FR3013237A1

FR3013237A1 - SYSTEM AND METHOD FOR SAMPLE TESTING

Info

Publication number: FR3013237A1
Application number: FR1361489A
Authority: FR
Inventors: Alain Fautrel; Cam Jean-Benoit Le; Jean-Pierre Guin
Original assignee: Centre National de la Recherche Scientifique CNRS; Universite de Rennes 1; Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale INSERM
Current assignee: Centre National de la Recherche Scientifique CNRS; Universite de Rennes 1; Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale INSERM
Priority date: 2013-11-21
Filing date: 2013-11-21
Publication date: 2015-05-22
Anticipated expiration: 2033-11-21
Also published as: WO2015075396A1; FR3013237B1

Abstract

Procédé de test d'échantillon comprenant de fournir un premier dispositif (10) comportant une première et une deuxième face opposées (11 et 12), et comprenant un réseau de puits (20) s'étendant entre la première face (11) et la deuxième face (12) du premier dispositif (10), chaque puits (20) débouchant sur au moins la première face (11) et chaque puits (20) contenant un réactif, et comprenant de fournir au moins un échantillon (40), et comprenant de mettre en contact la première face (11) du premier dispositif (10) avec l'échantillon (40), avec au moins deux puits (20) en regard chacun avec au moins une partie respective de l'échantillon (40) de manière étanche, pour former un ensemble (80), puis de mettre en contact le réactif avec l'échantillon (40).A sample testing method comprising providing a first device (10) having opposite first and second faces (11 and 12), and comprising a well array (20) extending between the first face (11) and the second face (12) of the first device (10), each well (20) opening on at least the first face (11) and each well (20) containing a reagent, and comprising providing at least one sample (40), and comprising contacting the first face (11) of the first device (10) with the sample (40), with at least two wells (20) facing each with at least a respective portion of the sample (40) of sealingly, to form an assembly (80), and then contacting the reagent with the sample (40).

Description

Système et procédé de test d'échantillon. La présente invention est relative au système et procédé de test d'échantillon.System and method for sample testing The present invention relates to the system and method of sample testing.

Dans le domaine de l'histologie, et du criblage haut débit différencié notamment, pour le test d'échantillons biologiques tels que des tissus, le haut débit Il permet 10 l'expression TMA d'évaluer par protéine (Tissue Micro Array). immuno-histochimie sur des centaines est réalisé avec le Système soit d'une même d'échantillons d'un même tissu de différents individus, soit d'évaluer l'expression d'une même protéine sur différents échantillons de tissus d'un même animal (coeur, rate, foie, poumons'). Un tel système reste limité à la 15 recherche d'expression d'une protéine cible sur un grand nombre d'échantillons disposés sur une même lame ou sur un même support. La présente invention a notamment pour but de pallier à ces inconvénients en permettant d'effectuer un grand nombre d'analyses différentes sur un même support, 20 par exemple simultanément. A cet effet, l'invention concerne un procédé de test d'échantillon comprenant : Fournir un premier dispositif comportant une première et une deuxième face opposées, et comprenant un réseau de puits s'étendant entre la 25 première face et la deuxième face du premier dispositif, chaque puits débouchant sur au moins la première face et chaque puits contenant un réactif, - Fournir au moins un échantillon, Mettre en contact la première face du premier 30 dispositif avec l'échantillon, avec au moins deux puits en regard chacun avec au moins une partie respective de l'échantillon de manière étanche, pour former un ensemble, - Mettre en contact le réactif avec l'échantillon. Grâce à ces dispositions, il sera possible de tester plusieurs Anticorps différents sur une même lame. Plus généralement un grand nombre d'échantillons 5 biologiques pourront être testés simultanément et par différents réactifs, visant une augmentation du débit d'analyses réalisées. Dans une même perspective de procédé de test haut débit, un même échantillon biologique pourra être testé par plusieurs réactifs simultanément permettant 10 des études statistiques. Un tel procédé de test va notamment dans la direction d'une possible automatisation du système. Comme autre avantage il sera aussi possible d'optimiser, rapidement sur un même support, des protocoles 15 expérimentaux. Dans des modes de réalisation préférés du procédé de tests d'échantillon biologique selon l'invention, on peut éventuellement avoir recours en outre à l'une et/ou à l'autre des dispositions suivantes : 20 - l'échantillon est un échantillon biologique. - la mise en contact du réactif avec les échantillons se fait par agitation de l'ensemble. - l'au moins un échantillon est porté par un deuxième dispositif comportant une première et une deuxième face 25 opposées et portant des échantillons sur au moins une de ses faces, et pour lequel la première face du premier dispositif et l'une des faces du deuxième dispositif sont mises en contact, avec au moins un puits en regard avec au moins une partie d'au moins un échantillon porté par au 30 moins une des faces du deuxième dispositif. - au moins un des puits débouche sur les deux faces opposées du premier dispositif. - le procédé comprend les étapes suivantes: - Positionner l'ensemble de sorte que le premier dispositif soit au-dessus du deuxième dispositif, Remplir l'au moins un des puits du premier dispositif par la deuxième face du premier dispositif. - le procédé comprend d'observer par des moyens optiques les échantillons depuis la deuxième face du premier dispositif. - le procédé comprend de fermer le débouché de l'au moins un puits sur la deuxième face du premier dispositif par une plaque. Dans des modes de réalisation préférés du système de tests d'échantillon biologique selon l'invention, on peut éventuellement avoir recours en outre à l'une et/ou à l'autre des dispositions suivantes : - Le système comprend au moins un premier dispositif comportant une première et une deuxième face opposées, et comprenant un réseau de puits s'étendant entre la première face et la deuxième face du premier dispositif, chaque puits débouchant sur au moins la première face et chaque puits contenant un réactif, le système comprenant également au moins un échantillon, et le système étant adapté pour mettre en contact la première face du premier dispositif avec l'échantillon, avec au moins deux puits en regard chacun avec au moins une partie respective de l'échantillon de manière étanche, pour former un ensemble adapté pour mettre en contact le réactif et l'échantillon. - Le système comprend en outre au moins un deuxième dispositif comportant une première et une deuxième faces 30 opposées, adapté pour porter des échantillons sur au moins une de ses faces et adapté pour que la première face du premier dispositif et l'une des faces du deuxième dispositif soient mises en contact, avec au moins un puits de la première face du premier dispositif en regard avec au moins une partie d'au moins un échantillon porté par au moins une des faces du deuxième dispositif. - La première face du premier dispositif est localement hydrophobe autour du débouché d'au moins un puits sur la première face du premier dispositif. - Le système comprend en outre un réservoir adapté pour être connecté à au moins un puits du premier dispositif, 10 ledit réservoir étant adapté pour remplir individuellement ledit puits. - Le système comprend en outre des alésages préalablement usinés dans le premier dispositif, lesdits alésages étant adaptés pour aider la séparation du premier dispositif et 15 du deuxième dispositif après la mise en contact du réactif et de l'échantillon. - Le premier dispositif est en polymère et adapté au thermo moulage des puits. - Le dispositif est en matériau anti Ultra-Violet au moins 20 en surface. - Au moins un des puits a une géométrie conique et pour lequel la section de débouché dudit puits sur la première face (11) est supérieure à la section du puits entre la première face et la deuxième face du premier dispositif. 