ES2579487B1

ES2579487B1 - Use of crosslinked saccharide based polymers as bile acid sequestrants

Info

Publication number: ES2579487B1
Application number: ES201530160A
Authority: ES
Inventors: Javier LÓPEZ JARAMILLO; María Dolores Girón González; Rafael Salto González; Fernando Hernández Mateo; Francisco Santoyo González
Original assignee: Universidad de Granada
Current assignee: Universidad de Granada
Priority date: 2015-02-11
Filing date: 2015-02-11
Publication date: 2017-05-19
Anticipated expiration: 2035-02-11
Also published as: ES2579487A1

Abstract

Uso de polímeros basados en sacáridos entrecruzados como secuestrantes de ácidos biliares.#La presente invención describe el uso de polímeros basados en sacáridos entrecruzados como un medicamento, particularmente para el tratamiento de enfermedades que requiere secuestran esteroles y/o ácidos biliares. Tales polímeros se obtienen a partir ya sea de ciclodextrinas y/o polisacáridos, tales como almidón o dextrina, que son entrecruzados con bis vinil-sulfonas, produciendo materiales homo y hetero-poliméricos. Por lo tanto, dichos materiales pueden ser utilizados en diferentes enfermedades tales como la hiperlipidemia, diabetes, arterosclerosis, hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia, hiperglucemia y obesidad, pero no se limita a éstas.Use of cross-linked saccharide polymers as bile acid sequestrants. # The present invention describes the use of cross-linked saccharide polymers as a medicament, particularly for the treatment of diseases that require sterile and / or bile acid sequestration. Such polymers are obtained from either cyclodextrins and / or polysaccharides, such as starch or dextrin, which are crosslinked with bis vinyl sulfones, producing homo and hetero-polymeric materials. Therefore, such materials can be used in different diseases such as hyperlipidemia, diabetes, atherosclerosis, hypercholesterolemia, hypertriglyceridemia, hyperglycemia and obesity, but it is not limited to these.

Description

USO DE POLI MEROS BASADOS EN SACARlDOS ENTRECRUZADOS COMO SECUESTRANTES DE ACIDOS BILIARES USE OF MEROS POLIES BASED ON CROSSED PUNCHES AS BILIAR ACID SEQUENCERS

CAMPO TECNICO DE LA INVENCION TECHNICAL FIELD OF THE INVENTION

La presente invención se refiere al uso de polímeros basados en sacáridos entrecruzados como secuestrantes de ácidos biliares. Más particularmente, la invención se refiere al uso de dichos materiales sintetizados a partir de almidón, dextrina y/o ciclodextrinas en la preparación de un medicamento y de una composición farmacéutica que comprende al menos uno de dichos compuestos para ser utilizados para la eliminación de ácidos biliares como fánnaco anticolesteremico útil para la reducción in vivo de los niveles de colesterol, los niveles de triglicéridos y los niveles de glucosa. The present invention relates to the use of crosslinked saccharide based polymers as bile acid sequestrants. More particularly, the invention relates to the use of said materials synthesized from starch, dextrin and / or cyclodextrins in the preparation of a medicament and a pharmaceutical composition comprising at least one of said compounds to be used for acid removal. bile as an anticolesteremic drug useful for in vivo reduction of cholesterol levels, triglyceride levels and glucose levels.

ESTADO DE LA TECNICA ANTERIOR STATE OF THE PREVIOUS TECHNIQUE

Enfermedades Cardiovasculares Las enfermedades cardiovasculares (ECV) son la principal causa de muerte en humanos en la sociedad actual. La guía de práctica cl ínica de estas enfermedades esta basada en la definición de ciertos valores de referencia y en la medición de ciertos factores de riesgo tradicionales, los cuales han sido redefinidos a la baja a lo largo del tiempo. La hipercolesterolemia, es decir, la elevación del colesterol total (COL) y/o de las lipoproteínas de baja densidad (LDL, del inglés "Iow density lipoproteins'') en sangre, es uno de tales factores de riesgo normalmente evaluado. Este trastorno tiene como consecuencias la acumulación de placas de ateroma que es especialmente relevante cuando tiene lugar en las arterias coronarias, produciendo el estrechamiento de las arterias y la reducción del flujo de sangre suministrada al miocardio. El manejo de la hipercolesterolemia es abordado primariamente mediante enfoques no-farmacológicos que suponen la modificación de algunos factores de riesgo tales como la dieta poco saludable, la inactividad física y el tabaco, aunque frecuentemente es necesario utilizar simultáneamente terapias farmacológicas. Cardiovascular Diseases Cardiovascular diseases (CVD) are the leading cause of death in humans in today's society. The clinical practice guideline for these diseases is based on the definition of certain reference values and the measurement of certain traditional risk factors, which have been redefined downwards over time. Hypercholesterolemia, that is, the elevation of total cholesterol (COL) and / or low density lipoproteins (LDL) in the blood, is one such risk factor normally assessed. The accumulation of atheroma plaques has consequences, which is especially relevant when it occurs in the coronary arteries, causing narrowing of the arteries and reducing the flow of blood supplied to the myocardium. The management of hypercholesterolemia is primarily addressed by non- pharmacological methods that involve the modification of some risk factors such as an unhealthy diet, physical inactivity and tobacco, although it is often necessary to use drug therapies simultaneously.

Los tratamientos farmacéuticos de las ECV se puede dividir en estrategias basadas en estatinas y estrategias no-basadas en estatinas [Brautbar, A. et al. Nat. Rev. Cardiol. (2011) Vol 8, 253-265]. Pharmaceutical treatments of CVD can be divided into statin-based strategies and non-statin-based strategies [Brautbar, A. et al. Nat. Rev. Cardiol. (2011) Vol 8, 253-265].

• •: Las Estatinas son inhibidores competitivos de 3-hidroxi-3-metil-glutaril-CoA reductasa (HMGCoA-R), un enzima limitante de la velocidad clave en la ruta biosintética de COL. Las estatinas constituyen la primera terapia farmacológica ya que la biosíntesis de COL supone hasta los dos tercios del COL total en el cuerpo Statins are competitive inhibitors of 3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA reductase (HMGCoA-R), a key speed limiting enzyme in the biosynthetic pathway of COL. Statins constitute the first pharmacological therapy since the biosynthesis of COL represents up to two thirds of the total COL in the body

• •: Los fármacos no basados en estatinas comprenden, niacina, fibratos, secuestrantes de ácidos biliares (SAB) y extractos naturales, fármacos que presentan una naturaleza y mecanismos de acción diversos [Rozman, D. et al. Pharmacol. Ther. (2010) Vol 127, 19-40]. Non-statin-based drugs include niacin, fibrates, bile acid sequestrants (SAB) and natural extracts, drugs that have a diverse nature and mechanisms of action [Rozman, D. et al. Pharmacol Ther. (2010) Vol 127, 19-40].

Secuestrantes de Ácidos Biliares (SAB) Bile Acid Sequestrants (SAB)

Los SAB explotan el hecho de que casi el 50% del catabolismo del COL se rige por su conversión en ácidos biliares (AB) para interrumpir la reabsorción y favorecer su excreción que en condiciones normales se limita a alrededor de 5%. En líneas generales, los SAB son hidrogeles poliméricos catiónicos que se unen selectivamente a los AB teniendo en cuenta que presentan carga negativa. Las fibras de la dieta diaria muestran también cierta capacidad para unirse a los AB. Además, los polisacáridos han sido usados como materiales de partida para producir SAB debido a su hidrofilia, baja toxicidad y biocompatibilidad. Así, se ha publicado la capacidad secuestrante de AB de dextrano reticulado con epicloridrina [Nichifor, M. et al. J. Pharm. Sci. (2001) Vol 90, 681-689; Niclifor, M. et al. J. Biol. Macromol. (2000) Vol 28, 15-21], metilanos (lee, J. K. et al. Biotheenol. Appl. Bioehem. (2002) Vol 35, 1-189] o quitosan funcionalizados con grupos alquilamonio [Lee, J. K. et al. Biosci. Biotechnol. Biochem. (1999) Vol 63, 833-839; Murata, Y. et al. Moleeules (2009) Vol 14, 755-762]. The SAB exploit the fact that almost 50% of the catabolism of the COL is governed by its conversion into bile acids (AB) to interrupt the reabsorption and favor its excretion which in normal conditions is limited to about 5%. In general, SABs are cationic polymeric hydrogels that selectively bind to ABs taking into account that they have a negative charge. The fibers of the daily diet also show some capacity to join the AB. In addition, polysaccharides have been used as starting materials to produce SAB due to their hydrophilicity, low toxicity and biocompatibility. Thus, the AB sequestering capacity of cross-linked dextran with epichloridrine has been published [Nichifor, M. et al. J. Pharm. Sci. (2001) Vol 90, 681-689; Niclifor, M. et al. J. Biol. Macromol. (2000) Vol 28, 15-21], methylanes (read, JK et al. Biotheenol. Appl. Bioehem. (2002) Vol 35, 1-189] or chitosan functionalized with alkylammonium groups [Lee, JK et al. Biosci. Biotechnol. Biochem. (1999) Vol 63, 833-839; Murata, Y. et al. Moleeules (2009) Vol 14, 755-762].

Ciclodextrinas y Matrices poliméricas basadas en ciclodextrinas Cyclodextrins and polymer matrices based on cyclodextrins

Las ciclodextrinas (CDs) son oligosacáridos cíclicos compuestos de unidades de Dglucosa con uniones 0-1,4, que contienen una cavidad interna hidrófoba que puede actuar como anfitrión para distintas moléculas huésped generalmente de carácter lipofílico. Esta capacidad de CDs para formar complejos de inclusión es bien conocida y ha sido utilizada en diversos campos incluyendo aplicaciones de tipo farmacéutico. Cyclodextrins (CDs) are cyclic oligosaccharides composed of Dglucose units with 0-1.4 junctions, which contain a hydrophobic internal cavity that can act as host for different host molecules generally lipophilic in nature. This ability of CDs to form inclusion complexes is well known and has been used in various fields including pharmaceutical applications.

