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FR2807838A1 - BIO-SENSOR AND METHOD FOR MANUFACTURING BIO-SENSOR OF AT LEAST ONE MOLECULE WITHIN AN ANALYTE - Google Patents

BIO-SENSOR AND METHOD FOR MANUFACTURING BIO-SENSOR OF AT LEAST ONE MOLECULE WITHIN AN ANALYTE Download PDF

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FR2807838A1
FR2807838A1 FR0004690A FR0004690A FR2807838A1 FR 2807838 A1 FR2807838 A1 FR 2807838A1 FR 0004690 A FR0004690 A FR 0004690A FR 0004690 A FR0004690 A FR 0004690A FR 2807838 A1 FR2807838 A1 FR 2807838A1
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Abstract

The invention concerns a method for making a biosensor, said biosensor comprising at least a reference electrode and at least a measuring electrode, each coated with a polymeric coating. Said method is characterised in that: said polymeric coating is obtained on said reference and measuring electrodes by electrochemical process, by soaking at least partly said reference and measuring electrodes in a chemical solution based at least on a saturated aliphatic diamine and by bringing them to sufficient potential to reach that corresponding to electrochemical oxidation of said chemical solution; modifying said polymeric coating of the measuring electrode by depositing an enzyme specific to said molecule to be detected in the analyte.

Description

L'invention concerne un procédé de fabrication un bio- capteur d'une molécule spécifique présente au sein d' analyte, ledit bio-capteur comprenant au moins une électrode de référence et au moins une électrode de mesure de ladite molécule ladite électrode de référence et ladite électrode de mesure étant recouverte, chacune, par un revêtement polymérique, ladite électrode de mesure comportant, en outre, une enzyme réagissant spécifiquement avec ladite molécule à détecter. L'invention concerne encore un bio- capteur issu d'un tel procédé. The invention relates to a method for manufacturing a biosensor of a specific molecule present within an analyte, said biosensor comprising at least one reference electrode and at least one electrode for measuring said molecule, said reference electrode and said measuring electrode being each covered by a polymeric coating, said measuring electrode further comprising an enzyme specifically reacting with said molecule to be detected. The invention also relates to a biosensor resulting from such a process.

L'invention concerne le domaine des bio-capteurs prévus aptes détecter une molécule spécifique au sein d'un analyte. The invention relates to the field of biosensors provided for detecting a specific molecule within an analyte.

I1 existe, pour l'heure, très peu de capteurs de pH fiables, faciles à réaliser et à mettre en oeuvre dans des applications en tant que bio-capteur spécifique d'une substance à détecter grâce à enzyme adaptée. De tels capteurs sont, qui plus est, particulièrement onéreux. There are, for the time being, very few reliable pH sensors, easy to perform and to implement in applications as a specific bio-sensor of a substance to be detected by means of a suitable enzyme. Such sensors are, moreover, particularly expensive.

I1 convient d'observer que de nombreuses substances, telles l'urée, le glucose et autres, ont une influence sur l'acidité en surface de notre peau. Parallèlement, il est très fréquent que des personnes, atteintes de certaines pathologies, soient amenées, pour cette raison, de maintenir, continuellement, sous surveillance la concentration de l'une ou l'autre de ces substances, afin d'en garantir le maintien dans des proportions déterminées pour ne pas aggraver leur situation. En fonction de ces concentrations, ces personnes sont, par ailleurs, amenées, la plupart du à prendre certains médicaments, souvent à caractère régulateur, précisément dans le but de compenser une déficience de l'organisme assurant, habituellement, lui-même cette régulation. It should be noted that many substances, such as urea, glucose and others, have an influence on the surface acidity of our skin. At the same time, it is very common for people suffering from certain pathologies to be kept, for this reason, to keep the concentration of one or other of these substances under constant surveillance, in order to guarantee their maintenance. in specific proportions so as not to aggravate their situation. Depending on these concentrations, these people are, moreover, most of them to take certain drugs, often of a regulatory nature, precisely in order to compensate for a deficiency of the organism which usually regulates itself.