25 D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront au cours de la description suivante de plusieurs de ses formes de réalisation, donnée à titre d'exemple non limitatif, en regard des dessins joints. 30 Sur les dessins : - la figure 1 montre le système selon un mode de réalisation de l'invention avec le premier dispositif, - la figure 2 montre une géométrie conique de puits, - la figure 3 schématise le remplissage individualisé des puits, - la figure 4 montre le remplissage commun de tous les puits par un réservoir commun, - la figure 5 schématise les étapes du procédé de 10 test pour le système selon le mode de réalisation de l'invention avec le premier dispositif, - les figures 6a-6d illustrent des possibles configurations d'étanchéité du premier dispositif, - la figure 7 montre le système selon un mode de 15 réalisation de l'invention avec le premier et le second dispositif, - les figures 8a-8d schématisent les étapes du procédé de test pour le système selon le mode de réalisation de l'invention avec le premier et le second 20 dispositif, - la figure 9 montre les alésages dans le premier dispositif, - la figure 10 montre le premier dispositif avec des puits débouchants sur les deux faces de la pièce, 25 - les figures 11a-11d schématisent des étapes du procédé de test dans le cas de puits débouchants sur les deux faces de la pièce. - la figure 12 illustre le cas de puits débouchants sur chaque face et de géométrie conique, 30 - la figure 13 illustre le cas de puits alimentés en solution ou en gaz par des connecteurs latéraux, - la figure 14 illustre l'automatisation du système.In the field of histology, and especially high-throughput screening, for the testing of biological samples such as tissues, high throughput allows TMA expression to be assessed by protein (Tissue Micro Array). Immunohistochemistry in hundreds is performed with the System either from the same samples of the same tissue of different individuals, or to evaluate the expression of the same protein on different tissue samples of the same animal (heart, spleen, liver, lungs'). Such a system remains limited to the search for the expression of a target protein on a large number of samples placed on the same slide or on the same support. The present invention is intended in particular to overcome these disadvantages by making it possible to carry out a large number of different analyzes on the same support, for example simultaneously. To this end, the invention relates to a sample testing method comprising: providing a first device having opposite first and second faces, and comprising a well array extending between the first face and the second face of the first face; device, each well opening on at least the first face and each well containing a reagent, - providing at least one sample, bringing the first face of the first device into contact with the sample, with at least two wells facing each with minus a respective portion of the sample in a sealed manner, to form an assembly; - bringing the reagent into contact with the sample. Thanks to these provisions, it will be possible to test several different antibodies on the same slide. More generally, a large number of biological samples may be tested simultaneously and by different reagents, aiming at an increase in the flow rate of analyzes carried out. In the same perspective of high-speed test method, the same biological sample can be tested by several reagents simultaneously for statistical studies. Such a test method goes in particular in the direction of a possible automation of the system. As another advantage, it will also be possible to optimize experimental protocols rapidly on the same support. In preferred embodiments of the biological sample test method according to the invention, one or more of the following may also be used: the sample is a biological sample . the reagent is brought into contact with the samples by agitating the assembly. the at least one sample is carried by a second device comprising opposite first and second faces and bearing samples on at least one of its faces, and for which the first face of the first device and one of the faces of the second device are brought into contact with at least one well facing at least a portion of at least one sample carried by at least one of the faces of the second device. at least one of the wells opens on the two opposite faces of the first device. the method comprises the following steps: Position the assembly so that the first device is above the second device. Fill the at least one of the wells of the first device with the second face of the first device. the method comprises observing by optical means the samples from the second face of the first device. - The method comprises closing the outlet of the at least one well on the second face of the first device by a plate. In preferred embodiments of the biological sample test system according to the invention, one or more of the following arrangements may also be used: The system comprises at least a first device having a first and a second opposite face, and comprising an array of wells extending between the first face and the second face of the first device, each well opening on at least the first face and each well containing a reagent, the system also comprising at least one sample, and the system being adapted to contact the first face of the first device with the sample, with at least two wells each facing with at least a respective portion of the sample in a sealed manner, to form a together adapted to contact the reagent and the sample. - The system further comprises at least a second device comprising a first and a second opposite face 30, adapted to carry samples on at least one of its faces and adapted so that the first face of the first device and one of the faces of the second device are brought into contact with at least one well of the first face of the first device facing at least a portion of at least one sample carried by at least one of the faces of the second device. - The first face of the first device is locally hydrophobic around the outlet of at least one well on the first face of the first device. The system further comprises a reservoir adapted to be connected to at least one well of the first device, said reservoir being adapted to individually fill said well. The system further includes bores pre-machined in the first device, said bores being adapted to assist in separating the first device and the second device after contacting the reagent and the sample. - The first device is made of polymer and suitable for thermo molding wells. - The device is anti-ultraviolet material at least 20 on the surface. - At least one of the wells has a conical geometry and for which the outlet section of said well on the first face (11) is greater than the section of the well between the first face and the second face of the first device. Other features and advantages of the invention will become apparent from the following description of several of its embodiments, given by way of non-limiting example, with reference to the accompanying drawings. In the drawings: FIG. 1 shows the system according to one embodiment of the invention with the first device; FIG. 2 shows a conical well geometry; FIG. 3 shows schematically the individualized filling of the wells; FIG. 4 shows the common filling of all the wells by a common tank, FIG. 5 schematizes the steps of the test method for the system according to the embodiment of the invention with the first device, FIGS. 6a-6d. illustrate possible sealing configurations of the first device, - Figure 7 shows the system according to an embodiment of the invention with the first and the second device, - Figures 8a-8d schematize the steps of the test method for the system according to the embodiment of the invention with the first and the second device; - Figure 9 shows the bores in the first device; - Figure 10 shows the first device with its outlets on both sides of the part, - Figures 11a-11d schematize steps of the test method in the case of wells opening on both sides of the part. FIG. 12 illustrates the case of wells opening on each face and of conical geometry; FIG. 13 illustrates the case of wells supplied with solution or gas by lateral connectors; FIG. 14 illustrates the automation of the system.

