HU215149B

HU215149B - Eljárás az egyes komponensek szempontjából javított immunogenecitással rendelkező, kombinált gyermekgyógyászati vakcina előállítására

Info

Publication number: HU215149B
Application number: HU9303028A
Authority: HU
Inventors: Jill G. Hackell; Deborah A. Hogerman; Dace Viceps Madore; Peter R. Paradiso
Original assignee: American Cyanamid Co.
Priority date: 1992-10-27
Filing date: 1993-10-26
Publication date: 2000-03-28
Also published as: IL107387A; DE69323264T2; AU5029093A; KR100289224B1; UA27754C2; CZ227293A3; EP0594950A1; CZ283587B6; LV12271B; GR3029884T3; NO933856D0; ES2126616T3; FI934725A0; EP0594950B1; NO933856L; AU669570B2; HU9303028D0; CA2109159A1; NO308588B1; IL107387A0

Abstract

A találmány tárgya kombinált gyermekgyógyászati vakcinakészítmény,amelyre az jellemző, hogy egyetlen immunizáló dózisban diftéria-,tetanusz- és szamárköhögés-antigének keverékét, valamint Haemophilusinfluenzae b típus kapszuláris poliszacharid antigén fragmentjei és aCRM197 fehérje konjugátumát tartalmazza egy gyó- gyászatilagelfogadható vizes hordozóközegben. Ez a kombinált vakcinakészítményfokozott antitestválaszt vált ki gyerekekben a diftéria, a tetanusz, aszamárköhögés és a Haemophilus influenzae b típusvakcinakomponensekkel szemben. A találmány vonatkozik a készítményelőállítására szolgáló eljárásra is. ŕ

Description

A találmány tárgya kombinációs gyermekgyógyászati vakcina, amely diftéria-antigént, tetanuszantigént, szamárköhögés-antigént és a Haemophilus influenzáé b típusa (Hib) kapszuláris poliszacharid antigénje fragmentjeinek, valamint diftéria CRM|₉₇ fehérje (CRM₁₉₇) konjugátumát tartalmazza, egyetlen immunizáló dózisban. Ez a kombinációs vakcina javított immunogenitást mutat gyerekekben mind a négy vakcinakomponensre nézve, ha a DTP és a Haemophilus influenzáé b típus konjugátumvakcinákkal hasonlítjuk össze, amelyeket egy időben, de egymástól külön adunk be. A találmány körébe tartozik a kombinált vakcina előállítására szolgáló eljárás is.

A kombinációs vakcinák számos előnnyel rendelkeznek, és alkalmazásukat általában bátorítják. Számos betegséggel szemben a vakcinálás optimális kora a csecsemőkor és a korai gyermekkor. Ebben a periódusban tipikusan számos vakcinálást terveznek be egy rövid időtartam alatt. A szimultán beadás szolgálhatja a vakcina beadásához kapcsolódó költségek csökkentését, fokozhatja a vakcina elfogadási arányát, és lehetővé teszi a gyerekek korai széles körű immunizálását.

A gyerekek vakcinálásában használt vakcinakombinációk, például a diftéria- és tetanusztoxoid, a Bordetella pertussis elpusztított teljes sejtjeivel együtt (DTP); vagy a sejtmentes szamárköhögés-antigénekkel; az élő kanyaró, mumpsz és rózsahimlő kombinációja (MMR); három gyermekbénulás-szerotípus, akár élő (orális poliovírus vakcina), akár inaktív (IPV); valamint a DTP-IPV kombináció.

A fiatal gyerekek jelenlegi amerikai egyesült államokbeli immunizációs gyakorlata kéthónapos korban indul 1. egy diftéria- és tetanusztoxoiddal, valamint szamárköhögés vakcinával (DTP), és 2. egy Haemophilus influenzáé b típusú konjugált vakcinával. Két ilyen kereskedelmi forgalomban levő vakcina a TriImmunol (Lederle Laboratories) és a HibTITER (Praxis Biologics, Inc.). Mindkét vakcinát javasolják két, négy és hat hónapos korban, egy 15-18 hónapos korban beadott erősítő dózissal. A DTP egy további dózisa javasolt 4-6 éves korban. Mindkét említett vakcina, külön beadva, rendkívül sikeres az Amerikai Egyesült Államokban a betegségek előfordulási számának csökkentésében.

