[go: up one dir, main page]

HUT77524A - Xa faktor gátló hatású N-szubsztituált glicinszármazékok - Google Patents

Xa faktor gátló hatású N-szubsztituált glicinszármazékok Download PDF

Info

Publication number
HUT77524A
HUT77524A HU9800071A HU9800071A HUT77524A HU T77524 A HUT77524 A HU T77524A HU 9800071 A HU9800071 A HU 9800071A HU 9800071 A HU9800071 A HU 9800071A HU T77524 A HUT77524 A HU T77524A
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
compound
substituted
mmol
alkyl
group
Prior art date
Application number
HU9800071A
Other languages
English (en)
Inventor
Matthew Mark Abelman
Todd Anthony Miller
Ruth Foelsche Nutt
Original Assignee
Corvas International, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US08/361,794 external-priority patent/US5696231A/en
Application filed by Corvas International, Inc. filed Critical Corvas International, Inc.
Publication of HUT77524A publication Critical patent/HUT77524A/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/01—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C311/10—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of a saturated carbon skeleton containing rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/01—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C311/12—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an unsaturated carbon skeleton containing rings
    • C07C311/13—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an unsaturated carbon skeleton containing rings the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C317/00—Sulfones; Sulfoxides
    • C07C317/44—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C317/48—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C317/00—Sulfones; Sulfoxides
    • C07C317/44—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C317/48—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C317/50—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups at least one of the nitrogen atoms being part of any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/50—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/51—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/57—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C323/58—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups with amino groups bound to the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/50—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/51—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/57—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C323/58—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups with amino groups bound to the carbon skeleton
    • C07C323/59—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups with amino groups bound to the carbon skeleton with acylated amino groups bound to the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/50—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/51—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/60—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton with the carbon atom of at least one of the carboxyl groups bound to nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/56—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/68—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D211/72—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/74—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/56—Amides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D451/00—Heterocyclic compounds containing 8-azabicyclo [3.2.1] octane, 9-azabicyclo [3.3.1] nonane, or 3-oxa-9-azatricyclo [3.3.1.0<2,4>] nonane ring systems, e.g. tropane or granatane alkaloids, scopolamine; Cyclic acetals thereof
    • C07D451/02—Heterocyclic compounds containing 8-azabicyclo [3.2.1] octane, 9-azabicyclo [3.3.1] nonane, or 3-oxa-9-azatricyclo [3.3.1.0<2,4>] nonane ring systems, e.g. tropane or granatane alkaloids, scopolamine; Cyclic acetals thereof containing not further condensed 8-azabicyclo [3.2.1] octane or 3-oxa-9-azatricyclo [3.3.1.0<2,4>] nonane ring systems, e.g. tropane; Cyclic acetals thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
    • C07K5/06043—Leu-amino acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0606—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing heteroatoms not provided for by C07K5/06086 - C07K5/06139, e.g. Ser, Met, Cys, Thr
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06086—Dipeptides with the first amino acid being basic
    • C07K5/06095—Arg-amino acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06104—Dipeptides with the first amino acid being acidic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06104—Dipeptides with the first amino acid being acidic
    • C07K5/06113—Asp- or Asn-amino acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
    • C07C2602/36—Systems containing two condensed rings the rings having more than two atoms in common
    • C07C2602/42—Systems containing two condensed rings the rings having more than two atoms in common the bicyclo ring system containing seven carbon atoms

