FR2905857A1 - Utilisation d'un extrait de pulpe de caroube pour hydrate la peau - Google Patents

Abstract

La présente invention concerne un procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à l'hydrater et/ou à la protéger vis-à-vis du dessèchement, comprenant l'application topique sur la peau d'une composition renfermant un extrait de pulpe de caroube (ceratonia siliqua) .Elle concerne également un extrait de pulpe de caroube et une composition renfermant cet actif en combinaison avec un autre actif à effet hydratant.

Description

1 Utilisation d'un extrait de pulpe de caroube pour hydrater la peau La

présente invention concerne un procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à l'hydrater et/ou à la protéger vis-à-vis du dessèchement, comprenant l'application topique sur la peau d'une composition renfermant un extrait de pulpe de caroube (ceratonia siliqua).

La peau est principalement constituée de trois couches, à savoir, en partant de la plus superficielle, l'épiderme, le derme et l'hypoderme.

L'épiderme est en particulier constitué de kératinocytes (majoritaires), de mélanocytes (intervenant dans la pigmentation de la peau) et de cellules de Langerhans. Sa fonction est de protéger le corps de l'environnement extérieur et d'assurer son intégrité, et notamment de freiner la pénétration de micro-organismes ou de substances chimiques, et d'empêcher l'évaporation de l'eau contenue dans la peau. Pour ce faire, les kératinocytes subissent un processus de maturation orientée continu au cours duquel les kératinocytes situés dans la couche basale de l'épiderme forment, au stade terminal de leur différenciation, des cornéocytes qui sont des cellules mortes totalement kératinisées sous forme d'enveloppes cornées constituées de protéines et de lipides tels que des céramides. Lors de ce processus de différenciation, des lipides épidermiques intercornéocytaires sont en outre formés puis organisés sous forme de bicouches 2905857 2 (feuillets) dans le stratum corneum, qui participent, avec les enveloppes cornées précitées, à la fonction barrière de l'épiderme.

5 La fonction barrière de l'épiderme peut toutefois se trouver perturbée dans certaines conditions climatiques (sous l'effet du froid et/ou du vent, par exemple), ou encore sous l'effet du stress ou de la fatigue, notamment, favorisant ainsi la pénétration d'allergènes, 10 d'agents irritants ou de micro-organismes qui occasionnent ainsi un dessèchement cutané susceptible de générer des sensations d'inconfort telles que des tiraillements ou des rougeurs, et également d'altérer l'éclat du teint et la souplesse de la peau.

15 Pour prévenir ce phénomène ou le corriger, il est connu d'appliquer sur la peau des compositions cosmétiques renfermant des agents hygroscopiques, tels que des sucres ou des polyols, destinés à capter l'eau 20 présente dans la peau et à freiner ainsi son évaporation. On a également classiquement recours à des corps gras permettant de former un film occlusif sur la peau, qui contribue à freiner l'évaporation de l'eau. Par ailleurs, ces compositions incorporent fréquemment des actifs 25 agissant sur une ou plusieurs des différentes cibles biologiques intervenant soit dans les processus de régénération de la peau, en particulier dans la différenciation des kératinocytes, la synthèse des lipides épidermiques et la cohésion des cornéocytes, soit 30 dans la synthèse endogène de constituants du facteur d'hydratation naturel (NMF, Natural Moisturizing Factor) de la peau, en particulier dans la synthèse de protéoglycanes.

2905857 3 Des exemples de tels actifs sont notamment les a- et R-hydroxyacides, notamment l'acide lactique, l'acide glycolique et l'acide salicylique ; l'urée ; ou les 5 composés aminosulfoniques. Toutefois, il subsiste toujours le besoin de proposer de nouveaux actifs cosmétiques permettant de lutter plus efficacement contre le dessèchement cutané.

10 En outre, compte tenu de la recherche toujours croissante par les consommateurs de produits naturels renfermant le moins d'ingrédients synthétiques possibles, et des contraintes réglementaires de plus en plus lourdes 15 pesant sur les composés issus de l'industrie chimique, il serait souhaitable que ces actifs cosmétiques soient d'origine végétale. Or, la Demanderesse a eu le mérite de montrer qu'il 20 était possible d'agir par voie topique sur une nouvelle cible biologique, à savoir la matriptase MT/SP1, pour lutter efficacement contre le dessèchement de la peau, en utilisant un extrait botanique, à savoir un extrait de pulpe de caroube (ceratonia siliqua).

