EA046742B1

EA046742B1 - ANTIBODY-DRUG CONJUGATES CONTAINING ECTEINASCIDIN DERIVATIVES

Info

Publication number: EA046742B1
Application number: EA202191131
Authority: EA
Inventors: Марчанте Мария дель Кармен Куэвас; Сольосо Андрес Франсесч; Лосано Альфонсо Латорре; Барраса Валентин Мартинес
Original assignee: Фарма Мар, С.А.
Priority date: 2018-10-25
Filing date: 2019-10-25
Publication date: 2024-04-17

Description

Область техникиField of technology

Настоящее изобретение относится к новым конъюгатам лекарственного средства, линкерным соединениям для лекарственного средства, к способам их получения, фармацевтическим композициям, содержащим такие конъюгаты лекарственных средств и их применению в качестве противоопухолевых агентов.The present invention relates to novel drug conjugates, drug linker compounds, methods for their preparation, pharmaceutical compositions containing such drug conjugates and their use as antitumor agents.

Уровень техникиState of the art

Международная заявка на патент номер PCT/EP2018/060868 относится к новым производным эктеинасцидина, которые демонстрируют очень многообещающую противоопухолевую активность. Одно из соединений, описанных в этой заявке на патент, в настоящее время проходит I фазу клинических испытаний для профилактики и лечения солидных опухолей.International patent application number PCT/EP2018/060868 relates to novel ecteinascidin derivatives that show very promising antitumor activity. One of the compounds described in this patent application is currently in Phase I clinical trials for the prevention and treatment of solid tumors.

В последние годы лечение рака значительно продвинулось благодаря разработке фармацевтических препаратов, которые более эффективно таргетно поражают и убивают раковые клетки. Исследователи использовали возможности рецепторов клеточной поверхности и антигенов, избирательно экспрессируемых клетками-мишенями, такими как раковые клетки, для разработки фармацевтических веществ на основе антител, которые связывают, на примере опухолей, опухолеспецифические или опухолеассоцииованные антигены. Для достижения этого цитотоксические молекулы, такие как химиотерапевтические лекарственные средства, бактерии и растительные токсины, и радионуклиды, были химически связаны с моноклональными антителами, которые связывают опухолеспецифические или опухолеассоциированные антигены клеточной поверхности.Cancer treatment has advanced significantly in recent years with the development of pharmaceutical drugs that more effectively target and kill cancer cells. Researchers have harnessed the power of cell surface receptors and antigens selectively expressed by target cells, such as cancer cells, to develop antibody-based pharmaceuticals that bind, in the example of tumors, tumor-specific or tumor-associated antigens. To achieve this, cytotoxic molecules such as chemotherapeutic drugs, bacteria and plant toxins, and radionuclides have been chemically coupled to monoclonal antibodies that bind tumor-specific or tumor-associated cell surface antigens.

Таким образом, ADC представляют собой многообещающую область развития, учитывая комплексную полезную нагрузку, структуру линкера и антитела, но остается потребность в разработке других ADC.Thus, ADCs represent a promising area of development given the complex payload, linker and antibody structure, but there remains a need to develop other ADCs.

Сущность изобретенияThe essence of the invention

Существует потребность в новых активных конъюгатах лекарственных средств. Настоящее изобретение удовлетворяет эту потребность. Кроме того, оно представляет новые линкерные соединения лекарственных средств для использования при получении конъюгатов лекарственных средств настоящего изобретения, способы получения новых конъюгатов лекарственных средств настоящего изобретения, фармацевтические композиции, содержащие указанные конъюгаты лекарственных средств, и их применение в качестве противоопухолевых агентов, а также набор, содержащий конъюгат лекарственного средства по настоящему изобретению для использования при лечении рака.There is a need for new active drug conjugates. The present invention satisfies this need. In addition, it provides new drug linker compounds for use in the preparation of the drug conjugates of the present invention, methods for preparing the new drug conjugates of the present invention, pharmaceutical compositions containing these drug conjugates and their use as antitumor agents, as well as a set, containing a drug conjugate of the present invention for use in the treatment of cancer.

В первом аспекте настоящего изобретения представлен конъюгат лекарственного средства, содержащий группу лекарственного средства, ковалентно присоединенную к остатку конъюгата лекарственного средства, где конъюгат лекарственного средства имеет формулу [D-(X)b-(AA)_w-(T)_g-(L)-]_n-Ab, где:In a first aspect of the present invention, there is provided a drug conjugate comprising a drug moiety covalently attached to a moiety of the drug conjugate, wherein the drug conjugate has the formula [D-(X)b-(AA) _w -(T) _g -(L) -] _n -Ab, where:

D является группой лекарственного средства, имеющей следующую формулу (I) или ее фармацевтически приемлемой солью, сложным эфиром, сольватом, таутомером или стереоизомером, ^R3D is a drug group having the following formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer thereof, ^R 3

(I) где: D ковалентно присоединен через гидрокси- или аминогруппу к (X)b, если имеется, или (AA)w, если имеется, или к (T)_g, если имеется, или (L);(I) where: D is covalently attached via a hydroxy or amino group to (X)b, if present, or (AA)w, if present, or to (T) _g , if present, or (L);

Y является -NH- или -O-;Y is -NH- or -O-;

R1 является -OH или -CN;R1 is -OH or -CN;

R₂ является -C(=O)R_a группой;R ₂ is a -C(=O)R _a group;

R3 является водородом или -OR_b группой;R3 is hydrogen or an -OR _b group;

R4 выбирают из водорода, -CH2OH, -CH2OC(=O)R_c, -CH2NH2 и -CIΙΛΊ IProtN’’;R4 is selected from hydrogen, -CH2OH, -CH2OC(=O)R _c , -CH2NH2 and -CIΙΛΊ IProtN'';

Ra выбирают из водорода, замещенного или незамещенного C1-C12 алкила, замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкенила и замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкинила;Ra is selected from hydrogen, substituted or unsubstituted C1-C12 alkyl, substituted or unsubstituted _C2 - _C12 alkenyl and substituted or unsubstituted _C2 - _C12 alkynyl;

R_b выбирают из замещенного или незамещенного C₁-C₁₂ алкила, замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкенила и замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкинила;R _b is selected from substituted or unsubstituted C ₁ -C ₁₂ alkyl, substituted or unsubstituted C ₂ -C ₁₂ alkenyl and substituted or unsubstituted C ₂ -C ₁₂ alkynyl;

R_c выбирают из замещенного или незамещенного C1-C12 алкила, замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкенила и замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкинила; иR _c is selected from substituted or unsubstituted C1-C12 alkyl, substituted or unsubstituted _C2 - _C12 alkenyl and substituted or unsubstituted _C2 - _C12 alkynyl; And

Prot^NH является защитной группой для амино, с необязательным условием, что если R4 является водородом, то Y является -O-;Prot ^NH is a protecting group for amino, with the optional proviso that if R4 is hydrogen, then Y is -O-;

- 1 046742- 1 046742

X и T являются удлиняющими группами, которые могут быть одинаковыми или разными;X and T are extension groups, which may be the same or different;

каждый AA независимо является аминокислотной единицей;each AA is independently an amino acid unit;

L является линкерной группой;L is a linker group;

w является целым числом от 0 до 12;w is an integer from 0 to 12;

b является целым числом 0 или 1;b is an integer 0 or 1;

g является целым числом 0 или 1;g is an integer 0 or 1;

Ab является группой, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт; и n является отношением группы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-(L)-] к группе, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, и является целым числом от 1 до 20.Ab is a group containing at least one antigen binding site; and n is the ratio of the group [D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -(L)-] to the group containing at least one antigen binding site, and is an integer from 1 to 20.

В другом аспекте настоящего изобретения представлен конъюгат лекарственного средства, содержащий группу лекарственного средства, ковалентно присоединенную к остатку конъюгата лекарственного средства, где соединение имеет формулу [D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-(L)-]_n-Ab, где:In another aspect of the present invention, there is provided a drug conjugate containing a drug moiety covalently attached to a moiety of the drug conjugate, wherein the compound has the formula [D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -(L)-] _n -Ab, where:

D является группой лекарственного средства, имеющей формулу (IH) или ее фармацевтически приемлемой солью, сложным эфиром, сольватом, таутомером или стереоизомером,D is a drug group having formula (IH) or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer thereof,

R₃ R ₃

(IH) где: волнистая линия означает точку ковалентного присоединения к (X)_b, если имеется, или (AA)_w, если имеется, или к (T)_g, если имеется, или к (L);(IH) where: the wavy line indicates the point of covalent attachment to (X) _b , if present, or (AA) _w , if present, or to (T) _g , if present, or to (L);

каждый из Y и Z независимо выбирают из -NH- и -O-;Y and Z are each independently selected from -NH- and -O-;

R₁ является -OH или -CN;R ₁ is -OH or -CN;

R₂ является -C(=O)R_a группой;R ₂ is a -C(=O)R _a group;

R_a выбирают из водорода, замещенного или незамещенного C1-C12 алкила, замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкенила и замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкинила, где необязательными заместителями являются один или несколько заместителей Rx;R _a is selected from hydrogen, substituted or unsubstituted C1-C12 alkyl, substituted or unsubstituted _C2 - _C12 alkenyl and substituted or unsubstituted _C2 - _C12 alkynyl, wherein the optional substituents are one or more Rx substituents;

R_b выбирают из замещенного или незамещенного C₁-C₁₂ алкила, замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкенила и замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкинила, где необязательными заместителями являются один или несколько заместителей Rx;R _b is selected from substituted or unsubstituted C ₁ -C ₁₂ alkyl, substituted or unsubstituted C ₂ -C ₁₂ alkenyl and substituted or unsubstituted C ₂ -C ₁₂ alkynyl, where the optional substituents are one or more Rx substituents;

заместители Rx выбирают из группы, состоящей из C₁-C₁₂ алкильных групп, которые могут быть необязательно замещены, по меньшей мере, одной группой Ry, C₂-C₁₂ алкенильных групп, которые могут быть необязательно замещены, по меньшей мере, одной группой Ry, C₂-C₁₂ алкинильных групп, которые могут быть необязательно замещены, по меньшей мере, одной группой R_y, атомами галогена, оксогруппами, тиогруппами, цианогруппами, нитрогруппами, ORy, OCORy, OCOORy, CORy, COORy, OCONRyRz, CONRyRz, S(O)Ry, SO₂Ry, P(O)(Ry)OR_z, NRyRz, NRyCORz, NRyC(=O)NRyR_z, NRyC(=NRy)NRyR_z, арильными группами, имеющими от 6 до 18 атомов углерода в одном или нескольких кольцах, которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранными из группы, состоящей из Ry, ORy, OCORy, OCOORy, NRyR_z, NRyCORz и NRyC(=NRy)NRyR_z, аралкильными группами, содержащими алкильную группу, имеющую от 1 до 12 атомов углерода, замещенную необязательно замещенной арильной группой, как определено выше, аралкилоксигруппами, содержащими алкоксигруппу, имеющую от 1 до 12 атомов углерода, замещенную необязательно замещенной арильной группой, как определено выше, и 5-14членную насыщенную или ненасыщенную гетероциклическую группу, имеющую одно или несколько колец, и содержащую, по меньшей мере, один атом кислорода, азота или серы в указанных кольцах, где указанная гетероциклическая группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями R_y, и где имеется более одного необязательных заместителей на любой указанной группе, где необязательные заместители R_y могут быть одинаковыми или разными;the Rx substituents are selected from the group consisting of C ₁ -C ₁₂ alkyl groups, which may be optionally substituted by at least one Ry group, C ₂ -C ₁₂ alkenyl groups, which may be optionally substituted by at least one group Ry, C ₂ -C ₁₂ alkynyl groups, which may be optionally substituted with at least one R _y group, halogen atoms, oxo groups, thio groups, cyano groups, nitro groups, ORy, OCORy, OCOORy, CORy, COORy, OCONRyRz, CONRyRz, S(O)Ry, SO ₂ Ry, P(O)(Ry)OR _z , NRyRz, NRyCORz, NRyC(=O)NRyR _z , NRyC(=NRy)NRyR _z , aryl groups having from 6 to 18 carbon atoms on one or more rings which may be optionally substituted by one or more substituents, which may be the same or different, selected from the group consisting of Ry, ORy, OCORy, OCOORy, NRyR _z , NRyCORz and NRyC(=NRy)NRyR _z , aralkyl groups containing an alkyl group having from 1 to 12 carbon atoms substituted by an optionally substituted aryl group as defined above, aralkyloxy groups containing an alkoxy group having from 1 to 12 carbon atoms substituted by an optionally substituted aryl group as defined above, and 5 - a 14-membered saturated or unsaturated heterocyclic group having one or more rings, and containing at least one oxygen, nitrogen or sulfur atom in said rings, wherein said heterocyclic group is optionally substituted by one or more R _y substituents, and where there is more than one optional substituents on any specified group, where the optional substituents R _y may be the same or different;

каждый Ry и R_z независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, C₁-C₁₂ алкильных групп, C₁-C₁₂ алкильных групп, которые замещены, по меньшей мере, одним атомом галогена, аралкильными группами, содержащими C₁-C₁₂ алкильную группу, которая замещена арильной группой, имеющей от 6 до 18 атомов углерода в одном или нескольких кольцах, и гетероциклоалкильных групп, содержащих C₁C₁₂ алкильную группу, которая замещена 5-14-членной насыщенной или ненасыщенной гетероциклической группой, имеющей одно или несколько колец и содержащей, по меньшей мере, один атом кислорода, азота или серы в указанных кольцах;each Ry and R _z are independently selected from the group consisting of hydrogen, C ₁ -C ₁₂ alkyl groups, C ₁ -C ₁₂ alkyl groups that are substituted with at least one halogen atom, aralkyl groups containing C ₁ -C ₁₂ an alkyl group which is substituted by an aryl group having from 6 to 18 carbon atoms in one or more rings, and heterocycloalkyl groups containing a C ₁ C ₁₂ alkyl group which is substituted by a 5-14 membered saturated or unsaturated heterocyclic group having one or more rings and containing at least one oxygen, nitrogen or sulfur atom in said rings;

- 2 046742- 2 046742

L является линкерной группой;L is a linker group;

b является целым числом 0 или 1;b is an integer 0 or 1;

g является целым числом 0 или 1;g is an integer 0 or 1;

где b+g+w необязательно не равно 0;where b+g+w is not necessarily equal to 0;

В другом аспекте настоящего изобретения представлен конъюгат лекарственного средства, содержащий группу лекарственного средства, ковалентно присоединенную к остатку конъюгата лекарственного средства, где конъюгат лекарственного средства имеет формулу [D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab, где:In another aspect of the present invention, there is provided a drug conjugate comprising a drug moiety covalently attached to a moiety of the drug conjugate, wherein the drug conjugate has the formula [D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L) -]n-Ab, where:

D является группой лекарственного средства, имеющей следующую формулу (I) или ее фармацевтически приемлемой солью, сложным эфиром, сольватом, таутомером или стереоизомером,D is a drug group having the following formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer thereof,

RsRs

(I) где: D ковалентно присоединен через гидрокси- или аминогруппу к (X)_b, если имеется, или (AA)_w, если имеется, или к (T)_g, если имеется, или (L);(I) where: D is covalently attached via a hydroxy or amino group to (X) _b , if present, or (AA) _w , if present, or to (T) _g , if present, or (L);

Y является -NH- или -O-;Y is -NH- or -O-;

R₁ является -OH или -CN;R ₁ is -OH or -CN;

R₂ является -C(=O)R группой;R ₂ is a -C(=O)R group;

R4 выбирают из водорода, -CH2OH, -CH₂OC(=O)Rc, -CH2NH2 и -CH₂NHProt^NH;R4 is selected from hydrogen, -CH2OH, -CH ₂ OC(=O)Rc, -CH2NH2 and -CH ₂ NHProt ^NH ;

R_a выбирают из водорода, замещенного или незамещенного C1-C12 алкила, замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкенила и замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкинила;R _a is selected from hydrogen, substituted or unsubstituted C1-C12 alkyl, substituted or unsubstituted _C2 - _C12 alkenyl and substituted or unsubstituted _C2 - _C12 alkynyl;

R_b выбирают из замещенного или незамещенного C1-C12 алкила, замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкенила и замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкинила;R _b is selected from substituted or unsubstituted C1-C12 alkyl, substituted or unsubstituted _C2 - _C12 alkenyl and substituted or unsubstituted _C2 - _C12 alkynyl;

Rc выбирают из замещенного или незамещенного C1-C12 алкила, замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкенила и замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкинила; иRc is selected from substituted or unsubstituted C1-C12 alkyl, substituted or unsubstituted _C2 - _C12 alkenyl and substituted or unsubstituted _C2 - _C12 alkynyl; And

ProtNH является защитной группой для амино, с необязательным условием, что если R₄ является водородом, то Y является -O-;ProtNH is a protecting group for amino, with the optional proviso that if R ₄ is hydrogen, then Y is -O-;

L является линкерной группой;L is a linker group;

b равен 1;b is equal to 1;

g является целым числом 0 или 1;g is an integer 0 or 1;

- 3 046742 ^R3- 3 046742 ^R 3

(I) где: D ковалентно присоединен через гидрокси- или аминогруппу к (X)b, если имеется, или (AA)_w, если имеется, или к (T)g, если имеется, или (L);(I) where: D is covalently attached via a hydroxy or amino group to (X)b, if present, or (AA) _w , if present, or to (T)g, if present, or (L);

Y является -NH- или -O-;Y is -NH- or -O-;

R1 является -OH или -CN;R1 is -OH or -CN;

R2 является -C(=O)R_a группой;R2 is a -C(=O)R _a group;

R3 является водородом или -ORb группой;R3 is hydrogen or an -ORb group;

R4 выбирают из водорода, -CH2OH, -CH2OC(=O)R_c, -CH2NH2 и -CH₂NHProt^NH;R4 is selected from hydrogen, -CH2OH, -CH2OC(=O)R _c , -CH2NH2 and -CH ₂ NHProt ^NH ;

R_a выбирают из водорода, замещенного или незамещенного C1-C12 алкила, замещенного или незамещенного C2-C12 алкенила и замещенного или незамещенного C2-C12 алкинила;R _a is selected from hydrogen, substituted or unsubstituted C1-C12 alkyl, substituted or unsubstituted C2-C12 alkenyl and substituted or unsubstituted C2-C12 alkynyl;

Rb выбирают из замещенного или незамещенного C1-C12 алкила, замещенного или незамещенного C2-C12 алкенила и замещенного или незамещенного C2-C12 алкинила;Rb is selected from substituted or unsubstituted C1-C12 alkyl, substituted or unsubstituted C2-C12 alkenyl and substituted or unsubstituted C2-C12 alkynyl;

R_c выбирают из замещенного или незамещенного C1-C12 алкила, замещенного или незамещенного C2-C12 алкенила и замещенного или незамещенного C2-C12 алкинила; иR _c is selected from substituted or unsubstituted C1-C12 alkyl, substituted or unsubstituted C2-C12 alkenyl and substituted or unsubstituted C2-C12 alkynyl; And

Prot^NH является защитной группой для амино, с необязательным условием, что если R является водородом, то Y является -O-;Prot ^NH is a protecting group for amino, with the optional proviso that if R is hydrogen then Y is -O-;

L является линкерной группой;L is a linker group;

w равен 2;w is 2;

b равен 1;b is equal to 1;

g является целым числом 0 или 1;g is an integer 0 or 1;

Как будет более подробно объясняться и показываться на примерах ниже, конъюгаты лекарственного средства формулы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-(L)-]_n-Ab настоящего изобретения представляют прорыв в решении проблем, описанных выше, относящихся к потребности в других конъюгатах лекарственного средства в дополнение к тем, которые основаны на трех основных семействах цитотоксических лекарственных средств, которые применяют в качестве полезных нагрузок в настоящее время, которые показывают превосходную противоопухолевую активность.As will be explained in more detail and exemplified below, the drug conjugates of the formula [D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -(L)-] _n -Ab of the present invention represent a breakthrough in solving the problems described above relating to the need for other drug conjugates in addition to those based on the three major families of cytotoxic drugs currently used as payloads that show excellent antitumor activity.

В предпочтительных вариантах осуществления настоящего изобретения, представлен конъюгат лекарственного средства, как определено в настоящем документе или его фармацевтически приемлемаяIn preferred embodiments of the present invention, a drug conjugate as defined herein or a pharmaceutically acceptable form thereof is provided.

D является группой лекарственного соль, сложный эфир, сольват, таутомер или стереоизомер, где средства, выбранной из формул (IHa) и (IHb):D is a medicinal salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer group, where the agent is selected from formulas (IHa) and (IHb):

где волнистые линии, R1, R₂, R₃, Y и Z такие, как определены для формулы (IH).where the wavy lines, R1, _R2 , _R3 , Y and Z are as defined for formula (IH).

В другом аспекте настоящего изобретения, представлено соединение формулы D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-L1 или формулы D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-H, где:In another aspect of the present invention, there is provided a compound of formula D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -L1 or formula D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -H, wherein:

L₁ является линкером, выбранным из группы формул, состоящей из:L ₁ is a linker selected from the group of formulas consisting of:

- 4 046742- 4 046742

каждая из волнистых линий указывает точку ковалентного присоединения к (T)g, если имеется, или (AA)_w, если имеется, или к (X)b, если имеется, или к D;each of the wavy lines indicates a point of covalent attachment to (T)g, if present, or (AA) _w , if present, or to (X)b, if present, or to D;

G выбирают из галогена, -O-мезила и -O-тозила;G is selected from halogen, -O-mesyl and -O-tosyl;

J выбирают из галогена, гидрокси, -N-сукцинимидокси, -O-(4-нитрофенила), -O-пентафторфенила, O-тетрафторфенила и -O-C(O)-OR₂₀;J is selected from halogen, hydroxy, -N-succinimidoxy, -O-(4-nitrophenyl), -O-pentafluorophenyl, O-tetrafluorophenyl and -OC(O)-OR ₂₀ ;

R₁₉ выбирают из -C1-C12 алкилена-, -C3-C8 карбоцикло, -O-(C₁-C₁₂ алкилена), -C₆-C₁₈ арилена в одном или нескольких кольцах которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями Rx, -C1-C12 алкилен-C₆-C₁₈ арилена-, где ариленовая группа находится в одном или нескольких кольцах, которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями Rx, -C₆-C₁₈ арилен-C₁-C₁₂ алкилена-, где ариленовая группа находится в одном или нескольких кольцах, которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями Rx, -C1-C12 алкилен-(С₃-С₈ карбоцикло)-, -(C3-C8 карбоцикло)-C₁-C₁₂ алкилена-, -C5-C14 гетероцикло-, где указанная гетероциклогруппа может быть насыщенной или ненасыщенной группой, имеющей одно или несколько колец и содержащей, по меньшей мере, один атом кислорода, азота или серы в указанных кольцах, где указанная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями Rx, -C1-C12 алкилен-(C₅-C₁₄ гетероцикло)-, где указанная гетероциклогруппа может быть насыщенной или ненасыщенной группой, имеющей одно или несколько колец и содержащей, по меньшей мере, один атом кислорода, азота или серы в указанных кольцах, где указанная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями Rx, -(C5-C14 гетероцикло)-C₁-C₁₂алкилена-, где указанная гетероциклогруппа может быть насыщенной или ненасыщенной группой, имеющей одно или несколько колец и содержащей, по меньшей мере, один атом кислорода, азота или серы в указанных кольцах, где указанная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями Rx, -(OCH₂CH₂)r- и -CH₂-(OCH₂CH₂)r-, где каждый из вышеуказанных алкиленовых заместителей, по отдельности или присоединенные в другой группе углеродной цепи, может быть необязательно замещен одними или несколькими заместителями Rx;R ₁₉ is selected from -C1-C12 alkylene-, -C3-C8 carbocyclo, -O-(C ₁ -C ₁₂ alkylene), -C ₆ -C ₁₈ arylene on one or more rings which may be optionally substituted with one or more substituents Rx, -C1-C12 alkylene-C ₆ -C ₁₈ arylene-, wherein the arylene group is on one or more rings which may be optionally substituted by one or more substituents Rx, -C ₆ -C ₁₈ arylene-C ₁ -C ₁₂ alkylene-, where the arylene group is on one or more rings which may be optionally substituted by one or more Rx substituents, -C1-C12 alkylene-(C ₃ -C ₈ carbocyclo)-, -(C3-C8 carbocyclo)-C ₁ -C ₁₂ alkylene-, -C5-C14 heterocyclo-, wherein said heterocyclo group may be a saturated or unsaturated group having one or more rings and containing at least one oxygen, nitrogen or sulfur atom in said rings, wherein said group is optional substituted with one or more Rx substituents, -C1-C12 alkylene-(C ₅ -C ₁₄ heterocyclo)-, where said heterocyclo group may be a saturated or unsaturated group having one or more rings and containing at least one oxygen, nitrogen atom or sulfur on said rings, wherein said group is optionally substituted with one or more Rx substituents, -(C5-C14 heterocyclo)-C ₁ -C ₁₂ alkylene-, wherein said heterocyclo group may be a saturated or unsaturated group having one or more rings and containing at least one oxygen, nitrogen or sulfur atom in said rings, wherein said group is optionally substituted by one or more Rx, -(OCH ₂ CH ₂ )r- and -CH ₂ -(OCH ₂ CH ₂ )r- substituents, wherein each of the above alkylene substituents, individually or attached to another group on the carbon chain, may be optionally substituted by one or more Rx substituents;

R20 является C1-C12 алкильной или арильной группой, имеющей от 6 до 18 атомов углерода в одном или нескольких ароматических кольцах, где указанные арильные группы необязательно замещены одним или несколькими заместителями R_x;R20 is a C1-C12 alkyl or aryl group having from 6 to 18 carbon atoms on one or more aromatic rings, wherein said aryl groups are optionally substituted by one or more R _x substituents;

r является целым числом от 1-10;r is an integer from 1-10;

g является целым числом 0 или 1;g is an integer 0 or 1;

b является целым числом 0 или 1;b is an integer 0 or 1;

w является целым числом от 0 до 12; и каждый из D, Rx, X, T и AA такой, как определены в первом аспекте изобретения.w is an integer from 0 to 12; and each of D, Rx, X, T and AA is as defined in the first aspect of the invention.

В предпочтительных вариантах осуществления настоящего изобретения, b+g+w не равно 0. В других вариантах осуществления, b+w не равно 0. В еще дополнительных вариантах осуществления, если w не равен 0, то b равен 1. В дополнительном варианте осуществления, если w равен 0, то b равен 1.In preferred embodiments of the present invention, b+g+w is not equal to 0. In other embodiments, b+w is not equal to 0. In still further embodiments, if w is not equal to 0, then b is equal to 1. In a further embodiment, if w is 0, then b is 1.

В другом аспекте настоящего изобретения, представлено соединение формулы D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-L1 или формулы D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-H или его фармацевтически приемлемая соль, сложный эфир, сольват, таутомер или стереоизомер; где каждый из D, X, AA, T, L₁, b, g и w такой, как определен в настоящем документе; но дополнительно, где если соединением является соединение формулы D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-H, то b+w+g#0.In another aspect of the present invention, there is provided a compound of formula D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -L1 or formula D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -H or pharmaceutical thereof an acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer; where each of D, X, AA, T, L ₁ , b, g and w is as defined herein; but additionally, where if the compound is a compound of the formula D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -H, then b+w+g#0.

В предпочтительном варианте осуществления согласно аспектам настоящего изобретения, n является отношением группы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-(L)-] к группе, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт и является целым числом от 1 до 20. В других вариантах осуществления, n находится в интервале от 1-12, 1-8, 3-8, 3-6, 3-5 или равен 1, 2, 3, 4, 5 или 6, предпочтительно, 3, 4 или 5 или 4.In a preferred embodiment according to aspects of the present invention, n is the ratio of the group [D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -(L)-] to the group containing at least one antigen binding site and is an integer from 1 to 20. In other embodiments, n is in the range of 1-12, 1-8, 3-8, 3-6, 3-5, or equal to 1, 2, 3, 4, 5, or 6, preferably 3, 4 or 5 or 4.

В другом аспекте настоящего изобретения, представлена группа лекарственного средства D дляIn another aspect of the present invention, drug group D is provided for

- 5 046742 применения в конъюгате антитело-лекарственное средство. В другом аспекте настоящего изобретения, представлена группа лекарственного средства D для применения в качестве полезной нагрузки в конъюгате антитело-лекарственное средство. В другом аспекте настоящего изобретения, представлено применение группы лекарственного средства D, как описано в настоящем документе, в производстве конъюгата антитело-лекарственное средство.- 5 046742 use in an antibody-drug conjugate. In another aspect of the present invention, drug group D is provided for use as a payload in an antibody-drug conjugate. In another aspect of the present invention, the use of drug group D, as described herein, in the production of an antibody-drug conjugate is provided.

В другом аспекте настоящего изобретения, представлен конъюгат лекарственного средства по настоящему изобретению, для применения в качестве лекарственного средства.In another aspect of the present invention, a drug conjugate of the present invention is provided for use as a drug.

В другом аспекте настоящего изобретения, представлен конъюгат лекарственного средства по настоящему изобретению для применения в лечении рака, и более предпочтительно, рака, выбранного из рака легких, колоректального рака, рака груди, карциномы поджелудочной железы, рака почек, лейкоз, множественной миеломы, лимфомы, рака ЖКТ и яичников. Наиболее предпочтительным раком является рак груди.In another aspect of the present invention, a drug conjugate of the present invention is provided for use in the treatment of cancer, and more preferably, a cancer selected from lung cancer, colorectal cancer, breast cancer, pancreatic carcinoma, renal cancer, leukemia, multiple myeloma, lymphoma, gastrointestinal and ovarian cancer. The most preferred cancer is breast cancer.

В другом аспекте настоящего изобретения, представлена фармацевтическая композиция, содержащая конъюгат лекарственного средства по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель.In another aspect of the present invention, there is provided a pharmaceutical composition comprising a drug conjugate of the present invention and a pharmaceutically acceptable carrier.

В другом аспекте настоящего изобретения, представлен способ профилактики или лечения рака, включающий введение эффективного количества конъюгата лекарственного средства по настоящему изобретению пациенту, нуждающемуся в этом. Предпочтительно, рак выбирают из рака легких, колоректального рака, рака груди, карциномы поджелудочной железы, рака почек, лейкоза, множественной миеломы, лимфомы, рака ЖКТ и яичников. Наиболее предпочтительным раком является рак груди.In another aspect of the present invention, a method of preventing or treating cancer is provided, comprising administering an effective amount of a drug conjugate of the present invention to a patient in need thereof. Preferably, the cancer is selected from lung cancer, colorectal cancer, breast cancer, pancreatic carcinoma, kidney cancer, leukemia, multiple myeloma, lymphoma, gastrointestinal and ovarian cancer. The most preferred cancer is breast cancer.

В другом аспекте настоящего изобретения, представлено применение конъюгата лекарственного средства по настоящему изобретению в получении лекарственного средства для лечения рака, и более предпочтительно, рака, выбранного из рака легких, колоректального рака, рака груди, карциномы поджелудочной железы, рака почек, лейкоза, множественной миеломы, лимфомы, рака ЖКТ и яичников. Наиболее предпочтительным раком является рак груди.In another aspect of the present invention, there is provided the use of a drug conjugate of the present invention in the preparation of a drug for the treatment of cancer, and more preferably, a cancer selected from lung cancer, colorectal cancer, breast cancer, pancreatic carcinoma, kidney cancer, leukemia, multiple myeloma , lymphoma, gastrointestinal and ovarian cancer. The most preferred cancer is breast cancer.

В другом аспекте настоящего изобретения, представлен набор, содержащий терапевтически эффективное количество конъюгата лекарственного средства по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель. Набор предназначен для применения в лечении рака, и более предпочтительно, рака, выбранного из рака легких, колоректального рака, рака груди, карциномы поджелудочной железы, рака почек, лейкоза, множественной миеломы, лимфомы, рака ЖКТ и яичников. Наиболее предпочтительным раком является рак груди. Набор по настоящему изобретению может содержать терапевтически эффективного количества конъюгата лекарственного средства по настоящему изобретению и, необязательно, инструкции по применению конъюгата лекарственного средства в лечении рака, в частности, рака, выбранного из рака легких, колоректального рака, рака груди, карциномы поджелудочной железы, рака почек, лейкоза, множественной миеломы, лимфомы, рака ЖКТ и яичников; наиболее предпочтительно, для применения конъюгата лекарственного средства в лечении рака груди.In another aspect of the present invention, there is provided a kit containing a therapeutically effective amount of a drug conjugate of the present invention and a pharmaceutically acceptable carrier. The kit is intended for use in the treatment of cancer, and more preferably, a cancer selected from lung cancer, colorectal cancer, breast cancer, pancreatic carcinoma, kidney cancer, leukemia, multiple myeloma, lymphoma, gastrointestinal and ovarian cancer. The most preferred cancer is breast cancer. The kit of the present invention may contain a therapeutically effective amount of a drug conjugate of the present invention and, optionally, instructions for use of the drug conjugate in the treatment of cancer, in particular cancer selected from lung cancer, colorectal cancer, breast cancer, pancreatic carcinoma, cancer kidney, leukemia, multiple myeloma, lymphoma, gastrointestinal and ovarian cancer; most preferably, for use of the drug conjugate in the treatment of breast cancer.

В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ получения конъюгата лекарственного средства по настоящему изобретению, включающий конъюгирование группы Ab, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, и лекарственного средства D, где Ab и D такие, как определено в настоящем документе.In another aspect of the present invention, there is provided a method for producing a drug conjugate of the present invention, comprising conjugating an Ab moiety containing at least one antigen binding site and a drug D, wherein Ab and D are as defined herein.

Подробное описание предпочтительных вариантов осуществленияDetailed Description of Preferred Embodiments

Следующее применяется ко всем аспектам настоящего изобретения.The following applies to all aspects of the present invention.

В соединениях настоящего изобретения алкильные группы могут быть разветвленными или неразветвленными и предпочтительно имеют от 1 до примерно 12 атомов углерода. Еще один предпочтительный класс алкильных групп имеет от 1 до примерно 6 атомов углерода. Еще более предпочтительными являются алкильные группы, имеющие 1, 2, 3 или 4 атома углерода. Метил, этил, нпропил, изопропил и бутил, включая н-бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил, являются особенно предпочтительными алкильными группами в соединениях настоящего изобретения.In the compounds of the present invention, the alkyl groups may be branched or straight-chain and preferably have from 1 to about 12 carbon atoms. Another preferred class of alkyl groups has from 1 to about 6 carbon atoms. Even more preferred are alkyl groups having 1, 2, 3 or 4 carbon atoms. Methyl, ethyl, npropyl, isopropyl and butyl, including n-butyl, isobutyl, sec-butyl and tert-butyl, are particularly preferred alkyl groups in the compounds of the present invention.

В соединениях настоящего изобретения алкенильные группы могут быть разветвленными или неразветвленными, имеют одну или несколько двойных связей и от 2 до примерно 12 атомов углерода. Еще один предпочтительный класс алкенильных групп имеет от 2 до примерно 6 атомов углерода. Еще более предпочтительны алкенильные группы, имеющие 2, 3 или 4 атома углерода. Этенил, 1-пропенил, 2-пропенил, 1-метилэтенил, 1-бутенил, 2-бутенил и 3-бутенил являются особенно предпочтительными алкенильными группами в соединениях по настоящему изобретению.In the compounds of the present invention, alkenyl groups may be branched or straight-chain, have one or more double bonds and from 2 to about 12 carbon atoms. Another preferred class of alkenyl groups has from 2 to about 6 carbon atoms. Even more preferred are alkenyl groups having 2, 3 or 4 carbon atoms. Ethenyl, 1-propenyl, 2-propenyl, 1-methylethenyl, 1-butenyl, 2-butenyl and 3-butenyl are particularly preferred alkenyl groups in the compounds of the present invention.

В соединениях настоящего изобретения алкинильные группы могут быть разветвленными или неразветвленными, имеют одну или несколько тройных связей и от 2 до примерно 12 атомов углерода. Еще один предпочтительный класс алкинильных групп имеет от 2 до примерно 6 атомов углерода. Еще более предпочтительны алкинильные группы, имеющие 2, 3 или 4 атома углерода.In the compounds of the present invention, the alkynyl groups may be branched or straight-chain, have one or more triple bonds and from 2 to about 12 carbon atoms. Another preferred class of alkynyl groups has from 2 to about 6 carbon atoms. Even more preferred are alkynyl groups having 2, 3 or 4 carbon atoms.

Подходящие арильные группы соединений по настоящему изобретению включают соединения с одним и несколькими кольцами, включая соединения с несколькими кольцами, которые содержатSuitable aryl groups of the compounds of the present invention include single- and multi-ring compounds, including multi-ring compounds that contain

- 6 046742 отдельные и/или конденсированные арильные группы. Типовые арильные группы имеют от 1 до 3 отдельных и/или конденсированных колец и от 6 до примерно 18 атомов углерода. Предпочтительно, арильные группы содержат от 6 до примерно 10 кольцевых атомов углерода. Особенно предпочтительные арильные группы включают замещенный или незамещенный фенил, замещенный или незамещенный нафтил, замещенный или незамещенный бифенил, замещенный или незамещенный фенантрил и замещенный или незамещенный антрил.- 6 046742 separate and/or fused aryl groups. Typical aryl groups have from 1 to 3 separate and/or fused rings and from 6 to about 18 carbon atoms. Preferably, aryl groups contain from 6 to about 10 ring carbon atoms. Particularly preferred aryl groups include substituted or unsubstituted phenyl, substituted or unsubstituted naphthyl, substituted or unsubstituted biphenyl, substituted or unsubstituted phenanthryl, and substituted or unsubstituted anthryl.

Подходящие гетероциклические группы включают гетероароматические и гетероалициклические группы, содержащие от 1 до 3 отдельных и/или конденсированных колец и от 5 до примерно 18 кольцевых атомов. Предпочтительно, гетероароматические и гетероалициклические группы содержат от 5 до примерно 10 кольцевых атомов, наиболее предпочтительно 5, 6 или 7 кольцевых атомов. Подходящие гетероароматические группы в соединениях настоящего изобретения содержат один, два или три гетероатома, выбранных из атомов N, O или S, и включают, например, кумаринил, включая 8кумаринил, хинолил, включая 8-хинолил, изохинолил, пиридил, пиразинил, пиразолил, пиримидинил, фурил, пирролил, тиенил, тиазолил, изотиазолил, триазолил, тетразолил, изоксазолил, оксазолил, имидазолил, индолил, изоиндолил, индазолил, индолизинил, фталазинил, птеридил, пуринил, оксадиазолил, тиадиазолил, фуразанил, пиридазинил, триазинил, циннолинил, бензимидазолил, бензофуранил, бензофуразанил, бензотиофенил, бензотиазолил, бензоксазолил, хиназолинил, хиноксалинил, нафтиридинил и фуропиридил. Подходящие гетероалициклические группы в соединениях настоящего изобретения содержат один, два или три гетероатома, выбранных из N, O или S, и включают, например, пирролидинил, тетрагидрофуранил, тетрагидротиенил, тетрагидротиопиранил, пиперидил, морфолинил, тиоморфолинил, тиоксанил, пиперазинил, азетидинил, оксетанил, тиетанил, гомопиперидил, оксепанил, тиепанил, оксазепинил, диазепинил, тиазепинил, 1,2,3,6-тетрагидропиридил, 2-пирролинил, 3-пирролинил, индолинил, 2H-пиранил, 4Н-пиранил, диоксанил, 1,3-диоксоланил, пиразолинил, дитианил, дитиоланил, дигидропиранил, дигидротиенил, дигидрофуранил, пиразолидинил, имидазолинил, имидазолидинил, 3-азабицикло[3.1.0]гексил, 3-азабицикло[4.1.0]гептил, ЗН-индолил и хинолизинил.Suitable heterocyclic groups include heteroaromatic and heteroalicyclic groups containing from 1 to 3 separate and/or fused rings and from 5 to about 18 ring atoms. Preferably, heteroaromatic and heteroalicyclic groups contain from 5 to about 10 ring atoms, most preferably 5, 6 or 7 ring atoms. Suitable heteroaromatic groups in the compounds of the present invention contain one, two or three heteroatoms selected from N, O or S atoms and include, for example, coumarinyl, including 8-coumarinyl, quinolyl, including 8-quinolyl, isoquinolyl, pyridyl, pyrazinyl, pyrazolyl, pyrimidinyl , furyl, pyrrolyl, thienyl, thiazolyl, isothiazolyl, triazolyl, tetrazolyl, isoxazolyl, oxazolyl, imidazolyl, indolyl, isoindolyl, indazolyl, indolizinyl, phthalazinyl, pteridyl, purinyl, oxadiazolyl, thiadiazolyl, furazanil, pyridazinyl, triazinyl, , benzimidazolyl, benzofuranyl , benzofurazanil, benzothiophenyl, benzothiazolyl, benzoxazolyl, quinazolinyl, quinoxalinyl, naphthyridinyl and furopyridyl. Suitable heteroalicyclic groups in the compounds of the present invention contain one, two or three heteroatoms selected from N, O or S and include, for example, pyrrolidinyl, tetrahydrofuranyl, tetrahydrothienyl, tetrahydrothiopyranyl, piperidyl, morpholinyl, thiomorpholinyl, thioxanyl, piperazinyl, azetidinyl, oxetanyl, thietanyl, homopiperidyl, oxepanil, tiepanil, oxazepinil, diazepinil, thiazepinyl, 1,2,3,6-tetrahydropyridyl, 2-pyrrolinyl, 3-pyrrolinyl, indolinyl, 2H-pyranyl, 4H-pyranyl, dioxanil, 1,3-dioxolanyl, pyrazolinyl, dithianyl, dithiolanyl, dihydropyranyl, dihydrothienyl, dihydrofuranyl, pyrazolidinyl, imidazolinyl, imidazolidinyl, 3-azabicyclo[3.1.0]hexyl, 3-azabicyclo[4.1.0]heptyl, 3H-indolyl and quinolizinyl.

Вышеупомянутые группы могут быть замещены в одном или нескольких доступных положениях одной или несколькими подходящими группами, такими как OR', =O, SR', SOR', SO₂R', NO₂, NHR', NR'R', =N-R', NHCOR', N(COR')₂, NHSO2R', NR'C(=NR')NR'R', CN, галоген, COR', COOR', OCOR', OCONHR', OCONR'R', CONHR', CONR'R', защищенная OH, защищенная амино, защищенная SH, замещенный или незамещенный C1-C12 алкил, замещенный или незамещенный C₂-C₁₂ алкенил, замещенный или незамещенный C₂-C₁₂ алкинил, замещенный или незамещенный арил и замещенная или незамещенная гетероциклическая группа, где каждую из R' групп независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, OH, NO₂, NH₂, SH, CN, галогена, COH, ТОалкила, CO2H, замещенного или незамещенного C1C₁₂ алкила, замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкенила, замещенного или незамещенного C₂-C₁₂алкинила, замещенного или незамещенного арила и замещенной или незамещенной гетероциклической группы. Если такие группы сами замещены, заместители могут быть выбраны из приведенного выше списка. Кроме того, если на заместителе имеется более одной группы R', каждый R' может быть одинаковым или разным.The above groups may be substituted at one or more available positions with one or more suitable groups such as OR', =O, SR', SOR', SO ₂ R', NO ₂ , NHR', NR'R', =N- R', NHCOR', N(COR') ₂ , NHSO2R', NR'C(=NR')NR'R', CN, halogen, COR', COOR', OCOR', OCONHR', OCONR'R', CONHR', CONR'R', protected OH, protected amino, protected SH, substituted or unsubstituted C1-C12 alkyl, substituted or unsubstituted _C2 - _C12 alkenyl, substituted or unsubstituted _C2 - _C12 alkynyl, substituted or unsubstituted aryl and a substituted or unsubstituted heterocyclic group, wherein each of the R' groups is independently selected from the group consisting of hydrogen, OH, NO ₂ , NH ₂ , SH, CN, halogen, COH, TOalkyl, CO2H, substituted or unsubstituted C1C ₁₂ alkyl, substituted or unsubstituted C ₂ -C ₁₂ alkenyl, substituted or unsubstituted C ₂ -C ₁₂ alkynyl, substituted or unsubstituted aryl and substituted or unsubstituted heterocyclic group. If such groups are themselves substituted, the substituents may be selected from the above list. In addition, if there is more than one R' group on a substituent, each R' may be the same or different.

В соединениях для настоящего изобретения, галогеновые заместители включают F, Cl, Br и I.In the compounds of the present invention, halogen substituents include F, Cl, Br and I.

Более конкретно, в соединения настоящего изобретения, алкильные группы в определениях R₂₀, Ra, R_b, R_c, R_x, R_y и R_z могут быть прямыми или разветвленными алкильными группами, имеющими от 1 до 12 атомов углерода, и они предпочтительно являются алкильной группой, имеющей от 1 до 6 атомов углерода, более предпочтительно, метильной группой, этильной группой или изопропильной группой, и наиболее предпочтительно, метильной группой. В определениях M и Q они могут быть прямыми или разветвленными алкильными группами, имеющими от 1 до 6 атомов углерода. Метил, этил, н-пропил, изопропил и бутил, включая н-бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил, являются особенно предпочтительными алкильными группами в соединениях настоящего изобретения.More specifically, in the compounds of the present invention, alkyl groups in the definitions of R ₂₀ , Ra, R _b , R _c , R _x , R _y and R _z may be straight or branched alkyl groups having from 1 to 12 carbon atoms, and they are preferably are an alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms, more preferably a methyl group, ethyl group or isopropyl group, and most preferably a methyl group. In the definitions of M and Q, they can be straight or branched alkyl groups having from 1 to 6 carbon atoms. Methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl and butyl, including n-butyl, isobutyl, sec-butyl and tert-butyl, are particularly preferred alkyl groups in the compounds of the present invention.

В соединениях настоящего изобретения, алкенильные группы определениях Ra, R_b, Rc и R_xявляются разветвленными или неразветвленными и могут иметь одну или несколько двойных связей и от 2 до 12 атомов углерода. Предпочтительно, они имеют от 2 до 6 атомов углерода, более предпочтительно, они являются разветвленными или неразветвленными алкенильными группами, содержащими 2, 3 или 4 атомов углерода. Этенил, 1-пропенил, 2-пропенил, 1-метилэтенил, 1-бутенил, 2бутенил и 3-бутенил являются особенно предпочтительными алкенильными группами в соединениях настоящего изобретения.In the compounds of the present invention, alkenyl groups as defined by Ra, _Rb , Rc and _Rx are branched or straight-chain and may have one or more double bonds and from 2 to 12 carbon atoms. Preferably they have from 2 to 6 carbon atoms, more preferably they are branched or straight-chain alkenyl groups containing 2, 3 or 4 carbon atoms. Ethenyl, 1-propenyl, 2-propenyl, 1-methylethenyl, 1-butenyl, 2-butenyl and 3-butenyl are particularly preferred alkenyl groups in the compounds of the present invention.

В соединениях настоящего изобретения, алкинильные группы определениях Ra, R_b, R_c и R_xявляются разветвленными или неразветвленными и могут иметь одну или несколько тройных связей и от 2 до 12 атомов углерода. Предпочтительно, они имеют от 2 до 6 атомов углерода, более предпочтительно, они являются разветвленными или неразветвленными алкинильными группами, содержащими 2, 3 или 4 атомов углерода.In the compounds of the present invention, alkynyl groups, as defined by Ra, _Rb , _Rc and _Rx, are branched or straight-chain and may have one or more triple bonds and from 2 to 12 carbon atoms. Preferably they have from 2 to 6 carbon atoms, more preferably they are branched or straight-chain alkynyl groups containing 2, 3 or 4 carbon atoms.

В соединениях настоящего изобретения, галогеновые заместители в определениях R_x, R_y и R_zвключают F, Cl, Br и I, предпочтительно, Cl.In the compounds of the present invention, the halogen substituents in the definitions of R _x , R _y and R _z include F, Cl, Br and I, preferably Cl.

- 7 046742- 7 046742

В соединениях настоящего изобретения, 5-14-членной насыщенной или ненасыщенной гетероциклической группой в определениях R_x является гетероциклическая группа, имеющая одно или несколько колец, содержащих, по меньшей мере, один атом кислорода, азота или серы в указанных кольцах. Гетероциклической группой является группа, которая может быть гетероароматической группой или гетероалициклической группой, последняя из которых может быть частично ненасыщенной, где и ароматическая, и алициклическая гетероциклическая группа содержит от 1 до 3 отдельных или конденсированных колец. Предпочтительно, гетероароматическая и гетероалициклическая группа содержат от 5 до 10 кольцевых атомов. Подходящие гетероароматические группы в соединениях настоящего изобретения содержат один, два или три гетероатома, выбранных из атомов N, O и S, и включают, например, хинолил, включая 8-хинолил, изохинолил, кумаринил, включая 8-кумаринил, пиридил, пиразинил, пиразолил, пиримидинил, фурил, пирролил, тиенил, тиазолил, изотиазолил, триазолил, тетразолил, изоксазолил, оксазолил, имидазолил, индолил, изоиндолил, индазолил, индолизинил, фталазинил, птеридинил, пуринил, оксадиазолил, тиадиазолил, фуразанил, пиридазинил, триазинил, циннолинил, бензимидазолил, бензофуранил, бензофуразанил, бензотиофенил, бензотиазолил, бензоксазолил, хиназолинил, хиноксалинил, нафтиридинил и фуропиридил. Подходящие гетероалициклические группы в соединениях настоящего изобретения содержат один, два или три гетероатома, выбранных из атомов N, O и S, и включают, например, пирролидинил, тетрагидрофуранил, дигидрофуранил, тетрагидротиенил, тетрагидротиопиранил, пиперидил, морфолинил, тиоморфолинил, тиоксанил, пиперазинил, азетидинил, оксетанил, тиетанил, гомопиперидил, оксепанил, тиепанил, оксазепинил, диазепинил, тиазепинил, 1,2,3,6-тетрагидропиридил, 2-пирролинил, 3-пирролинил, индолинил, 2Н-пиранил, 4Н-пиранил, диоксанил, 1,3-диоксоланил, пиразолинил, дитианил, дитиоланил, дигидропиранил, дигидротиенил, дигидрофуранил, пиразолидинил, имидазолинил, имидазолидинил, 3азабицикло[3.1.0]гексил, 3-азабицикло[4.1.0]гептил, ЗН-индолил и хинолизинил.In the compounds of the present invention, a 5-14 membered saturated or unsaturated heterocyclic group in the definitions of R _x is a heterocyclic group having one or more rings containing at least one oxygen, nitrogen or sulfur atom in said rings. A heterocyclic group is a group which may be a heteroaromatic group or a heteroalicyclic group, the latter of which may be partially unsaturated, wherein both the aromatic and alicyclic heterocyclic group contain from 1 to 3 separate or fused rings. Preferably, the heteroaromatic and heteroalicyclic group contain from 5 to 10 ring atoms. Suitable heteroaromatic groups in the compounds of the present invention contain one, two or three heteroatoms selected from N, O and S atoms and include, for example, quinolyl, including 8-quinolyl, isoquinolyl, coumarinyl, including 8-coumarinyl, pyridyl, pyrazinyl, pyrazolyl . , cinnolinyl, benzimidazolyl , benzofuranyl, benzofurazanil, benzothiophenyl, benzothiazolyl, benzoxazolyl, quinazolinyl, quinoxalinyl, naphthyridinyl and furopyridyl. Suitable heteroalicyclic groups in the compounds of the present invention contain one, two or three heteroatoms selected from N, O and S atoms and include, for example, pyrrolidinyl, tetrahydrofuranyl, dihydrofuranyl, tetrahydrothienyl, tetrahydrothiopyranyl, piperidyl, morpholinyl, thiomorpholinyl, thioxanyl, piperazinyl, azetidinyl , oxetanil, tietanyl, homopiperidyl, oxepanil, tiepanil, oxazepinil, diazepinil, thiazepinil, 1,2,3,6-tetrahydropyridyl, 2-pyrrolinyl, 3-pyrrolinyl, indolinyl, 2H-pyranyl, 4H-pyranyl, dioxanyl, 1,3 -dioxolanyl, pyrazolinyl, dithianyl, dithiolanyl, dihydropyranyl, dihydrothienyl, dihydrofuranyl, pyrazolidinyl, imidazolinyl, imidazolidinyl, 3-azabicyclo[3.1.0]hexyl, 3-azabicyclo[4.1.0]heptyl, 3H-indolyl and quinolizinyl.

В соединениях настоящего изобретения, арильная группа в определении R_x и R₂₀ является одинарным или множественным кольцевым соединением, которое содержит отдельные и/или конденсированные арильные группы и имеет от 6 до 18 кольцевых атомов и необязательно является замещенным. Типовые арильные группы содержат от 1 до 3 отдельных или конденсированных колец. Предпочтительно, арильные группы содержат от 6 до 12 кольцевых атомов углерода. Особенно предпочтительные арильные группы включают замещенный или незамещенный фенил, замещенный или незамещенный нафтил, замещенный или незамещенный бифенил, замещенный или незамещенный фенантрил и замещенный или незамещенный антрил, и наиболее предпочтительно, замещенный или незамещенный фенил, где заместители такие, как указаны выше.In the compounds of the present invention, an aryl group as defined by R _x and R ₂₀ is a single or multiple ring compound that contains single and/or fused aryl groups and has from 6 to 18 ring atoms and is optionally substituted. Typical aryl groups contain 1 to 3 separate or fused rings. Preferably, aryl groups contain from 6 to 12 ring carbon atoms. Particularly preferred aryl groups include substituted or unsubstituted phenyl, substituted or unsubstituted naphthyl, substituted or unsubstituted biphenyl, substituted or unsubstituted phenanthryl and substituted or unsubstituted anthryl, and most preferably, substituted or unsubstituted phenyl, where the substituents are as defined above.

В соединениях настоящего изобретения, аралкильные группы в определениях R_x, R_y и R_z содержат алкильную группу, как определено и представлено примерами выше, которые замещены одной или несколькими арильными группами, как определено и представлено примерами выше. Предпочтительные примеры включают необязательно замещенный бензил, необязательно замещенный фенилэтил и необязательно замещенный нафтилметил.In the compounds of the present invention, the aralkyl groups in the definitions of R _x , R _y and R _z contain an alkyl group, as defined and exemplified above, that is substituted by one or more aryl groups, as defined and exemplified above. Preferred examples include optionally substituted benzyl, optionally substituted phenylethyl and optionally substituted naphthylmethyl.

В соединениях настоящего изобретения, аралкилоксигруппы в определениях R_x содержат алкоксигруппу, имеющую от 1 до 12 атомов углерода, которые замещены одной или несколькими арильными группами, как определено и представлено примерами выше. Предпочтительно, алкоксигруппа имеет от 1 до 6 атомов углерода, и арильная группа содержит от 6 до примерно 12 кольцевых атомов углерода, и наиболее предпочтительно, аралкилоксигруппой является необязательно замещенная бензилокси, необязательно замещенная фенилэтокси и необязательно замещенная нафтилметокси.In the compounds of the present invention, the aralkyloxy groups in the definitions of R _x contain an alkoxy group having from 1 to 12 carbon atoms that are substituted by one or more aryl groups as defined and exemplified above. Preferably, the alkoxy group has from 1 to 6 carbon atoms, and the aryl group has from 6 to about 12 ring carbon atoms, and most preferably, the aralkyloxy group is optionally substituted benzyloxy, optionally substituted phenylethoxy, and optionally substituted naphthylmethoxy.

В соединениях настоящего изобретения, гетероциклоалкильные группы в определениях Ry и Rz содержат алкильную группу, как определено и представлено примерами выше, которая замещена одной или несколькими гетероциклильными группами, как определено и представлено примерами выше. Предпочтительно, гетероциклоалкильные группы содержат алкильную группу, имеющую от 1 до 6 атомов углерода, которая замещена гетероциклильной группой, имеющей от 5 до 10 кольцевых атомов в 1 или 2 кольцевых атомах, и может быть ароматической, частично насыщенной или полностью насыщенной. Более предпочтительно, гетероциклоалкильные группы включают метильную или этильную группу, которая замещена гетероциклильной группой, выбранной из группы, состоящей из пирролидинила, имидазолидинила, пиперидинила, пиперазинила, морфолинила, тетрагидрофуранила, оксанила, тианила, 8-хинолила, изохинолила, пиридила, пиразинила, пиразолила, пиримидинила, фурила, пирролила, тиенила, тиазолила, изотиазолила, триазолила, тетразолила, изоксазолила, оксазолила и бензимидазола.In the compounds of the present invention, the heterocycloalkyl groups in the definitions of Ry and Rz contain an alkyl group, as defined and exemplified above, which is substituted by one or more heterocyclyl groups, as defined and exemplified above. Preferably, heterocycloalkyl groups contain an alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms, which is substituted by a heterocyclyl group having from 5 to 10 ring atoms in 1 or 2 ring atoms, and may be aromatic, partially saturated or fully saturated. More preferably, the heterocycloalkyl groups include a methyl or ethyl group that is substituted with a heterocyclyl group selected from the group consisting of pyrrolidinyl, imidazolidinyl, piperidinyl, piperazinyl, morpholinyl, tetrahydrofuranyl, oxanyl, thianyl, 8-quinolyl, isoquinolyl, pyridyl, pyrazinyl, pyrazolyl, pyrimidinyl, furyl, pyrrolyl, thienyl, thiazolyl, isothiazolyl, triazolyl, tetrazolyl, isoxazolyl, oxazolyl and benzimidazole.

В соединениях настоящего изобретения, алкиленовые группы в определении Rj₉ являются прямыми или разветвленными алкиленовыми группами, имеющими от 1 до 12 атомов углерода, и алкиленовые группы в определениях M, X, T и R₃₀ являются прямыми или разветвленными алкиленовыми группами, имеющими от 1 до 6 атомов углерода. Предпочтительно, алкиленовые группы в определении Rj₉являются прямыми или разветвленными алкиленовыми группами, имеющими от 1 до 8 атомов углерода, более предпочтительно, прямыми или разветвленными алкиленовыми группами, имеющими от 1 до 6In the compounds of the present invention, alkylene groups in the definition of Rj ₉ are straight or branched alkylene groups having from 1 to 12 carbon atoms, and alkylene groups in the definitions of M, X, T and R ₃₀ are straight or branched alkylene groups having from 1 to 12 carbon atoms. 6 carbon atoms. Preferably, alkylene groups in the definition of Rj ₉ are straight or branched alkylene groups having from 1 to 8 carbon atoms, more preferably straight or branched alkylene groups having from 1 to 6

- 8 046742 атомов углерода. Для M предпочтительными являются прямые или разветвленные алкиленовые группы, имеющие от 1 до 3 атомов углерода. В определении X алкиленовыми группами в определении X являются, предпочтительно, прямые или разветвленные алкиленовые группы, имеющие от 2 до 4 атомов углерода. Для T, предпочтительными являются прямые или разветвленные алкиленовые группы, имеющие от 2 до 4 атомов углерода. В определении R₃₀, предпочтительными являются прямые или разветвленные алкиленовые группы, имеющие от 2 до 4 атомов углерода, наиболее предпочтительно, прямая алкиленовая группа, имеющая 3 атома углерода. Чтобы избежать сомнений, термин алкилен применяют для обозначения алкандиильных групп.- 8,046,742 carbon atoms. For M, straight or branched alkylene groups having 1 to 3 carbon atoms are preferred. In the definition of X, the alkylene groups in the definition of X are preferably straight or branched alkylene groups having from 2 to 4 carbon atoms. For T, straight or branched alkylene groups having 2 to 4 carbon atoms are preferred. In the definition of R ₃₀ , straight or branched alkylene groups having 2 to 4 carbon atoms are preferred, most preferably a straight alkylene group having 3 carbon atoms. To avoid doubt, the term alkylene is used to refer to alkanediyl groups.

В соединениях настоящего изобретения, карбоциклогруппы в определениях R₁₉ и M являются циклоалкильными группами, имеющими от 3 до 8 атомов углерода, которые имеют две ковалентные связи в любом положении циклоалкильного кольца, соединяющие указанную циклоалкильную группу с остатком конъюгата лекарственного средства. Предпочтительно, карбоциклогруппы в определениях R₁₉и M являются циклоалкильными группами, имеющими от 3 до 7 атомов углерода, и более предпочтительно, карбоциклогруппы, имеющие от 5 до 7 атомов углерода.In the compounds of the present invention, carbocyclo groups in the definitions of R ₁₉ and M are cycloalkyl groups having from 3 to 8 carbon atoms, which have two covalent bonds at any position of the cycloalkyl ring connecting the specified cycloalkyl group to the residue of the drug conjugate. Preferably, carbocyclo groups in the definitions of R ₁₉ and M are cycloalkyl groups having from 3 to 7 carbon atoms, and more preferably, carbocyclo groups having from 5 to 7 carbon atoms.

В соединениях настоящего изобретения, ариленовые группы в определении R₁₉ являются арильными группами, имеющими от 6 до 18 атомов углерода в одном или нескольких кольцах, которые имеют две ковалентные связи в любом положении на ароматической кольцевой системе, соединяющие указанные ариленовые группы с остатком конъюгата лекарственного средства. Предпочтительно, ариленовые группы в определении R₁₉ являются арильными группами, имеющими от 6 до 12 атомов углерода в одном или нескольких кольцах, которые имеют две ковалентные связи в любом положении на ароматической кольцевой системе, и наиболее предпочтительно, они являются фениленовыми группами.In the compounds of the present invention, arylene groups in the definition of R ₁₉ are aryl groups having from 6 to 18 carbon atoms in one or more rings that have two covalent bonds at any position on the aromatic ring system connecting said arylene groups to the drug conjugate moiety . Preferably, arylene groups in the definition of R ₁₉ are aryl groups having from 6 to 12 carbon atoms in one or more rings that have two covalent bonds at any position on the aromatic ring system, and most preferably they are phenylene groups.

В соединениях настоящего изобретения, гетероциклогруппы в определении R₁₉ являются гетероциклильными группами, содержащими от 1 до 3 отдельных или конденсированных колец, имеющих от 5 до 14 кольцевых атомов, и содержащих, по меньшей мере, один атом кислорода, азота или серы в указанных кольцах, где имеется две ковалентные связи в любом положении кольцевой системы указанных гетероциклических групп. Гетероциклическими группами являются группы, которые могут быть гетероароматическими группами или гетероалициклическими группами (последние могут быть частично ненасыщены). Предпочтительно, гетероциклогруппы в определении R₁₉ являются гетероциклильные группы, содержащие от 1 до 3 отдельных или конденсированных колец, имеющих от 5 до 12 кольцевых атомов, и содержащие, по меньшей мере, один атом кислорода, азота или серы в указанных кольцах, где имеются две ковалентные связи в любом положении на кольцевой системы указанных гетероциклических групп.In the compounds of the present invention, heterocyclo groups in the definition of R ₁₉ are heterocyclyl groups containing from 1 to 3 separate or fused rings having from 5 to 14 ring atoms, and containing at least one oxygen, nitrogen or sulfur atom in said rings, where there are two covalent bonds in any position of the ring system of these heterocyclic groups. Heterocyclic groups are groups that may be heteroaromatic groups or heteroalicyclic groups (the latter may be partially unsaturated). Preferably, heterocyclogroups in the definition of R ₁₉ are heterocyclyl groups containing from 1 to 3 separate or fused rings having from 5 to 12 ring atoms, and containing at least one oxygen, nitrogen or sulfur atom in said rings, where there are two covalent bonds in any position on the ring system of the specified heterocyclic groups.

Если имеется, более одного необязательных заместителей Rx, R_y или R_z на заместителе, каждый заместитель Rx могут быть одинаковыми или разными, каждый заместитель R_y могут быть одинаковыми или разными и каждый Rz могут быть одинаковыми или разными.If there is more than one optional Rx, _Ry, or _Rz substituent on a substituent, each Rx substituent may be the same or different, each _Ry substituent may be the same or different, and each Rz may be the same or different.

В варианте осуществления, D может быть соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:In an embodiment, D may be a compound of formula I or a pharmaceutically acceptable salt or ester thereof:

О. r₂oO. r ₂ o

I где: Y является -NH- или -O-;I where: Y is -NH- or -O-;

R1 является -OH или -CN;R1 is -OH or -CN;

R2 является -C(=O)R_a группой;R2 is a -C(=O)R _a group;

R₃ является водородом или -OR_b группой;R ₃ is hydrogen or an -OR _b group;

R4 выбирают из водорода, -CH2OH, -C’H2OC’(=O)R_c. -CH2NH2 и -CH₂NHProt^NH;R4 is selected from hydrogen, -CH2OH, -C'H2OC'(=O)R _c . -CH2NH2 and -CH ₂ NHProt ^NH ;

Ra выбирают из водорода, замещенного или незамещенного C1-C12 алкила, замещенного или незамещенного C2-C12 алкенила и замещенного или незамещенного C2-C12 алкинила;Ra is selected from hydrogen, substituted or unsubstituted C1-C12 alkyl, substituted or unsubstituted C2-C12 alkenyl and substituted or unsubstituted C2-C12 alkynyl;

R_b выбирают из замещенного или незамещенного C1-C12 алкила, замещенного или незамещенного C2-C12 алкенила и замещенного или незамещенного C2-C12 алкинила;R _b is selected from substituted or unsubstituted C1-C12 alkyl, substituted or unsubstituted C2-C12 alkenyl and substituted or unsubstituted C2-C12 alkynyl;

Rc выбирают из замещенного или незамещенного C1-C12 алкила, замещенного или незамещенного C2-C12 алкенила и замещенного или незамещенного C2-C12 алкинила; иRc is selected from substituted or unsubstituted C1-C12 alkyl, substituted or unsubstituted C2-C12 alkenyl and substituted or unsubstituted C2-C12 alkynyl; And

ProtNH является защитной группой для амино.ProtNH is an amino protecting group.

В варианте осуществления, соединение формулы I имеет условие, что если R4 является водородом, то Y является -O-.In an embodiment, the compound of formula I has the condition that if R4 is hydrogen, then Y is -O-.

- 9 046742- 9 046742

В дополнительном варианте осуществления, соединением формулы I может быть соединение формулы IC или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:In a further embodiment, the compound of Formula I may be a compound of Formula IC or a pharmaceutically acceptable salt or ester thereof:

R₃ R ₃

о. r₂oO. r ₂ o

IC где: Y является -NH-;IC where: Y is -NH-;

R1 является -OH или -CN;R1 is -OH or -CN;

R2 является -C(=O)R_a группой;R2 is a -C(=O)R _a group;

R4 выбирают из -CH2OH, -CH2O-(C=O)R_c, -CH2NH2 и -CH₂NHProt^NH;R4 is selected from -CH2OH, -CH2O-(C=O)R _c , -CH2NH2 and -CH ₂ NHProt ^NH ;

Prot^NH является защитной группой для амино.Prot ^NH is an amino protecting group.

В еще одном варианте осуществления, соединением формулы I может быть соединение формулы ID или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:In yet another embodiment, the compound of Formula I may be a compound of Formula ID or a pharmaceutically acceptable salt or ester thereof:

О. r₂oO. r ₂ o

ID где: Y является -O-;ID where: Y is -O-;

R1 является -OH или -CN;R1 is -OH or -CN;

R₂ является -C(=O)R_a группой;R ₂ is a -C(=O)R _a group;

R4 выбирают из водорода, -CH2OH, -CH₂O-(C=O)Rc, -CH2NH2 и -CH₂NHProt^NH;R4 is selected from hydrogen, -CH2OH, -CH ₂ O-(C=O)Rc, -CH2NH2 and -CH ₂ NHProt ^NH ;

В еще одном варианте осуществления, соединением формулы I может быть соединение формулы IE или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:In yet another embodiment, the compound of Formula I may be a compound of Formula IE or a pharmaceutically acceptable salt or ester thereof:

О. r₂oO. r ₂ o

IEI.E.

- 10 046742 где: Y является -NH- или -O-;- 10 046742 where: Y is -NH- or -O-;

R1 является -OH или -CN;R1 is -OH or -CN;

R2 является -C(=O)R_a группой;R2 is a -C(=O)R _a group;

R₄ выбирают из -CH2NH2 и -CH₂NHProt^NH;R ₄ is selected from -CH2NH2 and -CH ₂ NHProt ^NH ;

R_a выбирают из водорода, замещенного или незамещенного C₁-C₁₂ алкила, замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкенила и замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкинила;R _a is selected from hydrogen, substituted or unsubstituted C ₁ -C ₁₂ alkyl, substituted or unsubstituted C ₂ -C ₁₂ alkenyl and substituted or unsubstituted C ₂ -C ₁₂ alkynyl;

Rb выбирают из замещенного или незамещенного C1-C12 алкила, замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкенила и замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкинила; иRb is selected from substituted or unsubstituted C1-C12 alkyl, substituted or unsubstituted _C2 - _C12 alkenyl and substituted or unsubstituted _C2 - _C12 alkynyl; And

В еще одном варианте осуществления, соединением формулы I может быть соединение формулы IA или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:In yet another embodiment, the compound of Formula I may be a compound of Formula IA or a pharmaceutically acceptable salt or ester thereof:

IA где: Y является -NH- или -O-;IA where: Y is -NH- or -O-;

R₁ является -OH или -CN;R ₁ is -OH or -CN;

R₂ является -C(=O)R_a группой;R ₂ is a -C(=O)R _a group;

R3 является водородом;R3 is hydrogen;

R₄ выбирают из водорода, -CH2OH, -CH₂O-(C=O)R_c, -CH2NH2 и -CH₂NHProt^NH;R ₄ is selected from hydrogen, -CH2OH, -CH ₂ O-(C=O)R _c , -CH2NH2 and -CH ₂ NHProt ^NH ;

В варианте осуществления, соединение формулы IA имеет условие, что если R₄ является водородом, то Y является -O-.In an embodiment, the compound of formula IA has the condition that if R ₄ is hydrogen, then Y is -O-.

В еще одном варианте осуществления, соединением формулы I может быть соединение формулы IB или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:In yet another embodiment, the compound of Formula I may be a compound of Formula IB or a pharmaceutically acceptable salt or ester thereof:

О. r₂oO. r ₂ o

IB где: Y является -NH- или -O-;IB where: Y is -NH- or -O-;

R₁ является -OH или -CN;R ₁ is -OH or -CN;

R₂ является -C(=O)R_a группой;R ₂ is a -C(=O)R _a group;

R3 является -ORb группой;R3 is an -ORb group;

R4 выбирают из водорода, -CH2OH, -CH₂O-(C=O)R_c, -CH2NH2 и -CH₂NHProt^NH;R4 is selected from hydrogen, -CH2OH, -CH ₂ O-(C=O)R _c , -CH2NH2 and -CH ₂ NHProt ^NH ;

R_b выбирают из замещенного или незамещенного C₁-C₁₂ алкила, замещенного или незамещенного C2-C12 алкенила и замещенного или незамещенного C2-C12 алкинила;R _b is selected from substituted or unsubstituted C ₁ -C ₁₂ alkyl, substituted or unsubstituted C2-C12 alkenyl and substituted or unsubstituted C2-C12 alkynyl;

В варианте осуществления, соединение формулы IB имеет условие, что если R₄ является водородом, то Y является -O-.In an embodiment, the compound of formula IB has the condition that if R ₄ is hydrogen, then Y is -O-.

- 11 046742- 11 046742

В еще одном варианте осуществления, соединением формулы I может быть соединение формулы IF или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:In yet another embodiment, the compound of Formula I may be a compound of Formula IF or a pharmaceutically acceptable salt or ester thereof:

^R3 ^R 3

IF где: Y является -NH- или -O-;IF where: Y is -NH- or -O-;

R1 является -OH;R1 is -OH;

R2 является -C(=O)R_a группой;R2 is a -C(=O)R _a group;

R₄ выбирают из водорода, -CH2OH, -CH2OC(=O)R_c, -CH2NH2 и -CH₂NHProt^NH;R ₄ is selected from hydrogen, -CH2OH, -CH2OC(=O)R _c , -CH2NH2 and -CH ₂ NHProt ^NH ;

В варианте осуществления, соединение формулы IF имеет условие, что если R4 является водородом, то Y является -O-.In an embodiment, the compound of formula IF has the condition that if R4 is hydrogen, then Y is -O-.

В еще одном варианте осуществления, соединением формулы I может быть соединение формулы IG или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:In yet another embodiment, the compound of Formula I may be a compound of Formula IG or a pharmaceutically acceptable salt or ester thereof:

О. r₂oO. r ₂ o

IG где: Y является -NH- или -O-;IG where: Y is -NH- or -O-;

R₁ является -OH или -CN;R ₁ is -OH or -CN;

R2 является ацетилом;R2 is acetyl;

Prot^NH является защитной группой для аминоProt ^NH is an amino protecting group

В варианте осуществления, соединение формулы IG имеет условие, что если R4 является водородом, то Y является -O-.In an embodiment, the compound of formula IG has the condition that if R4 is hydrogen, then Y is -O-.

Предпочтительными соединениями соединений формулы I, IA, IB, IC, ID, IE, IF или IG являются такие, которые имеют общие формулы a или b или их фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:Preferred compounds of formula I, IA, IB, IC, ID, IE, IF or IG are those having the general formula a or b or a pharmaceutically acceptable salt or ester thereof:

- 12 046742- 12 046742

Необходимо отметить, что если соединения имеют общую формулу а или b, R4 может не быть водородом.It should be noted that if compounds have the general formula a or b, R4 may not be hydrogen.

Предпочтительными соединениями соединений формулы I, IA, IB, ID, IF или IG могут быть такие, которые имеют формулу c или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:Preferred compounds of the compounds of formula I, IA, IB, ID, IF or IG may be those having formula c or a pharmaceutically acceptable salt or ester thereof:

^R3 ^R 3

где: R1 является -OH или -CN;where: R1 is -OH or -CN;

R2 является -C(=O)R_a группой;R2 is a -C(=O)R _a group;

R_a выбирают из водорода, замещенного или незамещенного C1-C12 алкила, замещенного или незамещенного C2-C12 алкенила и замещенного или незамещенного C2-C12 алкинила; иR _a is selected from hydrogen, substituted or unsubstituted C1-C12 alkyl, substituted or unsubstituted C2-C12 alkenyl and substituted or unsubstituted C2-C12 alkynyl; And

Rb выбирают из замещенного или незамещенного C1-C12 алкила, замещенного или незамещенного C2-C12 алкенила и замещенного или незамещенного C2-C12 алкинила.Rb is selected from substituted or unsubstituted C1-C12 alkyl, substituted or unsubstituted C2-C12 alkenyl and substituted or unsubstituted C2-C12 alkynyl.

Чтобы избежать сомнений, указанные выше соединения могут быть группами лекарственного средства D и ковалентно присоединены через гидрокси или аминогруппу к (X)b, если имеется, или (AA)_w, если имеется, или к (T)g, если имеется, или (L). Таким образом, при конъюгировании ковалентная связь заменяет протон на соединения гидрокси- или аминогруппы.For the avoidance of doubt, the above compounds may be drug D groups and covalently attached via a hydroxy or amino group to (X)b, if present, or (AA) _w , if present, or to (T)g, if present, or ( L). Thus, during conjugation, a covalent bond replaces a proton with a hydroxy or amino group.

Предпочтительные соединения включают соединения общей формулы I, IA, IB, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, IEb, IFb и IGb, где:Preferred compounds include those of the general formula I, IA, IB, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, IEb, IFb and IGb, where:

Y является -NH-;Y is -NH-;

и R1; R2; R₃; R4; R_a; Rb; R_c; и Prot^NH такие, как определены выше.and R1; R2; R ₃ ; R4; R _a ; Rb; R _c ; and Prot ^NH are as defined above.

Y является -O-;Y is -O-;

и R1; R2; R₃; R₄; R_a; Rb; Rc; и Prot^NH такие, как определены выше.and R1; R2; R ₃ ; _R4 ; R _a ; Rb; Rc; and Prot ^NH are as defined above.

Другие предпочтительные соединения включают соединения общей формулы I, IA, IB, IC, ID, IE, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb и IGb, где:Other preferred compounds include those of the general formula I, IA, IB, IC, ID, IE, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb and IGb, where :

R₁ является -OH;R ₁ is -OH;

и Y; R2; R₃; R₄; R_a; Rb; Rc; и Prot^NH такие, как определены выше.and Y; R2; R ₃ ; _R4 ; R _a ; Rb; Rc; and Prot ^NH are as defined above.

Другие предпочтительные соединения включают соединения общей формулы I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb и IFb, где:Other preferred compounds include those of the general formula I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb and IFb, where :

R2 является -C(=O)R_a группой, где R_a является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный R_a выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R₂ является ацетилом;R2 is a -C(=O)R _a group, where R _a is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. Especially the preferred _RA is selected from the replaced or unnoticed methyl, replaced or unnoticed ethyle, replaced or unnoticed by N-spille, replaced or unnoticed by isopropil, replaced or unnoticed by the buttel, replaced or unnoticed by the fiction, replaced or unnoticed Tuesday-Butille and not visible or unnoticed tert-butyl. Most preferably, R ₂ is acetyl;

и Y; R1; R₃; R₄; Rb; Rc; и Prot^NH такие, как определены выше.and Y; R1; R ₃ ; _R4 ; Rb; Rc; and Prot ^NH are as defined above.

Другие предпочтительные соединения включают соединения общей формулы I, IB, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb и IGb, где:Other preferred compounds include those of the general formula I, IB, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb and IGb, where :

R₃ является водородом или -OR_b группой для соединений формулы I, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IDb, IEb, IFb или IGb; и R₃ является -OR_b группой для соединений формулы IB, IBa или IBb; где Rb является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный R_b выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила,R ₃ is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula I, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IDb, IEb, IFb or IGb; and R ₃ is an -OR _b group for compounds of formula IB, IBa or IBb; where Rb is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. Particularly preferred R _b is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl,

- 13 046742 замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Более предпочтительным R3 является водород и метокси, где водород является наиболее предпочтительной R3 группой;- 13 046742 substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl and substituted or unsubstituted tert-butyl. More preferred R3 is hydrogen and methoxy, where hydrogen is the most preferred R3 group;

и Y; R₁; R2; R₄; Ra; Rc; и Prot^NH такие, как определены выше.and Y; _R1 ; R2; _R4 ; Ra; Rc; and Prot ^NH are as defined above.

Другие предпочтительные соединения включают соединения общей формулы I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb и IGb, где:Other preferred compounds include those of general formula I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb , IFb and IGb, where:

R₄ выбирают из -CH2OH, -CH2OC(=O)Rc, -CH2NH2 и -CH₂NHProt^NH для соединений формулы I, IA, IB, IC, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IFb или IGb; и R4 выбирают из CH2NH2 и -CH2NHProt^NH для соединений формулы IE, IEa или IEb; где Rc является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный Rc выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного нпропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, Rc является метилом. Более предпочтительный R4 выбирают из -CH2OH и -CH2NH2. Более предпочтительно, R4 может быть -CH2NH2. Наиболее предпочтительно, R₄ является -CH₂OH;R ₄ is selected from -CH2OH, -CH2OC(=O)Rc, -CH2NH2 and -CH ₂ NHProt ^NH for compounds of formula I, IA, IB, IC, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IFb or IGb; and R4 is selected from CH2NH2 and -CH2NHProt ^NH for compounds of formula IE, IEa or IEb; where Rc is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. A particularly preferred Rc is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted npropyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl and substituted or unsubstituted tre t-butyl . Most preferably, Rc is methyl. The more preferred R4 is selected from -CH2OH and -CH2NH2. More preferably, R4 may be -CH2NH2. Most preferably, R ₄ is -CH ₂ OH;

и Y; R1; R2; R3; Ra; и R_b такие, как определены выше.and Y; R1; R2; R3; Ra; and R _b are as defined above.

Другие предпочтительные соединения включают соединения общей формулы I, IA, IB, IC, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb, IFb и IGb, где:Other preferred compounds include those of the general formula I, IA, IB, IC, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb, IFb and IGb, where :

Y является -NH-;Y is -NH-;

R1 является -OH;R1 is -OH;

и R2; R3; R4; R_a; R_b; Rc; и ProtNH такие, как определены выше.and R2; R3; R4; R _a ; R _b ; Rc; and ProtNH are as defined above.

Y является -NH-;Y is -NH-;

R₂ является -C(=O)R_a для соединений формулы I, IA, IB, IC, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb; где Ra является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный Ra выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R2 является ацетилом;R ₂ is -C(=O)R _a for compounds of formula I, IA, IB, IC, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb; where Ra is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. Particularly preferred Ra is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl and substituted or unsubstituted tre t -butyl. Most preferably, R2 is acetyl;

и R1; R3; R4; Rb; Rc; и Prot^NH такие, как определены выше.and R1; R3; R4; Rb; Rc; and Prot ^NH are as defined above.

Y является -NH-;Y is -NH-;

R₃ является водородом или -OR_b группой для соединений формулы I, IC, IE, IF, IG, Ia, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IEb, IFb или IGb; R₃ является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; и R₃является -OR_b группой для соединений формулы IB, IBa или IBb; где R_b является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный R_b выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного нпропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Более предпочтительный R3 является водородом и метокси, где водород является наиболее предпочтительной R3 группой;R ₃ is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula I, IC, IE, IF, IG, Ia, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IEb, IFb or IGb; R ₃ is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; and R ₃ is an -OR _b group for compounds of formula IB, IBa or IBb; where R _b is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. Particularly preferred R _b is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted npropyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted tre t- butyl. More preferred R3 is hydrogen and methoxy, where hydrogen is the most preferred R3 group;

и R1; R2; R4; Ra; Rc; и Prot^NH такие, как определены выше.and R1; R2; R4; Ra; Rc; and Prot ^NH are as defined above.

Y является -NH-;Y is -NH-;

R₄ выбирают из -CH₂OH, -CH₂OC(=O)R_c, -CH₂NH₂ и -CH₂NHProt^NH для соединений формулы I, IA, IB, IC, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IFb или IGb; и R4 выбирают из -CH2NH2 и -CH2NHProt^NH для соединений формулы IE, IEa или IEb; где Rc является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный Rc выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропил, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила или замещенного или незамещенного третбутила. Наиболее предпочтительно, Rc является метилом. Более предпочтительный R4 выбирают из CH2OH и CH2NH2. Более предпочтительно, R4 может быть -CH2NH2. Наиболее предпочтительно, R4 является -CH₂OH;R ₄ is selected from -CH ₂ OH, -CH ₂ OC(=O)R _c , -CH ₂ NH ₂ and -CH ₂ NHProt ^NH for compounds of formula I, IA, IB, IC, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IFb or IGb; and R4 is selected from -CH2NH2 and -CH2NHProt ^NH for compounds of formula IE, IEa or IEb; where Rc is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. A particularly preferred Rc is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, or substituted or unsubstituted tre tbutyl . Most preferably, Rc is methyl. The more preferred R4 is selected from CH2OH and CH2NH2. More preferably, R4 may be -CH2NH2. Most preferably, R4 is -CH ₂ OH;

и R₁; R₂; R₃; R_a; и R_b такие, как определены выше.and R ₁ ; _R2 ; R ₃ ; R _a ; and R _b are as defined above.

- 14 046742- 14 046742

Y является -NH-;Y is -NH-;

R_i является -OH;R _i is -OH;

R2 является -C(=O)Ra группой для соединений формулы I, IA, IB, IC, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb; где R_a является замещенным или незамещенным C₁-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный Ra выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R2 является ацетилом;R2 is a -C(=O)Ra group for compounds of formula I, IA, IB, IC, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb; where R _a is substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl. Particularly preferred Ra is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl and substituted or unsubstituted tre t -butyl. Most preferably, R2 is acetyl;

и R3; R4; R_b; Rc; и ProtNH такие, как определены выше.and R3; R4; R _b ; Rc; and ProtNH are as defined above.

Y является -NH-;Y is -NH-;

R_i является -OH;R _i is -OH;

R₃ является водородом или -OR_b группой для соединений формулы I, IC, IE, IF, IG, Ia, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IEb, IFb или IGb; R₃ является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; и R₃является -OR_b группой для соединений формулы IB, IBa или IBb; где R_b является замещенным или незамещенным C₁-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный R_b выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного нпропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Более предпочтительный R3 является водородом и метокси, где водород является наиболее предпочтительной R₃ группой;R ₃ is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula I, IC, IE, IF, IG, Ia, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IEb, IFb or IGb; R ₃ is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; and R ₃ is an -OR _b group for compounds of formula IB, IBa or IBb; where R _b is substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl. Particularly preferred R _b is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted npropyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted tre t- butyl. More preferred R3 is hydrogen and methoxy, where hydrogen is the most preferred _R3 group;

и R2; R4; Ra; Rc; и ProtNH такие, как определены выше.and R2; R4; Ra; Rc; and ProtNH are as defined above.

Y является -NH-;Y is -NH-;

R_i является -OH;R _i is -OH;

R₄ выбирают из -CH2OH, -CH2OC(=O)Rc, -CH2NH2 и -CH₂NHProtN^H для соединений формулы I, IA, IB, IC, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IFb или IGb; и R4 выбирают из -CH2NH2 и -CH2NHProtN^H для соединений формулы IE, IEa или IEb; где Rc является замещенным или незамещенным C1-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный Rc выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R_c является метилом. Более предпочтительный R₄ выбирают из CH2OH и CH2NH2. Более предпочтительно, R₄ может быть -CH2NH2. Наиболее предпочтительно, R₄ является -CH₂OH;R ₄ is selected from -CH2OH, -CH2OC(=O)Rc, -CH2NH2 and -CH ₂ ^NHProtNH for compounds of formula I, IA, IB, IC, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IFb or IGb; and R4 is selected from -CH2NH2 and ^-CH2NHProtNH for compounds of formula IE, IEa or IEb; where Rc is substituted or unsubstituted C1-C ₆ alkyl. A particularly preferred Rc is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted rubs -butyl. Most preferably, R _c is methyl. The more preferred R ₄ is selected from CH2OH and CH2NH2. More preferably, R ₄ may be -CH2NH2. Most preferably, R ₄ is -CH ₂ OH;

и R2; R3; Ra; и R_b такие, как определены выше.and R2; R3; Ra; and R _b are as defined above.

Y является -NH-;Y is -NH-;

R2 является -C(=O)Ra группой для соединений формулы I, IA, IB, IC, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb; где Ra является замещенным или незамещенным C₁-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный Ra выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R₂ является ацетилом;R2 is a -C(=O)Ra group for compounds of formula I, IA, IB, IC, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb; where Ra is substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl. Particularly preferred Ra is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl and substituted or unsubstituted tre t -butyl. Most preferably, R ₂ is acetyl;

R₃ является водородом или -OR_b группой для соединений формулы I, IC, IE, IF, IG, Ia, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IEb, IFb или IGb; R3 является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; и R3 является -ORb группой для соединений формулы IB, IBa или IBb; где Rb является замещенным или незамещенным Ci-C6 алкилом. Особенно предпочтительный Rb выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного нпропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Более предпочтительный R₃ является водородом и метокси, где водород является наиболее предпочтительной R₃ группой;R ₃ is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula I, IC, IE, IF, IG, Ia, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IEb, IFb or IGb; R3 is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; and R3 is an -ORb group for compounds of formula IB, IBa or IBb; where Rb is substituted or unsubstituted Ci-C6 alkyl. Particularly preferred Rb is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted npropyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted tre t-butyl . More preferred R ₃ is hydrogen and methoxy, where hydrogen is the most preferred R ₃ group;

- 15 046742 и R1; R4; Rc; и ProtNH такие, как определены выше.- 15 046742 and R1; R4; Rc; and ProtNH are as defined above.

Y является -NH-;Y is -NH-;

R2 является -C(=O)Ra группой для соединений формулы I, IA, IB, IC, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb; где R_a является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный R_a выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R2 является ацетилом;R2 is a -C(=O)Ra group for compounds of formula I, IA, IB, IC, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb; where R _a is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. Especially the preferred _RA is selected from the replaced or unnoticed methyl, replaced or unnoticed ethyle, replaced or unnoticed by N-spille, replaced or unnoticed by isopropil, replaced or unnoticed by the buttel, replaced or unnoticed by the fiction, replaced or unnoticed Tuesday-Butille and not visible or unnoticed tert-butyl. Most preferably, R2 is acetyl;

R4 выбирают из -CH2OH, -CH2OC(=O)Rc, -CH2NH2 и -CH₂NHProt^NH для соединений формулы I, IA, IB, IC, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IFb или IGb; и R4 выбирают из -CH2NH2 и CH2NHProt^NH для соединений формулы IE, IEa или IEb; где Rc является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный R_c выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R_c является метилом. Более предпочтительный R₄ выбирают из CH2OH и CH2NH2. Более предпочтительно, R4 может быть -CH2NH2. Наиболее предпочтительно, R4 является -CH2OH;R4 is selected from -CH2OH, -CH2OC(=O)Rc, -CH2NH2 and -CH ₂ NHProt ^NH for compounds of formula I, IA, IB, IC, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, IGa, Ib , IAb, IBb, ICb, IFb or IGb; and R4 is selected from -CH2NH2 and CH2NHProt ^NH for compounds of formula IE, IEa or IEb; where Rc is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. Especially the preferred R _C is selected from the replaced or unnoticed methyl, replaced or unnoticed ethyle, replaced or unnoticed by N-Propilia, replaced or unnoticed by isopropyl, replaced or unnoticed by the buttel, replaced or unnoticed by the same, replaced or unnoticed Tuesday-Butille and not visible or unnoticed tert-butyl. Most preferably, R _c is methyl. The more preferred R ₄ is selected from CH2OH and CH2NH2. More preferably, R4 may be -CH2NH2. Most preferably, R4 is -CH2OH;

и R1; R3; и R_b такие, как определены выше.and R1; R3; and R _b are as defined above.

Y является -NH-;Y is -NH-;

R4 выбирают из -CH2OH, -CH2OC(=O)Rc, -CH2NH2 и -CH₂NHProt^NH для соединений формулы I, IA, IB, IC, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IFb или IGb; и R4 выбирают из -CH2NH2 и -CH2NHProt^NH для соединений формулы IE, IEa или IEb; где Rc является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный Rc выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R_c является метилом. Более предпочтительный R4 выбирают из CH2OH и CH2NH2. Более предпочтительно, R4 может быть -CH2NH2. Наиболее предпочтительно, R4 является -CH2OH;R4 is selected from -CH2OH, -CH2OC(=O)Rc, -CH2NH2 and -CH ₂ NHProt ^NH for compounds of formula I, IA, IB, IC, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, IGa, Ib , IAb, IBb, ICb, IFb or IGb; and R4 is selected from -CH2NH2 and -CH2NHProt ^NH for compounds of formula IE, IEa or IEb; where Rc is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. A particularly preferred Rc is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted rubs -butyl. Most preferably, R _c is methyl. The more preferred R4 is selected from CH2OH and CH2NH2. More preferably, R4 may be -CH2NH2. Most preferably, R4 is -CH2OH;

и R1; R2; и R_a; такие, как определены выше.and R1; R2; and R _a ; such as defined above.

Y является -NH-;Y is -NH-;

R₁ является -OH;R ₁ is -OH;

R2 является -C(=O)R_a группой для соединений формулы I, IA, IB, IC, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb или IFb; и R₂ является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb; где R_a является замещенным или незамещенным C1-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный R_a выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R2 является ацетилом;R2 is a -C(=O)R _a group for compounds of formula I, IA, IB, IC, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb or IFb; and R ₂ is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb; where R _a is substituted or unsubstituted C1-C ₆ alkyl. Especially the preferred _RA is selected from the replaced or unnoticed methyl, replaced or unnoticed ethyle, replaced or unnoticed by N-spille, replaced or unnoticed by isopropil, replaced or unnoticed by the buttel, replaced or unnoticed by the fiction, replaced or unnoticed Tuesday-Butille and not visible or unnoticed tert-butyl. Most preferably, R2 is acetyl;

R3 является водородом или -ORb группой для соединений формулы I, IC, IE, IF, IG, Ia, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IEb, IFb или IGb; R3 является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; и R3 является -OR_b группой для соединений формулы IB, IBa или IBb; где R_b является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный R_b выбирают из замещенного илиR3 is hydrogen or an -ORb group for compounds of formula I, IC, IE, IF, IG, Ia, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IEb, IFb or IGb; R3 is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; and R3 is an -OR _b group for compounds of formula IB, IBa or IBb; where R _b is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. Particularly preferred R _b is selected from substituted or

- 16 046742 незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного нпропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Более предпочтительный R3 является водородом и метокси, где водород является наиболее предпочтительной R3 группой;- 16 046742 unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted npropyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl and substituted or unsubstituted tert -butyl. More preferred R3 is hydrogen and methoxy, where hydrogen is the most preferred R3 group;

и R₄; R_c; и Prot^{NH 1} такие, как определены выше.and R ₄ ; R _c ; and Prot ^{NH 1} are as defined above.

Y является -NH-;Y is -NH-;

R₁ является -OH;R ₁ is -OH;

R2 является -C(=O)R_a группой для соединений формулы I, IA, IB, IC, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb; где R_a является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный R_a выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R2 является ацетилом;R2 is a -C(=O)R _a group for compounds of formula I, IA, IB, IC, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb; where R _a is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. Especially the preferred _RA is selected from the replaced or unnoticed methyl, replaced or unnoticed ethyle, replaced or unnoticed by N-spille, replaced or unnoticed by isopropil, replaced or unnoticed by the buttel, replaced or unnoticed by the fiction, replaced or unnoticed Tuesday-Butille and not visible or unnoticed tert-butyl. Most preferably, R2 is acetyl;

R₄ выбирают из -CH₂OH, -CH₂OC(=O)R_c, -CH₂NH₂ и -CH₂NHProt^NH для соединений формулы I, IA, IB, IC, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IFb или IGb; и R4 выбирают u3-Ch2NH2 и -CH2NHProt^NH для соединений формулы IE, IEa или IEb; где Rc является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный Rc выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R_c является метилом. Более предпочтительный R₄ выбирают из CH2OH и CH2NH2. Более предпочтительно, R4 может быть -CH2NH2. Наиболее предпочтительно, R₄ является -CH₂OH;R ₄ is selected from -CH ₂ OH, -CH ₂ OC(=O)R _c , -CH ₂ NH ₂ and -CH ₂ NHProt ^NH for compounds of formula I, IA, IB, IC, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IFb or IGb; and R4 select u3-Ch2NH2 and -CH2NHProt ^NH for compounds of formula IE, IEa or IEb; where Rc is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. A particularly preferred Rc is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted rubs -butyl. Most preferably, R _c is methyl. The more preferred R ₄ is selected from CH2OH and CH2NH2. More preferably, R4 may be -CH2NH2. Most preferably, R ₄ is -CH ₂ OH;

и R3; и R_b такие, как определены выше.and R3; and R _b are as defined above.

Y является -NH-;Y is -NH-;

R2 является -C(=O)R_a группой для соединений формулы I, IA, IB, IC, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb; где R_a является замещенным или незамещенным C1-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный R_a выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R₂ является ацетилом;R2 is a -C(=O)R _a group for compounds of formula I, IA, IB, IC, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb; where R _a is substituted or unsubstituted C1-C ₆ alkyl. Especially the preferred _RA is selected from the replaced or unnoticed methyl, replaced or unnoticed ethyle, replaced or unnoticed by N-spille, replaced or unnoticed by isopropil, replaced or unnoticed by the buttel, replaced or unnoticed by the fiction, replaced or unnoticed Tuesday-Butille and not visible or unnoticed tert-butyl. Most preferably, R ₂ is acetyl;

R₃ является водородом или -OR_b группой для соединений формулы I, IC, IE, IF, IG, Ia, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IEb, IFb или IGb; R₃ является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; и R₃является -ORb группой для соединений формулы IB, IBa или IBb; где Rb является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный Rb выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного нпропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Более предпочтительный R3 является водородом и метокси, где водород является наиболее предпочтительной R₃ группой;R ₃ is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula I, IC, IE, IF, IG, Ia, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IEb, IFb or IGb; R ₃ is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; and R ₃ is an -ORb group for compounds of formula IB, IBa or IBb; where Rb is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. Particularly preferred Rb is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted npropyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted tre t-butyl . More preferred R3 is hydrogen and methoxy, where hydrogen is the most preferred _R3 group;

R₄ выбирают из -CH₂OH, -CH₂OC(=O)R_c, -CH₂NH₂ и -CH₂NHProt^NH для соединений формулы I, IA, IB, IC, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IFb или IGb; и R4 выбирают из -CH2NH2 и -CH2NHProt^NH для соединений формулы IE, IEa или IEb; где Rc является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный Rc выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R_c является метилом. Более предпочтительный R4 выбирают из CH2OH и CH2NH2. Более предпочтительно, R4 может быть -CH2NH2. Наиболее предпочтительно, R4 является -CH2OH;R ₄ is selected from -CH ₂ OH, -CH ₂ OC(=O)R _c , -CH ₂ NH ₂ and -CH ₂ NHProt ^NH for compounds of formula I, IA, IB, IC, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IFb or IGb; and R4 is selected from -CH2NH2 and -CH2NHProt ^NH for compounds of formula IE, IEa or IEb; where Rc is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. A particularly preferred Rc is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted rubs -butyl. Most preferably, R _c is methyl. The more preferred R4 is selected from CH2OH and CH2NH2. More preferably, R4 may be -CH2NH2. Most preferably, R4 is -CH2OH;

и R1 такой, как определен выше.and R1 is as defined above.

- 17 046742- 17 046742

Y является -NH-;Y is -NH-;

R₁ является -OH;R ₁ is -OH;

R2 является -C(=O)R_a группой для соединений формулы I, IA, IB, IC, IE, IF, la, lAa, IBa, ICa, lEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb; где R_a является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный Ra выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R2 является ацетилом;R2 is a -C(=O)R _a group for compounds of formula I, IA, IB, IC, IE, IF, la, lAa, IBa, ICa, lEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb; where R _a is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. Particularly preferred Ra is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl and substituted or unsubstituted tre t -butyl. Most preferably, R2 is acetyl;

R3 является водородом или -OR_b группой для соединений формулы I, IC, IE, IF, IG, Ia, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IEb, IFb или IGb; R3 является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; и R3 является -ORb группой для соединений формулы IB, IBa или IBb; где Rb является замещенным или незамещенным C1-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный R_b выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного нпропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Более предпочтительный R3 является водородом и метокси, где водород является наиболее предпочтительной R₃ группой;R3 is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula I, IC, IE, IF, IG, Ia, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IEb, IFb or IGb; R3 is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; and R3 is an -ORb group for compounds of formula IB, IBa or IBb; where Rb is substituted or unsubstituted C1-C ₆ alkyl. Particularly preferred R _b is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted npropyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted tre t- butyl. More preferred R3 is hydrogen and methoxy, where hydrogen is the most preferred _R3 group;

R₄ выбирают из -CH2OH, -CH2OC(=O)Rc, -CH2NH2 и -CH2NHProtNH для соединений формулы I, IA, IB, IC, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IFb или IGb; и R₄ выбирают из -CH2NH2 и CHNHProtNH для соединений формулы IE, IEa или IEb; где Rc является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный R_c выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R_c является метилом. Более предпочтительный R₄ выбирают из CH2OH и CH2NH2. Более предпочтительно, R4 может быть -CH2NH2. Наиболее предпочтительно, R₄ является -CH₂OH.R ₄ is selected from -CH2OH, -CH2OC(=O)Rc, -CH2NH2 and -CH2NHProtNH for compounds of formula I, IA, IB, IC, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, IGa, Ib, IAb , IBb, ICb, IFb or IGb; and R ₄ is selected from -CH2NH2 and CHNHProtNH for compounds of formula IE, IEa or IEb; where Rc is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. Especially the preferred R _C is selected from the replaced or unnoticed methyl, replaced or unnoticed ethyle, replaced or unnoticed by N-Propilia, replaced or unnoticed by isopropyl, replaced or unnoticed by the buttel, replaced or unnoticed by the same, replaced or unnoticed Tuesday-Butille and not visible or unnoticed tert-butyl. Most preferably, R _c is methyl. The more preferred R ₄ is selected from CH2OH and CH2NH2. More preferably, R4 may be -CH2NH2. Most preferably, R ₄ is -CH ₂ OH.

Другие предпочтительные соединения включают соединения общей формулы I, IA, IB, ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb, IFb и IGb, где:Other preferred compounds include those of the general formula I, IA, IB, ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb, IFb and IGb, where :

Y является -O-;Y is -O-;

R1 является -OH;R1 is -OH;

Y является -O-;Y is -O-;

R₂ является -C(=O)R_a группой для соединений формулы I, IA, IB, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb или IFb; и R₂ является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb; где R_a является замещенным или незамещенным C₁-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный R_a выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R2 является ацетилом;R ₂ is the -C(=O)R _a group for compounds of formula I, IA, IB, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb or IFb ; and R ₂ is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb; where R _a is substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl. Especially the preferred _RA is selected from the replaced or unnoticed methyl, replaced or unnoticed ethyle, replaced or unnoticed by N-spille, replaced or unnoticed by isopropil, replaced or unnoticed by the buttel, replaced or unnoticed by the fiction, replaced or unnoticed Tuesday-Butille and not visible or unnoticed tert-butyl. Most preferably, R2 is acetyl;

и R1; R3; R4; R_b; Rc; и ProtNH такие, как определены выше.and R1; R3; R4; R _b ; Rc; and ProtNH are as defined above.

Y является -O-;Y is -O-;

R₃ является водородом или -OR_b группой для соединений формулы I, ID, IE, IF, IG, Ia, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IDb, IEb, IFb или IGb; R₃ является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; и R₃является -OR_b группой для соединений формулы IB, IBa или IBb; где R_b является замещенным или незамещенным C₁-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный R_b выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного нпропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Более предпочтительный R3 является водородом и метокси, где водород является наиболее предпочтительной R3 группой;R ₃ is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula I, ID, IE, IF, IG, Ia, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IDb, IEb, IFb or IGb; R ₃ is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; and R ₃ is an -OR _b group for compounds of formula IB, IBa or IBb; where R _b is substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl. Particularly preferred R _b is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted npropyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted tre t- butyl. More preferred R3 is hydrogen and methoxy, where hydrogen is the most preferred R3 group;

и R1; R2; R4; R_a; Rc; и ProtNH такие, как определены выше.and R1; R2; R4; R _a ; Rc; and ProtNH are as defined above.

Y является -O-;Y is -O-;

- 18 046742- 18 046742

R4 выбирают из -CH2OH, -CH2OC(=O)Rc, -CH2NH2 и -CH2NHProt^NH для соединений формулы I, IA, IB, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, IDb, IFb или IGb; и R₄ выбирают из -CH2NH2 и -CHNHProtNH для соединений формулы IE, IEa или IEb; где Rc является замещенным или незамещенным C₁-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный R_c выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R_c является метилом. Более предпочтительный R₄ выбирают из -CH2OH и CH2NH2. Более предпочтительно, R4 может быть -CH2NH2. Наиболее предпочтительно, R4 является -CH2OH;R4 is selected from -CH2OH, -CH2OC(=O)Rc, -CH2NH2 and -CH2NHProt ^NH for compounds of formula I, IA, IB, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb , IBb, IDb, IFb or IGb; and R ₄ is selected from -CH2NH2 and -CHNHProtNH for compounds of formula IE, IEa or IEb; where Rc is substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl. Especially the preferred R _C is selected from the replaced or unnoticed methyl, replaced or unnoticed ethyle, replaced or unnoticed by N-Propilia, replaced or unnoticed by isopropyl, replaced or unnoticed by the buttel, replaced or unnoticed by the same, replaced or unnoticed Tuesday-Butille and not visible or unnoticed tert-butyl. Most preferably, R _c is methyl. The more preferred R ₄ is selected from -CH2OH and CH2NH2. More preferably, R4 may be -CH2NH2. Most preferably, R4 is -CH2OH;

и R1; R2; R3; R_a; и R_b такие, как определены выше.and R1; R2; R3; R _a ; and R _b are as defined above.

