルエーテル／酢酸（７０：３０：１、
ｖ／ｖ）の溶媒で展開し、分離した［¹⁴Ｃ］コレステリ
ルオレートと［¹⁴Ｃ］トリアシルグリセロールの量をラ
ジオスキャナー（アンビス社製）で定量した。その結
果、［¹⁴Ｃ］コレステリルオレートの生成に対する各Ｆ
Ｏ−６９７９物質のＩＣ₅₀値は下記のとおり測定され
た。

【００６０】 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 化合物ＩＣ₅₀（μＭ） ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ ＦＯ−６９７９−Ｍ０＞２５ＦＯ−６９７９−Ｍ１＞４５（４５μＭで２０％阻害）ＦＯ−６９７９−Ｍ２＞２５ＦＯ−６９７９−Ｍ３２１ＦＯ−６９７９−Ｍ４＞２５ ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

【００６１】次に本発明のＦＯ−６９７９物質のマウス
腹腔マクロファージ内での油滴形成に対する阻害作用に
ついて説明する。マウス腹腔マクロファージ内での油滴
形成は生田目らの方法（Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１２５
巻、３１９〜３２７頁、１９９９年）に従い行った。マ
ウス腹腔より単離したマクロファージを６．８％リポ蛋
白質欠乏血清を含むダルベッコ改変イーグル培地（６．
８％ＬＰＤＳ−ＤＭＥＭ培地）に２．０×１０⁶ｃｅｌ
ｌｓ／ｍｌで懸濁して、スライドチャンバー（Ｎｕｎｃ
社製）に０．２５ｍｌずつまく。

【００６２】次に５％炭酸ガスインキュベーター内で３
７℃で２時間培養を行った後、付着しない細胞をハンク
ス液（Ｈａｎｋｓ’ｓｏｌｕｔｉｏｎ）で洗浄すること
により除去する。洗浄後、６．８％ＬＰＤＳ−ＤＭＥＭ
培地で一時間培養した後、ＦＯ−６９７９−Ｍ３物質
（２．５μｌメタノール溶液）、リポソーム［１０μｌ
の０．３Ｍグルコース中にホスファチジルコリン／ホス
ファチジルセリン／ジセチルホスフェート／コレステロ
ール＝１０：１０：２：１５（ｎｍｏｌ）の組成から構
成されている］を添加し、さらに１４時間培養した。

【００６３】その後、マクロファージ内の油滴及び核を
それぞれオイルレッドＯ（ｏｉｌｒｅｄＯ）及びヘマ
トキシリンで二重染色し、光学顕微鏡（オリンパス社
製）で観察した。その結果、ＦＯ−６９７９−Ｍ３物質
２０μＭ存在下で、細胞質に蓄積する油滴の量は薬剤無
添加（コントロール）と比較すると約５０％に減少し、
ＦＯ−６９７９−Ｍ０、−Ｍ１、−Ｍ２及び−Ｍ４物質
では４０μＭ存在下で油滴の量は１０〜２０％の減少が
認められた。

【００６４】次に本発明のＦＯ−６９７９−Ｍ０、−Ｍ
１、−Ｍ２、−Ｍ３及び−Ｍ４物質毒性試験について説
明する。前記ＦＯ−６９７９−Ｍ０、−Ｍ１、−Ｍ２、
−Ｍ３及び−Ｍ４物質のいずれも、マウス腹腔マクロフ
ァージの生育に対して最終濃度５０μＭでも全く毒性を
示さなかった。また、ＦＯ−６９７９−Ｍ０、−Ｍ１、
−Ｍ２、−Ｍ３及び−Ｍ４物質のいずれも１００ｍｇ／
ｋｇでマウス腹腔内に投与したが、何ら毒性変化は認め
られなかった。

