EA048146B1 - Композиции поливалентной пневмококковой вакцины, содержащие конъюгаты полисахарид-белок - Google Patents
Композиции поливалентной пневмококковой вакцины, содержащие конъюгаты полисахарид-белок Download PDFInfo
- Publication number
- EA048146B1 EA048146B1 EA202290401 EA048146B1 EA 048146 B1 EA048146 B1 EA 048146B1 EA 202290401 EA202290401 EA 202290401 EA 048146 B1 EA048146 B1 EA 048146B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- pneumococcal
- serotypes
- vaccine composition
- valent
- polysaccharides
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 286
- 229940124959 polyvalent pneumococcal vaccine Drugs 0.000 title claims description 45
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 342
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 342
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 342
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 claims description 112
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 claims description 112
- 229940124733 pneumococcal vaccine Drugs 0.000 claims description 94
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 48
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 47
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 43
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 40
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 38
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 37
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 36
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims description 35
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 33
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 25
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 25
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 claims description 23
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 23
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 claims description 19
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 13
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 claims description 11
- 229940031000 streptococcus pneumoniae Drugs 0.000 claims description 10
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 claims description 9
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 claims description 8
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 7
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 7
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 claims description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- 208000035109 Pneumococcal Infections Diseases 0.000 claims description 5
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 4
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 4
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 3
- 229940071643 prefilled syringe Drugs 0.000 claims description 3
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 claims 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims 1
- 108010060123 Conjugate Vaccines Proteins 0.000 description 57
- 229940031670 conjugate vaccine Drugs 0.000 description 56
- 108010071134 CRM197 (non-toxic variant of diphtheria toxin) Proteins 0.000 description 45
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 34
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 26
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 16
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 15
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 12
- 108010040473 pneumococcal surface protein A Proteins 0.000 description 11
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 description 11
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 10
- 238000000569 multi-angle light scattering Methods 0.000 description 10
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 9
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 9
- -1 1-cyano4-dimethylaminopyridinium tetrafluoroborate Chemical compound 0.000 description 8
- 229960003983 diphtheria toxoid Drugs 0.000 description 8
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 8
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 8
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 8
- 102100037840 Dehydrogenase/reductase SDR family member 2, mitochondrial Human genes 0.000 description 7
- 101710188053 Protein D Proteins 0.000 description 7
- 101710132893 Resolvase Proteins 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 7
- 229940031999 pneumococcal conjugate vaccine Drugs 0.000 description 7
- 229960001973 pneumococcal vaccines Drugs 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 6
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 6
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 229940031960 pneumococcal polysaccharide vaccine Drugs 0.000 description 6
- 238000011176 pooling Methods 0.000 description 6
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 6
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 6
- 230000004044 response Effects 0.000 description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 6
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 5
- 101710183389 Pneumolysin Proteins 0.000 description 5
- RJGDLRCDCYRQOQ-UHFFFAOYSA-N anthrone Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C3=CC=CC=C3CC2=C1 RJGDLRCDCYRQOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 5
- UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L di(octadecanoyloxy)lead Chemical compound [Pb+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 5
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 5
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 5
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 5
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 5
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 5
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 5
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 4
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 4
- PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N carbonyldiimidazole Chemical compound C1=CN=CN1C(=O)N1C=CN=C1 PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 4
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 4
- 239000006167 equilibration buffer Substances 0.000 description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 4
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- JVIPLYCGEZUBIO-UHFFFAOYSA-N 2-(4-fluorophenyl)-1,3-dioxoisoindole-5-carboxylic acid Chemical compound O=C1C2=CC(C(=O)O)=CC=C2C(=O)N1C1=CC=C(F)C=C1 JVIPLYCGEZUBIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001425 Diethylaminoethyl cellulose Polymers 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IBVAQQYNSHJXBV-UHFFFAOYSA-N adipic acid dihydrazide Chemical compound NNC(=O)CCCCC(=O)NN IBVAQQYNSHJXBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 3
- 239000004643 cyanate ester Substances 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000006268 reductive amination reaction Methods 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VRDGQQTWSGDXCU-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 2-iodoacetate Chemical compound ICC(=O)ON1C(=O)CCC1=O VRDGQQTWSGDXCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000031729 Bacteremia Diseases 0.000 description 2
- 231100000699 Bacterial toxin Toxicity 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 2
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 2
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 241000606768 Haemophilus influenzae Species 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 2
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 2
- 201000005702 Pertussis Diseases 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000009362 Pneumococcal Pneumonia Diseases 0.000 description 2
- 206010035728 Pneumonia pneumococcal Diseases 0.000 description 2
- 229940124950 Prevnar 13 Drugs 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000688 bacterial toxin Substances 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- OOTFVKOQINZBBF-UHFFFAOYSA-N cystamine Chemical group CCSSCCN OOTFVKOQINZBBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940099500 cystamine Drugs 0.000 description 2
- UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N cysteamine Chemical compound NCCS UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 229940047650 haemophilus influenzae Drugs 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N heavy water Substances [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 description 2
- SYECJBOWSGTPLU-UHFFFAOYSA-N hexane-1,1-diamine Chemical compound CCCCCC(N)N SYECJBOWSGTPLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000002480 immunoprotective effect Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 229960003151 mercaptamine Drugs 0.000 description 2
- 238000012434 mixed-mode chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 2
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N periodic acid Chemical compound OI(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 229940049548 pneumovax Drugs 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 2
- 229940070741 purified protein derivative of tuberculin Drugs 0.000 description 2
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M sodium periodate Chemical compound [Na+].[O-]I(=O)(=O)=O JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 208000022218 streptococcal pneumonia Diseases 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 2
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- NKUZQMZWTZAPSN-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 2-bromoacetate Chemical compound BrCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O NKUZQMZWTZAPSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PVGATNRYUYNBHO-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)butanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCN1C(=O)C=CC1=O PVGATNRYUYNBHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BQWBEDSJTMWJAE-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-[(2-iodoacetyl)amino]benzoate Chemical compound C1=CC(NC(=O)CI)=CC=C1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O BQWBEDSJTMWJAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MLIWQXBKMZNZNF-KUHOPJCQSA-N (2e)-2,6-bis[(4-azidophenyl)methylidene]-4-methylcyclohexan-1-one Chemical compound O=C1\C(=C\C=2C=CC(=CC=2)N=[N+]=[N-])CC(C)CC1=CC1=CC=C(N=[N+]=[N-])C=C1 MLIWQXBKMZNZNF-KUHOPJCQSA-N 0.000 description 1
- MXRPMTXJSFUXHC-UHFFFAOYSA-N (4-nitrophenyl) cyanate Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(OC#N)C=C1 MXRPMTXJSFUXHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SGNXVBOIDPPRJJ-PSASIEDQSA-N 1-[(1r,6r)-9-azabicyclo[4.2.1]non-4-en-5-yl]ethanone Chemical compound CC(=O)C1=CCC[C@@H]2CC[C@H]1N2 SGNXVBOIDPPRJJ-PSASIEDQSA-N 0.000 description 1
- AWAFMFHOLVZLFG-UHFFFAOYSA-N 1-iodoaziridine-2,3-dione Chemical compound IN1C(=O)C1=O AWAFMFHOLVZLFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QCDWFXQBSFUVSP-UHFFFAOYSA-N 2-phenoxyethanol Chemical compound OCCOC1=CC=CC=C1 QCDWFXQBSFUVSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OTLNPYWUJOZPPA-UHFFFAOYSA-N 4-nitrobenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 OTLNPYWUJOZPPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108010071023 Bacterial Outer Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M Carbamate Chemical compound NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000186227 Corynebacterium diphtheriae Species 0.000 description 1
- 229920002271 DEAE-Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 108010041986 DNA Vaccines Proteins 0.000 description 1
- 229940021995 DNA vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 101710082714 Exotoxin A Proteins 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 101710116435 Outer membrane protein Proteins 0.000 description 1
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 1
- 208000025174 PANDAS Diseases 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 208000021155 Paediatric autoimmune neuropsychiatric disorders associated with streptococcal infection Diseases 0.000 description 1
- 240000000220 Panda oleosa Species 0.000 description 1
- 235000016496 Panda oleosa Nutrition 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 102000017033 Porins Human genes 0.000 description 1
- 108010013381 Porins Proteins 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241001505901 Streptococcus sp. 'group A' Species 0.000 description 1
- 241000193990 Streptococcus sp. 'group B' Species 0.000 description 1
- 102000010912 Transferrin-Binding Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010062476 Transferrin-Binding Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940047712 aluminum hydroxyphosphate Drugs 0.000 description 1
- 229940064734 aminobenzoate Drugs 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 238000012870 ammonium sulfate precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000003948 anatoxin Substances 0.000 description 1
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 239000002981 blocking agent Substances 0.000 description 1
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 108010031071 cholera toxoid Proteins 0.000 description 1
- 230000005757 colony formation Effects 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- XLJMAIOERFSOGZ-UHFFFAOYSA-M cyanate Chemical compound [O-]C#N XLJMAIOERFSOGZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011118 depth filtration Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940116349 dibasic ammonium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 239000012470 diluted sample Substances 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 210000000959 ear middle Anatomy 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 244000052637 human pathogen Species 0.000 description 1
- 229940042795 hydrazides for tuberculosis treatment Drugs 0.000 description 1
- 238000002169 hydrotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 208000022760 infectious otitis media Diseases 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 108010045069 keyhole-limpet hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 210000001989 nasopharynx Anatomy 0.000 description 1
- 125000002868 norbornyl group Chemical group C12(CCC(CC1)C2)* 0.000 description 1
- 230000000625 opsonophagocytic effect Effects 0.000 description 1
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 238000007248 oxidative elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 229960005323 phenoxyethanol Drugs 0.000 description 1
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 1
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 108020001580 protein domains Proteins 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000000601 reactogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 229960000344 thiamine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 235000019190 thiamine hydrochloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000011747 thiamine hydrochloride Substances 0.000 description 1
- DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M thiamine hydrochloride Chemical compound Cl.[Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 150000003568 thioethers Chemical class 0.000 description 1
- 229960004906 thiomersal Drugs 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 230000010474 transient expression Effects 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
- 239000000304 virulence factor Substances 0.000 description 1
- 230000007923 virulence factor Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Description
Перекрестная ссылка на родственную заявку
По изобретению испрашивается приоритет временной заявки в Индии № 201641033563, поданной 30 сентября 2016 года и включенной в настоящее изобретение в качестве ссылки в полном объеме.
Область изобретения
Настоящее изобретение относится к композициям поливалентной пневмококковой вакцины, содержащей конъюгированный с одним или несколькими белками-носителями капсульный пневмококковый полисахарид из одного или более серотипов Streptococcus pneumoniae. Если упомянутые капсульный пневмококковый полисахарид и белок-носитель являются конъюгированными, то в настоящем изобретении они имеют название конъюгаты полисахарид-белок.
Уровень техники
Streptococcus pneumoniae (пневмококк) представляет собой грамположительную бактерию, вызывающую инфекционные заболевания, такие как пневмония, бактериемия и менингит, и заболевания, связанные с образованием колоний, такие как острый средний отит (например, образование колоний в среднем ухе). Эти вызванные пневмококками болезни являются причиной заболеваемости и смертности, в особенности у детей в возрасте до 2 лет и у взрослых старше 60 лет. Частота пневмококковой пневмонии в США у людей старше 60 лет составляет от 3 до 8 случаев на 100000 человек. Несмотря на лечение антибиотиками, в 20% случаев пневмококковая пневмония приводит к бактериемии и менингиту, при этом совокупный показатель смертности составляет приблизительно 30%.
Проводилось исследование белков, таких как пневмолизин и пневмококковый поверхностный белок A (PspA), в отношении их пригодности к использованию в пневмококковых вакцинах в качестве возможных белков-носителей. Оба эти белка обладают частичной профилактической эффективностью у мышей (см. публикации Paton et al. Effect of immunization with pneumolysin on survival time of mice challenged with Streptococcus pneumoniae. Infect Immun. 1983 May; 40(2): 548-552, и McDaniel et al. PspA, a surface protein of Streptococcus pneumoniae, is capable of eliciting protection against pneumococci of more than one capsular type Infect Immun. 1991 Jan.; 59(1): 222-228), но также имеют недостатки в плане их использования в вакцинах в качестве иммуногенов. Пневмолизин хорошо сохраняется среди пневмококков, но при этом обладает токсическими эффектами в своем нативном состоянии (Alonso De Veiasco et al. Streptococcus pneumoniae: Virulence factors, pathogenesis, and vaccines. Microbiol. Rev. 1995 Dec; 59(4): 591-603). С другой стороны, по серологическим и структурным характеристикам PspA представляет собой гетерогенный белок (Crainetal. Pneumococcal surface protein A) is serologically highly variable and is expressed by all clinically important capsular serotypes of Streptococcus pneumoniae. Infect. Immun. 1990 Oct; 58(10): 3293-3299). Для использования PspA в составе вакцин потребуется множество типов PspA, что усложнит изготовление вакцины.
Пневмококковый поверхностный белок A адгезии (PsaA) представляет собой многофункциональный липопротеин, участвующий в адгезии к клетке-хозяину и образовании колоний. Он является высоко консервативным поверхностным белком и на 97% гомологичен известным серотипам S.pneumoniae. PsaA обладает иммуногенностью, и известно, что при естественном образовании пневмококковых колоний в носоглотке возрастает титр антител против PsaA.
Пневмококковые вакцины могут использоваться для профилактики инфекций. Современные вакцины включают поливалентные пневмококковые полисахаридные вакцины (содержащие пневмококковые полисахариды двух или нескольких серотипов) и пневмококковые конъюгированные вакцины. Известно, что профилактическая эффективность пневмококковой полисахаридной вакцины обусловлена концентрацией антител, образованных против капсульного полисахарида. Пневмококковые клетки инкапсулированы с полисахаридом, в результате чего возникает более чем 90 различных серотипов пневмококка. Капсула является основным показателем степени вирулентности для пневмококков - она не только защищает внутреннюю поверхность клетки от комплемент-опосредованного клеточного лизиса, но также обладает слабой иммуногенностью.
Вакцина Pneumovax®23 от компании Merck представляет собой поливалентную пневмококковую полисахаридную вакцину, которая содержит неконъюгированные капсульные полисахариды из пневмококков 23 серотипов, включая серотипы 1, 2, 3, 4, 5, 6B, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19F, 19A, 20, 22F, 23F и 33F. В дополнение к вакцине Pneumovax®23, разрешенные к применению современные поливалентные пневмококковые полисахаридные вакцины доказали свою эффективность для профилактики пневмококковой инфекции у взрослых, в частности, у пожилых людей и лиц с высоким риском инфекции. Тем не менее, младенцы и дети младшего возраста проявляют слабую реакцию на эту неконъюгированную пневмококковую полисахаридную вакцину.
Вакцина Prevnar®-7 представляет собой пневмококковую конъюгированную вакцину полисахаридбелок и включает семь наиболее часто выделяемых полисахаридных серотипов (например, 4, 6B, 9V, 14, 18C, 19F и 23F, конъюгированных с CRM197 (белком дифтерийного токсина)). С начала применения вакцины Prevnar®-7 в США в 2000 году наблюдается значительное снижение инфекционных пневмококковых заболеваний (IPD) у детей. Поскольку в некоторых регионах мира вакцина Prevnar®-7 имеет ограниченный охват серотипов, была разработана и одобрена к применению 13-валентная конъюгированная
- 1 048146 вакцина Prevenar-13®, содержащая тринадцать серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F и 23F, конъюгированных с CRMi97.
Вакцина Synflorix® представляет собой пневмококковую вакцину, включающую десять полисахаридных серотипов: конъюгированные с белком D (PD) серотипы 1, 4, 5, 6B, 7, 9, 14, 23F, конъюгированный со столбнячным анатоксином (TT) серотип 18C, и конъюгированный с дифтерийным анатоксином (DT) серотип 19F. Каждый из этих полисахаридных серотипов конъюгирован с использованием 1-циано4-диметиламино-пиридиния тетрафторбората (CDAP) при регулируемом уровне pH.
Несмотря на наличие указанных вакцин, существует потребность в дополнительных поливалентных пневмококковых вакцинах, содержащих альтернативные серотипы полисахаридов и белки-носители, а также в простом и эффективном производстве таких вакцин.
