FI56697C - Foerfarande foer framstaellning av depsipeptidantibiotikumet l 13365 - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av depsipeptidantibiotikumet l 13365 Download PDFInfo
- Publication number
- FI56697C FI56697C FI771721A FI771721A FI56697C FI 56697 C FI56697 C FI 56697C FI 771721 A FI771721 A FI 771721A FI 771721 A FI771721 A FI 771721A FI 56697 C FI56697 C FI 56697C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- methanol
- butanol
- water
- antibiotic
- positive
- Prior art date
Links
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 78
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 46
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical class CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 claims description 19
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 13
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 10
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 9
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 241000950168 Actinoplanes sarveparensis Species 0.000 claims description 7
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 6
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims description 5
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 5
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 5
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 claims description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 5
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 4
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims description 4
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 4
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 4
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 claims description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 claims description 3
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 3
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 claims description 3
- 238000002844 melting Methods 0.000 claims description 3
- 230000008018 melting Effects 0.000 claims description 3
- STZCRXQWRGQSJD-GEEYTBSJSA-M methyl orange Chemical compound [Na+].C1=CC(N(C)C)=CC=C1\N=N\C1=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C1 STZCRXQWRGQSJD-GEEYTBSJSA-M 0.000 claims description 3
- 229940012189 methyl orange Drugs 0.000 claims description 3
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 3
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 claims description 3
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 claims description 3
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 2
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 claims description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 2
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 claims description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 claims description 2
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 2
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 claims description 2
- 150000008282 halocarbons Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 2
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000012800 visualization Methods 0.000 claims 3
- 238000004448 titration Methods 0.000 claims 2
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 claims 2
- 125000004178 (C1-C4) alkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- FIHZWZBEAXASKA-UHFFFAOYSA-N Anthron Natural products COc1cc2Cc3cc(C)cc(O)c3C(=O)c2c(O)c1C=CC(C)C FIHZWZBEAXASKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 241000009355 Antron Species 0.000 claims 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 108010002156 Depsipeptides Proteins 0.000 claims 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 claims 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 claims 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 claims 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 claims 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000007844 bleaching agent Substances 0.000 claims 1
- MZNDIOURMFYZLE-UHFFFAOYSA-N butan-1-ol Chemical compound CCCCO.CCCCO MZNDIOURMFYZLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 claims 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 claims 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 claims 1
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 claims 1
- 239000010200 folin Substances 0.000 claims 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 claims 1
- 238000002386 leaching Methods 0.000 claims 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims 1
- -1 p-toluenesulfonyl Chemical group 0.000 claims 1
- OHRURASPPZQGQM-GCCNXGTGSA-N romidepsin Chemical compound O1C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)C(=C/C)/NC(=O)[C@H]2CSSCC\C=C\[C@@H]1CC(=O)N[C@H](C(C)C)C(=O)N2 OHRURASPPZQGQM-GCCNXGTGSA-N 0.000 claims 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 claims 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 claims 1
- 210000002268 wool Anatomy 0.000 claims 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 24
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 23
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 22
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 8
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 8
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 7
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 3
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 3
- XNWFRZJHXBZDAG-UHFFFAOYSA-N 2-METHOXYETHANOL Chemical compound COCCO XNWFRZJHXBZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000187844 Actinoplanes Species 0.000 description 2
- 108010001478 Bacitracin Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- OJMMVQQUTAEWLP-UHFFFAOYSA-N Lincomycin Natural products CN1CC(CCC)CC1C(=O)NC(C(C)O)C1C(O)C(O)C(O)C(SC)O1 OJMMVQQUTAEWLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 2
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 2
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 description 2
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 2
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003071 bacitracin Drugs 0.000 description 2
- 229930184125 bacitracin Natural products 0.000 description 2
- CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N bacitracin A Chemical compound C1SC([C@@H](N)[C@@H](C)CC)=N[C@@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]1C(=O)N[C@H](CCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2N=CNC=2)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCCCC1 CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- CZTQZXZIADLWOZ-CRAIPNDOSA-N cefaloridine Chemical compound O=C([C@@H](NC(=O)CC=1SC=CC=1)[C@H]1SC2)N1C(C(=O)[O-])=C2C[N+]1=CC=CC=C1 CZTQZXZIADLWOZ-CRAIPNDOSA-N 0.000 description 2
- 229960003866 cefaloridine Drugs 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 2
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 2