25 La matriptase MT/SP1 (encore désignée par ST14 et TAGD-15) est une protéase transmembranaire de type II largement exprimée dans la plupart des cellules d'origine épithéliale et notamment par les kératinocytes. Des 30 études récentes sur la souris ont montré que l'ablation de la matriptase MT/SP1 résultait en des malformations du stratum corneum, qui présentait un aspect plus compact et une stratification moins organisée, compromettant la 2905857 4 fonction barrière épidermique et finissant par entraîner la mort de la souris par déshydratation. Cette protéase est par ailleurs connue pour être exprimée dans une grande diversité de tumeurs humaines d'origine 5 épithéliale, ainsi que lors de la cicatrisation et dans des maladies de peau telles que l'ichtyose. Dans l'étude précitée, la souris est ainsi utilisée comme modèle pour l'étude de ces pathologies (K. List et al., Oncogene, 2002 ; 21:3765-3779). Une étude plus récente (List et 10 al., J. Cell. Biol., 2003 ; 163:901-910) a montré que la matriptase MT/SP1 était une enzyme clé dans la différenciation terminale épidermique et que la souris déficiente en matriptase constituait un bon modèle pour étudier l'ichtyose humaine sévère de type dit Harlequin.

15 Toutefois, à la connaissance de la Demanderesse, il n'a encore jamais été divulgué d'actifs cosmétiques, a fortiori d'origine botanique, stimulant l'expression de la matriptase MT/SP1.

20 En outre, il est connu d'utiliser dans le domaine alimentaire et en cosmétique la gomme de caroube (Ceratonia siliqua), ou farine de graine de caroube, comme agent gélifiant et/ou filmogène, de préférence en 25 association avec les carraghénanes, le guar ou la gomme de xanthane. Cette gomme > est constituée d'un polysaccharide, un D-galacto-D-mannane presque pur. Il a par ailleurs été suggéré que les fruits 30 épépinés du caroube pouvaient constituer, après un traitement d'hydrolyse alcaline aqueuse (A. De Leonardis et al., La Rivista Italiana Delle Sostanze Grasse, Vol. LXXX, Nov.-Déc. 2003) ou après extraction 2905857 5 (hydro)alcoolique (EP-0 131 176) une source d'antioxydants utilisables dans l'alimentaire ou en cosmétique. La pulpe de caroube est également utilisée pour fabriquer de la mélasse ou des substituts de cacao.

5 Dans le domaine pharmaceutique, elle est parfois employée sous forme de décoction pour fabriquer des préparations anti-diarrhéiques. La présente invention a ainsi pour objet un procédé 10 cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à l'hydrater et/ou à la protéger vis-à-vis du dessèchement, comprenant l'application topique sur la peau d'une composition renfermant un extrait de pulpe de caroube.

15 La présente invention a également pour objet l'utilisation cosmétique d'un extrait de pulpe de caroube pour favoriser la formation d'une barrière fonctionnelle et permettre une meilleure hydratation de la peau humaine et/ou la protéger vis-à-vis du dessèchement, 20 avantageusement en stimulant l'expression de la matriptase MT/SP1 dans l'épiderme. La présente invention e également pour objet un extrait de caroube caractérisé en ce que cet extrait est 25 susceptible d'être obtenu par extraction de la pulpe de caroube à l'aide d'au moins un solvant alcoolique. L'extrait de pulpe de caroube utilisable dans la présente invention peut être issu de gousses de caroube 30 éventuellement séchées et de préférence broyées. Ces gousses sont avantageusement épépinées avant leur mise en oeuvre.

2905857 6 Cet extrait peut être obtenu à l'aide de tout solvant et préférentiellement en utilisant un solvant alcoolique. Par cette expression, on entend un solvant d'extraction comprenant au moins un mono-alcool, tel que 5 le méthanol, l'éthanol ou l'isopropanol, et/ou au moins un glycol, tel que le propylène glycol ou le dipropylène glycol, éventuellement en présence d'eau. L'extraction est généralement réalisée en immergeant 10 ou en agitant doucement la matière première mise en oeuvre, avantageusement le broyat, dans un ou plusieurs des solvants cités ci-dessus à des températures allant, par exemple, de la température ambiante à 100 C, et avantageusement de 40 à 80 C, pendant une durée d'environ 15 30 min à 50 h, et de préférence de 20 à 40 h. Le rapport solvant/matière peut par exemple être compris entre 1:1 et 100:1 et de préférence entre 10:1 et 50:1.

