ES2206519T3

ES2206519T3 - Inhibicion del crecimiento del pelo.

Info

Publication number: ES2206519T3
Application number: ES95935068T
Authority: ES
Inventors: Gurpreet S. Ahluwalia; Douglas Shander; Peter Styczynski
Original assignee: Gillette Co LLC
Current assignee: Gillette Co LLC
Priority date: 1994-09-28
Filing date: 1995-09-21
Publication date: 2004-05-16
Anticipated expiration: 2015-09-21
Also published as: MX9702272A; EP0783292B1; DE69532167D1; AU3723095A; JP2001525789A; EP0783292A1; WO1996009806A2; ZA958145B; AU700683B2; CA2200851A1; DE69532167T2; ATE254443T1; JP3810435B2; US5554608A; CA2200851C

Abstract

SE REDUCE EL CRECIMIENTO DEL PELO EN LOS MAMIFEROS MEDIANTE LA APLICACION A LA PIEL DE UNA COMPOSICION QUE INCLUYE UN INHIBIDOR DE PROTEINA QUINASA C.

Description

Inhibición del crecimiento del pelo.

La invención se refiere a un método para reducir el crecimiento del pelo no deseado en los mamíferos y con un método cosmético para este propósito.

Una de las principales funciones del pelo de los mamíferos es el de ofrecerles una protección contra el medio ambiente. No obstante, dicha función ha perdido ampliamente su valor en los seres humanos, en quienes el pelo se conserva o se elimina de diversas partes del cuerpo, esencialmente por cuestiones cosméticas. Por ejemplo, generalmente se prefiere tener pelo en el cuero cabelludo pero no en el rostro.

Se han empleado varios procedimientos para eliminar el pelo no deseado, entre los que se incluyen el rasurado, la electrólisis, las cremas o lociones depilatorias, la depilación con cera, la eliminación del pelo de raíz y los antiandrógenos terapéuticos. Estos procedimientos convencionales por lo general presentan desventajas. Por ejemplo, al rasurarse pueden producirse marcas y cortes, además de que se percibe un aumento en el índice de crecimiento del pelo. Rasurarse también puede dejar pelos incipientes. Por otro lado, si bien la electrólisis puede mantener el área tratada libre de pelo durante períodos prolongados, también puede resultar costosa, dolorosa y, a veces, deja cicatrices. Las cremas depilatorias, aunque son muy eficaces, por lo general no se recomiendan para uso frecuente debido a su alto potencial de causar irritación. La depilación con cera y la eliminación del pelo de raíz pueden causar dolor, molestias y ser ineficientes para eliminar el pelo corto. Por último, los antiandrógenos -que se pueden usar para tratar el hirsutismo femenino- pueden presentar efectos secundarios no deseados.

El documento de patente JP-A-2.273.610 describe un inhibidor de la proteína cinasa, tal como la N-(2-amino: etil)-5-isoquinolin-sulfonamida, para promover el crecimiento del pelo y tratar la calvicie.

El documento de patente JP-A-1.238.515 describe un tónico capilar que controla el comportamiento del Ca en las células del cuero cabelludo, que contiene, por ejemplo, fenotiazina para remediar la calvicie, prevenir la alopecia y proporcionar un efecto sobre el crecimiento del pelo.

El documento de patente JP-A-62.298.513 describe una composición que contiene un compuesto tal como el ácido glicirretínico para promover el crecimiento del pelo.

El documento de patente EP-A-0.470.490 describe compuestos que son inhibidores de la proteína cinasa, para tratar una amplia variedad de enfermedades, tales como la artritis y el asma, y para estimular el crecimiento del pelo a fin de prevenir o reprimir la calvicie.

En Cancer Chemother Pharmacol (1987) 20: 291-296, el conocido efecto de la caída del cabello en los seres humanos tratados con el fármaco doxorrubicina se usó para desarrollar un modelo animal para combatir la pérdida de cabello inducida por los fármacos anticancerígenos. Se demostró que la administración endovenosa de doxorrubicina durante tres semanas a unos conejos Angora resultaba en la pérdida del pelo y la inhibición del crecimiento de pelo nuevo.

En Annals of Oncology 5: 769-770, 1994 se describió el estudio de Minoxidil -un N-óxido de pirimidina conocido para usar en la inducción del crecimiento del pelo en pacientes con calvicie de patrón masculino- para determinar su eficacia en la prevención de la alopecia inducida por la doxorrubicina. Los resultados del estudio no pudieron demostrar ninguna actividad significativa.