- 230000005757 colony formation Effects 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 238000002189 fluorescence spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 2
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 2
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 2
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 2
- OJMMVQQUTAEWLP-KIDUDLJLSA-N lincomycin Chemical compound CN1C[C@H](CCC)C[C@H]1C(=O)N[C@H]([C@@H](C)O)[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](SC)O1 OJMMVQQUTAEWLP-KIDUDLJLSA-N 0.000 description 2
- 229960005287 lincomycin Drugs 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 2
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 2
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 2
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- BBBFYZOJHSYQMW-LGDQNDJISA-N (2s)-2,4-diamino-4-oxobutanoic acid;(2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O BBBFYZOJHSYQMW-LGDQNDJISA-N 0.000 description 1
- UQZSVIGPZAULMV-DKWTVANSSA-N (2s)-2,4-diamino-4-oxobutanoic acid;propane-1,2,3-triol Chemical compound OCC(O)CO.OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O UQZSVIGPZAULMV-DKWTVANSSA-N 0.000 description 1
- WECIKJKLCDCIMY-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-n-(2-cyanoethyl)acetamide Chemical compound ClCC(=O)NCCC#N WECIKJKLCDCIMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 1
- 241000193468 Clostridium perfringens Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241000204022 Mycoplasma gallisepticum Species 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 1
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LGDAGYXJBDILKZ-UHFFFAOYSA-N [2-methyl-1,1-dioxo-3-(pyridin-2-ylcarbamoyl)-1$l^{6},2-benzothiazin-4-yl] 2,2-dimethylpropanoate Chemical compound CC(C)(C)C(=O)OC=1C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)N(C)C=1C(=O)NC1=CC=CC=N1 LGDAGYXJBDILKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- RJGDLRCDCYRQOQ-UHFFFAOYSA-N anthrone Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C3=CC=CC=C3CC2=C1 RJGDLRCDCYRQOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000001362 calcium malate Substances 0.000 description 1
- OLOZVPHKXALCRI-UHFFFAOYSA-L calcium malate Chemical compound [Ca+2].[O-]C(=O)C(O)CC([O-])=O OLOZVPHKXALCRI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940016114 calcium malate Drugs 0.000 description 1
- 235000011038 calcium malates Nutrition 0.000 description 1
- HDRTWMBOUSPQON-ODZAUARKSA-L calcium;(z)-but-2-enedioate Chemical compound [Ca+2].[O-]C(=O)\C=C/C([O-])=O HDRTWMBOUSPQON-ODZAUARKSA-L 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 150000001722 carbon compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 210000004534 cecum Anatomy 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 239000012225 czapek media Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000000295 emission spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012454 non-polar solvent Substances 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 238000004816 paper chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 238000003918 potentiometric titration Methods 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N rifampicin Chemical compound O([C@](C1=O)(C)O/C=C/[C@@H]([C@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)\C=C\C=C(C)/C(=O)NC=2C(O)=C3C([O-])=C4C)C)OC)C4=C1C3=C(O)C=2\C=N\N1CC[NH+](C)CC1 JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N 0.000 description 1
- 229960001225 rifampicin Drugs 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000012807 shake-flask culturing Methods 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 1
- 239000004544 spot-on Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000011149 sulphuric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
- C12P1/06—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using actinomycetales
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/045—Actinoplanes
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/827—Actinoplanes
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Mushroom Cultivation (AREA)
Description
ΓβΙ nn KUULUTUSjULKAISU ccfiQ7 JMBTa (11) UTLAGGNINGSSKRIFT 5>OD3/ C Pr.t-ntti ay3nr.?tiy 10 03 1930
Patent aeddelnt ^ ^ (51) Kv.lk.*/lnt.CI.' G 12 D 9/14· ; C 07 G 11/00 SUOMI — FINLAND (21) Pttenttihikemu* — Pit*ntaineknln| 771721 (22) Halctmitpllvl — AnaBknlnfsdag 31.05 · 77 ^ ^ (23) Alkupilvi— Glltlfhattdaf 31.05.77 (41) Tullut JulklMktl — Bltvlt ofFantllg 20 X2 77
Patentti- )a r.ldterlhallitu. Nthtivlkalpanoo,. kuuLjulluhun pvm._
Patant-och ragistaratyraltan Arwttkan utl«|d och uti.ikrtft*n pubik«r»d 30.11.79 (32)(33)(31) Fy/detty «tuoikws -Bqlrd priority 29.06.76
Englanti-England(GB) 2693^/76 (71) Gruppo Lepetit S.p.A., Via Durando, 38, 20158 Milano, Italia-Italien(lT) (72) Hermes Pagani, Milano, Carolina Coronelli, Milano, Francesco Parent!,
Milano, Giorgio Tamoni, Milano, Italia-Italien(lT) (7*0 S.A. Munsterhielm (5*0 Menetelmä depsipeptidiantibiootti L 13365:n valmi stand seksi - Förfarande för framställning av depsipeptidantibiotikumet L 13365 Tämä keksintö koskee uutta antibioottista ainetta, joka saadaan Actinoplanes-sukuun kuuluvan Actinoplanes sarveparensis-kannan käymisellä. Uusi antibioottinen aine, jota seuraavassa kutsutaan antibiootiksi L 13365, on vaaleankeltainen kiteinen yhdiste, jolla on selvät karakteristiset ominaisuudet kuten sulamispiste, infrapuna- ja ultraviolet-tiabsorptiomaksimit.
Kuten edellä mainittiin, valmistetaan antibioottia L 133&5 viljelemällä Actinoplanes sarveparensis-nimistä kantaa. Tämä kanta, joka identifioidaan talletusnumerollamme A/13826, eristettiin Sarvepar-kylässä (Intia) kerätystä maanäytteestä. Kanta on talletettu CBS:n viljelmäkokoelmaan (Central Bureau Voor Schimmelcultures -Oosterstraat 1 - Baarn - Hollanti) jossa sille annettiin numero 305.76.
Useat antibiootit, jotka saadaan Actinoplanes kantojen käymisellä, ovat tunnettuja kirjallisuudesta, kts. esim. FI-pat.julkaisu 52355, 5*+l*+5, 5*+326 ja 51+1+95. Kuitenkin antibioottiset aineet, jotka saadaan niissä, omaavat erilaiset fysikokemialliset ja biologiset ominaisuudet kuin tämän keksinnön mukainen antibioottinen aine ja saaduilla kannoilla, jotka tunnetaan mainituista patenteista, on erilaiset taksonomiset 2 56697 ja morfologiset tunnusmerkit kuin Actinoplanes sarveparensis CBS 305.76-kannalla.
Antibiootin L 13365 valmistamiseksi mikro-organismia viljellään aerobisissa olosuhteissa vesipitoisessa ravintoväliaineessa, joka sisältää assimiloitavan hiililähteen, assimiloitavan typpilähteen ja epäorgaanisia suoloja.
Antibioottia muodostavaa kantaa esiviljellään yleensä ravls-tuspullossa kunnes läsnä on huomattava antibioottinen aktiviteetti ja sen jälkeen viljelmä ympätään ravinto-käymisväliainetta sisältäviin käymisastioihin. Viljelemistä jatketaan 25-35°C:sessa aerobisissa olosuhteissa riittävän pitkän ajan kunnes saavutetaan huomattava anti-bioottipitoisuustaso. Tänä aikana suoritetaan mikrobiologisia kokeita käyttäen agar-diffuusio-menetelmää muodostuneen antibioottisen aineen pitoisuuden tarkistamiseksi.
