ES2389338A1

ES2389338A1 - PROCEDURE AND APPLIANCE FOR APPLYING A LIQUID IN AT LEAST ONE POOL OF A PLATE

Info

Publication number: ES2389338A1
Application number: ES201130501A
Authority: ES
Inventors: Antonio ALONSO ORTIZ; Abelardo CABALLERO GONZÁLEZ; Jose Maria MIRANDA SAYAGO
Original assignee: Universidad de Malaga; Servicio Andaluz de Salud
Current assignee: Universidad de Malaga; Servicio Andaluz de Salud
Priority date: 2011-03-31
Filing date: 2011-03-31
Publication date: 2012-10-25
Anticipated expiration: 2031-03-31
Also published as: WO2012131140A1; ES2389338B1

Abstract

Procedimiento y aparato para aplicar un líquido en al menos un pocillo de una placa. La invención describe un procedimiento y aparato que aprovecha las propiedades de la viscosidad y tensión superficial de los líquidos para llenar al menos un pocillo de una placa mientras se mantiene ésta en posición invertida, comprendiendo el aparato: un depósito (2) de líquido dotado de al menos un orificio (3) de retorno; una matriz de agujas (4) dispuestas verticalmente en la superficie superior del depósito que están dotadas de unos conductos interiores de las agujas conectados al depósito (2) de líquido; y una bomba (5) configurada para impulsar el líquido del depósito (2), de modo que colocando una placa (100) invertida encima de la matriz de agujas (4) se consigue que una porción del líquido quede adherido a los pocillos (101) por el efecto de la tensión superficial, retornando el resto del líquido al interior del depósito (2) a través del orificio (3) de retorno.Method and apparatus for applying a liquid in at least one well of a plate. The invention describes a method and apparatus that takes advantage of the properties of the viscosity and surface tension of liquids to fill at least one well of a plate while it is kept in an inverted position, the apparatus comprising: a liquid tank (2) equipped with at least one return hole (3); an array of needles (4) arranged vertically on the upper surface of the reservoir, which are provided with internal passages for the needles connected to the fluid reservoir (2); and a pump (5) configured to drive the liquid from the reservoir (2), so that by placing an inverted plate (100) on top of the array of needles (4) it is achieved that a portion of the liquid remains adhered to the wells (101). ) due to the effect of surface tension, returning the rest of the liquid to the interior of the tank (2) through the return hole (3).

Description

PROCEDIMIENTO Y APARATO PARA APLICAR UN LíQUIDO EN AL MENOS UN POCILLO DE UNA PLACA PROCEDURE AND APPLIANCE FOR APPLYING A LIQUID IN THE LESS ONE POOL OF A PLATE

OBJECT OF THE INVENTION

El objeto principal de la invención es un novedoso procedimiento que aprovecha las propiedades de la viscosidad y tensión superficial de los líquidos para llenar al menos un pocillo de una placa de pocillos mientras se mantiene ésta en posición invertida. The main object of the invention is a novel method that takes advantage of the properties of the viscosity and surface tension of the liquids to fill at least one well of a plate of wells while maintaining it in an inverted position.

Otro objeto de la invención es un aparato capaz de llenar de líquido al menos un pocillo de una placa empleando el procedimiento anterior. Another object of the invention is an apparatus capable of filling at least one well of a plate with liquid using the above procedure.

