ES2660194T3 - Procedimiento para la conservación de tejido vivo - Google Patents
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Abstract
Procedimiento para la conservación de plaquetas que se puede utilizar para extender la vida de plaquetas utilizables más allá de cinco días, que comprende las etapas de: a) colocar una composición que comprende plaquetas en una mezcla gaseosa que comprende xenón y oxígeno, en el que dicha mezcla gaseosa incluye 79%-95% de xenón y 5%-21% de oxígeno, y el contenido combinado de xenón y oxígeno en dicha mezcla gaseosa es al menos del 95%; b) mantener dicha composición que comprende plaquetas en presencia de dicha mezcla gaseosa durante un primer periodo de tiempo y a una primera temperatura hasta que dicho xenón en dicha mezcla gaseosa ha saturado al menos parcialmente dicha composición que comprende plaquetas; c) enfriar dicha composición que comprende plaquetas que está saturada al menos parcialmente con xenón hasta una segunda temperatura, siendo dicha segunda temperatura menor que dicha primera temperatura; y, d) mantener dicha composición que comprende plaquetas a dicha segunda temperatura durante un segundo período de tiempo.
Description
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DESCRIPCION
Procedimiento para la conservación de tejido vivo
[0001] La presente invención reivindica prioridad sobre la solicitud de Patente Provisional de Estados Unidos N° de Serie 61/539.009 presentada el 26 de septiembre de 2011.
[0002] La presente invención se refiere en general al campo de la conservación de tejido vivo, más particularmente se refiere a la conservación de plaquetas, e incluso más particularmente se refiere a la conservación de plaquetas en una atmósfera de xenón y oxígeno.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
[0003] El procedimiento estándar actual para el almacenamiento de plaquetas comprende mantener las plaquetas en una bolsa con agitación constante. Este procedimiento está limitado a cinco días de tiempo de almacenamiento y requiere mantener las plaquetas a temperatura ambiente porque las plaquetas no toleran la refrigeración. Por lo tanto, existe una necesidad continua de procedimientos para aumentar el tiempo de almacenamiento de plaquetas. La presente invención satisface éstas y otras necesidades.
[0004] El documento US 2010/0009334 da a conocer un procedimiento para almacenar plaquetas, comprendiendo dicho procedimiento obtener un concentrado de plaquetas a partir de sangre obtenida de un individuo y mantener el concentrado de plaquetas a temperaturas de refrigeración bajo una atmósfera que tiene una presión de 3,5 a 5 bares que comprende más del 65% de xenón y durante al menos una semana.
CARACTERÍSTICAS DE LA INVENCIÓN
[0005] La presente invención proporciona un procedimiento para la conservación de plaquetas que se puede utilizar para extender la vida de plaquetas utilizables más allá de cinco (5) días. El procedimiento comprende en general obtener una composición que comprende plaquetas y exponerla a una mezcla gaseosa, tal como se define en la reivindicación 1, y mantener la composición a una temperatura de refrigeración. La composición que comprende plaquetas se mantiene en general bajo presión; sin embargo, esto no es necesario.
[0006] Todos los intervalos descritos en el presente documento, incluyendo, pero no necesariamente limitados a, los porcentajes de gases, temperaturas, y unidades de presión, incluyen cada punto final del intervalo y todos los números enteros allí entre ellos y los números hasta la décima y centésima.
[0007] La mezcla gaseosa incluye 79%-95% de xenón y 5%-21 % de oxígeno. La mezcla gaseosa puede incluir pequeñas cantidades de otros gases. Al menos el 95% de la mezcla gaseosa incluye xenón y oxígeno, habitualmente la mezcla gaseosa incluye al menos 98% de xenón y oxígeno, aún más particularmente, la mezcla gaseosa incluye al menos 99% de xenón y oxígeno, y aún más en particular la mezcla gaseosa incluye al menos 99,5% de xenón y oxígeno, y aún todavía incluso más particularmente la mezcla gaseosa incluye al menos 99,9% de xenón y oxígeno. En una realización no limitativa de la invención, la mezcla gaseosa incluye 80%-92% de xenón. En todavía otra realización no limitativa de la invención, la mezcla gaseosa incluye 82%-91% de xenón. En aún otra realización no limitativa de la invención, la mezcla gaseosa incluye 85%-90% de xenón. En todavía otra realización no limitativa de la invención, la mezcla gaseosa incluye 86%-88% de xenón. En otra realización no limitativa de la invención, la mezcla gaseosa incluye más del 5% de oxígeno y menos del 21% de oxígeno. En aún otra realización no limitativa de la invención, la mezcla gaseosa incluye 6%-18% de oxígeno. En aún todavía otra realización no limitativa de la invención, la mezcla gaseosa incluye 10%-16% de oxígeno. En otra realización no limitativa de la invención, la mezcla gaseosa incluye 12%-14% de oxígeno.