Myseelikakun erottamisen jälkeen suodattamalla antibioottinen aine eristetään suodatetusta käymisliemestä tavanomaisia menetelmiä käyttäen, kuten esimerkiksi uuttamalla orgaanisella liuottimena, johon antibioottinen aine liukenee ja joka on sekoittumaton vesipitoisen väliaineen kanssa. Uutto suoritetaan sen jälkeen kun suodoksen pH on säädetty arvoon noin 2 - noin *f. Uuttamiseen sopivia orgaanisia liuottimia ovat edullisesti 1-6 hiiliatomia sisältävät alkanolit, alempien alifaattisten happojen C-^-C^-alkyyliesterit tai alemmat halogenoi-dut hiilivedyt. Liuotin erotetaan sen jälkeen käymisliemestä suurteho-sentrifugoinnilla, väkevöidään noin 1/200 - 1/kOO alkuperäisestä tilavuudesta, jäähdytetään ja annetaan seistä kunnes muodostuu sakka, joka kerätään suodattamalla. Tämä sakka koostuu verraten puhtaasta antibiootista L 13365· Emäliuokset kerätään ja kaadetaan ylimäärään inert-tiä ei-polaarista liuotinta, kuten petrolieetteriä, jolloin saadaan lisää raakaa antibioottia L 13365· Näin saatu raaka tuote liuotetaan metanoli-asetoni-seokseen ja saostetaan liuoksesta lisäämällä happamek-si tehtyä vettä. Molemmat erät yhdistetään ja puhdistetaan edelleen pylväskromatografoimalla käyttämällä eluoimissysteeminä kloroformi--metanoli-seosta.
Antibiootti L 13365 kiteytetään lopuksi metanoli:etyyliasetaatista 1:1 (til./til.).
Antibioottisella aineella L 13365 on huomattava antibakteeri-nen in vitro- ja in vivo-aktiviteetti. Antibiootilla L 133&5 on erityisesti huomattava in vitro-antimikrobinen vaikutus, erityisesti gram--positiivisia bakteereita vastaan, mikä ilmenee seuraavasta taulukosta: 3 56697 T a u 1 ukko
Kanta Pienin estävä kon- sentraatio tyig/ml)
Staphylococcus aureus ATCC 6538 0,02^
Staphylococcus aureus Tour 0)025
Streptococcus haemolyticus C 203 0,0062
Diplococcus pneumoniae UC ^+1 0,00078
Clostridium perfringens ISS 305*+3 0,012
Mycoplasma gallisepticum H21 C.Z.B. 0,2
Kuten edellä mainittiin, on antibiootilla L 13365 myös erinomainen in vivo-aktiviteetti hiiressä aikaansaatuja kokeellisia tulehduksia vastaan. Seuraavassa luetellaan antibiootin L 13365 ED^Q-arvot Staphylococcus aureus'elia, Streptococcus haemolyticus'elia ja Diplococcus pneumoniae111a aikaansaatua kokeellista tulehdusta vastaan:
Tulehduksen aikaansaava kanta s.c.
Streptococcus haemolyticus 0,2
Staphylococcus aureus 10
Diplococcus pneumoniae 0,½
Uusi antibioottinen aine on aktiivinen myös sellaisia mikro--organismi-kantoja vastaan, jotka ovat resistenttejä tavallisesti käytettyjä antibiootteja vastaan. Eräänä tyypillisenä esimerkkinä esitetään seuraavassa taulukossa I antibiootin L 13365 pienin estävä kon-sentraatio (MIC) lukuisille antibiooteille resistenttejä Staphylococcus aureus-kantoja vastaan:
Taulukko I
Kanta Muiden antibioot- Antibiootin L 13365 tien MIC-arvot MIC-arvo
Penisilliinille resistentti Staphylococcus aureus ATCC 6538 penisilliini>100 0,½
Streptomysiinille resistentti
Staphylococcus aureus Tour streptomysiini >100 0,078
Tetrasykliinille resistentti Staphylococcus aureus ATCC 6538 tetrasykliini >100 0,15
Bifampisiinille resistentti Staphylococcus aureus ATCC 6538 rifampisiini >100 0,01 ^ 56697
Kanta Muiden antibioot- Antibiootin L 13365 tien MIC-arvot MIC-arvo
Neomysiinille resistentti Staphylococcus aureus ATCC 6538 neomysiini>100 0,005
Erytromysiinille resistentti Staphylococcus aureus ATCC 6538 erytromysiini >100 0,0*+
Kloramfenikolille resistentti Staphylococcus aureus ATCC 6538 kloramfenikoli >100 0,02
Kefaloridiinille resistentti Staphylococcus aureus ATCC 6538 kefaloridiini>100 0,078
Kanamysiinille resistentti Staphylococcus aureus ATCC 6538 kanamysiini >100 0,0*+
Basitrasiinille resistentti Staphylococcus aureus ATCC 6538 basitrasiini >100 0,02
Linkomysiinille resistentti Staphylococcus aureus ATCC 6538 linkomysiini>100 0,15
Hiirille joko oraalisesti tai intraperitoneaalisesti annetun antibiootin L 13365 myrkyllisyys on erittäin alhainen, LD^Q-arvojen ollessa yli 1000 mg/kg.
Actinoplanes sarveparensis A/l^826-kannan kuvaus Pesäkkeiden makroskooppinen tutkimus
Kanta kasvaa hyvin erilaisilla ravintoagareilla. Kaura-aga-rilla pesäkkeiden läpimitta on 3 - *+ mm, niiden reuna on epätasainen ja niillä on karkea pinta. Ilmamyseeli puuttuu aina.
Mikroskooppinen tutkimus
Itiöpesäkkeitä muodostuu useissa agar-väliaineissa. Niillä on tasainen pallomainen muoto ja niiden läpimitta on 13 - 20 ^u .Värekarva-itLöt, jotka ovat erittäin liikkuvia, ovat pallomaisia, mutta joissakin tapauksissa hieman pitkänomaisia läpimitan ollessa 1,5 - 2 μ . Näiden tunnusmerkkien perusteella kanta A/13826 luokitellaan Actinoplanes--sukuun ja nimitetään Actinoplanes sarveparensis CBS 305-76. Taulukossa II on ilmoitettu Actinoplanes sarveparensis CBS 305.76-kannan viljelytunnusmerkit erilaisilla standardiväliaineilla Shirling'in ja Gottlieb'in mukaan (Intern. J. Syst. Bact., 16, 313-3^+0, 1966) ja muilla väliaineilla Waksman'in mukaan (The Actinomycetes, Voi. II,
The Williams and Wilkins Co., 1961). Viljelyominaisuudet määritettiin 5 56697 6-1^· vuorokauden inkubaation jälkeen 30°C:sessa.
Taulukossa III on ilmoitettu hiililähteiden hyväksikäyttö Pridham'in ja Gottlieb*in mukaan (Intern. J. Syst. Bact. ^6, 107, 19 W.