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

- származékokra vonatkozik, amely képletben X jelentése S, Ο, N vagy P atomokat tartalmazó valamely kétértékű csoport, vagy vegyértékkötés,
Rí jelentése adott esetben szubsztituált alifás, aliciklusos, aromás vagy heterociklusos csoport,
R2 jelentése egy vagy több nitrogénatomot tartalmazó, adott esetben szubsztituált aromás, heterociklusos csoport vagy adott esetben szubsztituált Ο, N, S atomokat tartalmazó csoport,
R3 jelentése hidrogénatom, vagy adott esetben szubsztituált alkil-, ciklusos alkil- vagy arilcsoport, és
R4 jelentése hidrogénatom vagy adott esetben szubsztituált alkilcsoport.
A találmány szerinti (I) általános képletű vegyületek enzim gátló és különösen Xa faktor gátló hatásúak.
• *.
• ν« · ·
KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁN^
£.9 8 00 871
DANUBIA Szabadalmi és Védjegy Iroda Kft. Budapest
Xa faktor gátló hatású N-szubsztituált glicin-származékok
A találmány N-szubsztituált glicin-származékokra vonatkozik, amelyek Xa faktor gátló hatásúak, a találmány vonatkozik továbbá az ilyen vegyületeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítményekre is.
A találmány szerinti vegyületek új peptid aldehidek és ezek a vegyületek, gyógyászatilag elfogadható sóik, valamint ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények felhasználhatók a vérkoaguláció gátlására in vitro és in vivő emlősöknél. A találmány vonatkozik továbbá ezen inhibitorok mint terápisi szerek alkalmazására abnormális trombózisos állapotokkal jellemzett emlősök kezelésére. A találmány vonatkozik továbbá ezen inhibitorok alkalmazására in vitro diagnosztikai szerként.
A normál hemostasis (vérzéscsillapítás) egy érzékeny egyensúly eredménye a rögképződés (vérkoaguláció, véralvadás) és a rögoldódás (fibrinolisis) között. A vérsejtek a specifikus plazma proteinek és az érfelületek közötti komplex együtthatás tartja fenn a vér folyékonyságát, hacsak károsodás nem történik. Az érfalakat beborító endotheliális gát károsodása az alatta fekvő szöveteket ezen vérkomponensek hatásának teszi ki. Ez viszont egy sorozat biokémiai reakciót indít meg, ami megváltoztatja a hemosztatikus egyensúlyt, eltolva a vérkoaguláció felé, ami vagy egy kívánt hemosztatikus dugasz kialakulását eredményezi, ami a vér folyását elzárja vagy pedig nem kívánatos elzá85873-3507 OE/Hoj ζ* &
-2ró hatású intravaszkuláris trombusok kialakulását eredményezi, aminek következménye a megtámadott szervhez a véráramlás teljes vagy részleges akadályoztatása.
A véralvadás válasz egy sor kiterjedt reakció összegződése, amelynél különböző speicifkus zymogének és szerin proteázok aktiválódnak a plazmában egy korlátozott proteolízissel. Ez a reakciósor oldhatatlan mátrixok kialakulását eredményezi, amely fibrinből és celluláris komponensekből áll, ami szükséges a primer hemosztatikus dugó vagy trombózis stabilizálásához. A proteolitikus aktiválási reakciók megindulása és tovább fejlődése egy sor kiterjedt pályán megy végbe amelyek membrán felületekhez lokalizálódnak a vaszkuláris sérülés helyénél (MannK.G. , Nesheim M.E., Church W.R., Haley P. és Krishnaswamy S. (1990) Blood 76: 1-16. és Lawson J.H., Kalafatis M., Stram S., és Mann K.G. (1994) J. Bioi. Chem.
269: 23357-23366). A vaszkuláris sérülésre bekövetkező vérkoaguláció megindulást egy katalitikus komplex kialakulása követi, amely a szerin proteáz Vlla faktorból és a nem-enzimatikus kofaktorból, a szövet faktorból (TF, tissue factor) áll (S.I. és Rao L.V.M. (1992) Arteriosclerosis and Thrombosis 12: 1112-1121). Ezt a választ úgy tűnik kizárólag a szubendoteliális TF szabályozza a Vlla faktor és annak zymogénje a VII faktor cirkuláló szintjének jelzésével és ezt követően a vaszkuláris integritás fokális megromlásával. Az autoaktiváció a faktor VIIa/TF komplexek számának növekedését eredményezi, amely komplexek felelősek a szerin proteáz Xa faktor kialakulásáért. Úgy gondolják, hogy a faktor VIIa/TF komplex mellett a képződő kis mennyiségű faktor Xa indítja a ··*· ···· k A ······« ········ s
koagulációs választ a faktor IX faktor IXaifa faktorrá történő proteolitikus módosítása révén, amely utóbbi faktor viszont az aktív szerinti proteáz faktor IXab faktorrá alakul a faktor VIIa/TF komplex révén (Mann K.G., Krishnaswamy S. és Lawson J.H. (1992) Sem. Hematology 29: 213-226). A IXab faktor az aktivált Villa faktorral komplexban felelős feltehetően a Xa faktor szignifikáns mennyiségben való képződéséért, amely faktor katalizálja a vérkoagulációs sorozat utolsó előtti lépését; a szerin proteáz trombin kialakulását.
A Xa faktor katalizálja a trombin képződést a protrombináz komplex kialakulását követően, amely a Xa faktorból, a nem-enzimatikus Va ko-faktorból és a szubsztrátum protrombinból (II faktor) áll, és amely legtöbb esetben a sérülés helyén megtapadt vérlemezkék felületén alakul ki (Fuster V., Badimon L., Badimon J.J. és Chesebro J.H. (1992) New Engl. J. Med. 326: 310-318). Az artériás érrendszerben kialakult robbanásszerű trombin képződés, amit a protrombináz katalizál, helyileg feldúsítja ezt a proteázt, ami felelős a fibrin kialakulásáért és további vérlemezkék bevonásáért, valamint a rögök kovalens stabilizálásáért a transzglutamináz zymogén faktor XIII aktiválása révén. Továbbá, a koagulációs válasz tovább terjed a nem-enzimatikus kofaktor V és VIII trombin-közvetített proteolitikus feedback aktiválása révén, ami további protrombináz kialakulást és ezt követően trombin képződést eredményez (Hemker H.C. és Kessels H. (1991) Haemostasis 21: 189-196.
Azok a vegyületek, amelyek beleszólnak a vérkoagulációs folyamatba (antikoagulánsok) igen fontos terápiás szerek a
-4(L' ι
trombotikus betegségek kezelésében és megelőzésében (Kessler
C.M. (1991) Chest 99: 97S-112S és Caims J.A., Hirsh J., Lewis H.D., Resnekov L., és Theroux P. (1992) Chest 102: 456S-481S). A jelenleg elfogadott klinikai antikoagulánsok számos hátrányos hatással rendelkeznek a relatíve nem-specifikus tulajdonságuknak köszönhetően, amelyet a vérkoagulációs kaszkádra fejtenek ki (Levine M.N., Hirsh J., Landefeld S. és Raskob G. (1992) Chest 102: 352S-363S). Ez további igényt jelent még hatásosabb antikoaguláns szerek kifejlesztésére, amelyek még hatásosabban szabályozzák a koagulációs kaszkád aktivitását azáltal, hogy szelektíve szólnak bele specifikus reakciók révén a folyamatba és ezek pozitív hatással lehetnek az antikoaguláns terápiával kapcsolatos komplikációk csökkentésében (Weitz J., Hirsh J. (1993) J. Láb. Clin. Med. 122: 364-373). Ezek a kutatások továbbá a normál humán proteinekre is irányulnak, amely proteinek endogén antikoagulánsként hatnak a vérkoagulációs kaszkád aktivitásának szabályozásában. Vizsgáltak továbbá különböző hematofág szerveket, mivel ezek képesek hatásosan gátolni a vér koagulációját a betáplálásuk alatt vagy azt követően és ez jelzi, hogy egy hatásos antikoaguláns folyamat alakulhat ki, és ezért hatásosak lehetnek terápiás szerként.
Leírták, hogy a plazma protein Lipoprotein-Associated Coagulation Inhibitor (LACI) vagy ahogy az utóbbi időben nevezik, a Tissue Factor Pathwy Inhibitor (TFPI), amely három egymás utáni Kunitz domént tartalmaz közvetlenül gátolja a faktor Xa enzim aktivitást és faktor Xa-függő módon gátolja a faktor Vlla-szövet faktor komplex enzim aktivitását (Salvensen • · · · · • · · · · ···· ···· ζ
V
G., és Pizzo S.V., Proteinase Inhibitors: a-Macroglobulines, Serpins, and Kunis, Hemostasis and Thrombosis, 3. kiadás, 251-253 J.B. Lippincott Company (R. W. Colman és mtársai, 1994). Leírták azt is, hogy a TFPI-t kódoló cDNS szekvencia és a klónozott protein molekulatömege 31950 dalton és 276 aminosavat tartalmaz (Broze G.J. és Girad T.J., US 5 106 833, 1. oszlop (1992)). Különböző TFPI-ből származtatott rekombináns proteineket is ismertettek (Girad T.J. és Broze G.J. EP 439 442 (1991), Rasmussen J.S. és Nordfand O.J., WO-91/02753 (1991), és Broze G.J. és .Girad T.J., US 5 106 833, 1. oszlop (1992)).
Az antistasin egy protein, amely 119 aminosavat tartalmaz és a mexikói pióca (Haementeria offícinalis) nyálmirigyében található Xa faktor enzim aktivitás gátló hatású (Tiszynski és mtársai (1987) J. Bioi. Chem., 262: 9718, Nutt és mtársai, (1988) J. Bioi, Chem., 263: 10162). A 6000 dalton molekulatömegű rekombináns protein, amely 58 aminosavat tartalmaz és nagymértékben homológ az antistasin amino terminusánál lévő 1-58 aminosawal, szintén gátolja a Xa faktor enzim aktivitást (Tung J. és mtársai, EP 454 372 (1991), Tung J. és mtársai,
US 5 189 019 (1993).
A Tick Anticoagulant Protein (TÁP) egy 60 aminosavból álló protein, amelyet az Ornithodoros moubata-ból izoláltak és amely szintén gátolja a faktor Xa enzim aktivitást, de nem gátolja a faktor Vlla enzim aktivitást (Waxman L. és mtársai (1990) Science, 248:593). A rekombináns módszerrel előállított TAP-t is ismertették (Vlausk G.P. és mtársai, EP 419 099 (1991) és Vlausk G.P. és mtársai, US 5 239 058 (1993)).
-6A kutya horogféreg (Ancylostoma caninum), amely humán egyedeket is megfertőzhet, hatásos antikoaguláns anyagot tartalmaz, mint azt leírták. E szerint az A. caninum olyan anyagot tartalmaz, amely gátolja in vitro a vér koagulációját (Loeb L. és Smith A.J. (1904) Proc. Pathol. Soc. Philadelphia, 7:173-178) Leírták, hogy az A. caninumból származó extraktum megnöveli a protrombin időt és a parciális tromboplasztin időt a humán plazmában és antikoaguláns hatású, ami a faktor Xa inhibició gátlásának, de nem a trombin gátlásának tudható be (Spellman Jr. J.J. és Nőssel H.L. (1971) AM. J. Physiol., 220:922-927). Az utóbbi időben A. caninumból származó oldható protein extraktumot ismertettek, amely megnöveli a ptrotrombin időt és a parciális tromboplasztin időt a humán plazmában in vitro. Az ismertetés szerint az antikoaguláns hatás a humán faktor Xa gátlásának, de nem a trombin gátlásának tudható be (Cappello M. és mtársai (1993) J. Infect. Diseases, 167:1474-1477).
A találmányunk új vegyületekre vonatkozik, amelyek peptid argininálok és amelyek a peptid váz részeként N-szubsztituált glicincsoportokat tartalmaznak. Ezek a vegyületek hatásosan gátolják a Xa faktort in vivő és in vitro.
A találmány szerinti vegyületeket az (I) általános képlettel írjuk le, amely képletben
a) X jelentése -S(O)2-, -N(R')-S(O)2-, -(C=O)-, -OC(=O)-, -NH-C(=O)-, -P(O)(R)-csoport, továbbá lehet vegyértékkötés, a csoportokban
R' jelentése hidrogénatom, 1-4 szénatomos alkil-, 6-14 szénatomos aril- vagy 6-16 szénatomos aralkilcsoport, és • ·
R jelentése NR', OR', R' vagy SR' csoport, azzal a megkötéssel, hogy R jelentése NH, OH, H vagy SH csoporttól eltérő,
b) Rí jelentése;
1) 1-12 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben Yi csoporttal szubsztituálva van,
2) 1-3 szénatomos alkilcsoport, amely 5-8 szénatomos ciklusos alkilcsoporttal szubsztituálva van, amely adott esetben a gyűrűn Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal szubsztituálva van,
3) 3-15 szénatomos ciklusos alkilcsoport, amely adott esetben a gyűrűn Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal szubsztituálva van,
4) 4-10-tagú heterociklusos alkilcsoport, ahol a gyűrű szén- és heteroatomokat tartalmaz és a heteroatom oxigén-, nitrogén- és S(O)j, ahol i értéke 0, 1 vagy 2, és amely a gyűrűn adott esetben Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal szubsztituálva van,
5) 4-10-tagú heterociklusos csoport, amely szén- és heteroatomokat tartalmaz és a heteroatom oxigén-, nitrogén- és S(O)i, beleértve a -N V ahol -N V jelentése 5-7-tagú heterociklusos csoport, amely 3-6 szénatomot tartalmaz a gyűrűben és V jelentése -CH2-, -O-, -S(=O)-, -S(O)2 vagy S és amely adott esetben a gyűrű szénatomon Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal szubsztituálva van,
6) 2-6 szénatomos alkenilcsoport, amely adott esetben
5-8 szénatomos ciklusos alkilcsoporttal
-8··· · ···· szubsztituálva van, amely gyűrű szénatomján Yb Y2 és/vagy Y3 csoporttal adott esetben szubsztituáiva van,
7) 6-14 szénatomos arilcsoport, amely adott esetben mono-, di- vagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal,
8) 5-14-tagú heteroarilcsoport, amely szénatomokat és heteroatomokat tartalmaz és a heteroatom oxigén-, nitrogén- és S(O)i, és amely gyűrű adott esetben mono-, di- vagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal,
9) 7-15 szénatomos aralkilcsoport, amely adott esetben az alkil-láncon hidroxilcsoporttal vagy halogénatommal szubsztituált és az arilgyűrűn mono-, di- vagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal,
10) 6-11 szénatomos heteroaralkil-csoport, amely szénés heteroatomokat tartalmaz és a heteroatom oxigén-, nitrogén- és S(O), és amely adott esetben az alkilláncon hidroxilcsoporttal vagy halogénatommaí szubsztituált, és a gyűrűn adott esetben mono-, divagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal,
11) 8-15 szénatomos aralkenil-csoport, amely adott esetben az arilgyűrűn mono-, di- vagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal,
12) 7-12-tagú heteroaralkenil-csoport, amely a gyűrűben szén- és heteroatomokat tartalmaz és a heteroatom oxigén-, nitrogén- és S(O)i és amely i
-9·· • ·· · adott esetben a gyűrűn mono-, di- vagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal,
13) (a) képletű csoport,
14) (b) képletű csoport,
15) (c) képletű csoport,
16) (d) képletű csoport,
17) difluor-metil- vagy 1-12 szénatomos perfluor-alkil-csoport,
18) 6-14 szénatomos perfluor-aril-csoport,
19) 7-15 szénatomos perfluor-aralkil-csoport, és
20) hidrogénatom,
Yi, Y2 és Y3 jelentése (i) egymástól függetlenül valamely következő csoport: halogénatom, ciano-, nitro-, tetrazolil-, amino-, guanidino-, amidino-, metil-amino- vagy metil-guanidino-csoport, -CF3, -CF2CF3, -CH(CF3)2, -C(OH)(CF3)2, -OCF3, -OCF2CF3, -OC(O)NH2, -OC(O)NHZi, -OC(O)NZiZ2, -NHC(O)Zi, -NHC(O)NH2, -NHC(O)NZi, -NHC(O)NZiZ2, -C(O)OH, -C(O)OZb -P(O)3H, P(O)3H2, -P(O)3(Z!)2, -S(O)3H, -S(O)mZ,, -Zb -OZj, -OH, -NH2, -NHZi és -NZjZ2-csoport és N-morfolino-csoport, amely csoportokban m értéke 0, 1 vagy 2 és Zi és Z2 jelentése egymástól függetlenül 1-12 szénatomos akii-, 6-14 szénatomos aril-, 5-14-tagú heteroaril-csoport, amely 1 -9 szénatomot tartalmaz, 7-15 szénatomos aralkil-, 6-11-tagú heteroaralkil-csoport, amely 3-9 szénatomot tartalmaz, vagy
-10(ii) Υι és Υ2 jelentése együttesen -OC(Z3)(Z4)O-csoport, ahol Z3 és Z4 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, 1-12 szénatomos alkil-, 6-14 szénatomos aril-, 5-14-tagú heteroaril-csoport, amely 1-9 szénatomot tartalmaz, 7-15 szénatomos aralkil-, 6-11-tagú heteroaralkil-csoport, amely 3-9 szénatomot tartalmaz, azzal a megkötéssel, hogy ha X jelentése vegyértékkötéstől eltérő, akkor Rí jelentése hidrogénatomtól eltérő,
c) R2 jelentése (e), (f) vagy (g) általános képletű csoport, hidrogénatom, -(CH2)pNHC(=NH)NH2, -(CH2)PS(O)2CH3, -(CH2)PC(O)Z5, -(CH2)PC(O)OZ6, -(CH2)PC(O)NZ6, -CH2S(O)2(CH2)PC(O)Z5, -CH2S(O)2(CH2)PC(O)OZ6, -CH2S(O)2(CH2)pC(O)NR5R6, -(CH2)PS(O)2Z6, -(CH2)PNH2, -(CH2)PC(O)NR5R6, -(CH2)POZ6 és -(CH2)PC(O) -N A , amely képletekben p értéke 1-6,
Z5 jelentése -OH, -OCH3, -OCH2CH3 vagy -NR5R6 képletű csoport,
Zö jelentése 1-4 szénatomos alkil-, 6-14 szénatomos arilvagy 7-16 szénatomos aralkilcsoport,
R5 jelentése hidrogénatom vagy Zó,
R6 jelentése hidrogénatom vagy 3-15 szénatomos ciklusos alkilcsoport, amely adott esetben mono-, di- vagy triszubsztituált Yj, Y2 és/vagy Y3 csoporttal, 7-15 szénatomos aralkilcsoport, amely adott esetben mono-, di- vagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal, 5-14-tagú heteroaril-csoport, ahol a gyűrű
- 11 • ·· · szén- és heteroatomokat tartalmaz és a heteroatom oxigén-, nitrogén- és S(O)i, és amely adott esetben mono-, di- vagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal, kinuklidil- vagy adamantil-csoport,
-N A jelentése 6,7-dimetoxi-l,2,3,4-tetrahidroizokinolinil-, 4-hidroxi-piperidin-, 4-keto-piperidil-, N-morfolino-, 3,4-metilén-dioxi-benzil-piperazinil-,
4-fenil-piperazinil-csoport, amely adott esetben fluor-, klór-, metoxi- vagy trifluor-metil-csoporttal szubsztituálva van, vagy 4-benzil-piperazinil-, amely adott esetben monoszubsztituált fluor-, klór-, metoxivagy trifluor-metil-csoporttal, és a fenti csoportok gyógyászatilag elfogadható kvaterner ammóniumsói,
d) R3 jelentése:
(1) hidrogénatom, (2) 1-8 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben OH csoporttal szubsztituál van, (3) 3-10 szénatomos ciklusos alkilcsoport, (4) 1-3 szénatomos alkilcsoport, amely 5-8 szénatomos ciklusos alkilcsoporttal szubsztituálva van, (5) 3-10 szénatomos arilcsoport, amely adott esetben mono-, di- vagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal, (6) 1-3 szénatomos alkilcsoport, amely a terminális szénatomon 4-10 szénatomos arilcsporttal szubsztituálva van, amely adott esetben mono-, divagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal, • ·
-12(7) 1-6 szénatomos alkilcsoport, amely alfa, béta, gamma vagy delta helyzetben 1-6 szénatomos leágazó alkilcsoportot tartalmaz, és
d) R4 jelentése hidrogénatom, adott esetben OH csoporttal szubsztituált 1-7 szénatomos alkilcsoport vagy benzil-oxi- vagy 1 -3 szénatomos alkilcsoport amely a terminális szénatomon 4-10 szénatomos arilcsoporttal szubsztituálva van, amely adott esetben mono-, di- vagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal.
Ismert, hogy a peptidil-arginin-aldehidek egyensúlyi szerkezeteket mutatnak vizes oldatban (Bajusz S. és mtársai (1990)
J. Med. Chem., 33: 1729). Ezek a szerkezetek, amelyeket az A reakcióvázlaton mutatunk be, vonatkoznak az (A) képletű arginin-aledhidre, a (B) képletű aldehid-hidrátra, valamint a (C) és (D) képletű két amino-ciklol formára. A képletekben R jelentése a találmány szerinti vegyületek körébe tartozó vegyületet képviselő csoportj. A találmány szerinti peptid-aldehidek magukban foglalják ezeket az egyensúlyi formákat.
Több egyéb között a találmány szerinti felismerés az, hogy a találmány szerinti új vegyületek hatásos Xa faktor inhibitorok in vivő és in vitro. Különösen azt találtuk, hogy bizonyos előnyös találmány szerinti vegyületek különösen előnyös szelektivitást mutatnak arra vonatkozóan, hogy igen hatásos Xa faktor gátlók, de inaktívak vagy jelentősen kisebb aktivitásúak (több nagyságrenddel) a plazmin gátlásában és szignifikáns mértékben kisebb aktivitásúak trombin gátlásában.
A találmány vonatkozik továbbá a találmány szerinti vegyületeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítményekre
-13··*· ·· · ·· is, amelyek még a hatóanyag mellett gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyagot tartalmaznak.
A találmány vonatkozik továbbá a találmány szerinti vegyületek és gyógyszerkészítmények alkalmazására emlősöknél trombózis meggátlására olyan esetekben, amelyek abnormális trombózis tüneteit mutatják, ennél az alkalmazásnál az emlősöknek a találmány szerinti vegyületek vagy gyógyszerkészítmények terápiásán hatásos mennyiségét adagoljuk.
A fenti (I) általános képletű vegyületeknél, hacsak másképpen nem jelöljük, az egyes csoportok a következőket jelentik.
Az alkenilcsoport telítetlen alifás csoport, amely legalább egy kettőskötést tartalmaz.
Az alkilcsoport telített alifás csoportokat jelent, amelyek lehetnek egyenes láncú, elágazó láncú vagy ciklusos csoportok.
Az alkoxi- és alkoxilcsoport R-O-általános képletű csoportokat jelent, ahol R jelentése alkilcsoport.
Az alkoxi-karbonil-csoport -C(O)OR csoportokat jelentenél, ahol R jelentése alkilcsoport.
Az aralkenil-csoport alkenilcsoportot jelent, amely arilcsoporttal szubsztituálva van.
Az aralkil-csoport alkilcsoportot jelent, amely arilcsoporttal szubsztituálva van, előnyös aralkilcsoportok például a benzilés pikolil- vagy más hasonló csoportok, amelyek mindegyike adott esetben még szubsztituálva is lehet.
Az arilcsoport aromás csoportokat jelent, amely legalább egy gyűrűből áll, amely konjugált pi elektron rendszerű és lehet karbociklusos aril-, heterociklusos aril- és biaril-csoport, amelyek mindegyike adott esetben még szubsztituálva lehet.
-14····
Az aril-oxi-csoport R-O- csoportot jelent, ahol R jelentése arilcsoport.
Az aralkoxi-csoport R-O- általános képletű csoportot jelent, ahol R jelentése aralkilcsoport.
Az aminosav kifejezés utal mind természetes, mind nem természetes aminosavakra, azok D és L formájira, ha azok szerkezeti ilyen sztereoizomer formákat lehetővé tesz, valamint ezek analógjaira. A természetes aminosavak közé tartoznak a következők: alanin (Alá), arginin (Arg), aszpargin (Asn), aszpartinsav (Asp), cisztein (Cys), glutamin (Gin), glutaminsav (Glu), glicin (Gly), hisztidin (His), izoleucin (Ile), leucin (Leu), lizin (Lys), metionin (Met), fenilalanin (Phe), prolin (Pro), szerin (Ser), threonin (Thr), triptofán (Trp), tirozin (Tyr) és valin (Val). A nem természetes aminosavak közé tartoznak, a korlátozás szándéka nélkül például a következők: azetidin-karbonsav, 2-amino-adipinsav, 3-amino-adipinsav, β-alanin, amino-propionsav,
2-amino-vajsav, 4-amino-vajsav, 6-amino-kapronsav,
2-amino-heptánonsav, 2-amino-izovajsav, 3-amino-izovajsav,
2-amino-pimelinsav, 2,4-diamino-izovajsav, dezmozin, 2,2’-diamino-pimelinsav, 2,3-diamino-propionsav, N-etil-glicin, N-etil-aszparagin, hidroxi-lizin, allo-hidroxi-lizin, 3-hidroxi-prolin, 4-hidroxi-prolin, izodezmozin, allo-izleucin, N-metil-glicin, N-metil-izoieucin, N-metil-valin, norvalin, norleucin, ornitin és pipekolinsav. Az aminosav analógok lehetnek természetes vagy nem-természetes aminosavak, amelyek reverzibilisen vagy irreverzibilisen kémiailag blokkolva vannak vagy az N-terminális aminocsoporton vagy valamely oldalláncúkon módosítottak, ilyenek például a következők: metionin-szulfoxid,
-15··«· *·' metionin-szulfon, S-(karboxi-metil)-cisztein, S-(karboxi-metil)-cisztein-szulfoxid vagy S-(karboxi-metil)-cisztein-szulfon.
Az aminosav analóg kifejezés egy aminosavra vonatkozik, amelyeknél vagy a C-terminális karboxicsoport, az N-terminális aminocsoport vagy az oldallánc valamely funkciós csoportja kémialag át van alakítva egy másik funkciós csoporttá, így például az aszpartinsav-(p-metilészter) egy aszpartinsav analóg; az N-etil-glicin egy glicin analóg, az alanin-karboxamid az alanin aminosav analógja.
Az aminosav-maradék a következő szerkezetű csoportra utal: (1) -C(O)-R-NH-, ahol R jelentése általában -CH(R')-, ahol R' jelentése H vagy egy széntartalmú (h) képletnek megfelelő csoport, ahol p értéke 2 vagy 3; vagy (2) egy azetidin-karbonsav-, prolin- vagy pipekolinsav-maradékot jelent.
A biaril-csoport fenilcsoportot jelent, amely karbociklusos vagy heterociklusos valamely fenti csoporttal szubsztituálva van orto-, méta- vagy para-helyzetben a fenilcsoport kapcsolódási helyéhez viszonyítva.
A sóoldat kifejezés nátrium-klorid vizes, telített oldatára utal.
A kámforcsoport (a), (b), (c) vagy (d) képletű csoportot jelent.
A karbociklusos aril-csoport egy aromás csoportot jelent, ahol az aromás gyűrű tagjai szénatomok. A karbociklusos arilcsoportok lehetnek monociklusos, karbociklusos arilcsoportok, vagy naftilcsoport amelyek mindegyike adott esetben szubsztituálva lehet. Alkalmas karbociklusos arilcsoportok közé tartozik a fenil- és naftilcsoport. Az előnyös •·
- 16» ·>*♦ • · · *·♦ * » ·· v «« szubsztituált karbociklusos arilcsoportok közé tartoznak például az indén- és fenilcsoportok, amelyek a következő csoporttal szubsztituálva lehetnek: rövid szénláncú alkil-, hidroxi-, rövid szénláncú alkoxi-, rövid szénláncú alkoxi-karbonil-, halogén-, trifluor-metil-, nitro- vagy cianocsoport. A szubsztituált naftilcsoport lehet 1- vagy 2-naftilcsoport, amely rövid szénláncú alkil-, alkoxi- vagy halogénatommal szubsztituálva van.
A cikloalkenil-csoport ciklusos alkenilcsoportot jelent, előnyösen például a ciklopentenil- vagy ciklohexenil-csoport.
A cikloalkilcsoport ciklusos alkilcsoportot jelent, előnyösen például a ciklohexil-, ciklopropil-, ciklopentil- vagy cikloheptil-csoport.
A ciklohexil-metil-csoport ciklohexil-csoportot jelent, amely egy CH2 csoporthoz kapcsolódik.
A halogénatom jelentése fluor-, klór-, bróm- vagy jódatom.
A heteroaralkenil-csoport alkenilcsoportot jelent, amely heteroaril-csoporttal szubsztituálva van.
A heteroaril-csoport 1-9 szénatomot és heteroatomokat tartalmazó arilcsoportot jelent. Alkalmas heteroatom például az oxigén-, nitrogén- és S(O)i, ahol i értéke 0, 1 vagy 2, és a heterociklusos arilcsoport lehet például a furanil-, tienil-, piridil-, pirrolil-, pirimidil-, pirazinil-, imidazolil-, stb. csoportok.
A heterociklusos csoport egy redukált heterociklusos gyűrűrendszerre vonatkozik, amely szén-, nitrogén-, oxigén- és/vagy kénatomokat tartalmaz.
A heterocikloalkil-csoport alkilcsoportot jelent, amely egy heterociklusos csoporttal szubsztituálva van, ilyen heterociklusos csoportokat ismertetnek például a következő irodalmi he-17lyen: Handbook of Chemistry and Physics, 49. kiadás, 1968, R.C. Weast, kiadó; The Chemical Rubber Co., Cleveland, OH; különösen Section C, Rules fór Naming Organic Compounds, B. Fundamental Heterocyclic Systems.
A rövid szénláncú kifejezés az említett szerves csoportokkal kapcsolatban azt jelenti, hogy a csoport max. 5, előnyösen 4, különösen előnyösen 2 szénatomot tartalmaz. Ezek a szénatomok lehetnek egyenes vagy elágazó láncúak.
A perfluor-alkil-csoport olyan alkilcsoportot jelent, amelyben minden hidrogén- fluoratommal van helyettesítve.
A perfluor-aril-csoport olyan arilcsoportot jelent, amelynél mindegyik hidrogén fluoratommal helyettesítve van.
A perfluor-aril-alkil-csoport aralkilcsoportot jelent, ahol minden hidrogénatom az arilcsoporton fluoratommal helyettesítve van.
A gyógyszerészetileg elfogadható só kifejezés vonatkozik a találmány szerinti vegyületek sóira, amelyeket egy szerves vagy szervetlen savval nyerünk. A gyakorlatban a sók alkalmazása azonos értékű a bázisformákkal.
A találmány szerinti vegyületek alkalmazhatók mind a szabad bázis, mind a só formában és midegyik forma a találmány oltalmi körébe tartozik.
A kvatemer ammóniumsó olyan vegyületre vonatkozik, amelynél a bázikus nitrogénatomot az R2 szubsztituensen egy alkil-halogéniddel, egy aril-halogeniddel vagy egy aralkil-halogeniddel reagáltatunk. Egyéb reagensek, amelyek könnyen lehasadó csoportokat tartalmaznak szintén alklamazhatók, ilyenek például az alkil-trifluor-metánszulfonátok, alkil- 18t
V
-metánszulfonátok, valamint alkil-p-toluolszulfonátok. A kvaterner ammóniumsó egy pozitív töltésű nitrogént tartalmaz az R-2 szubsztituensen. A gyógyszerészetileg elfogadható eílenionok közé tartozik a Cl, Br, I, CF3C(O)O- és CH3CO(0)0-csoport. A kívánt elleniont ioncserélő oszlopon való cserével tudjuk kialakítani. A bázikus nitrogénatomot tartalmazó R2 csoportok közé tartozik a CH2CH2CH2NHC(=NH)NH2, a (g‘) képletű csoport, a -(CH2)PNH2 képletű csoport, ahol p jelentése a fenti. A következő R2 csoportok is tartalmazhatnak bázikus nitrogénatomokat: -CH2S(O)2(CH2)PC(O)Z5, -(CH2)PS(O)2Z6, -(CH2)PC(O)NR5R6, és-(CH2)PC(O) -N^A csoport, ahol Z5, Z6, R5, Ró, N^Ajelentése azonos a fentiekben az (I) általános képletnél megadottakkal. Például a következő R6 csoportok tartalmaznak bázikus aminokat: 3-(R)-kinuklidin-, 3-(S)-kinuklidin,
3-il-2-etil-4(3H)-kinazlinon, etií-morfolin, etil-piperidin,
2-(2-etil)-piridin, valamint 4-(metil)-5-hidroxi-6-metil-3-piridin-metanol.
Az Arg-al meghatározás egy L-arginial-maradékra utal, amelyet az (i) képlettel írjuk le. Az N-alfa-terc-butoxi-karbonil-N8-nitro-L-arginin kifejezés egy (j) képletű vegyületre utal.
A bázikus nitrogénatomot tartalmazó R2 csoportok közé tartoznak például a következők: -CH2CH2CH2NHC(=NH) NH2, (g') képletű csoport és -(CH2)PNH2 csoport, ahol p értéke azonos a fentiekben megadottakkal, továbbá a következő R2 csoportok tartalmazhatnak még bázikus nitrogénatomokat:
-CH2S(O)2(CH2)PC(O)Z5, -(CH2)PS(O)2Z6, -(CH2)PC(O)NR5R6, és -(CH2)pC(0) -N A csoport, ahol Z5, Z6, R5, Ró, N A amely
- 19képletekben Z5, Z6, R5, R6 és N A azonos a fentiekben megadottakkal.
Például a következő Ró csoportok tartalmazhatnak bázikus aminokat: 3-(R)-kinuklidin-, 3-(S)-kinuklidin,
3-il-2-etil-4(3H)-kinazlinon, etil-morfolin, etil-piperidin,
2-(2-etil)-piridin, valamint 4-(metil)-5-hidroxi-6-metil-3 -piridin-metanol.
A terminális szénatom az egyenes láncú alkilcsoport végén az alap szerkezettől legtávolabb elhelyezkedő szénatomra utal.
A leírás során alkalmazott rövidítések a következőket jelentik:
Boc jelentése terc-butoxi-karbonil-csoport.
BOP jelentése benzotriazol-l-il-oxi-trisz(dimetil-amino)-foszfonium-hexafluor-foszfát-csoport.
BzlSO2 jelentése benzilszulfonil-csoport.
DCC jelentése N,N'-diciklohexil-karbodiimid-csoport.
EDC jelentése l-etil-3-(3-dimetil-amino-propil)-karbodiimid-hidrokloridsó.
HATU jelentése O-(7-azabenztriazol-l-il)-1,1,3,3-tetrametil-uronium-hexafluor-foszfát.
HBTU jelentése 2-( 1 H-benztriazol-1 -il)-1,1,3,3-tetrametil-uronium-hexafluor-foszfát.
HCI jelentése sósav.
HOAt jelentése 1 -hidroxi-7-azabenztriazol.
HOBt jelentése 1 -hidroxi-benztriazol-monohidrát.
HPLC jelentése nagynyomású folyadékkromatográfía.
L1AIH4 jelentése lítium-alumínium-hidrid.
LiAlH2(OEt)2 jelentése lítium-alumínium-dihidrid-dietoxid.
-20ΝΜΜ jelentése N-metil-morfolin.
NaOH jelentése nátrium-hidroxid.
THF jelentése tetrahidrofurán.
TBTU jelentése 2-(lH-benztriazol-l-il)-l,l,3,3-tetrametil-uronium-tetrafluor-borát.
TLC jelentése vékonyréteg-kromatográfía.
1. Előnyös találmány szerinti vegyületek Előnyösek azok az (I) általános képletű vegyületek, amelyek képletében (a) X jelentése -S(O)2-, -N(R’)-S(O)2-, -(C=O)-, -OC(=O)-,
-NH-C(=O)-, -P(O)(R”)- csoport vagy vegyértékkötés, a csoportokban R’ jelentése hidrogénatom, 1-4 szénatomos alkil-, 3-14 szénatomos aril- vagy 6-16 szénatomos aralkilcsoport, R” jelentése NR’, OR’, R’ vagy SR’ csoport, azzal a megkötéssel, hogy R” NH, OH, H vagy SH csoporttól eltérő;
(b) Rí jelentése valamely következő csoport:
(1) 1-12 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben Yi csoporttal szubsztituálva van, (2) 1-3 szénatomos alkilcsoport, amely 5-8 szénatomos ciklusos alkilcsoporttal szubsztituálva van, amely utóbbi csoport adott esetben a gyűrűn Yj, Y2 és/vagy Y3 csoporttal szubsztituálva van, (3) 3-15 szénatomos ciklusos alkilcsoport, amely adott esteben a gyűrűn Yb Y2 és/vagy Y3 csoporttal szubsztituálva van, (4) 4-10-tagú heterocikloalkil-csoport, amely a gyűrűben szén- és heteroatomokat tartalmaz és a heteroatom i
• · ··
-21 lehet oxigén-, nitrogén- és S(O),, ahol i értéke 0, 1 vagy 2, és amely csoport a gyűrű szénatomon Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal szubsztituálva van, (5) 4-10 szénatomos heterociklusos csoport, amely a gyűrűben szén- és heteroatomokat tartalmaz és a heteroatom lehet oxigén-, nitrogén- és S(O)i-, beleértve a -NJV csoportot, ahol -N V jelentése 5-7 tagú heterociklusos 3-6 szénatomot tartalmazó gyűrű ahol V jelentése -CH2-, -0-, -S(=O)-, -S(O)2- vagy -S- és amely csoportok még adott esetben a gyűrű szénatomon Yh Y2 és/vagy Y3 csoporttal szubsztituálva van, (6) 2-6 szénatomos alkenilcsoport, amely adott esetben
5-8 szénatomos ciklusos alkilcsoporttal szubsztituálva van, amely ciklusos csoport még a gyűrűn adott esetben Yj, Y2 és/vagy Y3 csoporttal szubsztituálva van, (7) 6-14 szénatomos arilcsoport, amely adott esteben mono-, di- vagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal, (8) 5-14 szénatomos heteroaril-csoport, amely a gyűrűben szén- és heteroatomokat tartalmaz és a heteroatom lehet oxigén-, nitrogén- és/vagy S(O)j-, amely adott esetben mono-, di- vagy tri-szubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal, (9) 7-15 szénatomos aralkilcsoport, amelyben az alkil-lánc adott esetben hidroxilcsoporttal vagy halogénatommal és az arilgyűrű halogénatommal
-22• ·· szubsztituált és az aril gyűrűn mono-, di- vagy tri-szubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal, (10) 6-11 szénatomos heteroaralkil-csoport, amely a gyűrűben szén- és heteroatomokat tartalmaz és a heteroatom lehet oxigén-, nitrogén- S(O)j-, és amelynél az alkil lánc adott esetben hidroxilcsoporttal vagy halogénatommal szubsztituált, és a gyűrűn mono-, di- vagy tri-szubsztituált Yb Y2 és/vagy Y3 csoporttal, (11) 8-16 szénatomos aralkenil-csoport, amely adott esetben mono-, di-vagy tri-szubsztituált az aril-gyűrűn Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal, (12) 7-12 szénatomos heteroaralkenil-csoport, amely a gyűrűben szén- és heteroatomokat tartalmaz és a heteroatom lehet oxigén-, nitrogén- és S(O),, és amelyben a gyűrűn adott esetben mono-, di- vagy tri-szubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal, (13) (a) képletű csoport, (14) (b) képletű csoport, (15) (c) képletű csoport, (16) (d) képletű csoport (17) difluor-metil- vagy 1-12 szénatomos perfluor-alkil-csoport, (18) 6-14 szénatomos perfluor-aril-csoport, (19) 7-15 szénatomos perfluor-aralkil-csoport, és (20) hidrogénatom,
Yi, Y2 és Y3 jelentése
-23Μ
(i) egymástól függetlenül halogénatom, ciano-, tetrazolil-, amino-, guanidino-, amidino-, metil-amino-, vagy metil-guanidino-csoport,
-CF3, -CF2CF3, -CH(CF3)2, -C(OH)(CF3)2, -OCF3, -OCF2CF3, -OC(O)NH2, -OC(O)NHZ,, -OC(O)NZiZ2, -NHC(O)Zi, -NHC(O)NH2, -NHC(O)NZi, -NHC(O)NZ,Z2, -C(O)OH, -C(O)OZi, -P(O)3H -P(O)3H2, -P(O)3(Z,)2, -S(O)3H, -S(O)mZb -z,, -ozl5 -OH, -NH2, -NHZi és -NZiZ2 csoport és n-morfolino-csoport, amely képletekben m értéke 0, 1 vagy 2, és Zj és Z2 jelentése egymástól függetlenül 1-12 szénatomos alkil-, 6-14 szénatomos aril-, 5-14 szénatomos heteroaril-csoport, amely 1-9 szénatomot tartalmaz, 7-15 szénatomos aralkil- és 6-11 szénatomos heteroaralkril-csoport, amely 3-9 szénatomot tartalmaz, vagy (ii) Yi és Y2 jelentése együttesen -OC(Z3)(Z4)O- csoport, ahol Z3 és Z4 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, 1-12 szénatomos alkil-, 6-14 szénatomos aril-, 5-14 szénatomos heteroaril-csoport, amely 1-9 szénatomot tartalmaz, 7-15 szénatomos aralkil- és 6-11 szénatomos heteroaralkil-csoport, amely 3-9 szénatomot tartalmaz, azzal a megkötéssel, hogy ha X jelentése vegyértékkötéstől eltérő, akkor Rj jelentése hidrogénatomtól eltérő, (c) R2 jelentése (e), (f) vagy (g) képletű csoport, továbbá hidrogénatom,
-24-(CH2)PNHC(=NH)NH2, -(CH2)PS(O)2CH3,
-(CH2)PC(O)Z5, -(CH2)PC(O)OZ6, -(CH2)PC(O)NZ6, -CH2S(O)2(CH2)PC(O)Z5, -CH2S(O)2(CH2)PC(O)OZ6, -CH2S(O)2(CH2)pC(O)NR5R6, -(CH2)PS(O)2Z6, -(CH2)PNH2, -(CH2)PC(O)NR5R6, -(CH2)POZ6 és -(CH2)PC(O) -N\A amely képletekben p értéke 1-6 közötti szám,
Z5 jelentése -OH, -OCH3, -OCH2CH3 vagy -NR5R6 általános képletű csoport,
Z6 jelentése 14 szénatomos -alkil-, 6-14.szénatomos . aril-, vagy 7-16 szénatomos aralkilcsoport,
R5 jelentése hidrogénatom vagy Z6,
R6 jelentése hidrogénatom vagy 3-15 szénatomos ciklusos alkilcsoport, amely adott esetben mono-, divagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal, 7-15 szénatomos aralkilcsoport, amely adott esetben mono-, di- vagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal, 5-14 szénatomos heteroaril-csoport, amelynél a gyűrű szén- és heteroatomokat tartalmaz és a heteroatom lehet oxigén-, nitogén- és S(O)i és amely adott esetben mono-, di- vagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal, lehet továbbá kinuklidin- vagy7 adamantil-csoport,
-N A jelentése 6,7-dimetioxi-l,2,3,4-tetrahidroizokinolinil, 4-hidroxi-piperidil, 4-keto-piperidil, N-morfolino, 3,4-metilén-dioxi-benzil-piperazinil,
4-fenil-piperazinil, amely adott esetben fluor-, »u klór-, metoxi- vagy trifluor-metil-csoporttal monoszubsztitált, vagy 4-benzil-piperazinil-csoport, amely adott esetben monoszubsztituált fluor-, klór-, metoxi- vagy trifluor-metil-csoporttal, valamint ezek gyógyszerészetileg elfogadható kvatemer ammóniumsói, (d) R3 jelentése valamely következő csoport:
(1) hidrogénatom, (2) 1 -8 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben -OH csoporttal szubsztituál van, (3) 3-10 szénatomos ciklusos alkilcsoport, (4) 1-3 szénatomos alkilcsoport, amely 5-8 szénatomos ciklusos alkilcsoporttal szubsztituáiva van, (5) 3-10 szénatomos arilcsoport, amely adott esetben mono-, di- vagy triszubsztituált Yj, Y2 és/vagy Y3 csoporttal, (6) 1-3 szénatomos alkilcsoport, amely a terminális szénatomon 4-10 szénatomos arilcsoporttal szubsztituáiva van, amely adott esetben mono-, divagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal, (7) 1-6 szénatomos alkilcsoport, amely tartalmazhat az alfa, béta, gamma és delta szénatomon 1-6 szénatomos alkilcsoportot leágazást, és (e) R4 jelentése hidrogénatom, 1-7 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben -OH csoprottal szubsztituálv van vagy lehet benzil-oxi- vagy 1-3 szénatomos alkilcsoport, amely a terminális szénatomon 4-10 szénatomos arilcsoporttal szubsztituáiva van, amely adott esetben
-26ί mono-, di- vagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal.
Az előnyös X csoportok közé tartozik az -SO2-, -NH-S(O)2és -N(R')-S-(0)2-csoport, különösen előnyös X csoport az -SO2-csoport.
Előnyös Rí csoportok közé tartozik az alkil-, aralkil- és arilcsoport. Előnyös aralkil- és arilcsoportok a szubsztituált vagy szubsztituálatlan benzil- vagy naftilcsoport. A szubszutituensek előnyös jelentése -C(O)OH, -C(O)OZi,
S(O)mZi és -OCF3-csoport. Előnyös a méta- és orto- szubsztitúció, különösen előnyös az orto-szubsztitúció. Különösen előnyös Rí csoport az aralkilcsoport. Még különösebben előnyös Rí csoport a szubsztituált vagy szubsztituálatlan benzilcsoport. A ciklohexil- és ciklohexil-metil-csoport szintén előnyös Rí csoport.
Az előnyös R2 csoportok közé tartoznak a következők: -CH2CH2CH2NHC(=NH)NH2, -CH2CH2S(O)2CH3, -CH2S(O)2(CH2)pC(O)Z5, -(CH2)PC(O)NR5R6, -(CH2)PCOOH és -(CH2)PC(O)N A . Különösen előnyösek a következő csoportok: -CH2CH2CH2NHC(=NH)NH2, -CH2CH2S(O)2CH3, -(CH2)pC(O)NR5R6 és még különösebben előnyös a -CH2CH2CH2NHC(=NH)NH2. Előnyös R5 csoport a hidrogénatom. Az előnyös Ró csoportok közé tartoznak a következők: hidrogénatom, 3-(R)-kinuklidin, 3-(S)-kinuklidin, 4-trifluor-metil-7-il-kumarin, 4-metil-7-il-kumarin, 7-il-kumarin,
3-il-2-etil-4(3H)-kinazolinon, 2-il-benzotiazol, 3-il-benzoesav,
3-il-4-hidroxi-benzoesav, 4-hidroxi-1 -metil-6-fenil-3-il-2(lH)-piridon és 1-adamantil vagy etil-morfolin, etil-piperidin,