20 La solution obtenue est alors généralement filtrée afin d'éliminer les substances insolubles de la plante. On élimine également, le cas échéant, le solvant s'il s'agit d'un solvant volatil tel que, par exemple, 25 l'éthanol, le méthanol ou l'isopropanol. Cette étape d'extraction est usuelle dans le domaine des extraits de plantes, et l'homme du métier est à même d'en ajuster les paramètres réactionnels, sur la base de 30 ses connaissances générales. A l'issue de cette étape d'extraction, on obtient une oléorésine de caroube.

2905857 7 Ladite oléorésine peut ensuite, selon un aspect avantageux, être soumise à une étape de décoloration, notamment à l'aide de charbon actif en présence d'un 5 solvant. Cette opération de décoloration comprend la mise en contact dans un solvant approprié de l'extrait obtenu après l'extraction au solvant avec du charbon actif. Le poids de charbon actif ajouté est de préférence compris entre 0,5% et 50% du poids de l'extrait. On utilisera par 10 exemple un ou plusieurs solvants choisis parmi l'eau, les alcools en C1-C4 tels que le méthanol, l'éthanol ou l'isopropanol, les solvants organiques polaires tels que le propylène glycol ou le dipropylène glycol, ou tout autre solvant usuel dans le domaine. Les solvants 15 volatils peuvent ensuite être éliminés sous pression réduite. L'extrait de pulpe de caroube mis en oeuvre selon l'invention peut être utilisé à raison de 0.00001 à 10 % 20 en poids, de préférence à raison de 0.0001 à 5 % en poids, plus préférentiellement à raison de 0.001 à 1 % en poids, mieux, à raison de 0.01 à 0.1% en poids, par rapport au poids total de la composition.

25 L'extrait de pulpe de caroube est utilisé selon l'invention à des fins cosmétiques, pour hydrater la peau humaine ou la protéger vis-à-vis du dessèchement. Les inventeurs ont mis en évidence que cet effet était atteint par une amélioration de la fonction barrière. Le 30 procédé selon l'invention peut donc être mis en oeuvre pour lutter contre les signes cutanés résultant d'une fonction barrière perturbée, y compris la rugosité de la peau, les inconforts dont les rougeurs, les 2905857 8 tiraillements, les picotements et les démangeaisons, la perte d'éclat du teint ou teint terne, la perte de souplesse de la peau et les gerçures.

5 L'effet hydratant de la composition utilisée selon l'invention peut notamment être mesuré par cornéométrie, selon des techniques habituelles bien connues de l'homme du métier.

10 De façon préférée, l'extrait de pulpe de caroube utilisé selon l'invention, ou la composition mise en oeuvre dans le procédé selon l'invention, sont appliqués sur une peau sèche, de préférence non pathologique. Ils peuvent être avantageusement appliqués sur la peau du 15 visage, du cou et éventuellement du décolleté ou en variante sur une partie quelconque du corps. La composition renfermant cet extrait peut être appliquée le matin et/ou le soir, sur l'ensemble du 20 visage, du cou et éventuellement du décolleté voire du corps. La composition mise en oeuvre selon l'invention comprend généralement, outre l'extrait décrit 25 précédemment, un milieu physiologiquement acceptable et de préférence cosmétiquement acceptable, c'est-à-dire qui convient à une utilisation en contact avec la peau humaine sans risque de toxicité, d'incompatibilité, d'instabilité, de réponse allergique et notamment qui ne 30 provoque pas de sensations d'inconfort (rougeurs, tiraillements, picotements...) inacceptables pour l'utilisateur.