A ce propos, l'invention se propose de répondre au souci de ces personnes au travers d'un bio-capteur capable de détecter en surface de peau, dans la salive ou dans les urines par exemple, la présence d'une substance déterminée, sa proportion et son évolution dans le temps. In this regard, the invention proposes to respond to the concern of these people through a bio-sensor capable of detecting on the surface of the skin, in saliva or urine for example, the presence of a specific substance, its proportion and its evolution over time.

I1 est déjà connu, notamment par le document JP-A-9 222 412, un bio-capteur comportant une électrode de référence et une électrode de mesure, celle-ci étant recouverte d'un mélange d'une enzyme d'oxydation-réduction et d'un accepteur d'électrons, ce bio- capteur étant utilisé pour la détection de l'albumine. Les valeurs mesurées dépendent de la variation du pH dans un échantillon déterminé. It is already known, in particular from JP-A-9 222 412, a bio-sensor comprising a reference electrode and a measurement electrode, which electrode is covered with a mixture of an oxidation-reduction enzyme. and an electron acceptor, this biosensor being used for the detection of albumin. The measured values depend on the pH change in a particular sample.

De même, il est connu par le document ES-A-2 091 1714, un bio- capteur destiné à la mesure du fructose dans les aliments et l'électrode de mesure est préparée à partir de l'enzyme fructose- deshydrogénas (FDH) dans un tampon de pH 5 contenant un tensioactif. Dans une seconde étape intervient une opération de séchage sous pression réduite, entre 3 et 8 C. I1 est ensuite ajouté une solution aqueuse de polyéthylène imine (PEI) à pH 5, avant qu'intervienne une autre opération de séchage entre 3 et 8 C. On procède, alors, à un mélangeage avec du graphite à une température d'environ 650 C pendant une minute et on ajoute de l'huile de paraffine pour former une pâte à partir de laquelle on mouille l'électrode. Similarly, it is known from document ES-A-2 091 1714, a biosensor for the measurement of fructose in foods and the measuring electrode is prepared from the enzyme fructose-dehydrogenas (FDH) in a pH buffer containing a surfactant. In a second step is carried out a drying operation under reduced pressure, between 3 and 8 C. It is then added an aqueous solution of polyethyleneimine (PEI) at pH 5, before intervening another drying operation between 3 and 8 C This is followed by mixing with graphite at a temperature of about 650 ° C for one minute and paraffin oil is added to form a paste from which the electrode is wetted.

I1 est encore connu par les documents DE-A-29 620 371 et DE-A-106 39 224 un dispositif optique de mesure du taux sucre dans le sang, lequel est intégré dans une montre. Le dispositif d'affichage peut être relié, soit au dispositif de mesure, soit au mécanisme de la montre par action sur une touche. Le dispositif est plus particulièrement destiné aux personnes diabétiques sont amenées à contrôler leur taux de sucre plusieurs fois par j Au vu de cet état de la technique, la présente invention se veut à même d'apporter une solution au problème de la fabrication, à un coût de revient réduit tout en étant d'une très grande fiabilité, d'un bio capteur capable de détecter, avec précision et très grande linéarité, la présence, au sein d'un analyte, d'une molécule spécifique au travers d'une mesure de pH. It is still known from DE-A-29 620 371 and DE-A-106 39 224 an optical device for measuring the sugar level in the blood, which is integrated in a watch. The display device can be connected either to the measuring device or to the watch mechanism by pressing a key. The device is more particularly intended for diabetic people are required to control their sugar level several times per day. In view of this state of the art, the present invention is intended to provide a solution to the problem of manufacturing, to a reduced cost while being very reliable, a bio sensor capable of accurately and very linearly detect the presence, within an analyte, of a specific molecule through a pH measurement.

