EA049429B1 - Ингибиторы репликации норовируса и коронавируса - Google Patents

Description

Область техники

Данное изобретение в целом относится к ингибиторам репликации норовируса и коронавируса и к способам лечения или профилактики норовируса и коронавируса путем введения ингибиторов пациенту, нуждающемуся в их лечении.

Уровень техники

Норовирусы являются важными кишечными патогенами, вызывающими вспышки небактериального гастроэнтерита во всем мире. Норовирусы в основном передаются от человека к человеку фекальнооральным путем, а также через зараженную пищу или воду. Косвенное заражение также возможно из-за персистенции вируса в окружающей среде. Норовирусы человека принадлежат к роду Norovirus, семейству Caliciviridae и представляют собой безоболочечные вирусы с одноцепочечным геномом РНК с положительным смыслом. Штаммы норовируса подразделяются на семь групп. Вирусы, принадлежащие к группам GI, GII и GIV, инфицируют людей, в то время как NoV групп GII, GIII, GIV, GV, GVI и GVII были описаны у животных.

Коронавирусы представляют собой семейство распространенных вирусов, которые вызывают у людей целый ряд заболеваний от обычной простуды до тяжелого острого респираторного синдрома (SARS). Коронавирусы также могут вызывать ряд заболеваний у животных. Коронавирусы представляют собой оболочечные РНК-вирусы с цепью с положительной полярностью, название которых происходит от их характерного коронообразного вида на электронных микрофотографиях. Коронавирусы классифицируются как семейство внутри порядка Nidovirales, вирусы, которые реплицируются с использованием вложенного набора мРНК. Подсемейство коронавирусов подразделяется на четыре рода: альфа-, бета-, гамма- и дельта-коронавирусы. Коронавирусы человека (HCoV) относятся к двум из этих родов: альфакоронавирусы (включая HCoV-229E и HCoV-NL63) и бета-коронавирусы (включая HCoV-HKU1, HCoVОС43, коронавирус ближневосточного респираторного синдрома (MERS-CoV), коронавирус тяжелого острого респираторного синдрома (SARS-CoV) и SARS-CoV-2).

В 2012 году в Саудовской Аравии появился новый коронавирус, получивший название коронавирус ближневосточного респираторного синдрома (MERS-CoV). Около половины зарегистрированных случаев заражения MERS-CoV закончились смертью, и большинство зарегистрированных случаев произошло у мужчин старшего и среднего возраста. Лишь небольшое количество зарегистрированных случаев касалось субъектов с легким респираторным заболеванием. Было обнаружено, что передача MERS-CoV от человека к человеку возможна, но очень ограничена. Еще один новый коронавирус появился в Ухане, Китай, в конце 2019 года. Данный вирус известен как SARS-CoV-2, 2019-nCoV, или Уханьский коронавирус, и он стал причиной всемирной пандемии в конце 2019 и 2020 гг.

Учитывая широкое распространение и потенциальное воздействие данных вирусов на здоровье, существует потребность в препаратах для лечения норовирусной и коронавирусной инфекций.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение, в общем, относится к способам лечения норовирусной и коронавирусной инфекций, к способам ингибирования репликации норовирусов и коронавирусов, к способам уменьшения количества норовирусов и коронавирусов, а также к соединениям и композициям, которые могут применяться для таких способов.

В данном изобретении предложены соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли:

где Z представляет собой О, NR¹ или связь; каждый RN независимо представляет собой Н или C1-6алкил; R¹ представляет собой C5-8карбоциклил, необязательно замещенный C_1-6алкилен-С_6-10арилом, или 5-8-членный N-гетероцикл, в котором кольцевой атом азота необязательно замещен СОО-С_1-6алкилом; R² представляет собой C1-6алкил, С1-6алкилен-С5-8карбоциклил, 4-10-членный гетероциклил, имеющий 1-3 гетероатома в кольце, выбранных из N, О и S, C1-6алкилен-C6-10арил или C0-6алкилен-5-10-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, где C1-6алкилен необязательно замещен 1-3 R⁷, и карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C1-6алкокси, C_1-6алкила, C_1-6галогеналкила, C_1-6алкилен-C_6-10арила, О-C_1-6алкилен-C_6-10арила и CO₂C_1-6алкила; R³ представляет собой C1-6алкил, C2-6алкенил, C2-6алкинил, C1-6алкилен-C5-8карбоциклил, C0-6алкилен-C6-10арил, необязательно замещенный 1-2 атомами галогена, или боковую цепь аминокислоты; каждый R⁴ независимо представляет собой галоген, ОН, CN, C1-6алкил, C_1-6галогеналкил, C_1-6алкил-ОН, C_2-6алкенил, C_2-6алкинил, C_1-6алкокси, C_3-6алкилоксиалкил, оксо (=O), NR^ASO2R^B, SO2NR^AR^B, COORA, С_0-4алкилен-С_6-10арил, С_0-4алкилен-(5-12-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S), или С_0-4алкилен-(4-12-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S); и арил, гетероарил и гетероцикл необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C_1-6алкила и СОО-C_1-6алкила, или два R⁴ с углеродом или атомами углерода, к которым они присоединены, объединяются с образованием спиро или конденсированного 3- 1 049429

12-членного карбоциклического или гетероциклического кольца, имеющего 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, которое необязательно замещено 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C₁.₆αлкила, C₁.₆алкилен-О-C₁.₆алкила, С(О)-C₁.₆алкила, SO₂-Cl.₆алkuла, С(О)-C₁.₆алкила и СООC₁.₆αлкила; R⁵ представляет собой C1.6алкилен-OH, C1.6αлкилен-OH, замещенный РО(ОСН2СН2)2, C1.6aлкилен-ОН, замещенный SO3H, -[С(О)]1.2-(4-8-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S), -[C(O)]1_2-NR^NR^N, C(O)-Y-H или -[C(O)]1_₂-NRⁿ-Y-X-A, где А представляет собой Н, C3.8карбоциклил, 4-12-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, C6.10арил или 5-8-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, и карбоциклил, гетероциклил, арил или гетероарил необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C1.6αлкила и СОО-C1.6алкила; Y представляет собой связь, C1. 6алкилен, C1.6алкилен-О-C1.6алкилен или C1.6алкенилен, где C1.6αлкилен и C1.6алкенилен необязательно замещены 1-3 заместителями, независимо выбранными из галогена, ОН, NRⁿRⁿ и C1.₆αлкокси; X представляет собой связь, NRⁿRⁿ, C(O), SO2 или ОС(О); каждый R⁶ независимо представляет собой Н, C1.₆aлкилен-ОН, C₁.₆алкилен-ОН, замещенный РО(ОСН₂СН₂)₂, C₁.₆алкилен-ОН, замещенный SO3H, CHO или С(О)-(4-8-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S); каждый R⁷ независимо представляет собой галоген, C1.6галогеналкил, С2_6алкенил, C3.5карбоциклил или C0.6αлкилен-C6.10арил и C6.10арил необязательно замещен 1-2 атомами галогена, или два R⁷ с углеродом или атомами углерода, к которым они присоединены, объединяются с образованием спиро или конденсированного С3_₆карбоциклильного кольца; каждый RA и R^B независимо представляют собой Н, C1.6αлкил, C1.6галогеналкил, C1.6αлкокси, С2_6алкенил, С2_6алкинил, C3.6циклоaлкил, C0.6алкилен-C6.10арил, Co-6алкилен-5-8-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S; n равно 0-3; m равно 0-5; и о равно 0-5. В некоторых вариантах осуществления Z представляет собой О или NR¹; каждый R^N независимо представляет собой Н или C1.₆алкил; R¹ представляет собой C5.8карбоциклил, необязательно замещенный C1.6αлкилен-C6.10арилом, или 5-8-членный N-гетероцикл, в котором азот в кольце необязательно замещен СОО-C1.6αлкилом; R² представляет собой C1.₆алкил, C1₆алкилен-С₅_₈карбоциклил, C₁.₆αлкилен-С₆.₁₀арил или C₁.₆αлкилен-5-10-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, где C₁.₆aлкилен необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из C₁.₆галогеналкила и С₂_₆алкенила, и карбоциклил, арил и гетероарил необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C₁.₆αлкокси, C₁.₆алкила, C₁.₆галогеналкила и CO₂C₁.₆αлкила; R³ представляет собой C1.6алкил, С2_6алкенил, С2_6алкинил, C1.6αлкилен-С5.12карбоциклил, C0.6алкилен-C6.10арил, или боковую цепь аминокислоты; каждый R⁴ независимо представляет собой галоген, ОН, CN, C1.₆алкил, C₁.₆галогеналкил, С1-₆алкил-ОН, С_2-6алкенил, С_2-6алкинил, C₁.₆aлкокси, С₃_₆алкилоксиалкил, оксо (=O), NR^ASO2R^b, SO2NR^AR^b, COORA, С0_4алкилен-С6_10арил, С0_4алкилен-(5-12-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S), или С0_4алкилен-(4-8-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S); и арил, гетероарил и гетероцикл необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C1.6алкила и СОО-C1.6алкила, или два R⁴ с углеродом или атомами углерода, к которым они присоединены, объединяются с образованием спиро-или конденсированного 512-членного карбоциклического или гетероциклического кольца, имеющего 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, который необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C1.₆алкила, C(O)-C₁.₆алкила и COO-C₁.₆αлкила; R⁵ представляет собой C1.6αлкилен-OH, C1.6алкилен-OH, замещенный РО(ОСН2СН2)2, C1.6алкилен-OH, замещенный SO3H, CHO, С(О)-(4-8членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S), CONR^NR^N или C(O)C(O)NRⁿ-Y-X-A, где А представляет собой С5_₈карбоциклил, 4-12-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, C₆.₁₀арил или 5-8-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, и карбоциклил, гетероциклил, арил или гетероарил необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C₁.₆алкила и СОО-C₁.₆αлкила; Y представляет собой C₁.₆αлкилен, необязательно замещенный 1-3 заместителями, независимо выбранными из галогена, ОН, NRⁿRⁿ и C1.6aлкокси; X равно нулю, NRⁿRⁿ, С(О), SO2 или OC(O); каждый R⁶ независимо представляет собой Н, C1.₆алкилен-ОН, C₁.₆алкилен-ОН, замещенный РО(ОСН₂СН₂)₂, C₁.₆алкилен-ОН, замещенный SO₃H, CHO или С(О)-(4-8-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S); каждый RA и R^B независимо представляют собой Н, C₁.₆αлкил, C₁.₆галогеналкил, C₁.₆αлкокси, С₂_₆алкенил, С₂_₆алкинил, C₃.₆циклоaлкил, C₀.₆алкилен-C₆.₁₀арил, C₀.₆алкилен-5-8-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S; n равно 0-3; m равно 0-5; и о равно 0-5.

Кроме того, предусмотрены способы введения биологическому образцу или пациенту безопасного и эффективного количества соединения, как описано в данном документе, например, соединения, представленного формулой I, или соединения из табл. А, В или С.

В данном документе также предложены способы снижения количества вируса в биологическом образце или у пациента путем введения указанному биологическому образцу или пациенту эффективного количества соединения, как описано в данном документе, например, соединения, представленного формулой I, или соединения из табл. А, В или С.

- 2 049429

Кроме того, предложены способы лечения или профилактики вирусной инфекции у пациента, включающие введение указанному пациенту эффективного количества соединения, как описано в данном документе, например, соединения, представленного формулой I, или соединения из табл. А, В или С.

Также предложены фармацевтические композиции, содержащие соединение, описанное в данном документе, например, представленное формулой I, или соединение из табл. А, В или С, или его фармацевтически приемлемую соль, и фармацевтически приемлемый эксципиент, носитель, адъювант или несущую среду.

В данном изобретении также предложены способы применения соединения, описанного в данном документе, для ингибирования репликации вирусов гриппа в биологическом образце или у пациента, для уменьшения количества вирусов в биологическом образце или у пациента, или для лечения вирусной инфекции у пациента.

В данном документе также предложено применение соединения, описанного в данном документе, для изготовления лекарственного средства для лечения вирусной инфекции у пациента, для уменьшения количества вируса в биологическом образце или у пациента, или для ингибирования репликации вируса в биологическом образце или у пациента.

Подробное описание сущности изобретения

В данном документе предложены соединения и их применение для лечения или профилактики вирусной инфекции (например, норовирусной или коронавирусной инфекции). Также предложены способы применения соединений, описанных в данном документе, или их фармацевтически приемлемых солей, или фармацевтически приемлемых композиций, содержащих такое соединение или его фармацевтически приемлемую соль, для ингибирования репликации вирусов в биологическом образце или у пациента, для уменьшения количества вирусов (снижение титра вируса) в биологическом образце или у пациента, а также для лечения вирусной инфекции у пациента.

Если не указано иное, структуры, изображенные в данном документе, также подразумевают включение всех изомерных (например, энантиомерных, диастереомерных, цис-транс, конформационных и ротационных) форм структуры. Например, конфигурации R и S для каждого асимметричного центра, (Z) и (Е) изомеры по двойной связи, и (Z) и (Е) конформационные изомеры включены в данное раскрытие, если только конкретно не указан только один из изомеров. Следовательно, отдельные стереохимические изомеры, а также смеси энантиомеров, диастереомеров, цис/транс, конформационных и ротационных изомеров данных соединений входят в объем данного изобретения. В некоторых случаях раскрытые в данном документе соединения являются стереоизомерами. Стереоизомеры относятся к соединениям, которые отличаются хиральностью одного или более стереоцентров. Стереоизомеры включают энантиомеры и диастереомеры. Раскрытые в данном документе соединения могут существовать в виде одного стереоизомера или в виде смеси стереоизомеров. Стереохимия соединений, проиллюстрированных в данном документе, указывает на относительную стереохимию, а не на абсолютную, если не указано иное. Как указано в данном документе, один стереоизомер, диастереомер или энантиомер относится к соединению, которое составляет по меньшей мере более 50% указанного стереоизомера, диастереомера или энантиомера, и в некоторых случаях по меньшей мере 90% или 95% указанного стереоизомера, диастереомера или энантиомера.

Если не указано иное, все таутомерные формы соединений по данному изобретению входят в объем данного изобретения.

Дополнительно, если не указано иное, структуры, изображенные в данном документе, также подразумевают включение соединений, которые отличаются только присутствием одного или более изотопнообогащенных атомов. Например, соединения, имеющие данные структуры, за исключением замены водорода дейтерием или тритием или замены углерода ¹³С- или ¹⁴С-обогащенным углеродом входят в объем данного изобретения. Такие соединения пригодны, например, в качестве аналитических инструментов или зондов в биологических анализах. Такие соединения, особенно аналоги дейтерия, также могут быть терапевтически пригодными.

Соединения по данному изобретению определяются в данном документе их химическими структурами и/или химическими названиями. В случае, если соединение упоминается как согласно его химической структуре, так и согласно химическому названию, а химическая структура и химическое название конфликтуют, химическая структура является определяющей для идентичности соединения.

Соединения

В данном документе предложены соединения формулы (I) или их фармацевтически приемлемая соль:

где Z представляет собой О, NR¹ или связь; каждый RN независимо представляет собой Н или С1-6алкил; R¹ представляет собой С5-8карбоциклил, необязательно замещенный С_1-6алкилен-С_6-10арилом

- 3 049429 или 5-8-членный N-гетероцикл, причем атом азота в кольце необязательно замещен СОО-С_1-6алкилом; R² представляет собой С1-6алкил, С1_6алкилен-С5_8карбоциклил, 4-10-членный гетероциклил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, С1.6αлкuлен-C6.10арил или C0.6алкилен-5-10-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, причем С1-6алкилен необязательно замещен 1-3 R⁷, и карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, С1-6алкокси, С_1-6алкила, С₁-₆галогеналкила, С₁.₆алкuлен-C₆.₁₀арuла, О-С₁.₆алкилен-C₆.₁₀арила и CO₂C₁.₆αлкuлα; R³ представляет собой С1-6алкил, С2-6алкенил, С2_6алкинил, С1.6алкилен-C5.8карбоцuклил, C0.6алкилен-C6.10арил, необязательно замещенный 1-2 галогенами, или боковую цепь аминокислоты; каждый R⁴ независимо представляет собой галоген, ОН, CN, С1-6алкил, С₁-₆галогеналкил, С_1-6алкил-ОН, C₂.₆алкенил, C₂.₆алкинил, С_1-6алкокси, C₃.₆aлкилоксиалкил, оксо (=O), NR^ASO2R⁶, SO2NR^AR^B, COORA, C0.4алкилен-С6.10арил, C0.4алкилен-(5-12 членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S), или C0.4αлкилен-(412-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S); и арил, гетероарил и гетероцикл необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C1.6алкила и COO-C1.6алкила, или два R⁴ с углеродом или атомами углерода, к которым они присоединены, объединяются с образованием спиро- или конденсированного 3-12-членного карбоциклического или гетероциклического кольца, имеющего 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, которое необязательно замещено 1-2 заместителями, независимо выбранных из галогена, C1.₆алкила, C₁.₆αлкuлен-ОC₁.₆алкила, С(О)-C₁.₆алкила, SO₂-C₁.₆αлкuлα, С(О)-C₁.₆алкила и СОО-C₁.₆алкила; R⁵ представляет собой C1.6αлкилен-ОН, C1.6алкилен-ОН, замещенный РО(ОСН2СН2)2, C1.6алкилен-ОН, замещенный SO3H, -[С(О)]1-2-(4-8-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S), -[c(o)]1_2-NRⁿRⁿ, C(O)-Y-H или -[C(O)]1_₂-NRⁿ-Y-X-A, где А представляет собой Н, C3.8карбоциклил, 412-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, C6.10арил или 5-8членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, и карбоциклил, гетероциклил, арил или гетероарил необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C1.6алкила и СОО-C1.6алкила; Y представляет собой связь, C1.6алкилен, C1.6αлкилен-OC1.6алкилен или C1.6алкенилен, где C1.6αлкилен и C1.6алкенилен необязательно замещены 13 заместителями, независимо выбранными из галогена, ОН, NRⁿRⁿ и C1.₆алкокси; X представляет собой связь, NRⁿRⁿ, C(O), SO2 или ОС(О); каждый R⁶ независимо представляет собой Н, C1.₆алкилен-ОН, C₁.₆αлкилен-ОН, замещенный РО(ОСН₂СН₂)₂, C₁.₆алкилен-ОН, замещенный SO₃H, CHO или С(О)-(4-8членный гетероцикл, содержащий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S); каждый R⁷ независимо представляет собой галоген, C1.6галогеналкил, С2-6алкенил, C3.5карбоциклил или C0-6αлкилен-C6.10арил и С6-10арил необязательно замещен 1-2 галогенами, или два R⁷ с углеродом или атомами углерода, к которым они присоединены, объединяются с образованием спиро- или конденсированного C3.₆карбоциклильного кольца; каждый R^A и R^B независимо представляет собой Н, C₁.₆алкил, C₁.₆галогеналкил, C₁.₆алкокси, С_2-6алкенил, С_2-6алкинил, C₃.₆циклоалкил, C₀.₆алкилен-C₆.₁₀арил, С₀-₆алкилен-5-8-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S; n равно 0-3; m равно 0-5; а также о равно 0-5.

В некоторых вариантах осуществления Z представляет собой О или NR¹; каждый R^N независимо представляет собой Н или C1.6αлкил; R¹ представляет собой С5_₈карбоциклил, необязательно замещенный C₁.₆aлкилен-C₆.₁₀арилом, или 5-8-членный N-гетероцикл, в котором азот в кольце необязательно замещен СОО-C₁.₆aлкилом; R² представляет собой C1.6алкил, C1.6алкилен-С5.8карбоциклил, C1.6алкилен-С6.10арил или C1.6алкилен-5-10-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, где C1.6алкилен необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из C1.6галогеналкила и С2-6алкенила, и карбоциклил, арил и гетероарил необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C1.6αлкокси, C1.6алкила, C1.6галогеналкила и CO2C1.6αлкила; R³ представляет собой C1.₆алкил, С_2-6алкенил, С_2-6алкинил, C₁.₆алкилен-С₅.₈карбоциклил, C₀.₆αлкилен-С₆.₁₀арил, или боковую цепь аминокислоты; каждый R⁴ независимо представляет собой галоген, ОН, CN, C₁.₆αлкил, C₁.₆галогеналкил, C₁.₆αлкил-ОН, С_2-6алкенил, С_2-6алкинил, C₁.₆алкокси, С₃_₆алкилоксиалкил, оксо (=O), NR^ASO2R^B, SO2NR^AR^B, COORA, С₀_₄алкилен-С₆_₁₀арил, С₀_4алкилен-(5-8членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S), или C₀.₄αлкилен-(48-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S); и арил, гетероарил и гетероцикл необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C₁.₆алкила и COO-C₁.₆αлкила, или два R⁴ с углеродом или атомами углерода, к которым они присоединены, объединяются с образованием спиро- или конденсированного 5-12-членного карбоциклического или гетероциклического кольца, имеющего 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, который необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C1.6алкила, C(O)-C1.6алкила и COO-C1.6αлкила; R⁵ представляет собой C1.₆алкилен-OH, C₁.₆αлкилен-OH, замещенный РО(ОСН₂СН₂)₂, C₁.₆aлкилен-OH, замещенный SO₃H, CHO, С(О)-(4-8-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S), CONRNRN или C(O)-C(O)NRⁿ-Y-X-A, где А представляет собой С₅_₈карбоциклил, 4-12-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, С₆_₁₀арил или 5-8-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, и

- 4 049429 карбоциклил, гетероциклил, арил или гетероарил необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C₁.₆алкила и COO-C₁.₆αлкила; Y представляет собой C₁.₆алкилен, необязательно замещенный 1-3 заместителями, независимо выбранными из галогена, ОН, NRⁿRⁿ и C1.6алкокси; X равно нулю, NRNRN, С(О), SO2 или OC(O); каждый R⁶ независимо представляет собой Н, C1.₆алкилен-OH, C₁.₆αлкилен-ОН, замещенный РО(ОСН₂СН₂)₂, C₁.₆алкилен-ОН, замещенный SO₃H, CHO или С(О)-(4-8членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S); каждый R^A и R^B независимо представляют собой Н, C₁.₆алкил, C₁.₆галогеналкил, C₁.₆алкокси, С₂_₆алкенил, С₂_₆алкинил, С₃_₆циклоалкил, C₀.₆αлкилен-С₆.₁₀арил, С₀.₆алкилен-5-8-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S; n равно 0-3; m равно 0-5; и о равно 0-5.

Используемый в данном документе термин алкил означает насыщенный углеводород с прямой или разветвленной цепью. Термин C_n означает, что алкильная группа содержит n атомов углерода. Например, С₄-алкил относится к алкильной группе, содержащей 4 атома углерода. C₁.₆αлкил относится к алкильной группе, имеющей атомы углерода в количестве, охватывающем весь диапазон (т.е. от 1 до 8 атомов углерода), а также все его подгруппы (например, 1-6, 2-6, 1-5, 2-6, 1-4, 2-5, 1, 2, 3, 4, 5 и 6 атомов углерода). Конкретные примеры включают, но не ограничиваются ими, метил, этил, изопропил, нпропил, втор-бутил и трет-бутил.

Используемый в данном документе термин галоген относится к F, Cl, Br или I.

Термин карбоцикл (или карбоциклил) относится к неароматической моноциклической, конденсированной, мостиковой или спироциклической системе, кольцевые атомы которой представляют собой углерод и которые могут быть насыщенными или иметь одну или более единиц ненасыщенности. Карбоцикл может иметь от пяти до восьми атомов углерода в кольце. В некоторых вариантах осуществления изобретения, число атомов углерода составляет от 5 до 6. В некоторых вариантах осуществления изобретения число атомов углерода составляет 6. Конденсированные бициклические кольцевые системы содержат два кольца, которые имеют два соседних кольцевых атома. Мостиковые бициклические группы включают два кольца, которые имеют три или четыре соседних кольцевых атома. Спиробициклические кольцевые системы имеют один кольцевой атом. Циклоалкильные группы могут включать циклоалкенильные группы. Конкретные примеры включают, но не ограничиваются ими, циклогексил, циклопентенил, циклопропил и циклобутил. Карбоциклическое кольцо является незамещенным или замещенным, как описано в данном документе.

Термин гетероцикл, используемый в данном документе, относится к неароматической моноциклической, конденсированной, спиро- или мостиковой кольцевой системе, которая может быть насыщенной или содержать одно или более единиц ненасыщенности, имеющей от пяти до восьми кольцевых атомов, в которой один или более (например, от одного до трех, или один, два или три) кольцевых атома представляет собой гетероатом, выбранный из N, S и О. N-гетероцикл означает, что по меньшей мере один из кольцевых гетероатомов представляет собой атом азота. В некоторых вариантах осуществления гетероцикл содержит 5-6 кольцевых членов. В некоторых вариантах осуществления гетероцикл содержит 5 кольцевых членов. В некоторых вариантах осуществления гетероцикл содержит 6 кольцевых членов. В некоторых вариантах осуществления гетероцикл представляет собой пиперидинил. Примеры гетероциклов включают, но не ограничиваются ими, хинуклидинил, пиперидинил, пиперизинил, пирролидинил, пиразолидинил, имидазолидинил, азепанил, диазепанил, триазепанил, азоканил, диазоканил, триазоканил, оксазолидинил, изоксазолидинил, тиазолидинил, изотиазолидинил, оксазоканил, оксазепанил, тиазепанил, тиазоканил, бензимидазолонил, тетрагидрофуранил, тетрагидротиофенил, морфолино (включая, например, 3-морфолино, 4-морфолино), 2-тиоморфолино, 3-тиоморфолино, 4-тиоморфолино, 1пирролидинил, 2-пирролидинил, 3-пирролидинил, пирролидин-2-он, 1-тетрагидропиперазинил, 2тетрагидропиперазинил, 3-тетрагидропиперазинил, 1-пиперидинил, 2-пиперидинил, 3-пиперидинил, 1пиразолинил, 3-пиразолинил, 4-пиразолинил, 5-пиразолинил, 1-пиперидинил, 2-пиперидинил, 3пиперидинил, 4-пиперидинил, 2-тиазолидинил, 3-тиазолидинил, 4-тиазолидинил, 1-имидазолидинил, 2имидазолидинил, 4-имидазолидинил, 5-имидазолидинил, индолинил, тетрагидрохинолинил, тетрагидроизохинолинил, бензотиоланил, бензодитианил, 3-(1-алкил)бензимидазол-2-онил и 1,3дигидроимидазол-2-онил. Кольцо гетероцикла является незамещенным или замещенным, как описано в данном документе.

Термин арил относится к ароматическим кольцевым группам, имеющим только кольцевые атомы углерода (обычно от шести до десяти), и включает моноциклические ароматические кольца, такие как фенил и конденсированные полициклические ароматические кольцевые системы, в которых два или более карбоциклических ароматических кольца конденсированы друг с другом. В некоторых вариантах осуществления арил представляет собой фенил. Арильное кольцо является незамещенным или замещенным, как описано в данном документе.

Термин гетероарил относится к гетероциклу, который является ароматическим, имеющим от пяти до восьми членов (например, от 5 до 6 членов), включая моноциклические гетероароматические кольца и полициклические ароматические кольца, в которых моноциклическое ароматическое кольцо конденсировано с одним или более другими ароматическими кольцами. Гетероарильные группы имеют один или более кольцевых (например, от 1 до 4, от 1 до 3, 1, 2, 3 или 4) гетероатомов, выбранных из N, О и S. Так

- 5 049429 же включены в объем термина гетероарил, как он используется здесь, представляет собой группу, в которой ароматическое кольцо конденсировано с одним или более неароматическими кольцами (карбоциклическими или гетероциклическими), где радикал или точка присоединения находится на ароматическом кольце. Примеры гетероарильных групп включают пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, имидазолил, пирролил, пиразолил, триазолил, тетразолил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазолил, тиазолил, изотиазолил или тиадиазолил, включая, например, 2-фуранил, 3-фуранил, N-имидазолил, 2имидазолил, 4-имидазолил, 5-имидазолил, 3-изоксазолил, 4-изоксазолил, 5-изоксазолил, 2-оксадиазолил, 5-оксадиазолил, 2-оксазолил, 4-оксазолил, 5-оксазолил, 3-пиразолил, 4-пиразолил, 1-пирролил, 2пирролил, 3-пирролил, 2-пиридил, 3-пиридил, 4-пиридил, 2-пиримидинил, 4-пиримидинил, 5пиримидинил, 3-пиридазинил, 2-тиазолил, 4-тиазолил, 5-тиазолил, 2-триазолил, 5-триазолил, тетразолил, 2-тиенил, 3-тиенил, изотиазолил, 1,2,3-оксадиазолил, 1,2,5-оксадиазолил, 1,2,4-оксадиазолил, 1,2,3триазолил, 1,2,3-тиадиазолил, 1,3,4-тиадиазолил, 1,2,5-тиадиазолил, пиразинил и 1,3,5-триазинил. Гетероарильное кольцо является незамещенным или замещенным, как описано в данном документе.

Используемый в данном документе термин боковая цепь аминокислоты относится к боковой цепи аминокислоты, например, метил для аланина, изопропил для валина, изобутил для лейцина, втор-бутил для изолейцина. Предполагаемые аминокислоты для боковых цепей включают аланин, аргинин, аспарагин, аспарагиновую кислоту, глутамин, глутаминовую кислоту, гистидин, изолейцин, лейцин, лизин, метионин, фенилаланин, серии, треонин, триптофан, тирозин и валин.

Как описано в данном документе, соединения по данному изобретению могут быть необязательно замещены одним или более заместителями, например, проиллюстрированными в целом ниже, или на примере конкретными классами, подклассами и видами в соответствии с данным изобретением. Понятно, что фраза необязательно замещенный используется взаимозаменяемо с фразой замещенный или незамещенный. Как правило, термин замещенный, предшествует ли ему термин необязательно или нет, относится к замене одного или более водородных радикалов в данной структуре радикалом указанного заместителя. Если не указано иное, необязательно замещенная группа может иметь заместитель в каждом замещаемом положении группы. Когда более чем одно положение в данной структуре может быть замещено более чем одним заместителем, выбранным из указанной группы, заместитель может быть одинаковым или различным в каждом положении.

В некоторых случаях по меньшей мере один R^N представляет собой Н. В некоторых случаях по меньшей мере один R^N представляет собой С1.6алкил. В некоторых случаях каждый R^N представляет собой Н. В некоторых случаях по меньшей мере один R^N представляет собой С1_6алкил, например, метил. В некоторых случаях каждый R^N представляет собой С_1-6алкил, например метил.

В некоторых случаях Z представляет собой О или NR¹. В некоторых случаях Z представляет собой О или связь. В некоторых случаях Z представляет собой О. В некоторых случаях Z представляет собой связь. В разнообразных случаях Z представляет собой NR¹. В некоторых случаях R¹ представляет собой С5-8карбоциклил, необязательно замещенный С1_6алкилен-С6_10арилом. В некоторых вариантах осуществления R¹ представляет собой С5-₈карбоциклил. В некоторых вариантах осуществления R¹ представляет собой С5_6карбоциклил. В некоторых случаях R¹ представляет собой циклопентил. В некоторых случаях R¹ представляет собой циклогексил. В некоторых случаях R¹ представляет собой С5_₈карбоциклил, замещенный С1.₆алкилен-С₆.₁₀арилом. В некоторых случаях R¹ представляет собой С5_6карбоциклил, замещенный С1.6алкилен-С6.10арилом. В некоторых случаях R¹ представляет собой С5-карбоциклил, замещенный С1.₆алкилен-С₆.₁₀арилом. В некоторых случаях R¹ представляет собой С6-карбоциклил, замещенный С1_6алкилен-С6_10арилом. В некоторых случаях R¹ представляет собой С5-карбоциклил, замещенный С1алкилен-С₆-₁₀арилом. В некоторых случаях R¹ представляет собой С6-карбоциклил, замещенный С1алкилен-С6-10арилом. В некоторых случаях R¹ представляет собой С5-₆карбоциклил, замещенный бензилом. В некоторых случаях R¹ представляет собой С5-карбоциклил, замещенный бензилом. В некоторых случаях R¹ представляет собой С6-карбоциклил, замещенный бензилом.

В некоторых случаях R¹ представляет собой 5-8-членный N-гетероцикл, где атом азота в кольце замещен СОО-С1_6алкилом. В некоторых случаях R¹ представляет собой 5-6-членный N-гетероцикл, где атом азота в кольце замещен СОО-С1_6алкилом. В некоторых случаях R¹ представляет собой 6-членный N-гетероцикл, где атом азота в кольце замещен СОО-С1_₆алкилом. В некоторых случаях R¹ представляет собой 6-членный N-гетероцикл, где азот кольца N-гетероцикла замещен СОО-трет-бутилом.

В некоторых случаях R² представляет собой С1_6алкил, С1.6алкилен-С5.8карбоциклил, 4-10-членный гетероциклил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, С1.6алкилен-С6.10арил, 5-10членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, или С1_6алкилен-6-10членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, где С1-6алкилен замещен 1-3 R⁷. В некоторых случаях R² представляет собой С1-6алкил. В некоторых случаях R² представляет собой метил. В некоторых случаях R² представляет собой С1_6алкилен-С6_10арил. В некоторых случаях R² представляет собой С1_6алкилен-С₆-арил. В некоторых случаях R² представляет собой бензил. В некоторых случаях R² представляет собой С1.6алкилен-С5.8карбоциклил. В некоторых случаях R² представляет собой 4-10-членный гетероциклил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S. В некоторых случаях R² представляет собой С1_6алкилен-6-10-членный гетероарил, имеющий 1-3

- 6 049429 кольцевых гетероатомы, выбранные из N, О и S. В некоторых случаях C₁.₆алкилен в R² замещен 1-3 R⁷. В некоторых случаях C1.6алкилен в R² замещен 1 R⁷. В некоторых случаях C1.₆алкилен в R² замещен 2 R⁷. В некоторых случаях C1.6алкилен в R² замещен 3 R⁷. В некоторых случаях C1.₆алкилен в R² является незамещенным. В некоторых случаях карбоциклил, гетероциклил, арил или гетероарил R² замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C1.6алкокси, C1.6алкила, C1.6галогеналкила, C16алкилен-С6-10арила, O-C1.6алкилен-С6_10арила и CO2C1.6алкила. В некоторых случаях карбоциклил, гетероциклил, арил или гетероарил R² замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C16алкокси, C_1-6алкила, C₁.₆галогеналкила и CO₂C₁.₆алкила. В некоторых случаях карбоциклил, гетероциклил, арил или гетероарил в R² является незамещенным.

В некоторых случаях R³ представляет собой C1-6алкил. В некоторых случаях R³ представляет собой С4-алкил. В некоторых случаях R² представляет собой. В некоторых случаях R³ представляет собой C1.6αлкилен-С5.8карбоциклил. В некоторых случаях R³ представляет собой C1.₆алкилен-С₆-карбоциклил. В некоторых случаях R³ представляет собой. В некоторых случаях R³ представляет собой С2_6алкилен-С2_6карбоциклил. В некоторых случаях R³ представляет собой C0.₆алкилен-С₆.₁₀арил. В некоторых случаях R³ представляет собой боковую цепь аминокислоты. В различных случаях боковая цепь аминокислоты представляет собой метил, изопропил, изобутил, втор-бутил, CH₂CH₂SCH₃, СН₂-индолил, бензил, СН₂ОН, СН(ОН)СН₃, CH2SH, СН₂-(4-ОН-фенил), CH₂C(O)NH₂, CH₂CH₂C(O)NH₂, СН2СООН, СН₂СН₂СООН, CH₂CH₂CH₂CH₂NH₂, CH₂CH₂CH₂NHC(NH)NH₂ или имидазолил.

В раскрытых в данном документе соединениях m равно 0-5. В разнообразных случаях m равно 0. В некоторых случаях m равно 1. В некоторых случаях m равно 2. В некоторых случаях m равно 3-5.

В некоторых случаях n равно 0. В некоторых случаях n равно 1, 2 или 3, или равно 1 или 2. В некоторых случаях каждый R⁴ независимо представляет собой C1.6алкил, оксо (=O), C0.4алкилен-С6.10арил, С0-4алкилен-(5-12-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S), или С0-4алкилен-(4-12-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S); и арил, гетероарил и гетероцикл необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C1.6алкила и СОО-C1.6αлкила. В некоторых случаях по меньшей мере один R⁴ представляет собой галоген, ОН, CN, C1.₆галогеналкил, C₁.₆αлкил-OH, С_2-6алкенил, С_2-6алкинил, C₁.₆алкокси, С_3-6алкилоксиалкил, NR^ASO2R^B, SO2NR^AR^B или COORA. В некоторых случаях два R⁴ объединяются с образованием спиро- или конденсированного 5-8-членного карбоцикла или гетероциклического кольца, имеющего 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, которое необязательно замещено 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C1.6αлкила, C1.6алкилен-О-C1.6алкила, С(O)-C1.6алкила, SO2-C1.6алкила, С(O)-C1.6алкила и COO-C1.6αлкила. В некоторых случаях два R⁴ объединяются с образованием спиро- или конденсированного 5-8-членного карбоцикла или гетероциклического кольца, имеющего 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, которое необязательно замещено 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C1.₆алкила, С(O)-C₁.₆алкила и COO-C₁.6αлкила. В некоторых вариантах осуществления n равно 1, и R⁴ представляет собой C1.6алкил, оксо (=O), С0_4алкилен-С6_10арил, С0-4алкилен-(5-12-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S), или С0-4алкилен-(4-12-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S); и арил, гетероарил и гетероцикл необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C1.6алкила и COO-C1.6алкила. В некоторых случаях n равно 2, и каждый R⁴ независимо представляет собой C1.₆алкил, оксо (=O), C₀.₄алкилен-С₆_₁₀арил, С₀-₄алкилен-(5-8членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S), или С _0-4алкилен-(48-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S); и арил, гетероарил и гетероцикл необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C₁.₆алкила и СОО-C₁.6алкила. В некоторых случаях n равно 2, и два R⁴ с углеродом или атомами углерода, к которым они присоединены, объединяются с образованием спиро- или конденсированного 5-12-членного карбоцикла или гетероциклического кольца, имеющего 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, которое необязательно замещено 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C1.6алкила, С(O)-C1.6αлкила и COO-C1.6αлкила. В некоторых случаях два R⁴ с углеродом, к которому они присоединены, образуют спиро-5-12-членный карбоцикл или гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, который необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C1.₆алкила, С(O)-C₁.₆αлkила и COO-C₁.₆αлкила. В некоторых случаях два R⁴ с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют конденсированный-5-12-членный карбоцикл или гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, который необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C₁.₆αлкила, С(O)-C₁.₆αлкила и COO-C₁.6αлкила.

В раскрытых в данном документе соединениях о равно 0-5. В некоторых случаях о равно 0. В некоторых случаях о равно 1 или 2. В разнообразных вариантах осуществления каждый R⁶ представляет собой Н. В некотором случае по меньшей мере R⁶ представляет собой C₁.₆алкилен-ОН, C₁.₆алкилен-ОН, замещенный РО(ОСН₂СН₂)₂, C₁.₆αлкилен-ОН, замещенный SO3H, СНО или С(О)-(4-8-членным гетероциклом, имеющим 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S).

В некоторых случаях R⁵ представляет собой C₁.₆aлкилен-ОН, C₁.₆алкилен-ОН, замещенный РО(ОСН₂СН₂)₂, C₁.₆алкилен-ОН, замещенный SO3H, -[С(О)]₁-₂-(4-8-членный гетероцикл, имеющий 1-3

- 7 049429 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S), [C(O)]_1-2-NRⁿRⁿ, C(O)-Y-H или C(O)-C(O)NRⁿ-Y-X-A, где А представляет собой Н, С3.8карбоциклил, 4-12-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, C6_10арил или 5-8-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, и карбоциклил, гетероциклил, арил или гетероарил необязательно замещен 1-2 заместителями, выбранными независимо из галогена, С1.балкила и СОО-C1_6αлкила. В некоторых случаях R⁵ представляет собой С1.балкилен-ОН, C₁_₆алкилен-ОН, замещенный РО(ОСН₂СН₂)₂, С1._балкилен-ОН, замещенный SO₃H, СНО, С(О)-(4-8-членным гетероциклом, имеющим 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S) или CONRⁿRⁿ. В некоторых случаях R⁵ представляет собой C1.6aлкилен-ОН. В некоторых случаях R⁵ представляет собой С1.балкилен-ОН, замещенный РО(ОСН₂СН₂)₂. В некоторых случаях R⁵ представляет собой С1.балкилен-ОН, замещенный SO3H. В некоторых случаях R⁵ представляет собой С1.балкилен-ОН, замещенный SO₃H. В некоторых случаях R⁵ представляет собой C(O)-Y-H. В некоторых случаях R⁵ представляет собой СНО. В некоторых случаях R⁵ представляет собой С(О)-(4-8-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S). В некоторых случаях R⁵ представляет собой С(О)-С(О)(4-8-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S). В некоторых случаях R⁵ представляет собой CONRⁿRⁿ. В некоторых случаях R⁵ представляет собой C(O)-C(O)NRⁿRⁿ.

В некоторых случаях R⁵ представляет собой C(O)-C(O)NRⁿ-Y-X-A, где А представляет собой Н, С3.8карбоциклил, 4-12-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О, и S, Сб.10арил или 5-8-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, и карбоциклил, гетероциклил, арил или гетероарил необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, С1.балкила и СОО-C1.6αлкила; Y представляет собой С1.балкилен, необязательно замещенный 1-3 заместителями, независимо выбранными из галогена, ОН, NRⁿRⁿ и С1.балкокси; и X равно нулю, NRⁿRⁿ, С(О), SO2 или ОС(О). В некоторых случаях А представляет собой Н, С5.8карбоциклил, 4-12-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О, и S, Сб.10арил или 5-8-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, и карбоциклил, гетероциклил, арил или гетероарил необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, С1.балкила и СОО-С1.балкила; Y представляет собой С1.балкилен, необязательно замещенный 1-3 заместителями, независимо выбранными из галогена, ОН, NRⁿRⁿ и С1.балкокси; и X равно нулю, NRⁿRⁿ, С(О), SO2 или ОС(О). В различных случаях R^N представляет собой Н. В разнообразных случаях Y представляет собой С1.балкилен. В некоторых случаях Y представляет собой связь, С1._балкилен или С1._балкенилен, где С1._балкилен и С1._балкенилен необязательно замещены 1-3 заместителями, независимо выбранными из галогена, ОН, NRⁿRⁿ и С1.балкокси. В некоторых случаях Y представляет собой С1.6алкилен, замещенный 1-3 (или 1) заместителем(ями), независимо выбранными из галогена, ОН, NRⁿRⁿ и С1.балкокси. В некоторых случаях X представляет собой связь. В некоторых случаях X представляет собой NRⁿRⁿ, С(О), SO2 или ОС(О). В разнообразных случаях А представляет собой С5.₈карбоциклил или С_б.₁₀арил и необязательно замещенный 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, С1._балкила и СОО-С1._балкила. В некоторых случаях А представляет собой 4-12-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, или 5-8-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, необязательно замещенные 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, С₁.₆алкила и СОО-С1._балкила. В некоторых случаях А включает пиридил (например, 2-пиридил).

В некоторых случаях каждый R⁷ независимо представляет собой галоген, С1.бгалогеналкил, С2.балкенил, С3.5карбоциклил или С0.балкилен-Сб.10арил и Сб.10арил необязательно замещен 1-2 галогенами. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере R⁷ представляет собой галоген. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере R⁷ представляет собой С1.бгалогеналкил. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере R⁷ представляет собой С2.бгалогеналкенил. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере R⁷ представляет собой С3.₅карбоциклил. В некоторых случаях по меньшей мере один R⁷ представляет собой С0.балкилен-Сб.10арил и Сб.10арил необязательно замещен 12 галогенами. В некоторых случаях по меньшей мере один R⁷ представляет собой С0._балкилен-С_б.₁₀арил и С_б.₁₀арил замещен 1-2 галогенами. В некоторых случаях по меньшей мере один R⁷ представляет собой С0.балкилен-Сб.10арил и Сб.10арил является незамещенным. В некоторых случаях по меньшей мере один R⁷ представляет собой фенил, необязательно замещенный 1-2 галогенами. В некоторых случаях по меньшей мере один R⁷ представляет собой фенил, необязательно замещенный 1 галогеном. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере R⁷ представляет собой хлорфенил. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере R⁷ представляет собой фенил. В некоторых случаях два R⁷ с углеродом или атомами углерода, к которым они присоединены, объединяются, образуя спиро- или конденсированное С3._бкарбоциклильное кольцо. В некоторых случаях два R⁷ с углеродом, к которому они присоединены, объединяются, образуя спиро-С₃._бкарбоциклильное кольцо. В некоторых случаях два R⁷ с атомами углерода, к которым они присоединены, объединяются, образуя конденсированное карбоциклильное кольцо С₃._б.

В некоторых случаях каждый RA и С1._бгалогеналкил, С1._балкокси, С₂._балкенил,

R^B независимо представляет собой Н, С₁._балкил, С₂._балкинил, С₃._бциклоалкил, С₀._балкилен-С_б.₁₀арил,

- 8 049429

С_0-6алкилен-5-8-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S. В некоторых случаях по меньшей мере один из R^A и R^B представляет собой Н. В некоторых случаях каждый из R^a и R^B представляет собой Н. В некоторых случаях по меньшей мере один из R^A и R^B представляет собой C1-6алкил. В некоторых случаях R^A представляет собой C1-6алкил. В некоторых случаях R^A представляет собой метил. В некоторых случаях R^B представляет собой О_1-6алкил. В некоторых случаях R^B представляет собой метил.

Предполагаемые конкретные соединения включают соединения в следующих таблицах. Соединения, иллюстрирующие конкретные стереоцентры, указывают по меньшей мере на относительную стереоизомерию. Соединения, имеющие хиральный центр без указания определенной стереоизомерии, указывают на смесь стереоцентров при данном хиральном центре.

Соединение может представлять собой соединение, указанное в табл. А, или его фармацевтически приемлемую соль.

Таблица А

- 9 049429

Соединение может представлять собой соединение, указанное в табл. В, или его фармацевтически приемлемую соль.

Таблица В

Соединение может представлять собой соединение, указанное в таблице С, или его фармацевтически приемлемую соль.

Таблица С

- 10 049429

- 11 049429

- 12049429

-13049429

- 14049429

- 15 049429

- 16 049429

- 17 049429

- 18 049429

- 19 049429

- 20 049429

-21 049429

- 22 049429

- 23 049429

-24049429

-25049429

-26049429

- 27 049429

- 28 049429

-29049429

- 30 049429

- 31 049429

- 32 049429

- 33 049429

- 34 049429

- 35 049429

- 36 049429

- 37 049429

-38049429

- 39 049429

- 40 049429

-41 049429

- 42 049429

- 43 049429

-44049429

- 45 049429

- 46 049429

- 47 049429

-48049429

- 49 049429

- 50 049429

- 51 049429

-52049429

- 53 049429

- 54 049429

-55 049429

- 56 049429

-57 049429

- 58 049429

Раскрытые в данном документе соединения могут быть пригодны в качестве ингибиторов репликации вируса гриппа в биологических образцах или у пациента. Данные соединения также могут быть пригодны для уменьшения количества норовирусов или коронавирусов (титр вируса) в биологическом образце или у пациента. Они также могут быть пригодны для терапевтического и профилактического лечения инфекций, вызванных норовирусами или коронавирусами в биологическом образце или у пациента.

Фармацевтически приемлемые соли

Соединения, описанные в данном документе, могут существовать в свободной форме или, в случае необходимости, в виде солей. Те соли, которые являются фармацевтически приемлемыми, представляют особый интерес, поскольку они пригодны при введении соединений, описанных ниже, в медицинских целях. Соли, которые не являются фармацевтически приемлемыми, пригодны в производственных процессах, для целей выделения и очистки, а в некоторых случаях для разделения стереоизомерных форм соединений по данному изобретению или их промежуточных соединений.

Используемый в данном документе термин фармацевтически приемлемая соль относится к солям соединения, которые в рамках здравого медицинского заключения подходят для использования в контакте с тканями людей и низших животных без чрезмерных побочных эффектов, таких как токсичность,

- 59 049429 раздражение, аллергический ответ и тому подобное, и они соответствуют разумному соотношению польза/риск.

Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны в данной области техники. Например, S. M. Berge и другие подробно описывают фармацевтически приемлемые соли в J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19, включенной в данный документ посредством ссылки. Фармацевтически приемлемые соли соединений, описанных в данном документе, включают соли, полученные из подходящих неорганических и органических кислот и оснований. Указанные соли могут быть получены in situ во время окончательного выделения и очистки соединений.

Если соединение, описанное в данном документе, содержит основную группу или достаточно основной биоизостер, то соли присоединения кислот могут быть получены посредством 1) приведения в контакт очищенного соединения в форме его свободного основания с подходящей органической или неорганической кислотой, и 2) выделения образованной соли. На практике, соли присоединения кислот могут быть более удобной формой применения, и применение солей равноценно применению формы свободного основания.

Примерами фармацевтически приемлемых нетоксичных кислотно-аддитивных солей являются соли аминогруппы, образованной с неорганическими кислотами, такими как соляная кислота, бромистоводородная кислота, фосфорная кислота, серная кислота и хлорная кислота, или с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, щавелевая кислота, малеиновая кислота, винная кислота, лимонная кислоту, янтарная кислота или малоновая кислота, или с использованием других методов, используемых в данной области техники, таких как ионный обмен. Другие фармацевтически приемлемые соли включают адипатную, альгинатную, аскорбатную, аспартатную, бензолсульфонатную, бензоатную, бисульфатную, боратную, бутиратную, камфоратную, камфорсульфонатную, цитратную, циклопентанпропионатную, диглюконатную, додецилсульфатную, этансульфонатную, формиатную, фумаратную, глюкогептонатную, глицерофосфатную, гликолятную, глюконатную, гликолятную, полусульфатную, гептаноатную, гексаноатную, гидрохлоридную, гидробромидную, гидроиодидную, 2-гидрокси-этансульфонатную, лактобионатную, лактатную, лауратную, лаурилсульфатную, малатную, малеатную, малонатную, метансульфонатную, 2-нафталинсульфонатную, никотинатную, нитратную, олеатную, оксалатную, пальмитатную, памоатную, пектинатную, персульфатную, 3-фенилпропионатную, фосфатную, пикратную, пивалатную, пропионатную, салицилатную, стеаратную, сукцинатную, сульфатную, тартратную, тиоцианатную, п-толуолсульфонатную, ундеканоатную, валератную соли и тому подобное.

Когда соединение, описанное в данном документе, содержит карбоксигруппу или достаточно кислый биоизостер, соли присоединения оснований могут быть получены путем 1) приведения в контакт очищенного соединения в его кислотной форме с подходящим органическим или неорганическим основанием и 2) выделения образованной таким образом соли. На практике применение соли присоединения основания может быть более удобным, и применение формы соли по существу равнозначно применению формы свободной кислоты. Соли, полученные из подходящих оснований, включают соли щелочных металлов (например, натрия, лития и калия), щелочноземельных металлов (например, магния и кальция), аммония и соли N⁺(С₁.₄αлкил)₄. Это раскрытие также предусматривает кватернизацию любых основных азотсодержащих групп соединений, раскрытых здесь. Посредством кватернизации могут быть получены растворимые или диспергируемые в воде или масле продукты.

Соли присоединения оснований включают фармацевтически приемлемые соли металлов и аминов. Подходящие соли металлов включают соли натрия, калия, кальция, бария, цинка, магния и алюминия. Обычно предпочтительны соли натрия и калия. Другие фармацевтически приемлемые соли включают, когда это уместно, нетоксичные катионы аммония, четвертичного аммония и амина, образованные с использованием противоионов, таких как галогенид, гидроксид, карбоксилат, сульфат, фосфат, нитрат, низший алкилсульфонат и арилсульфонат. Подходящие соли присоединения неорганических оснований получают из оснований металлов, которые включают гидрид натрия, гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид кальция, гидроксид алюминия, гидроксид лития, гидроксид магния, гидроксид цинка и т.п. Подходящие соли присоединения аминного основания получают из аминов, которые часто используют в медицинской химии благодаря их низкой токсичности и пригодности для медицинского применения. Аммиак, этилендиамин, N-метилглюкамин, лизин, аргинин, орнитин, холин, N,N'дибензилэтилендиамин, хлорпрокаин, диэтаноламин, прокаин, N-бензилфенэтиламин, диэтиламин, пиперазин, трис-(гидроксиметил)-аминометан, гидроксид тетраметиламмония, триэтиламин, дибензиламин, эфенамин, дегидроабиетиламин, N-этилпиперидин, бензиламин, тетраметиламмоний, тетраэтиламмоний, метиламин, диметиламин, этиламин, основные аминокислоты, дициклогексиламин и тому подобное.

Другие кислоты и основания, хотя сами по себе они не являются фармацевтически приемлемыми, могут быть использованы при получении солей, пригодных в качестве промежуточных соединений при получении соединений, описанных в данном документе, и их фармацевтически приемлемых солей присоединения кислот или оснований.

Следует понимать, что раскрытое в данном документе соединение может присутствовать в виде смеси/комбинации различных фармацевтически приемлемых солей. Также рассматриваются смеси/комбинации соединений в свободной форме и фармацевтически приемлемых солей.

- 60 049429

Фармацевтические композиции

Из описанных в данном документе соединений могут быть составлены фармацевтические композиции, которые дополнительно содержат фармацевтически приемлемые носитель, разбавитель, вспомогательное средство или несущую среду. В вариантах осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение, описанное выше, или его соль, и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель, вспомогательное средство или несущую среду. В вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит безопасное и эффективное количество соединения, как описано в данном документе, или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя, вспомогательного средства или несущей среды. Фармацевтически приемлемые носители включают, например, фармацевтические разбавители, эксципиенты или носители, надлежащим образом выбираемые с учетом предполагаемой формы введения и согласующиеся с общепринятыми фармацевтическими практиками.

Эффективное количество включает терапевтически эффективное количество и профилактически эффективное количество. Термин терапевтически эффективное количество относится к количеству, эффективному в лечении и/или облегчении инфекции, обусловленной норовирусом или коронавирусом, у пациента, инфицированного гриппом. Термин профилактически эффективное количество относится к количеству, эффективному для профилактики и/или существенного уменьшения вероятности или масштаба вспышки инфекции, обусловленной норовирусом или коронавирусом.

Фармацевтически приемлемый наполнитель может содержать инертные ингредиенты, которые не чрезмерно ингибируют биологическую активность соединений. Фармацевтически приемлемые носители должны быть биосовместимыми, например, нетоксичными, не вызывающими воспаление, неиммуногенными или лишенными других нежелательных реакций или побочных эффектов при введении субъекту. Могут быть использованы стандартные методики составления фармацевтических рецептур.

В контексте данного документа фармацевтически приемлемые носитель, вспомогательное средство или несущая среда включают всякие и любые растворители, разбавители или другую жидкую несущую среду, вспомогательные средства диспергирования или суспендирования, поверхностно-активные агенты, изотонические агенты, загустители или эмульгаторы, консерванты, твердые связующие, смазывающие агенты и тому подобное, подходящие для конкретной желаемой дозировочной формы. В Remington's Pharmaceutical Sciences, Sixteenth Edition, E. W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1980) раскрыты различные носители, используемые в составлении фармацевтически приемлемых композиций, и известные методики их приготовления. За исключением того, что любая среда со стандартным носителем может быть несовместима с веществами, описанными в данном документе, например, вызывая любой нежелательный биологический эффект или иным вредным образом взаимодействуя с любым другим компонентом(ами) фармацевтической приемлемой композиции, ее использование также рассматривается в рамках настоящего изобретения. Использованная в данном документе фраза побочные эффекты охватывает нежелательные и вредные эффекты терапевтического средства (например, профилактического или терапевтического агента). Побочные эффекты всегда являются нежелательными, но нежелательные эффекты необязательно являются вредными. Вредный эффект от терапевтического средства (например, профилактического или терапевтического агента) мог бы являться пагубным или связанным с неудобством или опасным. Побочные эффекты включают, но не ограничиваются ими: лихорадку, озноб, вялость, желудочно-кишечную токсичность (включая желудочные и кишечные изъязвления и эрозии), тошноту, рвоту, нейротоксичность, нефротоксичность, почечную токсичность (включая такие состояния, как папиллярный некроз и хронический интерстициальный нефрит), гепатотоксичность (включая повышенные уровни печеночных ферментов в сыворотке), миелотоксичность (включая лейкопению, миелосупрессию, тромбоцитопению и анемию), сухость во рту, металлический вкус, удлинение беременности, слабость, сонливость, боль (включая боль в мышцах, боль в костях и головную боль), облысение, астению, головокружение, экстрапирамидальные симптомы, акатизию, сердечно-сосудистые нарушения и сексуальную дисфункцию.

Некоторые примеры материалов, которые могут служить в качестве фармацевтически приемлемых носителей, включают следующие, но не ограничены ими: ионообменники, оксид алюминия, стеарат алюминия, лецитин, сывороточные белки (такие как человеческий сывороточный альбумин), буферные вещества (такие как твин 80, фосфаты, глицин, сорбиновую кислоту или сорбат калия), смеси неполных глицеридов насыщенных растительных жирных кислот, воду, соли или электролиты (такие как сульфат протамина, двунатриевый гидрофосфат, гидрофосфат калия, хлорид натрия или соли цинка), коллоидный диоксид кремния, трисиликат магния, поливинилпирролидон, полиакрилаты, воски, блок-полимеры полиэтилена-полиоксипропилена, метилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, ланолин, сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлозу и ее производные, такие как натрий карбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; порошковый трагакант; солод; желатин; тальк; эксципиенты, такие как масло какао и воски для суппозиториев; масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло; сафлоровое масло; кунжутное масло; оливковое масло; кукурузное масло и соевое масло; гликоли, такие как пропиленгликоль или полиэтиленгликоль; сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; агар; буферные агенты, такие как

- 61 049429 гидроксид магния и гидроксид алюминия; альгиновую кислоту; апирогенную воду; изотонический солевой раствор; раствор Рингера; этиловый спирт и фосфатные буферные растворы, а также другие нетоксичные совместимые смазывающие агенты, такие как лаурилсульфат натрия и стеарат магния, наряду с которыми по усмотрению составителя в композиции могут также присутствовать красящие агенты, высвобождающие агенты, покрывающие агенты, подсластители, вкусовые агенты и ароматизирующие агенты, консерванты и антиоксиданты.

Составы для доставки в легкие

В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции, раскрытые в данном документе, приспособлены для введения в нижние дыхательные пути (например, легкие) непосредственно через дыхательные пути путем ингаляции. Композиции для введения путем ингаляции могут принимать форму вдыхаемых порошковых композиций или жидких или порошковых спреев и могут вводиться в стандартной форме с использованием устройств для порошкового ингалятора или устройств для распыления аэрозоля. Такие устройства хорошо известны. Для введения путем ингаляции порошкообразные составы обычно содержат активное соединение вместе с инертным твердым порошкообразным разбавителем, таким как лактоза или крахмал. Вдыхаемые композиции сухого порошка могут быть представлены в капсулах и картриджах из желатина или подобного материала или в блистерах из ламинированной алюминиевой фольги для применения в ингаляторах или инсуффляторах. Каждая капсула или картридж обычно может содержать, например, от около 10 мг до около 100 г каждого активного соединения. Альтернативно, композиция может быть представлена без эксципиентов.

Ингаляционные композиции могут быть упакованы для разовой дозы или многодозовой доставки. Например, композиции могут быть упакованы для многодозовой доставки способом, аналогичным описанному в GB 2242134, патенте США № 6 632 666, 5 860 419, 5 873 360 и 5 590 645 (все иллюстрирующие устройство Diskus) или GB2i78965, GB2129691, GB2169265, патент США № 4 778 054, 4 811 731 и 5 035 237 (которые иллюстрируют устройство Diskhaler), или ЕР 69715 (устройство Turbuhaler), или GB 2064336 и патенте США № 4 353 656 (устройство Rotahaler).

Композиции спрея для местной доставки в легкие путем ингаляции могут быть составлены в виде водных растворов или суспензий или в виде аэрозолей, доставляемых из упаковок под давлением, таких как ингалятор с отмеренной дозой (MDI), с использованием подходящего сжиженного пропеллента, включая гидрофторалканы, такие как дихлордифторметан, трихлорфторметан, дихлортетрафторэтан и особенно 1,1,1,2-тетрафторэтан, 1,1,1,2,3,3,3-гептафтор-н-пропан и их смеси. Аэрозольные композиции, пригодные для ингаляции, могут быть представлены либо в виде суспензий, либо в виде растворов.

Лекарственные средства для введения путем ингаляции обычно имеют контролируемый размер частиц. Оптимальный размер частиц для вдыхания в бронхиальную систему обычно составляет от около 1 до около 10 мкм, а в некоторых вариантах осуществления от около 2 до около 5 мкм. Частицы размером более 20 мкм, как правило, слишком большие при вдыхании, чтобы достигнуть небольших дыхательных путей. Для достижения данных размеров частиц частицы активного ингредиента могут быть подвергнуты процессу уменьшения размера, такому как микрометровизация. Фракция желаемого размера может быть выделена воздушной классификацией или просеиванием. Предпочтительно частицы будут кристаллическими.

Интраназальные спреи могут быть составлены с водными или неводными несущими средами с добавлением агентов, таких как загустители, буферные соли или кислоты, или щелочи, для регулирования рН, изотонических регулирующих агентов или антиоксидантов.

Растворы для ингаляции путем распыления могут быть составлены с водной несущей средой с добавлением агентов, таких как кислота или щелочь, буферные соли, изотонические регулирующие агенты или противомикробные агенты. Их можно стерилизовать фильтрацией или нагреванием в автоклаве, или они могут быть представлены нестерильным продуктом. Небулайзеры подают аэрозоль в виде тумана, созданного из водного состава.

В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции, раскрытые в данном документе, могут быть составлены с дополнительными активными ингредиентами.

В некоторых вариантах осуществления фармацевтическую композицию, раскрытую в данном документе, вводят из порошкового ингалятора. В других вариантах осуществления фармацевтическую композицию, раскрытую в данном описании, вводят с помощью устройства для распыления аэрозоля, необязательно в сочетании с ингаляционной камерой, такой как ингаляционная камера Volumatic®.

Носителем может быть растворитель или дисперсионная среда, содержащая, например, воду, этанол, полиол (например, глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль и тому подобное), их подходящие смеси и/или растительные масла. Надлежащая текучесть может поддерживаться, например, путем использования покрытия, такого как, например, лецитин, путем поддержания требуемого размера частиц в случае дисперсий и путем использования поверхностно-активных веществ. Предотвращение действия микроорганизмов в композициях, раскрытых в данном документе, достигается путем добавления антибактериальных и/или противогрибковых агентов, например, парабенов, хлорбутанола, фенола, сорбиновой кислоты, тимеросала и тому подобного. Во многих случаях будет предпочтительно включать изотонические агенты, например сахара или хлорид натрия. Пролонгированная абсорбция инъецируемых

- 62 049429 композиций может быть достигнута путем использования в композициях агентов, замедляющих абсорбцию, например моностеарата алюминия и желатина.

В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция может находиться в матрице, которая контролирует высвобождение композиции. В некоторых вариантах осуществления матрица может содержать липид, поливиниловый спирт, поливинилацетат, поликапролактон, поли(гликолевую)кислоту, поли(молочную)кислоту, поликапролактон, полимолочную кислоту, полиангидриды, полилактид-со-гликолиды, полиаминокислоты, полиэтиленоксид, акрил концевой полиэтиленоксид, полиамиды, полиэтилены, полиакрилонитрилы, полифосфазены, поли(ортоэфиры), изобутират ацетата сахарозы (SAIB) и их комбинации, а также другие полимеры, такие как те, которые раскрыты, например, в патентах США № 6 667 371; 6 613 355; 6 596 296; 6 413 536; 5 968 543; 4 079 038; 4 093 709; 4 131 648; 4 138 344; 4 180 646; 4 304 767; 4 946 931, каждый из которых прямо включен в данный документ посредством ссылки в полном объеме. В данных вариантах осуществления матрица устойчиво высвобождает лекарственное средство.

Фармацевтически приемлемые носители и/или разбавители могут также включать любые растворители, дисперсионные среды, покрытия, антибактериальные и/или противогрибковые препараты, изотонические и замедляющие абсорбцию агенты и тому подобное. Применение таких сред и средств в отношении фармацевтически активных веществ хорошо известно в данной области техники. За исключением случаев, когда любая обычная среда или агент несовместимы с активным ингредиентом, предполагается их использование в фармацевтических композициях.

Фармацевтические композиции могут быть составлены для введения в соответствии с общепринятыми методиками. См., например, Remington, The Science and Practice of Pharmacy (20th Ed. 2000). Например, интраназальные фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть составлены в виде аэрозоля (данный термин включает как жидкие, так и сухие порошковые аэрозоли). Аэрозоли жидких частиц могут быть получены любыми подходящими способами, такими как управляемый давлением аэрозольный небулайзер или ультразвуковой небулайзер, как известно специалистам в данной области техники. См., например, патент США № 4501729. Аэрозоли твердых частиц (например, лиофилизированные и т.д.) также могут быть получены с помощью любого генератора аэрозоля лекарственного средства в виде твердых частиц согласно методикам, известным в фармацевтической области. В качестве другого примера, фармацевтические композиции могут быть составлены в виде растворимой формы по требованию, которая обеспечивает лиофилизированную часть фармацевтической композиции и растворяющую часть раствора фармацевтической композиции.

В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция находится в форме водной суспензии, которая может быть приготовлена из растворов или суспензий. Что касается растворов или суспензий, лекарственные формы могут состоять из мицелл липофильных веществ, липосом (фосфолипидных везикул/мембран) и/или жирной кислоты (например, пальмитиновой кислоты). В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция представляет собой раствор или суспензию, которая способна растворяться в жидкости, выделяемой слизистыми оболочками эпителия ткани, в которую она вводится, наносится и/или доставляется, что может преимущественно улучшать всасывание.

Фармацевтическая композиция может представлять собой водный раствор, неводный раствор или комбинацию водного и неводного раствора. Подходящие водные растворы включают, но не ограничиваются ими, водные гели, водные суспензии, водные суспензии микросфер, водные дисперсии микросфер, водные липосомные дисперсии, водные мицеллы липосом, водные микроэмульсии и любую комбинацию вышеуказанного или любой другой водный раствор, который может растворяться в жидкости, выделяемой слизистыми оболочками полости носа. Типичные неводные растворы включают, но не ограничиваются ими, неводные гели, неводные суспензии, неводные суспензии микросфер, неводные дисперсии микросфер, неводные липосомальные дисперсии, неводные эмульсии, неводные микроэмульсии и любую комбинацию вышеуказанного или любой другой неводный раствор, которые могут растворяться или смешаться в жидкости, выделяемой слизистыми оболочками.

Примеры порошковых составов включают, без ограничения, простые порошковые смеси, микрометровизированные порошки, лиофилизированный порошок, лиофилизированный порошок, порошковые микросферы, порошковые микросферы с покрытием, липосомальные дисперсии и любую комбинацию вышеперечисленного. Порошковые микросферы могут быть образованы из разнообразных полисахаридов и целлюлоз, которые включают, без ограничения, крахмал, метилцеллюлозу, ксантановую камедь, карбоксиметилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, карбомер, альгинат, поливиниловый спирт, акацию, хитозаны и любую их комбинацию.

В конкретных вариантах осуществления композиция представляет собой композицию, которая является по меньшей мере частично или даже по существу (например, по меньшей мере 80%, 90%, 95% или более) растворимой в жидкостях, которые секретируются слизистой оболочкой, чтобы облегчать абсорбцию. Альтернативно или дополнительно, композиция может быть составлена с носителем и/или другими веществами, которые способствуют растворению агента в секретах, включая без ограничения жирные кислоты (например, пальмитиновую кислоту), ганглиозиды (например, GM-1), фосфолипиды (например, фосфатидилсерин) и эмульгаторы (например, полисорбат 80).

- 63 049429

Специалистам в данной области техники будет понятно, что для интраназального введения или доставки, поскольку объем вводимой фармацевтической композиции, как правило, невелик, носовой секрет может изменить рН введенной дозы, поскольку диапазон рН в полости носа может быть таким широким, как от 5 до 8. Такие изменения могут повлиять на концентрацию неионизированного лекарственного средства, доступного для абсорбции. Соответственно, в репрезентативных вариантах осуществления фармацевтическая композиция дополнительно содержит буфер для поддержания или регулирования рН in situ. Типичные буферы включают, но не ограничиваются ими, аскорбатные, ацетатные, цитратные, проламиновые, карбонатные и фосфатные буферы.

В вариантах осуществления рН фармацевтической композиции выбирают таким образом, чтобы внутренняя среда ткани слизистой оболочки после введения находилась на кислой или нейтральной стороне, что (1) может обеспечить активное соединение в неионизированной форме для абсорбции, (2) предотвращает рост патогенных бактерий, которые чаще встречаются в щелочной среде, и (3) снижает вероятность раздражения слизистой оболочки.

Для жидких и порошковых спреев, или аэрозолей фармацевтическая композиция может быть составлена таким образом, чтобы иметь любой подходящий и желательный размер частиц или капель. В иллюстративных вариантах осуществления большинство и/или средний размер частиц или капель находятся в диапазоне от равно или более чем около 1, 2,5, 5, 10, 15 или 20 микрометров и равно или менее чем около 25, 30, 40, 45, 50, 60, 75, 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 275, 300, 325, 350, 375, 400 или 425 микрометров (включая все комбинации вышеуказанного). Типичные примеры подходящих диапазонов для большинства и/или среднего размера частиц или капель включают, без ограничения, от около 5 до 100 микрометров, от около 10 до 60 микрометров, от около 175 до 325 микрометров и от около 220 до 300 микрометров, которые способствуют отложению безопасного и эффективного количества действующего соединения, например, в полости носа (например, в верхней трети полости носа, верхнем проходе, обонятельной области и/или области пазухи для воздействия на обонятельный нервный путь). Как правило, частицы или капли размером менее чем около 5 микрометров осаждаются в трахее или даже легком, тогда как частицы или капли размером около 50 микрометров или больше обычно не достигают полости носа и откладываются в переднем носу.

Международная патентная публикация WO 2005/023335 (Kurve Technology, Inc.) описывает частицы и капли размера, имеющего диаметр, подходящий для практического применения представленных в данном документе вариантов осуществления фармацевтических композиций. В конкретных вариантах осуществления частицы или капли имеют средний диаметр от около 5 до 30 микрометров, от около 10 до 20 микрометров, от около 10 до 17 микрометров, от около 10 до 15 микрометров, от около 12 до 17 микрометров, от около 10 до 15 микрометров или от около 10 до 12 микрометров. Частицы могут по существу иметь средний диаметр или размер, как описано в данном документе, т. е., по меньшей мере, около 50%, 60%, 70%, 80%, 90% или 95% или более частиц имеют указанный диапазон диаметров или размеров.

Фармацевтическая композиция может быть доставлена в виде распыленной или распыляемой жидкости, имеющей размер капель, как описано выше.

В соответствии с конкретными вариантами осуществления данного раскрытия, которые включают способы интраназальной доставки, может быть желательным продлить время пребывания фармацевтической композиции в полости носа (например, в верхней трети полости носа, верхнем проходе, обонятельной области и/или в области пазухи), например, для усиления абсорбции. Таким образом, фармацевтическая композиция может быть необязательно составлена из биоадгезивного полимера, камеди (например, ксантановой камеди), хитозана (например, высокоочищенного катионного полисахарида), пектина (или любого углевода, который густеет как гель или эмульгируется при нанесении на слизистую оболочку носа), микросферы (например, крахмал, альбумин, декстран, циклодекстрин), желатина, липосомы, карбамера, поливинилового спирта, альгината, акации, хитозанов и/или целлюлозы (например, метил или пропил; гидроксил или карбокси; карбоксиметил или гидроксилпропил), которые являются агентами, которые увеличивают время пребывания в полости носа. В качестве дополнительного подхода повышение вязкости композиции также может обеспечить средство для продления контакта агента с носовым эпителием. Фармацевтическая композиция может быть составлена в виде назальной эмульсии, мази или геля, что обеспечивает преимущества для местного применения из-за их вязкости.

Влажные и сильно васкуляризированные мембраны могут способствовать быстрому всасыванию; следовательно, фармацевтическая композиция может необязательно содержать увлажнитель, особенно в случае композиции на гелевой основе, чтобы обеспечить адекватное внутриносовое содержание влаги. Примеры подходящих увлажнителей включают, но не ограничиваются ими, глицерин, минеральное масло, растительное масло, мембранные кондиционеры, успокаивающие агенты и/или сахарные спирты (например, ксилит, сорбит и/или маннит). Концентрация увлажнителя в фармацевтической композиции будет варьироваться в зависимости от выбранного агента и состава.

Фармацевтическая композиция может также необязательно включать усилитель абсорбции, такой как агент, который ингибирует активность фермента, уменьшает вязкость или эластичность слизистой, уменьшает эффекты очистки слизистых оболочек, открывает плотные соединения и/или растворяет дей

- 64 049429 ствующее соединение. Химические усилители известны в данной области и включают хелатирующие агенты (например, ЭДТА), жирные кислоты, соли желчных кислот, поверхностно-активные вещества и/или консерванты. Усилители проникновения могут быть особенно подходящими при составлении соединений, которые проявляют плохую проницаемость для мембран, недостаточную липофильность и/или разлагаются аминопептидазами. Концентрация усилителя абсорбции в фармацевтической композиции будет варьироваться в зависимости от выбранного агента и состава.

Для увеличения срока годности консерванты могут быть необязательно добавлены в фармацевтическую композицию. Подходящие консерванты включают, но не ограничиваются ими, бензиловый спирт, парабены, тимеросал, хлорбутанол и хлорид бензалкония и комбинации вышеуказанных. Концентрация консерванта будет варьироваться в зависимости от используемого консерванта, составляемого соединения, состава и тому подобного. В репрезентативных вариантах осуществления консервант присутствует в количестве около 2% по массе или менее.

Фармацевтические композиции, описанные в данном документе, могут необязательно содержать отдушку, например, как описано в ЕР 0 504 263 В1, для обеспечения ощущения запаха, для облегчения вдыхания композиции, чтобы способствовать доставке в обонятельную область и/или запускать транспорт обонятельных нейронов.

В качестве другого варианта композиция может содержать ароматизатор, например, для усиления вкуса и/или приемлемости композиции для субъекта.

Пористые частицы для легочного введения

В некоторых вариантах осуществления частицы являются пористыми, так что они имеют соответствующую плотность, чтобы избежать осаждения в задней части горла при введении через ингалятор. Сочетание относительно большого размера частиц и относительно низкой плотности позволяет избежать фагоцитоза в легких, обеспечивает надлежащим образом направленную доставку, избегает системной доставки компонентов и обеспечивает высокую концентрацию компонентов в легких.

Репрезентативные способы получения таких частиц и доставки таких частиц описаны, например, в патенте США № 7 384 649, озаглавленном Композиции в виде частиц для доставки в легкие, патенте США № 7 182 961, озаглавленном Композиции в виде частиц для доставки в легкие, патенте США № 7 146 978, озаглавленном Ингаляционное устройство и способ, патенте США № 7 048 908, озаглавленном Частицы для ингаляций, обладающие свойствами замедленного высвобождения, патенте США № 6 956 021, озаглавленном Стабильные высушенные распылением белковые составы, патенте США № 6 766 799, озаглавленном Ингаляционное устройство, и патенте США № 6 732 732, озаглавленном Ингаляционное устройство и способ.

Дополнительные патенты, раскрывающие такие частицы, включают патент США № 7 279 182, озаглавленный Состав для сушки распылением крупных пористых частиц, патент США № 7 252 840, озаглавленный Использование простых аминокислот для образования пористых частиц, патент США № 7 032 593, озаглавленный Ингаляционное устройство и способ, патент США № 7 008 644, озаглавленный Способ и устройство для производства сухих частиц, патент США № 6 848 197, озаглавленный Контроль влажности процесса для получения крупных пористых частиц, и патент США № 6 749 835, озаглавленный Состав для распылительной сушки крупных пористых частиц.

В патенте США 7 678 364, озаглавленном Частицы для ингаляций, обладающих свойствами замедленного высвобождения, раскрыты способы доставки частиц в легочную систему, включающие: введение в дыхательные пути пациента, нуждающегося в лечении, профилактики или диагностике, безопасного и эффективного количества сухого порошка, содержащего: а) катион многовалентного металла, который находится в комплексе с терапевтическим, профилактическим или диагностическим средством; b) фармацевтически приемлемый носитель; и с) компонент, содержащий катион многовалентного металла, в котором сухой порошок высушен распылением и имеет общее количество катиона многовалентного металла, которое составляет около 10% мас./мас. или более от общей массы агента, плотность утряски около 0,4 г/см³ или менее, средний геометрический диаметр от около 5 микрометров до около 30 микрометров и аэродинамический диаметр от около 1 до около 5 микрометров.

Количество соединений, описанных в данном документе, или их солей, присутствующих в частицах, может составлять от около 0,1 мас.% до около 95 мас.%, хотя в некоторых случаях даже может достигать 100%. Например, от около 1 до около 50%, например от около 5 до около 30%. Частицы, в которых соединение распределено по всей частице, могут быть предпочтительными.

В некоторых вариантах осуществления частицы включают поверхностно-активное вещество, отличное от фосфолипидов, описанных выше. Используемый в данном документе термин поверхностноактивное вещество относится к любому агенту, который предпочтительно абсорбирует на границе раздела между двумя несмешивающимися фазами, такой как граница раздела между водой и раствором органического полимера, граница раздела вода/воздух или граница раздела органический растворитель/воздух. Поверхностно-активные вещества обычно обладают гидрофильным фрагментом и липофильным фрагментом, так что при абсорбции частицам они имеют тенденцию представлять фрагменты во внешнюю среду, которые не притягивают частицы с аналогичным покрытием, тем самым уменьшая агломерацию частиц. Поверхностно-активные вещества могут также способствовать абсорбции терапев- 65 049429 тического или диагностического агента и увеличивать биодоступность агента.

Подходящие поверхностно-активные вещества, которые можно использовать при изготовлении частиц, раскрытых в данном документе, включают, но не ограничиваются ими, гексадеканол; жирные спирты, такие как полиэтиленгликоль (ПЭГ); полиоксиэтилен-9-лауриловый эфир; поверхностноактивная жирная кислота, такая как пальмитиновая кислота или олеиновая кислота; гликохолат; сурфактин; полоксамер; сложный эфир сорбитана и жирной кислоты, такой как сорбитантриолеат (Span 85); Tween® 80 и тилоксапол.

Поверхностно-активное вещество может присутствовать в частицах в количестве от около 0 до около 5% мас. Предпочтительно, он может присутствовать в частицах в количестве от около 0,1 до около 1,0% мас.

Частицы с плотностью утряски меньше чем около 0,4 г/см³, медианные диаметры по меньшей мере около 5 мкм и аэродинамический диаметр от около 1 мкм до около 5 мкм или от около 1 мкм до около 3 мкм, более способны избегать инерционного и гравитационного осаждения в ротоглоточной области и нацелены на дыхательные пути или глубокие легкие. Использование более крупных, более пористых частиц является преимуществом, поскольку они способны аэрозолизоваться более эффективно, чем более мелкие, более плотные частицы аэрозоля, такие как те, которые в настоящее время используются для ингаляционной терапии.

Липосомная доставка

Композиции, описанные в данном документе, преимущественно доставляются в легкие, чтобы доставить соединения в месте фактической или потенциальной инфекции норовируса или коронавируса. Доставка может быть достигнута путем доставки через легкие посредством дозирующих ингаляторов или других устройств для доставки через легкие, а также путем помещения частиц в капиллярные слои, окружающие альвеолы в легких.

Наноносители, такие как липосомы, в том числе небольшие однослойные везикулы, демонстрируют ряд преимуществ по сравнению с другими традиционными подходами к доставке лекарственных средств в легкие, включая пролонгированное высвобождение лекарственных средств и целенаправленную доставку лекарственных средств, специфичных для клеток. Наноразмерные лекарственные носители также могут быть подходящими для доставки плохо растворимых в воде лекарственных средств, и некоторые из соединений, описанных в данном документе, являются плохо растворимыми в воде. Дополнительные преимущества включают их способность обеспечивать контролируемое высвобождение, защиту от метаболизма и деградации, сниженную токсичность лекарственного средства и возможности нацеливания.

Липосомы (предпочтительно однослойные везикулы) имеют размер менее чем 200 нм, измеренный динамическим рассеянием света, и предпочтительно характеризуются тем, что они состоят из химически чистых синтетических фосфолипидов, наиболее предпочтительно имеющих алифатические боковые цепи длиной по меньшей мере 16 атомов углерода, и содержащие одно или более соединений, описанных в данном документе, или их фармацевтически приемлемые соли, достаточные для предпочтительной доставки (т.е. нацеливания) некоторого количества их соединений в капиллярные слои, окружающие альвеолы. Диаметр везикулы может быть измерен, например, динамическим рассеянием света с использованием гелий-неонового газового лазера NEC мощностью 100 мВт и коррелятора Malvern K7027, в идеале по меньшей мере два или три измерения, выполненные для каждого определения размера.

Выражение химически чистые фосфолипиды предназначено для определения фосфолипидов, которые по существу не содержат вредных моющих компонентов и примесей, которые вызывают агрегацию образовавшихся из них небольших однослойных везикул (SUV) и которые имеют чистоту более чем 97%. Предпочтительно, липосомы имеют диаметр преимущественно от около 50 до около 160 нм, являются по существу нейтральными по заряду и включают фосфолипиды, имеющие длину боковой цепи от 16 до 18 атомов углерода. Более предпочтительно, липосомы получают из дистеароилфосфатидилхолина (DSPC) и включают холестерин (наиболее предпочтительно в количестве от 10 до 50% от общего количества липидов) в качестве стабилизатора везикул.

Также было бы благоприятно, чтобы липосомы имели температуру плавления выше температуры тела (т.е. выше 37°C). По этой причине может быть благоприятно использовать чистые фосфолипиды, предпочтительно те, которые являются насыщенными и имеют длину углеродной цепи по меньшей мере 16 атомов углерода, предпочтительно от 16 до 18 атомов углерода. Дистеароилфосфатидилхолин (DSPC) является предпочтительным фосфолипидом.

Холестерин помогает стабилизировать липосомы и предпочтительно добавляется в количестве, достаточном для обеспечения стабильности липосом. Наиболее предпочтительно, липосомы дополнительно содержат пэгилированный фосфолипид, такой как DSPEPEG. Способ включает введение в кровоток пациента количества липосом размером менее чем 200 нм (предпочтительно однослойных везикул) и предпочтительно характеризующегося тем, что они состоят из химически чистых синтетических фосфолипидов, наиболее предпочтительно имеющих алифатические боковые цепи длиной по меньшей мере 16 атомов углерода и содержащих соединения, описанные в данном документе, или их фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, достаточные для предпочтительной доставки (т.е. нацеливания) некоторого количества соединений в капиллярные слои в легких, окружающие альвеолы.

- 66 049429

Описанные в данном документе соединения можно комбинировать с другими антиноровирусными или антикоронавирусными агентами. Такие дополнительные агенты также могут присутствовать в липосомах, могут присутствовать в разных липосомах или могут вводиться совместно с другим способом.

Липосомы включают одно или более соединений, описанных в данном документе, или их фармацевтически приемлемую соль и могут необязательно включать другие агенты против коронавируса. Липосомы могут быть получены путем растворения фосфолипида и холестерина в подходящем органическом растворителе, таком как хлороформ, и упаривания растворителя с образованием липидной пленки. Если для загрузки соединений, описанных в данном документе, в липосомы используют ионофор, то ионофор может быть добавлен в липидный раствор перед упариванием. Высушенную липидную пленку затем регидратируют в подходящей водной фазе, такой как забуференный фосфатом физиологический раствор или другой физиологически подходящий раствор. Водорастворимые лекарственные средства или терапевтические агенты могут содержаться в гидратирующем растворе, хотя, если требуется удаленная загрузка, в гидратирующем растворе, который инкапсулируется во внутреннем водном пространстве липосомы, может быть добавлен загрузочный агент, такой как, описанный выше хелатирующий агент.

После добавления увлажняющего раствора липосомы различного размера самопроизвольно образуются и инкапсулируют часть водной фазы. После этого липосомы и суспендирующий водный раствор подвергают воздействию силы сдвига, такой как экструзия, обработка ультразвуком или обработка в гомогенизаторе, в соответствии со способом, описанным в патенте США № 4 753 788; для производства везикулы в пределах указанного размера.

Затем липосомы могут быть обработаны для удаления нежелательных соединений из суспендирующего раствора, например неинкапсулированного лекарственного средства, что может быть достигнуто с помощью таких процессов, как гель-хроматография или ультрафильтрация.

Использование липосом в порошковых аэрозолях для целевой доставки в легкие описано, например, в Willis et al., Lung, June 2012, 190(3):251-262. Одним из преимуществ является то, что фосфолипиды, используемые для приготовления липосом, аналогичны эндогенному поверхностно-активному веществу в легких.

Пути введения и дозы

Соединения и фармацевтически приемлемые композиции, описанные выше, можно вводить людям и другим животным перорально, ректально, парентерально, интрацистернально, интравагинально, интраперитонеально, местно (например, в виде порошков, мазей или капель), будь то в виде перорального или назального спрея в легочную систему, например, с использованием ингалятора, такого как ингалятор с отмеренной дозой (MDI), или тому подобного, в зависимости от тяжести инфекции, подлежащей лечению. В некоторых вариантах осуществления соединение или композицию, раскрытые в данном документе, вводят перорально, посредством ингаляции или внутривенно.

Жидкие дозировочные формы для перорального введения включают следующие, но не ограничиваются ими: фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. Помимо действующих соединений, жидкие лекарственные формы могут содержать инертные разбавители, обычно применяемые в данной области техники, например, такие как вода или другие растворители, солюбилизирующие агенты и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла (в частности, хлопковое, арахисовое, кукурузное, масло зародышей пшеницы, оливковое, касторовое и кунжутное масло), глицерин, тетрагидрофуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры жирных кислот и сорбита, а также их смеси. Кроме инертных разбавителей пероральные композиции могут также включать вспомогательные средства, такие как смачивающие агенты, эмульгирующие и суспендирующие агенты, подсластители, вкусовые агенты и ароматизирующие агенты.

Инъекционные формы, например, стерильные инъецируемые водные или масляные суспензии, могут быть приготовлены в соответствии с известным уровнем техники с использованием подходящих диспергирующих или смачивающих средств и суспендирующих средств. Стерильный препарат для инъекций также может представлять собой стерильный раствор для инъекций, суспензию или эмульсию в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например, в виде раствора в 1,3бутандиоле. Приемлемыми несущими средами и растворителями, которые могут быть использованы, являются вода, раствор Рингера, U.S.?. и изотонический раствор натрия хлорида. Кроме того, стерильные нелетучие масла обычно используются в качестве растворителя или суспендирующей среды. Для данной цели можно использовать любое нелетучее масло со слабовыраженным вкусом, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, жирные кислоты, такие как олеиновая кислота, используются при приготовлении инъекционных препаратов.

Инъекционные составы можно стерилизовать, например, путем фильтрации через задерживающий бактерии фильтр или путем включения стерилизующих агентов в форме стерильных твердых композиций, которые можно растворять или диспергировать в стерильной воде или другой стерильной инъекционной среде перед применением.

Чтобы пролонгировать эффект описанного в данном документе соединения, часто желательно за

- 67 049429 медлять абсорбцию соединения, введенного подкожной или внутримышечной инъекцией. Это может представлять собой применение жидкой суспензии кристаллического или аморфного материала с плохой растворимостью в воде. Скорость абсорбции соединения зависит от скорости его растворения, которая, в свою очередь, может зависеть от размера кристаллов и кристаллической формы. В альтернативном варианте замедление абсорбции введенного парентерально соединения может быть достигнуто посредством растворения или суспендирования соединения в масляной несущей среде. Инъекционные депо-формы готовят путем формирования микроинкапсулированных матриц соединения в биоразлагаемых полимерах, таких как полилактид-полигликолид. В зависимости от соотношения количеств соединения и полимера и природы конкретного используемого полимера можно контролировать скорость высвобождения соединения. Примеры других биоразлагаемых полимеров включают сложные поли(ортоэфиры) и поли(ангидриды). Инъекционные депо-составы также готовят путем включения соединения в липосомы или микроэмульсии, которые совместимы с тканями организма.

Композиции для ректального или вагинального введения конкретно представляют собой суппозитории, которые могут быть приготовлены путем смешивания соединений, описанных в данном документе, с подходящими нераздражающими эксципиентами или носителями, такими как масло какао, полиэтиленгликоль или воск для суппозиториев, которые являются твердыми при температуре окружающей среды, но жидкими при температуре тела и поэтому тают в прямой кишке или влагалищной полости и высвобождают действующее соединение.

Твердые лекарственные формы для перорального введения включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых дозированных формах действующее соединение смешано по меньшей мере с одним инертным фармацевтически приемлемым эксципиентом или носителем, таким как цитрат натрия или дикальцийфосфат, и/или а) наполнителями или разбавителями, такими как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и кремниевая кислота b) связующие, такие как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидинон, сахароза и гуммиарабик, с) увлажнители, такие как глицерин, d) дезинтегрирующие агенты, такие как агар, карбонат кальция, картофельный или тапиоковый крахмал, альгиновая кислота, некоторые силикаты и карбонат натрия, е) агенты, замедляющие растворение, такие как парафин, f) ускорители абсорбции, такие как соединения четвертичного аммония, g) смачивающие агенты, такие как, например, цетиловый спирт и моностеарат глицерина, h) абсорбенты, такие как каолин и бентонитовая глина, и i) смазывающие вещества, такие как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия и их смеси. В случае капсул, таблеток и пилюль лекарственные формы также могут дополнительно содержать буферные агенты.

Твердые композиции схожего типа могут быть использованы в качестве наполнителей в мягких и твердых желатиновых капсулах с использованием таких эксципиентов как лактоза или молочный сахар, а также высокомолекулярные полиэтиленгликоли и т. п. Твердые лекарственные формы таблеток, драже, капсул, пилюль и гранул могут быть приготовлены с покрытиями и оболочками, такими как энтеросолюбильные покрытия и другие покрытия, хорошо известные в области фармацевтики. Они могут дополнительно могут необязательно содержать замутнители и также могут представлять собой композиции, которые высвобождают активный(-ые) ингредиент(-ы) только или предпочтительно в определенной части кишечника, необязательно замедленным образом. Примеры внедряющих композиций, которые могут быть использованы, включают полимерные вещества и воски. Твердые композиции схожего типа могут быть использованы в качестве наполнителей в мягких и твердых желатиновых капсулах с использованием таких эксципиентов как лактоза или молочный сахар, а также высокомолекулярные полиэтиленгликоли и т.п.