En el contexto de los SAS, el potencial terapéutico de CDs para equilibrar la homeostasis del COL se ha explorado previamente en modelos animales. Así, Abadie, In the context of SAS, the therapeutic potential of CDs to balance homeostasis of COL has been previously explored in animal models. So Abadie,

C. el al. [Biochem. J. (1994) Vol 299, 725-730] han descrito que ratones inyectados con [14C] quenodesoxicolato y (3H] colato mostraron una concentración de [14C quenodesoxicolato] en las heces cuando fueron alimentados con ~-CD, mientras que el efecto de la a-CD o y-CD era neutral. Sin embargo, el uso de colestiramina, una resina de intercambio aniónico utilizada actualmente en la terapia de hipercolesterolemia como un SAS, determinaba un aumento en la radiactividad tanto de [14C] quenodesoxicolate como de [3H] calaio. Otros estudios han demostrado que la ingestión de j3-CD aumenta la excreción de AB sin provocar el agotamiento de los vitaminas lipófilicas y que el mecanismo primario del potencial de ¡3-CD para producir un descenso en los niveles lipídicos parece ser consecuencia de su capacidad de unión a este rol que produce una alteración en la reabsorción de AS y en su adsorción intestinal [Trautwein, EA et al circulante. Biochim. Siophys. Acta (1999) Vol 1437, 112). Curiosamente, se ha demostrado que la a-CD produce una reducción en la absorción de ácidos grasos saturados de la dieta, con consecuencias sobre la síntesis hepática de COL y sobre una reducción en su eliminación, con un efecto neto de reducción de COL total en sangre. Este resultado ha constituido la base para su uso en ensayos clínicos en humanos. C. al. [Biochem. J. (1994) Vol 299, 725-730] have described that mice injected with [14C] chenodeoxycholate and (3H] colato showed a concentration of [14C chenodeoxycholate] in feces when fed with ~ -CD, while the effect of the a-CD or y-CD was neutral, however, the use of cholestyramine, an anion exchange resin currently used in hypercholesterolemia therapy as a SAS, determined an increase in the radioactivity of both [14C] quenodesoxicolate and [3H] calaio Other studies have shown that ingestion of j3-CD increases the excretion of AB without causing depletion of lipophilic vitamins and that the primary mechanism of the potential of ¡3-CD to produce a decrease in lipid levels seems be a consequence of its ability to bind to this role that produces an alteration in the reabsorption of AS and its intestinal adsorption [Trautwein, EA et al circulating. Biochim. Siophys. Acta (1999) Vol 1437, 112). Interestingly, it has been shown that a-CD produces a reduction in the absorption of saturated fatty acids from the diet, with consequences on the hepatic synthesis of COL and on a reduction in its elimination, with a net effect of reduction of total COL in blood. This result has been the basis for use in clinical trials in humans.

En los últimos años, las CDs y sus derivados se han utilizado también como unidades moleculares de construcción para la síntesis de una amplia variedad de sistemas poliméricos [Van de Mannaker el al. Biomacromolecules (2009) Vol 10 (12), 31573175]. Las matrices poliméricas basadas en CDs son con frecuencia concebidas para el estudió de sus aplicaciones farmacéuticas y biomédicas. Las estrategias de síntesis utilizadas suponen normalmente la reticulación covalente de las CDs usando epicloridrina, diepóxidos, diisocianatos o anhídrido como agentes reticulantes. Más recientemente, se han utilizado también bis vinil sulfonas, y de forma más particular diviníl sulfona (DVS), en la preparación de matrices poliméricas de CDs como un agente reticulante de longitud no-cero teniendo en cuenta la bien establecida capacidad de este reactivo para reaccionar con los grupos hidroxilo en condiciones alcalinas (pH> 10). De hecho, las características y la popularidad de la DVS como agente reti culante se basa en su especial reactividad, estabilidad, solubilidad en agua y precios asequibles que han determinado que se use en una gran cantidad de aplicaciones no sólo para la preparación de las matrices basadas en polisacáridos, In recent years, CDs and their derivatives have also been used as molecular building units for the synthesis of a wide variety of polymer systems [Van de Mannaker al. Biomacromolecules (2009) Vol 10 (12), 31573175]. Polymeric matrices based on CDs are often designed for the study of their pharmaceutical and biomedical applications. The synthesis strategies used normally involve covalent crosslinking of the CDs using epichloridrine, diepoxides, diisocyanates or anhydride as crosslinking agents. More recently, bis vinyl sulfones, and more particularly divinyl sulfone (DVS), have also been used in the preparation of polymer matrices of CDs as a non-zero length crosslinking agent taking into account the well established ability of this reagent to react with hydroxyl groups under alkaline conditions (pH> 10). In fact, the characteristics and popularity of DVS as a withdrawal agent is based on its special reactivity, stability, water solubility and affordable prices that have determined that it is used in a large number of applications not only for matrix preparation. based on polysaccharides,

sino también en bioconjugación y proteómica. En el caso de los polímeros basados en polisacáridos, las atractivas propiedades del doble enlace eleclrófilo de la DVS han sido usadas para llevar a cabo la reticulación de diversos polisacáridos naturales (celulosa, dextrano, agarosa y ácido hialurónico) con el objetivo de obtener materiales 5 de tipo hidrogel que presenten propiedades mecánicas y químicas mejoradas para ser utilizados como materiales avanzados en una variedad de aplicaciones que van desde su uso como soportes cromatográficos, sistemas de liberación de fármacos controlados y biomateriales biocompatibles para diferentes aplicaciones biomédicas. Las CD se han utilizado también para obtener matrices de polímeros heterogéneos o but also in bioconjugation and proteomics. In the case of polysaccharide-based polymers, the attractive properties of the DVS eleclrophile double bond have been used to carry out cross-linking of various natural polysaccharides (cellulose, dextran, agarose and hyaluronic acid) in order to obtain materials. Hydrogel type with improved mechanical and chemical properties to be used as advanced materials in a variety of applications ranging from use as chromatographic supports, controlled drug release systems and biocompatible biomaterials for different biomedical applications. CDs have also been used to obtain heterogeneous polymer matrices or

10 mixtos. Así, la reticulación de ¡3-CD con carboximetil celulosa o almidón usando diversos agentes reticulantes ha sido descrita para la producción de polímeros portadores de cargas electrostáticas y también no cargados. 10 mixed Thus, crosslinking of ¡3-CD with carboxymethyl cellulose or starch using various crosslinking agents has been described for the production of electrostatic and also non-charged polymers.

Además de la polimerización de CD mediante el uso de agentes de reticulación de In addition to the polymerization of CD through the use of crosslinking agents

15 bajo peso molecular, se han sintetizado también sistemas covalentemente reticulados basados en CD mediante la copolimerización de estos compuestos, tanto modificados químicamente como sin modificar, con una amplia variedad de otros polímeros preexistentes o de matrices derivados de ellos. La estrategia más ampliamente usada para preparar estas matrices de CD-polímero es la copolimerización química o Under low molecular weight, CD-based covalently cross-linked systems have also been synthesized by copolymerizing these compounds, both chemically modified and unmodified, with a wide variety of other pre-existing polymers or matrices derived therefrom. The most widely used strategy to prepare these CD-polymer matrices is chemical copolymerization or

20 inducida por radiación de monómeros vinílicos o de (met)acriloilo derivados de CD con monómeros vinílicos sencillos estructuralmente y usados comúnmente, tales como ácido acrílico (AA), metacrilato de 2-hidroxietilo (HEMA), y N-isopropilacrilamida (NIPAAm). Radiation-induced radiation of vinyl or (meth) acryloyl CD-derived monomers with structurally and commonly used simple vinyl monomers, such as acrylic acid (AA), 2-hydroxyethyl methacrylate (HEMA), and N-isopropylacrylamide (NIPAAm).

25 Recientemente, W0201 1012749 describe nuevas matrices poliméricas obtenidas a partir de polisacáridos o de mezclas de polisacáridos que han sido entrecruzados usando bis-vinilsulfonas así como el uso de tales materiales para secuestrar contaminantes en agua con fines de purificación. Las formas de realización preferidas de tal invención se basan en el uso de DVS, como agente reticulante, y de almidón, Recently, W0201 1012749 describes new polymer matrices obtained from polysaccharides or mixtures of polysaccharides that have been crosslinked using bis-vinyl sulfones as well as the use of such materials to sequester contaminants in water for purification purposes. Preferred embodiments of such invention are based on the use of DVS, as a crosslinking agent, and starch,

30 dextrina y ciclodextrinas (o y 13), como polisacáridos u oligosacáridos de elección, para la obtención de homo-y hetera-polímeros neutros y catiónicos por entrecruzamiento de uno de los mencionados polisacáridos y de una de las mencionadas CD. También se describe la introducción de cargas electrostáticas en estos materiales y se realiza utilizando diversos compuestos que contienen grupos funcionales de tipo ácido 30 dextrin and cyclodextrins (or and 13), as polysaccharides or oligosaccharides of choice, for obtaining neutral and cationic homo-and heterepolymers by cross-linking one of said polysaccharides and one of said CDs. The introduction of electrostatic charges in these materials is also described and is carried out using various compounds containing acidic functional groups

35 carboxílico y amina. 35 carboxylic and amine.

A pesar del actual estado de la técnica, sigue existiendo la necesidad de nuevas composiciones basadas en SAB para gestionar la hipercolesterolemia. El metabolismo de COL en humanos presenta dos características importantes desde la perspectiva del diseño de dichas composiciones: i) El COL presente en la dieta es la única alternativa a la biosíntesis como fuente de COL en mamíferos, COL que representa alrededor del 35% del COL en plasma (Gylling, HM el al. Aterosclerosis (1995) Vol 117, 305-302] y ii) aproximadamente el 50% del catabolismo de COL se rige por su conversión en AB. Sobre esta base, los compuestos con capacidad para secuestrar tanto AB como el COL presentes en la dieta son candidatos potenciales para ser utilizados como fármacos para reducir los niveles sanguíneos de COL. En este contexto, la capacidad de las CD para formar complejos de inclusión tanto con COL como con AS no ha sido explotada a pesar de ser un hecho conocido y de la demostración adicional de que la ingestión de ¡3-CD en animales aumenta la excreción de AS y disminuye los niveles de triglicéridos (TG). En el estado actual de la técnica sólo hay un único informe sobre la aplicación de polímeros de ¡3-CD insolubles para la absorción de sales biliares [Baile, WE et al. J. Mal. Sci. A (2000) vol 37, 677-690]. Sin embargo, estos polímeros no dependen sólo de la capacidad de la j3-CD para formar complejos de inclusión ya que se encontraban funcionalizados con grupos alquilo de amonio cuaternario para producir materiales catiónicos de forma similar a los fármacos SAB clásicos tales como colestiramina, colestipol, colesevelam, colextran o colestilan [Mendoza, PV et al. Progreso Polym. Sei. (2013) vol 38, 445-461]. Despite the current state of the art, there is still a need for new compositions based on SAB to manage hypercholesterolemia. The metabolism of COL in humans has two important characteristics from the perspective of the design of these compositions: i) The COL present in the diet is the only alternative to biosynthesis as a source of COL in mammals, COL representing about 35% of the COL in plasma (Gylling, HM al. Atherosclerosis (1995) Vol 117, 305-302] and ii) approximately 50% of the catabolism of COL is governed by its conversion into AB. On this basis, compounds capable of sequestering both AB and COL present in the diet are potential candidates to be used as drugs to reduce blood levels of COL. In this context, the ability of CDs to form inclusion complexes with both COL and AS has not been exploited despite being a known fact and additional demonstration that ingestion of 3-CD in animals increases excretion of AS and lowers triglyceride levels (TG). In the current state of the art there is only a single report on the application of insoluble 3-CD polymers for the absorption of bile salts [Baile, WE et al. J. Mal. Sci. A (2000) vol 37, 677-690]. However, these polymers do not depend solely on the ability of the j3-CD to form inclusion complexes since they were functionalized with quaternary ammonium alkyl groups to produce cationic materials similar to classical SAB drugs such as cholestyramine, colestipol, cholesevelam, colextran or colestilan [Mendoza, PV et al. Polym Progress. Yeah (2013) vol 38, 445-461].