A effet, l'invention concerne un procédé de fabrication d'un bio capteur d'au moins une molécule présente au sein d'un analyte, ledit bio-capteur comprenant au moins une électrode de référence et au moins une électrode de mesure en un matériau conducteur d'électricité ou semi-conducteur et recouverte, chacune, d'un revetement polymérique, ladite électrode de mesure portant, encore, enzyme susceptible de réagir spécifiquement avec ladite molécule à détecter, caractérisé en ce que - on obtient ledit revêtement polymérique lesdites électrodes de référence et de mesure par voie électrochimique, en venant tremper au moins partiellement lesdites électrodes de reférence et de mesure dans une solution chimique à base d'amine et les portant à un potentiel suffisant pour atteindre celui correspondant à l'oxydation électrochimique de ladite solution chimique ; - on modifie ledit revêtement polymérique de l'electrode de mesure par un dépôt d'une enzyme spécifique de ladite molécule à detecter dans l'analyte. In fact, the invention relates to a method for producing a bio-sensor of at least one molecule present within an analyte, said bio-sensor comprising at least one reference electrode and at least one measuring electrode in one electrically conductive or semiconductor material and each covered with a polymeric coating, said measuring electrode carrying, again, an enzyme capable of reacting specifically with said molecule to be detected, characterized in that said polymer coating is obtained; electrodes for reference and electrochemical measurement, by at least partially quenching said reference and measurement electrodes in an amine-based chemical solution and bringing them to a potential sufficient to reach that corresponding to the electrochemical oxidation of said chemical solution; said polymer coating of the measuring electrode is modified by depositing an enzyme specific for said molecule to be detected in the analyte.

Avantageusement, la solution chimique est une amine pure ou encore un mélange d'amines pures, sachant qu'elle peut encore se présenter sous forme d'une amine ou d'un mélange d'amines en solution dans un solvant plus difficile à oxyder manière électrochimique que la ou les amines que contient cette solution. Advantageously, the chemical solution is a pure amine or a mixture of pure amines, knowing that it can still be in the form of an amine or a mixture of amines in solution in a solvent that is more difficult to oxidize. electrochemical than the amine or amines contained in this solution.

L'invention concerne encore un bio-capteur conforme à ce procédé de fabrication et comportant au moins une electrode de reférence et au moins une électrode de mesure en matériau conducteur d'électricité ou semi-conducteur et recouverte chacune, d'un revêtement polymérique, ladite électrode de mesure portant, encore, une enzyme susceptible de réagir spécifiquement avec ladite molécule à détecter, caractérisé en ce qu'il comporte unité de traitement prévue apte à mesurer une différence de potentiel au travers des électrodes de référence et de mesure et à transmettre, par l'intermédiaire de moyens de signalisation visuelle et/ou sonore, une information d'interprétation claire concernant la ou les molécules spécifiques détectées au travers de la dite mesure de différence de potentiel. The invention also relates to a bio-sensor according to this manufacturing method and comprising at least one reference electrode and at least one measurement electrode made of electrically conductive or semiconductor material and each covered with a polymeric coating, said measuring electrode carrying, again, an enzyme capable of specifically reacting with said molecule to be detected, characterized in that it comprises a planned processing unit able to measure a potential difference across the reference and measurement electrodes and to transmit by means of visual and / or sound signaling means, clear interpretation information concerning the specific molecule or molecules detected through said potential difference measurement.

Selon un exemple de réalisation, ce bio-capteur peut être intégré dans le boîtier d'une montre bracelet. According to an exemplary embodiment, this bio-sensor can be integrated into the case of a wristwatch.

L'invention sera mieux comprise à la lecture de la description qui va suivre, se rapportant à des exemples de réalisation donnés à titre indicatif et non limitatif. The invention will be better understood on reading the description which follows, relating to exemplary embodiments given for information only and not limiting.

La compréhension de cette description sera facilitée au vu du dessin joint en annexe dans lequel - figure 1 est une représentation schématisée du principe de fonctionnement du bio-capteur donc de la capture électrochimique à l'interface électrode/échantillon pour la détection d'une molécule spécifique A ; - figure 2 illustre, de manière schématisée, un bio capteur comportant une électrode de référence et plusieurs électrodes de mesure ; - la figure 3 est une représentation schématisée d' bio- capteur conforme à l'invention. The understanding of this description will be facilitated in view of the attached drawing in which - Figure 1 is a schematic representation of the operating principle of the bio-sensor and therefore the electrochemical capture at the electrode / sample interface for the detection of a molecule specific A; FIG. 2 schematically illustrates a bio-sensor comprising a reference electrode and a plurality of measurement electrodes; - Figure 3 is a schematic representation of biosensor according to the invention.