Действующие соединения могут также находиться в микроинкапсулированной форме с одним или более эксципиентами, как отмечено выше. Твердые лекарственные формы таблеток, драже, капсул, пилюль и гранул могут быть приготовлены с покрытиями и оболочками, такими как энтеросолюбильные покрытия, покрытия, контролирующие высвобождение, и другие покрытия, хорошо известные в области фармацевтики. В таких твердых дозировочных формах действующее соединение может быть смешано по меньшей мере с одним инертным разбавителем, таким как сахароза, лактоза или крахмал. Такие дозировочные формы могут также содержать, как это обычно принято на практике, дополнительные вещества, отличные от инертных разбавителей, например, смазывающие агенты для изготовления таблеток и другие вспомогательные средства таблетирования, такие как стеарат магния и микрокристаллическая целлюлоза. В случае капсул, таблеток и пилюль дозировочные формы могут также содержать буферные агенты. Они могут дополнительно могут необязательно содержать замутнители и также могут представлять собой композиции, которые высвобождают активный(-ые) ингредиент(-ы) только или предпочтительно в определенной части кишечника, необязательно замедленным образом. Примеры внедряющих композиций, которые могут быть использованы, включают полимерные вещества и воски.

Лекарственные формы для местного или чрескожного введения описанного в данном документе соединения включают мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, порошки, растворы, спреи, ингаляторы или пластыри. Действующий компонент смешивают в стерильных условиях с фармацевтически приемлемым носителем и любыми необходимыми консервантами или буферами, которые могут потребоваться. Под

- 68 049429 разумевается, что состав для глазного применения, ушные капли и глазные капли также входят в объем данного изобретения. Кроме того, в данном изобретении предусмотрено применение трансдермальных пластырей, которые имеют дополнительное преимущество, заключающееся в обеспечении контролируемой доставки соединения в организм. Такие дозировочные формы могут быть изготовлены растворением или диспергированием соединения в подходящей среде. Дополнительно могут быть использованы усилители абсорбции для усиления потока соединения сквозь кожу. Скорость можно контролировать либо предусматривая мембрану, контролирующую скорость высвобождения, либо диспергируя соединение в полимерной матрице или геле.

Стерильные инъекционные формы описанных в данном документе композиций могут представлять собой водную или масляную суспензию. Составы данных суспензий могут быть составлены согласно методикам, известным в данной области, используя подходящие диспергирующие или смачивающие агенты и суспендирующие агенты. Стерильный инъекционный препарат также может представлять собой стерильный инъекционный раствор или суспензию в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например, раствор в 1,3-бутандиоле. Среди приемлемых несущих сред и растворителей, которые могут быть использованы, можно упомянуть воду, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные нелетучие масла обычно используются в качестве растворителя или суспендирующей среды. Для этой цели можно использовать любое мягкое нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицериды. При приготовлении инъекционных форм используют жирные кислоты, такие как олеиновая кислота и ее глицеридные производные, так как представляют собой природные фармацевтически приемлемые масла, такие как оливковое масло или касторовое масло, в особенности в их полиоксиэтилированных вариантах. Такие масляные растворы или суспензии могут также содержать разбавитель или диспергирующий агент в виде спирта с длинной цепью, такой как карбоксиметилцеллюлоза или похожие диспергирующие агенты, которые обычно используются при составлении составов фармацевтически приемлемых дозировочных форм, включая эмульсии и суспензии. В целях составления составов могут быть также использованы другие обычно применяемые поверхностно-активные вещества, такие как твины, спаны и другие эмульгирующие агенты или усилители биодоступности, которые обычно используются при производстве фармацевтически приемлемых твердых, жидких или других дозировочных форм.

Описанные в данном документе фармацевтические композиции могут быть введены перорально в любой перорально приемлемой дозировочной форме, включая, но не ограничиваясь ими, капсулы, таблетки, водные суспензии или растворы. В случае таблеток для перорального применения обычно используемые носители включают, но не ограничиваются ими, лактозу и кукурузный крахмал. Также обычно добавляют смазывающие агенты, такие как стеарат магния. Для перорального введения в форме капсул подходящие разбавители включают лактозу и высушенный кукурузный крахмал. Когда для перорального применения требуются водные суспензии, действующий ингредиент комбинируют с эмульгирующими и суспендирующими агентами. При желании также могут быть добавлены определенные подсластители, ароматизаторы или красители.

Альтернативно, фармацевтические композиции, описанные в данном документе, могут быть введены в форме суппозиториев для ректального введения. Они могут быть получены путем смешивания агента с подходящим нераздражающим эксципиентом, который является твердым при комнатной температуре, но жидким при ректальной температуре и, следовательно, будет плавиться в прямой кишке для высвобождения лекарственного средства. Такие материалы включают, но не ограничиваются ими, масло какао, пчелиный воск и полиэтиленгликоли.

Фармацевтические композиции, описанные в данном документе, также могут вводиться местно, особенно когда цель лечения включает области или органы, легко доступные для местного применения, включая заболевания глаз, кожи или нижнего кишечного тракта. Подходящие составы для местного применения легко готовятся для каждой из этих областей или органов.

Местное применение для нижнего кишечного тракта может быть осуществлено в виде ректального суппозитория (см. выше) или в подходящем составе для клизмы. Местное применение также включает использование трансдермальных пластырей.

Для местного применения фармацевтические композиции могут быть составлены в виде подходящей мази, содержащей действующий компонент, суспендированный или растворенный в одном или более носителях. Носители для местного введения соединений данного документа включают, но не ограничиваются ими, минеральное масло, жидкий вазелин, белый вазелин, пропиленгликоль, полиоксиэтилен, полиоксипропиленовое соединение, эмульгирующий воск и воду. Альтернативно, фармацевтические композиции могут быть составлены в виде подходящего лосьона или крема, содержащего действующие компоненты, суспендированные или растворенные в одном или более фармацевтически приемлемых носителях. Подходящие носители включают, но не ограничиваются ими, минеральное масло, моностеарат сорбитана, полисорбат 60, воск из цетиловых сложных эфиров, цетеариловый спирт, 2октилдодеканол, бензиловый спирт и воду.

Для офтальмологического применения фармацевтические композиции могут быть приготовлены в виде микрометровизированных суспензий в изотоническом стерильном солевом растворе с отрегулиро

- 69 049429 ванным рН или, в частности, в виде растворов в изотоническом стерильном солевом растворе с отрегулированным рН либо с консервантом, таким как хлорид бензалкония, либо без него. Альтернативно, для офтальмологических применений фармацевтические композиции могут быть составлены в виде мази, такой как вазелин.

Фармацевтические композиции также можно вводить с помощью назального аэрозоля или ингаляции. Такие композиции готовят в соответствии с методами, хорошо известными в области создания фармацевтических препаратов, и могут быть приготовлены в виде растворов в физиологическом растворе с использованием бензилового спирта или других подходящих консервантов, промоторов абсорбции для повышения биодоступности, фторуглеродов и/или других обычных солюбилизирующих или диспергирующих агентов.

Соединения для применения в способах по данному изобретению могут быть составлены в виде стандартной лекарственной формы. Термин стандартная лекарственная форма относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве стандартной дозы для субъектов, подвергающихся лечению, причем каждая единица содержит заранее определенное количество действующего материала, рассчитанное для получения желаемого терапевтического эффекта, необязательно в сочетании с подходящим фармацевтическим носителем. Стандартная лекарственная форма может быть предназначена для однократной суточной дозы или одной из множества суточных доз (например, от около 1 до 4 или более раз в сутки). Когда используют несколько суточных доз, стандартная лекарственная форма может быть одинаковой или разной для каждой дозы.

Способы лечения

В настоящем документе предложены способы применения соединения, описанного в данном документе, в качестве терапевтического агента. Описанные в данном документе соединения или их фармацевтически приемлемые соли могут применяться для снижения титра вируса в биологическом образце (например, в культуре инфицированных клеток) или у людей (например, титра вируса в легких у пациента). Описанные в данном документе соединения или их фармацевтически приемлемые соли можно применять в способах лечения вирусных инфекций. Неограничивающие примеры вирусных инфекций, которые можно лечить соединениями, описанными в данном документе, или их фармацевтически приемлемыми солями, включают коронавирусные инфекции, калицивирусные инфекции и пикорнавирусные инфекции.

Неограничивающие примеры калицивирусных инфекций включают состояния, опосредованные норовирусом, и норовирусную инфекцию. Используемые в данном документе термины опосредованное норовирусом состояние, норовирусная инфекция и норовирус используются взаимозаменяемо для обозначения заболевания, вызванного инфекцией норовирусом.

Норовирусы представляют собой инфекционные вирусы, вызывающие гастроэнтерит у млекопитающих. Норовирусы представляют собой РНК-вирусы семейства Caliciviridae, включающего семь геногрупп: GI, GII, GIII, GIV, GV, GVI и GVII. Геногруппа II, наиболее распространенная геногруппа человека, в настоящее время содержит 19 генотипов. Геногруппы I, II и IV заражают людей, тогда как геногруппа III заражает виды крупного рогатого скота, а геногруппа V недавно была выделена у мышей. Две группы, наиболее связанные с гастроэнтеритом у людей, представляют собой геногруппу I (GI), которая включает вирус Норфолк, вирус Desert Shield и вирус Southampton; и геногруппа II (GII), которая включает вирус Bristol, вирус Lordsdale, вирус Toronto, вирус Mexico, вирус Hawaii и вирус Snow Mountain.

В некоторых вариантах осуществления соединения, используемые в данном документе, предназначены для лечения норовирусов, связанных с гастроэнтеритом. В некоторых вариантах осуществления норовирусы связаны с вирусом Норфолк. В некоторых вариантах осуществления норовирусы связаны с HuNV GGII.4.

В некоторых вариантах осуществления соединения, раскрытые в данном документе, можно применять для лечения норовируса, причем соединение связывается со свободным вирусом или ингибирует протеазу норовируса. В некоторых случаях соединение может быть нацелено на оба (свободный вирус и протеазу).

У людей общими симптомами норовируса являются тошнота, рвота, водянистая диарея, боль в животе и, в некоторых случаях, потеря вкуса. Норовирус может вызвать длительную инфекцию у людей с ослабленным иммунитетом. В тяжелых случаях персистирующие инфекции могут привести к норовирусу.-ассоциированная энтеропатия, атрофия ворсинок кишечника и мальабсорбция. Норовирусассоциированный гастроэнтерит также называют зимней рвотой.

У человека обычно развиваются симптомы гастроэнтерита через 12-48 часов после контакта с норовирусом. Могут наблюдаться общая вялость, слабость, боли в мышцах, головные боли, субфебрилитет.

Используемые в данном документе термины состояние, опосредованное коронавирусом и коронавирусная инфекция используются взаимозаменяемо для обозначения заболевания, вызванного инфекцией коронавируса. Неограничивающие примеры коронавирусов включают коронавирус, связанный с тяжелым острым респираторным синдромом (SARS), коронавирус, связанный с ближневосточным респираторным синдромом (MERS), и вирус SARS-CoV-2 (также известный как 2019-nCoV, или Уханьский коронавирус). Неограничивающие примеры состояний, опосредованных коронавирусом, или коронави

- 70 049429 русных инфекций включают SARS, MERS и COVID-19.

Коронавирусы представляют собой семейство вирусов, вызывающих заболевания у млекопитающих и птиц. Коронавирусы относятся к подсемейству Orthocoronavirinae семейства Coronaviridae порядка Nidovirales. Существует четыре основных рода коронавирусов, известных как альфа, бета, гамма и дельта. Коронавирусы, поражающие человека, включают коронавирус человека 229Е (HCoV-229E), коронавирус человека ОС43 (HCoV-OC43), коронавирус, связанный с тяжелым острым респираторным синдромом (SARS-CoV), коронавирус человека NL63 (HCoV-NL63, коронавирус New Haven), коронавирус человека коронавирус HKU1, коронавирус, связанный с ближневосточным респираторным синдромом (MERS-CoV, ранее известный как новый коронавирус 2012 и HCoV-EMC), и SARS-CoV-2 (также известный как 2019-nCoV и Уханьский коронавирус).

У людей коронавирусы вызывают респираторные инфекции, в том числе обычную простуду, которая обычно протекает в легкой форме, хотя более редкие формы, такие как SARS, MERS и SARS-CoV-2 (причина вспышки COVID-19 в 2019-20 годах), могут быть смертельными. Симптомы различаются у других видов: у кур они вызывают заболевание верхних дыхательных путей, а у коров и свиней коронавирусы вызывают диарею. Не существует вакцин или противовирусных препаратов для профилактики или лечения коронавирусной инфекции человека. Коронавирусы HCoV-229E, -NL63, -ОС43 и -HKU1 постоянно циркулируют в человеческой популяции и вызывают респираторные инфекции у взрослых и детей во всем мире.

В некоторых вариантах осуществления соединения, используемые в данном документе, предназначены для лечения альфа- или бета-коронавирусов. В некоторых случаях используемые в данном документе соединения предназначены для лечения альфа-коронавирусов. Неограничивающие примеры альфакоронавирусов включают HCoV-229E и HCoV-NL63. В некоторых вариантах осуществления соединения, используемые в данном документе, предназначены для лечения бета-коронавирусов. Неограничивающими примерами бета-коронавирусов являются HCoV-HKU1, HCoV-OC43, коронавирус ближневосточного респираторного синдрома (MERS-CoV), коронавирус тяжелого острого респираторного синдрома (SARS-CoV) и SARS-CoV-2. В некоторых вариантах осуществления соединения, используемые в данном документе, предназначены для лечения коронавирусов, связанных с SARS, MERS и COVID-19. В некоторых вариантах осуществления коронавирусы связаны с SARS. В некоторых вариантах осуществления коронавирусы связаны с MERS. В некоторых вариантах осуществления коронавирусы связаны с COVID-19.

В некоторых вариантах осуществления соединения, раскрытые в данном документе, можно применять для лечения коронавируса, причем соединение связывается со свободным вирусом или ингибирует протеазу коронавируса. В некоторых случаях соединение может быть нацелено на оба (свободный вирус и протеазу).

У людей общими симптомами коронавируса являются лихорадка, кашель, одышка и миалгия.

Неограничивающие примеры пикорнавирусных инфекций включают состояния, опосредованные риновирусами, и риновирусные инфекции. Используемые в данном документе термины состояние, опосредованное риновирусом и риновирусная инфекция используются взаимозаменяемо для обозначения заболевания, вызванного инфекцией риновирусом.

Пикорнавирусы поражают как человека, так и животных, могут вызывать тяжелые параличи (паралитический полиомиелит), асептический менингит, гепатит, плевродинию, миокардит, кожную сыпь, простуду; хотя распространена бессимптомная инфекция. Членами данного семейства являются несколько важных с медицинской точки зрения родов, таких как энтеровирусы (включая полиовирус (PV), риновирусы и энтеровирусы человека (например, вирусы Коксаки)); гепатовирус, который включает вирус гепатита A (HAV); и афтовирусы, которые включают вирус ящура (FMDV). Риновирусы признаны основной причиной простуды у людей и включают три различных вида: А, В и С. Передача происходит в основном аэрозольным путем, и вирус размножается в носу.

В некоторых вариантах осуществления соединения, раскрытые в данном документе, можно применять для лечения пикорнавирусной инфекции. В некоторых вариантах осуществления соединения, раскрытые в данном документе, можно применять для лечения риновирусной инфекции. В некоторых вариантах осуществления соединения, раскрытые в данном документе, можно применять для лечения риновирусной инфекции, при этом соединение связывается со свободным вирусом или ингибирует протеазу риновируса. В некоторых случаях соединение может быть нацелено на оба (свободный вирус и протеазу).

Термины заболевание, нарушение и состояние могут быть использованы в данном документе взаимозаменяемо для указания на медицинское или патологическое состояние, опосредованное норовирусом или коронавирусом.

Использованные в данном документе термины субъект и пациент использованы взаимозаменяемо. Термины субъект и пациент относятся к животному (например, птице, такой как курица, перепел или индейка, или млекопитающему), в частности млекопитающему включающему непримата (например, корову, свинью, лошадь, овцу, кролика, морскую свинку, крысу, кошку, собаку и мышь) и примата (например, обезьяну, шимпанзе и человека), и более конкретно - человека. В одном варианте

- 71 049429 осуществления субъект представляет собой не являющееся человеком животное, такое как сельскохозяйственное животное (например, лошадь, корову, свинью или овцу), или домашнее животное (например, собаку, кошку, морскую свинку или кролика). В предпочтительном варианте осуществления субъект представляет собой человека.

Использованный в данном документе термин биологический образец включает без ограничения клеточные культуры или их экстракты; биопсийный материал, полученный от млекопитающего, или его экстракты; кровь, слюну, мочу, фекалии, сперму, слезы или другие жидкости организма или их экстракты.

Использованный в данном документе термин множественность заражения или MOI представляет собой отношение числа инфекционных агентов (например, фага или вируса) к числу мишеней инфекции (например, клеток). Например, при указании на группу клеток, инокулированных инфекционными вирусными частицами, множественность заражения или MOI представляет собой отношение, определяемое числом инфекционных вирусных частиц, осевших в лунке планшета, поделенное на число клетокмишеней, присутствующих в данной лунке.

Использованный в данном документе термин ингибирование репликации норовирусов и ингибирование репликации коронавирусов включает как уменьшение степени репликации вирусов (например, уменьшение по меньшей мере на 10%), так и полную остановку репликации вирусов (т.е. 100% уменьшение степени репликации вирусов). В некоторых вариантах осуществления репликация норовирусов или коронавирусов ингибируется по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 65%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90% или по меньшей мере на 95%.

Репликацию вируса гриппа можно измерять любым подходящим способом, известным в данной области техники. Например, можно измерить титр вируса норовируса или коронавируса в биологическом образце (например, инфицированной клеточной культуре) или у человека (например, титр вируса в легких пациента). Конкретнее, при исследованиях на клетках в каждом случае клетки культивируют in vitro, вирус вносят в культуру в присутствии или отсутствии испытываемого агента и по прошествии подходящего промежутка времени оценивают вирусозависимую конечную точку. Такие анализы известны в данной области. В основе первого типа исследования клеток, который может быть использован в данном изобретении, лежит гибель инфицированных клеток-мишеней, то есть процесс, называемый цитопатическим эффектом (СРЕ), где вирусная инфекция вызывает истощение ресурсов клетки и в конечном итоге лизис клетки. В первом типе исследования клеток в лунках микротитрационного планшета инфицируют малую долю клеток (типично от 1/10 до 1/1000), вирусу позволяют пройти через несколько циклов репликации в течение 48-72 ч, затем измеряют величину гибели клеток по уменьшению содержания клеточного АТФ по сравнению с неинфицированными контролями. В основе второго типа исследования клеток, который может быть использован в данном изобретении, лежит умножение вирусспецифичных молекул РНК в инфицированных клетках, причем уровни РНК непосредственно измеряют, используя метод гибридизации с ДНК, имеющей разветвленную цепь (bDNA). Во втором типе исследования клеток, малое число клеток первоначально инфицируют в лунках микротитрационного планшета, вирусу позволяют реплицироваться в инфицированных клетках и распространиться на другие клетки, затем клетки подвергают лизису и измеряют содержание вирусной РНК. Данное исследование останавливают рано, обычно спустя 18-36 ч, когда все клетки-мишени еще живы. Вирусную РНК количественно измеряют посредством гибридизации со специфическими олигонуклеотидными зондами, закрепленными на стенках аналитического планшета, затем усиливают сигнал посредством гибридизации с дополнительными зондами, связанными с репортерным ферментом.

Используемый в данном документе термин вирусный титр или титр является мерой концентрации вируса. Для проверки титра можно использовать серийное разбавление с получением приблизительной количественной информации на основании аналитической процедуры, которая по своей сути дает лишь информацию о положительном или отрицательном результате. Титр соответствует наибольшему коэффициенту разбавления, при котором все еще получают положительный результат; например, положительный результат в первых 8 серийных двукратных разбавлениях соответствует титру 1:256. Для определения титра получают несколько разбавлений, например, 10^-1, 10^-2, 10^-3, 10^-8.

Использованный в данном документе термин лечить, лечение и осуществлять лечение относятся как к вариантам терапевтического, так и профилактического лечения. Например, варианты терапевтического лечения включают уменьшение или ослабление прогрессирования, тяжести и/или продолжительности состояний, опосредованных норовирусом или коронавирусом, или ослабление одного или более симптомов (а именно, одного или более явных симптомов) состояний, опосредованных норовирусом или коронавирусом, что является результатом введения одного или более терапевтических средств (например, одного или более терапевтических агентов, таких как соединение или композиция по данному изобретению). В конкретных вариантах осуществления терапевтическое лечение включает ослабление по меньшей мере одного измеряемого физического параметра состояния, опосредованного норовирусом или короновирусом. В других вариантах осуществления терапевтическое лечение включает торможение прогрессирования состояния, опосредованного норовирусом или коронавирусом, либо физически, например путем стабилизации явного симптома, физиологически, например путем стабилизации

- 72 049429 физического параметра, либо обоими путями. В других вариантах осуществления терапевтическое лечение включает ослабление или стабилизацию инфекций, опосредованных норовирусом или коронавирусом. Противовирусные препараты могут быть использованы в амбулаторных условиях для лечения людей, уже страдающих от норовируса или коронавируса, для снижения тяжести симптомов и уменьшения количества дней болезни.

Термин химиотерапия относится к применению лекарственных средств, например низкомолекулярных лекарственных средств (а не вакцин) для лечения нарушения или заболевания.

Использованные в данном документе термины профилактика или профилактическое применение и профилактическое лечение относятся к любой медицинской или здравоохранительной процедуре, целью которой является предотвращение, а не лечение или вылечивание заболевания. Использованные в данном документе термины предотвращать, предотвращение и осуществление предотвращения относятся к уменьшению риска приобретения или развития данного состояния или к уменьшению или торможению рецидива указанного состояния у субъекта, который не болен, но который находился или может находиться вблизи индивидуума, имеющего данное заболевание. Термин химиопрофилактика относится к применению лекарственных средств, например низкомолекулярных лекарственных средств (а не вакцин) для предотвращения нарушения или заболевания.

В контексте данного документа профилактическое применение включает применение в ситуациях, в которых была зарегистрирована вспышка, чтобы предотвратить контактную передачу или распространение инфекции в местах, где в близком контакте друг с другом пребывает много людей, которые имеют высокий риск серьезных осложнений норовируса или коронавируса (например, в больничной палате, центр дневной помощи, тюрьма, центр сестринского ухода и так далее). Оно также включает применение среди групп населения, которым необходима защита от норовируса или коронавируса, но которые либо не приобретают защиту после вакцинации (например, из-за слабой иммунной системы), либо когда вакцина им недоступна, либо когда они не могут получить вакцину по причине побочных эффектов. Оно также включает применение на протяжении двух недель после вакцинации, поскольку в течение этого времени вакцина еще неэффективна. Профилактическое применение может также включать осуществление лечения индивидуума, который не болен норовирусом или коронавирусом или который не рассматривается, как имеющий высокий риск осложнений, чтобы уменьшить вероятность инфицирования норовирусом или коронавирусом и передачи его индивидууму с таким высоким риском, который находится в близком контакте с ним (например, работники системы здравоохранения, работники центров сестринского ухода и так далее).

В некоторых вариантах осуществления способы по данному изобретению представляют собой превентивную или профилактическую меру для пациента, в частности человека, имеющего предрасположенность к осложнениям, являющимся результатом инфекции норовируса или коронавируса. Профилактическое использование включает использование в ситуациях, когда был подтвержден нулевой пациент или вспышка, чтобы предотвратить распространение инфекции в остальной части сообщества или группы населения.

В другом варианте осуществления способы изобретения применяют в качестве профилактической меры для членов сообщества или популяционной группы, в частности людей, чтобы предотвратить распространение инфекции.

В контексте данного документа эффективное количество относится к количеству, достаточному, чтобы добиться желаемого биологического ответа. В данном изобретении желаемый биологический ответ заключается в том, чтобы ингибировать репликацию норовируса или коронавируса, уменьшить количество норовируса или коронавируса или уменьшить или ослабить тяжесть, длительность, прогрессирование или манифестацию обусловленной норовирусом или коронавирусом инфекции, предотвратить развитие обусловленной норовирусом или коронавирусом инфекции, предотвратить рецидив, развитие, манифестацию или прогрессирование симптомов, связанных с обусловленной норовирусом или коронавирусом инфекцией, либо повысить или улучшить профилактический или терапевтический эффект(ы) другой терапии, используемой против инфекций норовируса или коронавируса. Точное количество соединения, вводимого субъекту, зависит от способа введения, типа и тяжести инфекции и от характеристик субъекта, таких как общее состояние здоровья, возраст, пол, масса тела и переносимость лекарств. Специалисты в данной области техники могут определить подходящие дозы в зависимости от указанных и других факторов. В случае совместного введения с другими противовирусными агентами, например совместного введения с лекарственным средством против норовируса или коронавируса, эффективное количество второго агента будет зависеть от типа используемого лекарственного средства. Для одобренных агентов известны подходящие дозировки, и они могут быть подобраны специалистом в данной области в соответствии с состоянием пациента, типом состояния(ий), подвергаемых лечению, и количеством описанного в данном документе соединения, которое применяют. В случаях, когда количество явно не указано, для эффективного количества следует предложить предположительное значение. Например, раскрытые в данном документе соединения могут быть введены субъекту в дозировках в диапазоне приблизительно от 0,01 до 100 мг/кг массы тела/сутки для терапевтического или профилактического лечения.

- 73 049429

В общем, режимы дозирования могут быть выбраны в соответствии с разнообразными факторами, включая подвергаемое лечению нарушение и тяжесть нарушения; активность конкретного применяемого соединения; конкретную применяемую композицию; возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол и диету пациента; время введения, путь введения и скорость экскреции конкретного применяемого соединения; почечную и печеночную функцию субъекта; и конкретное применяемое соединение или его соль, продолжительность лечения; лекарственные средства, используемые в комбинации или совместно с конкретным применяемым соединением, и подобные им факторы, хорошо известные в медицинских областях. Специалист в данной области может легко определить и предписать эффективное количество описанных в данном документе соединений, требуемое для лечения, профилактики, торможения (полностью или частично) или остановки прогрессирования заболевания.

Дозировки описанных в данном документе соединений могут находиться в диапазоне от около 0,01 до около 100 мг/кг массы тела/сутки, от около 0,01 до около 50 мг/кг массы тела/сутки, от около 0,1 до около 50 мг/кг массы тела/сутки или от около 1 до около 25 мг/кг массы тела/сутки. Следует понимать, что общее суточное количество может быть введено в виде одной дозы или может быть введено в виде нескольких доз, например, дважды в сутки (например, каждые 12 часов), три раза в сутки (например, каждые 8 часов) или четыре раза в сутки (например, каждые 6 часов).

Для проведения терапевтического лечения описанные в данном документе соединения могут быть введены пациенту в пределах, например, 48 ч (или в пределах 40 ч или менее чем через 2 дня, или менее чем через 1,5 дня или в пределах 24 ч) после появления симптомов (например, заложенности носа, боли в горле, кашля, ломоты, слабости, головных болей и озноба/потения). Терапевтическое лечение может длиться в течение любого подходящего срока, например, в течение 5 суток, 7 суток, 10 суток, 14 суток и так далее. Для проведения профилактического лечения при вспышке в группе компактно проживающего населения описанные в данном документе соединения могут быть введены нулевому пациенту в пределах, например, 2 суток после появления симптомов, и такое лечение может быть продолжено в течение любого подходящего срока, например, в течение 7 суток, 10 суток, 14 суток, 20 суток, 28 суток, 35 суток, 42 суток и так далее.

Комбинированная терапия

Описанные в данном документе соединения можно применять в комбинированной терапии, т.е. в сочетании с другими соединениями, проявляющими активность против норовируса или коронавируса, или в сочетании с вакциной. Комбинированная терапия может быть особенно пригодной, когда пациент может подвергаться воздействию более чем одной формы норовируса или коронавируса.

Безопасное и эффективное количество может быть обеспечено в способе или фармацевтической композиции по данному изобретению, в которых применяют соединение формулы I, из табл. А, табл. В или табл. С, или его фармацевтически приемлемую соль отдельно или в комбинации с дополнительным подходящим терапевтическим агентом, например, противовирусным агентом или вакциной. При использовании комбинированной терапии безопасное и эффективное количество может быть обеспечено, используя первое количество соединения формулы I, из табл. А, табл. В или табл. С или его фармацевтически приемлемой соли, и второе количество дополнительного подходящего терапевтического агента (например, противовирусного агента или вакцины).

В вариантах осуществления соединение формулы I, из табл. А, табл. B или табл. С или его фармацевтически приемлемую соль и дополнительный терапевтический агент вводят в безопасном и эффективном количестве (т.е. каждое в количестве, которое было бы терапевтически эффективным, если вводить отдельно). В других вариантах осуществления соединение формулы I, из табл. А, табл. В или табл. С или его фармацевтически приемлемую соль и дополнительный терапевтический агент, каждое, вводят в количестве, которое само по себе не обеспечивает терапевтического эффекта (субтерапевтическая доза). В еще других вариантах осуществления соединение формулы I, из табл. А, табл. В или табл. С или его фармацевтически приемлемая соль могут быть введены в безопасном и эффективном количестве, тогда как дополнительный терапевтический агент вводят в субтерапевтической дозе. В еще других вариантах осуществления соединение формулы I, из табл. А, табл. В или табл. С его фармацевтически приемлемая соль могут быть введены в субтерапевтической дозе, тогда как дополнительный терапевтический агент, например, подходящий противовирусный терапевтический агент вводят в безопасном и эффективном количестве.

Использованные в данном документе термины в комбинации или совместное введение могут быть использованы взаимозаменяемо для указания на использование более чем одного терапевтического средства (например, одного или более профилактических и/или терапевтических агентов). Использование данных терминов не накладывает ограничений на порядок, в котором терапевтические средства (например, профилактические и/или терапевтические агенты) вводят субъекту.

Совместное введение охватывает введение первого и второго количеств соединений, используемых при совместном введении, по существу одновременно, как, например, в единой фармацевтической композиции, например, капсуле или таблетке, содержащей фиксированное соотношение первого и второго количеств, или в нескольких, отдельных капсулах или таблетках для каждого количества. Кроме того, такое совместное введение также охватывает использование каждого соединения последовательно в лю

- 74 049429 бом порядке.

В вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способам комбинированной терапии для ингибирования репликации вирусов в биологических образцах или у пациентов или для лечения или профилактики инфекций, вызванных норовирусом или коронавирусом, у пациентов с использованием соединений или фармацевтических композиций, описанных в данном документе, например, соединения формулы I, из табл. А, табл. В или табл. С, или его фармацевтически приемлемой соли. Соответственно, фармацевтические композиции также включают таковые, содержащие соединение, как описано в данном документе (например, ингибитор репликации вирусов) в комбинации с противовирусным соединением, проявляющим активность против норовируса или коронавируса.

Способы применения соединений и композиций, раскрытых в данном документе, также включают комбинацию химиотерапии с соединением или композицией формулы I, из табл. А, табл. В или табл. С, или его фармацевтически приемлемой соли или с комбинацией соединения или композиции данного изобретения с другим противовирусным агентом.

Когда совместное введение включает раздельное введение первого количества соединения формулы I, табл. А, табл. В или табл. С или его фармацевтически приемлемой соли или второго количества дополнительного терапевтического агента, соединения вводят достаточно близко друг к другу по времени, чтобы получить желаемый терапевтический эффект. Например, период времени между каждым введением, который может приводить к желаемому терапевтическому эффекту, может изменяться в диапазоне от минут до часов и может быть определен, принимая во внимание свойства каждого соединения, такие как активность, растворимость, биодоступность, время полувыведения из плазмы и кинетический профиль. Например, соединение формулы I, табл. А, табл. В или табл. С или его фармацевтически приемлемая соль и второй терапевтический агент могут быть введены в любом порядке в течение около 24 часов друг за другом, в течение около 16 ч друг за другом, в течение около 8 часов друг за другом, в течение около 4 часов друг за другом, в течение около 1 часа друг за другом или в течение около 30 минут друг за другом.

Более конкретно, первое терапевтическое средство (например, профилактический или терапевтический агент, такой как соединение по данному изобретению) может быть введено субъекту до (например, за 5 минут, 15 минут, 30 минут, 45 минут, 1 час, 2 часа, 4 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часов, 48 часов, 72 часов, 96 часов, 1 недели, 2 недель, 3 недель, 4 недель, 5 недель, 6 недель, 8 недель или 12 недель до), одновременно или после (например, 5 минут, 15 минут, 30 минут, 45 минут, 1 часа, 2 часов, 4 часов, 6 часов, 12 часов, 24 часов, 48 часов, 72 часов, 96 часов, 1 недели, 2 недель, 3 недель, 4 недель, 5 недель, 6 недель, 8 недель или 12 недель после) введения второго терапевтического средства (например, профилактического или терапевтического агента, такого как противовирусное средство).

Понятно, что способ совместного введения первого количества соединения формулы I, табл. А, табл. В или табл. С или его фармацевтически приемлемой соли и второго количества дополнительного терапевтического агента может привести к усиленному или синергетическому терапевтическому эффекту, причем объединенный эффект больше, чем аддитивный эффект, который появлялся бы в результате раздельного введения первого количества соединения формулы I, табл. А, табл. В или табл. С или его фармацевтически приемлемой соли и второго количества дополнительного терапевтического агента.

Использованный в данном документе термин синергетический относится к комбинации соединения по данному изобретению и другого терапевтического средства (например, профилактического или терапевтического агента), которое более эффективно, чем аддитивные эффекты терапевтических средств. Синергетический эффект комбинации терапевтических средств (например, комбинации профилактических или терапевтических агентов) может допускать применения меньших дозировок одного или более терапевтических средств и/или менее частое введение указанных терапевтических средств субъекту. Возможность использовать меньшие дозировки терапевтического средства (например, профилактического или терапевтического агента) и/или вводить указанное терапевтическое средство менее часто может приводить к снижению токсичности, связанной с введением указанного терапевтического средства субъекту без уменьшения эффективности указанного терапевтического средства в предотвращении, сдерживании или лечении нарушения. Кроме того, синергетический эффект может приводить к повышению эффективности агентов в плане профилактики, сдерживания или лечения нарушения. Наконец, синергетический эффект комбинации терапевтических средств (например, комбинации профилактических или терапевтических агентов) может устранить или уменьшить вредные или нежелательные побочные эффекты, связанные с использованием каждого терапевтического средства по отдельности.

Когда комбинированная терапия, использующая соединения по данному изобретению, сочетается с противогриппозной вакциной, оба терапевтических агента могут быть введены таким образом, что период времени между каждым введением может быть дольше (например, составляя дни, недели или месяцы).

Наличие синергетического эффекта может быть определено, используя подходящие способы оценки взаимодействия лекарственных средств. Подходящие способы включают, например, сигмоидальное уравнение для расчета максимальной эффективности Emax (Holford, N.H.G. and Scheiner, L.B., Clin. Pharmacokinet. 6: 429-453 (1981)), уравнение аддитивности Loewe (Loewe, S, and Muischnek, H., Arch.

- 75 049429

Exp. Pathol Pharmacol. 114: 313-326 (1926) и уравнение медианного эффекта (Chou, Т. С. and Talalay, P., Adv. Enzyme Regul. 22: 27-55 (1984)). Каждое вышеупомянутое уравнение может быть применено к экспериментальным данным для построения соответствующей диаграммы, способствующей оценке эффектов комбинации лекарственных средств. Соответствующие диаграммы, относящиеся к вышеупомянутым уравнениям, представляют собой соответственно кривую типа концентрация-эффект, кривую изоболограммы и кривую показателя аддитивности.

Методы хирального разделения

Описанные в данном документе соединения могут иметь асимметрические центры и встречаться в виде рацематов, рацемических смесей, отдельных диастереомеров или энантиомеров, причем все изомерные формы включены в настоящее описание. Соединения по данному изобретению, имеющие хиральный центр, могут существовать и быть выделенными в оптически активных и рацемических формах. Некоторые соединения могут проявлять полиморфизм. В данном изобретении охвачены рацемические, оптически активные, полиморфные или стереоизомерные формы или их смеси, соединения по данному изобретению, которые обладают подходящими свойствами, описанными в данном документе. Оптически активные формы могут быть получены, например, разделением рацемической формы методами перекристаллизации, синтезом из оптически активных исходных материалов, хиральным синтезом или хроматографическим разделением с использованием хиральной стационарной фазы или ферментативным разделением. Можно либо очистить соответствующее соединение, затем дериватизировать соединение с образованием соединений, описанных в данном документе, либо очистить само соединение.

Оптически активные формы соединений могут быть получены с использованием любого метода, известного в данной области, включая, но не ограничиваясь этим, разделение рацемической формы методами перекристаллизации, синтезом из оптически активных исходных веществ, хиральным синтезом или хроматографическим разделением с использованием хиральной стационарной фазы.

Примеры методов получения оптически активных материалов включают по меньшей мере следующие. i) физическое разделение кристаллов: методика, с помощью которой макроскопические кристаллы индивидуальных энантиомеров разделяются вручную. Данная методика может использоваться в случае, если существуют кристаллы отдельных энантиомеров, т.е. материал представляет собой конгломерат, и кристаллы визуально различаются;) ii) одновременная кристаллизация: методика, при которой отдельные энантиомеры кристаллизуются отдельно из раствора рацемата, возможно только в том случае, если последний представляет собой конгломерат в твердом состоянии; iii) ферментативное разделение: методика, при которой частичное или полное разделение рацемата в силу разной скорости реакции для энантиомеров с ферментом; iv) ферментативный асимметричный синтез: способ синтеза, при котором по меньшей мере на одной стадии синтеза используется ферментативная реакция для получения энантиомерно чистого или обогащенного синтетического предшественника желаемого энантиомера; v) химический асимметричный синтез: способ синтеза, посредством которого желаемый энантиомер синтезируется из ахирального предшественника в условиях, которые вызывают асимметрию (т.е. хиральность) в продукте, что может быть достигнуто с использованием хиральных катализаторов или хиральных вспомогательных веществ; vi) методы разделения диастереомеров: метод, при котором рацемическое соединение приводят в контакт с энантиомерно чистым реагентом (хиральным вспомогательным веществом), который превращает отдельные энантиомеры в диастереомеры. Получающиеся в результате диастереомеры затем разделяют с помощью хроматографии или кристаллизации благодаря их теперь более отчетливым структурным различиям, а затем хиральное вспомогательное вещество удаляют, получая желаемый энантиомер; vii) асимметричные превращения первого и второго порядка: метод, при которой диастереомеры из рацемата уравновешивают, получая перевес в растворе диастереомера из желаемого энантиомера или где предпочтительная кристаллизация диастереомера из желаемого энантиомера нарушает равновесие, такое, что в конечном итоге в принципе все вещества превращается в кристаллический диастереомер из желаемого энантиомера. Желаемый энантиомер затем высвобождается из диастереомера; viii) кинетические разрешения: данный метод относится к достижению частичного или полного разделения рацемата (или дальнейшего разделения частично разделенного соединения) за счет неравных скоростей реакции энантиомеров с хиральным нерацемическим реагентом или катализатором в кинетических условиях; ix) энантиоспецифический синтез из нерацемических предшественников: метод синтеза, при котором желаемый энантиомер получают из нехиральных исходных веществ и где стереохимическая целостность не нарушается или нарушается лишь минимально в ходе синтеза; х) хиральная жидкостная хроматография: метод, при котором энантиомеры рацемата разделяют в жидкой подвижной фазе в силу различий в их взаимодействии с неподвижной фазой (включая, но не ограничиваясь, с помощью хиральной ВЭЖХ). Стационарная фаза может быть изготовлена из хирального вещества, или подвижная фаза может содержать дополнительное хиральное вещество, чтобы вызвать различные взаимодействия; xi) xi) хиральная газовая хроматография: метод, при котором рацемат улетучивается и энантиомеры разделяются в силу их различного взаимодействия в газовой подвижной фазе с колонкой, содержащей фиксированную нерацемическую хиральную фазу адсорбента; xii) экстракция хиральными растворителями: метод, посредством которого энантиомеры разделяются посредством преимущественного растворения одного энантиомера в конкретном хиральном растворителе; xiii) перенос через хиральные мембраны: метод, при

- 76 049429 котором рацемат приводят в контакт с тонким мембранным барьером. Барьер обычно разделяет две смешиваемые жидкости, одна из которых содержит рацемат, и движущая сила, такая как концентрация или перепад давления, вызывает преимущественный перенос через мембранный барьер. Разделение происходит в результате нерацемической хиральной природы мембраны, которая позволяет проходить только одному энантиомеру рацемата.

Хиральная хроматография, включая, но не ограничиваясь, хроматографию с подвижным слоем, используется в одном варианте осуществления. Большое разнообразие хиральных стационарных фаз является коммерчески доступно.

Настоящее изобретение будет лучше понято со ссылкой на следующие неограничивающие примеры.

Синтез соединений

Пример 1: Синтез соединений С12, С20 и С1

Cbz^

ОН

(1экв.) т₃Р (2 экв.), пиридин(2 об.),

EtOAc. 16 Ч ---------------------- Cbz^

Стадия-П)

10% Pd/C, Н_г. давление баллона МеОН, комн.темп.Дч

Стадия-(2)

он

CI фрагмент кислоты

EDC.HCI (1,5ЭКВ.),HOBt (1,5экв.),

DIPEA (3экв.),ДМФА,О°С-комн.темп„ 16ч

DMP (2 экв.), дхм камн.темп.,3ч „ Стадия-(5)

4N н с I/диоксан (10 об.) диоксан (Юоб.), 0°С до комн, темп., 2ч

Стадия-(7)

Диэтил фосфит (3 экв.), DI PEA (3 экв.), ДХ М, (Ц-комн. ТЕМП, 16 ч

С12 трет-бутил-4-((S)-4-(((бензилокси)карбонил)амино)-5-метокси-5-оксоnентаноил)-2фенилпиперазин-1-карбоксилат (3)

Смесь (S)-4-(((бензилокси)карбонил)амино)-5-метокси-5-оксопентановой кислоты (1) (1 г, 3,389 ммоль), трет-бутил-2-фенилпиперазин-1-карбоксилата (2) (888 мг, 3,389 ммоль) и пиридина (2 мл, 1 объем) в EtOAc (40 мл) при 0°С обрабатывали Т₃Р (4,31 мл, 50% мас. в EtOAc, 16,129 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили 1N HCl (20 мл) и добавляли воду (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в петролейном эфире, с получением трет-бутил-4-((S)-4(((бензилокси)карбонил)амино)-5-метокси-5-оксопентаноил)-2-фенилпиперазин-1-карбоксилата (3). Система ТСХ: 50% этилацетата в петролейном эфире R_f: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 540,40 (М+Н)+.

трет-Бутил-4-((S)-4-амино-5-метокси-5-оксопентаноил)-2-фенилпиперазин-1 -карбоксилат (4)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-((S)-4-(((бензилокси)карбонил)амино)-5-метокси-5

- 77 049429 оксопентаноил)-2-фенилпиперазин-1-карбоксилата (3) (1 г, 1,855 ммоль) в МеОН (40 мл) добавляли 10% Pd/C (500 мг, 50% влаги) при комн. темп., и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 3 часов в атмосфере Н₂ (давление баллона). За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 3 ч реакционную смесь фильтровали через целит, промывали МеОН (2x10 мл) и упаривали при пониженном давлении с получением трет-бутил-4-((S)-4-амино-5-метокси-5-оксопентаноил)-2фенилпиперазин-1-карбоксилата (4). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 406,35 (М+Н)+.

трет-Бутил-4-((S)-4-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-5метокси-5-оксопентаноил)-2-фенилпиперазин-1-карбоксилат (5)

При 0°С к перемешиваемому раствору (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты) (1 г, 2,949 ммоль) в ДМФА (20 мл) добавляли EDC.HCl (845 мг, 4,424 ммоль), НОВТ (597 мг, 4,424 ммоль), DIPEA (1,5 мл, 8,849 ммоль) и трет-бутил4-((S)-4-амино-5-метокси-5-оксопентаноил)-2-фенилпиперазин-1-карбоксилат (4) (1,38 г, 3,539 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (30 мл), экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 40% этилацетатом в петролейном эфире, с получением трет-бутил-4-((S)-4-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-5-метокси-5-оксопентаноил)-2-фенилпиперазин-1-карбоксилата (5). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 727,67 (М+Н)⁺.

трет-Бутил-4-((S)-4-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-5гидроксипентаноил)-2-фенилпиперазин-1-карбоксилат (6)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-((S)-4-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-5-метокси-5-оксопентаноил)-2-фенилпиперазин-1-карбоксилата (5) (900 мг, 1,241 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,24 мл, 2,48 ммоль) при 0°С, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенный органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного трет-бутил-4-((S)-4-((S)-2-((((3хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-5-гидроксипентаноил)-2фенилпиперазин-1-карбоксилата (6). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=699,2 (M+H)⁺.

трет-Бутил-4-((S)-4-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-5оксопентаноил)-2-фенилпиперазин-1-карбоксилат (С20)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-((S)-4-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-5-гидроксипентаноил)-2-фенилпиперазин-1-карбоксилата (6) (150 мг, 0,2148 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (273 мг, 0,6446 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (50 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения трет-бутил-4-((S)-4-((S)-2-((((3 хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-5-оксопентаноил)-2-фенилпиперазин-1карбоксилата (С20). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 697,27 (М+Н)⁺.

трет-Бутил-4-((4S)-4-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-5(диэтоксифосфорил)-5-гидроксипентаноил)-2-фенилпиперазин-1-карбоксилат (С1)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-((S)-4-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-5-оксопентаноил)-2-фенилпиперазин-1-карбоксилата (С20) (200 мг неочищенного, 0,2873 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли DIPEA (0,16 мл, 0,8620 ммоль), затем диэтилфосфит (0,12 мл, 0,8620 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. на 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили хлоридом аммония (15 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали с получением неочищенного остатка. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением третбутил-4-((4S)-4-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-5(диэтоксифосфорил)-5-гидроксипентаноил)-2-фенилпиперазин-1-карбоксилата (С1). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=835,58 (M+H)⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-1-(диэтоксифосфорил)-1-гидрокси-5-оксо-5-(3фенилпиперазин-1-ил)пентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (С12)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-((4S)-4-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)3-циклогексилпропанамидо)-5-(диэтоксифосфорил)-5-гидроксипентаноил)-2-фенилпиперазин-1карбоксилата (С1) (220 мг, 0,2637 ммоль) в 1,4-диоксане (2 мл) добавляли по каплям 4N HCl в диоксане (2 мл) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции

- 78 049429 следили с помощью ТСХ и ЖХМС. После израсходования исходного материала реакционную смесь упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензuл-((2S)-3-цuклогексил-1-(((2S)-1-(диэтоксифосфорил)-1-гидрокси-5оксо-5-(3-фенилпиперазин-1 -ил)пентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (С12). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=735,53 (M+H)+.

Пример 2: Синтез соединений С22 и С2

Cl .он

Стадия-(1)

soci₂ (Зоб.) меон (10об.) 0°С-комн. темп., 16 ч

nh, hci ион (3 об.), Н₂О, ТГФ, |.темп„ 3 ч

Стадия-(З)

Cl з

i) DSC(1,5 ЭКВ.), Et₃N (3 ЭКВ.), acn. комн, темп,, 4 ч ii) Соед,-3(1,2жв.). Et₃N (Зэкв.) acn, комн.темп.,16ч

Стадия-(2) 'Ν'

ОН о

ьвн₄ (2,0 об.) ДХМ, 0°С-комн,темп,,2ч

Стадия-(5)

Диэтилфосфит (3 об.), dipea (Зоб.),ДХМ,0°С-комн.темп„ 16 ч

Стадия-(7) вор реагент(1,5об,), Et₃N (Зоб.), ДХМ, комн, темп., 16 ч

Стадия-(А)

О'

Ν' о -МН

Вес q

CI'

NH;HCI ¹ фрагмент амина (1,2 экв.)

EDC.HCI (1,5 ЭКВ,), HOBt (1,5 ЭКВ.), □IPEA (Зэкв.), ДМФА,0°С-комн. темп,_{ 16 ч

Стадия-(4) .он г

С2 ,Ν.

о, ο^Η°γ'

4N нстдиоксан (10 об.) диоксан (10 об.)

0°Сдо комн, темп,, 2 ч

Стадия-(В) темро(0^экв.),рюа (1,2 экв,), ДХМ, 0°С-комн. темп., 3 ч

Стадия-(8) о о nh₂hci ¹ фрагмент амина

Метил-N2-(трет-бутоксикарбонил)-N5,N5-диметил-L-глутаминат (С)

К перемешиваемому раствору (S)-4-((трет-бутоксикарбонuл)амино)-5-метокси-5-оксопентановой кислоты (А) (3 г, 11,4942 ммоль) в ДХМ (30 мл) добавляли TEA (3,2 мл, 22,988 ммоль) и добавляли реагент ВОР (7,62 г, 17,241 ммоль) и 2М диметиламин в ТГФ (7,4 мл, 14,942 ммоль) (В) при 0°C, а затем реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью

ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли водой (50 мл), экстрагировали ДХМ (2x50 мл).

Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 40% метанолом в ДХМ с получением метил-N2-(трет-бутоксикарбонuл)-N5,N5-диметил-Lглутамината (С). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 289,30 [М+Н]⁺.

Гидрохлорид метил-N5,N5-диметил-L-глутамина (фрагмент амина)

К перемешиваемому раствору метил-N2-(трет-бутоксикарбонил)-N5-(3-хлорфенэтил)-N5-метил-Lглутамината (С) (1,5 г, 5,208 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) добавляли по каплям добавляли 4N раствор HCl в диоксане (15 мл) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. После израсходования исходного материала реакци онную смесь упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения, полученное неочищенное вещество растирали с диэтиловым эфиром с получением гидрохлорида метил-N5,N5диметилЖ-глутамината (фрагмент амина). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 189,17 [М+Н]⁺.

Гидрохлорид метил-2-амино-4,4-диметилпентаноата (2)

К перемешиваемому раствору 2-амино-4,4-диметилпентановой кислоты (1) (4 г, 27,586 ммоль) в МеОН (40 мл) при комн. темп. по каплям добавляли SOCl₂ (12 мл, 3 об.) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка в виде твердого вещества. Вещество растирали с петролейным эфиром, твердое ве

- 79 049429 щество фильтровали, затем сушили в вакууме с получением гидрохлорида метил-2-амино-4,4диметилпентаноата (2). Система ТСХ: 5% МеОН/ДХМ Rf 0,3.

Метил-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-4,4-диметилпентаноат (4)

К перемешиваемому раствору (3-хлорфенил)метанола (3) (2 г, 14,084 ммоль) в ACN (20 мл) добавляли N,N'-дисуkцинамидилкарбонат (5,4 г, 21,126 ммоль), а затем триэтиламин (6 мл, 42,25 ммоль) при комнатной температуре, и перемешивали в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную массу использовали непосредственно в последующей реакции.

В другую круглодонную колбу помещали гидрохлорид метил-2-амино-4,4-диметилпентаноата (2) (3,27 г, 16,901 ммоль) в ACN (20 мл) и обрабатывали триэтиламином (6 мл, 42,252 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин, затем добавляли по каплям приготовленную выше реакционную массу, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (15 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x15 мл), объединенные органические слои промывали солевым раствором (20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением метил-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-4,4-диметилпентаноата (4). Система ТСХ: 20% этилацетата в петролейном эфире; Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z=328,41 (М+Н)^-.

2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-4,4-диметилпентановая кислота (5)

К перемешиваемому раствору метил-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-4,4диметилпентаноата (4) (1,5 г, 4,587 ммоль) в ТГФ (20 мл) и воде (10 мл) добавляли гидроксид лития (330 мг, 13,761 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 3 ч реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли 2N раствором HCl до рН ~ 4 и экстрагировали этилацетатом (2x10 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. соединение 2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-4,4диметилпентановой кислоты (5). Система ТСХ: 20% этилацетата в петролейном эфире; Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 620,1 (М+Н)⁺.

Метил-N2-(2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-4,4-диметилпентаноил)-N5,N5-диметил-Lглутаминат (6)

К перемешиваемому раствору 2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-4,4-диметилпентановой кислоты (5) (1,6 г, 5,1118 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (1,46 г, 7,667 ммоль), НОВТ (1,03 г, 7,667 ммоль), DIPEA (1,96 мл, 10,6508 ммоль) и гидрохлорид метил-N5-(3хлорфенэтил)-N5-метил-L-глутамината (фрагмент амина) (2,7 мл, 15,335 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли водой (30 мл), экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 80% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-N2-(2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)4,4-диметилпентаноил)-N5,N5-диметил-L-глутамината (6). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=484,90 [M+H]⁺.

-Хлорбензил( 1 -(((S)-5-(диметиламино)-1 -гидрокси-5 -оксопентан-2-ил)амино)-4,4-диметил-1 оксопентан-2-ил)карбамат (7)

К перемешиваемому раствору метил-N2-(2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-4,4диметилпентаноил)-N5,N5-диметил-L-глутамината (6) (600 мг, 1,2422 ммоль) в ДХМ (10 мл) при 0°С добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,3 мл, 2,484 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь гасили водой (30 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного остатка. Очищали колоночной хроматографией на силикагеле с получением 3-хлорбензил-(1-(((S)-5-(диметиламино)-1-гидрокси-5-оксопентан2-ил)амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (7). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ R_f: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=456,47 (М+Н)⁺.

3-Хлорбензил(1-(((S)-5-(диметиламино)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-4,4-диметил-1 -оксопентан2-ил)карбамат (С22)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-(1-(((S)-5-(диметиламино)-1-гидрокси-5-оксопентан-2ил)амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (7) (150 мг, 0,329 ммоль) в ДХМ (5 мл) при 0°C, добавляли PIDA (127 мг, 0,395 ммоль), а затем добавляли TEMPO (10 мг, 0,065 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (10 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-(1-(((S)-5-(диметиламино)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-4,4-диметил-1 оксопентан-2-ил)карбамата (С22). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 454,25

- 80 049429 (М+Н)+.

3-Хлорбензил-(1-(((2S)-1-(диэтоксифосфорил)-5-(диметиламино)-1-гидрокси-5-оксопентан-2ил)амино)-4,4-диметил-1 -оксопентан-2-ил)карбамат (С2)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-(1-(((S)-5-(диметиламuно)-1,5-диоксопентан-2ил)амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (С22) (200 мг, 0,4415 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли DIPEA (0,2 мл, 1,324 ммоль), затем добавляли диэтилфосфит (0,2 мл, 1,324 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комн. темп, в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили хлоридом аммония (15 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали с получением неочищенного остатка. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-(1-(((2S)-1(диэтоксифосфорил)-5-(диметиламино)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-4,4-диметил-1оксопентан-2-ил)карбамата (С2). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=592,51 (M+H)⁺.

Пример 3: Синтез соединений С16 и C6.

Метил-(8)-3-циклогексил-2-(((пентилокси)карбонил)амино)пропаноат (3)

К перемешиваемому раствору гидрохлорида (S)-2-амино-3-циклогексилпропаноата (2) (3 г, 13,531 ммоль) в ТГФ (20 мл) и DIPEA (7 мл, 40,59 ммоль) при 0°С добавляли пентилкарбонохлоридат (1) (2,34 мл, 16,2 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь гасили водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x80 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-^)-3-циклогексил-2(((пентилокси)карбонил)амино)пропаноата. Система ТСХ: 30% этилацетата в петролейном эфире R_f: 0,55 ЖХМС (ИЭР): m/z 330,2 (M+NH)⁺.

(S)-3 -Циклогексил-2 -(((пентилокси)карбонил)амино)пропановая кислота (4)

К перемешиваемому раствору метил(S)-3-циклогексил-2(((пентилокси)карбонил)амино)пропаноата (3) (2,5 г, 8,3 ммоль) в ТГФ (20 мл) и воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (600 мг, 25 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 3 ч реакционную смесь полностью

- 81 049429 перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляют водн. 1N раствором HCl до рН ~ 4 и экстрагировали дихлорметаном (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-3-циклогексил-2-(((пентилокси)карбонил)амино)пропановой кислоты (4). Система ТСХ: 5% МеОН/ДХМ Rf: 0,2.

Метил-(S)-2-((S)-3-циклогексил-2-(((пентилокси)карбонил)амино)пропанамидо)-5-(2,3дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5-оксопентаноат (5)

К перемешиваемому раствору (S)-3-циклогексил-2-(((пентилокси)карбонил)амино)пропановой кислоты (4) (1 г, 3,5 ммоль) в ДМФА (20 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC.HCl (1 г, 5,2 ммоль), НОВТ (700 мг, 5,23 ммоль), DIPEA (1,7 мл, 10,46 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-5-(2,3дигидробензо[1][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5-оксопентаноата (фрагмент амина) (1,38 г, 4,2 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (30 мл), экстрагировали этилацетатом (2x60 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 40% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-(S)-2-((S)-3-циклогексил-2(((пентилокси)карбонил)амино)пропанамидо)-5-(2,3-дигидробензо[Щ1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5оксопентаноата (5). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 560,63 (М+Н)+.

Пентил-((S)-3-циклогексил-1 -(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f][ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1 -гидрокси-5оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (6)

К перемешиваемому раствору метил-(S)-2-((S)-3-циклогексил-2(((пентилокси)карбонил)амино)пропанамидо)-5-(2,3-дигидробензо[Щ1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5оксопентаноата (5) (900 мг, 1,6 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,2 мл, 1,53 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенный органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного пентил-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5(2,3-дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2ил)карбамата (6). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=532,5 (M+H)⁺.

Пентил-((S)-3-циклогексил-1 -(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f][ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5диоксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (С16)

К перемешиваемому раствору пентил-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[1][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (6) (200 мг, 0,376 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (479 мг, 1,13 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (50 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения пентил-((S)-3циклогексил-1 -(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1 оксопропан-2-ил)карбамата (С16). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 530,56 (М+Н)⁺.

Пентил-((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-1-(диэтоксифосфорил)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (С6)

К перемешиваемому раствору пентил-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (С16) (248 мг, 0,47 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли DIPEA (0,24 мл, 1,41 ммоль), затем диэтилфосфит (0,19 мл, 1,41 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили хлоридом аммония (15 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным Na2SO4 и упаривали с получением неочищенного остатка. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением пентил((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-1-(диэтоксифосфорил)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С6). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,45 ЖХМС (ИЭР): m/z=668,68 (M+H)⁺.

- 82 049429

Пример 4: Синтез соединений С26 и С7.

Метил-(S)-3-циклогекCил-2-(((гексилокси)карбонил)амино)nропаноат (3)

К перемешиваемому раствору гидрохлорида (S)-2-амино-3-циклогексилпропаноата (2) (4,8 г, 2,1 ммоль) в ТГФ (20 мл) и DIPEA (9,7 мл, 5,4 ммоль) при 0°С добавляли гексилкарбонохлоридат (1) (3 г, 1,8 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь гасили водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x80 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-(8)-3-циклогексил-2(((гексилокси)карбонил)амино)пропаноата (3). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,55 ЖХМС (иЭР): m/z=314,42 (М+Н)+.

(8)-3-Циклогексил-2-(((гексилокси)карбонил)амино)пропановая кислота (4)

К перемешиваемому раствору метил(S)-3-циклогексил-2-(((гексилокси)карбонил)амино)nроnаноата (3) (2 г, 6,36 ммоль) в ТГФ (20 мл) и воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (450 мг, 19 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС.

Через 3 ч реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляют водн. 1N раствором HCl до рН ~ 4 и экстрагировали дихлорметаном (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-3циклогексил-2-(((гексилокси)карбонил)амино)пропановой кислоты (4). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 300,2 (М+Н)+.

трет-Бутил-1-((8)-4-((8)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-5метокси-5-оксопентаноил)-1,2,3,5-тетрагидро-4H-бензо[е][1,4]диазепин-4-карбоксилат (5)

При 0°С к перемешиваемому раствору (S)-3-циклогексил-2(((гексилокси)карбонил)амино)пропановой кислоты (1,2 г, 4 ммоль) в ДМФА (20 мл) добавляли EDC.HCl (1,14 г, 6 ммоль), НОВТ (834 мг, 6 ммоль), DIPEA (2 мл, 12 ммоль) и гидрохлорид метил-(8)-2-амино-5(2,3-дигидробензо[1][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5-оксопентаноата (фрагмент амина) (1,57 г, 4,8 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (500 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 40% этилацетатом в петролейном эфире, с получением трет-бутил-1-((S)-4-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3

- 83 049429 циклогексилпропанамидо)-5-метокси-5-оксопентаноил)-1,2,3,5-тетрагидро-4H-бензо[е][1,4]диазепин-4карбоксилата (5). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 574,53 (М+Н)+.

Гексил-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5оксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (6)

К перемешиваемому раствору метил-(S)-2-((S)-3-циклогексил-2(((гексилокси)карбонил)амино)пропанамидо)-5-(2,3-дигидробензо[Щ1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5оксопентаноата (5) (960 мг, 1,67 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,25 мл, 1,5 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенный органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного гексил-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5(2,3-дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2ил)карбамата (6). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=546,51 (M+H)⁺.

Гексил-((S)-3-циклогексил-1 -(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5диоксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (С26)

К перемешиваемому раствору гексил-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[Щ1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (6) (250 мг, 0,45 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (583 мг, 1,37 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (50 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного гексил-((S)-3циклогексил-1 -(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1 оксопропан-2-ил)карбамата (С26). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 544,55 (М+Н)⁺.

Гексил-((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-1-(диэтоксифосфорил)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (С7)

К перемешиваемому раствору гексил-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (248 мг, 0,45 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли DIPEA (0,23 мл, 1,37 ммоль), а затем диэтилфосфит (0,18 мл, 1,37 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили хлоридом аммония (15 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным Na2SO4 и упаривали с получением неочищенного остатка. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением гексил((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-1-(диэтоксифосфорил)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5Н)ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С7). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=682,6 (M+H)⁺.

- 84 049429

Пример 5: Синтез соединения С15 и С9

О но—» ск.— J i)NaBH₄,меон, ОТ-комнлемп., 16ч _Вос ϊ) ррп₃ , diad , ТГФ,-1О°С-комн.темп.,12 ч_. _._1U ζϊ ji) (Boc)_zO , TEA ϋ) ТФУ ДХМ,0°С-комн. темп., 16 ч ^{Х он} Стадия-(1) ^^-он Стадия-(2) ¹ ·> 4

С15 трет-Бутил(5-хлор-2-гидроксибензил)(2-гидроксиэтил)карбамат (3)

К перемешиваемому раствору 5-хлор-2-гидроксибензальдегида (1) (5 г, 32,05 ммоль) в метаноле (50 мл) добавляли 2-аминоэтан-1-ол (2) (1,95 мл, 32,05 ммоль) при комн. темп. и перемешивали в течение 6 ч, затем добавляли NaBH4 (605 мг, 16,02 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 6 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и добавляли триэтиламин (2,8 мл, 19,93 ммоль), (Вос)₂О (3,98 г, 18,27 ммоль) и оставляли при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении и подкисляли до рН ~ 4 с помощью 2N HCl, твердые вещества фильтровали и промывали водой (100 мл), сушили в вакууме с получением трет-бутил(5-хлор2-гидроксибензил)(2-гидроксиэтил)карбамата (3). Система ТСХ: 50% этилацетата в петролейном эфире; Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 300,35 [М-Н].

7-Хлор-2,3,4,5-тетрагидробензо[Ц[1,4]оксазепин (4)

К перемешиваемому раствору DIAD (3,25 г, 16,12 ммоль), трифенилфосфина (4,22 г, 13,12 ммоль) в ТГФ (50 мл) медленно добавляли трет-бутил(5-хлор-2-гидроксибензил)(2-гидроксиэтил)карбамат (3) (5 г, 16,61 ммоль) в ТГФ (20 мл) при -10°С и оставляли при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении и растворяли в дихлорметане (50 мл), добавляли ТФУ (17 мл) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 5 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь подщелачивали при рН ~ 12 с помощью 10% NaOH и экстрагировали ДХМ (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 7-хлор-2,3,4,5-тетрагидробензо[Ц[1,4]оксазепина (4). Система ТСХ: 100% этилацетата R_f: 0,25 ЖХМС (ИЭР): m/z 184,33 [М+Н]+.

Метил(S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-5-(7-хлор-2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)5-оксопентаноат (5)

К перемешиваемому раствору метил(S)-4-((трет-бутоксикарбонuл)амино)-5-метокси-5оксопентановой кислоты (5) (1,5 г, 57,47 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDCHCl (1,64 г, 86,20 ммоль), НОВТ (1,16 г, 86,20 ммоль), DIPEA (3,17 мл, 172,3 ммоль) и 7-хлор-2,3,4,5тетрагидробензо[Ц[1,4]оксазепин (4) (2,1 г, 68,96 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли водой (30 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 50% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил(S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-5-(7-хлор-2,3дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-5-оксопентаноата (6). Система ТСХ: 70% этилацетата в петролейном эфире R_f: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 427,36 [М+Н]+.

- 85 049429

Гидрохлорид метил(S)-2-амино-5-(7-хлор-2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-5оксопентаноата(7)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-5-(7-хлор-2,3дигидробензо[Щ1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5-оксопентаноата (6) (2 г, 4,69 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) добавляли по каплям 4N HCl в диоксане (20 мл) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали при комн. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. После израсходования исходного материала реакционную смесь упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения, полученное неочищенное вещество растирали с диэтиловым эфиром с получением гидрохлорида метил(S)-2-амино-5-(7-хлор-2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-5-оксопентаноата (7). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=327,25 [М+Н]+.

Метил (S)-5-(7-хлор-2,3-дигидробензо[f][1,4]оксαзеnин-4(5H)-ил)-2-((S)-2-((((3хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-5-оксопентаноат (7)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты) (0,7 г, 2,064 ммоль) ДМФА (10 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (0,59 г, 3,097 ммоль), НОВТ (0,418 г, 3,097 ммоль), DIPEA (0,5 мл, 6,19 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-5-(7-хлор-2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-5-оксопентаноата (7) (0,896 г, 2,477 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли водой (25 мл), экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 45% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил(S)-5-(7-хлор-2,3-дигидробензо[f][1,4]оксαзеnин-4(5H)-ил)-2-((S)-2-((((3хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-5-оксопентаноата (8). Система ТСХ: 50% этилацетата в петролейном эфире; R_f: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=647,22 (М+Н)⁺.

3-Хлорбензил-((S)-1-(((S)-5-(7-хлор-2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5оксопентан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (8)

К перемешиваемому раствору метил(S)-5-(7-хлор-2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-2((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-5-оксопентаноата (8) (0,3 г, 0,463 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,7 мл, 0,46 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь гасили водн. раствором NH₄Cl (10 мл) и экстрагировали EtOAc (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 3 -хлорбензил-((S)-1 -(((S)-5-(7-хлор-2,3-дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1 -гидрокси-5 оксопентан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (9). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=620,26 (M+H)⁺.

3-Хлорбензил-((S)-1-(((S)-5-(7-хлор-2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5-диоксопентан2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (С15)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((S)-1-(((S)-5-(7-хлор-2,3дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1оксопропан-2-ил)карбамата (9) (200 мг, 0,33 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан ДессаМартина (426 мг, 1,005 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукт. Данный неочищенный продукт очищали хроматографии CombiFlash, элюируя 3% метанолом в дихлорметане, с получением 3-хлорбензил((S)-1-(((S)-5(7-хлор-2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1оксопропан-2-ил)карбамата (С15). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=618,33 (M+H)⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-1-(((2S)-5-(7-хлор-2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1(диэтоксифосфорил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (С9)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((S)-1-(((S)-5-(7-хлор-2,3дигидробензо[Щ1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2ил)карбамата (С15) (250 мг неочищенного, 0,405 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли DIPEA (0,2 мл, 1,215 ммоль), затем диэтилфосфит (0,12 мл, 1,215 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали с получением неочищенного остатка. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((2S)-1-(((2S)-5-(7-хлор-2,3дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин-4 (5Н)-ил)-1-(диэтоксифосфорил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С9). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,3 ЖХМС

- 86 049429 (ИЭР): m/z 756,10 (М+Н)+.

Пример 6: Синтез соединений С29 и С11.

Метил-(2S)-2-((трет-бутоксuкарбонил)амuно)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепuн-4(5H)-ил)-4метил-5-оксопентаноат (2)

К перемешиваемому раствору метил^)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-5-(2,3дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-uл)-5-оkсопентаноата (1) (2,0 г, 5,08 ммоль) в ТГФ (30 мл) добавляли 1М LHMDS (10,7 мл, 10,01 ммоль) при -78°С и перемешивали в течение 1 часа, затем добавляли метилиодид (1,2 мл, 20,32 ммоль) в ТГФ и перемешивали при -78°C в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом (2x40 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 30% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-(2S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-4метил-5-оксопентаноата (2). Система ТСХ: 50% этилацетата в гексане R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=407,41 [M+H]⁺.

Гидрохлорид метил-(2S)-2-амино-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-4-метил-5оксопентаноата (3)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-5-(2,3дигuдробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-uл)-4-метил-5-оксопентаноата (4) (2,2 г, 7,18 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) добавляли по каплям 4N раствор HCl в диоксане (20 мл) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения, полученное неочищенное вещество растирали с диэтиловым эфиром с получением гидрохлорида метил-(2S)-2-амино-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-4-метил-5оксопентаноата (3). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ R_f: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=307,36 [M+H]⁺.

Метил-(2S)-2-((S)-2-((((3-хлорбензuл)оkси)карбонuл)амuно)-3-циклогеkсилпропанамuдо)-5-(2,3дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-4-метил-5-оксопентаноат (4)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты) (1,0 г, 2,98 ммоль) в ДМФА (15 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (0,84 г, 4,47 ммоль), HOBt (0,59 г, 4,47 ммоль), DIPEA (1,6 мл, 8,94 ммоль) и гидрохлорид метил(2S)-2-амuно-5-(2,3-дигuдробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-uл)-4-метил-5-оксопентаноата (3) (1 г, 3,27 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (40 мл), экстрагировали этилацетатом (2x40 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией на системе Grace, соединение элюировали 2% метанолом в дихлорметане с получением метил-(2S)-2-((S)-2-((((3хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-5-(2,3-дигидробензо[1][1,4]оксазепин

- 87 049429

4(5Н)-ил)-4-метил-5-оксопентаноата (4). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 628,59 (М+Н)+.

3-Хлорбензил-((2S)-3 -циклогексил-1-(((2S)-5-(2,3-дигидробензо[f] [ 1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1гидрокси-4-метил-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (5)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-4-метил-5-оксопентаноата (4) (1,2 г, 1,91 ммоль) в ДХМ (15 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,4 мл, 2,86 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (30 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали соляным раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)1-гидрокси-4-метил-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (5). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 600,56 (М+Н)⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-4метил-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (С29)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-5-(2,3дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1-гидрокси-4-метил-5-оксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2ил)карбамата (5) (150 мг, 0,25 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (318 мг, 0,751 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (10 мл), а затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x15 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x15 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-4-метил1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С29). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 598,28 (М+Н)⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-1-(диэтоксифосфорил)-5-(2,3дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1-гидрокси-4-метил-5-оксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2ил)карбамат (C11)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-5-(2,3дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-4-метил-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2ил)карбамата (С29) (250 мг неочищенный, 0,41 ммоль) в ДХМ (10 мл) с добавлением DIPEA (0,22 мл, 1,23 ммоль), затем добавляли диэтилфосфит (0,17 мл, 1,23 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили хлоридом аммония (15 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали с получением неочищенного остатка. Остаток очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-1(диэтоксифосфорил)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1-гидрокси-4-метил-5-оксопентан2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (C11).

Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=736,54 (M+H)⁺.

- 88 049429

Пример 7: Синтез соединения С23 и С13 о

С23 С13 трет-Бутил(S)-4-(((3-циклогексил-1-метокси-1-оксопропан-2-ил)карбамоил)окси)пиперидин-1карбоксилат(3)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-гидроксипиперидин-1-карбоксилата (1) (300 мг, 1,49 ммоль) в ACN (5 мл) добавляли N,N'-дисукцинамидилкарбонат (572 мг, 2,23 ммоль), а затем триэтиламин (0,62 мл, 4,47 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную массу использовали непосредственно в последующей реакции.

В другую круглодонную колбу помещали метил(S)-2-амино-3-циклогексилпропаноат (2) (250 мг, 1,12 ммоль) в ACN (5 мл) и обрабатывали триэтиламином (0,3 мл, 2,25 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин, затем добавляли по каплям приготовленную выше реакционную массу, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (15 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x15 мл), объединенные органические слои промывали солевым раствором (20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением трет-бутил(S)-4-(((3-циклогексил-1-метокси-1-оксопропан-2-ил)карбамоил)окси)пиперидин1-карбоксилата (3). Система ТСХ: 50% этилацетата в петролейном эфире R_f: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 435,2 [M+Na]^-.

(S)-2-((((1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-4-ил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановая кислота (4)

К перемешиваемому раствору трет-бутил(S)-4-(((3-циклогексил-1-метокси-1-оксопропан-2ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилата (3) (0,35 г, 0,84 ммоль) в ТГФ (10 мл), воде (10 мл) добавляли гидроксид лития (106 мг, 2,54 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-2-((((1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-4ил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (4). Система ТСХ: 20% этилацетата в петролейном эфире; R_f: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=421,39 [M+Na]⁺.

трет-Бутил-4-((((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1метокси-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилат (5)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((((1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-4ил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (4) (1,5 г, 3,64 ммоль) в ДМФА (20 мл) од

- 89 049429 новременно добавляли EDC-HCl (1,04 г, 5,46 ммоль), НОВТ (0,73 г, 5,46 ммоль), DIPEA (1,9 мл, 10,92 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-5оксопентаноата (фрагмент амина) (1,27 г, 4,36 ммоль) при 0°С и перемешивании при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), полученные твердые вещества фильтровали и промывали избытком воды, затем сушили в вакууме с получением трет-бутил-4-((((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1-метокси-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилата (5). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 673,46 (М+Н)+.

трет-Бутил-4-((((S)-3-циkлогексил-1-(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилат (6)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-((((S)-3-циkлогексил-1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1-метокси-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилата (5) (1,5 г, 2,23 ммоль) в ДХМ (15 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (2,2 мл, 4,46 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь гасили насыщ. раствором NH₄Cl (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Вещество растирали с диэтиловым эфиром с получением трет-бутил-4-((((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилата (6). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 645,67 (М+Н)⁺.

трет-Бутил-4-((((S)-3-циkлогексил-1-(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5диоксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилат (С23)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-((((S)-3-циkлогексил-1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилата (6) (200 мг, 0,31 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (395 мг, 0,93 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Данный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, элюируя 3% метанолом в дихлорметане, с получением третбутил-4-((((S)-3-циkлогексил-1-(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5-диоксопентан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилата (С23). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=643,68 (M+H)⁺.

трет-Бутил-4-((((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-1-(диэтоксифосфорил)-5-(2,3дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамоил)окси)пиперидин-1 -карбоксилат (С13)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-((((S)-3-циkлогексил-1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[f] [ 1,4]оксазепин-4(5H-ил)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилата (С23) (200 мг неочищенного, 0,31 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли DIPEA (0,16 мл, 0,93 ммоль), затем добавляли диэтилфосфит (0,13 мл, 0,93 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали с получением неочищенного остатка. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением трет-бутил-4-((((2S)3 -циклогексил-1 -(((2S)-1 -(диэтоксифосфорил)-5 -(2,3-дигидробензо[f] [ 1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1 гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамоил)окси)пиперидин-1 -карбоксилата (С13). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 781,71 (М+Н)⁺.

- 90 049429

Пример 8: Синтез соединений С24 и С14. о

DMP (ЗЭКВ.)

Стадия-{5)

С24

Дпэшлфхфлг (3 экв.),

DIPEA (ЗЭКВ.)

ДХМ,комн, темп., 16ч

Стадия-(б)

С14

Метил-(S)-3-циклогексил-2-(((гептилокси)карбонил)амино)пропаноат (3)

К перемешиваемому раствору гидрохлорида (S)-2-амино-3-циклогексилпропаноата (2) (2,97 г, 13,48 ммоль) в ТГФ (20 мл) и DIPEA (5,8 мл, 33,70 ммоль) при 0°С добавляли гептилкарбонохлоридат (1) (2 г, 11,235 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь гасили водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x80 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-(S)-3-циклогексил-2(((гептилокси)карбонил)амино)пропаноата (3). Система ТСХ: 20% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,55 ЖХМС (ИЭР): m/z 328,49 (М+Н)+.

(S)-3 -циклогексил-2-(((гептилокси)карбонил)амино)пропановая кислота (4)

К перемешиваемому раствору метил(S)-3-циклогексил-2-(((гептилокси)карбонил)амино)пропаноата (3) (1,2 г, 3,66 ммоль) в ТГФ (12 мл) и воде (6 мл) добавляли гидроксид лития (264 мг, 11,009 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 3 ч реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляют водн. 1N раствором HCl до рН ~ 4 и экстрагировали дихлорметаном (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-3-циклогексил-2-(((гептилокси)карбонил)амино)пропановой кислоты (4). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 314,2 (М+Н)+.

Метил-(S)-2-((S)-3-циkлогексил-2-(((гептилокси)карбонил)амино)пропанамидо)-5-(2,3дигидробензо[!][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5-оксопентаноат (5)

При 0°С к перемешиваемому раствору (S)-3-циклогексил-2(((гептилокси)карбонил)амино)пропановой кислоты (1 г, 3,18 ммоль) в ДМФА (20 мл) добавляли EDC-HCl (0,91 г, 4,7 ммоль), НОВТ (660 мг, 4,7 ммоль), DIPEA (1,2 мл, 9,5 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5-оксопентаноата (фрагмент амина) (1,26 г, 3,8 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (500 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 40% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-(S)-2-((S)-3-циkлогексил-2(((гептилокси)карбонил)амино)пропанамидо)-5-(2,3-дигидробензо[1][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5

- 91 049429 оксопентаноата (5). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 588,68 (М+Н)+.

Гептил-((S)-3-циклогексил-1 -(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f][ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1 -гидрокси-5оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (6)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((S)-3-циклогексил-2(((гептилокси)карбонил)амино)пропанамидо)-5-(2,3-дигидробензо[Щ1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5оксопентаноата (5) (600 мг, 1,01 ммоль) в ДХМ (12 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,76 мл, 1,52 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенный органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного гексилгептил((S)-3-циклогексил-1(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1оксопропан-2-ил)карбамата (6). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=560,3 (M+H)⁺.

Гептил-((S)-3-циклогексил-1 -(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f][ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5диоксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С24)

К перемешиваемому раствору гептил-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[Щ1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (6) (180 мг, 0,32 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (410 мг, 0,96 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (50 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного гептил-((S)-3циклогексил-1 -(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1 оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С24). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 558,52 (М+Н)⁺.

Гептил((2S)-3-циклогексил-1 -(((2S)-1 -(диэтоксифосфорил)-5-(2,3-дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин4(5Н)-ил)-1 -гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С14)

К перемешиваемому раствору гексилгептил-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (249 мг, 0,446 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли DIPEA (0,177 мл, 1,33 ммоль), а затем диэтилфосфит (0,18 мл, 1,33 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили хлоридом аммония (15 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным Na2SO4 и упаривали с получением неочищенного остатка. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением гептил((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-1-(диэтоксифосфорил)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С14). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=696,70 (M+H)⁺.

- 92 049429

Пример 9: Синтез соединения С17 и С5.

EtMgCI (2 экв.), Ti(OiPr)₄ (1 экв.),

BF₃-Et₃O (2 3KB.),Et₂O: ТГФ(1:1), О°С-комн. темп.. 2 ч ,

Стадия-(1)

(Вос)₂(1,1 ЭКВ.),TEA (2экв.), ДХМ,0°С-комн.темп.,Зч

Стадия-®

EDC.HC (1,5экв.), HOBt (1,5 экв.) DIPEA (Зэкв.)

ДМФА, ОТ-комн.темп., 16ч

4N НС1/диоксан (6 экв.)

60% NaH (1,5 экв.), ДМФА, 40%, 4 ч

Стадия-(З)

диоксан (10о6.), 0°Сдо комн, темп.

Стадия-®

Стадия-®

4N HCI/диоксан(6экв.) диоксан (Юоб.) 0°С до комн. темп.

Стадия-(б)

EDC.HCI (1,5 экв.), HOBt (1,5 экв.), DIPEA (3 экв.), ДМФА,О°С-комн.темп,1бч

Стадия-(7)

1-Бензилциклопропан-1-амин (2)

К перемешиваемому раствору 2-фенилацетонитрила (1) (2 г, 17,094 ммоль) в Et₂O:ТГФ (1:1) (20 мл) добавляли изопропоксид титана (5,14 г, 18,119 ммоль), а затем медленно по каплям добавляли 2М этилмагнийхлорид в ТГФ (17 мл, 34,188 ммоль) в течение 10 минут при 0°C. Затем реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 1 ч, а затем медленно добавляли BF₃-Et₂O (4,8 мл, 34,188 ммоль) при 0°C в течение 15 мин (возникла экзотермическая реакция) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 1 час реакционную смесь выливали в 10% раствор NaOH (100 мл), образовался белый осадок. Реакционную смесь фильтровали через слой целита, промывали этилацетатом (50 мл), фильтрат промывали солевым раствором (100 мл), и объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 70% этилацетатом в петролейном эфире, с получением 1-бензилциклопропан-1-амина (2). Система ТСХ: 80% этилацетата в петролейном эфире; R_f: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 148,11 [М+Н]+.

трет-Бутил(1-бензилциклопропил)карбамат (3)

К перемешиваемому раствору 1-бензилциклопропан-1-амина (2) (4,2 г, 28,5714 ммоль) в ДХМ (50 мл) добавляли TEA (4,1 мл, 57,142 ммоль), а затем медленно по каплям добавляли Вос-ангидрид (6,8 мл, 31,428 ммоль) в течение 10 мин при 0°C. Затем реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в те

- 93 049429 чение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 3 ч реакционную смесь разбавляли водой (50 мл), экстрагировали ДХМ (2x50 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% этилацетатом в петролейном эфире с получением трет-бутил(1-бензилциклопропил)карбамата (3). Система ТСХ: 30% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,8 ЖХМС (ИЭР): m/z=148,11 [М-Вос]⁺.

трет-Бутил(1-бензилциклопропил)(метил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору трет-бутил(1-бензилциклопропил)карбамата (3) (2x2,5 г, 10,121 ммоль) в ДМФА (25 мл) в герметичном сосуде добавляли 60% NaH (607 мг, 15,182 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 15 минут после медленного добавления по каплям метилиодида (2,6 мл, 40,485 ммоль) в течение 10 минут при 0°C. Затем реакционную смесь нагревали до 40°C в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении с получением трет-бутил(1бензилциклопропил)(метил)карбамата (4). Система ТСХ: 5% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z=162,11 [М-Вос]⁺.

гидрохлорид 1-бензил-N-метилциклопропан-1-амина (5)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-(1-бензилциклопропил)(метил)карбамата (4) (1,3 г, 4,9808 ммоль в 1,4-диоксане (10 мл) добавляли по каплям 4 N раствор HCl в диоксане (20 мл) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. После израсходования исходного материала реакционную смесь упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения, полученное неочищенное вещество растирали с диэтиловым эфиром с получением гидрохлорида 1-бензил-N-метилциклопропан-1-амина (5). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=162,32 [M+H]⁺.

Метил-N5-(1-бензилциклопропил)-N2-(трет-бутоксикарбонил)-N5-метил-L-глутамин (7)

К перемешиваемому раствору (S)-4-((трет-бутоксикарбонил)амино)-5-метокси-5-оксопентановой кислоты (6) (1 г, 3,831 ммоль) в ДМФА (10 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (1,1 г, 5,747 ммоль), НОВТ (775 мг, 5,747 ммоль), DIPEA (2,11 мл, 11,494 ммоль) и гидрохлорид 1-бензил-Nметилциклопропан-1-амина (5) (678 мг, 4,214 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 40% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-N5-(1-бензилциклопропил)-N2-(трет-бутоксикарбонил)-N5-метил-L-глутамината (7). Система ТСХ: 50% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=305,19 [М-Вос]⁺.

Гидрохлорид метил-N5-(1-бензилциклопропил)-N5-метил-L-глутамината (8)

К перемешиваемому раствору метил-N5-(1-бензилциклопропил)-N2-(трет-бутоксикарбонил)-N5метил-Ь-глутамината (7) (1,0 г, 2,475 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) по каплям добавляли 4 N раствор HCl в диоксане (20 мл) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. После израсходования исходного материала реакционную смесь упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения, полученное неочищенное вещество растирали с диэтиловым эфиром с получением гидрохлорида метил-М5-(1бензилциклопропил)-N5-метил-L-глутамината (8). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=305,26 [M+H]⁺.

Метил-N5-(1-бензилциклопропил)-N2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропаноил)-N5-метил-L-глутаминат (9)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты) (1,0 г, 2,949 ммоль) ДМФА (10 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (845 мг, 4,424 ммоль), НОВТ (597 мг, 5,899 ммоль), DIPEA (1,63 мл, 8,849 ммоль) и гидрохлорид метил-N5-(1-бензилциклопропил)-N5-метил-L-глутамината (8) (986 мг, 3,244 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли водой (30 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 60% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-N5-(1-бензилциклопропил)-N2((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноил)-N5-метил-L-глутамината (9). Система ТСХ: 50% этилацетата в петролейном эфире; Rf: 0,5 ЖхМС (ИЭР): m/z 626,58 (М+Н)⁺.

-Хлорбензил-((S)-1 -(((S)-5-(( 1 -бензилциклопропил)(метил)амино)-1 -гидрокси-5-оксопентан-2ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (10)

К перемешиваемому раствору метил-N5-(1-бензилциклопропил)-N2-((S)-2-((((3хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноил)-N5-метил-L-глутамината (9) (1 г, 1,6

- 94 049429 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляли 2М LiBH4 в ТГФ (1,6 мл, 3,2 ммоль) при 0°C и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь погасили водой (10 мл) и экстрагировали этилацетат (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (10 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 80% этилацетатом в петролейном эфире с получением 3-хлорбензил-((S)-1-(((S)-5-((1-бензилциклопропил)(метил)амино)-1-гидрокси5-оксопентан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (10). Система ТСХ: 100% этилацетата Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 598,98 (М+Н)+.

-Хлорбензил-((S)-1 -(((S)-5-(( 1 -бензилциклопропил)(метил)амино)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)3-циклогексил-1-оксопропан -2-ил)карбамат (соединение С17)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((S)-1-(((S)-5-((1-бензилциклопропил)(метил)амино)-1гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (10) (150 мг, 0,2508 ммоль) растворяли в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (320 мг, 0,752 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x10 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 20% МеОН в ДХМ с получением 3 -хлорбензил-((S)-1 -(((S)-5 -((1 -бензилциклопропил)(метил)амино)-1,5-диоксопентан2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С17). Система ТСХ: 80% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 596,44 (М+Н)⁺.

3-Хлорбензил((2S)-1 -(((2S)-5-((1-бензилциклопропил)(метил)амино)-1 -(диэтоксифосфорил)-1 гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С5)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((S)-1-(((S)-5-((1-бензилциклопропил)(метил)амино)1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С17) (200 мг, 0,033 ммоль) в ДХМ (10 мл), добавляли DIPEA (0,2 мл, 1,032 ммоль), затем добавляли диэтилфосфит (0,14 мл, 1,032 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили хлоридом аммония (15 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали с получением неочищенного остатка. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((2S)-1 -(((2S)-5-((1-бензилциклопропил)(метил)амино)-1 -(диэтоксифосфорил)-1 -гидрокси5-оксопентан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С5). Система ТСХ: 100% этилацетата Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 734,51 (М+Н)⁺.

- 95 049429

Пример 10: Синтез соединений С18 и С19.

Метил-(S)-3-циклогексил-2-((пропоксикарбонил)амино)пропаноат (3)

К перемешиваемому раствору гидрохлорида (S)-2-амино-3-цuклогексилпропаноата (2) (4 г, 22,13 ммоль) в ТГФ (20 мл) и DIPEA (8,7 мл, 49,18 ммоль) при 0°С добавляли пропилкарбонохлоридат (1) (3 г, 24,59 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь гасили водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x80 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 20% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-(S)-3-циклогексил-2((пропоксикарбонил)амино)пропаноата (3). Система ТСХ: 50% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,55 ЖХМС (ИЭР): m/z 272,2 (М+Н)+.

(S)-3-циклогексил-2-((пропоксикарбонил)амино)пропановая кислота (4)

К перемешиваемому раствору метил(S)-3-циклогексил-2-((пропоксикарбонил)амино)пропаноата (3) (3 г, 11,07 ммоль) в ТГФ (20 мл) и воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (1,06 г, 44,28 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 3 ч реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляют водн. 1N раствором HCl до рН ~ 4 и экстрагировали дихлорметаном (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)3-циклогексил-2-((пропоксикарбонил)амино)пропановой кислоты (4). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 256,26 (М-н)⁺.

Метил-(S)-2-((S)-3-циклогексил-2-((пропоксикарбонил)амuно)пропанамидо)-5-(2,3дигидробензо[1][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5-оксопентаноат (5)

К перемешиваемому раствору (S)-3-циклогексил-2-((пропоксикарбонил)амино)пропановой кислоты (4) (0,6 г, 2,33 ммоль) в ДМФА (10 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC.HCl (0,66 г), г, 3,501 ммоль), НОВТ (0,47 г, 3,5 ммоль), DIPEA (1,2 мл, 6,99 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-5-(2,3дигидробензо[1][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5-оксопентаноата (фрагмент амина) (0,8 г, 2,33 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (30 мл), экстрагировали этилацетатом

- 96 049429 (2x60 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 40% этилацетатом в петролейном эфире, с получением этил-(S)-2-((S)-3-циклогексил-2((пропоксикарбонил)амино)пропанамидо)-5-(2,3-дигидробензо[1][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5оксопентаноата (5). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 532,61 (м+Н)⁺.

