JP2002085551A

JP2002085551A - 白血球除去フィルター材

Info

Publication number: JP2002085551A
Application number: JP2000282820A
Authority: JP
Inventors: Jun Tanaka; 純田中; Aiko Sato; 愛子佐藤; Norio Inama; 徳生稲摩
Original assignee: Asahi Medical Co Ltd
Current assignee: Asahi Kasei Medical Co Ltd
Priority date: 2000-09-19
Filing date: 2000-09-19
Publication date: 2002-03-26

Abstract

(57)【要約】【課題】第ＶIII因子及び赤血球の付着を抑制しつ
つ、且つ高い白血球除去能を有することのできる、白血
球含有液から白血球を除去するためのフィルター材、お
よび白血球除去方法を提供すること。【解決手段】白血球除去フィルター材の少なくとも表
面に平均分子量が５０，０００以上２００，０００未満
であるキトサンをフィルター材１ｇ当たり１０．０〜２
５．０ｍｇのコート量で導入することを特徴とする白血
球フィルター材、および該フィルター材を用いる白血球
除去方法。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、白血球含有液から
白血球を除去するためのフィルター材および白血球除去
方法に関する。より詳細には、白血球含有液である全血
製剤から有用成分である第ＶIII因子の付着を抑制しな
がら白血球を除去するための白血球除去フィルター材、
及び該白血球除去フィルター材を用いた白血球の除去方
法に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】輸血の分野においては、血液製剤中に含
まれている混入白血球を除去してから血液製剤を輸血す
る、いわゆる白血球除去輸血が普及してきている。これ
は、輸血に伴う頭痛、吐き気、悪寒、非溶血性発熱反応
などの比較的軽微な副作用や、受血者に深刻な影響を及
ぼすアロ抗原感作、ウィルス感染、輸血後GVHDなどの重
篤な副作用が、主として輸血に用いられた血液製剤中に
混入している白血球が原因で引き起こされることが明ら
かにされたためである。

【０００３】その白血球除去方法には、大きく分けて遠
心分離機を用いて血液成分の比重差を利用して白血球を
分離除去する遠心分離法と、繊維素材や、連続気孔を有
する多孔質体などの多孔質素子からなるフィルター材を
用いて白血球を除去するフィルター法の２種類がある。
フィルター法は、白血球除去能に優れていること、操作
が簡便であること、及びコストが安いことなどの利点を
有するため現在普及している。

【０００４】さらに、近年は、血液製剤の高品質保持を
目的として、血液センターで血液製剤から白血球除去フ
ィルターを使用して白血球を除去した後、調製した各種
血液製剤を保存するというシステムが検討されている。
その中でも、予め採血後の全血から白血球を除去した
後、赤血球製剤や血漿製剤などの製剤を調整する方法が
普及しはじめている。

【０００５】上記の繊維素材や多孔質体などのフィルタ
ー材による白血球除去の機構は、主としてフィルター材
表面と接触した白血球が、フィルター材表面に粘着又は
吸着されることによるとされている。従って、従来のフ
ィルター材における白血球除去能の向上の手段として、
フィルター材と白血球との衝突頻度を高めること、即ち
繊維径やフィルター材の細孔径を小さくしたり、フィル
ター装置内におけるフィルター材の充填密度を高めるこ
となどの検討が行われてきた。しかしながら、全血製剤
のように、製剤中に高い割合で赤血球を含む製剤におい
て、上記の手段のみを用いて高性能化を行うには限界が
あった。即ち、白血球のフィルター材への接触頻度を高
めるに伴い、製剤中に高濃度で存在する赤血球のフィル
ター材への接触頻度及び通液抵抗も高まり、処理時間の
延長や赤血球膜の破壊に伴う溶血が生じる等の問題があ
った。

【０００６】一方、フィルター材の表面化学性状に着目
した検討もなされている。特公平０１―０４２９０６号
公報では親水性かつ負荷電の表面を有するフィルター材
を開示しており、ＷＯ８７／０５８１２では非イオン性
親水基と塩基性含窒素官能基を有し、塩基性含窒素官能
基を０．２重量％以上４．０重量％未満含有するフィル
ター材を開示している。しかしながら、上記の技術は粘
着性の高い細胞として知られる血小板の通過率を向上さ
せつつ白血球除去能の維持を目的としており、白血球除
去能をさらに向上させることは困難であった。また、特
開平０６―２４７８６２公報には塩基性官能基と非イオ
ン性親水基を有し、塩基性官能基の非イオン性親水基に
対するモル比が０．６以上６未満、かつ塩基性官能基を
５×１０^-5ｍｅｑ／ｍ²以上０．１ｍｅｑ／ｍ²未満の密
度で有するフィルター材を開示している。しかしなが
ら、このフィルター材は赤血球の付着抑制効果が充分で
なく、白血球の除去能を安定して向上させることが困難
であった。

