ES2225214T3

ES2225214T3 - Nuevos compuestos de xantona, su preparacion y uso como medicamento.

Info

Publication number: ES2225214T3
Application number: ES00962275T
Authority: ES
Inventors: Vichai Dept. of Chemistry REUTRAKUL; Thaiwatchai Santisuk; Gerhard Noessner; Juergen Schmidt; Bernd Nickel; Thomas Klenner; Sebastian Hose
Original assignee: Zentaris AG
Current assignee: Aeterna Zentaris GmbH
Priority date: 1999-07-01
Filing date: 2000-06-27
Publication date: 2005-03-16
Anticipated expiration: 2020-06-27
Also published as: EP1065210A1; JP3848158B2; DE29923419U1; SI1200444T1; WO2001002408A1; AR043089A1; CN1151156C; DE60012750T2; EP1200444A1; ATE272641T1; HUP0201810A3; BR0012127A; AU7406900A; CA2376681A1; CN1368973A; PT1200444E; HUP0201810A2; UA72260C2; DK1200444T3; HK1048475A1

Abstract

Un compuesto según la **Fórmula** donde: R1 es un átomo de hidrógeno, un grupo metilo (-CH3), un residuo alquilo C2-8, un grupo formilo (-CHO), un residuo acetilo (-COCH3), -CO-alquil-C2-6, CO-cicloalquil- C3-8, -CO-aril-C6-18 o un residuo ¿CO-aralquil-C7-24, teniendo cada uno de ellos opcionalmente uno o más sustituyentes seleccionados del grupo consistente en ¿OH, -SH, -NH2, NH-alquil-C1-6, -N(alquil-C1-6)2, -NH-aril-C6- 14, -N(aril-C6-14)2, -N(alquil- C1-6)(aril-C6-14), -NHCOR2, -NO2, -CN, -(CO)R3, -(CS)R4, - F, -Cl, -Br, -I, -O-alquil-C1-6, -O-aril-C6-14, -O-(CO)R5, -S-alquil-C1-6, -S-aril-C6-14, - SOR6 y ¿SO2R7, donde R2 a R7 son independientemente entre sí un átomo de hidrógeno, residuo alquil-C1-6, -O-alquil-C1- 6, -O-aril-C6-14, -NH2, -NH-alquil-C1-6-, -N(alquil-C1-6)2, -NH-aril-C6-14, -N(aril-C6-14)2 -N(alquil-C1-6)(aril-C6-14), -S-alquil-C1-6, -S-aril-C6-14; un residuo ¿COO-alquil-C1-6 que tiene opcionalmente uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en ¿OH, -SH, -NH2, NH-alquil-C1-6, -N(alquil- C1-6)2, -NH-aril-C6-14, -N(aril-C6-14)2, -N(alquil-C1- 6, )(aril-C6-14), -NHCOR8, -NO2, -CN, -(CO)R9, -(CS)R10, -F, -Cl, -Br, -I, -O-alquil-C1-6, -O- aril-C6-14, -O-(CO)R11, -S-alquil-C1-6, -S-aril-C6-14, - SOR12 y ¿SO2R13, donde R8 a R13 son independientemente entre sí un átomo de hidrógeno, residuo alquil-C1-6, -O- alquil-C1-6, -O-aril-C6-14, -NH2, -NH-alquil- C1-6-, -N(alquil-C1-6)2, -NH-aril-C6-14, -N(aril-C6-14)2, - N(alquil-C1-6) (aril-C6-14), -S-alquil- C1-6, -S-aril-C6-14; un residuo -CONR14R15 donde R14 y R15 son independientemente entre sí un átomo de hidrógeno, residuo alquil-C1-6, -O-alquil-C1-6, -O-aril-C6-14, -NH2, -NH- alquil- C1-6-, -N(alquil-C1-6)2, -NH-aril-C6-14, -N(aril-C6-14)2 - N(alquil-C1-6) (aril-C6-14), -S-alquil- C1-6, -S-aril-C6-14; o un contra-catión seleccionado del grupo consistente en un ión de metal alcalino o alcalino-térreo tal como Li+, Na+, K+, Ca++, Mg++, NR16R17R18R19(+) donde R16 a R19 son independientemente entre síun átomo de hidrógeno, o un residuo alquil-C1-6; R2 y R3 forman parte del enlace doble C17=C18 [- C17H=C18(CH3)2] o son cada uno de ellos hidrógeno [-C17H2- C18H(CH3)2] o un tautómero, enantiómero, estereoisómero de los mismos o una sal o solvato fisiológicamente aceptable de los mismos o mezclas de los mismos.

Description

Nuevos compuestos de xantona, su preparación y su uso como medicamento.

La invención se refiere compuestos nuevos de xantona, su preparación y su uso como medicamentos. Más particularmente, la presente invención se refiere al aislamiento del nuevo producto natural de xantona, la sootepenseona, a partir de Dasymaschalon sootepense Craib, Annonaceae, su identificación y derivación, y al uso de sootepenseona y sus derivados como agentes anticancerosos.

Campo de la invención.

El cáncer es quizás uno de los factores contra la vida humana más activos entre los que operan en el mundo hoy en día y los esfuerzos de todo el mundo científico están dirigidos a su prevención y erradicación.