Anteriormente se había descrito que el índice y la naturaleza del crecimiento del pelo se pueden modificar aplicando a la piel inhibidores de ciertas enzimas. Éstos incluyen los inhibidores de la 5-alfa reductasa, ornitina-descarboxilasa, S-adenosilmetionina-descarboxilasa, gama-glutamil-transpeptidasa y trans-glutaminasa. Véanse, por ejemplo, Breuer y colaboradores, Patente de los Estados Unidos No. 4.885.289; Shander, Patente de los Estados Unidos No. 4.720.489; Ahluwalia, Patente de los Estados Unidos No. 5.095.007; Ahluwalia y colaboradores, Patente de los Estados Unidos No. 5.096.911; Shander y colaboradores, Patente de los Estados Unidos No. 5.132.293; y Shander y colaboradores, Patente de los Estados Unidos No. 5.143.925.

Ahora se ha descubierto que es posible inhibir el crecimiento del pelo no deseado de los mamíferos (incluso el de los humanos) -particularmente el crecimiento del pelo estimulado por los andrógenos- mediante la aplicación a la piel de una composición que incluya un inhibidor de la proteína cinasa C ("PKC", Protein Kinase C) en una cantidad eficaz para reducir el crecimiento del pelo. El crecimiento del pelo no deseado que se reduce puede ser el crecimiento normal del pelo o bien, el crecimiento del pelo que resulta de una condición anormal o una enfermedad. Por lo tanto, la presente invención se refiere al tema principal que se define en las reivindicaciones 1 a 10.

La PKC es una familia de enzimas dependiente de los fosfolípidos, sensible al calcio, que tiene la aptitud de fosforilar las proteínas. La PKC incluye un sitio de enlace la ATP, un sitio de enlace de calcio y una región que interactúa con el fosfolípido. Los inhibidores preferidos de la PKC incluyen aquellos inhibidores que interactúan con uno ó más de estos sitios de enlace específicos.

Entre los inhibidores de la PKC que se pueden utilizar se encuentran: (1) las sulfonamidas de isoquinolina, tales como 1-(5-isoquinolinil sulfonil)-2-metilpiperizina, y sus derivados (J. Biol. Chem. 264: 810-815, 1989); (2) bisindolilmaleimidas, tales como el monohidrocloruro de 3-[1-(3 dimetilamino)propil]-1H-indol-3-il]-4-(1H-indol-3-il)-1H-pirrol-2,5-diona (GF1092038), Ro 31-7549, y derivados de Ro 31-7549 (Biochem. J. 294: 335-337, 1993; J. Biol. Chem. 266: 15771-15781, 1991; y J. Invest. Dermatol. 100: 240-246, 1993); (3) derivados de fenotiazina, tales como tioridazina, trifluoperazina y triflucarbina (J. Dermat. Sci. 4: 18-25, 1992; y J. Biol. Chem. 255: 8378-8380, 1980); (4) lisoesfingolípidos, tales como esfingosina y derivados de esfingosina (Science 235:670-674, 1987; y Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 32:377-397, 1992); (5) estaurosporina y derivados de estaurosporina, tales como 7-oxoestaurosporina y 11-hidroxiestaurosporina (Carcinogenesis 13: 355-359, 1992; J. Antibiot. 45:195-198, 1992; y J. Org. Chem. 57:6327-6329, 1992); (6) verapamil, fentolamina e imipramina (J. Biol. Chem. 255: 8378-8380, 1980); (7) 6-palmitato de ácido L-ascórbico (Cancer Res. 47:6633-6638, 1987); (8) glicósido de ácido glicirretínico y ácido 18\beta-glicirretínico (Cancer Letters 49:9-12, 1990); (9) polimixina B, sangivamicina y doxorrubicina-Fe(III) (J. Dermat. Sci. 4:18-25, 1992; J. Biol. Chem. 263:1682-1692, 1988; y Trends in Pharmacol. Sci. 12: 188-194, 1991); (10) el producto fungal, balanol, aislado del Verticillium balanoides (J. Am. Chem. Soc. 115: 6452-6453, 1993); (11) indolocarbazoles sustituidos (Bioorg. Med. Chem. Let. 3:1959-1964, 1993); (12) 2-(aminometil)piperidinas (J. Med. Chem. 34:2928-2931, 1991); (13) curcumina (FEES Letters 341: 19-22, 1994); (14) 4-propil-5(4-piridinil)-2-(3H)-oxazolona (Cancer Research 52: 1195-1200, 1992); y (15) decualinio (Trends in Pharmacol. Sci. 12: 188-194, 1991). Los inhibidores pueden ser irreversibles o reversibles (competitivos y no competitivos).

El inhibidor de PKC se incorpora preferiblemente en una composición tópica, la cual incluye un vehículo o material portador no tóxico dermatológicamente aceptable que se adapta para ser extendido sobre la piel. Los ejemplos de los vehículos adecuados son acetona, alcoholes o una crema, loción, o gel que pueda liberar eficazmente el compuesto activo. Uno de dichos vehículos se describe en la Publicación PCT co-pendiente WO 94/21217. Además, es posible añadir un intensificador de la penetración al vehículo para optimizar aún más la eficacia de la formulación.