【００６５】以上詳しく述べたように、本発明のＦＯ−
６９７９−Ｍ０、−Ｍ１、−Ｍ２、−Ｍ３及び−Ｍ４物
質は毒性が低く、アシルコエンザイムＡコレステロール
アシル転移酵素に対して特異的な阻害を示し、マクロフ
ァージ内での油滴形成を阻害することから、ヒトのコレ
ステロール蓄積に起因する疾病の予防治療に有用である
と期待される。

【００６６】

【実施例】５００ｍｌ容三角フラスコにグルコース２．
０％、ポリペプトン０．５％、イーストエクストラクト
０．２％、ＫＨ₂ＰＯ₄０．１％、アガー０．１％、Ｍ
ｇＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ０．０５％を水道水で溶解した培地
（ｐＨ６．０に調整）１００ｍｌを仕込み、綿栓後、蒸
気滅菌し、寒天培地上に生育させたボーベリアエスピ
ー（Ｂｅａｕｖｅｒｉａｓｐ．）ＦＯ−６９７９（Ｆ
ＥＲＭＰ−１６７１６）の胞子懸濁液（１０⁷ｓｐｏ
ｒｅｓ／ｍｌ）を１００μｌを無菌的に植菌し、２７℃
で３日間振とう培養して種培養液を得た。

【００６７】一方、３０リットル容ジャー培養装置（三
ツワ社製）にグルコース１．０％、トリプトン０．５
％、イーストエクストラクト０．３％、アガー０．１％
を水道水で溶解した培地（ｐＨ６．０に調整）を２０リ
ットルに仕込み、蒸気滅菌し、上記の種培養液２００ｍ
ｌを無菌的に移植した。これを２７℃で５日間攪拌培養
後、培養液２０リットルを国産式Ｓ型超遠心分離機Ｓ−
６型（国産精工社製）を用いて、１００００回転で上清
と菌体に分離し、菌体を１８リットルのアセトンで処理
してろ過した後、ろ液を減圧濃縮して水溶液および析出
物を得た。この析出物を２００ｍｌヘキサンで洗浄し、
不溶の粗物質６ｇを得た。これをシリカゲル（６００
ｇ、シリカゲル６０、メルク社製）のカラムにチャージ
し、クロロホルム−メタノール（１００：０、１００：
１、１００：２、１００：３、０：１００）の溶液各
３．６リットルで段階的に溶出させた。

【００６８】溶出されたＦＯ−６９７９−Ｍ１、−Ｍ２
及び−Ｍ４成分を含むクロロホルム−メタノール（１０
０：２）画分を集め、減圧乾固して白色物質１６８ｍｇ
を得た。これをさらに高速液体クロマトグラフィー［装
置はＲＡＮＩＮ社製のモデルＳＤ−２００、カラムは資
生堂社製のＣＡＰＣＥＬＬ−ＰＡＣＣ１８ＵＧ（２
０×２５０ｍｍ）、検出はＵＶ２１０ｎｍ、流速は６ｍ
ｌ／分、溶出条件は５０分まで５０％のアセトニトリル
水で溶出し、その後、２５分間に７５％アセトニトリル
水になるよう直線的に濃度を変化させた］で繰り返し精
製することにより、溶出時間４５分のピークからＦＯ−
６９７９−Ｍ１を４７．６ｍｇ、溶出時間４９分のピー
クからＦＯ−６９７９−Ｍ２を４４．５ｍｇ、溶出時間
７７分のピークからＦＯ−６９７９−Ｍ４を２７．２ｍ
ｇをそれぞれ得た。