BACKGROUND OF THE INVENTION

Para realizar cultivos y pruebas de diferentes tipos son conocidas unas placas dotadas de una pluralidad de pocillos (existen, por ejemplo, placas de 96 pocillos). Normalmente, el primer paso para realizar el cultivo o prueba en cuestión es llenar cada pocillo de la placa con un líquido determinado. Este proceso resulta extremadamente tedioso, ya que suele realizarse de forma manual depositando una gota por pocillo con la ayuda de un gotero. Otro inconveniente de este método es que se derrama mucho líquido, ensuciando la superficie de la mesa sobre la que se lleva a cabo, y además en modo alguno se obtienen volúmenes iguales en todos los pocillos: mientras unos se derraman los otros se quedan a medio llenar. For plates and tests of different types, plates with a plurality of wells are known (there are, for example, 96-well plates). Normally, the first step to perform the culture or test in question is to fill each well of the plate with a certain liquid. This process is extremely tedious, since it is usually done manually by depositing a drop per well with the help of a dropper. Another drawback of this method is that a lot of liquid is spilled, soiling the surface of the table on which it is carried out, and also in no way equal volumes are obtained in all the wells: while some spill the others stay halfway fill in.

DESCRIPTION OF THE INVENTION

La presente invención resuelve los problemas anteriores gracias a un novedoso procedimiento donde la aplicación del líquido se realiza con la placa en posición invertida, aprovechándose el efecto predominante de la tensión superficial en distancias pequeñas para que el líquido se adhiera a la superficie interior del pocillo o pocillos. Una gran ventaja de este procedimiento es que se consiguen llenar uniformemente de líquido todos los pocillos de una forma mucho más rápida y más limpia. Alternativamente, si se llena sólo un pocillo de cada placa, se consigue llenar con la misma cantidad de líquido dicho único The present invention solves the above problems thanks to a novel procedure where the application of the liquid is carried out with the plate in an inverted position, taking advantage of the predominant effect of the surface tension over small distances so that the liquid adheres to the inner surface of the well or wells. A great advantage of this procedure is that all wells are uniformly filled with liquid in a much faster and cleaner way. Alternatively, if only one well of each plate is filled, it is possible to fill with the same amount of liquid said single

5 pocillo de varias placas consecutivas. 5 well of several consecutive plates.

Por lo tanto, un primer aspecto de la presente invención está dirigido de manera general a un procedimiento para aplicar un líquido a al menos un pocillo de una placa, comprendiendo el procedimiento los pasos de: colocar la Therefore, a first aspect of the present invention is generally directed to a method for applying a liquid to at least one well of a plate, the process comprising the steps of: placing the

10 placa en posición invertida; y aplicar el líquido a cada pocillo desde debajo de dicha placa. Además, puesto que la viscosidad y tensión superficial de un líquido cualquiera son dependientes de la temperatura, el procedimiento de la invención preferentemente comprende además modificar la temperatura del líquido previamente a su aplicación en los pocillos. De ese modo, se consigue 10 plate in inverted position; and apply the liquid to each well from under said plate. In addition, since the viscosity and surface tension of any liquid are temperature dependent, the process of the invention preferably further comprises modifying the temperature of the liquid prior to its application in the wells. That way, you get

15 controlar el volumen de líquido que queda adherido al pocillo o pocillos: a mayor temperatura, menor cantidad de líquido queda adherido a los pocillos. 15 control the volume of liquid that adheres to the well or wells: the higher the temperature, the less liquid is adhered to the wells.

Nótese que en este documento, el término "líquido" pretende hacer referencia no sólo a líquidos propiamente dichos, sino en general cualquier 20 sustancia capaz de fluir lo suficiente como para ser impulsada con una bomba Note that in this document, the term "liquid" is intended to refer not only to liquids themselves, but in general any substance capable of flowing sufficiently to be driven with a pump

y pasar a través de los conductos de las agujas. and pass through the needle ducts.

Un segundo aspecto de la invención está dirigido a un aparato para aplicar un líquido a al menos un pocillo de una placa empleando el 25 procedimiento descrito, donde el aparato comprende medios para aplicar el líquido estando la placa en posición invertida. Preferentemente, dichos medios comprenden fundamentalmente: un depósito que almacena el líquido, una bomba que lo impulsa, y una matriz de agujas que aplica el líquido a los pocillos. A continuación, se describe con mayor detalle cada uno de estos A second aspect of the invention is directed to an apparatus for applying a liquid to at least one well of a plate using the method described, wherein the apparatus comprises means for applying the liquid while the plate is in an inverted position. Preferably, said means basically comprise: a reservoir that stores the liquid, a pump that drives it, and a needle array that applies the liquid to the wells. Each of these is described in more detail below.

