JP2000513333A - ポリマーを基剤とした制御された放出デバイスの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （１）有機溶媒中に溶解されたポリマー及び懸濁された不安定な薬剤を含むポリマー溶液／薬剤混合物を形成する工程、（２）該ポリマー溶液／薬剤混合物から溶媒を除去し、それにより固体のポリマー／薬剤マトリックスを形成する工程、（３）該ポリマー／薬剤マトリックスのガラス転移温度より低い温度でポリマー／薬剤マトリックスを破砕し、それによりポリマー／薬剤マトリックス微粒子を形成する工程を含む、ポリマー／薬剤微粒子の形成方法。１つの態様において、ポリマー溶液／薬剤マトリックス混合物を凍結し、得られた固体のポリマー溶液／薬剤マトリックスから溶媒を抽出することにより、該溶媒はポリマー溶液／薬剤混合物から除去される。該ポリマーは、ポリ（乳酸−コ−グリコール酸）等の生物学的適合性ポリマーであってもよい。薬剤は、蛋白質、ポリヌクレオチド等の不安定な薬剤であってもよい。本発明の他の態様には、上記に概説した方法により形成されるポリマー／薬剤マトリックスの微粒子が含まれる。本発明のさらなる態様には、（１）有機溶媒中に溶解されたポリマー及び懸濁された不安定な薬剤を含むポリマー溶液／薬剤混合物を形成する工程、（２）該ポリマー溶液／薬剤混合物から溶媒を除去し、それにより固体のポリマー／薬剤マトリックスを形成する工程；（３）該ポリマー／薬剤マトリックスを機械的に圧縮し、それにより移植可能なポリマー／薬剤マトリックス塊を形成する工程を含む、移植可能なポリマー／薬剤マトリックス塊の製造方法が含まれる。

Description

【発明の詳細な説明】 ポリマーを基剤とした制御された放出デバイスの製造方法 発明の背景 製薬工業において今日の研究の中心領域は、薬剤の放出を制御し又は持続させ る方法の開発である。かかる方法は、処方投薬スケジュールへの患者の不従順、 多数の注射の必要性、及び体内での薬剤濃度の変動等の、伝統的な薬剤投与方法 に関連する一定の問題を除去する。これらの問題は、薬剤が蛋白質又はペプチド である場合に、特に重大である。かかる薬剤は、しばしばインビボでの半減期が 短い。さらに、消化器官で起こる急速な消化のため、蛋白質を基剤とした薬剤を 未保護の状態で経口投与することができない。 薬剤放出を維持又は制御する方法は、浸透性ポンプ等の移植デバイス、又は移 植、経口投与、又は注射することができる生物学的適合性ポリマーマトリックス 中に分散された薬剤を利用することができる。かかる適用に使用されるポリマー には、しばしば、ポリ（乳酸）及びポリ（乳酸−コ−グリコール酸）が含まれる 。両ポリマーは、インビボでゆっくりと加水分解し、取り込まれていた薬剤を放 出する。ポリマー分解生成物は、その元の酸であり、身体により吸収される。 注射を介して投与されるポリマー／薬剤マトリックス粒子は、一般に２００ミ クロン以下のオーダーの大きさの範囲を有していなければならない。ポリマー／ 薬剤マトリックス粒子の大きさや形態は、採用される製造方法に依存し、薬剤が 蛋白質である小さいポリマー／薬剤マトリックス粒子の形成は、今日では２、３ の技術に限られている。例えば、ポリ（乳酸）とトリプシン又はインシュリンの いずれかとを含むポリマー／蛋白質マトリックス粒子は、油／水エマルジョン法 及び高められた温度での巧妙な混合方法の双方によって調製された（タバタ（Ｔ ａｂａｔａ）ら、Ｊ．Ｃｏｎｔ．Ｒｅｌｅａｓｅ ２３：５５−６４（１９９３ ））。従って、形成されたポリマー／蛋白質マトリックスは、引きつづいて顆粒 に磨砕された。巧妙な混合方法によって調製された顆粒は、おそらく加熱工程の ため、蛋白質活性のかなりの画分（１０％）を失った。これらの顆粒も初期の蛋 白質の大放出により損害を受けた。油／水エマルジョン法で調製された顆粒は、 おそらく油に対する蛋白質の不安定性により、より多くの量（約４０〜６０％） の蛋白質活性を失った。 注射可能なポリマー／薬剤マトリックス微粒子を形成する方法が、ワイセ（Ｗ ｉｓｅ）により開示された（Ｗｉｓｅ ｉｎ Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｉｃ Ｃｏ ｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｖｏｌ．１，ワイセ編、 ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ：Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ、８章（１９８４））。ポリ（乳酸 −コ−グリコール酸）及び麻酔性アンタゴニストであるナルトレキソンを含む微 粒子は、固体のポリマー／ナルトレキソンマトリックスのビーズ又はロッドを極 低温で磨砕することによって形成した。ポリマー／ナルトレキソンマトリックス のフィルムをポリマーの軟化点よりも高い温度で所望の形に成形することにより 、ビーズ及びロッドが形成された。従って、この方法は、多くの蛋白質、ペプチ ド、ポリヌクレオチド、類似物等の熱的に不安定な薬剤を含むポリマー／薬剤マ トリックス微粒子の調製に適していない。 ゴンボツ（Ｇｏｍｂｏｔｚ）らに発行され、その内容が参照まで本明細書に取 り込まれている、米国特許第５，０１９，４００号明細書に開示されたもう一つ の例は、ポリマー／蛋白質ミクロスフェアの製造方法である。この方法は、生物 学的適合性ポリマー及び薬剤物質を含む混合物を噴霧（ａｔｏｍｉｚｉｎｇ）し 、得られたエアゾールの液滴を凍結することを含む。この方法において、粒子の 大きさ及び形状は、噴霧の方法及び噴霧器を通るポリマー溶液の流速に依存する 。粒子の大きさと形態における再現性を最適化するために、多くの変数はしっか りと制御される。 ポリマー／薬剤マトリックスの移植片の形成の今日の方法は、熱的に不安定又 は有機溶媒に不安定な薬剤を用いるときの欠点に困っている。これらの方法では 、薬剤活性がかなり損失する結果を生じるであろう（約４５℃よりも高い）高め られた温度及び／又は水／有機エマルジョン等の厳しい条件が採用される。他の 方法には、ポリマーマトリックス内に薬剤の細かく、微視的な分散が生じず、イ ンビボでより不安定に薬剤を放出することになる塊状のポリマーと固体の薬剤と の簡単な混合物が利用される。 