FI60204B - Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara pleuromutiliner - Google Patents

Description

ΓβΙ KUULUTUSJULKAISU rr\nf\A jjgrg W <11> UTLÄGGNINGSSKRIFT 602 0 4 • fevB C (45) n--n'tl iy:'n!Vtty 10 12 17-!1

Patent oeddelat (S1) Kv.lk?/lnt-CI.3 C 0? Ώ 295/04 SUOMI —FINLAND (21) Pit*n«lh«k.nw*-Pm.nun.eki»tet 79^061 (22) Htktmiipilvl — AMeknlnpdig 27*12.79 * * (23) AlkupUvt—Giltlgh«t»dag 26.09.72 (41) Tullut luikituksi — Bllvlt offundig 27.12.79

Patentti- ja rekisterihallitus .... „ ,., ., ., ..

_ . . . . ^ . (44) Nihtlvllulptnon > kuvl.|ulkalsun pvm. — aD q,

Patent-och registerstyrelsen ' ' Antokin utltgd oeh uti.*krift«n pubHcund 31.08.81 (32)(33)(31) ttuoikuus—Begird prloritaf 05.10.71 O5.IO.7I, 25.Ο5.72, 25.Ο5.72, 25.Ο5.72 Sveitsi-Schveiz(CH) II+I+50/7I* 1M51/71 7738/72, 7739/72, 77^0/72 (71) Sandoz A.G., Basel, Sveitsi-Schweiz(CH) (72) Helmut Egger, Wien, Hellmut Reinshagen, Wien, Itävalta-österrike(AT) (71*) Oy Kolster Ab (5U) Menetelmä uusien terapeuttisesti käytettävien pleuromutiliinien valmistamiseksi - Förfarande för framställning av nya terapeutiskt an-vändbara pleuromutiliner (62) Jakamalla erotettu hakemuksesta 261+5/72 (patentti 58635) ~

Avdelad frän ansökan 261+5/72 (patent 58635)

Esillä oleva keksintö koskee menetelmää uusien terapeuttisesti käytettävien pleuromutiliinien valmistamiseksi, joiden kaava on __ 0-CO-CH2-S-(CH2)n-/~^p-R2 ch3 oh jossa on etyyli tai vinyyli, n on kokonaisluku 2-5, ja R2 on 2 60204 C1 _l+-alkyylikarbonyylioksi-C1 _l4alkyyli tai bentsoyylioksi-C1 _4-alkyyli sekä näiden yhdisteiden happoadditiosuolojen ja kvaternääris-ten suolojen valmistamiseksi.

Keksinnön mukaisesti saadaan kaavan I mukaisia uusia pleuro-mutiliineja ja niiden happoadditiosuoloja sekä kvaternäärisiä suoloja siten, että kaavan Ia mukainen yhdiste 0-C0-CH,-S-(CH,) V\l-R? o I 2 n v_y 2 \—< “· CH3 oh jossa R.j ja h merkitsevät samaa kuin edellä, ja on alempi hydrok-sialkyyli, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka kaava on

,R4-B III

jossa B on alkoksikarbonyyli tai kloori- tai bromiformyyli, tai ryhmä R^-CO-O-CO-, ja R^ on alempi alkyyli tai fenyyli, ja saadut kaavan I mukaiset pleuromutiliinit muutetaan haluttaessa happoaddi-tiosuolaksi tai kvaternääriseksi suolaksi.

Menetelmä voidaan toteuttaa esim. siten, että kaavan Ia mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan liuottimessa kaavan III mukaisen happojohdannaisen kanssa. Edullisesti voidaan happojohdannais-ta käyttää myös liuottimena, tai käytetään happojohdannaisen ja inertin liuottimen, esim. kloorihiilivedyn, kuten dikloorimetaanin, seosta. Reaktiotuote voidaan erottaa reaktioseoksesta sinänsä tunnetuilla menetelmillä ja puhdistaa sopivassa tapauksessa.

Kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan muuttaa happoadditio-suoloikseen ja päinvastoin.

Kaavan I mukaisista yhdisteistä voidaan saada sinänsä tunnetuilla menetelmillä vastaavat kvaternääriset suolat.

• · · I

Alempi hydroksialkyyliryhmä R^ sisältää edullisesti 1-4, ja erikoisesti 2 hiiliatomia.