Пропил-((S)-3-циkлогексил-1 -(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f][ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1 -гидрокси-5оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (6)

К перемешиваемому раствору этил-(S)-2-((S)-3-циклогексил-2((пропоксикарбонил)амино)пропанамидо)-5-(2,3-дигидробензо[1][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5оксопентаноата (5) (400 мг, 0,753 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,7 мл, 1,506 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенный органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением пропил-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5(2,3-дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2ил)карбамата (6). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=504,64.5 (M+H)⁺.

Пропил-((S)-3-циkлогексил-1 -(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f][ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5диоксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С18)

К перемешиваемому раствору пропил-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[1][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (6) (230 мг, 0,45 ммоль) в ЕА (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (581 мг, 1,37 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (50 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением пропил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин4(5Н)-ил)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С18). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 502,46 (М+Н)⁺.

Пропил ((2S)-3-циkлогексил-1 -(((2S)-1 -(диэтоксифосфорил)-5-(2,3-дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин4(5Н)-ил)-1 -гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С19)

К перемешиваемому раствору пропил-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С18) (неочищенный) (200 мг, 0,199 ммоль) в ДХМ (2 мл) добавляли DIPEA (0,2 мл, 0,59 ммоль), затем диэтилфосфит (0,2 мл, 0,59 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили хлоридом аммония (15 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали с получением неочищенного остатка. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением пропил((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-1-(диэтоксифосфорил)-5-(2,3дигидробензо[1][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (соединение С19). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,45 ЖХМС (ИЭР): m/z=640,59 (M+H)⁺.

- 97 049429

Пример 11: Синтез соединения С21

О

i) DSC рЗКй.),NE5₃ (3 Μ®.}, MeCN, (Инет темп, б ч ii) йюд.-2 (I эка.) EtjN (3 asei

ACN, комн тет, 6 ч

Стадия-(1)

СЮНКэО/НгОЛФ/ «о&ш.темп., 16ч

Стадия-®

Метил-(S)-3-циклогексил-2-(индолин-1-карбоксамидо)пропаноат (3)

К перемешиваемому раствору индолина (1) (3 г, 25,21 ммоль) в ACN (30 мл) добавляли N,N'дисукцинамидилкарбонат (12,9 г, 50,42 ммоль), а затем триэтиламин (4,7 мл, 0,327 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную массу использовали непосредственно в последующей реакции.

В другую круглодонную колбу помещали метил(S)-2-амино-3-циклогексилпропаноат (2) (4 г, 21,73 ммоль) в ACN (20 мл) и обрабатывали триэтиламином (9,1 мл, 65,21 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин, затем добавляли по каплям приготовленную выше реакционную массу, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), объединенные органические слои промывали солевым раствором (50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением метил-(S)-3-циклогексил-2-(индолин-1-карбоксамидо)пропаноата (3). Система ТСХ: 50% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,45 ЖХМС (ИЭР): m/z 331,34 [М+Н]+.

(S)-3 -циклогексил-2-(индолин-1 -карбоксамидо)пропановая кислота (4)

К перемешиваемому раствору метил(S)-3-циклогексил-2-(индолин-1-карбоксамидо)пропаноата (3) (2 г, 6,06 ммоль) в ТГФ (20 мл) и воде (10 мл) добавляли гидроксид лития (436 мг, 18,18 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 3 ч реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляют водн. 1N раствором HCl до рН ~ 4 и экстрагировали дихлорметаном (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного (S)-3-циклогексил-2-(индолин-1-карбоксамидо)пропановой кислоты (4). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 317,49 [М+Н]⁺.

Метил-(S)-2-((S)-3-циклогексил-2-(индолин-1-карбоксамидо)пропанамидо)-5-(2,3дигидробензо[1][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5-оксопентаноат (5)

При 0°С к перемешиваемому раствору (S)-3-циклогексил-2-(индолин-1-кαрбоксамидо)пропановой

- 98 049429 кислоты (4) (600 мг, 1,89 ммоль) в ДМФА (20 мл) добавляли EDC.HCl (543 мг, 2,84 ммоль), НОВТ (384 мг, 2,84 ммоль), DIPEA (1,1 мл, 5,67 ммоль), и реакционную массу перемешивали в течение 15 мин. Через 15 мин добавляли гидрохлорид метил-№-метил-№-фенэтилЩ-глутамина (фрагмент амина) (622 мг, 1,89 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (150 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x80 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (80 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, элюируя 60% EtOAc в петролейном эфире, с получением метил-(S)-2-((S)-3-циклогексил-2-(индолин-1карбоксамидо)пропанамидо)-5-(2,3-дигидробензо[1][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5-оксопентаноата (5). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 591,17 [М+Н]^-.

N-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)индолин-1-карбоксамид (6)

При 0°С к перемешиваемому раствору N-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[1][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)индолин-1-карбоксамида (5) (100 мг, 0,16 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,14 мл, 0,34 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Объединенный органический слой промывали солевым раствором (20 мл), и сушили органический слой над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали нормально-фазовой хроматографией с получением N-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5(2,3-дигидробензо[f] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2ил)индолин-1-карбоксамида (6). Система тСх: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,45 ЖХМС (ИЭР): m/z 563,48 (М+Н)⁺.

N-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3-дигидробензон[1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5-диоксопентан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)индолин-1-карбоксамид (7)

К перемешиваемому раствору N-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)индолин-1-карбоксамида (6) (150 мг, 0,266 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (334 мг, 0,8 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (50 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением N-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)индолин-1 карбоксамида (7). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 561,45 (М+Н)⁺.

Диэтил-((2S)-2-((S)-3-циклогексил-2-(индолин-1-карбоксамидо)пропанамидо)-5-(2,3дигидробензо[Щ1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентил)фосфонат (соединение С21)

К перемешиваемому раствору полученного N-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)индолин-1 карбоксамида (7) (150 мг, 0,26 ммоль) в ДХМ (2 мл) добавляли DIPEA (0,14 мл, 0,8 ммоль) и диэтилфосфит (0,11 мл, 0,8 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (10 мл), экстрагировали ДХМ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄j фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением чистого диэтил-((2S)-2-((S)-3-циклогексил-2(индолин-1-карбоксамидо)пропанамидо)-5-(2,3-дигидробензо[Щ1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5оксопентил)фосфоната (соединение С21). Система ТСХ: 80% этилацетата в петролейном эфире R_f: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 699,58 (М+Н)⁺.

- 99 049429

Пример 13: Синтез соединений С27 и С8.

1-Фенэтилпирролидин-2-он (3)

К перемешиваемому раствору пирролидин-2-она (1) (10 г, 117,64 ммоль) в толуоле (150 мл) добавляли 60% NaH (7,0 г, 176,47 ммоль), TBAI (8,68 г, 23,52 ммоль), а затем (2-бромэтил)бензол (2) (21,64 мл, 152,94 ммоль) и кипятили с обратным холодильником в течение 6 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (150 мл), экстрагировали этилацетатом (2x150 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 70% этилацетатом в гексане, с получением 1-фенэтилпирролидин-2-она (3). Система ТСХ: 80% этилацетата в гексане; Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=190,29 (M+H)+.

2-Оксо-1-фенэтилпирролидин-3-карбальдегид (4)

К перемешиваемому раствору 1-фенэтилпирролидин-2-она (3) (4,0 г, 21,141 ммоль) в ТГФ (60 мл) добавляли по каплям 2М LDA в ТГФ (16 мл, 31,71 ммоль) при -78°C.

Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч, затем добавляли ДМФА (2,3 мл, 31,712 ммоль) в ТГФ (10 мл) и перемешивали в течение 2 ч при той же температуре. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь погасили насыщ. раствором NH4Q, экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением 2-оксо-1-фенэтилпирролидин-3-карбальдегида (4), который использовали на следующей стадии без какой-либо очистки. Система ТСХ: 80% этилацетата в гексане; Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=218,20 (М+Н)+.

Метил(E)-2-(((бензилокси)карбонил)амино)-3-(2-оксо-1-фенэтилпирролидин-3-ил)акрилат (6)

К перемешиваемому раствору 2-оксо-1-фенэтилпирролидин-3-карбальдегида (4) (4,5 г, неочищенный) в ТГФ (60 мл) добавляли метил-2-(((бензилокси)карбонил)амино)-2-(диметоксифосфорил)ацетат (8,2 г, 24,86 ммоль), затем DBU (4,72 г, 31,07 ммоль) при 0°C, и перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x40 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 25% этилацетатом в гексане, с получением метил(E)-2

- 100 049429 (((бензилокси)карбонил)амино)-3-(2-оксо-1-фенэтилпирролидин-3-ил)акрилата (6). Система ТСХ: 50% этилацетата в гексане; Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=218,20 (M+H)+.

Метил-2-амино-3-(2-оксо-1 -фенэтилпирролидин-3 -ил)пропаноат (7)

К перемешиваемому раствору метил(E)-2-(((бензилокси)карбонил)амино)-3-(2-оксо-1фенэтилпирролидин-3-ил)акрилата (6) (2,2 г, 5,213 ммоль) в метаноле (15 мл), этилацетате (15 мл) добавляли 10% Pd/C (500 мг) и перемешивали в течение 6 ч в атмосфере Н₂ под давлением из баллона (15 фунтов на кв. дюйм). За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 6 ч реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (30 мл), фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением метил-2-амино-3-(2-оксо-1-фенэтилпирролидин-3-ил)пропаноата (7). Система ТСХ: 50% этилацетата в гексане; Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=291,28 (M+H)⁺.

Метил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1фенэтилпирролидин-3-ил)пропаноат (8)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты) (1,0 г, 2,948 ммоль) в ДМФА (15 мл) одновременно добавляли EDC.HCl (0,84 г, 4,42 ммоль), НОВТ (0,59 г, 4,42 ммоль), DIPEA (1,14 мл, 8,84 ммоль) и метил-2-амино-3-(2-оксо-1-фенэтилпирролидин-3-ил)пропаноат (7) (0,5 г, 1,74 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x40 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 2% метанолом в дихлорметане, с получением метил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1-фенэтилпирролидин-3-ил)пропаноата (8). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=612,47 (М+Н)^-.

-Хлорбензил-((2S)-3 -циклогексил-1-((1 -гидрокси-3 -(2-оксо-1 -фенэтилпирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (9)

К перемешиваемому раствору метил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1-фенэтилпирролидин-3-ил) пропаноата (8) (400 мг, 0,65 ммоль) в ДХМ (4 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,65 мл, 1,30 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали при той же температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 2% метанолом в дихлорметане, с получением 3-хлорбензил-((2S)-3-циkлогексил-1-((1гидрокси-3-(2-оксо-1 -фенэтилпирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (9).

Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=584,45 (M+H)⁺.

-Хлорбензил-((2S)-3 -циклогексил-1 -оксо-1 -((1 -оксо-3-(2-оксо-1 -фенэтилпирролидин-3-ил)пропан2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (соединение С27)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S-3-циклогексил-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-1фенэтилпирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (9) (130 мг, 0,22 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (188 мг, 0,44 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 5 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (15 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, данный неочищенный продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-1фенэтилпирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С27). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=582,29 (М+Н)^-.

-Хлорбензил-((2S)-3 -циклогексил-1-((1 -(диэтоксифосфанил)-1 -гидрокси-3-(2-оксо-1 фенэтилпирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С8)

К перемешиваемому раствору неочищенного 3-хлорбензил-((2S)-3-циkлогексил-1-оксо-1-((1-оксо3-(2-оксо-1-фенэтилпирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С27) (220 мг, 0,378 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли DIPEA (0,2 мл, 1,13 ммоль) и диэтилфосфит (0,2 мл, 1,13 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (15 мл), экстрагировали ДХМ (3x15 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3 -хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1 -(((2S)-1 -(диэтоксифосфорил)-1 -гидрокси-3 -(2-оксо-1 фенэтилпирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С8). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=720,58 (M+H)⁺.

- 101 049429

Пример 14: Синтез соединений C30 и С28.

4N нседюкш, М-Дивган,

Стадия·!!)

«sciets?!

Стадия-®

трет-Бутил(2-гидроксибензил)(2-гидроксиэтил)карбамат (С)

К перемешиваемому раствору 2-гидроксибензальдегида (А) (25 г, 204,91 ммоль) в метаноле (50 мл) добавляли 2-аминоэтан-1-ол (12,49 мл, 204,91 ммоль) при комн. темп. и перемешивали в течение 6 ч, затем добавляли NaBH₄ (3,89 г, 102,45 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 6 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и добавляли триэтиламин (33,2 мл, 245,89 ммоль), (Вос)₂О (49,13 г, 225,40 ммоль) и оставляли при комнатной температуре в течение 24 ч. За ходом реакции следили с помощью

ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении и подкисляли до рН ~ 4 с помощью 2 N HCl, твердые вещества фильтровали и промывали водой (200 мл), сушили в вакууме с получением трет-бутил(2-гидроксибензил)(2-гидроксиэтил)карбамата (С) Система ТСХ: 30% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=290,27 [M+Na]+.

2,3,4,5-Т етрагидробензо [f][1,4] оксазепин (С)

К перемешиваемому раствору DIAD (36,72 мл, 187,26 ммоль), трифенилфосфина (49,1 г, 187,26 ммоль) в ТГФ (250 мл) медленно добавляли трет-бутил(2-гидроксибензил)(2-гидроксиэтил)карбамат (С) (25 г, 93,63 ммоль) в ТГФ (100 мл) при -10°С и оставляли при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении и растворяли в дихлорметане (200 мл), добавляли ТФУ (175 мл) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 5 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, данный неочищенный продукт разбавляли водой и промывали ди этиловым эфиром (2x100 мл), затем водный слой подщелачивали до рН ~ 12 с помощью 10% NaOH и экстрагировали ДХМ (2x150 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 2,3,4,5-тетрагидробензо[f][1,4]оксазепина (D). Система ТСХ: 80% этилацетата в петролейном эфире; Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 150,12 [М+Н]⁺.

- 102 049429

Метил(S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-5оксопентаноат(F)

К перемешиваемому раствору (S)-4-((трет-бутоксикарбонил)амино)-5-метокси-5-оксопентановой кислоты (Е) (10,0 г, 38,31 ммоль) в ДМФА (1оО мл) одновременно добавляли EDC.HCl (10,9 г). г, 57,47 ммоль), НОВТ (7,7 г, 57,47 ммоль), DIPEA (20,0 мл, 114,93 ммоль) и 2,3,4,5тетрагидробензо[1][1,4]оксазепин (D) (6,2 г, 42,14 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного соединения, данное неочищенное вещество очищали нормально-фазовой хроматографией, элюируя 40% этилацетатом в гексане, с получением метил(S)-2-((третбутоксикарбонил)амино)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-5-оксопентаноата (F). Система ТСХ: 50% этилацетата в петролейном эфире R_f: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=393,38 [М+Н]+.

Гидрохлорид метил(S)-2-амино-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-5-оксопентаноата (фрагмент амина)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-5-(2,3дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-5-оксопентаноата (F) (5,0 г, 12,75 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) добавляли по каплям 4N HCl в диоксане (20 мл) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения, полученное неочищенное вещество растирали с диэтиловым эфиром с получением чистого гидрохлорида метил(S)-2-амино-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-5-оксопентаноата (фрагмент амина). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане R_f: 0,1 ЖХМС (иЭР): m/z 293,1 [М+Н]⁺.

Гидрохлорид метил(S)-3-циклогексил-2-(((пиперидин-4-илокси)карбонил)амино)пропаноата (2)

К перемешиваемому раствору трет-бутил(S)-4-(((3-циклогексил-1-метокси-1-оксопропан-2ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилата (1) (4 г, 9,70 ммоль) в 1,4-диоксане (40 мл) по каплям добавляли 4N HCl в диоксане (40 мл) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения, полученное неочищенное вещество растирали с диэтиловым эфиром с получением гидрохлорида метил(S)-3циклогексил-2-(((пиперидин-4-илокси)карбонил)амино)пропаноата (2).

Система тСх: 50% этилацетата в петролейном эфире; R_f: 0,1 ЖхМС (ИЭР): m/z 313,33 [М+Н]⁺.

Метил(S)-3-циклогексил-2-((((1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил)окси)карбонил)амино)пропаноат (3)

К перемешиваемому раствору метил(S)-3-циклогексил-2-(((пиперидин-4илокси)карбонил)амино)пропаноата (2) (3,3 г, 10,57 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавляли триэтиламин (4,5 мл), затем мезилхлорид (1 мл, 12,69 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ДХМ и промывали водой (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением метил(S)-3циклогексил-2-((((1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил)окси)карбонил)амино)пропаноата (3). Система ТСХ: 70% этилацетата в петролейном эфире R_f: 0,3 ЖХМС (иЭр): m/z=391,2 [М+Н]⁺.

(S)-3-циклогексил-2-(((( 1 -(метилсульфонил)пиперидин-4-ил)окси)карбонил)амино)пропановая кислота (4)

К перемешиваемому раствору метил(S)-3-циклогексил-2-((((1-(метилсульфонил)пиперидин-4ил)окси)карбонил)амино)пропаноата (3) (2,0 г, 5,12 ммоль) в ТГФ (15 мл), воде (15 мл) добавляли гидроксид лития (644 мг, 15,38 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-3-циклогексил-2-((((1-(метилсульфонил)пиперидин-4ил)окси)карбонил)амино)пропановой кислоты (4).

Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 377,52 [М+Н]⁺.

Метuл(S)-2-((S)-3 -циклогексил-2-(((( 1 -(метилсульфонил)пиперидин-4ил)окси)карбонил)амино)пропанамидо)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-5-оксопентаноат (5)

К перемешиваемому раствору (S)-3-циклогексил-2-((((1-(метилсульфонил)пиперидин-4ил)окси)карбонил)амино)пропановой кислоты (4) (1,0 г, 2,65 ммоль) ДМФА (15 мл) одновременно добавляли EDC.HCl (764 мг, 3,98 ммоль), НОВТ (538 мг, 3,98 ммоль), DIPEA (1,4 мл, 7,97 ммоль) и гидрохлорид метил-(S)-2-амино-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5-оксопентаноата (фрагмент амина) (0,93 г, 3,19 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), полученные твердые вещества фильтровали и промывали избытком воды, затем сушили в вакууме с

- 103 049429 получением метил(S)-2-((S)-3-циклогексил-2-((((1-(метилсульфонил)пиперидин-4ил)окси)карбонил)амино)пропанамидо)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-5оксопентаноата (5). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 651,25 [М+Н]^-.

-(Метилсульфонил)пиперидин-4-ил((S)-3 -циклогексил- 1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамат (6)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((S)-3-циклогексил-2-((((1-(метилсульфонил)пиперидин4-ил)окси)карбонил)амино)пропанамидо)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-5оксопентаноата (5) (0,5 г, 0,76 ммоль) в ДХМ (15 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,76 мл, 1,53 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь гасили насыщ. раствором NH₄Cl (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Его растирали с диэтиловым эфиром с получением 1 -(метилсульфонил)пиперидин-4-ил((S)-3 -циклогексил- 1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (6). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=623,40 (M+H)⁺.

-(Меmuлсульфонuл)nunерuдuн-4-uл((S)-3 -циклогексил- 1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[1] [ 1,4]оксазеπин-4(5H)-ил)-1,5-диоксоπентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (соединение C30)

К перемешиваемому раствору 1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил((S)-3-циkлогексил-1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин-4(5H-ил)-1 -гидрокси-5 -оксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2ил)карбамата (6) (220 мг, 0,35 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (449 мг, 1,06 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, данный остаток очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1(метилсульфонил)пиперидин-4-ил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5Н)ил)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение C30). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 621,44 [М+Н]⁺.

-(Метилсульфонил)пиперидин-4-ил((2S)-3 -циклогексил-1 -(((25)-1 -(диэтоксифосфорил)-5 -(2,3дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамат (соединение С28)

К перемешиваемому раствору 1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил((S)-3-циkлогексил-1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[f] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (соединение C30) (220 мг, неочищенного, 0,35 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли DIPEA (0,19 мл, 1,06 ммоль), затем добавляли диэтилфосфит (0,15 мл, 1,06 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным Na2SO4 и упаривали с получением неочищенного остатка. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил((2S)-3циклогексил-1 -(((2S)-1-(диэтоксифосфорил)-5-(2,3-дигидробензо[f] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1-гидрокси5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С28). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=759,50 [М+Н]⁺.

- 104 049429

Пример 23: Синтез соединения C10

1-(3-Хлорфенил)циклопропан-1-ол (2)

К перемешиваемому раствору 2-фенилацетонитрила (1) (5 г, 29,41 ммоль) в ТГФ (60 мл) добавляли изопропоксид титана (11,69 г, 41,17 ммоль), а затем медленно по каплям добавляли 2М этилмагнийхлорид в ТГФ (37 мл, 73,52 ммоль) в течение 30 мин при 0°C. Затем реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 36 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония (50 мл), экстрагировали этилацетатом (3x40 мл), промывали солевым раствором (100 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 15% этилацетатом в петролейном эфире с получением 1-(3-хлорфенил)циклопропан-1-ола (2). Система ТСХ: 20% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=151,18 [M-OH]⁺.

Метил(S)-2-(((1-(3-хлорфенил)циклопропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилnропаноат (4)

К перемешиваемому раствору 1-(3-хлорфенил)циклопропан-1-ола (2) (1,4 г, 8,33 ммоль) в ACN (20 мл) добавляли Ν,Ν'-дисукцинамидилкарбонат (3,19 г, 12,49 ммоль), затем триэтиламин (2,8 мл, 24,99 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали в течение 6 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную массу использовали непосредственно в последующей реакции.

В другую круглодонную колбу помещали метил(S)-2-амино-3-циклогексилпропаноат (3) (2,70 г, 12,82 ммоль) в ACN (20 мл) и обрабатывали триэтиламином (3,5 мл, 24,27 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин, затем добавляли по каплям приготовленную выше реакционную массу, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), объединенные органические слои промывали солевым раствором (50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением метил(S)-2-(((1-(3-хлорфенил)циклопропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата (4). Система ТСХ: 20% этилацетата в петролейном эфире R_f: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z=380,44 [M+H]⁺.

(S)-2-(((1-(3-хлорфенил)циклопропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановая кислота (5)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-(((1-(3-хлорфенил)циклопропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропаноата (4) (1,3 г, 3,43 ммоль) в ТГФ (20 мл), воде (10 мл) добавляли гидроксид лития (246 мг, 10,29 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 3 ч реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляют водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного (S)-2-(((1-(3-хлорфенил)циклопропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (5). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 366,43 [М+Н]⁺.

Метил-N2-((S)-2-(((1-(3-хлорфенил)циклопропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноил)-N5метил-М5-фенэтил-Е-глутаминат (7)

К перемешиваемому раствору (S)-2-(((1-(3-хлорфенил)циклопропокси)карбонил)амино)-3

- 105 049429 циклогексилпропановой кислоты (5) (1,0 г, 2,73 ммоль) ДМФА (10 мл) одновременно добавляли EDC.HCl (0,78 г, 4,10 ммоль), НОВТ (0,55 г, 4,10 ммоль), DIPEA (1,5 мл, 8,21 ммоль) и гидрохлорид метил-N-5-метил-N-5-фенэтил-L-глутамината (6) (1,03 г, 3,28 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли водой (30 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 60% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-IV 2-((S)-2-(((1-(3-хлорфенил)циклопропокси)карбонил)амино)3-циклогексилпропаноил)-N5-метил-N5-фенэтил-L-глутамината (7). Система ТСХ: 80% этилацетата в петролейном эфире; Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=627,47 (M+H)+.

-(3 -Хлорфенил)циклопропил((S)-3 -циклогексил-1 -(((S)-1 -гидрокси-5 -(метил(фенэтил)амино)-5 оксопентан-2-ил)амино)- 1-оксопропан-2-ил) карбамат (8)

К перемешиваемому раствору метил-N2-((S)-2-(((1-(3-хлорфенил)циклопропокси)карбонил)амино)3-циклогексилпропаноил)-N5-метил-N5-фенэтил-L-глутамината (7) (1 г, 1,60 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (2,4 мл, 4,80 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь погасили водой (10 мл) и экстрагировали этилацетат (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Растирали с диэтиловым эфиром с получением 1-(3-хлорфенил)циклопропил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-1-гидрокси-5(метил(фенэтил)амино)-5-оксопентан)-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (8). Система ТСХ: 100% этилацетата Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=598,60 (M+H)⁺.

-(3 -Хлорфенил)циклопропил((S)-3 -циклогексил-1 -(((S)-5 -(метил(фенэтил)амино)-1,5диоксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение C10)

К перемешиваемому раствору 1-(3-хлорфенил)циклопропил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-1-гидрокси5-(метил(фенэтил)амино)-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (8) (150 мг, 0,25 ммоль) растворяли в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (319 мг, 0,75 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x10 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, данный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, элюируя 3% метанолом в дихлорметане, с получением 1-(3-хлорфенил)циклопропил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5метил(фенэтил)амино)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение C10). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=596,43 (М+Н)⁺.

Пример 27: Синтез соединения С4

- 106 049429

1-(трет-бутил)-2-этил(S)-5-оксопирролидин-1,2-дикарбоксилат (1)

К перемешиваемому раствору этил(S)-5-оксопирролидин-2-карбоксилата (1) (20,0 г, 127,38 ммоль) в ДХМ (200 мл) добавляли триэтиламин (22,02 мл, 152,86 ммоль), Вос-ангидрид (30,54 мл, 140,12 ммоль) и DMAP (1,5 г, 12,73 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ, реакционную смесь гасили ледяной водой (500 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3x400 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией на системе Grace, соединение элюировали 30% этилацетатом и петролейным эфиром с получением 1-(трет-бутил)-2этил(S)-5-оксопирролидин-1,2-дикарбоксилата (2) (29,0 г, 112,71 ммоль, выход 88%) в виде белого твердого вещества с металлическим оттенком. Система ТСХ: 30% этилацетата в петролейном эфире; Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 258,23 (М+Н)+.

1-(трет-бутил) 2-этил(2S)-4-метил-5-оксопирролидин-1,2-дикарбоксилат (2)

К перемешиваемому раствору 1-(трет-бутил)-2-этил(S)-5-оксопирролидин-1,2-дикарбоксилата (2) (6,0 г, 23,34 ммоль) в сухом ТГФ (600 мл) добавляли 1М LiHMDS (28 мл, 28,01 ммоль) при -78°C и перемешивали в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ, реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x200 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией на системе Grace, соединение элюировали 20% этилацетатом и петролейным эфиром с получением 1-(трет-бутил)-2-этил(2S)-4-метил-5-оксопирролидин-1,2дикарбоксилата (3) (1,4 г, 5,16 ммоль, выход 22%) в виде прозрачной липкой жидкости. Система ТСХ: 20% этилацетата в петролейном эфире; Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 272,28 (М+Н)⁺.

Этил-(2S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-метил-5-оксо-5-(фенэтиламино)пентаноат (5)

К перемешиваемому раствору 1-(трет-бутил)-2-этил(2S)-4-метил-5-оксопирролидин-1,2дикарбоксилата (3) (1,4 г, 5,16 ммоль) в толуоле (50 мл) добавляли 2-фенилэтиламин (4) (625 мг, 5,16 ммоль) и нагревали в герметично закрытой пробирке при 90°C в течение 6 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС, реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией на системе Grace, соединение элюировали 50% этилацетатом и петролейным эфиром с получением этил-(2S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-метил-5-оксо-5(фенэтиламино)пентаноата (5) (1,0 г, 2,549 ммоль, выход 49%) в виде прозрачной липкой жидкости. Система ТСХ: 50% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 393,4 (М+Н)⁺.

Этил-(2S)-2-амино-4-метил-5-оксо-5-(фенэтиламино)пентаноат (6)

К перемешиваемому раствору этил-(2S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-метил-5-оксо-5(фенэтиламино)пентаноата (5) (1,0 г, 2,98 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) по каплям добавляли 4М HCl в диоксане (10 мл) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения, полученное неочищенное вещество растирали с диэтиловым эфиром с получением этил(2S)-2-амино-4-метил-5-оксо-5(фенэтиламино)пентаноата (6) (0,720 г, 2,462 ммоль, выход 96%) в виде белого твердого вещества с металлическим оттенком Система ТСХ: 70% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,9 ЖХМС (ИЭР): m/z 293,28 (М+Н)⁺.

Этил-(2S)-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-4-метил-5оксо-5-(фенэтиламино)пентаноат (7)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты) (0,830 г, 2,448 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли EDC.HCl (0,71 г, 3,672 ммоль), HOBt (0,49 г, 3,67 ммоль), DIPEA (1,35 мл, 7,345 ммоль) и этил(2S)-2амино-4-метил-5-оксо-5-(фенэтиламино)пентаноат (6) (0,714 г, 2,448 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией на системе Grace, соединение элюировали 50% метанолом в дихлорметане с получением этил-(2S)-2-((S)-2-((((3хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-4-метил-5-оксо-5(фенэтиламино)пентаноата (7) (1,3 г, 2,116 ммоль, выход 86%) в виде белого твердого вещества с металлическим оттенком. Система ТСХ: 50% этилацетата в петролейном эфире R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 614,47 (М+Н)⁺.

-хлорбензил-((2S)-3 -циклогексил-1 -(((2S)-1 -гидрокси-4-метил-5 -оксо-5 -(фенэтиламино)пентан-2ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (8)

К перемешиваемому раствору этил-(2S)-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-4-метил-5-оксо-5-(фенэтиламино)пентаноата (7) (0,250 г, 0,407 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,407 мл, 0,814 ммоль) при 0°C, реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь

- 107 049429 гасили насыщенным раствором NH4C1 (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного 3-хлорбензил((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-1-гидрокси-4-метил-5-оксо-5-(фенэтиламино)пентан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (8) (0,200 г, 0,349 ммоль, выход 86%) в виде белого твердого вещества с металлическим оттенком. Система ТСХ: 100% этилацетата Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 572,49 (М+Н)+.

3-Хлорбензил((2S)-3-циклогексил-1-(((3S)-2-гидрокси-5-метил-6-оксо-1-(фенэтилпиперидин-3ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С4)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-1-гидрокси-4-метил-5оксо-5-(фенэтиламино)пентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (8) (200 мг, 0,349 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (296,6 мг, 0,699 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (15 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄j фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищают препаративной ВЭЖХ с получением 3 -хлорбензил((2S)-3 -циклогексил-1 -(((3 S)-2-гидрокси-5-метил-6-оксо-1 -(фенэтилпиперидин-3 ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С4) (40 мг, 0,0877 ммоль, выход 25%) в виде белого твердого вещества с металлическим оттенком. Система ТСХ: 100% этилацетата R_f: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 552,89 (М-ОН)⁺.

Пример 30: Синтез соединений С26 и С7.

Метил-(S)-3-циклогексил-2-(((гексилокси)карбонил)амино)пропаноат (3)

К перемешиваемому раствору гидрохлорида (S)-2-амино-3-циклогексилпропаноата (2) (4,8 г, 2,1 ммоль) в ТГФ (20 мл) и DIPEA (9,7 мл, 5,4 ммоль) при 0°С добавляли гексилкарбонохлоридат (1) (3 г, 1,8 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь гасили водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x80 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-(S)-3-циклогексил-2(((гексилокси)карбонил)амино)пропаноата (3). Система ТСХ: 5% МеОН в ДХМ R_f: 0,55 ЖХМС (ИЭР): m/z=314,42 (М+Н)⁺.

(S)-3-Циклогексил-2-(((гексилокси)карбонил)амино)пропановая кислота (4)

К перемешиваемому раствору метил(S)-3-циклогексил-2-(((гексилокси)карбонил)амино)пропаноата (3) (2 г, 6,36 ммоль) в ТГФ (20 мл) и воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (450 мг, 19 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью

- 108 049429

ТСХ и ЖХМС. Через 3 ч реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляют водн. 1N раствором HCl до рН ~ 4 и экстрагировали дихлорметаном (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)3-циклогексил-2-(((гексилокси)карбонил)амино)пропановой кислоты (4). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=300,2 (M+H)+.

трет-Бутил-1-((S)-4-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-5метокси-5-оксопентаноил)-1,2,3,5-тетрагидро-4H-бензо[е][1,4]диазепин-4-карбоксилат (5)

При 0°С к перемешиваемому раствору (S)-3-циклогексил-2(((гексилокси)карбонил)амино)пропановой кислоты (1,2 г, 4 ммоль) в ДМФА (20 мл) добавляли EDC.HCl (1,14 г, 6 ммоль), НОВТ (834 мг, 6 ммоль), DIPEA (2 мл, 12 ммоль) и гидрохлорид метил-(S)-2-амино-5(2,3-дигидробензо[Щ1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5-оксопентаноата (фрагмент амина) (1,57 г, 4,8 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (500 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 40% этилацетатом в петролейном эфире, с получением трет-бутил-1-((S)-4-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-5-метокси-5-оксопентаноил)-1,2,3,5-тетрагидро-4H-бензо[е][1,4]диазепин-4карбоксилата (5). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХмС (ИЭР): m/z 574,53 (М+Н)⁺.

Гексил-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (6)

К перемешиваемому раствору метил-(S)-2-((S)-3-циклогексил-2(((гексилокси)карбонил)амино)пропанамидо)-5-(2,3-дигидробензо[Щ1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5оксопентаноата (5) (960 мг, 1,67 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,25 мл, 1,5 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенный органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного гексил-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5(2,3-дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2ил)карбамата (6). Система ТСХ: 5% МеОН в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=546,51 (M+H)⁺.

Гексил-((S)-3-циклогексил-1 -(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5диоксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С26)

К перемешиваемому раствору гексил-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[Щ1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (6) (250 мг, 0,45 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (583 мг, 1,37 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (50 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO_4; фильтровали и концентрировали с получением неочищенного гексил-((S)-3циклогексил-1 -(((S)-5-(2,3-дигидробензо[f] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1 оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С26), который использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,5 жХмС (ИЭР): m/z=544,55 (М+Н)+.

Гексил((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-1-(диэтоксифосфорил)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин4(5Н)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С7)

К перемешиваемому раствору гексил-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-5-(2,3дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (248 мг, 0,45 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли DIPEA (0,23 мл, 1,37 ммоль), а затем диэтилфосфит (0,18 мл, 1,37 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили хлоридом аммония (15 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным Na2SO4 и упаривали с получением неочищенного остатка. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением гексил((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-1-(диэтоксифосфорил)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С7). Система ТСХ: 5% МеОН в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=682,6 (M+H)⁺.

- 109 049429

Пример 32: Синтез соединения С35 и С31.

Метил(S)-2-(3-(3 -хлорбензил)-3 -метилуреидо)-3 -циклогексилпропаноат (3)

К перемешиваемому раствору гидрохлорида метил(S)-2-амино-3-циклогексилпропаноата (2) (500 мг, 2,26 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) добавляли дифосген (0,4 мл, 3,39 ммоль) при комн. темп. и нагревали с обратным холодильником до кипения в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка, данный остаток использовали непосредственно в последующей реакции.

В другую круглодонную колбу помещали 1-(3-хлорфенил)-N-метилметанамин (1) (350 мг, 2,26 ммоль) в ACN (10 мл) и обрабатывали триэтиламином (0,95 мл, 6,78 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин, затем добавляли по каплям приготовленную выше реакционную массу и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. и нагревали до 80°С в течение 3 ч, реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), объединенные органические слои промывали солевым раствором (20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением метил(S)-2-(3-(3-хлорбензил)-3-метилуреидо)-3-циклогексuлпропаноата (3). Система ТСХ: 50% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=367,32 [M+H]+.

(S)-2-(3-(3-Хлорбензил)-3-метилуреидо)-3-циклогексилпропановая кислота (4)

К перемешиваемому раствору (S)-2-(3-(3-хлорбензил)-3-метилуреидо)-3-циклогексилпропаноата (3) (600 мг, 1,63 ммоль) в ТГФ (4 мл), воде (2 мл) добавляли гидроксид лития (117 мг, 4,89 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x15 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-2-(3-(3хлорбензил)-3-метилуреидо)-3-циклогексилпропановой кислоты (4). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 353,47 [М+Н]⁺.

Метил(S)-2-((S)-2-(3-(3-хлорбензuл)-3-метuлуреuдо)-3-циклогексилпропанамuдо)-5-(2,3дигидробензо[1][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-5-оксопентаноат (5)

К перемешиваемому раствору (S)-2-(3-(3-хлорбензил)-3-метилуреидо)-3-циклогексилпропановой кислоты (500 мг, 1,42 ммоль) в ДМФА (10 мл) одновременно добавляли EDC.HCl (406 мг, 2,13 ммоль), HOBt (287 мг, 2,13 ммоль), DIPEA (0,7 мл, 4,26 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино -5-(2,3дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H-ил)-5-оксопентаноата (фрагмент амина) (559 мг, 1,70 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 2% метанолом в дихлорметане с получением метил(S)-2-((S)-2-(3-(3

- 110 049429 хлорбензил)-3-метилуреидо)-3-циклогексилпропанамидо)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксαзепин-4(5H)ил)-5-оксопентаноата (5). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=627,89 [M+H]+.

(S)-2-(3-(3-Хлорбензил)-3-метилуреидо)-3-циклогексил-N-((S)-5-(2,3дигидробензо[1] [ 1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1 -гидрокси-5-оксопентан-2 -ил)пропанамид (6)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((S)-2-(3-(3-хлорбензил)-3-метилуреидо)-3циклогексилпропанамидо)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-5-оксопентаноата (5) (480 мг, 0,95 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,95 мл, 1,91 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением соединения (S)-2-(3-(3-хлорбензил)-3-метилуреидо)-3-циклогексил-N-((S)-5-(2,3дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)пропанамида (6). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 599,53 [М+Н]⁺.

(S)-2-(3-(3-Хлорбензил)-3-метилуреидо)-3-циклогексил-N-((S)-5-(2,3дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1,5-диоксопентан-2-ил)пропанамид (соединение С35)

К перемешиваемому раствору (S)-2-(3-(3-хлорбензил)-3-метилуреидо)-3-циклогексил-N-((S)-5-(2,3дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1-гидрокси-5-оксопентан-2-ил)пропанамида (6) (200 мг, 0,33 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (425 мг, 1,00 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (15 мл), а затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3 х 15 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x15 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением (S)-2-(3-(3хлорбензил)-3-метилуреидо)-3-циклогексил-N-((S)-5-(2,3-дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5диоксопентан-2-ил)пропанамида (соединение С35). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf-: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=597,44 (M+H)⁺.

Диэтил((28)-2-((8)-2-(3-(3-хлорбензил)-3-метилуреидо)-3-циклогексилпропанамидо)-5-(2,3дигидробензо[f] [ 1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1 -гидрокси-5-оксопентил)фосфонат (соединение C31)

К перемешиваемому раствору (S)-2-(3-(3-хлорбензил)-3-метилуреидо)-3-циклогексил-N-((S)-5-(2,3дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5Н)-ил)-1,5-диоксопентан-2-ил)пропанамидα (соединение С35) (110 мг неочищенного, 0,18 ммоль) в ДХМ (4 мл) добавляли DIPEA (0,1 мл, 0,55 ммоль)), затем добавляли диэтилфосфит (76 мг, 0,55 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили хлоридом аммония (10 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали с получением неочищенного остатка. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением диэтил((2S)-2-((S-2-(3-(3-хлорбензил)-3-метилуреидо)-3-циклогексилпропанамидо)-5-(2,3дигидробензо[f] [ 1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-1 -гидрокси-5-оксопентил)фосфоната (соединение С31). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=735,44 (M+H)⁺.

Пример 33: Синтез соединения С32

NaNOj ц эмМ, Χ'χΜ ФЛ0р»ЯЮЦЙН(1.6ЭКВ.), s ] дасо, 45°С. 16 ч Гт nJ 8ос Стадия ГА) Вос/ А В Ас2ОПжв.|, И/жк); ^%^°2 даЖ-^кгетДч Хх Стадам-(C) С I , . Ini- о (Вос)2О Д Зж,}, ОМАР УМ жМ, В< Стадая-Ш 1 0 (j) IN HCl {ОД, Жш&теиЦч б A ® к2с°з· НСНО, ТГф. 4ч Т

4N НС1/ЙИ0Ю1Ϊ6Об.) О2 даоканрОой.) _______УС до тми, wn., 2 ч г &здйя-(8) xNOj 4 l-SuOCH(NMeb. эс О МеОСН2СН2ОМе, zN 75X124 v—Стадия (2) 2 Р0С 0 иомолтмеон ' ...............ТО, -Ж-, 20 тин....................... О~ Стздйя-(4)

- 111 049429

трет-Бутил-4-нитропиперидин-1-карбоксилат (В)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-иодопиперидин-1-карбоксилата (А) (20 г, 64,308 ммоль) в ДМСО (100 мл) добавляли флороглюцин (12,9 г, 102,89 ммоль), а затем нитрит натрия (8,8 г, 128,6 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при 45°C в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили водой (250 мл) и экстрагировали диэтиловым эфиром (3x100 мл), объединенные органические слои промывали водой (2x50 мл), солевым раствором (50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением трет-бутил-4-нитропиперидин-1-карбоксилата (В). Система ТСХ: 50% EtOAc/петролейный эфир Rf: 0,45.

Гидрохлорид 4-нитропиперидина (С)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-нитропиперидин-1-карбоксилата (В) (3 г, 13,043 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) добавляли 4N НС (5 мл) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 4 часа реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение растирали с диэтиловым эфиром (2x10 мл) с получением гидрохлорида 4-нитропиперидина (С). Система ТСХ: 5% МеОН/ДХМ Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 131,10 [М+Н]+.

1-(4-Нитропиперидин-1-ил)этан-1-он (промеж. соед.-4)

К перемешиваемому раствору гидрохлорида 4-нитропиперидина (С) (2,2 г, 13,25 ммоль) в ДХМ (20 мл) одновременно добавляли уксусный ангидрид (1,25 мл, 13,25 ммоль) и триэтиламин (2,7 мл, 19,87 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали ДХМ (2x20 мл), органические слои промывали водой (2x10 мл), солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали нормально-фазной хроматографией с получением указанного в заголовке продукта Система ТСХ: 30% EtOAc в петролейном эфире R_f: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 173,33 [М+Н]⁺.

-(трет-бутил)2-метил(S)-5 -оксопирролидин-1,2-дикарбоксилат (2)

К перемешиваемому раствору этил(8)-5-оксопирролидин-2-карбоксилата (1) (20,0 г, 127,38 ммоль) в ДХМ (200 мл) добавляли триэтиламин (22,02 мл, 152,86 ммоль), Вос-ангидрид (30,54 мл, 140,12 ммоль) и DMAP (1,5 г, 12,73 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16

- 112 049429

ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ, реакционную смесь гасили ледяной водой (500 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3x400 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией на системе Grace, соединение элюировали 30% этилацетатом и петролейным эфиром с получением 1-(трет-бутил)-2этил(S)-5-оксопирролидин-1,2-дикарбоксилата (2). Система ТСХ: 30% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 258,23 (М+Н)+.

1-(трет-бутил)-2-метил-(S,Z)-4-((диметиламино)метилен)-5-оксопирролидин-1,2-дикарбоксилат (3)

К перемешиваемому раствору 1-(трет-бутил)-2-метил-(S)-5-оксопирролидин-1,2-дикарбоксилата (2) (10 г, 41,15 ммоль) в диметоксиметане (100 мл) добавляли реактив Бредерика (13 мл, 61,72 ммоль) при 0°C и перемешивали при 80°C в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение растирали с диэтиловым эфиром (2x20 мл) с получением 1-(трет-бутил)-2-метил-(S,Z)-4-((диметиламино)метилен)-5оксопирролидин-1,2-дикарбоксилата (3). Система ТСХ: 60% EtOAc в петролейном эфире Rf: 0,2.

1-(трет-бутил)2-метил(S)-4-метилен-5-оксопирролидин-1,2-дикарбоксилат (4)

К перемешиваемому раствору 1-(трет-бутил)-2-метил-(S,Z)-4-((диметиламино)метилен)-5оксопирролидин-1,2-дикарбоксилата (3) (500 мг, 1,666 ммоль) в ТГФ (4 мл) добавляли 1N HCl (1,75 мл) при комнатной температуре и перемешивали в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Разделяли слои, и органический слой использовали непосредственно в последующей реакции.

В другой круглодонной колбе к указанному выше органическому слою добавляли 33% формальдегид (3 об.) и карбонат калия (344 мг, 2,49 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 4 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Слои разделяли, водный слой экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), объединенные органические слои промывали насыщ. раствором гидрокарбоната натрия (100 мл), солевым раствором (50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением 1(трет-бутил)-2-метил-(S)-4-метилен-5-оксопирролидин-1,2-дикарбоксилата. Система ТСХ: 30% EtOAc/петролейный эфир Rf: 0,2.

Диметил(S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-метиленпентандиоат (5)

К перемешиваемому раствору 1-(трет-бутил)-2-метил(S)-4-метилен-5-оксопирролидин-1,2дикарбоксилата (4) (400 мг, 1,56 ммоль) в сухом ТГФ (10 мл) добавляли метоксид лития (1М в метаноле) (1,88 мл, 1,88 ммоль) при -40°C и перемешивали при той же температуре в течение 20 мин. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония (5 мл), экстрагировали этилацетатом (3x20 мл), объединенные органические слои промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия. и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением диметил-(S)-2-((третбутоксикарбонил)амино)-4-метиленпентандиоата (5). Система ТСХ: 30% EtOAc в петролейном эфире R_f: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 310,3 (M+Na+H)+.

Диметил-2-((1-ацетил-4-нитропиперидин-4-ил)метил)-4-((третбутоксикарбонил)амино)пентандиоат (6)

К перемешиваемому раствору диметил-(S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4метиленпентандиоата (5) (500 мг, 1,74 ммоль) в ACN (5 мл) добавляли 1-(4-нитропиперидин-1-ил)этан-1он (промеж. соед.-4) (300 мг, 1,74 ммоль) и DBU (0,55 мл, 3,48 ммоль) при 0°С и перемешивании при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением диметил-2-((1-ацетил-4-нитропиперидин-4-ил)метил)-4-((третбутоксикарбонил)амино)пентандиоата (6). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,35 ЖХМС (ИЭР): m/z 482,4 (М+Н)+.

Метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((третбутоксикарбонил)амино)пропаноат (7)

К перемешиваемому раствору диметил-2-((1-ацетил-4-нитропиперидин-4-ил)метил)-4-((третбутоксикарбонил)амино)пентандиоата (6) (100 мг, 0,217 ммоль) в метаноле (4 мл) добавляли хлорид никеля (31 мг, 0,23 ммоль), затем борогидрид натрия (42 мг, 1,08 ммоль) при -10°С и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили водой (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x10 мл), объединенные органические слои промывали водой (2x10 мл), солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропаноата (7). Система ТСХ: 10% МеОН/ДХМ Rf: 0,2 ЖХ-МС (ESI): m/z 420,35 (M+Na+H)+.

Гидрохлорид метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-аминопропаноата (8)

К перемешиваемому раствору метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((третбутоксикарбонил)амино)пропаноата (7) (80 мг, 0,2 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли 4М HCl в диоксане (2 мл) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью

- 113 049429

ТСХ. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток растирали с нпентаном с получением гидрохлорида метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2аминопропаноата (8). Система тСх: 15% МеОН/ДХМ Rf: 0,1.

Метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-2-((((3хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)пропаноат (9)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты) (54 мг, 0,16 ммоль) в ДМФА (5 мл) при 0°C одновременно добавляли EDC-HCl (42 мг, 0,22 ммоль), НОВТ (30 мг, 0,22 ммоль), DIPEA (0,1 мл, 0,44 ммоль) и гидрохлорид метил 3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4,5]декан-3-ил)-2-аминопропаноата (8) (50 мг, 0,14 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3ил)-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)пропаноата (9).

Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z=619,57 (М+Н)+.

3-Хлорбензил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-гидроксипропан-2ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (10)

К перемешиваемому раствору метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-2((((3-хлорбензил)окси))карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)пропаноата (9) (90 мг, 0,14 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,2 мл, 0,24 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенный органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 3-хлорбензил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3гидроксипропан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (10). Система ТСХ: 5% МеОН в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=591,43 (M+H)⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение C32)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (10) (80 мг, 0,13 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (230 мг, 0,54 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С32). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=589,46 (М+Н)⁺.

- 114 049429

Пример 34: Синтез соединений С51 и С34.

* мн_гна ²

i) DSC, NEt₅ACN, fl С ww wn 6 ч нХоед.Д, EtjNACN имньмп 1оч

Стадия-®

О

LiOH , H₂O, НФ mm Ai

Стадия-®

фрагмент-2 амина

ЕЭС нС „ НОВ!, ΟίΡΕΑ, ДХМ,0’С-комнлемп„16ч

Стадия-®

трет-Бутил(S)-4-(((1-метокси-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилат (3)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-гидроксипиперидин-1-карбоксилата (1) (10 г, 49,67 ммоль) в ACN (80 мл) добавляли N,N'-дисукцинамидилкарбонат (19,7 г, 74,51 ммоль), а затем триэтиламин (20,9 мл, 149,1 ммоль) при 0°С и перемешивании при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную массу использовали непосредственно в последую щей реакции.

В другую круглодонную колбу помещали гидрохлорид метил-L-лейцината (2) (13,5 г, 74,58 ммоль) в ACN (50 мл) и обрабатывали триэтиламином (20,9 мл, 149,1 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин, затем добавляли по каплям приготовленную выше реакционную массу, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (150 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x150 мл), объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением трет-бутил(S)-4-(((1-метокси-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилата (3). Система ТСХ: 30% этилацетата в петролейном эфире R_f·: 0,5 ЖХМС (ИЭр): m/z 395,29 [M+Na]^-.

(((1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-4-ил)окси)карбонил)-L-лейцин (4)

К перемешиваемому раствору трет-бутил(S)-4-(((1-метокси-4-метил-1-оксопентан-2ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилата (3) (3,5 г, 9,40 ммоль) в ТГФ (20 мл), воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (1,18 г, 28,2 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (((1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-4-ил)окси)карбонил)-Lлейцина (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 381,53 [M+Na]+.

трет-Бутил-4-((((S)-1 -(((S)-1 -метокси-1 -оксо-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилат (5)

К перемешиваемому раствору (((1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-4-ил)окси)карбонил)-Lлейцина (4) (2,0 г, 5,58 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (1,6 г, 8,37 ммоль), НОВТ (1,13 г, 8,37 ммоль), DIPEA (2,8 мл, 16,75 ммоль) и гидрохлорид метил-(S)-2-амино-3-((S)-2

- 115 049429 оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (1,2 г, 6,70 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), объединенные органические слои промывали солевым раствором (50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, элюируя 5% метанолом в дихлорметане, с получением трет-бутил-4-((((S)-1-(((S)-1-метокси-1-оксо-3((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилата (5). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=527,74 [М+Н]+.

трет-Бутил-4-((((S)-1 -((((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил1 -оксопентан-2-ил)карбамоил)окси)пиперидин-1 -карбоксилат (6)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-((((S)-1-(((S)-1-метокси-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамоил)окси)пиперидин-1карбоксилата (5) (620 мг, 1,17 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,2 мл, 2,35 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь гасили насыщ. раствором NH₄Cl (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Очищали предварительной очисткой СФХ с получением чистого трет-бутил-4-((((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилата (6). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=499,70 [M+H]⁺.

трет-Бутил-4-((((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((5)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)пентан-2-ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилат (соединение С34)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-((((S)-1-((((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилата (6) (100 мг, 0,20 ммоль) в дихлорметане (3 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (255 мг, 0,60 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (10 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x15 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x15 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, данный остаток очищали препаративной ВЭЖХ с получением трет-бутил-4-((((S)4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилата (соединение С34). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 497,44 (М+Н)⁺.

(2S)-2-((S)-2-((((1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-4-ил)окси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-1 -сульфонат (соединение С51)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-((((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамоил)окси)пиперидин-1-карбоксилат (соединение С34) (90 мг, 0,18 ммоль) в этаноле (2 мл), EtOAc (1 мл), воде (1 мл) добавляли NaHSO₃ (38 мг, 0,36 ммоль) при комн. темп. и нагревали до 50°С в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 часов реакционную смесь охлаждали до комн. темп. и фильтровали через слой целита, затем промывали этанолом (5 мл). Фильтрат упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка. Данный остаток растирали с диэтиловым эфиром (2x5 мл), EtOAc (2x5 мл), растворители декантировали, твердое вещество хорошо сушили с получением (2S)-2-((S)-2-((((1-(третбутоксикарбонил)пиперидин-4-ил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфоната (соединение С51). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ R_f: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 577,2 [М-Н]- М = свободное основание

- 116 049429

Пример 35: Синтез соединений С37 и С40.

трет-Бутил-4-(бензиламино)пиперидин-1-карбоксилат (3)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-оксопиперидин-1-карбоксилата (1) (3 г, 15,0753 ммоль) и фенилметанамина (2) (2,2 мл, 18,0904 ммоль) в метаноле (30 мл) добавляли 8М комплекс боранпиридин (2,8 г, 3,39 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка, гасили ледяной водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), объединенные органические слои промывали солевым раствором (20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением трет-бутил-4-(бензиламино)пиперидин-1-карбоксилата (3). Система ТСХ: 50% этилацетата в гексане R_f: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=291,52 [M+H]+.

трет-Бутил-(S)-4-( 1 -бензил-3 -(1 -метокси-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)уреидо)пиперидин-1 карбоксилат (2)

К перемешиваемому раствору гидрохлорида метил-L-лейцината (4) (3 г, 13,574 ммоль) в 1,4диоксане (30 мл) добавляли дифосген (2,4 мл, 20,361 ммоль) при комн. темп. и кипятили с обратным холодильником в течение 5 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка, данный остаток использовали непосредственно в последующей реакции.

В другую круглодонную колбу помещали трет-бутил-4-(бензиламино)пиперидин-1-карбоксилат (3) (3 г, 10,344 ммоль) в ACN (30 мл) и обрабатывали триэтиламином (4,47 мл, 31,034 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин, затем добавляли по каплям приготовленную выше реакционную массу и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. и нагревали до 80°С в течение 16 ч, реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), объединенные органические слои промывали солевым раствором (20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением трет-бутил-(8)-4-(1-бензил-3-(1-метокси-4-метил-1-оксопентан-2ил)уреидо)пиперидин-1-карбоксилата (5). Система ТСХ: 50% этилацетата в гексане R_f: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=484,50[M+Na]+.

(Бензил( 1 -(трет-бутоксикарбонил)nиnеридин-4-ил)карбамоил)-L-лейцин (6)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-(S)-4-(1-бензил-3-(1-метокси-4-метил-1-оксопентан-2

- 117 049429 ил)уреидо)пиперидин-1-карбоксилата (5) (3,4 г, 7,375 ммоль) в ТГФ (30 мл), воде (15 мл) добавляли гидроксид лития (531 мг, 22,125 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x15 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (бензил(1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-4-ил)карбамоил)-Lлейцина (6). Система ТСХ: 50% этилацетата в гексане Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=448,39 [M+H]+.

трет-Бутил-4-(1 -бензил-3-((S)-1 -(((S)-1 -метокси-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)уреидо)пиперидин-1-карбоксилат (7)

К перемешиваемому раствору (бензил(1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-4-ил)карбамоил)Тлейцина (6) (2,3 г, 5,145 ммоль) ДМФА (30 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (1,47 г, 7,718 ммоль), HOBt (1,04 г, 7,718 ммоль), DIPEA (2,8 мл, 15,436 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-5-(2,3дигидробензо[f][1,4]оксазепин-4(5H)-ил)-5-оксопентаноата (фрагмент амина-2) (1,14 г, 6,171 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 2% метанолом в дихлорметане с получением трет-бутил-4-(1-бензил-3-((S)-1(((S)-1 -метокси-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2ил)уреидо)пиперидин-1-карбоксилата (7). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 616,88 (М+Н)⁺.

трет-Бутил-4-(1 -бензил-3-((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)уреидо)пиперидин-1-карбоксилат (8)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-(1-бензил-3-((S)-1-(((S)-1-метокси-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)уреидо)пиперидин-1карбоксилата (7) (1,3 г, 2,524 ммоль) в ТГФ (20 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (2,5 мл, 5,048 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Очищали предварительной очисткой СФХ с получением чистого трет-бутил-4-( 1 -бензил-3-((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)уреидо)пиперидин-1-карбоксилата (8). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 588,65 [М+Н]⁺.

трет-Бутил-4-(1 -бензил-3-((S)-4-метил-1 -оксо- 1-(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан2-ил)амино)пентан-2-ил)уреидо)пиперидин-1-карбоксилат (соединение С37)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-(1-бензил-3-((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)уреидо)пиперидин-1карбоксилата (8) (100 мг, 0,17 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (216 мг, 0,511 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (15 мл), а затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x15 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x15 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением трет-бутил-4-( 1 -бензил-3-((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан2-ил)амино)пентан-2-ил)уреидо)пиперидин-1-карбоксилата (соединение С37). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=597,44 (М+Н)⁺.

(2S)-2-((S)-2-(3-бензил-3-(1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-4-ил)уреидо)-4-метилпентанамидо)1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-1 -сульфонат (соединение С40)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-(1 -бензил-3-((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -okco-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)уреидо)пиперидин-1-карбоксилата (соединение С37) (50 мг, 1,103 ммоль) в ТГФ/Н2О (2/1) (3 мл) и NaHSO₃ (16 мг, 0,154 ммоль) при комн. темп. и реакционную смесь перемешивали при 40°C в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали слой целита EtOH (20 мл) с получением неочищенного соединения. Неочищенный продукт растирали с эфиром и н-пентаном с получением (2S)-2-((S)-2-(3-бензил-3-(1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-4-ил)уреидо)-4метилпентанамидо)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-1 -сульфоната натрия (соединение С40). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=586,60 [М-сульфонат натрия]⁺.

- 118 049429

Пример 36: Синтез соединения С36 о

Метил-(((3-хлорбензил)окси)карбонил)-L-фенилаланинат (3)

К перемешиваемому раствору (З-хлорфенил)метанола (1) (4,0 г, 2,8 ммоль) в ДХМ (200 мл) медленно добавляли пиридин (13,2 мл, 16,8 ммоль), трифосген (4,14 г, 2,3 ммоль) при 0°C, затем метил-Lфенилаланинат (2) (6,02 г, 3,36 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС.

Реакционную смесь гасили ледяной водой (150 мл), концентрировали органический слой, снова промывали 1N раствором HCl, затем экстрагировали ДХМ (2x150 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в гексане, с получением 1-метил-(((3-хлорбензил)окси)карбонил)-Ефенилаланината (3). Система ТСХ: 50% этилацетата в гексане R_f: 0,8 ЖХМС (ИЭР): m/z=348,29 [M+H]+.

(((3-хлорбензил)окси)карбонил)-L-фенилаланин (4)

К перемешиваемому раствору 1- метил-(((3-хлорбензил)окси)карбонил)-Е-фенилаланината (3) (5,6 г, 16,13 ммоль) в ТГФ (60 мл), метаноле (20 мл) и деминерализованной воде (40 мл) добавляли ЕЮИ-Н₂О (1,35 г, 32,26 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь концентрировали и подкисляли 1N HCl, экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением (((3-хлорбензил)окси)карбонил)-L-фенилаланина (4), который использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 50% этилацетата в гексане R_f: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=334,28 [M+H]⁺.

Метил-(2S)-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-фенилпропанамидо)-3-(2оксопирролидин-3-ил)пропаноат (5)

К перемешиваемому раствору (((3-хлорбензил)окси)карбонил)-L-фенилаланина (4) (1,0 г, 3,003 ммоль) (4) в ДМФА (100 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (0,670 г, 3,603 ммоль), НОВТ (0,859 г, 4,50 ммоль), DIPEA (1,65 мл, 9,00 ммоль) и метил(28)-2-амино-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (0,670 г, 3,60 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x 100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 2% метанолом в дихлорметане, с получением метил-(2S)-2-((S)-2((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-фенилпропанамидо)-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (5). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=502,43 [M+H]⁺.

3-Хлорбензил-((28)-1-(((28)-1-гидрокси-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксо-3

- 119 049429 фенилпропан-2-ил)карбамат (6)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3фенилпропанамидо)-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (5) (0,75 г, 1,494 ммоль) в дихлорметане (50 мл) добавляли 2М LiBH4 в ТГФ (1,49 мл, 2,98 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 2 ч. Ход реакции контролировали методом ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH4Cl и экстрагировали дихлорметаном (2x50 мл), фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 3-хлорбензил-((2S)-1-(((2S)-1-гидрокси-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксо3-фенилпропан-2-ил)карбамата (6). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 474,4 [М+Н]+.

3-Хлорбензил-((2S)-1-оксо-1-(((2S)-1-оксо-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-3фенилпропан-2-ил)карбамат (7)

К перемешиваемому раствору (3-хлорбензил-((2S)-1-(((2S)-1-гидрокси-3-(2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)карбамата (6) (0,350 г, 0,738 ммоль) в дихлорметане (25 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (0,626 г, 1,476 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, в результате чего получали 3-хлорбензил-((2S)-1-оксо-1-(((2S)-1-оксо-3-(2-оксопирролидин-3-ил)nроnан-2-ил)амино)3-фенилпропан-2-ил)карбамат (7). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 472,54 (М+Н)⁺.

-Хлорбензил-((2S)-1 -(((2S)-1 -(диэтоксифосфорил)-1 -гидрокси-3 -(2-оксопирролидин-3 -ил)пропан2-ил)амино)-3-фенилпропан-2-ил)карбамат (соединение С36)

К перемешиваемому раствору неочищенного 3-хлорбензил-((2S)-1-оксо-1-(((2S)-1-оксо-3-(2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-3-фенилпропан-2-ил)карбамата (7) (330 мг, 0,7003 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли DIPEA (0,2 мл, 2,101 ммоль) и диэтилфосфит (0,3 мл, 2,101 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (15 мл), экстрагировали ДХМ (3x15 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и хорошо сушили с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензuл-((2S)-1-(((2S)-1(диэтоксифосфорил)-1-гидрокси-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-3-фенилпропан-2ил)карбамата (соединение С36). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 610,36 (М+Н)⁺.

Пример 37: Синтез соединений С38 и С53.

- 120 049429

1,2-Дифенилэтан-1-ол (2)

К перемешиваемому раствору бензилмагнийхлорида (5,0 г, 46,7289 ммоль) в ТГФ (50 мл), охлажденному до -30°C, затем медленно добавляли бензальдегид (1) (70 мл, 140,1869 ммоль), растворенный в ТГФ (50 мл), и перемешивали при -30°С до комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH₄Cl (150 мл), затем экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 20% этилацетатом в гексане, с получением 1,2-дифенилэтан-1-ола (2). Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 183,46 [М-ОН]⁺.

(((1 -фенилпропан-2-ил)окси)карбонил)-L-лейцин (4)

К перемешиваемому раствору 1,2-дифенилэтан-1-ола (2) (5,0 г, 25,25 ммоль) в ацетонитриле (250 мл), а затем добавляли DSC (12,92 г, 50,4 ммоль), триэтиламин (10,9 мл, 75,6 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. Затем добавляли гидрохлорид метил-L-лейцината (3) (4,306 г, 29,6 ммоль), триэтиламин (10,6 мл (72,0 ммоль), реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч, ход реакции контролировали методом ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь концентрировали и экстрагировали этилацетатом (3x100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 20% этилацетатом в гексане, с получением (((1-фенилпропан-2ил)окси)кaрбонил)-L-лейцинa (4). Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане Rf: 0,8 ЖХМС (ИЭР): m/z=369,19 [M+Na]⁺.

((1,2-Дифенилэтокси)карбонил)-L-лейцин (5)

К перемешиваемому раствору (((1-фенилпропан-2-ил)окси)карбонил)-L-лейцинα (4) (5,8 г, 15,69 ммоль) в ТГФ (60 мл) и воде (40 мл) добавляли LiOH.H₂O (1,976 г, 47,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь концентрировали и подкисляли 1N HCl, экстрагировали этилацетатом (3x100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением ((1,2-дифенилэтокси)кaрбонил)-L-лейцина (5), который использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 50% этилацетата в гексане R_f: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=355,17 [M+Na]⁺.

Метил-(28)-2-((28)-2-(((1,2-дифенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((8)-2оксопирролидин-3-ил)пропаноат (6)

К перемешиваемому раствору ((1,2-дифенилэтокси)карбонил)-L-лейцина (5) (3,0 г, 8,440 ммоль) в ДМФА (30 мл) добавляли EDC-HCl (2,292 г, 12,00 ммоль), НОВТ (1,62 г, 12,00 ммоль), DIPEA (4,64 мл, 25,2 ммоль), перемешивали при 0°С в течение 10 минут, а затем одновременно добавляли метил-(28)-2амино-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (2,248 г, 10,12 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 100% этилацетатом, с получением метил-(28)-2-((28)-2-(((1,2-дифенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)3-((8)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (6). Система ТСХ: 100% этилацетата R_f: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 524,55 [М+Н]⁺.

1,2-Дифенилэтил((8)-1-(((8)-1-гидрокси-3-((8)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (7)

К перемешиваемому раствору метил(28)-2-((28)-2-(((1,2-дифенилэтокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-((8)-2-оксопирролидин-3 ил)пропаноата (6) (0.530 г, 1.013 ммоль) в ДХМ (50 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1.013 мл, 2.026 ммоль) при 0°C и перемешивали в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH4C1 (10 мл) и экстрагировали ДХМ (2x50 мл), фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получе

- 121 049429 нием 1,2-дифенилэтил((S)-1-((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил1-оксопентан-2-ил)карбамата (7) Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 496,59 (М+Н)+.

1,2-дифенилэтил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С38)

К перемешиваемому раствору 1,2-дифенилэтил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (7) (0,300 мг, 0,605 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (0,513 г, 1,216 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (20 мл), и органический слой промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали, концентрировали и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ с получением 1,2-дифенилэтил ((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо- 3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С38). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 494,44 (М+Н)+.

(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-дифенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфонат (соединение С53)

К перемешиваемому раствору 1,2-дифенилэтил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С38) (0,100 мг, 0,2027 ммоль) в этилацетате (2,0 мл), этаноле (1,0 мл), воде (0,4 мл) затем добавляли NaHSO₃ (0,0632 мг, 0,6081 ммоль) и перемешивали при 40°C в течение 4 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита, фильтрат сушили над сульфатом натрия, концентрировали и неочищенное соединение промывали диэтиловым эфиром с получением (2S)-2-((2S)-2(((1,2-дифенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-1-сульфоната (соединение С53). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 574,2 (М+Н)+.

Пример 38: Синтез соединений С39 и С50.

'ΌΛο'· ’ 2

Метил-((( 1 -фенилпропан-2-ил)окси)карбонил)-L-лейцинат (3)

К перемешиваемому раствору 1-фенилпропан-2-ола (1) (7,0 г, 51,39 ммоль) в ДХМ (35 мл) медленно добавляли пиридин (6,0 мл, 77,09 ммоль), трифосген (7,62 г, 25,6 ммоль) при 0°C, затем гидрохлорид метил-L-лейцината (2) (8,942 г, 61,6 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (150 мл), концентрировали органический слой, снова промывали 1N раствором HCl, затем экстрагировали ДХМ (2x150 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 20% этилацетатом в гексане, с получением метил-(((1

- 122 049429 фенилпропан-2-ил)окси)карбонил)-L-лейцината (3). Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане Rf: 0,8 ЖХМС (ИЭР): m/z 308,52 [М+Н]+.

(((1-фенилпропан-2-ил)окси)карбонил)Ф-лейцин (4)

К перемешиваемому раствору метил-(((1-фенилпропан-2-ил)окси)карбонил)-L-лейцината (3) (6,7 г, 21,81 ммоль) в ТГФ (60 мл) и деминерализованной воде (40 мл) добавляли LiOH.H₂O (2,74 г, 65,43 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. После израсходования исходного материала реакционную смесь концентрировали и подкисляли 1N HCl, экстрагировали этилацетатом (3x100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением ((1-фенилпропан-2-ил)окси)карбонил)-Ь-лейцина (4), который использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 50% этилацетата в гексане; Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=294,55 (M+H)⁺.

Метил-(2S)-2-((2S)-4-метил-2-((((1-фенилпропан-2-ил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин- 3-ил)пропаноат (5)

К перемешиваемому раствору (((1-фенилпропан-2-ил)окси)карбонил)-Ь-лейцина (4) (2,5 г, 8,532 ммоль) в ДМФА (25 мл) добавляли EDC.HCl (1,518 г, 10,20 ммоль), НОВТ (1,073 г, 7,95 ммоль), DIPEA (4,715 мл, 25,5 ммоль) перемешивали при 0°С в течение 10 минут, а затем одновременно добавляли метил-(2S)-2-амино-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (2,273 г, 10,2 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 100% этилацетатом, с получением метил-(2S)-2-((2 S)-4-метил-2-(((( 1 -фенилпропан-2-ил)окси) карбонил)амино)пентанамидо)-3 ((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (5). Система ТСХ: 100% этилацетата Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 462,65 [М+Н]⁺.

-Фенилпропан-2-ил-((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (6)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-4-метил-2-((((1-фенилпропан-2ил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (5) (2,4 г, 5,199 ммоль) в дихлорметане (50 мл), добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (5,2 мл, 10,39 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH4Cl (20 мл) и экстрагировали дихлорметаном (2x50 мл), фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 1-фенилпропан-2-ил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (6). Система ТСХ: 100% этилацетата Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 434,5 [М+Н]⁺.

-Фенилпропан-2-ил-((S)-4-метил-1 -оксо- 1-(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С39)

К перемешиваемому раствору 1-фенилпропан-2-ил-((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (6) (0,300 г, 0,461 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (0,390 г мг, 0,923 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 3 часа реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, в результате чего получали 1 -фенилпропан-2-ил((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С39). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,8 ЖХМС (ИЭР): m/z 432,58 (М+Н)⁺.

(2S)-1-Гидрокси-2-((2S)-4-метил-2-((((1-фенилпропан-2-ил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфонат (соединение С50)

К перемешиваемому раствору 1-фенилпропан-2-ил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С39) (0,100 г, 0,231 ммоль) в этилацетате (2,0 мл), этаноле (1,0 мл), воде (0,4 мл) затем добавляли NaHSO3 (0,0361 мг, 0,347 ммоль) и перемешивали при 40°С в течение 16 часов. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита, фильтрат сушили над сульфатом натрия, концентрировали, и неочищенное соединение промывали диэтиловым эфиром с получением (2S)-1-гидрокси-2-((2S)4-метил-2-((((1-фенилпропан-2-ил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-1-сульфоната (соединение С50). Система ТСХ: 15% метанола в дихлорметане R_f: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 512,12 (М+Н)⁺.

- 123 049429

Пример 39: Синтез соединений С52 и С41.

С41 (трет-Бутоксикарбонил)фенилаланин (2)

К перемешиваемому раствору фенилаланина (1) (10 г, 60,606 ммоль) в 1,4-диоксане (100 мл) добавляли 2 N раствор NaOH (36 мл, 72,72 ммоль), а затем добавляли Вос-ангидрид (14,5 мл, 66,66 ммоль) при 0°C, затем реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры в течение 24 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, данный неочищенный продукт разбавляли водой и подкисляли до рН ~ 2 с помощью 2N HCl и экстрагировали ДХМ (2x100 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением (трет-бутоксикарбонил)фенилаланина (2) Система ТСХ: 50% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,7 ЖХМС (ИЭР): m/z=288,20 [M+Na]+.

трет-Бутил-(1-(2,2-диметил-4,6-диоксо-1,3-диоксан-5-ил)-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)карбамат (3)

К перемешиваемому раствору (трет-бутоксикарбонил)фенилаланина (2) (15 г, 56,60 ммоль) в ДХМ (150 мл) добавляли DMAP (10,35 г, 84,905 ммоль), а затем порциями добавляли кислоту Мельдрума (12,2 г, 84,905 ммоль) при 0°C, после перемешивания в течение 15 минут медленно добавляли DCC в ДХМ

- 124 049429 (11,6 г, 56,6037 ммоль) при 0°C, а затем реакционную смесь оставляли на 24 часа при комнатной температуре. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС, реакционную смесь гасили ледяной водой (200 мл) и экстрагировали ДХМ (2x100 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного соединения, данное неочищенное вещество очищали. нормально-фазовой хроматографией, элюируя 80% этилацетатом в гексане, с получением трет-бутил-(1-(2,2-диметил-4,6-диоксо-1,3-диоксан5-ил)-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)карбамата (3) Система ТСХ: 50% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=390,64 [M-H]⁺.

трет-Бутил-(1-(2,2-диметил-4,6-диоксо-1,3-диоксан-5-ил)-3-фенилпропан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-(1-(2,2-диметил-4,6-диоксо-1,3-диоксан-5-ил)-1-оксо-3фенилпропан-2-ил)карбамата (3) (10,0 г, 25,575 ммоль) в ДХМ (100 мл) добавляли АсОН (9,2 мл, 153,452 ммоль), а затем медленно порциями добавляли NaBH₄ (3,9 г, 102,3017 ммоль) в течение 30 мин при 0°C, затем реакционную смесь перемешивали. при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (200 мл) и экстрагировали ДХМ (2x100 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного соединения, данное неочищенное вещество очищали нормально-фазовой хроматографией, элюируя 40% этилацетатом в гексане, с получением трет-бутил-(1-(2,2-диметил-4,6-диоксо-1,3-диоксан-5-ил)-3фенилпропан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 50% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=376,39 [M-H]⁺.

трет-Бутил-2-бензил-5-оксопирролидин-1-карбоксилат (5)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-(1-(2,2-диметил-4,6-диоксо-1,3-диоксан-5-ил)-3фенилпропан-2-ил)карбамата (4) (12 г, 31,8302 ммоль) в толуоле (240 мл), затем реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 6 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения, данное неочищенное вещество очищали с помощью нормально-фазовой хроматографии, элюируя 20% этилацетатом в гексане, с получением трет-бутил-2-бензил-5оксопирролидин-1-карбоксилата (5). Система ТСХ: 50% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,7 ЖХМС (ИЭР): m/z=298,26 [M+Na]⁺.

Трет-бутил-4-((5-бензил-1-(трет-бутоксикарбонил)-2-оксопирролидин-3-ил)(гидрокси)метил)-2,2диметилоксазолидин-3-карбоксилат (6)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-2-бензил-5-оксопирролидин-1-карбоксилата (5) (4 г, 14,545 ммоль) в ТГФ (40 мл) при -78°С добавляли 1М LiHMDS в ТГФ (29 мл, 29,0909 ммоль) и перемешивали при той же температуре в течение 30 минут, затем добавляли промеж. соед.-С (5 г, 21,818 ммоль) и перемешивали при той же температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили раствором NH₄Cl (100 мл) и экстрагировали EtOAc (3x300 мл), сушили над Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного трет-бутил-4-((5бензил-1-(трет-бутоксикарбонил)-2-оксопирролидин-3-ил)(гидрокси)метил)-2,2-диметилоксазолидин-3карбоксилата (6) (который использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 30% метанола в петролейном эфире Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 427,41 (М+Н)⁺.

трет-Бутил-(Е)-4-((5-бензил-1-(трет-бутоксикарбонил)-2-оксопирролидин-3-илиден)метил)-2,2диметилоксазолидин-3-карбоксилат (7)

К перемешиваемому раствору трет-бутил(4R)-4-((1S)-(1-(трет-бутоксикарбонил)-2оксопирролидин-3-ил)(гидрокси)метил)-2,2-диметилоксазолидин-3-карбоксилата (6) (6 г неочищенного, 11,9047 ммоль) в ДХМ (60 мл) при 0°С медленно добавляли NEt₃ (5,1 мл) и MsCl (4,1 г, 35,714 ммоль) при той же температуре реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили раствором NH₄Cl (100 мл) и экстрагировали ДХМ (3x300 мл), сушили над Na2SO4 и упаривали при пониженном давлении с получением трет-бутил-4-((5-бензил-1-(трет-бутоксикарбонил)-2-оксопирролидин-3ил)((метилсульфонил)окси)метил)-2,2-диметилоксазолидин-3-карбоксилат (6,5 г, неочищенный). Данное неочищенное соединение растворяли в ДХМ (60 мл), затем добавляли DBU (5 мл, 33,505 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 3 ч при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (100 мл), экстрагировали ДХМ (2x100 мл), сушили над безводным Na2SO4 и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, элюируя 20% этилацетатом в гексане, с получением трет-бутил-(Е)-4-((5-бензил-1(трет-бутоксикарбонил)-2-оксопирролидин-3-илиден)метил)-2,2-диметилоксазолидин-3-карбоксилата (7). Система ТСХ: 10% этилацетата в петролейном эфире; Rf: 0,7 ЖХМС (ИЭР): m/z=509,64 [M+Na]⁺.

трет-Бутил-4-((5-бензил-1-(трет-бутоксикарбонил)-2-оксопирролидин-3-ил)метил)-2,2диметилоксазолидин-3-карбоксилат (8)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-(Е)-4-((5 -бензил-1-(трет-бутоксикарбонил)-2оксопирролидин-3-илиден)метил)-2,2-диметилоксазолидин-3-карбоксилата (7) (1,5 г, 3,0864 ммоль) в МеОН (20 мл) добавляли 10% Pd/C (800 мг, 10% влаги) при комн. темп., и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч под давлением баллона с газом Н₂. За ходом реакции следили с

- 125 049429 помощью ТСХ и ЖХМС. Через 3 ч реакционную смесь фильтровали через целит и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, элюируя 10% этилацетатом в гексане, с получением трет-бутил-4-((5 -бензил-1-(трет-бутоксикарбонил)-2оксопирролидин-3-ил)метил)-2,2-диметилоксазолидин-3-карбоксилата (8). Система ТСХ: 10% EtOAc в петролейном эфире Rf: 0,4

3-(2-амино-3-гидроксипропил)-5-бензилпирролидин-2-он (9)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-((5-бензил-1-(трет-бутоксикарбонил)-2оксопирролидин-3-ил)метил)-2,2-диметилоксазолидин-3-карбоксилата (8) (1,1 г, 2,254 ммоль) в диоксане (10 мл) добавляли 4М HCl в диоксане (10 мл) при 0°C. Смесь доводили до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 ч. После израсходования исходного материала растворитель упаривали с получением неочищенного остатка. Растирали с диэтиловым эфиром с получением 3-(2-амино-3гидроксипропил)-5-бензилпирролидин-2-она (9). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=249,43 (M+H)

3-Хлорбензил-((2S)-1-((1-(5-бензил-2-оксопирролидин-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-3циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (10)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент амина) (200 мг, 0,589 ммоль) в ДМФА (10 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (170 мг, 0,884 ммоль), НОВТ (120 мг, 0,884 ммоль), D1PEA (0,3 мл, 1,769 ммоль) и 3-(2-амино-3-гидроксипропил)-5-бензилпирролидин-2-он (9) (175 мг, 0,707 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 часов реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали ДХМ (2x50 мл), сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, элюируя 20% метанолом в ДХМ, с получением 3-хлорбензил-((2S)-1((1-(5-бензил-2-оксопирролидин-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2ил)карбамата (10). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=570,70 [M+H]⁺.

-Хлорбензил-((2S)-1 -((1 -(5-бензил-2-оксопирролидин-3-ил)-3 -оксопропан-2-ил)амино)-3 циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С52)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-1-((1-(5-бензил-2-оксопирролидин-3-ил)-3гидроксипропан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (10) (150 мг, 0,263 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (335 мг, 0,7908 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO_4; фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((2S)-1-((1-(5-бензил-2оксопирролидин-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С52). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 568,53 [M+H]⁺.

-Хлорбензил-((2S)-1 -((3 -(5-бензил-2-оксопирролидин-3-ил)-1 -(диэтоксифосфорил)-1 гидроксипропан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С41)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-1-((1-(5-бензил-2-оксопирролидин-3-ил)-3оксопропан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С52) (150 мг неочищенного, 0,264 ммоль) в ДХМ (10 мл), добавляли DIPEA (0,15 мл, 0,793 ммоль), затем добавляли диэтилфосфит (0,12 мл, 0,793 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали с получением неочищенного остатка. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((2S)-1-((3-(5-бензил-2-оксопирролидин-3-ил)-1(диэтоксифосфорил)-1 -гидроксипропан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С41). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=706,74 [M+H]⁺.

- 126 049429

Пример 40: Синтез соединений С42 и С49.

-(3-метоксибензил)циклопропан-1-ол (2)

Раствор метил-2-(3-метоксифенил)ацетата (10,0 г, 55,49 ммоль) в ТГФ (100 мл) охлаждали до 0°C, затем медленно добавляли Ti(OiPr)₄ (22,06 мл, 77,69 ммоль) и этилмагнийхлорид (138,0 мл, 138,73 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH4Cl (150 мл), фильтровали через слой целита, а затем экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 20% этилацетатом в гексане, с получением 1-(3-метоксибензил)циклопропан-1-ола (2). Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 179,35 [М+Н].

Метил-((1-(3-метоксибензил)циклопропокси)карбонил)-L-лейцинат (4)

К перемешиваемому раствору 1-(3-метоксибензил)циклопропан-1-ола (2) (5,6 г, 37,00 ммоль) в ДХМ (100 мл) медленно добавляли пиридин (6,0 мл, 77,09 ммоль), трифосген (5,47 г, 18,5 ммоль) при 0°C, затем гидрохлорид метил-L-лейцината (3) (6,49 г, 44,00 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили ледяной водой (150 мл), затем добавляли ДХМ (300 мл) и промывали 1N раствором HCl. Органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 20% этилацетатом в гексане, с получением метил-((1-(3метоксибензил)циклопропокси)карбонил)-L-лейцината (4). Система ТСХ: 20% этилацетата в петролейном эфире; Rf: 0,8 ЖХМС (ИЭР): m/z 350,47 [М+Н]⁺ ((1-(3-метоксибензил)циклопропокси)карбонил)-Lлейцин (5)

К перемешиваемому раствору ((1-(3-метоксибензил)циклопропокси)карбонил)-L-лейцината (4) (3,0 г, 8,5 ммоль) в ТГФ (60 мл), воде (30 мл) добавляли LiOH.H₂O (1,08 г, 25,78 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала избыток ТГФ упаривали при пониженном давлении. Затем смесь подкисляли 1N HCl, экстрагировали этилацетатом (3x100 мл), объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением ((1-(3метоксибензил)циклопропокси)карбонил)-L-лейцина (5), который использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 336,40 [M+Na]⁺.

Метил-(S)-2-((S)-2-(((1-(3-метоксибензил)циклопропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3((8)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (6)

К перемешиваемому раствору ((1-(3-метоксибензил)циклопропокси)карбонил)-L-лейцина (5) (2,2 г,

- 127 049429

6,5 ммоль) в ДМФА (40 мл) добавляли EDC-HCl (1,86 г, 9,7 ммоль), НОВТ (1,34 г, 9,7 ммоль), DIPEA (3,39 мл, 19,5 ммоль) перемешивали при 0°С в течение 10 минут, а затем одновременно добавляли метил(2S)-2-амино-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (1,46 г, 7,8 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя смесью 70% этилацетат/петролейный эфир, с получением метил(S)-2-((S)-2-(((1-(3метоксибензил)циклопропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (6). Система ТСХ: 70% этилацетата в петролейном эфире; Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=504,60 [М+Н]+.

-(3 -Метоксибензил)циклопропил((S)- 1-(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (7)

К перемешиваемому раствору метил-(S)-2-((S)-2-(((1-(3метоксибензил)циклопропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноат (6) (0,530 г, 1,013 ммоль) в ДХМ (20 мл), добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,013 мл, 2,026 ммоль) при 0°C и перемешивали в течение 2 ч ход реакции контролировали с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH₄Cl (10 мл) и экстрагировали ДХМ (2x50 мл), фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 1-(3метоксибензил)циклопропил((S)-1 -((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (7) Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 476,67 (М+Н)⁺.

-(3 -Метоксибензил)циклопропил((S)-4-метил-1 -оксо- 1-(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С42)

К перемешиваемому раствору 1,2-дифенилэтил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (7) (0,300 мг, 0,605 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (0,513 г, 1,216 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч Реакционную смесь разбавляли ДХМ (20 мл), и органический слой промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали, и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ с получением 1-(3-метоксибензил)циклопропил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С42). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 жХмС (ИЭР): m/z 474,62 (М+Н)⁺.

(2S)-1-Гидрокси-2-((S)-2-((((1-(3-метоксибензил)циклопропокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфонат (соединение С49)

К перемешиваемому раствору 1-(3-метоксибензил)циклопропил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С42) (0,100 мг, 0,2027 ммоль) в этилацетате (2,0 мл), этаноле (1,0 мл), воде (0,4 мл) затем добавляли NaHSO₃ (0,0632 мг, 0,6081 ммоль) и перемешивали при 40°С в течение 4 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита, фильтрат сушили над сульфатом натрия, концентрировали и неочищенное соединение промывали диэтиловым эфиром с получением ((2S)-1гидрокси-2-((S)-2-(((1-(3-метоксибензил)циклопропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфоната (соединение С49). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 554,1 (М+Н)⁺.

- 128 049429

Пример 41: Синтез соединения С43

ВяВг, К_гСО₃,

Стадия-П)

СНзСООН. 6N на.

кипячение с ойрпн. тэд., бч

Стадия-(2)

ЫаВЩ.МеОН. комн, темп., 39 мвв.

Сгадая-(З)

2 3

Трифосген, Ру,

МММ-· коми, rem

Стадая-(Ф

Этил-1 -бензил-2-оксоциклопентан-1 -карбоксилат (2)

К перемешиваемому раствору К₂СО₃ (17,6 г, 128,205 ммоль) в ацетоне (100 мл) добавляли этил-2оксоциклопентан-1-карбоксилат (1) (10 г, 64,102 ммоль) при комн, темп., а затем бензилбромид (7,6 мл, 64,102 ммоль) при комн, темп., и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником при 70°С в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и гасили насыщенным раствором NaHCO₃ (150 мл), затем экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), затем этилацетатный слой промывали насыщенным раствором NaHCO₃ (3x100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 3% этилацетатом в гексане, с получением этил-1-бензил-2 оксоциклопентан-1-карбоксилата. Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане; Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=247,26 (М+Н)⁺.

2-бензилциклопентан-1-он (3)

К перемешиваемому раствору этил-1-бензил-2-оксоциклопентан-1-карбоксилата (2) (15 г, 60,975 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (150 мл) добавляли 6N водн. НС1 (75 мл) при комн, темп., и реакция смесь кипятили с обратным холодильником при 70°С в течение 6 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь охлаждали до комн, темп., выливали в ледяную воду (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 2% этилацетатом в гексане, с получением 2-бензилциклопентан-1-она (3). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=l 75,21 [М+Н]⁺.

2-Бензилциклопентан-1-ол (4)

К перемешиваемому раствору 2-бензилциклопентан-1-она (3) (5 г, 28,735 ммоль) в МеОН (50 мл) добавляли NaBH₄ (1,06 г, 57,471 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь оставляли перемешиваться при комн. темп, в течение 30 мин. Ход реакции контролировали с помощью ТСХ. Реакционную смесь перегоняли и гасили IN НС1, экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения 2-бензилциклопентан-1-ола (4). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане R_f: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=171,43 [М+Н]⁺.

Метил-(((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)-Ь-лейцинат (6)

К перемешиваемому раствору 2-бензилциклопентан-1-ола (4) (5 мг, 28,409 ммоль) в ДХМ (50 мл) медленно добавляли пиридин (2,5 мл, 28,409 ммоль), трифосген (2,1 г, 14,204 ммоль) при 0°С, а затем гидрохлорид метил-Ь-лейцината (5) (4,9 г, 34,091 ммоль) и перемешивали при комн. темп, в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), концентрировали органический слой, снова промывали 1N водн. раствором НС1, затем экстрагировали ДХМ

- 129049429 (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 4% этилацетатом в гексане, с получением метил-(((2бензилциклопентил)окси)карбонил)-L-лейцината (6). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=348,33 [M+H]+.

(((2-Бензилциклопентил)окси)карбонил)>лейцин (7)

К перемешиваемому раствору метил-(((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)-L-лейцината (6) (4,5 г, 12,968 ммоль) в ТГФ (40 мл), деминерализованной воде (20 мл) добавляли LiOH.H₂O (933 мг, 38,904 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь концентрировали и подкисляли 1N водн. HCl, экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением (((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)>лейцина (7). Данный неочищенный продукт использовали для следующей стадии без какой-либо очистки. Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 334,45 [М+Н]⁺.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-(((((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (8)

К перемешиваемому раствору (((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)>лейцина (7) (2 г, 6,006 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (1,72 г, 9,009 ммоль), НОВТ (1,21 г, 9,009 ммоль), DIPEA (3,13 мл, 18,018 ммоль) и метил-(2S)-2-амино-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (1,34 г, 7,207 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 5% метанолом в дихлорметане, с получением метил-(2S)-2-((2S)-2((((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (8). Система тСх: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 502,68 [М+Н]⁺.

2-бензилциклопентил-((S)- 1-(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (9)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-((((2-бензилциkлопентил)окси)карбонил)амино)4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (8) (1 г, 1.990 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (2 мл, 3.981 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH₄Cl и экстрагировали дихлорметаном (2x50 мл), фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 2-бензилциклопентил-((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (9). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=474,84 (М+Н)⁺.

2-бензилциклопентил ((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С43)

К перемешиваемому раствору 2-бензилциклопентил-((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)- 4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (9) (0,2 г, 0,422 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (0,537 г, 1,268 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2бензилциkлопентил-((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С43). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 472,62 (М+Н)⁺.

- 130 049429

Пример 42: Синтез соединений С44 и С48.

-Бензилциклобутан-1 -ол (2)

К перемешиваемому раствору метил-2-фенилацетата (1) (5 г, 33,29 ммоль) в ТГФ (50 мл) медленно добавляли изопроксид титана (13,2 мл, 46,61 ммоль) при 0°C, а затем этилмагнийбромид (66 мл, 66,58 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH₄Cl (150 мл), фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 7% этилацетатом в гексане, с получением 1-бензилциклопропан-1-ола (2). Система ТСХ: 2 0% этилацетата в гексане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=149,28 (M+H)+.

Метил-((1-бензилциклопропокси)карбонил)-L-лейцинат (4)

К перемешиваемому раствору 1-бензилциклопропан-1-ола (2) (3,0 г, 20,25 ммоль) в ДХМ (30 мл) медленно добавляли пиридин (3 мл, 39,97 ммоль), трифосген (3 г, 10,12 ммоль) при 0°C, затем гидрохлорид метил-L-лейцината (3) (3,5 г, 24,30 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили 1N водн. HCl (50 мл), затем экстрагировали ДХМ (2x50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном дав лении.

Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 10% этилацетатом в гексане, с получением метил((1-бензилциклопропокси)карбонил)-L-лейцината (4). Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=320,52 [M+H]⁺.

((1-Бензилциклопропокси)карбонил)-L-лейцин (5)

К перемешиваемому раствору метил((1-бензилциклопропокси)карбонил)-L-лейцината (4) (3,0, 9,40 ммоль) в ТГФ (15 мл), воде (5 мл) добавляли LiOH-H₂O (677 мг, 28,21 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь концентрировали и подкисляли 1N HCl, экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением ((1-бензилциклопропокси)карбонил)-L-лейцина (5), который использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане R_f: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 306,50 [М+Н]⁺.

Метил (S)-2-((S)-2-(((1-бензилциклопропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропаноат (6)

К перемешиваемому раствору ((1-бензилциклопропокси)карбонил)-L-лейцина (5) (2,5 г, 8,19

- 131 049429 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (2,3 г, 12,29 ммоль), НОВТ (1,65 г, 12,29 ммоль), DIPEA (4,2 мл, 24,58 ммоль) и метил(2S)-2-амино-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (1,83 г, 9,83 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x40 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 5% метанолом в дихлорметане, с получением метил-(S)-2-((S)-2-(((1-бензилциклопропокси)карбонил)амuно)-4метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (6). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=508,63 [M+H]+.

-Бензилциклопропил((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (7)

К перемешиваемому раствору метuл(S)-2-((S)-2-(((1-бензилциклопропокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (6) (2,8 г, 5,91 ммоль) в дихлорметане (30 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (5,9 мл, 11,83 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH4Cl (50 мл) и экстрагировали ДХМ (2x50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением 1-бензилциклопропил((S)-1-(((S)-1-гuдроксu-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (7). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=446,61 (M+H)+.

1-Бензилциклопропил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролuдин-3-ил)пропан-2ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С44)

К перемешиваемому раствору 1-бензuлциклопропил((S)-1-(((S)-1-гuдроксu-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-Метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (7) (0,15 г, 0,33 ммоль) в дихлорметане (4 мл), добавляли периодинан Десса-Мартина (226 мг, 1,01 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1-бензuлциклопропuл((S)-4метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С44). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=444,42 (m+h)⁺.

(2S)-2-((S)-2-(((1-бензилциклопропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-1-гидрокси-3-((S)2-оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфонат (соединение С48)

К перемешиваемому раствору 1-бензилциклопропил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (50 мг, 0,11 ммоль) в EtOAc (2 мл) добавляли Е1ОН/Н₂О (2/1) (3 мл) и NaHSO₃ (35 мг, 0,33 ммоль) при комн. темп., и реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь охлаждали до комн. темп., фильтровали через слой целита и промывали слой целита EtOH (10 мл) с получением неочищенного соединения. Неочищенный продукт растирали с этилацетатом и диэтиловым эфиром с получением (2S)-2-((S)-2-(((1-бензилциклопропокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопuрролидин-3 -ил)пропан-1 -сульфоната (соединение С48). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=526,2 (M+H)+ М= свободное ос нование

Пример 43: Синтез соединений С55 и С45.

- 132 049429

-(З-Хлорбензил)циклопропан-1 -ол (2)

К перемешиваемому раствору метил-2-(3-хлорфенил)ацетата (1) (7 г, 38,043 ммоль) в ТГФ (50 мл) медленно добавляли изопроксид титана (15 мл, 53,260 ммоль) при 0°C, затем добавляли этиломагнийбромид (95 мл, 95,108 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH₄Cl (150 мл), фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (200 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 5% этилацетатом в гексане, с получением 1-(3-хлорбензил)циклопропан-1-ола (2) (4,2 г, 23,076 ммоль, выход 60%) в виде белого твердого вещества с металлическим оттенком. Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане; Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=183,33 (M+H)+.

Метил-(( 1-(3 -хлорбензил)циклопропокси)карбонил)-L-лейцинат (4)

К перемешиваемому раствору 1-(3-хлорбензил)циклопропан-1-ола (2) (3,7 г, 20,329 ммоль) в ДХМ (50 мл) медленно добавляли пиридин (1,5 мл, 16,8 ммоль), трифосген (3 г, 10,164 ммоль). ммоль) при 0°C, затем гидрохлорид метил-Ь-лейцината (3) (3,4 г, 24,395 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), концентрировали органический слой, снова промывали 1N водн. HCl, затем экстрагировали ДХМ (2x50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 10% этилацетатом в гексане, с получением метил-((1-(3-хлорбензил)циклопропокси)карбонил)-Ь-лейцината (4) (3,2 г, 9,065 ммоль, выход 44%) в виде желтой маслянистой жидкости. Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане; R_f: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=354,26 (M+H)⁺.

((1 -(3-Хлорбензил)циклопропокси)карбонил)-Ь-лейцин (5)

К перемешиваемому раствору метил-((1-(3-хлорбензил)циклопропокси)карбонил)-Ь-лейцината (4) (3,2 г, 9,065 ммоль) в ТГФ (40 мл), воде (20 мл) добавляли LiOH-H₂ (652 мг, 27,195 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь концентрировали и подкисляли 1N HCl, экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением ((1-(3-хлорбензил)циклопропокси)карбонил)-Ь-лейцина (5) (2,8 г неочищенный, 8,259 ммоль, выход 91%) в виде желтой липкой жидкости. Данный неочищенный продукт использовали для следующей стадии без какой-либо очистки. Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане R_f: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=340,23 (M+H)⁺.

Метил-(S)-2-((S)-2-(((1-(3-хлорбензил)циклопропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропаноат (6)

К перемешиваемому раствору ((1-(3-хлорбензил)циклопропокси)карбонил)-Ь-лейцина (5) (2,8 г, 8,2595 ммоль) (5) в ДМФА (50 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (2,36 г, 12,389 ммоль), НОВТ (1,67 г, 12,389 ммоль), DIPEA (4,45 мл, 24,778 ммоль) и метил-(2S)-2-амино-3-(2-оксопирролидин-3ил)пропаноат (фрагмент-амина-2) (1,68 г, 9,085 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 5% метанолом в дихлорметане, с получением метил-(S)-2-((S)-2-(((1-(3хлорбензил)циклопропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (6) (2,3 г, 4,536 ммоль, выход 54%) в виде желтой липкой жидкости. Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=508,63 (М+Н)⁺.

1-(3-Хлорбензил)циклопропил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2

- 133 049429 ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамат (7)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((S)-2-(((l-(3хлорбензил)циклопропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (6) (2,2 г, 4,339 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (4,3 мл, 8,678 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH4Cl (50 мл) и экстрагировали ДХМ (2x50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением 1(3 -хлорбензил)циклопропил((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2 -ил)карбамата (7) (1,3 г, 2,713 ммоль, выход 62%) в виде белого твердого вещества с металлическим оттенком. Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=480,00 (M+H)+.

-(3 -Хлорбензил)циклопропил((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С45)

К перемешиваемому раствору 1-(3-хлорбензил)циклопропил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (7) (0,18 г, 0,375 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (0,477 г, 1,127 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1-(3хлорбензил)циклопропил((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С45) (33 мг, 0,069 ммоль, выход 18%) в виде белого твердого вещества с металлическим оттенком. Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=478,41 (M+H)⁺.

((2S)-2-((S)-2-((( 1 -(3 -хлорбензил)циклопропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-1 гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-1 -сульфонат (соединение С55)

К перемешиваемому раствору 1-(3-хлорбензил)циклопропил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С45) (0,100 мг, 0,2027 ммоль) в этилацетате (2,0 мл), этаноле (1,0 мл), воде (0,4 мл) затем добавляли NaHSO₃ (0,0632 мг, 0,6081 ммоль) и перемешивали при 40°С в течение 4 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита, фильтрат сушили над сульфатом натрия, концентрировали и неочищенное соединение промывали диэтиловым эфиром с получением (2S)-2-((S)2-(((1 -(3 -хлорбензил))циклопропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-1 -гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфоната (соединение С55) (25 мг, 0,047 ммоль, выход 26%) в виде белого твердого вещества с металлическим оттенком. Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 558,1 (М+Н)⁺.

- 134 049429

Пример 44: Синтез соединений С46 и С57.

ТиГуйч, 100 Х, '^ОН

Стздия~Ш

о

LiOH , Н₂0, ТГФ, комн. темп.

&ада-(2) з

Метил-(((2-метил-1-фенилпропан-2-ил)окси)карбонил)-L-лейцинат (3)

К перемешиваемому раствору 2-метил-1-фенилпропан-2-ола (1) (2 г, 13,31 ммоль) в толуоле (20 мл) добавляли метил(S)-2-изоцианато-4-метилпентаноат (2,7 г, 15,98 ммоль) при комн. темп. и нагревали до 100°C в герметично закрытой пробирке в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка, неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением метил-(((2-метил-1фенилпропан-2-ил)окси)карбонил)-L-лейцината (3). Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=344,41 [M+Na]+.

(((2-Метил-1 -фенилпропан-2-ил)окси)карбонил)-L-лейцин (4)

К перемешиваемому раствору метил-(((2-метил-1-фенилnропан-2-ил)окси)карбонил)-L-лейцината (3) (3,2 г, 9,96 ммоль) в ТГФ (30 мл), воде (10 мл) добавляли гидроксид лития (717 мг, 29,90 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (((2метил-1-фенилпропан-2-ил)окси)карбонил)-L-лейцина (4). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 330,50 [M+Na]⁺.

Метил(S)-2-((S)-4-метил-2-((((2-метил-1-фенилпропан-2-ил)окси)кαрбонил)амино)пентанамидо)-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (5)

К перемешиваемому раствору (((2-метил-1-фенилпропан-2-ил)окси)карбонил)-L-лейцина (2 г, 6,51 ммоль) в ДМФА (15 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (1,86 г, 9,77 ммоль), HOBt (1,31 г, 9,77 ммоль), DIPEA (3,6 мл, 19,54 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (1,4 г, 7,81 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x40 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 3% метанолом в дихлорметане с получением метил(S)-2-((S)-4-метил-2-((((2-метил-1-фенилпропан-2ил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (5). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 476,37 [М+Н]⁺.

2-Метил-1-фенилnропан-2-ил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2- 135 049429 ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (6)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((S)-4-метил-2-((((2-метил-1-фенилпропан-2ил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (5) (2 г, 4,21 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (4,2 мл, 8,42 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 2-метил-1фенилпропан-2-ил-((S)- 1-(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-4-диметил-1 оксобутан-2-ил)карбамата (6). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 448,49 [М+Н]+.

2-Метил-1 -фенилпропан-2-ил-((S)-4-метил-1 -оксо- 1-(((S)-1 -оксо-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С46)

К перемешиваемому раствору 2-метил-1-фенилпропан-2-ил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (6) (200 мг, 0,89 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (599 мг, 2,67 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (15 мл), а затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x15 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x15 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-метил-1-фенилпропан-2uл((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2ил)карбамата (соединение С46). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 446,45 (М+Н)⁺.

(2S)-1 -гидрокси-2-((S)-4-метил-2-((((2-метил-1 -фенилпропан-2ил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфонαт (соединение С57)

К перемешиваемому раствору 2-метил-1-фенилпропан-2-ил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамαта (соединение С46) (0,100 г, 0,231 ммоль) в этилацетате (2,0 мл), этаноле (1,0 мл), воде (0,4 мл) затем добавляли NaHSO₃ (0,0361 мг, 0,347 ммоль) и перемешивали при 40°С в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита, фильтрат сушили над сульфатом натрия, концентрировали, и неочищенное соединение промывали диэтиловым эфиром с получением (2S)-1-гидрокси-2((S)-4-метил-2-((((2-метил-1-фенилпропaн-2-ил)окси)кaрбонил)aмино)пентaнaмидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфоната (соединение С57). Система ТСХ: 15% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 526,12 (М+Н)⁺.

Пример 45: Синтез соединения С47

Метил-(((4,4-дифторциклогексил)метокси)карбонил)-О-лейцинат (3)

К перемешиваемому раствору (4,4-дифторциклогексил)метанола (1) (9,5 г, 63,33 ммоль) в ДХМ (100 мл) медленно добавляли пиридин (10 мл, 63,33 ммоль), трифосген (9,32 г, 31,66 ммоль) при 0°C, затем гидрохлорид метил-Ь-лейцината (2) (11,46 г, 63,33 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили ледяной водой (150 мл), концентрировали органический слой, снова промывали 1N раствором HCl, затем экстрагировали ДХМ (2x150 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный оста

- 136 049429 ток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 20% этилацетатом в гексане, с получением метил-(((4,4дифторциклогексил)метокси)карбонил)-D-лейцината (3). Система ТСХ: 20% этилацетата в петролейном эфире; Rf: 0,8 ЖХМС (ИЭР): m/z=322,1 (М+Н)+.

(((4,4-Дифторциклогексил)метокси)карбонил)Ж-лейцин (4)

К перемешиваемому раствору метил-(((4,4-дифторциклогексил)метокси)карбонил)Ю-лейцината (3) (13 г, 40,49 ммоль) в ТГФ (130 мл) и воде (75 мл) добавляли LiOH.H₂O (5 г, 121,49 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь концентрировали и подкисляли 1N HCl, экстрагировали этилацетатом (4x100 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением (((4,4 -дифторциклогексил)метокси)карбонил)Жлейцина (4), который использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 308,1 [М+Н]⁺.

Метил(S)-2-((S)-2-(((((4,4-дифторциклогексил)метокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропаноат (5)

К перемешиваемому раствору (((4,4-дифторциклогексил)метокси)карбонил)Ж-лейцина (4) (5 г, 16,28 ммоль) в ДМФА (100 мл) добавляли EDC-HCl (4,58 г, 24,42 ммоль), НОВТ (3,33 г, 24,42 ммоль), DIPEA (8,36 мл, 48,85 ммоль) перемешивали при 0°С в течение 10 минут, а затем одновременно добавляли метил(2S)-2-амино-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (3,65 г, 19,54 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (200 мл), экстрагировали этилацетатом (3x100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя смесью 70% этилацетата/петролейного эфира, с получением метил-(S)-2-((S)-2-((((4,4дифторциклогексил)метокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (5). Система ТСХ: 70% этилацетата в петролейном эфире; R_f: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=476,54 (М+Н)(4,4-Дифторциkлогексил)метил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (6)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((S)-2-((((4,4дифторциклогексил)метокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (5) (2,8 г, 5,894 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (5,89 мл, 11,789 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH₄Cl (50 мл) и экстрагировали ДХМ (3x50 мл), фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 1-(3-метоксибензил)циклопропил(4,4дифторциклогексил)метил((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (6) Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 448,63 (М+Н)⁺.

(4,4-Дифторциkлогексил)метил((S)-4-метил-1 -оксо- 1-(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С47)

К перемешиваемому раствору (4,4-дифторциkлогексил)метил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (7) (250 мг, 0,526 ммоль) в этилацетате (20 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (669 мг, 1,57 ммоль) при 0°С в течение 10 минут и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (20 мл), и органический слой промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали, и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ с получением (4,4дифторциклогексил)метил((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С47). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 446,55 (М+Н)⁺.

- 137 049429

Пример 46: Синтез соединения C33

сзз

1-Бензилциклопропан-1-амин (2)

К перемешиваемому раствору 2-фенилацетонитрила (1) (2 г, 17,094 ммоль) в Et₂O:ТГФ (1:1) (20 мл) добавляли изопропоксид титана (5,14 г, 18,119 ммоль), а затем медленно по каплям добавляли 2М этилмагнийхлорид в ТГФ (17 мл, 34,188 ммоль) в течение 10 мин при 0°C. Затем реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 1 ч, а затем медленно добавляли BF₃-Et₂O (4,8 мл, 34,188 ммоль) при 0°С в течение 15 минут (возникала экзотермическая реакция) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 1 час реакционную смесь выливали в 10% раствор NaOH (100 мл), образовался белый осадок. Реакционную смесь фильтровали через слой целита, промывали этилацетатом (2x50 мл), фильтрат промывали солевым раствором (100 мл), и объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 70% этилацетатом в петролейном эфире, с получением 1-бензилциклопропан-1-амина (2). Система ТСХ: 80% этилацетата в петролейном эфире; Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=148,11 (М+Н)+.

Метил-N5-( 1 -бензилциклопропил)-N2-(трет-бутоксикарбонил)-L-глутамин (4)

К перемешиваемому раствору (S)-4-((трет-бутоксикарбонил)амино)-5-метокси-5-оксопентановой кислоты (3) (1 г, 1,915 ммоль) в ДМФА (10 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (731 мг, 3,831 ммоль), НОВТ (517 мг, 3,831 ммоль), DIPEA (1 мл, 5,747 ммоль) и 1-бензилциклопропан-1-амин (2) (337 мг, 2,298 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 40% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-N5-(1бензилциклопропил)-N2-(трет-бутоксикарбонил)-L-глутамината (4). Система ТСХ: 50% этилацетата в петролейном эфире R_f: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=413 [M+Na]+.

Гидрохлорид метил-N5-(1-бензилциклопропил)-L-глутамина (5)

К перемешиваемому раствору метил-N5-(1-бензилциклопропил)-N2-(трет-бутоксикарбонил)-Lглутамината (4) (1,0 г, 2,564 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) по каплям добавляли 4N HCl в диоксане (20 мл) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. После израсходования исходного материала реакционную смесь упари вали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения, полученное неочищенное вещество растирали с диэтиловым эфиром с получением гидрохлорида метил-N5-(1-бензилциклопропил)L-глутамината (5). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=291,28 [M+H]⁺.

Метил-N5-(1-бензилциклопропил)-N2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропаноил)-L-глутаминат (6)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3

- 138 049429 циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты) (1,0 г, 2,949 ммоль) в ДМФА (10 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (1,12 г, 5,899 ммоль), НОВТ (796 мг, 5,899 ммоль), DIPEA (1,6 мл, 8,849 ммоль) и гидрохлорид метил-N5-(1-бензилциkлопропил)-L-глутамината (5) (855 мг, 3,539 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли водой (30 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 60% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-N5-(1-бензилциkлопропил)-N2-((S)2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноил)-L-глутамината (6). Система ТСХ: 80% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=612,88 (M+H)+.

-Хлорбензил-((S)-1 -(((S)-5-((1 -бензилциклопропил)амино)-1 -гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (7)

К перемешиваемому раствору метил-N5-(1-бензилциклопропил)-N2-((S)-2-((((3хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноил)-Ь-глутамината (6) (700 мг, 1,143 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,14 мл, 2,287 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь погасили водой (10 мл) и экстрагировали этилацетат (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (10 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 80% этилацетатом в петролейном эфире с получением 3-хлорбензил-((S)-1-(((S)-5-((1-бензилциkлопропил)амино)-1-гидрокси-5оксопентан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (7) Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС(ИЭР): m/z 584,53 (М+Н)⁺.

-Хлорбензил-((S)-1 -(((S)-5-((1 -бензилциклопропил)амино)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-3 циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение C33)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((S)-1-(((S)-5-((1-бензилциkлопропил)амино)-1гидрокси-5-оксопентан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (7) (200 мг, 0,343 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (290 мг, 0,686 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x10 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((S)-1-(((S)-5-((1бензилциклопропил)амино)-1,5-диоксопентан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение C33). Система ТСХ: 80% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,4

Пример 47: Синтез соединений С43 и С61.

- 139 049429

Этил-1 -бензил-2-оксоциклопентан-1 -карбоксилат (2)

К перемешиваемому раствору K₂CO₃ (17,6 г, 128,205 ммоль) в ацетоне (100 мл) добавляли этил-2оксоциклопентан-1-карбоксилат (1) (10 г, 64,102 ммоль) при комн. темп., а затем бензилбромид (7,6 мл, 64,102 ммоль) при комн. темп., и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником при 70°С в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и гасили насыщенным раствором NaHCO₃ (150 мл), затем экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), затем этилацетатный слой промывали насыщенным раствором NaHCO₃ (3x100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 3% этилацетатом в гексане, с получением этил-1-бензил-2оксоциклопентан-1-карбоксилата. Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане; Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=247,26 (M+H)+.

2-бензилциклопентан-1-он (3)

К перемешиваемому раствору этил-1-бензил-2-оксоциклопентан-1-карбоксилата (2) (15 г, 60,975 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (150 мл) добавляли 6N водн. HCl (75 мл) при комн. темп., и реакция смесь кипятили с обратным холодильником при 70°C в течение 6 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь охлаждали до комн. темп., выливали в ледяную воду (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 2% этилацетатом в гексане, с получением 2-бензилциклопентан-1-она (3). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=175,21 [M+H]⁺.

2-бензилциклопентан-1-ол (4)

К перемешиваемому раствору 2-бензилциклопентан-1-она (3) (5 г, 28,735 ммоль) в МеОН (50 мл) добавляли NaBH₄ (1,06 г, 57,471 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь оставляли перемешиваться при комн. темп. в течение 30 мин. Ход реакции контролировали с помощью ТСХ. Реакционную смесь перегоняли и гасили 1N HCl, экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения 2-бензилциклопентан-1-ола (4). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане; Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=171,43 (M+H)⁺.

Метил-(((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)-L-лейцинат (6)

К перемешиваемому раствору 2-бензилциклопентан-1-ола (4) (5 мг, 28,409 ммоль) в ДХМ (50 мл) медленно добавляли пиридин (2,5 мл, 28,409 ммоль), трифосген (2,1 г, 14,204 ммоль) при 0°C, а затем гидрохлорид меmил-L-лейцината (5) (4,9 г, 34,091 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), концентрировали органический слой, снова промывали 1N водн. раствором HCl, затем экстрагировали ДХМ (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 4% этилацетатом в гексане, с получением метил-(((2бензилциклопентил)окси)карбонил)-L-лейцината (6). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане; Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=348,33 (M+H)⁺.

(((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)-L-лейцин (7)

К перемешиваемому раствору метил-(((2-бензилциклопентил)окси)кαрбонил)-L-лейцината (6) (4,5 г, 12,968 ммоль) в ТГФ (40 мл), деминерализованной воде (20 мл) добавляли LiOH.H₂O (933 мг, 38,904 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь концентрировали и подкисляли 1N водн. HCl, экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением (((2-бензилциклопентил)окси)кαрбонил)-L-лейцина (7), который использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 334,45 (М+Н)⁺.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-(((((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)амино)-4-метилпенmанамидо)-3-((S)2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (8)

К перемешиваемому раствору (((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)-L-лейцина (7) (2 г, 6,006

- 140 049429 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (1,72 г, 9,009 ммоль), НОВТ (1,21 г, 9,009 ммоль), DIPEA (3,13 мл, 18,018 ммоль) и метил-(2S)-2-амино-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (1,34 г, 7,207 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 5% метанолом в дихлорметане, с получением метил-(2S)-2-((2S)-2((((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (8). Система тСх: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 502,68 (М+Н)+.

2-бензилциклопентил-((S)- 1-(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (9)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-((((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)амино)4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (8) (1 г, 1.990 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (2 мл, 3.981 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH₄Cl и экстрагировали дихлорметаном (2x50 мл), фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 2-бензилциклопентил-((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (9). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=474,84 (M+H)⁺.

2-бензилциклопентил ((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С43)

К перемешиваемому раствору 2-бензилциклопентил-((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (9) (0,2 г, 0,422 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (0,537 г, 1,268 ммоль) при 0°С и перемешивали. при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2бензилциклопентил-((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С43). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 472,62 (М+Н)⁺.

(2S)-2-((2S)-2-((((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-1-гидрокси-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфонат (соединение С61)

К перемешиваемому раствору 2-бензилциклопентил-((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С43) (80 мг, 0,169 ммоль) в этаноле (2 мл), EtOAc (5 мл), воде (1 мл) добавляли NaHSO₃ (22 мг, 0,219 ммоль) при комн. темп. и нагревали до 50°C в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 часов реакционную смесь охлаждали до комн. темп. и фильтровали через слой целита, затем промывали этанолом (5 мл). Фильтрат упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка. Данный остаток растирали с диэтиловым эфиром (2x5 мл), EtOAc (2x5 мл), растворители декантировали, твердое вещество хорошо сушили с получением (2S)-2-((2S)-2-((((2бензилциклопентил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3 ил)пропан-1-сульфоната (соединение С61). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 552,2 [М-Н]-.

- 141 049429

Пример 48: Синтез соединений С54 и С69.

Метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-2-((((3хлорбензил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору кислоты (((3-хлорбензил)окси)карбонил)>лейцина (фрагмент кислоты) (270 мг, 0,903 ммоль) в ДМФА (5 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC-HCl (259 мг, 1,35 ммоль), НОВТ (183 мг, 1,35 ммоль), DIPEA (0,5 мл, 2,7 ммоль) и гидрохлорид этил-3-(8-ацетил-2-оксо1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-аминопропаноата (промеж. соед.-7) (345 мг, 0,99 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-2-((((3хлорбензил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)пропаноата (1). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z=593,59 (M+H)+.

3-Хлорбензил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-гидроксипропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-2((((3-хлорбензил)окси))карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)пропаноата (1) (280 мг, 0,47 ммоль) в ДХМ (3 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,4 мл, 0,94 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 4 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), и объединенный органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 3-хлорбензил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (2). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=551,38 (M+H)⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С54)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (2) (120 мг, 0,26 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (479 мг, 1,13 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С54). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,35 ЖХМС (ИЭР): m/z 549,50 (М+Н)⁺.

- 142 049429

-Хлорбензил-((2R)-1 -((3 -(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро [4.5]декан-3 -ил)-1 -(диэтоксифосфорил)-1 гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С69)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С54) (200 мг, 0,36 ммоль) в ДХМ (2 мл) добавляли DIPEA (0,2 мл, 1,09 ммоль), диэтилфосфит (0,1 мл, 0,72 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Гасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), и объединенный органический слой сушили над Na₂SO₄. Неочищенный продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((2R)-1-((3-(8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-1-(диэтоксифосфорил))-1-гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С69). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 587,2 (М+Н)+.

Пример 49: Синтез соединений С56 и С63.

1-Бензилциклобутан-1-ол (2)

К перемешиваемому раствору циклобутанона (1) (5 г, 71,428 ммоль) в ТГФ (50 мл) добавляли фенилмагнийбромид (71 мл, 142,85 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH4Cl (150 мл), фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (200 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 3% этилацетатом в гексане, с получением 1-бензилциклобутан-1-ола (2). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане; Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=163,10 (M+H)⁺.

Метил-(( 1 -бензилциклобутокси)карбонил)-L-лейцинат (4)

К перемешиваемому раствору 1-бензилциклобутан-1-ола (2) (3 г, 18,518 ммоль) в толуоле (30 мл) добавляли метил-(S)-2-изоцианато-4-метилпентаноат (3) (3,79 г, 22,222 ммоль) и перемешивали при 90°С в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь охлаждали до комн. темп. и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 2% этилацетатом в гексане, с получением метил((1-бензилциклобутокси)карбонил)-L-лейцината (4). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане; Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z=334,38 [М+Н].

((1-бензилциклобутокси)карбонил)-L-лейцин (5)

К перемешиваемому раствору метил-((1-бензилциклобутокси)карбонил)-L-лейцината (4) (3,5 г, 10,510 ммоль) в ТГФ (40 мл), деминерализованной воде (20 мл) добавляли LiOH.H₂O (756 мг, 31,531 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь концентрировали и под

- 143 049429 кисляли 1N HCl, экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением ((1-бензилциклобутокси)карбонил)-Ь-лейцина (5), который использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=320,36 (M+H)+.

Метил-(S)-2-((S)-2-(((1-бензилциkлобутокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропаноат (6)

К перемешиваемому раствору ((1-бензилциклобутокси)карбонил)Ж-лейцина (5) (3 г, 9,803 ммоль) в ДМФА (30 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (2,8 г, 14,705 ммоль), НОВТ (1,9 г, 14,705 ммоль), DIPEA (5,4 мл, 29,411 ммоль) и метил-(2S)-2-амино-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина2) (2,1 г, 11,764 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 5% метанолом в дихлорметане, с получением метил-(S)-2-((S)-2-(((1бензилциkлобутокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (6). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 448,18 (М+Н)⁺.

-Бензилциkлобутил-((S)- 1-(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (7)

К перемешиваемому раствору метил-(S)-2-((S)-2-(((1-бензилциклобутокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропαноата (6) (400 мг, 0,871 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,1 мл, 2,614 ммоль) при 0°C и перемешивали в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH4Cl и экстрагировали дихлорметаном (2x50 мл), фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 1 -бензилциклобутил-((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (7). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=458,52 (M+H)⁺.

-Бензилциkлобутил((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С56)

К перемешиваемому раствору 1-бензилциkлобутил-((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (7) (0,2 г, 0,435 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (0,554 г, 1,307 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, в результате чего получали 1-фенилциклобуmил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С56). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 458,2 (М+Н)⁺.

(2S)-2-((S)-2-(((1-бензилциклобутокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфонат (соединение С63)

К перемешиваемому раствору неочищенного 1-бензилциkлобутил-((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С56) (180 мг, 0,393 ммоль) в EtOAc (5 мл) добавляли EtOH/H₂O (2 мл, 1 мл) и NaHSO₃ (61 мг, 0,590 ммоль) при комнатной температуре, и реакционную смесь перемешивали при 40°C в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали слой целита EtOH (20 мл) с получением (2S)-2-((S)-2-(((1-бензилциkлобутокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфоната (соединение С63). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 538,2 (М+Н)⁺.

- 144 049429

Пример 50: Синтез соединений С58 и С59.

2,3-Дигидрохинолин-4(1Н)-он (2)

Перемешиваемый раствор 3-(фениламино)пропановой кислоты (1) (20 г, 121,21 ммоль) в РРА (200 г) нагревали до 100°C в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой и экстрагировали EtOAc (3 x100 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (100 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 2,3-дигидрохинолин-4(1H)-она (2), который использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 50% этилацетата в гексане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 148,07 [М+Н]+.

трет-Бутил-4-оксо-3,4-дигидрохинолин-1 (2H)-карбоксилат (3)

К перемешиваемому раствору 2,3-дигидрохинолин-4(1H)-она (2) (5,4 г, 36,73 ммоль) в дихлорметане (80 мл) добавляли DIPEA (7,5 мл, 43,78 ммоль), (Вос)₂О (9,5 мл, 43,78 ммоль), DMAP (445 мг, 3,64 ммоль) при комн. темп. и нагревали до 50°С в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь разбавляли ДХМ и промывали водой (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка, неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением трет-бутил-4-оксо-3,4-дигидрохинолин1(2H)-карбоксилата (3). Система ТСХ: 40% этилацетата в гексане Rf: 0,7 ЖХМС (ИЭР): m/z 248,12 [М+Н]⁺.

трет-Бутил-4-гидрокси-3,4-дигидрохинолин-1 (2H)-карбоксилат (4)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-оkсо-3,4-дигидрохинолин-1(2H)-карбоксилата (3) (4 г, 16,12 ммоль) в метаноле (40 мл) добавляли NaBH₄ (900 мг, 24,19 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NH₄Cl и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, данный неочищенный продукт разбавляли водой и экстрагировали EtOAc (2x50 мл), сушили над сульфа том натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка, неочищенный остаток очищали с помощью нормально-фазовой хроматографией с получением трет-бутил-4гидрокси-3,4-дигидрохинолин-1(2H)-kарбоксилата (4). Система ТСХ: 40% этилацетата в гексане R_f: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=272,30 [M+Na]+.

трет-Бутил-4-((((S)-1 -метокси-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамоил)окси)-3,4-дигидрохинолин- 145 049429

1(2Н)-карбоксилат (6)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-гидрокси-3,4-дигидрохинолин-1(2Н)-карбоксилата (4) (2 г, 8,03 ммоль) в толуоле (20 мл) добавляли метил(S)-2-изоцианато-4-метилпентаноат (5) (2,06 г, 12,04 ммоль) при комн. темп. и нагревали до 100°С в герметично закрытой пробирке в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка, неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением трет-бутил-4-((((S)-1-метокси-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамоил)окси)-3,4дигидрохинолин-1(2H)-карбоксилата (6). Система ТСХ: 30% этилацетата в гексане Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z=443,44 [M+Na]+.

(((1-(трет-бутоксикарбонил)-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-4-ил)окси)карбонил)-L-лейцин (7)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-((((S)-1-метокси-4-метил-1-оксопентан-2ил)карбамоил)окси)-3,4-дигидрохинолин-1(2H)-карбоксилата (6) (2,4 г, 5,71 ммоль) в ТГФ (15 мл), воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (411 мг, 17,14 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (((1-(трет-бутоксикарбонил)-1,2,3,4тетрагидрохинолин-4-ил)окси)карбонил)Щ-лейцина (7). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 429,21 [M+Na]⁺.

трет-Бутил-4-((((S)-1 -(((5)-1 -метокси-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамоил)окси)-3,4-дигидрохинолин-1 (2H)-карбоксилат (8)

К перемешиваемому раствору (((1-(трет-бутоксикарбонил)-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-4ил)окси)карбонил)Щ-лейцина (7) (2 г, 4,92 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC.HCl (1,4 г, 7,38 ммоль), HOBt (0,9 г, 7,38 ммоль), DIPEA (2,5 мл, 14,76 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (1,1 г, 5,91 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (80 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 3% метанолом в дихлорметане с получением трет-бутил-4-((((S)-1-(((S)-1-метокси-1оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамоил)окси)3,4-дигидрохинолин-1(2H)-карбоксилата (8). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=575,54 (M+H)⁺.

трет-Бутил-4-((((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил1-оксопентан-2-ил)карбамоил)окси)-3,4-дигидрохинолин-1(2H)-карбоксилат (9)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-((((S)-1-(((S)-1-метокси-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамоил)окси)-3,4дигидрохинолин-1(2H)-карбоксилата (8) (500 мг, 0,87 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,8 мл, 1,74 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением трет-бутил-4-((((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамоил)окси)-3,4дигидрохинолин-1(2H)-карбоксилата (9). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 569,60 [M+Na]⁺.

трет-Бутил-4-((((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)пентан-2-ил)карбамоил)окси)-3,4-дигидрохинолин-1(2H)-карбоксилат (соединение С59)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-((((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамоил)окси)-3,4-дигидрохинолин-1 (2H)карбоксилата (9) (150 мг, 0,27 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (349 мг, 0,82 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (20 мл), а затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением трет-бутил-4-((((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)пентан-2-ил)карбамоил)окси)-3,4-дигидрохинолин-1(2H)-карбоксилата (соединение С59). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖхМС (ИЭР): m/z 545,45 (М+Н)⁺.

(2S)-2-((2S)-2-((((1-(трет-бутоксикарбонил)-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-4-ил)окси)карбонил)амино)4-метилпентанамидо)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-1 -сульфонат (соединение С58)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-((((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)кαрбамоил)окси)-3,4-дигидрохинолин-1(2H)карбоксилата (соединение С59) (0,15 г, 0,27 ммоль) растворяли в этилацетате (3,0 мл), этаноле (2,0 мл),

- 146 049429 воде (0,5 мл), а затем добавляли NaHSO₃ (46 мг, 0,55 ммоль) и перемешивали при 40°С в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита, фильтрат сушили над сульфатом натрия, концентрировали и неочищенное соединение промывали EtOAc и диэтиловым эфиром с получением (2S)-2-((2S)-2-((((1-(трет-бутоксикарбонил)-1,2,3,4тетрагидрохинолин-4-ил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфоната (соединение С58). Система ТСХ: 15% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 625,2 [М]^-.

Пример 51: Синтез соединений С71 и С62.

1-(Пиридин-3-илметил)циклопропан-1-ол (2)

К перемешиваемому раствору метил-2-(пиридин-3-ил)ацетата (1) (10 г, 66,225 ммоль) в ТГФ (100 мл) добавляли изопропоксид титана (27,4 г, 96,549 ммоль), а затем медленно по каплям добавляли 2М этилмагнийхлорид в ТГФ (115 мл, 231,78 ммоль) в течение 30 мин при -78°C. Затем реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония (50 мл), экстрагировали этилацетатом (3x40 мл), промывали солевым раствором (100 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 94% этилацетатом в петролейном эфире, с получением 1-(пиридин-3илметил)циклопропан-1-ола (2). Система ТСХ: 80% этилацетата в гексане; Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=150,06 (М+Н)+.

Метил-(( 1 -(пиридин-3 -илметил)циклопропокси)карбонил)-L-лейцинат (4)

К перемешиваемому раствору 1-(пиридин-3-илметил)циклопропан-1-ола (2) (3,7 г, 24,832 ммоль) в толуоле (20 мл) добавляли Et₃N (10 мл, 74,496 ммоль), а затем метил(S)-2-изоцианато-4-метилпентаноат (3) (6,3 г, 37,248 ммоль) и перемешивали при 110°С в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь охлаждали до комн. темп. и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 40% этилацетатом в гексане, с получением метил-((1-(пиридин-3-илметил)циклопропокси)карбонил)-L-лейцината (4). Система ТСХ: 70% этилацетата в гексане Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z=321,34 [M+H].

((1 -(Пиридин-3 -илметил)циклопропокси)карбонил)-Ь-лейцин (5)

К перемешиваемому раствору метил-((1-(пиридин-3-илметил)циклопропокси)карбонил)-Lлейцината (4) (4,8 г, 15,00 ммоль) в ТГФ (40 мл), деминерализованной воде (20 мл) добавляли LiOH.Н₂О (1,8 г, 45,00 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь концентрировали и подкисляли 1N HCl, экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением ((1-(пиридин-3-илметил)циклопропокси)карбонил)L-лейцина (5), который использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=307,22 (М+Н)⁺.

Метил-(S)-2-((S)-4-метил-2-(((1-(пиридин-3илметил)циклопропокси)кαрбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)nропаноат (6)

К перемешиваемому раствору ((1-(пиридин-3-илметил)циклопропокси)карбонил)-Ь-лейцина (5) (1,5 г, 4,901 ммоль) в ДМФА (15 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (1,4 г, 7,352 ммоль), НОВТ (0,99 г,

- 147 049429

7,352 ммоль), DIPEA (2,7 мл, 14,705 ммоль) и метил-(2S)-2-амино-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (1 г, 5,882 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 5% метанолом в дихлорметане, с получением метил-(S)-2-((S)-4-метил2-(((1-(пиридин-3-илметил)циkлоnропокси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (6). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 475,14 [М+Н]+.

1-(Пиридин-3-илметил)циклопропил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С71)

К перемешиваемому раствору метил-(S)-2-((S)-4-метил-2-(((1-(пиридин-3илметил)циклопропокси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (6) (300 мг, 0,632 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляли 2,4 М LAH в ТГФ (0,3 мл, 0,632 ммоль) при -78°C и перемешивали в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH4Cl и экстрагировали дихлорметаном (2x50 мл), фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 1-(пиридин-3-илметил)циkлопропил((S)-4-метил-1-оксо-1(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С71). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=445,12 [M+H]⁺.

(2S)-1 -Г идрокси-2-((S)-4-метил-2-((( 1 -(пиридин-3илметил)циклопропокси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-1сульфонат (соединение С62)

К перемешиваемому раствору неочищенного 1-(пиридин-3-илметил)циkлопропил((S)-4-метил-1оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С71) (200 мг, 0,450 ммоль) в EtOAc (5 мл) добавляли ЕЮШН^ (2 мл, 1 мл) и NaHSO₃ (70 мг, 0,675 ммоль) при комн. темп., и реакционную смесь перемешивали при 40°C в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали слой целита EtOH (20 мл) с получением (2S)-1-гидрокси-2-((S)-4-метил-2-(((1-(пиридин-3илметил)циклопропокси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-1сульфоната (соединение С62). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 525,2 (М+Н)⁺.

Пример 52: Синтез соединения С64

Метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-2-((((4,4дифторциклогексил)метокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору (((4,4-дифторциклогексил)метокси)карбонил)-Е-лейцина (фрагмент кислоты-2) (1,2 г, 3,9 ммоль) в ДМФА (20 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC.HCl (1,1 г, 5,86 ммоль), НОВТ (0,79 г, 5,86 ммоль), DIPEA (2,1 мл, 11,72 ммоль) и гидрохлорид метил-3-(8-ацетил-2оксо-1,8-диазаспиро[4,5]декан-3-ил)-2-аминопропаноата (промеж. соед.-7) (1,49 г, 4,29 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-2((((4,4-дифторциклогексил)метокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)пропаноата (1). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,65 ЖХМС (ИЭР): m/z=601,71 (M+H)⁺.

(4,4-Дифторциkлогексил)метил((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-2

- 148 049429 ((((4,4-дифторциклогексил)метокси))карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)пропаноата (1) (500 мг, 0,85 ммоль) в ДХМ (3 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,85 мл, 1,7 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 4 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением (4,4-дифторциклогексил)метил((2S)-1-((1-(8-ацетил)-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (2). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=559,68 (M+H)+.

(4,4-Дифторциклогексил)метил((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3оксопропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С64)

К перемешиваемому раствору (4,4-дифторциклогексил)метил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (2) (400 мг, 0,71 ммоль) в этилацетате (4 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (1,2 г, 2,87 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением (4,4-дифторциклогексил)метил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С64). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 557,3 (М+Н)⁺.

Пример 53: Синтез соединений С96 и С72.

Метил-2-(3-хлорфенил)-2-метилпропаноат (2)

К перемешиваемому раствору метил-2-(3-хлорфенил)ацетата (1) (10 г, 54,17 ммоль) в ТГФ (100 мл) добавляли 60% NaH (6,5 г, 162,51 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 15 мин, затем добавляли MeI (13,5 мл, 216,68 ммоль) при той же температуре и оставляли при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония и экстрагировали EtOAc (2 x100 мл), объединили органический слой и промывали солевым раствором (100 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-2-(3-хлорфенил)-2-метилпропаноата (2). Система ТСХ: 10% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=213,31 [М+Н]⁺.

- 149 049429

2-(3 -Хлорфенил)-2-метилпропан-1 -ол (3)

К перемешиваемому раствору метил-2-(3-хлорфенил)-2-метилпропаноата (6 г, 28,30 ммоль) в ТГФ (80 мл) медленно добавляли 2,4 М LAH в ТГФ (11,7 мл, 28,30 ммоль) при -50°C и перемешивали в течение 1 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония и экстрагировали EtOAc (2x50 мл), объединили органический слой и промывали солевым раствором (60 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% этилацетатом в петролейном эфире с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропан-1-ола (3). Система ТСХ: 30% этилацетата Rf: 0,3 ЖХмС (ИЭР): m/z=167,4 [М-ОН]⁺.

Метил-((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-L-лейцинат (5)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропан-1-ола (3) (2,8 г, 15,16 ммоль), метилL-лейцината (2,64 г, 18,19 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавляли пиридин (3 мл, 1 об.), затем трифосген (2,24 г, 7,58 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (30 мл), экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 8% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-((2-(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонилЖ-лейцината(5). Система ТСХ: 30% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 356,31 [М+Н]⁺.

((2-(3-Хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-Г-лейцин (6)

К перемешиваемому раствору метил-((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-Г-лейцината (5) (2,3 г, 6,47 ммоль) в ТГФ (10 мл) и воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (800 мг, 19,43 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, разбавляли и промывали диэтиловым эфиром (20 мл), водн. слой подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 4 и экстрагировали дихлорметаном (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением ((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-L-лейцина (6). Система ТСХ: 10% МеОН в ДХМ Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=342,34 [М+Н]⁺.

Метил-(S)-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3((S)-2-оксопирролидин- 3-ил)пропаноат (7)

К перемешиваемому раствору ((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-L-лейцина (6) (10 г, 29,32 ммоль) в ДМФА (100 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (8,401 г, 43,98 ммоль), HOBt (5,76 г, 43,98 ммоль), DIPEA (15,2 мл, 87,9 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (6,545 г, 35,19 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 4% метанолом в дихлорметане с получением метил-(S)-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (7). Система ТСХ: 100% этилацетата Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 510,55 [М+Н]⁺.

2-(3-Хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (8)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (7) (3 г, 5,893 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (8,8 мл, 17,681 ммоль) при 0°C. и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением смеси соед.-8 (2,8 г, 5,81 ммоль, выход 98%). Смесь очищали СФХ с получением 2-(3хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (8). Система ТСХ: 100% этилацетата R_f: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 482,50 [М+Н]⁺.

2-(3-Хлорфенил)-2-метилпропил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С96)

К перемешиваемому раствору 2-метил-1-фенилпропан-2-ил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (8) (1 г, 2,079 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (2,644 г, 6,237 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (15 мл), а затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x15 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x15 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали на силикагеле с нормальной фазой. Продукт 10% МеОН/ДХМ элюи

- 150 049429 ровали в виде 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С96). Система ТСХ: 100% этилацетата Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 480,2 (М+Н)+.

(2S)-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-1гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфонат натрия (соединение С72)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С96) (750 мг, 1,565 ммоль) в этилацетате (2,0 мл), этаноле (2,0 мл), воде (2,0 мл) затем добавляли NaHSO₃ (325 мг, 3,131 ммоль) и перемешивали при 50-60°С в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита, промывали метанолом (10 мл), фильтрат сушили над сульфатом натрия, концентрировали и неочищенное соединение промывали комбинацией ДХМ/диэтиловый эфир/пентан с получением (2S)-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-1-сульфоната натрия (соединение С72). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане, далее 100% этилацетата Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 560,1 (M-Na)^-.

Пример 55: Синтез соединений С60 и С76.

Метил-2-(3-(бензилокси)фенил)ацетат (2)

К перемешиваемому раствору метил-2-(3-гидроксифенил)ацетата (1) (5 г, 3,012 ммоль) в ДМФА (50 мл) медленно добавляли K₂CO₃ (12,46 мл, 9,03 ммоль) при комн. темп., а затем бензилбромид (7,7 мл, 4,51 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили охлажденной льдом водой (150 мл) и перемешивали в течение 1 ч, экстрагировали диэтиловым эфиром (3x100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 7% этилацетатом в гексане, с получением метил-2-(3-(бензилокси)фенил)ацетата (2). Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 257,36 [М+Н]⁺.

-(3-(бензилокси)бензил)циклопропан-1 -ол (3)

К перемешиваемому раствору метил-2-(3-(бензилокси)фенил)ацетата (2) (6 г, 23,43 ммоль) в ТГФ (60 мл) медленно добавляли изопроксид титана (9,3 мл, 46,61 ммоль) при 0°C, затем этилмагнийбромид (58,5 мл, 58,5 ммоль) при 0°C? и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH₄Cl (50 мл), фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюи

- 151 049429 руя 10% этилацетатом в гексане, с получением 1-бензилциклопропан-1-ола (3). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=255,1 [M+H]+.

Метил-(( 1 -(3 -(бензилокси)бензил)циклопропокси)карбонил)-L-лейцинат (4)

К перемешиваемому раствору 1-бензилциклопропан-1-ола (3) (2,5 г, 9,82 ммоль) в ДХМ (30 мл) добавляли пиридин (3 мл), гидрохлорид метил-L-лейцината (4) (1,7 г, 11,79 ммоль), а затем медленно добавляли трифосген (1,45 г, 4,91 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили 1N водн. HCl (50 мл), затем экстрагировали ДХМ (2x50 мл), промывали (2x50 мл) раствором NaHCO₃, органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 15% этилацетатом в гексане, с получением метил-((1-(3(бензилокси)бензил)циклопропокси)карбонил)-L-лейцината (5). Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане; Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=426,47 (M+H)⁺.

((1 -(3 -(Бензилокси)бензил)циклопропокси)карбонил)-L-лейцин (6)

К перемешиваемому раствору метил-((1-бензилциклопропокси)карбонил)-Г-лейцината (5) (1,2 г, 2,8 ммоль) в ТГФ (10 мл), воде (2,5 мл) добавляли LiOH.H₂O (350 мг, 8,4 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь концентрировали и подкисляли 1N HCl, экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением ((1-(3-(бензилокси)бензил))циклопропокси)карбонил)-Г-лейцина (6), который непосредственно использовали на следующей стадии. Система ТСХ: 70% этилацетата и петролейный эфир R_f: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 412,44 [M+H]⁺.

Метил-(S)-2-((S)-2-(((1-(3-(бензилокси)бензил)циклопропокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (6)

К перемешиваемому раствору ((1-(3-(бензилокси)бензил)циклопропокси)карбонил)-L-лейцина (6) (23,2 г, 7,78 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (2,2 г, 11,67 ммоль), НОВТ (1,576 г, 11,67 ммоль), DIPEA (4,3 мл, 23,34 ммоль) и метил(R)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (1,73 г, 9,34 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x40 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом и петролейным эфиром, с получением метил-(S)-2-((S)-2-(((1-(3(бензилокси)бензил)циклопропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (7). Система ТСХ: 50% этилацетата в петролейном эфире R_f: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=580,78 [M-H]⁺.

-(3 -(Бензилокси)бензил)циклопропил((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (6)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((S)-2-(((1-(3(бензилокси)бензил)циклопропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (7) (1,3 г, 2,24 ммоль) в дихлорметане (13 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (3,36 мл, 6,6 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH₄Cl (50 мл) и экстрагировали ДХМ (2x50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением 1(3 -(бензилокси)бензил)циклопропил-((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан -2-ил)карбамата (8). Система ТСХ: 70% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=552,46 [М+Н]⁺.

-(3 -(Бензилокси)бензил)циклопропил((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С60)

К перемешиваемому раствору 1-бензилциклопропил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (7) (200 мг, 0,362 ммоль) растворяли в этилацетате (4 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (446 мг, 1,088 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (20 мл), фильтровали через слой целита, фильтрат промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1-(3-(бензилокси)бензил)циклопропил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С60). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=444,42 (M+H)⁺.

(2S)-2-((S)-2-(((1-(3-(бензилокси)бензил)циклопропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-1гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфонат натрия (соединение С76)

К перемешиваемому раствору 1-(3-(бензилокси)бензил)циклопропил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С60) (150 мг,

- 152 049429

0,273 ммоль) в этилацетате (1,0 мл), этаноле (1,0 мл), воде (1,0 мл) затем добавляли NaHSO₃ (31 мг, 0,3 ммоль) и перемешивали при 50-60°C в течение 24 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита, промывали метанолом (10 мл), фильтрат сушили над сульфатом натрия, концентрировали, и неочищенное соединение промывали комбинацией ДХМ/диэтиловый эфир/пентан с получением (2S)-2-((S)-2-(((1-(3(бензилокси)бензил)циклопропокси)карбонuл)амино)-4-метилпентанамидо)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфоната натрия (соединение С76). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане, затем 100% этилацетата Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 630,2 (M-Na).

Пример 56: Синтез соединения С64 и С95 о

Метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-2-((((4,4дифторциклогексил)метокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору (((4,4-дифторциклогексил)метокси)карбонил)-Ь-лейцина (фрагмент кислоты-2) (1,2 г, 3,9 ммоль) в ДМФА (20 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC.HCl (1,1 г, 5,86 ммоль), НОВТ (0,79 г, 5,86 ммоль), DIPEA (2,1 мл, 11,72 ммоль) и гидрохлорид метил-3-(8-ацетил-2оксо-1,8-диазаспиро[4,5]декан-3-ил)-2-аминопропаноата (промеж. соед.-7) (1,49 г, 4,29 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-2((((4,4-дифторциклогексил)метокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)пропаноата(1). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,65 ЖХМС (ИЭР): m/z=601,71 (M+H)+.

(4,4-Дифторциклогексил)метил((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-2((((4,4-дифторциклогексил)метокси))карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)пропаноата (1) (500 мг, 0,85 ммоль) в ДХМ (3 мл) добавляли 2М LiBH4 в ТГФ (0,85 мл, 1,7 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 4 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением (4,4-дифторциклогексил)метил((2S)-1-((1-(8-ацетил)-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (2). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=559,68 (M+H)⁺.

(4,4-Дифторциклогексил)метил((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3оксопропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С64)

К перемешиваемому раствору (4,4-дифторциклогексил)метил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (2) (400 мг, 0,71 ммоль) в этилацетате (4 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (1,2 г, 2,87 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным

- 153 049429

Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением (4,4-дифторциклогексил)метил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С64). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 557,3 (М+Н)+.

(4,4-Дифторциклогексил)метил-((2S)-1-((3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-1(диэтоксифосфорил)-1-гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С95)

К перемешиваемому раствору (4,4-дифторциклогексил)метил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С64) (100 мг, 0,179 ммоль) в ДХМ (2 мл) добавляли DIPEA (0,1 мл, 0,53 ммоль) и диэтилфосфит (0,08 мл, 0,53 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (10 мл), экстрагировали ДХМ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением (4,4дифторциклогексил)метил((2S)-1-((3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-1(диэтоксифосфорил)-1-гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С95). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 695,3.3 (М+Н)+.

Пример 57: Синтез соединений С66 и С85.

1-Этил-5-метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-((1-нитроциклогексил)метил)пентандиоат

К перемешиваемому раствору 1-этил-5-метил-(S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4метиленпентандиоата (2) (1,86 г, 6,17 ммоль) в ACN (8 мл) добавляли нитроциклогексан (1) (800 мг, 6,17 ммоль) и DBU (1,8 мл, 12,4 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением 1-этил-5-метил-2((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-((1-нитроциклогексил)метил)пентандиоата (3). Система ТСХ: 60% этилацетат/петролейный эфир Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 453,48 (М+Na+H)⁺.

Этил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноат (4)

К перемешиваемому раствору 1-этил-5-метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-((1нитроциклогексил)метил)пентандиоата (3) (500 мг, 1,16 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли хлорид никеля (151 мг, 1,16 ммоль), затем борогидрид натрия (221 мг, 5,81 ммоль) при -10°C и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили водой (5 мл) и экстрагировали смесью 10% МеОН/ДХМ (3x25 мл), объединенные органические

- 154 049429 слои промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением этил2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (4). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 369,55 (М+Н)+.

Гидрохлорид этил-2-амино-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (5)

К перемешиваемому раствору этил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (4) (2 г, 5,43 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 1,4-диоксанHCl (20 мл) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток растирали с нпентаном с получением гидрохлорида этил-2-амино-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (5). Система ТСХ: 15% МеОН/ДХМ Rf: ОД ЖХМС (ИЭР): m/z 269,03 (М+Н)⁺.

Этил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-(2-оксо-1азаспиро [4.5] декан-3 -ил)пропаноат (6)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты) (1,2 г, 4,01 ммоль) в ДМФА (15 мл) при 0°C одновременно добавляли EDC.HCl (1,1 г, 6,01 ммоль), НОВТ (800 мг, 6,01 ммоль), DIPEA (2 мл, 12 ммоль) и гидрохлорид этил-2-амино-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (1,4 г, 4,8 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением этил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (6). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 550,61 (М+Н)⁺.

Этил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-(2-оксо-1азаспиро [4.5] декан-3 -ил)пропаноат (7)

К перемешиваемому раствору этил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (6) (800 мг, 1,45 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH4 в ТГФ (1,45 мл, 2,91 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комн. темп.. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением этил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (7). Система ТСХ: 5% МеОН в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=508,20 (М+Н)⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-4-метил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С66)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (7) (100 мг, 0,19 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (334 мг, 0,78 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((2S)-4-метил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С66). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=506,2 (М+Н)⁺.

3-Хлорбензил-((2R)-1-((1-(диэтоксифосфорил)-1-гидрокси-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С85)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-4-метил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С66) (200 мг, 0,39 ммоль) в ДХМ (3 мл) добавляли DIPEA (0,2 мл, 1,1 ммоль), диэтилфосфит (0,14 мл, 1,1 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Гасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), и объединенный органический слой сушили над Na2SO4. Неочищенный продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((2R)-1-((1-(диэтоксифосфорил)-1-гидрокси-3-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С85). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=644,2 (M+H)⁺.

- 155 049429

Пример 58: Синтез соединений С67 и С82.

Метил-(S)-2-амино-3-(3-фторфенил)пропаноат (2)

К перемешиваемому раствору (S)-2-амино-3-(3-фторфенил)пропановой кислоты (1) (500 мг, 2,73 ммоль) в метаноле (10 мл) одновременно добавляли ацетилхлорид (1 мл, 10 об.) и кат. ДМФА при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч при 80°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную массу упаривали досуха и растирали с н-пентаном с получением метил(S)-2амино-3-(3-фторфенил)пропаноата (2). Система ТСХ: 5% МеОН в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС(ИЭР): m/z=198,24 (М+Н)+.

Метил-(S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-(3-фторфенил)пропаноат (4)

К перемешиваемому раствору метuл(S)-2-амино-3-(3-фторфенил)пропаноата (3) (108 мг, 0,76 ммоль), метил(S)-2-амино-3-(3-фторфенuл)пропаноата (2) (100 мг, 0,507 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавляли пиридин (0,1 мл, 1 об.), затем трифосген (225 мг, 0,76 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (30 мл), экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 8% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-(S)-2-((((3-хлорбензuл)окси)карбонил)амино)-3-(3-фторфенил))пропаноата (4).

Система ТСХ: 40% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 366,30 [М+Н]+.

(S)-2-((((3-хлорбензuл)окси)карбонил)амино)-3-(3-фторфенил)пропановая кислота (5)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-(3фторфенил)пропаноата (4) метил (1,2 г, 3,28 ммоль) в ТГФ (8 мл), воде (2 мл) добавляли гидроксид лития (404 мг, 9,86 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N растворе HCl до рН ~ 3 и экстрагиро вали этилацетатом (2x40 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонuл)амино)-3-(3-фторфенuл)пропановой кислоты (5). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 351,92 (М+Н)⁺.

Метил-3-(8-ацетuл-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-uл)-2-((S)-2-((((3хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-(3-фторфенил)пропанамидо)пропаноат (6)

К перемешиваемому раствору (R)-2-((((3-хлорбензuл)окси)карбонил)амино)-3-(3фторфенил)пропановой кислоты (5) (970 мг, 2,76 ммоль) в ДМФА (15 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC-HCl (790 мг, 790 ммоль), НОВТ (595 мг, 4,41 ммоль), DIPEA (1,4 мл, 8,28 ммоль) и гидрохлорид метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-аминопропаноата (промеж. соед.-7) (1,15 г, 3,31 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), экстрагировали

- 156 049429 этилацетатом (2x100 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 60% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3ил)-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-(3-фторфенил)пропанамидо)пропаноата (6). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,65 ЖХМС (ИЭР): m/z 631,31 (М+Н)+.

3-Хлорбензил-((2S)-1-((1-(8-ацетuл-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-uл)-3-гидроксипропан-2ил)амино)-3-(3-фторфенил)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (7)

К перемешиваемому раствору метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-2((((3-хлорбензил)окси))карбонил)амино)-3-(3-фторфенил)пропанамидо)пропаноата (6) (600 мг, 0,95 ммоль) в ДХМ (3 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,95 мл, 1,9 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 4 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 3-хлорбензил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3гидроксипропан-2-ил)амино)-3-(3-фторфенил)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (7). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=603,7 (M+H)⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-1-((1-(8-ацетuл-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-uл)-3-оксопропан-2ил)амино)-3-(3-фторфенил)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С67)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-3-(3-фторфенил)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (7) (500 мг, 0,79 ммоль) в этилацетате (4 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (1 г, 2,38 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспuро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2ил)амино)-3-(3-фторфенил)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С67). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 601,2 (М+Н)⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-1 -((3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-1 -(диэтоксифосфорил)-1 гидроксипропан-2-ил)амино)-3-(3 -фторфенил)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С67)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-3-(3-фторфенил)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С82) (100 мг, 0,18 ммоль) в ДХМ (2 мл) и добавляли DIPEA (0,1 мл, 0,54 ммоль) и диэтилфосфит (0,07 мл, 0,54 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (10 мл), экстрагировали ДХМ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением чистого 3-хлорбензил-((2S)-1-((3-(8-ацетил-2оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-1-(диэтоксифосфорил)-1-гидроксипропан-2-ил)амино)-3-(3фторфенил)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С67). Система ТСХ: 100% EtOAc в петролейном эфире Rf: 0,25 ЖХМС (ИЭР): m/z 739,2 (М+Н)⁺.

Пример 59: Синтез соединения С68

2

ЖМЛГФ, Н₂О.

-Ж-нттеяш,? ч

сев (3S)-3-((2S)-2-(((1,2-дифенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-2-оксо-4-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору 1,2-дифенилэтил((S)-1-(((S)-1-циано-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)1 -(тетрагидро-1 λ⁴-тиофен-1 -илиден)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамата (1) (750 мг, 1,2 ммоль) в ТГФ/Н₂О (5 мл/2,5 мл) при 0°C добавляли оксон (745 мг, 2,4 ммоль), и смесь перемеши

- 157 049429 вали при комн. темп. в течение 2 ч. Затем добавляли раствор 2-пиколиламина (0,06 мл, 0,4189 ммоль) в ТГФ/ДМФА (0,5 мл/0,25 мл). Затем к смеси добавляли 1N HCl, доводили PH до кислого и экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением (3S)-3-((2S)-2-(((1,2-дифенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-2оксо-4-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутановой кислоты (2). Система ТСХ: 15% метанола в ДХМ Rf: 0,1 ЖХМС (иЭР): m/z=538,44 (m+H)⁺. '

1,2-Дифенилэтил((S)-1-(((S)-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-((пиридин-2илметил)амино)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С68)

К перемешиваемому раствору (3S)-3-((2S)-2-(((1,2-дифенилэтокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-2-оксо-4-((S)-2-оксопирролидин-3-uл)бутановой кислоты (2) (150 мг, 0,2793 ммоль) в ТГФ (3 мл) при -40°С по каплям добавляли изобутилхлорформиат (0,045 мл, 0,33516 ммоль) и NMM (0,045 мл, 0,4189 ммоль). Смесь перемешивали при -40°С в течение 30 мин. Затем добавляли раствор 2пиколиламина (0,06 мл, 0,4189 ммоль) в ТГФ/ДМФА (0,5 мл/0,25 мл). Смесь перемешивали при -40°С в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1,2-дифенилэтил((S)-1-(((S)-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-((пиридин2-илметил)амино)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С68). Система ТСХ: 10%' метанола в ДХМ Rf: 0,45 ' ЖХМС (ИЭР): m/z 628,3 [М+Н]⁺.

Пример 60: Синтез соединений С70 и С84.

Метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору ((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-Ь-лейцина (фрагмент кислоты-1) (1 г, 2,9 ммоль) в ДМФА (20 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC.HCl (1 г, 5,2 ммоль), НОВТ (0,7 г, 5,2 ммоль), DIPEA (1,5 мл, 8,7 ммоль) и гидрохлорид метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-аминопропаноата (промеж. соед.-7) (1,2 г, 3,5 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3-циклогексил-2-(1H-индол2-карбоксамидо)пропанамидо)пропаноата (1) Система ТСХ: 5% метанол в ДХМ Rf: 0,65 ЖХМС (ИЭР): m/z 521,27 (М+Н)⁺.

2-(3-Хлорфенил)-2-метилпропил((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропаноата (1) (350 мг, 0,56 ммоль) в ДХМ (3 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,56 мл, 1,1 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 4 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3

- 158 049429 гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (2). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,25 ЖХМС (ИЭР): m/z=593,26 (M+H)+.

2-(3-Хлорфенил)-2-метилпропuл((2S)-1-((1-(8-ацетuл-2-оксо-1,8-дuазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3оксопропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С70)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((28)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (2) (240 мг, 0,4 ммоль) в этилацетате (4 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (515 мг, 1,21 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С70). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=591,3 (M+H)⁺.

2-(3-Хлорфенил)-2-метилпропил((2S)-1-((3-(8-ацетuл-2-оксо-1,8-дuазаспиро[4.5]декан-3-ил)-1(диэтоксифосфорил)-1-гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С84)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((28)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С70) (270 мг, 0,28 ммоль) в ДХМ (2 мл) и добавляли DIPEA (0,24 мл, 0,86 ммоль) и диэтилфосфит (0,25 мл, 0,21 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (10 мл), экстрагировали ДХМ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2метилпропил((2S)-1-((3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-1-(диэтоксифосфорил)-1гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С84). Система ТСХ: 80% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 729,2 (М+Н)+.

Пример 61: Синтез соединения С73

1-Бензuлциклобутил((2S)-1-(((2S)-1-цuано-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (3)

К перемешиваемому раствору 1-бензилцuклобутил-((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С56) (700 мг, 1,552 ммоль ДХМ (10 мл), добавляли Et₃N (0,27 мл, 1,862 ммоль) с последующим добавлением ацетонциангидрина (2) (263 мг, 3,104 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали дихлорметаном (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 1-бензилциклобутил-((2S)-1-(((2S)-1-циано-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (3). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 485,75 [М+Н]⁺.

1-Бензuлцuклобутuл((2S)-1-(((2S)-4-амuно-3-гидроксu-4-оксо-1-((S)-2-оксопuрролuдин-3-uл)бутан2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору 1-бензилциклобутил((2S)-1-(((2S)-1-циано-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (3) (500 мг, 1,033 ммоль), ДМСО (10 мл) добавляли K2CO3 (213 мг, 1,549 ммоль) и Н₂О₂ (30%) (0,6 мл, 5,681 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением 1-бензилциклобутил((2S)-1-(((2S)-4-амино-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10%

- 159 049429 метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 503,23 (М+Н)+.

1-Бензилциклобутил((S)-1-(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С73)

К перемешиваемому раствору 1-бензилциклобутил-((2S)-1-(((2S)-4-амино-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (4) (450 мг, 0,896 ммоль) в EtOAc (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (1,3 г, 3,286 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (50 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раство ром тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1-бензилциклобутил-((S)-1-(((S)-4-aмино-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутaн-2-ил)aмино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С73). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 501,2 [М+Н]⁺.

Пример 62: Синтез соединений С74 и С94.

Метил(1Н-индол-2-карбонил)-Е-лейцинат (3)

К перемешиваемому раствору 1Н-индол-2-карбоновой кислоты (2) (1 г, 6,21 ммоль) в ДМФА (20 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC.HCl (1,7 г, 9,31 ммоль), НОВТ (1,2 г, 5,47 ммоль), триэтиламин (2,6 мл, 4,5 ммоль) и метил-Е-лейцинат (2) (1,2 г, 1,5 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-(1Ниндол-2-карбонил)-Е-лейцината (3). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,65 ЖХМС (ИЭР): m/z=289,28 (M+H)⁺.

(1 Н-индол-2-карбонил)-Е-лейцин (4)

К перемешиваемому раствору метил-(1Н-индол-2-карбонил)-Е-лейцинатметила (3) (0,8 г, 2,77 ммоль) в ТГФ (4 мл), воде (1 мл) добавляли гидроксид лития (349 мг, 8,33 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x40 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (1Н-индол-2-карбонил)-Елейцина (4). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=275,1 (M+H)⁺.

Метил-2-((S)-2-(1H-индол-2-карбоксамидо)-4-метилпентанамидо)-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноат (5)

К перемешиваемому раствору (1H-индол-2-карбонил)-D-лейцина (4) (1 г, 3,649 ммоль) в ДМФА (15 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC-HCl (1,03 г, 5,47 ммоль), НОВТ (0,32 г, 5,47 ммоль), DIPEA

- 160 049429 (1,9 мл, 10 ммоль) и гидрохлорид метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2аминопропаноата (промеж. соед.-7) (1,39 г, 4 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-2-((S)-2(1Н-индол-2-карбоксамидо)-4-метилпентанамидо)-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3ил)пропаноата (5). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,65 ЖХМС (ИЭР): m/z=554,76 (M+H)+.

N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-4метил-1 -оксопентан-2-ил)-1 H-индол-2-карбоксамид (6)

К перемешиваемому раствору метил-2-((S)-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)-4-метилпентанамидо)-3(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан -3-ил)пропаноата (5) (900 мг, 1,62 ммоль) в ДХМ (3 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,6 мл, 3,25 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 4 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенный органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением N((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1оксопентан-2-ил)-1H-индол-2-карбоксамида (6). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=526,75 (M+H)⁺.

N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-4-метил1-оксопентан-2-ил)-1Н-индол-2-карбоксамид (соединение С74)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)-1Н-индол-2-карбоксамида (6) (200 мг, 0,38 ммоль) в этилацетате (4 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (0,48 г, 0,38 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2)ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)-1Н-индол-2-карбоксамида (соединение С74). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=524,2 (M+H)⁺.

Диэтил-(2-((S)-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)-4-метилпентанамидо)-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-1-гидроксипропил)фосфонат (соединение С94)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3оксопропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)-1Н-индол-2-карбоксамида (соединение С74) (30 мг, 0,05 ммоль) в ДХМ (2 мл) добавляли DIPEA (0,03 мл, 0,15 ммоль) и диэтилфосфита (0,03 мл, 0,15 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (10 мл), экстрагировали ДХМ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением чистого диэтил-(3-(8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-1гидроксипропил)фосфоната (соединение С94). Система ТСХ: 100% EtOAc в петролейном эфире Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 662,2 (М+Н)⁺.

- 161 049429

Пример 63: Синтез соединений С75 и С81.

о

Метuл-(S)-3-цuклогексuл-2-(1Н-uндол-2-карбоксамuдо)nропаноат (3)

К перемешиваемому раствору 1Н-индол-2-карбоновой кислоты (1) (2 г, 12,42 ммоль) в ДМФ (20 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC.HCl (3,5 г, 18,6 ммоль), НОВТ (1,5 г, 12,4 ммоль), триэтиламин (5,2 мл, 37,2 ммоль) и метил(S)-2-амино-3-циклогексилпропаноат (2) (3,4 г, 18,6 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-(S)-3-циклогексил-2-(1H-uндол-2-карбоксамидо)пропаноата (3). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,65 ЖХМС (ИЭР): m/z=329,33 (M+H)+.

(S)-3-циклогексил-2-(1H-индол-2-карбоксамидо)пропановая кислота (4)

К перемешиваемому раствору метил(S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропаноата (3) (7 г, 24,3 ммоль) в ТГФ (12 мл), воде(3 мл) добавляли гидроксид лития (3 г, 72,9 ммоль) при комн. Темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-3-циклогексил-2-(1Ниндол-2-карбоксамидо)пропановой кислоты (4). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ R_f: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 315,1 (М+Н)⁺.

Метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((8)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)пропаноат (5)

К перемешиваемому раствору (К)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропановой кислоты (фрагмент кислоты-5) (1 г, 3,18 ммоль) в ДМФА (20 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC.HCl (0,88 г, 4,6 ммоль), НОВТ (0,62 г, 4,6 ммоль), DIPEA (1,6 мл, 9,3 ммоль) и гидрохлорид метил-3-(8-ацетил-2оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-аминопропаноата (промеж. соед.-7) (1,3 г, 3,8 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-3 -(8-ацетил-2 -оксо-1,8 -диазаспиро[4.5]декан-3 -ил)-2-((8)-3 -циклогексил-2

- 162 049429 (1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропаноата (5). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,65 ЖХМС (ИЭР): m/z=594,28 (M+H)+.

N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-3циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)-1 Н-индол-2-карбоксамид (6)

К перемешиваемому раствору метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((8)-3циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропаноата (5) (600 мг, 1,08 ммоль) в ДХМ (3 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1 мл, 2,1 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 4 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенный органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-3циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-1Н-индол-2-карбоксамида (6). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=566,3 (M+H)⁺.

N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-3циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)-1 Н-индол-2-карбоксамид (соединение С75)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3гидроксипропан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-1Н-индол-2-карбоксамида (6) (500 мг, 0,88 ммоль) в этилацетате (4 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (1,12 г, 2,87 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3оксопропан-2)-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-1Н-индол-2-карбоксамида (соединение С75). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=564,2 (M+H)⁺.

Диэтил-(3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)-1-гидроксипропил)фосфонат (соединение С81)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3оксопропан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)-1 Н-индол-2-карбоксамида (соединение С75) (30 мг, 0,05 ммоль) в ДХМ (2 мл) добавляли DIPEA (0,03 мл, 0,15 ммоль) и диэтилфосфита (0,03 мл, 0,15 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (10 мл), экстрагировали ДХМ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением диэтил-(3-(8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-1гидроксипропил)фосфоната (соединение С81). Система ТСХ: 80% этилацетата в петролейном эфире R_f: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 702,3 (м+Н)⁺.

Пример 64: Синтез соединений С78 и С99.

(2S)-2-((2S)-4-метил-2-(((((1-фенилпропан-2-ил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-4-метил-2-((((1-фенилпропан-2ил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (1) (1,5 г, 3,253 ммоль) в ТГФ (10 мл), воде (8 мл) добавляли гидроксид лития (234 мг, 9,7613 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре. на 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-((2S)-4-метил-2-((((1фенилпропан-2-ил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой ки

- 163 049429 слоты (2). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=448,66(M+H)+.

-Фенилпропан-2-ил((S)-1 -(((S)-4-циано-3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро- 1l4тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-4-метил-2-((((1-фенилпропан-2ил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2) (1,1 г, 2,46 ммоль), ДХМ (15 мл), одновременно добавляли HATU (1,4 г, 3,691 ммоль), DIPEA (1,36 мл, 7,382 ммоль) и 1-(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромид (3) (608 мг, 2,953 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 1-фенилпропан-2-ил((S)-1-(((S)-4-циано3-оксо-1).-((S)-2-оксопuрролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-uл)амино)-4-метил1-оксопентан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 557,89 [М+Н]⁺.

1-фенилпропан-2-ил((S)-1-(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопuрролидин-3-ил)бутан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С99)

К перемешиваемому раствору 1-фенилпропан-2-ил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2ил)карбамата (4) (150 мг, 0,269 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли м-ХПБК (31 мг, 0,179 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1 -фенилпропан-2-ил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопuрролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С99). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 475,2 [М+Н]⁺.

1-Фенилпропан-2-ил((S)-1 -(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С78)

К перемешиваемому раствору 1-фенилпропан-2-ил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2ил)карбамата (4) (200 мг, 0,359 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли м-ХПБК (154 мг, 0,899 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли циклопропанамин (1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1фенилпропан-2-ил((S)-1-(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С78). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=515,2 (М+Н)⁺.

Пример 65: Синтез соединения С79 в^ ''V коми, tmt..· 24ч , .CN

Стадия-(A) з

1А

1-(Цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромид (3)

К перемешиваемому раствору тетрагидротиофена (1А) (10 г, 113,63 ммоль) добавляли бромацето

- 164 049429 нитрил (2А) (13,5 г, 113,63 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Полученные твердые вещества промывали диэтиловым эфиром и сушили с получением 1(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромида (3). ЖХМС (ИЭР): m/z 205,0 [М-Н]⁺.

(S)-2-((S)-4-метил-2-((((2-метил-1-фенилпропан-2-ил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((S)-4-метил-2-((((2-метил-1-фенилпропан-2ил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (1) (800 мг, 1,68 ммоль) в ТГФ (6 мл), воде (3 мл) добавляли гидроксид лития (80 мг, 3,36 ммоль) при комн. тем. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-2-((S)-4-метил-2-((((2метил-1-фенилпропан-2-ил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 484,15 [M+Na]⁺.

2-Метил-1 -фенилпропан-2-ил((S)-1 -(((S)-4-циано-3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((S)-4-метил-2-((((2-метил-1-фенилпропан-2ил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (3) (700 мг, 1,51 ммоль), ДХМ (15 мл) одновременно добавляли HATU (1,14 г, 3,02 ммоль), DIPEA (0,8 мл, 4,53 ммоль) и 1-(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромид (3) (376 мг, 1,82 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 2-метил-1-фенилпропан-2-ил((S)-1-(((S)4-циано-3-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 571,78 [М+Н]⁺.

2-Метил-1 -фенилпропан-2-ил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С79)

К перемешиваемому раствору 2-метил-1-фенилпропан-2-ил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2ил)карбамата (4) (150 мг, 0,26 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли м-ХПБК (90 мг, 0,52 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2метил-1 -фенилпропан-2-ил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С79). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 448,49 [М+Н]⁺.

Пример 66: Синтез соединений С80 и С98.

(S)-2-((S)-2-(3-бензил-3-(1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-4-ил)уреидо)-4-метилпентанамидо)-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-(1-бензил-3-((S)-1-(((S)-1-метокси-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)уреидо)пиперидин-1карбоксилата (1) (2 г, 3,252 ммоль) в ТГФ (15 мл), воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (234 мг, 3,36 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давле

- 165 049429 нии, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-2-((S)-2-(3-бензил-3-(1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-4-ил)уреидо)-4-метилпентанамидо)3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 601,4 [М+Н]+.

трет-Бутил-4-(1 -бензил-3-((S)-1 -(((S)-4-циано-3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)уреидо)пиперидин-1 -карбоксилат (4)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((S)-2-(3-бензил-3-(1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-4ил)уреидо)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2) (1,5 г, 2,495 ммоль) в ДХМ (20 мл) одновременно добавляли HATU (1,42 г, 3,743 ммоль), DIPEA (1,37 мл, 7,487 ммоль) и 1-(цианометил)тетрагидро-1Н-тиофен-1-ия бромид (3) (616 мг, 2,995 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением трет-бутил-4-(1-бензил-3-((S)-1-(((S)-4циано- 3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)уреидо)пиперидин-1-карбоксилата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 711,53 [М+Н]⁺.

трет-Бутил-4-(3 -((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)-1-бензилуреидо)пиперидин-1-карбоксилат (соединение С80)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-(1-бензил-3-((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2ил)уреидо)пиперидин-1-карбоксилата (4) (150 мг, 0,211 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли м-ХПБК (72 мг, 0,422 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением трет-бутил-4-(3-((S)-1-(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)-1-бензилуреидо)пиперидин-1-карбоксилата (соединение С80). Система тСх: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖхМс (ИЭР): m/z 629,3 [М+Н]⁺.

трет-Бутил-4-(1 -бензил-3-((S)-1 -(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)уреидо)пиперидин-1-карбоксилат (соединение С98)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-(1-бензил-3-((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2ил)уреидо)пиперидин-1-карбоксилата (4) (200 мг, 0,281 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли м-ХПБК (121 мг, 0,704 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов при 0°C, добавляли циклопропанамин (1 мл) и перемешивали при комн. темп. на 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением трет-бутил-4-( 1 -бензил-3-((S)-1 -(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)уреидо)пиперидин-1 -карбоксилата (соединение С98). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (иЭр): m/z 669,3 [М+Н]⁺.

- 166 049429

Пример 67: Синтез соединения С86

(2S)-2-((2S)-2-((((1-(трет-бутоксикарбонил)-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-4-ил)окси)карбонил)амино)4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-((((S)-1-(((S)-1-метокси-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамоил)окси)-3,4дигидрохинолин-1(2H)-карбоксилата (1) (400 мг, 0,69 ммоль) в ТГФ (4 мл), воде (2 мл) добавляли гидроксид лития (50 мг, 2,08 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x15 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-((2S)-2-((((1-(трет-бутоксикарбонил)-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-4uл)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2). Система тСх: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 559,65 [М-Н]⁺.

трет-Бутил-4-((((S)-1 -(((S)-4-циано-3-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен1-илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамоил)окси)-3,4-дигидрохинолин-1 (2H)карбоксилат (4)

К перемешиваемому раствору (2S)-((2S)-2-((((1-(трет-бутоксикарбонил)-1,2,3,4-тетрагидрохинолин4-ил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2) (350 мг, 0,62 ммоль) в ДХМ (10 мл) одновременно добавляли HATU (474 мг, 1,24 ммоль), DIPEA (0,3 мл, 1,87 ммоль) и метил-1-(цианометил)тетрагидро-1Н-тиофен-1-ия бромид (3) (155 мг, 0,74 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x15 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 3% метанолом в дихлорметане с получением трет-бутил-4-((((S)-1-(((S)-4-циано-3оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 оксопентан-2-ил)карбамоил)окси)-3,4-дигидрохинолин-1(2H)-карбоксилата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 670,48 [М+Н]⁺.

(3S)-3-((2S)-2-((((1-(трет-бутоксикарбонил)-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-4-ил)окси)карбонил)амино)4-метилпентанамидо)-2-оксо-4-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутановая кислота (5)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-((((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин3-ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2uл)карбамоил)окси)-3,4-дигидрохинолин-1(2H)-карбоксuлата (4) (300 мг, 0,44 ммоль) в ТГФ (5 мл), воде (2 мл) добавляли оксон (826 мг, 1,34 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (3S)-3-((2S)-2-((((1-(третбутоксикарбонил)-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-4-ил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-2-оксо4-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутановой кислоты (5). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 587,37 [М-Н]⁺.

трет-Бутил-4-((((S)-1 -(((S)-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-((пиридин-2

- 167 049429 илметил)амино)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамоил)окси)-3,4-дигидрохинолин1(2Н)-карбоксилат (соединение С86)

К перемешиваемому раствору (38)-3-((28)-2-((((1-(трет-бутоксикарбонил)-1,2,3,4тетрагидрохинолин-4-ил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-2-оксо-4-((S)-2-оксопирролидин3-ил)бутановой кислоты (5) (130 мг, 0,22 ммоль) в ТГФ (6 мл) добавляли NMM (29 мг, 0,28 ммоль), изобутилхлорформиат (36 мг, 0,26 ммоль), а затем пиридин-2-илметанамин (6) (30 мг, 0,26 ммоль) при -40°C и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали солевым раствором (2x15 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением трет-бутил-4-((((S)-1-(((S)-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3ил)-4-((пиридин-2-илметил)амино)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамоил)окси)-3,4дигидрохинолин-1(2H)-карбоксилата (соединение С86). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 679,3 (М+Н)+.

Пример 68: Синтез соединений С90 и С87.

(S)-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил-(S)-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропаноата (1) (2 г, 3,9292 ммоль) в ТГФ (20 мл), воде (10 мл) добавляли гидроксид лития (282 мг, 11,7878 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-2-((S)2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин3-ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ R_f: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=496,69 (М+Н)⁺.

2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1 -(((S)-4-циано-3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2) (1,1 г, 2,2222 ммоль), ДХМ (15 мл) одновременно добавляли HATU (380 мг, 3,3333 ммоль), DIPEA (1,22 мл, 6,666 ммоль) и 1(цианометил)тетрагидро -1Н-тиофен-1-ия бромид (3) (915 мг, 4,444 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-4-циано-3оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 оксопентан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 605,71 [М+Н]⁺.

2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С90)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2

- 168 049429 оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-114-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2ил)карбамата (4) (350 мг, 0,579 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли м-ХПБК (200 мг, 1,158 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (1,5 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С90). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 523,2 (М+Н)+.

2-(3-Хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С87)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2ил)карбамат (4) (150 мг, 0,248 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли м-ХПБК (85 мг, 0,496 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли циклопропанамин (1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1 -(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С87). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 563,2 [М+Н]⁺.

Пример 69: Синтез соединения С88

(S)-2-((S)-2-((((1-(3-хлорбензил)циклопропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((S)-2-(((1-(3хлорбензил)циклопропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (1) (2,6 г, 5,12 ммоль) в ТГФ (30 мл), воде (15 мл) добавляли гидроксид лития (629 мг, 15,36 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x60 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-2-((S)-2-(((1-(3-хлорбензил)циклопропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ R_f: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 494,68 [М+Н]⁺.

-(3 -Хлорбензил)циклопропил((S)-1 -(((S)-4-циано-3-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамат

К перемешиваемому раствору (S)-2-((S)-2-(((1-(3-хлорбензил)циклопропокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2) (1,5 г, 3,04 ммоль), ДХМ (20 мл) одновременно добавляли HATU (1,7 г, 4,56 ммоль), DIPEA (1,3 мл, 9,12 ммоль) и 1(цианометил)тетрагидро-1Н-тиофен-1-ия бромид (3) (940 мг, 4,56 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x60 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюирова

- 169 049429 ли 5% метанолом в дихлорметане с получением 1-(3-хлорбензил)циклопропил((S)-1-(((S)-4-циано-3оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-114-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 оксопентан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 603,74 [М+Н]+.

-(3 -Хлорбензил)циклопропил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С88)

К перемешиваемому раствору 1-(3-хлорбензил)циклопропил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-114-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2ил)карбамата (4) (200 мг, 0,33 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли м-ХПБК (114 мг, 0,66 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1-(3-хлорбензил)циклопропил((S)-1-(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С88). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 521,2 [М+Н]⁺.

Пример 70: Синтез соединения С89

2-Бензилциклопентил((2S)-1-(((2R)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору 2-бензилциклопентил-((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С43) (300 мг, 0,636 ммоль) в ДХМ (10 мл) последовательно добавляли пиридин (0,2 мл, 2,547 ммоль), изоцианоциклопропан (1) (51 мг, 0,764 ммоль) при 0°C, перемешивали в течение 10 минут, добавляли ТФУ (0,09 мл, 1,273 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (100 мл), экстрагировали EtOAc (2x55 мл), объединенные органические слои промывали 1N HCl (3x20 мл), солевым раствором (3x20 мл), органические слои сушили над безводного Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток представлял собой 2-бензилциклопентил-((2S)-1-(((2R)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (2). Система ТСХ: 10% метанол/ дихлорметан Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=557,3 [M+H].

2-Бензилциклопентил((S)-1 -(((R)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С89)

К перемешиваемому раствору 2-бензилциклопентила ((2S)-1-(((2R)-4-(циклопропиламино)-3гидрокси-4-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (2) (250 мг, 0,449 ммоль) в EtOAc (10 мл) при 0°С добавляли периодинан Десса-Мартина (571 мг, 1,34 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (25 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-бензилциклопентил-((S)-1-(((R)4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3).-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С89). Система ТСХ: 10% метанол/ дихлорметан R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 555,3 (М+Н)⁺.

- 170 049429

Пример 71: Синтез соединения С93

(S)-2-((S)-2-((((1-(3-Метоксибензил)циклопропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((S)-2-(((1-(3метоксибензил)циклопропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (1) (1,8 г, 3,57 ммоль) в ТГФ (30 мл), воде (15 мл) добавляли гидроксид лития (440 мг, 10,73 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x40 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-2-((S)-2-(((1-(3-метоксибензил)циклопропокси)карбонил)амино)-4-метuлпентанамидо)-3((5)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 490,69 [М+Н]+.

1-(3-Метоксибензил)циклопропил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((S)-2-(((1-(3-метоксибензил)циклопропокси)карбонил)амино)4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2) (1,5 г, 3,06 ммоль), ДХМ (20 мл) одновременно добавляли HATU (1,7 г, 4,60 ммоль), DIPEA (1,3 мл, 9,20 ммоль) и 1(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромида (3) (947 мг, 4,60 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x40 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 1-(3-метоксибензил)циклопропил((S)-1-(((S)-4-циано-3оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 оксопентан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 599,26 [М+Н]⁺.

-(3 -Метоксибензил)циклопропил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С93)

К перемешиваемому раствору 1-(3-метоксибензил)циклопропuл((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2ил)карбамата (4) (300 мг, 0,50 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли м-ХПБК (172 мг, 1,00 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1(3-метоксибензил)циклопропил((S)-1-(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С93). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане R_f: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 517,2 [М+Н]⁺.

- 171 049429

Пример 72: Синтез соединения С96

Метил-2-(3-хлорфенил)-2-метилпропаноат (2)

К перемешиваемому раствору метил-2-(3-хлорфенил)ацетата (1) (10 г, 54,17 ммоль) в ТГФ (100 мл) добавляли 60% NaH (6,5 г, 162,51 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 15 мин, затем добавляли MeI (13,5 мл, 216,68 ммоль) при той же температуре и оставляли при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония и экстрагировали EtOAc (2x100 мл), объединили органический слой и промывали солевым раствором (100 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-2-(3-хлорфенил)-2-метилпропаноата (2). Система ТСХ: 10% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=213,31 [М+Н]+.

2-(3-Хлорфенил)-2-метилпропан-1-ол (3)

К перемешиваемому раствору метил-2-(3-хлорфенил)-2-метилпропаноата (6 г, 28,30 ммоль) в ТГФ (80 мл) медленно добавляли 2,4 М LAH в ТГФ (11,7 мл, 28,30 ммоль) при -50°C и перемешивали в течение 1 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония и экстрагировали EtOAc (2x50 мл), объединили органический слой и промывали солевым раствором (60 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% этилацетатом в петролейном эфире с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропан-1-ола (3). Система ТСХ: 30% этилацетата Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=167,4 [М-ОН]⁺.

Метил-((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-L-лейцинат (5)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропан-1-ола (3) (2,8 г, 15,16 ммоль), метилL-лейцината (4) (2,64 г, 18,19 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавляли пиридин (3 мл, 1 об.), затем трифосген (2,24 г, 7,58 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (30 мл), экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 8% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-((2-(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)-L-лейцината(5). Система ТСХ: 30% этилацетата в петролейном эфире R_f: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 356,31 [М+Н]+.

((2-(3-Хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-L-лейцин (6)

К перемешиваемому раствору метил-((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-L-лейцината (5) (2,3 г, 6,47 ммоль) в ТГФ (10 мл) и воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (800 мг, 19,43 ммоль) при

- 172 049429 комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, разбавляли и промывали диэтиловым эфиром (20 мл), водн. слой подкисляли водн. раствором 1N HCl до рН ~ 4 и экстрагировали дихлорметаном (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением ((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-L-лейцина (6). Система ТСХ: 10% МеОН в ДХМ Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 342,34 [М+Н]+.

Метил-(S)-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3((S)-2-оксопирролидин- 3-ил)пропаноат (7)

К перемешиваемому раствору ((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-L-лейцина (6) (10 г, 29,32 ммоль) в ДМФА (100 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (8,401 г, 43,98 ммоль), HOBt (5,76 г, 43,98 ммоль), DIPEA (15,2 мл, 87,9 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (6,545 г, 35,19 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 4% метанолом в дихлорметане с получением метил-(S)-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (7). Система ТСХ: 100% этилацетата Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 510,55 [М+Н]+.

2-(3-Хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (8)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (7) (3 г, 5,893 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли 2М LiBH4 в ТГФ (8,8 мл, 17,681 ммоль) при 0°C. и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением смеси соед.- 8 (2,8 г, 5,81 ммоль, выход 98%). Смесь очищали СФХ с получением 2-(3хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропaн-2-ил)aмино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (8). Система ТСХ: 100% этилацетата Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 482,50 [М+Н]+.

2-(3-Хлорфенил)-2-метилпропил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С96)

К перемешиваемому раствору 2-метил-1-фенилпропан-2-ил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (8) (1 г, 2,079 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (2,644 г, 6,237 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (15 мл), а затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x15 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x15 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO_4; фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали на силикагеле с нормальной фазой. Продукт элюировали 10% МеОН/ДХМ с получением в виде 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С96). Система ТСХ: 10% МеОН в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 480,2 (М+Н)+.