Los nuevos agentes con valor quimioterapéutico en la lucha contra el cáncer son obviamente un asunto de gran importancia para la medicina. Pero el desarrollo de nuevas drogas en el campo del cáncer es una tarea difícil, dado que los agentes anticancerosos deben ser letales para las células tumorales o deben incapacitarlas, pero no deben causar un daño excesivo a las células normales. Actualmente, el estado de los conocimientos en materia de biología del cáncer y la química médica no garantizan el diseño de nuevas clases de moléculas que puedan ser agentes antitumorales efectivos. A pesar de los grandes progresos logrados en la biología del cáncer, la farmacología molecular, la farmacocinética, la química médica y los campos relacionados, los conocimientos que se persiguen todavía son esquivos.

Desde que el concepto de tratamiento quimioterapéutico de las enfermedades malignas ha estado en la cresta de la ola durante las últimas décadas, los científicos de todo el mundo han investigado los principios provenientes de las plantas y sus derivados como nuevos inhibidores antitumorales. Ejemplos de importantes agentes anticancerosos de origen vegetal son los alcaloides vincaleucoblastina (vinblastina) y leurocristina (vincristina), ambos aislados a partir de Catharanthus roseus. Shradha Sinha y Audha Jain ofrecen una revisión abarcativa de productos naturales como agentes anticancerosos en: Progress in Drug Research, Vol. 42, páginas 53-132 (1994) Basel (Suiza).

Resumen de la invención

De conformidad con la presente invención, se proporcionan nuevos compuestos citotóxicos de xantona con la fórmula general (I)

1

Donde

R^{1} es un átomo de hidrógeno, un grupo metilo (-CH_{3}), un residuo alquilo C_{2}-C_{6}, un grupo formilo (-CHO), un residuo acetilo (-COCH_{3}), residuo -CO-alquil-C_{2-6}, CO-cicloalquil-C_{3-8}, -CO-aril-C_{6-18} o -CO-aralquil-C_{7-24}, teniendo cada uno de ellos uno o más sustituyentes seleccionados del grupo consistente en -OH, -SH, -NH_{2}, NH-alquil-C_{1-6}, -N(alquil-C_{1-6})_{2}, -NH-aril-C_{6-14}, -N(aril-C_{6-14})_{2}, -N(alquil-C_{1-6},)(aril-C_{6-14}), -NHCOR^{2}, -NO_{2}, -CN, -(CO)R^{3}, -(CS)R^{4}, -F, -Cl, -Br, -I, -O-alquil-C_{1-6},-O-aril-C_{6-14}, -O-(CO)R^{5}, -S-alquil-C_{1-6}, -S-aril-C_{6-14}, -SOR^{6} y -SO_{2}R^{7}, donde R^{2} a R^{7} son independientemente entre sí un átomo de hidrógeno, residuo alquil-C_{1-6}, -O-alquil-C_{1-6}, -O-aril-C_{6-14}, -NH_{2}, -NH-alquil-C_{1-6}-, -N(alquil-C_{1-6})_{2}, -NH-aril-C_{6-14}, -N(aril-C_{6-14})_{2} -N(alquil-C_{1-6})(aril-C_{6-14}), -S-alquil-C_{1-6}, -S-aril-C_{6-14};

un residuo -COO-alquil-C_{1-6} que tiene, opcionalmente, uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en -OH, -SH, -NH_{2}, NH-alquil-C_{1}-C_{6}, -N(alquil-C_{1-6})_{2}, -NH-aril-C_{6-14}, -N(aril-C_{6-14})_{2}, -N(alquil-C_{1}-C_{6},)(aril-C_{6}-C_{14}), -NHCOR^{8}, -NO_{2}, -CN, -(CO)R^{9}, -(CS)R^{10}, -F, -Cl, -Br, -I, -O-alquil-C_{1-6},-O-aril-C_{6-14}, -O-(CO)R^{11}, -S-alquil-C_{1-6}, -S-aril-C_{6-14}, -SOR^{12} y -SO_{2}R^{13}, donde R^{8} a R^{13} son, independientemente entre sí, un átomo de hidrógeno, residuo alquil-C_{1-6}, -O-alquil-C_{1-6}, -O-aril-C_{6-14}, -NH_{2}, -NH-alquil-C_{1-6}-, -N(alquil-C_{1-6})_{2}, -NH-aril-C_{6-14},
-N(aril-C_{6-14})_{2} -N(alquil-C_{1-6}) (aril-C_{6-14}), -S-alquil-C_{1-6}, -S-aril-C_{6-14};

un residuo -CONR^{14}R^{15} donde R^{14} y R^{15} son, independientemente entre sí, un átomo de hidrógeno, residuo alquil-C_{1-6}, -O-alquil-C_{1-6}, -O-aril-C_{6-14}, -NH_{2}, -NH-alquil-C_{1-6}-, -N(alquil-C_{1-6})_{2}, -NH-aril-C_{6-14}, -N(aril-C_{6-14})_{2} -N(alquil-C_{1-6}) (aril-C_{6-14}), -S-alquil-C_{1-6}, -S-aril-C_{6-14};

o un contra-catión seleccionado del grupo consistente en un ión metálico alcalino o alcalino-térreo tal como Li, Na, K, Ca, Mg NR^{16}R^{17}R^{18}R^{19}(+) donde R^{16} a R^{19} son independientemente entre sí un átomo de hidrógeno, o un residuo alquilo-C_{1-6}; R^{2} y R^{3} forman parte del enlace doble C^{17}=C^{18}[-C^{17}H=C^{18}(CH_{3})_{2}] o son cada uno hidrógeno
[-C^{17}H_{2}-C^{18}H(CH_{3})_{2}] o un tautómero, enantiómero, estereoisómero de los mismos o una sal o solvato fisiológicamente aceptable de los mismos o mezclas de los mismos.