Jóllehet kívánatos lenne, hogy a DTP-t és a Haemophilus influenzáé b típus konjugátumot kombináljuk egyetlen vakcinává, azzal a céllal, hogy csökkentsük a gyerekek immunizálási eseményeinek számát, az ilyen kombinációknak elfogadható biztonsági profillal kell rendelkezniük, valamint egy védőimmunogenitással, amely nem lehet kevesebb, mint a külön beadott vakcináké.

Azt tapasztaltuk, hogy egy olyan kombinációs gyermekgyógyászati vakcina, amely egyetlen immunizáló dózisban tartalmazza a diftéria-antigént, tetanuszantigént, szamárköhögés-antigént és a Haemophilus influenzáé b típus kapszuláris poliszacharid ffagmentjei CRM₁₉₇ fehérjével alkotott konjugátumát gyógyászatilag elfogadható vizes hordozóközegben, gyermekekben mind a négy vakcinakomponensre vonatkozóan fokozott immunogenitást mutat. A találmány ezen a felismerésen alapul. Pontosabban, a jelen találmány szerinti kombinációs vakcina egy steril keveréket tartalmaz, a diftériatoxoidot alumínium-foszfátra adszorbeálva, a tetanusztoxoidot alumínium-foszfátra adszorbeálva, inaktivált Bordetella pertussist és Haemophilus influenzáé b típus kapszuláris poliszacharid fragmentjei és CRM₎₉₇ fehérje konjugátumát gyógyászatilag elfogadható vizes hordozóközegben. Rázás után a jelen találmány szerinti kombinációs vakcinakészítmény egy homogén fehér szuszpenzió. Emellett a vakcinakomponensek stabilak és kompatibilisek, és nem mutatnak a komponensek közötti gátló aktivitást.

Sikerült módszereket kidolgozni a gyermekek szimultán kombinációs vakcinálására, valamint a Haemophilus influenzáé b típus poliszacharid, a diftéria-antigén, a tetanuszantigén és a szamárköhögés-antigén vakcinakomponensek immunogenitásának fokozására. Ezek szerint a módszerek szerint egyetlen immunizáló dózist adunk be a diftéria-antigénből, a tetanuszantigénből, a szamárköhögés-antigénből, valamint a Haemophilus influenzáé b típus kapszuláris poliszacharid fragmentek és a CMR₁₉₇ fehérje konjugátumából, és ezt az egyetlen dózist embereknek, főleg gyermekeknek adjuk be.

A jelen találmány szerinti kombinációs gyermekgyógyászati vakcina diftéria-, tetanusz- és szamárköhögés-antigéneket tartalmaz a Haemophilus influenzáé b típus kapszuláris poliszacharid fragmentjeit kovalens kötéssel a CRM₁₉₇-hez rögzítő konjugátumot. Egy előnyös megvalósítási mód szerint a diftéria-antigén a diftériatoxoid, alumínium-foszfátra adszorbeálva, a tetanuszantigén pedig tetanusztoxoid, alumínium-foszfátra adszorbeálva. Ezeket a toxoidokat a szakterületen jártas szakember számára ismert módszerekkel állíthatjuk elő. A diftériatoxoid és a tetanusztoxoid Corynebacterium diphtheriaeből, valamint Clostridium tetaniból származik, amelyeket megfelelő táptalajon a Mueller és Miller által leírt módszerrel szaporítunk [J. Immunoi., 40, 21-32 (1941); J. Immunoi., 56, 143-147 (1947)], majd formaldehid alkalmazásával detoxifikáljuk. A toxoidokat a Pillemer-féle alkoholfrakcionálási módszerrel tovább tisztítjuk [J. Immunoi., 54, 213-224 (1946)], majd vizes oldattal hígítjuk, amely egybázisú nátrium-foszfátot, kétbázisú nátriumfoszfátot, glicint és thimerosalt (higanyszármazék) tartalmaz konzerválószerként.