Пневмококковые вакцины описаны в дополнительных ссылках. Например, в патенте США № 5360897 раскрыт иммуногенный конъюгат, содержащий продукт восстановительного аминирования интактного капсульного полимера из бактериального патогена S.pneumoniae, имеющий по меньшей мере две карбонильные группы, и бактериальный токсин или анатоксин, при этом указанный конъюгат включает сшитый конъюгат, в котором имеется прямая ковалентная связь между капсульным полимером и токсином или анатоксином.
В патенте США № 5693326 предложен обобщенный способ получения конъюгированной вакцины, в котором для активации вирусных, грибковых или бактериальных полисахаридов используется органическое цианирующее вещество, выбранное из группы 1-циано-4-(диметиламино)-пиридиния тетрафторбората, N-цианотриэтил- аммония тетрафторбората, и р-нитрофенилцианата, для образования активированного углевода и последующего соединения с белком или белком-носителем.
В патенте США № 5854416 раскрыты аминокислотные последовательности и ДНКпоследовательности белков из S.pneumonia размером 37кДа, известные как PsaA (пневмококковые поверхностные белки A адгезии), и в патенте США № 7862823 раскрыта композиция поливалентной конъюгированной вакцины, содержащая пневмококковые капсульные полисахариды и по меньшей мере два разных белка-носителя, такие как DT и TT.
В патенте США № 7955605 описан способ получения иммуногенного конъюгата, включающего серотип 19A, при этом активированный полисахаридный серотип 19A и белок-носитель ресуспендированы в диметилсульфоксиде (ДМСО) с образованием конъюгата.
В патенте США № 8192746 раскрыта композиция 15-валентной пневмококковой конъюгированной вакцины полисахарид-белок, содержащая капсульные полисахариды серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F, конъюгированные с CRM197.
Патент США № 8465749 относится к способу получения конъюгированной вакцины путем взаимодействия полисахарида с CDAP и взаимодействия белка с гидразином или дигидразидом адипиновой кислоты в определенном диапазоне pH.
В патенте США № 8557250 B2 раскрыт способ, включающий контактирование смеси, состоящей из множества цианат-активированных полисахаридов с разной иммуногенностью, по меньшей мере с одним гидразид-активированным белком.
В патентах США № 8808708, 7955605 и в патенте США № 8603484 описана 13-валентная иммуногенная композиция, состоящая из конъюгатов полисахарид-белок с серотипами 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F и 23F, и белка-носителя CRM197.
В патентной публикации США № 2009/0017059 A1 раскрыта иммуногенная композиция, в которой серотипы 19A и 19F конъюгированы с различными бактериальными анатоксинами, включая столбнячный анатоксин, дифтерийный анатоксин коклюшный анатоксин, бактериальные цитолизины и/или пневмолизин.
В патентной публикации США № 2010/0074922 A1 раскрыта иммуногенная композиция, содержащая 10 или более серотипов, в которой капсульный сахарид серотипа 19F конъюгирован с DT, капсульный сахарид серотипа 18C конъюгирован со столбнячным анатоксином и капсульные сахариды серотипов 1, 4, 5, 6В, 7F, 9V, 14 и 23F конъюгированы с белком D, выделенным из Haemophilus influenzae.
В патентной публикации США № 2010/0239604 описана иммуногенная композиция, включающая поливалентные конъюгаты капсульного сахарида S.pneumoniae серотипов 19A и 19F, при этом серотип 19A конъюгирован с первым бактериальным анатоксином и 19F конъюгирован со вторым бактериальным анатоксином и капсульные сахариды S.pneumoniae серотипов 2-9 конъюгированы с белком D.
В патентной публикации США № 2012/321658 A1 раскрыта иммуногенная композиция, в которой серотипы 1, 3, 19A и 19F связаны с белком-носителем (носителями) или напрямую, или опосредованно с помощью химической реакции, отличной от восстановительного аминирования, и один или более других сахаридов выбраны из второй группы, состоящей из серотипов 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 14, 18C и 23F, которые связаны с белком-носителем (носителями) с помощью восстановительного аминирования.
В патенте IN 140/DEL/2011 рассмотрена вакцина S. pneumoniae, содержащая или (a) 7 или больше, или (b) 10 или больше полисахаридов из разных серотипов, конъюгированных по меньшей мере с 2 или с большим количеством белков-носителей, выбранных из группы, включающей DT, дифтерийный анаток
- 2 048146 син, CRM197 и столбнячный анатоксин.
В публикации WO № 2013/191459 A1 раскрыта конъюгированная 15-валентная композиция, содержащая разные серотипы S.pneumoniae, полученные из капсульного полисахарида серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9N, 9V, 14, 18C, 19A, 19F и 23F, конъюгированного с CRM197.
В публикации WO № 2014/092377 A1 раскрыта 13-валентная композиция, в которой 12 серотипов выбраны из 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F и 23F, и оставшийся серотип 12 или 9N конъюгирован с CRM197.
В публикации WO № 2014/092378 A1 описана иммуногенная конъюгированная композиция, в которой 12 серотипов выбраны из 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F и 23F и оставшийся один из серотипов 22F или 33F конъюгирован с CRM197.
В документе WO 2016207905 A2 раскрыта композиция поливалентной пневмококковой конъюгированной вакцины (PCV), содержащая: 1) по меньшей мере 12 капсульных полисахаридов, выбранных из серотипов S.Pneumoniae 1, 3, 4, 5, 6В, 7F, 9N, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F, активированных с помощью CDAP и конъюгированных с белком-носителем CRM197, и 2) фармацевтически приемлемый носитель, при этом композиция не содержит капсульный полисахарид из серотипа 6A.
В опубликованной заявке на китайский патент CN 101590224 описана 14-валентная пневмококковая полисахаридно-белковая конъюгированная вакцина, содержащая серотипы 1, 2, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9N, 9V, 14, 18C, 19A, 19F и 23F, конъюгированные с CRM197.
В опубликованной заявке на китайский патент CN 103623401 раскрыта композиция 14поливалентного пневмококкового капсульного полисахаридно-белкового конъюгата, в которой указанные 14 различных серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F конъюгированы с CRM197.
В опубликованной заявке на китайский патент CN 103656632 раскрыта поливалентная композиция пневмококкового капсульного полисахарида, содержащая серотип 6A, и по меньшей мере один дополнительный серотип, выбранный из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6В, 7F, 8, 9N, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19A, 19F, 20, 22F, 23F и 33F, конъюгированный с CRM197.
В опубликованной заявке на китайский патент CN 103656631 рассмотрена поливалентная композиция пневмококкового капсульного полисахаридно-белкового конъюгата и способ ее получения. Конъюгированную композицию получают из капсульных полисахаридов пневмококка 24 разных серотипов и белка-носителя путем ковалентной связи, при этом 24 разных серотипа 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19A, 19F, 20, 22F, 23F и 33F конъюгированы с CRM197.
В опубликованной заявке на китайский патент CN 104069488 раскрыты поливалентные пневмококковые капсульные полисахариды 14 разных серотипов и белок-носитель, при этом 14 серотипов включают конъюгированные с CRM197 серотипы 1, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F.
Авторы Deborahetal. (1996, том 21, выпуск 1, страницы 17-22) описывают значительную гомологию PsaA и фимбриальных белков адгезии. Иммунизация мышей CBA/CaHNJ XID путем введения PsaA с использованием или полного адъюванта Фрейнда или полного адъюванта TiterMax™ создает мощную защиту мышей от гетерологичного внутривенного заражения пневмококковым штаммом WU2 3-го типа в дозах, превышающих LD50 до 45 раз.
Авторы Miyaji E.N. et al. (2001, Vaccine, 20 (5-6): 805-12) описывают S.pneumoniae как один из наиболее важных патогенов человека. Авторы сконструировали векторы ДНК-вакцины, содержащие или полноразмерный ген PsaA, или усеченный ген PspA. Обе конструкции проявляют транзиторную экспрессию антигенов в клетках позвоночных и индуцированную выраженную реакцию антител на пневмококковые антигены у мышей BALB/c после внутримышечного введения.
Авторы Wuorimaaetal. (2001, The Paediatric Infectious Disease Journal, том 20 (3), стр. 272-277), проводили исследование с участием здоровых детей раннего возраста с целью оценки переносимости и иммуногенности 11-валентной пневмококковой конъюгированной вакцины, в которой в качестве носителей использовали и TT и DT.
Авторы Gatchalian et al. (2001, 17th Annual Meeting of the Eur. Soc. Paed. Inf. Dis. (ESPID), стендовое сообщение № 4, P1A, стендовая сессия 1, Стамбул, Турция) приводят результаты опсонофагоцитарного анализа (OPA) у детей после введения 11-валентной вакцины, без проявления реакции антител на серотип 3 на уровне, который сопоставим с реакциями на другие исследуемые серотипы.
Авторы Anderson et al. (2003, Vaccine, 21 (13-14): 1554-9) описывают сравнительное исследование четырехвалентных конъюгированных вакцин с каждым из полисахаридных типов 6A, 14, 19F и 23F по отдельности, в комбинации со столбнячным анатоксином или дифтерийным CRM197, или со смесью из половины доз полисахаридных типов 6A, 14, 19F и 23F по отдельности, в комбинации со столбнячным анатоксином и дифтерийным CRM197.
Авторы Nurkkaet al. (2004, Ped. Inf. Dis J., 23: 1008-1014) проводили исследование иммуногенности и безопасности 11-валентной вакцины, конъюгированной с пневмококковым белком D, при этом у серотипа 3 не выявлено примирующего эффекта в случае введения детям раннего возраста, которые получили три дозы вакцины с последующей бустерной дозой или такой же вакцины или пневмококковой полисахаридной вакцины.
- 3 048146
В указанных выше ссылках раскрыты, наряду с другими композициями, способами и т.п., поливалентные пневмококковые вакцины, содержащие полисахариды из одного или более серотипов, а также конъюгирование этих полисахаридов с белками-носителями, такими как CRM197, белок D, DT и TT. Учитывая, что в разных регионах превалируют разные серотипы, существует потребность в дополнительных поливалентных пневмококковых вакцинах, содержащих новые конъюгаты полисахаридов из серотипов с улучшенной иммунной реакцией, а также в простом и эффективном способе их производства.
Сущность изобретения
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, и указанная композиция содержит два или более капсульных пневмококковых полисахарида из серотипов, и каждый из них по отдельности конъюгирован с пневмококковым поверхностным белком адгезии A (PsaA) или с комбинацией PsaA и CRM197 в качестве белков-носителей.
В одном варианте осуществление настоящего изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, которая представляет собой композицию 10-валентной, 14-валентной, 15-валентной, 17валентной, 18-валентной, 19-валентной, 20-валентной, 22-валентной, 23-валентной, 24-валентной или 25валентной пневмококковой вакцины.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей пневмококковые полисахариды из каждого из серотипов, выбранных из пневмококковых серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей пневмококковые полисахариды из каждого из серотипов, выбранных из пневмококковых серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, которые конъюгированы с пневмококковым поверхностным белком A адгезии (PsaA) в качестве белка-носителя.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов, выбранных из 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, которые конъюгированы с пневмококковым поверхностным белком адгезии A (PsaA) или с комбинацией PsaA и CRM197 в качестве белков-носителей.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов, выбранных из 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, при этом по меньшей мере 3 пневмококковых полисахарида конъюгированы с пневмококковым поверхностным белком A адгезии (PsaA).
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов 3, 6A, 6В, конъюгированные с пневмококковым поверхностным белком A адгезии (PsaA).
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей по меньшей мере 10 пневмококковых полисахаридов, выбранных из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, и белки-носители включают PsaA или комбинацию PsaA и CRM197.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей по меньшей мере 14 пневмококковых полисахаридных конъюгатов.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей по меньшей мере 17 пневмококковых полисахаридных конъюгатов.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей по меньшей мере 19 пневмококковых полисахаридных конъюгатов.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей по меньшей мере 20 пневмококковых полисахаридных конъюгатов.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей по меньшей мере 22 пневмококковых полисахаридных конъюгатов.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей по меньшей мере 24 пневмококковых полисахаридных конъюгатов.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей белок-носитель и пневмококковые полисахариды из двух или более серотипов, при этом серотипы выбраны из серотипов 3, 5, 6A, 6В, 9V и 18C, и белком-носителем является PsaA.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей белок-носитель и пневмококковые полисахариды из двух или более серотипов, при этом серотипы выбраны из 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19F, 19A и 22F, и белком-носителем является PsaA.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой
- 4 048146 вакцины, содержащей белок-носитель и пневмококковые полисахариды из двух или более серотипов, при этом серотипы выбраны из 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 18C, 19F, 19A, 22F, 23F, 33F, 34, 35, 38 и 45, и белком-носителем является PsaA.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей белок-носитель и пневмококковые полисахариды из одного или более серотипов, при этом серотипы представляют собой 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, и белок-носитель представляет PsaA.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей белок-носитель и пневмококковые полисахариды из одного или более серотипов, при этом каждый пневмококковый полисахарид по отдельности конъюгирован с PsaA или комбинацией PsaA и CRMi97.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей по меньшей мере шесть пневмококковых полисахаридов, каждый из которых по отдельности конъюгирован с PsaA, и один или более пневмококковых полисахаридов, каждый из которых по отдельности конъюгирован с CRM197.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей по меньшей мере пять пневмококковых полисахаридов, каждый из которых по отдельности конъюгирован с PsaA, и по меньшей мере пять пневмококковых полисахаридов, каждый из которых по отдельности конъюгирован с CRM197.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 14-валентной пневмококковой вакцине, содержащей по меньшей мере пять пневмококковых полисахаридов, каждый из которых по отдельности конъюгирован с PsaA, и по меньшей мере пять пневмококковых полисахаридов, каждый из которых по отдельности конъюгирован с CRM197.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 17-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды по меньшей мере из пяти серотипов, каждый из которых по отдельности конъюгирован с PsaA, и пневмококковые полисахариды по меньшей мере из пяти серотипов, каждый из которых по отдельности конъюгирован с CRM197.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 20-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды по меньшей мере из пяти серотипов, каждый из которых по отдельности конъюгирован с PsaA, и пневмококковые полисахариды по меньшей мере из пяти серотипов, каждый из которых по отдельности конъюгирован с CRM197.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 22-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды по меньшей мере из пяти серотипов, каждый из которых по отдельности конъюгирован с PsaA, и пневмококковые полисахариды по меньшей мере из пяти серотипов, каждый из которых по отдельности конъюгирован с CRM197.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 24-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды по меньшей мере из пяти серотипов, каждый из которых по отдельности конъюгирован с PsaA, и пневмококковые полисахариды по меньшей мере из пяти серотипов, каждый из которых по отдельности конъюгирован с CRM197.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 14-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F, при этом по меньшей мере серотипы 3 и 6В конъюгированы с PsaA, и один или более из серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F конъюгирован с CRMi97.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 14-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F, при этом по меньшей мере серотипы 3 и 6A конъюгированы с PsaA, и один или более из серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F конъюгирован с CRMi97.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 15-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F, при этом по меньшей мере серотипы 3, 6A и 6В конъюгированы с PsaA, и один или более серотипов из 1, 4, 5, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F конъюгирован с CRM197.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 17-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 12F, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F и 35B, при этом по меньшей мере серотипы 3, 6A и 6В конъюгированы с PsaA, и один или более из серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 12F, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F и 35B конъюгирован с CRM197.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 20-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 11A, 12F, 14, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 35B и 45, при этом по меньшей мере серотипы 3, 6A и 6В, конъюгированы с PsaA, и один или более из серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 11A, 12F, 14, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 35B и 45 конъюгирован с CRMi97.