【０００７】また、ＷＯ９９／１１３０４によれば、２
５ｇ／Ｌ以下の血漿蛋白濃度の血液から白血球を除去す
るフィルター材としてその表面に非イオン性の親水性部
分と塩基性部分とを含む親水性塩基性基を有しており、
該親水性塩基性基において、該親水性部分が該塩基性部
分より末端側に位置している白血球除去フィルター材が
開示されている。しかし全血の場合、血漿蛋白濃度が５
０ｇ／Ｌ〜８０ｇ／Ｌと高く、ＷＯ９９／１１３０４に
開示されている技術では、全血から白血球を除去する
際、白血球除去能を安定して向上させることが困難であ
った。

【０００８】また、全血から白血球を除去し、赤血球及
び血小板を回収するフィルター材として、特開平１０−
３３８６３９公報には、平均分子量２００，０００〜７
００，０００のキトサン及びキトサン誘導体を基材表面
に塗布した白血球除去フィルター材が開示されている。
しかし、上記フィルター材では、有用成分の一つである
第ＶIII因子がフィルター材表面に吸着され、第ＶIII因
子の回収量が不十分であった。また、上記フィルター
は、キトサンのコート量が多いために、該フィルターを
用いて実際に血液処理を行うとき、溶出物量が多く、医
療器具の溶出物安全基準内に納まらない恐れがある。

【０００９】第ＶIII因子は血友病の治療に使用される
極めて重要な成分であるが、原料となる血液にはわずか
な量しか含まれておらず、それゆえ、原料血液をフィル
ターで濾過した際に、フィルター表面に吸着して回収で
きない第ＶIII因子を１０％以下に留めることが、献血
で提供された血液を有効に活用する上で極めて重要な問
題であった。しかしながら、従来の白血球除去フィルタ
ー材は何れも吸着性が高く、満足な回収率を得ることが
できなかった。

【００１０】

【発明が解決しようとする課題】本発明の第一の課題
は、第ＶIII因子及び赤血球の付着を抑制しつつ、白血
球に対する親和性が極めて高く、白血球含有液を濾過す
る際に格段に高い白血球除去能を発揮できると共に溶出
物が少ない白血球除去フィルター材を提供することにあ
る。本発明の第二の課題は、血漿蛋白濃度が５０ｇ／Ｌ
〜８０ｇ／Ｌと高濃度である全血製剤等の白血球含有液
から、第ＶIII因子及び赤血球付着を抑制しつつ、白血
球を非常に高い効率で除去する方法を提供することであ
る。

【００１１】

【課題を解決する手段】本発明者らは、少なくともその
表面に、平均分子量が５０，０００以上２００，０００
未満であるキトサンがフィルター材当たり１０．０〜２
５．０ｍｇ／ｇのコート量で導入された、白血球除去フ
ィルター材を用いれば、上記課題を達成できることを見
出した。すなわち、本発明は、白血球含有液から、有用
成分である第ＶIII因子および赤血球を高い効率で回収
しながら、白血球を除去し、かつ溶出量を少なく抑える
ためには、フィルター材表面にコートするキトサンの平
均分子量が５０，０００以上２００，０００未満であ
り、コート量がフィルター材当たり１０．０〜２５．０
ｍｇ／ｇであることが必要であることを見出した結果な
されたものである。

【００１２】本発明は、白血球含有液から白血球を除去
するフィルター材であって、該フィルター材は、少なく
ともその表面に平均分子量が５０，０００以上２００，
０００未満であるキトサンがフィルター材当たり１０．
０〜２５．０ｍｇ／ｇのコート量で導入された、白血球
除去フィルター材に関する。また、本発明は、少なくと
も、１）導入口、２）前記の白血球除去フィルター材を
含むフィルター、３）導出口、を含む装置を用い、導入
口から白血球含有液を注入し、導出口から該フィルター
で濾過された液を回収することからなる、白血球含有液
から白血球を除去する方法に関する。

