FI65777C - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara erolinderivat - Google Patents

Description

rBl m. KUULUTUSJULICAISU / rnnr? fgfc w utlAggn i ngsskmft 657 7 7 C ^-Patentti ayönncLly 10 07 1934 ' latent ccddolat (51) toJkVa.3 t »7 D 457/02 SUOMI —FINLAND (21) Putuwttlhtkumu» —NtuntuMBliiiliig 790351 (22) HAmtopM-AnMalni+t 02.02.79 ' * (23) Alkupllvt—GNtightttdag 02.02.79 (41) Tullut lulkMai — MMt offwtMg 09.08 79

Fatwttl· j· rekisterlhallltiN .... . . ,. ____ . * . , ^ , (44) NlhtivllulpMiM )· kuuUulkslwfu pvm. — e«h reglsterstyrelew ' AmMcmi udugd och utUkrNkun puMcurad 30.03.84 (32)(33)(31) ttuollmw »H»"» prtoHut 08.02.78 USA(US) 875978 (71) Eli Lilly and Company, 307 East McCarty Street, Indianapolis, Indiana, USA(US) (72) Edmund Carl Kornfeld, Indianapolis, Indiana, Nicholas James Bach, Indianapolis, Indiana, USA(US) (74) Oy Koister Ab (54) Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten ergoliini johdannaisten valmistamiseksi - Förfarande för framstälIning av terapeutiskt användbara ergolinderivat

Keksintö koskee menetelmää uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten kaavan I mukaisten ergoliinijohdannaisten ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmistamiseksi, ch2-y-ch3 /\/Q*-r1 [ T s

VV

HN-D-X

jossa kaavassa Rx on etyyli, n-propyyli tai allyyli, Y on O, S tai S(>2, X on vety, kloori tai bromi ja katkoviiva tarkoittaa mahdollista sidosta.

2 65777

Ergoliini-rengasjärjestelmään perustuvilla yhdistellä: /β\ H v 9 7

,\° 5n-h ' V

13 I 11 5 \

1 2 I

h-n ___rJ

on hämmästyttävän monenlaista farmaseuttista aktiivisuutta. Esim. monilla lysergiinihapon, 8 /3-karboksi-6-metyyli-9-ergoleenin, amideilla on arvokkaita ja ainutlaatuisia farmaseuttisia ominaisuuksia. Tavallisesti nimitetään "ergoliiniksi" ylläesitettyä rakennetta ja lysergiini-hapolle läheistä yhdistettä, jossa 9,10-asemas-sa on kaksoissidos, nimitetään 9-ergoleeniksi mieluummin kuin 9,10-didehyrdoergoliiniksi. Nimeä D-ergoliini tai D-8-ergoleeni tai D-9-ergoleeni käytetään nimettäessä tiettyjä yhdisteitä, "D"-kirjain ilmaisee, että C-5-hiiliatomeilla on R:ksi nimitetty absoluuttinen ste-reokemia ja että vety on — ja sijaitsee rengas järjestelmä tason yläpuolella. Kuitenkin uusi käytäntö pyrkii poistamaan "D”:n käytön, sillä perusteella että äskettäin syntetisoidut ergoliinit ja ergo-leenit ovat poikkeuksetta luonnontuotteiden, kuten lysergiinihapon tai elymoklaviinin johdannaisia, joilla kaikilla on R-stereokemial- linen ---"D"-sarjan --- konfiguraation ja joissa sterokemiallinen kokonaisuus C-5-asemassa on säilytetty. Nyt kuvatuilla ergoliini-ja ergoleenijohdannaisilla on R-stereokemiallinen konfiguraatio, riippumatta siitä, edeltääkö yhdisteen nimeä D-kirjan vai ei. Näihin farmakologisesti aktiivisiin lysergiinihapon amideihin kuuluu luonnossa esiintyviä oksitosiinisia alkaloideja, kuten erkorniini, ergokryptiini, ergonoviini, ergokristiini, ergosiini, ergotamiini-ja synteettisiä oksitosiinisia aineita kuten metergiini sekä synteettisiä hallusinogeeneja - lysergiinihappodietyyliamidi eli LSD.

6-metyyli-8-karboksiergoliinin amidit, yleiseltä nimeltään dihydra-ergot-alkaloideina tunnetut yhdisteet, ovat oksitosiinisia aineita, jotka eivät ole yhtä tehokkaita eivätkä myöskään yhtä toksisia kuin itse ergot-alkaloidit. Clemens, Semonsky, Meites ja heidän työtoverinsa ovat havainneet, että monilla ergot-sukuisilla lääkkeillä on 3 65777 prolaktiinia inhiboiva vaikutus. Ergokorniini, dihydroergokornii-ni, 2-bromi-<*-ergokryptiini ja D-6-metyyli-3-syanometyyliergolii-ni ovat esimerkkejä sellaisista lääkkeistä. Mm. seuraavat kirjallisuusviitteet sisältävät joitakin uudempia tuloksia ergoliinike-mian alalta: Nagasawa ja Meites, Proc. Soc. Exp't'l. Biol. Med., 135, 469 (1970); Lutterbeck et ai., Brit. Med. J. 228, (heinäk. 24, 1971): Heuson et ai., Europ. J. Cancer, 353 (1970); Coll. Czech. Chem. Commun., 33, 577 (1968); Nature, 221, 666 (1969); Seda et ai., J. Reprod. Fert., 24, 263 (1971); Mantle and Finn, id, 441; Semonsky ja työtoverit Coll. Czech. Chem. Comm., 36, 2200 (1971); Schaar ja Clemens, Endocr., 90, 285-8(1972); Clemens ja Schaar, Proc. Soc.

Exp. Biol. Med., 139, 659-662 (1972), Back ja Kornfeld, Tetrahedron Letters, 3225 (1974) ja Sweeney, Clemens, Kornfeld ja Poore, 64th Annual Meeting, American Association for Cancer Research, huhtik. 1973. Ergoliinien tai lysergiinihapon johdannaisia koskevia patenttijulkaisuja ovat US-patentti 3 923 812, US-patentti 3 929 796, US-patentti 3 944 582, US-patentti 3 934 772, US-patentti 3 954 988, US-patentti 3 957 785, US-patentti 3 959 288, US-patentti 3 966 739, US-patentti 3 968 111 ja US-patentti 4 001 242.

Parkinsonin tautia, joka tunnetaan myös halvausvapinana tai täristyshalvauksena, kuvattiin ensimmäisen kerran 18. vuosisadan loppupuolella. Sille on ominaista vapina, lihasjännitys ja asento-heijasteiden häviäminen. Tauti kehittyy tavallisesti hitaasti, 10-20 vuoden kuluessa, ennenkuin oireet aiheuttavat kykenemättömyyttä. Nimityksiin "Parkinsonismi" ja "Parkinsonin oireyhtymä" sisältyy Parkinsonin taudin lisäksi myös lääkkeen aikaansaama täristyshal-vaus sekä aivotulehduksen jälkitilana oleva täristyshalvaus. Täris-tyshalvauksen hoito on oireenmukaista, tukevaa tai lievittävää. Parkinsonin tautia on hoidettu erilaisilla sympaattikusta kiihdyttävillä aineilla, joista on suurempi hyöty jäykkyyteen ja liikuntakyvyt tömyy teen nähden kuin vapinan suhteen. Aivan äskettäin on käytetty 1-dopaa (1-dihydroksifenyylialaniinia), koska on havaittu, että täristyshalvausta potevien potilaiden aivojen katekoliamiini-sisältö on muuttunut. Ikävä kyllä, 1-dopa metaboloituu nopeasti.

On ehdotettu sen tähden, että käytetään monoamiiniolesidaasi-inhi-biittoreita hidastamaan aivojen katekoliamiinien hajoamista. 1-do-pan käytön tarkoituksena dekarboksylaasi-inhibiittorin kanssa oli lisätä aivojen 1-dopan tasoa ja täten lievittää Parkinsonin taudin 4 65777 oireita. On myös esitetty (Corrodi ja työtoverit), että tietyt ergotjohdannaiset, kuten luonnossa esiintyvä alkaloidi, ergokor-niini, ovat suoria dopamiinin reseptorin pitkävaikutteisia kiihokkeita ja sen tähden niillä saattaa olla arvoa Parkinsonin taudin hoidossa /katso J. Pharm. Pharmac., 25, 409(1973)J.Johnson et. ai, Experientiässä, 29, 763(1973) pohtivat Corrodin et. ai, todistetta siitä, että ergokorniini ja 2-bromi- tf'-ergokryptiini stimuloi do-pamiini-reseptoreita, ja ulottavat havaintonsa muihin ergotalkaloi-deihin. Trever W. Stone, julkaisussa Brain Research, 72, 1977 (1974), varmisti yllä esitetyt kokeet ja tuotti edelleen todisteen siitä, että ergot-alkaloideilla on dopamiinireseptoria stimuloivaa aktiivisuutta.

Pääosa kemiallisesta muunnostyöstä, jota on suoritettu ergot-alkaloidien piirissä, liittyy lysergiinihapon synteettisten amidien valmistukseen, joilla on joitakin, mutta ei kaikkia yhden tai useamman luonnossa esiintyvän alkaloidin ominaisuuksista. Samassa määrin kuin uudempi tutkimustyö on keskittynyt löytämään prolaktiini-inku-biittoreita, joilla ei ole CNS-vaikutuksia, kemiallinen mielenkiinto on kohdistunut ergoliini-rengasjärjestelmän 8-aseman johdannaisten valmistamiseen. On kuitenkin olemassa useita julkaisuja, jotka kuvaavat ergoliinin 6-metyyliryhmän korvaamista muilla ryhmillä, erityisesti korkeammilla alkyyli-ryhmillä. Fehr, Stadler ja Hoffman, Helv. Chim. Acta, 53, 2197 (1970) antoivat lysergiinihapon ja di-hydrolysergiinihapon metyyliestereiden reagoida syaanibromidin kanssa. Muodostuvan 6-syanojohdannaisen käsittely sinkkipölyllä ja etik-kahapolla tuotti vastaavan 6-nor-johdannaisen, jonka alkylointi, etyylijodidilla esim. tuotti 6-nor-6-etyllysergiinihapon metyyli-esterin ja vastaavan isolysergiinihapon esterin. Valmistettiin myös 6-etyyli-8 p> -metoksikarbonyyliergoliini(metyylilysergaatin 6-etyy-li-9,10-dihydro-johdannainen). Kummallakaan näistä uusista johdannaisista ei ollut käyttöä. Bernardi et ai., Il Farmaco-Ed. Sei., 30, 789 (1975), valmistivat alfa-salpaajan nikergoliinin useita analogeja. Lähtöaineisiin sisältyi sellaisia yhdisteitä kuten 1-metyyli-6-etyyli (allyyli, syklopropyylimetyyli)8 /i-hydroksimetyy-li-10 -metoksiergoliini. Nämä lähtöaineet muutettiin vuorostaan vastaaviksi 10 c*-metoksi-8ft -(5-brominikotinyylimetyyli)-johdannaisiksi. Eräässä uudessa julkaisussa Krepelka, Army, Kotva ja Semonsky, 5 65777

Coll. Czech. Chem. Commun, 42, 1209 (1977) valmistivat 8-/*-syano-metyyliergoliinin ja 8β -metyyliergoliinin (6-norfestuklaviinin) 6-alkyyli-analogeja mm. 6-etyyli-, 6-n-propyyli-, 6-isopropyyli-, 6-n-butyyli-, 6-isobutyyli- ja 6-n-heptyyli-johdannaiset. Nämä yhdisteet lisäsivät rotilla maidoneritystä estäviä ja hedelmöitetyn munasolun kohdun limakalvon tapahtuvaa uppoutumista estäviä vaikutuksia yhtä paljon kuin vastaavat 6-metyylijohdannaiset. Julkaisijoiden mukaan biologisen kokeen yksityiskohtien piti pian ilmestyä. Cassady ja Floss, Lloydia, 40, 90 (1977), tiedottivat ely-moklaviinin (6-metyyli-8-hydroksimetyyli-8-ergoleenia) 6-alkyyli-johdannaisten valmistamisesta. Heidän julkaisemiensa tietojen mukaan prolaktiinia inhiboivat vaikutukset lisääntyivät, kun N-6:ssa sijaitsevan alkyyliryhmän koko suurennettiin metyylistä propyylik-si, mutta vähenivät butyylisubstituentin ollessa kysymyksessä. Niwaguchi et ai., J. Pharm. Soc. (Japan) (Yakugaku Zasshi) 96, 673, (1976) valmistivat 6-norlysergiinihapon dietyyliamidin ja uudelleen alkyloivat tämän välituotteen valmistaakseen vastaavat LSD:n 6-al-lyyli-, 6-etyyli- ja 6-n-propyyli-johdannaiset. Niiden farmakologiaa Hashimoto et ai. ovat pohtineet julkaisussa Europ J. Pharm., 45, 341 (1977).

US-patentti 3 920 664 koskee D-2-halogeeni-6-alkyyli (metyyli, etyyli, n-propyyli)-8Ji-syanometyyliergoliineja, jotka on valmistettu poistamalla metyyli-ryhmä vastaavasta 6-metyyli-yhdistees-tä ja uudelleen alkyloimalla se Fehr et al.:n (supra) esittämällä menetelmällä. US-patentti 3 901 894 koskee 6-metyyli-8β -metyyli-markaptometyyliergoliineja, jotka on valinnaisesti substituoitu C-2:ssa kloorilla tai bromilla. US-patentti 3 959 288 koskee analogisia 8-metoksimetyyli-yhdisteitä.

Useimmat yllämainituista ergoliineista tai ergoleeneista ovat prolaktiinin inhibiittoreita. Jotkut näistä yhdisteistä ovat osittautuneet myös käyttökelpoisiksi hoidettaessa täristyshalvaus-ta; esim.01 -bromiergokryptiini (bromikriptiini)- Brit. J. Chin. Pharm. 3, 571 (1976), Brit Med. J. 4, (1974), sivu 442 ja lergot-riili, Neurology, 25, 459 (1975).

Nyt kuvatut kaavan I mukaiset ergo1iinijohdannaiset soveltuvat täristyshalvauksen hoitoon ja ovat erittäin voimakkaita pro-laktiini-inhibiittoreita. Kaavan I mukaisia ergoliinijohdannaisia 65777 ja niiden happoadditiosuoloja voidaan valmistaa siten, että yhdiste, jonka kaava on ch2q 1 “-K2 11

/yV

HN -ίχ jossa Q on poistuva ryhmä 2 R on vety, etyyli, n-propyyli tai allyyli, ja X ja katkoviiva tarkoittavat samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan missä tahansa järjestyksessä 2 (A) alkylointiaineen kanssa, kun R on vety, (B) 8-asemassa, korvaavan aineen kanssa, jonka kaava on

r3-y-ch3 III

jossa Y tarkoittaa samaa kuin edellä ja 3 R on alkalimetalli tai kvatemäärinen ammoniumradikaali, (C) halogenointiaineen kanssa, kun X on vety, ja 2 (D) hydrogenointiaineen kanssa, kun R on allyyli ja/tai 8 ö Δ - tai Δ -sidos on läsnä.