La concentración del inhibidor en la composición puede variar en una amplia gama, hasta una solución saturada, preferiblemente, entre 0,1% y 30% en peso o incluso, más; la reducción del crecimiento del pelo aumenta a medida que aumenta la cantidad de inhibidor aplicado por área unitaria de la piel. La cantidad máxima eficazmente aplicada está limitada sólo por la proporción a la cual el inhibidor penetra en la piel. Por lo general, las cantidades eficaces fluctúan entre 100 y 3000 microgramos o más por centímetro cuadrado de piel.

La composición debe aplicarse tópicamente a aquella área seleccionada del cuerpo de la cual se desea inhibir el crecimiento del pelo. Por ejemplo, la composición puede aplicarse en el rostro, en particular, en la zona donde crece la barba -es decir, la mejilla, el cuello, el bozo y el mentón. La composición también se puede aplicar a las piernas, brazos, torso o axilas. La composición resulta particularmente adecuada para reducir el crecimiento del pelo indeseado en las mujeres que sufren de hirsutismo u otras enfermedades. En los seres humanos, la composición debe aplicarse una o dos veces al día, o incluso con una frecuencia mayor, durante al menos tres meses para lograr una reducción notable en el crecimiento del pelo. La reducción en el crecimiento del pelo se demuestra cuando se reduce la frecuencia de eliminación del pelo (por rasurado, eliminación de raíz, uso depilatorio, depilación con cera), o si el individuo nota que hay menos pelo en el sitio tratado, o cuantitativamente, cuando el peso del pelo que se elimina por rasurado (es decir, la masa capilar) se reduce. Entre los beneficios obtenidos a través de una eliminación del pelo menos frecuente se incluyen la conveniencia y una menor irritación de la piel.

Se considera que los hámsteres sirios dorados intactos, macho, son modelos aceptables para el crecimiento del pelo de la barba de los humanos, porque presentan órganos de la ijada con forma ovalada, uno a cada lado, siendo la medida de cada uno de ellos de 8 mm en su diámetro mayor. Allí, el pelo que crece es denso, áspero y negro, similar al pelo de la barba humana. En el hámster estos órganos producen pelo en respuesta a los andrógenos. Para evaluar la eficacia de un inhibidor de la PKC en particular, se depilan los órganos de la ijada de cada uno de un grupo de hámsteres aplicando un producto depilatorio basado en tioglicolato (Surgex). A un órgano de cada animal, se aplican 10-25 \mul del vehículo solo, una vez por día, mientras que al otro órgano de cada animal se aplica una cantidad igual del vehículo que contiene un inhibidor de la PKC. Luego de trece aplicaciones (una aplicación por día, durante cinco días a la semana), los órganos de la ijada se rasuran y se pesa la cantidad de pelo recuperada (masa capilar) de cada uno de ellos. Se calcula el porcentaje de reducción del crecimiento del pelo restando el valor de la masa capilar (mg) del lado tratado con el compuesto de prueba, del valor de la masa capilar del lado tratado con el vehículo; el valor delta obtenido luego se divide por el valor de la masa del pelo del lado tratado con el vehículo y el número resultante se multiplica por 100.

El ensayo antes descrito se denominará en el presente ensayo del "hámster sirio dorado". Las composiciones preferidas proveen una inhibición en el crecimiento del pelo de por lo menos 35% aproximadamente, más preferiblemente, de al menos 50% aproximadamente, y lo más preferiblemente, de al menos 70% aproximadamente cuando se somete a prueba en el ensayo del hámster sirio dorado.

Un número de inhibidores de PKC se sometieron a prueba en el ensayo del hámster sirio dorado; los resultados se presentan en la Tabla I.