30 elementos: 30 items:

Depósito Deposit

Se trata de un depósito que almacena el líquido que se desea aplicar a la placa. Puesto que no todo el líquido bombeado a través de las agujas queda adherido a los pocillos y por lo tanto vuelve a caer hacia el depósito, la superficie superior de dicho depósito comprende al menos un orificio de It is a reservoir that stores the liquid that you want to apply to the plate. Since not all of the liquid pumped through the needles is adhered to the wells and therefore falls back into the reservoir, the upper surface of said reservoir comprises at least one orifice of

5 retorno en su superficie superior. Este orificio podría tener cualquier forma, siempre que su tamaño sea suficiente como para permitir el retorno de todo el líquido no adherido a los pocillos, evitando así que chorree por los laterales del aparato. En cuanto a su ubicación y número, en principio también podría ser cualquiera. Por ejemplo, podría concebirse un depósito con una superficie 5 return on its upper surface. This hole could have any shape, provided that its size is sufficient to allow the return of all the liquid not adhered to the wells, thus preventing it from dripping down the sides of the apparatus. As for its location and number, in principle it could also be anyone. For example, a tank with a surface could be conceived

10 superior inclinada o conformada de manera obligase al líquido a dirigirse hacia un único orificio de retorno. Otra solución, correspondiente a una realización preferida de la invención, es configurar el orificio u orificios de manera que rodeen sustancialmente la matriz de agujas, de modo que el líquido no tiene otro camino más que retornar al depósito. 10 top inclined or shaped so that the liquid is directed towards a single return hole. Another solution, corresponding to a preferred embodiment of the invention, is to configure the hole or holes so that they substantially surround the needle array, so that the liquid has no other way than to return to the reservoir.

Preferentemente, el aparato de la invención además comprende un reborde de apoyo para la placa de pocillos, facilitándose así la colocación adecuada de la placa sobre el depósito (es decir, de modo que cada aguja quede introducida en el pocillo correspondiente). Preferably, the apparatus of the invention further comprises a support flange for the well plate, thus facilitating proper placement of the plate on the reservoir (that is, so that each needle is inserted into the corresponding well).

Matriz de agujas Needle Matrix

Se trata del elemento que lleva a cabo la aplicación efectiva del líquido en los pocillos. En este documento, el término "agujas" pretende hacer 25 referencia no sólo a agujas hipodérmicas propiamente dichas, sino en general a cualquier conducto delgado, fabricado en cualquier material, que permita la aplicación de líquido en las condiciones que se describen en esta solicitud. Además, se entiende que la "matriz' más básica podría estar constituida por una única aguja (en caso de que el aparato estuviese configurado para llenar This is the element that carries out the effective application of the liquid in the wells. In this document, the term "needles" is intended to refer not only to hypodermic needles themselves, but in general to any thin conduit, made of any material, which allows the application of liquid under the conditions described in this application. In addition, it is understood that the most basic "matrix" could be constituted by a single needle (in case the apparatus was configured to fill

30 un solo pocillo de una placa). 30 a single well of a plate).

Las agujas están dispuestas verticalmente con la punta en su extremo The needles are arranged vertically with the tip at their end

superior, formando una matriz sobre la superficie superior del depósito y siendo la posición de las agujas correspondiente con la posición de los pocillos que se desea llenar con líquido cuando la placa está correctamente situada. Los extremos inferiores de las agujas están conectados por su base al depósito, permitiendo así que el líquido del depósito suba por los conductos de las agujas hasta salir por la punta de las mismas. upper, forming a matrix on the upper surface of the tank and the position of the needles corresponding to the position of the wells to be filled with liquid when the plate is correctly positioned. The lower ends of the needles are connected by their base to the reservoir, thus allowing the liquid in the reservoir to rise through the needle ducts until they exit through the tip thereof.