- 5 048146
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 22-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 35B и 38, при этом по меньшей мере серотипы 3, 6A и 6В конъюгированы с PsaA, и один или более из серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 3 и 38 конъюгирован с CRM197.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 22-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 35B и 38, при этом серотипы 1, 3, 6, 10, 12F, 15A 15B, 22F, 34, 35B и 38 конъюгированы с PsaA, и серотипы 14, 5, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 23F и 33F конъюгированы с CRM197.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 24-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 8, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 16F, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 35B и 38, при этом по меньшей мере серотипы 3, 6A и 6В конъюгированы с PsaA, и один или более из серотипов 1, 4, 5, 7F, 8, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 16F, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 35B и 38 конъюгирован с CRM197.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 24-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 8, 9В, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 16F 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 35B и 38, при этом серотипы 1, 3, 6A, 8, 10A, 12F, 15A 15B, 16F 22F, 34, 35 и 38 конъюгированы с PsaA, и один или более из серотипов 14, 5, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 23F и 33F конъюгирован с CRM197.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, полученной в виде стандартной лекарственной формы.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, полученной в виде стандартной лекарственной формы, при этом стандартная лекарственная форма содержит от приблизительно 0,1 мкг до приблизительно 50 мкг каждого полисахарида, от приблизительно 0,1 мкг до приблизительно 10 мкг, или от приблизительно 1 мкг до приблизительно 5 мкг каждого полисахарида, при этом каждый полисахарид по отдельности конъюгирован с белком-носителем, и количество белка-носителя составляет от приблизительно 1,5 мкг до приблизительно 5 мкг.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей фармацевтически приемлемые вещества, такие как разбавитель, буфер, консервант, стабилизатор, адъювант и/или лиофилизирующий эксципиент.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, полученной в виде стандартной лекарственной формы, которая поставляется как флакон с единичной дозой, флакон с несколькими дозами или предварительно заполненный шприц.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины в виде разовой дозы 0,5 мл, и указанная разовая доза содержит: один или более пневмококковых полисахаридов в количестве от приблизительно 2,2 до 4,4 мкг; PsaA в количестве от приблизительно 1 мкг до приблизительно 10 мкг, конъюгированный с каждым из одного или более пневмококковых полисахаридов; CRM197 в количестве от приблизительно 1 мкг до приблизительно 10 мкг, конъюгированный с каждым из одного или более пневмококковых полисахаридов; адъювант фосфат алюминия в количестве от приблизительно 0,2 мг до приблизительно 1 мг; и эксципиент.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 13-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F и 33F, каждый из которых по отдельности конъюгирован с PsaA или с комбинацией PsaA и CRM197, при этом доза композиции пневмококковой вакцины составляет приблизительно 0,5 мл, и композиция получена в виде стерильной жидкости, содержащей каждый полисахарид в количестве от приблизительно 2,2 мкг до приблизительно 4,4 мкг, PsaA и CRM197 в количестве от приблизительно 25 мкг до приблизительно 30 мкг, хлорид натрия и L-гистидиновый буфер, и элементарный алюминий в количестве приблизительно 0,125 мг в виде приблизительно 0,5 мг фосфата алюминия.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 14-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F, каждый из которых по отдельности конъюгирован с PsaA или с комбинацией PsaA и CRM197, при этом доза композиции пневмококковой вакцины составляет приблизительно 0,5 мл, и композиция получена в виде стерильной жидкости, содержащей каждый полисахарид в количестве от приблизительно 2,2 мкг до приблизительно 4,4 мкг, PsaA и CRM197 в количестве от приблизительно 30 мкг до приблизительно 35 мкг, хлорид натрия и L-гистидиновый буфер, и элементарный алюминий в количестве приблизительно 0,125 мг в виде приблизительно 0,5 мг фосфата алюминия.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 14-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F, каждый из которых по отдельности конъюгирован с PsaA или комбинацией PsaA и CRM197, при этом доза композиции пневмококковой вакцины составляет приблизительно 0,5 мл, и композиция получена в виде стерильной жидкости, содержащей от приблизительно 2,2 до 4,4 мкг каж
- 6 048146 дого полисахарида, от приблизительно 30 мкг до приблизительно 35 мкг PsaA и CRM197, хлорид натрия и L-гистидиновый буфер, и элементарный алюминий в количестве приблизительно 0,125 мг в виде приблизительно 0,5 мг фосфата алюминия.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 15-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F, в которой по меньшей мере серотипы 3, 6A и 6В конъюгированы с PsaA, и один или более серотипов из 1, 4, 5, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F конъюгирован с CRM197, при этом доза композиции пневмококковой вакцины составляет приблизительно 0,5 мл, и композиция получена в виде стерильной жидкости, содержащей от приблизительно 2,2 мкг до приблизительно 4,4 мкг каждого полисахарида, от приблизительно 5 мкг до приблизительно 20 мкг PsaA, от приблизительно 20 мкг до приблизительно 40 мкг CRM197, хлорид натрия и L-гистидиновый буфер, и элементарный алюминий в количестве приблизительно 0,125 мг в виде приблизительно 0,5 мг фосфата алюминия.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 17-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 12F, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F и 35B, в которой по меньшей мере серотипы 3, 6A и 6В конъюгированы с PsaA, и один или более серотипов из 1, 4, 5, 7F, 9V, 12F, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F и 35B конъюгированы с CRM197, при этом доза композиции пневмококковой вакцины составляет приблизительно 0,5 мл, и композиция получена в виде стерильной жидкости, содержащей от приблизительно 2,2 до приблизительно 4,4 мкг каждого полисахарида, от приблизительно 5 до приблизительно 20 мкг PsaA, от приблизительно 20 до приблизительно 40 мкг CRM197, хлорид натрия и L-гистидиновый буфер, и элементарный алюминий в количестве приблизительно 0,125 мг в виде приблизительно 0,5 мг фосфата алюминия.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 20-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 11A, 12F, 14, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 35B и 45, в которой по меньшей мере серотипы 3, 6A и 6В, конъюгированы с PsaA, и один или более серотипов из 1, 4, 5, 7F, 9V, 11A, 12F, 14, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 35B и 45 конъюгированы с CRM197, при этом доза композиции пневмококковой вакцины составляет приблизительно 0,5 мл, и композиция получена в виде стерильной жидкости, содержащей от приблизительно 2,2 мкг до приблизительно 4,4 мкг каждого полисахарида, от приблизительно 5 мкг до приблизительно 20 мкг PsaA, от приблизительно 20 мкг до приблизительно 50 мкг CRM197, хлорид натрия и L-гистидиновый буфер, и элементарный алюминий в количестве приблизительно 0,125 мг в виде приблизительно 0,5 мг фосфата алюминия.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 22-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 35B и 38, в которой по меньшей мере серотипы 3, 6A и 6В конъюгированы с PsaA, и один или более из серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 35B и 38 конъюгированы с CRM197, при этом доза композиции пневмококковой вакцины составляет приблизительно 0,5 мл, и композиция получена в виде стерильной жидкости, содержащей от приблизительно 2,2 мкг до приблизительно 4,4 мкг каждого из полисахаридов, от приблизительно 5 мкг до приблизительно 20 мкг PsaA, от приблизительно 20 мкг до приблизительно 50 мкг CRM197, хлорид натрия и L-гистидиновый буфер, и элементарный алюминий в количестве приблизительно 0,125 мг в виде приблизительно 0,5 мг фосфата алюминия.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 22-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 35B и 38, в которой серотипы 1, 3, 6, 10, 12F, 15A 15B, 22F, 34, 35B, 38 конъюгированы с PsaA, и серотипы 14, 5, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 23F и 33F конъюгированы с CRM197, при этом доза композиции пневмококковой вакцины составляет приблизительно 0,5 мл, и композиция получена в виде стерильной жидкости, содержащей от приблизительно 2,2 мкг до приблизительно 4,4 мкг каждого полисахарида, от приблизительно 20 мкг до приблизительно 40 мкг PsaA, от приблизительно 20 мкг до приблизительно 40 мкг CRM197, хлорид натрия и Lгистидиновый буфер, и элементарный алюминий в количестве приблизительно 0,125 мг в виде приблизительно 0,5 мг фосфата алюминия.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к 24-валентной пневмококковой вакцине, содержащей пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 8, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 16F, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 35B и 38, в которой по меньшей мере серотипы 3, 6A и 6B конъюгированы с PsaA, и один или более из серотипов из 1, 4, 5, 7F, 8, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 16F, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 35B и 38 конъюгированы с CRMJ97, при этом доза композиции пневмококковой вакцины составляет приблизительно 0,5 мл, и композиция получена в виде стерильной жидкости, содержащей от приблизительно 2,2 мкг до приблизительно 4,4 мкг каждого полисахарида, от приблизительно 5 мкг до приблизительно 20 мкг PsaA, от приблизительно 20 мкг до приблизительно 50 мкг CRMj97, хлорид натрия и L-гистидиновый буфер, и элементарный алюминий в количестве приблизительно 0,125 мг в виде приблизительно 0,5 мг фосфата алюминия.
- 7 048146
Краткое описание фигур
Фиг. 1: хроматограмма эксклюзионной ВЭЖХ показывает кинетику реакции конъюгирования серотипа 7F (A), серотипа 14 (B), серотипа 19F (C), серотипа 3 (D), серотипа 6A (E) и серотипа 6В (F).
Фиг. 2: хроматограмма эксклюзионной ВЭЖХ показывает кинетику реакции конъюгирования серотипа 5 (A), серотипа 9V (B), серотипа 18C (C), серотипа 3 (D), серотипа 6A (E) и серотипа 6В (F).
Фиг. 3: иммунный ответ на различные серотипы у кроликов, иммунизированных с композицией по настоящему изобретению, как описано в примере 3.
Фиг. 4: иммунный ответ на различные серотипы у кроликов, иммунизированных вакциной Prevnar 13®.
Фиг. 5: иммунный ответ на различные серотипы у кроликов, иммунизированных другой композицией настоящего изобретения, описанной в примере 4.
Подробное описание
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей пневмококковые полисахариды, в которой один или более пневмококковых полисахаридов представляют собой нативные пневмококковые полисахариды.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей пневмококковые полисахариды, в которой один или более пневмококковых полисахаридов фрагментированы, и средняя молекулярная масса каждого из фрагментированных пневмококковых полисахаридов меньше, чем у нативного пневмококкового полисахарида.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей пневмококковые полисахариды, в которой каждый из пневмококковых полисахаридов перед конъюгированием с белком-носителем активирован посредством 1-циано-4-диметиламинопиридиниятетрафторбората (CDAP) с образованием эфира циановой кислоты.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей пневмококковые полисахариды, в которой один или более пневмококковых полисахаридов, присоединены к аминогруппе белка-носителя напрямую или присоединены к аминогруппе с помощью спейсера.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей пневмококковые полисахариды, в котором спейсером является цистамин, цистеамин, гександиамин, дигидразид адипиновой кислоты (ADH), EDAC или EDC (1-этил-3-(3диметиламинопропил)карбодиимид).
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей пневмококковые полисахариды из одного или более серотипов и белок-носитель, при этом белок-носитель PsaA представляет собой модифицированный PsaA и не содержит гидрофобный N-концевой лидерный пептид дикого типа.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей пневмококковые полисахариды из одного или более серотипов и белок-носитель, при этом белок-носитель PsaA содержит 290 аминокислот.
Настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей два или более серотипов капсульных пневмококковых полисахаридов, каждый из которых по отдельности конъюгирован с белком-носителем, и в настоящем изобретении это называется конъюгатами полисахаридбелок и/или конъюгатами. Если эти конъюгаты включены в композицию пневмококковой вакцины по изобретению, пневмококковая вакцина является поливалентной вакциной с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок (также называемой в изобретении поливалентной конъюгированной вакциной, конъюгированной вакциной и/или полисахарид-белковой конъюгированной вакциной). В дополнение к поливалентной конъюгированной вакцине, настоящее изобретение относится к способу получения и/или введения такой вакцины пациенту.
В некоторых вариантах осуществления композиция пневмококковой вакцины является поливалентной иммуногенной композицией, содержащей один или более конъюгатов. Например, конъюгаты могут включать два или более пневмококковых полисахаридов, и каждый из пневмококковых полисахаридов выбран из пневмококковых полисахаридов, относящихся к серотипам 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45.
В некоторых вариантах осуществления композиция пневмококковой вакцины является поливалентной и включает пять пневмококковых полисахаридов (5-валентная), десять пневмококковых полисахаридов (10-валентная), одиннадцать пневмококковых полисахаридов (11-валентная), двенадцать пневмококковых полисахаридов (12-валентная), тринадцать пневмококковых полисахаридов (13-валентная), четырнадцать пневмококковых полисахаридов (14-валентная), пятнадцать пневмококковых полисахаридов (15-валентная), шестнадцать пневмококковых полисахаридов (16-валентная), семнадцать пневмококковых полисахаридов (17-валентная), восемнадцать пневмококковых полисахаридов (18-валентная), девятнадцать пневмококковых полисахаридов (19-валентная), двадцать пневмококковых полисахаридов (20валентная), двадцать один пневмококковый полисахарид (21-валентная), двадцать два пневмококковых
- 8 048146 полисахарида (22-валентная), двадцать три пневмококковых полисахарида (23-валентная), двадцать четыре пневмококковых полисахарида (24-валентная), двадцать пять пневмококковых полисахаридов (25валентная), двадцать шесть пневмококковых полисахаридов (26-валентная), двадцать семь пневмококковых полисахаридов (27-валентная), двадцать восемь пневмококковых полисахаридов (28-валентная), двадцать девять пневмококковых полисахаридов (29-валентная) или тридцать пневмококковых полисахаридов (30-валентная). В других вариантах осуществления композиция пневмококковой вакцины представляет собой композицию 10-валентной, 14-валентной, 15-валентной, 17-валентной, 18-валентной, 19валентной, 20-валентной, 22-валентной, 23-валентной, 24-валентной или 25-валентной пневмококковой вакцины.
Неожиданно выявлено, что композиции поливалентных пневмококковых конъюгированных вакцин согласно настоящему изобретению дают улучшенный иммунный ответ по сравнению с поливалентными пневмококковыми вакцинами, содержащими пневмококковые полисахариды, не конъюгированные с белками-носителями. Более конкретно, композиции поливалентных пневмококковых конъюгированных вакцин по настоящему изобретению, к удивлению, оказались наиболее эффективными, когда пневмококковые полисахариды из одного или более серотипов Streptococcus pneumoniae были конъюгированы с PsaA и/или CRM197.
Белки-носители представляют собой нетоксичные и не реактогенные белки, которые могут быть получены в достаточном количестве и с достаточной степенью чистоты. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой конъюгированной вакцины, содержащей один или более белков-носителей, конъюгированных с одним или несколькими полисахаридами S.pneumoniae (которые в настоящем изобретении называются пневмококковым полисахаридом). Путем конъюгирования пневмококкового полисахарида с белком-носителем увеличивается иммуногенность этого пневмококкового полисахарида по сравнению с неконъюгированным пневмококковым полисахаридом. Подходящие для настоящего изобретения белки-носители должны быть пригодны для стандартных методик конъюгирования.
Белок CRM197 представляет собой вариант дифтерийного токсина и является нетоксичным для использования в вакцинах. Можно выделять CRM197 из культуры штамма C7 (β 197) Corynebacterium diphtheriae, выращенной в среде на основе казаминокислот и дрожжевого экстракта. Можно получать CRM197 с помощью рекомбинантной технологии в соответствии со способами, описанными в патенте США № 5614382. В качестве альтернативы, CRM197 могут быть получены рекомбинантно в соответствии с известными в литературе способами, или в соответствии со способом, описанным в опубликованной заявке PCT WO 2016/079755. Можно выполнять очистку CRM197 путем ультрафильтрации, преципитации сульфатом аммония, ионообменной хроматографии или другими способами, хорошо известными в данной области.
В некоторых вариантах осуществления пневмококковые полисахариды согласно настоящему изобретению конъюгированы с одним или несколькими белками-носителями. Например, каждый по отдельности пневмококковый полисахарид конъюгирован с белком-носителем. В других вариантах осуществления пневмококковой полисахарид, в количестве более одного, конъюгирован с белком-носителем. Например, два пневмококковых полисахарида, три пневмококковых полисахарида, четыре пневмококковых полисахарида, пять пневмококковых полисахаридов, шесть пневмококковых полисахаридов, семь пневмококковых полисахаридов, восемь пневмококковых полисахаридов, девять пневмококковых полисахаридов или десять пневмококковых полисахаридов конъюгированы с белком-носителем. В некоторых вариантах осуществления пневмококковый полисахарид конъюгирован более чем с одним белкомносителем. Например, пневмококковый полисахарид конъюгирован с одним белком-носителем, двумя белками-носителями, тремя белками-носителями и/или четырьмя белками-носителями.