En el caso de un compuesto conforme a la fórmula 1 anterior en forma de fenolato con un contra-catión divalente o multivalente, la carga positiva remanente se puede compensar mediante la asociación con un anión fisiológicamente aceptable tal como Cl- o OH-

Al compuesto novedoso conforme a la fórmula I, donde R^{1} es un átomo de hidrógeno y R^{2} y R3 forman parte del enlace doble C^{17}-C^{18} se le ha dado el nombre de sootepenseona (1).

Conforme a otro aspecto de la invención, se proporciona un proceso para elaborar un compuesto conforme a la fórmula I mediante el aislamiento de sootepenseona (1) a partir de las hojas de Dasymaschalon sootepenseone Craib, Annonaceae y su subsiguiente derivación.

La presente invención asimismo proporciona el uso de compuestos conforme a la fórmula I como medicamentos, en particular para el tratamiento de las enfermedades cancerosas.

La presente invención además proporciona fórmulas farmacéuticas, que comprenden una cantidad efectiva de compuesto conforme a la fórmula (1) para tratar a un paciente que lo necesita. Tal y como se utiliza en la presente, el término una cantidad efectiva de un compuesto conforme a la fórmula (I) se define como la cantidad de compuesto que, una vez administrada a un paciente, inhibe el crecimiento de células tumorales, mata células malignas, reduce el volumen o el tamaño de los tumores o elimina el tumor por completo en el paciente tratado.

Así, los compuestos sustancialmente puros de acuerdo con la invención, se pueden formular en formas farmacéuticas utilizando vehículos farmacéuticamente aceptables para la administración oral, tópica o parenteral a pacientes que necesitan terapia oncolítica.

En una realización preferida, el paciente es un mamífero, en particular un ser humano.

La cantidad efectiva que se va a administrar a un paciente se basa típicamente en el área de superficie corporal, el peso del paciente y la condición del paciente. La interrelación de dosificaciones para animales o humanos (en base a miligramos por metro cuadrado de superficie corporal) la describe Freireich, E.J. et al., en Cancer Chemother. Rep., 50 (4) 219 (1966). El área de superficie corporal se puede determinar aproximadamente a partir de la altura y el peso del paciente (ver por ejemplo Scientific tables, Geigy Pharmaceuticals, Ardly, N.Y. páginas 537-538 (1979)). Los niveles de dosis preferidos también dependerán de la evaluación que los médicos practicantes realicen de la naturaleza de la condición cancerosa determinada del paciente y del estado físico general del paciente. Las dosis antitumorales efectivas de los presentes compuestos de xantona varían de 1 microgramo por kilogramo hasta aproximadamente 5000 microgramos por kilogramo de peso corporal del paciente, más preferentemente de 2 microgramos hasta aproximadamente 1000 microgramos por kilogramo de peso corporal del paciente.

Las dosis efectivas también variarán, tal como lo reconocen los expertos en la técnica, dependiendo de la vía de administración, el uso de excipientes y la posibilidad de su uso junto con otros tratamientos terapéuticos, incluyendo otros agentes antitumorales y la terapia de radiación.

La presente formulación farmacéutica se puede administrar por vía intravenosa, intramuscular, intradérmica, subcutánea, intraperitoneal, tópica o intravenosa en la forma de un liposoma.

Los ejemplos de formas de dosificación incluyen soluciones acuosas del agente activo, en solución salina isotónica, glucosa al 5% y otros vehículos líquidos farmacéuticamente aceptables conocidos. Se pueden utilizar agentes solubilizantes adicionales conocidos por las personas familiarizadas en la técnica, como excipientes farmacéuticos para hacer llegar a su objetivo al agente activo. En forma alternativa, los presentes compuestos se pueden modificar químicamente para mejorar la solubilidad en agua, por ejemplo, mediante la formación de sales de fenolato farmacéuticamente aceptables.

Los presentes compuestos también se pueden formular en formas de dosificación para otras vías de administración utilizando métodos conocidos. Las composiciones farmacéuticas se pueden formular, por ejemplo, en formas de dosificación para administración oral en cápsula, sello de gel o comprimido. Las cápsulas pueden comprender cualquier material conocido farmacéuticamente aceptable, tal como la gelatina o los derivados de la celulosa. Los comprimidos pueden estar formulados conforme a cualquier procedimiento convencional, mediante la compresión de mezclas del agente activo y vehículos sólidos y lubricantes, conocidos para las personas familiarizadas con la técnica. Los ejemplos de vehículos sólidos incluyen el almidón, el azúcar, la bentonita. Los compuestos de la presente invención también se pueden administrar en forma de comprimidos de cubierta dura o cápsulas que contengan, por ejemplo, lactosa o manitol como aglutinante y rellenos convencionales y agentes para la realización de comprimidos.