De acuerdo con una realización preferida de la invención, el aparato de la invención comprende además una pieza de protección paralela a la superficie superior del depósito y dotada de una matriz de orificios configurados para el paso de las puntas de la matriz de agujas. Así, la base de las agujas está fijada a la superficie superior del depósito, pero la pieza de protección sirve de protección a las mismas, dejando visible sólo la punta. Además, estos orificios tienen una holgura alrededor de las puntas de las agujas para permitir el paso del líquido de retorno hacia el depósito. According to a preferred embodiment of the invention, the apparatus of the invention further comprises a protection piece parallel to the upper surface of the reservoir and provided with an array of holes configured for the passage of the tips of the needle array. Thus, the base of the needles is fixed to the upper surface of the tank, but the protection piece serves as protection to them, leaving only the tip visible. In addition, these holes have a clearance around the tips of the needles to allow the passage of the return liquid into the reservoir.

Bomba Bomb

Se trata de una bomba adecuada para impulsar el líquido del depósito, provocando su ascensión a través de los conductos interiores de las agujas hasta salir a través de las puntas de dichas agujas. De ese modo, cuando se coloca una placa de pocillos en posición invertida encima de la matriz de agujas, estando la punta de las agujas en contacto con, o muy cerca de, el fondo de cada pocillo, el líquido bombeado queda adherido a los pocillos por el efecto de la tensión superficial. A medida que se bombea, el líquido se va acumulando en los pocillos hasta que las fuerzas gravitatorias superan a las fuerzas debidas a la tensión superficial, momento en cual el líquido en exceso comienza a desprenderse del pocillo y a chorrear hacia el interior del depósito a través del orificio u orificios de retorno descritos anteriormente. It is a suitable pump to propel the liquid from the tank, causing it to rise through the inner ducts of the needles until it comes out through the tips of the needles. Thus, when a well plate is placed in an inverted position above the needle matrix, the tip of the needles being in contact with, or very close to, the bottom of each well, the pumped liquid is adhered to the wells. by the effect of surface tension. As it is pumped, the liquid accumulates in the wells until the gravitational forces exceed the forces due to surface tension, at which point the excess liquid begins to detach from the well and drip into the tank through of the hole or return holes described above.

Existen diferentes configuraciones posibles para el sistema de bombeo en general, y la propia bomba en particular. La bomba, por ejemplo, podría estar sumergida en el interior del depósito. Otra opción sería situar la bomba junto al depósito, facilitándose así las tareas de mantenimiento de la misma. En cualquier caso, la bomba preferentemente está conectada mediante un conducto de alimentación a un sub-depósito interior comprendido dentro del depósito, estando este sub-depósito interior conectado a su vez directamente a las agujas. Así, al accionar la bomba el líquido sube por el conducto de alimentación causando un aumento de la presión en el subdepósito, que a su vez provoca que el líquido suba por los conductos de las agujas hasta salir por la punta, quedando adherido a los pocillos según se ha explicado anteriormente. There are different possible configurations for the pumping system in general, and the pump itself in particular. The pump, for example, could be submerged inside the tank. Another option would be to place the pump next to the tank, thus facilitating maintenance tasks. In any case, the pump is preferably connected by means of a feed line to an inner sub-tank comprised within the tank, this inner sub-tank being in turn directly connected to the needles. Thus, when the pump is operated, the liquid rises through the feed line causing an increase in the pressure in the sub-tank, which in turn causes the liquid to rise through the needle ducts until it exits the tip, being attached to the wells as explained above.