Sur les différentes figures, les mêmes références désignent des éléments identiques ou similaires. Dans tout ce qui suivra, on notera z un axe vertical dans l'espace tel que représenté à la figure 1. On notera également x et y deux axes perpendiculaires entre eux et perpendiculaires à z de manière à ce que les axes (x, y, z) forment un repère orthonormé. Le système selon un premier mode de réalisation comprend un premier dispositif 10 comportant une première 10 et une deuxième face opposées, 11 et 12 comme représenté à la figure 1. Le premier dispositif 10 est en matériau biocompatible. En variante, il est en matériau non biocompatible dont la surface intérieure des puits serait bio- 15 compatible. Il est facile à nettoyer et à réutiliser fréquemment. Il peut s'agir par exemple d'une plaque de verre d'épaisseur de l'ordre du centimètre par exemple. Le premier dispositif 10 peut être également une plaque en matériau polymère adapté ou soumis à un traitement de 20 surface adapté. En effet les matériaux polymères peuvent générer une fixation aspécifique des molécules biologiques (protéines, acides nucléiques,...) et un traitement de surface préalable avec un composé hydrophobe assurera une fiabilité dans la concentration des composés à tester. 25 Le premier dispositif 10 comprend un réseau de puits 20 qui peuvent être réalisés s'étendant entre la première face 11 et la deuxième face 12 du premier dispositif 10. Un réseau de puits 20 peut comprendre par exemple des puits 20 disposés de manière ordonnée en lignes 30 et en colonnes. Les lignes définissent alors la direction x. Chaque puits 20 débouche sur au moins la première face 11. Les puits 20 peuvent être par exemple cylindriques d'axe parallèle à z. Un puits cylindrique 20 peut avoir une section quelconque fixe en fonction de z comme représenté à la figure 1. Dans un autre mode de réalisation, la géométrie des puits peut être adaptée en fonction des applications visées. La section du puits 20 peut par exemple être variable en fonction de z. Le puits 20 peut également par exemple avoir une forme conique comme représentée à la figure 2. Un puits 20 aura par exemple une taille de diamètre comprise entre 1 mm et 15 mm, de préférence entre 5 mm et 10 mm, en fonction des applications visées. Les puits 20 auront typiquement une profondeur de l'ordre de quelques millimètres, et qui pourra être corrélée au diamètre des puits. Dans une plaque en verre, les puits 20 sont 15 fabriqués par exemple par usinage ultrasonore au travers d'un masque ou par gravage ou encore par pressage à chaud contre une préforme. Une attaque par l'acide fluorhydrique HF peut être utilisée pour améliorer l'état de surface final des puits. Dans le cas de l'usinage de puits 20 dans 20 un matériau polymère, la mise en forme peut être faîte par traitement thermique, par moulage par exemple. Chaque puits 20 est adapté pour recevoir un réactif. Les puits 20 débouchent sur la première face 11, et sont obturés du côté opposé. Ils pourront recevoir un 25 traitement de surface au préalable qui conditionne également la dimension des puits en fonction du traitement souhaité. La densité et la taille des puits 20 du premier dispositif 10 sont des paramètres qui peuvent varier en 30 fonction de la taille des matériaux et du volume de réactif que doivent contenir les puits 20. Ce réactif peut être différent d'un puits 20 à l'autre. Certains puits 20 du premier dispositif 10 peuvent également par exemple être laissés vides comme représenté à la figure 3.In the different figures, the same references designate identical or similar elements. In all that follows, we note z a vertical axis in space as shown in Figure 1. We also note x and y two axes perpendicular to each other and perpendicular to z so that the axes (x, y , z) form an orthonormal frame. The system according to a first embodiment comprises a first device 10 comprising a first 10 and a second opposite face, 11 and 12 as shown in Figure 1. The first device 10 is made of biocompatible material. Alternatively, it is of non-biocompatible material whose inner surface of the wells would be biocompatible. It is easy to clean and reuse frequently. It may be for example a glass plate with a thickness of about one centimeter, for example. The first device 10 may also be a plate of polymer material adapted or subjected to a suitable surface treatment. In fact, the polymeric materials can generate an aspecific binding of the biological molecules (proteins, nucleic acids, etc.) and a preliminary surface treatment with a hydrophobic compound will ensure a reliability in the concentration of the compounds to be tested. The first device 10 comprises a network of wells 20 which can be made extending between the first face 11 and the second face 12 of the first device 10. A well network 20 may comprise, for example, wells 20 arranged in an orderly manner. lines 30 and in columns. The lines then define the x direction. Each well 20 opens on at least the first face 11. The wells 20 may for example be cylindrical with an axis parallel to z. A cylindrical well 20 may have any fixed section as a function of z as shown in FIG. 1. In another embodiment, the geometry of the wells may be adapted according to the intended applications. The section of the well 20 may for example be variable as a function of z. The well 20 may also for example have a conical shape as shown in FIG. 2. A well 20 will have, for example, a diameter size of between 1 mm and 15 mm, preferably between 5 mm and 10 mm, depending on the intended applications. . The wells 20 will typically have a depth of the order of a few millimeters, and which may be correlated to the diameter of the wells. In a glass plate, the wells 20 are made for example by ultrasonic machining through a mask or by etching or by hot pressing against a preform. An attack by hydrofluoric acid HF can be used to improve the final surface state of the wells. In the case of machining wells 20 in a polymeric material, the shaping can be done by heat treatment, for example by molding. Each well 20 is adapted to receive a reagent. The wells 20 open on the first face 11, and are closed on the opposite side. They may receive a prior surface treatment which also conditions the size of the wells depending on the desired treatment. The density and size of the wells 20 of the first device 10 are parameters which may vary depending on the size of the materials and the volume of reagent that must be contained in the wells 20. This reagent may be different from a well 20 to 'other. Some wells 20 of the first device 10 may also for example be left empty as shown in FIG.