-272-(2-etil)-piridin, 4-hidroxi-fenentil, (R)-alfa-metil-benzil, (S)-alfa-metil-benzil, 4-(metil)-5-hidroxi-6-metil-3-piridin-metanol, (lR,2S)-(N-metil-N-(l-etil))-benzil-alkohol, (lS,2R)-(N-metil-N-(l-etil))-benzil-alkohol, (1R,2R)-(N-metil-N-(l-etil))-benzil-alkohol, (lS,2S)-(N-metil-N-(l-etil))-benzil-alkohol és 4-(metil)-5-hidroxi-6-metil-3-piridin-metanol.
Az R2 előnyös kvaterner ammóniumsók közé tartoznak az 1-10 szénatomos alkilcsoporttal alkilezett csoportok. Különösen előnyös egyenes láncú kvaterner ammóniumsó a metil-, etil-, propil- és butilcsoportot tartalmazó csoport. Előnyös elágazó láncú alkilcsoportot tartalmazó kvaterner ammóniumsónál az alkilcsoport izopropil-, izobutil-, izopentil- vagy izoamil-csoport. Az előnyös ciklusos kvaterner ammóniumsóknál a ciklusos csoport előnyösen ciklohexil-, ciklopentil- vagy ciklohexil-metil-csoport. További előnyös kvaterner ammóniumsók azok, amelyek 7-15 szénatomos aralkilcsoporttal vannak szubsztituálva, ilyen aralkilcsoport például a benzilvagy fenetilcsoport. Előnyösek még azok a kvaterner ammóniumsók is, amelyek 6-14 szénatomos arilcsoportot tartalmaznak, amelyek még adott esetben szubsztituálva is lehetnek.
A kvaterner ammóniumsóknál az előnyös ellenion kklór-, bróm-, jód-, acetát- vagy trifluor-acetát-csoport.
Az előnyös R3 csoportok közé tartoznak az 1-7 szénatomos alkilcsoportok, amelyek adott esetben a terminális szénatomon -OH csoporttal szubsztituálva vannak. További előnyös R3 csoportok például a metil-, ciklohexil-metil-, fenil- vagy benzilcsoport, különösen előnyös R3 csoport a metil- vagy ciklohexil-csoport.
• · ·
-28Az előnyös R4 csoportok közé tartoznak a hidrogénatom és 1-7 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben a terminális szénatomon -OH csoporttal szubsztituálva van. Különösen előnyös a hidrogénatom.
Különösen előnyösek azok az (I) általános képletű vegyületek, amelyek képletében X jelentése -S(O)2, Rí jelentése szubsztituált vagy szubsztituálatlan aralkilcsoport, R2 jelentése -CH2CH2CH2NHC(=NH)NH2 csoport, R3 jelentése metilcsoport és R» jelentése hidrogénatom.
Továbbá előnyösek azok a találmány szerinti vegyületek, amelyek (I) általános képletében X jelentése -S(O)2, Rí jelentése szubsztituált vagy szubsztituálatlan aralkilcsoport, R2 jelentése -CH2CH2CH2NHC(=NH)NH2 csoport, R3 jelentése ciklohexilcsoport és R4 jelentése hidrogénatom. Egészen különösen előnyösek azok a vegyületek, amelyek képletében Rí jelentése szubsztituált vagy szubsztituálatlan benzilcsoport.
Az előnyös vegyületek például a következők: D-kámforszulfonil-aszpartil-szarkozin-arginin-aldehid (10. példa), D-kámforszulfonil-ciszteinszulfon-ecetsav-szarkozin-arginin-aldehid (44. példa), D-kámforszulfonil-L-metionin-szulfon-szarkozin-arginin-aldehid (28. példa), benzilszulfonil-D-arginin-szakrozin-arginin-aldehid (16. példa), (2-karbometoxi)-benzolszulfonil-(D)-argininil-szarkozin-argininal (21. példa), N-benzilszulfonil-(D)-metionin-szulfon-szarkozin-argininal (35. példa), benzilszulfonil-metioninil(szulfon)N-ciklohexil-glicinil-argininal (50. példa), (D)-kámforszulfonil-aszpartil-szarkozin-arginin-aldehid (56. példa), (D)-kámforszulfonil-3-(3-piridil)-alanin-szarkozin··»· ····
-arginin-aldehid (62. példa), benzilszulfonil-3-(3-piridil)-alanin-szarkozin-arginin-aldehid (67. példa), (D)-kámforszulfonil-glicin-szarkozin-arginin-aldehid (73. példa), d-kámforszulfonil-glutamil(O-metil)-szarkozil-argininal, benzilszulfonil-glutamil(O-metil)-szarkozil-argininal, d-kámforszulfonil-glutaminil-szarkozil-argininal, d-kámforszulfonil-glutamil-szarkozil-argininal, valamint az (A), (B), (C)(, (D), (E), (F), (G), (H) és (I) képletű vegyületek.
További előnyös (I) általános képletű vegyületek a következő példákban ismertetett vegyületek: 56 és 115A, 16 és 116A, 116C, 117, 115C, 118E, 115D, 116F, 108 és 120E, 114 és120H, 113 és 120G és 120J.
A találmány oltalmi körébe tartoznak az (I) általános képletű vegyületek sói is. A só kifejezés magában foglal minden olyan sót, amelyet valamely találmány szerinti vegyületből vagy szerves vagy szervetlen savból nyerünk. A só a használatkor egyenértékű a bázis formával. A találmány szerinti vegyületek egyaránt hasznosak szabad bázis és só formában, mind a kettő a találmány oltalmi körébe tartozik. A sók közé tartoznak a savaddiciós sók, például sósavval, hidrogén-bromiddal, ecetsavval, benzolszulfonsawal, és más alkalmas savval alkotott savaddiciós sók. A sók közé tartoznak a kvaterner ammóniumsók is.
2. Az előnyös vegyületek előállítása
A találmány szerinti vegyületeket például az 1., 3., 4. és 5. ábrákon bemutatott reakció vázlatok szerint állíthatjuk elő. Az 1-4. példákban az előnyös előállítási eljárásokat mutatjuk be, • · · ·
-30amelyeket az általában alkalmazott intermedier N8-nitro-L-argininal-etil-ciklol előállításához alkalmazunk.
Mint az az 1. ábrából kitűnik, különböző Boc-védett aminosavakat kapcsolunk a szarkozin-benzilészterhez. Más N-alkilezett aminosavak is alkalmazhatók. A Boc csoportot sósavas hidrolízissel távolítjuk el. A terminálisán szabad amin hidroklorid sóját trietil-aminnal reagáltatjuk, majd RiSO2C1 acetonitriles oldatát adagoljuk, így nyerjük a szulfonamidot, amit azután hidrogéngázzal hidrogénezünk a szénhordozós palládiumkatalizátor jelenlétében Parr készülékben, így távolítjuk el a benzilészter védőcsoportot. A szabad savat az Ng-nitro-argininal-etil-ciklol-hidrokloridsóval (előállítása az 1-4. pédák szerint) kapcsoljuk karbodiimid jelenlétében.
Az adduktum N8 nitrocsoportját ezután hidrogénezéssel távolítjuk el, ezt hidrogéngázzal végezzük szénhordozós palládiumkatalizátorral etanol, víz és ecetsav jelenlétében. A vegyületet ezután 3 n sósavval vagy hexafluor-foszforsawal reagáltatjuk, így nyerjük a találmány szerinti argininal vegyületet.
A kémiai kapcsolást (például az 1. ábra szerinti első lépés) előnyösen peptidkötés kialakításával végezzük, ehhez a szokásos kapcsolási reagenseket alkalmazzuk (Bodanszky N. Peptide Chemistry, 55-73, Springer-Verlag, New York (1988)). A kémiai kapcsolást végezhetjük egy lépésben vagy két lépésben. Az egylépéses kapcsolással a két összekapcsolandó partnert közvetlenül kapcsoljuk. Az előnyös kapcsolási reagensek az egylépéses kapcsolásnál például a következők: N,N'-diciklohexil-karbodiimid plussz 1-hidroxi-benztriazol-monohidrát, 1-alkil-3-(3-dimetil-amino-propil)-karbodiimid, 1-hidroxiI
-31 -benztriazol-monohidrát, benztriazol-1 -il-oxi-trisz(dimetil-amino)-foszfonium-hexafluor-foszfát, 2-(lH-benztriazol-l-il)-l,l,3,3,-tetrametil-uronium-hexafluor-foszfát vagy
2-( 1 H-benztriazol-1 -il)-1,1,3,3-tetrametil-uronium-tetrafluor-borát. A kétlépéses kapcsolásnál a C-terminális karboxilcsoport aktivált észtere vagy anhidridje az egyik kapcsolási partner, ezt a másik kapcsolási partnerhez való kapcsolás előtt alakítjuk ki.
Az olyan találmány szerinti vegyületeknél, amelyek halogénatommal, ciano-, nitro- vagy -S-Zj csoporttal szubsztituált alkenil- vagy arilcsoprotot tartalmaznak, előnyösen kerüljük a hidrogéngáz és szénhordozós palládiumkatalizátor alkalmazását. Ezen vegyületeknél az N8-nitro arginin védőcsoportot bór-trisz(trifluor-acetát), B(OCOCF3)3 alkalmazásával távolítjuk el. A reagenst BBr3 és CF3COOH diklór-metánban 0°-on való reagáltatásával állítjuk elő. Ez a reagens kereskedelmi forgalomban is beszerezhető. Általában az N8-nitro vegyületet a bór-trisz(trifluor-acetáttal) trifluor-ecetsavban kezeljük 0°-on (Fieser M. és Fieser L.F., Reagents fór Organic Synthesis, 46, John Wiley & Sons, New York (1974), PLess J. és Bauer W. (1973) Angew. Chem. Internat. Ed. 12, 147).
Egy még előnyösebb módszer a di-N-t-butoxi-karbonil védőcsoport alkalmazása az L-argininal részhez olyan csoportoknál, amelyek hidrogénezésre, szénhordozós palládiumra inkompatibilsak. így például alfa-N-t-benzil-oxi-karbonil-omega,omega'-di-N-t-butoxi-karbonil-arginint feloldjuk acetonitrilben és hidroxi-benztriazollal és l-etil-3-(3-dimetil-amino-propil)-karbodiimid-hidrokloridsóval kezeljük, így
-32nyerjük az alfa-N-benzil-oxi-karbonil-omega,omega'-di-N-t-butoxi-karbonil-L-arginin-laktámot. A laktam megnyitását L1AIH4 tetrahidrofurános oldatával való kezeléssel nyitjuk meg -70°C-on, így nyerjük a alfa-N-benzil-oxi-karbonil-omega,omega'-di-N-t-butoxi-karbonil-L-arginint. Ez az aldehid dietil-acetát formájában védett, ezt etanollal és sósavval való kezeléssel végezzük. Az N-benzil-oxi-karbonil-védőcsoport eltávolítását hidrogéngázzal végezzük szénhordozós palládium jelenlétében, így nyerjük a ómega,omega'-di-terc-butoxi-karbonil-L-argininal-dietil-acetál-hidroklorisót. Ezt a védett L-argininal részt kapcsoljuk ezután a kívánt karbonsavhoz úgy, hogy N-hidroxi-benztriazollal és l-etil-3-(3-dimetil-amino-propil)-karbodiimid-hidrokloridsóval kezeljük. A dietil-acetál és a di-BOC védőcsoprotokat hexafluor-foszfonsav actonitriles oldatával távolítjuk el 0°-on. A reakciót úgy állítjuk le, hogy 2,5 mólos vizes nátrium-acetátot adagolunk addig, amíg pH=4 értéket elérünk. A keveréket 2 mikronos szűrőn szűrjük. A kívánt szubsztituált L-argininal vegyületet HPLC-vel nyerjük, ehhez 0,1% CF3COOH/10-40%-os vizes acetinitril oldatot alkalmazunk.
A 3. ábrán bemutatjuk a 74A példa szerint előállított Boc-védett metionin-szulfon-szarkozin-benzilészter N-alkilezését (2-jód-etil)-benzollal. Ehhez különböző N-alkilező szereket alkalmazhatunk. A benzilészter-védőcsoport eltávolítását hidrogéngázzal szénhordozós palládium jelenlétében végezzük. A kapott szabad savat kapcsoljuk a 4. példa szerinti vegyülethez, ehhez l-etil-3-(dimetil-amino-propil)-klarbodiimidet, N-hidroxi-benztriazolt és N-metil-morfolint alkalmazunk. Az • · * · · ·
-33 Ng-nitrocsoport eltávolítását hidrogéngázzal szénhordozós palládiumkatalizátor metanol, ecetsav és víz jelenlétében végezzük. A ciklusos arginin-etil-aminal megnyitását hexafluor-foszforsav/víz eleggyel végezzük. A 3. ábra bemutatja az olyan vegyületek szintézisét, amelyek képletében X jelentése vegyértékkötés. Ilyen szintézist ismertetünk a 74A-79. példákban.
A 4. ábrán bemutatunk egy előnyös eljárást olyan vegyületek előállítására, amelyek N-alkilezett R2 csoportot tartalmaznak. Az N-alkilezett kifejezés magában foglalja az N-alkilezett, N-arilezett és N-aralkilezett kvaterner ammóniumsókat is. A 79-89. pédákban részletesen bemutatjuk ezt az előállítási eljárást.
A Boc-védett glutaminsav benzilészter kapcsolását a
3-(R)-amino-kinuklidin-dihidrokloriddal ismert módon végezzük. Különböző aminokat alkalmazhatunk. A Boc védőcsoprot eltávolítását erős savval végezzük. Az amint ezután trietil-aminnal és benzilszulfonil-kloriddal reagáltatjuk. A benzilészter-védőcsoportot katalitikus hidrogénezéssel távolítjuk el. A szabad savat ezután a 4. példa szerinti vegyülethez kapcsoljuk ismert kapcsolószerek alkalmazásával. Az R2 bázikus amin-csoportját ezután allil-jodiddal reagáltatjuk. Az Ng-nitrocsoportot eltávolítjuk és az allilcsoprotot hidrogéngázzal redukáljuk szénhordozós palládium jelenlétében. A ciklusos arginin-etil-aminal megnyitását hexafluor-foszforsawal vagy 6 mólos sósavval végezzük vizes oldatban, így nyerjük a kívánt végterméket.
-34Αζ 5. ábrán bemutatunk egy előnyös eljárást az N-benzilszulfonil-L-cisztein-szulfon-S-((R)-alfa-metil-benzil-karboxi-amid)-szarkozin-argininal előállítására. Ezt az eljárást részletesen a 90-97. példákban mutatjuk be. A butil-acetát-ciszteinszulfon-szarkozin-O-benzilészter Boc védőcsoportját (a vegyületet a 26-39. példa szerint állítjuk elő) vízmentes sósavas kezeléssel távolítjuk el. A terminális amincsoportot ezután egy aminbázissal és R1SO2CI vegyülettel reagáltatjuk, így nyerjük a szulfonamidot. A t-butilésztert trifluor-ecetsawal reagáltatjuk a karbonsav előállítására. A savat ezután (R)-alfa-metil-benzil-aminhoz kapcsoljuk 1-etil-_______
-3-(3-dimetil-amino-propil)-karbodiimid-hidrokloridsó és 1-hidroxi-benztriazol alkalmazásával. A kapott adduktumot ezután hidrogéngázzal kezeljük szénhordozós palládium jelenlétében a benzilészter védőcsoport eltávolítására. A kapott savat ezután a 4. példa szerinti vegyülethez kapcsoljuk ismert kapcsolási módszerrel. Az N8-nitrocsoport eltávolítását katalitikus hidrogénezéssel végezzük, majd ezután nyitjuk az argininal-etil-ciklol-aminalt hexafluor-foszforsav vagy 6 mólos sósav alkalmazásával vizes oldatban, így nyerjük az argininal terméket.
3. Előnyös vegyületek kiválasztása
A találmány szerinti vegyületeket azon az alapon értékeljük, hogy képesek a trombint, plazmint, rekombináns szövet plazminogén aktivátort (rt-PA), aktivált protein C-t (aPC), kimotripszint és tripszint gátolni az alábbiak szerint. Bizonyos előnyös vegyületeket azon képességük alapján választunk ki, hogy gátolják a Xa faktort, míg lényegesen nem gátolják a
-35trombint, plazmint, t-PA-t, a PC-t, kimotripszint és tripszint. A nem gátolják lényegesen kifejezés azt jelenti, hogy az IC50 (vagy Kj) értéke egy adott vegyület esetén a trombin, plazmin, t-PA, aPC, kimotripszin és tripszin esetén nagyobb vagy azonos, mint a Xa faktorra meghatározott IC50 (vagy Ki) érték).
A találmány szerinti vegyületeket puffer oldatban oldjuk úgy, hogy a vizsgálathoz a koncentráció tartomány 0-100 pmól közötti legyen. A vizsgálatoknál a Xa faktor, trombin, plazmin, t-PA, aPC, kimotripszin és tripszin vizsgálatához a kromogén szintetikus szubsztrátumot az oldathoz adagoljuk, amely tartalmazza a vizsgálandó vegyületet és a kívánt enzimet és az enzim maradék katalitikus aktivitását spektrofotometriásán határozzuk meg. Az adott vegyület IC50 értékét a szubsztrátum átalakulás mértékével határozzuk meg, amelyet egy specifikus enzim hoz létre. Az IC50 érték az a vizsgálandó vegyület koncentráció, amely 50%-os mértékben gátolja a szubsztrátum átalakulást. Hasonlóképpen, egy adott vegyület Kj értékét azon szubsztrátum átalakulásból határozzuk meg, amelyet egy specifikus enzim okoz, különböző enzim koncentrációk esetén. A K, érték az a vizsgálandó vegyület koncentráció, amely 50%-ban gátolja a szubsztrátum átalakulás mértékét (sebességét). Az A és B példákban bemutatjuk a találmány szerinti vegyületek in vitro vizsgálatát.
Bizonyos előnyös találmány szerinti vegyületek esetén a Kj érték 0,001-200 nmól közötti érték az Xa faktor esetén. A különösen előnyös vegyületeknél a Kj érték 0,001-501 nmól, a még előnyösebb vegyületeknél ez az érték 0,001-10 nmól közötti érték.
• ·
-36• ·· ·
Bizonyos előnyös találmány szerinti vegyületek esetében az IC50 érték, a trombin, plazmin, t-PA, aPC, kimotripszin és tripszin esetén legalább tízszer nagyobb, mint az Xa faktorra mutatott IC50 érték. A különösen előnyös találmány szerinti vegyületeknél az előzőekben említett enzimekre meghatározott IC50 érték 20-100 000-szer, a még előnyösebb vegyületeknél 100-1 000 000-szor nagyobb, mint az Xa faktorra meghatározott IC50 érték. Abban az esetben, ha a találmány szerinti vegyületek IC50 értéke a trombin, plazmin, rt-PA, aPC, kimotripszin vagy tripszin esetében nagyobb, mint a vizsgáit legmagasabb koncentráció, IC50 értékként ezt a legmagasabb koncentrációt fogadjuk el.
4. Gyógyszerkészítmények
A találmány vonatkozik a gyógyszerkészítményekre is, amelyek a találmány szerinti vegyületeket hatásos mennyiségét tartalmazzák gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyaggal együtt.
A találmány szerinti vegyületek terápiásán hatásos mennyisége függ az adagolás módjától, a kezelt emlős típusától és annak fizikai jellemzőitől. Ezeket a faktorokat, és ezek összefüggéseit a szakterületen jártas szakember meg tudja határozni. A kívánt mennyiséget és az adagolás módját úgy lehet beállítani, hogy a optimális eredményt érjük el, függőn a beteg étrendjétől, az egyidejűleg alkalmazott egyéb gyógyszerektől, valamint egyéb faktoroktól, amelyeket a szakterületen jártas szakember meg tud állapítani.
A találmány szerinti vegyületek terápiásán hatásos mennyisége széles határok között változik és függ a kívánt határstól és
-37·· ···· »·» ·· · a terápiás indikációtól. A dózis általában 0,01 mg/kg és 100 mg/kg, előnyösen 0,01 és 10 mg/kg közötti érték.
A gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyagok ismertek a gyógyszerészet terén és például a következő irodalmi helyen vannak ismertetve: Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co. (A.R. Gennaro szerk. 1985). így például alkalmazhatók a következők: steril sóoldat és foszfáttal pufferolt sóoldat fiziológiás pH-nál. Adagolhatok továbbá különböző konzerválószerek, stabilizátorok, színező- és ízanyagok, így például nátrium-benzoát, szorbinsav és p-hidroxi-benzoesav észeterek alkalmazhatók konzerválószerként, továbbá különböző antioxidánsok és szuszpendálószerek is alkalmazhatók (lásd a fenti hivatkozást).
A találmány szerinti gyógyszerkészíytmények lehetnek tabletták, kapszulák vagy elixírek orális adagoláshoz, kúpok rektális adagoláshoz, steril oldatok és szuszpenziók injekció céljára, stb. A dózist és az adagolás módját úgy lehet beállítnai, hogy optimális hatásosságot érjünk el, a dózis függ különféle faktoroktól, így például a beteg tömegétől, az étrendtől, egyidejűleg alkalmazott egyéb gyógyszerektől és más egyéb, a szakember számára ismert faktortól.
Ha az adagolás parenterális, így például intravénás és naponta történik az adagolás, az injekciózható gyógyszerkészítményt például folyékony oldat vagy szuszpenzió formájában állítjuk elő, vagy szilárd formában, amelyet közvetlenül az injekció beadása előtt alakítunk oldattá vagy szuszpenzióvá, vagy ez a készítmény lehet emulzió is. Alkalmas hordozóanyagok például a víz, sóoldat, dextróz, mannit, laktóz, lecitin, albumin, nátri• ·· • ·
-38·· ··· · ·* * · um-glutamát, cisztein-hidroklorid, stb. Az injekciózható gyógyszerkészítmények tartalmazhatnak még kis mennyiségű, nem toxikus kiegészítő anyagokat is, így például nedvesítőszereket, pH-beállító anyagokat, stb. Ha szükséges, abszorpciót fokozó készítmények (például liposzómák) is előállíthatók.
5. Alkalmazás és módszerek
A találmány szerinti vegyületek hatásos Xa faktor inhibitorok in vitro és in vivő. Mint ilyenek, ezek a vegyületek alkalmazhatók in vitro diagnosztikai reagensként a véralvadás gátlására, valamint in vivő gyógyszerként emlősöknél trombózis megakadályozására, akiknél abnormális trombózisos tünetek vannak.
A találmány szerinti vegyületek alkalmazhatók in vitro diagnosztikai reagensként a vérvételi csövekben alvadás gátlására. A lezárt vizsgálócsövek, amelyekben vákuum van a véna punkcióval levett vér tárolására, az orvosi területen jól ismertek (Kasten B.L., Specimen Collection, Laboratory Test Handbook,
2. kiadás, Lexi-Comp Inc., Cleveland, 16-17 (szerk. Jacobs D.S. és mtársai, 1990). Az ilyen vákuum csövek lehetnek mentesek véralvadást gátló adalékoktól, ebben az esetben ezeket emlősöknél a szérumnak a vértől való elválasztására használják. A csövek tartalmazhatnak véralvadásgátló adalékokat is (így például heparinsók, EDTA sók, citrátsók vagy oxalátsók), ebben az esetben az emlős plazmának a vértől való elválasztására alkalmasak. A találmány szerinti vegyületek hatásos Xa faktor gátlók és mint ilyenek, bevihetők a vérgyűjtő csövekbe az emlősöktől levett vér alvadásának gátlására.
· »►<·
-39A találmány szerinti vegyületeket önmagukban vagy más találmány szerinti vegyületekkel vagy más egyéb, ismert véralvadásgátló vegyületekkel együttesen alkalmazzuk a vérvételi csövekben. A csövekbe adagolt mennyiség olyan, amely kielégítően meggátolja a levett vér alvadását. A vegyületek adagolását az ilyen csőbe ismert módon végezzük, így azokat adagolhatjuk folyékony vagy szilárd készítmények, vagy szilárd, folyadékokból lifolizált készítmény formájában. A beadagolt vegyület mennyisége olyan, hogy ha 2-10 ml vérrel kombináljuk, akkor az kielégítően képes legyen meggátolni a véralvadást. A szükséges koncentráció általában 1-10 000 nmól közötti érték, előnyösen 10-1000 nmól.
A találmány szerinti vegyületek gyógyszerként alkalmazhatók trombózis gátlására emlősöknél abnormális trombózisos tünetek esetén.
Az abnormális trombózis tünetei a szakterületen jól ismertek és ezek érinthetik az emlősök artériás és vénás érrendszerét egyaránt. A koronáriás artériés érrendszerrel kapcsolatban az abnormális trombózist (trombusok képződését) az jellemzi, hogy meghatározott atheroszklerotikus plakkok összeomlanak és ez a fő kiváltó oka az akut myocardiális infarktusnak és az instabil anginának, továbbá jellemző az elzáró koronáriás trombus képződés, ami vagy trombolitikus terápiából vagy perkután transzluminális koronáriás angioplasztikából (PTCA) származik. A vénás érrendszerrel kapcsolatban az abnormális trombózis tüneteit olyan betegeknél észlelik, akik alsó végtagi nűtéten vagy a hasi területen végzett műtéteken mennek keresztül és ezeknél gyakran alakul ki trombus képződés a vénás érrendszerben, ami *>·« *·*»
-40csökkentett véráramot eredményez az érintett végtagokban és hajlamosít a tüdőembóliára. Az abnormális trombózist jellemzi továbbá a disszeminált intravaszkuláris koagulopátia, amely általában mindegyik vaszkuláris rendszerben előfordul szeptikus sokk alatt bizonyos virális fertőzéseknél és ráknál, továbbá jellemzők rá olyan tünetek, amelynél a koagulációs faktor és a szisztémás koaguláció gyors pusztulása következik be, ami az életveszélyes trombusok kialakulását eredményezi a mikroérrendszer teljes egészében és ez szerteágazó szervkárosodáshoz vezet.
A találmány szerinti vegyületek és gyógyszerkészítmények alkalmazhatók emlősöknél az abnormális trombózis tüneteivel kapcsolatos állapotok kezelésére, ennél az emlősnek valamely találmány szerinti vegyület vagy gyógyszerkészítmény terápiásán hatásos mennyiségét adagoljuk.
A találmány szerinti vegyületeket vagy gyógyszerkészítményeket in vivő adagoljuk emlősöknek, előnyösen embereknek. Az in vivő adagolásnál a vegyületeket vagy gyógyszerkészítményeket különböző módon adagolhatjuk, így orálisan, parenterálisan, intravénásán, szubkután, intramuszkulárisan, kolonálisan, rektálisan, nazálisán vagy intraperitoneálisan a különböző készítmény formák alkalmazásával. Az adagolást előnyösen parenterálisan, így intravénásán végezzük. Az adagolást végezhetjük azonban előnyösen még orálisan, így például tabletták, kapszulák vagy elixírek formájában naponta.
A találmány szerinti vegyületeket vagy gyógyszerkészítményeket adagolhatjuk önmagukban vagy egy másik találmány sze• ·
rinti vegyülettel kombinációban vagy más terápiás vagy in vivő diagnosztikai szerrel kombinációban.
A gyógyászat területén jártas szakember számára nyilvánvaló, hogy a terápiásán hatásos mennyiség egy adott találmány szerinti vegyületre vagy gyógyszerkészítményre függ a beteg korától, tömegétől és különösen az alkalmazott vegyülettől, az adagolás módjától és a kívánt hatástól. Miután ezek a faktorok, valamint ezek összefüggése a mennyiség megállapítására a gyógyászati területen ismert, a mennyiség meghatározása a kívánt eredmény elérésére, a trombózis megakadályozásánál a szakterületen jártas szakember köteles tudásához tartozik. Általában a vegyületek vagy gyógyszerkészítmények adagolását alacsony dózissal kezdjük, majd a dózist addig emeljük, amíg a kívánt hatást a trombózis in vivő gátlásában elérjük és ezt a mennyiséget határozzuk meg mint terápiásán hatásos mennyiséget. A találmány szerinti vegyületek esetén önmagukban vagy gyógyszerkészítmény részeként ez a dózis általában kb. 0,01 mg/kg és 100 mg/kg testtömeg, előnyösen 0,01 és 10 mg/kg testtömeg közötti érték.
A találmány jobb megértése érdekében mutatjuk be a következő példákat. A példák azonban semmiképpen sem korlátozó jellegűek és minden változtatás most vagy a későbbiekben, amely a szakember tudásához tartozik, az oltalmi körbe esik.
1. példa
N-aIfa-t-Butoxi-karbonil-Ng-nitro-L-arginin-laktám ((1) képletű vegyület) g (6,3 mmól) N-alfa-t-butoxi-karbonil-N8-nitroarginint feloldunk 100 ml tetrahidrofuránban miközben az oldatot 50°-ra
-42melegítjük. Az oldatot ezután hagyjuk szobahőmérsékletre lehűlni, hozzáadunk 0,84 ml (6,9 mmól) N-metil-piperidint és az oldatot jégfürdővel hűtjük. Ezután 0,83 ml (6,3 mmól) izobutil-klór-hangyasavésztert adagolunk és a keveréket 0°-on 6 órán át keverjük, majd a keverést 18 órán át folytatjuk, miközben a jeget a dewar edényben hagyjuk felolvadni 1 éjszaka alatt. Az oldószert ezután vákuumban eltávolítjuk, a nyers terméket 10 ml (20%) etil-acetát/diklór-metánban oldjuk flash kromatográfiával tisztítjuk (3x5 cm szilikagél oszlop, 20% etil-acetát/diklór-metán). 125 ml eluátumot gyűjtünk. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk, így 1,39 g (74%) cím szerinti vegyületet nyerünk fehér hab fromájában, Rf=0,44 (szilikagél, 95/5=diklór-metán/izopropanol). Az izobutanol szennyezésként jelen van. Ezt a vegyületet tovább tisztíthatjuk diklór-metán/hexán vagy etanol/víz elegyből való átkristályosítással.
2. példa
N-alfa-t-Butoxi-karboniI-N8-nitro-L-argininal ((2) képletű vegyület) (a) 1. eljárás
3,8 ml 1 mólos oldat (3,8 mmól) LiAlELt tetrahidrofurán oldatot jégfürdőn lehűtünk, cseppenként hozzáadunk 0,43 ml (3,8 mmól) etil-acetátot 5 ml tetrahidrofuránban, majd 30 percig keverjük 0°-on, így alakítjuk ki az LiAlH2(OEt)2 vegyületet.
Az így nyert LiAlH2(OEt)2 vegyületet tartalmazó oldatot cseppenként 0,92 g (3,1 mmól) 5 ml tetrahidrofuránban oldott 1 példa szerinti vegyülethez adagoljuk, majd 30 perc elteltével hozzáadunk 2 ml 1 n vizes sósav/tetrahidrofurán elegyet (1:1 arányú keverék), majd ezután 20 ml 1 n sósavat adagolunk és az
-43···· ···· oldatot háromszor 20-20 ml etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázisokat egyesítjük, 5 ml vízzel, 5 ml telített nátrium-hidrogén-karbonáttal, majd kétszer 5-5 ml sóoldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, az oldószert vákuumban eltávolítjuk, így 0,94 g (100%) cím szerinti vegyületet nyerünk szürkésfehér, szilárd anyag formájában.
(b) 2. eljárás
A cím szerinti vegyületet egy másik módszer szerint, a következőképpen állítjuk elő.
Egy 12 literes négy-nyakú gömblombikot felszerelünk egy keverőberendezéssel, erős nitrogénáramban lánggal kiszárítjuk, majd miután a lombik lehűlt, bemérünk 120 g (376 mmól, 1 ekvivalens) N-alfa-t-butoxi-karbonil-N8-nitro-L-arginint nitrogénáramban, majd hozzáadunk 6 1 vízmentes tetrahidrofuránt (Aldrich, biztonsági zárás) egy kanüíön keresztül. A lombikot ezután ellátjuk egy hőmérővel, majd a kapott szuszpenziót 50°-ra melegítjük egy lángpisztollyal, miközben keverjük. A keveréket ezután 5°-ra lehűtjük jégfiirdő vei, majd tovább ezen a hőmérsékleten tartjuk jég/aceton fürdővel.
Azalatt, míg az oldat eléri a -5°C hőmérsékletet, egy 500 ml-es lombikba bemérünk 36,66 g (376 mmól, 1 ekvivalens) Ν,Ο-dimetil-hidroxil-amin-hidrokloridot és 300 ml diklór-metánban szuszpendáljuk. A szuszpenziót 5 percig nitrogénnel öblítjük, majd 0°-ra lehűtjük, hozzáadunk egy fecskendőn keresztül nitrogénatmoszférában 46 ml, 1 ekvivalens N-metil-piperidint, és a kapott keveréket rövid ideig ultrahanggal kezeljük, hogy a teljes oldódás és a szabad bázis képződés végbemenjen, majd visszahűtjük 0°-ra jégfürdővel nitrogénat-44moszférában. Az így kapott szabad bázist tartalmazó oldatot használjuk később.
Ha a fenti arginin oldat a -5°-ot elérte, egy fecskendővel 45 ml N-metil-piperidint 5 perc elteltével 46 ml izobutil-klór-hangyasavésztert (0,95 ekvivalens) adagolunk egy fecskendőn keresztül. A kapott oldatot 15 percen keresztül -5°-on kezeljük, majd ezután a fentiek szerint előállított N,O-dimetil-hidroxil-amin szabad bázist tartalmazó oldatot adagoljuk be egy kanülön keresztül 15 perc alatt. A kapott keveréket -5°C hőmérsékleten további 1,5 órán át keverjük, amikoris vékonyrétegkromatográfiával (1/10/90 ecetsav/metanol/diklór-metán) kimutatjuk, hogy a reakció teljesen végbement. A keveréket még hidegen szűrjük, a sót 400 ml hideg tetrahidrofuránnal mossuk és a szűrletet vákuumban betöményítjük forgó bepárló alkalmazásával, így egy sárga színű habot nyerünk.
A nyers intermediert feloldjuk 300 ml diklór-metánban és szilikagél oszlopra adagoljuk (70-230 mesh, 7x50 cm). Az oszlopot először 2 1 diklór-metánnal, majd 2 1 2%-os metanol/diklór-metán eleggyel eluáljuk. Ezt 5% metanol/diklór-metán eleggyel való eluálás követi addig, amíg az összes terméket eluáljuk (az eluátumot UV aktivitásra vizsgáljuk, és ötször 1 1 frakciót veszünk le, míg az UV aktivitás megjelenik. A tiszta terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük vákuumban betöményítjük és nagyvákuumban tartjuk 1 éjszakán át, így 120,1 g (88%) N-alfa-t-butoxi-karbonil-N8-nitro-L-arginint-(Ν,Ο-dimetil-hidroxil-amidot nyerünk halványsárga hab formájában. Ezt 300 ml diklór-metánban 300 ml töluolban oldjuk,
I
-45majd az illékony anyagot eltávolítjuk vákuumban az összes maradék víz vagy metanol eltávolítására.
120,1 g (331,4 mmól) N-alfa-t-butoxi-karbonil-N8-nitro-L-arginint-(N,O-dimetil-hidroxil-amidot feloldunk 2,8 1 vízmentes (Aldrich, biztonsági zárás) tetrahidrofuránban és egy 5 literes 4-nyakú gömblombikba visszük, amely mechanikai keverővei és alacsony hőmérsékleten mérésére alkalmas hőmérővel van ellátva. Az oldatot -70°-ra lehűtjük szárazjég/aceton elegy gyel és hozzáadunk egy kanülön keresztül közvetlenül egy 100 ml Aldrich, biztonsági zárás üvegből 300 ml 1 mólos tetrahidrofurános LiAlH4 oldatot. Ezután további 5 ml 1 mólos LiAlHí/tetrahidrofurán oldatot adagolunk fecskendőn keresztül (összesen 331 ml). Ezen adagolás közben a hőmérsékletet -60° alatt tartjuk. A keveréket 0,5 órán át -70°-on keverjük, majd a hűtőfürdőt eltávolítjuk, a keveréket hagyjuk lassan 0°-ra melegedni (kb. 2,5 óra). -30 és -20°C között egy sűrű zagyot nyerünk. Amikor a rekaciókeverék hőmérséklete a 0°-ot elérte, kis mennyiségű alikvot részt kiveszünk, etil-acetát/2 mól kálium-biszulfát között megosztjuk, és a szerves fázist vékonyrétegkromatográfiával (szilikagél, etil-acetát) analizáljuk.
Ha úgy ítéltük, hogy a reakció végbement, lehűtjük -70°-ra, hozzáadunk egy csepegetető tölcsérrel 503 ml 2 mólos kálium-biszulfátot olyan sebsséggel, hogy a hőmérsékletet -30°C alatt tartsuk. A hűtőfürdőt ezután eltávolítjuk, a keveréket hagyjuk 0°-ra melegedni kb. 2 óra alatt, amikoris a fehér kiváló csapadékot leszűrjük. A fehér, szilárd anyagot 500 ml hideg tetrahidrofuránnal mossuk, a szűrletet vákuumban betöményítjük forgó bepárlóval addig, amíg az összes tetrahidrofuránt eltá-46volítjuk, és a visszamaradó fehér, iszapos anyag túlnyomórészt vizes. A terméket 1,5 1 etil-acetátban oldjuk, kétszer 200-200 ml 0,2 mólos sósavval mossuk, a sósavas extraktumokat 400 ml etil-acetáttal visszextraháljuk, a szerves extraktumokat egyesítjük és kétszer 200-200 ml telített nátrium-hidrogén-karbonáttal extraháljuk. A hidrogén-karbonátos extraktumokat szintén vissza extraháljuk 400 ml etil-acetáttal. A szerves fázisokat ezután egyesítjük, 200 ml sóoldattal mossuk, majd vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk. Az oldatot ezután szűrjük, vákuumban forgóbepárlóban betöményí tjük, majd nagyvákuumba helyezzük 1 éjszakára, így 89 g cím szerinti vegyületet nyerünk fehér, szilárd anyag formájában. Ezt az anyagot szilikagélen kromatografáljuk (0-»10% metanol/diklór-metán gradiens). A tiszta frakciókat egyesítjük, betöményítjük, így 75 g (74%) cím szerinti vegyületet nyerünk fehér, szilárd anyag formájában.
3. példa
N-alfa-t-Butoxi-karbonil-N8-nitro-L-argininal-etiI-ciklol ((3) képletű vegyület)
41,60 g (0,137 mól) 2. példa szerinti vegyületet feloldunk 200 ml etanolban, és hozzáadunk 1 ml koncentrált sósavat. Miután a reakció a TLC szerint végbement (szilikagél, 10% metanol/diklór-metán) az oldószert vákuumban eltávolítjuk, a nyers terméket flash kromatográfíával tisztítjuk (szilikagél oszlop, 230-400 mesh, 0-»10% etil-acetát/diklór-metán). A frakciókat egyesítjük, így 36,88 g (81%) cím szerinti vegyületet nyerünk halványsárga hab formájában. Rf=0,62 (szilikagél,
95/5=CH2Cl2/metanol).
4. példa
-47«···· · · · · · • ···· ·· · ·*
Ng-Nitro-L-argininal-etil-ciklol-hidrokloridsó ((4) képletű vegyület) g 3. példa szerinti vegyületet feloldunk 500 ml vízmentes etanolban 0°-on és lassan hozzáadunk 500 ml sósavval telített vízmentes etanolt. A kapott keveréket hagyjuk 25°-ra melegedni, majd vékonyrétegkromatográfíával ellenőrizzük. Az igen poláros termék megjenése a kívánt vegyület. A sósav legnagyobb részét száraz nitrogénárammal eltávolítjuk, és a szerves oldószert vákuumban eltévolítjuk. így 33 g cím szerinti vegyületet nyerünk sárgásá-fehéres szilárd anyag formájában, ezt további tisztítás nélkül használjuk.
5. példa (D)-N8-N02-arginin-szarkozin-benziIészter-hídrokIoridsó ((5) képletű vegyület)
6,2 g (19,4 mmól) Boc-D-Ng-nitroarginint feloldunk 100 ml vízmentes dimetil-formamidban és keverés közben hozzáadunk
8,2 g (23,3 mmól) szarkozin-benzilészter-para-toluolszulfonsav-sót, majd 8,6 g (19,4 mmól) benzotriazol-l-il-oxi-trisz-(dimetil-amino)-foszfonium-hexafluor-foszfátot és 10,6 ml (97,1 mmól) N-metil-morfolint. A kapott keveréket 16 órtán át szobahőmérsékleten keverjük, majd feloldjuk 900 ml etil-acetátban és 300-300 ml vízzel, 1 mólos vizes sósavval, vízzel, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal és sóoldattal mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. Rf=0,39 (l/9=metanol/diklór-metán). A kapott olajos anyagot 50 ml diklór-metánban oldjuk, és 50 ml 4 mólos sósav/dioxán oldattal kezeljük. 5 óra elteltével a cím szerinti vegyületet a keverék 500 • · ·
-48ml éterbe való öntésével kicsapjuk erőteljes keverés közben. A csapadékot szűrjük, vákuumban szárítjuk, így 8 g cím szerinti vegyületet nyerünk szürkésfehér por formájában, kihozatal kvantitatív.
6. példa (D)-KámforszuIfonil-(D)-Ng-N02-arginin-szarkozin-benzilészter ((6) képletű vegyület)
4,19 g 810,1 mmól) 5. példa szerinti vegyületet feloldunk 10 ml vízmentes dimetil-formamidban és 50 ml tetrahidroíuránban és hozzáadunk 3,7 g (15,1 mmól) (D)-kámforszulfonil-kloridot, majd 7 ml (50,3 mmól) trietil-amint. A kapott keveréket 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd feloldjuk 800 ml etil-acetátban és 200-200 ml vízzel, 1 mólos vizes sósavval, vízzel, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal és sóoldattal mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A kapott olajos anyagot diklór-metánban oldjuk, szilikagélen szűrjük, majd először 500 ml diklór-metánnal, majd 1000 ml l/9=metanol/diklór-metán eleggyel eluáljuk. A metanolt/diklór-metán frakciót betöményítjük, így 5,7 g (95%) cím szerinti vegyületet nyerünk szürkésfehér hab formájában. Rf=0,45 (1 /9=metanol/diklór-metán).
7. példa (D)-Kámforszulfonil-(D)-N8-N02-arginin-szarkozin ((7) képletű vegyület)
2,5 g (10%) palládium/szén katalizátort 300 ml metanolban oldott 5,7 g (9,57 mmól) 6. példa szerinti vegyülethez adagolunk ·· ·»«· ····
-49nitrogénáramban. A kapott keveréket 1 atmoszférán 16 órán át hidrogénezzük, majd szűrjük, betöményítjük, így 4,5 g (96%) cím szerinti vegyületet nyerünk fehér hab formájában.
8. példa (D)-KámforszuIfoniI-(D)-N8-N02-arginin-szarkozin-Ng-N02-argininciklusos OEt-aminal ((8) képletű vegyület)
1,64 g (6,1 mmól) 4. példa szerinti vegyületet és 2 g (4,1 mmól) 7. példa szerinti vegyületet keverés közben feloldunk 20 ml vízmentes acetonitrilben, majd hozzáadunk 0,28 g (2 mmól)
1-hidroxi-7-azabenztriazolt és 1,5 g (4,1 mmól) O-(7-azabenztriazol-l-il)-l,l,3,3-tetrametil-uronium-hexafluor-foszfátot, végül 1,7 ml (15,8 mmól) N-metil-morfolint. 16 óra elteltével a keveréket 600 ml etil-acetáttal hígítjuk, 150-150 ml vízzel, 1 mólos vizes sósavval, vízzel, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal és sóoldattal extraháljuk, a szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A kapott olajat kromatografáljuk (szilikagél, 4/l/4=hexán/metanol/diklór-metán), így 1,25 g (43%) cím szerinti vegyületet nyerünk szürkésfehér hab formájában. Rf=0,26 (l/9=metanol/diklór-metán).
9. példa (D)-Kámforszulfonil-(D)-arginin-szarkozin-arginin-ciklusos OEt-aminal ((9) képletű vegyület)
1,25 g (10%) palládium/szén katalizátort 500 ml-es Parr edénybe teszünk, hozzáadunk 10 ml vizet és 4 ml jégecetet, majd 100 ml metanolban oldott 1,25 g (1,74 mmól) 8. példa szeI • · · · · · «· ·»*· ··*·
-50rinti vegyületet. A keveréket hidrogénatmoszférában 40 psi nyomáson 3 napig rázzuk, majd a katalizátort szűrjük, a szűrletet vákuumban betöményítjük, a kapott olajat azeotroposan toluollal desztilláljuk az ecetsav eltávolítására, így 1 g cím szerinti vegyületet nyerünk kvantitatív kihozatallal.
10. példa (D)-KámforszuIfonil-(D)-arginin-szarkozin-arginin-aldehid ((10) képletű vegyület) g (1,7 mmól) 9. példa szerinti vegyületet feloldunk 20 ml 50/50=víz/acetonitril elegyben keverés közben, lehűtjük 0°-ra jégfürdővel, majd az oldathoz lassan, 50 ml 60 t%-os hexafluor-foszforsav/víz oldatot adunk. 1 óra elteltével a keverék pH-ját pH=4 értékre beállítjuk, telített vizes nátium-acetáttal. A keveréket ezután celliten szűrjük. A cím szerinti vegyületet a szűrletből nyerjük ki preparatív HPLC-vel (2 inch Vydac C18 oszlop,
7->28% acetonitril/víz gradiens, amely 0,1% trifluor-ecetsavat tartalmaz, 6 perc, áramlási sebesség 115 ml/perc), a frakciókat egyesítjük és liofílizáljuk. Tömegspektroszkópiával (FAB) igazoljuk a molekulatömeget, amelynek számított értéke 598,7.
11. példa
Szarkozin-O-fluor-metilészter-hidrokloridsó ((11) képletű vegyület) g (158 mmól) Boc-szarkozint feloldunk 500 ml diklór-metánban, és keverés közben hozzáadunk 15,7 g (158 mmól) karbonil-diimidazolt. 15 perc elteltével 29,5 g (150 mmól)
9-fluorén-metanolt adagolunk és a keverést folytatjuk. 16 óra elteltével a keveréket 1200 ml etil-acetáttal hígítjuk, 300-300 ml i
« ·
-51 • » · · · « · fc * · ··· vízzel, 1 mólos vizes sósavval, vízzel, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal és sóoldattal extraháljuk, a szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A kapott olajos anyagot 500 ml diklór-metánban oldjuk, 100 ml 4 mólos sósav/dioxán oldattal kezeljük, majd 12 óra elteltével a cím szerinti vegyületet kicsapjuk úgy, hogy a keveréket 1000 ml éterbe öntjük erőteljes keverés közben a csapadékot szűrjük, vákuumban szárítjuk, így 35 g (73%) cím szerinti vegyületet nyerünk szürkésfehér por formájában.