[0008] En otro aspecto y/o aspecto alternativo no limitativo de la presente invención, el procedimiento incluye la etapa de exponer la composición que comprende plaquetas a la mezcla gaseosa bajo una cierta presión. En una realización no limitativa de la invención, la composición que comprende plaquetas se expone a la mezcla gaseosa bajo una presión de gases de 0-10 bares. En otra realización no limitativa de la invención, la composición que comprende plaquetas se expone a la mezcla gaseosa bajo una presión de gases de 1-8 bares. En todavía otra realización no limitativa de la invención, la composición que comprende plaquetas se expone a la mezcla gaseosa bajo una presión de gases de 2-6 bares. En aún otra realización no limitativa de la invención, la composición que comprende plaquetas se expone a la mezcla gaseosa bajo una presión de gases de 3-5 bares. En aún todavía otra realización no limitativa de la invención, la composición que comprende plaquetas se expone a la mezcla gaseosa bajo una presión de gases de 3,5-5 bares.
[0009] En todavía otro aspecto y/o aspecto alternativo no limitativo de la presente invención, el procedimiento incluye la etapa de mantener la composición que incluye las plaquetas durante un primer periodo de tiempo a una primera
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temperatura en presencia de la mezcla gaseosa. En una realización no limitativa de la invención, la composición que comprende las plaquetas se mantiene durante un primer período de tiempo a una primera temperatura en presencia de la mezcla gaseosa, cuya primera temperatura es de 18°C-37°C. En una realización no limitativa, la composición que comprende las plaquetas se mantiene durante un primer período de tiempo a una primera temperatura en presencia de la mezcla gaseosa, cuya primera temperatura es de 18°C-23°C. En todavía una realización no limitativa, la composición que comprende las plaquetas se mantiene durante un primer período de tiempo a una primera temperatura en presencia de la mezcla gaseosa, cuya primera temperatura es de 20°C-22°C. El primer periodo de tiempo se selecciona para permitir que el xenón en la mezcla gaseosa se sature parcial o totalmente en la composición que comprende plaquetas. En una realización no limitativa de la invención, el primer período de tiempo permite que el xenón en la mezcla gaseosa alcance al menos aproximadamente el 60% de la saturación completa en la composición que comprende plaquetas. En otra realización no limitativa de la invención, el primer período de tiempo permite que el xenón en la mezcla gaseosa alcance al menos aproximadamente el 75% de la saturación completa en la composición que comprende plaquetas. En todavía otra realización no limitativa de la invención, el primer período de tiempo permite que el xenón en la mezcla gaseosa alcance al menos aproximadamente el 90% de la saturación completa en la composición que comprende plaquetas. En aún otra realización no limitativa de la invención, el primer período de tiempo permite que el xenón en la mezcla gaseosa alcance aproximadamente el 95%-100% de la saturación completa en la composición que comprende plaquetas. En general, durante el primer período de tiempo, aproximadamente 2-20% del xenón en la mezcla gaseosa se disuelve en la composición que comprende plaquetas, y habitualmente durante el primer período de tiempo, aproximadamente 5-18% del xenón en la mezcla gaseosa se disuelve en la composición que comprende plaquetas, y más habitualmente durante el primer período de tiempo aproximadamente 8-15% del xenón en la mezcla gaseosa se disuelve en la composición que comprende plaquetas. En otra realización no limitativa de la invención, el primer período de tiempo es de 5 segundos a 10 horas. En todavía otra realización no limitativa de la invención, el primer período de tiempo es de 60 segundos a 5 horas. En aún otra realización no limitativa de la invención, el primer período de tiempo es de 60 segundos a 4 horas. En aún otra realización no limitativa de la invención, el primer período de tiempo es de 60 segundos a 3,5 horas. En aún todavía otra realización no limitativa de la invención, el primer período de tiempo es 3-3,5 horas. Tal como puede entenderse, la temperatura y/o presión pueden ser constantes o pueden variar, mientras que la composición que comprende plaquetas está parcial o totalmente saturada por el xenón en la mezcla gaseosa. El procedimiento de la invención también incluye la etapa de enfriar la composición que comprende plaquetas hasta una segunda temperatura después de que la composición que comprende plaquetas se haya saturado parcial o completamente por el xenón en la mezcla gaseosa. En general, la composición que comprende plaquetas se enfría hasta una segunda temperatura que está por encima del punto de congelación de la composición que comprende plaquetas durante un segundo período de tiempo. En una realización no limitativa de la invención, la composición que comprende plaquetas se enfría hasta una segunda temperatura de 0,1°C- 6°C durante un segundo período de tiempo. En otra realización no limitativa de la invención, la composición que comprende plaquetas se enfría hasta una segunda temperatura de 3°C-6°C durante un segundo período de tiempo. El segundo período de tiempo es generalmente de al menos 5 días y hasta un mes. En una realización no limitativa, el segundo período de tiempo es mayor de 5 días y hasta 21 días. En otra realización no limitativa, el segundo período de tiempo es mayor de 5 días y hasta 14 días.