Le premier dispositif 10 peut être translucide pour permettre l'observation temporelle continue ou séquentielle du réactif contenu dans les puits 20 par des moyens optiques ou spectroscopiques. Le réactif peut être par exemple un liquide, un solide éventuellement sous forme de poudre, par exemple un aérosol. Le remplissage des puits 20 peut se faire simultanément pour tous les puits 20 par la mise en contact de la première face 11 du premier dispositif 10 sur laquelle débouchent les puits 20, avec un réservoir contenant le réactif destiné à remplir les puits 20. Le remplissage par un réservoir commun, tel que représenté à la figure 4, vise par exemple le gain de temps, et à terme par exemple l'automatisation du procédé.The first device 10 may be translucent to allow continuous or sequential temporal observation of the reagent contained in the wells 20 by optical or spectroscopic means. The reagent may be for example a liquid, a solid optionally in the form of a powder, for example an aerosol. The filling of the wells 20 can be done simultaneously for all the wells 20 by contacting the first face 11 of the first device 10 on which the wells 20 open, with a reservoir containing the reagent for filling the wells 20. The filling by a common tank, as shown in Figure 4, is for example the time saving, and ultimately for example the automation of the process.

Les puits 20 peuvent également être remplis individuellement par des réactifs identiques dans chaque puits 20 ou par des réactifs différents. Le système de l'invention comprend également par exemple au moins un échantillon 40 de dimensions allant de quelques pm à quelques cm. Il peut s'agir par exemple d'un échantillon biologique : peau, tissu ou cellules. Il peut s'agir d'un morceau de polymère pour des applications industrielles, ou encore d'un échantillon végétal, d'un matériau quelconque ou d'une micro ou nano-structure électromécanique. La structure peut être par exemple à fonction passive telle qu'un film avec un substrat ou à fonction active telle qu'un capteur. Dans le mode de réalisation qui sera ici décrit, on considérera par soucis de simplification le cas d'un 30 échantillon biologique. Le premier dispositif 10 est mis en contact avec l'échantillon biologique 40 comme représenté à la figure 5. Pour cela l'échantillon biologique 40 est positionné sur le premier dispositif 10 de manière à ce que, si l'échantillon biologique 40 doit être testé sur une face préférentiellement, ce soit cette face de l'échantillon biologique 40 qui soit mise face au premier dispositif 10. Au moins un puits 20 est placé en regard avec au moins une partie de l'échantillon biologique 40. L'échantillon biologique 40 est d'étendue spatiale suffisamment étendue pour recouvrir plusieurs puits voisins les uns des autres, et d'une rigidité telle qu'au repos il ne rentre pas au contact avec le réactif contenu dans les puits. Le réactif et l'échantillon biologique sont alors mis en contact. Pour cela l'ensemble 80 formé par l'échantillon biologique 40 et le premier dispositif 10 maintenus ensemble est par exemple retourné autour d'un axe du plan (x,y) pour que, sous l'effet de la gravité, le réactif contenu dans l'au moins un puits 20 entre en contact avec l'échantillon biologique 40. L'ensemble 80 est ensuite retourné à nouveau autour d'un axe du plan (x,y), vers sa position initiale par exemple, de manière à ce que le réactif contenu dans le puits 20, si il est liquide, redescende par gravité au fond des puits 20. L'échantillon 40 et le premier dispositif 10 sont séparés. Pour amener en contact le réactif avec l'échantillon biologique, l'ensemble 80 peut également en variante être retourné autour d'un axe du plan (x,y) plus de deux fois ou secoué verticalement ou de façon plus générale agité, avant de séparer l'échantillon 40 et le premier dispositif 10. Dans tout ce qui suivra le terme « agitation » sera utilisé de façon générale pour décrire aussi bien un simple retournement du système autour d'un axe du plan (x,y), que 30 plusieurs retournements consécutifs du système autour d'un axe du plan (x,y), qu'un mouvement translationnel du système selon une direction quelconque, qu'un mouvement périodique du système, qu'un mouvement aléatoire en direction et en périodicité adapté pour l'amenée en contact du réactif et de l'échantillon biologique. Une telle « agitation » pourra notamment être automatisée. L'étanchéité entre les puits 20 du premier dispositif 10 doit être assurée pour éviter la 5 contamination inter-puits lors de l'agitation par exemple de l'ensemble 80 par exemple si des liquides différents sont placés dans chaque puits 20. La première face 11 du premier dispositif 10 sur laquelle débouchent les puits 20 va par exemple subir un traitement de surface pour être 10 rendue localement hydrophobe entre les puits 20. La première face 11 sera traitée par une texturation mécanique, par un traitement chimique ou par un dépôt de matériau sur la première face 11 du premier dispositif 10. La première face 11 sera par exemple traitée par un dépôt 15 de nanoparticules de silice. La première face 11 du premier dispositif 10 sera par exemple ainsi subdivisée en petites zones entourant chacun des puits, et séparées les unes des autres par une zone hydrophobe de manière à ce qu'après mise en contact et 20 agitation de l'ensemble 80, le réactif comme par exemple un liquide, contenu dans les puits 20 ne puisse pas transiter entre les puits 20, c'est-à-dire que la jonction entre les puits 20 soit étanche comme représentée à la figure 6a. L'hydrophobicité peut être obtenue par texturation 25 de la surface ou par l'ajout d'une matière hydrophobe ou dont la structuration de surface la rend hydrophobe. La première face 11 pourra être par exemple rendue hydrophobe sur toute sa surface, puis localement traitée pour libérer certaines zones de l'hydrophobie, par un 30 traitement au travers d'un masque par exemple, tel qu'un gravage au travers d'un masque. Ces zones de la première face 11 rendues hydrophobes peuvent être des lignes délimitant les puits 20. Ces lignes peuvent être épaisses (figure 6b) ou multiples telles que de doubles lignes (figure 6c). La première face 11 pourra en variante être localement traitée pour être rendue hydrophobe seulement dans certaines zones, par traitement au travers d'un masque directement par exemple.The wells 20 can also be individually filled with identical reagents in each well 20 or with different reagents. The system of the invention also comprises for example at least one sample 40 of dimensions ranging from a few pm to a few cm. It may be for example a biological sample: skin, tissue or cells. It may be a piece of polymer for industrial applications, or a plant sample, any material or an electromechanical micro or nano-structure. The structure may be for example passive function such as a film with a substrate or active function such as a sensor. In the embodiment which will be described here, it will be considered for the sake of simplification the case of a biological sample. The first device 10 is brought into contact with the biological sample 40 as shown in FIG. 5. For this, the biological sample 40 is positioned on the first device 10 so that, if the biological sample 40 is to be tested on one side preferably, it is this face of the biological sample 40 which faces the first device 10. At least one well 20 is placed facing at least a part of the biological sample 40. The biological sample 40 is of sufficient spatial extent to cover several wells adjacent to each other, and a rigidity such that at rest it does not come into contact with the reagent contained in the wells. The reagent and the biological sample are then brought into contact. For this, the assembly 80 formed by the biological sample 40 and the first device 10 held together is for example returned around an axis of the plane (x, y) so that, under the effect of gravity, the reagent contained in the at least one well 20 comes into contact with the biological sample 40. The assembly 80 is then returned again around an axis of the (x, y) plane, towards its initial position for example, so as to the reagent contained in the well 20, if it is liquid, gravitates down to the bottom of the wells 20. The sample 40 and the first device 10 are separated. To bring the reagent into contact with the biological sample, the assembly 80 may also alternatively be turned around an axis of the plane (x, y) more than twice or shaken vertically or more generally agitated, before separating the sample 40 and the first device 10. In all that will follow the term "agitation" will be used generally to describe both a simple reversal of the system about an axis of the plane (x, y), that 30 several consecutive reversals of the system around an axis of the plane (x, y), a translational movement of the system in any direction, a periodic movement of the system, a random movement in direction and periodicity adapted to bringing the reagent and the biological sample into contact. Such "agitation" may in particular be automated. The seal between the wells 20 of the first device 10 must be ensured in order to avoid the inter-well contamination during the agitation, for example of the assembly 80, for example if different liquids are placed in each well 20. The first face 11 of the first device 10 on which the wells 20 open for example will undergo a surface treatment to be made locally hydrophobic between the wells 20. The first face 11 will be treated by mechanical texturing, by a chemical treatment or by a deposit of material on the first face 11 of the first device 10. The first face 11 will for example be treated by a deposition 15 of silica nanoparticles. The first face 11 of the first device 10 will for example be subdivided into small zones surrounding each of the wells, and separated from each other by a hydrophobic zone so that after contacting and shaking the assembly 80, the reagent such as a liquid contained in the wells 20 can not pass between the wells 20, that is to say that the junction between the wells 20 is sealed as shown in Figure 6a. The hydrophobicity can be obtained by texturing the surface or by adding a hydrophobic material or whose surface structuring renders it hydrophobic. The first face 11 may for example be rendered hydrophobic over its entire surface, and then locally treated to release certain areas of the hydrophobicity, by a treatment through a mask for example, such as etching through a mask. These areas of the first face 11 made hydrophobic may be lines delimiting the wells 20. These lines may be thick (Figure 6b) or multiple such as double lines (Figure 6c). The first face 11 may alternatively be locally treated to be rendered hydrophobic only in certain areas, by treatment through a mask directly for example.

L'étanchéité entre les puits 20 peut également être assurée par des entretoises 70 placées entre les puits 20 tel que représenté à la figure 6d, assemblées de manière étanche au premier dispositif 10, et assemblées de manière étanche à l'échantillon 40.The tightness between the wells 20 can also be ensured by spacers 70 placed between the wells 20 as shown in FIG. 6d, sealingly assembled to the first device 10, and sealed to the sample 40.

On pourrait également assurer l'étanchéité en utilisant un film polymère ou métallique adhésif que l'on viendrait coller sur le dispositif 10, assurant ainsi l'étanchéité des puits du côté de la surface 12. Dans ce mode de réalisation, un disque de tissu 15 initialement congelé à tester est par exemple sélectionné, et mis en contact avec le liquide réactif placé dans les puits 20 du premier dispositif 10 par exemple distants de 1 à 2 mm deux à deux. Pour que la réponse du tissu au liquide réactif soit représentative, une surface minimum du tissu 20 devra être mise en contact avec le liquide de test, via un ou plusieurs puits 20. La dimension caractéristique de la surface la plus petite sera par exemple typiquement de l'ordre de 600m. En variante de ce mode de réalisation, il peut 25 s'agir par exemple d'un procédé pour effectuer des tests d'allergologie, faits sur la peau du patient qui constituera l'échantillon biologique 40. La peau est dans un premier temps rendue sensible par des coups d'aiguille ou en la grattant. Les puits 20 sont remplis de réactifs 30 différents entre les puits 20 qui sont des substances allergènes. Les puits 20 sont alors mis en contact de façon étanche avec la surface de la peau subissant le test. Le bras du patient peut par exemple être positionné au-dessus du premier dispositif 10, puis l'ensemble du bras et du dispositif 10 est assemblé par du scotch par exemple. Le patient secoue ensuite par exemple son bras puis revient à la position initiale. Le patient peut également par exemple retourner son bras pour mettre en contact les allergènes et sa peau pendant une heure ou plus généralement agiter son bras solidarisé au dispositif 10. Après que le patient a remis son bras dans sa position initiale, le premier dispositif 10 est séparé du bras du patient sur lequel les réactifs ont réagi avec la peau du patient. Le procédé décrit précédemment permet donc par exemple de réaliser le test d'allergologie. Dans ce mode de réalisation un même tissu sera sectorisé pour effectuer conjointement une série d'analyses différentes.Sealing could also be ensured by using an adhesive polymeric or metallic film which would be adhered to the device 10, thus sealing the surface-side wells. In this embodiment, a disc of fabric The initially frozen sample to be tested is, for example, selected and brought into contact with the reactive liquid placed in the wells 20 of the first device 10, for example at a distance of 1 to 2 mm in pairs. In order for the response of the tissue to the reactive liquid to be representative, a minimum area of the tissue 20 will have to be contacted with the test liquid via one or more wells 20. The characteristic dimension of the smallest surface will typically be the order of 600m. As an alternative to this embodiment, it may be for example a method for performing allergy tests, made on the skin of the patient that will constitute the biological sample 40. The skin is first rendered sensitive by needle blows or scraping. Wells 20 are filled with different reagents between wells 20 which are allergenic substances. The wells 20 are then brought into sealed contact with the surface of the skin undergoing the test. The patient's arm may for example be positioned above the first device 10, then the entire arm and the device 10 is assembled by tape for example. The patient then shakes his arm for example and then returns to the initial position. The patient may also for example turn his arm to contact the allergens and his skin for an hour or more generally shake his arm attached to the device 10. After the patient has returned his arm to its initial position, the first device 10 is separated from the patient's arm on which the reagents reacted with the patient's skin. The method described above thus makes it possible, for example, to carry out the allergy test. In this embodiment the same fabric will be sectorized to jointly perform a series of different analyzes.

