[go: up one dir, main page]

FI76693B - Saett att framstaella ett aktivaemne, vilket aer anvaendbart saosom laekemedel vid behandling av melanomer. - Google Patents

Saett att framstaella ett aktivaemne, vilket aer anvaendbart saosom laekemedel vid behandling av melanomer. Download PDF

Info

Publication number
FI76693B
FI76693B FI821304A FI821304A FI76693B FI 76693 B FI76693 B FI 76693B FI 821304 A FI821304 A FI 821304A FI 821304 A FI821304 A FI 821304A FI 76693 B FI76693 B FI 76693B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
group
vilket
ett
antibody
radical
Prior art date
Application number
FI821304A
Other languages
English (en)
Other versions
FI76693C (fi
FI821304L (fi
FI821304A0 (fi
Inventor
Franz Klauss Jansen
Pierre Gros
Original Assignee
Sanofi Sa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sanofi Sa filed Critical Sanofi Sa
Publication of FI821304A0 publication Critical patent/FI821304A0/fi
Publication of FI821304L publication Critical patent/FI821304L/fi
Publication of FI76693B publication Critical patent/FI76693B/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI76693C publication Critical patent/FI76693C/fi

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/44—Antibodies bound to carriers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3053—Skin, nerves, brain
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/6811—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin
    • A61K47/6817—Toxins
    • A61K47/6819—Plant toxins
    • A61K47/6825—Ribosomal inhibitory proteins, i.e. RIP-I or RIP-II, e.g. Pap, gelonin or dianthin
    • A61K47/6827—Ricin A
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A61K47/6865—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from skin, nerves or brain cancer cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/806—Antigenic peptides or proteins
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
    • Y10S530/828—Cancer