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCiÓN BRIEF DESCRIPTION OF THE INVENTION

La presente invención se refiere al uso de polímeros basados en sacáridos entrecruzados como medicamento, de forma especial para el tratamiento de enfermedades que requieran el secuestro de esteroles y/o ácidos biliares. Tales poi ímeros se obtienen por polimerización de un sacárido o mezclas de sacáridos usados como monómeros, tales como almidón o dextrina, que son entrecruzados con al menos una a,j3-sulfona insaturada para dar lugar a materiales homo-y heteropolimérícos. En una forma particular, la invención se refiere al uso de polímeros basados en sacáridos entrecruzados para la elaboración de un medicamento para el tratamiento de enfermedades que requieran el control de los niveles de esteroles y/o ácidos biliares. The present invention relates to the use of cross-linked saccharide polymers as a medicament, especially for the treatment of diseases that require the sequestration of sterols and / or bile acids. Such polymers are obtained by polymerization of a saccharide or mixtures of saccharides used as monomers, such as starch or dextrin, which are crosslinked with at least one α, unsaturated α-3-sulfone to give rise to homo- and heteropolymeric materials. In a particular form, the invention relates to the use of cross-linked saccharide-based polymers for the preparation of a medicament for the treatment of diseases that require the control of the levels of sterols and / or bile acids.

Por tanto, dichos materiales pueden ser utilizados en diferentes enfermedades tales como la hiperlipidemia, la diabetes, la aterosclerosis, hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia, hiperglucemia y obesidad, aunque su uso no está limitado a éstas. Therefore, such materials can be used in different diseases such as hyperlipidemia, diabetes, atherosclerosis, hypercholesterolemia, hypertriglyceridemia, hyperglycemia and obesity, although their use is not limited to them.

BREVE DESCRIPCION DE LAS FIGURAS BRIEF DESCRIPTION OF THE FIGURES

Figura 1. Detección frente a una disolución de COL y una disolución de AC-ADC de una biblioteca de compuestos preparada por entrecruzamiento de ¡3-CD (C), dextrina (X), almidón (S) con un alto (H) o bajo (L) estequiometria DVS:sacárido y, eventualmente, con bis(2-piridilmetil)amina (8PY), bis(2-hidroxietil)amina (DOH) o dietilamina (DE). Los polímeros remarcados se ensayaron in vivo en ratas Wistar hipercolesterolémicas. Las muestras son: colestiramina (1), h-S (2), h-X (3), h-C (4), 1S (5), I-X (6), I-e (7), I-es (8), l-e_DE (9), I-X_DE (10), I-ex (11), h-S_DOH (12), hX_DOH (13), h-e_DOH (14), I-S_DOH (15), I-X_DOH (16), I-C_DOH (17), I-CX_DOH (18), I-CS_DOH (19), I-X_BPY (20), I-S_BPY (21), I-CX_BPY (22), I-CS_BPY (23) Figure 1. Detection against a solution of COL and an AC-ADC solution of a library of compounds prepared by crosslinking of ¡3-CD (C), dextrin (X), starch (S) with a high (H) or low (L) DVS stoichiometry: saccharide and, eventually, with bis (2-pyridylmethyl) amine (8PY), bis (2-hydroxyethyl) amine (DOH) or diethylamine (DE). The highlighted polymers were tested in vivo in hypercholesterolemic Wistar rats. Samples are: cholestyramine (1), hS (2), hX (3), hC (4), 1S (5), IX (6), Ie (7), I-es (8), l-e_DE ( 9), I-X_DE (10), I-ex (11), h-S_DOH (12), hX_DOH (13), h-e_DOH (14), I-S_DOH (15), I-X_DOH (16), I-C_DOH (17), I-CX_DOH (18), I-CS_DOH (19), I-X_BPY (20), I-S_BPY (21), I-CX_BPY (22), I-CS_BPY (23)

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

La presente invención se refiere al uso de polímeros basados en sacáridos entrecruzados (referidos a partir de aquí como "polímeros de la invención") para el secuestro de esteroles y/o ácidos biliares (AS), composiciones farmacéuticas que comprenden los polímeros de la invención, el uso de los polímeros de la invención como un medicamento, y el uso de los polímeros de la invención para el tratamiento de enfermedades o afecciones mediados por esteroles y/o AB. Tales enfermedades incluyen hipercolesterolemia y otras condiciones como hiperlipidemia, diabetes, ateroesclerosis, hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia, hiperglucemia u obesidad, que pOdrían beneficiarse del secuestro de AB y/o metabolitos de AS en el tracto gastrointestinal mediante la administración, preferiblemente administración oral, del polímero de la invención a un sujeto con necesidad del mismo. The present invention relates to the use of crosslinked saccharide-based polymers (referred to herein as "polymers of the invention") for the sequestration of sterols and / or bile acids (AS), pharmaceutical compositions comprising the polymers of the invention. , the use of the polymers of the invention as a medicament, and the use of the polymers of the invention for the treatment of diseases or conditions mediated by sterols and / or AB. Such diseases include hypercholesterolemia and other conditions such as hyperlipidemia, diabetes, atherosclerosis, hypercholesterolemia, hypertriglyceridemia, hyperglycemia or obesity, which could benefit from sequestration of AB and / or AS metabolites in the gastrointestinal tract by administration, preferably oral administration, of the polymer of the invention to a subject in need thereof.

Los términos "tratar' o "tratamiento" usados en el presente documento se refieren al logro de un beneficio terapéutico. Por beneficio terapéutico se entiende la erradicación, mejora o prevención del trastorno subyacente que está siendo tratado. Por ejemplo, en un paciente con hipercolesterolemia, el beneficio terapéutico incluye la erradicación o mejora de la hipercolesterolemia subyacente. Además, un beneficio terapéutico se logra con la erradicación, mejora o prevención de uno o más de los síntomas fisiológicos asociados con el trastorno subyacente de tal manera que se observa una mejora en el paciente, a pesar de que el paciente todavía puede estar afectado por el trastorno subyacente. En algunos modos de tratamiento, el polímero o la composición de la invención se pueden administrar a un paciente con riesgo de desarrollar hipercolesterolemia o diabetes o a un paciente con informes acerca de uno o más de síntomas fisiológicos de hipercolesterolemia o diabetes, a pesar de que no se haya realizado un diagnóstico de hipercolesterolemia o diabetes. The terms "treat" or "treatment" used herein refer to the achievement of a therapeutic benefit. "Therapeutic benefit is the eradication, improvement or prevention of the underlying disorder being treated. For example, in a patient with hypercholesterolemia , the therapeutic benefit includes the eradication or improvement of the underlying hypercholesterolemia.In addition, a therapeutic benefit is achieved with the eradication, improvement or prevention of one or more of the physiological symptoms associated with the underlying disorder such that an improvement in the patient, although the patient may still be affected by the underlying disorder.In some modes of treatment, the polymer or composition of the invention can be administered to a patient at risk of developing hypercholesterolemia or diabetes or to a patient with reports about one or more of the physiological symptoms of hypercholesterolemia or diabetes, although a diagnosis of hypercholesterolemia or diabetes has not been made.

Los términos "ácido biliar" y "sal biliar" se usan indistintamente en el presente documento y los expertos en la técnica entenderán que un ácido biliar estará presente en el tracto gastrointestinal en forma de sal y, en menor grado, en forma protonada. The terms "bile acid" and "bile salt" are used interchangeably herein and those skilled in the art will understand that a bile acid will be present in the gastrointestinal tract in the form of salt and, to a lesser extent, in protonated form.

Los polimeros de la invención The polymers of the invention

Los polímeros basados en sacáridos entrecruzados, o "polímeros de la invención", son polímeros basados en sacáridos entrecruzados obtenidos por polimerización de un sacárido o mezcla de sacáridos, utilizados como monómeros, y de al menos una a,j3-sulfona insaturada, utilizada como agente de reticulación, que exhiben una mayor afinidad y/o capacidad para la unión de sales biliares y colesterol, y/o su retención en comparación con secuestrantes de ácidos biliares comerciales. Los polímeros de la invención presentan una combinación de enlaces de hidrógeno, propiedades electrostáticas, átomos de nitrógeno cargados, hidrofobicidad, capacidades de inclusión y/o una arquitectura polimérica de matriz reticular que proporcionar el mencionado aumento de afinidad y/o capacidad de secuestro de sales y/ o inclusión de colesterol. Polymers based on crosslinked saccharides, or "polymers of the invention", are polymers based on crosslinked saccharides obtained by polymerization of a saccharide or mixture of saccharides, used as monomers, and at least one unsaturated α, 3-sulfone, used as crosslinking agent, which exhibit a higher affinity and / or capacity for the binding of bile salts and cholesterol, and / or their retention compared to commercial bile acid sequestrants. The polymers of the invention have a combination of hydrogen bonds, electrostatic properties, charged nitrogen atoms, hydrophobicity, inclusion capacities and / or a polymeric architecture of a reticular matrix that provide the aforementioned increase in affinity and / or salt sequestration capacity. and / or inclusion of cholesterol.

La matriz entrecruzada (o reticular) se puede obtener por métodos conocidos por expertos en la técnica, particularmente tal y como se describe en el documento W02011012749, ejemplos de los cuales se ilustran en los Ejemplos de este The crosslinked (or crosslinked) matrix can be obtained by methods known to those skilled in the art, particularly as described in W02011012749, examples of which are illustrated in the Examples herein.

documento. las matrices entrecruzadas son generalmente el producto de reacción de una mezcla de reacción que se somete a condiciones de reacción. La mezcla de reacción puede contener componentes que no se incorporan químicamente al producto. La mezcla de reacción comprende típicamente al menos un polisacárido o ciclodextrina, o una mezcla de dos polisacáridos o ciclodextrinas diferentes, o una mezcla de un polisacárido y una ciclodextrina. document. crosslinked matrices are generally the reaction product of a reaction mixture that is subjected to reaction conditions. The reaction mixture may contain components that are not chemically incorporated into the product. The reaction mixture typically comprises at least one polysaccharide or cyclodextrin, or a mixture of two different polysaccharides or cyclodextrins, or a mixture of a polysaccharide and a cyclodextrin.

Los sacáridos utilizados se seleccionan de entre polisacáridos naturales tales como almidón, dextrina, inulina, etc. y/o oligosacáridos cíclicos tales como ciclodextrinas o ciclodextrinas modificadas. En una realización preferida, el polisacárido se selecciona entre almidón , almidón modificado, dextrina y mezclas de los mismos. En otra realización, el sacárido es un oligosacárido cíclico, preferiblemente a, j3 ó y ciclodextrinas o mezclas de los mismos, preferiblemente j3-ciclodextrina. The saccharides used are selected from among natural polysaccharides such as starch, dextrin, inulin, etc. and / or cyclic oligosaccharides such as cyclodextrins or modified cyclodextrins. In a preferred embodiment, the polysaccharide is selected from starch, modified starch, dextrin and mixtures thereof. In another embodiment, the saccharide is a cyclic oligosaccharide, preferably a, j3 or and cyclodextrins or mixtures thereof, preferably j3-cyclodextrin.