[0010] En un aspecto preferido de la presente invención, el procedimiento incluye la etapa de colocar la composición que comprende plaquetas en un recipiente que permite que la mayoría de las plaquetas en el recipiente se coloquen completamente o sustancialmente planas, mientras que la composición que comprende plaquetas 1) se satura parcial o completamente con xenón, 2) se enfría posteriormente hasta la segunda temperatura después de la saturación parcial o total con el gas xenón, y 3) se almacena durante el segundo período de tiempo a la segunda temperatura. En una realización no limitativa, el recipiente está diseñado para provocar que la mayoría de las plaquetas en el recipiente se coloquen completamente o sustancialmente planas, mientras que la composición que comprende plaquetas se enfría hasta la segunda temperatura después de la saturación parcial o total con el gas xenón. En todavía otra realización no limitativa, el recipiente está diseñado para provocar que la mayoría de las plaquetas en el recipiente se coloquen completamente o sustancialmente planas, mientras que la composición que comprende plaquetas se satura parcial o totalmente con xenón.
[0011] En una realización preferida de la invención, se proporciona un procedimiento para la conservación de plaquetas que comprende colocar una composición que comprende plaquetas en una mezcla gaseosa que comprende o que consiste en 79%-95% de xenón y 5%-21% de oxígeno bajo una presión de 3,5-5 bares a una temperatura de 18°C-23°C durante un período de tiempo y, a continuación, enfriar la composición hasta una temperatura enfriada de 3°C a 6°C, y mantener la composición bajo la presión y en la temperatura de refrigeración durante un período de tiempo. La composición bajo la presión y en la temperatura de refrigeración puede almacenarse en un refrigerador durante un período de 5 días a 14 días. La cámara de enfriamiento puede utilizarse para enfriar la composición y, posteriormente, la cámara de enfriamiento se utiliza para el almacenamiento de la composición. La composición se puede colocar en un recipiente permeable a una mezcla gaseosa y la composición puede exponerse a la mezcla gaseosa en una cámara herméticamente sellada. El recipiente puede comprender un recipiente herméticamente sellado equipado con una cubierta permeable para la mezcla gaseosa. Se puede utilizar una bolsa fabricada de material permeable a la mezcla gaseosa como recipiente. Se pueden colocar al menos 200 ml de la composición que comprende las plaquetas en la bolsa, y, posteriormente, la composición
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se puede mantener en la mezcla gaseosa y bajo presión durante al menos 3 horas. La composición se puede mantener en la mezcla gaseosa y bajo presión sin bombeo adicional de la mezcla gaseosa en la cámara herméticamente sellada, y el enfriamiento de la composición se puede iniciar desde el punto de estabilización de la presión de la mezcla gaseosa tiempo en la cámara herméticamente sellada, y con la estabilización resultante de la saturación del plasma con plaquetas con la mezcla gaseosa. Antes de la transfusión de la composición que comprende las plaquetas, la composición puede mantenerse bajo presión no superior a 1 atmósfera y a una temperatura de 18°C-23°C durante al menos un período de tiempo suficiente para calentar el ambiente de la composición hasta dicha temperatura.
