ES2217011T3 - Acidos de lupulo usados para inhibir staphylococcus aureus. - Google Patents

Abstract

Procedimiento in vitro para mejorar la actividad de fertilización de los espermatozoides, en particular para aumentar la movilidad de los espermatozoides, que comprende el tratamiento de los espermatozoides in vitro con un inhibidor de fosfatidilinositol-3 kinasa (PI3K), 1. Uso de un compuesto seleccionado entre los ácidos hexahidro- beta, las sales de hexahidro-beta, los ácidos tetrahidro- iso-alfa, las sales de tetrahidro-iso-alfa y sus mezclas en la preparación de un medicamento tópico que afecta al crecimiento de Staphylococcus aureus en la zona vaginal, en el que el compuesto está presente en el medicamento en una cantidad efectiva para matar, inhibir o controlar de otra manera el crecimiento o proliferación de S. aureus sin impedir el crecimiento de Lactobacillus.

Description

Ácidos de lúpulo usados para inhibir Staphylococcus aureus.

Antecedentes del invento

El presente invento se refiere al empleo de compuestos que afectan al crecimiento de ciertas especies bacterianas. Más específicamente, el presente invento se refiere al empleo de los ácidos tetrahidro-iso-alfa o ácidos hexahidro-beta a concentraciones eficaces para matar, inhibir o controlar de otra manera el crecimiento o proliferación de
Staphylococcus aureus sin impedir el crecimiento de Lactobacillus, en la fabricación de un medicamento tópico para tratar enfermedades asociadas con infecciones e infestaciones de S. aureus, es decir, del síndrome de choque tóxico, sin desorganizar la flora bacteriana normal en el área de su aplicación.

El síndrome de choque tóxico (toxic shock syndrome, TSS) es una enfermedad conocida comúnmente, causada por S. aureus. TSS es una enfermedad grave, inducida por toxina, resultado de la exposición a la toxina de S. aureus denominada toxina-1 del síndrome de choque tóxico (TSST-1) (Iandolo, Ann. Rev. of Micro. 43:275-402, 1989). La enfermedad se caracteriza por un comienzo repentino de síntomas, que incluyen fiebre elevada, escalofríos, erupciones cutáneas, vómitos o diarrea y una caída rápida de la presión sanguínea que conduce a un choque.

Se ha descrito que el síndrome de choque tóxico ocurre tanto en hombres como en mujeres de todas las edades, con una incidencia aproximada de dos casos anuales por cada 10.000 personas. Sin embargo, el TSS se observa más comúnmente en mujeres menstruantes, en las que el lugar primario de infección es la vagina. La evidencia epidemiológica sugiere, especialmente, que las mujeres que emplean tampones altamente absorbentes incurren en mayor riesgo de desarrollar la enfermedad, dado que el tampón altamente absorbente sirve de ambiente adecuado para el crecimiento de S. aureus. Se ha publicado también que el TSS ocurre en bebés, niños, hombres y mujeres no menstruantes, pero con una frecuencia menor. Generalmente estos casos no están asociados con el uso de tampones, pero resultan de heridas en la piel o infecciones en otras partes del cuerpo. El empleo de anticonceptivos de barrera también se ha implicado como otro factor de riesgo.

Debido al repentino comienzo de la enfermedad, algunas personas que padecen el TSS no pueden recibir la intervención médica adecuada antes de que resulten complicaciones graves. Tales complicaciones pueden incluir fallo renal, fallo cardiaco, fallo hepático y de choque profundo. Por consiguiente, se hace un gran énfasis en la prevención de la enfermedad. Por ejemplo, se advierte a las mujeres contra el uso de tampones de alta absorbencia. Sin embargo, muchas mujeres no están dispuestas a sacrificar la comodidad y la conveniencia del empleo de tampones de alta absorbencia por lo que ellas perciben como un riesgo remoto de desarrollar TSS. Por tanto, se está llevando a cabo un esfuerzo considerable dirigido hacia el desarrollo de nuevos tampones capaces de reducir el riesgo de contraer TSS en comparación con los tampones convencionales.