【００１３】

【本発明の実施の形態】以下、本発明を詳細に説明す
る。本発明の白血球除去フィルター材とは、フィルター
材を形成する基材と該基材の表面にキトサンが導入され
たフィルター材である。ここでキトサンが導入されてい
るとは、キトサンが共有結合、イオン結合、物理吸着、
包埋、沈殿不溶化等のあらゆる公知の方法によってフィ
ルター材を形成する基材の表面に脱落しないように導入
されていることを言う。

【００１４】本発明のキトサンにおいて、その分子量は
５０，０００以上２００，０００未満であることが必要
である。平均分子量が５０，０００以下の場合は、血液
濾過中に、基材に導入されたキトサンが脱落すなわち溶
出しやすくなるため適さない。また、２００，０００以
上の場合は、血小板の回収率は高まるものの白血球除去
能が安定して向上せず、第ＶIII因子の回収率も低くな
るため適さない。より好ましくは平均分子量が８０，０
００以上１６０，０００未満、更に好ましくは平均分子
量が９０，０００以上１３０，０００未満である。

【００１５】また、キトサンの脱アセチル化度は、７５
％以上９５％未満が好ましい。脱アセチル化度が７５％
未満の場合、溶媒への溶解性が悪くなり基材表面に均一
に導入されないため白血球除去能が安定して向上しない
傾向にある。脱アセチル化度が９５％以上の場合、血液
濾過中に、基材に導入されたキトサンが脱落すなわち溶
出しやすくなるため好ましくない。より好ましくは８０
％以上９０％未満である。

【００１６】上記のキトサンは、例えば和光純薬工業
（株）から、キトサン１０、キトサン１００、キトサン
５００、キトサン１０００として入手した試薬を、ゲル
バーミエーションクロマトグラフィーを利用して分画し
て得ることができる。

【００１７】本発明におけるキトサンの基材へのコート
濃度は、０．１％以上３．０％未満であることが好まし
い。コート濃度が０．１％未満の場合は、コート量が不
十分でフィルター材への第８因子と赤血球の吸着抑制効
果が十分に得られず、白血球除去能も向上しない傾向に
ある。３．０％以上の場合は、コート膜が基材繊維間に
またがって形成され、基材のポアが閉塞する傾向にあ
る。そのため白血球含有液の片流れや流速の低下が起こ
り、十分な白血球除去能を得ることができなくなる傾向
にあるため好ましくない。より好ましくは、０．２％以
上２．０％未満，更に好ましくは０．３％以上１．５％
未満である。

【００１８】キトサンの基材へのコート量は、フィルタ
ー１ｇ当たり１０．０〜２５．０ｍｇである。コート量
が、１０．０ｍｇ／ｇより少ないときは、所望の白血球
除去能を発揮することができず、２５．０ｍｇ／ｇを超
えるときには、溶出量が多くなり不適当である。

【００１９】本発明におけるフィルター材を形成する基
材としては、メルトブロー法やフラッシュ紡糸法あるい
は抄造法などによって製造された不織布の他、紙、織
布、編布等の繊維や連続した細孔を有する多孔質体（ス
ポンジ状構造物）、多孔膜などが挙げられる。この中で
も不織布あるいは多孔質体は、白血球を効率良く除去で
きる構造であるため好ましい。

【００２０】フィルター材を形成する基材が繊維よりな
る場合、その素材としては、ポリアミド、ポリエステ
ル、ポリアクリロニトリル、ポリトリフルオロエチレ
ン、ポリメチルメタアクリレート、ポリスチレン、ポリ
エチレン、ポリプロピレンなどの合成繊維や、セルロー
スなどの再生繊維や精製繊維、セルロースアセテートな
どの半合成繊維、麻、綿、絹などの天然繊維、ガラス繊
維などの無機繊維を挙げることができる。この中でも製
造のし易さ、取扱いのし易さなどの観点からポリエステ
ル、ポリプロピレン、ポリエチレンの合成繊維、セルロ
ースからなる再生繊維または精製繊維であることがより
好ましい。

【００２１】さらに、繊維を基材とする場合、ほぼ均一
な繊維径を有する繊維からなる基材であっても良いし、
ＷＯ９７／２３２６６号に開示されているような、繊維
径の異なる、複数種の繊維が混繊された形態の基材であ
っても良い。