[0012] La presente invención es adecuada para la conservación de plaquetas, tales como plaquetas presentes en el plasma. En el procedimiento se pueden utilizar una bolsa convencional o recipientes especialmente configurados diseñados para el almacenamiento de productos de la sangre. Se pueden diseñar la bolsa o recipiente y el material se puede seleccionar de manera que la bolsa o recipiente sea impermeable o permeable a xenón y oxígeno. El procedimiento se puede realizar usando un equipo comercialmente disponible que es capaz de suministrar una mezcla gaseosa a la bolsa o recipiente, tal como, pero no limitado a, una cámara herméticamente sellada. La cámara herméticamente sellada puede diseñarse para soportar una presión interna de gas de al menos 5-10 bares; sin embargo, esto no es necesario. El enfriamiento de la composición que comprende plaquetas puede realizarse usando los equipos existentes de refrigeración (por ejemplo, los refrigeradores convencionales, etc.), en los que se pueden enfriar y almacenar productos de la sangre conservados; sin embargo, esto no es necesario.
[0013] Sin pretender estar limitado por ninguna teoría particular, se considera que el procedimiento facilita la difusión de xenón y oxígeno en la composición que comprende las plaquetas (incluyendo la difusión en las propias plaquetas), y que esto tiene lugar mientras las plaquetas se mantienen en una mezcla gaseosa con un contenido de xenón del 79% al 95% y un contenido de oxígeno del 5% al 21% a una primera temperatura de aproximadamente 18°C-37°C y a una presión de 0-10 bares. Se considera que la saturación parcial o total de las plaquetas con xenón facilita el almacenamiento posterior de las plaquetas a una temperatura de 0,1°C a 6°C, con conservación de la viabilidad y la funcionalidad de las plaquetas.
[0014] El procedimiento puede utilizarse con cualquier composición que comprende plaquetas, que incluyen, pero no se limitan necesariamente a, las composiciones que comprenden o consisten en plasma de la sangre, plasma rico en plaquetas, o plaquetas aisladas. Las plaquetas se pueden obtener usando técnicas convencionales de cualquier animal, tal como cualquier mamífero, que incluye seres humanos.
[0015] En contraste con los procedimientos publicados anteriormente, la presente invención no requiere la adición de almidones a la composición que comprende las plaquetas. Además, los datos relacionados con la presente invención demuestran que una cierta cantidad de oxígeno en la mezcla gaseosa a la que están expuestas las plaquetas es deseable para conservar la viabilidad de las plaquetas. En particular, dado que ciertos procesos metabólicos todavía tienen lugar en las plaquetas a temperaturas de refrigeración, se necesita oxígeno para la respiración aeróbica. El requisito de las plaquetas por el oxígeno es más pronunciado cuando se conservan grandes volúmenes de plasma con plaquetas, tales como volúmenes superiores a 200 ml, y en tales casos, tener un 5%-21% de oxígeno presente en la mezcla gaseosa de xenón/oxígeno es deseable. En diversas realizaciones, el volumen de la composición que comprende las plaquetas en la bolsa o recipiente era de aproximadamente 5 ml-400 ml o más. En ciertas realizaciones, la composición que comprende las plaquetas se mezcla y/o se agita suavemente para aumentar el contacto con el oxígeno en la composición; sin embargo, esto no es necesario. En general, la composición que comprende las plaquetas no se mezcla o agita cuando se enfría a la segunda temperatura; sin embargo, esto no es necesario.
[0016] En todavía otro aspecto preferido de la presente invención, para realizar el procedimiento de la presente invención, la composición de plaquetas se coloca en una bolsa o recipiente permeable a gases, y la bolsa o recipiente permeable a gases se coloca en una cámara herméticamente sellada en la que se añade la mezcla gaseosa. En particular, podría utilizarse como dichas bolsas o recipientes un recipiente herméticamente sellado equipado con una cubierta permeable para la mezcla gaseosa o una bolsa o recipiente fabricados de material permeable a las mezclas gaseosas (por ejemplo, bolsas utilizadas convencionalmente para el almacenamiento de plasma con plaquetas).