【００６９】一方、３０リットル容ジャー培養装置（三
ツワ社製）にグルコース１．０％、トリプトン０．５
％、イーストエクストラクト０．３％、マルトエクスト
ラクト０．３％、アガー０．１％を水道水で溶解した培
地（ｐＨ６．０に調整）を２０リットル仕込み、蒸気滅
菌し、前記の種培養液２００ｍｌを無菌的に移植し、２
７℃で攪拌培養を開始した。２４時間後、この培養液に
ろ過滅菌したＬ−バリン水溶液を最終濃度０．３％で無
菌的に添加した。これをさらに２７℃で４日間攪拌培養
して得られた培養液２０リットルを、同様に遠心により
集めた菌体をアセトン処理し、ろ過して得られたろ液を
減圧濃縮して析出物を得た。これを２００ｍｌヘキサン
で洗浄し、得られた不溶の粗物質１．８ｇをシリカゲル
（１８０ｇ、シリカゲル６０、メルク社製）のカラムに
チャージし、クロロホルム−メタノール（１００：０、
１００：１、１００：２、１００：３、０：１００）の
溶液各１．１リットルで段階的に溶出させた。

【００７０】溶出されたＦＯ−６９７９−Ｍ３成分を多
く含む画分（クロロホルム−メタノール１００：２溶出
液の前半部分）とＦＯ−６９７９−Ｍ０成分を多く含む
画分（クロロホルム−メタノール１００：２溶出液の後
半部分）とを集め、減圧乾固して、それぞれ白色物質１
００ｍｇと３５７ｍｇを得た。これをさらに個々に高速
液体クロマトグラフィー（装置はＲＡＮＩＮ社製のモデ
ルＳＤ−２００、カラムは資生堂社製のＣＡＰＣＥＬＬ
−ＰＡＣＣ１８ＵＧ（２０×２５０ｍｍ）、検出は
ＵＶ２１０ｎｍ、流速は６ｍｌ／分、溶出条件は５０分
まで５０％のアセトニトリル水で溶出し、その後、２５
分間に７５％アセトニトリル水になるよう直線的に濃度
を変化させた）で繰り返し精製することにより、溶出時
間２７分のピークからＦＯ−６９７９−Ｍ０を１８２ｍ
ｇ、溶出時間５２分のピークからＦＯ−６９７９−Ｍ３
を１０．５ｍｇをそれぞれ得た。

【００７１】

【発明の効果】以上説明したように、本発明の新規ＦＯ
−６９７９−Ｍ０、−Ｍ１、−Ｍ２、−Ｍ３及び−Ｍ４
物質は、毒性が低く、アシルコエンザイムＡコレステロ
ールアシル転移酵素を特異的に阻害することから、ヒト
のコレステロール蓄積に起因する疾病の予防および治療
に有用であると期待される。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明のＦＯ−６９７９−Ｍ０物質の¹Ｈ−プ
ロトン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム：重メタ
ノール＝１：２）である。

【図２】本発明のＦＯ−６９７９−Ｍ１物質の¹Ｈ−プ
ロトン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム：重メタ
ノール＝１：２）である。

【図３】本発明のＦＯ−６９７９−Ｍ２物質の¹Ｈ−プ
ロトン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム：重メタ
ノール＝１：２）である。

【図４】本発明のＦＯ−６９７９−Ｍ３物質の¹Ｈ−プ
ロトン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム：重メタ
ノール＝４：１）である。

【図５】本発明のＦＯ−６９７９−Ｍ４物質の¹Ｈ−プ
ロトン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム：重メタ
ノール＝１：２）である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 9/10 １０１Ｃ１２Ｎ 1/14 Ａ４Ｈ０４５Ｃ０７Ｋ 5/087 Ｃ１２Ｐ 21/02 ＡＣ１２Ｎ 1/14 Ｃ０７Ｄ 273/00 Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ１２Ｎ 9/99 // Ｃ０７Ｄ 273/00 (Ｃ１２Ｎ 1/14 ＡＣ１２Ｎ 9/99 Ｃ１２Ｒ 1:645） (Ｃ１２Ｎ 1/14 (Ｃ１２Ｐ 21/02 ＡＣ１２Ｒ 1:645）Ｃ１２Ｒ 1:645） (Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ０７Ｍ 7:00 Ｃ１２Ｒ 1:645）Ａ６１Ｋ 37/02 Ｃ０７Ｍ 7:00 37/64 (72)発明者供田洋東京都港区白金５丁目９番１号社団法人北里研究所内Ｆターム(参考） 4B064 AG37 BA05 BC04 BD02 BE05 BE07 BE09 BE14 BG01 BG09 BH01 BH04 BH05 BH06 BH07 BH10 CA05 DA06 4B065 AA58X AC14 CA24 CA44 4C056 AA10 AB10 AC10 AD01 AE10 AF08 FA03 FB05 FC01 4C084 AA06 AA07 BA01 BA11 BA15 BA27 BA32 CA04 DC32 NA14 ZA452 ZC202 ZC332 4C086 AA03 AA04 BC76 NA14 ZA45 ZC20 ZC33 4H045 AA10 AA20 BA12 BA33 CA15 DA55 EA23 FA71 GA15 GA22 HA02