Taulukossa IV on esitetty kannan fysiologiset tunnusmerkit. Actinonlanes sarveparensis C.B.S. 305*76
Taulukko II Vilj elytunnusmerkit
Viljelyväliaine Viljelyominaisuudet Väliaine No 2 Runsasta kasvua, rypistynyt pinta, (hiivauute-mallas-agar) oranssista ruskeaan (pesäkkeen keskiosa on tummempi) Väliaine No 3 Niukkaa kasvua, ohut, läpinäkyvästä (kaura-agar) vaaleanoranssiin - itiöpesäkkeiden muo dostusta Väliaine No 1+ Kohtuullista kasvua, rapea pinta, vaa- (epäorgaanisia suoloja- leanoranssi (9/G/7) tärkkelys-agar) Väliaine No 5 Runsasta kasvua, rapea pinta, kirkas (glyseroli-asparagiini- oranssi (9/1/11) agar) Väliaine No 6 Niukkaa kasvua, rapea pinta, ruskea (peptoni-hiivauute-rauta- (13/C/7) agar) Väliaine No 7 Kohtuullista kasvua, rapea pinta, (tyrosiini-agar) oranssi (ll/F/8)
Kaura-agar Runsasta kasvua, karhea pinta, oranssi (Waksman*in mukaan) (9/H/12) (pesäkkeen keskiosa tummempi)
Hyckey'n ja Tresner'in Kohtuullista kasvua, rypistynyt pinta, agar ruskea (18/A/12)
Czapek-glukoosi-agar Runsasta kasvua, rypistynyt pinta, oranssi (11/G/ll)
Glukoosi-asparagiini-agar Runsasta kasvua, karhea pinta, kirk kaan oranssi (9/1/11)
Ravinto-agar Kohtuullista kasvua, karhea pinta, oranssi (ll/F/8)
Peruna-agar Kohtuullista kasvua, rypistynyt pinta, oranssista-ruskeaan - itiöpesäkemuo-dostusta
Bennetfin agar Kohtuullista kasvua, rypistynyt pinta, vaalean oranssi (9/D/5)
Kalsium-malaatti-agar Niukkaa kasvua, ohut läpinäkyvästä vaa lean oranssiin, itiöpesäkemuodostusta 6 S6697
Kuorittu maito-agar Runsasta kasvua, rypistynyt pinta, oranssista vaalean ruskeaan, täplä-var j o j a
Czapek-agar Runsasta kasvua, rypistynyt pinta, oranssi (11/G/ll)
Muna-agar Niukkaa kasvua, karhea pinta, läpi näkyvä
Pept.glukoosi-agar Kohtuullista kasvua, rypistynyt pinta, tummanoranssi (ll/B/12)
Agar Erittäin niukkaa kasvua, ohut, läpi näkyvä
Loeffler-seerumi Erittäin niukkaa kasvua, oranssi
Peruna Niukkaa kasvua, rypistynyt, tumman oranssi
Liivate Niukkaa kasvua, vaalean oranssi
Selluloosa Ei kasvua Väri määritettiin Maerz'in ja Paul·'in menetelmän mukaan (Maerz, A. ja M. Reg. Paul 1950· A dictionary of color, 2. painos M. Grow - Hill Book Company, Inc., New York).
Joidenkin viljelyväliaineiden kohdalla esitetyt numerot viit-taavat Shirling'in ja Gottlieb'in käyttämiin numeroihin (Intern. J. Syst. Bact., 16, 313-3^0, 1966).
Taulukko III
Hiiliyhdisteiden hyväksikäyttö
Hiililähde Hyväksikäyttö arabinoosi + ksyloosi +
Glukoosi + fruktoosi + mannoosi + mannitoli + inositoli + ramnoosi + (C^) g sakkaroosi + laktoosi + (C^)^ raffinoosi (C^)^ selluloosa
Erikoissalisiini + tarkoittaa hyväksikäyttöä - tarkoittaa ei-hyväksikäyttöä 7 56697
Taulukko IV
Fysiologiset tunnusmerkit
Koe Tulos Tärkkelyshydrolyysi positiivinen H2S-muodostus positiivinen
Melaniini-muodostus negatiivinen
Tyrosinaasi-reaktio negatiivinen
Kaseiini-hydrolyysi positiivinen
Kalsiummaleaatti-hydrolyysi positiivinen
Nitraatti-pelkistys positiivinen
Lakmusmaito-koagulaatio negatiivinen
Lak musmaito-peptonisaatio positii vinen
Liivate-nesteytys positiivinen
Antibiootti sen aineen muodostus .ia eristys Antibioottisen aineen valmistamiseksi Actinoplanes sarve-parensis C.B.S. 305.76-kantaa esiviljellään aerobisesti ravintoväli-aineessa kunnes on osoitettavissa huomattava antibioottinen aktiviteetti pH-arvossa noin 6 - noin 10. Ravistuspulloviljelmällä voi olla esimerkiksi seuraava koostumus g/l:na: lihauutetta 3,0 tryptonia 5,0 hiivauutetta 5,0
Glukoosia 1,0 liukoista tärkkelystä 2^,0 kalsiumkarbonaattia 0 tislattua vettä q.s. 1000 ml:aan.
Pulloja ravistellaan noin 2*+ tuntia noin 28-30°C: sessa ja näitä esiviljelmiä (yksi litra) käytetään käymisastioiden ymppäämi-seksi, joista kukin sisältää 10 litraa seuraavaa ravintoväliainetta: lihauutetta *f0 g peptonia *+0 g hiivauutetta 10 g natriumkloridia 25 g soijapapujauhoa 100 g glukoosia 500 g kalsiumkarbonaattia 50 g vesijohtovettä q.s. 10 litraan.
8 56697 Käymiserät inkuboidaan aerobisesti samalla hämmentäen 28--30°C:sessa. Tietyin väliajoin määritetään antibioottinen aktiviteetti mikrobiologisesti agar-diffuusiomenetelmällä käyttämällä Staphylococcus aureus’ta koe-organismina. Maksimiaktiviteetti saavutetaan 72--96 tunnin käymisen jälkeen.
Antibiootin L 1^65 eristys .ia puhdistus Käymisliemi (80 litraa) suodatetaan käyttämällä l^ssta Clarcefia (piimää, jota myy CECA) (p.Ail.) suodatusapuaineena. Myseelikakku heitetään pois ja suodatettu liuos, joka on hapotettu pH-arvoon 2,5 10 $:sella HC1: :llä, uutetaan kahdesti etyyliasetaattimäärällä, joka vastaa noin 50 % tilavuudesta.