Пример 73: Синтез соединения С97

(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-дифенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-дифенилэтокси)карбонил)амино)-4

- 173 049429 метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (1) (2 г, 3,824 ммоль) в ТГФ (20 мл), воде (10 мл) добавляли гидроксид лития (275 мг, 11,472 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-((2S)-2-(((1,2дифенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 15% МеОН в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 510,67 [М+Н]+.

1,2-дифенилэтил((S)-1 -(((S)-4-циано-3 -оксо-1 -((S)-2 -оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро- 1l4тиофен)-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-2-(((1,2-дифенилэтокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3 ил)пропановой кислоты (2) (1,5 г, 2,946 ммоль) ДХМ (15 мл) с одновременно добавлением HATU (1,6 г, 4,420 ммоль), DIPEA (1,6 мл, 8,840 ммоль) и 1(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромида (3) (728 мг, 3,536 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 1,2-дифенилэтил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 619,51 [М+Н]⁺.

1,2-дифенилэтил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С97)

К перемешиваемому раствору 1,2-дифенилэтил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1114-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2ил)карбамата (4) (400 мг, 0,647 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли м-ХПБК (278 мг, 0,618 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, и добавляли циклопропанамин (2 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1,2дифенилэтил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С97). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 577,2 [М+Н]⁺.

Пример 74: Синтез соединения С100

(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-дифенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-дифенилэтокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (1) (2 г, 3,824 ммоль) в ТГФ (20 мл), воде (10 мл) добавляли гидроксид лития (275 мг, 11,472 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-((2S)-2-(((1,2дифенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 15% МеОН в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 510,67 [М+Н]⁺.

1,2-дифенилэтил((S)-1 -(((S)-4-циано-3 -оксо-1 -((S)-2 -оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро- 1l4тиофен)-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-2-(((1,2-дифенилэтокси)карбонил)амино)-4

- 174 049429 метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2) (1,5 г, 2,946 ммоль) ДХМ (15 мл) с одновременно добавлением HATU (1,6 г, 4,420 ммоль), DIPEA (1,6 мл, 8,840 ммоль) и 1(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромида (3) (728 мг, 3,536 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстраги ровали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 1,2-дифенилэтил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 619,51 [М+Н]+.

1,2-дифенилэтил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С100)

К перемешиваемому раствору 1,2-дифенилэтил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-П4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2ил)карбамат (4) (400 мг, 0,647 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли м-ХПБК (278 мг, 1,618 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, и добавляли водн. раствор аммиака (1,5 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и

ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1,2-дифенилэтил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2 ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С100). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 537,2 [М+Н]⁺.

Пример 75: Синтез соединения С65

Метил-((пентилокси)карбонил)-L-лейцинат (3)

К перемешиваемому раствору пентилкарбонохлоридата (1) (3,7 г, 24,56 ммоль), гидрохлорида метил-L-лейцината (3 г, 20,68 ммоль) в ТГФ (30 мл) добавляли DIPEA (10,4 мл, 62,06 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и

ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (30 мл) и промывали водой (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением метил((пентилокси)карбонил)-L-лейцината (3). Система ТСХ: 50% этилацетата в петролейном эфире R_f: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 201,39 [М+Н]⁺.

((Пентилокси)карбонил)-L-лейцин (4)

К перемешиваемому раствору метил-((пентилокси)карбонил)-Ь-лейцината (3) (2,5 г, ммоль) в ТГФ (30 мл), воде (10 мл) добавляли гидроксид лития (717 мг, 29,90 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакци онную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (((2-метил-1-фенилпропан-2ил)окси)карбонил)-Ь-лейцина (4). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 330,50 [M+Na]+.

Метил-2-метил-2-((S)-4-метил-2-(((пентилокси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-(2оксопирролидин-3-ил)пропаноат (5)

- 175 049429

К перемешиваемому раствору ((пентилокси)карбонил)А-лейцина (4) (400 мг, 1,632 ммоль) ДМФА (5 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (467 мг, 2,44 ммоль), HOBt (330 мг, 2,44 ммоль), DIPEA (0,87 мл, 4,89 ммоль) и гидрохлорид метил-2-амино-2-метил-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-2А) (391 мг, 1,95 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормальнофазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 4% метанола в дихлорметане с получением метuл-2-метил-2-((S)-4-метил-2-(((пентилокси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-(2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (5). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=524,7 [M+H]+.

Пентил-((2S)-1-((1-гидрокси-2-метил-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1оксопентан-2-ил) карбамат (6)

К перемешиваемому раствору метил-2-метuл-2-((S)-4-метил-2(((пентилокси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (5) (400 мг, 0,93 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,9 мл, 1,86 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакцион ную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением пентил((2S)-1-((1-гидрокси-2-метил-3-(2-оксопирролидин-3-uл)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1оксопентан-2-ил)карбамата (6). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ R_f: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=400,20 [М+Н]⁺.

Пентил-((2S)-4-метил-1-((2-метuл-1-оксо-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С65)

К перемешиваемому раствору пентил-((2S)-1-((1-гидрокси-2-метил-3-(2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (6) (200 мг, 0,50 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (630 мг, 1,48 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением пентuл((2S)-4-метил-1-((2-метил-1-оксо-3-(2 оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С65). Система ТСХ: 10% МеОН в ДХМ R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 398,2 (М+Н)⁺.

Пример 76: Синтез соединений С77 и С91.

№$Н₄ {У » В.)» МеОН ЗХ-яттет, 16 ч

Стадия®}

з Coeft-XU Ш), {ОД»®.),

Ру {1

Стадия®}

МОИ

ТГФ н_гО ¢3.-4), иамя.темп;

Стадия-® о HCI HjN, j/ / ΟΜβ • .л. о. он A Z j

X X Д X 1 ^ΗΝ~%

ХИ ----- '·

Н EDC. HCS {1.5 3KB.;, НОВ; (1,5 3№j,

DIPEA (ΤΜίΒ.ΐ, ДХМ, 0Χ·Κ0ΜΗ.·^^

Стадия®

- 176 049429

4-Пропилциклогексан-1-ол (2)

К перемешиваемому раствору 4-пропилциклогексан-1-она (1) (500 мг, 3,57 ммоль) в метаноле (10 мл) добавляли боргидрид натрия (337 мг, 8,92 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл), и объединенный органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 4-пропилциклогексан-1-ола (2). Система ТСХ: 30% этилацетат/петролейный эфир Rf 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 124,87 [М-ОН]⁺.

Метил-(((4-пропилциkлогексил)окси)карбонил)-L-лейцинат (4)

К перемешиваемому раствору 4-пропилциклогексан-1-ола (2) (200 мг, 1,418 ммоль), метил-Lлейцината (3) (308 мг, 2,1 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли пиридин (0,2 мл, 1 об.), затем трифосген (209 мг, 0,7 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 8% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-(((4пропилциклогексил)окси)карбонил)-Ь-лейцината (4). Система ТСХ: 20% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 314,51 [М+Н]⁺.

(((4-пропилциклогексил)окси)карбонил)-Ь-лейцин (5)

К перемешиваемому раствору метил-(((4-пропилциклогексил)окси)карбонил)-Ь-лейцината (4) (500 мг, 1,597 ммоль) в ТГФ (3 мл), воде (1 мл) добавляли гидроксид лития (115 мг, 4,8 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x40 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (((4пропилциклогексил)окси)карбонил)-Ь-лейцина (5). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 300,4 (М+Н)⁺.

Метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-4-метил-2-((((4пропилциклогексил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)пропаноат (6)

К перемешиваемому раствору (((4-пропилциклогексил)окси)карбонил)-Ь-лейцина (5) (700 мг, 2,34 ммоль) в ДМФА (15 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC-HCl (670 мг, 3,51 л). ммоль), НОВТ (473 мг, 3,51 ммоль), DIPEA (1,2 мл, 7,02 ммоль) и гидрохлорид метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-аминопропаноата (промеж. соед.-7) (974 мг, 1,2 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 60% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-4-метил-2-((((4пропилциклогексил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)пропаноата (6). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,65 ЖХМС (ИЭР): m/z=575,91 (M+H)⁺.

Метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-4-метил-2-((((4пропилциклогексил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)пропаноат (7)

К перемешиваемому раствору метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-4метил-2-((((4-пропилциклогексил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)пропаноата (6) (350 мг, 0,63 ммоль) в ДХМ (3 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,63 мл, 1,27 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 4 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенный органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-4-метил-2-((((4пропилциклогексил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)пропаноата (7). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=551,4 (M+H)⁺.

4-Пропилциклогексил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С77)

К перемешиваемому раствору метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-4метил-2-((((4-пропилциклогексил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)пропаноата (7) (290 мг, 0,52 ммоль) в этилацетате (4 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (670 мг, 1,58 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 4-пропилциkлогексил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3

- 177 049429 оксопропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С77). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=549,3 (M+H)+.

4-Пропилциклогексил-((2R)-1 -((3 -(8-ацетил-2 -оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3 -ил)-1 (диэтоксифосфорил)-1-гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С91)

К перемешиваемому раствору 4-пропилциклогексил-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С77) (450 мг, 0,821 ммоль) в ДХМ (2 мл) добавляли DIPEA (0,34 мл, 2,46 ммоль) и диэтилфосфит (0,42 мл, 2,46 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. Реакционную смесь гаси ли ледяной водой (10 мл), экстрагировали ДХМ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением чистого диэтил-(3-(8-ацетил-2оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3 -ил)-2 -((S)-3 -циклогексил-2 -(1 Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-1 гидроксипропил)фосфоната (соединение С91). Система ТСХ: 100% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,25 ЖХМС (ИЭР): m/z 687,3 (М+Н)+.

Пример 77: Синтез соединения С83

Метил(Е)-2-(бензилиденамино)пропаноат (3)

К перемешиваемому раствору гидрохлорида метилаланината (1) (15 г, 108,30 ммоль), бензальдегида (11,4 г, 108,30 ммоль) в ДХМ (100 мл) добавляли триэтиламин (18,2 мл, 129,96 ммоль), а затем сульфат магния (9,1 г, 75,81 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали ДХМ (50 мл). Фильтрат промывали водой (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного метил(E)-2-(бензилиденамино)пропаноата (3), который использовали на следующей стадии. Система ТСХ: 10% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=192,38 [M+H]+.

Диметил 2-амино-2-метилпентандиоат (5)

К перемешиваемому раствору неочищенного метил(E)-2-(бензилиденамино)пропаноата (3) (15 г, 78,53 ммоль) в ацетонитриле (100 мл) добавляли карбонат калия (32,5 г, 235,60 ммоль), хлорид бензилтриэтиламмония (3,5 г, 15,70 ммоль) при 0°C, затем одновременно добавляли метилакрилат (10 г, 117,80 ммоль) и перемешивали в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь

- 178 049429 гасили насыщ. раствором хлорида аммония и экстрагировали EtOAc (2x50 мл), объединили органический слой и промывали солевым раствором (2x60 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 80% этилацетатом в петролейном эфире с получением диметил-2-амино-2-метилпентандиоата (5). Система ТСХ: 80% этилацетата Rf: 0,2

Диметил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-2-метилпентандиоат (5)

К перемешиваемому раствору диметил-2-амино-2-метилпентандиоата (5) (7,5 г, 39,68 ммоль) в метаноле (75 мл), ТГФ (75 мл) добавляли NaHCO₃ (6,6 г, 78,57 ммоль), затем добавляли boc-ангидрид (12,9 мл, 59,52 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (30 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% этилацетатом в петролейном эфире с получением диметил-2-((третбутоксикарбонил)амино)-2-метилпентандиоата (6). Система ТСХ: 30% этилацетата в петролейном эфире Rf 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 312,27 [M+Na]+.

Диметил 2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-(цианометил)-2-метилпентандиоат (6)

К перемешиваемому раствору диметил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-2-метилпентандиоата (5) (7,5 г, 25,95 ммоль) в ТГФ (70 мл) добавляли 1М LiHMDS в ТГФ (57 мл, 29,95 ммоль) при -78°С и перемешивали в течение 1 ч, затем по каплям добавляли бромацетонитрил (2,16 г, 31,14 ммоль) и перемешивание продолжали еще 3 ч при той же температуре. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили метанолом (10 мл) и уксусной кислотой (5 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 1 ч, затем экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного диметил-2-((третбутоксикарбонил)амино)-4-(цианометил)-2-метилпентандиоата (8), который использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 5% МеОН в ДХМ R_f: 0,5

Метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-2-метил-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (6)

Раствор СОС1₂-6Н₂О (10,3 г, 45,73 ммоль) и диметил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4(цианометил)-2-метилпентандиоата (8) (7,3 г, 22,25 ммоль) в МеОН (70 мл) энергично перемешивали и охлаждали до 0°C, добавляя порциями NaBH₄ (3,3 г, 86,84 ммоль) в течение 30 минут. Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 24 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь концентрировали для удаления метанола и гасили 1N раствором HCl (50 мл), затем образовавшиеся твердые вещества фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (100 мл). Два слоя разделяли и сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Данный остаток очищали колоночной хроматографией с получением метил-2-((третбутоксикарбонил)амино)-2-метил-3-(2-оксопирролидин- 3-ил)пропаноата (9). Система ТСХ: 10% МеОН в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=301,10 [M+H]⁺.

Метил-2-амино-2-метил-3-(2-оксопирролидин-3 -ил)пропаноат (фрагмент амина-2А)

Раствор 4М HCl в диоксане (5 мл) добавляли к раствору метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-2метил-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (9) (0,5 г, 1,66 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) при 0°C. Смесь перемешивали в течение 2 ч, а затем концентрировали с получением неочищенного метил-2-амино-2метил-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата. Соль HCl (фрагмент амина-2А), которую использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 10% МеОН в ДХМ Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): mz=201,39 [M+H]⁺.

Метил-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-2метил-3-(2-оксопирролидин-3-ил) пропаноат (11)

К перемешиваемому раствору ((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-Е-лейцина (10) (600 мг, 1,910 ммоль) ДМФА (10 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (547 мг, 2,82 ммоль), HOBt (386 мг, 2,85 ммоль), DIPEA (1 мл, 5,73 ммоль) и гидрохлорид метил-2-амино-2-метил-3-(2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (фрагмент амина-2А) (458 мг, 2,29 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (30 мл), экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 4% метанолом в дихлорметане с получением метил-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-2-метил-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (11). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=524,7 [M+H]⁺.

2-(3-Хлорфенил)-2-метилпропил((2S)-1-((1-гидрокси-2-метил-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (12)

К перемешиваемому раствору метил-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-2-метил-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (11) (550 мг, 1,049 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1 мл, 2,09 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и

- 179 049429

ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((2S)-1-((1-гидрокси-2-метил-3-(2-оксопирролидин3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (12). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=496,7 [М+Н]+.

2-(3-Хлорфенил)-2-метилпропил((2S)-4-метил-1-((2-метил-1-оксо-3-(2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С83)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((2S)-1-((1-гидрокси-2-метил-3-(2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил))амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (12) (160 мг, 0,32 ммоль) в дихлорметане (5 мл), добавляли периодинан Десса-Мартина (411 мг, 0,96 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2метилпропил((2S)-4-метил-1-((2-метил-1-оксо-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С83). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 494,2 (М+Н)⁺.

Пример 78: Синтез соединений С101 и С92.

Метил-2-(3-хлорфенил)-2-метилпропаноат (2)

К перемешиваемому раствору метил-2-(3-хлорфенил)ацетата (1) (10 г, 54,17 ммоль) в ТГФ (100 мл) добавляли 60% NaH (6,5 г, 162,51 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 15 мин, затем добавляли MeI (13,5 мл, 216,68 ммоль) при той же температуре и оставляли при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония и экстрагировали EtOAc (2x100 мл), объединили органический слой и промывали солевым раствором (100 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-2-(3-хлорфенил)-2-метилпропаноата (2). Система ТСХ: 10% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=213,31 [M+H]+.

2-(3-Хлорфенил)-2-метилпропан-1-ол (3)

К перемешиваемому раствору метил-2-(3-хлорфенил)-2-метилпропаноата (6 г, 28,30 ммоль) в ТГФ (80 мл) медленно добавляли 2,4 М LAH в ТГФ (11,7 мл, 28,30 ммоль) при -50°C и перемешивали в течение 1 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония и экстрагировали EtOAc (2x50 мл), объединили органический слой и промывали солевым раствором (60 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% этилацетатом в петролейном эфире с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропан-1-ола (3). Система ТСХ: 30% этилацетата ЖХМС (иЭр): m/z= 167,4 [М-ОН]⁺.

- 180 049429

Метил-((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-L-лейцинат (5)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропан-1-ола (3) (2,8 г, 15,16 ммоль), метилL-лейцината (4) (2,64 г, 18,19 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавляли пиридин (3 мл, 1 об.), затем трифосген (2,24 г, 7,58 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (30 мл), экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 8% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-((2-(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)-Ь-лейцината(5). Система ТСХ: 30% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 356,31 [М+Н]+.

((2-(3-Хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-Ь-лейцин (6)

К перемешиваемому раствору метил-((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-Ь-лейцината (5) (2,3 г, 6,47 ммоль) в ТГФ (10 мл) и воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (800 мг, 19,43 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, разбавляли и промывали диэтиловым эфиром (20 мл), водн. слой подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 4 и экстрагировали дихлорметаном (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением ((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-L-лейцина (6). Система ТСХ: 10% МеОН в ДХМ Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=342,34 [M+H]⁺.

Метил-(S)-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропаноат (7)

К перемешиваемому раствору ((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-L-лейцина (6) (10 г, 29,32 ммоль) в ДМФА (100 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (8,401 г, 43,98 ммоль), HOBt (5,76 г, 43,98 ммоль), DIPEA (15,2 мл, 87,9 ммоль) и гидрохлорид метил((S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (6,545 г, 35,19 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 4% метанолом в дихлорметане с получением метил-(S)-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (7). Система ТСХ: 100% этилацетата Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 510,55 [М+Н]⁺.

2-(3-Хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С101)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (7) (2x7 г, 13,75 ммоль) в ДХМ (70 мл) добавляли 2М LiBH4 в ТГФ (20 мл, 41,25 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением смеси соед.-8 (10 г, 20,75 ммоль, выход 75,58%). Смесь очищали СФХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2метилпропил((S)- 1-(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1 оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С101). Система ТСХ: 100% этилацетата Rf: 0,2

2-(3-Хлорфенил)-2-метилпропил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С96)

К перемешиваемому раствору 2-метил-1-фенилпропан-2-ил((S)-1-(((5)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (8) (1 г, 2,079 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (2,644 г, 6,237 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (15 мл), а затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x15 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x15 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали на силикагеле с нормальной фазой. Продукт элюировали 10% МеОН/ДХМ с получением в виде 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С96). Система ТСХ: 10% МеОН в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 480,2 (М+Н)⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-2-метилпропил((2S)-1 -(((2S)-1 -(диэтоксифосфанил)-1 -гидрокси-3 -((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С92)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С96) в ДХМ (5 мл) одновременно добавляли диэтилфосфат (138 мг, 1,002 ммоль), DIPEA (0,18 мл, 1,002 ммоль) и при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали 10% метанолом в ДХМ (3x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали

- 181 049429 при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3хлорфенил)-2-метилпропил((2S)-1-(((2S)-1-(диэтоксифосфанил)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С92). Система ТСХ: 100% этилацетата Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 618,2 [М+Н]+.

Пример 79: Синтез соединения С102

Вес

I №че««я 35-доадхжИеям, I—( NaNO_z, ДМФА.55Х16Ч

Стздия-(1)

Зое

ДХМ, -Ж да -19 % , 2 ч

Ή >ю₂

4N НС1/динкм)(6<й}

Димиан {Web) ГЯ ДО ВОЙН. ΤΑΜίί, ?.ч

Стадия-(2) .NOHCl з

NO, 4

Стадия-СЗ)

Стадия-(5)

Садия-Ш

MiCi₂, №8H₄, Me CM

ИК-нжн.темаДч

Промек. «ед.-5

DBU, AON. квмн. темп.. 16 ч

4N ’дймсж(%&)

6X да mm гема, 2 ч

Стадии-(6) а,

С!

‘ОН

а.

ΜΗ, '° НС:

EOC.HCI , HOBt, DiPEA. _C(

Стадия-(7)

О 2M ВТГФ

ДШ, К цо юми. rem., 4 ч

Стздия-(8)

О, 'Ν' Н .он

J МР {2я®Л,ЕА.

С ими. rem, Зч

О

Стадия-® jU\>

С102

I трет-Бутил-3-нитроазетидин-1-карбоксилат (2)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-3-иодазетидин-1-карбоксилата (1) (20 г, 70,671 ммоль) в ДМСО (100 мл) добавляли флороглюцин (10,225 г, 148,409 ммоль), а затем нитрит натрия (9,79 г, 77,738 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при 45°C в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили водой (250 мл) и экстрагировали диэтиловым эфиром (3x100 мл), объединенные органические слои промывали водой (2x50 мл), солевым раствором (50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением трет-бутил-3-нитроазетидин-1-карбоксилата (2). Система ТСХ: 50% EtOAc/петролейный эфир R_f: 0,45.

Гидрохлорид 3-нитроазетидина (3)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-3-нитроазетидин-1-карбоксилата (2) (3,5 г, 17,326 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) добавляли 4М HCl в 1,4-диоксане (5 мл) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 4 часа реакцион ную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение растирали с диэтиловым эфиром (2x10 мл) с получением гидрохлорида 3-нитроазетидина (3). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 102,80 [М+Н]+.

1-(3-нитроазетидин-1-ил)этан-1-он (4)

К перемешиваемому раствору гидрохлорида 3-нитроазетидина (3) (3,3 г, 23,913 ммоль) в ДХМ (20 мл) одновременно добавляли уксусный ангидрид (2,2 мл, 23,913 ммоль) и триэтиламин (2,7 мл, 35,869 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали ДХМ (2x20 мл), органические слои промывали водой (2x10 мл), солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматогра

- 182 049429 фией с получением 1-(3-нитроазетидин-1-ил)этан-1-она. Система ТСХ: 30% EtOAc в петролейном эфире Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 144,78 [М+Н]+.

Диметил-2-((1-ацетил-3-нитроазетидин-3-ил)метил)-4-((трет-бутоксикарбонил)амино)пентандиоат (5)

К перемешиваемому раствору 1-(3-нитроазетидин-1-ил)этан-1-она (4) (1,5 г, 10,416 ммоль) в ACN (15 мл) добавляли диметил-(S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-метиленпентандиоат промеж. соед.-5 диметил-2-((1-ацетил-3-нитроазетидин-3-ил)метил)-4-((трет-бутоксикарбонил)амино)пентандиоат (5) (3,3 г, 11,458 ммоль) и DBU (1,9 мл, 12,499 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением диметил-2((1-ацетил-4-нитропиперидин-4-ил)метил)-4-((трет-бутоксикарбонил)амино)пентандиоата (5). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,35 ЖХМС (ИЭР): m/z 454,36 (M+Na+H)+.

Метил-3-(2-ацетил-6-оксо-2,5-диазаспиро[3.4]октан-7-ил)-2-((третбутоксикарбонил)амино)пропаноат (6)

К перемешиваемому раствору диметил-2-((1-ацетил-3-нитроазетидин-3-ил)метил)-4-((третбутоксикарбонил)амино)пентандиоата (5) (5,2 г, 12,06 ммоль) в метаноле (100 мл) добавляли хлорид никеля (1,7 г, 13,27 ммоль), затем борогидрид натрия (2,29 г, 60,3 ммоль) при -10°С и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили водой (50 мл) и экстрагировали ДХМ (3x150 мл), объединенные органические слои промывали водой (2x30 мл), солевым раствором (50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением метил-3(2-ацетил-6-оксо-2,5-диазаспиро[3.4]октан-7-ил)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропаноата (6). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 370,2 (М+Н)⁺.

Метил-3-(2-ацетил-6-оксо-2,5-диазаспиро[3.4]октан-7-ил)-2-аминопропаноат (7)

К перемешиваемому раствору метил-3-(2-ацетил-6-оксо-2,5-диазаспиро[3.4]октан-7-ил)-2-((третбутоксикарбонил)амино)пропаноата (6) (2 г, 5,42 ммоль) в ДХМ (4 мл) добавляли 1,4-диоксан HCl (12 мл) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток растирали с нпентаном с получением метил-3-(2-ацетил-6-оксо-2,5-диазаспиро[3.4]октан-7-ил)-2-аминопропаноата (7). Система ТСХ: 15% МеОН/ДХМ R_f: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 270,21 (М+Н)⁺.

Метил-3-(2-ацетил-6-оксо-2,5-диазаспиро[3.4]октан-7-ил)-2-((S)-2-((((3хлорбензил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)пропаноат (8)

К перемешиваемому раствору (((3-хлорбензил)окси)карбонил)-Е-лейцина (1 г, 3,34 ммоль) в ДМФА (12 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC-HCl (0,7 г, 3,67 ммоль), НОВТ (0,49 г, 3,67 ммоль), DIPEA (1,8 мл, 10,02 ммоль) и гидрохлорид метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4,5]декан-3-ил)-2аминопропаноата (8) (1 г, 3,64 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (60 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-3-(2-ацетил-6-оксо-2,5диазаспиро[3.4]октан-7-ил)-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)пропаноата (8). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 551,41(M+H)⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-1-((1-(2-ацетил-6-оксо-2,5-диазаспиро[3.4]октан-7-ил)-3-гидроксипропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (9)

К перемешиваемому раствору метил-3-(2-ацетил-6-оксо-2,5-диазаспиро[3.4]октан-7-ил)-2-((S)-2((((3-хлорбензил)окси))карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)пропаноата (9) (600 мг, 0,94 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,9 мл, 1,89 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенный органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 3-хлорбензил-((2S)-1-((1-(2-ацетил-6-оксо-2,5-диазаспиро[3.4]октан-7-ил)-3гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (9). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=523,57 (M+H)⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-1-((1-(2-ацетил-6-оксо-2,5-диазаспиро[3.4]октан-7-ил)-3-оксопропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С102)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-1-((1-(2-ацетил-6-оксо-2,5-диазаспиро[3.4]октан7-ил)-3-гидроксипропан-2-ил))амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (9) (100 мг, 0,19 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (478 мг, 0,76 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. рас

- 183 049429 твором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((2S)-1-((1-(2-ацетил-6-оксо-2,5-диазаспиро[3.4]октан-7-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С102). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 521,2 (М+Н)+.

Пример 80: Синтез соединений С103 и С111.

Метил(8)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3,3-диметилбутаноат (2)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропан-1-ола (промеж. соед.-3) (3,0 г, 16 ммоль), метил(8)-2-амино-3,3-диметилбутаноата (2,8 г, 19,0 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавляли пиридин (9 мл, 3 об.), а затем трифосген (2,36 г, 8,0 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили 2N HCl (30 мл), экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил(S)-2(((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3,3-диметилбутаноата (2). Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 356,43 [М+Н]⁺.

(S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3,3-диметилбутановая кислота (3)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)3,3-диметилбутаноатената (2) (4,1 г, 11,54 ммоль) в ТГФ (20 мл), воды (20 мл) добавляли гидроксид лития (2,7 г, 115,54 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствор HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метилnроnокси)kарбонил)амино)-3,3-диметилбутановой кислоты (3). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 342,41 [М+Н]⁺.

Метил(S)-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метилпроπокси)карбонил)амино)-3,3-диметилбутанамидо)3-((S)-2-оkсопирролидин-3-ил)пропаноат (4)

К перемешиваемому раствору (S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3,3диметилбутановой кислоты (3) (2 г, 5,86 ммоль) в ДМФА (15 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (1,6 г, 8,79 ммоль), HOBt (1,1 г, 8,79 ммоль), DIPEA (2,5 мл, 17,52 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (1,3 г, 7,03 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давле

- 184 049429 нии. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 4% метанолом в дихлорметане с получением метил(S)-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3,3-диметилбутанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 510,57 [М+Н]+.

2-(3-Хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил)карбамат (5)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3,3-диметилбутанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (4) (500 мг, 0,98 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1 мл, 1,96 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил)карбамата (5). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 482,58 (М+Н)⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-2-метилпропил((S)-3,3-диметил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3 -((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)бутан-2-ил)карбамат (соединение С103)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил)карбамата (5) (200 мг, 0,41 ммоль) в дихлорметане (5 мл), добавляли периодинан Десса-Мартина (528 мг, 1,24 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (15 мл), а затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x15 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x15 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2метилпропил((S)-3,3-диметил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)бутан-2-ил)карбамата (соединение С103). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,45 ЖХМС (ИЭР): m/z 480,20 (М+Н)⁺.

(2S)-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3,3-диметилбутанамидо)-1гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфонат натрия (соединение С111)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-3,3-диметил-1-оксо-1-(((S)-1оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)бутан-2-ил)карбамата (соединение С103) (100 мг, 0,20 ммоль) в этаноле (2 мл), EtOAc (1 мл), воде (1 мл) добавляли NaHSO₃ (43 мг, 0,41 ммоль) при комн. темп. и нагревали до 50°С в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 часов реакционную смесь охлаждали до комн. темп. и фильтровали через слой целита, затем промывали этанолом (5 мл). Фильтрат упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка. Данный остаток растирали с диэтиловым эфиром, EtOAc 3 раза с получением (2S)-2-((S)-2-(((2-(3хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3,3-диметилбутанамидо)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфоната натрия (соединение С111). Система ТСХ:15% метанола в дихлорметане Rf: 0,1 жХмС (ИЭР): m/z 560,1 [M-Na]-.

- 185 049429

Пример 81: Синтез соединений С104 и С114.

2-(3-Хлорфенил)ацетальдегид (2)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)этан-1-ола (1) (20 г, 128,20 ммоль) в ДХМ (200 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (16,3 г, 384,61 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали ДХМ (80 мл). Фильтрат промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x150 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x150 мл), затем солевым раствором (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта; неочищенный продукт очищали нормально-фазовой хроматографией с получением 2-(3-хлорфенил)ацетальдегида (2). Система ТСХ: 1 0% этилацетата в гексане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 156,18 [М+1]+.

2-(3-хлорфенил)-1 -фенилэтан-1 -ол (4)

К перемешиваемому раствору фенилмагнийбромида (3) (155 мл, 155,84 ммоль) в тетрагидрофуране (120 мл) добавляли 2-(3-хлорфенил)ацетальдегид (12 г, 77,92 ммоль) при -30°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом (2x100 мл). Органический слой объединяли и промывали водой (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка, неочищенный остаток очищали с помощью нормально-фазовой хроматографии с получением 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтан-1-ола (4). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,7 ЖХМС (ИЭР): m/z 215,18 [М-ОН]⁺ Метил-((2-(3-хлорфенил)-1фенилэтокси)карбонил)-L-лейцинат (6)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтан-1-ола (4) (4 г, 17,23 ммоль), гидрохлорида метил-L-лейцината (5) (3,7 г, 25,85 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавляли пиридин (12 мл, 3 об.), а затем трифосген (2,5 г, 8,61 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ДХМ и промывали 1N HCl (50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-((2-(3-хлорфенил)-1фенилэтокси)карбонил)-L-лейцината (6). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=426,43 [M+Na]+.

- 186 049429 ((2-(3-Хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)-Ь-лейцин (7)

К перемешиваемому раствору метил-((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)Ю-лейцината (6) (2,2 г, 5,45 ммоль) в ТГФ (30 мл), воде (15 мл) добавляли гидроксид лития (671 мг, 16,37 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением ((2-(3хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)-Ь-лейцина (7). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 412,41 [M+Na]+.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропаноат (8)

К перемешиваемому раствору ((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)-Ь-лейцина (7) (1,7 г, 4,36 ммоль) ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (1,2 г, 6,55 ммоль), HOBt (0,88 г, 6,55 ммоль), D1PEA (1,8 мл, 13,10 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (0,97 г, 5,24 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (80 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормальнофазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (8). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 558,57 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -фенилэтил((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (9)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1фенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (8) (800 мг, 1,43 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,4 мл, 2,87 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 2-(3-хлорфенил)-1 -метилпропил((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан2-ил)амино)-4-диметил-1-оксобутан-2-ил)карбамата (9). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 530,60 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -фенилэтил((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил) пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С104)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (9) (250 мг, 0,47 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (600 мг, 1,41 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-1фенилэтил((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2ил)карбамата (соединение С104). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=528,2 (М+Н)⁺.

(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-1гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфонат натрия (соединение С114)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-3,3-диметил-1-оксо-1-(((S)-1оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)бутан-2-ил)карбамата (соединение С104) (100 мг, 0,18 ммоль) в этаноле (0,5 мл), EtOAc (1 мл), воде (0,5 мл) добавляли NaHSO₃ (39 мг, 0,37 ммоль) при комн. темп. и нагревали до 50°C в течение 16 ч За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 часов реакционную смесь охлаждали до комн. темп. и фильтровали через слой целита, затем промывали этанолом (5 мл). Фильтрат упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка. Этот остаток растирали с диэтиловым эфиром, EtOAc 3 раза с получением (2S)-2-((2S)-2-(((2(3 -хлорфенил)-1 -фенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-1 -гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфоната натрия (соединение С114). Система ТСХ:15% метанола в дихлорметане Rf: 0,1 жХмС (ИЭР): m/z 608,2 [M-Na]-.

- 187 049429

Пример 82: Синтез соединения С107

Метил-2-((S)-2-(((((4,4-дифторциклогексuл)метокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-2метил-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (2)

К перемешиваемому раствору (((4,4-дифторциклогексил)метокси)карбонил)Ж-лейцина (1) (600 мг, 1,95 ммоль) ДМФА (10 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (559 мг, 2,92 ммоль), HOBt (395 мг, 2,92 ммоль), DIPEA (1 мл, 5,86 ммоль) и гидрохлорид метил-2-амино-2-метил-3-(2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (фрагмент амина-2А) (469 мг, 2,29 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (30 мл), экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением метuл-2-((S)-2-((((4,4-дифторциkлогексил)метокси)карбонuл)амино)4-метилпентанамидо)-2-метил-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (2). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=490,40 [M+H]+.

(4,4-Дифторциклогексил)метил-((2S)-1 -((1-гидрокси-2-метил-3 -(2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (3)

К перемешиваемому раствору метил-2-((8)-2-(((((4,4дифторциклогексил)метокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-2-метил-3-(2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (2) (750 мг, 1,53 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,5 мл, 3,06 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (30 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением (4,4-дифторциклогексил)метuл((2S)-1-((1-гидрокси-2-метил-3-(2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (3). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=462,49 [М+Н]⁺.

(4,4-Дифторциклогексил)метил((25)-4-метил-1-((2-метил-1-оксо-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропан2-ил)амино)-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С107)

К перемешиваемому раствору (4,4-дифторциkлогексuл)метuл((2S)-1-((1-гидрокси-2-метuл-3-(2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (3) (500 мг, 1,08 ммоль) в дихлорметане (15 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (1,3 г, 3,25 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением (4,4дифторциклогексил)метил((2S)-4-метил-1-((2-метил-1-оксо-3-(2-оксопuрролидин-3-uл)пропан-2ил)амино)-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С107). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 460,2 (М+Н)⁺.

- 188 049429

Пример 83: Синтез соединения С108

2-(3-Хлорфенил)-2-метилпропаналь (2)

К перемешиваемому раствору ДМСО (7,6 мл, 108,69 ммоль) в ДХМ (100 мл) добавляли оксалилхлорид (7 мл, 81,52 ммоль) при -78°С и перемешивали в течение 30 минут, затем добавляли 2-(3хлорфенил)-2-метилпропан-1-ол (10 г, 54,34 ммоль) в ДХМ при -78°C и продолжали в течение 2 часов, после чего добавляли TEA (45,6 мл, 326,08 ммоль) при той же температуре и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (100 мл) и промывали ледяной водой (3x100 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 2-(3-хлорфенил)-2метилпропаналя (2), который использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 148,07 [М+Н]+.

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропан-1 -ол (4)

К перемешиваемому раствору фенилмагнийбромида (3) (85 мл, 82,87 ммоль) в тетрагидрофуране (100 мл) добавляли 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропаналь (10 г, 55,24 ммоль) при -30°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой объединяли и промывали водой (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка, неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропан-1-ола (4). Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 243,01 [М-ОН]⁺.

Метил-((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)-L-лейцинат (4)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропан-1-ола (4) (3,6 г, 13,84 ммоль) метил(S)-2-амино-3,3-диметилбутаноата HCl (2,4 г, 16,61 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавляли пиридин (10,8 мл, 3 об.), а затем трифосген (2,0 г, 6,75 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили 2N HCl (50 мл), экстрагировали ДХМ (2x40 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)-L-лейцината (6). Система ТСХ: 30% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=454,48 [M+Na]+.

((2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)-Ь-лейцин (7)

К перемешиваемому раствору метил-((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)-Lлейцината (6) (3,0 г, 6,60 ммоль) в ТГФ (20 мл), воде (20 мл) добавляли гидроксид лития (0,81 г, 19,82 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с

- 189 049429 помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствор HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2 х40 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением ((2-(3хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)-L-лейцина (7).

Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 440,47 [M+Na]+.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (8)

К перемешиваемому раствору ((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)-Ь-лейцина (7) (2,2 г, 5,27 ммоль) ДМФА (15 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (1,5 г, 7,85 ммоль), HOBt (1,0 г, 7,40 ммоль), DIPEA (2,8 мл, 16,18 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (1,2 г, 6,33 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (80 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 3% метанолом в дихлорметане с получением метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (8). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 586,62 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамат (9)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (8) (1,5 г, 2,56 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (2,5 мл, 5,12 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (30 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)-4-диметил-1-оксобутан-2-ил)карбамата (9). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 580,96 [M+Na]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3 -((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С108)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (9) (250 мг, 0,44 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (570 мг, 1,34 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2метил-1 -фенилпропил((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С108). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 545,45 (М+Н)⁺.

- 190 049429

Пример 84: Синтез соединений С109 и C115.

2-(3-Хлорфенил)ацетальдегид (2)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)этан-1-ола (1) (20 г, 128,20 ммоль) в ДХМ (200 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (16,3 г, 38,46 ммоль) при 0°C. и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь фильтровали через слой целлита и промывали ДХМ (80 мл), а затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x160 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x120 мл), и органический слой промывали солевым раствором (100 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали нормально-фазовой хроматографией с получением 2-(3хлорфенил)ацетальдегида (2). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 155,15 [М+Н]+.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -фенилэтан-1 -ол (4)

К перемешиваемому раствору фенилмагнийбромида (3) (155 мл, 155,84 ммоль) в тетрагидрофуране (120 мл) добавляли 2-(3-хлорфенил)ацетальдегид (12 г, 77,92 ммоль) при -30°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом (2x100 мл). Органический слой объединяли и промывали водой (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка, неочищенный остаток очищали с помощью нормально-фазовой хроматографии с получением 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтан-1-ола (4). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,7 ЖХМС (ИЭР): m/z 215,18 [М-ОН]⁺.

Метил-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноат (6)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтан-1-ола (4) (3,5 г, 15,08 ммоль), метил(S)-2-амино-3-циклогексилпропаноата (5) (3,6 г, 19,60 ммоль) в ДХМ (35 мл) добавляли пиридин (10,5 мл, 3 об.), а затем трифосген (2,2 г, 7,54 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили 1N HCl (50 мл), экстрагировали ДХМ (2x60 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил(2S)-2(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата (6). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=466,49 [M+Na]+.

(2S)-2-(((2-(3-Хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановая кислота (7)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3

- 191 049429 циклогексилпропаноата (6) (3,3 г, 7,44 ммоль) в ТГФ (40 мл), воде (20 мл) добавляли гидроксид лития (915 мг, 22,33 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (7). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 452,44 [M+Na]+.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (8)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (7) (3 г, 6,99 ммоль) в ДМФА (30 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (2 г, 10,48 ммоль), HOBt (1,4 г, 10,48 ммоль), DIPEA (3 мл, 20,97 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (1,5 г, 8,38 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (80 мл), экстрагировали этилацетатом (2x60 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 3% метанолом в дихлорметане с получением метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3хлорфенил)-1 -фенилэтокси)карбонил)амино)-3 -циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3 ил)пропаноата (8). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 598,30 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -фенилэтил((S)-3 -циклогексил-1 -(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3 ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (9)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1фенилэтокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (8) (1 г, 1,67 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,6 мл, 3,34 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 2-(3-хлорфенил)-1 -фенилэтил-((S)-3-циклогексил- 1-(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (9). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 570,66 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -фенилэтил((S)-3 -циклогексил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (соединение С109)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-1-гидрокси3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (9) (700 мг, 1,22 ммоль) в дихлорметане (12 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (1,5 мг, 3,68 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (600 мл), а затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3 х 30 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x30 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-1фенилэтил((S)-3-циклогексил-1 -оксо- 1-(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С109). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 568,2 (М+Н)⁺.

(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-1гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфонат натрия (соединение С115)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтил((S)-3-циклогексил-1-оксо-1-(((S)-1оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С109) (100 мг, 0,17 ммоль) в этаноле (0,5 мл), EtOAc (1 мл), воде (0,5 мл), добавляли NaHSO₃ (36 мг, 0,35 ммоль) при комн. темп. и нагревали до 50°С в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 часов реакционную смесь охлаждали до комн. темп. и фильтровали через слой целита, затем промывали этанолом (5 мл). Фильтрат упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка. Данный остаток растирали с диэтиловым эфиром, EtOAc 3 раза с получением (2S)-2((2S)-2-(((2-(3 -хлорфенил)-1 -фенилэтокси)карбонил)амино)-3. -циклогексилпропанамидо)-1 -гидрокси-3 ((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-1-сульфоната натрия (соединение С115). Система ТСХ: 15% метанола в дихлорметане Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 648,2 [M-Na]^-.

- 192 049429

Пример 85: Синтез соединений С110 и C113.

Метил-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропаноат (3)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропан-1-ола (1) (3,0 г, 11,53 ммоль), гидрохлорида метил(S)-2-амино-3-циклогексилпропаноата (2,5 г, 13,84 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавляли пиридин (9 мл, 3 об.), а затем трифосген (1,7 г, 5,76 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили 2N HCl (50 мл), экстрагировали ДХМ (2x40 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 8% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропаноата (3). Система ТСХ: 1 0% этилацетата в гексане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=494,15 [M+Na]+.

(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановая кислота (4)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата (3) (3,0 г, 6,36 ммоль) в ТГФ (20 мл), воде (20 мл) добавляли гидроксид лития (0,78 г, 19,10 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x40 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (4). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 456,17 [М+Н]⁺.

- 193 049429

Метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (5)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (4) (2,8 г, 6,12 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (1,75 г, 9,19 ммоль), HOBt (1,24 г, 9,19 ммоль), DIPEA (3,2 мл, 18,38 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (1,36 г, 7,35 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормальнофазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 4% метанолом в дихлорметане с получением метил(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (5). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 626,64 [М+Н]+.

2-(3 -Хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((S)-3 -циклогексил-1 -(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (6)

К перемешиваемому раствору метил(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (5) (2,0 г, 3,20 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТгФ (6,4 мл, 6,4 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (30 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((S)-1 -(((S)-3 -циклогексил-1 -гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (6). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 598,67 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((S)-3 -циклогексил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оkсо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (соединение С110)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((S)-3-циkлогексил-1-(((S)1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (6) (1 г, 1,67 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (2,12 г, 5,01 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (30 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x30 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x30 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2метил-1 -фенилпропил((S)-3 -циклогексил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С110). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 596,3 (М+Н)⁺.

(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (7)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (5) (500 мг, 0,80 ммоль) в ТГФ (6 мл), воде (3 мл) добавляли гидроксид лития (100 мг, 2,4 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2((2S)-2-(((2-(3 -хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропокси)карбонил)амино)-3 -циклогексилпропанамидо)-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (7). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 610,37 [М-Н]⁺.

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (9)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропановой кислоты (7) (600 мг, 0,98 ммоль) ДХМ (15 мл) одновременно добавляли HATU (746 мг, 1,96 ммоль), DIPEA (5,4 мл, 2,94 ммоль) и 1-(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромид (8) (242 мг, 1,17 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x15 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 2-(3-хлорфенил)2-метил-1 -фенилпропил((S)-1 -(((S)-4-циано-3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1l4тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (9). Система ТСХ: 10%

- 194 049429 метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 721,69 [М+Н]+.

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((S)-1-(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин3-ил)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение C113)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 оксопропан-2-ил)карбамат (9) (350 мг, 0,47 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли м-ХПБК (162 мг, 0,94 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((S)-1-(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (соединение

C113). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 521,2 [М+Н]⁺.

Пример 86: Синтез соединения С105

2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропан-1-ол (2)

К перемешиваемому раствору (3-фторфенил)магнийбромида (1) (32 мл, 65,934 ммоль) добавляли 2(3-хлорфенил)-2-метилпропаналь (промеж. соед.-4) (4 г, 21,978 ммоль) в диэтиловом эфире (50 мл) при 30°С и перемешивали при комн. тем. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом (2x100 мл). Органический слой объединяли и промывали водой (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка, неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением 2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2метилпропан-1-ола (2). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане Rf: 0,7 ЖХМС (ИЭР): m/z 261,27 [МОН]^-.

Метил-(28)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропаноат (4)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропан-1-ола (2) (4,0 г, 14,388 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавляли пиридин (4,0 мл), 1 об.) и метил(S)-2-амино-3циклогексилпропаноат (3) (3,2 г, 17,266), затем порциями добавляли трифосген (2,12 г, 7,194 ммоль) в течение 15 мин при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. За ходом реакции

- 195 049429 следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ДХМ и промывали 1N HCl (50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2- метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата (4). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=512,19 [M+Na]+.

(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановая кислота (5)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата (4) (3,5 г, 7,157 ммоль) в ТГФ (25 мл), воде (15 мл) добавляли гидроксид лития (515 мг, 21,472 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (5). Система ТСХ: 30% этилацетата в гексане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=498,3 [M+Na]⁺.

Метил(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циkлогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (6)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (5) (2 г, 4,2105 ммоль) ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (1,2 г, 6,315 ммоль), HOBt (852 мг, 6,315 ммоль), DIPEA (2,3 мл, 12,631 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (940 мг, 5,052 ммоль) при 0°С и перемешивании при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 30% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циkлогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (6). Система ТСХ: 80% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,5 ЖхМС (ИЭР): m/z=645,11 [M+H]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -(3 -фторфенил)-2-метилпропил((S)-3 -циклогексил- 1-(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (7)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (6) (1,8 г, 2,7993 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (3,5 мл, 6,998 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 2-(3 -хлорфенил)-1 -(3 -фторфенил)-2-метилпропил((S)-3 -циклогексил-1 -(((S)1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (7). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 616,73 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -(3 -фторфенил)-2-метилпропил((S)-3 -циклогексил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -okco-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (соединение С105)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил1-(((S)-1 -гидрокси-3-((S))-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (7) (200 мг, 0,324 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (275 мг, 0,649 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3хлорфенил)-1 -(3 -фторфенил)-2-метилпропил((S)-3 -циклогексил-1 -оксо- 1-(((S)-1 -okco-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С105) Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 614,3 (М+Н)⁺.

- 196 049429

Пример 87: Синтез соединения С106

щюжж. «жд.-4

1,2-Бис(3-хлорфенил)-2-метилпропан-1-ол (2)

К перемешиваемому раствору (3-хлорфенил)магнийбромида в тетрагидрофуране (1) (41 мл, 27,472 ммоль) добавляли 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропаналь (5 г, 27,472 ммоль) в диэтиловом эфире (50 мл) при -30°C и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом (2x100 мл). Органический слой объединяли и промывали водой (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка, неочищенный остаток очищали с помощью нормально-фазовой хроматографии с получением 1,2-бис(3-хлорфенил)-2метилпропан-1-ола (2). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане Rf: 0,7 ЖХМС (ИЭР): m/z 277,16 [МОН]^-.

Метил-(2S)-2-(((1,2-бис(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноат (4)

К перемешиваемому раствору 1,2-бис(3-хлорфенил)-2-метилпропан-1-ола (2) (4,2 г, 14,285 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавляли пиридин (4,2 мл, 1 объем) и метил(S)-2-амино-3-циклогексилпропаноат (3) (3,17 г, 17,1428), затем порциями добавляли трифосген (2,11 г, 7,1428 ммоль) в течение 15 минут при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ДХМ и промывали 1N HCl (50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-(2S)-2-(((1,2-бис(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропаноата (4). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=528,24 [M+Na]+.

(28)-2-(((1,2-бис(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановая кислота (5)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-(((1,2-бис(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата (4) (3,2 г, 6,336 ммоль) в ТГФ (20 мл), воде (15 мл) добавляли гидроксид лития (456 мг, 19,009 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнат

- 197 049429 ной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-(((1,2-бис(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (5). Система ТСХ: 30% этилацетата в гексане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=514,22 [M+Na]+.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-бис(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (6)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-(((1,2-бис(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (5) (1,5 г, 3,054 ммоль) ДМФА (15 мл) одновременно добавляли EDC.HCl (875 мг, 4,582 ммоль), HOBt (618 мг, 4,582 ммоль), DIPEA (1,7 мл, 9,164 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (681 мг, 3,665 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 30% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-(3хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (6). Система ТСХ: 80% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=683,78 [M+Na]⁺.

1,2-Бис(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (7)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-бис(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (6) (1 г, 1,517 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH4 в ТГФ (1,5 мл, 3,034 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 1,2-бис(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (7). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 632,64 [М+Н]⁺.

1,2-Бис(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-3 -циклогексил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3 -((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (соединение С106)

К перемешиваемому раствору 1,2-бис(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-1гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин)-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (7) (200 мг, 0,316 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (268 мг, 0,633 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1,2-(3хлорфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3 -((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С106). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 630,2 (М+Н)⁺.

Пример 88: Синтез соединения С112

3-(8-Ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3-циклогексил-2-(1H-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3

- 198 049429 циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропаноата (1) (900 мг, 1,51 ммоль) в ТГФ (7 мл), воде (3 мл) добавляли гидроксид лития (109 мг, 4,55 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 3-(8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропановой кислоты (2) Система ТСХ: 10% МеОН в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 580,19 [М+Н]+.

N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-циано-3-оксо-4-(тетрагидро-1l4тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-1H-индол-2-карбоксамид (5)

К перемешиваемому раствору 3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропановой кислоты (2) (570 мг, 0,984 ммоль) в ТГФ (10 мл) одновременно добавляли HATU (514 мг, 1,476 ммоль), DIPEA (0,51 мл, 2,215 ммоль) и 1(цианометил)тетрагидро-1Н-тиофен-1-ий (3) (304 мг, 1,476 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали EtOAc (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением N-((2S)-1-((1-(8-αцеmuл-2-оkсо-1,8-дuαзαсnuро[4.5]деkαн-3-ил)-4циано-3-оκсо-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогеκсил-1-оκсопропан-2-ил)1H-индол-2-карбоксамида (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 689,61 [М+Н]⁺.

N-((2R)-1-((1-(8-αцеmил-2-оkсо-1,8-дuазαсnиро[4.5]деkαн-3-ил)-4-αмuно-3,4-дuоkсобуmαн-2ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-1Н-индол-2-карбоксамид (соединение С112)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4циано-3-оксо-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циkлогексил-1-оксопропан-2-ил)1Н-индол-2-карбоксамида (4) (200 мг, 0,290 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли м-ХПБК (124 мг, 0,726 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением N-((2R)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-амино-3,4-диоксобутан-2ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-1Н-индол-2-карбоксамида (соединение С112). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 607,3 [М+Н]⁺.

Пример 89: Синтез соединения С116

(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1фенилэтокси)карбонил)амино)-3-циkлогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (1) (1 г, 1,67 ммоль) в ТГФ (15 мл), воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (206 мг, 5,02 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (2). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 584,37 [М+Н]⁺.

2-(3-Хлорфенил)-1-фенилэтил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циkлогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3

- 199 049429 циклогексилnроnанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)nроnановой кислоты (2) (500 мг, 0,85 ммоль) ДХМ (5 мл) одновременно добавляли HATU (488 мг, 1,28 ммоль), DIPEA (0,4 мл, 9,12 ммоль) и 1(цианометил)тетрагидро-1Н-тиофен-1-ия бромида (3) (265 мг, 1,28 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x60 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 1-(3-хлорбензил)циклоnроnил((S)-1-(((S)-4-циано-3оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 И-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 оксопентан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 693,3 (М+Н)+.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -фенилэтил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение C116)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-П4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1оксопропан-2-ил)карбамата (4) (180 мг, 0,26 ммоль) в метаноле (2 мл) добавляли м-ХПБК (89 мг, 0,52 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтил((S)-1-(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1-((S)-2-оkсопирролидин-3ил)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С116). Система ТСХ: 15% метанола в дихлорметане Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=611,3 [M+H]+.

Пример 90: Синтез соединений С118

Диэтил-2-(2,3-диметилбутан-2-ил)малонат (3)

Раствор диэтил-2-(пропан-2-илиден)малоната (1) (5 г, 25,00 ммоль) в ТГФ (100 мл) охлаждали до 0°C, затем добавляли иодид меди (I) (7,1 г, 37,00 ммоль). Смесь перемешивали при 0°С в течение 0,5 ч. Затем к вышеуказанной смеси по каплям добавляли изопропилмагнийбромид 1,5М в ТГФ (50 мл, 75,00 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Смесь гасили 1N HCl и экстрагировали этилацетатом (2x100 мл) и промывали водой (2x100 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением диэтил-2(2,3-диметилбутан-2-ил)малоната (3). Система ТСХ: 5% этилацетата в петролейном эфире Rf-: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 245,39 [М+Н]+.

2-(Этоксикарбонил)-3,3,4-триметилпентановая кислота (4)

Перемешиваемый раствор (3) (6 г, 24,59 ммоль) в смеси этанола (150 мл) и ТГФ (75 мл) обрабатывали 1N раствором NaOH (25 мл, 24,59 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. После этого смесь упаривали до сиропа, растворяли в воде (200 мл) и экстраги

- 200 049429 ровали этиловым эфиром (2x100 мл). Водную фазу подкисляли 1N HCl до рН 2,0 и экстрагировали EtOAc (2x100 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (200 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 2-(этоксикарбонил)-3,3,4-триметилпентановой кислоты (4). Система ТСХ: 50% EtOAc в петролейном эфире Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 217,08 [М+Н]+.

Этил-2-(((бензилокси)карбонил)амино)-3,3,4-триметилпентаноат (5)

К перемешиваемому раствору (4) (2 г, 9,259 ммоль) в сухом бензоле добавляли триэтиламин (2,62 мл, 18,518 ммоль) и дифенилфосфорилазид (2,98 мл, 13,888 ммоль). Реакционную смесь нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры добавляли бензиловый спирт (1,5 мл, 13,88 ммоль), и реакционную смесь снова нагревали с обратным холодильником в течение 16 ч. После упаривания растворителя неочищенный материал гасили 5% раствором лимонной кислоты и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (50 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали, а неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией с получением этил-2-(((бензилокси)карбонил)амино)-3,3,4триметилпентаноата (5). Система ТСХ: 50% EtOAc в петролейном эфире Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 322,44 [М+Н]⁺.

2-(((бензилокси)карбонил)амино)-3,3,4-триметилпентановая кислота (6)

К перемешиваемому раствору метилэтил-2-(((бензилокси)карбонил)амино)-3,3,4триметилпентаноата (5) (2 г, 6,230 ммоль) в МеОН/ТГФ (15 мл), вода (5 мл) добавляли гидроксид лития (785 мг, 18,691 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 2-(((бензилокси)карбонил)амино)-3,3,4триметилпентановой кислоты (6). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 294,37 [М+Н]⁺.

Метил(2S)-2-(2-(((бензилокси)карбонил)амино)-3,3,4-триметилпентанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3 -ил)пропаноат (7)

К перемешиваемому раствору 2-(((бензилокси)карбонил)амино)-3,3,4-триметилпентановой кислоты (6) (1,5 г, 5,119 ммоль) в ДМФА (15 мл) добавляли EDC-HCl (1,46 г, 7,679 ммоль), HOBt (1,03 г, 7,67 ммоль) и DIPEA (2,67 мл, 15,358 ммоль) при 0°C, затем гидрохлорид метил-2-амино-2-метил-3-(2оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-2А) (1,25 г, 5,6313 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией с получением метил-(2S)-2-(2(((бензилокси)карбонил)амино)-3,3,4-триметилпентанамидо)-3 -((S)-2-оксопирролидин- 3 -ил)пропаноата (7). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=462,53 [M+H]⁺.

Бензил-( 1-(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-3,3,4-триметил-1 оксопентан-2-ил)карбамат (8)

К перемешиваемому раствору метил-((2S)-2-(2-(((бензилокси)карбонил)амино)-3,3,4триметилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (7) (500 мг, 1,084 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли 2М LiBH4 в ТГФ (1,08 мл, 2,16 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (30 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением бензил-(1-(((S)-1гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-3,3,4-триметил-1 -оксопентан-2ил)карбамата (8). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=434,20 [M+H]⁺.

Бензил-(3,3,4-триметил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)пентан -2-ил)карбамат (соединение С118)

К перемешиваемому раствору (1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)-3,3,4-триметил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (8) (200 мг, 0,461 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (293 мг, 0,692 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. После полного израсходования исходного материала по данным ТСХ и ЖХМС реакционную массу фильтровали через слой целита, и слой целита тщательно обрабатывали этилацетатом (30 мл). Затем органический слой промывали 10% раствором тиосульфата натрия (2x50 мл), затем насыщенным раствором гидрокарбоната натрия (2x50 мл), водой (1x50 мл), солевым раствором (1x50 мл). Затем органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали в вакууме. Затем неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением бензил-(3,3,4-триметил-1 -оксо- 1-(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2ил)карбамата (соединение С118). Система ТСХ: 10% МеОН в ДХМ Rf: 0,45 ЖХМС (ИЭР): m/z 432,2 (М+Н)⁺.

- 201 049429

Пример 91: Синтез соединения С119

Метил-2-((S)-3 -циклогексил-2-( 1 Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3 -(2-оксо-1 азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору (8)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропановой кислоты (фрагмент кислоты-5) (1 г, 2,564 ммоль) в ДМФА (15 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC.HCl (842 мг, 4,424 ммоль), НОВТ (590 г, 4,424 ммоль), DIPEA (1,9 мл, 10 ммоль) и гидрохлорид метил-2амино-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноат (промеж. соед.-7А) (940 мг, 3,244 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 5% МеОН в ДХМ, с получением метил-2-((8)-3 -циклогексил-2-( 1 Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3 -(2-оксо-1 азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (1). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,65 ЖХМС (ИЭР): m/z=551,61 (M+H)+.

2-((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил-2-((8)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил) пропаноата (1) (1,3 г, 2,36 ммоль) в ТГФ (7 мл), воде (3 мл), добавляли гидроксид лития (170 мг, 7,09 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Ре акционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 2-((8)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 537,64 [М+Н]⁺.

3-Хлорбензил-((28)-1-((4-циано-3-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-(тетрагидро-114тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору 2-((8)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропановой кислоты (2) (870 мг, 1,623 ммоль) в ТГФ (10 мл) одновременно добавляли HATU (923 мг, 2,434 ммоль), DIPEA (0,84 мл, 4,869 ммоль) и 1-(цианометил)тетрагидро-1Н-тиофен-1-ий (3) (525 мг, 2,434 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали EtOAc (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 3-хлорбензил-((28)-1-((4-циано-3-оксо-1-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-(тетрагидро-114-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1оксопропан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 646,35 [М+Н]⁺.

- 202 049429

N-((2S)-1-((4-амино-3,4-диоксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-3циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-1Н-индол-2-карбоксамид (соединение С119)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-1-((4-циано-3-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)-4(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)-1 Н-индол-2карбоксамида (4) (150 мг, 0,232 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли м-ХПБК (100 мг, 0,580 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали МеОН в ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением N-((2S)-l-((4-амино-3,4-диоксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-3циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-1Н-индол-2-карбоксамида (соединение С119). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 564,2 [М+Н]+.

Пример 92: Синтез соединения С120

(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (1) (1,1 г, 1,71 ммоль) в ТГФ (10 мл), воде (4 мл) добавляли гидроксид лития (214 мг, 5,13 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,1 ЖХМС ' (ИЭР): m/z 630,59 [М+Н]+.

2-(3-Хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1оксопропан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропановой кислоты (2) (900 мг, 1,43 ммоль) ДХМ (10 мл) одновременно добавляли HATU (1 г, 2,86 ммоль), DIPEA (8 мл, 4,29 ммоль) и 1-(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромид (3) (219 мг, 1,71 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (20 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 2-(3-хлорфенил)1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (4).

Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=739,67 [M+H]⁺.

2-(3-Хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С120)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-4-циано3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (4) (180 мг, 0,243 ммоль) в метаноле (2 мл) добавляли м

- 203 049429

ХПБК (83 мг, 0,487 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл) и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-4амино-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2ил)карбамата (соединение С120). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 657,1 [М+Н]+.

Пример 93: Синтез соединений С128 и С122.

ί ²

о

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1 -(нафталин-2-ил)пропан-1 -ол (2)

- 204 049429

К перемешиваемому раствору магниевой стружки (2,3 г, 96,61 ммоль) и иода (2 шарика) в тетрагидрофуране (40 мл) медленно добавляли 2-бромнафталин (3) (8 г, 38,647 ммоль) и 1,2-дибромэтан при комн. темп. и перемешивали при 40°C в течение 5 мин, окраска реакционной смеси обесцвечивалась, и реакционную массу перемешивали в течение 3 ч. В другой круглодонной колбе (2-(3-хлорфенил)-2метилпропаналь) (промеж. соед.-4) (4 г, 21,97 ммоль) в ТГФ (40 мл) охлаждали до -78°С вышеприготовленного раствора Гриньяра и медленно добавляли при -78°C, перемешивали в течение 1 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом (2x100 мл). Органический слой объединяли и промывали водой (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка, неочищенный остаток очищали с помощью нормально-фазовой хроматографии с получением 2(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2-ил)пропан-1-ола(2). Система ТСХ: 15% этилацетата в гексане Rf: 0,4.

Метил-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2ил)пропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропаноат (4)

К перемешиваемому раствору после хроматографии 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2ил)пропан-1-ола (2) (3,5 г, 11,290 ммоль), гидрохлорида метил(S)-2-амино-3-циkлогексилпропаноата (3) (2,5 г, 13,548 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавляли пиридин (3,5 мл, 1 об.), затем трифосген (1,67 г, 5,64 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ДХМ и промывали 1N HCl (50 мл) и промывали (2x50 мл) насыщенным раствором NaHCO₃ органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 15% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-(2S)-2-(((2(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2-ил)пропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата (4). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 544,52 [M+Na]+.

(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2-ил)nропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановая кислота (5)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2ил)пропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата (4) (2,8 г, 5,374 ммоль) в ТГФ (38 мл), воде (10 мл) добавляли гидроксид лития (661 мг, 16,37 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2ил)пропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (5). Система ТСХ: 50% этилацетата в гексане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=530,33 [M+Na]⁺.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2-ил)пропокси)карбонил)амино)-3циkлогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (6)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2ил)пропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (5) (1,9 г, 3,74 ммоль) ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC HCl (1,07 г, 5,621 ммоль), HOBt (758 мг, 5,621 ммоль), DIPEA (2 мл, 11,242 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (0,836 г, 4,497 ммоль) при 0°C и перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (80 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2-ил)пропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропаноата (6). Система ТСХ: 80% этилацетата в гексане Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 676,33 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-2-метил-1 -(нафталин-2-ил)пропил((S)-3-циклогексил- 1-(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (7)

К перемешиваемому раствору метил(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2ил)пропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (6) (400 мг, 0,592 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,6 мл, 1,18 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафтαлин-2-ил)пропил((S)-3-циkлогексил-1-(((S)-1гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (7). Система ТСХ: 100% этилацетата Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 648,73 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-2-метил-1 -(нафталин-2-ил)пропил((S)-3-циклогексил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оkсо-3-((S)- 205 049429

2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (соединение С128)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2-ил)пропил((S)-3циклогексил-1 -(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2ил)карбамата (7) (300 мг, 0,46 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (589 мг, 1,39 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита, промывали этилацетатом (20 мл), фильтрат промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2ил)пропил((S)-3-циклогексил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С128). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 646,2 (М+Н)+.

(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2-ил)пропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (8)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2ил)пропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (6) (2 г, 2,962 ммоль) в ТГФ (15 мл), воде (10 мл) добавляли гидроксид лития (0,364 г, 8,88 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x10 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-((2S)-2(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2-ил)пропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (8) Система ТСХ: 100% этилацетата Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 684,49 [M+Na]+.

2-(3 -Хлорфенил)-2-метил-1 -(нафталин-2-ил)пропил((S)-1 -(((S)-4-циано-3-оксо- 1-((S)-2оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 оксопропан-2-ил)карбамат (10)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2ил)пропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (8) (2x300 мг, 0,453 ммоль) ДХМ (10 мл) одновременно добавляли HATU (258 мг, 0,680 ммоль), DIPEA (0,4 мл, 2,178 ммоль) и 1-(цианометил)тетрагидро-1Н-тиофен-1-ия бромид (9) (140 мг, 0,680 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (25 мл), экстрагировали 5% метанолом в дихлорметане (2x15 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормальнофазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2-ил)пропил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 оксопропан-2-ил)карбамата (10). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 771,71 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-2-метил-1 -(нафталин-2-ил)пропил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С122)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2-ил)пропил((S)-1-(((S)-4циано-3-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (10) (500 мг, 0,649 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли мХПБК (279 мг, 1,623 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°С и добавляли водн. раствор аммиака (2,5 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 6 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2-ил)пропил((S)-1-(((S)-4амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2ил)карбамата (соединение С122). Система ТСХ: 10% метанола в 100% этилацетате Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=689,2 [M+H]⁺.

- 206 049429

Пример 94: Синтез соединения С123

Диметил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-(2-метил-2-нитропропил)пентандиоат (2)

К перемешиваемому раствору 2-нитропропана (1) (2 г, 22,47 ммоль) в ACN (60 мл) добавляли диметил(S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-метиленпентандиоат (промеж. соед.-5) (7,4 г, 24,71 ммоль) и DBU (6 мл, 44,94 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении с получением неочищенного продукта: данный неочищенный продукт разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой CombiFlash, соединение элюировали 30% этилацетатом в гексане с получением диметил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-(2-метил-2нитропропил)пентандиоата (2). Система ТСХ: 30% этилацетата в гексане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 377,14 [М+Н]+.

Метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (3)

К перемешиваемому раствору диметил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-(2-метил-2нитропропил)пентандиоата (2) (3 г, 7,97 ммоль) в МеОН (30 мл) добавляли NiCl₂ (1 г, 7,97 ммоль) и перемешивали при -10°С в течение 10 минут, затем добавляли NaBH₄ (1,5 г, 39,89 ммоль) при той же температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. NH₄Cl (100 мл), фильтровали через слой целита, и фильтрат экстрагировали ДХМ (2x40 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением метил-2-((третбутоксикарбонил)амино)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (3). Система ТСХ: 100% этилацетата Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 337,12 [M+Na]+.

Гидрохлорид метил-2-амино-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (4)

К перемешиваемому раствору метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)пропаноата (3) (2,3 г, 7,32 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) при 0°С добавляли по каплям 4N HCl в диоксане (10 мл), и реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения, полученное неочищенное вещество растирали с диэтиловым эфиром с получением гидрохлорида метил-2-амино-3-(5,5диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (4). Система ТСХ: 20% метанола в ДХМ Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=228,18 [М+Н]⁺.

Метил-2-((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)пропаноат (5)

К перемешиваемому раствору (S)-3-циклогексил-2-(1H-индол-2-карбоксамидо)пропановой кислоты

- 207 049429 (фрагмент кислоты-5) (1,5 г, 4,77 ммоль) ДМФА (15 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (1,3 г, 7,150 ммоль), HOBt (965 мг, 7,150 ммоль), DIPEA (2 мл, 14,31 ммоль) и гидрохлорид метил-2-амино-3-(5,5диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (4) (1,4 г, 5,721 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (80 мл), экстрагировали этилацетатом (2x60 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 3% метанолом в дихлорметане с получением метuл-2-((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)-3-(5, 5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (5). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 511,64 [М+Н]+.

2-((S)-3-Циклогексил-2-(1H-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (6)

К перемешиваемому раствору метuл-2-((S)-3-циклогексил-2-(1H-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (5) (1 г, 1,96 ммоль) в ТГФ (15 мл), воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (241 мг, 5,88 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 2-((S)-3-циkлогексил-2-(1H-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (6). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 497,75 [М+Н]⁺.

N-((2S)-1-((4-циано-1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3-оксо-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-1H-индол-2-карбоксамид (8)

К перемешиваемому раствору 2-(((S)-3-циkлогексил-2-(1H-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3(5,5 -диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (6) (500 мг, 1,00 ммоль) ДХМ (5 мл) одновременно добавляли HATU (574 мг, 1,511 ммоль), DIPEA (0,6 мл, 4,53 ммоль) и 1(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромид (7) (311 мг, 1,511 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (30 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением N-((2S)-1-((4-циано-1-(5,5-диметил-2-оксопuрролидин-3uл)-3-оксо-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-uл)амино)-3-циклогексuл-1-оксопропан-2-uл)-1Hиндол-2-карбоксамида (8). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 606,69 [М+Н]+.

N-((2S)-1-((4-амино-1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-3циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)-1 H-индол-2-карбоксамид (соединение С123)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-1-((4-циано-1-(5,5-диметuл-2-оксопuрролидин-3-ил)-3-оксо4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-uлиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксоnропан-2-ил)-1H-индол-2карбоксамида (8) (200 мг, 0,33 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли м-ХПБК (113 мг, 0,66 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением N-((2S)1-((4-амино-1-(5,5-диметuл-2-оксопирролидин-3-uл)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-3-циклогексил1-оксопропан-2-ил)-1H-индол-2-карбоксамида (соединение С123). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 524,2 (М+Н)⁺.

Пример 95: Синтез соединений С124 и С136.

- 208 049429

2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(м-толил)пропан-1-ол (2)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропаналя (промеж. соед.-4) (7 г, 38,461 ммоль) в ТГФ (60 мл) добавляли 3-метилмагнийбромид (115 мл, 115,384 ммоль) при - 30°C, и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH₄Cl (50 мл), фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 10% этилацетатом в гексане, с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(м-толил)пропан-1-ола (2). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=258,81 [M-OH].

Метил-(2 S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2 -метил-1 -(м-толил)пропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропаноат (4)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(м-толил)пропан-1-ола (2) (6 г, ммоль) в ДХМ (60 мл) добавляли пиридин (6 мл) гидрохлорид метил-L-лейцината (3) (3,8 г, 26,277 ммоль), затем медленно добавляли трифосген (3,24 г, 10,948 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили 1N водн. HCl (100 мл), затем экстрагировали ДХМ (2x50 мл), промывали (2x50 мл) раствором NaHCO^A, органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 15% этилацетатом в гексане, с получением метил-(2S)-2-(((2-(3хлорфенил)-2-метил-1-(м-толил)пропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата (4). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=508,53 [M+Na]+.

((1 -(3 -(Бензилокси)бензил)циклопропокси)карбонил)-L-лейцин (5)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(мтолил)пропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата (4) (4,8 г, 9,896 ммоль) в ТГФ (20 мл), воде (5 мл) добавляли LiOH.H₂O (712 мг, 29,690 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь концентрировали и подкисляли 1N HCl, экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением ((1-(3(бензилокси)бензил))циклопропокси)карбонил)-L-лейцина (5). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=470,18 [M-H].

Метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(м-толил)пропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (6)

К перемешиваемому раствору ((1-(3-(бензилокси)бензил)циклопропокси)карбонил)-L-лейцина (5) (2 г, 4,246 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (1,2 г, 6,309 ммоль), HOBt (0,859 г, 6,369 ммоль), DIPEA (2,3 мл, 12,738 ммоль) и метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (0,947 г, 5,095 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом и петролейным эфиром, с получением метил-(2S)-2-((2s)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2метил-1 -(м-толил)пропокси)карбонил)амино)-3 -циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (6). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 640,35

- 209 049429

[М+Н]+.

(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(м-толил)пропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (7)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(мтолил)пропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (6) (550 мг, 0,86 ммоль) в ТГФ (10 мл), воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (61 мг, 2,582 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(м-толил)пропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (7). Система ТСХ: 15% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 626,31 [М+Н]⁺.

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1 -(м-толил)nропил((S)-1 -(((S)-4-циано-3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 ил)-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (9)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(мтолил)пропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропановой кислоты (7) (300 мг, 0,480 ммоль) ДХМ (10 мл) одновременно добавляли HATU (273 мг, 0,720 ммоль), DIPEA (0,26 мл, 1,44 ммоль) и 1-(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромид (8) (92 мг, 0,720 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 2-(3хлорфенил)-2-метил-1-(м-толил)пропил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (9). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 735,41 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-2-метил-1 -(м-толил)пропил((S)-1 -(((S)-4-амино-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин3 -ил)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С124)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(м-толил)пропил((S)-1-(((S)-4-циано-3оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (9) (200 мг, 0,272 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли мХПБК (93 мг, 0,544 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (2 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(м-толил)пропил((S)-1-(((S)-4-амино3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2ил)карбамата (соединение С124). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 653,2 [М+Н]⁺.

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1-(м-толил)пропил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (10)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S))-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(мтолил)пропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (6) (1 г, 1,564 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,9 мл, 3,912 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь гасили водн. раствором NH₄Cl (50 мл) и экстрагировали EtOAc (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (2x20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением соединения 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(м-толил)пропил((S)-3-циклогексил-1(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (10).

Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=612,7 (М+Н)⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-2-метил-1 -(м-толил)пропил((S)-3 -циклогексил-1 -оксо- 1-(((S)-1 -okco-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (соединение С136)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(м-толил)пропил((S)-3-циклогексил-1(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (5А) (300 мг, 0,490 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (416 мг, 0,981 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO3 (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, данный неочищенный продукт очищали комбинированной флэш-хроматографией, элюируя 3% метанолом в дихлорметане, с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(м-толил)пропил((S)

- 210 049429

3-циклогексил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопuрролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2ил)карбамата (соединение С136). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 610,2 (М+Н)+.

Пример 96: Синтез соединений С141 и С126.

Метил-(S)-2-(5-хлор-1 Н-индол-2-карбоксамидо)-3-циклогексилпропаноат (3)

К перемешиваемому раствору 5-хлор-1H-индол-2-карбоновой кислоты (1) (3 г, 15,3 ммоль) в

ДМФА (30 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (4,3 г, 22,95 ммоль), HOBt (3,0 г, 22,95 ммоль). ммоль), DIPEA (8,0 мл, 45,9 ммоль) и метил(S)-2-амино-3-циклогексилпропаноат (2) (2,8 г, 15,3 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (80 мл), экстрагировали этилацетатом (2x60 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 20% этилацетатом в гексане с получением метил-(S)-2-(5-хлор-1Н-индол2-карбоксамидо)-3-циклогексилпропаноата (3). Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 363,08 [М+Н]⁺.

- 211 049429 (S)-2-(5-хлор-1Н-индол-2-карбоксамидо)-3-циклогексилпропановая кислота (4)

К перемешиваемому раствору метил-(S)-2-(5-хлор-1Н-индол-2-карбоксамидо)-3циклогексилпропаноата (3) (3,5 г, 9,6 ммоль) в ТГФ (40 мл), воде (20 мл) добавляли гидроксид лития (1,2 г, 28,9 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-2-(5-хлор-1Н-индол-2-карбоксамидо)-3-циклогексилпропановой кислоты (4). Система ТСХ: 50% этилацетата в гексане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 349,22 [М+Н]+.

Метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((8)-2-(5-хлор-1Н-индол-2карбоксамидо)-3-циклогексилпропанамидо)пропаноат (5)

К перемешиваемому раствору (S)-2-(5-хлор-1H-индол-2-карбоксамидо)-3-циклогексилпропановой кислоты (4) (1,2 г, 3,4 ммоль) в ДМФА (120 мл) одновременно добавляли EDC.HCl (0,98 г). г, 5,16 ммоль), HOBt (0,69 г, 5,16 ммоль), DIPEA (1,9 мл, 10,32 ммоль) и гидрохлорид метил-3-(8-ацетил-2-оксо1,8-диазаспиро[4,5]декан-3-ил)-2-аминопропаноата (промеж. соед.-7) (1,02 г, 3,4 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x60 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-2-(5-хлор-1H-индол-2-карбоксамидо)-3циклогексилпропанамидо)пропаноата (5). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=628,6 [М+Н]⁺.

3-(8-Ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-2-(5-хлор-1H-индол-2-карбоксамидо)-3циклогексилпропанамидо)пропановая кислота (6)

К перемешиваемому раствору метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-2-(5 хлор-1Н-индол-2-карбоксамидо)-3-циклогексилпропанамидо)пропаноата (5) (1,2 г, 1,9 ммоль) в ТГФ (40 мл), воде (20 мл) добавляли гидроксид лития (0,24 г, 5,7 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС.

Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 3-(8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-2-(5-хлор-1Н-индол-2-карбоксамидо)-3циклогексилпропанамидо)пропановой кислоты (6) Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 614,34 [М+Н]⁺.

N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-циано-3-оксо-4-(тетрагидро-1l4тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)-5-хлор-1 Н-индол-2-карбоксамид (8)

К перемешиваемому раствору 3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-2-(5-хлор1Н-индол-2-карбоксамидо)-3-циклогексилпропанамидо)пропановой кислоты (6) (0,5 г, 0,81 ммоль) в ДХМ (20 мл) одновременно добавляли HATU (0,464 г, 1,22 ммоль), DIPEA (0,45 мл, 2,44 ммоль) и 1(цианометил)тетрагидро-1Н-тиофен-1-ия бромид (7) (0,26 г, 1,22 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x60 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[8.5]декан3-ил)-4-циано-3-оксо-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1оксопропан-2-ил)-5-хлор-1H-индол-2-карбоксамида (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 723,5 [М+Н]⁺.

N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-амино-3,4-диоксобутан-2ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)-5-хлор-1 Н-индол-2-карбоксамид (соединение С126)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4циано-3-оксо-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)5-хлор-1Н-индол-2-карбоксамида (8) (200 мг, 0,27 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли м-ХПБК (71,3 мг, 0,41 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (2,0 мл) и перемешивали, при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением N-((2S)-l-((l-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-амино-3,4диоксобутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)-5-хлор-1 H-индол-2-карбоксамида (соединение С126). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 641,1 [М+Н]⁺.

- 212 049429

N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-3циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)-5 -хлор-1 Н-индол-2 -карбоксамида (6-А)

К перемешиваемому раствору метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-2-(5хлор-1Н-индол-2-карбоксамидо)-3-циклогексилпропанамидо)пропаноата (5) (0,500 г, 0,79 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,15 мл, 1,59 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением N-((2S)-1((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1оксопропан-2-ил)-5-хлор-1Н-индол-2-карбоксамида (6-А). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 600,51 [М+Н]+.

N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-3циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)-5 -хлор-1 Н-индол-2 -карбоксамид (соединение С141)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-l-((l-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3гидроксипропан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-5-хлор-1Н-индол-2-карбоксамида (6-А) (170 мг, 0,28 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (240 мг, 0,566 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением N((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1оксопропан-2-ил)-5-хлор-1Н-индол-2-карбоксамида (соединение С141). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 598,1 (М+Н)⁺.

Пример 97: Синтез соединения С130

Метил(хиноксалин-2-карбонил)-L-фенилаланинат (3)

К перемешиваемому раствору хиноксалин-2-карбоновой кислоты (1) (5,0 г, 28,72 ммоль) в ДМФА (30 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (8,22 г, 43,0 ммоль), HOBt (5,81 г, 43,00 ммоль), DIPEA (15,8 мл, 86,16 ммоль) и метил-L-фенилаланинат (2) (5,1 г, 28,72 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (80 мл), экстрагировали этилацетатом (2x60 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочи

- 213 049429 щенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 3% метанолом в дихлорметане с получением метил(хиноксалин-2-карбонил)-L-фенилаланината (3). Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=336,58 [M+H]+.

(Хиноксалин-2-карбонил)-L-фенилаланин (4)

К перемешиваемому раствору метил(хиноксалин-2-карбонил)-Ь-фенилаланината (3) (5,0 г, 14,9 ммоль) в ТГФ (40 мл), воде (20 мл) добавляли гидроксид лития (1,8 г, 44,7 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением ((хиноксалин-2-карбонил)L-фенилаланина (4). Система ТСХ: 50% этилацетата в гексане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=322,2 [M+H]⁺.

Метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((8)-3-фенил-2-(хиноксалин-2карбоксамидо)пропанамидо)пропаноат (5)

К перемешиваемому раствору ((хиноксалин-2-карбонил)-L-фенилаланина (4) (1,0 г, 3,1 ммоль) ДМФА (10о мл) одновременно добавляли EDC.HCl (0,92 г, 4,66 ммоль), HOBt (0,63 г, 4,66 ммоль), DIPEA (1,7 мл, 9,33 ммоль) и гидрохлорид метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4,5]декан-3-ил)-2аминопропаноата (промеж. соед.-7) (0,92 г, 3,1 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x60 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3-фенил-2(хиноксалин-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропаноата (5). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 601,39 [М+Н]⁺.

3-(8-Ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3-фенил-2-(хиноксалин-2карбоксамидо)пропанамидо)пропановая кислота (6)

К перемешиваемому раствору метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3фенил-2-(хиноксалин-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропаноата (5) (0,350 г, 0,58 ммоль) в ТГФ (20 мл), воде (10 мл) добавляли гидроксид лития (0,073 г, 1,74 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x10 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3ил)-2-((S)-3-фенил-2-(хиноксалин-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропановой кислоты (6) Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 587,62 [М+Н]⁺.

N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-циано-3-оксо-4-(тетрагидро-1λ⁴тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)хиноксалин-2-карбоксамид (8)

К перемешиваемому раствору 3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3-фенил-2(хиноксалин-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропановой кислоты (6) (0,2 г, 0,34 ммоль) в ДХМ (20 мл) одновременно добавляли HATU (0,194 г, 0,51 ммоль), DIPEA (0,2 мл, 1,02 ммоль) и 1(цианометил)тетрагидро-1Н-тиофен-1-ия бромид (7) (0,110 г, 1,22 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x10 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан3-ил)-4-циано-3-оксо-4-(тетрагидро-1λ⁴-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-1-оксо-3-фенилпропан-2ил)хиноксалин-2-карбоксамида (8). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 696,6 [М+Н]⁺.

N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-амино-3,4-диоксобутан-2ил)амино)-1 -оксо-3-фенилпропан-2-ил)хиноксалин-2-карбоксамид (соединение С130)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4циано-3-оксо-4-(тетрагидро-1 λ⁴-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-1 -оксо-3 -фенилпропан-2ил)хиноксалин-2-карбоксамида (8) (0,170 г, 0,24 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли м-ХПБК (0,084 мг, 0,48 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли водный раствор аммиака (2,0 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-амино-3,4диоксобутан-2-ил)амино)-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)хиноксалин-2-карбоксамида (соединение С130). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 641,1 [М+Н]⁺.

- 214 049429

Пример 98: Синтез соединений С135 и С137.

Смдая-(З)

LiOH. н_яа.

Грмфосген, Ру, ДО* И~к9ж,те^ фрагментаяина'2 ейа.на, ноет

DIPEA. ДММ0Х- коми тет Лбч ион . ТГО 1-1 комн.

^Р С137

2-(3-Хлорфенил)-1 -(4-фторфенил)-2-метилпропан-1 -ол (2)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропаналя (промеж. соед.-4) (5 г, 27,472 ммоль) в ТГФ (50 мл) добавляли 3-метилмагнийбромид (82 мл, 82,417 ммоль) при - 30°C, и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH4Q (50 мл), фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 10% этилацетатом в гексане, с получением 2-(3хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропан-1-ола (2). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=261,21 [M-OH].

Метил-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропаноат (4)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропан-1-ола (2) (6,5 г, 23,381 ммоль) в ДХМ (65 мл) добавляли пиридин (6,5 мл) гидрохлорид метил-L-лейцината (3) (5,1 г, 28,057 ммоль), затем медленно добавляли трифосген (3,46 г, 11,690 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили 1N водн. HCl (100 мл), затем экстрагировали ДХМ (2x50 мл), промывали (2x50 мл) раствором NaHCO₃, ор

- 215 049429 ганический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 15% этилацетатом в гексане, с получением метил(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата (4). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=512,18 [M+Na]+.

(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановая кислота (5)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата(4) (5,5 г, 11,247 ммоль) в ТГФ (40 мл), к воде (10 мл) добавляли LiOH.H₂O (809 мг, 33,742 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь концентрировали и подкисляли 1N HCl, экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением (2S)-2(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (5), которую использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 498,45 [M+Na]⁺.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (6)

К перемешиваемому раствору ((1-(3-(бензилокси)бензил)циклопропокси)карбонил)-L-лейцина (5) (1 г, 2,105 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (426 мг, 3,157 ммоль), НОВТ (603 мг, 3,157 ммоль), DIPEA (1,16 мл, 6,315 ммоль) и метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (0,587 г, 3,157 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 80% этилацетатом и петролейным эфиром, с получением метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3хлорфенил)-1 -(4-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3 -циклогексилпропанамидо)-3 -((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропаноата (6). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 644,51 [М+Н]⁺.

(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (7)

К перемешиваемому раствору метил(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (6) (800 мг, 1,244 ммоль) в ТГФ (10 мл), воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (89 мг, 3,732 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (7). Система ТСХ: 15% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 630,28 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -(4-фторфенил)-2-метилпропил((S)-1 -(((S)-4-циано-3 -оксо-1 -((S)-2оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 оксопропан-2-ил)карбамат (9)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропановой кислоты (7) (750 мг, 1,192 ммоль) ДХМ (10 мл) одновременно добавляли HATU (679 мг, 1,78 ммоль), DIPEA (0,6 мл, 3,577 ммоль) и 1-(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромид (8) (228 мг, 1,788 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 2-(3-хлорфенил)1 -(4-фторфенил)-2-метилпропил((S)-1 -(((S)-4-циано-3-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (9). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 739,31 [M+Na]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -(4-фторфенил)-2-метилпропил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С135)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-4-циано3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (9) (200 мг, 0,271 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли мХПБК (93 мг, 0,542 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (2 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции сле

- 216 049429 дили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO3 (40 мл) и экстра гировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропил((S)-1(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан2-ил)карбамата (соединение С135). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 657,2 [М+Н]+.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропаноат (10)

К перемешиваемому раствору метил(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (6) (1,5 г, 2,439 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH4 в ТГФ (2,4 мл, 4,878 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и

ЖХМС. Затем реакционную смесь гасили водн. раствором NH₄Cl (50 мл) и экстрагировали EtOAc (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (2x20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением соединения 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(м-толил)пропил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-1гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (10). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=616,69 (М+Н)⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -(4-фторфенил)-2-метилпропил((S)-3 -циклогексил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -okco-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (соединение С137)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(м-толил)пропuл((S)-3-циклогексил-1(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (10) (300 мг, 0,487 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (620 мг, 1,463 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, данный неочищенный продукт очищали хроматографией CombiFlash, элюируя 3% метанолом в дихлорметане, с получением 2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил))-2-метилпропил((S)-3циклогексил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2ил)карбамата (соединение С137). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=614,2 (М+Н)⁺.

Пример 99: Синтез соединений С117 и С133.

- 217 049429

Метил-(S)-3-циклогексил-2-(4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамидо)пропаноат (3)

К перемешиваемому раствору 4-метокси-1Н-индол-2-карбоновой кислоты (1) (3 г, 157 ммоль) в ДМФА (30 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC.HCl (4,4 г, 23 ммоль), НОВТ (3,10 г, 23 ммоль), DIPEA (8,3 г, 47 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-3-циклогексилпропаноата (2) (4,16 г, 18 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x40 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-(S)-3-циклогексил-2-(4-метокси-1Н-индол-2карбоксамидо)пропаноата (3). Система ТСХ: 40% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=359,5 [M+H]+.

(S)-3-циклогексил-2-(4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамидо)пропановая кислота (4)

К перемешиваемому раствору метил(S)-3-циклогексил-2-(4-метокси-1H-индол-2карбоксамидо)пропаноата (3) (5 г, 13,9 ммоль) в ТГФ (30 мл) в воде (20 мл) добавляли гидроксид лития (1,75 г, 41,8 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-3-циклогексил-2-(4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамидо)пропановой кислоты (4). Система ТСХ: 80% этилацетата в петролейном эфире; Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=345,3 (M+H)⁺.

Метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-mi)-2-((S)-3-циклогексил-2-(4-метокси-1Hиндол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропаноат (5)

К перемешиваемому раствору (S)-3-циклогексил-2-(4-метокси-1H-индол-2карбоксамидо)пропановой кислоты (4) (1 г, 2,9 ммоль) в ДМФА (10 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC.HCl (8з2 мг, 4,3 ммоль), НОВТ (588 мг, 4,3 ммоль), DIPEA (1,54 мл, 8,7 ммоль) и гидрохлорид метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-аминопропаноата (промеж. соед.-7) (1,06 г, 3,1 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (30 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 5% метанолом в дихлорметане, с получением метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)3-циклогексил-2-(4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропаноата (5). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,65 ЖХМС (ИЭР): m/z 624,71 (М+Н)⁺.

3-(8-Ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3-циклогексил-2-(4-метокси-1Н-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)пропановая кислота (6)

К перемешиваемому раствору метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3циклогексил-2-(4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропаноата (5) (600 мг, 0,93 ммоль) в ТГФ (4 мл), воде (2 мл) добавляли гидроксид лития (121 мг, 0,96 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакци онную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 3-(8-ацетил-2-оксо-1,8

- 218 049429 диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3-циклогексил-2-(4-метокси-1Н-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)пропановой кислоты (6). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 610,6 [М+Н]+.

N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-циано-3-оксо-4-(тетрагидро-1l4тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)-4-метокси-1 Н-индол-2карбоксамид (8)

К перемешиваемому раствору 3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((8)-3циклогексил-2-(4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропановой кислоты (6) (400 мг, 6,5 ммоль) в ДХМ (4 мл) одновременно добавляли HATU (374 мг, 9,8 ммоль), DIPEA (0,35 мл, 1,97 ммоль) и 1-(цианометил)тетрагидро-1Н-тиофен-1-ия бромид (7) (202 мг, 9,8 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (15 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан3-ил)-4-циано-3-оксо-4-(тетрагидро-114-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1оксопропан-2-ил)-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (8). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 719,7 [М+Н]⁺.