マトリックス全体にわたって薬剤を実質的に均一に分布させながら、ある条件 下で、有機溶媒に鋭敏な薬剤のみならず、感熱性薬剤にも好適な方法によって固 体のポリマー／薬剤マトリックスを形成する、注射又は移植に好適なポリマー／ 薬剤マトリックスのデバイスを形成する方法に対する要求がある。さらに、該方 法は、スケールアップ、ＦＤＡの滅菌の要求に応じる放出デバイスが制御された ポリマー／薬剤マトリックスの効率のよい、経済的な製造を可能にする閉鎖され 、衛生的にされた環境の中で行わなければならない。 発明の概要 本発明は、ポリマーでカプセル化された薬剤微粒子（以下、「ポリマー／薬剤 マトリックス微粒子」という）の製造方法に関する。該方法は、（１）有機溶媒 中に溶解されたポリマーと共溶解、又は懸濁された薬剤を含むポリマー溶液／薬 剤混合物を形成し、（２）該ポリマー溶液／薬剤混合物から溶媒を除去し、それ により固体のポリマー／薬剤マトリックスを形成し、（３）該ポリマー／薬剤マ トリックスのガラス転移温度よりも低い温度でポリマー／薬剤マトリックスを破 砕し、それによりポリマー／薬剤マトリックス微粒子を形成することを含む。ポ リマー／薬剤マトリックスは、例えば、磨砕（ｇｒｉｎｄｉｎｇ）や粉砕するこ とにより破砕することができる。１つの態様において、ポリマー／薬剤マトリッ クスは、ポリマー溶液／薬剤混合物から溶媒を除去することにより、例えば、ポ リマー溶液／薬剤混合物を凍結し、得られた固体のポリマー溶液／薬剤マトリッ クスから溶媒を抽出することにより形成される。 １つの態様において、ポリマー溶液／薬剤混合物は、例えば、該混合物を注入 、滴下、噴霧又はポリマー溶液／薬剤混合物の凝固点よりも低い温度の液状非溶 媒中に該化合物を押出すことにより、凍結させる。該ポリマーは、ポリ（乳酸） 、ポリ（乳酸−コ−グリコール酸）コポリマー等の生物学的適合性ポリマーであ ってもよい。薬剤は、蛋白質、核酸、小さい有機分子等の治療、予防又は診断用 の薬剤であってもよい。 本発明の他の態様には、上記で概説された方法により形成されたポリマー／薬 剤マトリックス粒子が含まれる。好ましくは、これらの粒子は、微粒子である。 これらは、ポリ（乳酸）、ポリ（乳酸−コ−グリコール酸）コポリマー等の生物 学的適合性ポリマー、治療、予防、診断剤等の薬剤、及び、任意に１以上の賦形 剤又は金属含有塩等の放出改質剤を含む。 本発明のさらなる態様は、移植可能なポリマー／薬剤マトリックス塊を形成す る方法である。該方法は、（１）有機溶媒中に溶解されたポリマー及び共溶解又 は懸濁された薬剤を含むポリマー溶液／薬剤混合物を形成する工程、（２）該ポ リマー溶液／薬剤混合物から溶媒を除去し、それにより固体のポリマー／薬剤マ トリックスを形成する工程、及び（３）該ポリマー／薬剤マトリックスを機械的 に圧縮し、それにより移植可能なポリマー／薬剤マトリックス塊を形成する工程 を含む。本発明は、この方法により製造された移植可能な薬剤／ポリマーマトリ ックス塊も含む。従って、該方法は、熱押出を用いずにポリマーマトリックス全 体にわたって薬剤物質の実質的な分散を生じるものである。 本明細書に記載する方法は、ポリマー／薬剤マトリックスデバイスの大きさや 形態を決定する、破砕又は圧縮工程からポリマー／薬剤マトリックスの製造工程 を分離する利点を示す。該方法により、温和な条件、例えば、低温度を利用する 製造方法を使用することができる。従って、該方法は、多くの蛋白質、ポリペプ チド、ポリヌクレオチド等の熱的に不安定な薬剤に特によく適合する。該方法は 、有機溶媒中に薬剤を溶解させたり、薬剤の水溶液を有機溶媒と接触させずに、 ポリマー／薬剤マトリックスを形成することも可能にする。多くの蛋白質やオリ ゴヌクレオチド等のある薬剤は、ポリマー溶液を形成するのに適したごくわずか の有機溶媒に溶解し、水／有機界面で変性されるが、その問題は、本発明により 除去される。従って、該方法は、ポリマー／薬剤マトリックス微粒子と、加工す る前に存在している、薬剤、例えば蛋白質の活性を高度（約９０％よりも大）に 維持する移植可能なデバイスとの形成を可能にする。 該方法は、また粒径を決定する際の工程変数を減らし、破砕又は圧縮前の固体 のポリマー／薬剤マトリックスの貯蔵を可能にする。これらの特徴は、ポリマー ／薬剤マトリックス微粒子及び移植可能デバイスを製造する際に、先に述べた方 法よりもかなり柔軟かつ単純にし、該方法のスケールアップを可能にする。 図面の簡単な説明 図１は、極低温での磨砕によって製造されたポリ（乳酸−コ−グリコール酸） ／ＥＰＯ微粒子からのエリトロポエチンのラットにおけるインビボ放出と、ゴン ボツ（Ｇｏｍｂｏｔｚ）らに対して発行された米国特許第５，０１９，４００号 明細書に記載の方法により製造されたポリ（乳酸−コ−グリコール酸）／ＥＰＯ 微粒子からのそれとを比較したグラフである。 図２は、滴下凍結し、次いで溶媒抽出することによって形成されたポリマー／ ＥＰＯマトリックスから調製された、ポリ（乳酸−コ−グリコール酸）／ＥＰＯ 微粒子からのＥＰＯのインビトロ放出を示すグラフである。 図３は、液体窒素中に押出すことによって形成されたポリマー／ＥＰＯマトリ ックスから調製されたポリ（乳酸−コ−グリコール酸）／ＥＰＯ微粒子からのＥ ＰＯのインビトロ放出を示すグラフである。 図４は、４つの異なるＥＰＯ／ＰＬＧＡマトリックス連続的放出デバイス：ゴ ンボツ（Ｇｏｍｂｏｔｚ）らの方法により製造されたミクロスフェア；ゴンボツ （Ｇｏｍｂｏｔｚ）らの方法により調製されたミクロスフェアの圧縮によって調 製されたウェハー；本発明の微粒子の圧縮によって調製されたウェハー；及びＰ ＬＧＡとＥＰＯ薬剤物質との固体状の混合物の圧縮によって調製されたウェハー に対するエリトロポエチンのラット中でのインビボ放出を比較したグラフである 。 発明の詳細な説明 本発明は、ポリマーでカプセル化された薬剤微粒子（以下、「ポリマー／薬剤 マトリックス微粒子」という）を製造する方法に関する。該方法は、（１）有機 溶媒中に溶解されたポリマーと懸濁された不安定な薬剤とを含有するポリマー溶 液／薬剤混合物を形成し、（２）該ポリマー溶液／薬剤混合物から溶媒を除去し 、それにより固体のポリマー／薬剤マトリックスを形成し、（３）該ポリマー／ 薬剤マトリックスのガラス転移温度よりも低い温度でポリマー／薬剤マトリック スを破砕し、それによりポリマー／蛋白質マトリックス微粒子を形成することを 含む。