En la presente, los términos "cantidad efectiva" y "dosis efectiva" en referencia al tratamiento de animales se definen como aquella cantidad de alcaloide que ocasionará la remisión o inhibición del crecimiento de la enfermedad cancerosa en el animal al que se le administra, sin ocasionar una respuesta tóxica intolerable. La cantidad efectiva puede variar con la forma de administración, el esquema de administración, el tipo de tumor y otros factores relacionados, todos los cuales pueden variar sin alejarse del alcance o la operatividad de la invención. Generalmente, una dosis efectiva sería aquella que varía en el rango de aproximadamente 0,001-100,0 mg/kg de peso corporal/
día.

Los términos "cáncer" o "tumor", tal como se usan en la presente, incluyen de manera no taxativa, adrenocarcinomas, glioblastomas (y otros tumores cerebrales), cáncer de mama, cervical, colorectal, de endometrio, gástrico, hepático, pulmonar (de células pequeñas y no pequeñas), linfomas (incluyendo los que no son de Hodgkin, los de Burkitt, los difusos de células grandes, los foliculares y el de Hodgkin difuso), melanoma (metastásico), neuroblastoma, sarcoma osteogénico, cáncer de ovarios, retinoblastomas, sarcomas de tejidos blandos, cáncer testicular y otros tumores que responden a la quimioterapia.

Otros objetos y ventajas de la invención serán evidentes con facilidad a partir de la siguiente descripción.

Descripción detallada de la invención

Los compuestos inventados conforme a la fórmula (I) tienen un sistema de anillo de xantona pentacíclico (ver para revisión: Sultanbawa, M.U.S.; Xhanthonoids of tropical plants, Tetrahedron 36 (1980) 1455-1506). Se ha informado que los siguientes compuestos naturales tienen un sistema de anillo similar:

Ácido gambógico (2), aislado a partir de Garcinia hanburyi (ver Amorosa, M. et al, Ann Chim. (Roma) 1966, 56, 232; Ahmad, A.S. et al., J. Chem. Soc. ©, 1966, 772 (estructura); Arnone A. et al., Tetr. Lett., 1967, 4201 (datos pmr, estructura), morellín (3) aislado a partir de Garcinia morella (ver: Rao, B.S., J. Chem. Soc., 1937, 853 (aislamiento); Kartha, G. et al., Tetr. Lett., 1963, 459 (estructura cristal.)) Fair, P.M. et al., Indian J. Chem., 1964, 2, 402 (estructura)), hanburín (4), aislado a partir de Garcinia hanburyi (ver: Asano, J. et al., Phytochemistry, 1996, 41, 815 (aislamiento, datos uv, ir, pmr, cmr) y forbesiona (5) aislada a partir de Garcinia forbesii (ver: Yuan-Wah eong, Leslie J. Harrison, Graham J. Bennett y Hugo T-W. Tan, J. Chem. Research (S) 1996, 392-393).

Estos compuestos tienen una cadena lateral isoprenilo en C-5 en común con un grupo hidroxifenólico con enlace de hidrógeno. El morellín (3) y el ácido gambógico (2) tienen un sistema de anillo cromeno en común. Todos los componentes (2) a (5) tienen en común un esqueleto de carbono biciclo[2.2.2]octeno fusionado a un sistema de anillo 2,2-dimetil-tetrahidrofurano (ver figura 1).

Sin embargo, estos compuestos muestran diferencias estructurales significativas si se los compara con los compuestos conforme a la fórmula (I) de la presente invención:

1.) la cadena lateral isoprenilo en C-5 se oxida en un aldehído como en (3) o en un ácido carboxílico como en (2),

2.) el anillo dihidrofurano condensado en posición 3,4- falta como en (4) o en su lugar hay presente un anillo de piranona en la posición 2,3- como en (3)

3.) el sistema de anillo se sustituye con una cadena lateral isoprenilo adicional en C-5 como en (3) y (5)

Por el contrario, los compuestos de la presente invención contienen anillos dihidrofurano completamente sustituidos excepto en el carbono 2', fusionado al sistema de anillo de xantona modificado.

Para la taxonomía de la Dasymaschalon sootepense Craib ver V.H. Heywood, "Flowering Plants of the world", University Press, Oxford, 1978.

De manera sorprendente, los compuestos de la presente invención muestran una notable actividad antitumoral. Más aún, los presentes compuestos tienen una baja toxicidad.

Así, los compuestos de xantona conforme a la presente invención son nuevos e involucran una etapa de invención.

Las estructuras de (2) a (5) se resumen a continuación:

2

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Ejemplo 1 Aislamiento de sootepenseona (1; VR-3016, D-25637) a partir de Dasymaschalon sootepense

El material vegetal se recogió en octubre de 1994 en Doitung, provincia de Chiangrai, Tailandia del norte. Las hojas se secaron al sol y al aire (aproximadamente a 30-35ºC) durante tres días y se almacenaron en una bolsa de tela. Las hojas secas pulverizadas (64 kg) de D. sootepense se extrajeron secuencialmente con hexano (110 litros), cloroformo (107 litros) y metanol (180 litros) para proporcionar los correspondientes extractos en crudo de 204,2, 192,7 y 1187,0 gr respectivamente. El extracto de metanol en crudo se dividió aún más con acetato de etilo (12 litros)-agua(4,35 litros) y n-butanol (10 litros)-agua para proporcionar fracciones de acetato de etilo, n-butanol y agua de 103,6, 388,7 y 401,8 gr, respectivamente.

