FI70702B - Foerfarande foer framstaellning av farmaceutiskt aktiva n-substituerade aziridin-2-karboxylsyra-derivat - Google Patents

Description

nrrsrrri r . KUULUTUSJULKAISU

[B] (11) UTLÄGGNINGSSKRIFT 7 0 702 c (45) P: ;i:y jru:; ';ty

P*. tent rr.z "l nt CC 1C 1Q3C

(51) Kv.ik.'/Int.ci.* C 07 D 203/22 (21) Patenttihakemus Patcntansökning 80051 0 (22) Hakemispäivä - Ansökningsdag 20.02.80 (Η) (23) Alkupäivä — Giltighctsdag 2 0.02.80 (41) Tullut julkiseksi — Blivit offentlig 22.08.80

Patentti- ja rekisterihallitus Nähtäväksipanon ja kuul.julkaisun pvm. _ 26.06.86

Patent- och registerstyrelsen ' Ansökan utlagd och utl.skriften publicerad (86) Kv. hakemus Int. ansökan (32)(33)(31) Pyydetty etuoikeus — Begärd prioritet 21.02.79

Saksan 1i i ttotasavalta-Förbundsrepubliken

Tyskland(DE) P 2906603.3 (71) Boehr inger Mannheim GmbH., Mannheim-Wa1dhof , Saksan 1 iittotasavalta-Förbundsrepubl iken Tyskland(OE) (72) Elmar Bosies, Weinheim, Wolfgang Kampe, Heddesheim, Max Thiel, Mannheim, Uwe Bicker, Lorsch, Dietmar Boerner, Lampe r the i m-HCit tenf el d , Saksan 1iittotasavalta-Förbundsrepubliken Tyskland(DE) (7*0 Berggren Oy Ab (5*0 Menetelmä farmaseuttisesti aktiivisten N-substituoitujen atsiridiini--2-karboksyy1ihappojohdannais ten valmistamiseksi - Förfarande för framstäl1 ning av farmaceutiskt aktiva N-substituerade aziridin-2-karb-oxy1syrader i vat

Esillä olevan keksinnön kohteena on menetelmä uusien farmaseuttisesti aktiivisten N-substituoitujen atsiridiini-2-karboksyy-1ihappojohdannaisten valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava

X

\~f N (I)

O-R

jossa X on nitriili- tai karbamoyyliryhmä ja R on tyydytetty C1-Cg-alkyylijäännös, joka voi olla substitu-oitu halogeenilla, hydroksilla, C1-Cg-alkoksikarbonyylillä,

Cg-C10-sykloalkyylillä, fenoksilla tai fenyylillä, joka vuorostaan mahdollisesti on substituoitu yhdellä tai useammalla halogeenilla, trifluorimetyylillä, nitriilillä, C^Cg-alkyy-lillä tai C^-Cg-alkoksilla ; alkenyyli- tai alkynyylijäännös, joka sisältää 3-8 C-atomia, jolloin tyydyttämätön C-atomi ei ole sitoutunut happiatomiin; Cg-C^g-sykloalkyvlijäännös tai tetrahydropyranyyli-, pyridinyylimetyyli-, pyrimidinyylimetyy1i-tai 2-syan-1-atsiridinyyli-oksietvylijäännös, sekä niiden farmakologisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi .

2 70702

Yleisen kaavan I mukaiset yhdisteet voivat sisältää asymmetrisiä hiiliatomeja ja ne voivat esiintyä cis-trans-isomeereina. Keksinnön kohteena on menetelmä kaikkien stereoisomeeristen muotojen sekä niiden seosten valmistamiseksi. Mahdollisesti suoritettava stereoisomeeristen muotojen erotus toteutetaan sinänsä tunnetuilla menetelmillä.

Saksalaisista hakemusjulkaisuista 27 27 550, 26 56 323 ja 27 31 264 tunnetaan immuniteettia stimuloivia atsiridiini- 2-karboksyvlihappojohdannaisia, joiden rengastyppiatomi on asyloitu.

Nyt on yllättäen todettu, että kaavan I mukaisilla atsiridiini- 2-karboksyylihappojohdannaisilla, joissa rengastyppiatomissa on alkoksi-, aryylioksi- tai hetaryylioksi-substituentti, on huomattavasti parempi immuniteetin stimuloimisvaikutus, ja lisäksi näillä yhdisteillä ei ole mainittavia sivuvaikutuksia. Nämä aineet soveltuvat tämän johdosta erinomaisesti erilaisten sairauksien käsittelyyn, jotka liittyvät immuunijärjestelmien heikentymiseen.

Lisäksi on eläinkokeissa todettu, että keksinnön mukaisilla aineilla on tehokkuutta pahanlaatuisia tuumoreita vastaan ja tämän johdosta ne soveltuvat lisäaineiksi pahanlaatuisten kasvaimien immunoterapiaan. Edelleen on todettu, että nämä aineet kykenevät myös pienentämään röntgen-säteiden ja syto-staattisten aineiden myrkyllisyyttä luuytimeen nähden tai kompensoimaan sen osaksi.

Kirjallisuudesta tunnetaan tiettyjä sellaisia yleisen kaavan I mukaisia yhdisteitä, joissa on vety ja X on alkoksikarbon-yyli- tai karbamoyyliryhmä (katso esim. Chem. Abstracts 81, 25 474 t ja 8j), 192 460 z) . Ilmoituksia näiden yhdisteiden farmakologisesta tehokkuudesta ei kuitenkaan esitetä kirjallisuuden näissä kohdissa.