該ポリマー／薬剤マトリックスは、例えば、細かく砕くか、又は粉末化す ることにより、破砕することができる。１つの態様において、ポリマー溶液／薬 剤混合物を凍結し、得られた固体のポリマー溶液／薬剤マトリックスから非溶媒 中に溶媒を抽出することにより、ポリマー溶液／薬剤混合物から溶媒を除去する 。 本発明のもう１つの態様には、本発明の方法により形成されるポリマー／薬剤 マトリックス粒子が含まれる。好ましくは、これらの粒子は、微粒子である。こ れらは、ポリ（乳酸）、ポリ（乳酸−コ−グリコール酸）コポリマー等の生物学 的適合性ポリマー、薬剤物質、及び任意に１以上の賦形剤及び／又は金属含有塩 等の放出改質剤を含む。該微粒子は、１以上の付加的な薬剤をさらに含んでいて もよい。 本発明のさらなる態様は、カプセル化された不安定な薬剤を含有する生物分解 性移植片を製造する方法である。該方法は、（１）有機溶媒中に溶解させたポリ マー及び共溶解され又は懸濁された薬剤を含むポリマー溶液／薬剤混合物を形成 する工程、（２）該ポリマー溶液／薬剤混合物から溶媒を除去し、それにより固 体のポリマー溶液／薬剤マトリックスを形成する工程、並びに（３）該ポリマー ／薬剤マトリックスを機械的に圧縮し、それにより移植可能なポリマー／薬剤マ トリックス塊を形成する工程を含む。 本明細書で用いられる「不安定な薬剤」という用語は、生理学的温度（約３７ ℃）よりも高い温度のように高められた温度に温めたり、あるいは有機溶媒中又 は水／有機界面で溶液中に溶解させた際に、実質的な量の活性を失う薬剤をいう 。前者の場合、薬剤は「熱的に不安定な薬剤」をもいい、一方、後者の場合、薬 剤はさらに「有機溶媒に不安定な薬剤」をいう。不安定な薬剤の例には、蛋白質 、ポリペプチド及びポリヌクレオチドが含まれる。これらのタイプの分子は、し ばしば、生理学的条件下で活性に必要な構造中に存在し、温めると構造的に変化 をする。活性な構造は、水素結合や塩架橋等の相互作用によって安定化させるこ とができ、該分子をジメチルスルホキシド、１，１，１，３，３，３−ヘキサフ ルオロイソプロパノール等の非水性溶媒中に溶解させたり、水／有機界面に存在 しているときに、崩壊させることができる。本発明の方法は、低温、即ち室温以 下でポリマー／薬剤マトリックスを形成させることが可能であるので、不安定な 薬剤に対して特に有利である。さらに、該方法は、有機溶媒中に薬剤を溶解させ ずにポリマー／薬剤マトリックスの形成を可能にする。 本明細書で用いられている「薬剤」という用語は、インビボでの治療、予防又 は診断的な性質を有する剤又はその薬理学的に許容できる塩をいう。不安定な薬 剤であり、好適な治療又は予防剤の例には、例えば、免疫グロブリン様蛋白質、 抗体、サイトカイン（例えば、リンホカイン、モノカイン、ケモカイン）、イン ターロイキン、インターフェロン、エリトロポエチン（本明細書において「ＥＰ Ｏ」ともいう）、ヌクレアーゼ、腫瘍壊死因子、コロニー刺激因子、インシュリ ン、酵素、腫瘍抑制剤、ホルモン（例えば、成長ホルモン及び副腎皮質刺激ホル モン）、抗原（例えば、細菌性及びウイルス性抗原）、成長因子、ペプチド、ポ リペプチド、アンチセンス分子等のポリヌクレオチド等の蛋白質が含まれる。 本明細書に用いられる「ポリマー／薬剤マトリックス」という用語は、ポリマ ーマトリックス全体にわたって分散されるポリマー、コポリマー又はポリマー混 合物を含む固体物質をいう。ポリマー／薬剤マトリックスは、均質又は不均質で あってもよく、界面活性剤、糖類等の賦形剤、金属含有塩等の放出改質剤、或い は１以上の付加的な薬剤物質をさらに含んでいてもよい。 本明細書に用いられる「非溶媒」という用語は、液状又は固体状で、第２又は 参照物質を実質的に溶解しない物質をいう。従って、かかる物質は、参照物質に 対する非溶媒として述べられ得る。 本明細書において用いられる「微粒子」という用語は、約５００μｍ未満の最 大寸法（例えば、約５×１０^-4ｍ以下のオーダーの最大寸法を有する）を有する 形態の粒子をいう。 本明細書に用いられる「放出改質剤」という用語は、ポリマー／薬剤マトリッ クス内に含まれたときにマトリックスの薬剤−放出特性を改質する物質をいう。 放出改質剤は、例えば、マトリックスからの薬剤放出の速度を減少させたり、増 加させたりすることができる。放出改質剤の１つのグループには、バーンステイ ン（Ｂｅｒｎｓｔｅｉｎ）らにより、米国特許出願第０８／２３７，０５７号明 細書に開示されている、金属含有塩が含まれ、その内容は参照までに本明細書に 取り込まれている。 本発明の利点は、温和な条件下でポリマー溶液／薬剤混合物からポリマー／薬 剤マトリックスを形成させることができる点にある。ポリマー溶液／薬剤混合物 は、溶媒中に溶解された生物学的適合性ポリマー及び共溶解され又は懸濁された 薬剤を含む。懸濁させたなら、薬剤は、例えば、微結晶又は部分的に非晶質であ ろう粉末として存在するであろう。薬剤を混合物中に懸濁させる際には、攪拌、 例えば、震盪、かき混ぜ、ボルテックス、均質化又は音波処理により、混合物全 体にわたって実質的に均一に薬剤を分散させることができる。溶解されたポリマ ーの重量に対する、溶解され又は懸濁された薬剤の重量は、約０．０２％〜１０ ０％であり得る。ポリマー溶液／薬剤混合物には、さらに糖類、酸類、塩基類、 界面活性剤及び安定剤を含む１以上の賦形剤及び／又は金属含有塩等の放出改質 剤を含めることができる。ポリマー溶液／薬剤混合物には、さらに１以上の付加 的な薬剤を含めることができる。 ポリマー溶液／薬剤混合物から溶媒を除去し、それにより任意の幾何学的形状 や大きさの固体塊を形成し、その全体にわたって薬剤分子や賦形剤及び／又は放 出改質剤を分散させる方法により、固体のポリマー／薬剤マトリックスを形成さ せることができる。固体のポリマー／薬剤マトリックスを形成する方法により、 薬剤が実質的に分解されるべきでなく、例えば、多くの蛋白質、ポリヌクレオチ ド等の感熱性薬剤に対して低温度で行うことができる。 １つの態様において、ポリマー溶液／薬剤マトリックスは、ポリマー溶液／薬 剤混合物を使用、例えば、注入、噴霧、スプレー又は滴下することにより、固体 のポリマー溶液／薬剤混合物の粒子を形成する、ポリマー溶液／薬剤混合物を冷 凍するのに十分な温度で、液化ガスになりうるガスに形成される。