[0017] En diversas realizaciones, el primer período de tiempo durante el cual la composición que comprende plaquetas se mantiene en la mezcla gaseosa bajo una presión de 0-10 bares puede determinarse basándose en la determinación del cese del aumento en la presión de la mezcla gaseosa en una cámara herméticamente sellada, sin bombeo adicional de la mezcla gaseosa en la cámara. Por ejemplo, el xenón y el oxígeno se pueden añadir al recipiente para conseguir una presión de entre 0 y 10 bares. En una realización no limitativa, la presión es de 3-4 bares. La adición de la mezcla gaseosa se puede detener, y si se desea, la cámara puede separarse de la fuente de mezcla gaseosa y mantenerse con, por ejemplo, agitación. Durante la agitación, la presión disminuirá y se estabilizará. Por ejemplo, si la composición que comprende plaquetas está a aproximadamente 4 bares de presión total, la presión en la bolsa o recipiente se reducirá y se estabiliza a niveles de aproximadamente 3,5 a 3,9 bares, lo que se cree que es indicativo de que el gas xenón ha penetrado adecuadamente la plaquetas. Después de este descenso de la presión, el recipiente se enfría hasta la segunda
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temperatura de acuerdo con el procedimiento de la invención. Debido a que la solubilidad de la mezcla gaseosa es más alta a temperaturas más bajas, la presión dentro de la bolsa o recipiente puede disminuir aún más durante el enfriamiento. Como un ejemplo no limitativo, la presión dentro del recipiente de aproximadamente 3,8 bares a temperatura ambiente puede disminuir hasta aproximadamente 3,6 bares durante el enfriamiento hasta la segunda temperatura.
[0018] En una realización preferida, cuando se utiliza una bolsa o recipiente fabricados de un material permeable a una mezcla gaseosa y que contiene 200-400 ml de una composición de plaquetas, se puede utilizar un primer periodo de tiempo de 2-5 horas de exposición a la mezcla gaseosa bajo una presión de 0-10 bares a la primera temperatura; sin embargo, esto no es necesario.
[0019] El enfriamiento de la composición de plaquetas hasta la segunda temperatura puede iniciarse de varias formas de realización antes de, simultáneamente con, o después del punto de tiempo en el que se produce la estabilización de la presión de la mezcla gaseosa en la cámara herméticamente sellada.
[0020] Antes de usar las plaquetas conservadas para transfusión, la presión en la bolsa o recipiente puede liberarse de manera que las plaquetas están a presión atmosférica, y la temperatura se puede elevar, por ejemplo, mediante la extracción de la composición de la refrigeración a la segunda temperatura y dejando que se eleve hasta una temperatura de aproximadamente 18°C a 37°C. En particular, la cámara herméticamente sellada se puede sacar de la cámara de refrigeración a la segunda temperatura, después de lo cual el cierre hermético se abre, y el recipiente con la composición de plaquetas se extrae del recipiente y se mantiene a temperatura ambiente y presión atmosférica durante un período suficiente para calentar el ambiente de la composición hasta temperatura ambiente, y para el equilibrio de la presión y/o la liberación de la mezcla gaseosa al medio circundante. Para reducir el tiempo de la liberación de la mezcla gaseosa, la bolsa o el recipiente se podría colocar bajo las condiciones de presión disminuida (en comparación con la presión atmosférica), es decir, un vacío; sin embargo, esto no es necesario.
[0021] La presente invención se compara con ciertos atributos de los procedimientos publicados anteriormente, tal como se describe en el ejemplo siguiente.
Ejemplo 1
[0022] El siguiente equipo y materiales se utilizaron en los experimentos realizados.
[0023] El plasma con plaquetas (obtenido a partir de sangre donada por medio de aféresis) se colocó en bolsas de plástico producidas por Baxter (bolsas de plástico de Baxter PL 1813/1).
[0024] Se utilizó en los experimentos una cámara herméticamente cerrada, en la que se colocaron bolsas con plasma con plaquetas para el almacenamiento. Esta cámara fue diseñada para soportar una presión interna de al menos 5 bares y se fabrica especialmente de manera que estaba equipada con conductos destinados al suministro de xenón y oxígeno bajo presión y con medidores de flujo y manómetros destinados al control de la cantidad y proporción de los gases suministrados en la cámara y la presión del gas dentro de la cámara. El xenón y el oxígeno se suministran desde botellas individuales a alta presión.
[0025] Se utilizó un refrigerador con fines médicos con una temperatura preestablecida de 4°C como cámara de enfriamiento.
[0026] La evaluación de la idoneidad del plasma con plaquetas después de la conservación y el almacenamiento se llevó a cabo en términos de los siguientes parámetros.