【００２２】また、こられの繊維は平均繊維径が０．０
１μｍ以上３．０μｍ未満であることが好ましい。平均
繊維径が０．０１μｍ未満であると繊維としての機械的
強度が低く、安定して製造できない恐れがあるため好ま
しくない。平均繊維径が３．０μｍ以上であると白血球
との接触頻度が低く、本発明の効果が発揮されない恐れ
があるため好ましくない。より好ましい平均繊維径は
０．１μｍ以上２．０μｍ未満である。なお、ここで言
う繊維の平均繊維径とは、以下の手順によって求められ
る値である。白血球除去フィルター材または該フィルタ
ー材を形成する繊維基材から実質的に均一と認められる
部分をサンプリングし走査型電子顕微鏡などを用いて写
真に撮る。サンプリングに際しては、一辺が０．５ｃｍ
程度の正方形によって区分し、その中から６ヶ所をラン
ダムサンプリングする。またサンプリングした各区分に
ついて３ヶ所以上、好ましくは５ヶ所以上を拡大倍率２
０００倍以上で写真に撮る。この写真の上に０．１ｍｍ
から１０ｍｍ程度の等間隔で縦及び横に線を引いた格子
状の透明なシートを載せ、縦線と横線の交点、即ち格子
点にある繊維について繊維軸に対して直角方向の繊維の
幅を測定し、これを繊維径とする。このような測定を５
０本以上、好ましくは１００本以上の繊維について測定
し、その平均値を平均繊維径とする。ただし、複数の繊
維が重なり合っており、他の繊維の陰になってその幅が
測定できない場合、また複数の繊維が溶融するなどして
太い繊維になっている場合等々の場合にはこれらのデー
タは削除する。

【００２３】フィルター材を構成する基材が多孔質体あ
るいは多孔膜である場合、その素材としてはポリアクリ
ロニトリル、ポリスルホン、セルロース、セルロースア
セテート、ポリビニルホルマール、ポリエステル、ポリ
（メタ）アクリレート、ポリウレタンなどを例示するこ
とができる。また、多孔質体あるいは多孔膜の平均孔径
は１μｍ以上３０μｍ未満であることが好ましい。平均
孔径が１μｍ未満であると、赤血球の通過抵抗に起因す
る処理時間の延長が起こる恐れがあるため好ましくな
い。平均孔径が３０μｍを超えると、白血球との衝突頻
度が低下し、本発明の効果が発揮されない恐れがあるた
め好ましくない。より好ましい平均孔径は５μｍ以上１
５μｍ未満である。なお、ここで言う平均孔径とは、水
銀圧入法で測定した値である。即ち、水銀圧入圧０．１
ｐｓｉａの時の水銀圧入量を０％、水銀圧入圧１８０ｐ
ｓｉａの時の水銀圧入量を１００％としたときの、５０
％の水銀圧入圧に相当する細孔径を平均孔径とする。

【００２４】本発明において、フィルター材表面にキト
サンを導入する方法は、フィルター材の少なくとも表面
にキトサンが導入できる方法であればいずれの方法でも
良い。具体的には、コーティング法、含浸法、基材表面
に塗布する方法、、化学結合法などが挙げられる。

【００２５】本発明の第二の課題は、５０ｇ／Ｌ〜８０
ｇ／Ｌと血漿蛋白濃度が高い全血製剤等の白血球含有液
から、第ＶIII因子及び赤血球の付着を抑制しつつ、白
血球を非常に高い効率で除去する白血球除去方法を提供
することである。本発明者らが鋭意検討を重ねた結果、
少なくとも導入口と導出口を有する容器内に本発明の白
血球除去フィルター材を適切に充填した装置で白血球含
有液を濾過し、濾過された液を回収することによって、
上記第二の課題を達成できることを見出した。本発明の
白血球除去フィルター材を充填した装置で濾過する白血
球含有液としては、５０ｇ／Ｌ〜８０ｇ／Ｌと血漿蛋白
濃度が高い全血製剤などが挙げられる。このような白血
球含有液を、本発明の白血球除去フィルター材を充填し
た装置で濾過することによって白血球を効率よく除去す
ることができ、第ＶIII因子や赤血球の付着をも抑制す
る、良好な結果を与えることができる。