В некоторых вариантах осуществления изобретения белок-носитель представляет собой PsaA. В дополнительных вариантах осуществления используется комбинация белков-носителей, которая включает два или более белков-носителей, таких как PsaA и CRM197, каждый из которых по отдельности конъюгирован с каждым из пневмококковых полисахаридов. В других вариантах осуществления белкомносителем являются два белка-носителя, включающие PsaA и CRM197.
В некоторых вариантах осуществления белок-носитель выбран из одного или более следующих белков-носителей: PsaA, CRM197, инактивированные бактериальные токсины, такие как столбнячный анатоксин, коклюшный анатоксин, холерный анатоксин, экзотоксин A из синегнойной палочки, бактериальные белки наружной мембраны, такие как белковый комплекс наружной мембраны (OMPC), порины, трансферрин-связывающие белки, пневмолизин, PspA, пептидаза C5a из стрептококка группы A или группы B или белок D из Haemophilus influenzae, овальбумин, гемоцианин, (гемоцианин лимфы улитки KLH), бычий сывороточный альбумин (БСА) и очищенный белковый дериват туберкулина (PPD).
Кроме того, один или более конъюгатов может включать нативные белки-носители (например, дикого типа), и/или один или более конъюгатов может включать белки-носители, модифицированные из их нативной формы в ненативную форму (например, белки, лишенные одной или нескольких аминокислот генно-инженерным способом). В некоторых вариантах осуществления белки-носители можно конструировать с удалением одного или более белковых доменов, таких как лидерный пептид, или с удалением
- 9 048146 других доменов, которые могут иметь нежелательные для конъюгатов согласно настоящему изобретению свойства. Например, PsaA может представлять собой белок-носитель из 290 аминокислот, сконструированный с отсутствием гидрофобного N-концевого лидерного пептида, имеющего индекс гидропатии 2,052.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к вакцинной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит пневмококковые полисахариды (например, капсульные пневмококковые полисахариды), выбранные из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45. Каждый из выбранных пневмококковых полисахаридов по отдельности конъюгирован с белком-носителем PsaA, или первая часть из выбранных пневмококковых полисахаридов конъюгирована с PsaA, и вторая часть из выбранных пневмококковых полисахаридов конъюгирована с CRM197. В любом из этих вариантов осуществления вакцинная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок представляет собой иммуногенную поливалентную композицию с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, такую как 10-валентная, 13-валентная, 14-валентная, 15-валентная, 17-валентная, 18-валентная, 19-валентная, 20-валентная, 22-валентная, 23-валентная, 24валентная или 25-валентная иммуногенная поливалентная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к вакцинной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит пневмококковые полисахариды (например, капсульные пневмококковые полисахариды), выбранные из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45. Каждый из выбранных пневмококковых полисахаридов по отдельности конъюгирован с белком-носителем PsaA. В других вариантах осуществления первая часть из выбранных пневмококковых полисахаридов конъюгирована с PsaA, и вторая часть из выбранных пневмококковых полисахаридов конъюгирована с CRM197. В любом из этих вариантов осуществления вакцинная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок представляет собой иммуногенную поливалентную композицию с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, такую как 10-валентная, 13-валентная, 14-валентная, 15-валентная, 17-валентная, 18-валентная, 19-валентная, 20-валентная, 22валентная, 23-валентная, 24-валентная или 25-валентная иммуногенная поливалентная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок.
Еще в одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к вакцинной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит пневмококковые полисахариды (например, капсульные пневмококковые полисахариды), выбранные из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45. В этих вариантах осуществления по меньшей мере три из выбранных пневмококковых полисахаридов по отдельности конъюгированы с белком-носителем PsaA, и каждый из дополнительных пневмококковых полисахаридов по отдельности конъюгирован с белкомносителем CRM197. В любом из этих вариантов осуществления вакцинная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок представляет собой иммуногенную поливалентную композицию с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, такую как 10-валентная, 13-валентная, 14-валентная, 15-валентная, 17-валентная, 18-валентная, 19-валентная, 20-валентная, 22-валентная, 23-валентная, 24валентная или 25-валентная иммуногенная поливалентная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок.
Еще в одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к вакцинной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит пневмококковые полисахариды (например, капсульные пневмококковые полисахариды), выбранные из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45. В этих вариантах осуществления по меньшей мере первые пять из выбранных пневмококковых полисахаридов, каждый по отдельности, конъюгированы с белкомносителем PsaA, и по меньшей мере вторые пять полисахаридов, каждый по отдельности, конъюгированы с белком-носителем CRM197. Первые пять из выбранных пневмококковых полисахаридов выбраны из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, и вторые пять полисахаридов выбраны из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45. В других вариантах осуществления первая часть из выбранных пневмококковых полисахаридов конъюгирована с PsaA, и вторую часть из выбранных пневмококковых полисахаридов конъюгирована с CRM197. В любом из этих вариантов осуществления вакцинная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахаридбелок представляет собой иммуногенную поливалентную композицию с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, такую как 10-валентная, 14-валентная, 15-валентная, 17-валентная, 18-валентная, 19валентная, 20-валентная, 22-валентная, 23-валентная, 24-валентная или 25-валентная иммуногенная поливалентная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок.
- 10 048146
Еще в одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции 14валентной вакцине с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит по меньшей мере три пневмококковых полисахарида (например, капсульные пневмококковые полисахариды), выбранные из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, которые конъюгированы с PsaA. Кроме того, композиция 14-валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок дополнительно содержит по меньшей мере пять пневмококковых полисахаридов, выбранных из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, которые конъюгированы с CRMi97.
Еще в одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции 15валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит по меньшей мере три пневмококковых полисахарида (например, капсульные пневмококковые полисахариды), выбранные из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, которые конъюгированы с PsaA. Кроме того, композиция 15-валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок дополнительно содержит по меньшей мере пять пневмококковых полисахаридов, выбранных из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, которые конъюгированы с CRM197.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к композиции 17валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит по меньшей мере три пневмококковых полисахарида (например, капсульные пневмококковые полисахариды), выбранные из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, которые конъюгированы с PsaA. Кроме того, композиция 17-валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок дополнительно содержит по меньшей мере пять пневмококковых полисахаридов, выбранных из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, которые конъюгированы с CRM197.
В других вариантах осуществления настоящее изобретение относится к композиции 20-валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит по меньшей мере три пневмококковых полисахарида (например, капсульные пневмококковые полисахариды), выбранные из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, которые конъюгированы с PsaA. Кроме того, композиция 20-валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок дополнительно содержит по меньшей мере пять пневмококковых полисахаридов, выбранных из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, которые конъюгированы с CRM197.
В дополнительных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к композиции 22валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит по меньшей мере пять пневмококковых полисахаридов (например, капсульные пневмококковые полисахариды), выбранные из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, которые конъюгированы с PsaA. Кроме того, композиция 22-валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок дополнительно содержит по меньшей мере пять пневмококковых полисахаридов, выбранных из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, которые конъюгированы с CRM197.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к композиции 24валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит по меньшей мере пять пневмококковых полисахаридов (например, капсульные пневмококковые полисахариды), выбранные из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, которые конъюгированы с PsaA. Кроме того, композиция 24-валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок дополнительно содержит по меньшей мере пять пневмококковых полисахаридов, выбранных из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, которые конъюгированы с CRM197.
Еще в одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции 25валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит по меньшей мере пять пневмококковых полисахаридов (например, капсульные пневмококковые полисахариды), вы
- 11 048146 бранные из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, которые конъюгированы с PsaA. Кроме того, композиция 25-валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок дополнительно содержит по меньшей мере пять пневмококковых полисахаридов, выбранных из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, которые конъюгированы с CRM197.
В других вариантах осуществления настоящее изобретение относится к композиции 14-валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит пневмококковые полисахариды (например, капсульные пневмококковые полисахариды), выбранные из серотипов 1, 3, 4, 5, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F. По меньшей мере серотип 3 и серотип 6В из выбранных серотипов конъюгированы с PsaA, и каждый из одного или более серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F конъюгирован с CRM197.
В других вариантах осуществления настоящее изобретение относится к композиции 14-валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит пневмококковые полисахариды (например, капсульные пневмококковые полисахариды), выбранные из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F. По меньшей мере серотип 3 и серотип 6A из выбранных серотипов конъюгирован с PsaA, и каждый из одного или более серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F конъюгирован с CRM197.
В дополнительных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к композиции 15валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит пневмококковые полисахариды (например, капсульные пневмококковые полисахариды), выбранные из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F. По меньшей мере серотипы 3, 6A и 6В из выбранных серотипов конъюгированы с PsaA, и каждый из одного или более серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F конъюгирован с CRM197.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к композиции 17валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит пневмококковые полисахариды (например, капсульные пневмококковые полисахариды), выбранные из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 12F, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F и 35B. По меньшей мере серотипы 3, 6A и 6В из выбранных серотипов конъюгированы с PsaA, и каждый из одного или более серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 12F, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F и 35B конъюгирован с CRM197.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к композиции 20валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит пневмококковые полисахариды (например, капсульные пневмококковые полисахариды), выбранные из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 11, 12F, 14, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 35B и 45. По меньшей мере серотипы 3, 6A и 6В из выбранных серотипов конъюгированы с PsaA, и каждый из одного или более серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 11A, 12F, 14, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 35B и 45 конъюгирован с CRM197.
В других вариантах осуществления настоящее изобретение относится к композиции 22-валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит пневмококковые полисахариды (например, капсульные пневмококковые полисахариды), выбранные из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 35B и 38. По меньшей мере серотипы 3, 6A и 6В из выбранных серотипов конъюгированы с PsaA, и каждый из одного или более серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 35B и 38 конъюгирован с CRM197.
В других вариантах осуществления настоящее изобретение относится к композиции 22-валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит пневмококковые полисахариды (например, капсульные пневмококковые полисахариды), выбранные из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 35B и 38. Серотипы 1, 3, 6A, 10A, 12F, 15A 15B, 22F, 34, 35 и 38 из выбранных серотипов конъюгированы с PsaA, и каждый из серотипов 14, 5, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19, 19F, 23F и 33F конъюгирован с CRM197.
В других вариантах осуществления настоящее изобретение относится к композиции 24-валентной вакцины с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит пневмококковые полисахариды (например, капсульные пневмококковые полисахариды), выбранные из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 8, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 16F, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 35B и 38. Серотипы 1, 3, 6A, 8, 10A, 12F, 15A 15B, 16F, 22F, 34, 35 и 38 из выбранных серотипов конъюгированы с PsaA, и каждый из серотипов 14, 5, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 23F и 33F конъюгирован с CRM197.
Композиции конъюгатов пневмококковый полисахарид-белок по настоящему изобретению дополнительно содержат одно или несколько из следующих веществ: фармацевтически приемлемый носитель, фармацевтически приемлемый разбавитель, буфер, консервант, стабилизатор, адъювант и/или лиофилизирующее эксципиент. Например, композиции конъюгатов пневмококковый полисахарид-белок по настоящему изобретению могут содержать фармацевтически приемлемый носитель. В некоторых вариантах осуществления композиции конъюгатов пневмококковый полисахарид-белок по настоящему изобретению содержат по меньшей мере 10 пневмококковых полисахаридов, выбранных из серотипов 1, 2, 3, 4,
- 12 048146
5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45. Каждый из выбранных серотипов по отдельности конъюгирован с PsaA или с комбинацией PsaA и CRMj97, и с фармацевтически приемлемым носителем.
В некоторых вариантах осуществления пневмококковые полисахариды, используемые в композициях по настоящему изобретению, могут быть выделены из одного или более микроорганизмов (например, из пневмококков) в соответствии с общепринятыми способами. Например, пневмококковые полисахариды могут быть получены в соответствии с известными методиками. Кроме того, очистку пневмококковых полисахаридов можно выполнять в соответствии с описанным в публикации PCT WO 2016/174683 A1 способом.
Выделенные пневмококковые полисахариды могут быть очищены в соответствии с общепринятыми способами и могут быть использованы в своей нативной форме. В других вариантах осуществления, выделенные и очищенные пневмококковые полисахариды могут быть фрагментированы для получения одного или более фрагментов пневмококковых полисахаридов, и средняя молекулярная масса каждого их фрагментов пневмококкового полисахарида меньше, чем средняя молекулярная масса выделенных и очищенных пневмококковых полисахаридов.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей пневмококковые полисахариды, и размер молекул каждого из пневмококковых полисахаридов находится в диапазоне от приблизительно 150 до 450 кДа.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей один или более серотипов капсульных пневмококковых полисахаридов, каждый из которых по отдельности конъюгирован с белком-носителем, например, в виде конъюгата полисахаридбелок, при этом каждый конъюгат полисахарид-белок имеет молекулярную массу от приблизительно 1500 до приблизительно 15000 кДа.
В других вариантах осуществления выделенные и очищенные пневмококковые полисахариды перед конъюгированием с одним или несколькими белками-носителями могут быть активированы. Например, выделенные и очищенные пневмококковые полисахариды могут быть активированы (например, путем химической реакции) перед конъюгированием с одним или несколькими белками-носителями. Каждый из активированных пневмококковых полисахаридов может быть по отдельности конъюгирован с белкомносителем, с образованием конъюгата полисахарид-белок (например, гликоконъюгата). В других вариантах осуществления один или более из активированных пневмококковых полисахаридов могут быть конъюгированы с отдельным белком-носителем, и/или активированный пневмококковый полисахарид может быть конъюгирован с отдельным белком-носителем. Конъюгаты могут быть получены известными способами.
В некоторых вариантах осуществления пневмококковые полисахариды могут быть активированы химическим способом, а затем конъюгированы с белками-носителями в соответствии с известными способами, например, способами, описанными в патентах США №№ 4365170, 4673574 и 4902506. Например, пневмококковые полисахариды могут быть активированы путем окисления концевой гидроксильной группы до альдегида с помощью окислителя, такого как периодат (например, периодат натрия, периодат калия или периодическая кислота), путем случайного окислительного расщепления одной или нескольких вицинальных гидроксильных групп углеводов и образования одной или нескольких реактогенных альдегидных групп.
Пневмококковые полисахариды могут быть также активированы с помощью CDAP (1-циано-4диметиламино-пиридиний тетрафторбората), с последующим конъюгированием с одним или несколькими белками-носителями, такими как PsaA, CRM197, PspA или с их комбинацией. В других вариантах осуществления пневмококковые полисахариды, активированные посредством CDAP для образования цианатного эфира, могут быть напрямую конъюгированы с одним или несколькими белкаминосителями, или конъюгированы с помощью спейсера (например, линкера). Спейсер может присоединяться к аминогруппе на белке-носителе. В некоторых вариантах осуществления спейсером могут быть цистамин или цистеамин, которые образуют тиолированный полисахарид, способный соединяться с белком-носителем посредством тиоэфирной связи с малеимид-активированным белком-носителем (например, с помощью GMBS (N-(g-малеймидобутирилокси]сульфосукцинимидный эфир) или с галоацетилированным белком-носителем (например, с использованием йодацетимида, этил-йодацетимада HCl, SIAB (№сукцинимидил-(4-йодацетат)-аминобензоат), SIA (N-сукцинимидил-йодацетат), SBAP(Nсукцинимидил-3-(бромацетатамидо)пропионат) и/или N-сукцинимидил-бромацетата. В других вариантах осуществления цианатный эфир присоединяется с помощью гександиамина или дигидразида адипиновой кислоты (ADH), и амино-дериватизированный сахарид конъюгируется с белком-носителем посредством химической реакции с карбодиимидом (например, EDAC или EDC) через карбоксильную группу на белке-носителе. Такие конъюгаты описаны в опубликованной международной патентной заявке № WO 93/15760, опубликованной международной патентной заявке № WO 95/08348, опубликованной международной патентной заявке № WO 96/29094 и в литературе, см. Chu et al., 1983, Infect. Immunity 40:245-256.