2905857 9 Ce milieu contient généralement de l'eau et éventuellement d'autres solvants tels que l'éthanol. La composition utilisée selon l'invention peut se 5 présenter sous toute forme adaptée à une application topique sur la peau et en particulier sous forme d'émulsion huile-dans-eau, eau-dans-huile ou multiple (E/H/E ou H/E/H), qui peuvent éventuellement être des microémulsions ou des nanoémulsions, ou sous forme 10 d'hydrodispersion, de solution, de gel aqueux ou de poudre. On préfère que cette composition se présente sous la forme d'une émulsion huile--dans-eau. Cette composition est de préférence utilisée en tant 15 que produit de soin ou de nettoyage de la peau du visage et/ou du corps et elle peut se présenter notamment sous forme de fluide, de gel ou de mousse, conditionnés par exemple dans un flacon-pompe, un aérosol ou un tube, ou de crème conditionnée par exemple dans un pot. En 20 variante, elle peut avoir 1a forme d'un produit de maquillage et en particulier d'un fond de teint ou d'une poudre libre ou compacte. Elle peut contenir différents adjuvants, tels qu'au 25 moins un composé choisi parmi : - les huiles, qui peuvent être choisies notamment parmi : les huiles de silicone, linéaires ou cycliques, volatiles ou non volatiles, telles que les 30 polydiméthylsiloxanes (dimethicones), les polyalkylcyclosiloxanes (cyclomethicones) et les polyalkylphenylsiloxanes (phenyldimethicones); les huiles synthétiques telles que les huiles fluorées, 2905857 10 les alkyl benzoates et les hydrocarbures ramifiés tels que le polyisobutylène; les huiles végétales et notamment de soja ou de jojoba; et les huiles minérales telles que l'huile de paraffine; 5 - les cires, telles que l'ozokérite, la cire de polyéthylène, la cire d'abeille ou la cire de carnauba; les élastomères de silicone obtenus notamment par réaction, en présence d'un catalyseur, d'un 10 polysiloxane ayant au moins un groupe réactif (hydrogène ou vinyle, notamment) et portant au moins un groupe alkyle (notamment méthyle) ou phényle, terminal et/ou latéral, avec un organosilicone tel qu'un organohydrogenopolysiloxane; 15 - les tensioactifs, de préférence émulsionnants, qu'ils soient non ioniques, anioniques, cationiques ou amphotères, et en particulier les esters d'acides gras et de polyols tel que les esters d'acides gras et de glycérol, les esters d'acides gras et de sorbitan, les 20 esters d'acides gras et de polyéthylèneglycol et les esters d'acides gras et de sucrose; les éthers d'alcools gras et de polyéthylèneglycol; les alkylpolyglucosides; les polysiloxanes modifiés polyéthers; la bétaïne et ses dérivés; les 25 polyquaterniums; les sels de sulfate d'alcools gras éthoxylés; les sulfosuccinates; les sarcosinates; les alkyl- et dialkylphosphates et leurs sels; et les savons d'acides gras; les co-tensioactifs tels que les alcools gras 30 linéaires et en particulier les alcools cétylique et stéarylique; les épaississants et/ou gélifiants, et en particulier les homo- et copolymères réticulés ou non, hydrophiles 2905857 11 ou amphiphiles, d'acide acryloylméthylpropane sulfonique (AMPS) et/ou d'acrylamide et/ou d'acide acrylique et/ou de sels ou d'esters d'acide acrylique; la gomme de xanthane ou de guar; les dérivés 5 cellulosiques; et les gommes de silicone (dimethiconol); - les filtres organiques, tels que les dérivés de dibenzoylméthane (dont le butyl methoxydibenzoylmethane), les dérivés d'acide 10 cinnamique (dont l'ethylhexyl methoxycinnamate), les salicylates, les acides para-aminobenzoïques, les (3- (3'-diphénylacrylates, les benzophénones, les dérivés de benzylidène camphre, les phénylbenzimidazoles, les triazines, les phénylbenzotriazoles et les dérivés 15 anthraniliques; les filtres inorganiques, à base d'oxydes minéraux sous forme de pigments ou de nanopigments, enrobés ou non, et en particulier à base de dioxyde de titane ou d'oxyde de zinc; 20 - les colorants; - les conservateurs; - les charges, et en particulier les poudres à effet soft-focus, qui peuvent être notamment choisies parmi les polyamides, la silice, le talc, le mica, les 25 fibres (notamment de polyamide ou de cellulose); - les séquestrants tels que les sels d'EDTA; - les parfums; et leurs mélanges, sans que cette liste ne soit limitative.