12. példa (D)-Ng-NO2-Arginin-szarkozin-O-fIuorenil-metilészter-hidrokloridsó ((12) képletű vegyület) g (31,3 mmól) Boc-(D)-N8-nitroarginint feloldunk 150 ml vízmentes dimetil-formamidban és keverés közben hozzáadunk 21,2 g (40,5 mmól) 11. példa szerinti vegyületet, majd ezt követően 13,9g (31,3 mmól) benztriazol-l-il-oxi-trisz-(dimetil-amino)-foszfonium-hexafluor-foszfátot és 120,7 ml (156,5 mmól) 2,4,6-kollidint. A kapott keveréket 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd feloldjuk 1200 ml etil-acetátban és 350-350 ml vízzel, 1 mólos vizes sósavval, vízzel, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal és sóoldattal mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. Rf=0,45 (l/9=metanol/diklór-metán).
A kapott olajos anyagot feloldjuk 500 ml diklór-metánban, hozzáadunk 100 ml 4 mólos sósav/dioxán oldatot. 12 óra eltelté4« • ♦ν» ··*·
-52vei a cím szerinti vegyületet kicsapjuk úgy, hogy a keveréket 500 ml dietil-éterbe öntjük, erőteljes keverés közben. A kapott csapadékot szűrjük, vákuumban szárítjuk, így 15 g (95%) cím szerinti vegyületet nyerünk szűrkésfehér por formájában.
13. példa
BenzilszulfoniI-(D)-Ng-NC>2-arginin-szarkozin ((13) képletű vegyület)
7,5 g 14,8 mmól) 12. példa szerinti vegyületet feloldunk 30 ml vízmentes dimetil-formamidban, és 45 ml acetonitrilben és hozzáadunk 4,2 g (22,3 mmól) α-toluolszulfonil-kloridot, majd 12,9 ml (74,3 mmól) diizopropil-etil-amint. A kapott keveréket 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd 7,3 ml (74,2 mmól) piperidint adunk a fluorenil-metil-csoport eltávolítására. További 12 óra után a keveréket 600 ml etil-acetátban feloldjuk és kétszer 200-200 ml telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát oldatba extraháljuk. A vizes frakciókat egyesítjük, 200 ml etil-acetátban mossuk, majd pH=4-ig megsavanyítjuk koncentrált sósavval. Ezután kétszer 300-300 ml etil-acetáttal extraháljuk, a szerves frakciókat 300 ml sóoldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és az oldatot vákuumban eltávolítjuk. így 3,28 g (50%) cím szerinti vegyületet vegyületet nyerünk szürkésfehér hab formájában. Rp=0,15 (1 /9=metanol/diklór-metán).
14. példa
Benzilszulfonil-(D)-Ng-NC>2-arginin-szarkozin-Ng-N02-arginin-ciklusos OEt-aminal ((14) képletű vegyület)
-532,25 g (8,42 mmól) 4. példa szerinti vegyületet és 3,12 g (7,02 mmól) 13. példa szerinti vegyületet keverés közben feloldunk 10 ml vízmentes dimetil-formamidban és 30 ml vízmentes acetonitrilben. A kapott keveréket ezután 2,02 g (10,5 mmól) l-etil-3-(3-dimetil-amino-propil)-karbodiimid-hidrokloridsót és 1,42 g (10,5 mmól) 1-hidroxi-benztriazol-monohidrátot, majd ezt követően 6 ml (4,5 mmól) diizopropil-etil-amint. 16 óra elteltével a keveréket vákuumban betöményítjük, majd 600 ml etil-acetáttal hígítjuk és 150-150 ml vízzel, 1 mólos vizes sósavval, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal, majd sóoldattal extraháljuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük az oldatot vákuumban eltávolítjuk, így 3,29 g (71 %) cím szerinti vegyületet nyerünk szürkésfehér hab formájában. TLC-vel két folt mutatkozik, Rf=0,40, illetve 0,50 (1 /9=metanol/diklór-metán).
15. példa
Benzilszulfonil-(D)-arginin-szarkozin-arginin-ciklusos
OEt-aminal ((15) képletű vegyület) g (10%) szénhordozós palládiumot 500 ml-es Parr edénybe teszünk, majd hozzáadunk 10 ml vizet és 10 ml jégecetet. A keverékhez ezután 100 ml etanolban oldott, 3,29 g (5 mmól) 4. példa szerinti vegyületet adagolunk, majd a keveréket hidrogénatmoszférában 40 psi nyomáson 5 napon át rázzuk. (A katalizátort kétszer eltávolitottuk és újat tettünk). A katalizátort ezután szűréssel elválasztjuk, a szűrletet vákuumban betöményítjük, a kapott olajos anyagot azeotroposan toluollal desztil···· ····
-54láljuk a maradék ecetsav eltávolítására, így 2,8 g cím szerinti vegyületet nyerünk kvantitatív kihozatallal.
16. példa
Benzilszulfonil-(D)-arginin-szarkozin-arginin-aldehid ((16) képletű vegyület)
2,8 g (5 mmól) 15. példa szerinti vegyületet felodunk 40 ml vízben, lehűtjük 0°-ra jégfürdőn keverés közben, majd hozzáadunk lassan 40 ml koncentrált sósavat. 1,5 óra elteltével a reakció HPLC vizsgálat szerint végbement, ekkor a pH-t pH=4-re beállítjuk telített vizes nátrium-acetáttal. A kapott keveréket ezután celliten szűrjük. A cím szerinti vegyületet a szűrletből nyerjük preparatív HPLC-vei (2 inch Vydac Cl8 oszlop,
5-»17% acetonitril/víz gradiens, amely 0,1% trifluor-ecetsavat tartalmaz, átfutási idő 55 perc, áramlási sebesség 115 ml/perc), az egyesített frakciókat liofílizáljuk. A számított molekulatömeget, amely 539,6, tömegspektroszkópiával (FAB) igazoljuk.
17. példa (2-Karbometoxi)-benzolszulfonil-(D)-N8-nitroargininil-szarkozin-O-fluorenil-metilészter ((17) képletű vegyület)
0,99 ml (7,5 mmól) kollidint elkeverünk 25 ml acetonitrilben szuszpendált 1,5 g (3 mmól) 12. példa szerinti vegyüléttel és 0,77 g (3,3 mmól) 2-karbometoxi-benzolszulfonil-kloriddal szobahőmérsékleten. A keveréket 18 órán át keverjük, majd 30 ml desztillált vizet adunk hozzá és vákuumban betöményítjük és a visszamaradó anyagot kétszer 50-50 ml etil-acetáttal extraháljuk, 50 ml 3 %-os vizes sósavval, 50 ml sóoldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk és • ·
-55betöményítjük vákuumban. 1,7 g 84% cím szerinti vegyületet nyerünk halványsárga hab formájában, Rf=0,81 (9/1 =diklór-metán/metanol).
18. példa (2-Karbometoxi)-benzolszulfonil-(D)-Ng-nitroa rgininal-sza rkozin ((18) képletű vegyület)
2,5 ml (25 mmól) piperidint 20 ml acetonitrilben oldott 1,7 g (2,5 mmól) 17. példa szerinti vegyülethez adagolunk, majd 1,5 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután vákuumban betöményítjük, a visszamaradó anyagot 50 ml etil-acetáttal hígítjuk, kétszer 50-50 ml vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal extraháljuk, koncentrált sósavval pH=l értékig megsavanyítjuk, etil-acetáttal extraháljuk, sóoldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban betöményítjük. így 1 g (80%) cím szerinti vegyületet nyerünk fehér hab formában.
Rr=0,10 (9/1 =diklór-metán/metanol).
19. példa (2-Karbometoxi)-benzolszulfonil-(D)-Ng-nitroa rgininal-sza rkozin-Ng-nitroarginin-etil-amin ((19) képletű vegyület) g (2 mmól) 18. példa szerinti vegyületet és 0,66 g (2,5 mmól) 4. példa szerinti vegyületet 20 ml acetonitrilben szuszpendálunk, majd hozzáadunk 0,48 g (2,5 mmól) 1 -etil-3-(3-dimetil-amino-propil)-karbodiimid-hidrokloridsót, majd 0,34 g (2,5 mmól) 1-hidroxi-benztriazol-monohidrátot. A keveréket 30 percen át keverjük, majd 0,70 ml (56 mmól) N-metil-morfolint adunk hozzá. 48 órán át szobahőmérsékleten keverjük a ke véré• ·
-56ket, majd vákuumban betöményítjük, a visszamaradó anyagot kétszer 50-50 ml etilacetáttal extraháljuk, 50 ml 3%-os vizes sósavval, majd 50 ml sóoldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban betöményítjük. így 0,77 g (55%) cím szerinti vegyületet nyerünk halványsárga hab fromájában. Rf=0,73 (9/l=diklór-metán/metanol).
20. példa (2-Karbometoxi)-benzolszulfonil-(D)-argininal-szarkozin-arginin-etil-aminal ((20) képletű vegyület)
0,77 g (1,1 mmól) 19. példa szerinti vegyületet feloldunk 20 ml metanolban, 5 ml ecetsavban és 5 ml desztillált vízben, majd a kapott oldatot egy 250 ml-es Parr készülékbe tesszük. Az edényt argongázzal átöblítjük, majd bemérünk 0,3 g (10%) palládium/szén katalizátort és a keveréket 50 psi nyomáson 2,5 napon át rázzuk, majd celliten szűrjük, betöményítjük vákuumban, így nyerjük a cím szerinti vegyületet szürkésfehér hab formájában.
21. példa (2-Karbometoxi)-benzolszuIfonil-(D)-argininal-szarkozin-argininal ((21) képletű vegyület)
0,3 g (0,49 mmól) 20. példa szerinti vegyületet feloldunk 8 ml (48 mmól) 6 n sósavban 0°-on, majd 0°-on 4 órán át, majd szobahőmérsékleten 1,5 órán át keverjük. A keveréket ezután 0°-ra visszahűtjük, hozzáadunk 20 ml telített nátrium-acetátot (pH=4-ig), majd az anyagot fordított fázisú HPLC-vel tisztítjuk, a kapott anygot liofilizáljuk, így ynerjük a terméket fehér por • · • · · >
-57formájában. Az elméleti molekulatömeget (583) spektrofotometriával (FAB) igazoljuk.
22. példa (D)-KámforszulfoniI-L-metionin-szulfon-O-benzilészter ((22) képletű vegyület)
3,86 g (12,5 mmól) L-metionin-szulfon-O-benzilészter-hidrokloridsót feloldunk 120 ml vízmentes 50/50=dimetil-formamid/tetrahidrofuránban elegyben, hozzáadunk 4,7 g (18,7 mmól) D-kámforszuífonil-kloridot, majd 8,7 ml (62,5 mmól) trietil-amint. A kapott keveréket 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd feloldjuk 800 ml etil-acetátban és 300-300 ml vízzel, 1 mólos vizes sósavval, vízzel, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal és sóoldattal mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és az oldószert vákuumabn eltávolítjuk. A kapott olajos anyagot diklór-metánban oldjuk, szilikagél szűrjük, először 5400 ml diklór-etánnal, majd 1000 ml l/9=metanol/diklór-metán eleggyel eluáljuk. A metanol/diklór-metános frakciót betöményítjük, így
5,4 g (88%) cím szerinti vegyületet nyerünk fehér hab formájában. Rf=0,65 (l/9=metanol/diklór-metán).
23. példa (D)-Kámforszulfonil-L-metionin-szulfon ((23) képletű vegyület)
5,4 g (11,1 mmól) 22. példa szerinti vegyületet feloldunk 400 ml metanolban és nitrogénáramban hozzáadunk 2,5 g (10%) palládium/szén katalizátort. A kapott keveréket 1 atmoszféra nyomáson 16 órán át hidrogénezzük, majd szűrjük, a szűrletet vákuumban betöményítjük, így 4,1 g (94%) cím szerinti vegyü• · · «
-58letet nyerünk, fehér hab formájában. Rf=0,2 (1 /9=metanol/diklór-metán).
24. példa (D)-Kámforszulfonil-L-metionin-szulfon-szarkozin-O-benzilészter ((24) képletű vegyület)
3,7 g (9,4 mmól) 23. példa szerinti vegyületet feloldunk 47 ml dimetil-formamidban, keverés közben hozzáadunk 3,3 g (9,4 mmól) szarkozin-O-benzilészter-para-toluolszulfonátsót, majd
5,1 ml (47 mmól) N-metil-morfolint és 5,4 g (9,4 mmól) benztriazol-l-il-oxi-trisz-(dimetil-amino)-foszfonium-hexafluor-foszfátot. A kapott anyagot 16 órán át keverjük, majd feloldjuk 700 ml etil-acetátban és 250-250 ml vízzé, 1 mólos vizes sósavval, vízzel, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal és sóoldattal mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, az oldószert vákuumban eltávolítjuk, így 5,16 g (96%) cím szerinti vegyületet nyerünk szürkésfehér hab formájában. Rf=0,3 (l/9=metanol/diklór-metán).
25. példa (D)-KámforszuIfoniI-L-metionin-szulfon-szarkozin ((25) képletű vegyület)
5,16 g (9,01 mmól) 24. példa szerinti vegyületet feloldunk 300 ml metanolban és nitrogénáramban hozzáadunk 4 g (10%) palládium/szén katalizátort és a kapott keveréket 1 atmoszféra nyomáson 16 órán át hidrogénezzük. A keveréket ezután szűrjük, vákuumban betöményítjük, így 3,79 g (88%) cím szerinti vegyületet nyerünk fehér hab formájában. Rf=0,2 (1 /9=metanol/diklór-metán).
• ·
-5926. péld (D)-Kámforszulfonil-L-metionin-szulfon-szarkozin-Ng-N02-arginin-ciklusos OEt-amin ((26) képletű vegyület)
0,85 g (3,1 mmól) 4. példa szerinti vegyületet keverés közben feloldunk 6 ml vízmentes dimetil-formamidban és 16 mé vízmentes acetonitrilben. A keverékhez ezután 1,7 ml (15,8 mmól) N-metil-morfolint, majd 1,15 g (2,38 mmól) 25. példa szerinti vegyületet 0,65 g (4,7 mmól) hidroxi-benzitriazol-amint és 1,8 g (4,7 mmól) 2-(lH-benztriazol-l-il)-l,l,3,3-tetrametil-uronium-hexafluor-foszáftot. A keveréket ezután 16 órán át keverjük, majd 500 ml etil-acetáttal hígítjuk, 200-200 ml vízzel, 1 mólos vizes sósavval, vízzel, telített vizes nátrium-karbonáttal és sóoldattal extraháljuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A visszamaradó olajos anyagot kromatografáljuk szilikagél (4/l/4=hexán/metanol/diklór-metán), így 0,61 g (35%) cím szerinti vegyületet nyerünk szürkésfehér hab formájában. Rf=0,45 (1 /9=metanol/diklór-metán).
27. példa (D)-Kámforszulfonil-L-metionin-szuIfon-szarkozin-arginin-ciklusos OEt-aminal ((27) képletű vegyület)
0,5 g (10%9 palládium/szén katalizátort egy 500 ml-es Parr készülékbe teszünk, hozzáadunk 6 ml vizet és 10 ml jégecetet. A kapott keverékhez ezután 60 ml metanolban oldott 0,61 g (0,84 mmól) 26. példa szerinti vegyületet adagolunk és 40 psi nyomáson 3 napon át hidrogénatmoszférában rázzuk. A katalizátort i
• ·
-60ezután szűrjük, a szűrletet vákuumban betöményítjük, a visszamardó olajos anyagot toluollal azeotroposan ledesztilláljuk a maradék ecetsav eltávolítására, így 0,5 g (87%) cím szerinti vegyületet nyerünk.
28. példa (D)-Kámforszulfonil-L-metionin-szulfon-szarkozin-arginin-aldehid ((28) képletű vegyület)
0,5 g (0,73 mmól) 27. példa szerinti vegyületet feloldunk 20 ml 50/50=víz/acetoniril elegyben keverés közben, és jeges fürdővel 0°-ra lehűtjük. A kapott oldathoz lassan 30 ml 60 tömeg%-os hexafluor-foszforsav/víz oldatot adagolunk, majd 1 óra elteltével a pH értékét pH=4-re beállítjuk telített vizes nátrium-acetáttal. A keveréket ezután celliten szűrjük, a cím szerinti vegyületet a szűrletből preparatív HPLC-vel nyerjük ki (2 inch, Vyadc C18 oszlop, 15-35% acetontril/víz gradiens, amely 0,1% trifluor-cetesavat tartalmaz, átfutási idő 40 perc, áramlási sebesség 115 ml/perc), majd az egyesített frakciókat liofílizáljuk. A számított molekulatömeget (605,7) tömegspektrometriával (FAB) igazoljuk.
29. példa
N-Boc-(D)-Metionil-szarkozin-benzilészter ((29) képletű vegyület)
17,1 g (68,58 mmól) N-Boc-(D)-metionint és 24,08 g (68,60 mmól) szarkozin-benzilészter-tozilátsót 110 ml acetonitrilben és 25 ml dimetil-formamidban 0°-on szuszpendálunk, majd hozzáadunk 30,34 g (68,58 mmól) benztriazol-l-il-oxi-trisz(dimetil-amino)-foszfonium-hexafluot-foszfátot és
-61 20,83 g (205,83 mmól) N-metil-morfolint. 30 perc után a jégfurdőt eltávolítjuk, és a keveréket 18 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután a térfogatot vákuumban 25°-on lecsökkentjük, így egy olajos anyagot nyerünk, ezt 250 ml etil-acetátbnan oldjuk, majd egymást követően 50 ml 1 n sósavval, 50 ml telített nátrium-hidrogén-karbonáttal és 50 ml sóoldattal mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, majd vákuumban betöményítjük és a kapott nyers terméket oszlopkromatográfíával szilikagélen tisztítjuk (60/40=hexán/etil-acetát), így 26,07g (92,6%) cím szerinti vegyületet nyerünk olaj formájában. A vékonyrétegkromatográfiával a cím szerinti anyag egyetlen foltot mutat, Rf=0,55 (szilikagél,
3/2=etil-acetát/hexán).
30. példa
N-Boc-(D)-Metionil-szulfon-szarkozin-benzilészter ((30) képletű vegyület) g (63 mmól) 29. példa szerinti vegyületet feloldunk 335 ml jégecetben, hozzáadunk48,7 g (316,5 mmól) nátrium-percorát-tetrahidrátot és a kapott anyagot 55°-ra melegítjük. 2,5 órán át ezen a hőmérsékleten végezzük a reakciót, majd a keveréket 1,1 liter sóoldattal hígítjuk, a vizes fázist négyszer 250-250 ml etil-acetáttal extraháljuk, a szerves extraktumokat egyesítjük, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk. Az oldatot ezután szűrjük, vákuumban betöményítjük, majd ismételten 200 ml toluollal azeotroposan váuumban az ecetsavat eltávolítjuk. A visszamaradó iszapos anyagot 200 ml etil-acetátban oldjuk, szűrjük, a szürletet betöményítjük, így 24,15 g (86,2%) cím szerinti vegyületet nyerünk fehér, szilárd anyag fromájában.
I
-62Vékonyrétegkromatográfíával az anyag egyetlen foltot mutat, Rf=0,30 (szilikagél, 2/3=etil-acetát/hexán).
31. példa
N-benzil-szulfonil-(D)-metioninil-szulfon-szarkozin-benzilészter ((31) képletű vegyület) g (15,8 mmól) 30. példa szerinti vegyületet feloldunk 50 ml diklór-metánban, majd hozzáadunk 27 ml 4 mólos sósavat dioxánban és a kapott keveréket több órán át szobahőmérsékleten keverjük addig, amíg az összes kiindulási anyag elfogy. A keveréket ezután vákuumban betöményítjük, a visszamaradó olajos anyagot acetonitrilben oldjuk, majd vákuumban betöményítjük. Ezt háromszor megismételjük. A visszamaradó olajos anyagot 17 ml acetonitrilben és 5 ml dimetil-formamidban szuszpendáljuk, jégfürdő hőmérsékletére lehűtjük és hozzáadunk 5,28 g (23,7 mmól) benzilszulfonil-kloridot és 4,80 g (47,5 mmól) N-metil-morfolint. 30 perc elteltével a jégfürdőt eltávolítjuk és az anyagot további 18 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd vákuumban betöményítjük, a kapott olajos anyagot 20 ml etil-acetátban oldjuk és egymást követően 5 ml 1 n sósavval, 50 ml telített nátrium-hidrogén-karbonáttal és 50 ml sóoldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és a szerves fázist vákuumban betöményítjük. Az így nyert nyers terméket ezután oszlopkromatográfiával szilikagél tisztítjuk (3/7=hexán/etil-acetát), így 4,42 g (56,3%) cím szerinti vegyüI letet nyerünk a szilárd anyag formájában. Az anyag vékonyrétegkromatográfíára egyetlen foltot mutat, Rf=0,70 (szilikagél, 95/5=diklór-metán/metanol).
I • · · ·
-6332. példa
N-benzil-szulfonil-(D)-metioninil-szulfon-szarkozinsav ((32) képletű vegyület)
4,42 g (8,9 mmól) 31. példa szerinti vegyületet feloldunk 200 ml tetrahidrofuránban, hozzáadunk 0,8 g (10%) palládium/szén katalizátort és a keveréket 1 atmoszféra hidrogéngáz nyomáson 18 órán át keverjük. Ezután a katalizátort leszűrjük az oldószert vákuumban eltávolítjuk, a visszamaradó olajos anyagot telített nátrium-hidrogén-karbonáttal oldjuk. Ezt az oldatot azután 100 ml etil-acetáttal extraháljuk, a szerves fázist dekantáljuk, a visszamaradó vizes fázist 100 ml etil-acetátra rétegezzük és 3 n sósavval pH=2 értékig megsavanyítjuk (pH papír). Ezután a fázisokat elválasztjuk, a szerves réteget félre teszszük és a vizes fázist tovább extraháljuk háromszor 100-100 ml etil-acetáttal. A szerves extraktumokat egyesítjük, sóoldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, majd vákuumban betöményítjük. így 3,17 g (87,6%) cím szerinti vegyületet nyerünk habos szilárd anyag formájában. A vékonyrétegkromatográfiára az anyag egyetlen foltot ad,
Rf=0,50 (szilikagél, 90/10/2=diklór-metán/metanol/ecetsav).
33. példa
N-benzil-szulfonil-(D)-metioninil-szulfon-szarkozin-nitroarginin-etil-amin ((33) képletű vegyület)
1,22 g (3 mmól) 32. példa szerinti vegyületet és 1,6 g (6 mmól) 4. példa szerinti vegyületet 15 ml acetonitrilben és 9 ml dimetil-formamidban szuszpendálunk, majd hozzáadunk 0,61 g (4,5 mmól) 1-hidroxi-benztriazol-monohidrátot, 1,71 g (4,5
-64mmól) 2-( 1 H-benztriazol-1 -il)-1,1,3,3-tetrametil-utonium-hexafluor-foszfátot, majd 1,5 g (15 mmól) N-metil-morfolint. A kapott anyagot 3 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd a térfogatot 25°-on vákuumban lecsökkentjük, a kapott olajos anyagot 600 ml etil-acetátban oldjuk, majd egymást követően 150 ml 1 n sósavval, 150 ml telített nátrium-hidrogén-karbonáttal, és 150 ml sóoldattal mossuk. A szerves réteget vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, majd vákuumban betöményítjük, a kapott nyers terméket oszlopkromatográfíával szilikagél tisztítjuk (97,5/2,5=diklór-metán/metanol), így 1,6 g (32,3%) cím szerinti vegyületet nyerünk szilárd anyag fromájában. Vékonyrétegkromatográfíával az anyag egyetelen foltot mutat Rf=0,60 (szilikagél, 90/10/2=metán/metanol/ecetsav).
34. példa
N-benzil-szulfonil-(D)-metioninil-szuIfon-szarkozin-arginin-etil-amin-acetátsó ((34) képletű vegyület)
0,50 g 80,80 mmól) 33. példa szerinti vegyületet feloldunk 40 ml metanolban, 7 ml vízben és 0,3 ml jégecetben. A kapott oldathoz 0,25 g (10%) palládium/szén katalizátort adunk és a keveréket egy Parr készülékbe tesszük és 40 psi hidrogénnyomásonl8 órán át szobahőmérsékleten rázzuk, eddigre a kiindulási anyag elfogy. A katalizátort ezután leszűrjük, az oldat térfogatát vákuumban 25°-on lecsökkentjük, a visszamaradó olajos anyaghoz toluolt adunk, többször bepároljuk, majd metanolt adagolunk és elpárologtatunk. így 0,48 g (95%) cím szerinti vegyületet nyerünk fehér szilárd anyag formájában.
··« · ······
-6535. példa
N-benzil-szulfonil-metioninil-szulfon-szarkozin-argininal ((35) képletű vegyület)
0,48 g (0,75 mmól) 34. példa szerinti vegyületet egy műanyag reakcióedénybe teszünk és 50 ml acetonirtilben és 50 ml ionmentesített vízben feloldjuk. A kapott oldatot 0°-ra lehűtjük, hozzáadunk 10 ml hexafluor-foszforsavat (60 tömeg% víz)
0°-on, majd a keveréket ezen a hőmérsékleten 2 órán át keverjük, eddigre a kiindulási anyag elfogy. A rekaciókeverékhez ezután 100 ml 2,5 mólos nátrium-acetátot adunk, ekkor a pH értéke pH=5-re emelkedik. A cím szerinti vegyületet preparatív HPLC-vel tisztítjuk (2 inch Vyadc Cl8 oszlop, 115 ml/perc áramlási sebesség, 6-25% acetonitril/víz gardiens, amely 0,1% TFA-t tartalmaz, táfutási idő 50 perc). A kapott anyag számított molekulatömegét (546,6) tömegspektroszkópiával (FAB) igazoljuk.
36. példa
S-(t-butil-acetát)-L-cisztein ((36) képletű vegyület) g (341,7 mmól) L-cisztein-hidroklorid-monohidátot és 27,33 g (683,4 mmól) nátrium-hidroxidot feloldunk 360 ml vízben és szobahőmérsékleten hozzáadunk 130 ml dioxánban 62,3 g (370,6 mmól) terc-butil-bróm-acetátot 30 perc alatt. A keveréket 18 órán át keverjük, eközben sűrű csapadék képződik. A szilárd anyagot leszűrjük, 100 ml dietil-éterrel mossuk, majd nagyvákuumban 40°-on szárítjuk, így 82,5 g (103,8%) nyers kihozatali! (beleértve a hozzá tapadó szervetlen só) cím szerinti vegyületet nyerünk.
-66···» ···· ···
37. példa
N-Boc-S-(t-butil-acetát)-L-cisztein ((37) képletű vegyület)
82,5 g (340,5 mmól) 30. példa szerinti vegyületet és 33,96 g (404 mmól) nátrium-hidrogén-karbonátot 600 ml ionmentesített vízben szuszpendálunk, majd hozzáadunk 350 ml dioxánban oldott 80,88 g (370 mmól) di-terc-butil-dikarbonátot és a kapott szuszpenziót 18 órán át keverjük. Az anyagot ezután kétszer 100-100 ml dietil-éterrel extraháljuk, a szuszpenziót 200 ml etil-acetáttal rétegezzük és 1 n sósavval pH=2-ig (pH papír) megsavanyítjuk. A kapott szerves fázist eltesszük, a vizes fázist tovább extraháljuk kétszer 200-200 ml etil-acetáttal. A szerves extraktumokat egyesítjük, sóoldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, így 84,3 g (74,6%) cím szerinti vegyületet nyerünk tiszta olaj formájában. Vékonyrétegkromatográfíára az anyag egyetlen foltot mutat, Rf=0,55 (szilikagél, 90/10/2=diklór-metán/metanol/ecetsav).
38. példa
N-Boc-S-(t-butil-acetát)-L-cisztein-szarkozin-O-benzilészert ((38) képletű vegyület)
57,32 g 8160,9 mmól) 37. példa szerinti vegyületet és 60 g (170,9 mmól) szarkozin-benzilészter-tozilátsót 300 ml acetonitrilben és 60 ml dimetil-formamidban szuszpendálunk 0°-on, majd hozzáadunk 75,2 g (170,9 mmól) benztriazol-1-il-oxi-trisz-(dimetil-amino)-foszfonium-hexafluor-foszfátot és 51,9 g (512,7 mmól) N-metil-morfolint. 30 perc után a jégfürdőt • · ··
-67*· · • · · · · · · * · · ·»· · · «···· · · · ♦ · * ···· ·· · ·· eltávolítjuk, a keveréket 48 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd a tréfogatot vákuumban 25°-on lecsökkentjük. A viszszamaradó olajos anyagot 250 ml etil-acetátban oldjuk, egymást követően 5 ml 1 n sósavval, 50 ml telített nátrium-hidrogén-karbonáttal és 50 ml sóoldattal mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, vákuumban betöményítjük, a visszamaradó nyers terméket oszlopkromatográfíával szilikagél tisztítjuk (60/40=hexán/etil-acetát), így 68,1 g (80,2%) cím szerinti vegyületet nyerünk olaj formájában. Vékonyrétegkromatográfíára az anyag egyetlen foltot mutat, Rf=0,64 (szilikagél, 3/2=etil-acetát/hexán).
39. példa
S-(t-butil-acetát)-L-cisztein-szulfon-szarkozin-0-benzilészter-hidrokloridsó ((39) képletű vegyület)
55,6 g (111,96 mól) 38. példa szerinti vegyületet feloldunk 580 ml jégecetben, és hozzáadunk 86,1 g (559,8 mmól) nátrium-perborát-tetrahidrátot. A kapott keveréket 55°-on melegítjük
2,5 órán át, majd 1 1 sóoldattal hígítjuk, a vizes fázist négyszer 250-250 ml etil-acetáttal extraháljuk, a szerves fázisokat egyesítjük és vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk. Az oldatot szűrjük, vákuumban betöményítjük, majd ismételten 200 ml toluollal azeotroposan vákuumban az ecetsavat eltávolítjuk. A visszamaradó szuszpenziót 200 ml etil-acetátban oldjuk, szűrjük, a szűrletet betöményítjük, így 50,6 g (85,5%) N-Boc-S-(t-butil-acetát)-L-cisztein-szulfon-szarkozin-O-benzilésztert nyerünk fehér, szilárd anyag fromájában. Vékonyrétegkroma·*«.· ··· *
-68• ·· · · • » · · » • « · ··· · • · · · · · · • ···· ·· · tográfiával az anyag egyetlen foltot mutat, Rf=0,50 (szilikagél, 3/2=etil-acetát/hexán).
48,6 ml (683 mmól) acetil-kloridot feloldunk 133 ml etil-acetátban, 0°-ra lehűtjük és lassan keverés közben hozzáadunk 25,5 ml (683 mmól) vízmentes metanolt. 10 perc elteltével a keveréket hagyjuk szobahőmérsékletre melegem 30 perc alatt, majd visszahűtjük 0°-ra. A keverékhez ezután lassan 1000 ml vízmentes etil-acetátban oldott 20,78 g (42,7 mmól) N-Boc-S-(t-butil-acetát)-L-cisztein-szulfon-szarkozin-O-benzilésztert adunk. 4,5 óra után csökkentett hőmérsékleten a reakció TLC-re végbementnek tűnik (I/9=metanol/metilén-klorid). A keveréket ezután vákuumban 100 ml-re betöményítjük és a cím szerinti vegyületet kicsapjuk úgy, hogy keverés közben 600 ml dietil-éterbe öntjük. A cím szerinti vegyületet szűréssel eltávolítjuk, elválasztjuk, vákkumban szárítjuk, így 11,5 g (61%) fehér poranyagot nyerünk.
40. példa
N-(D)-KámforszuIfoniI-S-(t-butil-acetát)-L-cisztein-szulfon-szarkozin-O-benzilészter ((40) képletű vegyület)
3,9 g (9,22 mmól) 39. példa szerinti vegyületet és 3,5 g (13,8 mmól) (D)-kámfor-szulfonil-kloridot feloldunk keverés közben 20 ml vízmentes dimetil-formamidban és 20 ml vízmentes tetrahidrofuránban. A keverékhez 6,4 ml (46,1 mmól) dietil-amint adunk, majd 16 óra elteltével 600 ml etil-acetáttal hígítjuk és 150-150 ml vízzel, 1 mólos vizes sósavval, vízzel, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal és sóoldattal mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk,
-69• ·· • » · · » · · *4 · ··♦ · ·
4···« 4 · · · 4 ···· ·· · ·· szűrjük és vákuumban betöményítjük, így 3,89 g (70%) cím szerinti vegyületet nyerünk sárgás-színű hab formájában. Rf=0,84 (1 /9=metanol/diklór-metán).
41. példa
N-(D)-Kámforszulfonil-S-(t-butil-acetát)-L-cisztein-szulfon-sza rkozin ((41) képletű vegyület)
3,89 g (6,49 mmól) 40. példa szerinti vegyületet feloldunk 300 ml metanolban keverés közben nitrogénáramban. A keverékhez ezután 10 g palládiumkatalizátort adunk, erőteljesen keverjük 1 atmoszféra nyomáson, majd 16 óra elteltével a katalizátort leszűrjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A viszszamaradó olajos anyagot 100 ml etil-acetátban oldjuk, a terméket 150 ml telített vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal extraháljuk, majd 100 ml etil-acetáttal mossuk, és koncentrált sósavban megsavanyítjuk. A terméket ezután háromszor 200-200 ml etil-acetáttal extraháljuk, a szerves fázisokat egyesítjük, 200 ml sóoldattal mossuk, és vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és vákuumban betöményítjük. így 1,9 g (57%) cím szerinti vegyületet nyerünk fehér hab formájában.
42. példa (D)-Kámforszulfonil-S-(t-butil-acetát)-L-cisztein-szuIfon-szarkozin-Ng-N02-arginin-ciklusos OEt-aminal ((42) képletű vegyület)
1,5 g (5,59 mmól) 4. példa szerinti vegyületet és 1,9 g (3,72 mmól) 41. példa szerinti vegyületet keverés közben feloldunk 10 ml dimetil-formamidban és 20 ml vízmentes tetrahidrofuránban. A kapott anyaghoz 0,76 g (5,6 mmól) 1-hidroxi-benztriazol• h*· ····
-70• · « · · · • · ··· « * *·· ····· • ···« ·· · ·»
-monohidrátot és 2,12 g (5,6 mmól) 2-(l H-benztriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil-uronium-hexafluor-foszfátot, majd 2 ml (19 mmól) N-metil-morfolint adagolunk. 16 óra elételtével a keveréket 600 ml etil-acetáttal hígítjuk, 150-150 ml vízzel, 1 mólos vizes sósavval, vízzel, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal és sóoldattal mossuk, a szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és az oldatot vákuumban eltávolítjuk. A visszamaradó olajos anyagot kromatografáljuk (szilikagél, 4/l/4=hexán/metanol/diklór-metán), így 1,16 g (43%) cím szerinti vegyületet nyerünk szürkésfehér hab formájában. TLC-re az anyag két foltot mutat, Rf=0,40, illetve 0,47 (1 /9=metanol/diklór-metán).
43. példa (D)-Kámforszulfonil-cisztein-szulfon-s-(t-butil-acetát)-szarkozin-arginin-ciklusos OEt-aminal ((43) képletű vegyület) g (10%) palládium/szén katalizátort egy 500 ml-es Parr készülékbe teszünk, hozzáadunk 10 ml vizet és 3 ml jégecetet és a kapott keverékhez 100 ml metanolban oldott 1,16 g (1,6 mmól) 42. példa szerinti vegyületet adunk. A keveréket 1 napon át 40 psi hidrogénnyomáson rázzuk, majd a katalizátort szűrjük, a szűrletet vákuumban betöményítjük, a visszamaradó olajos anyagból toluollal azeotroposan az ecetsavat eltávolítjuk, így 1 g cím szerinti vegyületet nyerünk.
44. példa (D)-Kámforszulfonil-s-(ecetsav)-cisztein-szulfon-szarkozin-arginin-aldehid ((44) képletű vegyület) ·*♦· ·♦·· «· • · • « • · · • ··«·
-71 **· · · ··· « · • » · fc · ·· <# *4 g (1,6 mmól) 43. példa szerinti vegyületet feloldunk 30 ml 50/50 víz/acetontril elegyben keverés közben és lehűtjük 0°-ra jégfürdőben. Az oldathoz lassan 50 ml 60 tömeg%-os hexafluor-foszforsav/víz oldatot adunk, majd 1 óra elteltével a pH-t kb. pH=4 értékre beállítjuk telített vizes nátrium-acetáttal. A keveréket ezután celliten szűrjük, a cím szerinti vegyületet a szűrletből HPLC-vel nyerjük ki (2 inch Vydac Cl8 oszlop, 8-27% acetonitril/víz gardiens, amely 0,1% trifluor-ecetsavat tartalmaz, áfutási idő 60 perc, áramlási sebesség 115 ml/perc), majd az egyesített frakciókat liofílizáljuk. A számított molekulatömeget (635,7) tömegspektroszkópiával (FAB) igazoljuk.
45. példa
Benzilszulfonil-metionin(szulfon)-metil-észter ((45) képletű vegyület)
4,9 g (30 mmól) karbonil-diimidazolt elkeverünk 60 ml diklór-metánban oldott 8 g (28,5 mmól) benzilszulfonil-metionin-szulont 0°-on, majd a keveréket hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni és további 17 órán át keverjük. Ezután 2,3 ml (57 mmól) metanolt adagolunk, a keverést 17 órán át még folytatjuk, majd az anyagot vákuumban betöményítjük. A visszamaradó anyagot kétszer 100-100 ml etil-acetáttal extraháljuk, 75 ml vizes 3%-os sósavval, 75 ml sóoldattal, 75 ml telített nátrium-hidrogén-karbonáttal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, vákuumban betöményítjük, így 6 g (71%) cím szerinti vegyületet nyerünk fehér hab formájában. Rf=0,ll (1/1 =etil-acetát/hexán).
46. példa t-Butil-N-ciklohexil-glicin
-72• ·* » · * * ♦ »··· · ((46) képletű vegyület)
7,6 ml terc-butil-bróm-acetátot 10 perc alatt 200 ml tetrahidrofuránban oldott 11,7 ml ciklohexil-aminhoz adagolunk 0°-on. Miután az adagolást befejeztük, a jégfürdőt eltávolítjuk és az anyagot szobahőmérsékleten 20 órán át keverjük. A keveréket ezután szűrjük, vákuumban betöményítjük, a terméket flash kromatográfiával szilikagél tisztítjuk (hexán/etil-acetát=4/l-»2/l), így 10,8 g (99,8%) tiszta olajat nyerünk. Rf=0,22 (l/l=etil-acetát/hexán).
47. példa
BenzilszuIfonil-metionin(szulfon)-N-ciklohexil-glicin-t-butilészter ((47) képletű vegyület) g (23,5 mmól) 46. példa szerinti vegyületet feloldunk 40 ml tetrahidrofuránban, majd 15 perc alatt hozzáadunk 2 m,ólos toluolos trimetil-alumínium oldatot (11,5 ml, 23 mmól) 0°-on.
Az anyagot 1,3 órán át keverjük, majd hozzáadunk 10 perc alatt 10 ml tetrahidrofuránban oldott 1,4 g (4,7 mmól) benzilszulfonil-metionin-szulfon-metilésztert, majd a keveréket szobahőmérsékletre melegítjük és itt 3 napon át keverjük. A keveréket ezután 50 ml hideg, 3%-os sósavba öntjük, amely még 50 ml etil-acetátot is tartalmaz, elválasztjuk, 50 ml etilacetáttal extraháljuk, 50 ml 3%-os sósavval és 50 ml sóoldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk és vákuumban betöményítjük. A visszamardó anyagot szilikagélen kromatografáljuk (diklór-metán, metanol gradiens 2-5%), így 0,36 g (16%) cím szerinti vegyületet nyerünk narancsszínű olaj formájában.
Rf=0,81 (9/1 =diklór-metán/metanol).
-73fc·· ·»* · • w · · · · · • « · ··· 4 » ···· · · * · · · • ···· ·· V ··
48. példa
Benzilszulfonil-metioninil(szuIfon)N-ciklohexil-glicinil-Ng-nitrocikloarginin-etil-aminal ((48) képletű vegyület)
0,36 g (0,76 mmól) 47. példa szerinti vegyületet szobahőmérsékleten 3,5 órán tá 5 ml trifluor-ecetsawal és 5 ml diklór-metánnal keverünk, majd hozzáadunk 5 ml toluolt és a keverket vákuumban betöményítjük.
A visszamaradó anyagot 5 ml acetonitrilben oldjuk, hozzáadunk 0,223 g (0,76 mmól) 4. példa szerinti vegyületet, 0,18 g (0,91 mmól) l-etil-3-(3-dimetil-amino-propil)-karbodiimid-hidrokloridsót, 0,12 g (0,91 mmól) 1-hidroxi-benztriazol-monohidrátot és végül 0,25 g (2,3 mmól) N-metil-morfolint. A keveréket szobahőmérsékleten 20 órán át keverjük, majd vákuumban betöményítjük, a visszamaradó anyagot kétszer 50-50 ml etil-acetáttal extraháljuk, 50 ml 3%-os vizes sósavval, 50 ml sóoldattal, 50 ml nátrium-hidrogén-karbonáttal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban betöményítjük. így 0,30 g (60%) terméket nyerünk halványsárga hab formájában. Rf=0,9 (9/l=diklór-metán/metanol).
49. példa
BenziIszulfonil-metioniniI(szulfon)N-ciklohexil-glicinil-cikloarginin-etil-aminal ((49) képletű vegyület)
0,30 g (0,47 mmól) 48. példa szerinti vegyületet feloldunk 12 ml metanolban, 2 ml ecetsavban és 2 ml desztillált vízben és a kapott oldatot egy 250 ml-es Parr készülékbe tesszük. A készüléket átöblítjük argonnal, majd bemérünk 15 g (10%) palládi-74um/szén katalizátort és a keveréket 45 psi hidrogénnyomáson
2,8 napon át rázzuk, majd szűrjük, celliten betöményítjük, így nyerjük a nyers terméket, ezt forsított fázisú HPLC-n tisztítjuk (2 inch Vydac Cl8 oszlop, áramlási sebesség 115 ml/perc 20-50% gardiens 50 perc,), majd a terméket liofílizáljuk, így 0,2 g (74%) cím szerinti vegyületet nyerünk fehér por formájában.
50. példa
Benzilszulfonil-metioninil(szulfon)N-ciklohexil-glicinil-argininal ((50) képletű vegyület)
0,20 g (0,34 mmól) 49. példa szerinti vegyületet feloldunk 3 ml acetonitrilben, jégfürdőn 0°-ra hűtjük, majd hozzáadunk 8 ml 6 n sósavat. A jégfürdőt ezután eltávolítjuk, a keveréket szobahőmérsékleten 3 órán át keverjük, majd további 1 ml koncentrált sósavat adagolunk. 1 óra elteltével 15 ml telített nátrium-acetátunk adagolunk, az oldatot szűrjük, HPLC-vel tisztítjuk. A terméket fordított fázisú HPLC-vel nyerjük ki (2 inch Vydac C18, 115 ml/perc áramlási sebesség, gradiens 13-45% acetonitril/víz, amely 0,1% trifluor-ecetsavat tartalmaz, átfutási idő 40 perc), majd liofílizáljuk, így nyerjük a cím szerinti terméket fehér por formájában. Az elméleti molekulatömeget (614) és képletet (C26H42N6O7S2) spektrofotometriával (FAB) igazoljuk.
51. példa
További benziIszuIfoniI-metioninil(szulfon)N-alkil-glicinil-cikloarginal vegyületek előállítása ((53) képletű vegyület)
A 45-50. példák szerinti eljárással állítjuk elő az (51), (51/1) és (51/2), valamint (51/3) képletű vegyületeket. Az előál-75lításnál a 46. példa szerinti ciklohexil-amin helyett más szubsztituált aminokat alkalmaztunk. Ilyenek például a következők: ciklohexil-metil-amin, 4-hidroxi-ciklohexil-amin, anilin, benzil-amin, ciklopentil-amin, izopropil-amin, izobutil-amin, R és S szek-butil-amin, 1-etil-l-amino-propán, n-butil-amin, n-propil-amin.
52. példa
Aszpartil-béta-benzilészter-szarkozin-O-fluorenil-metilészert-hidrokloridsó ((52) képletű vegyület)
5,6 g (18,3 mmól) szarkozin-O-fluorenil-metilészter-hidroklirdsót feloldunk 90 ml vízmentes dimetil-formamidban és keverés közben hozzáadunk 6,5 g (20,2 mmól) N-Boc-aszpartinsav-béta-benzilésztert, majd 8,12 g (18,4 mmól) benztriazol-1 -il-oxi-trisz(dimetil-amino)-foszfonium-hexafluor-foszfátot és 5 ml (36,7 mmól) 2,4,6-kollidint. A keveréket 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd feloldjuk 800 ml etil-acetátban és 200-200 ml vízzel, 1 mólos vizes sósavval, vízzel, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal és sóoldattal mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, az oldószert vákuumban eltávolítjuk. Rf=0,85 (1 /9=metanol/diklór-metán).
A kapott olajos anyagot 200 ml diklór-metánban oldjuk és 50 ml 4 mólos sósav/dioxán oldattal kezeljük. 12 óra elteltével a cím szerinti vegyületet kicsapjuk úgy, hogy a keveréket 500 ml éterbe öntjük erőteljes keverés közben, majd szűrjük, vákuumban szárítjuk, így 8,5 g (86%) cím szerinti vegyületet nyerünk • · • ·
-76szürkésfehér por formájában. Rf=0,5 (l/9=metanol/diklór-metán).
53. példa (D)-Kámforszulfonil-aszpartil-béta-benzilészter-szarkozin ((53) képletű vegyület)
8,2 g (15,4 mmól) 52. példa szerinti vegyületet feloldunk 30 ml vízmentes dimetil-formamidban és 50 ml acetonitrilben, hozzáadunk 5,9 g (23,6 mmól) (D)-kmáforszulfonil-kloridot, majd 14 ml (78,7 mmól) diizopropil-etil-amint. Az anyagot 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd hozzáadunk 10 ml (100 mmól) piperidint a fluorenil-metilészter eltávolítására. További 12 óra elteltével a keveréket feloldjuk 600 ml etil-acetátban és kétszer 200-200 ml telített vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal extraháljuk. A vizes fázisokat egyesítjük, 200 ml etil-acetáttal mossuk, majd sósavval kb. pH=4 értékig megsavanyítjuk. A kapott anyagot ezután kétszer 300-300 ml etil-acetáttal extraháljuk, a szerves fázisokat 300 ml sóoldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, majd az oldószert vákuumban eltávolítjuk. így 6 g (55%) cím szerinti vegyületet nyerünk szürkésfehér hab formájában. Rf=0,38 (1 /9=metanol/diklór-metán).
54. példa (D)-Kámforszulfonil-aszpartil-béta-benzilészter-szarkozin-Ng-N02-arginin-ciklusos OEt-aminal ((54) képletű vegyület)
1,18 g (4,41 mmól) 4. példa szerinti vegyületet és 2,1 g (40,1 mmól) 53. példa szerinti vegyületet keverés közben felöl-ΊΊ dunk 10 ml vízmentes dimetil-formamidban és 30 ml vízmentes tetrahidrofuránban. A kapott keverékhez hozzáadunk 0,81 g (6,02 mmól) 1-hidroxi-benztriazol-monohidrátot, 2,28 g (6,02 mmól) 2-( 1 H-benztriazol-1 -il)-1,1,3,3-tetrametil-uronium-hexafluor-foszfátot és 2 ml (20 mmól) N-metil-morfolint. 16 óra elteltével a keveréket 700 ml etil-acetáttal hígítjuk és 150 -150 ml vízzel, 1 mólos vizes sósavval, vízzel, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal és sóoldattal extraháljuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szárjük, az oldószert vákuumban eltávolítjuk, így 2,65 g (91%) cím szerinti vegyületet nyerünk szürkésfehér hab formájában. A TLC két foltot mutat, Rp=0,43, illetve 0,54 (l/9=metanol/diklór-metán).