[0027] Número de células - Un parámetro que indica el grado de conservación de la población después del almacenamiento. Este parámetro se calcula como el porcentaje del número de células al inicio del experimento - antes de comenzar la conservación del plasma con plaquetas.
[0028] Nivel de pH - Uno de los parámetros que determinan la viabilidad y la funcionalidad de las plaquetas (valor ideal de pH es 7,4). Con valores de pH inferiores a 6,2 o superiores a 7,8, las plaquetas (transfusionadas a pacientes) se eliminarán rápidamente del flujo sanguíneo mediante sistemas de descontaminación del cuerpo humano. El nivel de pH dentro del intervalo de 6,2 a 7,8 se considera que es un buen resultado de conservación. El mejor resultado en términos de valor de pH es un pH igual a 7,4.
[0029] Nivel de lactato - Un parámetro que indica la viabilidad de las células durante el almacenamiento en las condiciones de déficit de oxígeno. El nivel de lactato aumenta durante el almacenamiento debido a los procesos metabólicos. Mayores concentraciones de lactato se vuelven tóxicas para las plaquetas. Además, cuando la concentración de lactato es más alta
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que 20 mM/1, el valor de pH del plasma puede reducirse hasta 6,2 e inferior. La viabilidad y la funcionalidad de las plaquetas se degradan como consecuencia de esta caída del pH. Un nivel aceptable de lactato en el plasma con plaquetas almacenado no debe exceder el valor de nivel de lactato para el plasma con plaquetas que se ha almacenado a temperatura ambiente durante un período de hasta 5 días.
[0030] Nivel de glucosa - Un parámetro que también está relacionado con el metabolismo y refleja una "reserva de alimento para las células". Si el nivel de glucosa en el plasma con plaquetas disminuye significativamente después del almacenamiento, un cierto porcentaje de las plaquetas puede ser no viable y después de la transfusión, y tales plaquetas serían incapaces de realizar su función y se eliminarían de la sangre.
[0031] Los resultados del almacenamiento de plaquetas obtenidos mediante la realización de una realización no limitativa de la presente invención se evaluaron basándose en los parámetros indicados anteriormente. También se evaluaron tres muestras de control de preparaciones de plaquetas humanas en términos de estos parámetros para el propósito de comparación, de la siguiente manera:
Muestra 1 (Fresca) - Concentrado de plasma con plaquetas humana fresca 60 ms humanas obtenido por aféresis. Muestra 2 (Control TA) - plasma con plaquetas después del almacenamiento durante un período de 5 días a temperatura ambiente (procedimiento de almacenamiento estándar).
Muestra 3 (Control +4) - plasma con plaquetas después del almacenamiento durante un período de 14 días en un refrigerador a una temperatura de 4°C y bajo presión atmosférica.
[0032] Se obtuvieron los siguientes resultados de los experimentos.
- Número de muestra
- Condiciones Tiempo de almacenamiento, días Número de células pH Lactato, mM Glucosa, mM
- 1
- Fresca 0 100% 7,7 0,6 18,4
- 2
- Control TA 5 93% 7,2 10,6 11,8
- 3
- Control +4 14 41% 7,3 10,4 12,5
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- 02-0% 14 49% 8,1 11,6 12,5
- 5
- 02-5% 14 46% 8,1 9,6 12,3
- 6
- 02-13% 14 93% 7,4 8,0 16,2
- 7
- 02-21% 14 45% 7,4 7,7 12,1
[0033] Las muestras 4-7 en la tabla se conservaron y se almacenaron en los porcentajes de gas indicados usando de 0 a 21% de oxígeno, y en el que el porcentaje restante de la mezcla gaseosa era xenón. La muestra 4 es un ejemplo comparativo. Los resultados de los experimentos muestran:
1) En términos del número de células de plaquetas, se obtuvo el mejor resultado para una concentración de oxígeno de aproximadamente 13% (Muestra 6).
2) En términos del nivel de pH, se obtuvieron los mejores resultados para las concentraciones de oxígeno de 13% y 21% (Muestras 6 y 7).
3) En términos del nivel de lactato, se obtuvo el mejor resultado para una concentración de oxígeno de 21% (muestra 7). Sin embargo, el resultado obtenido para una concentración de oxígeno de 13% fue sólo ligeramente diferente, y los resultados para otras muestras eran diferentes en un 25-50% en comparación con el mejor resultado (Muestra 7).