Orgaaninen faasi erotetaan vesipitoisesta faasista suurteho-sentrifugoinnilla, kuivataan sitten natriumsulfaatilla, väkevöidään 1+5-50°C: sessa tyhjössä noin 1/300 alkuperäisestä tilavuudesta ja jäähdytetään lopuksi noin 0-10°C:seen.
Muodostuu raaka sakka, joka kerätään suodattimelle, pestään pienellä määrällä etyyliasetaattia ja kuivataan Lt-5°C: sessa tyhjössä. Saadaan Ι,ΐΜ-O g antibioottia L 1336?, jonka puhtaus on 70 % määritettynä spektrofotometrisesti.
Edellä mainitusta suodatuksesta saatavat emäliuokset kaadetaan 20 tilavuusosaan petrolieetteriä ja saadaan lisää (2,550 g) antibioottista ainetta, jonka puhtausaste on 20-25 % (määritettynä spektrofotometrisesti). Tämä aine suspensoidaan pieneen määrään metanoli: :asetonin 9!1 seosta, liukenemattomat aineosat suodatetaan pois ja laimennetaan vedellä; liuoksen pH säädetään arvoon noin 2,5 10 %: sella HCltllä samalla hämmentäen ja sentrifugoimalla kerätty sakka liuotetaan edelleen mahdollisimman pieneen määrään butanolia noin ^-5-50° C:sessa. Liuos väkevöidään tyhjössä noin 1/5 osaan alkuperäisestä tilavuudesta ja jäähdytetään noin M·0 Crseen; saatu sakka, joka kerätään ja kuivataan tyhjössä, muodostaa antibioottisen aineen L 13365 (0,^50 g), jonka puhtausaste on 80 % (määritettynä spektrofotometrisesti). Saadut erät puhdistetaan sitten tavanomaisten menetelmien mukaan. Tätä tarkoitusta varten ne liuotetaan mahdollisimman pieneen määrään kloroformi :metanolin 85:15 seosta ja kromatografoidaan piihappogeeli--celite-pylvään (1:1 til./til. ) läpi, joka on etukäteen aktivoitu 100°C:sessa ja pestään edellä mainitulla kloroformi/metanoli-seoksella.
Fraktioiden eluointi ja ohutkerroskromatografiatarkistus suoritetaan samalla seoksella. Ohutkerroskromatogrammianalyysiarvojen perusteella kerätyt fraktiot väkevöidään tyhjössä pdeneen tilavuuteen.
9 56697
Lisättäessä etyylieetteriä muodostuu sakka, joka koostuu antibiootista L 13365 jonka puhtausaste on 95 % (määritettynä spektrofotometrisesti). Mainittu sakka liuotetaan metanoli:etyyliasetaatti-seokseen 1:1, kuumennetaan 1+5°C:seen ja liukenemattomat aineosat suodatetaan pois; jäähdytetään *+ C:seen ja annetaan seistä yli yön samassa lämpötilassa jolloin saadaan puhdasta antibioottista ainetta L 13365 vaaleankeltaisina neulasina.
Antibiootin L 13365 fvsiko-kemialliset ominaisuudet Antibiootti L 13365 on vaaleankeltainen kiteinen jauhe, jolla on hapan luonne. Antibiootin L 13365 happamen hydrolysaatin analyysi 6N kloorivetyhapossa suljetussa putkessa 110°C:sessa paljasti neljä aminohappoa, joista kolme on identifioitu aminohappo-analysaattorissa asparagiinihapoksi, treoniiniksi ja glysiiniksi. Antibiootille L 13365 on myös tunnusomaista seuraavat ominaisuudet:
1) Sulamispiste: 210°C
2) Elementaarianalyysi: 0=51,35 H=5,05 N=10,50 S=ll,05 o (erotuksena) =22,05 3) Ultravioletti- ja näkyvä absorptiospektri liuotin Λ maks (nm) El^cm
Kloorivetyhappo 0,1N 360 103 290 (olka) 237 326
Puskuri 0,15 M *f08 (olka) pH 7,5 378 67 290 (olka) 237 326
Puskuri 0,15 M *+08 99 pH 8,8 290 (olka) 238 336
Ultraviolettiabsorptiospektrit määritettiin UNICAM Sp 800 ultraviolettispektrofotometrillä käyttämällä L 13365:n liuoksia metyy-lisellosolvissa (MCS)-puskureissa eri pH-arvoissa 1:1 - suhteessa. Spektri on esitetty täydellisenä kuviossa 1.
*+) Fluoresenssispektri
Antibiootti sisältää voimakkaasti fluoroivan kromoforin ja tuotteen liuoksella 0,1N natriumhydroksidissa, joka on aktivoitu 2U-0 nm:ssa on emissiospektri, jonka maksimit ovat kohdissa 355 ja ^90 nm.
Fluoresenssispektri määritettiin Perkin-Elmer MPF - M+ fluoresenssi-spektrofotometrillä.
5) Infrapunaspektri
Karakteristiset absorptiojuovat nujol'issa on havaittu seu-raavilla taajuuksilla (cm-1): 3>+00 (olka), 3350 (terävä), 3200 (olka), 10 566S7 3100 (terävä), 2930 ja 2870 (nujol), 2800-2M-00, 2380 (atmosfääristä hiilidioksidia), 1750 (terävä), 16?0 (terävä), 1620 (terävä), 15*^0 (terävä), 1**80 (terävä), 1^60 ja 1380 (nujol), 1*4-20 (terävä), 13*+0 (terävä), I32O (terävä), 1280 (terävä), 12kO (terävä), 1195 (terävä), 1170 (terävä), ll*f5 (terävä), 1120 (terävä), 1075 (leveä), 1015 (terävä), 990 (terävä), 935 (terävä), 920 (leveä), 900 (terävä), 865 (terävä), 8*f0 (terävä), 800 (terävä), 770 (terävä), 755 (terävä), 7^0 (terävä), 720 (nujol).
Infrapunaspektri määritettiin Perkin-Elmer 157 spektrofoto- metrillä.
Spektri on esitetty täydellisenä kuviossa 2.