55. példa (D)-Kámforszulfonil-aszpartil—szarkozin-arginin-ciklusos OEt-aminal ((55) képletű vegyület) g (10%) palládium/szén katalizátort egy 500 ml-es Parr készülékbe adunk, majd hozzáadunk 10 ml vizet és 10 ml jégecetet. A keverékhez ezután 100 ml metanolban oldott 2,6 g (3,5 mmól) 50.példa szerinti vegyületet adunk, majd 1 napon át 40 psi hidrogénnyomáson rázzuk. A katalizátort ezután szűrjük, a szűrletet vákuumban betöményítjük, a visszamaradó olajos anyagból toluollal azeotroposan az ecetsavat eltávolítjuk, így 2 g cím szerinti vegyületet nyerünk, ezt HPLC-vel tisztítjuk (2 inch Vydac Cl8 oszlop, áramlási sebesség 115 ml/perc, 20-60% oldószer gradiens, 20 perc), így 0,7 g (30%) cím szerinti vegyületet nyerünk fehér por formájában.
56. példa • · • · · · · «
-78(D)-Kámforszulfonil-aszpartil—szarkozin-arginin-aldehid ((56) képletű vegyület)
0,7 g (1,2 mmól) 55. példa szerinti vegyületet feloldunk 20 ml 50/50=víz/acetonitril elegyben keverés közben, majd lehűtjük jégfürdővel 0°-ra. A kapott oldathoz ezután lassan 40 ml 60 tömeg%-os vizes hexafluor-foszforsav oldatot adunk, majd 1,5 óra elteltével a keverék pH-ját pH=4 körüli értékre beállítjuk telített vizes nátrium-acetáttal. Az így kapott keveréket celliten szűrjük, a cím szerinti vegyületet a szűrletből preparatív HPLC-vel nyerjük (2 inch Vydac Cl8 oszlop, 8-25% acetonitril/víz gradiens, amely 0,1% diklór-ecetsavat tartalmaz, átfutási idő 55 perc, áramlási sebesség 115 ml/perc), majd az egyesített frakciókat liofílizáljuk. Az eméleti molekulatömeget (557,6) tömegspektroszkópiával (FAB) igazoljuk.
57. példa
3-(3-Piridil)-alanin-szarkozin-benzilészter-hidrokloridsó ((57) képletű vegyület) g (37,5 mmól) Boc-3-(3-piridil)-L-alanint feloldunk 190 ml vízmentes dimetil-formamidban és keverés közben hozzáadunk 13,2 g (37,5 mmól) szarkozin-O-benzilészter-p-toluolszulfonsavsót, majd 16,6 g (35,5 mmól) benztriazol-l-il-oxi-trisz-(dimetil-amino)-foszfonium-hexafluor-foszfátot és 21 ml (187,7 mmól) N-metil—morfolint. A keveréket 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd feloldjuk 1000 1 etil-acetátban és 200-200 ml vízben, 1 mólos vizes sósavval, vízzel, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal és sóoldattal mossuk, a szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, és az ol4 • · · · · · ·
-79···· ···· dószert vákuumban eltávolítjuk. Rf=0,57 (l/9=metanol/diklór-metán).
A kapott olajos anyagot 250 ml diklór-metánban oldjuk, majd hozzáadunk 50 ml 4 mólos sósav/dioxán oldatot. 12 óra elteltével a cím szerinti vegyületet kicsapjuk, úgy, hogy a keveréket 500 ml éterbe öntjük erőteljes keverés közben, majd szűrjük, vákuumban szárítjuk, így 5,78 g (42%) cím szerinti vegyületet nyerünk szürkésfehér por formájában.
58. példa (D)-Kámforszulfonil-3-(3-piridiI)-alanin-szarkozin-benzilészter ((58) képletű vegyület)
3,3 g (9,07 mmól) 57. példa szerinti vegyületet feloldunk 20 ml vízmentes dimetil-formamidban és 25 ml acetontrilben, hozzáadunk 3,4 g (D)-kámforszulfonil-kloridot, majd 6 ml (45 mmól) trietil-amint. A keveréket 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd feloldjuk 200 ml etil-acetátban, 100-100 ml vízzel, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal és sóoldattal mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A kapott olajos anyagot diklór-metánban oldjuk, szilikagélen szűrjük, először 500 ml diklór-metánnal, majd 1000 ml l/9=metanol/diklór-metán eleggyel eluáljuk. A metanolt/diklór-metános frakciót betöményítjük, így 3,33 g (68%) cím szerinti vegyületet nyerünk barnássárga hab formájában. Rf=0,52 (1 /9=metanol/diklór-metán).
59. példa (D)-Kámforszulfonil-3-(3-piridil)-alanin-szarkozin • · • · ·
-80((59) képletű vegyület)
3,33 g (6,15 mmól) 58. példa szerinti vegyületet feloldunk 200 ml metanolban nitrogénáramban, hozzáadunk 2,5 g (10%) palládium/szén katalizátort és a keveréket 1 atmoszféra hidrogéngáz nyomáson 4 napon át hidrogénezzük. A katalizátort a reakció során kétszer eltávolítottuk és újat adtunk. A keveréket szűrjük, vákuumban betöményítjük, így 2 g (72%) cím szerinti vegyületet nyerünk fehér hab formájában.
60. példa (D)-Kámforszulfonil-3-(3-piridiI)-alanin-szarkozin-Ng-N02-arginin-ciklusos OEt-aminal ((60) képletű vegyület)
1,54 g (5,76 mmól) 4. példa szerinti vegyületet és 2 g (4,4 mmól) 59. példa szerinti vegyületet keverés közben feloldunk 10 ml vízmentes dimetil-formamidban és 10 vízmentes acetonitrilben. A kapott keverékhez 1,3 g (6,6 mmól) l-etil-3-(3-dimetil-amino)-rpopil)-karbodiimid-hidrokloridsót, 0,9 g (6,6 mmól) 1-hidroxi-benztriazol-monohidrátot és 3 ml (22 mmól) diizopropil-etil-amint adagolunk. 16 óra elteltével a keveréket vákuumban betöményítjük, 500ml etil-acetáttal hígítjuk, 100-100 ml vízzel, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal és sóoldattal extraháljuk, a szerve fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. így 2,07 g (70%) cím szerinti vegyületet nyerünk szürkésfehér hab formájában. A TLC két foltot mutat, Rf=0,35, illetve 0,40 (l/9=metanol/diklór-metán).
61. példa
I
-81 (D)-Kámforszulfonil-3-(3-piridil)-alanin-szarkozin-arginin-ciklusos OEt-aminal ((61) képletű vegyület)
Egy 500 ml-es Parr készülékbe bemérünk 2 g (10%) palládium/szén katalizátort, valamint 10 ml vizet és 6 ml jégecetet. A keverékhez ezután 100 ml metanolban oldott 2,07 g 83,11 mmól) 60. példa szerinti vegyületet adagolunk és a keveréket 40 TLC nyomáson 3 napon át hidrogénezzük. A katalizátort ezután szűrjük, a szűrletet vákuumban betöményítjük, a kapott olajos anyagból a visszamaradó ecetsavat toluollal azeotroposan eltávolítjuk, így 1,9 g cím szerinti vegyületet nyerünk kvantitatív kihozatallal.
62. példa (D)-Kámforszulfonil-3-(3-piridil)-alanin-szarkozin-arginin-aldehid ((62) képletű vegyület)
1,9 g (3,1 mmól) 61. példa szerinti vegyületet feloldunk 30 ml 50/50=víz/acetonitril elegyben keverés közben és jégfürdőben lehűtjük 0°-ra. A kapott oldothoz lassan 40 ml 60 tömeg%-os hexafluor-foszforsav/víz oldatot adunk, majd 2 óra elteltével a pH értékét kb. pH=4-re beállítjuk telített vizes nátrium-acetáttal. A keveréket ezután celliten szűrjük, a cím szerinti vegyületet a szűrletből nyerjük ki preparatív HPLC-vel (2 inch Vydac Cl8 oszlop, 8-25% acetonitril/víz gradiens, amely 0,1% trifluor-ecetsavat tartalmaz, átfutási idő 55 perc, áramlási sebeség 115 ml/perc), majd az egyesített lifolizáljuk. Az elméleti molekultömeget (591,7) tömegspektroszkópiával (FAB) igazoljuk.
I « ·
-8263. példa
Benzolszulfonil-3-(3-piridil)-alanin-szarkozin-benzilészter ((63) képletű vegyület)
A cím szerinti vegyületet az 68. példában leírtak szerint állítjuk elő úgy, hogy 2,44 g (6,7 mmól) 57. példa szerinti vegyületet 10 ml vízmentes dimetil-formamidban és 25 ml acetonitrilben oldjuk és 1,9 g (10,1 mmól) a-toluolszulfonil-kloridot és 5 ml (34 mmól) trietil-amint alkalmazunk. így 0,86 g (27%) cím szerinti vegyületet nyerünk barnássárga hab formájában. Rf=0,45 (l/9=metanoí/diklór-metán).
64. példa
Benzolszulfonil-3-(3-pindiI)-alanin-szarkozin ((64) képletű vegyület)
A cím szerinti vegyületet az 59. példában leírtak szerint állítjuk elő úgy, hogy 0,86 g (1,78 mmól) 63. példa szerinti vegyületet oldunk 100 ml metanolban és 0,5 g (10%) palládium/szén katalizátort alkalamzunk. így 0,37 g (53%) cím szerinti vegyületet nyerünk fehér hab formájában.
65. példa
Benzolszulfonil-3-(3-piridiI)-aIanin-szarkozin-Ng-N02-arginin-ciklusos OEt-aminal ((65) képletű vegyület)
A cím szerinti vegyületet a 60. példában leírtak szerint állítjuk elő, 0,33 g (1,23 mmól) 4. példa szerinti vegyület, 0,37 g (0,95 mmól) 64. példa szerinti vegyület, 5 ml vízmentes dimetil-formamid és 5 ml vízmentes acetonitril, 0,27 g (1,4 mmól) l-etil-3-(3-dimetil-amino-propil)-karbodiimidi • · ·
-83-hidroklorisó, 0,2 g (1,4 mmól) 1-hidroxi-benztriazol-monohidrát t
és 1 ml (1,3 mmól) diizopropil-etil-amin alkalmazásával. így 0,32 g (70%) cím szerinti vegyületet nyerünk szürkésfehér hab formájában. A TLC két foltot mutat, Rf=0,30, illetve 0,35 (1 /9=metanol/diklór-metán).
66. példa
BenzoIszuIfoniI-3-(3-piridil)-aIanin-szarkozin-arginin-ciklusos OEt-aminal ((66) képletű vegyület)
A cím szerinti vegyületet a 61. példában leírtak szerint állítjuk elő, 0,3 g (10%) palládium/szén katalizátor, 5 ml víz, 1 ml jégecet, 0,32 g (0,53 mmól) 65. példa szerinti vegyület és 30 ml metanol alkalmazásával, így 0,3 g cím szerinti vegyületet nyerünk kvantitatív kihozatallal.
67. példa
BenzolszulfoniI-3-(3-piridil)-alanin-szarkozin-arginin-aldehid ((67) képletű vegyület)
A cím szerinti vegyületet a 62. példában leírtak szerint állítjuk elő, 0,29 g (0,5 mmól) 66. példa szerinti vegyület, 10 ml 50/50=víz/acetonitril és 20 ml 60 tömeg%-os hexafluor-foszforsav/víz alkalmazásával. 4 óra elteltével a pH-t kb. pH=4 értékre beállítjuk telített vizes nátrium-acetáttal, majd a kapott keveréket celliten szűrjük, a cím szerinti vegyületet a szűrletből nyerjük ki preparatív HPLC-vel (2 inch Vydac Cl8 oszlop, 5-15% acetonitril/víz gradiens, amely 0,1% trifluor-ecetsavat tartalmaz, átfutási idő 60 perc, áramlási sebesség 115 ml/perc),
az egyesített frakciókat liofilizáljuk. Az elméleti molekulatömeget (531,6) tömegspektroszkópiával (FAB) igazoljuk.
68. példa
Glicin-szakrozin-benzilészter-hidrokloridsó ((68) képletű vegyület)
5.7 g (32,5 mmól) Boc-glicint feloldunk 160 ml vízmentes dimetil-formamidban, hozzáadunk 17,1 g (48,8 mmól) szarkozin-benzilészter-p-toluolszulfonsavat, majd 14,4 g (32,5 mmól) benztriazol-1 -il-oxi-trisz(dimetil-amino)-foszfonium-hexafluor-foszfátot és 18 ml (162,7 mmól) N-metil-morfolint. A kapott keveréket szobahőmérsékleten 16 órán át keverjük, majd feloldjuk 1000 ml etil-acetátban és 300-300 ml vízzel, 1 mólos vizes sósavval, vízzel, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal és sóoldattal mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. Rf=0,78 (l/9=metanol/diklór-metán).
A kapott olajat 100 ml diklór-metánban oldjuk, majd hozzáadunk 50 ml 4 mólos sósav/dioxán oldatot. 5 óra elteltével 8,8 g cím szerinti vegyületet nyerünk ki, miután az oldószert vákuumban toluollal azeotroposan eltávolíttuk.
69. példa (D)-Kámforszulfonil-glicin-szarkozin-benzilészter ((69) képletű vegyület)
8.8 g (32,3 mmól) 68.példa szerinti vegyületet feloldunk 20 ml vízmentes dimetil-formamidban és 150 ml tetrahidrofuránban, hozzáadunk 12,1 g (48,1 mmól) (D)-kámforszulfonil-kloridot, majd 22 ml (161 mmól) trietil-amint. A kapott keveréket 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd feloldjuk 1000 ml ·»» · ·«· · • · ·· · ·
etil-acetátban, 300-300 ml vízzel, 1 mólos vizes sósavval, vízzel, telített vizes nátrium-karbonáttal majd sóoldattal mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és az oldószeret vákuumban eltávolítjuk. A visszamaradó olajos anyagot diklór-metánban oldjuk, szilikagélen szűrjük és először 500 ml diklór-metánnal, majd 1000 ml l/9=metanol/diklór-metán eleggyel eluáljuk. A metanol/diklór-metános frakciót betöményítjük, így 13,37 g (91%) cím szerinti vegyületet nyerünk szürkésfehér hab formájában. Rf=0,77 (l/9=metanol/diklór-metán).
70. példa (D)-Kámforszulfonil-glicin-szarkozin ((70) képletű vegyület) g (28,9 mmól) 69. példa szerinti vegyületet feloldunk 600 ml metanolban nitrogénáramban, majd hozzáadunk 5 g (10%) palládium/szén katalizátort és a keveréket 1 atmoszféra nyomáson 16 órán tá hidrogénezzük. A keveréket ezután szűrjük, vákuumban betöményítjük, a visszamaradó olajos anyagot 400 ml telített vizes nátrium-hidrogén-karbonátban oldjuk és 300 ml etil-acetáttal mossuk. A vizes frakciót ezután sósavval kb. pH=4-ig megsavanyítjuk, majd kétszer 500-500 ml etil-acetáttal extraháljuk. A szerves frakciókat egyesítjük, kétszer 300-300 ml sóoldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és vákuumban betöményítjük. így 2,12 g (21%) cím szerinti vegyületet nyerünk fehér hab formájában. Rf=0,31 (1 /9=metanol/diklór-metán).
71. példa (D)-KámforszulfoniI-gIicin-szarkozin-NB-N02~
-arginin-ciklusos OEt-aminal *4 »»»· ····
-86((71) képletű vegyület)
2,37 g (8,85 mmól) 4. példa szerinti vegyületet ás 2,12 g (5,90 mmól) 70. példa szerinti vegyületet keverés közben feloldunk 8 ml vízmentes dimetil-formamidban és 20 ml vízmentes acetontrilben. A kapott keverékhez 0,4 g (2,95 mmól) l-hidroxi-7-azabenztriazolt és 2,2 g 5,9 mmól) O-(7-azabenzriazol-1 -il)-1,1,3,3-tetrametil-uronium-hexafluor-foszfátot, majd 3 ml (29,5 mmól) N-metil-morfolint adagolunk. 16 óra elteltével a keveréket vákuumban betöményítjük, majd 600 ml etil-acetáttal hígítjuk és 200-200 ml vízzel ml, 1 mólos vizes sósavval, vízzel, telített vizes nátrium-karbonáttal majd sóoldattal extraháljuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, az oldószert vákuumban eltávolítjuk és a visszamaradó olajos anyagot szilikagélen kromatografáljuk (4/l/4=hexán/metanol/diklór-metán), így 2 g (59%) cím szerinti vegyületet nyerünk szürkésfehér hab formájában. A TLC két foltot mutat, Rf=0,36, illetve 0,44 (1 /9=metanol/diklór-metán).
72. példa (D)-KámforszulfoniI-glicin-szarkozin-arginin-ciklusos
OEt-aminal ((72) képletű vegyület)
Egy Parr készülékbe bemérünk 1 g (10%9 palládium/szén katalizátort, majd hozzáadunk 10 ml vizet és 7 ml jégecetet. A kapott keverékhez ezután 100 ml metanolban oldott 2 g (3,48 mmól) 71. példa szerinti vegyületet adunk és 40 psi hidrogénnyomáson 1 napon át rázzuk. A katalizátort ezután szűréssel elválasztjuk, a szűrletet vákuumban betöményítjük. Az így kapott ·< ·· ► ·*·· I · · · · · • ·· · 9 9 • · « · · » » · · * · β ·· olajos anyagból preparatív HPLC-vel nyerjük ki a cím szerinti vegyületet (2 inch Vydac C18 oszlop, 10-30% acetonitril/víz gradiens, amely 0,1% trifluor-ecetsavat tartalmaz, átfutási idő 55 perc, áramlási sebsség 115 ml/perc), mennyisége 0,57 g, 31%.
73. példa (D)-Kámforszulfonil-glicin-szarkozin-arginin-aldehid ((73) képletű vegyület)
0,57 g (1,08 mmól) 72. példa szerinti vegyületet feloldunk 20 ml 50/50=víz/acetonitril elegyben keverés közben 0°-on, majd hozzáadunk lassan 30 ml 60t%-os hexafluor-foszforsav/víz oldatot. 1 óra elteltével a pH értékét pH=4-re beállítjuk telített vizes nátrium-acetáttal, majd a kapott keveréket celliten szűrjük. A cím szerinti vegyületet a szűrletből nyerjük HPLC-vel (2 inch Vydac Cl8 oszlop, 7-27% acetonitril/víz, amely 0,1% trifluor-ecetsavat tartalmaz, átfolyási idő 60 perc, áramlási sebsség 115 ml/perc), az egyesített frakciókat liofílizáljuk. Az elméleti molekultömeget (500,6) tömegspektroszkópiával (FAB) igazoljuk.
74a példa
N-Boc-L-metionin-szulfon-O-benzilészter ((74) képletű vegyület) g (178 mmól) N-Boc-L-metionin-szulfont feloldunk 500 ml vízmentes THF-ben, lehűtjük 0°-ra, és hozzáadunk kis részletekben 34,6 g (214 mmól) karbonil-diimidazolt. 30 perc elteltével a keveréket szobahőmérsékleten 2 órán át melegítjük, amíg a CO2 felszabadulás megszűnik. Ezután 27,6 ml (267 mmól) benzil-kloridot adagolunk és a keveréket 12 órán át keverjük.
-88• » ·««· «
A keverék térfogatát ezután vákuumban lecsökkentjük, a visszamaradó anyagot 500 ml etil-acetáttal hígítjuk, a szerves fázist 100 ml telített hidrogén-karbonáttal, majd 1 ml sóoldattal, majd 100 ml telített vizes citromsav oldattal mossuk, MgSO4 felett szárítjuk, szűrjük és az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A visszamaradó fehér, szilárd anyagot 300 ml l/l=dietil-éter/hexán eleggyel mossuk, szűrjük, egy Böchner tölcséren, így 50 g (92%) cím szerinti vegyületet nyerünk. A vékonyréteg-kromatográfía egyetlen foltot mutat, Rf=0,18 (szilikagél, 3/2=hexán/etil-acetát).
74b példa
N-Boc-N-Fenil-L-metionin-szulfon-szarkozin-benzilészter
4,7 g (10 mmól) 74a példa szerinti N-Boc-L-metionin-szulfon-szarkozin-benzilészter feloldunk 20 ml vízmentes Ν,Ν-dimetil-formamidban 0°-on és hozzáadunk 2,9 ml (20 mmól) (2-jód-etil)-benzolt, majd 400 mg (10 mmól) nátrium-hidridet 60%-os diszperzió formájában. A keveréket hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni és 24 órán át keverjük. Ezután 200 ml etil-acetáttal hígítjuk, egymást követően 75 ml telített nátrium-hidrogén-karbonáttal, 75 ml sóoldattal és 75 ml 1 mólos vizes sósavval mossuk, a szerves fázist magnézium-szulfáton szárítjuk, szrűjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. Gí nyerjük a nyers, alkilezett anyagot. Ezt flash kromatográfíával szilikagélen tisztítjuk.
75. példa
N-Boc-N-Fenetil-L-metionin-szulfon-szarkozinsav *< ** • β *
Λ 9«·
-895.7 g (10 mmól) 74. példa szerinti vegyületet feloldunk 200 ml metanolban, hozzáadunk 1 g 10%-os palládium/szén katalizátort és atmoszférikus nyomáson 24 órán át hidrogénezzük. A keveréket ezután celliten szűrjük, a térfogatot vákuumban csökkentjük, így nyerjük a kívánt savat.
76. példa
N-Boc-N-Fenetil-L-metionin-szulfon-szarkozin-ciklusos nitro-arginin-etil-amin
4.8 g (10 mmól) 75. példa szerinti vegyületet feloldunk 25 ml Ν,Ν-dimetil-formamidban, hozzáadunk 1,9 g (10 mmól) l-etil-3-(3-dimetil-amino-propil)-karbodiimid-hidrokloridsót, majd 2,3 g (10 mmól) 1-hidroxi-benztriazolt és a kapott keveréket 30 percen át keverjük. Ezután 4 g (15 mmól) ciklusos nitroarginin-aminal-hidroklordiot, majd 2,2 (20 mmól) N-metil-morfolint adagolunk és a keveréket szobahőmérsékleten 18 órán tá keverjük. Ezután hozzáadunk 300 ml etil-acetátot és az anyagot egymást követően 100 ml telített nátrium-hidrogén-karbonáttal, 100 ml sóoldattal és 100 ml 1 mólos vizes sósavval mossuk, a szerves fázist magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük r
és az oldószert vákuumban betöményítjük. így nyerjük a kívánt kapcsolt terméket.
77. példa
N-Boc-N-Fenetil-L-metionin-szuIfon-szarkozin-ciklusos arginin-etil-amin-acetátsó
6.9 g (10 mmól) 76. példa szerinti vegyületet feloldunk 60 ml vízben, 20 ml ecetsavban és 600 ml metanolban, bemérjük egy 2000 ml-es Parr készülékbe és hozzáadunk 5 g (10%) palládium/szén katalizátort. A kapott keveréket 40 psi nyomáson 3 • ·
-90napon át hidrogénezzük, majd a katalizátort szűrjük, a szűrletet vákuumban betöményítjük. A terméket toluollal azeotroposan r
tisztítjuk a maradék ecetsav eltávolítására. így nyerjük a cím szerinti vegyületet.
78. példa
N-Fenetil-L-metionin-szulfon-szarkozin-argininal-bisztrifluor-acetátsó ((78) képletű vegyület)
6,4 g (10 mmól) 77. példa szerinti vegyületet feloldunk 200 ml l/l=víz/acetontril elegyben keverés közben, lehűtjük 0°-ra, majd hozzáadunk lassan 300 ml 60t%-os hexafluor-foszforsav/víz oldatot. Kb. 1 óra elteltével analitikus HPLC-vel (20-60% acetonitril/víz, amely 0,1% trifluor-ecetsavat tartalmaz) kimutatjuk, hogy a hidrolízis teljesen végbement. A keverék pH-ját pH^4 értékre beállítjuk 3 mólos vizes nátrium-acetáttal, majd a keveréket celliten szűrjük és preparatív HPLC-vel tisztítjuk. így nyerjük a cím szerinti vegyületet.
79. példa
N-Boc-L-Glutamát-(béta-3-(S)-amino-kinuklidiniI)-alfa-benzilészter ((79) képletű vegyület)
3,3 g (10 mmól) N-Boc-L-glutámsav-(béta-sav)-benzilésztert feloldunk 50 ml Ν,Ν-dimetil-formamidban, hozzáadunk 2 g (15 mmól) l-hidroxi-7-azabenztriazolt és 3,8 g (10 mmól) O-(7-azabenztriazol-1 -il)-1,1,3,3-tetrametil-aronium--hexafluor-fosfátot és akapott keveréket szobahőmérsékleten 30 percig keverjük. Ezután 3 g (15 mmól) 3-(R)-amino-kinuklidin-dihidrokloridot, majd ezt követően 10,5 ml (60 • « « ·
-91 mmól) Ν,Ν-diizopropil-etil-amint adagolunk és az anyagot szobahőmérsékleten 18 órán át keverjük. Ezután hozzáadunk 500 ml etil-acetátot, majd egymást követően 100 ml telített nátrium-hidrogén-karbonáttal, kétszer 100-100 ml vízzel és kétszer 100-100 ml sóoldattal mossuk. A szerves fázist MgSO4 felett szárítjuk, szűrjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. így nyerjük a cím szerinti vegyületet.
80. példa
N-Benzilszulfonil-L-gIutamát(béta-3(S)-amino-kinuklidinil)-alfa-benzilészter ((80) képletű vegyület)
4,5 g (10 mmól) 79. példa szerinti vegyületet feloldunk 100 ml vízmentes etil-acetátban és szobahőmérsékleten hozzáadunk 100 ml 4 mólos sósavat vízmentes dioxánban. A kapott keveréket 3 órán át keverjük, majd vákuumabn betöményítjük, így nyerjük a nyers dihidrokloridsót. Ezt ezután 50 ml vízmentes Ν,Ν-dimetil-formamidban feloldjuk, hozzáadunk 2,1 g (12 mmól) benzolszulfonil-kloridot, majd 7 ml (50 mmól) trietil-amint. A keveréket szobahőmérsékleten 15 órán át keverjük, majd hozzaádunk 400 ml etil-acetátot, a szerves fázist egymást követően kétszer 100-100 ml telített vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal, kétszer 100-100 ml sóoldattal mossuk, a szerves fázist magnézium-szulfáton szárítjuk, szárjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. így nyerjük a cím szerinti vegyületet.
81. példa
N-Benzilszulfonil-L-glutámos alfasav(béta-3(S)-amino-kinuklidinil) ((81) képletű vegyület) • ·
-924 g (10 mmól) 80. példa szerinti vegyületet feloldunk 200 ml metanolban, hozzáadunk 1 g 10%-os palládium/szén katalizátort és a kapott szuszpenziót atmoszférikus nyomáson 10 órán át hidrogénezzük. A keveréket ezután celliten szűrjük, az oldószert vákuumban eltávolítjuk, így nyerjük a cím szerinti vegyületet szabad sav formájában.
82. példa
N-BenzilszuIfonil-L-glutainát(béta-3(S)-amino-kinuklidinil)-szarkozin-benzilészter
3,1 g (10 mmól) 81. példa szerinti vegyületet feloldunk 40 ml Ν,Ν-dimetil-formamidban, hozzáadunk 2,1 g (11 mmól) l-etil-3-(3-dimetil-amino-propil)-karbodiimid-hidrokloridsót és
2,3 g (15 mmól) 1-hidroxi-benztriazolt. A kapott keveréket ezután 15 percen át szobahőmérsékleten keverjük, majd 3,5 g (10 mmól) szarkozin-benzilészter-p-toluolszulfonátsót, majd 2,2 ml (20 mmól) N-metil-morfolint adagolunk hozzá. A keveréket 15 órán át keverjük, majd 300 ml etil-acetáttal hígítjuk, egymást követően kétszer 100-100 ml telített nátrium-hidrogén-karbonáttal, vízzel, majd sóoldattal mossuk, a szerves fázist magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. így nyerjük a cím szerinti vegyületet.
83. példa
N-BenzilszuIfonil-L-gIutamát(béta-3(S)-amino-kinuklidinil)-szarkozinsav
4,7 g (10 mmól) 82. példa szerinti vegyületet feloldunk 200 ml metanolban, majd hozzáadunk 1 g (10%) palládium/szén katalizátort és atmoszférikus nyomáson 12 órán át hidrogénezzük.
• · · • ·
-93A keveréket ezután celliten szűrjük az oldószert elpárologtatjuk vákuumban, így nyerjük a cím szerinti vegyületet.
84. példa
N-BenzilszulfoniI-L-glutamát(béta-3(S)-amino-kinuklidinil)-szarkozin-ciklusos arginin-etil-aminl
3,8 g (10 mmól) 83. példa szerinti vegyületet feloldunk 30 ml Ν,Ν-dimetil-formamidban, hozzáadunk 4,2 g (11 mmól)
2-( 1 H-benztirazol-1 -il)-1,1,3,3 -tetrametil-uronium-hexafluor-foszfátot, majd 2,3 g (15 mmól) 1-hidroxi-benztriazol-monohidrátot. A keveréket 15 percig keverjük, majd 3,7 g 810 mmól) ciklusos nitro-arginin-etil-aminl-hidrokloridsót, majd ezután 2,2 ml (20 mmól) N-metil-morfolint adunk hozzá és a kapott keveréket 12 órán át keverjük. Az anyagot ezután 300 ml etil-acetáttal hígítjuk, egymást követően kétszer 100-100 ml telített nátriumhidrogén-karbonáttal, vízzel, majd sóoldattal mossuk, a szerves fázist magnézium-szulfáton szárítjuk, az oldószer vákuumban eltávolítjuk, így nyerjük a cím szerinti vegyületet.
85. példa
N-BenzilszulfoniI-L-gIutamát(béta-3(S)-amino-kinuklidinil-N’-(3-l-propeni!))-jód-szarkozin-ciklusos arginin-etil-aminl g (10 mmól) 84. példa szerinti vegyületet feloldunk 25 ml acetonitrilben, hozzáadunk 1,8 ml (20 mmól) allil-jodidot, majd a keveréket szobahőmérsékleten 15 órán át keverjük. Ezután 250 ml etil-éterrel hígítjuk és a kiváló csapadékot szűrjük, vákuumban szárítjuk, így nyerjük a cím szerinti vegyületet.
86. példa
I • ·
-94N-BenzilszuIfonil-L-glutamát(béta-3(S)-amino-kinuklidinil-N'-propiI-jodidsó)-szarkozin-ciklusos arginin-etil-aminal
8,6 g (10 mmól) 85. példa szerinti vegyületet feloldunk 60 ml vízben, 20 ml ecetsavban és 600 ml metanolban, egy 2 literes Parr készülékbe tesszük és hozzáadunk 5 g (10%) palládium/szén katalizátort. A kapott keveréket ezután 40 psi nyomáson 3 napon át hidrogénezzük, majd a katalizátor szűrjük a szűreletet vákuumban betöményítjük, és a termékből toluolos, azeotroposan eltávolítjuk a maradék ecetsavat, így nyerjük a cím szerinti vegyületet.
87. példa
N-BenziIszulfonil-L-glutamát(béta-3(S)-amino-kinuklidinil-N'-propil-jodidsó)-szarkozin-argininal
8,1 g (10 mmól) 86. példa szerinti vegyületet feloldunk 200 ml l/l=víz/acetonitril elegyben keverés közben, majd 0°-ra lehűtjük. A kapott oldathoz ezután lassan 300 ml 60 t%-os hexafluor-foszforsav/víz oldatot adunk, majd 1 elteltével analitikai HPLC-vel (20-60% acetonitril/víz, amely 0,1% trifluor-ecetsavat tartalmaz) kimutatjuk, hogy a hidrolízis teljesen végbement. A keverék pH-ját ezután pH=4-re beállítjuk 3 mólos vizes nátrium-acetáttal, a keveréket celliten szűrjük, majd preparatív HPLC-vel tisztítjuk, így nyerjük a cím szerinti vegyületet.
88. példa
N-Benzilszulfonil-L-gIutamát(béta-3(S)-amino-kinuklidinil)-szarkozin-ciklusos arginin-etil-aminal • ·
-956,9 g (10 mmól) 87. példa szerinti vegyületet feloldunk 60 ml vízben, 20 ml ecetsavban, 600 ml metanolban és egy 2000 ml-es Parr készülékbe tesszük, hozzáadunk 5 g (10%) palládium/szén katalizátort és a kapott keveréket 40 psi nyomáson 3 napon át hidrogénezzük. A katalizátort ezután szűrjük, a szűrletet ezután vákuumban betöményítjük, a kapott termékből toluollal azeotroposan a maradék ecetsavat eltávolítjuk, így nyerjük a cím szerinti vegyületet.
89. példa
N-Benzilszulfonil-L-glutamát(béta-3(S)-amino-kinuklidinil-N'-propil-jodidsó)-szarkozin-argininal ((89) képletű vegyület)
6,4 g (10 mmól) 88. példa szerinti vegyületet feloldunk 200 ml l/l=víz/acetontril oldatban keverés közben és jégfürdővel 0°-ra lehűtjük. A kapott oldathoz ezután lassan 300 ml 60t%-os hexafluor-foszoforsav/víz oldatot adunk, majd 1 óra elteltével analitikai HPLC-vel (20-60% acetontril/víz, amely 0,1% trifluor-ecetsavat tartalmaz) kimutatjuk, hogy a kiindulási vegyület hidrolízise teljesen végbement. A keverék pH-ját ezután pH=4 értékre beállítjuk 3 mólos vizes nátrium-acetáttal, majd a keveréket celliten szűrjük és preparatív HPLC-vel tisztítjuk. így nyerjük a cím szerinti vegyületet.
90. példa
N-Benzilszulfonil-S-(t-butil-acetát)-L-cisztein-szulfon-sza rkozin-benzilészert g (9,7 mmól) 39. példa szerinti vegyületet feloldunk 100 m molekulaszitával szárított etil-acetátban, hozzáadunk 26 ml
5,7 mólos vízmentes sósav/etil-acetátot (ezt in situ állítjuk elő • ·
-96acetil-kloridból vízmentes metanollal) cseppenként. A kapott keveréket szobahőmérsékleten 8 órán át keverjük, amíg a kiindulási anyag elfogy. A keveréket ezután vákuumban toluollal azeotroposan bepároljuk (3x50 ml), a kapott olajos anyagot 35 ml acetontrilben szuszpendáljuk, jégfürdővel lehűtjük, majd hozzáadunk 2,1 g (11,1 mól) benzilszulfonil-kloridot és 2,9 g (37,1 mmól) piridint. A jégfürdőt eltávolítjuk 30 perc után, majd a keverést szobahőmérsékleten 18 órán át folytatjuk. A keveréket ezután vákuumban betöményítjük, az olajos anyagot 200 ml etil-acetátban felvesszük, és egymást követően 50-50 ml 1 n sósavval, telített nátrium-hidrogén-karbonáttal és sóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, a szerves fázist vákuumban betöményítjük, így nyerjük a kívánt szulfonamid terméket.
91. példa
N-Benzilszulfonil-S-(karboxi-metil)-L-cisztein-szulfon-szarkozin-benzilészter
5,1 g (10 mmól) 90. példa szerinti vegyületet feloldunk 100 ml diklór-metánban, hozzáadunk 100 ml triklór-ecetsavat, a kapott keveréket 4 órán át szobahőmérsékleten keverjük, ezalatt a kiindulási anyag elfogy. A keveréket ezután vákuumban betöményítjük, így nyerjük a kívánt savat.
92. példa
N-Benzilszulfonil-S-((R)-alfa-metil/benzil-karboxi-metiI-amid)-L-cisztein-szulfon-szarkozin-benzilészter
4,94 g (10 mmól) 91. példa szerinti vegyületet feloldunk 40 t
Ν,Ν-dimetil-formamidban, hozzáadunk 2,1 g (11 mmól)
- etil-3 -(3 -dimetil-amino-orpil)-karbodiimid-hidrokloridsót és
2,3 g (11 mmól) 1-hidroxi-benztriazol-monohidrátot. AkeveréI • » · · ·
két 15 pecig keverjük, majd 2,5 ml (20 mmól) (R)-alfa-metil-benzil-amint adagolunk és a keverést szobahőmérsékleten 12 órán át folytatjuk. A keveréket ezután 300 ml etil-acetáttal hígítjuk és egymást követően 75-75 ml telített nátrium-hidrogén-karbonáttal, sóoldattal és 1 mólos sósavval mossuk. A szerves fázist magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és vákuumban betöményítjük, így nyerjük a kívánt karboxi-amidot.
93. példa
N-Benzilszulfonil-S-((R)-alfa-metil-benzil-karboxi-metil-amid)-L-cisztein-szulfon-szarkozinsav
5,97 g (10 mmól) 92. példa szerinti vegyületet feloldunk 100 ml metanolban, hozzáadunk 1 g (10%) palládium/szén katalizátort és a keveréket atmoszférikus hidrogénnyomáson 24 órán át keverjük. A keveréket ezután celliten szűrjük, a szűrletet vákuumban betöményítjük, így nyerjük a megfelelő savat.
94. példa
N-BenzilszulfoniI-L-cisztein-sziilfon-S-((R)-alfa-metil-benzil-karboxamid)-szarkozin ciklusos nitro-arginin-etil-aminal
5,1 g (10 mmól) 93. példa szerinti vegyületet feloldunk 25 ml Ν,Ν-dimetil-formamidban, hozzáadunk 1,9 g (10 mmól)
-etil-3 -(3 -dimetil-amino-propil)-karbodiimid-hidroklordisót, majd 2,3 g (15 mmól) 1-hidroxi-benztriazol-monohidrátot és a keveréket 30 percen át keverjük. Ezután 4 g (15 mmól) ciklusos nitroarginin-etil-aminal-hidrokloridot, majd 2,2 ml (20 mmól) N-metil-morfolint adagolunk. A keveréket szobahőmérsékleten 18 órán át keverjük, majd 300 ml etil-acetáttal hígítjuk és egymást követően 100-100 ml nátrium-hidrogén-karbonáttal, sóol5 » · • « « · • ·
-98dattal és 1 mólos vizes sósavval mossuk. A szerves fázist MgSO4 felett szárítjuk, szűrjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk, így nyerjük a kívánt kapcsolt terméket.
95. példa
N-Benzilszulfonil-L-cisztein-szulfon-S-((R)-alfa-metil-benzil-karboxamíd)-szarkozin ciklusos arginin-etil-aminal
8,6 g 810 mmól) 94. példa szerinti vegyületet feloldunk 60 ml vízben, 20 ml ecetsavban és 600 ml metanolban, egy 2000 ml-es Parr készülékbe tesszük,hozzáadunk 5 g 10%-os palládium/szén katalizátort és a keveréket 40 psi hidrogénnyomáson 3 napon át rázzuk. A katalizátort ezutánszűrjük, a szűrletet vákuumban betöményítjük, a termékből toluollal azeotroposan a maradék ecetsavat eltávolítjuk, így nyerjük a cím szerinti vegyületet.
96. példa
N-Benzilszulfonil-L-cisztein-szulfon-S-((R)-alfa-metil-benzil-karboxamid)-szarkozin-argininal ((96) képletű vegyület)
8,1 g (10 mmól) 95. példa szerinti vegyületet feloldunk 200 ml l/l=víz/acetonítril elegyben és keverés közben 0°-ra lehűtjük, majd hozzáadunk lassan300 ml 60 t%-os hexafluor-foszofrsav/víz oldatot és kb. 1 óra után analitikus HPLC-vel (20-60% acetonitril/víz, amely 0,1% trifluor-ecetsavat tartalmaz) kimutatjuk, hogy a kiindulási anyag hidrolízise teljesen végbement. A keverék pH-ját ezután pH=4 értékre beállítjuk 3 mólos vizes nátrium-acetáttal, a keveréket celliten szűrjük, preparatív HPLC-vel tisztítjuk, így nyerjük a cím szerinti vegyületet.
I • · · ·
-9997. példa
További vegyületek előállítása
Az 1-96. példákban leírtak szerint állítjuk elő a 97A-97I képleteknek megfelelő vegyületeket.
98. példa
Metil-2-klór-metil-benzoát ((98) képletű vegyület)
182 g (1,2 mól) metil-2-metil-benzoátot és 3,6 g (0,022 mól) 2,2'-azobisz(2-metil-propionitrilt (AIBN) elkeverünk és 60°on klórgázt vezetünk a keverékbe egy gázelosztócsőn keresztül. A hőmérsékletet a klórgáz adagolási sebességével 64-66°C értéken tartjuk. Az adagolást 5 órán át folytatjuk, majd nitrogénét vezetünk a keveréken keresztül a gázok eltávolítására, majd a keveréket szűrjük. A szűrt anyagot 500 ml éterben oldjuk, az oldatot kétszer 200 ml telített nátrium-hidrogén-karbonáttal és 200 ml sóoldattal mossuk, MgSO4 felett szárítjuk, vákuumban betöményítjük, így nyerjük a keverék terméket, mennyisége 237 g. Az elvégeztt NMR (CDCI3) vizsgálat szerint a termék 65% kívánt monoklór terméket, 33% diklór terméket és 2% kiindulási anyagot tartalmaz.
Megjegyzés: előnyös, ha a reakció lefutását NMRel 0,5 óra intervallumokban ellenőrizzük, hogy a klórozást megállítsuk akkor, amikor a monoklór térnék mennyisége elérte a 65 mól%-ot. Ezzel a gyűrű klórozását minimális értéken tartjuk (2. típusú benzil-protonok az NMR-ben). Úgy túnik, hogy a monoklór térnék maximális kihozatala 65%.
99. példa
I
- 100• ·« ·· ···· ···· • · · · · · · ·· · ··· · ·
2-Metoxi-karbonil-benziIszulfonil-klorid (tiouróniumsó útján) ((99A) és (99B) képletű vegyületek)
A. Tiouróniumsó előállítása
142 g (0,5 mól) 98. példa szerinti benzil-klorid keveréket és
38,1 g (0,5 mól) tiokarbamidot 500 ml MeOH-ban visszafolyatás közben 4 órán át melegítünk, majd lehűtjük és az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A visszamaradó anyagot éterrel jól elkeverjük, szárítjuk, így 126 g tiouróniumsót nyerünk. Az NMR (DMSO-dő) vizsgálat kimutuat két típusú benzil-protont, valamint diklór-metil mellékterméket, amely a monoklór-származékok előállítása során keletkezett.
B. Szulfonil-klorid előállítása g 99A példa szerinti tiouróniumsó keveréket 1650 ml vízben mechanikusan kömyzetei hőmérsékleten 30 percig keverjük, majd lehűtjük 0 °-ra és a keverést további 30 percen át folytatjuk. A keveréket ezután 0,2 μ nylon szűrőn szűrjük, miközben a hőmérsékletet 0°-o-n tartjuk. (A leszűrt csapadék diklór-metil- és metil-metoxi-karbonil-benzolokat, mellékterméket és a 98. példából származó kiindulási anyagot tartalmaz). A vizes szűrletet lehűtjük 0°-ra, és mechaniksu keverés közben klórgázt buborékoltatunk keresztül az oldaton. Miután a zöld színt elértük, nitrogéngázt vezetünk keresztül a keveréken a felesleges klór eltávolítására, majd 700 ml étert adagolunk és a rétegeket elválasztjuk. A vizes fázist ismételen 700 ml éterrel mossuk, az éteres oldatokat egyesítjük, 500 ml 1%-os NaHSO3 oldattal, kétszer 500-500 ml telített NaHCO3 oldattal, 500 ml sóoldattal mossuk, majd magnézium-szulfáton szárítjuk és betöI «»· · ····
-101 ményítjük, így 36,5 g terméket nyerünk. A nyers szulfonil-kloridot (90 g) 70 ml EtOAc-ból kikristályosítjuk. A terméket szűrjük, hideg EtOAc-vel mossuk, így 67 g szilárd terméket nyerünk. További 10 g anyagot nyerünk még a szűrletből (kihozatal a 2 lépésnél összesen 23,6%).
100. példa
Metil-2-bróm-metil-benzoát ((100) képletű vegyület)
15,02 g (0,1 mól) metil-o-toluétot elkeverünk 19,58 g (0,11 mól) NBS-sel 200 ml CCl4-ben és hozzáadunk 1,21 g (0,0050 mól) benzoil-peroxidot. A kapott keveréket keverjük, egy napfénylámpával besugározzuk, és lassan visszafolyatásig mnelegítjük. 15 óra elteltével az oldatot lehűtjük, szűrjük és betöményítjük. A maradékot flash kromatográfíával szilikagélen tisztítjuk (hexán, metilén-klorid:20/l-20/2 gradiens, majd végül metilén-klorid), így 15,88 g (69%) kívánt terméket nyerünk halványsrága olaj formájában. TLC (szilikagél, hexán, etil-acetát:Rf=0,3.
101. példa
Metil-2-acetiI-tio-metil-benzoát ((101) képletű vegyület)
15,87 g (0,0863 mól) 100. példa szerinti vegyületet feloldunk 140 ml vízmentes DMF-ben szobahőmérsékleten nitrogénáramban, majd hozzáadunk 9,49 g (0,083 mól, 1,2 ekvivalens) kálium-tio-acetátot kis részletekben 20 perc alatt, miközben a hőmérsékletet 25-35°C között tartjuk. 1 óra elteltével a keveréket 500 ml vízbe öntjük keverés közben, majd háromszor 100-100 ml éterrel extraháljuk. A szerves fázisokat egyesítjük,
I •··· ···· • · · · · · • · · ·· » ··«· · · · · · * ·»·· ·· · ·
- 102 háromszor 50-50 ml vízzel, 50 ml sóoldattal mossuk, majd magnézium-szulfáton szárítjuk. Az oldsózer eltávolítása után 14,88 g (96%) terméket nyerünk sárga olaj formájában, ez TLC-re tiszta (szilikagél, hexán/éter=9/l), Rf=0,2.
102. példa
O-metoxi-karbonil-benzoIszulfonsav-nátriumsó ((102) képletű vegyület)
14,88 g (0,0664 mól) 101. példa szerinti vegyületet feloldunk 110 ml ecetsavban 60°-on, hozzáadunk 30%-os H2O2-t (41,4 ml, 0,332 mól) cseppenként óvatosan, miközben a hőmérsékletet kb. 60-65°-on tartjuk. A lassú adagolás és a gondos kijelzés ellenére kb. 30 perc adagolási idő után a reakció exotermmé válik és 108°C-nál visszafolyik. Miután az exoterm reakció megszűnt, a keveréket 60°-ra lehűtjük, a maradék H2O2-t 1 óra alatt beadagoljuk. A keveréket ezután 2 órán áét 70-75°-on tartjuk, majd környzetei hőmérsékletre lehűtjük és 1 éjszakán át keverjük. Az oldószert ezután heptánnal azeotroposan eltávolítjuk (vízfürdő kisebb mint 50°, Shield), majd a maradékot kisebb mint 1 mm vákuumban 10 órán át tartjuk, így 17,63 g szulfonsavat nyerünk viszkózus sárga olaj formájában, közel kvantitatív kihozatallal. A kapott olajos anyagot 300 ml vízben feloldjuk, óvatosan kb. 75 ml 1 n HaOH oldattal semlegesítjük pH=7-ig. Az oldatot ezután háromszor 100 ml részletekben éterrel extraháljuk, rövid ideig egy forgó bepárlóba tesszük az éter nyomok eltávolítására. A vizes fázist ezután liofilizáljuk, így 17,54 g (104%) terméket nyerünklaza szerkezetű, színtelen szilárd anyag formájában. TLC (szilikagél, metilén-klorid/metanol/ecetsav=27/3/3):Rf=0,2. AzNMR analíi
I «w ··»· ··♦· « · · ··« · · ····· · · «« 4 • · · 4 · ·· »*
-103zis szerint 20% dinátriumsó van jelen az éter hidrolízisből származóan. Egy hasonló vagy nagyobb mennyiségekben végzett előállításnál, amelynél vagy HaOH-t vagy NaHCO3-mat használunk a smelegesítésre, általában 13-20% dinátriumsót tartalmazó terméket nyerünk.
103. példa
O-metoxi-karbonil-benzolszulfonil-klorid ((103) képletű vegyület)
3,16 g (80%, 2,53 g, 0,010 mól) 102. példa szerinti vegyülethez 2,08 g (0,01 mól) TLCs-öt adunk és a kapott szuszpenziót keverés közben jégfürdővel lehűtjük, miköpzben lassan 11,5 g (0,75 mól, 7 ml) POCl3-mat adagolunk hozzá. A reakciókeverék enyhén exoterm 40°C-ig, ezután környzetei hőmérsékleten keverjük. 15 óra elteltével a keveréket 40°-ra melegítjük 5 óra alatt, majd lehűtjük, acetonitrillel hígítjuk, majd egy egynyakú lombikba visszük. Az oldószert és a felesleges reagenst egy forgó bepárlóban eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot egy rövid szilikagél oszlopon gyors átvitellel tisztítjuk (hexán/etil-acetát=2/l), így 2,00 g (80%) terméket nyerünk színtelen, amorf, szilárd anyag formájában. TLC (szilikagél, hexán/etil-acetát=2/l):Rf kb. 0,5, egy koncentráció függő sáv észlelhető.
104. példa (2-Metoxi-karbonil)-benzolszuIfoniI-D-Ng-N02-arginin-szarkozin ((104) képletű vegyület)
9-,· ·**·
-104« · R · >
• » 4 ·»· • ·· · · · · • ···· «·
A cím szerinti vegyületet a 99. vagy 103. példa szerinti vegyület és a 12. példa szerinti vegyület kapcsolásával nyerjük a 13. példában leírtak szerint.
105. példa (2-Metoxi-karbonil)-benzilszulfonil-D-Ng-N02-arginin-szarkozin-Ng-N02-arginin ciklusos OEt-aminal ((105) képletű vegyület)