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

1 76693
Tapa valmistaa aktiiviainetta, joka on käyttökelpoinen melanoomien hoidossa.
Tämän keksinnön kohteena on menetelmä melanoomien 5 hoidossa käyttökelpoisten aktiiviaineiden valmistamiseksi.
Aikaisemmissa FR-patentissa 2 437 213 ja sen lisä-patentissa 2 466 252 on kuvattu konjugoiduiksi nimitettyjä syöpää vastustavia tuotteita, jotka on saatu kytkemällä kovalentilla sidoksella risiinin ketju A proteiinirakentee-10 seen kuten johonkin vasta-aineeseen, immunoglobuliiniin tai immunoglobuliinifragmenttiin , joka kykenee tunnistamaan selektiivisesti sellaisten solujen kuten syöpäsolujen pinnalla olevan antigeenin, joihin halutaan vaikuttaa. Näiden konjugoitujen tuotteiden pääasiallinen ominaisuus 15 on se, että ne toimivat kohteena olevien solujen spesifisinä sytotoksisina aineina.
Syöpäsolujen eri antigeenejä vastaan spesifisesti suunnattujen vasta-aineiden käytöllä on jo saatu aikaan konjugoituja tuotteita, joilla on merkittävää spesifisyyttä 20 kohdesoluihin nähden. Syöpäsoluihin liittyvien antigeenien karakterisoiminen ja näitä antigeenejä vastaan suunnattujen monokloonisten vasta-aineiden löytäminen tekevät mahdolliseksi löytää myös sellaisia konjugoituja tuotteita, joilla on suurempi spesifisyys nimenomaan näitä antigeenejä sisäl-25 täviin syöpäsoluihin nähden.
Tämän keksinnön kohteena on tapa valmistaa aktiivi-ainetta, joka on käyttökelpoinen lääkeaineena melanoomien hoidossa ja joka on molekyyli, jossa risiinin ketju A on kovalenttisella disulfidityyppisellä sidoksella liitetty 30 ihmisen melanoomaa vastustavaan vasta-aineeseen Anti P 97.
Puhtaan risiinin ketjun A valmistaminen on kuvattu aikaisemmin julkaistuissa patenteissa. Monokloonisten ihmisen antimelanomaa vastustavien vasta-aineiden valmistus on mainittu tieteellisessä kirjallisuudessa (erityisesti 35 voidaan mainita julkaisu Proceedings of the National Academy of Sciences 77(4), 2183-7, 1980).
2 76693 Näiden konjugoitujen tuotteiden valmistamiseksi on välttämätöntä, että kytkettävillä proteiineilla on molemmilla vähintään yksi joko luonnostaan rakenteeseen kuuluva tai keinotekoisesti lisätty rikkiatomi, joka pystyy luomaan 5 halutun disulfidi-tyyppisen sidoksen.
Risiinin ketjussa A on luonnostaan yksi halutun kaltaisen sidoksen mahdollistava rikkiatomi. Tämä on ketjussa A oleva kysteiinitähteen tioliryhmän rikkiatomi, joka varmistaa ketjun A sitoutumisen ketjuun B toksiinin ollessa 10 kokonainen.
Melanomaa vastustava vasta-aine ei sisällä mitään vapaata tiolia eikä muitakaan kytkennässä käyttökelpoisia rikkiatomeja. Täten onkin sopivinta lisätä immunoglobulii-nimolekyyliin keinotekoisesti yksi tai useampia rikkiatome-15 ja, jotka pystyvät sittemmin toimimaan disulfidisidoksen muodostajina yhden tai useamman risiinin ketjun A molekyylin kanssa.
Keksinnön mukaisia konjugoituja tuotteita valmistetaan saattamalla risiinin ketju A, jolla SH-ryhmä on vapaa-20 na, yhteyteen sellaisen vasta-aineen kanssa, johon SH-ryhmä on keinotekoisesti lisätty aktiivisessa muodossaan ja etenkin jonkin sopivan rikkiä sisältävän orgaanisen radikaalin sekadisulfidina.
Aktivoidulla rikkiatomilla substituoitu vasta-aine 25 saadaan itse vasta-aineesta substituoimalla sellaisella reagenssilla, joka sisältää aktivoidun rikkiatomin, seuraa-van kaavan mukaisesti:
AC+Y-R-S-S- X->AC -R-S-S-X
jossa:.AC tarkoittaa vasta-ainetta 30 .Y tarkoittaa ryhmää, joka mahdollistaa reagenssin kovalenttisen sitoutumisen proteiiniin
.R tarkoittaa ryhmää, joka voi kantaa samanaikaisesti substituentteja Yja-S-S-X
.X tarkoittaa aktivoivaa radikaalia.
35 Funktionaalinen ryhmä Y on jonkin ryhmä, joka pystyy sitoutumaan kovalenttisesti minkä tahansa substituoitavan proteiinin sisältämien aminohappojen sivuketjujen funktio- 3 76693 naalisen ryhmän kanssa. Näistä voidaan erityisesti mainita proteiinin sisältämien lysyyliradikaalien päätteenä olevat aminoryhmät. Tässä tapauksessa Y voi olla etenkin: - karboksyyliryhmä, joka voi sitoutua proteiinin 5 aminoryhmiin jonkin kytkentäaineen kuten karbodi-imidin ja etenkin jonkin vesiliuoksen johdannaisen kuten l-etyyli-3-(3-dietyyliamino-propyyli)-karbodi-imidin läsnä ollessa, - karboksyylihapon kloridi, joka pystyy reagoimaan suoraan aminoryhmien kanssa ja asyloimaan ne, 10 - niin sanottu "aktiivinen" esteri, kuten orto- tai para-, nitro tai dinitro-fenyyliesteri tai sitten N-hydrok-si-sukkiini-imidin esteri, joka reagoi suoraan aminoryhmien kanssa ja asyloi ne, - kaksiarvoisen karboksyylihapon sisäinen anhydridi 15 kuten esimerkiksi sukkiinianhydridi, joka reagoi spontaanisti aminoryhmien kanssa ja synnyttää amidisidoksia, - lmidoesteriryhma-C jossa, on alkyyli- 20 ryhmä, ja joka reagoi proteiinin aminoryhmien kanssa seuraavasti „ n
HN«. N
Prot - NH2 + - R2--->Prot-NH- C - R2 + RjOH
R^Cr 25 X tarkoittaa funktionaalista ryhmää, joka kykenee reagoimaan vapaan tioliradikaalin kanssa. Erityisesti X voi olla 2-pyridyyli- tai 4-pyridyyliryhmä, joka voi vielä olla substituoitu yhdellä tai useammalla alkyyliradikaalil-la, halogeenilla tai karboksyyliryhmällä. X voi myös olla 30 fenyyliryhmä, joka on mieluimmin substituoitu nitro- tai karboksyyliryhmällä tai molemmilla niistä. X voi vielä olla alkoksikarbonyyliryhmä kuten metoksikarbonyyliryhmä.
Radikaali R tarkoittaa mitä tahansa radikaalia, jolla voi olla substituenttina samanaikaisesti sekä Y että S - S - X. Se on valittava siten, että se ei sisällä ryhmiä, joiden voidaan olettaa käytettävien reagenssien ja synteettisten tuotteiden välisiin lopullisiin reaktioihin.
4 76693
Ryhmä R voi erityisesti olla ryhmä -^CH2^n' j°ssa n on 1-10 tai R0 - CH -
J I
CH - 5 jossa R^ on vety tai 1-8 hiiliatomia sisältävä alkyyliradi-kaali ja R^ on lopullisessa reaktioissa käytettäviin rea-gensseihin nähden inertti substituentti kuten karbamaatti-ryhmä - NH - C - ORc, jossa Rc tarkoittaa 1-5 hiiliatomia n 5 b
O
10 sisältävää suoraa tai haaraketjuista alkyyliryhmää ja etenkin tertiobutyyliryhmää.
Yhdisteen Y-R-S-S-X reaktio immunoglobulii-nin kanssa suoritetaan homogeenisessa nestefaasissa, useimmiten vedessä tai puskuriliuoksessa. Mikäli reagenssien 15 liukoisuus sitä vaatii, on mahdollista lisätä reaktioseok-seen aina 20 tilavuus-%:iin asti veden kanssa sekoittuvaa orgaanista liuotinta kuten alkoholia ja etenkin tertiääristä butanolia.
Reaktio suoritetaan huoneen lämpötilassa ja reaktio- 20 aika voi vaihdella muutamasta tunnista 24 tuntiin. Reaktion jälkeen poistetaan dialyysin avulla molekyylipainoltaan kevyemmät tuotteet ja etenkin ylimääräiset reagenssit.
Tällä menetelmällä voidaan proteiiniin liittää 1-5 substitu- enttiryhmää kun on kysymyksessä luokkaa G oleva immunoglobu- 25 liini ja 1-15 kun on kysymyksessä luokkaa M oleva immunoglo-buliini.
Käytettäessä mainitunlaisia yhdisteitä kytkentä risiinin ketjun A kanssa tapahtuu molempien proteiinien ollessa läsnä vesiliukoisessa lämpötilan ollessa alle 30°C ^ ja reaktioajan vaihdellessa muutamasta tunnista yhteen vuorokauteen. Saatu liuos dialysoidaan molekyylipainoltaan kevyempien tuotteiden poistamiseksi, minkä jälkeen konju-goitu tuote voidaan puhdistaa erilaisilla tunnetuilla menetelmillä.
Seuraava esimerkki auttaa paremmin ymmärtämään keksinnön luonnetta.
35 5 76693
Esimerkki 1
Aktivoidulla disulfidiryhmällä substituoitua ihmisellä melanomaa vastustavaa vasta-ainetta (antigeeniä P 97 vastaan suunnattu vasta-aine) ja risiinin ketjua A lähtöainei-^ na käyttäen saatu konjugoitu tuote.
a) Ihmisellä melanomaa vastustava vasta-aine (anti P 97) Tämä vasta-aine saatiin julkaisussa Proceedins of National Academy of Sciences 1980, 77 (4) 2183-7, kuvatulla menetelmällä.
Sille suoritettiin viimeinen puhdistus dialysoimalla puskuria PBS vasten. (10 mM fosfaattia, 140 nM natriumklo-ridia, pH: 7,4).
b) Risiinin ketju A
^ Risiinin ketju A valmistettiin ja puhdistettiin haki jan aikaisemmissa patenttihakemuksissa ( patentti FR 7827838 ja sen lisäys FR 7924655) kuvatulla tavalla.
c) Aktivoitu ihmisellä melanomaa vastustava vasta-aine 20 0,5 ml:aan liuosta, joka sisälsi 20 mg/ml 3-(2-pyri-dyyli-disulfanyyli)-propionihappoa tertiobutanolissa, lisättiin 0,2 ml l-etyyli-3-(3-dimetyyliaminopropyyli)-karbodi-imidin 60 mg/ml-liuosta ja annettiin seistä 3 minuuttia huoneen lämpötilassa.
25
Lisättiin 30^ul näin saatua liuosta 1,66 ml:aan liuosta, joka sisälsi 2,4 mg/ml melanomaa vastustavaa vasta-ainetta PBS-puskurissa. Seosta inkuboitiin 20 tuntia 30°C: ssa.