Другие подходящие способы активации и/или присоединения, предназначенные для использования
- 13 048146 с полисахарид-белковыми конъюгатами и вакцинными композициями по изобретению, включают способы с использованием карбодиимидов, гидразидов, активных сложных эфиров, норборана, рнитробензойной кислоты, N-гидроксисукцинимида, S-NHS, EDC, TSTU, и другие способы, описанные в опубликованной международной патентной заявке WO 98/42721. Например, для конъюгирования можно задействовать карбонильный линкер, который может быть получен путем реакции свободной гидроксильной группы сахарида с GDI (1,1'-карбонилдиимидазол) (см. Bethell et al. J. Biol. Chem. 1979, 254: 2572-4; Hearn et al. J. Chromatogr. 1981, 218: 509-18) и последующего взаимодействия с белком с образованием карбаматной связи. В некоторых вариантах осуществления можно применять восстановление аномерного конца до первичной гидроксильной группы, необязательно введение защиты/снятие защиты первичной гидроксильной группы, взаимодействие первичной гидроксильной группы с CDI с образованием CDI-карбаматного промежуточного соединения и присоединение CDI-карбаматного промежуточного соединения к аминогруппе на белке.
Например, другие подходящие способы активации и/или присоединения, используемые для вакцинных композиций с полисахаридно-белковыми конъюгатами по изобретению, включают следующий способ: сортированные по размеру пневмококковые полисахариды (например, приблизительно 6 мл сортированных по размеру полисахаридов в концентрации приблизительно 10 мг/мл) и CDAP (например, приблизительно 100 мг/мл в ацетонитриле (вес/объем)) можно смешивать в стеклянной пробирке в соотношении приблизительно 1 приблизительной (например, взбалтыванием в течение приблизительно 1 минуты). При необходимости можно регулировать уровень pH раствора полисахарида (например, до приблизительно 9,25 с помощью приблизительно 0,2М триэтиламина, с взбалтыванием в течение 3 мин при комнатной температуре). Дополнительно, к активированным пневмококковым полисахаридам можно медленно добавлять PsaA (например, приблизительно 4 мл раствора в концентрации приблизительно 15 мг/мл) (например, в соотношении приблизительно 1 приблизительно к 1 (полисахарид: белокноситель)). Можно регулировать уровень pH реакции (например, до приблизительно 9,05 с помощью 0,2 М триметиламина), и можно продолжать реакцию (например, путем взбалтывания в течение 5 ч при комнатной температуре). Реакцию смеси можно подавлять (например, путем добавления глицина в избыточной концентрации).
В некоторых вариантах осуществления реакционную смесь можно подвергать диафильтрации с использованием мембраны (например, мембраны 100 К MWCO с отсечением по молекулярной массе), и можно очищать способом гель-хроматографии. После диафильтрации и очистки можно анализировать фракции путем эксклюзионной хроматографии с детекцией многоуглового лазерного рассеивания (SECMALLS) и способом с использованием антрона. После анализа содержащие конъюгаты фракции можно объединять и фильтровать в стерильных условиях (например, с помощью 0,2 мкм фильтров).
После конъюгирования пневмококковых полисахаридов с одним или несколькими белкаминосителями конъюгаты полисахарид-белок можно подвергать очистке разными способами (например, обогащать в плане количества конъюгата полисахарид-белок). Эти способы включают без ограничения методики концентрации/диафильтрации, осаждения/элюирования, колоночную хроматографию и глубинную фильтрацию. Например, после очистки конъюгатов из этих конъюгатов можно составлять композиции конъюгированных пневмококковых полисахаридов и белков по изобретению, которые можно применять в качестве вакцин.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу получения конъюгата полисахарид-белок для композиции пневмококковой вакцины, описанной в изобретении, и указанный способ дополнительно включает введение конъюгата пневмококковый полисахарид-белок в состав вакцинной композиции, включающей адъювант, буфер и эксципиент.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу получения конъюгата полисахарид-белок для композиции пневмококковой вакцины, описанной в изобретении, при этом адъювант представляет собой фосфат алюминия.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения нуждающегося в этом пациента, и указанный способ включает введение описанной в изобретении композиции пневмококковой вакцины нуждающемуся в этом пациенту.
В некоторых вариантах осуществления пациент имеет заболевание, обусловленное streptococcus pneumoniae, например, инвазивную пневмококковую инфекцию (IPD).
В одном варианте осуществления пациентом является человек, например, младенец (в возрасте приблизительно меньше 1 года), ребенок раннего возраста (от приблизительно 12 месяцев до приблизительно 24 месяцев), ребенок младшего дошкольного возраста (от приблизительно 2-х лет до приблизительно 5 лет), ребенок старшего дошкольного и младшего школьного возраста (от приблизительно 5 лет до приблизительно 13 лет), подросток (от приблизительно 13 лет до приблизительно 18 лет), взрослый человек (от приблизительно 18 лет до приблизительно 65 лет) или человек старшего возраста (старше 65 лет).
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу индукции иммунного ответа на капсульный полисахаридный конъюгат S.pneumoniae, и указанный способ включает введение пациенту иммунологически эффективного количества композиции пневмококковой вакцины,
- 14 048146 описанной в изобретении.
В одном варианте осуществления способ индукции иммунного ответа на капсульный полисахаридный конъюгат S.pneumoniae включает введение пациенту описанной в изобретении композиции пневмококковой вакцины системным, подкожным путем и/или введение в слизистую оболочку.
В некоторых вариантах осуществления количество каждого конъюгата в дозе вакцинных композиций по изобретению представляет собой количество, которое достаточно для индукции иммунопротективного ответа, а именно, иммунопротективного ответа без значительных нежелательных эффектов. Количество каждого конъюгата можно варьировать в зависимости от пневмококкового серотипа, вместе с тем, каждая доза вакцинных композиций может содержать от приблизительно 0,1 до приблизительно 50 мкг каждого из пневмококковых полисахаридов, от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 мкг, или от приблизительно 1 до приблизительно 5 мкг каждого из пневмококковых полисахаридов, конъюгированных с каждым белком-носителем, и содержать белок-носитель в количестве от приблизительно 1,5 до приблизительно 5 мкг.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции пневмококковой вакцины, содержащей пневмококковые полисахариды и белки-носители, и в такой композиции пневмококковой вакцины процентное отношение белка к полисахариду (белок/ПС) составляет от приблизительно 0,5 до приблизительно 2,0, и предпочтительное соотношение белок/ПС составляет от 0,7 до 1,2.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к вакцинным композициям с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которые содержат пневмококковые полисахариды с молекулярной массой в диапазоне от приблизительно 100 до приблизительно 400 кДа, от приблизительно 125 до приблизительно 425 кДа, от приблизительно 150 до приблизительно 450 кДа, от приблизительно 175 до приблизительно 475 кДа, от приблизительно 200 до приблизительно 500 кДа, от приблизительно 250 до приблизительно 550 кДа или от приблизительно 300 до приблизительно 600 кДа.
В других вариантах осуществления настоящее изобретение относится к вакцинным композициям с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, содержащим один или более конъюгатов полисахаридбелок, молекулярная масса которых находится в диапазоне от приблизительно 1000 до приблизительно 10000 кДа, от приблизительно 1500 до приблизительно 15000 кДа, от приблизительно 2000 до приблизительно 20000 кДа, от приблизительно 2500 до приблизительно 25000 кДа или от приблизительно 3000 до приблизительно 30000 кДа.
Вакцинные композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок согласно настоящему изобретению могут быть изготовлены с помощью известных способов. Так, например, можно делать вакцинные композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем, например, с водой или физиологическим раствором. Дополнительно, вакцинные композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок могут дополнительно содержать одно или несколько из следующих веществ: буфер, консервант или стабилизатор, полисорбат, адъювант, такой как соединения алюминия, например, гидроксид алюминия, фосфат алюминия или гидроксифосфат алюминия, и/или лиофилизирующее эксципиент. Можно делать выбор в отношении включения любого из указанных выше соединений в вакцинные композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок по изобретению в зависимости от способа и пути введения такой композиции нуждающемуся в этом пациенту, и дополнительно, можно исходить из стандартной фармацевтической практики.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу получения четырнадцати-валентной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит пневмококковые полисахариды, выбранные из серотипов 1, 3, 4, 5, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F, при этом по меньшей мере серотипы 3 и 6В конъюгированы с PsaA, и один или более из серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F конъюгированы с CRM!97. Способ получения четырнадцати-валентной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок включает следующие этапы:
(a) раздельное конъюгирование одного или более из четырнадцати пневмококковых полисахаридов (например, активированных посредством CDAP) с иммуногенным белком-носителем, таким как PsaA и/или CRM197, (b) диафильтрация и очистка конъюгатов с помощью эксклюзионной хроматографии, (c) анализ очищенных фракций способом SEC-MALLS, объединение фракций, содержащих каждый из четырнадцати конъюгатов, и стерилизация посредством фильтрации моновалентных конъюгированных фракций, и (d) составление композиции из четырнадцати конъюгатов (в количестве каждого серотипа, например, от приблизительно 2,2 до 4,4 мкг, PsaA в количестве от приблизительно 5 мкг до приблизительно 10 мкг, и CRMj97 в количестве от приблизительно 15 мкг до приблизительно 36 мкг), адъюванта (например, фосфата алюминия), вспомогательного вещества и буфера для получения четырнадцати-валентной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок.
В некоторых вариантах осуществления четырнадцати-валентная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок может проходить фильтрацию (например, в асептических условиях).
- 15 048146
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу получения четырнадцати-валентной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, и указанная композиция содержит пневмококковые полисахариды, выбранные из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F, при этом по меньшей мере серотипы 3 и 6A конъюгированы с PsaA, и один или более из серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F конъюгированы с CRM197. Способ получения четырнадцати-валентной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок включает следующие этапы:
(a) раздельное конъюгирование одного или более из четырнадцати пневмококковых полисахаридов (например, активированных посредством CDAP) с иммуногенным белком-носителем, таким как PsaA и/или CRMj97, (b) диафильтрация и очистка конъюгатов с помощью эксклюзионной хроматографии, (c) анализ очищенных фракций способом SEC-MALLS, объединение фракций, содержащих каждый из четырнадцати конъюгатов, и стерилизация посредством фильтрации моновалентных конъюгированных фракций, и (d) составление композиции из четырнадцати конъюгатов (в количестве каждого серотипа, например, от приблизительно 2,2 до 4,4 мкг, PsaA в количестве от приблизительно 5 мкг до приблизительно 10 мкг, и CRM197 в количестве от приблизительно 15 мкг до приблизительно 36 мкг), адъюванта (например, фосфата алюминия), вспомогательного вещества и буфера для получения четырнадцати-валентной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок.
В некоторых вариантах осуществления четырнадцати-валентная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок может проходить фильтрацию (например, в асептических условиях).
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу получения пятнадцати-валентной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит пневмококковые полисахариды, выбранные из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F, при этом по меньшей мере серотипы 3, 6A и 6В конъюгированы с PsaA, и один или более из серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 14, 18C, 19a, 19F, 22F, 23F и 33F конъюгированы с CRM197. Способ получения пятнадцати-валентной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок включает следующие этапы:
(a) раздельное конъюгирование одного или более из пятнадцати пневмококковых полисахаридов (например, активированных посредством CDAP) с иммуногенным белком-носителем, таким как PsaA и/или CRM197, (b) диафильтрация и очистка конъюгатов с помощью эксклюзионной хроматографии, (c) анализ очищенных фракций способом SEC-MALLS, объединение фракций, содержащих каждый из пятнадцати конъюгатов, и стерилизация посредством фильтрации моновалентных конъюгированных фракций, и (d) составление композиции из пятнадцати конъюгатов (в количестве каждого серотипа, например, от приблизительно 2,2 до 4,4 мкг, PsaA в количестве от приблизительно 5 мкг до приблизительно 20 мкг, и CRM197 в количестве от приблизительно 20 мкг до приблизительно 40 мкг), адъюванта (например, фосфата алюминия), вспомогательного вещества и буфера для получения пятнадцати-валентной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок.
В некоторых вариантах осуществления пятнадцати-валентная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок может проходить фильтрацию (например, в асептических условиях).
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу получения семнадцати-валентной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит пневмококковые полисахариды, выбранные из серотипов 1, 3,4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 12F, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F и 35B, при этом по меньшей мере серотипы 3, 6A и 6В конъюгированы с PsaA, и один или более из серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 12F, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F и 35B конъюгированы с CRM197. Способ получения семнадцати-валентной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахаридбелок включает следующие этапы:
(a) раздельное конъюгирование одного или более из семнадцати пневмококковых полисахаридов (например, активированных посредством CDAP) с иммуногенным белком-носителем, таким как PsaA и/или CRM197, (b) диафильтрация и очистка конъюгатов с помощью эксклюзионной хроматографии, (c) анализ очищенных фракций способом SEC-MALLS, объединение фракций, содержащих каждый из семнадцати конъюгатов, и стерилизация посредством фильтрации моновалентных конъюгированных фракций, и (d) составление композиции из семнадцати конъюгатов (в количестве каждого серотипа, например, от приблизительно 2,2 до 4,4 мкг, PsaA в количестве от приблизительно 5 мкг до приблизительно 20 мкг, и CRM197 в количестве от приблизительно 20 мкг до приблизительно 40 мкг), адъюванта (например, фосфата алюминия), вспомогательного вещества и буфера для получения семнадцати-валентной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок.
В некоторых вариантах осуществления семнадцати-валентная композиция с конъюгатом пневмо
- 16 048146 кокковый полисахарид-белок может проходить фильтрацию (например, в асептических условиях).
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу получения двадцативалентной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит пневмококковые полисахариды, выбранные из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 11A, 12F, 14, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 35B и 45, при этом по меньшей мере серотипы 3, 6A и 6В конъюгированы с PsaA, и один или более из серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 11A, 12F, 14, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 35B и 45 конъюгированы с CRM197. Способ получения двадцативалентной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок включает следующие этапы:
(a) раздельное конъюгирование одного или более из двадцати пневмококковых полисахаридов (например, активированных посредством CDAP) с иммуногенным белком-носителем, таким как PsaA и/или CRM197, (b) диафильтрация и очистка конъюгатов с помощью эксклюзионной хроматографии, (c) анализ очищенных фракций способом SEC-MALLS, объединение фракций, содержащих каждый из двадцати конъюгатов, и стерилизация посредством фильтрации моновалентных конъюгированных фракций, и (d) составление композиции из двадцати конъюгатов (в количестве каждого серотипа, например, от приблизительно 2,2 до 4,4 мкг, PsaA в количестве от приблизительно 5 мкг до приблизительно 20 мкг, и CRM197 в количестве от приблизительно 20 мкг до приблизительно 50 мкг), адъюванта (например, фосфата алюминия), вспомогательного вещества и буфера для получения двадцати-валентной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок.
В некоторых вариантах осуществления двадцативалентная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок может проходить фильтрацию (например, в асептических условиях).
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу получения двадцати двух валентной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которая содержит один или более пневмококковых полисахаридов, выбранных из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 35B и 38, при этом по меньшей мере серотипы 3, 6A и 6В конъюгированы с PsaA, и один или более из серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 35B и 38 конъюгированы с CRMi97. Способ получения двадцати двух валентной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок включает следующие этапы:
(a) раздельное конъюгирование одного или более из двадцати двух пневмококковых полисахаридов (например, активированных посредством CDAP) с иммуногенным белком-носителем, таким как PsaA и/или CRMj97, (b) диафильтрация и очистка конъюгатов с помощью эксклюзионной хроматографии, (c) анализ очищенных фракций способом SEC-MALLS, объединение фракций, содержащих каждый из двадцати двух конъюгатов, и стерилизация посредством фильтрации моновалентных конъюгированных фракций, и (d) составление композиции из двадцати двух конъюгатов (в количестве каждого серотипа, например, от приблизительно 2,2 до 4,4 мкг, PsaA в количестве от приблизительно 5 мкг до приблизительно 20 мкг, и CRM197 в количестве от приблизительно 20 мкг до приблизительно 50 мкг), адъюванта (например, фосфата алюминия), вспомогательного вещества и буфера для получения двадцати-валентной композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок.
В некоторых вариантах осуществления двадцати двух валентная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок может проходить фильтрацию (например, в асептических условиях).