En una realización preferida, el agente de entrecruzamiento (o reticulación) tiene más de un grupo vi nilo, tales como bis-vinil sulfonas, siendo aún más preferido divinil sulfona, seleccionado preferiblemente de entre H2C=CHS02RS02CH=CH2, H2C=CHS02CH2CH2XRXCH2CH2S02CH=CH2 donde R es un (C1-C10), un dialquilaril ((C1-C10)Ar(CI-C10), (CH,CH,O)"CH,CH, donde n = 2-20, siendo X = O o S, y mezclas de estos. In a preferred embodiment, the cross-linking agent (or cross-linking) has more than one viyl group, such as bis-vinyl sulfones, with divinyl sulfone being even more preferred, preferably selected from H2C = CHS02RS02CH = CH2, H2C = CHS02CH2CH2XRXCH2CH2S02CH = CH2 where R is a (C1-C10), a dialkylaryl ((C1-C10) Ar (CI-C10), (CH, CH, O) "CH, CH, where n = 2-20, where X = O or S , and mixtures of these.

Las matrices pueden entrecruzarse (o reticularse) utilizando al menos dos polisacáridos para conferir propiedades sinérgicas para la unión a sales biliares y/o colesterol. Preferiblemente, la matriz polimérica comprende dos polisacáridos seleccionados de entre los compuestos almidón, almidón modificado, dextrina, ciclodextrinas, ciclodextrinas modificadas, y mezclas de los mismos. The matrices can be crosslinked (or crosslinked) using at least two polysaccharides to confer synergistic properties for binding to bile salts and / or cholesterol. Preferably, the polymer matrix comprises two polysaccharides selected from the compounds starch, modified starch, dextrin, cyclodextrins, modified cyclodextrins, and mixtures thereof.

En algunas formas de realización, los polímeros de la invención contienen una carga electrostática positiva permanente localizada en un átomo de nitrógeno. Sin estar confirmado de forma teórica, se cree que estas cargas positivas permanentes proporcionan un material mejorado que exhibe una mejor afinidad, así como una mejor capacidad para unirse y retener a ácidos biliares mediante múltiples fuerzas atractivas. Para conseguir estos propósitos, los polímeros de la invención se obtienen como se describe en el documento W02011012749 con el fin de introducir las mencionadas cargas electrostáticas positivas para facilitar el secuestro y/o encapsulación de sales biliares yla colesterol. En una realización preferida, la carga introducida en los polímeros reticulados es una carga positiva que se introduce a través de la incorporación durante el proceso de preparación de derivados seleccionados de la lista que comprende derivados que poseen grupos amino y mezclas de los mismos. Los derivados preferidos para la introducción de carga se seleccionan de entre la lista que comprende H,N(CH,)nCOOH (donde n = 1-20), HS(CH,)"COOH (donde n = 1-20), HN((CH,)"COOH], (n = 1-3), HOCH,CH,N(CH,)" HN((CH,)"NMe,], (donde n = 1-10), HN((CH,)"Py], (donde n = 0-1 Y Py = 2-piridil), YCH,CH2(NCH,h donde Y= CI, Br y mezclas de los mismos. In some embodiments, the polymers of the invention contain a permanent positive electrostatic charge located in a nitrogen atom. Without being theoretically confirmed, it is believed that these permanent positive charges provide an improved material that exhibits better affinity, as well as a better ability to bind and retain bile acids through multiple attractive forces. To achieve these purposes, the polymers of the invention are obtained as described in W02011012749 in order to introduce said positive electrostatic charges to facilitate the sequestration and / or encapsulation of bile salts and cholesterol. In a preferred embodiment, the charge introduced into the crosslinked polymers is a positive charge that is introduced through the incorporation during the process of preparing derivatives selected from the list comprising derivatives having amino groups and mixtures thereof. Preferred derivatives for charge introduction are selected from the list comprising H, N (CH,) nCOOH (where n = 1-20), HS (CH,) "COOH (where n = 1-20), HN ((CH,) "COOH], (n = 1-3), HOCH, CH, N (CH,)" HN ((CH,) "NMe,], (where n = 1-10), HN (( CH,) "Py], (where n = 0-1 and Py = 2-pyridyl), YCH, CH2 (NCH, h where Y = CI, Br and mixtures thereof.

En general, las reacciones se llevan a cabo de tal manera tal que las matrices entrecruzadas resultantes se obtienen como polvos sólidos insolubles que precipitan en el medio de reacción. La reacción se lleva a cabo bien en solución o en medios dispersos. La reacción puede iniciarse mediante cambios de temperatura o bien mediante irradiación. La formación de las estructuras reticulares se produce cuando los sacaridos reaccionan y se entrecruzan entre sí. Los parametros que afectan a la reacción de formación de la estructura incluyen la temperatura, la elección de disolvente, y la concentración de los sacáridos, las ami nas y los agentes reticulante de tipo bis-vinil sulfona, y la proporción sacarido/bis-vinil sulfona. In general, the reactions are carried out in such a way that the resulting crosslinked matrices are obtained as insoluble solid powders that precipitate in the reaction medium. The reaction is carried out either in solution or in dispersed media. The reaction can be initiated by temperature changes or by irradiation. The formation of the reticular structures occurs when the saccharides react and intersect with each other. Parameters that affect the formation reaction of the structure include the temperature, the choice of solvent, and the concentration of saccharides, amino and bis-vinyl sulfone crosslinking agents, and the saccharide / bis-vinyl ratio sulfone

Las reacciones de polimerización para preparar los polímeros de la invención incluyen la preparación de una solución acuosa de los sacáridos y la adición de la bis-vinil sulfona como reactivo reticulante a la fase acuosa de una sola vez o de una manera semi-continua. Por ejemplo, el agente reticulante se puede añadir a la polimerización de una sola vez o se puede añadir lentamente durante un período de tiempo. Opcionalmente aminas alifaticas o aromáticas se pueden añadir una vez que la reacción de polimerización se ha iniciado cuando se pretende obtener polímeros entrecruzados funcionalizados con grupos amino, de tal manera que mediante este protocolo se pueden obtener homo-y hetero-polímeros cargados. Polymerization reactions to prepare the polymers of the invention include the preparation of an aqueous solution of the saccharides and the addition of bis-vinyl sulfone as a crosslinking reagent to the aqueous phase only once or in a semi-continuous manner. For example, the crosslinking agent can be added to the polymerization at once or it can be added slowly over a period of time. Optionally aliphatic or aromatic amines can be added once the polymerization reaction has started when it is intended to obtain crosslinked polymers functionalized with amino groups, such that by this protocol can be obtained homo- and hetero-charged polymers.

Uso de los polímeros de la invención Use of the polymers of the invention

Los polímeros de la invención tienen propiedades químicas, físicas y estructurales que determinan su afinidad y/o capacidad de inclusión de sales biliares y/o de colesterol preferentemente sobre acidos grasos, fosfatos y/o otros compuestos presentes en el tracto gastrointestinal vías. The polymers of the invention have chemical, physical and structural properties that determine their affinity and / or ability to include bile salts and / or cholesterol, preferably on fatty acids, phosphates and / or other compounds present in the gastrointestinal tract.

Además, en otras realizaciones, la presente invención proporciona un método de eliminación de los ácidos biliares en el tracto gastrointestinal de un sujeto que lo necesite, método que comprende la administración de una cantidad eficaz de un polímero de la invención o de una composición conteniendo el polímero de la invención, en donde el polímero o composición es bien tolerado en la forma administrada. En algunos casos, el sujeto sufre hipercolesterolemia y por lo tanto el método sirve para tratar la hipercolesterolemia. En olros casos, el método reduce el colesterol en suero y los niveles de glucosa y de triglicéridos. In addition, in other embodiments, the present invention provides a method of removing bile acids in the gastrointestinal tract of a subject in need thereof, a method comprising administering an effective amount of a polymer of the invention or of a composition containing the polymer of the invention, wherein the polymer or composition is well tolerated in the administered form. In some cases, the subject suffers from hypercholesterolemia and therefore the method is used to treat hypercholesterolemia. In other cases, the method reduces serum cholesterol and glucose and triglyceride levels.

Los polímeros y composiciones farmacéuticas descritas en el presente documento tienen la capacidad de retener una cantidad significativa de sales biliares en el tracto gastrointestinal. El término "cantidad significativa" tal y como se usa en el presente documento no está destinado a indicar que se secuestra la cantidad total de las sales biliares presente en el tracto gastrointestinal. Por lo tanto, los polímeros de la invención se pueden utilizar para eliminar las sales biliares de un sujeto mediante la administración de una "cantidad eficaz del polímero" a un sujeto que lo necesite. Las sales biliares pueden ser secuestradas y retenidas por los polímeros de la invención y luego eliminadas del tracto gastrointestinal. Además, los polímeros de la invención se pueden utilizar para reducir el colesterol en un sujeto. Este uso conduce a una reducción significativa de los niveles medios de colesterol en suero que, en algunos casos, se reduce en al menos 10%, preferible 20%, más preferible 25% y más preferiblemente 40% después de 2, 4, 12, 24, 52 o más semanas de tratamiento. Tal y como se usa aquí, un sujeto puede ser un ser humano u otro mamífero con necesidad ya sea de eliminación de sales biliares, reducción de colesterol o reducción de triglicéridos. The polymers and pharmaceutical compositions described herein have the ability to retain a significant amount of bile salts in the gastrointestinal tract. The term "significant amount" as used herein is not intended to indicate that the total amount of bile salts present in the gastrointestinal tract is sequestered. Therefore, the polymers of the invention can be used to remove the bile salts of a subject by administering an "effective amount of the polymer" to a subject in need thereof. Bile salts can be sequestered and retained by the polymers of the invention and then removed from the gastrointestinal tract. In addition, the polymers of the invention can be used to reduce cholesterol in a subject. This use leads to a significant reduction in the mean serum cholesterol levels which, in some cases, is reduced by at least 10%, preferably 20%, more preferably 25% and more preferably 40% after 2, 4, 12, 24, 52 or more weeks of treatment. As used herein, a subject can be a human being or another mammal in need of either elimination of bile salts, reduction of cholesterol or reduction of triglycerides.

Los métodos, los polímeros y composiciones descritas en el presente documento son adecuados para la eliminación de sales biliares y/o colesterol de un sujeto con necesidad de tal eliminación. Por ejemplo, los pacientes que experimentan hipercolesterolemia o hiperlipidemia pueden beneficiarse de la mencionada eliminación de sales biliares y/o colesterol. Los métodos descritos en este documento son aplicables a estos pacientes, independientemente de la enfermedad o afección subyacente que esté causando niveles altos de colesterol en suero o la necesidad de la eliminación de ácidos biliares. The methods, polymers and compositions described herein are suitable for the removal of bile salts and / or cholesterol from a subject in need of such removal. For example, patients experiencing hypercholesterolemia or hyperlipidemia may benefit from the aforementioned elimination of bile salts and / or cholesterol. The methods described in this document are applicable to these patients, regardless of the underlying disease or condition that is causing high serum cholesterol levels or the need for bile acid elimination.