【００２６】

【発明の実施の形態】次に、実施例により本発明をより
詳細かつ具体的に説明するが、本発明はこれに限定され
るものではない。

【実施例１】［フィルターの製造］平均繊維径が１２μ
ｍのポリエステル製不織布０．８ｇと、その下層にメル
トブロー法によって製造された、平均繊維径が約１．７
μｍのポリエステル不織布０．６ｇと平均繊維径が約
１．３μｍのポリエステル不織布５．８ｇとを、血液の
導入口と導出口を有し有効濾過断面積が４４．９ｃｍ²
（６．７ｃｍ×６．７ｃｍ）の容器に、充填密度が約
０．２３ｇ／ｃｍ³となるように充填した。なお、ここ
で示した不織布の重量は、有効濾過断面積に相当する不
織布の充填重量である。平均分子量１００，０００、脱
アセチル化度８５％のキトサンを、１％酢酸中に溶解し
て０．５％キトサン溶液を作成し、上記のフィルターに
充填し１分間静置した。その後窒素ガスによって余分な
液を吹き飛ばし、さらに４５℃で１６時間真空乾燥させ
ることによってフィルター装置を作製した。得られたフ
ィルター材のキトサンコート量は、１３．６ｍｇ／ｇで
あった。

【００２７】［平均分子量の測定］実施例および比較例
におけるキトサンの平均分子量は、次のようにして測定
した。１％酢酸水溶液を溶媒として、０．５ｗｔ％およ
び２．０ｗｔ％のキトサン溶液を調製する。酢酸水溶液
の調製には脱イオン水を使用した。調製したキトサン溶
液を、２５℃で３時間静置した後、回転粘度計（東機産
業（株）製、Ｒ１００型）を使用して粘度を測定した。
粘度の測定には、含有する重金属が影響するため、粘度
を測定するキトサンは、ＥＤＴＡ・２Ｎａを添加し脱イ
オン水に十分透析した後、苛性アルカリ−メタノールで
沈殿させ、塩分を十分洗浄して乾燥させて試料とした。
平均分子量の算出には、下記の粘度式を用いた。［η］＝Ｋ・Ｍα 式（１）［η］：極限粘度、Ｋ：定数、Ｍ：平均分子量、α：定
数本発明の平均分子量算出にあたっては、Ｋ＝８．９３×
１０^-4、α＝０．７１を使用した。［η］は、次の手順
で求めた。ここで、ηsp＝（η−η₀）／η₀、η：キトサン溶液の
粘度、η₀：溶媒の粘度、Ｃはキトサン溶液の濃度であ
る。キトサン溶液の濃度を横軸に、ηsp／Ｃを縦軸にプ
ロットし、Ｃ＝０に外挿して［η］を求める。求めた
［η］から、式（１）により平均分子量Ｍを計算した。

【００２８】［コート量の測定］実施例及び比較例のコ
ート量は、以下のような色素吸着法によって測定した。
色素吸着法は、負の荷電を有するトリパンブルーのよう
な色素を親水性塩基性基中の塩基性部分に吸着させ、ト
リパンブルー溶液の吸光度変化量からフィルター材表面
にコーティングされたキトサン量を定量する方法であ
る。より具体的にはトリパンブルーを含むｐＨが約６の
水溶液を調製してこれを元液とする。次にこの元液をフ
ィルター材に適当量含浸させ、１６時間以上室温下で接
触させる。元液とフィルター材に含浸させた後の上清液
との吸光度を５７８ｎｍの可視光で測定し、吸光度差か
らフィルター材単位重量当たりのコート量を算出する。

【００２９】［溶出物量の測定］実施例及び比較例のフ
ィルターの溶出物量は、次のように蒸発残留物量を測定
することにより知ることができる。蒸発残留物量の測定
は、厚生省告示第３０１号（昭和４５年８月１０日）
「ディスポーザブル輸血セット基準Ｖ−（２）に準ず
る。フィルター材１．５ｇをとり、細片とし、水約１５
０ｍＬで３０分間煮沸した後、水を加えて正確に１５０
ｍＬとし、これを試験液とする。試験液１０ｍＬを水浴
上で蒸発乾固し、残留物を１０５℃で１時間乾燥した
後、測定した重量（ｍｇ）を蒸発残留物量とした。その
量が１．０ｍｇであるときに医療器具の溶出物安全基準
を満たしていることになる。