La fracción de acetato de etilo (100 gr) se cromatografió sobre gel de sílice (Merck nº 7734, 1,62 kg, el extracto se mezcló previamente con 180 gr de gel de sílice), eluyendo con mezclas de hexano-acetato de etilo y acetato de etilo-metanol. Las fracciones (300 ml cada una de ellas) se combinaron en la base de un cromatógrafo de capa fina o TLC para proporcionar un total de 19 fracciones (F_{1} a F_{19}). Las fracciones F_{7} (1,10 gr) y F_{8} (0,84 gr), eluidas con acetato de etilo-hexano al 7-8%, se cromatografiaron repetidamente sobre gel de sílice utilizando hexano-acetato de etilo como disolventes de elusión. La fracción eluida con acetato de etilo-hexano al 30% proporcionó un sólido amarillo claro que fue purificado aún más mediante cromatografía radial (gel de sílice, acetato de etilo-hexano al 20%) y recristalización a partir de cloruro de metileno-metanol para proporcionar VR-3016 (0,2373 gr). El licor madre se purificó mediante cromatografía líquida de alta resolución o HPLC (cloruro de metileno), seguido de recristalización en el mismo disolvente para proporcionar 0,1103 gr adicionales de VR-3016. El compuesto fue identificado como un nuevo derivado de xantona modificado, al que se le dio el nombre de sootepenseona 1, en base a los datos del espectro y al análisis de difracción de rayos x de un solo cristal.

Datos físico-químicos de sootepenseona (1):

Punto de fusión 192-193ºC

[\alpha]^{28}D-8,00, c=0,075 en CHCl_{3}

Análisis elemental: Encontrados: C72,32; H, 6,89

C_{28}H_{32}O_{6} requiere: C, 72,39, H, 6,94.

IR, \lambda_{max} CHCL_{3} cm^{-1}:3560, 3033, 3011, 2980, 2932, 1740, 1638, 1590, 1470, 1428, 1382.

UV, \lambda_{max} EtOH nm (log e): 213(3,06), 263(2 18), 326(sh)(2,66), 355(2,74)

Espectr. de masa: m/z (70eV) 464(2%), 436(100), 421(17), 339(60), 297(40), 281(8), 421(7), 215(28), 69(90).

Asignaciones NMR (resonancia magnética nuclear): ^{1}H y ^{13}C NMR (300 y 400 Mhz, CDCL_{3}): ver en página separada.

El procedimiento de aislamiento descrito se resume en el esquema 1.

Caracterización de la estructura de sootepenseona (1)

La identidad de sootepenseona se reveló mediante el análisis de sus datos espectrales, es decir, el espectro infrarrojo, el espectro ultravioleta, el espectro de masa y en particular los espectros de NMR de ^{1}H y NMR de ^{13}C.

TABLA 1

3

TABLA 2

4

Estereoquímica relativa

La estereoquímica relativa de sootepenseona (1) se ha confirmado mediante el análisis de difracción de rayos x de un solo cristal. Por lo tanto, la configuración absoluta es o bien la estereoquímica, que se muestra a continuación:

5

Sootepenseona (1)

o la forma enantiomérica correspondiente de la misma. La estereoquímica relativa tal como se muestra anteriormente para sootepenseona (1) es también válida para los derivados de sootepenseona conforme a la fórmula (I), excepto para el caso de los derivados en los que sucede una inversión o racemización bajo las condiciones de reacciones seleccionadas, en uno o más centros quirales a C-5, C- 7, C-10a, C-12 y C-22

Preparación de derivados de sootepenseona TABLA 3

6

7

La preparación de los compuestos 6 a 13 se puede lograr partiendo de sootepenseona (1) mediante procedimientos de derivación estándar de química orgánica que son conocidos para los expertos en la técnica.

Ejemplo 2 Preparación de 1-O-acetil-sootepenseona (6)

Una solución de 1 mg de sootepenseona (1) en 1 ml de anhídrido de ácido acético anhidro se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. El disolvente se evaporó en un baño de agua bajo presión reducida. Rendimiento: 1 mg de (6) como residuo en crudo.

Por ejemplo, las sales de sootepenseona (7) se pueden preparar conforme a los métodos y los reactivos descritos por Houben-Weyl, en Methoden der Organischen Chemie (métodos de química orgánica) 4ª edición, 1963 volumen 6/2, "Sauerstoffverbindungen I (compuestos de oxígeno I), parte 2", páginas 35 y sig. Así que, por ejemplo, un equivalente de una base adecuada se puede hacer reaccionar con un equivalente de sootepenseona en un disolvente adecuado y luego evaporar el solvente u obtener por filtración la sal precipitada (7). Una base adecuada se puede seleccionar, por ejemplo del grupo compuesto por hidróxidos alcalinos o alcalino-térreos o una amina orgánica.

La metilación del grupo OH- (compuesto nº 9) se puede lograr comenzando a partir de sootepenseona (1) con diazometano de manera análoga al método descrito por Mustafa; Hishmat; JOCEAH; J. Org. Chem; 22; 1957; 1644, 1646.

La acilación del grupo OH- (compuestos Nº 6, 8, 11 y 12) se puede lograr comenzando a partir de sootepenseona (1) de manera análoga al método y los reactivos descritos por Houben-Weyl, en Methoden der Organischen Chemie (métodos de química orgánica) 4ª edición, 1985, volumen E5, "Carbosäuren und Carbosäure-Derivate (ácidos carboxílicos y sus derivados)", páginas 691 y sig.