30 Des exemples de tels adjuvants sont cités notamment dans le Dictionnaire CTFA (International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook publié par The 2905857 12 Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association, Sème Edition, 2002) qui décrit une grande variété, sans limitation, d'ingrédients cosmétiques et pharmaceutiques habituellement utilisés dans l'industrie du soin de la 5 peau, qui conviennent pour être utilisés comme ingrédients additionnels dans les compositions selon la présente invention. La composition utilisée selon l'invention peut en 10 outre comprendre d'autres actifs que l'extrait de pulpe de caroube et en particulier au moins un actif choisi parmi : les agents kératolytiques et en particulier les a-hydroxyacides tels que les acides glycolique, lactique et citrique, et leurs esters ou leurs sels; les R- 15 hydroxyacides, tels que l'acide salicylique et ses dérivés dont l'acide n-octanoyl-s-salicylique ; les agents augmentant la différenciation et/ou la cornéification des kératinocytes, soit directement, soit indirectement en 20 stimulant par exemple la production de R-endorphines, tels que les extraits de Thermus thermophilus ou de coques de fèves de Theobroma cacao, les extraits hydrosolubles de maïs, les extraits peptidiques de Voandzeia substerranea et le niacinamide ; les lipides 25 épidermiques et les agents augmentant la synthèse de lipides épidermiques, soit directement, soit en stimulant certaines Rglucosidases qui modulent la déglycosylation de précurseurs lipidiques comme le glucosylcéramide en céramides, tels que les phospholipides, les céramides, 30 les hydrolysats de protéine de lupin et les dérivés d'acide dihydrojasmonique ; les agents humectants, tels que les polyols et en particulier la glycérine, les glycosaminoglycannes tels que l'acide hyaluronique, les 2905857 13 sucres et leurs alkylesters, les acides aminés tels que la glycine, l'arginine, l'histidine, l'alanine, la thréonine, la lysine, l'acide glutamique, la taurine, la proline, la sérine et leurs dérivés, l'acide pyrrolidone 5 carboxylique (PCA) et ses sels, l'urée et ses dérivés, l'ectoïne, la glucosamine, la créatine, la choline, la bétaine, les sels minéraux tels que les sels de chlore, de sodium, de potassium, de calcium, de magnésium, de zinc, de manganèse, de phosphate et les polymères 10 synthétiques humectants tels que les homoet copolymères de méthacryloyloxyéthyl phosphorylcholine et les homo- et copolymères de (meth)acrylate de glycéryle ; les systèmes de comblement ; les agents facilitant l'absorption percutanée tels que les alcools, les alcools gras et les 15 acides gras et leurs dérivés ester ou éther, les pyrrolidones, les terpènes, les huiles essentielles et les a-hydroxyacides; les agents anti-oxydants et/ou antiradicalaires et/ou anti-pollution, tels que le tocophérol et ses esters, l'acide ascorbique et ses alkyl- et 20 phosphorylesters et certains extraits de plantes ou d'algues et en particulier de Thermus thermophilus ; et leurs mélanges, sans que cette liste ne soit limitative. Les agents précités peuvent être éventuellement 25 vectorisés dans des systèmes de ciblage tels que des liposomes, des micelles telles que les micelles à base de lactate de sodium et sodium PCA commercialisées par les Laboratoires Sérobiologiques sous la dénomination commerciale Micelles Sèches LS8695, des oléosomes, des nanocapsules ou 30 des nanoparticules, ou encore être véhiculés dans des matrices polymériques telles que la matrice filmogène à base de gomme d'acacia et d'alginate véhiculant de la 2905857 14 sérine, disponible auprès de la société COLETICA sous la dénomination commerciale MICROPATCH . Par "systèmes de comblement", on entend les systèmes 5 de délivrance cutanée de composés susceptibles d'absorber l'eau contenue dans la peau et d'augmenter de volume par suite de cette absorption. Des exemples de tels systèmes sont notamment des sphères de comblement à base de glycosaminoglycannes telles que les sphères à base 10 d'acide hyaluronique ou de chondroïtine sulfate notamment commercialisées par la société COLETICA. Il est apparu à la Demanderesse que l'association de l'extrait de pulpe de caroube avec un ou plusieurs des 15 actifs décrits précédemment permettait de combiner avantageusement dans une même formule les effets, respectivement à long terme et immédiat, de ces deux types d'actifs et d'obtenir ainsi une hydratation maximale et de longue durée de la peau.

20 L'invention a donc également pour objet une composition cosmétique renfermant, dans un milieu physiologiquement acceptable, un extrait de pulpe de caroube et au moins un actif choisi parmi : les agents 25 kératolytiques, les agents augmentant la différenciation et/ou la cornéification des kératinocytes, les lipides épidermiques et les agents augmentant la synthèse de lipides épidermiques, les agents humectants, les systèmes de comblement et leurs mélanges.

30 Plus particulièrement, l'invention a pour objet une composition renfermant, dans un milieu physiologiquement acceptable, un extrait de pulpe de caroube et au moins un 2905857 15 actif choisi parmi un extrait fermenté de Thermus thermophilus, le hyaluronate de sodium et leurs mélanges. L'invention sera maintenant illustrée par les 5 exemples non limitatifs suivants. EXEMPLES Exemple 1 : préparation d'un extrait de pulpe de caroube 10 On a préparé un extrait de pulpe de caroube selon les étapes suivantes : 1 - Extraction Ethanol 92 15 On broie 250 kg de gousses de caroube séchées débarrassées de leurs graines. On charge le broyat dans un réacteur en continu de 2000 litres. Le solvant d'extraction, constitué d'éthanol à 92 , est chargé dans 20 le réacteur et le mélange est chauffé à 60 C. On fait circuler 7500 litres de solvant durant 30 heures dans le réacteur, soit un rapport solvant / matière de 30/1. Le solvant est ensuite évaporé sous vide.