Existen diferentes modos de controlar el flujo de líquido bombeado a las agujas. Por ejemplo, la propia bomba podría ser regulable. Otra posibilidad, según una realización preferente de la invención, es que el conducto de alimentación tenga una vía de escape lateral regulable. De ese modo, cuando se desea disminuir el flujo bombeado basta con abrir la vía de escape, saliendo así parte del líquido bombeado al interior del depósito antes de alcanzar el sub-depósito. En caso de que se desee aumentar el flujo, bastaría con cerrar la vía de escape en la medida deseada para reducir el volumen de líquido que escapa al depósito. There are different ways to control the flow of liquid pumped to the needles. For example, the pump itself could be adjustable. Another possibility, according to a preferred embodiment of the invention, is that the feed duct has an adjustable lateral escape route. Thus, when it is desired to reduce the pumped flow, it is sufficient to open the exhaust path, thus leaving part of the pumped liquid inside the tank before reaching the sub-tank. If it is desired to increase the flow, it would be sufficient to close the escape route to the desired extent to reduce the volume of liquid escaping to the tank.

Además, como se ha mencionado anteriormente se puede aprovechar la variación de la viscosidad y tensión superficial con la temperatura para modificar el volumen de líquido que queda adherido al pocillo. En efecto, el volumen de líquido que queda adherido al pocillo depende del momento en el que se alcanza el equilibrio entre las fuerzas de tensión superficial y las fuerzas gravitatorias: a medida que aumenta el volumen de líquido adherido al pocillo, van aumentando también las fuerzas gravitatorias hasta llegar a un momento en el cual el exceso de líquido cae, volviendo al depósito por el orificio de retorno. Teniendo en cuenta que la viscosidad y la tensión superficial descienden al aumentar la temperatura, calentar el líquido tiene el efecto de disminuir el volumen de líquido que queda adherido al pocillo. In addition, as mentioned above, the variation of viscosity and surface tension with temperature can be used to modify the volume of liquid that adheres to the well. In fact, the volume of liquid that adheres to the well depends on the moment in which the equilibrium between surface tension forces and gravitational forces is reached: as the volume of liquid adhered to the well increases, the forces also increase gravitational until reaching a time when excess liquid falls, returning to the tank through the return hole. Taking into account that the viscosity and surface tension decrease with increasing temperature, heating the liquid has the effect of decreasing the volume of liquid that adheres to the well.

En consecuencia, en una realización preferida de la invención el aparato comprende medios de calentamiento del líquido contenido en el depósito, preferentemente una resistencia. Es más, según otra realización preferida el aparato comprende un termostato regulable desde el exterior del depósito para controlar la temperatura de calentamiento. Accordingly, in a preferred embodiment of the invention the apparatus comprises means for heating the liquid contained in the reservoir, preferably a resistor. Moreover, according to another preferred embodiment, the apparatus comprises a thermostat adjustable from outside the tank to control the heating temperature.

Este procedimiento y aparato se podrían utilizar en principio con cualquier líquido, aunque a mayor tensión superficial del líquido, mayor será el volumen atrapado en los pocillos. Además, es evidente que sería aplicable a placas con cualquier número de pocillos. Es más, sería posible configurar la disposición de las agujas y diferentes rebordes de apoyo para conseguir un aparato versátil capaz de llenar placas de diferentes tamaños. This procedure and apparatus could be used in principle with any liquid, although the higher the surface tension of the liquid, the greater the volume trapped in the wells. In addition, it is evident that it would be applicable to plates with any number of wells. Moreover, it would be possible to configure the arrangement of the needles and different support flanges to achieve a versatile apparatus capable of filling plates of different sizes.

Por último, preferentemente la bomba es de funcionamiento en continuo, de modo que el técnico sólo tiene que colocar sucesivamente placas sobre el aparato, esperar a que el líquido empiece a caer al depósito (lo cual es señal de que los pocillos están llenos) y pasar a la siguiente placa. Finally, preferably the pump is in continuous operation, so that the technician only has to successively place plates on the apparatus, wait for the liquid to begin to fall into the tank (which is a sign that the wells are full) and Go to the next plate.

BRIEF DESCRIPTION OF THE FIGURES

La Fig. 1 muestra una vista en sección de un ejemplo del aparato de la presente invención lleno con aceite. Fig. 1 shows a sectional view of an example of the apparatus of the present invention filled with oil.