Композиции по настоящему изобретению могут быть представлены в виде единичной дозы, например, во флаконе с единичной дозой, в виде многократной дозы, например, во флаконе с множеством доз, или в виде предварительно заполненного шприца. Композиции по настоящему изобретению могут дополнительно содержать один или более консервантов, выбранных из тиомерсала, 2-феноксиэтанола и т.п., в количестве, которое может составлять от приблизительно 4 мг/мл до приблизительно 20 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение также относится к иммуногенной композиции (например, к вакцине), например, к композиции с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которую вводят в виде однократной дозы приблизительно 0,5 мл и делают таким образом, чтобы в ней содержалось по меньшей мере следующее: пневмококковые полисахариды из двух или более серотипов в количестве от приблизительно 2,2 до 4,4 мкг, от приблизительно 1 мкг приблизительно 10 мкг PsaA на каждый серотип, от приблизительно 1 мкг до приблизительно 10 мкг CRM197 на каждый серотип, от приблизительно 0,2 мг до приблизительно 1 мг адъюванта (например, фосфата алюминия), и одно или несколько вспомогательных веществ (например, хлорид натрия и/или буфер).
В других вариантах осуществления настоящее изобретение также относится к тринадцативалентной иммуногенной композиции (например, к вакцине) в стерильной жидкой композиции, такой как тринадцати-валентная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которую вводят в виде однократной дозы приблизительно 0,5 мл и готовят таким образом, чтобы в ней содержалось по меньшей мере следующее: пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F и 33F, каждый из которых по отдельности конъюгирован с PsaA или с комбинацией PsaA и
- 17 048146
CRM197.
Дополнительно, композицию тринадцати-валентной вакцины можно делать в виде одной или нескольких доз объемом приблизительно 0,5 мл на дозу, при этом в каждой дозе 0,5 мл содержится каждый из тринадцати серотипов в количестве от приблизительно 2,2 мкг до приблизительно 4,4 мкг, PsaA и CRM197 в количестве от приблизительно 25 мкг до приблизительно 30 мкг, приблизительно 0,125 мг адъюванта (например, элементарного алюминия, то есть, приблизительно 0,5 мг фосфата алюминия), хлорид натрия и L-гистидиновый буфер.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение также относится к четырнадцативалентной иммуногенной композиции (например, к вакцине) в стерильной жидкой композиции, такой как четырнадцати-валентная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которую вводят в виде однократной дозы приблизительно 0,5 мл и готовят таким образом, чтобы в ней содержалось по меньшей мере следующее: пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F, каждый из которых по отдельности конъюгирован с PsaA или с комбинацией PsaA и C.'RM|97
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение также относится к четырнадцативалентной иммуногенной композиции (например, к вакцине) в стерильной жидкой композиции, такой как четырнадцати-валентная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которую вводят в виде однократной дозы приблизительно 0,5 мл и готовят таким образом, чтобы в ней содержалось по меньшей мере следующее: пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F, каждый из которых по отдельности конъюгирован с PsaA или с комбинацией PsaA и CRM197.
Дополнительно, композицию четырнадцати-валентной вакцины можно делать в виде одной или нескольких доз объемом приблизительно 0,5 мл на дозу, при этом в каждой дозе 0,5 мл содержится каждый из четырнадцати серотипов в количестве от приблизительно 2,2 мкг до приблизительно 4,4 мкг, PsaA и CRM197 в количестве от приблизительно 20 мкг до приблизительно 35 мкг, приблизительно 0,125 мг адъюванта (например, элементарного алюминия, то есть, приблизительно 0,5 мг фосфата алюминия), хлорид натрия и L-гистидиновый буфер.
В других вариантах осуществления настоящее изобретение также относится к пятнадцативалентной иммуногенной композиции (например, к вакцине) в стерильной жидкой композиции, такой как пятнадцати-валентная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которую вводят в виде однократной дозы приблизительно 0,5 мл и готовят таким образом, чтобы в ней содержалось по меньшей мере следующее: пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F, каждый из которых по отдельности конъюгирован с CRM197.
Дополнительно, композицию пятнадцати-валентной вакцины можно делать в виде одной или нескольких доз объемом приблизительно 0,5 мл на дозу, при этом в каждой дозе 0,5 мл содержится каждый из пятнадцати серотипов в количестве от приблизительно 2,2 мкг до приблизительно 4,4 мкг, PsaA в количестве от приблизительно 5 мкг до приблизительно 20 мкг, CRM197 в количестве от приблизительно 20 мкг до приблизительно 40 мкг, приблизительно 0,125 мг адъюванта (например, элементарного алюминия, то есть, приблизительно 0,5 мг фосфата алюминия), хлорид натрия и L-гистидиновый буфер.
В дополнительных вариантах осуществления настоящее изобретение также относится к семнадцати-валентной иммуногенной композиции (например, к вакцине) в стерильной жидкой композиции, такой как семнадцати-валентная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которую вводят в виде однократной дозы приблизительно 0,5 мл и готовят таким образом, чтобы в ней содержалось по меньшей мере следующее: пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 12F, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F и 35B, каждый из которых по отдельности конъюгирован с CRM197.
Дополнительно, композицию семнадцати-валентной вакцины можно делать в виде одной или нескольких доз объемом приблизительно 0,5 мл на дозу, при этом в каждой дозе 0,5 мл содержится каждый из семнадцати серотипов в количестве от приблизительно 2,2 мкг до приблизительно 4,4 мкг, PsaA в количестве от приблизительно 5 мкг до приблизительно 20 мкг, CRM197 в количестве от приблизительно 20 мкг до приблизительно 40 мкг, приблизительно 0,125 мг адъюванта (например, элементарного алюминия, то есть, приблизительно 0,5 мг фосфата алюминия), хлорид натрия и L-гистидиновый буфер.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение также относится к двадцативалентной иммуногенной композиции (например, к вакцине) в стерильной жидкой композиции, такой как двадцати-валентная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которую вводят в виде однократной дозы приблизительно 0,5 мл и готовят таким образом, чтобы в ней содержалось по меньшей мере следующее: пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 11A, 12F, 14, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 35B и 45, при этом по меньшей мере каждый из серотипов 3, 6A и 6В по отдельности конъюгирован с PsaA, и один или более из серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 11, 12F, 14, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 35B и 45, каждый по отдельности, конъюгирован с CRM197.
Дополнительно, композицию двадцати-валентной вакцины можно делать в виде одной или нескольких доз объемом приблизительно 0,5 мл на дозу, при этом в каждой дозе 0,5 мл содержится каждый из двадцати серотипов в количестве от приблизительно 2,2 мкг до приблизительно 4,4 мкг, PsaA в коли
- 18 048146 честве от приблизительно 5 мкг до приблизительно 20 мкг, CRM197 в количестве от приблизительно 20 мкг до приблизительно 50 мкг, приблизительно 0,125 мг адъюванта (например, элементарного алюминия, то есть, приблизительно 0,5 мг фосфата алюминия), хлорид натрия и L-гистидиновый буфер.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение также относится к двадцати двухвалентной иммуногенной композиции (например, к вакцине) в стерильной жидкой композиции, такой как двадцати двух-валентная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которую вводят в виде однократной дозы приблизительно 0,5 мл и готовят таким образом, чтобы в ней содержалось по меньшей мере следующее: пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 35B и 38, при этом по меньшей мере каждый из серотипов 3, 6A и 6B по отдельности конъюгирован с PsaA, и один или более из серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 35 в и 38, каждый по отдельности, конъюгирован с CRM197.
Дополнительно, композицию двадцати двух-валентной вакцины можно делать в виде одной или нескольких доз объемом приблизительно 0,5 мл на дозу, при этом в каждой дозе 0,5 мл содержится каждый из двадцати двух серотипов в количестве от приблизительно 2,2 мкг до приблизительно 4,4 мкг, PsaA в количестве от приблизительно 5 мкг до приблизительно 20 мкг, CRM197 в количестве от приблизительно 20 мкг до приблизительно 50 мкг, приблизительно 0,125 мг адъюванта (например, элементарного алюминия, то есть, приблизительно 0,5 мг фосфата алюминия), хлорид натрия и L-гистидиновый буфер.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение также относится к двадцати четырех-валентной иммуногенной композиции (например, к вакцине) в стерильной жидкой композиции, такой как двадцати четырех-валентная композиция с конъюгатом пневмококковый полисахарид-белок, которую вводят в виде однократной дозы приблизительно 0,5 мл и готовят таким образом, чтобы в ней содержалось по меньшей мере следующее: пневмококковые полисахариды из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 8, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 16F, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 35B и 38, при этом по меньшей мере каждый из серотипов 3, 6A и 6В по отдельности конъюгирован с PsaA, и один или более из серотипов 1, 4, 5, 7F, 8, 9V, 10A, 12F, 14, 15A, 15B, 16F, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, 34, 3 и 38, каждый по отдельности, конъюгирован с CRM197.
Дополнительно, композицию двадцати четырех-валентной вакцины можно делать в виде одной или нескольких доз объемом приблизительно 0,5 мл на дозу, при этом в каждой дозе 0,5 мл содержится каждый из двадцати четырех серотипов в количестве от приблизительно 2,2 мкг до приблизительно 4,4 мкг, PsaA в количестве от приблизительно 5 мкг до приблизительно 20 мкг, CRM197 в количестве от приблизительно 20 мкг до приблизительно 50 мкг, приблизительно 0,125 мг адъюванта (например, элементарного алюминия, то есть, приблизительно 0,5 мг фосфата алюминия), хлорид натрия и L-гистидиновый буфер.
Композицию по настоящему изобретению можно вводить нуждающемуся в этом пациенту с помощью любого числа общепринятых путей введения, применяемых в области вакцинации. Например, композиции по настоящему изобретению можно вводить системно, например, парентерально (например, подкожно, внутримышечно, внутрикожно и/или внутривенно) или через слизистую оболочку (например, перорально и/или интраназально).
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение также относится к способам индукции иммунного ответа у нуждающегося в этом пациента на один или более капсульных полисахаридов S.pneumoniae, конъюгированных с одним или несколькими белками-носителями. Способы индукции иммунного ответа включают введение нуждающемуся в этом пациенту иммунологически эффективного количества композиций, описанных в изобретении.
В соответствии со способами настоящего изобретения, пациентом, для которого предназначены описанные в изобретении композиции, является человек, например, младенец (в возрасте приблизительно меньше 1 года), ребенок раннего возраста (от приблизительно 12 месяцев до приблизительно 24 месяцев), ребенок младшего дошкольного возраста (от приблизительно 2-х лет до приблизительно 5 лет), ребенок старшего дошкольного и младшего школьного возраста (от приблизительно 5 лет до приблизительно 13 лет), подросток (от приблизительно 13 лет до приблизительно 18 лет), взрослый человек (от приблизительно 18 лет до приблизительно 65 лет) или человек старшего возраста (старше 65 лет).
Согласно изобретению, эффективное количество описанных композиций относится к количеству, необходимому для индукции иммунного ответа у пациента, которому вводят эту композицию. Иммунный ответ характеризуется наличием в организме-хозяине одного или более антител, специфичных к антигену S.pneumoniae, что значительно уменьшает вероятность инфицирования или степень тяжести инфекции S.pneumoniae во время последующего заражения.
Примеры
Следующие примеры приведены для иллюстрации раскрытия и предназначены исключительно для иллюстративной цели, и не должны считаться ограничением объема изобретения.
Пример 1. Конъюгирование отдельных пневмококковых полисахаридов с белком-носителем с образованием конъюгатов полисахарид-PsaA.
A. Приготовление PsaA.
- 19 048146
Выполняли ПЦР-амплификацию гена PsaA из пневмококка серотипа 4 с удаленной гидрофобной лидерной пептидной последовательности. Последовательность гена верифицировали и для повышения экспрессии клонировали в E.coli с помощью вектора, сконструированного авторами (pBE66).
Глицериновую стоковую культуру, кодирующую ген PsaA, обновляли на 20 мл среды LB, содержащей 1 мл стокового глицерина в конической колбу объемом 150 мл. Культуру инкубировали в течение приблизительно 6 ч при температуре 37°C при 200 оборотах в минуту до конечной оптической плотности 3,5 OD при OD600 нм. Обновленную культуру переносили в 1 л посевной культуры в конической колбе объемом 5 л. Культуру выращивали в течение приблизительно 10 ч при 37°C при 200 оборотах в у до конечной OD 3 при 600 нм.
Культуру для посева переносили асептически в 20-литровый ферментер, содержащий среды из следующих компонентов: HyPeptone 6 г/л, дрожжевой экстракт 12 г/л, дикалий гидроортофосфат 13,5 г/л, двуосновной фосфат аммония 4 г/л, лимонная кислота 1,7 г/л, MgSO4 · 7H2O 1,2 г/л, глюкоза 4 г/л, тиамина гидрохлорид 10 мг/л, а также микроэлементы 1 мл/л (например, микроэлементы для 100 мл композиции: FeCI3 2,7 г, ZnCI20,2 г, COCI2 · 6H2O 0,2 г, Na2MoO4 · 2H2O 0,2 г, CuSO4 · 5H2O 0,1 г, борная кислота 0,05 г, CACI2 · 2H2O 0,1 г, конц., HCl 10 мл). Первоначальная ферментация начиналась при оптической плотности 0,2 при OD 600 нм. Показатели pH поддерживали на уровне 7 ± 0,2 в течение ферментации путем добавления 20% ортофосфорной кислоты и 12,5% гидроксида аммония.
При падении уровня глюкозы ниже 0,5 г/л начинали периодическую ферментацию с подпиткой с постоянной скоростью 3-4 г/л в час, и в течение ферментации содержание растворенного кислорода %DO поддерживали на уровне > 20% с кислородным обогащением.
Клетки выращивали в ферментере, и осадок клеток собирали центрифугированием. Клетки лизировали с помощью устройства для разрушения клеток (Panda). Лизат центрифугировали при 10000g, и прозрачный супернатант подвергали очистке.
Очистку PsaA проводили аналогично процедуре, описанной авторами Larentis et al., 2011 (Protein expression and Purification 78 (2011) 38). Очистку дополнительно оптимизировали с помощью хроматографии со смешанным режимом (керамический гидроксиапатит типа LL) после диэтиламиноэтилцеллюлозы (ДЭАЭ) для достижения более высокой чистоты PsaA.
Анионообменная хроматография: 30 мл смолы ДЭАЭ сефарозы(GE) вносили в колонку XK16/20. Смолу промывали стерильной дистиллированной водой в объеме 5 колонок, а затем 20 Мм Трис, 1 мМЭДТА, pH 8,0 (уравновешивающий буфер) в объеме 10 колонок. 30 мл супернатанта разводили до 100 мл уравновешивающего буфера, наносили на колонку и собирали проточную фракцию. Колонку промывали 5 объемами уравновешивающего буфера. PsaA элюировали с помощью 12 объемов линейного градиента (0-100% буфер B). (Буфер A содержит 20 мМ Трис, 1 мМ ЭДТА, pH 8,0; буфер B содержит 20 мМ Трис, 1 мМ ЭДТА, 250 мМ NaCl, pH 8,0). Затем выполняли промывание колонки 20 мМ Трис, 1 мМ ЭДТА, 1 М NaCl, pH 8,0.
Хроматография со смешанным режимом: 25 мл керамического гидроксиапатита (типа II CHT-II) вносили в колонку. Смолу промывали объемами стерильной дистиллированной воды, а затем 10 объемами 20 мМ Трис, pH 6,8. Элюированные фракции из смолы ДЭАЭ, которые показали четкую основную видимую полосу приблизительно 37 кДа хорошей концентрации PsaA в SDS-PAGE (электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия) объединяли и наносили на смолу CHT-II. Проточную фракцию собирали и колонку промывали уравновешивающим буфером в объеме 5 колонок. Белок элюировали с помощью линейных градиентов в объеме 5 колонок (15% В, 20% В, 50% В и 100% В). Буфер A содержит 20 мМ Трис, pH 6,8, а буфер B содержит 250 мМ фосфатного буфера, pH 6,8.
Все элюированные фракции, показывающие чистую полосу предполагаемого размера PsaA, объединяли, концентрировали на кассете 10 кДа MWCO и подвергали диафильтрации против 20 мМ фосфатного буфера, pH 7,5. Очищенный белок наносили на SDS-PAGE гель для оценки чистоты.