La présente invention a trait, tout particulièrement, au domaine des bio-capteurs et à leur procédé de fabrication. The present invention relates, in particular, to the field of bio-sensors and their manufacturing process.

Plus particulièrement, l'invention concerne un bio capteur d'au moins une molécule présente au sein d'un analyte. More particularly, the invention relates to a bio-sensor of at least one molecule present within an analyte.

Ainsi, tel que visible dans les différentes figures 1 à 3 du dessin ci-joint, un tel bio-capteur 1 comporte au moins une électrode de référence 2 et au moins une électrode de mesure 3. A ce propos, a été représenté, dans la figure 2, un bio-capteur comportant plusieurs électrodes de mesure 3A, 3B, 3D susceptibles, éventuellement, de détecter, chacune, une molécule différente.  Thus, as can be seen in the various FIGS. 1 to 3 of the attached drawing, such a biosensor 1 comprises at least one reference electrode 2 and at least one measurement electrode 3. In this respect, it has been shown in FIG. FIG. 2, a biosensor comprising a plurality of measurement electrodes 3A, 3B, 3D likely to detect, each, a different molecule.

électrodes de référence 2 et de mesure 3 sont conçues en un matériau conducteur d'électricité ou semi-conducteur sont recouvertes, chacune, d'un revêtement polymérique 4, ladite électrode de mesure 3 portant, encore, une enzyme réagissant spécifiquement avec ladite molécule à détecter. reference electrodes 2 and measuring electrodes 3 are made of an electrically conductive or semiconductor material, each of which is covered with a polymeric coating 4, said measuring electrode 3 carrying, again, an enzyme reacting specifically with said molecule with detect.

En fait, selon le procédé de fabrication d'un tel bio-capteur, le revêtement polymérique <B>4</B> au niveau des électrodes 2,3 est obtenu par voie électrochimique. Pour cela on trempe au moins partiellement lesdites electrodes 2, 3 dans une solution chimique à base amine et l'on vient porter ces électrodes à un potentiel suffisant pour atteindre celui correspondant à l'oxydation électrochimique de ladite solution chimique. In fact, according to the method of manufacturing such a bio-sensor, the polymeric coating <B> 4 </ B> at the level of the electrodes 2,3 is obtained electrochemically. For this purpose, said electrodes 2, 3 are at least partially quenched in an amine-based chemical solution and these electrodes are brought to a potential sufficient to reach that corresponding to the electrochemical oxidation of said chemical solution.

dans une dernière étape, on vient modifier ce revetement polymérique 4 au travers de ladite enzyme réagissant spécifiquement avec la molécule à détecter. Dans la figure 1 il est illustré le principe de la capture électrochimique à l'interface électrode-échantillon pour détection d' molécule spécifique, repérée A. in a last step, this polymeric coating 4 is modified through said enzyme reacting specifically with the molecule to be detected. In Figure 1 is illustrated the principle of electrochemical capture at the electrode-sample interface for detection of specific molecule, identified A.

Ainsi comme visible sur cette figure, lors d'une réaction chimique entre deux réactifs, il y a un échange d'électrons entre eux. Si une molécule A vient réagir sur une autre molécule B piégee ou greffée dans un polymère P à la surface d'une électrode de mesure EM, il y a modification de la densité de la charge à la surface cette électrode KM par transfert électronique des molécules A les molécules B. Thus, as can be seen in this figure, during a chemical reaction between two reactants, there is an exchange of electrons between them. If a molecule A comes to react on another molecule B which is trapped or grafted in a polymer P on the surface of a measuring electrode EM, there is a modification of the density of the charge on the surface of this electrode KM by electron transfer of the molecules A molecules B.