La Fig. 2 muestra una vista en sección de una placa de pocillos convencional. Fig. 2 shows a sectional view of a conventional well plate.

La Fig. 3 muestra una vista en sección de un ejemplo del aparato de la invención durante la aplicación de aceite a una placa de pocillos. Fig. 3 shows a sectional view of an example of the apparatus of the invention during application of oil to a well plate.

La Fig. 4 muestra una vista en sección de la placa de pocillos cuando se ha alcanzado el volumen final de aceite en cada pocillo, retornando el exceso de aceite al depósito. Fig. 4 shows a sectional view of the well plate when the final volume of oil in each well has been reached, returning the excess oil to the reservoir.

PREFERRED EMBODIMENT OF THE INVENTION

Se describe a continuación un ejemplo del aparato (1) de la invención haciendo referencia a las figuras adjuntas. En particular, en la Fig. 1 se 5 aprecian las partes que componen el aparato (1) de la invención en posición de reposo: un depósito (2) cuya parte superior está dotada de unos orificios (3) de retorno; una matriz de agujas (4) que se comunican con un sub-depósito (10), el cual está a su vez comunicado gracias a un conducto (9) de comunicación con la bomba (5). Se puede apreciar cómo el conducto (9) de An example of the apparatus (1) of the invention is described below with reference to the attached figures. In particular, in Fig. 1 the parts comprising the apparatus (1) of the invention can be seen in the rest position: a tank (2) whose upper part is provided with return holes (3); an array of needles (4) that communicate with a sub-tank (10), which is in turn connected by a conduit (9) for communication with the pump (5). You can see how the conduit (9) of

10 comunicación tiene una vía (11) de escape, que se ha representado abierta en la Fig. 1, que permitirá regular el caudal de aceite que se bombea hacia las agujas (4). The communication has an escape route (11), which is shown open in Fig. 1, which will allow to regulate the flow of oil that is pumped into the needles (4).

La parte superior del aparato (1) también cuenta con una pieza (6) de The upper part of the device (1) also has a piece (6) of

15 protección que cubre la parte superior del depósito (2) y la base de las agujas (4), y que está dotada de una matriz de orificios (7) de paso de las puntas de las agujas (4). Se observa cómo existe entre los orificios (7) y las agujas (4) una distancia que permite que el aceite que caiga de la placa vuelva a entrar en el depósito (2). Además, unos rebordes (8) de apoyo permiten colocar 15 protection covering the upper part of the tank (2) and the base of the needles (4), and which is provided with a matrix of holes (7) for passing the needle tips (4). It is observed how there is a distance between the holes (7) and the needles (4) that allows the oil that falls from the plate to re-enter the tank (2). In addition, support flanges (8) allow positioning

20 adecuadamente la placa (100) de pocillos (101) que se desea rellenar: se asegura así que la posición de los pocillos (101) corresponde con la de las agujas (4), y que la punta de las agujas (4) queda en contacto, o casi, con el fondo de los pocillos (101). 20 suitably the plate (100) of wells (101) to be filled: it is thus ensured that the position of the wells (101) corresponds to that of the needles (4), and that the tip of the needles (4) remains in contact, or almost, with the bottom of the wells (101).

25 Se ha representado también en las figuras un medio (12) de calentamiento, en este ejemplo una resistencia, que servirá para calentar el aceite y así modificar la cantidad del mismo que queda adherida a la placa (100). La resistencia está conectada a un termostato (13) que permite regular la temperatura del aceite desde el exterior del aparato simplemente girando 25 A heating means (12), in this example a resistor, which will serve to heat the oil and thus modify the amount of the same that is adhered to the plate (100) has also been shown in the figures. The resistor is connected to a thermostat (13) that allows to regulate the oil temperature from the outside of the device simply by turning

30 una rueda. 30 a wheel.