Y является -O-;Y is -O-;

R₁ является -OH;R ₁ is -OH;

R2 является -C(=O)R_a группой для соединений формулы I, IA, IB, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb; где R_a является замещенным или незамещенным C1-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный R_a выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R2 является ацетилом;R2 is a -C(=O)R _a group for compounds of formula I, IA, IB, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb; where R _a is substituted or unsubstituted C1-C ₆ alkyl. Especially the preferred _RA is selected from the replaced or unnoticed methyl, replaced or unnoticed ethyle, replaced or unnoticed by N-spille, replaced or unnoticed by isopropil, replaced or unnoticed by the buttel, replaced or unnoticed by the fiction, replaced or unnoticed Tuesday-Butille and not visible or unnoticed tert-butyl. Most preferably, R2 is acetyl;

Y является -O-;Y is -O-;

R₁ является -OH;R ₁ is -OH;

R₃ является водородом или -OR_b группой для соединений формулы I, ID, IE, IF, IG, Ia, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IDb, IEb, IFb или IGb; R₃ является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; и R₃является -OR_b группой для соединений формулы IB, IBa или IBb; где R_b является замещенным или незамещенным C1-Ce алкилом. Особенно предпочтительный R_b выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного нпропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Более предпочтительный R3 является водородом и метокси, где водород является наиболее предпочтительной R3 группой;R ₃ is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula I, ID, IE, IF, IG, Ia, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IDb, IEb, IFb or IGb; R ₃ is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; and R ₃ is an -OR _b group for compounds of formula IB, IBa or IBb; where R _b is substituted or unsubstituted C1-Ce alkyl. Particularly preferred R _b is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted npropyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted tre t- butyl. More preferred R3 is hydrogen and methoxy, where hydrogen is the most preferred R3 group;

и R2; R4; R_a; Rc; и ProtNH такие, как определены выше.and R2; R4; R _a ; Rc; and ProtNH are as defined above.

Y является -O-;Y is -O-;

R₁ является -OH;R ₁ is -OH;

R4 выбирают из -CH2OH, -CH₂OC(=O)R_c, -CH2NH2 и -CH₂NHProtN^H для соединений формулы I, IA, IB, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, IDb, IFb или IGb; и R4 выбирают из -CH2NH2 и -CH2NHProtN^H для соединений формулы IE, IEa или IEb; где Rc является замещенным или незамещенным C1-Ce алкилом. Особенно предпочтительный Rc выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, Rc является метилом. Более предпочтительный R4 выбирают из -CH₂OH и CH₂NH₂. Более предпочтительно, R₄ может быть -CH₂NH₂. Наиболее предпочтительно, R₄ является -CH₂OH;R4 is selected from -CH2OH, -CH ₂ OC(=O)R _c , -CH2NH2 and -CH ₂ NHProtN ^H for compounds of formula I, IA, IB, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, IDb, IFb or IGb; and R4 is selected from -CH2NH2 and ^-CH2NHProtNH for compounds of formula IE, IEa or IEb; where Rc is substituted or unsubstituted C1-Ce alkyl. A particularly preferred Rc is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted rubs -butyl. Most preferably, Rc is methyl. The more preferred R4 is selected from -CH ₂ OH and CH ₂ NH ₂ . More preferably, R ₄ may be -CH ₂ NH ₂ . Most preferably, R ₄ is -CH ₂ OH;

и R2; R3; R_a; и R_b такие, как определены выше.and R2; R3; R _a ; and R _b are as defined above.

Y является -O-;Y is -O-;

R2 является -C(=O)R_a группой для соединений формулы I, IA, IB, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb; где R_a является замещенным или незамещенным C1-Ce алкилом. Особенно предпочтительный R_a выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенногоR2 is a -C(=O)R _a group for compounds of formula I, IA, IB, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb; where R _a is substituted or unsubstituted C1-Ce alkyl. A particularly preferred R _a is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted

- 19 046742 втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R2 является ацетилом;- 19 046742 sec-butyl and substituted or unsubstituted tert-butyl. Most preferably, R2 is acetyl;

R3 является водородом или -ORb группой для соединений формулы I, ID, IE, IF, IG, Ia, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IDb, IEb, IFb или IGb; R3 является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; и R3 является -ORb группой для соединений формулы IB, IBa или IBb; где Rb является замещенным или незамещенным C₁-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный Rb выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного нпропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Более предпочтительный R3 является водородом и метокси, где водород является наиболее предпочтительной R3 группой;R3 is hydrogen or an -ORb group for compounds of formula I, ID, IE, IF, IG, Ia, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IDb, IEb, IFb or IGb; R3 is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; and R3 is an -ORb group for compounds of formula IB, IBa or IBb; where Rb is substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl. Particularly preferred Rb is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted npropyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted tre t-butyl . More preferred R3 is hydrogen and methoxy, where hydrogen is the most preferred R3 group;

и R1; Ид; Rc; и Prot^NH такие, как определены выше.and R1; Eid; Rc; and Prot ^NH are as defined above.

Y является -O-;Y is -O-;

R2 является -C(=O)R_a группой для соединений формулы I, IA, IB, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb или IFb; и R₂ является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb; где R_a является замещенным или незамещенным C1-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный Ra выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R2 является ацетилом;R2 is a -C(=O)R _a group for compounds of formula I, IA, IB, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb or IFb; and R ₂ is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb; where R _a is substituted or unsubstituted C1-C ₆ alkyl. Particularly preferred Ra is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl and substituted or unsubstituted tre t -butyl. Most preferably, R2 is acetyl;

R4 выбирают из -CH2OH, -CH₂OC(=O)Rc, -CH2NH2 и -CH₂NHProt^NH для соединений формулы I, IA, IB, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, IDb, IFb или IGb; и R4 выбирают из -CH2NH2 и -CH2NHProt^NH для соединений формулы IE, IEa или IEb; где Rc является замещенным или незамещенным C1-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный Rc выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R_c является метилом. Более предпочтительный R₄ выбирают из -CH2OH и -CH2NH2. Более предпочтительно, R4 может быть -CH2NH2. Наиболее предпочтительно, R4 является -CH2OH;R4 is selected from -CH2OH, -CH ₂ OC(=O)Rc, -CH2NH2 and -CH ₂ NHProt ^NH for compounds of formula I, IA, IB, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, IGa , Ib, IAb, IBb, IDb, IFb or IGb; and R4 is selected from -CH2NH2 and -CH2NHProt ^NH for compounds of formula IE, IEa or IEb; where Rc is substituted or unsubstituted C1-C ₆ alkyl. A particularly preferred Rc is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted rubs -butyl. Most preferably, R _c is methyl. The more preferred R ₄ is selected from -CH2OH and -CH2NH2. More preferably, R4 may be -CH2NH2. Most preferably, R4 is -CH2OH;

и R1; R3; и Rb такие, как определены выше.and R1; R3; and Rb are as defined above.

Y является -O-;Y is -O-;

R₃ является водородом или -OR_b группой для соединений формулы I, ID, IE, IF, IG, Ia, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IDb, IEb, IFb или IGb; R₃ является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; и R₃является -OR_b группой для соединений формулы IB, IBa или IBb; где R_b является замещенным или незамещенным C1-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный Rb выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного нпропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Более предпочтительный R3 является водородом и метокси, где водород является наиболее предпочтительной R3 группой;R ₃ is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula I, ID, IE, IF, IG, Ia, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IDb, IEb, IFb or IGb; R ₃ is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; and R ₃ is an -OR _b group for compounds of formula IB, IBa or IBb; where R _b is substituted or unsubstituted C1-C ₆ alkyl. Particularly preferred Rb is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted npropyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted tre t-butyl . More preferred R3 is hydrogen and methoxy, where hydrogen is the most preferred R3 group;

R4 выбирают из -CH2OH, -CH2OC(=O)Rc, -CH2NH2 и -CH2NHProt^NH для соединений формулы I, IA, IB, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, IDb, IFb или IGb; и R4 выбирают из -CH2NH2 и -CH2NHProt^NH для соединений формулы IE, IEa или IEb; где R_c является замещенным или незамещенным C1-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный Rc выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R_c является метилом. Более предпочтительный R4 выбирают из -CH2OH и -CH2NH2. Более предпочтительно, R4 может быть -CH2NH2. Наиболее предпочтительно, R4 является -CH2OH;R4 is selected from -CH2OH, -CH2OC(=O)Rc, -CH2NH2 and -CH2NHProt ^NH for compounds of formula I, IA, IB, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb , IBb, IDb, IFb or IGb; and R4 is selected from -CH2NH2 and -CH2NHProt ^NH for compounds of formula IE, IEa or IEb; where R _c is substituted or unsubstituted C1-C ₆ alkyl. A particularly preferred Rc is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted rubs -butyl. Most preferably, R _c is methyl. The more preferred R4 is selected from -CH2OH and -CH2NH2. More preferably, R4 may be -CH2NH2. Most preferably, R4 is -CH2OH;

и R1; R2; и Ra; такие, как определены выше.and R1; R2; and Ra; such as defined above.

Y является -O-;Y is -O-;

R₁ является -OH;R ₁ is -OH;

R₂ является -C(=O)R_a группой для соединений формулы I, IA, IB, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa,R ₂ is the -C(=O)R _a group for compounds of formula I, IA, IB, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, Ida, IEa,

- 20 046742- 20 046742

IFa, Ib, lAb, IBb, IDb, lEb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb; где R_a является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный R_a выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R2 является ацетилом;IFa, Ib, lAb, IBb, IDb, lEb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb; where R _a is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. Especially the preferred _RA is selected from the replaced or unnoticed methyl, replaced or unnoticed ethyle, replaced or unnoticed by N-spille, replaced or unnoticed by isopropil, replaced or unnoticed by the buttel, replaced or unnoticed by the fiction, replaced or unnoticed Tuesday-Butille and not visible or unnoticed tert-butyl. Most preferably, R2 is acetyl;

R3 является водородом или -OR_b группой для соединений формулы I, ID, IE, IF, IG, Ia, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IDb, IEb, IFb или IGb; R3 является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; и R3 является -ORb группой для соединений формулы IB, IBa или IBb; где Rb является замещенным или незамещенным C1-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный R_b выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного нпропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Более предпочтительный R3 является водородом и метокси, где водород является наиболее предпочтительной R₃ группой;R3 is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula I, ID, IE, IF, IG, Ia, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IDb, IEb, IFb or IGb; R3 is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; and R3 is an -ORb group for compounds of formula IB, IBa or IBb; where Rb is substituted or unsubstituted C1-C ₆ alkyl. Particularly preferred R _b is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted npropyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted tre t- butyl. More preferred R3 is hydrogen and methoxy, where hydrogen is the most preferred _R3 group;

и R₄; Rc; и ProtNH такие, как определены выше.and R ₄ ; Rc; and ProtNH are as defined above.

Y является -O-;Y is -O-;

R1 является -OH;R1 is -OH;

R2 является -C(=O)R_a группой для соединений формулы I, IA, IB, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb; где R_a является замещенным или незамещенным C1-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный R_a выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R₂ является ацетилом;R2 is a -C(=O)R _a group for compounds of formula I, IA, IB, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb; where R _a is substituted or unsubstituted C1-C ₆ alkyl. Especially the preferred _RA is selected from the replaced or unnoticed methyl, replaced or unnoticed by ethyle, replaced or unnoticed by N-spille, replaced or unnoticed by isopropyl, replaced or unnoticed by the buttel, replaced or unnoticed by the same, replaced or unnoticed Tuesday-Butille and noticed or unnoticed tert-butyl. Most preferably, R ₂ is acetyl;

R4 выбирают из -CH2OH, -CH₂OC(=O)Rc, -CH2NH2 и -CH₂NHProt^NH для соединений формулы I, IA, IB, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, IDb, IFb или IGb; и R4 выбирают из -CH2NH2 и -CH2NHProt^NH для соединений формулы IE, IEa или IEb; где Rc является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный Rc выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, Rc является метилом. Более предпочтительный R₄ выбирают из -CH2OH и -CH2NH2. Более предпочтительно, R4 может быть -CH2NH2. Наиболее предпочтительно, R₄ является -CH₂OH;R4 is selected from -CH2OH, -CH ₂ OC(=O)Rc, -CH2NH2 and -CH ₂ NHProt ^NH for compounds of formula I, IA, IB, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, IGa , Ib, IAb, IBb, IDb, IFb or IGb; and R4 is selected from -CH2NH2 and -CH2NHProt ^NH for compounds of formula IE, IEa or IEb; where Rc is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. A particularly preferred Rc is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted rubs -butyl. Most preferably, Rc is methyl. The more preferred R ₄ is selected from -CH2OH and -CH2NH2. More preferably, R4 may be -CH2NH2. Most preferably, R ₄ is -CH ₂ OH;

и R₃; и R_b такие, как определены выше.and R ₃ ; and R _b are as defined above.

Y является -O-;Y is -O-;

R2 является -C(=O)Ra группой для соединений формулы I, IA, IB, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb; где Ra является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный Ra выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R₂ является ацетилом;R2 is a -C(=O)Ra group for compounds of formula I, IA, IB, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb; where Ra is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. Particularly preferred Ra is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl and substituted or unsubstituted tre t -butyl. Most preferably, R ₂ is acetyl;

R₃ является водородом или -OR_b группой для соединений формулы I, ID, IE, IF, IG, Ia, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IDb, IEb, IFb или IGb; R₃ является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; и R₃является -OR_b группой для соединений формулы IB, IBa или IBb; где R_b является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный Rb выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного нпропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Более предпочтительный R3 является водородом и метокси, где водород является наиболее предпочтительной R3 группой;R ₃ is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula I, ID, IE, IF, IG, Ia, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IDb, IEb, IFb or IGb; R ₃ is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; and R ₃ is an -OR _b group for compounds of formula IB, IBa or IBb; where R _b is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. Particularly preferred Rb is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted npropyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted tre t-butyl . More preferred R3 is hydrogen and methoxy, where hydrogen is the most preferred R3 group;

R4 выбирают из -CH2OH, -CH2OC(=O)Rc, -CH2NH2 и -CH₂NHPiOt’^{N 1} для соединений формулы I, IA, IB, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, IDb, IFb или IGb; и R₄ выбирают из -CH₂NH₂ иR4 is selected from -CH2OH, -CH2OC(=O)Rc, -CH2NH2 and -CH ₂ NHPiOt' ^{N 1} for compounds of formula I, IA, IB, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, IGa , Ib, IAb, IBb, IDb, IFb or IGb; and R ₄ is selected from -CH ₂ NH ₂ and

- 21 046742- 21 046742

-CHNHProtNH для соединений формулы IE, IEa или IEb; где Rc является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный R_c выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R_c является метилом. Более предпочтительный R₄ выбирают из -CH2OH и -CH2NH2. Более предпочтительно, R₄ может быть -CH2NH2. Наиболее предпочтительно, R4 является -CH2OH;-CHNHProtNH for compounds of formula IE, IEa or IEb; where Rc is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. Especially the preferred R _C is selected from the replaced or unnoticed methyl, replaced or unnoticed ethyle, replaced or unnoticed by N-Propilia, replaced or unnoticed by isopropyl, replaced or unnoticed by the buttel, replaced or unnoticed by the same, replaced or unnoticed Tuesday-Butille and not visible or unnoticed tert-butyl. Most preferably, R _c is methyl. The more preferred R ₄ is selected from -CH2OH and -CH2NH2. More preferably, R ₄ may be -CH2NH2. Most preferably, R4 is -CH2OH;

Y является -O-;Y is -O-;

R1 является -OH;R1 is -OH;

R2 является -C(=O)R_a группой для соединений формулы I, IA, IB, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb; где R_a является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный Ra выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R₂ является ацетилом;R2 is a -C(=O)R _a group for compounds of formula I, IA, IB, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb; where R _a is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. Particularly preferred Ra is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl and substituted or unsubstituted tre t -butyl. Most preferably, R ₂ is acetyl;

R3 является водородом или -OR_b группой для соединений формулы I, ID, IE, IF, IG, Ia, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IDb, IEb, IFb или IGb; R3 является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; и R3 является -ORb группой для соединений формулы IB, IBa или IBb; где Rb является замещенным или незамещенным C1-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный R_b выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного нпропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Более предпочтительный R₃ является водородом и метокси, где водород является наиболее предпочтительной R₃ группой;R3 is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula I, ID, IE, IF, IG, Ia, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IDb, IEb, IFb or IGb; R3 is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; and R3 is an -ORb group for compounds of formula IB, IBa or IBb; where Rb is substituted or unsubstituted C1-C ₆ alkyl. Particularly preferred R _b is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted npropyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted tre t- butyl. More preferred R ₃ is hydrogen and methoxy, where hydrogen is the most preferred R ₃ group;

R4 выбирают из -CH2OH, -CH2OC(=O)R_c, -CH2NH2 и -CH₂NHProtNH для соединений формулы I, IA, IB, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, IDb, IFb или IGb; и R4 выбирают из -CH2NH2 и -CHNHProtNH для соединений формулы IE, IEa или IEb; где Rc является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный Rc выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R_c является метилом. Более предпочтительный R₄ выбирают из -CH₂OH и -CH₂NH₂. Более предпочтительно, R₄ может быть -CH₂NH₂. Наиболее предпочтительно, R₄ является -CH₂OH.R4 is selected from -CH2OH, -CH2OC(=O)R _c , -CH2NH2 and -CH ₂ NHProtNH for compounds of formula I, IA, IB, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, IGa, Ib , IAb, IBb, IDb, IFb or IGb; and R4 is selected from -CH2NH2 and -CHNHProtNH for compounds of formula IE, IEa or IEb; where Rc is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. A particularly preferred Rc is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted rubs -butyl. Most preferably, R _c is methyl. More preferred R ₄ is selected from -CH ₂ OH and -CH ₂ NH ₂ . More preferably, R ₄ may be -CH ₂ NH ₂ . Most preferably, R ₄ is -CH ₂ OH.

Другие предпочтительные соединения включают соединения общей формулы Ic, IAc, IBc, IDc и IGc где:Other preferred compounds include those of the general formula Ic, IAc, IBc, IDc and IGc where:

R1 является -OH;R1 is -OH;

и R2; R3; Ra и R_b такие, как определены выше.and R2; R3; Ra and R _b are as defined above.

Другие предпочтительные соединения включают соединения общей формулы Ic, IAc, IBc, IDc, IFc и IGc, где:Other preferred compounds include those of the general formula Ic, IAc, IBc, IDc, IFc and IGc, where:

R2 является -C(=O)Ra группой для соединений формулы Ic, IAc, IBc, IDc или IFc; и R2 является ацетилом для соединений формулы IGc; где Ra является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный Ra выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R₂ является ацетилом;R2 is a -C(=O)Ra group for compounds of formula Ic, IAc, IBc, IDc or IFc; and R2 is acetyl for compounds of formula IGc; where Ra is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. Particularly preferred Ra is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl and substituted or unsubstituted tre t -butyl. Most preferably, R ₂ is acetyl;

и R1; R3; R_b такие, как определены выше.and R1; R3; R _b are as defined above.

R3 является водородом или -OR_b группой для соединений формулы Ic, IDc, IFc или IGc; R3 является водородом для соединений формулы IAc; и R3 является -ORb группой для соединений формулы IBc; где R_b является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом. Особенно предпочтительный R_b выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенногоR3 is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula Ic, IDc, IFc or IGc; R3 is hydrogen for compounds of formula IAc; and R3 is an -ORb group for compounds of formula IBc; where R _b is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl. A particularly preferred R _b is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted

- 22 046742 втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Более предпочтительный R3 является водородом и метокси, где водород является наиболее предпочтительной R3 группой;- 22 046742 sec-butyl and substituted or unsubstituted tert-butyl. More preferred R3 is hydrogen and methoxy, where hydrogen is the most preferred R3 group;

и R1; R2; и Ra такие, как определены выше.and R1; R2; and Ra are as defined above.

R1 является -OH;R1 is -OH;

R2 является -C(=O)R_a группой для соединений формулы Ic, IAc, IBc, IDc или IFc; и R2 является ацетилом для соединений формулы IGc; где R_a является замещенным или незамещенным C₁-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный R_a выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R2 является ацетилом;R2 is a -C(=O)R _a group for compounds of formula Ic, IAc, IBc, IDc or IFc; and R2 is acetyl for compounds of formula IGc; where R _a is substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl. Especially the preferred _RA is selected from the replaced or unnoticed methyl, replaced or unnoticed ethyle, replaced or unnoticed by N-spille, replaced or unnoticed by isopropil, replaced or unnoticed by the buttel, replaced or unnoticed by the fiction, replaced or unnoticed Tuesday-Butille and not visible or unnoticed tert-butyl. Most preferably, R2 is acetyl;

и R3; и Rb такие, как определены выше.and R3; and Rb are as defined above.

R₁ является -OH;R ₁ is -OH;

R₃ является водородом или -OR_b группой для соединений формулы Ic, IDc, IFc или IGc; R₃ является водородом для соединений формулы IAc; и R₃ является -OR_b группой для соединений формулы IBc; где Rb является замещенным или незамещенным C1-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный Rb выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Более предпочтительный R3 является водородом и метокси, где водород является наиболее предпочтительной R3 группой;R ₃ is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula Ic, IDc, IFc or IGc; R ₃ is hydrogen for compounds of formula IAc; and R ₃ is an -OR _b group for compounds of formula IBc; where Rb is substituted or unsubstituted C1-C ₆ alkyl. Particularly preferred Rb is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted rubs -butyl. More preferred R3 is hydrogen and methoxy, where hydrogen is the most preferred R3 group;

и R2; и R_a такие, как определены выше.and R2; and R _a are as defined above.

R2 является -C(=O)Ra группой для соединений формулы Ic, IAc, IBc, IDc или IFc; и R2 является ацетилом для соединений формулы IGc; где Ra является замещенным или незамещенным C1-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный Ra выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R2 является ацетилом;R2 is a -C(=O)Ra group for compounds of formula Ic, IAc, IBc, IDc or IFc; and R2 is acetyl for compounds of formula IGc; where Ra is substituted or unsubstituted C1-C ₆ alkyl. Particularly preferred Ra is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl and substituted or unsubstituted tre t -butyl. Most preferably, R2 is acetyl;

R3 является водородом или -ORb группой для соединений формулы Ic, IDc, IFc или IGc; R3 является водородом для соединений формулы IAc; и R3 является -ORb группой для соединений формулы IBc; где Rb является замещенным или незамещенным C1-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный Rb выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Более предпочтительный R₃ является водородом и метокси, где водород является наиболее предпочтительной R3 группой;R3 is hydrogen or an -ORb group for compounds of formula Ic, IDc, IFc or IGc; R3 is hydrogen for compounds of formula IAc; and R3 is an -ORb group for compounds of formula IBc; where Rb is substituted or unsubstituted C1-C ₆ alkyl. Particularly preferred Rb is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted rubs -butyl. More preferred R ₃ is hydrogen and methoxy, where hydrogen is the most preferred R 3 group;

R1 является -OH;R1 is -OH;

R2 является -C(=O)Ra группой для соединений формулы Ic, IAc, IBc, IDc или IFc; и R2 является ацетилом для соединений формулы IGc; где Ra является замещенным или незамещенным C1-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный Ra выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R₂ является ацетилом;R2 is a -C(=O)Ra group for compounds of formula Ic, IAc, IBc, IDc or IFc; and R2 is acetyl for compounds of formula IGc; where Ra is substituted or unsubstituted C1-C ₆ alkyl. Particularly preferred Ra is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl and substituted or unsubstituted tre t -butyl. Most preferably, R ₂ is acetyl;

R3 является водородом или -ORb группой для соединений формулы Ic, IDc, IFc или IGc; R3 является водородом для соединений формулы IAc; и R3 является -ORb группой для соединений формулы IBc; где Rb является замещенным или незамещенным C1-Ce алкилом. Особенно предпочтительный Rb выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Более предпочтительный R₃ является водородом и метокси, где водород является наиболее предпочтительной R₃ группой.R3 is hydrogen or an -ORb group for compounds of formula Ic, IDc, IFc or IGc; R3 is hydrogen for compounds of formula IAc; and R3 is an -ORb group for compounds of formula IBc; where Rb is substituted or unsubstituted C1-Ce alkyl. Particularly preferred Rb is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted rubs -butyl. More preferred R ₃ is hydrogen and methoxy, where hydrogen is the most preferred R ₃ group.

- 23 046742- 23 046742

Следующие предпочтительные заместители (где позволено возможными группами заместителей) применяют для соединений формулы I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb, Ic, IAc, IBc, IDc, IFc и IGc:The following preferred substituents (where permitted by possible substituent groups) are used for compounds of formula I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb, Ic, IAc, IBc, IDc, IFc and IGc:

В соединениях настоящего изобретения, особенно предпочтительный R₁ является -OH.In the compounds of the present invention, a particularly preferred R ₁ is -OH.

В соединениях настоящего изобретения, особенно предпочтительный R2 является -C(=O)R_aгруппой, где Ra является замещенным или незамещенным C₁-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный Ra выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, R2 является ацетилом.In the compounds of the present invention, a particularly preferred R2 is a -C(=O)R _a group, where Ra is a substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl. Particularly preferred Ra is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl and substituted or unsubstituted tre t -butyl. Most preferably, R2 is acetyl.

В соединениях настоящего изобретения, особенно предпочтительный R3 является водородом или -OR_b группой, где R_b является замещенным или незамещенным C₁-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный R_b выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Более предпочтительный R₃ является водородом и метокси, где водород является наиболее предпочтительной R₃ группой.In the compounds of the present invention, a particularly preferred R3 is hydrogen or an -OR _b group, where R _b is a substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl. Especially the preferred R _B is selected from the replaced or unnoticed methyl, replaced or unnoticed ethyle, replaced or unnoticed by N-spille, replaced or unnoticed by isopropyl, replaced or unnoticed by the buttel, replaced or unnoticed by the same, replaced or unnoticed Tuesday-Butille and noticed or unnoticed tert-butyl. More preferred R ₃ is hydrogen and methoxy, where hydrogen is the most preferred R ₃ group.

В соединениях настоящего изобретения, особенно предпочтительный R₄ выбирают из H, -CH2OH, CH2OC(=O)Rc, -CH2NH2 и -CH₂NHProtNH, где Rc является замещенным или незамещенным C₁-C₆алкилом. Особенно предпочтительный Rc выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, Rc является метилом. Более предпочтительный R₄ выбирают из H, CH₂OH и CH₂NH₂. Наиболее предпочтительно, R₄ является -CH₂OH.In the compounds of the present invention, a particularly preferred R ₄ is selected from H, -CH2OH, CH2OC(=O)Rc, -CH2NH2 and -CH ₂ NHProtNH, wherein Rc is substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl. A particularly preferred Rc is selected from substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl, and substituted or unsubstituted rubs -butyl. Most preferably, Rc is methyl. More preferred R ₄ is selected from H, CH ₂ OH and CH ₂ NH ₂ . Most preferably, R ₄ is -CH ₂ OH.

В соединениях общей формулы I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb и IGb особенно предпочтительный R₄ выбирают из -CH₂OH, -CH₂OC(=O)R_c, -CH2NH2 и -CH₂NHProtNH для соединений формулы I, IA, IB, IC, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IFb или IGb; и R₄ выбирают из -CH2NH2 и -CH₂NHProt^NH для соединений формулы IE, IEa или IEb; где Rc является замещенным или незамещенным C₁-C₆ алкилом. Особенно предпочтительный Rc является замещенным или незамещенным метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила, замещенного или незамещенного втор-бутила и замещенного или незамещенного трет-бутила. Наиболее предпочтительно, Rc является метилом. Более предпочтительный R4 выбирают из CH2OH и CH2NH2. Наиболее предпочтительно, R₄ является -CH₂OH.In compounds of general formula I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb and IGb particularly preferred R ₄ is selected from -CH ₂ OH, -CH ₂ OC(=O)R _c , -CH2NH2 and -CH ₂ NHProtNH for compounds of formula I, IA, IB, IC, ID, IF, IG, Ia, IAa , IBa, ICa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IFb or IGb; and R ₄ is selected from -CH2NH2 and -CH ₂ NHProt ^NH for compounds of formula IE, IEa or IEb; where Rc is substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl. Particularly preferred Rc is substituted or unsubstituted methyl, substituted or unsubstituted ethyl, substituted or unsubstituted n-propyl, substituted or unsubstituted isopropyl, substituted or unsubstituted n-butyl, substituted or unsubstituted isobutyl, substituted or unsubstituted sec-butyl and substituted or unsubstituted tre t- butyl. Most preferably, Rc is methyl. The more preferred R4 is selected from CH2OH and CH2NH2. Most preferably, R ₄ is -CH ₂ OH.

Особенно предпочтительны соединения формулы Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IFa, IGa, если R₄ является CH₂OH или -CH₂OC(=O)R_c, и соединения формулы Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb, если R₄ является CH2NH2 или -CH₂NHProtNH.Particularly preferred are compounds of the formula Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IFa, IGa, when R ₄ is CH ₂ OH or -CH ₂ OC(=O)R _c , and compounds of the formula Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb, if R ₄ is CH2NH2 or -CH ₂ NHProtNH.

В соединениях настоящего изобретения, особенно предпочтительный Y является -NH-.In the compounds of the present invention, a particularly preferred Y is -NH-.

Альтернативно, в соединениях настоящего изобретения, особенно предпочтительный Y является -O-.Alternatively, in the compounds of the present invention, a particularly preferred Y is -O-.

Предпочтительные соединения по настоящему изобретению включают.Preferred compounds of the present invention include:

Соединения формулы I, IA, IB, IC, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IFb и IGb, где:Compounds of formula I, IA, IB, IC, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IFb and IGb, where:

R4 выбирают из -CH2OH и -CH2OC(=O)Rc;R4 is selected from -CH2OH and -CH2OC(=O)Rc;

Особенно предпочтительны соединения формулы Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IFa и IGa и/или соединения, где R₄ является -CH₂OH.Particularly preferred are compounds of formula Ia, IAa, IBa, ICa, Ida, IFa and IGa and/or compounds wherein R ₄ is -CH ₂ OH.

Соединения формулы I, IA, IB, IC, ID, IE IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb и IGb, гдеCompounds of formula I, IA, IB, IC, ID, IE IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb and IGb, where

R4 выбирают из -CH2NH2 и -CH₂NHProtNH; иR4 is selected from -CH2NH2 and -CH ₂ NHProtNH; And

Особенно предпочтительны соединения формулы Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb и IGb и/или соединения, где R4 является -CH2NH2.Particularly preferred are compounds of formula Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb and IGb and/or compounds wherein R4 is -CH2NH2.

Соединения формулы Ic, IAc, IBc, IDc, IFc, IGc, гдеCompounds of the formula Ic, IAc, IBc, IDc, IFc, IGc, where

R2 является -C(=O)Ra группой для соединений формулы Ic, IAc, IBc, IDc или IFc; и R2 является ацетилом для соединений формулы IGc;R2 is a -C(=O)Ra group for compounds of formula Ic, IAc, IBc, IDc or IFc; and R2 is acetyl for compounds of formula IGc;

R3 является водородом или -OR_b группой для соединений формулы Ic, IDc, IFc, IGc; R3 является водородом для соединений формулы IAc; или R3 является -OR_b группой для соединений формулы IBc;R3 is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula Ic, IDc, IFc, IGc; R3 is hydrogen for compounds of formula IAc; or R3 is an -OR _b group for compounds of formula IBc;

Ra выбирают из водорода и замещенного или незамещенного C₁-C₆ алкила; иRa is selected from hydrogen and substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl; And

- 24 046742- 24 046742

R_b является замещенным или незамещенным C₁ -C₆ алкилом.R _b is substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl.

Особенно предпочтительные соединения по настоящему изобретению включают:Particularly preferred compounds of the present invention include:

Соединения формулы I, IA, IB, IC, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IFb и IGb, гдеCompounds of formula I, IA, IB, IC, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IFb and IGb, where

Y является -NH-;Y is -NH-;

R₄ выбирают из -CH2OH и -CH₂OC(=O)R_c; иR ₄ is selected from -CH2OH and -CH ₂ OC(=O)R _c ; And

Rc выбирают из замещенного или незамещенного C1-C12 алкила, замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкенила и замещенного или незамещенного C₂-C₁₂ алкинила.Rc is selected from substituted or unsubstituted C1-C12 alkyl, substituted or unsubstituted _C2 - _C12 alkenyl and substituted or unsubstituted _C2 - _C12 alkynyl.

Более предпочтительны соединения формулы Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, IGa и/или соединения, где R₄является -CH2OH.More preferred are compounds of formula Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, IGa and/or compounds wherein R ₄ is -CH2OH.

Соединения формулы I, IA, IB, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, IDb, IFb и IGb, гдеCompounds of formula I, IA, IB, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, IDb, IFb and IGb, where

Y является -O-;Y is -O-;

R₄ выбирают из -CH2OH и -CH₂OC(=O)Rc; иR ₄ is selected from -CH2OH and -CH ₂ OC(=O)Rc; And

Более предпочтительны соединения формулы Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, IGa и/или соединения, где R₄является -CH₂OH.More preferred are compounds of formula Ia, IAa, IBa, Ida, IFa, IGa and/or compounds wherein R ₄ is -CH ₂ OH.

Соединения формулы I, IA, IB, IC, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb, IFb и IGb, гдеCompounds of formula I, IA, IB, IC, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb, IFb and IGb, where

Y является -NH-;Y is -NH-;

Более предпочтительны соединения формулы Ib, IAb, IBb, ICb, IEb, IFb, IGb и/или соединения, где R4 является -CH2NH2.More preferred are compounds of formula Ib, IAb, IBb, ICb, IEb, IFb, IGb and/or compounds wherein R4 is -CH2NH2.

Соединения формулы I, IA, IB, ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb, IFb и IGb, гдеCompounds of formula I, IA, IB, ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb, IFb and IGb, where

Y является -O-;Y is -O-;

R₄ выбирают из -CH2NH2 и -CH₂NHProtNH; иR ₄ is selected from -CH2NH2 and -CH ₂ NHProtNH; And

Более предпочтительны соединения формулы Ib, IAb, IBb, IDb, IEb, IFb, IGb и/или соединения, где R₄ является -CH₂NH₂.More preferred are compounds of formula Ib, IAb, IBb, IDb, IEb, IFb, IGb and/or compounds wherein R ₄ is -CH ₂ NH ₂ .

Соединения формулы I, IA, IB, IC, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IFb, IGb, гдеCompounds of formula I, IA, IB, IC, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IFb, IGb, where

R2 является -C(=O)R_a группой для соединений формулы I, IA, IB, IC, ID, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb;R2 is a -C(=O)R _a group for compounds of formula I, IA, IB, IC, ID, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb;

R3 является водородом или -OR_b группой для соединений формулы I, IC, ID, IF, IG, Ia, ICa, IDa, IFa, IGa, Ib, ICb, IDb, IFb или IGb; R3 является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; или R3 является -ORb группой для соединений формулы IB, IBa или IBb;R3 is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula I, IC, ID, IF, IG, Ia, ICa, IDa, IFa, IGa, Ib, ICb, IDb, IFb or IGb; R3 is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; or R3 is an -ORb group for compounds of formula IB, IBa or IBb;

R₄ выбирают из -CH2OH и -CH2OC(=O)Rc;R ₄ is selected from -CH2OH and -CH2OC(=O)Rc;

R_a выбирают из водорода и замещенного или незамещенного C1-C6 алкила;R _a is selected from hydrogen and substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl;

R_b является замещенным или незамещенным C1 -C₆ алкилом; иR _b is substituted or unsubstituted C1 -C ₆ alkyl; And

Rc является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом.Rc is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl.

Более предпочтительны соединения формулы Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IFa, IGa и/или соединения, где R4 является -CH2OH.More preferred are compounds of formula Ia, IAa, IBa, ICa, Ida, IFa, IGa and/or compounds wherein R4 is -CH2OH.

Соединения формулы I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb и IGb, гдеCompounds of formula I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb and IGb, Where

R3 является водородом или -ORb группой для соединений формулы I, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IDb, IEb, IFb или IGb; R₃ является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; или R₃ является -OR_b группой для соединений формулы IB, IBa или IBb;R3 is hydrogen or an -ORb group for compounds of formula I, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IDb, IEb, IFb or IGb; R ₃ is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; or R ₃ is an -OR _b group for compounds of formula IB, IBa or IBb;

R4 выбирают из -CH2NH2 и -CH₂NHProtNH;R4 is selected from -CH2NH2 and -CH ₂ NHProtNH;

R_b является замещенным или незамещенным C₁-C₆ алкилом; иR _b is substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl; And

Более предпочтительны соединения формулы Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb и/или соединения, где R₄ является -CH2NH2.More preferred are compounds of formula Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb and/or compounds wherein R ₄ is -CH2NH2.

R2 является -C(=O)R_a группой для соединений формулы Ic, IAc, IBc, IDc или IFc; и R2 является ацетилом для соединений формулы IGc;R2 is a -C(=O)R _a group for compounds of formula Ic, IAc, IBc, IDc or IFc; and R2 is acetyl for compounds of formula IGc;

R3 является водородом или -ORb группой для соединений формулы Ic, IDc, IFc, IGc; R3 является водородом для соединений формулы IAc; или R₃ является -OR_b группой для соединений формулы IBc;R3 is hydrogen or -ORb group for compounds of formula Ic, IDc, IFc, IGc; R3 is hydrogen for compounds of formula IAc; or R ₃ is an -OR _b group for compounds of formula IBc;

R_a является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом; иR _a is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl; And

- 25 046742- 25 046742

Более предпочтительные соединения по настоящему изобретению включаютMore preferred compounds of the present invention include

Y является -NH-;Y is -NH-;

R2 является -C(=O)R_a группой для соединений формулы I, IA, IB, IC, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb;R2 is a -C(=O)R _a group for compounds of formula I, IA, IB, IC, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb;

R3 является водородом или -OR_b группой для соединений формулы I, IC, IF, IG, Ia, ICa, IFa, IGa, Ib, ICb, IFb или IGb; R₃ является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; или R₃ является -OR_bгруппой для соединений формулы IB, IBa или IBb;R3 is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula I, IC, IF, IG, Ia, ICa, IFa, IGa, Ib, ICb, IFb or IGb; R ₃ is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; or R ₃ is an -OR _b group for compounds of formula IB, IBa or IBb;

R4 является -CH2OH;R4 is -CH2OH;

R_a выбирают из водорода и замещенного или незамещенного C1-C6 алкила; иR _a is selected from hydrogen and substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl; And

R_b является замещенным или незамещенным C1 -C₆ алкилом.R _b is substituted or unsubstituted C1 -C ₆ alkyl.

Еще более предпочтительны соединения формулы Ia, IAa или IBa, ICa, IFa, IGa.Even more preferred are compounds of formula Ia, IAa or IBa, ICa, IFa, IGa.

Соединения формулы I, IA, IB, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, IDb, IFb и IGb, где Y является -O-;Compounds of formula I, IA, IB, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, IDb, IFb and IGb, where Y is -O-;

R2 является -C(=O)Ra группой для соединений формулы I, IA, IB, ID, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb или IFb; и R₂ является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb;R2 is a -C(=O)Ra group for compounds of formula I, IA, IB, ID, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb or IFb; and R ₂ is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb;

R₃ является водородом или -OR_b группой для соединений формулы I, ID, IF, IG, Ia, IDa, IFa, IGa, Ib, IDb, IFb или IGb; R₃ является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; или R₃ является -OR_bгруппой для соединений формулы IB, IBa или IBb;R ₃ is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula I, ID, IF, IG, Ia, IDa, IFa, IGa, Ib, IDb, IFb or IGb; R ₃ is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; or R ₃ is an -OR _b group for compounds of formula IB, IBa or IBb;

R4 является -CH2OH;R4 is -CH2OH;

Ra выбирают из водорода и замещенного или незамещенного C1-C6 алкила; иRa is selected from hydrogen and substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl; And

Еще более предпочтительны соединения формулы Ia, IAa, IBa, IDa, IFa или IGa.Even more preferred are compounds of formula Ia, IAa, IBa, IDa, IFa or IGa.

Y является -NH-;Y is -NH-;

R2 является -C(=O)Ra группой для соединений формулы I, IA, IB, IC, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb или IFb; и R₂ является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb;R2 is a -C(=O)Ra group for compounds of formula I, IA, IB, IC, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb or IFb; and R ₂ is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb;

R₃ является водородом или -OR_b группой для соединений формулы I, IC, IE, IF, IG, Ia, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IEb, IFb или IGb; R₃ является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; или R₃является -ORb группой для соединений формулы IB, IBa или IBb;R ₃ is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula I, IC, IE, IF, IG, Ia, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IEb, IFb or IGb; R ₃ is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; or R ₃ is an -ORb group for compounds of formula IB, IBa or IBb;

Ra выбирают из водорода и замещенного или незамещенного C1-C6 алкила;Ra is selected from hydrogen and substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl;

Rb является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом; иRb is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl; And

Еще более предпочтительны соединения формулы Ib, IAb, IBb, ICb, IEb, IFb, IGb и/или соединения, где R₄ является -CH2NH2.Even more preferred are compounds of formula Ib, IAb, IBb, ICb, IEb, IFb, IGb and/or compounds wherein R ₄ is -CH2NH2.

Y является -O-;Y is -O-;

R2 является -C(=O)Ra группой для соединений формулы I, IA, IB, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb;R2 is a -C(=O)Ra group for compounds of formula I, IA, IB, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb;

R3 является водородом или -ORb группой для соединений формулы I, ID, IE, IF, IG, Ia, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IDb, IEb, IFb или IGb; R3 является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; или R3 является -ORb группой для соединений формулы IB, IBa или IBb;R3 is hydrogen or an -ORb group for compounds of formula I, ID, IE, IF, IG, Ia, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IDb, IEb, IFb or IGb; R3 is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; or R3 is an -ORb group for compounds of formula IB, IBa or IBb;

Еще более предпочтительны соединения формулы Ib, IAb, IBb, IDb, IEb, IFb, IGb и/или соединения, где R4 является CH2NH2.Even more preferred are compounds of formula Ib, IAb, IBb, IDb, IEb, IFb, IGb and/or compounds wherein R4 is CH2NH2.

Соединения формулы I, IA, IB, IC, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IFb и IGb, гдеCompounds of formula I, IA, IB, IC, ID, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IFb and IGb, where

R2 является -C(=O)Ra группой для соединений формулы I, IA, IB, IC, ID, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb;R2 is a -C(=O)Ra group for compounds of formula I, IA, IB, IC, ID, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb;

R3 является водородом или -ORb группой для соединений формулы I, IC, ID, IF, IG, Ia, ICa, IDa, IFa, IGa, Ib, ICb, IDb, IFb или IGb; R3 является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; или R3 является -ORb группой для соединений формулы IB, IBa или IBb;R3 is hydrogen or an -ORb group for compounds of formula I, IC, ID, IF, IG, Ia, ICa, IDa, IFa, IGa, Ib, ICb, IDb, IFb or IGb; R3 is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; or R3 is an -ORb group for compounds of formula IB, IBa or IBb;

R4 является -CH2OH;R4 is -CH2OH;

R_a является замещенным или незамещенным C₁-C₆ алкилом; иR _a is substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl; And

R_b является замещенным или незамещенным C₁-C₆ алкилом.R _b is substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl.

- 26 046742- 26 046742

Еще более предпочтительны соединения формулы Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IFa или IGa.Even more preferred are compounds of formula Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IFa or IGa.

R2 является -C(=O)R_a группой для соединений формулы I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, la, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb;R2 is the -C(=O)R _a group for compounds of formula I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, la, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb;

R3 является водородом или -OR_b группой для соединений формулы I, IC, ID, IE, IF, IG, la, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IDb, IEb, IFb или IGb; R₃ является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; или R3 является -ORb группой для соединений формулы IB, IBa или IBb;R3 is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula I, IC, ID, IE, IF, IG, la, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IDb, IEb, IFb or IGb; R ₃ is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; or R3 is an -ORb group for compounds of formula IB, IBa or IBb;

R₄ выбирают из -CH2NH2 и -CH₂NHProtNH;R ₄ is selected from -CH2NH2 and -CH ₂ NHProtNH;

R_a является замещенным или незамещенным C1-C₆ алкилом;R _a is substituted or unsubstituted C1-C ₆ alkyl;

Еще более предпочтительны соединения формулы Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb и/или соединения, где R₄ является -CH2NH2.Even more preferred are compounds of formula Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb and/or compounds wherein R ₄ is -CH2NH2.

Y является -NH-;Y is -NH-;

R2 является -C(=O)R_a группой для соединений формулы I, IA, IB, IC, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb или IFb; и R₂ является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb;R2 is a -C(=O)R _a group for compounds of formula I, IA, IB, IC, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb or IFb; and R ₂ is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb;

R₃ является водородом или -OR_b группой для соединений формулы I, IC, IF, IG, Ia, ICa, IFa, IGa, Ib, ICb, IFb или IGb; R3 является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; или R3 является -ORb группой для соединений формулы IB, IBa или IBb;R ₃ is hydrogen or -OR _b group for compounds of formula I, IC, IF, IG, Ia, ICa, IFa, IGa, Ib, ICb, IFb or IGb; R3 is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; or R3 is an -ORb group for compounds of formula IB, IBa or IBb;

R₄ является -CH2OC(=O)R_c;R ₄ is -CH2OC(=O)R _c ;

R_c является замещенным или незамещенным C₁-C₆ алкилом.R _c is substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl.

Более предпочтительны соединения формулы Ia, IAa, IBa, ICa, IFa или IGa.More preferred are compounds of formula Ia, IAa, IBa, ICa, IFa or IGa.

Соединения формулы Ic, IAc, IBc, IDc, IFc и IGc, гдеCompounds of the formula Ic, IAc, IBc, IDc, IFc and IGc, where

R₃ является водородом или метокси для соединений формулы Ic, IDc, IFc или IGc; R₃ является водородом для соединений формулы IAc; или R3 является метокси для соединений формулы IBc; иR ₃ is hydrogen or methoxy for compounds of formula Ic, IDc, IFc or IGc; R ₃ is hydrogen for compounds of formula IAc; or R3 is methoxy for compounds of formula IBc; And

R_a является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом.R _a is substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl.

В частности, более предпочтительные соединения по настоящему изобретению включают:In particular, more preferred compounds of the present invention include:

Y является -NH-;Y is -NH-;

R₃ является водородом или метокси для соединений формулы I, IC, IF, IG, Ia, ICa, IFa, IGa, Ib, ICb, IFb или IGb; R₃ является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; и R₃ является метокси для соединений формулы IB, IBa или IBb;R ₃ is hydrogen or methoxy for compounds of formula I, IC, IF, IG, Ia, ICa, IFa, IGa, Ib, ICb, IFb or IGb; R ₃ is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; and R ₃ is methoxy for compounds of formula IB, IBa or IBb;

R₄ является -CH₂OH; иR ₄ is -CH ₂ OH; And

R_a является замещенным или незамещенным C1-C₆ алкилом.R _a is substituted or unsubstituted C1-C ₆ alkyl.

Даже более предпочтительны соединения формулы Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, IGa.Even more preferred are compounds of formula Ia, IAa, IBa, ICa, IFa, IGa.

Y является -O-;Y is -O-;

R2 является -C(=O)R_a группой для соединений формулы I, IA, IB, ID, IF, la, IAa, IBa, IDa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb;R2 is a -C(=O)R _a group for compounds of formula I, IA, IB, ID, IF, la, IAa, IBa, IDa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb;

R₃ является водородом или метокси для соединений формулы I, ID, IF, IG, Ia, IDa, IFa, IGa, Ib, IDb, IFb или IGb; R₃ является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; или R₃ является метокси для соединений формулы IB, IBa или IBb;R ₃ is hydrogen or methoxy for compounds of formula I, ID, IF, IG, Ia, IDa, IFa, IGa, Ib, IDb, IFb or IGb; R ₃ is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; or R ₃ is methoxy for compounds of formula IB, IBa or IBb;

R₄ является -CH₂OH; иR ₄ is -CH ₂ OH; And

Даже более предпочтительны соединения формулы Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, IGa.Even more preferred are the compounds of formula Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, IGa.

Y является -NH-;Y is -NH-;

R2 является -C(=O)R_a группой для соединений формулы I, IA, IB, IC, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb;R2 is a -C(=O)R _a group for compounds of formula I, IA, IB, IC, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IEb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb;

R3 является водородом или метокси для соединений формулы I, IC, IE, IF, IG, Ia, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IEb, IFb или IGb; R₃ является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; или R₃является метокси для соединений формулы IB, IBa или IBb;R3 is hydrogen or methoxy for compounds of formula I, IC, IE, IF, IG, Ia, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IEb, IFb or IGb; R ₃ is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; or R ₃ is methoxy for compounds of formula IB, IBa or IBb;

- 27 046742- 27 046742

R_a является замещенным или незамещенным C1-C₆ алкилом; иR _a is substituted or unsubstituted C1-C ₆ alkyl; And

Даже более предпочтительны соединения формулы Ib, IAb, IBb, ICb, IEb, IFb, IGb и/или соединения, где R₄ является -CH2NH2.Even more preferred are compounds of formula Ib, IAb, IBb, ICb, IEb, IFb, IGb and/or compounds wherein R ₄ is -CH2NH2.

Y является -O-;Y is -O-;

R2 является -C(=O)R_a группой для соединений формулы I, IA, IB, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb;R2 is a -C(=O)R _a group for compounds of formula I, IA, IB, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, IDb, IEb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb;

R3 является водородом или метокси для соединений формулы I, ID, IE, IF, IG, Ia, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IDb, IEb, IFb или IGb; R3 является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; или R3 является метокси для соединений формулы IB, IBa или IBb;R3 is hydrogen or methoxy for compounds of formula I, ID, IE, IF, IG, Ia, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IDb, IEb, IFb or IGb; R3 is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; or R3 is methoxy for compounds of formula IB, IBa or IBb;

Ra является замещенным или незамещенным C₁-C₆ алкилом; иRa is substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl; And

Даже более предпочтительны соединения формулы Ib, IAb, IBb, IDb, IEb, IFb, IGb и/или соединения, где R₄ является -CH₂NH₂.Even more preferred are compounds of formula Ib, IAb, IBb, IDb, IEb, IFb, IGb and/or compounds wherein R ₄ is -CH ₂ NH ₂ .

R3 является водородом или метокси для соединений формулы I, IC, ID, IF, IG, Ia, ICa, IDa, IFa, IGa, Ib, ICb, IDb, IFb и IGb; R3 является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; или R3 является метокси для соединений формулы IB, IBa или IBb;R3 is hydrogen or methoxy for compounds of formula I, IC, ID, IF, IG, Ia, ICa, IDa, IFa, IGa, Ib, ICb, IDb, IFb and IGb; R3 is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; or R3 is methoxy for compounds of formula IB, IBa or IBb;

R₄ является -CH₂OH; иR ₄ is -CH ₂ OH; And

Ra выбирают из метила, этила, н-пропила, изопропила и бутила, включая н-бутил, втор-бутил, изобутил и трет-бутил.Ra is selected from methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl and butyl, including n-butyl, sec-butyl, isobutyl and tert-butyl.

Даже более предпочтительны соединения формулы Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa или IGa.Even more preferred are compounds of formula Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa or IGa.

R2 является -C(=O)Ra группой для соединений формулы I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb или IFb; и R2 является ацетилом для соединений формулы IG, IGa или IGb;R2 is the -C(=O)Ra group for compounds of formula I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb , IEb or IFb; and R2 is acetyl for compounds of formula IG, IGa or IGb;

R3 является водородом или метокси для соединений формулы I, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IDb, IEb, IFb и IGb; R3 является водородом для соединений формулы IA, IAa или IAb; или R3 является метокси для соединений формулы IB, IBa или IBb;R3 is hydrogen or methoxy for compounds of formula I, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IDb, IEb, IFb and IGb; R3 is hydrogen for compounds of formula IA, IAa or IAb; or R3 is methoxy for compounds of formula IB, IBa or IBb;

R_a выбирают из метила, этила, н-пропила, изопропила и бутила, включая н-бутил, втор-бутил, изобутил и трет-бутил; иR _a is selected from methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl and butyl, including n-butyl, sec-butyl, isobutyl and tert-butyl; And

Даже более предпочтительны соединения формулы Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb и/или соединения, где R4 является -CH2NH2.Even more preferred are compounds of formula Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb and/or compounds wherein R4 is -CH2NH2.

Соединения формулы Ic или IAc, IDc, IFc и IGc гдеCompounds of formula Ic or IAc, IDc, IFc and IGc where

R2 является -C(=O)Ra группой для соединений формулы Ic, IAc, IDc или IFc; и R2 является ацетилом для соединений формулы IGc;R2 is a -C(=O)Ra group for compounds of formula Ic, IAc, IDc or IFc; and R2 is acetyl for compounds of formula IGc;

R3 является водородом; иR3 is hydrogen; And

Соединения формулы Ic, IBc, IDc, IFc и IGc, гдеCompounds of the formula Ic, IBc, IDc, IFc and IGc, where

R₂ является -C(=O)R_a группой для соединений формулы Ic, IBc, IDc или IFc; и R₂ является ацетилом для соединений формулы IGc;R ₂ is a -C(=O)R _a group for compounds of formula Ic, IBc, IDc or IFc; and R ₂ is acetyl for compounds of formula IGc;

R₃ является метокси; иR ₃ is methoxy; And

R_a выбирают из метила, этила, н-пропила, изопропила и бутила, включая н-бутил, втор-бутил, изобутил и трет-бутил.R _a is selected from methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl and butyl, including n-butyl, sec-butyl, isobutyl and tert-butyl.

Даже более предпочтительные соединения по настоящему изобретению включают:Even more preferred compounds of the present invention include:

Соединения формулы I, IA, IC, IF, IG, Ia, IAa, ICa, IFa, IGa, Ib, IAb, ICb, IFb и IGb, гдеCompounds of formula I, IA, IC, IF, IG, Ia, IAa, ICa, IFa, IGa, Ib, IAb, ICb, IFb and IGb, where

Y является -NH-;Y is -NH-;

R2 является ацетилом;R2 is acetyl;

R3 является водородом; иR3 is hydrogen; And

R₄ является -CH₂OH.R ₄ is -CH ₂ OH.

Наиболее предпочтительны соединения формулы Ia, IAa, ICa, IFa или IGa.Most preferred are compounds of formula Ia, IAa, ICa, IFa or IGa.

- 28 046742- 28 046742

Соединения формулы I, IA, ID, IF, IG, la, IAa, IDa, IFa, IGa, Ib, lAb, IDb, IFb и IGb, гдеCompounds of formula I, IA, ID, IF, IG, la, IAa, IDa, IFa, IGa, Ib, lAb, IDb, IFb and IGb, where

Y является -O-;Y is -O-;

R2 является ацетилом;R2 is acetyl;

R3 является водородом; иR3 is hydrogen; And

R₄ является -CH2OH.R ₄ is -CH2OH.

Наиболее предпочтительны соединения формулы Ia, IAa, IDa, IFa или IGaMost preferred are compounds of formula Ia, IAa, Ida, IFa or IGa

Соединения формулы I, IA, IC, IE, IF, IG, Ia, IAa, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, ICb, IEb, IFb и IGb, гдеCompounds of formula I, IA, IC, IE, IF, IG, Ia, IAa, ICa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, ICb, IEb, IFb and IGb, where

Y является -NH-;Y is -NH-;

R2 является ацетилом;R2 is acetyl;

R3 является водородом; иR3 is hydrogen; And

R4 является -CH2NH2.R4 is -CH2NH2.

Наиболее предпочтительны соединения формулы Ib, IAb, ICb, IEb, IFb или IGb.Most preferred are compounds of formula Ib, IAb, ICb, IEb, IFb or IGb.

Соединения формулы I, IA, ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IDb, IEb, IFb и IGb, гдеCompounds of formula I, IA, ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IDb, IEb, IFb and IGb, where

Y является -O-;Y is -O-;

R₂ является ацетилом;R ₂ is acetyl;

R₃ является водородом; иR ₃ is hydrogen; And

R₄ является -CH₂NH₂.R ₄ is -CH ₂ NH ₂ .

Наиболее предпочтительны соединения формулы Ib, IAb, IDb, IEb, IFb или IGb.Most preferred are compounds of formula Ib, IAb, IDb, IEb, IFb or IGb.

Соединения формулы I, IA, IC, ID, IF, IG, Ia, IAa, ICa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, ICb, IDb, IFb и IGb, гдеCompounds of formula I, IA, IC, ID, IF, IG, Ia, IAa, ICa, IDa, IFa, IGa, Ib, IAb, ICb, IDb, IFb and IGb, where

R₂ является ацетилом;R ₂ is acetyl;

R3 является водородом; иR3 is hydrogen; And

R4 является -CH2OH.R4 is -CH2OH.

Наиболее предпочтительны соединения формулы Ia, IAa, ICa, IDa, IFa или IGa.Most preferred are compounds of formula Ia, IAa, ICa, IDa, IFa or IGa.

R₁ является -OH;R ₁ is -OH;

R₂ является ацетилом;R ₂ is acetyl;

R₃ является водородом; иR ₃ is hydrogen; And

R₄ является -CH₂OH.R ₄ is -CH ₂ OH.

Соединения формулы I, IA, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, ICb, IDb, IEb, IFb и IGb, гдеCompounds of formula I, IA, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, ICb, IDb, IEb, IFb and IGb, where

R2 является ацетилом;R2 is acetyl;

R3 является водородом; иR3 is hydrogen; And

R4 является -CH2NH2.R4 is -CH2NH2.

Наиболее предпочтительны соединения формулы Ib, IAb, ICb, IDb, IEb, IFb или IGb.Most preferred are compounds of formula Ib, IAb, ICb, IDb, IEb, IFb or IGb.

Соединения формулы Ic или IAc, IDc, IFc, IGc, гдеCompounds of the formula Ic or IAc, IDc, IFc, IGc, where

R2 является ацетилом; иR2 is acetyl; And

R₃ является водородом.R ₃ is hydrogen.

Соединения формулы Ic или IBc, IDc, IFc, IGc, гдеCompounds of formula Ic or IBc, IDc, IFc, IGc, where

R₂ является ацетилом; иR ₂ is acetyl; And

R3 является метокси.R3 is methoxy.

Соединение по настоящему изобретению формулы:The compound of the present invention has the formula:

МеОMeO

- 29 046742- 29 046742

- 30 046742- 30 046742

или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир. Особенно предпочтительно соединение формулы:or a pharmaceutically acceptable salt or ester thereof. Particularly preferred is a compound of the formula:

- 31 046742- 31 046742

или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир. Соединение по настоящему изобретению формулы:or a pharmaceutically acceptable salt or ester thereof. The compound of the present invention has the formula:

- 32 046742- 32 046742

M eOM eO

Μ eOΜ eO

- 33 046742- 33 046742

- 34 046742- 34 046742

или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир. Более предпочтительно соединение формулы:or a pharmaceutically acceptable salt or ester thereof. More preferably, a compound of the formula:

- 35 046742- 35 046742

или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир.or a pharmaceutically acceptable salt or ester thereof.

Даже более предпочтительными соединениями по настоящему изобретению являются соединения формулы:Even more preferred compounds of the present invention are those of the formula:

Дополнительными предпочтительными соединениями по настоящему изобретению являются соединения формулы:Additional preferred compounds of the present invention are those of the formula:

- 36 046742- 36 046742

В дополнительном варианте осуществления по настоящему изобретению, соединениями являются соединения формулы:In a further embodiment of the present invention, the compounds are compounds of the formula:

предпочтительнымиpreferred

Другие предпочтительные соединения включают соединение формулы:Other preferred compounds include a compound of the formula:

- 37 046742- 37 046742

- 38 046742- 38 046742

В дополнительных предпочтительных вариантах, предпочтения, описанные выше для разных заместителей, объединены. Настоящее изобретения также относится к таким комбинациям предпочтительных замещений (где позволено возможными группами заместителей) в соединениях формулы I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb, Ic, IAc, IBc, IDc, IFc или IGc по настоящему изобретению.In further preferred embodiments, the preferences described above for the various substituents are combined. The present invention also relates to such combinations of preferred substitutions (where permitted by possible substituent groups) in compounds of formula I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa , Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb, Ic, IAc, IBc, IDc, IFc or IGc according to the present invention.

- 39 046742- 39 046742

Чтобы избежать сомнений, соединения выше могут быть группой лекарственного средства D и ковалентно присоединены через гидрокси или аминовую группу к (X)b, если имеется, или (AA)_w, если имеется, или к (T)g, если имеется, или (L). Таким образом, если конъюгирована, ковалентная связь замещает протон на гидрокси или аминовой группе соединения.For the avoidance of doubt, the compounds above may be drug group D and covalently attached via a hydroxy or amine group to (X)b, if present, or (AA) _w , if present, or to (T)g, if present, or ( L). Thus, if conjugated, the covalent bond replaces a proton on the hydroxy or amine group of the compound.

Предпочтительные конъюгаты лекарственного средства согласно настоящему изобретению даны ниже. Предпочтительные определения (X)_b, (AA)_w, (T)_g и (L), приведенные ниже, применимы ко всем группам лекарственного средства D соединения, описанного выше. Предпочтительные конъюгаты лекарственного средства согласно настоящему изобретению включают:Preferred drug conjugates according to the present invention are given below. The preferred definitions (X) _b , (AA) _w , (T) _g and (L) below apply to all drug groups D of the compound described above. Preferred drug conjugates of the present invention include:

конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)b-(AA)_w-(T)_g-(L)-]_n-Ab по настоящему изобретению, где L является линкерной группой, выбранной из группы, состоящей из:a drug conjugate of the formula [D-(X)b-(AA) _w -(T) _g -(L)-] _n -Ab of the present invention, wherein L is a linker group selected from the group consisting of:

J О о о Д’ VJ O o o D’ V

N-M-C—I |__CH2JLq_£_^ 2^^N’^M’^CH2CH2'^Nyi--/ ⁴⁴ о оо ’NMC—I |_ _CH2 JLq_£_^ 2^ ^N ' ^M ' ^CH2CH2 ' ^N yi--/ ⁴⁴ o oo '

c-r₁₉-c-n-n=| c-r₁₉-n-n=^ , L·C-R₁₉-N-C-I , уcr ₁₉ -cnn=| cr ₁₉ -nn=^ , L CR ₁₉ -NCI , y

О и S О _u ОООO and S O _u LLC

Ь II Η II Ь S II Π II > ς и|| tb II Η II b S II Π II > ς u|| t

I—C^R-|9^—N^_С I _i 5 C-Ri9-N-C-CH₂-| , I—C~Rig^-c—5 , ооI—C^R-|9 ^— N ^_ C I _i 5 C-Ri9-NC-CH ₂ -| , I—C~Rig ^- c—5 , oo

C Rig^-S—, C R19 O~N—з где волнистые линии означают точку ковалентных присоединений к Ab (волнистая линия направо) и к (T)g, если имеется, или (AA)w, если имеется, или с (X)b, если имеется, или к D (волнистая линия налево);C Rig ^- S—, C R19 O~N— where the wavy lines indicate the point of covalent attachment to Ab (wavy line to the right) and to (T)g, if present, or (AA)w, if present, or with (X )b, if available, or to D (wavy line to the left);

R₁₉ выбирают из -C₁-C₁₂ алкилена-, -C3-C8 карбоцикло, -O-(C₁-C₁₂ алкилена), -C₆-C₁₈ арилена в одном или нескольких кольцах, которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями R_x, -C1-C₁₂ алкuлен-C₆-C₁₈ арилена-, где ариленовая группа находится в одном или нескольких кольцах, которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями R_x, -C₆-C₁₈ арилен-C₁-C₁₂ алкилена-, где ариленовая группа находится в одном или нескольких кольцах, которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями R_x, -C₁-C₁₂ алкилен-^-C карбоцикло)-, -(C3-C8 карбоцикло)^-^ алкилена-, -C5-C₁₄гетероцикло-, где указанная гетероциклогруппа может быть насыщенной или ненасыщенной группой, имеющей одно или несколько колец и содержащей, по меньшей мере, один атом кислорода, азота или серы в указанных кольцах, где указанная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями R_x, -C1-C₁₂ алкuлен-(C₅-Cl₄ гетероцикло)-, где указанная гетероциклогруппа может быть насыщенной или ненасыщенной группой, имеющей одно или несколько колец и содержащей, по меньшей мере, один атом кислорода, азота или серы в указанных кольцах, где указанная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями R_x, -(C₅-C₁₄ гетероцикло)-Cl-Cl₂алкилена-, где указанная гетероциклогруппа может быть насыщенной или ненасыщенной группой, имеющей одно или несколько колец и содержащей, по меньшей мере, один атом кислорода, азота или серы в указанных кольцах, где указанная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями R_x, -(OCH₂CH₂)_r- и -CH₂-(OCH₂CH₂)_r-, где каждый из вышеуказанных алкиленовых заместителей, по отдельности или присоединенных к другой группе углеродной цепи, может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями Rx;R ₁₉ is selected from -C ₁ -C ₁₂ alkylene-, -C3-C8 carbocyclo, -O-(C ₁ -C ₁₂ alkylene), -C ₆ -C ₁₈ arylene on one or more rings, which may optionally be substituted by one or more substituents R _x , -C1-C ₁₂ alkulene-C ₆ -C ₁₈ arylene-, where the arylene group is on one or more rings, which may be optionally substituted with one or more substituents R _x , -C ₆ -C ₁₈ arylene -C ₁ -C ₁₂ alkylene-, where the arylene group is on one or more rings, which may be optionally substituted by one or more R _x substituents, -C ₁ -C ₁₂ alkylene-^-C carbocyclo)-, -(C3- C8 carbocyclo)^-^ alkylene-, -C5-C ₁₄ heterocyclo-, where said heterocyclo group may be a saturated or unsaturated group having one or more rings and containing at least one oxygen, nitrogen or sulfur atom in said rings, wherein said group is optionally substituted with one or more R _x substituents, -C1-C ₁₂ alculene-(C ₅ -Cl ₄ heterocyclo)-, wherein said heterocyclo group may be a saturated or unsaturated group having one or more rings and containing at least , one oxygen, nitrogen or sulfur atom in said rings, wherein said group is optionally substituted with one or more R _x substituents, -(C ₅ -C ₁₄ heterocyclo)-Cl-Cl ₂ alkylene-, wherein said heterocyclo group may be a saturated or unsaturated group having one or more rings and containing at least one oxygen, nitrogen or sulfur atom in said rings, wherein said group is optionally substituted by one or more substituents R _x , -(OCH ₂ CH ₂ ) _r - and -CH ₂ - (OCH ₂ CH ₂ ) _r -, wherein each of the above alkylene substituents, alone or attached to another group on the carbon chain, may be optionally substituted with one or more Rx substituents;

R30 является -C1 -C₆ алкиленовой- группой;R30 is a -C1 -C ₆ alkylene group;

M выбирают из группы, состоящей из -C1-C6 алкилена-, -C1-C6 алкилен-^-^ карбоцикло)-, -(CH₂CH₂O)_s-, -C1-C₆ алкилен-^-^ карбоцикло)-CON(H или С-калкилЕС-к алкилена-, фенилена, которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями R_x, фенилен-С-к алкилена-, где фениленовая группа может быть необязательно замещена одним или несколькими заместителями R_x, и -C1-C6 алкилен-ТО^Н или к-^алкил^-^ алкилена-;M is selected from the group consisting of -C1-C6 alkylene-, -C1-C6 alkylene-^-^ carbocyclo)-, -(CH ₂ CH ₂ O) _s -, -C1-C ₆ alkylene-^-^ carbocyclo) -CON(H or C-calkylEC-to alkylene-, phenylene, which may be optionally substituted with one or more R _x substituents, phenylene-C-to alkylene-, wherein the phenylene group may be optionally substituted with one or more R _x substituents, and -C1-C6 alkylene-TO^H or k-^alkyl^-^ alkylene-;

Q выбирают из группы, состоящей из -N(H или С-Сдлки.Цфенилена- и -N(H или C₁-C₆алкuл)- 40 046742 (CH2)s;Q is selected from the group consisting of -N(H or C-Sdlk.Cphenylene- and -N(H or C ₁ -C ₆ alkyl)- 40 046742 (CH2)s;

r является целым числом от 1 до 10; и s является целым числом от 1 до 10.r is an integer from 1 to 10; and s is an integer from 1 to 10.

конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)b-(AA)_w-(T)_g-(L)-]_n-Ab по изобретению, где L выбирают из группы, состоящей из:a drug conjugate of the formula [D-(X)b-(AA) _w -(T) _g -(L)-] _n -Ab according to the invention, where L is selected from the group consisting of:

настоящемуpresent

где: волнистые линии означают точку ковалентных присоединений к Ab (волнистая линия направо) и к (T)_g, если имеется, или (AA)_w, если имеется, или к (X)_b, если имеется, или к D (волнистая линия налево);where: wavy lines indicate the point of covalent attachment to Ab (wavy line to the right) and to (T) _g , if present, or (AA) _w , if present, or to (X) _b , if present, or to D (wavy line left);

R₁₉ выбирают из -C₁-C₁₂ алкилена-, -O-(C₁-C₁₂ алкилена), -C₆-C₁₂ арилена в одном или нескольких кольцах которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями Rx, -C₁-C₁₂алкилен-^^^ арилена-, где ариленовая группа находится в одном или нескольких кольцах, которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями Rx, -C₆-C₁₂ арилен-Q-C^ алкилена-, где ариленовая группа находится в одном или нескольких кольцах, которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями Rx, -C5-C₁₂ гетероцикло-, где указанная гетероциклогруппа может быть насыщенной или ненасыщенной группой, имеющей одно или несколько колец, и содержащей, по меньшей мере, один атом кислорода, азота или серы в указанных кольцах, где указанная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями Rx, -C₁-C₁₂ алкилен(C5-C12 гетероцикло)-, где указанная гетероциклогруппа может быть насыщенной или ненасыщенной группой, имеющей одно или несколько колец, и содержащей, по меньшей мере, один атом кислорода, азота или серы в указанных кольцах, где указанная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями Rx, -(C₅-C₁₂ гетероцикло)-C₁-C₁₂ алкилена-, где указанная гетероциклогруппа может быть насыщенной или ненасыщенной группой, имеющей одно или несколько колец и содержащей, по меньшей мере, один атом кислорода, азота или серы в указанных кольцах, где указанная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями Rx, -(OCH₂CH₂)_r- и -CH₂(OCH₂CH₂)_r-, где каждый из вышеуказанных алкиленовых заместителей, по отдельности или присоединенных к другой группе углеродной цепи, может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями R_x;R ₁₉ is selected from -C ₁ -C ₁₂ alkylene-, -O-(C ₁ -C ₁₂ alkylene), -C ₆ -C ₁₂ arylene on one or more rings which may be optionally substituted by one or more Rx, -C substituents ₁ -C ₁₂ alkylene-^^^ arylene-, where the arylene group is on one or more rings which may be optionally substituted by one or more Rx substituents, -C ₆ -C ₁₂ arylene-QC^ alkylene-, where the arylene group is on one or more rings which may be optionally substituted with one or more Rx substituents, -C5-C ₁₂ heterocyclo-, wherein said heterocyclogroup may be a saturated or unsaturated group having one or more rings and containing at least one atom oxygen, nitrogen or sulfur on said rings, wherein said group is optionally substituted with one or more Rx substituents, -C ₁ -C ₁₂ alkylene (C5-C12 heterocyclo)-, wherein said heterocyclo group may be a saturated or unsaturated group having one or more rings , and containing at least one oxygen, nitrogen or sulfur atom in the specified rings, where the specified group is optionally substituted by one or more Rx substituents, -(C ₅ -C ₁₂ heterocyclo)-C ₁ -C ₁₂ alkylene-, where the specified a heterocyclo group may be a saturated or unsaturated group having one or more rings and containing at least one oxygen, nitrogen or sulfur atom on said rings, wherein said group is optionally substituted with one or more Rx, -(OCH ₂ CH ₂ ) _r substituents - and -CH ₂ (OCH ₂ CH ₂ ) _r -, wherein each of the above alkylene substituents, alone or attached to another group on the carbon chain, may be optionally substituted with one or more R _x substituents;

R3o является -C₁-C₆ алкиленовой- группой;R3o is a -C ₁ -C ₆ alkylene group;

M выбирают из группы, состоящей из -C₁-C₆ алкилена-, -C₁-C₆ алкилен-(C₃-C₈ карбоцикло)- и фенилена, которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями R_x; и r является целым числом от 1-6.M is selected from the group consisting of -C ₁ -C ₆ alkylene-, -C ₁ -C ₆ alkylene-(C ₃ -C ₈ carbocyclo)- and phenylene, which may be optionally substituted by one or more R _x substituents; and r is an integer from 1-6.

конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-(L)-]_n-Ab по настоящему изобретению, выбранный из формул (IV), (V) и (VI):a drug conjugate of formula [D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -(L)-] _n -Ab of the present invention selected from formulas (IV), (V) and (VI):

(IV) (V)(IV) (V)

АЬ (VI) где: X и T являются удлиняющими группами, как определено в настоящем документе;AB (VI) where: X and T are extension groups as defined herein;

каждый AA независимо является аминокислотной единицей как определено в настоящем документе;each AA is independently an amino acid unit as defined herein;

b является целым числом 0 или 1;b is an integer 0 or 1;

g является целым числом 0 или 1;g is an integer 0 or 1;

D является группой лекарственного средства;D is a drug group;

Ab является группой, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт;Ab is a group containing at least one antigen binding site;

n является отношением группы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-(L)-], где L такой, как определен в формуле (IV), (V) или (VI) к группе, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, и является целымn is the ratio of the group [D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -(L)-], where L is as defined in formula (IV), (V) or (VI) to the group, containing at least one antigen-binding site, and is an entire

- 41 046742 числом от 1 до 20;- 41 046742 in numbers from 1 to 20;

R₁₉ выбирают из -C1-C8 алкилена-, -O-(C₁-C8 алкилена), -C1-C8 алкилен-С₆-С12 арилена-, где ариленовая группа находится в одном или нескольких кольцах которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями R_x, и -C₆-C₁₂ арилен-О-^ алкилена-, где ариленовая группа находится в одном или нескольких кольцах, которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями R_x, где каждый из вышеуказанных алкиленовых заместителей, по отдельности или присоединенных к другой группе углеродной цепи, может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями R_x;R ₁₉ is selected from -C1-C8 alkylene-, -O-(C ₁ -C8 alkylene), -C1-C8 alkylene-C ₆ -C12 arylene-, where the arylene group is on one or more rings which may optionally be substituted by one or more R _x substituents, and -C ₆ -C ₁₂ arylene-O-^ alkylene-, where the arylene group is on one or more rings, which may be optionally substituted by one or more R _x substituents, where each of the above alkylene substituents, alone or attached to another group on the carbon chain, may be optionally substituted with one or more R _x substituents;

R3o является -C2-C4 алкиленовой- группой; иR3o is a -C2-C4 alkylene group; And

M выбирают из группы, состоящей из -C1-C3 алкилена- и -C1-C3 алкилен-ДТ-О карбоцикло)-.M is selected from the group consisting of -C1-C3 alkylene- and -C1-C3 alkylene-DT-O carbocyclo)-.

конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)b-(AA)_w-(T)g-(L)-]n-Ab по настоящему изобретению, выбранный из формул (IV), (V) и (VI):a drug conjugate of formula [D-(X)b-(AA) _w -(T)g-(L)-]n-Ab of the present invention selected from formulas (IV), (V) and (VI):

(VI) где: X и T являются удлиняющими группами, которые могут быть одинаковыми или разными; каждый AA независимо является аминокислотной единицей;(VI) where: X and T are extension groups, which may be the same or different; each AA is independently an amino acid unit;

b является целым числом 0 или 1;b is an integer 0 or 1;

g является целым числом 0 или 1;g is an integer 0 or 1;

n является отношением группы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-(L)-], где L такой, как определен в формулах (IV), (V) или (VI), к группе, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт и является целым числом от 1 до 20;n is the ratio of the group [D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -(L)-], where L is as defined in formulas (IV), (V) or (VI), to the group , containing at least one antigen-binding site and is an integer from 1 to 20;

R₁₉ выбирают из -C1-C6 алкилена-, фенилен-^-^ алкилена-, где фениленовая группа необязательно может быть замещена одним или несколькими заместителями R_x, выбранными из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогрупп, где каждый из вышеуказанных алкиленовых заместителей, по отдельности или присоединенных к другой группе углеродной цепи, необязательно могут быть замещены одним или несколькими заместителями Rx, выбранными из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, арильных групп, имеющих от 6 до 12 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогрупп и, предпочтительно, R₁₉ является -C1-C6 алкиленовой группой;R ₁₉ is selected from -C1-C6 alkylene-, phenylene-^-^ alkylene-, where the phenylene group may optionally be substituted by one or more R _x substituents selected from the group consisting of alkyl groups having from 1 to 6 carbon atoms, alkoxy groups having from 1 to 6 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano groups, wherein each of the above alkylene substituents, alone or attached to another group of the carbon chain, may optionally be substituted by one or more Rx substituents selected from the group consisting of alkyl groups having from 1 to 6 carbon atoms, alkoxy groups having from 1 to 6 carbon atoms, aryl groups having from 6 to 12 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano groups and, preferably, R ₁₉ is -C1-C6 alkylene group;

R₃₀ является -C2-C4 алкиленовой- группой; иR ₃₀ is a -C2-C4 alkylene group; And

M является -C1-C3 алкилен-^-^ карбоцикло)-.M is -C1-C3 alkylene-^-^ carbocyclo)-.

Предпочтительно, чтобы в определении конъюгата лекарственного средства формулы [D-(X)_b(AA)_w-(T)_g-(L)-]_n-Ab, L такой, как определен в предпочтительных определениях для указанной группы выше, и (AA)_w имеет формулу (II):Preferably, in the definition of a drug conjugate of formula [D-(X) _b (AA) _w -(T) _g -(L)-] _n -Ab, L is as defined in the preferred definitions for the group above, and ( AA) _w has formula (II):

R_Z1 ^Jw (II) где волнистые линии означают точку ковалентных присоединений к (X)b, если имеется, или к группе лекарственного средства (волнистая линия налево) и к (T)g, если имеется, или к линкеру (волнистая линия направо); иR _Z 1 ^J w (II) where the wavy lines indicate the point of covalent attachment to (X)b, if present, or to the drug group (wavy line to the left) and to (T)g, if present, or to the linker (wavy line right); And

R21, в каждом случае, выбирают из группы, состоящей из водорода, метила, изопропила, изобутила, втор-бутила, бензила, п-гидроксибензила, -CH2OH, -CH(OH)CH₃, -CH2CH2SCH3, -CH₂cOnH₂,R21 is, in each case, selected from the group consisting of hydrogen, methyl, isopropyl, isobutyl, sec-butyl, benzyl, p-hydroxybenzyl, -CH2OH, -CH(OH) _CH3 , -CH2CH2SCH3, _-CH2cOnH2 _,

- 42 046742- 42 046742

-CH2COOH,-CH2CH2CONH2, -CH2CH2COOH,-(CH2)3NHC(=NH)NH2, -(CH2)3NH2, -(CH2)3NHCOCH3,-CH2COOH, -CH2CH2CONH2, -CH2CH2COOH, -(CH2)3NHC(=NH)NH2, -(CH2)3NH2, -(CH2)3NHCOCH3,

-(CH_;)_;\HCHO, -(CH2)4NHC(=NH)NH2, -(CH2)4NH2,-(CH2)4NHCOCH3, -(CH2)4NHCHO, -(CH2)3NHCONH2,-(CH _; ) _; \HCHO, -(CH2)4NHC(=NH)NH2, -(CH2)4NH2,-(CH2)4NHCOCH3, -(CH2)4NHCHO, -(CH2)3NHCONH2,

-(CH₂)₄NHCONH₂,-CH₂CH₂CH(OH)CH₂NH₂, 2-пиридилметила-, 3-пиридилметила-, 4-пиридилметила-,-(CH ₂ ) ₄ NHCONH ₂ , -CH ₂ CH ₂ CH(OH)CH ₂ NH ₂ , 2-pyridylmethyl-, 3-pyridylmethyl-, 4-pyridylmethyl-,

и w является целым числом от 0 до 12.and w is an integer from 0 to 12.

конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)b-(AA)_w-(T)_g-(L)-]_n-Ab согласно первому аспекту настоящего изобретения, где L такой, как определен в предпочтительных определениях для указанной группы выше, и (AA)_w имеет формулу (II), где:a drug conjugate of the formula [D-(X)b-(AA) _w -(T) _g -(L)-] _n -Ab according to the first aspect of the present invention, wherein L is as defined in the preferred definitions for the group above, and (AA) _w has formula (II), where:

R₂₁ в каждом случае выбирают из группы, состоящей из водорода, метила, изопропила, втор-бутила, бензила, индолилметила, -(CH₂)₃NHCONH₂,-(CH₂)₄NH₂, -(CH₂)₃NHC(=NH)NH₂ и -(CH₂)₄NHC(=NH)NH₂; и w является целым числом от 0 до 6.R ₂₁ in each case is selected from the group consisting of hydrogen, methyl, isopropyl, sec-butyl, benzyl, indolylmethyl, -(CH ₂ ) ₃ NHCONH ₂ , -(CH ₂ ) ₄ NH ₂ , -(CH ₂ ) ₃ NHC (=NH)NH ₂ and -(CH ₂ ) ₄ NHC(=NH)NH ₂ ; and w is an integer from 0 to 6.

конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)b-(AA)_w-(T)_g-(L)-]_n-Ab согласно первому аспекту настоящего изобретения, где L такой, как определен в предпочтительных определениях для указанной группы выше, где w равен 0 или 2, и если w равен 2, то (AA)_w имеет формулу (III), где:a drug conjugate of the formula [D-(X)b-(AA) _w -(T) _g -(L)-] _n -Ab according to the first aspect of the present invention, wherein L is as defined in the preferred definitions for the group above, where w is 0 or 2, and if w is 2, then (AA) _w has formula (III), where:

(III) волнистая линия означает точку ковалентных присоединений к (X)_b, если имеется, или к группе лекарственного средства (волнистая линия налево) и к (T)_g, если имеется, или к линкеру (волнистая линия направо);(III) the wavy line indicates the point of covalent attachment to (X) _b , if present, or to the drug group (wavy line to the left) and to (T) _g , if present, or to the linker (wavy line to the right);

R22 выбирают из метила, бензила, изопропила, втор-бутила и индолилметила; иR22 is selected from methyl, benzyl, isopropyl, sec-butyl and indolylmethyl; And

R₂₃ выбирают из метила, -(CH₂)₄NH₂, -(CH₂)₃NHCONH₂ и -(CH₂)₃NHC(=NH)NH₂.R ₂₃ is selected from methyl, -(CH ₂ ) ₄ NH ₂ , -(CH ₂ ) ₃ NHCONH ₂ and -(CH ₂ ) ₃ NHC(=NH)NH ₂ .

В вариантах осуществления настоящего изобретения b+g+w не равен 0. В других вариантах осуществления, b+w не равно 0. В еще дополнительных вариантах осуществления, если w не равно 0, то b равен 1. Кроме того, предпочтительно, чтобы в определении конъюгата лекарственного средства формулы [D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab, L и (AA)w такие, как определены в предпочтительных определениях для указанной группы выше, и X является удлиняющей группой, выбранной из:In embodiments of the present invention, b+g+w is not equal to 0. In other embodiments, b+w is not equal to 0. In still further embodiments, if w is not equal to 0, then b is equal to 1. Moreover, it is preferable that in defining a drug conjugate of the formula [D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab, L and (AA)w as defined in the preferred definitions for the group above, and X is an extension group selected from:

где D конъюгирован через аминовую группу (например, где Z является -NH-):where D is conjugated via an amine group (for example, where Z is -NH-):

- COO-(C1-C₆ алкилен)КИ-;- COO-(C1-C ₆ alkylene)KI-;

- COO-CH₂-(фенилен, который может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями R_x)-NH-;- COO-CH ₂ -(phenylene, which may be optionally substituted with one or more R _x )-NH- substituents;

- COO-(C1-C₆ алкuлен)NH-COO-CH₂-(фенилен, который может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями R_x)-NH-;- COO-(C1-C ₆ alculene)NH-COO-CH ₂ -(phenylene, which may optionally be substituted with one or more R _x substituents)-NH-;

- COCH2NH-COCH2-NH-;- COCH2NH-COCH2-NH-;

- COCH2NH-;- COCH2NH-;

- COO-(C1-C₆ алкилен^-;- COO-(C1-C ₆ alkylene^-;

- COO-(C1-C₆ алкилен)NHCO(C₁-C₆ алкилен^-; или где D конъюгирован через гидроксигруппу (например, где Z является -O-):- COO-(C1-C ₆ alkylene)NHCO(C ₁ -C ₆ alkylene^-; or where D is conjugated through a hydroxy group (for example, where Z is -O-):

- CONH-(C1-C₆ алкилен)КИ-;- CONH-(C1-C ₆ alkylene)KI-;

- CONH-(C1-C₆ алкилен)NH-COO-CH₂-(фенилен, который может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями R_x)-NH-;- CONH-(C1-C ₆ alkylene)NH-COO-CH ₂ -(phenylene, which may be optionally substituted with one or more R _x substituents)-NH-;

- COCH2NH-COCH2-NH-;- COCH2NH-COCH2-NH-;

- 43 046742- 43 046742

- COCH2NH-;- COCH2NH-;

- CONH-(C1-C₆ алкилен^-;- CONH-(C1-C ₆ alkylene^-;

- CONH-(C1-C₆ алкилен)ННС.’О(С.’|-С.’₆ алкилен^-; и b равно 0 или 1, предпочтительно, 1.- CONH-(C1-C ₆ alkylene)HHC.'O(C.'|-C.' ₆ alkylene^-; and b is 0 or 1, preferably 1.

конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)g-(L)-]_n-Ab по настоящему изобретению, где L и (AA)_w такие, как определены в предпочтительных определениях для указанной группы выше, и X является удлиняющей группой, выбранной из группы, состоящей из:a drug conjugate of the formula [D-(X) _b- (AA) _w- (T)g-(L)-] _n -Ab of the present invention, wherein L and (AA) _w are as defined in the preferred definitions for said groups above, and X is an extension group selected from the group consisting of:

- COO-(C₂-C₄ алкилен)МИ-;- COO-(C ₂ -C ₄ alkylene)MI-;

- COO-CH₂-фенилен-NH-, где указанная фениленовая группа необязательно может быть замещена от одного до четырех заместителями R_x, выбранными из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогрупп;- COO-CH ₂ -phenylene-NH-, wherein said phenylene group may optionally be substituted with one to four R _x substituents selected from the group consisting of alkyl groups having from 1 to 6 carbon atoms, alkoxy groups having from 1 to 6 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano groups;

- COO-(C₂-C₄ алкuлен)NH-COO-CH₂-(фенилен, который необязательно может быть замещен от одного до четырех заместителями R_x, выбранными из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогруппЕМИ-;- COO-(C ₂ -C ₄ alculene)NH-COO-CH ₂ -(phenylene, which may optionally be substituted with one to four R _x substituents selected from the group consisting of alkyl groups having from 1 to 6 carbon atoms , alkoxy groups having from 1 to 6 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano groupsEMI-;

- COCH2NH-COCH2-NH-;- COCH2NH-COCH2-NH-;

- COO-(C₂-C₄ алкилен^-;- COO-(C ₂ -C ₄ alkylene^-;

- COO-(C₂-C₄ алкилен)NHCO(C₁-C₃ алкилен^-; или где D конъюгирован через гидроксигруппу (например, где Z является -O-):- COO-(C ₂ -C ₄ alkylene)NHCO(C ₁ -C ₃ alkylene^-; or where D is conjugated through a hydroxy group (for example, where Z is -O-):

- CONH-(C₂-C₄алкuлен)NH-;- CONH-(C ₂ -C ₄ alculene)NH-;

- CONH-(C₂-C₄ алкилен)NH-COO-CH₂-(фенилен, который необязательно может быть замещен от одного до четырех заместителями R_x, выбранных из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогрупп)-NH-;- CONH-(C ₂ -C ₄ alkylene)NH-COO-CH ₂ -(phenylene, which may optionally be substituted with one to four R _x substituents selected from the group consisting of alkyl groups having from 1 to 6 carbon atoms , alkoxy groups having from 1 to 6 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano groups) -NH-;

- COCH2NH-COCH2-NH-;- COCH2NH-COCH2-NH-;

- CONH-(C₂-C₄ алкилен^-;- CONH-(C ₂ -C ₄ alkylene^-;

- CONH-(C₂-C₄ алкилен)NHCO(C₁-C₃ алкилен^-; и b равен 0 или 1, предпочтительно, 1.- CONH-(C ₂ -C ₄ alkylene)NHCO(C ₁ -C ₃ alkylene^-; and b is 0 or 1, preferably 1.

конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)b-(AA)_w-(T)g-(L)-]_n-Ab по настоящему изобретению, где L и (AA)w такие, как определены в предпочтительных определениях для указанной группы выше, и X является удлиняющей группой, выбранной из группы, состоящей из:a drug conjugate of the formula [D-(X)b-(AA) _w -(T)g-(L)-] _n -Ab of the present invention, wherein L and (AA)w are as defined in the preferred definitions for said groups above, and X is an extension group selected from the group consisting of:

- COO-CH₂-фенилен-NH-- COO-CH ₂ -phenylene-NH-

- COO(CИ₂)зNHCOOCИ₂-фенилен-NH-;- COO(CI ₂ )3NHCOOCI ₂ -phenylene-NH-;

- COO(CH2)3NH-;- COO(CH2)3NH-;

- COO(CH2)3-S-;- COO(CH2)3-S-;

- COO(CH2)3NHCO(CH2)2S-; или где D конъюгирован через гидроксигруппу (например, где Z является -O-):- COO(CH2)3NHCO(CH2)2S-; or where D is conjugated via a hydroxy group (for example, where Z is -O-):

- COO-CH₂-фенилен-NH-- COO-CH ₂ -phenylene-NH-

- CONИ(CH₂)₃NHCOOCH₂-фенилен-NИ-;- CONI(CH ₂ ) ₃ NHCOOCH ₂ -phenylene-NI-;

- CONH(CH₂)₃NH-;- CONH(CH ₂ ) ₃ NH-;

- CONH(CH2)3-S-;- CONH(CH2)3-S-;

- CONH(CH₂)₃NHCO(CH₂)₂S-; и b равен 0 или 1, предпочтительно, 1.- CONH(CH ₂ ) ₃ NHCO(CH ₂ ) ₂ S-; and b is 0 or 1, preferably 1.

- конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)b-(AA)_w-(T)g-(L)-]_n-Ab по настоящему изобретению, где L,(AA)_w и (X)_b такие, как определены в предпочтительных определениях для указанной группы выше и T является удлиняющей группой, выбранной из группы, состоящей из:- a drug conjugate of the formula [D-(X)b-(AA) _w -(T)g-(L)-] _n -Ab according to the present invention, where L,(AA) _w and (X) _b are as follows: are defined in the preferred definitions for the above group and T is an extension group selected from the group consisting of:

- CO-(C₁-C₆ алкилен)-^-;- CO-(C ₁ -C ₆ alkylene)-^-;

- CO-(C₁-C₆ алкилен)-[О-(С₂-С₆ алкиленф-NH-;- CO-(C ₁ -C ₆ alkylene)-[O-(C ₂ -C ₆ alkylene-NH-;

- COO-(C₁-C₆ алкилен)-[О-(С₂-С₆ алкиленф-NH-;- COO-(C ₁ -C ₆ alkylene)-[O-(C ₂ -C ₆ alkylene-NH-;

где j является целым числом от 1 до 25, и g равен 0 или 1.where j is an integer from 1 to 25, and g is 0 or 1.

конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)b-(AA)_w-(T)_g-(L)-]_n-Ab по настоящему изобретению, где L, (AA)_w и (X)_b такие, как определены в предпочтительных определениях для указанной группы выше, и T является удлиняющей группой, выбранной из группы, состоящей из:a drug conjugate of the formula [D-(X)b-(AA) _w -(T) _g -(L)-] _n -Ab of the present invention, where L, (AA) _w and (X) _b are as defined in the preferred definitions for the above group, and T is an extension group selected from the group consisting of:

- CO-(Ci -С₄алкилен)МК-- CO-(Ci -C ₄ alkylene)MK-

- 44 046742- 44 046742

- СЮ-(С/-С|алкилен)-[О-(С₂-С|алкилен)||-НН-;- CIO-(C/-C|alkylene)-[O-(C ₂ -C|alkylene)||-NN-;

- СЮО-(САС|алкилен)-[О-(С.’₂-С-|алкилен)||-НН-;- SSO-(SAS|alkylene)-[O-(C.' ₂ -C-|alkylene)||-NN-;

где j является целым числом от 1 до 10; и g равен 0 или 1.where j is an integer from 1 to 10; and g is 0 or 1.

конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-(L)-]_n-Ab по настоящему изобретению, где L, (AA)_w и (X)_b такие, как определены в предпочтительных определениях для указанной группы выше, и T является удлиняющей группой, выбранной из группы, состоящей из:a drug conjugate of the formula [D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -(L)-] _n -Ab of the present invention, where L, (AA) _w and (X) _b are as defined in the preferred definitions for the above group, and T is an extension group selected from the group consisting of:

- СО-(С1 -С₄алкилен)МН-- CO-(C1 -C ₄ alkylene)MH-

- СЮ-(С/-С₁алкилен)-[О-(С₂-С-_|алкилен)]_|-НН-;- CIO-(C/-C ₁ alkylene)-[O-(C ₂ -C- _| alkylene)] _| -NN-;

-СЮО-(САС₁алкилен)-[О-(С₂-С₄алкилен)]_|-НН-;-CSO-(CAC ₁ alkylene)-[O-(C ₂ -C ₄ alkylene)] _| -NN-;

где j является целым числом от 1 до 5; и g равен 0 или 1.where j is an integer from 1 to 5; and g is 0 or 1.

предпочтительный конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-(L)-]_n-Ab по настоящему изобретению является таким, где L, (AA)_w, (X)_b и (T)_g такие, как определено выше, и где D является соединением формулы I, IA, IB, 1С, ID, IE, IF, IG, la, IAa, IBa, 1Са, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, lAb, IBb, 1СЬ, IDb, IEb, IFb, IGb, (IH), (IHa) или (IHb) или ее фармацевтически приемлемой солью, сложным эфиром, сольватом, таутомером или стереоизомером, где R1 является СЫ или ОН в соединениях формулы I, IA, IB, ТС, ID, IE, IG, Ia, IAa, IBa, ТСэ, IDa, IEa, IGa, Ib, IAb, IBb, ТСЬ, IDb, IEb, IGb, (IH), (IHa) или (IHb); R₁ является OH в соединениях формулы IF, IFa и IFb, и более предпочтительно, R₁ является СЫ.a preferred drug conjugate of the formula [D-(X) _b- (AA) _w- (T) _g- (L)-] _n -Ab of the present invention is one wherein L, (AA) _w , (X) _b and (T) _g are as defined above, and wherein D is a compound of formula I, IA, IB, 1C, ID, IE, IF, IG, la, IAa, IBa, 1Ca, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, lAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb, (IH), (IHa) or (IHb) or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer thereof, wherein R1 is CH or OH in compounds of formula I , IA, IB, TS, ID, IE, IG, Ia, IAa, IBa, TSe, IDa, IEa, IGa, Ib, IAb, IBb, TSь, IDb, IEb, IGb, (IH), (IHa) or ( IHb); R ₁ is OH in compounds of formula IF, IFa and IFb, and more preferably, R ₁ is CH.

Другой предпочтительный конъюгат лекарственного средства формулыAnother preferred drug conjugate of formula

[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-|n-Ab по настоящему изобретению является таким, где L, (AA)w, (X)b и (T)g такие, как определено выше, и где D является соединением формулы I, IA, IB, IQ ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IGa. IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, IOb, IDb, IEb, IFb, (IH), (IHa) или (IHb) или его фармацевтически приемлемая соль, сложный эфир, сольват, таутомер или стереоизомер, где R2 является 01=0)^.,, где R_a выбирают из водорода и замещенного или незамещенного С1-С6 алкила, где необязательными заместителями являются один или несколько заместителей R_x, и более предпочтительно, R2 является ацетилом.[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-|n-Ab of the present invention is one where L, (AA)w, (X)b and (T)g are as defined above, and wherein D is a compound of formula I, IA, IB, IQ ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, IGa. IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, IOb, IDb, IEb, IFb, (IH), (IHa) or (IHb) or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer thereof, wherein R2 is 01 =0)^., where R _a is selected from hydrogen and substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl, wherein the optional substituents are one or more R _x substituents, and more preferably R2 is acetyl.

Другой предпочтительный конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-(L)-|_n-Ab по настоящему изобретению является таким, где L, (AA)_w, (X)_b и (T)_g такие, как определено выше, и где D является соединением формулы I, IA, IB, IC ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, Il'a, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, Rb, IDb, IEb, IFb, IGb, (IH), (IHa) или (IHb) или его фармацевтически приемлемая соль, сложный эфир, сольват, таутомер или стереоизомер, где R3 является водородом или -0R_b группой в соединениях формулы I, IC ID, IE, IF, IG, Ia, Il'a, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, Rb, IDb, IEb, IFb, IGb, (IH), (IHa) или (IHb); R3 является водородом в соединениях формулы IA, IAa или IAb; R3 является -ORb группой в соединениях формулы IB, IBa или IBb, где Rb является замещенной или незамещенной С1-С6 алкильной группой, где необязательными заместителями являются один или несколько заместителей R_x, и более предпочтительно, R3 является водородом или метокси. Наиболее предпочтительно, R₃ является водородом.Another preferred drug conjugate of the formula [D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -(L)-| _{The n} -Ab of the present invention is one wherein L, (AA) _w , (X) _b and (T) _g are as defined above, and wherein D is a compound of formula I, IA, IB, IC ID, IE, IF , IG, Ia, IAa, IBa, Il'a, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, Rb, IDb, IEb, IFb, IGb, (IH), (IHa) or (IHb) or its a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer, wherein R3 is hydrogen or -0R _b group in compounds of formula I, IC ID, IE, IF, IG, Ia, Il'a, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, Rb, IDb, IEb, IFb, IGb, (IH), (IHa) or (IHb); R3 is hydrogen in compounds of formula IA, IAa or IAb; R3 is an -ORb group in compounds of formula IB, IBa or IBb, wherein Rb is a substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl group, wherein the optional substituents are one or more R _x substituents, and more preferably, R3 is hydrogen or methoxy. Most preferably, R ₃ is hydrogen.

Другой предпочтительный конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-(L)-|_n-Ab по настоящему изобретению является таким, где L, (AA)_w, (X)_b и (T)_g такие, как определено выше, и где D является соединением формулы (IH), (IHa) или (IHb) или его фармацевтически приемлемая соль, сложный эфир, сольват, таутомер или стереоизомер, где Y является -NH- или -O-.Another preferred drug conjugate of the formula [D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -(L)-| _{The n} -Ab of the present invention is one wherein L, (AA) _w , (X) _b and (T) _g are as defined above, and wherein D is a compound of formula (IH), (IHa) or (IHb) or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer thereof, wherein Y is -NH- or -O-.

Другой предпочтительный конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-|n-Ab по настоящему изобретению является таким, где L, (AA)w,(X)b и (T)g такие, как определено выше, и где D является соединением формулы (IH), (IHa) или (IHb), или его фармацевтически приемлемая соль, сложный эфир, сольват, таутомер или стереоизомер, где Z является -NH- или -О- и более предпочтительно, Z является -NH-.Another preferred drug conjugate of the formula [D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-|n-Ab of the present invention is one wherein L, (AA)w,(X)b and (T)g are as defined above, and wherein D is a compound of formula (IH), (IHa) or (IHb), or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer thereof, wherein Z is -NH- or -O- and more preferably Z is -NH-.

Еще более предпочтительный конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-(L)-]_n-Ab по настоящему изобретению является таким, где L, (AA)_w, (X)_b и (T)_g такие, как определено выше, и где D является соединением формулы (IHa) или (IHb) или его фармацевтически приемлемая соль, сложный эфир, сольват, таутомер или стереоизомер, где:An even more preferred drug conjugate of formula [D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -(L)-] _n -Ab of the present invention is one wherein L, (AA) _w , (X) _b and (T) _g are as defined above, and wherein D is a compound of formula (IHa) or (IHb) or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer thereof, wherein:

R1 является -СЫ или -OH;R1 is -CH or -OH;

R2 является -С(=О^, где Ra выбирают из водорода и замещенного или незамещенного С1-С6 алкила, где необязательными заместителями являются один или несколько заместителей R_x;R2 is -C(=O^, where Ra is selected from hydrogen and substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl, wherein the optional substituents are one or more _Rx substituents;

R3 является водородом или -OR_b группой, где R_b является замещенной или незамещенной С1-С6 алкильной группой, где необязательными заместителями являются один или несколько заместителей Rx,R3 is hydrogen or an -OR _b group, where R _b is a substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl group, where the optional substituents are one or more Rx substituents,

Y является -NH- или -О-; иY is -NH- or -O-; And

Z является -NH- или -О-.Z is -NH- or -O-.

Другой предпочтительный конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-(L)-]_n-Ab по настоящему изобретению является таким, где L, (AA)_w, (X)_b и (T)_g такие, как определено выше, и где D является соединением формулы (IHa) или (IHb), или его фармацевтическиAnother preferred drug conjugate of formula [D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -(L)-] _n -Ab of the present invention is one wherein L, (AA) _w , (X) _b and (T) _g are as defined above, and wherein D is a compound of formula (IHa) or (IHb), or its pharmaceutical

- |5 046742 приемлемая соль, сложный эфир, сольват, таутомер или стереоизомер, где:- |5 046742 an acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer, where:

R1 является -CN или -OH;R1 is -CN or -OH;

R2 является ацетилом;R2 is acetyl;

R3 является водородом или метокси, более предпочтительно, водородом;R3 is hydrogen or methoxy, more preferably hydrogen;

Y является -NH- или -O-; иY is -NH- or -O-; And

Z является -NH- или -O-.Z is -NH- or -O-.

Другой предпочтительный конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)b-(AA)_w-(T)g-(L)-]_n-Ab по настоящему изобретению является таким, где L, (AA)_w, (X)_b и (T)g такие, как определено выше, и где D является соединением формулы (IHa) или (IHb) или его фармацевтически приемлемая соль, сложный эфир, сольват, таутомер или стереоизомер, где:Another preferred drug conjugate of the formula [D-(X)b-(AA) _w- (T)g-(L)-] _n -Ab of the present invention is one wherein L, (AA) _w , (X) _b and (T)g are as defined above, and wherein D is a compound of formula (IHa) or (IHb) or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer thereof, wherein:

R₁ является -CN;R ₁ is -CN;

R₂ является ацетилом:R ₂ is acetyl:

R₃ является водородом;R ₃ is hydrogen;

Y является -NH- или -O-; иY is -NH- or -O-; And

Z является -NH-.Z is -NH-.

Другой предпочтительный конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)b-(AA)_w-(T)g-(L)-]_n-Ab по настоящему изобретению является таким, где L, (AA)_w, (X)_b и (T)g такие, как определено выше, и где D выбирают из:Another preferred drug conjugate of the formula [D-(X)b-(AA) _w- (T)g-(L)-] _n -Ab of the present invention is one wherein L, (AA) _w , (X) _b and (T)g are as defined above, and where D is selected from:

иAnd

или его фармацевтически приемлемая соль, сложный эфир, сольват, таутомер или стереоизомер; где волнистая линия означает точку ковалентного присоединения к (X)b, если имеется, или (AA)w, если имеется, или к (T)_g, если имеется, или к (L).or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer thereof; where the wavy line indicates the point of covalent attachment to (X)b, if present, or (AA)w, if present, or to (T) _g , if present, or to (L).

иAnd

или его фармацевтически приемлемая соль, сложный эфир, сольват, таутомер или стереоизомер; где волнистая линия означает точку ковалентного присоединения к (X)_b, если имеется, или (AA)_w, если имеется, или к (T)_g, если имеется, или к (L).or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer thereof; where the wavy line indicates the point of covalent attachment to (X) _b , if present, or (AA) _w , if present, or to (T) _g , if present, or to (L).

Другой предпочтительный конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)b-(AA)_w-(T)g-(L)-]_n-Ab по настоящему изобретению является таким, где L, (AA)_w, (X)_b, (T)g и D такие, как определено выше, и где группа Ab, содержащая, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, является антигенсвязывающим пептидом.Another preferred drug conjugate of the formula [D-(X)b-(AA) _w- (T)g-(L)-] _n -Ab of the present invention is one wherein L, (AA) _w , (X) _b , (T)g and D are as defined above, and wherein the Ab group containing at least one antigen binding site is an antigen binding peptide.