【００３０】［血液処理法］４００ｍＬの血液に抗凝固
剤として５６ｍＬのＣＰＤ液（組成：クエン酸ナトリウ
ム２６．３ｇ／Ｌ、クエン酸３．２７ｇ／Ｌ、グルコー
ス２３．２ｇ／Ｌ、リン酸２水素ナトリウム２．５１）
を加えて調製した全血製剤４５６ｍＬを、２０℃で６時
間保存した。保存後の全血製剤４５６ｍＬを、上記フィ
ルターを用い、落差７０ｃｍで濾過した。濾過中の血液
処理流速は、２５ｍＬ／ｍｉｎに調整した。濾過を開始
するにあたり、フィルターを、血液回路を介して全血製
剤が入っている血液バッグに接続後、血液バッグを手で
つかんで加圧し、強制的にフィルター内に血液を満たし
た。かくして、フィルター内に血液が満たされた後、血
液バッグ内に血液がなくなるまで濾過を行い、濾過した
血液を回収した。この時の濾過時間は、フィルターの導
出口より血液が流出し始めた時から血液バッグ内の血液
がなくなるまでとした。

【００３１】［白血球除去能］濾過前の全血製剤（以
下、濾過前液と言う）、及び回収された全血製剤（以
下、回収液と言う）の白血球濃度と、濾過前液の体積及
び回収液の体積を測定し、以下の式（Ｉ）に従って白血
球除去能を求めた。白血球除去能＝−Ｌｏｇ｛（回収液中の白血球濃度×回収液体積）／（濾過前液中の白血球濃度×濾過前液体積）｝（Ｉ）なお、濾過前液及び回収液の体積は、それぞれの重量を
血液製剤の比重（１．０５）で割った値とした。濾過前
液の白血球濃度は、チュルク液によって１０倍希釈し、
ビュルケルチュルク型の血球計算盤に注入して、光学顕
微鏡を用いて白血球数をカウントすることによって測定
した。また、回収液の白血球濃度の測定は、以下に示す
方法によって行った。回収液を、リューコプレート液
（ＳＯＢＩＯＤＡ社製）にて５倍希釈する。希釈液をよ
く混和した後、室温にて６〜１０分間放置した。これ
を、２，７５０×ｇで６分間遠心し、上清を除去して液
量を１．０２ｇに調整した。この試料液をよく混和した
後、ナジェット型の血球計算盤に注入し、光学顕微鏡を
用いて白血球数をカウントすることによって白血球濃度
を測定した。

【００３２】［赤血球回収率］赤血球回収率は、次式
（II）により求めた。赤血球回収率(％)＝{(回収液重量×回収液のヘマトクリット)／(濾過前液重量×濾過前液のヘマトクリット)}×１００ (II) ヘマトクリットは、微量血液検査用ガラス毛細管に血液
を入れ、遠心処理を行い、ヘマトクリットリーダーを用
いて測定した。

【００３３】［第ＶIII因子回収率］また、第ＶIII因子
の回収率は、次式（III）により求めた。第ＶIII因子回収率(％)＝{(回収液の第ＶIII因子活性率(％))／（濾過前後の第ＶIII因子活性率(％))}×１００ (III) 第ＶIII因子活性率(％)は、通常の方法で測定した。

【００３４】［評価］以上の結果、白血球除去能は３．
３、赤血球回収率は９１％、第ＶIII因子回収率は９５
％であり、高い白血球除去能と赤血球回収能を発揮し、
かつ第ＶIII因子の損失も１０％以下と良好であった。
また、前記の方法で測定した溶出物量は、０．６４ｍｇ
であり、溶出物基準を満たしていた。なお、上記の実施
例において、濾過後にフィルター装置内に約１０％の血
液が残留するが、赤血球回収率は残留した血液を回収し
ないまま求めた。よって、この算出法による赤血球回収
率が９０％であるということは、フィルターを通過した
血液に換算すれば、殆ど１００％の赤血球が回収されて
いるということになる。

【００３５】

【実施例２】コーティング液として、平均分子量１０
０，０００、脱アセチル化度８５％のキトサンを、１％
酢酸中に溶解し１．０％キトサン溶液を使用してコート
量２１．２ｍｇ／ｇのフィルター材を得た以外は、実施
例１と同様な方法によりフィルターを作製した。実施例
１と同様な方法により全血製剤を濾過したところ、白血
球除去能は３．５、赤血球回収率は９０％、第ＶIII因
子回収率は９５％であり、高い白血球除去能と赤血球回
収能を発揮し、かつ第ＶIII因子の損失も１０％以下と
良好であった。また、溶出物量は、０．８１ｍｇで基準
内であった。