La Fig. 2, por otro lado, muestra una placa (100) de pocillos (101) convencional. Fig. 2, on the other hand, shows a conventional well plate (100) (101).

De este modo, como se ha representado en la Fig. 3, cuando la bomba Thus, as depicted in Fig. 3, when the pump

5 (5) está en funcionamiento el aceite sube por el conducto (9) de alimentación, llega al sub-depósito (10) y asciende a través de las agujas (4) hasta salir por la punta. Cuando se coloca sobre las agujas (4) una placa (100) en posición invertida, cada una de las agujas (4) queda introducida en uno de los pocillos 5 (5) is in operation the oil rises through the feed line (9), reaches the sub-tank (10) and ascends through the needles (4) until it comes out through the tip. When a plate (100) is placed upside down on the needles (4), each of the needles (4) is inserted into one of the wells

(101) Y tocando, o casi, el fondo. El aceite que sube por cada aguja (4) (101) And touching, or almost, the bottom. The oil that rises for each needle (4)

10 comienza así a quedar adherido a los pocillos (101), aumentando poco a poco el volumen de aceite de cada pocillo (101). En un momento determinado deja de acumularse aceite, bien porque el pocillo (101) está completamente lleno (como se ha representado en la Fig. 4), o bien antes debido a que se ha alcanzado el equilibrio entre las fuerzas de tensión superficial y las fuerzas 10 thus begins to adhere to the wells (101), gradually increasing the volume of oil in each well (101). At a given time, oil stops accumulating, either because the well (101) is completely full (as shown in Fig. 4), or earlier because the balance between the surface tension forces and the forces

15 gravitatorias. En ese momento, el aceite sobrante empieza a resbalar por las agujas (4) hacia abajo o a gotear de los pocillos (101), se introduce por los orificios (7) de la pieza (6) de protección y termina volviendo al depósito por los orificios (3) de retorno. 15 gravitational At that time, the excess oil begins to slide down the needles (4) down or drip from the wells (101), is introduced through the holes (7) of the protective piece (6) and ends up returning to the tank through the return holes (3).

20 Si se desea aumentar el flujo de aceite, basta con cerrar gradualmente la vía (11) de escape hasta conseguir el flujo deseado. Por otro lado, si se desea disminuir la cantidad de aceite adherida a cada pocillo (101) al final del proceso, basta con accionar el termostato (13) para activar la resistencia (12). Al subir la temperatura del aceite, la tensión superficial baja y por tanto la 20 If it is desired to increase the oil flow, it is enough to gradually close the exhaust path (11) until the desired flow is achieved. On the other hand, if you want to reduce the amount of oil attached to each well (101) at the end of the process, simply turn on the thermostat (13) to activate the resistance (12). When the oil temperature rises, the surface tension drops and therefore the

25 cantidad de aceite adherido a los pocillos (101) al final del proceso también será menor. Así, jugando con la temperatura del aceite, se consigue regular la cantidad administrada a cada pocillo (101) según cada aplicación particular. The amount of oil attached to the wells (101) at the end of the process will also be less. Thus, playing with the oil temperature, it is possible to regulate the amount administered to each well (101) according to each particular application.

Claims

1. Procedure for applying a liquid in at least one well (101) of

a plate (100), characterized in that it comprises the following steps: - placing the plate (100) in an inverted position; and -apply the liquid to each well (101) from under the plate (100).

2. 2.: Procedimiento de acuerdo con la reivindicación 1, que además comprende el paso de modificar la temperatura del líquido previamente a su aplicación a los pocillos (101). Method according to claim 1, further comprising the step of modifying the temperature of the liquid prior to its application to the wells (101).