El régimen de dosificación para tratar la hipercolesterolemia o reducir el colesterol en plasma con los polímeros y composiciones farmacéuticas de la presente invención se puede seleccionar utilizando una variedad de factores. Estos factores incluyen el tipo, edad, peso, sexo, dieta, y afección del paciente, la gravedad de la enfermedad, la vía de administración, consideraciones farmacológicas tales como la actividad, eficacia, farmacocinética y perfiles toxicológicos del compuesto particular empleado, si se utiliza un sistema de suministro de fármaco o si el polímero de la invención se administra como parte de una combinación de fármacos. Por lo tanto, el régimen de dosificación empleado realmente puede variar ampliamente. The dosage regimen for treating hypercholesterolemia or reducing plasma cholesterol with the polymers and pharmaceutical compositions of the present invention can be selected using a variety of factors. These factors include the type, age, weight, sex, diet, and condition of the patient, the severity of the disease, the route of administration, pharmacological considerations such as the activity, efficacy, pharmacokinetics and toxicological profiles of the particular compound employed, if uses a drug delivery system or if the polymer of the invention is administered as part of a combination of drugs. Therefore, the dosage regimen employed can really vary widely.

El tratamiento inicial de un paciente que sufre de una enfermedad hiperlipidémica tal como la hipercolesterolemia y/o la ateroscierosis puede comenzar con dosis adaptadas de acuerdo con los factores mencionados anteriormente. El tratamiento generalmente debe continuarse según sea necesario durante un período de varias semanas a varios meses o años hasta que la enfermedad haya sido controlada o eliminada. Los pacientes sometidos a tratamiento con los polímeros de la invención descrita en el presente documento se pueden monitorizar de forma rutinaria mediante, por ejemplo, la medición de suero, colesterol total y/o niveles de triglicéridos por cualquiera de los métodos bien conocidos en la técnica, para determinar la eficacia de la terapia de combinación. El análisis continuado de tales datos permite la modificación del régimen de tratamiento durante la terapia de modo que las cantidades eficaces óptimas de cada tipo de agente se administran en cualquier punto en el tiempo, y de tal modo que la duración del tratamiento puede ser determinada también. De esta manera, el régimen de tratamiento/programa de dosificación puede modificarse racionalmente durante el transcurso de la terapia de forma tal que se administra la menor cantidad del polímero de la invención y, opcionalmente, el tratamiento de combinación , al objeto de que la administración se continúe sólo el tiempo que sea necesario para tratar con éxito la enfermedad hiperlipidémica. The initial treatment of a patient suffering from a hyperlipidemic disease such as hypercholesterolemia and / or atherosclerosis can begin with adapted doses according to the factors mentioned above. Treatment should generally be continued as necessary for a period of several weeks to several months or years until the disease has been controlled or eliminated. Patients undergoing treatment with the polymers of the invention described herein can be routinely monitored by, for example, the measurement of serum, total cholesterol and / or triglyceride levels by any of the methods well known in the art. , to determine the effectiveness of combination therapy. The continued analysis of such data allows the modification of the treatment regimen during therapy so that the optimal effective amounts of each type of agent are administered at any point in time, and so that the duration of treatment can also be determined. . In this way, the treatment regimen / dosage schedule can be rationally modified during the course of the therapy such that the least amount of the polymer of the invention and, optionally, the combination treatment is administered, so that the administration Only as long as necessary to successfully treat hyperlipidemic disease is continued.

Los polímeros de la invención o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, o las composiciones descritas en este documento, pueden ser suministrados al paciente usando una variedad de vías o modos de administración. Las vías preferidas para la administración son la oral o la intestinal. La vía intestinal de administración se refiere The polymers of the invention or pharmaceutically acceptable salts thereof, or the compositions described herein, can be delivered to the patient using a variety of routes or modes of administration. Preferred routes for administration are oral or intestinal. The intestinal route of administration refers

en general a la administración directa en un segmento del tracto gastrointestinal, por ejemplo, a través de una sonda gastrointestinal o a través de un estoma. La vía más preferida para la administración es la vía oral. in general to direct administration in a segment of the gastrointestinal tract, for example, through a gastrointestinal catheter or through a stoma. The most preferred route for administration is the oral route.

Los polímeros (o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos) se pueden administrar per se o en forma de una composición farmacéutica en la que el o los compuesto activos están agregados o mezclados con uno o más excipientes farmacéutica mente aceptables. Las composiciones farmacéuticas para uso de acuerdo con la presente invención pueden formularse de una manera convencional usando uno The polymers (or pharmaceutically acceptable salts thereof) can be administered per se or in the form of a pharmaceutical composition in which the active compound (s) are added or mixed with one or more pharmaceutically acceptable excipients. Pharmaceutical compositions for use in accordance with the present invention can be formulated in a conventional manner using one

o más excipientes farmacéuticamente aceptables que comprenden portadores, diluyentes y auxiliares, que facilitan el procesamiento de los compuestos activos en preparaciones que se pueden utilizar fisiológicamente. La composición apropiada depende de la vía de administración elegida. or more pharmaceutically acceptable excipients comprising carriers, diluents and auxiliaries, which facilitate the processing of active compounds in preparations that can be used physiologically. The appropriate composition depends on the route of administration chosen.

Para la administración oral, los polímeros o composiciones de la invención pueden formularse fácilmente combinando el poi ímero o la composición con excipientes farmacéuticamente aceptables bien conocidos en la técnica. Tales excipientes permiten que las composiciones de la invención sean formulados como polvos, comprimidos, píldoras, grageas, cápsulas, geles, jarabes, pastas, suspensiones, obleas, y similares, para la ingestión oral por el paciente a ser tratado. Las preparaciones farmacéuticas para uso oral se pueden obtener como excipiente sólido, moliendo opcionalmente la mezcla resultante y procesando la mezcla de gránulos, después de añadir auxiliares adecuados, si se desea, para obtener comprimidos o núcleos de grageas. Los excipientes adecuados son , en particular, cargas tales como azúcares, incluidas la lactosa o sacarosa; preparaciones de celulosa tales como, por ejemplo, almidón de maíz, almidón de trigo, almidón de arroz, almidón de patata, gelatina, goma de tragacanto, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica, y/o polivinil pirrolidona (PVP); y diversos agentes aromatizantes conocidos en la técnica. Si se desea, pueden añadirse agentes disgregantes, tales como la polivinil pirrolidona (PVP) reticulada, agar, o ácido algínico For oral administration, the polymers or compositions of the invention can be easily formulated by combining the polymer or the composition with pharmaceutically acceptable excipients well known in the art. Such excipients allow the compositions of the invention to be formulated as powders, tablets, pills, dragees, capsules, gels, syrups, pastes, suspensions, wafers, and the like, for oral ingestion by the patient to be treated. Pharmaceutical preparations for oral use can be obtained as a solid excipient, optionally grinding the resulting mixture and processing the granule mixture, after adding suitable auxiliaries, if desired, to obtain tablets or dragee cores. Suitable excipients are, in particular, fillers such as sugars, including lactose or sucrose; cellulose preparations such as, for example, corn starch, wheat starch, rice starch, potato starch, gelatin, tragacanth gum, methylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, sodium carboxymethylcellulose, and / or polyvinyl pyrrolidone (PVP); and various flavoring agents known in the art. If desired, disintegrating agents, such as cross-linked polyvinyl pyrrolidone (PVP), agar, or alginic acid may be added

o una sal del mismo tal como alginato de sodio. or a salt thereof such as sodium alginate.

Habiendo descrito la invención en detalle, es evidente que son posibles modificaciones y variaciones sin apartarse del alcance de la invención definida en las reivindicaciones adjuntas. Having described the invention in detail, it is evident that modifications and variations are possible without departing from the scope of the invention defined in the appended claims.

EJEMPLOS EXAMPLES

Modelos experimentales Experimental models

Para determinar la capacidad in vitre de los polímeros de la invención para secuestrar tanto COL de la dieta como AS, dichos compuestos fueron evaluados frente a una solución de COL y una solución de acido cólico (AC) yacido desoxicólico (ADC) como se describe en el ejemplo 3. La solución de AC-ADC es un buen modelo ya que el AC es el más predominante en la bilis, siendo su abundancia relativa de 37,5% (25% para ADC), y la afinidad de ¡3-CD para ellos es de las más bajas de los componentes de los AS . Los polímeros fueron triturados hasta polvo y homogeneizados con un mortero antes del ensayo. Después de la incubación y la centrifugación los sobrenadantes fueron analizados por espectroscopia de masas de alta resolución (EMAR). Los resultados in vitro de los polímeros de la invención presentan una capacidad de unión máximo de aproximadamente 32,3 polímero mmol/gr. Por lo tanto, la capacidad de unión in vitro de sales biliares a los polímeros de la invención es de aproximadamente 0,5 a aproximadamente 75 polímero mmol/gr de polímero, en particular de aproximadamente 1 a aproximadamente 50 mmol/gr de polímero, y más particularmente de aproximadamente 5 a aproximadamente 35 mmol/gr de polímero cuando se mide en el mencionado ensayo. To determine the in vitro capacity of the polymers of the invention to sequester both COL from the diet and AS, said compounds were evaluated against a solution of COL and a solution of colic acid (AC) lying deoxycholic (ADC) as described in Example 3. The AC-ADC solution is a good model since AC is the most predominant in bile, its relative abundance being 37.5% (25% for ADC), and the affinity of ¡3-CD for them it is one of the lowest of the components of the AS. The polymers were crushed to powder and homogenized with a mortar before testing. After incubation and centrifugation the supernatants were analyzed by high resolution mass spectroscopy (EMAR). The in vitro results of the polymers of the invention have a maximum binding capacity of approximately 32.3 mmol / g polymer. Therefore, the in vitro binding capacity of bile salts to the polymers of the invention is from about 0.5 to about 75 mmol / g polymer, in particular from about 1 to about 50 mmol / g polymer, and more particularly from about 5 to about 35 mmol / g of polymer when measured in said test.

Para determinar la retención in vivo de AS y/o COL, los polímeros de la invención se analizan en un modelo de rata hipercolesterolémica como se describe en el Ejemplo 6. El modelo de rata proporciona una medida compleja y relevante de la capacidad secuestrante de bilis para el polímero AS y/o COL y su afinidad de unión por AS más de otros aniones en el tracto gastrointestinal. Preferiblemente se utilizaron ratas Wistar macho. Los animales se aclimataron y luego se indujo hipercolesterolemia mediante la suplementación de la dieta convencional con un 2% de peso sobre el peso total (p/p) COL (dieta hipercolesterolémica) durante dos semanas. A continuación, los animales fueron alimentados con la dieta hipercolesterolémica suplementada con 5% (p/p) del polímero de la invención a ensayar. Al final de dicho periodo los animales fueron sacrificados por dislocación cervical y se tomaron muestra de sangre para el análisis de COL, TG, glucosa, creatinína y transaminasas. To determine the in vivo retention of AS and / or COL, the polymers of the invention are analyzed in a hypercholesterolemic rat model as described in Example 6. The rat model provides a complex and relevant measure of bile sequestration capacity. for the AS and / or COL polymer and its binding affinity for AS more than other anions in the gastrointestinal tract. Preferably male Wistar rats were used. The animals were acclimatized and then hypercholesterolemia was induced by supplementing the conventional diet with 2% weight over the total weight (w / w) COL (hypercholesterolemic diet) for two weeks. Next, the animals were fed the hypercholesterolemic diet supplemented with 5% (w / w) of the polymer of the invention to be tested. At the end of that period the animals were sacrificed by cervical dislocation and blood samples were taken for the analysis of COL, TG, glucose, creatinine and transaminases.