3 60204

Luku n on edullisesti 2 tai 3.

Kaavan I mukaisilla yhdisteillä, niiden farmakologisesti hyväksyttävillä happoadditiosuoloilla ja niiden kvaternäärisillä suoloilla on, samalla kun ne ovat erittäin vähän myrkyllisiä, mielenkiintoisia biologisia, erikoisesti mikrobeja tappavia ominaisuuksia ja niitä voidaan käyttää tämän johdosta lääkeaineina.

Niillä on estovaikutus bakteerien suhteen, mikä on voitu todeta tutkittaessa in vitro (agarlevykoe) ja in vivo (hiirikokeita) käyttäen erilaisia bakteerikantoja. Tämä estovaikutus on voitu todeta aina väkevyysalueella noin 0,002-5 μg/ml. Erikoisesti on tutkittu estovaikutus mykoplasman suhteen, ja on todettu sen esiintyvän väkevyyden noin 0,008-2,5 jig/ml yläpuolella. Tämän johdosta voidaan keksinnön mukaisesti valmistettuja yhdisteitä käyttää bakteereja tappavina tehokkaina antibiootteina.

Lääkeaineina voidaan käyttää kaavan I mukaisia yhdisteitä ja niiden vesiliukoisia, fysiologisesti sopivia suoloja yksin tai sopivissa annostusmuodoissa yhdessä epäorgaanisten tai orgaanisten, farmakologisesti indifferenttisten apuaineiden kanssa. Niitä käytetään esim. kapselien ja injektoimis- tai instillaatiovalmisteiden aineosina, jotka sisältävät optimaalisen verenkuvan aikaansaamiseksi riittävän määrän aktiivisia aineosia, so. noin 10-500 mg kapselia kohden.

Tämän lisäksi muodostavat keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet erinomaisia ravintoaineseosten ja juomaveden lisäaineita.

Kaavan Ia’ mukaiset lähtöaineyhdisteet

0-C0-CHo-S-(CHo)-/ 'n-rJ

LTT j/1 y CH3 oh jossa R.j , n j-a R^ merkitsevät samaa kuin edellä, voidaan valmistaa saattamalla kaavan IV mukainen yhdiste 4 60204 0-C0-CH2-0-S02-R5 fy<r^l/1 iv y—\ CH3 CH3 oh jossa merkitsee samaa kuin edellä, ja R^ on alkyyli tai aryyli reagoimaan kaavan V mukaisen yhdisteen kanssa /~~\ i

H-S-(CH2)n-N ^"*2 V

jossa n ja merkitsevät samaa kuin edellä.

Tämä menetelmä voidaan suorittaa esimerkiksi siten, että natriumin liuokseen vedettömässä alemmassa alkoholissa, esim. etanolissa, liuotetaan kaavan V mukaisen yhdisteen happoadditiosuolaa, esim. hydrohalogenidia, tai vapaata emästä. Tähän liuokseen lisätään sitten kaavan IV mukaisen yhdisteen liuos inertissä liuotti-messa, esim. alifaattisessa ketonissa, kuten etyylimetyyliketonis-sa tai asetonissa. Reaktio tapahtuu edullisesti huoneen lämpötilassa aina reaktioseoksen kiehumislämpötilaan saakka, erikoisesti lämpötilassa 25-55°C, ja kestää 2-12 tuntia.

Yhdisteitä, joilla on kaava

ψ/Λ -(CH2)n-SH V

jossa n ja R2 merkitsevät samaa kuin edellä, voidaan saada saattamalla kaavan VI mukainen yhdiste reagoimaan tiovirtsa-aineen kanssa ja hydrolysoimalla muodostunut kompleksi tämän jälkeen al-kaalisesti.

Mikäli lähtöainetuotteita ei ole kuvattu, ovat ne tunnettuja tai niitä voidaan valmistaa sinänsä tunnetuilla menetelmillä, vast, analogisesti tässä kuvattujen menetelmien tai sinänsä tunnettujen menetelmien suhteen.