1

La actividad de la PKC se comprobó en los folículos pilosos aislados de los órganos de la ijada, usando un equipo comercial para ensayos que se obtiene de GIBCO BRL (Gaithersburg, MD). El ensayo se basa en la fosforilación de (incorporación de ^{32}-P en) la proteína básica acetilada con mielina. Luego del aislamiento, los folículos pilosos del órgano de la ijada se lavaron en solución salina amortiguada con fosfato y se homogenizaron en una solución amortiguadora que contenía Tris 20 mM, pH 7,5, EDTA 0,5 mM, Triton X-100 al 0,5%, \beta-mercaptoetanol 10 mM, y 25 \mug/cada uno de los inhibidores de la proteasa, aprotinina y leupeptina. El homogenado de folículos pilosos se añadió a la mezcla de reacción de la PKC a una concentración final de 10-20 \mug/ensayo. El ensayo también incluía solución amortiguadora, H_{2}O, fosfolípido. El ensayo se llevó a cabo en presencia o ausencia de inhibidores de PKC seleccionados. El volumen de la mezcla de reacción fue de 50 \mul, el sustrato ^{32}P-ATP se añadió en un volumen de 10 \mul. La reacción procedió a 32º durante 15 minutos, luego de lo cual se extrajo una alícuota de 16,3 \muL de la mezcla de reacción y se diseminó sobre un filtro de papel. Los filtros se lavaron dos veces en ácido fosfórico al 1% con una agitación suave durante 5 minutos. Luego los filtros se lavaron dos veces en H_{2}O y se colocaron en viales de centelleo. La incorporación de ^{32}P, una medición de la actividad enzimática, se determinó usando técnicas de centelleo líquido estándar. Se observó una inhibición significativa con la tioridazina (inhibición del 30% a 500 \muM) y trifluoperazina (inhibición del 42% a 500 \muM) -que, según se cree, interfieren con el sitio de enlace de los fosfolípidos- como así también con H-7, el más selectivo de los inhibidores de PKC y antagonista del sitio de enlace de la ATP. Se produjo una inhibición del 86% de la fosforilación debido a la inhibición de la actividad de la PKC a 200 \muM H-7. La inhibición de la actividad de la PKC fue de casi el 100% con el glicósido del ácido glicirretínico (glicirricina) a 200 \muM; y del 52% con el ácido 18\beta-glicirretínico a 500 \muM.

Claims

1. Un método cosmético para inhibir el crecimiento del pelo de los mamíferos, que comprende:

seleccionar un área de la piel en la que se desea reducir el crecimiento del pelo; y

aplicar a dicha área de la piel una composición de un inhibidor de la proteína cinasa C, en una cantidad eficaz para reducir el crecimiento del pelo.

2. El método de acuerdo con la reivindicación 1, en el que dicho inhibidor es verapamil, tioridazina, curcumina, trifluoperazina, 1-(5-isoquinolinilsulfonil)2-metilpiperazina, 6-palmitato de ácido L-ascórbico, glicósido de ácido glicirretínico, ácido 18\beta-glicirretínico, imipramina, fentolamina, una sulfonamida de isoquinolina, una bisindolilmaleimida, un derivado de fenotiazina, un lisoesfingolípido, una estaurosporina, polimixina B, sangivamicina, doxorrubicina-Fe (III), balanol, un indolocarbazol sustituido, una 2-(aminometil) piperidina, 4-propil-5(4-piridinil)-2-(3H)-oxazolona, o decualinio.

3. El método de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, en el que dicho inhibidor interactúa con: (a) el sitio de enlace de la ATP en la PKC, (b) el sitio de enlace del calcio en la PKC, o (c) la región en la PKC que interactúa con el fosfolípido.

4. El método de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, en el que dicho inhibidor es un inhibidor irreversible.

5. El método de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, en el que la concentración de dicho inhibidor en la citada composición está entre el 1% y el 30%, y/o la composición se aplica a la piel en una cantidad de entre 100 y 3000 microgramos de dicho inhibidor por centímetro cuadrado de piel y/o la composición se aplica a la piel sobre el rostro de dicho mamífero.

6. El método de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, en el que la composición provee una reducción en el crecimiento del pelo de por lo menos el 30% cuando se somete a prueba en el ensayo del hámster sirio dorado, preferiblemente, de al menos el 50%, más preferiblemente, de al menos el 70%.

7. El método de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, en el que dicho mamífero es un ser humano.

8. El uso de un inhibidor de la proteína cinasa C, para la fabricación de un medicamento para inhibir el crecimiento del pelo en los mamíferos.

9. El uso de acuerdo con la reivindicación 8, en el que dicho medicamento emplea un vehículo o material portador no tóxico, dermatológicamente aceptable, adaptado para ser extendido sobre la piel de un mamífero.

10. Un uso de acuerdo con la reivindicación 8, en el que dicho inhibidor es verapamil, tioridazina, curcumina, trifluoperazina, 1-(5- isoquinolinilsulfonil)2-metil-piperazina, 6-palmitato de ácido L-ascórbico, glicósido de ácido glicirretínico, ácido 18\beta-glicirretínico, imipramina, fentolamina, una sulfonamida de isoquinolina, una bisindolilmaleimida, un derivado de fenotiazina, un lisoesfingolípido, una estaurosporina, polimixina B, sangivamicina, doxorrubicina-Fe (III), balanol, un indolocarbazol sustituido, una 2-(aminometil) piperidina, 4-propil-5 (4- piridinil)-2-(3H)-oxazolona, o decualinio.