Le remplissage individualisé des puits permettra de tester différents composés réactifs ou différentes concentrations de réactif lors d'un même essai. Dans un autre exemple de ce mode de réalisation, en agronomie on peut par exemple tester l'impact de différents produits phytosanitaires ou différentes doses sur des feuilles de végétaux ou l'impact de pathogènes différents sur une même feuille. Ce type de test peut se faire sur plants en culture. Dans cet exemple le dispositif fonctionne en environnement non maitrisé, au sens où, contrairement aux tests en laboratoire, il faut intégrer les effets du rayonnement solaire, des variations de température, de la pluie etc. Il s'agit donc, dans de telles conditions, d'assurer que les produits testés sur les plants ne se dégradent pas et que le test demeure valide. Pour éviter les effets du rayonnement solaire en particulier on peut envisager plusieurs solutions qui sont d'utiliser un matériau constitutif du dispositif 10 non transparent aux UV, ou de réaliser un traitement de surface anti-UV (non transparent aux UV) sur le dispositif 10 ou encore rajouter un autre matériau, sous forme de tissu ou de voile par exemple, autour de la zone sur laquelle les tests sont réalisés.The individualized filling of the wells will make it possible to test different reactive compounds or different concentrations of reagent during the same test. In another example of this embodiment, in agronomy one can for example test the impact of different plant protection products or different doses on plant leaves or the impact of different pathogens on the same leaf. This type of test can be done on plants in culture. In this example, the device operates in an environment that is not mastered, in the sense that, unlike laboratory tests, it is necessary to integrate the effects of solar radiation, variations in temperature, rain, etc. It is therefore, in such conditions, to ensure that the products tested on the plants do not degrade and that the test remains valid. To avoid the effects of solar radiation in particular, it is possible to envisage several solutions that are to use a material constituting the device that is not transparent to UV, or to carry out an anti-UV surface treatment (non-transparent to UV) on the device 10. or add another material, such as fabric or veil for example, around the area on which the tests are performed.

Dans un tel mode de réalisation pour faire des tests en dehors d'un laboratoire, le dispositif pourra par exemple être instrumenté, typiquement avec une sonde de température ou un « patch » affecté par le rayonnement UV ou si sa température excède une certaine valeur. Cette affectation pourrait se traduire de toute manière détectable, telle qu'un changement de couleur par exemple. En variante pour d'autres applications, industrielles par exemple, pour lesquelles de plus grandes quantités de produits doivent être testées sur de grandes surfaces, des dimensions de dispositif et de puits beaucoup plus grandes pourraient être envisagées. Pour l'ensemble des modes de réalisation ci-dessus, le suivi de la réaction peut se faire par exemple de façon instrumentée, in situ via des méthodes spectroscopiques.In such an embodiment for testing outside a laboratory, the device may for example be instrumented, typically with a temperature probe or a "patch" affected by UV radiation or if its temperature exceeds a certain value. This assignment could result in any detectable way, such as a change of color for example. Alternatively for other applications, for example industrial applications, for which larger quantities of products have to be tested over large areas, much larger device and well dimensions could be envisaged. For all the above embodiments, the reaction can be monitored, for example, in an instrumented manner, in situ via spectroscopic methods.

Selon un deuxième mode de réalisation, le système de l'invention peut également comprendre un deuxième dispositif 30, qui comporte une première et une deuxième faces opposées 31 et 32 comme représenté à la figure 7. Il peut s'agir par exemple d'une plaque de verre 30 25 telle qu'une plaque de microscope. La plaque de verre 30 peut avoir typiquement des dimensions comprises entre 1cm et 10cm, par exemple 2,5cm par 7cm. Le deuxième dispositif 30 est adapté pour recevoir au moins un échantillon biologique 40 sur au moins une de 30 ses faces. Il peut s'agir par exemple de la face 31 recevant un échantillon biologique 40. L'échantillon biologique 40 peut être par exemple un prélèvement de tissu. Dans ce mode de réalisation, l'échantillon biologique 40 est solidarisé à la face 31 du deuxième dispositif 30 en utilisant tout moyen mécanique et/ou chimique adapté permettant d'avoir accès à une portion de l'échantillon biologique. On utilise par exemple de la paraffine qui permet le positionnement et l'adhésion de l'échantillon biologique 40 à la face 31 du deuxième dispositif 30. Le deuxième dispositif 30 est alors placé sur le premier dispositif 10 de sorte que la face 31 du deuxième dispositif 30 soit face à la première face 11 du premier dispositif 10 comme illustré à la figure 8a. Pour que le procédé de test puisse être mis en oeuvre, l'échantillon biologique 40 est positionné sur le deuxième dispositif 30 de sorte qu'au moins un puits 20 contenant du réactif soit mis en contact avec au moins une partie de l'échantillon biologique 40. L'ensemble 80 formé par le premier dispositif 10 et le deuxième dispositif 30 portant l'échantillon biologique maintenus ensemble est alors agité pour que le réactif contenu dans au moins un des puits 20 soit mis en contact avec l'échantillon biologique 40. Le premier dispositif 10 et le deuxième dispositif 30 sont maintenus ensemble par des pinces, du ruban adhésif ou tout autre moyen adapté. Un moyen de pression pourra être utilisé afin de garantir une bonne étanchéité à l'interface entre le premier dispositif 10 et le deuxième dispositif 30 pendant le temps nécessaire. L'étanchéité inter-puits peut être assurée par pressage mécanique par exemple entre le premier dispositif 10 et le deuxième dispositif 30. Dans ce cas, notamment dans le cas d'une faible rugosité de la lame de microscope, l'adhésion entre le premier dispositif 10 et le deuxième dispositif 30 peut être forte. Des alésages préalablement usinés dans le premier dispositif 10 et en correspondance avec d'autres dans le second dispositif 30 peuvent être par exemple adaptés pour assurer cette mise en contact étanche du premier dispositif 10 et du deuxième dispositif 30 par utilisation d'une tige par exemple filetée et traversant les deux dispositifs 10 et 30 et en les maintenant en contact via des boulons positionnés de part et d'autre de l'ensemble 80 et qui maintiennent le contact. L'étanchéité peut également par exemple être assurée par l'utilisation de deux autres surfaces venant prendre en sandwich l'ensemble 80 pour améliorer le contact entre le premier dispositif 10 et le deuxième dispositif 30.According to a second embodiment, the system of the invention may also comprise a second device 30, which comprises first and second opposite faces 31 and 32 as shown in FIG. 7. It may be for example a glass plate 30 such as a microscope plate. The glass plate 30 can typically have dimensions between 1cm and 10cm, for example 2.5cm by 7cm. The second device 30 is adapted to receive at least one biological sample 40 on at least one of its faces. It may be for example the face 31 receiving a biological sample 40. The biological sample 40 may be for example a tissue sample. In this embodiment, the biological sample 40 is secured to the face 31 of the second device 30 using any suitable mechanical and / or chemical means for accessing a portion of the biological sample. For example paraffin is used which allows the positioning and adhesion of the biological sample 40 to the face 31 of the second device 30. The second device 30 is then placed on the first device 10 so that the face 31 of the second device 30 is facing the first face 11 of the first device 10 as shown in Figure 8a. In order for the test method to be implemented, the biological sample 40 is positioned on the second device 30 so that at least one well containing reagent is contacted with at least a portion of the biological sample. 40. The assembly 80 formed by the first device 10 and the second device 30 carrying the biological sample held together is then agitated so that the reagent contained in at least one of the wells 20 is brought into contact with the biological sample 40. The first device 10 and the second device 30 are held together by clips, tape or any other suitable means. A pressure means may be used to ensure a good seal at the interface between the first device 10 and the second device 30 for the necessary time. The inter-well seal can be provided by mechanical pressing, for example between the first device 10 and the second device 30. In this case, particularly in the case of a low roughness of the microscope slide, the adhesion between the first device 10 and the second device 30 may be strong. Bores previously machined in the first device 10 and in correspondence with others in the second device 30 may for example be adapted to ensure that the first device 10 and the second device 30 are brought into sealed contact by using a rod, for example threaded and passing through the two devices 10 and 30 and keeping them in contact via bolts positioned on either side of the assembly 80 and which maintain contact. The tightness may also for example be ensured by the use of two other surfaces sandwiching the assembly 80 to improve the contact between the first device 10 and the second device 30.