A szamárköhögés-antigén előnyösen egy inaktivált teljes sejtkészítmény, Bordetella pertussis törzsből, vagy törzsek kombinációjából készítve. Az inaktivált teljes sejt szamárköhögés-készítményt úgy állítjuk elő, hogy az I-es fázisú Bordetella pertussist módosított Cohen-Wheeler-táptalajban szaporítjuk, amely savas kazeinhidrolizátumot tartalmaz. A Bordetella pertussist thimerosallal inaktiváljuk, összegyűjtjük, majd egy vizes oldatban szuszpendáljuk, amely egybázisú káliumfoszfátot, kétbázisú nátrium-foszfátot, glicint és thimerosalt (higanyszármazék) tartalmaz konzerválószerként.

HU 215 149 Β

A DTP-komponenseket egy keverék formájában is felhasználhatjuk. Például a DTP-nek egy kereskedelmi forgalomban levő készítményét, amelyet például a Lederle Laboratories árul Tri-Immunol márkanév alatt, használhatjuk a jelen találmány szerinti kombinációs vakcinakészítményekhez.

A jelen találmány szerinti kombinációs vakcina Hib konjugációs komponense a Haemophilus influenzáé b típus bakteriális kapszuláris poliszacharidja fragmentjeit tartalmazza, kovalens kötéssel a CRM₁₉₇ fehérjéhez kapcsolt formában. A fragmenteket a kémiailag definiált táptalajon növesztett Haemophilus influenzáé b típus tisztított kapszuláris poliszacharidja perjodátos hasításával állítjuk elő. A CRM₁₉₇ fehéije egy nem toxikus variánsa a kazaminosavakat és élesztőkivonatot tartalmazó táptalajon növesztett C. diphteriae C7 törzs (Béta 197) tenyészeteiből izolált diftériatoxinnak. A Haemophilus influenzáé b típus fragmentjeit a CRM₁₉₇ fehérjéhez kovalens kötéssel kötjük hozzá. Egy poliszacharidnak kovalens kötéssel egy fehérjéhez való kötésének egy különösen előnyös módszere a reduktív aminálás. A Haemophilus influenzáé b típus és a CRM₁₉₇ konjugátumainak reduktív aminálással való előállítását a 4,673,574, 4,761,283 és 4,902,506 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásokban közlik. A konjugátumot diaszűréssel tisztítjuk a reagálatlan fehérjék vagy poliszacharidfragmentek vagy -reagensek eltávolítása céljából, majd szűréssel sterilezzük. Egy kereskedelmi forgalomban levő Haemophilus influenzáé b típus konjugátumot, azaz például azt, amelyet a Praxis Biologics Inc. hoz forgalomba HibTITER néven, használhatjuk a jelen találmány szerinti kombinációs vakcina komponenseként.

A jelen találmány szerinti kombinációs vakcinakészítményt úgy állítjuk elő, hogy egy Haemophilus influenzáé b típus konjugátumkoncentrátumot adunk egy DTP-készítményhez, miközben a DTP-vakcinát a végső térfogatra hígítjuk. A végső immunizáló dózis ennek következtében 0,5 ml marad. A kombinációs vakcinák minden egyes 0,5 ml-es dózisát úgy formulázzuk, hogy minimum 7,5 Lf diftéria-toxoidot, 5 Lf tetanusztoxoidot (mindkét toxoid minimum 2 egység antitoxint indukál milliliterenként tengerimalacpotencia-tesztben), 10 pg tisztított Haemophilus influenzáé b típus szacharidot és körülbelül 25 pg CRM_I97 fehérjét tartalmazzon. A vakcina minden egyes 0,5 ml-es dózisát úgy formulázzuk, hogy az inaktivált szamárköhögéssejtekből 16 OPU-nál kevesebbet tartalmazzon. Az összes humán immunizáló dózis (az első három beadott 0,5 ml-es dózis) hozzávetőleg 12 egység szamárköhögés-vakcinát és hozzávetőleg 4 védőegységet tartalmaz humán dózisonként. A vakcinának minden egyes komponense - a différiatoxoid, a tetanusztoxoid, a szamárköhögés és a Haemophilus influenzáé b típus konjugátum - eléri a megkívánt hatékonysági standardokat.