0,56 g (2,09 mmól) ciklusosArg(NO2)OEt aminál HC1 sóját (4. példa szerinti vegyület) és 1,05 g (2,09 mmól) (2-metoxi-karbonil)-benziIszulfonil-D-N8-NO2-arginin-szarkozint (104. példa szerinti vegyület) keverés közben feloldunk 100 ml vizes DMF-ben, majd hozzáadunk 0,60 g (3,1 mmól) EDC-t, 0,42 g (3,1 mmól) HOBt-t és 1,1 ml (10,4 mmól) NMM-et. 16 óra elteltével a keveréket 500 ml etil-acetáttal hígítjuk, 100-100 ml vízzel, 1 mólos vizes sóssavval, vízzel, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal és sóoldattal extraháljuk, a szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A visszamaradó olajat kromatografáljuk (szilikagél, l/9=metanol/metilén-klorid), így 0,5 g (33%) cím szerinti vegyületet nyerünk szürkésfehér hab formájában. Rf=0,39 (l/9=metanol/metilén-klorid).
106. példa (2-Metoxi-karbonil)-benzilszulfonil-D-arginin-szarkozin-arginin-aldehid
0,5 g (0,83 mmól) 105. példa szerinti vegyületet elkeverünk 100 ml 4/l=etanol/ecetsav eleggyel és hozzáadunk 0,5 g nedves Pearlman-féle katalizátort. A keveréket erőteljesen hidrogénatomszférában 16 órán át, majd a katalizátor szűréssel ·»«·· ·** r * »
- 105 • » 4 ··}· · t>
««·· · · · « · · * ·*·· · * « * »' eltávolítjuk, a szűrletet vákuumban betöményítjük, így 0,45 g cím szerinti vegyületet nyerünk kvantitatív kihozatallal.
107. példa (2-Metoxi-karbonil)-benzilszulfonil-D-arginin-szarkozin-arginin-aldehid ((107) képletű vegyület)
0,45 g (0,83 mmól) 106. példa szerinti vegyületet feloldunk 20 ml 50/50=víz/acetonitril elegyben keverés közben, majd hozzáadunk 3 ml 1 mólos nátrium-hidroxid oldatot. 16 óra elteltével a keveréket jégfürdővel lehűtjük, hozzáadunk 50 ml koncentrált sósavat. 1,5 óra után a reakció végbement, ekkor a pH-t pH=4 értékre beállítjuk telített vizes nátrium-acetáttal. A kapott keveréket szűrjük, majd preparatív HPLC-vel kinyerjük a cím szerinti vegyületet, majd az egyesített frakciókat liofilizáljuk.
108. példa (2-Metoxi-karbonil)-benziIszuIfonil-D-arginin-szarkozin-arginin-aldehid ((108) képletű vegyület)
A cím szerinti vegyületet a 106. példából nyerjük hidrolízissel a 21. példában leírtak szerint.
109. példa (2-Metoxi-karbonil)-benzilszulfonil-D-arginin-szarkozin-arginin ciklusos OEt-aminal ((109) képletű vegyület)
0,6 g (0,85 mmól) 19. példa szerinti vegyületet feloldunk 40 ml etanolban, hozzáadunk 4 ml 1 mólos nátrium-hidroxidot, majd 4 óra elteltével 60 ml 4/l=etanol/ecetsav elegyet és 0,5 g nedves Pearlman-féle katalizátort és a kapott keveréket
-106·· « · ··· · hidrogénatomszférában 16 órán át keverjük. A katalizátort ezután szűréssel eltávolítjuk, a szűrletet vákuumben betöményítjük. Tömegspektroszkópiával mind a cím szerinti vegyületet, mind kevés 2-etoxi-karbonil-benzolszulfonamidot mutatunk ki. A kapott olajat 20 ml 50/50 víz/acetonitril elegyben oldjuk keverés közben, majd hozzáadunk 2 ml 1 mólos nátrium-hidroxid oldatot. 2 óra ewlteltével a HPLC csak egy csúcsot mutat. A pH-t ezután 1 mólos sósavval semlegsítjük, a keveréket vákuumban betöményítjük, így nyerjük a cím szerinti vegyületet.
110. példa (2-Metoxi-karbonil)-benzilszulfonil-D-arginin-szarkozin-arginin-aldehid ((110) képletű vegyület)
0,5 g (0,8 mmól) 109. példa szerinti vegyületet feloldunk 20 ml 50/50=víz/acetonitril elegyben keverés közben, majd 0°-ra hűtjük jégfürdővel. Az oldathoz 50 ml koncentrált sósavat adunk, majd 5 óra elteltével a reakciókeveréket HPLC-re vizsgáljuk e szerint a reakció végbement. Ekkor a pH értékét pH=4-re beállítjuk telített vizes nátrium-acetáttal, a keveréket szűrjük, majd preparatív HPLC-vel nyerjük ki a cím szerinti vegyületet és az egyesített frakciókat liofílizáljuk.
111. példa (3-Metoxi-karbonil)-benziIszulfonil-D-arginin-szarkozin-arginin-aldehid ((111) képletű vegyület)
A cím szerinti vegyületet a 17-21. példákban leírtak szerint állítjuk elő és a 17. példa szerinti eljárásban alkalmazott • ·
I • · · · · • · · • · · · · · ·
- 107szulfonil-klorid helyett 3-metoxi-karbonil-benzolszulfonil-kloridot használunk.
112. példa (3-Karboxi)-benzilszulfoniI-D-arginin-szarkozin-arginin-aldehid ((112) képletű vegyület)
A cím szerinti vegyületet a 17-19., 109. és 110. péládkban leírtak szerint állítjuk elő, és a 17. példa szerinti szulfonil-klorid helyett 3-karbonil-benzolszulfonil-kloridot használunk.
113. példa (3-Metoxi-karbonil)-benzilszulfonil-D-arginin-szarkozin-arginin-aldehid ((113) képletű vegyület)
A cím szerinti vegyületet a 105-108. példákban leírtak szerint állítjuk elő, és a 105. példa szerinti kiindulási vegyületként (3-metoxi-karboml)-benzolszulfonil-D-N6-NO2-arginin-szarkozint alkalmazunk.
114. példa (3-Karboxi)-benzilszulfonil-D-arginin-szarkozin-arginin-aldehid ((114) képletű vegyület)
A cím szerinti vegyületet a 105-108. példákban leírtak szerint állítjuk elő és a 105. példa szerinti kiindulási vegyületként (3 -karboxi)-benzolszulfonil-D-Ns-N02-arginin-szarkozint alkalmazunk.
115. példa
Általános eljárás Rí helyén kámfor-származékot tartalmazó vegyületek előállítására
I ··«· · · · · • ·
-108• · · · « * · • « ♦ · ·» · · ····· ·· ·· · • · · · · ·· · · *
Az előzőekben a találmány részletes ismertetésénél és a példákban bemutatott eljárások szerint a megfelelő reagnesek alkalmazásával állítjuk elő a következő vegyületeket. Tömegspektroszkópiával igazoljuk a molekulatömeg értékeket.
Példa száma Rí X r2 r3 R4 MS*
115A d-Kámfor -so2- -ch2cooh ch3 H 557,6
115B d-Kámfor -so2- -CH2C(O)NH2 ch3 H 558
115C d-Kámfor -so2- -(CH2)2COOH ch3 H 573
115D d-Kámfor -so2- -(CH2)2C(O)OCH3 ch3 H 587
115E d-Kámfor(OH) -so2- -CH2COOH ch3 H 561
* Tömegspektroszkópiával mért értékek
A fenti vegyületeket az 5-10., 22-28., 36-44., 52-62. és/vagy 68-73. példák szerint állítjuk elő és R2 reagensként az alábbi táblázatban összefoglalt vegyületeket alkalmazzuk az R2 csoport bevitelére, amelynek sztereokémiái konfigurációja az R2 reagensé.
R2 csoport
-(CH2)3NHC(=NH)NH2
-CH2C(O)NH2
-ch2cooh
-CH2C(O)OCH3
-CH2S(O)2CH2COOH
-(CH2)2C(O)NH2
R2 reagens
Β o c-D-Ng-nitro arginin Boc-L-aszparginsav Boc-L-aszpartinsav-p-benzilészter
Boc-L-aszpartinsav-p-metilészter
L-cisztein-hidroklorid-monohidrát
Boc-L-glutamin
I • · ‘ -109 ·« « · ·«··
-(CH2)2COOH Boc-L-glutámsav-P-benzil- észter
-(CH2)2C(O)OCH3 Boc-L-glutámsav-P-metilészter
-(CH2)2S(O)2CH3 L-metionin-szuéfon-O-benzil-
észter-hidrokloridsó
116. példa
Általános eljárás Rí helyén benzilcsoportot tartalmazó vegyületek előállítására
A következő táblázatban összefoglalt vegyületeket állítjuk elő, a molekulatömeg értékek igazolására tömegspektroszkópiát alkalmazunk.
Példa száma Rí X r2 Rs R4 MS*
116A Benzil -so2- -(CH2)3NHC(=NH)NH2 ch3 H -
116B Benzil -so2- -(CH2)2COOH ch3 H 513
116C Benzil -so2- -(CH2)2C(O)OCH3 ch3 H 527
116D Benzil -so2- -(CH2)2C(O)NH2 ch3 H 512
116E Benzil -so2- -CH2C(O)NH2 ch3 H 498
116F Benzil -so2- -CH2S(O)2CH2COOH ch3 H 577
116G Benzil -so2- -(CH2)3NHC(=NH)NH2+ ch3 H
* Tömegspektroszkópiai értékek + L-konfiguráció
A fenti vegyületeket a 11-16., 29-35 és/vagy 63-67. példák szerint állítjuk elő a következő táblázatban megadott R2 reagensek alkalmazásával az R2 csoport bevitelére, ennek sztereokémiái konfigurációja az R2 csoporté.
I
-110-
R2 csoport R2 reagens
-CH2)3NHC(=NH)NH2 Boc-D-N8-nitroarginin
-CH2C(O)NH2 Boc-L-aszpar ginsav
-CH2COOH Boc-L-aszparinsav-pbenzil- észter
-CH2C(O)OCH3 Boc-L-aszpartinsav-P-metil- észter
-CH2S(O)2CH2COOH L-cisztein-hidroklorid- -monohidrát
-(CH2)2C(O)NH2 Boc-L-glutamin
-(CH2)2COOH Boc-L-glutámsav-P-benzil- észter
-(CH2)2C(O)OCH3 Boc-L-glutámsav-p-metilészter
-(CH2)2S(O)2CH3 L-metionin-szulfon
-(CH2)3NHC(=NH)NH2+ Boc-L-N8-nitro-ar ginin
117. példa
BenzilszuIfoniI-(D)-arginin-N-meti!(0-Bn)-arginin-aldehid
Az alábbiakban megadott vegyületeket a példákban megadottak szerint állítjuk elő kereskedelkmi forgalomban beszerezhető N-metil-O-benzil-szerin-terc-butilészert alkalmazásával (a Boc-szarkozin helyett). R2 reagensként Boc-Ng-D-nitroarginint alkalmaztunk. A molekulatömeg értéket tömegspektroszkópiával igazoltuk.
Rí X r2 R3 R4 MS*
Benzil -SO2- -(CH2)3NHC(=NH)NH2 ch3 -CH2-OBn 660
* Tömegspektroszkópiai értékek
I
-111 118. példa
Általános eljárás Rí helyén benzilcsoportok és R2 helyén L-Asp(OMe) oldalláncot tartalmazó vegyületek előállítására
A következő táblázatban összefoglalt vegyületeket állítjuk elő. A molekulatömeg értékeket tömegspektroszkópiával igazoljuk.
Példa száma Rí X r2 r3 R. MS *
118A Benzil -SOj- -CH2C(O)OCH3 izo-propil H 541
118B Benzil -so2- -CH2C(O)OCH3 3-pentil H 569
118C Benzil -so2- -CH2C(O)OCH3 ciklopentil H 567
118D Benzil -so2- -CH2C(O)OCH3 ciklohexil H 581
118E Benzil -so2- -CH2C(O)OCH3 i-butil H 555
118F Benzil -so2- -CH2C(O)OCH3 Chx-CH2- H 595
118G Benzil -so2- -CH2C(O)OCH3 benzil H 589
118H Benzil -so2- -CH2C(O)OCH3 n-propil H 541
1181 Benzil -so2- -CH2C(O)OCH3 ciklobutil H 553
* Tömegspektroszkópiai értékek
A fenti vegyületeket a 45-51. példákban leírtak szerint állítjuk elő, kivéve, hogy R2 reagensként Boc-L-aszpartinsav-β-metilésztert és az alábbiakban megadott R3 reagenseket alkalmazzuk. A vegyületek sztereokémiái konfigurációja az R2 reagensé.
r3 R3 reagens
• ·
-112-
i-propil N-izopropil-glicin-terc-butilészter
3-pentil N-(3-pentil)-glicin-terc-butilészter
ciklopentil N-ciklopentil-glicint-terc-butilészter
ciklohexil N-N-ciklohexil-glicin-terc-butilészter
i-butil N-izobutil-glicin-terc-butilészter
Chx-CH2 N-ciklohexil-metil-terc-butilészter
benzil N-benzil-glicin-terc-butilészter
n-propil N-propil-glicin-terc-butilészter
ciklobutil N-ciklobutil-glicin-terc-butilészter
Chx N-ciklohexil-glicin-terc-butilészter
szek-butil N-szek-butil-glicin-terc-butilészter
119. példa
Általános eljárás Rí helyén 4-tolil-csoportot tartalmazó vegyületek előállítására
Az alábbi táblázatban összefoglalt vegyületeket állítjuk elő.
A molekulatömeg értékeket tömegspektroszkópiával igazoljuk.
Példa száma Rí X r2 r3 R4 MS*
119A 4-tolil -SO2- -(CH2)3NHC(=NH)NH2 ch3 H 540
119B 4-tolil -so2- -(CH2)2C(O)NH2 ch3 H 512
119C 4-tolil -so2- -(CH2)2S(O)2CH3 ch3 H 547
* Tömegspektroszkópiai értékek
A vegyületeket a példákban megadottak szerint állítjuk elő, kivéve, hogy a benzolszulfonil-klorid helyett 4-toluolszulfonil-kloridot és az alábbiakban megadott R2 reagenseket alkalma-
• ·
-113zunk. A termékek szeterokémiai konfigurációja R.2-nél az R2 reagensével azonos.
r2 R2 reagens
-(CH2)3NHC(=NH)NH2 Boc-D-Ns-nitroar ginin
-CH2C(O)NH2 Boc-L-aszparginsav
-CH2COOH Boc-L-aszpartinsav-p-benzilészter
-CH2C(O)OCH3 Boc-L-aszpartinsav-P-metilészter
-CH2S(O)2CH2COOH L-cisztein-hidroklorid-monohidrát
-(CH2)2C(O)NH2 Boc-L-glutamin
-(CH2)2C(O)OCH3 Boc-L-glutámsav-p-benzilészter
-(CH2)2C(O)OCH3 B oc-L-glutámsav- β -metilé szter
-(CH2)2S(O)2CH3 Boc-L-metionin-szulfon
120. példa
Általános eljárás R2 helyén D-Arg vagy L-ARg oldalláncot tartalmazó vegyületek előállítására A következőben összefoglalt vegyületeket a 98-114. példákban megadott eljárások szerint állítjuk elő.
Példa száma Rí X r2 r3 R4 MS*
120 A Ph(2-CO2Me)- -so2- -(CH2)3NHC(=NH)NH2 metil H 584
120B Ph(2-CO2H)- -so2- -(CH2)3NHC(=NH)NH2 metil H 570
120C Ph(3-CO2Me) -so2- -(CH2)3NHC(=NH)NH2 metil H 584
120D Ph(3-Co2H)- -so2- -(CH2)3NHC(=NH)NH2 metil H 570
120E Ph(2-CO2Me)- ch2- -so2- -(CH2)3NHC(=NH)NH2 metil H 598
120F Ph(2-CO2H)- -so2- -(CH2)3NHC(=NH)NH2 metil H 584
• · ·
- 114• · ·
ch2-
120G Ph(3-CO2Me)- ch2- -SO2- -(CH2)3NHC(=NH)NH2 metil H
120H Ph(3-CO2H)- ch2- -SO2- -(CH2)3NHC(=NH)NH2 metil H
1201 Ph(3-CO2M) -SO2- -(CH2)3NHC(=NH)NH2+ ch3 H
120J Chx-CH2- -SO2- -(CH2)3NHC(=NH)NH2 ch3 H
120K Chx -SO2- -(CH2)3NHC(=NH)NH2 ch3 H
* Tömegspektroszkópiai érték + L-konfíguráció
121. példa
Általános eljárás R2 helyén i-butil-csoportot tartalmazó vegyületek előállítására
A 37. példában leírtak szerint állítjuk elő a vegyületeket azzal az eltéréssel, hogy a di-terc-butil-dikarbonát helyett metil-klór-hangyasavésztert éls a 36. példa szerinti vegyület helyett R2 reagensként D-leucint alkalmazunk, ezekkel a kiindulási anyagokkal nyerjük a metoxi-karbonil-D-leucint és ezt használjuk az Ri-X-NH-CH(R2)COOH helyett. A kapott vegyületek sztereokémiái konfigurációja azonos az R2 reagensével.
Példa száma Rí X r2 Rs R4 MS*
121A metil-O- CO i-butil metil -ch2oh 431
121B metil-O- CO i-butil metil -CH(CH3)2 443
♦ Tömegspektroszkópiai érték
122. példa ··* ·
-115Ri helyén alkilcsoportot és X helyén karbonilcsoportot tartalmazó vegyületek előállítása A következőkben összefoglalt vegyületeket a találmány részletes ismertetésénél és a példákban leírt eljárások szerint állítjuk elő, R-3 reagensként a 118. példa szerint vegyületeket és Rrként 2-propil-pentanonsavat alkalmazunk. R2 reagensként Boc-L-aszpartinsav-P-metilésztert alkalmazunk. A kapott vegyületek sztereokémiái konfigurációja az R2-nél azonos az R2 reagensével·
Példa száma Rí X r2 r3 R4 MS *
122A (CH3CH2)CH- co -CH2C(0)0CH3 i-propil H 513
122B (CH3CH2)CH- co -CH2C(O)OCH3 Chx H 553
122C (CH3CH2)CH- co -CH2C(O)OCH3 i-butil H 527
122D (CH3CH2)CH- co -CH2C(O)OCH3 szek-butil H 527
* Tömegspektroszkópiai érték
123. példa
Rj-X helyén metil-oxi-karbonil-csoportot tartalmazó vegyületek előállítása
Az alábbiak szerinti vegyületeket a részletes leírás és a példák szerinti eljárásokkal állítjuk elő, R2 reagensként a 115. példában megadott reagenseket alkalmazzuk és Ri-X csoportként metil-oxi-karbonil-kloridot alkalmazunk.
Példa száma Rí X r2 r3 R4 MS *
123A metil-O- CO L-CysO2-(S- -COOH) metil H 681
• ·
-116-
123B (-)metil-O- CO L-Glu(Ome) metil H
123C (-)metil-O- CO L-Glu metil H
123D (-)metil-O- CO L-Met(O2) metil H
* Tömegspektroszkópiai érték
124. példa
3-(4-Etoxi-karbonil-fenil)-bután-2-on ((124) képletű vegyület)
7,5 g etil-4-bróm-benzoátot, 3,6 g 3-butén-2-ol-t, 0,17 g trifenil-foszfínt, 0,073 g palládium-acetátot és 3,5 g nátrium-hidrogén-karbonátot 40 ml DMF-ben szuszpendálunk és 30 percen át argont buborlékoltatunk keresztül rajta. A reakcióedényt ezután egy 120°C hőmérsékletű olajfürdőn melegítjük. 3 nap elteltével a keveréket lehűtjük, celliten szűrjük, 150 ml etil-acetáttal hígítjuk, kétszer 300-300 ml sóoldattal molssuk, magnézium-szulfáton szárítjuk és betöményítjük. A kapott anyagot szilikagélen kromatografáljuk (hexán/etil-acetát=4/l), így
4,7 g cím szerinti vegyületet nyerünk, kihozatal 57%. Rf=0,59 (hexán/EtO Ac=1 /1).
125. példa
Etil-4-(2-acetoxi-etil)-benzoát ((125) képletű vegyület)
4,4 g 124. példa szerinti vegyületet feloldunk 100 ml kloroformban, hozzáadunk 13,8 g 50%-os N-klór-perbenzoesavat, majd a kapott oldatot 19 órán át visszafolyatás közben melegítjük, ekkor további 6,9 g 50%-os N-klór-perbenzoesavat adagolunk és a visszafolyatást még 24 órán át folytatjuk. A keveréket ezután szobahőmérsékletre lehűtjük, az oldószert csökkentett • ·
- 117nyomáson eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot 150 ml etil-acetáttal hígítjuk, 100-10 ml nátrium-hidrogén-karbonáttal, nátrium-tioszulfáttal és sóoldattal mossu, magnézium-szulfáton szárítjuk, majd betöményítjük. A kapott anyagot szilikagélen kromatografáljuk (hexán/etil-acetát gradiens, 9/1 —>4/1), így 2,2 g cím szerinti vegyületet nyerünk, 47%. Rf=0,70 (hexán/EtOAc=l/l).
126. példa
Etil-4-(2-hidroxi-etil)-benzoát ((126) képletű vegyület)
0,2 g nátriumból és 25 ml etanolból frissen előállított nátrium-etoxidhoz 2,1 g 125. példa szerinti vegyületet adunk, majd a keveréket olajfürdőn 65°-on 1 órán át melegítjük, majd lehűtjük szobahőmérsékletre és 3%-os sósavval semlegesítjük. Az oldószert ezután csökkentett nyomáson eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot 100 ml etil-acetáttal extraháljuk, 50 ml sóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk és betöményítjük. A kapott anyagot szilikagélen kromatografáljuk (hexán és etil-acetát gradiens, 9/1 >2/1), így 1,2 g (70%) cím szerinti vegyületet nyerünk. Rf=0,41 (hexán/EtOAc=l/l).
127. példa
2-(4-Etoxi-karbonil-fenil)-etil-karbamoil-(d)-Ng-N02-argininal-szarkozin-fluorenil-metilészter ((127) képletű vegyület) g 126. példa szerinti vegyületet és 2,7 ml kollidint feloldunk 10 ml diklór-metánban és 2 perc alatt hozzáadunk 15 ml diklór-metánban oldott foszgént (2,7 ml, 1,93 mólos toluolos oldat) 0°-on. 45 perc elteltével 2,6 g 12. példa szerinti (d)-N8‘
-118 -N02-argininil-szarkozin-fluoreml-metilészter-hidrokloridsó adagolunk hozzá egy részletben, majd a hűtőfürdőt eltávolítjuk és a keveréket szobahőmérsékleten 22 órán át keverjük. Ezután a keveréket 3%-os sósavval semlegesítjük, csökkentett nyomáson betöményítjük, a visszamaradó anyagot 200 ml etil-acetáttal hígítjuk, 50-50 ml 3%-os sósavval, sóoldattal és nátrium-hidrogén-karbonát oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk és betöményítjük. így 3,4 g (95%) cím szerinti vegyületet nyerünk, Rf=0,19 (=CH2Cl2/MeOH=95/5).
128. példa
2-(4-Etoxi-karboniI-fenil)-etiI-karbamoil-(d)-argininal-szarkozinil-arginin-etil-aminal ((128) képletű vegyület)
3,4 g 127. példa szerinti észterről eltávolítjuk a védőcsoportot piperidinnel a 18. példában leírtak szerint. A kapott karbonsavat Ng-NO2arginin-etil-aminál-hidrokloridsóval kapcsoljuk a 19. példa szerint; és a 20. példa szerinti eljárással a nitrocsoportok hidrogenolízisével nyerjük a cím szerinti vegyületet, mennyisége 1,8 g (59%).
129. példa
2-(4-Etoxi-karbonil-fenil)-etil-karbamoil-(d)-argininal-szarkozinil-argininal ((129) képletű vegyület) g 128. példa szerinti vegyületet a 21. példa szerint hidrolizálunk, így nyerjük a cím szerinti vegyületet, mennyisége 0,54 g.
130. példa ···· ··*· • · · ··· * · «··· · · · · · Α· » ··«· ·· · ·*
-119 2-(4-Etoxi-karboniI-fenil)-etil-karbamoil-(d)-argininil-szarkozinil-arginin-etil-aminal ((130) képletű vegyület)
1,8 g 128. példa szerinti vegyületet feloldunk 5 ml metanolban, hozzáadunk 6 ml lítium-hidroxidot, a keveréket 4 órán át keverjük, majd 3%-os sósavval pH=6-ig semlegsítjük, és betöményítjük. így nyerjük a cím szerinti vegyületet.
131. példa
2-(4-Etoxi-karbonil-fenil)-etil-karbamoil-(d)-argininil-szarkozinil-argininal ((131) képletű vegyület) g 130. példa szerinti vegyületet a 21. példában leírtak szerint hidrolizálunk, így 0,39 g cím szerinti vegyületet nyerünk.
132. példa
N-Boc-L-metionin-szulfon-O-benzilészter ((132) képletű vegyület) g (178 mmól) N-Boc-L-metionin-szulfont feloldunk 500 ml vízmentes THF-ben, amelyet előzőleg 0°-ra lehűtöttünk, majds hozzáadunk kis részletekben 34,6 g (214 mmól) karbonil-diimidazolt. 30 perc elteltével a keveréket szobahőmérsékletre melegítjük és tartjuk 2 órán át, amíg a CO2 képződés megszűnik. Ezután 27,5 g (267 mmól) benzil-alkoholt adagolunk a keverékhez és 12 órán át keverjük.
A keveréket ezután csökkentett nyomáson betöményítjük, a visszamaradó anyagot 500 ml etil-acetáttal hígítjuk, a szerves fázist 100-100 ml telített nátrium-hidrogén-karbonáttal, majd sóoldattal, majd telített vizes citromsawal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, az oldószert vákuumban eltávo- 120 Htjuk. A visszamaradó fehér, szilárd anyagot 300 ml dietil-éter/hexán=l/l eleggyel mossuk, majd Büchner tölcséren szűrjük, így 50 g (92%) cím szerinti vegyületet nyerünk.
TLC-vel a cím szerinti vegyület egyetlen foltot ad, Rf=0,18 (szilikagél, 3/2=hexán/etil-acetát).
133. példa
L-Metionin-szulfon-O-benzilészter-hidrokloridsó ((133) képletű vegyület) g 132. példa szerinti vegyületet feloldunk 200 ml 4 mólos dioxános sósav oldatban. Az oldódás lényegébe 2 óra alatt megy végbe, ekkor már kiindulási anyag vékonyrétegkromatográfíával nem mutatható ki. Az oldatot ezután vákuumban betöményítjük, a kapott szilárd anyagot dietil-éterrel mossuk, így 55 g (100%) cím szerinti vegyületet nyerünk fehér, szilárd anyag formájában.
134. példa
N-Benzilszulfonil-L-metionin-szulfon-O-benzilészter ((134) képletű vegyület)
4,6 g (15 mmól) 133. példa szerinti vegyületet35 ml vízmentes CELCN-ben szuszpendálunk, lehűtjük 0°-ra jégfurdőn, hozzáadunk 3,46 g benzinszulfonil-kloridot 10 ml CLhCN-ben oldva, majd 3,8 ml (45 mmól) piridint. A keveréket jégfürdön 15 órán át keverjük, majd lassan szobahőmérsékletre melegítjük.
Az oldószert vákuumban elpárologtatjuk.
A visszamaradó anyagot 200 ml etil-acetátban oldjuk, az oldatot 50-50 ml telített vizes bikarbonáttal, 50 ml sóoldattal, telített vizes citromsavval mossuk, majd MgSCL felett szárítjuk, vákuumban betöményítjük, a visszamardó olajat szilikagélen
-121·* ·· ·»a· **· • · « · * » k · *· * * • a a · « · ·
9 999 ·· · · * flash kromatográfiával tisztítjuk, így nyerjük a cím szerinti vegyületet.
135. példa
N-Benzilszulfonil-L-metionin-szulfon ((135) képletű vegyület)
1,6 g 134. példa szerinti vegyületet feloldunk 50 ml CH3OH-ban, hozzáadunk 250 mg (10%) palládium/szén katalizátort és atmoszférikus nyomáson szobahőmérsékleten 12 órán át hidrogénezzük. A keveréket ezután celliten szűrjük, az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, így nyerjük a cím szerinti vegyületet.
A. példa
ICso meghatározása
A találmány szerinti vegyületek képességét, hogy az Xa faktor katalitikus aktivitására inhibitorként hatnak annak a koncentrációnak a meghatározásával igazoltuk, amely az enzim aktivitást 50%-ban gátolja (IC50), ehhez tisztított humán Xa faktort alkalmaztunk.
Pufferként minden vizsgálatnál HBSA-t használtunk (10 mmól HEPES, pH7,5, 150 mmól nátrium-klorid, 0,1% szavarvasmarha szérumalbumin.
A vizsgálatokat úgy végeztük, hogy a Corning microtiter lemez megfelelő lyukaiba bemértünk 50 μΐ HBSA-t, 50 μΐ vizsgálandó vegyületet HBSA-val hígítva (vagy csak HBSA-t a gátlás nélkül sebesség meghatározására), valamint 50μ1 enzimet HBSA-val hígítva [tisztított humán X faktorból előállítva, beszerzés Enzyme Research Laboratories, az előállítást Bock P.E. és munkatársai szerint végeztük (Bock P.E. és mtársai (1989) * » ·*♦·
-122 Archives of Biochem. Biophys. 273:375). az enzimet HBSA-val a vizsgálat előtt a végső 0,5 nmól koncentrációra hígítottuk]. 30 perces környzetei hőmérsékleten való inkubálás után 50 μΐ S2765 szubsztrátumot adagoltunk a lyukakba ((N-alfa-benzil-oxi-kabronil-D-argininil-L-glicil-arginin-p-nitroanilid-dihidroklorid), ezt a Kabi Diagnostica cégtől szereztük be, ionmentesített vízben oldottuk, majd HBSA-val hígítottuk a vizsgálat előtt), így a lyukakban a végső össztérfogat 200 μΐ és a végső koncentráció 250 μιηόΐ (kb. 5-szörös Km). A kromogén szubsztrátum hidrolízis kezdeti sebességét 450 nm-en mutatott abszorpció változás alapján mértük, ehhez Thermo Max®
Kinetic Microplate Reader-t alkalmaztunk, a leolvasást 5 percen át végeztük, ez alatt kevesebb mint 5% használódott el a beadagolt szubsztrátumból.
ICso-ként azt az értéket határoztuk meg, amely a hidrolízist a kezdeti mértékéhez viszonyítva 50%-ban csökkent.
A következtő 1. táblázatban összefoglaljuk bizonyos előnyös vegyületekre mneghatározott IC50 értékeket (nmól).
1. táblázat
Előnyös vegyületek IC50 értéke
Vegyület IC50 (nmól)
10. példa szerinti vegyület 8,2
16. példa szerinti vegyület 1,7
21. példa szerinti vegyület 32
28. példa szerinti vegyület 1,8
35. példa szerinti vegyület 637
44. példa szerinti vegyület 7,3
50. példa szerinti vegyület kevesebb mint 25
·' » » ·«·
-123-
56. példa szerinti vegyület 4,6
62. példa szerinti vegyület 101
67. példa szerinti vegyület 926
73. példa szerinti vegyület 614
B példa
In vitro enzim vizsgálat a specificitás meghatározására
Vizsgáltuk a találmány szerinti vegyületek képességét, hogy szelektíve gátolják a Xa faktor katalitikus aktivitást, annak a koncentrációnak a meghatározásával mértük, amely 50%-ban képes az enzim aktivitást gátolni (IC50), és ezt az értéket összehasonlítottuk a következő hasonló szerin proteázokra vagy azok közül némelyikkre meghatározott értékek: trombin, rekombináns szövet plazminogén aktivátor (rt-PA), plazmin, aktivált protein C, kimotripszin, és tripszin.
A vizsgálatoknál pufferként HBSA-t alkalmaztunk (10 mmól HEPES, pH=7,5, 150 mmól nátrium-klorid, 0,1% szarvasmarha szérumalbumin).
Az IC50 meghatározásokat úgy végeztük, hogy Corning miktrotiter lemezek megfelelő lyukaiba bemértünk 50 μΐ HBSA-t, 50μ1 vizsgálandó vegyületet a meghatározott koncentrációban (ez egy széles koncentráció intervallumot fedett le) HBSA-val hígítva (vagy HBSA-t önmagában a Vo gátlás nélküli sebesség meghatározására), valamint 50 μΐ HBSA-val hígított enzimet. 30 perc környzetei hőmérsékleten történő inkubáció után az alábbiakban meghatározott koncentrációban 50 μΐ szubsztrátumot adagoltunk, így a végső térfogat 200 μΐ. A kromogén szubsztrátum hidrolízisének kezdeti sebességét a 450
W ~·\>· ··# ·
- 124• « · • · * »4·4 * • · · ·· nm-en mutatott abszorpció változással határoztuk meg, ehhez Thermo Max® Kinetic Microplate Reader berendezést alkalmaztunk, a mérést 5 percen át végeztük, amelynél az adagolt szubsztrátum kevesebb, mint 50%-át hasznosítottuk. Az IC50 érték az a beadagolt inhibitor koncentráció, amely a hidrolízis kezdeti sebességének 50%-os csökkenését eredményezte.
Az Xa faktor vizsgálatot az A. példa szerint végeztük.
Trombin vizsgálat
A trombin katalitikus aktivitását a Pefachrome t-PA (CH3SO2-D-hexahidrotirozin-glicil-L-arginin-p-nitroalinin, beszerezhető Pentapharm Ltd.) kromogén szubsztrátum alkalmazásával végeztük. A szubsztrátumot ionmentesített vízben oldottuk, majd HBSA-val hígítottuk a vizsgálat előtt, a végső koncentráció 300 pmól (kb. 5-szörös Km érték). A tisztított humán α-trombint az Enzyme Research Laboratories, Inc. cégtől szereztük be. Az enzimet HBSA-val a vizsgálat előtt 0,25 nmól végső koncentrációra hígítottuk.
Rekombináns szövet plazminogén aktivátor (rt-PA) vizsgálat
Az rt-PA katalitikus aktivitást Pefachrome t-PA (CH3SO2-D-hexahidrotirozin-glicil-L-arginin-p-nitroalanin, Pentapharm Ltd.) szubsztrátum alkalmazásával határoztuk meg. A szubsztrátumot ionmentesített vízben oldottuk, majd HPSA-val hígítottuk a vizsgálat előtt úgy, hogy a végső koncentráció 50 pmól (kb. háromszoros Km érték). A humán rt-PA-t (Activase®) a Genentech, Inc. cégtől szereztük be. Az enzimet ionmentesített vízben oldottuk, majd HPSA-val hígítottuk a vizsgálat előtt 1 nmól végső koncentrációra.
•·· »·ί*· • · · • ·
- 125·%· «
««· ··
Plazmin vizsgálat
A plazmin katalitikus aktivitását S-2251 ([D-valíl-L-leucil-L-lizin-p-nitroanilid-dihidroklorid], Kabi Diagnostica) kromogén szubsztrátum alkalmazásával határoztuk meg. A szubsztrátumot ionmentesített vízben oldottuk, majd HBSA-val hígítottuk a vizsgálat előtt 300 pmól végső koncentrációra (kb.
2,5-szörös Km érték). A tisztíott humán plazmint az Enzyme Research Laboratories, Inc. cégtől szereztük be. Az enzimet a vizsgálat előtt HBSA-val hígítottuk 1 nmól végső koncentrációra.
Aktivált protein C (aPC) vizsgálat
Az aPC katalitikus aktivitását Pefachrome PC (delta-benzil-oxi-karbonil-D-lizin-L-prolil-L-arginin-p-nitroalanin, Pentapharm Ltd.) kromogén szubsztrátum alkalmazásával határoztuk meg. A szubsztrátumot ionmentesített vízzel oldottuk, majd HBSA-val hígítottuk a 250 pmól végső koncentrációra (kb.
3-szoros Km érték). A tisztított humán aPC-t a Hematologic Technologies, Inc. cégtől szereztük be. Az enzimet a vizsgálat előtt HBSA-val hígítottuk 1 nmól végső koncentrációra.
Kimotripszin vizsgálat
A kimotripszin katalitikus aktivitást S-2586 (metoxi-szukcinil-L-arginin-L-prolil-L-tirozil-p-nitroanilid, Kabi Diagnostica) kromogén szubsztártum alkalmazásával határoztuk meg. A szubsztrátumot ionmentesített vízben oldottuk, majd HBSA-val hígíottuk a vizsgálat előtt 100 pmól végső koncentrációra (kb. 9-szeres Km). A tisztíott (3-szor kristályosított;
TRL3) szarvasmarha pankreáz alfa-kimotripszint a Wortington Biochemical Corp. cégtől szereztük be. Az enzimet felhasználás
- 126 előtt ionmentesített vízben oldottuk, majd HBSA-ban hígítottuk a vizsgálat előtt 1 nmól végső koncentrációra.
Tripszin vizsgálat
A tripszin katalitikus aktivitást S-2222 (benzoil-L-izoleucin-L-glutaminsav-[gamma-metil-észter]-L-arginin-p-nitroanilid, Kabi Diagnostica) kromogén szubsztrátum alkalmazásával határoztuk meg. A szubsztrátumot ionmentesített vízben oldottuk, majd HBSA-val hígítottuk a vizsgálat előtt 250 μιηόΐ végső koncentrációra (kb. 4-szeres Km). A tisztított (3-szór kristályosított; TRL3) szarvasmarha penkreáz tripszint Worthington Biochemical Corp. cégtől szereztük be. Az enzimet ionmentesített vízben oldottuk, HBSA-val hígítottuk a vizsgálat előtt 0,5 nmól végső koncentrációra.
A találmány szerinti bizonyos vegyületekre meghatározott IC50 értékeket (nmól) a következő 2. táblázatban foglaljuk öszsze, ezekből látható a találmány szerinti vegyületek szelektivitása az Xa faktorra, összehasonlítva más szerin proteázokkal.
2. táblázat
Példa Xa plazmin PCa tPA
10 8,16 1620 2500 >2500
16 1,1 777
21 32 2500
28 1,8 >2500 inaktív 2500
35 637 2500 inaktív inaktív
44 7,32 >2500 inaktív 250-2500
50 13,4 >2500
56 4,63 inaktív inaktív
62 101 inaktív
··«· ····
-127-
67 926 inaktív inaktív >2500
73 614 inaktív inaktív inaktív
97A 25,5 1920
97D inaktív inaktív inaktív inaktív
97E 3,42 1310 inaktív 2500
97G 13,8 2,5-25 2500-2500 >2500
97H >2500 >2500
971 22 >2500
115C 4,22 >2500 inaktív >2500
115D 2,55 >2500 inaktív 250-2500
115E 59,2 >2500 - -
116D 10,3 >2500 - -
116C 3,57 -2500 - -
116F 10 >2500 - -
117 4,56 4,33 - -
118E 11,9 -2500 >2500 inaktív
1181 36,9 >2500 >2500 inaktív
118B 74,8 -2500 >2500 inaktív
119B 8,06 1960 inaktív 250-2500
120E 11,1 -2500 - -
120H 9,6
120G 2,8
120B 20,4 >2500 - -
120J 11,5
- jelentése nem vizsgált.
··«* ····
-128C. példa (D)-Kámforszulfonil-aszpartil-szarkozin-arginin-aldehid ex vivő antikoaguláns hatása humán plazmában A találmány szerinti vegyület az 56. példa szerinti (D)-kámforszulfonil-aszpartil-szarkozin-arginin-aldehid ex vivő antikoaguláns hatását az aktivált parciális tromboplasztin idő (APTT) és protrombin idő (PT) meghosszabbodásával határoztuk meg, egyesített normál humán plazma felhasználásával.
Friss, fagyasztott, citrált egyesített normál humán plazmát a George King Biomedical Overland Park, KA cégtől szereztük be. Az APTT és PT meghatározását Coag-A-Mate RA4 automatizált koagulométerrel végeztük (General Diagnostic, Organon Technica, Oklahoma City, OK) Platelin®L vagy Simplstin® Excel (Irganon Technika, Durham, NC) felhasználásával mint alvadás iniciátorokkal, ezeket a gyártó cégek instrukciói szerint használtuk. A vizsgálatokat úgy végeztük, hogy hígítási sort készítettünk a vizsgálandó vegyületekből gyorsan felolvasztott plazmában, majd vagy 200 μΐ-t vagy 100 μΐ-t adagoltunk a lyukakba az APTT, illetve PT mérésekhez.
Mint az a 2. táblázatból kitűnik, a (D)-kámforszulfonil-aszpartil-szarkozin-arginin-aldehid megnyújtotta az APTT-t dózistól függő módon a humán plazmában, jelezve az antikoaguláns hatást humán egyedeknél. Ebből szakember arra következtet, hogy ez a vegyület hatásos antitrombotikus szer humán egyedeknél.
- 129 D példa
Többszörös testen kívüli sönt modell patkányoknál orális adagolás alkalmazásával
Az 56. példa szerinti vegyületet értékeljük egy több kamrás, A-V sönt modellel patkányoknál. Az A-V sönt modell az egyik leggyakrabban alkalmazott módszer antitrombotikus vegyületek kiértékelésére (Smith J.R. és White A.M. Br. J. Pharmacol. 77:29-38 (1982)). Ennél a modellnél lokalizált aívadást alakítunk ki - amely elsődlegesen fibrinből áll biznyos vérlemezke és makrofág részvétellel (Shand R.A: és Smith J.R. és Wallis R.B. Thromb. Rés. 36:223-232 (1984)) - egy mesterséges trombogén területen (tipikusan egy selyem- vagy pamutszál fragmens), amely egy szialstikus kamrában van, amely része egy kívül elhelyezett, a nyaki artéria és V. juguláris közötti söntnek. Az ebben a példában ismertetett eljárás egy módosított A-V sönt modell, amely lehetővé teszi a vizsgálandó anyag orális adagolását, majd a hatásosság kiértékelését 2-3 órás időintervallumokban.
Hím Harlan Sprgue Dawley patkányokat (420-450 g) legalább 72 órán át aklimatizáltunk a kísérlet előtt. Az állatoknak a műtét előtt 12 órával ételt nem, de vizet szabadon adtunk. A nem altatott kísérleti állatokat 3 vagy 4 csoportba osztottuk (6 vagy 7 kísérleti állat csoportonként) és ezeknek orálisan adagoltuk egy fecskendő tűn keresztül a vizsgálandó vegyületet 1,
3, 10 és 50 mg/kg dózisban. Közvetlenül az orális adagolás után az állatokat nátrium-pentobarbitallal (nembutal) elaltattuk, az altatószert intraperitoneálisan adagoltuk 50 mg/testtömeg kg dózisban és az állatokat egy izotermális ágyba helyeztük a testhőmérsélet fenntartására. Az altatás szintjét 15 percen ke• · « · ···· β 1 -130resztül ellenőriztük a farok megcsípésére mutatott reagálással, a légzés és a testhőmérséklet ellenőrzésével. A sebészeti altatás kívánt mélységét intravénás dózis adagolásával (5 mg/kg) tartottunk fenn. A bal femorális artériát katétereztük standard eljárással a vérnyomás kijelzésére és a vérvétel érdekében, ezt egy polietilén csővel (PE50) végeztük. A bal femorális vénát PE50 csővel katétereztük az altatószer adagolására.
A söntöket összeszereltük két sóoldattal töltött 12,5 cm-es PE90 cső és egy 6 cm-es PE160 cső alkalmazásával, amely egy 3 méretű selyemvarratot tartalmaz, és összekapcsoltuk az ércsípőkkel. A selyemszál 0,5 cm-es kis darabja kinyúlik a kamra és sönt összeillesztéséből. A bal V. jugulárist és a jobb nyaki artériát katétereztük a PE90 sönt végével. A söntöt megnyitottuk, így vér áramlik a nyaki artériából a kamrán keresztül és elhagyja a söntöt a V. jugulárison át. 15 perc után a kamra mindkét végét lezárjuk, és az alvadékot tartalmazó varratot eltávolítjuk a kamra artériás végének leválasztása után. Az alvadékot azonnal megmérjük és feljegyezzük. Ez a művelet meghatározott idő intervallumokban történik (60, 90, 120 és 150 perccel az orális adagolás után), hogy lehetőség legyen a hatásosság megállapítására egy nagy időintervallumon át. Négy söntöt helyeztünk el,
45, 75, 105 és 135 perccel az orális adagolás után iniciáltuk az áramlást. A négy söntből származó alvadók tömege volt az elsődleges végpontja a protokollnak. A vérnyomást, a szívritmust és a hőmérsékletet, valamint a légzést folyamatosan ellenőriztük. A kísérlet befejezését követően a kísérleti állatokat végleg elaltattuk 100 mg/kg dózis nembutallal. 1 állattal 1 kísérletet végeztünk.
• · ·
- 131 A következő 3. táblázatban összefoglaljuk a kapott eredményeket, amelyek jelzik az 56. példa szerinti vegyület orális aktivitását trombózis gátlására. Minden vizsgált dózis esetén a kezelt állatoknál az 56. példa szerinti vegyület hatására kisebb rögösödés volt kimutatható, mint a vízzel kezelt állatoknál. A vegyületeknek ez a rögképződést csökkentő hatása hosszú időn át megmaradt.
3. táblázat
Rögök mérete orális adagolás után a vegyülettel vagy vízzel való kezelésnél
Rög mérete (mg) Orális adagolás utáni idő
Orális dózis 60 perc 90 perc 120 perc 150 perc
Víz 32,77 34,60 32,42 32,33
1,0 mg/kg 25,72 19,15 20,82 21,63
3,0 mg/kg 17,78 18,65 24,10 18,68
10 mg/kg 16,63 14,11 18,33 15,57
50 mg/kg 13,85 14,37 12,45 10,3
£. példa
A vizsgáit vegyületek antitrombotikus hatásának értékelése patkány modellen FeCb-indukált vérlemezke-függő artériás trombózisra
A találmány szerinti vegyületek antitrombotikus hatását (trombus képződés megakadályozását) értékeltük ebben a kísérletben patkány modellen akut vaszkuláris trombózis esetén.
Ez egy igen jól jellemzett modell a vérlmezeke-függő artériás trombózis vizsgálatára, amelyek antitrombotikus vegyületek, • · ·
-132így például közvetlen trombin inhibitorok hatásosságának kiértékelésére alkalmaznak (Kurz K.D., Main B.W. és Sandusky G.E., Thromb. Rés., 60:269-280 (1990)). Ezen modellnél vérlemezke-gazdag, záró hatású trombusok képződnek a patkány nyaki artériában, amelyet lokálisan egy szűrőpapír darabkán abszorbeált frissen készült FeCh oldattal kezelnek. Az FeCb bediffundál az artéria kezelt fragmensébe és ott dezendotelializációt vált ki a megtámadott véredény felületen.
Ez a vér szubendothelialis szerkezetnek való kitételét eredményezi, ami viszont a vérlemezkék tapadását, trombin képződést és vérlemezke aggregációt okoz, ami záró trombusok képződéséhez vezet. A találmány szerinti vegyületek hatását az elzáró trombusok képződésére az FeCl3 adagolását követően ultrahangos flowtometriával (áramlási képesség mérése) mutattuk ki és alkalmaztuk mint elsődleges végpontot. A flowtometria alkalmazása a nyaki artériás véráram mérésére az eredeti eljárás módosítása, amelynél az alvadók képződést termikus detektálással követték (Kurz K.D., Main B.W. és Sandusky G.E., Thromb. Rés., 60:269-280 (1990)).
Hím Harlan Sprague Dawley patkányokat (420-450 g) 72 órán át aklimatizáltunk a vizsgálat előtt és a műtétet megelőzően 12 órával ételt nem adtunk, a vízhez való hozzáférés szabad volt. Az állatokat előkészítettük, Nembutal-lal altattuk, majd beépítettük a katétert a vérnyomás mérésére, a hatóanyag és az altatószer adagolásásra. A bal nyaki eret izoláltuk a középvonalban végzett nyaki bemetszéssel, tompa megnyitással és szétterítéssel, így a nyaki véredény egy 2 centiméteres szegmensét választottuk el. Egy selyem varratot illesztettünk az izo-133• · ·
Iáit véredény proximális és disztális végéhez, hogy rést biztosítsunk az ultrahangos folyás-érzékelő (Transonic) elhelyezésére a véredény proximális vége körül. Az érzékelőt ezután egy karral rögzítettük.
A műtétet követően a kísérleti állatokat véletlenszerűen kontroll csoportba (sóoldat) vagy kezelt csoportba osztottuk, ez utóbbiaknak vizsgálandó vegyületként 56. vagy 16. példa szerinti vegyületet adagoltunk. A vizsgálandó vegyületeket egyetlen intravénás bolus formájában adagoltuk, a különböző dózisokban a folyás-érzékelő behelyezése után és 5 perccel a trombogén stimulust megelőzően. A t=0 időnél egy 3 mm átmérőjű szűrőpapírt helyeztünk (Whatman #3) az izolált nyaki artériás szegmens érzékelőhöz közeli részéhez, amely szűrőpapírt 10 μΐ 35%-os frissen készült FeCl3 oldattal impregnáltunk. Ezt követően a vérnyomást, a véráramot, a szívritmust és a légzést 60 percen keresztül figyeltük. Az elzáródás megjelenését (ezt a 0 véráram jelzi) mint elsődleges végpontot jegyeztük fel.
A találmány szerinti vegyületek mint antitrombotikus szerek hatásossága az in vivő modellnél a trombus képződés megakadályozására dózis függő mértékben csökkenti a trombotikus elzáródás előfordulását. A vizsgált vegyületekre, valamint néhány ismert antikoaguláns szerre e módszerrel meghatározott ED50 értékeket a következő 4. táblázatban foglaljuk össze, ezekből kitűnik a találmány szerinti vegyületek hatásossága.
I ···· ·«··
-1344. táblázat
Vegyület ED50 a
Standard Heparin 200 U/kg
Argatroban 3,8 mg/kg
Hirulog™ 3,0 mg/kg
16. példa szerinti vegyület >5 mg/kg
56. példa szerinti vegyület 4,5 mg/kg
a ED50 jelentése az a dózis, amely a teljes trombotikus elzá ródás bekövetkezését a vizsgálati állatok 50%-ánál megakadályozza.
···· ····
-135Szabadalmi igénypontok