Sitten liuos dialysoitiin jatkuvana 3 päivän aikana käyttäen 21 litraa PBS-puskuria 4°C:ssa. Näin saatiin 4 mg aktivoitua vasta-ainetta pitoisuuden ollessa 2,3 mg/ml.
Analysoimalla spektrofotometrisesti aaltopituudella 343 nm pelkistetyn glutationin kanssa vaihtamalla vapautunut pyridiini-2-tioni, todettiin että oli saatu vasta-aine, joka sisälsi 2,6 aktivoivaa ryhmää yhtä vasta-ainemoolia kohden.
35 6 76693 d) Konjugoitu tuote 1,3 ml:aan aktivoidun vasta-aineen PBS-puskuriliu-osta (pitoisuus 2,3 mg/ml, eli 3 mg aktivoitua vasta-ainetta) lisättiin 0,52 ml risiinin ketjun A liuosta samassa 5 puskurissa (pitoisuus 5,8 mg/ml) ja inkiboitiin 25°C:ssa 20 tuntia.
Reaktioseos puhdistettiin kromatografisesti Sephadex G 100-geeliä sisältävällä pylväällä. Kustakin fraktiosta määritettiin vasta-aineen pitoisuus spektrofotometrisesti 10 aallonpituudella 280 nm ja ketjun A pitoisuus sen perusteella miten hyvin se pystyy estämään proteosynteesin mitattuna solun ulkopuolella olevassa systeemissä. Identtiset konjugoitua tuotetta sisältävät fraktiot yhdistettiin ja saatiin näin ollen 1 mg konjugoitua tuotetta pitoisuuden 15 ollessa 0,2 mg/ml.
Suoritetut analyyttiset määritykset osoittivat, että liuos sisälsi 50yug/ml biologisesti aktiivista ketjua A, eli noin 1,4 moolia ketjua A yhtä vasta-ainemoolia kohden.
Sytofluormetrian avulla suoritettu tutkimus osoitti 20 lisäksi, että käytetty melanomaa vastustava vasta-aine, vastaava aktivoitu vasta-aine ja tämän vasta-aineen konjugoitu yhdistelmä risiinin ketjun A kanssa antoivat hyvin samanlaiset fluoresenssin histogrammit, minkä perusteella voidaan varmistaa siitä, että vasta-aineessa ei ole tapah-25 tunut mitään merkittävää muutosta sille suoritettujen aktivointi- ja kytkentäreaktioiden aikana ja etenkin että se yhä kykenee konjugoidun tuotteen osana tunnistamaan antigeenin P 97, jota vastaan se on suunnattu.
Edellä saatu keksinnön mukainen konjugoitu tuote on 30 tutkittu sen biologisten ominaisuuksien ja erityisesti sen syöpää vastustavan vaikutuksen osalta.
1) - Proteosynteesin estyminen
Risiinin ketjun A biologinen perusominaisuus on sen kyky estää solussa tapahtuvan proteosynteesin muuntamalla 35 ribosomi-alayksikköä 60 S.
Tässä on käytetty solumallia. Tämä testi mittaa 14 tutkittujen aineiden vaikutusta C-leusiinin imeytymiseen viljelmän syöpäsoluihin.
7 76693 Käytetyt solut olivat peräisin solukannasta M 1477, joka oli otettu antigeeniä P 97 sisältävästä ihmisen melanomasta. Trypsinoinnin jälkeen näitä soluja 5 inkuboitiin jälleen noin 24 tuntia, jotta mahdollisesti muuntuneet pinta-antigeenit ilmestyisivät jälleen solujen pinnalle. Kun tutkittavat aineet oli lisätty, suoritettiin jälleen inkubointi. Inkuboinnin päätyttyä mitattiin tällä tavalla käsiteltyihin soluihin imeyty-14 10 nyt C-leusiinin suhteellinen määrä.
Tämä mittaus suoritettiin julkaisussa Journal of Biological Chemistry 1974, 249 (11), 3557-62 kuvatun 14 tekniikan sovellutuksella käyttäen C-leusiinia merkkiaineena proteosynteesin asteen määrittämisessä. Imeyty-15 neen radioaktiivisuuden määrittäminen suoritettiin tässä tapauksessa suodattamalla erotetuista kokonaisista soluista .
Näiden määritysten perusteella piirrettiin vaikutuksen ja annoksen suuruuden välistä suhdetta kuvaa- 20 vat käyrät, joissa abskissalla on tutkittujen aineiden 14 pitoisuudet ja ordinaatalla C-leusiinin imeytyminen ilmaistuna prosentteina tutkittavia aineita sisältämättömiin vertailusoluihin imeytyneestä määrästä.
Näin voitiin myös määrittää kullekin tutkitul- 14 25 le aineelle 50 %:isesti C-leusiinin imeytymisen estävä pitoisuus eli "50 %:isesti estävä pitoisuus" (CI 50).
Edellä olevassa esimerkissä valmistetulla kon-jugoidulla tuotteella (ITHM) saadut tulokset käyvät ilmi kuviosta 1. Tässä kuviossa on niinikään esitetty 30 vastaavasti käyrät, jotka on saatu risiinillä (R), risiinin ketjulla A(AR) ja risiinin ketjun A ja dinitro-fenyyliradikaalia (DNP) vastustavan vasta-aineen konju-goidulla yhdistelmällä, (DS-10) joka ei osoittanut mitään affiniteettia testattuihin soluihin nähden.
35 8 76693 Tämän kuvion perusteella voidaan todeta, että tutkitulla konjugoidulla tuotteella (ITHM) on voimakas -9 sytoksinen vaikutus (CI 50 = 5x10 M), noin 400 kertaa voimakkaampi kuin risiinin ketjulla A.
5 Toisaalta DNP:tä vastustava konjugoitu tuote (DS-10) vaikuttaa soluihin M 1477 vasta suuremmalla pitoisuudella (10 8M) . Sitä vastoin tämä sama konjugoitu tuote DS 10 osoittautui sytoksiseksi CI 50-arvolla -9 noin 10 M, kun se saatettiin yhteyteen M 1477 -solu-10 jen kanssa, jotka oli ennalta keinotekoisesti muutettu DNP-radikaaleja sisältäviksi. Nämä kaksi jälkimmäistä johtopäätöstä osoittavat konjugoidun tuotteen ITHM sytotoksisen vaikutuksen spesifisen luonteen.
2) Kolonioiden muodostumisen estyminen 15 Melanomaviljelmän M 1477 solut irrotettiin alus tastaan Versene-liuoksella (PBS-puskuri, joka sisältää etyleenidiamiinitetraetikkahappoa) tai trypsinisoimal- la. Näitä soluja istutettiin läpimitaltaan 5 cm:n 4
Petri-maljoihin noin 2x10 kappaletta kuhunkin, jotka 20 sisälsivät seuraavan kasvualustan: RPMI 1640-ravintoliuos (Merieux), johon oli lisätty 2 mM glutamiinia, 2 g/1 natriumbikarbonaattia, 15 % inaktivoitua vasikansikiöseerumia (seromed) ja antibiootteja (penisilliini, streptomysiini ja amfoteri-25 siin B).
24 tunnin kuluttua solut käsiteltiin erilaisilla pitoisuuksilla tutkittavaa konjugoitua tuotetta.
Vertailun vuoksi sama koesarja suoritettiin myös toisaalta risiinillä, toisaalta risiinin ketjulla A ja 30 vielä konjugoidulla tuotteella, joka ei ole tälle solu-kannalle spesifinen (risiinin ketjun A ja anti-DNP-vasta-aineen konjugoitu yhdistelmä (DS 10)).
Jälleen 24 tunnin kuluttua viljelmän kasvualusta poistettiin ja korvattiin tuoreella samalla alustalla, 35 jossa ei ollut yhtään sytotoksisia aineita.
10-15 vuorokautta myöhemmin määritettiin kehit- 9 76693 tyneiden kolonioiden määrä kolonioiden automaattisella laskimella (Artek 880-systeemi) sen jälkeen kun ne oli värjätty kristailiviolettiliuoksella.
Tällä menetelmällä pystytään havaitsemaan niinkin 5 pieniä määriä kuin 10 elävää solua maljaa kohden ja tämä on voitu todeta myös käytettäessä vertailuviljelmiä. Niin ikään on osoitettu, että kolonioiden muodostuminen on tarkasti verrannollinen solujen alkuperäiseen 1 4 pitoisuuteen, ainakin alueella 10 - 10 solua millilit- 10 raa kohden.
Saadut tulokset on esitetty kuviossa 2, jossa ordinaatalla ja logaritmisinä koordinaatteina käyvät ilmi kolonioiden määrät kussakin maljassa ja abskis-salla tuotteen pitoisuus. Tutkimukset on suoritettu 15 risiinillä (R), risiinin ketjulla A (AR) ja keksinnön mukaisella konjugoidulla tuotteella (ITHM).
Konjugoidulla tuotteella ITHM on suuri aktiivisuus, sillä viimeinenkin melanomasolu kuolee konjugoi- -9 dun tuotteen pitoisuuden ollessa 2 x 10 M. Tämä pi- 20 toisuus on täysin vertailukelpoinen risiinin vastaavaan -9 pitoisuuteen (1 x 10 M) kun taas risiinin ketjulla A on saman tuloksen saamiseksi kohotettava pitoisuus 10 ^M:iin.
Niin ikään voidaan havaita että konjugoidulla 25 tuotteella DS 10 on vaikutusta vasta pitoisuudella _ 8 2 x 10 M, joka on suurin pitoisuus, jolla sitä on testattu.
Tämän kokeen johtopäätökset varmistavat täysin proteosynteesin estymistutkimuksen tulokset.
30 Keksinnön mukaisesti valmistetuilla konjugoi- duilla tuotteilla on siis voimakkaasti spesifinen vaikutus ihmisellä esiintyvän melanoman solukantoihin. Niitä voidaan siten käyttää tautien hoidossa ihmisillä hoidettaessa melanomia ja mahdollisesti muita sairaus-35 10 76693 tiloja, jotka ovat herkkiä käytetylle vasta-aineelle olivatpa ne sitten pahanlaatuisia tai eivät.
Nämä konjugoidut tuotteet on sovitettu käytettäviksi ruiskeina. Niitä voidaan käyttää joko sellai-5 sinaan tai yhdessä jonkun toisen kyseessä olevan syö-pätilan hoitokeinon kanssa ja etenkin yhdistettynä muihin, immunodepressiivisiin lääkkeisiin, joiden tehtävänä on viivyttää tai heikentää potilaan luonnollista immuunireaktiota elimistölle vierasta proteiinia 10 eli siis tässä tapauksessa kyseistä konjugoitua tuotetta vastaan.
Pyrittäessä eliminoimaan syöpäsolut kokonaan hoidossa on käytettävä riittävän suurta annosta konjugoitua tuotetta ja hoidon kesto on määritettävä kussa-15 kin tapauksessa potilaan ja hoidettavan taudintilan mukaan.