Kaavan I mukaisia yhdisteitä, joissa Y merkitsee SO:a, voidaan valmistaa hapettamalla vastaava yhdiste, jossa Y on S. Sopivia hapettavia aineita ovat perhapot, kuten m-klooribentsoehappo tai perjodaatti.

Farmaseuttisesti hyväksyttäviä, kaavan I mukaisia happoadditiosuoloja ovat seuraavista epäorgaanisista hapoista johdetut suolat: suola-, typpi-, fosfori-, rikki-, bromivety- ja jodivetyhapos-ta, typpihapokkeesta sekä fosforihaposta johdetut suolat sekä suolat, jotka on johdettu myrkyttömistä orgaanisista hapoista, kuten esim. alifaattisista mono- ja dikarboksyylihapoista, fenyylillä substituoiduista aikaani-, hydroksialkaani- ja alkaanidihapoista, aromaattisista hapoista, alifaattisista ja aromaattisista sulfoni-hapoista. Sellaisiin farmaseuttisesti hyväksyttäviin suoloihin kuuluu täten sulfaatti, pyrosulfaatti, bisulfaatti, sulfiitti, bisul- » 7 65777 fiitti, nitraatti, fosfaatti, monovetyfosfaatti, divetyfosfaatti, metafosfaatti, pyrofosfaatti, koloridi, bromidi, jodidi, fluoridi, asetaatti, propionaatti, dekanoaatti, kaprylaatti, akrylaatti, formaatti, isobutyraatti, kapraatti, heptamoaatti, propiolaatti, oksa-laatti, malonaatti, sukkinaatti, suberaatti, sebakaatti, fumaraatti, maleaatti, mantelihapon suola, butyyni-l,4-dioaatti, heksyyni-1,6-dioaatti, bentsoaatti, klooribentsoaatti, metyylibentsoaatti, dinit-robentsoaatti, hydroksibentsoaatti, metoksibentsoaatti, ftalaatti, tereftalaatti, bentseenisulfonaatti, tolueenisulfonaatti, klooribent-seenisulfonaatti, kysleenisulfonaatti, fenyyliasetaatti, fenyylipro-pionaatti, fenyylibutyraatti, sitraatti, laktaatti, ^-hydroksibuty-raatti, glykollaatti, malaatti, tartraatti, metaanisulfonaatti, pro-paanisulfonaatti, naftaleeni-l-sulfonaatti ja naftaleeni-2-sulfonaat-ti.

Ylläesitetyssä kaavassa II Q on poistuva ryhmä. Tämä lohkeava ryhmä aiheuttaa kationin muodostumisen asemassa 8, jolloin muodostuneet kationit reagoivat kaavan III mukaisen reagenssin kanssa. Sopivia poistuvia ryhmiä ovat esimerkiksi kloori-, bromi- tai jodi-atomi tai sulfonaattiesteri, kuten metyyli-, etyyli-, propvyli-, fenyyli-, bentsyyli- tai tolyylisulfonaattiesteri.

3

Ylläesitetyssä kaavassa III R merkitsee aikalimeta11ia ku- 3 ten natriumia tai kaliumia ja edullisesti natriumia. R voi myös olla kvaternäärinen steerisesti tilaa vievä ammoniumradikaali, kuten N,N,N-trimetyyli-N-bentsyyliammonium-, tetrabutyyliammonium- tai N,N,N-trietyyli-N-oktadekyyliammonium- ja edullisesti Ν,Ν,Ν-trime- 3 tyyli-N-bentsyyliammoniummetylaatti. R -ryhmä voi muodostua kationin kaikissa tapauksissa.

Ylläesitetyssä menetelmässä vaiheessa A käytettyjä alkyloin-tiaineita ovat esim. etyyli-, n-propyyli- tai alkyylihalogenidit. Sopivia inerttejä liuottimia ovat polaariset orgaaniset liuottimet kuten DMA, DMF, asetonitriili tai nitrometaani. Reaktio suoritetaan lämpötila-alueella 20-50°C. Sopivat emäkset, joita voi olla reaktio-seoksessa happoja poistavina lisäaineina, ovat mm. liukenemattomat orgaaniset emäkset kuten natriumkarbonaatti, kaliumkarbonaatti, natriumbikarbonaatti ja natriumhydroksidi sekä liukoiset emäkset, kuten tertiääriset amiinit, erityisesti aromaattiset tertiääriset amiinit kuten pyridiini.

8 65777

Ylläesitetyn menetellään B-vaiheessa käytettyjä/ sopivia liuottimia, kaavan I mukaisia yhdisteitä valmistettaessa, ovat orgaaniset liuottimet, kuten dimetyyliformamidi (DMF), dimetyy-liasetamidi (DMA), dimetyylisulfoksidi (DMSO) tai alkanolit kuten metanoli. Reaktio suoritetaan lämpötilassa, joka voi olla huoneen lämpötilasta palautusjäähdytyslämpötllaan.

Sopiviin halogenointi-aineisiin, joita voidaan käyttää ylläesitetyn vaiheen C mukaisessa valmistustavassa, kuuluvat N-kloo-risukkinamidi, N-klooriasetanilidi, N-klooriftalimidi, N-kloori-klooriftalimidi, 1-kloooribentsotriatsoli, N-kloori-2,6-dikloori- 4-nitro-asetanilidi, N-kloori-2,4,6-triklooriasetanilidi ja sul-furyylikloridi. Viimeksi mainittua käytetään joko yksinään tai booritrifluorieteraatin kanssa.

N-bromisukkinimidillä suoritettavaan halogenointireaktioon sopiva liuotin on dioksaani. N-kloorisuWclnimidin ja useimpien muiden positiivisten halogeeniyhdisteiden kanssa käytetään DMF:a, mutta SC^CI^n kanssa käytetään esim. CH2Cl2:a, CH^NC^za tai CH^CNza. Reaktio suoritetaan tavallisesti huoneen lämpötilassa.

6-allyyli-ryhmä voidaan hydrogenoida 6-n-propyyli-ryhmäksi normaaleilla hydrogenointimenetelmillä, kuten katalyyttisellä hyd-rogenoinnilla, esim. Pd/C:n avulla. Tämä on esitetty edellä kuvatun menetelmän vaiheessa D.

O Q

Kuten on esitetty vaiheessa D, Δ - tai Δ -asemassa sijaitseva valinnainen kaksoissidos voidaan pelkistää hydrogenoida vastaavan tyydytetyn yhdisteen saamiseksi missä tahansa reaktiosar-jan vaiheessa, viimeinen vaihe mukaanluettuna. Sopivia hydrogenoin-tiaineita ovat esim. Pt- tai Pd-katalyyttiset aineet. Tämän pelkistyksen jälkeen muodostuneet yhdisteet ovat 8/^-yhdisteitä.

Vaiheet A, B, C ja D voidaan suorittaa missä tahansa järjestyksessä. Täten mikä tahansa näistä vaiheista voi olla reaktiosar-jan viimeinen vaihe.

Kaavan I piiriin kuuluvia yhdisteitä ovat esimerkiksi seu-raavat yhdisteet: D-6-etyyli-8 /3-metyylimerkaptometyyliergoliinimaleaatti D-2-kloori-6-n-propyyli-8 /3-metoksimetyyliergoliinisukki- naatti D-6-allyyli-8 /^-metyylimerkaptometyyliergoliinihydrokloridi D-2-bromi-6-allyyli-8 fi-metoksimetyyliergoliinitartraatti 9 65777 D-6-n-propyyli-8 f> -metyylimerkaptometyyli-9-ergoleenihydro- bromidi D-6-n-propyyli-8-metoksimetyyli-8-ergoleenimelaatti D-2-kloori-6-allyyli-8 y2>-metoksimetyyli-9-ergoleenibentso- aatti D-2-bromi-6-etyyli-8-metyylimerkaptometyyli-8-ergoleeni- fosfaatti D-6-n-propyyli-8 fb -metyylisulfonyylimetyyli-9-ergoleenima- aatti.

Edullisena pidetyn ryhmän muodostavat kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa R^ on n-propyyli, Y on S ja X ja katkoviiva tarkoittavat samaa kuin edellä. Erityisen edullisena pidetyn ryhmän muodostavat yhdisteet, joissa R1 on n-propyyli, Y on S, X on H ja katkoviiva tarkoittaa samaa kuin edellä. Erään toisen edullisena pidetyn yhdisteiden ryhmän muodostavat C-8:ssa rikkiä sisältävät yhdisteet, esim. yhdisteet, joissa Y on S tai SOj ja joissa R' on n-propyyli ja katkoviiva tarkoittaa sidosta.

Kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa eri tavoin monista eri lähtöaineista, joista valmistus etenee kaavan II mukaisten yhdisteiden kautta. Yksi helposti saatava lähtöaine on lysergiinihappo (D-6-metyyli-8/T>-karboksi-9-ergoleeni) , jota on tuotettu valittujen Claviceps-lajien käymisen avulla. C-8:ssa sijaitsevassa karboksyyliryhmässä tapahtuva esteröinti ja täten muodostuneen esteri-ryhmän pelkistäminen tuottaa 8-hydroksimetyyli-ryhmän. Tämä sama yhdiste voi olla tuotettu elymoklaviinistä, toisesta lähtöaineesta, joka on saatavissa US-patentin 3 709 891 mukaisen käymismenetelmän avulla.

Kummastakin lähtöaineesta tuotetun D-6-metyyli-8p> -hydroksi-metyyli-9-ergoleenin 6-metyyli-ryhmä voidaan poistaa ja korvata etyyli-, allyyli- tai n-propyyli-ryhmällä US-patentin 3 920 664 esimerkissä 8 esitetyn menetelmän mukaisesti.

Tämän menetelmän mukaan syaanibromidi yksinään tai edullisesti inertissä liuottimessa reagoi esim. D-6-metyyli-8/^-hydroksi-metyyli-9-ergoleenin kanssa tuottaen vastaavan 6-syaanijohdannaisen. Tälle reaktiolle soveltuviin inertteihin liuottimiin kuuluvat klooratut hiilivedyt kuten kloroformi, metyleenidikloridi, hiilitetra-kloridi ja etyleenidikloridi, aromaattiset hiilivedyt, bentseeni, tolueeni tai ksyleeni mukaanluettuina; polaariset liuottimet kuten 65777 10 DMA, DMF ja DMSQ. Reaktiolämpötila ei ole kriittinen, ja voidaan käyttää lämpötiloja, jotka ovat ympäristön lämpötilasta aina liuottimen kiehumapisteeseen saakka. Syanidi-ryhmä poistetaan helposti pelkistämällä se etikkahapossa sinkkipölyllä, jolloin muodostuu sekundäärinen amiini-ryhmä N-6:een, jonka jälkeen amiini voidaan alkyloida esim. etyylijodidilla emäksen läsnäollessa D-6-etyyli-8>-hydroksimetyyli-9-ergoleenin tuottamiseksi. Sinkki-etikkahapon loh-keamisreaktio voidaan suorittaa myös happamen tai emäksisen hydro-lyysin avulla. Lisäksi voidaan käyttää muita pelkistäviä aineita sinkin ja etikkahapon tilalla kuten Raney-nikkeliä ja vetyä. Vaihtoehtoisesti voidaan N-metyyli-ryhmä poistaa 9-ergoleenista, siten että se reagoi kloroformaatin, kuten metyyliklooriformaatin, fenyy-liklooriformaatin, bentsyyliklooriformaatin ja trikloorietyylikloori-formaatin kanssa, jolloin muodostuu karbamaattivälituote, joka voidaan pilkkoa halutun 6-nor-sekundäärisen amiinin saamiseksi. Sekundäärisen amiinin alkylointi esim. etyyli-, n-propyyli- tai allyyl-lihalogenidilla tai tosylaatilla suoritetaan inertissä liuottimessa, mieluummin polaarisessa, orgaanisessa liuottimessa, kuten DMA:ssa, DMFissa, asetonitriilissä tai nitrometaanissa 20-50°C:n lämpötila-alueella. Sopiviin emäksiin, joita voi olla reaktioseoksessa hapon neutraloimiseksi, kuuluu liukenemattomia epäorgaanisia emäksiä kuten natriumkarbonaatti, kaliumkarbonaatti, natriumbikarbonaatti ja natriumhydroksidi sekä liukoisia emäksiä, kuten tertiääriset amiinit, erityisesti aromaattiset tertiääriset amiinit kuten pyridiini. Seuraavaksi C-8:ssa sijaitseva hydroksimetyyliryhmä esteröidään helposti korvattavissa olevalla ryhmällä, kuten p-tolueenisulfonyyliok-si-ryhmällä tai metaanisulfonyylioksi-ryhmällä (p-tosyyli- tai mesyy-li-johdannaisilla). Esteröintireaktiossa käytetään hyväksi hapanta halogenidia tai anhydridiä, esim. mesyylikloridia tai p-tosyylibro-midia. Reaktio suoritetaan edullisesti aromaattisessa tert.-amiini-liuottimessa kuten kollidiinissa, pyridiinissä tai pikoliinissa. Reaktiolämpötila on 20-50°C:n alueella. Tämä esteriryhmä voidaan puolestaan korvata metyylimerkapto-ryhmällä US-patentin 3 901 894, esimerkissä 2 esitetyn menetelmän mukaisesti. Samoin mesyylioksi- tai p-tosyylioksi-ryhmä voidaan korvata metoksiryhmällä metanolin emäs-liuoksen kanssa suoritettavan reaktion avulla tai metyylisulfonyy-liryhmällä natriummetaanisulfinaatin kanssa tapahtuvan reaktion avulla. Tämä korvausreaktio voidaan suorittaa muodostamalla natrium-suola, 11 65777 esim. natriummetyylimerkaptidi, siten# että käytetään emästä kuten NaH:a, KH:a, natriummetoksidia tai natriumetoksidia. Käytetään inert-tiä polaarista liuotinta kuten DMA:a, DMF:a tai DMSO:a. Reaktioseos kuumennetaan tavallisesti 50-100°C:n lämpötila-alueelle. Mesyylioksi-tai p-tosyylioksi-ryhmä korvataan tavallisesti metanolin avulla kva-temäärisen ammonium-emäksen läsnäollessa.

Ylläesitetty reaktiosarja esittää alkyloinnin tapahtuvan 6-asemassa ennen 8-asemassa tapahtuvaa lopullista korvausreaktiota. On myös mahdollista muuttaa näiden kahden vaiheen järjestystä, nimittäin korvata 8-asemassa sijaitseva ryhmä ennenkuin suoritetaan alkylointi 6-asemassa.