【００３６】

【実施例３】コーティング液として、平均分子量１５
０，０００、脱アセチル化度８８％のキトサンを、１％
酢酸中に溶解し０．５％キトサン溶液を使用してコート
量１２．１ｍｇ／ｇのフィルター材を得た以外は、実施
例１と同様な方法によりフィルターを作製した。実施例
１と同様な方法により全血製剤を濾過したところ、白血
球除去能は３．１、赤血球回収率は９１％、第ＶIII因
子回収率は９３％であり、高い白血球除去能と赤血球回
収能を発揮し、かつ第ＶIII因子の損失も１０％以下と
良好であった。また、溶出物量は、０．５２ｍｇで基準
内であった。

【００３７】

【実施例４】コーティング液として、平均分子量１８
０，０００、脱アセチル化度８７％のキトサンを、１％
酢酸中に溶解し１．０％キトサン溶液を使用ししてコー
ト量１９．６ｍｇ／ｇのフィルター材を得た以外は、実
施例１と同様な方法によりフィルターを作製した。実施
例１と同様な方法により全血製剤を濾過したところ、白
血球除去能は３．３、赤血球回収率は９１％、第ＶIII
因子回収率は９３％であり、高い白血球除去能と赤血球
回収能を発揮し、かつ第ＶIII因子の損失も１０％以下
と良好であった。また、溶出物量は、０．７２ｍｇで基
準内であった。

【００３８】

【比較例１】コーティング液として、平均分子量２５
０，０００、脱アセチル化度８７％のキトサンを、１％
酢酸中に溶解し０．５％キトサン溶液を使用した以外
は、実施例１と同様な方法によりフィルターを作製し
た。コート量は、１４．１ｍｇ／ｇであった。実施例１
と同様な方法により全血製剤を濾過したところ、白血球
除去能は２．７、赤血球回収率は９１％、第ＶIII因子
回収率は８８％であり、第ＶIII因子の回収率が悪かっ
た。フィルター材表面にコーティングしたキトサンの平
均分子量が２００，０００を超えたため、血液を濾過し
ている間に、フィルター材表面に吸着されて回収できな
かった第ＶIII因子の量が増加し、第ＶIII因子の損失が
１０％を超えたと考えられる。なお、溶出物量は０．５
８ｍｇであった。

【００３９】

【比較例２】コーティング液として、平均分子量２５
０，０００、脱アセチル化度８７％のキトサンを、１％
酢酸中に溶解し１．０％キトサン溶液を使用した以外
は、実施例１と同様な方法によりフィルターを作製し
た。コート量は、２０．６ｍｇ／ｇであった。実施例１
と同様な方法により全血製剤を濾過したところ、白血球
除去能は２．８、赤血球回収率は９０％、第ＶIII因子
回収率は８５％であり、第ＶIII因子の損失が１０％を
超えた。フィルター材表面にコーティングされたキトサ
ンの量を、比較例１の場合に比べて増加させたにも関わ
らず、白血球除去能は、ほとんど向上せず、逆に第ＶII
I因子の回収率が低下した。フィルター材表面にコーテ
ィングしたキトサンの平均分子量が２００，０００を超
えた場合、コーティング量を増加させることで、血液を
濾過している間にフィルター材表面に吸着されて回収で
きない第ＶIII因子の量が増加すると考えられる。な
お、溶出物量は、０．８０ｍｇであった。

【００４０】

【比較例３】コーティング液として、平均分子量５０
０，０００、脱アセチル化度９０％のキトサンを、１％
酢酸中に溶解し０．５％キトサン溶液を使用した以外
は、実施例１と同様な方法によりフィルターを作製し
た。コート量は、１５．２ｍｇ／ｇであった。実施例１
と同様な方法により全血製剤を濾過したところ、白血球
除去能は２．５、赤血球回収率は９０％、第ＶIII因子
回収率は８５％であり、第ＶIII因子の回収率が悪かっ
た。フィルター材表面にコーティングしたキトサンの平
均分子量が２００，０００を超えた場合、平均分子量が
増加することで、フィルター材表面に吸着されて回収で
きない第ＶIII因子の量が増加すると考えられる。な
お、溶出物量は、０．６４ｍｇであった。