Другой предпочтительный конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)b-(AA)_w-(T)g-(L)-]_n-Ab по настоящему изобретению является таким, где L, (AA)_w, (X)_b, (T)g и D такие, как определено выше, и группа Ab, содержащая, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, является антителом, однодоменным антителом или его антигенсвязывающим фрагментом.Another preferred drug conjugate of the formula [D-(X)b-(AA) _w- (T)g-(L)-] _n -Ab of the present invention is one wherein L, (AA) _w , (X) _b , (T)g and D are as defined above, and the Ab group containing at least one antigen binding site is an antibody, a single domain antibody or an antigen binding fragment thereof.

Другой предпочтительный конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)b-(AA)_w-(T)g-(L)-]_n-Ab по настоящему изобретению является таким, где L, (AA)_w, (X)_b, (T)g и D такие, как определено выше, и группа Ab, содержащая, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, является моноклональным, поликлональным антителом или биспецифическим антителом, и где антитело или его антигенсвязывающий фрагмент получают из любых видов, предпочтительно, человека, мыши или кролика.Another preferred drug conjugate of the formula [D-(X)b-(AA) _w- (T)g-(L)-] _n -Ab of the present invention is one wherein L, (AA) _w , (X) _b , (T)g and D are as defined above, and the Ab group containing at least one antigen binding site is a monoclonal, polyclonal antibody or bispecific antibody, and wherein the antibody or antigen binding fragment thereof is derived from any species, preferably human, mouse or rabbit.

Другой предпочтительный конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)b-(AA)_w-(T)g-(L)-]_n-Ab по настоящему изобретению является таким, где L, (AA)_w, (X)_b, (T)g и DAnother preferred drug conjugate of the formula [D-(X)b-(AA) _w- (T)g-(L)-] _n -Ab of the present invention is one wherein L, (AA) _w , (X) _b , (T)g and D

- 46 046742 такие, как определено выше, и группа Ab, содержащая, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, является антителом или его антигенсвязывающим фрагментом, которое выбирают из группы, состоящей из антитела человека, антигенсвязывающего фрагмента антитела человека, гуманизированного антитела, антигенсвязывающего фрагмента гуманизированного антитела, химерного антитела, антигенсвязывающего фрагмента химерного антитела, гликозилированного антитела и гликолзилированного антигенсвязывающего фрагмента.- 46 046742 as defined above, and the group Ab containing at least one antigen binding site is an antibody or an antigen binding fragment thereof, which is selected from the group consisting of a human antibody, a human antigen binding fragment, a humanized antibody, an antigen binding fragment a humanized antibody, a chimeric antibody, an antigen binding fragment of a chimeric antibody, a glycosylated antibody and a glycosylated antigen binding fragment.

[D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-(L)-]n-Ab по настоящему изобретению является таким, где L, (AA)_w, (X)_b, (T)_g и D такие, как определено выше, и группой Ab, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, является антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, где антителом или его антигенсвязывающим фрагментом является антигенсвязывающий фрагмент, выбранный из группы, состоящей из Fab фрагмента, Fab' фрагмента, F(ab')2 фрагмента и Fv фрагмента.[D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -(L)-]n-Ab of the present invention is one where L, (AA) _w , (X) _b , (T) _g and D are as defined above, and the group Ab containing at least one antigen binding site is an antibody or an antigen binding fragment thereof, wherein the antibody or antigen binding fragment thereof is an antigen binding fragment selected from the group consisting of a Fab fragment, a Fab' fragment , F(ab')2 fragment and Fv fragment.

Другой предпочтительный конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-(L)-]n-Ab по настоящему изобретению является таким, где L, (AA)_w, (X)_b, (T)_g и D такие, как определено выше, и группой Ab, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, является антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, где антитело или его антигенсвязывающим фрагментом является моноклональное антитело, которое иммуноспецифически связывается с антигенами раковых клеток, вирусными антигенами, антигенами клеток, которые продуцируют аутоиммунные антитела, ассоциированные с аутоиммунным заболеванием, микробными антигенами и, предпочтительно, моноклональным антителом, которое иммуноспецифически связывается с антигенами раковой клетки.Another preferred drug conjugate of the formula [D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -(L)-]n-Ab of the present invention is one wherein L, (AA) _w , (X) _b , (T) _g and D are as defined above, and the Ab group containing at least one antigen binding site is an antibody or an antigen binding fragment thereof, wherein the antibody or an antigen binding fragment thereof is a monoclonal antibody that immunospecifically binds to cancer antigens cells, viral antigens, cell antigens that produce autoimmune antibodies associated with an autoimmune disease, microbial antigens and, preferably, a monoclonal antibody that immunospecifically binds to cancer cell antigens.

Другой предпочтительный конъюгат лекарственного средства формулы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-(L)-]n-Ab согласно настоящему изобретению является таким, где L, (AA)_w, (X)_b, (T)_g и D такие, как определено в настоящем документе, и группой Ab, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, является антитело, выбранное из группы, состоящей из абциксимаба, алемтузумаба, анетумаба, атезолизумаба, авелумаба, базиликсимаба, бевацизумаба, блинатомумаба, брентуксимаба, катумаксомаба, цетуксимаба, колтуксимаба, даклизумаба, даратумумаба, денинтузумаба, деносумаба, депатуксизумаба, динутуксимаба, дурвалумаба, элотузумаба, энфортумаба, глембатумумаба, гемтузумаба, ибритумомаба, индатуксимаба, индусатумаба, инотузумаба, ипилимумаба, лабетузумаба, ладиратузумаба, лапритуксимаба, лифастузумаба, лорвотузумаба, милатузумаба, мирветуксимаба, наратуксимаба, нецитумумаба, нимотузумаба, ниволумаба, обинутузумаба, офатумумаба, оларатумаба, омализумаба, паливизумаба, панитумумаба, пембролизумаба, пертузумаба, пинатузумаба, полатузумаба, рамуцирумаба, ровальпитузумаба, сацитузумаба, силтуксимаба, сиртратумаба, софитузумаба, вадастуксимаба, ворсетузумаба, трастузумаба, анmи-CD4 антитело, анτи-CD5 антитело, анτи-CD13 антитело и анти-CD 30 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент или его иммунологически активная часть, где предпочтительно, антитело выбирают из абциксимаба, алемтузумаба, анетумаба, атезолизумаба, авелумаба, базиликсимаба, бевацизумаба, блинатомумаба, брентуксимаба, катумаксомаба, цетуксимаба, даклизумаба, даратумумаба, денинтузумаба, деносумаба, депатуксизумаба, динутуксимаба, дурвалумаба, элотузумаба, энфортумаба, глембатумумаба, гемтузумаба, ибритумомаба, индатуксимаба, индусатумаба, инотузумаба, ипилимумаба, лабетузумаба, ладиратузумаба, лапритуксимаба, мирветуксимаба, наратуксимаба, нецитумумаба, нимотузумаба, ниволумаба, обинутузумаба, офатумумаба, оларатумаба, омализумаба, паливизумаба, панитумумаба, пембролизумаба, пертузумаба, полатузумаба, рамуцирумаба, ровальпитузумаба, сацитузумаба, силтуксимаба, сиртратумаба, вадастуксимаба, ворсетузумаба, трастузумаба, анти-CD4 антитела, антиCD5 антитела, анти-CD13 антитела и анти-CD 30 антитела или его антигенсвязывающего фрагмента или его иммунологически активной части, и еще более предпочтительно, абциксимаба, алемтузумаба, атезолизумаба, авелумаба, базиликсимаба, бевацизумаба, блинатомумаба, брентуксимаба, катумаксомаба, цетуксимаба, даклизумаба, даратумумаба, деносумаба, динутуксимаба, дурвалумаба, элотузумаба, гемтузумаба, ибритумомаба, инотузумаба, ипилимумаба, лабетузумаба, нецитузумаба, нимотузумаба, ниволумаба, обинутузумаба, офатумумаба, оларатумаба, омализумаба, паливизумаба, панитумумаба, пембролизумаба, пертузумаба, рамуцирумаба, ровальпитузумаба, силтуксимаба, трастузумаба, анти-CD4 антитела, анти-CD5 антитела, анти-CD13 антитела и анти-CD 30 антитела или его антигенсвязывающего фрагмента или его иммунологически активной части. Из них, особенно предпочтительными являются брентуксимаб, гемтузумаб, инозутумаб, ровалпитузумаб, трастузумаб, анmи-CD4 антитело, анти-CD5 антитело, анти-CD13 антитело и анти-CD 30 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент или его иммунологически активная часть; или антитело выбирают из Трастузумаба и анти-CD13 антитела или его антигенсвязывающего фрагмента или его иммунологически активной части, в частности, Трастузумаба или его антигенсвязывающего фрагмента или его иммунологически активной части.Another preferred drug conjugate of the formula [D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -(L)-]n-Ab according to the present invention is one wherein L, (AA) _w , (X) _b , (T) _g and D are as defined herein, and the Ab group containing at least one antigen binding site is an antibody selected from the group consisting of abciximab, alemtuzumab, anetumab, atezolizumab, avelumab, basiliximab, bevacizumab, blinatomumab, brentuximab, catumaxomab, cetuximab, coltuximab, daclizumab, daratumumab, denintuzumab, denosumab, depatuxizumab, dinutuximab, durvalumab, elotuzumab, enfortumab, glembatumumab, gemtuzumab, ibritumomab, ba, indusatumab, inotuzumab, ipilimumab, labetuzumab, ladiratuzumab, laprituximab, lifastuzumab, lorvotuzumab, milatuzumab, mirvetuximab, naratuximab, necitumumab, nimotuzumab, nivolumab, obinutuzumab, ofatumumab, olaratumab, omalizumab, palivizumab, panitumumab, pembrolizumab, pertuzumab, pinatuzumab, polatuzumab, ramucirumab, rovalpituzumab, sacituzumab, siltuximab, sirtratumab, sofituzumab, vadastuximab, vorsetuzumab, trastuzumab, anti-CD4 antibody, anti-CD5 antibody, anti-CD13 antibody and anti-CD 30 antibody or an antigen binding fragment or an immunologically active portion thereof, where preferably the antibody is selected from abciximab, alemtuzumab, anetumab, atezolizumab, avelumab, basiliximab, bevacizumab, blinatomumab, brentuximab, catumaxomab, cetuximab, daclizumab, daratumumab, denintuzumab, denosumab, depatuxizumab, dinutuximab, durvalumab, elotuzumab, enfortumab, glembatumumab, gemtuzumab, ibritumomab, ba, indusatumab, inotuzumab, ipilimumab, labetuzumab, ladiratuzumab, laprituximab, mirvetuximab, naratuximab, necitumumab, nimotuzumab, nivolumab, obinutuzumab, ofatumumab, olaratumab, omalizumab, palivizumab, panitumumab, pembrolizumab, pertuzumab, polatuzumab, ramucirumab, rovalpituzumab, sacituzumab, siltuximab, vadastuximab, vorsetuzumab, trastuzumab, anti-CD4 antibodies, anti-CD5 antibodies, anti-CD13 antibodies and anti-CD 30 antibodies or an antigen-binding fragment or an immunologically active part thereof, and even more preferably, abciximab, alemtuzumab, atezolizumab, avelumab, basiliximab, bevacizumab, blinatomumab, brentuximab, catumaxomab, cetuximab, daclizumab, daratumumab , denosumab, dinutuximab, durvalumab, elotuzumab, gemtuzumab, ibritumomab, inotuzumab, ipilimumab, labetuzumab, necituzumab, nimotuzumab, nivolumab, obinutuzumab, ofatumumab, olaratumab, omalizumab, palivizumab, panitumumab, pembrolizumab, uzumab, ramucirumab, rovalpituzumab, siltuximab, trastuzumab, anti -CD4 antibodies, anti-CD5 antibodies, anti-CD13 antibodies and anti-CD 30 antibodies or an antigen-binding fragment or an immunologically active part thereof. Of these, particularly preferred are brentuximab, gemtuzumab, inosutumab, rovalpituzumab, trastuzumab, anti-CD4 antibody, anti-CD5 antibody, anti-CD13 antibody and anti-CD 30 antibody or an antigen binding fragment or an immunologically active portion thereof; or the antibody is selected from Trastuzumab and an anti-CD13 antibody or an antigen binding fragment or an immunologically active part thereof, in particular Trastuzumab or an antigen binding fragment or an immunologically active part thereof.

Особенно предпочтительные конъюгаты лекарственного средства формулы [D-(X)b-(AA)_w-(T)_g-(L)-]n-Ab по настоящему изобретению включают следующие:Particularly preferred drug conjugates of the formula [D-(X)b-(AA) _w- (T) _g- (L)-]n-Ab of the present invention include the following:

(a) конъюгат лекарственного средства по настоящему изобретению где:(a) a drug conjugate of the present invention wherein:

- 47 046742- 47 046742

L выбирают из группы, состоящей из:L is selected from the group consisting of:

где: волнистые линии означают точку ковалентных присоединений к Ab (волнистая линия направо) и к (T)g, если имеется, или (AA)_w, если имеется, или к (X)_b, если имеется, или к (D) (волнистая линия налево);where: wavy lines indicate the point of covalent attachment to Ab (wavy line to the right) and to (T)g, if present, or (AA) _w , if present, or to (X) _b , if present, or to (D) ( wavy line to the left);

R₁₉ выбирают из -C1-C12 алкилена-, -O-(C1-C₁₂ алкилена), -C6-C12 арилена в одном или нескольких кольцах которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями Rx, -C1-C12 алкилен-^^^ арилена-, где ариленовая группа находится в одном или нескольких кольцах которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями Rx, -C₆-C₁₂ арилен-C₁-C₁₂алкилена-, где ариленовая группа находится в одном или нескольких кольцах которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями Rx, -C5-C12 гетероцикло-, где указанная гетероциклогруппа может быть насыщенной или ненасыщенной группой, имеющей одно или несколько колец и содержащей, по меньшей мере, один атом кислорода, азота или серы в указанных кольцах, где указанная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями Rx, -C1-C12 алкилен(C5-C12 гетероцикло)-, где указанная гетероциклогруппа может быть насыщенной или ненасыщенной группой, имеющей одно или несколько колец и содержащей, по меньшей мере, один атом кислорода, азота или серы в указанных кольцах, где указанная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями Rx, -(C₅-C₁₂ гетероцикло)-C₁-C₁₂ алкилена-, где указанная гетероциклогруппа может быть насыщенной или ненасыщенной группой, имеющей одно или несколько колец и содержащей, по меньшей мере, один атом кислорода, азота или серы в указанных кольцах, где указанная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями Rx, -(OCH₂CH₂)r- и -CH2(OCH₂CH₂)_r-, где каждый из вышеуказанных алкиленовых заместителей, по отдельности или присоединенных к другой группе углеродной цепи, может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями R_x;R ₁₉ is selected from -C1-C12 alkylene-, -O-(C1-C ₁₂ alkylene), -C6-C12 arylene on one or more rings which may be optionally substituted with one or more Rx substituents, -C1-C12 alkylene-^ ^^ arylene-, where the arylene group is on one or more rings which may be optionally substituted by one or more Rx substituents, -C ₆ -C ₁₂ arylene-C ₁ -C ₁₂ alkylene-, where the arylene group is on one or more rings which may be optionally substituted with one or more Rx substituents, -C5-C12 heterocyclo-, wherein said heterocyclo group may be a saturated or unsaturated group having one or more rings and containing at least one oxygen, nitrogen or sulfur atom in said rings wherein said group is optionally substituted with one or more Rx substituents, -C1-C12 alkylene(C5-C12 heterocyclo)-, wherein said heterocyclo group may be a saturated or unsaturated group having one or more rings and containing at least one oxygen atom , nitrogen or sulfur in said rings, wherein said group is optionally substituted with one or more Rx substituents, -(C ₅ -C ₁₂ heterocyclo)-C ₁ -C ₁₂ alkylene-, wherein said heterocyclo group may be a saturated or unsaturated group having one or several rings and containing at least one oxygen, nitrogen or sulfur atom in said rings, wherein said group is optionally substituted by one or more Rx, -(OCH ₂ CH ₂ )r- and -CH2(OCH ₂ CH ₂ ) _r substituents - wherein each of the above alkylene substituents, alone or attached to another group on the carbon chain, may be optionally substituted with one or more R _x substituents;

R30 является -C1-C6 алкиленовой- группой;R30 is a -C1-C6 alkylene group;

M выбирают из группы, состоящей из -C1-C6 алкилена-, -C1-C6 алкилен-(C₃-C₈ карбоцикло)- и фенилена, которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями Rx;M is selected from the group consisting of -C1-C6 alkylene-, -C1-C6 alkylene-(C ₃ -C ₈ carbocyclo)- and phenylene, which may be optionally substituted with one or more Rx substituents;

r является целым числом от 1-6; (AA)_w имеет формулу (II):r is an integer from 1-6; (AA) _w has formula (II):

(11) где волнистые линии означают точку ковалентных присоединений к (X)_b, если имеется, или к группе лекарственного средства (волнистая линия налево) и к (T)_g, если имеется, или к линкеру (волнистая линия направо);(11) where the wavy lines indicate the point of covalent attachment to (X) _b , if present, or to the drug group (wavy line to the left) and to (T) _g , if present, or to the linker (wavy line to the right);

R₂₁ в каждом случае выбран из группы, состоящей из водорода, метила, изопропила, изобутила, втор-бутила, бензила, п-гидроксибензила, -CH2OH, -CH(OH)CH₃, -CH2CH2SCH3, -CH2CONH2, CH2COOH, -CH2CH2CONH2, -CH2CH2COOH, -(CH2)3NHC(=NH)NH2, -(CH2)3NH2, -(CH2)3NHCOCH3, (CH2)3NHCHO, -(CH2)4NHC(=NH)NH2, -(CH2)4NH2, -(CH2)4NHCOCH3, -(CH2)4NHCHO, -(CH2)3NHCONH2, -(CH2)4NHCONH2, -CH₂CH₂CH(OH)CH₂NH₂, 2-пиридилметила-, 3-пиридилметила-, 4-пиридилметила-, фенила, циклогексила,R ₂₁ in each case is selected from the group consisting of hydrogen, methyl, isopropyl, isobutyl, sec-butyl, benzyl, p-hydroxybenzyl, -CH2OH, -CH(OH)CH ₃ , -CH2CH2SCH3, -CH2CONH2, CH2COOH, -CH2CH2CONH2 , -CH2CH2COOH, -(CH2)3NHC(=NH)NH2, -(CH2)3NH2, -(CH2)3NHCOCH3, (CH2)3NHCHO, -(CH2)4NHC(=NH)NH2, -(CH2)4NH2, - (CH2)4NHCOCH3, -(CH2)4NHCHO, -(CH2)3NHCONH2, -(CH2)4NHCONH2, -CH ₂ CH ₂ CH(OH)CH ₂ NH ₂ , 2-pyridylmethyl-, 3-pyridylmethyl-, 4-pyridylmethyl -, phenyl, cyclohexyl,

где X является удлиняющей группой, выбранной изwhere X is an extension group chosen from

- 48 046742 если D конъюгирован через аминовую группу (например, где Z является -NH-): -COO-(C₁-C₆алкилен^Н-. -COO-CH₂-(фенилен, который может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями R_x)-NH-, -COO-(C₁-C₆ алкилен)NH-COO-CH₂-(фенилен, который может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями R_x)-NH-, -COCH2NH-COCH2-NH-, COCH2-NH-, -COO-(C₁-C₆ алкилен^-, -COO-(C₁-C₆ алкилен)NHCO(C₁-C₆ алкилен^-; или если D конъюгирован через гидроксигруппу (например, где Z является -O-): -CONH-(C₁-C₆алкиле^НН^ -COO-CH₂-(фенилен, который может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями R_x)-NH-, -CONH-(C₁-C₆ алкилен)МН-СОО-СН₂-(фенилен, который может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями R_x)-NH-, -COCH2NH-COCH2-NH-, -COCH2NH-, -CONH-(C₁-C₆ алкилен^- и -CONH-(C₁-C₆ алкилеиЖНСО^-^ алкилен^-;- 48 046742 if D is conjugated through an amine group (for example, where Z is -NH-): -COO-(C ₁ -C ₆ alkylene^H-. -COO-CH ₂ -(phenylene, which may optionally be substituted by one or several substituents R _x )-NH-, -COO-(C ₁ -C ₆ alkylene)NH-COO-CH ₂ -(phenylene, which may be optionally substituted with one or more substituents R _x )-NH-, -COCH2NH-COCH2 -NH-, COCH2-NH-, -COO-(C ₁ -C ₆ alkylene^-, -COO-(C ₁ -C ₆ alkylene)NHCO(C ₁ -C ₆ alkylene^-; or if D is conjugated through a hydroxy group (for example, where Z is -O-): -CONH-(C ₁ -C ₆ alkyl^HH^ -COO-CH ₂ -(phenylene, which may be optionally substituted with one or more R _x substituents) -NH-, - CONH-(C ₁ -C ₆ alkylene)MH-COO-CH ₂ -(phenylene, which may be optionally substituted with one or more R _x substituents) -NH-, -COCH2NH-COCH2-NH-, -COCH2NH-, -CONH -(C ₁ -C ₆ alkylene^- and -CONH-(C ₁ -C ₆ alkylene and JHCO^-^ alkylene^-;

b равен 0 или 1, предпочтительно, 1;b is 0 or 1, preferably 1;

где T является удлиняющей группой, выбранной из -CO-(C₁-C₆ алкилен)-КН-, -CO-(C₁-C₆ алкилен)[O-(C₂-C₆ алкиленф-NH- и -COO-(C₁-C₆ алкилен)-[О-(С₂-С₆ алкиленф-NH-, где j является целым числом от 1 до 25;where T is an extension group selected from -CO-(C ₁ -C ₆ alkylene)-KH-, -CO-(C ₁ -C ₆ alkylene)[O-(C ₂ -C ₆ alkylene-NH- and -COO -(C ₁ -C ₆ alkylene)-[O-(C ₂ -C ₆ alkylene-NH-, where j is an integer from 1 to 25;

g равен 0 или 1;g is 0 or 1;

D является группой лекарственного средства формулы I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, IG, IH, la, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb, (IHa) или (IHb) или ее фармацевтически приемлемой солью, сложным эфиром, сольватом, таутомером или стереоизомером, где:D is a group of a drug of formula I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, IG, IH, la, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb, (IHa) or (IHb) or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer thereof, where:

R2 является C(=O)R_a, в соединениях формулы I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb, (IH), (IHa) или (IHb); R₂ является ацетилом в соединениях формулы IG, IGa или IGb, где R_a выбирают из водорода и замещенного или незамещенного C₁-C₆ алкила, где необязательными заместителями являются один или несколько заместителей Rx;R2 is C(=O)R _a , in compounds of formula I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb , IEb, IFb, (IH), (IHa) or (IHb); R ₂ is acetyl in compounds of formula IG, IGa or IGb, where R _a is selected from hydrogen and substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl, wherein the optional substituents are one or more Rx substituents;

R3 является водородом или -ORb группой в соединениях формулы I, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb,(IH), (IHa) или (IHb); R3 является водородом в соединениях формулы IA, IAa или IAb; R3 является -OR_b группой в соединениях формулы IB, IBa или IBb, где R_bявляется замещенной или незамещенной C₁-C₆ алкильной группой, где необязательными заместителями являются один или несколько заместителей R_x;R3 is hydrogen or -ORb group in compounds of formula I, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb, (IH), (IHa) or (IHb); R3 is hydrogen in compounds of formula IA, IAa or IAb; R3 is an -OR _b group in compounds of formula IB, IBa or IBb, where R _b is a substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl group, wherein the optional substituents are one or more R _x substituents;

группа Ab, содержащая, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, является антителом или его антигенсвязывающим фрагментом, и ее выбирают из группы, состоящей из антитела человека, антигенсвязывающ фрагмент антитела человека, гуманизированного антитела, антигенсвязывающего фрагмента гуманизированного антитела, химерного антитела, антигенсвязывающего фрагмента химерного антитела, гликозилированного антитела и гликозилированного антигенсвязывающего фрагмента; и n является отношением группы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-(L)-] к группе Ab, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, и является целым числом от 1 до 12.the group Ab containing at least one antigen binding site is an antibody or an antigen binding fragment thereof, and is selected from the group consisting of a human antibody, an antigen binding fragment of a human antibody, a humanized antibody, an antigen binding fragment of a humanized antibody, a chimeric antibody, an antigen binding fragment of a chimeric antibodies, glycosylated antibodies and glycosylated antigen-binding fragment; and n is the ratio of the group [D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -(L)-] to the Ab group containing at least one antigen binding site, and is an integer from 1 to 12 .

(b) конъюгат лекарственного средства по настоящему изобретению, выбранный из формул (IV), (V) и (VI):(b) a drug conjugate of the present invention selected from formulas (IV), (V) and (VI):

(VI) где: R₁₉ выбирают из -C₁-C8 алкилена-, -O-(C₁-C8 алкилена), -C₁-C8 алкилен-^-^ арилена-, где ариленовая группа находится в одном или нескольких кольцах которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями R_x, и -C₆-C₁₂ арилен-^-^ алкилена-, где ариленовая группа находится в одном или нескольких кольцах которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями R_x, где каждый из вышеуказанных алкиленовых заместителей, по отдельности или присоединенных к другой группе углеродной цепи, может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями Rx;(VI) where: R ₁₉ is selected from -C ₁ -C8 alkylene-, -O-(C ₁ -C8 alkylene), -C ₁ -C8 alkylene-^-^ arylene-, where the arylene group is on one or more rings which may be optionally substituted with one or more R _x substituents, and -C ₆ -C ₁₂ arylene-^-^ alkylene-, where the arylene group is on one or more rings which may be optionally substituted with one or more R _x substituents, where each of the above alkylene substituents, alone or attached to another group of the carbon chain, may be optionally substituted by one or more Rx substituents;

R3o является -C2-C4 алкиленовой- группой;R3o is a -C2-C4 alkylene group;

M выбирают из группы, состоящей из -C₁-C3 алкилена- и -C₁-C3 алкилен-^-^ карбоцикло)-;M is selected from the group consisting of -C ₁ -C3 alkylene- and -C ₁ -C3 alkylene-^-^ carbocyclo)-;

(AA)w имеет формулу (II)(AA)w has formula (II)

- 49 046742- 49 046742

R₂₁ ^jw (II) где: волнистые линии означают точку ковалентных присоединений к (X)b, если имеется, или к группе лекарственного средства (волнистая линия налево) и к (T)_g, если имеется, или к линкеру (волнистая линия направо);R ₂₁ ^j w (II) where: wavy lines indicate the point of covalent attachment to (X)b, if present, or to the drug group (wavy line to the left) and to (T) _g , if present, or to the linker (wavy line right);

R21 в каждом случае выбран из группы, состоящей из водорода, метила, изопропила, втор-бутила, бензила, индолилметила, -(CH2)₃NHCONH2, -(CH₂)₄NH₂, -(CH2)₃NHC(=NH)NH2 и -(CH₂)₄NHC(=NH)NH₂;R21 in each case is selected from the group consisting of hydrogen, methyl, isopropyl, sec-butyl, benzyl, indolylmethyl, -(CH2) ₃ NHCONH2, -(CH ₂ ) ₄ NH ₂ , -(CH2) ₃ NHC(=NH) NH2 and -(CH ₂ ) ₄ NHC(=NH)NH ₂ ;

w является целым числом от 0 до 6;w is an integer from 0 to 6;

X является удлиняющей группой, выбранной из группы, состоящей из если D конъюгирован через аминовую группу (например, где Z является -NH-): -COO-(C₂-C₄алкuлен)NH-, -COO-CH₂-фенилен-NH-, где указанная фениленовая группа необязательно может быть замещена от одного до четырех заместителями R_x, выбранных из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогрупп, -COO-(C₂-C₄ алкuлен)NH-COO-CH₂-(фенилен, который необязательно может быть замещен от одного до четырех заместителями R_x, выбранных из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогрупп)-NH-, -COCH2NH-COCH2-NH-, -COO-(C₂-C₄ алкилен^- и -COO-(C₂C₄ алкилен)NHCO(C₁-C₃ алкилен^-; или если D конъюгирован через гидроксигруппу (например, где Z является -O-): -CONH-(C₂^алкиле^КЕ-, -COO-CH₂-фенилен-NH-, где указанная фениленовая группа необязательно может быть замещена от одного до четырех заместителями R_x, выбранными из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогрупп, -CONH-(C₂-C₄ алкилен)NH-COO-CH₂-(фенилен, который необязательно может быть замещен от одного до четырех заместителями Rx, выбранными из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогрупп)-NH-, -COCH2NH-COCH2-NH-, -CONH-(C2C₄ алкилен^- и -CONH-(C₂-C₄ алкилен)NHCO(C₁-C₃ алкилен^-;X is an extension group selected from the group consisting of if D is conjugated via an amine group (eg where Z is -NH-): -COO-(C ₂ -C ₄ alculene)NH-, -COO-CH ₂ -phenylene- NH-, wherein said phenylene group may optionally be substituted with one to four R _x substituents selected from the group consisting of alkyl groups having 1 to 6 carbon atoms, alkoxy groups having 1 to 6 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano groups, -COO-(C ₂ -C ₄ alculene)NH-COO-CH ₂ -(phenylene, which may optionally be substituted with one to four R _x substituents selected from the group consisting of alkyl groups having from 1 to 6 carbon atoms, alkoxy groups having from 1 to 6 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano groups) -NH-, -COCH2NH-COCH2-NH-, -COO-(C ₂ -C ₄ alkylene^- and -COO-( C ₂ C ₄ alkylene)NHCO(C ₁ -C ₃ alkylene^-; or if D is conjugated through a hydroxy group (for example, where Z is -O-): -CONH-(C ₂ ^alkyl ^KE-, -COO-CH ₂ -phenylene-NH-, wherein said phenylene group may optionally be substituted with one to four R _x substituents selected from the group consisting of alkyl groups having from 1 to 6 carbon atoms, alkoxy groups having from 1 to 6 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano groups, -CONH-(C ₂ -C ₄ alkylene)NH-COO-CH ₂ -(phenylene, which may optionally be substituted with one to four Rx substituents selected from the group consisting of alkyl groups having from 1 to 6 carbon atoms, alkoxy groups having from 1 to 6 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano groups) -NH-, -COCH2NH-COCH2-NH-, -CONH-(C2C ₄ alkylene^- and -CONH-( C ₂ -C ₄ alkylene)NHCO(C ₁ -C ₃ alkylene^-;

где T является удлиняющей группой, выбранной из -CO-(C₁-C₄алкилен)-NH-, -СО-(С1-С₄алкилен)[O-(C₂-C₄алкилен)]_J-NH- и -COO-(C₁-C₄алкилен)-[O-(C₂-C₄алкилен)]_J-NH-, где j является целым числом от 1 до 10;where T is an extension group selected from -CO-(C ₁ -C ₄ alkylene)-NH-, -CO-(C1-C ₄ alkylene)[O-(C ₂ -C ₄ alkylene)] _J -NH- and -COO-(C ₁ -C ₄ alkylene)-[O-(C ₂ -C ₄ alkylene)] _J -NH-, where j is an integer from 1 to 10;

g равен 0 или 1;g is 0 or 1;

D является группой лекарственного средства формулы I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, IG, IH, la, lAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb, (IHa) или (IHb) или ее фармацевтически приемлемой солью, сложным эфиром, сольватом, таутомером или стереоизомером, где:D is a group of a drug of formula I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, IG, IH, la, lAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb, (IHa) or (IHb) or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer thereof, where:

R2 является ацетилом;R2 is acetyl;

R3 является водородом или метокси в соединениях формулы I, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb,(IH), (IHa) или (IHb); R3 является водородом в соединениях формулы IA, IAa или IAb; R3 является метоксигруппой в соединениях формулы IB, IBa или IBb, предпочтительно, R3 является водородом;R3 is hydrogen or methoxy in compounds of formula I, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, ICb, IDb, IEb, IFb, IGb,(IH), (IHa ) or (IHb); R3 is hydrogen in compounds of formula IA, IAa or IAb; R3 is a methoxy group in compounds of formula IB, IBa or IBb, preferably R3 is hydrogen;

группа Ab, содержащая, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, является антителом или его антигенсвязывающим фрагментом, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент является моноклональным антителом, которое иммуноспецифически связывается с антигенами раковых клеток, вирусными антигенами, антигенами клеток, которые продуцируют аутоиммунные антитела, ассоциированные с аутоиммунным заболеванием, микробными антигенами и, предпочтительно, моноклональным антителом, которое иммуноспецифически связывается с антигенами раковой клетки; и n является отношением группы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-(L)-] где L такой, как определен в формулах (IV), (V) или (VI), с группой Ab, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, и является целым числом от 3 до 8.an Ab group containing at least one antigen-binding site is an antibody or an antigen-binding fragment thereof, where the antibody or antigen-binding fragment is a monoclonal antibody that immunospecifically binds to cancer cell antigens, viral antigens, cell antigens that produce autoimmune antibodies associated with an autoimmune disease, microbial antigens and, preferably, a monoclonal antibody that immunospecifically binds to cancer cell antigens; and n is the relation of the group [D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -(L)-] where L is as defined in formulas (IV), (V) or (VI), with the group Ab containing at least one antigen binding site and is an integer from 3 to 8.

(c) конъюгат лекарственного средства по настоящему изобретению, выбранный из формул (IV), (V) и (VI):(c) a drug conjugate of the present invention selected from formulas (IV), (V) and (VI):

- 50 046742- 50 046742

(iv) (V)(iv) (v)

Ab (VI) где: R₁₉ выбирают из -C₁-C₆ алкилена-, -фенилен-С1-С₆ алкилена-, где фениленовая группа может быть необязательно замещена одним или несколькими заместителями R_x, выбранными из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогрупп, где каждый из вышеуказанных алкиленовых заместителей, по отдельности или присоединенных к другой группе в углеродной цепи, необязательно может быть замещен одним или несколькими заместителями R_x, выбранными из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, арильных групп, имеющих от 6 до 12 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогрупп, и предпочтительно, R₁₉ является C1-C₆ алкиленовой группой;Ab (VI) where: R ₁₉ is selected from -C ₁ -C ₆ alkylene-, -phenylene-C1-C ₆ alkylene-, where the phenylene group may be optionally substituted by one or more R _x substituents selected from the group consisting of alkyl groups having from 1 to 6 carbon atoms, alkoxy groups having from 1 to 6 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano groups, wherein each of the above alkylene substituents, alone or attached to another group in the carbon chain, may optionally be replaced by one or several R _x substituents selected from the group consisting of alkyl groups having from 1 to 6 carbon atoms, alkoxy groups having from 1 to 6 carbon atoms, aryl groups having from 6 to 12 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano groups and preferably, R ₁₉ is a C1-C ₆ alkylene group;

R30 является -C2-C4 алкиленовой- группой;R30 is a -C2-C4 alkylene group;

M является -C1-C3 алкилен-^-^ карбоцикло)-;M is -C1-C3 alkylene-^-^ carbocyclo)-;

w равен 0 или 2, и если w равен 2, то (AA)_w имеет формулу (III):w is 0 or 2, and if w is 2, then (AA) _w has formula (III):

(III) где волнистая линия означает точку ковалентных присоединений к (X)_b, если имеется, или к группе лекарственного средства (волнистая линия налево) и к (T)g, если имеется, или к линкеру (волнистая линия направо);(III) where the wavy line indicates the point of covalent attachment to (X) _b , if present, or to the drug group (wavy line to the left) and to (T)g, if present, or to the linker (wavy line to the right);

R₂₂ выбирают из метила, бензила, изопропила, втор-бутила и индолилметила;R ₂₂ is selected from methyl, benzyl, isopropyl, sec-butyl and indolylmethyl;

R23 выбирают из метила, -(CH₂)₄NH₂, -(CH₂)3NHCONH₂ и -(CH₂)3NHC(=NH)NH₂;R23 is selected from methyl, -(CH ₂ ) ₄ NH ₂ , -(CH ₂ )3NHCONH ₂ and -(CH ₂ )3NHC(=NH)NH ₂ ;

X является удлиняющей группой, выбранной из группы, состоящей из -COO-(C₂-C₄ алкилен)МИ-, -COO-CH₂-фенилен-NH-, где указанная фениленовая группа необязательно может быть замещена от одного до четырех заместителями R_x, выбранными из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогрупп, -COO-(C₂-C₄ алкuлен)NH-COO-CH₂-(фенилен, который необязательно может быть замещен от одного до четырех заместителями R_x, выбранных из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп или цианогруппуМИ-, -COCH₂NH-COCH₂-NH-,-COO-(C₂-C₄ алкилен^- и -COO(C₂-C₄ алкuлен)NHCO(C₁-C₃ алкилен^-;X is an extension group selected from the group consisting of -COO-(C ₂ -C ₄ alkylene)MI-, -COO-CH ₂ -phenylene-NH-, wherein said phenylene group may optionally be substituted with one to four R substituents _x selected from the group consisting of alkyl groups having from 1 to 6 carbon atoms, alkoxy groups having from 1 to 6 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano groups, -COO-(C ₂ -C ₄ alculene)NH-COO -CH ₂ -(phenylene, which may optionally be substituted with one to four R _x substituents selected from the group consisting of alkyl groups having 1 to 6 carbon atoms, alkoxy groups having 1 to 6 carbon atoms, halogen atoms, nitro group or cyano group MI-, -COCH ₂ NH-COCH ₂ -NH-, -COO-(C ₂ -C ₄ alkylene^- and -COO(C ₂ -C ₄ alkylene)NHCO(C ₁ -C ₃ alkylene^-;

где T является удлиняющей группой, выбранной из -CO-(C₁-C₄алкuлен)-NH-, -CO-(C₁-C₄алкилен)[O-(C₂-C₄алкuлен)]_J-NH- и -COO-(C₁-C₄алкuлен)-[O-(C₂-C₄алкuлен)]_J-NH-, где j является целым числом от 1 до 5;where T is an extension group selected from -CO-(C ₁ -C ₄ alkylene)-NH-, -CO-(C ₁ -C ₄ alkylene)[O-(C ₂ -C ₄ alkylene)] _J -NH- and -COO-(C ₁ -C ₄ alkylene)-[O-(C ₂ -C ₄ alkylene)] _J -NH-, where j is an integer from 1 to 5;

g равен 0 или 1;g is 0 or 1;

D является группой лекарственного средства формулы I, IA, IC, ID, IE, IG, IH, la, IAa, ICa, IDa, IEa, IGa, Ib, IAb, ICb, IDb, IEb, IGb, (IHa) или (IHb) или ее фармацевтически приемлемой солью, сложным эфиром, сольватом, таутомером или стереоизомером где:D is a drug group of formula I, IA, IC, ID, IE, IG, IH, la, IAa, ICa, IDa, IEa, IGa, Ib, IAb, ICb, IDb, IEb, IGb, (IHa) or (IHb ) or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer thereof where:

R1 является CN;R1 is CN;

R2 является ацетилом:R2 is acetyl:

R3 является водородом;R3 is hydrogen;

Y является -NH- или -O-;Y is -NH- or -O-;

Z является -NH-;Z is -NH-;

группа Ab, содержащая, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, является моноклональным антителом, выбранным из группы, состоящей из абциксимаба, алемтузумаба, анетумаба, атезолизумаба, авелумаба, базиликсимаба, бевацизумаба, блинатомумаба, брентуксимаба, катумаксомаба, цетуксимаба, колтуксимаба, даклизумаба, даратумумаба, денинтузумаба, деносумаба,group Ab containing at least one antigen binding site is a monoclonal antibody selected from the group consisting of abciximab, alemtuzumab, anetumab, atezolizumab, avelumab, basiliximab, bevacizumab, blinatomumab, brentuximab, catumaxomab, cetuximab, coltuximab, daclizumab, daratumumab , denintuzumab, denosumab,

- 51 046742 депатуксизумаба, динутуксимаба, дурвалумаба, элотузумаба, энфортумаба, глембатумумаба, гемтузумаба, ибритумомаба, индатуксимаба, индусатумаба, инотузумаба, ипилимумаба, лабетузумаба, ладиратузумаба, лапритуксимаба, лифастузумаба, лорвотузумаба, милатузумаба, мирветуксимаба, наратуксимаба, нецитумумаба, нимотузумаба, ниволумаба, обинутузумаба, офатумумаба, оларатумаба, омализумаба, паливизумаба, панитумумаба, пембролизумаба, пертузумаба, пинатузумаба, полатузумаба, рамуцирумаба, ровальпитузумаба, сацитузумаба, силтуксимаба, сиртратумаба, софитузумаба, вадастуксимаба, ворсетузумаба, трастузумаба, анти-CD4 антитела, анти-CD5 антитела, анти-CD13 антитела и анти-CD 30 антитела или их антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части, где предпочтительно, антитело выбирают из абциксимаба, алемтузумаба, анетумаба, атезолизумаба, авелумаба, базиликсимаба, бевацизумаба, блинатомумаба, брентуксимаба, катумаксомаба, цетуксимаба, даклизумаба, даратумумаба, денинтузумаба, деносумаба, депатуксизумаба, динутуксимаба, дурвалумаба, элотузумаба, энфортумаба, глембатумумаба, гемтузумаба, ибритумомаба, индатуксимаба, лапритуксимаба, обинутузумаба, пембролизумаба, индусатумаба, инотузумаба, ипилимумаба, лабетузумаба, ладиратузумаба, мирветуксимаба, наратуксимаба, нецитумумаба, нимотузумаба, ниволумаба, офатумумаба, оларатумаба, омализумаба, паливизумаба, панитумумаба, пертузумаба, полатузумаба, рамуцирумаба, ровальпитузумаба, сацитузумаба, силтуксимаба, сиртратумаба, вадастуксимаба, ворсетузумаба, трастузумаба, анти-CD4 антитела, антиCD5 антитела, анти-CD13 антитела и анти-CD 30 антитела или их антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части, и еще более предпочтительно, абциксимаба, алемтузумаба, атезолизумаба, авелумаба, базиликсимаба, бевацизумаба, блинатомумаба, брентуксимаба, катумаксомаба, цетуксимаба, даклизумаба, даратумумаба, деносумаба, динутуксимаба, дурвалумаба, элотузумаба, гемтузумаба, ибритумомаба, инотузумаба, ипилимумаба, лабетузумаба, нецитузумаба, нимотузумаба, ниволумаба, обинутузумаба, офатумумаба, оларатумаба, омализумаба, паливизумаба, панитумумаба, пембролизумаба, пертузумаба, рамуцирумаба, ровальпитузумаба, силтуксимаба, трастузумаба, анти-CD4 антитела, анти-CD5 антитела, анти-CD13 антитела и анти-CD 30 антитела или их антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части. Из них особенно предпочтительными являются брентуксимаб, гемтузумаб, инозутумаб, ровалпитузумаб, трастузумаб, анти-CD4 антитело, hhtu-CD5 антитело, hhtu-CD13 антитело и анти-CD 30 антитело или их антигенсвязывающ фрагмент или иммунологически активная часть; или антитело выбирают из Трастузумаба и анти-CD13 антитела или их антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активная часть, в частности, трастузумаба или его антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части; и n является отношением группы [D-(X)b-(AA)_w-(T)g-(L)-], где L такой, как определен в формулах (IV), (V) или (VI) к группе Ab, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, и является целым числом от 3 до 5.- 51 046742 depatuxizumab, dinutuximab, durvalumab, elotuzumab, enfortumab, glembatumumab, gemtuzumab, ibritumomab, indatuximab, indusatumab, inotuzumab, ipilimumab, labetuzumab, ladiratuzumab, laprituximab, lifastuzumab, lorvotuzumab ba, milatuzumab, mirvetuximab, naratuximab, necitumumab, nimotuzumab, nivolumab, obinutuzumab , ofatumumab, olaratumab, omalizumab, palivizumab, panitumumab, pembrolizumab, pertuzumab, pinatuzumab, polatuzumab, ramucirumab, rovalpituzumab, sacituzumab, siltuximab, sirtratumab, sofituzumab, vadastuximab, vorsetuzumab, trastuzumab, CD4 antibodies, anti-CD5 antibodies, anti-CD13 antibodies and an anti-CD 30 antibody or an antigen binding fragment or immunologically active portion thereof, where preferably the antibody is selected from abciximab, alemtuzumab, anetumab, atezolizumab, avelumab, basiliximab, bevacizumab, blinatomumab, brentuximab, catumaxomab, cetuximab, daclizumab, daratumumab, , denosumab, depatuxizumab, dinutuximab, durvalumab, elotuzumab, enfortumab, glembatumumab, gemtuzumab, ibritumomab, indatuximab, laprituximab, obinutuzumab, pembrolizumab, indusatumab, inotuzumab, ipilimumab, labetuzumab, ladiratuzumab, maba, naratuximab, necitumumab, nimotuzumab, nivolumab, ofatumumab, olaratumab, omalizumab, palivizumab, panitumumab, pertuzumab, polatuzumab, ramucirumab, rovalpituzumab, sacituzumab, siltuximab, sirtratumab, vadastuximab, vorsetuzumab, trastuzumab, anti-CD4 antibody, anti-CD5 antibody, anti-CD13 antibody and anti-CD 30 antibody or antigen-binding fragment thereof or immunologically active part, and even more preferably, abciximab, alemtuzumab, atezolizumab, avelumab, basiliximab, bevacizumab, blinatomumab, brentuximab, catumaxomab, cetuximab, daclizumab, daratumumab, denosumab, dinutuximab, durvalumab, elotuzumab, gemtuzumab, aba, inotuzumab, ipilimumab, labetuzumab, necituzumab, nimotuzumab, nivolumab, obinutuzumab, ofatumumab, olaratumab, omalizumab, palivizumab, panitumumab, pembrolizumab, pertuzumab, ramucirumab, rovalpituzumab, siltuximab, trastuzumab, anti-CD4 antibodies, anti-CD5 antibodies, anti-CD13 antibodies and anti-CD 3 0 antibodies or an antigen-binding fragment or immunologically active portion thereof. Of these, particularly preferred are brentuximab, gemtuzumab, inosutumab, rovalpituzumab, trastuzumab, anti-CD4 antibody, hhtu-CD5 antibody, hhtu-CD13 antibody and anti-CD 30 antibody or an antigen-binding fragment or immunologically active part thereof; or the antibody is selected from Trastuzumab and an anti-CD13 antibody or an antigen binding fragment or immunologically active portion thereof, in particular trastuzumab or an antigen binding fragment or immunologically active portion thereof; and n is the ratio of the group [D-(X)b-(AA) _w -(T)g-(L)-], where L is as defined in formulas (IV), (V) or (VI) to the group Ab containing at least one antigen binding site and is an integer from 3 to 5.

(d) конъюгат лекарственного средства по настоящему изобретению, выбранный из формул (IV), (V) и (VI):(d) a drug conjugate of the present invention selected from formulas (IV), (V) and (VI):

где: R₁₉ является -C2-C6 алкиленом-;where: R ₁₉ is -C2-C6 alkylene-;

R30 является -C2-C4 алкиленом-;R30 is -C2-C4 alkylene-;

M является -C1-C3 алкилен-^-Ц карбоцикло)-;M is -C1-C3 alkylene-^-C carbocyclo)-;

где R22 является изопропилом, R23 выбирают из метила и -(CH₂)3NHCONH₂, где волнистая линияwhere R22 is isopropyl, R23 is selected from methyl and -(CH ₂ )3NHCONH ₂ where the wavy line

- 52 046742 означает точку ковалентных присоединений к (X)b, если имеется, или к группе лекарственного средства (волнистая линия налево) и к (T)g, если имеется, или к линкеру (волнистая линия направо);- 52 046742 means the point of covalent attachment to (X)b, if present, or to the drug group (wavy line to the left) and to (T)g, if present, or to the linker (wavy line to the right);

X является удлиняющей группой, выбранной из группы, состоящей из -COO-(C₂-C₄ алкилен)МИ-, -COO-CH₂-фенилен-NH-, где указанная фениленовая группа необязательно может быть замещена от одного до четырех заместителями R_x, выбранными из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогрупп, -COO-(C₂-C₄ алкилен)NH-COO-CH₂-(фенилен, который необязательно может быть замещен от одного до четырех заместителями R_x, выбранными из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогрупп)-NH-, -COCH2NH-COCH2-NH-, -COO-(C₂-C₄ алкилен^- и -COO-(C₂C₄ алкилен)NHCO(C₁-C₃ алкилен^-;X is an extension group selected from the group consisting of -COO-(C ₂ -C ₄ alkylene)MI-, -COO-CH ₂ -phenylene-NH-, wherein said phenylene group may optionally be substituted with one to four R substituents _x selected from the group consisting of alkyl groups having from 1 to 6 carbon atoms, alkoxy groups having from 1 to 6 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano groups, -COO-(C ₂ -C ₄ alkylene)NH-COO -CH ₂ -(phenylene, which may optionally be substituted with one to four R _x substituents selected from the group consisting of alkyl groups having 1 to 6 carbon atoms, alkoxy groups having 1 to 6 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano groups) -NH-, -COCH2NH-COCH2-NH-, -COO-(C ₂ -C ₄ alkylene^- and -COO-(C ₂ C ₄ alkylene)NHCO(C ₁ -C ₃ alkylene^-;

b равен 0 или 1, предпочтительно, 1; где T является удлиняющей группой, выбранной из -CO-(C1C₄алкuлен)-NH-, -CO-(C₁-C₄алкилен)-[O-(C₂-C₄алкилен)]_j-NHC₄алкилен)]_j-NH-, где j является целым числом от 1 до 5;b is 0 or 1, preferably 1; where T is an extension group selected from -CO-(C1C ₄ alkylene)-NH-, -CO-(C ₁ -C ₄ alkylene)-[O-(C ₂ -C ₄ alkylene)] _j -NHC ₄ alkylene) ] _j -NH-, where j is an integer from 1 to 5;

g равен 0 или 1;g is 0 or 1;

D является группой лекарственного средства, выбранной из:D is a drug group selected from:

и -COO-(Cl-C₄алкuлен)-[O-(C₂-and -COO-(Cl-C ₄ alculene)-[O-(C ₂ -

или ее фармацевтически приемлемой солью, сложным эфиром, сольватом, таутомером или стереоизомером; где волнистая линия означает точку ковалентного присоединения к (X)b, если имеется, или (AA)_w, если имеется, или к (T)g, если имеется, или к (L);or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer thereof; where the wavy line indicates the point of covalent attachment to (X)b, if present, or (AA) _w , if present, or to (T)g, if present, or to (L);

группа Ab, содержащая, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, выбранный из Брентуксимаба, Гемтузумаба, Инозутумаба, Ровалпитузумаба, Трастузумаба, анти-CD4 антитела, антиCD5 антитела, анти-CD13 антитела и анти-CD 30 антитела или их антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части, и более предпочтительно, его выбирают из Трастузумаба и анти-CD13 антитела или их антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части, в частности, Трастузумаба или его антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части; и n является отношением группы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)g-(L)-], где L такой, как определен в формулах (IV), (V) или (VI) к группе Ab, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, и является целым числом от 3 до 5.group Ab containing at least one antigen binding site selected from Brentuximab, Gemtuzumab, Inosutumab, Rovalpituzumab, Trastuzumab, anti-CD4 antibody, anti-CD5 antibody, anti-CD13 antibody and anti-CD 30 antibody or an antigen binding fragment thereof or immunologically active part, and more preferably, it is selected from Trastuzumab and an anti-CD13 antibody or an antigen binding fragment or immunologically active part thereof, in particular Trastuzumab or an antigen binding fragment or immunologically active part thereof; and n is the ratio of the group [D-(X) _b -(AA) _w -(T)g-(L)-], where L is as defined in formulas (IV), (V) or (VI) to the group Ab containing at least one antigen binding site and is an integer from 3 to 5.

(e) конъюгат лекарственного средства по настоящему изобретению, выбранный из формул (IV), (V) и (VI):(e) a drug conjugate of the present invention selected from formulas (IV), (V) and (VI):

где: R₁₉ является -C₂-C₆ алкиленом-;where: R ₁₉ is -C ₂ -C ₆ alkylene-;

R30 является -C₂-C₄ алкиленом-;R30 is -C ₂ -C ₄ alkylene-;

M является -C1-C3 алкилен-^-С карбоцикло)-;M is -C1-C3 alkylene-^-C carbocyclo)-;

- 53 046742- 53 046742

где R22 является изопропилом, R23 выбирают из метила и -(CH₂)3NHCONH₂, и волнистая линия означает точку ковалентных присоединений к (X)_b, если имеется, или к группе лекарственного средства (волнистая линия налево) и к (T)_g, если имеется, или к линкеру (волнистая линия направо);where R22 is isopropyl, R23 is selected from methyl and -(CH ₂ )3NHCONH ₂ , and the wavy line indicates the point of covalent attachment to (X) _b , if any, or to the drug group (wavy line to the left) and to (T) _g , if available, or to the linker (wavy line to the right);

X является удлиняющей группой, выбранной из группы, состоящей из -COO-(C₂-C₄ алкилен)\11-, -COO-CH₂-фенилен-NH-, где указанная фениленовая группа необязательно может быть замещена от одного до четырех заместителями Rx, выбранными из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогрупп, -COO-(C₂-C₄ αлкилен)NH-COO-CH₂-(фенилен, который необязательно может быть замещен от одного до четырех заместителями R_x, выбранными из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и циано1рупп)-\11-, -COCH2NH-COCH2-NH-, -COO-(C₂-C₄ алкилен^- и -COO-(C₂C4 алкиле) i)\l ICO)(C|-C₃ алкилен^-;X is an extension group selected from the group consisting of -COO-(C ₂ -C ₄ alkylene)\11-, -COO-CH ₂ -phenylene-NH-, wherein said phenylene group may optionally be substituted with one to four substituents Rx selected from the group consisting of alkyl groups having 1 to 6 carbon atoms, alkoxy groups having 1 to 6 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano groups, -COO-(C ₂ -C ₄ αalkylene)NH-COO -CH ₂ -(phenylene, which may optionally be substituted with one to four R _x substituents selected from the group consisting of alkyl groups having 1 to 6 carbon atoms, alkoxy groups having 1 to 6 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano1 groups)-\11-, -COCH2NH-COCH2-NH-, -COO-(C ₂ -C ₄ alkylene^- and -COO-(C ₂ C4 alkyl) i)\l ICO)(C|-C ₃ alkylene^-;

где T является удлиняющей группой, выбранной из -СО-(С1-С₄алкилен)-ЫН-, -СО-(С1-С₄алкилен)[О-(С₂-С₄алкилен)]^Н- и -СЮС)-(С/-С|алкилен)-|О-(С’₂-С’.|алкилен)|_г\11-, где j является целым числом от 1 до 5;where T is an extension group selected from -CO-(C1- _C4 alkylene)-UN-, -CO-(C1- _C4 alkylene)[O-( _C2 - _C4 alkylene)]^H- and -C1C )-(C/-C|alkylene)-|O-(C' ₂ -C'.|alkylene)| _z \11-, where j is an integer from 1 to 5;

g равен 0 или 1;g is 0 or 1;

или ее фармацевтически приемлемой солью, сложным эфиром, сольватом, таутомером или стереоизомером; где волнистая линия означает точку ковалентного присоединения к (X)_b, если имеется, или (AA)_w если имеется, или к (T)_g, если имеется, или к (L);or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer thereof; where the wavy line indicates the point of covalent attachment to (X) _b , if present, or (AA) _w, if present, or to (T) _g , if present, or to (L);

группу Ab, содержащую, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, выбирают из брентуксимаба, гемтузумаба, инозутумаба, ровалпитузумаба, трастузумаба, анти-CD4 антитела, антиCD5 антитела, анти-CD13 антитела и анти-CD 30 антитела или их антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части, и более предпочтительно, ее выбирают из Трастузумаба и анти-CD13 антитела или их антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части, в частности, Трастузумаба или его антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части; и n является отношением группы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-(L)-], где L такой, как определен в формулах (IV), (V) или (VI) к группе, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, и является целым числом от 3 до 5.an Ab group containing at least one antigen binding site is selected from brentuximab, gemtuzumab, inosutumab, rovalpituzumab, trastuzumab, anti-CD4 antibody, anti-CD5 antibody, anti-CD13 antibody and anti-CD 30 antibody or an antigen binding fragment thereof or an immunologically active part, and more preferably it is selected from Trastuzumab and an anti-CD13 antibody or an antigen binding fragment or immunologically active part thereof, in particular Trastuzumab or an antigen binding fragment or immunologically active part thereof; and n is the ratio of the group [D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -(L)-], where L is as defined in formulas (IV), (V) or (VI) to the group , containing at least one antigen-binding site, and is an integer from 3 to 5.

(f) конъюгат лекарственного средства по настоящему изобретению формулы (IV):(f) the drug conjugate of the present invention of formula (IV):

АЬAB

О (IV) где: R19 является С₂-С₅ алкиленом-;O (IV) where: R19 is C ₂ -C ₅ alkylene-;

где R22 является изопропилом, R23 выбирают из метила и -(CH2)₃NHCONH2 и волнистая линия означает точку ковалентных присоединений к (X)b (волнистая линия налево) и к (T)_g, если имеется, или к линкеру (волнистая линия направо); иwhere R22 is isopropyl, R23 is selected from methyl and -(CH2) ₃ NHCONH2 and the wavy line indicates the point of covalent attachment to (X)b (wavy line to the left) and to (T) _g , if present, or to the linker (wavy line to the right ); And

- 54 046742- 54 046742

X является -COOCH₂-фенилен-NH группой;X is a -COOCH ₂ -phenylene-NH group;

b равен 1;b is equal to 1;

T является удлиняющей группой формулы -CO-(C₁-C₄алкилен)-[O-(C₂-C₄алкилен)]₄-NH-;T is an extension group of the formula -CO-(C ₁ -C ₄ alkylene)-[O-(C ₂ -C ₄ alkylene)] ₄ -NH-;

g равен 0 или 1;g is 0 or 1;

или формулы (V)or formula (V)

где M является -метилциклогексиленом-;where M is -methylcyclohexylene-;

b равен 1;b is equal to 1;

w равен 0;w is 0;

X является удлиняющей группой, выбранной из -(CH₂)3S- и -(CH₂)3NHCO(CH₂)₂S-, g равен 0;X is an extension group selected from -(CH ₂ )3S- and -(CH ₂ )3NHCO(CH ₂ ) ₂ S-, g is 0;

или формулы (VI)or formula (VI)

где R₁₉ является -C2-C5 алкиленом-;where R ₁₉ is -C2-C5 alkylene-;

R₃₀ является -C3 алкиленом-;R ₃₀ is -C3 alkylene-;

где R22 является изопропилом, R23 выбирают из метила и -(CH₂)3NHCONH₂ и волнистая линия означает точку ковалентных присоединений к (X)_b (волнистая линия налево) и к (T)_g, если имеется, или к линкеру (волнистая линия направо); иwhere R22 is isopropyl, R23 is selected from methyl and -(CH ₂ )3NHCONH ₂ and the wavy line indicates the point of covalent addition to (X) _b (wavy line to the left) and to (T) _g if present, or to the linker (wavy line right); And

b равен 1;b is equal to 1;

T является удлиняющей группой формулы -CO-(C₁-C₄ αлкилен)-[O-(C₂-C₄ алкилен)] 4-NH-;T is an extension group of the formula -CO-(C ₁ -C ₄ alkylene)-[O-(C ₂ -C ₄ alkylene)] 4-NH-;

g равен 0 или 1;g is 0 or 1;

или ее фармацевтически приемлемой солью, сложным эфиром, сольватом, таутомером или стереоизомером; где волнистая линия означает точку ковалентного присоединения к (X)_b;or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer thereof; where the wavy line indicates the point of covalent attachment to (X) _b ;

- 55 046742 группой Ab, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, является брентуксимаб, гемтузумаб, инозутумаб, ровалпитузумаб, трастузумаб, анти-CD4 антитело, анти-CD5 антитело, анти-CD13 антитело и анти-CD30 антитело или их антигенсвязывающий фрагмент или иммунологически активная часть, и более предпочтительно, ее выбирают из Трастузумаба и анти-CD13 антитела или их антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части, в частности, Трастузумаба или его антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части; и n является отношением группы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)g-(L)-], где L такой, как определен в формуле (IV), к группе Ab, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, и является целым числом от 3 до 5 и, предпочтительно, 4.- 55 046742 a group of Abs containing at least one antigen binding site is brentuximab, gemtuzumab, inosutumab, rovalpituzumab, trastuzumab, anti-CD4 antibody, anti-CD5 antibody, anti-CD13 antibody and anti-CD30 antibody or an antigen binding fragment thereof or an immunologically active portion, and more preferably, it is selected from Trastuzumab and an anti-CD13 antibody or an antigen binding fragment or immunologically active portion thereof, in particular Trastuzumab or an antigen binding fragment or immunologically active portion thereof; and n is the ratio of the group [D-(X) _b -(AA) _w -(T)g-(L)-], where L is as defined in formula (IV), to the group Ab containing at least , one antigen binding site, and is an integer from 3 to 5 and preferably 4.

g) конъюгат антитело-лекарственное средство по настоящему изобретению, выбранный из группы, состоящей из:g) an antibody-drug conjugate of the present invention selected from the group consisting of:

- 56 046742- 56 046742

( __ |_|N__ где n равен от 2 до 6, более предпочтительно, 3, 4 или 5, и каждый и независимо выбирают из брентуксимаба, гемтузумаба, инозутумаба, ровалпитузумаба, трастузумаба, анти-CD4 антитела, анти-CD5 антитела, анти-CD13 антитела и анти-CD30 антитела или их антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части, и более предпочтительно, его выбирают из трастузумаба и анти-CD13 антитела или их антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части, в частности, трастузумаба или его антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части.( __ |_|N__ where n is from 2 to 6, more preferably 3, 4 or 5, and each and independently selected from brentuximab, gemtuzumab, inosutumab, rovalpituzumab, trastuzumab, anti-CD4 antibody, anti-CD5 antibody, anti -CD13 antibodies and anti-CD30 antibodies or an antigen binding fragment or immunologically active part thereof, and more preferably, it is selected from trastuzumab and an anti-CD13 antibody or an antigen binding fragment or immunologically active part thereof, in particular trastuzumab or an antigen binding fragment or immunologically active part parts.

В варианте осуществления, конъюгаты антитело-лекарственное средство по настоящему изобретению исключают:In an embodiment, the antibody-drug conjugates of the present invention exclude:

Более предпочтительно, конъюгат антитело-лекарственное средство выбирают из группы, состоящей из:More preferably, the antibody-drug conjugate is selected from the group consisting of:

где n равен от 2 до 6, более предпочтительно, 3, 4 или 5 и выбирают из трастузумаба иwhere n is from 2 to 6, more preferably 3, 4 or 5 and is selected from trastuzumab and

8η™-ΟΠ13 антитела или их антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части, более предпочтительно, является трастузумабом или его антигенсвязывающим фрагментом или иммунологически активной частью,The 8η™-ΟΠ13 antibody or an antigen binding fragment or immunologically active part thereof is more preferably trastuzumab or an antigen binding fragment or immunologically active part thereof,

- 57 046742- 57 046742

антигенсвязывающим фрагментом или иммунологически активной частью,antigen-binding fragment or immunologically active part,

где n равен от 2 до 6, более предпочтительно, 3, 4 или 5 и ^ь выбирают из трастузумаба и анти-CD13 антитела или его антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части, более предпочтительно, является трастузумабом или его антигенсвязывающим фрагментом илиwhere n is from 2 to 6, more preferably 3, 4 or 5 and ^b is selected from trastuzumab and an anti-CD13 antibody or an antigen binding fragment or immunologically active part thereof, more preferably is trastuzumab or an antigen binding fragment or

антигенсвязывающим фрагментом или иммунологически активной частью, иan antigen-binding fragment or immunologically active portion, and

- 58 046742- 58 046742

Q__ ' где n равен от 2 до 6, более предпочтительно, 3, 4 или 5 и выбирают из трастузумаба и антиCD13 антитела или их антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части, более предпочтительно, является трастузумабом или его антигенсвязывающим фрагментом или иммунологически активной частью.Q__' where n is from 2 to 6, more preferably 3, 4 or 5 and is selected from trastuzumab and an anti-CD13 antibody or an antigen binding fragment or immunologically active part thereof, more preferably is trastuzumab or an antigen binding fragment or immunologically active part thereof.

h) конъюгат антитело-лекарственное средство по настоящему изобретению, выбран из группы, состоящей из:h) the antibody-drug conjugate of the present invention is selected from the group consisting of:

- 59 046742- 59 046742

- 60 046742- 60 046742

где n равен от 2 до 6, более предпочтительно, 3, 4 или 5, и каждый и независимо выбирают из брентуксимаба, гемтузумаба, инозутумаба, ровалпитузумаба, трастузумаба, анти-CD4 антитела, анти-CD5 антитела, анти-CD13 антитела и анти-CD30 антитела или их антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной част, и более предпочтительно, его выбирают из трастузумаба и анти-CD13 антитела или их антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части, в частности, Трастузумаба или его антигенсвязывающего фрагмента илиwhere n is from 2 to 6, more preferably 3, 4 or 5, and each and independently selected from brentuximab, gemtuzumab, inosutumab, rovalpituzumab, trastuzumab, anti-CD4 antibody, anti-CD5 antibody, anti-CD13 antibody and anti- CD30 antibody or antigen binding fragment or immunologically active portion thereof, and more preferably is selected from trastuzumab and anti-CD13 antibody or antigen binding fragment or immunologically active portion thereof, in particular Trastuzumab or antigen binding fragment or

или его антигенсвязывающим фрагментом или иммунологически активной частью.or an antigen-binding fragment or immunologically active portion thereof.

Более предпочтительно, конъюгат антитело-лекарственное средство выбирают из группы,More preferably, the antibody-drug conjugate is selected from the group

- 61 046742- 61 046742

Q — где n равен от 2 до 6, более предпочтительно, 3, 4 или 5, и является трастузумабом или его антигенсвязывающим фрагментом или иммунологически активной частью,Q - where n is from 2 to 6, more preferably 3, 4 or 5, and is trastuzumab or an antigen-binding fragment or immunologically active part thereof,

ОABOUT

где n равен от 2 до 6, более предпочтительно, 3, 4 или 5, и ' является трастузумабом или его антигенсвязывающим фрагментом или иммунологически активной частью,where n is from 2 to 6, more preferably 3, 4 or 5, and ' is trastuzumab or an antigen-binding fragment or immunologically active part thereof,

где n равен от 2 до 6, более предпочтительно, 3, 4 или 5, и является трастузумабом или его антигенсвязывающим фрагментом или иммунологически активной частью,where n is from 2 to 6, more preferably 3, 4 or 5, and is trastuzumab or an antigen-binding fragment or immunologically active part thereof,

- 62 046742- 62 046742

HN— где n равен от 2 до 6, более предпочтительно, 3, 4 или 5, и является трастузумабом или его антигенсвязывающим фрагментом или иммунологически активной частью,HN—where n is from 2 to 6, more preferably 3, 4 or 5, and is trastuzumab or an antigen-binding fragment or immunologically active part thereof,

где n равен от 2 до 6, более предпочтительно, 3, 4 или 5, и ........... является трастузумабом или его антигенсвязывающим фрагментом или иммунологически активной частью,where n is from 2 to 6, more preferably 3, 4 or 5, and ........... is trastuzumab or an antigen-binding fragment or immunologically active part thereof,

- 63 046742- 63 046742

где n равен от 2 до 6, более предпочтительно, 3, 4 или 5, и является трастузумабом или его антигенсвязывающим фрагментом или иммунологически активной частью.where n is from 2 to 6, more preferably 3, 4 or 5, and is trastuzumab or an antigen-binding fragment or immunologically active part thereof.

Особенно предпочтительно, конъюгаты антитело-лекарственное средство по настоящему изобретению должны быть в выделенной или очищенной форме.Particularly preferably, the antibody-drug conjugates of the present invention will be in isolated or purified form.

Предпочтительные соединения формулы D-(X)_b-(AA)_w-(T)g-L₁ или формулы D-(X)_b-(AA)_w-(T)g-H по настоящему изобретению включают:Preferred compounds of formula D-(X) _b -(AA) _w -(T)gL ₁ or formula D-(X) _b -(AA) _w -(T)gH of the present invention include:

соединение формулы D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1 или формулы D-(X)b-(AA)w-(T)g-H, где каждый из D, X, AA, T, L1, b, g и w такие, определено в настоящем документе в настоящем изобретении; но дополнительно, где если соединением является соединение формулы D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-H, то b+w+g^O.a compound of formula D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1 or formula D-(X)b-(AA)w-(T)gH, where each of D, X, AA, T, L1, b, g and w are as defined herein in the present invention; but additionally, where if the compound is a compound of the formula D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -H, then b+w+g^O.

соединение формулы D-(X)_b-(AA)_w-(T)g-L₁изобретению где:compound of formula D-(X) _b -(AA) _w -(T)gL ₁ invention where:

L1 является линкером формулы:L1 is a linker of the formula:

или формулы D-(X)_b-(AA)_w-(T)g-H по настоящемуor formula D-(X) _b -(AA) _w -(T)gH according to the present

где: волнистая линия означает точку ковалентного присоединения к (T)_g, если имеется, или (AA)_w, если имеется, или к (X)_b, если имеется, или к D;where: the wavy line indicates the point of covalent attachment to (T) _g , if present, or (AA) _w , if present, or to (X) _b , if present, or to D;

R₁₉ выбирают из -C1-C12 алкилена-, -O-(C₁-C₁₂ алкилена), -C₆-C₁₂ арилена в одном или нескольких кольцах которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями R_x, -C1-C₁₂алкилен-C₆-C₁₂ арилена-, где ариленовая группа находится в одном или нескольких кольцах которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями R_x, -C₆-C₁₂ арилен-Цалкилена-, где ариленовая группа находится в одном или нескольких кольцах которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями R_x, -C₅-C₁₂ гетероцикло-, где указанная гетероциклогруппа может быть насыщенной или ненасыщенной группой, имеющей одно или несколько колец и содержащей, по меньшей мере, один атом кислорода, азота или серы в указанных кольцах, где указанная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями R_x, -C1-C₁₂ алкилен(C₅-C₁₂ гетероцикло)-, где указанная гетероциклогруппа может быть насыщенной или ненасыщенной группой, имеющей одно или несколько колец и содержащей, по меньшей мере, один атом кислорода, азота или серы в указанных кольцах, где указанная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями R_x, -(C₅-C₁₂ гетероцикло)-C₁-C₁₂ алкилена-, где указанная гетероциклогруппа может быть насыщенной или ненасыщенной группой, имеющей одно или несколько колец и содержащей, по меньшей мере, один атом кислорода, азота или серы в указанных кольцах, где указанная группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями R_x, -(OCH₂CH₂)_r- иR ₁₉ is selected from -C1-C12 alkylene-, -O-(C ₁ -C ₁₂ alkylene), -C ₆ -C ₁₂ arylene on one or more rings which may be optionally substituted with one or more _Rx , -C1- substituents C ₁₂ alkylene-C ₆ -C ₁₂ arylene-, where the arylene group is on one or more rings which may be optionally substituted by one or more R _x substituents, -C ₆ -C ₁₂ arylene-Tsalkylene-, where the arylene group is on one or several rings which may be optionally substituted with one or more substituents R _x , -C ₅ -C ₁₂ heterocyclo-, where said heterocyclo group may be a saturated or unsaturated group having one or more rings and containing at least one oxygen atom, nitrogen or sulfur in said rings, wherein said group is optionally substituted with one or more R _x substituents, -C1-C ₁₂ alkylene (C ₅ -C ₁₂ heterocyclo)-, wherein said heterocyclo group may be a saturated or unsaturated group having one or more rings and containing at least one oxygen, nitrogen or sulfur atom in said rings, where said group is optionally substituted by one or more R _x substituents, -(C ₅ -C ₁₂ heterocyclo)-C ₁ -C ₁₂ alkylene-, where said a heterocyclo group may be a saturated or unsaturated group having one or more rings and containing at least one oxygen, nitrogen or sulfur atom on said rings, wherein said group is optionally substituted with one or more R _x , -(OCH ₂ CH ₂ ) substituents _r - and

- 64 046742- 64 046742

-CH₂-(OCH₂CH₂)_r-, где каждый из вышеуказанных алкиленовых заместителей, по отдельности или присоединенных к другой группе углеродной цепи, может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями Rx;-CH ₂ -(OCH ₂ CH ₂ ) _r -, wherein each of the above alkylene substituents, alone or attached to another group on the carbon chain, may be optionally substituted with one or more Rx substituents;

r является целым числом от 1-6; и каждый из D, Rx, X, AA, T, b, g и w такой, как определен в настоящем изобретении; но где если соединением является соединение формулы D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-H, то b+w+g^0.r is an integer from 1-6; and each of D, Rx, X, AA, T, b, g and w is as defined in the present invention; but where if the compound is a compound of the formula D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -H, then b+w+g^0.

соединение формулы D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-Li или формулы D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-H по настоящему изобретению, где:a compound of formula D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -Li or formula D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -H of the present invention, where:

где: волнистая линия означает точку ковалентного присоединения к (T)g, если имеется, или (AA)w, если имеется, или к (X)_b, если имеется, или к D;where: the wavy line indicates the point of covalent attachment to (T)g, if present, or (AA)w, if present, or to (X) _b , if present, or to D;

R₁₉ выбирают из -Q-C8 алкилена-, -O-(C₁-C₈ алкилена), -Q-C8 алкилен-С₆-С₁₂ арилена-, где ариленовая группа находится в одном или нескольких кольцах которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями Rx и -C₆-C₁₂ арилен-С₁-С₈ алкилена-, где ариленовая группа находится в одном или нескольких кольцах которые могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями R_x, где каждый из вышеуказанных алкиленовых заместителей, по отдельности или присоединенных к другой группе углеродной цепи, может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями R_x;R ₁₉ is selected from -Q-C8 alkylene-, -O-(C ₁ -C ₈ alkylene), -Q-C8 alkylene-C ₆ -C ₁₂ arylene-, where the arylene group is on one or more rings which may optionally be substituted with one or more Rx substituents and -C ₆ -C ₁₂ arylene-C ₁ -C ₈ alkylene-, wherein the arylene group is on one or more rings which may be optionally substituted with one or more _Rx substituents, wherein each of the above alkylene substituents , alone or attached to another group on the carbon chain, may be optionally substituted with one or more R _x substituents;

(AA)w имеет формулу (II):(AA)w has formula (II):

где волнистые линии означают точку ковалентных присоединений к (X)_b, если имеется, или к D (волнистая линия налево) и к (T)g, если имеется, или L1 или к атому водорода (волнистая линия направо);where the wavy lines indicate the point of covalent attachment to (X) _b , if present, or to D (wavy line to the left) and to (T)g, if present, or L1 or to the hydrogen atom (wavy line to the right);

где R₂₁ в каждом случае выбирают из группы, состоящей из водорода, метила, изопропила, вторбутила, бензила, индолилметила, -(CH₂)3NHCONH₂,-(CH₂)₄NH₂, -(CH₂)3NHC(=NH)NH₂ и -(CH₂)₄NHC(=NH)NH₂ и w является целым числом от 0 до 6;where R ₂₁ in each case is selected from the group consisting of hydrogen, methyl, isopropyl, sec-butyl, benzyl, indolylmethyl, -(CH ₂ )3NHCONH ₂ , -(CH ₂ ) ₄ NH ₂ , -(CH ₂ )3NHC(=NH )NH ₂ and -(CH ₂ ) ₄ NHC(=NH)NH ₂ and w is an integer from 0 to 6;

X является удлиняющей группой, выбранной из группы, состоящей из если D конъюгирован через аминовую группу (например, где Z является -NH-): -COO-(C₂-C₄алкилен)NH-,-COO-CH₂-фенилен-NH, где указанная фениленовая группа необязательно может быть замещена от одного до четырех заместителями Rx, выбранными из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогрупп, -COO-(C₂-C₄ алкилен)NH-COO-CH₂-(фенилен, который необязательно может быть замещен от одного до четырех заместителями Rx, выбранными из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогрупп)-NH-, -COCH2NH-COCH2-NH-, -COO-(C₂-C₄алкилен^- и -COO-(C₂-C₄ алкилен)-NHCO(C₁-C₃ алкилен^-, или если D конъюгирован через гидроксигруппу (например, где Z является -O-): -CONH-(C2-C4 алкилен)NH-, -COO-CH₂-фенилен-NH-, где указанная фениленовая группа необязательно может быть замещена от одного до четырех заместителями R_x, выбранными из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогрупп, -CONH-(C₂-C₄ алкилен)NH-COO-CH₂-(фенилен, который необязательно может быть замещен от одного до четырех заместителями Rx, выбранными из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогруппфМИ-, -COCH2NH-COCH2-NH-, -CONH-(C2C4 алкилен^- и -CONH-(C₂-C₄ ап<иден)\1 ICO(C’|-C’₃ алкилен^-;X is an extension group selected from the group consisting of if D is conjugated via an amine group (eg where Z is -NH-): -COO-(C ₂ -C ₄ alkylene)NH-, -COO-CH ₂ -phenylene- NH, wherein said phenylene group may optionally be substituted with one to four Rx substituents selected from the group consisting of alkyl groups having 1 to 6 carbon atoms, alkoxy groups having 1 to 6 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano groups , -COO-(C ₂ -C ₄ alkylene)NH-COO-CH ₂ -(phenylene, which may optionally be substituted with one to four Rx substituents selected from the group consisting of alkyl groups having from 1 to 6 carbon atoms , alkoxy groups having from 1 to 6 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano groups) -NH-, -COCH2NH-COCH2-NH-, -COO-(C ₂ -C ₄ alkylene^- and -COO-(C ₂ - C ₄ alkylene)-NHCO(C ₁ -C ₃ alkylene^-, or if D is conjugated through a hydroxy group (for example, where Z is -O-): -CONH-(C2-C4 alkylene)NH-, -COO-CH ₂ -phenylene-NH-, wherein said phenylene group may be optionally substituted with one to four R _x substituents selected from the group consisting of alkyl groups having from 1 to 6 carbon atoms, alkoxy groups having from 1 to 6 carbon atoms, halogen, nitro groups and cyano groups, -CONH-(C ₂ -C ₄ alkylene)NH-COO-CH ₂ -(phenylene, which may optionally be substituted with one to four Rx substituents selected from the group consisting of alkyl groups having from 1 to 6 carbon atoms, alkoxy groups having from 1 to 6 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano groups fMI-, -COCH2NH-COCH2-NH-, -CONH-(C2C4 alkylene^- and -CONH-(C ₂ -C ₄ an<idene)\1 ICO(C'|-C' ₃ alkylene^-;

T является удлиняющей группой, выбранной из -CO-(C₁-C₄ алкилен)-№И-; -CO-(C₁-C₄ алкилен)-[О(C2-C4 алкилен)])-№И- и -COO-(C₁-C₄ алкиленНО-^-^ алкилен^-КИ-, где j является целым числом от 1 до 10;T is an extension group selected from -CO-(C ₁ -C ₄ alkylene)-Ni-; -CO-(C ₁ -C ₄ alkylene)-[O(C2-C4 alkylene)])-Ni- and -COO-(C ₁ -C ₄ alkyleneNO-^-^ alkylene^-KI-, where j is an integer from 1 to 10;

b равен 0 или 1;b is 0 or 1;

g равен 0 или 1;g is 0 or 1;

где если соединением является соединение формулы D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-H, то b+w+g^0; иwhere if the compound is a compound of the formula D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -H, then b+w+g^0; And

D является группой лекарственного средства формулы I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, IG, la, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb и IGb; и ковалентно присоединен через гидрокси илиD is a group of a drug of formula I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, IG, la, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb and IGb; and covalently attached via hydroxy or

- 65 046742 аминовую группу; или является группой лекарственного средства формулы (IHa) или формулы (IHb) или ее фармацевтически приемлемой солью, сложным эфиром, сольватом, таутомером или стереоизомером где:- 65 046742 amine group; or is a drug group of formula (IHa) or formula (IHb) or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer thereof where:

где волнистые линии (IHa) и (IHb) означают точку ковалентного присоединения к (X)_b, если имеется, или (AA)_w, если имеется, или к (T)_g, если имеется, или к L₁;where the wavy lines (IHa) and (IHb) indicate the point of covalent attachment to (X) _b , if present, or (AA) _w , if present, or to (T) _g , if present, or to L ₁ ;

R₁ является -OH или -CN;R ₁ is -OH or -CN;

R2 является -C(=O)Ra группой, где Ra выбирают из водорода и замещенного или незамещенного C₁C6 алкила, где необязательными заместителями являются один или несколько заместителей Rx;R2 is a -C(=O)Ra group, where Ra is selected from hydrogen and substituted or unsubstituted C ₁ C6 alkyl, wherein the optional substituents are one or more Rx substituents;

R₃ является водородом или -OR_b группой, где R_b является замещенной или незамещенной C₁-C₆алкильной группой, где необязательными заместителями являются один или несколько заместителей R_x.R ₃ is hydrogen or an -OR _b group, where R _b is a substituted or unsubstituted C ₁ -C ₆ alkyl group, wherein the optional substituents are one or more R _x substituents.

Y является -NH- или -O-; иY is -NH- or -O-; And

Z является -NH- или -O-.Z is -NH- or -O-.

- соединение формулы D-(X)_b-(AA)_w-(T)g-L₁изобретению, где:- a compound of the formula D-(X) _b -(AA) _w -(T)gL ₁ according to the invention, where:

L₁ является группой формулы:L ₁ is a group of the formula:

где: волнистая линия означает точку ковалентного присоединения к (T)g, если имеется, или (AA)_w, если имеется, или к (X)_b, если имеется, или к D;where: the wavy line indicates the point of covalent attachment to (T)g, if present, or (AA) _w , if present, or to (X) _b , if present, or to D;

R₁₉ выбирают из -C₁-C₆ алкилена-, фенилен-С1-С₆ алкилена-, где фениленовая группа может быть необязательно замещена одним или несколькими заместителями Rx, выбранными из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогрупп, где каждый из вышеуказанных алкиленовых заместителей, по отдельности или присоединенных к другой группе в углеродной цепи, необязательно может быть замещен одним или несколькими заместителями R_x, выбранными из группы, состоящей из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, алкоксигрупп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, арильных групп, имеющих от 6 до 12 атомов углерода, атомов галогена, нитрогрупп и цианогрупп, и, предпочтительно, R₁₉ является C₁-C₆ алкиленовой группой;R ₁₉ is selected from -C ₁ -C ₆ alkylene-, phenylene-C1-C ₆ alkylene-, wherein the phenylene group may be optionally substituted by one or more Rx substituents selected from the group consisting of alkyl groups having from 1 to 6 atoms carbon, alkoxy groups having from 1 to 6 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano groups, wherein each of the above alkylene substituents, alone or attached to another group in the carbon chain, may optionally be substituted by one or more R _x substituents selected from group consisting of alkyl groups having from 1 to 6 carbon atoms, alkoxy groups having from 1 to 6 carbon atoms, aryl groups having from 6 to 12 carbon atoms, halogen atoms, nitro groups and cyano groups, and preferably R ₁₉ is C ₁ -C ₆ alkylene group;

где волнистые линии означают точку ковалентных присоединений к X (волнистая линия налево) и к (T)_g, если имеется, или L₁ или к атому водорода (волнистая линия направо);where the wavy lines indicate the point of covalent attachment to X (wavy line to the left) and to (T) _g , if any, or L ₁ or to the hydrogen atom (wavy line to the right);

R23 выбирают из метила, -(CH^hNH^, -(CI Ι2)ΛΊ ICON 12 и -(CH2)3NHC(=NH)NH2;R23 is selected from methyl, -(CH^hNH^, -(CI Ι2)ΛΊ ICON 12 and -(CH2)3NHC(=NH)NH2;

X является удлиняющей группой, выбранной из если D конъюгирован через аминовую группу (например, где Z является -NH-): -COO-CH2фенилен-NH-, -COO(CH₂)₃NHCOO-CH₂-фенилен-NH, -COO-(CH₂)₃)NH-, -COO(CH₂)₃-S- и -COO(CH2)3NHCO-(CH2)2S-, или если D конъюгирован через гидроксигруппу (например, где Z является -O-):-COO-CH₂-фениленNH-,-CONH(CH₂)₃NHCOOCH₂-фенилен-NH-,X is an extension group selected from if D is conjugated via an amine group (eg where Z is -NH-): -COO-CH2phenylene-NH-, -COO( _CH2 ) _3NHCOO - _CH2- phenylene-NH, -COO -(CH ₂ ) ₃ )NH-, -COO(CH ₂ ) ₃ -S- and -COO(CH2)3NHCO-(CH2)2S-, or if D is conjugated via a hydroxy group (for example, where Z is -O-) :-COO-CH ₂ -phenyleneNH-,-CONH(CH ₂ ) ₃ NHCOOCH ₂ -phenylene-NH-,

-CONH(CH2)3NHCO(CH2)2S-,-CONH(CH2)3NHCO(CH2)2S-,

-CONH(CH₂)3NH-,-CONH(CH ₂ )3NH-,

-CONH(CH₂)3-Sгде T является удлиняющей группой, выбранной из -CO-(C1-C₄ алкилен^КИ-, -CO-(C1-C₄ алкилен)[O-(C₂-C₄ алкилен)]j-NH- и -COO-(C1-C₄ алкилен)-[О-(С₂-С₄ алкилен)]j-NH-, где j является целым числом-CONH(CH ₂ )3-Swhere T is an extension group selected from -CO-(C1-C ₄ alkylene^KI-, -CO-(C1-C ₄ alkylene)[O-(C ₂ -C ₄ alkylene) ]j-NH- and -COO-(C1-C ₄ alkylene)-[O-(C ₂ -C ₄ alkylene)]j-NH-, where j is an integer

- 66 046742 от 1 до 5;- 66 046742 from 1 to 5;

b равен 0 или 1;b is 0 or 1;

g равен 0 или 1;g is 0 or 1;

где, если соединением является соединение формулы D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-H, то b+w+g#0; иwhere, if the compound is a compound of the formula D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -H, then b+w+g#0; And

D является группой лекарственного средства формулы I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb и IGb; и ковалентно присоединен через гидрокси или аминовую группу; или является группой лекарственного средства формулы (IHa) или формулы (IHb) или ее фармацевтически приемлемой солью, сложным эфиром, сольватом, таутомером или стереоизомером:D is a group of a drug of formula I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, IG, Ia, IAa, IBa, ICa, IDa, IEa, IFa, IGa, Ib, IAb, IBb, ICb, IDb, IEb, IFb and IGb; and covalently attached via a hydroxy or amine group; or is a drug group of formula (IHa) or formula (IHb) or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer thereof:

где волнистые линии (IHa) и (IHb) означают точку ковалентного присоединения;where the wavy lines (IHa) and (IHb) indicate the point of covalent addition;

R1 является -CN или -OH;R1 is -CN or -OH;

R2 является ацетилом;R2 is acetyl;

R3 является водородом или метокси, предпочтительно, водородом;R3 is hydrogen or methoxy, preferably hydrogen;

Y является -NH- или -O-, иY is -NH- or -O-, and

Z является -NH- или -O-.Z is -NH- or -O-.

Соединение формулы D-(X)_b-(AA)_w-(T)g-L1 изобретению, где:A compound of the formula D-(X) _b -(AA) _w -(T)g-L1 according to the invention, where:

или формулы D-(X)b-(AA)_w-(T)g-H по настоящемуor the formula D-(X)b-(AA) _w -(T)gH according to the present

где: волнистая линия означает точку ковалентного присоединения к (T)_g, если имеется, или (AA) если имеется, или к (X)_b, если имеется, или к D;where: the wavy line indicates the point of covalent attachment to (T) _g if present, or (AA) if present, or to (X) _b , if present, or to D;

R₁₉ является -C2-C6 алкиленом-;R ₁₉ is -C2-C6 alkylene-;

R₂₂ является изопропилом, R₂₃ выбирают из метила и -(CH₂)₃NHCONH₂, где волнистые линии означают точку ковалентных присоединений к X (волнистая линия налево) и к (T)g, если имеется, или L1 или к атому водорода (волнистая линия направо);R ₂₂ is isopropyl, R ₂₃ is selected from methyl and -(CH ₂ ) ₃ NHCONH ₂ where the wavy lines indicate the point of covalent addition to X (wavy line to the left) and to (T)g, if present, or L1 or a hydrogen atom (wavy line to the right);

X является удлиняющей группой, выбранной из -COO-CH₂-фенилен-NH-, -COO(CH₂)3NHCOO-CH₂фенилен-NH, -COO-(CH2b)NH-, -COO(CH2)3-S- и -COO-(CH2bNHCO-(CH2)2S-;X is an extension group selected from -COO-CH ₂ -phenylene-NH-, -COO(CH ₂ )3NHCOO-CH ₂ phenylene-NH-, -COO-(CH2b)NH-, -COO(CH2)3-S- and -COO-(CH2bNHCO-(CH2)2S-;

где T является удлиняющей группой, выбранной из -CO-(C1-C₄ алкилен)-МИ-, -CO-(C1-C₄ алкилен)[O-(C₂-C₄ αлкилен)]j-NH- и -COO-(C1-C₄ алкилен)-[О-(С₂-С₄ алкиленф-МИ-, где j является целым числом от 1 до 5;where T is an extension group selected from -CO-(C1-C ₄ alkylene)-MI-, -CO-(C1-C ₄ alkylene)[O-(C ₂ -C ₄ αalkylene)]j-NH- and - COO-(C1-C ₄ alkylene)-[O-(C ₂ -C ₄ alkylene-MI-, where j is an integer from 1 to 5;

b равен 0 или 1;b is 0 or 1;

g равен 0 или 1;g is 0 or 1;

где если соединением является соединение формулы D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-H, то b+w+g#0; иwhere if the compound is a compound of the formula D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -H, then b+w+g#0; And

- 67 046742- 67 046742

или ее фармацевтически приемлемой солью, сложным эфиром, сольватом, таутомером или стереоизомером; где волнистая линия означает точку ковалентного присоединения.or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, tautomer or stereoisomer thereof; where the wavy line indicates the point of covalent addition.

соединение формулы D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-L₁ или формулы D-(X)_b-(AA)_w-(T)_g-H по настоящему изобретению, где:a compound of formula D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -L ₁ or formula D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -H according to the present invention, where:

L1 является группой формулы:L1 is a group of the formula:

R₁₉ является -C2-C5 алкиленом-;R ₁₉ is -C2-C5 alkylene-;

где R22 является изопропилом, R23 выбирают из метила и -(CH₂)3NHCONH₂, где волнистые линии означают точку ковалентных присоединений к X (волнистая линия налево) и к (T)g, если имеется, или L1 или к атому водорода (волнистая линия направо);where R22 is isopropyl, R23 is selected from methyl and -(CH ₂ )3NHCONH ₂ where the wavy lines indicate the point of covalent addition to X (wavy line to the left) and to (T)g, if present, or L1 or to the hydrogen atom (wavy line to the right);

X является -COO-CH₂-фенилен-NH- группой;X is -COO-CH ₂ -phenylene-NH- group;

T является -CO-(CH₂)₂-[O-(CH₂)₂]₄-NH- группой;T is a -CO-(CH ₂ ) ₂ -[O-(CH ₂ ) ₂ ] ₄ -NH- group;

b равен 0 или 1;b is 0 or 1;

g равен 0 или 1;g is 0 or 1;

- 68 046742- 68 046742

соединение формулы D-X-(AA)_w-(T)_s-L₁, выбранное из:a compound of formula DX-(AA) _w -(T) _s -L ₁ selected from:

- 69 046742- 69 046742

соединение формулы D-X-(AA)_w-(T)_g-L₁, выбранное из:a compound of formula DX-(AA) _w -(T) _g -L ₁ selected from:

- 70 046742- 70 046742

ОABOUT

оO

Термин фармацевтически приемлемые соли, сложные эфиры, сольваты, таутомеры или стереоизомеры в конъюгатах лекарственного средства настоящего изобретения относится к любой фармацевтически приемлемой соли, сложному эфиру, сольвату, гидрату или стереозиомерной форме или любому другому соединению, которое, при введении пациенту, способно предоставлять соединение, как описано в настоящем документе, прямо или косвенно. Однако следует принимать во внимание, что не фармацевтически приемлемые соли также подпадают в объем изобретения, поскольку они могут быть полезны при получении фармацевтически приемлемых солей. Получение солей, пролекарств и производных может осуществляться способами, известными в данной области техники.The term pharmaceutically acceptable salts, esters, solvates, tautomers or stereoisomers in the drug conjugates of the present invention refers to any pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate, hydrate or stereoisomer form or any other compound that, when administered to a patient, is capable of providing the compound as described herein, directly or indirectly. However, it should be appreciated that non-pharmaceutically acceptable salts also fall within the scope of the invention since they may be useful in the preparation of pharmaceutically acceptable salts. The preparation of salts, prodrugs and derivatives can be carried out by methods known in the art.

- 71 046742- 71 046742

Например, фармацевтически приемлемые соли соединений, представленных в настоящем документе, синтезируют из исходного соединения, которое содержит основную или кислотную группу, обычными химическими способами. Обычно такие соли получают, например, путем взаимодействия свободных кислотных или основных форм этих соединений со стехиометрическим количеством соответствующего основания или кислоты в воде или в органическом растворителе или в их смеси. Обычно предпочтительны не водные среды, такие как простой эфир, этилацетат, этанол, изопропанол или ацетонитрил. Примеры кислотно-аддитивных солей включают аддитивные соли минеральных кислот, такие как, например, гидрохлорид, гидробромид, гидроиодид, сульфат, нитрат, фосфат, и аддитивные соли органических кислот, такие как, например, ацетат, трифторацетат, малеат, фумарат, цитрат, оксалат, сукцинат, тартрат, малат, миндалят, метансульфонат и п-толуолсульфонат. Примеры аддитивных солей щелочных металлов включают неорганические соли, такие как, например, соли натрия, калия, кальция и аммония, и соли органических щелочных металлов, такие как, например, этилендиамин, этаноламин, ^№диалкилэтаноламин, триэтаноламин и соли основных аминокислот.For example, pharmaceutically acceptable salts of the compounds provided herein are synthesized from a parent compound that contains a basic or acidic group by conventional chemical methods. Typically such salts are prepared, for example, by reacting the free acid or base forms of these compounds with a stoichiometric amount of the corresponding base or acid in water or an organic solvent or a mixture thereof. Generally, non-aqueous media such as ether, ethyl acetate, ethanol, isopropanol or acetonitrile are preferred. Examples of acid addition salts include mineral acid addition salts such as, for example, hydrochloride, hydrobromide, hydroiodide, sulfate, nitrate, phosphate, and organic acid addition salts, such as, for example, acetate, trifluoroacetate, maleate, fumarate, citrate, oxalate , succinate, tartrate, malate, almond, methanesulfonate and p-toluenesulfonate. Examples of alkali metal addition salts include inorganic salts such as, for example, sodium, potassium, calcium and ammonium salts, and organic alkali metal salts, such as, for example, ethylenediamine, ethanolamine, N-dialkylethanolamine, triethanolamine and basic amino acid salts.

Конъюгат лекарственного средства по настоящему изобретению может быть в кристаллической форме, либо в виде свободных соединений, либо в виде сольватов (например, гидратов), и предполагается, что обе формы входят в объем настоящего изобретения. Способы сольватации обычно известны в данной области техники.The drug conjugate of the present invention may be in crystalline form, either as free compounds or as solvates (eg, hydrates), and both forms are intended to be within the scope of the present invention. Solvation methods are generally known in the art.

Любое соединение, которое является пролекарством конъюгата лекарственного средства настоящего изобретения, находится в пределах объема и сути изобретения. Термин пролекарство используется в самом широком смысле и охватывает те производные, которые превращаются in vivo в соединения по настоящему изобретению. Такие производные могут быть очевидны специалистам в данной области техники и включают, например, соединения, где свободная гидроксигруппа превращается в производное сложного эфира. Многие подходящие пролекарства хорошо известны специалистам в данной области техники, и их можно найти, например, в Burger Medicinal Chemistry и Drug Discovery 6^th ed. (Donald J. Abraham ed., 2001, Wiley) и Design и Applications of Prodrugs (H. Bundgaard ed., 1985, Harwood Academic Publishers), содержания которых включены в настоящий документ в качестве ссылки.Any compound that is a prodrug of a drug conjugate of the present invention is within the scope and spirit of the invention. The term prodrug is used in its broadest sense and covers those derivatives that are converted in vivo into the compounds of the present invention. Such derivatives may be apparent to those skilled in the art and include, for example, compounds where the free hydroxy group is converted to an ester derivative. Many suitable prodrugs are well known to those skilled in the art and can be found, for example, in Burger Medicinal Chemistry and Drug Discovery 6 ^th ed. (Donald J. Abraham ed., 2001, Wiley) and Design and Applications of Prodrugs (H. Bundgaard ed., 1985, Harwood Academic Publishers), the contents of which are incorporated herein by reference.

Что касается соединений настоящего изобретения, фармакологически приемлемые сложные эфиры особо не ограничены и могут быть выбраны специалистом в данной области техники. В случае указанных сложных эфиров предпочтительно, чтобы такие сложные эфиры можно было расщеплять биологическим способом, таким как гидролиз in vivo. Группой, составляющей указанные сложные эфиры (группой, показанной как R, если ее сложные эфиры выражены как -COOR), может быть, например, C1-C4 алкокси C1-C4 алкильная группа, такая как метоксиэтил, 1-этоксиэтил, 1-метил-1метоксиэтил, 1-(изопропокси)этил, 2-метоксиэтил, 2-этоксиэтил, 1,1-диметил-1-метоксиметил, этоксиметил, пропоксиметил, изопропоксиметил, бутоксиметил или трет-бутоксиметил; C1-C4 алкоксилированная C1-C4 алкокси C1-C4 алкильная группа, такая как 2-метоксиэтоксиметил; C₆-Cio арилокси C1-C4 алкильная группа, такая как феноксиметил; галогенированная C1-C4 алкокси C1-C4 алкильная группа, такая как 2,2,2-трихлорэтоксиметил или бис(2-хлорэтокси)метил; C₁-C₄алкоксикарбонил C₁-C₄ алкильная группа, такая как метоксикарбонилметил; циано C₁-C₄ алкильная группа, такая как цианометил или 2-цианоэтил; C₁-C₄ алкилтиометильная группа, такая как фенилтиометил или нафтилтиометил; C₁-C₄ алкилсульфонил C₁-C₄ низшая алкильная группа, которая может быть необязательно замещена атомом (атомами) галогена, такая как 2-метансульфонилэтил или 2трифторметансульфонилэтил; C6-C10 арилсульфонил C1-C4 алкильная группа, такая как 2бензолсульфонилэтил или 2-толуолсульфонилэтил; C1-C7 алифатический ацилокси C1-C4 алкильная группа, такая как формилоксиметил, ацетоксиметил, пропионилоксиметил, бутурилоксиметил, пивалоилоксиметил, валерилоксиметил, изовалерилоксиметил, гексаноилоксиметил, 1-формилоксиэтил, 1-ацетоксиэтил, 1-пропионилоксиэтил, 1-бутурилоксиэтил, 1-пивалоилоксиэтил, 1-валерилоксиэтил, 1изовалерилоксиэтил, 1-гексаноилоксиэтил, 2-формилоксиэтил, 2-ацетоксиэтил, 2-пропионилоксиэтил, 2бутурилоксиэтил, 2-пивалоилоксиэтил, 2-валерилоксиэтил, 2-изовалерилоксиэтил, 2-гексаноилоксиэтил, 1-формилоксипропил, 1-ацетоксипропил, 1-пропионилоксипропил, 1-бутурилоксипропил, 1пивалоилоксипропил, 1-валерилоксипропил, 1-изовалерилоксипропил, 1-гексаноилоксипропил, 1ацетоксибутил, 1-пропионилоксибутил, 1-бутурилоксибутил, 1-пивалоилоксибутил, 1-ацетоксипентил, 1пропионилоксипентил, 1-бутурилоксипентил, 1-пивалоилоксипентил или 1-пивалоилоксигексил; C₅-C₆циклоалкилкарбонилокси C₁-C₄ алкильная группа, такая как циклопентилкарбонилоксиметил, циклогексилкарбонилоксиметил, 1-циклопентилкарбонилоксиэтил, 1-циклогексилкарбонилоксиэтил, 1циклопентилкарбонилоксипропил, 1-циклогексилкарбонилоксипропил, 1циклопентилкарбонилоксибутил или 1-циклогексилкарбонилоксибутил; C6-C10 арилкарбонилокси C1-C4 алкильная группа, такая как бензоилоксиметил; C1-C6 алкоксикарбонилокси C1-C4 алкильная группа, такая как метоксикарбонилоксиметил, 1-(метоксикарбонилокси)этил, 1-(метоксикарбонилокси)пропил, 1-(метоксикарбонилокси)бутил, 1-(метоксикарбонилокси)пентил, 1-(метоксикарбонилокси)гексил, этоксикарбонилоксиметил, 1-(этоксикарбонилокси)этил, 1-(этоксикарбонилокси)пропил, 1(этоксикарбонилокси)бутил, 1-(этоксикарбонилокси)пентил, 1-(этоксикарбонилокси)гексил,With regard to the compounds of the present invention, pharmacologically acceptable esters are not particularly limited and can be selected by one skilled in the art. In the case of these esters, it is preferable that such esters can be cleaved by a biological method, such as in vivo hydrolysis. The group constituting these esters (the group shown as R when its esters are expressed as -COOR) may be, for example, a C1-C4 alkoxy C1-C4 alkyl group such as methoxyethyl, 1-ethoxyethyl, 1-methyl- 1-methoxyethyl, 1-(isopropoxy)ethyl, 2-methoxyethyl, 2-ethoxyethyl, 1,1-dimethyl-1-methoxymethyl, ethoxymethyl, propoxymethyl, isopropoxymethyl, butoxymethyl or tert-butoxymethyl; a C1-C4 alkoxylated C1-C4 alkoxy C1-C4 alkyl group such as 2-methoxyethoxymethyl; a C ₆ -Cio aryloxy C1-C4 alkyl group such as phenoxymethyl; a halogenated C1-C4 alkoxy C1-C4 alkyl group such as 2,2,2-trichloroethoxymethyl or bis(2-chloroethoxy)methyl; a C ₁ -C ₄ alkoxycarbonyl C ₁ -C ₄ alkyl group such as methoxycarbonylmethyl; a cyano C ₁ -C ₄ alkyl group such as cyanomethyl or 2-cyanoethyl; a C ₁ -C ₄ alkylthiomethyl group such as phenylthiomethyl or naphthylthiomethyl; a C ₁ -C ₄ alkylsulfonyl C ₁ -C ₄ lower alkyl group which may be optionally substituted with halogen atom(s), such as 2-methanesulfonylethyl or 2-trifluoromethanesulfonylethyl; a C6-C10 arylsulfonyl C1-C4 alkyl group such as 2-benzenesulfonylethyl or 2-toluenesulfonylethyl; C1-C7 aliphatic acyloxy C1-C4 alkyl group such as formyloxymethyl, acetoxymethyl, propionyloxymethyl, buturyloxymethyl, pivaloyloxymethyl, valeryloxymethyl, isovaleryloxymethyl, hexanoyloxymethyl, 1-formyloxyethyl, 1-acetoxyethyl, 1-propionyloxyethyl, 1-buturyloxyethyl, yloxyethyl, 1 -valeryloxyethyl, 1-isovaleryloxyethyl, 1-hexanoyloxyethyl, 2-formyloxyethyl, 2-acetoxyethyl, 2-propionyloxyethyl, 2-buturyloxyethyl, 2-pivaloyloxyethyl, 2-valeryloxyethyl, 2-isovaleryloxyethyl, 2-hexanoyloxyethyl, 1-formyloxypropyl, acetoxypropyl, 1-propionyloxypropyl , 1-buturyloxypropyl, 1-pivaloyloxypropyl, 1-valeryloxypropyl, 1-isovaleryloxypropyl, 1-hexanoyloxypropyl, 1-acetoxybutyl, 1-propionyloxybutyl, 1-buturyloxybutyl, 1-pivaloyloxybutyl, 1-acetoxypentyl, 1-propionyloxypentyl, tyl, 1-pivaloyloxypentyl or 1-pivaloyloxyhexyl ; C ₅ -C ₆ cycloalkylcarbonyloxy C ₁ -C ₄ alkyl group such as cyclopentylcarbonyloxymethyl, cyclohexylcarbonyloxymethyl, 1-cyclopentylcarbonyloxyethyl, 1-cyclohexylcarbonyloxyethyl, 1-cyclopentylcarbonyloxypropyl, 1-cyclohexylcarbonyloxypropyl, 1-cyclopentylcarbonyloxybutyl or 1-cyclo exylcarbonyloxybutyl; a C6-C10 arylcarbonyloxy C1-C4 alkyl group such as benzoyloxymethyl; C1-C6 alkoxycarbonyloxy C1-C4 alkyl group such as methoxycarbonyloxymethyl, 1-(methoxycarbonyloxy)ethyl, 1-(methoxycarbonyloxy)propyl, 1-(methoxycarbonyloxy)butyl, 1-(methoxycarbonyloxy)pentyl, 1-(methoxycarbonyloxy)hexyl, ethoxycarbonyloxymethyl , 1-(ethoxycarbonyloxy)ethyl, 1-(ethoxycarbonyloxy)propyl, 1(ethoxycarbonyloxy)butyl, 1-(ethoxycarbonyloxy)pentyl, 1-(ethoxycarbonyloxy)hexyl,

- 72 046742 пропоксикарбонилоксиметил, 1-(пропоксикарбонилокси)этил, 1-(пропоксикарбонилокси)пропил, 1(пропоксикарбонилокси)бутил, изопропоксикарбонилоксиметил, 1-(изопропоксикарбонилокси)этил, 1(изопропоксикарбонилокси)бутил, бутоксикарбонилоксиметил, 1-(бутоксикарбонилокси)этил, 1(бутоксикарбонилокси)пропил, 1-(бутоксикарбонилокси)бутил, изобутоксикарбонилоксиметил, 1(изобутоксикарбонилокси)этил, 1-(изобутоксикарбонилокси)пропил, 1-(изобутоксикарбонилокси)бутил, трет-бутоксикарбонилоксиметил, 1-(трет-бутоксикарбонилокси)этил, пентилоксикарбонилоксиметил, 1(пентилоксикарбонилокси)этил, 1-(пентилоксикарбонилокси)пропил, гексилоксикарбонилоксиметил, 1(гексилоксикарбонилокси)этил или 1-(гексилоксикарбонилокси)пропил; C₅-C₆ циклоалкилоксикарбонилокси C1-C4 алкильная группа, такая как циклопентилоксикарбонилоксиметил, 1(циклопентилоксикарбонилокси)этил, 1 -(циклопентилоксикарбонилокси)пропил, 1 (циклопентилоксикарбонилокси)бутил, циклогексилоксикарбонилоксиметил, 1(циклогексилоксикарбонилокси)этил, 1-(циклогексилоксикарбонилокси)пропил или 1(циклогексилоксикарбонилокси)бутил; [5-(C1-C₄ алкил)-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил]метильная группа, такая как (5-метил-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил)метил, (5-этил-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил)метил, (5пропил-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил)метил, (5-изопропил-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил)метил или (5-бутил-2оксо-1,3-диоксолен-4-ил)метил; [5-(фенил, который может быть необязательно замещен C1-C4 алкилом, C1-C4 алкокси или атомами галогена)-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил]метильная группа, такая как (5-фенил-2оксо-1,3-диоксолен-4-ил)метил, [5-(4-метилфенил)-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил]метил, [5-(4метоксифенил)-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил]метил, [5-(4-фторфенил)-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил]метил или [5-(4-хлорфенил)-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил]метил; или фталидильная группа, которая может быть необязательно замещена C1-C4 алкильной или C1-C4 алкоксигруппами, такая как фталидил, диметилфталидил или диметоксифталидил и, предпочтительно, является пивалоилоксиметильной группой, фталидильной группой или (5-метил-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил)метильной группой, и более предпочтительно, (5-метил-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил)метильной группой.- 72 046742 propoxycarbonyloxymethyl, 1-(propoxycarbonyloxy)ethyl, 1-(propoxycarbonyloxy)propyl, 1(propoxycarbonyloxy)butyl, isopropoxycarbonyloxymethyl, 1-(isopropoxycarbonyloxy)ethyl, 1(isopropoxycarbonyloxy)butyl, butoxycarbonyloxymethyl, 1-(butoxycarbonyl), yloxy)ethyl, 1 (butoxycarbonyloxy)propyl, 1-(butoxycarbonyloxy)butyl, isobutoxycarbonyloxymethyl, 1-(isobutoxycarbonyloxy)ethyl, 1-(isobutoxycarbonyloxy)propyl, 1-(isobutoxycarbonyloxy)butyl, tert-butoxycarbonyloxymethyl, 1-(tert-butoxycarbonyloxy)ethyl, pentyloxycarbonyloxymethyl, 1 (pentyloxycarbonyloxy)ethyl, 1-(pentyloxycarbonyloxy)propyl, hexyloxycarbonyloxymethyl, 1(hexyloxycarbonyloxy)ethyl or 1-(hexyloxycarbonyloxy)propyl; C ₅ -C ₆ cycloalkyloxycarbonyloxy C1-C4 alkyl group such as cyclopentyloxycarbonyloxymethyl, 1(cyclopentyloxycarbonyloxy)ethyl, 1-(cyclopentyloxycarbonyloxy)propyl, 1(cyclopentyloxycarbonyloxy)butyl, cyclohexyloxycarbonyloxymethyl, 1(cyclohexyloxycarbonyloxy)ethyl, yloxycarbonyloxy)propyl or 1(cyclohexyloxycarbonyloxy)butyl; [5-(C1-C ₄ alkyl)-2-oxo-1,3-dioxolen-4-yl]methyl group such as (5-methyl-2-oxo-1,3-dioxolen-4-yl)methyl , (5-ethyl-2-oxo-1,3-dioxolen-4-yl)methyl, (5-propyl-2-oxo-1,3-dioxolen-4-yl)methyl, (5-isopropyl-2-oxo- 1,3-dioxolen-4-yl)methyl or (5-butyl-2oxo-1,3-dioxolen-4-yl)methyl; [5-(phenyl, which may be optionally substituted with C1-C4 alkyl, C1-C4 alkoxy or halogen atoms)-2-oxo-1,3-dioxolen-4-yl]methyl group such as (5-phenyl-2oxo -1,3-dioxolen-4-yl)methyl, [5-(4-methylphenyl)-2-oxo-1,3-dioxolen-4-yl]methyl, [5-(4methoxyphenyl)-2-oxo-1 ,3-dioxolen-4-yl]methyl, [5-(4-fluorophenyl)-2-oxo-1,3-dioxolen-4-yl]methyl or [5-(4-chlorophenyl)-2-oxo-1 ,3-dioxolen-4-yl]methyl; or a phthalidyl group which may be optionally substituted with C1-C4 alkyl or C1-C4 alkoxy groups, such as phthalidyl, dimethylphthalidyl or dimethoxyphthalidyl and is preferably a pivaloyloxymethyl group, phthalidyl group or (5-methyl-2-oxo-1,3- a dioxolen-4-yl)methyl group, and more preferably a (5-methyl-2-oxo-1,3-dioxolen-4-yl)methyl group.