Keksinnön mukaisten yhdisteiden immuniteettia stimuloiva vaikutus voidaan osoittaa:

II

70702 3 1. leukosyyttien määrän kasvun perusteella edellä mainittujen aineiden oraalisen tai intravenööttisen annostelun jälkeen , 2. leukosyyttien muuttumisen kohoamisen perusteella, mitattuna radioaktiivisesti merkityn tymidiinin liittämisen avulla ihmisen lymfosyytteihin, hautomisen jälkeen edellä mainituilla aineilla (vertaa: K. Resch: "Praxis der Immunologie", julkaisija K.O. Vorländer Thieme-Verlag, Stuttqart 1976), ja 3. kokeellisen infektion avulla hiirissä.

Viimemainitussa tutkimuksessa on yllättäen todettu, että yleisen kaavan I mukaisten aineiden 1isäannostelu jonkin tunnetun bakteriostaattisesti vaikuttavan kemoterapeuttisen aineen, esim. kloramfenikolin, lisäksi aikaansaa selvemmän terapeuttisen vaikutuksen kuin annosteltaessa pelkästään tätä bakteriostaattista kemoterapeuttista ainetta.

Näin ollen voidaan muodostaa lääkeaineita, jotka yleisen kaavan I mukaisen yhdisteen ja sopivien kantaja- ja apuaineiden lisäksi sisältävät kemoterapeuttista ainetta, jolloin kemo-terapeuttisilla aineilla ymmärretään kaupan olevia aineita, joilla on mikrobeja tappava vaikutus, kuten penisilliiniä, kefalosporiinia, sulfonamidia, aminoglykosidi-antibiootteja, tetrasykliiniä yms. Synergistinen vaikutus ilmenee selvästi esimerkiksi käytetäessä edellä esitettyä lääkeaineyhdistelmää, joka sisältää yleisen kaavan I mukaisten yhdisteiden ryhmään kuuluvaa immuniteettia stimuloivaa ainetta ja bakteriostaat-tisesti vaikuttavaa kemoterapeuttista ainetta, kloramfeni-kolia .

C^g-alkyyli- tai _g-alkoksijäännökset voivat olla suora-ketjuisia tai haarautuneita ja ne sisältävät edullisesti 1-6 hiiliatomia. Edullisesti käytetään tällöin metyyli-, etyyli-, propyyli-, isopropyy1i-, n-butyyli-, sek.-butyy1i-, tert.-butyyli-, n-pentyyli- ja n-heksyyliryhmiä ja vastaavia alkok-siryhmiä.

Alkenyyli- tai alkyylijäännökset ovat edullisesti vinyyli, allyyli, metyy1iallyyli, krotyyli, 1-metyyliprop-2-enyyli, 4 70702 propargyyli, 2-butinyyli, 1-metyyli-but-2-inyyli tai 3-pentinyy- li.

Sykloalkyyli on edullisesti syklopropyyli, syklopentyy1i tai sykloheksyyli.

Halogeenilla tarkoitetaan edellä olevassa keksinnössä fluoria, klooria tai bromia.

Kaavan 1 mukaiset yhdisteet valmistetaan keksinnön mukaisesti siten, että

a) yhdiste, jolla on yleinen kaava II

Hal2 H-CH - CH - X (II)

Ha ±2 jossa X tarkoittaa samaa kuin edellä ja Hal^ ja Hal2 ovat kloori tai bromi

saatetaan reagoimaan hydroksyyliamiini-johdannaisen kanssa, jolla on yleinen kaava III

r-o-nh2 (III) jossa R tarkoittaa samaa kuin edellä, tai b) yhdiste, jolla on yleinen kaava IVa tai IVb tai tällaisen yhdisteen suola

M M

H-CH-CH-X tai H-CH-CH-X

t I

NH-OR NH

(DR

(IVa) (IVb) joissa R ja X tarkoittavat samaa kuin edellä, ja M on kloori tai bromi tai OH-ryhmä, saatetaan reagoimaan il-H-poislohkaisevan reagenssin kanssa, tai

c) yhdisteessä, jolla on yleinen kaava V

^ COOR

vf

N

O-R

n 5 70702 jossa R tarkoittaa samaa kuin edellä ja on alkyyliryhmä, muutetaan alkoksikarbonyyliryhmä -COOR^ karbamoyy 1 iryhmäks i -CONH^, minkä jälkeen mahdollisesti jollakin edellä esitetyillä menetelmillä saatu yleisen kaavan I mukainen yhdiste, jossa X = karbamoyyli, muutetaan vastaavaksi nitriiliyhdisteeksi, ja mahdollisesti saatu yleisen kaavan I mukainen yhdiste muutetaan farmakologisesti hyväksyttäväksi suolaksi.