【００４１】

【比較例４】コーティング液として、平均分子量２２
０，０００、脱アセチル化度８７％のキトサンを、１％
酢酸中に溶解し０．５％キトサン溶液を使用した以外
は、実施例１と同様な方法によりフィルターを作製し
た。コート量は、１３．７ｍｇ／ｇであった。実施例１
と同様な方法により全血製剤を濾過したところ、白血球
除去能は２．７、赤血球回収率は９０％、第ＶIII因子
回収率は８８％であり、第ＶIII因子の回収率が悪かっ
た。フィルター材表面にコーティングしたキトサンの平
均分子量が２００，０００を超えた場合、第ＶIII因子
の損失が１０％を超えると考えられる。なお、溶出物量
は、０．７７ｍｇであった。

【００４２】

【比較例５】コーティング液として、平均分子量４０，
０００、脱アセチル化度８７％のキトサンを、１％酢酸
中に溶解し０．５％キトサン溶液を使用した以外は、実
施例１と同様な方法によりフィルターを作製した。コー
ト量は、７．４ｍｇ／ｇであった。実施例１と同様な方
法により全血製剤を濾過したところ、白血球除去能は
２．１、赤血球回収率は９０％、第ＶIII因子回収率は
８８％であり、白血球除去能と第ＶIII因子回収率共に
低かった。フィルター材表面にコーティングしたキトサ
ンの平均分子量が５０，０００未満の場合、血液濾過中
にコーティングしたキトサンが脱落し、期待するキトサ
ンの効果が得られず、また、コート量も少ないために、
白血球除去能と第ＶIII因子回収率が共に低かったと考
えられる。なお、溶出物量は、０．５２ｍｇであった。

【００４３】

【比較例６】コーティング液として、平均分子量１５
０，０００、脱アセチル化度８８％のキトサンを、１％
酢酸中に溶解し２．０％キトサン溶液を使用した以外
は、実施例１と同様な方法によりフィルターを作製し
た。コート量は、３４．３ｍｇ／ｇであった。実施例１
と同様な方法により全血製剤を濾過したところ、白血球
除去能は３．１、赤血球回収率は９０％、第ＶIII因子
回収率は９０％であった。また、溶出物量は１．２４ｍ
ｇであった。白血球除去能、赤血球回収率、第ＶIII因
子回収率は共に一応の性能のものが得られているが、溶
出物量が高く溶出基準を満たしていない。これは、コー
ト量が多すぎるためであると考えられる。

【００４４】

【比較例７】コーティング液として、平均分子量２５
０，０００、脱アセチル化度８７％のキトサンを、１％
酢酸中に溶解し３．２％キトサン溶液を使用した以外
は、実施例１と同様な方法によりフィルターを作製し
た。コート量は、４７．６ｍｇ／ｇであった。実施例１
と同様な方法により全血製剤を濾過したところ、白血球
除去能は２．３、赤血球回収率は８９％、第ＶIII因子
回収率は７８％であった。また、溶出物量は、１．８３
ｍｇであった。平均分子量が２５０，０００と高く、ま
た、コート量が４７．６ｍｇ／ｇと高いために、第ＶII
I因子回収率が低く、また、溶出物量が多くなったもの
と考えられる。

【００４５】実施例１〜４、比較例１〜４の結果を表
１、表２にまとめて示す。

【表１】実施例

【００４６】

【表２】比較例

【００４７】

【発明の効果】以上のとおり、少なくとも表面に平均分
子量が、５０，０００以上２００，０００未満であるキ
トサンが導入された白血球除去フィルター材によって、
第ＶIII因子及び赤血球の付着を抑制し、白血球に対す
る親和性が極めて高い白血球除去フィルター材を提供す
ることができる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者稲摩徳生大分県大分市大字里2111番地２号旭メディカル株式会社内Ｆターム(参考） 4C077 AA12 BB02 BB03 KK11 KK13 MM09 NN02 PP02 PP03 PP05 PP08 PP10 PP12 PP13 PP15 4D019 AA03 BA04 BA12 BA13 BB02 BB03 BB07 BB08 BC05 BC09

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】白血球含有液から白血球を除去するフィ
ルター材であって、該フィルター材には、少なくともそ
の表面に平均分子量が５０，０００以上２００，０００
未満であるキトサンがフィルター材１ｇ当たり１０．０
〜２５．０ｍｇ導入されていることを特徴とする白血球
除去フィルター材。
【請求項２】１）導入口、２）請求項１記載の白血球
除去フィルター材を含むフィルター、３）導出口、を少
なくとも含む白血球除去装置を用い、導入口から白血球
含有液を注入し、導出口から該フィルターで濾過された
液を回収することからなる、白血球含有液から白血球を
除去する方法。