Подразумевается, что любое соединение, упомянутое в настоящем документе, представляет такое конкретное соединение, а также определенные варианты или формы. В частности, соединения, упомянутые в настоящем документе, могут иметь асимметричные центры и, следовательно, существовать в различных энантиомерных формах. Все оптические изомеры и стереоизомеры соединений, упомянутых в настоящем документе, и их смеси рассматриваются в пределах объема настоящего изобретения. Таким образом, любое данное соединение, упомянутое в настоящем документе, предназначено для представления любого из рацемата, одной или нескольких энантиомерных форм, одной или нескольких диастереомерных форм, одной или нескольких атропизомерных форм и их смесей. В частности, конъюгаты лекарственного средства формулы [D-(X)b-(AA)_w-(T)g-(L)]n-Ab и соединения формулы D-X-(AA)_w-(T)g-Li или D-X-(AA)_w-(T)g-H могут включать энантиомеры в зависимости от их асимметрии, или диастереоизомеры. Стереоизомерия вокруг двойной связи также возможна, поэтому в некоторых случаях молекула могла существовать как ^-изомер или (2)-изомер. Если молекула содержит несколько двойных связей, каждая двойная связь будет иметь свою собственную стереоизомерию, которая может быть такой же или отличной от стереоизомерии других двойных связей молекулы. Одинарные изомеры и смеси изомеров подпадают в объем настоящего изобретения.Any compound mentioned herein is intended to represent that particular compound as well as certain variants or forms. In particular, the compounds mentioned herein may have asymmetric centers and therefore exist in different enantiomeric forms. All optical isomers and stereoisomers of the compounds mentioned herein, and mixtures thereof, are contemplated within the scope of the present invention. Thus, any given compound referred to herein is intended to be any of a racemate, one or more enantiomeric forms, one or more diastereomeric forms, one or more atropisomeric forms, and mixtures thereof. In particular, conjugates of a drug of the formula [D-(X)b-(AA) _w -(T)g-(L)]n-Ab and a compound of the formula DX-(AA) _w -(T)g-Li or DX -(AA) _w -(T)gH may include enantiomers, depending on their asymmetry, or diastereoisomers. Stereoisomerism around the double bond is also possible, so in some cases the molecule could exist as a ^-isomer or a (2)-isomer. If a molecule contains multiple double bonds, each double bond will have its own stereoisomerism, which may be the same or different from the stereoisomerism of the other double bonds of the molecule. Single isomers and mixtures of isomers fall within the scope of the present invention.

Кроме того, соединения, упомянутые в настоящем документе, могут существовать в виде геометрических изомеров (т.е. цис- и транс-изомеров), в виде таутомеров или в виде атропизомеров. В частности, термин таутомер относится к одному из двух или нескольких структурных изомеров соединения, которые существуют в равновесии и легко превращаются из одной изомерной формы в другую. Обычными таутомерными парами являются амин-имин, амид-имид, кето-енол, лактам-лактим и т.д. Кроме того подразумевается, что любое соединение, указанное в настоящем документе, представляет гидраты, сольваты и полиморфы и их смеси, когда такие формы существуют в среде. Кроме того, соединения, указанные в настоящем документе, могут существовать в изотопно меченых формах. Все геометрические изомеры, таутомеры, атропизомеры, гидраты, сольваты, полиморфы и изотопно меченые формы соединений, упомянутых в настоящем документе, и их смеси, рассматриваются в объеме настоящего изобретения.In addition, the compounds mentioned herein may exist as geometric isomers (ie, cis and trans isomers), as tautomers, or as atropisomers. More specifically, the term tautomer refers to one of two or more structural isomers of a compound that exist in equilibrium and are readily converted from one isomeric form to another. Common tautomeric pairs are amine-imine, amide-imide, keto-enol, lactam-lactim, etc. It is further intended that any compound provided herein represents hydrates, solvates and polymorphs and mixtures thereof, when such forms exist in the environment. In addition, the compounds described herein may exist in isotopically labeled forms. All geometric isomers, tautomers, atropisomers, hydrates, solvates, polymorphs and isotopically labeled forms of the compounds mentioned herein, and mixtures thereof, are contemplated within the scope of the present invention.

Защищенные формы соединений, описанных в настоящем документе, рассматриваются в объеме настоящего изобретения. Подходящие защитные группы хорошо известны специалистам в данной области техники. Общий обзор защитных групп в органической химии представлен Wuts, PGM и Greene TW в Protecting Groups in Organic Synthesis, 4^th Ed. Wiley-Interscience и Kocienski PJ в Protecting Groups, 3^rd Ed. Georg Thieme Verlag. В этих ссылках представлены разделы, посвященные защитным группам для групп ОН, амино и SH. Все эти ссылки полностью включены в качестве ссылки.Protected forms of the compounds described herein are contemplated within the scope of the present invention. Suitable protecting groups are well known to those skilled in the art. A general overview of protecting groups in organic chemistry is provided by Wuts, PGM and Greene TW in Protecting Groups in Organic Synthesis, ^4th Ed. Wiley-Interscience and Kocienski PJ in Protecting Groups, ^3rd Ed. Georg Thieme Verlag. These references provide sections on protecting groups for the OH, amino, and SH groups. All of these links are incorporated by reference in their entirety.

В объеме настоящего изобретения, защитная группа ОН определена как О-связанная группа, возникающая в результате защиты ОН посредством образования подходящей защищенной ОН группы. Примеры таких защищенных ОН-групп включают простые эфиры, простые силиловые эфиры, сложные эфиры, сульфонаты, сульфенаты и сульфинаты, карбонаты и карбаматы. В случае простых эфиров, защитная группа для ОН может быть выбрана из метила, метоксиметила, метилтиометила, (фенилдиметилсилил)метоксиметила, бензилоксиметила, п-метоксибензилоксиметила, [(3,4- 73 046742 диметоксибензил)окси]метила, п-нитробензилоксиметила, o-нитробензилоксиметила, [(R)-1-(2нитрофенил)этокси]метила, (4-метоксифенокси)метила, гваяколметила, [(п-фенилфенил)окси]метила, трет-бутоксиметила, 4-пентенилоксиметила, силоксиметила, 2-метоксиэтоксиметила, 2цианоэтоксиметила, бис(2-хлорэтокси)метила, 2,2,2-трихлорэтоксиметила, 2(триметилсилил)этоксиметила, метоксиметила, O-бис(2-ацетоксиэтокси)метила, тетрагидропиранила, фтористого тетрагидропиранила, 3-бромтетрагидропиранила, тетрагидротиопиранила, 1метоксициклогексила, 4-метокситетрагидропиранила, 4-метокситетрагидротиопиранила, S, S-диоксида 4-метокситетрагидротиопиранила, 1-[(2-хлор-4-метил)фенил]-4-метоксипиперидин-4-ила, 1-(2фторфенил)-4-метоксипиперидин-4-ила, 1-(4-хлорфенил)-4-метоксипиперидин-4-ила, 1,4-диоксан-2-ила, тетрагидрофуранила, тетрагидротиофуранила, 2,3,3a,4,5,6,7,7a-октагидро-7,8,8-mриметил-4,7метанбунзофуран-2-ила, 1-этоксиэтила, 1-(2-хлорэтокси)этила, 2-гидроксиэтила, 2-бромэтила, 1-[2(триметилсилил)этокси]этила, 1-метил-1-метоксиэтила, 1-метил-1-бензилоксиэтила, 1-метил-1бензилокси-2-фторэтила, 1-метил-1-феноксиэтила, 2,2,2-трихлорэтила, 1,1-дианизил-2,2,2-трихлорэтила, 1,1,1,3,3,3-гексафтор-2-фенилизопропила, 1-(2-цианоэтокси)этила, 2-триметилсилилэтила, 2(бензилтио)этила, 2-(фенилселенил)этила, трет-бутила, циклогексила, 1-метил-1'-циклопропилметила, аллила, пренила, циннамила, 2-феналлила, пропаргила, п-хлорфенила, п-метоксифенила, п-нитрофенила, 2,4-динитрофенила, 2,3,5,6-тетрафтор-4-(трифторметил)фенила, бензила, п-метоксибензила, 3,4диметоксибензила, 2,6-диметоксибензила, o-нитробензила, п-нитробензила, пентадиенилнитробензила, пентадиенилнитропиперонила, галобензила, 2,6-дихлорбензила, 2,4-дихлорбензила, 2,6-дифторбензила, п-цианобензила, фтористого бензила, 4-фтористого алкоксибензила, триметилсилилксилила, пфенилбензила, 2-фенил-2-пропила, п-ациламинобензил, п-азидобензила, 4-азидо-3-хлорбензила, 2трифторметилбензила, 4-трифторметилбензила, п-(метилсульфинил)бензила, п-силетанилбензила, 4ацетоксибензила, 4-(2-триметилсилил)этоксиметоксибензила, 2-нафтилметила, 2-пиколила, 4-пиколила, N-оксида 3-метил-2-пиколила, 2-хинолинилметила, 6-метокси-2-(4-метилфенил)-4-хинолинметила, 1пиренилметила, дифенилметила, 4-метоксидифенилметила, 4-фенилдифенилметила, p,p'динитробензгидрила, 5-дибензосуберила, трифенилметил, трис(4-трет-бутилфенил)метила, αнафтилдифенилметила, п-метоксифенилдифенилметила, ди(п-метоксифенил)фенилметила, три(пметоксифенил)метила, 4-(4'-бромфенацилокси)фенилдифенилметила, 4,4',4-трис(4,5дихлорфталимидофенил)метила, 4,4',4-трж(левулиноилоксифенил)метила, 4,4',4трис(бензоилоксифенил)метила, 4,4'-диметокси-3-[№(имидазолилметил)]тритила, 4,4'-диметокси-3-[№ (имидазолилэтил)карбамоил]тритила, бис(4-метоксифенил)-1'-пиренилметила, 4-(17-тетрабензо [a,c,g, Йфлуоренилметил)-4,4-диметокситритила, 9-антрила, 9-(9-фенил)ксантенила, 9-фенилтиоксантила, 9-(9фенил-10-оксо)антрила, 1,3-бензодитиолан-2-ила, 4,5-бис(этоксикарбонил)-[1,3]-диоксолан-2-ила, S, Sдиоксида бензизотиазолила. В случае простых эфиров силила, защитная группа для OH может быть выбрана из триметилсилила, триэтилсилила, триизопропилсилила, диметилизопропилсилила, диэтилизопропилсилила, лиметилгексилсилила, 2-норборнилдиметилсилила, трет-бутилдиметилсилила, трет-бутилдифенилсилила, трибензилсилила, три-п-ксилилсилила, трифенилсилила, дифенилметилсилила, ди-трет-бутилметилсилила, бис(трет-бутил)-1-пиренилметоксисилила, трис(триметилсилил)силила, (2-гидроксистирил)диметилсилила, (2-гидроксистирил)диизопропилсилила, трет-бутилметоксифенилсилила, трет-бутоксидифенилсилила, 1,1,3,3-тетраизопропил-3 -[2(трифенилметокси)этокси]дисилоксан-1-ила и фтористого силила. В случае сложных эфиров, защитная группа для ОН вместе с атомом кислорода незащищенной ОН, к которому она присоединена, образуют сложный эфир, который может быть выбран из формиата, бензоилформиата, ацетата, хлорацетата, дихлорацетата, трихлорацетата, трихлорацетамидата, трифторацетата, метоксиацетата, трифенилметоксиацетата, феноксиацетата, п-хлорфеноксиацетата, фенилацетата, дифенилацетата, 3фенилпропионата, пропаноила с бисфтористым типом цепи, 4-пентеноата, 4-оксопентаноата, 4,4(этилендитио)пентаноата, 5[3-бис(4-метоксифенил)гидроксиметилфенокси]левулината, пивалоата, 1адамантоата, кротоната, 4-метоксикротоната, бензоата, п-фенилбензоата, 2,4,6-триметилбензоата, 4бромбензоата, 2,5-дифторбензоата, п-нитробензоата, пиколината, никотината, 2-(азидометил)бензоата, 4азидобутирата, (2-азидометил)фенилацетата, 2-{[(тритилтио)окси]метил}бензоата, 2-{[(4метокситритилтио)окси]метил}бензоата, 2-{ [метил(тритилтио)амино]метил}бензоата, 2-{ {[(4метокситритил)тио]метиламино}метил}бензоата, 2-(аллилокси)фенилацетата, 2(пренилоксиметил)бензоата, 6-(левулинилоксиметил)-3 -метокси-2-нитробензоата, 6(левулинилоксиметил)-3-метокси-4-нитробензоата, 4-бензилоксибутирата, 4триалкилсилилоксибутирата, 4-ацетокси-2,2-диметилбутирата, 2,2-диметил-4-пентеноата, 2-йодбензоата, 4-нитро-4-метилпентаноата, о-(дибромметил)бензоата, 2-формилбензолсульфоната, 4(метилтиометокси)бутирата, 2-(метилтиометоксиметил)бензоата, 2-(хлорацетоксиметил)бензоата, 2-[(2хлорацетокси)этил]бензоата, 2-[2-(бензилокси)этил]бензоата, 2-[2-(4-метоксибензил-окси)этил]бензоата, 2,6-дихлор-4-метилфеноксиацетата, 2,6-дихлор-4-( 1,1,3,3-тетраметилбутил)феноксиацетата, 2,4-бис(1,1 диметилпропил)феноксиацетата, хлордифенилацетата, изобутирата, моносукцината, (Е)-2-метил-2бутеноата, о-(метоксикарбонил)бензоата, α-нафтоата, нитрата, алкил Ν,Ν,Ν',Ν'тетраметилфосфородиамидата и 2-хлорбензоата. В случае сульфонатов, сульфенатов и сульфинатов,For the purposes of the present invention, an OH protecting group is defined as an O-linked group resulting from the protection of OH through the formation of a suitable protected OH group. Examples of such protected OH groups include ethers, silyl ethers, esters, sulfonates, sulfenates and sulfinates, carbonates and carbamates. In the case of ethers, the OH protecting group may be selected from methyl, methoxymethyl, methylthiomethyl, (phenyldimethylsilyl)methoxymethyl, benzyloxymethyl, p-methoxybenzyloxymethyl, [(3,4-73 046742 dimethoxybenzyl)oxy]methyl, p-nitrobenzyloxymethyl, o- nitrobenzyloxymethyl, [(R)-1-(2nitrophenyl)ethoxy]methyl, (4-methoxyphenoxy)methyl, guaiacolmethyl, [(p-phenylphenyl)oxy]methyl, tert-butoxymethyl, 4-pentenyloxymethyl, siloxymethyl, 2-methoxyethoxymethyl, 2cyanoethoxymethyl , bis(2-chloroethoxy)methyl, 2,2,2-trichloroethoxymethyl, 2(trimethylsilyl)ethoxymethyl, methoxymethyl, O-bis(2-acetoxyethoxy)methyl, tetrahydropyranyl, tetrahydropyranyl fluoride, 3-bromotetrahydropyranyl, tetrahydrothiopyranyl, 1methoxycyclohexyl, 4- methoxytetrahydropyranyl, 4-methoxytetrahydrothiopyranyl, S, S-dioxide 4-methoxytetrahydrothiopyranyl, 1-[(2-chloro-4-methyl)phenyl]-4-methoxypiperidin-4-yl, 1-(2fluorophenyl)-4-methoxypiperidin-4- yl, 1-(4-chlorophenyl)-4-methoxypiperidin-4-yl, 1,4-dioxan-2-yl, tetrahydrofuranyl, tetrahydrothiofuranyl, 2,3,3a,4,5,6,7,7a-octahydro- 7,8,8-mrimethyl-4,7methanobunzofuran-2-yl, 1-ethoxyethyl, 1-(2-chloroethoxy)ethyl, 2-hydroxyethyl, 2-bromoethyl, 1-[2(trimethylsilyl)ethoxy]ethyl, 1- methyl-1-methoxyethyl, 1-methyl-1-benzyloxyethyl, 1-methyl-1-benzyloxy-2-fluoroethyl, 1-methyl-1-phenoxyethyl, 2,2,2-trichloroethyl, 1,1-dianisyl-2,2, 2-trichloroethyl, 1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-phenylisopropyl, 1-(2-cyanoethoxy)ethyl, 2-trimethylsilylethyl, 2(benzylthio)ethyl, 2-(phenylselenyl)ethyl, tert- butyl, cyclohexyl, 1-methyl-1'-cyclopropylmethyl, allyl, prenyl, cinnamyl, 2-phenallyl, propargyl, p-chlorophenyl, p-methoxyphenyl, p-nitrophenyl, 2,4-dinitrophenyl, 2,3,5,6 -tetrafluoro-4-(trifluoromethyl)phenyl, benzyl, p-methoxybenzyl, 3,4dimethoxybenzyl, 2,6-dimethoxybenzyl, o-nitrobenzyl, p-nitrobenzyl, pentadienylnitrobenzyl, pentadienylnitropiperonyl, halobenzyl, 2,6-dichlorobenzyl, 2,4- dichlorobenzyl, 2,6-difluorobenzyl, p-cyanobenzyl, benzyl fluoride, 4-alkoxybenzyl fluoride, trimethylsilylxylyl, pphenylbenzyl, 2-phenyl-2-propyl, p-acylaminobenzyl, p-azidobenzyl, 4-azido-3-chlorobenzyl, 2-trifluoromethylbenzyl, 4-trifluoromethylbenzyl, p-(methylsulfinyl)benzyl, p-silethanylbenzyl, 4-acetoxybenzyl, 4-(2-trimethylsilyl)ethoxymethoxybenzyl, 2-naphthylmethyl, 2-picolyl, 4-picolyl, 3-methyl-2-picolyl N-oxide, 2 -quinolinylmethyl, 6-methoxy-2-(4-methylphenyl)-4-quinolinmethyl, 1pyrenylmethyl, diphenylmethyl, 4-methoxydiphenylmethyl, 4-phenyldiphenylmethyl, p,p'dinitrobenzhydryl, 5-dibenzosuberyl, triphenylmethyl, tris(4-tert-butylphenyl )methyl, αnaphthyldiphenylmethyl, p-methoxyphenyldiphenylmethyl, di(p-methoxyphenyl)phenylmethyl, tri(pmethoxyphenyl)methyl, 4-(4'-bromophenacyloxy)phenyldiphenylmethyl, 4,4',4-tris(4,5dichlorophthalimidophenyl)methyl, 4, 4',4-trzh(levulinoyloxyphenyl)methyl, 4,4',4tris(benzoyloxyphenyl)methyl, 4,4'-dimethoxy-3-[N(imidazolylmethyl)]trityl, 4,4'-dimethoxy-3-[N (imidazolylethyl)carbamoyl]trityl, bis(4-methoxyphenyl)-1'-pyrenylmethyl, 4-(17-tetrabenzo[a,c,g, Dfluorenylmethyl)-4,4-dimethoxytrityl, 9-anthryl, 9-(9- phenyl)xanthenyl, 9-phenylthioxanthyl, 9-(9phenyl-10-oxo)anthryl, 1,3-benzodithiolan-2-yl, 4,5-bis(ethoxycarbonyl)-[1,3]-dioxolan-2-yl, S, Sbenzisothiazolyl dioxide. In the case of silyl ethers, the protecting group for OH may be selected from trimethylsilyl, triethylsilyl, triisopropylsilyl, dimethylisopropylsilyl, diethylisopropylsilyl, lymethylhexylsilyl, 2-norbornyldimethylsilyl, t-butyldimethylsilyl, t-butyldiphenylsilyl, tribenzylsilyl, tri-p-xylylsilyl, triphenylmethylsilyl, , di-tert-butylmethylsilyl, bis(tert-butyl)-1-pyrenylmethoxysilyl, tris(trimethylsilyl)silyl, (2-hydroxystyryl)dimethylsilyl, (2-hydroxystyryl)diisopropylsilyl, tert-butylmethoxyphenylsilyl, tert-butoxydiphenylsilyl, 1,1,3 ,3-tetraisopropyl-3-[2(triphenylmethoxy)ethoxy]disiloxan-1-yl and silyl fluoride. In the case of esters, the OH protecting group together with the oxygen atom of the unprotected OH to which it is attached forms an ester, which may be selected from formate, benzoyl formate, acetate, chloroacetate, dichloroacetate, trichloroacetate, trichloroacetamidate, trifluoroacetate, methoxyacetate, triphenylmethoxyacetate, phenoxyacetate, p-chlorophenoxyacetate, phenylacetate, diphenylacetate, 3-phenylpropionate, bisfluoroyl propanoyl, 4-pentenoate, 4-oxopentanoate, 4,4(ethylenedithio)pentanoate, 5[3-bis(4-methoxyphenyl)hydroxymethylphenoxy]levulinate, pivaloate, 1adamantoate, crotonate, 4-methoxycrotonate, benzoate, p-phenylbenzoate, 2,4,6-trimethylbenzoate, 4bromobenzoate, 2,5-difluorobenzoate, p-nitrobenzoate, picolinate, nicotinate, 2-(azidomethyl)benzoate, 4azidobutyrate, (2- azidomethyl)phenylacetate, 2-{[(tritylthio)oxy]methyl}benzoate, 2-{[(4methoxytritylthio)oxy]methyl}benzoate, 2-{[(tritylthio)amino]methyl}benzoate, 2-{ {[( 4methoxytrityl)thio]methylamino}methyl}benzoate, 2-(allyloxy)phenylacetate, 2(prenyloxymethyl)benzoate, 6-(levulinyloxymethyl)-3-methoxy-2-nitrobenzoate, 6(levulinyloxymethyl)-3-methoxy-4-nitrobenzoate, 4-benzyloxybutyrate, 4trialkylsilyloxybutyrate, 4-acetoxy-2,2-dimethylbutyrate, 2,2-dimethyl-4-pentenoate, 2-iodobenzoate, 4-nitro-4-methylpentanoate, o-(dibromomethyl)benzoate, 2-formylbenzenesulfonate, 4 (methylthiomethoxy)butyrate, 2-(methylthiomethoxymethyl)benzoate, 2-(chloroacetoxymethyl)benzoate, 2-[(2chloroacetoxy)ethyl]benzoate, 2-[2-(benzyloxy)ethyl]benzoate, 2-[2-(4-methoxybenzyl) -oxy)ethyl]benzoate, 2,6-dichloro-4-methylphenoxyacetate, 2,6-dichloro-4-(1,1,3,3-tetramethylbutyl)phenoxyacetate, 2,4-bis(1,1 dimethylpropyl)phenoxyacetate , chlorodiphenylacetate, isobutyrate, monosuccinate, (E)-2-methyl-2butenoate, o-(methoxycarbonyl)benzoate, α-naphthoate, nitrate, alkyl Ν, Ν, Ν', Ν' tetramethylphosphorodiamidate and 2-chlorobenzoate. In the case of sulfonates, sulfenates and sulfinates,

- 74 046742 защитная группа для ОН вместе с атомом кислорода незащищенной ОН, к которому она присоединена, образуют сульфонат, сульфенат или сульфинаты, которые могут быть выбраны из сульфата, аллилсульфоната, метансульфоната, бензилсульфоната, тозилата, 2-[(4-нитрофенил)этил]сульфоната, 2трифторметилбензолсульфоната, 4-монометокситритилсульфената, алкил 2,4-динитрофенилсульфената, 2,2,5,5-тетраметилпирролидин-3-он-1-сульфината и диметилфосфинотиоила. В случае карбонатов, защитная группа для ОН вместе с атомом кислорода незащищенной ОН, к которому она присоединена, образуют карбонат, который может быть выбран из метилкарбоната, метоксиметилкарбоната, 9флуоренилметилкарбоната, этилкарбоната, бромэтилкарбоната, 2-(метилтиометокси)этилкарбоната, 2,2,2-трихлорэтилкарбоната, 1,1-диметил-2,2,2-трихлорэтилкарбоната, 2-(триметилсилил)этилкарбоната, 2-[диметил(2-нафтилметил)силил]этилкарбоната, 2-(фенилсульфонил)этилкарбоната, 2(трифенилфософнио)этилкарбоната, цис-[4-[[(метокситритил)сульфенил]окси]тетрагидрофуран-3ил]оксикарбоната, изобутилкарбоната, трет-бутилкарбоната, винилкарбоната, аллилкарбоната, циннамилкарбоната, пропаргилкарбоната, п-хлорфенилкарбоната, п-нитрофенилкарбоната, 4-этокси-1нафтилкарбоната, 6-бром-7-гидроксикумарин-4-илметилкарбоната, бензилкарбоната, oнитробензилкарбоната, п-нитробензилкарбоната, п-метоксибензилкарбоната, 3,4диметоксибензилкарбоната, антрахинон-2-илметилкарбоната, 2-дансилэтилкарбоната, 2-(4нитрофенил)этилкарбоната, 2-(2,4-динитрофенил)этилкарбоната, 2-(2-нитрофенил)пропилкарбоната, 2(3,4-метилендиокси-6-нитрофенил)пропилкарбоната, 2-циано-1-фенилэтилкарбоната, 2-(2пиридил)амино-1-фенилэтилкарбоната, 2-[Ы-метил-Н-(2-пиридил)]амино-1-фенилэтилкарбоната, фенацилкарбоната, 3',5'-диметоксибензоилкарбоната, метилдитиокарбоната и S-бензилтиокарбоната. И в случае карбаматов, защитная группа для ОН вместе с атомом кислорода незащищенной ОН, к которому она присоединена, образуют карбамат, который может быть выбран из диметилтиокарбамата, Nфенилкарбамата и N-метил-N-(o-нитрофенил)карбамата.- 74 046742 the protecting group for OH, together with the oxygen atom of the unprotected OH to which it is attached, forms a sulfonate, sulfenate or sulfinates, which can be selected from sulfate, allylsulfonate, methanesulfonate, benzylsulfonate, tosylate, 2-[(4-nitrophenyl)ethyl ]sulfonate, 2trifluoromethylbenzenesulfonate, 4-monomethoxytrityl sulfenate, alkyl 2,4-dinitrophenylsulfenate, 2,2,5,5-tetramethylpyrrolidin-3-one-1-sulfinate and dimethylphosphinothioyl. In the case of carbonates, the OH protecting group together with the oxygen atom of the unprotected OH to which it is attached forms a carbonate, which may be selected from methyl carbonate, methoxymethyl carbonate, 9-fluorenyl methyl carbonate, ethyl carbonate, bromoethyl carbonate, 2-(methylthiomethoxy)ethyl carbonate, 2,2,2 -trichloroethyl carbonate, 1,1-dimethyl-2,2,2-trichloroethyl carbonate, 2-(trimethylsilyl)ethyl carbonate, 2-[dimethyl(2-naphthylmethyl)silyl]ethyl carbonate, 2-(phenylsulfonyl)ethyl carbonate, 2(triphenylphosphonio)ethyl carbonate, cis-[4-[[(methoxytrityl)sulfenyl]oxy]tetrahydrofuran-3yl]oxycarbonate, isobutyl carbonate, tert-butyl carbonate, vinyl carbonate, allyl carbonate, cinnamyl carbonate, propargyl carbonate, p-chlorophenyl carbonate, p-nitrophenyl carbonate, 4-ethoxy-1naphthyl carbonate, 6- bromo-7-hydroxycoumarin-4-ylmethyl carbonate, benzyl carbonate, onitrobenzyl carbonate, p-nitrobenzyl carbonate, p-methoxybenzyl carbonate, 3,4 dimethoxybenzyl carbonate, anthraquinon-2-yl methyl carbonate, 2-dansilethyl carbonate, 2-(4nitrophenyl)ethyl carbonate, 2-(2,4- dinitrophenyl)ethyl carbonate, 2-(2-nitrophenyl)propyl carbonate, 2(3,4-methylenedioxy-6-nitrophenyl)propyl carbonate, 2-cyano-1-phenylethyl carbonate, 2-(2pyridyl)amino-1-phenylethyl carbonate, 2-[N -methyl-H-(2-pyridyl)]amino-1-phenylethyl carbonate, phenacyl carbonate, 3',5'-dimethoxybenzoyl carbonate, methyl dithiocarbonate and S-benzylthiocarbonate. And in the case of carbamates, the OH protecting group together with the unprotected OH oxygen atom to which it is attached forms a carbamate, which may be selected from dimethylthiocarbamate, Nphenylcarbamate and N-methyl-N-(o-nitrophenyl)carbamate.

В объеме настоящего изобретения аминозащитная группа определена как N-связанная группа, возникающая в результате защиты аминогруппы посредством образования подходящей защищенной аминогруппы. Примеры защищенных аминогрупп включают карбаматы, мочевины, амиды, гетероциклические системы, N-алкиламины, N-алкениламины, N-алкиниламины, N-ариламины, имины, енамины, производные N-металлов, производные N-N, производные N-P, Производные N-Si и производные N-S. В случае карбаматов, защитная группа для аминогруппы вместе с аминогруппой, к которой она присоединена, образуют карбамат, который может быть выбран из метилкарбамата, этилкарбамата, 9-флуоренилметилкарбамата, 2,6-ди-трет-бутил-9-флуоренилметилкарбамата, 2,7бис(триметилсилил)флуоренилметилкарбамата, 9-(2-сульфо)флуоренилметилкарбамата, 9-(2,7дибром)флуоренилметилкарбамата, 17-тетрабензо [a,c,g,i] флуоренилметилкарбамата, 2-хлор-3 инденилметилкарбамата, бенз[1]инден-3 -илметилкарбамата, 1,1 -диоксобензо [Ъ]тиофен-2илметилкарбамата, 2-метилсульфонил-3-фенил-1-проп-2-енилкарбамата, 2,7-ди-трет-бутил-[9,(10,10диоксо-10,10,10,10-тетрагидротиоксантил)]метилкарбамата, 2,2,2-трихлорэтилкарбамата, 2триметилсилилэтилкарбамата, (2-фенил-2-триметилсилил)этилкарбамата, 2-фенилэтилкарбамата, 2хлорэтилкарбамата, 1,1 -диметил-2-галоэтилкарбамата, 1,1 -диметил-2,2-дибромэтилкарбамата, 1,1диметил-2,2,2-трихлорэтилкарбамата, 2-(2'-пиридил)этилкарбамата, 2-(4'-пиридил)этилкарбамата, 2,2бис(4'-нитрофенил)этилкарбамата, 2-[(2-нитрофенил)дитио] -1 -фенилэтилкарбамата, 2-(N,Nдициклогексилкарбоксамидо)этилкарбамата, трет-бутилкарбамата, фтористого BOC карбамата, 1адамантилкарбамата, 2-адамантилкарбамата, 1-(1-адамантил)-1-метилэтилкарбамата, 1-метил-1-(4бифенилил)этилкарбамата, 1-(3,5 -ди-трет-бутилфенил)-1 -метилэтилкарбамата, триизопропилсилилоксикарбамата, винилкарбамата, аллилкарбамата, пренилкарбамата, 1изопропилаллилкарбамата, циннамилкарбамата, 4-нитроциннамилкарбамата, 3-(3'-пиридил)проп-2енилкарбамата, гексадиенилкарбамата, пропаргилкарбамата, 1,4-бут-2-инилбискарбамата, 8хинолилкарбамата, N-гидроксипиперидинилкарбамата, алкилдитиокарбамата, бензилкарбамата, 3,5-дитрет-бутилбензилкарбамата, п-метоксибензилкарбамата, п-нитробензилкарбамата, пбромбензилкарбамата, п-хлорбензилкарбамата, 2,4-дихлорбензилкарбамата, 4метилсульфинилбензилкарбамата, 4-трифторметилбензилкарбамата, фтористого бензилкарбамата, 2нафтилметилкарбамата, 9-антрилметилкарбамата, дифенилметилкарбамата,4фенилацетоксибензилкарбамата, 4-азидобензилкарбамата, 4-азидометоксибензилкарбамата, м-хлор-пацилоксибензилкарбамата, п-(дигидроксиборил)бензилкарбамата, 5-бензизоксазолилметилкарбамата, 2(трифторметил)-6-хромонилметилкарбамата, 2-метилтиоэтилкарбамата,2метилсульфонилэтилкарбамата, 2-(п-толуолсульфонил)этилкарбамата,2-(4нитрофенилсульфонил)этилкарбамата, 2-(2,4-динитрофенилсульфонил)этилкарбамата, 2-(4трифторметилфенилсульфонил)этилкарбамата, [2-(1,3-дитианил)]метилкарбамата,2фосфониоэтилкарбамата, 2-[фенил(метил)сульфонио]этилкарбамата, 1 -метил-1 (трифенилфосфонио)этилкарбамата, 1,1-диметил-2-цианоэтилкарбамата, 2-дансилэтилкарбамата, 2-(4нитрофенил)этилкарбамата, 4-метилтиофенилкарбамата, 2,4-диметилтиофенилкарбамата, мнитрофенилкарбамата, 3,5 -диметоксибензилкарбамата, 1 -метил-1 -(3,5-диметоксифенил)этилкарбамата, α-метилнитропиперолинкарбамата, o-нитробензилкарбамата, 3,4-диметокси-6-нитробензилкарбамата,For the purposes of the present invention, an amino protecting group is defined as an N-linked group resulting from the protection of an amino group by the formation of a suitable protected amino group. Examples of protected amino groups include carbamates, ureas, amides, heterocyclic systems, N-alkylamines, N-alkenylamines, N-alkynylamines, N-arylamines, imines, enamines, N-metal derivatives, N-N derivatives, N-P derivatives, N-Si derivatives and derivatives N-S. In the case of carbamates, the protecting group for the amino group together with the amino group to which it is attached forms a carbamate, which may be selected from methyl carbamate, ethyl carbamate, 9-fluorenyl methyl carbamate, 2,6-di-tert-butyl-9-fluorenyl methyl carbamate, 2,7 bis (trimethylsilyl)fluorenylmethylcarbamate, 9-(2-sulfo)fluorenylmethylcarbamate, 9-(2,7dibromo)fluorenylmethylcarbamate, 17-tetrabenzo[a,c,g,i]fluorenylmethylcarbamate, 2-chloro-3 indenylmethylcarbamate, benzo[1]indene- 3-ylmethylcarbamate, 1,1-dioxobenzo[b]thiophen-2ylmethylcarbamate, 2-methylsulfonyl-3-phenyl-1-prop-2-enylcarbamate, 2,7-di-tert-butyl-[9,(10,10dioxo- 10,10,10,10-tetrahydrothioxanthyl)]methylcarbamate, 2,2,2-trichloroethylcarbamate, 2trimethylsilylethylcarbamate, (2-phenyl-2-trimethylsilyl)ethylcarbamate, 2-phenylethylcarbamate, 2chloroethylcarbamate, 1,1-dimethyl-2-haloethylcarbamate, 1,1-dimethyl-2,2-dibromoethylcarbamate, 1,1dimethyl-2,2,2-trichloroethylcarbamate, 2-(2'-pyridyl)ethylcarbamate, 2-(4'-pyridyl)ethylcarbamate, 2,2bis(4' -nitrophenyl)ethylcarbamate, 2-[(2-nitrophenyl)dithio]-1-phenylethylcarbamate, 2-(N,Ndicyclohexylcarboxamido)ethylcarbamate, tert-butylcarbamate, BOC fluoride carbamate, 1-adamantylcarbamate, 2-adamantylcarbamate, 1-(1-adamantyl) -1-methylethylcarbamate, 1-methyl-1-(4biphenylyl)ethylcarbamate, 1-(3,5-di-tert-butylphenyl)-1-methylethylcarbamate, triisopropylsilyloxycarbamate, vinylcarbamate, allylcarbamate, prenylcarbamate, 1-isopropylallylcarbamate, cinnamylcarbamate, 4-nitrocin namylcarbamate, 3-(3'-pyridyl)prop-2enylcarbamate, hexadienylcarbamate, propargylcarbamate, 1,4-but-2-inylbiscarbamate, 8quinolylcarbamate, N-hydroxypiperidinylcarbamate, alkyldithiocarbamate, benzylcarbamate, 3,5-ditert-butylbenzylcarbamate, p-meth hydroxybenzylcarbamate, p- nitrobenzylcarbamate, p-bromobenzylcarbamate, p-chlorobenzylcarbamate, 2,4-dichlorobenzylcarbamate, 4-methylsulfinylbenzylcarbamate, 4-trifluoromethylbenzylcarbamate, benzyl fluoride, 2-naphthylmethylcarbamate, 9-anthrylmethylcarbamate, 4phenylacetoxybenzyl carbamate, 4-azidobenzylcarbamate, 4-azidomethoxybenzylcarbamate, m-chloro-pacyloxybenzylcarbamate, p-( dihydroxyboryl)benzylcarbamate, 5-benzisoxazolylmethylcarbamate, 2-(trifluoromethyl)-6-chromonylmethylcarbamate, 2-methylthioethylcarbamate, 2-methylsulfonylethylcarbamate, 2-(p-toluenesulfonyl)ethylcarbamate, 2-(4nitrophenylsulfonyl)ethylcarbamate, 2-(2,4-dinitrophen) ylsulfonyl)ethylcarbamate, 2-(4trifluoromethylphenylsulfonyl)ethylcarbamate, [2-(1,3-dithianyl)]methylcarbamate, 2phosphonioethylcarbamate, 2-[phenyl(methyl)sulfonio]ethylcarbamate, 1-methyl-1(triphenylphosphonio)ethylcarbamate, 1,1-dimethyl-2 -cyanoethylcarbamate, 2-dansylethylcarbamate, 2-(4nitrophenyl)ethylcarbamate, 4-methylthiophenylcarbamate, 2,4-dimethylthiophenylcarbamate, mnitrophenylcarbamate, 3,5-dimethoxybenzylcarbamate, 1-methyl-1-(3,5-dimethoxyphenyl)ethylcarbamate, α-methylni tropiperolinecarbamate , o-nitrobenzylcarbamate, 3,4-dimethoxy-6-nitrobenzylcarbamate,

- 75 046742 фенил(о-нитрофенил)метилкарбамата, 2-нитрофенилэтилкарбамата, 6-нитровератрилкарбамата, 4метоксифенацилкарбамата, 3',5'-диметоксибензоинкарбамата, 9-ксантенилметилкарбамата, Х-метил-Х(о-нитрофенил)карбамата, трет-амилкарбамата, 1-метилциклобутилкарбамата, 1метилциклогексилкарбамата, 1 -метил-1 -циклопропилметилкарбамата, циклобутилкарбамата, циклопентилкарбамата, циклогексилкарбамата, изобутилкарбамата, изоборнилкарбамата, циклопропилметилкарбамата, п-децилоксибензилкарбамата, диизопропилметилкарбамата, 2,2диметоксикарбонилвинилкарбамата, о-(Н,Н-диметилкарбоксамидо)бензилкарбамата, 1,1 -диметил-3 (Н,Н-диметил-карбоксамидо)пропилкарбамата, бутинилкарбамата, 1,1-диметилпропинилкарбамата, 2йодэтилкарбамата, 1-метил-1-(4'-пиридил)этилкарбамата, 1-метил-1-(п-фенилазофенил)этилкарбамата, п(п'-метоксифенилазо)бензилкарбамата, п-(фенилазо)бензилкарбамата, 2,4,6-триметилбензилкарбамата, изоникотинилкарбамата, 4-(триметиламмоний)бензилкарбамата, п-цианобензилкарбамата, ди(2пиридил)метилкарбамата, 2-фуранилметилкарбамата, фенилкарбамата, 2,4,6-три-третбутилфенилкарбамата, 1-метил-1-фенилэтилкарбамата и S-бензилтиокарбамата. В случае мочевин, защитные группы для аминогруппы могут быть выбраны из фенотиазинил-(10)-карбонила, N'-pтолуолсульфониламинокарбонила, N'-фениламинотиокарбонила, 4-гидроксифениламинокарбонила, 3гидрокситриптаминокарбонила и N'-фениламинотиокарбонила. В случае амидов, защитная группа для амино вместе с аминогруппой, к которой она присоединена, образуют амид, который может быть выбран из формамида, ацетамида, хлорацетамида, трихлорацетамида, трифторацетамида, фенилацетамида, 3фенилпропанамида, пент-4-енамида, пиколинамида, 3-пиридилкарбоксамида, Nбензоилфенилаланиламида, бензамида, п-фенилбензамида, o-нитрофенилацетамида, 2,2-диметил-2-(онитрофенил)ацетамида, o-нитрофеноксиацетамида, 3-(о-нитрофенил)пропанамида, 2-метил-2-(онитрофенокси)пропанамида, 3-метил-3-нитробутанамида, о-нитроциннамида, o-нитробензамида, 3-(4трет-бутил-2,6-динитрофенил)-2,2-диметилпропанамида, о-(бензоилоксиметил)бензамида, 2(ацетоксиметил)бензамида, 2-[(трет-бутилдифенилсилокси)метил]бензамида, 3-(3',6'-диоксо-2',4',5'триметилциклогекса-1 ',4'-диен)-3,3-диметилпропионамида, о-гидрокси-транс-циннамида, 2-метил-2-(офенилазофенокси)пропанамида, 4-хлорбутанамида, ацетоацетамида, 3-(п-гидроксифенил)пропанамида, (N'-дитиобензилоксикарбониламино)ацетамида и N-ацетилметилнинамида. В случае гетероциклических систем, защитная группа для аминогруппы вместе с аминогруппой, к которой она присоединена, образуют гетероциклическую систему, которая может быть выбрана из 4,5-дифенил-3-оксазолин-2-она, N-фталимида, N-дихлорфталимида, N-тетрахлорфталимида, N-4-нитрофталимида, N-тиодигликолоила, N-дитиасукцинимида, №2,3-дифенилмалеимида, N-2,3-диметилмалеимида, N-2,5-диметилпиррола, N2,5-бис(триизопропилсилокси)пиррола, N-1,1,4,4-тетраметилдисилилазациклопентанового аддукта, N1,1,3,3-тетраметил-1,3-дисилаизоиндолина, N-дифенилсилилдиэтилена, N-5-замещенного-1,3-диметил1,3,5-триазациклогексан-2-она, N-5-замещенного-1,3-бензил-1,3,5-триазациклогексан-2-она, 1замещенного 3,5-динитро-4-пиридона и 1,3,5-диоксазина. В случае N-алкил-, N-алкенил-, N-алкинилили N-ариламинов, защитная группа для аминогруппы может быть выбрана из N-метила, N-трет-бутила, N-аллила, N-пренила, N-циннамила, N-фенилаллила, N-пропаргила, N-метоксиметила, N-[2(триметилсилил)этокси]метила, N-3-ацетоксипропила, N-цианометила, N-2-азанорборненов, N-бензила, N-4-метоксибензила, N-2,4-диметоксибензила, N-2-гидроксибензила, N-ферроценилметила, N-2,4динитрофенила, о-метоксифенила, п-метоксифенила, N-9-фенилфлуоренила, N-флуоренила, N'-оксида N2-пиколиламина, N-7-метоксикумар-4-илметила, N-дифенилметила, N-бис(4-метоксифенил)метила, N-5дибензосуберила, N-трифенилметила, N-(4-метилфенил)дифенилметила и N-(4метоксифенил)дифенилметила. В случае иминов, защитная группа для аминогруппы может быть выбрана из N-1,1-диметилтиометилена, N-бензилидена, N-п-метоксибензилидена, N-дифенилметилена, N-[2-пиридил)мезитил]метилена, N-(N',N'-диметиламинометилена), N-(N',N'-дибензиламинометилена), N-(N'-трет-бутиламинометилена), N, N'-изопропилидена, N-п-нитробензилидена, N-салицилидена, N-5хлорсалицилидена, N-(5-хлор-2-гидроксифенил)фенилметилена, N-циклогексилидена и N-третбутилидена. В случае енаминов, защитная группа для аминогруппы может быть выбрана из N-(5,5диметил-3 -оксо-1 -циклогексенила), N-2,7-дихлор-9-флуоренилметилена, N-1-(4,4-диметил-2,6диоксоциклогексилиден)этила, N-(1,3-диметил-2,4,6-(1H,3H,5H)-триоксопиримидин-5-илиден)метила, N4,4,4-трифтор-3-оксо-1-бутенила и N-(1-изопропил-4-нитро-2-оксо-3-пирролин-3-ила). В случае производных N-металла, защитная группа для аминогруппы может быть выбрана из N-борана, Nдифенилборинового эфира, N-диэтилборинового эфира, N-9-борабициклононана, N-дифторборинового эфира и 3,5-бис(трифторметил)фенилбороновой кислоты; и также включая Nфенил(пентакарбонилхром)карбенил, N-фенил(пентакарбонилвольфрам)карбенил, Nметил(пентакарбонилхром)карбенил, N-метил(пентакарбонилвольфрам)карбенил, хелат N-меди, хелат N-цинка и 18-краун-6-производное. В случае N-N производных, защитная группа для аминогруппы вместе с аминогруппой, к которой она присоединена, образуют N-N производное, которое может быть выбрано из N-нитроамино, N-нитрозоамино, N-оксида амин, азида, производного триазена и Nтриметилсилилметил-Ы-бензилгидразина. В случае N-P производных, защитная группа для аминогруппы вместе с аминогруппой, к которой она присоединена, образуют N-P производное, которое может быть выбрано из дифенилфосфонамида, диметилтиофосфонамида, дифенилтиофосфонамида,- 75 046742 phenyl(o-nitrophenyl)methylcarbamate, 2-nitrophenylethylcarbamate, 6-nitroveratrilcarbamate, 4methoxyphenacylcarbamate, 3',5'-dimethoxybenzoincarbamate, 9-xanthenylmethylcarbamate, X-methyl-X(o-nitrophenyl)carbamate, Bamata, 1 -methylcyclobutylcarbamate, 1methylcyclohexylcarbamate, 1-methyl-1-cyclopropylmethylcarbamate, cyclobutylcarbamate, cyclopentylcarbamate, cyclohexylcarbamate, isobutylcarbamate, isobornylcarbamate, cyclopropylmethylcarbamate, p-decyloxybenzylcarbamate, diisopropylmethylcarbamate, 2,2dimet oxycarbonylvinylcarbamate, o-(H,H-dimethylcarboxamido)benzylcarbamate, 1,1 - dimethyl-3 (H,H-dimethyl-carboxamido)propylcarbamate, butynylcarbamate, 1,1-dimethylpropynylcarbamate, 2iodoethylcarbamate, 1-methyl-1-(4'-pyridyl)ethylcarbamate, 1-methyl-1-(p-phenylazophenyl)ethylcarbamate , p(p'-methoxyphenylazo)benzylcarbamate, p-(phenylazo)benzylcarbamate, 2,4,6-trimethylbenzylcarbamate, isonicotinylcarbamate, 4-(trimethylammonium)benzylcarbamate, p-cyanobenzylcarbamate, di(2pyridyl)methylcarbamate, 2-furanylmethylcarbamate, phenylcarbamate, 2,4,6-tri-tert-butylphenylcarbamate, 1-methyl-1-phenylethylcarbamate and S-benzylthiocarbamate. In the case of ureas, protecting groups for the amino group can be selected from phenothiazinyl-(10)-carbonyl, N'-ptoluenesulfonylaminocarbonyl, N'-phenylaminothiocarbonyl, 4-hydroxyphenylaminocarbonyl, 3-hydroxytryptaminocarbonyl and N'-phenylaminothiocarbonyl. In the case of amides, the amino protecting group together with the amino group to which it is attached forms an amide, which may be selected from formamide, acetamide, chloroacetamide, trichloroacetamide, trifluoroacetamide, phenylacetamide, 3-phenylpropanamide, pent-4-enamide, picolinamide, 3-pyridylcarboxamide , Nbenzoylphenylalanilamide, benzamide, p-phenylbenzamide, o-nitrophenylacetamide, 2,2-dimethyl-2-(nitrophenyl)acetamide, o-nitrophenoxyacetamide, 3-(o-nitrophenyl)propanamide, 2-methyl-2-(nitrophenoxy)propanamide, 3-methyl-3-nitrobutanamide, o-nitrocinnamide, o-nitrobenzamide, 3-(4tert-butyl-2,6-dinitrophenyl)-2,2-dimethylpropanamide, o-(benzoyloxymethyl)benzamide, 2(acetoxymethyl)benzamide, 2 -[(tert-butyldiphenylsiloxy)methyl]benzamide, 3-(3',6'-dioxo-2',4',5'trimethylcyclohexa-1',4'-diene)-3,3-dimethylpropionamide, o-hydroxy -trans-cinnamide, 2-methyl-2-(ophenylazophenoxy)propanamide, 4-chlorobutanamide, acetoacetamide, 3-(p-hydroxyphenyl)propanamide, (N'-dithiobenzyloxycarbonylamino)acetamide and N-acetylmethylninamide. In the case of heterocyclic systems, the protecting group for the amino group together with the amino group to which it is attached form a heterocyclic system, which can be selected from 4,5-diphenyl-3-oxazolin-2-one, N-phthalimide, N-dichlorophthalimide, N -tetrachlorophthalimide, N-4-nitrophthalimide, N-thiodiglycoloyl, N-dithiasuccinimide, N-2,3-diphenylmaleimide, N-2,3-dimethylmaleimide, N-2,5-dimethylpyrrole, N2,5-bis(triisopropylsiloxy)pyrrole, N-1,1,4,4-tetramethyldisilyl acyclopentane adduct, N1,1,3,3-tetramethyl-1,3-disilaisoindoline, N-diphenylsilyldiethylene, N-5-substituted-1,3-dimethyl1,3,5-triazacyclohexane -2-one, N-5-substituted-1,3-benzyl-1,3,5-triazacyclohexan-2-one, 1-substituted 3,5-dinitro-4-pyridone and 1,3,5-dioxazine. In the case of N-alkyl-, N-alkenyl-, N-alkynylyl N-arylamines, the protecting group for the amino group can be selected from N-methyl, N-tert-butyl, N-allyl, N-prenyl, N-cinnamyl, N -phenylallyl, N-propargyl, N-methoxymethyl, N-[2(trimethylsilyl)ethoxy]methyl, N-3-acetoxypropyl, N-cyanomethyl, N-2-azanorbornenes, N-benzyl, N-4-methoxybenzyl, N- 2,4-dimethoxybenzyl, N-2-hydroxybenzyl, N-ferrocenylmethyl, N-2,4dinitrophenyl, o-methoxyphenyl, p-methoxyphenyl, N-9-phenylfluorenyl, N-fluorenyl, N'-oxide N2-picolylamine, N- 7-methoxycoumar-4-ylmethyl, N-diphenylmethyl, N-bis(4-methoxyphenyl)methyl, N-5dibenzosuberyl, N-triphenylmethyl, N-(4-methylphenyl)diphenylmethyl and N-(4methoxyphenyl)diphenylmethyl. In the case of imines, the protecting group for the amino group may be selected from N-1,1-dimethylthiomethylene, N-benzylidene, N-p-methoxybenzylidene, N-diphenylmethylene, N-[2-pyridyl)mesityl]methylene, N-(N' ,N'-dimethylaminomethylene), N-(N',N'-dibenzylaminomethylene), N-(N'-tert-butylaminomethylene), N, N'-isopropylidene, N-p-nitrobenzylidene, N-salicylidene, N-5chlorosalicylidene , N-(5-chloro-2-hydroxyphenyl)phenylmethylene, N-cyclohexylidene and N-tert-butylidene. In the case of enamines, the protecting group for the amino group may be selected from N-(5,5dimethyl-3-oxo-1-cyclohexenyl), N-2,7-dichloro-9-fluorenylmethylene, N-1-(4,4-dimethyl -2,6dioxocyclohexylidene)ethyl, N-(1,3-dimethyl-2,4,6-(1H,3H,5H)-trioxopyrimidin-5-ylidene)methyl, N4,4,4-trifluoro-3-oxo- 1-butenyl and N-(1-isopropyl-4-nitro-2-oxo-3-pyrrolin-3-yl). In the case of N-metal derivatives, the protecting group for the amino group may be selected from N-borane, N-diphenylborine ester, N-diethylborine ester, N-9-boracyclononane, N-difluoroborine ester and 3,5-bis(trifluoromethyl)phenylboronic acid; and also including Nphenyl(pentacarbonyltungsten)carbenyl, N-phenyl(pentacarbonyltungsten)carbenyl, Nmethyl(pentacarbonylchrome)carbenyl, N-methyl(pentacarbonyltungsten)carbenyl, N-copper chelate, N-zinc chelate and 18-crown-6-derivative. In the case of N-N derivatives, the protecting group for the amino group together with the amino group to which it is attached forms an N-N derivative, which can be selected from N-nitroamino, N-nitrosoamino, amine N-oxide, azide, triazene derivative and Ntrimethylsilylmethyl-N-benzylhydrazine . In the case of N-P derivatives, the protecting group for the amino group together with the amino group to which it is attached forms an N-P derivative, which may be selected from diphenylphosphonamide, dimethylthiophosphonamide, diphenylthiophosphonamide,

- 76 046742 диалкилфосфороамидата, дибензилфосфороамидата, дифенилфосфороамидата и иминотрифенилфосфорана. В случае N-Si производных, защитная группа для NH2 может быть выбрана из трет-бутилдифенилсилила и трифенилсилила. В случае N-S производных, защищенная аминогруппа может быть выбрана из производных N-сульфенила или N-сульфонила. Производные N-сульфенила могут быть выбраны из бензолсульфенамида, 2-нитробензолсульфенамида, 2,4динитробензолсульфенамида, пентахлорбензолсульфенамида, 2-нитро-4-метоксибензолсульфенамида, трифенилметилсульфенамида, 1-(2,2,2-трифтор-1,1-дифенил)этилсульфенамида и N-3-hutpo-2пиридинсульфенамида. Производные N-сульфонила могут быть выбраны из метансульфонамида, трифторметансульфонамида, трет-бутилсульфонамида, бензилсульфонамида, 2(триметилсилил)этансульфонамида, п-толуолсульфонамида, бензолсульфонамида, oанизилсульфонамида, 2-нитробензолсульфонамида, 4-нитробензолсульфонамида, 2,4динитробензолсульфонамида, 2-нафталинсульфонамида, 4-(4',8'диметоксинафтилметил)бензолсульфонамида, 2-(4-метилфенил)-6-метокси-4-метилсульфонамида, 9антраценсульфонамида, пиридин-2-сульфонамида, бензотиазол-2-сульфонамида, фенацилсульфонамида, 2,3,6-триметил-4-метоксибензолсульфонамида, 2,4,6-триметоксибензолсульфонамида, 2,6-диметил-4метоксибензолсульфонамида, пентаметилбензолсульфонамида, 2,3,5,6-тетраметил-4метоксибензолсульфонамида, 4-метоксибензолсульфонамида, 2,4,6-триметилбензолсульфонамида, 2,6диметокси-4-метилбензолсульфонамида, 3-метокси-4-трет-бутилбензолсульфонамида и 2,2,5,7,8пентаметилхроман-6-сульфонамида.- 76 046742 dialkylphosphoramidate, dibenzylphosphoramidate, diphenylphosphoramidate and iminotriphenylphosphorane. In the case of N-Si derivatives, the protecting group for NH2 can be selected from tert-butyldiphenylsilyl and triphenylsilyl. In the case of N-S derivatives, the protected amino group may be selected from N-sulfenyl or N-sulfonyl derivatives. The N-sulfenyl derivatives may be selected from benzenesulfenamide, 2-nitrobenzenesulfenamide, 2,4dinitrobenzenesulfenamide, pentachlorobenzenesulfenamide, 2-nitro-4-methoxybenzenesulfenamide, triphenylmethylsulfenamide, 1-(2,2,2-trifluoro-1,1-diphenyl)ethylsulfenamide and N -3-hutpo-2pyridine sulfenamide. The N-sulfonyl derivatives may be selected from methanesulfonamide, trifluoromethanesulfonamide, tert-butylsulfonamide, benzylsulfonamide, 2(trimethylsilyl)ethanesulfonamide, p-toluenesulfonamide, benzenesulfonamide, oanisylsulfonamide, 2-nitrobenzenesulfonamide, 4-nitrobenzenesulfonamide, 2,4dinitrobenzenesulfonamide. amide, 2-naphthalene sulfonamide, 4- (4',8'dimethoxynaphthylmethyl)benzenesulfonamide, 2-(4-methylphenyl)-6-methoxy-4-methylsulfonamide, 9-anthracenesulfonamide, pyridine-2-sulfonamide, benzothiazole-2-sulfonamide, phenacylsulfonamide, 2,3,6-trimethyl- 4-methoxybenzenesulfonamide, 2,4,6-trimethoxybenzenesulfonamide, 2,6-dimethyl-4methoxybenzenesulfonamide, pentamethylbenzenesulfonamide, 2,3,5,6-tetramethyl-4methoxybenzenesulfonamide, 4-methoxybenzenesulfonamide, 2,4,6-trimethylbenzenesulfonamide, 2,6dimethoxy- 4-methylbenzenesulfonamide, 3-methoxy-4-tert-butylbenzenesulfonamide and 2,2,5,7,8pentamethylchroman-6-sulfonamide.

В объеме настоящего изобретения аминозащитная группа определена как S-связанная группа, возникающая в результате защиты SH группы посредством образования подходящей защищенной SH группы. Примеры таких защищенных SH групп включают простые тиоэфиры, дисульфиды, силилтиоэфиры, сложные тиоэфиры, тиокарбонаты и тиокарбаматы. В случае простых тиоэфиров, защитная группа для SH может быть выбрана из S-алкила, S-бензила, S-п-метоксибензила, S-oгидроксибензила, S-п-гидроксибензила, S-o-ацетоксибензила, S-п-ацетоксибензила, S-п-нитробензила, So-нитробензила, S-2,4,6-триметилбензила, S-2,4,6-триметоксибензила, S-4-пиколила, S-2-пиколил-Nоксида, S-2-хинолинилметила, S-9-антрилметила, S-9-флуоренилметила, S-ксантенила, Sферроценилметила, S-дифенилметила, S-бис(4-метоксифенил)метила, S-5-дибензосуберила, Sтрифенилметила, 4-метокситритила, S-дифенил-4-пиридилметила, S-фенила, S-2,4-динитрофенила, S-2хинолила, S-трет-бутила, S-1-адамантила, S-метоксиметила, S-изобутоксиметила, S-бензилоксиметила, S-1-этоксиэтила, S-2-тетрагидропиранила, S-бензилтиометила, S-фенилтиометила, S-ацетамидометила (Acm), S-триметилацетамидометила, S-бензамидометила, S-аллилоксикарбониламинометила, S-N[2,3,5,6-тетрафтор-4-(№-пиперидино)фенил-Ы-аллилоксикарбониламинометила, S-фталимидометила, Sфенилацетамидометила, S-ацетилметила, S-карбоксиметила, S-цианометила, S-(2-нитро-1-фенил)этила, S-2-(2,4-динитрофенил)этила, S-2-(4'-пиридил)этила, S-2-цианоэтила, S-2-(триметилсилил)этила, S-2,2бис(карбоэтокси)этила, S-(1-м-нитрофенил-2-бензоил)этила, S-2-фенилсульфонилэтила, S-1-(4метилфенилсульфонил)-2-метилпроп-2-ила и S-п-гидроксифенацила. В случае дисульфидов, защищенная SH группа может быть выбрана из S-этилдисульфида, S-трет-бутилдисульфида, S-2нитрофенилдисульфида, S-2,4-динитрофенилдисульфида, S-2-фенилазофенилдисульфида, S-2карбоксифенилдисульфида и S-3-нитро-2-пиридилдисульфида. В случае силилтиоэфиров, защитная группа для SH может быть выбрана из списка групп, которые перечислены выше для защиты OH простыми эфирами силила. В случае тиоэфиров, защитная группа для SH может быть выбрана из Sацетила, S-бензоила, S-2-метоксиизобутурила, S-трифторацетила, S-N-Цпбифенилил)изопропилокси]карбонил]-Ы-метил-у-аминотиобутирата и S-N-(трет-бутоксикарбонил)-Nметил-у-аминотиобутирата. В случае тиокарбоната, защитная группа для SH может быть выбрана из S2,2,2-трихлорэтоксикарбонила, S-трет-бутоксикарбонила, S-бензилоксикарбонила, S-пметоксибензилоксикарбонила и S-флуоренилметилкарбонила. В случае тиокарбамата, защищенная SH группа может быть выбрана из S-(N-этилкарбамата) и S-(N-метоксиметилкарбамата).For the purposes of the present invention, an amino protecting group is defined as an S-linked group resulting from the protection of an SH group through the formation of a suitable protected SH group. Examples of such protected SH groups include thioethers, disulfides, silylthioethers, thioesters, thiocarbonates and thiocarbamates. In the case of thioethers, the protecting group for SH may be selected from S-alkyl, S-benzyl, S-p-methoxybenzyl, S-ohydroxybenzyl, S-p-hydroxybenzyl, S-o-acetoxybenzyl, S-p-acetoxybenzyl, S-p -nitrobenzyl, So-nitrobenzyl, S-2,4,6-trimethylbenzyl, S-2,4,6-trimethoxybenzyl, S-4-picolyl, S-2-picolyl-Noxide, S-2-quinolinylmethyl, S-9 -anthrylmethyl, S-9-fluorenylmethyl, S-xanthenyl, Sferrocenylmethyl, S-diphenylmethyl, S-bis(4-methoxyphenyl)methyl, S-5-dibenzosuberyl, Striphenylmethyl, 4-methoxytrityl, S-diphenyl-4-pyridylmethyl, S -phenyl, S-2,4-dinitrophenyl, S-2quinolyl, S-tert-butyl, S-1-adamantyl, S-methoxymethyl, S-isobutoxymethyl, S-benzyloxymethyl, S-1-ethoxyethyl, S-2-tetrahydropyranyl , S-benzylthiomethyl, S-phenylthiomethyl, S-acetamidomethyl (Acm), S-trimethylacetamidomethyl, S-benzamidomethyl, S-allyloxycarbonylaminomethyl, S-N[2,3,5,6-tetrafluoro-4-(N-piperidino)phenyl-N -allyloxycarbonylaminomethyl, S-phthalimidomethyl, Sphenylacetamidomethyl, S-acetylmethyl, S-carboxymethyl, S-cyanomethyl, S-(2-nitro-1-phenyl)ethyl, S-2-(2,4-dinitrophenyl)ethyl, S-2 -(4'-pyridyl)ethyl, S-2-cyanoethyl, S-2-(trimethylsilyl)ethyl, S-2,2bis(carboethoxy)ethyl, S-(1-m-nitrophenyl-2-benzoyl)ethyl, S -2-phenylsulfonylethyl, S-1-(4methylphenylsulfonyl)-2-methylprop-2-yl and S-p-hydroxyphenacyl. In the case of disulfides, the protected SH group may be selected from S-ethyl disulfide, S-tert-butyl disulfide, S-2nitrophenyl disulfide, S-2,4-dinitrophenyl disulfide, S-2-phenylazophenyl disulfide, S-2carboxyphenyl disulfide and S-3-nitro-2 -pyridyl disulfide. In the case of silyl thioethers, the protecting group for SH may be selected from the list of groups that are listed above for the protection of OH with silyl ethers. In the case of thioethers, the protecting group for SH may be selected from S-acetyl, S-benzoyl, S-2-methoxyisobuturyl, S-trifluoroacetyl, S-N-Cnbiphenylyl)isopropyloxy]carbonyl]-N-methyl-y-aminothiobutyrate and S-N-(tert- butoxycarbonyl)-Nmethyl-y-aminothiobutyrate. In the case of a thiocarbonate, the protecting group for SH may be selected from S2,2,2-trichloroethoxycarbonyl, S-tert-butoxycarbonyl, S-benzyloxycarbonyl, S-pmethoxybenzyloxycarbonyl and S-fluorenylmethylcarbonyl. In the case of a thiocarbamate, the protected SH group may be selected from S-(N-ethylcarbamate) and S-(N-methoxymethylcarbamate).

Упоминание этих групп не следует интерпретировать как ограничение объема изобретения, поскольку они были упомянуты как простая иллюстрация защитных групп для групп ОН, амино и SH, но другие группы, имеющие указанную функцию, могут быть известны специалисту в данной области техники, и следует понимать, что они также охватываются настоящим изобретением.The mention of these groups should not be interpreted as limiting the scope of the invention since they have been mentioned as a mere illustration of protecting groups for the OH, amino and SH groups, but other groups having this function may be known to one skilled in the art and it is understood that they are also covered by the present invention.

Для более лаконичного описания, некоторые количественные выражения, приведенные в настоящем документе, не дополнены термином примерно. Подразумевается, что независимо от того, используется ли термин примерно явным образом или нет, каждая величина, указанная в настоящем документе, предназначена для ссылки на фактическое данное значение, а также подразумевается, что оно относится к приближению к такому заданному значению, которое разумно выводится на основе обычных навыков в данной области техники, включая эквиваленты и приближения, обусловленные условиями эксперимента и/или измерения для такого заданного значения.For a more concise description, some quantitative expressions given in this document are not supplemented by the term approximately. It is understood that, whether the term approximately is used explicitly or not, each value stated herein is intended to refer to an actual given value and is also intended to refer to an approximation to such given value that is reasonably inferred to based on normal skill in the art, including equivalents and approximations required by the experimental and/or measurement conditions for such a given value.

Конъюгаты антитело-лекарственное средство (ADC) представляют собой таргетную стратегию доставки цитотоксической молекулы к раковой клетке (см., например, международные заявки на патент WO-A-2004/010957, WO-A-2006/060533 и WO-A-2007/024536). Такие соединения обычно называютAntibody-drug conjugates (ADCs) are a targeted strategy for delivering a cytotoxic molecule to a cancer cell (see, for example, international patent applications WO-A-2004/010957, WO-A-2006/060533 and WO-A-2007/ 024536). Such connections are usually called

- 77 046742 конъюгатами лекарственного средства, токсина и радионуклида. Уничтожение опухолевой клетки происходит при связывании конъюгата лекарственного средства с опухолевой клеткой и выделении и/или активации цитотоксической активности группы лекарственного средства. Селективность, обеспечиваемая конъюгатами лекарственного средства, минимизирует токсичность для нормальных клеток, тем самым повышая переносимость лекарственного средства у пациента. Три примера конъюгатов лекарственное средство-антитело этого типа, получивших одобрение на рынке, включают: Гемтузумаб озогамицин для острого миелогенного лейкоза, Брентуксимаб ведотинфор для рецидивирующей и устойчивой к лечению лимфомы Ходжкина или анапластической крупноклеточной лимфомы и адо-Трастузумаб эмтанзин для рака груди, особенно HER2 +- 77 046742 conjugates of a drug, toxin and radionuclide. The destruction of the tumor cell occurs when the drug conjugate binds to the tumor cell and releases and/or activates the cytotoxic activity of the drug group. The selectivity provided by drug conjugates minimizes toxicity to normal cells, thereby increasing patient tolerance of the drug. Three examples of drug-antibody conjugates of this type that have received market approval include: Gemtuzumab ozogamicin for acute myelogenous leukemia, Brentuximab vedotinfor for relapsed and treatment-resistant Hodgkin lymphoma or anaplastic large cell lymphoma, and ado-Trastuzumab emtansine for breast cancer, especially HER2+

Эффективность лекарственных средств для химиотерапии рака обычно зависит от различий в скорости роста, биохимических путях и физиологических характеристиках между раковыми и нормальными тканями. Следовательно, большинство стандартных химиотерапевтических агентов относительно неспецифичны и проявляют ограничивающую дозу токсичность, которая способствует субоптимальным терапевтическим эффектам. Один из подходов к избирательному нацеливанию на злокачественные клетки, а не на здоровые ткани, заключается в использовании специфических моноклональных антител (mAb), которые распознают опухолеассоциированные антигены, экспрессируемые на поверхности опухолевых клеток [Meyer, D.L. & Senter, P.D. (2003) Recent advances in antibody drug conjugates for cancer therapy. Annu. Rep. Med. Chem., 38, 229-237; Chari, R.V. (2008) Targeted cancer therapy: conferring specificity to cytotoxic drugs. Acc. Chem. Res. 41, 98-107]. Более чем 30 иммуноглобулинов G-типа (IgG) и родственных агентов было одобрено в течение последних 25 лет в основном для рака и воспалительных заболеваний.The effectiveness of cancer chemotherapy drugs typically depends on differences in growth rates, biochemical pathways, and physiological characteristics between cancerous and normal tissues. Consequently, most standard chemotherapeutic agents are relatively nonspecific and exhibit dose-limiting toxicities that contribute to suboptimal therapeutic effects. One approach to selectively targeting malignant cells rather than healthy tissue is the use of specific monoclonal antibodies (mAbs) that recognize tumor-associated antigens expressed on the surface of tumor cells [Meyer, D.L. & Senter, P.D. (2003) Recent advances in antibody drug conjugates for cancer therapy. Annu. Rep. Med. Chem., 38, 229-237; Chari, R.V. (2008) Targeted cancer therapy: conferring specificity to cytotoxic drugs. Acc. Chem. Res. 41, 98-107]. More than 30 immunoglobulin G (IgG) and related agents have been approved over the past 25 years, primarily for cancer and inflammatory diseases.

Альтернативной стратегией является поиск химического конъюгата малых антинеопластических молекул с mAb, используемыми как в качестве носителей (увеличенный период полужизни), так и в качестве таргетных агентов (селективность). Значительные усилия были направлены на использование моноклональных антител (mAb) для таргетной доставки лекарственных средств благодаря их высокой селективности в отношении опухолеассоциированных антигенов, благоприятной фармакокинетике и относительно низкой свойственной токсичности.An alternative strategy is to find a chemical conjugate of small antineoplastic molecules with mAbs used both as carriers (extended half-life) and as targeting agents (selectivity). Considerable effort has been directed toward the use of monoclonal antibodies (mAbs) for targeted drug delivery due to their high selectivity for tumor-associated antigens, favorable pharmacokinetics, and relatively low inherent toxicity.

Конъюгаты mAb-лекарственное средство (ADC) получают ковалентным связыванием противораковых лекарственных средств с mAb, обычно через условно стабильную линкерную систему. После связывания с антигенами клеточной поверхности, mAb, используемые для большинства ADC, активно транспортируются в лизосомы или другие внутриклеточные компартменты, где ферменты, низкий pH или восстанавливающие агенты способствуют высвобождению лекарственного средства. Однако в настоящее время в разработке находятся ограниченные ADC.mAb-drug conjugates (ADCs) are prepared by covalently linking anticancer drugs to mAbs, typically through a conditionally stable linker system. After binding to cell surface antigens, the mAbs used for most ADCs are actively transported to lysosomes or other intracellular compartments, where enzymes, low pH, or reducing agents promote drug release. However, there are limited ADCs currently in development.

Антигены должны иметь высокую селективность к опухолевым клеткам, чтобы ограничить токсичность и нецелевые эффекты. Множество опухолеассоциированных антигенов было исследовано в доклинических моделях и в клинических испытаниях, включая антигены, сверхэкспрессируемые в Вклетках (например, CD20, CD22, CD40, CD79), Т-клетках (CD25, CD30), клетках карциномы (HER2, EGFR, EpCAM, EphB2, PSMA), эндотелиальных (эндоглин) или стромальных клетках (фибробластактивированный белок), чтобы назвать несколько [Teicher BA. Antibody-drug conjugate targets. CunCancer Drug Targets 9(8):982-1004, 2009]. Важным свойством мишеней ADC является их способность к интернализации; это может быть присущей особенностью самого антигена или может быть вызвано связыванием антитела с его антигеном. Действительно, интернализация ADC имеет решающее значение для снижения токсичности, связанной с внеклеточной доставкой полезной нагрузки лекарственного средства.Antigens must have high selectivity for tumor cells to limit toxicity and off-target effects. A variety of tumor-associated antigens have been studied in preclinical models and clinical trials, including antigens overexpressed in B cells (eg, CD20, CD22, CD40, CD79), T cells (CD25, CD30), carcinoma cells (HER2, EGFR, EpCAM, EphB2 , PSMA), endothelial (endoglin) or stromal cells (fibroblast-activated protein), to name a few [Teicher BA. Antibody-drug conjugate targets. CunCancer Drug Targets 9(8):982–1004, 2009]. An important property of ADC targets is their ability to be internalized; this may be an intrinsic feature of the antigen itself or may be caused by the binding of the antibody to its antigen. Indeed, internalization of ADCs is critical for reducing toxicity associated with extracellular delivery of drug payload.

Что касается конъюгированных малых молекул и в отличие от огромного разнообразия предполагаемых антигенных мишеней, ограниченное количество семейств цитотоксических препаратов, используемых в качестве полезной нагрузки в ADC, в настоящее время активно исследуются в клинических испытаниях: калихеамицин (Pfizer), дуокармицины (Synthon), пирролобензодиазепины (Spirogen), иринотекан (Immunomedics), майтанзиноиды (DM1 и DM4; ImmunoGen+Genentech/Roche, Sanofi-Aventis, Biogen Idec, Centocor/Johnson & Johnson, Millennium/Takeda) и ауристатины (MMAE и MMAF; Seattle Genetics+Genentech/Roche, MedImmune/AstraZeneca, Bayer-Schering, Celldex, Progenics, Genmab). Калихеамицин, дуокармицины и пирролобензодиазепины являются белками, связывающимися с малой бороздой ДНК, иринотекан является ингибитором топоизомеразы I, а майтанзиноиды и ауристатины являются агентами деполимеризации тубулина.For conjugated small molecules, and in contrast to the vast diversity of putative antigenic targets, a limited number of cytotoxic drug families used as payloads in ADCs are currently being actively investigated in clinical trials: calicheamicin (Pfizer), duocarmycins (Synthon), pyrrolobenzodiazepines ( Spirogen), irinotecan (Immunomedics), maytansinoids (DM1 and DM4; ImmunoGen+Genentech/Roche, Sanofi-Aventis, Biogen Idec, Centocor/Johnson & Johnson, Millennium/Takeda) and auristatins (MMAE and MMAF; Seattle Genetics+Genentech/Roche , MedImmune/AstraZeneca, Bayer-Schering, Celldex, Progenics, Genmab). Calicheamicin, duocarmycins and pyrrolobenzodiazepines are DNA minor groove binding proteins, irinotecan is a topoisomerase I inhibitor, and maytansinoids and auristatins are tubulin depolymerization agents.

Интересно, что представитель трех из этих цитотоксических ADC достиг поздней стадии клинических испытаний. Трастузумаб эмтанзин (T-DM1), трастузумаб, связанный с майтанзиноидным полусинтетическим лекарственным средством стабильным линкером (одобрение FDA от 22 февраля 2013 для распространенного HER2 положительного рака груди); Инотузумаб озогамицин (CMC-544), гуманизированное анти-CD22 mAb (G5/44, IgG4), конъюгированное с калихеамицином кислотолабильным линкером (ацетилфенокси-бутановым) (B-клеточная неходжкинская лимфома); Брентуксимаб ведотин, гуманизированное анти-CD30 mAb, связанное с монометилауристатином E (MMAE) через малеимидкапроил-валил-цитруллинил-п-аминобензилкарбаматный линкер (одобрениеInterestingly, a representative of three of these cytotoxic ADCs has reached late-stage clinical trials. Trastuzumab emtansine (T-DM1), trastuzumab linked to a maytansinoid semisynthetic drug by a stable linker (FDA approval February 22, 2013 for advanced HER2 positive breast cancer); Inotuzumab ozogamicin (CMC-544), a humanized anti-CD22 mAb (G5/44, IgG4) conjugated to calicheamicin with an acid-labile linker (acetylphenoxy-butane) (B-cell non-Hodgkin's lymphoma); Brentuximab vedotin, a humanized anti-CD30 mAb linked to monomethyl auristatin E (MMAE) via a maleimide caproyl-valyl-citrullinyl-p-aminobenzylcarbamate linker (approved

- 78 046742- 78 046742

FDA от 19 августа 2011 для анапластической крупноклеточной лимфомы и лимфомы Ходжкина).FDA on August 19, 2011 for anaplastic large cell lymphoma and Hodgkin lymphoma).

Линкеры представляют ключевой компонент ADC структур. Было исследовано несколько классов линкеров второго поколения, включая кислотолабильные гидразоновые линкеры (лизосомы) (например гемтузумаб и инотузумаб озогамицин); линкеры на основе дисульфида (восстановительная внутриклеточная среда); не расщепляемые тиоэфирные линкеры (катаболическое разложение в лизосомах) (например, трастузумаб эмтанзин); пептидные линкеры (например, цитрулин-валин) (подобный лизосомальным протеазам катепсин-B) (например брентуксимаб ведотин): см, например, WOA-2004/010957, WO-A-2006/060533 и WO-A-2007/024536. Очистка конъюгатов антитело-лекарственное средство эксклюзионной хроматографией по размеру (ЭХР) также описана [см., например, Liu et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 93: 8618-8623 (1996) и Chari et al., Cancer Research, 52: 127-131 (1992)].Linkers represent a key component of ADC structures. Several classes of second-generation linkers have been investigated, including acid-labile hydrazone linkers (lysosomes) (eg, gemtuzumab and inotuzumab ozogamicin); disulfide-based linkers (reductive intracellular environment); non-cleavable thioester linkers (catabolic degradation in lysosomes) (for example, trastuzumab emtansine); peptide linkers (eg citrulline-valine) (lysosomal protease-like cathepsin-B) (eg brentuximab vedotin): see, for example, WOA-2004/010957, WO-A-2006/060533 and WO-A-2007/024536. Purification of antibody-drug conjugates by size exclusion chromatography (SEC) has also been described [see, for example, Liu et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 93: 8618-8623 (1996) and Chari et al., Cancer Research, 52: 127-131 (1992)].

Трастузумаб (Герцептин) представляет собой моноклональное антитело, которое взаимодействует с рецептором HER2/neu. Его основным применением является лечение определенных раков груди. Рецепторами HER являются белки, которые встроены в клеточную мембрану и передают молекулярные сигналы извне клетки (молекулы, называемые EGF) внутрь клетки и включают и выключают гены. Белки HER стимулируют пролиферацию клеток. При некоторых формах рака, особенно при некоторых типах рака груди, HER2 сверхэкспрессируется и вызывает неконтролируемое размножение раковых клеток.Trastuzumab (Herceptin) is a monoclonal antibody that interacts with the HER2/neu receptor. Its main use is to treat certain breast cancers. HER receptors are proteins that are embedded in the cell membrane and transmit molecular signals from outside the cell (molecules called EGF) to the inside of the cell and turn genes on and off. HER proteins stimulate cell proliferation. In some forms of cancer, especially some types of breast cancer, HER2 is overexpressed and causes cancer cells to multiply uncontrollably.

Ген HER2 амплифицирован в 20-30% ранней стадии рака груди, что заставляет его сверхэкспрессировать рецепторы эпидермального фактора роста (EGF) в клеточной мембране. При некоторых типах рака, HER2 может посылать сигналы без прибытия факторов роста и их связывания с рецептором, что делает его действие в клетке конститутивным; однако трастузумаб в этом случае не эффективен.The HER2 gene is amplified in 20-30% of early stage breast cancers, causing them to overexpress epidermal growth factor (EGF) receptors in the cell membrane. In some types of cancer, HER2 can send signals without growth factors arriving and binding to the receptor, making its action constitutive in the cell; however, trastuzumab is not effective in this case.

Путь HER2 способствует росту и делению клеток, когда он функционирует нормально; однако, когда он сверхэкспрессируется, рост клеток ускоряется сверх нормальных пределов. При некоторых типах рака этот путь используется для ускорения роста и пролиферации клеток и, следовательно, образования опухолей. В раковых клетках белок HER2 может экспрессироваться в 100 раз больше, чем в нормальных клетках (2 миллиона против 20000 на клетку). Эта сверхэкспрессия приводит к сильной и постоянной передаче сигналов пролиферации и, следовательно, к образованию опухоли. Сверхэкспрессия HER2 также вызывает деактивацию контрольных точек, что способствует еще большему увеличению пролиферации.The HER2 pathway promotes cell growth and division when it functions normally; however, when it is overexpressed, cell growth is accelerated beyond normal limits. In some types of cancer, this pathway is used to accelerate cell growth and proliferation and hence tumor formation. In cancer cells, HER2 protein can be expressed 100 times more than in normal cells (2 million versus 20,000 per cell). This overexpression results in strong and persistent proliferation signaling and hence tumor formation. Overexpression of HER2 also causes checkpoint deactivation, which further increases proliferation.

В соединениях настоящего изобретения Ab является группой, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт. В альтернативном варианте осуществления, Ab может быть любым подходящим агентом, который способен связываться с клеткой мишенью, предпочтительно, клеткой животного, и более предпочтительно, клеткой человека. Примеры таких агентов включают лимфокины, гормоны, факторы роста и молекулы, переносящие питательные вещества (например, трансферрин). В другом примере, Ab может быть аптамером и может включать нуклеиновую кислоту или пептидный аптамер.In the compounds of the present invention, an Ab is a group containing at least one antigen binding site. In an alternative embodiment, the Ab may be any suitable agent that is capable of binding to a target cell, preferably an animal cell, and more preferably a human cell. Examples of such agents include lymphokines, hormones, growth factors, and nutrient transport molecules (eg, transferrin). In another example, the Ab may be an aptamer and may include a nucleic acid or peptide aptamer.

Если Ab является группой, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, группа предпочтительно является антигенсвязывающим пептидом или полипептидом. В предпочтительном варианте осуществления, группой является антитело или его антигенсвязывающий фрагмент.If the Ab is a group containing at least one antigen binding site, the group is preferably an antigen binding peptide or polypeptide. In a preferred embodiment, the group is an antibody or an antigen-binding fragment thereof.

Термин антитело в конъюгатах лекарственного средства настоящего изобретения относится к любому иммуноглобулину, предпочтительно полноразмерному иммуноглобулину. Предпочтительно, термин охватывает моноклональные антитела, поликлональные антитела, мультиспецифические антитела, такие как биспецифические антитела, и их фрагменты, пока они проявляют желаемую биологическую активность. Антитела могут быть получены от любого вида, но, предпочтительно, происходят от грызунов, например крысы или мыши, человека или кролика. Альтернативно, антитела, предпочтительно, моноклональные антитела, могут быть гуманизированными, химерными или фрагментами антитела. Термин химерные антитела может также включать приматизированные антитела, содержащие антигенсвязывающие последовательности вариабельного домена, полученные от приматов, не относящихся к человеку (например, старосветской мартышки, обезьян и т.д.) и последовательности константной области человека. Иммуноглобулины также могут быть любого типа (например, IgG, IgE, IgM, IgD и IgA), класса (например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2) или подкласса молекулы иммуноглобулина.The term antibody in the drug conjugates of the present invention refers to any immunoglobulin, preferably full-length immunoglobulin. Preferably, the term covers monoclonal antibodies, polyclonal antibodies, multispecific antibodies, such as bispecific antibodies, and fragments thereof, as long as they exhibit the desired biological activity. Antibodies can be obtained from any species, but preferably come from rodents, such as rat or mouse, human or rabbit. Alternatively, the antibodies, preferably monoclonal antibodies, may be humanized, chimeric, or antibody fragments. The term chimeric antibodies may also include primatized antibodies containing antigen binding variable domain sequences derived from non-human primates (eg, monkeys, apes, etc.) and human constant region sequences. Immunoglobulins can also be of any type (eg, IgG, IgE, IgM, IgD and IgA), class (eg, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 and IgA2) or subclass of the immunoglobulin molecule.

Термин моноклональное антитело относится к по существу гомогенной популяции молекул антитела (т.е. где отдельные антитела, составляющие популяцию, идентичны, за исключением возможных встречающихся в природе мутаций, которые могут присутствовать в незначительных количествах), продуцируемой одним клоном B клеточной линии, часто гибридомой. Важно отметить, что каждое моноклональное антитело имеет одинаковую антигенную специфичность - то есть оно направлено против одной детерминанты антигена.The term monoclonal antibody refers to an essentially homogeneous population of antibody molecules (i.e. where the individual antibodies making up the population are identical except for possible naturally occurring mutations that may be present in minute quantities) produced by a single clone B cell line, often a hybridoma . It is important to note that each monoclonal antibody has the same antigen specificity - that is, it is directed against one antigen determinant.

Получение моноклональных антител может проводиться способами, известными в данной области техники. Однако, в качестве примера, моноклональные антитела могут быть получены способом гибридомы (Kohler et al (1975) Nature 256:495), методом В-клеточной гибридомы человека (Kozbor et al., 1983, Immunology Today 4: 72) или методом EBV-гибридомы (Cole et al., 1985, Monoclonal Antibodies иThe production of monoclonal antibodies can be carried out by methods known in the art. However, by way of example, monoclonal antibodies can be produced by the hybridoma method (Kohler et al (1975) Nature 256:495), the human B cell hybridoma method (Kozbor et al., 1983, Immunology Today 4: 72) or the EBV- hybridomas (Cole et al., 1985, Monoclonal Antibodies and

- 79 046742- 79 046742

Cancer Therapy, Alan R. Liss, Inc., pp. 77-96). Альтернативно, моноклональное антитело может быть получено с применением способов рекомбинантной ДНК (см., US 4816567) или выделено из фаговых библиотек антител с применением методов, описанных в Clackson et al. (1991) Nature, 352:624-628; Marks et al (1991) J. MoI. Biol., 222:581-597.Cancer Therapy, Alan R. Liss, Inc., pp. 77-96). Alternatively, the monoclonal antibody can be produced using recombinant DNA methods (see US 4,816,567) or isolated from phage antibody libraries using the methods described in Clackson et al. (1991) Nature, 352:624-628; Marks et al (1991) J. MoI. Biol., 222:581-597.

Поликлональными антителами являются антитела, направленные против различных детерминант (эпитопов). Эта гетерогенная популяция антитела может быть получена из сыворотки иммунизированных животных с использованием различных методов, хорошо известных в данной области техники.Polyclonal antibodies are antibodies directed against various determinants (epitopes). This heterogeneous population of antibodies can be obtained from the serum of immunized animals using various methods well known in the art.

Термин биспецифическое антитело относится к искусственному антителу, состоящему из двух разных моноклональных антител. Они могут быть сконструированы для связывания либо с двумя соседними эпитопами на одном антигене, тем самым увеличивая авидность и специфичность, либо для связывания двух разных антигенов для множества применений, но особенно для привлечения цитотоксических Т-клеток и естественных киллеров (NK) или перенацеливания токсинов, радионуклидов или цитотоксических лекарственных средств для лечения рака (Holliger & Hudson, Nature Biotechnology, 2005, 23(9), 1126-1136). Биспецифическое антитело может иметь гибридную тяжелую цепь иммуноглобулина с первой специфичностью связывания в одном плече, и гибридную пару тяжелая цепь-легкая цепь иммуноглобулина (обеспечивающую вторую специфичность связывания) в другом плече. Эта асимметричная структура облегчает отделение желаемого биспецифического соединения от нежелательных комбинаций цепей иммуноглобулина, поскольку присутствие легкой цепи иммуноглобулина только в одной половине биспецифической молекулы обеспечивает простой способ разделения (WO 94/04690; Suresh et al., Methods in Enzymology, 1986, 121:210; Rodrigues et al., 1993, J. of Immunology 151:6954-6961; Carter et al., 1992, Bio/Technology 10:163-167; Carter et al., 1995, J. of Hematotherapy 4:463-470; Merchant et al., 1998, Nature Biotechnology 16:677-681).The term bispecific antibody refers to an artificial antibody consisting of two different monoclonal antibodies. They can be designed to bind either to two adjacent epitopes on the same antigen, thereby increasing avidity and specificity, or to bind two different antigens for a variety of applications, but especially for the recruitment of cytotoxic T cells and natural killer (NK) cells or the retargeting of toxins. radionuclides or cytotoxic drugs for the treatment of cancer (Holliger & Hudson, Nature Biotechnology, 2005, 23(9), 1126-1136). A bispecific antibody may have a hybrid immunoglobulin heavy chain with a first binding specificity in one arm, and a hybrid immunoglobulin heavy chain-light chain pair (providing a second binding specificity) in the other arm. This asymmetric structure facilitates the separation of the desired bispecific compound from undesired immunoglobulin chain combinations, since the presence of the immunoglobulin light chain in only one half of the bispecific molecule provides a simple separation method (WO 94/04690; Suresh et al., Methods in Enzymology, 1986, 121:210; Rodrigues et al., 1993, J. of Immunology 151:6954-6961; Carter et al., 1992, Bio/Technology 10:163-167; Carter et al., 1995, J. of Hematotherapy 4:463-470; Merchant et al., 1998, Nature Biotechnology 16:677-681).

Способы получения гибридных или биспецифических антител известны в данной области техники. В одном способе, биспецифические антитела могут быть получены слиянием двух гибридом в единую квадрому путем химического перекрестного связывания или генетического слияния двух разных модулей Fab или scFv (Holliger & Hudson, Nature Biotechnology, 2005, 23(9), 1126-1136).Methods for producing hybrid or bispecific antibodies are known in the art. In one method, bispecific antibodies can be produced by fusing two hybridomas into a single quadraoma by chemical cross-linking or genetic fusion of two different Fab or scFv modules (Holliger & Hudson, Nature Biotechnology, 2005, 23(9), 1126-1136).

Термин химерное антитело относится к антителу, разные части которого получены от разных видов животных. Например, химерное антитело может получить вариабельную область от мыши и константную область от человека. Напротив, гуманизированное антитело происходит преимущественно от человека, даже если оно содержит не человеческие части. В частности, гуманизированные антитела представляют собой иммуноглобулины человека (реципиентное антитело), в которых остатки из гипервариабельной области реципиента заменены остатками из гипервариабельных областей видов, не относящихся к человеку (донорное антитело), таких как мышь, крыса, кролик или примат, не относящийся к человеку, имеющими желаемую специфичность, аффинность и емкость. В некоторых случаях, остатки каркасной области (FR) иммуноглобулина человека заменяются соответствующими не человеческими остатками. Более того, гуманизированные антитела могут содержать остатки, которые не найдены в реципиентном антителе или в донорном антителе. Эти модификации делают для дальнейшего улучшения эффективности антитела. В общем, гуманизированное антитело будет включать по существу все из, по меньшей мере, одного и, обычно, двух вариабельных доменов, в которых все или по существу все гипервариабельные петли соответствуют петлям не человеческого иммуноглобулина, и все или по существу все FR принадлежат к последовательностям иммуноглобулина человека. Гуманизированное антитело необязательно также будет включать, по меньшей мере, часть константной области иммуноглобулина (Fc), обычно иммуноглобулина человека.The term chimeric antibody refers to an antibody whose different parts are derived from different animal species. For example, a chimeric antibody may obtain a variable region from a mouse and a constant region from a human. In contrast, a humanized antibody is predominantly human derived, even if it contains non-human parts. In particular, humanized antibodies are human immunoglobulins (recipient antibody) in which residues from the hypervariable region of the recipient are replaced by residues from the hypervariable regions of a non-human species (donor antibody), such as mouse, rat, rabbit, or non-human primate. to a person having the desired specificity, affinity and capacity. In some cases, framework region (FR) residues of human immunoglobulin are replaced by corresponding non-human residues. Moreover, humanized antibodies may contain residues that are not found in the recipient antibody or the donor antibody. These modifications are made to further improve the effectiveness of the antibody. In general, a humanized antibody will include substantially all of at least one and typically two variable domains, in which all or substantially all of the hypervariable loops correspond to non-human immunoglobulin loops, and all or substantially all of the FRs belong to the sequences human immunoglobulin. The humanized antibody will also optionally include at least a portion of an immunoglobulin constant region (Fc), typically human immunoglobulin.

Рекомбинантные антитела, такие как химерные и гуманизированные моноклональные антитела, могут быть получены методами рекомбинантной ДНК, известными в данной области техники. Полностью человеческие антитела могут быть получены с использованием трансгенных мышей, которые неспособны экспрессировать гены тяжелой и легкой цепей эндогенного иммуноглобулина, но которые могут экспрессировать гены тяжелой и легкой цепей человека. Трансгенных мышей иммунизируют обычным способом выбранным антигеном. Моноклональные антитела, направленные против антигена, могут быть получены с применением обычного метода гибридомы. Трансгены человеческого иммуноглобулина, содержащиеся в трансгенных мышах, перестраиваются во время дифференциации Вклеток и впоследствии претерпевают переключение классов и соматическую мутацию. Таким образом, используя такой метод, можно получить терапевтически полезные антитела IgG, IgA, IgM и IgE. Для обзора этого метода получения антител человека см. Lonberg и Huszar (1995, Int. Rev. Immunol. 13:65-93). Подробное обсуждение этого метода получения антител человека и моноклональных антител человека и протоколы получения таких антител см., например, патенты США №№ 5625126; 5633425; 5569825; 5661016; 5545806; каждый из которых включен в настоящий документ в качестве ссылки полностью. Другие антитела человека могут быть получены коммерчески, например, от Abgenix, Inc. (Freemont, CA) и Genpharm (San Jose, CA).Recombinant antibodies, such as chimeric and humanized monoclonal antibodies, can be produced by recombinant DNA techniques known in the art. Fully human antibodies can be produced using transgenic mice that are unable to express endogenous immunoglobulin heavy and light chain genes, but which can express human heavy and light chain genes. Transgenic mice are immunized in the usual manner with the selected antigen. Monoclonal antibodies directed against an antigen can be produced using the conventional hybridoma method. Human immunoglobulin transgenes contained in transgenic mice are rearranged during B cell differentiation and subsequently undergo class switching and somatic mutation. Thus, using this method, therapeutically useful IgG, IgA, IgM and IgE antibodies can be obtained. For a review of this method of producing human antibodies, see Lonberg and Huszar (1995, Int. Rev. Immunol. 13:65-93). For a detailed discussion of this method of producing human antibodies and human monoclonal antibodies and protocols for producing such antibodies, see, for example, US patent No. 5625126; 5633425; 5569825; 5661016; 5545806; each of which is incorporated herein by reference in its entirety. Other human antibodies can be obtained commercially, for example from Abgenix, Inc. (Freemont, CA) and Genpharm (San Jose, CA).

Термин антигенсвязывающий фрагмент в конъюгате лекарственного средства настоящего изобретения относится к части полноразмерного антитела, где такие антигенсвязывающие фрагментыThe term antigen binding fragment in a drug conjugate of the present invention refers to the portion of a full length antibody wherein such antigen binding fragments

- 80 046742 антител сохраняют антигенсвязывающую функцию соответствующего полноразмерного антитела. Антигенсвязывающий фрагмент может включать часть вариабельной области антитела, где указанная часть содержит, по меньшей мере, один, два, предпочтительно, три CDR, выбранных из CDR1, CDR2 и CDR3. Антигенсвязывающий фрагмент может также включать часть легкой и тяжелой цепи иммуноглобулина. Примеры фрагментов антитела включают Fab, Fab', F(ab')₂, scFv, di-scFv, sdAb и BiTE (привлекающие Т-клетки биспецифические активаторы), Fv фрагменты, включая нанотела, диатела, слияния диатело-Fc, триатела и тетратела; минитела; линейные антитела; фрагменты, продуцируемые библиотекой экспрессии Fab, анти-идиотипические (анти-Id) антитела, CDR- (определяющую комплементарность область) и эпитоп-связывающие фрагменты любых из вышеперечисленных, которые иммуноспецифически связываются с антигеном-мишенью, таким как антигены раковых клеток, вирусные антигены или микробные антигены, молекулы одноцепочечных или однодоменных антител, включая антитела, имеющие только тяжелые цепи, например, домены VHH верблюда и V-NAR акулы; и мультиспецифические антитела, образованные из фрагментов антител. Для сравнения, полноразмерным антителом, называемым антитело, является антитело, содержащее домены VL и VH, а также полные константные домены легкой и тяжелой цепи.- 80 046742 antibodies retain the antigen-binding function of the corresponding full-length antibody. The antigen binding fragment may include a portion of an antibody variable region, wherein said portion comprises at least one, two, preferably three CDRs selected from CDR1, CDR2, and CDR3. The antigen binding fragment may also include part of an immunoglobulin light and heavy chain. Examples of antibody fragments include Fab, Fab', F(ab') ₂ , scFv, di-scFv, sdAb and BiTE (T cell-attracting bispecific activators), Fv fragments including nanobodies, diabodies, diabody-Fc fusions, tribodies and tetrabodies ; minibodies; linear antibodies; fragments produced by a Fab expression library, anti-idiotypic (anti-Id) antibodies, CDR (complementarity determining region) and epitope-binding fragments of any of the above that immunospecifically bind to a target antigen, such as cancer cell antigens, viral antigens or microbial antigens, single-chain or single-domain antibody molecules, including heavy chain-only antibodies, such as camel VHH and shark V-NAR domains; and multispecific antibodies formed from antibody fragments. By comparison, a full-length antibody, referred to as an antibody, is an antibody containing the VL and VH domains, as well as the complete light and heavy chain constant domains.

Антитело может также иметь одну или несколько эффекторных функций, которые относятся к биологической активности, приписываемой Fc области (Fc области с нативной последовательностью или Fc области варианта аминокислотной последовательности, сконструированной способами, известными в данной области техники, для изменения связывания рецептора) антитела. Примеры эффекторных функций антитела включают связывание CIq; комплементзависимую цитотоксичность; связывание с рецептором Fc; антителозависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность (ADCC); фагоцитоз; подавление рецепторов клеточной поверхности (например, B-клеточного рецептора; BCR) и т. д.An antibody may also have one or more effector functions that relate to the biological activity attributable to the Fc region (native sequence Fc region or amino acid sequence variant Fc region engineered by methods known in the art to alter receptor binding) of the antibody. Examples of antibody effector functions include CIq binding; complement-dependent cytotoxicity; Fc receptor binding; antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC); phagocytosis; suppression of cell surface receptors (eg, B-cell receptor; BCR), etc.