Se han propuesto varias aproximaciones para evitar el síndrome de choque tóxico por el empleo de tampones. Uno de tales métodos incluye incorporar agentes bactericidas o bacteriostáticos (es decir, antibióticos o fenol) dentro del tampón para inhibir el crecimiento de S. aureus. Otros métodos incluyen la incorporación de agentes que evitan la producción de la TSST-1 o inactivan la TSST-1. Por ejemplo, la patente de EE.UU. nº 4.405.323 describe la incorporación de un agente antibacteriano, tal como povidona yodada, mercurio, zinc, penicilina, eritromicina y nitrofurazona, dentro de un tampón para prevenir TSS. La patente de EE.UU. nº 4.431.427 describe la incorporación de un ácido soluble en agua (es decir, ácido cítrico, glicólico, málico, tartárico o láctico) en un tampón en una cantidad suficiente para mantener un pH de 4,5 o menor en los fluidos absorbidos por el tampón a fin de inhibir el crecimiento de bacterias patógenas. La publicación PCT WO 86/05388 describe que la inclusión de un catión divalente no tóxico, tal como magnesio, bario, calcio, estroncio o similar, en una almohadilla absorbente tiene el efecto de inhibir la producción de TSST-1 por S. aureus. La patente de EE.UU. nº 4.585.792 describe que el ácido L-ascórbico puede suministrarse en un tampón a la zona vaginal a fin de inactivar las toxinas asociadas con TSS. La patente de EE.UU. nº 5.389.374 describe que puede inhibirse la producción de enterotoxinas de S. aureus exponiendo a la bacteria a un material absorbente tratado o con un mono- o con un diéster de alcohol alifático polihidroxilado.

Aunque el empleo de algunos de estos métodos se ha mostrado eficaz en la inhibición del crecimiento de S. aureus y TSS, su empleo también puede resultar problemático. Por ejemplo, exponer una población bacteriana a antibióticos puede seleccionar mutantes resistentes al antibiótico y disminuir la eficacia del antibiótico en el tratamiento de infecciones futuras. Además, la inclusión de antibióticos convencionales probablemente dará como resultado un aumento considerable del coste para el consumidor. Por otra parte, el empleo de antibióticos o de otros agentes bactericidas o bacteriostáticos puede tener el efecto indeseable de desorganizar la flora normal presente en la zona vaginal, lo que finalmente daría como resultado el inicio de otras infecciones y enfermedades bacterianas. Por ejemplo, Lactobacillus es una de las bacterias predominantes entre la flora vaginal normal. La administración de un compuesto que inhiba Lactobacillus puede también tener el efecto añadido de promover el establecimiento de otros microorganismos menos deseables que también están presentes en la vagina. Por ejemplo, un número bajo de Candida albicans puede estar presente en la vagina de muchas mujeres asintomáticas sanas. La administración de un compuesto que inhiba el crecimiento de Lactobacillus puede tener también el efecto añadido de permitir crecer y predominar a C. albicans, lo que daría como resultado una infección por levaduras.

Sería ventajoso, por tanto, disponer de un método para evitar TSS que no afecte a la flora bacteriana normal, que no permita la selección de bacterias resistentes a antibiótico y que no dé como resultado un aumento sustancial del coste global para el consumidor. En particular, lo que se necesita es un método relativamente económico para inhibir el crecimiento de S. aureus sin impedir el crecimiento de Lactobacillus o de otra microflora normal.

Breve compendio del invento

El presente invento se resume en que se describen ciertos compuestos que son capaces de afectar al crecimiento de Staphylococcus aureus, sin impedir el crecimiento de Lactobacillus, cuando se aplican a ciertas concentraciones. Estos compuestos se seleccionan entre ácidos tetrahidro-iso-alfa, ácidos hexahidro-beta y sus sales, mezclas o combinaciones. Por consiguiente, el presente invento proporciona el empleo de un compuesto seleccionado entre ácidos hexahidro-beta, sales hexahidro-beta, ácidos tetrahidro-iso-alfa, sales tetrahidro-iso-alfa y sus mezclas en la producción de un medicamento tópico que afecte al crecimiento de Staphylococcus aureus en la zona vaginal, en el que el compuesto está presente en el medicamento en una cantidad eficaz para matar, inhibir o controlar de otra manera el crecimiento o proliferación de S. aureus sin impedir el crecimiento de Lactobacillus. Una cantidad eficaz de tales compuestos, por ejemplo, incluye una concentración en el intervalo de 0,2 ppm a 25 ppm o, más preferiblemente, en el intervalo de 0,5 ppm a 12,5 ppm.

El medicamento puede ser un producto que contenga un material absorbente y el compuesto. El material puede incluir, por ejemplo, material de fibra de celulosa tal como los que se usan típicamente en los productos de higiene femenina (es decir, compresas femeninas, tampones, etc.), o los que se emplean para absorber fluidos corporales o para aplicar compuestos empleados para evitar o tratar infecciones bacterianas.

El medicamento puede incluir también una composición que contenga un vehículo aceptable farmacéuticamente y el compuesto. El vehículo puede incluir, por ejemplo, ungüentos o lavados tópicos formulados para facilitar la administración eficaz del compuesto.

Otros objetos, ventajas y características del presente invento se mostrarán evidentes a partir de la siguiente descripción detallada y ejemplos.