Konzerválószerként thimerosalt (higanyszármazék) adunk a kombinációs vakcinához 1:10 000 végkoncentrációban. A végtermék dózis alumíniumtartalma nem haladja meg a 0,85 mg/0,5 ml dózisértéket a vizsgálatban. A vizsgálatokban a maradék formaldehid menynyisége <0,02%.

A négy vakcinakomponenst (D, T, P és Hib-konjugátum) tartalmazó kombinációs vakcinát vizes készítmény formájában adjuk be. Felrázás után a vakcina homogén, fehér szuszpenzió. Megfelelő vakcinaadjuvánsokat is beépíthetünk a kombinációs vakcinába. A vakcinát intramuszkulárisan adjuk be.

Egy négykomponensű kombinációs vakcinát állítottunk elő az előzőkben leírt módon DTP (TriImmunol, Lederle Laboratories) és Hib-konjugátum (HibTITER, Praxis Biologics) felhasználásával.

A kombináció mind a négy vakcinakomponensének fokozott immunogenitását sikerült kimutatni klinikai vizsgálatokkal. Multicenteres biztonsági és immunogenitási vizsgálatokat végeztünk csecsemőkön és gyerekeken. Emellett nagyméretű biztonsági vizsglatot végeztünk gyermekekben, hogy megfigyeljük a ritka káros jelenségek előfordulását nagy mintaszámban.

Mind a csecsemő, mind a gyermek immunogenitási vizsgálatoknál az alanyokat úgy randomizáltuk, hogy vagy egyetlen 0,5 ml-es dózist kapjanak a négykomponensű (D, T, P és Hib-konjugátum, kombinálva) kombinációs vakcina három különböző konzisztenciájú sarzsából, vagy egy 0,5 ml-es dózist kapjanak az egyes DTP és Hib-konjugátum vakcinából, amelyeket a három megfelelő DTP és Hib-konjugátum sarzsból választunk, amelyeket egy időben adunk be külön-külön injekcióként (DTP-Hib konjugátum, külön) 18±3 hónapos korban, illetve 2, 4 vagy 6 hónapos korban. Ezeket az alanyokat hat kezelési csoport egyikébe osztjuk be. Az akut biztonsági vizsgálatokat az egyes immunizálások utáni, a szülők által megfigyelt káros hatások alapján becsüljük meg. Az immunogenitást úgy határozzuk meg, hogy a Haemophilus influenzáé b típus poliszacharid (Hib poliszacharid), diftéria, tetanusz és szamárköhögés elleni antitestek szerológiai elemzését hajtjuk végre.

Mindegyik protokollt egymástól függetlenül elemezzük. A biztonsági és immunogenitási adatok elsődleges elemzése arra az eredményre vezet, hogy a négykomponensű vakcinának mindhárom konzisztenciájú sarzsa hasonló volt az összes vizsgált paraméter szempontjából, és így az adatok összeestek. Ugyanez volt az eset a DTP és a Hib-konjugátumok három megfelelő sarzsával, amelyeket egy időben, három különböző injekció formában adunk be.

a) Csecsemő biztonsági és immunogenitási vizsgálat

Összesen 215 alanyt (kombinált vakcina n=107, DTP-Hib konjugátum; külön n=108) vettünk be a csecsemővizsgálat protokolljába, és randomizáltuk mind a négy klinikai vizsgálóhelyen. Az összes alany demográfiai jellemzői hasonlóak voltak.