Антитело также может быть функционально активным фрагментом (также именуемым в настоящем документе как иммунологически активная часть), производным или аналогом антитела, которое иммуноспецифически связывается с целевым антигеном, таким как антиген раковой клетки, вирусный антиген или микробный антиген, или другими антителами, связанными с опухолевыми клетками. В этом отношении, функционально активный означает, что фрагмент, производное или аналог способен вызывать анти-идиотипические антитела, которые распознают тот же антиген, который распознает антитело, из которого получен фрагмент, производное или аналог. В частности, в типовом варианте осуществления, антигенность идиотипа молекулы иммуноглобулина может быть усилена делецией последовательностей каркаса и CDR, которые являются С-концевыми по отношению к последовательности CDR, которая специфически распознает антиген. Чтобы определить, какие последовательности CDR связывают антиген, синтетические пептиды, содержащие последовательности CDR, могут применяться в анализах связывания с антигеном любым методом анализа связывания, известным в данной области техники (например, анализом BIAcore), см, например, Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, National Institute of Health, Bethesda, Md; Kabat E et al., 1980, J. of Immunology 125(3):961-969).An antibody may also be a functionally active fragment (also referred to herein as an immunologically active moiety), derivative, or analogue of an antibody that immunospecifically binds to a target antigen, such as a cancer cell antigen, a viral antigen, or a microbial antigen, or other tumor-related antibodies. cells. In this regard, functionally active means that the fragment, derivative or analogue is capable of eliciting anti-idiotypic antibodies that recognize the same antigen that recognizes the antibody from which the fragment, derivative or analogue is derived. In particular, in an exemplary embodiment, the antigenicity of an idiotype immunoglobulin molecule can be enhanced by deletion of framework and CDR sequences that are C-terminal to the CDR sequence that specifically recognizes the antigen. To determine which CDR sequences bind an antigen, synthetic peptides containing the CDR sequences can be used in antigen binding assays by any binding assay known in the art (eg, BIAcore assay), see, eg, Kabat et al., 1991 , Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, National Institute of Health, Bethesda, Md.; Kabat E et al., 1980, J. of Immunology 125(3):961-969).

Термин антитело может также включать слитый белок антитела или его функционально активный фрагмент, например, в котором антитело слито через ковалентную связь (например, пептидную связь) либо на N-конце, либо на C -конце, с аминокислотной последовательностью другого белка (или ее частью, такой как, по меньшей мере, часть белка из 10, 20 или 50 аминокислот), которая не является антителом. Антитело или его фрагмент может быть ковалентно связано с другим белком на N-конце константного домена.The term antibody may also include an antibody fusion protein or a functionally active fragment thereof, for example, in which the antibody is fused via a covalent bond (e.g., a peptide bond) at either the N-terminus or C-terminus to the amino acid sequence of another protein (or portion thereof) , such as at least a portion of a protein of 10, 20, or 50 amino acids) that is not an antibody. The antibody or fragment thereof may be covalently linked to another protein at the N-terminus of the constant domain.

Кроме того, антитело или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему изобретению может включать аналоги и производные антител или их антигенсвязывающие фрагменты, которые либо модифицированы, например, путем ковалентного присоединения любого типа молекулы, до тех пор, пока такое ковалентное присоединение позволяет антителу сохранять иммуноспецифичность связывания с антигеном. Примеры модификаций включают гликозилирование, ацетилирование, пегилирование, фосфорилирование, амидирование, дериватизацию известными защитными/блокирующими группами, протеолитическое расщепление, связывание с единицей клеточного антитела или другим белком, и т. д. Любая из многочисленных химических модификаций может быть проведена известными методами, включая, но не ограничиваясь ими, специфическое химическое расщепление, ацетилирование, формилирование, метаболический синтез в присутствии туникамицина и т. д. Кроме того, аналог или производное могут содержать одну или несколько аминокислот, не существующих в природе.In addition, the antibody or antigen-binding fragments of the present invention may include analogs and derivatives of antibodies or antigen-binding fragments thereof that are either modified, for example, by covalent attachment of any type of molecule, as long as such covalent attachment allows the antibody to retain the immunospecificity of binding to the antigen. Examples of modifications include glycosylation, acetylation, PEGylation, phosphorylation, amidation, derivatization with known protecting/blocking groups, proteolytic cleavage, binding to a cellular antibody unit or other protein, etc. Any of numerous chemical modifications can be carried out by known methods, including, but not limited to, specific chemical cleavage, acetylation, formylation, metabolic synthesis in the presence of tunicamycin, etc. In addition, an analog or derivative may contain one or more amino acids that do not exist in nature.

Антитела или антигенсвязывающие фрагменты настоящего изобретения могут также иметь модификации (например, замены, делеции или добавления) в Fc домене антитела. В частности, модификации могут быть в Fc-шарнирной области и приводить к усиленному связыванию рецептора FcRn.(WO 97/34631).Antibodies or antigen binding fragments of the present invention may also have modifications (eg, substitutions, deletions or additions) in the Fc domain of the antibody. In particular, modifications may be in the Fc-hinge region and lead to increased binding of the FcRn receptor (WO 97/34631).

В одном варианте осуществления, антителом в конъюгате лекарственного средства настоящего изобретения может быть любое антитело или его антигенсвязывающ фрагмент, предпочтительно, моноклональное антитело, которое применяется в лечении заболевания, предпочтительно, рака. Раком может быть рак груди, колоректальный рак, рак эндометрия, рак почек меланома, лейкозы, рак легких,In one embodiment, the antibody in the drug conjugate of the present invention can be any antibody or antigen-binding fragment thereof, preferably a monoclonal antibody, that is used in the treatment of a disease, preferably cancer. Cancer can be breast cancer, colorectal cancer, endometrial cancer, kidney cancer, melanoma, leukemia, lung cancer,

- 81 046742 множественная миелома, лимфомы (например, болезнь Ходжкина и неходжкинская лимфома), солидные опухоли, такие как саркома и карциномы, меланома, мезотелиома, остеосаркома, рак яичников и рак почек. В предпочтительном варианте осуществления, раком является рак легких, колоректальный рак, рак груди, карцинома поджелудочной железы, рак почек, лейкоз, множественная миелома, лимфома, рак ЖКТ и яичников. В более предпочтительном варианте осуществления, раком является колоректальный рак, рак груди, лейкоз, лимфома и рак яичников.- 81 046742 multiple myeloma, lymphomas (eg Hodgkin's disease and non-Hodgkin's lymphoma), solid tumors such as sarcoma and carcinomas, melanoma, mesothelioma, osteosarcoma, ovarian cancer and kidney cancer. In a preferred embodiment, the cancer is lung cancer, colorectal cancer, breast cancer, pancreatic carcinoma, kidney cancer, leukemia, multiple myeloma, lymphoma, gastrointestinal and ovarian cancer. In a more preferred embodiment, the cancer is colorectal cancer, breast cancer, leukemia, lymphoma and ovarian cancer.

Антитела, которые могут применяться в лечении рака, включают, но не ограничены ими, антитела против следующих антигенов: CA125 (яичники), CA15-3 (карциномы), CA19-9 (карциномы), L6 (карциномы), Lewis Y (карциномы), Lewis X (карциномы), альфа фетопротеина (карциномы), CA 242 (колоректальный), плацентарной щелочной фосфатазы (карциномы), специфического антигена простаты (простата), простатической кислой фосфатазы (простата), эпидермального фактора роста (карциномы), например, белка EGF рецептора 2 (рак груди), MAGE-I (карциномы), MAGE-2 (карциномы), MAGE-3 (карциномы), MAGE-4 (карциномы), анти-трансферринового рецептора (карциномы), p97 (меланома), MUCl-KLH (рак груди), CEA (колоректальный), gplOO (меланома), MARTl (меланома), PSA (простата), IL-2 рецептора (T-клеточный лейкоз и лимфомы), CD20 (неходжкинская лимфома), CD52 (лейкоз), CD33 (лейкоз), CD22 (лимфома), хорионического гонадотропина человека (карцинома), CD38 (множественная миелома), CD40 (лимфома), муцина (карциномы), P21 (карциномы), MPG (меланома) и Neu онкогенного продукта (карциномы). Некоторые конкретные полезные антитела включают, но не ограничены ими, BR96 mAb (Trail, P. A., et al. Science (1993) 261, 212-215), BR64 (Trail, PA, et al. Cancer Research (1997) 57, 100-105), mAb против CD40 антигена, такие как S2C6 mAb (Francisco, J. A., et al. Cancer Res. (2000) 60:3225-3231), mAb против CD70 антигена, такие как 1F6 mAb, и mAb против CD30 антигена, такие как AClO (Bowen, M. A., et al. (1993) J. Immunol., 151:5896- 5906; Wahl et al., 2002 Cancer Res. 62(13):37363742). Многие другие интернализующие антитела, которые связываются с опухолеассоциированныи антигенами, могут применяться и были описаны (Franke, A. E., et al. Cancer Biother Radiopharm. (2000) 15:459-476; Murray, J. L., (2000) Semin Oncol, 27:64-70; Breitling, F. и Dubel, S., Recombinant Antibodies, John Wiley и Sons, New York, 1998).Antibodies that may be used in the treatment of cancer include, but are not limited to, antibodies against the following antigens: CA125 (ovarian), CA15-3 (carcinomas), CA19-9 (carcinomas), L6 (carcinomas), Lewis Y (carcinomas) , Lewis X (carcinomas), alpha fetoprotein (carcinomas), CA 242 (colorectal), placental alkaline phosphatase (carcinomas), prostate specific antigen (prostate), prostatic acid phosphatase (prostate), epidermal growth factor (carcinomas), e.g. EGF receptor 2 (breast cancer), MAGE-I (carcinoma), MAGE-2 (carcinoma), MAGE-3 (carcinoma), MAGE-4 (carcinoma), anti-transferrin receptor (carcinoma), p97 (melanoma), MUCl -KLH (breast cancer), CEA (colorectal), gplOO (melanoma), MARTl (melanoma), PSA (prostate), IL-2 receptor (T-cell leukemia and lymphomas), CD20 (non-Hodgkin's lymphoma), CD52 (leukemia) , CD33 (leukemia), CD22 (lymphoma), human chorionic gonadotropin (carcinoma), CD38 (multiple myeloma), CD40 (lymphoma), mucin (carcinoma), P21 (carcinoma), MPG (melanoma) and Neu oncogenic product (carcinoma) . Some specific useful antibodies include, but are not limited to, BR96 mAb (Trail, P. A., et al. Science (1993) 261, 212-215), BR64 (Trail, P. A., et al. Cancer Research (1997) 57, 100- 105), anti-CD40 antigen mAb such as S2C6 mAb (Francisco, J. A., et al. Cancer Res. (2000) 60:3225-3231), anti-CD70 antigen mAb such as 1F6 mAb, and anti-CD30 antigen mAb such as AClO (Bowen, M. A., et al. (1993) J. Immunol., 151:5896-5906; Wahl et al., 2002 Cancer Res. 62(13):37363742). Many other internalizing antibodies that bind to tumor-associated antigens can be used and have been described (Franke, A. E., et al. Cancer Biother Radiopharm. (2000) 15:459-476; Murray, J. L., (2000) Semin Oncol, 27:64 -70; Breitling, F. and Dubel, S., Recombinant Antibodies, John Wiley and Sons, New York, 1998).

Настоящее изобретение охватывает лечения раков, ассоциированных с этими антителами.The present invention covers treatments for cancers associated with these antibodies.

Другие опухолеассоциированные антигены включают, но не ограничены ими, BMPR1B, E16, STEAP1, STEAP2, 0772P. MPF, Napi3b, Sema5b, PSCA hlg, ETBR, MSG783, TrpM4, CRIPTO, CD21, CD79b, FcRH2, HER2, NCA, MDP, IL20Rn, Бревикан, EphB2R, ASLG659, PSCA, GEDA, BAFF-R, CD79A, CXCR5, HLA-DOB, P2X5, CD72, LY64, FCRH1, IRTA2 и TENB2.Other tumor-associated antigens include, but are not limited to, BMPR1B, E16, STEAP1, STEAP2, 0772P. MPF, Napi3b, Sema5b, PSCA hlg, ETBR, MSG783, TrpM4, CRIPTO, CD21, CD79b, FcRH2, HER2, NCA, MDP, IL20Rn, Brevican, EphB2R, ASLG659, PSCA, GEDA, BAFF-R, CD79A, CXCR5, HLA -DOB, P2X5, CD72, LY64, FCRH1, IRTA2 and TENB2.

В альтернативном варианте осуществления, антителом в конъюгате лекарственного средства настоящего изобретения может быть антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, предпочтительно, моноклональное антитело, которое иммуноспецифически связывается с вирусным антигеном, микробным антигеном или антигеном клетки, которая продуцирует аутоиммунные антитела, ассоциированные с аутоиммунным заболеванием.In an alternative embodiment, the antibody in the drug conjugate of the present invention may be an antibody or antigen-binding fragment thereof, preferably a monoclonal antibody, that immunospecifically binds to a viral antigen, microbial antigen, or antigen of a cell that produces autoimmune antibodies associated with an autoimmune disease.

Вирусный антиген может включать, но не ограничен ими, любой вирусный пептид, полипептид или белок, такой как HIV gpl20, HIV nef, F RSV гликопротеин, нейраминидазу вируса гриппа, гемагглютинин вируса гриппа, HTLV tax, гликопротеин вируса простого герпеса (например, Gb, Gc, Gd и Ge) и поверхностный антиген гепатита B, способный вызывать иммунный ответ.A viral antigen may include, but is not limited to, any viral peptide, polypeptide or protein, such as HIV gpl20, HIV nef, RSV F glycoprotein, influenza virus neuraminidase, influenza virus hemagglutinin, HTLV tax, herpes simplex virus glycoprotein (e.g., Gb, Gc, Gd and Ge) and hepatitis B surface antigen, which can trigger an immune response.

Микробный антиген может включать, но не ограничен ими, любой микробный пептид, полипептид, белок, сахарид, полисахарид или молекулу жира (например, бактериальный, грибковый, патогенный простейший или дрожжевой полипептид, включая, например, LPS и капсульный полисахарид), который способен вызывать иммунный ответ.A microbial antigen may include, but is not limited to, any microbial peptide, polypeptide, protein, saccharide, polysaccharide, or fat molecule (e.g., bacterial, fungal, protozoan, or yeast polypeptide, including, e.g., LPS and capsular polysaccharide) that is capable of causing immune response.

В дополнительном варианте осуществления, антитело или антигенсвязывающий фрагмент связывается с эпитопом, который присутствует на клетке, такой как опухолевая клетка. Предпочтительно, если клеткой является опухолевая клетка, эпитоп опухолевой клетки отсутствует на не опухолевых клетках или присутствует в более низкой концентрации или в другой пространственной конфигурации, чем в опухолевых клетках.In a further embodiment, the antibody or antigen binding fragment binds to an epitope that is present on a cell, such as a tumor cell. Preferably, if the cell is a tumor cell, the tumor cell epitope is absent on non-tumor cells or is present at a lower concentration or in a different spatial configuration than in tumor cells.

В одном варианте осуществления, антитело или антигенсвязывающий фрагмент связывается с эпитопом, присутствующим в контексте одного из следующих антигенов: CA125, CA15-3, CA19-9 L6, Lewis Y, Lewis X, альфа фетопротеин, CA 242, плацентарная щелочная фосфатаза, специфический антиген простаты, простатическая кислая фосфатаза, эпидермальный фактор роста, например, белок EGF рецептора 2, MAGE-I, MAGE-2, MAGE-3, mAgE-4, анти-трансферриновый рецептор, p97, MUCl-KLH, CEA, gplOO, MARTl, PSA, IL-2 рецептор, CD20, CD52, CD33,Cd22, хорионический гонадотропин человека, CD38, CD40, муцин, P21, MPG, Neu онкогенный продукт, BMPR1B, E16, STEAP1, STEAP2, 0772P. MPF, Napi3b, Sema5b, PSCA hlg, ETBR, MSG783, TrpM4, CRIPTO, CD21, CD79b, FcRH2, HER2, NCA, MDP, IL20Ro, Бревикан, EphB2R, ASLG659, PSCA, GEDA, BAFF-R, CD79A, CXCR5, HLA-DOB, P2X5, CD72, LY64, FCRH1, IRTA2, TENB2, вирусный антиген (такой как вирусный пептид, полипептид или белок, такой как HIV gpl20, HIV nef, RSV F гликопротеин, нейраминидаза вируса гриппа, гемагглютинин вируса гриппа, HTLV tax, гликопротеин вируса простого герпеса (например, Gb, Gc, Gd и Ge) и поверхностный антиген гепатита B), которые способны вызывать иммунный ответ), микробныйIn one embodiment, the antibody or antigen binding fragment binds to an epitope present in the context of one of the following antigens: CA125, CA15-3, CA19-9 L6, Lewis Y, Lewis X, alpha fetoprotein, CA 242, placental alkaline phosphatase, specific antigen prostate, prostatic acid phosphatase, epidermal growth factor, e.g. EGF receptor protein 2, MAGE-I, MAGE-2, MAGE-3, mAgE-4, anti-transferrin receptor, p97, MUCl-KLH, CEA, gplOO, MARTl, PSA, IL-2 receptor, CD20, CD52, CD33, Cd22, human chorionic gonadotropin, CD38, CD40, mucin, P21, MPG, Neu oncogenic product, BMPR1B, E16, STEAP1, STEAP2, 0772P. MPF, Napi3b, Sema5b, PSCA hlg, ETBR, MSG783, TrpM4, CRIPTO, CD21, CD79b, FcRH2, HER2, NCA, MDP, IL20Ro, Brevican, EphB2R, ASLG659, PSCA, GEDA, BAFF-R, CD79A, CXCR5, HLA -DOB, P2X5, CD72, LY64, FCRH1, IRTA2, TENB2, viral antigen (such as a viral peptide, polypeptide or protein such as HIV gpl20, HIV nef, RSV F glycoprotein, influenza virus neuraminidase, influenza virus hemagglutinin, HTLV tax, herpes simplex virus glycoprotein (eg, Gb, Gc, Gd and Ge) and hepatitis B surface antigen), which are capable of inducing an immune response), microbial

- 82 046742 антиген (любой микробный пептид, полипептид, белок, сахарид, полисахарид и молекула жира (например, бактериальный, грибковый, патогенный простейший или дрожжевой полипептид, включая, например, LPS и капсульный полисахарид), который способен вызывать иммунный ответ) или антиген клетки, которая продуцирует аутоиммунные антитела, ассоциированные с аутоиммунным заболеванием.- 82 046742 antigen (any microbial peptide, polypeptide, protein, saccharide, polysaccharide and fat molecule (for example, bacterial, fungal, pathogenic protozoan or yeast polypeptide, including, for example, LPS and capsular polysaccharide), which is capable of causing an immune response) or antigen cells that produce autoimmune antibodies associated with autoimmune disease.

В одном варианте осуществления, если антигеном является ErBB2 (также известный как ERBB2, CD340 или HER2; эти термины могут применяться взаимозаменяемо), антитело или антигенсвязывающий фрагмент может связываться с одним или несколькими из следующих эпитопов: ARHC L (SEQ ID NO: 1), QNGS (SEQ ID NO: 2) и PPFCVARC PSG (SEQ ID NO: 3). Эти эпитопы соответствуют положениям 557-561, 570-573 и 593-603, соответственно, полипептидной последовательности HER2 человека (Доступ: NM_004448, Версия: NM_004448.3).In one embodiment, if the antigen is ErBB2 (also known as ERBB2, CD340, or HER2; these terms may be used interchangeably), the antibody or antigen binding fragment may bind to one or more of the following epitopes: ARHC L (SEQ ID NO: 1), QNGS (SEQ ID NO: 2) and PPFCVARC PSG (SEQ ID NO: 3). These epitopes correspond to positions 557-561, 570-573 and 593-603, respectively, of the human HER2 polypeptide sequence (Accession: NM_004448, Version: NM_004448.3).

В другом варианте осуществления, антителом может быть любое антитело, известное для лечения или профилактики вирусной или микробной инфекции - т.е. инфекционного заболевания. Примеры таких антител включают, но не ограничены ими, PRO542 (Progenies), которое является CD4 слитым антителом, применяемым для лечения ВИЧ инфекции; OsTAVIR (Protein Design Labs, Inc., CA), которое является антителом человека, применяемым для лечения вируса гепатита В; PROTOVIR. (Protein Design Labs, Inc., CA), которое является гуманизированным IgG1 антителом, применяемым для лечения цитомегаловируса (CMV); и анти-LPS антитела.In another embodiment, the antibody may be any antibody known to treat or prevent a viral or microbial infection - i.e. infectious disease. Examples of such antibodies include, but are not limited to, PRO542 (Progenies), which is a CD4 fusion antibody used to treat HIV infection; OsTAVIR (Protein Design Labs, Inc., CA), which is a human antibody used to treat hepatitis B virus; PROTOVIR. (Protein Design Labs, Inc., CA), which is a humanized IgG1 antibody used to treat cytomegalovirus (CMV); and anti-LPS antibodies.

Другие антитела, применяемые в лечении инфекционных заболеваний, включают, но не ограничены ими, антитела против антигенов из патогенных штаммов бактерий (Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Neisseria gonorrheae, Neisseria meningitidis, Corynebacterium diphtheriae, Clostridium botulinum, Clostridium perfringens, Clostridium tetani, Hemophilus influenzae, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella ozaenas, Klebsiella rhinoscleromotis, Staphylococcus aureus, Vibrio colerae, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Campylobacter (Vibrio) fetus, Aeromonas hydrophila, Bacillus cereus, Edwardsiella tarda, Yersinia enterocolitica, Yersinia pestis, Yersinia pseudotuberculosis, Shigella dysenteriae, Shigella flexneri, Shigella sonnei, Salmonella typhimurium, Treponema pallidum, Treponema pertenue, Treponema carateneum, Borrelia vincentii, Borrelia burgdorferi, Leptospira icterohernorrhagiae, Mycobacterium tuberculosis, Pneumocystis carinii, Francisella tularensis, Brucella abortus, Brucella suis, Brucella melitensis, Mycoplasma spp., Rickettsia prowazeki, Rickettsia tsutsugumushi, Chlamydia spp.); патогенных грибов (Coccidioides immitis, Aspergillus fumigatus, Candida albicans, Blastomyces dermatitidis, Cryptococcus neoformans, Histoplasma capsulatum); простейших (Entomoeba histolytica, Tоксоplasma gondii, Trichomonas tenas, Trichomonas hominis, Trichomonas vaginalis, Tryoanosoma gambiense, Trypanosoma rhodesiense, Trypanosoma cruzi, Leishmania donovani, Leishmania tropica, Leishmania braziliensis, Pneumocystis pneumonia, Plasmodium vivax, Plasmodium falciparum, Plasmodium malaria); или гельминтов (Enterobius vermicularis, Trichuris trichiura, Ascaris lumbricoides, Trichinella spiralis, Strongyloides stercoralis, Schistosoma japonicum, Schistosoma mansoni, Schistosoma haematobium и анкилостом).Other antibodies used in the treatment of infectious diseases include, but are not limited to, antibodies against antigens from pathogenic strains of bacteria (Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Neisseria gonorrheae, Neisseria meningitidis, Corynebacterium diphtheriae, Clostridium botulinum, Clostridium perfringens, Clostridium tetani, Hemophilus influenzae , Klebsiella pneumoniae, Klebsiella ozaenas, Klebsiella rhinoscleromotis, Staphylococcus aureus, Vibrio colerae, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Campylobacter (Vibrio) fetus, Aeromonas hydrophila, Bacillus cereus, Edwardsiella tarda, Yersinia enterocolitica, Yersinia pestis, pseudotuberculosis, Shigella dysenteriae, Shigella flexneri, Shigella sonnei, Salmonella typhimurium, Treponema pallidum, Treponema pertenue, Treponema carateneum, Borrelia vincentii, Borrelia burgdorferi, Leptospira icterohernorrhagiae, Mycobacterium tuberculosis, Pneumocystis carinii, Francisella tularensis, Brucella abortus, Brucella suis, Brucella melitensis, coplasma spp., Rickettsia prowazeki , Rickettsia tsutsugumushi, Chlamydia spp.); pathogenic fungi (Coccidioides immitis, Aspergillus fumigatus, Candida albicans, Blastomyces dermatitidis, Cryptococcus neoformans, Histoplasma capsulatum); protozoa (Entomoeba histolytica, Toxoplasma gondii, Trichomonas tenas, Trichomonas hominis, Trichomonas vaginalis, Tryoanosoma gambiense, Trypanosoma rhodesiense, Trypanosoma cruzi, Leishmania donovani, Leishmania tropica, Leishmania braziliensis, Pneumocystis pneumonia, Plasmodium vivax, Plasmodium falciparum , Plasmodium malaria); or helminths (Enterobius vermicularis, Trichuris trichiura, Ascaris lumbricoides, Trichinella spiralis, Strongyloides stercoralis, Schistosoma japonicum, Schistosoma mansoni, Schistosoma haematobium and hookworms).

Другие антитела, применяемые для лечения вирусных заболеваний, включают, но не ограничены ими, антитела против антигенов патогенных вирусов, включая, в качестве примеров и не для ограничения: Poxviridae, Herpesviridae, Вирус простого герпеса 1, Вирус простого герпеса 2, Adenoviridae, Papovaviridae, Enteroviridae, Picornaviridae, Parvoviridae, Reoviridae, Retroviridae, вирусы гриппа, вирусы парагриппа, паротиты, корь, респираторно-синцитиальный вирус, краснуху, Arboviridae, Rhabdoviridae, Arenaviridae, вирус гепатита A, вирус гепатита B, вирус гепатита C, вирус гепатита E, вирус гепатита не-Л/не-B. Rhinoviridae, Coronaviridae, Rotoviridae и вирус иммунодефицита человека.Other antibodies useful in the treatment of viral diseases include, but are not limited to, antibodies against antigens of pathogenic viruses, including, by way of example and not limitation: Poxviridae, Herpesviridae, Herpes simplex virus 1, Herpes simplex virus 2, Adenoviridae, Papovaviridae, Enteroviridae, Picornaviridae, Parvoviridae, Reoviridae, Retroviridae, influenza viruses, parainfluenza viruses, mumps, measles, respiratory syncytial virus, rubella, Arboviridae, Rhabdoviridae, Arenaviridae, hepatitis A virus, hepatitis B virus, hepatitis C virus, hepatitis E virus, virus hepatitis non-L/non-B. Rhinoviridae, Coronaviridae, Rotoviridae and human immunodeficiency virus.

В альтернативном варианте осуществления, антителом конъюгата лекарственного средства настоящего изобретения может быть любое антитело, известное для лечения и профилактики аутоиммунных заболеваний, таких как, но не ограниченных ими, болезни, связанные с Th2 лимфоцитами (например, атопический дерматит, атопическая астма, риноконъюнктивит, аллергический ринит, синдром Оменна, системный склероз и болезнь трансплантат против хозяина); расстройства, связанные с Th1 лимфоцитами (например, ревматоидный артрит, рассеянный склероз, псориаз, синдром Шергрена, тиреоидит Хашимото, болезнь Грейвса, первичный билиарный цирроз печени, гранулематоз Вегенера и туберкулез); расстройства, связанные с активированными В-лимфоцитами (например, системная красная волчанка, синдром Гудпастура, ревматоидный артрит и диабет I типа); и активный хронический гепатит, болезнь Аддисона, аллергический альвеолит, аллергическая реакция, аллергический ринит, синдром Альпорта, анафилаксия, анкилозирующий спондилит, анти-фосфолипидный синдром, артрит, аскаридоз, аспергиллез, атопическая аллергия, атопический дерматит, атопический ринит, болезнь Бехчета, легочная аллергия птицевода, бронхиальная астма, синдром Каплана, кардиомиопатия, глютеновая болезнь, болезнь Шагаса, хронический гломерулонефрит, синдром Когана, болезнь холодового агглютинина, врожденная инфекционная краснуха, синдром криоглобулиноза, CREST-синдром, болезнь Крона, криоглобулинемия, синдром Кушинга, дерматомиозит, дискоидная волчанка, синдром Дрессера, синдром Итона-Ламберта, эховирусная инфекция, энцефаломиелит, эндокринная офтальмопатия, инфекция вирусом Эпштейн-Барр, лошадиный запал, эритематоз, синдром Эвана, синдром Фелти, фибромиалгия, циклит Фуха, атрофия желудка, желудочно-кишечная аллергия, гигантоклеточный артериит, гломерулонефрит, синдром Гудпастура, болезнь трансплантат против хозяина, болезньIn an alternative embodiment, the antibody of the drug conjugate of the present invention may be any antibody known for the treatment and prevention of autoimmune diseases, such as, but not limited to, diseases associated with Th2 lymphocytes (for example, atopic dermatitis, atopic asthma, rhinoconjunctivitis, allergic rhinitis, Omenn's syndrome, systemic sclerosis and graft-versus-host disease); disorders associated with Th1 lymphocytes (eg, rheumatoid arthritis, multiple sclerosis, psoriasis, Sjörgren's syndrome, Hashimoto's thyroiditis, Graves' disease, primary biliary cirrhosis, Wegener's granulomatosis, and tuberculosis); disorders associated with activated B lymphocytes (eg, systemic lupus erythematosus, Goodpasture syndrome, rheumatoid arthritis and type I diabetes); and active chronic hepatitis, Addison's disease, allergic alveolitis, allergic reaction, allergic rhinitis, Alport syndrome, anaphylaxis, ankylosing spondylitis, anti-phospholipid syndrome, arthritis, ascariasis, aspergillosis, atopic allergy, atopic dermatitis, atopic rhinitis, Behçet's disease, pulmonary allergy poultry farmer, bronchial asthma, Kaplan syndrome, cardiomyopathy, celiac disease, Chagas disease, chronic glomerulonephritis, Cogan syndrome, cold agglutinin disease, congenital infectious rubella, cryoglobulinosis syndrome, CREST syndrome, Crohn's disease, cryoglobulinemia, Cushing's syndrome, dermatomyositis, discoid lupus, Dresser syndrome, Eaton-Lambert syndrome, echovirus infection, encephalomyelitis, endocrine ophthalmopathy, Epstein-Barr virus infection, equine fuse, erythematosis, Evan's syndrome, Felty's syndrome, fibromyalgia, Fuch's cyclitis, gastric atrophy, gastrointestinal allergy, giant cell arteritis, glomerulonephritis , Goodpasture syndrome, graft-versus-host disease, disease

- 83 046742- 83 046742

Грейвса, острый полирадикулоневрит, тиреоидит Хашимото, гемолитическая анемия, пурпура ГенохаШонлейна, идиопатическая атрофия надпочечников, идиопатический легочный фибрит, IgA нефропатия, воспалительные заболевания кишечника, инсулинозависимый сахарный диабет, ювенильный артрит, ювенильный сахарный диабет (I типа), синдром Ламберта-Итона, ламинит, красный плоский лишай, волчаночный гепатит, волчаночная лимфопения, болезнь Меньера, смешанное заболевание соединительной ткани, рассеянный склероз, миастения гравис, злокачественная анемия, полигландулярные синдромы, пресенильная деменция, первичная агаммаглобулинемия, первичный билиарный цирроз, псориаз, псориатический артрит, феномен Рейно, привычный выкидыш, синдром Рейтера, ревматическая лихорадка, ревматоидный артрит, синдром Самптера, шистосомоз, синдром Шмидта, склеродермия, синдром Шульмана, синдром Сьоргена, синдром скованного человека, симпатическая офтахния, системная красная волчанка, артериит Такаясу, височный артериит, тиреоидит, тромбоцитопения, тиреотоксикоз, токсический эпидермальный некролиз, инсулинорезистентность типа B, сахарный диабет I типа, язвенный колит, увеит, витилиго, макроглобулемия Вальденстрема и гранулематоз Вегенера.Graves', acute polyradiculoneuritis, Hashimoto's thyroiditis, hemolytic anemia, Henoch-Schonlein purpura, idiopathic adrenal atrophy, idiopathic pulmonary fibritis, IgA nephropathy, inflammatory bowel disease, insulin-dependent diabetes mellitus, juvenile arthritis, juvenile diabetes mellitus (type I), Lambert-Eaton syndrome, laminitis , lichen planus, lupus hepatitis, lupus lymphopenia, Meniere's disease, mixed connective tissue disease, multiple sclerosis, myasthenia gravis, pernicious anemia, polyglandular syndromes, presenile dementia, primary agammaglobulinemia, primary biliary cirrhosis, psoriasis, psoriatic arthritis, Raynaud's phenomenon, habitual miscarriage, Reiter's syndrome, rheumatic fever, rheumatoid arthritis, Sumpter's syndrome, schistosomiasis, Schmidt's syndrome, scleroderma, Shulman's syndrome, Sjorgen's syndrome, stiff person's syndrome, sympathetic ophtachnia, systemic lupus erythematosus, Takayasu's arteritis, temporal arteritis, thyroiditis, thrombocytopenia, thyrotoxicosis, toxic epidermal necrolysis, insulin resistance type B, diabetes mellitus type I, ulcerative colitis, uveitis, vitiligo, Waldenström's macroglobulemia and Wegener's granulomatosis.

Антитела, иммуноспецифические в отношении антигена клетки, ответственной за продуцирование аутоиммунных антител, могут быть получены любым способом, известным специалисту в данной области техники, таким как, например, методы химического синтеза или рекомбинантной экспрессии. Примеры аутоиммунных антител включают, но не ограничены ими, анти-ядерное антитело; анти ds ДНК; анти ss ДНК, анти-кардиолипиновое антитело IgM, IgG; анти-фосфолипидное антитело IgM, IgG; анти-SM антитело; анти-митохондриальное антитело; тиреоидное антитело; микросомальное антитело; тироглобулиновое антитело; hhtu-SCL-70; анти-Jo; анти-U1RNP; анти-La/SSB; анти-SSA; анти-SSB; антитело против перитальных клеток; анти-гистоны; анти-RNP; C-ANCA; Р-ANCA; анти-центромер; анти-фибрилларин и анти-GBM антитело.Antibodies that are immunospecific for an antigen of a cell responsible for producing autoimmune antibodies can be produced by any method known to one skilled in the art, such as, for example, chemical synthesis or recombinant expression methods. Examples of autoimmune antibodies include, but are not limited to, anti-nuclear antibody; anti ds DNA; anti ss DNA, anti-cardiolipin antibody IgM, IgG; anti-phospholipid antibody IgM, IgG; anti-SM antibody; anti-mitochondrial antibody; thyroid antibody; microsomal antibody; thyroglobulin antibody; hhtu-SCL-70; anti-Jo; anti-U1RNP; anti-La/SSB; anti-SSA; anti-SSB; anti-perital cell antibody; anti-histones; anti-RNP; C-ANCA; R-ANCA; anti-centromere; anti-fibrillarin and anti-GBM antibody.

В другом варианте осуществления, антителом конъюгата лекарственного средства по настоящему изобретению может быть антитело, которое связывается как с рецептором, так и с рецепторным комплексом, экспрессируемым на активированном лимфоците, таком как лимфоцит, связанный с аутоиммунным заболеванием. Рецептор или рецепторный комплекс может содержать член суперсемейства генов иммуноглобулинов, член суперсемейства рецепторов TNF, интегрин, интерлейкин, цитокиновый рецептор, хемокиновый рецептор, главный белок гистосовместимости, лектин или белок контроля комплемента. Неограничивающими примерами подходящих членов суперсемейства иммуноглобулинов являются CD2, CD3, CD4, CD5, CD8, CD13, CD19, CD22, CD28, CD79, CD90, CD152/CTLA-4, PD-I и ICOS. Неограничивающими примерами подходящих членов суперсемейства рецептора TNF являются CD27, CD40, CD95/Fas, CD134/OX40, CD137/4-1BB, TNF-Rl, TNFR-2, RANK, TACI, BCMA, остеопротегерин, Apo2/TRAEL-Rl, TRAIL-R2, TRAIL-R3, TRABL-R4 и APO-3. Неограничивающими примерами подходящих интегринов являются CDl Ia, CDlIb, CDlIc, CD18, CD29, CD41, CD49a, CD49b, CD49c, CD49d, CD49e, CD49f, CD103 и CD104. Неограничивающими примерами подходящих лектинов являются лектин C-типа, S-типа и I-типа.In another embodiment, the drug conjugate antibody of the present invention may be an antibody that binds to both a receptor and a receptor complex expressed on an activated lymphocyte, such as a lymphocyte associated with an autoimmune disease. The receptor or receptor complex may comprise a member of the immunoglobulin gene superfamily, a member of the TNF receptor superfamily, an integrin, an interleukin, a cytokine receptor, a chemokine receptor, a major histocompatibility protein, a lectin, or a complement control protein. Non-limiting examples of suitable members of the immunoglobulin superfamily include CD2, CD3, CD4, CD5, CD8, CD13, CD19, CD22, CD28, CD79, CD90, CD152/CTLA-4, PD-I and ICOS. Non-limiting examples of suitable members of the TNF receptor superfamily include CD27, CD40, CD95/Fas, CD134/OX40, CD137/4-1BB, TNF-Rl, TNFR-2, RANK, TACI, BCMA, osteoprotegerin, Apo2/TRAEL-Rl, TRAIL- R2, TRAIL-R3, TRABL-R4 and APO-3. Non-limiting examples of suitable integrins include CDlIa, CDlIb, CDlIc, CD18, CD29, CD41, CD49a, CD49b, CD49c, CD49d, CD49e, CD49f, CD103 and CD104. Non-limiting examples of suitable lectins include C-type, S-type and I-type lectin.

Антителом, которое связывает молекулярную мишень или антиген, представляющий интерес, например, антиген ErbB2, является антитело, способное связывать этот антиген с достаточной аффинностью, так что антитело полезно для нацеливания на клетку, экспрессирующую антиген. Если антителом является такое, которое связывает ErbB2, оно обычно предпочтительно связывает ErbB2 в отличие от других рецепторов ErbB и может быть таким, которое не вступает в значительную перекрестную реакцию с другими белками, такими как EGFR, ErbB 3 или ErbB4. В таких вариантах осуществления, степень связывания антитела с этими не-БгЬВ2 белками (например, связывания клеточной поверхности с эндогенным рецептором), будет менее 10%, по данным анализа сортировки флуоресцентно-активированных клеток (FACS) или радиоиммунопреципитации (RIA). Иногда антиErbB2 антитело не будет значительно перекрестно реагировать с белком neu крысы, например, как описано в Schecter et al., Nature 312:513-516 (1984) и Drebin et al., Nature 312:545-548 (1984).An antibody that binds a molecular target or antigen of interest, such as ErbB2 antigen, is one that is capable of binding that antigen with sufficient affinity such that the antibody is useful in targeting a cell expressing the antigen. If the antibody is one that binds ErbB2, it will generally preferentially bind ErbB2 over other ErbB receptors and may be one that does not significantly cross-react with other proteins such as EGFR, ErbB 3 or ErbB4. In such embodiments, the extent of antibody binding to these non-BrLB2 proteins (eg, cell surface binding to an endogenous receptor) will be less than 10%, as determined by fluorescence-activated cell sorting (FACS) or radioimmunoprecipitation analysis (RIA). Sometimes an anti-ErbB2 antibody will not cross-react significantly with rat neu protein, for example, as described in Schecter et al., Nature 312:513-516 (1984) and Drebin et al., Nature 312:545-548 (1984).

В другом варианте осуществления, антитело конъюгата лекарственного средства или мишень настоящего изобретения может быть выбрано из антитела или мишени в таблице ниже. Такие антитела являются иммуноспецифическим для антиген-мишени, и могут быть получены коммерчески или получены любым способом, известным в данной области техники, таким как, например, методы рекомбинантной экспрессии.In another embodiment, the drug conjugate antibody or target of the present invention may be selected from the antibody or target in the table below. Such antibodies are immunospecific for the target antigen, and can be produced commercially or produced by any method known in the art, such as, for example, recombinant expression methods.

Таблица 1Table 1

Терапевтические моноклональные антителаTherapeutic monoclonal antibodies

Наименование Name Торговое наименование Trade name Мишень Target 3F8 3F8 GD2 ганглиозид GD2 ganglioside 8H9 8H9 B7-H3 B7-H3 Абаговомаб Abagomab CA-125 (имитация) CA-125 (imitation) Абциксимаб Abciximab ReoPro ReoPro CD417E3 CD417E3

- 84 046742- 84 046742

Наименование Name Торговое наименование Trade name Мишень Target Абитузумаб Abituzumab CD51 CD51 Абрилумаб Abrilumab Интегрин α4β7 Integrin α4β7 Актоксумаб Actoxumab Clostridium difficile Clostridium difficile Адалимумаб Adalimumab Humira Humira TNF-α TNF-α Адекатумумаб Adecatumumab EpCAM EpCAM Атидортоксумаб Atidortoxumab Staphylococcus aureus альфа токсин Staphylococcus aureus alpha toxin Адуканумаб Aducanumab Бета-амилоид Beta amyloid Афасевикумаб Afasevicumab IL17A и IL17F IL17A and IL17F Афутузумаб Afutuzumab CD20 CD20 Алемтузумаб Alemtuzumab Campath, Lemtrada Campath, Lemtrada CD52 CD52 Алирокумаб Alirocumab Praluent Praluent PCSK9 PCSK9 Алтумомаб Altumomab Hybri-ceaker Hybri-ceaker CEA CEA Аматуксимаб Amatuximab Мезотелин Mesothelin Андекаликсимаб Andecaliximab желатиназа B gelatinase B Анетумаб Anetumab MSLN MSLN Анифролумаб Anifrolumab рецептор интерферонао/β interferon/β receptor Анрукинзумаб Anrukinzumab IL-13 IL-13 Аполизумаб Apolizumab HLA-DRβ-цепь HLA-DRβ chain Апрутумаб Aprutumab FGFR2 FGFR2 Аскринвакумаб Askrinvacumab Активин-рецептороподобная киназа 1 Activin receptor-like kinase 1 Аселизумаб Aselizumab L-селектин (CD62L) L-selectin (CD62L) Атезолизумаб Atezolizumab Tecentriq Tecentriq PD-L1 PD-L1 Атидортоксумаб Atidortoxumab Staphylococcus aureus альфа токсин Staphylococcus aureus alpha toxin Аетинумаб Aetinumab RTN4 RTN4 Аторолимумаб Atorolimumab Резус фактор Rh factor Авелумаб Avelumab Bavencio Bavencio PD-L1 PD-L1 Азинтуксизумаб Azintuxizumab CD319 CD319 Бапинеузумаб Bapineuzumab бета амилоид beta amyloid Басиликсимаб Basiliximab Simulect Simulect CD25 (α цепь IL-2 рецептора) CD25 (IL-2 receptor α chain) Бавитуксимаб Bavituximab фосфатидилсерин phosphatidylserine BCD-100 BCD-100 PD-1 PD-1 Бектумомаб Bectumomab LymphoScan Lymphoscan CD22 CD22 Бегеломаб Begelomab DPP4 DPP4 Белантамаб Belantamab BCMA BCMA Белимумаб Belimumab Benlysta Benlysta BAFF BAFF Бемаритузумаб Bemarituzumab FGFR2 FGFR2 Бентрализумаб Bentralizumab Fasenra Fasenra CD125 CD125 Берлиматоксумаб Berlimatoxumab Staphylococcus aureus бикомпонентный лейкоцидин Staphylococcus aureus bicomponent leukocidin Берсанлимаб Bersanlimab ICAM-1 ICAM-1 Бертилимумаб Bertilimumab CCL11 (эотаксин-1) CCL11 (eotaxin-1) Бесилесомаб Besilesomab Scintimun Scintimun CEA-родственный антиген CEA-related antigen Бевацизумаб Bevacizumab Avastin Avastin VEGF-A VEGF-A Безлотоксумаб Bezlotoxumab Zinplava Zinplava Clostridium difficile Clostridium difficile Блинатомумаб Blinatumab Blincyto Blincyto CD19, CD3 CD19, CD3 Бимагрумаб Bimagrumab ACVR2B ACVR2B Бимекизумаб Bimekizumab IL17A и IL17F IL17A and IL17F Биртамимаб Birtamimab сывороточный амилоидный A белок serum amyloid A protein Биватузумаб Bivatuzumab CD44 v6 CD44 v6 BIVV009 BIVV009 C1s C1s Блеселумаб Bleselumab CD40 CD40 Блонтуветмаб Blontuvetmab Blontress Blontress CD20 CD20 Блосозумаб Blosozumab SOST SOST Бокоцизумаб Bococizumab Невральная апоптоз-регулируемая протеиназа 1 Neural apoptosis-regulated proteinase 1 Бразикумаб Brasicumab IL23 IL23 Брентуксимаб Brentuximab Adcentris Adcentris CD30 (TNFRSF8) CD30 (TNFRSF8) Бриакинумаб Briakinumab IL-12, IL-23 IL-12, IL-23

- 85 046742- 85 046742

Наименование Name Торговое наименование Trade name Мишень Target Бродалумаб Brodalumab Siliz Siliz IL-17 IL-17 Бронтиктузумаб Brontictuzumab Notch 1 Notch 1 Буросумаб Burosumab Crysvita Crysvita FGF 23 FGF 23 Кабирализумаб Cabiralizumab CSF1R CSF1R Камиданлумаб Camidanlumab CD25 CD25 Камрелизумаб Camrelizumab Запрограммированная гибель клеток 1 Programmed cell death 1 Канакинумаб Canakinumab Ilaris Ilaris IL-1 IL-1 Кантузумаб Cantuzumab MUC-1 MUC-1 Капромаб Capromab Prostascint Prostascint клетки карциномы простаты prostate carcinoma cells Карлумаб Carlumab MCP-1 MCP-1 Каротуксимаб Carotuximab эндоглин endoglin Катумаксомаб Catumaxomab Removab Removab EpCAM, CD3 EpCAM, CD3 CC49 CC49 TAG-72 TAG-72 cBR96 cBR96 Lewis-Y антиген Lewis-Y antigen Цеделизумаб Cedelizumab CD4 CD4 Цемиплимаб Cemiplimab PCDC1 PCDC1 Цергутузумаб Cergutuzumab IL2 IL2 Цетрелимаб Cetrelimab Запрограмированная гибель клетки 1 Programmed cell death 1 Цетуксимаб Cetuximab Erbitux Erbitux EGFR EGFR Цибисатамаб Cibisatamab CEACAM5 CEACAM5 Циксутумумаб Cixutumumab IGF-1 рецептор (CD221) IGF-1 receptor (CD221) Клазакизумаб Clazakizumab IL6 IL6 Кленоликсимаб Clenoliximab CD4 CD4 Кливатузумаб Clivatuzumab hPAM4-Cide hPAM4-Cide MUC1 MUC1 Кодритузумаб Codrituzumab глипикан 3 glypican 3 Кофетузумаб Cofetuzumab PTK7 PTK7 Колтуксимаб Coltuximab CD19 CD19 Конатумумаб Conatumumab TRAIL-R2 TRAIL-R2 Концизумаб Concizumab TFPI TFPI Косфровиксимаб Cosfroviximab ZMapp ZMapp Гликопротеин вируса Эбола Ebola virus glycoprotein CR6261 CR6261 Influenza A hemagglutinin Influenza A hemagglutinin Кренезумаб Crenezumab 1-40-β-амилоид 1-40-β-amyloid Кризанлизумаб Crizanlizumab Селектин P Selectin P Кротедумаб Crotedumab GCGR GCGR Кузатузумаб Cusatuzumab CD70 CD70 Дацетузумаб Dacetuzumab CD40 CD40 Дактизумаб Dactizumab Zenapax Zenapax CD25 (α цепь IL-2 рецептора) CD25 (IL-2 receptor α chain) Далотузумаб Dalotuzumab IGF-1 рецептор (CD221) IGF-1 receptor (CD221) Дапиролизумаб пегол Dapirolizumab pegol CD154 (CD40L) CD154 (CD40L) Даратумумаб Daratumumab Darzalex Darzalex CD38 CD38 Дектрекумаб Dectrecumab IL-13 IL-13 Демцизумаб Demcizumab DLL4 DLL4 Денинтузумаб Denintuzumab CD19 CD19 Деносумаб Denosumab Prolia Prolia RANKL RANKL Депатуксизумаб Depatuxizumab EGFR EGFR Дерлотуксимаб Derlotuximab Г истоновый комплекс Easton complex Детумомаб Detumomab B-клетки лимфомы B cell lymphoma Дезамизумаб Desamizumab сывороточный амилоидный P компонент serum amyloid P component Динутуксимаб Dinutuximab Unituxin Unituxin GD2 ганглиозид GD2 ganglioside Диридавумаб Diridavumab гемагглютинин hemagglutinin Домагрозумаб Domagrozumab GDF-8 GDF-8 Дрозитумаб Drozitumab DR5 DR5 Дулиготузумаб Duligotuzumab ERBB3 (HER3) ERBB3 (HER3) Дупилумаб Dupilumab Dupixent Dupixent IL4 IL4 Дурвалумаб Durvalumab Imfinzi Imfinzi PD-L1 PD-L1 Дусигитумаб Dusigitumab ILGF2 ILGF2 Экромексимаб Ecromeximab GD3 ганглиозид GD3 ganglioside

- 86 046742- 86 046742

Наименование Name Торговое наименование Trade name Мишень Target Экулизумаб Eculizumab Soliris Soliris C5 C5 Эдобакомаб Edobacomab эндотоксин endotoxin Эдреколомаб Edrecolomab Panorex Panorex EpCAM EpCAM Эфализумаб Efalizumab Raptiva Raptiva LFA-1 (CD11a) LFA-1 (CD11a) Элделумаб Eldelumab белок, индуцируемый интерфероном гамма interferon gamma-inducible protein Элезанумаб Elezanumab RGMA RGMA Элгемтумаб Elgemtumab ERBB3 (HER3) ERBB3 (HER3) Элотузумаб Elotuzumab Empliciti Empliciti SLAMF7 SLAMF7 Элсилимомаб Elsilimomab IL-6 IL-6 Эмактузумаб Emactuzumab CSF1R CSF1R Эмапалумаб Emapalumab Gamifant Gamifant Интерферон гамма Interferon gamma Эмибетузумаб Emibetuzumab HHGFR HHGFR Эмицизумаб Emicizumab Hemlibra Hemlibra Активированный F9, F10 Activated F9, F10 Энапотамаб Enapotamab AXL AXL Энаватузумаб Enavatuzumab TWEAK рецептор TWEAK receptor Энфортумаб Enfortumab нектин-4 nectin-4 Энлимомаб пегол Enlimomab pegol ICAM-1 (CD54) ICAM-1 (CD54) Эноблитузумаб Enoblituzumab CD276 CD276 Энокизумаб Enokizumab IL9 IL9 Энотикумаб Enoticumab DLL4 DLL4 Энситуксимаб Ensituximab 5AC 5AC Эпитумомаб Epitumomab эписиалин episialin Эпратузумаб Epratuzumab CD22 CD22 Эптинезумаб Eptinezumab Пептид, родственный гену кальцитонина Calcitonin gene-related peptide Эренумаб Erenumab Aimovig Aimovig CGRP CGRP Эртумаксомаб Ertumaxomab Rexomun Rexomun HER2/neu, CD3 HER2/neu, CD3 Этарацизумаб Etaracizumab Abegrin Abegrin интегрин αγβ3 αγβ3 integrin Этигилимаб Etigilimab TIGIT TIGIT Этролизумаб Etrolizumab интегрин β7 β7 integrin Эвинакумаб Evinacumab Ангиопоэтин 3 Angiopoietin 3 Эволокумаб Evolocumab Repatha Repatha PCSK9 PCSK9 Эксбиврумаб Exbivrumab поверхностный антиген гепатита В hepatitis B surface antigen Фанолесомаб Fanolesomab NeutroSpec NeutroSpec CD15 CD15 Фаралимомаб Faralimomab рецептор интерферона interferon receptor Фарицимаб Faricimab VEGF-A и Ang-2 VEGF-A and Ang-2 Фарлетузумаб Farletuzumab фолатный рецептор1 folate receptor1 Фасинумаб Fasinumab HNGF HNGF FBTA05 FBTA05 Lymphomun Lymphomun CD20 CD20 Фелвизумаб Felvizumab респираторно-синцитиальный вирус respiratory syncytial virus Фезакинумаб Fezakinumab IL-22 IL-22 Фибатузумаб Fibatuzumab Эфриновый рецептор A3 Ephrin receptor A3 Фиклатузумаб Ficlatuzumab HGF HGF Фигитумумаб Figitumumab IGF-1 рецептор (CD221) IGF-1 receptor (CD221) Фиривумаб Firivumab гемагглютинин вируса гриппа A influenza A virus hemagglutinin Фланвотумаб Flanvotumab TYRP1 (гликопротеин 75) TYRP1 (glycoprotein 75) Флетикумаб Fleticumab IL-20 IL-20 Фонтолизумаб Fontolizumab HuZAF HuZAF IFN-γ IFN-γ Формалумаб Formalumab CD3 эпсилон CD3 epsilon Формавирумаб Formavirumab гликопротеин вируса бешенства rabies virus glycoprotein Фреманезумаб Fremanezumab пептид альфа, родственный гену кальцитонина calcitonin gene-related peptide alpha Фрезолимумаб Frezolimumab TGF-β TGF-β Фруневетмаб Frunevetmab NGF NGF Фулранумаб Fulranumab NGF NGF Футуксимаб Futuximab EGFR EGFR Галканезумаб Galcanezumab кальцитонин calcitonin Г аликсимаб G aliximab CD80 CD80 Г анитумаб G anitumab 1 рецептор (CD221) 1 receptor (CD221)

- 87 046742- 87 046742

Наименование Name Торговое наименование Trade name Мишень Target Гантенерумаб Gantenerumab бета амилоид beta amyloid Г атипотузумаб G atipotuzumab MUC1 MUC1 Г авилимомаб Gavilimomab CD147 (базигин) CD147 (basigin) Гедивумаб Gedivumab Г емагглютинин НЛ Hemagglutinin NL Г емтузумаб Gemtuzumab Mylotarg Mylotarg CD33 CD33 Г евокизумаб Gevokizumab IL-Ιβ IL-Ιβ Г илветмаб G ilvetmab PCDC1 PCDC1 Г имсилумаб G imsilumab CSF2 CSF2 Г ирентуксимаб Girentuximab Rencarex Rencarex карбоангидраза 9 (CA-IX) carbonic anhydrase 9 (CA-IX) Г лембатумумаб Glembatumumab GPNMB GPNMB Г олимумаб Golimumab Simponi Simponi TNF-α TNF-α Г омиликсимаб G omiliximab CD23 (IgE рецептор) CD23 (IgE receptor) Госуранемаб Gosuranemab tau белок tau protein Гуселкумаб Guselkumab Tremfya Tremfya IL23 IL23 Ианалумаб Ianalumab BAFF-R BAFF-R Ибализумаб Ibalizumab Trogarzo Trogarzo CD4 CD4 Ибритумомаб Ibritumomab Zevalin Zevalin CD20 CD20 Икрукумаб Icrucumab VEGFR-1 VEGFR-1 Идаруцизумаб Idarucizumab Praxbind Praxbind дабигатран dabigatran Ифаботузумаб Ifabotuzumab EPHA3 EPHA3 Иладатузумаб Iladatuzumab CD97B CD97B IMAB362 IMAB362 CLDN18.2 CLDN18.2 Ималумаб Imalumab MIF MIF Имапрелимаб Imaprelimab MCAM MCAM Имциромаб Imciromab Myoscint Myoscint сердечный миозин cardiac myosin Имгатузумаб Imgatuzumab EGFR EGFR Инклакумаб Inclacumab селектин P selectin P Индатуксимаб Indatuximab SDC1 SDC1 Индусатумаб Indusatumab GUCY2C GUCY2C Инебилизумаб Inebilizumab CD19 CD19 Инфликсимаб Infliximab Remicade Remicade TNF-α TNF-α Инолимомаб Inolimomab CD25 (α цепь IL-2 рецептора) CD25 (IL-2 receptor α chain) Инотузумаб Inotuzumab Besponsa Besponsa CD22 CD22 Интетумумаб Intetumumab CD51 CD51 Ипилимумаб Ipilimumab Yervoy Yervoy CD152 CD152 Иомаб-B Iomab-B CD45 CD45 Иратумумаб Iratumumab CD30 (TNFRSF8) CD30 (TNFRSF8) Изатуксимаб Isatuximab CD38 CD38 Искалимаб Iskalimab CD40 CD40 Истиратумаб Istiratumab IGF1R, CD221 IGF1R, CD221 Итолизумаб Itolizumab Л1зумаб L1zumab CD6 CD6 Иксекизумаб Ixekizumab Taltz Taltz IL-17A IL-17A Келиксимаб Keliximab CD4 CD4 Лабетузумаб Labetuzumab CEA-Cide CEA-Cide СЕЛ SEL Лакнотузумаб Lacnotuzumab CSF1, MCSF CSF1, MCSF Ладиратузумаб Ladiratuzumab LIV-1 LIV-1 Ланаделумаб Lanadelumab калликреин kallikrein Ландогрозумаб Landogrosumab GDF-8 GDF-8 Лапритуксимаб Laprituximab EGFR EGFR Ларкавиксимаб Larkaviximab Гликопротеин вируса Эбола Ebola virus glycoprotein Лебрикизумаб Lebrikizumab IL-13 IL-13 Лемалесомаб Lemalesomab NCA-90 (гранулоцитарный антиген) NCA-90 (granulocyte antigen) Лендализумаб Lendalizumab С5 C5 Ленвервимаб Lenvervimab Поверхностный антиген гепатита В Hepatitis B surface antigen Лензилумаб Lenzilumab CSF2 CSF2 Лерделимумаб Lerdelimumab TGF beta 2 TGF beta 2 Леронлимаб Leronlimab CCR5 CCR5

- 88 046742- 88 046742

Наименование Name Торговое наименование Trade name Мишень Target Лезофавумаб Lezofavumab Г емагглютинин HA Hemagglutinin HA Лексатумумаб Lexatumumab TRAIL-R2 TRAIL-R2 Либивирумаб Libivirumab Поверхностный антиген гепатита В Hepatitis B surface antigen Лифастузумаб Lifastuzumab Котранспортер фосфата-натрия Sodium phosphate cotransporter Лигелизумаб Ligelizumab IGHE IGHE Лилотомаб Lilotomab CD37 CD37 Линтузумаб Lintuzumab CD33 CD33 Лирилумаб Lirilumab KIR2D KIR2D Лоделцизумаб Lodelcizumab PCSK9 PCSK9 Локиветмаб Lokivetmab Cytopoint Cytopoint Canis lupus familiaris IL31 Canis lupus familiaris IL31 Лонкастуксимаб Loncastuximab CD19 CD19 Лосатуксизумаб Losatuxizumab EGFR, ERBB1 HER1 EGFR, ERBB1 HER1 Лорвотузумаб Lorvotuzumab CD56 CD56 Лукатумумаб Lucatumumab CD40 CD40 Лулизумаб пегол Lulizumab pegol CD28 CD28 Лумиликсимаб Lumiliximab CD23 (IgE рецептор) CD23 (IgE receptor) Лумретузумаб Lumretuzumab ERBB3 (HER3) ERBB3 (HER3) Лупартумаб Lupartumab LYPD3 LYPD3 Лутикизумаб Lutikizumab Интерлейкин 1 альфа Interleukin 1 alpha MABp1 MABp1 Xilonix Xilonix IL1A IL1A Мапатумумаб Mapatumumab TRAIL-R1 TRAIL-R1 Маргетуксимаб Margetuximab HER2 HER2 Марстацимаб Marstacimab TFPI TFPI Маслимомаб Maslimomab T -клеточный рецептор T cell receptor Маврилимумаб Mavrilimumab α-цепь GMCSF рецептора GMCSF receptor α chain Матузумаб Matuzumab EGFR EGFR Меполизумаб Mepolizumab Bosatria Bosatria IL-5 IL-5 Метелимумаб Metelimumab TGF бета 1 TGF beta 1 Милатузумаб Milatuzumab CD74 CD74 Минретумомаб Minretumomab TAG-72 TAG-72 Мирикизумаб Mirikizumab IL23A IL23A Мирветуксимаб Mirvetuximab Фолатный рецептор альфа Folate receptor alpha Митумомаб Mitumomab GD3 ганглиозид GD3 ganglioside Модотуксимаб Modotuximab EGFR внеклеточный домен III EGFR extracellular domain III Могаулизумаб Mogaulizumab Poteligeo Poteligeo CCR4 CCR4 Монализумаб Monalizumab NKG2A NKG2A Моролимумаб Morolimumab Резус фактор Rh factor Мосунетузумаб Mosunetuzumab CD3E, MS4A1, CD20 CD3E, MS4A1, CD20 Мотавизумаб Motavizumab Numax Numax респираторно-синцитиальный вирус respiratory syncytial virus Моксетумомаб Moxetumomab CD22 CD22 Муромонаб-CD3 Muromonab-CD3 Orthoclone OKT3 Orthoclone OKT3 CD3 CD3 Намилумаб Namilumab CSF2 CSF2 Наратуксимаб Naratuximab CD37 CD37 Нарнатумаб Narnatumab RON RON Натализумаб Natalizumab Tysabri Tysabri интегрин α4 α4 integrin Навициксизумаб Navicixizumab DLL4 DLL4 Навивумаб Navivumab гемагглютинин HA вируса гриппа A influenza A virus hemagglutinin HA Накситамаб Naxitamab C-Met C-Met Небакумаб Nebacumab эндотоксин endotoxin Нецитумумаб Necitumumab Portrazza Portrazza EGFR EGFR Немолизумаб Nemolizumab IL31RA IL31RA Нерелимомаб Nerelimomab TNF-α TNF-α Несвакумаб Nesvacumab ангиопоэтин 2 angiopoietin 2 Нетакимаб Netakimab Интерлейкин 17A Interleukin 17A Нимотузумаб Nimotuzumab Theracim, Theraloc Theracim, Theraloc EGFR EGFR Нирсевимаб Nirsevimab RSVFR RSVFR Ниволумаб Nivolumab Opdivo Opdivo PD-1 PD-1

- 89 046742- 89 046742

Наименование Name Торговое наименование Trade name Мишень Target Обилтоксаксимаб Obiltoxaximab Anthim Anthem Bacillus anthracis антракс Bacillus anthracis anthrax Обинутузумаб Obinutuzumab Gazyva Gazyva CD20 CD20 Окаратузумаб Ocaratuzumab CD20 CD20 Окрелизумаб Ocrelizumab Ocrevus Ocrevus CD20 CD20 Одулимомаб Odulimomab LFA-1 (CD11a) LFA-1 (CD11a) Офатумумаб Ofatumumab Arzerra Arzerra CD20 CD20 Оларатумаб Olaratumab Lartruvo Lartruvo PDGF-R α PDGF-R α Олеклумаб Oleklumab 5'-нуклеотидаза 5'-nucleotidase Олендализумаб Olendalizumab Комплемент C5a Complement C5a Олокизумаб Olokizumab IL6 IL6 Омализумаб Omalizumab Xolair Xolair Fc область IgE IgE Fc region OMS721 OMS721 MASP-2 MASP-2 Онартузумаб Onartuzumab Рецепторная киназа фатора роста гепатоцитов человека Human hepatocyte growth factor receptor kinase Онтуксизумаб Ontuxizumab TEM1 TEM1 Онватилимаб Onvatilimab VSIR VSIR Опицинумаб Opicinumab LINGO-1 LINGO-1 Ореговомаб Oregovomab OvaRex OvaRex CA-125 CA-125 Ортикумаб Orticumab oxLDL oxLDL Отеликс изумаб Otelix Izumab CD3 CD3 Отилимаб Otilimab GMCSF GMCSF Отлертузумаб Otlertuzumab CD37 CD37 Окселумаб Oxelumab OX-40 OX-40 Озанезумаб Ozanezumab NOGO-A NOGO-A Озорализумаб Osoralizumab TNF-α TNF-α Пагибаксимаб Pagibaximab липотейхоевая кислота lipoteichoic acid Паливизумаб Palivizumab Synagis, Abbosynagis Synagis, Abbosynagis F белок респираторно-синцитиального вируса F protein of respiratory syncytial virus Памревлумаб Pamrevlumab CTGF CTGF Панитумумаб Panitumumab Vectibix Vectibix EGFR EGFR Панкомаб Pancomab Опухолеспецифическое гликолизирование MUC1 Tumor-specific glycolysis MUC1 Панобакумаб Panobacumab Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Парсатузумаб Parsatuzumab EGFL7 EGFL7 Пасколизумаб Pascolizumab IL-4 IL-4 Пазотуксизумаб Pazotuxizumab Фолатная гидролаза Folate hydrolase Патеклизумаб Pateklizumab LTA LTA Патритумаб Patritumab ERBB3 (HER3) ERBB3 (HER3) Пембролизумаб Pembrolizumab Keytruda Keytruda PD1 PD1 Пемтумомаб Pemtumomab Theragyn Theragyn MUC1 MUC1 Перакизумаб Perakizumab IL17A IL17A Пертузумаб Pertuzumab Omnitarg Omnitarg HER2/neu HER2/neu Пидилизумаб Pidilizumab PD-1 PD-1 Пинатузумаб Pinatuzumab CD22 CD22 Пинтумомаб Pintumomab антиген аденокарциномы adenocarcinoma antigen Плакулумаб Placulumab TNF человека Human TNF Плозализумаб Plosalizumab CCR2 CCR2 Погализумаб Pogalizumab Член 4 суперсемесйтсва TNFR Member 4 of the TNFR superfamily Полатузумаб Polatuzumab CD79B CD79B Понезумаб Ponezumab бета-амилоил человека human beta-amylyl Поргавиксимаб Porgaviximab Гликопротеин Заир эволавируса Zaire evolavirus glycoprotein Празинезумаб Prasinezumab NACP NACP Презализумаб Prezalizumab ICOSL ICOSL Приликсимаб Priliximab CD4 CD4 Притоксаксимаб Pritoxaximab E. colishiga токсин типа 1 E. colishiga toxin type 1 Притумумаб Pritumumab виментин vimentin PRO 140 PRO 140 CCR5 CCR5 Квилизумаб Quilizumab IGHE IGHE

- 90 046742- 90 046742

Наименование Name Торговое наименование Trade name Мишень Target Ракотумомаб Racotumomab Vaxira Vaxira Г англиозид NGNA G anglioside NGNA Радретумаб Radretumab экстра домен-B фибронектина extra domain-B fibronectin Рафивирумаб Rafivirumab Г ликопротеин вируса бешенства Glycoprotein of rabies virus Ралпанцизумаб Ralpancizumab Невральная апоптоз-регулируемая протеиназа 1 Neural apoptosis-regulated proteinase 1 Рамуцирумаб Ramucirumab Cyramza Cyramza VEGFR2 VEGFR2 Раневетмаб Ranevetmab NGF NGF Равагалимаб Ravagalimab CD40 CD40 Равулизумаб Ravulizumab C5 C5 Раксибакумаб Raxibacumab сииреязвенный токсин, защитный антиген antigen toxin, protective antigen Рефанезумаб Refanezumab Миелин-ассоциированный гликопротеин Myelin-associated glycoprotein Регавирумаб Regavirumab Г ликопротеин В цитомегаловируса B Glycoprotein B of cytomegalovirus B Релатлимаб Relatlimab LAG3 LAG3 Ремтолумаб Remtolumab Интерлейкин 17 альфа, TNF Interleukin 17 alpha, TNF Реслизумаб Reslizumab Cinqair Cinqair IL-5 IL-5 Рилотумумаб Rilotumumab HGF HGF Ринукумаб Rinukumab Рецептор бета фатора роста тромбоцитов Platelet growth factor beta factor receptor Рисанкизумаб Risankizumab IL23A IL23A Ритуксимаб Rituximab MabThera, Rituxan MabThera, Rituxan CD20 CD20 Ривабазумаб пегол Rivabazumab pegol Система секретирования Pseudomonas aeruginosa типа III Pseudomonas aeruginosa type III secretion system Робатумумаб Robatumumab IGF-1 рецептор (CD221) IGF-1 receptor (CD221) Rmab Rmab Rabishield Rabbishield Г ликопротеин вируса бешенства G Rabies virus G lycoprotein G Роледумаб Roledumab RHD RHD Ромилкимаб Romilkimab Интерлейкин 13 Interleukin 13 Ромосозумаб Romosozumab Evenity Evenity склеростин sclerostin Ронтализумаб Rontalizumab IFN-α IFN-α Росмантузумаб Rosmantuzumab Корневой тромбоцит-специфический спондин 3 Root platelet-specific spondin 3 Ровалпитузумаб Rovalpituzumab DLL3 DLL3 Ровелизумаб Rovelizumab LeukArrest LeukArrest CD11, CD18 CD11, CD18 Розаноликсизумаб Rosanolixizumab FCGRT FCGRT Руплизумаб Ruplizumab Antova Antova CD154 (CD40L) CD154 (CD40L) SA237 SA237 IL-6R IL-6R Сацитузумаб Sacituzumab TROP-2 TROP-2 Самализумаб Samalizumab CD200 CD200 Самротамаб Samrotamab LRRC15 LRRC15 Сапелизумаб Sapelizumab IL6R IL6R Сарилумаб Sarilumab Kevzara Kevzara IL6 IL6 Сатрализумаб Satralizumab IL6 рецептор IL6 receptor Сатумомаб Satumomab TAG-72 TAG-72 Секукинумаб Secukinumab Cosentyx Cosentyx IL-17A IL-17A Селикрелумаб Selicrelumab CD40 CD40 Серибантумаб Seribantumab ERBB3 (HER3) ERBB3 (HER3) Сетоксаксимаб Setoxaximab E. coli шига-токсин типа 2 E. coli Shiga toxin type 2 Сетрусумаб Setrusumab SOST SOST Севирумаб Sevirumab цитомегаловирус cytomegalovirus Сибротузумаб Sibrotuzumab FAP FAP SGN-CD19A SGN-CD19A CD19 CD19 SHP647 SHP647 Молекула клеточной адгезии типа аддрессин в слизистых оболочках Adressin-type cell adhesion molecule in mucous membranes Сифалимумаб Sifalimumab IFN-α IFN-α Силтуксимаб Siltuximab Sylvant Sylvant IL-6 IL-6 Симтузумаб Simtuzumab LOXL2 LOXL2 Синтилимаб Sintilimab PD-1 PD-1 Сиплизумаб Siplizumab CD2 CD2 Сиртратумаб Sirtratumab SLITRK6 SLITRK6 Сирукумаб Sirukumab IL-6 IL-6 Софитузумаб Sofituzumab CA-125 CA-125

- 91 046742- 91 046742

Наименование Name Торговое наименование Trade name Мишень Target Соланезумаб Solanezumab бета амилоид beta amyloid Сонепцизумаб Sonepcizumab сфингозин-1 -фосфат sphingosine-1-phosphate Сонтузумаб Sontuzumab эписиалин episialin Спартализумаб Spartalizumab PDCD1, CD279 PDCD1, CD279 Стамулумаб Stamulumab миостатин myostatin Суптавумаб Suptavumab RSVFR RSVFR Сутимлимаб Sutimlimab C1S C1S Сувизумаб Suvizumab HIV-1 HIV-1 Сувратоксумаб Suvratoxumab Staphylococcus aureus альфа токсин Staphylococcus aureus alpha toxin Табалумаб Tabalumab BAFF BAFF Такатузумаб Takatuzumab AFP-Cide AFP-Cide альфа-фетопротеин alpha fetoprotein Талакотузумаб Talacotuzumab CD123 CD123 Тализумаб Talizumab IgE IgE Тамтуветмаб Tamtuvetmab Tactress Tactress CD52 CD52 Танезумаб Tanezumab NGF NGF Таплитумомаб Taplitumomab CD19 CD19 Тарекстумаб Tarextumab Notch рецептор Notch receptor Таволимаб Tavolimab CD134 CD134 Тефибазумаб Tefibazumab Aurexis Aurexis агглютинин А agglutinin A Телизотузумаб Telizotuzumab HGFR HGFR Тенатумомаб Tenatumomab тенасцин C tenascin C Тенеликсимаб Teneliximab CD40 CD40 Теплизумаб Teplizumab CD3 CD3 Теподитамаб Tepoditamab Ассоциированный с дендритными клетками лектин 2 Dendritic cell associated lectin 2 Тепротумумаб Teprotumumab IGF-1 рецептор (CD221) IGF-1 receptor (CD221) Тезидолумаб Tesidolumab C5 C5 Тетуломаб Tetulomab CD37 CD37 Тезепелумаб Tezepelumab TSLP TSLP Тибулизумаб Tibulizumab BAFF BAFF Т илдракизумаб T ildrakizumab Ilumya Ilumya IL23 IL23 Тигатузумаб Tigatuzumab TRAIL-R2 TRAIL-R2 Т имигутузумаб T imigutuzumab HER2 HER2 Тимолумаб Timolumab AOC3 AOC3 Тираготумаб Tiragotumab TIGIT TIGIT Тислелизумаб Tislelizumab PCDC1, CD279 PCDC1,CD279 Тизотумаб Tizotumab Фактор коагуляции III Coagulation factor III Тоцилизумаб Tocilizumab Actemra, RoActemra Actemra, RoActemra IL-6 рецептор IL-6 receptor Т омузотуксимаб T omuzotuximab EGFR, HER1 EGFR, HER1 Торализумаб Toralizumab CD154 (CD40L) CD154 (CD40L) Тозатоксумаб Tosatoxumab Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus Тозитумомаб Tositumomab Bexxar Bexxar CD20 CD20 Товетумаб Tovetumab CD140a CD140a Тралокинумаб Tralokinumab IL-13 IL-13 Трастузумаб Trastuzumab Herceptin Herceptin HER2/neu HER2/neu TRBS07 TRBS07 Ektomab Ektomab GD2 ganglioside GD2 ganglioside Трегализумаб Tregalizumab CD4 CD4 Т ремелимумаб T remelimumab CTLA-4 CTLA-4 Тревогрумаб Trevogrumab Фактор роста/дифференцировки 8 Growth/Differentiation Factor 8 Тукотузумаб Tucotuzumab EpCAM EpCAM Тувирумаб Tuvirumab Вирус гепатита В Hepatitis B virus Ублитуксимаб Ublituximab MS4A1 MS4A1 Улокуплумаб Ulocuplumab CXCR4 (CD184) CXCR4 (CD184) Урелумаб Urelumab 4-1BB (CD137) 4-1BB (CD137) Уртоксазумаб Urtoxazumab Escherichia coli Escherichia coli Устекинумаб Ustekinumab Stelara Stelara IL-12, IL-23 IL-12, IL-23 Утомилумаб Utomilumab 4-1BB (CD137) 4-1BB (CD137)

- 92 046742- 92 046742

Наименование Name Торговое наименование Trade name Мишень Target Вадастуксимаб Vadastuximab CD33 CD33 Ваналимаб Vanalimab CD40 CD40 Вандортузумаб Vandortuzumab STEAP1 STEAP1 Вантиктумаб Vantictumab Связанный с ожогом рецептор Burn associated receptor Ваникузумаб Vanicuzumab ангиопоэтин 2 angiopoietin 2 Вапаликсимаб Vapaliximab AOC3 (VAP-1) AOC3 (VAP-1) Вартсакумаб Vartsacumab VEGF-A VEGF-A Варлилумаб Varlilumab CD27 CD27 Вателизумаб Vatelizumab ITGA2 (CD49b) ITGA2 (CD49b) Ведолизумаб Vedolizumab Entyvio Entyvio интегрин α₄β₇ integrin α ₄ β ₇ Велтузумаб Veltuzumab CD20 CD20 Вепалимомаб Vepalimomab AOC3 (VAP-1) AOC3 (VAP-1) Везенкумаб Vesencumab NRP1 NRP1 Визилизумаб Visilizumab Nuvion Nuvion CD3 CD3 Волоциксимаб Volociximab интегрин α₅β₁ integrin α ₅ β ₁ Вонлеролизумаб Vonlerolizumab CD134 CD134 Вопрателимаб Vopratelimab ICOS ICOS Ворсетузумаб Vorsetuzumab CD70 CD70 Вотумумаб Votumumab HumaSPECT HumaSPECT опухолевый антиген CTAA16.88 tumor antigen CTAA16.88 Вунакизумаб Vunakizumab Интерлейкин 17 альфа Interleukin 17 alpha Ксентузумаб Xentuzumab IGF1, IGF2 IGF1, IGF2 XMAB-5574 XMAB-5574 CD19 CD19 Залутумумаб Zalutumumab HuMax-EGFr HuMax-EGFr EGFR EGFR Занолимумаб Zanolimumab HuMax-CD4 HuMax-CD4 CD4 CD4 Затуксимаб Zatuximab HER1 HER1 Зенокутузумаб Zenocutuzumab ERBB3, HER3 ERBB3, HER3 Зиралимумаб Ziralimumab CD147 (basigin) CD147 (basigin) Золбетуксимаб Zolbetuximab CLDN18 CLDN18 Золимомаб Zolimomab CD5 CD5

В дополнение к вышесказанному, антителом конъюгата лекарственное средство-антитело настоящего изобретения может быть Витаксин, который является гуманизированным антителом для лечения саркомы; Smart IDIO, который является гуманизированным анти-HLA-DR антителом для лечения неходжкинской лимфомы; Онколим, который является анти-HLA-Dr10 антителом мыши с радиоактивной меткой для лечения неходжкинской лимфомы; и Алломун, которое является гуманизированным анти-CD2 mAb для лечения болезни Ходжкина или неходжкинской лимфомы.In addition to the above, the antibody of the drug-antibody conjugate of the present invention may be Vitaxin, which is a humanized antibody for the treatment of sarcoma; Smart IDIO, which is a humanized anti-HLA-DR antibody for the treatment of non-Hodgkin's lymphoma; Oncolim, which is a radiolabeled anti-HLA-Dr10 mouse antibody for the treatment of non-Hodgkin's lymphoma; and Allomune, which is a humanized anti-CD2 mAb for the treatment of Hodgkin's disease or non-Hodgkin's lymphoma.

Антителом конъюгата лекарственного средства настоящего изобретения также может быть любое антитело-фрагмент, известное для лечения любого заболевания, предпочтительно, рака. Опять же, такие фрагменты антитела являются иммуноспецифическими в отношении антигена-мишени и могут быть получены коммерчески или получены любым способом, известным в данной области техники, таким как, например, методы рекомбинантной экспрессии. Примеры таких доступных антител включают любые из приведенной ниже таблицы.The antibody of the drug conjugate of the present invention may also be any antibody fragment known to treat any disease, preferably cancer. Again, such antibody fragments are immunospecific for the target antigen and can be obtained commercially or produced by any method known in the art, such as, for example, recombinant expression methods. Examples of such available antibodies include any of the following table.

Таблица 2table 2

Фрагменты терапевтических моноклональных антителFragments of therapeutic monoclonal antibodies

Тип/формат фрагмента Fragment type/format Наименование Name Торговое наименование Trade name Мишень Target Fab/химерное Fab/chimeric абциксимаб abciximab ReoPro ReoPro CD41 (интегрин альфа-IIb) CD41 (integrin alpha-IIb) Fab/ гуманизированное Fab/ humanized абрезекимаб abrezekimab Интерлейкин 13 Interleukin 13 F(ab')₂/мыши F(ab') ₂ /mouse афелимомаб afelimomab TNF-α TNF-α F(ab')₂/ гуманизированное F(ab') ₂ / humanized алацизумаб пегол alacizumab pegol VEGFR2 VEGFR2 Fab/мыши Fab/mouse анатумомаб anatumomab TAG-72 TAG-72 Fab/овцы Fab/sheep CroFab CroFab Змеиный яд snake poison Fab/овцы Fab/sheep DigiFab DigiFab Дигоксин Digoxin Fab/овцы Fab/sheep Digibind Digibind Дигоксин Digoxin Fab'/мыши Fab'/mouse арцитумомаб arcitumomab CEA-scan CEA-scan CEA CEA Fab'/мыши Fab'/mouse бектумомаб bectumomab LymphoScan Lymphoscan CD22 CD22 Fab'/мыши Fab'/mouse бициромаб biciromab FibriScint FibriScint фибрин II, бета цепь fibrin II, beta chain

- 93 046742- 93 046742

Тип/формат фрагмента Fragment type/format Наименование Name Торговое наименование Trade name Мишень Target BiTE/мыши BiTE/mice блинатумомаб blinatumomab Blincyto Blincyto CD19 CD19 scFv/ гуманизированное scFv/ humanized бролуцизумаб brolucizumab VEGFA VEGFA sdAb/ гуманизированное sdAb/ humanized каплацизумаб caplacizumab Cablivi Cablivi VWF VWF Fab'/ ПЭГ илированное гуманизированное Fab'/ PEGylated humanized сертолизумаб пегол sertolizumab pegol Cimzia Cimzia TNF-α TNF-α Fab/ гуманизированное Fab/ humanized цитатузумаб cituzumab EpCAM EpCAM F(ab')₂/мыши F(ab') ₂ /mouse дорлимомаб dorlimomab неизвестна unknown scFv/химерное гуманизированное scFv/chimeric humanized дувортуксизумаб duvortuxizumab CD19, CD3E CD19, CD3E scFv/человека scFv/human эфунгумаб efungumab Mycograb Mycograb Hsp90 Hsp90 F(ab')₂/ гуманизированное F(ab') ₂ / humanized эрлизумаб erlizumab ITGB2 (CD18) ITGB2 (CD18) Di-scFy Di-scFy флотетузумаб flotetuzumab IL-3 рецептор IL-3 receptor scFv/человека scFv/human ганкотамаб gancotamab неизвестна unknown F(ab')₂/мыши F(ab') ₂ /mouse иговомаб igovomab Indimacis-125 Indimacis-125 CA-125 CA-125 Fab/ гуманизированное Fab/ humanized лампализумаб lampalizumab CFD CFD scFv/ гуманизированное scFv/ humanized летолизумаб letolizumab TRAP TRAP Fab/мыши Fab/mouse наколомаб nacolomab C242 антиген C242 antigen Fab/мыши Fab/mouse наптумомаб naptumomab 5T4 5T4 Fab/мыши Fab/mouse нофетумомаб nofetumomab неизвестна unknown scFv/ гуманизированное scFv/ humanized опортузумаб oportuzumab Vicinium Vicinium EpCAM EpCAM Fab/ гуманизированное Fab/ humanized ранибизумаб ranibizumab Lucentis Lucentis VEGF-A VEGF-A BiTE/мыши BiTE/mice солитомаб solitomab EpCAM EpCAM Fab'/мыши Fab'/mouse сулесомаб sulesomab LeukoScan LeukoScan NCA-90 (грануло цитарный антиген) NCA-90 (granulocyte antigen) Fab Fab тадоцизумаб tadocizumab интегрин α^β₃ integrin α^β ₃ Fab/мыши Fab/mouse телимомаб telimomab неизвестна unknown scFv/ гуманизированное scFv/ humanized вобарилизумаб vobarilizumab IL6R IL6R Fab/ гуманизированное Fab/ humanized Thromboview Thromboview D-димер D-dimer Fab/ ПЭГилированное гуманизированное Fab/ PEGylated humanized CDP791 CDP791 VEGF VEGF Fab/ биспецифическое гуманизированное Fab/bispecific humanized MDX-H210 MDX-H210 Her2/Neu & CD64 (yFcR1) Her2/Neu & CD64 (yFcR1) scFv/ гуманизированное scFv/ humanized пекселизумаб pexelizumab комплемент C5 complement C5 (ScFv)4 мыши слитое со стрептавидином (ScFv)4 mouse fused with streptavidin CC49 CC49 антиген TAG-72 панкарциномы antigen TAG-72 pancarcinoma ScFv человека слитое с βлактамазой Human ScFv fused to β-lactamase SGN-17 SGN-17 P97 антиген P97 antigen ScFv человека слитое с ПЭГ Human ScFv fused to PEG F5 scFv-ПЭГ Иммунолипосома F5 scFv-PEG Immunoliposome Her2 Her2 Диатело (Vh-VlL человека Diathelo (human Vh-VlL C6.5K-A C6.5K-A Her2/Neu Her2/Neu Диатело (Vh-VlL человека Diathelo (human Vh-VlL L19 L19-yIFN L19 L19-yIFN EDB домен фибронектина EDB domain fibronectin Диатело (V_L-V_H)₂человека Diathelo (V _L -V _H ) ₂ people T84.66 T84.66 CEA CEA Минитело (scF_v-C_H3)2, химера мыши-человека (минитело) Minibody (scF _v -C _H 3)2, mouse-human chimera (minibody) T84.66 T84.66 CEA CEA Минитело, химера мышичеловека (минитело) Minibody, mouse-human chimera (minibody) 10H8 10H8 Her2 Her2 S_CF_V димер Fc (ScFv^-Fc, химера мыши-человека (минитело) S _C F _V Fc dimer (ScFv^-Fc, mouse-human chimera (minibody) T84.66 T84.66 CEA CEA

- 94 046742- 94 046742

Тип/формат фрагмента Fragment type/format Наименование Name Торговое наименование Trade name Мишень Target Биспецифическое scFv (V_L-V_H-V_H-V_L), мыши Bispecific scFv (V _L -V _H -V _H -V _L ), mice r28M r28M CD28 и MAP CD28 and MAP Биспецифическое (VL-VH- VH-VL), происхождение неизвестно Bispecific (VL-VH- VH-VL), origin unknown BiTE MT103 BiTE MT103 CD19 и CD3 CD19 and CD3 Биспецифическое scFv (Vl-Vh-Vh-Vl), происхождение неизвестно Bispecific scFv (Vl-Vh-Vh-Vl), origin unknown BiTE BiTE Ep-CAM и CD3 Ep-CAM and CD3 Биспецифическое тандемное диатело (VHVL-VH-VL) (мыши) Bispecific tandem diabody (VHVL-VH-VL) (mice) тандаб tandab CD19 & CD3 CD19 & CD3 VhH-β-лактамаза, слитое, верблюжье VhH-β-lactamase, fusion, camel нанотело nanobody CEA CEA Dab/человека Dab/person анти-TNFtt dAb anti-TNFtt dAb TNFu TNFu VhH/верблюжье VhH/camel нанотело nanobody TNFu TNFu VhH/верблюжье VhH/camel нанотело nanobody фактор фон Виллебранда factor background von Willebrand

Fab фрагмент, антигенсвязывающий (одно плечо);Fab fragment, antigen binding (one arm);

F(ab')₂ фрагмент, антигенсвязывающий, включая шарнирную область (оба плеча);F(ab') ₂ fragment, antigen-binding, including the hinge region (both arms);

Fab' фрагмент, антигенсвязывающий, включая шарнирную область (одно плечо);Fab' antigen-binding fragment including the hinge region (one arm);

scFv одноцепочечный вариабельный фрагмент;scFv single chain variable fragment;

ди-scFv димерный одноцепочечный вариабельный фрагмент;di-scFv dimeric single chain variable fragment;

(Holliger & Hudson, Nature Biotechnology, 2005, 23(9), 1126-1136).(Holliger & Hudson, Nature Biotechnology, 2005, 23(9), 1126-1136).

В предпочтительном варианте осуществления, антитело в конъюгатах лекарственного средства настоящего изобретения целенаправленно воздействует на антиген клеточной поверхности.In a preferred embodiment, the antibody in the drug conjugates of the present invention specifically targets a cell surface antigen.

В предпочтительных вариантах осуществления, антитело в конъюгатах лекарственного средства настоящего изобретения может связываться с рецептором, кодированным ErbB геном. Антитело может специфически связываться с ErbB рецептором, выбранным из EGFR, HER2, HER3 и HER4. Предпочтительно, антитело в конъюгате лекарственного средства может специфически связываться с внеклеточным доменом HER2 рецептора и ингибировать рост опухолевых клеток, которые сверэкспрессируют HER2 рецептор. Антитело конъюгата лекарственного средства может быть моноклональное антитело, например, моноклональное антитело мыши, химерное антитело или гуманизированное антитело. Предпочтительно, гуманизированным антителом может быть huMAb4D5-1, huMAb4D5-2, huMAb4D5-3, huMAb4D5-4, huMAb4D5-5, huMAb4D5-6, huMAb4D5-7 или huMAb4D5-8 (Трастузумаб), особенно предпочтительно, Трастузумаб. Антителом также может быть фрагмент антитела, например, Fab фрагмент.In preferred embodiments, the antibody in the drug conjugates of the present invention can bind to a receptor encoded by the ErbB gene. The antibody can specifically bind to an ErbB receptor selected from EGFR, HER2, HER3 and HER4. Preferably, the antibody in the drug conjugate can specifically bind to the extracellular domain of the HER2 receptor and inhibit the growth of tumor cells that overexpress the HER2 receptor. The drug conjugate antibody may be a monoclonal antibody, such as a mouse monoclonal antibody, a chimeric antibody, or a humanized antibody. Preferably, the humanized antibody may be huMAb4D5-1, huMAb4D5-2, huMAb4D5-3, huMAb4D5-4, huMAb4D5-5, huMAb4D5-6, huMAb4D5-7 or huMAb4D5-8 (Trastuzumab), particularly preferably Trastuzumab. An antibody can also be an antibody fragment, such as a Fab fragment.

Другие предпочтительные антитела включают:Other preferred antibodies include:

(i) анmи-CD4 антитела. Антителом конъюгата лекарственного средства может быть моноклональное антитело, например, моноклональное антитело мыши, химерное антитело или гуманизированное антитело;(i) anti-CD4 antibodies. The drug conjugate antibody may be a monoclonal antibody, such as a mouse monoclonal antibody, a chimeric antibody, or a humanized antibody;

(ii) анти-CD5 антитела. Антителом конъюгата лекарственного средства может быть моноклональное антитело, например, моноклональное антитело мыши, химерное антитело или гуманизированное антитело;(ii) anti-CD5 antibodies. The drug conjugate antibody may be a monoclonal antibody, such as a mouse monoclonal antibody, a chimeric antibody, or a humanized antibody;

(iii) анти-CD13 антитела. Антителом конъюгата лекарственного средства может быть моноклональное антитело, например, моноклональное антитело мыши, химерное антитело или гуманизированное антитело;(iii) anti-CD13 antibodies. The drug conjugate antibody may be a monoclonal antibody, such as a mouse monoclonal antibody, a chimeric antibody, or a humanized antibody;

(iv) анти-CD20 антитела. Антителом конъюгата лекарственного средства может быть моноклональное антитело, например, моноклональное антитело мыши, химерное антитело или гуманизированное антитело. Предпочтительно, гуманизированным антителом является ритуксимаб или его фрагмент антитела, например, Fab фрагмент; и (v) анти-CD30 антитела. Антителом конъюгата лекарственного средства может быть моноклональное антитело, например, моноклональное антитело мыши, химерное антитело или гуманизированное антитело. Предпочтительно, гуманизированным антителом является брентуксимаб ведотин или его фрагмент антитела.(iv) anti-CD20 antibodies. The drug conjugate antibody may be a monoclonal antibody, such as a mouse monoclonal antibody, a chimeric antibody, or a humanized antibody. Preferably, the humanized antibody is rituximab or an antibody fragment thereof, for example a Fab fragment; and (v) anti-CD30 antibodies. The drug conjugate antibody may be a monoclonal antibody, such as a mouse monoclonal antibody, a chimeric antibody, or a humanized antibody. Preferably, the humanized antibody is brentuximab vedotin or an antibody fragment thereof.

В одном варианте осуществления изобретения, конъюгат лекарственное средство-антитело может демонстрировать одно или несколько из следующих действий: (i) повышенная цитотоксичность (или снижение выживаемости клеток), (ii) повышенная цитостатическая активность (цитостаз), (iii) повышенная аффинность связывания с антигеном или эпитопом - мишенями, (iv) повышеннаяIn one embodiment of the invention, the drug-antibody conjugate may exhibit one or more of the following: (i) increased cytotoxicity (or decreased cell survival), (ii) increased cytostatic activity (cytostasis), (iii) increased antigen binding affinity or epitope - targets, (iv) increased

- 95 046742 интернализация конъюгата, (v) уменьшение побочных эффектов у пациента, и/или (vi) улучшенный профиль токсичности. Такое увеличение может быть в сравнении с известным в данной области конъюгатом лекарственного средства-антитела, который связывает тот же или другой эпитоп или антиген.- 95 046742 internalization of the conjugate, (v) reduced side effects in the patient, and/or (vi) improved toxicity profile. Such an increase may be compared to a drug-antibody conjugate known in the art that binds the same or a different epitope or antigen.

Способы получения конъюгатов лекарственное средство-антитело.Methods for preparing drug-antibody conjugates.

Конъюгаты лекарственное средство-антитело по настоящему изобретению могут быть получены по методикам, хорошо известным в данной области техники. Способы конъюгирования групп, содержащих антитела с, по меньшей мере, одним антигенсвязывающим сайтом, например антитела к ряду различных лекарственных средств, с использованием различных процессов, были описаны и проиллюстрированы ранее в, например, WO-A-2004/010957, WO-A-2006/060533 и WO-A-2007/024536, содержания которых включены в настоящий документ в качестве ссылки. Они включают использование линкерной группы, которая дериватизирует лекарственное средство, токсин или радионуклид таким образом, чтобы затем его можно было присоединить к такой группе, как антитело. Присоединение к такой группе, как антитело, обычно осуществляется одним из трех путей: через свободные тиольные группы в цистеинах после частичного восстановления дисульфидных групп в антителе; через свободные аминогруппы в лизинах в антителе; и через свободные гидроксильные группы в серинах и/или треонинах в антителе. Способ присоединения варьируется в зависимости от сайта присоединения фрагмента, такого как антитело. Также описана очистка конъюгата антитело-лекарственное средство с помощью эксклюзионной хроматографии по размеру (ЭХР) [см., например, Liu et al., Proc. Natl. Acad. Set (USA), 93: 8618-8623 (1996) и Chari et al., Cancer Research, 52: 127-131 (1992)].The drug-antibody conjugates of the present invention can be prepared by methods well known in the art. Methods for conjugating groups containing antibodies with at least one antigen binding site, for example antibodies to a number of different drugs, using various processes have been described and illustrated previously in, for example, WO-A-2004/010957, WO-A- 2006/060533 and WO-A-2007/024536, the contents of which are incorporated herein by reference. These involve the use of a linker group that derivatizes the drug, toxin or radionuclide so that it can then be attached to a group such as an antibody. Attachment to a group such as an antibody usually occurs in one of three ways: through free thiol groups in cysteines after partial reduction of disulfide groups in the antibody; through free amino groups in lysines in the antibody; and through free hydroxyl groups on serines and/or threonines in the antibody. The method of attachment varies depending on the site of attachment of the fragment, such as an antibody. Purification of an antibody-drug conjugate using size exclusion chromatography (SEC) has also been described [see, for example, Liu et al., Proc. Natl. Acad. Set (USA), 93: 8618-8623 (1996) and Chari et al., Cancer Research, 52: 127-131 (1992)].

Как отмечалось ранее, полезные лекарственные нагрузки конъюгатов лекарственного средства по настоящему изобретению представляют собой производные эктеинасцидина, описанные в международной заявке на патент № PCT/EP2018/060868, содержания которых включены в настоящий документ в качестве ссылки. Эти соединения синтезируют способами, описанными в настоящем изобретении.As previously noted, the drug payloads of the drug conjugates of the present invention are the ecteinascidin derivatives described in International Patent Application No. PCT/EP2018/060868, the contents of which are incorporated herein by reference. These compounds are synthesized by the methods described in the present invention.

Как отмечено выше, представлен способ получения конъюгата лекарственного средства по настоящему изобретению, включающий конъюгирование группы Ab, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, и лекарственного средства D формулы (IH), (IHa) или (IHb), где Ab и D такие, как определено в настоящем документе.As noted above, there is provided a method for preparing a drug conjugate of the present invention, comprising conjugating an Ab moiety containing at least one antigen binding site and a drug D of formula (IH), (IHa) or (IHb), wherein Ab and D such as defined herein.

Один из примеров получения конъюгата лекарственного средства настоящего изобретения включает получение конъюгатов лекарственное средство-антитело формулы (G) или (G') настоящего изобретения следующим образом:One example of the preparation of a drug conjugate of the present invention involves the preparation of drug-antibody conjugates of formula (G) or (G') of the present invention as follows:

где указанный способ включает следующие стадии:where said method includes the following steps:

(i) взаимодействия лекарственного средства (D-H) формулы (IH)-H:(i) drug interactions (D-H) of formula (IH)-H:

где заместители в определениях (IH)-H такие, как определено выше для формулы (IH), с соединением формулы (D') или (E):wherein the substituents in the definitions (IH)-H are as defined above for formula (IH), with a compound of formula (D') or (E):

- 96 046742- 96 046742

с получением соединения формулы (F) или (F'), соответственно:to obtain a compound of formula (F) or (F'), respectively:

(ii) частичного восстановления одной или нескольких дисульфидных связей в антителе, предназначенном для конъюгирования, с получением восстановленного антитела Ab-SH, имеющего свободные тиольные группы:(ii) partially reducing one or more disulfide bonds in the antibody to be conjugated to produce a reduced Ab-SH antibody having free thiol groups:

восстановление /А\ ---------► s S дисульфидных связейreduction /A\ ---------► s S disulfide bonds

Ab-SH (iii) взаимодействия частично восстановленного антитела Ab-SH, имеющего свободные тиольные группы, с соединением формулы (F) или (F'), полученным на стадии (i), с получением желаемого конъюгата лекарственное средство-антитело формулы (G) или (G') соответственно:Ab-SH (iii) reacting the partially reduced Ab-SH antibody having free thiol groups with the compound of formula (F) or (F') obtained in step (i) to obtain the desired drug-antibody conjugate of formula (G) or (G') respectively:

В другом предпочтительном варианте осуществления этого способа, антитело выбирают изIn another preferred embodiment of this method, the antibody is selected from

- 97 046742 брентуксимаба, гемтузумаба, инозутумаба, ровалпитузумаба, трастузумаба, aHTu-CD4 антитела, антиCD5 антитела, анти-CD13 антитела и анти-CD30 антитела или их антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части, или его выбирают из трастузумаба и анти-CD13 антитела или их антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части, и наиболее предпочтительно, оно является трастузумабом или его антигенсвязывающим фрагментом или иммунологически активной частью. Более того, частичное восстановление этого моноклонального антитела проводят с применением гидрохлорида трис[2-карбоксиэтил]фосфина (TCEP).- 97 046742 brentuximab, gemtuzumab, inosutumab, rovalpituzumab, trastuzumab, aHTu-CD4 antibody, anti-CD5 antibody, anti-CD13 antibody and anti-CD30 antibody or an antigen-binding fragment or immunologically active part thereof, or selected from trastuzumab and anti-CD13 antibody or an antigen binding fragment or immunologically active portion thereof, and most preferably it is trastuzumab or an antigen binding fragment or immunologically active portion thereof. Moreover, partial reconstitution of this monoclonal antibody is carried out using tris[2-carboxyethyl]phosphine hydrochloride (TCEP).

Другой пример способа получения конъюгата лекарственного средства настоящего изобретения включает получение конъюгатов лекарственное средство-антитело формулы (W) или (W') настоящего изобретения, следующим образом:Another example of a method for producing a drug conjugate of the present invention involves preparing drug-antibody conjugates of formula (W) or (W') of the present invention, as follows:

(i) взаимодействия антитела с гидрохлоридом 2-иминотиолана (реагентом Трота) с получением тиол-активированного антитела:(i) reacting the antibody with 2-iminothiolane hydrochloride (Trot's reagent) to produce a thiol-activated antibody:

(ii) взаимодействия тиол-активированного антитела с соединением формулы (F) или (F'), с получением желаемого конъюгата лекарственное средство-антитело формулы (W) или (W'), соответственно.(ii) reacting the thiol-activated antibody with a compound of formula (F) or (F'), to obtain the desired drug-antibody conjugate of formula (W) or (W'), respectively.

В другом предпочтительном варианте осуществления этого способа, антитело выбирают из Брентуксимаба, Гемтузумаба, Инозутумаба, Ровалпитузумаба, Трастузумаба, анти-CD4 антитела, антиCD5 антитела, анти-CD13 антитела и анти-CD30 антитела или их антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части, или его выбирают из Трастузумаба и анти-CD13 антитела или их антигенсвязывающего фрагмента или иммунологически активной части, и наиболее предпочтительно, он является Трастузумабом или его антигенсвязывающим фрагментом или иммунологически активной частью.In another preferred embodiment of this method, the antibody is selected from or selected from Brentuximab, Gemtuzumab, Inosutumab, Rovalpituzumab, Trastuzumab, anti-CD4 antibody, anti-CD5 antibody, anti-CD13 antibody and anti-CD30 antibody or an antigen binding fragment or immunologically active portion thereof of Trastuzumab and an anti-CD13 antibody or an antigen binding fragment or immunologically active part thereof, and most preferably it is Trastuzumab or an antigen binding fragment or immunologically active part thereof.

Другой пример способа получения конъюгата лекарственного средства настоящего изобретения включает получение конъюгатов лекарственное средство-антитело формулы (O) или (P) следующим образом:Another example of a method for producing a drug conjugate of the present invention involves preparing drug-antibody conjugates of formula (O) or (P) as follows:

- 98 046742- 98 046742

(i) либо:(i) either:

(a) взаимодействия лекарственного средства (D-H) формулы (IH)-H:(a) drug interactions (D-H) of formula (IH)-H:

где заместители в определениях (IH)-H такие, как определено выше, с соединением формулы X2C(O)-X1 где X1 и X2 являются уходящими группами, с получением соединения формулы (B):wherein the substituents in the definitions (IH)-H are as defined above, with a compound of formula X2C(O)-X1 where X1 and X2 are leaving groups, to give a compound of formula (B):

и точкой присоединения -(C=O)X1 группы является свободная -NH2 группа соединения формулы DH, либо (b) взаимодействия указанного лекарственного средства (D-H) формулы (IH)-H, как определено выше, с 4-нитрофенилхлорформиатом с получением соединения формулы (J):and the point of attachment of the -(C=O)X1 group is the free -NH2 group of the compound of formula DH, or (b) reacting said drug (D-H) of formula (IH)-H, as defined above, with 4-nitrophenylchloroformate to produce a compound of formula (J):

и точкой присоединения (4-нитрофенил)-O-CO- группы является такой же, как для X1(CO) группы в (a) выше;and the point of attachment of the (4-nitrophenyl)-O-CO- group is the same as for the X1(CO) group in (a) above;

(ii) либо:(ii) either:

(c) взаимодействия соединения формулы (B), полученного на стадии (i), с гидрокси соединением формулы HO-(CH₂)1.₆NHProt^NH и удаления Prot^NH группы из сопряженного соединения с получением соединения формулы (C):(c) reacting the compound of formula (B) obtained in step (i) with a hydroxy compound of formula HO-(CH ₂ )1. ₆ NHProt ^NH and removing the Prot ^NH group from the conjugate compound to give the compound of formula (C):

с последующим взаимодействием полученного соединения формулы (C) с соединением формулы Me-S-S-(CH₂)1.₃-CO₂H с получением соединения формулы (K):followed by reacting the resulting compound of formula (C) with a compound of formula Me-SS-(CH ₂ )1. ₃ -CO ₂ H to obtain the compound of formula (K):

II IIII II

D O-(CH₂)₁.₆-N^\(CH₂)₁.3 ^SMeΗ (К) , либо (d) взаимодействия соединения (J), полученного на стадии (i), с соединением формулы HO-(CH₂)1.₃SProt^SH и удаления Prot^NH группы из сопряженного соединения с получением соединения сD O-(CH ₂ ) ₁ . ₆ -N^\(CH ₂ ) ₁ .3 ^SMe Η (K), or (d) interaction of compound (J) obtained in step (i) with a compound of the formula HO-(CH ₂ )1. ₃ SProt ^SH and removing the Prot ^NH group from the conjugate compound to obtain a compound with

- 99 046742 получением соединения формулы (L):- 99 046742 by obtaining a compound of formula (L):

(iii) взаимодействия (K) или (L), полученной на стадии (ii), с дитиотретиолом в условиях восстановления дисульфида с получением соединения формулы (M) и (N), соответственно:(iii) reacting (K) or (L) obtained in step (ii) with dithiothrethiol under disulfide reduction conditions to obtain a compound of formula (M) and (N), respectively:

D 0{CH₂)^NH (CH₂)i-3—SH ^D O(CH₂)₁.₃-sh (Μ) (N) (iv) взаимодействия конъюгируемого антитела с сукцинимидил-4-(№малеимидометил)циклогексан1-карбоксилатом для дериватизации указанного антитела в одной или нескольких лизиновых группах с сукцинимидил-4-(№малеимидометил)циклогексан-1 -карбонильной группой:D 0{CH ₂ )^NH (CH ₂ )i-3—SH ^D O(CH ₂ ) ₁ . ₃ -sh (Μ) (N) (iv) interaction of the conjugated antibody with succinimidyl-4-(Namaleimidomethyl)cyclohexane1-carboxylate to derivatize said antibody in one or more lysine groups with succinimidyl-4-(Namaleimidomethyl)cyclohexane-1 - carbonyl group:

(v) взаимодействия дериватизированного антитела, полученного на стадии (iv), либо с (M), либо с (N), полученными на стадии (iii), с получением желаемого конъюгата лекарственное средство-антитело формулы (O) или (P):(v) reacting the derivatized antibody obtained in step (iv) with either (M) or (N) obtained in step (iii) to obtain the desired drug-antibody conjugate of formula (O) or (P):

Соединением формулы X₂-C(O)-X₁ предпочтительно является 1,1'-карбонилдиимидазол. Аналогично, гидроксисоединением, взаимодействующим с соединением формулы (B), предпочтительно является HO-(CH₂)₂.₄-NHProt^NH, и более предпочтительно, HO-(CH₂)₃-NHProt^NH.The compound of formula X ₂ -C(O)-X ₁ is preferably 1,1'-carbonyldiimidazole. Likewise, the hydroxy compound reacting with the compound of formula (B) is preferably HO-(CH ₂ ) ₂ . ₄ -NHProt ^NH , and more preferably HO-(CH ₂ ) ₃ -NHProt ^NH .