B. Активация и конъюгирование пневмококкового полисахарида из серотипа 3 с PsaA.
Полисахарид из серотипа 3 с уменьшенным размером (в концентрации 5 мг/мл) и 1,5 мл CDAP (100 мг/мл в ацетонитриле (вес/объем)) смешивали в стеклянной посуде в соотношении 1: 0,5 (ПС: CDAP) и взбалтывали в течение 1 мин. Уровень pH раствора полисахарида доводили до 9,0 с помощью 3,5 мл 0,2 М триэтиламина и взбалтывали в течение 1 мин при комнатной температуре (КТ). PsaA в количестве 210 мг (14,0 мл в концентрации 15,0 мг/мл) медленно добавляли к активированному полисахариду в соотношении 1: 0,7 (ПС: белок-носитель).
Значение pH реакционной смеси доводили до приблизительно 9,01 с помощью 0,7 мл 0,2 М триэтиламина, и продолжали реакцию при взбалтывании в течение 5 ч при комнатной температуре с последующей остановкой реакции путем добавления глицина (100 мМ) в избыточной концентрации. Кинетику реакций конъюгирования контролировали с помощью эксклюзионной высокоэффективной жидкостной хроматографии (SEC-HPLC) в каждый час реакции.
Затем реакционную смесь подвергали диафильтрации и концентрировали с помощью мембраны 100 кДа MWCO TFF. Концентрат очищали с помощью эксклюзионной хроматографии. Фракции анализировали с помощью SEC-MALLS и способа с использованием антрона, и содержащие конъюгаты фракции
- 20 048146 объединяли и стерилизовали путем фильтрации с помощью 0,2 мкм фильтров.
C. Активация и конъюгирование пневмококкового полисахарида из серотипа 6A с PsaA.
Полисахарид тип 6A с уменьшенным размером (в концентрации 14,6 мг/мл) и 400 мкл CDAP (100 мг/мл в ацетонитриле (вес/объем)) смешивали в стеклянной посуде в соотношении 1:1 (ПС: CDAP) и взбалтывали в течение 1 мин. Уровень pH раствора полисахарида доводили до 9,5 с помощью 800 мкл 0,2 М триэтиламина и взбалтывали в течение 1 мин при комнатной температуре (КТ). PsaA в количестве 40 мг (3,78 мл в концентрации 11,0 мг/мл) медленно добавляли к активированному полисахариду в соотношении 1: 1 (ПС: белок-носитель).
Значение pH реакционной смеси доводили до приблизительно 9,01 с помощью 0,7 мл 0,2 М триэтиламина и реакцию продолжали при взбалтывании в течение 5 ч при комнатной температуре с последующей остановкой реакции путем добавления глицина (100 мМ) в избыточной концентрации. Кинетику реакций конъюгирования контролировали с помощью SEC-HPLC в каждый час реакции.
Затем реакционную смесь подвергали диафильтрациии концентрировали с помощью мембраны 100 кДа MWCO TFF. Концентрат очищали с помощью эксклюзионной хроматографии. Фракции анализировали путем SEC-MALLS и способа с использованием антрона, и содержащие конъюгаты фракции объединяли и стерилизовали путем фильтрации через 0,2 мкм фильтры.
D. Активация и конъюгирование пневмококкового полисахарида из серотипа 6В с PsaA.
Полисахарид типа 6В с уменьшенным размером (в концентрации 14,97 мг/мл) и 4,0 мл CDAP (100 мг/мл в ацетонитриле (вес/объем)) смешивали в стеклянной посуде в соотношении 1: 2 (ПС: CDAP) и взбалтывали в течение 1 мин. Уровень pH раствора полисахарида доводили до 9,1 путем добавления 8,0 мл 0,2 М триэтиламина и взбалтывали в течение 1 мин при комнатной температуре (КТ). PsaA в количестве 340 мг (22,66 мл в концентрации 15,0 мг/мл) медленно добавляли к активированному полисахариду в соотношении 1: 10,7 (ПС: белок-носитель).
Значение pH реакционной смеси доводили до приблизительно 9,01 путем добавления 0,7 мл 0,2 М триэтиламина и реакцию продолжали при взбалтывании в течение 5 ч при комнатной температуре с последующей остановкой реакции путем добавления глицина (100 мМ) в избыточной концентрации. Кинетику реакций конъюгирования контролировали с помощью SEC-HPLC в каждый час реакции.
Затем реакционная смесь подвергали диафильтрациии концентрировали с использованием мембраны 100 кДа MWCO TFF. Концентрат очищали с помощью эксклюзионной хроматографии. Фракции анализировали путем SEC-MALLS и способа с использованием антрона, и содержащие конъюгаты фракции объединяли и стерилизовали путем фильтрации через 0,2 мкм фильтры.
Выполняли SEC-ВЭЖХ для определения кинетики реакции конъюгирования серотипов 3 (D), 6A (E) и 6В (F). Для всех трех хроматограмм использовали следующие символы: полисахарид (сплошная линия), PsaA (пунктирная линия), 3 или 5 ч реакции (точечная линия). Как показано на фигуре 2 для всех хроматограмм, поглощение PsaA указано, исходя из сокращения или исчезновения принадлежащего PsaA пика при времени удерживания приблизительно 19 мин. Конъюгирование подтверждается по формированию нового пика от приблизительно 13,5 мин до приблизительно 14 мин.
Конъюгаты PsaA с пневмококковыми полисахаридами из серотипов 5, 9V, 12F, 10A, 15B, 18C и 45 были получены с помощью аналогичной вышеописанной методики. Выполняли эксклюзионную высокоэффективную жидкостную хроматографию для определения кинетики реакции конъюгирования серотипов 5 (A), 9В (B) и 18C (C). Все три хроматограммы показаны на фиг. 2: полисахарид (сплошная линия), PsaA (пунктирная линия), 3 или 5 ч реакции (точечная линия). Во всех хроматограммах поглощение PsaA указано, исходя из сокращения или исчезновения принадлежащего PsaA пика при времени удерживания приблизительно 19 мин. Конъюгирование подтверждается по формированию нового пика от приблизительно 13,5 мин до приблизительно 14 мин.
Пример 2. Получение конъюгатов пневмококкового капсульного полисахарида и CRM197.
A. Активация полисахарида и конъюгирование с белком-носителем.
Сортированные по размеру полисахариды (6,0 мл ПС, концентрация 10 мг/мл) и CDAP (100 мг/мл в ацетонитриле (вес/объем)) смешивали в стеклянной пробирке в соотношении 1:1 и перемешивали в течение 1 мин. Уровень pH раствора полисахарида доводили до 9,25 с помощью 0,2 М триэтиламина и взбалтывали в течение 3 мин при комнатной температуре (КТ). К активированному полисахариду медленно добавляли CRM197 (4,0 мл, в концентрации 15,0 мг/мл) в соотношении 1:1 (ПС: белок-носитель).
Значение pH реакции доводили до приблизительно 9,05 путем добавления 0,2 М триэтиламина, и реакцию продолжали при взбалтывании в течение 5 ч при комнатной температуре, и в итоге реакцию останавливали путем добавления глицина в избыточной концентрации.
Затем реакционную смесь подвергали диафильтрации с использованием мембраны 100 К MWCO и очищали путем эксклюзионной хроматографии. Фракции анализировали с помощью SEC-MALLS, способом с антроном, и содержащие конъюгаты фракции объединяли и стерилизовали путем фильтрации через 0,2 мкм фильтры. Этот материал называется одновалентным нерасфасованным конъюгатом.
На фиг. 1 показана кинетика реакции конъюгатов, полученных из серотипов 7F (A), 14 (B) и 19F (C) с CRM197. На всех трех хроматограммах использованы следующие обозначения: полисахарид (сплошная линия), CRM197 (пунктирная линия), 5 ч реакции (точечная линия). Во всех хроматограммах поглощение
- 21 048146
CRM197 указано, исходя из сокращения или исчезновения принадлежащего CRM197 пика при времени удерживания приблизительно 19 мин. Конъюгирование подтверждается по формированию нового пика от приблизительно 13,5 мин до приблизительно 14 мин.
На фиг. 1 показана кинетика реакции конъюгатов, полученных из серотипов 3 (D), 6A (E) и 6В (F) с CRM197. На всех трех хроматограммах использованы следующие обозначения: полисахарид (сплошная линия), CRM197 (пунктирная линия), 5 ч реакции (точечная линия). Во всех хроматограммах поглощение CRM197 указано, исходя из сокращения или исчезновения принадлежащего CRM197 пика при времени удерживания приблизительно 19 мин. Конъюгирование подтверждается по формированию нового пика от приблизительно 13,5 мин до приблизительно 14 мин.
Пример 3. Приготовление конъюгированной вакцины из пневмококкового капсульного полисахарида и белка.
Композиция 15-валентной конъюгированной вакцина была получена в виде 0,5 мл дозы, содержащей 2,2 мкг каждого из пневмококковых полисахаридов серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F, конъюгированных с белком CRMj97 в количестве приблизительно 28 мкг, и 2,2 мкг каждого полисахарида из серотипов 3, 6A и 6В, конъюгированных с белком PsaA в количестве приблизительно 7 мкг. Все конъюгаты были адсорбированы на геле фосфата алюминия в количестве, эквивалентном 0,5 мг Al3+ на дозу 0,5 мл. В качестве разбавителя и носителя использовали 9% вес/объем физиологический раствор, и уровень pH конечной композиции доводили до pH 6 с помощью 1N хлористоводородной кислоты. Для эффективной адсорбции после регулирования pH состав перемешивали в течение 2 ч. при постоянном взбалтывании. Через 2 ч. смешивания сформированной смесью асептически заполняли стерильные несиликонизированные 3 мл флаконы в количестве 0,58 мл на флакон, закрывали стерильными резиновыми пробками 13 мм и герметично упаковывали 13 мм стерильным обжимным алюминиевым колпачком розового цвета, с последующим оптическим контролем и маркировкой заполненных флаконов. Несколько флаконов из партии случайным образом выбирали и отправляли для анализа по следующим показателям: внешний вид, уровень pH, осмоляльность, общее содержание полисахарида и белка (мкг/SHD=безопасная человеческая доза), % адсорбции, содержание алюминия (мг/SHD).
Пример 4. Приготовление конъюгированной вакцины из пневмококкового капсульного полисахарида и белка.
Композиция 15-валентной конъюгированной вакцина была получена в виде 0,5 мл дозы, содержащей 2,2 мкг каждого полисахарида из серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F, конъюгированных с белком PsaA в количестве приблизительно 14 мкг. Все конъюгаты были адсорбированы на геле фосфата алюминия в количестве, эквивалентном 0,5 мг Al3+ на дозу 0,5 мл. В качестве разбавителя и носителя использовали 9% вес/объем физиологический раствор, и уровень pH конечной композиции доводили до pH 6 с помощью 1N хлористоводородной кислоты. Для эффективной адсорбции после регулирования pH состав перемешивали в течение 2 ч при постоянном взбалтывании. Через 2 часа смешивания сформированной смесью асептически заполняли стерильные несиликонизированные 3 мл флаконы в количестве 0,58 мл на флакон, закрывали стерильными резиновыми пробками 13 мм и герметично упаковывали 13 мм стерильным обжимным алюминиевым колпачком розового цвета, с последующим оптическим контролем и маркировкой заполненных флаконов. Несколько флаконов из партии случайным образом выбирали и отправляли для анализа по следующим показателям: внешний вид, уровень pH, осмоляльность, общее содержание полисахарида и белка (мкг/SHD=безопасная человеческая доза), % адсорбции, содержание алюминия (мг/SHD).
A. Иммунизация кроликов изготовленной вакциной.
Здоровые кролики весом от 1,5 до 2 кг были выведены и выращены в условиях без специфических патогенов. Кроликов иммунизировали вышеуказанным препаратом по следующей схеме.
Группа 1 состояла из 7 кроликов, иммунизированных 15-валентной конъюгированной вакциной (пример 3). 15-валентная вакцина состоит из 2 мкг каждого из полисахаридов S.pneumoniae из серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F, 33F, конъюгированных с CRM197, и из 2,2 мкг каждого из полисахаридов S.pneumoniae из серотипов 3, 6A и 6В, конъюгированных с PsaA. Кроликов иммунизировали в дни 1, 15 и 29; образцы крови собирали в дни 0, 15 и 36. Из образца крови отделяли сыворотку и хранили при -80°C.
Группа 2 состояла из 7 кроликов, иммунизированных 13-валентной конъюгированной вакциной Prevnar13®. Кроликов иммунизировали в дни 1, 15 и 29; образцы крови собирали в дни 0, 12, 26 и 40. Данные, полученные на 12-й день и 40-й день, были использованы для графика сравнения с исследованием PsaA (фиг. 4). Из образца крови отделяли сыворотку и хранили при -80°C.
Группа 3 состояла из 7 кроликов, иммунизированных 15-валентной конъюгированной вакциной (пример 4). 15-валентная вакцина состоит из 2,2 мкг каждого из полисахаридов серотипов 1, 4, 5, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F, конъюгированных с белком CRMI9- в количестве приблизительно 28 мкг, и из 4,4 мкг каждого из полисахаридов серотипов 3, 6A и 6В, конъюгированных с белком PsaA в количестве приблизительно 14 мкг. Кроликов иммунизировали в дни 1, 15 и 29; образцы крови собирали в дни 0, 15 и 36. Из образца крови отделяли сыворотку и хранили при -80°C. Полученную из иммунизированных кроликов сыворотку анализировали на серотип-специфичный иммунный ответ с помощью
- 22 048146 иммуноферментного анализа ELISA.
Анализ ELISA выполняли в соответствии с протоколом, предложенным ВОЗ. Коротко, ELISAпланшеты Maxisorp™ покрывали пневмококковыми полисахаридами заданного серотипа (1 мкг/50 мкл/ на лунку с использованием фосфатно-буферного раствора (ФБР); стерильные без эндотоксинов, с 0,02% азидом натрия). Планшеты помещали в коробку с увлажненными бумажными полотенцами для увлажнения воздуха, и инкубировали при 37 ± 2°C в течение 5 ч, после этого планшеты сохраняли при 5 ± 3°C до использования.
Исследуемые сыворотки предварительно адсорбировали на CWPS Mlti™ для устранения фоновой реактивности, производимой клеточной стенкой полисахарида. Для получения 2 мкл исследуемой сыворотки и образца для положительного контроля сыворотку разводили применяемым перед адсорбцией раствором 998 мкл (1 мл-1 мкл CWPS Mlti™ в 999 мкл 10% SuperBlock™ в фосфатно-солевом буфере с твином PBST) для достижения конечного разведения 1:500. Разведенные образцы инкубировали при комнатной температуре (25 ± 5°C) в течение 1 ч при непрерывном встряхивании. Несвязанные пневмококковые полисахариды были удалены пощелкиванием планшета и свободные участки в лунки блокировали путем добавления 200 мкл блокирующего вещества (20% SuperBlock™ в ФБР). Планшет инкубировали при комнатной температуре (25 ± 5°C) в течение 1 ч без встряхивания.
B. Добавление исследуемых и контрольных образцов.
Добавляли 50 мкл разбавителя (10% SuperBlock™ в PBST) во все лунки, кроме лунок от A1 до A12. Вслед за этим в лунки A1-A10 добавляли предварительно адсорбированные исследуемые образцы сыворотки в объеме 100 мкл/на лунку, и в лунки A11 и A12 добавляли контрольные образцы сыворотки. Проводили двукратное серийное разведение исследуемых образцов путем переноса 50 мкл из 1 во 2 лунку и так далее, т.е. от A1 - A10 до H1-H10. Аналогичным образом проводили серийное разведение контрольных образцов (007SP) от A11 и 12 до E11 и E12. Лунки F11 и F12 до H11 и H12 без разведения были оставлены в качестве холостой пробы.
Планшеты инкубировали при комнатной температуре (25 ± 5°C) в течение 2 ч без встряхивания. После этапа инкубации содержимое удаляли и планшеты промывали трижды раствором PBST (примерно 250мкл/на лунку) вручную или с помощью машины для мойки планшетов.
C. Добавление первичного антитела.
Во все лунки добавляли 50 мкл/на лунку рекомбинантный белок A/G пероксидазу (разведенный 1: 20000 с использованием 10% SuperBlock™ в PBST) и планшеты инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре (25 ± 5°C) без встряхивания. После этого планшеты трижды промывали PBST (250 мкл/на лунку) вручную или с помощью машины для мойки планшетов.