4) En términos del nivel de glucosa, se obtuvieron resultados aceptables para todas las muestras, en las que el oxígeno estaba presente en la composición de la mezcla gaseosa. Se obtuvo el mejor resultado para la concentración de oxígeno de 13% (muestra 6).
[0034] Los resultados de los experimentos ilustran que el procedimiento de la presente invención proporciona un almacenamiento a largo plazo de plasma con plaquetas conservado en comparación con los procedimientos previamente descritos. Además, el término almacenamiento a largo plazo se consigue para volúmenes significativamente mayores de plasma con plaquetas que se han descrito previamente, lo cual permite el uso de la presente invención con bolsas que se emplean convencionalmente para el almacenamiento de plasma con plaquetas.
[0035] Los experimentos demostraron resultados adecuados utilizando una concentración de oxígeno más baja de 5%, y que el oxígeno en concentraciones superiores al 21% es tóxica para las células de plaquetas.
Claims (14)
- 5101520253035404550REIVINDICACIONES1. Procedimiento para la conservación de plaquetas que se puede utilizar para extender la vida de plaquetas utilizables más allá de cinco días, que comprende las etapas de:a) colocar una composición que comprende plaquetas en una mezcla gaseosa que comprende xenón y oxígeno, en el que dicha mezcla gaseosa incluye 79%-95% de xenón y 5%-21% de oxígeno, y el contenido combinado de xenón y oxígeno en dicha mezcla gaseosa es al menos del 95%;b) mantener dicha composición que comprende plaquetas en presencia de dicha mezcla gaseosa durante un primer periodo de tiempo y a una primera temperatura hasta que dicho xenón en dicha mezcla gaseosa ha saturado al menos parcialmente dicha composición que comprende plaquetas;c) enfriar dicha composición que comprende plaquetas que está saturada al menos parcialmente con xenón hasta una segunda temperatura, siendo dicha segunda temperatura menor que dicha primera temperatura; y,d) mantener dicha composición que comprende plaquetas a dicha segunda temperatura durante un segundo período de tiempo.
- 2. Procedimiento, según la reivindicación 1, en el que dicha mezcla gaseosa incluye 86%-88% de xenón y 12%-14% de oxígeno.
- 3. Procedimiento, según la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en el que dicha primera temperatura es de 18°C-37°C.
- 4. Procedimiento, según cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en el que dicha primera temperatura es de 18°C-23°C.
- 5. Procedimiento, según cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en el que la etapa de mantener dicha composición que comprende plaquetas en dicha presencia de dicha mezcla gaseosa durante un primer periodo de tiempo y a una primera temperatura incluye someter dicha composición que comprende plaquetas a una presión de al menos 2 bares.
- 6. Procedimiento, según cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en el que la etapa de mantener dicha composición que comprende plaquetas en dicha presencia de dicha mezcla gaseosa durante un primer periodo de tiempo y a una primera temperatura incluye someter dicha composición que comprende plaquetas a una presión de 2-10 bares.
- 7. Procedimiento, según cualquiera de las reivindicaciones 1 -6, en el que dicho primer periodo de tiempo es de 5 segundos a diez horas.
- 8. Procedimiento, según cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en el que dicho primer periodo de tiempo es de 60 segundos a cinco horas.
- 9. Procedimiento, según cualquiera de las reivindicaciones 1-8, en el que dicha segunda temperatura es de 0,1°C-6°C.
- 10. Procedimiento, según cualquiera de las reivindicaciones 1-9, en el que dicha segunda temperatura es de 3°C-6°C.
- 11. Procedimiento, según cualquiera de las reivindicaciones 1-10, en el que dicho primer periodo de tiempo es menor que dicho segundo periodo de tiempo.
- 12. Procedimiento, según cualquiera de las reivindicaciones 1-11, en el que dicho primer periodo de tiempo es menor que dicho segundo periodo de tiempo, y dicho segundo período de tiempo es de 5-21 días.
- 13. Procedimiento, según cualquiera de las reivindicaciones 1-12, en el que dicha composición que comprende plaquetas está al menos al 80% de la saturación completa con dicho gas xenón durante dicho primer período de tiempo y a dicha primera temperatura.
- 14. Procedimiento, según cualquiera de las reivindicaciones 1-13, en el que dicha composición se coloca en una bolsa o recipiente permeable a dicha mezcla gaseosa y dicha composición se expone a dicha mezcla gaseosa en una cámara herméticamente sellada.
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