В одном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения, соединением, взаимодействующим с соединением формулы (C) с получением соединения формулы (K), является 3(метилдисульфанил)пропановая кислота.In one preferred embodiment of the present invention, the compound reacted with the compound of formula (C) to produce the compound of formula (K) is 3(methyldisulfanyl)propanoic acid.

В другом предпочтительном варианте осуществления, соединением HO-(CH₂)₁.₃SProt^SH, которое взаимодействует с соединением формулы (J) с получением соединения формулы (L), является HO(CH^SProtSH.In another preferred embodiment, the compound HO-(CH ₂ ) ₁ . ₃ SProt ^SH that reacts with a compound of formula (J) to produce a compound of formula (L) is HO(CH^SProtSH.

Если присоединение к линкерной группе лекарственного средства осуществляется через свободные тиольные группы в цистеинах после частичного восстановления дисульфидных групп в группе, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, такой как моноклональное антитело, частичное восстановление обычно проводят сначала разбавлением до подходящей концентрации и буферизацией раствора перед частичным восстановлением дисульфидных связей путем добавления подходящего восстанавливающего агента, такого как гидрохлорид трис[2-карбоксиэтил]фосфина (TCEP) или дитиотреитол (DTT). Путем выбора подходящих соотношений группы, подлежащей восстановлению, такой как моноклональное антитело, и восстанавливающего агента, условий реакции и времени восстановления, возможно получить желаемое соотношение свободного тиола к группе, например четыре свободных тиольных группы на моноклональное антитело.If attachment to a drug linker group is via free thiol groups in cysteines after partial reduction of disulfide groups in a group containing at least one antigen-binding site, such as a monoclonal antibody, partial reduction is usually accomplished by first diluting to a suitable concentration and buffering the solution before partial reduction of disulfide bonds by adding a suitable reducing agent such as tris[2-carboxyethyl]phosphine hydrochloride (TCEP) or dithiothreitol (DTT). By selecting suitable ratios of group to be reduced, such as a monoclonal antibody, and reducing agent, reaction conditions and reduction time, it is possible to obtain the desired ratio of free thiol to group, for example four free thiol groups per monoclonal antibody.

Частично восстановленную группу, такую как частично восстановленное моноклональное антитело, имеющую свободные тиольные группы, полученную, как описано выше, затем подвергают взаимодействию с соединением лекарственное средство-линкер по изобретению формулы D-(X)_b-(AA)_w A partially reduced group, such as a partially reduced monoclonal antibody having free thiol groups, prepared as described above, is then reacted with a drug-linker compound of the invention of the formula D-(X) _b -(AA) _w

- 100 046742 (T)g-L1 (где группой L1 в таком соединении является малеимидная группа, которая может свободно взаимодействовать с тиольными группами). Полученные конъюгаты лекарственное средство-антитело очищают любыми подходящими средствами, известными в данной области техники, например, эксклюзионной хроматографией по размеру (ЭХР) [см., например, Liu et al., Proc. Natl. Acad. Sci.USA, 93: 8618-8623 (1996) и Chari et al., Cancer Research, 52: 127-131 (1992)].- 100 046742 (T)g-L1 (where the L1 group in such a compound is a maleimide group that can freely interact with thiol groups). The resulting drug-antibody conjugates are purified by any suitable means known in the art, for example, size exclusion chromatography (SEC) [see, for example, Liu et al., Proc. Natl. Acad. Sci.USA, 93: 8618-8623 (1996) and Chari et al., Cancer Research, 52: 127-131 (1992)].

В одном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения, частично восстановленным моноклональным антителом является трастузумаб или анти-CD13 антитело или их антигенсвязывающий фрагмент или иммунологически активная часть, предпочтительно, трастузумаб или его антигенсвязывающий фрагмент или иммунологически активная часть; или, предпочтительно, анти-CD13 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент или иммунологически активная часть.In one preferred embodiment of the present invention, the partially reduced monoclonal antibody is trastuzumab or an anti-CD13 antibody or an antigen binding fragment or immunologically active portion thereof, preferably trastuzumab or an antigen binding fragment or immunologically active portion thereof; or, preferably, an anti-CD13 antibody or an antigen-binding fragment or immunologically active portion thereof.

В альтернативном варианте осуществления изобретения, лизины в группе, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, такой как моноклональное антитело, сначала могут взаимодействовать с сукцинимидил-4-(Х-малеимидометил)циклогексан-1-карбоксилатом. Свободная аминовая группа на антителе может взаимодействовать со сложным эфиром N-гидроксисукцинимида с получением малеимид-активированного антитела:In an alternative embodiment of the invention, the lysines in the group containing at least one antigen-binding site, such as a monoclonal antibody, may first be reacted with succinimidyl-4-(X-maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate. The free amine group on the antibody can react with an N-hydroxysuccinimide ester to produce a maleimide-activated antibody:

оO

SMCCSMCC

Малеимид-активированное антитело затем может взаимодействовать с соединением формулы D(X)b-(AA)_w-(T)g-H, имеющим реакционноспособную тиольную группу.The maleimide-activated antibody can then be reacted with a compound of formula D(X)b-(AA) _w -(T)gH having a reactive thiol group.

В альтернативном варианте осуществления изобретения, лизины в группе, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, такой как моноклональное антитело, сначала могут взаимодействовать с гидрохлоридом 2-иминотиолана (реагентом Трота). Свободная аминовая группа антитела может взаимодействовать с имидным тиолактоном с получением тиол-активированного антитела.In an alternative embodiment of the invention, the lysines in the group containing at least one antigen binding site, such as a monoclonal antibody, may first be reacted with 2-iminothiolane hydrochloride (Trot's reagent). The free amine group of the antibody can react with the imide thiolactone to produce a thiol-activated antibody.

Один конкретный пример способов получения конъюгатов лекарственное средство-антитело формулы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)g-(L)-]_n-Ab настоящего изобретения конъюгированием через свободные тиольные группы в цистеинах после частичного восстановления дисульфидных групп в антителе показан на фигуре 1.One specific example of methods for preparing drug-antibody conjugates of the formula [D-(X) _b- (AA) _w- (T)g-(L)-] _n -Ab of the present invention by conjugation through free thiol groups in cysteines after partial reduction of disulfide groups in the antibody is shown in Figure 1.

Другой конкретный пример способов получения конъюгатов лекарственное средство-антитело формулы [D-(X)_b-(AA)_w-(T)g-(L)-]_n-Ab настоящего изобретения конъюгированием через свободные аминогруппы в лизинах после взаимодействия антитела с реагентом Трота показан на фигуре 2.Another specific example of methods for preparing drug-antibody conjugates of the formula [D-(X) _b -(AA) _w -(T)g-(L)-] _n -Ab of the present invention by conjugation through free amino groups in lysines after reaction of the antibody with the reagent Trota is shown in figure 2.

Композиции, содержащие конъюгат лекарственное средство-антитело по изобретению, и их применениеCompositions containing the drug-antibody conjugate of the invention and their use

Также представлена фармацевтическая композиция, содержащая конъюгат лекарственного средства по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель. Примеры форм введения конъюгата лекарственного средства, имеющего общую формулу [D-(X)_b-(AA)_w-(T)g-(L)-]_n-Ab по настоящему изобретению, включают, без ограничений, пероральную, местную, парентеральную, подъязычную, ректальную, вагинальную, глазную и интраназальную. Парентеральное введение включает подкожные инъекции, внутривенные, внутримышечные, внутригрудинные методы инъекции или инфузии. Предпочтительно, композиции вводят парентерально. Фармацевтические композиции по изобретению могут быть составлены таким образом, чтобы позволить конъюгату лекарственного средства настоящего изобретения быть биодоступным при введении композиции животному, предпочтительно, человеку. Композиции могут принимать форму одной или более дозированныхAlso provided is a pharmaceutical composition containing a drug conjugate of the present invention and a pharmaceutically acceptable carrier. Examples of administration forms for the drug conjugate having the general formula [D-(X) _b- (AA) _w- (T)g-(L)-] _n -Ab of the present invention include, but are not limited to, oral, topical, parenteral , sublingual, rectal, vaginal, ocular and intranasal. Parenteral administration includes subcutaneous injection, intravenous, intramuscular, intrathoracic injection or infusion methods. Preferably, the compositions are administered parenterally. The pharmaceutical compositions of the invention may be formulated to allow the drug conjugate of the invention to be bioavailable when the composition is administered to an animal, preferably a human. The compositions may take the form of one or more dosage units

- 101 046742 единиц, где, например, таблетка может представлять единичную дозированную единицу, а контейнер с конъюгатом лекарственное средство-антитело по настоящему изобретению в аэрозольной форме может содержать множество дозированных единиц.- 101 046742 units, where, for example, a tablet may represent a single dosage unit, and a container containing a drug-antibody conjugate of the present invention in aerosol form may contain multiple dosage units.

Фармацевтически приемлемый носитель или наполнитель может быть в виде частиц, так что композиции имеют, например, таблетированную или порошковую форму. Носитель (носители) может быть жидкостью, при этом композиции представляют собой, например, пероральный сироп или жидкость для инъекций. Кроме того, носитель (носители) может быть газообразным, чтобы обеспечить аэрозольную композицию, полезную, например, при ингаляционном введении. Термин носитель относится к разбавителю, адъюванту или эксципиенту, с которым вводят конъюгате лекарственное средство-антитело по настоящему изобретению. Такие фармацевтические носители могут быть жидкостями, такими как вода и масла, включая масла нефтяного, животного, растительного или синтетического происхождения, такие как арахисовое масло, соевое масло, минеральное масло, кунжутное масло и подобные. Носителями могут быть солевой раствор, аравийская камедь, желатин, крахмальная паста, тальк, кератин, коллоидный диоксид кремния, мочевина и подобные. Кроме того, могут использоваться вспомогательные, стабилизирующие, загущающие, смазывающие и красящие агенты. В одном варианте осуществления, при введении животному, конъюгаты лекарственное средствоантитело настоящего изобретения или композиции и фармацевтически приемлемые носители являются стерильными. Вода является предпочтительным носителем, если конъюгаты лекарственное средствоантитело по настоящему изобретению вводят внутривенно. Солевые растворы и водные растворы декстрозы и глицерина также могут использоваться в качестве жидких носителей, особенно для растворов для инъекций. Подходящие фармацевтические носители также включают эксципиенты, такие как крахмал, глюкоза, лактоза, сахароза, желатин, солод, рис, мука, мел, силикагель, стеарат натрия, моностеарат глицерина, тальк, хлорид натрия, сухое обезжиренное молоко, глицерин, пропилен, гликоль, вода, этанол и подобные. Настоящие композиции, при желании, могут также содержать небольшие количества смачивающих или эмульгирующих агентов или pH буферных агентов.The pharmaceutically acceptable carrier or excipient may be particulate, such that the compositions are in, for example, tablet or powder form. The carrier(s) may be a liquid, with the compositions being, for example, an oral syrup or an injectable liquid. In addition, the carrier(s) may be gaseous to provide an aerosol composition useful, for example, for inhalation administration. The term carrier refers to the diluent, adjuvant or excipient with which the drug-antibody conjugate of the present invention is administered. Such pharmaceutical carriers can be liquids such as water and oils, including oils of petroleum, animal, vegetable or synthetic origin, such as peanut oil, soybean oil, mineral oil, sesame oil and the like. The carriers may be saline, gum acacia, gelatin, starch paste, talc, keratin, colloidal silica, urea and the like. In addition, auxiliary, stabilizing, thickening, lubricating and coloring agents can be used. In one embodiment, when administered to an animal, the drug-antibody conjugates of the present invention or compositions and pharmaceutically acceptable carriers are sterile. Water is the preferred carrier when the drug-antibody conjugates of the present invention are administered intravenously. Saline solutions and aqueous solutions of dextrose and glycerol can also be used as liquid carriers, especially for injection solutions. Suitable pharmaceutical carriers also include excipients such as starch, glucose, lactose, sucrose, gelatin, malt, rice, flour, chalk, silica gel, sodium stearate, glycerol monostearate, talc, sodium chloride, skim milk powder, glycerin, propylene, glycol, water, ethanol and the like. The present compositions, if desired, may also contain small amounts of wetting or emulsifying agents or pH buffering agents.

Когда композиция предназначена для перорального введения, композиция предпочтительно имеет твердую или жидкую форму, где полутвердые, полужидкие, суспензионные и гелевые формы включены в формы, рассматриваемые в настоящем документе как твердые или жидкие.When the composition is for oral administration, the composition is preferably in solid or liquid form, wherein semi-solid, semi-liquid, suspension and gel forms are included in forms referred to herein as solid or liquid.

В качестве твердой композиции для перорального введения, композиция может быть составлена в виде порошка, гранулы, прессованной таблетки, пилюли, капсулы, жевательной резинки, вафли или подобной формы. Такая твердая композиция обычно содержит один или несколько инертных разбавителей. Кроме того, может присутствовать один или несколько из следующих: связующие, такие как карбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза, микрокристаллическая целлюлоза или желатин; эксципиенты, такие как крахмал, лактоза или декстрины, разрыхлители, такие как альгиновая кислота, альгинат натрия, кукурузный крахмал и подобные; смазывающие вещества, такие как стеарат магния; глиданты, такие как коллоидный диоксид кремния; подсластители, такие как сахароза или сахарин; ароматизатор, такой как мята перечная, метилсалицилат или апельсиновый ароматизатор; и краситель.As a solid composition for oral administration, the composition may be formulated as a powder, granule, compressed tablet, pill, capsule, chewing gum, wafer or the like. Such a solid composition typically contains one or more inert diluents. In addition, one or more of the following may be present: binders such as carboxymethylcellulose, ethylcellulose, microcrystalline cellulose or gelatin; excipients such as starch, lactose or dextrins; disintegrants such as alginic acid, sodium alginate, corn starch and the like; lubricants such as magnesium stearate; glidants such as colloidal silicon dioxide; sweeteners such as sucrose or saccharin; a flavoring such as peppermint, methyl salicylate or orange flavoring; and dye.

Когда композиция имеет форму капсулы (например, желатиновой капсулы), она может содержать, помимо материалов вышеуказанного типа, жидкий носитель, такой как полиэтиленгликоль, циклодекстрин или жирное масло.When the composition is in the form of a capsule (eg, a gelatin capsule), it may contain, in addition to materials of the above type, a liquid carrier such as polyethylene glycol, cyclodextrin or fatty oil.

Композиция может быть в форме жидкости, например эликсира, сиропа, раствора, эмульсии или суспензии. Жидкость может быть полезной для перорального введения или для доставки путем инъекции. Когда композиция предназначена для перорального введения, она может содержать один или несколько подсластителей, консервантов, красителей/пигментов и усилителей вкуса. В композицию для введения инъекцией, также могут быть включены один или несколько из поверхностно-активного вещества, консерванта, смачивающего агента, диспергирующего агента, суспендирующего агента, буфера, стабилизатора и изотонического агента.The composition may be in the form of a liquid, such as an elixir, syrup, solution, emulsion or suspension. The liquid may be useful for oral administration or delivery by injection. When the composition is intended for oral administration, it may contain one or more sweeteners, preservatives, colors/pigments and flavor enhancers. One or more of a surfactant, a preservative, a wetting agent, a dispersing agent, a suspending agent, a buffer, a stabilizer, and an isotonic agent may also be included in the composition for injection.

Предпочтительным путем введения является парентеральное введение, включая, но не ограниченное ими, внутрикожное, внутримышечное, внутрибрюшинное, внутривенное, подкожное, интраназальное, эпидуральное, интраназальное, внутримозговое, внутрижелудочковое, интратекальное, интравагинальное или трансдермальное. Предпочтительный способ введения оставлен на усмотрение практикующего врача и будет частично зависеть от места заболевания (такого как очаг рака). В более предпочтительном варианте осуществления, настоящие конъюгаты лекарственное средство-антитело по настоящему изобретению вводят внутривенно.The preferred route of administration is parenteral, including, but not limited to, intradermal, intramuscular, intraperitoneal, intravenous, subcutaneous, intranasal, epidural, intranasal, intracerebral, intraventricular, intrathecal, intravaginal, or transdermal. The preferred route of administration is left to the discretion of the practitioner and will depend in part on the site of the disease (such as the site of cancer). In a more preferred embodiment, the present drug-antibody conjugates of the present invention are administered intravenously.

Жидкие композиции по изобретению, независимо от того, являются ли они растворами, суспензиями или другой подобной формой, также могут включать один или несколько из следующих: стерильные разбавители, такие как вода для инъекций, физиологический раствор, предпочтительно, солевой раствор, раствор Рингера, изотонический хлорид натрия, нелетучие масла, такие как синтетические моно- или диглицериды, полиэтиленгликоли, глицерин или другие растворители; антибактериальные агенты, такие как бензиловый спирт или метилпарабен; и агенты для корректировки тоничности, такие как хлорид натрия или декстроза. Парентеральная композиция может быть заключена в ампулу, одноразовый шприц или флакон для многократных доз из стекла, пластика или другогоThe liquid compositions of the invention, whether in solutions, suspensions or other similar form, may also include one or more of the following: sterile diluents such as water for injection, saline, preferably saline, Ringer's solution, isotonic sodium chloride, fixed oils such as synthetic mono- or diglycerides, polyethylene glycols, glycerin or other solvents; antibacterial agents such as benzyl alcohol or methylparaben; and tonicity adjusting agents such as sodium chloride or dextrose. The parenteral composition may be contained in an ampoule, disposable syringe, or multiple dose vial made of glass, plastic, or other

- 102 046742 материала. Предпочтительным адъювантом является солевой раствор.- 102 046742 materials. The preferred adjuvant is saline solution.

Количество конъюгата лекарственного средства настоящего изобретения, которое эффективно при лечении конкретного расстройства или состояния, будет зависеть от природы расстройства или состояния и может быть определено стандартными клиническими методами. Кроме того, необязательно могут применяться in vitro или in vivo анализы, чтобы помочь определить оптимальные диапазоны доз. Точная доза, используемая в композициях, также будет зависеть от пути введения и серьезности заболевания или расстройства, и должна определяться в соответствии с мнением практикующего врача и обстоятельствами каждого пациента.The amount of a drug conjugate of the present invention that is effective in treating a particular disorder or condition will depend on the nature of the disorder or condition and can be determined by standard clinical techniques. In addition, in vitro or in vivo assays may optionally be used to help determine optimal dosage ranges. The exact dosage used in the compositions will also depend on the route of administration and the severity of the disease or disorder, and should be determined in accordance with the judgment of the practitioner and the circumstances of each patient.

Композиции содержат эффективное количество конъюгата лекарственного средства настоящего изобретения, так чтобы получить подходящую дозировку. Правильная дозировка соединения будет варьироваться в зависимости от конкретного состава, способа применения и конкретного участка применения, хозяина и болезни, которую лечат, например, рака и, если это так, то типа опухоли. Следует принимать во внимание другие факторы, такие как возраст, масса тела, пол, диета, время введения, скорость выведения, состояние хозяина, комбинации лекарственных средств, чувствительность реакции и тяжесть заболевания. Введение может проводиться непрерывно или периодически в пределах максимально переносимой дозы.The compositions contain an effective amount of the drug conjugate of the present invention so as to obtain a suitable dosage. The correct dosage of the compound will vary depending on the specific formulation, the route of application and the specific site of application, the host and the disease being treated, such as cancer and, if so, the type of tumor. Other factors such as age, body weight, sex, diet, time of administration, rate of elimination, host condition, drug combinations, sensitivity of reaction and severity of disease should be taken into account. Administration can be carried out continuously or intermittently within the maximum tolerated dose.

Конъюгат лекарственного средства по настоящему изобретению или композиции можно вводить любым удобным путем, например, путем инфузии или болюсной инъекции, путем абсорбции через эпителиальные или кожно-слизистые оболочки.The drug conjugate of the present invention or composition can be administered by any convenient route, for example, by infusion or bolus injection, by absorption through epithelial or mucocutaneous membranes.

В конкретных вариантах осуществления, может быть желательно вводить одно или несколько конъюгатов лекарственного средства настоящего изобретения или композиций локально в область, нуждающуюся в лечении. В одном варианте осуществления, введение может осуществляться путем прямой инъекции в место (или прежнее место) рака, опухоль или неопластическую или предопухолевую ткань. В другом варианте осуществления, введение может осуществляться прямой инъекцией в место (или прежнее место) проявления аутоиммунного заболевания.In particular embodiments, it may be desirable to administer one or more drug conjugates or compositions of the present invention locally to the area in need of treatment. In one embodiment, administration may be by direct injection into the site (or former site) of cancer, tumor, or neoplastic or preneoplastic tissue. In another embodiment, administration may be by direct injection into the site (or former site) of the autoimmune disease.

Также может применяться легочное введение, например, с помощью ингалятора или небулайзера и состава с аэрозолизирующим агентом, или путем перфузии во фторуглероде или синтетическом легочном поверхностно-активном веществе. В некоторых вариантах осуществления, конъюгат лекарственное средство-антитело по настоящему изобретению или композиции могут быть составлены в виде суппозиториев с традиционными связующими агентами и носителями, такими как триглицериды.Pulmonary administration may also be used, for example, using an inhaler or nebulizer and an aerosolizing agent formulation, or by perfusion in a fluorocarbon or synthetic pulmonary surfactant. In some embodiments, the drug-antibody conjugate or compositions of the present invention may be formulated as suppositories with conventional binding agents and carriers, such as triglycerides.

Настоящие композиции могут иметь форму растворов, суспензий, эмульсии, таблеток, пилюль, пеллетов, капсул, капсул, содержащих жидкости, порошков, составов с замедленным высвобождением, суппозиториев, эмульсий, аэрозолей, спреев, суспензий или любой другой формы, подходящей для использования. Другие примеры подходящих фармацевтических носителей описаны в Remington's Pharmaceutical Sciences by E. W. Martin.The present compositions may be in the form of solutions, suspensions, emulsions, tablets, pills, pellets, capsules, liquid capsules, powders, sustained release formulations, suppositories, emulsions, aerosols, sprays, suspensions, or any other form suitable for use. Other examples of suitable pharmaceutical carriers are described in Remington's Pharmaceutical Sciences by E. W. Martin.

Фармацевтические композиции могут быть приготовлены с использованием методологии, хорошо известной в области фармацевтики. Например, композиция, предназначенная для введения путем инъекции, может быть приготовлена путем объединения конъюгата лекарственного средства по настоящему изобретению с водой с образованием раствора. Поверхностно-активное вещество может быть добавлено для облегчения составления гомогенного раствора или суспензии.Pharmaceutical compositions can be prepared using methodology well known in the pharmaceutical field. For example, a composition intended for administration by injection can be prepared by combining a drug conjugate of the present invention with water to form a solution. A surfactant may be added to facilitate formulation of a homogeneous solution or suspension.

Мы обнаружили, что конъюгаты лекарственного средства и композиции настоящего изобретения особенно эффективны при лечении рака.We have found that the drug-composition conjugates of the present invention are particularly effective in the treatment of cancer.

Таким образом, как описано ранее, настоящее изобретение представляет способ лечения пациента, нуждающегося в этом, особенно человека, пораженного раком, который включает введение больному индивидууму терапевтически эффективного количества конъюгата лекарственного средства или композиции по настоящему изобретению. Настоящее изобретение представляет конъюгат лекарственного средства по настоящему изобретению для применения в лечении рака и, более предпочтительно, рака, выбранного из рака легких, колоректального рака, рака груди, карциномы поджелудочной железы, рака почек, лейкоза, множественной миеломы, лимфомы, рака ЖКТ и яичников. Наиболее предпочтительно, раком является рак груди.Thus, as previously described, the present invention provides a method of treating a patient in need thereof, especially a person affected by cancer, which includes administering to the patient a therapeutically effective amount of a drug conjugate or composition of the present invention. The present invention provides a drug conjugate of the present invention for use in the treatment of cancer and, more preferably, a cancer selected from lung cancer, colorectal cancer, breast cancer, pancreatic carcinoma, renal cancer, leukemia, multiple myeloma, lymphoma, gastrointestinal and ovarian cancer . Most preferably, the cancer is breast cancer.

Конъюгаты лекарственного средства и композиции по настоящему изобретению полезны для ингибирования размножения опухолевой клетки или раковой клетки или для лечения рака у животного. Конъюгат лекарственного средства и композиции настоящего изобретения могут применяться соответственно во множестве условий для лечения рака животных. Конъюгаты по изобретению, содержащие группу лекарственное средство-линкер, содержащую, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, могут применяться для доставки лекарственного средства или единицы лекарственного средства к опухолевой клетке или раковой клетке. Не будучи связанными теорией, в одном варианте осуществления группа, содержащая, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, конъюгата лекарственного средства по настоящему изобретению, связывается или ассоциирует с раковой клеткой или антигеном, ассоциированным с опухолевой клеткой, и конъюгат лекарственного средства по настоящему изобретению может быть поглощен внутрь опухолевой клетки или раковой клетки через рецептор-опосредованный эндоцитоз. Антиген может быть присоединен к опухолевой клетке илиThe drug-composition conjugates of the present invention are useful for inhibiting the proliferation of a tumor cell or cancer cell or for treating cancer in an animal. The drug conjugate and compositions of the present invention can be used, respectively, in a variety of conditions for the treatment of animal cancer. Conjugates of the invention containing a drug-linker group containing at least one antigen binding site can be used to deliver a drug or drug unit to a tumor cell or cancer cell. Without being bound by theory, in one embodiment, a moiety comprising at least one antigen binding site of a drug conjugate of the present invention binds or associates with a cancer cell or an antigen associated with a tumor cell, and the drug conjugate of the present invention may be taken up into the tumor cell or cancer cell via receptor-mediated endocytosis. The antigen may be attached to the tumor cell or

- 103 046742 раковой клетке, или может быть белком внеклеточного матрикса, связанным с опухолевой клеткой или раковой клеткой. Попав внутрь клетки, одна или несколько специфических последовательностей в линкере гидролитически расщепляются одной или несколькими ассоциированными с опухолевой клеткой или раковой клеткой протеазами или гидролазами, что приводит к высвобождению лекарственного средства или соединения лекарственное средство-линкер. Высвободившееся лекарственное средство или соединение лекарственное средство-линкер затем свободно мигрирует в клетке и индуцирует цитотоксическую активность. В альтернативном варианте осуществления, лекарственное средство или единица лекарственного средства отщепляется от конъюгата лекарственного средства настоящего изобретения вне опухолевой клетки или раковой клетки, и лекарственное средство или соединение лекарственное средство-линкер впоследствии проникает в клетку.- 103 046742 cancer cell, or may be an extracellular matrix protein associated with a tumor cell or cancer cell. Once inside the cell, one or more specific sequences in the linker are hydrolytically cleaved by one or more tumor cell or cancer cell associated proteases or hydrolases, resulting in the release of the drug or drug-linker compound. The released drug or drug-linker compound then migrates freely within the cell and induces cytotoxic activity. In an alternative embodiment, the drug or drug unit is cleaved from the drug conjugate of the present invention outside the tumor cell or cancer cell, and the drug or drug-linker compound subsequently enters the cell.

В одном варианте осуществления, группа, содержащая, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, связывается с опухолевой клеткой или раковой клеткой. В другом варианте осуществления, группа, содержащая, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, связывается с антигеном опухолевой клетки или раковой клетки, который находится на поверхности опухолевой клетки или раковой клетки. В еще одном варианте осуществления, группа, содержащая, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, связывается с антигеном опухолевой клетки или раковой клетки, который является белком внеклеточного матрикса, ассоциированным с опухолевой клеткой или раковой клеткой.In one embodiment, the group containing at least one antigen binding site binds to a tumor cell or cancer cell. In another embodiment, the group containing at least one antigen-binding site binds to a tumor cell or cancer cell antigen that is located on the surface of the tumor cell or cancer cell. In yet another embodiment, the moiety comprising at least one antigen binding site binds to a tumor cell or cancer cell antigen that is an extracellular matrix protein associated with a tumor cell or cancer cell.

Специфичность группы, содержащей, по меньшей мере, один антигенсвязывающий сайт, к определенной опухолевой клетке или раковой клетке может быть важной для определения тех опухолей или раков, которые лечатся наиболее эффективно. Например, конъюгаты лекарственного средства по настоящему изобретению, имеющие единицу трастузумаба, могут быть полезны для лечения антигенположительных карцином, включая лейкозы, рак легких, рак толстой кишки, лимфомы (например, болезнь Ходжкина, неходжкинскую лимфому), солидные опухоли, такие как саркома и карциномы, множественную миелому, рак почек и меланому. Раком может быть рак легких, колоректальный рак, рак груди, карцинома поджелудочной железы, рак почек, лейкоз, множественная миелома, лимфома или рак яичников. Например, конъюгаты лекарственного средства по настоящему изобретению, имеющие единицу ритуксимаба, могут быть полезны для лечения опухолей, экспрессирующих CD-20, таких как гематологические раки, включая лейкозы и лимфомы. Например, конъюгаты лекарственного средства по настоящему изобретению, имеющие единицу анти-CD4-антитела, могут быть полезны для лечения опухолей, экспрессирующих CD-4, таких как гематологические раки, включая лимфомы. Например, конъюгаты лекарственного средства по настоящему изобретению, имеющие единицу анти-CD5 антитела, могут быть полезны для лечения опухолей, экспрессирующих CD-5, таких как гематологические раки, включая лейкозы и лимфомы. Например, конъюгаты лекарственного средства по настоящему изобретению, имеющие единицу анти-CD13 антитела, могут быть полезны для лечения опухолей, экспрессирующих CD-13, таких как гематологические раки, включая лейкозы и лимфомы.The specificity of a group containing at least one antigen binding site for a particular tumor cell or cancer cell may be important in determining which tumors or cancers are most effectively treated. For example, drug conjugates of the present invention having a trastuzumab unit may be useful for the treatment of antigen-positive carcinomas, including leukemias, lung cancers, colon cancers, lymphomas (eg, Hodgkin's disease, non-Hodgkin's lymphoma), solid tumors such as sarcoma and carcinomas , multiple myeloma, kidney cancer and melanoma. The cancer may be lung cancer, colorectal cancer, breast cancer, pancreatic carcinoma, kidney cancer, leukemia, multiple myeloma, lymphoma, or ovarian cancer. For example, drug conjugates of the present invention having a rituximab unit may be useful for the treatment of tumors expressing CD-20, such as hematological cancers, including leukemias and lymphomas. For example, drug conjugates of the present invention having an anti-CD4 antibody unit may be useful for treating tumors expressing CD-4, such as hematologic cancers, including lymphomas. For example, drug conjugates of the present invention having an anti-CD5 antibody unit may be useful for treating tumors expressing CD-5, such as hematologic cancers, including leukemias and lymphomas. For example, drug conjugates of the present invention having an anti-CD13 antibody unit may be useful for treating tumors expressing CD-13, such as hematologic cancers, including leukemias and lymphomas.

Другие конкретные типы рака, которые можно лечить конъюгатами лекарственного средства по настоящему изобретению, включают, но не ограничены ими: раки системы кроветворения, включая все формы лейкоза; лимфомы, такие как болезнь Ходжкина, неходжкинская лимфома и множественная миелома.Other specific types of cancer that can be treated with the drug conjugates of the present invention include, but are not limited to: cancers of the hematopoietic system, including all forms of leukemia; lymphomas such as Hodgkin's disease, non-Hodgkin's lymphoma and multiple myeloma.

В частности, конъюгаты лекарственного средства и композиции настоящего изобретения проявляют превосходную активность при лечении рака груди.In particular, the drug-composition conjugates of the present invention exhibit excellent activity in the treatment of breast cancer.

Конъюгаты лекарственного средства и композиции настоящего изобретения обеспечивают специфическое к конъюгированию таргетирование опухоли или рака, тем самым снижая общую токсичность этих конъюгатов. Линкерные единицы стабилизируют конъюгат лекарственное средствоантитело в крови, но расщепляются опухолеспецифическими протеазами и гидролазами внутри клетки, высвобождая Лекарственное средство.The drug-composition conjugates of the present invention provide conjugate-specific targeting of a tumor or cancer, thereby reducing the overall toxicity of these conjugates. The linker units stabilize the drug-antibody conjugate in the blood but are cleaved by tumor-specific proteases and hydrolases within the cell, releasing the drug.

Конъюгаты лекарственного средства и композиции настоящего изобретения могут вводиться животному, которое также получает хирургию в качестве лечения рака. В одном варианте осуществления настоящего изобретения, дополнительным способом лечения является радиационная терапия.The drug-composition conjugates of the present invention can be administered to an animal that is also receiving surgery as a treatment for cancer. In one embodiment of the present invention, the additional treatment is radiation therapy.

В конкретном варианте осуществления настоящего изобретения, конъюгат лекарственного средства или композиция настоящего изобретения может вводиться с радиотерапией. Радиотерапия может вводиться одновременно, до или после лечения конъюгатом лекарственного средства или композицией настоящего изобретения. В варианте осуществления, конъюгат лекарственного средства или композицию настоящего изобретения вводят одновременно с радиационной терапией. В другом конкретном варианте осуществления, радиационную терапию вводят до или после введения конъюгата лекарственного средства или композиции настоящего изобретения, предпочтительно, по меньшей мере, через час, пять часов, 12 часов, день, неделю, месяц, более предпочтительно, несколько месяцев (например, вплоть до трех месяцев), до или после введения конъюгата лекарственное средство-антитело или композиции настоящего изобретения.In a specific embodiment of the present invention, a drug conjugate or composition of the present invention may be administered with radiotherapy. Radiotherapy may be administered simultaneously, before or after treatment with a drug conjugate or composition of the present invention. In an embodiment, the drug conjugate or composition of the present invention is administered simultaneously with radiation therapy. In another specific embodiment, radiation therapy is administered before or after administration of a drug conjugate or composition of the present invention, preferably at least an hour, five hours, 12 hours, a day, a week, a month, more preferably several months (e.g. up to three months) before or after administration of the drug-antibody conjugate or composition of the present invention.

Что касается радиационной терапии, можно использовать любой протокол радиационной терапии в зависимости от типа рака, подлежащего лечению. Пример, но не в качестве ограничения, можноRegarding radiation therapy, any radiation therapy protocol can be used depending on the type of cancer being treated. As an example, but not as a limitation, you can

- 104 046742 применять рентгеновское излучение; в частности, высокоэнергетическое мегавольтное излучение (излучение с энергией более 1 МэВ) может использоваться для лечения глубоких опухолей, а электронно-лучевое и ортовольтное рентгеновское излучение может использоваться при раке кожи. Также можно вводить радиоизотопы, испускающие гамма-лучи, такие как радиоактивные изотопы радия, кобальта и других элементов.- 104 046742 use x-rays; in particular, high-energy megavoltage radiation (radiation with energy greater than 1 MeV) can be used to treat deep tumors, and electron beam and orthovoltage x-rays can be used for skin cancer. Radioisotopes that emit gamma rays, such as radioactive isotopes of radium, cobalt and other elements, can also be administered.

В настоящем изобретении представлен набор, содержащий терапевтически эффективное количество конъюгата лекарственного средства по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель. В варианте осуществления, представлен набор, включающий композицию по настоящему изобретению и, необязательно, инструкции по применению при лечении рака и, более конкретно, рака, выбранного из рака легких, колоректального рака, рака груди, карциномы поджелудочной железы, рака почек, лейкоза, множественной миеломы, лимфомы, рака ЖКТ и яичников.The present invention provides a kit containing a therapeutically effective amount of a drug conjugate of the present invention and a pharmaceutically acceptable carrier. In an embodiment, a kit is provided comprising a composition of the present invention and, optionally, instructions for use in the treatment of cancer and, more particularly, cancer selected from lung cancer, colorectal cancer, breast cancer, pancreatic carcinoma, kidney cancer, leukemia, multiple myeloma, lymphoma, gastrointestinal and ovarian cancer.

В одном варианте осуществления, набор согласно этому аспекту предназначен для использования при лечении рака и более предпочтительно, рака, выбранного из рака легких, колоректального рака, рака груди, карциномы поджелудочной железы, рака почек, множественной миеломы, лимфомы, рака ЖКТ и яичников. Наиболее предпочтительно, набор предназначен для использования при лечении рака груди.In one embodiment, the kit according to this aspect is for use in the treatment of cancer and more preferably, a cancer selected from lung cancer, colorectal cancer, breast cancer, pancreatic carcinoma, kidney cancer, multiple myeloma, lymphoma, gastrointestinal and ovarian cancer. Most preferably, the kit is for use in the treatment of breast cancer.

Краткое описание чертежейBrief description of drawings

Изобретение иллюстрировано диаграммами, например, в прилагаемых чертежах, в которых:The invention is illustrated by diagrams, for example in the accompanying drawings, in which:

на фиг. 1 представлена схематическая иллюстрация одного способа по настоящему изобретению, где конъюгирование антитела осуществляется через свободные тиольные группы;in fig. 1 is a schematic illustration of one method of the present invention where antibody conjugation is accomplished via free thiol groups;

на фиг. 2 представлена схематическая иллюстрация одного способа по настоящему изобретению, где конъюгирование антитела осуществляется через свободные аминогруппы;in fig. 2 is a schematic illustration of one method of the present invention where antibody conjugation is accomplished via free amino groups;

фиг. 3 - дозозависимые кривые, соответствующие одному типовому эксперименту, проведенному для оценки антипролиферативного потенциала ADC1 в HER2-положительных (черные символы) или HER2-отрицательных (полые символы) клеточных линиях. Точки соответствуют средним для трех значений с усами, обозначающими СО, линии на чертеже соответствуют наилучшей подгонке путем нелинейной регрессии экспериментальных точек к четырехпараметрической логистической кривой, используемой для получения значений IC₅₀, представленных в табл. 13;fig. 3 - Dose-response curves corresponding to one representative experiment performed to evaluate the antiproliferative potential of ADC1 in HER2-positive (black symbols) or HER2-negative (open symbols) cell lines. The dots represent the means of the three values, with whiskers representing SD; the lines in the figure represent the best fit by nonlinear regression of the experimental points to the four-parameter logistic curve used to obtain the IC ₅₀ values presented in Table 1. 13;

фиг. 4 - гистограммы, показывающие действие на выживание клеток либо трастузумаба в дозе 20 мкг/мл, либо ADC1 в дозе 16 или 2,5 мкг/мл в нескольких клеточных линиях, либо HER2-положительных (SK-BR-3 и HCC-1954), либо HER2-отрицательных (MDA-MB-231 и MCF-7). Столбики соответствуют среднему для трех определений с усами, обозначающими СО. Статистическую значимость измеряют с применением непарного двустороннего t-критерия, значения p суммируют следующим образом: ***, p<0,001; **, p<0,01; *, p< 0,05;fig. 4 - histograms showing the effect on cell survival of either trastuzumab at a dose of 20 μg/ml, or ADC1 at a dose of 16 or 2.5 μg/ml in several cell lines, or HER2-positive (SK-BR-3 and HCC-1954) , or HER2-negative (MDA-MB-231 and MCF-7). Bars represent the average of three determinations with whiskers indicating SD. Statistical significance was measured using an unpaired two-tailed t test, and p values were summarized as follows: ***, p < 0.001; **, p<0.01; *, p<0.05;

фиг. 5 - Дозозависимые кривые, показывающие антипролиферативный потенциал ADC2 в HER2положительных (черные символы) или HER2-отрицательных (полые символы) клеточных линиях. Точки соответствуют средним для трех значений с усами, обозначающими СО, линии на чертеже соответствуют наилучшей подгонке путем нелинейной регрессии экспериментальных точек к четырехпараметрической логистической кривой, используемой для получения значений IC₅₀, представленных в табл. 15;fig. 5 - Dose-response curves showing the antiproliferative potential of ADC2 in HER2-positive (black symbols) or HER2-negative (hollow symbols) cell lines. The dots represent the means of the three values, with whiskers representing SD; the lines in the figure represent the best fit by nonlinear regression of the experimental points to the four-parameter logistic curve used to obtain the IC ₅₀ values presented in Table 1. 15;

фиг. 6 - гистограммы, показывающие действие на выживание клеток либо Трастузумаба в дозе 20 мкг/мл, либо ADC2 в дозе 16 или 2,5 мкг/мл в нескольких клеточных линиях, либо HER2-положительных (SK-BR-3 и HCC-1954), либо HER2-отрицательных (MDA-MB-231 и MCF-7). Столбики соответствуют среднему для трех определений с усами, обозначающими СО. Статистическую значимость измеряют с применением непарного двустороннего t-критерия, значения p суммируют следующим образом: ***, p<0,001; **, p<0,01; *, p< 0,05;fig. 6 - histograms showing the effect on cell survival of either Trastuzumab at a dose of 20 μg/ml, or ADC2 at a dose of 16 or 2.5 μg/ml in several cell lines, or HER2-positive (SK-BR-3 and HCC-1954) , or HER2-negative (MDA-MB-231 and MCF-7). Bars represent the average of three determinations with whiskers indicating SD. Statistical significance was measured using an unpaired two-tailed t test, and p values were summarized as follows: ***, p < 0.001; **, p<0.01; *, p<0.05;

фиг. 7 - дозозависимые кривые, показывающие антипролиферативный потенциал ADC3 в HER2положительных (черные символы) или HER2-отрицательных (полые символы) клеточных линиях. Точки соответствуют средним для трех значений с усами, обозначающими СО, линии на чертеже соответствуют наилучшей подгонке путем нелинейной регрессии экспериментальных точек к четырехпараметрической логистической кривой, используемой для получения значений IC₅₀, представленных в табл. 17;fig. 7 - Dose-response curves showing the antiproliferative potential of ADC3 in HER2-positive (black symbols) or HER2-negative (hollow symbols) cell lines. The dots represent the means of the three values, with whiskers representing SD; the lines in the figure represent the best fit by nonlinear regression of the experimental points to the four-parameter logistic curve used to obtain the IC ₅₀ values presented in Table 1. 17;

фиг. 8 - гистограммы, показывающие действие на выживание клеток либо трастузумаба в дозе 20 мкг/мл, либо ADC3 в дозе 20 или 3 мкг/мл в нескольких клеточных линиях, либо HER2-положительных (SK-BR-3 и HCC-1954), либо HER2-отрицательных (MDA-MB-231 и MCF-7). Столбики соответствуют среднему для трех определений с усами, обозначающими СО. Статистическую значимость измеряют с применением непарного двустороннего t-критерия, значения p суммируют следующим образом: ***, p<0,001; **, p<0,01; *, p< 0,05;fig. 8 - histograms showing the effect on cell survival of either trastuzumab at a dose of 20 μg/ml, or ADC3 at a dose of 20 or 3 μg/ml in several cell lines, either HER2-positive (SK-BR-3 and HCC-1954), or HER2 negative (MDA-MB-231 and MCF-7). Bars represent the average of three determinations with whiskers indicating SD. Statistical significance was measured using an unpaired two-tailed t test, and p values were summarized as follows: ***, p < 0.001; **, p<0.01; *, p<0.05;

фиг. 9 - дозозависимые кривые, показывающие антипролиферативный потенциал ADC4 в HER2положительных (черные символы) или HER2-отрицательных (полые символы) клеточных линиях. Точки соответствуют средним для трех значений с усами, обозначающими СО, линии на чертеже соответствуют наилучшей подгонке путем нелинейной регрессии экспериментальных точек к четырехпараметрической логистической кривой, используемой для получения значений IC₅₀,fig. 9 - Dose-response curves showing the antiproliferative potential of ADC4 in HER2-positive (black symbols) or HER2-negative (hollow symbols) cell lines. The dots correspond to the means of three values with whiskers indicating SD, the lines in the drawing correspond to the best fit by nonlinear regression of the experimental points to the four-parameter logistic curve used to obtain the IC ₅₀ values.

- 105 046742 представленных в табл. 18;- 105 046742 presented in table. 18;

фиг. 10 - гистограммы, показывающие действие на выживание клеток либо трастузумаба в дозе 3 мкг/мл, либо ADC4 в дозе 3 или 0,2 мкг/мл в нескольких клеточных линиях, либо HER2-положительных (SK-BR-3 и HCC-1954), либо HER2-отрицательных (MDA-MB-231 и MCF-7). Столбики соответствуют среднему для трех определений с усами, обозначающими СО. Статистическую значимость измеряют с применением непарного двустороннего t-критерия, значения p суммируют следующим образом: ***, p<0,001; **, p<0,01; *, p< 0,05;fig. 10 - histograms showing the effect on cell survival of either trastuzumab at a dose of 3 μg/ml, or ADC4 at a dose of 3 or 0.2 μg/ml in several cell lines, or HER2-positive (SK-BR-3 and HCC-1954) , or HER2-negative (MDA-MB-231 and MCF-7). Bars represent the average of three determinations with whiskers indicating SD. Statistical significance was measured using an unpaired two-tailed t test, and p values were summarized as follows: ***, p < 0.001; **, p<0.01; *, p<0.05;

фиг. 11 - дозозависимые кривые, показывающие антипролиферативный потенциал ADC6 в HER2положительных (черные символы) или HER2-отрицательных (полые символы) клеточных линиях. Точки соответствуют средним для трех значений с усами, обозначающими СО, линии на чертеже соответствуют наилучшей подгонке путем нелинейной регрессии экспериментальных точек к четырехпараметрической логистической кривой, используемой для получения значений IC₅₀, представленных в табл. 21;fig. 11 - Dose-response curves showing the antiproliferative potential of ADC6 in HER2-positive (black symbols) or HER2-negative (hollow symbols) cell lines. The dots represent the means of the three values, with whiskers representing SD; the lines in the figure represent the best fit by nonlinear regression of the experimental points to the four-parameter logistic curve used to obtain the IC ₅₀ values presented in Table 1. 21;

фиг. 12 - оценка объема опухоли опухолей BT-474 у мышей, леченных плацебо, 11-R (в дозе 5 мг/кг), ADC 1 (2.2 TCEP) (в дозе 1,6 и 6,5 мг/кг) и ADC 1 (в дозе 2,24 мг/кг);fig. 12 - assessment of tumor volume of BT-474 tumors in mice treated with placebo, 11-R (at a dose of 5 mg/kg), ADC 1 (2.2 TCEP) (at a dose of 1.6 and 6.5 mg/kg) and ADC 1 (at a dose of 2.24 mg/kg);

фиг. 13 - оценка объема опухоли опухолей JIMT-1 у мышей, леченных плацебо, 11-R (в дозе 5,0 мг/кг) и ADC 1 (в дозе 5, 10 и 30 мг/кг);fig. 13 - assessment of tumor volume of JIMT-1 tumors in mice treated with placebo, 11-R (at a dose of 5.0 mg/kg) and ADC 1 (at a dose of 5, 10 and 30 mg/kg);

фиг. 14 - оценка объема опухоли опухолей SKOV3 у мышей, леченных плацебо, 11-R (в дозе 5,0 мг/кг) и ADC 1 (в дозе 5, 10 и 30 мг/кг);fig. 14 - assessment of tumor volume of SKOV3 tumors in mice treated with placebo, 11-R (at a dose of 5.0 mg/kg) and ADC 1 (at a dose of 5, 10 and 30 mg/kg);

фиг. 15 - оценка объема опухоли опухолей N87 у мышей, леченных плацебо, 11-R (в дозе 5,0 мг/кг) и ADC 1 (2.2 TCEP) (в дозе 5, 10 и 30 мг/кг);fig. 15 - assessment of tumor volume of N87 tumors in mice treated with placebo, 11-R (at a dose of 5.0 mg/kg) and ADC 1 (2.2 TCEP) (at a dose of 5, 10 and 30 mg/kg);

фиг. 16 - оценка объема опухоли опухолей Gastric-008 (PDX) у мышей, леченных плацебо, 11-R (в дозе 5,0 мг/кг) и ADC-1 (в дозе 5, 10 и 30 мг/кг).fig. 16 - Tumor volume assessment of Gastric-008 tumors (PDX) in mice treated with placebo, 11-R (at a dose of 5.0 mg/kg) and ADC-1 (at a dose of 5, 10 and 30 mg/kg).

ПримерыExamples

Настоящее изобретение даже иллюстрировано с помощью следующих не ограничивающих примеров. В примерах, применяют следующие сокращения:The present invention is even illustrated by the following non-limiting examples. In the examples, the following abbreviations are used:

КДИ - 1,1'-карбонилдиимидазол;KDI - 1,1'-carbonyldiimidazole;

ДИПЭА - N.N-диизопропилэтиламин;DIPEA - N.N-diisopropylethylamine;

Hex - гексан;Hex - hexane;

EtOAc - этилацетат;EtOAc - ethyl acetate;

ДХМ - дихлорметан;DCM - dichloromethane;

NMP - №метил-2-пирролидон;NMP - Namethyl-2-pyrrolidone;

ДМФ - диметилформамид;DMF - dimethylformamide;

ЭДК - гидрохлорид №(3-диметиламинопропил)-№-этилкарбодиимид;EDC - N(3-dimethylaminopropyl)-N-ethylcarbodiimide hydrochloride;

ЭДТК - этилендиаминтетрауксусная кислота;EDTA - ethylenediaminetetraacetic acid;

MeOH - метанол;MeOH - methanol;

ДТТ - дитиотреитол;DTT - dithiothreitol;

Py - пиридин;Py - pyridine;

ТГФ - тетрагидрофуран;THF - tetrahydrofuran;

ТКЭФ - гидрохлорид трис[2-карбоксиэтил]фосфина;TKEP - tris[2-carboxyethyl]phosphine hydrochloride;

МК - 6-малеимидокапроил;MK - 6-maleimidocaproyl;

Fmoc - 9-флуоренилметоксикарбонил;Fmoc - 9-fluorenylmethoxycarbonyl;

Cit - цитруллин;Cit - citrulline;

Val - валин;Val - valine;

ДМСО - диметилсульфоксид;DMSO - dimethyl sulfoxide;

Trt - трифенилметил;Trt - triphenylmethyl;

HOBt - 1-гидроксибензотриазол;HOBt - 1-hydroxybenzotriazole;

ДИПКДИ - Ν,Ν'-диизопропилкарбодиимид;DIPCDI - Ν,Ν'-diisopropylcarbodiimide;

ТФК - трифторуксусная кислота;TFA - trifluoroacetic acid;

PABOH - 4-аминобензиловый спирт;PABOH - 4-aminobenzyl alcohol;

бис-PNP - бис(4-нитрофенил)карбонат;bis-PNP - bis(4-nitrophenyl) carbonate;

NAC - N-ацетилцистеин;NAC - N-acetylcysteine;

ЭХР - эксклюзионная хроматография по размеру;ECS - size exclusion chromatography;

ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография;HPLC - high performance liquid chromatography;

ADC - конъюгат антитело-лекарственное средство;ADC - antibody-drug conjugate;

ATCC - American Type Culture Collection;ATCC - American Type Culture Collection;

DMEM - среда Игла, модифицированная по Дульбекко;DMEM - Dulbecco's modified Eagle's medium;

RPMI - среда Rosmell Park Memorial Institute Medium;RPMI - Rosmell Park Memorial Institute Medium;

ITS - инсулин-трансферрин-селенит натрия добавка к среде;ITS - insulin-transferrin-sodium selenite additive to the medium;

ФТС - фетальная телячья сыворотка;FTS - fetal calf serum;

SRB - сульфородамин B;SRB - sulforhodamine B;

ФРФБ - физиологический раствор с фосфатным буфером;FBS - physiological solution with phosphate buffer;

- 106 046742- 106 046742

ДЗ - дозозависимый;DZ - dose dependent;

УФ - ультрафиолет;UV - ultraviolet;

СМЦК - сукцинимидил-4-(№малеимидометил)циклогексан-1-карбоксилат;SMCC - succinimidyl-4-(Nmaleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate;

LAR - отношение линкера к антителу.LAR - linker to antibody ratio.

Синтез соединений.Synthesis of compounds.

Соединение 1 получают как описано в примере 20 из WO 01/87895.Compound 1 is prepared as described in example 20 of WO 01/87895.

Пример 0-1.Example 0-1.

А)A)

3-S R = Н + За-S R = Ас3-S R = N + For-S R = Ac

К раствору 1 (0,5 г, 0,80 ммоль) в уксусной кислоте (20 мл, 0,04 M) добавляют L-триптофанол (2-S) (533 мг, 3,0 ммоль, Sigma-Aldrich). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 16 ч и затем уксусную кислоту выпаривают. Водный насыщенный раствор NaHCO₃ добавляют, и смесь экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (Гексан:ЕЮЛе, 1:1) дает соединения 3-S (616 мг, 97%) и 3a-S(12 мг, 2%).To a solution of 1 (0.5 g, 0.80 mmol) in acetic acid (20 mL, 0.04 M) add L-tryptophanol (2-S) (533 mg, 3.0 mmol, Sigma-Aldrich). The reaction mixture is stirred at 23°C for 16 hours and then the acetic acid is evaporated. An aqueous saturated solution of NaHCO ₃ is added and the mixture is extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. Flash chromatography (Hexane:EULLe, 1:1) gives compounds 3-S (616 mg, 97%) and 3a-S (12 mg, 2%).

3-S3-S

Rf=0,50 (гексан:ЕЮЛе, 1:1).Rf=0.50 (hexane:EGLe, 1:1).

1H ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ 7,71 (с, 1H), 7,36 (дд, J=7,9, 1,0 Гц, 1H), 7,27 (дд, J=8,2, 0,9 Гц, 1H), 7,13 (ддд, J=8,3, 7,0, 1,2 Гц, 1H), 7,03 (ддд, J=8,0, 7,0, 1,0 Гц, 1H), 6,62 (с, 1H), 6,26 (д, J=1,4 Гц, 1H), 6,04 (д, J=1,3 Гц, 1H), 5,75 (с, 1H), 5,14 (дд, J=11,7, 1,2 Гц, 1H), 4,60 (с, 1H), 4,41 (с, 1H), 4,36-4,24 (м, 2H), 4,21 (д, J=2,7 Гц, 1H), 3,82 (с, 3H), 3,52 (с, 1H), 3,50-3,47 (м, 1H), 3,45 (дкв, J=8,4, 2,2 Гц, 1H), 3,35 (т, J=10,1 Гц, 1H), 3,01-2,78 (м, 5H), 2,62 (дд, J=15,3, 4,7 Гц, 1H), 2,41 (с, 1H), 2,38 (с, 3H), 2,37-2,31 (м, 1H), 2,28 (с, 3H), 2,17 (с, 3H), 2,06 (с, 3H).1H NMR (300 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.71 (s, 1H), 7.36 (dd, J=7.9, 1.0 Hz, 1H), 7.27 (dd, J=8, 2, 0.9 Hz, 1H), 7.13 (ddd, J=8.3, 7.0, 1.2 Hz, 1H), 7.03 (ddd, J=8.0, 7.0, 1.0 Hz, 1H), 6.62 (s, 1H), 6.26 (d, J=1.4 Hz, 1H), 6.04 (d, J=1.3 Hz, 1H), 5 .75 (s, 1H), 5.14 (dd, J=11.7, 1.2 Hz, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.41 (s, 1H), 4.36- 4.24 (m, 2H), 4.21 (d, J=2.7 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.52 (s, 1H), 3.50-3.47 (m, 1H), 3.45 (dkv, J=8.4, 2.2 Hz, 1H), 3.35 (t, J=10.1 Hz, 1H), 3.01-2.78 ( m, 5H), 2.62 (dd, J=15.3, 4.7 Hz, 1H), 2.41 (s, 1H), 2.38 (s, 3H), 2.37-2.31 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.06 (s, 3H).

ИЭР-МС m/z: 794,2 (M+H)+.ESI-MS m/z: 794.2 (M+H)+.

3a-S.3a-S.

Rf=0,70 (гексан:ЕЮЛе, 1:1).Rf=0.70 (hexane:EGLe, 1:1).

1H ЯМР (500 МГц, CDCI3): δ 7,83 (с, 1H), 7,38 (дт, J=7,9, 0,9 Гц, 1H), 7,25 (дт, J=8,3, 0,9 Гц, 1H), 7,11 (ддд, J=8,2, 7,1, 1,2 Гц, 1H), 7,02 (ддд, J=8,0, 7,0, 1,0 Гц, 1H), 6,62 (с, 1H), 6,24 (д, J=1,4 Гц, 1H), 6,03 (д, J=1,3 Гц, 1H), 5,79 (с, 1H), 5,13 (д, J=11,7 Гц, 1H), 4,60 (с, 1H), 4,39 (с, 1H), 4,36-4,22 (м, 3H), 4,17-4,09 (м, 1H), 3,91 (дд, J=10,5, 8,6 Гц, 1H), 3,83 (с, 3H), 3,51-3,41 (м, 2H), 3,04-2,92 (м, 3H), 2,72 (дд, J=15,1, 4,0 Гц, 1H), 2,54-2,41 (м, 2H), 2,38 (с, 3H), 2,35-2,30 (м, 1H), 2,29 (с, 3H), 2,21-2,16 (м, 1H), 2,18 (с, 3H), 2,12 (с, 3H); 2,05 (с, 3H).1H NMR (500 MHz, CDCI3): δ 7.83 (s, 1H), 7.38 (dt, J=7.9, 0.9 Hz, 1H), 7.25 (dt, J=8.3 , 0.9 Hz, 1H), 7.11 (ddd, J=8.2, 7.1, 1.2 Hz, 1H), 7.02 (ddd, J=8.0, 7.0, 1 ,0 Hz, 1H), 6.62 (s, 1H), 6.24 (d, J=1.4 Hz, 1H), 6.03 (d, J=1.3 Hz, 1H), 5, 79 (s, 1H), 5.13 (d, J=11.7 Hz, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.39 (s, 1H), 4.36-4.22 (m , 3H), 4.17-4.09 (m, 1H), 3.91 (dd, J=10.5, 8.6 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.51- 3.41 (m, 2H), 3.04-2.92 (m, 3H), 2.72 (dd, J=15.1, 4.0 Hz, 1H), 2.54-2.41 ( m, 2H), 2.38 (s, 3H), 2.35-2.30 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.21-2.16 (m, 1H), 2 .18 (s, 3H), 2.12 (s, 3H); 2.05 (s, 3H).

¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃): δ 171,2, 170,7, 168,6, 147,5, 145,8, 143,0, 141,1, 140,4, 135,6, 130,1, 129,5, 126,7, 122,2, 121,2, 120,9, 119,4, 118,4, 118,2, 118,2, 113,6, 113,5, 110,9, 110,0, 109,1, 102,1, 91,4, 67,2, 63,4, 61,3, 60,4, 59,7, 59,1, 54,8, 54,6, 47,7, 42,0, 41,6, 31,6, 24,0, 22,6, 21,0, 15,9, 14,2, 9,7. ¹³ C NMR (101 MHz, CDCl ₃ ): δ 171.2, 170.7, 168.6, 147.5, 145.8, 143.0, 141.1, 140.4, 135.6, 130, 1, 129.5, 126.7, 122.2, 121.2, 120.9, 119.4, 118.4, 118.2, 118.2, 113.6, 113.5, 110.9, 110.0, 109.1, 102.1, 91.4, 67.2, 63.4, 61.3, 60.4, 59.7, 59.1, 54.8, 54.6, 47, 7, 42.0, 41.6, 31.6, 24.0, 22.6, 21.0, 15.9, 14.2, 9.7.

ИЭР-МС m/z: 836,2 (M+H)+.ESI-MS m/z: 836.2 (M+H)+.

В)IN)

3-S 4-S3-S 4-S

- 107 046742- 107 046742

К раствору 3-S (616 мг, 0,77 ммоль) в CHAVIM) (1,39:1, 51 мл, 0,015 M) добавляют AgNOa (3,40 г, 23,3 ммоль). Через 3 ч при 23°C, реакционную смесь гасят смесью 1:1 насыщенных водных растворов NaCl и NaHCO3, перемешивают в течение 15 мин, разбавляют CH2CI2, перемешивают в течение 5 мин и экстрагируют CH2CI2. Объединенные органические слои сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (C^C^CHsOH, от 99:1 до 85:15) с получением 4-S (471 мг, 78%).To a solution of 3-S (616 mg, 0.77 mmol) in CHAVIM) (1.39:1, 51 mL, 0.015 M) add AgNOa (3.40 g, 23.3 mmol). After 3 hours at 23°C, the reaction mixture is quenched with a 1:1 mixture of saturated aqueous solutions of NaCl and NaHCO3, stirred for 15 minutes, diluted with CH2CI2, stirred for 5 minutes and extracted with CH2CI2. The combined organic layers are dried over anhydrous Na2SO4, filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (C^C^CHsOH, 99:1 to 85:15) to give 4-S (471 mg, 78%).

Rf=0,50 (CH2C12:CHbOH, 9:1).Rf=0.50 (CH2C12:CHbOH, 9:1).

1H ЯМР (500 МГц, CDCI3): δ 7,71 (с, 1H), 7,36 (дд, J=7,8, 1,1 Гц, 1H), 7,26 (дд, J=7,8, 1,1 Гц, 1H), 7,12 (ддд, J=8,2, 7,0, 1,2 Гц, 1H), 7,03 (ддд, J=8,0, 7,1, 1,0 Гц, 1H), 6,64 (с, 1H), 6,23 (д, J=1,3 Гц, 1H), 6,01 (д, J=1,4 Гц, 1H), 5,75 (с, 1H), 5,25 (д, J=11,4 Гц, 1H), 4,92 (с, 1H), 4,52 (шс, 3H), 4,22 (дд, J=11,4, 2,2 Гц, 1H), 4,19 (с, 1H), 3,83 (с, 3H), 3,54 (шс, 2H), 3,35 (т, J=10,2 Гц, 1H), 3,26 (с, 1H), 3,01-2,93 (м, 3H), 2,88 (шс, 3H), 2,63 (дд, J=15,2, 4,8 Гц, 1H), 2,38 (с, 3H), 2,36-2,31 (м, 2H), 2,28 (с, 3H), 2,05 (с, 3H).1H NMR (500 MHz, CDCI3): δ 7.71 (s, 1H), 7.36 (dd, J=7.8, 1.1 Hz, 1H), 7.26 (dd, J=7.8 , 1.1 Hz, 1H), 7.12 (ddd, J=8.2, 7.0, 1.2 Hz, 1H), 7.03 (ddd, J=8.0, 7.1, 1 ,0 Hz, 1H), 6.64 (s, 1H), 6.23 (d, J=1.3 Hz, 1H), 6.01 (d, J=1.4 Hz, 1H), 5, 75 (s, 1H), 5.25 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.52 (shs, 3H), 4.22 (dd, J=11 ,4, 2.2 Hz, 1H), 4.19 (s, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.54 (shs, 2H), 3.35 (t, J=10.2 Hz , 1H), 3.26 (s, 1H), 3.01-2.93 (m, 3H), 2.88 (shs, 3H), 2.63 (dd, J=15.2, 4.8 Hz, 1H), 2.38 (s, 3H), 2.36-2.31 (m, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.05 (s, 3H).

¹³C ЯМР (126 МГц, CDCI3): δ 171,9, 168,6, 147,5, 145,4, 142,9, 141,2, 140,7, 135,5, 130,4, 126,8, 122,3, 122,0, 121,3, 119,4, 118,4, 115,2, 112,8, 111,0, 110,0, 109,6, 101,8, 81,9, 76,8, 65,2, 62,8, 62,5, 60,4, 58,1, 57,9, 55,9, 55,1, 53,4, 51,6, 41,8, 41,3, 39,6, 24,1, 23,8, 20,5, 15,8, 9,7. ¹³ C NMR (126 MHz, CDCI3): δ 171.9, 168.6, 147.5, 145.4, 142.9, 141.2, 140.7, 135.5, 130.4, 126.8 , 122.3, 122.0, 121.3, 119.4, 118.4, 115.2, 112.8, 111.0, 110.0, 109.6, 101.8, 81.9, 76 ,8, 65.2, 62.8, 62.5, 60.4, 58.1, 57.9, 55.9, 55.1, 53.4, 51.6, 41.8, 41.3 , 39.6, 24.1, 23.8, 20.5, 15.8, 9.7.

ИЭР-МС m/z: 767,3 (M-H2O+H)+.ESI-MS m/z: 767.3 (M-H2O+H)+.

(+)-ВР-ИЭР-ВП-МС m/z 767,2788 [M-H2O+H]⁺ (Рассч. для C41H43N4O9S: 767,2745).(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z 767.2788 [M-H2O+H] ⁺ (Calc. for C41H43N4O9S: 767.2745).

В')IN')

За-S 4a-SFor-S 4a-S

К раствору 3a-S (30 мг, 0,035 ммоль) в CH3CN:H2O (1,39:1, 2,4 мл, 0,015 M) добавляют AgNO3 (180 мг, 1,07 ммоль). Через 3 ч при 23°C, реакционную смесь гасят смесью 1:1 насыщенных водных растворов NaCl и NaHCO₃, перемешивают в течение 15 мин, разбавляют CH₂Cl₂, перемешивают в течение 5 мин и экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением 4a-S (24 мг, 83%).To a solution of 3a-S (30 mg, 0.035 mmol) in CH3CN:H2O (1.39:1, 2.4 mL, 0.015 M) add AgNO3 (180 mg, 1.07 mmol). After 3 hours at 23°C, the reaction mixture is quenched with a 1:1 mixture of saturated aqueous solutions of NaCl and NaHCO ₃ , stirred for 15 minutes, diluted with CH ₂ Cl ₂ , stirred for 5 minutes and extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give 4a-S (24 mg, 83%).

Rf= 0,60 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).Rf= 0.60 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCI3): δ 7,81 (с, 1H), 7,37 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,30-7,21 (м, 1H), 7,06 (дддт, J=34,7, 8,0, 7,1, 1,1 Гц, 2H), 6,63 (с, 1H), 6,22 (д, J=1,3 Гц, 1H), 6,02 (дд, J=12,9, 1,4 Гц, 1H), 5,74 (с, 1H), 5,25-5,21 (м, 1H), 4,89 (д, J=8,7 Гц, 1H), 4,55-4,45 (м, 2H), 4,30-4,18 (м, 1H), 4,14 (дд, J=10,5, 4,2 Гц, 1H), 4,00-3,88 (м, 2H), 3,82 (с, 3H), 3,56-3,44 (м, 2H), 3,23 (д, J=9,0 Гц, 1H), 2,95 (д, J=15,7 Гц, 2H), 2,87-2,78 (м, 2H), 2,71 (дд, J=15,0, 3,9 Гц, 1H), 2,48 (дд, J=15,1, 9,6 Гц, 1H), 2,37 (с, 3H), 2,35-2,29 (м, 1H), 2,28 (с, 3H), 2,22-2,16 (м, 1H), 2,15 (с, 3H), 2,12 (с, 3H), 2,03 (с, 3H).1H NMR (400 MHz, CDCI3): δ 7.81 (s, 1H), 7.37 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.30-7.21 (m, 1H), 7. 06 (ddt, J=34.7, 8.0, 7.1, 1.1 Hz, 2H), 6.63 (s, 1H), 6.22 (d, J=1.3 Hz, 1H) , 6.02 (dd, J=12.9, 1.4 Hz, 1H), 5.74 (s, 1H), 5.25-5.21 (m, 1H), 4.89 (d, J =8.7 Hz, 1H), 4.55-4.45 (m, 2H), 4.30-4.18 (m, 1H), 4.14 (dd, J=10.5, 4.2 Hz, 1H), 4.00-3.88 (m, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.56-3.44 (m, 2H), 3.23 (d, J=9, 0 Hz, 1H), 2.95 (d, J=15.7 Hz, 2H), 2.87-2.78 (m, 2H), 2.71 (dd, J=15.0, 3.9 Hz, 1H), 2.48 (dd, J=15.1, 9.6 Hz, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.35-2.29 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.22-2.16 (m, 1H), 2.15 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 2.03 (s, 3H).

ИЭР-МС m/z: 809,2 (M-H2O+H)⁺.ESI-MS m/z: 809.2 (M-H2O+H) ⁺ .

Пример 0-2.Example 0-2.

А)A)

3-R3-R

К раствору 1 (0,5 г, 0,80 ммоль) в уксусной кислоте (20 мл, 0,04 M) добавляют D-триптофанол (2-R) (533 мг, 3,0 ммоль, Sigma-Aldrich). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 16 ч и затем уксусную кислоту выпаривают. Водный насыщенный раствор NaHCO₃ добавляют и смесь экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируютTo a solution of 1 (0.5 g, 0.80 mmol) in acetic acid (20 mL, 0.04 M) add D-tryptophanol (2-R) (533 mg, 3.0 mmol, Sigma-Aldrich). The reaction mixture is stirred at 23°C for 16 hours and then the acetic acid is evaporated. An aqueous saturated solution of NaHCO ₃ is added and the mixture is extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated

- 108 046742 под вакуумом. Флэш-хроматография (гексан:ЕЮАс, 1:1) дает соединение 3-R (479 мг, 75%).- 108 046742 under vacuum. Flash chromatography (hexane:EAAc, 1:1) gave compound 3-R (479 mg, 75%).

Rf=0,44 (Гексан:EtOAc, 1:1).Rf=0.44 (Hexane:EtOAc, 1:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,61 (с, 1H), 7,39 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,29 (д, J=9,6 Гц, 1H), 7,12 (т, J=7,3 Гц, 1H), 7,03 (т, J=7,3 Гц, 1H), 6,60 (с, 1H), 6,25 (с, 1H), 6,03 (с, 1H), 5,75 (с, 1H), 5,04 (д, J=11,7 Гц, 1H), 4,62 (с, 1H), 4,37 (с, 1H), 4,32-4,25 (м, 1H), 4,22 (д, J=2,7 Гц, 1H), 4,19-4,09 (м, 1H), 3,82 (с, 3H), 3,77 (с, 1H), 3,64 (д, J=9,0 Гц, 1H), 3,49-3,41 (м, 2H), 3,02-2,90 (м, 2H), 2,60-2,52 (м, 2H), 2,45 (д, J=14,7 Гц, 2H), 2,40 (с, 3H), 2,28 (с, 3H), 2,22-2,14 (м, 2H), 2,18 (с, 3H), 2,10 (м, 3H). ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.61 (s, 1H), 7.39 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.29 (d, J=9.6 Hz, 1H), 7.12 (t, J=7.3 Hz, 1H), 7.03 (t, J=7.3 Hz, 1H), 6.60 (s, 1H), 6.25 (s, 1H), 6.03 (s, 1H), 5.75 (s, 1H), 5.04 (d, J=11.7 Hz, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.37 ( s, 1H), 4.32-4.25 (m, 1H), 4.22 (d, J=2.7 Hz, 1H), 4.19-4.09 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.77 (s, 1H), 3.64 (d, J=9.0 Hz, 1H), 3.49-3.41 (m, 2H), 3.02-2, 90 (m, 2H), 2.60-2.52 (m, 2H), 2.45 (d, J=14.7 Hz, 2H), 2.40 (s, 3H), 2.28 (s , 3H), 2.22-2.14 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.10 (m, 3H).

ИЭР-МС m/z: 794,3 (M+H)+.ESI-MS m/z: 794.3 (M+H)+.

В)IN)

3-R 4-R3-R 4-R

К раствору 3-R (479 мг, 0,60 ммоль) в CH₃CN:H₂O (1,39:1, 40 мл, 0,015 M) добавляют AgNO₃ (3,03 г, 18,1 ммоль). Через 3 ч при 23°C, реакционную смесь гасят смесью 1:1 насыщенных водных растворов NaCl и NaHCO₃, перемешивают в течение 15 мин, разбавляют CH₂Cl₂, перемешивают в течение 5 мин и экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением 4-R (428 мг, 91%).To a solution of 3-R (479 mg, 0.60 mmol) in CH ₃ CN:H ₂ O (1.39:1, 40 ml, 0.015 M) add AgNO ₃ (3.03 g, 18.1 mmol). After 3 hours at 23°C, the reaction mixture is quenched with a 1:1 mixture of saturated aqueous solutions of NaCl and NaHCO ₃ , stirred for 15 minutes, diluted with CH ₂ Cl ₂ , stirred for 5 minutes and extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give 4-R (428 mg, 91%).

Rf=0,45 (CH2Cl2:CH₃OH, 9:1).Rf=0.45 (CH2Cl2:CH ₃ OH, 9:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,62 (с, 1H), 7,39 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,28 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,11 (ддд, J=8,2, 7,0, 1,2 Гц, 1H), 7,02 (ддд, J=7,9, 7,1, 1,0 Гц, 1H), 6,61 (с, 1H), 6,22 (д, J=1,3 Гц, 1H), 5,99 (д, J=1,3 Гц, 1H), 5,73 (с, 1H), 5,17 (дд, J=11,5, 1,2 Гц, 1H), 4,86 (с, 1H), 4,56-4,47 (м, 2H), 4,17 (дд, J=5,1, 1,6 Гц, 1H), 4,08 (дд, J=11,5, 2,1 Гц, 1H), 3,81 (с, 3H), 3,78 (д, J=3,8 Гц, 1H), 3,64 (дд, J=10,8, 3,8 Гц, 2H), 3,51 (д, J=5,1 Гц, 1H), 3,48-3,43 (м, 2H), 3,24 (д, J=8,6 Гц, 1H), 3,00-2,80 (м, 2H), 2,57 (с, 1H), 2,55-2,43 (м, 1H), 2,40 (с, 3H), 2,27 (с, 3H), 2,19-2,12 (м, 1H), 2,16 (с, 3H), 2,08 (с, 3H). ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.62 (s, 1H), 7.39 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.28 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.11 (ddd, J=8.2, 7.0, 1.2 Hz, 1H), 7.02 (ddd, J=7.9, 7.1, 1.0 Hz, 1H) , 6.61 (s, 1H), 6.22 (d, J=1.3 Hz, 1H), 5.99 (d, J=1.3 Hz, 1H), 5.73 (s, 1H) , 5.17 (dd, J=11.5, 1.2 Hz, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.56-4.47 (m, 2H), 4.17 (dd, J =5.1, 1.6 Hz, 1H), 4.08 (dd, J=11.5, 2.1 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.78 (d, J= 3.8 Hz, 1H), 3.64 (dd, J=10.8, 3.8 Hz, 2H), 3.51 (d, J=5.1 Hz, 1H), 3.48-3, 43 (m, 2H), 3.24 (d, J=8.6 Hz, 1H), 3.00-2.80 (m, 2H), 2.57 (s, 1H), 2.55-2 .43 (m, 1H), 2.40 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.19-2.12 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 2. 08 (s, 3H).

¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃): δ 171,8, 168,6, 147,6, 145,4, 143,0, 141,3, 140,7, 136,0, 131,1, 130,0, 129,6, 126,6, 122,1, 121,6, 121,2, 119,4, 118,4, 115,6, 112,9, 111,1, 110,6, 101,8, 81,7, 65,8, 62,7, 61,8, 60,4, 60,3, 57,9, 57,8, 56,1, 55,0, 52,1, 42,2, 41,3, 41,1, 23,8, 23,4, 20,5, 15,7, 9,8. ¹³ C NMR (101 MHz, CDCl ₃ ): δ 171.8, 168.6, 147.6, 145.4, 143.0, 141.3, 140.7, 136.0, 131.1, 130, 0, 129.6, 126.6, 122.1, 121.6, 121.2, 119.4, 118.4, 115.6, 112.9, 111.1, 110.6, 101.8, 81.7, 65.8, 62.7, 61.8, 60.4, 60.3, 57.9, 57.8, 56.1, 55.0, 52.1, 42.2, 41, 3, 41.1, 23.8, 23.4, 20.5, 15.7, 9.8.

ИЭР-МС m/z: 767,6 (M-H₂O+H)+.ESI-MS m/z: 767.6 (MH ₂ O+H)+.

(+)-ВР-ИЭР-ВП-МС m/z: 767,2799 [M-H₂O+H]+ (рассч. для C₄₁H₄₃N₄O₉S: 767,2745).(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 767.2799 [MH ₂ O+H]+ (calculated for C ₄₁ H ₄₃ N ₄ O ₉ S: 767.2745).

Пример 0-3. Синтез аллил №[^)-(2-амино-3-(Ш-индол-3-ил)пропил)]карбамата (9-R)Example 0-3. Synthesis of allyl N[^)-(2-amino-3-(III-indol-3-yl)propyl)]carbamate (9-R)

- 109 046742- 109 046742

К раствору D-триптофанола (2-R) (2,0 г, 10,4 ммоль) в CH3CN (42 мл, 4 мл/ммоль) добавляют дитрет-бутил дикарбонат (4,6 г, 20,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 3 ч и концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (CH₂Cl₂:CH₃OH от 99:1 до 85:15) с получением 5-R (2,2 г, 73%).To a solution of D-tryptophanol (2-R) (2.0 g, 10.4 mmol) in CH3CN (42 ml, 4 ml/mmol) add di-tert-butyl dicarbonate (4.6 g, 20.8 mmol). The reaction mixture is stirred at 23°C for 3 hours and concentrated in vacuo. Flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH 99:1 to 85:15) to give 5-R (2.2 g, 73%).

Rf=0,5 (СН2С12:СНзОН, 9:1).Rf=0.5 (CH2C12:CH3OH, 9:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl3): δ 8,13 (с, 1H), 7,67 (дд, J=7,8, 1,1 Гц, 1H), 7,38 (дд, J=8,1, 1,3 Гц, 1H), 7,29-7,10 (м, 2H), 7,06 (с, 1H), 4,82 (с, 1H), 4,00 (с, 1H), 3,71 (дд, J=11,0, 3,8 Гц, 1H), 3,62 (дд, J=11,0, 5,5 Гц, 1H), 3,01 (д, J=6,7 Гц, 2H), 2,14 (с, 1H), 1,44 (с, 9H). ¹ H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.13 (s, 1H), 7.67 (dd, J=7.8, 1.1 Hz, 1H), 7.38 (dd, J=8, 1, 1.3 Hz, 1H), 7.29-7.10 (m, 2H), 7.06 (s, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.00 (s, 1H), 3.71 (dd, J=11.0, 3.8 Hz, 1H), 3.62 (dd, J=11.0, 5.5 Hz, 1H), 3.01 (d, J=6, 7 Hz, 2H), 2.14 (s, 1H), 1.44 (s, 9H).

5-R 6-R5-R 6-R

К раствору 5-R (2,4 г, 8,2 ммоль) в CH₂Cl₂ (50 мл, 6 мл/ммоль) добавляют фталимид (2,7 г, 18,2 ммоль), трифенилфосфин (4,8 г, 18,2 ммоль) и смесь охлаждают при 0°C. Раствор диэтилазодикарбоксилата (ДЭАД) в CH₂Cl₂ (25 мл, 3 мл/ммоль) добавляют в течение 15 мин. Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 16 ч, концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением 6-R (3,3 г, 96%).To a solution of 5-R (2.4 g, 8.2 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (50 ml, 6 ml/mmol) add phthalimide (2.7 g, 18.2 mmol), triphenylphosphine (4.8 g , 18.2 mmol) and the mixture is cooled at 0°C. A solution of diethyl azodicarboxylate (DEAD) in CH ₂ Cl ₂ (25 ml, 3 ml/mmol) is added over 15 minutes. The reaction mixture was stirred at 23°C for 16 hours and concentrated under vacuum. The resulting residue was purified by flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give 6-R (3.3 g, 96%).

R=0,7 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 9:1).R=0.7 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 9:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 8,50 (с, 1H), 7,81 (дд, J=5,5, 3,1 Гц, 2H), 7,66 (дд, J=5,6, 3,2 Гц, 2H), 7,60 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,35 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,19-7,04 (м, 3H), 4,81 (с, 1H), 4,40 (с, 1H), 3,83 (дд, J=13,9, 3,7 Гц, 1H), 3,72 (дд, J=13,9, 9,9 Гц, 1H), 3,08-3,01 (м, 2H), 1,23 (с, 9H). ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 8.50 (s, 1H), 7.81 (dd, J=5.5, 3.1 Hz, 2H), 7.66 (dd, J=5 ,6, 3.2 Hz, 2H), 7.60 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.35 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.19-7.04 (m, 3H), 4.81 (s, 1H), 4.40 (s, 1H), 3.83 (dd, J=13.9, 3.7 Hz, 1H), 3.72 (dd, J=13.9, 9.9 Hz, 1H), 3.08-3.01 (m, 2H), 1.23 (s, 9H).

6-R 7-R6-R 7-R

К раствору 6-R (3,25 г, 7,74 ммоль) в этаноле (231 мл, 30 мл/ммоль) добавляют моногидрат гидразина (37 мл, 774 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 80°C в герметично закрытой пробирке в течение 2,25 ч, концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (EtOAc:CH₃OH, от 100:1 до 50:50) дает 7-R (2,15 г, 96%).To a solution of 6-R (3.25 g, 7.74 mmol) in ethanol (231 mL, 30 mL/mmol) was added hydrazine monohydrate (37 mL, 774 mmol). The reaction mixture is stirred at 80°C in a hermetically sealed test tube for 2.25 hours and concentrated under vacuum. Flash chromatography (EtOAc:CH ₃ OH, 100:1 to 50:50) gave 7-R (2.15 g, 96%).

R=0,2 (EtOAc:CH₃OH, 6:4).R=0.2 (EtOAc:CH ₃ OH, 6:4).

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7,60 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,33 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,13-7,04 (м, 2H), 7,05- 110 0467421H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.60 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.33 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.13-7.04 ( m, 2H), 7.05- 110 046742

6,96 (м, 1H), 4,02-3,94 (м, 1H), 2,99-2,87 (м, 3H), 2,78 (дд, J=13,1, 9,7 Гц, 1H), 1,39 (с, 9H). ИЭР-МС m/z: 290,2 (M+H)+.6.96 (m, 1H), 4.02-3.94 (m, 1H), 2.99-2.87 (m, 3H), 2.78 (dd, J=13.1, 9.7 Hz, 1H), 1.39 (s, 9H). ESI-MS m/z: 290.2 (M+H)+.

К раствору 7-R (2,15 г, 7,4 ммоль) в CH3CN (74 мл, 10 мл/ммоль) и ДМФ (7,4 мл, 1 мл/ммоль) добавляют N.N-диизопропилэтиламин (1,06 мл, 5,9 ммоль) и аллил хлорформиат (7,9 мл, 74 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 16 ч. Смесь разбавляют EtOAc, NH4C1 добавляют и смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (гексан:ЕЮАс, от 100:1 до 1:100) с получением 8-R (1,69 г, 61%).To a solution of 7-R (2.15 g, 7.4 mmol) in CH3CN (74 ml, 10 ml/mmol) and DMF (7.4 ml, 1 ml/mmol) add NN-diisopropylethylamine (1.06 ml, 5.9 mmol) and allyl chloroformate (7.9 ml, 74 mmol). The reaction mixture was stirred at 23°C for 16 hours. The mixture was diluted with EtOAc, NH4C1 was added and the mixture was extracted with EtOAc. The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (hexane:EEAc, 100:1 to 1:100) to give 8-R (1.69 g, 61%).

Rf=0,4 (гексан:ЕЮАс, 1:1).Rf=0.4 (hexane:EAAc, 1:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 8,25 (с, 1H), 7,62 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,35 (дд, J=8,1, 0,9 Гц, 1H), 7,16 (дддд, J=27,8, 8,0, 7,0, 1,1 Гц, 2H), 7,04 (д, J=2,4 Гц, 1H), 5,90 (дат, J=17,3, 10,7, 5,6 Гц, 1H), 5,34-5,22 (м, 1H), 5,20 (дт, J=10,5, 1,4 Гц, 1H), 5,12 (с, 1H), 4,82 (с, 1H), 4,55 (дкв, J=5,4, 1,7 Гц, 2H), 4,02 (с, 1H), 3,35 (дт, J=10,0, 4,7 Гц, 1H), 3,21 (с, 1H), 2,95 (ддд, J=21,6, 15,4, 9,1 Гц, 2H), 1,42 (с, 9H).1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 8.25 (s, 1H), 7.62 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.35 (dd, J=8.1, 0, 9 Hz, 1H), 7.16 (dddd, J=27.8, 8.0, 7.0, 1.1 Hz, 2H), 7.04 (d, J=2.4 Hz, 1H), 5.90 (dat, J=17.3, 10.7, 5.6 Hz, 1H), 5.34-5.22 (m, 1H), 5.20 (dt, J=10.5, 1 ,4 Hz, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.55 (dkv, J=5.4, 1.7 Hz, 2H), 4.02 (s , 1H), 3.35 (dt, J=10.0, 4.7 Hz, 1H), 3.21 (s, 1H), 2.95 (ddd, J=21.6, 15.4, 9 .1 Hz, 2H), 1.42 (s, 9H).

ИЭР-МС m/z: 274,3 (M-Boc+H)+.ESI-MS m/z: 274.3 (M-Boc+H)+.

К раствору 8-R (1,30 г, 3,50 ммоль) в CH₂Cl₂ (58 мл, 16,6 мл/ммоль) добавляют трифторуксусную кислоту (30 мл, 8,3 мл/ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 1,5 ч, концентрируют под вакуумом с получением неочищенного 9-R, который применяют на следующих стадиях без дальнейшей очистки.To a solution of 8-R (1.30 g, 3.50 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (58 ml, 16.6 ml/mmol) add trifluoroacetic acid (30 ml, 8.3 ml/mmol). The reaction mixture was stirred at 23°C for 1.5 hours, concentrated in vacuo to obtain crude 9-R, which was used in the following steps without further purification.

Rj=0,2 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 9:1).Rj=0.2 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 9:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,95 (с, 1H), 7,53 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,36 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,17 (с, 1H), 7,09 (т, J=7,5 Гц, 1H), 7,03 (т, J=7,5 Гц, 1H), 5,87 (ддт, J=16,4, 10,8, 5,6 Гц, 1H), 5,34-5,13 (м, 2H), 4,50 (д, J=5,5 Гц, 2H), 3,62 (шс, 1H), 3,42 (дд, J=14,9, 3,9 Гц, 1H), 3,36-3,20 (м, 1H), 3,11-3,00 (м, 2H).1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.95 (s, 1H), 7.53 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.36 (d, J=8.1 Hz, 1H ), 7.17 (s, 1H), 7.09 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.03 (t, J=7.5 Hz, 1H), 5.87 (ddt, J =16.4, 10.8, 5.6 Hz, 1H), 5.34-5.13 (m, 2H), 4.50 (d, J=5.5 Hz, 2H), 3.62 ( shs, 1H), 3.42 (dd, J=14.9, 3.9 Hz, 1H), 3.36-3.20 (m, 1H), 3.11-3.00 (m, 2H) .

ИЭР-МС m/z: 274,3 (M+H)+.ESI-MS m/z: 274.3 (M+H)+.

Пример 0-4. Синтез аллил N-[(S)-(2-амино-3-(1H-индол-3-ил)пропил)]карбамата (9-S)Example 0-4. Synthesis of allyl N-[(S)-(2-amino-3-(1H-indol-3-yl)propyl)]carbamate (9-S)

2-S 5-S2-S 5-S

К раствору L-триптофанола (2-S) (2,0 г, 10,4 ммоль) в CH3CN (42 мл, 4 мл/ммоль) добавляют дитрет-бутил дикарбонат (4,6 г, 20,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 3 ч, концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением 5-S (2,24 г, 73%).To a solution of L-tryptophanol (2-S) (2.0 g, 10.4 mmol) in CH3CN (42 ml, 4 ml/mmol) add di-tert-butyl dicarbonate (4.6 g, 20.8 mmol). The reaction mixture was stirred at 23°C for 3 hours and concentrated under vacuum. Flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give 5-S (2.24 g, 73%).

Rf=0,5 (CH2Cl2:CH₃OH, 9:1).Rf=0.5 (CH2Cl2:CH ₃ OH, 9:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDC13): δ 8,10 (с, 1H), 7,65 (дд, J=7,8, 1,1 Гц, 1H), 7,37 (дд, J=8,1, 1,3 Гц, 1H), 7,23-7,11 (м, 2H), 7,06 (с, 1H), 4,81 (с, 1H), 3,99 (с, 1H), 3,70 (дд, J=11,0, 3,8 Гц, 1H), 3,61 (дд, J=11,0, 5,5 Гц, 1H), 3,00 (д, J=6,7 Гц, 2H), 2,01 (с, 1H), 1,42 (с, 9H).1H NMR (400 MHz, CDC13): δ 8.10 (s, 1H), 7.65 (dd, J=7.8, 1.1 Hz, 1H), 7.37 (dd, J=8.1 , 1.3 Hz, 1H), 7.23-7.11 (m, 2H), 7.06 (s, 1H), 4.81 (s, 1H), 3.99 (s, 1H), 3 .70 (dd, J=11.0, 3.8 Hz, 1H), 3.61 (dd, J=11.0, 5.5 Hz, 1H), 3.00 (d, J=6.7 Hz, 2H), 2.01 (s, 1H), 1.42 (s, 9H).

- 111 046742- 111 046742

В)IN)

онHe

5-S5-S

ФталимидPhthalimide

PPh₃ , ДЭАДPPh ₃ , DEAD

ДХМ оDXM o

нn

6-S6-S

К раствору 5-S (1,2 г, 4,13 ммоль) в CH2C12 (24,8 мл, 6 мл/ммоль) добавляют фталимид (1,33 г, 9,1 ммоль), трифенилфосфин (2,4 г, 9,1 ммоль) и смесь охлаждают при 0°C. Раствор диэтилазодикарбоксилата (ДЭАД) (3 мл, 10,32 ммоль) в CH₂Cl₂ (12,4 мл, 3 мл/ммоль) добавляют в течение 15 мин. Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 16 ч, концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением 6-S (2,8 г, >100%).To a solution of 5-S (1.2 g, 4.13 mmol) in CH2C12 (24.8 ml, 6 ml/mmol) add phthalimide (1.33 g, 9.1 mmol), triphenylphosphine (2.4 g, 9.1 mmol) and the mixture is cooled at 0°C. A solution of diethyl azodicarboxylate (DEAD) (3 mL, 10.32 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (12.4 mL, 3 mL/mmol) was added over 15 min. The reaction mixture was stirred at 23°C for 16 hours and concentrated under vacuum. The resulting residue was purified by flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give 6-S (2.8 g, >100%).

Rf=0,7 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).Rf=0.7 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDC13): δ 8,49 (с, 1H), 7,80 (дд, J=5,4, 3,1 Гц, 2H), 7,66 (дд, J=5,6, 3,2 Гц, 2H), 7,60 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,34 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,21-7,04 (м, 3H), 4,74 (с, 1H), 4,42 (с, 1H), 3,83 (дд, J=13,9, 3,7 Гц, 1H), 3,72 (дд, J=13,9, 9,9 Гц, 1H), 3,10-3,01 (м, 2H), 1,23 (с, 9H).1H NMR (400 MHz, CDC13): δ 8.49 (s, 1H), 7.80 (dd, J=5.4, 3.1 Hz, 2H), 7.66 (dd, J=5.6 , 3.2 Hz, 2H), 7.60 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.34 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.21-7.04 (m , 3H), 4.74 (s, 1H), 4.42 (s, 1H), 3.83 (dd, J=13.9, 3.7 Hz, 1H), 3.72 (dd, J= 13.9, 9.9 Hz, 1H), 3.10-3.01 (m, 2H), 1.23 (s, 9H).

К раствору 6-S (0,86 г, 2,07 ммоль) в этаноле (72 мл, 36 мл/ммоль) добавляют моногидрат гидразина (10 мл, 207 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 80°C в герметично закрытой пробирке в течение 2,25 ч, концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (EtOAc:CH₃OH, от 100:1 до 50:50) с получением 7-S (1,0 г, 84%).To a solution of 6-S (0.86 g, 2.07 mmol) in ethanol (72 mL, 36 mL/mmol) was added hydrazine monohydrate (10 mL, 207 mmol). The reaction mixture is stirred at 80°C in a hermetically sealed test tube for 2.25 hours and concentrated under vacuum. Flash chromatography (EtOAc:CH ₃ OH, 100:1 to 50:50) to give 7-S (1.0 g, 84%).

Rj=0,2 (EtOAc:CH₃OH, 6:4).Rj=0.2 (EtOAc:CH ₃ OH, 6:4).

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7,61 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,35 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,13-6,97 (м, 2H), 7,09 (с, 1H), 4,06-3,96 (м, 1H), 3,01-2,76 (м, 4H), 1,38 (с, 9H).1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.61 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.35 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.13-6.97 ( m, 2H), 7.09 (s, 1H), 4.06-3.96 (m, 1H), 3.01-2.76 (m, 4H), 1.38 (s, 9H).

ИЭР-МС m/z: 290,3 (M+H)⁺.ESI-MS m/z: 290.3 (M+H) ⁺ .

□)□)

AllocCIAllocCI

ДИПЭАDIPEA

nh₂ nh ₂

ΗΗ

7-S7-S

NHAIIocNHAIIoc

ΗΗ

8-S8-S

CH₃CN, ДМФCH ₃ CN, DMF

К раствору 7-S (0,95 г, 3,3 ммоль) в CH₃CN (33 мл, 10 мл/ммоль) и ДМФ (3,3 мл, 1 мл/ммоль) добавляют N.N-диизопропилэтиламин (0,5 мл, 2,6 ммоль) и аллилхлорформиат (3,5 мл, 33 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 20 ч. Смесь разбавляют EtOAc, NH₄Cl добавляют и смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (гексан:ЕЮАс, от 100:1 до 1:100) с получением 8-S (0,88 г, 73%).To a solution of 7-S (0.95 g, 3.3 mmol) in _CH3CN (33 ml, 10 ml/mmol) and DMF (3.3 ml, 1 ml/mmol) add NN-diisopropylethylamine (0.5 ml, 2.6 mmol) and allyl chloroformate (3.5 ml, 33 mmol). The reaction mixture was stirred at 23°C for 20 hours. The mixture was diluted with EtOAc, NH ₄ Cl was added and the mixture was extracted with EtOAc. The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (hexane:EEAc, 100:1 to 1:100) to give 8-S (0.88 g, 73%).

Rf=0,5 (гексан:ЕЮАс, 1:1).Rf=0.5 (hexane:EAAc, 1:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 8,17 (с, 1H), 7,63 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,20 (дд, J=8,1, 0,9 Гц, 1H), 7,13 (дддд, J=27,8, 8,0, 7,0, 1,1 Гц, 2H), 7,06 (д, J=2,4 Гц, 1H), 5,90 (ддт, J=17,3, 10,7, 5,6 Гц, 1H), 5,31-5,18 (м, 2H), 5,09 (с, 1H), 4,80 (с, 1H), 4,59-4,52 (м, 2H), 4,03 (с, 1H), 3,37 (дт, J=10,0, 4,7 Гц, 1H), 3,21 (с, 1H), 3,052,87 (м, 2H), 1,42 (с, 9H).1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 8.17 (s, 1H), 7.63 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.20 (dd, J=8.1, 0, 9 Hz, 1H), 7.13 (dddd, J=27.8, 8.0, 7.0, 1.1 Hz, 2H), 7.06 (d, J=2.4 Hz, 1H), 5.90 (ddt, J=17.3, 10.7, 5.6 Hz, 1H), 5.31-5.18 (m, 2H), 5.09 (s, 1H), 4.80 ( s, 1H), 4.59-4.52 (m, 2H), 4.03 (s, 1H), 3.37 (dt, J=10.0, 4.7 Hz, 1H), 3.21 (s, 1H), 3.052.87 (m, 2H), 1.42 (s, 9H).

ИЭР-МС m/z: 274,3 (M-Boc+H)+.ESI-MS m/z: 274.3 (M-Boc+H)+.

Е)E)

NHAIIocNHAIIoc

ΗΗ

NHAIIocNHAIIoc

ТФК/ДХМTPA/DXM

8-S g-s8-S g-s

К раствору 8-S (0,875 г, 2,3 ммоль) в CH₂Cl₂ (38 мл, 16,6 мл/ммоль) добавляют трифторуксусную кислоту (19 мл, 8,3 мл/ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 2 ч, концентрируют под вакуумом с получением неочищенного 9-S который применяют на следующих стадиях без дальнейшей очистки.Trifluoroacetic acid (19 mL, 8.3 mL/mmol) was added to a solution of 8-S (0.875 g, 2.3 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (38 mL, 16.6 mL/mmol). The reaction mixture was stirred at 23°C for 2 hours, concentrated in vacuo to obtain crude 9-S which was used in the following steps without further purification.

Rf=0,2 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).Rf=0.2 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7,56 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,37 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,21 (с, 1H), 7,13 (т, J=7,5 Гц, 1H), 7,05 (т, J=7,5 Гц, 1H), 5,94 (ддт, J=16,4, 10,8, 5,6 Гц, 1H), 5,34-5,16 (м, 2H), 4,56 (д, J=5,5 Гц, 2H),1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.56 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.37 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H) , 7.13 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.05 (t, J=7.5 Hz, 1H), 5.94 (ddt, J=16.4, 10.8, 5 .6 Hz, 1H), 5.34-5.16 (m, 2H), 4.56 (d, J=5.5 Hz, 2H),

- 112 046742- 112 046742

3,60 (шс, 1H), 3,43 (дд, J=14,9, 3,9 Гц, 1H), 3,37-3,31 (м, 1H), 3,14-2,99 (м, 2H). ИЭР-МС m/z: 274,3 (M+H)+.3.60 (shs, 1H), 3.43 (dd, J=14.9, 3.9 Hz, 1H), 3.37-3.31 (m, 1H), 3.14-2.99 ( m, 2H). ESI-MS m/z: 274.3 (M+H)+.

Пример 0-5.Example 0-5.

К раствору 1 (1,45 г, 2,33 ммоль) в уксусной кислоте (58 мл, 0,08 M) добавляют 9-R (0,95 г, 3,50 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 50°C в течение 18 ч и затем уксусную кислоту выпаривают. Водный насыщенный раствор NaHCO₃ добавляют и смесь экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄. Флэш-хроматография (гексан :EtOAc, 1:1) дает соединение 10-R (1,3 г, 64%).To a solution of 1 (1.45 g, 2.33 mmol) in acetic acid (58 ml, 0.08 M) add 9-R (0.95 g, 3.50 mmol). The reaction mixture is stirred at 50°C for 18 hours and then the acetic acid is evaporated. An aqueous saturated solution of NaHCO ₃ is added and the mixture is extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ . Flash chromatography (hexane:EtOAc, 1:1) gave compound 10-R (1.3 g, 64%).

Rf=0,5 (гексан:EtOAc, 1:1).Rf=0.5 (hexane:EtOAc, 1:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,66 (с, 1H), 7,36 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,27 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,10 (ддд, J=8,3, 7,0, 1,3 Гц, 1H), 7,01 (тд, J=7,5, 7,0, 1,0 Гц, 1H), 6,62 (с, 1H), 6,23 (д, J=1,4 Гц, 1H), 6,01 (д, J=1,4 Гц, 1H), 5,99-5,89 (м, 1H), 5,79 (с, 1H), 5,44-5,21 (м, 2H), 5,14-4,99 (м, 2H), 4,63 (ддд, J=7,3, 4,4, 1,5 Гц, 2H), 4,36 (с, 1H), 4,33-4,24 (м, 1H), 4,29-4,26 (м, 1H), 4,21 (д, J=2,7 Гц, 1H), 4,19-4,13 (м, 3H), 3,80 (с, 3H), 3,56 (с, 1H), 3,48-3,43 (м, 3H), 3,27 (дт, J=13,2, 4,0 Гц, 1H), 3,04-2,88 (м, 2H), 2,56 (дд, J=15,2, 3,8 Гц, 1H), 2,492,35 (м, 2H), 2,31 (с, 3H), 2,28 (с, 3H), 2,17 (с, 3H), 2,07 (с, 3H). ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.66 (s, 1H), 7.36 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.27 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.10 (ddd, J=8.3, 7.0, 1.3 Hz, 1H), 7.01 (td, J=7.5, 7.0, 1.0 Hz, 1H) , 6.62 (s, 1H), 6.23 (d, J=1.4 Hz, 1H), 6.01 (d, J=1.4 Hz, 1H), 5.99-5.89 ( m, 1H), 5.79 (s, 1H), 5.44-5.21 (m, 2H), 5.14-4.99 (m, 2H), 4.63 (ddd, J=7, 3, 4.4, 1.5 Hz, 2H), 4.36 (s, 1H), 4.33-4.24 (m, 1H), 4.29-4.26 (m, 1H), 4 .21 (d, J=2.7 Hz, 1H), 4.19-4.13 (m, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.56 (s, 1H), 3.48- 3.43 (m, 3H), 3.27 (dt, J=13.2, 4.0 Hz, 1H), 3.04-2.88 (m, 2H), 2.56 (dd, J= 15.2, 3.8 Hz, 1H), 2.492.35 (m, 2H), 2.31 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 2, 07 (s, 3H).

ИЭР-МС m/z: 877,3 (M+H)+.ESI-MS m/z: 877.3 (M+H)+.

10-R 11-R10-R 11-R

К раствору 10-R (600 мг, 0,68 ммоль) в CH₂Cl₂ (12 мл, 18 мл/ммоль) добавляют дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия(П) (77 мг, 0,1 ммоль) и уксусную кислоту (0,4 мл, 6,8 ммоль). Гидрид трибутилолова (1,1 мл, 4,08 ммоль) добавляют при 0°C, реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 0,5 ч и концентрируют под вакуумом. Полученный неочищенный продукт разбавляют EtOAc, насыщенный водный раствор NH₄Cl добавляют и смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Флэшхроматография (гексан:EtOAc, от 100:1 до 1:100 и EtOAc:CH₃OH, от 100:1 до 1:100) с получением 11-R (440 мг, 82%).To a solution of 10-R (600 mg, 0.68 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (12 ml, 18 ml/mmol) add bis(triphenylphosphine) palladium(II) dichloride (77 mg, 0.1 mmol) and acetic acid (0.4 ml, 6.8 mmol). Tributyltin hydride (1.1 ml, 4.08 mmol) was added at 0°C, the reaction mixture was stirred at 0°C for 0.5 h and concentrated in vacuo. The resulting crude product was diluted with EtOAc, a saturated aqueous NH ₄ Cl solution was added and the mixture was extracted with EtOAc. The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. Flash chromatography (hexane:EtOAc, 100:1 to 1:100 and EtOAc:CH ₃ OH, 100:1 to 1:100) gave 11-R (440 mg, 82%).

Rf=0,5 (CH2CL:CH₃OH, 1:1).Rf=0.5 (CH2CL:CH ₃ OH, 1:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,64 (с, 1H), 7,38 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,29 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,11 (ддт, J=8,3, 7,0, 1,4 Гц, 1H), 7,03 (ддт, J=8,3, 7,0, 1,4 Гц, 1H), 6,58 (с, 1H), 6,24 (д, J=1,5 Гц, 1H), 6,02 (д, J=1,5 Гц, 1H), 5,02 (д, J=11,8 Гц, 1H), 4,63 (с, 1H), 4,36 (с, 1H), 4,28 (д, J=5,1 Гц, 1H), 4,21 (д, J=2,2 Гц, 1H), 4,16 (с, 1H), 3,80 (с, 3H), 3,51-3,39 (м, 4H), 3,32-3,13 (м, 3H), 2,95 (д, J=8,9 Гц, 2H), 2,89-2,76 (м, 2H), 2,73-2,57 (м, 1H), 2,42 (д, J=14,8 Гц, 1H), 2,36 (с, 3H), 2,25 (с, 3H), 2,16 (с, 3H), 2,09 (с, 3H).1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.64 (s, 1H), 7.38 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.29 (d, J=8.1 Hz, 1H ), 7.11 (ddt, J=8.3, 7.0, 1.4 Hz, 1H), 7.03 (ddt, J=8.3, 7.0, 1.4 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 6.24 (d, J=1.5 Hz, 1H), 6.02 (d, J=1.5 Hz, 1H), 5.02 (d, J=11 .8 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.36 (s, 1H), 4.28 (d, J=5.1 Hz, 1H), 4.21 (d, J=2 .2 Hz, 1H), 4.16 (s, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.51-3.39 (m, 4H), 3.32-3.13 (m, 3H) , 2.95 (d, J=8.9 Hz, 2H), 2.89-2.76 (m, 2H), 2.73-2.57 (m, 1H), 2.42 (d, J =14.8 Hz, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 2.09 (s, 3H).