A preimmunizálás és a posztimmunizálás után egy hónappal vett szérumminták szerológiai elemzései azt mutatták, hogy nincs különbség a Hib poliszacharidokra, a diftériára vagy a teta3

HU 215 149 Β nuszra adott válaszban (lásd 1. táblázat). Azonban a szamárköhögés agglutininekre adott antitestválaszok jelentősen magasabbak voltak a kombinált vakcinacsoportban (142,58), a DTP-Hib konjugátumokkal kapott (külön csoport) eredményekkel összehasonlítva (82,44; p=0,013).

b) Gyermek biztonsági és immunogenitási vizsgálat

Összesen 378 alanyt (kombinált vakcina n=189, DTP-Hib konjugátum; külön n=189) vettünk be a gyermekvizsgálat protokolljába, és randomizáltuk mind az öt klinikai vizsgálóhelyen. Az összes alany demográfiai jellemzői hasonlóak voltak.

A Hib poliszacharidokra adott válasz a három immunizáció közül minden egyes esetben magasabb volt a kombinált vakcinát kapó alanyok esetében (lásd 2. táblázat). Két dózis után a ti terek geometriai átlaga (GMT) a kombinált vakcinát kapott csoport esetében 0,66 pg/ml volt, míg a DTP-Hib konjugátum esetében (külön csoport) 0,34 pg/ml volt (p<0,001). Ugyanezt a trendet figyelhettük meg a harmadik dózis után, 6,67 pg/ml a kombinált vakcina esetében és 4,42 pg/ml a DTP-Hib konjugátum esetében (p=0,034).

A DTP-komponensekre adott szerológiai válaszokat egy hónappal azután méljük, hogy a harmadik dózisokat beadtuk. A diftéria elleni antitest (0,71 IU/ml a 0,40 IU/ml-rel szemben; p=0,009), a tetanusz elleni antitest (8,20 a 4,51-gyei szemben; p< 0,001) és a szamárköhögés-agglutininek elleni antitest (51,93 a 23,34-gyel szemben; p=0,008) geometriai átlagai az összes esetben lényegesen magasabbak voltak a kombinált vakcinacsoportban, ha a külön-külön beadott vakcinákat kapott csoporttal hasonlítjuk össze (lásd 2. táblázat). A diftéria és a szamárköhögés esetében ez a szignifikancia elveszett, ha az alapvonal titerre adott válaszaránnyal hasonlítjuk össze. A szérumok egy alcsoportját vizsgáltuk a specifikus szamárköhögés antigénekre adott antitestek szempontjából: szamárköhögés-toxin (PT), FHA és 69K fehérje. A PT-re adott válasz (85,92 17,60-nal szemben; p=0,001), illetve az FHA-ra adott válasz (2,32 0,79-cel szemben; p=0,0001) lényegesen magasabb a kombinált vakcinacsoportban, mint a külön-külön beadott csoportban (lásd 3. táblázat). Nem volt azonban megfigyelhető különbség a 69K fehérje esetében (kombinált vakcina 66,43 a kombinált vakcina esetében a külön beadott vakcináknál megfigyelt 41,55-tel szemben; p=0,11).

c) Nagyméretű gyermek biztonsági vizsgálat immunogenitási alcsoporttal

Egy nagyméretű gyermek biztonsági vizsgálatot Észak-Kalifomiában a Kaiser Permanente Medical Care Program keretében végeztünk. Ebben a vizsgálatban mind nem randomizált, mind randomizált elrendezést használtunk. Az előbbi lehetővé tette adatok gyűjtését a kombinált vakcina esetében nagyszámú alanyon (n=5777). Az utóbbi lehetővé tette, hogy egy ellenőrzött vizsgálatot végezzünk, amely során a kombinált vakcina biztonságát (n=720) össze lehet hasonlítani DTPHib konjugátumot külön injekciókban kapott (n=691) csoporttal. Tehát összesen 6497 egyed kapott 3 dózist a kombinált vakcinából (D, T, P és Hib-konjugátum kombináció), körülbelül 2, 4 és 6 hónapos korukban.

Az immunizáció első 24 órájában bekövetkező lokális és szisztémás események előfordulását feljegyeztük. A ritka eseményeket, úgymint a szívrohamot úgy becsültük meg, hogy értékeltük a kórházba szállításokat 60 napon belül, és a sürgősségi szobák használatát az immunizálás utáni 30 napon belül. A három látogatásos sorozatnál a lokális és a szisztémás reakciók nem jelentek meg következetesen gyakrabban a kombinált vakcina adagolását követően, mint csak a DTP adagolását követően. Emellett nem volt lényeges különbség a gyógyítás szempontjából káros jelenségek előfordulási gyakoriságában a kórházba szállításoknál, illetve a sürgősségi szobák használatánál. A SIDS halálozási arány valamivel alacsonyabb volt a kombinált vakcinát kapott csoportnál, mint a kontrollcsoportnál.