6) Omina!skierto Γ' “1 25 joi = + -^5° (G=0,8 % metanoli Jklorof ormissa 1:1) 7) Liukoisuus
Yhdiste on liukoinen dimetyylisulfoksidiin, dimetyyliforma-midiin ja kloroformi/metanoli-seoksiinj vähäliukoinen kloroformiin, metanoliin, metanoli/etyyliasetaatti-seoksiin, natriumbikarbonaatti -liuoksiin ja jääetikkaan; liukenematon veteen ja muihin tavallisiin orgaanisiin liuottimiin.
8) Karakteristiset reaktiot
Fehling positiivinen
Tollens positiivinen KMnO^ positiivinen H2S0]+ väk* tummanruskea väri
Ninhydriini negatiivinen
FeCl^ positiivinen
Millon negatiivinen
Schiff negatiivinen
Antroni positiivinen
Foliinl-Ciocalteau negatiivinen
Elson Morgan negatiivinen 9) Happamuus
Antibiootin L 13365 me tyylisellosoM: vesiliuoksen *f:lpotentio-metrisessa titrauksessa 0,1N natriumhydroksidilla saadaan pK arvoksi cl 7,8. Täten määritetty ekvivalenttipaino on l*+00.
10) Kromatografinen käyttäytyminen n 66697
Liuotinsysteemi Rf
Puskurilla pH 6,0 kyllästetty n-butanoli 0,75
Vesikyllästetty n-butanoli + 2 % p-tolueenisulfonihappoa 0,80
Vesikyllästetty n-butanoli + 2% väk. ammoniakki 0,70
Butanolilla kyllästetty puskuri pH 6,0 0,0
Ammoniumkloridi (20 % p./til. vedessä) 0,0 n-butanoli :metanoli: vesi ^-0:10: 20 joka sisältää 0,75 g metyylioranssia 0,90 n-butanoli: metanoli:vesi ^-0:10:30 0,90 vesi:asetoni 1:1 0,35 vedellä kyllästetty etyyliasetaatti 0,0-0,31 kloroformi:metanoli 85ϊ 15 (**) 0,51 (*) Paperikromatografointi Whatman-paperi 11a no 1. Antibiootti osoitettu S.aureuksella ympätyillä agar-levyillä.
(**) Ohutkerroskromatografointi piihappogeelilevyillä HF/tT-^^ · Fluorisoiva täplä UV-valossa.
Claims (1)
12 S66S7 Patenttivaatimus: Menetelmä depsipeptidiantibiootti L 13365:n valmistamiseksi, jolla on seuraavat tunnusmerkit: a) sulamispiste 210°C; b) likimääräinen elementaarikoostumus: 51,35 % hiiltä, 5,05 % vetyä, 10,50 % typpeä, 11,05 % rikkiä ja 22,05 % happea; c) UV-spektri karakteristiset UV-absorptiojuovat seuraavissa liuotinsystee-meissä (kuvio 1) liuotin Λ maks (nm) 1 cm kloorivetyhappo 0,1N 360 103 290 (olka) 237 326 puskuri 0,15 M i+08 (olka) pH 7,5 378 67 290 (olka) 237 326 puskuri 0,15 M i+08 99 pH 8,8 290 (olka) 238 336 d) IR-spektri karakteristiset infrapuna-absorptiojuovat nujolissa seuraa-villa taajuuksilla (cm-1) (kuvio 2): 3^0 (olka), 3350, 3200 (olka), 3100, 293Ο ja 2870 (nujol), 2800-2*+00, 2380 (atmosfäärinen hiilidioksidi), 1750, I67O, 1620, l5>+0, lt+80, ll+60 ja 138Ο (nujol), 1^+20, 13!+0, 1320, 1280, 12UO, 1195, 1170, 11^5, 1120, 1075 (leveä), 1015, 990, 935, 920 (leveä), 900, 865, 8*+0, 800, 770, 755, 7^0, 720 (nujol); e) ominaiskierto ΓαΠ (0,8 % metanoli:kloroformissa 1:1) = + 125° : ^ 4-36 f) liukoisuus: liukoinen dimetyylisulfoksidiin, dimetyyliformamidiin ja kloroformi/metanoli-seoksiin; vähäliukoinen kloroformiin, metanoliin, metanoli/etyyliasetaatti-seoksiin, natriumbikarbonaattiliuoksiin ja jääetikkaan; liukenematon veteen ja muihin tavallisiin orgaanisiin liuottimiin; g) karakteristiset reaktiot: Fehling positiivinen Tollens positiivinen KMn0jf positiivinen t'\ti 6 ,;:f $6657 13 H^SO^ väk. tummanruskea väri ninhydriini negatiivinen FeCl^ positiivinen Millon negatiivinen Schiff negatiivinen antroni positiivinen fOliini Ciocalteau negatiivinen Elson Morgan negatiivinen h) ionisoituvat funktiot: potentiometrisesti on havaittavissa ionisoituva funktio, jonka pK& on 7,8 (metyylisellosolvijvesi ^:1); i) Rf-arvot kromatografisesti Whatman-paperilla no 1, täplät visualisoi tu mikrobiologisesti Staphylococcus aureus'lla eluolntisysteemi Rf-arvo puskurilla pH 6,0 kyllästetty n-butanoli 0,75 vedellä kyllästetty n-butanoli + 2 % p-tolueenisulfonihappoa 0,80 vedellä kyllästetty n-butanoli + 2 % väk. ammoniakki 0,70 butanolilla kyllästetty puskuri pH 6,0 0,0 ammoniumkloridi (20 % p./til. vedessä) 0,0 n-butanoli:metanoli:vesi ^-0:10:20 joka sisältää 0,75 g metyylioranssia 0,90 n-butanoli:metanoli:vesi ^0:10:30 0,90 vesi:asetoni 1:1 0,35 vedellä kyllästetty etyyliasetaatti 0,0-0,31 ohutkerroskromatografointi piihappogeelilevyillä HF/UVj^, fluorisoivan täplän visualisointi UV-valossa eluointisysteemi Rf-arvo kloroformi:metanoli 85:15 0,51 j) aminohappoanaiyysi happamen hydrolyysin jälkeen osoittaa että läsnä on asparagiinihappoa, treoniinia, glysiiniä ja toistaiseksi tunnistamatonta neljättä aminohappoa $ k) ekvivalenttipaino noin l*+00, määritetty titrauksella, tunnettu siitä, että viljellään Actinoplanes sarveparensis G.B.S. No 305*76 viljelyväliaineessa, joka sisältää assimiloivan hiililähteen, assimiloivan typpilähteen ja epäorgaanisia t1 Ui ,ίύ lk Sb6S7 suoloja submersissä aerobisissa olosuhteissa kunnes mainittu organismi on tuottanut huomattavan määrän antibioottia L 133&5 mainitussa väliaineessa, antibioottinen aine