25 On obtient 125kg d'oléorésine de caroube. Le rendement de cette étape est de 50%. 2 - Décoloration de l'oléorésine 30 On réalise deux lavages à chaud de l'oléorésine avec de l'éthanol à 96.2 et du charbon actif : 2905857 16 ter lavage : on mélange 1000g d'oléorésine avec 5000m1 d'éthanol 96.2 et 125g de charbon actif. On agite fortement durant 2 heures à 50-60 C puis on laisse reposer à température ambiante durant 2 heures. Après 5 filtration de la solution sur Büchner, on récupère le filtrat primaire. 2nd lavage : on reprend la totalité du filtrat primaire. On ajoute 500m1 d'éthanol à 96.2 et 125g de charbon 10 actif. On agite durant deux heures à 50-60 C puis on laisse reposer à température ambiante durant 12 heures. Après filtration de la solution sur Büchner, on récupère le filtrat final.

15 Ce filtrat est ensuite filtré à nouveau sur filtre conique afin d'éliminer les derniers résidus de charbon actif, puis on évapore l'éthanol à l'aide d'un évaporateur rotatif sous vide.

20 Le rendement de cette opération de décoloration est de 60%. Le rendement total du procédé est de 30%.

25 Exemple 2 : Test de stimulation de l'expression de l'ARNm de la matriptase MT/SP1 (RT-PCR) On a évalué l'activité de l'extrait obtenu à l'Exemple 1 puis dilué à 70% en poids dans du propylène glycol sur 30 l'expression de l'ARNm de la matriptase MT/SP1. Protocole : 2905857 17 L'effet de cet extrait a été évalué par amplification en chaîne par polymérase en temps réel (en anglais RT-PCR pour real-time polymerase chain reaction ), en vue de quantifier l'expression de l'ARN messager de la matriptase 5 MT/SP1 dans un échantillon traité par rapport à un échantillon non traité. Les résultats sont normalisés par rapport à l'expression de gènes domestiques dans ces échantillons.

10 Les résultats sont exprimés en nombre de fois d'augmentation ou de diminution d'expression du gène cible (matriptase MT/SP1) dans l'échantillon traité. Les séquences des ADNc/ARNm des gènes investigués ont été 15 obtenues chez GenBank. Gène cible : Matriptase MT/SP1 Gène domestique : (3-2-microglobuline Toutes les amorces de PCR ont été obtenues en utilisant le logiciel PRIMER3 de Whitehead Institute for Biomedical 20 Research. L'ARNm a été isolé en utilisant le kit Qiagen RNeasy (QIAGEN) selon les recommandations du fabricant. La transcription inverse en ADNc a été effectuée à l'aide du 25 kit gene Amp RNA PCR (Applied Biosystems) selon les recommandations du fabricant. La mesure de PCR en temps réel a été effectuée en utilisant l'appareil iCYCLER IQ (Biorad) avec détection 30 SYBR Green I. Dans tous les essais, l'ADNc a été amplifié en utilisant un programme standardisé. Chaque échantillon a été chargé avec du supermixe IQ SYBR Green I, de l'eau et de l'amorce (stock) ; la quantité finale d'ADNc par 2905857 18 réaction correspondait à 50 ng d'ARN total utilisé pour la transcription inverse. La quantification relative de l'expression du gène cible 5 a été effectuée en utilisant le modèle mathématique de Pfaffl (Pfaffl, MW, Nucleic Acids Res. 29(9), p. E45, 2001). Le test a été réalisé sur des kératinocytes humains 10 normaux mis en culture en triplicat avec l'extrait pendant six heures. Les résultats obtenus ont été confirmés en utilisant des cellules de deux donneurs différents.