Claims (2)

11 76693
1. Tapa valmistaa aktiiviainetta, joka on käyttökelpoinen lääkeaineena melanoomien hoidossa ja joka on mole- 5 kyyli, jossa risiinin ketju A on kovalenttisella disulfidi-tyyppisellä sidoksella liitetty ihmisen melanoomaa vastustavaan vasta-aineeseen Anti P 97, tunnettu siitä, että risiinin ketju A, jonka kaava on RASH, saatetaan reagoimaan vasta-aineen Anti P 97 johdannaisen kanssa, jonka 10 kaava on AC-S-S-X, jossa X on aktivoiva radikaali ja AC on Anti P 97.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen tapa, tunnet-t u siitä, että X on ryhmä, joka pystyy reagoimaan vapaan tioliradikaalin kanssa, erikoisesti 2- tai 4-pyridyyliryh- 15 mä, joka voi olla substituoitu, fenyyliryhmä tai alkoksi-karbonyyliryhmä. 20 1. Sätt att framställa ett aktivämne, vilket är an- vändbart säsom läkemedel vid behandling av melanomer och vilket utgörs av en molekyl, väri ricinens kedja A är med en kovalent bindning av typen disulfid bunden vid antikrop-pen Anti P 97 mot människans melanom, känneteck-25 n a t därav, att ricinens kedja A med formeln RASH omsätts med ett derivat av antikroppen Anti P 97 med formeln AC-S-S-X, väri X är en aktiverande radikal och AC är Anti P 97.
2. Sätt enligt patentkravet 1, känneteck-30 n a t därav, att X är en grupp, vilken förmär att reagera med en fri tiolradikal, i synnerhet en 2- eller 4-pyridyl-grupp, vilken kan vara substituerad, en fenylgrupp eller en alkoxikarbonylgrupp.
FI821304A 1981-04-15 1982-04-14 Saett att framstaella ett aktivaemne, vilket aer anvaendbart saosom laekemedel vid behandling av melanomer. FI76693C (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR8107596A FR2504010B1 (fr) 1981-04-15 1981-04-15 Medicaments anticancereux contenant la chaine a de la ricine associee a un anticorps antimelanome et procede pour leur preparation
FR8107596 1981-04-15

Publications (4)

Publication Number Publication Date
FI821304A0 FI821304A0 (fi) 1982-04-14
FI821304L FI821304L (fi) 1982-10-16
FI76693B true FI76693B (fi) 1988-08-31
FI76693C FI76693C (fi) 1988-12-12

Family

ID=9257448

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI821304A FI76693C (fi) 1981-04-15 1982-04-14 Saett att framstaella ett aktivaemne, vilket aer anvaendbart saosom laekemedel vid behandling av melanomer.