Menetelmissä a) ja b) lisätään halogeenivetyä lohkaisevaksi reagenssiksi emäksiä, ennen kaikkea tertiäärisiä amiineja, kuten trietyyliarniinia , trietanoliamiinia , diatsabisykloalkee-nia yms. Tällöin voidaan käyttää alkoholeja, kuten metanolia, etanolia ja butanolia, mutta myös inerttisiä liuottimia, kuten metyleenikloridia, dioksaania, bentseeniä ja tolueenia. Erittäin hyvin voidaan lisätä myös liuottimia, kuten dimetyvli-formamidia tai dimetyylisulfoksidia. Tämän lisäksi voidaan käyttää muutamissa tapauksissa ennen kaikkea alkoholaatteja, kuten natriummetylaattia tai natriumetylaattia , vastaavassa alkoholissa. Edullista on käyttää menetelmässä b), ennen kaikkea kun ryhmä M tarkoittaa OH-ryhmää, vettä lohkaisevana aineena trifenyylifosfiinia hiilitetrakloridin ja trietyyli-amiinin läsnäollessa, jolloin lisätään liuottimeksi tavallisesti metyleenikloridia tai kloroformia. Veden lohkaiseminen voidaan suorittaa kuitenkin myös rikkihappoa käyttäen.

Esteriryhmän muuttaminen amidi-ryhmiksi menetelmässä c) voidaan suorittaa käyttäen kaasumaista ammoniakkia orgaanisessa liuottimessa, edullisesti metanolissa tai etanolissa, tai vesipitoista ammoniakkia lämpötilassa 0-25°C. Haluttu amidi saostuu tai erotetaan reaktioseoksesta esim. patsaskromato-grafiän avulla.

Karbamoyyliryhmän muuttamiseksi nitriiliryhmäksi käytetään kirjallisuudessa tunnettuja dehydrausaineita, jolloin käytetään ennen kaikkea trifenyy1ifosfiinin, hiilitetrakloridin ja trietyyliamiinin muodostamaa seosta. Liuottimena käytetään tavallisesti jotain halogenoitua hiilivetyä, kuten esim. metyleenikloridia tai kloroformia, tai myös asetonitriiliä. Haluttu nitriili erotetaan säännön mukaisesti tislaamalla reaktioseoksesta.

70702

Keksinnön mukaisten yhdisteiden valmistuksessa tarvittavat lähtöaineet ovat tunnettuja aineita tai niitä voidaan valmistaa samalla tavoin kuin tunnettuja yhdisteitä näiden valmistusta kuvaavien menetelmien avulla.

Kaavan IVa mukaisia yhdisteitä voidaan saada esim. liittämällä O-substituoituja hydroksyyliamiini-johdannaisia aktivoituihin, edullisesti bromin avulla aktivoituihin, akryylihaopojohdannaisiin tavanomaisia menetelmiä käyttäen.

Sellaisten farmaseuttisten tuotteiden valmistamiseksi, joilla on immuniteettiä stimuloiva vaikutus, sekoitetaan yleisen kaavan I mukaisia yhdisteitä sinänsä tunnetulla tavalla sopivien farmaseuttisten kantaja-aineiden kanssa ja muodostetaan esim. tableteiksi tai rakeiksi, tai lisäämällä myös vastaavia apuaineita veteen tai öljyyn, kuten esim. oliiviöljyyn, suspen-doidaan tai liuotetaan näihin ja käytetään kapseleihin. Koska vaikuttava aine on hapon suhteen labiili, varustetaan valmisteet vasta alkalisessa ohutsuolen ympäristössä liukenevalla päällysteellä tai sekoitetaan vastaavan kantaja-aineen, kuten esim. korkeamman rasvahapon tai karboksimetyyliselluloosan kanssa. Kiinteitä kantaja-aineita ovat esim. tärkkelys, laktoosi, manniitti, metyy1iselluloosa, talkki, helposti disper-goituvat piihapot, suurimolekyyliset rasvahapot (kuten stearii-nihappo), gelatiini, agar-agar, kaisiumfosfaatti, magnesium-stearaatti, eläin- ja kasvisrasvat ja kiinteät, suurimolekyy-liset polymeerit (kuten polyetyleeniglykoli), ja oraaliseen käyttöön tarkoitetut valmisteet voivat sisältää haluttaessa maku- ja makeutusaineita.

Injektioväliaineena käytetään edullisesti vettä, joka sisältää injektioliuoksissa tavanomaisia lisäaineita, kuten stabi-loimisaineita, liukenemista edistäviä aineita tai heikosti alkalista puskuria. Tällaisia lisäaineita ovat esim. dimetyy-lisulfoksidi, dimetyyliformamidi, N-metyylipyrrolidoni, fosfaatti- ja karbonaattipuskuri, etanoli, kompleksin muodostajat (kuten etyleenidiamiinitetraetikkahappo ja sen ei-myrkyl-liset suolat), suurimolekyyliset polymeerit (kuten juokseva polyetyleenioksidi) viskositeetin säätämistä varten.

n 7 7 O 7 O 2

Sellaisten sairauksien estämiseksi, joihin liittyy immuuni-järjestelmän heikkeneminen, käytetään yleisen kaavan I mukaisia farmakologisesti aktiivisia yhdisteitä 1-600 mg, edullisesti 50-500 mu, suuruisina yksittäisannoksina, jolloin näitä yksittäisannoksia voidaan antaa tarpeen mukaan kerran tai useammin vuorokaudessa.

Lääkeaineyhdistelmissä, joissa käytetään yleisen kaavan I mukaisia yhdisteitä yhdessä jonkin kemoterapeuttisen aineen kanssa, tulevat yleensä kysymykseen samat galeeniset valmisteet kuin edellä mainituissa yksittäisaineissa. Molemmat vaikuttavat aineet, immuniteettia stimuloiva aine sekä kemoterapeutti-nen aine, esiintyvät yleensä näissä valmistusmuodoissa suhteessa 10:1-1:10, jolloin on osoittautunut edulliseksi käyttää kummankin komponentin ekvimolaarisia suhteita.