Los ensayos in vivo en ratas con hipercolesterolemia revelan que los polímeros In vivo assays in rats with hypercholesterolemia reveal that polymers

seleccionados para tales ensayos producen similares niveles reducidos de COL El análisis de la actividad de transaminasa y el nivel de creatinina no detecta ninguna diferencia estadísticamente significativa en comparación con el grupo de conlrollo cual apoya la ausencia de toxicidad de los polímeros ensayados. En general, la capacidad de estos polímeros para regular hipocolesterolemia es similar a la de la colestiramina SAB usada como referencia, pero con tres ventajas adicionales: i) normalizan el nivel de triglicéridos (TG), ii) no incrementan el nivel de creatinina, y ¡ii) algunos de estos compuestos reducen los niveles de glucosa en suero. Selected for such tests produce similar reduced levels of COL. The analysis of transaminase activity and creatinine level does not detect any statistically significant difference compared to the conglomerate group which supports the absence of toxicity of the polymers tested. In general, the ability of these polymers to regulate hypocholesterolemia is similar to that of SAB cholestyramine used as a reference, but with three additional advantages: i) normalize the triglyceride level (TG), ii) do not increase the creatinine level, and Ii) some of these compounds reduce serum glucose levels.

Ensayos essays

A continuación se indican algunos ejemplos no limitantes para ilustrar los usos de los polímeros de la invención. Los siguientes experimentos fueron usados para llevar en a cabo las pruebas in vitro e in vivo que se detallan a continuación: Below are some non-limiting examples to illustrate the uses of the polymers of the invention. The following experiments were used to carry out the in vitro and in vivo tests detailed below:

1. Síntesis de una biblioteca de polímeros SAS Se preparó una biblioteca de 22 homo-y hetero-polímeros siguiendo la metodología descrita en la patente W020 11012749. j3-CD (C), dextrina (X) y almidón (S) fueron entrecruzados con DVS utilizando cantidades estequiométricas adecuadas para conseguir una alta (h) o baja (1) reticulación. Las ami nas bis (2-piridilmetil) amina (BPY), bis (2-hidroxietil) amina (DOH) o dietilamina (DE) se utilizaron en la preparación de polímeros catiónicos entrecruzados basados en sacáridos. Los componentes de la biblioteca preparados son los siguientes: HS (2), hx (3), HC (4), LS (5), IX (6), LC (7), 1CS (8), I-C_DE (9), I-X_DE (10), I-CX (11 ), h-S_DOH (12), h-X_DOH (13), h-C_DOH (14), I-S_DOH (15), I-X_DOH ( 16), I-C_DOH (17), I-CX_DOH (18), I-CS_DOH (19), 1X_BPY (20), I-S_BPY (21), I-CX_BPY (22), I-CS_BPY (23 ) 1. Synthesis of a SAS polymer library A library of 22 homo- and hetero-polymers was prepared following the methodology described in patent W020 11012749. j3-CD (C), dextrin (X) and starch (S) were crosslinked with DVS using stoichiometric amounts suitable to achieve high (h) or low (1) cross-linking. The bis (2-pyridylmethyl) amine (BPY), bis (2-hydroxyethyl) amine (DOH) or diethylamine (DE) amines were used in the preparation of crosslinked cationic polymers based on saccharides. The components of the library prepared are the following: HS (2), hx (3), HC (4), LS (5), IX (6), LC (7), 1CS (8), I-C_DE (9 ), I-X_DE (10), I-CX (11), h-S_DOH (12), h-X_DOH (13), h-C_DOH (14), I-S_DOH (15), I-X_DOH (16) , I-C_DOH (17), I-CX_DOH (18), I-CS_DOH (19), 1X_BPY (20), I-S_BPY (21), I-CX_BPY (22), I-CS_BPY (23)

1. Protocolo para la preparación de horno-polímeros neutros: Se disolvió almidón, dextrina o j3-CD (10 g) en tampón de carbonato (0,5 M, pH 12, 500 mi) bajo agitación magnética a temperatura ambiente. Para el caso particular de almidón, la solubilización completa de este compuesto requiere además calefacción a reflujo (1520 min), dejándose posteriormente un tiempo suficiente para alcanzar la temperatura ambiente. La agitación de las disoluciones de los sacáridos se continuo durante 30 min antes de la adición de 10 o 5 mi de DVS al objeto de obtener unas relaciones molares DVS:glucosa de 2:1 o 1:1, respectivamente. La reacción de entrecruzamiento se mantuvo durante 7-8 h a temperatura ambiente observándose la aparición de un polvo sólido que precipitó en el medio de reacción. Dicho producto sólido se aisló por filtración, se lavó a fondo con agua desionizada y después con etanol. El polímero resultante se secó a vacío durante 18 horas a 50°C. 1. Protocol for the preparation of oven-neutral polymers: Starch, dextrin or j3-CD (10 g) was dissolved in carbonate buffer (0.5 M, pH 12, 500 ml) under magnetic stirring at room temperature. For the particular case of starch, the complete solubilization of this compound also requires reflux heating (1520 min), leaving a sufficient time afterwards to reach room temperature. Stirring of the saccharide solutions was continued for 30 min before the addition of 10 or 5 ml of DVS in order to obtain DVS: glucose molar ratios of 2: 1 or 1: 1, respectively. The cross-linking reaction was maintained for 7-8 h at room temperature, observing the appearance of a solid powder that precipitated in the reaction medium. Said solid product was isolated by filtration, washed thoroughly with deionized water and then with ethanol. The resulting polymer was dried under vacuum for 18 hours at 50 ° C.

2. 2.: Protocolo para la preparación de hetero-polímeros neutros: j3-CD (5 g) Y almidón, dextrina (5 g) se co-polimerizan con DVS (5 mi, DVS: Glc proporción de 1:1 molar). La reacción de reticulación y el aislamiento del producto resultante se llevó a cabo tal y como se ha descrito anteriormente. Protocol for the preparation of neutral hetero-polymers: j3-CD (5 g) and starch, dextrin (5 g) are co-polymerized with DVS (5 ml, DVS: Glc ratio of 1: 1 molar). The crosslinking reaction and isolation of the resulting product was carried out as described above.

3. 3.: Protocolo para la preparación de homo-y hetero-polímeros cargados: Los polímeros se prepararon como se ha descrito anteriormente. Las cargas electrostáticas se introdujeron por adición de 25 mmoles de bis (2-piridilmetil) amina, bis (2-hidroxietil) amina o dietilamina una vez transcurridas 1,5 horas después de iniciada la reacción de entrecruzamiento. La reacción de ca-polimerización se mantiene durante 6-7 horas antes del aislamiento del polímero Protocol for the preparation of homo- and hetero-charged polymers: The polymers were prepared as described above. Electrostatic charges were introduced by adding 25 mmol of bis (2-pyridylmethyl) amine, bis (2-hydroxyethyl) amine or diethylamine after 1.5 hours after the cross-linking reaction began. The ca-polymerization reaction is maintained for 6-7 hours before polymer isolation.

2. Análisis de la capacidad secuestrante de la biblioteca de polímeros SAS La biblioteca de polímeros SAB se ensayo frente a una solución de COL y una solución de AC y ADC para evaluar la capacidad de dichos polímeros para secuestrar tanto el COL de la dieta como los AB. Los polímeros fueron triturados hasta obtener un polvo y homogeneizados usando un mortero antes del ensayo. El polímero (0,5 gr) se incubó durante 1 h a 37 oC, con 5 mi de una solución de CA (3 mM) y DCA (2 mM) en 25 mM HEPES a pH 7,8, 2,5% de DMSO 0, alternativamente, con 5 mi de COL (5 mM) en THF. Después de la incubación las muestras se centrifugaron a 14000 rpm y los sobrenadantes se analizaron por espectroscopia de masas de alta resolución EMAR. Una representación gráfica de los datos obtenidos se muestra en la Figura 1. 2. Analysis of the sequestering capacity of the SAS polymer library The SAB polymer library was tested against a solution of COL and a solution of AC and ADC to assess the ability of said polymers to sequester both the dietary COL and the AB. The polymers were crushed to a powder and homogenized using a mortar before testing. The polymer (0.5 gr) was incubated for 1 h at 37 oC, with 5 ml of a solution of CA (3 mM) and DCA (2 mM) in 25 mM HEPES at pH 7.8, 2.5% DMSO 0, alternatively, with 5 ml of COL (5 mM) in THF. After incubation the samples were centrifuged at 14000 rpm and the supernatants were analyzed by EMAR high resolution mass spectroscopy. A graphic representation of the data obtained is shown in Figure 1.

3. Selección de polimeros SAS para la experimentación in vívo con animales De acuerdo con los datos obtenidos, los polímeros 8, 11 Y 21 fueron seleccionados como buenos candidatos para la experimentación con animales teniendo en cuenta sus propiedades como SAB y el rendimiento de su síntesis como parámetro crítico para la producción a escala. a) El polímero 11 muestra un 70% de la capacidad de colestiramina para secuestrar tanto AC como ADC pudiendo por tanto ser capaz de comportarse como un medicamento SAB. b) El polímero 21 se une preferentemente a COL por lo que debe ser capaz de comportarse como un aditivo de alimentos para reducir la absorción de COL. 3. Selection of SAS polymers for in vivo experimentation with animals According to the data obtained, polymers 8, 11 and 21 were selected as good candidates for experimentation with animals taking into account their properties as SAB and the performance of their synthesis as a critical parameter for scale production. a) Polymer 11 shows 70% of the ability of cholestyramine to sequester both AC and ADC and may therefore be able to behave like a SAB medication. b) Polymer 21 preferably binds COL so it must be able to behave as a food additive to reduce the absorption of COL.

e) El polímero 8 muestra una capacidad de secuestro similar tanto para COL como AB por lo que debe ser capaz de comportarse como un compuesto para la absorción simultánea del COL de la dieta y la excreción de AB. e) Polymer 8 shows a similar sequestration capacity for both COL and AB so it must be able to behave as a compound for the simultaneous absorption of COL from the diet and the excretion of AB.

5 4. Síntesis a mayor escala de polímeros SAB para la experimentación con 5 4. Synthesis on a larger scale of SAB polymers for experimentation with

animales animals

El sacárido correspondiente o la mezcla de sacáridos (25 gr) se disuelve en lampón de carbonato (0,5 M pH 12, 2,5 L) bajo agitación mecánica (700 rpm). La adición de DVS (25 mi) se llevó a cabo posteriormente gola a gola y la reacción de entrecruzamiento 10 se mantuvo durante toda la noche. El producto solido obtenido se aisló por filtración y se lavó a fondo con agua desionizada, con MeOH y finalmente con éter dietílico. Los polímeros de sacáridos entrecruzados resultantes se sometieron a extracción en Soxhlet con acetato de etilo para eliminar cualquier rastro de componentes sin reaccionar y luego se secaron a vacío durante 18 horas a 50°C. Las muestras fueron The corresponding saccharide or saccharide mixture (25 gr) is dissolved in carbonate lamp (0.5 M pH 12, 2.5 L) under mechanical stirring (700 rpm). The addition of DVS (25 ml) was subsequently carried out gola to gola and the cross-linking reaction 10 was maintained overnight. The solid product obtained was isolated by filtration and washed thoroughly with deionized water, with MeOH and finally with diethyl ether. The resulting crosslinked saccharide polymers were subjected to Soxhlet extraction with ethyl acetate to remove any trace of unreacted components and then dried under vacuum for 18 hours at 50 ° C. The samples were

15 trituradas antes de la adición a la dieta. 15 crushed before adding to the diet.