La alquilación del grupo OH- en C-1 (compuesto Nº 10) se puede lograr comenzando a partir de sootepenseona (1) de manera análoga a los procedimientos estándar y utilizando reactivos estándar tal como lo describe Houben-Weyl en Methoden der Organischen Chemie (métodos de química orgánica) 4ª edición, volumen VI/3, "Sauerstoffverbindungen (compuestos de oxígeno) parte 3", Georg Thieme Verlag Stuttgart, 1965, páginas 49 y sig.

La hidrogenación del enlace doble isoprenilo C^{17}-C^{18} con el enlace sencillo C17-C17 (donde R2 y R3, en la fórmula (I), son cada uno un átomo de hidrógeno; compuesto nº 13) se puede realizar mediante procedimientos estándar tal como los describe por ejemplo Houben-Weyl, en Methoden der Organischen Chemie (métodos de química orgánica) 4ª edición, volumen IV/1c, "Reduktion (reducción), parte I", Georg Thieme Verlag Stuttgart, 1981, páginas 15 y sig.

Actividad biológica

Los compuestos conforme a la presente invención son menos tóxicos que los compuestos estándar (ver tabla 1). Por otro lado, la sootepenseona (1; D-25637) es más activa en la prueba de fibra hueca que los compuestos estándar (ver tabla 3).

TABLA 1

8

Discusión de los resultados

La sootepenseona es como mínimo 100 veces menos tóxica que la Actinomicina D, aproximadamente 16 veces menos tóxica que la Vinblastina y un 60% y un 20% menos tóxica que la Adriamicina y la Bleomicina respectivamente.

2. Actividad antitumoral in vitro (Proliferación XTT/prueba citotoxicidad)

El ensayo XTT se llevó a cabo tal como lo describe D.A. Scudiero et al., Cancer Res 48 (1 de septiembre, 1988) pg 4827-4833. Los resultados de este procedimiento se expresan como la dosis que inhibe en un 50% el crecimiento en comparación con el crecimiento del control después de 45 horas, con posterioridad a la aplicación de la sustancia. El valor de dosis obtenido se denomina DE 50 y la actividad que se indica para niveles de DE 50 es de 30 \mug/ml. Cuanto menor es el nivel de DE 50, más activo es el material probado. Los valores de actividad de sootepenseona (1) obtenidos en el Ejemplo 1 se informan en la Tabla 2 que figura a continuación.

TABLA 2

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Discusión de los resultados

D-25637 tiene una actividad anticancerosa significativa contra todas las líneas celulares tumorales probadas.

3. Actividad antitumoral in vivo de sootepenseona (D-25637) (ensayo de fibra hueca)

La prueba de fibra hueca se llevó a cabo tal como lo describe Melinda G. Hollingshead et. al., en Life Sciences, Vol. 57, Nº 2, pg. 131-141, 1995. Los resultados figuran en la Tabla 3.

TABLA 3

10

Discusión de los resultados

El compuesto D-25637 es más activo (49% de inhibición) contra la línea celular tumoral KB que la Vinblastina (13%) y la Actinomicina D (40%), y es casi tan activo como la Bleomicina (53%). Asimismo, contra la línea celular MCF-7 el compuesto D-25637 mostró una actividad anticancerosa tan fuerte (41%) como la de la Adriamicina, mientras que la Actinomicina D, Bleomicina y Vinblastina aumentaron el crecimiento tumoral (los valores negativos de inhibición indican un incremento en el crecimiento celular, en comparación con el grupo control que no recibió tratamiento).

Claims

1. Un compuesto según la Fórmula general (I):

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11

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donde:

R^{1} es un átomo de hidrógeno, un grupo metilo (-CH_{3}), un residuo alquilo C_{2-8}, un grupo formilo (-CHO), un residuo acetilo (-COCH_{3}), -CO-alquil-C_{2-6}, CO-cicloalquil-C_{3-8}, -CO-aril-C_{6-18} o un residuo -CO-aralquil-C_{7-24}, teniendo cada uno de ellos opcionalmente uno o más sustituyentes seleccionados del grupo consistente en -OH, -SH, -NH_{2}, NH-alquil-C_{1-6}, -N(alquil-C_{1-6})_{2}, -NH-aril-C_{6-14}, -N(aril-C_{6-14})_{2}, -N(alquil-C_{1-6})(aril-C_{6-14}), -NHCOR^{2}, -NO_{2}, -CN, -(CO)R^{3}, -(CS)R^{4}, -F, -Cl, -Br, -I, -O-alquil-C_{1-6}, -O-aril-C_{6-14}, -O-(CO)R^{5}, -S-alquil-C_{1-6}, -S-aril-C_{6-14}, -SOR^{6} y
-SO_{2}R^{7}, donde R^{2} a R^{7} son independientemente entre sí un átomo de hidrógeno, residuo alquil-C_{1-6}, -O-alquil-C_{1-6}, -O-aril-C_{6-14}, -NH_{2}, -NH-alquil-C_{1-6}-, -N(alquil-C_{1-6})_{2}, -NH-aril-C_{6-14}, -N(aril-C_{6-14})_{2} -N(alquil-C_{1-6})(aril-C_{6-14}), -S-alquil-C_{1-6}, -S-aril-C_{6-14};