Eräs sopiva valmiste sisältää esim. 100 mg kloramfenikolia kemoterapeuttisena aineena ja 33,3 mg 2-syan-1-etoksiatsiri-diiniä sekä sopivaa kantaja-ainetta, kuten tärkkelystä, ja valmistetaan 250 mg suuruisten tablettien muodossa, joita nautitaan yleensä kahdesti vuorokaudessa oraalisesti.

Koepöytäkirja

Leukosyyttien määrittäminen käyttäen oraalista yksittäistä annostelua rotille

Koejärjestely: Kokeessa käytettiin naaraspuolisia, täysikasvuisia Sprague-Dawley-rottia WIGA-firmalta (Gassner, Sulzfeld), joiden paino oli 180-200 g. Eläimiä pidettiin vakiolämpötilas-sa (23+1°C), vakioilmankosteudessa (55+5 %) päivä/yö-rytmin ollessa 12 h. Eläimille annettiin SNIFF-rottapellettejä (Inter-mast, Soest) ja vettä ad libitum. Joka kerralla 10 rottaa sai yhdellä kertaa oraalisesti tutkimukseen tarkoitettua ainetta (liuotettuna 10 ml:aan 0,5-prosenttista tyloosiliuosta/ruumiin-painokilo) nielusondin avulla annosteltuna. Vertailua varten käsiteltiin joka kerralla 10 eläintä ainoastaan 10 ml :11a 0,5-prosenttista tyloosi 1iuosta/ruumiinpainokilo. Ennen annostelua eläimiä pidettiin paastolla ja retro-orbitaalisesta laskimo-punoksesta otettiin heparinisoidun pistokapillaarin (B 3095/2, Sherwood Med. Inc. St. Louis) avulla verta ja määritettiin leukosyytit "coulter counter"-laitteella tunnetulla tavalla.

8 70702

Neljäntenä päivänä otettiin eläimistä verta retro-orbitaali-sesta la skimopunok.se s ta ja leukosyytit laskettiin. Yksittäisistä arvoista laskettiin keskiarvo. Koeryhmät arvioitiin ainoastaan silloin, kun vertailuryhmät eivät osoittaneet mitään fysiologisia muutoksia. Taulukossa 1 on esitetty arvot verrattuina 1-karbamoyyli-2-syanatsiridiiniin (BA 1).

Seuraavat arvot osoittavat, että kaikki tutkitut aineet saavat aikaan merkittävän lisäyksen leukosyyttien määrässä ja siten ovat voimakkaasti immunogeenisiä.

Taulukko 1

Annos: 200 mg/kg, per os

Esimerkki n:o Leukosyytit tuhatkertaisina (x 10^) O-arvo Maksimi (+ 4. päivä) 1, 2, 3, 6b 8,04 15,68 la, 6e 7,29 16,53 lb, 6c 9,1 21 ,5 4 7,03 12,45 4a 8,23 12,88 4b 7,16 10,99 4d 6,84 10,84 6 7,48 11,59 6a 5,89 19,29 7a 6,6 12,9 7e 5,6 11,3 7g 6,6 10,3 7 i 6,7 11,4 1-karbamoyyli-2- syanatsiridiini 8,9 9,5 (vertailuaine) BA 1 70702 9 2-syano-1-metoksiatsiridiinin (esimerkki 6a) synergistinen vaikutus kloramfenikolin kanssa

Koejärjestely: Joka kerralla infektoitiin 20 naaraspuolista NMRI-hiirtä E. colilla (108) laimennettuna 1:60 siten, että 0,5 ml infektioliuosta annettiin vatsaontelon sisäisesti g (mikro-organismimäärä = 5,4 x 10 mikro-organismia/eläin). Yhteensä infektoitiin 4 ryhmää. Ensimmäisen ryhmän muodostivat infektioverrokit, toiselle ryhmälle annettiin 20 mg/kg kloramfenikolia oraalisesti, kolmannelle ryhmälle 10 mg/kg 2-syano-1-metoksiatsirid.iinia oraalisesti ja neljännelle ryhmälle 20 mg/kg kloramfenikolia + 10 mg/kg 2-syano-1-metoksi-atsiridiinia. Eläimet kontrolloitiin päivittäin kuolleisuuden suhteen. Kuten taulukosta 2 ilmenee, kuoli infektioverrokki-rvhmässä 4 päivän aikana kaikki eläimet, kun taas kloramfeni-kolilla käsiteltyjen eläinten ryhmässä 13 jäi eloon 20:stä, ja kloramfenikolilla + 2-syano-1-metoksiatsiridiinilla käsitellyssä ryhmässä 19 jäi eloon 20:stä. 2-syano-1-metoksiatsiridiinilla on vain vähäinen vaikutus (2 20:stä jäi eloon). Nämä kuolleisuusluvut (4 vrk:ssa) eivät muuttuneet enää 14 päivän aikana.

Taulukko 2

Henkiinjääneiden määrä 1 päivä 4 päivää 14 päivää Kloramfenikoli 20 mg/kg 13/20 13/20 13/20 2-syano-1-metoksi- atsiridiini 10 mg/kg 2/20 2/20 2/20

Kloramfenikoli (20 mg/kg + 2-(syano-1-metoksiatsiri- 20/20 19/20 19/20 diini (10 mg/kg)

Verrokit 1/20 0/20 0/20

Seuraavissa esimerkeissä kuvataan lähemmin keksinnön mukaisten yhdisteiden valmistusta.