9-ergoleenit, joissa on 8-metyylisulfinyylimetyyliryhmä ja jotka voivat olla välituotteita, kun valmistetaan kaavan I mukaisia 8-metyylisulfonyylimetyyli-yhdisteitä, valmistetaan vastaavasta 8-metyylimerkaptometyyliyhdisteestä perjodaatin tai samanlaisen hapet-timen, esim. perhappojen kuten perbentsoehapon tai peretikkahapon kanssa suoritettavalla reaktiolla ympäristön lämpötilassa. Tavallisesti käytetään 9-ergoleenin vesiliukoista suolaa, ja vesi on reaktion liuotin neutraaleissa tai happamissa olosuhteissa.

Nämä, täten valmistetut 6-n-propyyli-(etyyli- tai allyyli-), metyylisulfonyyli- tai metyylimerkaptometyyli-9-ergoleenit ovat kaavan I piiriin kuuluvia yhdisteitä. Näiden yhdisteiden C-2:een voidaan puolestaan liittää klooria tai bromia US-patentin 3 920 664 mukaisella menetelmällä, jolloin saadaan kaavan I mukaisia yhdisteitä, 1 a 9 joissa R on Cl tai Br ja joissa on Δ -kaksoissidos. Halogenointi-aineita, joita voidaan käyttää tässä menetelmässä ovat N-kloorisuk-kinimidi, N-klooriasetanilidi, N-klooriftaali-imidi, N-klooritetra-klooriftaali-imidi, 1-klooribentsotriatsoli, N-kloori-2,6-dikloori- 4-nitroasetanilidi, N-kloori-2,4,6-triklooriasetanilidi ja sulfu-ryylikloridi, jolloin viimeksi mainittua reagenssia käytetään yksinään tai booritrifluoridieteraatin kanssa. N-bromisukkinimidillä suoritettavassa halogenointireaktiossa käyttökelpoinen liuotin on dioksaani. N-kloorisukkinimidin ja useimpien muiden positiivisten halogeeni-yhdisteiden kanssa käytetään DMF:a, mutta SO^Cl^sn kanssa käytetään sellaisia liuottimia kuten Cl^C^sa, CH^NO^a tai CH^CNia. Reaktio suoritetaan tavallisesti huoneen lämpötilassa.

Yllämainitun halogenointireaktion on esitetty tapahtuvan vaiheiden A tai B jälkeen. Halogenointireaktio voisi tapahtua myös ennen 12 65777 vaiheita A tai B. Jos halutaan,/ voidaan halogenoida minkä tahansa hydrogenointivaiheen jälkeen.

Lysergiinihappo, yksi edellä mainituista lähtöaineista, voidaan pelkistää vastaavaksi dihydroyhdisteeksi, dihydrolysergiiniha-poksi, tunnetuilla menetelmillä kuten katalyyttisellä hydrogenoin-nilla käyttämällä platinaoksidia tai muita sopivia katalysaattoreita, jotka ovat tällöin inertissä liuottimessa, edullisesti alemmassa alkanolissa. Normaaleilla menetelmillä tuotetaan esim. me-tyylidihydrolysergaattia. N-6:ssa sijaitseva metyyli-ryhmä voidaan sitten poistaa, saattamalla se reagoimaan syaanibromidin kanssa sekundäärisen amiini-ryhmän muodostamiseksi kuten edellä on esitetty. Sekundäärinen amiini voidaan sitten alkyloida joko etyylijodidilla, n-propyylijodidilla tai alkyylibromidilla, jolloin saadaan yhdiste, jossa on etyyli-, n-propyyli- tai allyyliryhmä N-6:ssa ja metoksi-karbonyyli-(esteri)-ryhmä C-8:ssa. Sekundäärinen amiini voidaan vastaavan amidin tuottamiseksi vaihtoehtoisesti asyloida asetyyliklori-dilla tai propionyylikloridilla terttäärisen amiiniemäksen läsnäollessa, ympäristön lämpötilassa. N-6tssa sijaitsevan amidi-ryhmän ja C-8:ssa sijaitsevan esteri-ryhmän samanaikäinen pelkistäminen pelkistävällä metallihydridillä, kuten THF:ssä olevalla litiumalumiinihyd-ridillä, huoneen lämpötilassa, tuottaa vastaavan D-6-etyyli (tai n-propyyli)-8.3 -hydroksimetyyliergoliinin. Lisäksi, N-6:ssa sijaitsevan alkyyli-ryhmän pelkistäminen tavallisilla hydrogenointimenetelmillä, kuten katalyyttisellä hydrogenoinnilla, tuottaa 6-n-propyyliyhdistei-tä. Samalla tavalla D-6-etyyli (tai n-propyyli tai allyyli)-8/3-me-tyylikarbonyyli-yhdiste voidaan pelkistää vastaavaksi 8 ft -hydroksi-metyylijohdannaiseksi käyttämällä pelkistävänä aineena metallihydri-diä, kuten LiAIH^ tai NaBH (OCH^)^*3 haihtuvassa liuottimessa (di-etyylieetterissä tai THF:ssä), huoneen lämpötilassa tai NaBH^:a etanolissa , palautusjäähdytyslämpötilassa. Metaanisulfonyylikloridilla suoritettava 8 β-hydroksimetyyli-ryhmän hydroksi-ryhmän esteröinti metaanisulfonyylikloridilla mesyylioksi-johdannaisen tuottamiseksi sekä tämän johdannaisen reaktio metanolin, metaanietiolin tai metaa-nisulfiinihapon kanssa tuottaa kaavan I mukaisia yhdisteitä, joissa katkoviiva ei tarkoita sidosta ja X on H, Ritilä ja Y:llä on sama merkitys kuin edellä on esitetty. Näistä kunkin johdannaisen C-2 voidaan sitten kloorata tai bromata US-patentissa 3 920 664 esitetyllä menetelmällä kaavan I mukaisten yhdisteiden tuottamiseksi, 13 65777 joissa X on Cl tai Br, katkoviiva ei tarkoita sidosta ja Reillä ja Y:llä on sama merkitys kuin edellä. Käytetään samoja reaktio- q olosuhteita kuin vastaavia Δ -ergoleeneja valmistettaessa.

Yllä mainitut ergoliini-yhdisteet voidaan valmistaa myös elymoklaviinista, toisesta helposti saatavasta lähtöaineesta, pel- g kistämällä Δ -kaksoissidos D-6-metyyli-8 -hydroksimetyyliergolii- nin tuottamiseksi. Sama reaktioiden sarja --- N-6:ssa sijaitsevan metyyliryhmän korvaaminen, etyyli-, n-propyyli- tai allyyli-ryhmäl-lä sekä sitä seuraava hydroksimetyyli-ryhmän korvaaminen, metoksi-metyyli-, metyylisulfonyylimetyyli- tai metyylimerkaptometyyli- ryhmällä mesylaattiesteri-välituotteen kautta --- voidaan suorittaa kuten edellä.

Lopulta, elymoklaviinia itse voidaan käyttää yllämainitussa reaktiosarjassa, joka perustuu metyylilysergaattiin ja n-6:ssa sijaitsevan metyyli-ryhmän poistamiseen, jolloin suoritetaan reaktio syaa-nibromidin kanssa ja poistetaan 6-syanoryhmä, minkä jälkeen täten muodostunut sekudäärinen amiini saatetaan reagoimaan alkyyli- tai allyylihalogenidin kanssa D-6-etyyli-, n-propyyli tai allyyli-8-hydroksimetyyli-8-ergoleenin tuottamiseksi. Tässä esimerkissä, koska hydroksimetyyli-ryhmän hydroksyyli on allyylihydroksyyli, kloorilla korvaaminen voidaan suorittaa ja allyylikloori itse on helposti korvattavissa metoksi-, metyylisulfonyyli- tai metyylimerkapto-ryhmällä, niiden kaavan I mukaisten yhdisteiden muodostamiseksi, joissa kaksoissidos sijaitsee 8-asemassa ja Y:llä ja R^:llä on aiemmat merkitykset. Edullinen allyylisen hydroksyylin kloorausaine on trifenyylifosfiinin ja CCl4:n seos, mutta voidaan käyttää muita klooraus-aineita, kuten HCl:a HBr:a, dietyylieetterihydrokloridia, fosforitrihalogenidia tai POCl^a» jolloin näiden voimakkaampien aineiden yhteydessä on huolellisesti käytettävä olosuhteita, joiden avulla vältytään ei toivottavista sivutuotteista. Kuten aiemmin, mikä tahansa kaavan I mukaisista yhdisteistä, joissa X on Cl tai Br, voidaan valmistaa vastaavasta yhdisteestä, joissa X on H, kuten edellä on kuvattu. Tämä C-2:n klooraus tai bromaus voi tapahtua muilla yllämainituilla välituotteilla, joissa on esim. esteriryhmä C-8:ssa ja esteriryhmä itse on myöhemmin korvattu metoksimetyyli-tai metyylimerkaptoryhmällä.

14 65777 8- tai 9-asemassa sijaitseva valinnainen kaksoissidos voidaan pelkistää missä tahansa reaktiosarjän vaiheessa, viimeinen vaihe mukaanluettuna, vastaavan tyydyttyneen yhdisteen tuottamiseksi. Pelkistäviä aineita, joita voidaan käyttää, ovat tavalliset reagenssit kuten katalyyttiseen hydrogenointiin käytettävät Pt ja Pd. Tämän pelkistysvaiheen jälkeen muodostuneet yhdisteet ovat 8 >3 -yhdisteitä.

Kuten yllä esitetystä käy ilmi, mikä tahansa vaiheista, jotka käsittävät 6-asemassa tapahtuvan alkyloinnin, korvausreaktion 8-asemassa, halogenoinnin 2-asemassa ja 6-allyylin tai Δ - tai Δ -kaksoissidoksen mahdollisen hydrogenoinnin, voidaan suorittaa viimeksi, kun kaavan I mukaisia yhdisteitä valmistetaan. Näiden vaiheiden vaihtaminen reaktiosarjassa on mahdollista.

Kaavan I mukaiset yhdisteet ja niiden happoadditiosuolat ovat valkoisia, kiteisiä, kiinteitä aineita, jotka helposti kiteytyvät orgaanisista liuottimista. Niiden valmistusta valaisevat seu-raavat esimerkit.

Esimerkki 1 D-6-n-propyyli-8 ^-metyyllmerkaptometyyliergoliinin valmistaminen

Liuos valmistettiin 100 g:sta metyylidihydrolysergaattia ja 2,5 l:sta metyleenidikloridia.

Lisättiin 100 g:a syaanibromidia, ja reaktioseos suljettiin ja säilytettiin huoneen lämpötilassa noin 24-25 tuntia. Osasta liuosta tehdyllä ohutlevykromatografiällä (TLC) saatiin esille yksi pää-täplä sekä joitakin pienempiä täpliä. Orgaaninen kerros, joka sisälsi yllämainitussa reaktiossa muodostuneen metyyli-6-syano-8/3-metoksikarbonyyliergoliinin, pestiin peräkkäin vettä sisältävällä viinihapolla, vedellä sekä kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin sen jälkeen. Kun liuotin oli haihdutettu tyhjössä, saatiin jäännös, josta ohutlevykromatografiän avulla saatiin esille yksi päätäplä, joka oli vähemmän polaarinen kuin lähtöaine, ja mainittu täplä vastasi D-6-syano-8/3-metoksikarbonyyliergoliinia. Täten valmistettu yhdiste suli noin 202-5°C:ssa, saanto oli 98,5 g.

Reaktioseosta, joka sisälsi 59,6 g D-6-syano-8/¾-metoksikar-bonyyliergoliinia, 300 g sinkkipölyä, 2,5 1 etikkahappoa ja 500 ml vettä, palautusjäähdytettiin typpikehässä noin seitsemän tunnin ajan, jonka jälkeen se jätettiin ympäristön lämpötilaan noin 15 65777 16 tunniksi. Reaktioseos suodatettiin, ja suodos kaadettiin jään päälle. Saatu vesiseos tehtiin alkaliseksi 14 N ammoniumhydroksidin vesiliuoksella, ja alkalinen kerros uutettiin kloroformilla. Kloro-formikerros erotettiin, pestiin natriumkloridin kyllästetyllä vesi-liuoksella, jonka jälkeen se kuivattiin. Kloroformin haihduttaminen tuotti jäännöksen, joka sisälsi yllämainitussa reaktiossa muodostunutta D-8 ^-metoksikarbonyyliergoliinia; sp. = 154-6°C, saanto 46,9 g. TLC:ssä ilmeni yksi päätäplä ja pienempi lähtöainetta vastaava täplä.

Vaihtoehtoisesti hydrattiin Raney-nikkelin DMF (dimetyyliform- amidi)-liuoksella liuos, joka sisälsi 98,5 g D-6-syano-8/#-metoksi- 6 2 karbonyyliergoliinia. Alkupaine oli 3,44 x 10 dyneä/cm . Reaktion päätyttyä hydrausseos suodatettiin ja suodos väkevöitiin tyhjössä 200 ml:n tilavuuteen. Tämä seos kaadettiin viinihapon vesiliuokseen ja vesikerros uutettiin etyyliasetaatilla. Hapan vesikerros tehtiin emäksiseksi 14 N ammoniumhydroksidin vesiliuoksella, ja alkalinen kerros uutettiin etyyliasetaatilla. Tämä etyyliasetaattikerros erotettiin, pestiin vedellä, natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella, jonka jälkeen se kuivattiin. Tyhjössä suoritettu liuottimen haihduttaminen tuotti D-S/S -metoksikarbonyyliergoliinia, joka suli 150-3°C:ssa, saanto = 68,8 g (76 %).

Reaktioseos valmistettiin 10,8 g:sta D-8^-metoksikarbonyyliergoliinia, 10 mlrsta n-propyylijodidia ja 8,2 g:sta kaliumkarbonaattia, joka oli 200 ml:ssa DMF:a. Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa typen alla noin 16 tunnin ajan. TLC ilmaisi yhden päätäplän sekä kahden pienemmän täplän olemassaolon. Reaktioseos laimennettiin vedellä ja vesikerros uutettiin etyyliasetaatilla. Etyyliasetaatti-uute erotettiin, pestiin vedellä, natriumkloridin kyllästetyllä liuoksella, jonka jälkeen se kuivattiin. Tyhjössä suoritettu haihduttaminen tuotti jäännöksen, joka antoi TLC:llä samanlaisen tuloksen kuin oli aiemmin saatu. Jäännös liuotettiin kloroformiin, joka sisälsi 2 % metanolia, ja se suodatettiin florosiilin läpi, jota oli 200 g. Haihduttamalla liuotin tyhjössä saatiin 8,55 g D-6-n-propyyli-e^-metoksikarbonyyliergoliinia, joka suli 203-6°C:ssa.