L'électrochimie interfaciale permet d'étudier ce type réaction à la jonction d'une électrode en contact avec un liquide un gaz contenant l'échantillon de molécules à doser. Cela est rendu possible en enregistrant un différentiel de potentiel par comparaison du signal électrique de l'électrode spécifique de mesure KM à celui d'une électrode de référence ER, celle-ci, bien que de même nature que l'électrode de mesure EM ne contenant pas de molécules B dans le polymère P qui recouvre sa surface. Interfacial electrochemistry makes it possible to study this type of reaction at the junction of an electrode in contact with a liquid, a gas containing the sample of molecules to be assayed. This is made possible by recording a potential differential by comparing the electrical signal of the specific measurement electrode KM with that of a reference electrode ER, which, although of the same nature as the measuring electrode EM, containing no B molecules in the polymer P which covers its surface.

A noter qu'en ce qui concerne la solution dans laquelle l'on vient tremper les électrodes 2, 3 pour l'obtention du revêtement polymérique par voie électrochimique, elle peut être composée d'une ou plusieurs amines pures ou en solutions dans un solvant plus difficile à oxyder de manière électrochimique que cette ou ces amines. Note that with regard to the solution in which the electrodes 2, 3 are dipped to obtain the polymer coating electrochemically, it may be composed of one or more pure amines or solutions in a solvent more difficult to oxidize electrochemically than this or these amines.

Par ailleurs, cette ou ces amines se caractérisent en qu'elles comportent au moins deux fonctions amines primaires ayant en a de chacune d'entre elles un groupement alkyl. Moreover, this or these amines are characterized in that they comprise at least two primary amine functions having at each of them an alkyl group.

A titre d'exemple, cette solution chimique peut être à base d'éthylène diamine ou encore de diéthylènetriamine voire solution de l'un et/ou l'autre de ces composants, pour l'obtention en tant que revêtement polymérique, une couche de polyéthylènimine linéaire. By way of example, this chemical solution may be based on ethylene diamine or else on diethylenetriamine, or even a solution of one and / or the other of these components, in order to obtain, as a polymeric coating, a layer of linear polyethyleneimine.

En ce qui concerne la modification du revêtement polymérique 4 finalement obtenu par une enzyme réagissant spécifiquement avec la molécule à détecter, elle peut résulter d'une simple opération de trempe de ladite électrode de mesure 3 dans une solution de ladite enzyme jusqu'à imprégnation de ce revêtement polymérique 4, tout comme elle peut provenir du dépôt de ladite enzyme, sous forme de gel, ce revêtement polymérique 4. As regards the modification of the polymer coating 4 finally obtained by an enzyme reacting specifically with the molecule to be detected, it may result from a simple operation of quenching said measuring electrode 3 in a solution of said enzyme until impregnation with this polymeric coating 4, just as it can come from the deposition of said enzyme, in gel form, this polymeric coating 4.

Bien entendu, pour la détection de plusieurs molécules différentes, le revêtement polymérique 4 de plusieurs électrodes de mesure , 3A, 3B, 3C, 3D est modifié par des enzymes différentes réagissant spécifiquement, respectivement, à l'une molécules à détecter. Of course, for the detection of several different molecules, the polymeric coating 4 of several measuring electrodes, 3A, 3B, 3C, 3D is modified by different enzymes that react specifically, respectively, to one molecule to be detected.

Selon l'invention, le bio-capteur 1 comporte encore, une unité traitement 5 à laquelle sont raccordées ces électrodes de référence 2 et de mesure 3 et qui est prévue apte, d'une part, à mesurer une différence de potentiel par l'intermédiaire de ces dernières et, d'autre part, à interpréter la les mesures effectuées en vue d'émettre une information clairement compréhensible pour un usager au travers de moyens signalisation visuelle et/ou sonore 6, là encore raccordés à cette unité de traitement 5. According to the invention, the biosensor 1 also comprises a treatment unit 5 to which these reference and measurement electrodes 2 and 3 are connected, and which is provided capable, on the one hand, of measuring a potential difference by the intermediate of the latter and, secondly, to interpret the measurements made to provide information clearly understandable to a user through visual and / or sound signaling means 6, again connected to this processing unit 5 .