60204

Farmakologiset kokeet ja niiden tulokset

Menetelmä: Pienimmän vaikuttavan pitoisuuden määritys laimen- nusmenetelmän avulla (laimennuskerroin 0,5) Väliaine: Modifioitu Bakos-liemi (ilman fenolipunaista ) V ilj elyaika: 48 tuntia 37°C:ssa putkessa, jonka jälkeen näyte siirrettiin agarlevylle ja lisättiin tutkittavaa yhdistettä sisältävää liuosta, ja seurattiin kasvua 48 tunnin ajan (37°C).

Tutkitut yhdisteet, käytetyt koe-organismit ja saadut tulokset on esitetty taulukoissa I ja II.

Taulukko I. Keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden pienin vaikuttava pitoisuus (|ig/ml)

Mikro- 14-desoksi-14- 14-desoksi-14- Tetra- organismi ££2-(4-asetoksi- [[2-(4-asetoksi- sykliini- etyyli)piperatsino/- etyyli)piperät- hydro- etyylimerkaptoaset- sino_/etyylimer- kloridi oksi^-mutiliini kaptoasetoksi - mutiliini ätcc : M. hcmirus 14152 0,0078 0,0039 3,125 M. gallisepticum 19610 0,0156 0,0078 0,78 M. sp. 1 SH| 0,0128 0,625 6,25 M. Hyorhirus 17981 0,0062 0,156 6,25

Taulukko TI. Vertailuyhdisteen pienin vaikuttava pitoisuus (pg/ml)

Mikro-organismi l4-desoksi-14-p-hydroksi- Tetrasykliini- fenyylimerkaptoasetoksi- hydrokloridi mutiliini

ATCC

M. hominis 14152 3,9 3,12 M. gallisepticum 19610 1,95 3,12 M. sp. I R1 15,625 12,5

Tuloksista ilmenee, että vertailuyhdisteellä (DE-OS 2 036 027, esimerkki 16) on lähes sama aktiivisuus kuin tetrasykliinihydro-kloridilla, ja että uusilla yhdisteillä on huomattavasti parempi aktiivisuus.

6 60204

Seuraavissa esimerkeissä, jotka kuvaavat keksintöä lähemmin, on kaikki lämpötilat esitetty Celssius-asteina.

Esimerkki 1; 14-desoksi-i^~/S-(4-asetoksietyyli)plperatslno7etyy-limerkaptoasetoksl}-mutiliini a) (4-hydroksietyylipiperatsino)etaanitioli 4-hydroksi 4-hydroksietyylipiperatsiini kuumennetaan yhdessä ety- leenisulfidin bentseeniliuoksen kanssa moolisuhteessa 3:1 autoklaavissa 17 tuntia 100°C:ssa. Annetaan jäähtyä, erotetaan polymeeri materiaali suodattamalla, pestään bentseenillä, haihdutetaan liuotin, ja tislataan tuote Vigreux-kolonnin kautta. Saadun tuotteen kiehumapiste on 97,5°/0,l torr.

b) 14-desoksi-14^£2-(4-asetoksietyyli)piperatsino7etyyli-merkaptoasetoksi^-mutiliini 1,81 g (4-hydroksietyylipiperatsino)etaanitiolia lisätään typpikehässä liuokseen, jossa on 0,35 g natriumia 25 ml:ssa vedetöntä etanolia, ja tämän jälkeen tipottain liuos, jossa on 5,35 g 14-desoksi-14-tosyylioksiasetoksimutiliinia 15 ml:ssa etyylimetyyliketonia. Neljä tuntisen sekoittamisen jälkeen huoneen lämpötilassa haihdutetaan liuotin tyhjössä, ja jäännös liuotetaan 50 ml:aan etyyliasetaattia, jolloin tapahtuu osittainen uudelleenesteröityminen. A.setyloidun tuotteen erottaminen asety-loimattomasta tuotteesta tapahtuu patsaskromatografoimalla piihappogeelillä käyttäen elutoimisaineena kloroformi/metanolia (7:1). Nopeammin liikkuva fraktio muutetaan kloorivedyn eetteri-liuoksen avulla hydrokloridiksi, jonka pehmenemispiste on 137 -140°C. Vastaavan bis(vetymaleinaatti):n sulamispiste on 142-144°C.