otetaan talteen suodatetusta käymis-väliaineesta, jonka pH on ensin säädetty arvoon noin 2 -noin *+, uuttamalla orgaanisella liuottimena, joka on (C^-C^J-alkanoli, alemman alifaattisen hapon (C-^-C1+)-alkyyliesteri tai alempi halogenoi-tu hiilivety, ja näin saatu antibioottinen aine puhdistetaan kiteyttämällä ja pylväskromatografisesti. Förfarande för framställning av depsipeptidantibiotikumet L 13365 som uppvisar följande kännetecken: a) smältpunkt 210°C; b) ungefäriig elementarsammansättning: 51,35 % koi, 5,05 % väte, 10,50 # kväve, 11,05 % svavel och 22,05 # syre; c) UV-spektrum karakteristiska UV-absorptionsband i följande lösningsmedels-system (fig. 1) lösningsmedel A niaks (nm) El^cm klorvätesyra 0,1N 360 103 290 (skuldra) 237 326 buffert 0,15 M H08 (skuldra) «H n «r 378 67 290 (skuldra) 237 326 buffert 0,15 M MD8 99 pH 8,8 290 (skuldra) 238 336 d) IR-spektrum karakteristiska infraröda absorptionsband i nujol vid följande frekvenser (cm~^) (fig. 2): 3^00 (skuldra), 3350, 3200 (skuldra), 3100, 2930 och 2870 (nujol), 2800-21+00, 238Ο (atmosfärisk koldioxid), 1750, I67O, 1620, l5*+0, l*+80, 11+60 och 1380 (nujol), l*+20, 13*+0, 1320, 1280, 121+0, 1195, 1170, ll>+5, 1120, 107 5 (bred), 1015, 990, 935, 920 (bred), 900, 865, 8*+0, 800, 770, 7 55 , 7*+0 , 720 (nujol) e) specifik vridning (0,8# i metanolikloroform 1:1) = + 125° ; f) löslighet: lösligt i dimetylsulfoxid, dimetylformamid och i kloroform/me-tanol-blandningar; svagt lösligt i kloroform, metanol, metanol/etyl- 15 56697 acetat-blandningar, natriumbikarbonatlösningar och isättika; olösligt i vatten och övriga vanliga organiska lösningsmedel; g) karakteristiska reaktioner: Fehling positiv Tollens positiv KMnO^ positiv Η230^ kone. mörkbrun färg ninhydrin negativ FeCl^ positiv Millon negativ Schiff negativ antron positiv folin Ciocalteau negativ Elson Morgan negativ h) joniserbara funktioner: joniserbar funktion med pKa = 7,8 potentiometriskt pävisbar (metylcellosolv:vatten *+:l) i) Rf-värden kromatografering pä Whatman papper nr. 1, visualisering av fläckarna genom mikrobiologisk framkallning pä Staphylococcus aureus elueringssystem Rf-värde med buffert pH 6,0-mättad n-butanol 0,75 vattenmättad n-butanol + 2 % p-toluensulfonsyra 0,80 vattenmättad n-butanol + 2 % kone. ammoniak 0,70 butanolmättad buffert pH 6,0 0,0 ammoniumklorid (20 % vikt./vol. i vatten) 0,0 n-butanol:metanol:vatten *+0:10:20 innehällande 0,75 g metylorange 0,90 n-butanol:metanol:vatten *+0:10:30 0,90 vattemaceton 1:1 0,35 vattenmättad etylacetat 0,0-0,31 tunnskiktskromatografi pä silikagelplattor HF/UVg^., visualisering av den fluorescerande fläcken under UV-ljus elueringssystem Rf-värde kloroform:metanol 85:15 0,51 j) aminosyraanalys efter sur hydrolys indikerar närvaron av asparaginsyra, treonin, glyein och en tillsvidare inte identifierad fjärde aminosyraj
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB26934/76A GB1533677A (en) | 1976-06-29 | 1976-06-29 | Antibiotic |
| GB2693476 | 1976-06-29 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI771721A FI771721A (fi) | 1977-12-30 |
| FI56697B FI56697B (fi) | 1979-11-30 |
| FI56697C true FI56697C (fi) | 1980-03-10 |
Family
ID=10251519
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI771721A FI56697C (fi) | 1976-06-29 | 1977-05-31 | Foerfarande foer framstaellning av depsipeptidantibiotikumet l 13365 |
Country Status (32)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US4100273A (fi) |
| JP (1) | JPS532402A (fi) |
| AR (1) | AR212652A1 (fi) |
| AT (1) | AT352271B (fi) |
| AU (1) | AU514594B2 (fi) |
| BE (1) | BE856273A (fi) |
| CA (1) | CA1086669A (fi) |
| CH (1) | CH624992A5 (fi) |
| CS (1) | CS203159B2 (fi) |
| DD (1) | DD133573A5 (fi) |
| DE (1) | DE2724090A1 (fi) |
| DK (1) | DK278577A (fi) |
| ES (1) | ES460248A1 (fi) |
| FI (1) | FI56697C (fi) |
| FR (1) | FR2356666A1 (fi) |
| GB (1) | GB1533677A (fi) |
| GR (1) | GR63764B (fi) |
| HK (1) | HK39979A (fi) |
| HU (1) | HU174186B (fi) |
| IE (1) | IE45445B1 (fi) |
| IL (1) | IL52063A (fi) |
| LU (1) | LU77623A1 (fi) |
| NL (1) | NL7705490A (fi) |
| NO (1) | NO146873C (fi) |
| NZ (1) | NZ184053A (fi) |
| PH (1) | PH12811A (fi) |
| PL (1) | PL105792B1 (fi) |
| PT (1) | PT66730B (fi) |
| SE (1) | SE7707467L (fi) |
| SU (1) | SU680657A3 (fi) |
| YU (1) | YU159277A (fi) |
| ZA (1) | ZA772862B (fi) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6024717B2 (ja) * | 1978-05-24 | 1985-06-14 | 三共株式会社 | 抗生物質マイコプラネシン |
| GB8624806D0 (en) * | 1986-10-16 | 1986-11-19 | Pfizer Ltd | Glycopeptide antibiotic |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1455128A (en) * | 1973-03-19 | 1976-11-10 | Lepetit Spa | Purpuromycin and its derivatives |