un residuo -COO-alquil-C_{1-6} que tiene opcionalmente uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en -OH, -SH, -NH_{2}, NH-alquil-C_{1-6}, -N(alquil-C_{1-6})_{2}, -NH-aril-C_{6-14}, -N(aril-C_{6-14})_{2}, -N(alquil-C_{1-6},)(aril-C_{6-14}),
-NHCOR^{8}, -NO_{2}, -CN, -(CO)R^{9}, -(CS)R^{10}, -F, -Cl, -Br, -I, -O-alquil-C_{1-6}, -O-aril-C_{6-14}, -O-(CO)R^{11}, -S-alquil-C_{1-6}, -S-aril-C_{6-14}, -SOR^{12} y -SO_{2}R^{13}, donde R^{8} a R^{13} son independientemente entre sí un átomo de hidrógeno, residuo alquil-C_{1-6}, -O-alquil-C_{1-6}, -O-aril-C_{6-14}, -NH_{2}, -NH-alquil-C_{1-6}-, -N(alquil-C_{1-6})_{2}, -NH-aril-C_{6-14}, -N(aril-C_{6-14})_{2}, -N(alquil-C_{1-6}) (aril-C_{6-14}), -S-alquil-C_{1-6}, -S-aril-C_{6-14};

un residuo -CONR^{14}R^{15} donde R^{14} y R^{15} son independientemente entre sí un átomo de hidrógeno, residuo alquil-C_{1-6}, -O-alquil-C_{1-6}, -O-aril-C_{6-14}, -NH_{2}, -NH-alquil-C_{1-6}-, -N(alquil-C_{1-6})_{2}, -NH-aril-C_{6-14}, -N(aril-C_{6-14})_{2} -N(alquil-C_{1-6}) (aril-C_{6-14}), -S-alquil-C_{1-6}, -S-aril-C_{6-14};

o un contra-catión seleccionado del grupo consistente en un ión de metal alcalino o alcalino-térreo tal como Li+, Na+, K+, Ca++, Mg++, NR^{16}R^{17}R^{18}R^{19}(+) donde R^{16} a R^{19} son independientemente entre sí un átomo de hidrógeno, o un residuo alquil-C_{1-6};

R^{2} y R^{3} forman parte del enlace doble C^{17}=C^{18}[-C^{17}H=C^{18}(CH_{3})_{2}] o son cada uno de ellos hidrógeno [-C^{17}H_{2}-C^{18}H(CH_{3})_{2}]

o un tautómero, enantiómero, estereoisómero de los mismos o una sal o solvato fisiológicamente aceptable de los mismos o mezclas de los mismos.

2. Un compuesto conforme a la fórmula I de la reivindicación 1, donde R^{1} es un átomo de hidrógeno y R^{2} y R^{3} forman parte del enlace doble C^{17}=C^{18}(Sootepenseona).

3. Un proceso para elaborar un compuesto conforme a la fórmula I de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, donde R^{1} es un átomo de hidrógeno y R^{2} y R^{3} forman parte del enlace doble C^{17}=C^{18}(Sootepenseona), que comprende las etapas de:

(a) extraer las hojas de Dasymaschalon sootepenseone Craib, Annonaceae sucesivamente con disolventes orgánicos en orden de polaridad creciente.

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(b) dividir los extractos en bruto de la mayor polaridad con una mezcla de agua y un disolvente orgánico polar ligeramente miscible,

(c) purificar el extracto orgánico mediante cromatografía con disolventes adecuados,

(d) opcionalmente, repetir la etapa c) con fracciones que contienen sootepenseona, y

(e) opcionalmente, purificar mediante recristalización.

4. Un proceso para la elaboración de un compuesto conforme a la fórmula I de la reivindicación 1, donde R^{1} es un contra-catión seleccionado del grupo consistente en un ión metálico alcalino o alcalino-terreo tal como Li+, Na+, K+, Ca++, Mg++, NR^{16}R^{17}R^{18}R^{19}(+) donde R^{16} a R^{19} son independientemente entre sí un átomo de hidrógeno, o un residuo alquilo-C_{1-6}; y R^{2} y R^{3} forman parte del enlace doble-C^{17}=C^{18}, que comprende hacer reaccionar un compuesto conforme a la fórmula 1 de la reivindicación 1, donde R^{1} es un anión de hidrógeno, con como mínimo un equivalente de una base orgánica o inorgánica adecuada, mediante métodos conocidos per se, para obtener la correspondiente sal de fenolato.

5. Un proceso para la elaboración de un compuesto conforme a la fórmula I de la reivindicación 1, donde R^{1} tiene el significado que se define en la reivindicación 1 y donde R^{2} y R^{3} son cada uno un átomo de hidrógeno, comprendiendo el paso de hacer reaccionar un compuesto conforme a la reivindicación 1, donde R_{1} tiene el significado que se define en la reivindicación 1 y donde R_{2} y R_{3} forman parte del enlace doble -C^{17}=C^{18}, con hidrógeno en presencia o ausencia de un catalizador adecuado mediante un método conocido per se.