3. 3.: Aparato (1) para aplicar un líquido en al menos un pocillo (101) de una placa (100), caracterizado porque comprende medios para aplicar el líquido en el pocillo (101) estando la placa (100) en posición invertida, y donde dichos medios comprenden, asimismo: Apparatus (1) for applying a liquid in at least one well (101) of a plate (100), characterized in that it comprises means for applying the liquid in the well (101) with the plate (100) being in an inverted position, and where said means also include:

a liquid reservoir (2) provided with at least one return hole (3) in its upper surface;

a matrix of needles (4) arranged vertically on the upper surface of the tank and whose position is corresponding to the wells (101) that it is desired to fill with liquid, with inner ducts of the needles connected to the liquid tank (2); Y

a pump (5) configured to drive the liquid in the tank

(2) causing its ascension through the inner ducts of the needles (4) until it exits through the tips of said needles, so that by placing an inverted plate (100) on top of the needle array (4) it achieves that a portion of the liquid is adhered to the wells (101) by the effect of surface tension, returning the rest of the liquid to the interior of the tank (2) through the at least one return hole (3).

4. Apparatus (1) according to claim 3, wherein the at least one return hole (3) is arranged so that it substantially surrounds the needle array (4).

5. 5.: Aparato (1) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 3-4, donde el depósito (2) tiene una superficie superior plana. Apparatus (1) according to any of claims 3-4, wherein the reservoir (2) has a flat top surface.

6. 6.: Aparato (1) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 3-5, que además comprende una pieza (6) de protección paralela a la superficie superior del depósito (2) y dotada de una matriz de orificios (7) configurado para el paso de las puntas de la matriz de agujas (4). Apparatus (1) according to any of claims 3-5, further comprising a protection piece (6) parallel to the upper surface of the reservoir (2) and provided with an array of holes (7) configured for the passage of the tips of the needle array (4).

7. 7.: Aparato (1) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 3-6, que además comprende un reborde (8) de apoyo para la placa (100) de pocillos (101). Apparatus (1) according to any of claims 3-6, further comprising a support flange (8) for the well plate (100) (101).

8. 8.: Aparato (1) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 3-7, donde la bomba (2) está sumergida en el interior del depósito (2) o situada junto al depósito (2). Apparatus (1) according to any of claims 3-7, wherein the pump (2) is submerged inside the tank (2) or located next to the tank (2).

9. 9.: Aparato (1) de acuerdo con la reivindicación 8, donde la bomba (2) es de funcionamiento continuo. Apparatus (1) according to claim 8, wherein the pump (2) is continuously operated.

10. 10.: Aparato (1) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 8-9, donde la bomba (2) está conectada mediante un conducto (9) de alimentación a un sub-depósito interior (10) situado en el interior del depósito (2), y que a su vez está directamente conectado a las agujas (4). Apparatus (1) according to any of claims 8-9, wherein the pump (2) is connected by a supply line (9) to an inner sub-tank (10) located inside the tank (2), and which in turn is directly connected to the needles (4).

11. eleven.: Aparato (1) de acuerdo con la reivindicación 10, donde el conducto (9) de alimentación tiene una vía de escape (11) lateral regulable que controla el flujo de líquido que sale a través de las agujas (4). Apparatus (1) according to claim 10, wherein the supply conduit (9) has an adjustable lateral exhaust path (11) that controls the flow of liquid that flows through the needles (4).

12. 12.: Aparato (1) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 3-11, Apparatus (1) according to any of claims 3-11,

which further comprises a means (12) for heating the liquid contained in the tank (2).

13. 13.: Aparato (1) de acuerdo con la reivindicación 12, donde el medio (12) de calentamiento es una resistencia. Apparatus (1) according to claim 12, wherein the heating means (12) is a resistor.

14. 14.: Aparato (1) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 12-13, que además comprende un termostato (13) regulable desde el exterior del dep6sito (2) para controlar la temperatura de calentamiento. Apparatus (1) according to any of claims 12-13, further comprising a thermostat (13) adjustable from outside the tank (2) to control the heating temperature.

15. fifteen.: Aparato (1) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 3-14, donde el líquido es aceite. Apparatus (1) according to any of claims 3-14, wherein the liquid is oil.