ИЭР-МС m/z: 793,2 (M+H)+.ESI-MS m/z: 793.2 (M+H)+.

11-R 12-R11-R 12-R

К раствору 11-R (850 мг, 1,07 ммоль) в CH₃CN:H₂O (1,39:1, 70 мл, 0,015 M) добавляют AgNO₃ (3,64To a solution of 11-R (850 mg, 1.07 mmol) in CH ₃ CN:H ₂ O (1.39:1, 70 ml, 0.015 M) add AgNO ₃ (3.64

- 113 046742 г, 21,4 ммоль). Через 17 ч при 23°C, реакционную смесь гасят смесью 1:1 насыщенных водных растворов NaCl и NaHCO3, перемешивают в течение 15 мин, разбавляют CH2Cl2, перемешивают в течение 5 мин и экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением 12-R (553 мг, 66%).- 113 046742 g, 21.4 mmol). After 17 hours at 23°C, the reaction mixture is quenched with a 1:1 mixture of saturated aqueous solutions of NaCl and NaHCO3, stirred for 15 minutes, diluted with CH2Cl2, stirred for 5 minutes and extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give 12-R (553 mg, 66%).

R=0,3 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 9:1).R=0.3 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 9:1).

¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ 7,60 (с, 1H), 7,38 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,28 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,11 (ддт, J=8,3, 7,1, 1,2 Гц, 1H), 7,02 (ддт, J=8,3, 7,1, 1,2 Гц, 1H), 6,58 (с, 1H), 6,22 (с, 1H), 6,00 (с, 1H), 5,16 (д, J=11,5 Гц, 1H), 4,87 (с, 1H), 4,54 (с, 1H), 4,51 (д, J=3,3 Гц, 1H), 4,17 (д, J=5,4 Гц, 1H), 4,07 (дд, J=11,3, 2,2 Гц, 1H), 3,81 (с, 3H), 3,52 (д, J=5,1 Гц, 1H), 3,24 (д, J=8,8 Гц, 2H), 2,99-2,78 (м, 4H), 2,66 (дд, J=14,9, 3,5 Гц, 1H), 2,49-2,39 (м, 2H), 2,38 (с, 3H), 2,28 (м, 2H), 2,25 (с, 3H), 2,21-2,16 (м, 2H), 2,15 (с, 3H), 2,08 (с, 3H). ¹ H NMR (500 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.60 (s, 1H), 7.38 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.28 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.11 (ddt, J=8.3, 7.1, 1.2 Hz, 1H), 7.02 (ddt, J=8.3, 7.1, 1.2 Hz, 1H) , 6.58 (s, 1H), 6.22 (s, 1H), 6.00 (s, 1H), 5.16 (d, J=11.5 Hz, 1H), 4.87 (s, 1H), 4.54 (s, 1H), 4.51 (d, J=3.3 Hz, 1H), 4.17 (d, J=5.4 Hz, 1H), 4.07 (dd, J=11.3, 2.2 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.52 (d, J=5.1 Hz, 1H), 3.24 (d, J=8.8 Hz, 2H), 2.99-2.78 (m, 4H), 2.66 (dd, J=14.9, 3.5 Hz, 1H), 2.49-2.39 (m, 2H) , 2.38 (s, 3H), 2.28 (m, 2H), 2.25 (s, 3H), 2.21-2.16 (m, 2H), 2.15 (s, 3H), 2.08 (s, 3H).

¹³C ЯМР (101 МГц, CD3OD): δ 171,7, 169,4, 148,7, 145,9, 143,7, 141,4, 140,9, 136,9, 130,8, 130,0, 129,7, 126,0, 121,4, 121,0, 119,7, 119,1, 118,4, 117,5, 114,9, 110,8, 107,5, 106,4, 102,1, 91,3, 63,2, 60,0, 59,0, 58,6, 55,3, 54,6, 52,7, 52,4, 48,4, 45,8, 42,5, 40,2, 24,5, 23,2, 19,2, 15,0, 8,2. ¹³ C NMR (101 MHz, CD3OD): δ 171.7, 169.4, 148.7, 145.9, 143.7, 141.4, 140.9, 136.9, 130.8, 130.0 , 129.7, 126.0, 121.4, 121.0, 119.7, 119.1, 118.4, 117.5, 114.9, 110.8, 107.5, 106.4, 102 ,1, 91.3, 63.2, 60.0, 59.0, 58.6, 55.3, 54.6, 52.7, 52.4, 48.4, 45.8, 42.5 , 40.2, 24.5, 23.2, 19.2, 15.0, 8.2.

ИЭР-МС m/z: 766,2 (M-H₂O+H)+.ESI-MS m/z: 766.2 (MH ₂ O+H)+.

(+)-ВР-ИЭР-ВП-МС m/z: 766,2972 [M-H₂O+H]+ (Рассч. для C₄₁H₄₄N₅O₈S⁺: 766,2905).(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 766.2972 [MH ₂ O+H]+ (Calc. for C ₄₁ H ₄₄ N ₅ O ₈ S ⁺ : 766.2905).

К раствору 10-R (700 мг, 0,8 ммоль) в CH₃CN:H₂O (1,39:1, 52,5 мл, 0,015 M) добавляют AgNO₃ (2,66 г, 16 ммоль). Через 20 ч при 23°C, реакционную смесь гасят смесью 1:1 насыщенных водных растворов NaCl и NaHCO₃, перемешивают в течение 15 мин, разбавляют CH₂Cl₂, перемешивают в течение 5 мин и экстрагируют CH2Cl2. Объединенные органические слои сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (CH2Cl2: CH3OH, от 99:1 до 85:15) с получением 13-R (438 мг, 63%).To a solution of 10-R (700 mg, 0.8 mmol) in CH ₃ CN:H ₂ O (1.39:1, 52.5 ml, 0.015 M) add AgNO ₃ (2.66 g, 16 mmol). After 20 hours at 23°C, the reaction mixture is quenched with a 1:1 mixture of saturated aqueous solutions of NaCl and NaHCO ₃ , stirred for 15 minutes, diluted with CH ₂ Cl ₂ , stirred for 5 minutes and extracted with CH2Cl2. The combined organic layers are dried over anhydrous Na2SO4, filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (CH2Cl2:CH3OH, 99:1 to 85:15) to give 13-R (438 mg, 63%).

Rf=0,40 (CH2Cl2:CH₃OH, 9:1).Rf=0.40 (CH2Cl2:CH ₃ OH, 9:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,64 (с, 1H), 7,37 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,32-7,20 (м, 1H), 7,11 (т, J=7,7 Гц, 1H), 7,01 (т, J=7,4 Гц, 1H), 6,62 (с, 1H), 6,21 (с, 1H), 6,05-5,90 (м, 1H), 5,99 (с, 1H), 5,75 (д, J=6,0 Гц, 1H), 5,40-5,07 (м, 4H), 4,88 (д, J=14,7 Гц, 1H), 4,68-4,50 (м, 3H), 4,28-4,13 (м, 1H), 4,08 (дт, J=11,4, 2,4 Гц, 1H), 3,83 (с, 3H), 3,68-3,40 (м, 4H), 3,37-3,19 (м, 2H), 2,98-2,79 (м, 2H), 2,59-2,36 (м, 3H), 2,29 (с, 3H), 2,27 (с, 3H), 2,14 (с, 3H), 2,10-2,16 (м, 1H), 2,08 (с, 3H).1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.64 (s, 1H), 7.37 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.32-7.20 (m, 1H), 7 .11 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.01 (t, J=7.4 Hz, 1H), 6.62 (s, 1H), 6.21 (s, 1H), 6 .05-5.90 (m, 1H), 5.99 (s, 1H), 5.75 (d, J=6.0 Hz, 1H), 5.40-5.07 (m, 4H), 4.88 (d, J=14.7 Hz, 1H), 4.68-4.50 (m, 3H), 4.28-4.13 (m, 1H), 4.08 (dt, J= 11.4, 2.4 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.68-3.40 (m, 4H), 3.37-3.19 (m, 2H), 2.98 -2.79 (m, 2H), 2.59-2.36 (m, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 2.10-2.16 (m, 1H), 2.08 (s, 3H).

ИЭР-МС m/z: 850,3 (M-H₂O+H)+.ESI-MS m/z: 850.3 (MH ₂ O+H)+.

Пример 0-6.Example 0-6.

К раствору 1 (955 мг, 1,5 ммоль) в уксусной кислоте (37,5 мл, 0,08 M) добавляют 9-S (627 мг, 2,29 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 50°C в течение 18 ч и затем уксусную кислоту выпаривают. Водный насыщенный раствор NaHCO₃ добавляют и смесь экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄. Флэш-хроматография (гексан :EtOAc, 1:1) дает соединение 10-S (756 мг, 58%).To a solution of 1 (955 mg, 1.5 mmol) in acetic acid (37.5 mL, 0.08 M) add 9-S (627 mg, 2.29 mmol). The reaction mixture is stirred at 50°C for 18 hours and then the acetic acid is evaporated. An aqueous saturated solution of NaHCO ₃ is added and the mixture is extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ . Flash chromatography (hexane:EtOAc, 1:1) gives compound 10-S (756 mg, 58%).

Rf=0,4 (гексан: EtOAc, 1:1).Rf=0.4 (hexane: EtOAc, 1:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,78 (с, 1H), 7,36 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,24 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,10 (ддд, J=8,3, 7,0, 1,3 Гц, 1H), 7,01 (тд, J=7,5, 7,0, 1,0 Гц, 1H), 6,68 (с, 1H), 6,23 (д, J=1,4 Гц, 1H), 6,01 (д, J=1,4 Гц, 1H), 6,07-5,93 (м, 1H), 5,82 (с, 1H), 5,41-5,19 (м, 2H), 5,1 (д, J=11,7 Гц, 1H), 4,66 (дт, J=5,9, 1,3 Гц, 1H), 4,57 (с, 1H), 4,37 (с, 1H), 4,33-4,20 (м, 3H), 3,81 (с, 3H), 3,46 (д, J=4,2 Гц, 2H), 3,22-3,13 (м, 1H), 3,11-2,88 (м, 4H), 2,66 (дд, J=15,2, 4,2 Гц, 1H), 2,51 (дд, J=15,3, 6,0 Гц, 1H), 2,43-2,32 (м, 2H), 2,31 (с, 3H), 2,26 (с, ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.78 (s, 1H), 7.36 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.24 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.10 (ddd, J=8.3, 7.0, 1.3 Hz, 1H), 7.01 (td, J=7.5, 7.0, 1.0 Hz, 1H) , 6.68 (s, 1H), 6.23 (d, J=1.4 Hz, 1H), 6.01 (d, J=1.4 Hz, 1H), 6.07-5.93 ( m, 1H), 5.82 (s, 1H), 5.41-5.19 (m, 2H), 5.1 (d, J=11.7 Hz, 1H), 4.66 (dt, J =5.9, 1.3 Hz, 1H), 4.57 (s, 1H), 4.37 (s, 1H), 4.33-4.20 (m, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.46 (d, J=4.2 Hz, 2H), 3.22-3.13 (m, 1H), 3.11-2.88 (m, 4H), 2.66 (dd , J=15.2, 4.2 Hz, 1H), 2.51 (dd, J=15.3, 6.0 Hz, 1H), 2.43-2.32 (m, 2H), 2, 31 (s, 3H), 2.26 (s,

- 114 046742- 114 046742

3H), 2,19 (с, 3H), 2,04 (с, 3H). ИЭР-МС m/z: 877,3 (M+H)+.3H), 2.19 (s, 3H), 2.04 (s, 3H). ESI-MS m/z: 877.3 (M+H)+.

В)IN)

MeMe

PdCI₂(PPh₃)₂Bu₃SnHPdCl ₂ (PPh ₃ ) ₂ Bu ₃ SnH

АсОНAcOH

ДХМDXM

MeMe

10-S10-S

К раствору 10-S (650 мг, 0,72 ммоль) в CH₂Cl₂ To a solution of 10-S (650 mg, 0.72 mmol) in CH ₂ Cl ₂

11-S (13,3 мл, 18 мл/ммоль) добавляют дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия(П) (83 мг, 0,11 ммоль) и уксусную кислоту (0,42 мл, 7,4 ммоль). Гидрид трибутилолова (1,2 мл, 4,4 ммоль) добавляют при 0°C, реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 0,5 ч и концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (гексан:EtOAc, от 100:1 до 1:100 и EtOAc:CH₃OH, от 100:1 до 1:100) с получением 11-S (445 мг, 78%).11-S (13.3 mL, 18 mL/mmol), add bis(triphenylphosphine)palladium(P) dichloride (83 mg, 0.11 mmol) and acetic acid (0.42 mL, 7.4 mmol). Tributyltin hydride (1.2 ml, 4.4 mmol) was added at 0°C, the reaction mixture was stirred at 23°C for 0.5 h and concentrated in vacuo. Flash chromatography (hexane:EtOAc, 100:1 to 1:100 and EtOAc:CH ₃ OH, 100:1 to 1:100) gave 11-S (445 mg, 78%).

R=0,5 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 1:1).R=0.5 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 1:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,74 (с, 1H), 7,36 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,26 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,12 (ддт, J=8,3, 7,0, 1,4 Гц, 1H), 7,02 (ддт, J=8,3, 7,0, 1,4 Гц, 1H), 6,62 (с, 1H), 6,26 (д, J=1,5 Гц, 1H), 6,04 (д, J=1,5 Гц, 1H), 5,12 (д, J=11,8 Гц, 1H), 4,59 (с, 1H), 4,42 (с, 1H), 4,36-4,17 (м, 3H), 3,81 (с, 3H), 3,51-3,39 (м, 3H), 2,98-2,75 (м, 4H), 2,69-2,60 (м, 2H), 2,47 (д, J=16,1 Гц, 1H), 2,38 (с, 3H), 2,35-2,17 (м, 2H), 2,28 (с, 3H), 2,13 (с, 3H), 2,04 (с, 3H).1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.74 (s, 1H), 7.36 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.26 (d, J=8.1 Hz, 1H ), 7.12 (ddt, J=8.3, 7.0, 1.4 Hz, 1H), 7.02 (ddt, J=8.3, 7.0, 1.4 Hz, 1H), 6.62 (s, 1H), 6.26 (d, J=1.5 Hz, 1H), 6.04 (d, J=1.5 Hz, 1H), 5.12 (d, J=11 .8 Hz, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.42 (s, 1H), 4.36-4.17 (m, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.51 -3.39 (m, 3H), 2.98-2.75 (m, 4H), 2.69-2.60 (m, 2H), 2.47 (d, J=16.1 Hz, 1H ), 2.38 (s, 3H), 2.35-2.17 (m, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 2.04 (s, 3H) .

ИЭР-МС m/z: 793,3 (M+H)⁺.ESI-MS m/z: 793.3 (M+H) ⁺ .

К раствору 11-S (435 мг, 0,55 ммоль) в CH₃CN:H₂O (1,39:1, 38,5 мл, 0,015 M) добавляют AgNO₃(1,84 г, 11 ммоль). Через 24 ч при 23°C, реакционную смесь гасят смесью 1:1 насыщенных водных растворов NaCl и NaHCO₃, перемешивают в течение 15 мин, разбавляют CH₂Cl₂, перемешивают в течение 5 мин и экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением 12-S (152 мг, 35%).To a solution of 11-S (435 mg, 0.55 mmol) in CH ₃ CN:H ₂ O (1.39:1, 38.5 ml, 0.015 M) add AgNO ₃ (1.84 g, 11 mmol). After 24 hours at 23°C, the reaction mixture is quenched with a 1:1 mixture of saturated aqueous solutions of NaCl and NaHCO ₃ , stirred for 15 minutes, diluted with CH ₂ Cl ₂ , stirred for 5 minutes and extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give 12-S (152 mg, 35%).

R=0,2 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 9:1).R=0.2 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 9:1).

¹H ЯМР (500 МГц, CD3OD): δ 7,34 (дд, J=7,7, 1,5 Гц, 1H), 7,28 (дд, J=7,7, 1,5 Гц, 1H), 7,04 (ддт, J=8,2, 7,0, 1,1 Гц, 1H), 6,95 (ддт, J=8,2, 7,0, 1,2 Гц, 1H), 6,55 (с, 1H), 6,31-6,25 (м, 1H), 6,15-6,05 (м, 1H), 5,31 (д, J=11,4 Гц, 1H), 4,91 (с, 1H), 4,64 (с, 1H), 4,40-4,19 (м, 3H), 3,76 (с, 3H), 3,64 (д, J=5,2 Гц, 1H), 3,44 (д, J=9,0 Гц, 1H), 3,03-2,85 (м, 4H), 2,85-2,65 (м, 2H), 2,59 (д, J=15,6 Гц, 1H), 2,52-2,39 (м, 2H), 2,37 (с, 3H), 2,27 (с, 3H), 2,09 (с, 3H), 2,00 (с, 3H). ^1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 7.34 (dd, J=7.7, 1.5 Hz, 1H), 7.28 (dd, J=7.7, 1.5 Hz, 1H) , 7.04 (ddt, J=8.2, 7.0, 1.1 Hz, 1H), 6.95 (ddt, J=8.2, 7.0, 1.2 Hz, 1H), 6 .55 (s, 1H), 6.31-6.25 (m, 1H), 6.15-6.05 (m, 1H), 5.31 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.64 (s, 1H), 4.40-4.19 (m, 3H), 3.76 (s, 3H), 3.64 (d, J=5, 2 Hz, 1H), 3.44 (d, J=9.0 Hz, 1H), 3.03-2.85 (m, 4H), 2.85-2.65 (m, 2H), 2, 59 (d, J=15.6 Hz, 1H), 2.52-2.39 (m, 2H), 2.37 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.09 (s , 3H), 2.00 (s, 3H).

¹³C ЯМР (126 МГц, CD3OD): δ 171,4, 169,3, 148,6, 145,8, 143,5, 141,2, 140,8, 136,5, 131,2, 130,3, 129,5, 126,3, 121,6, 121,2, 119,8, 119,4, 118,6, 117,5, 114,9, 111,0, 107,5, 107,4, 102,2, 91,1, 63,5, 60,5, 59,2, 58,5, 55,3, 54,7, 53,4, 52,7, 48,6, 44,7, 42,7, 39,9, 24,3, 23,4, 19,2, 15,1, 8,2. ¹³ C NMR (126 MHz, CD3OD): δ 171.4, 169.3, 148.6, 145.8, 143.5, 141.2, 140.8, 136.5, 131.2, 130.3 , 129.5, 126.3, 121.6, 121.2, 119.8, 119.4, 118.6, 117.5, 114.9, 111.0, 107.5, 107.4, 102 ,2, 91.1, 63.5, 60.5, 59.2, 58.5, 55.3, 54.7, 53.4, 52.7, 48.6, 44.7, 42.7 , 39.9, 24.3, 23.4, 19.2, 15.1, 8.2.

ИЭР-МС m/z: 766,2 (M-H₂O+H)+.ESI-MS m/z: 766.2 (MH ₂ O+H)+.

(+)-ВР-ИЭР-ВП-МС m/z: 766,2958 [M-H₂O+H]+ (рассч. для C₄₁H₄₄N₅O₈S: 766,2905).(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 766.2958 [MH ₂ O+H]+ (calculated for C ₄₁ H ₄₄ N ₅ O ₈ S: 766.2905).

К раствору 10-S (5 мг, 0,006 ммоль) в CH3CN:H2O (1,39:1, 0,5 мл, 0,015 M) добавляют AgNO₃ (29 мг,To a solution of 10-S (5 mg, 0.006 mmol) in CH3CN:H2O (1.39:1, 0.5 ml, 0.015 M) add AgNO ₃ (29 mg,

- 115 046742- 115 046742

0,17 ммоль). Через 20 ч при 23°C, реакционную смесь гасят смесью 1:1 насыщенных водных растворов NaCl и NaHCO₃, перемешивают в течение 15 мин, разбавляют CH₂Cl₂, перемешивают в течение 5 мин и экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением 13-S (5 мг, 100%).0.17 mmol). After 20 hours at 23°C, the reaction mixture is quenched with a 1:1 mixture of saturated aqueous solutions of NaCl and NaHCO ₃ , stirred for 15 minutes, diluted with CH ₂ Cl ₂ , stirred for 5 minutes and extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give 13-S (5 mg, 100%).

Rj=0,40 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 9:1).Rj=0.40 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 9:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,75 (с, 1H), 7,37 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,32-7,20 (м, 1H), 7,12 (т, J=7,7 Гц, 1H), 7,02 (т, J=7,4 Гц, 1H), 6,84 (с, 1H), 6,24 (с, 1H), 6,08-5,97 (м, 1H), 6,01 (с, 1H), 5,87 (с, 1H), 5,42-5,19 (м, 4H), 4,88 (с, 1H), 4,69-4,65 (м, 2H), 4,58 (с, 1H), 4,28-4,13 (м, 2H), 3,84 (с, 3H), 3,68-3,40 (м, 2H), 3,243,15 (м, 2H), 3,08-2,90 (м, 2H), 2,73-2,57 (м, 2H), 2,53-2,37 (м, 3H), 2,34 (с, 3H), 2,25 (с, 3H), 2,14 (с, 3H), 2,10-2,16 (м, 1H), 2,03 (с, 3H). ^1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.75 (s, 1H), 7.37 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.32-7.20 (m, 1H), 7.12 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.02 (t, J=7.4 Hz, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.24 (s, 1H), 6.08-5.97 (m, 1H), 6.01 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 5.42-5.19 (m, 4H), 4.88 (s, 1H), 4.69-4.65 (m, 2H), 4.58 (s, 1H), 4.28-4.13 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.68 -3.40 (m, 2H), 3.243.15 (m, 2H), 3.08-2.90 (m, 2H), 2.73-2.57 (m, 2H), 2.53-2 .37 (m, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 2.10-2.16 (m, 1H), 2. 03 (s, 3H).

ИЭР-МС m/z: 850,3 (M-H₂O+H)+.ESI-MS m/z: 850.3 (MH ₂ O+H)+.

Пример 0-7.Example 0-7.

A) Синтез ^)-5-метокситриптофанола (17-S)A) Synthesis of ^)-5-methoxytryptophanol (17-S)

ТГФ 16-S 17-STHF 16-S 17-S

К раствору LiAlH₄ (23,4 мл, 1,0 M в ТГФ, 23,4 ммоль) при -40°C осторожно добавляют H₂SO₄ (0,31 мл, 5,57 ммоль) и суспензию 5-метокси-Ь-триптофана (16-S) (1,0 г, 4,26 ммоль, Chem-Impex) в ТГФ (13,4 мл, 0,3 M). Реакционную смесь оставляют выделять газ при 23°C, нагревают в течение 3 ч при 80°C и 18 ч при 23°C. Охлаждают при -21°C, реакционную смесь осторожно гасят NaOH 2N до щелочного pH. EtOAc добавляют, и смесь фильтруют через Celite® и промывают CH3OH. Неочищенный продукт концентрируют под вакуумом с получением 17-S в виде неочищенного продукта, который применяют на следующей стадии без дальнейшей очистки.To a solution of LiAlH ₄ (23.4 ml, 1.0 M in THF, 23.4 mmol) at -40°C, carefully add H ₂ SO ₄ (0.31 ml, 5.57 mmol) and a suspension of 5-methoxy- L-tryptophan (16-S) (1.0 g, 4.26 mmol, Chem-Impex) in THF (13.4 ml, 0.3 M). The reaction mixture is allowed to evolve gas at 23°C, heated for 3 hours at 80°C and 18 hours at 23°C. Cool at -21°C, the reaction mixture is carefully quenched with NaOH 2N to an alkaline pH. EtOAc is added and the mixture is filtered through Celite® and washed with CH3OH. The crude product is concentrated in vacuo to obtain 17-S as a crude product, which is used in the next step without further purification.

R=0,2 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 4:1).R=0.2 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 4:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,19 (дт, J=8,8, 0,7 Гц, 1H), 7,06-7,00 (м, 2H), 6,72 (дд, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 3,77 (с, 3H), 3,63-3,48 (м, 1H), 3,42-3,33 (м, 1H), 3,17-3,06 (м, 1H), 2,86 (ддт, J=14,3, 6,1, 0,8 Гц, 1H), 2,66 (дд, J=14,3, 7,5 Гц, 1H).1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.19 (dt, J=8.8, 0.7 Hz, 1H), 7.06-7.00 (m, 2H), 6.72 (dd, J=8.8, 2.4 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.63-3.48 (m, 1H), 3.42-3.33 (m, 1H), 3 ,17-3.06 (m, 1H), 2.86 (ddt, J=14.3, 6.1, 0.8 Hz, 1H), 2.66 (dd, J=14.3, 7, 5 Hz, 1H).

ИЭР-МС m/z: 221,4 (M+H)⁺.ESI-MS m/z: 221.4 (M+H) ⁺ .

B) Синтез ^)-5-метокситриптофанола (17-R)B) Synthesis of ^)-5-methoxytryptophanol (17-R)

ТГФ 16-R 17-RTHF 16-R 17-R

К раствору LiAlH₄ (11,7 мл, 1,0 M в ТГФ, 11,7 ммоль) при -40°C добавляют осторожно H₂SO₄ (0,31 мл, 5,75 ммоль) и суспензию 5-метокси-Э-триптофана (16-R) (0,5 г, 2,13 ммоль, Aldrich) в ТГФ (6,7 мл, 0,3 M). Реакционную смесь оставляют выделять газ при 23°C, нагревают в течение 3,5 ч при 80°C и 18 ч при 23°C. Охлаждают при -21°C, реакционную смесь осторожно гасят NaOH 2N до щелочного pH. EtOAc добавляют и смесь фильтруют через Celite® и промывают CH3OH. Неочищенный продукт концентрируют под вакуумом с получением 17-R в виде неочищенного продукта, который применяют на следующей стадии без дальнейшей очистки.To a solution of LiAlH ₄ (11.7 ml, 1.0 M in THF, 11.7 mmol) at -40°C, carefully add H ₂ SO ₄ (0.31 ml, 5.75 mmol) and a suspension of 5-methoxy- E-tryptophan (16-R) (0.5 g, 2.13 mmol, Aldrich) in THF (6.7 ml, 0.3 M). The reaction mixture is allowed to evolve gas at 23°C, heated for 3.5 hours at 80°C and 18 hours at 23°C. Cool at -21°C, the reaction mixture is carefully quenched with NaOH 2N to an alkaline pH. EtOAc is added and the mixture is filtered through Celite® and washed with CH3OH. The crude product is concentrated in vacuo to give 17-R as a crude product, which is used in the next step without further purification.

R=0,2 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 4:1).R=0.2 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 4:1).

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7,20 (д, J=8,9 Гц, 1H), 7,06-6,96 (м, 2H), 6,71 (дд, J=8,8, 2,5 Гц, 1H), 3,75 (с, 3H), 3,62-3,52 (м, 1H), 3,37 (дд, J=10,8, 7,0 Гц, 1H), 3,09 (шс, 1H), 2,82 (дд, J=14,3, 5,9 Гц, 1H), 2,62 (дд, J=14,4, 7,6 Гц, 1H).1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.20 (d, J=8.9 Hz, 1H), 7.06-6.96 (m, 2H), 6.71 (dd, J=8.8 , 2.5 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.62-3.52 (m, 1H), 3.37 (dd, J=10.8, 7.0 Hz, 1H) , 3.09 (shs, 1H), 2.82 (dd, J=14.3, 5.9 Hz, 1H), 2.62 (dd, J=14.4, 7.6 Hz, 1H).

ИЭР-МС m/z: 221,6 (M+H)+.ESI-MS m/z: 221.6 (M+H)+.

Пример 0-8.Example 0-8.

- 116 046742- 116 046742

К раствору 1 (530 мг, 0,85 ммоль) в уксусной кислоте (10,6 мл, 0,08 M) добавляют 17-S (469 мг, 2,13 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 50°C в течение 18 ч и затем уксусную кислоту выпаривают. Водный насыщенный раствор NaHCO₃ добавляют, и смесь экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (геkсан:EtOAc, 1:1) дает соединение 18-S (420 мг, 60%).To a solution of 1 (530 mg, 0.85 mmol) in acetic acid (10.6 mL, 0.08 M) add 17-S (469 mg, 2.13 mmol). The reaction mixture is stirred at 50°C for 18 hours and then the acetic acid is evaporated. An aqueous saturated solution of NaHCO ₃ is added and the mixture is extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. Flash chromatography (hexane:EtOAc, 1:1) gives compound 18-S (420 mg, 60%).

Rf=0,3 (гексан:EtOAc, 1:1).Rf=0.3 (hexane:EtOAc, 1:1).

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7,13 (д, J=8,8 Гц, 1H), 6,80 (д, J=2,4 Гц, 1H), 6,66 (дд, J=8,8, 2,5 Гц, 1H), 6,51 (с, 1H), 6,27 (с, 1H), 6,11 (с, 1H), 5,21 (д, J=11,7 Гц, 1H), 4,67 (с, 1H), 4,49-4,29 (м, 4H), 3,75 (с, 3H), 3,73 (с, 3H), 3,47 (т, J=5,8 Гц, 3H), 3,37 (д, J=5,1 Гц, 1H), 3,01-2,81 (м, 2H), 2,75 (д, J=7,4 Гц, 1H), 2,66 (дд, J=15,1, 4,1 Гц, 1H), 2,55-2,35 (м, 4H), 2,34 (с, 3H), 2,28 (с, 3H), 2,11 (с, 3H), 1,99 (с, 3H).1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.13 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.80 (d, J=2.4 Hz, 1H), 6.66 (dd, J= 8.8, 2.5 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.21 (d, J=11.7 Hz, 1H), 4.67 (s, 1H), 4.49-4.29 (m, 4H), 3.75 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.47 (t , J=5.8 Hz, 3H), 3.37 (d, J=5.1 Hz, 1H), 3.01-2.81 (m, 2H), 2.75 (d, J=7, 4 Hz, 1H), 2.66 (dd, J=15.1, 4.1 Hz, 1H), 2.55-2.35 (m, 4H), 2.34 (s, 3H), 2, 28 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.99 (s, 3H).

ИЭР-МС m/z: 824,3 (M+H)⁺.ESI-MS m/z: 824.3 (M+H) ⁺ .

В)IN)

МеОMeO

MeMe

МеОMeO

AgNO₃ _AgNO3

CH₃CN / H₂O _CH3CN / _H2O

MeMe

18-S18-S

19-S19-S

К раствору 18-S (420 мг, 0,519 ммоль) в CH3CN:H₂O (1,39:1, 36 мл, 0,015 M) добавляют AgNO₃ (2,60 г, 15,3 ммоль). Через 3 ч при 23°C, реакционную смесь гасят смесью 1:1 насыщенных водных растворов NaCl и NaHCO₃, перемешивают в течение 15 мин, разбавляют CH₂Cl₂, перемешивают в течение 5 мин и экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением 19-S (250 мг, 60%).To a solution of 18-S (420 mg, 0.519 mmol) in CH3CN:H ₂ O (1.39:1, 36 mL, 0.015 M) add AgNO ₃ (2.60 g, 15.3 mmol). After 3 hours at 23°C, the reaction mixture is quenched with a 1:1 mixture of saturated aqueous solutions of NaCl and NaHCO ₃ , stirred for 15 minutes, diluted with CH ₂ Cl ₂ , stirred for 5 minutes and extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give 19-S (250 mg, 60%).

Rf=0,45 (СН2С12:СНзОН, 9:1).Rf=0.45 (CH2C12:CH3OH, 9:1).

1H ЯМР (500 МГц, CD3OD): δ 7,15 (дд, J=8,9, 0,6 Гц, 1H), 6,82 (дд, J=2,4, 0,6 Гц, 1H), 6,68 (дд, J=8,8, 2,5 Гц, 1H), 6,54 (с, 1H), 6,27 (д, J=1,3 Гц, 1H), 6,08 (д, J=1,3 Гц, 1H), 5,30 (д, J=11,5 Гц, 1H), 4,62 (с, 1H), 4,34 (дд, J=11,4, 2,0 Гц, 1H), 4,31-4,27 (м, 2H), 3,76 (с, 3H), 3,75 (с, 3H), 3,66-3,58 (м, 1H), 3,55-3,45 (м, 2H), 3,42 (д, J=7,8 Гц, 1H), 2,93-2,73 (м, 3H), 2,68 (дд, J=15,1, 4,2 Гц, 1H), 2,54 (д, J=15,4 Гц, 1H), 2,42 (дд, J=15,1, 10,1 Гц, 2H), 2,35 (с, 3H), 2,29 (с, 3H), 2,09 (с, 3H), 2,00 (с, 3H).1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 7.15 (dd, J=8.9, 0.6 Hz, 1H), 6.82 (dd, J=2.4, 0.6 Hz, 1H), 6.68 (dd, J=8.8, 2.5 Hz, 1H), 6.54 (s, 1H), 6.27 (d, J=1.3 Hz, 1H), 6.08 (d , J=1.3 Hz, 1H), 5.30 (d, J=11.5 Hz, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.34 (dd, J=11.4, 2, 0 Hz, 1H), 4.31-4.27 (m, 2H), 3.76 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.66-3.58 (m, 1H), 3.55-3.45 (m, 2H), 3.42 (d, J=7.8 Hz, 1H), 2.93-2.73 (m, 3H), 2.68 (dd, J= 15.1, 4.2 Hz, 1H), 2.54 (d, J=15.4 Hz, 1H), 2.42 (dd, J=15.1, 10.1 Hz, 2H), 2, 35 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 2.00 (s, 3H).

¹³C ЯМР (126 МГц, CD3OD): δ 172,7, 170,8, 155,1, 149,9, 147,2, 145,0, 142,6, 142,2, 133,1, 132,4, 132,1, 131,3, 128,1, 122,5, 121,6, 120,3, 116,4, 113,0, 112,9, 111,4, 109,0, 103,6, 100,8, 92,5, 66,6, 65,0, 61,7, 60,4, 59,9, 56,7, 56,1, 54,8, 54,1, 51,7, 44,1, 41,3, 30,7, 25,4, 24,7, 20,6, 16,3, 9,5. ¹³ C NMR (126 MHz, CD3OD): δ 172.7, 170.8, 155.1, 149.9, 147.2, 145.0, 142.6, 142.2, 133.1, 132.4 , 132.1, 131.3, 128.1, 122.5, 121.6, 120.3, 116.4, 113.0, 112.9, 111.4, 109.0, 103.6, 100 ,8, 92.5, 66.6, 65.0, 61.7, 60.4, 59.9, 56.7, 56.1, 54.8, 54.1, 51.7, 44.1 , 41.3, 30.7, 25.4, 24.7, 20.6, 16.3, 9.5.

ИЭР-МС m/z: 798,1 (M-H₂O+H)+.ESI-MS m/z: 798.1 (MH ₂ O+H)+.

(+)-ВР-ИЭР-ВП-МС m/z:797,2899 [M-H₂O+H]+ (Рассч. для C₄₂H₄₅N₄O₁₀S 797,2851).(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 797.2899 [MH ₂ O+H]+ (Calc. for C ₄₂ H ₄₅ N ₄ O ₁₀ S 797.2851).

Пример 0-9.Example 0-9.

- 117 046742- 117 046742

К раствору 1 (311 мг, 0,50 ммоль) в уксусной кислоте (6,25 мл, 0,08 M) добавляют 17-R (220 мг, 1,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 50°C в течение 18 ч и затем уксусную кислоту выпаривают. Водный насыщенный раствор NaHCO₃ добавляют и смесь экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (гексан:EtOAc, 1:1) дает соединение 18-R (280 мг, 68%).To a solution of 1 (311 mg, 0.50 mmol) in acetic acid (6.25 mL, 0.08 M) add 17-R (220 mg, 1.0 mmol). The reaction mixture is stirred at 50°C for 18 hours and then the acetic acid is evaporated. An aqueous saturated solution of NaHCO ₃ is added and the mixture is extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. Flash chromatography (hexane:EtOAc, 1:1) gives compound 18-R (280 mg, 68%).

Rf=0,3 (гексан: EtOAc, 1:1).Rf=0.3 (hexane: EtOAc, 1:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,53 (с, 1H), 7,18 (д, J=8,7 Гц, 1H), 6,82 (д, J=2,4 Гц, 1H), 6,78 (дд, J=8,6, 2,3 Гц, 1H), 6,60 (с, 1H), 6,23 (с, 1H), 6,02 (с, 1H), 5,76 (с, 1H), 5,04 (д, J=11,7 Гц, 1H), 4,62 (с, 1H), 4,36 (с, 1H), 4,28 (д, J=5,0 Гц, 1H), 4,24-4,09 (м, 3H), 3,81 (с, 3H), 3,79 (с, 3H), 3,64 (с, 1H), 3,47-3,40 (м, 3H), 3,012,90 (м, 2H), 2,53 (д, J=6,9 Гц, 2H), 2,45-2,41 (м, 1H), 2,40 (с, 3H), 2,27 (с, 3H), 2,22-2,14 (м, 1H), 2,18 (с, 3H), 2,06 (с, 3H). ^1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.53 (s, 1H), 7.18 (d, J=8.7 Hz, 1H), 6.82 (d, J=2.4 Hz, 1H), 6.78 (dd, J=8.6, 2.3 Hz, 1H), 6.60 (s, 1H), 6.23 (s, 1H), 6.02 (s, 1H), 5.76 (s, 1H), 5.04 (d, J=11.7 Hz, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.36 (s, 1H), 4.28 (d, J =5.0 Hz, 1H), 4.24-4.09 (m, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.64 (s, 1H), 3 .47-3.40 (m, 3H), 3.012.90 (m, 2H), 2.53 (d, J=6.9 Hz, 2H), 2.45-2.41 (m, 1H), 2.40 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.22-2.14 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 2.06 (s, 3H).

ИЭР-МС m/z: 824,3 (M+H)+.ESI-MS m/z: 824.3 (M+H)+.

18-R 19-R18-R 19-R

К раствору 18-R (330 мг, 0,40 ммоль) в CH₃CN:H₂O (1,39:1, 28 мл, 0,015 M) добавляют AgNO₃ (2,04 г, 12,0 ммоль). Через 3 ч при 23°C, реакционную смесь гасят смесью 1:1 насыщенных водных растворов NaCl и NaHCO3, перемешивают в течение 15 мин, разбавляют CH2Cl2, перемешивают в течение 5 мин и экстрагируют CH2Cl2. Объединенные органические слои сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением 19-R (224 мг, 69%).To a solution of 18-R (330 mg, 0.40 mmol) in CH ₃ CN:H ₂ O (1.39:1, 28 ml, 0.015 M) add AgNO ₃ (2.04 g, 12.0 mmol). After 3 hours at 23°C, the reaction mixture is quenched with a 1:1 mixture of saturated aqueous solutions of NaCl and NaHCO3, stirred for 15 minutes, diluted with CH2Cl2, stirred for 5 minutes and extracted with CH2Cl2. The combined organic layers are dried over anhydrous Na2SO4, filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give 19-R (224 mg, 69%).

Rf=0,44 (CH2Cl2:CH₃OH, 9:1).Rf=0.44 (CH2Cl2:CH ₃ OH, 9:1).

1H ЯМР (500 МГц, CD3OD): δ 7,14 (дд, J=8,8, 0,5 Гц, 1H), 6,83 (д, J=2,5 Гц, 1H), 6,68 (дд, J=8,8, 2,5 Гц, 1H), 6,59 (с, 1H), 6,26 (д, J=1,4 Гц, 1H), 6,07 (д, J=1,4 Гц, 1H), 5,21 (д, J=11,5 Гц, 1H), 4,68-4,55 (м, 1H), 4,32-4,25 (м, 2H), 4,12 (дд, J=11,5, 2,1 Гц, 1H), 3,75 (с, 3H), 3,74 (с, 3H), 3,60 (д, J=5,2 Гц, 1H), 3,57-3,45 (м, 3H), 3,41 (д, J=8,8 Гц, 1H), 2,97-2,83 (м, 3H), 2,73 (дд, J=15,0, 3,4 Гц, 1H), 2,69 (д, J=14,9 Гц, 1H), 2,34 (с, 3H), 2,30 (с, 3H), 2,20 (дд, J=15,1, 10,4 Гц, 1H), 2,12 (с, 3H), 2,11-2,08 (м, 1H), 2,05 (с, 3H).1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 7.14 (dd, J=8.8, 0.5 Hz, 1H), 6.83 (d, J=2.5 Hz, 1H), 6.68 ( dd, J=8.8, 2.5 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 6.26 (d, J=1.4 Hz, 1H), 6.07 (d, J=1 .4 Hz, 1H), 5.21 (d, J=11.5 Hz, 1H), 4.68-4.55 (m, 1H), 4.32-4.25 (m, 2H), 4 .12 (dd, J=11.5, 2.1 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 3.60 (d, J=5.2 Hz, 1H), 3.57-3.45 (m, 3H), 3.41 (d, J=8.8 Hz, 1H), 2.97-2.83 (m, 3H), 2.73 (dd , J=15.0, 3.4 Hz, 1H), 2.69 (d, J=14.9 Hz, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 2 .20 (dd, J=15.1, 10.4 Hz, 1H), 2.12 (s, 3H), 2.11-2.08 (m, 1H), 2.05 (s, 3H).

¹³C ЯМР (126 МГц, CD3OD): δ 173,0, 170,8, 155,0, 149,8, 147,3, 145,0, 142,8, 142,3, 133,5, 133,1, 132,2, 132,1, 131,1, 130,5, 127,8, 122,5, 121,7, 120,0, 116,4, 113,5, 112,9, 111,4, 110,2, 103,5, 100,9, 92,6, 66,8, 64,5, 61,3, 60,4, 60,0, 56,8, 56,1, 55,9, 54,1, 44,1, 41,3, 25,6, 24,5, 20,6, 16,2, 9,6. ¹³ C NMR (126 MHz, CD3OD): δ 173.0, 170.8, 155.0, 149.8, 147.3, 145.0, 142.8, 142.3, 133.5, 133.1 , 132.2, 132.1, 131.1, 130.5, 127.8, 122.5, 121.7, 120.0, 116.4, 113.5, 112.9, 111.4, 110 ,2, 103.5, 100.9, 92.6, 66.8, 64.5, 61.3, 60.4, 60.0, 56.8, 56.1, 55.9, 54.1 , 44.1, 41.3, 25.6, 24.5, 20.6, 16.2, 9.6.

ИЭР-МС m/z: 797,4 (M-H₂O+H)+.ESI-MS m/z: 797.4 (MH ₂ O+H)+.

(+)-ВР-ИЭР-ВП-МС m/z: 797,2896 [M-H2O+H]+ (рассч. для C42H45N4O10S 797,2851).(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 797.2896 [M-H2O+H]+ (calc. for C42H45N4O10S 797.2851).

Пример 0-10. Синтез аллил N-[(S)-2-амино-3-(5-метокси-1H-индол-3-ил)пропил)]карбамата (24-S)Example 0-10. Synthesis of allyl N-[(S)-2-amino-3-(5-methoxy-1H-indol-3-yl)propyl)]carbamate (24-S)

- 118 046742- 118 046742

К раствору 17-S (6,9 г, 31,4 ммоль) в CH₃CN (126 мл, 4 мл/ммоль) добавляют ди-трет-бутил дикарбонат (13,7 г, 62,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 5,5 ч, концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) дает 20-S (4,5 г, 45%).To a solution of 17-S (6.9 g, 31.4 mmol) in CH ₃ CN (126 mL, 4 mL/mmol) was added di-tert-butyl dicarbonate (13.7 g, 62.8 mmol). The reaction mixture was stirred at 23°C for 5.5 hours and concentrated under vacuum. Flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) gave 20-S (4.5 g, 45%).

R=0,6 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 9:1).R=0.6 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 9:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 8,04 (с, 1H), 7,25 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,10 (д, J=2,4 Гц, 1H), 7,03 (с, 1H), 6,87 (дд, J=8,8, 2,5 Гц, 1H), 4,83 (с, 1H), 3,98 (с, 1H), 3,87 (с, 3H), 3,73-3,58 (м, 2H), 2,96 (д, J=6,6 Гц, 2H), 1,42 (с, 9H). ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 8.04 (s, 1H), 7.25 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.10 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.87 (dd, J=8.8, 2.5 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 3.98 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.73-3.58 (m, 2H), 2.96 (d, J=6.6 Hz, 2H), 1.42 (s, 9H).

К раствору 20-S (4,5 г, 14 ммоль) в CH₂Cl₂ (84 мл, мл/ммоль) добавляют фталимид (4,5 г, 30,9 ммоль), трифенилфосфин (8,1 г, 30,9 ммоль) и смесь охлаждают при 0°C. Раствор 40% диэтилазодикарбоксилата (ДЭАД) в CH₂Cl₂ (10,4 мл, 35 ммоль) добавляют в течение 15 мин. Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 18 ч, концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (гексан:EtOAc, от 99:1 до 85:15) с получением 21-S (5,8 г, 92%).To a solution of 20-S (4.5 g, 14 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (84 ml, ml/mmol) add phthalimide (4.5 g, 30.9 mmol), triphenylphosphine (8.1 g, 30. 9 mmol) and the mixture is cooled at 0°C. A solution of 40% diethyl azodicarboxylate (DEAD) in CH ₂ Cl ₂ (10.4 ml, 35 mmol) was added over 15 minutes. The reaction mixture was stirred at 23°C for 18 hours and concentrated under vacuum. The resulting residue was purified by flash chromatography (hexane:EtOAc, 99:1 to 85:15) to give 21-S (5.8 g, 92%).

Rf=0,55 (гексан:EtoAc, 1:1).Rf=0.55 (hexane:EtoAc, 1:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 8,48 (с, 1H), 7,78 (дд, J=5,5, 3,1 Гц, 2H), 7,69-7,61 (м, 2H), 7,21 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,06 (дд, J=18,5, 2,4 Гц, 2H), 6,81 (дд, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 4,87 (с, 1H); 4,39 (с, 1H), 3,87 (с, 3H), 3,83-3,66 (м, 2H), 2,98 (д, J=6,1 Гц, 2H), 1,20 (с, 9H). ^1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 8.48 (s, 1H), 7.78 (dd, J=5.5, 3.1 Hz, 2H), 7.69-7.61 (m , 2H), 7.21 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.06 (dd, J=18.5, 2.4 Hz, 2H), 6.81 (dd, J=8, 8, 2.4 Hz, 1H), 4.87 (s, 1H); 4.39 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.83-3.66 (m, 2H), 2.98 (d, J=6.1 Hz, 2H), 1.20 (s, 9H).

К раствору 21-S (6,29 г, 14 ммоль) в этаноле (420 мл, 30 мл/ммоль) добавляют моногидрат гидразина (61,1 мл, 1260 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 80°C в герметично закрытой пробирке в течение 2 ч, концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 100:1 до 50:50) дает 22-S (4,2 г, 95%).To a solution of 21-S (6.29 g, 14 mmol) in ethanol (420 mL, 30 mL/mmol) was added hydrazine monohydrate (61.1 mL, 1260 mmol). The reaction mixture is stirred at 80°C in a hermetically sealed test tube for 2 hours and concentrated under vacuum. Flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 100:1 to 50:50) gave 22-S (4.2 g, 95%).

R=0,1 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 8:2).R=0.1 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 8:2).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,22 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,12 (д, J=2,4 Гц, 1H), 7,06 (с, 1H), 6,76 (дд, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 4,06-3,97 (м, 1H), 3,82 (с, 3H), 3,06-2,82 (м, 4H), 1,37 (с, 9H).1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.22 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.12 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.06 (s, 1H ), 6.76 (dd, J=8.8, 2.4 Hz, 1H), 4.06-3.97 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.06-2, 82 (m, 4H), 1.37 (s, 9H).

- 119 046742- 119 046742

К раствору 22-S (4,0 г, 12,52 ммоль) в CH3CN (125 мл, 10 мл/ммоль) и ДМФ (12 мл, 1 мл/ммоль) добавляют N.N-диизопропилэтиламин (1,8 мл, 10 ммоль) и аллилхлорформиат (13,3 мл, 125 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 5 ч. Смесь разбавляют EtOAc и NH₄Cl добавляют, и смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (Гексан:ЕЮАс, от 100:1 до 1:100) с получением 23-S (2,65 г, 52%).To a solution of 22-S (4.0 g, 12.52 mmol) in CH3CN (125 ml, 10 ml/mmol) and DMF (12 ml, 1 ml/mmol) add NN-diisopropylethylamine (1.8 ml, 10 mmol ) and allyl chloroformate (13.3 ml, 125 mmol). The reaction mixture was stirred at 23°C for 5 hours. The mixture was diluted with EtOAc and NH ₄ Cl was added and the mixture was extracted with EtOAc. The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (Hexane:EEAc, 100:1 to 1:100) to give 23-S (2.65 g, 52%).

Rf=0,5 (гексан:ЕЮАс, 1:1).Rf=0.5 (hexane:EAAc, 1:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 8,11 (с, 1H), 7,28-7,20 (м, 1H), 7,04 (д, J=13,1 Гц, 2H), 6,85 (дд, J=8,9, 2,4 Гц, 1H), 5,97-5,82 (м, 1H), 5,33-5,24 (м, 1H), 5,19 (дт, J=10,4, 1,3 Гц, 1H), 5,11 (с, 1H), 4,82 (с, 1H), 4,55 (д, J=5,6 Гц, 2H), 4,01 (с, 1H), 3,86 (с, 3H), 3,37 (д, J=13,7 Гц, 1H), 3,21 (с, 1H), 2,89 (дд, J=14,5, 7,0 Гц, 1H), 1,41 (с, 9H).1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 8.11 (s, 1H), 7.28-7.20 (m, 1H), 7.04 (d, J=13.1 Hz, 2H), 6 .85 (dd, J=8.9, 2.4 Hz, 1H), 5.97-5.82 (m, 1H), 5.33-5.24 (m, 1H), 5.19 (dt , J=10.4, 1.3 Hz, 1H), 5.11 (s, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.55 (d, J=5.6 Hz, 2H), 4 .01 (s, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.37 (d, J=13.7 Hz, 1H), 3.21 (s, 1H), 2.89 (dd, J= 14.5, 7.0 Hz, 1H), 1.41 (s, 9H).

К раствору 23-S (2,60 г, 6,44 ммоль) в CH₂Cl₂ (106 мл, 16,6 мл/ммоль) добавляют трифторуксусную кислоту (54 мл, 8,3 мл/ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 1,5 ч, концентрируют под вакуумом с получением 24-S (3,9 г, 100%).Trifluoroacetic acid (54 mL, 8.3 mL/mmol) was added to a solution of 23-S (2.60 g, 6.44 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (106 mL, 16.6 mL/mmol). The reaction mixture was stirred at 23°C for 1.5 hours, concentrated in vacuo to give 24-S (3.9 g, 100%).

Rj=0,1 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 9:1).Rj=0.1 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 9:1).

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 8,27 (с, 1H), 7,25 (дд, J=9,0, 2,4 Гц, 1H), 7,10 (с, 1H), 6,96 (д, J=2,3 Гц, 1H), 6,87 (дд, J=9,0, 2,4 Гц, 1H), 5,81 (ддт, J=16,3, 10,9, 5,7 Гц, 1H), 5,23 (дд, J=19,3, 13,6 Гц, 2H), 4,49 (д, J=5,9 Гц, 2H), 3,82 (с, 3H), 3,81-3,55 (м, 1H), 3,62-3,39 (м, 2H), 3,08 (квд, J=15,1, 7,3 Гц, 2H).1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.27 (s, 1H), 7.25 (dd, J=9.0, 2.4 Hz, 1H), 7.10 (s, 1H), 6. 96 (d, J=2.3 Hz, 1H), 6.87 (dd, J=9.0, 2.4 Hz, 1H), 5.81 (ddt, J=16.3, 10.9, 5.7 Hz, 1H), 5.23 (dd, J=19.3, 13.6 Hz, 2H), 4.49 (d, J=5.9 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.81-3.55 (m, 1H), 3.62-3.39 (m, 2H), 3.08 (kvd, J=15.1, 7.3 Hz, 2H).

Пример 0-11г.Example 0-11g.

К раствору 1 (120 мг, 0,19 ммоль) в уксусной кислоте (6 мл, 0,08 M) добавляют 24-S (117 мг, 0,35 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 18 ч и затем уксусную кислоту выпаривают. Водный насыщенный раствор NaHCO₃ добавляют и смесь экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (гексан:ЕЮАс, 1:1) дает соединение 25-S (95 мг, 54%).To a solution of 1 (120 mg, 0.19 mmol) in acetic acid (6 mL, 0.08 M) add 24-S (117 mg, 0.35 mmol). The reaction mixture is stirred at 23°C for 18 hours and then the acetic acid is evaporated. An aqueous saturated solution of NaHCO ₃ is added and the mixture is extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. Flash chromatography (hexane:EAAc, 1:1) gave compound 25-S (95 mg, 54%).

Rf=0,4 (гексан:ЕЮАс, 1:1).Rf=0.4 (hexane:EAAc, 1:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCI3): δ 7,64 (с, 1H), 7,14 (д, J=8,8 Гц, 1H), 6,80 (с, 1H), 6,77 (д, J=8,8 Гц, 1H), 6,68 (с, 1H), 6,24 (с, 1H), 6,03 (с, 1H), 6,02-5,93 (м, 1H), 5,76 (с, 1H), 5,38 (д, J=10,5 Гц, 1H), 5,26 (д, J=10,5 Гц, 1H), 5,11 (д, J=11,7 Гц, 1H), 4,66 (д, J=5,6 Гц, 2H), 4,57 (с, 1H), 4,37 (с, 1H), 4,33-4,19 (м, 3H), 3,82 (с, 3H), 3,79 (с, 3H), 3,46 (с, 2H), 3,17 (с, 1H), 3,10-2,90 (м, 3H), 2,68-2,45 (м, 2H), 2,38-2,33 (м, 1H), 2,32 (с, 3H), 2,27 (с, 3H), 2,16 (с, 3H), 2,04 (с, 2H).1H NMR (400 MHz, CDCI3): δ 7.64 (s, 1H), 7.14 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.77 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.68 (s, 1H), 6.24 (s, 1H), 6.03 (s, 1H), 6.02-5.93 (m, 1H), 5.76 (s, 1H), 5.38 (d, J=10.5 Hz, 1H), 5.26 (d, J=10.5 Hz, 1H), 5.11 (d, J=11 .7 Hz, 1H), 4.66 (d, J=5.6 Hz, 2H), 4.57 (s, 1H), 4.37 (s, 1H), 4.33-4.19 (m , 3H), 3.82 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.46 (s, 2H), 3.17 (s, 1H), 3.10-2.90 (m, 3H), 2.68-2.45 (m, 2H), 2.38-2.33 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 2.04 (s, 2H).

ИЭР-МС m/z: 907,1 (M+H)+.ESI-MS m/z: 907.1 (M+H)+.

- 120 046742- 120 046742

25-S 26-S25-S 26-S

К раствору 25-S (90 мг, 0,1 ммоль) в CH₂Cl₂ (2 мл, 18 мл/ммоль) добавляют дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия(П) (12 мг, 0,1 ммоль) и уксусную кислоту (0,056 мл, 0,99 ммоль). Гидрид трибутилолова (0,16 мл, 0,60 ммоль) добавляют при 0°C, реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 0,5 ч и концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (гексан:EtOAc, от 100:1 до 1:100 и EtOAc:CH3OH, от 100:1 до 1:100) с получением 26-S (75 мг, 92%).To a solution of 25-S (90 mg, 0.1 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (2 ml, 18 ml/mmol) add bis(triphenylphosphine) palladium(II) dichloride (12 mg, 0.1 mmol) and acetic acid (0.056 ml, 0.99 mmol). Tributyltin hydride (0.16 ml, 0.60 mmol) was added at 0°C, the reaction mixture was stirred at 0°C for 0.5 h and concentrated in vacuo. Flash chromatography (hexane:EtOAc, 100:1 to 1:100 and EtOAc:CH3OH, 100:1 to 1:100) gave 26-S (75 mg, 92%).

Rf=0,25 (СЩСССНзОН, 1:1).Rf=0.25 (SSHSSSNZON, 1:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl3): δ 7,62 (с, 1H), 7,15 (д, J=9,3 Гц, 1H), 6,81-6,76 (м, 2H), 6,72 (с, 1H), 6,25 (д, J=1,2 Гц, 1H), 6,03 (д, J=1,2 Гц, 1H), 5,12 (д, J=11,7 Гц, 1H), 4,57 (с, 1H), 4,41 (с, 1H), 4,36-4,24 (м, 2H), 4,20 (д, J=11,7 Гц, 1H), 3,82 (с, 3H), 3,79 (с, 3H), 3,44 (дд, J=22,0, 7,1 Гц, 2H), 3,08-2,78 (м, 4H), 2,73-2,64 (м, 2H), 2,41-2,22 (м, 3H), 2,28 (с, 3H), 2,25-2,15 (м, 1H), 2,14 (с, 3H), 2,08 (с, 3H), 2,04 (с, 3H). ^1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.62 (s, 1H), 7.15 (d, J=9.3 Hz, 1H), 6.81-6.76 (m, 2H), 6 .72 (s, 1H), 6.25 (d, J=1.2 Hz, 1H), 6.03 (d, J=1.2 Hz, 1H), 5.12 (d, J=11, 7 Hz, 1H), 4.57 (s, 1H), 4.41 (s, 1H), 4.36-4.24 (m, 2H), 4.20 (d, J=11.7 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.44 (dd, J=22.0, 7.1 Hz, 2H), 3.08-2.78 (m , 4H), 2.73-2.64 (m, 2H), 2.41-2.22 (m, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.25-2.15 (m, 1H ), 2.14 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 2.04 (s, 3H).

ИЭР-МС m/z: 823,3 (M+H)+.ESI-MS m/z: 823.3 (M+H)+.

26-S 27-S26-S 27-S

К раствору 26-S (70 мг, 0,085 ммоль) в CH₃CN:H₂O (1,39:1, 6 мл, 0,015 M) добавляют AgNO₃ (335 мг, 1,7 ммоль). Через 18 ч при 23°C, реакционную смесь гасят смесью 1:1 насыщенных водных растворов NaCl и NaHCO₃, перемешивают в течение 15 мин, разбавляют CH₂Cl₂, перемешивают в течение 5 мин и экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением 27-S (23 мг, 33%).To a solution of 26-S (70 mg, 0.085 mmol) in CH ₃ CN:H ₂ O (1.39:1, 6 ml, 0.015 M) add AgNO ₃ (335 mg, 1.7 mmol). After 18 hours at 23°C, the reaction mixture is quenched with a 1:1 mixture of saturated aqueous solutions of NaCl and NaHCO ₃ , stirred for 15 minutes, diluted with CH ₂ Cl ₂ , stirred for 5 minutes and extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give 27-S (23 mg, 33%).

Rf=0,2 (СЩСССНзОН, 9:1).Rf=0.2 (SSHSSSNZON, 9:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): δ 7,62 (с, 1H), 7,15 (д, J=7,8 Гц, 1H), 6,78 (с, 1H), 6,75 (д, J=7,8 Гц, 1H), 6,21 (д, J=1,5 Гц, 1H), 6,01 (д, J=1,5 Гц, 1H), 5,78 (с, 1H), 5,22 (д, J=11,5 Гц, 1H), 4,90 (с, 1H), 4,58-4,42 (м, 3H), 4,29-4,10 (м, 2H), 3,84-3,80 (м, 1H), 3,83 (с, 3H), 3,79 (с, 3H), 3,53-3,48 (м, 2H), 3,22 (д, J=8,7 Гц, 1H), 3,12 (с, 1H), 3,02 (д, J=12,8 Гц, 1H), 2,89-2,64 (м, 3H), 2,46 (с, 3H), 2,42-2,34 (м, 2H), 2,27 (с, 3H), 2,12 (с, 3H), 2,03 (с, 3H).1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.62 (s, 1H), 7.15 (d, J=7.8 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.75 (d, J=7.8 Hz, 1H), 6.21 (d, J=1.5 Hz, 1H), 6.01 (d, J=1.5 Hz, 1H), 5.78 (s, 1H) , 5.22 (d, J=11.5 Hz, 1H), 4.90 (s, 1H), 4.58-4.42 (m, 3H), 4.29-4.10 (m, 2H ), 3.84-3.80 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.53-3.48 (m, 2H), 3.22 ( d, J=8.7 Hz, 1H), 3.12 (s, 1H), 3.02 (d, J=12.8 Hz, 1H), 2.89-2.64 (m, 3H), 2.46 (s, 3H), 2.42-2.34 (m, 2H), 2.27 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 2.03 (s, 3H).

¹³C ЯМР (126 МГц, CDCl₃): δ 172,1, 168,7, 154,0, 147,6, 145,6, 143,0, 141,2, 140,8, 131,6, 130,6, 129,6, 127,1, 121,8, 120,9, 118,4, 115,2, 112,5, 111,8, 101,8, 100,2, 81,5, 62,6, 60,6, 58,0, 57,8, 56,0, 55,8, 55,0, 42,3, 41,4, 31,9, 29,7, 27,8, 26,9, 25,6, 24,0, 22,7, 20,5, 16,0, 14,1, 13,6, 9,7. ¹³ C NMR (126 MHz, CDCl ₃ ): δ 172.1, 168.7, 154.0, 147.6, 145.6, 143.0, 141.2, 140.8, 131.6, 130, 6, 129.6, 127.1, 121.8, 120.9, 118.4, 115.2, 112.5, 111.8, 101.8, 100.2, 81.5, 62.6, 60.6, 58.0, 57.8, 56.0, 55.8, 55.0, 42.3, 41.4, 31.9, 29.7, 27.8, 26.9, 25, 6, 24.0, 22.7, 20.5, 16.0, 14.1, 13.6, 9.7.

ИЭР-МС m/z: 796,3 (M-H₂O+H)+.ESI-MS m/z: 796.3 (MH ₂ O+H)+.

(+)-ВР-ИЭР-ВП-МС m/z: 796,3062 [M-H₂O+H]+ (Рассч. для C₄₂H₄₆N₅O₉S 796,3011).(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 796.3062 [MH ₂ O+H]+ (Calc. for C ₄₂ H ₄₆ N ₅ O ₉ S 796.3011).

Пример 0-12. Синтез аллил №[^)-2-амино-3-(5-метокси-Ш-индол-3-ил)пропил)]карбамата (24-R)Example 0-12. Synthesis of allyl N[^)-2-amino-3-(5-methoxy-N-indol-3-yl)propyl)]carbamate (24-R)

- 121 046742- 121 046742

ΝΗ₂-ΝΗ₂Ή₂Ο EtOHΝΗ ₂ -ΝΗ ₂ Ή ₂ Ο EtOH

МеОMeO

ТФК/ДХМTPA/DXM

24-R24-R

МеОMeO

23-R23-R

AllocCIAllocCI

ДИПЭАDIPEA

МеОMeO

СН₃СМ,ДМФCH ₃ SM, DMF

22-R22-R

А)A)

МеОMeO

ВосгОVosgo

МеОMeO

CH₃CNCH ₃ CN

К раствору 17-RTo solution 17-R

17-R (2,35 г,17-R (2.35 g,

10,7 ммоль) в10.7 mmol) in

20-R20-R

CH3CN (43 мл, 4 мл/ммоль) добавляют ди-третбутилдикарбонат (4,67 г, 21,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 2,5 ч, концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) дает 20-R (1,7 г, 50%).CH3CN (43 ml, 4 ml/mmol) add di-tert-butyl dicarbonate (4.67 g, 21.4 mmol). The reaction mixture was stirred at 23°C for 2.5 hours and concentrated under vacuum. Flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) gave 20-R (1.7 g, 50%).

Rf=0,6 (CH2CECH3OH, 9:1).Rf=0.6 (CH2CECH3OH, 9:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 8,05 (с, 1H), 7,25 (д, J=8,9 Гц, 1H), 7,09 (д, J=2,4 Гц, 1H), 7,02 (д, J=2,4 Гц, 1H), 6,86 (дд, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 4,83 (с, 1H), 3,98 (с, 1H), 3,87 (с, 3H), 3,69 (тд, J=9,2, 7,5, 5,3 Гц, 1H), 3,61 (дд, J=10,9, 5,6 Гц, 1H), 2,95 (д, J=6,8 Гц, 2H), 1,42 (с, 9H). ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 8.05 (s, 1H), 7.25 (d, J=8.9 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.02 (d, J=2.4 Hz, 1H), 6.86 (dd, J=8.8, 2.4 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 3, 98 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.69 (td, J=9.2, 7.5, 5.3 Hz, 1H), 3.61 (dd, J=10, 9, 5.6 Hz, 1H), 2.95 (d, J=6.8 Hz, 2H), 1.42 (s, 9H).

К раствору 20-R (1,7 г, 5,3 ммоль) в CH₂Cl₂ (32 мл, 6 мл/ммоль) добавляют фталимид (1,72 г, 11,7 ммоль), трифенилфосфин (3,06 г, 11,7 ммоль) и смесь охлаждают при 0°C. Раствор 40% диэтилазодикарбоксилата (ДЭАД) в CH₂Cl₂ (4,0 мл, 13,2 ммоль) добавляют в течение 15 мин. Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 16 ч, концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (гексан:EtOAc, от 99:1 до 85:15) с получением 21-R (2,0 г, 84%).To a solution of 20-R (1.7 g, 5.3 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (32 ml, 6 ml/mmol) add phthalimide (1.72 g, 11.7 mmol), triphenylphosphine (3.06 g , 11.7 mmol) and the mixture is cooled at 0°C. A solution of 40% diethyl azodicarboxylate (DEAD) in CH ₂ Cl ₂ (4.0 ml, 13.2 mmol) was added over 15 minutes. The reaction mixture was stirred at 23°C for 16 hours and concentrated under vacuum. The resulting residue was purified by flash chromatography (hexane:EtOAc, 99:1 to 85:15) to give 21-R (2.0 g, 84%).

Rf=0,45 (гексан:EtoAc, 1:1).Rf=0.45 (hexane:EtoAc, 1:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 8,31 (с, 1H), 7,80 (дд, J=5,4, 3,0 Гц, 2H), 7,67 (дд, J=5,4, 3,0 Гц, 2H), ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 8.31 (s, 1H), 7.80 (dd, J=5.4, 3.0 Hz, 2H), 7.67 (dd, J=5 ,4, 3.0 Hz, 2H),

7,30-7,12 (м, 2H), 7,08 (дд, J=15,2, 2,4 Гц, 1H), 6,84 (дд, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 4,85 (д, J=9,2 Гц, 1H), 4,43 (кв, J=5,3 Гц, 1H), 3,86 (с, 3H), 3,83-3,68 (м, 2H), 3,01 (д, J=5,4 Гц, 2H), 1,22 (с, 9H).7.30-7.12 (m, 2H), 7.08 (dd, J=15.2, 2.4 Hz, 1H), 6.84 (dd, J=8.8, 2.4 Hz, 1H), 4.85 (d, J=9.2 Hz, 1H), 4.43 (kv, J=5.3 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.83-3, 68 (m, 2H), 3.01 (d, J=5.4 Hz, 2H), 1.22 (s, 9H).

К раствору 21-R (2,0 г, 4,45 ммоль) в этаноле (133 мл, 30 мл/ммоль) добавляют моногидрат гидразина (21,6 мл, 445 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 80°C в герметично закрытой пробирке в течение 2 ч, концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (CH2Cl2:CH3OH, от 100:1 до 50:50) с получением 22-R (1,15 г, 81%).To a solution of 21-R (2.0 g, 4.45 mmol) in ethanol (133 mL, 30 mL/mmol) was added hydrazine monohydrate (21.6 mL, 445 mmol). The reaction mixture is stirred at 80°C in a hermetically sealed test tube for 2 hours and concentrated under vacuum. Flash chromatography (CH2Cl2:CH3OH, 100:1 to 50:50) to give 22-R (1.15 g, 81%).

R=0,1 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 8:2).R=0.1 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 8:2).

- 122 046742- 122 046742

1H ЯМР (400 МГц, CDCI3): δ 7,21 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,12 (с, 1H), 7,05 (с, 1H), 6,75 (дд, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 3,95 (ддд, J=10,7, 8,7, 5,4 Гц, 1H), 3,82 (с, 3H), 2,98-2,79 (м, 3H), 2,75 (дд, J=13,1, 9,4 Гц, 1H), 1,37 (с, 9H).1H NMR (400 MHz, CDCI3): δ 7.21 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.75 (dd, J=8.8, 2.4 Hz, 1H), 3.95 (ddd, J=10.7, 8.7, 5.4 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 2.98 -2.79 (m, 3H), 2.75 (dd, J=13.1, 9.4 Hz, 1H), 1.37 (s, 9H).

К раствору 22-R (1,1 г, 3,4 ммоль) в CH₃CN (34 мл, 10 мл/ммоль) и ДМФ (3,4 мл, 1 мл/ммоль) добавляют N.N-диизопропилэтиламин (0,5 мл, 2,7 ммоль) и аллилхлорформиат (3,7 мл, 34 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 19 ч. Смесь разбавляют EtOAc и NH4C1 добавляют и смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэшхроматографией (гексан:ЕЮАс, от 100:1 до 1:100) с получением 23-R (0,95 г, 69%).To a solution of 22-R (1.1 g, 3.4 mmol) in CH ₃ CN (34 ml, 10 ml/mmol) and DMF (3.4 ml, 1 ml/mmol) add NN-diisopropylethylamine (0.5 ml, 2.7 mmol) and allyl chloroformate (3.7 ml, 34 mmol). The reaction mixture was stirred at 23°C for 19 hours. The mixture was diluted with EtOAc and NH4C1 was added and the mixture was extracted with EtOAc. The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (hexane:EEAc, 100:1 to 1:100) to give 23-R (0.95 g, 69%).

Rf=0,5 (гексан:ЕЮАс, 1:1).Rf=0.5 (hexane:EAAc, 1:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 8,55 (с, 1H), 7,20 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,05 (с, 1H), 6,98-6,87 (м, 1H), 6,82 (дт, J=8,8, 1,8 Гц, 1H), 5,96-5,81 (м, 1H), 5,37-5,22 (м, 2H), 5,22-5,14 (м, 1H), 5,02-4,97 (м, 1H), 4,60-4,47 (м, 2H), 4,00 (с, 1H), 3,84 (с, 3H), 3,31 (с, 1H), 3,19 (с, 1H), 2,88 (тд, J=14,5, 13,3, 5,9 Гц, 2H), 1,40 (с, 9H).1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 8.55 (s, 1H), 7.20 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.98-6 .87 (m, 1H), 6.82 (dt, J=8.8, 1.8 Hz, 1H), 5.96-5.81 (m, 1H), 5.37-5.22 (m , 2H), 5.22-5.14 (m, 1H), 5.02-4.97 (m, 1H), 4.60-4.47 (m, 2H), 4.00 (s, 1H ), 3.84 (s, 3H), 3.31 (s, 1H), 3.19 (s, 1H), 2.88 (td, J=14.5, 13.3, 5.9 Hz, 2H), 1.40 (s, 9H).

К раствору 23-R (0,94 г, 2,3 ммоль) в CH₂Cl₂ (39 мл, 16,6 мл/ммоль) добавляют трифторуксусную кислоту (19 мл, 8,3 мл/ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 1,5 ч, концентрируют под вакуумом с получением 24-R (0,72 г, 100%).Trifluoroacetic acid (19 mL, 8.3 mL/mmol) was added to a solution of 23-R (0.94 g, 2.3 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (39 mL, 16.6 mL/mmol). The reaction mixture was stirred at 23°C for 1.5 hours, concentrated in vacuo to give 24-R (0.72 g, 100%).

Rf=0,1 (CH2Cl2:CH₃OH, 9:1).Rf=0.1 (CH2Cl2:CH ₃ OH, 9:1).

1H ЯМР (400 МГц, CD₃OD): δ 7,27 (д, J=8,8, 1H), 7,18 (с, 1H), 7,04 (д, J=2,4 Гц, 1H), 6,80 (ддд, J=8,8, 2,4, 0,9 Гц, 1H), 5,95 (ддт, J=16,4, 10,8, 5,5 Гц, 1H), 5,32 (д, J=17,1 Гц, 1H), 5,20 (д, J=10,5 Гц, 1H), 4,604,53 (м, 2H), 3,83 (с, 3H), 3,59 (дт, J=11,4, 5,5 Гц, 1H), 3,47-3,30 (м, 2H), 3,13-2,94 (м, 2H).1H NMR (400 MHz, CD ₃ OD): δ 7.27 (d, J=8.8, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.04 (d, J=2.4 Hz, 1H ), 6.80 (ddd, J=8.8, 2.4, 0.9 Hz, 1H), 5.95 (ddt, J=16.4, 10.8, 5.5 Hz, 1H), 5.32 (d, J=17.1 Hz, 1H), 5.20 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.604.53 (m, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.59 (dt, J=11.4, 5.5 Hz, 1H), 3.47-3.30 (m, 2H), 3.13-2.94 (m, 2H).

Пример 0-13.Example 0-13.

К раствору 1 (0,71 г, 1,14 ммоль) в уксусной кислоте (45 мл, 0,08 M) добавляют 24-R (0,54 мг, 1,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 7 ч и затем уксусную кислоту выпаривают. Водный насыщенный раствор NaHCO₃ добавляют и смесь экстрагируют CH2C12. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (гексан:ЕЮАс, 1:1) дает соединение 25-R (670 мг, 65%).To a solution of 1 (0.71 g, 1.14 mmol) in acetic acid (45 ml, 0.08 M) add 24-R (0.54 mg, 1.8 mmol). The reaction mixture is stirred at 23°C for 7 hours and then the acetic acid is evaporated. An aqueous saturated solution of NaHCO ₃ is added and the mixture is extracted with CH2C12. The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. Flash chromatography (hexane:EAAc, 1:1) gave compound 25-R (670 mg, 65%).

Rf=0,4 (гексан: EtOAc, 1:1).Rf=0.4 (hexane: EtOAc, 1:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDC13): δ 7,52 (с, 1H), 7,17 (д, J=8,8 Гц, 1H), 6,83-6,73 (м, 2H), 6,61 (с, 1H), 6,23 (д, J=1,0 Гц, 1H), 6,02 (д, J=1,0 Гц, 1H), 6,05-5,89 (м, 1H), 5,75 (с, 1H), 5,44-5,30 (м, 1H), 5,25 (д, J=10,4 Гц, 1H), 5,13-4,99 (м, 2H), 4,71-4,59 (м, 2H), 4,36 (с, 1H), 4,30-4,07 (м, 3H), 3,80 (с, 3H), 3,79 (с, 3H), 3,61-3,53 (м, 1H); 3,48-3,41 (м, 3H), 3,26 (дт, J=13,3, 3,8 Гц, 1H), 3,04-2,88 (м, 2H), 2,52 (дд, J=14,9, 3,7 Гц, 1H), 2,462,35 (м, 2H), 2,31 (с, 3H), 2,29 (с, 3H), 2,16 (с, 3H), 2,12-2,02 (м, 1H), 2,09 (с, 3H).1H NMR (400 MHz, CDC13): δ 7.52 (s, 1H), 7.17 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.83-6.73 (m, 2H), 6. 61 (s, 1H), 6.23 (d, J=1.0 Hz, 1H), 6.02 (d, J=1.0 Hz, 1H), 6.05-5.89 (m, 1H ), 5.75 (s, 1H), 5.44-5.30 (m, 1H), 5.25 (d, J=10.4 Hz, 1H), 5.13-4.99 (m, 2H), 4.71-4.59 (m, 2H), 4.36 (s, 1H), 4.30-4.07 (m, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.61-3.53 (m, 1H); 3.48-3.41 (m, 3H), 3.26 (dt, J=13.3, 3.8 Hz, 1H), 3.04-2.88 (m, 2H), 2.52 ( dd, J=14.9, 3.7 Hz, 1H), 2.462.35 (m, 2H), 2.31 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.16 (s, 3H ), 2.12-2.02 (m, 1H), 2.09 (s, 3H).

ИЭР-МС m/z: 907,3 (M+H)+.ESI-MS m/z: 907.3 (M+H)+.

- 123 046742- 123 046742

К раствору 25-R (745 мг, 0,82 ммоль) в CH₂Cl₂ (15 мл, 18 мл/ммоль) добавляют дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия(П) (92 мг, 0,1 ммоль) и уксусную кислоту (0,47 мл, 8,2 ммоль). Гидрид трибутилолова (1,33 мл, 4,9 ммоль) добавляют при 0°C, реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 0,75 ч и концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (гексан:EtOAc, от 100:1 до 1:100 и EtOAc:CH₃OH, от 100:1 до 1:100) с получением 26-R (680 мг, >100%).To a solution of 25-R (745 mg, 0.82 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (15 ml, 18 ml/mmol) add bis(triphenylphosphine) palladium(II) dichloride (92 mg, 0.1 mmol) and acetic acid (0.47 ml, 8.2 mmol). Tributyltin hydride (1.33 ml, 4.9 mmol) was added at 0°C, the reaction mixture was stirred at 0°C for 0.75 h and concentrated in vacuo. Flash chromatography (hexane:EtOAc, 100:1 to 1:100 and EtOAc:CH ₃ OH, 100:1 to 1:100) gave 26-R (680 mg, >100%).

Rj=0,25 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 1:1).Rj=0.25 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 1:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,57 (с, 1H), 7,16 (д, J=8,8 Гц, 1H), 6,85-6,72 (м, 2H), 6,57 (с, 1H), 6,21 (д, J=1,4 Гц, 1H), 6,00 (д, J=1,3 Гц, 1H), 5,05-4,97 (м, 1H), 4,63 (с, 1H), 4,35 (с, 1H), 4,31-4,09 (м, 4H), 3,80 (с, 3H), 3,78 (с, 3H), 3,50-3,40 (м, 3H), 3,24 (дкв, J=9,9, 5,3 Гц, 1H), 2,95 (с, 1H), 2,91-2,75 (м, 2H), 2,62 (дд, J=14,8, 3,6 Гц, 1H), 2,43-2,28 (м, 2H), 2,36 (с, 3H), 2,25 (с, 3H), 2,22-2,14 (м, 1H), 2,15 (с, 3H), 2,08 (с, 3H). ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.57 (s, 1H), 7.16 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.85-6.72 (m, 2H), 6.57 (s, 1H), 6.21 (d, J=1.4 Hz, 1H), 6.00 (d, J=1.3 Hz, 1H), 5.05-4.97 (m , 1H), 4.63 (s, 1H), 4.35 (s, 1H), 4.31-4.09 (m, 4H), 3.80 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 3.50-3.40 (m, 3H), 3.24 (dkv, J=9.9, 5.3 Hz, 1H), 2.95 (s, 1H), 2.91-2 .75 (m, 2H), 2.62 (dd, J=14.8, 3.6 Hz, 1H), 2.43-2.28 (m, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.22-2.14 (m, 1H), 2.15 (s, 3H), 2.08 (s, 3H).

ИЭР-МС m/z: 823,3 (M+H)+.ESI-MS m/z: 823.3 (M+H)+.

26-R 27-R26-R 27-R

К раствору 26-R (660 мг, 0,80 ммоль) в CH₃CN:H₂O (1,39:1, 56 мл, 0,015 M) добавляют AgNO₃ (2,70 г, 16,0 ммоль). Через 16,5 ч при 23°C, реакционную смесь гасят смесью 1:1 насыщенных водных растворов NaCl и NaHCO₃, перемешивают в течение 15 мин, разбавляют CH₂Cl₂, перемешивают в течение 5 мин и экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением 27-R (271 мг, 42%).To a solution of 26-R (660 mg, 0.80 mmol) in CH ₃ CN:H ₂ O (1.39:1, 56 ml, 0.015 M) add AgNO ₃ (2.70 g, 16.0 mmol). After 16.5 hours at 23°C, the reaction mixture is quenched with a 1:1 mixture of saturated aqueous solutions of NaCl and NaHCO ₃ , stirred for 15 minutes, diluted with CH ₂ Cl ₂ , stirred for 5 minutes and extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give 27-R (271 mg, 42%).

R=0,1 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 9:1).R=0.1 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 9:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,46 (с, 1H), 7,16 (д, J=8,9 Гц, 1H), 6,83 (с, 1H), 6,72 (д, J=8,9 Гц, 1H), 6,58 (с, 1H), 6,20 (д, J=1,8 Гц, 1H), 5,99 (д, J=1,8 Гц, 1H), 5,76 (с, 1H), 5,15 (д, J=11,4 Гц, 1H), 4,86 (с, 1H), 4,52 (м, 2H), 4,17 (д, J=5,3 Гц, 1H), 4,07 (д, J=11,4 Гц, 1H), 3,80 (с, 3H), 3,78 (с, 3H), 3,55-3,43 (м, 2H), 3,323,20 (м, 2H), 3,01-2,82 (м, 4H), 2,68-2,59 (м, 1H), 2,44-2,31 (м, 1H), 2,38 (с, 3H), 2,30-2,19 (м, 1H), 2,26 (с, 3H), 2,15 (с, 3H), 2,07 (с, 3H).1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.46 (s, 1H), 7.16 (d, J=8.9 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 6.72 (d , J=8.9 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 6.20 (d, J=1.8 Hz, 1H), 5.99 (d, J=1.8 Hz, 1H ), 5.76 (s, 1H), 5.15 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.52 (m, 2H), 4.17 (d , J=5.3 Hz, 1H), 4.07 (d, J=11.4 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 3.55-3 .43 (m, 2H), 3.323.20 (m, 2H), 3.01-2.82 (m, 4H), 2.68-2.59 (m, 1H), 2.44-2.31 (m, 1H), 2.38 (s, 3H), 2.30-2.19 (m, 1H), 2.26 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 2.07 ( s, 3H).

¹³C ЯМР (101 МГц, CD3OD): δ 171,7, 171,3, 153,8, 153,3, 148,0, 147,6, 145,4, 145,4, 143,1, 141,3, 140,7, 131,6, 131,4, 131,2, 129,3, 126,8, 121,6, 120,9, 118,3, 115,6, 112,2, 111,8, 101,8, 100,2, 81,7, 63,5, 63,1, 61,7, 58,0, 57,8, 56,1, 55,8, 55,0, 42,2, 42,1, 41,4, 41,0, 25,1, 23,8, 20,5, 16,0, 9,7. ¹³ C NMR (101 MHz, CD3OD): δ 171.7, 171.3, 153.8, 153.3, 148.0, 147.6, 145.4, 145.4, 143.1, 141.3 , 140.7, 131.6, 131.4, 131.2, 129.3, 126.8, 121.6, 120.9, 118.3, 115.6, 112.2, 111.8, 101 ,8, 100.2, 81.7, 63.5, 63.1, 61.7, 58.0, 57.8, 56.1, 55.8, 55.0, 42.2, 42.1 , 41.4, 41.0, 25.1, 23.8, 20.5, 16.0, 9.7.

ИЭР-МС m/z: 796,3 (M-H₂O+H)+.ESI-MS m/z: 796.3 (MH ₂ O+H)+.

(+)-ВР-ИЭР-ВП-МС m/z: 796,3045 [M-H₂O+H]+ (рассч. для C₄₂H₄₆N₅O9S 796,3011).(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 796.3045 [MH ₂ O+H]+ (calc. for C ₄₂ H ₄₆ N ₅ O9S 796.3011).

Пример 0-14.Example 0-14.

- 124 046742- 124 046742

К раствору соединения 1 (2,0 г, 3,21 ммоль) в ацетонитриле (200 мл, 0,01 M) добавляют гидрохлорид 2-бензофуран-3-ил-этиламина (30) (1,90 г, 9,65 ммоль, Sigma Aldrich) и циануровый хлорид (TCT) (200 мг, 10%). Реакционную смесь перемешивают при 85°C в течение 24 ч и затем добавляют водный насыщенный раствор NaHCO₃ и смесь экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (гексан:EtOAc, от 9:1 до 1:9) дает соединение 31(1,95 г, 79%).To a solution of compound 1 (2.0 g, 3.21 mmol) in acetonitrile (200 ml, 0.01 M) add 2-benzofuran-3-yl-ethylamine hydrochloride (30) (1.90 g, 9.65 mmol , Sigma Aldrich) and cyanuric chloride (TCT) (200 mg, 10%). The reaction mixture was stirred at 85°C for 24 hours and then aqueous saturated NaHCO ₃ solution was added and the mixture was extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. Flash chromatography (hexane:EtOAc, 9:1 to 1:9) gave 31 (1.95 g, 79%).

Rf=0,5 (гексан:EtOAc, 1:1).Rf=0.5 (hexane:EtOAc, 1:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,38-7,36 (м, 2H), 7,19-7,10 (м, 2H), 6,64 (с, 1H), 6,20 (д, J=1,5 Гц, 1H), 6,05 (д, J=1,5 Гц, 1H), 5,76 (с, 1H), 5,05 (д, J=11,7 Гц, 1H), 4,54 (с, 1H), 4,33-4,24 (м, 2H), 4,23-4,16 (м, 2H), 3,81 (с, 3H), 3,49-3,38 (м, 2H), 3,28-3,21 (м, 1H), 3,06-2,78 (м, 5H), 2,57-2,50 (м, 2H), 2,37 (с, 3H), 2,27 (с, 3H), 2,21 (м, 3H), 2,08 (с, 3H). ^1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.38-7.36 (m, 2H), 7.19-7.10 (m, 2H), 6.64 (s, 1H), 6.20 (d, J=1.5 Hz, 1H), 6.05 (d, J=1.5 Hz, 1H), 5.76 (s, 1H), 5.05 (d, J=11.7 Hz , 1H), 4.54 (s, 1H), 4.33-4.24 (m, 2H), 4.23-4.16 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3. 49-3.38 (m, 2H), 3.28-3.21 (m, 1H), 3.06-2.78 (m, 5H), 2.57-2.50 (m, 2H), 2.37 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.21 (m, 3H), 2.08 (s, 3H).

ИЭР-МС m/z: 765,3 (M+H)+.ESI-MS m/z: 765.3 (M+H)+.

В) /=\B) /=\

3232

К раствору соединения 31 (380 мг, 0,49 ммоль) в CH₃CN:H₂O (1,39:1, 25 мл, 0,015 M) добавляют AgNO₃ (1,30 г, 7,45 ммоль). Через 5 ч при 23°C, добавляют смесь 1:1 насыщенных водных растворов NaCl и NaHCO₃, перемешивают в течение 15 мин, разбавляют CH₂Cl₂, перемешивают в течение 5 мин и экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением соединения 32 (175 мг, 47%).To a solution of compound 31 (380 mg, 0.49 mmol) in CH ₃ CN:H ₂ O (1.39:1, 25 ml, 0.015 M) add AgNO ₃ (1.30 g, 7.45 mmol). After 5 hours at 23°C, add a 1:1 mixture of saturated aqueous solutions of NaCl and NaHCO ₃ , stir for 15 minutes, dilute with CH ₂ Cl ₂ , stir for 5 minutes and extract with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give compound 32 (175 mg, 47%).

Rf=0,40 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 9:1).Rf=0.40 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 9:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,35 (ддд, J=10,7, 7,6, 1,1 Гц, 2H), 7,14 (дтд, J=19,7, 7,3, 1,3 Гц, 2H), 6,65 (с, 1H), 6,16 (д, J=1,5 Гц, 1H), 6,01 (д, J=1,5 Гц, 1H), 5,75 (с, 1H), 5,15 (дд, J=11,5, 1,2 Гц, 1H), 4,80 (с, 1H), 4,48 (д, J=3,2 Гц, 1H), 4,44 (с, 1H), 4,20-4,06 (м, 2H), 3,81 (с, 1H), 3,50 (д, J=18,8 Гц, 1H), 3,30 (ддд, J=12,6, 7,9, 5,1 Гц, 1H), 3,22 (д, J=9,1 Гц, 1H), 2,99 (д, J=17,9 Гц, 1H), 2,84 (дд, J=19,2, 12,0 Гц, 3H), 2,592,49 (м, 2H), 2,36 (с, 3H), 2,27 (с, 3H), 2,21-2,14 (м, 1H), 2,18 (с, 3H), 2,06 (с, 3H).1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.35 (ddd, J=10.7, 7.6, 1.1 Hz, 2H), 7.14 (dtd, J=19.7, 7.3 , 1.3 Hz, 2H), 6.65 (s, 1H), 6.16 (d, J=1.5 Hz, 1H), 6.01 (d, J=1.5 Hz, 1H), 5.75 (s, 1H), 5.15 (dd, J=11.5, 1.2 Hz, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.48 (d, J=3.2 Hz , 1H), 4.44 (s, 1H), 4.20-4.06 (m, 2H), 3.81 (s, 1H), 3.50 (d, J=18.8 Hz, 1H) , 3.30 (ddd, J=12.6, 7.9, 5.1 Hz, 1H), 3.22 (d, J=9.1 Hz, 1H), 2.99 (d, J=17 .9 Hz, 1H), 2.84 (dd, J=19.2, 12.0 Hz, 3H), 2.592.49 (m, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.27 (s , 3H), 2.21-2.14 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 2.06 (s, 3H).

¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃): δ 171,2, 168,7, 154,4, 150,0, 147,9, 145,5, 142,9, 140,9, 140,8, 131,3, 129,0, 127,7, 123,7, 122,2, 121,2, 120,8, 118,9, 118,3, 115,5, 113,5, 111,7, 101,7, 82,1, 62,7, 61,7, 60,3, 57,8, 57,4, 55,9, 55,0, 42,2, 41,3, 39,7, 38,2, 29,7, 23,7, 21,3, 20,6, 15,9, 9,7. ¹³ C NMR (101 MHz, CDCl ₃ ): δ 171.2, 168.7, 154.4, 150.0, 147.9, 145.5, 142.9, 140.9, 140.8, 131, 3, 129.0, 127.7, 123.7, 122.2, 121.2, 120.8, 118.9, 118.3, 115.5, 113.5, 111.7, 101.7, 82.1, 62.7, 61.7, 60.3, 57.8, 57.4, 55.9, 55.0, 42.2, 41.3, 39.7, 38.2, 29, 7, 23.7, 21.3, 20.6, 15.9, 9.7.

ИЭР-МС m/z: 738,6 (M-H₂O+H)+.ESI-MS m/z: 738.6 (MH ₂ O+H)+.

(+)-ВР-ИЭР-ВП-МС m/z: 756,2654 [M+H]+ (рассч. для C₄₀H₄₂N₃O₁₀S 756,2585).(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 756.2654 [M+H]+ (calculated for C ₄₀ H ₄₂ N ₃ O ₁₀ S 756.2585).

Пример 0-15.Example 0-15.

- 125 046742- 125 046742

К раствору 1 (500 мг, 0,80 ммоль) в уксусной кислоте (10 мл, 0,08 M) добавляют гидрохлорид 2-(5метоксибензофуран-3-ил)этиламина (33) (Diverchim, ref: DW04590) (444 мг, 1,60 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 50°C в течение 6 дней и затем уксусную кислоту выпаривают. Водный насыщенный раствор NaHCO3 добавляют и смесь экстрагируют CH2Cl2. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (гексан:EtOAc, 1:1) дает 34 (270 мг, 43%).To a solution of 1 (500 mg, 0.80 mmol) in acetic acid (10 ml, 0.08 M) add 2-(5methoxybenzofuran-3-yl)ethylamine hydrochloride (33) (Diverchim, ref: DW04590) (444 mg, 1.60 mmol). The reaction mixture is stirred at 50°C for 6 days and then the acetic acid is evaporated. Aqueous saturated NaHCO3 solution is added and the mixture is extracted with CH2Cl2. The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. Flash chromatography (hexane:EtOAc, 1:1) gives 34 (270 mg, 43%).

Rf=0,3 (гексан:EtOAc, 1:1).Rf=0.3 (hexane:EtOAc, 1:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,25 (д, J=9,1 Гц, 1H), 6,80-6,73 (м, 2H), 6,63 (с, 1H), 6,18 (д, J=1,4 Гц, 1H), 6,03 (д, J=1,4 Гц, 1H), 5,78 (с, 1H), 5,03 (дд, J=11,5, 1,3 Гц, 1H), 4,52 (с, 1H), 4,29 (с, 1H), 4,26 (дд, J=4,7, 1,5 Гц, 1H), 4,23-4,16 (м, 2H), 3,80 (с, 3H), 3,78 (с, 3H), 3,46-3,43 (м, 1H), 3,43-3,37 (м, 1H), 3,24 (с, 1H), 3,03 (д, J=18,0 Гц, 1H), 2,91 (дд, J=17,9, 9,2 Гц, 1H), 2,87-2,72 (м, 2H), 2,53-2,47 (м, 2H), 2,36 (с, 3H), 2,27 (с, 3H), 2,20 (с, 3H), 2,06 (с, 3H).1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.25 (d, J=9.1 Hz, 1H), 6.80-6.73 (m, 2H), 6.63 (s, 1H), 6 .18 (d, J=1.4 Hz, 1H), 6.03 (d, J=1.4 Hz, 1H), 5.78 (s, 1H), 5.03 (dd, J=11, 5, 1.3 Hz, 1H), 4.52 (s, 1H), 4.29 (s, 1H), 4.26 (dd, J=4.7, 1.5 Hz, 1H), 4, 23-4.16 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 3.46-3.43 (m, 1H), 3.43-3.37 ( m, 1H), 3.24 (s, 1H), 3.03 (d, J=18.0 Hz, 1H), 2.91 (dd, J=17.9, 9.2 Hz, 1H), 2.87-2.72 (m, 2H), 2.53-2.47 (m, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.06 (s, 3H).

ИЭР-МС m/z: 795,8 (M+H)⁺.ESI-MS m/z: 795.8 (M+H) ⁺ .

В)IN)

МеОMeO

MeMe

AgNO₃ _AgNO3

МеОMeO

CH₃CN / H₂O _CH3CN / _H2O

MeMe

К раствору 34 (345 мг, 0,43 ммоль) в CH₃CN:H2O (1,39:1, 30 мл, 0,015 M) добавляют AgNO₃ (2,20 г, 13,0 ммоль). Через 3 ч при 23°C, смесь 1:1 насыщенных водных растворов NaCl и NaHCO₃ добавляют, перемешивают в течение 15 мин, разбавляют CH₂Cl₂, перемешивают в течение 5 мин и экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением 35 (175 мг, 51%).To a solution of 34 (345 mg, 0.43 mmol) in CH ₃ CN:H2O (1.39:1, 30 ml, 0.015 M) add AgNO ₃ (2.20 g, 13.0 mmol). After 3 hours at 23°C, a 1:1 mixture of saturated aqueous solutions of NaCl and NaHCO ₃ is added, stirred for 15 minutes, diluted with CH ₂ Cl ₂ , stirred for 5 minutes and extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give 35 (175 mg, 51%).

Rf=0,35 (CH2Cl2:CH₃OH. 9:1).Rf=0.35 (CH2Cl2:CH ₃ OH. 9:1).

¹H ЯМР (500 МГц, CD3OD): δ 7,27 (д, J=9,0 Гц, 1H), 6,90 (д, J=2,6 Гц, 1H), 6,80 (дд, J=9,0, 2,6 Гц, 1H), 6,57 (с, 1H), 6,23 (д, J=1,2 Гц, 1H), 6,05 (д, J=1,2 Гц, 1H), 5,23 (д, J=11,5 Гц, 1H), 4,27-4,08 (м, 4H), 3,77 (с, 3H), 3,75 (с, 3H), 3,63 (д, J=14,1 Гц, 2H), 3,40-3,34 (м, 2H), 2,93-2,87 (м, 5H), 2,80 (д, J=15,5 Гц, 1H), 2,57-2,54 (м, 2H), 2,34 (с, 3H), 2,30 (с, 3H), 2,14 (с, 3H), 2,05 (с, 3H). ^1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 7.27 (d, J=9.0 Hz, 1H), 6.90 (d, J=2.6 Hz, 1H), 6.80 (dd, J =9.0, 2.6 Hz, 1H), 6.57 (s, 1H), 6.23 (d, J=1.2 Hz, 1H), 6.05 (d, J=1.2 Hz , 1H), 5.23 (d, J=11.5 Hz, 1H), 4.27-4.08 (m, 4H), 3.77 (s, 3H), 3.75 (s, 3H) , 3.63 (d, J=14.1 Hz, 2H), 3.40-3.34 (m, 2H), 2.93-2.87 (m, 5H), 2.80 (d, J =15.5 Hz, 1H), 2.57-2.54 (m, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 2 .05 (s, 3H).

¹³C ЯМР (126 МГц, CD3OD): δ 171,9, 170,6, 157,5, 147,0, 145,0, 142,3, 141,0, 132,2, 131,1, 129,1, 122,2, 120,9, 120,2, 116,3, 115,1, 114,0, 112,7, 111,4, 103,5, 102,7, 92,9, 62,0, 60,3, 59,8, 59,4, 56,5, 56,2, 56,0, 54,0, 43,8, 41,2, 40,7, 30,8, 30,3, 28,7, 24,5, 21,6, 20,6, 16,2, 9,6. ¹³ C NMR (126 MHz, CD3OD): δ 171.9, 170.6, 157.5, 147.0, 145.0, 142.3, 141.0, 132.2, 131.1, 129.1 , 122.2, 120.9, 120.2, 116.3, 115.1, 114.0, 112.7, 111.4, 103.5, 102.7, 92.9, 62.0, 60 ,3, 59.8, 59.4, 56.5, 56.2, 56.0, 54.0, 43.8, 41.2, 40.7, 30.8, 30.3, 28.7 , 24.5, 21.6, 20.6, 16.2, 9.6.

ИЭР-МС m/z: 768,6 (M-H₂O+H)+.ESI-MS m/z: 768.6 (MH ₂ O+H)+.

(+)-ВР-ИЭР-ВП-МС m/z: 768,2630[M-H2O+H]+ (рассч. для C₄₁H₄₂N₃O₁₀S 768,2585).(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 768.2630[M-H2O+H]+ (calc. for C ₄₁ H ₄₂ N ₃ O ₁₀ S 768.2585).

Пример 0-16.Example 0-16.

- 126 046742- 126 046742

К раствору LiAlH₄ (148 мл, 1,0 M в ТГФ, 148 ммоль) при -40°C осторожно добавляют H₂SO₄ (7,14 мл, 72,9 ммоль) и суспензию ^)-2-амино-3-(бензофуран-3-ил)пропановой кислоты (36-S) (получена как описано в Tetrahedron Asymmetry 2008, 19, 500-511) (5,54 г, 26,9 ммоль) в ТГФ (85 мл, 0,003 M). Реакционную смесь оставляют выделять газ 23°C, нагревают при 80°C в течение 3 ч и 18 ч при 23°C. Охлаждают при -21°C реакционную смесь осторожно гасят NaOH 2N до щелочного pH. EtOAc добавляют и смесь фильтруют через Celite® и промывают CH₃OH. Неочищенный продукт концентрируют под вакуумом с получением соединения 37-S (3,93 г, >100%).To a solution of LiAlH ₄ (148 ml, 1.0 M in THF, 148 mmol) at -40°C, carefully add H ₂ SO ₄ (7.14 ml, 72.9 mmol) and a suspension of ^)-2-amino-3 -(benzofuran-3-yl)propanoic acid (36-S) (prepared as described in Tetrahedron Asymmetry 2008, 19, 500-511) (5.54 g, 26.9 mmol) in THF (85 ml, 0.003 M) . The reaction mixture is left to gas at 23°C, heated at 80°C for 3 hours and 18 hours at 23°C. Cool the reaction mixture at -21°C and carefully quench NaOH 2N to an alkaline pH. EtOAc is added and the mixture is filtered through Celite® and washed with CH ₃ OH. The crude product was concentrated in vacuo to give compound 37-S (3.93 g, >100%).

R=0,1 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 4:1).R=0.1 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 4:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD): δ 7,67-7,62 (м, 1H), 7,61 (с, 1H), 7,51-7,41 (м, 1H), 7,34-7,18 (м, 2H), 3,69-3,48 (м, 1H), 3,44 (дд, J=10,8, 6,6 Гц, 1H), 3,18 (дтд, J=7,4, 6,4, 4,6 Гц, 1H), 2,88 (ддд, J=14,4, 6,1, 1,0 Гц, 1H), 2,68 (ддд, J=14,4, 7,5, 0,9 Гц, 1H). ^1H NMR (400 MHz, CD ₃ OD): δ 7.67-7.62 (m, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.51-7.41 (m, 1H), 7. 34-7.18 (m, 2H), 3.69-3.48 (m, 1H), 3.44 (dd, J=10.8, 6.6 Hz, 1H), 3.18 (dtd, J=7.4, 6.4, 4.6 Hz, 1H), 2.88 (ddd, J=14.4, 6.1, 1.0 Hz, 1H), 2.68 (ddd, J= 14.4, 7.5, 0.9 Hz, 1H).

Пример 0-17.Example 0-17.

К раствору LiAlH₄ (118 мл, 1,0 M в ТГФ, 118 ммоль) при -40°C добавляют осторожно H₂SO₄ (3,1 мл, 57,8 ммоль) и суспензию ^)-2-амино-3-(бензофуран-3-ил)пропановой кислоты (36-R) (полученную как описано в Tetrahedron Asymmetry 2008, 19, 500-511) (4,4 г, 21,4 ммоль) в ТГФ (67,4 мл, 0,003 M). Реакционную смесь оставляют выделять газ 23°C, нагревают при 80°C в течение 3 ч и 18 ч при 23°C. Охлаждают при -21°C реакционную смесь осторожно гасят NaOH 2N до щелочного pH. EtOAc добавляют и смесь фильтруют через Celite® и промывают CH3OH. Неочищенный продукт концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15, кремнезем амин) с получением соединения 37-R (2,77 г, 68%).To a solution of LiAlH ₄ (118 ml, 1.0 M in THF, 118 mmol) at -40°C, carefully add H ₂ SO ₄ (3.1 ml, 57.8 mmol) and a suspension of ^)-2-amino-3 -(benzofuran-3-yl)propanoic acid (36-R) (prepared as described in Tetrahedron Asymmetry 2008, 19, 500-511) (4.4 g, 21.4 mmol) in THF (67.4 ml, 0.003 M). The reaction mixture is left to gas at 23°C, heated at 80°C for 3 hours and 18 hours at 23°C. Cool the reaction mixture at -21°C and carefully quench NaOH 2N to an alkaline pH. EtOAc is added and the mixture is filtered through Celite® and washed with CH3OH. The crude product is concentrated under vacuum. Flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15, silica amine) to give compound 37-R (2.77 g, 68%).

R=0,1 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 4:1).R=0.1 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 4:1).

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7,63-7,52 (м, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,46-7,33 (м, 1H), 7,21 (дтд, J=19,9, 7,3, 1,3 Гц, 2H), 3,57 (дд, J=10,7, 4,6 Гц, 1H), 3,42 (дд, J=10,8, 6,6 Гц, 1H), 3,15 (дтд, J=7,6, 6,3, 4,6 Гц, 1H), 2,84 (ддд, J=14,4, 6,0, 1,0 Гц, 1H), 2,64 (ддд, J=14,4, 7,5, 0,9 Гц, 1H).1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.63-7.52 (m, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.46-7.33 (m, 1H), 7.21 (dtd , J=19.9, 7.3, 1.3 Hz, 2H), 3.57 (dd, J=10.7, 4.6 Hz, 1H), 3.42 (dd, J=10.8 , 6.6 Hz, 1H), 3.15 (ddd, J=7.6, 6.3, 4.6 Hz, 1H), 2.84 (ddd, J=14.4, 6.0, 1 ,0 Hz, 1H), 2.64 (ddd, J=14.4, 7.5, 0.9 Hz, 1H).

Пример 0-18.Example 0-18.

38-S38-S

К раствору соединения 1 (850 мг, 1,36 ммоль) в CH3CN (136 мл, 0,01 M) добавляют (Ь)-2-амино-3(бензофуран-3-ил)пропан-1-ол (37-S) (1,30 г, 6,83 ммоль и циануровый хлорид (TCT) (170 мг, 20%). Реакционную смесь перемешивают при 85°C в течение 24 ч и затем добавляют водный насыщенный раствор NaHCO₃ и смесь экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (гексан:EtOAc, от 9:1 до 1:9) дает соединение 38-S (750 мг, 69%).To a solution of compound 1 (850 mg, 1.36 mmol) in CH3CN (136 ml, 0.01 M) add (b)-2-amino-3(benzofuran-3-yl)propan-1-ol (37-S ) (1.30 g, 6.83 mmol and cyanuric chloride (TCT) (170 mg, 20%). The reaction mixture was stirred at 85°C for 24 hours and then aqueous saturated NaHCO ₃ solution was added and the mixture was extracted with CH ₂ Cl _2. The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo (hexane:EtOAc, 9:1 to 1:9) to give compound 38-S (750 mg, 69%).