Seuraavissa esimerkeissä kuvattujen yhdisteiden rakenne on varmistettu mikropolttoanalyysin sekä NMR- ja massaspektrien avulla.

10 w . vv. , 70702

Esimerkki 1 2-syan-1-etoksiatsiridiini 2,29 g:aan 2-bromi-3-etoksiaminopropionitriili-hydrokloridia (sp. 97-100°C) 30 ml:ssa tolueenia lisätään 2,98 g trietano-liamiinia ja keitetään palautusjäähdyttäen 5 h. Tolueeni poistetaan sitten pyörivässä haihduttajassa, jäännöstä käsitellään eetterillä, se suodatetaan ja suodos haihdutetaan. Jäännös liuotetaan vähäiseen määrään jääkylmää 2-n suolahappoa, uutetaan kolmasti eetterillä, eetterifaasi pestään neutraaliksi vedellä, kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Jäännös tislataan tämän jälkeen.

Saanto: 0,6 g (= 53 % teor.) 2-syan-1-etoksiatsiridiiniä, kpQ : 38-40°C.

Analogisella tavalla saadaan a) 3-bentsyylioks iamino-2-bromipropionitriili-hydrokloridistä (sp. 128-130°C) 1-bentsyylioksi-2-syanatsiridiini (kpg 113-115°C)

b) 2-bromi-3-isopropoksiaminopropionitriili-hydrokloridistä (sp. 100-104°C) 2-syan-1-isopropoksiatsiridiini (kpQ

28-29°C).

Esimerkki 2 2-syan-1-etoksiatsiridiini 4,7 g:aan 2,3-dibromipropionitriiliä 10 ml:ssa etanolia lisätään tipoittain samalla sekoittaen lämpötilassa 20°C liuos, jossa on 3,3 g trietanoliamiinia 10 ml:ssa etanolia. 1 tunnin kuluttua lisätään tipoittain liuos, jossa on 1 ,8 g O-etyy-lihydroksyyliamiinia 10 ml:ssa etanolia, ja liuos, jossa on 3,3 g trietanoliamiinia 10 mlrssa etanolia samanaikaisesti, ja keitetään 120 h samalla sekoittaen. Jäähdyttämisen jälkeen suoritetaan erotus imusuodattamalla, suodos haihdutetaan, jäännös liuotetaan dietyylieetteriin, ravistetaan kahdesti jääkylmän 2-n suolahapon kanssa, pestään jäävedellä neutraaliksi, kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Jäännös tislataan.

Saanto: 0,44 g (= 17 % teor.) 2-syan-1-etoksiatsiridiiniä, kpQ ^ 38-40°C.

1 1

Esimerkki 3 70702 2-syan-1-etoksiatsiridiini

1,93 g:aan 2-bromi-3-etoksiaminopropionitriiliä (öljymäinen aine) 20 ml:ssa metyleenikloridia lisätään lämpötilassa 0°C

1,52 g diatsabisykloundekeeniä, ja liuoksen annetaan seistä 48 h jäähdytyskaapissa. Tämän jälkeen haihdutetaan,jäännöstä sekoitetaan eetterin kanssa, se suodatetaan ja suodos haihdutetaan. Jäännös liuotetaan pieneen määrään jääkylmää 2-n suolahappoa, uutetaan kolmasti eetterillä, eetterifaasi pestään vedellä neutraaliksi, kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Jäännös tislataan tämän jälkeen.

Saanto: 0,4 g (= 36 % teor.) 2-syan-1-etoksiatsiridiiniä, kpQ 38-40°C.

Esimerkki 4 1-(4-klooribentsyylioksi)-2-syanatsiridiini 4,7 g:aan 2,3-dibromipropionitriiliä 10 ml:ssa etanolia lisätään tipoittain lämpötilassa 20°C samalla sekoittaen liuos, jossa on 3,3 g trietanoliamiinia 10 ml:ssa etanolia. 1 tunnin kuluttua imusuodatetaan, suodokseen lisätään liuos, jossa on 3,46 g 4-klooribentsyylioksiamiinia 20 mlissa etanolia, ja sekoitetaan huoneen lämpötilassa yli yön. Tämän jälkeen haihdutetaan, jäännös liuotetaan 50 ml:aan metyleenikloridia ja siihen lisätään lämpötilassa 0°C 3,34 g diatsabisykloundekeeniä. Liuoksen annetaan seistä 48 h jäähdytyskaapissa, haihdutetaan, jäännös sekoitetaan eetterin kanssa, imusuodatetaan ja suodos haihdutetaan. Jäännös lisätään piigeelipatsaaseen (100 g; elutoimisaine eetteri/ligroiini tilavuussuhde 1/1).

Saatua tuotetta sekoitetaan sitten ligroiinin kanssa ja imu-suodatetaan .

Saanto: 1,69 g (= 37 % teor.) 1 -(4-klooribentsyylioksi)-2-syan-atsiridiiniä, sp. 41-45°C.