5. Análisis de caracterización elemental de los polímeros SAB ensayados en la experimentación con animales 5. Elemental characterization analysis of SAB polymers tested in animal experiments

Los análisis elementales (CHNS) se determinaron con un analizador elemental 20 Thermo Scientific flash 2000 (Tabla 1). Elemental analyzes (CHNS) were determined with a 20 Thermo Scientific flash 2000 elemental analyzer (Table 1).

Compuesto %N %C %S Compound% N% C% S

Colestiramina 5.6 ± 0.11 63.4±0.15 Polímero 8 39.9 ± 0.05 9.5 ± 0.11 Polímero 11 40.3 ± 0.14 8.6 ± 0.03 Polímero 21 0.4 ± 0.06 41 .1 ± 0.00 8.5 ± 0.00 Cholestyramine 5.6 ± 0.11 63.4 ± 0.15 Polymer 8 39.9 ± 0.05 9.5 ± 0.11 Polymer 11 40.3 ± 0.14 8.6 ± 0.03 Polymer 21 0.4 ± 0.06 41 .1 ± 0.00 8.5 ± 0.00

Tabla 1. Datos de Análisis Elemental (CHNS) Table 1. Elemental Analysis Data (CHNS)

6. Experimentación animal 6. Animal experimentation

25 Todos los experimentos con animales se llevaron a cabo siguiendo un estricto cumplimiento de las recomendaciones de la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio de los Institutos Nacionales de Salud. El cuidado de los animales y los procedimientos experimentales fueron aprobados por el Comité de Ética de Experimentación Animal (CEEA) de la Universidad de Granada, España (Ref. 42025 All animal experiments were carried out in strict accordance with the recommendations of the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals of the National Institutes of Health. Animal care and experimental procedures were approved by the Animal Experimentation Ethics Committee (CEEA) of the University of Granada, Spain (Ref. 420

COL CABBAGE: TG Creatinina AST ALT GGT Glucosa TG Creatinine AST ALT GGT Glucose

(mmoI/L) (mmoI / L)
(mmoI/L) (mmoI / L): ( ~moI/L) (U/L) (U/L) (U/L) (~ moI / L) (U / L) (U / L) (U / L)
(mmoI/L) (mmoI / L)

Control Control: 1.93 ± 0.73± 51.27 ± 11 3.2± 52.4 ± 0.66 ± 12.17 ± 1.93 ± 0.73 ± 51.27 ± 11 3.2 ± 52.4 ± 0.66 ± 12.17 ±

0.22 0.22: 0. 15 4.42 26.8 4.72 1.23 3.98 0. 15 4.42 26.8 4.72 1.23 3.98

Dieta Diet: 2.71± 1.25 ± 63.65± 7.96 156.0 ± 60.0 ± 0.99 ± 9.31± 3.34 2.71 ± 1.25 ± 63.65 ± 7.96 156.0 ± 60.0 ± 0.99 ± 9.31 ± 3.34

0.54 0.54: 0.23 (p<0.05) 72.89 9.06 1.58 0.23 (p <0.05) 72.89 9.06 1.58

(p<0.02) (p <0.02): (p<O.Ol) (p <O. Ol)

Colestiramina Cholestyramine: 1.8 ± 0.32 1.98 ± 64.53 ± 161.2 ± 74.0 ± 1.36 ± 11 .01 ± 1.8 ± 0.32 1.98 ± 64.53 ± 161.2 ± 74.0 ± 1.36 ± 11 .01 ±

0.83 0.83: 6.19 108.59 30.1 8 1_58 1.63 6.19 108.59 30.1 8 1_58 1.63

(p<0.02) (p <0.02): (p<0.01 ) (p <0.01)

Polímero 8 Polymer 8: 1.75 ±0.2 0.89 ± 48.62 ± 11 8.4± 53.2 ± 4.06 ± 11.2 ± 1.75 ± 0.2 0.89 ± 48.62 ± 11 8.4 ± 53.2 ± 4.06 ± 11.2 ±

0.23 0.23: 6.19 9.53 5.02 3. 14 1.64 6.19 9.53 5.02 3. 14 1.64

Polímero 11 Polymer 11: 1.61 ± 0.82 ± 56.22 ± 102.4 ± 41.0 ± 1.04 ± 7.64± 3.54 1.61 ± 0.82 ± 56.22 ± 102.4 ± 41.0 ± 1.04 ± 7.64 ± 3.54

0.24 0.24: 0.22 9.72 13.20 4.95 0.97 0.22 9.72 13.20 4.95 0.97

Polímero 21 Polymer 21: 1.64 • 0.74. 48.62. 11 8.2. 55.8. 1.47. 6.07. 1.64 • 0.74. 48.62. 11 8.2. 55.8. 1.47. 6.07.

0.41 0.41: 0. 19 4.42 11.52 10.38 1.01 0.34 0. 19 4.42 11.52 10.38 1.01 0.34

(p<0.01 ) (p <0.01)

2012-CEEA). 2012-CEEA).

Un total de 30 ratas Wistar macho que pesaban 100 gr fueron divididas aleatoriamente en 6 grupos y se les dio acceso ad libitum a comida yagua. El grupo de control fue A total of 30 male Wistar rats weighing 100 gr were randomly divided into 6 groups and were given ad libitum access to food and water. The control group was

5 alimentado exclusivamente con una dieta convencional. Los cinco grupos restantes se alimentaron con dieta convencional suplementada con 2% (p/p) de colesterol durante dos semanas para inducir la hipercolesterolemia y luego durante dos semanas adicionales con la misma dieta suplementada con 5% (p/p) de los polímero SAB seleccionados para ensayo. Al final del periodo experimental los animales fueron 5 fed exclusively with a conventional diet. The remaining five groups were fed a conventional diet supplemented with 2% (w / w) cholesterol for two weeks to induce hypercholesterolemia and then for an additional two weeks with the same diet supplemented with 5% (w / w) of the SAB polymer selected for trial. At the end of the experimental period the animals were

10 sacrificados por dislocación cervical y se tomaron muestra de sangre para el análisis de colesterol, triglicéridos, glucosa, creatinina y transaminasas. Los análisis de química clínica se llevaron a cabo por un laboratorio veterinario certificado y se recogen en la Tabla 2. 10 sacrificed by cervical dislocation and blood sample was taken for the analysis of cholesterol, triglycerides, glucose, creatinine and transaminases. Clinical chemistry analyzes were carried out by a certified veterinary laboratory and are listed in Table 2.

....

Tabla 2. Anallsls de QUlmlca Chnlca Table 2. Anallsls of QUlmlca Chnlca

El análisis de los datos revela que la hipercolesterolemia se indujo con éxito y que los valores tanto de COL y TG detectados en el grupo de animales de control que no recibieron ningún compuesto fueron 1,4 veces y 1,7 veces, respectivamente más altos que el grupo de animales alimentados con una dieta convencional, siendo estas diferencias estadísticamente significativas (p-valor <0,02 y <0,01, respectivamente ). Los grupos cuya dieta se complementó con cualquiera de polímeros o colestiramina mostraron bajos niveles similares de COL pero los niveles de TG en sangre eran dependientes del tratamiento. Así, los polímeros ensayados regularizan los niveles de TG en el grupo de control alimentado con dieta convencional mientras que la colestiramina indujo un aumento de 1,6 veces en los niveles de TG . Este resultado es estadísticamente significativa (valor de p <0.01) Data analysis reveals that hypercholesterolemia was successfully induced and that the values of both COL and TG detected in the group of control animals that did not receive any compound were 1.4 times and 1.7 times, respectively higher than the group of animals fed a conventional diet, these differences being statistically significant (p-value <0.02 and <0.01, respectively). The groups whose diet was supplemented with either polymers or cholestyramine showed similar low levels of COL but blood TG levels were treatment dependent. Thus, the polymers tested regularize TG levels in the control group fed conventional diet while cholestyramine induced a 1.6-fold increase in TG levels. This result is statistically significant (p value <0.01)

El análisis de los datos revela que los polímeros seleccionados no alteran la actividad transaminasa en la sangre, siendo los valores similares a los del grupo de control alimentado con dieta convencional excepto los valores de gamma-glutamiltransferasa (GGT) para el caso del polímero 8. El análisis de creatinina (indicativo de lesión renal aguda) indica valores normales. The analysis of the data reveals that the selected polymers do not alter the transaminase activity in the blood, the values being similar to those of the control group fed with conventional diet except the values of gamma-glutamyltransferase (GGT) in the case of polymer 8. Creatinine analysis (indicative of acute kidney injury) indicates normal values.

Cuando se introducen elementos de la presente invención o en realizaciones preferidas de la misma, los artículos "un", "una", "er y "dicho" pretenden indicar que hay uno o más de los elementos. Los términos "que comprende", "que incluye" y "que tiene" pretenden ser inclusivos y significan que puede haber elementos adicionales distintos de los elementos enumerados. When elements of the present invention are introduced or in preferred embodiments thereof, the articles "a", "an", "er and" said "are intended to indicate that there is one or more of the elements. The terms" comprising ", "which includes" and "which has" are intended to be inclusive and mean that there may be additional elements other than the elements listed.

En vista de lo anterior, se considera que se consiguen los objetivos de la in vención y también otros resultados ventajosos. In view of the above, it is considered that the objectives of the invention and other advantageous results are achieved.

Dado que es posible hacer distintos cambios en los polímeros de la invención, en las composiciones farmacéuticas y en los métodos de tratamiento descritos sin apartarse del alcance de la invención, se pretende que toda la materia contenida en la descripción anterior y mostrada en la figura adjunta se interpreta como ilustrativa y no en un sentido limitativo. Since it is possible to make different changes in the polymers of the invention, in the pharmaceutical compositions and in the treatment methods described without departing from the scope of the invention, it is intended that all the material contained in the above description and shown in the attached figure It is interpreted as illustrative and not in a limiting sense.

Claims

1. one.: Uso de un compuesto que comprende un polímero basado en sacarido entrecruzados obtenido por polimerización de un sacárido o mezclas de sacáridos como monómeros y al menos una sultana a,j3-insaturada como agente de entrecruzamiento o una sal del polímero resultante como un medicamento. Use of a compound comprising a crosslinked saccharide based polymer obtained by polymerization of a saccharide or mixtures of saccharides as monomers and at least one a, j3-unsaturated sultana as a crosslinking agent or a salt of the resulting polymer as a medicament.

2. 2.: Uso de un compuesto según la reivindicación 1 como medicamento para el tratamiento de enfermedades mediadas por ácidos biliares. Use of a compound according to claim 1 as a medicament for the treatment of diseases mediated by bile acids.