Country Status (30)

Country Link
US (1) US4414148A (fi)
EP (1) EP0063988B1 (fi)
JP (1) JPS57179124A (fi)
KR (1) KR880001045B1 (fi)
AR (1) AR228394A1 (fi)
AT (1) ATE17653T1 (fi)
AU (1) AU556641B2 (fi)
CA (1) CA1195248A (fi)
CZ (1) CZ256482A3 (fi)
DD (1) DD204849A5 (fi)
DE (1) DE3268752D1 (fi)
DK (1) DK159277C (fi)
EG (1) EG15718A (fi)
ES (1) ES511433A0 (fi)
FI (1) FI76693C (fi)
FR (1) FR2504010B1 (fi)
GR (1) GR69199B (fi)
HU (1) HU188314B (fi)
IE (1) IE53009B1 (fi)
IL (1) IL65441A0 (fi)
MA (1) MA19429A1 (fi)
NO (1) NO154905C (fi)
NZ (1) NZ200302A (fi)
OA (1) OA07069A (fi)
PH (1) PH20846A (fi)
PL (1) PL135800B1 (fi)
PT (1) PT74741B (fi)
SU (1) SU1329604A3 (fi)
YU (1) YU83082A (fi)
ZA (1) ZA822528B (fi)

Families Citing this family (144)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5843926A (ja) * 1981-09-08 1983-03-14 Suntory Ltd 選択性制癌剤
FR2523445A1 (fr) * 1982-03-17 1983-09-23 Sanofi Sa Nouveaux conjugues associant, par liaison covalente, une enzyme et un anticorps, et associations medicamenteuses utilisant lesdits conjugues
ATE25197T1 (de) * 1982-05-12 1987-02-15 Harvard College Hybridproteinekodierende fusionierte gene, sie enthaltende klonierungsvektoren und deren verwendung.
US4520226A (en) * 1982-07-19 1985-05-28 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Treatment of graft versus host disease using a mixture of T-lymphocyte specific monoclonal antibody: ricin conjugates
JPS5990052A (ja) * 1982-11-16 1984-05-24 Katsu Taniguchi モノクロ−ナル特異抗体を用いたメラノ−マ診断薬
US4916213A (en) * 1983-02-22 1990-04-10 Xoma Corporation Ribosomal inhibiting protein-immunoglobulin conjugates with specificity for tumor cell surface antigens, and mixtures thereof
US4591572A (en) * 1983-04-01 1986-05-27 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Pigmentation associated, differentiation antigen of human melanoma and autologous antibody
JPS59186924A (ja) * 1983-04-08 1984-10-23 Kureha Chem Ind Co Ltd ヒト免疫グロブリン結合抗腫瘍剤
US4664911A (en) * 1983-06-21 1987-05-12 Board Of Regents, University Of Texas System Immunotoxin conjugates employing toxin B chain moieties
GB2142428A (en) * 1983-06-23 1985-01-16 Erba Farmitalia Adenocarcinoma related antigenic determinants and antibodies specific thereto
FR2547731A1 (fr) * 1983-06-27 1984-12-28 Centre Nat Rech Scient Immunotoxine antitumorale, preparations pharmaceutiques la contenant et son utilisation in vitro
GB2148299B (en) * 1983-09-01 1988-01-06 Hybritech Inc Antibody compositions of therapeutic agents having an extended serum half-life
US4545985A (en) * 1984-01-26 1985-10-08 The United States Of America As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services Pseudomonas exotoxin conjugate immunotoxins
FR2570278B1 (fr) * 1984-09-14 1987-02-13 Pasteur Institut Compositions et procede pour proteger les lymphocytes t contre l'agent etiologique des lymphadenopathies et du syndrome d'immunodepression acquise
EP0232447A1 (en) * 1986-02-13 1987-08-19 Xoma Corporation Lectin immunotoxins
AU585940B2 (en) * 1984-09-25 1989-06-29 Xoma Corporation Lectin immunotoxins
US4590071A (en) * 1984-09-25 1986-05-20 Xoma Corporation Human melanoma specific immunotoxins
FR2573656B1 (fr) * 1984-11-29 1987-02-27 Sanofi Sa Medicament comportant en tant qu'association au moins une immunotoxine et au moins un polymere contenant du mannose
US4851510A (en) * 1984-11-30 1989-07-25 Wadley Technologies, Inc. Monoclonal antibodies to novel melanoma-associated antigens
US5256413A (en) * 1985-01-08 1993-10-26 The General Hospital Corporation Method and use for site-specific activation of substances
AT384549B (de) * 1985-01-08 1987-11-25 Strasser Engelbert Verfahren zur herstellung einer vaccine
FR2577135B1 (fr) * 1985-02-13 1989-12-15 Sanofi Sa Immunotoxines a longue duree d'action comportant un constituant glycopeptidique inactivant les ribosomes modifie sur ses motifs polysaccharidiques
US4744981A (en) * 1985-10-17 1988-05-17 Neorx Corporation Trichothecene antibody conjugates
DE3688137D1 (de) * 1985-11-29 1993-04-29 Consolidated Pharmaceuticals L Ricin-antikoerper-konjugate.
US4831122A (en) * 1986-01-09 1989-05-16 Regents Of The University Of Minnesota Radioimmunotoxins
US4689401A (en) * 1986-03-06 1987-08-25 Cetus Corporation Method of recovering microbially produced recombinant ricin toxin a chain
USRE38008E1 (en) 1986-10-09 2003-02-25 Neorx Corporation Methods for improved targeting of antibody, antibody fragments, hormones and other targeting agents, and conjugates thereof
US4771128A (en) * 1986-10-10 1988-09-13 Cetus Corporation Method of purifying toxin conjugates using hydrophobic interaction chromatography
US5009995A (en) * 1986-10-27 1991-04-23 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Monoclonal antibodies to melanoma cells
US5582862A (en) 1988-04-04 1996-12-10 General Hospital Corporation Antibodies that bind to α2-antiplasmin crosslinked to fibrin which do not inhibit plasma α2-antiplasmin
US5372812A (en) * 1988-04-04 1994-12-13 The General Hospital Corporation Composition and method for acceleration of clot lysis
US5609869A (en) * 1988-08-19 1997-03-11 The General Hospital Corporation Hybrid immunoglobulin-thrombolytic enzyme molecules which specifically bind a thrombus, and methods of their production and use
US5811265A (en) * 1988-08-19 1998-09-22 The General Hospital Corporation Hybrid immunoglobulin-thrombolytic enzyme molecules which specifically bind a thrombus, and methods of their production and use
US5252713A (en) * 1988-09-23 1993-10-12 Neorx Corporation Polymeric carriers for non-covalent drug conjugation
US5171563A (en) * 1988-09-30 1992-12-15 Neorx Corporation Cleavable linkers for the reduction of non-target organ retention of immunoconjugates
IE910820A1 (en) * 1990-03-22 1991-09-25 Sloan Kettering Inst Cancer Gp75 as a tumor vaccine for melanoma
ZA912490B (en) * 1990-04-19 1992-12-30 Res Dev Foundation Antibody conjugates for treatment of neoplastic disease
US5981194A (en) * 1992-07-10 1999-11-09 University Of British Columbia Use of p97 and iron binding proteins as diagnostic and therapeutic agents
US5690935A (en) * 1995-01-13 1997-11-25 Regents Of The University Of Minnesota Biotherapy of cancer by targeting TP-3/P80