D. Продолжение реакции и считывание.
Хромогенная реакция была продолжена путем добавления 50 мкл/на лунку TMB-субстрата и инкубацией в течение 15 мин при комнатной температуре (25 ± 5°C) без встряхивания. Реакцию останавливали добавлением 50 мкл/на лунку 1,25 М серной кислоты. Оптическую плотность измеряли при 450 нм.
E. Оценка Титра.
Титр антител у иммунизированных животных рассчитывали, как обратный коэффициент разведения. Наибольшее разведение, которое показывало OD450hm в два раза выше, чем титр перед иммунизацией (приблизительно 0,2), указывалось, как титр. Титр сывороточных антител к каждому серотипу показывали в виде диаграммы и сравнивали с показателями в разных группах исследования.
Результаты иммунного ответа животных из группы 1 показывают дозозависимое повышение серотип-специфичного повышения титра антител в сыворотке крови, т.е. уровень титра антител у вакцинированных животных возрастал с каждой последующей дозой. Иммунный ответ на серотип 3 (фиг. 5) составил приблизительно 1:10000, когда животные были иммунизированы конъюгатами PsaA, содержащими 4,4 мкг полисахарида (группа 3). Дополнительно, титр сывороточных антител к серотипам 3, 6A и 6В был по меньшей мере в два раза выше по сравнению с иммунным ответом, полученным от кроликов, иммунизированных вакциной Prevnar®13. Титр сывороточных IgG после первой иммунизации у кроликов вакциной Prevnar®13 не показывает это повышение в той же степени, как это выявлено при использовании 15-валентной композиции по настоящему изобретению (фиг. 3 и 4). Даже при том, что концентрация полисахарида для серотипа 6В в вакцине Prevnar®13 в два раза больше (4,4 мкг), по сравнению с концентрацией полисахарида серотипа 3, конъюгированного с PsaA (фиг. 3), уровень ответа IgG в два раза выше. Титр антител серотипа 3 едва достигает 8000 в композициях, содержащих 2,2 мкг серотипа 3, конъюгированного с CRM197. Этот титр показывает заметное улучшение (16000) при конъюгировании с 4,4 мкг PsaA. Это улучшение иммунного ответа обусловлено конъюгированием PsaA и полисахаридов из серотипов 3, 6A и 6B. Титр сывороточных антител к серотипу 14 у животных, вакцинированных Prevnar®13, были ниже по сравнению с результатами композиций по настоящему изобретению. Ответ IgG на другие серотипы у животных, вакцинированных или вакцинными композициями по изобретению, или вакциной Prevnar®13, были сходными. Титры серотипов 3, 6A и 6В были улучшены при конъюгировании с PsaA даже при концентрации 2,2 мкг.
Используемые в настоящем изобретении численные значения указаны в качестве приближений от
-
Claims (29)
- минимальных до максимальных значений в пределах указанных диапазонов, и им предшествует слово приблизительно, если конкретно не указано иное. Раскрытые в изобретении диапазоны следует считать непрерывными диапазонами, включающими каждое значение между указанными минимальным и максимальным значениями, а также любые диапазоны, которые могут быть образованы с использованием этих значений. Численные значения, представленные в настоящем изобретении, являются различными вариантами осуществления настоящего изобретения.Используемые в изобретении термины в единственном числе включают в себя множественное число, если из контекста явно не следует иное. Аналогичным образом, если слово или явным образом ограничивает обозначение только единственного элемента, эксклюзивно от других элементов при ссылке на перечень из двух или более элементов, то использование или в таком списке следует толковать как включение (a) любого одного элемента из перечня, (b) всех элементов из перечня или (с) любого сочетания элементов в перечне. Дополнительно, термины содержащий и подобные, используемые в настоящем изобретении, означают включение по меньшей мере перечисленного признака (признаков) таким образом, что не исключается наличие любого превышающего количества того же признака (тех же признаков) и/или одного или более дополнительных типов признаков. Указание на один вариант осуществления, вариант осуществления или аналогичные формулировки означает, что конкретный признак композиции, композиция, способ или характеристика, описанные в связи с этим вариантом осуществления, могут быть включены по меньшей мере в один вариант осуществления данного уровня техники. Таким образом, появление таких фраз или формулировок в настоящем документе не обязательно относится к одному и тому же варианту осуществления. Кроме того, можно объединять различные конкретные признаки, композиции, способы или характеристики любым подходящим образом в одном или нескольких вариантах осуществления.Настоящее изобретение не является исчерпывающим или не предназначено ограничивать данный уровень техники описанными в изобретении конкретными формами. В иллюстративных целях в изобретении описаны конкретные варианты осуществления, но вместе с тем, возможны различные эквивалентные модификации без отхода от данного уровня техники, что будет очевидно специалистам в данной области. В некоторых случаях не были показаны и/или описаны подробно общеизвестные элементы и действия, чтобы избежать излишнего ограничения описания вариантов осуществления данного уровня техники. Несмотря на определенный порядок представления в настоящем изобретении этапов способов, в альтернативных вариантах осуществления этапы могут иметь другой подходящий порядок. Аналогичным образом, некоторые варианты осуществления данного уровня техники, раскрытые в контексте конкретных вариантов осуществления, могут быть объединены или исключены в других вариантах осуществления. Кроме того, связанные с некоторыми вариантами осуществления преимущества могут быть описаны в контексте этих вариантов осуществления, но вместе с тем, другие варианты осуществления могут также демонстрировать такие преимущества, но не во всех вариантах осуществления, входящих в объем уровня техники, должны обязательно демонстрироваться такие преимущества или другие преимущества, раскрытые в настоящем изобретении. Таким образом, настоящее раскрытие и связанные с ними уровни техники могут включать другие варианты осуществления, не показанные и/или не описанные в настоящем изобретении явным образом.Из вышеизложенного следует понимать, что конкретные варианты осуществления настоящего изобретения были описаны в иллюстративных целях, но при этом можно делать различные модификации без отклонения от объема изобретения. Таким образом, настоящее изобретение не ограничено ничем, кроме прилагаемой формулы изобретения.ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины, содержащая пневмококковый капсульный полисахарид двух или более серотипов, выбранных из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, каждый из которых индивидуально конъюгирован с белком-носителем, причем белок-носитель содержит пневмококковый поверхностный белок A адгезии (PsaA), и причем указанная поливалентная пневмококковая вакцина содержит пневмококковый капсульный полисахарид из по меньшей мере двух разных серотипов, конъюгированный с PsaA, и конъюгаты адсорбированы на геле фосфата алюминия, и причем в PsaA отсутствует гидрофобный N-концевой лидерный пептид дикого типа.
- 2. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по п.1, причем композиция пневмококковой вакцины является 10-валентной, 13-валентной, 14-валентной, 15-валентной, 17-валентной, 18валентной, 19-валентной, 20-валентной, 22-валентной, 23-валентной, 24-валентной или 25-валентной композицией пневмококковой вакцины.
- 3. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1, 2, в которой процентное отношение белка-носителя к пневмококковому капсульному полисахариду (белок/ПС) составляет от 0, 5 до 2,0 белок/ПС.- 24 048146
- 4. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-3, причем композиция пневмококковой вакцины дополнительно содержит фармацевтически приемлемый носитель.
- 5. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-4, где указанная композиция вакцины включает пневмококковые капсульные полисахариды из по меньшей мере 10 серотипов, причем серотипы выбраны из 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45.
- 6. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-5, причем композиция поливалентной пневмококковой вакцины содержит пневмококковые капсульные полисахариды из по меньшей мере 14 серотипов.
- 7. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-5, причем композиция поливалентной пневмококковой вакцины содержит пневмококковые капсульные полисахариды из по меньшей мере 17 серотипов.
- 8. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-5, причем композиция поливалентной пневмококковой вакцины содержит пневмококковые капсульные полисахариды из по меньшей мере 19 серотипов.
- 9. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-5, причем композиция поливалентной пневмококковой вакцины содержит пневмококковые капсульные полисахариды из по меньшей мере 20 серотипов.
- 10. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-5, причем композиция поливалентной пневмококковой вакцины содержит пневмококковые капсульные полисахариды из по меньшей мере 22 серотипов.
- 11. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-5, причем композиция поливалентной пневмококковой вакцины содержит пневмококковые капсульные полисахариды из по меньшей мере 24 серотипов.
- 12. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-5, причем композиция поливалентной пневмококковой вакцины является 13-валентной композицией пневмококковой вакцины, содержащей пневмококковый капсульный полисахарид, выбранный из серотипов 1, 3, 4, 5, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F и 33F.
- 13. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-5, причем композиция поливалентной пневмококковой вакцины является 14-валентной композицией пневмококковой вакцины, которая содержит пневмококковые капсульные полисахариды, выбранные из серотипов 1, 3, 4, 5, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F.
- 14. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-5, причем композиция поливалентной пневмококковой вакцины является 14-валентной композицией пневмококковой вакцины, которая содержит пневмококковые полисахариды, выбранные из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F.
- 15. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-5, где два или более серотипов выбраны из 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19F, 22F и 19A, и белок-носитель представляет собой PsaA.
- 16. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-5, где два или более серотипов выбраны из 1, 3, 4, 5, 6A, 6В, 7F, 9V, 10A, 12F, 14, 15a, 15b, 18C, 19F, 19A, 22F, 23F, 33F, 34, 35, 38 и 45, и белок-носитель представляет собой PsaA.
- 17. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-5, где два или более серотипов выбраны из 3, 5, 6A, 6В, 9V, 12F, 10A, 15B, 18C и 45, и белок-носитель представляет собой PsaA.
- 18. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-17, причем композиция поливалентной пневмококковой вакцины составлена в стандартную лекарственную форму.
- 19. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-18, где стандартная лекарственная форма содержит от 0,1 до 50 мкг каждого из пневмококковых полисахаридов, от 0,1 до 10 мкг или от 1 до 5 мкг каждого из пневмококковых полисахаридов, причем каждый из пневмококковых полисахаридов по отдельности конъюгирован с белком-носителем, и количество белка-носителя составляет от 1,5 до 5 мкг.
- 20. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-19, дополнительно содержащая фармацевтически приемлемый разбавитель, буфер, консервант, стабилизатор, адъювант и/или лиофилизирующий эксципиент.
- 21. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-20, где стандартная лекарственная форма представлена в виде флакона с разовой дозой, флакона с несколькими дозами или предварительно заполненного шприца.
- 22. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-21, причем композиция поливалентной пневмококковой вакцины представлена в виде разовой дозы 0,5 мл, которая содержит:от 2,2 до 4,4 мкг одного или более пневмококковых полисахаридов;- 25 048146 от 1 до 10 мкг PsaA, конъюгированного с каждым из одного или более пневмококковых полисахаридов;от 0,2 до 1 мг адъюванта фосфата алюминия; и эксципиент.
- 23. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-5, 18-22, причем композиция поливалентной пневмококковой вакцины представляет собой 13-валентную композицию пневмококковой вакцины, которая содержит:пневмококковый капсульный полисахарид, выбранный из серотипов 1, 3, 4, 5, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F и 33F, причем доза пневмококковой вакцинной композиции составляет 0,5 мл в лекарственной форме стерильной жидкости, содержащей:от 2,2 до 4,4 мкг каждого из пневмококковых полисахаридов, от 25 до 30 мкг PsaA,0,125 мг элементарного алюминия в форме фосфата алюминия в количестве 0,5 мг, хлорид натрия, иL-гистидиновый буфер.
- 24. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-5, 18-22, причем композиция поливалентной пневмококковой вакцины представляет собой 14-валентную композицию пневмококковой вакцины, которая содержит:пневмококковый капсульный полисахарид, выбранный из серотипов 1, 3, 4, 5, 6В, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F, причем доза пневмококковой вакцинной композиции составляет 0,5 мл в лекарственной форме стерильной жидкости, содержащей:от 2,2 до 4,4 мкг каждого из пневмококковых полисахаридов, от 25 до 30 мкг PsaA,0,125 мг элементарного алюминия в форме фосфата алюминия в количестве 0,5 мг, хлорид натрия, иL-гистидиновый буфер.
- 25. Композиция поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-5, 18-22, причем композиция поливалентной пневмококковой вакцины представляет собой 14-валентную композицию пневмококковой вакцины, которая содержит:пневмококковые капсульные полисахариды, выбранные из серотипов 1, 3, 4, 5, 6A, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F, 22F, 23F и 33F, причем доза пневмококковой вакцинной композиции составляет 0,5 мл в лекарственной форме стерильной жидкости, содержащей:от 2,2 до 4,4 мкг каждого из пневмококковых полисахаридов, от 20 до 35 мкг PsaA,0,125 мг элементарного алюминия в форме фосфата алюминия в количестве 0,5 мг, хлорид натрия, иL-гистидиновый буфер.
- 26. Способ получения композиции поливалентной пневмококковой вакцины, где указанный способ включает:a) индивидуальную конъюгацию пневмококковых капсульных полисахаридов двух или более серотипов, выбранных из серотипов 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6В, 6C, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15A, 15B, 15C, 16F, 17F, 18C, 19F, 19A, 20A, 20B, 22F, 23A, 23B, 23F, 24B, 24F, 31, 33F, 34, 35B, 35F, 38, 39 и 45, с иммуногенным белком-носителем для получения индивидуальных конъюгатов, где белком-носителем является PsaA;b) диафильтрацию и очистку индивидуальных конъюгатов;c) объединение фракций, содержащих индивидуальные конъюгаты двух или более серотипов; иd) составление объединенных конъюгатов с адъювантом, эксципиентом и буфером для получения композиции поливалентной пневмококковой вакцины, и причем в PsaA отсутствует гидрофобный N-концевой лидерный пептид дикого типа.
- 27. Способ по п.26, в котором пневмококковые капсульные полисахариды конъюгируют с иммуногенным белком-носителем с использованием CDAP-химии.
- 28. Применение композиции поливалентной пневмококковой вакцины по любому из пп.1-25 в получении лекарственного средства для лечения заболевания, опосредуемого Streptococcus pneumoniae, у пациента, представляющего собой человека, причем заболевание, опосредуемое Streptococcus pneumoniae, представляет собой инвазивную пневмококковую инфекцию (IPD).
- 29. Применение по п.28, в котором человеком является младенец (в возрасте меньше 1 года), ребенок раннего возраста (от 12 месяцев до 24 месяцев), ребенок младшего дошкольного возраста (от 2 лет до 5 лет), ребенок старшего дошкольного и младшего школьного возраста (от 5 лет до 13 лет), подросток (от 13 лет до 18 лет), взрослый человек (от 18 лет до 65 лет) или человек старшего возраста (старше 65 лет).-
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IN201641033563 | 2016-09-30 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA048146B1 true EA048146B1 (ru) | 2024-10-30 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP7403576B2 (ja) | 多糖類－タンパク質コンジュゲートを含む多価肺炎球菌ワクチン組成物 | |
| JP6808658B2 (ja) | 多価肺炎球菌コンジュゲートワクチン | |
| US12048739B2 (en) | Purified capsular polysaccharides of Streptococcus pneumoniae | |
| US20220143166A1 (en) | Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate vaccine | |
| WO2020157772A1 (en) | Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate vaccine compositions | |
| WO2020152706A1 (en) | Multivalent pneumococcal conjugate vaccine compositions | |
| US20230101892A1 (en) | Multivalent pneumococcal vaccine compositions comprising polysaccharide-protein conjugates | |
| EA048146B1 (ru) | Композиции поливалентной пневмококковой вакцины, содержащие конъюгаты полисахарид-белок | |
| EA040051B1 (ru) | Композиции поливалентной пневмококковой вакцины, содержащие конъюгаты полисахарид-белок | |
| EA047156B1 (ru) | Мультивалентная вакцина на основе конъюгата пневмококковый полисахарид-белок | |
| OA19223A (en) | Multivalent pneumococcal vaccine compositions comprising polysaccharideprotein conjugates. | |
| OA20315A (en) | Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate vaccine. | |
| EA048093B1 (ru) | Очищенные капсульные полисахариды streptococcus pneumoniae | |
| OA20178A (en) | Purified capsular polysaccharides of streptococcus pneumoniae. |