Noin 720 mg D-6-n-propyyli-8/$ -metoksikarbonyyliergoliinia liuotettiin 25 ml:aan dioksaania ja 50 ml saan metanolia. Lisättiin 16 65777 natriumboorihydridiä 1 g, ja reaktioseosta palautusjäähdytettiin typen alla noin kahden tunnin ajan. Yhden tunnin kuluttua lisättiin toinen gramma natriumboorihydridiä. TLCissä ilmeni yksi päätäplä ja yksi pienempi täplä. Reaktioseos jäähdytettiin, laimennettiin vedellä ja vesiseos uutettiin kloroformi-isopropanoli-liuotinseok-sella. Erotettiin orgaaninen kerros, pestiin natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella ja kuivattiin. Orgaanisen liuottimen haihduttaminen tuotti jäännöksen, joka D-6-n-propyyli-8^-hydroksimetyyli-ergoliinia, joka kiteytettiin eetteriheksaani-liuottimesta, jolloin saatiin 167-169°C:ssa sulavia kiteitä, saanto = 620 mg.

Valmistettiin liuos 31,2 g:sta D-6-n-propyyli-8^-hydroksi-metyyliergoliinia ja 400 ml:sta pyridiiniä. Lisättiin hitaasti 20 ml:aa metaanisulfonyylikloridia pyridiini-liuokseen. Kun lisäys oli päättynyt, seosta sekoitettiin noin tunnin ajan ja se kaadettiin jään ja 14 N ammoniumhydroksidin seokseen. Alkalinen vesikerros uutettiin etyyliasetaatilla. Etyyliasetaatti-kerros erotettiin, pestiin vedellä ja natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella, jonka jälkeen se kuivattiin. Orgaanisen liuottimen haihduttaminen tuotti jäännöksen, joka TLCslla antoi yhden päätäplän sekä useita pienempiä täpliä. Jäännökseen kloroformiliuos kromatografoitiin 300 g:11a florosiliä käyttämällä eluenttina kloroformia, joka sisälsi nousevat määrät metanolia (0:sta 4 prosenttiin). Tästä kromatografisesta työprosessista saatiin D-6-n-propyyli-8/3 -mesyyliok-simetyyliergoliini puhdistetussa muodossa, ja se suli noin 178-180°C:ssa hajoten? saanto = 25,6 g.

Analyysi laskettu: C, 62,96? H, 7,23? N, 7,77? S, 8,85 Määritetty: C, 62,66? H, 6,94? N, 7,46? S, 9,04.

Liuotettiin 25 g metyylimerkaptaania 200 ml:aan dimetyyli-asetamidia (DMA:a). Liuos jäähdytettiin jää-vesi-hauteessa noin 0°C:een. Seuraavaksi lisättiin annoksina 14,4 g natriumhydridiä (50 % suspensiona mineraaliöljyssä), joten metyylimerkaptaania nat-riumsuola muodostui. Natriumsuolasuspensio lämmitettiin huoneen lämpötilaan. Lisättiin hitaasti liuos, jossa oli 10,9 g D-6-n-pro-pyyli-8/6-mesyylioksimetyyliergoliinia 60 ml:ssa DMA:a. Reaktioseosta sekoitettiin tunnin ajan typen alla, ja se laimennettiin sitten vedellä. Vesikerros uutettiin etyyliasetaatilla, ja etyyliasetaatti- 17 65777 kerros erotettiin. Erotettu kerros pestiin vedellä sekä natrium-kloridin kyllästetyllä vesiliuoksella, jonka jälkeen se kuivattiin. Liuottimen haihduttaminen tuotti jäännöksen, joka sisälsi ylläesitetyssä reaktiossa muodostuneen D-6-n-propyyli-8/i-metyylimerkapto-metyyliergoliinia. Jäännöksestä saatiin TLCsllä yksi päätäplä, saanto = 6,9 g; sp. 206-9°C, jossa yhdiste hajosi. Jäännös puhdistettiin edelleen suspendoimalla se 100 ml:aan kiehuvaa metanolia. Palautusjäähdytysliuokseen lisättiin 1,6 ml metaanisulfonihappoa, joka oli 10 ml:ssa metanolia. Lisäyksen päätyttyä seoksen annettiin jäähtyä, jona aikana D-6-n-propyyli-e^-metyylimerkaptoergoliini-metaanisulfonaatin kiteet saostuivat. Liuos jäähdytettiin, jonka jälkeen se suodatettiin. Saatiin 6 g suolaa, joka suli noin 255°C:ssa hajoten tällöin.

Analyysi laskettu: C, 58,50; H, 7,36; N, 6,82; S, 15,62 Määritetty: C, 58,45; H, 7,39; N, 6,92; S, 15,62.

Esimerkki 2 D-6-n-propyyli-8 -metokslmetyyllergolilni

Valmistettiin reaktioseos 8,4 g:sta esimerkin 1 mukaisesti valmistettua D-6-n-propyyli-8/4 -mesyylioksimetyyliergoliinia, 50 ml:sta 40 prosenttista N,N,N-trimetyyli-N-bentsyyliammonium-metylaatin metanoliliuosta ja käyttäen liuottimena 200 ml DMA:a. Reaktioseosta palautusjäähdytettiin typpikehässä 1,25 tunnin ajan. Ohutlevykromatografiällä ilmeni yksi päätäplä lähtöainetäplän lisäksi. Reaktioseos jäähdytettiin ja laimennettiin etyyliasetaatilla. Etyyliasetaatti-kerros erotettiin, pestiin vedellä sekä kyllästetyllä natriumkloridi-liuoksella, jonka jälkeen se kuivattiin. Liuotin poistettiin haihduttamalla. Saatiin 5,00 g jäännöstä, joka sisälsi D-6-n-propyyli-8/f-metoksimetyyliergoliinia. Yhdiste suli 223-6°C:ssa samalla hajoten. Esimerkin 1 mukaisesti valmistettiin metaanisulfo-naattisuola, jolloin saatiin D-6-n-propyyli-8/^-metoksimetyyliergo-liini-metaanisulf onaattia , joka eetteri-etanoli-liuotinseoksesta suoritetun kiteytyksen jälkeen suli 202-4°C:ssa. Saanto 4,09 g.

Analyysi laskettu: C, 60,89; H, 7,66; N, 7,10; S, 8,13 Määritetty: C, 60,60; H, 7,79; N, 7,18; S, 8,08.

65777 18

Esimerkki 3 D-6-n-propyyli-8/3 -hydroksimetyyliergoliinin valmistaminen

Valmistettiin liuos 9,25 g:sta D-8/3 -metoksikarbonyyliergo-liinia ja 100 mlssta pyridiiniä. Lisättiin 25 ml propionihappo-anhydridiä, ja reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa yhden tunnin ajan. Reaktioseos kaadettiin sitten 4 prosenttiseen axtunoniumhydroksidin vesiliuokseen, ja lisättiin 2 litraa vettä.

Saatu seos jäähdytettiin ja suodatettiin. Suodatuspuristuskakku sisälsi D-6-propionyyli-8y# -metoksikarbonyyliergoliinia, joka suli 260-3°C:ssa hajoten tällöin; saanto 9,30 g.

Analyysi laskettu: C, 69,92; H, 6,79; N, 8,58; Määritetty: C, 70,14; H, 6,99; N, 8,73; 1000 ml:aa THF:a (tetrahydrofuraania) valmistettiin suspensio 9.8 g:sta D-6-propionyyli-8/$-metoksikarbonyyliergoliinia. Lisättiin annoksittain viisi grammaa litiumaluminiumhydridiä, samalla kun reaktioseosta jäähdytettiin jää-vesi-hauteessa. Kun litiumaluminium-hydridin lisäys oli päättynyt, reaktioseoksen annettiin lämmetä ympäristön lämpötilaan. Sitten sitä palautusjäähdytettiin typpikehän alla 16 tunnin ajan. Sitten reaktioseos jäähdytettiin noin 0°C:een, ja ylimäärä litiumaluminiumhydridiä sekä muut metallo-orgaaniset aineet liuotettiin lisäämällä järjestyksessä etyyliasetaattia, etanolia ja vettä. Reaktioseos laimennettiin sitten vedellä, ja vesi-kerros uutettiin useita kertoja kloroformi-isopropanoliliuotin-seoksella. Orgaaniset uutteet erotettiin, yhdistettiin ja yhdistetyt uutteet pestiin kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella. Sitten orgaaninen kerros kuivattiin, ja liuotin poistettiin haihduttamalla. Jäännös, joka oli yllämainitussa pelkistysvaiheessa muodostunutta D-ö-n-propyyli-e^-hydroksimetyyliergoliinia, kiteytettiin metano-lista, jolloin saatiin 4,75 g 174- 6°C:ssa sulavaa ainetta. Toinen metanolista suoritettu toistokiteytys tuotti D-6-n-propyyli-8^ -hydroksimetyyliergoliinia, joka suli 176-8°C:ssa.

Analyysi laskettu: C, 76,02; H, 8,51; N, 9,85, Määritetty: C, 75,73; H, 8,33; N, 9,63.

Tämä yhdiste voidaan muuttaa mesylaattiesterin kautta esimerkin 1 mukaiseksi, vastaavaksi 8^-metyylimerkaptometyyli-johdannaiseksi tai esimerkin 2 mukaiseksi, vastaavaksi 8^-metoksimetyyli-johdannaiseksi.

65777 19

Esimerkki 4 D-6-allyyli-8/3 -metyyllmerkaptometyyliergoliinin valmistaminen 2 g D-8/3-metoksikarbonyyliergoliinia liuotettiin 75 ml:aan DMF:a. Kaliumkarbonaattia lisättiin 1,7 g, jonka jälkeen lisättiin 0,71 ml allyylibromidia. Reaktioseosta sekoitettiin ympäristön lämpötilassa, typpikehässä noin 3 1/2 tunnin ajan. TLC:ssa ilmeni yksi nopeasti liikkuva päätäplä. Reaktioseos laimennettiin vedellä, ja muodostunut vesikerros uutettiin etyyliasetaatilla. Etyyliase-taattikerros erotettiin, pestiin vedellä sekä kyllästetyllä natrium-kloridia vesiliuoksella, jonka jälkeen se kuivattiin. Liuottimen haihduttaminen tyhjössä tuotti jäännöksen, jossa metanolista suoritetun toistokiteytyksen jälkeen oli 570 mg D-6-allyyli-8/#-metoksi-karbonyyliergoliinia, joka suli 146-8°C:ssa.

Analyysi laskettu: C, 73,52; H, 7,14; N, 9,03 Määritetty: C, 73,27; H, 7,24; N, 8,97.

4,08 g D-6-allyyli-8y5 -metoksikarbonyyliergoliinia liuotettiin seokseen, jossa oli 50 ml dioksaania ja 100 ml metanolia. Lisättiin viisi g natriumboorihydridiä ja saatua reaktioseosta palautus jäähdytettiin noin kahden tunnin ajan. Tunnin kuluttua lisättiin toinen erä natriumboorihydridiä. Reaktioseos laimennettiin vedellä ja 14 N aramoniumhydroksidin vesiliuoksella. Alkalista vesi-kerrosta uutettiin useita kertoja kloroformi-isopropanoli-liuotin-seoksella. Orgaaniset uutteet yhdistettiin ja yhdistetyt uutteet pestiin kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella, jonka jälkeen ne kuivattiin. Liuottimen haihduttaminen tuotti jäännöksen, joka sisälsi D-6-allyyli-8/5-hydroksimetyyliergoliinia. Yhdiste suli 204-6°C:ssa metanoli-eetteriliuotinseoksesta suoritetun toistokiteytyksen jälkeen.

Analyysi laskettu: C, 76,56; H, 7,85; N, 9,92; Määritetty: C, 76,35; H, 7,72; N, 9,65.

Valmistettiin liuos 3,77 g:sta D-6-allyyli-8/£-hydroksimetyy-liergoliinia ja 100 ml:sta pyridiiniä. Lisättiin 2,5 ml metaani-sulfonyylikloridia, ja muodostunutta seosta sekoitettiin ympäristön lämpötilassa noin kolmen tunnin ajan. Sen jälkeen reaktioseos laimennettiin vedellä ja 14 N:11a ammoniumhydroksidin vesiliuoksella.

20 65777

Vesikerros uutettiin useita kertoja etyyliasetaatilla. Etyyliase-taattiuutteet yhdistettiin, yhdistetyt uutteet pestiin vedellä ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella, jonka jälkeen ne kuivattiin. Liuottimen haihduttaminen tuotti kloroformimetanoli-seoksesta suoritetun toistokiteytyksen jälkeen D-6-allyyli-8^4 -mesyylioksimetyyliergoliinia, joka suli 195-6°C:ssa samalla hajoten; saanto 3,5 g.

Analyysi laskettu: C, 63,31; H, 6,71; N, 7,77; S, 8,89, Määritetty: C, 63,03; H, 6,49; N, 7,51; S, 8,68.

Esimerkissä 1 esitetyn menetelmän mukaisesti valmistettiin natriumsuola 12 g:sta metyylimerkaptaania, ylimäärästä NaH:a ja 150 ml DMF:a. Natriummetyylimerkaptidin seokseen lisättiin nopeasti liuos, jossa oli 4,3 g D-6-allyyli-8/$-mesyylioksimetyyliergoliinia 50 ml:ssa DMF:a. Reaktioseosta sekoitettiin tunnin ajan typpikehän alla, ja se laimennettiin sitten vedellä. Vesikerros uutettiin sitten etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattikerros erotettiin, pestiin vedellä ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella, jonka jälkeen se kuivattiin. Etyyliasetaatin haihduttaminen tuotti jäännöksen, joka sisälsi yllämainitussa pelkistysväiheessa muodostaneen D-6-allyyli-8 /3-metyylimerkaptometyyliergoliinin. Jäännös liuotettiin kloroformiin, kromatografoitiin 200 g:11a florosiiliä käyttämällä eluenttina kloroformia, joka sisälsi nousevat määrät meta-nolia (0-2 %). Saatiin kolme g D-6-allyyli-8/# -metyylimerkaptometyy-liergoliinia, joka suli 171-3°C:ssa. Kuten esimerkissä 1, valmistettiin metaanisulfonaattisuola, joka suli 272-4°C:ssa hajoten tällöin; saanto 3,05 g.

Analyysi laskettu: C, 58,79; H, 6,91; N, 6,86; S, 15,70, Määritetty: C, 58,63; H, 6,76; N, 6,61; S, 15,71.