tels moyens de signalisation visuelle 6 peuvent se présenter sous forme d'un écran d'affichage 7 apte afficher, sous forme d'une valeur biochimique d'interprétation accessible à l'usager, la ou les mesures de différentiel de potentiel effectuées par l'unité de traitement 5 par l'intermédiaire des électrodes 2, 3. Ainsi, cet écran d'affichage 7 peut se présenter sous forme d'un écran graphique ou autre. such visual signaling means 6 may be in the form of a display screen 7 capable of displaying, in the form of a biochemical value of interpretation accessible to the user, the potential difference measurement or measurements made by the treatment unit 5 via the electrodes 2, 3. Thus, this display screen 7 may be in the form of a graphic screen or other.

Selon un autre mode de réalisation, de tels moyens de signalisation visuelle et/ou sonore 6 sont prévus aptes à émettre une signalisation repérable visuellement ou par voie sonore en cas de détection, par l'intermédiaire de l'unité de traitement 5, d'un dépassement d'un ou plusieurs seuils de mesure prédéterminés, connus en mémoire de cette unité de traitement 5. According to another embodiment, such visual and / or audible signaling means 6 are provided capable of emitting visually or audibly recognizable signaling in the event of detection, via the processing unit 5, of exceeding one or more predetermined measurement thresholds known in memory of this processing unit 5.

A titre d'exemple, ces moyens de signalisation visuelle ou sonore 6 peuvent se présenter sous forme d'un simple voyant ou d'un buseur activé au cas où le différentiel de potentiel mesuré par l'unité de traitement 5 se traduit par une valeur biochimique supérieure ou inférieure à une valeur normale. Ainsi, cette valeur biochimique peut correspondre au taux d'uree ou au taux de sucre dans le sang qui, précisément, peut être déterminé au travers de la mesure du pH de la peau donc de la sueur du porteur du bio-capteur 1. By way of example, these visual or audible signaling means 6 may be in the form of a single indicator light or an activated buzzer in the event that the potential differential measured by the processing unit 5 is translated into a value biochemical higher or lower than a normal value. Thus, this biochemical value can correspond to the rate of urea or the blood sugar level which, precisely, can be determined by measuring the pH of the skin and therefore the sweat of the biosensor 1 carrier.

Comme cela ressort déjà de la description qui précède, ce bio- capteur n'est nullement limité à la détection des valeurs biochimiques qui viennent d'être citées. As already apparent from the foregoing description, this biosensor is not limited to the detection of biochemical values just cited.

Par ailleurs, on observera que les avantages qui découlent d'un tel bio-capteur 1, conçu selon l'invention, consistent en ce que revêtement polymérique 4 des électrodes est très adhérent. L'on pu observer que l'adhérence du revêtement polymérique 4 était encore améliorée sur des matériaux conducteurs ou semi-conducteurs, composant ces électrodes de référence 2 et de mesure 3, tels que le platine, l'or, le carbone vitreux, les fibres de carbone, le silicium. La présente invention n'est toutefois pas limitée à cette énumeration de matériaux conducteurs ou semi-conducteurs susceptibles de constituer les dites électrodes. Moreover, it will be observed that the advantages which derive from such a bio-sensor 1, designed according to the invention, consist in that the polymeric coating 4 of the electrodes is very adherent. It was observed that the adhesion of the polymeric coating 4 was further improved on conductive or semi-conductive materials, composing these reference electrodes 2 and measurement 3, such as platinum, gold, glassy carbon, carbon fiber, silicon. The present invention is however not limited to this enumeration of conductive or semiconductive materials likely to constitute said electrodes.

De plus, ledit revêtement polymérique n'est pas toxique pour les humains, tout en étant non corrosif, alors qu'au contraire et convient de le rappeler, les amines qui sont à l'origine de revêtement le sont. In addition, said polymeric coating is not toxic to humans, while being non-corrosive, while on the contrary and should be remembered, the amines which are the source of coating are.