Claims (29)

1. ábra
Ρ9800071 .........
1/32 (ί ) • ·
(1) hidrogénatom, »· »·« «
- 140*τ · • · (2) 1-8 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben OH csoporttal szubsztituál van, (3) 3-10 szénatomos ciklusos alkilcsoport, (4) 1-3 szénatomos alkilcsoport, amely 5-8 szénatomos ciklusos alkilcsoporttal szubsztituálva van, (5) 3-10 szénatomos arilcsoport, amely adott esetben mono-, di- vagy triszubsztituált Yj, Y2 és/vagy Y3 csoporttal, (6) 1-3 szénatomos alkilcsoport, amely a terminális szénatomon 4-10 szénatomos arilcsporttal szubsztituálva van, amely adott esetben mono-, divagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal, (7) 1-6 szénatomos alkilcsoport, amely alfa, béta, gamma vagy delta helyzetben 1-6 szénatomos leágazó alkilcsoportot tartalmaz, és
d) R4 jelentése hidrogénatom, adott esetben OH csoporttal szubsztituált 1-7 szénatomos alkilcsoport vagy benzil-oxi- vagy 1-3 szénatomos alkilcsoport amely a terminális szénatomon 4-10 szénatomos arilcsoporttal szubsztituálva van, amely adott esetben mono-, di- vagy triszubsztituált Yb Y2 és/vagy Y3 csoporttal.
1) 1-12 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben Yi csoporttal szubsztituálva van,
1. (I) általános képletű vegyületek, valamint gyógyászatilag elfogadható sóik - a képletben
a) X jelentése -S(O)2-, -N(R')-S(O)2-, -(C=O)-, -OC(=O)-,
-NH-C(=O)-, -P(0)(R)-csoport, továbbá lehet vegyértékkötés, a csoportokban
R' jelentése hidrogénatom, 1-4 szénatomos alkil-, 6-14 szénatomos aril- vagy 6-16 szénatomos aralkilcsoport, és
R jelentése NR', OR', R' vagy SR' csoport, azzal a megkötéssel, hogy R jelentése NH, OH, H vagy SH csoporttól eltérő,
b) Rí jelentése:
2/32
KÖZZÉTÉTELI PÉÍBW (j)
A) reakcióvázlat
I . Ρ9800071
2. Az 1. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében
X jelentése -SO2-, -NH-S(O)2, -N(R')-SO2 csoport.
2) 1-3 szénatomos alkilcsoport, amely 5-8 szénatomos ciklusos alkilcsoporttal szubsztituálva van, amely adott esetben a gyűrűn Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal szubsztituálva van,
3 o
Ο·.
r
CH,
N^NH2
NH · CH3CO2H (34)
CH
CH,
S-°
CH3 Z o (35) (36) ···· ··· ··
3 0 (33)
CH,
I 3 o=s=o o <
II HÍ
CH
3/32
KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁNY • · • · ·
3- (S)-kinuklidin, 4-trifluor-metil-7-il-kumarin,
3. A 2. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében X jelentése SO2 csoport.
3-6 szénatomot tartalmaz a gyűrűben és V jelentése -CH2-, -O-, -S(=O)-, -S(O)2 vagy S és amely adott esetben a gyűrű szénatomon Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal szubsztituálva van,
3) 3-15 szénatomos ciklusos alkilcsoport, amely adott esetben a gyűrűn Yb Y2 és/vagy Y3 csoporttal szubsztituálva van,
4/32 közzétételi példány
ΝΗ (Η ) ·· • ·
Ρ 9 8 Ο ο 071
KÖZZÉTÉTELI Ρ
4 »·· • · ···· »·
4-(metil)-5-hidroxi-6-metil-3-piridin-metanol, (1 R,2 S)-(N-metil-N-( 1 -etil))-benzil-alkohol, (lS,2R)-(N-metil-N-(l-etil))-benzil-alkohol, (1R,2R)-(N-metil-N-(l -etil))-benzil-alkohol, (1 S,2S)-(N-metil-N-(l-etiI))-benzil-alkohol és 4-(metil)-5-hidroxi-6-metil-3-piridin-metanol.
4-hidroxi-l-metil-6-fenil-3-il-2(lH)-piridon és 1-adamantil vagy etil-morfolin, etil-piperidin, 2-(2-etil)-piridin, 4-hidroxi-fenentil, (R)-alfa-metil-benzil, (S)-alfa-metil-benzil,
4- metil-7-il-kumarin, 7-il-kumarin, 3-il-2-etil-4(3H)-kinazolinon, 2-il-benzotiazol, 3-il-benzoesav, 3-il-4-hidroxi-benzoesav,
4. Az 1. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében
Rí jelentése alkil-, cikloalkil-, ciklusos alkilcsoporttal ··· · ··♦·
ΙΑ · · · »·« * « W ········· • ···· ·· * »k
-141 szubsztituált alkil-, aralkil- vagy arilcsoport, amelyek mindegyike adott esetben szubsztituálva lehet.
4-fenil-piperazinil-csoport, amely adott esetben fluor-, klór-, metoxi- vagy trifluor-metil-csoporttal szubsztituálva van, vagy 4-benzil-piperazinil-, amely adott esetben monoszubsztituált fluor-, klór-, metoxivagy trifluor-metil-csoporttal, és a fenti csoportok gyógyászatilag elfogadható kvaterner ammóniumsói,
d) R3 jelentése:
4) 4-10-tagú heterociklusos alkilcsoport, ahol a gyűrű szén- és heteroatomokat tartalmaz és a heteroatom oxigén-, nitrogén- és S(O),, ahol i értéke 0, 1 vagy 2, és amely a gyűrűn adott esetben Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal szubsztituálva van, ·· • · · · · · ·
- 136···
5 ' o (40)
H,C 3 O
OH (41) • · ·«·· ··♦* ch3 h3c
5/32 (7)
5. A 4. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében Rí jelentése szubsztituált vagy szubsztituálatlan naftil-, szubsztituált vagy szubsztituálatlan fenil-, szubsztituált vagy szubsztituálatlan benzilcsoport.
5) 4-10-tagú heterociklusos csoport, amely szén- és heteroatomokat tartalmaz és a heteroatom oxigén-, nitrogén- és S(O),, beleértve a -Ν V ahol -Ν V jelentése 5-7-tagú heterociklusos csoport, amely
6/32 ·· (10) νη2
Η2Ν^Ν-ΝΟ2
NH
HCI (12) • ·· · · • · · » · • · · · · · • « · · · * • · · · · · · Ρ9800071
6. Az 5. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében Rí jelentése szubsztituált benzil- vagy szubsztituált naftilcsoport.
6) 2-6 szénatomos alkenilcsoport, amely adott esetben 5-8 szénatomos ciklusos alkilcsoporttal szubsztituálva van, amely gyűrű szénatomján Yj,
Y2 és/vagy Y3 csoporttal adott esetben szubsztituálva van,
07 1 ch3
CH
CH, λ-;
KŐZZÉTÉTELIPÉLDÁNY ch3
CH
O
CHj 0 /S ch3
CH
CH, (37) o
s CH,
CH,
CH3
CH,
CH3 O / | 3 O (38) o=/ ch3 / °V
HCI · H2N (f
ÍH3 O (39) ~o
CH,
O
0.
kCH
7/32 η2ν^ν-νο2
ΝΗ
CH,
KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁNY
A. N JI
S —
II H g o
OH (13)
H,N^ ^N-NO °k N-NO2
CH, (H) h2n_nh r
NH
Q s »
S_n-YNxXn g Ο H \----(
CH, US)
O (16) • · · • · ·· ^Ν-ΝΟ2 „ . . 8/32
Υ Közzétételi példány ch3o \ // η2ν ο
··* · ·*·· • · ·
7. A 6. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében Rj jelentésénél a szubsztituens valamely következő csoport: -C(O)OH, -C(O)OZi, -(O)mZi vagy CF3 csoport.
7) 6-14 szénatomos arilcsoport, amely adott esetben mono-, di- vagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal,
8. A 7. igénypont szerinti vegyület, ahol a szubsztituens a gyűrű méta- vagy orto-helyeztében van.
8) 5-14-tagú heteroarilcsoport, amely szénatomokat és heteroatomokat tartalmaz és a heteroatom oxigén-, nitrogén- és S(O)j, és amely gyűrű adott esetben mono-, di- vagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal,
9/32
Ρ 9 8 Ο Ο 07 J
CH,
I (22) (23)
CH, (24) ch3
I
OH (25)
CH, (26) ·· • ·
800071 ch3
I o=s=o
9. A 4. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében Rí jelentése ciklohexil- vagy ciklohexil-metil-csoport.
9) 7-15 szénatomos aralkilcsoport, amely adott esetben az alkil-láncon hidroxilcsoporttal vagy halogénatommal szubsztituált és az arilgyűrűn mono-, di- vagy triszubsztituált Yj, Y2 és/vagy Y3 csoporttal,
10/32
KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁN?
C)^>° h3c
CH
0 II x-S—N
II η ö n' vNYNH2 H o ÍJh
CH, (27)
CH,
CH CH< Ό
CH3 O Yn3 O
CH3 I 3 o=s=o k
(29)
CH, ch3 ο λ γπ3 ο
Ο ch3
I o=s=o
CH
Μ (30)
Ο
II οι-α “XJ (31) ·· » · ···· * ·· ···
Ρ.98 00 Ο7 1 ch, ι 3 o=s=o ο <
II
CH
10. Az 1. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében R2 jelentése valamely következő csoport: -CH2CH2CH2NHC(=NH)NH2, CH2CH2S(O)2CH3, -CH2S(O)2(CH2)nC(O)Z3, -(CH2)nC(O)NR5R6 és -(CH2)„C(O)NJV
10) 6-11 szénatomos heteroaralkil-csoport, amely szénés heteroatomokat tartalmaz és a heteroatom oxi·*·· ···«
- 137gén-, nitrogén- és S(O)j és amely adott esetben az alkilláncon hidroxilcsoporttal vagy halogénatommal szubsztituált, és a gyűrűn adott esetben mono-, divagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal,
11/32
KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁNY
ΟΠ-βΎ^0 (32)
CH,
I 3 o=s=o o II H
CH
ΟΠΓΎ
11. A 10. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében R2 jelentése jelentése valamely következő csoport: -CH2CH2CH2NHC(=NH)NH2, CH2CH2S(O)2CH3, -(CH2)nC(O)NR5R6.
11) 8-15 szénatomos aralkenil-csoport, amely adott esetben az arilgyűrűn mono-, di- vagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal,
12/32 • · · · · • · · *** * ·♦·· · ··*··« • ···· ·· ·
12. A 11. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében R2 jelentése -CH2CH2CH2NHC(=NH)NH2.
í ·*«· ···· _ 142 - * *· *
12) 7-12-tagú heteroaralkenil-csoport, amely a gyűrűben szén- és heteroatomokat tartalmaz és a heteroatom oxigén-, nitrogén- és S(O)i és amely adott esetben a gyűrűn mono-, di- vagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal,
13/32
KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁNY ch3 h3c (42) (45) (46) ···· ··♦· ρ 9 8 Ο Ο 07 ]
13. Az 1. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében Rs jelentése hidrogénatom.
13) (a) képletű csoport,
14/32 CH’ (49)
Ο (50) • · • ·· ··♦ · ··· ♦ ·
14. Az 1. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében R6 jelentése valamely következő csoport: 3-(R)-kinuklidin,
14) (b) képletű csoport,
15/32 'KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁNY (51/1) (51/2) ( 51/3) ·· ··♦ ·*· ·
..· · * • ·
15. Az 1. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében R3 jelentése 1-7 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben a terminális szénatomon OH csoporttal szubsztituálva van, ciklohexil-metil-, fenil-vagy benzilcsoport.
15) (c) képletű csoport,
16/32 ··· * • · ♦· *
Ρ 33 00 07 1
Ο (56) .···
I ·· ··*· *·** • » · * • ··· * - .
KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁNY
16. A 15. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében R3 jelentése metil- vagy ciklohexil-csoport.
16) (d) képletű csoport,
17. A 16. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében R4 jelentése hidrogénatom vagy 1-7 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben a terminális szénatomon OH csoporttal szubsztituálva van.
17) difluor-metil- vagy 1-12 szénatomos perfluor-alkil-csoport,
18/32
NH, (62)
Ο
Ο (67) ·» ·«.« «*<· • · * .
^9800071
KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁNY 19/32
18. A 17. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében R4 jelentése hidrogénatom.
I f
·»·· ··· · • ·
-143• · · »·· · • ·· · · · · ··«····
18) 6-14 szénatomos perfluor-aril-csoport,
19. Az 1. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében X jelentése -S(O)2 csoport, Rí jelentése szubsztituált vagy szubsztituálatlan aralkilcsöpört, R2 jelentése
-CH2CH2CH2NHC(=NH)NH2 csoport, R3 jelentése metilcsoport és R4 jelentése hidorgénatom.
19) 7-15 szénatomos perfluor-aralkil-csoport, és
20/32
Ρ9300071
·. . *..· > · ϊ • · ♦ ·♦· „ · a « « ··:··:.* ····♦ ·* ch3
KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁNY
2CF3CO2H (78) (74 )
II
SII o
o (89) • · ·· ·· · · ··
KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁNY ch3
20. Az 1. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében X jelentése -S(O)2 csoport, Rí jelentése szubsztituált vagy szubsztituálatlan aralkilcsoport, R2 jelentése
-CH2CH2NHC(=NH)NH2, csoport, R3 jelentése ciklohexilcsoport és R4 jelentése hidorgénatom.
20) hidrogénatom,
Yi, Y2 és Y3 jelentése (i) egymástól függetlenül valamely következő csoport: halogénatom, ciano-, nitro-, tetrazolil-, amino-, guanidino-, amidino-, metil-amino- vagy metil-guanidino-csoport, -CF3, -CF2CF3, -CH(CF3)2, -C(OH)(CF3)2, -OCF3, -OCF2CF3, -OC(O)NH2, -OC(O)NHZi, -OC(O)NZiZ2, -NHC(O)Zb • ·
-138- ....... * **
-NHC(O)NH2, -NHC(O)NZb -NHC(O)NZ1Z2, -C(O)OH, -C(O)OZb -P(O)3H, P(O)3H2, -P(O)3(Z,)2, -S(O)3H, -S(O)mZb -Zb -0Zb -OH, -NH2, -NHZi és -NZiZ2-csoport és N-morfolino-csoport, amely csoportokban m értéke 0, 1 vagy 2 és Zi és Z2 jelentése egymástól függetlenül 1-12 szénatomos akii-, 6-14 szénatomos aril-, 5-14-tagú heteroaril-csoport, amely 1 -9 szénatomot tartalmaz, 7-15 szénatomos aralkil-, 6-11-tagú heteroaralkil-csoport, amely 3-9 szénatomot tartalmaz, vagy (ii) Yi és Y2 jelentése együttesen -OC(Z3)(Z4)O-csoport, ahol Z3 és Z4 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, 1-12 szénatomos alkil-, 6-14 szénatomos aril-, 5-14-tagú heteroaril-csoport, amely 1-9 szénatomot tartalmaz, 7-15 szénatomos aralkil-, 6-11-tagú heteroaralkil-csoport, amely 3-9 szénatomot tartalmaz, azzal a megkötéssel, hogy ha X jelentése vegyértékkötéstől eltérő, akkor Rí jelentése hidrogénatomtól eltérő,
c) R2 jelentése (e), (f) vagy (g) általános képletű csoport, hidrogénatom, -(CH2)PNHC(=NH)NH2, -(CH2)PS(O)2CH3, -(CH2)PC(O)Z5, -(CH2)PC(O)OZ6, -(CH2)pC(O)NZ6, -CH2S(O)2(CH2)pC(O)Z5, -CH2S(O)2(CH2)PC(O)OZ6, -CH2S(O)2(CH2)PC(O)NR5R6, -(CH2)PS(O)2Z6,
-(CH2)PNH2, -(CH2)pC(O)NR5R6, -(CH2)POZ6 és -(CH2)PC(O) -N_A , amely képletekben p értéke 1-6, • t* · ··«·
- 139 Z5 jelentése -OH, -OCH3, -OCH2CH3 vagy -NR5R.6 képletű csoport,
Ző jelentése 1-4 szénatomos alkil-, 6-14 szénatomos aril vagy 7-16 szénatomos aralkilcsoport,
R5 jelentése hidrogénatom vagy Zö,
R6 jelentése hidrogénatom vagy 3-15 szénatomos ciklusos alkilcsoport, amely adott esetben mono-, di- vagy triszubsztituált ¥1, Y2 és/vagy Y3 csoporttal, 7-15 szénatomos aralkilcsoport, amely adott esetben mono-, di- vagy triszubsztituált Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal, 5-14-tagú heteroaril-csoport, ahol a gyűrű szén- és heteroatomokat tartalmaz és a heteroatom oxigén-, nitrogén- és S(O)j, és amely adott esetben mono-, di- vagy triszubsztituált Yb Y2 és/vagy Y3 csoporttal, kinuklidil- vagy adamantil-csoport,
-N A jelentése 6,7-dimetoxi-1,2,3,4-tetrahidroizokinolinil-, 4-hidroxi-piperidin-, 4-keto-piperidil-, Ν-morfolino-, 3,4-metilén-dioxi-benzil-piperazinil-,
21/32 o
(97C) • ·« · ···· _ 22/32 közzétételi példán?
(97G) • · • · · ·
21. A 20. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében Rí jelentése sat vagy szubsztituálatlan benzilcsoport.
22. Az 1. igénypont szerinti valamely következő vegyület: D-kámforszulfonil-aszpartil-szarkozin-arginin-aldehid (10. példa), D-kámforszulfonil-ciszteinszulfon-ecetsav-szarkozin-arginin-aldehid, D-kámforszulfonil-L-metionin-szulfon-szarkozin-arginin-aldehid, benzilszulfonil-D-arginin-szakrozin-arginin-aldehid, (2-karbometoxi)-benzolszulfonil-(D)-argininil-szarkozin-argininal, N-benzilszulfonil-(D)-metionin-szulfon-szarkozin-argininal, benzilszulfonil-metionmil(szulfon)N-ciklohexil-glicinil-argininal, (D)-kámforszulfonil-aszpartil-szarkozin-arginin-aldehid, (D)-kámforszulfonil-3-(3-piridil)-alanin-szarkozin-arginin-aldehid, benzilszulfonil-3-(3-piridil)-alanin-szarkozin-arginin-aldehid, (D)-kámforszulfonil-glicin-szarkozin-arginin-aldehid, valamint az (A)-(I) képleteknek megfelelő vegyületek.
I
-144A*' • · « 4
23/32 ρ 98 Ο Ο Ο 7 1 ch3 o=s=o
A,
Η νη2
KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁNY (97 Η) (100) (10D (102)
I ··· · ··♦ · p980G07l
KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁNY
23. Az 1. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében Rí Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal mono-, di- vagy triszubsztituált és Yi, Y2 és/vagy Y3 jelentése egymástól függetlenül -C(O)OH, -C(O)OZj, -(O)mZi vagy CF3 csoport.
24/32 (109) νη^νη2 ch3
CO2Ho
Ο H Jl I o
(110) • · · · · • · · ··♦ • · · · · · ^ 98 00 07 1 KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁNY
24. A 12. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében X jelentése -S(O)2 csoport.
25/32
MeO2C u
(111 )
MsOjC
NH2 NH NH2 (114) ·· ··· . PS8n0 07 1 KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁNY
EtO2C
25. A 24. igénypont szerinti vegyület, amelnyek képeltében Rí jelentése alkil-, ciklusos alkil-, ciklusos alkilcsoporttal szubsztituált alkil-, aril- vagy aralkilcsoport, amelyek mindegyike adott esetben szubsztituálva lehet.
26/32
EtChC (125)
EtOjC (126)
EtOjC
EtO2C
EtOj<
O
O (129) »· ·*· ··*· o=s=o (132)
HCI · HN (133)
CH, (134)
OH (135) ··· · ··♦·
Ρ 9 8 Ο Ο 07 1
26. A 15. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében Rí, Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal mono-, di- vagy triszubsztituált és Yj, Y2 és/vagy Y3 jelentése egymástól függetlenül -C(O)OH, -C(O)OZi, -(O)mZi vagy CF3 csoport.
27. A 25. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében Rí jelentése szubsztituált vagy szubsztituálatlan naftil-, szubsztituált vagy szubsztituálatlan fenil-, szubsztituált vagy szubsztituálatlan benzilcsoprot.
28/32 közzétételi példány
CH
CH
OH
CH ?H3° ch3 II CH,
R2 ch3 I I °
Η O
ü)
NH
O
28. A 27. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében Rí jelentése benzilcsoport.
29. A 25. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében Rí jelentése ciklohexil- vagy ciklohexil-metil-csoport.
30. Az 1. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében R2 jelentése -CH2CH2S(O)2CH3 csoport.
31. A 30. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében X jelentése -S(O)2 és Rj jelentése aralkilcsoport.
32. A 31. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében Rí Yi, Y2 és/vagy Y3 csoporttal mono-, di- vagy triszubsztituált
- 145• «· «· «··· ···· • · · · « · r • · · »·· » · ···· · · · · · · és Yi, Y2 és/vagy Y3 jelentése egymástól függetlenül -C(O)OH, -C(O)OZi, -(O)mZi vagy CF3 csoport.
33. Az 1. igénypont szerinti vegyületek körébe tartozó (16) képletű vegyület.
34 Az 1. igénypont szerinti vegyületek körébe tartozó (28) képletű vegyület.
35. Az 1. igénypont szerinti vegyületek körébe tartozó (56) képletű vegyület.
36. Az 1. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében X jelentése -S(0)2)csoport, Rí jelentése aralkilcsoport, R2 jelentése csoport, R3 jelentése metil-, ciklohexil-metil-, fenil- vagy benzilcsoport és R4 jelentése hidorgénatom.
37. A 36. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében Rí jelentése szubsztituált vagy szubsztituálatlan benzilcsoport.
38. A 37. igénypont szerinti vegyület, amelynek képletében Yi és Y2 jelentése egymástól függetlenül C(O)OH, -C(O)OZb -S(O)mZi vcagy CF3 csoport.
a meghatalmazott:
·· ’ Ρ 9 8 Ο Ο 0 7 1
R,
29/32
KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁN?
HU9800071A 1994-12-21 1995-12-21 Xa faktor gátló hatású N-szubsztituált glicinszármazékok HUT77524A (hu)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/361,794 US5696231A (en) 1994-12-21 1994-12-21 N-substituted glycine derivatives as enzyme inhibitors
US08/484,509 US6025472A (en) 1994-12-21 1995-06-07 N-substituted glycine derivatives as enzyme inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
HUT77524A true HUT77524A (hu) 1998-05-28