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記式［Ｉ］【化１】で表される化合物であるＦＯ−６９７９−Ｍ０物質。
【請求項２】ボーベリア属に属し、ＦＯ−６９７９−
Ｍ０物質を生産する能力を有する微生物を培地に培養
し、培養液中にＦＯ−６９７９−Ｍ０物質を蓄積せし
め、該培養物からＦＯ−６９７９−Ｍ０物質を採取する
ことを特徴とする新規ＦＯ−６９７９−Ｍ０物質の製造
法。
【請求項３】ボーベリア属に属し、ＦＯ−６９７９−
Ｍ０物質を生産する能力を有する微生物が、ボーベリア
エスピーＦＯ−６９７９（Ｂｅａｕｖｅｒｉａｓ
ｐ．ＦＯ−６９７９ＦＥＲＭＰ−１６７１６）であ
る請求項２に記載の製造法。
【請求項４】ボーベリア属に属し、ＦＯ−６９７９−
Ｍ０物質を生産する能力を有する微生物。
【請求項５】微生物が、ボーベリアエスピー（Ｂｅ
ａｕｖｅｒｉａｓｐ．）ＦＯ−６９７９である請求項
４に記載の微生物。
【請求項６】ボーベリアエスピー（Ｂｅａｕｖｅｒ
ｉａｓｐ．）ＦＯ−６９７９（ＦＥＲＭＰ−１６７
１６）株。
【請求項７】下記式［ＩＩ］【化２】で表される化合物であるＦＯ−６９７９−Ｍ１物質。
【請求項８】ボーベリア属に属し、ＦＯ−６９７９−
Ｍ１物質を生産する能力を有する微生物を培地に培養
し、培養液中にＦＯ−６９７９−Ｍ１物質を蓄積せし
め、該培養物からＦＯ−６９７９−Ｍ１物質を採取する
ことを特徴とする新規ＦＯ−６９７９−Ｍ１物質の製造
法。
【請求項９】ボーベリア属に属し、ＦＯ−６９７９−
Ｍ１物質を生産する能力を有する微生物が、ボーベリア
エスピーＦＯ−６９７９（Ｂｅａｕｖｅｒｉａｓ
ｐ．ＦＯ−６９７９ＦＥＲＭＰ−１６７１６）であ
る請求項８に記載の製造法。
【請求項１０】ボーベリア属に属し、ＦＯ−６９７９
−Ｍ１物質を生産する能力を有する微生物。
【請求項１１】微生物が、ボーベリアエスピー（Ｂ
ｅａｕｖｅｒｉａｓｐ．）ＦＯ−６９７９である請求項
１０に記載の微生物。
【請求項１２】ボーベリアエスピー（Ｂｅａｕｖｅ
ｒｉａｓｐ．）ＦＯ−６９７９（ＦＥＲＭＰ−１６
７１６）株。
【請求項１３】下記式［ＩＩＩ］【化３】で表される化合物であるＦＯ−６９７９−Ｍ２物質。
【請求項１４】ボーベリア属に属し、ＦＯ−６９７９
−Ｍ２物質を生産する能力を有する微生物を培地に培養
し、培養液中にＦＯ−６９７９−Ｍ２物質を蓄積せし
め、該培養物からＦＯ−６９７９−Ｍ２物質を採取する
ことを特徴とする新規ＦＯ−６９７９−Ｍ２物質の製造
法。
【請求項１５】ボーベリア属に属し、ＦＯ−６９７９
−Ｍ２物質を生産する能力を有する微生物が、ボーベリ
アエスピーＦＯ−６９７９（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ
ｓｐ．ＦＯ−６９７９ＦＥＲＭＰ−１６７１６）で
ある請求項１４に記載の製造法。
【請求項１６】ボーベリア属に属し、ＦＯ−６９７９
−Ｍ２物質を生産する能力を有する微生物。
【請求項１７】微生物が、ボーベリアエスピー（Ｂ
ｅａｕｖｅｒｉａｓｐ．）ＦＯ−６９７９である請求項
１６に記載の微生物。
【請求項１８】ボーベリアエスピー（Ｂｅａｕｖｅ
ｒｉａｓｐ．）ＦＯ−６９７９（ＦＥＲＭＰ−１６
７１６）株。
【請求項１９】下記式［ＩＶ］【化４】で表される化合物であるＦＯ−６９７９−Ｍ３物質。
【請求項２０】ボーベリア属に属し、ＦＯ−６９７９
−Ｍ３物質を生産する能力を有する微生物を培地に培養
し、培養液中にＦＯ−６９７９−Ｍ３物質を蓄積せし
め、該培養物からＦＯ−６９７９−Ｍ３物質を採取する
ことを特徴とする新規ＦＯ−６９７９−Ｍ３物質の製造
法。
【請求項２１】ボーベリア属に属し、ＦＯ−６９７９
−Ｍ３物質を生産する能力を有する微生物が、ボーベリ
アエスピーＦＯ−６９７９（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ
ｓｐ．ＦＯ−６９７９ＦＥＲＭＰ−１６７１６）で
ある請求項２０に記載の製造法。
【請求項２２】ボーベリア属に属し、ＦＯ−６９７９
−Ｍ３物質を生産する能力を有する微生物。
【請求項２３】微生物が、ボーベリアエスピー（Ｂ
ｅａｕｖｅｒｉａｓｐ．）ＦＯ−６９７９である請求項
２２に記載の微生物。
【請求項２４】ボーベリアエスピー（Ｂｅａｕｖｅ
ｒｉａｓｐ．）ＦＯ−６９７９（ＦＥＲＭＰ−１６
７１６）株。
【請求項２５】下記式［Ｖ］【化５】で表される化合物であるＦＯ−６９７９−Ｍ４物質。
【請求項２６】ボーベリア属に属し、ＦＯ−６９７９
−Ｍ４物質を生産する能力を有する微生物を培地に培養
し、培養液中にＦＯ−６９７９−Ｍ４物質を蓄積せし
め、該培養物からＦＯ−６９７９−Ｍ４物質を採取する
ことを特徴とする新規ＦＯ−６９７９−Ｍ４物質の製造
法。
【請求項２７】ボーベリア属に属し、ＦＯ−６９７９
−Ｍ４物質を生産する能力を有する微生物が、ボーベリ
アエスピーＦＯ−６９７９（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ
ｓｐ．ＦＯ−６９７９ＦＥＲＭＰ−１６７１６）で
ある請求項２６に記載の製造法。
【請求項２８】ボーベリア属に属し、ＦＯ−６９７９
−Ｍ４物質を生産する能力を有する微生物。
【請求項２９】微生物が、ボーベリアエスピー（Ｂ
ｅａｕｖｅｒｉａｓｐ．）ＦＯ−６９７９である請求項
２８に記載の微生物。
【請求項３０】ボーベリアエスピー（Ｂｅａｕｖｅ
ｒｉａｓｐ．）ＦＯ−６９７９（ＦＥＲＭＰ−１６
７１６）株。