次いで、例え ば、粒子の凝固点よりも低い温度で粒子を非溶媒と接触させ、それにより溶媒を 非溶媒中に抽出するか、または真空内で粒子を凍結乾燥することにより、溶媒を これらの粒子から除去することができる。 他の態様において、ポリマー／薬剤混合物の凝固点よりも高いが、ポリマー／ 薬剤マトリックスの沈殿を生じさせるにはまだ十分に低い温度で、非溶媒、例え ば、エタノール又はイソペンタン中にポリマー溶液／薬剤混合物を導入する。こ れは、非溶媒／ポリマー／薬剤マトリックス混合物を生じ、それから濾過により ポリマー／薬剤マトリックスを除去することができる。 より好ましい態様において、アルコール等の液体非溶媒、例えば、エタノール 、又はアルカン等の非極性有機液体中に、ポリマー溶液／薬剤混合物の凝固点よ りも低い温度で、ポリマー溶液／薬剤混合物を使用、例えば、注入、噴霧、スプ レー又は滴下することにより、ポリマー／薬剤マトリックスが形成され、それに より固体のポリマー溶液／薬剤混合物が形成される。これに次いで、溶媒を固体 のポリマー溶液／薬剤混合物がら非溶媒へ抽出することにより、ポリマー／薬剤 マトリックスが得られる。 さらなる態様において、ポリマー溶液／薬剤混合物を連続した液体流として、 例えば、シリンジを介して、液化ガスで覆われた液体非溶媒又は非溶媒中に、ポ リマー溶液／薬剤混合物の凝固点よりも低い温度で押出すことにより固体のポリ マー／薬剤マトリックスを形成することができる。これは、固体のポリマー溶液 ／薬剤混合物を生じ、これから溶媒は非溶媒中に抽出される。その代わりに、ポ リマー溶液／薬剤混合物を、混合物を凍結させるのに適した温度で、該混合物を ガス中に押出すことができる。次いで、例えば、混合物の凝固点よりも低い温度 で固体混合物を非溶媒と接触させ、それにより溶媒を非溶媒中に抽出するか、あ るいは固体混合物を凍結乾燥することにより、生成した固体のポリマー溶液／薬 剤混合物から溶媒を除去する。 固体のポリマー／薬剤マトリックスから溶媒及び／又は非溶媒を除去した後、 マトリックスを破砕し、注射に適した大きさの粒子を製造する。１つの態様にお いて、目的の大きさの範囲は、約３０μｍ〜約１８０μｍである。破砕は、ポリ マー／薬剤マトリックスのガラス転移温度よりも低く、マトリックスが脆いこの 温度よりも低い温度で行う。例えば、破砕工程の温度は、約４０℃未満、好まし くは約４℃未満であってもよい。破砕方法には、低温で行うことができる磨砕、 粉砕、均質化、又は微粉化方法が含まれる。例えば、固体のマトリックスを極低 温部を有する分析用ミルを用いて低温で破砕するか、あるいはすり鉢の中で液体 窒素下で保持しながら又はポリマーのガラス転移温度よりも低い温度の環境の中 で、乳棒を用いて破砕することができる。破砕する際に、マトリックスを乾燥さ せたり、あるいはそのガラス転移温度よりも低い温度で非溶媒中に懸濁すること ができる。 本発明の方法で調製されたポリマー／薬剤マトリックスの微粒子の大きさの範 囲を、破砕工程で制御することができる。実施例１に記載の方法の態様において 、最終的な粒径分布は、総磨砕時間の関数であり、磨砕時間が短くなるにつれて 、平均して、より大きな粒子がつくられ、磨砕時間が長くなるにつれて、平均し て、より小さな粒子がつくられる。この方法において製造された微粒子の試料の 大きさの範囲は、篩にかけ、従って特定の大きさの範囲外の粒子を除去すること により、さらに制限することができる。 ポリマー／薬剤マトリックスの微粒子の形成の際に、使用しうるポリマーには 、生物学的適合性ポリマーが含まれる。生物学的適合性ポリマー及びその分解生 成物は、受容者に対して非毒性である。これらには、ポリ（乳酸）、ポリ（グリ コール酸）、ポリ（ラクチド）、ポリ（グリコリド）、ポリ（ラクチド−コ−グ リコリド）、ポリ（カプロラクトン）、ポリカーボネート、ポリアミド、ポリ酸 無水物、ポリ（アミノ酸）、ポリ（オルトエステル）、ポリアセタール、ポリシ アノアクリレート、ポリ（エーテルエステル）、ポリ（ジオキサノン）、ポリ（ アルキレンアルキレート）、ポリ（エチレングリコール）とポリ（オルトエステ ル）とのコポリマー、分解性ポリウレタン、並びにそれらのコポリマー及び混合 物等の生物腐食性（bioerodable）ポリマーが含まれる。また、ポリアクリレー ト、エチレン−酢酸ビニルコポリマー、アシル置換セルロースアセテート、非分 解性ポリウレタン、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル、ポリフッ化ビニル、ポリ（ ビニルイミダゾール）、クロロスルホネートポリオレフィン、及びポリエチレン オキシド等の非生物腐食性ポリマーも含まれる。これらの物質の好適な混合物又 はコポリマーも用いることができる。所定のポリマーに好適な溶媒／非溶媒系は 、通常の実験を経て決定することができる。 本発明の方法の特に好ましい態様において、使用されるポリマーは、ポリ（乳 酸−コ−グリコール酸）（ｄ，１−ＰＬＧＡ）コポリマーである。この態様にお いて、ポリマー溶液／薬剤混合物を形成するのに好適な溶媒には、塩化メチレン 、アセトン、酢酸エチル、酢酸メチル、テトラヒドロフラン及びクロロホルムが 含まれる。好適な非溶媒には、エタノール等のアルコール、及びイソペンタン等 の非極性炭化水素溶媒が含まれる。 本発明のさらなる態様には、上記した方法によって製造されたポリマー／薬剤 マトリックスの微粒子が含まれる。これらの微粒子は、生物学的適合性ポリマー 、不安定な薬剤及び、任意に１以上の賦形剤及び／又は金属含有塩等の放出改質 剤を含む。粒子は、均質であってもよく、あるいは不均質であってもよい。薬剤 が共溶解されているポリマー溶液／薬剤混合物から製造された微粒子は、マトリ ックス全体をわたって薬剤分子が均一に分散している、均質のものでもよい。し かしながら、ある場合には、ポリマー溶液／薬剤混合物を凍結した際、又は混合 物から溶媒を除去した際に、薬剤分子は凝集することができ、その結果、不均質 ポリマー／薬剤マトリックスが生じる。薬剤が懸濁されているポリマー溶液／薬 剤混合物から製造されたそれらの微粒子は、より高い及びより低い薬剤密度の領 域では不均質であろう。これらの粒子は、広い範囲の大きさを有し、不規則な形 態により特徴付けられる。これらのポリマー／薬剤マトリックスの微粒子は、マ トリックス内で薬剤の重量パーセントによって示されるように、ある範囲の薬剤 負荷を有することができる。