15 Résultats : L'extrait de pulpe de caroube testé à 0.10 stimule l'expression de l'ARNm de la matriptase de 86% (écart-type : 0.05), par rapport au témoin non traité. Exemple 3 : Test de stimulation de l'expression de la protéine matriptase MT/SP1 (immunofluorescence) 25 Protocole : La stimulation de l'expression de la matriptase obtenue avec l'extrait décrit à l'Exemple 1 a été évaluée dans un modèle de peau reconstruite. Ce modèle a été préparé de la manière suivante : une solution de collagène contenant du collagène de type I de queue de rat (BD), du milieu DMEM 10X (Gibco), du bicarbonate de sodium 20 30 2905857 19 (Gibco) et des fibroblastes a été versée dans des inserts de culture cellulaire de 24 mm (Falcon, Becton Dickinson, Schwechat, Autriche) qui ont été placés dans des plaques à six puits (Falcon). Après deux heures à 37 C, les gels ont 5 été équilibrés dans du KGM à 37 C dans un environnement à 5% de CO2 / 95% d'air, au sein d'un incubateur humidifié. Après deux heures, du KGM contenant des kératinocytes a été ajouté au gel. Après immersion de la culture pendant la nuit, le milieu a été remplacé par du milieu de kératinocytes sans 10 sérum (SKDM, qui est un milieu riche en Cal'-consistant en KGM sans extrait pituitaire bovin, transferrine de SIGMA, BSA de SIGMA et acide L-ascorbique de SIGMA) à l'extérieur de l'insert, et les kératinocytes ont été maintenus à l'interface air-liquide. Le milieu de culture des peaux 15 reconstruites a été remplacé tous les deux jours par du SKDM frais préchauffé, et la culture a été poursuivie jusqu'à sept jours, avec ou sans l'extrait testé. Les peaux reconstruites ont ensuite été préparées en vue de 20 leur analyse par immunofluorescence. Des coupes de 5 pm d'épaisseur ont été réalisées à partir de peaux reconstruites fixées par du paraformaldéhyde puis congelées. Les liaisons non spécifiques des coupes ont été bloquées avec du sérum (sérum albumine bovine). Les échantillons de peaux 25 reconstruites ainsi préparés ont été incubés avec un anticorps anti-matriptase (Bethyl Laboratories, TX), puis marqués dans une seconde étape par un second anticorps complexé à un agent fluorescent (anti lapin Alexa Fluor 546, Molecular Probes, UK). La détection a été effectuée par 30 immunofluorescence. Les lames ont été examinées à l'aide d'un microscope Leica.

2905857 Résultats : On a observé que l'extrait de pulpe de caroube à 0.1% (en poids) stimulait visiblement l'expression de la matriptase 5 MT/SP1 au niveau du stratum granulosum. Ces résultats ont étéconfirmés en utilisant des cellules issues de deux donneurs. Exemple 4 : Compositions cosmétiques 10 Les compositions suivantes peuvent être préparées de Les quantités façon classique pour l'homme du métier. indiquées ci-dessous sont exprimees en pourcentages pondéraux. Les ingrédients en majuscules sont identifiés conformément à la dénomination I:NCI.

15 3A - Gel crème (émulsion huile-dans-eau) EDTA tétrasodique 0.05 % Glycérine 5.00 % 20 Gélifiants de phase aqueuse 4.00 % Alcool 3.00 % Conservateurs 0.50 % Extrait de pulpe de caroube(' 0.01 % Hyaluronate de sodium 3.00 % 25 Cyclomethicone 8.00 % Dimethicone 3.00 % Isononanoate d'isononyle 3.00 % Parfum qs Colorants qs 30 Eau qsp 100.00 % (1) tel que décrit à l'Exemple 1 puis dilué à 70% en poids dans du propylène glycol 20 2905857 21 Cette composition peut être appliquée quotidiennement, matin et/ou soir, sur la peau du visage pour l'hydrater et la rendre souple, lisse et lumineuse.

3B - Sérum (émulsion eau-dans-silicones) Glycérine 5.00 % Conservateurs qs 10 Alcool 10.00 % Extrait de pulpe de caroube(' 0.10 % GLYCERYL POLYMETHACRYLATE & PROPYLENE GLYCOL(2) 10.00 % Mélange de sucres et d'acides aminés(3) 3.00 % Pyrrolidone carboxylate de sodium 4.00 % 15 Hyaluronate de sodium 2.50 % SACCHARIDE ISOMERATE(4 1.00 % Micelles sèches hydratantes(5) 20.00 % Extrait de Thermus thermophillus(6) 3.00 % CYCLOPENTASILOXANE & PEG/PPG-18/8 DIMETHICONE 20.00 % 20 Colorants qs Eau qsp 100.00 % (1) tel que décrit à l'Exemple 1 puis dilué à 70% en poids dans du propylène glycol 25 (2) LUBRAJEL MS de GUARDIAN LABORATORIES (3) HYDRATYL LS 8453 de LABORATOIRES SEROBIOLOGIQUES 4> PENTAVITIN de PENTAPHARM (5) Micelles Sèches LS8695 de LABORATOIRES SEROBIOLOGIQUES (6) Venuceane de SEDERMA Cette composition peut être appliquée quotidiennement, matin et/ou soir, sur des peaux particulièrement déshydratées 5 30 2905857 22 et/ou exposées aux agressions de l'environnement, pour améliorer leur confort et leur aspect.