Family

ID=27001429

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9800071A HUT77524A (hu) 1994-12-21 1995-12-21 Xa faktor gátló hatású N-szubsztituált glicinszármazékok

Country Status (10)

Country Link
US (1) US6025472A (hu)
EP (1) EP0801654A1 (hu)
JP (1) JPH10512550A (hu)
CN (1) CN1171116A (hu)
AU (1) AU716995B2 (hu)
BR (1) BR9510264A (hu)
HU (1) HUT77524A (hu)
MX (1) MX9704684A (hu)
NZ (1) NZ300829A (hu)
WO (1) WO1996019493A1 (hu)

Families Citing this family (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6022861A (en) * 1995-06-07 2000-02-08 Cor Therapeutics, Inc. Ketoheterocyclic inhibitors of factor Xa
US6211154B1 (en) 1995-06-07 2001-04-03 Cor Therapeutics, Inc. Ketoheterocyclic inhibitors of factor Xa
US5919765A (en) * 1995-06-07 1999-07-06 Cor Therapeutics, Inc. Inhibitors of factor XA
US6046169A (en) * 1995-06-07 2000-04-04 Cor Therapeutics, Inc. Inhibitors of factor XA
US5721214A (en) * 1995-06-07 1998-02-24 Cor Therapeutics, Inc. Inhibitors of factor Xa
US6069130A (en) 1995-06-07 2000-05-30 Cor Therapeutics, Inc. Ketoheterocyclic inhibitors of factor Xa
US6245743B1 (en) 1996-06-05 2001-06-12 Cor Therapeutics, Inc. Inhibitors of factor Xa
US6194435B1 (en) 1996-10-11 2001-02-27 Cor Therapeutics, Inc. Lactams as selective factor Xa inhibitors
US6063794A (en) 1996-10-11 2000-05-16 Cor Therapeutics Inc. Selective factor Xa inhibitors
US6369080B2 (en) 1996-10-11 2002-04-09 Cor Therapeutics, Inc. Selective factor Xa inhibitors
US6262047B1 (en) 1996-10-11 2001-07-17 Cor Therapeutics, Inc. Selective factor Xa inhibitors
US6369063B1 (en) 1997-04-14 2002-04-09 Cor Therapeutics, Inc. Selective factor Xa inhibitors
EP0977772A1 (en) 1997-04-14 2000-02-09 Cor Therapeutics, Inc. SELECTIVE FACTOR Xa INHIBITORS
CA2285705A1 (en) * 1997-04-14 1998-10-22 Cor Therapeutics, Inc. Selective factor xa inhibitors
US6228854B1 (en) 1997-08-11 2001-05-08 Cor Therapeutics, Inc. Selective factor Xa inhibitors
US6218382B1 (en) 1997-08-11 2001-04-17 Cor Therapeutics, Inc Selective factor Xa inhibitors
US6333321B1 (en) 1997-08-11 2001-12-25 Cor Therapeutics, Inc. Selective factor Xa inhibitors
US6011047A (en) * 1997-11-26 2000-01-04 Corvas International Inc. Substituted 3-amino-2-hydroxyphenylacetamide derivatives as enzyme inhibitors
US6204384B1 (en) 1997-11-26 2001-03-20 Corvas International, Inc. Substituted 3-amino-2-hydroxyphenylacetamide derivatives as enzyme inhibitors (II)
EP1022268A1 (en) * 1999-01-02 2000-07-26 Aventis Pharma Deutschland GmbH Arylalkanoyl derivatives, processes for their preparation, their use and pharmaceutical compositions containing them
BR9916733A (pt) 1999-01-02 2001-09-25 Aventis Pharma Gmbh Derivados de arilalcanoìla, processos para sua preparação, seu uso e composições farmacêuticas que os contêm
AU1624801A (en) 1999-11-19 2001-05-30 Corvas International, Inc. Plasminogen activator inhibitor antagonists related applications
US6797504B1 (en) 2000-09-08 2004-09-28 Dendreon San Diego Llc Inhibitors of serine protease activity of matriptase or MTSP1
US7157596B2 (en) 2000-09-08 2007-01-02 Dendreon Corporation Inhibitors of serine protease activity of matriptase or MTSP1
US6777431B2 (en) 2001-07-13 2004-08-17 Corvas International, Inc. Non-convalent thrombin inhibitors
WO2003059874A2 (en) 2001-12-21 2003-07-24 Pharmacia Corporation Aromatic thioether liver x-receptor modulators
AU2003233670A1 (en) 2002-05-24 2003-12-12 Pharmacia Corporation Sulfone liver x-receptor modulators
JP2005527621A (ja) 2002-05-24 2005-09-15 ファーマシア コーポレイション アニリノ肝ｘ受容体調節因子
EP2982668A3 (en) 2002-12-03 2016-04-13 Pharmacyclics LLC 2-(2-hydroxybiphenyl-3-yl)-1h-benzoimidazole-5-carboxamidine derivatives as factor viia inhibitors for the treatment of thromboembolic disorders
US7019019B2 (en) * 2002-12-23 2006-03-28 Dendreon Corporation Matriptase inhibitors and methods of use
CN108347916B (zh) 2015-10-14 2022-02-08 先时迈纳米生物科技股份有限公司 一种减少冰晶形成的组合物及其方法

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HU192646B (en) * 1984-12-21 1987-06-29 Gyogyszerkutato Intezet Process for preparing new n-alkyl-peptide aldehydes
JPH075634B2 (ja) * 1987-10-30 1995-01-25 日東紡績株式会社 トリペプチド類及びこれを含有する抗プラスミン剤
GB9019558D0 (en) * 1990-09-07 1990-10-24 Szelke Michael Enzyme inhibitors
CA2075154A1 (en) * 1991-08-06 1993-02-07 Neelakantan Balasubramanian Peptide aldehydes as antithrombotic agents
WO1994013693A1 (en) * 1992-12-15 1994-06-23 Corvas International, Inc. NOVEL INHIBITORS OF FACTOR Xa
US5885967A (en) * 1994-03-04 1999-03-23 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5681844A (en) * 1994-04-18 1997-10-28 Corvas International, Inc. Methionine sulfone and s-substituted cysteine sulfone derivatives as enzyme inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
CN1171116A (zh) 1998-01-21
MX9704684A (es) 1998-02-28
NZ300829A (en) 2001-03-30
US6025472A (en) 2000-02-15
BR9510264A (pt) 1997-11-04
WO1996019493A1 (en) 1996-06-27
EP0801654A1 (en) 1997-10-22
AU4608696A (en) 1996-07-10
JPH10512550A (ja) 1998-12-02
AU716995B2 (en) 2000-03-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HUT77524A (hu) Xa faktor gátló hatású N-szubsztituált glicinszármazékok
EP0664786B1 (en) Arginine keto-amide enzyme inhibitors
EP0765339B1 (en) 3-amino-2-oxo-1-piperidineacetic derivatives containing an arginine mimic as enzyme inhibitors
EP0007477B1 (en) 1-(3-mercapto-2-methylpropanoyl)prolyl amino acid derivatives and salts thereof, processes for their preparation, and pharmaceutical compositions containing such compounds
KR100366328B1 (ko) 엘라스타제의퍼플루오로알킬케톤억제제및이들의제조방법
US6034215A (en) 3-amino-2-oxo-1-piperidnercetic derivatives as enzyme inhibitors
WO1995035311A1 (en) 3-amino-2-oxo-1-piperidineacetic derivatives as enzyme inhibitors
RU2191193C2 (ru) Ингибиторы серинпротеазы
WO1995035311A9 (en) 3-amino-2-oxo-1-piperidineacetic derivatives as enzyme inhibitors
JPH04330094A (ja) 有機化学における改良
RU2178419C2 (ru) Ингибиторы протеазы серина
AU6476196A (en) Ketoheterocyclic inhibitors of factor xa
KR20010108477A (ko) 보체 프로테아제의 저분자량 억제제
KR19990087416A (ko) 세린 프로테아제 억제제
AU710408B2 (en) Inhibitors of factor Xa
EP0736036A1 (en) Kininogen inhibitors
US6069232A (en) Polyfluoroalkyl tryptophan tripeptide thrombin inhibitors
JPS62265263A (ja) 置換４−アミノ−３−ヒドロキシ酪酸誘導体およびその製造方法
CA2191844C (en) Acylated enol derivatives as prodrugs of elastase inhibitors
EP0832879A1 (en) Process for preparing intermediates for thrombin inhibitors
CA2207373A1 (en) N-substituted glycine derivatives as inhibitors of factor xa
AU700808B2 (en) 3-amino-2-oxo-1-piperidineacetic derivatives as enzyme inhibitors
CA2192686A1 (en) Arginine mimic derivatives as enzyme inhibitors
WO2001027141A1 (en) Inhibitors of factor xa having an arginine or arginine aldehyde mimic

Legal Events

Date Code Title Description
DFC4 Cancellation of temporary protection due to refusal