Esimerkki 5 D-6-n-propyyli-8/3 -metokslkarbonyyliergoliinin vaihtoehtoinen valmistustapa

Edellisen esimerkin mukaisella menetelmällä valmistettua D-6-allyyli-8/£-metoksikarbonyyliergoliinia liuotettiin 1,07 g 40 mitään THF:a ja hydrattiln 5 prosenttisen hiileen imeytetyn palladiumin päällä, jota oli 5 g, ympäristön lämpötilassa vedyn alku- 6 2 paineen ollessa 4,13 x 10 dyneä/cm . 23 tunnin kuluttua hydraus 21 65777 oli täydellinen, ja seos suodatettiin. Liuotin haihdutettiin tyhjössä. Saatu jäännös antoi TLCsllä kaksi täplää, yhden uuden täplän sekä toisen täplän, joka vastasi 5-nor yhdistettä. Jäännös liuotettiin kloroformiin, ja kloroformi-liuos kromatografoitiin 30 g:11a florisiiliä käyttämällä eluenttina kloroformia, joka sisälsi nousevat määrät metanolia (0-4 %). Fraktiot, jotka TLCsn perusteella sisälsivät D-e-n-propyyli-e^-metoksikarbonyyliergoliinia, yhdistettiin ja saatiin täten kiteinen aine, joka suli 204-6°C:ssa, saanto 740 mg. Metanoli-kloroformiliuotinseoksesta suoritettu tois-tokiteytys tuotti D-6-n-propyyli-fy0 -metoksikarbonyyliergoliinia, joka suli 209-211°C:ssa; saanto 465 mg.

Analyysi laskettu: C, 73,05; H, 7,74; N, 8,97; Määritetty: C, 72,84; H, 7,49; N, 8,67.

Tämä on vaihtoehtoinen menetelmä esimerkin 1 mukaisen välituotteen valmistamiseksi.

Esimerkki 6 P-6-etyyli-8/3 -metyylimerkaptoergolilnin valmistaminen.

Valmistettiin liuos 6,5 g:sta D-6-metyyli-8^-hydroksimetyyli-ergoliinia (dihydrolysergolia) sekä 250 ml:sta DMF:a. Lisättiin 8 g syanogeenibromidia, ja reaktioseosta sekoitettiin ympäristön lämpötilassa, typpikehän alla 16 tunnin ajan. Liuotin poistettiin tyhjössä, ja jäännös laimennettiin vedellä ja suodatettiin. Suodatus-puristuskakku pestiin hyvin etanolilla ja eetterillä. Täten valmistettu D-6-syano-8^-hydroksimetyyliergoliini suli 260°C:n yläpuolella.

Lisättiin 4,03 g D-6-syano-e^-hydroksimetyyliergoliinia 100 ml:aan 6N suolahapon vesiliuosta, ja muodostunut hapan reaktio-seos palautusjäähdytettiin typpikehän alla noin kahden tunnin ajan.

Happamesta seoksesta suoritetussa ohutlevykromatografiässä ei ilennyt yhtään liikkuvaa täplää. Reaktioseos kaadettiin jään päälle ja tehtiin emäksiseksi 15 N:11a ammoniumhydroksidin vesiliuokselle. Suodatuspuristushakku, joka sisälsi ylläesitetyssä reaktiossa muodostuneen sekundäärisen amiini- D-8/3 -hydroksimetyyliergoliinin, painoi 3,65 g, ja se käytettiin välittömästi jatkopuhdistukseen.

Valmistettiin liuos, jossa oli 3,65 g D-8/3-hydroksimetyyliergoliinia 100 ml:ssa DMF:a ja johon lisättiin 4,1 g kaliumkarbonaattia. Lisättiin 1,04 g etyylijodidia, ja reaktioseosta sekoitet- 6 5 7 7 7 22 tiin ympäristön lämpötilassa typen alla noin 23 tunnin ajan, jonka jälkeen lisättiin vettä. Vesiseos uutettiin useilla erillä etyyliasetaattia, etyyliasetaatti-uutteet yhdistettiin ja yhdistetyt uutteet pestiin vedellä sekä natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella, jonka jälkeen ne kuivattiin. Liuottimen haihduttaminen tuotti jäännöksenä ylläesitetyssä reaktiossa muodostuneen D-6-etyyli-8^ -hydroksimetyyliergoliinia. Jäännös toistokiteytettiin kloroformin ja metanolin seoksesta, jolloin saatiin D-6-etyyli-8 ^J-hydroksi-metyyliergoliini yhtenä täplänä ohutlevykromatografiällä, saanto 1,06 g.

Analyysi laskettu: C, 75,52; H, 8,20; N, 10,36, Määritetty: C, 75,60; H, 7,93; N, 10,06.

Valmistettiin liuos 2,7 g:sta D-6-etyyli-8/$-hydroksimetyyliergoliinia ja 100 ml:sta pyridiiniä.

Lisättiin 1,50 ml mesyylikloridia ja näin saatua reaktio-seosta sekoitettiin yhden tunnin ajan. Reaktioseos laimennettiin sitten vedellä ja tehtiin emäksiseksi lisäämällä 14 N ammonium-hydroksidin vesiliuosta. Alkalinen kerros uutettiin useita kertoja etyyliasetaatilla, ja etyyliasetaatti-uutteet yhdistettiin. Yhdistetyt uutteet pestiin vedellä, natriumkloridin kyllästetyllä vesi-liuoksella, ja kuivattiin. Liuottimen haihduttaminen tuotti yllämainitussa reaktiossa muodostunutta D-6-etyyli- 8/ -mesyylioksiergo-liinia sisältävän jäännöksen. Ohutlevykromatografiän avulla jäännöksestä saatiin esille yksi päätäplä. Jäännös kromatografoitiin 200 g:lla florisilia käyttäen kloroformia, joka sisälsi nousevat määrät (0-5 %) metanolia. Kromatogrämmiä seurattiin ohutlevykromatograf iän avulla. Fraktiot, jotka TLC:n perusteella sisälsivät D-6-etyyli-8/0 -mesyylioksimetyyliergoliinia yhdistettiin, jolloin saatiin toistokiteytyksen jälkeen 1,50 g kiteistä ainetta, joka suli 184-5°C:ssa.

Analyysi laskettu: C, 62,04» H, 6,94; N, 8,04» S, 9,20, Määritetty: C, 62,16» H, 6,73» N, 8,01» S, 9,24.

Liuos, jossa on 2,9 g metyylimerkaptaania 75 ml:ssa DMF:a jäähdytettiin jäävesi-seoksessa. Siihen lisättiin annoksittain 2,4 g natriumhydridiä mineraaliöljyyn valmistettuna 50 %:n suspensiona, täten muodostuvana metyylimerkaptaanin natriumsuolana. Reaktio- 23 65777 seoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan. Sitten lisättiin pisaroittain liuos, jossa oli 1,8 g D-6-etyyli-8y£ -mesyylioksi-metyyliergoliinia 25 ml:ssa DMF:a. Muodostunutta reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa typen alla 1,25 tuntia, ja se laimennettiin vedellä. Vesiseos uutettiin etyyliasetaatilla. Etyyliasetaatti-uute pestiin vedellä sekä natriumkloridia kyllästetyllä vesiliuoksella ja kuivattiin. Liuottimen haihduttaminen jäännöksen, joka sisälsi ylläesitetyssä reaktiossa muodostuneen D-6-etyyli-8y$-metyyli-merkaptometyyliergoliinia. Jäännöksestä saatiin ohutlevy-kromatografiän avulla esille yksi täplä. Jäännös toistokiteytettiin eetterin ja heksaanin seoksesta, mikä tuotti kiteisen D-6-etyyli-8^-metyylimerkaptometyyliergoliinin, joka suli 201-2°C:ssa hajoten.

Ylläesitetyssä reaktiossa muodostunut D-e-etyyli-e^ -metyy-limerkaptometyyliergoliini lietettiin 30 ml:aan metanolia. Lietettä kuumennettiin höyryhauteella, ja siihen lisättiin 0,33 ml metaani-sulfonihappoa, jolloin muodostui metaanisulfonaatti-suola. Reaktio-seos jäähdytettiin huoneen lämpötilaan, jonka jälkeen se laimennettiin 50 ml:lla eetteriä. D-6-metyyli-8^-metyylimerkaptometyyliergo-liinimetaanisulfonaatti saostui jäähdytettäessä, ja se koottiin suodattamalla, sulamispiste 254-6°C, jossa aine hajoaa? saanto 1,80 g.

Esimerkki 7 D-6-n-propyyli-8-metyylimerkaptometyyli-8-ergoleenin valmistaminen

Suspendoitiin 11 g elymokaviinia 200 ml:aan DMF:a. Lisättiin noin 11 g syanogeenibromidia, ja muodostunutta seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa typpikehän alla noin 16 tunnin ajan, jonka jälkeen seos laimennettiin vedellä. Ylläesitetyssä reaktiossa muodostunut D-6-syano-8-hydroksimetyyli-8-ergoleeni saostui, ja se koottiin suodattamalla? paino 8,2 g, sp. 215-22°C, jossa aine hajoaa. Puhdistamatta edelleen suodatuspuristuskakku sekoitettiin 300 ml:n kanssa etikkahappoa, 60 ml:n kanssa vettä ja 41 g:n kanssa sinkki-pölyä. Saatua seosta palautusjäähdytettiin typpikehän alla noin 20 tunnin ajan. Sen jälkeen reaktioseos suodatettiin, ja suodos kaadettiin jään päälle. Suodos tehtiin voimakkaasti happameksi 14 N ammoniumhydroksidin vesiliuoksella. Alkalinen kerros uutettiin useita kertoja kloroformin ja isopropanolin seoksella. Uutteet yhdis- 24 65777 tettiin, ja yhdistetyt uutteet pestiin natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella, jonka jälkeen ne kuivattiin. Liuottimen poistamisen jälkeen jäi D-8-hydroksimetyyli-8-ergoleenia ja sen asetaatti-esteriä sisältävä jäännös. Ilman lisäpuhdistusta jäännös liuotettiin 200 ml:aan DMF:a, johon lisättiin 6,2 g kaliumkarbonaatti ja 8 ml n-propyyli-iodidia. Reaktioseosta sekoitettiin typen alla kuuden tunnin ajan, jonka jälkeen se laimennettiin vedellä. Vesikerros uutettiin useita kertoja etyyliasetaatilla, ja etyyliasetaatti-uutteet yhdistettiin ja pestiin vedellä sekä kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella, jonka jälkeen ne kuivattiin. Liuotin haihduttaminen tuotti jäännöksen, jossa ohutlevykromatografiän avulla ilmeni kaksi päätäplää. Jäännös liuotettiin 100 ml saan metanolia ja 100 ml saan dioksaania. Lisättiin 25 ml 2N natriumhydroksidin vesi-liuosta, ja alkalista seosta sekoitettiin typen alla 1,25 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Sitten reaktioseos laimennettiin vedellä ja vesikerros uutettiin useita kertoja kloroformi-isopropanoli-liuotinseoksella. Orgaaniset uutteet yhdistettiin, ja yhdistetyt uutteet pestiin natriumkloridia kyllästetyllä vesiliuoksella, jonka jälkeen ne kuivattiin. Liuottimen haihduttaminen tuotti jäännöksen, joka TCLsllä antoi yhden päätäplän. Jäännös liuotettiin kloroformiin, ja kloroformi-liuos kromatografoitiin 200 g s 11a florosiliä. Eluent-tina käytettiin kloroformia, joka sisälsi nousevat määrät (2-5 %) metanolia. Yhdistettiin fraktiot, jotka TLC:n perusteella sisälsivät D-6-n-propyyli-8-hydroksi-metyyli-8-ergoleenia. Liuotin haihdutettiin kuivaksi, ja muodostunut jäännös kiteytettiin eetteristä, mikä tuotti D-6-n-propyyli-8-hydroksimetyyli-8-ergoleenia, joka suli 189-191°C:ssa hajoten; paino 2,9 g.

Analyysi laskettu: C, 76,56; H, 7,85; N, 9,92; Määrätty: C, 76,30; H, 7,85; N, 9,96.

8,1 g D-6-n-propyyli-8-hydroksimetyyli-8-ergoleenia lietet-tiin 1000 ml:aan asetonitriiliä, joka sisälsi 39,3 g trifenyyli- fosfiinia ja 14,4 ml hiilitetrakloridia --- tätä reagenssia koskevia tietoja katso Tetrahedron 23, 2789 (1967). Saatua reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa, typpikehän alla 19 tunnin ajan. Haihtuvat aineosat poistettiin sitten tyhjössä, ja jäännös laimennettiin viinihapon vesiliuoksella. Hapan vesikerros uutettiin useita 25 65777 kertoja tolueenilla, ja tolueeni-uutteet keitettiin pois. Vesiker-ros tehtiin sitten emäksiseksi natriumbikarbonaatilla, ja alkalinen kerros uutettiin useita kertoja kloroformin ja isopropanolin seoksella. Orgaaniset uutteet erotettiin, ja erotetut uutteet pestiin natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella, jonka jälkeen ne kuivattiin. Liuottimen haihduttaminen tuotti jäännöksen, jossa ohut-levykromatografiällä ilmeni yksi päätäplä. Kloroformin ja metanolin (2 %) seokseen valmistettu liuos kromatografoitiin 200 g:11a floro-siiliä. Fraktiot, jotka TLC:n perusteella sisälsivät ylläesitetyssä reaktiossa muodostunutta D-6-n-propyyli-8-kloorietyyli-8-ergolee-nia, yhdistettiin ja liuotin poistettiin siitä tyhjössä. Saadun jäännöksen kloroformia ja metanolista suoritettu toistokiteytys tuotti D-6-n-propyyli-8-kloorimetyyli-8-ergoleenia, joka hajosi noin 185°C:ssa; saanto 4,65 g; toinen fraktio 2,30 g.

Analyysi laskettu: C, 71,87; H, 7,04; N, 9,31; Määritetty: C, 71,62; H, 6,89; N, 9,57.

50 ml liuosta, joka sisälsi 25 g metyylimerkaptaania 100 ml:ssa DMA:a laimennettiin 200 ml:11a DMA:a, ja saatu liuos jäähdytettiin jää-vesi-seoksessa. Siihen lisättiin annoksittain 10,6 g natrium-hydridiä mineraaliöljyyn valmistettuna 50 %:na suspensiona. Reak-tioseoksen annettiin lämmetä 75°C:een, jolloin lisättiin nopeasti pisaroittain liuos, jossa oli 6,7 g D-6-n-propyyli-8-kloorimetyyli- 8-ergoleenia 75 ml:ssa DMA:a. Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämmössä 2 tunnin ajan typpikehässä. Sitten reaktioseos jäähdytettiin, laimennettiin vedellä, ja vesiseos uutettiin etyyliasetaatilla. Etyyliasetaatti-liuos erotettiin, pestiin vedellä ja natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella, jonka jälkeen se kuivattiin. Orgaanisen liuottimen haihduttamisen jälkeen jäi jäännös, jossa TLC:n perusteella oli oleellisesti yhden täplän muodostava aine. Jäännöksen kloroformi-liuos kromatografoitiin 200 g:11a florosiiliä käyttämällä eluenttina kloroformia, joka sisälsi nousevat määrät (0-30 %) metanolia. Fraktiot, jotka TLC:n perusteella sisälsivät D-6-n-propyyli-8-metyylimerkaptpmetyyli-8-ergoleeniä, yhdistettiin, ja orgaaninen liuotin poistettiin yhdistetyistä uutteista. Ensin eetteristä ja sitten etanolista suoritettu jäännöksen toistokiteytys tuotti 2,70 g D-6-n-propyyli-8-metyylimerkaptometyyli-8-ergoleenia, 26 65777 joka suli 180-3°C:ssa samalla hajoten. Jäännöksen käsittely maleii-nihapolla tuotti D-6-n-propyyli-8-metyylimerkaptometyyli-8-ergo-leeniä anorfisena kiinteänä aineena.