好ましい態様において、薬剤負荷は、全マトリック ス重量の０．０１％〜５０％の範囲内にある。 本発明のさらなる面は、移植可能なポリマー／薬剤マトリックス塊を形成する 方法である。１つの態様において、該方法は、（１）有機溶媒中に溶解されたポ リマー及び懸濁された不安定な薬剤を含むポリマー溶液／薬剤混合物を形成する 工程、（２）該ポリマー溶液／薬剤混合物から溶媒を除去し、それにより固体の ポリマー／薬剤マトリックスを形成する工程、及び（３）該ポリマー／薬剤マト リックスを機械的に圧縮し、それにより移植可能なポリマー／薬剤マトリックス 塊を形成する工程を含む。工程（１）及び（２）は、上記したように、ポリマー ／薬剤マトリックス微粒子の形成のために行うことができる。 その他の態様において、前記方法は、固体のポリマー／薬剤マトリックスを圧 縮する前に、低温で固体のポリマー／薬剤マトリックスを破砕する工程をさらに 含む。この破砕は、ポリマー／薬剤マトリックス微粒子の形成に対して上記概説 した方法に従って行うことができる。従って、この態様において、移植可能な塊 の形成は、薬剤／ポリマーマトリックス粒子又は微粒子を機械的に圧縮すること を含む。 この方法は、前記のように低温で有機溶媒中への薬剤の溶解、熱押出、溶融加 工又は水／有機界面の存在を必要としないでポリマー／薬剤マトリックスを形成 するので、薬剤が不安定な薬剤であるときに特に有利である。 ポリマー／薬剤マトリックスの機械的圧縮は、いくつかの方法のうちの１つで 行なうことができる。例えば、必要量のポリマー／薬剤マトリックスを秤量し、 機械プレスで圧縮することができる。得られたウェハー全体を移植したり、ある いは、より小さい部分に切断して個々に移植することができる。ポリマー／薬剤 マトリックスは、圧縮前に、塊状ポリマー、他の生物学的適合性物質等の結合剤 と結合することもできる。１つの態様において、塊状ポリマーは、ポリマー／薬 剤マトリックス中におけるものとは異なる組成及び性質の（例えば、より低いガ ラス転移温度を有する）ポリマーである。もう１つの態様において、ポリマー／ 薬剤マトリックス、又は結合剤と結合したポリマー／薬剤マトリックスを圧縮し てロッドにすることができ、該ロッドは、移植したり、大きな孔径のシリンジを 介して注射することができる。あるいは、ロッドの端部を薄く切って、所望の厚 さのウェハーを移植することができる。 移植可能な、デバイスを形成する方法は、得られた移植片を少なくともポリマ ー又は結合剤のガラス転移温度に、一時的に加熱する工程をさらに有することが できる。これは、最終生成物の、弾性、表面形態等の特性を最適化するために行 うことができる。圧縮された移植片を生物学的適合性の被覆剤で被覆し、取扱い 性を向上させたり、放出特性を改変することができる。 本発明の利点は、非常に低い残存溶媒濃度、例えば、残存溶媒１００万重量当 たり約５０部未満を有する移植可能なデバイスの形成を可能にすることにある。 これは、溶媒除去の前に、ポリマー溶液／薬剤混合物を凍結する際に特に適して いる。 本発明のさらなる面は、本発明の方法によって調製された移植可能なポリマー ／薬剤マトリックス塊を含む。かかるポリマー／薬剤マトリックス塊は、生物学 的適合性のポリマー、及びポリマー／薬剤マトリックスの微粒子に対して上記で 論じたようにポリマーマトリックス内に分散された薬剤を含む。本発明のポリマ ー／薬剤マトリックス塊は、結合剤と同様に、ポリマー／薬剤マトリックスの微 粒子に対して前に論じたように、１以上の賦形剤、放出改質剤及び／又は付加的 な薬剤をさらに含んでいてもよい。ポリマー／薬剤マトリックス塊もまた、生物 学的適合性のポリマーで被覆されていてもよい。ポリマー／薬剤マトリックス塊 は、ウェハー、ロッド、ビーズ等のいかなる好適な形であってもよい。 本発明を以下の実施例により詳細に述べる。 実施例 実施例１−ポリマー／薬剤マトリックス微粒子の調製 ポリマー溶液でのエリトロポエチン形成懸濁液の調製 ヒトエリトロポエチン（ＥＰＯ）を、米国特許第４，７０３，００８号明細書 に記載のとおりに誘導した。ＥＰＯを脱イオン水に溶かし、約１ｍｇ／ｍＬの濃 度の水溶液を形成した。次いで、ＥＰＯ溶液を、製剤緩衝液、５ｍＭリン酸塩緩 衝液、ｐＨ７に対して、３回透析を行った。 透析に続いて、透析後の溶液中のＥＰＯ濃度が約１ｍｇ／ｍＬであることを、 ２８０ｎｍの吸収（ε＝１．３４５Ｌｇ^-1ｃｍ^-1）を測定することで決定して、 確認した。次いで、透析後のＥＰＯ溶液を硫酸アンモニウムとインシュリンとの 濃縮溶液に混合した。別に、硫酸アンモニウム溶液を、５ｍＭリン酸塩緩衝液、 ｐＨ７中で調製した。硫酸アンモニウム溶液と追加緩衝液の適当量を、５０ｍＬ のポリプロピレンチューブに加え、形成に望ましい濃度とした。次いで、透析後 のＥＰＯ溶液を前記溶液に加え、緩やかに上下に回転して混合した。 定形化されたＥＰＯ溶液を、テフロン配管につながった６０ｍＬのプラスチッ クシリンジ中へ吸引し、次いで、超音波ノズル（タイプＶＩＡ、ソニックスアン ドマテリアルズ社、ダンブリー、コネチカット）を通して、噴霧された原料が常 に完全に浸っていることを確めつつ液体窒素を含むポリプロピレン容器へ噴霧し 、凍結粒子を得た。その容器を、液体窒素が完全に蒸発するまで−８０℃に保っ た。生物学的に活性を有する凝集−安定化ＥＰＯを含有する凍結粒子をガラスビ ーカーに移し、次いで凍結乾燥して、生物学的に活性を有する凝集−安定化ＥＰ ０粒子を形成した。ＥＰＯ粒子を乾燥窒素雰囲気下で凍結乾燥器から取り出し、 低湿度環境下で処理して−８０℃で乾燥下で（dessicated）保存した。凍結乾燥 されたＥＰＯ製剤は、重量で、１０％のＥＰＯ）７９％の硫酸アンモニウム、１ ０％のリン酸塩そして１％のインシュリンから構成されていた。 １０ｋｄの非ブロックＤ，Ｌ−ＰＬＧＡの溶液（１０％ ｗ／ｖ）を塩化メチ レン中で調製した。ＥＰＯ粒子（２５ｍｇ）とふるい分けされた炭酸マグネシウ ム（５０ｍｇ）３８μｍ未満）とを、４．２５ｍＬのこの溶液に加えた。タンパ ク質粒径を小さくするために、得られた懸濁液を超音波プローブ（ビルチス社、 ガードナー、ニューヨーク）で３０秒間、超音波処理した。 滴下凍結によるポリマー／薬剤マトリックスの調製 ポリマー溶液中の薬剤懸濁液の滴を、エタノール（１７０ｍＬ）の凍結床を覆 っている５ｍＬのガラスピペットから液体窒素床へ約１分間にわたって滴下し、 ポリマー／薬剤マトリックスを形成した。