En variante, l'étanchéité inter-puits est assurée selon l'une quelconque des façons décrites ci-dessus pour le premier mode de réalisation. Puis l'ensemble 80 est agité. Le premier dispositif 10 et le deuxième dispositif 30 sont ensuite séparés comme 15 représenté respectivement aux figures 8a à 8d. Dans ce mode de réalisation la séparation du premier dispositif 10 et du deuxième dispositif 30 peut être aidée par exemple par des alésages 90. Les alésages 90 peuvent être par exemple traversants du premier dispositif 20 10 comme représenté à la figure 9. Des tiges peuvent alors à travers les alésages 90 sur le deuxième et lui appliquer un effort permettant le ce deuxième dispositif 30 du premier venir en appui dispositif 30, décollement de dispositif 10. 25 Dans cette configuration du biologique 40 peut être testé par système, l'échantillon exemple par plusieurs réactifs différents placés dans les différents puits 20 du premier dispositif 10 tous en regard avec une partie respective de l'échantillon biologique 40 lors de 30 l'agitation de l'ensemble 80 et deuxième dispositif 30. Lorsque le premier dispositif 10 et le deuxième dispositif 30 sont séparés, un réactif a réagi avec l'échantillon biologique 40 dans chaque zone dans laquelle un réactif a été mis en contact avec une zone de l'échantillon biologique 40. Dans cet exemple de réalisation, le deuxième dispositif 30 peut recevoir plusieurs échantillons biologiques 40 à tester par exemple simultanément. Le deuxième dispositif 30 comprend par exemple un réseau d'emplacements susceptibles de recevoir les échantillons biologiques 40, ce réseau étant correspondant du réseau de puits 20 fourni par le premier dispositif 10. Les échantillons biologiques 40 sont donc, dans ce cas, positionnés de telle sorte que chaque échantillon biologique 40 fasse face à au moins un puits 20 du premier dispositif 10. Certains puits 20 peuvent ne faire face à aucun échantillon biologique 40. Les échantillons biologiques 40 sont solidarisés au 15 deuxième dispositif 30 qui joue le rôle de porte échantillon comme décrit ci-dessus, et par exemple par l'utilisation de paraffine. Chaque échantillon biologique 40 est par exemple coulé dans de la paraffine puis placé sur le deuxième dispositif 30. 20 Les puits 20 du premier dispositif 10 peuvent contenir un réactif identique ou différent entre les puits 20. L'ensemble 80 et deuxième dispositif 30 est ensuite agité pour mettre en contact les échantillons biologiques 25 40 avec les réactifs contenus dans les puits. Les échantillons biologiques 40 peuvent être tous testés par un même réactif ou par différents réactifs contenus dans les différents puits 20 mis en regard avec des échantillons biologiques 40. 30 Dans un mode de réalisation du système dans cette configuration, des échantillons de 0.6mm à 2mm de diamètre et de quelques micromètres d'épaisseur sont prélevés dans des tissus imprégnés et inclus en parrafine. Ces échantillons sont ensuite positionnés sur une plaque jouant le rôle de deuxième dispositif 30. Les puits 20 sont alors par exemple de diamètre supérieur à la taille de l'échantillon biologique 40 déposé sur la plaque. Le diamètre des puits pourra être par exemple compris entre 5 1mm et 15mm. La distance entre les puits pour éviter la contamination pourra être par exemple de 1mm. En variante on pourra avoir des puits de 1mm de diamètre, avec une distance entre deux puits typiquement de 2mm. La plaque utilisée pour déposer les échantillons biologiques 40 10 pourra avoir typiquement des dimensions de l'ordre de 25x70cm, et une épaisseur de l'ordre de 1 à 2mm. Dans un autre mode de réalisation, une culture cellulaire est déposée, sous forme de culture de cellules arrêtée, sur une lame de microscope comme deuxième 15 dispositif 30, pour tester par exemple l'efficacité des anticorps. La culture de cellules peut être arrêtée en étant fixée ou congelée. La culture de cellules est fixée par un agent fixant, par exemple par du para formaldéhyde, de l'acétone ou de l'éthanol. 20 Dans un autre mode de réalisation, en envisageant l'absence de problèmes de contamination, des échantillons biologiques 40 peuvent être placés sur les deux faces 31 et 32 du deuxième dispositif 30. Dans ce mode de réalisation, des tests de chacune des faces 31 et 32 peuvent être 25 réalisés successivement par mise en contact de chacune des faces 31 et 32 du deuxième dispositif 30 avec le réactif contenu dans les puits 20 du premier dispositif 10 via la mise en contact de la première face 11 du premier dispositif 10 successivement avec les faces 31 et 32 du 30 deuxième dispositif 30. Dans un autre mode de réalisation, au moins un puits 20 peut également déboucher sur la deuxième face 12. Dans ce mode de réalisation, le fond du puits 20 sur la deuxième face 12 peut être alors constitué d'une plaque de verre supplémentaire 50, jointe à la deuxième face 12 du premier dispositif 10 de façon étanche et amovible comme représenté à la figure 10. Dans ce mode de réalisation le dispositif 10' qui peut remplacer le premier dispositif 10 de l'invention, peut être constitué du premier dispositif 10 et d'une plaque 50 par exemple en verre qui est associée à la deuxième face 12 du premier dispositif 10 de façon étanche pour en constituer le fond.Alternatively, the inter-well seal is provided in any of the ways described above for the first embodiment. Then the assembly 80 is agitated. The first device 10 and the second device 30 are then separated as shown in Figures 8a to 8d respectively. In this embodiment, the separation of the first device 10 and the second device 30 may be assisted for example by bores 90. The bores 90 may for example be through the first device 20 as shown in FIG. through the bores 90 on the second and apply a force to it that the second device 30 of the first come into support device 30, detachment of device 10. In this configuration of the biological 40 can be tested by system, the sample example by several different reagents placed in the different wells 20 of the first device 10 all facing a respective part of the biological sample 40 during the agitation of the assembly 80 and second device 30. When the first device 10 and the second 30 are separated, a reagent reacted with the biological sample 40 in each zone in which a reagent was In this embodiment, the second device 30 can receive several biological samples 40 to be tested, for example simultaneously. The second device 30 comprises for example a network of locations capable of receiving the biological samples 40, this network being corresponding to the well network 20 provided by the first device 10. The biological samples 40 are therefore, in this case, positioned to so that each biological sample 40 faces at least one well 20 of the first device 10. Some wells 20 can not face any biological sample 40. The biological samples 40 are secured to the second device 30 which acts as a sample holder as described above, and for example by the use of paraffin. Each biological sample 40 is for example cast in paraffin and then placed on the second device 30. The wells 20 of the first device 10 may contain an identical or different reagent between the wells 20. The assembly 80 and second device 30 is then stirred to contact the biological samples with the reagents contained in the wells. The biological samples 40 may all be tested by the same reagent or by different reagents contained in the different wells compared with biological samples 40. In one embodiment of the system in this configuration, samples of 0.6mm to 2mm diameter and a few micrometers thick are taken from impregnated tissues and included in paraffin. These samples are then positioned on a plate acting as a second device 30. The wells 20 are then for example greater in diameter than the size of the biological sample 40 deposited on the plate. The diameter of the wells may for example be between 1mm and 15mm. The distance between the wells to avoid contamination may for example be 1mm. Alternatively we can have wells of 1mm in diameter, with a distance between two wells typically 2mm. The plate used to deposit the biological samples 40 10 may typically have dimensions of the order of 25x70cm, and a thickness of the order of 1 to 2mm. In another embodiment, a cell culture is deposited as a stopped cell culture on a microscope slide as a second device 30 for testing, for example, the effectiveness of the antibodies. The cell culture can be stopped by being fixed or frozen. The cell culture is fixed by a fixing agent, for example paraformaldehyde, acetone or ethanol. In another embodiment, considering the absence of contamination problems, biological samples 40 may be placed on both sides 31 and 32 of the second device 30. In this embodiment, tests of each of the faces 31 and 32 can be made successively by contacting each of the faces 31 and 32 of the second device 30 with the reagent contained in the wells 20 of the first device 10 via contacting the first face 11 of the first device 10 successively with the faces 31 and 32 of the second device 30. In another embodiment, at least one well 20 may also lead to the second face 12. In this embodiment, the bottom of the well 20 on the second face 12 may be then constituted by an additional glass plate 50, joined to the second face 12 of the first device 10 in a sealed and removable manner as shown in FIG. embodiment the device 10 'which can replace the first device 10 of the invention may consist of the first device 10 and a plate 50 for example glass which is associated with the second face 12 of the first device 10 in a sealed manner for make up the bottom.