US5977322A (en) 1995-06-14 1999-11-02 The Regents Of The University Of California High affinity human antibodies to tumor antigens
AU741338B2 (en) * 1996-09-20 2001-11-29 Bristol-Myers Squibb Company Chimeric, humanized and single chain antibodies to alpha-2-antiplasmin
US6869604B1 (en) * 1998-03-27 2005-03-22 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Recombinant anti-tumor RNAse
PT1075277E (pt) * 1998-05-08 2009-05-08 Univ California Métodos para detectar e inibir a angiogénese
US6852318B1 (en) 1998-05-08 2005-02-08 The Regents Of The University Of California Methods for detecting and inhibiting angiogenesis
ATE536550T1 (de) 2000-10-06 2011-12-15 Life Technologies Corp Halbleiter nanokristalle enthaltende transfektibare mizellen
US20050059031A1 (en) 2000-10-06 2005-03-17 Quantum Dot Corporation Method for enhancing transport of semiconductor nanocrystals across biological membranes
WO2002040874A1 (en) 2000-11-16 2002-05-23 California Institute Of Technology Apparatus and methods for conducting assays and high throughput screening
ZA200305980B (en) * 2001-02-12 2007-01-31 Res Dev Foundation Modified proteins, designer toxins, and methods of making thereof
WO2002100172A1 (en) * 2001-06-11 2002-12-19 Xenoport, Inc. Administration of agents via the pept-2 transporter
AU2002327310B2 (en) 2001-07-17 2006-09-28 Research Development Foundation Therapeutic agents comprising pro-apoptotic proteins
US7118910B2 (en) 2001-11-30 2006-10-10 Fluidigm Corporation Microfluidic device and methods of using same
US20030158254A1 (en) * 2002-01-24 2003-08-21 Xenoport, Inc. Engineering absorption of therapeutic compounds via colonic transporters
US20030158089A1 (en) * 2002-01-24 2003-08-21 Xenoport, Inc. Administrative agents via the SMVT transporter
US7332585B2 (en) 2002-04-05 2008-02-19 The Regents Of The California University Bispecific single chain Fv antibody molecules and methods of use thereof
US20030228619A1 (en) * 2002-06-10 2003-12-11 Xenoport, Inc. Peptide nucleic acids as tags in encoded libraries
CA2488858A1 (en) * 2002-06-12 2003-12-24 Research Development Foundation Immunotoxin as a therapeutic agent and uses thereof
KR20050038005A (ko) 2002-07-18 2005-04-25 헬릭스 바이오파마 코포레이션 암세포 성장의 저해를 위한 우레아제의 사용
US20040161424A1 (en) * 2002-10-08 2004-08-19 Xenoport Human organic solute transporters
AU2004228678A1 (en) 2003-04-03 2004-10-21 Fluidigm Corp. Microfluidic devices and methods of using same
CA2553034A1 (en) 2004-02-02 2005-08-18 Ambrx, Inc. Modified human interferon polypeptides and their uses
CA2568952C (en) 2004-06-18 2019-05-21 Ambrx, Inc. Novel antigen-binding polypeptides and their uses
AU2005327906B2 (en) 2004-07-21 2010-05-13 Ambrx, Inc. Biosynthetic polypeptides utilizing non-naturally encoded amino acids
JP2008520963A (ja) * 2004-11-16 2008-06-19 シーナ・キャンサー・ダイアグノスティクス・リミテッド サンプル中の分析物を検出する方法
EP1836314B1 (en) 2004-12-22 2012-01-25 Ambrx, Inc. Modified human growth hormone
CN104803865A (zh) 2004-12-22 2015-07-29 Ambrx公司 含有非天然氨基酸和多肽的组合物、涉及非天然氨基酸和多肽的方法以及其用途
KR101224781B1 (ko) * 2004-12-22 2013-01-21 암브룩스, 인코포레이티드 비천연적으로 코딩된 아미노산을 포함하는 인간 성장호르몬의 조제물
US7736872B2 (en) * 2004-12-22 2010-06-15 Ambrx, Inc. Compositions of aminoacyl-TRNA synthetase and uses thereof
JP2008525032A (ja) 2004-12-22 2008-07-17 アンブレツクス・インコーポレイテツド 組換えヒト成長ホルモンを発現及び精製するための方法
CN101132813A (zh) * 2005-02-01 2008-02-27 研究发展基金会 靶向blys受体的blys融合蛋白和用于治疗b细胞增殖性疾病的方法
EP1861512A4 (en) 2005-03-18 2009-12-09 Fluidigm Corp THERMAL REACTION DEVICE AND USE METHOD THEREFOR
EP1893229B1 (en) * 2005-06-03 2011-10-19 Ambrx, Inc. Improved human interferon molecules and their uses
CN103103238B (zh) * 2005-08-18 2016-08-10 Ambrx公司 一种在细胞中制造在特定位置处具有所选氨基酸的抗体或抗体片段多肽的方法
JP5508716B2 (ja) * 2005-11-08 2014-06-04 アンブルックス，インコーポレイテッド 非天然アミノ酸、および非天然アミノ酸ポリペプチドを修飾するための促進剤
CN101454461A (zh) 2005-11-16 2009-06-10 Ambrx公司 包括非天然氨基酸的方法和组合物
DK1968635T3 (en) * 2005-12-14 2014-12-15 Ambrx Inc Compositions and Methods of, and uses of non-natural amino acids and polypeptides
SG174781A1 (en) * 2006-09-08 2011-10-28 Ambrx Inc Hybrid suppressor trna for vertebrate cells
JP5451390B2 (ja) * 2006-09-08 2014-03-26 アンブルックス，インコーポレイテッド 脊椎動物細胞内におけるサプレッサーｔｒｎａの転写
WO2008030558A2 (en) * 2006-09-08 2008-03-13 Ambrx, Inc. Modified human plasma polypeptide or fc scaffolds and their uses
CA2680227C (en) * 2007-03-07 2021-01-26 Uti Limited Partnership Compositions and methods for the prevention and treatment of autoimmune conditions
ES2385114T3 (es) 2007-03-30 2012-07-18 Ambrx, Inc. Polipéptidos de FGF-21 modificados y sus usos
NZ580686A (en) * 2007-05-02 2012-11-30 Ambrx Inc Modified interferon beta polypeptides and their uses
CA2699394C (en) 2007-09-17 2020-03-24 The Regents Of The University Of California Internalizing human monoclonal antibodies targeting prostate cancer cells in situ
US9139634B2 (en) 2007-09-21 2015-09-22 The Regents Of The University Of California Interferon-antibody fusion proteins demonstrating potent apoptotic and anti-tumor activities
NZ603812A (en) 2007-11-20 2014-06-27 Ambrx Inc Modified insulin polypeptides and their uses
NZ586947A (en) 2008-02-08 2012-11-30 Ambrx Inc Modified leptin polypeptides and their uses
IL198123A0 (en) 2008-04-18 2009-12-24 Snecma Propulsion Solide A heat treatment oven with inductive heating
EP2599793A1 (en) 2008-05-29 2013-06-05 Nuclea Biotechnologies, Inc. Anti-phospho-akt antibodies
CN106928339A (zh) 2008-07-23 2017-07-07 Ambrx 公司 经修饰的牛g‑csf多肽和其用途
CN107022020A (zh) 2008-09-26 2017-08-08 Ambrx公司 修饰的动物促红细胞生成素多肽和其用途
BRPI0919031A2 (pt) * 2008-09-26 2014-09-23 Ambrx Inc Micro-organismos e vacinas dependentes de replicação através do uso de aminoácidos não naturais
CA2751612A1 (en) 2009-02-06 2010-08-12 The Regents Of The University Of California Calcium-binding agents induce hair growth and/or nail growth
EP2805964A1 (en) 2009-12-21 2014-11-26 Ambrx, Inc. Modified bovine somatotropin polypeptides and their uses
MX2012006980A (es) 2009-12-21 2012-07-17 Ambrx Inc Polipeptidos de somatotropina porcina modificados y sus usos.
WO2011133948A2 (en) 2010-04-22 2011-10-27 Longevity Biotech, Inc. Highly active polypeptides and methods of making and using the same