N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-амино-3,4-диоксобутан-2ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (соединение С117)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4циано-3-оксо-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид а (8) (190 мг, 0,26 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли м-ХПБК (113 мг, 0,66 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества.

Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-амино-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан2-ил)-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (соединение С117). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 637,3 [М+Н]⁺.

N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-3циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамид (6)

К перемешиваемому раствору метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3циклогексил-2-(4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропаноата (5) (250 мг, 0,4 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,6 мл, 1,2 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенный органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-гидроксипропан-2ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (6). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=596,73 (M+H)⁺.

N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-3циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)-4-метокси-1 Н-индол-2-карбоксамид (соединение С133)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3гидроксипропан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)-4-метокси-1 Н-индол-2-карбоксамида (6) (6) (200 мг, 0,35 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (445 мг, 1,05 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением N-((2S)-1-((1-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)3 -оксопропан-2)-ил)амино)-3-циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)-4-метокси-1 Н-индол-2-карбоксамида (соединение С133). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 594,2 (М+Н)⁺.

- 219 049429

Пример 100: Синтез соединения С121

Гидрохлорид метил-(S)-3-((R)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-аминопропаноата (промеж. соед.-7-пик-1)

К перемешиваемому раствору метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((третбутоксикарбонил)амино)пропаноата (пик-1) (1,1 г, 2,77 ммоль) в ДХМ (4 мл) добавляли диоксан HCl (4 мл) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС через 2 ч, реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали растиранием с н-пентаном с получением гидрохлорида метил-(S)-3-((S)-8-ацетил2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-аминопропаноата (промеж. соед.-7 пик-1). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 298,08 (М+Н)+.

Метил-(S)-3-((R)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3-циклогексил-2-(1Ниндол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропаноат (2)

К перемешиваемому раствору (R)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропановой кислоты (фрагмент амина-6) (700 мг, 3,92 ммоль) в ДМФА (5 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC.HCl (630 мг, 3,3 ммоль), НОВТ (440 мг, 3,3 ммоль), DIPEA (1,1 мл, 4,5 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-3-((R)-8ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-аминопропаноата (промеж. соед.-7 пик-1) (840 мг, 1,2 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x15 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 10% метанолом в дихлорметане, с получением метил-(S)-3-((R)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3циклогексил-2-(1H-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропаноата (2). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 594,6 (М+Н)⁺.

(S)-3-((R)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)пропановая кислота (3)

К перемешиваемому раствору метил(S)-3-((R)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропаноата (2) (550 мг, 0,927 ммоль) в ТГФ (5 мл), воде (3 мл) добавляли гидроксид лития (66 мг, 2,782 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакци онную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали 10% МеОН в ДХМ (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-3-((R)-8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 580,45 [М+Н]⁺.

N-((S)-1-(((S)-1-((R)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-циано-3-оксо-4-(тетрагидро1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-1H-индол-2-карбоксамид (5)

К перемешиваемому раствору (S)-3-((R)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропановой кислоты (3) (300 мг, 0,518 ммоль) в ТГФ (5 мл) одновременно добавляли HATU (269 мг, 0,777 ммоль), DIPEA (0,26 мл, 1,165 ммоль) и 1

- 220 049429 (цианометил)тетрагидро-1Н-тиофен-1-ий (4) (160 мг, 0,777 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (25 мл), экстрагировали EtOAc (2x15 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением N-((S)-1-(((S)-1-((R)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4циано-3-оксо-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)1H-индол-2-кαрбоксамида (5). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 689,61 [М+Н]+.

N-((S)-1-(((S)-1-((R)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-амино-3,4-диоксобутан-2ил)амино)-3-циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)-1 H-индол-2-карбоксамид (соединение С121)

К перемешиваемому раствору N-((S)-1-(((S)-1-((R)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)4-циано-3 -оксо-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2 ил)-1Н-индол-2-карбоксамида (5) (200 мг, 0,290 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли м-ХПБК (124 мг, 0,726 ммоль) при 0°C, реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°С и добавляли водн. раствор аммиака (1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением N-((S)-1-(((S)-1-((R)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспuро[4.5]декан-3-ил)-4-амино-3,4диоксобутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-1H-индол-2-карбоксамида (соединение С121). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 607,2 [М+Н]+.

Пример 101: Синтез соединения С125

Метил-(R)-3-((R)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((третбутоксикарбонил)амино)пропаноат (2) (пик-1) и метил(S)-3-((S)-8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропаноат (2) (пик-2)

Метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((третбутоксикарбонил)амино)пропаноат (1) (4 г, 10,55 ммоль) разделяли с помощью разделения СФХ с получением метил-(R)-3-((R)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспuро[4.5]декан-3-ил)-2-((третбутоксикарбонил)амино)пропаноата (2) (пик-1) и метил(S)-3-((S)-8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропаноата (2) (пик-2)

Гидрохлорид метил-(S)-3-((S)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспuро[4.5]декан-3-ил)-2-аминоnропаноата (промеж. соед.-7 пик-2)

К перемешиваемому раствору метил-3-(8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((третбутоксикарбонил)амино)пропаноата (2 пик-2) (2 г, 5,037 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли диоксан HCl (5 мл) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с по

- 221 049429 мощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали растиранием с н-пентаном с получением гидрохлорида метил-(S)-3-((S)-8-ацетил2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-аминопропаноата (промеж. соед.-7 пик-2). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 298,4 (М+Н)+.

Метил-(8)-3-((8)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((8)-3-циклогексил-2-(1Ниндол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропаноат (3)

К перемешиваемому раствору (R)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропановой кислоты (фрагмент амина-6) (480 мг, 1,52 ммоль) в ДМФА (5 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC.HCl (430 мг, 2,2 ммоль), НОВТ (309 мг, 2,2 ммоль), DIPEA (0,814 мл, 4,5 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-3-((11)-8ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-аминопропаноата (промеж. соед.-7 пик-2) (509 мг, 1,52 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x15 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 10% метанолом в дихлорметане, с получением метил-(S)-3-((S)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3.-ил)-2((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропаноата (3). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 594,3 (М+Н)⁺.

(S)-3-((S)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)пропановая кислота (4)

К перемешиваемому раствору метил-(S)-3-((S)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропаноата (3) (700 мг, 1,1 ммоль) в ТГФ (4,5 мл), воде (2,5 мл) добавляли гидроксид лития (148 мг, 3,5 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x15 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-3-((S)-8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3-циkлогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропановой кислоты (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 580,3 [М+Н]⁺.

N-((S)-1-(((S)-1-((S)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.6]декан-3-ил)-4-циано-3-оксо-4-(тетрагидро1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)-1H-индол-2-карбоксамид (5)

К перемешиваемому раствору (S)-3-((S)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропановой кислоты (4) (560 мг, 0,96 ммоль), ТГФ (5 мл) одновременно добавляли HATU (550 мг, 1,44 ммоль), DIPEA (0,54 мл, 2,8 ммоль) и 1(цианометил)тетрагидро-1Н-тиофен-1-ия бромид (5) (298 мг, 1,44 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (15 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением N-((S)-1-(((S)-1-((S)-8-ацетил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.6]декан-3-ил)-4-циано-3-оксо-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3циkлогексил-1-оксопропан-2-ил)-1H-индол-2-карбоксамида (6). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 689,6 [М+Н]⁺.

N-((S)-1-(((S)-1-((S)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-амино-3,4-диоксобутан-2ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)- 1Н-индол-2-карбоксамид (соединение С125)

К перемешиваемому раствору N-((S)-1-(((S)-1-((S)-8-ацетил-2-оксо-l,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)4-циано-3-оксо-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2ил)-1H-индол-2-карбоксамида (6) (200 мг, 0,29 ммоль) в метаноле (2 мл) добавляли м-ХПБК (124 мг, 0,72 ммоль) при 0°C, реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°С и добавляли водн. раствор аммиака (1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (15 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (15 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением N-((S)-1-(((S)-1-((S)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-амино-3,4-диоксобутан2-ил)амино)-3-циkлогексил-1-оксопропан-2-ил)-1H-индол-2-карбоксамида (9) (соединение С125). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 607,3 [М+Н]⁺.

- 222 049429

Пример 102: Синтез соединения С142

(S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

Раствор метил(S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (1) (1 г, 3,496 ммоль) в метаноле (10 мл) охлаждали до 0°C, затем добавляли раствор NaOH (500 мг в 5 мл воды). Полученный раствор перемешивали при 0°C в течение 1 часа, затем удаляли избыток метанола в вакууме. Остаток подкисляли до рН 3 и экстрагировали дихлорметаном (2x50 мл), объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над MgSO₄, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 50% этилацетата в петролейном эфире R_f: 0,2 трет-Бутил-((S)-4-диазо-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)карбамат (3)

Раствор (S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2) (3 г, 11,029 ммоль) в ТГФ (30 мл) помещали в атмосферу N₂ и охлаждали до -23°C. Полученный прозрачный бесцветный раствор последовательно обрабатывали триэтиламином (3 мл, 22,059 ммоль), а затем изобутилхлорформиатом (1,8 мл, 13,235 ммоль). Реакционную смесь медленно обрабатывали раствором диазометана (~50 мл, ~25 ммоль) в диэтиловом эфире. Полученный желтый прозрачный раствор постепенно нагревали до комн. темп. и перемешивали в течение 1 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. После этого реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл), промывали один раз водой (50 мл), один раз солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали с получением Данный материал очищали колоночной хроматографией с нормальной фазой с получением трет-бутил((S)-4-диазо-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)карбамата (3). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ R_f: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=319,19 [M+Na]+.

Гидрохлорид (S)-3-((S)-2-амино-4-хлор-3-оксобутил)пuрролидин-2-она (4)

Раствор трет-бутил-(( 1 S)-3 -диазо-2-оксо-1 -{[(3 S)-2-оксопирролидин-3 -ил]метил} пропил)карбамата (3) (1,5 г, 5,06 ммоль) в 1,4-диоксане (15 мл) помещали в атмосферу N₂ и охлаждали до 0°C. Данный прозрачный бледно-желтый раствор по каплям обрабатывали раствором 4М соляной кислоты в 1,4-диоксане (15 мл). После завершения добавления реакционную смесь нагревали до комн. темп. в течение 1 ч с образованием белого осадка. Избыток 1,4-диоксана упаривали в вакууме, и твердое вещество растирали с диэтиловым эфиром с получением гидрохлорида (S)-3-((S)-2-амино-4-хлор-3-оксобутил)пирролидин-2она (4). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ R_f: 0,1 ЖХмС (ИЭР): m/z 205,13 [М+Н]⁺.

N-((S)-1-(((S)-4-хлор-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1оксопентан-2-ил)-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (5)

Раствор гидрохлорида (S)-3-((S)-2-амино-4-хлор-3-оксобутил)пирролидин-2-она (4) (500 мг, 2,083 ммоль) и 4-метокси-1H индол-2-карбоновой кислоты (660 мг, 2,083 ммоль) и в ДМФА (10 мл) помещали в атмосферу N₂ и охлаждали до 0°C. Данный бледно-желтый раствор последовательно обрабатывали HATU (1,18 г, 3,124 ммоль) и N-метилморфолином (0,45 мл, 4,166 ммоль). Через 1 час реакцию гасили

- 223 049429 смесью 1:1 лед/нас. NaHCO₃ (50 мл) и трижды экстрагировали этилацетатом (50 мл). Объединенные органические слои промывали один раз солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали с получением желтого сиропа. Данное вещество очищали нормально-фазовой хроматографией с получением N-((S)-1-(((S)-4-хлор-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)-4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамида (5). Система ТСХ: 10% МеОН в ДХМ Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 491,52 [М+Н]+.

N-((S)-1-(((S)-4-гидрокси-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1оксопентан-2-ил)-4-метокси-1 H-индол-2-карбоксамид (соединение С142)

Раствор N-((S)-1-(((S)-4-хлор-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1оксопентан-2-ил)-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (5) (200 мг, 0,428 ммоль) и бензоилмуравьиную кислоту (80 мг, 0,53 ммоль) в ДМФА (4 мл) помещали в атмосферу N2. Данный прозрачный бледножелтый раствор обрабатывали фторидом цезия (155 мг, 1,02 ммоль) с последующим нагреванием до 65°C. Через 4 ч желтую суспензию охлаждали до комн. темп., разбавляли этилацетатом (60 мл), трижды промывали водой (30 мл), один раз солевым раствором (30 мл), сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного (3S)-3-({N-[(4-метокси-1H-индол-2-ил)карбонил]-Lлейцил}амино)-2-оксо-4-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]бутилоксо(фенил)ацетата в виде неочищенной желтой пены. МС (ИЭР+) для C₃₂H₃₆N₄O₈ m/z 605,2 (М+Н)⁺. Данный неочищенный продукт переносили в метанол (20 мл), помещали в атмосферу N2 и обрабатывали карбонатом калия (7 мг, 0,04 ммоль) при интенсивном перемешивании. Через 1 ч летучие вещества удаляли в вакууме (баня <30°C) с получением неочищенного продукта. Данное вещество очищали нормально-фазовой хроматографией с получением N-((S)-1-(((S)-4-гидрокси-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1оксопентан-2-ил)-4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамида (соединение С142) Система ТСХ: 10% МеОН в ДХМ R_f: 0,55 ЖХМС (ИЭР): m/z 473,2 [М+Н]⁺.

Пример 103: Синтез соединения С128

Метил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты) (1 г, 2,949 ммоль) в ДМФА (20 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC.HCl (842 мг, 4,41 ммоль), НОВТ (595 мг, 4,41 ммоль), DIPEA (1,52 мл, 8,823 ммоль) и гидрохлорид метил-2-амино-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (промеж. соед.7А) (890 мг, 3,529 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 5% этилметанолом в ДХМ, с получением метил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (1). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,65 ЖХМС (ИЭР): m/z=577,63 (M+H)⁺.

2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропановая кислота (2)

- 224 049429

К перемешиваемому раствору метилметил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (1) (600 мг, 1,043 ммоль) в ТГФ (7 мл), воде (3 мл) добавляли гидроксид лития (100 мг, 4,173 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Ре акционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 2-((S)-2-((((3хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=562,63 (M+H)+.

-Хлорбензил-((2S)-1 -((4-циано-3 -оксо-1 -(2-оксо-1 -азаспиро[4.5]декан-3 -ил)-4-(тетрагидро-1l4тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору 2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропановой кислоты (2) (450 мг, 0,802 ммоль) в ДХМ (8 мл) одновременно добавляли HATU (259 мг, 1,203 ммоль), DIPEA (0,41 мл, 2,406 ммоль) и 1-(цианометил)тетрагидро-1Н-тиофен-1-ий (3) (259 мг, 1,203 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали EtOAc (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 3-хлорбензuл-((2S)-1-((4-циано-3-оксо-1-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1оксопропан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 671,32 (М+Н)⁺.

-Хлорбензил-((2S)-1 -((4-амино-3,4-диоксо-1 -(2-оксо-1 -азаспиро[4.5]декан-3 -ил)бутан-2-ил)амино)3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С128)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-1-((4-циано-3-оксо-1-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1оксопропан-2-ил)карбамата (4) (200 мг, 0,298 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли м-ХПБК (128 мг, 0,745 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((2S)-1 -((4-амино-3,4-диоксо-1 -(2-оксо-1 -азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С128). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 589,2 (М+Н)⁺.

Пример 104: Синтез соединения С129

О I NaCNBHз, МаОН

..........АсОН, кожтжузч з

S : Сгедия-Д;

Бензил(E)-2-(2-метилпропилиден)гидразин-1 -карбоксилат (3)

К перемешиваемому раствору бензилгидразинкарбоксилата (1) (5 г, 30,12 ммоль) в толуоле (50 мл) добавляли изобутиральдегид (2,7 мл, 30,12 ммоль) и перемешивали при 60°C в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь непосредственно концентрировали при понижен- 225 049429 ном давлении с получением неочищенного соединения, полученное неочищенное вещество растирали с диэтиловым эфиром с получением бензил(Е)-2-(2-метилпропилиден)гидразин-1-карбоксилата (3). Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане; Rf: 0,7 ЖХМС (ИЭР): m/z 221,29 (М+Н)+.

Бензил-2-изобутилгидразин-1 -карбоксилат (4)

К перемешиваемому раствору бензил(E)-2-(2-метилпропилиден)гидразин-1-карбоксилата (3) (3 г, 13,574 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляли уксусную кислоту (0,5 мл), а затем цианоборогидрид натрия (1,7 г, 27,149 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, и соединение элюировали 10% этилацетатом в петролейном эфире с получением бензил-2-изобутилгидразин-1карбоксилата (4). Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 223,26 [М+Н]⁺.

Бензил-2-изобутил-2-(((S)-1 -метокси-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)карбамоил)гидразин-1-карбоксилат (5)

К перемешиваемому раствору бензил-2-изобутилгидразин-1-карбоксилата (4) (1 г, 4,504 ммоль) в хлороформе (15 мл) одновременно добавляли пиридин (1 мл, 1 об.) и метил-(S)-2-амино-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (1 г, 5,405 ммоль), трифосген (666 мг, 2,252 ммоль) при 0°С и перемешивали при 60°С в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x50 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, и соединение элюировали 8% метанолом в дихлорметане с получением бензил-2-изобутил-2-(((S)-1-метокси-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)карбамоил)гидразин-1-карбоксилата (5). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=435,39 [M+H]⁺.

Бензил-2-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)карбамоил)-2изобутилгидразин-1-карбоксилат (6)

К перемешиваемому раствору бензил-2-изобутил-2-(((S)-1-метокси-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)карбамоил)гидразин-1-карбоксилата (5) (1 г, 2,304 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH4 в ТГФ (2,3 мл, 4,608 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением бензил-2((S-1 -гидрокси-3 -(S-2-оксопирролидин-З -ил)пропан-2-ил)карбамоил)-2-изобутилгидразин-1 карбоксилата (6). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 407,69 [М+Н]⁺.

Бензил-(5S)-6-гидрокси-2-изобутил-3-оксо-5-(((S)--2-оксопирролидин-3-ил)метил)-1,2,4-триазинан1-карбоксилат (соединение С129)

К перемешиваемому раствору бензил-2-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)карбамоил)-2-изобутилгидразин-1-карбоксилата (6) (150 мг, 0,369 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (469 мг, 1,107 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением бензил-(5S)-6-гидрокси-2-изобутил-3-оксо-5(((S)-2-оксопирролидин-3-ил)метил)-1,2,4-триазинан-1-карбоксилата (соединение С129) Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 405,1 (М+Н)⁺.

- 226 049429

Пример 105: Синтез соединений С132 и С131.

Промеж,

Вс EbSiH, W 0°С-50 ^йС, 16 Ч йада«Н1)

Я n-Buti, ТГй-Ж.Ы

СвдюИ?}

О

Сгедия-Ш

- 227 049429

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1 -(нафталин-2-ил)пропан-1 -ол (2)

К перемешиваемому раствору 5-бром-2,3-дигидро-1H-инден-1-она (10 г, 47,846 ммоль) в трифторуксусной кислоте (50 мл) медленно добавляли триэтилсилан (76 мл, 478,6 ммоль) при 0°C, затем полученную реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь выливали в ледяную воду и экстрагировали этилацетатом (2x100 мл). Объединенные органические слои нейтрализовали водн. раствором гидрокарбоната натрия (2x200 мл) и промывали водой (200 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка, неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением 5-бром-2,3-дигидро-1H-индена (2). Система ТСХ: петролейный эфир R_f: 0,8 ГХМС (ESI): m/z 196,7 [М+Н]+.

2-(3-Хлорфенил)-1 -(2,3-дигидро-1 H-инден-5-ил)-2-метилпропан-1 -ол (3)

Раствор 5-бром-2,3-дигидро-1H-индена (2) (2,5 г, 12,820 ммоль) в ТГФ (25 мл) охлаждали до -78°C, затем к вышеуказанной смеси н-бутиллитий 2,0 М в ТГФ (7,69 мл, 15,384 ммоль) добавляли по каплям. Смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч. После этого добавляли раствор 2-(3-хлорфенил)-2метилпропаналя (промеж. соед.-4) (3,5 г, 19,23 ммоль) в ТГФ (5 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Смесь гасили водн. раствором NH₄Cl, экстрагировали этилацетатом (2x100 мл) и промывали водой (100 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении и очищали нормально-фазовой хроматографией с получением 2-(3-хлорфенил)-1-(2,3-дигидро-1H-инден-5-ил)-2-метилпропан-1-ола (3). Система ТСХ: 5% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 284,76 [М-ОН]⁺.

Метил-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(2,3-дигидро-1H-инден-5-ил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3 -циклогексилпропаноат (5)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-(2,3-дигидро-1Н-инден-5-ил)-2-метилпропан-1-ола (3) (4 г, 13,33 ммоль), гидрохлорида метил(S)-2-амино-3-циклогексилпропаноата (4) (3,53 г, 15,99 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавляли пиридин (4 мл, 1 об.), а затем трифосген (1,97 г, 6,66 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили водн. раствором NaHCO₃ (100 мл), экстрагировали ДХМ (2x50 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением метил-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(2,3-дигидро-1H-инден-5-ил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропаноата (5). Система ТСХ: 10% этилацетата в петролейном эфире R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 534,37 [M+Na]⁺.

(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(2,3-дигидро-1H-инден-5-ил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановая кислота (6)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(2,3-дигидро-1H-инден-5-ил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата (4) (3,5 г, 6,849 ммоль) в МеОН/ТГФ (20 мл), воде (10 мл) добавляли гидроксид лития (0,86 г, 20,549 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором НС до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением (2S)2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(2,3-дигидро-1H-инден-5-ил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (5). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=520,29 [M+Na]⁺.

Меmuл-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3 -хлорфенил)-1 -(2,3-дигидро-1 H-инден-5 -ил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3 -циклогексилпропанамидо)-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропаноат (6)

- 228 049429

К перемешиваемому раствору (2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(2,3-дигидро-1H-инден-5-ил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (6) (2,5 г, 5,03 ммоль) в ДМФА (50 мл) добавляли EDC.HCl (1,44 г, 7,545 ммоль), HOBt (1,01 г, 7,545 ммоль) и DIPEA (2,72 мл, 15,09 г), ммоль) при 0°C, затем гидрохлорид метил-2-амино-2-метил-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (1,34 г, 6,036 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией с получением метил(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(2,3-дигидро-1H-инден-5ил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (7). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=666,47 [M+H]+.

(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1 -(2,3-дигидро-1 H-инден-5 -ил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота(8)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(2,3-дигидро-1H-инден-5-ил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(S-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (7) (850 мг, 1,278 ммоль) в ТГФ (4 мл), воде (2 мл) добавляли гидроксид лития (165 мг, 3,83 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали дихлорметаном (2x100 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-((2S)-2(((2-(3 -хлорфенил)-1 -(2,3-дигидро-1 Н-инден-5-ил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3 циkлогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (8). 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=652,53 (M+H)⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -(2,3-дигидро-1 Н-инден-5-ил)-2-метилпропил((S)-1 -(((S)-4-циано-3-оксо-1 -((S)-2оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 оксопропан-2-ил)карбамат (10)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(2,3-дигидро-1Н-инден-5-ил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропановой кислоты (8) (350 мг, 0,453 ммоль) ДМФА (10 мл) одновременно добавляли HATU (306 мг, 0,806 ммоль), DIPEA (0,29 мл, 1,6128 ммоль) и 1-(цианометил)тетрагидро-1Н-тиофен-1-ия бромид (9) (167 мг, 0,806 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (25 мл), экстрагировали 5% метанолом в дихлорметане (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением 2-(3-хлорфенил)-1-(2,3-дигидро-1Н-инден-5-ил)-2метилпропил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (10). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=761,63 (M+H)⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -(2,3-дигидро-1 H-инден-5-ил)-2-метилпропил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 ((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С131)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-(2,3-дигидро-1Н-инден-5-ил)-2-метилпропил((S)1 -(((S)-4-циано-3-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (10) (150 мг, 0,197 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли м-ХПБК (65%) (105 мг, 0,3947 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, а затем добавляли водн. раствор аммиака (1,5 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 6 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-1-(2,3-дигидро-1H-инден-5ил)-2-метилпропил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-3 циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С131). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 679,1 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -(2,3-дигидро-1 Н-инден-5-ил)-2-метилпропил((S)-3-циkлогексил-1 -(((S)-1 гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (11)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(2,3-дигидро-1H-инден-5ил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3-циkлогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (7) (50θ мг, 0,7518 ммоль) в ДХМ (6 мл) добавляли 2м LiBH4 в ТГФ (0,75 мл, 1,503 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (30 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 2-(3-хлорфенил)-1-(2,3-дигидро-1H-инден-5-ил)-2

- 229 049429 метилпропил((S)-3 -циклогексил-1 -(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1 оксопропан-2-ил)карбамата (11). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=638,74 [М+Н]+.

2-(3-Хлорфенил)-1-(2,3-дигидро-1H-инден-5-ил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1-оксо-1-(((S)-1оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (соединение С132)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-(2,3-дигидро-1H-инден-5-ил)-2-метилпропил((S)3 -циклогексил-1 -(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2 ил)карбамата (11) (200 мг, 0,3139 ммоль) в этилацетата (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (399 мг, 0,9419 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. После полного израсходования исходного материала по данным ТСХ и ЖХМС реакционную массу фильтровали через слой целита, и слой целита тщательно обрабатывали этилацетатом (30 мл). Затем органический слой промывали 10% раствором тиосульфата натрия (2x50 мл), затем насыщенным раствором гидрокарбоната натрия (2x50 мл), водой (1x50 мл), солевым раствором (1x50 мл). Затем органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали в вакууме. Затем неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-1-(2,3-дигидро-1H-инден-5ил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С132). Система ТСХ: 10% МеОН в ДХМ Rf: 0,45 ЖХМС (ИЭР): m/z=636,00 (M+H)+.

Пример 106: Синтез соединений С145 и С134.

(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (1) (2,5 г, 3,793 ммоль) в ТГФ (10 мл), воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (466 мг, 11,380 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с по

- 230 049429 мощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2((2S-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 15% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 646,49 [М+Н]+.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -(4-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1 -(((S)-4-циано-3-оксо-1 -((S)-2оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 оксопропан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропановой кислоты (2) (500 мг, 0,775 ммоль) ДХМ (10 мл) одновременно добавляли HATU (441 мг, 1,16 ммоль), DIPEA (0,4 мл, 2,32 ммоль) и 1-(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромид (3) (239 мг, 1,162 ммоль) при 0°С при 0°С и перемешивании при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 2-(3хлорфенил)-1 -(4-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1 -(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)-4(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 755,47 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -(4-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С134)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-4-циано3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (4) (200 мг, 0,265 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли мХПБК (91 мг, 0,530 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (2 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1 -оксопропан2-ил)карбамата (соединение С134). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 673,1 [М+Н]⁺.

2-(3-Хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-4-(циклопропиламино)3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С145)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропил 2-(3-хлорфенил)-1(4-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (4) (0,2 г, 0,265 ммоль) в метаноле (4 мл) добавляли м-ХПБК (91 мг, 0,530 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли циклопропиламин (2,0 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO3 (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)2-метилпропил((S)-3 -циклогексил-1 -(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С145). Система ТСХ: 10% метанол в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 713,2 [М+Н]⁺.

- 231 049429

Пример 107: Синтез соединения С138

Метил-(S)-3-((S)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3-циклогексил-2-(1Ниндол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору (R)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропановой кислоты (фрагмент кислоты-5) (1 г, 3,1 ммоль) в ДМФА (10 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC-HCl (912 мг, 4,7 ммоль), НОВТ (644 мг, 4,7 ммоль), DIPEA (1,69 мл, 9,5 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-3-((R)-8ацетил-2-оксо- 1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2-аминопропаноата (промеж. соед.-7) (1,16 г, 3,5 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x25 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 10% метанолом в дихлорметане, с получением метил-(S)-3-((S)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспuро[4.5]декан-3-ил)-2-((S)-3циклогексил-2-(1H-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропаноата (1) (1,6 г, 2,6 ммоль, выход 89%) в виде твердого вещества бледно-зеленого цвета. Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 594,3 [М+Н]+.

2-((S)-3-Циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3-(2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил(S)-3-((S)-8-ацетил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-2((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)пропаноата (1) (500 мг, 0,84 ммоль) в метаноле (10 мл) добавляли гидроксид калия (280 мг, 5,05 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении с получением 2-((S)-3-циклогексил-2-(1Ниндол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3-(2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декана-3-ил)пропановой кислоты (2) (450 мг, 0,83 ммоль, выход 99,7%) в виде твердого вещества желтого цвета. Система ТСХ: 15% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 538,6 [М+Н]⁺.

2-((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3-(8-изобутирил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропановая кислота (4)

К перемешиваемому раствору 2-((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3(2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропановой кислоты (2) (450 мг, 0,83 ммоль) в диоксане (4,5 мл) и воде (2,2 мл) при 0°С добавляли изомасляный ангидрид (3) (0,65 мл, 4,18 ммоль) при комн. темп. и пере

- 232 049429 мешивали при комнатной температуре. В течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении и подкисляли 1N HCl, экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 20% ацетонитрилом в воде с получением 2-((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)-3-(8-изобутирил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропановой кислоты (4) (150 мг, 0,24 ммоль, выход 29,4%) в виде белого твердого вещества. Система ТСХ: 15% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 608,7 [М+Н]+.

N-((2S)-1-((4-циано-1-(8-изобутирил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксо-4-(тетрагидроП4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-Ш-индол-2-карбоксамид (6)

К перемешиваемому раствору 2-((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3(8-изобутирил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропановой кислоты (4) (150 мг, 0,26 ммоль) в ТГФ (3 мл) одновременно добавляли HATU (140 мг, 0,37 ммоль), DIPEA (0,13 мл, 0,74 ммоль) и 1(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромид (5) (101 мг, 0,49 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (15 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением N-((2S)-1-((4-циано-1-(8-изобутирил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксо-4-(тетрагидро-П4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-1Н-индол-2-карбоксамида (6) (150 мг, 0,21 ммоль, выход 88%) в виде твердого вещества желтого цвета. Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 717,8 [М+Н]⁺.

N-((2S)-1-((4-амино-1-(8-изобутирил-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3,4-диоксобутан-2ил)амино)-3-циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)-1 H-индол-2-карбоксамид (соединение С138)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-1-((4-циано-1-(8-изобутирил-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксо-4-(тетрагидро-П4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-1H-индол-2-карбоксамид (6) (150 мг, 0,32 ммоль) в метаноле (2 мл) добавляли м-ХПБК (90 мг, 0,52 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (1,1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (15 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (15 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением N-((2S)-1-((4-амино-1-(8-изобутирил-2-оксо-1,8диазаспиро[4,5]декан-3-ил)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-1H-индол2-карбоксамида (соединение С138) (7 мг, 0,019 ммоль, выход 5%) в виде белого твердого вещества с металлическим оттенком. Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 635,2 [М+Н]⁺.

Пример 108: Синтез соединения С139

- 233 049429

4-Нитротетрагидро-2Н-пиран(2)

К перемешиваемому раствору 4-иодтетрагидро-2Н-пирана (1) (10,0 г, 47,1 ммоль) ДМФА (250 мл) добавляли NaNO₂ (6,4 г, 94,3 ммоль), флороглюцин (9,5 г, 75,4 ммоль), ДМСО (100 мл) добавляли и нагревали при 45°С в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (80 мл), экстрагировали диэтиловым эфиром (2x60 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, элюируя 20% раствором этилацетата и гексана, с получением 4-нитротетрагидро-2Н-пирана (2). Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=131,92 [M+H]+.

Диметил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-((4-нитротетрагидро-2Н-пиран-4ил)метил)пентандиоат(3)

К перемешиваемому раствору 4-нитротетрагидро-2Н-пирана (2) (2,1 г, 16,0 ммоль) в ACN (20 мл), воде (20 мл) добавляли диметил(S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-метиленпентандиоат (5,06 г, 17,6 ммоль) и DBU (7,3 мл, 48,0 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, элюируя 30% этилацетатом и гексаном, с получением диметил-2-((третбутоксикарбонил)амино)-4-((4-нитротетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)пентандиоата (3). Система ТСХ: 30% этилацетата в гексане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 441,25 [M+Na]⁺.

Метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноат(4)

К перемешиваемому раствору 2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-((4-нитротетрагидро-2Н-пиран-4ил)метил)пентандиоата (3) (5,5 г, 13,15 ммоль) в МеОН (250 мл), добавляли NiCl₂ (1,69 г, 13,15 ммоль) и перемешивали при -10°C в течение 10 мин. К нему добавляли NaBH₄ (2,5 г, 65,7 ммоль) и перемешивали в течение 2 ч. После того как ТСХ указала на завершение реакции, реакционную смесь концентрировали, гасили насыщ. NH₄Cl, фильтровали через кальцитовый слой, и фильтрат экстрагировали 10% метанолом в ДХМ (2x60 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (4). Система ТСХ: 100% этилацетата Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 379,1 [M+Na]⁺.

Гидрохлорид метил-2-амино-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (5)

К перемешиваемому раствору метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-(2-оксо-8-окса-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (4) (3,8 г, 10,67 ммоль)) в 1,4-диоксане (30 мл) добавляли 4N HCl/диоксан (30 мл) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение промывали диэтиловым эфиром с получением гидрохлорида метил-2-амино-3(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (5). Система ТСХ: 100% этилацетата Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 257,24 [М+Н]⁺.

Метил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-8окса-1 -азаспиро[4.5]декан-3 -ил)пропаноат (7)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (6) (1,5 г, 4,7 ммоль) в ДМФА (15 мл) последовательно добавляли EDC.HCl (1,35 г, 7,1 ммоль), HOBt (0,95 г, 7,1 ммоль), DIPEA (2,6 мл, 14,1 ммоль) и гидрохлорида метил2-амино-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (5) (1,44 г, 4,7 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x60 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, элюируя 5% метанолом в дихлорметане с получением метил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)3-циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (7). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=578,59 [М+Н]⁺.

- 234 049429

2-((S)-2-((((3-Хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-8-окса-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропановая кислота (8)

К перемешиваемому раствору метил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (7) (0,700 г, 1,2 ммоль) в ТГФ (10 мл), воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (0,152 г, 3,6 ммоль) при комн. темп. и продолжали перемешивание в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x10 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропановой кислоты (8). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 564,6 [М+Н]+.

-Хлорбензил-((25)-1 -((4-циано-3 -оксо-1 -(2-оксо-1 -азаспиро[4.5]декан-3 -ил)-4-(тетрагидро-1l4тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (10)

К перемешиваемому раствору 2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропановой кислоты (8) (0,550 г, 0,97 ммоль) в ДХМ (20 мл), добавляли HATU (0,555 г, 1,4 ммоль), DIPEA (0,5 мл, 2,92 ммоль) и 1(цианометил)тетрагидро-1Н-тиофен-1-ия бромид (9) (0,315 г, 1,46 ммоль) при 0°C, затем продолжали перемешивание при комн. темп. в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (30 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x10 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 3-хлорбензил-((2S)-1-((4-циано-3-оксо-1-(2оксо-1 -азаспиро[10.5]декан-3-ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил1-оксопропан-2-ил)карбамата (10). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 673,4 [М+Н]⁺.

3-Хлорбензил((2S)-1-((4-амино-3,4-диоксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С139)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-1-((4-циано-3-оксо-1-(2-оксо-1αзаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1оксопропан-2-ил)карбамата (10) (0,270 г, 0,40 ммоль) в метаноле (10 мл) добавляли м-ХПБК (206,93 мг, 1,2 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (2,0 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((2S)-1 -((4-амино-3,4-диоксо-1 -(2-оксо-1 -азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С139). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 591,1 [М+Н]⁺.

Пример 109: Синтез соединения С140

- 235 049429

Диэтил-2-(2-циклогексилпропан-2-ил)малонат (3)

Раствор диэтил-2-(пропан-2-илиден)малоната (1) (5 г, 25,00 ммоль) в ТГФ (100 мл) охлаждали до 0°C, затем добавляли иодид меди (I) (7,1 г, 37,00 ммоль). Смесь перемешивали при 0°С в течение 0,5 ч. Затем к вышеуказанной смеси по каплям добавляли 1,0 М циклогексилмагнийбромид в ТГФ (75 мл, 75,00 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Смесь гасили 1N HCl, экстрагировали этилацетатом (2x100 мл) и промывали водой (2x100 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением диэтил-2-(2-циклогексилпропан-2-ил)малоната (3). Система ТСХ: 5% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 471,27 [M+Na]+.

3-Циклогексил-2-(этоксикарбонил)-3-метилбутановая кислота (4)

Перемешиваемый раствор диэтил-2-(2-циклогексилпропан-2-ил)малоната (3) (4,5 г, 15,84 ммоль) в смеси этанола (100 мл) и ТГФ (50 мл) обрабатывали 1N раствором NaOH (25 мл, 15,84 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 24 ч смесь упаривали до сиропа, растворяли в воде (200 мл) и экстрагировали диэтиловым эфиром (2x100 мл). Водную фазу подкисляли 1N HCl до рН 2,0 и экстрагировали EtOAc (2x100 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (200 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 3-циклогексил-2-(этоксикарбонил)-3-метилбутановой кислоты (4). Система ТСХ: 50% EtOAc в петролейном эфире Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 279,29 [M+Na]+.

Этил-2-(((бензилокси)карбонил)амино)-3-циклогексил-3-метилбутаноат (5)

К перемешиваемому раствору 3-циклогексил-2-(этоксикарбонил)-3-метилбутановой кислоты (4) (3 г, 11,718 ммоль) в сухом бензоле (30 мл) добавляли триэтиламин (3,31 мл, 23,436 ммоль) и дифенилфосфорилазид (3,77 мл, 17,578 ммоль). Реакционную смесь нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 часа реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли бензиловый спирт (1,8 мл, 17,57 ммоль), и реакционную смесь снова кипятили с обратным холодильником в течение 16 ч. После упаривания растворителя неочищенный материал гасили 5% раствором лимонной кислоты и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (50 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали, а неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией с получением этил-2(((бензилокси)карбонил)амино)-3-циклогексил-3. -метилбутаноата (5). Система ТСХ: 5% EtOAc в петролейном эфире Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 362,36 [М+Н]+.

2-(((Бензилокси)карбонил)амино)-3 -циклогексил-3 -метилбутановая кислота (6)

К перемешиваемому раствору этил-2-(((бензилокси)карбонил)амино)-3-циклогексил-3метилбутаноата (5) (3,2 г, 8,31 ммоль) в МеОН/ТГФ (15 мл), воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (1,1 г, 26,59 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором НО до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 2-(((бензилокси)карбонил)амино)-3-циклогексил-3метилбутановой кислоты (6). Система ТСХ: 10% МеОН в ДХМ Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 334,37 [М+Н]⁺.

Метил-(2S)-2-(2-(((бензилокси)карбонил)амино)-3-циклогексил-3-метилбутанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропаноат (7)

К перемешиваемому раствору 2-(((бензилокси)карбонил)амино)-3-циклогексил-3-метилбутановой кислоты (6) (2,4 г, 7,207 ммоль) в ДМФА (25 мл) добавляли EDC-HCl (2,06 г, 10,81 ммоль), HOBt (1,46 г, 10,81 ммоль) и DIPEA (3,87 мл, 21,6216 ммоль) при 0°C, затем гидрохлорид метил-2-амино-2-метил-3-(2оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-2А) (1,9 г, 8,64 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали флэшхроматографией с получением метил-(2S)-2-(2-(((бензuлокси)карбонил)амино)-3-циклогексил-3метилбутанамидо)-3-((S)-2-оксопuрролидин-3-ил)пропаноата (7). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=502,60 [M+H]⁺.

Бензил-(3-циклогексил-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-3метил-1-оксобутан-2-ил)карбамат (8)

К перемешиваемому раствору метил(2S)-2-(2-(((бензилокси)карбонил)амино)-3-циклогексил-3

- 236 049429 метилбутанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (7) (500 мг, 0,998 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли 2М LiBH4 в ТГФ (0,99 мл, 1,996 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (30 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением бензил-(3циклогексил-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-3-метил-1-оксобутан2-ил)карбамата (8). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 474,46 [М+Н]+.

Бензил(3 -циклогексил-3 -метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)бутан -2-ил)карбамат (соединение С140)

К перемешиваемому раствору бензил-(3-циклогексил-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин3-ил)пропан-2-ил)амино)-3-метил-1-оксобутан-2-ил)карбамата (8) (200 мг, 0,422 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (268 мг, 0,634 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. . За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. После полного израсходования исходного материала по данным ТСХ и ЖХМС реакционную массу фильтровали через слой целита, и слой целита тщательно обрабатывали этилацетатом (30 мл). Затем органический слой промывали 10% раствором тиосульфата натрия (2x50 мл), затем насыщенным раствором гидрокарбоната натрия (2x50 мл), водой (1x50 мл), солевым раствором (1x50 мл). Затем органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали в вакууме. Затем неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением бензил(3 -циклогексил-3 -метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)бутан-2-ил)карбамата (соединение С140). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,45 ЖХМС (ИЭР): m/z 472,2 (М+Н)⁺.

Пример 110: Синтез соединения СИЗ

- А .

¹ _С| О NHj °3

-.МГСдоОС * i гУ Трифосгек Ру. ДХ^

Ж?¹) 0’£-№Н.т&«.,Зч

Л ⁰ Стадам }i ОН Стадия-12)

2-(3-Хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропан-1-ол (2)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропаналя (промеж. соед.-4) (5 г, 27,472 ммоль) в ТГФ (50 мл) добавляли (4-хлорфенил)магнийбромид (54 мл, 54,945 ммоль) при -30°C, и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным NH4Cl (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 10% этилацетатом в гексане, с получением 2-(3-хлорфенил)-1-(4хлорфенил)-2-метилпропан-1-ола (2). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=277,19 [M-OH].

Метил-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3

- 237 049429 циклогексилпропаноат (4)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропан-1-ола (2) (3 г, 10,20 ммоль) в ДХМ (30 мл) добавляли пиридин (3 мл), гидрохлорид метил(S)-2-амино-3циклогексилпропаноата (3) (2,4 г, 13,265 ммоль), затем порциями добавляли трифосген (1,5 г, 5,102 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили 1N водн. HCl (50 мл), затем экстрагировали ДХМ (2x50 мл), промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 15% этилацетатом в гексане, с получением метил-(2S)-2-(((2-(3 -хлорфенил)-1 -(4-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3 циклогексилпропаноата (4). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=528,52 [M+Na]+.

(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановая кислота (5)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата (4) (4,2 г, 8,313 ммоль) в ТГФ (15 мл), к воде (10 мл) добавляли LiOH.H₂O (1 г, 24,940 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь концентрировали и подкисляли 1N HCl, экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением (2S)-2-(((2-(3хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (5), которую использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 514,45 [M+Na]⁺.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (6)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (5) (4 г, 8,143 ммоль) в ДМФА (35 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (2,3 г, 12,219 ммоль), HOBt (1,6 г, 12,219 ммоль), DIPEA (3,5 мл, 24,429 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (1,8 г, 9,775 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 80% этилацетатом и петролейным эфиром, с получением метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (6). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 660,47 [М+Н]⁺.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (7)

К перемешиваемому раствору метил(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (6) (700 мг, 1,062 ммоль) в ДХМ (7 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1 мл, 4,878 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь гасили водн. раствором NH₄Cl (50 мл) и экстрагировали EtOAc (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (2x20 мл), сушили над Na2SO4 и концентрировали с получением соединения 2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (7). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=632,65 (М+Н)⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -(4-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -okco-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (соединение С143)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил1-(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (7) (200 мг, 0,316 ммоль) в ДХМ (6 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (403 мг, 0,95 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, который очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-1-(4хлорфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3 -((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С143). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=630,1 (M+H)⁺.

- 238 049429

Пример 111: Синтез соединения С144

2-(3-Хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-4-(циклопропиламино)3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С144)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-4-циано3-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (1) (150 мг, 0,203 ммоль) в метаноле (2 мл) добавляли мХПБК (69 мг, 0,406 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли циклопропанамин (1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропил((S)-3циклогексил-1 -(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С144). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 697,2 [М+Н]+.

Пример 112: Синтез соединения С146

Этил-1 -(3-хлорбензил)-2-оксоциклопентан-1 -карбоксилат (3)

К перемешиваемому раствору K₂CO₃ (17,6 г, 128,205 ммоль) в ацетоне (100 мл) добавляли этил-2оксоциклопентан-1-карбоксилат (1) (10 г, 64,102 ммоль), а затем 1-(бромметил)-3-хлорбензол (9,6 мл, 76,923 ммоль) при комн. темп., и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником при 70°С в течение 36 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и гасили насыщенным раствором NaHCO₃ (150 мл), затем экстрагировали этилацетатом

- 239 049429 (2x100 мл). Органический слой промывали насыщенным раствором NaHCO₃ (3x100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 3% этилацетатом в гексане, с получением этил-1-(3-хлорбензил)-2оксоциклопентан-1-карбоксилата (3). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): mz=281,23 [M+H]+.

2-(3 -хлорбензил)циклопентан-1 -он (4)

К перемешиваемому раствору этил-1-(3-хлорбензил)-2-оксоциклопентан-1-карбоксилата (3) (15 г, 35,714 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (150 мл) добавляли 6N водную HCl (75 мл) при комн. темп., и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником при 120°C в течение 6 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь охлаждали до комн. темп. и выливали в ледяную воду (100 мл), экстрагировали этилацетатом (3x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 2% этилацетатом в гексане, с получением 2-(3-хлорбензил)циклопентан-1-она (4). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=209,09 [M+H]⁺.

2-(3 -Хлорбензил)циклопентан-1 -ол (5)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентан-1-она (4) (5 г, 24,038 ммоль) в МеОН (50 мл) добавляли NaBH₄ (1,82 г, 48,076 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь доводили до комнатной температуры и перемешивали в течение 30 мин. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили 1N HCl и упаривали для удаления растворителя, затем экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения 2-(3-хлорбензил)циклопентан-1-ола (5). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 193,14 [М-ОН].

Метил-(((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)-L-фенилаланинат (7)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентан-1-ола (5) (3 г, 14,28 ммоль), метил-Lфенилаланината HCl (6) (3 г, 16,75 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавляли пиридин (9 мл, 3 об.), затем трифосген (2,1 г, 7,09 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили 2N HCl (30 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x50 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-(((2-(3хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)-L-фенилаланината (7). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане; Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=416,4 [M+H]⁺.

(((2-(3-Хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)-L-фенилаланин (3)

К перемешиваемому раствору метил-(((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)-Lфенилаланината (7) (2,1 г, 5,06 ммоль) в ТГФ (20 мл), деминерализованной воде (10 мл) добавляли LiOHН2О (622 мг, 15,12 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь концентрировали и подкисляли 1N водн. HCl, экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением (((2-(3хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)-L-фенилаланина (8), который использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 424,3 [M+Na]+.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (9)

К перемешиваемому раствору (((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)-L-фенилаланина (8) (1,8 г, 4,48 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (1,2 г, 6,73 ммоль), НОВТ (0,9 г, 6,73 ммоль), DIPEA (2,4 мл, 13,46 ммоль) и метил-(2S)-2-амино-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (1,34 г, 5,422 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 5% метанолом в дихлорметане, с получением метил-(2S)-2-((2S)-2((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин3-ил)пропаноата (9). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 570,4 [М+Н]⁺.

(2S)-2-((2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-фенилпропанамидо)-3-((S)2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (10)

К перемешиваемому раствору метилметил(2S)-2-((2S)-2-((((2-(3хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-фенилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (9) (1,1 г, 1,495 ммоль) в ТГФ (20 мл), деминерализованной воде (10 мл) добавляли LiOH-H2O (622 мг, 15,12 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь

- 240 049429 концентрировали и подкисляли 1N водн. HCl, экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением (2S)-2-((2S)-2-((((2-(3хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-фенилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропановой кислоты (5). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 556,4 [М+Н]+.

2-(3-Хлорбензил)циклопентил-((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-1 -оксо-3-фенилпропан-2-ил)карбамат (12)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-2-((((2-(3хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-фенилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропановой кислоты (10) (500 мг, 8,99 ммоль) ДХМ (10 мл) одновременно добавляли HATU (680 мг, 1,33 ммоль), DIPEA (0,4 мл, 4,41 ммоль) и 1-(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромид (11) (455 мг, 2,20 ммоль) при 0°C и перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (20 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением ((S)-1-(((S)4-циано-3-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-1 оксо-3-фенилпропан-2-ил)карбамата (12). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 665,4 [М+Н]⁺.

2-(3-Хлорбензил)циклопентил((S)-1 -(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)карбамат (соединение С146)

К перемешиваемому раствору ((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4(тетрагидро-1 l4-тиофен)-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-1 -оксо-3-фенилпропан-2-ил)карбамата (12) (120 мг, 0,18 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли м-ХПБК (62 мг, 0,36 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли циклопропиламин (0,01 мл, 0,21 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 4 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3хлорбензил)циклопентил((S)-1-(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)карбамата (соединение С146). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 623,1 (М+Н)⁺.

Пример 113: Синтез соединения С147

- 241 049429

Метил-((2-(3 -хлорфенил)-1 -фенилэтокси)карбонил)-Ь-лейцинат (3)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтан-1-ола (1) (4 г, 17,23 ммоль) и гидрохлорид метил-Ь-лейцината (2) (3,7 г, 25,85 ммоль) в ДХМ (40 мл), добавляли пиридин (12 мл, 3 об.), затем трифосген (2,5 г, 8,61 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ДХМ и промывали 1N HCl (50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-((2-(3-хлорфенил)-1фенилэтокси)карбонил)-Ь-лейцината (3). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=426,43 [M+Na]+.

((2-(3-Хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)-Ь-лейцин (4)

К перемешиваемому раствору метил-((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)-Ь-лейцината (4) (2,2 г, 5,45 ммоль) в ТГФ (30 мл), воде (15 мл) добавляли гидроксид лития (671 мг, 16,37 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением ((2-(3хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)-Ь-лейцина (4). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 412,41 [M+Na]⁺.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропаноат (5)

К перемешиваемому раствору ((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)-Ь-лейцина (4) (1,7 г, 4,36 ммоль) ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (1,2 г, 6,55 ммоль), HOBt (0,88 г, 6,55 ммоль), DIPEA (1,8 мл, 13,10 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (0,97 г, 5,24 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (80 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормальнофазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (5). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 558,57 [М+Н]⁺.

(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (6)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S))-2-(((2-(3-хлорфенил)-1фенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (5) (1 г, 1,79 ммоль) в ТГФ (15 мл), воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (220 мг, 5,37 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-((2S)-2-(((2-(3хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропановой кислоты (9). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 544,52 [М+Н]⁺.

2-(3-Хлорфенил)-1-фенилэтил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (8)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (6) (800 мг, 1,473 ммоль) ДХМ (10 мл) одновременно добавляли HATU (839 мг, 2,209 ммоль), DIPEA (0,6 мл, 4,41 ммоль) и 1(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромид (7) (455 мг, 2,209 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (30 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали с помощью очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтил((S)1 -(((S)-4-циано-3-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (8). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 653,52 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -фенилэтил((S)-1 -(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С147)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2ил)карбамата (8) (200 мг, 0,30 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли м-ХПБК (105 мг, 0,61 ммоль) при 0°C,

- 242 049429 и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли циклопропиламин (1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3хлорфенил)-1 -фенилэтил((S)-1 -(((S)-4-(циkлопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С147). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 611,2 (М+Н)+.

Пример 114: Синтез соединения С148

С148

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((2S)-3-циkлогексил-1-(((2S)-4-(циkлопропиламино)-3гидрокси-4-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат(2)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((S)-3-циkлогексил-1-оксо1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С104) (250 мг, 0,409 ммоль) в ДХМ (10 мл) последовательно добавляли пиридин (0,75 мл, 3 об), изоцианоциклопропан (1) (41 мг, 0,614 ммоль) при 0°C и перемешивали в течение 10 мин. К этому добавляли ТФУ (0,06 мл, 819 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x15 мл). Органический слой промывали 1N HCl (3x 15 мл), солевым раствором (3x10 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((2S)-3-циkлогексил-1 -(((2S)-4(циклопропиламино)-3 -гидрокси-4-оксо-1 -((S)-2-оксопuрролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан2-ил)карбамата (2). Система ТСХ: 5% метанол/ дихлорметан; Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=681,6 (M+H)⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((S)-3 -циклогексил-1 -(((S)-4-(циkлопропиламино)-3,4диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С148)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((2S-3-циkлогексил-1-(((2S)4-(циклопропиламино)-3 -гидрокси-4-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-1 оксопропан-2-ил)карбамата (2) (200 мг, 0,293 ммоль) в EtOAc (10 мл) добавляли периодинан ДессаМартина (373 мг, 0,881 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (25 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенuлпропил((S)-3-циkлогексил-1-(((S)-4(циkлопропиламино)-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (соединение С148). Система ТСХ: 10% метанол/дихлорметан Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 679,2 (М+Н)⁺.

- 243 049429

Пример 115: Синтез соединения С149

Метил-(S)-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2оксо-1 -азаспиро [4.5]декан-3 -ил)пропаноат (2)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты) (1 г, 2,57 ммоль) в ДМФА (20 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC.HCl (736 мг, 3,85 ммоль), НОВТ (519 мг, 3,85 ммоль), DIPEA (1,34 мл, 7,71 ммоль) и гидрохлорид метил-2-амино-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноат (промеж. соед.-7А) (820 мг, 2,82 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 5% метанолом в ДХМ, с получением метил-(S)-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (2). Система ТСХ: 5% метанол/ДХМ Rf: 0,65 ЖХМС (ИЭР): m/z=576,66 (M+H)+.

(S)-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циkлогексилnропанамидо)-3-((S)-2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропановая кислота (3)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (2) (1 г, 1,73 ммоль) в ТГФ (7 мл), воде (3 мл) добавляли гидроксид лития (249 мг, 5,20 ммоль) при комн. темп. и перемешивали. при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Ре акционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-2-((S)-2-((((3хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циkлогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропановой кислоты (3). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 562,47 [М+Н]+.

3-Хлорбензил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-(тетрагидро1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (5)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропановой кислоты (3) (800 мг, 1,42 ммоль) в ТГФ (8 мл) одновременно добавляли HATU (798 мг, 2,135 ммоль), DIPEA (0,74 мл, 4,270 ммоль) и 1-(цианометил)тетрагидро-1Н-тиофен-1-ий (4) (461 мг, 2,135 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали EtOAc (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 3-хлорбензил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2 -ил)амино)-3 -циклогексил-1 оксопропан-2-ил)карбамата (5). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 671,53 [М+Н]+.

3-Хлорбензил-((S)-3 -циклогексил-1 -(((S)-4-(циkлопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2-okco- 1

- 244 049429 азаспиро [4.5]декан-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С149)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2-оксо-1αзаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1оксопропан-2-ил)карбамата (5) (300 мг, 0,447 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли м-ХПБК (192 мг, 1,117 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли циклопропанамин (6) (1,5 мл, 5 об.)) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3 -хлорбензил-((S)-3-циклогексил-1 -(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2-okco- 1 азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С149). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (иЭР): m/z 629,2 [М+Н]+.

Пример 116: Синтез соединения С150

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1 -(нафталин-2-ил)пропил((S)-3-циклогексил-1 -(((S)-3,4-диоксо-1 -((S)-2оксопирролидин-3-ил)-4-(пирролидин-1 -ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С150)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2-ил)пропил((S)-1-(((S)-4циано-3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (1) (400 мг, 0,519 ммоль) в метаноле (2,5 мл) добавляли мХПБК (223 мг, 1,29 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°С и добавляли пирролидин (0,738 мл, 5,1 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали 10% метанолом в ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1(нафталин-2-ил)пропил((S)-3-циклогексил-1 -(((S)-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4(пирролидин-1-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С150). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 743,2 [М+Н]⁺.

Пример 117: Синтез соединения С151

- 245 049429

Этил-1 -(3-хлорбензил)-2-оксоциклопентан-1 -карбоксилат (3)

К перемешиваемому раствору K2CO3 (17,6 г, 128,205 ммоль) в ацетоне (100 мл) добавляли этил-2оксоциклопентан-1-карбоксилат (1) (10 г, 64,102 ммоль) при комн. темп., а затем 1-(бромметил)-3хлорбензол (9,6 мл, 76,923 ммоль) при комн. темп., и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником при 70°С в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и гасили насыщенным раствором NaHCO₃ (150 мл), затем экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), затем этилацетатный слой промывали насыщенным раствором NaHCO₃ (3x100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 3% этилацетатом в гексане, с получением этил-1-(3хлорбензил)-2-оксоциклопентан-1-карбоксилата (3). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане; Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=281,23 (M+H)+.

2-(3-хлорбензил)циклопентан-1-он (4)

К перемешиваемому раствору этил-1-(3-хлорбензил)-2-оксоциклопентан-1-карбоксилата (3) (15 г, 35,714 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (150 мл) добавляли 6N водную HCl (75 мл) при комн. темп., и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником при 120°C в течение 6 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь охлаждали до комн. темп., выливали в ледяную воду (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 2% этилацетатом в гексане, с получением 2-(3-хлорбензил)циклопентан-1-она (4). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=209,09 [M+H]⁺.

2-(3-хлорбензил)циклопентан-1-ол (5)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентан-1-она (4) (5 г, 24,038 ммоль) в МеОН (50 мл) добавляли NaBH₄ (1,82 г, 48,076 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь оставляли перемешиваться при комн. темп. в течение 30 мин. Ход реакции контролировали с помощью ТСХ. Реакционную смесь перегоняли и гасили 1N HCl, экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения 2-(3хлорбензил)циклопентан-1-ола (5). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=193,14 [M-OH].

Метил-(2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноат (7)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентан-1-ола (5) (5 г, 23,809 ммоль) в ДХМ (50 мл) медленно добавляли пиридин (15 мл), трифосген (3,5 г, 11,904 ммоль) при 0°C, затем добавляли метил-(S)-2-амино-3-циклогексилпропаноат (6) (5,3 г, 28,571 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), концентрировали органический слой, снова промывали 1N водн. раствором HCl, затем экстрагировали ДХМ (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 4% этилацетатом в гексане, с получением метил-(2S)-2-((((2-(3-хлорбензuл)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата (7). Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=422,26 [M+H]+.

(2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановая кислота (8)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((((2-(3хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата (7) (3 г, 7,125 ммоль) в ТГФ (30 мл)), деминерализованной воде (10 мл) добавляли LiOH·Н₂О (513 мг, 21,377 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь концентрировали и подкисляли 1N водн. HCl, экстрагировали этилацетатом (2x25 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном

- 246 049429 давлении с получением (2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (8), которую использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 430,38 [M+Na]+.

метил-(2S)-2-((2S)-2-(((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (9)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (8) (2,2 г, 5,405 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC.HCl (1,5 г, 8,108 ммоль), НОВТ (1,09 г, 8,108 ммоль), DIPEA (2,9 мл, 16,216 ммоль) и метил(2S)-2амино-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (1,2 г, 6,486 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 5% метанолом в дихлорметане, с получением метил-(2S)-2-((2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (9). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 576,61 [М+Н]⁺.

(2S)-2-((2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (10)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-((((2-(3хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин3-ил)пропаноата (9) (1 г, 1,739 ммоль) в ТГФ (10 мл), воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (125 мг, 5,217 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-((2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (10). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 562,47 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорбензил)циклопентил-((S)-1 -(((S)-4-циано-3-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (12)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-2-((((2-(3хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин3-ил)пропановой кислоты (10) (0,7 г, 1,247 ммоль), ДХМ (10 мл) одновременно добавляли HATU (0,71 г, 1,871 ммоль), DIPEA (0,66 мл, 3,743 ммоль) и 1-(цианометил)тетрагидро-1Н-тиофен-1-ия бромид (11) (239 мг, 1,871 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 2-(3хлорбензил)циклопентил-((S)-1 -(((S)-4-циано-3-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1l4тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (12). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 671,31 [М+Н]⁺.

2-(3-Хлорбензил)циклопентил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С151)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентил-((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 оксопропан-2-ил)карбамата (12) (250 мг, 0,373 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли м-ХПБК (160 мг, 0,932 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов при 0°C, добавляли циклопропанамин (13) (25 мг, 0,447 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x10 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорбензил)циклопентил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-4(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2ил)карбамата (соединение С151). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 629,2 (М+Н)⁺.

- 247 049429

Пример 118: Синтез соединения С152

Этил-1 -(3-хлорбензил)-2-оксоциклопентан-1 -карбоксилат (3)

К перемешиваемому раствору K₂CO₃ (17,6 г, 128,205 ммоль) в ацетоне (100 мл) добавляли этил-2оксоциклопентан-1-карбоксилат (1) (10 г, 64,102 ммоль), а затем 1-(бромметил)-3-хлорбензол (9,6 мл, 76,923 ммоль) при комн. темп., и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником при 70°С в течение 36 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и гасили насыщенным раствором NaHCO₃ (150 мл), затем экстрагировали этилацетатом (2x100 мл). Органический слой промывали насыщенным раствором NaHCO₃ (3x100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 3% этилацетатом в гексане, с получением этил-1-(3-хлорбензил)-2оксоциклопентан-1-карбоксилата (3). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане; Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=281,23 (M+H)+.

2-(3-хлорбензил)циклопентан-1-он (4)

К перемешиваемому раствору этил-1-(3-хлорбензил)-2-оксоциклопентан-1-карбоксилата (3) (15 г, 35,714 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (150 мл) добавляли 6N водную HCl (75 мл) при комн. темп., и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником при 120°C в течение 6 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь охлаждали до комн. темп. и выливали в ледяную воду (100 мл), экстрагировали этилацетатом (3x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 2% этилацетатом в гексане, с получением 2-(3-хлорбензил)циклопентан-1-она (4). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане; Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=209,09 (M+H)⁺.

2-(3-Хлорбензил)циклопентан-1-ол (5)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентан-1-она (4) (5 г, 24,038 ммоль) в МеОН (50 мл) добавляли NaBH₄ (1,82 г, 48,076 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь доводили до комнатной температуры и перемешивали в течение 30 мин. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили 1N HCl и упаривали для удаления растворителя, затем экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения 2-(3-хлорбензил)циклопентан-1-ола (5). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 193,14 [М-ОН].

Метил-(((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)-L-лейцинат (6)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентан-1-ола (5) (1,7 г, 8,095 ммоль) добавляли гидрохлорид метил-L-лейцината (5) (1,4 г, 9,714 ммоль) в ДХМ (15 мл) порциями добавляли пиридин (5,1 мл, 24,285 ммоль), затем трифосген (1,19 г, 4,047 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в

- 248 049429 течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили 1N водным раствором HCl (50 мл) и экстрагировали ДХМ (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 4% этилацетатом в гексане, с получением метил-(((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)Ж-лейцината (7). Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане; Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=382,38 (M+H)+.

(((2-(3 -Хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)-Ь-лейцин (8)

К перемешиваемому раствору метил-(((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)-L-лейцината (7) (1,6 г, 4,199 ммоль) в ТГФ (20 мл), деминерализованной воде (10 мл) добавляли LiOH.H₂O (302 мг, 12,598 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь концентрировали и подкисляли 1N водн. раствором HCl, экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением (((2-(3хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)-L-лейцина (8), который использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=368,22 (M+H)⁺.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (9)

К перемешиваемому раствору (((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)-Ь-лейцина (8) (1,4 г, 3,814 ммоль) в ДМФА (10 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (1,09 г, 5,722 ммоль), НОВТ (0,772 г, 5,722 ммоль), DIPEA (2,1 мл, 18,018 ммоль) и метил(2S)-2-амино-3-(2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (1,34 г, 15,422 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 5% метанолом в дихлорметане, с получением метил-(2S)-2((2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропаноата (9). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 536,59 (М+Н)⁺.

2-(3-хлорбензил)циклопентил ((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)-4 -метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (10)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-((((2-(3хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (9) (0.8 г, 1.495 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1.4 мл, 2.990 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH4Cl и экстрагировали дихлорметаном (2x50 мл), фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 2-(3-хлорбензил)циклопентил((S)-1(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2ил)карбамата (10). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=508,38 (M+H)⁺.

2-(3 -хлорбензил)циклопентил((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С152)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (10) (0,1 г, 0,197 ммоль в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (0,167 г, 0,394 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3хлорбензил)циклопентил((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С152). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 506,1 (М+Н)⁺.

- 249 049429

Пример 119: Синтез соединения С153

Метил-2-((S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3(2-оксо-1 -азаспиро [4.5] декан-3 -ил)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (1) (фрагмент кислоты-37) (1,0 г, 2,33 ммоль) в ДМФА (15 мл) добавляли EDC.HCl (0,667 г, 3,49 ммоль), HOBt (0,47 г, 3,49 ммоль), DIPEA (1,3 мл, 6,99 ммоль) и гидрохлорид метил-2-амино-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-18) (0,68 г, 2,33 ммоль) при 0°С и перемешивали. при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (250 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (2x200 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% метанолом в дихлорметане с получением метил-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1фенилэтокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропаноата (1). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=666,50 (М+Н)+.

2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(2оксо-1-азаспиро[4.5]декан- 3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)3-циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (1) (0,9 г, 1,35 ммоль) в ТГФ (6 мл), воде (6 мл) добавляли гидроксид лития (170 мг, 4,06 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Избыток ТГФ перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали ДХМ (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=652,49 (M+H)⁺.

2-(3-Хлорфенил)-1 -фенилэтил((2S)-1 -((4-циано-3-оксо-1 -(2-оксо-1 -азаспиро[4.5]декан-3 -ил)-4(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору 2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропановой кислоты (2) (800 мг, 1,27 ммоль, в ДХМ (12 мл) добавляли HATU (700 мг, 1,83 ммоль), DIPEA (0,7 мл, 3,66 ммоль) и 1(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ий (3) (305 мг, 2147 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали ДХМ (2x50 мл). Объединенные органические слои промывали водой (1x50 мл), соляным раствором (1x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали в вакууме. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 2-(3-хлорфенил)-1 -фенилэтил((2S)-1 -((4-циано-3-оксо-1 -(2-оксо-1 -азаспиро[4.5]декан-3-ил)4-(тетрагидро-1λ⁴-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (4).

- 250 049429

Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=761,43 (M+H)+.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -фенилэтил((2S)-3 -циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -(2-оксо1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат(С153)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтuл((2S)-1-((4-циано-3-оксо-1-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-(тетрагидро-1λ⁴-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексuл-1оксопропан-2-ил)карбамата (4) (200 мг, 0,263 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли м-ХПБК (68 мг, 0,394 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, а затем добавляли циклопропиламин (0,03 мл, 0,526 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экс трагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали водой (1x20 мл) и соляным раствором (1x30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтил((2S)-3циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С153). Система ТСХ: 10% метанола в ЖХМС (ИЭР): m/z=719,2 (M+H)+.

Пример 120: Синтез соединения С154 дихлорметане Rf: 0,5.

Оме

LW, ДХМ ОТ-коин. теш, 2 ч

LiBH₄ . ДХМ iFC-!«)MH.TW,24 фрагмент зминаЗ

SDC.HCi. ΗΟΒϊ

DiP£A, ДШ, gWm. темп.

Стадия-!]}

С154 пиридин fiT-камн.темп, 16ч

ЕМИЯ-βί

Метил(S)-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилnропанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропаноат (2)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (1) (5,0 г, 14,7 ммоль) в ДМФА (50 мл) добавляли EDC-HCl (4,2 г, 22,11 ммоль), HOBt (2,98 г, 22,11 ммоль), DIPEA (8,15 мл, 44,22 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-3((S)-2-оксопuрролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (3,92 г, 17,69 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (250 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (2x200 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% метанолом в дихлорметане с получением метил(S)-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (2). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z=508,47 (M+H)+.

-Хлорбензил-((S)-3 -циклогексил- 1-(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопuрролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (3)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (2) (4,0 г, 7,88 ммоль) в ДХМ (200 мл) при 0°С добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (7,8 мл, 1,57 ммоль), затем реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (200 мл) и экстрагировали ДХМ (2x200 мл). Органический слой промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4 и концентрировали с получением неочищенного продукта, чтобы получить чистый 3хлорбензил-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1

- 251 049429 оксопропан-2-ил)карбамат (3). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=480,37 [M+H]+.

-Хлорбензил-((S)-3-циклогексил-1 -оксо- 1-(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((S)-3-циклогексил-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (3) (2,0 г, 4,16 ммоль) в ДХМ (50 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (5,29 г, 12,49 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали ДХМ (50 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ ,фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% метанолом в дихлорметане с получением 3-хлорбензил((S)-3-циклогексил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=478,1 (M+H)⁺.

-Хлорбензил-((2S)-3 -циклогексил-1 -(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1 -((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (5)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((S)-3-циклогексил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (4) (600 мг, 1,25 ммоль) и изоцианоциклопропана (126,41 мг, 1,88 ммоль) в ДХМ (60 мл), затем добавляли пиридин (3 мл) при 0°C и перемешивали в течение 10 мин. К данному раствору добавляли ТФУ (0,3 мл, 2,51 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x15 мл). Органический слой промывали 1N HCl (3x15 мл), солевым раствором (3x10 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного 3-хлорбензил-((2,5)-3циклогексил-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (5). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=563,2 (M+H)⁺.

-Хлорбензил-((S)-3-циклогексил-1 -(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (С154)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3гидрокси-4-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (5) (450 мг, 0,799 ммоль) добавляли периодинан Десса-Мартина (677,79 мг, 1,59 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали ДХМ (50 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% метанолом в дихлорметане с получением 3-хлорбензил((S)-3-циклогексил-1)-(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С154).

Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=561,1 (M+H)⁺.

- 252 049429

Пример 121: Синтез соединения С155 и соединения С180

Метил-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонuл)амино)-3-циклогексилпропанамидо)3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенuлэтокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты-37) (1 г, 2,33 ммоль) в ДМФА (10 мл) одновременно добавляли EDC.HCl (667 мг, 3,49 ммоль), HOBt (471 мг, 3,49 ммоль), DIPEA (1 мл, 6,99 ммоль) и гидрохлорид метил-2-амино-3-(5,5-диметил-2- оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-21) (699 мг, 2,79 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (80 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением метuл-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенuл)-1фенилэтокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (1). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 626,48 [М+Н]+.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -фенилэтил((2S)-3 -циклогексил-1 -((1 -(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3 -ил)-3 гидроксипропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору метил-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенuлэтокси)карбонuл)амино)3-циклогексилпропанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (1) (920 мг, 1,47 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,4 мл, 2,94 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 2-(3хлорфенил)-1 -фенилэтил((2 S)-3-циклогексил-1 -((1 -(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3 гидроксипропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (2). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 598,40 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -фенилэтил((2S)-3 -циклогексил-1 -((1 -(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3 -ил)-3 оксопропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (С180)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенuл)-1-фенилэтuл((2S)-3-циkлогексил-1-((1-(5,5-диметил2-оксопирролидин-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (2) (150 мг, 0,25 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (213 мг, 0,50 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-1фенилэтил((2S)-3 -циклогексил-1 -((1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3 -ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-1оксопропан-2-ил)карбамата (С180). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 596,52 (М+Н)⁺.

- 253 049429

2-(3 -Хлорфенил)-1 -фенилэтил((2S)-3 -циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-1 -(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3-гидрокси-4-оксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтил((2S)-3-циклогексил-1-((1-(5,5-диметил2-оксопирролидин-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С180) (300 мг, 0,50 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли уксусную кислоту (1 мл), добавляли изоцианоциклопропан (3) (50 мг, 0,75 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 часов реакционную смесь непосредственно концентрировали с получением неочищенного продукта: данный остаток растворяли в метаноле (5 мл), воде (2 мл) и добавляли карбонат калия (104 мг, 0,75 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка. Данный остаток растирали с диэтиловым эфиром (30 мл) с получением 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтил((2S-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-1-(5,5диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3-гидрокси-4-оксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=681,56 [M+H]+.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -фенилэтил((2S-3 -циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-1 -(5,5-диметил-2оксопирролидин-3 -ил)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (С155)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтил((2S)-3-циклогексил-1-((4(циклопропиламино)-1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3-гидрокси-4-оксобутан-2-ил)амино)-1оксопропан-2-ил)карбамата (4) (280 мг, 0,41 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (349 мг, 0,82 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3 x20 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 6% метанолом в дихлорметане с получением 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтил((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-1-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С155). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 679,2 (М+Н)⁺.

Пример 122: Синтез соединения С156 и соединения С167

Метил-2-((2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (промеж. соед.-5) (1,5 г, 3,68 ммоль) в ДМФА при 0°С одновременно

- 254 049429 добавляли EDC-HCl (718 мг, 3,68 ммоль), НОВТ (490 мг, 3,62 ммоль), DIPEA (4,5 мл, 3 об.) и гидрохлорид метил-2-амино-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина 5) (737 мг, 11,05 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-2-((2S)-2-((((2-(3хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)пропаноата. Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 604,5 (М+Н)+.

2-((2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил-2-((2S)-2-((((2-(3хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)пропаноата (1) (1 г, 1,65 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (2,48 мл, 4,96 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенный органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 2-((2S)-2-((((2-(3хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 5% МеОН в ДХМ R_f 0,3 ЖХМС (ИЭР): mz 576,5 (М+Н)⁺.

2-(3 -Хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1 -((1 -(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3 -ил)-3оксопропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (С156)

К перемешиваемому раствору 2-((2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2) (200 мг, 0,33 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (422 мг, 0,99 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С156). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 574,2 (М+Н)⁺.

2-(3-Хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-1-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3-гидрокси-4-оксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((1-(5,5-диметил2-оксопирролидин-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С156) (350 мг, 0,60 ммоль) в ДХМ (20 мл) последовательно добавляли пиридин (1 мл, 3 об.), изоцианоциклопропан (3) (61 мг, 0,91 ммоль) при 0°C и перемешивании в течение 10 мин. К этому добавляли ТФУ (0,13 мл, 1,21 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x15 мл). Органический слой промывали 1N HCl (3x15 мл), солевым раствором (3x10 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4 и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного 2-(3хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-1-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3-гидрокси-4-оксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 5% метанол/ дихлорметан Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 659,5 [М+Н]⁺.

2-(3-Хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-1-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (С167)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((4(циклопропиламино)-1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3-гидрокси-4-оксобутан-2-ил)амино)-1оксопропан-2-ил)карбамата (4) (200 мг, 0,30 ммоль) в EtOAc (10 мл) добавляли периодинан ДессаМартина (386 мг, 0,91 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (25 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x10 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x10 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-1(5,5-диметил-2-оксопирролидин)-3-ил)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С167). Система ТСХ: 10% метанол/ дихлорметан Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 657,2 (М+Н)⁺.

- 255 049429

Пример 123: Синтез соединений С174 и С157.

W. пиридин. ДХМ,

ЙХ-иомн.теж, 16 ч

Стадия®)

G157

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксогексан-2-ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)гексанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (1) (600 мг, 1,02 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1 мл, 1,53 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксогексан-2-ил)карбамата (2). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=558,52 [M+H]+.

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((S)-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил) пропан-2-ил)амино)гексан-2-ил)карбамат (С157)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксогексан-2-ил)карбамата (2) (100 мг, 0,15 ммоль в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (519 мг, 1,02 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (30 мл). Фильтрат промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали нормальнофазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((S)-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)гексан-2-ил)карбамата (С157). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 558,52 [М+Н]⁺.

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((2S)-1-(((2S)-4-(циkлопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксогексан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((S)-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)гексан-2-ил)карбамата (С157) (250 мг, 0,45 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли изоцианоциклопропан (3) (45 мг, 0,67 ммоль), пиридин (71 мг, 0,90 ммоль), а затем ТФУ (102 мг, 0,90 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 часов реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и промывали 1N раствором HCl (15 мл), затем солевым раствором (15 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка. Данный остаток растирали с диэтиловым эфиром (30 мл) с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((2S))-1(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1

- 256 049429 оксогексан-2-ил)карбамат (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 641,55 [М+Н]+.

2-(3 -Хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((S)-1 -(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо- 1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксогексан-2-ил)карбамат (С174)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((2S)-1-(((2S)-4(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1 -((S)-2-оксопuрролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксогексан2-ил)карбамата (4) (210 мг, 0,32 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (417 мг, 0,98 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (20 мл). Фильтрат промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 8% метанолом в дихлорметане с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((S)-1-(((S)-4(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопuрролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксогексан-2ил)карбамата (С174). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 639,2 [М+Н]⁺.

Пример 124: Синтез соединения С158

г

(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1фенилэтокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопuрролидин-3-ил)пропаноата (1) (0,7 г, 1,17 ммоль) в ТГФ (5 мл), метаноле (5 мл) и воде (3 мл) добавляли гидроксид лития (144 мг, 3,51 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3-циkлогексилпропановой кислоты (2). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 584,60 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -фенилэтил((S)-1 -(((S)-4-циано-3-оксо-1 -((S)-2-оксопuрролидин-3-ил)-4(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3циkлогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопuрролидин-3-ил)пропановой кислоты (2) (420 мг, 0,72 ммоль) в ДХМ (10 мл) одновременно добавляли HATU (410 мг, 1,08 ммоль), DIPEA (0,3 мл, 2,16 ммоль) и 1(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромид (3) (222 мг, 1,08 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 1-(3-хлорбензил)циkлопропил((S)-1-(((S)-4-циано-3оксо-1 -((S)-2-оксопuрролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 оксопентан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 693,53 (М+Н)⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -фенилэтил((S)-3-циkлогексил-1 -(((S)-4-(циkлопропиламино)-3,4-диоксо- 1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбонат (С158)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтuл((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопuрролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1- 257 049429 оксопропан-2-ил)карбамата (4) (200 мг, 0,28 ммоль) в метаноле (4 мл) добавляли м-ХПБК (99 мг, 0,57 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли циклопропанамин (1 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (2x40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-4(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (С158). Система ТСХ: 15% метанола в дихлорметане Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 651,2 [М+Н]+.

Пример 125: Синтез соединений С165 и С159.

С166

С159

Диметил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-((1-нитроциклопентил)метил)пентандиоат (2)

К перемешиваемому раствору диметил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-метиленпентандиоата (6,8 г, 14,34 ммоль) в ACN добавляли нитроциклопентан (1) (1,5 г, 13,04 ммоль) и DBU (3,6 мл, 13,44 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением диметил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-((1нитроциклопентил)метил)пентандиоата (2). Система ТСХ: 10% петролейный эфир/EtOAc R_f: 0,25 ЖХМС (ИЭР): m/z 403,2 (М+Н)⁺. '

Метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.4]нонан-3-ил)пропаноат (3)

К перемешиваемому раствору диметил-диметил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-((1нитроциклопентил)метил)пентандиоата (2) (4,3 г, 10,64 ммоль) в метаноле (50 мл) добавляли хлорид никеля (1,3 г, 10,64 ммоль), затем борогидрид натрия (2 г, 53,21 ммоль) при -10°С и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x50 мл), объединенные органические слои промывали водой (2x50 мл), солевым раствором (50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.4]нонан-3-ил)пропаноата (3). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,2 ЖХМС (ИЭР):m/z 341,3 (М+Н)⁺.

Гидрохлорид метил-2-амино-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.4]нонан-3-ил)пропаноата (4)

- 258 049429

К перемешиваемому раствору метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-(2-оксо-1азаспиро[4.4]нонан-3-ил)пропаноата (3) (2,5 г, 3,75 ммоль) в диоксане (25 мл) добавляли 4М HCl в диоксане (25 мл) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток растирали с н-пентаном с получением гидрохлорида метил-2-амино-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.4]нонан-3-ил)пропаноата (4). Система ТСХ: 10% МеОН/ДХМ Rf: 0,2

Метил-2-((2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.4]нонан-3-ил)пропаноат (6)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (5) (2 г, 4,91 ммоль в ДМФА) при 0°С одновременно добавляли EDC.HCl (1,4 г, 7,17 ммоль), НОВТ (90о мг, 6,66 ммоль), DIPEA (2,7 мл, 3 об.) и гидрохлорид метил-2амино-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.4]нонан-3-ил)пропаноата (4) (1,6 г, 5,89 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-2-((2S))-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.4]нонан-3-ил)пропаноата (6). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 630,8 (М+Н)+.

2-(3 -Хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1 -((1 -гидрокси-3-(2-оксо-1 -азаспиро[4.4]нонан-3 ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (7)

К перемешиваемому раствору метил 2-((2S)-2-((((2-(3хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1азаспиро[4.4]нонан-3-ил)пропаноата (6) (700 мг, 1,11 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (2,2 мл, 0,24 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 2-(3хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.4]нонан-3ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (7). Система ТСХ: 5% МеОН в ДХМ R_f 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=602,4 (M+H)⁺.

2-(3 -Хлорбензил)циклопентил((2£-3-циклогексил-1 -оксо-1 -((1 -оксо-3 -(2-оксо-1 -азаспиро[4.4]нонан3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (С165)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S-3-циkлогексил-1-((1гидрокси-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.4]нонан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (7) (200 мг, 0,33 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (422 мг, 0,99 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S-3-циклогексил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-1азаспиро[4.4] нонан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (С165). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 600,2 (М+Н)⁺.

2-(3 -Хлорбензил)циклопентил((2S-3-циkлогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1 (2-оксо-1-азаспиро[4.4] нонан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (9)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циkлопентил((2S-3-циkлогексил-1-оксо-1-((1-оксо-3(2-оксо-1-азаспиро[4.4]нонан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (С165) (400 мг, 0,06 ммоль) в ДХМ (20 мл) последовательно добавляли пиридин (1,2 мл, 3 об.), изоцианоциклопропан (8) (66 мг, 1,29 ммоль) при 0°C и перемешивали в течение 10 мин. К этому добавляли ТФУ (0,05 мл, 0,66 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x15 мл). Органический слой промывали 1N HCl (3x15 мл), солевым раствором (3x10 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4 и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного 2-(3хлорбензил)циклопентил((2S)-3 -циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-3 -гидрокси-4-оксо-1 -(2-оксо-1 азаспиро[4.4]нонан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (9). Система ТСХ: 5% метанол/дихлорметан Rf: 0,5 ЖХМС (иЭр): m/z 685,2 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -(2-оксо1-азаспиро[4.4]нонан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (С159)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циkлопентил((2S)-3-циkлогексил-1-((4(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.4]нонан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1оксопропан-2-ил)карбамата (9) (200 мг, 0,29 ммоль) в EtOAc (10 мл) добавляли периодинан Десса

- 259 049429

Мартина (371 мг, 0,87 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (25 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x10 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x10 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорбензил)циkлопентил((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)3,4-диоксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.4]нонан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С159). Система ТСХ: 10% метанол/ дихлорметан Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 683,2 (М+Н)+.

Пример 126: Синтез соединений С186 и С160

-(2-Хлорфенил)-2-(3 -хлорфенил)-2-метилпропан-1 -ол (2)

К перемешиваемому раствору (2-хлорфенил)магнийбромида в ТГФ (1) (65 мл, 65,934 ммоль) добавляли 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропаналь (4 г, 21,978 ммоль) в ТГФ (50 мл) при -30°C и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой объединяли и промывали водой (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка, неочищенный остаток очищали нормальнофазовой хроматографией с получением 1-(2-хлорфенил)-2-(3-хлорфенил)-2-метилпропан-1-ола (2). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане Rf: 0,7

Метил-(2S)-2-(((1-(2-хлорфенил)-2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропаноат (4)

К перемешиваемому раствору 1-(2-хлорфенил)-2-(3-хлорфенил)-2-метилпропан-1-ола (2) (3,5 г, 11,904 ммоль) и метил(S)-2-амино-3-циклогексилпропаноата (3) (2,64 г, 14,285 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавляли пиридин (3,8 мл, 1 объем), а затем порциями добавляли трифосген (1,76 г, 5,9523 ммоль) в течение 15 мин при 0°С и перемешивали при комнатной температуре. температура в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ДХМ и промывали 1N HCl (50 мл), солевым раствором (50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта; неочищенный остаток очищали с помощью нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-(2S)-2-(((1-(2-хлорфенил)-2-(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата (4). Система ТСХ: 5% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=528,36 [M+Na]⁺.

- 260 049429 (2S)-2-(((1-(2-хлорфенил)-2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановая кислота (5)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-(((1-(2-хлорфенил)-2-(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата (4) (3,8 г, 7,524 ммоль) в ТГФ (30 мл), воде (10 мл) добавляли гидроксид лития (541 мг, 22,57 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S-2-(((1-(2-хлорфенил)-2-(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (5). Система ТСХ: 80% этилацетата в гексане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 514,36 [M+Na]+.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-(((1-(2-хлорфенил)-2-(3-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (6)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-(((1-(2-хлорфенил)-2-(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (5) (2 г, 4,073 ммоль) в ДМФА (15 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (1,16 г, 6,10 ммоль), HOBt (824 мг, 6,10 ммоль), DIPEA (2,2 мл, 12,21 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (910 мг, 4,88 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 60% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-(2S)-2-((2S)-2-(((1-(2-хлорфенил)-2-(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (6). Система ТСХ: 80% этилацетата в петролейном эфире; Rf: 0,5 жХмС (ИЭР): m/z 660,43 [М+Н]⁺.

-(2-Хлорфенил)-2-(3 -хлорфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1 -(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (7)

К перемешиваемому раствору метил(2S)-2-((2S)-2-(((1-(2-хлорфенил)-2-(3-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (6) (1,5 г, 2,276 ммоль) в ДХМ (2θ мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (2,2 мл, 4,552 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 1-(2-хлорфенил)-2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1-(((S)1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (7). Система тСх: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (иЭР): m/z 632,38 [М+Н]⁺.

11-(2-Хлорфенил)-2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (С 160)

К перемешиваемому раствору 1-(2-хлорфенил)-2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил1-(((S)-1 -гидрокси-3-((S))-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (7) (100 мг, 0,15 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (201 мг, 0,47 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (20 мл). Фильтрат промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x30 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x30 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash; соединение элюировали 5% метанола в дихлорметане, с получением 1 -(2-хлорфенил)-2-(3 -хлорфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1 -оксо1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (С160). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 630,2 (М+Н)⁺.

1-(2-Хлорфенил)-2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-4(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан2-ил)карбамат (9)

К перемешиваемому раствору 1-(2-хлорфенил)-2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (С 160) (250 мг, 0,39 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли изоцианоциклопропан (8) (39 мг, 0,59 ммоль), пиридин (0,5 мл, 2 об.), затем ТФУ (0,1 мл, 0,79 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 часов реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и промывали 1N раствором HCl (30 мл), затем солевым раствором (20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка. Данный остаток растирали с диэтиловым эфиром (30 мл) с получением 1-(2-хлорфенил)-2-(3хлорфенил)-2-метилпропил ((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1

- 261 049429 ((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (9). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 715,57 [М+Н]+.

-(2-Хлорфенил)-2-(3 -хлорфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1 -(((S)-4-(циклопропиламино)3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (С186)

К перемешиваемому раствору 1-(2-хлорфенил)-2-(3-хлорфенил)-2-метилпропил((2S)-3циkлогексил-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (9) (170 мг, 0,23 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (201 мг, 0,47 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (20 мл). Фильтрат промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 6% метанолом в дихлорметане с получением 1-(2-хлорфенил)-2-(3-хлорфенил)2-метилпропил((S)-3 -циклогексил-1 -(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С186). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 713,2 [М+Н]⁺.

Пример 127: Синтез соединения С161

Ди-трет-бутил-((S)-3-((S)-2-(4-метокси-1Н-индол-2-кαрбоксамидо)-4-метилпентанамидо)-2-оксо-4((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутил)фосфат (1)

К раствору N-((S)-1 -(((S)-4-гидрокси-3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (С142) (200 мг, 0,423 ммоль) в ТГФ (4 мл) добавляли 1H-тетразол (300 мг, 4,23 ммоль) и ди-трет-бутилдиэтилфосфорамидит (2 мл, 6,35 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 4 часов, затем добавляли 30% водн. раствор пероксида водорода (0,5 мл) при 0°C. Перемешивали смесь при 25°С в течение 1 часа. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. После этого реакционную смесь гасили 10% раствором метабисульфита натрия (Na₂S₂O₅) (10 мл). Затем слои разделяли и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (2x20 мл). Органический слой сушили над Na₂SO₄ и упаривали под вакуумом. Данный неочищенный материал очищали нормально-фазовой колоночной хроматографией с получением ди- трет-бутил-((S)-3-((S)-2-(4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамидо)-4-метилпентанамидо)-2-оксо-4-(((S)2-оксопирролидин-3-ил)бутил)фосфата (1). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,55 ЖХМС (ИЭР): m/z 665,87 [М+Н]⁺.

(S)-3-((S)-2-(4-метокси-1H-индол-2-карбоксамидо)-4-метилпентанамидо)-2-оксо-4-((S)-2оксопирролидин-3 -ил)бутилдигидрофосфат (С161)

Раствор ди-трет-бутил-((S)-3-((S)-2-(4-метокси-1H-индол-2-карбоксамидо)-4-метилпентанамидо)-2оксо-4-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутил)фосфата (1) (100 мг, 0,15 ммоль) в ДХМ (2 мл) помещали в атмосферу N2 и охлаждали до 0°C. Затем добавляли трифторуксусную кислоту (0,2 мл), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 6 часов. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Смесь концентрировали в вакууме, а затем концентрировали из дихлорметана (2x5 мл) и диэтилового эфира (2x5 мл) для удаления остаточной кислоты. Неочищенное соединение очищали с помощью препаративной обращенно-фазовой ВЭЖХ с использованием 0,1% ТФУ в воде и ацетонитрила в качестве градиентов с получением (S)-3-((S)-2-(4-метокси-1H-индол-2карбоксамидо)-4-метилпентанамидо)-2-оксо-4-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутилдигидрогенфосфата (С161). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ %: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 553,1 [М+Н]⁺.

- 262 049429

Пример 128: Синтез соединений С162 и С172.