Analogisella tavalla saadaan saatettaessa 2,3-dibromipropio-nitriili reagoimaan a) fenetoksiamiinin kanssa 2-syan-1-fenetoksiatsiridiini (öljymäinen aine), b) 2-metoksibentsyylioksiamiinin kanssa 2-syan-1-(2-metyylibentsyylioksi)-atsiridiini (sp. 45-49°C), 12 70702 c) 3,4-dimetoksi-bentsyylioksiamiinin kanssa 2-syan-1-(3,4-dimetoksi-bentsyylioksi)-atsiridiini (sp. 45-48°C), d) 2-fluoribentsyylioksiamiinin kanssa 2-syan-1-(3-fluoribentsyylioksi)-atsiridiini (kp^ 1 38-140°C) .

Esimerkki 5 1 -etoksiatsiridiini-2-karboksiamidi 22 g 1-etoksiatsiridiini-2-karboksyylihappoetyyliesteriä liuotetaan 100 ml:aan etanoli/100 ml väkevää ammoniakkia ja annetaan seistä 3 h huoneen lämpötilassa. Liuos haihdutetaan ja puhdistetaan piigeelipatsaassa (200 g piigeeliä; elutoimisaine asetoni/toluoli tilavuussuhde 1/1). Tuote voidaan kiteyttää uudelleen asetonista.

Saanto: 14,5 g (= 80 % teor.) 1-etoksiatsiridiini-2-karboksi-amidia, sp. 50-54°C.

Analogisella tavalla saadaan a) 1-metoksiatsiridiini-2-karboksyylihappoetyyliesteristä 1-metoksiatsiridiini-2-karboksiamidi, sp. 83-86°C, b) 1-isopropoksiatsiridiini-2-karboksyylihappoetyyliesteristä 1-isopropoksiatsiridiini-2-karboksiamidi, sp. 118-120°C, c) 1-n-butoksiatsiridiini-2-karboksyylihappoetyyliesteristä 1-n-butoksiatsiridiini-2-karboksiamidi, sp. 64-67°C, d) 1-bentsyylioksiatsiridiini-2-karboksyylihappoetyyliesteristä 1-bentsyylioksiatsiridiini-2-karboksiamidi, sp. 87-90°C, e) 1-allyylioksiatsiridiini-2-karboksyylihappoetyyliesteristä 1-allyylioksiatsiridiini-2-karboksiamidi, sp. 57-60°C.

Tässä esimerkissä käytetyt lähtöaineet valmistettiin seuraavasti: 1-etoksiatsiridiini-2-karboksyylihappoetyyliesteri 69,6 g:aan 2,3-dibromipropionihappoetyyliesteriä 140 ml:ssa etanolia lisätään 40 g trietanoliamiinia 40 ml:ssa etanolia.

1 tunnin kuluttua lisätään tipoittain samanaikaisesti liuos, jossa on 16,3 g O-etyylihydroksyyliamiinia 30 ml:ssa etanolia,

II

13 7 0 7 0 2 ja 40 g trietanoliamiinia 80 mlrssa etanolia, ja sekoitetaan 12 h huoneen lämpötilassa. Sakka erotetaan imusuodattamalla ja suodosta kuumennetaan 20 h palautus jäähdyttäen. Sakka imu-suodatetaan jälleen, suodos haihdutetaan ja puhdistetaan pii-geelipatsaassa (100 g piigeeliä; eluutioaine asetoni/toluoli; tilavuussuhde 1/1). Saadaan keltaista öljyä, joka tislataan. Saanto: 25,5 g (= 60 % teor.) 1-etoksiatsiridiini-2-karboksyy1i-happoetyy1iesteriä, kp^ 38-40°C.

Samalla tavoin saadaan 2,3-dibromipropionihappoetyyliesteristä ja a) O-metyylihydroksyyliamiinista 1-metoksiatsiridiini-2-karboksyylihappoetyyliesteri, kp0,2: 42°C, b) O-isopropyylihydroksvyliamiinista 1-isopropoksiatsiridiini-2-karboksyylihappoetyyliesteri, c) O-n-butyylihydroksyyliamiinista 1-n-butoksiatsiridiini-2-karboksyylihappoetyyliesteri d) 0-bentsyylihydroksyyliamiinistä 1-bentsyy1ioksiatsiridiini-2-karboksyylihappoetyyliesteri, e) O-allyylihydroksyyliamiinista 1-allyylioksiatsiridiini-2-karboksyylihappoetyyliesteri.

Esimerkki 6 1-allyylioksi-2-syanatsiridiini

Suspensioon, jossa on 6,9 g 1-allyylioksi-2-atsiridiinikarbok-siamidia (valmistus katso esimerkkiä 5e) 110 ml:ssa metyleeni-kloridia, lisätään samalla sekoittaen huoneen lämpötilassa 25,6 g trifenyylifosfiiniä, 14,8 g hiilitetrakloridia ja 9,8 g tri-etyyliamiinia. Sitten sekoitetaan 20 h, haihdutetaan pyörivässä haihduttajassa, jäännös liuotetaan dietyylieetteriin, suodatetaan, suodos haihdutetaan ja öljymäinen jäännös lisätään pii-geelipatsaaseen (100 g piigeeliä, elutoimisaine aseton.i/toluoli tilavuussuhde 1/1).

Saadaan 2,6 g raakatuotetta, joka tislataan tämän jälkeen. Saanto: 1,9 g (=32 % teor.) 1-allyylioksi-2-syanatsiridiiniä kpQ 58-59°C.