| GB1458512A (en) * | 1973-11-22 | 1976-12-15 | Lepetit Spa | Antibiotic substance |
| DE2510160A1 (de) * | 1975-03-08 | 1976-09-16 | Bayer Ag | Antibioticum, ein verfahren zu seiner herstellung sowie seine verwendung als arzneimittel |
| US4031206A (en) * | 1976-02-04 | 1977-06-21 | Pfizer Inc. | Antibiotics produced by species of pseudonocardia |
| US4174390A (en) * | 1977-02-07 | 1979-11-13 | Eli Lilly And Company | Antibiotic A-7413 and process for preparation thereof |
| US4169887A (en) * | 1978-02-21 | 1979-10-02 | Pfizer Inc. | Antibiotics produced by species of actinoplanes |
-
1976
- 1976-06-29 GB GB26934/76A patent/GB1533677A/en not_active Expired
-
1977
- 1977-05-05 GR GR53381A patent/GR63764B/el unknown
- 1977-05-09 AU AU24991/77A patent/AU514594B2/en not_active Expired
- 1977-05-09 NZ NZ184053A patent/NZ184053A/xx unknown
- 1977-05-11 IL IL52063A patent/IL52063A/xx unknown
- 1977-05-13 ZA ZA00772862A patent/ZA772862B/xx unknown
- 1977-05-16 PH PH19779A patent/PH12811A/en unknown
- 1977-05-18 NL NL7705490A patent/NL7705490A/xx not_active Application Discontinuation
- 1977-05-23 AR AR267740A patent/AR212652A1/es active
- 1977-05-27 DE DE19772724090 patent/DE2724090A1/de not_active Withdrawn
- 1977-05-31 FI FI771721A patent/FI56697C/fi not_active IP Right Cessation
- 1977-05-31 US US05/802,215 patent/US4100273A/en not_active Expired - Lifetime
- 1977-06-23 NO NO772225A patent/NO146873C/no unknown
- 1977-06-23 DK DK278577A patent/DK278577A/da not_active Application Discontinuation
- 1977-06-27 CS CS774233A patent/CS203159B2/cs unknown
- 1977-06-27 PT PT66730A patent/PT66730B/pt unknown
- 1977-06-27 DD DD7700199717A patent/DD133573A5/xx unknown
- 1977-06-27 LU LU77623A patent/LU77623A1/xx unknown
- 1977-06-28 HU HU77LE807A patent/HU174186B/hu unknown
- 1977-06-28 SU SU772497858A patent/SU680657A3/ru active
- 1977-06-28 CA CA281,602A patent/CA1086669A/en not_active Expired
- 1977-06-28 SE SE7707467A patent/SE7707467L/xx not_active Application Discontinuation
- 1977-06-28 CH CH792977A patent/CH624992A5/fr not_active IP Right Cessation
- 1977-06-28 JP JP7710377A patent/JPS532402A/ja active Pending
- 1977-06-28 YU YU01592/77A patent/YU159277A/xx unknown
- 1977-06-28 AT AT458377A patent/AT352271B/de not_active IP Right Cessation
- 1977-06-28 IE IE1327/77A patent/IE45445B1/en unknown
- 1977-06-28 FR FR7719871A patent/FR2356666A1/fr active Granted
- 1977-06-29 ES ES460248A patent/ES460248A1/es not_active Expired
- 1977-06-29 PL PL1977199238A patent/PL105792B1/pl unknown
- 1977-06-29 BE BE178912A patent/BE856273A/xx unknown
-
1978
- 1978-04-07 US US05/894,221 patent/US4280001A/en not_active Expired - Lifetime
-
1979
- 1979-06-21 HK HK399/79A patent/HK39979A/xx unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4918174A (en) | Tiacumicin compounds | |
| FI65630C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av glykopeptid-antibiotikumet a/16686 | |
| HU188684B (en) | Process for producing a2, and simultaneously produced a1 and a3 components of antibioticum a/16686 | |
| PL97788B1 (pl) | Sposob wytwarzania nowych ryfamycyn | |
| Fehr et al. | Mutalomycin, a new polyether antibiotic taxonomy, fermentation, isolation and characterization | |
| Isono et al. | Studies on homomycin. II | |
| FI56697C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av depsipeptidantibiotikumet l 13365 | |
| JP5144167B2 (ja) | 新規ｋｂ−３３４６−５物質およびその製造方法 | |
| FI65082C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av nya antibiotiskt aktiva foereningar | |
| AU605495B2 (en) | Process for the preparation of antibiotics 10381b | |
| AU752169B2 (en) | Macrolides with antitumor activity | |
| US4598145A (en) | Albacarcins V and M | |
| AU2008255202A1 (en) | Antibiotics GE 81112 factors A, B, B1, pharmaceutically acceptable salts and compositions, and use thereof | |
| US4692333A (en) | Antimicrobial and antitumor antibiotic M 9026 and its pure individual factors 1, 2, and 3 and microbial process for production thereof | |
| US4461831A (en) | Antitumor agents albacarcins V and M | |
| US4912133A (en) | BU-3862T antitumor antibiotic | |
| US4992376A (en) | Biological pure culture of Streptomyces violaceus ATCC 53807 | |
| US3577530A (en) | Janiemycin | |
| AU682543B2 (en) | Antitumor antibiotics | |
| US5093248A (en) | BU-3862T antitumor antibiotic | |
| US4956374A (en) | Polysubstituted thiazolylpyridine carboxyamide antifungal antibiotic | |
| EP0139158A2 (en) | Antibiotic SB 22484 | |
| US4276382A (en) | Antibiotic substances | |
| CA1077421A (en) | Antibiotic sf-1540 from streptomyces | |
| IE910094A1 (en) | A novel antibiotic Alisamycin, a process for its production¹and its use |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed |
Owner name: GRUPPO LEPETIT S.P.A. |