ITMI20122145A1 - Composizioni per uso orale contenenti idrolizzati di collagene, di elastina e vitamina c favorenti la deposizione di matrice extra-cellulare - Google Patents
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Description
COMPOSIZIONI PER USO ORALE CONTENENTI IDROLIZZATI DI COLLAGENE, DI ELASTINA E VITAMINA C FAVORENTI LA DEPOSIZIONE DI MATRICE EXTRA-CELLULAREâ€
La presente invenzione ha per oggetto composizioni comprendenti idrolizzato di collagene, idrolizzato di elastina e vitamina C favorenti la deposizione di matrice extra-cellulare.
Stato della tecnica
Il collagene (o collageno) à ̈ la principale proteina del tessuto connettivo. È la proteina più abbondante nei mammiferi (circa il 25% della massa proteica totale), e rappresenta nell'uomo circa il 6% del peso corporeo. Esistono numerosissimi tipi di collagene propriamente detto e diverse proteine che hanno struttura polipeptidica largamente assimilabile al collagene. In letteratura sono stati finora descritti 28 tipi di collagene. Quattro sono i tipi più noti ed indagati: il tipo I rappresenta il 90% del collagene totale ed entra nella composizione dei principali tessuti connettivi, come pelle, tendini, ossa e cornea; il tipo II à ̈ abbondante nelle cartilagini, nei dischi intervertebrali e nel corpo vitreo; il tipo III ha grande importanza nel sistema cardiovascolare. È anche il collagene del tessuto di granulazione. Viene prodotto velocemente ed in grandi quantità prima del collagene di tipo I, più resistente, da cui à ̈ successivamente sostituito; il IV compone la membrana basale.
Il collagene ottenuto per estrazione da tessuto connettivale bovino sottoposto a digestione enzimatica con collagenasi batterica genera frammenti di collagene (la cui miscela à ̈ definita idrolizzato di collagene) con pesi molecolari che vanno da 0,5 a 25 KDa. Tali frammenti sono oralmente biodisponibili per valori superiori al 90% della dose somministrata e dimostrano un importante tropismo per quei tessuti (derma e connettivo, cartilagini articolari, sinovia, ossa) ricchi in fibroblasti, condrociti, osteoblasti e cellule della sinovia. L’impiego orale di tale idrolizzato à ̈ inoltre descritto determinare vantaggi in ambito clinico (più rapida guarigione delle ferite cutanee, riduzione del danno articolare in pazienti artrosici, riduzione del dolore in atleti con traumi articolari e/o dei legamenti, rallentamento delle degenerazione osteoporotica in pazienti anziani con osteoporosi senile).
Tali vantaggi clinici sembrerebbero essere legati al riconoscimento molecolare, recettore mediato, di questi frammenti di collagene idrolizzato da parte delle specie cellulari prima descritte. In effetti, test in vitro hanno dimostrato come l’incubazione di una coltura di condrociti bovini con idrolizzato di collagene bovino aumenta, senza generare aspetti di proliferazione, l’efficienza nella deposizione di tessuto cartilagineo. Tale fenomeno risulterebbe inoltre totalmente non correlato alla tipologia di collagene impiegato ma solo in relazione alle cellule target impiegate. L’uso di idrolizzato di collagene di tipo I favorisce infatti tanto la deposizione di collagene di tipo I quanto quella di tipo II in dipendenza della coltura cellulare impiegata. Allo stesso modo mediante l’impiego di idrolizzato di collagene di tipo II si ottengono deposizioni di collagene di tipo I e di tipo II semplicemente per differente uso delle varie tipologie cellulari (i condrociti producono sempre tipo II; i fibroblasti sempre tipo I).
Descrizione dell’invenzione
Si à ̈ ora trovato che la deposizione di matrice extracellulare da parte di fibroblasti, condrociti, osteoblasti e cellule della sinovia à ̈ potenziata in maniera sinergica dalla presenza di idrolizzato di collagene, idrolizzato di elastina e vitamina C.
Oggetto dell’invenzione sono quindi le associazioni tra idrolizzato di collagene, idrolizzato di elastina e vitamina C il cui uso à ̈ finalizzato all’ottimizzazione dei processi di deposizione della matrice extracellulare a partire dall’attivazione di fibroblasti, condrociti, osteoblasti e di cellule della sinovia.