PT2605789T (pt) 2010-08-17 2019-09-03 Ambrx Inc Polipeptidos de relaxina modificados e suas utilizações
US9567386B2 (en) 2010-08-17 2017-02-14 Ambrx, Inc. Therapeutic uses of modified relaxin polypeptides
US11246915B2 (en) 2010-09-15 2022-02-15 Applied Molecular Transport Inc. Cholix toxin-derived fusion molecules for oral delivery of biologically active cargo
AU2011302645B2 (en) 2010-09-15 2015-02-26 Applied Molecular Transport, Llc Systems and methods of delivery of bioactive agents using bacterial toxin-derived transport sequences
AR083006A1 (es) 2010-09-23 2013-01-23 Lilly Co Eli Formulaciones para el factor estimulante de colonias de granulocitos (g-csf) bovino y variantes de las mismas
SG188653A1 (en) 2010-09-29 2013-04-30 Uti Limited Partnership Methods for treating autoimmune disease using biocompatible bioabsorbable nanospheres
US9511151B2 (en) 2010-11-12 2016-12-06 Uti Limited Partnership Compositions and methods for the prevention and treatment of cancer
CN105388287A (zh) 2011-03-11 2016-03-09 内布拉斯加大学董事委员会 冠状动脉疾病的生物标志物
EP2694095B1 (en) 2011-04-05 2018-03-07 Longevity Biotech, Inc. Compositions comprising glucagon analogs and methods of making and using the same
AU2012262560B2 (en) 2011-05-27 2016-06-09 Ambrx, Inc. Compositions containing, methods involving, and uses of non-natural amino acid linked dolastatin derivatives
MX371526B (es) 2011-05-27 2020-01-31 Ambrx Inc Composiciones que contienen, metodos que incluyen, y usos de derivados de dolastatina enlazados a aminoacidos no naturales.
US8980267B2 (en) 2012-03-03 2015-03-17 Immungene Inc Engineered antibody-interferon mutant fusion molecules
US10988516B2 (en) 2012-03-26 2021-04-27 Uti Limited Partnership Methods and compositions for treating inflammation
US10800856B2 (en) 2012-06-07 2020-10-13 Ambrx, Inc. Prostate-specific membrane antigen antibody drug conjugates
CN104619350A (zh) 2012-06-14 2015-05-13 Ambrx公司 结合到核受体配体多肽的抗psma抗体
US10208123B2 (en) 2012-06-19 2019-02-19 Ambrx, Inc. Anti-CD70 antibody drug conjugates
US9603948B2 (en) 2012-10-11 2017-03-28 Uti Limited Partnership Methods and compositions for treating multiple sclerosis and related disorders
WO2014145718A2 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Longevity Biotech, Inc. Peptides comprising non-natural amino acids and methods of making and using the same
US11559580B1 (en) 2013-09-17 2023-01-24 Blaze Bioscience, Inc. Tissue-homing peptide conjugates and methods of use thereof
US10519247B2 (en) 2013-11-01 2019-12-31 Board Of Regents,The University Of Texas System Targeting HER2 and HER3 with bispecific antibodies in cancerous cells
JP2017500285A (ja) 2013-11-04 2017-01-05 ユーティーアイ リミテッド パートナーシップ 持続的免疫療法のための方法および組成物
FR3018526B1 (fr) 2014-03-14 2021-06-11 Herakles Installation de densification cvi comprenant une zone de prechauffage a forte capacite
RU2723178C2 (ru) 2014-05-07 2020-06-09 ЭППЛАЙД МОЛЕКЬЮЛАР ТРАНСПОРТ ЭлЭлСи Слитые молекулы, происходящие от Cholix-токсина, для пероральной доставки биологически активных нагрузок
EP3209316A2 (en) 2014-10-24 2017-08-30 Bristol-Myers Squibb Company Modified fgf-21 polypeptides and uses thereof
BR112017023853A2 (pt) 2015-05-06 2018-07-17 Uti Limited Partnership composições de nanopartícula para terapia sustentada.
JP6931649B2 (ja) 2015-11-03 2021-09-08 アンブルックス, インコーポレイテッドAmbrx, Inc. 新規な抗ｃｄ３抗体およびその使用
ES2975747T3 (es) 2015-11-30 2024-07-12 Univ California Administración de carga útil específica de tumor y activación inmunitaria utilizando un anticuerpo humano que se dirige a un antígeno de superficie celular de tumor altamente específico
US20190161523A1 (en) 2016-04-12 2019-05-30 Blaze Bioscience, Inc. Methods of treatment using chlorotoxin conjugates
WO2017181149A1 (en) 2016-04-15 2017-10-19 Blaze Bioscience, Inc. Methods of treating breast cancer
WO2018089829A1 (en) 2016-11-10 2018-05-17 Fortis Therapeutics, Inc. Cd46-specific effector cells and uses thereof
US11434301B2 (en) 2016-11-11 2022-09-06 The Regents Of The University Of California Anti-CD46 antibodies and methods of use
US20180163270A1 (en) 2016-12-12 2018-06-14 Cepheid Integrated immuno-pcr and nucleic acid analysis in an automated reaction cartridge
EP3565573B1 (en) 2017-01-05 2023-08-23 The Regents of The University of California Pac1 receptor agonists (maxcaps) and uses thereof
US10266578B2 (en) 2017-02-08 2019-04-23 Bristol-Myers Squibb Company Modified relaxin polypeptides comprising a pharmacokinetic enhancer and uses thereof
WO2019173787A1 (en) 2018-03-08 2019-09-12 Applied Molecular Transport Inc. Toxin-derived delivery constructs for oral delivery
HUE059330T2 (hu) 2018-03-08 2022-11-28 Applied Molecular Transport Inc Toxinból származó bejuttatási konstrukciók orális beadásra
HUE068337T2 (hu) 2018-03-29 2024-12-28 Ambrx Inc Humanizált, prosztataspecifikus membránantigén (PSMA) elleni ellenanyag-hatóanyag konjugátumok
JP2021535140A (ja) 2018-08-28 2021-12-16 アンブルックス, インコーポレイテッドAmbrx, Inc. 抗ｃｄ３抗体葉酸生物複合体およびその使用
CN116948006A (zh) 2018-09-11 2023-10-27 北京泰德制药股份有限公司 白介素-2多肽偶联物及其用途
US20220009986A1 (en) 2018-10-19 2022-01-13 Ambrx, Inc. Interleukin-10 polypeptide conjugates, dimers thereof, and their uses
US20220226488A1 (en) 2019-02-12 2022-07-21 Ambrx, Inc. Compositions containing, methods and uses of antibody-tlr agonist conjugates
CA3150859A1 (en) 2019-08-16 2021-02-25 Applied Molecular Transport Inc. Compositions, formulations, and interleukin production and purification
WO2021173889A1 (en) 2020-02-26 2021-09-02 Ambrx, Inc. Uses of anti-cd3 antibody folate bioconjugates
CA3174114A1 (en) 2020-03-11 2021-09-16 Ambrx, Inc. Interleukin-2 polypeptide conjugates and methods of use thereof
JP2023534765A (ja) 2020-08-07 2023-08-10 フォーティス セラピューティクス，インク． 免疫複合体を標的とするｃｄ４６およびその使用方法
TW202227449A (zh) 2020-08-20 2022-07-16 美商Ａｍｂｒｘ 公司 抗體－ｔｌｒ促效劑偶聯物、其方法及用途
CA3213805A1 (en) 2021-04-03 2022-10-06 Feng Tian Anti-her2 antibody-drug conjugates and uses thereof
WO2024077277A1 (en) 2022-10-07 2024-04-11 Ambrx, Inc. Drug linkers and antibody conjugates thereof
WO2024155627A1 (en) 2023-01-16 2024-07-25 Ambrx, Inc. Anti-cd70 antibody-drug conjugates
WO2024178310A1 (en) 2023-02-23 2024-08-29 Ambrx, Inc. Trop2-directed antibody-drug conjugates and uses thereof