_________ TT“ 70702

Analogisella tavalla saadaan a) 1-metoksiatsiridiini-2-karboksiamidista (katso esimerkkiä 5a) 2-syan-1 -metoksiatsiridiini (kpQ 31-32°C), b) 1-etoksiatsiridiini-2-karboksiamidista (katso esimerkkiä 5) 2-syan-1-etoksiatsiridiini (kpg 38-40°C) , c) 1-isopropoksiatsiridiini-2-karboksiamidista (katso esimerkkiä 5b) 2-svan-1-isopropoksiatsiridiini (kpn 1 : 28-29°C), d) 1-n-butoksiatsiridiini-2-karboksiamidista (katso esimerkkiä 5c) 1-n-butoksi-2-syanatsiridiini (kpn .: 83-84°C), e) 1-bentsyylioksiatsiridiini-2-karboksiamidista (katso esimerkkiä 5d) 1-bentsyylioksi-2-syanatsiridiini (kp^ 113-115°C). Esimerkki 7

Esimerkin 4 mukaisesti saadaan saatettaessa 2,3-dibromipro-pionitriili reagoimaan a) O-(2-bromietyyli)-hyroksyyliamiinin kanssa 1- (2-bromietoksi)-2-syanatsiridiini (öljymäinen aine) b) O-(2-hydroksietvyli)-hydroksyyliamiinin kanssa 2- syan-1-(2-hydroksietoksi)-atsiridiini (öljymäinen aine), c) O-(2-tetrahvdropyranyyli)-hydroksvyliamiinin kanssa 2-syan-1-(2-tetrahydropyranyylioksi)-atsiridiini (öljymäinen aine), 70702 15 d) O-(2-fenoksietyyli)-hydroksyyliamiinin kanssa 2-syan-l-(2-fenoksietoksi)-atsiridiini (öljymäinen aine), e) 1,2-bis-(amiinioksi)-etaanin kanssa 1,2-bis-(2-syan-l-atsiridinyylioksi)-etaani (öljymäinen aine), f) O-(2-metyyli-2-propenyyli)-hydroksyyliamiinin kanssa 2-syan-l-(2-metyyli-2-propenyylioksi)-atsiridiini kpQ 65-67°C , g) O-(3-propynyyli)-hydroksyyliamiinin kanssa 2-syan-l-(3-propynyylioksi)-atsiridiini (Öljymäinen aine), h) O-sykloheksyylihydroksyyliamiinin kanssa 2-syan-l-sykloheksyylioksi-atsiridiini (öljymäinen aine), i) 0-(4-syanbentsyyli)-hydroksyyliamiinin kanssa 2-syan-l-(4-syanbentsyylioksi)-atsiridiini, sp. 48-51°C (ligroiini), k) 0-(2-pyridyylimetyyli)-hydroksyyliamiinin kanssa 2-syan-l-(2-pyridyylimetoksi)-atsiridiini (öljymäinen aine), l) 0-(etoksikarbonyylimetyyli)-hydroksyyliamiinin kanssa 2-syanatsiridin-l-yyli-oksietikkahappoetyyliesteri (öljymäinen aine), m) 0-(4-metyylibentsyyli)-hydroksyyliamiinin kanssa 2-syan-l-(4-metyylibentsyylioksi)-atsiridiini, sp. 20°C, n) 0-(3-aaa-trifluorimetyylibentsyyli)-hydroksyyliamiinin ' kanssa 2-syan-l-(3-aaa-trifluorimetyylibentsyylioksi)-atsiridiini (öljymäinen aine), o) 0-(5-kloori-2-metoksibentsyyli)-hydroksyyliamiinin kanssa 1- (5-kloori-2-metoksibentsyylioksi)-2-syanatsiridiini, sp. 62-64°C, p) 0-(4-metoksibentsyyli)-hydroksyyliamiinin kanssa 2- syan-l-(4-metoksibentsyylioksi)-atsiridiini, sp. 44-46°C, q) 0-(2,4-diklooribentsyyli)-hydroksyyliamiinin kanssa 2-syan-l-(2,4-diklooribentsyylioksi)-atsiridiini, sp.

40-44°C, _____ — I! 16 70702 r) 0-(3,4-diklooribentsyyli)-hydroksyyliamiinin kanssa 2-syan-1- (3,4-diklooribentsvylioksi)-atsiridiini, sp. 48-50°C, s) 0-(pyrimidin-2-yylimetyyli)-hydroksyyliamiinin kanssa 2-syan-1-.(pyrimidin-2-yylimetoksi) -atsiridiini, t) 0-(pyrimidin-4-yylimetyyli)-hydroksyyliamiinin kanssa 2-syan-1-(pyrimidin-4-yylimetoksi)-atsiridiini.

Esimerkki 8

Esimerkin 4 mukaisella tavalla saadaan saatettaessa 2,3-di-bromipropionitriili reagoimaan 0-(3-fluoribentsyyli)-hydroksyyliamiinin kanssa 2-syan-1-(3-fluoribentsyylioksi)-atsiridiini (katso esimerkkiä 4d). Suoritettaessa patsaskromatografinen erottaminen piigeelin avulla (eluutioaine eetteri/ligroiini tilavuussuhde 1/1) voidaan molemmat invertomeerit erottaa, jolloin saadaan a) trans-2-syan-1-(3-fluoribentsyylioksi)-atsiridiini (öljymäinen aine), ja b) cis-2-syan-1-(3-fluoribentsyylioksi)-atsiridiini (öljymäinen aine).