Analyysi laskettu: C, 64,46; H, 6,59; N, 6,54; S, 7,48, Määritetty: C, 64,31; H, 6,51; N, 6,81; S, 7,61.

Esimerkki 8 D-6-n-propyyli-8/$ -metyylimerkaptometyyli-9-ergoleenin valmistaminen 25 g metyylilysergaattia liuotettiin 750 ml:aan metyleenidi-kloridia. Lisättiin 35 g syanogeenibromidia, ja saatua seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa typen alla 22 tunnin ajan. Orgaaninen kerros pestiin viinihapon vesiliuoksella, vedellä ja kyllästetyllä natriumkloridi vesiliuoksella. Sitten orgaaninen kerros kuivattiin, ja orgaaninen liuotin poistettiin haihduttamalla. Jäännös sisälsi ylläesitetyssä reaktiossa muodostunutta D-6-syano-8 /^-me-toksikarbonyyli-9-ergoleenia ja TLC:n perusteella siinä oli yksi päätäplä antava aine. Jäännös liuotettiin 600 ml:aan etikkahappoa ja 120 ml:aan vettä, johon lisättiin 80 g sinkkipölyä. Muodostunutta seosta palautusjäähdytettiin typen alla 18 1/2 tunnin ajan. Sitten reaktioseos jäähdytettiin ja suodatettiin. Suodos kaadettiin jään päälle ja tehtiin sitten emäksiseksi 14 N ammoniumhydroksidin vesi-liuoksella. Alkalinen seos uutettiin useita kertoja kloroformilla. Kloroformiuutteet yhdistettiin, yhdistetyt uutteet pestiin natrium-kloridin kyllästetyllä vesiliuoksella^ jonka jälkeen ne kuivattiin. Tämän reaktion tuote metyyli-D-6-mesmetyylisergaatti sisälsi vähän vastaavaa isolysergaattia. Jäännös, ilman jatkopuhdistusta, liuotettiin DMF:a ja alkyloitiin n-propyyli-iodidilla ja kaliumkarbonaatilla menetelmän 7 mukaisesti, jotta liuotettiin D-6-n-propyyli -8/5-metoksikarbonyyli-9-ergoleenia, joka sisälsi pienen määrän c^-metok-sikarbonyyli-isomeeriä. Jäännös lietettiin eetteriin ja liete kro-matografoitiin 150 g:11a florosiiliä käyttämällä eetteriä eluenttina. Yhdistettiin fraktiot, jotka NMR:n perusteella sisälsivät pääasiassa /5-isomeeriä, ja niistä poistettiin eetteri haihduttamalla. Saatu jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin, ja orgaaninen kerros uutettiin viinihapon vesiliuoksella. Vesiuutteet erotettiin ja tehtiin emäksisiksi 14N ammoniumhydroksidin vesiliuoksella. Uusi alkalinen 65777 27 kerros uutettiin useita kertoja kloroformilla, kloroformi-uutteet yhdistettiin ja yhdistetyt uutteet pestiin natriumkloridia kyllästetyllä vesiliuoksella, jonka jälkeen ne kuivattiin.

Kloroformi haihduttaminen tuotti jäännöksen, joka tuotti TLCsllä yhden päätäplän. Jäännös kromatografoitiin uudelleen 30 g:lla florisiiliä käyttäen eluenttina eetteri-heksaani (1:1) liuotin-seosta. Fraktiot, jotka TLC:n ja NMR:n perusteella sisälsivät D-6-n-propyyli-8β -metoksikarbonyyli-9-ergoleenia, yhdistettiin ja pelkistettiin litiumaluminiumhydridillä seuraavasti: 0,67 g jäännöstä liuotettiin 75 ml:aan THF:a, johon lisättiin annoksittain 0,5 g litiumaluminiumhydridiä. Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 70 minuuttia, ja se jäähdytettiin sitten jäävesi-hauteessä. Metallo-orgaaniset aineet ja ylimäärä hydridiä hajoitettiin lisäämällä säännöllisessä järjestyksessä etyyliasetaattia ja 10 % natrium-hydroksidin vesiliuosta. Reaktioseos suodatettiin, ja suodos laimennettiin vedellä. Vesiseos uutettiin useita kertoja kloroformi-isopropanoliliuotinseoksella. Orgaaniset uutteet yhdistettiin, ja yhdistetyt uutteet pestiin kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella sekä kuivattiin sen jälkeen. Liuottimen haihduttaminen tuotti jäännöksen, josta TLC:llä ilmeni kolme päätäplää. Jäännöksen kloroformiliuos kromatografoitiin 30 g :11a florosiiliä käyttäen kloroformia, joka sisälsi nousevat määrät (2-10 %) metanolia. Saatiin neljä fraktiota, joista kukin käsiteltiin erikseen 10 ml:11a pyridiiniä, joka sisälsi 0,5 ml metaanisulfonyylikloridia. Kukin reaktioseos laimennettiin vedellä ja tehtiin sitten emäksiseksi väkevöidyllä ammoniumhydroksidilla. Alkalinen liuos uutettiin kussakin esimerkissä etyyliasetaatilla, ja etyyliasetaatti-uute pestiin natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella ja sitten kuivattiin. Neljäs näin käsitellyistä kromatografisista BMR:n perusteella näytti sisältävän D-6-n-propyyli-8/3 -mesyylioksimetyyli-9-ergoleenia.

Yhdiste uutettiin uudelleen florosiilin läpi, jolloin se tuotti 250 mg ainetta, joka suli noin 150°C:ssa hajoten. Seuraavaksi lisättiin 1,40 ml liuosta, joka sisälsi 25 g metyylimerkaptaania 100 ml:ssa DMA:a, 40 ml:aan DMA:a, ja seos jäähdytettiin jää-vesi-hauteessa. Jäähdytettyyn liuokseen lisättiin annoksittain 240 mg natriumhydridiä mineraaliöljyyn valmistettuna 50 %:na suspensiona.

28 65777

Saatu reaktioseos lämmitettiin noin 15°C:een. Liuos, jossa oli 250 mg D-6-n-propyyli-8/tf-mesyylioksimetyyli-9-ergoleenia 10 ml:ssa DMA:a, lisättiin nopeasti pisaroittain. Saatua reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa typpikehän alla 1,25 tunnin ajan, jonka jälkeen seos jäähdytettiin ja laimennettiin vedellä. Muodostunutta vesiseosta uutettiin useita kertoja etyyliasetaatilla. Etyyliasetaatti-kerrokset erotettiin sekä yhdistettiin, ja yhdistetyt kerrokset pestiin vedellä sekä natriumkloridia kyllästetyllä vesi-liuoksella. Yhdistetty orgaaninen kerros kuivattiin, ja orgaaninen liuotin poistettiin haihduttamalla. Jäännös näytti olevan TLC:lla yhden täplän muodostavaa ainetta. Jäännöksen eetteri-liuos suodatettiin florisiilin läpi, ja florisiili pestiin eetterillä. Eetteri-liuos laimennettiin sitten heksaanilla, kiteisen, ylläesitetyssä reaktiossa muodostuneen D-6-n-propyyli-8/3-metyylimerkaptometyyli- 9-ergoleenin tuottamiseksi. Yhdiste hajosi noin 197°C:ssa, saanto 100 mg.

Analyysi laskettu: C, 73,03? H, 7,74? N, 8,97? S, 10,26? Määritetty: C, 73,05? H, 7,94? N, 9,26? S, 10,31.

Esimerkki 9 D-2-bromi-6-n-propyyli-8/3-metyylimerkaptometyyllergoliinin valmistaminen

Liuos, jossa oli 1,62 g N-bromisukkinimidiä 50 ml:ssa diok-saania, lisättiin nopeasti pisaroittain, 63°C:ssa liuokseen, jossa oli 2,60 g D-6-n-propyyli-8^-metoksikarbonyyliergoliinia 100 ml:ssa dioksaania. Reaktioseosta kuumennettiin kahden tunnin ajan 60-65°C:ssa, typpikehässä. Reaktioseos kaadettiin sitten jäiden ja 14 N ammoniumhydroksidin vesiliuoksen päälle. Alkalinen seos uutettiin etyyliasetaatilla, ja etyyliasetaatti-uute erotettiin ja pestiin vedellä sekä sen jälkeen natriumkloridia kyllästetyllä vesi-liuoksella. Etyyliasetaatti-kerros kuivattiin, ja liuotin poistettiin haihduttamalla. Jäännöksen ohutlevykromatografiassa tuli ilmi yksi täplä. Jäännöksen kloroformi-liuos, joka sisälsi ylläesitetyssä reaktiossa muodostuneen D-2-bromi-6-n-propyyli-8^-metoksikarbonyy-liergoliinia, kromatografoitiin 30 g:11a florisiiliä käyttäen elu-enttina kloroformia, joka sisälsi 1 prosentin metanolia. Fraktiot, jotka TLC:n perusteella sisälsivät yhden päätäplän sisältävää ainetta, yhdistettiin, jolloin saatiin 1,64 g D-2-bromi-6-n-propyyli-8/3 - 29 65777

O

metoksikarbonyyliergoliinia, joka suli 167-8 C:ssa. Metanolista suoritettu toistokiteytys tuotti 168-9°C:ssa sulavaa ainetta.

Analyysi laskettu: C, 58,32; H, 5,92; N, 7,16 Määritetty: C, 58,46; H, 5,76; N, 7,20.

Liuos, jossa oli D-2-bromi-6-n-propyyli-8^g-metoksikarbonyy-liergoliinia 1,4 g 100 ml:ssa THF:a, jäähdytettiin jää-vesi-seokses-sa. Lisättiin annoksittain 1,5 g litiumaluminiumhydridiä. Reaktioseos-ta sekoitettiin huoneen lämpötilassa noin tunnin ajan, jonka jälkeen se jäähdytettiin. Ylimäärä litiumaluminiumhydridiä ja metallo-orgaaniset aineet, joita oli läsnä, hajoitettiin lisäämällä säännöllisessä järjestyksessä etyyliasetaattia ja natriumhydroksidin 10 prosenttista vesiliuosta. Reaktioseosta laimennettiin edelleen vedellä, ja vesikerros uutettiin kloroformin ja isopropanolin seoksella. Orgaaninen uute erotettiin, pestiin natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella ja kuivattiin. Kloroformin haihduttaminen tuotti jäännöksen, joka antoi yhden päätäplän TLC:llä. Metanolista suoritettu jäännöksen toistokiteytys tuotti ylläesitetyssä reaktiossa muodostunutta D-2-bromi-6-n-propyyli-8/$-hydroksimetyyliergo-liinia, sulamispiste 208-210°C, saanto 1,19 g.

Analyysi laskettu: C, 59,51; H, 6,38; N, 7,71; Br, 21,99 Määritetty: C, 59,55; H, 6,14; N, 7,50; Br, 21,72.

Valmistettiin liuos, joka sisälsi 1,3 g D-2-bromi-6-n-propyy-li-8^-hydroksimetyyliergoliinia 50 ml:ssa pyridiiniä. Lisättiin 1,5 ml metaanisulfonyylikloridia ja muodostunutta reaktioseosta sekoitettiin 1,5 tunnin ajan. Reaktioseos kaadettiin sitten jäätä ja 14 N aranoniumhydroksidin vesiliuosta sisältävän seoksen päälle. Alkalinen vesikerros uutettiin etyyliasetaatilla, ja etyyliasetaatti-kerros erotettiin ja pestiin vedellä sekä natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella. Etyyliasetaatti-liuos kuivattiin ja etyyliasetaatti poistettiin haihduttamalla. Ohutlevykromatografiällä jäännöksestä saatiin esille yksi päätäplä. Metanolista suoritettu jäännöksen toistokiteytys tuotti D-2-bromi-6-n-propyyli-8 ^-mesyy-lioksimetyyliergoliinia; saanto 1,43 g.

Analyysi laskettu: C, 50,74; H, 6,17; N, 5,92; Määritetty: C, 50,90; H, 6,03; N, 6,00.

30 6 5 7 7 7 Jäävesi-hauteessa jäähdytettiin 8 ml metyylimerkaptaania DMA-liuosta (40 millimoolia metyylimerkaptaania). Liuokseen lisättiin annoksittain 1/6 g natriumhydridiä mineraaliöljyyn valmistettuna 50 %:n lietteenä. Seoksen annettiin lämmetä noin 15°C:een, jossa lämpötilassa siihen lisättiin nopeasti pisaroittain liuos, jossa oli 1,5 g D-2-bromi-6-n-propyyli-8/3-mesyylioksimetyyliergoleenia 40 mlsssa DMA:a. Saatua reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa typen alla 1,5 tunnin ajan, jonka jälkeen se jäähdytettiin ja laimennettiin vedellä. Vesikerros uutettiin useita kertoja etyyliasetaatilla ja etyyliasetaattiuutteet erotettiin ja yhdistettiin. Yhdistetyt uutteet pestiin vedellä ja natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella sekä kuivattiin sen jälkeen. Tyhjössä suoritettu liuottimen haihduttaminen tuotti jäännöksen, jossa oli yksi päätäplä. Metanolista suoritetun jäännöksen toistokiteytyksen jälkeen saatiin ylläesitetyssä reaktiossa muodostunutta D-2-bromi-6-n-propyyli-8/J-metyylimerkaptometyyliergoliinia, joka suli 159-161°C:ssa. (Kokonaissaanto 1,08 g).

Metaanisulfonaatti-suola valmistettiin liuottamalla 150 mg D-2-bromi-6-n-propyyli-8/3-metyylimerkaptometyyliergoliinia noin 25 ml:ssa kuumaa metanolia. Lisättiin 1,6 ml metaanisulfonihappo-liuosta, joka sisälsi 2,5 millimoolia happoa, ja liuos jäähdytettiin. Sitten reaktioseos laimennettiin eetterillä, ja saatiin 940 mg metaanisulfonaatti-suolaa, joka suli 256°C:ssa hajoten tällöin.

D-6-n-propyy1i-8/S-metoksikärbonyyliergoliini, ylläesitetyn reaktion lähtöaine, voidaan valmistaa metyylidihydrolysergaatista samalla reaktiosarjalla, jota on käytetty esimerkissä 8 metyyli-lysergaatin itsensä vastaavan 6-n-propyyli-johdannaisen valmistamiseksi .

Esimerkki 10 D-6-n-propyyli-8 /6-metyylisulflnyylimetyyliergoliinin valmistaminen

Valmistettiin liuos liuottamalla 1,2 g D-6-n-propyyli-e^-metyylimerkaptometyyliergoliinia 100 ml:aan vettä. Siihen lisättiin liuos, joka sisälsi 685 mg natriumperjodaattia 25 ml:ssa vettä, ja muodostunutta seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 17 tunnin ajan. Reaktioseos laimennettiin natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, ja alkalinen kerros uutettiin kloroformin ja isopropanolin seoksella.