Esimerkki 2: 14-desoksi-lH- lh. -(4-asetoksietyyli)piperätsino7 ~ etyylimerkaptoasetoksi) -mutiliini a) d4-desoksi-14- (C2 -(4-hydroksietyyli)piperatsinq7etyy-limerkapt oas et oks mut i li i ni Menetellään kuten esimerkissä Ib on selitetty, mutta liuotetaan tyhjöhaihduttaessa saatu jäännös 50 ml:aan metyleeni-kloridia, pestään viisikertaisella määrällä vettä ja kuivataan magnesiumsulfaatilla. Liuokseen lisätään 5 ml 5,8-n kloori-vedyn eetteriliuosta; lisättäessä eetteriä kiteytyy hydrokloridi. Pehmenemispiste 192-197°C.

7 60204 b) 14-desoksi-14 fa -(4-asetoksietyyli )piperatsinoj etyyli-merkaptoasetoksi)-mutiliini 4,0 g:aan 14-desoksi-14 f(7-( 4-hydroksietyyli)piperat sinoj -etyylimerkaptoasetoksi^-mutiliinia lisätään samalla jään avulla jäähdyttäen 10 ml asetanhydridiä ja tämän jälkeen sekoitetaan 5 tuntia huoneen lämpötilassa. Seos kaadetaan tämän jälkeen 150 ml:aan kylmää vettä, sekoitetaan 1 tunti ja uutetaan kolmasti eetterillä. Eetterifaasi heitetään pois ja vesifaasi tehdään alkaaliseksi 10-n natriumhydroksidin vesiliuoksella samalla jäähdyttäen. Saostunut vapaa emäs liuotetaan etyyliasetaattiin. Liuoksen kuivaamisen jälkeen magnesiumsulfaatilla ja liuottimen haihduttamisen jälkeen jää jäljelle puhdas emäs. Bis(vetymale-aatti):n sulamispiste on 142-144°C.

Esimerkki 3: 14-desoksi-14- {h.'zL 4-propionyylioksietyyli)piperatsi-no^etyylimerkaptoasetoksj} -mutiliini 0,50 g 14-desoksi-14- 4-hydroksietyyli)piperatsino7-etyylimerkaptoasetoksi"}-mutiliinia keitetään 5 ml:ssa dikloori-metaania 0,20 g:n kanssa propionyylikloridia 2 tuntia palautus-jäähdyttäen. Jäähdyttämisen jälkeen saostetaan kiteinen dihydro-kloridi lisäämällä kloorivedyn eetteriliuosta ja laimentamalla vedettömällä eetterillä. Suola erotetaan imusuodattamalla ja pestään eetterillä. Sp. 182-187°.

Esimerkki 4: 14-desoksi-14- Jh. -(4-pivaloyylioksietyyli)piperatsi-no7 etyylimerkaptoasetoksi)mutiliini 0,50 g ^-desoksi-^-f^-i 4-hydroksietyyli)piperatsino7-etyylimerkaptoasetoksi}-mutiliinia keitetään 5 ml:ssa dikloori-metaania 0,15 g:n kanssa pivaloyylikloridia 4 tuntia palautus-jäähdyttäen. Jäähdyttämisen jälkeen saostuu lisätään kloorivedyn eetteriliuosta, ja laimennetaan vedettömällä eetterillä, jolloin saostuu kiteinen dihydrokloridi. Se pestään imusuodattamisen jälkeen lyhyen aikaa vedettömällä eetterillä ja kuivataan tyhjössä. Yhdiste hydrolysoituu veden läsnäollessa erittäin helposti lähtöaineeksi.

60204

Esimerkki 5 : m-desoksi-m- ^2-( ^-bentsoyylioksietyyli)piperatsi-no^etyylimerkaptoasetoksi mutiliini 0,50 g 14-desoksi-14- 4-hydroksietyyli)piperatsino?- etyylimerkaptoasetoksi^mutiliinia annetaan reagoida esimerkeissä 3 ja 4 kuvatulla tavalla 2 tuntia 0,16 g:n kanssa bentsoyyliklo-ridia. Tämän jälkeen dihydrokloridi saostetaan kuvatulla tavalla. Pehmenemispiste 132-135°.