Ces électrodes possèdent, en outre, un potentiel qui répond linéairement au pH de solutions aqueuses, dans une gamme de pH de à 13 environ. Ainsi, bien que cette réponse des électrodes ne soit pas Nernstienne, elle est linéaire, avec une variation de l'ordre de 40 à mV par unité de pH à température ordinaire. These electrodes furthermore have a potential that responds linearly to the pH of aqueous solutions, in a pH range of about 13 to about. Thus, although this electrode response is not Nernstian, it is linear, with a variation of the order of 40 to mV per unit pH at ordinary temperature.

Finalement, un bio-capteur 1, conforme à l'invention, se prête aisément, à une miniaturisation permettant d'envisager son intégration, pour la détection de substance dans la sueur, par exemple dans le boîtier d'une montre, tenant compte, par ailleurs, que signal qu'il délivre est une tension mesurable, quasiment sans consommation d'énergie électrique. A noter que le cadran d'affichage d'une telle montre 8 peut, alors, constituer, avantageusement, les moyens de signalisation visuelle 6 préalablement cités. Cette montre 8 comporte, dans ces conditions, un ou plusieurs boutons de commande, par exemple similaire à un remontoir, permettant de sélectionner son mode de fonctionnement en tant que montre ou de bio-capteur. Finally, a bio-sensor 1, according to the invention, easily lends itself to miniaturization to consider its integration, for the detection of substance in sweat, for example in the case of a watch, taking into account, Moreover, that signal it delivers is a measurable voltage, almost without consumption of electrical energy. Note that the display dial of such a watch 8 may, then, be advantageously, the visual signaling means 6 previously mentioned. This watch 8 comprises, under these conditions, one or more control buttons, for example similar to a winding, to select its operating mode as a watch or biosensor.

Bien , l'invention n'est nullement limitée ' un tel mode de réalisation puisque le bio-capteur 1 peut emprunter bien d'autres formes de réalisation, en particulier celle d'un stylo, plus adapté pour la détection d'une molécule dans la salive, voire les urines. Un tel stylo peut, bien évidemment, recevoir l' quelconque des moyens de signalisation sonore et/ou visuelle 6 auxquels il a été fait référence plus haut. Well, the invention is not limited to such an embodiment since the bio-sensor 1 can borrow many other embodiments, in particular that of a pen, more suitable for the detection of a molecule in saliva, even urine. Such a pen may, of course, receive any of the sound and / or visual signaling means 6 to which reference has been made above.

Tel cela ressort de la description précède, la présente invention vient répondre de manière avantageuse aux différents problèmes actuellement rencontrés dans ce domaine des bio-capteurs. As is apparent from the foregoing description, the present invention responds advantageously to the various problems currently encountered in this field of bio-sensors.

Bien l'invention ait été décrite à propos d'une forme de réalisation particulière, il est bien entendu qu'elle n'y est nullement limitée et qu'on peut y apporter diverses modifications de formes, de matériaux et de combinaisons de ces divers éléments sans pour cela s'eloigner du cadre et l'esprit de l'invention.Although the invention has been described with respect to a particular embodiment, it is understood that it is in no way limited and that it can make various modifications of shapes, materials and combinations of these various elements without, for that, moving away from the frame and the spirit of the invention.

Claims (1)