31 65777

Orgaaninen uute erotettiin, pestiin kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin. Liuottimen haihduttaminen tuotti jäännöksen, joka liuotettiin kiehuvaan metanoliin, johon oli lisätty 0,2 ml metaanisulfonihappoa. Liuos jäähdytettiin huoneen lämpötilaan ja laimennettiin yhtä suurella tilavuudella eetteriä. Liuottimet poistettiin tyhjössä, ja jäännös liuotettiin 100 ml:aan kiehuvaa asetonia. Asetoni-liuos suodatettiin ja jäähdytettiin. Saatiin D-6-n-propyyli-8^-metyylisulfinyylimetyyliergoliinin kiteinen metaanisulfonaattisuola, joka suli 200-9°C:ssa hajoten.

Analyysi laskettu: C, 56,31; H, 7,09; N, 6,57; S, 15,03.

Määritetty: C, 56,09; H, 6,85; N, 6,41; S, 14,86.

Valmistettiin vastaava vapaa emäs nomaalin menetelmin, ja se suli 173-5°C:ssa samalla hajoten.

Analyysi laskettu: C, 69,05; H, 7,93; N, 8,48; S, 9,70.

Määritetty: C, 68,99; H, 7,68; N, 8,71; S, 9,76.

Tämä tuote voidaan hapettaa perhapolla, kuten esim. m-kloori-perbentsoehapolla, esimerkin 11 mukaisen yhdisteen muodostamiseksi.

Esimerkki 11 D-6-n-propyyli-8 &-metyylisulfonyylimetyyliergoliinln valmistaminen

Valmistettiin reaktioseos 3,6 g:sta D-6-n-propyyli-8/3 -mesyy-lioksimetyyliergoliinia, 10 g:sta natriummetaanisulfinaattia ja 200 ml:sta DMF:a. Seosta kuumennettiin 110°C:ssa, typen alla, 3,75 tunnin ajan. Sitten reaktioseos laimennettiin vedellä ja vesi-seos uutettiin useita kertoja etyyliasetaatilla. Etyyliasetaatti-kerrokset yhdistettiin, ja yhdistetyt kerrokset pestiin vedellä, kyllästetyllä NaCL:n vesiliuoksella sekä kuivattiin tämän jälkeen. Etyyliasetaatin haihduttaminen tuotti jäännöksen, jossa oli yllä-esteityssä reaktiossa muodostunut D-6-n-propyyli-8/3-metyylisulfo-nyylimetyyliergoliini. Jäännös liuotettiin kloroformiin ja klorofor-miliuos kromatografoitiin 200 g:11a fluorosiiliä käyttämällä eluent-tina kloroformia, joka sisälsi nousevat määrät (2-4 prosenttia) metanolia. Saatiin ohutlevykromatografiässä kaksi pääfraktiota, yksi, juuri lähtöaineen edellä liikkuva fraktio ja toinen fraktio, joka liikkui juuri lähtöaineen takana. Fraktiot, jotka sisälsivät tämän toisen, hitaamman aineosan, yhdistettiin, ja niistä poistettiin liuotin haihduttamalla. Metanolista suoritettu jäännöksen tois- 6 5 7 7 7 32 tokiteytys tuotti kiteisen D-6-n-propyyli-8/£-metyylisulfonyyli-metyyliergoliinin, joka suli 184-6°C:ssa (kokonaissaanto 690 mg).

Analyysi laskettu: C, 65,86; H, 7,56; N, 8,09; S, 9,25; Määritetty: C, 66,08; H, 7,49; N, 7,88; S, 9,05.

Metaanisulfonihapposuola valmistettiin metanolissa normaalien menetelmien mukaisesti.

Esimerkki 12 D-2-kloori-6-n-propyyli-8/3-metyylimerkaptometyyliergollinln valmistaminen 7,2 g D-6-n-propyyli-8/3-mesyylioksimetyyliergoliinia liuotettiin 100 ml:aan metyleenidikloridia ja 380 ml:aan asetonitriiliä.

6,3 g booritrifluoridieteraattia lisättiin, ja seos jäähdytettiin noin 0-5°C:een. Seuraavaksi, noin 10 minuutin kuluessa, lisättiin pisaroittain liuos, jossa oli 1,80 ml sulfuryylikloridia ja 30 ml metyleenidikloridia. Reaktioseosta sekoitettiin jäähdyttäen noin 30 minuutin ajan, jonka jälkeen se laimennettiin 5 %:lla ammonium-hydroksidillä. Alkalinen kerros uutettiin useita kertoja kloroformin ja isopropanolin seoksella. Orgaaniset uutteet yhdistettiin, ja yhdistetyt uutteet pestiin kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella, jonka jälkeen ne kuivattiin.

Liuotin poistettiin haihduttamalla ja saatu jäännös liuotettiin metyleenidikloridia. Metyleenidikloridi-liuos kromatografoitiin 200 g:11a florosiiliä käyttäen eluenttina metyleenidikloridia, joka sisälsi nousevat määrät (2-3 prosenttia) metanolia. Kromatogrämmiä seurattiin ohutlevykromatografiän avulla. Kerättiin jakeet, jotka sisälsivät lähtöainetta hiukan nopeammin liikkuvan aineen, ja niistä haihdutettiin liuotin tyhjössä. Tämä jae, joka sisälsi ylläesitetyssä reaktiossa muodostuneen D-2-kloori-6-n-propyyli-8-mesyylioksi-metyyliergoliinin, toistokiteytettiin metanolista, jolloin saatiin kiteinen aine, joka suli 130-l°C:ssa (82 %:n saanto). Toinen metanolista suoritettu toistokiteytys tuotti yhdisteen, joka suli 133-5°C:ssa.

Analyysi laskettu: C, 57,49; H, 6,35; N, 7,06;

Cl, 8,93; S, 8,08 Määritetty: C, 57,29; H, 6,20; N, 7,12;

Cl, 9,13; S, 8,21.

33 6 5 7 7 7

Liuos, jossa oli 7 g metyylimerkaptaania 200 ml:ssa DMF:a jäähdytettiin jäävesi-hauteessa noin Q°C:een. 9,6 g natriumhydridiä mineraaliöljyyn valmistettuna 50 %:na suspensiona lisättiin siihen annoksittain, jolloin muodostui metyylimerkaptadi. Jäähdytyshaude poistettiin, ja sekoittamista jatkettiin noin 10 minuutin ajan, jona aikana lisättiin nopeasti pisaroittain liuos, jossa oli 6,2 g D-2-kloori-6-n-propyyli-8/3 -mesyylioksimetyyliergoliinia 75 ml:ssa DMF:a. Reaktioseosta sekoitettiin vielä tunnin ajan typen alla, jonka jälkeen se laimennettiin vedellä. Vesiliuos uutettiin useita kertoja etyyliasetaatilla. Etyyliasetaatti-uutteet yhdistettiin, ja yhdistetyt uutteet pestiin vedellä sekä natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella. Etyyliasetaatti-kerros kuivattiin, ja etyyliasetaatti poistettiin siitä haihduttamalla. Jäännös pestiin eetterillä, ja eetterin pesuvesi laimennettiin heksaanilla. Saatiin 4,4 g kiteistä ainetta, joka suli 183-6°C:ssa ja sisälsi ylläesitetyssä reaktiossa muodostuneen D-2-kloori-6-n-propyyli-8/$-metyylimerkaptometyylier-goliinin. Yhdiste muutettiin metaanisulfonaattisuolaksi, joka meta-noli-eetteri-liuottimesta suoritetun toistokiteytyksen jälkeen suli 267-9°C:ssa.

Analyysi laskettu: C, 53,98; H, 6,57; N, 6,29;

Cl, 7,97; S, 14,41.

Määritetty: C, 54,22; H, 6,64; N, 6,45;

Cl 8,13; S, 14,20.

Esimerkki 13 D-6-propyyli-8/S-metyyllmerkaptometyyliergoliinln valmistaminen

Kun esimerkin 1 mukainen alkylointi-reaktio toistettiin käyttämällä 315 mg D-8^-metyylimerkaptometyyliergoliinia, 0,12 ml n-propyyli-iodidia ja 275 mg kaliumkarbonaattia 10 ml:ssa DMF:a, ja reaktio suoritettiin huoneen lämpötilassa typen alla noin 22,5 tunnin aikana, ja käsittelyä jatkettiin kuvatulla tavalla, saatiin D-6-n-propyyli-8^-metyylimerkaptometyyliergoliini. Tämä tuote muutettiin esimerkin 1 mukaisella menetelmällä metaanisulfonaattisuolaksi, jolloin saatiin D-6-n-propyyli-8/3-metyylimerkaptometyyli-ergoliinimetaanisulfonaattia, joka suli noin 259-262°C:ssa samalla hajoten.

34 65777

Esimerkki 14 D-6-n-propyyli-8 /d-metyylimerkaptometyyllergoliini Esimerkissä 4 valmistettua D-6-allyyli-8/3-metyylimerkapto-metyyliergoliinimetaanisulfonaattia hydrattiin 51 mg käyttäen 10 mg 5 % Pd/Csa ja 5 ml 80 % etanolia/20 % vettä vedyn paineessa, 6 2 joka oli 1,01 x 10 dyne/cm , ja sekoitettiin noin 20 tunnin ajan. Katalysaattori poistettiin suodattamalla, ja suodos väkevöitiin tyhjössä 45°C:ssa. Jäännös liuotettiin 10 ml:aan metanolia, lisättiin 0,5 g florosiliä, ja metanoli poistettiin tyhjössä 45°C:ssa. Florosili kromatografoitiin käyttämällä eluenttina kloroformia, joka sisälsi nousevat määrät metanolia. Kromatogrammia seurattiin ohutlevykromatografiän avulla. Lähtöainetta vähän nopeammin liikkuvat jakeet koottiin, ja liuotin haihdutettiin niistä tyhjössä.

Tämä jaejäännös toistokiteytettiin eetteristä ja kuivattiin tyhjössä, jolloin se tuotti 31 mg D-6-n-propyyli-8/5 -metyylimerkapto-metyyliergoliinia, joka suli noin 253-256°C:ssa hajoten.

Esimerkki 15 D^-kloori-e-n-propyyli-B/ff-metyylisulfinyylimetyyliergoliinin valmistaminen

Liuos, jossa oli 1,05 g (3,0 mmoolia) D-2-kloori-6-n-propyy-limerkaptometyyliergoliinia ja 0,20 ml (3,1 mmoolia) metyylisulfoni-happoa 50 ml:ssa metanolia, lisättiin yhtenä osana liuokseen, jossa 011 665 mg (3,3 mmoolia) m-klooriperbentsoehappoa (85 %) 25 mltssa kloroformia. Seosta sekoitettiin 1/2 tunnin ajan typen alla. Orgaaninen liuotin poistettiin tyhjössä. Jäännös antoi olennaisesti yhden täplän TLCrllä. Jäännöksen kloroformi-liuos suodatettiin, 50 g:n läpi Al2/.j:a sekä florosiilin läpi. Florosiili pestiin 2-4 % meta-nolilla. Yhdistetyt liuokset laimennettiin sitten dietyylieetteril-lä, joka kiteytti D-2-kloori-6-n-propyyli-8^-metyylisulfinyylier-goliinin, sp. 142-150°C. Saanto, 250 mg.

Analyysi laskettu: C, 62,53; H, 6,91; N, 7,68;

Cl, 9,71; S, 8,79.

Määritetty: C, 62,66; H, 6,73; N, 7,50;

Cl, 9,88; S, 9,01.

35 6 5 7 7 7

Esimerkki 16 D-2-kloorl-6-n-propyyli-8/? -metyylisulfonyylimetyyliergolii-nin valmistaminen D-2-kloori-6-n-propyyli-8/^-metyylisulfinyylimetyyliergo-liinia 0,49 g (1,3 mmoolia) ja 0,10 ml (1,5 mmoolia) metyylisulfo-nihappoa liuotettiin 50 ml:aan metanolia. Liuos lisättiin yhtenä osana liuokseen, jossa oli 295 mg (1,5 mmoolia) m-klooriperbentsoe-happoa 25 ml:ssa kloroformia. Seosta sekoitettiin typen alla 1/2 tunnin ajan. Orgaaninen liuotin poistettiin tyhjössä. TCL:lla jäännöksestä tuli esille olennaisesti yksi täplä.Jäännös liuotettiin kloroformiin, suodatettiin 50 g:n läpi A^O^sa sekä florosiilin läpi. Sitten liuos laimennettiin dietyylieetterillä, joka kiteytti D-2-kloori-6-n-propyyli-8/^-metyylisulfonyylimetyylierogliinin.

Sp. 212-5°C (hajoaa). Saanto, 275 mg.

Analyysi laskettu: C, 59,91; H, 6,62; N, 7,35; S, 8,42; Cl, 9,31, Määritetty: C, 59,63; H, 6,34; N, 7,14; S, 8,32; Cl, 9,38.

Todisteena kaavan I mukaisten yhdisteiden käyttökelpoisuudesta Parkinsonin oireyhtymän on todettu, että ne vaikuttavat muuttamalla käyttäytymistä koemenettelyssä, jossa käytetään hyväksi 6-hydroksidopamiinin vaurioittamia rottia. Tässä kokeessa käytetään nigro-seostriatalin vaurioittamia rottia, jotka on saatu aikaan Ungerstedt'in ja Arbuthnott'in menetelmällä, Brain Res, 24, 485 (1970). Yhdiste, jolla on dopamiinin vaikutusaktiivisuutta, saa aikaan rottien kääntymisen ympyrässä vaurioituneen sivun vastakkaiselle puolelle. Viiveajan jälkeen, joka vaihtelee yhdisteestä toiseen, kierrosta lukumäärä lasketaan 15 min. jaksoa aikana. D-6-n-propyyli-8y^-metyylimerkaptometyyliergoliininesylaatilla ei ollut vain erittäin lyhyt, 6 tai 7 minuutin pituinen viiveaika, vaan se aikaansai kunkin rotan suorittamaan keskimäärin 105 kierrosta.

Tulokset, jotka on saatu tämän yhdisteen ja muiden läheisten yhdisteiden testauksesta rotan kiertokokeessa, on esitetty seuraa-vassa taulukossa 1. Yhdisteet liuotettiin veteen, ja vesiliuos ruiskutettiin rotan vatsaonteloon. Taulukon ensimmäisessä sarakkeessa on yhdisteen nimi, toisessa sarakkeessa IP-annos (vatsaontelon sisään 36 65777 annettu annos) mg:na/kg, sarakkeessa 3 koe-eläinten prosentuaalinen määrä, joilla ilmeni kääntyrniskäyttäytyminen, sarakkeessa 4 vaikutuksen viiveaika, sarakkeessa 5 vaikutuksen kesto, ja sarakkeessa 6 on esitetty viiveajan päätyttyä ensimmäisten 15 minuutin kuluttua havaittujen käännösten keskimääräinen lukumäärä.