Une telle configuration permet par exemple un nettoyage plus facile des puits 20 du premier dispositif 10. Dans cette configuration, comme représenté à la figure 11a, le premier dispositif 10 est positionné retourné, c'est-à-dire avec la deuxième face 12 au-dessus de la première face 11, et le premier dispositif 10 est positionné au-dessus du deuxième dispositif 30 comportant des échantillons biologiques 40 d'assemblés à celui-ci. Les puits 20 peuvent être remplis simultanément ou individuellement, à ras bord, comme représenté sur les figures 11a et 11b. Un réservoir au niveau de la surface 12, sur laquelle débouche chaque puit, peut par exemple permettre un remplissage de l'ensemble des puits en une seule opération comme représenté aux figures 11a à 11c. En variante les puits peuvent également déboucher individuellement sur la deuxième face 12. Les échantillons biologiques 40 sont donc à ce stade mis en contact avec les réactifs contenus dans les puits 20. Une plaque telle que la plaque en verre supplémentaire 50 peut alors être positionnée au-dessus de la deuxième face 12 du premier dispositif 10 comme représenté sur la figure 11c. La plaque 50 peut également permettre d'éviter l'évaporation du réactif et le changement de sa concentration. La plaque 50 peut également par exemple aider en ajoutant du poids qui étanchéifie à la jonction premier dispositif 10- deuxième dispositif 30. Le contact entre le premier dispositif 10 et la plaque 50 est alors rendu étanche, avant d'agiter par exemple l'ensemble plaque 50- premier dispositif 10- deuxième dispositif 30 si nécessaire en variante. En variante de cette configuration, le procédé peut ne comporter que les deux premières étapes illustrées aux figures 11a et 11b. Les échantillons biologiques 40 mis en contact avec le réactif contenu dans les puits peuvent alors être par exemple observés par des moyens optiques sans avoir à séparer les dispositifs 10 et 30 et sans avoir à vider les puits 20, les échantillons biologiques 40 ayant déjà été mis en contact avec le/les réactifs. L'observation se fait par exemple au travers du réactif contenu dans les puits 20. Dans le cas de puits 20 débouchant sur les deux faces 11 et 12, on peut envisager de fabriquer le premier dispositif 10 par un usinage par jets d'eau.Such a configuration allows, for example, easier cleaning of the wells 20 of the first device 10. In this configuration, as shown in FIG. 11a, the first device 10 is positioned turned over, that is to say with the second face 12 at the above the first face 11, and the first device 10 is positioned above the second device 30 comprising biological samples 40 assembled therewith. Wells 20 may be filled simultaneously or individually to the brim as shown in FIGS. 11a and 11b. A reservoir at the surface 12, on which each well opens, may for example allow filling of all the wells in a single operation as shown in FIGS. 11a to 11c. Alternatively, the wells can also lead individually to the second face 12. The biological samples 40 are therefore at this stage brought into contact with the reagents contained in the wells 20. A plate such as the additional glass plate 50 can then be positioned at above the second face 12 of the first device 10 as shown in Figure 11c. The plate 50 may also make it possible to avoid the evaporation of the reagent and the change in its concentration. The plate 50 can also for example help by adding the weight which seals the junction first device 10- second device 30. The contact between the first device 10 and the plate 50 is then sealed, before stirring for example all plate 50 first device 10 second device 30 if necessary alternatively. As an alternative to this configuration, the method may comprise only the first two steps illustrated in FIGS. 11a and 11b. The biological samples 40 brought into contact with the reagent contained in the wells can then be observed, for example, by optical means without having to separate the devices 10 and 30 and without having to empty the wells 20, the biological samples 40 having already been placed. in contact with the reagent (s). The observation is done for example through the reagent contained in the wells 20. In the case of wells 20 opening on both faces 11 and 12, it is conceivable to manufacture the first device 10 by water jet machining.

En variante le premier dispositif 10 peut également comporter au moins un puits 20 ayant une géométrie conique. Par exemple dans une telle configuration, la section de débouché dudit puits 20 sur la première face 11 peut être inférieure à la section du puits 20 entre la première face 11 et la deuxième face 12 du premier dispositif 10 comme représenté à la figure 12. Dans une telle configuration, dans le cas où les puits 20 débouchent de part et d'autre du premier dispositif 10, le premier dispositif 10 peut être par exemple retourné la deuxième face 12 au-dessus de la première face 11. La première face 11 du premier dispositif 10 est mise en contact avec la face 31 du deuxième dispositif 30 comportant les échantillons biologiques 40, les débouchés des puits sur la première face 11 étant mis en regard avec les échantillons biologiques 40. Les puits 20 peuvent alors être remplis par la deuxième face 12 du premier dispositif 10. Chaque puits 20 étant rempli par la face sur laquelle sa section est la plus évasée, vers la partie où sa section est la plus étroite, l'air piégé sous le réactif lors du remplissage, dans le cas d'un réactif liquide par exemple, peut être plus facilement évacué. Les échantillons biologiques 40 mis en contact avec le réactif contenu dans les puits 20 peuvent alors être par exemple observés par des moyens optiques sans avoir à séparer les dispositifs 10 et 30, les échantillons biologiques 40 ayant déjà été mis en contact avec le/les réactifs. L'ensemble 80 maintenu, formé du premier dispositif 15 et du deuxième dispositif 30 portant l'échantillon biologique, est alors recouvert sur la deuxième face 12 du premier dispositif 10 par exemple par une plaque en verre 50. L'étanchéité entre la deuxième face 12 du premier dispositif 10 et la plaque 50 est ensuite assurée par 20 exemple par pressage mécanique. En variante, le système comprenant l'ensemble 80 et la plaque 50 maintenus ensemble, peut être ensuite retourné et le deuxième dispositif 30 comprenant les échantillons biologiques 40 et se trouvant au-dessus peut être ensuite 25 séparé du premier dispositif 10. Ce système peut au préalable avoir été agité. Dans un mode particulier de réalisation le réactif peut également être gazeux. Dans cette variante le remplissage des puits 20 peut se faire par exemple par des 30 connecteurs latéraux et des canaux transversaux 61 tel que représenté à la figure 13, au moins une face débouchante des puits 20 du dispositif 10 étant mise en contact avec des échantillons biologiques 40 du dispositif 30. La mise en contact entre les échantillons biologiques 40 et les puits 20 est directement assurée par cette configuration. Les puits peuvent également être alimentés en solution par des connecteurs latéraux. Ces connecteurs latéraux, dans le cas des liquides 5 ou des gaz peuvent intercepter les puits à différentes hauteurs, en fonction de leur application. Après la mise en contact de l'échantillon biologique 40 avec le ou les réactifs et la séparation de l'échantillon biologique 40 du dispositif 10, l'échantillon 10 biologique 40 est analysé. En particulier, l'échantillon biologique 40 est mesuré pour déterminer l'occurrence d'une réaction entre l'échantillon biologique 40 et le/les réactif(s). Une telle mesure peut être visuelle, optique ou autre. 15 En variante on pourra utiliser à la place du second dispositif 30 portant l'échantillon biologique, une lame de Tissue Micro Array (TMA) sur laquelle chaque échantillon pourra être analysé indépendamment. Il sera, dans ce mode de réalisation, possible de tester plusieurs Anticorps 20 différents et ainsi de valider, sur une même lame, des séries d'hybridomes lors de la synthèse d'anticorps (Ac) monoclonaux aussi bien sur des tissus inclus en paraffine que des tissus congelés. Il sera également possible d'optimiser, rapidement sur le même support, les protocoles 25 par exemple pour l'utilisation d'un Ac en immunohistochimie (tampon de démasquage, dilution des Ac, kit de révélation). Le système pourra en particulier être utilisé pour le criblage d'immunoglobuline et pour l'évaluation 30 simultanée de l'interaction de molécules avec des coupes fines de tissus. Dans le cadre d'applications industrielles pourront par exemple être testés la réaction de morceaux de polymères par des substances chimiques.Alternatively the first device 10 may also include at least one well 20 having a conical geometry. For example in such a configuration, the outlet section of said well 20 on the first face 11 may be smaller than the section of the well 20 between the first face 11 and the second face 12 of the first device 10 as shown in FIG. such a configuration, in the case where the wells 20 open on either side of the first device 10, the first device 10 may be for example returned the second face 12 above the first face 11. The first face 11 of the first device 10 is brought into contact with the face 31 of the second device 30 comprising the biological samples 40, the outlets of the wells on the first face 11 being compared with the biological samples 40. The wells 20 can then be filled by the second face 12 of the first device 10. Each well 20 being filled by the face on which its section is the widest, towards the part where its section is the narrowest, the air trapped under the reagent during filling, in the case of a liquid reagent for example, can be more easily evacuated. The biological samples 40 brought into contact with the reagent contained in the wells 20 can then be observed, for example, by optical means without having to separate the devices 10 and 30, the biological samples 40 having already been brought into contact with the reagent (s). . The assembly 80 maintained, formed of the first device 15 and the second device 30 carrying the biological sample, is then covered on the second face 12 of the first device 10 for example by a glass plate 50. The seal between the second face 12 of the first device 10 and the plate 50 is then provided for example by mechanical pressing. Alternatively, the system comprising the assembly 80 and the plate 50 held together, can then be turned over and the second device 30 including the biological samples 40 and lying above can then be separated from the first device 10. This system can previously have been agitated. In a particular embodiment, the reagent may also be gaseous. In this variant the filling of the wells 20 can be done for example by lateral connectors and transverse channels 61 as shown in FIG. 13, at least one open face of the wells 20 of the device 10 being brought into contact with biological samples. 40 of the device 30. The contact between the biological samples 40 and the wells 20 is directly provided by this configuration. The wells can also be supplied with solution by lateral connectors. These side connectors, in the case of liquids or gases, can intercept wells at different heights, depending on their application. After the biological sample 40 is brought into contact with the reagent (s) and the biological sample 40 is separated from the device 10, the biological sample 40 is analyzed. In particular, the biological sample 40 is measured to determine the occurrence of a reaction between the biological sample 40 and the reagent (s). Such a measurement can be visual, optical or other. Alternatively, instead of the second biological sample bearing device 30, a Tissue Micro Array (TMA) slide on which each sample can be analyzed independently. In this embodiment, it will be possible to test several different antibodies and thus to validate, on the same slide, hybridoma series during the synthesis of monoclonal antibodies (Ac) as well as on paraffin-embedded tissues. only frozen tissues. It will also be possible to optimize, quickly on the same support, the protocols 25 for example for the use of an Ac in immunohistochemistry (anti-unmasking buffer, dilution of Ac, revelation kit). In particular, the system can be used for immunoglobulin screening and for simultaneous evaluation of the interaction of molecules with thin tissue sections. In the context of industrial applications, for example, the reaction of polymer pieces with chemical substances may be tested.