A Hib poliszacharidra, a diftériára, a tetanuszra és a szamárköhögésre adott antitestválaszokat a kombinált vakcina harmadik dózisának beadását követő egy hónap elteltével mértük 123 alanyból álló csoportban. A kapott értékek összehasonlíthatók voltak a multicenteres biztonsági vizsgálatban kapott eredményekkel, illetve az előzőkben leírt gyermek immunogenitási vizsgálatban kapott eredményekkel (lásd 4. táblázat).

d) Szerológiai eljárások

A szerológiai vizsgálatokat ELISA-val végeztük Haemophilus influenzáé b típus poliszacharid és a tetanuszantitestek esetében (a gyermekvizsgálatok során), a Vero-sejtvizsgálatot alkalmaztuk [J. Bioi. Stand., 2, 189-201; J. Bioi. Stand., 2, 203-209] a diftéria-antitestek esetében, a tetanusz antitestek esetében az egérpusztulási módszert alkalmaztuk [Bull WHO 43, 453-459; Minimum Requirements: Tetanus Toxoid Appendix A, 1953. június 15., Pub. Health Sérv., NIH; Craig, Manual of Clinical Laboratory Immunoi., 408-414,3. kiadás (1986)], a szamárköhögés-antitestek esetében pedig a mikroagglutinációs tesztet alkalmaztuk [Manclark et al., Manual of Clinical Laboratory Immunoi., 388-394, 3. kiadás (1986)].

Amint az az alábbiakban ismertetett klinikai vizsgálatokból nyilvánvaló, a gyerekek válasza az egyes vakcinakomponensekre magasabb volt a kombinált vakcinák esetében, mint az egyidejűleg, de külön beadott DPT és Hib-konjugátum vakcinák esetében. Az ilyen kombinált vakcina alkalmazása tehát felére csökkentheti a gyermekeknek beadott immunizáló injekciók számát, és egy fontos lépés a vakcinálás javítása irányában.

HU 215 149 Β

1. táblázat

A kombinált, illetve külön beadott vakcinákra adott antitestválaszok összehasonlítása¹

Komponens (n²)	Antitesttiter (GMT)	p-érték³
Kombinált (107)	Külön (108)
Hib-konjugátum
(pg/ml)
pre	0,21	0,25	0,270
post	2,77	3,19	0,689
Diftéria
(IU/ml)
pre	0,12	0,13	0,812
post	9,56	10,79	0,637
Tetanusz
(U/ml)
pre	0,60	0,52	0,542
post	9,68	8,60	0,582
Szamárköhögés-agglutininek
(reciprok hígítás)
pre	14,20	11,43	0,451
post	142,58	82,44	0,013

¹ Kombinált négykomponensű (D, T, P cs Hib-konjugátum) vakcina, illetve külön (DTP-Hib konjugátum) vakcinák beadva.

18 hónapos korban, cs egy hónappal később vérvétel a szerológiai vizsgálatokhoz.

² Az összes szereplő alany.

³ A primer (covariate adjusted) modell hatásai alapján, beleértve: kezelés, center, sarzs, kor, alapvonal antitestszint.

2. táblázat

Komponens (n²)	Antitesttiter (GMT)	p-érték³
Kombinált (189)	Külön (189)
Hib-konjugátum
(pg/ml)
pre	0,09	0,09	0,762
post 3	6,67	4,42	0,034
Diftéria
(IU/ml)
pre	0,04	0,05	0,624
post 3	0,71	0,40	0,009
Tetanusz
(U/ml)
pre	0,45	0,50	0,404
post 3	8,20	4,51	<0,001

Komponens (n²)	Antitesttiter (GMT)	p-érték³
Kombinált (189)	Külön (189)
Szamárköhögés-agglutininek (reciprok hígítás)
pre	6,53	4,69	0,121
post 3	51,93	23,34	0,008

¹ Kombinált négykomponensű (D, T, P és Hib-konjugátum) vakcina, illetve külön (DTP-Hib konjugátum) vakcinák beadva 2, 4 és 6 hónapos korban.