37 65777

K

, HE LntNOoorHin

»*3 o rH O rH VO

φ 3 rH i—H (N *H

« H

s Q + +4*

x jj *T <N <N iH rH -H

5 8 * ™ > J2

J

^ ^ l o *r ί· m r~

H

'ti :2 ίί o oo o o o f «3 c ° oo o o o

<#> flj rH »H rH r—< rH <H

etsi

S3S

SM

JO Ή Ή rH rH iH '—I

Sf

Hi1 ,·,,,, S ·§ ^ i Si äii ti ö3 il li *! ft i!a f| , s f Ia! Il sf ?! 1 Iti ?i p li iff af I Fill III dL f|i lp fis I tit tii 65777 38 h • :ra ^ Ή g ug m .h ai r—| a s λ r* ™ 3 8 > J2 | > -H rr

•H -rj g l VO

§ £ ° ^ ^ m il s c; ^ "S ai o o 3 (0 :ίβ ffl tn o $ 3 S1 h

+Jrl>S

fiÄSä

§ CT! r-H <H

ά| li 11 i I l! ;

•H ^3 Λ-3 S

s lii il I

i IfHS ί 39 65777

Kaavan I mukaiset yhdisteet ovat myös käyttökelpoisia prolaktiinin inhibiittoreina, ja sellaisina niitä voidaan käyttää riittämättömän, kuten esim. synnytyksen jälkeisen maidonerityksen ja maidonmuodon hoidossa. Edelleen, yhdisteet ovat käyttökelpoisia hoidettaessa Parkinsonin oireyhtymää.

Todisteena käyttökelpoisuudesta sairauksien hoidossa, jolloin on toivottavaa vähentää prolaktiinin tasoa, kaavan I mukaisten yhdisteiden on osoitettu seuraavan menetelmän mukaisesti inhiboivan prolaktiinia.

Täysikasvuisia, Sprague-Dawley-rotua olevia rottia, jotka painoivat noin 200 g, kasvatettiin ilmaistoidussa ja valaistuksen suhteen valvotussa huoneessa (valaistu 6 ap.- 8 ip.), ja niitä ruokittiin laboratorioruoalla sekä vedellä ad. libitum. Kuhunkin rottaan ruiskutettiin vatsaontelon sisälle 2,0 mg reserpiiniä vesi-lietteenä, 18 tuntia ennen ergoliini-johdannaisen antamista. Reserpiinin tarkoitus oli säilyttää prolaktiini-tasot tasaisesti kohonneina. Koeyhdisteet liuotettiin 10 prosenttiseen alkoholiin 10 mg/ml:n konsentraationa, ja ne ruiskutettiin vatsaontelon sisälle normaalin annoksen ollessa 50 mg/kg. Kutakin yhdistettä annettiin 10 rotan ryhmälle, ja 10 koiraspuolisen rotan muodostama kontrolliryhmä sai yhtä suuren määrän 10 %:sta alkoholia. Tunnin kuluttua käsittelystä kaikki rotat tapettiin katkaisemalla kaula, ja prolaktiini määritettiin 150 mlrsta seerumia. Tulokset arvioitiin statistisesti käyttämällä Student 'in testiä prolaktiinin tason muutosten merkitsevyyden "p" laskemiseksi.

Käsiteltyjen rottien ja kontrollirottien prolaktiinitason ero jaettuna kontrollirottien prolaktiinitasolla antaen kaavan I mukaisten yhdisteiden aiheuttaman prolaktiinin erittymisen prosentuaalisen inhiboitumisen. Nämä inhiboitumisprosentit on esitetty myöhemmin taulukossa 2. Tässä taulukossa sarake 1 ilmaisee yhdisteen nimen, sarake 2 rottien kunkin ryhmän prolaktiini-tason, sarake 3 prolaktiinin prosentuaalisen inhiboitumisen, sarake 4 merkitsevyyden tason. Tiedot on kerätty kolmesta eri kokeesta, joista kullakin on oma kontrollinsa. Taulukko 2 esittää kokeessa saadut tulokset.

65777 40 £ ,Η

j>1 O ι—i O

g °° IO

j3 'o, ! O o 1 o ^ e vv v

S

8 cP a!> ** λ. I I m 00 I id ^ I σ\ in 1 σ\

3 TT TT 1-4 ' <N

t| m o TT o ^ 4· I 4* I 4-1 +1 +1

P TT ID 00 <N TT

O Ή {N in (N

m rH in i* i3 ad id

I S I S

ll-jhj. 1¾ «J 11 m» s

00 d Γ -R 00 -H

•H Λ -rl ^ -H -in -H

^ rH rH CO -H rH *r-j I h 8 ti! h (m g ^.¾ I «I i|· «1 vj>j? § S I il &s S I ώg 65777 41 (—4 r-H f—4 I—I »H r—4

¢1 O O O O O O

gj I O O O O O O

4J : OOOOOO

VVVVVV

id g df> A <ye e* <#> -jf> oP »s fi ·Η I ιΗ^ίΗ^ΗΉΉ

•H+J I (J\ CD <T\ <J\ CD

2 m cn (N rr oj (N

2 .......

13 r'OrHOO^HO

1¾ +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 m (T> -Η (Τ» CTv o cn m oo m m oo m •S ^ j| ij I If li s j| , fi ?i ti ?i If I 01 p p II fl p i ill if If If It If ft 65777 42 to

f-H rH

C1 O O

m o o tj =o I O ° I s v t; β ·Η Ö0

'3 Tj I CT» CN

p 2 I oo ϋ

+3 CO 'ί H

^ r' o o β +1 +1 +1

CU

ro vo m *3 Ci cn rr ro

Il I

l| 1 s

21 51 S

Ίο 1¾ ^ g Φ OO -H to •d Γη ΛI 3 ^ ^ il i 0 H Π 2 CU Ή · 1 | l| il s S S is iS h 43 65777

Annosreaktio-käyriä käyttämällä on määritetty, että D-6-n-propyyli-8 fi -metyylimerkaptometyyliergoliinimesylaatti on noin 100 kertaa tehokkaampi prolaktiinin inhibiittorina kuin vastaava D-6-metyyli-yhdiste ja noin 30 kertaa voimakkaampi 6-hyd-roksidopamiinin vaurioittamilla rotilla suoritetussa kääntymiskäyt-täytymiskokeessa kuin vastaava D-6-metyyli-johdannainen.

Lisäksi, kaavan I mukaiset yhdisteet, erityisesti D-6-n-pro-pyyli-8^-metyylimerkaptometyyliergoliini ja sille läheiset Δ - ja Δ -yhdisteet ovat härän aivojen aivojuurien synaptosomien membraaneissa sijaitseviin dopamiinireseptoreihin suurella affiniteetilla tapahtuvan tritioiden dopamiinin sitoutumisen äärimmäisen tehokkaita inhibiittoreita --- katso Bymaster ja Wong, Fed. Proc.

36, 1006 (1977) ja ovat täten käyttökelpoisia Parkinsonin taudin hoidossa. Seuraavassa taulukossa 3 esitetään useiden ergoliinien, 8-ergoleenien ja 9-ergoleenien inhibitiokykyä koskeva määritys-sarja, joka on laadittu tämän keksinnön sekä aiempien tutkimusten perusteella. Taulukossa sarake 1 ilmaisee yhdisteen nimen, Ki (nanomooleina) inhibiittorin konsentraatio, joka tarvitaan hidastamaan reaktionopeus puoleen reaktion alkunopeudesta.

Taulukko 3

Yhdisteen nimi (nM) D-6-n-propyyli-8/$ -metyylimerkapto- metyyliergoliinimesylaatti 3+1 D-6-n-propyyli-8-metyylimerkapto- metyyli-8-ergoleenimaleaatti 2 D-6-n-propyyli-8/# -metyylimerkapto- metyyli-9-ergoleeni 2 D-2-bromi-6-n-propyyli-8/3 -metyyli- merkaptometyyliergoliinimesylaatti 3 D-6~allyyli-8/# -metyylimerkapto- metyyliergoliinimesylaatti 5 D-6-etyyli-8/5 -metyylimerkapto- metyyliergoliinimesylaatti 3,5 D-6-n-propyyli-8/$ -metoksimetyyli- ergoliinimesylaatti 10 44 6 5 7 7 7

Aiempien tutkimusten mukaiset yhdisteet (nM) D-6-metyyli-8/3 -metyylimerkapto- metyylieirgoliinimesylaatti 13 D-6-metyyli-8/3-metoksimetyyli- ergoliinimesylaatti 75 D-6-metyyli-8/£ -metyylimerkapto- metyyli-9-ergoleeni 6 D-2-kloori-6-metyyli-8/3 -metyyli- merkaptometyyliergoliinimesylaatti 6

Kaavan I mukaiset yhdisteet, erityisesti D-ö-n-propyyli-e^ -metyylimerkaptometyyliergoliinit ovat, hämmästyttävää kyllä, sero-toniinin vaikutuksen voimistajia eikä serotoniinin vastavaikuttajia kuten useimmat ergoleenit ja ergoliinit.

Käytettäessä kaavan I mukaisia yhdisteitä prolaktiinin erittymisen inhiboinnissa tai hoidettaessa Parkinsonin oireyhtymää tai käytettäessä jonkin muun farmakologisen vaikutuksen vuoksi annetaan ergoliinia, 8-ergoleenia tai 9-ergoleenia tai niiden farmaseuttisesti hyväksyttävän hapon suolaa Parkinsonismia potevalle tai sellaiselle kohteelle, jonka prolaktiini-taso on vähentynyt, määrältään 0,01- 15 mg/kg nisäkkään painoa. D-6-n-propyyli-8/3-metyy-limerkaptometyyliergoliiniä käytettäessä annosalue on 0,01-0,5 mg. Annostelua, joka tapahtuu suun kautta, pidetään parempana. Jos käytetään parenteraalista annostelua, on suotavaa ruiskuttaa ihon alle ja käyttää sopivaa, tunnettua, farmaseuttista formulaatiota. Muut parenteraaliset annostelutavat, kuten vatsaontelonsisäinen, lihakseen tai laskimoon suoritettu antaminen ovat yhtä tehokkaita. Erityisesti, kun annetaan laskimoon tai lihakseen, käytetään vesiliukoista, farmaseuttisesti hyväksyttävää suolaa. Suun kautta tapahtuvaa antamista varten voidaan kaavan I mukainen yhdiste joko vapaana emäksenä tai suolansa muodossa sekoittaa normaalien farmaseuttisten täyteaineiden kanssa ja pakata tyhjiin gelatiinikapselei-hin tai puristaa tapleteiksi.

Claims (12)

45 65777

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten kaavan I mukaisten ergoliinijohdannaisten ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmistamiseksi, ch2-y-ch3 >\,A >r1 I II iV HN_i'-χ jossa kaavassa on etyyli, n-propyyli tai allyyli, Y on O, S tai SO2, X on vety, kloori tai bromi ja katkoviiva tarkoittaa mahdollista sidosta, tunnettu siitä, että vhdiste, jonka kaava on .K .· i ti-R2 / n I II IV · . .H lii____J-x 2 jossa Q on poistuva ryhmä, R on vety, etyyli, n-propyyli tai allyyli ja X ja katkoviiva tarkoittavat samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan missä tahansa järjestyksessä (A) alkylointiaineen kanssa, kun R on vety, (B) 8-asemassa korvaavan aineen kanssa, jonka kaava on R3 - Y - CH3 III jossa Y tarkoittaa samaa kuin edellä ja 3 R on alkalimetalli tai kvaternäärinen ammoniumradikaali; (C) halogenointiaineen kanssa, kun X on vety, ja 2 (D) haluttaessa hydrausaineen kanssa, kun R on allyyli 8 9 ja/taiA - taiΔ -kaksoissidos on läsnä.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että Q on kloori, bromi tai jodi tai sulfonaattiesteri kuten metyyli-, etyyli-, propyyli-, fenyyli-, bentsyyli- tai tolyylisulfo-naattiesteri. 46 6 5 7 7 7

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että on natrium tai N,N,N-trimetyyli-N-bentsyyliammonium-metylaatti.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä D-6-n propyyli- 8 v^-metyylimerkaptometyyliergoliinin valmistamiseksi, tunnet-t u siitä, että D-6-n-propyyli-8<^-mesyylioksimetyyliergoliini saatetaan reagoimaan metyylimerkaptaanin natriumsuolan kanssa.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä D-6-n-propyyli-8 £-metoksimetyyliergoliinin valmistamiseksi, tunnettu siitä, että D-6-n-propyyli-8-mesyylioksimetyyliergoliini saatetaan reagoimaan N,N,N-trimetyyli-N-bentsyyliammoniummetylaatin kanssa.

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä D-6-allyyli-8 -metyylimerkaptometyyliergoliinin valmistamiseksi, tunnettu siitä, että D-6-allyyli-8/^-mesyylioksi-metyyliergoliini saatetaan reagoimaan metyylimerkaptaanin natriumsuolan kanssa.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä D-6-etyyli-8-metyylimerkaptometyyliergoliinin valmistamiseksi, tunnettu siitä, että D-6-etyyli-8^ -mesyylioksimetyyliergoliini saatetaan reagoimaan metyylimerkaptaanin natriumsuolan kanssa.

8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä D-6-n-propyyli- 8-metyylimerkaptometyyli-8-ergoleenin valmistamiseksi, tunnet-t u siitä, että D-6-n-propyyli-8-kloorimetyyli-8-ergoleeni saatetaan reagoimaan metyylimerkaptaanin natriumsuolan kanssa.

9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä D-6-n-propyyli- 8./>-metyylimerkaptometyyli-9-ergoleenin valmistamiseksi, tunnettu siitä, että D-6-n-propyyli-e^-mesyylioksimetyyli-9-ergoleeni saatetaan reagoimaan metyylimerkaptaanin natriumsuolan kanssa.

10. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä D-6-n-propyyli-8 /^-metyylisulfonyylimetyyliergoliinin valmistamiseksi, tunnettu siitä, että D-6-n-propyyli-8^*-mesyylioksimetyyliergoliini saatetaan reagoimaan natriummetaanisulfinaatin kanssa.

11. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä D-6-n-propyyli-8^-metyylimerkaptometyyliergoliinin valmistamiseksi, tunnet-t u siitä, että D-8/* -metyylimerkaptometyyliergoliini saatetaan reagoimaan n-propyylijodidin kanssa. 47 65 7 77

12. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä D-6-n-propyyli-8/^ -metyylimerkaptometyyliergoliinin valmistamiseksi, tunnet-t u siitä, että D-6-allyyli-8p/ -metyylimerkaptometyyliergoliini saatetaan reagoimaan vedyn kanssa 5 % Pd/C:n läsnä ollessa. 65777 48