Descripción detallada del invento

El presente invento describe compuestos que, cuando se aplican a la zona vaginal a ciertas concentraciones, afectan al crecimiento de Staphylococcus aureus sin impedir el crecimiento de Lactobacillus. Los compuestos se seleccionan entre ácidos tetrahidro-iso-alfa, ácidos hexahidro-beta, sus sales y sus mezclas y pueden combinarse con varios materiales o vehículos para formar productos y composiciones apropiadas para facilitar una administración eficaz. El presente invento también describe empleos de los compuestos en la producción de un medicamento que prevenga o trate la infección o infestación por S. aureus en la zona vaginal sin desorganizar la flora normal de Lactobacillus en la zona vaginal.

Los inventores han descubierto que los ácidos de lúpulo tetrahidro-iso-alfa y hexahidro-beta presentan, inesperadamente, distintos efectos bactericidas o bacteriostáticos frente a Lactobacillus comparado con S. aureus. Específicamente, Lactobacillus y S. aureus muestran un nivel diferente de sensibilidad a los ácidos tetrahidro-iso-alfa y hexahidro-beta, siendo S. aureus más sensible que Lactobacillus. En consecuencia, ahora es posible inhibir selectivamente S. aureus sin impedir el crecimiento de Lactobacillus al poner en contacto S. aureus con una cantidad de ácido tetrahidro-iso-alfa o hexahidro-beta que inhibe de manera eficaz S. aureus, mientras permite seguir creciendo a Lactobacillus.

La realización principal del presente invento es proporcionar el uso de un compuesto seleccionado entre los ácidos tetrahidro-iso-alfa, los ácidos hexahidro-beta, sus sales y sus mezclas en la producción de un medicamento para inhibir la infección o infestación por S. aureus poniendo en contacto la zona vaginal con el medicamento. Se pone en contacto la zona vaginal con una concentración eficaz del compuesto que mata, inhibe o controla de otra manera el crecimiento o proliferación de S. aureus sin impedir el crecimiento de Lactobacillus. En la realización preferida, se expone la proximidad de S. aureus a una concentración efectiva del compuesto en un intervalo de 0,2 ppm a 25 ppm y, más preferiblemente, en el intervalo de 0,5 ppm a 12,5 ppm.

Según se emplea en esta memoria, el término "compuesto" pretende incluir los ácidos hexahidro-beta, las sales hexahidro-beta, los ácidos tetrahidro-iso-alfa, las sales tetrahidro-iso-alfa y sus mezclas o combinaciones.

Para afectar al crecimiento de S. aureus el compuesto debe ponerse en contacto con la zona vaginal bien independientemente o bien como parte de una composición o producto en el que la composición o producto contenga una cantidad efectiva del compuesto de acuerdo con el presente invento. En otra realización, el compuesto puede disponerse en capas o revestirse sobre un anticonceptivo de tipo barrera, tal como un diafragma o una esponja anticonceptiva que se coloca en la zona vaginal.

Según se emplea en esta memoria, el término "producto" incluye aquellos productos capaces de, bien inherentemente o bien en virtud de la manera en la que están reunidos, absorber líquidos tales como agua, orina, fluidos menstruales, sangre y similares. Tales productos incluyen, por ejemplo, productos catemeniales (p.ej., tampones), supositorios, pañales desechables y compresas higiénicas, además de otros tipos de tampones destinados para uso médico y/o quirúrgico. Productos que, de acuerdo con el presente invento, pueden prepararse de acuerdo a métodos conocidos para la producción de tales productos. En general, los productos deben prepararse para permitir que una cantidad eficaz del compuesto utilizado se ponga en contacto con la zona vaginal.

En una realización, el producto comprende un material absorbente y una cantidad de compuesto que mata, inhibe o controla de otra forma y de manera eficaz el crecimiento o proliferación en el entorno de S. aureus. Según se emplea en esta memoria, el término "material absorbente" incluye, sin limitaciones, fibras naturales o fibras sintéticas, películas, espumas, pasta de madera, turba de musgo, polímeros superabsorbentes y similares que sean capaces de, bien inherentemente o bien en virtud de la manera en que se han reunido, absorber líquidos, tales como agua, orina, fluidos menstruales, sangre y similares.

El término "composición" incluye las composiciones capaces de, bien inherentemente o bien en virtud de su formulación, emplearse como un ungüento tópico o irrigación vaginal. Las composiciones pueden formularse de acuerdo a métodos conocidos para la preparación de composiciones útiles farmacéuticamente. Las formulaciones se describen en detalle en varias fuentes que son bien conocidas y fácilmente disponibles para los expertos en la técnica. Por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Science, por E. W. Martin, describe formulaciones que pueden usarse en conexión con el presente invento. En general, las composiciones deben formularse de tal manera que una cantidad eficaz del compuesto utilizado se combine con el vehículo apropiado para facilitar una administración eficaz.