3. 3.: Uso de un compuesto según las reivindicaciones 1 o 2, donde la sulfana 0,13insaturada es preferiblemente una bis-vinil sulfona, preferiblemente seleccionada de entre H,C = CHSO,RSO,CH=CH" H,C=CHSO,CH,CH,XRXCH,CH,SO,CH=CH, donde R es un alquilo (C1-C10) un dialquilarilo «C1-C10)Ar(C1C10))(CH2CH20)nCH2 CH2 con n=2-20, en el que X es O ó S, y mezclas de los mismos. Use of a compound according to claims 1 or 2, wherein the 0.13 unsaturated sulfate is preferably a bis-vinyl sulfone, preferably selected from H, C = CHSO, RSO, CH = CH "H, C = CHSO, CH, CH , XRXCH, CH, SO, CH = CH, where R is a (C1-C10) alkyl, a "C1-C10" dialkylaryl, Ar (C1C10)) (CH2CH20) nCH2 CH2 with n = 2-20, where X is O or S, and mixtures thereof.

4. Four.: Uso de un compuesto según la reivindicación 3, en el que la bis-vinil sulfona es divinil sulfona. Use of a compound according to claim 3, wherein the bis-vinyl sulfone is divinyl sulfone.

5. 5.: Uso de un compuesto según cualquiera de las rei vindicaciones 1, 2,3 o 4 en el que el polímero comprende al menos un sacárido seleccionado de almidón, almidón modificado, ciclodextrinas, ciclodextrinas modificadas, quitosano, celulosa, dextrano, inulina, amilosa, amilopectina, dextrina y sus mezclas. Use of a compound according to any of claims 1, 2,3 or 4 wherein the polymer comprises at least one saccharide selected from starch, modified starch, cyclodextrins, modified cyclodextrins, chitosan, cellulose, dextran, inulin, amylose, amylopectin , dextrin and mixtures thereof.

6. 6.: Uso de un compuesto según la reivindicación 5 en el que el polímero comprende almidón, dextrina o mezclas de los mismos. Use of a compound according to claim 5 wherein the polymer comprises starch, dextrin or mixtures thereof.

7. 7.: Uso de un compuesto según la reivindicación 5, en el que el polímero comprende al menos una ciclodextrina, preferiblemente a, 13, ó y-ciclodextrina, o mezclas de los mismos. Use of a compound according to claim 5, wherein the polymer comprises at least one cyclodextrin, preferably a, 13, or y-cyclodextrin, or mixtures thereof.

8. 8.: Uso de un compuesto según la reivindicación 5, en el que el polímero comprende al menos dos sacáridos Use of a compound according to claim 5, wherein the polymer comprises at least two saccharides

9. 9.: Uso de un compuesto según la reivindicación 8, en el que el polímero comprende al menos un sacárido seleccionado de almidón o dextrina y un segundo sacarido que es una ciclodexlrina. Use of a compound according to claim 8, wherein the polymer comprises at least one saccharide selected from starch or dextrin and a second saccharide which is a cyclodexlrin.

10. 10.: Uso de un compuesto según la reivindicación 9 en el que el segundo sacárido es una ciclodextrina seleccionada de entre a, ¡3 o V ciclodextrina, preferiblemente [3ciclodextrina. Use of a compound according to claim 9 wherein the second saccharide is a cyclodextrin selected from a, ¡3 or V cyclodextrin, preferably [3cyclodextrin.

11. eleven.: Uso de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones de 1 a 10 en donde el polímero incorpora grupos funcionales cargados positivos Use of a compound according to any one of claims 1 to 10 wherein the polymer incorporates positively charged functional groups

12. 12.: Uso de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones de 1 a 11 en donde los grupos funcionales cargados positivos son grupos amino. Use of a compound according to any one of claims 1 to 11 wherein the positively charged functional groups are amino groups.

13. 13.: Uso de un compuesto según la reivindicación 12 en el que los grupos amino de carga positiva se introducen por la incorporación al polímero de un compuesto seleccionado de la lista que comprende H2N(CH2)nCOOH (donde n=1-20), HS(CH,),COOH (donde n=1-20), HN[(CH,),COOH], (n=1-3), HOCH,CH,N(CH,h, HN[(CH,),NMe~, (donde n=1-10), HN[(CH,),Py], (donde n=0-1 y Py = 2-piridil), YCH2CH2(NCH3)3 , donde Y= CI, Br y mezclas de los mismos. Use of a compound according to claim 12 wherein the positively charged amino groups are introduced by incorporation into the polymer of a compound selected from the list comprising H2N (CH2) nCOOH (where n = 1-20), HS (CH ,), COOH (where n = 1-20), HN [(CH,), COOH], (n = 1-3), HOCH, CH, N (CH, h, HN [(CH,), NMe ~ , (where n = 1-10), HN [(CH,), Py], (where n = 0-1 and Py = 2-pyridyl), YCH2CH2 (NCH3) 3, where Y = CI, Br and mixtures of the same.

14. 14.: Uso de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 10 a 13, en donde el polímero comprende: a) un sacárido seleccionado de almidón, dextrina, ¡3-ciclodextrinas y mezclas de los mismos; b) al menos un bis-vinilsulfona, preferiblemente divinil sulfona c) al menos un derivado de amina seleccionado de la lista que comprende H,N(CH,)nCOOH (donde n=1-20), HS(CH,)"COOH (donde n=1-20), HN[(CH,),COOH], (n=1-3), HOCH,CH,N(CH,h. HN[(CH,),NMe,], (donde n=1-10), HN[(CH,),Py], (donde n=Q-1 y Py = 2-piridil), YCH2CH2(NCH3)3 , donde Y= CI, Br y mezclas de los mismos. Use of a compound according to any of claims 10 to 13, wherein the polymer comprises: a) a saccharide selected from starch, dextrin, 3-cyclodextrins and mixtures thereof; b) at least one bis-vinylsulfone, preferably divinyl sulfone c) at least one amine derivative selected from the list comprising H, N (CH,) nCOOH (where n = 1-20), HS (CH,) "COOH (where n = 1-20), HN [(CH,), COOH], (n = 1-3), HOCH, CH, N (CH, h. HN [(CH,), NMe,], (where n = 1-10), HN [(CH,), Py], (where n = Q-1 and Py = 2-pyridyl), YCH2CH2 (NCH3) 3, where Y = CI, Br and mixtures thereof.

15. fifteen.: Uso de un compuesto según la reivindicación 14, en el que el polímero comprende al menos una ciclodextrina seleccionada de a, 13, ó y ciclodextrina, preferiblemente 13ciclodextrina. Use of a compound according to claim 14, wherein the polymer comprises at least one cyclodextrin selected from a, 13, and and cyclodextrin, preferably 13 cyclodextrin.

16. 16.: Uso de un compuesto según la reivindicación 15, en su forma de sal y que tiene un contraión seleccionado de entre er, Br-, CH30S03", HS04", SO/ o, nitrato, HC03", ca/ o, acetato, lactato, fosfato, hidrophosphate, metanosulfonato, fumarato, malato, piruvato, malonato, benzoato, glucuronato, oxalato, acetilglicinato, succinato, propionato, butirato, ascorbato, citrato, tartrato, maleato, folato, un derivado de aminoácido, un nucleótido, un lípido, un fosfolípido, o una combinación de los mismos. Use of a compound according to claim 15, in its salt form and having a counterion selected from er, Br-, CH30S03 ", HS04", SO / o, nitrate, HC03 ", ca / o, acetate, lactate, phosphate, hydrophosphate, methanesulfonate, fumarate, malate, pyruvate, malonate, benzoate, glucuronate, oxalate, acetylglycinate, succinate, propionate, butyrate, ascorbate, citrate, tartrate, maleate, folate, an amino acid derivative, a nucleotide, a lipid, a phospholipid, or a combination thereof.

17. 17.: Uso de un compuesto según la reivindicación 16 en el que el contraión es el", Br", ca/ o, citrato, o una combinación de los mismos. Use of a compound according to claim 16 wherein the counterion is ", Br", ca / o, citrate, or a combination thereof.

18. A pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of at least any one of the polymer based on cross-linked saccharides of claims 1 to 17 or any of its tautomers, stereoisomers, salts, solvates, hydrates or prodrugs thereof, and at less a pharmaceutically acceptable carrier, adjuvant or vehicle.

19. A pharmaceutical composition according to claim 18 wherein the composition is a free flowing powder.

20. A pharmaceutical composition according to claims 18 or 19, suitable for oral or intestinal administration, preferably oral administration,

21. A treatment method for a mammal, preferably a human being, in need of control of bile acid levels, which comprises administration to the affected individual a therapeutically effective amount of a crosslinked saccharide based polymer compound according to any of claims 1 to 17 or a pharmaceutical composition according to any of claims 18 or 19 to a subject in need thereof.

22. A method of treating a mammal, preferably a human being, in need of a reduction in cholesterol levels, which comprises administering to the affected individual a therapeutically effective amount of a polymer compound based on crosslinked saccharides according to any one of claims 1 to 17 or a pharmaceutical composition according to any one of claims 18 or 19 to a subject in need thereof.

23.-A method of treating a mammal, preferably a human being, in need of a reduction in serum triglyceride levels, which comprises administering to the affected individual a therapeutically effective amount of a polymer compound based on crosslinked saccharides according to any of claims 1 to 17 or a pharmaceutical composition according to any of claims 18 or 19 to a subject in need thereof.

24. A method of treating diabetes of a mammal, preferably a human being, comprising administering to the affected individual a therapeutically effective amount of a polymer-based polymer compound based on crosslinked saccharides according to any one of claims 1 to 17 or a pharmaceutical composition according to any of claims 18 or 19 to a subject in need thereof.

25. A method of removing bile salts from a mammal, preferably a human being, comprising the administration of an effective amount of polymers based on crosslinked saccharides according to any one of claims 1 to 17 or a pharmaceutical composition according to any of claims 18 or 19 to a subject in need thereof.

26. 26.: El método de la reivindicación 22 en el que el colesterol sérico se reduce en al menos un 10%, preferiblemente un 20%, más preferiblemente un 25% y más preferiblemente un 40% después de 2, 4, 12, 24, 52 o más semanas de tratamiento. The method of claim 22 wherein the serum cholesterol is reduced by at least 10%, preferably 20%, more preferably 25% and more preferably 40% after 2, 4, 12, 24, 52 or more weeks of treatment

27. 27.: El método de una cualquiera de las reivindicaciones 22 a 26 en el que el sujeto tiene hiperlipidemia primaria o la enfermedad cardíaca coronaria. The method of any one of claims 22 to 26 wherein the subject has primary hyperlipidemia or coronary heart disease.

28. 28.: Un método para mejorar el control glucémico en un sujeto animal con diabetes mellitus de tipo 11 que comprende la administración de una cantidad eficaz de un pOlímero de acuerdo con cualquier reivindicación partir del 1 a 17 o una composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 18 o 1 9 a un sujeto con necesidad de los mismos. A method for improving glycemic control in an animal subject with type 11 diabetes mellitus comprising the administration of an effective amount of a pOlimer according to any claim from 1 to 17 or a pharmaceutical composition according to any of claims 18 or 1 9 to a subject in need thereof.

29. 29.: El método de una cualquiera de las reivindicaciones 22 a 28 en el que el polímero basado en sacáridos entrecruzados se administra en la forma de un comprimido, un polvo, un polvo contenido dentro de una bolsita, una cápsula de gelatina blanda, o una cápsula de gelatina dura. The method of any one of claims 22 to 28 wherein the polymer based on crosslinked saccharides is administered in the form of a tablet, a powder, a powder contained within a sachet, a soft gelatin capsule, or a capsule. hard jelly