滴の大きさは約１０〜５０μＬであっ た。粒子を含むすべての槽を−８０℃のフリーザーに置き、ここで窒素を蒸発さ せた。エタノール床を続いて溶かし、ポリマー／薬剤マトリックス粒子を包みこ ませた。粒子を保存処理して、塩化メチレンを取り除いた。２４時間で、予め− ８０℃に冷却した追加量（１７０ｍＬ）のエタノールを槽に加えた。４８時間後 、ブフナー漏斗を用いてろ過することにより、窒素を除いたグローブボックス中 へ粒子を集め、凍結乾燥器中で乾燥した。この方法で製造された粒子は、不規則 な形状のもので、その直径は約２〜４ｍｍであった。 押出によるポリマー／薬剤マトリックスの調製 ポリマー溶液中の薬剤懸濁液を、ステンレススチール製２２ゲージ針を備えた ガラスシリンジを通して、液体窒素で覆われたエタノール凍結床に上記のように 数秒間以上にわたって押出すことにより、ポリマー／薬剤マトリックスを形成し た。続く工程は、上記と同一であった。この方法で製造された粒子は滴下−凍結 により製造されたものと類似していた。 ポリマー／薬剤マトリックスの低温粉砕 上記の方法を経て調製された粒子を、液体窒素で予め冷却しておいたすり鉢と 乳棒とで磨砕した。粒子を常に液体窒素中に沈ませることを確実にすることに注 意を払った。粒子が均一に小さいことがはっきりするまで、乳棒でこれらを砕い た。磨砕工程を終えた時点で、粒子を液体窒素中のスラリーとして予め冷却した ２０ｍＬのガラス瓶に移した。次いで、この瓶を−８０℃のフリーザーに置いた 。瓶から窒素が蒸発した後、瓶を吸引デシケーターに移し、室温で原料を真空乾 燥し、粒子から残存するすべての水分を除去した。次いで、粒子を２５０μｍの 篩でふるい分けた。 実施例２−インビボキャラクタライゼーション 体重が４００±５０ｇ（標準偏差）である、オスのSprague-Dawleyラットを動 物モデルとして用いた。ラットには実験前に絶食処理を行わず、次いで、鉄補給 標準食を与え、水へのアクセスを自由にした。鉄デキストラン（シグマ社、セン トルイス、ミズーリ）を週に２回、腹腔内に注射した。 シクロスポリンＡとヒドロコルチゾンを試験動物に投与することにより、ＥＰ Ｏに対するラットの免疫系の応答を抑制した。一日あたり０．５ｍＬの注射用滅 菌塩水（合衆国薬局方）中の１０ｍｇのシクロスポリンＡ（Sandimmune（登録商 標）インジェクション、サンドズ、イーストハノーバ、ニュージャージー）と５ ｍｇのヒドロコルチゾン（スペクトラム社、ガーデナ、カリフォルニア）を、各 ラットに０日目〜１４日目まで腹腔内注射して与えた。 ０時間に、実施例１に記載のように調製されたＥＰＯ／ポリマーマトリックス 微粒子の形態で、ラットに１０，０００単位のＥＰＯを肩甲骨間の領域の皮下へ 注射した。注射後３、１２、２４、３２及び４８時間で、各ラットの尾の静脈か ら血液試料を採取した。次いで、追加の血液試料を続く１０〜１２日の間、およ そ一日に一回採取した。 ラット血清中のＥＰＯ濃度を、酵素結合免疫ソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ ）によって決定した。図１に示す結果から、１２日の期間の間、粒子からＥＰＯ の放出が持続していることが明らかに示された。血清プロフィールを、動物一匹 あたり１０，０００ＩＵの投与量で標準化した。対照のために、ゴンボツらに記 載の方法により調製された同じ製剤で処理されたラットの血清プロフィールをそ の図中に含める。ゴンボツらに従って調製されたミクロスフェアと、実施例１に 記載されたように調製された粒子とのインビボ性能の間には、明らかな違いはな い。 実施例３−インビトロキャラクタライゼーション 実施例１に記載されたポリマー／ＥＰＯ微粒子のインビトロ放出特性のキャラ クタライゼーションを行った。微粒子をＨＥＰＥＳ緩衝液中に懸濁し、得られた 懸濁液を３７℃で１１８日間維持した。ＥＰＯ放出の程度はゲル濾過クロマトグ ラフィーで決定した。図２と図３は、滴下凍結により（図２）、又は押出により （図３）形成されたＰＬＧＡ／ＥＰＯマトリックスから調製されたＰＬＧＡ／Ｅ ＰＯ微粒子の放出プロフィールを示す。総放出タンパク質の５％未満は凝集（非 活性）型であった。 実施例４−ＥＰＯ／ＰＬＧＡマトリックス移植可能デバイスの調製とそれからの インビボ放出のキャラクタライゼーション 移植可能デバイスの調製 カプセル化エリトロポエチンを含むＰＬＧＡ移植片を、ゴンボツらの方法、米 国特許第５，０１９，４００号明細書により調製されたＥＰＯ／ＰＬＧＡミクロ スフェアの、及び上記実施例１の方法を用いて調製された微粒子の機械的な圧縮 を使用して調製した。 カーバーラボラトリープレス（モデルＣ）フレッド Ｓ．カーバー社、メノメ ニーファールス、ウィスコンシン）における、ＥＰＯ／ＰＬＧＡ微粒子又はミク ロスフェアを圧縮してＥＰＯ／ＰＬＧＡマトリックスウェハーを得た。１／２イ ンチ径のステンレススチール製テストシリンダ類に、１００ｍｇの原料を加えた 。１５，０００ｐｓｉで１５秒間でウェハーを形成し、かみそりの刃を用いて必 要な小片に切断した。移植の前にウェハー断片を秤量し、投与量を決定した。 調製され、テストされたデバイスを、以下の表にまとめている（ＳＣ：皮下） ： インビボキャラクタライゼーション Sprague-Dawleyラットの肩甲骨の中央の領域（その部位を剃り、消毒した後） に付けた切開中に乾燥ウェハーを皮下に挿入した。ステープルと手術用接着剤と で切開を閉じた。補給製剤からのＥＰＯの放出動力学を、実施例２で記載したよ うに免疫一抑制を伴う血清ＥＰＯレベルをモニターすることで評価した。 上記の表に掲げた４つのデバイスを用いて得られた結果を図４に示す。４つの 場合のすべてにおいて、１４日後の血清ＥＰＯレベルはＥＬＩＳＡアッセイにつ いての定量レベルよりも下回っており、放出持続時間が４つのデバイスすべてに ついて同じであることを示している。しかしながら、血清ＥＰＯレベルから推定 されるＥＰＯ放出の動力学は、４つのデバイス間で大きく異なっていた。移植片 についてのＥＰＯの放出持続時間は、注射されたミクロスフェアについてと同じ であった。しかしながら、放出期間の非常に重要な後半において、移植片はミク ロスフェアで見られるよりも約１０倍高い血清ＥＰＯレベルを産生した。 