En una realización, la composición consiste en una irrigación vaginal para matar, inhibir o controlar de otra forma el crecimiento o proliferación de S. aureus en la vagina. Esto es particularmente útil para proporcionar un tratamiento a una mujer que le ayude a luchar contra una infección o infestación de S. aureus que puede causarle el síndrome de choque tóxico. Alternativamente, la composición puede formularse como un ungüento tópico.

Ejemplos

Se han llevado a cabo ensayos de concentración inhibitoria mínima (CIM) de varios compuestos de lúpulo mediante el empleo de especies de Staphylococcus aureus y de aislados vaginales de Lactobacillus vaginalis, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus gasseri y Lactobacillus jensenii como microorganismos de ensayo. Los ensayos de Lactobacillus se llevaron a cabo en tubos de caldo MRS (Difco) para Lactobacillus. Se añadió una alícuota de 0,1 ml de una disolución 1% (p/p) de cada ácido de lúpulo en alcohol a un tubo de caldo MRS estéril para dar una concentración final de 100 ppm del compuesto de lúpulo. Esta disolución se diluyó consecutivamente en tubos con caldo MRS estéril empleando una serie de diluciones dobles. Una segunda serie de diluciones preparadas como anteriormente, pero empleando 0,1 ml de alcohol sin ácido de lúpulo, se utilizó como control positivo de crecimiento bacteriano. Cada tubo se inoculó con un cultivo fresco de (10^{4} células) de una especie de Lactobacillus en caldo MRS. Los cultivos se incubaron anaeróbicamente en un incubador de CO_{2} a 28ºC durante cinco días. El crecimiento se evaluó por valoración visual y registro del desarrollo de turbidez en el tubo de caldo.

Los ensayos CIM para Staphylococcus aureus se llevaron a cabo en caldo tripticasa de soja de Difco (TSB) empleando la misma técnica de dilución consecutiva y un nivel de inóculo como el descrito anteriormente. El pH del TSB se ajustó a pH 7,0, pH 6,0 o pH 5,0 mediante el empleo de ácido clorhídrico. Los tubos se incubaron aeróbicamente a 37ºC durante tres días y el crecimiento se evaluó por valoración visual y se registró el desarrollo de turbidez en el caldo.

Los resultados del ensayo CIM de los ácidos tetrahidro-iso-alfa y ácidos hexahidro-beta en S. aureus y Lactobacillus se muestran en las Tablas 1 y 2, respectivamente. Según se ilustra por comparación de las Tablas 1 y 2, resulta evidente que S. aureus es mucho más sensible a los ácidos tetrahidro-iso-alfa y a los ácidos hexahidro-beta que las especies de Lactobacillus analizadas. En particular, Lactobacillus mostró un fuerte crecimiento a concentraciones de ácido hexahidro-beta y ácido tetrahidro-iso-alfa tan altas como 12,5 ppm. En contraste, S. aureus no mostró, o lo hizo muy débilmente, crecimiento en ácido tetrahidro-iso-alfa y ácido hexahidro-beta a concentraciones tan bajas como 1,56 ppm. La sensibilidad de S. aureus también parece aumentar bajo condiciones ácidas, con la concentración inhibitoria mínima disminuyendo a 0,78 ppm a pH 6,0 y a menos de 0,2 ppm a pH 5,0. Normalmente, el pH de la vagina está en el intervalo de aproximadamente 4,5 a 5,0.

TABLA 1

1

TABLA 2

2

Claims (8)

1. Uso de un compuesto seleccionado entre los ácidos hexahidro-beta, las sales de hexahidro-beta, los ácidos tetrahidro-iso-alfa, las sales de tetrahidro-iso-alfa y sus mezclas en la preparación de un medicamento tópico que afecta al crecimiento de Staphylococcus aureus en la zona vaginal, en el que el compuesto está presente en el medicamento en una cantidad efectiva para matar, inhibir o controlar de otra manera el crecimiento o proliferación de S. aureus sin impedir el crecimiento de Lactobacillus.

2. El uso de la reivindicación 1, en el que la cantidad del compuesto está en el intervalo de 0,2 ppm a 25 ppm.

3. El uso de la reivindicación 1 ó 2, en el que el medicamento es un producto que comprende un material absorbente y el compuesto.

4. El uso de la reivindicación 3, en el que el material absorbente se selecciona entre una fibra natural, una fibra sintética, una película, una espuma, una pasta de madera, una turba de musgo y un polímero superabsorbente.

5. El uso de la reivindicación 3 ó 4, en el que el producto se selecciona entre un tampón, un supositorio, un pañal desechable y una compresa higiénica.

6. El uso de la reivindicación 1 ó 2, en el que el medicamento es una composición que contiene un vehículo aceptable farmacéuticamente y el compuesto.

7. El uso de la reivindicación 1 ó 2, en el que la composición es bien una irrigación o un ungüento tópico.

8. El uso de la reivindicación 1 ó 2, en el que el medicamento es una barrera anticonceptiva.