L'automatisation du système est par exemple appliquée à différentes étapes du procédé, tel qu'illustré à la figure 14. Le second dispositif 30 est par exemple convoyé automatiquement d'un bout à l'autre du processus.The automation of the system is for example applied to different steps of the method, as shown in Figure 14. The second device 30 is for example automatically conveyed from one end to the other of the process.

Le remplissage du premier dispositif 10 se fait par exemple automatiquement en parallèle du processus de convoyage du second dispositif 30 pour mener à l'assemblage du premier et du second dispositif. L'ensemble 80 est alors secoué dans une nouvelle étape automatisée puis l'ensemble est convoyé et désassemblé. Le premier dispositif 10 est transporté jusqu'à la station de nettoyage alors que le deuxième dispositif 30 est convoyé vers la station d'analyse, munie par exemple d'un microscope. Le deuxième dispositif 30 est ensuite convoyé après analyse vers la sortie.The filling of the first device 10 is for example automatically in parallel with the process of conveying the second device 30 to lead to the assembly of the first and the second device. The assembly 80 is then shaken in a new automated step then the assembly is conveyed and disassembled. The first device 10 is transported to the cleaning station while the second device 30 is conveyed to the analysis station, provided for example with a microscope. The second device 30 is then conveyed after analysis to the output.

Claims

CLAIMS-A sample testing method comprising: providing a first device (10) having opposing first and second faces (11 and 12), and comprising a well array (20) extending between the first face (11) and the second face (12) of the first device (10), each well (20) opening on at least the first face (11) and each well (20) containing a reagent, - Providing at least one sample (40), Put contacting the first face (11) of the first device (10) with the sample (40), with at least two wells (20) facing each with at least a respective portion of the sample (40) in a sealed manner, to form an assembly (80), - contacting the reagent with the sample (40).

The method of testing samples according to claim 1 wherein the sample (40) is a biological sample.

3-test method of samples according to any one of claims 1 and 2 wherein the contacting of the reagent with the samples (40) is by agitation of the assembly (80).

4-test method of samples according to any one of claims 1 to 3 wherein the at least one sample (40) is carried by a second device (30) having a first and second opposite sides (31 and 32 ) and bearing samples (40) on at least one of its faces, and for which the first face of the first device (10) and one of the faces of the second device (30) are brought into contact with at least one well (20) facing at least a portion of at least one sample (40) carried by at least one of the faces of the second device (30).

5-Process according to any one of claims 1 to 4 wherein at least one of the wells (20) opens on the two opposite faces (11, 12) of the first device (10).

6-Process according to claim 5 comprising the following steps: Position the assembly (80) so that the first device (10) is above the second device (30), Fill the at least one of the wells (20) the first device (10) by the second face (12) of the first device (10).

7-Process according to any one of claims 5 and 6 comprising observing by optical means the samples (40) from the second face (12) of the first device (10).

8-Process according to any one of claims 5 to 7 comprising closing the outlet of the at least one well (20) on the second face (12) of the first device (10) by a plate (50).

9-System comprising at least a first device (10) having opposite first and second faces (11 and 12), and comprising a well network (20) extending between the first face (11) and the second face ( 12) of the first device (10), each well (20) opening on at least the first face (11) and each well (20) containing a reagent, the system also comprising at least one sample (40), and the system being adapted to contact the first face (11) of the first device (10) with the sample (40), with at least two wells (20) facing each with at least a respective portion of the sample (40) of sealingly, to form an assembly (80) adapted to contact the reagent and the sample (40).

10- The system of claim 9 further comprising at least a second device (30) having a first and a second opposite faces (31 and 32), adapted to carry samples (40) on at least one of its faces and adapted for that the first face of the first device (10) and one of the faces of the second device (30) are brought into contact with at least one well (20) of the first face of the first device (10) facing at least a portion of at least one sample (40) carried by at least one of the faces of the second device (30).

11- System according to any one of claims 9 and 10 wherein the first face (11) of the first device (10) is locally hydrophobic around the outlet of at least one well (20) on the first face (11) of the first device (10).

12- System according to any one of claims 9 to 11 comprising a reservoir (60) adapted to be connected to at least one well (20) of the first device (10), said reservoir (60) being adapted to individually fill said well (20).

13- System according to any one of claims 9 to 12 comprising bores (90) previously machined in the first device (10), said bores (90) being adapted to assist the separation of the first device (10) and the second device (30) after contacting the reagent with the sample (40).

14- System according to any one of claims 9 to 13 wherein the first device (10) is made of polymer and suitable for thermo molding wells (20).

15- System according to any one of claims 9 to 14 for which the device (10) is anti ultraviolet material at least on the surface.

16- System according to any one of claims 9 to 15 for which at least one of the wells (20) has a conical geometry and for which the outlet section of said well (20) on the first face (11) is greater than the section of the well (20) between the first face (11) and the second face (12) of the first device (10).