6. Un proceso para elaborar un compuesto conforme a la fórmula 1 de la reivindicación 1, donde R^{1} es un grupo metilo (-CH_{3}), un residuo alquilo C_{2}-C_{6}, un grupo formilo (-CHO), un residuo acetilo (-COCH_{3}), un residuo -CO-alquil-C_{2-6}, CO-cicloalquil-C_{3-8}, -CO-aril-C_{6-18} o -CO-aralquil-C_{7-24}, teniendo cada uno de ellos opcionalmente uno o más sustituyentes seleccionados del grupo consistente en -OH, -SH, -NH_{2}, NH-alquil-C_{1-6}, -N(alquil-C_{1-6})_{2}, -NH-aril-C_{6-14}, -N(aril-C_{6-14})_{2}, -N(alquil-C_{1-6}) (aril-C_{6-14}), -NHCOR^{2}, -NO_{2}, -CN, -(CO)R^{3}, -(CS)R^{4}, -F, -Cl, -Br, -I, -O-alquil-C_{1-6}, -O-aril-C_{6-14}, -O-(CO)R^{5}, -S-alquil-C_{1-6}, -S-aril-C_{6-14}, -SOR^{6} y -SO_{2}R^{7}, donde R^{2} a R^{7} son independientemente entre sí un átomo de hidrógeno, residuo alquil-C_{1-6}, -O-alquil-C_{1-6}, -O-aril-C_{6-14}, -NH_{2}, -NH-alquil-C_{1-6}-, -N(alquil-C_{1-6})_{2}, -NH-aril-C_{6-14}, -N(aril-C_{6-14})_{2}, -N(alquil-C_{1-6})(aril-C_{6-14}), -S-alquil-C_{1-6}, -S-aril-C_{6-14};

un residuo -COO-alquil-C_{1-6} que tiene opcionalmente uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en -OH, -SH, -NH_{2}, NH-alquil-C_{1-6}, -N(alquil-C_{1-6})_{2}, -NH-aril-C_{6-14}, -N(aril-C_{6-14})_{2}, -N(alquil-C_{1-6},)(aril-C_{6-14}),
-NHCOR^{8}, -NO_{2}, -CN, -(CO)R^{9}, -(CS)R^{10}, -F, -Cl, -Br, -I, -O-alquil-C_{1-6},-O-aril-C_{6-14}, -O-(CO)R^{11}, -S-alquil-C_{1-6},
-S-aril-C_{6-14}, -SOR^{12} y -SO_{2}R^{13}, donde R^{8} a R^{13} son independientemente entre sí un átomo de hidrógeno, residuo alquil-C_{1-6}, -O-alquil-C_{1-6}, -O-aril-C_{6-14}, -NH_{2}, -NH-alquil-C_{1-6}-, -N(alquil-C_{1-6})_{2}, -NH-aril-C_{6-14}, -N(aril-C_{6-14})_{2} -N(alquil-C_{1-6}) (aril-C_{6-14}), -S-alquil-C_{1-6}, -S-aril-C_{6-14};

un residuo -CONR^{14}R^{15} donde R^{14} y R^{15} son independientemente entre sí un átomo de hidrógeno, residuo alquil-C_{1-6}, -O-alquil-C_{1-6}, -O-aril-C_{6-14}, -NH_{2}, -NH-alquil-C_{1-6}-, -N(alquil-C_{1-6})_{2}, -NH-aril-C_{6-14}, -N(aril-C_{6-14})_{2} -N(alquil-C_{1-6}) (aril-C_{6-14}), -S-alquil-C_{1-6}, -S-aril-C_{6-14}; y donde R^{2} y R^{3} forman parte del enlace doble C^{17}=C^{18} o son cada uno un átomo de hidrógeno, que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto conforme a la reivindicación 1, donde R_{1} es un contra-catión seleccionado del grupo consistente en un ión metálico alcalino o alcalino-térreo tal como Li+, Na+, K+, Ca++, Mg++, NR^{16}R^{17}R^{18}R^{19}(+) donde R^{16} a R^{19} son, independientemente entre sí, un átomo de hidrógeno, o un residuo alquil-C_{1-6}, con un reactivo alquilante o acilante adecuado, en presencia o ausencia de una base, mediante un método conocido per se.

7. Un compuesto conforme a la fórmula I de la reivindicación 1 ó 2 para su uso como medicamento.

8. Un compuesto conforme a la fórmula I de la reivindicación 1 o de la reivindicación 2 para su uso como agente anticanceroso.

9. Un medicamento para su uso en el tratamiento de enfermedades humanas o animales, que contiene como mínimo un compuesto conforme a la fórmula I de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, opcionalmente junto a vehículos, diluyentes y/o excipientes aceptables fisiológicamente comúnmente utilizados.

10. Un medicamento para su uso en el tratamiento de enfermedades cancerosas humanas o animales, que contiene como mínimo un compuesto conforme a la fórmula I de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, opcionalmente junto a vehículos, diluyentes y/o excipientes aceptables fisiológicamente comúnmente utilizados.

11. La utilización de un compuesto conforme a la fórmula I de la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para la elaboración de un medicamento para el tratamiento de enfermedades humanas o animales.

12. La utilización de un compuesto conforme a la fórmula I de la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para la elaboración de un medicamento para el tratamiento del cáncer.

13. Un proceso para la elaboración de un medicamento conforme a las reivindicaciones 9 ó 10, caracterizado porque se procesan uno o más compuestos conforme a la fórmula I de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, opcionalmente junto a vehículos, diluyentes y/o excipientes aceptables fisiológicamente comúnmente utilizados para lograr una forma farmacéutica adecuada.

14. Un compuesto conforme a la fórmula I de la reivindicación 1, obtenible mediante el proceso que se indica en cualquiera de las reivindicaciones 3 a 6.