2-(3-хлорфенил)ацетальдегид (2)

К перемешиваемому раствору ДМСО (2,7 мл, 38,46 ммоль) в ДХМ (30 мл) добавляли оксалилхлорид (2,5 мл, 28,84 ммоль) при -78°С и перемешивали в течение 30 мин, затем добавляли 2-(3хлорфенил)этан-1-ол (1) (3 г, 19,23 ммоль) в ДХМ при -78°C и продолжали перемешивание в течение 2 ч, после чего добавляли TEA (8,3 мл, 57,69 ммоль) при той же температуре и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (100 мл) и промывали ледяной водой (3x60 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 2-(3-хлорфенил)ацетальдегида (2). Данное неочищенное вещество использовали для следующей стадии. Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,4

1,2-Бис(3 -хлорфенил)этан-1 -ол

К перемешиваемому раствору (3-хлорфенил)магнийбромида (3) (58 мл, 58,44 ммоль) в ТГФ (50 мл) добавляли 2-(3-хлорфенил)ацетальдегид (2) (3 г, 19,48 ммоль) при -30°C и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% этилацетатом в гексане с получением 1,2-бис(3-хлорфенил)этан-1-ола (4). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 249,11 [М-ОН]⁺.

Метил-(2S)-2-(((1,2-бис(3-хлорфенил)этокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноат (6)

К перемешиваемому раствору 1,2-бис(3-хлорфенил)этан-1-ола (4) (2,3 г, 8,64 ммоль) и гидрохлорида метил(S)-2-амино-3-циклогексилпропаноата (5) (1,9 г, 10,37 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавляли пиридин (2,3 мл, 1 об.), а затем трифосген (1,27 г, 4,32 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ДХМ и промывали 1N HCl (50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 7% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-(2S)-2-(((1,2-бис(3

- 263 049429 хлорфенил)этокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата (6). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 500,28 [M+Na]+.

(2S)-2-((( 1,2-бис(3 -хлорфенил)этокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановая кислота (фрагмент кислоты-53)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-(((1,2-бис(3-хлорфенил)этокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропаноата (6) (2,1 г, 4,40 ммоль) в ТГФ (10 мл), воде (5 мл), добавляли гидроксид лития (316 мг, 13,20 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-(((1,2-бис(3-хлорфенил)этокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты(фрагмент кислоты-53). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 486,25 [M+Na]⁺.

Метил-2-((2S)-2-((( 1,2-бис(3 -хлорфенил)этокси)карбонил)амино)-3 -циклогексилпропанамидо)-3(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (7)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-(((1,2-бис(3-хлорфенил)этокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты-53) (1 г, 2,07 ммоль) в ДМФА (10 мл) одновременно добавляли EDC.HCl (595 мг, 3,11 ммоль), HOBt (420 мг, 3,11 ммоль), DIPEA (0,8 мл, 6,23 ммоль) и гидрохлорид метил-2-амино-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-21) (623 мг, 2,49 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (80 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением метил-2-((2S)-2-(((1,2-бuс(3хлорфенил)этокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (7). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 660,2 [М+Н]⁺.

1,2-бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1-((1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3гидроксипропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (8)

К перемешиваемому раствору метил-2-((2S)-2-(((1,2-бис(3-хлорфенил)этокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (7) (950 мг, 1,44 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,4 мл, 2,88 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (30 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 1,2-бис(3хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1-((1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3-гидроксипропан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (8). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 632,50 [М+Н]⁺.

1,2-Бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1-((1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3оксопропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (С162)

К перемешиваемому раствору 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1-((1-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (8) (400 мг, 0,63 ммоль) растворяли в дихлорметане (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (537 мг, 1,26 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x30 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x30 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 1,2-бис(3хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1-((1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3-оксопропан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С162). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 630,1 (М+Н)⁺.

1,2-Бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-1-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3 -ил)-3-гидрокси-4-оксобутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (10)

К перемешиваемому раствору 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1-((1-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С162) (350 мг, 0,55 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли пиридин (1 мл) добавляли изоцианоциклопропан (9) (55 мг, 0,83 ммоль) добавляли ТФУ (0,3 мл) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Органический слой объединяли, сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка. Данный остаток растирали с диэтиловым эфиром (30 мл) 3 раза с получением 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1-((4(циклопропиламино)-1-(5,5-диметил-2-оксобутан-3-ил)-3-гидрокси-4-оксобутан-2-ил)амино)-1оксопропан-2-ил)карбамата (10). Система ТСХ: 15% метанола в дихлорметане Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР):

- 264 049429 m/z=669,59 [M+H]+.

1,2-бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-1-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (С172)

К перемешиваемому раствору 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((28)-3-циклогексил-1-((4(циклопропиламино)-1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3-гидрокси-4-оксобутан-2-ил)амино)-1оксопропан-2-ил)карбамата (10) (280 мг, 0,39 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (332 мг, 0,78 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (30 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x30 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x30 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-1(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С172). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХмС (ИЭР): m/z 713,2 (М+Н)⁺.

Пример 129: Синтез соединения С163

Метил-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3 -ил)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору ((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)-Ь-лейцина (фрагмент кислоты-38) (1,6 г, 3,83 ммоль) в ДМФА (16 мл) одновременно добавляли EDC.HCl (1 г, 5,75 ммоль), HOBt (0,77 г, 5,75 ммоль), DIPEA (1,6 мл, 11,50 ммоль) и гидрохлорид метил-2-амино-3-(5,5диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-20) (1,15 г, 4,60 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (80 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением метил-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (1). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 614,48 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((2S)-1 -((1 -(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3 гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору метил-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (1) (350 мг, 0,57 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли 2М LiBH4 в ТГФ (0,6 мл, 1,14 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и

- 265 049429 концентрировали с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((2S)-1-((1-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (2). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 586,56 [М+Н]+.

2-(3 -Хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((2S)-1 -((1 -(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3 оксопропан-2-иламино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (3)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((2S)-1-((1-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (2) (300 мг, 0,51 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (519 мг, 1,02 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2метил-1-фенилпропил((2S)-1-((1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (3). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 584,55 (М+Н)⁺.

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((2S)-1-((4-(циклопропиламино)-1-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3-гидрокси-4-оксобутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (5)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((2S)-1-((1-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (3) (250 мг, 0,42 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли уксусную кислоту (0,5 мл), добавляли изоцианоциклопропан (4) (56 мг, 0,83 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь концентрировали с получением неочищенного продукта; неочищенный остаток растворяли в метаноле (10 мл), воде (5 мл), добавляли карбонат калия (80 мг, 0,58 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение промывали водн. 1N раствором HCl и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка. Данный остаток растирали с диэтиловым эфиром (30 мл) 3 раза с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((2S)-1-((4-(циклопропиламино)-1-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3-гидрокси-4-оксобутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (5). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=669,59 [М+Н]⁺.

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((2S)-1-((4-(циклопропиламино)-1-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (С163)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((2S)-1-((4(циклопропиламино)-1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3-гидрокси-4-оксобутан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (5) (200 мг, 0,29 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (310 мг, 0,59 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x30 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x30 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((2S)-1-((4(циклопропиламино)-1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-4-метил-1оксопентан-2-ил)карбамата (С163). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 667,2 (М+Н)⁺.

- 266 049429

Пример 130: Синтез соединения С164 о

Метил-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)гексаноат (3)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропан-1-ола (1) (2,5 г, 9,61 ммоль) и гидрохлорида метuл(S)-2-аминогексаноата (2) (2,0 г, 11,53 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавляли пиридин (7,5 мл, 3 об.), затем трифосген (1,4 г, 4,82 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ДХМ и промывали 1N HCl (50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 8% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенuл)-2метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)гексаноата (3). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=432,32 [M+H]+.

(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)гексановая кислота (4)

К перемешиваемому раствору метuл-(2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)гексаноата (3) (3,0 г, 6,96 ммоль) в ТГФ (30 мл), воде (10 мл) добавляли гидроксид лития (500 мг, 20,88 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-(((2-(3-хлорфенuл)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)гексановой кислоты (4). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 416,31 [М-Н]’.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенuл)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)гексанамидо)3 -((S)-2-оксопирролидин-3-uл)пропаноат (5)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-(((2-(3-хлорфенuл)-2-метuл-1фенилпропокси)карбонил)амино)гексановой кислоты (4) (2,5 г, 5,99 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC.HCl (1,7 г, 8,98 ммоль), HOBt (1,2 г, 8,98 ммоль), DIPEA (3,0 мл, 17,97 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (1,3 г, 7,19 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили

- 267 049429 ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)гексанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (5). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 586,52 [М+Н]+.

(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)гексанамидо)-3-((S)2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (6)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)гексамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (5) (500 мг, 0,85 ммоль) в ТГФ (10 мл), воде (3 мл) добавляли гидроксид лития (61 мг, 2,56 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-((2S)-2-(((2-(3хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)гексанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропановой кислоты (6). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 572,50 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((S)-1 -(((S)-4-циано-3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 uл)-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-1-оксогексан-2-ил)кαрбамат (8)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)гексамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (6) (350 мг, 0,612 ммоль) в ДХМ (10 мл) одновременно добавляли HATU (465 мг, 1,22 ммоль), DIPEA (0,3 мл, 1,91 ммоль) и 1-(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромид (7) (350 мг, 1,68 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (20 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 4% метанолом в дихлорметане с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропил((S)-1 -(((S)-4-циано-3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 илиден)бутан-2-ил)амино)-1-оксогексан-2-ил)карбамата (8). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 681,56 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксогексан-2-ил)карбамат (С164)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо1-((S)-2- оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-1 -оксогексан-2ил)карбамата (8) (200 мг, 0,29 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли м-ХПБК (151 мг, 0,88 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (2 мл) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Ре акционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2(3 -хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксогексан-2-ил)карбамата (С164). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 599,2 (М+Н)⁺.

Пример 131: Синтез соединения С166

ТФХ гаридин (ГС-кот темп., 1бч (тадвя-р!

С103

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((2S)-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (2)

- 268 049429

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (С108) (250 мг, 0,449 ммоль) в ДХМ (10 мл) последовательно добавляли пиридин (0,75 мл, 3 об.), изоцианоциклопропан (1) (45 мг, 0,671 ммоль) при 0°C и перемешивали в течение 10 мин. К этому добавляли ТФУ (0,06 мл, 899 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x15 мл). Органический слой промывали 1N HCl (3x15 мл), солевым раствором (3x10 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного 2-(3хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((2S)-1 -(((2S)-4-(циклоnропиламино)-3 -гидрокси-4-оксо-1 -((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамата (2).

Система ТСХ: 5% метанол/ дихлорметан Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 641,5 [М+Н]+.

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((S)-1 -(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамат (С 166)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((S)-1-(((2S)-4(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1оксопентан-2-ил)карбамата (2) (200 мг, 0,312 ммоль) в EtOAc (10 мл) добавляли периодинан ДессаМартина (396 мг, 0,936 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (25 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((S)-1-(((S)-4-(циклопропиламино)3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С166). Система тСх: 10% метанол/дихлорметан Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 639,2 (М+Н)⁺.

Пример 132: Синтез соединения С168

C1S8 (S)-2-((трет-Бутоксикарбонил)амино)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

Раствор метил-N-(трет-бутоксикарбонил)-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланината (1) (1 г, 3,496 ммоль) в метаноле (10 мл) охлаждали до 0°C, затем добавляли раствор NaOH (500 мг в 5 мл воды). Полученный раствор перемешивали при 0 ° С в течение 1 часа, затем удаляли избыток метанола в вакууме. Остаток подкисляли до рН 3 и экстрагировали дихлорметаном (2x50 мл), объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над MgSO₄, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 50% этилацетата в петролейном эфире R_f: 0,2.

трет-Бутил-((S)-4-диазо-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)карбамат (3)

Раствор N-(трет-бутоксикарбонил)-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланина (3) (3 г, 11,0 29 ммоль) в ТГФ (30 мл) помещали в атмосферу N2 и охлаждали до -23°C. Полученный прозрачный бесцветный раствор последовательно обрабатывали триэтиламином (3 мл, 22,059 ммоль), а затем изобутил

- 269 049429 хлорформиатом (1,8 мл, 13,235 ммоль). Реакционную смесь медленно обрабатывали раствором диазометана (~50 мл, ~25 ммоль) в диэтиловом эфире. Полученный желтый прозрачный раствор постепенно нагревали до комн. темп. и перемешивали в течение 1 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. После этого реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл), промывали один раз водой (50 мл), один раз солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали с получением Данный материал очищали колоночной хроматографией с нормальной фазой с получением трет-бутил((S)-4-диазо-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин3-ил)бутан-2-ил)карбамата (3). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,5 ЖХмС (ИЭР): m/z=319,19 [M+Na]+.

Г идрохлорид ((S)-3 -((S)-2-амино-4-хлор-3-оксобутил)пирролидин-2-она (4)

Раствор трет-бутил-(( 1 S)-3 -диазо-2-оксо-1 -{[(3 S)-2-оксопирролидин-3 -ил]метил} пропил)карбамата (1,5 г, 5,06 ммоль) в 1,4-диоксане (15 мл) помещали в атмосферу N₂ и охлаждали до 0°C. Данный прозрачный бледно-желтый раствор по каплям обрабатывали раствором 4М соляной кислоты в 1,4-диоксане (15 мл). После завершения добавления реакционную смесь нагревали до комн. темп. в течение 1 ч с образованием белого осадка. Избыток 1,4-диоксана упаривали в вакууме, и твердое вещество растирали с диэтиловым эфиром с получением гидрохлорида (S)-3-((S)-2-амино-4-хлор-3-оксобутил)пирролидин-2она (4) (1 г, 4,16 ммоль, выход 83%) в виде бледно-желтого твердого вещества. Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 205,13 [М+Н]⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-1-(((2S)-4-хлор-3-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат(5)

Раствор гидрохлорида (S)-3-((S)-2-амино-4-хлор-3-оксобутил)пирролидин-2-она (4) фрагмент амина-19 (547 мг, 1,769 ммоль) и (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты фрагмент кислоты-2 (500 мг, 1,474 ммоль) и в ДМФА (50 мл) помещали в атмосферу N2 и охлаждали до 0°C. Данный бледно-желтый раствор последовательно обрабатывали HATU (841 мг, 2,212 ммоль) и N-метилморфолином (0,32 мл, 2,949 ммоль). Через 1 час реакцию гасили смесью 1:1 лед/нас. NaHCO₃ (50 мл) и трижды экстрагировали этилацетатом (50 мл). Объединенные органические слои промывали один раз солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали с получением желтого сиропа. Данный материал очищали нормально-фазовой хроматографией с получением 3-хлорбензил-((2S)-1-(((2S)-4-хлор-3-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (5). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ R_f: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 594,47 [М+Н]⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-3-циkлогексил-1-(((2S)-4-гидрокси-3-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (С168)

Раствор 3-хлорбензил-((2S)-1-(((2S)-4-хлор-3-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (5) (300 мг, 0,42 ммоль) и бензоилмуравьиной кислоты (95 мг, 0,63 ммоль) в ДМФА (20 мл) помещали под атмосферу N2. Данный прозрачный бледножелтый раствор обрабатывали фторидом цезия (151 мг, 0,84 ммоль), затем нагревали до 65°C. Через 4 часа теперь уже желтую суспензию охлаждали до комн. темп., разбавляли этилацетатом (60 мл), трижды промывали водой (30 мл), один раз солевым раствором (30 мл), сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного ((3S)-3-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-2-оксо-4-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутил-2-оксо-2-фенилацетата в виде неочищенной желтой пены. МС (ИЭР+) для C₃₈H₄ClN₃O₈ m/z 707,3 (М+Н)⁺. Данный неочищенный продукт переносили в метанол (40 мл), помещали в атмосферу N2 и обрабатывали карбонатом калия (30 мг, 0,04 ммоль) при интенсивном перемешивании. Через 1 ч летучие вещества удаляли в вакууме (баня <30°C) с получением неочищенного продукта. Данное вещество очищали нормально-фазовой хроматографией с получением 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-4-гидрокси-3-оксо-1-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С168). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,55 ЖХМС (ИЭР): m/z 576,2 [М+Н]⁺.

- 270 049429

Пример 133: Синтез соединения С169

С169

-(3 -хлорбензил)циклобутан- 1-ол (3)

К перемешиваемому раствору 1-(бромметил)-3-хлорбензола (1) (3 г, 14,705 ммоль) в диэтиловом эфире (60 мл) добавляли кат. 1,2-дибромэтан (0,2 мл, 1,47 ммоль), кат. иод (94 мг, 0,73 ммоль) и магниевую стружку (1 г, 44,11 ммоль) при комн. темп. Наблюдается самостоятельное закипание. Выдерживали при комн. темп. в течение 1 ч. Затем полученный реагент Гриньяра медленно по каплям добавляли в другую круглодонную колбу, содержащую циклобутанон (2) (1 г, 14,28 ммоль) в диэтиловом эфире (20 мл) при -78°C. Выдерживали до комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным NH₄Cl (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x60 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 10% этилацетатом в гексане, с получением 1-(3-хлорбензил)циклобутан-1ола (3). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=197,28 [M+H].

Метил-((1-(3-хлорбензил)циклобутокси)карбонил)-L-лейцинат (5)

К перемешиваемому раствору 1-(3-хлорбензил)циклобутан-1-ола (3) (1,1 г, 5,61 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли пиридин (1,3 мл, 16,83 ммоль) и метил-L-лейцинат (4) (1,2 г, 8,41 ммоль), затем порциями добавляли трифосген (0,83 г, 2,806 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили 1N водн. HCl (20 мл), затем экстрагировали ДХМ (2x50 мл), промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 15% этилацетатом в гексане, с получением метил-((1-(3-хлорбензил)циклобутокси)карбонил)-Lлейцината (5). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=368,35 [M+H]⁺.

((1-(3 -Хлорбензил)циклобутокси)карбонил)-L-лейцин (6)

К перемешиваемому раствору метил-((1-(3-хлорбензил)циклобутокси)карбонил)Ж-лейцината (5) (1,6 г, 4,35 ммоль) в ТГФ (6,5 мл), воде (1,6 мл) добавляли LiOH.H₂O (0,42 г, 17,43 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. После израсходования исходного материала реакционную смесь концентрировали и подкисляли 1N HCl, экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением ((1-(3-хлорбензил)циклобутокси)карбонил)-L-лейцина (6). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 354,34 [М+Н]⁺.

Метил-2-((S)-2-(((1-(3-хлорбензил)циклобутокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-(2-оксо8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноат (7)

- 271 049429

К перемешиваемому раствору ((1-(3-хлорбензил)циклобутокси)карбонил)-Ь-лейцина (6) (1 г, 2,83 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (0,65 г, 4,24 ммоль), HOBt (0,57 г, 4,22 ммоль), DIPEA (1,2 мл, 8,49 ммоль) и метил-2-амино-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропаноат (фрагмент амина-22) (1 г, 3,39 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 80% этилацетатом и петролейным эфиром, с получением метил-2-((S)-2-(((1-(3хлорбензил)циклобутокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-(2-оксо-8-окса-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (7). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 592,53 [М+Н]+.

1-(3-Хлорбензил)циклобутил ((2S)-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (8)

К перемешиваемому раствору метил 2-((S)-2-(((1-(3-хлорбензил)циkлобутокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (7) (800 мг, 1,35 ммоль) в ДХМ (15 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,3 мл, 2,7 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь гасили водн. раствором NH₄Cl (50 мл) и экстрагировали EtOAc (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (2x20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали, с получением соединения 1-(3-хлорбензил)циклобутил-((2S)-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (8). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=564,52 (M+H)⁺.

1-(3-хлорбензил)циклобутил((2S)-4-метил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (9)

К перемешиваемому раствору 1-(3-хлорбензил)циклобутил((2S)-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-8-окса-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (8) (700 мг, 1,24 ммоль) в ДХМ (6 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (1,05 мг, 2,48 ммоль) при 0°C и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO3 (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, который очищали нормально-фазовой очисткой с получением 1-(3-хлорбензил)циkлобутил((2S)-4метил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2ил)карбамата (9). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 562,32 (М+Н)⁺.

1-(3-Хлорбензил)циклобутил((2S)-1-(((2S)-4-(циkлопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-(2-оксо-8окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (11)

К перемешиваемому раствору полученного 1-(3-хлорбензил)циклобутил((2S)-4-метил-1-оксо-1-((1оксо-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4,5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (9) (110 мг, 0,19 ммоль) в ДХМ (5 мл) и добавляли изоцианоциклопропан (10) (25 мг, 0,29 ммоль). ммоль), пиридин (0,7 мл, 0,78 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут при 0°C, добавляли ТФУ (45 мг, 0,39 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь подкисляли 1N раствором HCl (5 мл) и экстрагировали ДХМ (2x10 мл). Органический слой промывали солевым раствором (5 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение с получением 1-(3хлорбензил)циклобутил-((2S)-1-((4-(циkлопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-(2-оксо-8-окса-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (11). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 647,36 [М+Н]⁺.

1-(3-хлорбензил)циkлобутил-((2S)-1-((4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-(2-оксо-8-окса-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (С169)

К перемешиваемому раствору 1-(3-хлорбензил)циkлобутил-((2S)-1-((4-(циклопропиламино)-3гидрокси-4-оксо-1-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2ил)карбамата (11) (100 мг, 0,155 ммоль) в ДХМ (6 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (262 мг, 0,62 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, который очищали нормально-фазовой очисткой с получением 1(3-хлорбензил)циклобутил-((2S)-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-(2-оксо-8-окса-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (С169). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭр): m/z 645,2 (М+Н)⁺.

- 272 049429

Пример 134: Синтез соединений С170 и С178.

1-(Метилсульфонил)-4-нитропиперидин (2)

К перемешиваемому раствору гидрохлорида 4-нитропиперидина (1) (3 г, 18 ммоль) в ДХМ (30 мл) одновременно добавляли мезилхлорид (158 мл, 19,87 ммоль) и триэтиламин (3,79 мл, 27 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (40 мл), экстрагировали ДХМ (2x30 мл), органические слои промывали водой (2x20 мл), солевым раствором (20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением 1-(метилсульфонил)-4-нитропиперидина (2). Система ТСХ: 30% EtOAc в петролейном эфире Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 209,14 [М+Н]⁺.

Диметил-2-((1-ацетил-4-нитропиперидин-4-ил)метил)-4-((трет-бутоксикарбонил)амино)пентандиоат (3)

К перемешиваемому раствору диметил(S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4метиленпентандиоата (промеж. соед.-5) (Е0574-200) (3,03 г, 10,09 ммоль) в ACN (20 мл) добавляли 1(метилсульфонил)-4-нитропиперидин (2) (1,5 г, 7,211 ммоль) и DBU (2,19 мл, 14,42 ммоль) при 0°С и перемешивании при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормальнофазовой хроматографией с получением диметил-2-((1-ацетил-4-нитропиперидин-4-ил)метил)-4-((третбутоксикарбонил)амино)пентандиоата (3). Система ТСХ: 70% этилацетата в петролейном эфире R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 496,8 (М+Н)⁺.

Метил-(2S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноат(4)

К перемешиваемому раствору диметил-диметил-(2S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-((1(метилсульфонил)-4-нитропиперидин-4-ил)метил)пентандиоата (3) (2,8 г, 5,65 ммоль) в метаноле (30 мл) добавляли хлорид никеля (801 мг, 6,21 ммоль), затем борогидрид натрия (1,07 г, 28,28 ммоль) при -10°С и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (50 мл) и экстрагировали 10% МеОН в ДХМ (3x25 мл), объединенные органические слои промывали водой (2x20 мл), солевым раствором (25 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением метил-(2S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (4). Система ТСХ: 10% МеОН/ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 378,36 (M+Na)⁺.

Гидрохлорид метил-(2S)-2-амино-3-(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3

- 273 049429 ил)пропаноата (фрагмент амина-25)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-(8-(метилсульфонил)2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (4) (2 г, 4,61 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) добавляли 4М HCl в 1,4-диоксане (10 мл) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток растирали с н-пентаном с получением гидрохлорида метил(2S)-2-амино-3-(8-(метилсульфонил)-2оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-25). Система ТСХ: 15% МеОН/ДХМ Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 334,29 (М+Н)+.

Метил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(8(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноат (5)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты-2) (1,3 г, 3,83 ммоль) в ДМФА (20 мл) последовательно добавляли EDC-HCl (1,09 г, 5,75 ммоль), HOBt (0,776 г, 5,751 ммоль), DIPEA (2,0 мл, 11,502 ммоль) и гидрохлорид метил(2S)-2-амино-3-(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3ил)пропаноата (фрагмент амина-25) (1,55 г, 4,218 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x60 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, элюируя 5% метанолом в дихлорметане с получением метил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(8(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (5). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=655,41 [M+H]⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-3-циkлогексил-1-(((2S)-1-гидрокси-3-(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (6)

К перемешиваемому раствору метил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата 5) (1,6 г, 2,4 ммоль) в ТГФ (20 мл), 2М LiBH₄ (2,4 мл, 4,8 ммоль) при 0°C и продолжали перемешивать в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x10 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 3-хлорбензил-((2S)-3циkлогексил-1-(((2S)-1-гидрокси-3-(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (6). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 627,40 [М+Н]⁺.

3-Хлорбензил((2S)-3-циkлогексил-1-(((2S)-1-(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан3 -ил)-3 -оксопропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (С178)

При 0°С к перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1 -(((2S)-1-гидрокси-3-(8(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (6) (270 мг, 0,431 ммоль) в этилацетате (4 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (457 г, 1,07 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 3 ч реакционную смесь разбавляли этилацетатом (15 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенный продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-1-(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С178). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 625,1 [М+Н]⁺.

-хлорбензил-((2S)-3 -циклогексил-1 -(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-1-(8(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-оксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамат (8)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-1-(8-(метилсульфонил)-2оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С178) (300 мг, 0,48 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли изоцианоциклопропан (6) (64,32 мг, 0,96 ммоль), пиридин (0,15 мл, 1,92 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут при 0°C, добавляли ТФУ (109,4 мг) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь подкисляли 1N раствором HCl (5 мл) и экстрагировали ДХМ (2x10 мл). Органический слой промывали солевым раствором (5 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение с полу чением 3-хлорбензил((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-4-(циkлопропиламино)-3-гидрокси-1-(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-оксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (8). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 710,33 [М+Н]⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-3-циkлогексил-1-(((2S)-4-(циkлопропиламино)-1-(8-(метилсульфонил)-2-оксо1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (С170)

При 0°С к перемешиваемому раствору 33-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-4

- 274 049429 (циклопропиламино)-3-гидрокси-1-(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4оксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (8) (330 мг, 0,466 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (494 мг, 1,16 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 3 ч реакционную смесь разбавляли этилацетатом (15 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенный продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-1-(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3,4диоксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С170). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 708,2 [М+Н]+.

Пример 135: Синтез соединения С171

Метил-2-((S)-3 -циклогексил-2-( 1 Н-индол-2 -карбоксамидо)пропанамидо)-3 -(2-оксо-1 азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноат (2)

К перемешиваемому раствору (S)-3-циклогексил-2-(1H-индол-2-карбоксамидо)пропановой кислоты (1) (фрагмент кислоты-34) (1,5 г, 4,77 ммоль) в ДМФА (30 мл) добавляли EDC.HCl (1,36 г, 7,165 ммоль), HOBt (0,96 г, 7,165 ммоль), DIPEA (2,54 мл, 14,31 ммоль) и гидрохлорид метил-2-амино-3-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-19) (1,68 г, 5,724 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (250 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (2x200 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% метанолом в дихлорметане с получением метил-2-((S)-3-циклогексил-2-(1H-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (2). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,45 ЖХМС (ИЭР): m/z=551,50 (M+H)+.

2-((S)-3-циклогексил-2-(1H-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропановая кислота (3)

К перемешиваемому раствору метил-2-((S)-3-циклогексил-2-(1H-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноат (2) (1,5 г, 2,722 ммоль) в ТГФ (15 мл), воде (15 мл) добавляли гидроксид лития (343 мг, 8,166 ммоль) при комн. темп. и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Избыток ТГФ перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали ДХМ (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 2-((S)-3-циклогексил-2-(1H-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропановой кислоты (3). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 537,44 [М+Н]+.

N-((2S)-1-((4-циано-3-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-(теmрагидро-1λ⁴-тиофен-1

- 275 049429 илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-1Н-индол-2-карбоксамид (5)

К перемешиваемому раствору 2-((S)-3-циkлогексил-2-(1H-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропановой кислоты (3) (1,3 г, 2,42 ммоль) в ДХМ (25 мл) добавляли HATU (1,3 г, 3,358 ммоль), D1PEA (1,2 мл, 6,716 ммоль) и 1-(цианометил)тетрагидро-1Н- -тиофен-1-ий (4) (556 мг, 2,686 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали ДХМ (2x50 мл). Объединенные органические слои промывали водой (1x50 мл), соляным раствором (1x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали в вакууме. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением N-((2S)-1-((4-циано-3-оксо-1-(2оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-(тетрагидро-1Х4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1оксопропан-2-ил)-1H-индол-2-карбоксамида (5). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,45 ЖХМС (ИЭР): m/z=646,51 (M+H)+.

N-((2S)-3-циклогексил-1-((3,4-диоксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-(пирролидин-1ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)-1 H-индол-2-карбоксамид (С171)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-1-((4-циано-3-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)-4(тетрагидро-1 Х⁴-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)-1H-индол-2карбоксамида (5) (200 мг, 0,310 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляли м-ХПБК (159 мг, 0,930 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, затем добавляли пирролидин (0,06 мл, 0,93 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x15 мл). Органический слой промывали водой (1x20 мл) и соляным раствором (1x 30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением N-((2S)-3-циkлогексuл-1-((3,4-диоксо-1-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-(пирролидин-1-uл)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-uл)-1H-индол-2карбоксамида (С171). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=616,4 (M+H)⁺.

Пример 136: Синтез соединения С175

Метил-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенuлэтокси)карбонuл)амино)-3-циклогексилпропанамидо)3-(2-оксо-1 -азаспиро [4.5] декан-3 -ил)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-(((1,2-бис(3-хлорфенил)этокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты-53) (1 г, 2,07 ммоль) в ДМФА (10 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (596 мг, 3,11 ммоль), HOBt (421 мг, 3,11 ммоль), DIPEA (0,8 мл, 6,23 ммоль) и гидрохлорид метил-2-амино-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (промеж. соед.-7А) (603 мг, 2,07 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (80 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой промывали солевым раствором (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением метил-2-((2S)-2-(((1,2-бис(3хлорфенил)этокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропаноата (1). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 700,31 [М+Н].

1,2-Бис(3 -хлорфенил)этил((2 S)-3 -циклогексил-1 -((1 -гидрокси-3 -(2-оксо-1 -азаспиро[4.5]декан-3 ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат

К перемешиваемому раствору метuл-2-((2S)-2-(((1,2-бис(3-хлорфенuл)этокси)карбонuл)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (1) (900 мг, 1,28 ммоль) в ДХМ (9 мл) добавляли 2М LiBH4 в ТГФ (1,28 мл, 2,57 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемеши

- 276 049429 вали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (30 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением соединения 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (2). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 672,50 (М+Н)+.

1,2-Бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (С175)

К перемешиваемому раствору 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1-((1-гидрокси-3-(2оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3)-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (2) (800 мг, 1,190 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (1 г, 2,38 ммоль) при 0°C, и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x30 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x30 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (С175). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=670,2 (M+H)⁺.

Пример 137: Синтез соединения С176 и С200

фрагмент κίοοϊίΑζ

С 200

С176

Метил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-8окса-1 -азаспиро [4.5]декан-3 -ил)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты-2) (1,0 г, 2,94 ммоль) в ДМФА (200 мл) добавляли EDC.HCl (842 мг, 4,41 ммоль), HOBt (595 мг, 4,41 ммоль), DIPEA (1,5 мл, 8,82 ммоль) и гидрохлорид метил(2S)-2-амино-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-22) (992 мг, 3,24 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x25 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением метил-2-((S)-2-((((3хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропаноата (1). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z=578,28 [M+H]⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (2) (1,6 г, 2,76 ммоль) в ТГФ (10 мл) при 0°С добавляли 2М LiBH4 в ТГФ (2,7 мл, 5,53 ммоль), затем реакционную смесь пере

- 277 049429 мешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x10 мл). Органический слой промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного продукта для получения чистого 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (2). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=550,31 [M+H]+.

3-Хлорбензил-((2S)-3-циkлогексил-1-оксо-1-(((2S)-1-оксо-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (С200)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил 3-хлорбензил((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-1-гидрокси3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (2) (300 мг, 0,545 ммоль) в EtOAc (6 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (578 мг, 1,36 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали EtOAc (20 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x10 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x10 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, остаток очищают нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% метанолом в дихлорметане с получением 3-хлорбензил((2S)-3-циклогексил-1-оксо-1-(((2S)-1-оксо-3(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (С200). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=548,1 (М+Н)⁺.

-Хлорбензил-((2S)-3 -циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1 -(2-оксо-8-окса1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-оксо-1-(((2S)-1-оксо-3-(2-оксо-8окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (С200) (300 мг, 0,547 ммоль) и изоцианоциклопропана (3) (73,3 мг, 1,09 ммоль) растворяли в ДХМ (10 мл), затем добавляли пиридин (0,17 мл) при 0°С и перемешивали в течение 10 мин. К данному раствору добавляли ТФУ (124 мг, 1,09 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (10 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x15 мл). Органический слой промывали 1N HCl (3x5 мл), солевым раствором (3x5 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного 3хлорбензил-((2S)-3-циkлогексил-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4 -оксо-1-(2-оксо-8-окса-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=633,34 (M+H)⁺.

-Хлорбензил-((2S)-3 -циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -(2-оксо-8-окса-1 азаспиро[4.5]декан-3-ил))бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (С176)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3гидрокси-4-оксо-1-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (4) (340 мг, 0,537 ммоль) добавляли периодинан Десса-Мартина (569 мг, 1,34 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали EtOAc (10 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% метанолом в дихлорметане с получением 3-хлорбензил((2S)-3-циклогексил-1-((4(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1оксопропан-2-ил)карбамата (С176). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане ЦТ: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=631,2 (М+Н)⁺.

- 278 049429

Пример 138: Синтез соединений С177 и С189.

^аплент <«ою№55

ст

сот

Метил-2-((2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты-55) (1 г, 2,44 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (0,69 г, 3,66 ммоль), HOBt (0,49 г, 3,66 ммоль), DIPEA (1,2 мл, 7,32 ммоль) и гидрохлорид метил-2-амино-3-(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-25) (1 г, 3,39 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 80% этилацетатом и петролейным эфиром, с получением метил-2-((28)-2-((((2-(3хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(8-(метилсульфонил)-2оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (1). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 723,69 [М+Н]+.

2-(3-Хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((1-гидрокси-3-(8-(метилсульфонил)-2-оксо1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору метил-2-((2S)-2-((((2-(3хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(8-(метилсульфонил)-2оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (1) (1,6 г, 2,21 ммоль) в ДХМ (15 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (2,2 мл, 4,43 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь гасили водн. раствором NH₄Cl (50 мл) и экстрагировали EtOAc (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (2x20 мл), сушили над Na2SO4 и концентрировали с получением соединения 2-(3хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((1-гидрокси-3-(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (2). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=695,40 (M+H)⁺.

2-(3-Хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((1-(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8диазаспиро[4,5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (С189)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((1-гидрокси-3(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (2) (150 мг, 0,22 ммоль) в ДХМ (4 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (235 мг, 0,55 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с

- 279 049429 получением неочищенного продукта, данный неочищенный продукт очищали нормально-фазовой очисткой с получением 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((1-(8-(метилсульфонил)-2-оксо1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С189). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 693,2 (М+Н)+.

2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3 -циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-3 -гидрокси-1-(8(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-оксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору полученного 2-(3-хлорбензuл)циклопентuл((2S)-3-циклогексил-1-((1(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (С189) (380 мг, 0,54 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли изоцианоциклопропан (3) (74 мг, 1,09 ммоль), пиридин (0,7 мл, 2,1 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут при 0°C, и добавляли ТФУ (0,12 мл, 1,09 ммоль) и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь подкисляли 1N раствором HCl (5 мл) и экстрагировали ДХМ (2x10 мл). Органический слой промывали солевым раствором (5 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Из неочищенного соединения получали 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-1-(8(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-оксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамат (4). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 778,81 (М+Н)⁺.

2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-1-(8(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамат (С177)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензuл)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((4(циклопропиламино)-3-гидрокси-1-(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-4оксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (4) (330 мг, 1,06 ммоль) в ДХМ (6 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (449 мг, 0,62 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (10 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, данный неочищенный продукт очищали нормально-фазовой очисткой с получением 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-1-(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (С177). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 776,2 (М+Н)⁺.

Пример 139: Синтез соединения С179

Метил-2-((S)-3-циклогексил-2-(4-метокси-1H-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3-(2-оксо-8окса-1 -азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноат (2)

К перемешиваемому раствору (S)-3-циклогексил-2-(4-метокси-1H-индол-2карбоксамидо)пропановой кислоты (1) (1,0 г, 2,9 ммоль) в ДМФА при 0°С одновременно добавляли EDC.HCl (0,83 г, 4,35 ммоль), НОВТ (0,587 г, 4,35 ммоль), DIPEA (1,6 мл, 3 об.) и гидрохлорид метил-2амино-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5] декан-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-22) (1,0 г, 3,4 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в

- 280 049429 петролейном эфире, с получением метил-2-((S)-3-циклогексил-2-(4-метокси-1Н-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (2). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,7 ЖХМС (ИЭР): m/z 583,64 (М+Н)+.

N-((2S)-3-циклогексил-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамид (3)

К перемешиваемому раствору метил-2-((S)-3-циклогексил-2-(4-метокси-1H-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4,5]декан-3-ил)пропаноата (2) (1,5 г, 2,57 ммоль) в ДХМ (50 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (2,5 мл, 5,14 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комн. темп. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенный органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением N-((2S)-3-циклогексил-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-4-метокси-Ш-индол-2-карбоксамида (3). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=555,46 (М+Н)⁺.

N-((2S))-3-циклогексил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2ил)амино)пропан-2-ил)-4-метокси-1 Н-индол-2-карбоксамид (С179)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-3-циклогексил-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-8-окса-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамида (3) (150 мг, 0,27 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (229,60 мг, 0,54 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением N-((2S)-3-циклогексил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-8-окса-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)-4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамида (С179). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 553,2 (М+Н)⁺.

Пример 140: Синтез соединений С201 и С181.

- 281 049429 (4-Хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метанол (3)

К перемешиваемому раствору (4-хлорфенил)магнийбромида (2) (35 мл, 35,55 ммоль) ТГФ (70 мл) добавляли 1-(3-хлорфенил)циклопропан-1-карбальдегид (1) (3,2 г, 17,77 ммоль) при -30°C и перемешивали при комн. темп. в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 7% этилацетатом в гексане с получением (4-хлорфенил)(1-(3хлорфенил)циклопропил)метанола (3). Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 275,18 [М-ОН]⁺.

Метил-(((4-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метил)карбонил)-Е-лейцинат (5)

К перемешиваемому раствору (4-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метанола (3) (4 г, 13,69 ммоль) в ACN (40 мл) добавляли Ν,Ν'-дисукцинамидилкарбонат (8,7 г, 33,98 ммоль), затем триэтиламин (6,6 мл, 47,94 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную массу использовали непосредственно в последующей реакции.

В другую колбу помещали гидрохлорид метил-Ь-лейцината (2) (6,1 г, 34,24 ммоль) в ACN (50 мл) и обрабатывали триэтиламином (6,6 мл, 47,94 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин, затем добавляли по каплям приготовленную выше реакционную массу, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (150 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного метил-((4-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)-Ьлейцината (5), который использовали непосредственно на следующей стадии. Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 486,13 [M+Na]⁺.

(((4-Хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)-Е-лейцин (6)

К перемешиваемому раствору метил-(((4-хлорфенил)(1-(3хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)-Ь-лейцината (5) (5,6 г, 12,09 ммоль) в ТГФ (40 мл) добавляли воду (10 мл) добавляли гидроксид лития (870 мг, 36,28 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x40 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением ((4-хлорфенил)(1-(3хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)-Ь-лейцина (6). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 472,19 [М+Н]⁺.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-((((4-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (7)

К перемешиваемому раствору (((4-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)-Ьлейцина (6) (4,5 г, 10,02 ммоль) в ДМФА (30 мл) одновременно добавляли HATU (9,5 г, 25,05 ммоль), DIPEA (4,7 мл, 30,05 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (2,23 г, 12,02 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 7% метанолом в дихлорметане с получением метил-(2S)-2((2S)-2-((((4-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (7). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 618,25 [М+Н]⁺.

(4-Хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (8)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-((((4-хлорфенил)(1-(3хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (7) (1,0 г, 1,62 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,2 мл, 2,43 ммоль) при 0°C и перемешивали в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH₄Cl и экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (4хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (8). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 590,34 [М+Н]⁺.

(4-Хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С181)

- 282 049429

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (8) (100 мг, 0,197 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (167 мг, 0,394 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл) и солевым раствором (1x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали нормальнофазовой хроматографией CombiFlash, элюируя 3% метанолом в дихлорметане, с получением 2-(3хлорбензил)циклопентил((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С181). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 588,1 [М+Н]+.

(4-Хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метил((2S)-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3гидрокси-4-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (10)

К перемешиваемому раствору (4-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метил((S)-4-метил-1оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С181) (450 мг, 0,731 ммоль) в ДХМ (10 мл) и добавляли пиридин (0,25 мл, 3 об), изоцианоциклопропан (9) (97 мг, 1,462 ммоль), затем ТФУ (0,11 мл, 1,462 ммоль) при 0°C и перемешивание при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и промывали 1N раствором HCl (2x15 мл), а затем солевым раствором (20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного (4-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метил((2S)-1-(((2S)-4(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-(((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1оксопентан-2-ил)карбамата (10). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 673,58 (М+Н)⁺.

(4-Хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метил((S)-1-(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С201)

К перемешиваемому раствору (4-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метил((2S)-1-(((2S)-4(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1оксопентан-2-ил)карбамата (10) (200 мг, 0,297 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (378 мг, 0,892 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (25 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением (4-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метил((S)-1-(((S)-4(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С201). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 671,1 [М+Н]⁺.

Пример 141: Синтез соединения С195

С195

2-(3-Хлорбензил)циклопентил((2S)-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С175) (190 мг, 0,283 ммоль) в ДХМ (10 мл) последовательно добавляли пиридин (0,1 мл, 0,851 ммоль), изоцианоциклопропан (1) (0,03 мл, 0,425 ммоль) при 0°C, затем ТФУ (0,06 мл, 0,867 ммоль) при 0°C и перемешивали

- 283 049429 при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и промывали 1N HCl (2x15 мл), солевым раствором (20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (2). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 754,33 [М+Н]+.

1,2-Бис(3 -хлорфенил)этил((2S)-3 -циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -(2-оксо-1 азаспиро[4.5]декан)-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С195)

К перемешиваемому раствору 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1-((4(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1оксопропан-2-ил)карбамата (2) (175 мг, 0,231 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли периодинан ДессаМартина (196 мг, 0,4635 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (25 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1-((4(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (соединение С195). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 752,3 (М+Н)⁺.

Пример 142: Синтез соединений С185 и С184.

С185

Пн к-2

- 284 049429

(R)-2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (7)

К перемешиваемому раствору метил-(S)-2-((S)-2-(((((R)-2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (1) 2М LiBH4 в ТГФ (1,19 мл, 2,30 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь гасили водн. раствором NH₄Cl (50 мл) и экстрагировали EtOAc (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (2x20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением (R)-2-(3-хлорфенил)-1-(3фторфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил- 1-(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (2). Система ТСХ: Этилацетат Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 616 [М+Н]+.

(R)-2-(3-Хлорфенил)-1 -(3-фторфенил)-2-метилпропил((S)-3-циkлогексил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3 ((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (3)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентил(R)-2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)1-оксопропан-2-ил)карбамата(2) (630 мг, 1,01 ммоль) в этилацетате (6,5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (1,31 г, 3,0 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением (R)-2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((S)3 -циклогексил-1 -оксо- 1-(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропaн-2-ил)aмино)пропaн-2ил)карбамата (3). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 614,30 [М+Н]⁺.

(R)-2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-4(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан2-ил)карбамат (5)

К перемешиваемому раствору (R)-2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((S)-3циклогексил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2ил)карбамата (3) (510 мг, 0,831 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли изоцианоциклопропан (4) (111 мг, 1,66 ммоль), пиридин (0,262 мл, 3,3 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут при 0°С и добавляли ТФУ (0,12 мл, 1,66 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь подкисляли 1N раствором HCl (5 мл) и экстрагировали ДХМ (2x10 мл). Органический слой промывали солевым раствором (5 мл и сушили над Na2SO4 и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение с получением (R)-2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((2S)-3-циклогексил-1(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1оксопропан-2-ил)карбамата (5). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 699,3 [М+Н]⁺.

(R)-2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-4(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамат (соединение С185)

К перемешиваемому раствору (R)-2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((2S)-3циклогексил-1 -(((2S)-4-(циклопропиламино)-3 -гидрокси-4-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (5) (500 мг, 0,71 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (750 мг, 1,70 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (15 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным

- 285 049429

Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, который очищали с помощью нормально-фазовой очистки с получением (R)-2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2метилпропил((S)-3-циклогексил-1 -(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С185). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 697,2 [М+Н]+.

(S)-2-(3-Хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((S)-2-((((S)-2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (1) (0,700 г, 1,08 ммоль) в ДХМ (7 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1 мл, 2,177 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь гасили водн. раствором NH₄Cl (50 мл) и экстрагировали EtOAc (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (2x20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением (S)-2-(3-хлорфенил)-1 -(3 -фторфенил)-2-метилпропил((S)-3 -циклогексил-1 -(((S)-1 -гидрокси-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (2). Система ТСХ: Этилацетат Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 616,61 [М+Н]⁺.

(S)-2-(3-Хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (3)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентил(S)-2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2метилпропил((S)-3-циклогексил- 1-(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-1 оксопропан-2-ил)карбамата(2) (620 мг, 1,01 ммоль) в этилацетате (6,5 мл) добавляли периодинан ДессаМартина (1,282 г, 3,0 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением (S)-2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((S)-3циклогексил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2ил)карбамата (3). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 614,30 [М+Н]⁺.

(S)-2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-4(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан2-ил)карбамат (10)

К перемешиваемому раствору (S)-2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((S)-3циклогексил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2ил)карбамата (3) (600 мг, 0,978 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли изоцианоциклопропан (4) (131,1 мг, 1,957 ммоль), пиридин (0,3 мл, 3,915 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут при 0°С и добавляли ТФУ (0,15 мл, 1,95 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь подкисляли 1N раствором HCl (5 мл) и экстрагировали ДХМ (2x10 мл). Органический слой промывали солевым раствором (5 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение с получением (S)-2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((2S)-3-циклогексил-1(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1оксопропан-2-ил)карбамата (5). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 699,2 [М+Н]⁺.

(S)-2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-4(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2ил)карбамат (соединение С184)

К перемешиваемому раствору (S)-2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((2S)-3циклогексил-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (5) (400 мг, 0,71 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (727 мг, 1,716 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (15 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, который очищали с помощью нормально-фазовой очистки с получением (S)-2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((S)-3-циклогексил-1 -(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С184). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 697,2 [М+Н]⁺.

- 286 049429

Пример 143: Синтез соединений С187 и С203.

(1-(3 -хлорфенил)циклопропил)метанол (2)

К перемешиваемому раствору 1-(3-хлорфенил)циклопропан-1-карбоновой кислоты (1) (10 г, 51,02 ммоль) в ТГФ (200 мл) добавляли по каплям LiAlH₄ при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH₄Cl и экстрагировали этилацетатом (2x100 мл). Органический слой объединяли и промывали водой (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 15% этилацетатом в петролейном эфире с получением соединения (1-(3-хлорфенил)циклопропил)метанола (2). Система ТСХ: 30% этилацетата в гексане Rf: 0,6.

-(3-хлорфенил)циклопропан-1 -карбальдегид (3)

К перемешиваемому раствору (1-(3-хлорфенил)циклопропил)метанола (2) (8 г, 4,39 ммоль) в этилацетате (80 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (2,79 г, 6,59 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (100 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x50 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x50 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением 1-(3хлорфенил)циклопропан-1-карбальдегида (3). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,7 ЖХМС (ИЭР): m /z 181,1 [М+Н]^-.

(3-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метанол (5)

К перемешиваемому раствору 1-(3-хлорфенил)циклопропан-1-карбальдегида (3) (6,5 г, 36,11 ммоль) в ТГФ (200 мл) добавляли по каплям (3-хлорфенил)магнийбромид (4) при -30°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл).

- 287 049429

Органический слой объединяли и промывали водой (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 08% этилацетатом в петролейном эфире с получением (3-хлорфенил)(1-(3хлорфенил)циклопропил)метанола (5) Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,7 ЖХМС (ИЭР): m/z 315,13 [M+Na+H]+.

Метил-(((3-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)Ж-лейцинат (7)

К перемешиваемому раствору (3-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метанола (5) (5,0 г, 17,06 ммоль) в ацетонитриле (50 мл) добавляли TEA (8,30 мл, 59,7 ммоль), DSC (10,9 г, 42,01 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Затем добавляли метил-(S)-2-амино-3-циклогексилпропаноат (6) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (50 мл) и экстрагировали водой (50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-(((3 -хлорфенил)(1 -(3 -хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)-Ь-лейцината (7). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=464,16 [М+Н]⁺.

(((3-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)-Ь-лейцин (8)

К перемешиваемому раствору метилметил(((3-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)-Ь-лейцината (7) (4,9 г, 10,50 ммоль) в ТГФ (30 мл), воде (20 мл) добавляли гидроксид лития (1,33 г, 31,66 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением ((3-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)-Ь-лейцина (8). Система ТСХ: 30% этилацетата в гексане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 450,1 [М+Н]⁺.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-((((3-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (9)

К перемешиваемому раствору (((3-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)-Lлейцина (8) (1,2 г, 2,60 ммоль) в ДМФА (12 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (765 мг, 4,01 ммоль), HOBt (541 мг, 4,01 ммоль), DIPEA (1,42 мл, 8,01 ммоль) и метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (1,08 г, 5,847 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 50% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил(2S)-2-((2S)-2-((((3-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил))циклопропил)метокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (9) (1,2 г, 1,96 ммоль, выход 75%). Система ТСХ: Этилацетат Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 618,5 [М+Н]⁺.

(3-Хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (10)

К перемешиваемому раствору метил(2S)-2-((2S)-2-((((3-хлорфенил)(1-(3хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (9) (0,750 г, 1,20 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,55 мл, 2,45 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь гасили водн. раствором NH₄Cl (50 мл) и экстрагировали EtOAc (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (2x20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением (3-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метил ((S)-1-(((S)-1гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (10). Система ТСХ: Этилацетат Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 590,5 (М+Н)⁺.

(3 -хлорфенил)(1 -(3 -хлорфенил)циклопропил)метил((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -okco-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С203)

К перемешиваемому раствору ((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (10) (320 мг, 0,54 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (689 мг, 1,62 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% дихлорметаном в метаноле с получением (3хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С203). Система ТСХ: Этилацетат Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 588,0 (М+Н)⁺.

- 288 049429 (3-Хлорфенил)( 1 -(3 -хлорфенил)циклоnропил)метил((2S)-1 -(((2S)-4-(циkлоnропuламино)-3 -гидрокси-4оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамат (12)

К перемешиваемому раствору ((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С203) (290 мг, 0,49 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли изоцианоциклопропан (11) (66 мг, 0,98 ммоль), пиридин (0,15 мл, 1,97 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут при 0°C, добавляли ТФУ (0,075 мл, 0,91 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь подкисляли 1N раствором HCl (5 мл) и экстрагировали ДХМ (2x10 мл). Органический слой промывали солевым раствором (5 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение с получением (3-хлорфенил)(1-(3хлорфенил)циkлопропил)метил((2S)-1 -(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1 -((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (12). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 673,2 [М+Н]+.

(3-хлорфенил)( 1 -(3-хлорфенил)циkлопропил)метил((S)-1 -(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 ((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С187)

К перемешиваемому раствору ((2S)-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (12) (290 мг, 0,43 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (457 мг, 1,02 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (15 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, который очищали нормально-фазовой очисткой с получением (3-хлорфенил)(1-(3хлорфенил)циkлопропил)метил((S)-1-(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С187). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 671,1 (М+Н)⁺.

Пример 144: Синтез соединений С188 и С212. о о о о

Првмеж. ®ед.-5

Г : ^{4 2} OBU. ACN, mwrem. 1бч. L ’ ₁ Piv- Λ J ^БОС

ΡΥ ^ν ₃ м цени. ДХМ

NiC-L NaSH₄ MsOH.

-10 “С-йжн.даж.Дч

4N даетаи рЭеб.;

ЫН; HCl фрагмент аивм-ЗО ёос.нст noa/tra.

ЯЙЛвХчямнлемл

ДИ, «там, 1Й

- 289 049429

2,2-Диметил-1 -(4-нитропиперидин-1 -ил)пропан- 1-он (2)

К перемешиваемому раствору гидрохлорида 4-нитропиперидина (1) (2,9 г, 22,307 ммоль) в ДХМ (30 мл) одновременно добавляли пивалиновый ангидрид (6,5 мл, 33,461 ммоль) и Et₃N (9,4 мл, 66,921 ммоль) при -20°C и перемешивали в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (40 мл), экстрагировали ДХМ (2x30 мл), органические слои промывали водой (2x20 мл), солевым раствором (20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением 2,2-диметил-1-(4-нитропиперидин-1-ил)пропан-1-она (2) (2,5 г, 11,68 ммоль, выход 52%) в виде бесцветной жидкости. Система ТСХ: 30% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 215,18 [М+Н]+.

Диметил-(2S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-((4-нитро-1-пивалоилпиперидин-4ил)метил)пентандиоат (3)

К перемешиваемому раствору диметил-(S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4метиленпентандиоата (промежуточное соединение-5) (3,84 г, 13,395 ммоль) в ACN (30 мл) добавляли 2,2-диметил-1-(4-нитропиперидин-1-ил)пропан-1-он (2) (2,4 г, 11,162 ммоль) и DBU (2,19 мл, 14,42 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением диметил-(2S)-2-((третбутоксикарбонил)амино)-4-((4-нитро-1-пивалоилпиперидин-4-ил)метил)пентандиоата (3). Система ТСХ: 30% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 502,47 (М+Н)⁺.

Метил-(2S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-(2-оксо-8-пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3ил)пропаноат (4)

К перемешиваемому раствору диметил-(2S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-((4-нитро-1пивалоилпиперидин-4-ил)метил)пентандиоата (3) (4,9 г, 9,760 ммоль) в метаноле (10 мл) добавляли хлорид никеля (1,38 г, 10,737 ммоль), затем борогидрид натрия (1,85 г, 48,80 ммоль) при -10°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (50 мл) и экстрагировали 10% МеОН в ДХМ (3x25 мл), объединенные органические слои промывали водой (2x20 мл), солевым раствором (25 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением метил-(2S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3(2-оксо-8-пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (4). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 440,45 (М+Н)⁺.

Гидрохлорид метил-(2S)-2-амино-3-(2-оксо-8-пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-30)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-(2-оксо-8-пивалоил1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (4) (3,2 г, 7,954 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли 1,4диоксан-HCl (20 мл) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток растирали с н-пентаном с получением гидрохлорида метил(2S)-2-амино-3-(2-оксо-8-пивалоил1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (фрагмент амина 30). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 340,35 (М+Н)⁺.

Метил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-8пивалоил-1,8 -диазаспиро [4.5] декан-3 -ил)пропаноат (5)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты-2) (1,0 г, 2,941 ммоль) в ДМФА (10 мл) последовательно добавляли EDC.HCl (1,0 г, 4,411 ммоль), HOBt (0,842 г, 4,411 ммоль), DIPEA (1,52 мл, 8,823 ммоль) и гидрохлорид метил(2S)-2-амино-3-(2-оксо-8-пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3ил)пропаноата (фрагмент амина-30) (1,55 г, 4,218 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x60 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, элюируя 5% метанолом в дихлорметане, с получением метил(2S)-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-8-пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (5). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=661,61 [M+H]⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-3-циkлогексил-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-8-пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (6)

К перемешиваемому раствору метил(2S)-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-8-пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (5) (1,0 г, 1,371 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,3 мл, 2,743 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь гасили водн. раствором NH₄Cl (50 мл) и экстрагировали EtOAc (2x20 мл). Органиче

- 290 049429 ский слой промывали солевым раствором (2x20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением соединения 3 -хлорбензил((2S)-3 -циклогексил-1-((1 -гидрокси-3 -(2-(метилсульфонил)-8-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (6). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 633,4 (М+Н)+.

-Хлорбензил-((2S)-3 -циклогексил-1 -оксо-1 -((1 -оксо-3-(2-оксо-8-пивалоил-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (соединение С212)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-3-циkлогексил-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-8пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (6) (200 мг, 0,31 ммоль) в EtOAc (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (534 мг, 1,26 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Данный неочищенный продукт очищают нормально-фазовой очисткой с получением 3-хлорбензил((2S)-3-циклогексил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-8-пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С212). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 631,3 (М+Н)⁺.

-Хлорбензил((2S)-3-циkлогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1 -(2-оксо-8пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (8)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-8пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С212) (300 мг, 0,47 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли изоцианоциклопропан (7) (48 мг, 0,71 моль), пиридин (0,15 мл, 1,716 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут при 0°C и добавляли ТФУ (0,1 мл, 0,858 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь подкисляли 1N раствором HCl (5 мл) и экстрагировали ДХМ (2x10 мл). Органический слой промывали солевым раствором (5 мл и сушили над Na2SO4 и концентрировали с получением неочищенного вещества. Из неочищенного соединения получали 3 -хлорбензил((2S)-3-циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-3 -гидрокси-4-оксо-1 -(2-оксо-8-пивалоил1,8-диазаспиро[8.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (4). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 716,6 [М+Н]⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-3-циkлогексил-1-((4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-(2-оксо-8-пивалоил-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С188)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циkлопропиламино)-3гидрокси-4-оксо-1-(2-оксо-8-пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (8) (260 мг, 0,36 ммоль) в EtOAc (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (462 мг, 1,019 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (10 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукт. Данный неочищенный продукт очищали нормально-фазовой очисткой с получением 3-хлорбензил((2S)-3-циkлогексил-1-((4-(циkлопропиламино)-3,4диоксо-1-(2-оксо-8-пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (соединение С188). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 714,2 (М+Н)⁺.

- 291 049429

Пример 145: Синтез соединений С193 и С190.

С190

Метил-2-((S)-3 -циклогексил-2-(4-метокси-1 Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3-(2-оксо-1 азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору (S)-3-циклогексил-2-(4-метокси-1Н-индол-2карбоксамидо)пропановой кислоты (фрагмент кислоты-49) (1 г, 2,90 ммоль) в ДМФА (10 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (833 мг, 4,36 ммоль), HOBt (590 мг, 4,36 ммоль), DIPEA (1,6 мл, 8,7 ммоль) и гидрохлорид метил-2-амино-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-19) (843 мг, 2,90 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (80 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой промывали солевым раствором (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением метил-2-((S)-3-циклогексил-2-(4-метокси-1H-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (1). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 580,3 [М+Н].

N-((2S)-3-циклогексил-1-((1 -гидрокси-3 -(2-оксо-1 -азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1 оксопропан-2-ил)-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (2)

К перемешиваемому раствору метил-2-((S)-3-циклогексил-2-(4-метокси-1Н-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (1) (900 мг, 1,55 ммоль) в ДХМ (9 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,5 мл, 3,10 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (30 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением N-((2S)-3циклогексил-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)-4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамида (2). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 553,58 [М+Н]⁺.

N-((2S)-3-циклогексил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино) пропан-2-ил)-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (соединение С193)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-3-циkлогексил-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамида (2) (150 мг, 2,715 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (230 мг, 5,43 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x30 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x30 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали нормально-фазовой хроматогра

- 292 049429 фией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением N-((2S)-3циклогексил-1 -оксо-1 -((1 -оксо-3 -(2-оксо-1 -азаспиро [4.5]декан-3 -ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)-4метокси-1Н-индол-2-карбоксамида (соединение С193). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 551,2 (М+Н)+.

N-((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропuламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамид (4)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-3-циклогексил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)-4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамида (соединение С193) (370 мг, 0,672 ммоль) в ДХМ (10 мл) последовательно добавляли пиридин (0,1 мл, 2,01 ммоль), изоцианоциклопропан (3) (0,07 мл, 1,008 ммоль) при 0°C, затем ТФУ (0,15 мл, 1,34 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и промывали 1N HCl (2x15 мл), солевым раствором (20 мл). Органический слой сушили над Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного N-((2S)-3-циkлогексил-1-((4-(циkлопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-(2-оксо1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамида (4). Система тСх: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 635,3 [М+Н]⁺.

N-((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропuламино)-3,4-диоксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамид (соединение С190)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропuламино)-3-гидрокси-4-оксо1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-4-метокси-1H-индол-2карбоксамида (4) (200 мг, 0,314 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (267 мг, 0,629 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (25 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением N-((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (соединение С190). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 634,2 (М+Н)⁺.

Пример 146: Синтез соединения С191

N-((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропuламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-(2-оксо-8-окса-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамид (2)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-3-циклогексил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-8-окса-1азаспиро[4.5]декан-3-ил))пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)-4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамида (500 мг, 0,904 ммоль) в ДХМ (60 мл) последовательно добавляли пиридин (1,5 мл, 3 об.), изоцианоциклопропан (1) (121 мг, 1,80 ммоль) при 0°C и перемешивали в течение 10 мин. К этому добавляли ТФУ (0,2 мл, 2,5 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (30 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x30 мл). Органический слой промывали 1N HCl (3x30 мл), солевым раствором (3x20 мл). Органический слой сушили над Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного N-((2S)-3-циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1 -(2-оксо-8-окса-1 азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамида (2). Система ТСХ: 10% метанол/ дихлорметан Rf: 0,7 ЖХМС (ИЭР): m/z 638,36 [М+Н]⁺.

N-((2S)-3-Циkлогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-(2-оксо-8-окса-1 азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамид (со

- 293 049429 единение С191)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-3-циклогексuл-1-((4-(циклопропuламино)-3-гидрокси-4-оксо1-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5] декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-4-метокси-Ш-индол2-карбоксамида (2) (400 мг, 0,62 ммоль) в ДХМ (50 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (798 мг, 1,59 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (25 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением N-((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-(2-оксо-8-окса-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамида (соединение С191). Система ТСХ: 10% метанол/ дихлорметан Rf: 0,8 ЖХМС (ИЭР): m/z 636,3 (М+Н)+.

Пример 147: Синтез соединений С192 и С223.

Метил-2-((2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4,5]декан-3-ил)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты-52) (1,3 г, 3,2 ммоль) в ДМФА (5 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC-HCl (915 мг, 4,7 ммоль), НОВТ (646 мг, 4,7 ммоль), DIPEA (1,7 мл, 3 об.) и гидрохлорид метил-2-амино-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-19) (926 мг, 3,2 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 5% метанолом в ДХМ, с получением метил-2-((2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентuл)окси)карбонuл)амино)3. -циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (1). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=644,8 (M+H)⁺.

2-(3-Хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору метил-2-((2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (1) (1 г, 1,55 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,55 мл, 3,10 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и

- 294 049429 концентрировали с получением 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циkлогексил-1-((1- гидрокси-3-(2оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (2). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=616,5 (M+H)+.

2-(3 -Хлорбензил)циклопентил((2S)-3 -циклогексил-1 -оксо-1 -((1 -оксо-3 -(2-оксо-1 азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (соединение С223)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циkлопентил((2S)-3-циклогексил-1-((1-гидрокси-3(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (2) (850 мг, 1,37 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (1,17 г, 4,13 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3циклогексил-1 -оксо-1-((1 -оксо-3 -(2-оксо-1 -азаспиро [4.5]декан-3 -ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2ил)карбамата (соединение С223) Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 614,2 (М+Н)⁺.

2-(3 -Хлорбензил)циклопентил((2S)-3 -циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-3 -гидрокси-4-оксо-1 (2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогеkсил-1-оkсо-1-((1-оkсо3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С223) (600 мг, 1,25 ммоль) в ДХМ (60 мл) последовательно добавляли пиридин (1,8 мл, 3 об.), изоцианоциклопропан (3) (126,41 мг, 1,88 ммоль) при 0°C и перемешивании в течение 10 мин. К этому добавляли ТФУ (0,2 мл, 2,5 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (30 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x30 мл). Органический слой промывали 1N HCl (3x 30 мл), солевым раствором (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного 2-(3 -хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-3 гидрокси-4-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 5% метанол/ дихлорметан; Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=700,50 (M+H)⁺.

2-(3 -Хлорбензил)циклопентил((2S)-3 -циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -(2-оксо1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С192)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((4(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро)[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1оксопропан-2-ил)карбамата (4) (450 мг, 0,79 ммоль) в EtOAc (50 мл) добавляли периодинан ДессаМартина (677 мг, 1,59 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (25 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорбензил)циклопентил-((2S)-3-циклогексил-1-((4(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (соединение С192). Система ТСХ: 10% метанол/ дихлорметан Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 697,2 (М+Н)⁺.

Пример 148: Синтез соединений С194 и С215.

„ С194

I) фениптамоистжаякт^

CsF , ЖМУί 1 я й) К₂СО5, МеОН, кбмн.темяЭч

Стадия®}

C21S

- 295 049429

-Бензилциклобутил-((S)-1 -(((S)-4-хлор-3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С194)

К перемешиваемому раствору ((1-бензилциклобутокси)карбонил)-L-лейцина (фрагмент кислоты25) (300 мг, 0,940 ммоль) в ДМФА (4 мл) одновременно добавляли HATU (394 мг, 1,410 ммоль), NMM (0,2 мл, 1,880 ммоль) и гидрохлорид (S)-3-((S)-2-амино-4-хлор-3-оксобутил)пирролидин-2-она (аминфрагмент-23) (270 мг, 128 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 80% этилацетатом и петролейным эфиром с последующей очисткой препаративной ВЭЖХ, с получением 1бензилциклобутил((S)-1 -(((S)-4-хлор-3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С194). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 506,1 (М+Н)+.

-Бензилциклобутил-((S)-1 -(((S)-4-гидрокси-3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С215)

К перемешиваемому раствору 1-бензилциkлобутил-((S)-1-(((S)-4-хлор-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С194) (280 мг, 0,554 ммоль) в ДМФА (4 мл) добавляли фенилглиоксиловую кислоту (124 мг, 0,831 ммоль) и CsF (167 мг, 1,108 ммоль) и нагревали до 65°C в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (40 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), объединяли органический слой и промывали холодной водой (2x30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного продукта, данный неочищенный продукт растворяли в метаноле (5 мл), добавляли (7 мг) при 0°С и перемешивали в течение 1 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1-бензилциклобутил-((S)-1-(((S)-гидрокси-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С215). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=488,3 (M+H)+.

Пример 149: Синтез соединения С195

С1Э5

2-(3-Хлорбензил)циклопентил((2S)-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С175) (190 мг, 0,283 ммоль) в ДХМ (10 мл) последовательно добавляли пиридин (0,1 мл, 0,851 ммоль), изоцианоциклопропан (1) (0,03 мл, 0,425 ммоль) при 0°C, затем ТФУ (0,06 мл, 0,867 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и промывали 1N HCl (2x15 мл), солевым раствором (20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (2).

Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 754,33 (М+Н)+.

1,2-Бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан)-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С195)

К перемешиваемому раствору 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1-((4(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1оксопропан-2-ил)карбамата (2) (175 мг, 0,231 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли периодинан ДессаМартина (196 мг, 0,4635 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и

- 296 049429 промывали этилацетатом (25 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циклогексил-1-((4(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (соединение С195). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 752,3 (М+Н)+.

Пример 150: Синтез соединения С196

C1S6

2-(3-Хлорбензил)циклопентил((2S)-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентuл((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С152) (350 мг, 0,693 ммоль) в ДХМ (10 мл) последовательно добавляли пиридин (0,75 мл, 3 об.), изоцианоциклопропан (1) (55 мг, 0,831 ммоль) при 0°C, затем ТФУ (0,07 мл, 1,386 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и промывали 1N HCl (2x15 мл), солевым раствором (20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (2). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 591,2 [М+Н]⁺.

2-(3-Хлорбензил)циклопентил((S)-1-(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С196)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентuл((2S)-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3гидрокси-4-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (2) (200 мг, 0,338 ммоль) в EtOAc (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (431 мг, 1,016 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (25 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорбензил)циклопентил((S)-1-(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С196). Система тСх: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 589,1 (М+Н)⁺.

Пример 151: Синтез соединения С197

3-Хлорбензил-((2S)-1-(((2S)-4-хлор-3-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)- 297 049429

3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С197)

Раствор гидрохлорида (S)-3-((S)-2-амино-4-хлор-3-оксобутил)пирролидин-2-она (фрагмент амина28) (150 мг, 0,442 ммоль) и (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты-2) (164 мг, 0,53 ммоль) в ДМФА (20 мл) помещали в атмосферу N₂ и охлаждали до 0°C. Данный бледно-желтый раствор последовательно обрабатывали HATU (252 мг, 0,66 ммоль) и N-метилморфолином (0,12 мл, 0,88 ммоль). Через 1 час реакцию гасили смесью 1:1 лед/насыщ. NaHCO₃ (20 мл) и трижды экстрагировали этилацетатом (30 мл). Объединенные органические слои промывали один раз солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((2S)-1-(((2S)-4хлор-3-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2ил)карбамата (соединение С197). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 594,47 [М+Н]+.

Пример 152: Синтез соединения С198

Метил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(5,5диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (2)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты-2) (1 г, 2,94 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли EDC-HCl (844 мг, 4,42 ммоль), HOBt (596 мг, 4,42 ммоль), DIPEA (1,2 мл, 8,84 ммоль), а затем гидрохлорид метил-2-амино-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (885 мг, 3,53 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением этил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (2). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 536,51 [М+Н]⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-((1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3-гидроксипропан2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (3)

К перемешиваемому раствору метил 2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (2) (900 мг, 1,63 ммоль) в ДХМ (10 мл) при 0°С добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,6 мл, 3,27 ммоль), затем реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 3-хлорбензил((2S)-3-циклогексил-1((1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (3). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 508,55 [М+Н]⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-3-циkлогексил-1-((1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3-оксопропан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С198)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-3-циkлогексил-1-((1-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (3) (200 мг, 0,39 ммоль) в этилацетате (6 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (334 мг, 0,78 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (20 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x15 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x15

- 298 049429 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 4% метанолом в дихлорметане с получением 3-хлорбензил((28)-3-циклогексил-1-((1-(5,5диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С198). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 506,1 [М+Н]+.

Пример 153: Синтез соединений С199 и С208.

С199

С208

2-Бензилциклопентил((S)-1-(((S)-4-хлор-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С199)

Раствор гидрохлорида (S)-3-((S)-2-амино-4-хлор-3-оксобутил)пирролидин-2-она (фрагмент амина23) (540 мг, 2,252 ммоль) и (((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)-L-лейцина (фрагмент кислоты-23) (500 мг, 1,501 ммоль) в ДМФА (10 мл) помещали в атмосферу N2 и охлаждали до 0°C. Данный бледножелтый раствор последовательно обрабатывали HATU (856 мг, 2,252 ммоль) и N-метилморфолином (0,3 мл, 3,003 ммоль). Через 1 час реакцию гасили смесью 1:1 лед/нас. NaHCO₃ (50 мл) и трижды экстрагировали этилацетатом (50 мл). Объединенные органические слои промывали один раз солевым раствором (100 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением желтого сиропа. Данный материал очищали нормально-фазовой хроматографией с получением 2-бензилциклопентил-((8)-1-(((8)4-хлор-3 -оксо-1 -((8)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С199). Система ТСХ: 10% МеОН в ДХМ Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 520,1 [М+Н]⁺.

2-бензилциклопентил((S)-1-(((S)-4-гидрокси-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С208)

Раствор 2-бензилциклопентил((S)-1-(((S)-4-хлор-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (200 мг, 0,385 ммоль) и бензоилмуравьиной кислоты (87 мг, 0,577 ммоль) в ДМФА (4 мл) помещали в атмосферу N2. Данный прозрачный бледно-желтый раствор обрабатывали CsF (116 мг, 0,770 ммоль), затем нагревали до 65°C. Через 4 часа желтую суспензию охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом (60 мл), трижды промывали водой (30 мл), один раз солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного (3S)-3-((2S)-2-((((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-2-оксо-4-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутил-2-оксо-2-фенилацетата в виде неочищенной желтой пены. МС (ИЭР+) для C₃₅H₄₃N₃O₈ m/z 633,3 (М+Н)+. Данный неочищенный продукт переносили в метанол (20 мл), помещали в атмосферу N₂ и обрабатывали карбонатом калия (10 мг, 0,04 ммоль) при интенсивном перемешивании. Через 1 ч летучие вещества удаляли в вакууме (баня <30°C) с получением неочищенного продукта. Данный материал очищали нормально-фазовой хроматографией с получением 2-бензилциклопентил-((8)-1 -(((8)-4-гидрокси-3-оксо-1 -((8)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С208) Система ТСХ: 10% МеОН в ДХМ Rf: 0,55 ЖХМС (ИЭР): m/z 501,28 [М+Н]⁺.

- 299 049429

Пример 154: Синтез соединений С202 и С210.

кислоты-55

Метил-2-((2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентuл)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-8-пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((((2-(3-хлорбcπзил)циклопcπτил)окси)карбоπил)амиπо)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты-55) (1 г, 2,45 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли одновременно EDC-HCl (0,701 г, 3,671 ммоль), HOBt (0,49 г, 3,671 ммоль), DIPEA (1,2 мл, 7,35 ммоль) и гидрохлорид метил-2-амино-3-(2-оксо-8-пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-25) (1 г, 2,94 ммоль) при 0°С и перемешивали при комн. темп. в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 80% этилацетатом и петролейным эфиром, с получением метил-2-((2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонuл)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-8-пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (1). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 729,71 [М+Н]+.

2-(3-Хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-8-пивαлоил-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору метил-2-((28)-2-((((2-(3хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-8-пивалоил-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (1) (1,0 г, 1,371 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляли 2М LiBH4 в ТГФ (1,3 мл, 2,743 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь гасили водн. раствором NH₄Cl (50 мл) и экстрагировали EtOAc (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (2x20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением соединения 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3циклогексил-1-((1-гидрокси-3-(2-(метилсульфонил)-8-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (2). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=701,24 (M+H)⁺.

2-(3-Хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1 -оксо-1 -((1 -оксо-3-(2-оксо-8-пивалоил-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (соединение С202)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((1-гидрокси-3(2-оксо-8-пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (2) (700 мг, 1,0 ммоль) растворяли в EtOAc (20 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (1,27 г, 3,0 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Данный неочищенный продукт очищают нормально-фазовой

- 300 049429 очисткой с получением 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-8пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С202). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 699,3 (М+Н)+.

2-(3 -Хлорбензил)циклопентил((2S)-3 -циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1 (2-оксо-8-пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору полученного 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-8-пивалоил-1,8-диазаспиро[4,5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2ил)карбамата (соединение С202) (300 мг, 0,42 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли изоцианоциклопропан (3) (57 мг, 0,858 ммоль), пиридин (0,13 мл, 1,716 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут при 0°C, и добавляли ТФУ (0,1 мл, 0,858 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь подкисляли 1N раствором HCl (5 мл) и экстрагировали ДХМ (2x10 мл). Органический слой промывали солевым раствором (5 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Из неочищенного соединения получали 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((4(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-(2-оксо-8-пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (4). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 784,3 [М+Н]⁺.

2-(3-Хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-(2-оксо8-пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С210)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((4(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-(2-оксо-8-пивалоил-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (4) (200 мг, 0,255 ммоль) растворяли в EtOAc (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (324 мг, 0,765 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (10 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукт. Данный неочищенный продукт очищали нормально-фазовой очисткой с получением 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-(2-оксо-8-пивалоил-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С210). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 782,4 (М+н)⁺.

Пример 155: Синтез соединений С222 и С205.

Метил-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (2)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (1) (1,7 г, 3,57 ммоль) в ДМФА (10 мл) одновременно добавляли EDC.HCl (1 г, 5,36 ммоль), HOBt (0,7 г, 5,36 ммоль), DIPEA (1,8 мл, 10,73 ммоль) и метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-21) (0,98 г, 3,93 ммоль) при 0°С и перемешивании при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли водой (50 мл), экстрагировали эти

- 301 049429 лацетатом (2x50 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash соединение элюировали 30% этилацетатом в петролейном эфире, и после очистки СФХ получали метил-2((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (2). Система ТСХ: 70% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=672,60 [M+H]+.

2-(3 -хлорфенил)-1 -(3 -фторфенил)-2-метилпропил((2S)-3 -циклогексил-1 -((1 -(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3-гидроксипропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (3)

К перемешиваемому раствору метил-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (2) (1,1 г, 1,63 ммоль) в ТГФ (10 мл), LiBH₂ (1,6 мл, 3,27 ммоль) при 0°C и продолжали перемешивать в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x10 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 2-(3-хлорфенил)-1-(3фторфенил)-2-метилпропил((2S)-3-циклогексил-1-((1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3гидроксипропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (3). Система ТСХ: 70% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 644,49 [М+Н]⁺.

2-(3-Хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((2S)-3-циклогексил-1-((1-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3 -ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С222)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-3-циkлогексил-1-(((2S)-1-гидрокси-3-(8(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (3) (230 мг, 0,357 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (379 мг, 0,89 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 3 ч реакционную смесь разбавляли этилацетатом (15 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенный продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-1-(8(метилсульфонил)-2-оксо-1,8-диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (соединение С222). Система ТСХ:05% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 642,35 (М+Н)⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -(3 -фторфенил)-2-метилпропил((2S)-3 -циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-1 (5,5-диметил-2-оксопирролидин)-3-ил)-3-гидрокси-4-оксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (6)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((2S)-3циклогексил-1-((1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (соединение С222) (250 мг, 0,436 ммоль) и изоцианоциклопропана (4) (58 мг, 0,87 ммоль) в ДХМ (6 мл), затем добавляли пиридин (0,2 мл) при 0°С и перемешивали в течение 10 мин. К данному раствору добавляли ТФУ (99 мг, 0,87 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (10 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x15 мл). Органический слой промывали 1N HCl (3x5 мл), солевым раствором (3x5 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного 2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2метилпропил((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3гидрокси-4-оксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (5). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 727,47 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -(3 -фторфенил)-2-метилпропил((2S)-3 -циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-1 (5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С205)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((2S)-3циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3-гидрокси-4оксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (5) (250 мг, 0,343 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (364 мг, 0,858 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 3 ч реакционную смесь разбавляли этилацетатом (15 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл и сушили над Na2SO4 и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенный продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3хлорбензил-((2S)-3-циkлогексил-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-1-(8-(метилсульфонил)-2-оксо-1,8диазаспиро[4.5]декан-3-ил)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С205). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 725,01 [М+Н]⁺.

- 302 049429

Пример 156: Синтез соединений С225 и С206.

Метил-2-((2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентuл)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4,5]декан-3-ил)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((((2-(3-хлорбензил)циклопентuл)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты-55) (1,2 г, 2,91 ммоль) в ДМФА (10 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC-HCl (844 мг, 4,4 ммоль), НОВТ (597 мг, 4,4 ммоль), DIPEA (1,56 мл, 8,8 ммоль) и гидрохлорид метил(2S)-2-амино-3-(2-оксо-8-окса-1-αзаспиро[4.5]декан-3-uл)пропаноата (фрагмент амина-22) (1,03 г, 3,5 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (30 мл), экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем путем элюирования 70% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-2-((2S)-2-((((2-(3хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3 -циклогексилпропанамидо)-3 -(2-оксо-8-окса-1 азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (1). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=646,4 (M+H)+.

2-(3 -хлорбензuл)циkлопентuл((2S)-3 -циклогексил-1-((1-гидрокси-3 -(2-оксо-8-окса-1 азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору метил-2-((2S)-2-((((2-(3хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3 -циклогексилпропанамидо)-3 -(2-оксо-8-окса-1 азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (1) (800 мг, 1,20 ммоль) в ТГФ (8 мл) добавляли 2М LiBH4 в ТГФ (1,23 мл, 2,40 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь гасили водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 2-(3хлорбензил)циклопентuл((2S)-3-циклогексил-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (2). Система ТСХ: 5% МеОН в ДХМ Rf 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 618,6 (М+Н)⁺.

2-(3 -хлорбензил)циkлопентил((2S)-3 -циклогексил-1 -оксо-1 -((1 -оксо-3 -(2-оксо-8-окса-1 азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (соединение С225)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензuл-2-(3-хлорбензuл)циkлопентил((2S)-3-циkлогексил-1((1-гидрокси-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (2) (400 мг, 0,64 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (823 мг, 1,90 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорбензил)циклопентuл((2S)-3

- 303 049429 циклогексил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2ил)карбамата (соединение С225). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 616,3 (М+Н)+.

2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3 -циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-3 -гидрокси-4-оксо-1 (2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-оксо-1-((1-оксо3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С225) (380 мг, 0,64 ммоль) в ДХМ (20 мл) последовательно добавляли пиридин (0,24 мл, 2,5 ммоль) изоцианоциклопропан (3) (86 мг, 1,29 ммоль) при 0°C и перемешивании в течение 10 мин. К этому добавляли ТФУ (0,10 мл, 1,29 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x15 мл). Органический слой промывали 1N HCl (3x15 мл), солевым раствором (3x10 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((4(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)1-оксопропан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 5% метанол/ дихлорметан Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 701,3 [М+Н]⁺.

2-(3-Хлорбензил)циклопентил ((2S)-3-циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -(2-оксо8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С206)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1-((4(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-(2-оксо-8-окса)-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)1-оксопропан-2-ил)карбамат (4) (420 мг, 0,61 ммоль) в EtOAc (15 мл) добавляли периодинан ДессаМартина (763 мг, 1,81 ммоль) при 0°С и перемешивании при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (35 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x15 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x15 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорбензил)циклопентил-((2S)-3-циклогексил-1-((4(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С206). Система ТСХ: 10% метанол/дихлорметан Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 699,3 (М+Н)⁺.

Пример 157: Синтез соединения С207

(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (1) (1,3 г, 2,22 ммоль) в ТГФ (10 мл), воде (3 мл) и добавляли гидроксид лития (273 мг, 6,65 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 572,5 [М+Н]⁺.

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3ил)-4-(тетрагидро-И4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1

- 304 049429 фенилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2) (900 мг, 1,57 ммоль) в ДХМ (10 мл) одновременно добавляли HATU (1,19 г, 2,89 ммоль), DIPEA (0,3 мл, 3 об.) и 1-(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромид (3) (486 мг, 2,36 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (20 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 4% метанолом в дихлорметане с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропил((S)-1 -(((S)-4-циано-3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 681,7 [М+Н]+.

2-(3 -Хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С207)

К перемешиваемому раствору ((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамата (4) (200 мг, 0,44 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли м-ХПБК (189 мг, 1,09 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. К данному добавляли водн. раствор аммиака (2 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2(3 -хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С207). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 599,1 (М+Н)⁺.

Пример 158: Синтез соединений С250 и С208.

Метил-(2S)-2-((((3 -хлорфенил)(1 -(3 -хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)амино)-3 циклогексилпропаноат (3)

К перемешиваемому раствору (3-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метанола (1) (2,5 г, 8,51 ммоль) в ацетонитриле (25 мл) добавляли Et₃N (4,16 мл, 29,10 ммоль), DSC (5,47 г, 21,01 ммоль) при 0°C и перемешивании при комнатной температуре в течение 4 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ.

- 305 049429

Затем добавляли метил(S)-2-амино-3-циклогексилпропаноат (2) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении, разбавляли водой (25 мл) и экстрагировали этилацетатом (25 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-(2S)-2-((((3-хлорфенил)(1-(3хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата (2). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=504,5 [М+Н]+.

2S)-2-((((3-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циkлопропил)метокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановая кислота (4)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((((3-хлорфенил)(1-(3хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропаноата (3) (2,5 г, 4,90 ммоль) в ТГФ (15 мл), воде (10 мл), добавляли гидроксид лития (416 мг, 9,92 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении до (2S)-2-((((3-хлорфенил)(1-(3хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (4). Система ТСХ: 50% этилацетата в гексане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 490,2 [М+Н]⁺.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-((((3-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)амино)-3циkлогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (5)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((((3-хлорфенил)(1-(3хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановой кислоты (4) (1 г, 2,0 ммоль) в ДМФА (10 мл) одновременно добавляли EDC.HCl (585 мг, 3,01 ммоль), HOBt (414 мг, 3,01 ммоль), DIPEA (1,09 мл, 6,1 ммоль) и метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (542 мг, 2,10 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash соединение элюировали 60% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-(2S)-2-((2S)-2-((((3-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил))циклопропил)метокси)карбонил)амино)-3циkлогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (5). Система ТСХ: Этилацетат Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 618,5 [М+Н]⁺.

(3-Хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метил((S)-3-циkлогексил-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (6)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-((((3-хлорфенил)(1-(3хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропаноата (5) (900 мг, 1,30 ммоль) в ТГФ (9 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (1,3 мл, 2,70 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь гасили водн. раствором NH4Cl (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (2x20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением (3-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метил ((S)-3-циклогексил- 1-(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан2-ил)карбамата (6). Система ТСХ: Этилацетат Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 630,3 (М+Н)⁺.

(3 -Хлорфенил)(1 -(3 -хлорфенил)циклопропил)метил((S)-3 -циклогексил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -okco-3-((S)2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат) (соединение С250)

К перемешиваемому раствору (3-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метил((S)-3циклогексил-1 -(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2ил)карбамата (6) (200 мг, 0,31 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (403 мг, 0,95 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением (3-хлорфенил)(1-(3хлорфенил)циклопропил)метил((S)-3-циклогексил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата) (соединение С250). Система ТСХ: Этилацетат Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 628,2 (М+Н)⁺.

(3 -Хлорфенил)(1 -(3 -хлорфенил)циклопропил)метил((2S)-3 -циклогексил-1 -(((2S)-4(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан2-ил)карбамат (8)

К перемешиваемому раствору (3-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метил((S)-3циклогексил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2

- 306 049429 ил)карбамата) (соединение С250) (180 мг, 0,28 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли изоцианоциклопропан (7) (38 мг, 0,57 ммоль), пиридин (0,09 мл, 1,14 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут при 0°C и добавляли ТФУ (0,046 мл, 0,57 ммоль), и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь подкисляли 1N раствором HCl (5 мл) и экстрагировали ДХМ (2x10 мл). Органический слой промывали солевым раствором (5 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного соединения. Из неочищенного соединения получали (3-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метил((2S)-3циклогексил-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (8). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 713,6 [М+Н]+.

(3 -Хлорфенил)( 1 -(3 -хлорфенил)циклопропил)метил((S)-3-циклогексил-1 -(((S)-4(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2ил)карбамат (соединение С208)

К перемешиваемому раствору (3-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метил((2S)-3циклогексил-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (8) (200 мг, 0,28 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (297 мг, 0,70 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (15 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, который очищали нормально-фазовой очисткой с получением (3хлорфенил)( 1 -(3 -хлорфенил)циклопропил)метил(3 -хлорфенил)( 1 -(3 -хлорфенил)циклопропил)метил((S)3-циклогексил-1-(((S)-4-(циклопропилaмино)-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутaн-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С208). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 711,3 (М+Н)+.

Пример 159: Синтез соединения С209

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((S)-1-(((S)-4-хлор-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С209)

Раствор гидрохлорида 3-((S)-2-амино-4-хлор-3-оксобутил)пирролидин-2-она (фрагмент амина-23) (69,3 мг, 0,28 ммоль) и ((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)Ж-лейцина (фрагмент кислоты-38) (100 мг, 0,23 ммоль и в ДМФА (20 мл)) помещали в атмосферу N2 и охлаждали до 0°C. Данный бледно-желтый раствор последовательно обрабатывали HATU (136,62 мг, 0,35 ммоль) и Nметилморфолином (0,1 мл, 0,47 ммоль). Через 1 час реакцию гасили смесью 1:1 лед/нас. NaHCO₃ (20 мл) и трижды экстрагировали этилацетатом (30 мл). Объединенные органические слои промывали один раз солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропил((S)-1 -(((S)-4-хлор-3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2 -ил)амино)-4-метил-1 оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С209). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 604,2 [М+Н]+.

- 307 049429

Пример 160: Синтез соединения С214

Метил-2-((S)-2-(4-метокси-1H-индол-2-карбоксамидо)-4-метилпентанамидо)-3-(2-оксо-1азаспиро [4.5]декан-3 -ил)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору (4-метокси-1H-индол-2-карбонил)-D-лейцина (фрагмент кислоты-60) (1,5 г, 5 ммоль) в ДМФА (15 мл) при 0°С добавляли EDC-HCl (1,42 г, 7,4 ммоль), НОВТ (1 г, 7,4 ммоль) и DIPEA (2,1 мл, 12,3 ммоль), затем гидрохлорид метил-2-амино-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропаноата (фрагмент амина-19) (1,7 г, 5,9 ммоль), и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 5% метанолом в дихлорметане, с получением метил-2-((S)-2-(4-метокси-1 H-индол-2-карбоксамидо)-4-метилпентанамидо)-3-(2-оксо-1 азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (1). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 541,47 [М+Н]+.

N-((2S)-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1оксопентан-2-ил)-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (2)

К перемешиваемому раствору метил-2-((S)-2-(4-метокси-1H-индол-2-карбоксамидо)-4метилпентанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропаноата (2) (0,8 г, 1,48 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли 2М LiBH4 в ТГФ (1,5 мл, 2,96 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония (50 мл) и экстрагировали ДХМ (2*50 мл). Объединенные органические слои промывали водой (50 мл), солевым раствором (50 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением N-((2S)-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)-4-метокси-1H-индол-2карбоксамида (2). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ R_f: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 513,30 [М+Н]⁺.

4-Метокси-N-((2S)-4-метил-1 -оксо-1 -((1-оксо-3 -(2-оксо-1 -азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2ил)амино)пентан-2-ил)-1H-индол-2-карбоксамид (соединение С214)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-1-((1-гидрокси-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (2) (100 мг, 0,195 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (124 мг, 0,292 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную массу фильтровали через слой целита, и слой целита тщательно обрабатывали этилацетатом (30 мл). Затем органический слой промывали 10% раствором тиосульфата натрия (2x20 мл), затем насыщенным раствором гидрокарбоната натрия (2x20 мл), водой (1x20 мл), солевым раствором (1x20 мл). Затем органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали в вакууме с получением 4-метокси-N((2S)-4-метил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)1H-индол-2-карбоксамида (соединение С214). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 511,3 [М+Н]⁺.