Tali processi risultano di vantaggio nelle prevenzione e nel trattamento di: 1) Striae rubrae dell’adolescente dovute a variazioni di peso
2) Striae gravidarum
3) Lupus eritematoso sistemico
4) Panarterite nodosa
5) Dermatomiosite
6) Lichen sclero-atrofico delle mucose
7) Cicatrici ipertrofiche o cheloidee post-chirurgiche o esiti di ustione 8) Esiti intervento in chirurgia plastica
9) Senescenza cutanea
10) Panniculopatie
11) Tendinopatie e miopatie
12) Traumatismi (menisco, legamenti, capsule articolari, fratture) 13) Artrosi (ginocchio, anca, lombo-sacrale)
14) Osteoporosi senile.
In particolare à ̈ risultata efficace l’associazione tra idrolizzato di collagene e idrolizzato di elastina in rapporto 10:1, indipendentemente dal dosaggio di vitamina C aggiunta.
Le composizioni dell’invenzione possono essere somministrate per via topica o orale. Formulazioni adatte per la via topica comprendono forme in crema, gel, unguento, emulsioni acqua/olio e viceversa, oppure spray per uso dermatologico, contenenti collagene in concentrazioni da 0,1 a 2%, preferibilmente da 1 a 2%; idrolizzato di elastina da 0,1 a 2%, preferibilmente da 0,1 a 0,5%; e vitamina C da 0,1 a 2%, preferibilmente da 0,5 a 1%.
Formulazioni adatte per uso orale sono compresse, capsule o polveri comprendenti tra 100 mg e 10 g, preferibilmente 5 g, di idrolizzato di collagene; tra 10 mg e 1 g, preferibilmente 500 mg, di idrolizzato di elastina; e da 1 a 1000 mg, preferibilmente da 5 a 200 mg, di vitamina C.
L’elastina idrolizzata si ottiene estraendo l’elastina dalla pelle dei pesci, denaturandola con il calore e sottoponendola quindi a digestione con elastasi batterica. Si ottengono peptidi idrosolubili del peso di circa 1400 Da che hanno la funzione di inibitori di elastasi. Potrebbero però anche avere funzione di attivatori cellulari parimenti a quanto osservato con il collagene idrolizzato.
Per verificarne il potenziale sinergico sono state preparate colture di fibroblasti umani coltivate con RPMI e FCS (5%), a 37°C, al 5% di ossigeno, al 5% di CO2 e al 90% di azoto molecolare. La coltura veniva considerata idonea al t=0 con un contenuto cellulare di 350.000 cellule/cm2. In queste condizioni si à ̈ verificata la capacità di neo-produzione di collagene impiegando (test A) idrolizzato di collagene di tipo I (1 mg/ml),(test B) idrolizzato di elastina (1 mg/ml), (test C) vitamina C (1 mg/ml) oppure A+B, A+C, B+C, A+B+C. Test D identifica invece la coltura in assenza di stimoli. Ogni test à ̈ stato eseguito in triplicato. L’analisi à ̈ stata eseguita dopo 7 giorni di coltura. I risultati hanno chiaramente dimostrato un notevole effetto additivo nel test A+B+C come mostrato in tabella 1.
---------------------------------------------------------------------------------------------Tabella 1. Produzione di collagene di tipo I in coltura di fibroblasti umani stimolata per 24 ore
Test µg di collagene/10<6>cellule p (vs test D) A 1.8±0.5 < 0.05
B 1.2±0.3 N.S
C 0.6±0.4 N.S.
A+B 4.2±1.1 < 0.01 A+C 1.9±0.8 < 0.05 B+C 1.4±0.6 N.S.
A+B+C 6.7±2.3 <0.01
D 0.8±0.3
---------------------------------------------------------------------------------------------Si à ̈ quindi verificato, nelle medesime condizioni sperimentali prima descritte, l’impiego di dosaggi diversi di A, B e C. In particolare riducendo del 90% i dosaggi dei 3 componenti oggetto dello studio. Come mostrato in tabella 2, l’idrolizzato di collagene (0,1 mg/ml) associato all’idrolizzato di elastina (0,1 mg/ml) e alla vitamina C (0,1 mg/ml) dimostra ottima capacità di stimolo alla produzione di neo-collagene.