Näitä invertomeerejä saadaan suhteessa 5:1 (trans/cis). NMR-spektrissä saadaan niille yhtäläiset arvot.

Claims (5)

1. 70702 17
2. 1. Menetelmä farmaseuttisesti aktiivisten N-substituoitujen atsiridiini-2-karboksyylihappojohdannaisten valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava X V~7 N (I)
3. 0-R jossa X on nitriili- tai karbamoyyliryhmä ja R on tyydytetty -Cg-alkyylijäännös, joka voi olla substitu-oitu halogeenilla, hydroksilla, -Cg-alkoksikarbonyylillä, Cg-C^o-sykl°alkyylillä, fenoksilla tai fenyylillä, joka vuorostaan mahdollisesti on substituoitu yhdellä tai useammalla halogeenilla, trifluorimetyylillä, nitriilillä, -Cg-alkyylillä tai C.j -Cg-alkoksilla; alkenyyli- tai alkynyyli jäännös , joka sisältää 3-8 C-atomia, jolloin tyydyttämätön C-atomi ei ole sitoutunut happiatomiin; C^-C^g-sykloalkyylijäännös tai tetra-hydropyranyyli-, pyridinyylimetyyli-, pyrimidinvylimetyyli- tai 2-syan-1-atsiridinyyli-oksietyylijäännös, sekä niiden farmakologisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että a) yhdiste, jolla on yleinen kaava II Hai 2 H-CH - CH - X (II) kal2 jossa X tarkoittaa samaa kuin edellä ja Hal^ ja Hal2 ovat kloori tai bromi saatetaan reagoimaan hydroksyyliamiini-johdannaisen kanssa, jolla on yleinen kaava III r-o-nh2 (III) jossa R tarkoittaa samaa kuin edellä, tai b) yhdiste, jolla on yleinen kaava IVa tai IVb tai tällaisen yhdisteen suola M M H-CH-CH-X tai H-CH-CH-X NH-OR NH OR (IVa) (IVb) 70702 18 joissa R ja X tarkoittavat samaa kuin edellä, ja M on kloori tai bromi tai OH-ryhmä, saatetaan reagoimaan M-H-poislohkaisevan reagenssin kanssa, tai c) yhdisteessä, jolla on yleinen kaava V COOR, ,_S 1 Γ7 (v) N ' ' O-R jossa R tarkoittaa samaa kuin edellä ja on alkyyliryhmä, muutetaan alkoksikarbonyyliryhmä -COOR^ karbamoyyliryhmäksi -COUII2, minkä jälkeen mahdollisesti jollakin edellä esitetyillä menetelmillä saatu yleisen kaavan I mukainen yhdiste, jossa X = karbamoyyli, muutetaan vastaavaksi nitriiliyhdisteeksi, ja mahdollisesti saatu yleisen kaavan I mukainen yhdiste muutetaan farmakologisesti hyväksyttäväksi suolaksi.
4. 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 2-syan-1-metoksiatsiridiini, 2-syan-1-etoksiatsiridiini, 2-syan-1-isopropoksiatsiridiini, 1-(2-bromietoksi)-2-syanatsiridiini, 1- allyylioksi-2-syanatsiridiini, 2- syan-1-(3-propynyylioksi)-atsiridiini, 1-bentsyylioksi-2-syanatsiridiini, 1- (4-klooribentsyvlioksi)-2-syanatsiridiini, 2- svan-1-(2-metyylibentsyylioksi)-atsiridiini, 2-syan-1-(3—fluoribentsyylioksi)-atsiridiini, 2-syan-1-(4-syanbentsyylioksi)-atsiridiini, 2-syan-1-fenetoksiatsiridiini tai 1,2-bis-(2-syan-1-atsiridinyylioksi)-etaani. 70702 19
5. 1. Förfarande för framställning av farmaceutiskt aktiva N-substituerade aziridin-2-karboxylsyra-derivat med den allmänna formeln I X ~f (I) N O-R väri X betecknar en nitril- eller en karbamoyl-grupp och R betecknar en mättad -Cg-alkylrest, som kan vara substituerad med halogen, hydroxi, -Cg-alkoxikarbonyl, C^-C^g-cykloalkyl, fenoxi eller fenyl, vilken äter eventuellt är substituerad med en eller flera halogen, trifluormetyl, nitril, C^-Cg-alkyl eller C^-Cg-alkoxi;en alkenyl- eller alkynyl-rest med 3-8 C-atomer, varvid en omättad C-atom icke är bunden vid syreatomen; en Cg-C^g-cykloalkyl- rest eller en tetrahydropvranyl-, pyridinylmetyl-, pyrimidi-nylmetyl- eller 2-cyan-1-aziridinyl-oxietyl-rest, samt deras farmakologiskt acceptabla salter, kännetecknat av att man a) omsätter en förening med den allmänna formeln II Hal2 H-CH - CH - X (II) Hal2 väri X har den ovan angivna betydelsen och Hal^ och Hal2 är klor eller brom, med ett hydroxylaminderivat med den allmänna formeln III r-o-nh2 (III) väri R har den ovan angivna betydelsen, eller b) behandlar en förening med den allmänna formeln IVa eller IVb eller ett sait av en dylik förening M M H-CH-CH-X eller H-CH-CH-X NH-OR NH OR (IVa) (IVb)