- 308 049429

Пример 161: Синтез соединения С209 и С236.

2-(3-Хлорфенuл)-2-метил-1-фенuлпропuл((S)-1-(((S)-4-хлор-3-оксо-1-((S)-2-оксопuрролидин-3ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С209)

Раствор гидрохлорида 3-((S)-2-амино-4-хлор-3-оксобутил)пирролидин-2-она (фрагмент амина-23) (69,3 мг, 0,28 ммоль) и ((2-(3-хлорфенuл)-2-метил-1-фенuлпропокси)карбонил)-L-лейцина (фрагмент кислоты-38) (100 мг, 0,23 ммоль и в ДМФА (20 мл)) помещали в атмосферу N2 и охлаждали до 0°C. Данный бледно-желтый раствор последовательно обрабатывали HATU (136,62 мг, 0,35 ммоль) и Nметилморфолином (0,1 мл, 0,47 ммоль). Через 1 час реакцию гасили смесью 1:1 лед/нас. NaHCO₃ (20 мл) и трижды экстрагировали этилацетатом (30 мл). Объединенные органические слои промывали один раз солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропил((S)-1 -(((S)-4-хлор-3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С209). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 604,2 [М+Н]+.

2-(3-Хлорфенuл)-2-метил-1-фенuлпропил((S)-1-(((S)-4-гидрокси-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С236)

Перемешиваемый раствор 2-(3-хлорфенил)-2-метuл-1-фенилпропил((S)-1-(((S)-4-хлор-3-оксо-1-((S)2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С209) (550 мг, 0,9097 ммоль), фенилглиоксиловой кислоты (204,86 мг, 1,364 ммоль) в ДМФА (20 мл) помещали в атмосферу N2. Данный прозрачный бледно-желтый раствор обрабатывали фторидом цезия (343,41 мг, 2,27 ммоль), затем нагревали до 65°C. Через 4 часа теперь уже желтую суспензию охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом (60 мл), трижды промывали водой (30 мл), один раз солевым раствором (30 мл), сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного (3S)-3-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метuл-1-фенилпропоксu)карбонuл)амuно)-4-метилпентанамидо)-2оксо-4-((S)-2-оксопирролидин-3-uл)бутuл-2-оксо-2-фенuлацетата в виде неочищенной желтой пены. МС (ИЭР+) для C₃₉H₄₄ClN₃O₈ m/z 718,75 (М+Н)⁺. Данный неочищенный продукт помещали в метанол (40 мл), помещали в атмосферу N2 и обрабатывали карбонатом цезия (144,64 мг, 0,446 ммоль) при интенсивном перемешивании. Через 1 ч летучие вещества удаляли в вакууме (баня <30°C) с получением неочищенного продукта. Неочищенное соединение подвергали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((Б)-1 -(((S)-4-гидрокси-3-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С236) Система ТСХ: 10% МеОН в ДХМ R_f: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 586,2 [М+Н]⁺.

Пример 162: Синтез соединения С211

С2И

2-(3-Хлорфенuл)-2-метил-1-фенuлпропuл((S)-3-циклогексuл-1-(((S)-4-(этиламuно)-3,4-диоксо-1- 309 049429 ((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С211)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1оксопропан-2-ил)карбамата (1) (200 мг, 0,27 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли м-ХПБК (142 мг, 0,831 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. К этому добавляли этиламин-HCl (600 мг, 7,358 ммоль), DIPEA (0,8 мл, 4,49 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил1-фенилпропил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-4-(этиламино)-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С211). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 667,3 [М+Н]+.

Пример 163: Синтез соединения С216

С216

2-Метил-1-фенилпропан-1-ол (3)

К перемешиваемому раствору фенилмагнийбромида (2) (139 мл, 138,8 ммоль) в ТГФ (100 мл) добавляли 1-(3-хлорфенил)изобутиральдегид (1) (5 г, 69,44 ммоль) при -30°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали с помощью нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 7% этилацетатом в гексане с получением 2-метил-1фенилпропан-1-ола (3). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 133,26 [МОН]⁺.

Метил-(2S)-3-циклогексил-2-(((2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)пропаноат (5)

К перемешиваемому раствору 2-метил-1-фенилпропан-1-ола (3) (2,0 г, 13,3 ммоль) и гидрохлорида метил(S)-2-амино-3-циклогексилпропаноата (4) (2,95 г, 15,96 ммоль) в ДХМ (30 мл), добавляли пиридин (6 мл, 3 об.), а затем трифосген (1,97 г, 6,65 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли

- 310 049429

ДХМ и промывали 1N раствором HCl (50 мл), а затем солевым раствором (50 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-(2S)-3-циклогексил-2-(((2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)пропаноата (5). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=384,21 [M+Na]+.

(2S)-3-Циклогексил-2-(((2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)пропановαя кислота (6)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-3-циклогексил-2-(((2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)пропаноата (5) (3,0 г, 8,31 ммоль) в ТГФ (20 мл) воды (10 мл) добавляли гидроксид лития (598 мг, 24,93 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-3-циклогексил-2-(((2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)пропановой кислоты (6). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 370,19 [М+Н]⁺.

Метил-(2S)-2-((2S)-3-циклогексил-2-(((2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)пропанамидо)-3((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропаноат (7)

К перемешиваемому раствору (2S)-3-циклогексил-2-(((2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)пропановой кислоты (6) (2,5 г, 7,21 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли HATU (6,84 г, 18,01 ммоль), DIPEA (3,4 мл, 21,6 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (1,6 г, 8,64 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением метил-(2S)-2-((2S)-3-циклогексил-2-(((2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)пропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (7). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 516,47 [М+Н]⁺.

(2S)-2-((2S)-3-циклогексил-2-(((2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)пропанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (8)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-3-циклогексил-2-(((2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)пропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (7) (500 мг, 0,97 ммоль) в ТГФ (4 мл) и воде (2 мл) добавляли гидроксид лития (70 мг, 2,91 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2((2S)-3-циклогексил-2-(((2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)пропанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (8). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 502,31 [М+Н]⁺.

2-Метил-1 -фенилпропил((S)-1 -(((S)-4-циано-3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (10)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-3-циклогексил-2-(((2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)пропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (8) (400 мг, 0,798 ммоль) в ДХМ (10 мл) одновременно добавляли HATU (606 мг, 1,59 ммоль), DIPEA (0,37 мл, 2,39 ммоль) и 1-(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромид (9) (400 мг, 1,99 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (20 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 4% метанолом в дихлорметане с получением 2-метил-1-фенилпропил((S)-1-(((S)-4циано-3-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (10). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 611,41 [М+Н]⁺.

2-Метил-1 -фенилпропил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С216)

К перемешиваемому раствору 2-метил-1-фенилпропил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 оксопропан-2-ил)карбамата (10) (350 мг, 0,57 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли м-ХПБК (296 мг, 1,72 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (2 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с

- 311 049429 помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO3 (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-метил-1-фенилпропил((S)-1-(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С216). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 529,3 (М+Н)+.

Пример 164: Синтез соединения С217

⁴ С217

2-((2 S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1 -фенилэтокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(5,5диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1фенилэтокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (1) (910 мг, 1,45 ммоль) в ТГФ (10 мл), воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (178 мг, 4,35 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 2-((2S-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(5,5диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 1 00% этилацетат Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 612,67 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -фенилэтил((2 S)-1 -((4-циано-1 -(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3-оксо-4(тетрагидро-114-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору 2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2) (820 мг, 1,339 ммоль) в ДХМ (10 мл) одновременно добавляли HATU (562 мг, 2,00 ммоль), DIPEA (0,74 мл, 4,017 ммоль) и 1-(цианметил)тетрагидро-1Н-тиофен-1-ия бромид (3) (414 мг, 2,009 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (40 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтил((2S)-1-((4циано-1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3-оксо-4-(тетрагидро-114-тиофен-1-илиден)бутан-2ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 721,49 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -фенилэтил((2 S)-1 -((4-амино-1 -(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3,4диоксобутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С217)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтил((2S)-1-((4-циано-1-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3-оксо-4-(тетрагидро-114-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1оксопропан-2-ил)карбамата (4) (300 мг, 0,446 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли м-ХПБК (215 мг, 1,249 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. К этому добавляли водн. раствор аммиака (2 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтил((2S)-1-((4-амино-1-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С217). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 639,3 [М+Н]⁺.

- 312 049429

Пример 165: Синтез соединения С218

Метил-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3 -(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору ((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)-L-лейцина (фрагмент кислоты-38) (1,6 г, 3,83 ммоль) в ДМФА (16 мл) одновременно добавляли EDC.HCl (1 г, 5,75 ммоль), HOBt (0,77 г, 5,75 ммоль), DIPEA (1,6 мл, 11,50 ммоль) и гидрохлорид метил-2-амино-3-(5,5диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-21) (1,15 г, 4,60 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (80 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением метил-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (1). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 614,48 [М+Н]+.

2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил 2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (1) (490 мг, 0,797 ммоль) в ТГФ (5 мл), воде (3 мл) добавляли гидроксид лития (98 мг, 2,393 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстра гировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 586,56 [М+Н]⁺.

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((2S)-1-((4-циано-1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)3-оксо-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (3)

К перемешиваемому раствору 2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3ил)пропановой кислоты (2) (310 мг, 0,516 ммоль) в ДХМ (10 мл) одновременно добавляли HATU (217 мг, 0,774 ммоль), DIPEA (0,28 мл, 1,54 ммоль) и 1-(цианметил)тетрагидро1H-тиофен-1-ия бромид (3) (159 мг, 0,774 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (20 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 2-(3хлорфенил)-2-метил-1 -фенилпропил((2S)-1 -((4-циано-1 -(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3 -ил)-3 -оксо-4

- 313 049429 (тетрагидро-114-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (иЭР): m/z 709,52 (М+Н)+.

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((2S)-1-((4-амино-1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С218)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((2S)-1-((4-циано-1-(5,5диметил-2-оксопирролидин-3-ил))-3-оксо-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-4метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (3) (240 мг, 0,33 ммоль) в метаноле (4 мл) добавляли м-ХПБК (116 мг, 0,676 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. К этому добавляли водн. раствор аммиака (2 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилпропил((2S)-1-((4-амино1 -(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2ил)карбамата (соединение С218). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 627,3 [М+Н]⁺.

Пример 166: Синтез соединений С235 и С219.

(3 S)-3-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1 -(нафталин-2-ил)пропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-2-оксо-4-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутановая кислота (соединение С235)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафтαлин-2-ил)пропил((S)-1-(((S)-4циано-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (промеж. соед.-9) (600 мг, 0,779 ммоль) в ТГФ (2,5 мл), воде (2,5 мл) добавляли оксон (717 мг, 2,33 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали 10% метанолом в ДХМ (3x15 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного вещество, соединение очищали с помощью препаративной ВЭЖХ с получением (3S)-3-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1(нафтαлин-2-ил)пропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-2-оксо-4-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутановой кислоты (соединение С235). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=688,59 [М+Н]⁺.

(3 S)-3-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1 -(нафталин-2-ил)пропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-2-гидрокси-4-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору (3S)-3-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафтαлин-2uл)пропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-2-оксо-4-((S)-2-оксопирролидин-3ил)бутановой кислоты (соединение С235) (1,0 г, 1,45 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляли NaCNBH₃ (89 мг, 1,45 ммоль) добавляли при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (10 мл), экстрагировали 10% метанолом в дихлорметане (3x20 мл) и промывали 1N раствором HCl (2x15 мл), а затем солевым раствором (20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при понижен

- 314 049429 ном давлении с получением неочищенного продукта, очищали нормально-фазовой CombiFlash, элюируя 10% метанолом в ДХМ, с получением (3S)-3-((2S)-2--(((2-(3-хлорфенил)-2-метuл-1-(нафталин-2uл)пропокси)карбонил)амино)-3-циклогексuлпропанамидо)-2-гидрокси-4-((S)-2-оксопирролидин-3ил)бутановой кислоты (2). Система ТСХ: 15% метанола в дихлорметане Rf: 0,1 (тот же RF) ЖХМС (ИЭР): m/z 692,36 [М+Н]+.

2-(3-Хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2-ил)пропил((2S)-3-циkлогексил-1-(((2S)-4-(диэтиламино)-3гидрокси-4-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-uл)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору (3S)-3-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метuл-1-(нафталин-2uл)пропокси)карбонил)амино)-3-циклогексuлпропанамидо)-2-гидрокси-4-((S)-2-оксопирролидин-3ил)бутановой кислоты (2) (600 мг, 0,868 ммоль) в ДМФА (5 мл) добавляли HATU (494 мг, 1,302 ммоль), DIPEA (0,5 мл, 2,604 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин при 0°C. К этому добавляли диэтиламин (3) (6 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2-ил)проnuл((2S)-3-циклогексил-1-(((2S)-4-(диэтиламино)3-гидрокси-4-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (4).

Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 747,5 (М+Н)⁺.

2-(3-Хлорфенuл)-2-метил-1-(нафталин-2-ил)пропил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-4-(диэтиламино)-3,4диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С219)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-(нафталин-2-ил)пропил((2S-3циклогексил-1-(((2S)-4-(диэтиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (4) (350 мг, 0,469 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (995 мг, 2,348 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл) и солевым раствором (1x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3хлорфенuл)-2-метил-1-(нафталин-2-uл)пропил((S)-3-циклогексuл-1-(((S)-4-(диэтиламино)-3,4-диоксо-1((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С219). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 745,3 (М+Н)⁺.

Пример 167: Синтез соединения С220

2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенuл)-1-(3-фторфенuл)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенuл)-2метилпропокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (1) (500 мг, 0,74 ммоль) в ТГФ (5 мл), воде (3 мл) добавляли гидроксид лития (60,9 мг, 1,48 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенuл)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)гексанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-uл)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 658,45 [М+Н]⁺.

2-(3-Хлорфенuл)-1-(3-фторфенил)-2-метилпропил((2S)-1-((4-циано-1-(5,5-диметил-2

- 315 049429 оксопирролидин-3 -ил)-3 -оксо-4-(тетрагидро-114-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 оксопропан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-2-метил-1фенилпропокси)карбонил)амино)гексанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2) (350 мг, 0,531 ммоль) ДХМ (10 мл) одновременно добавляли HATU (302 мг, 0,796 ммоль), DIPEA (0,27 мл, 1,59 ммоль) и 1-(цианометил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромид (3) (172 мг, 0,796 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (20 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 4% метанолом в дихлорметане с получением 2-(3-хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2метилпропил((2S)-1-((4-циано-1-(5,5-диметил-2-оксопuрролидин-3-ил)-3-оксо-4-(тетрагидро-114-тиофен1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 767,55 [М+Н]+.

2-(3-Хлорфенил)-1-(3-фторфенил)-2-метилnропил((2S)-1-((4-амино-1-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С220)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метил-1-фенилnропил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-114-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-1 -оксогексан-2ил)карбамата (4) (200 мг, 0,26 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли м-ХПБК (112 мг, 0,65 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C, добавляли водн. раствор аммиака (1 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (40 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-1 -(3 -фторфенил)-2-метuлпропил((2S)-1 -((4-амино-1 -(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С220). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 685,2 (М+Н)⁺.

Пример 168: Синтез соединения С221

фрагмент ямина-29 .

C32i ((S)-2-((трет-бутоксикαрбонuл)амино)-3-((S)-2-оксопuрролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил(S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-((S)-2-оксопuрролидин3-ил)пропаноата (1) (3 г, 10,48 ммоль) в ТГФ (15 мл), воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (800 мг, 20,97 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-2-((трет-бутоксикαрбонил)амино)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)nропановой кислоты (2). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 273,20 [М+Н]⁺.

трет-Бутил-((S)-1-(циклопропансульфонамидо)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)карбамат (3)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропановой кислоты (2) (1 г, 3,67 ммоль) в ДХМ добавляли CDI (1,1 г, 7,35 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при 40°С в течение 2 ч. После этого добавляли циклопропансульфонамид (889 мг, 7,35 ммоль), DBU (1,1 мл, 7,35 ммоль) и перемешивали в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь непосредственно упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюи

- 316 049429 ровали 15% метанолом в дихлорметане с получением трет-бутил-((S)-1-(циклопропансульфонамидо)-1оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=376,46 (М+Н)+.

Гидрохлорид (S)-2-амино-N-(циклопропилсульфонил)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропанамида (фрагмент амина-29)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-((S)-1-(циклопропансульфонамидо)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)карбамата (4) (1,2 г, 3,2 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) при 0°C по каплям добавляли 4N HCl в диоксане (15 мл), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь упаривали при по ниженном давлении с получением неочищенного соединения, полученное неочищенное вещество растирали с диэтиловым эфиром с получением гидрохлорида (S)-2-амино-N-(циклопропилсульфонил)-3-((S)2-оксопирролидин-3-ил)пропанамида (фрагмент амина-29). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=276,21 (М+Н)+.

-Хлорбензил-((S)-3 -циклогексил- 1-(((S)-1 -(циклопропансульфонамидо)-1 -оксо-3 -((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С221)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты-2) (150 мг, 0,442 ммоль) в ДМФА (6 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (126 мг, 0,663 ммоль), HOBt (89 мг, 0,663 ммоль), DIPEA (0,2 мл, 1,327 ммоль) и гидрохлорид (S)-2-амино-N-(циклопропилсульфонил)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропанамида (фрагмент амина-29) (165 мг, 0,530 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3 -хлорбензил-((S)-3-циклогексил-1 -(((S)-1 -(циклопропансульфонамидо)-1 -оксо-3 -((S)-2-оксопирролидин3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С221). Система ТСХ: 15% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=597,2 [M+H]+.

Пример 169: Синтез соединений С290 и С229.

- 317 049429

Нитроциклобутан (2)

К перемешиваемому раствору бромциклобутана (1) (10 г, 74,07 ммоль) в ДМСО (100 мл) добавляли флороглюцин (9,3 г, 74,07 ммоль), затем мочевину (8,88 г, 148,14 ммоль) и нитрит натрия (25,5 г, 370,37 ммоль) при комнатной температуре, и полученную реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили ледяной водой (150 мл) и экстрагировали диэтиловым эфиром (3x100 мл), объединенные органические слои промывали водой (150 мл), солевым раствором (150 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при минимальном пониженном давлении для получения соединения 2, которое использовали непосредственно на следующей стадии.

Диметил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-((1-нитроциклобутил)метил)пентандиоат (3)

К перемешиваемому раствору вышеуказанной неочищенной жидкости в ACN (60 мл) добавляли диметил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-метиленпентандиоат (промеж. соед.-5) (5,5 г, 19,8 ммоль) и DBU (9 мл, 59,4). ммоль) при комнатной температуре и перемешивание продолжали в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Избыток ACN упаривали при пониженном давлении. . Неочищенный остаток помещали в этилацетат (200 мл) и промывали водой (150 мл) и солевым раствором (150 мл), сушили над сульфатом натрия, упаривали и очищали неочищенный остаток нормальнофазовой хроматографией с получением диметил 2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-((1нитроциклобутил)метил)пентандиоата (3). Система ТСХ: 20% этилацетата в петролейном эфире Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=411,31 [M+Na]+.

Метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-(6-оксо-5-азаспиро[3.4]октан-7-ил)пропаноат (4)

К перемешиваемому раствору диметил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-((1нитроциклобутил)метил)пентандиоата (3) (5 г, 12,8 ммоль) в метаноле (50 мл) добавляли хлорид никеля (1,67 г, 12,8 ммоль), затем борогидрид натрия (2,4 г, 64,4 ммоль) при -10°С и медленно оставляли нагреваться до комнатной температуры. и перемешивали в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония (100 мл) и экстрагировали ДХМ (3x100 мл), объединенные органические слои промывали водой (250 мл), затем солевым раствором (200 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения, и неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-(6-оксо-5-азаспиро[3.4]октан-7-ил)пропаноата (4). Система ТСХ: 10% МеОН/ДХМ Rf: 0,6 ЖХ-МС (ESI): m/z 349,25 [M+Na]+.

Гидрохлорид метил-2-амино-3-(6-оксо-5-азаспиро[3.4]октан-7-ил)пропаноата (фрагмент амина-26)

К перемешиваемому раствору метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-(6-оксо-5азаспиро[3.4]октан-7-ил)пропаноата (4) (3 г, 9,2 ммоль) в 1,4-диоксане(30 мл) добавляли 4N раствор диоксан-HCl (30 мл) при 0°C, и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток растирали с н-пентаном с получением гидрохлорида метил-2амино-3-(6-оксо-5-азаспиро[3.4]октан-7-ил)пропаноата (фрагмент амина-26). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ R_f: 0,1 ЖХМС (иЭР): m/z 227,26 [М+Н]⁺.

Метил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(6-оксо-5азаспиро[3.4]октан-7-ил)пропаноат (5)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты-2) (1,2 г, 3,53 ммоль) в ДМФА (12 мл) добавляли одновременно добавляли EDC.HCl (1 г, 5,309 ммоль), HOBt (0,716 г, 5,309 ммоль), DIPEA (1,88 мл, 10,617 ммоль) и гидрохлорид метил-2-амино-3-(6-оксо-5-азаспиро[3.4]октан-7-ил)пропаноата (фрагмент амина-26) (0,927 г, 3,539 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x100 мл), орга

- 318 049429 нический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией с получением метил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-(6-оксо-5азаспиро[3.4]октан-7-ил)пропаноата (5). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 548,40 [М+Н]+.

3-Хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-((1-гидрокси-3-(6-оксо-5-азаспиро[3.4]октан-7-ил)пропан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (6)

К перемешиваемому раствору метил-2-((S)-2-((((3-хлорбензил)окси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-(6-оксо-5-азаспиро[3.4]октан-7-ил)пропаноата (5) (1,2 г, 2,193 ммоль) в дихлорметане (25 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (2,2 мл, 4,387 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH₄Cl и экстрагировали дихлорметаном (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 3-хлорбензил((2S)-3-циклогексил-1-((1-гидрокси-3-(6оксо-5-азаспиро[3.4]октан-7-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (6). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=520,63 [М+Н]⁺.

3-Хлорбензил((2S)-3-циклогексил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(6-оксо-5-азаспиро[3,4]октан-7-ил)пропан-2ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (соединение С229)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-((1-гидрокси-3-(6-оксо-5азаспиро[3.4]октан-7-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (6) (150 мг, 0,289 ммоль) в этилацетате (3 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (183 мг, 0,433 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали нормально-фазовой хроматографией с получением 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(6-оксо-5азаспиро[3.4]октан-7-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С229). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 518,2 [М+Н]⁺.

-Хлорбензил((2S)-3-циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1 -(6-оксо-5 азаспиро[3.4]октан-7-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (7)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил((2S)-3-циклогексил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(6-оксо-5азаспиро[3.4]октан-7-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С229) (200 мг, 0,386 ммоль) в ДХМ (5 мл) затем добавляли пиридин (0,124 мл, 1,512 ммоль), изоцианоциклопропан (51 мг, 0,7736 ммоль), затем ТФУ (0,06 мл, 0,7736 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и промывали 1N HCl (2x30 мл), затем водой (20 мл) и солевым раствором (20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривают при пониженном давлении с получением неочищенного 3-хлорбензил((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-(6-оксо-5азаспиро[3.4]октан-7-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (7). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=603,39 [M+H]⁺.

3-Хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-(6-оксо-5азаспиро[3.4]октан-7-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С290)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-3гидрокси-4-оксо-1-(6-оксо-5-азаспиро[3.4]октан-7-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (7) (170 мг, 0,282 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (239 мг, 0,564 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (25 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-хлорбензил((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-(6-оксо-5азаспиро[3.4]октан-7-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С290). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,45 ЖХМС (ИЭР): m/z=601,53 [M+H]⁺.

- 319 049429

Пример 170: Синтез соединения С224

2-(3-Хлорбензил)циклопентuл((S)-3-циклогексил-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору метил-(28)-2-((28)-2-((((2-(3хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин3-ил)пропаноата (1) (12 г, 20,869 ммоль) в дихлорметане (120 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (20,8 мл, 41,739 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH₄Cl и экстрагировали дихлорметаном (2x100 мл), сушили над безводным Na2SO4 и упаривали при пониженном давлении с получением 2-(3хлорбензил)циклопентил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (2). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 548,57 [М+Н]+.

Хиральная ВЭЖХ очистка 2-(3-хлорбензил)циклопентил((S)-3-циклогексuл-1-(((S)-1-гидрокси-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (2-PK-1, 2-PK-2, 2-PK-3, 2-PK-4)

СФХ очистка 2-(3-хлорбензил)циклопентил ((S)-3-циклогексил-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (10 г) в условиях препаративной СФХ Колонка/размеры: CHIRALPAK-IA-3 (4,6x250 мм), 3 мкм, % СО₂: 60% совместный растворитель: 40% (ацетонитрил: IPA 1:1), общий поток: 3,0 г /мин Противодавление: 1500 фунтов на квадратный дюйм, температура: 30°С УФ: MAX PLOT Растворимость: метанол 2-PK-1, 2-PK-2 2-PK-3 2-PK-4. Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 548,57 [М+Н]+.

(1 S,2S)-2-(3-хлорбензил)циклопентил((S)-3 -циклогексил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3 -((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (соединение С224)

К перемешиваемому раствору (1S,2S)-2-(3-хлорбензuл)циклопентил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-1гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (2-PK-1) (0,1 г, 0,182 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (0,155 г, 0,365 моль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором Na

- 320 049429

HCO3 (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением (1S,2S)-2-(3-хлорбензил)циклопентил((S)-3-циклогексил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С224). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 546,2 [М+Н]+.

Пример 171: Синтез соединения С225

2-(3 -Хлорбензил)циклопентил((2S)-3 -циклогексил-1 -оксо-1 -((1 -оксо-3 -(2-оксо-8-окса-1 азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (соединение С225)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3-циклогексил-1((1-гидрокси-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2ил)карбамата (1) (400 мг, 0,64 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (823 мг, 1,90 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорбензил)циклопентил((2S)-3циклогексил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2-оксо-8-окса-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2ил)карбамата (соединение С225). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=616,3 (M+H)⁺.

Пример 172: Синтез соединений С226 и С246.

Метил-((2-(3 -хлорфенил)-1 -(4-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-L-лейцинат (1)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропан-1-ола (1) (2,5 г, 8,51

- 321 049429 ммоль) в ацетонитриле (25 мл) добавляли Et₃N (4,16 мл, 29,10 ммоль), DSC (5,47 г, 21,01 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Затем добавляли метил-Ь-лейцинат (2) (3,08 г, 21,01 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении, разбавляли водой (25 мл) и экстрагировали этилацетатом (25 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-((2-(3 -хлорфенил)-1 -(4-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-Ь-лейцината (1). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=488,23 [M+Na+H]+.

((2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-Ь-лейцин (фрагмент кислоты-57)

К перемешиваемому раствору метил-((2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2метилпропокси)карбонил)-Ь-лейцинатаа (1) (1,8 г, 3,80 ммоль) в ТГФ (11 мл), воде (7 мл) добавляли гидроксид лития (325 мг, 7,74 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением ((2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-Ь-лейцина (4). Система ТСХ: 50% этилацетата в гексане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 474,2 [M+Na+H]+.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-((((3-хлорфенил)(1-(3-хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (5)

К перемешиваемому раствору ((2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-Ьлейцина (4) (1 г, 2,0 ммоль) ДМФА (10 мл) одновременно добавляли EDC.HCl (633 мг, 3,31 ммоль), HOBt (448 мг, 3,31 ммоль), DIPEA (1,1 мл, 6,63 ммоль) и метил-(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (586 мг, 2,6 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash соединение элюировали 60% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-(2S)-2-((2S)-2-((((3-хлорфенил)(1-(3хлорфенил))циклопропил)метокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропаноата (5). Система ТСХ: Этилацетат Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 620,6 [М+Н]⁺.

(2-(3-хлорфенил)-1 -(4-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (6)

К перемешиваемому раствору метил(2S)-2-((2S)-2-((((3-хлорфенил)(1-(3хлорфенил)циклопропил)метокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропаноата (5) (300 мг, 4,8 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (0,48 мл, 0,96 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь гасили водн. раствором NH4Cl (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x15 мл). Органический слой промывали солевым раствором (2x15 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением (2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2метилпропил((S)- 1-(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1 оксопентан-2-ил)карбамата (6). Система ТСХ: Этилацетат Rf: 0,2 ЖхМС (ИЭР): m/z 592,5 (М+Н)⁺.

2-(5-хлорциклогекса- 1,5-диен-1 -ил)-1 -(4-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С246)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-1гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (6) (100 мг, 0,130 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (172 мг, 0,401 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (15 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x15 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x15 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением 2-(5-хлорциклогекса-1,5-диен-1-ил)-1(4-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С246). Система ТСХ: Этилацетат Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): mz 590,2 (М+Н)⁺.

2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропил((2S)-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси4-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамат (8)

К перемешиваемому раствору 2-(5-хлорциклогекса-1,5-диен-1-ил)-1-(4-хлорфенил)-2метилпропил((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С246) (200 мг, 0,33 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли изоцианоциклопропан (7) (45 мг, 0,67 ммоль), пиридин (0,10 мл, 1,35 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут при 0°C и добавляли ТФУ (0,055 мл, 0,67 ммоль) и перемешивали при

- 322 049429 комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь подкисляли 1N раствором HCl (5 мл) и экстрагировали ДХМ (2x10 мл). Органический слой промывали солевым раствором (5 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение с получением 2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2метилпропил((2S)-1 -(((2S)-4-(циклопропиламино)-3 -гидрокси-4-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (8). Система ТСХ: 5% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 675,2 [М+Н]⁺.

2-(3-хлорфенил)-1 -(4-хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1 -(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 ((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С226)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-(4-хлорфенил)-2-метилпропил((2S)-1-(((2S)-4(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1оксопентан-2-ил)карбамата (8) (200 мг, 0,29 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан ДессаМартина (314 мг, 0,74 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (15 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, который очищали нормально-фазовой очисткой с получением 2-(3-хлорфенил)-1-(4хлорфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С226). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 673,3 (М+Н)⁺.

Пример 173: Синтез соединений С227 и С233.

Q

С!

нм-Ч NH₂HC!

О амина-19 HATU. NMM. ЙМФА, δΎ-юмн, темп,. 2 ч

N-((2S)-1 -((4-хлор-3-оксо-1 -(2-оксо-1 -азаспиро[4.5]декан-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 оксопентан-2-ил)-4-метокси-1 Н-индол-2-карбоксамид (соединение С227)

К перемешиваемому раствору (4-метокси-1H-индол-2-карбонил)-D-лейцина (фрагмент кислоты-5) (600 мг, 1,973 ммоль) и гидрохлорида 3-(2-амино-4-хлор-3-оксобутил)-1-азаспиро[4.5]декан-2-она (фрагмент амина-19) (731,8 мг, 2,368 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли HATU (1,12 г, 2,959 ммоль) и DIPEA (1,1 мл, 5,921 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 10% метанолом и дихлорметаном, с получением N-((2S)-1-((4-хлор-3-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)-4-метокси-1 H-индол-2-карбоксамида (соединение

С227). Система ТСХ: 10% МеОН в ДХМ Rf: 0,6 ЖХМС (ИЭР): m/z 559,2 [М+Н]+.

N-((2S)-1 -((4-гидрокси-3-оксо-1 -(2-оксо-1 -азаспиро[4.5]декан-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 оксопентан-2-ил)-4-метокси-1 H-индол-2-карбоксамид (соединение С233)

Раствор N-((2S)-1-((4-хлор-3-оксо-1-(2-оксо-1-азаспuро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил1-оксопентан-2-ил)-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (соединение С227) (540 мг, 0,9667 ммоль), фенилглиоксиловой кислоты (217,93 мг, 1,45 ммоль) в ДМФА (20 мл) помещали в атмосферу N2. Данный прозрачный бледно-желтый раствор обрабатывали фторидом цезия (292,24 мг, 1,93 ммоль), затем нагревали до 65°C. Через 4 часа теперь уже желтую суспензию охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом (60 мл), трижды промывали водой (30 мл), один раз солевым раствором (30 мл), сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного 3-((S)-2-(4-метокси-1Hиндол-2-карбоксамидо)-4-метилпентанамидо)-2-оксо-4-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутил-2-оксо2-фенилацетата в виде неочищенной желтой пены. МС (ИЭР+) для C₃₇H₄₄N₄O₈ m/z 673,7 (М+Н)⁺. Данный

- 323 049429 неочищенный продукт помещали в метанол (40 мл), помещали в атмосферу N2 и обрабатывали карбонатом цезия (144,64 мг, 0,446 ммоль) при интенсивном перемешивании. Через 1 ч летучие вещества удаляли в вакууме (баня <30°C) с получением неочищенного продукта. Неочищенное соединение подвергали препаративной ВЭЖХ с получением N-((2S)-1-((4-гидрокси-3-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)-4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамида (соединение С233) Система ТСХ: 10% МеОН в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z 541,3 [М+Н]+.

Пример 174: Синтез соединения С228

2-((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору (S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропановой кислоты (фрагмент кислоты-34) (1 г, 3,183 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC.HCl (0,91 г, 4,774 ммоль), HOBt (0,645 г, 4,774 ммоль), DIPEA (2 мл, 9,549 ммоль) и метил(S)-2-амино-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-19) (1,2 г, 3,819 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом и петролейным эфиром, с получением метил-2-((S)-3циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропаноата(1). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 537,48 [М+Н]⁺.

2-((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3ил)пропановая кислота

К перемешиваемому раствору метил-2-((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил) пропаноата (1) (1,5 мг, 2,723 ммоль) в ТГФ (10 мл), воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (350 мг, 8,171 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 2-((S)-3-циклогексил-2(1H-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 15% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 315,23 [М+Н]⁺.

N-((2S)-1-((4-циано-3-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)-1 H-индол-2-карбоксамид (4)

К перемешиваемому раствору 2-((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-3(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропановой кислоты (2) (1,3 г, 2,425 ммоль) в ДХМ (10 мл) одновре

- 324 049429 менно добавляли HATU (1,4 г, 3,638 ммоль), DIPEA (1,3 мл, 7,276 ммоль) и 1-(цианметил)тетрагидро-1Hтиофен-1-ия бромид (3) (602 мг, 2,910 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением N-((2S)-1-((4-циано-3-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)-4-(тетрагидро-1l4тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)-1Н-индол-2-карбоксамида (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 646,47 (М+Н)+.

3-((S)-3-Циклогексил-2-(1Н-индол-2-карбоксамидо)пропанамидо)-2-оксо-4-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутановая кислота (соединение С228)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-1-((4-циано-3-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)-4(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)-1 Н-индол-2карбоксамида (4) (500 мг, 0,77 ммоль) в ТГФ (10 мл), воде (5 мл) добавляли оксон (476 мг, 1,54 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3-((S)-3-циклогексил-2-(1Н-индол-2карбоксамидо)пропанамидо)-2-оксо-4-(2-оксо-1-азаспиро[4,5]декан-3-ил)бутановой кислоты (соединение С228). Система ТСХ: 15% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 565,2 [М+Н]⁺.

Пример 175: Синтез соединения С230

3-Метил-1-фенилбутан-2-ол (3)

К перемешиваемому раствору 2-фенилацетальдегида (166,6 мл, 333,3 ммоль) в ТГФ (400 мл) добавляли изопропилмагнийбромид (1) (8 г, 111,1 ммоль) при -30°C, и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH₄Cl (500 мл), фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (2x200 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 20% этилацетатом в гексане, с получением 3-метил-1-фенилбутан-2-ола (3). Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 147,1 [М-ОН].

Метил-(((3-метил-1-фенилбутан-2-ил)окси)карбонил)-L-лейцинат (5)

- 325 049429

К перемешиваемому раствору 3-метил-1-фенилбутан-2-ола (3) (6,5 г, 39,5 ммоль) в ДХМ (300 мл) добавляли пиридин (19,5 мл) гидрохлорид метил-L-лейцината (4) (6,8 г, 47,4 ммоль), затем медленно добавляли трифосген (5,84 г, 19,75 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили 1N водн. HCl (100 мл), затем экстрагировали ДХМ (2x50 мл), промывали (2x50 мл) раствором NaHCO₃, органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 10% этилацетатом в гексане, с получением метил-(((3-метил-1фенилбутан-2-ил)окси)карбонил)®-лейцината (5). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=358,29 [M+Na]+.

(((3-Метил-1-фенилбутан-2-ил)окси)карбонил)®-лейцин (6)

К перемешиваемому раствору метил-(((3-метил-1-фенилбутан-2-ил)окси)карбонил)-L-лейцината (5) (5,0 г, 14,9 ммоль) в ТГФ (10 мл), воде (10 мл) добавляли гидроксид лития (1,83 г, 44,7 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (((3-метил-1-фенилбутан-2-ил)окси)карбонил)®-лейцина (6). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 344,39 [M+Na]⁺.

Метил-(2S)-2-((2S)-4-метил-2-((((3-метил-1-фенилбутан-2-ил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропаноат (7)

К перемешиваемому раствору (((3-метил-1-фенилбутан-2-ил)окси)карбонил)-L-лейцина (6) (1 г, 3,11 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (0,89 г, 4,66 ммоль), HOBt (0,629 г, 4,66 ммоль), DIPEA (1,71 мл, 9,33 ммоль) и метил-(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (0,901 г, 3,7 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 10% метанолом и дихлорметаном, с получением метил-(2S)-2-((2S)-4-метил-2-((((3 -метил-1-фенилбутан-2ил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (7). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,6 ЖхМС (ИЭР): m/z=490,85 [M+H]⁺.

-Метил-1 -фенилбутан-2-ил((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (8)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-4-метил-2-((((3-метил-1-фенилбутан-2ил)окси)карбонил)амино)пентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (7) (0,8 г, 1,63 ммоль) в дихлорметане (30 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (3,2 мл, 3,27 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH4Cl и экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 3-метил-1-фенилбутан-2-ил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамата (8). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 462,46 [М+Н]⁺.

-Метил-1 -фенилбутан-2-ил((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С230)

К перемешиваемому раствору 3-метил-1-фенилбутан-2-ил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (8) (300 мг, 0,644 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (551,1 мг, 1,229 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл) и солевым раствором (1x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение подвергали препаративной ВЭЖХ с получением 3-метил-1-фенилбутан-2-ил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С230). Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 460,2 [М+Н]⁺.

- 326 049429

Пример 176: Синтез соединения С231

С231

2,2-Диметил-1 -фенилпропан-1 -ол (3)

К перемешиваемому раствору фенилмагнийбромида (2) (116 мл, 116,27 ммоль) в ТГФ (100 мл) добавляли пивалальдегид (1) (5 г, 58,13 ммоль) при -30°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 8% этилацетатом в гексане с получением 2,2-диметил-1-фенилпропан-1-ола (3). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 147,06 [М-ОН]⁺.

Метил-(2S)-3-циклогексил-2-(((2,2-диметил-1-фенилnроnокси)карбонил)амино)nроnаноат (5)

К перемешиваемому раствору 2,2-диметил-1-фенилпропан-1-ола (3) (3 г, 18,29 ммоль) гидрохлорида метил(8)-2-амино-3-циклогексилпропаноата (4) (4,0 г, 21,94 ммоль) в дихлорметане (40 мл) добавляли пиридин (9 мл, 3 об.), а затем трифосген (2,7 г, 9,14 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли ДХМ и промывали 1N HCl (50 мл), органический слой промывали солевым раствором (50 мл) и сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-(28)-3-циклогексил-2-(((2,2-диметил-1фенилпропокси)карбонил)амино)пропаноата (5). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=432,32 [M+H]⁺.

(28)-3-Циклогексил-2-(((2,2-диметил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)пропановая кислота (6)

К перемешиваемому раствору метил-(28)-3-циклогексил-2-(((2,2-диметил-1фенилпропокси)карбонил)амино)пропаноата (5) (6,0 г, 16,00 ммоль) в ТГФ (15 мл), воде (15 мл) добавляли гидроксид лития (1,15 г, 48,00 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (28)-3-циклогексил-2-(((2,2-диметил-1фенилпропокси)карбонил)амино)пропановой кислоты (6). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 362,40 [М+Н]⁺.

- 327 049429

Метил-(2S)-2-((2S)-3-циклогексил-2-(((2,2-диметил-1фенилпропокси)карбонил)амино)пропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (7)

К перемешиваемому раствору (2S)-3-циклогексил-2-(((2,2-диметил-1фенилпропокси)карбонил)амино)пропановой кислоты (6) (2 г, 5,54 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли HATU (5,2 г, 13,85 ммоль), DIPEA (2,6 мл, 16,62 ммоль) и гидрохлорид метил(S)-2-амино3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина-2) (1,23 г, 6,6 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой объединяли и промывали солевым раствором (50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением метил(метил(2S)-2-((2S)-3-циклогексил-2-(((2,2-диметил-1фенилпропокси)карбонил)амино)пропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (7). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 530,70 [М+Н]+.

((2S)-2-((2S)-3-циклогексил-2-(((2,2-диметил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)пропанамидо)-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (8)

К перемешиваемому раствору (метил(2S)-2-((2S)-3-циклогексил-2-(((2,2-диметил-1фенилпропокси)карбонил)амино)пропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (7) (700 мг, 1,32 ммоль) в ТГФ (10 мл), воде (3 мл) добавляли гидроксид лития (95 мг, 3,96 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2((2S)-3-циклогексил-2-(((2,2-диметил-1-фенилпропокси)карбонил)амино)пропанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (8). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 516,60 [М+Н]⁺.

2,2-Диметил-1 -фенилпропил((S)-1 -(((S)-4-циано-3-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3-циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (10)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-3-циклогексил-2-(((2,2-диметил-1фенилпропокси)карбонил)амино)пропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (8) (500 мг, 0,97 ммоль) в ДХМ (10 мл) одновременно добавляли HATU (737 мг, 1,94 ммоль), DIPEA (0,45 мл, 2,91 ммоль) и 1-(цианметил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромид (9) (500 мг, 2,42 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (20 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 3% метанолом в дихлорметане с получением 2,2-диметил-1-фенилпропил((S)-1(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамата (10). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 625,91 [М+Н]⁺.

2,2-Диметил-1 -фенилпропил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2ил)амино)-3-циклогексил-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С231)

К перемешиваемому раствору 2,2-диметил-1-фенилпропил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3 -ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 оксопропан-2-ил)карбамата (10) (200 мг, 0,32 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли м-ХПБК (165 мг, 0,96 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. К этому добавляли водн. раствор аммиака (2 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2,2-диметил-1-фенилпропил((S)-1-(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1-((S)-2оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-3 -циклогексил-1 -оксопропан-2-ил)карбамата (соединение

С231). Система ТСХ: 10% метанол в дихлорметане Rf: 0,4.

- 328 049429

Пример 177: Синтез соединения С232

трет-Бутил-((S)-1-(метокси(метил)амино)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору (S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропановой кислоты (1) (5 г, 18,38 ммоль) в ДМФА (40 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (5,2 г, 27,53 ммоль), HOBt (3,72 г, 27,53 ммоль), NMM (5,56 мл, 55,14 ммоль) и N,О-диметилгидроксиламин (2,13 г, 22,058 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением трет-бутил-((S)-1(метокси(метил)амино)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)карбамата (2). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=316,30 [М+Н]+.

трет-Бутил((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-uл)пропан-2-uл)карбамат (3)

К перемешиваемому раствору трет-бутил-((S)-1-(метокси(метил)амино)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)карбамата (2) (1 г, 3,17 ммоль) в ТГФ добавляли 1М LAH (1,32 мл, 3,17 ммоль) при -78°C и перемешивали в течение 30 мин. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением трет-бутил((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)карбамата (3). Система ТСХ: 10% МеОН/ДХМ Rf: 0,3

Этил(S,Е)-4-((трет-бутоксикарбонил)амино)-5-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пент-2-еноат (5)

К перемешиваемому раствору трет-бутил((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)карбамата (3) (250 мг, 0,97 ммоль), этил-2-(трифенил-15-фосфанилиден)ацетата (348 мг, 0,976 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляли DBU (148 мг, 0,976 ммоль) при комнатной температуре и перемешивании в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 2% метанолом в дихлорметане, с получением этuл(S,Е)-4-((трет-трет-бутоксикарбонuл)амино)-5-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пент-2-еноата (5). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=327,21 (М+Н)⁺.

Гидрохлорид этuл(S,E)-4-амино-5-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пент-2-еноата (фрагмент амина-31)

К перемешиваемому раствору этuл(S,Е)-4-((трет-трет-бутоксикарбонuл)амино)-5-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пент-2-еноата (5) (350 мг, 1,073 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) при 0°С по каплям добавляли 4N HCl в диоксане (5 мл), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения, полученное неочищенное вещество растирали с диэтиловым эфиром с получением гидрохлорида этил(S,E)-4-амино-5-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пент-2еноата (фрагмент амина-31). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ R_f: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 227,30 (М+Н)⁺.

- 329 049429

Этил (4S,E)-4-((2S)-2-(((1,2-дифенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-5-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пент-2-еноат (соединение С232)

К перемешиваемому раствору ((1,2-дифенилэтокси)карбонил)-L-лейцина (фрагмент кислоты-22) (200 мг, 0,563 ммоль) в ДМФА (6 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (161 мг, 0,84 ммоль), HOBt (114 мг, 0,84 ммоль), DIPEA (0,2 мл, 1,68 ммоль) и гидрохлорид этил-(S,E)-4-амино-5-((S)-2-оксопирролидин3-ил)пент-2-еноата (фрагмент амина-31) (152 мг, 0,675 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением этил(4S,E)-4-((2S)-2-(((1,2-дифенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-5-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пент-2-еноата (соединение С232). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 564,3 [М+Н]+.

Пример 178: Синтез соединения С234

[>—NC

Ш пиридин. ДХМ

УС-юмя. темп.,? 6 ч

Стадиями)

С214

С234

N-((2S)-1-((4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)-4-метокси-1Н-индол-2-карбоксамид (1)

К перемешиваемому раствору метилового эфира 4-метокси-N-((2S)-4-метил-1-оксо-1-((1-оксо-3-(2оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)-1H-индол-2-кαрбоксамида (соединение С214) (350 мг, 0,686 ммоль) в ДХМ 5 мл) добавляли изоцианоциклопропан (69 мг, 1,02 ммоль), пиридин (216 мг, 2,74 ммоль), затем перемешивали в течение 15 минут, затем добавляли ТФУ (80 мг, 0,75 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и промывали 1N раствором HCl (15 мл), затем солевым раствором (15 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка. Данный остаток растирали с диэтиловым эфиром (30 мл) с получением N-((2S)-1-((4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)-4-метокси-1Н-индол-2карбоксамида (1). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=596,63 (M+H)⁺.

N-((2S)-1-((4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (соединение С234)

К перемешиваемому раствору N-((2S)-1-((4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-(2-оксо-1азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)-4-метокси-1Н-индол-2карбоксамида (1) (140 мг, 0,23 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (149 мг, 0,35 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (20 мл). Фильтрат промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), затем насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали препаративной ВЭЖХ с получением N-((2S)-1-((4-(циклопропиламино)3,4-диоксо-1-(2-оксо-1-азаспиро[4.5]декан-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)-4метокси-1H-индол-2-карбоксамида (соединение С234). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=594,3 (M+H)⁺.

- 330 049429

Пример 179: Синтез соединения С237

К перемешиваемому раствору циклогексанкарбальдегида (1) (10 г, 0,0998 ммоль) в ТГФ (100 мл) добавляли бензилмагнийбромид (2) (250 мл, 0,2496 ммоль) при -70°C, и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH₄Cl (500 мл), фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (2x200 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 20% этилацетатом в гексане, с получением 1-циклогексил-2фенилэтан-1-ола (3). Система ТСХ: 20% этилацетата в гексане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 187,2 [М-ОН].

Метил-((1-циклогексил-2-фенилэтокси)карбонил)-L-лейцинат (5)

К перемешиваемому раствору 1-циклогексил-2-фенилэтан-1-ола (3) (6 г, 29,3 ммоль) в ДХМ (100 мл) добавляли пиридин (18 мл) гидрохлорид метил-L-лейцината (4) (5,1 г, 35,1 ммоль), затем медленно добавляли трифосген (4,4 г, 14,6 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили 1N водн. HCl (100 мл), затем экстрагировали ДХМ (2x50 мл), промывали (2x50 мл) раствором NaHCO₃, органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 10% этилацетатом в гексане, с получением метил((1-циклогексил-2фенилэтокси)карбонил)-Ь-лейцината (5). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане; Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=398,35 [M+Na]+.

((1 -циклогексил-2-фенилэтокси)карбонил)Ж-лейцин (6)

К перемешиваемому раствору метил-((1-циклогексил-2-фенилэтокси)карбонил)Ж-лейцината (5) (2,5 г, 6,663 ммоль) в ТГФ (10 мл), воде (10 мл) добавляли гидроксид лития (600 мг, 13,32 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (((3-метил-1-фенилбутан-2-ил)окси)карбонил)-L-лейцина (6). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 384,47 [M+Na]+.

- 331 049429

Метил(2S)-2-((2S)-2-(((1-циклогексил-2-фенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (7)

К перемешиваемому раствору ((1-циклогексил-2-фенилэтокси)карбонил)-Г-лейцина (6) (1 г, 2,7683 ммоль) в ДМФА (20 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (0,79 г, 4,1524 ммоль), HOBt (0,561 г, 4,1524 ммоль), DTPEA (1,6 мл, 8,3049 ммоль) и метил-(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (0,620 г, 3,3219 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 10% метанолом и дихлорметаном, с получением метил-(2S)-2-((2S)-2-(((1-циклогексил-2фенилэтокси)карбонил)амино)-4.-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (7). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,6 ЖХмС (ИЭР): m/z=530,7 [M+H]+.

1-Циклогексил-2-фенилэтил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (8)

К перемешиваемому раствору метилметил(2S)-2-((2S)-2-(((1-циклогексил-2фенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (7) (0,5 г, 0,944 ммоль) в дихлорметане (30 мл) добавляли 2М LiBH4 в ТГФ (2 мл, 1,889 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH4Cl и экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 1-циклогексил-2-фенилэтил((S)-1-((S)-1гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (8). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 502,48 [М+Н]⁺.

-Циклогексил-2-фенилэтил((S)-4-метил-1 -оксо- 1-(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С237)

К перемешиваемому раствору 1-циклогексил-2-фенилэтил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (8) (270 мг, 0,5385 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (685,1 мг, 1,6157 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл) и солевым раствором (1x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение подвергали препаративной ВЭЖХ с получением 1-циклогексил-2-фенилэтил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С237). ЖХМС (ИЭР): m/z 500,3 [М-Н]⁺.

Пример 180: Синтез соединения С238

- 332 049429

2-(3 -Хлорфенил)-1 -(4-фторфенил)-2-метилпропан-1 -ол (2)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-2-метилпропаналя (промеж. соед.-3) (10 г, 54,945 ммоль) в ТГФ (100 мл) добавляли (4-фторфенил)магнийбромид (54 мл, 10,89 ммоль) при -30°C, и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH₄Cl (100 мл) и фильтровали через слой целита, и промывали этилацетатом (100 мл). Слои разделяли и сушили над сульфатом натрия, затем упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 10% этилацетатом в гексане, с получением 2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропан-1-ола (2). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 261,28 [М-ОН].

Метил-((2-(3 -хлорфенил)-1 -(4-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-L-лейцинат (4)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропан-1-ола (2) (5 г, 17,985 ммоль) в ДХМ (30 мл) добавляли пиридин (6 мл), метил-L-лейцинат (3) (4,3 г, 23,381 ммоль), затем медленно добавляли трифосген (2,6 г, 8,992 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ. Реакционную смесь гасили 1N водн. HCl (100 мл), затем экстрагировали ДХМ (2x50 мл), промывали насыщ. NaHCO₃ (2x50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 15% этилацетатом в гексане, с получением метилметил((2-(3хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-L-лейцината (4). Система ТСХ: 10% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=472,27 [M+Na]+.

((2-(3-Хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-L-лейцин (5)

К перемешиваемому раствору ((2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-Lлейцината (4) (3,6 г, 8,017 ммоль) в ТГФ (20 мл), воде (5 мл) добавляли LiOH.H₂O (1 г, 24,051 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x40 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением ((2(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-L-лейцина (5). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 458,23 [M+Na]+.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропаноат (6)

К перемешиваемому раствору ((2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)-Lлейцина (5) (1,4 г, 3,21 ммоль) в ДМФА (14 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (922 мг, 4,827 ммоль), HOBt (651 мг, 4,827 ммоль), DIPEA (1,4 мл, 9,654 ммоль) и метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин 3-ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (718 мг, 3,862 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 80% этилацетатом и петролейным эфиром, с получением метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропокси)карбонил)амино)-4-метилпентαнαмидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропаноата (6). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 604,65 [М+Н]⁺.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -(4-фторфенил)-2-метилпропил((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (7)

К перемешиваемому раствору метил(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2

- 333 049429 метилпропокси)кαрбонил)амино)-4-метилпентанαмидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноαта (6) (300 мг, 0,497 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли 2М LiBH4 в ТГФ (0,5 мл, 0,995 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Затем реакционную смесь гасили водн. раствором NH₄Cl (50 мл) и экстрагировали EtOAc (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (2x20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением соединения 2-(3-хлорфенил)-1 -(4-фторфенил)-2-метилпропил((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (7). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=576,64 (M+H)+.

2-(3-Хлорфенил)-1 -(4-фторфенил)-2-метилпропил((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3 -((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С238)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2-метилпропил((S)-1-(((S)-1гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (7) (270 мг, 0,469 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (398 мг, 0,939 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (20 мл). Фильтрат промывали насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного вещества, данное неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-1-(4-фторфенил)-2метилпропил((S)-4-метил-1 -оксо- 1-({{S)-1 -оксо-3 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропαн-2ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С238). Система ТСХ: 10% метанола в ДХМ Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=574,2 (M+H)⁺.

Пример 181: Синтез соединения С239

С!

фрагмент амина-29

2-(3-Хлорбензил)циклопентил((S)-1 -(((S)-1 -(циклопропансульфонамидо)-1 -оксо-3 -((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С239)

К перемешиваемому раствору (((2-(3-хлорбензил)циклопентил)окси)карбонил)-L-лейцина (фрагмент кислоты-52) (250 мг, 0,681 ммоль) в ДМФА (6 мл) одновременно добавляли EDC-HCl (195 мг, 1,021 ммоль), HOBt (137 мг, 1,021 ммоль), DIPEA (0,3 мл, 2,043 ммоль) и гидрохлорид (S)-2-амино-N(циклопропилсульфонил)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропαнαмида (фрагмент амина-29) (254 мг, 0,817 ммоль) при 0°C и перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорбензил)циклопентил((S)-1-(((S)-1(циклопропансульфонамидо)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С239). Система ТСХ: 15% метанола в дихлорметане Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z=625,3 [M+H]⁺.

- 334 049429

Пример 182: Синтез соединения С240

Метил-(2S)-2-((2S)-2-(((((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)2-оксопирролидин-3 -ил)пропаноат (1)

К перемешиваемому раствору (((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)-Ь-лейцина (фрагмент кислоты-23) (1 г, 3,003 ммоль) в ДМФА (10 мл) одновременно добавляли HATU (1,7 г, 4,504 ммоль), DIPEA (2 мл, 9,009 ммоль) и метил(S)-2-амино-3-((S) 2-оксопирролидин-3-ил)пропаноат (фрагмент амина-2) (0,656 г, 3,603 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (100 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом и петролейным эфиром, с получением метил-(2S)-2-((2S)-2-((((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (1). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ЮР): m/z 502,94 [М+Н]+.

(2S)-2-((2S)-2-((((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору Метил(2S)-2-((2S)-2-((((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)амино)4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (1) (700 мг, 1,39 ммоль) в ТГФ (10 мл), воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (190 мг, 4,1866 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2-((2S)-2-((((2бензилциклопентил)окси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 15% метанола в дихлорметане Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 488,38.31 [М+Н]⁺.

2-Бензилциклопентил-((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1l4тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-2-((((2-бензилциклопентил)окси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2) (500 мг, 1,025 ммоль) в ДХМ (10 мл) одновременно добавляя HATU (584 мг, 1,538 ммоль), DIPEA (1 мл, 3,076 ммоль) и 1(цианметил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромид (3) (255 мг, 1,23 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x20 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 2-бензилциклопентил-((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)2-оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2

- 335 049429 ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 597,73 (М+Н)+.

2-Бензилциклопентил((S)-1 -(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С240)

К перемешиваемому раствору 2-бензилциклопентил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1l4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2ил)карбамата (4) (430 мг, 0,72 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли м-ХПБК (190 мг, 1,08 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. К этому добавляли водн. раствор аммиака (5 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO₃ (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-бензилциклопентил((S)-1-(((S)-4-амино-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С240). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 515,2 (М+Н)+.

Пример 183: Синтез соединений С272 и С241.

(2S)-2-(((1,2-Бис(3-хлорфенил)этокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропановая кислота (фрагмент кислоты-53)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-(((1,2-бис(3-хлорфенил)этокси)карбонил)амино)-3циклогексилпропановой кислоты (фрагмент кислоты-53) (2 г, 4,31 ммоль) в ДМФА (10 мл) при 0°С одновременно добавляли EDC-HCl (1,2 г, 6,28 ммоль), НОВТ (872 мг, 6,45 ммоль), DIPEA (6 мл, 3 об.) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина 2) (962 мг, 5,17 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-бис(3хлорфенил)этокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата. Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ R_f: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 631,2 (М+Н)+.

1,2-Бис(3 -хлорфенил)этил((S)-3 -циклогексил-1 -(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3 ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-бис(3хлорфенил)этокси)карбонил)амино)-3-циклогексилпропанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропаноата (1) (1,5 г, 2,37 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли 2М LiBH4 в ТГФ (2,37 мл, 4,75 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((S)-3циклогексил-1 -(((S)-1 -гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)пропан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2ил)карбамата (2). Система ТСХ: 5% МеОН в ДХМ R_f 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z 604,2 (М+Н)+.

1,2-Бис(3-хлорфенил)этил((S)-3-циклогексил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3

- 336 049429 ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамат (соединение С272)

К перемешиваемому раствору ((S)-3-циклогексил-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3ил)пропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата(2) (500 мг, 0,82 ммоль) в этилацетате (20 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (1 г, 2,48 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (20 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1,2-бис(3 -хлорфенил)этил((S)-3 -циклогексил-1 -оксо- 1-(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3 ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С272). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=602,2 (M+h)⁺.

1,2-Бис(3 -хлорфенил)этил((2S)-3-циkлогексил-1 -(((2S)-4-(циkлопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1 ((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((S)-3-циклогексил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пропан-2-ил)карбамата (соединение С272) (350 мг, 0,69 ммоль) в ДХМ (20 мл) последовательно добавляли пиридин (1 мл, 3 об.), изоцианоциклопропана (3) (46 мг, 0,91 ммоль) при 0°C и перемешивании в течение 10 мин. К этому добавляли ТФУ (0,15 мл, 1,31 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x15 мл). Органический слой промывали 1N HCl (3x 15 мл), солевым раствором (3x10 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циkлогексил-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси4-оксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 5% метанол/ дихлорметан; Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=687,4 (M+H)⁺.

1,2-Бис(3 -хлорфенил)этил((S)-3 -циклогексил-1 -(((S)-4-(циkлопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С241)

К перемешиваемому раствору 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((2S)-3-циkлогексил-1-(((2S)-4(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-1 -оксопропан2-ил)карбамата (4) (250 мг, 0,36 ммоль) в EtOAc (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (308 мг, 0,72 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (25 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x10 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x10 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((S)-3-циклогексил-1-(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С241). Система ТСХ: 10% метанол/дихлорметан; Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=685,2 (M+H)⁺.

- 337 049429

Пример 184: Синтез соединений С282 и С242.

Метил-((1,2-бис(3-хлорфенил)этокси)карбонил)-L-лейцинат (2)

К перемешиваемому раствору 1,2-бис(3-хлорфенил)этан-1-ола (промеж. соед.-3) (2,7 г, 10,11 ммоль), метил(S)-метил-L-лейцината HCl (2,2 г, 12,13 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавляли пиридин (8,5 мл, 3 об.), затем трифосген (1,4 г, 4,72 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили 2N HCl (50 мл), экстрагировали ДХМ (2x40 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 10% этилацетатом в петролейном эфире с получением метил-((1,2бис(3-хлорфенил)этокси)карбонил)-L-лейцината (2). Система ТСХ: 30% этилацетата в гексане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z=477,1 [M+Na]+.

((1,2-Бис(3-хлорфенил)этокси)карбонил)-L-лейцин (3)

К перемешиваемому раствору метил-((1,2-бис(3-хлорфенил)этокси)карбонuл)-L-лейцината (2) (2,5 г, 5,24 ммоль) в ТГФ (20 мл), воде (20 мл) добавляли гидроксид лития (0,64 г, 15,72 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн. 1N раствором HCl до рН ~ 3 и экстрагировали этилацетатом (2x40 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением ((1,2-бис(3хлорфенил)этокси)карбонил)-L- лейцина (3). Система ТСХ: 100% EtOAc Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 423,1 [M+Na]+.

Метил-(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-бис(3-хлорфенил)этокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)оксопирролидин-3-ил)пропаноат (4)

К перемешиваемому раствору ((1,2-бис(3-хлорфенил)этокси)карбонил)-L-лейцина (3) (2 г, 4,728 ммоль) в ДМФА при 0°С одновременно добавляли EDC-HCl (1,35 г, 7,092 ммоль), НОВТ (957 мг, 7,092 ммоль), DIPEA (4 мл, 3 об.) и гидрохлорид метил(S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (фрагмент амина 2) (1,055 г, 5,673 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 16 ч реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в петролейном эфире, с получением метил-(2S)-2-((2S)-2-(((1,2бис(3-хлорфенил)этокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопuрролидин-3ил)пропаноата (4). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 жХмС (ИЭР): m/z 591,9 (M+Na)+.

1,2-Бис(3-хлорфенил)этил((S)-1-(((S)-1-гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (5)

- 338 049429

К перемешиваемому раствору меmuл-(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-бuс(3хлорфенил)этокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (4) (1,5 г, 2,538 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли 2М LiBH₄ в ТГФ (2,53 мл, 5,076 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Через 2 ч реакционную смесь погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и концентрировали. Неочищенный остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 90% этилацетатом в петролейном эфире, с получением 1,2-бис(3-хлорфенил)этил-1,2-бис(3хлорфенил)этил ((S)-1 -(((S)-1 -гидрокси-3 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-метил-1 оксопентан-2-ил)карбамата (5). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,2 ЖХМС (ИЭР): m/z=564,2 (M+H)+.

1,2-Бис(3 -хлорфенил)этил((S)-4-метил-1 -оксо-1 -(((S)-1 -оксо-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамат (соединение С282)

К перемешиваемому раствору 1,2-бuс(3-хлорфенuл)эmuл-1,2-бuс(3-хлорфенил)эmил((S)-1-(((S)-1гидрокси-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)-4-меτил-1-оксопенτан-2-ил)карбамаτа (5) (500 мг, 0,888 ммоль) в этилацетате (20 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (1,1 г, 2,66 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (20 мл) и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл), затем насыщ. раствором тиосульфата натрия (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали неочищенный продукт, очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((S)-4-метил-1-оксо-1-(((S)-1-оксо-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С282). Система ТСХ: 5% метанола в ДХМ Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=562,1 (M+H)⁺.

1,2-Бис(3-хлорфенил)этил((2S)-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-(((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (7)

К перемешиваемому раствору 1,2-бис(3 -хлорфенил)этил((S)-4-метил-1 -оксо- 1-(((S)-1 -okco-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропан-2-ил)амино)пентан-2-ил)карбамата (соединение С282) (350 мг, 0,623 ммоль) в ДХМ (10 мл) последовательно добавляли пиридин (1 мл, 3 об.), изоцианоциклопропан (6) (61 мг, 0,91 ммоль) при 0°C и перемешивали в течение 10 мин. К нему добавляли ТФУ (0,14 мл, 2,49 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили ледяной водой (20 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x15 мл). Органический слой промывали 1N HCl (3x15 мл), солевым раствором (3x10 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((2S)-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3-гидрокси-4-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (7). Система ТСХ: 5% метанол/ дихлорметан Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=647,5 [M+H]⁺.

1,2-Бис(3 -хлорфенил)этил((S)-1 -(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С242)

К перемешиваемому раствору 1,2-бис(3-хлорфенил)этил((2S)-1-(((2S)-4-(циклопропиламино)-3гидрокси-4-оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3 -ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамата (7) (200 мг, 0,309 ммоль) в EtOAc (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (393 мг, 0,928 ммоль) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (25 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x10 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO3 (3x10 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 1,2-бис(3 -хлорфенил)этил((S)-1 -(((S)-4-(циклопропиламино)-3,4-диоксо- 1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С242). Система ТСХ: 10% метанол/ дихлорметан Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z 645,2 (М+Н)⁺.

- 339 049429

Пример 185: Синтез соединения С243

(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропановая кислота (2)

К перемешиваемому раствору метил-(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1фенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (1) (1,2 г, 2,154 ммоль) в ТГФ(10 мл), воде (5 мл) добавляли гидроксид лития (271 мг, 6,460 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь полностью перегоняли при пониженном давлении, неочищенное соединение подкисляли водн 1N раствором HCl до рН ~ 2 и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением (2S)-2((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-4-метилпентанамидо)-3-((S)-2оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2). Система ТСХ: 100% этилацетата Rf: 0,1 ЖХМС (ИЭР): m/z 544,46 [М+Н]+.

2-(3 -Хлорфенил)-1 -фенилэтил((S)-1 -(((S)-4-циано-3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1 -оксопентан-2-ил)карбамат (4)

К перемешиваемому раствору (2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтокси)карбонил)амино)-4метилпентанамидо)-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропановой кислоты (2) (800 мг, 1,472 ммоль) в ДХМ (10 мл) одновременно добавляли HATU (618 мг, 2,209 ммоль), DIPEA (0,81 мл, 4,418 ммоль) и 1(цианметил)тетрагидро-1H-тиофен-1-ия бромид (3) (455 мг, 2,209 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ледяной водой (30 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x25 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали с помощью очищали нормально-фазовой хроматографией CombiFlash, соединение элюировали 5% метанолом в дихлорметане с получением 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтил((S)1 -(((S)-4-циано-3 -оксо-1 -((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-1 l4-тиофен-1 -илиден)бутан-2ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (4). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=653,67 [M+H]⁺.

2-(3-Хлорфенил)-1-фенилэтил((S)-1-(((S)-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4-(пиперидин1-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамат (соединение С243)

К перемешиваемому раствору 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтил((S)-1-(((S)-4-циано-3-оксо-1-((S)-2оксопирролидин-3-ил)-4-(тетрагидро-П4-тиофен-1-илиден)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2ил)карбамата (4) (350 мг, 0,535 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли м-ХПБК (185 мг, 1,071 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. К ней добавляли пиперидин (4 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и промывали насыщ. раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл и сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2-(3-хлорфенил)-1-фенилэтил((S)-1-(((S)-3,4-диоксо-1-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)-4(пиперидин-1-ил)бутан-2-ил)амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил)карбамата (соединение С243). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,3 ЖХМС (ИЭР): m/z 639,2 [М+Н]⁺.

- 340 049429

Пример 186: Синтез соединения С244

3-Хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3ил)-3-гидрокси-4-оксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (2)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-((1-(5,5-диметил-2оксопирролидин-3-ил)-3-оксопропан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С198) (230 мг, 0,455 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли пиридин (1 мл, 4 об.), изоцианоциклопропан (2) (45 мг, 0,682 ммоль), затем ТФУ (0,13 мл, 1,09 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и промывали 1N раствором HCl (2x15 мл), а затем солевым раствором (20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного 3хлорбензил-((2 S)-3-циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-1 -(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3 -ил)-3гидрокси-4-оксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (2). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,5 ЖХМС (ИЭР): m/z=591,35 (M+H)+.

3-Хлорбензил-((2S)-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-1-(5,5-диметил-2-оксопирролидин-3ил)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамат (соединение С244)

К перемешиваемому раствору 3-хлорбензил-((2S-3-циклогексил-1-((4-(циклопропиламино)-1-(5,5диметил-2-оксопирролидин-3-ил)-3-гидрокси-4-оксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (2) (100 мг, 0,169 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (143 мг, 0,338 ммоль) при 0°С и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За ходом реакции следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этилацетатом (25 мл), а фильтрат промывали раствором тиосульфата натрия (3x20 мл), а затем насыщенным раствором NaHCO₃ (3x20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Неочищенное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3 -хлорбензил-((2 S)-3-циклогексил-1 -((4-(циклопропиламино)-1 -(5,5-диметил-2-оксопирролидин3-ил)-3,4-диоксобутан-2-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение С244). Система ТСХ: 10% метанола в дихлорметане Rf: 0,4 ЖХМС (ИЭР): m/z=589,3 (M+H)⁺.

Тестирование активности соединений

Анализы противовирусной активности in vitro

Анализы активности против норовируса:

Противовирусные анализы на основе клеток. Противовирусные эффекты ингибиторов исследуют в клетках, содержащих репликон вируса Норфолк (клетки HG23). Вкратце, конфлюэнтные и полуконфлюэнтные клетки инкубируют со средой, содержащей ДМСО (<0,1%) или каждое соединение (до 100 мкМ) в течение 48 часов. После инкубации выделяли тотальную РНК и количественно определяли вирусный геном с помощью количественной ОТ-ПЦР в реальном времени (qRT-PCR). Значения ЕС₅₀ определяются с помощью программного обеспечения GraphPadPrism. В дополнение к репликону вируса Норфолк, СРЕ (цитопатический эффект) противовирусную активность ингибиторов определяют с использованием FCoV (коронавирус кошек), MERS-CoV (коронавирус, связанный с ближневосточным респираторным синдромом), SARS-CoV (коронавирус, связанный с тяжелым острым респираторным синдромом), коронавируса человека 229Е, норовируса мыши и риновируса человека.

Анализы вирусной протеазы. Противовирусную активность ингибиторов определяли с помощью анализа FRET (Ферстеровский перенос энергии). Очищенную вирусную протеазу инкубировали с пептидом-субстратом протеазы (Edans-DFHLQ/GP-Dabcyl) и ингибитором, и значения IC₅₀ впоследствии определяли по сигналам флуоресценции.

Анализ FRET протеазы норо-Норфолк проводили в 50 мМ HEPES-Na, pH 8, 50 мМ NaCl, 0,4 мМ ЭДТА, 4% глицерина и 6 мМ DTT. Самогасящийся пептидный субстрат

- 341 049429

[5-FAM]-EPDFHL OG PEDLAKK-[TAMRA] был специально синтезирован Anaspec. Соединения разводили 3-кратными серийными разведениями до конечных концентраций от 200 мкМ до 10,2 нМ. Норопротеазу добавляли до конечной концентрации 1-7 мкМ в зависимости от уровня активности фермента, а пептидный субстрат добавляли до конечной концентрации 10 мкМ. Анализ инкубировали в течение 90 минут при 37°С и считывали в приборе Perkin Elmer Envision с возбуждением при 473 нм и измерением эмиссии при 519 нм.

Анализ протеазы SARS2 FRET проводили в 20 мМ HEPES-Na, pH 7, 120 мМ NaCl, 0,4 мМ ЭДТА, 0,01% Тритона, 5% глицерина и 4 мМ DTT. Самогасящийся пептидный субстрат 5-FAM-TSA VLQ SGF RKK (5TAMRA)-NH2 был специально синтезирован Anaspec. Соединения разводили 3-кратными серийными разведениями до конечных концентраций от 20 мкМ до 1,0 нМ. SARS2 протеазу добавляли до конечной концентрации 25 нМ в зависимости от уровня активности фермента, а пептидный субстрат добавляли до конечной концентрации 1,3 мкМ. Анализ инкубировали в течение 30 минут при 30°С и считывали в приборе Perkin Elmer Envision с возбуждением при 473 нм и измерением эмиссии при 519 нм.

Результаты анализа ингибирования протеазы норовируса представлены в табл. D ниже.

Таблица D

Соединение №	1С50 (мкМ)
С32	4,2 мкМ
С37	26,0 мкМ
С38	3,7 мкМ
С43	5,9 мкМ
С52	9,2 мкМ
С54	7,0 мкМ
С66	10,9 мкМ
С67	9,1 мкМ
С68	>200
С69	>200
С70	5,2 мкМ
С71	87,0 мкМ

Соединение №	1С50 (мкМ)
С72	2,3 мкМ
С73	39,1 мкМ
С74	16,4 мкМ
С75	8,1 мкМ
С76	10,5 мкМ
С77	32,6 мкМ
С78	>200
С79	>200
С80	>200
С81	23,9 мкМ
С82	126,6 мкМ
С83	>200

- 342 049429

Соединение №	1С50 (мкМ)
С84	190,5 мкМ
С85	143,4 мкМ
С86	>200
С87	208,7 мкМ
С88	>200
С89	99,2 мкМ
С90	136,2 мкМ
С91	>200
С92	36,3 мкМ
С93	209,3 мкМ
С 94	156,3 мкМ
С95	115,9 мкМ
С96	4,1 мкМ
С97	66,9 мкМ
С98	>200
С99	>200
С100	>200
С101	>200
С102	6,9 мкМ
С103	21,3 мкМ
С104	2,8 мкМ
С105	2,7 мкМ
С106	1,8 мкМ
С107	85,5 мкМ
С108	0,979 мкМ
С109	1,4 мкМ
сио	1,3 мкМ
сш	40,7 мкМ
С112	109,2 мкМ
СПЗ	104,5 мкМ
С114	1,7 мкМ
С115	2,2 мкМ
СПб	98,1 мкМ

Соединение №	1С50 (мкМ)
С117	77,7 мкМ
С118	118,8 мкМ
С119	67,6 мкМ
С120	62,6 мкМ
С121	106,8 мкМ
С122	35,2 мкМ
СПЗ	121,5 мкМ
С124	36,5 мкМ
С125	47,2 мкМ
С126	>200
С127	5,7 мкМ
С128	155,6 мкМ
С129	>200
С130	>200
С131	193,1 мкМ
С132	6,0 мкМ
С133	0,743 мкМ
С134	171,3 мкМ
С135	191,5 мкМ
С136	3,2 мкМ
С137	9,9 мкМ
С138	92,9 мкМ
С139	162,8 мкМ
С140	76,0 мкМ
С141	9,6 мкМ
С142	>200
СИЗ	3,7 мкМ
С144	140,2 мкМ
С145	>200
С146	>200
С147	>200
С148	58,7 мкМ
С149	>200

- 343 049429

Соединение №	1С50 (мкМ)
С150	>200
С151	130,7 мкМ
С152	2,9 мкМ
С153	>200
С154	76,1 мкМ
С155	86,4 мкМ
С156	6,1 мкМ
С157	3,1 мкМ
С158	100,4 мкМ
С159	75,3 мкМ
С160	4,3 мкМ
С161	>200
С162	8,3 мкМ
С163	62,8 мкМ
С164	142,6 мкМ
С165	5,5 мкМ
С166	13,9 мкМ
С167	38,6 мкМ
С168	>200
С169	>200
С170	52,5 мкМ
С171	>200
С172	>200
СПЗ	44,0 мкМ
С174	57,9 мкМ
С175	38,3 мкМ
С176	69,7 мкМ
С177	100,0 мкМ
С178	3,5 мкМ
С179	3,1 мкМ
С180	6,1 мкМ
С181	3,3 мкМ
С182	106,1 мкМ

Соединение №	1С50 (мкМ)
СИЗ	16,2 мкМ
С184	81,7 мкМ
С185	28,2 мкМ
С186	30,8 мкМ
С187	81,9 мкМ
С188	46,6 мкМ
С189	3,3 мкМ
С190	37,1 мкМ
С191	91,9 мкМ
С192	27,7 мкМ
С193	3,8 мкМ
С194	>200
С195	>200
С196	26,3 мкМ
С197	155,0 мкМ
С198	3,3 мкМ
С199	92,8 мкМ
С200	1,2 мкМ
С201	2,7 мкМ
С202	7,3 мкМ
С203	1,5 мкМ
С204	1,8 мкМ
С205	183,8 мкМ
С206	76,3 мкМ
С207	106,0 мкМ
С208	>200
С209	88,0 мкМ
С210	>200
С211	57,8 мкМ
С212	5,3 мкМ
С213	18,9 мкМ
С214	4,6 мкМ
С215	>200

- 344 049429

Соединение №	1С50 (мкМ)
С216	>200
С217	>200
С218	>200
С219	>200
С220	>200
С221	>200
С222	13,8 мкМ
С223	22,6 мкМ
С224	7,8 мкМ
С225	7,0 мкМ
С226	169,2 мкМ
С227	>200
С228	25,8 мкМ
С229	4,6 мкМ
С230	13,4 мкМ
С231	204,1 мкМ
С232	>200
С233	>200
С234	124,4 мкМ
С235	8,9 мкМ
С236	185,1 мкМ
С237	8,6 мкМ
С238	1,6 мкМ
С239	Действует
С240	>200
С241	85,7 мкМ
С242	33,9 мкМ
С243	>200
С244	97,6 мкМ
С245	>200
С246	52,1 мкМ
С247	182,7 мкМ
С248	>200
Соединение №	1С50 (мкМ)
С282	1,0 мкМ
С283	>200
С284	201,6 мкМ
С285	27,1 мкМ
С286	15,2 мкМ
С287	>200
С288	119,1 мкМ
С289	86,0 мкМ
С290	93,2 мкМ

Соединение №	1С50 (мкМ)
С249	>200
С250	11,7 мкМ
С251	58,2 мкМ
С252	0,973 мкМ
С253	1,8 мкМ
С254	>200
С255	>200
С256	>200
С257	>200
С258	42,9 мкМ
С259	4,4 мкМ
С260	>200
С261	192,6 мкМ
С262	3,2 мкМ
С263	1,0 мкМ
С264	12,7 мкМ
С265	10,4 мкМ
С266	0,796 мкМ
С267	7,5 мкМ
С268	0,549 мкМ
С269	2,2 мкМ
С270	105,8 мкМ
С271	>200
С272	16,4 мкМ
С273	>200
С274	>200
С275	1,5 мкМ
С276	3,5 мкМ
С277	33,4 мкМ
С278	3,5 мкМ
С279	>200
С280	>200
С281	>200
Соединение №	1С50 (мкМ)
С291	2,5 мкМ
С292	90,5 мкМ
С293	8,7 мкМ
С294	177,3 мкМ
С295	5,1 мкМ
С296	115,5 мкМ
С297	217,1 мкМ
С298	217,9 мкМ

Результаты анализа ингибирования протеазы SARS-CoV-2 представлены в табл. Е ниже.

- 345 049429

Соединение №	1С50 (мкМ)
С1	>200
С2	71,0 мкМ
СЗ	>200
С4	>200
С5	>200
С6	>200
С7	>200
С8	>200
С9	>200
СЮ	>200
СИ	>200
С12	>200
С13	>200
С14	>200
С15	>200
С16	37,8 мкМ
С17	2,7 мкМ
С18	49,25 мкМ
С19	94,3 мкМ
С20	>200

Таблица Е

Соединение №	1С50 (мкМ)
С21	>200
С22	3,8 мкМ
С23	>200
С24	>200
С25	11,1 мкМ
С26	>200
С27	>200
С28	>200
С29	>200
СЗО	42,3 мкМ
С31	>200
С32	0,023
сзз	>200
C34	0,1 мкМ
C35	18,9 мкМ
С36	2,5 мкМ
С37	0,1373 0,2621
С38	0,016 мкМ
С39	0,153 мкМ
С40	0,1735 0,2214

- 346 049429

Соединение №	1С50 (мкМ)
С41	0,308 мкМ
С42	0,356 мкМ
С43	0,056 мкМ
С44	0,331 мкМ
С45	0,304 мкМ
С46	1,382 мкМ
С47	0,073 мкМ
С48	0,241 мкМ
С49	0,266 мкМ
С50	0,119 мкМ
С51	0,115 мкМ
С52	0,5 мкМ
С53	0,04 мкМ
С54	0,1 мкМ
С55	0,3 мкМ
С56	0,6 мкМ
С57	0,8 мкМ
С58	0,1 мкМ
С59	0,1 мкМ
С60	0,6 мкМ
С61	0,0 мкМ
С62	4,6 мкМ
С63	1,6 мкМ
С64	0,1 мкМ
С65	26,9 мкМ
С66	0,1 мкМ
С67	0,3 мкМ
С68	2,1 мкМ
С69	26,8 мкМ
С70	0,1 мкМ
С71	1,6 мкМ
С72	0,01 мкМ
С73	0,60 мкМ

Соединение №	1С50 (мкМ)
С74	0,14 мкМ
С75	0,0012
С76	0,38 мкМ
С77	0,6 мкМ
С78	0,5 мкМ
С79	3,8 мкМ
С80	0,9 мкМ
С81	0,2 мкМ
С82	4,4 мкМ
С83	1,3 мкМ
С84	9,2 мкМ
С85	17,8 мкМ
С86	0,9 мкМ
С87	0,7 мкМ
С88	1,3 мкМ
С89	0,3 мкМ
С90	0,1 мкМ
С91	>20
С92	0,2 мкМ
С93	>20
С94	2,6 мкМ
С95	7,0 мкМ
С96	0,0 мкМ
С97	0,1 мкМ
С98	2,2 мкМ
С99	2,8 мкМ
С100	1,0 мкМ
С101	>20
С102	0,118 мкМ
сюз	0,736 мкМ
С104	0,006 мкМ
С105	0,0006
С106	0,0001

- 347 049429

Соединение №	1С50 (мкМ)
С107	6,792 мкМ
С108	0,0012
С109	0,002
СПО	0,0014
Cl И	0,4911
С112	0,1850
СИЗ	0,1333
С114	0,0111
С115	0,0157
СПб	4,8437
С117	0,0553
С118	0,8685
С119	0,7962
С120	1,0555
С121	0,1775
С122	0,4559
С123	0,2945
С124	0,3245
С125	0,0201
С126	1,1927
С127	0,0036
С128	0,8984
С129	>20
С130	>20
С131	15,81
С132	0,060
С133	0,0000855
С134	0,767
С135	1,8901
С136	0,00045
С137	0,0436
С138	0,2454
С139	3,1425

- 348 049429

Соединение №	1С50 (мкМ)
Cl 73	1,4331
С174	0,0082
С175	0,3862
С176	1,5674
С177	4,3893
С178	0,0710
С179	0,000015
С180	0,0566
С181	0,000076
С182	2,4676
С183	0,2490
С184	2,3188
С185	0,1426
С186	1,2417
С187	0,1086
С188	1,8928
С189	0,3398
С190	0,0445
С191	0,3052
С192	0,6169
С193	0,0007
С194	0,4850
С195	2,0137
С196	0,1082
С197	0,6200
С198	0,0047
С199	0,1961
С200	0,00065
С201	0,0044
С202	0,6444
С203	0,0105
С204	0,224 мкМ
С205	2,559 мкМ

Соединение №	1С50 (мкМ)
С206	5,109 мкМ
С207	0,315 мкМ
С208	1,046 мкМ
С209	1,875 мкМ
С210	2,647 мкМ
С211	0,339 мкМ
С212	0,194 мкМ
С213	0,257 мкМ
С214	0,011 мкМ
С215	20 000 мкМ
С216	3,102 мкМ
С217	3,991 мкМ
С218	1,847 мкМ
С219	20 000 мкМ
С220	1,832 мкМ
С221	20 000 мкМ
С222	0,235 мкМ
С223	0,781 мкМ
С224	0,183 мкМ
С225	1,01 мкМ
С226	0,057 мкМ
С227	0,059 мкМ
С228	0,12 мкМ
С229	0,0008 мкМ
С230	0,07 мкМ
С231	1,8 мкМ
С232	15,1 мкМ
С233	0,020 мкМ
С234	0,0008 мкМ
С235	0,071 мкМ
С236	0,271 мкМ
С237	0,003 мкМ
С238	0,0001 мкМ

- 349 049429

Все ссылки, представленные в данном документе, включены в него в полном объеме посредством ссылки. Используемые в данном документе все сокращения, символы и условные обозначения соответствуют тем, которые используются в современной научной литературе. См., например, Janet S. Dodd, ed., The ACS Style Guide: A Manual for Authors and Editors, 2nd Ed., Washington, D.C.: American Chemical Society, 1997.

Следует понимать, что хотя изобретение было описано в связи с его подробным описанием, вышеприведенное описание предназначено для иллюстрации, а не для ограничения объема раскрытия, который определяется объемом прилагаемой формулы изобретения. Другие аспекты, преимущества и модификации находятся в пределах объема следующей формулы изобретения.

Claims (23)

1. Соединение, имеющее структуру формулы (I), или его фармацевтически приемлемая соль:

где Z представляет собой О или NR¹;

каждый RN независимо представляет собой Н или C_1-6алкил;

R¹ представляет собой 5-8-членный N-гетероцикл, причем атом азота в кольце необязательно замещен СОО-C_1-6алкилом;

R² представляет собой C1-6алкилен-C6-10арил, причем C1-6алкилен замещен 1-3 R⁷, и арил необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбранными из галогена, C1_₆алкокси, C₁_₆алкила и CO₂C₁_₆алкила;

R³ представляет собой C₁_₆алкил, C₁_₆алкилен-С₅.₈карбоциклил, или C₀_₆алкилен-С₆.₁₀арил, необязательно замещенный 1-2 галогенами;

каждый R⁴ независимо представляет собой C₁_₆алкил, C₀_₄алкилен-C₆_₁₀арил, или два R⁴ с углеродом или атомами углерода, к которым они присоединены, объединяются с образованием спиро- или конденсированного 3-12-членного карбоциклического или гетероциклического кольца, имеющего 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S, которое необязательно замещено 1-2 заместителями, независимо выбранных из С(О)-C₁.₆алкила, и SO₂-C₁_₆алкила;

R⁵ представляет собой C1_6алкилен-ОН, C1_6алкилен-ОН, замещенный РО(ОСН2СН2)2, C1_6алкиленОН, замещенный SO3H, -[С(О)]1.2-(4-8-членный гетероцикл, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S), -[C(O)]1_2-NR^NRN, C(O)-Y-H или -[C(O)]1-2-NRⁿ-Y-X-A, где А представляет собой Н, C₃.₈карбоциклил, или 5-8-членный гетероарил, имеющий 1-3 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S;

Y представляет собой связь или C₁_₆алкилен, C₁_₆алкилен необязательно замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из галогена и ОН;

X представляет собой связь или SO₂;

каждый R⁶ представляет собой Н;

каждый R⁷ независимо представляет собой галоген или C₀_₆алкилен-С₆_₁₀арил, и С₆_₁₀ арил необязательно замещен 1-2 галогенами, или два R⁷ с углеродом или атомами углерода, к которым они присоединены, объединяются с образованием спиро- или конденсированного C₃_₆карбоциклильного кольца;

n равно 0-3; и о равно 1.

2. Соединение или соль по п.1, где каждый RN представляет собой Н.

3. Соединение или соль по п.1 или 2, где Z представляет собой NR¹.

4. Соединение или соль по п.1 или 2, где Z представляет собой О.

5. Соединение или соль по любому из пп.1-4, где R² представляет собой бензил.

6. Соединение или его соль по любому из пп.1-5, где R³ представляет собой C₁_₆алкил или C₁_₆алкилен-С₅_₈карбоциклил.

7. Соединение или его соль по любому из пп.1-6, где R³ представляет собой

8. Соединение или его соль по любому из пп.1-6, где R³ представляет собой метил, изопропил, изобутил или втор-бутил.

9. Соединение или соль по любому из пп.1-5, где R³ представляет собой C₀_₆алкилен-C₆_₁₀арил.

10. Соединение или соль по любому одному из пп.1-9, где n равно 0.

11. Соединение или соль по любому из пп.1-10, где C₁.₆алкилен замещен 1 или 2 R⁷.

12. Соединение или соль по любому из пп.1-10, где C₁_₆алкилен замещен 3 R⁷.

13. Соединение или соль по п.11 или 12, где по меньшей мере один R⁷ представляет собой C₀.₆алкилен-C₆_₁₀арил, необязательно замещенный 1-2 галогенами.

14. Соединение или соль по п.13, где по меньшей мере один R⁷ представляет собой фенил, необязательно замещенный 1-2 галогенами.

15. Соединение или соль по п.13 или 14, где по меньшей мере один R⁷ представляет собой фенил, необязательно замещенный 1 галогеном.

16. Соединение или соль по любому из пп.1-15, где каждый R⁶ представляет собой Н.

17. Соединение или соль по любому из пп.1-16, где R⁵ представляет собой C(O)-C(O)NRⁿ-Y-X-A.

18. Соединение или соль по любому из пп.1-17, где Y представляет собой C₁_₆алкилен.

19. Соединение или соль по любому из пп.1-18, где X представляет собой связь.

- 351 049429

20. Соединение, указанное в таблице ниже, или его фармацевтически приемлемая соль:

- 352 049429

- 353 049429

- 354 049429

- 355 049429

- 356 049429

- 357 049429

- 358 049429

- 359 049429

- 360 049429

- 361 049429

- 362 049429

- 363 049429

- 364 049429

- 365 049429

- 366 049429

- 367 049429

- 368 049429

- 369 049429

- 370 049429

- 371 049429

- 372 049429

- 373 049429

- 374 049429

- 375 049429

- 376 049429

- 377 049429

- 378 049429

- 379 049429

- 380 049429

- 381 049429

- 382 049429

- 383 049429

- 384 049429

- 385 049429

- 386 049429

- 387 049429

- 388 049429

- 389 049429

- 390 049429

- 391 049429

- 392 049429

- 393 049429

- 394 049429

- 395 049429

21. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение или соль по любому из пи. 1-20, и фармацевтически приемлемый эксципиент.

22. Способ лечения или профилактики вирусной инфекции у хозяина, включающий введение хозяину терапевтического количества соединения или соли по любому из пи. 1-20, где вирусная инфекция представляет собой коронавирусную инфекцию, калицивирусную инфекцию или пикорнавирусную инфекцию.

23. Способ по п.11, где коронавирусная инфекция представляет собой тяжелый острый респираторный синдром (SARS), ближневосточный респираторный синдром (MERS) или коронавирусное заболевание 2019 (COVID-19).