Esimerkki 6: 14-desoksi-14- 4-asetoksietyyli)piperatsino7 ~ etyylimerkaptoasetoksi^-dihydromutiliini a) 14-desoksi-lU-tosyylioksiasetoksidihydromutiliini

Menetelmä «C:

Liuokseen, jossa on 8,86 g dihydropleuromutiliinia 30 ml:ssa kuivaa pyridiiniä, lisätään lämpötilassa -15° 6,10 g p-tolueeni-sulfokloridia yhdellä kertaa samalla voimakkaasti sekoittaen, sitten sekoitetaan 2 tuntia lämpötilassa -15° ja sitten vielä 1 tunti lämpötilassa 0°. Seos kaadetaan sitten jääveteen ja tuote liuotetaan metyleenikloridiin. Orgaaninen faasi pestään samalla jäähdyttäen ensin jäävedellä ja tämän jälkeen kyllästetyllä natriumvetykarbonaattiliuoksella. Kuivattaessa natriumsulfaatilla ja haihdutettaessa saadaan ohutkerroskromatograafisessa käsittelyssä yhtenäinen tuote, jonka pehmenemispiste on 78-80°.

Menetelmä : 0,5 3 g 14-desoksi-14-tosyylioksiasetoksimutiliinia hydra-taan 10 ml:ssa etikkaesteriä, 0,10 g:11a 10-% palladiumhiiltä katalysaattorina, ilmakehän paineessa ja huoneen lämpötilassa. Laskettu vetymäärä on kulunut noin 1 tunnin kuluttua. Liuos erotetaan katalysaattorista suodattamalla, ja se haihdutetaan kuiviin tyhjössä. Pehmenemispiste 78-80°.

b) 14-desoksi-14 4-hydroksietyyli)piperatsino?etyyli-merkaptoasetoksi"3-dihydromutiliini 14-desoksi-14-tosyylioksiasetoksidihydromutiliini saatetaan analogisesti esimerkin 2a kanssa, reagoimaan (4-hydroksi-etyylipiperatsino)etaanitiolin kanssa, jolloin saadaan 14-desoksi-It-βϊ -(4-hydroksietyyli)piperatsino/etyylimerkaptoasetoksi^-dihydromutiliinia, jonka dihydrokloridisuolan pehmenemispiste on 135-140°C.

9 60204 c) 14-desoksi-14- CC2-< 4-asetoksietyyli)piperatsin<i7 etyy-limerkaptoasetoks^ -dihydromutiliini.

0,50 g 14-desoksi-14- 4-hydroksietyyli)piperätsino/- etyylimerkaptoasetoksi^ -dihydromutiliinia annetaan seistä 1,5 ml:n kanssa asetanhydridiä 2 tuntia huoneen lämpötilassa, tämän jälkeen laimennetaan 10 ml:11a vettä ja sekoitetaan 1 tunti huoneen lämpötilassa ylimääräisen asetanhydridin hajoittamiseksi. Liuos uutetaan kolmasti eetterillä. Haihdutetusta liuoksesta seostetaan dihydrokloridi kloorivedyn eetteriliuoksella esimerkissä 4 kuvatulla tavalla. Sp. 133-135°.

Claims (3)

10 60204 Patenttivaatimus : Menetelmä uusien terapeuttisesti käytettävien pleuromuti-liinien valmistamiseksi, joiden kaava on

0-C0-CH„-S-(CHo) -l/ \-R0 I 2 2 n \ / 2 CH3 oh jossa on etyyli tai vinyyli, n on kokonaisluku 2-5, ja R2 on C1 _l+alkyylikarbonyylioksi-C1 _4alkyyli tai bentsoyylioksi-C^ _^al-kyyli, v sekä näiden yhdisteiden happoadditiosuolojen ja kvaternääris- ten suolojen valmistamiseksi, tunnettu' siitä, että kaavan Ia mukainen yhdiste

0-C0-CHo-S-(CH„)-N 'N-Ri | 2 2 n \__/ 2 5 % LiJC i \ CH3 ch3 oh jossa R-j ja n· merkitsevät samaa kuin edellä, ja R^ on alempi hyd-roksialkyyli, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka kaava on R4-B III jossa B on alkoksikarbonyyli tai kloori- tai bromiformyyli, tai ryhmä R^-CO-O-CO-, ja on alempi alkyyli tai fenyyli, ja saadut kaavan I mukaiset pleuromutiliinit muutetaan haluttaessa happo-additiosuolaksi tai kvaternääriseksi suolaksi.