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2437213A1 (fr) * 1978-09-28 1980-04-25 Cm Ind Produits cytotoxiques formes par liaison covalente de la chaine a de la ricine avec un anticorps et leur procede de preparation
US4315851A (en) * 1978-12-29 1982-02-16 Kureha Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha Pharmaceutical composition having antitumor activity
JPS5616418A (en) * 1979-07-20 1981-02-17 Teijin Ltd Antitumor protein complex and its preparation
FR2466252A2 (fr) * 1979-10-03 1981-04-10 Clin Midy Nouveaux produits ayant notamment des proprietes anticancereuses a base de chaine a de la ricine et d'une proteine

Also Published As

Publication number Publication date
FR2504010A1 (fr) 1982-10-22
YU83082A (en) 1985-03-20
ES8303918A1 (es) 1983-02-16
KR830009777A (ko) 1983-12-23
CA1195248A (en) 1985-10-15
NO154905C (no) 1987-01-14
FI76693C (fi) 1988-12-12
PT74741B (fr) 1983-11-09
EP0063988A1 (fr) 1982-11-03
US4414148A (en) 1983-11-08
OA07069A (fr) 1984-01-31
KR880001045B1 (ko) 1988-06-18
NO821198L (no) 1982-10-18
EP0063988B1 (fr) 1986-01-29
FI821304L (fi) 1982-10-16
FR2504010B1 (fr) 1985-10-25
AR228394A1 (es) 1983-02-28
IL65441A0 (en) 1982-07-30
PL135800B1 (en) 1985-12-31
DK159277C (da) 1991-02-18
IE820815L (en) 1982-10-15
JPS57179124A (en) 1982-11-04
AU556641B2 (en) 1986-11-13
CZ256482A3 (en) 1994-01-19
PT74741A (fr) 1982-05-01
FI821304A0 (fi) 1982-04-14
DK167482A (da) 1982-10-16
ZA822528B (en) 1983-02-23
IE53009B1 (en) 1988-05-11
MA19429A1 (fr) 1982-12-31
HU188314B (en) 1986-04-28
SU1329604A3 (ru) 1987-08-07
AU8251082A (en) 1983-04-21
PH20846A (en) 1987-05-08
ES511433A0 (es) 1983-02-16
ATE17653T1 (de) 1986-02-15
PL235981A1 (fi) 1982-10-25
NZ200302A (en) 1985-03-20
DE3268752D1 (en) 1986-03-13
NO154905B (no) 1986-10-06
DK159277B (da) 1990-09-24
DD204849A5 (de) 1983-12-14
GR69199B (fi) 1982-05-06
EG15718A (en) 1986-09-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI76693B (fi) Saett att framstaella ett aktivaemne, vilket aer anvaendbart saosom laekemedel vid behandling av melanomer.
US4507234A (en) Conjugate having cytotoxicity and process for the preparation thereof
King et al. Preparation of protein conjugates via intermolecular disulfide bond formation
CA1209472A (en) Anti-cancer drugs for the treatment of leukaemias t constituted by the chain a of ricin and a specific monoclonal antibody
Garnett et al. An improved synthesis of a methotrexate-albumin-791T/36 monoclonal antibody conjugate cytotoxic to human osteogenic sarcoma cell lines
JPS62501449A (ja) Ｐｅｇ修飾抗体及びその製造方法
KR860001149B1 (ko) 면역 글로불린 접합체의 제조방법
JPS59116232A (ja) 細胞毒性複合体及びその製造法
US4794082A (en) Biotinylating agents
US4709037A (en) Biotinylating agents
US4798795A (en) Biotinylating agents
EP0043285B1 (en) Method for determination of valproic acid and reagents therein
KR930003333B1 (ko) 탄수화물 단위가 변형된 리보솜을 비활성화시키는 당단백질 성분을 함유하는 지속-작용성 면역독소의 제조방법
CA1314245C (en) Process for the preparation of conjugates in which a monovalent carboxylic ionophore is associated by means of a covalent bond with a macromolecule, which are useful as immunotoxin potentiators
US4614650A (en) Cytotoxic composition including at least an immunotoxine and an amine
JPH09507841A (ja) プロカインアミドおよびｎａｐａのマレイミド付加物結合体
JPH0625143B2 (ja) イミダゾリド
JPS59134734A (ja) 殺細胞性修飾免疫グロブリン及びその製造方法
RU2181127C2 (ru) Сополимеры n-винилпирролидона, кротоновой кислоты и п-кротоноиламинофенола, содержащие ковалентно присоединенную 3-гидроксиантраниловую кислоту (гаптен), в качестве синтетических антигенов
CN113861264A (zh) 一种抗生物素蛋白修饰方法及其应用方法以及试剂盒

Legal Events

Date Code Title Description
MM Patent lapsed
MM Patent lapsed

Owner name: SANOFI