3C - Crème (émulsion huile-dans-eau) 5 Panthénol 0.40 % Polymère carboxyvinylique 0.60 % Solution de soude à 25% 0.30 % Hyaluronate de sodium 0.30 % 10 Glycérine 3.00 % Extrait de pulpe de caroube(' 0.05 % GLYCERYL POLYMETHACRYLATE & PROPYLENE GLYCOL(2) 10.00 % Stéarate de glycéryle 1.50 % Alcool cétylique 1.50 % 15 Stéarate de polyoxyéthylène (40 OE) 2.00 % Alcool stéarylique oxyéthyléné (2 OE) 0.50 % Néopentanoate d'octyldodécyle 5.00 % Benzoate d' alkyles en C12_15 3.00 % Huiles végétales 3.00 % 20 Ester de phytostérol 1.00 % Acétate de tocophéryle 1.00 % Huiles de silicone 4.00 % EDTA disodique 0.05 % Conservateurs 0.90 % 25 Colorants qs Eau qsp 100.00 % 01) tel que décrit à l'Exemple 1 puis dilué à 70% en poids dans du propylène glycol 30 (2) LUBRAJEL MS de GUARDIAN LABORATORIES Cette crème peut être appliquée sur une peau sèche le matin et/ou le soir, pour améliorer sa douceur et sa

Claims (15)

REVENDICATIONS

1. Procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à l'hydrater et/ou à la protéger vis-à-vis du dessèchement, comprenant l'application topique sur la peau d'une composition renfermant un extrait de pulpe de caroube (ceratonia siliqua).

2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé 10 en ce que l'extrait est issu de gousses de caroube épépinées.

3. Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que l'extrait est susceptible d'être 15 obtenu par extraction alcoolique à l'aide d'un mono-alcool et/ou d'un glycol, éventuellement mélangés à de l'eau.

4. Procédé selon la revendication 3, caractérisé 20 en ce que le solvant d'extraction comprend de l'éthanol.

5. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce qu'il est mis en oeuvre pour lutter contre les signes cutanés résultant 25 d'une fonction barrière perturbée.

6. Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que lesdits signes sont choisis parmi : la rugosité de la peau, les rougeurs, les tiraillements, les 30 picotements, les démangeaisons, la perte d'éclat du teint, la perte de souplesse de la peau et les gerçures. 2905857 25

7. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce qu'il est mis en oeuvre sur une peau sèche.

8. Utilisation cosmétique d'un extrait de pulpe de caroube (ceratonia siliqua) pour hydrater la peau humaine et/ou la protéger vis-à-vis du dessèchement.

9. Utilisation selon la revendication 8, caractérisée en ce que l'extrait stimule l'expression de la matriptase MT/SP1 dans l'épiderme.

10. Composition cosmétique renfermant, dans un milieu physiologiquement acceptable, un extrait de pulpe de caroube (ceratonia siliqua) et au moins un actif choisi parmi les agents kératolytiques, les agents augmentant la différenciation et/ou la cornéification des kératinocytes, les lipides épidermiques et les agents augmentant la synthèse de lipides épidermiques, les agents humectants, les agents facilitant l'absorption percutanée, les systèmes de comblement et leurs mélanges.

11. Composition selon la revendication 10, caractérisée en ce que l'actif est choisi parmi un extrait fermenté de Thermus thermophilus, le hyaluronate de sodium et leurs mélanges.

12. Extrait de caroube (ceratonia siliqua), caractérisé en ce que l'extrait est susceptible d'être obtenu par extraction de la pulpe de caroube à l'aide d'au moins un solvant alcoolique. 2905857 26

13. Extrait selon la revendication 12, caractérisé en ce que l'extrait est issu de gousses de caroube épépinées. 5

14. Extrait selon la revendication 13, caractérisé en ce que l'extrait est susceptible d'être obtenu par extraction alcoolique à l'aide d'un mono-alcool et/ou d'un glycol, éventuellement mélangés à de l'eau. 10

15. Extrait selon la revendication 14, caractérisé en ce que le solvant d'extraction comprend de l'éthanol.