Inoltre nel tentativo di evidenziare rapporti tra i dosaggi di idrolizzato di collagene e di elastina ancor più favorenti la sintesi di neo-collagene (non possono escludersi infatti fenomeni di competizione molecolare), si à ̈ verificata l’azione dei 2 idrolizzati in rapporto 1:1, in rapporto 10:1, in rapporto 100:1, in rapporto 1:10 e in rapporto 1:100 Come mostrato in tabella 3, l’uso del rapporto 10:1 a favore dell’idrolizzato di collagene ha dimostrato l’effetto migliore.
---------------------------------------------------------------------------------------------Tabella 2. Produzione di collagene di tipo I in coltura di fibroblasti umani stimolata per 24 ore impiegando dosaggi inferiori del 90% dei dosaggi impiegati nel test mostrato in tabella 1.
Test µg di collagene/10<6>cellule p (vs test D) A 0.8±0.3 N.S.
B 0.6±0.1 N.S
C 0.7±0.2 N.S.
A+B+C 5.2±1.1 < 0.01
D 0.7±0.4
---------------------------------------------------------------------------------------------Tabella 3. Produzione di collagene di tipo I in coltura di fibroblasti umani stimolata per 24 ore impiegando diversi rapporti di dosaggio tra idrolizzato di collagene e idrolizzato di elastina. In termini di dosaggio 1 identifica 0,1 mg/ml; 10 identifica 1 mg/ml e 100 identifica 10 mg/ml.
Test µg di collagene/10<6>cellule p (vs test D) 1:1 4.9±1.0 < 0.01 10:1 5.8±1.1 < 0.01 100:1 1.7±2.2 < 0.01 1:10 3.2±0.9 < 0.01 1:100 1.4±0.7 < 0.05
D 0.6±0.2
--------------------------------------------------------------------------------------------Di particolare rilievo poi la dimostrazione dell’utilità della vitamina C aggiunta nel test dove l’idrolizzato di collagene e quello di elastina veniva testate in rapporto 10:1. Nel test infatti, l’aggiunta di dosi di Vitamina C che andavano dallo 0,01 allo 0,5 produceva un incremento nella produzione di collagene di un ulteriore 25%, indipendentemente dal dosaggio di vitamina C impiegato (dati non mostrati).
Si riportano di seguito alcuni esempi di formulazioni dell’invenzione Esempio 1
Crema per uso topico:
-idrolizzato di collagene: 1%
-idrolizzato di elastina: 0,1%
-vitamina C: 0,5%
Esempio 2
Spray per uso dermatologico:
-idrolizzato di collagene : 0,5%
-idrolizzato di elastina: 0,05%
-vitamina C: 0,25%
Esempio 3
Polvere per bustine orale (mg/dose)
-idrolizzato di collagene: 5000 mg
-idrolizzato di elastina: 500 mg
Vitamina C: 12 mg.
Claims (6)
- RIVENDICAZIONI 1. Composizioni comprendenti idrolizzato di collagene, idrolizzato di elastina e vitamina C.
- 2. Composizioni secondo la rivendicazione 1 in forma di preparazioni topiche in crema, gel, unguento, emulsioni acqua/olio e viceversa, oppure spray per uso dermatologico.
- 3. Composizioni secondo la rivendicazione 2 contenenti idrolizzato di collagene in concentrazioni da 0,1 a 2%, preferibilmente da 1 a 2%; idrolizzato di elastina da 0,1 a 2%, preferibilmente da 0,1 a 0,5%; e vitamina C da 0,1 a 2%, preferibilmente da 0,5 a 1%.
- 4. Composizioni secondo la rivendicazione 1 per uso orale in forma di compresse, capsule o polveri.
- 5. Composizioni secondo la rivendicazione 4 comprendenti tra 100 mg e 10 g, preferibilmente 5 g, di idrolizzato di collagene; tra 10 mg e 1 g, preferibilmente 500 mg, di idrolizzato di elastina; e da 1 a 1000 mg, preferibilmente da 5 a 200 mg, di vitamina C.
- 6. Composizioni delle rivendicazioni 1-5 per uso nel trattamento finalizzato all’ottimizzazione dei processi di deposizione della matrice extracellulare a partire dall’attivazione di fibroblasti, condrociti, osteoblasti e di cellule della sinovia.
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