REVENDICATIONS Procédé de fabrication d'un bio-capteur (1) d'au moins une molécule présente au sein d'un analyte, ledit bio-capteur comprenant au moins une électrode de référence (2) et au moins électrode de mesure (3, 3A, 3B, 3C, 3D) en un matériau conducteur d'électricité ou semi-conducteur et recouverte, chacune, d' revêtement polymérique <B>(4),</B> ladite électrode de mesure portant encore une enzyme susceptible de réagir spécifiquement avec ladite molécule à détecter, caractérisé en ce que - on obtient ledit revêtement polymérique (4) sur lesdites électrodes de référence (2) et de mesure (3, 3A, 3B, 3C, 3D) voie électrochimique, en venant tremper au moins partiellement lesdites électrodes de référence et de mesure dans une solution chimique à base d'amine et en les portant à un potentiel suffisant pour atteindre celui correspondant à l'oxydation électrochimique ladite solution chimique ; - on modifie ledit revêtement polymérique (4) de l'électrode de mesure par un dépôt d'une enzyme spécifique de ladite molécule à détecter dans l'analyte. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la solution chimique est une amine pure. 3) Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la solution chimique est un mélange d'amines pures. 4) Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la solution chimique est une amine en solution dans un solvant plus difficile à oxyder de manière électrochimique que l'amine que contient ladite solution. 5) Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la solution est un mélange d'amines en solution dans un solvant plus difficile à oxyder de manière électrochimique que les amines que contient ladite solution. 6) Bio-capteur obtenu par le procédé de fabrication selon l'une quelconque des revendications précédentes, et comportant au moins une électrode de référence (2) et au moins une électrode de mesure (3, 3A, 3B, 3C, 3D) en un matériau conducteur d'électricité ou semi-conducteur et recouverte, chacune, d'un revêtement polymérique (4), ladite électrode de mesure (3, 3A, 3B, , 3D) portant, encore, une enzyme susceptible de réagir spécifiquement avec ladite molécule à détecter, caractérisé en ce qu'il comporte une unité traitement (5) prévue apte à mesurer une différence de potentiel travers des électrodes de référence (2) et mesure (3, 3A, 3B 3C, 3D) et à transmettre, par l'intermédiaire de moyens de signalisation visuelle et/ou sonore (6), une information d'interprétation claire concernant la ou les molécules spécifiques détectées au travers de la dite mesure de différence de potentiel. 7) Bio-capteur selon la revendication 6, caractérisé en ce qu'il est intégré dans le boîtier d'une montre bracelet (8). 8) Bio-capteur selon la revendication 6, caractérisé par le fait qu'il emprunte la forme d'un stylo intégrant lesdits moyens de signalisation visuelle et/ou sonore. Claims A method for producing a bio-sensor (1) of at least one molecule present within an analyte, said bio-sensor comprising at least one reference electrode (2) and at least one measuring electrode (3, 3A, 3B, 3C, 3D) made of an electrically conductive or semiconductor material and each coated with a polymeric coating (B) (4), said measuring electrode still carrying an enzyme capable of reacting specifically with said molecule to be detected, characterized in that - said polymeric coating (4) is obtained on said electrodes of reference (2) and measurement (3, 3A, 3B, 3C, 3D) electrochemical way, by soaking at least partially setting said reference and measurement electrodes in an amine-based chemical solution and raising them to a potential sufficient to reach that corresponding to the electrochemical oxidation of said chemical solution; said polymer coating (4) of the measuring electrode is modified by depositing an enzyme specific for said molecule to be detected in the analyte. Process according to claim 1, characterized in that the chemical solution is a pure amine. 3) Process according to claim 1, characterized in that the chemical solution is a mixture of pure amines. 4) Process according to claim 1, characterized in that the chemical solution is an amine in solution in a solvent more difficult to oxidize electrochemically than the amine contained in said solution. 5) Process according to claim 1, characterized in that the solution is a mixture of amines in solution in a solvent more difficult to oxidize electrochemically than the amines contained in said solution. 6) Bio-sensor obtained by the manufacturing method according to any one of the preceding claims, and comprising at least one reference electrode (2) and at least one measuring electrode (3, 3A, 3B, 3C, 3D) in an electrically conductive or semiconductor material and each covered with a polymeric coating (4), said measuring electrode (3, 3A, 3B,, 3D) carrying, again, an enzyme capable of reacting specifically with said molecule to be detected, characterized in that it comprises a treatment unit (5) provided capable of measuring a potential difference across reference electrodes (2) and measuring (3, 3A, 3B 3C, 3D) and to be transmitted by by means of visual and / or sound signaling means (6), clear interpretation information relating to the specific molecule (s) detected through said potential difference measurement. 7) Bio-sensor according to claim 6, characterized in that it is integrated in the case of a wristwatch (8). 8) Bio-sensor according to claim 6, characterized in that it takes the form of a pen incorporating said visual and / or sound signaling means.
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