均等物 当業者であれば、単なる日常的実験手法により、本明細書に記載された発明の 具体的態様に対する多くの均等物を認識し、又は確認できるであろう。かかる均 等物は下記の請求の範囲の範疇に含まれるものである。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項 【提出日】平成１０年７月２３日（１９９８．７．２３） 【補正内容】 請求の範囲 １．薬剤が不安定な薬剤であり、 （ａ）有機溶媒中にポリマーを溶解させ、不安定な薬剤が該溶媒に実質上不溶で ある、ポリマー溶液を形成させ； （ｂ）該ポリマー溶液中に不安定な薬剤を懸濁して、ポリマー溶液／薬剤混合物 を形成させ； （ｃ）該ポリマー溶液／薬剤混合物から溶媒を除去し、それによりポリマー／薬 剤マトリックスを形成させ；そして （ｄ）該ポリマー／薬剤マトリックスのガラス転移温度よりも低い温度でポリマ ー／薬剤マトリックスを破砕し、それによりポリマー／薬剤マトリックス微粒子 を形成させる 工程を本質的に含むポリマー／薬剤マトリックス微粒子の形成方法。 ２．不安定な薬剤が治療用、診断用又は予防用の剤である請求項１記載の方法。 ３．不安定な薬剤が免疫グロブリン蛋白質、抗体、サイトカイン、インターロイ キン、インターフェロン、エリトロポエチン、ヌクレアーゼ、腫瘍壊死因子、コ ロニー刺激因子、インシュリン、酵素、腫瘍抑制剤、ホルモン、抗原、成長因子 、ペプチド、ポリペプチド又はポリヌクレオチドである請求項２記載の方法。 ４．不安定な薬剤が蛋白質である請求項２記載の方法。 ５．ポリマー／薬剤マトリックスを磨砕、粉砕又は微粉化することにより、ポリ マー／薬剤マトリックスを破砕する請求項１記載の方法。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 38/43 Ａ６１Ｋ 45/00 39/00 47/30 39/395 37/02 37/24 45/00 37/48 47/30 37/26 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，Ｓ Ｄ，ＳＺ，ＵＧ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ， ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，Ｇ Ｂ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ， ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，Ｎ Ｏ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ， ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．薬剤が不安定な薬剤であり、 （ａ）有機溶媒中に溶解されたポリマー及び懸濁された薬剤を含むポリマー溶液 ／薬剤混合物を形成させ； （ｂ）該ポリマー溶液／薬剤混合物から溶媒を除去し、それによりポリマー／薬 剤マトリックスを形成させ；そして （ｃ）該ポリマー／薬剤マトリックスのガラス転移温度よりも低い温度でポリマ ー／薬剤マトリックスを破砕し、それによりポリマー／薬剤マトリックス微粒子 を形成させる 工程を含むポリマー／薬剤マトリックス微粒子の形成方法。 ２．不安定な薬剤が治療用、診断用又は予防用の剤である請求項１記載の方法。 ３．不安定な薬剤が免疫グロブリン蛋白質、抗体、サイトカイン、インターロイ キン、インターフェロン、エリトロポエチン、ヌクレアーゼ、腫瘍壊死因子、コ ロニー刺激因子、インシュリン、酵素、腫瘍抑制剤、ホルモン、抗原、成長因子 、ペプチド、ポリペプチド又はポリヌクレオチドである請求項２記載の方法。 ４．不安定な薬剤が蛋白質である請求項２記載の方法。 ５．ポリマー／薬剤マトリックスを磨砕、粉砕又は微粉化することにより、ポリ マー／薬剤マトリックスを破砕する請求項１記載の方法。 ６．非溶媒と接触させながらポリマー／薬剤マトリックスを破砕する請求項５記 載の方法。 ７．ポリマー／薬剤マトリックスを分析用ミル中で粉砕することにより、ポリマ ー／薬剤マトリックスを破砕する請求項５記載の方法。 ８．ポリマー／薬剤マトリックスを乳鉢を用いて微粉化することにより、ポリマ ー／薬剤マトリックスを破砕する請求項５記載の方法。 ９．ポリマー溶液／薬剤混合物の凝固点よりも低い温度でポリマー溶液／薬剤混 合物から溶媒を除去する請求項１記載の方法。 １０．有機溶媒がジクロロメタン、アセトン、酢酸エチル、テトラヒドロフラン 又は酢酸メチルである請求項１記載の方法。 １１．ポリマーが生物腐食性（bioerodable）ポリマーである請求項１記載の方 法。 １２．生物腐食性ポリマーがポリ（乳酸）、ポリ（乳酸−コ−グリコール酸）コ ポリマー、ポリ（カプロラクトン）、ポリカーボネート、ポリアミド、ポリ酸無 水物、ポリ（アミノ酸）、ポリ（オルトエステル）、ポリアセタール、ポリシア ノアクリレート及びポリウレタンからなる群より選ばれたものである請求項１１ 記載の方法。 １３．ポリマーがコポリマー又はポリマーブレンドである請求項１１記載の方法 。 １４．薬剤が粉末として懸濁されている請求項１記載の方法。 １５．ポリマー溶液／薬剤混合物がさらに１以上の賦形剤を含む請求項１記載の 方法。 １６．賦形剤が界面活性剤、酸類、塩基類、糖類及び安定剤からなる群より選ば れたものである請求項１５記載の方法。 １７．ポリマー溶液／薬剤混合物がさらに１以上の付加的な薬剤物質を含む請求 項１記載の方法。 １８．ポリマー溶液／薬剤混合物がさらに放出改質剤を含む請求項１記載の方法 。 １９．放出改質剤が金属含有塩である請求項１８記載の方法。 ２０．（ｉ）ポリマー溶液／薬剤混合物を凍結し、それにより固体のポリマー溶 液／薬剤混合物を形成させ；そして （ｉｉ）該固体のポリマー溶液／薬剤混合物から溶媒を抽出する 工程を含む方法により、ポリマー溶液／薬剤混合物から溶媒を除去する請求項１ 記載の方法。 ２１．固体のポリマー溶液／薬剤混合物を非溶媒と接触させ、これにより溶媒を 非溶媒中に抽出することにより、ポリマー溶液／薬剤混合物から溶媒を抽出する 請求項２０記載の方法。 ２２．固体のポリマー溶液／薬剤混合物を凍結乾燥することにより、固体のポリ マー溶液／薬剤混合物から溶媒を抽出する請求項２０記載の方法。 ２３．ポリマー溶液／薬剤混合物を、該ポリマー溶液／薬剤混合物の凝固点より も低い温度の液体非溶媒中に導くことにより、ポリマー溶液／薬剤マトリックス を凍結する請求項２０記載の方法。 ２４．液体非溶媒中に、ポリマー溶液／薬剤混合物を注入すること、噴霧するこ と、スプレーすること、押出すこと又は滴下することにより、ポリマー溶液／薬 剤混合物を液体非溶媒に導く請求項２３記載の方法。 ２５．ポリマー溶液／薬剤混合物を、液化ガスの存在下で凍結された非溶媒床上 に導くことにより、ポリマー／薬剤マトリックスを凍結させる請求項２０記載の 方法。 ２６．ガスが窒素又はアルゴンである請求項２５記載の方法。 ２７．凍結された非溶媒床上にポリマー溶液／薬剤混合物を注入すること、噴霧 すること、スプレーすること、押出すこと又は滴下することにより、液化ガスの 存在下で凍結された非溶媒床上にポリマー溶液／薬剤混合物を導く請求項２５記 載の方法。 ２８．ポリマー溶液／薬剤混合物を凍結するのに適した温度でガス中へポリマー 溶液／薬剤混合物を押出すことにより、ポリマー溶液／薬剤混合物を凍結させる 請求項２０記載の方法。 ２９．（ｉ）ポリマー／蛋白質マトリックスを沈澱させるのに適した温度でポリ マー溶液／薬剤混合物を非溶媒に導入し、それによりポリマー／薬剤マトリック ス−非溶媒混合物を形成させ、そして （ｉｉ）ポリマー／薬剤マトリックス−非溶媒混合物をろ過することにより、非 溶媒とポリマー／薬剤マトリックスとを分離する 工程を含む方法により、ポリマー溶液／薬剤混合物から溶媒を除去する請求項１ 記載の方法。 ３０．非溶媒がエタノール又はイソペンタンである請求項２９記載の方法。 ３１．ポリマー溶液／薬剤混合物を溶媒中に注入すること、噴霧すること、スプ レーすること、押出すこと又は滴下することにより、ポリマー溶液／薬剤混合物 を非溶媒に導く請求項２９記載の方法。 ３２．溶媒を蒸発させることにより、ポリマー溶液／薬剤混合物から溶媒を除去 する請求項１記載の方法。 ３３．溶媒を蒸発させる前に、ポリマー溶液／薬剤混合物をフィルム状に広げる 請求項３２記載の方法。 ３４．溶媒を蒸発させる前に、ポリマー溶液／薬剤混合物を面上にスプレーする 請求項３２記載の方法。 ３５．請求項１記載の方法により製造されてなるポリマー／薬剤マトリックス微 粒子。 ３６．ポリマーが生物腐食性ポリマーである請求項３５記載のポリマー／薬剤マ トリックス微粒子。 ３７．生物腐食性ポリマーがポリ（乳酸）、ポリ（乳酸−コ−グリコール酸）コ ポリマー、ポリ（カプロラクトン）、ポリカーボネート、ポリアミド、ポリ酸無 水物、ポリ（アミノ酸）、ポリ（オルトエステル）、ポリアセタール、ポリシア ノアクリレート及びポリウレタンからなる群より選ばれたものである請求項３６ 記載のポリマー／薬剤マトリックス微粒子。 ３８．ポリマーがコポリマー又はポリマーブレンドである請求項３５記載のポリ マー／薬剤マトリックス微粒子。 ３９．不安定な薬剤が免疫グロブリン蛋白質、抗体、サイトカイン、インターロ イキン、インターフェロン、エリトロポエチン、ヌクレアーゼ、腫瘍壊死因子、 コロニー刺激因子、インシュリン、酵素、腫瘍抑制剤、ホルモン、抗原、成長因 子、ペプチド、ポリペプチド又はポリヌクレオチドである請求項３５記載のポリ マー／薬剤マトリックス微粒子。 ４０．さらに１以上の賦形剤を含む請求項３５記載のポリマー／薬剤微粒子。 ４１．賦形剤が界面活性剤、酸類、塩基類、糖類及び安定剤からなる群より選ば れたものである請求項４０記載のポリマー／薬剤微粒子。 ４２．さらに放出改質剤を含む請求項３５記載のポリマー／薬剤マトリックス微 粒子。 ４３．放出改質剤が金属含有塩である請求項４２記載のポリマー／薬剤マトリッ クス微粒子。 ４４．さらに１以上の付加的な薬剤を含む請求項３５記載のポリマー／薬剤マト リックス微粒子。 ４５．薬剤が不安定な薬剤であり、 （ａ）有機溶媒中に溶解されたポリマー及び懸濁された薬剤を含むポリマー溶液 ／薬剤混合物を形成させ； （ｂ）該ポリマー溶液／薬剤混合物から溶媒を除去し、それにより固体のポリマ ー／薬剤マトリックスを形成させ；そして （ｃ）機械的にポリマー／薬剤マトリックスを圧縮し、それにより移植可能なポ リマー／薬剤マトリックス塊を形成させる 工程を含む移植可能なポリマー／薬剤マトリックス塊の形成方法。 ４６．ポリマーが生物腐食性ポリマーである請求項４５記載の方法。 ４７．ポリマー溶液／薬剤混合物の凝固点よりも低い温度でポリマー溶液／薬剤 混合物から溶媒を除去する請求項４５記載の方法。 ４８．（ｉ）ポリマー溶液／薬剤混合物を凍結し、それにより固体のポリマー溶 液／薬剤混合物を形成させ；そして （ｉｉ）該固体のポリマ一溶液／薬剤混合物から溶媒を抽出する 工程を含む方法により、ポリマー溶液／薬剤混合物から溶媒を除去する請求項４ ７記載の方法。 ４９．ポリマー溶液／薬剤混合物の凝固点よりも低い温度で液体非溶媒中にポリ マー溶液／薬剤混合物を導くことにより、ポリマー溶液／薬剤マトリックスを凍 結させる請求項４８記載の方法。 ５０．ポリマー溶液／薬剤混合物を液体非溶媒中へ注入すること、噴霧すること 、スプレーすること、押出すこと又は滴下することにより、ポリマー溶液／薬剤 混合物を液体非溶媒に導く請求項４９記載の方法。 ５１．ポリマー溶液／薬剤混合物を、液化ガスの存在下で凍結された非溶媒床上 に導くことにより、ポリマー／薬剤マトリックスを凍結する請求項４８記載の方 法。 ５２．固体のポリマー溶液／薬剤混合物を非溶媒と接触させ、それにより溶媒を 非溶媒中に抽出することにより、ポリマー溶液／薬剤混合物から溶媒を抽出する 請求項４８記載の方法。 ５３．固体のポリマー溶液／薬剤混合物を凍結乾燥することにより、固体のポリ マー溶液／薬剤混合物から溶媒を抽出する請求項４８記載の方法。 ５４．（ｉ）ポリマー／蛋白質マトリックスを沈澱させるのに適した温度で非溶 媒中にポリマー溶液／薬剤混合物を導き、それによりポリマー／薬剤マトリック ス−非溶媒混合物を形成させ、そして （ｉｉ）ポリマー／薬剤マトリックス−非溶媒混合物をろ過することにより、非 溶媒とポリマー／薬剤マトリックスとを分離する 工程を含む方法により、ポリマー溶液／薬剤混合物から溶媒を除去する請求項４ ５記載の方法。 ５５．請求項４５記載の方法により製造されてなる移植可能なポリマー／薬剤マ トリックス塊。