² Az összes szereplő alany.

3. táblázat

Antitestválasz három szamárköhögés vakcinakomponensre kombinált, illetve külön beadott vakcina csoportokban

V akcinakomponens	Antitesttiter (GMT¹)	p-érték²
Kombinált (n=52)	Külön (n=34)
Szamárköhögés-toxin
pre	1,09	1,80
post 3	85,92	17,60	0,001
69K
pre	6,13	5,98
post 3	66,43	41,55	0,11
FHA
pre	3,97	4,73
post 3	2,32	0,79	0,0001

¹ Az antitesttiterek ELlSA-egység/ml.

² A p-értékeket Wilcoxon 2 mintás teszttel számítjuk.

4. táblázat

Antitestválaszok a kombinált (D, T, P és Hibkonjugátum) vakcina egyes komponenseire

Komponens	n	Antitesttiter (GMT)
Hib-konjugátum (pg/ml)	123	8,20
Diftéria (IU/ml)	123	0,92
Tetanusz (U/ml)	123	7,52
Szamárköhögésagglutininek (reciprok hígítás)	123	110,10

¹ Antitesttiterek egy hónappal a harmadik dózis után. Immunizálás előtti szérum nincs.

Claims

1. Kombinált gyermekgyógyászati vakcinakészítmény, amely fokozott antitestválaszt vált ki gyerekekben a diftéria, a tetanusz, a szamárköhögés és a Haemophilus influenzáé b típus vakcinakomponensekkel szemben, azzal jellemezve, hogy egyetlen immunizáló dózisban diftéria-, tetanusz- és szamárköhögés-antigének keverékét, valamint Haemophilus influenzáé b típus kapszuláris poliszacharid antigén fragmentjei és CRM₁₉₇ fehérje konjugátumát tartalmazza egy gyógyászatilag elfogadható vizes hordozóközegben.

2. Az 1. igénypont szerinti vakcinakészítmény, azzal jellemezve, hogy diftéria-antigénként diftériatoxoidot, tetanuszantigénként tetanusztoxoidot és szamárköhögés-antigénként inaktivált Bordetella pertussis sejteket tartalmaz.

3. A 2. igénypont szerinti vakcinakészítmény, azzal jellemezve, hogy a diftériatoxoid és a tetanusztoxoid alumínium-foszfátra van adszorbeálva, és az inaktivált Bordetella pertussis sejtek egybázisú kálium-foszfát, kétbázisú nátrium-foszfát és nátrium-klorid elegyét tartalmazó oldatban vannak szuszpendálva.

4. Eljárás kombinált gyermekgyógyászati vakcinakészítmény előállítására, amely fokozott antitestválaszt vált ki gyerekekben a diftéria, a tetanusz, a szamárköhögés és a Haemophilus influenzáé b típus vakcinakomponensekkel szemben, azzal jellemezve, hogy egyetlen immunizáló dózisban diftéria-, tetanusz- és szamárköhögés-antigének keverékét, valamint Haemophilus influenzáé b típus kapszuláris poliszacharid antigén fragmentjei és CRM_]97 fehérje konjugátumát egy gyógyászatilag elfogadható vizes hordozóközegben összekeverjük.

5. A 4. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy diftéria antigénként diftéria-toxoidot, tetanuszantigénként tetanusztoxoidot, és szamárköhögés-antigénként inaktivált Bordetella pertussis sejteket alkalmazunk.

6. Az 5. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a diftériatoxoidot és a tetanusztoxoidot alumínium-foszfátra adszorbeáljuk, és az inaktivált Bordetella pertussis sejteket egybázisú kálium-foszfát, kétbázisú nátrium-foszfát és nátrium-klorid elegyét tartalmazó oldatban szuszpendáljuk.