Rf=0,25 (гексан:EtOAc, 1:1).Rf=0.25 (hexane:EtOAc, 1:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,39-7,33 (м, 1H), 7,33-7,29 (м, 1H), 7,20 (ддд, J=8,3, 7,2, 1,4 Гц, 1H), 7,14 (тд, J=7,4, 1,0 Гц, 1H), 6,61 (с, 1H), 6,21 (д, J=1,4 Гц, 1H), 6,06 (д, J=1,4 Гц, 1H), 5,74 (с, 1H), 5,08 (д, J=11,2 Гц, 1H), 4,58 (с, 1H), 4,37 (с, 1H), 4,32-4,23 (м, 2H), 4,19 (д, J=2,7 Гц, 1H), 3,81 (с, 3H), 3,52-3,41 (м, 3H), 3,36-3,29 (м, 1H), 3,13 (д, J=9,8 Гц, 1H), 3,00-2,81 (м, 3H), 2,57 (дд, J=15,7, 4,9 Гц, 1H), 2,50 (д, J=15,2 Гц, 1H), 2,37 (с, 3H), 2,31-2,25 (м, 1H), 2,29 (с, 3H), 2,16 (с, 3H), 2,10 (д, J=7,2 Гц, 1H), 2,05 (с, 3H).1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.39-7.33 (m, 1H), 7.33-7.29 (m, 1H), 7.20 (ddd, J=8.3, 7 ,2, 1.4 Hz, 1H), 7.14 (td, J=7.4, 1.0 Hz, 1H), 6.61 (s, 1H), 6.21 (d, J=1, 4 Hz, 1H), 6.06 (d, J=1.4 Hz, 1H), 5.74 (s, 1H), 5.08 (d, J=11.2 Hz, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.37 (s, 1H), 4.32-4.23 (m, 2H), 4.19 (d, J=2.7 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.52-3.41 (m, 3H), 3.36-3.29 (m, 1H), 3.13 (d, J=9.8 Hz, 1H), 3.00-2 .81 (m, 3H), 2.57 (dd, J=15.7, 4.9 Hz, 1H), 2.50 (d, J=15.2 Hz, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.31-2.25 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 2.10 (d, J=7.2 Hz, 1H), 2.05 (s, 3H).

ИЭР-МС m/z: 795,2 (M)⁺.ESI-MS m/z: 795.2 (M) ⁺ .

- 127 046742- 127 046742

39-S39-S

38-S38-S

К раствору соединения 38-S (890 мг, 1,12 ммоль) в CH₃CN:H₂O (1,39:1, 75 мл, 0,015 M) добавляют AgNO₃ (4,70 г, 28,0 ммоль). Через 18 ч при 23°C, добавляют смесь 1:1 насыщенных водных растворов NaCl и NaHCO3, перемешивают в течение 15 мин, разбавляют CH2Cl2, перемешивают в течение 5 мин и экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением соединения 39-S (500 мг, 57%).To a solution of compound 38-S (890 mg, 1.12 mmol) in CH ₃ CN:H ₂ O (1.39:1, 75 ml, 0.015 M) add AgNO ₃ (4.70 g, 28.0 mmol) . After 18 hours at 23°C, add a 1:1 mixture of saturated aqueous solutions of NaCl and NaHCO3, stir for 15 minutes, dilute with CH2Cl2, stir for 5 minutes and extract with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give compound 39-S (500 mg, 57%).

Rj=0,30 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 9:1).Rj=0.30 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 9:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,38-7,33 (м, 1H), 7,33-7,28 (м, 1H), 7,23-7,16 (м, 1H), 7,16-7,09 (м, 1H), 6,62 (с, 1H), 6,18 (д, J=1,4 Гц, 1H), 6,03 (д, J=1,4 Гц, 1H), 5,71 (с, 1H), 5,19 (д, J=11,2 Гц, 1H), 4,85 (с, 1H), 4,49 (с, 2H), 4,24-4,10 (м, 3H), 3,81 (с, 3H), 3,54 (д, J=4,9 Гц, 1H), 3,49 (д, J=2,3 Гц, 3H), 3,33 (т, J=10,1 Гц, 2H), 3,22 (с, 1H), 2,98 (с, 1H), 2,84 (д, J=7,6 Гц, 2H), 2,62-2,53 (м, 2H), 2,37 (с, 3H), 2,30-2,24 (м, 1H), 2,28 (с, 3H), 2,14 (с, 3H), 2,04 (с, 3H).1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.38-7.33 (m, 1H), 7.33-7.28 (m, 1H), 7.23-7.16 (m, 1H), 7.16-7.09 (m, 1H), 6.62 (s, 1H), 6.18 (d, J=1.4 Hz, 1H), 6.03 (d, J=1.4 Hz , 1H), 5.71 (s, 1H), 5.19 (d, J=11.2 Hz, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.49 (s, 2H), 4.24 -4.10 (m, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.54 (d, J=4.9 Hz, 1H), 3.49 (d, J=2.3 Hz, 3H) , 3.33 (t, J=10.1 Hz, 2H), 3.22 (s, 1H), 2.98 (s, 1H), 2.84 (d, J=7.6 Hz, 2H) , 2.62-2.53 (m, 2H), 2.37 (s, 3H), 2.30-2.24 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.14 (s , 3H), 2.04 (s, 3H).

¹³C ЯМР (126 МГц, CDCl3): δ 172,0, 170,7, 156,1, 150,6, 149,9, 147,1, 145,0, 142,4, 142,2, 132,0, 131,4, 128,7, 125,5, 123,8, 122,6, 121,6, 120,1, 116,5, 114,4, 112,3, 103,5, 92,6, 66,0, 65,1, 62,2, 60,4, 59,7, 56,6, 56,1, 54,8, 54,1, 51,6, 44,0, 41,3, 38,3, 30,8, 24,8, 20,6, 16,3, 9,6. ¹³ C NMR (126 MHz, CDCl3): δ 172.0, 170.7, 156.1, 150.6, 149.9, 147.1, 145.0, 142.4, 142.2, 132.0 , 131.4, 128.7, 125.5, 123.8, 122.6, 121.6, 120.1, 116.5, 114.4, 112.3, 103.5, 92.6, 66 ,0, 65.1, 62.2, 60.4, 59.7, 56.6, 56.1, 54.8, 54.1, 51.6, 44.0, 41.3, 38.3 , 30.8, 24.8, 20.6, 16.3, 9.6.

ИЭР-МС m/z: 768,2 (M-H₂O+H)+.ESI-MS m/z: 768.2 (MH ₂ O+H)+.

(+)-ВР-ИЭР-ВП-МС m/z:768,2652 [M-H₂O+H]+ (рассч. для C₄₁H₄₂N₃O₁₀S 768,2585)(+)-HR-IER-TOF-MS m/z: 768.2652 [MH ₂ O+H]+ (calculated for C ₄₁ H ₄₂ N ₃ O ₁₀ S 768.2585)

Пример 0-19.Example 0-19.

(100 мг, 0,16 ммоль) в CH3CN (16 мл, 0,01 M) добавляют (R)-2-aMUHO-3К раствору соединения 1 (бензофуран-3-ил)пропан-1-ол (37-R) (307 мг, 1,6 ммоль) и циануровый хлорид (TCT) (40 мг, 40%). Реакционную смесь перемешивают при 85°C в течение 44 ч и затем добавляют водный насыщенный раствор NaHCO₃ и смесь экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (гексaн:EtOAc, от 9:1 до 1:9) дает соединение 38-R (95 мг, 75%).(100 mg, 0.16 mmol) in CH3CN (16 ml, 0.01 M) add (R)-2-aMUHO-3 to a solution of compound 1 (benzofuran-3-yl)propan-1-ol (37-R) (307 mg, 1.6 mmol) and cyanuric chloride (TCT) (40 mg, 40%). The reaction mixture was stirred at 85°C for 44 hours and then aqueous saturated NaHCO ₃ solution was added and the mixture was extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. Flash chromatography (hexane:EtOAc, 9:1 to 1:9) gave compound 38-R (95 mg, 75%).

Rf=0,3 (гексaн:EtOAc, 1:1).Rf=0.3 (hexane:EtOAc, 1:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl3): δ 7,42-7,27 (м, 2H), 7,28-7,09 (м, 2H), 6,58 (с, 1H), 6,20 (д, J=1,4 Гц, 1H), 6,05 (д, J=1,4 Гц, 1H), 5,79 (с, 1H), 5,00 (д, J=11,4 Гц, 1H), 4,59 (с, 1H), 4,34 (с, 1H), 4,31-4,16 (м, 4H), 3,80 (с, 3H), 3,79-3,76 (м, 1H), 3,63 (с, 1H), 3,54-3,40 (м, 4H), 2,99-2,87 (м, 2H), 2,68 (д, J=15,0 Гц, 1H), 2,56-2,47 (м, 1H), 2,38 (с, 3H), 2,27 (с, 3H), 2,17 (с, 3H), 2,07 (с, 3H). ^1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.42-7.27 (m, 2H), 7.28-7.09 (m, 2H), 6.58 (s, 1H), 6.20 ( d, J=1.4 Hz, 1H), 6.05 (d, J=1.4 Hz, 1H), 5.79 (s, 1H), 5.00 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.34 (s, 1H), 4.31-4.16 (m, 4H), 3.80 (s, 3H), 3.79-3.76 (m, 1H), 3.63 (s, 1H), 3.54-3.40 (m, 4H), 2.99-2.87 (m, 2H), 2.68 (d, J=15 .0 Hz, 1H), 2.56-2.47 (m, 1H), 2.38 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.07 (c, 3H).

ИЭР-МС m/z: 795,2 (M+H)+.ESI-MS m/z: 795.2 (M+H)+.

- 128 046742- 128 046742

38-R 39-R38-R 39-R

К раствору соединения 38-R (95 мг, 0,11 ммоль) в CH₃CN:H2O (1,39:1, 11 мл, 0,015 M) добавляют AgNO₃ (601 мг, 3,58 ммоль). Через 18 ч при 23°C, добавляют смесь 1:1 насыщенных водных растворов NaCl и NaHCO₃, перемешивают в течение 15 мин, разбавляют CH₂Cl₂, перемешивают в течение 5 мин и экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением соединения 39-R (66 мг, 70%).To a solution of compound 38-R (95 mg, 0.11 mmol) in CH ₃ CN:H2O (1.39:1, 11 ml, 0.015 M) add AgNO ₃ (601 mg, 3.58 mmol). After 18 hours at 23°C, add a 1:1 mixture of saturated aqueous solutions of NaCl and NaHCO ₃ , stir for 15 minutes, dilute with CH ₂ Cl ₂ , stir for 5 minutes and extract with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give compound 39-R (66 mg, 70%).

Rf=0,3 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).Rf=0.3 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,39-7,31 (м, 2H), 7,23-7,07 (м, 2H), 6,59 (с, 1H), 6,17 (д, J=1,4 Гц, 1H), 6,01 (д, J=1,4 Гц, 1H), 5,75 (с, 1H), 5,12 (дд, J=11,3, 1,2 Гц, 1H), 4,84 (с, 1H), 4,56-4,43 (м, 2H), 4,19-4,07 (м, 3H), 3,79 (с, 3H), 3,83-3,74 (м, 1H), 3,66-3,51 (м, 3H), 3,24 (с, 1H), 2,99-2,79 (м, 2H), 2,75-2,64 (м, 1H), 2,592,43 (м, 2H), 2,38 (с, 3H), 2,27 (с, 3H), 2,16 (с, 3H), 2,07 (с, 3H). ^1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.39-7.31 (m, 2H), 7.23-7.07 (m, 2H), 6.59 (s, 1H), 6.17 (d, J=1.4 Hz, 1H), 6.01 (d, J=1.4 Hz, 1H), 5.75 (s, 1H), 5.12 (dd, J=11.3, 1.2 Hz, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.56-4.43 (m, 2H), 4.19-4.07 (m, 3H), 3.79 (s, 3H ), 3.83-3.74 (m, 1H), 3.66-3.51 (m, 3H), 3.24 (s, 1H), 2.99-2.79 (m, 2H), 2.75-2.64 (m, 1H), 2.592.43 (m, 2H), 2.38 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 2 .07 (s, 3H).

¹³C ЯМР (101 МГц, CD3OD): δ 170,5, 169,1, 154,9, 148,9, 148,5, 145,7, 143,6, 141,1, 140,8, 130,6, 129,9, 127,1, 124,1, 122,4, 122,4, 121,2, 120,3, 118,7, 118,2, 115,1, 113,6, 110,9, 102,1, 91,1, 65,0, 63,3, 60,2, ¹³ C NMR (101 MHz, CD3OD): δ 170.5, 169.1, 154.9, 148.9, 148.5, 145.7, 143.6, 141.1, 140.8, 130.6 , 129.9, 127.1, 124.1, 122.4, 122.4, 121.2, 120.3, 118.7, 118.2, 115.1, 113.6, 110.9, 102 ,1, 91.1, 65.0, 63.3, 60.2,

59,0, 58,4, 55,4, 54,5, 52,7, 52,3, 42,5, 38,7, 29,4, 23,5, 23,2, 19,1, 14,8, 8,3.59.0, 58.4, 55.4, 54.5, 52.7, 52.3, 42.5, 38.7, 29.4, 23.5, 23.2, 19.1, 14, 8, 8.3.

ИЭР-МС m/z: 768,2 (M-H₂O+H)+.ESI-MS m/z: 768.2 (MH ₂ O+H)+.

(+)-ВР-ИЭР-ВП-МС m/z: 767,2628 [M-H₂O+H]+ (рассч. для C₄₁H₄₂N₃O₁₀S 768,2585).(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 767.2628 [MH ₂ O+H]+ (calc. for C ₄₁ H ₄₂ N ₃ O ₁₀ S 768.2585).

Пример 0-20. Синтез аллил-Ы-[^)-2-амино-3-(бензофуран-3-ил)пропил]карбамата (44-S).Example 0-20. Synthesis of allyl-N-[^]-2-amino-3-(benzofuran-3-yl)propyl]carbamate (44-S).

К раствору соединения 37-S (1,0 г, 5,22 ммоль) в CH3CN (21 мл, 4 мл/ммоль) добавляют ди-третбутил дикарбонат (2,28 г, 10,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 2 ч, концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением соединения 40-S (0,5 г, 33%).To a solution of compound 37-S (1.0 g, 5.22 mmol) in CH3CN (21 mL, 4 mL/mmol) was added di-tert-butyl dicarbonate (2.28 g, 10.4 mmol). The reaction mixture was stirred at 23°C for 2 hours and concentrated under vacuum. Flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give 40-S (0.5 g, 33%).

Rf=0,7 (CH2Cl2:CH₃OH, 9:1).Rf=0.7 (CH2Cl2:CH ₃ OH, 9:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,64 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,49 (с, 1H), 7,46 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,36-7,19 (м, 2H), 4,94 (с, 1H), 3,98 (с, 1H), 3,71-3,56 (м, 2H), 2,93 (д, J=6,9 Гц, 2H), 1,41 (с, 9H).1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.64 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.46 (d, J=7.6 Hz, 1H ), 7.36-7.19 (m, 2H), 4.94 (s, 1H), 3.98 (s, 1H), 3.71-3.56 (m, 2H), 2.93 ( d, J=6.9 Hz, 2H), 1.41 (s, 9H).

- 129 046742- 129 046742

К раствору соединения 40-S (0,5 г, 1,71 ммоль) в CH2C12 (11 мл, 6 мл/ммоль) добавляют фталимид (0,55 г, 3,77 ммоль), трифенилфосфин (0,99 г, 3,77 ммоль) и смесь охлаждают при 0°C. Раствор 40% диэтилазодикарбоксилата (ДЭАД) в CH₂Cl₂ (1,26 мл, 4,29 ммоль) добавляют в течение 15 мин. Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 18 ч, концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (гексан:EtOAc, от 99:1 до 40:60) с получением соединения 41-S (0,68 г, 94%).To a solution of compound 40-S (0.5 g, 1.71 mmol) in CH2C12 (11 ml, 6 ml/mmol) add phthalimide (0.55 g, 3.77 mmol), triphenylphosphine (0.99 g, 3 .77 mmol) and the mixture is cooled at 0°C. A solution of 40% diethyl azodicarboxylate (DEAD) in CH ₂ Cl ₂ (1.26 ml, 4.29 mmol) was added over 15 minutes. The reaction mixture was stirred at 23°C for 18 hours and concentrated under vacuum. The resulting residue was purified by flash chromatography (hexane:EtOAc, 99:1 to 40:60) to give compound 41-S (0.68 g, 94%).

Rf=0,8 (СН2С12:СНзОН, 9:1).Rf=0.8 (CH2C12:CH3OH, 9:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,89-7,79 (м, 2H), 7,83-7,62 (м, 2H), 7,65-7,55 (м, 2H), 7,49-7,42 (м, 1H), 7,33-7,20 (м, 2H), 4,83 (д, J=9,0 Гц, 1H), 4,39 (ддт, J=12,1, 6,3, 2,9 Гц, 1H), 3,88-3,70 (м, 2H), 2,96 (д, J=6,4 Гц, 2H), 1,24 (с, 9H).1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.89-7.79 (m, 2H), 7.83-7.62 (m, 2H), 7.65-7.55 (m, 2H), 7.49-7.42 (m, 1H), 7.33-7.20 (m, 2H), 4.83 (d, J=9.0 Hz, 1H), 4.39 (ddt, J= 12.1, 6.3, 2.9 Hz, 1H), 3.88-3.70 (m, 2H), 2.96 (d, J=6.4 Hz, 2H), 1.24 (s , 9H).

К раствору соединения 41-S (345 мг, 0,82 ммоль) в этаноле (25 мл, 30 мл/ммоль) добавляют моногидрат гидразина (3,6 мл, 73,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 80°C в герметично закрытой пробирке в течение 2 ч, концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 100:1 до 50:50) с получением соединения 42-S (233 мг, 98%).To a solution of compound 41-S (345 mg, 0.82 mmol) in ethanol (25 mL, 30 mL/mmol) was added hydrazine monohydrate (3.6 mL, 73.8 mmol). The reaction mixture is stirred at 80°C in a hermetically sealed test tube for 2 hours and concentrated under vacuum. Flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 100:1 to 50:50) to give compound 42-S (233 mg, 98%).

Rf=0,1 (СН2С12:СНзОН, 8:2).Rf=0.1 (CH2C12:CH3OH, 8:2).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,62 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,49-7,42 (м, 2H), 7,33-7,18 (м, 2H), 4,85 (д, J=8,81H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.62 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.49-7.42 (m, 2H), 7.33-7.18 (m, 2H), 4.85 (d, J=8.8

Гц, 1H), 3,91 (с, 1H), 2,91-2,76 (м, 3H), 2,67 (дд, J=13,1, 6,8 Гц, 1H), 1,25 (с, 9H).Hz, 1H), 3.91 (s, 1H), 2.91-2.76 (m, 3H), 2.67 (dd, J=13.1, 6.8 Hz, 1H), 1.25 (s, 9H).

42-S 43-S42-S 43-S

К раствору соединения 42-S (280 мг, 0,96 ммоль) в CH3CN (10 мл, 10 мл/ммоль) и ДМФ (16 мл, 1 мл/ммоль) добавляют N.N-диизопропилэтиламин (0,14 мл, 0,77 ммоль) и аллилхлорформиат (1,02 мл, 9,64 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 2 ч. Смесь разбавляют EtOAc и добавляют NH4C1 и смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэшхроматографией (гексан:ЕЮАс, от 100:1 до 1:100) с получением соединения 43-S (445 мг, >100%).To a solution of compound 42-S (280 mg, 0.96 mmol) in CH3CN (10 ml, 10 ml/mmol) and DMF (16 ml, 1 ml/mmol) add NN-diisopropylethylamine (0.14 ml, 0.77 mmol) and allyl chloroformate (1.02 ml, 9.64 mmol). The reaction mixture was stirred at 23°C for 2 hours. The mixture was diluted with EtOAc and NH4C1 was added and the mixture was extracted with EtOAc. The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (hexane:EEAc, 100:1 to 1:100) to give compound 43-S (445 mg, >100%).

Rf=0,5 (гексан:ЕЮАс, 1:1).Rf=0.5 (hexane:EAAc, 1:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCI3): δ 7,60 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,52-7,43 (м, 2H), 7,34-7,20 (м, 2H), 5,90 (ддт, J=16,4, 10,8, 5,6 Гц, 1H), 5,32-5,17 (м, 2H), 4,93-4,86 (м, 1H), 4,56 (д, J=5,6 Гц, 2H), 4,08-3,98 (м, 1H), 3,403,21 (м, 2H), 2,88 (м, 2H), 1,25 (с, 9H).1H NMR (400 MHz, CDCI3): δ 7.60 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.52-7.43 (m, 2H), 7.34-7.20 (m, 2H ), 5.90 (ddt, J=16.4, 10.8, 5.6 Hz, 1H), 5.32-5.17 (m, 2H), 4.93-4.86 (m, 1H ), 4.56 (d, J=5.6 Hz, 2H), 4.08-3.98 (m, 1H), 3.403.21 (m, 2H), 2.88 (m, 2H), 1 .25 (s, 9H).

К раствору соединения 43-S (160 мг, 0,43 ммоль) в CH₂Cl₂ (8 мл, 16,6 мл/ммоль) добавляют трифторуксусную кислоту (4 мл, 8,3 мл/ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 1,5 ч, концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 100:1 до 50:50) с получением соединения 44-S (175 мг, >100%).To a solution of compound 43-S (160 mg, 0.43 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (8 ml, 16.6 ml/mmol) was added trifluoroacetic acid (4 ml, 8.3 ml/mmol). The reaction mixture is stirred at 23°C for 1.5 hours and concentrated under vacuum. Flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 100:1 to 50:50) to give compound 44-S (175 mg, >100%).

Rf=0,2 (СН2С12:СНзОН, 9:1).Rf=0.2 (CH2C12:CH3OH, 9:1).

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7,72 (с, 1H), 7,64 (дт, J=8,4, 0,9 Гц, 1H), 7,49 (дт, J=8,4, 0,9 Гц, 1H), 7,37-7,22 (м, 2H), 5,94 (ддт, J=16,3, 10,7, 5,5 Гц, 1H), 5,32 (дкв, J=17,3, 1,7 Гц, 1H), 5,19 (дкв, J=10,6, 1,5 Гц, 1H), 4,56 (дт, J=5,7, 1,5 Гц, 2H), 3,56 (квд, J=7,0, 4,4 Гц, 1H), 3,46-3,32 (м, 1H), 3,32-3,24 (м, 1H), 3,03 (дд, J=14,8, 6,9 Гц, 1H), 2,91 (ддд, J=14,8, 7,1, 0,9 Гц, 1H).1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.72 (s, 1H), 7.64 (dt, J=8.4, 0.9 Hz, 1H), 7.49 (dt, J=8.4 , 0.9 Hz, 1H), 7.37-7.22 (m, 2H), 5.94 (ddt, J=16.3, 10.7, 5.5 Hz, 1H), 5.32 ( dkv, J=17.3, 1.7 Hz, 1H), 5.19 (dkv, J=10.6, 1.5 Hz, 1H), 4.56 (dt, J=5.7, 1, 5 Hz, 2H), 3.56 (kvd, J=7.0, 4.4 Hz, 1H), 3.46-3.32 (m, 1H), 3.32-3.24 (m, 1H ), 3.03 (dd, J=14.8, 6.9 Hz, 1H), 2.91 (ddd, J=14.8, 7.1, 0.9 Hz, 1H).

Пример 0-21. Синтез аллил-Ы-[Щ)-2-амино-3-(бензофуран-3-ил)пропил]карбамата (44-R).Example 0-21. Synthesis of allyl-N-[N]-2-amino-3-(benzofuran-3-yl)propyl]carbamate (44-R).

- 130 046742- 130 046742

37-R 40-R37-R 40-R

К раствору соединения 37-R (2,75 г, 14,4 ммоль) в CH₃CN (58 мл, 4 мл/ммоль) добавляют ди-третбутилдикарбонат (6,27 г, 28,76 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 2,5 ч, концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением соединения 40-R (3,7 г, 88%).To a solution of compound 37-R (2.75 g, 14.4 mmol) in CH ₃ CN (58 ml, 4 ml/mmol) was added di-tert-butyl dicarbonate (6.27 g, 28.76 mmol). The reaction mixture was stirred at 23°C for 2.5 hours and concentrated under vacuum. Flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give 40-R (3.7 g, 88%).

Rf=0,6 (CH2CLCH3OH, 9:1).Rf=0.6 (CH2CLCH3OH, 9:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,64 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,52-7,43 (м, 2H), 7,35-7,20 (м, 2H), 4,85 (д, J=8,2 Гц, 1H), 4,00 (шс, 1H), 3,69 (дд, J=11,0, 4,0 Гц, 1H), 3,62 (дд, J=10,9, 5,1 Гц, 1H), 2,94 (д, J=6,9 Гц, 2H), 1,42 (с, 9H). ^1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.64 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.52-7.43 (m, 2H), 7.35-7.20 (m , 2H), 4.85 (d, J=8.2 Hz, 1H), 4.00 (shs, 1H), 3.69 (dd, J=11.0, 4.0 Hz, 1H), 3 .62 (dd, J=10.9, 5.1 Hz, 1H), 2.94 (d, J=6.9 Hz, 2H), 1.42 (s, 9H).

^В> 7=4 /=Х °гО / \ PPh₃ / \ n ^В> 7 = 4 / = Х °гО / \ PPh ₃ / \ n

У ' θΗ Фталимид у //U ' θΗ Phthalimid u //

NHBoc Д^ЭАД । .°NHBoc D ^EA D । .°

О д_ХМ о NHBocO d _XM o NHBoc

40-R41-R40-R41-R

К раствору соединения 40-R (3,7 г, 12,7 ммоль) в CH₂Cl₂ (76 мл, 6 мл/ммоль) добавляют фталимид (4,1 г, 28 ммоль), трифенилфосфин (7,3 г, 28 ммоль) и смесь охлаждают при 0°C. Раствор 40% диэтилазодикарбоксилата (ДЭАД) в CH₂Cl₂ (9,4 мл, 31,7 ммоль) добавляют в течение 15 мин. Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 16 ч, концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением соединения 41R(4,05 г, 76%).To a solution of compound 40-R (3.7 g, 12.7 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (76 ml, 6 ml/mmol) add phthalimide (4.1 g, 28 mmol), triphenylphosphine (7.3 g, 28 mmol) and the mixture is cooled at 0°C. A solution of 40% diethyl azodicarboxylate (DEAD) in CH ₂ Cl ₂ (9.4 ml, 31.7 mmol) was added over 15 minutes. The reaction mixture was stirred at 23°C for 16 hours and concentrated under vacuum. The resulting residue was purified by flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give compound 41R (4.05 g, 76%).

R=0,8 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 9:1).R=0.8 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 9:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,67-7,68 (м, 4H), 7,61 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,58 (с, 1H), 7,46 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,27 (дтд, J=17,2, 7,3, 1,4 Гц, 2H), 4,84 (д, J=9,0 Гц, 1H), 4,46-4,30 (м, 1H), 3,89-3,66 (м, 2H), 2,97 (д, J=6,4 Гц, 2H), 1,24 (с, 9H). ^1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.67-7.68 (m, 4H), 7.61 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.46 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.27 (dtd, J=17.2, 7.3, 1.4 Hz, 2H), 4.84 (d, J=9, 0 Hz, 1H), 4.46-4.30 (m, 1H), 3.89-3.66 (m, 2H), 2.97 (d, J=6.4 Hz, 2H), 1, 24 (s, 9H).

К раствору соединения 41-R (4,0 г, 9,5 ммоль) в этаноле (285 мл, 30 мл/ммоль) добавляют моногидрат гидразина (41,5 мл, 856 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 80°C в герметично закрытой пробирке в течение 2 ч, концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (CH2Cl2:CH3OH, от 100:1 до 50:50) с получением соединения 42-R (2,2 г, 80%).To a solution of compound 41-R (4.0 g, 9.5 mmol) in ethanol (285 ml, 30 ml/mmol) was added hydrazine monohydrate (41.5 ml, 856 mmol). The reaction mixture is stirred at 80°C in a hermetically sealed test tube for 2 hours and concentrated under vacuum. Flash chromatography (CH2Cl2:CH3OH, 100:1 to 50:50) to give 42-R (2.2 g, 80%).

Rf=0,1 (CH2Ch:CH₃OH, 8:2).Rf=0.1 (CH2Ch:CH ₃ OH, 8:2).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,60 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,45 (с, 1H), 7,44 (д, J=7,1 Гц, 1H), 7,25 (дтд, J=18,8, 7,3, 1,3 Гц, 2H), 4,94 (д, J=8,8 Гц, 1H), 3,98-3,78 (м, 1H), 2,90-2,77 (м, 2H), 2,65 (дд, J=13,1, 7,0 Гц, 1H), 1,40 (с, 9H).1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.60 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.44 (d, J=7.1 Hz, 1H ), 7.25 (dtd, J=18.8, 7.3, 1.3 Hz, 2H), 4.94 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.98-3.78 ( m, 1H), 2.90-2.77 (m, 2H), 2.65 (dd, J=13.1, 7.0 Hz, 1H), 1.40 (s, 9H).

- 131 046742- 131 046742

К раствору соединения 42-R (2,2 г, 7,6 ммоль) в CH3CN (76 мл, 10 мл/ммоль) и ДМФ (7,6 мл, 1 мл/ммоль) добавляют N.N-диизопропилэтиламин (1,1 мл, 6,08 ммоль) и аллилхлорформиат (8,05 мл, 76 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 7 ч. Смесь разбавляют EtOAc и добавляют NH₄Cl и смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэшхроматографией (гексан:ЕЮАс, от 100:1 до 1:100) с получением соединения 43-R (2,3 г, 81%).To a solution of compound 42-R (2.2 g, 7.6 mmol) in CH3CN (76 ml, 10 ml/mmol) and DMF (7.6 ml, 1 ml/mmol) add NN-diisopropylethylamine (1.1 ml , 6.08 mmol) and allyl chloroformate (8.05 ml, 76 mmol). The reaction mixture was stirred at 23°C for 7 hours. The mixture was diluted with EtOAc and NH ₄ Cl was added and the mixture was extracted with EtOAc. The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (hexane:EEAc, 100:1 to 1:100) to give compound 43-R (2.3 g, 81%).

Rf=0,7 (гексан:ЕЮАс, 1:1).Rf=0.7 (hexane:EAAc, 1:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDC13): δ 7,60 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,52-7,43 (м, 2H), 7,34-7,20 (м, 2H), 5,90 (ддт, J=17,3, 10,8, 5,6 Гц, 1H), 5,29 (д, J=17,2, 1H), 5,20 (д, J=10,4, 1H), 5,10 (т, J=6,2 Гц, 1H), 4,86 (д, J=8,4 Гц, 1H), 4,56 (д, J=5,4, 2H), 4,08-3,97 (м, 1H), 3,36 (дт, J=10,7, 4,7 Гц, 1H), 3,30-3,23 (м, 1H), 2,87 (тд, J=14,8, 6,5 Гц, 2H), 1,41 (с, 9H).1H NMR (400 MHz, CDC13): δ 7.60 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.52-7.43 (m, 2H), 7.34-7.20 (m, 2H ), 5.90 (ddt, J=17.3, 10.8, 5.6 Hz, 1H), 5.29 (d, J=17.2, 1H), 5.20 (d, J=10 ,4, 1H), 5.10 (t, J=6.2 Hz, 1H), 4.86 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.56 (d, J=5.4, 2H), 4.08-3.97 (m, 1H), 3.36 (dt, J=10.7, 4.7 Hz, 1H), 3.30-3.23 (m, 1H), 2 .87 (td, J=14.8, 6.5 Hz, 2H), 1.41 (s, 9H).

К раствору соединения 43-R (1,32 г, 3,52 ммоль) в CH2Cl2 (60 мл, 16,6 мл/ммоль) добавляют трифторуксусную кислоту (30 мл, 8,3 мл/ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 23°C в течение 1,5 ч, концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (CH2Cl2:CH3OH, от 100:1 до 50:50) с получением соединения 44-R (0,90 г, 94%).Trifluoroacetic acid (30 mL, 8.3 mL/mmol) was added to a solution of compound 43-R (1.32 g, 3.52 mmol) in CH2Cl2 (60 mL, 16.6 mL/mmol). The reaction mixture is stirred at 23°C for 1.5 hours and concentrated under vacuum. Flash chromatography (CH2Cl2:CH3OH, 100:1 to 50:50) to give 44-R (0.90 g, 94%).

R=0,2 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 9:1).R=0.2 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 9:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDC13): δ 7,75 (с, 1H), 7,69-7,61 (м, 1H), 7,54-7,46 (м, 1H), 7,39-7,24 (м, 2H), 5,95 (ддт, J=16,3, 10,8, 5,5 Гц, 1H), 5,32 (дд, J=17,3, 1,8 Гц, 1H), 5,24-5,16 (м, 1H), 4,57 (дт, J=5,7, 1,5 Гц, 2H), 3,68 (квд, J=7,1, 4,2 Гц, 1H), 3,48 (дд, J=14,8, 4,2 Гц, 1H), 3,42-3,30 (м, 1H), 3,14-2,95 (м, 2H).1H NMR (400 MHz, CDC13): δ 7.75 (s, 1H), 7.69-7.61 (m, 1H), 7.54-7.46 (m, 1H), 7.39-7 .24 (m, 2H), 5.95 (ddt, J=16.3, 10.8, 5.5 Hz, 1H), 5.32 (dd, J=17.3, 1.8 Hz, 1H ), 5.24-5.16 (m, 1H), 4.57 (dt, J=5.7, 1.5 Hz, 2H), 3.68 (kvd, J=7.1, 4.2 Hz, 1H), 3.48 (dd, J=14.8, 4.2 Hz, 1H), 3.42-3.30 (m, 1H), 3.14-2.95 (m, 2H) .

Пример 0-22.Example 0-22.

45-S45-S

К раствору соединения 1 (750 мг, 1,2 ммоль) в CH3CN (120 мл, 0,01 M) добавляют соединение 44-S (1370 мг, 6 ммоль) и циануровый хлорид (TCT) (184 мг, 20%). Реакционную смесь перемешивают при 85°C в течение 23 ч и затем добавляют водный насыщенный раствор NaHCO₃ и смесь экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (гексан:ЕЮАс, от 9:1 до 1:9) дает соединение 45-S (755 мг, 72%).To a solution of compound 1 (750 mg, 1.2 mmol) in CH3CN (120 ml, 0.01 M) was added compound 44-S (1370 mg, 6 mmol) and cyanuric chloride (TCT) (184 mg, 20%). The reaction mixture was stirred at 85°C for 23 hours and then aqueous saturated NaHCO ₃ solution was added and the mixture was extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. Flash chromatography (hexane:EEAc, 9:1 to 1:9) gave compound 45-S (755 mg, 72%).

Rf=0,36 (гексан:ЕЮАс, 1:1).Rf=0.36 (hexane:EAAc, 1:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDC13): δ 7,38-7,28 (м, 2H), 7,23-7,08 (м, 2H), 6,67 (с, 1H), 6,19 (д, J=1,4 Гц, 1H), 6,09-5,95 (м, 1H), 6,04 (д, J=1,4 Гц, 1H), 5,92 (с, 1H), 5,80 (с, 1H), 5,44-5,34 (м, 1H), 5,26 (дкв, J=10,4, 1,3 Гц, 1H), 5,08 (дд, J=11,4, 1,1 Гц, 1H), 4,70-4,63 (м, 2H), 4,56 (с, 1H), 4,34 (с, 1H), 4,31-4,18 (м, 3H), 3,80 (с, 3H), 3,50-3,39 (м, 2H), 3,24-3,15 (м, 1H), 3,00 (дт, J=12,2, 6,0 Гц, 2H), 2,95 (д, J=5,2 Гц, 2H), 2,60 (дд, J=15,4, 4,5 Гц, 2H), 2,44 (дд, J=15,6, 5,2 Гц, 1H), 2,29 (с, 3H), 2,27 (с, 3H), 2,25-2,20 (м, 1H), 2,18 (с, 3H), 2,12 (с, 1H), 2,04 (с, 3H).1H NMR (400 MHz, CDC13): δ 7.38-7.28 (m, 2H), 7.23-7.08 (m, 2H), 6.67 (s, 1H), 6.19 (d , J=1.4 Hz, 1H), 6.09-5.95 (m, 1H), 6.04 (d, J=1.4 Hz, 1H), 5.92 (s, 1H), 5 .80 (s, 1H), 5.44-5.34 (m, 1H), 5.26 (dkv, J=10.4, 1.3 Hz, 1H), 5.08 (dd, J=11 ,4, 1.1 Hz, 1H), 4.70-4.63 (m, 2H), 4.56 (s, 1H), 4.34 (s, 1H), 4.31-4.18 ( m, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.50-3.39 (m, 2H), 3.24-3.15 (m, 1H), 3.00 (dt, J=12, 2, 6.0 Hz, 2H), 2.95 (d, J=5.2 Hz, 2H), 2.60 (dd, J=15.4, 4.5 Hz, 2H), 2.44 ( dd, J=15.6, 5.2 Hz, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.25-2.20 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 2.12 (s, 1H), 2.04 (s, 3H).

ИЭР-МС m/z: 878,2 (M+H)+.ESI-MS m/z: 878.2 (M+H)+.

- 132 046742- 132 046742

К раствору соединения 45-S (750 мг, 0,85 ммоль) в CH2C12 (15,3 мл, 18 мл/ммоль) добавляют дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия(П) (96 мг, 0,14 ммоль) и уксусную кислоту (0,5 мл, 8,5 ммоль). Гидрид трибутилолова (1,4 мл, 5,1 ммоль) добавляют при 0°C и реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 30 минут и концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (Гексαн:EtOAc, от 100:1 до 1:100 и CH₂Cl₂:CH₃OH, от 100:1 до 1:100) с получением соединения 46-S (430 мг, 64%).To a solution of compound 45-S (750 mg, 0.85 mmol) in CH2C12 (15.3 ml, 18 ml/mmol) add bis(triphenylphosphine)palladium(II) dichloride (96 mg, 0.14 mmol) and acetic acid (0.5 ml, 8.5 mmol). Tributyltin hydride (1.4 ml, 5.1 mmol) was added at 0°C and the reaction mixture was stirred at 0°C for 30 minutes and concentrated in vacuo. Flash chromatography (Hexαn:EtOAc, 100:1 to 1:100 and CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 100:1 to 1:100) to give compound 46-S (430 mg, 64%).

Rf=0,3 (CH2CECH₃OH, 1:1).Rf=0.3 (CH2CECH ₃ OH, 1:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,37-7,29 (м, 2H), 7,22-7,11 (м, 2H), 6,57 (с, 1H), 6,21 (д, J=1,5 Гц, 1H), ^1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.37-7.29 (m, 2H), 7.22-7.11 (m, 2H), 6.57 (s, 1H), 6.21 (d, J=1.5 Hz, 1H),

6,06 (д, J=1,5 Гц, 1H), 5,07 (д, J=11,5 Гц, 1H), 4,57 (с, 1H), 4,37 (с, 1H), 4,29-4,23 (м, 2H), 4,14 (с, 1H), 3,79 (с, 3H), 3,50-3,47 (м, 2H), 3,38 (д, J=8,7 Гц, 1H), 2,95-2,71 (м, 4H), 2,68-2,52 (м, 2H), 2,51-2,38 (м, 1H), 2,35 (с, 3H), 2,33-2,26 (м, 1H), 2,29 (с, 3H), 2,17-2,08 (м, 1H), 2,10 (с, 3H), 2,04 (с, 3H).6.06 (d, J=1.5 Hz, 1H), 5.07 (d, J=11.5 Hz, 1H), 4.57 (s, 1H), 4.37 (s, 1H), 4.29-4.23 (m, 2H), 4.14 (s, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.50-3.47 (m, 2H), 3.38 (d, J=8.7 Hz, 1H), 2.95-2.71 (m, 4H), 2.68-2.52 (m, 2H), 2.51-2.38 (m, 1H), 2 .35 (s, 3H), 2.33-2.26 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.17-2.08 (m, 1H), 2.10 (s, 3H ), 2.04 (s, 3H).

ИЭР-МС m/z: 794,3 (M+H)+.ESI-MS m/z: 794.3 (M+H)+.

46-S 47-S46-S 47-S

К раствору соединения 46-S (550 мг, 0,7 ммоль) в CH₃CN:H₂O (1,39:1, 49 мл, 0,015 M) добавляют AgNO₃ (2,4 г, 14 ммоль). Через 16 ч при 23°C, реакционную смесь гасят смесью 1:1 насыщенных водных растворов NaCl и NaHCO₃, перемешивают в течение 15 мин, разбавляют CH₂Cl₂, перемешивают в течение 5 мин и экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением соединения 47-S (53 мг, 10%).To a solution of compound 46-S (550 mg, 0.7 mmol) in CH ₃ CN:H ₂ O (1.39:1, 49 ml, 0.015 M) add AgNO ₃ (2.4 g, 14 mmol). After 16 hours at 23°C, the reaction mixture is quenched with a 1:1 mixture of saturated aqueous solutions of NaCl and NaHCO ₃ , stirred for 15 minutes, diluted with CH ₂ Cl ₂ , stirred for 5 minutes and extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give compound 47-S (53 mg, 10%).

R=0,1 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 9:1).R=0.1 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 9:1).

1H ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ 7,36 (д, 7,9 Гц, 1H), 7,33 (д, 7,4 Гц, 1H), 7,23 (т, J=7,4 Гц, 1H), 7,16 (т, J=7,4 Гц, 1H), 6,77 (с, 1H), 6,20 (с, 1H), 6,04 (с, 1H), 5,92 (с, 1H), 5,20 (д, J=11,1 Гц, 1H), 4,90 (с, 1H), 4,50 (с, 1H), 4,46-4,39 (м, 1H), 4,25 (д, J=11,1 Гц, 1H), 4,20 (с, 1H), 3,84 (с, 3H), 3,81 (д, J=4,2 Гц, 1H), 3,58 (с, 1H), 3,40-3,14 (м, 3H), 2,90 (т, J=13,0 Гц, 1H), 2,76 (м, 3H), 2,50 (с, 3H), 2,46-2,37 (м, 1H), 2,32-2,26 (м, 2H), 2,30 (с, 3H), 2,15 (с, 3H), 2,04 (с, 3H).1H NMR (500 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.36 (d, 7.9 Hz, 1H), 7.33 (d, 7.4 Hz, 1H), 7.23 (t, J=7.4 Hz, 1H), 7.16 (t, J=7.4 Hz, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.20 (s, 1H), 6.04 (s, 1H), 5, 92 (s, 1H), 5.20 (d, J=11.1 Hz, 1H), 4.90 (s, 1H), 4.50 (s, 1H), 4.46-4.39 (m , 1H), 4.25 (d, J=11.1 Hz, 1H), 4.20 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.81 (d, J=4.2 Hz , 1H), 3.58 (s, 1H), 3.40-3.14 (m, 3H), 2.90 (t, J=13.0 Hz, 1H), 2.76 (m, 3H) , 2.50 (s, 3H), 2.46-2.37 (m, 1H), 2.32-2.26 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.15 (s , 3H), 2.04 (s, 3H).

¹³C ЯМР (126 МГц, CD3OD): δ 170,5, 169,2, 154,6, 149,1, 148,7, 145,7, 143,5, 141,0, 140,9, 131,2, 129,6, 126,9, 124,4, 122,5, 121,4, 119,7, 118,7, 115,0, 112,7, 111,0, 110,7, 102,1, 91,2, 63,5, 61,2, 59,2, 58,5, ¹³ C NMR (126 MHz, CD3OD): δ 170.5, 169.2, 154.6, 149.1, 148.7, 145.7, 143.5, 141.0, 140.9, 131.2 , 129.6, 126.9, 124.4, 122.5, 121.4, 119.7, 118.7, 115.0, 112.7, 111.0, 110.7, 102.1, 91 ,2, 63.5, 61.2, 59.2, 58.5,

55,3, 54,7, 53,4, 52,7, 43,3, 42,5, 39,9, 36,9, 29,3, 24,1, 23,6, 19,1, 15,0, 8,2.55.3, 54.7, 53.4, 52.7, 43.3, 42.5, 39.9, 36.9, 29.3, 24.1, 23.6, 19.1, 15, 0.8.2.

ИЭР-МС m/z: 767,2 (M-H₂O+H)+.ESI-MS m/z: 767.2 (MH ₂ O+H)+.

(+)-ВР-ИЭР-ВП-МС m/z: 767,2794 [M-H₂O+H]+ (Рассч. для C₄₁H₄₃N₄O₉S 767,2745).(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 767.2794 [MH ₂ O+H]+ (Calc. for C ₄₁ H ₄₃ N ₄ O ₉ S 767.2745).

Пример 0-23.Example 0-23.

К раствору соединения 1 (621 мг, 1 ммоль) в CH3CN (100 мл, 0,01 M) добавляют соединение 44-RTo a solution of compound 1 (621 mg, 1 mmol) in CH3CN (100 ml, 0.01 M) add compound 44-R

- 133 046742 (825 мг, 3 ммоль) и циануровый хлорид (TCT) (248 мг, 40%). Реакционную смесь перемешивают при 85°C в течение 66 ч и затем добавляют водный насыщенный раствор NaHCO₃ и смесь экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (гексан:EtOAc, от 9:1 до 1:9) дает соединение 45-R (530 мг, 58%).- 133 046742 (825 mg, 3 mmol) and cyanuric chloride (TCT) (248 mg, 40%). The reaction mixture was stirred at 85°C for 66 hours and then aqueous saturated NaHCO ₃ solution was added and the mixture was extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. Flash chromatography (hexane:EtOAc, 9:1 to 1:9) gave compound 45-R (530 mg, 58%).

Rf=0,4 (гексан:EtOAc, 1:1).Rf=0.4 (hexane:EtOAc, 1:1).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,42-7,28 (м, 2H), 7,23-7,08 (м, 2H), 6,60 (с, 1H), 6,20 (д, J=1,4 Гц, 1H), ^1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.42-7.28 (m, 2H), 7.23-7.08 (m, 2H), 6.60 (s, 1H), 6.20 (d, J=1.4 Hz, 1H),

6,04 (д, J=1,4 Гц, 1H), 6,01-5,92 (м, 1H), 5,77 (с, 1H), 5,44-5,20 (м, 2H), 5,09 (с, 1H), 5,04-4,96 (м, 1H), 4,716.04 (d, J=1.4 Hz, 1H), 6.01-5.92 (m, 1H), 5.77 (s, 1H), 5.44-5.20 (m, 2H) , 5.09 (s, 1H), 5.04-4.96 (m, 1H), 4.71

4,55 (м, 2H), 4,34 (с, 1H), 4,30-4,18 (м, 3H), 3,79 (с, 3H), 3,53 (дд, J=10,2, 4,4 Гц, 1H), 3,46 (м, 2H), 3,504.55 (m, 2H), 4.34 (s, 1H), 4.30-4.18 (m, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.53 (dd, J=10, 2, 4.4 Hz, 1H), 3.46 (m, 2H), 3.50

3,40 (м, 1H), 3,03-2,87 (м, 2H), 2,67 (д, J=15,0 Гц, 1H), 2,47 (дд, J=15,6, 3,7 Гц, 1H), 2,40-2,32 (м, 2H), 2,30 (с, 3H), 2,29 (с, 3H), 2,19-2,12 (м, 2H), 2,16 (с, 3H), 2,09 (с, 3H).3.40 (m, 1H), 3.03-2.87 (m, 2H), 2.67 (d, J=15.0 Hz, 1H), 2.47 (dd, J=15.6, 3.7 Hz, 1H), 2.40-2.32 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.19-2.12 (m, 2H ), 2.16 (s, 3H), 2.09 (s, 3H).

ИЭР-МС m/z: 878,3 (M+H)+.ESI-MS m/z: 878.3 (M+H)+.

К раствору соединения 45-R (552 мг, 0,63 ммоль) в CH₂Cl₂ (11,3 мл, 18 мл/ммоль) добавляют дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия(П) (70,7 мг, 0,1 ммоль) и уксусную кислоту (0,36 мл, 6,3 ммоль). Гидрид трибутилолова (1,02 мл, 3,8 ммоль) добавляют при 0°C и реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 0,5 ч и концентрируют под вакуумом Полученный неочищенный продукт разбавляют EtOAc, добавляют насыщенный водный раствор NH₄Cl и смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Флэш-хроматография (гексан:EtOAc, от 100:1 до 1:100 и EtOAc:CH₃OH, от 100:1 до 1:100) с получением соединения 46-R (423 мг, 85%).To a solution of compound 45-R (552 mg, 0.63 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (11.3 ml, 18 ml/mmol) add bis(triphenylphosphine) palladium(P) dichloride (70.7 mg, 0.1 mmol) and acetic acid (0.36 ml, 6.3 mmol). Tributyltin hydride (1.02 ml, 3.8 mmol) was added at 0°C and the reaction mixture was stirred at 0°C for 0.5 h and concentrated in vacuo. The resulting crude product was diluted with EtOAc, saturated aqueous NH ₄ Cl was added and the mixture is extracted with EtOAc. The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. Flash chromatography (hexane:EtOAc, 100:1 to 1:100 and EtOAc:CH ₃ OH, 100:1 to 1:100) gave compound 46-R (423 mg, 85%).

Rf=0,3 (CH2Cl2:CH₃OH, 1:1).Rf=0.3 (CH2Cl2:CH ₃ OH, 1:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,45-7,28 (м, 2H), 7,23-7,08 (м, 2H), 6,56 (с, 1H), 6,19 (д, J=1,4 Гц, 1H),1H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.45-7.28 (m, 2H), 7.23-7.08 (m, 2H), 6.56 (s, 1H), 6.19 ( d, J=1.4 Hz, 1H),

6,05 (д, J=1,4 Гц, 1H), 4,98 (д, J=11,5 Гц, 1H), 4,59 (с, 1H), 4,34 (с, 1H), 4,27 (дд, J=5,1, 1,7 Гц, 1H), 4,226.05 (d, J=1.4 Hz, 1H), 4.98 (d, J=11.5 Hz, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.34 (s, 1H), 4.27 (dd, J=5.1, 1.7 Hz, 1H), 4.22

4,16 (м, 2H), 3,80 (с, 3H), 3,49-3,39 (м, 2H), 3,31 (дкв, J=9,8, 5,5, 4,5 Гц, 2H), 2,95 (с, 1H), 2,83 (д, J=5,6 Гц,4.16 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.49-3.39 (m, 2H), 3.31 (dq, J=9.8, 5.5, 4.5 Hz, 2H), 2.95 (s, 1H), 2.83 (d, J=5.6 Hz,

2H), 2,74-2,51 (м, 3H), 2,35 (с, 3H), 2,32-2,21 (м, 2H), 2,26 (с, 3H); 2,16 (с, 3H), 2,06 (с, 3H).2H), 2.74-2.51 (m, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.32-2.21 (m, 2H), 2.26 (s, 3H); 2.16 (s, 3H), 2.06 (s, 3H).

ИЭР-МС m/z: 794,3 (M+H)+.ESI-MS m/z: 794.3 (M+H)+.

46-R46-R

47-R47-R

К раствору соединения 46-R (412 мг, 0,52 ммоль) в CH₃CN:H₂O (1,39:1, 36 мл, 0,015 M) добавляют AgNO₃ (1,76 г, 10,4 ммоль). Через 22 ч при 23°C, реакционную смесь гасят смесью 1:1 насыщенных водных растворов NaCl и NaHCO₃, перемешивают в течение 15 мин, разбавляют CH₂Cl₂, перемешивают в течение 5 мин и экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают флэш-хроматографией (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 85:15) с получением соединения 47-R (175 мг, 43%).To a solution of compound 46-R (412 mg, 0.52 mmol) in CH ₃ CN:H ₂ O (1.39:1, 36 ml, 0.015 M) add AgNO ₃ (1.76 g, 10.4 mmol) . After 22 hours at 23°C, the reaction mixture is quenched with a 1:1 mixture of saturated aqueous solutions of NaCl and NaHCO ₃ , stirred for 15 minutes, diluted with CH ₂ Cl ₂ , stirred for 5 minutes and extracted with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 85:15) to give compound 47-R (175 mg, 43%).

Rj=0,1 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 9:1).Rj=0.1 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 9:1).

1H ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ 7,34 (дд, J=11,1, 7,9 Гц, 2H), 7,22-7,07 (м, 2H), 6,57 (с, 1H), 6,17 (д, J=1,2 Гц, 1H), 6,01 (д, J=1,2 Гц, 1H), 5,11 (д, J=11,2 Гц, 1H), 4,84 (с, 1H), 4,53-4,47 (м, 2H), 4,21-4,07 (м, 2H), 3,80 (с, 3H), 3,56 (д, J=5,1 Гц, 1H), 3,43 (с, 1H), 3,24 (д, J=9,1 Гц, 1H), 2,98-2,78 (м, 4H), 2,72-2,58 (м, 2H), 2,38 (с, 3H), 2,35-2,27 (м, 2H), 2,28 (с, 3H), 2,14 (с, 3H), 2,08 (с, 3H).1H NMR (500 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.34 (dd, J=11.1, 7.9 Hz, 2H), 7.22-7.07 (m, 2H), 6.57 (s, 1H), 6.17 (d, J=1.2 Hz, 1H), 6.01 (d, J=1.2 Hz, 1H), 5.11 (d, J=11.2 Hz, 1H) , 4.84 (s, 1H), 4.53-4.47 (m, 2H), 4.21-4.07 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.56 (d , J=5.1 Hz, 1H), 3.43 (s, 1H), 3.24 (d, J=9.1 Hz, 1H), 2.98-2.78 (m, 4H), 2 .72-2.58 (m, 2H), 2.38 (s, 3H), 2.35-2.27 (m, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.14 (s, 3H ), 2.08 (s, 3H).

¹³C ЯМР (101 МГц, CD3OD): δ 170,6, 169,1, 155,0, 148,8, 145,6, 143,7, 141,1, 140,8, 130,9, 129,7, 126,9, 124,2, 122,4, 121,1, 119,6, 118,9, 118,7, 115,0, 113,2, 112,5, 111,0, 102,1, 91,3, 63,3, 60,4, 59,0, 58,4, 55,3, 54,6, 52,6, 51,1, 44,9, 42,4, 39,8, 38,7, 29,4, 24,0, 23,2, 19,1, 15,0, 8,3. ¹³ C NMR (101 MHz, CD3OD): δ 170.6, 169.1, 155.0, 148.8, 145.6, 143.7, 141.1, 140.8, 130.9, 129.7 , 126.9, 124.2, 122.4, 121.1, 119.6, 118.9, 118.7, 115.0, 113.2, 112.5, 111.0, 102.1, 91 ,3, 63.3, 60.4, 59.0, 58.4, 55.3, 54.6, 52.6, 51.1, 44.9, 42.4, 39.8, 38.7 , 29.4, 24.0, 23.2, 19.1, 15.0, 8.3.

ИЭР-МС m/z: 767,2 (M-H₂O+H)+.ESI-MS m/z: 767.2 (MH ₂ O+H)+.

- 134 046742 (+)-ВР-ИЭР-ВП-МС m/z: 767,2806[M-H2O+H]+ (Рассч. для C-ICCO.S 767,2745).- 134 046742 (+)-VR-IER-VP-MS m/z: 767.2806[M-H2O+H]+ (Calc. for C-ICCO.S 767.2745).

Пример биоактивности полезных нагрузокExample of bioactivity of payloads

Целью этого анализа является оценка in vitro цитостатической (способность задерживать или останавливать рост опухолевых клеток) или цитотоксической (способность убивать опухолевые клетки) активности тестируемых образцов.The purpose of this assay is to evaluate in vitro the cytostatic (ability to inhibit or stop the growth of tumor cells) or cytotoxic (ability to kill tumor cells) activity of the tested samples.

Клеточные линииCell lines

Наименование Name N ATCC NATCC Виды Kinds Ткань Textile Характеристика Characteristic A549 A549 CCL-185 CCL-185 человек Human Легкие Lungs карцинома легкого (NSCLC) lung carcinoma (NSCLC) HT29 HT29 HTB-38 HTB-38 человек Human Толстая кишка Colon колоректальная аденокарцинома colorectal adenocarcinoma MDA-MB-231 MDA-MB-231 HTB-26 HTB-26 человек Human Грудь Breast аденокарцинома груди breast adenocarcinoma PSN1 PSN1 CRM-CRL-3211 CRM-CRL-3211 человек Human Поджелудочная железа Pancreas аденокарцинома поджелудочной железы pancreatic adenocarcinoma PC-3 PC-3 CRL-1435 CRL-1435 человек Human Простата Prostate аденокарцинома простаты prostate adenocarcinoma 22Rv1 22Rv1 CRL-2505 CRL-2505 человек Human Простата Prostate карцинома простаты prostate carcinoma

Оценка цитотоксической активности с применением SRB и MTT колориметрических анализов.Evaluation of cytotoxic activity using SRB and MTT colorimetric assays.

Колориметрический анализ с применением реакции Сульфородамина B (SRB) адаптируют для проведения количественного измерения роста и жизнеспособности клеток (следуя методике, описанной у Skehan et al. J. Natl. Cancer Inst. 1990, 82, 1107-1112). Другой колориметрический анализ на основе восстановления бромида 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия (MTT) до пурпурного формазана также применяют для оценки антипролиферативной активности (следуя методике, описанной у Mosmann et al. J. Immunol. Meth. 1983, 65, 55-63).A colorimetric assay using the Sulforhodamine B (SRB) reaction is adapted to provide quantitative measurements of cell growth and viability (following the procedure described by Skehan et al. J. Natl. Cancer Inst. 1990, 82, 1107-1112). Another colorimetric assay based on the reduction of 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) to purple formazan is also used to assess antiproliferative activity (following the procedure described by Mosmann et al. J. Immunol. Meth. 1983, 65, 55-63).

В этих формах анализов применяют 96-луночные микропланшеты для культивирования клеток, следуя стандартам American National Standards Institute и Society for Laboratory Automation и Screening (ANSI SLAS 1-2004 (R2012) 10/12/2011. Все клеточные линии, применяемые в этом исследовании, получают от American Type Culture Collection (ATCC) и получают из разных типов рака человека.These forms of assay use 96-well cell culture microplates following American National Standards Institute and Society for Laboratory Automation and Screening standards (ANSI SLAS 1-2004 (R2012) 12/10/2011. All cell lines used in this study are obtained from the American Type Culture Collection (ATCC) and are derived from different types of human cancer.

A549, HT29, MDA-MB-231 и PSN1 клетки выдерживают в среде Игла, модифицированной по Дульбекко (DMEM), в PC-3 и 22Rv1 клетки выдерживают в среде Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI). Ко всем клеточным линиям добавляют 10% фетальную телячью сыворотку (ФТС), 2 мМ Lглутамина, 100 Ед/мл пенициллина и 100 Ед/мл стрептомицина при 37°C, 5% CO₂ и 98% влажности. Для экспериментов клетки собирают из субконфлюентных культур с применением трипсинизации и ресуспендируют в свежей среде перед подсчетом и высеванием на планшет.A549, HT29, MDA-MB-231 and PSN1 cells were maintained in Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM), while PC-3 and 22Rv1 cells were maintained in Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI). All cell lines were supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS), 2 mM L-glutamine, 100 U/ml penicillin and 100 U/ml streptomycin at 37°C, 5% CO ₂ and 98% humidity. For experiments, cells are harvested from subconfluent cultures using trypsinization and resuspended in fresh medium before being counted and plated.

A549, HT29, MDA-MB-231 и PSN1 клетки высевают в 96-луночные микропланшеты в количестве 5000 клеток на лунку в аликвотах по 150 мл и оставляют присоединяться к поверхности планшета в течение 18 ч (в течение ночи) в среде, не содержащей лекарственное средство. После этого один контрольный (необработанный) планшет для каждой клеточной линии фиксируют (как описано ниже) и применяют для эталонной оценки в нулевой момент времени. Культуральные планшеты затем обрабатывают тестируемыми соединениями (50 мл аликвоты 4X исходных растворов в полной среде плюс 4% ДМСО) с применением десяти 2/5 серийных разведений (концентрации варьируются от 10 до 0,003 мкг/мл) и тройных культур (1% конечная концентрация в ДМСО). Через 72 ч обработки, противоопухолевый эффект измеряют с применением методики SRB: коротко, клетки дважды промывают ФРФБ, фиксируют в течение 15 мин в 1% растворе глутаральдегида при комнатной температуре, промывают дважды в ФРФБ и окрашивают в 0,4% растворе SRB в течение 30 мин при комнатной температуре. Затем клетки промывают несколько раз 1% раствором уксусной кислоты и сушат на воздухе при комнатной температуре. Затем SRB экстрагируют в 10 мМ растворе основания trizma, и абсорбцию измеряют в автоматизированном спектрофотометрическом планшетном ридере при 490 нм.A549, HT29, MDA-MB-231 and PSN1 cells were seeded into 96-well microplates at 5000 cells per well in 150 ml aliquots and allowed to attach to the plate surface for 18 hours (overnight) in drug-free medium means. One control (untreated) plate for each cell line is then fixed (as described below) and used for reference evaluation at time zero. Culture plates are then treated with test compounds (50 ml aliquots of 4X stock solutions in complete medium plus 4% DMSO) using ten 2/5 serial dilutions (concentrations ranging from 10 to 0.003 μg/ml) and triplicate cultures (1% final concentration in DMSO ). After 72 h of treatment, the antitumor effect is measured using the SRB method: briefly, cells are washed twice with PBS, fixed for 15 min in 1% glutaraldehyde at room temperature, washed twice in PBS and stained in 0.4% SRB for 30 min at room temperature. The cells are then washed several times with a 1% acetic acid solution and air dried at room temperature. SRB is then extracted in 10 mM trizma base solution and absorbance is measured in an automated spectrophotometric plate reader at 490 nm.

Подходящее количество PC-3 и 22Rv1 клеток, для достижения конечной плотности в анализе от 5000 до 15000 клеток на лунку в зависимости от клеточной линии, высевают в 96-луночные планшеты и окрашивают в культуральной среде в течение 24 ч при 37°C при 5% CO₂ и 98% влажности. Затем в культуральную среду добавляют соединения или ДМСО для достижения конечного объема 200 мкл и предполагаемой концентрации соединения в интервале, охватывающем десять серийных 2/5 разведений, начиная от 0,1 мкг/мл в 1% об./об. ДМСО. В этот момент ряд контрольных планшетов в нулевой момент времени, обработанных 1% об./об. ДМСО, обрабатывают MTT как описано ниже. Остальные планшеты инкубируют в течение 72 ч в вышеуказанных условиях окружающей среды. Затем 50 мкл 1 мг/мл раствора MTT в культуральной среде добавляют в лунки и инкубируют в течение 6-8 ч при 37°C, позволяя образоваться кристаллам формазана. Затем культуральную среду удаляют и 100 мкл чистого ДМСО добавляют в каждую лунку для растворения продукта формазана в окрашенном растворе, абсорбцию которого при 540 нм наконец измеряют в многоканальном микропланшетном ридере PolarStar Omega (BMG Labtech, Ortenberg, Germany).Suitable numbers of PC-3 and 22Rv1 cells to achieve a final assay density of 5,000 to 15,000 cells per well depending on the cell line are seeded in 96-well plates and stained in culture medium for 24 hours at 37°C at 5% CO ₂ and 98% humidity. Compounds or DMSO are then added to the culture medium to achieve a final volume of 200 μl and an estimated compound concentration over a range spanning ten serial 2/5 dilutions starting at 0.1 μg/ml at 1% v/v. DMSO. At this point, a number of control plates at time zero, treated with 1% v/v. DMSO, treat with MTT as described below. The remaining plates are incubated for 72 hours under the above environmental conditions. Then, 50 μl of 1 mg/ml MTT solution in culture medium is added to the wells and incubated for 6-8 hours at 37°C to allow formazan crystals to form. The culture medium was then removed and 100 μl of pure DMSO was added to each well to dissolve the formazan product in the colored solution, the absorbance of which at 540 nm was finally measured in a PolarStar Omega multichannel microplate reader (BMG Labtech, Ortenberg, Germany).

Действие на рост и выживание клеток оценивают с применением алгоритма NCI (Boyd MR и PaullEffects on cell growth and survival were assessed using the NCI algorithm (Boyd MR and Paull

- 135 046742- 135 046742

KD. Drug Dev. Res. 1995, 34, 91-104). Значения, полученные в тройных культурах, подгоняют нелинейной регрессией к четырехпараметрической логистической кривой через нелинейный анализ регрессии. Три эталонных параметра рассчитывают (согласно вышеупомянутому алгоритму NCI) через автоматическую интерполяцию кривых, полученных такой подгонкой: GI₅₀=концентрация соединения, которая дает 50% ингибирование роста клеток, по сравнению с контрольными культурами; TGI=общее ингибирование роста клеток (цитостатический эффект), по сравнению с контрольными культурами, и LC₅₀=концентрация соединения, которая дает 50% чистый цитотоксический эффект по уничтожению клеток).K.D. Drug Dev. Res. 1995, 34, 91-104). The values obtained in triplicate cultures are fitted by nonlinear regression to a four-parameter logistic curve via nonlinear regression analysis. Three reference parameters are calculated (according to the aforementioned NCI algorithm) through automatic interpolation of the curves obtained by this fitting: GI ₅₀ = concentration of compound that gives 50% inhibition of cell growth, compared with control cultures; TGI=total cell growth inhibition (cytostatic effect), compared to control cultures, and LC ₅₀ =concentration of compound that produces 50% net cytotoxic effect in killing cells).

В табл. 3-9 показаны данные биологической активности соединений настоящего изобретения.In table 3-9 show the biological activity data of the compounds of the present invention.

Таблица 3Table 3

Биологическая активность (молярная)Biological activity (molar)

Соединение Compound МЧТ т λίΑ,ΝΗ н ОМе АсО \ s _u Т Г Me \ Ιί\1 ^N“T^Me О f J ''—О R, MChT t λίΑ,ΝΗ n ОМе АСО \ s _u Т Г Me \ Ιί\1 ^N “T ^Me О f J ''—О R, 3-S R1=CN, R4=-CH₂OH 3a-S R1=CN, R₄=-CH₂OAc 10-S R1=CN, R4=-CH₂NHAlloc 11-S R1=CN, R4=-CH2NH2 4-S R1=OH, R4=-CH2OH 4a-S R1=OH, R4=-CH2OAc 12-S R1=OH, R4=-CH2NH2 13-S R₁=OH, R₄=-CH₂NHAlloc 3-S R1=CN, R4=-CH ₂ OH 3a-S R1=CN, R ₄ =-CH ₂ OAc 10-S R1=CN, R4=-CH ₂ NHAlloc 11-S R1=CN, R4=- CH2NH2 4-S R1=OH, R4=-CH2OH 4a-S R1=OH, R4=-CH2OAc 12-S R1=OH, R4=-CH2NH2 13-SR ₁ =OH, R ₄ =-CH ₂ NHAlloc A549 A549 HT29 HT29 MDA-MB-231 MDA-MB-231 PSN1 PSN1 PC-3 PC-3 22Rv1 22Rv1 GI50 GI50 3-S 3-S 4,03E-10 4.03E-10 2,77E-10 2.77E-10 4,91E-10 4.91E-10 9,95E-10 9.95E-10 TGI TGI 6,17E-10 6.17E-10 >1,26E-07 >1.26E-07 5,29E-10 5.29E-10 1,64E-09 1.64E-09 LC50 LC50 >1,26E-07 >1.26E-07 >1,26E-07 >1.26E-07 6,17E-10 6.17E-10 >1,26E-07 >1.26E-07 GI.50 GI.50 3a-S 3a-S 3,11E-09 3.11E-09 2,99E-09 2.99E-09 2,87E-09 2.87E-09 2,15E-09 2.15E-09 TGI TGI 3,23E-09 3.23E-09 3,23E-09 3.23E-09 3,59E-09 3.59E-09 3,59E-09 3.59E-09 LC50 LC50 >1,20E-07 >1.20E-07 >1,20E-07 >1.20E-07 4,90E-09 4.90E-09 1,20E-08 1.20E-08 GI.50 GI.50 10-S 10-S 2,05E-08 2.05E-08 1,14E-08 1.14E-08 4,79E-09 4.79E-09 7,64E-09 7.64E-09 TGI TGI 3,08E-08 3.08E-08 1,25E-08 1.25E-08 8,44E-09 8.44E-09 1,25·Ε-Ο8 1.25 Ε-Ο8 LC50 LC50 7,53E-08 7.53E-08 >1,14E-06 >1.14E-06 1,60E-08 1.60E-08 2,39E-08 2.39E-08 GI50 GI50 11-S 11-S 8,45E-09 8.45E-09 3,41E-09 3.41E-09 2,27E-09 2.27E-09 3,28E-09 3.28E-09 TGI TGI 2,65E-08 2.65E-08 >1,26E-07 >1.26E-07 3,41E-09 3.41E-09 4,54E-09 4.54E-09 LC50 LC50 >1,26E-07 >1.26E-07 >1,26E-07 >1.26E-07 6,43E-09 6.43E-09 8,07E-09 8.07E-09 GI50 GI50 4-S 4-S 1,27E-09 1.27E-09 1,27E-09 1.27E-09 1,22E-09 1.22E-09 1,78E-09 1.78E-09 8,08E-10 8.08E-10 3,58E-10 3.58E-10 TGI TGI 1,40E-09 1.40E-09 1,40E-09 1.40E-09 2,55E-09 2.55E-09 2,29E-09 2.29E-09 LC50 LC50 >1,27E-07 >1.27E-07 >1,27E-07 >1.27E-07 6,50E-09 6.50E-09 3,44E-09 3.44E-09 GI50 GI50 4a-S 4a-S 3,99E-09 3.99E-09 3,14E-09 3.14E-09 3,39E-09 3.39E-09 3,02E-09 3.02E-09 TGI TGI 6,17E-09 6.17E-09 3,39E-09 3.39E-09 5,44E-09 5.44E-09 3,27E-09 3.27E-09 LC50 LC50 >1,21E-07 >1.21E-07 >1,21E-07 >1.21E-07 1,00E-08 1.00E-08 3,51E-09 3.51E-09 GI50 GI50 12-S 12-S 2,04E-08 2.04E-08 4,85E-09 4.85E-09 5,23E-09 5.23E-09 3,44E-09 3.44E-09 TGI TGI 5,61E-08 5.61E-08 8,42E-09 8.42E-09 8,42E-09 8.42E-09 5,49E-09 5.49E-09 LC50 LC50 >1,28E-07 >1.28E-07 >1,28E-07 >1.28E-07 1,53E-08 1.53E-08 1,21E-08 1.21E-08 GI50 GI50 13-S 13-S 1,15E-08 1.15E-08 1,15E-08 1.15E-08 1,15E-08 1.15E-08 1,96E-08 1.96E-08 TGI TGI 1,61E-08 1.61E-08 1,27E-08 1.27E-08 1,27E-08 1.27E-08 2,88E-08 2.88E-08 LC50 LC50 2,42E-08 2.42E-08 >1,15E-06 >1.15E-06 1,38E-08 1.38E-08 4,61E-08 4.61E-08

- 136 046742- 136 046742

Таблица 4Table 4

Соединение Compound MI 1 ^н OMe Η°γΕMe AcO \ S 1 II Μθ^Λ^ν \ ιϊχΤ ^NH^-Me_zV J-L Ln. 0 f ; 0 R MI 1 ⁿ OMe Η°γΕMe AcO \ S 1 II Μθ^Λ^ν \ ιϊχΤ ^N H ^-Me _zV JL Ln. 0 f ; 0 R 3-R R₁=CN, R4=-CH₂OH 10-R R1=CN, R4=-CH₂NHAlloc 11-R R1=CN, R4=-CH₂NH₂ 4-R R1=OH, R4=-CH₂OH 12-R R1=OH, R4=-CH₂NH₂ 13-R R1=OH, R4=-CH₂NHAlloc 3-RR ₁ =CN, R4=-CH ₂ OH 10-R R1=CN, R4=-CH ₂ NHAlloc 11-R R1=CN, R4=-CH ₂ NH ₂ 4-R R1=OH, R4=- CH ₂ OH 12-R R1=OH, R4=-CH ₂ NH ₂ 13-R R1=OH, R4=-CH ₂ NHAlloc A549 A549 HT29 HT29 MDA-MB-231 MDA-MB-231 PSN1 PSN1 GI50 GI50 3-R 3-R 4,03E-10 4.03E-10 2,77E-10 2.77E-10 2,77E-10 2.77E-10 3,90E-10 3.90E-10 TGI TGI 5,79E-10 5.79E-10 >1,26E-07 >1.26E-07 5,04E-10 5.04E-10 6,05E-10 6.05E-10 LC50 LC50 >1,26E-07 >1.26E-07 >1,26E-07 >1.26E-07 1,25E-09 1.25E-09 >1,26E-07 >1.26E-07 GI50 GI50 10-R 10-R 3,76E-09 3.76E-09 3,08E-09 3.08E-09 2,85E-09 2.85E-09 2,62E-09 2.62E-09 TGI TGI 5,93E-09 5.93E-09 >1,14E-07 >1.14E-07 4,33E-09 4.33E-09 3,88E-09 3.88E-09 LC50 LC50 >1,14E-07 >1.14E-07 >1,14E-07 >1.14E-07 7,18E-09 7.18E-09 6,61E-09 6.61E-09 GI50 GI50 11-R 11-R 1,77E-09 1.77E-09 1,39E-09 1.39E-09 1,01E-09 1.01E-09 1,39E-09 1.39E-09 TGI TGI 4,54E-09 4.54E-09 >1,26E-07 >1.26E-07 1,51E-09 1.51E-09 1,89E-09 1.89E-09 LC50 LC50 >1,26E-07 >1.26E-07 >1,26E-07 >1.26E-07 2,65E-09 2.65E-09 >1,26E-07 >1.26E-07 GI50 GI50 4-R 4-R 1,27E-09 1.27E-09 1,26E-09 1.26E-09 1,27E-09 1.27E-09 4,59E-10 4.59E-10 TGI TGI 1,40E-09 1.40E-09 1,40E-09 1.40E-09 1,40E-09 1.40E-09 8,54E-10 8.54E-10 LC50 LC50 > 1,27E-07 > 1.27E-07 >1,27E-07 >1.27E-07 1,53E-09 1.53E-09 2,55E-09 2.55E-09 GI50 GI50 12-R 12-R 1,40E-09 1.40E-09 5,74E-10 5.74E-10 3,19E-10 3.19E-10 4,98E-10 4.98E-10 TGI TGI 2,93E-09 2.93E-09 1,10E-09 1.10E-09 6,76E-10 6.76E-10 1,22E-09 1.22E-09 LC50 LC50 1,22E-08 1.22E-08 2,93E-09 2.93E-09 1,40E-09 1.40E-09 >1,28E-07 >1.28E-07 GI50 GI50 13-R 13-R 7,26E-09 7.26E-09 6,91E-09 6.91E-09 4,95E-09 4.95E-09 2,88E-09 2.88E-09 TGI TGI 7,72E-09 7.72E-09 7,60E-09 7.60E-09 7,95E-09 7.95E-09 3,11E-09 3.11E-09 LC50 LC50 >1,15E-07 >1.15E-07 >1,15E-07 >1.15E-07 1,38E-08 1.38E-08 3,46E-09 3.46E-09

Таблица 5Table 5

СоединениеCompound

38-S R1=CN, R₄=-CH₂OH38-S R1=CN, R ₄ =-CH ₂ OH

45-S R1=CN, R4=-CH2NHAlloc45-S R1=CN, R4=-CH2NHAlloc

46-S R1=CN, R₄=-CH₂NH₂39-S R1=OH, R4=-CH₂OH 47-S R1=OH, R4=-CH₂NH₂ 46-S R1=CN, R ₄ =-CH ₂ NH ₂ 39-S R1=OH, R4=-CH ₂ OH 47-S R1=OH, R4=-CH ₂ NH ₂

A549 A549 HT29 HT29 MDA-MB-231 MDA-MB-231 PSN1 PSN1 PC-3 PC-3 22Rv1 22Rv1 GI50 GI50 38-S 38-S 8,05E-09 8.05E-09 4,53E-09 4.53E-09 2,52E-09 2.52E-09 5,03E-09 5.03E-09 TGI TGI 8,55E-09 8.55E-09 7,05E-09 7.05E-09 4,28E-09 4.28E-09 8,18E-09 8.18E-09 LC50 LC50 9,44E-09 9.44E-09 >1,26E-07 >1.26E-07 7,80E-09 7.80E-09 1,51E-08 1.51E-08 GI50 GI50 45-S 45-S 1,82E-08 1.82E-08 1,82E-08 1.82E-08 1,71E-08 1.71E-08 1,94E-08 1.94E-08 TGI TGI 1,94E-08 1.94E-08 1,94E-08 1.94E-08 2,16E-08 2.16E-08 2,62E-08 2.62E-08 LC50 LC50 2,16E-08 2.16E-08 >1,14E-07 >1.14E-07 2,96E-08 2.96E-08 3,64E-08 3.64E-08 GI50 GI50 46-S 46-S 8,19E-09 8.19E-09 2,77E-09 2.77E-09 3,65E-09 3.65E-09 3,15E-09 3.15E-09 TGI TGI 2,14E-08 2.14E-08 6,17E-09 6.17E-09 6,80E-09 6.80E-09 4,79E-09 4.79E-09 LC50 LC50 >1,26E-07 >1.26E-07 >1,26E-07 >1.26E-07 1,26E-08 1.26E-08 9,20E-09 9.20E-09

- 137 046742- 137 046742

GI50 GI50 39-S 39-S 4,84E-09 4.84E-09 3,94E-09 3.94E-09 3,44E-09 3.44E-09 8,02E-09 8.02E-09 2,78E-09 2.78E-09 4,81E-10 4.81E-10 TGI TGI 8,27E-09 8.27E-09 6,74E-09 6.74E-09 7,13E-09 7.13E-09 1,02E-08 1.02E-08 ^LC50 ^LC 50 1,65E-08 1.65E-08 >1,27E-07 >1.27E-07 1,78E-08 1.78E-08 1,27E-08 1.27E-08 GI50 GI50 47-S 47-S 1,40E-08 1.40E-08 4,33E-09 4.33E-09 6,24E-09 6.24E-09 5,99E-09 5.99E-09 TGI TGI 2,80E-08 2.80E-08 6,75E-09 6.75E-09 9,68E-09 9.68E-09 8,54E-09 8.54E-09 ^LC50 ^LC 50 >1,27E-07 >1.27E-07 >1,27E-07 >1.27E-07 1,66E-08 1.66E-08 1,27E-08 1.27E-08

Таблица 6Table 6

СоединениеCompound

38-R R1=CN, R4=-CH₂OH38-R R1=CN, R4=-CH ₂ OH

45-R R1=CN, R4=-CH₂NHAlloc45-R R1=CN, R4=-CH ₂ NHAlloc

46-R R1=CN, R4=-CH₂NH₂ 46-R R1=CN, R4=-CH ₂ NH ₂

39-R R1=OH, R₄=-CH₂OH39-R R1=OH, R ₄ =-CH ₂ OH

47-R R1=OH, R₄=-CH₂NH₂ 47-R R1=OH, R ₄ =-CH ₂ NH ₂

A549 A549 HT29 HT29 MDA-MB-231 MDA-MB-231 PSN1 PSN1 GI50 GI50 38-R 38-R 6,54E-10 6.54E-10 5,41E-10 5.41E-10 4,53E-10 4.53E-10 6,54E-10 6.54E-10 TGI TGI 1,04E-09 1.04E-09 5,91E-10 5.91E-10 8,43E-10 8.43E-10 9,94E-10 9.94E-10 ^LC50 ^LC 50 >1,26E-07 >1.26E-07 >1,26E-07 >1.26E-07 2,01E-09 2.01E-09 1,76E-09 1.76E-09 GI50 GI50 45-R 45-R 1,82E-08 1.82E-08 1,25E-08 1.25E-08 9,57E-09 9.57E-09 1,06E-08 1.06E-08 TGI TGI 1,94E-08 1.94E-08 2,28E-08 2.28E-08 1,94E-08 1.94E-08 1,94E-08 1.94E-08 ^LC50 ^LC 50 2,39E-08 2.39E-08 >1,14E-07 >1.14E-07 4,33E-08 4.33E-08 3,76E-08 3.76E-08 GI50 GI50 46-R 46-R 1,51E-09 1.51E-09 1,21E-09 1.21E-09 1,23E-09 1.23E-09 9,95E-10 9.95E-10 TGI TGI 2,77E-09 2.77E-09 1,39E-09 1.39E-09 1,39E-09 1.39E-09 1,51E-09 1.51E-09 ^LC50 ^LC 50 >1,26E-07 >1.26E-07 >1,26E-07 >1.26E-07 1,51E-09 1.51E-09 2,65E-09 2.65E-09 GI50 GI50 39-R 39-R 2,67E-10 2.67E-10 2,93E-10 2.93E-10 2,04E-10 2.04E-10 3,65E-10 3.65E-10 TGI TGI 4,33E-10 4.33E-10 6,24E-10 6.24E-10 5,98E-10 5.98E-10 5,73E-10 5.73E-10 ^LC50 ^LC 50 >1,27E-07 >1.27E-07 >1,27E-07 >1.27E-07 2,80E-09 2.80E-09 1,06E-09 1.06E-09 GI50 GI50 47-R 47-R 2,04E-09 2.04E-09 8,03E-10 8.03E-10 5,99E-10 5.99E-10 1,40E-09 1.40E-09 TGI TGI 3,82E-09 3.82E-09 1,40E-09 1.40E-09 1,17E-09 1.17E-09 2,04E-09 2.04E-09 ^LC50 ^LC 50 1,40E-08 1.40E-08 >1,27E-07 >1.27E-07 2,55E-09 2.55E-09 3,31E-09 3.31E-09

Таблица 7Table 7

- 138 046742- 138 046742

LC50 LC50 >1,21E-07 >1.21E-07 >1,21E-07 >1.21E-07 1,58E-09 1.58E-09 >1,21E-07 >1.21E-07 GI50 GI50 25-S 25-S 7,17E-09 7.17E-09 7,17E-09 7.17E-09 5,84E-09 5.84E-09 6,84E-09 6.84E-09 TGI TGI 7,61E-09 7.61E-09 7,72E-09 7.72E-09 9,04E-09 9.04E-09 9,26E-09 9.26E-09 LC50 LC50 >1,10E-07 >1.10E-07 >1,10E-07 >1.10E-07 1,54E-08 1.54E-08 1,43E-08 1.43E-08 GI50 GI50 26-S 26-S 1,12E-08 1.12E-08 2,79E-09 2.79E-09 1,34E-09 1.34E-09 3,04E-09 3.04E-09 TGI TGI 2,19E-08 2.19E-08 3,16E-09 3.16E-09 1,94E-09 1.94E-09 3,28E-09 3.28E-09 LC50 LC50 >1,22E-07 >1.22E-07 >1,22E-07 >1.22E-07 3,89E-09 3.89E-09 3,52E-09 3.52E-09 GI50 GI50 19-S 19-S 3,07E-09 3.07E-09 1,35E-09 1.35E-09 1,96E-09 1.96E-09 2,95E-09 2.95E-09 TGI TGI 3,31E-09 3.31E-09 1,60E-09 1.60E-09 3,31E-09 3.31E-09 3,19E-09 3.19E-09 LC50 LC50 >1,23E-07 >1.23E-07 >1,23E-07 >1.23E-07 1,10E-08 1.10E-08 >1,23E-07 >1.23E-07 GI50 GI50 27-S 27-S 6,02E-09 6.02E-09 1,23E-09 1.23E-09 1,19E-09 1.19E-09 1,97E-09 1.97E-09 TGI TGI 1,12E-08 1.12E-08 1,35E-09 1.35E-09 1,23E-09 1.23E-09 2,83E-09 2.83E-09 LC50 LC50 >1,23E-07 >1.23E-07 >1,23E-07 >1.23E-07 1,35E-09 1.35E-09 4,55E-09 4.55E-09

Таблица 8 ______________________Биологическая активность (молярная) СоединениеTable 8 ______________________Biological activity (molar) Compound

МеОMeO

18-R R1=CN, R₄=-CH₂OH18-R R1=CN, R ₄ =-CH ₂ OH

25-R R1=CN, R₄=-CH₂NHAlloc25-R R1=CN, R ₄ =-CH ₂ NHAlloc

26-R R1=CN, R₄=-CH₂NH₂ 26-R R1=CN, R ₄ =-CH ₂ NH ₂

19-R И- OH, R4=-CH2OH19-R И- OH, R4=-CH2OH

27-R R· OH, R₄=-CH₂NH₂ 27-RR OH, R ₄ = -CH ₂ NH ₂

A549 A549 HT29 HT29 MDA-MB-231 MDA-MB-231 PSN1 PSN1 GI50 GI50 18-R 18-R 1,21E-09 1.21E-09 1,21E-09 1.21E-09 1,21E-09 1.21E-09 5,70E-10 5.70E-10 TGI TGI 1,34E-09 1.34E-09 1,34E-09 1.34E-09 1,34E-09 1.34E-09 1,06E-09 1.06E-09 ^LC50 ^LC 50 >1,21E-07 >1.21E-07 >1,21E-07 >1.21E-07 1,46E-09 1.46E-09 >1,21E-07 >1.21E-07 GI50 GI50 25-R 25-R 1,32E-09 1.32E-09 1,54E-09 1.54E-09 1,21E-09 1.21E-09 1,21E-09 1.21E-09 TGI TGI 2,43E-09 2.43E-09 2,76E-09 2.76E-09 2,54E-09 2.54E-09 2,32E-09 2.32E-09 ^LC50 ^LC 50 9,92E-09 9.92E-09 >1,10E-07 >1.10E-07 8,38E-09 8.38E-09 6,73E-09 6.73E-09 GI50 GI50 26-R 26-R 1,94E-09 1.94E-09 7,29E-10 7.29E-10 1,17E-09 1.17E-09 9,72E-10 9.72E-10 TGI TGI 3,40E-09 3.40E-09 1,58E-09 1.58E-09 1,22E-09 1.22E-09 1,70E-09 1.70E-09 ^LC50 ^LC 50 >1,22E-07 >1.22E-07 >1,22E-07 >1.22E-07 1,46E-09 1.46E-09 3,52E-09 3.52E-09 GI50 GI50 19-R 19-R 1,47E-09 1.47E-09 1,72E-09 1.72E-09 1,23E-09 1.23E-09 1,23E-09 1.23E-09 TGI TGI 3,56E-09 3.56E-09 1,72E-09 1.72E-09 1,35E-09 1.35E-09 1,35E-09 1.35E-09 ^LC50 ^LC 50 >1,23E-07 >1.23E-07 >1,23E-07 >1.23E-07 >1,23E-07 >1.23E-07 1,47E-09 1.47E-09 GI50 GI50 27-R 27-R 2,09E-09 2.09E-09 5,04E-10 5.04E-10 3,07E-10 3.07E-10 6,39E-10 6.39E-10 TGI TGI 3,93E-09 3.93E-09 5,53E-10 5.53E-10 5,41E-10 5.41E-10 1,17E-09 1.17E-09 ^LC50 ^LC 50 1,01E-08 1.01E-08 >1,23E-07 >1.23E-07 8,60E-10 8.60E-10 2,46E-09 2.46E-09

Таблица 9Table 9

- 139 046742- 139 046742

32 R1=OH, R₃=H 34 R1=CN, R₃=OMe 35 R1=OH, R₃=OMe 32 R1=OH, R ₃ =H 34 R1=CN, R ₃ =OMe 35 R1=OH, R ₃ =OMe A549 A549 HT29 HT29 MDA-MB-231 MDA-MB-231 PSN1 PSN1 GI50 GI50 31 31 1,96E-08 1.96E-08 1,05E-08 1.05E-08 8,89E-09 8.89E-09 6,80E-09 6.80E-09 TGI TGI 2,09E-08 2.09E-08 1,57E-08 1.57E-08 1,70E-08 1.70E-08 1,57E-08 1.57E-08 LC50 LC50 2,35E-08 2.35E-08 >1,31E-07 >1.31E-07 3,53E-08 3.53E-08 4,31E-08 4.31E-08 GI50 GI50 32 32 6,88E-09 6.88E-09 6,88E-09 6.88E-09 4,76E-09 4.76E-09 6,09E-09 6.09E-09 TGI TGI >1,32E-08 >1.32E-08 >1,32E-08 >1.32E-08 1,05E-08 1.05E-08 8,34E-09 8.34E-09 LC50 LC50 >1,32E-08 >1.32E-08 >1,32E-08 >1.32E-08 >1,32E-08 >1.32E-08 1,20E-08 1.20E-08 GI50 GI50 34 34 5,91E-08 5.91E-08 5,41E-08 5.41E-08 4,53E-08 4.53E-08 5,41E-08 5.41E-08 TGI TGI 8,05E-08 8.05E-08 8,55E-08 8.55E-08 7,67E-08 7.67E-08 5,91E-08 5.91E-08 LC50 LC50 >1,26E-07 >1.26E-07 1,25E-07 1.25E-07 1,12E-07 1.12E-07 >1,26E-07 >1.26E-07 GI50 GI50 35 35 8,14E-09 8.14E-09 7,89E-09 7.89E-09 4,58E-09 4.58E-09 6,24E-09 6.24E-09 TGI TGI 8,78E-09 8.78E-09 8,65E-09 8.65E-09 8,27E-09 8.27E-09 9,03E-09 9.03E-09 LC50 LC50 >1,27E-07 >1.27E-07 >1,27E-07 >1.27E-07 1,65E-08 1.65E-08 1,40E-08 1.40E-08

Эти данные демонстрируют, что полезные нагрузки, применяемые в настоящем изобретении, обладают высокой эффективностью in vitro.These data demonstrate that the payloads used in the present invention are highly effective in vitro.

Синтез линкеров.Synthesis of linkers.

Получение LIN1: MC-Val-Cit-PABC-PNP.Preparation of LIN1: MC-Val-Cit-PABC-PNP.

Схема реакцииReaction scheme

Хоротритиловая смолаChorotrityl resin

1Fmoc-Cit-OH1Fmoc-Cit-OH

2.- Fmoc-Val-OH2.- Fmoc-Val-OH

3.- МС-ОН3.- MS-ON

ДИПКДИ, HOBt, ДМФDIPCDI, HOBt, DMF

71%71%

РАВОН,RAVON,

ДИПКДИ/HOBtDIPCDI/HOBt

MC-Val-Cit-OH ----------►MC-Val-Cit-OH ----------►

CH₂CI₂, ДМФCH ₂ CI ₂ , DMF

LIN 1-1 67%LIN 1-1 67%

Бис-PNPBis-PNP

ДИПЭАDIPEA

MC-Val-Cit-PABOH ---------► MC-Val-Cit-PABC-PNPMC-Val-Cit-PABOH ---------► MC-Val-Cit-PABC-PNP

CH₂CI₂, ДМФCH ₂ CI ₂ , DMF

LIN 1-2 _57% LIN 1 (a) Получение LIN 1-1: MC-Val-Cit-OH.LIN 1-2 _57% LIN 1 (a) Preparation of LIN 1-1: MC-Val-Cit-OH.

LIN 1-1LIN 1-1

h₂n Аэh ₂ n Ae

Cl-TrtCl-смолу (20 г, 1,49 ммоль/г) (Iris Biotech, Ref.: BR-1065, 2-Хлортритилхлоридная смола (200400 меш, 1% DVB, 1,0-1,6 ммоль/г), CAS 42074-68-0) помещают на пластину фильтрпресса. 100 мл ДХМ добавляют к смоле и смесь перемешивают в течение 1 ч. Растворитель удаляют фильтрацией в вакууме. Раствор Fmoc-Cit-OH (11,83 г, 29,78 ммоль) и ДИПЭА (17,15 мл, 98,45 ммоль) в ДХМ (80 мл) добавляют и смесь перемешивают в течение 10 мин. После этого добавляют ДИПЭА (34,82 ммоль, 199,98 ммоль) и смесь перемешивают в течение 1 ч. Реакцию останавливают добавлением MeOH (30 мл) после перемешивания в течение 15 минут. Смолу Fmoc-Cit-O-TrtCl-, полученную в результате, подвергают следующим промываниям/обработкам: ДХМ (5/50 мл/0,5 мин), ДМФ (5/50 млх0,5 мин), пиперидин:ДМФ (1:4, 1/1 мин, 2/10 мин), ДМФ (5/50 млх0,5 мин), ДХМ (5/50 млх0,5 мин). Конечная промывка пиперидином дает NH₂-Cit-O-TrtCl-смолу. Рассчитывают нагрузку: 1,15 ммоль/г.Cl-TrtCl resin (20 g, 1.49 mmol/g) (Iris Biotech, Ref.: BR-1065, 2-Chlorotrityl chloride resin (200400 mesh, 1% DVB, 1.0-1.6 mmol/g) , CAS 42074-68-0) is placed on the filter press plate. 100 ml of DCM was added to the resin and the mixture was stirred for 1 hour. The solvent was removed by vacuum filtration. A solution of Fmoc-Cit-OH (11.83 g, 29.78 mmol) and DIPEA (17.15 mL, 98.45 mmol) in DCM (80 mL) was added and the mixture was stirred for 10 min. DIPEA (34.82 mmol, 199.98 mmol) was then added and the mixture was stirred for 1 hour. The reaction was quenched by adding MeOH (30 ml) after stirring for 15 minutes. The resulting Fmoc-Cit-O-TrtCl- resin is subjected to the following washes/treatments: DCM (5/50 ml/0.5 min), DMF (5/50 ml x 0.5 min), piperidine: DMF (1: 4, 1/1 min, 2/10 min), DMF (5/50 ml x 0.5 min), DXM (5/50 ml x 0.5 min). A final wash with piperidine gives NH ₂ -Cit-O-TrtCl resin. Calculate the load: 1.15 mmol/g.

NH₂-Cit-O-TrtCl-смолу, полученную выше, промывают ДМФ (5/50 млх0,5 мин) и раствор FmocVal-OH (31,22 г, 91,98 ммоль), HOBt (11,23 г, 91,98 ммоль) в ДМФ (100 мл) добавляют к NH₂-Cit-OTrtCl-смоле, перемешивают и добавляют ДИПКДИ (14,24 мл, 91,98 ммоль), и смесь перемешивают в течение 1,5 ч. Реакцию останавливают промыванием ДМФ (5/50 млх0,5 мин). Fmoc-Val-Cit-O-TrtClсмолу, полученную таким образом, обрабатывают пиперидином:ДМФ (1:4, 1/1 мин, 2/10 мин) и промывают ДМФ (5/50 млх0,5 мин). Конечная промывка пиперидином дает NH₂-Val-Cit-O-TrtCl-смолу.The NH ₂ -Cit-O-TrtCl resin obtained above was washed with DMF (5/50 ml x 0.5 min) and a solution of FmocVal-OH (31.22 g, 91.98 mmol), HOBt (11.23 g, 91 .98 mmol) in DMF (100 ml) was added to NH ₂ -Cit-OTrtCl resin, stirred and DIPKDI (14.24 ml, 91.98 mmol) was added and the mixture was stirred for 1.5 hours. The reaction was stopped by washing DMF (5/50 ml x 0.5 min). The Fmoc-Val-Cit-O-TrtCl resin thus obtained was treated with piperidine:DMF (1:4, 1/1 min, 2/10 min) and washed with DMF (5/50 ml x 0.5 min). A final wash with piperidine gives NH ₂ -Val-Cit-O-TrtCl-resin.

Раствор 6-малеимидокапроновой кислоты (MC-OH) (9,7 г, 45,92 ммоль), HOBt (6,21 г, 45,92 ммоль) в ДМФ (100 мл) добавляют к NH₂-Val-Cit-O-TrtCl-смоле, полученной выше, перемешивают и добавляют ДИПКДИ (7,12 мл, 45,92 ммоль), и смесь перемешивают в течение 1,5 ч. Реакцию останавливаютA solution of 6-maleimidocaproic acid (MC-OH) (9.7 g, 45.92 mmol), HOBt (6.21 g, 45.92 mmol) in DMF (100 ml) was added to NH ₂ -Val-Cit-O The -TrtCl resin obtained above was stirred and DIPCDI (7.12 ml, 45.92 mmol) was added and the mixture was stirred for 1.5 hours. The reaction was stopped

- 140 046742 промыванием ДМФ (5*50 млх0,5 мин) и ДХМ (5*50 млх0,5 мин).- 140 046742 by washing with DMF (5*50 mlx0.5 min) and DCM (5*50 mlx0.5 min).

Пептид отщепляют от смолы обработками ТФК:ДХМ (1:99, 5*100 мл). Смолу промывают ДХМ (7*50 млх0,5 мин). Объединенные фильтраты выпаривают досуха при пониженном давлении и полученное твердое вещество растирают с Et2O и фильтруют с получением LIN 1-1 (7,60 г, 71%) в виде белого твердого вещества.The peptide is cleaved from the resin by treatments with TFA: DCM (1:99, 5*100 ml). The resin is washed with DCM (7 * 50 ml x 0.5 min). The combined filtrates were evaporated to dryness under reduced pressure and the resulting solid was triturated with Et2O and filtered to give LIN 1-1 (7.60 g, 71%) as a white solid.

1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-бб): δ 12,47 (с, 1H), 8,13 (д, J=7,3 Гц, 1H), 7,74 (д, J=9,0 Гц, 1H), 6,99 (с, 2H), 5,93 (с, 1H), 5,35 (с, 2H), 4,20 (дд, J=9,0, 6,8 Гц, 1H), 4,15-4,07 (м, 1H), 3,36 (т, J=7,0 Гц, 2H), 3,00-2,88 (м, 2H), 2,21-2,12 (м, 1H), 2,11-2,03 (м, 1H), 1,98-1,86 (м, 1H), 1,74-1,62 (м, 1H), 1,61-1,50 (м, 1H), 1,501,31 (м, 6H), 1,21-1,11 (м, 2H), 0,84 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,80 (д, J=6,8 Гц, 3H).1H NMR (500 MHz, DMSO-bb): δ 12.47 (s, 1H), 8.13 (d, J=7.3 Hz, 1H), 7.74 (d, J=9.0 Hz, 1H), 6.99 (s, 2H), 5.93 (s, 1H), 5.35 (s, 2H), 4.20 (dd, J=9.0, 6.8 Hz, 1H), 4.15-4.07 (m, 1H), 3.36 (t, J=7.0 Hz, 2H), 3.00-2.88 (m, 2H), 2.21-2.12 ( m, 1H), 2.11-2.03 (m, 1H), 1.98-1.86 (m, 1H), 1.74-1.62 (m, 1H), 1.61-1. 50 (m, 1H), 1.501.31 (m, 6H), 1.21-1.11 (m, 2H), 0.84 (d, J=6.8 Hz, 3H), 0.80 (d , J=6.8 Hz, 3H).

ИЭР-МС m/z: Рассч. для C21H33N5O7: 467,2. Найдено: 468,3 (M+H)+.ESI-MS m/z: Calc. for C21H33N5O7: 467.2. Found: 468.3 (M+H)+.

(b) Получение LIN 1-2: MC-Val-Cit-PABOH.(b) Preparation of LIN 1-2: MC-Val-Cit-PABOH.

LIN 1-2LIN 1-2

К раствору LIN 1-1 (1,6 г, 3,42 ммоль) и 4-аминобензилового спирта (PABOH) (0,84 г, 6,84 ммоль) в ДХМ (60 мл) добавляют раствор HOBt (0,92 г, 6,84 ммоль) в ДМФ (5 мл). Добавляют ДИПКДИ (1,05 мл, 6,84 ммоль), реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч при 23°C, добавляют Et2O (150 мл) и полученное твердое вещество фильтруют в фильтрпрессе в вакууме с получением LIN 1-2 (1,31 г, 67%).To a solution of LIN 1-1 (1.6 g, 3.42 mmol) and 4-aminobenzyl alcohol (PABOH) (0.84 g, 6.84 mmol) in DCM (60 ml) add a solution of HOBt (0.92 g , 6.84 mmol) in DMF (5 ml). Add DIPCDI (1.05 ml, 6.84 mmol), the reaction mixture is stirred for 2 hours at 23°C, add Et2O (150 ml) and the resulting solid is filtered in a vacuum filter press to give LIN 1-2 (1. 31 g, 67%).

1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-66): δ 9,88 (с, 1H), 8,03 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,77 (дд, J=12,2, 8,5 Гц, 1H), 7,53 (д, J=8,2 Гц, 2H), 7,21 (д, J=8,2 Гц, 2H), 6,99 (с, 3H), 6,01-5,92 (м, 1H), 5,39 (с, 2H), 5,07 (с, 1H), 4,41 (с, 2H), 4,39-4,31 (м, 1H), 4,23-4,12 (м, 1H), 3,36 (т, J=7,0 Гц, 2H), 3,06-2,97 (м, 1H), 2,96-2,90 (м, 1H), 2,222,03 (м, 2H), 2,01-1,88 (м, 1H), 1,76-1,62 (м, 1H), 1,63-1,28 (м, 6H), 1,25-1,11 (м, 2H), 0,84 (д, J=6,9 Гц, 3H), 0,81 (д, J=6,8 Гц, 3H).1H NMR (500 MHz, DMSO-66): δ 9.88 (s, 1H), 8.03 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.77 (dd, J=12.2, 8 .5 Hz, 1H), 7.53 (d, J=8.2 Hz, 2H), 7.21 (d, J=8.2 Hz, 2H), 6.99 (s, 3H), 6. 01-5.92 (m, 1H), 5.39 (s, 2H), 5.07 (s, 1H), 4.41 (s, 2H), 4.39-4.31 (m, 1H) , 4.23-4.12 (m, 1H), 3.36 (t, J=7.0 Hz, 2H), 3.06-2.97 (m, 1H), 2.96-2.90 (m, 1H), 2.222.03 (m, 2H), 2.01-1.88 (m, 1H), 1.76-1.62 (m, 1H), 1.63-1.28 (m , 6H), 1.25-1.11 (m, 2H), 0.84 (d, J=6.9 Hz, 3H), 0.81 (d, J=6.8 Hz, 3H).

ИЭР-МС m/z: Рассч. для C28H40N6O7: 572,3. Найдено: 573,3 (M+H)+.ESI-MS m/z: Calc. for C28H40N6O7: 572.3. Found: 573.3 (M+H)+.

(c) Получение LIN 1: MC-Val-Cit-PAB-PNP.(c) Obtaining LIN 1: MC-Val-Cit-PAB-PNP.

LIN 1LIN 1

К раствору LIN 1-2 (500 мг, 0,87 ммоль) и бис(4-нитрофенил) карбоната (бис-PNP) (2,64 г, 8,72 ммоль) в ДХМ:ДМФ (8:2, 25 мл) добавляют ДИПЭА (0,45 мл, 2,61 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 20 ч при 23°C и выливают на колонку с силикагелем (ДХМ:СН3ОН, от 50:1 до 10:1) с получением чистого целевого LIN 1 (364 мг, 57%).To a solution of LIN 1-2 (500 mg, 0.87 mmol) and bis(4-nitrophenyl) carbonate (bis-PNP) (2.64 g, 8.72 mmol) in DCM:DMF (8:2, 25 ml ) add DIPEA (0.45 ml, 2.61 mmol). The reaction mixture was stirred for 20 hours at 23°C and poured onto a silica gel column (DCM:CH3OH, 50:1 to 10:1) to obtain the pure target LIN 1 (364 mg, 57%).

Rf=0,40 (СН2С12:СНэОН, 9:1).Rf=0.40 (CH2C12:CHeOH, 9:1).

1H ЯМР (400 МГц, CDCI3/CD3OD): δ9,45 (с, 1H), 8,23 (д, J=8,3 Гц, 2H), 7,59 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,35 (д, J=8,3 Гц, 2H), 7,34 (д, J=8,5 Гц, 2H), 6,65 (с, 2H), 5,20 (с, 2H), 4,56 (дт, J=10,5, 5,4 Гц, 1H), 4,15 (д, J=7,2 Гц, 1H), 3,46 (дд, J=8,0, 6,4 Гц, 2H), 3,16-2,89 (м, 2H), 2,21 (дд, J=8,3, 6,6 Гц, 2H), 2,06-1,97 (м, 1H), 1,901,83 (м, 1H), 1,73-1,46 (м, 7H), 1,34-1,20 (м, 2H), 0,91 (д, J=6,7 Гц, 3H), 0,90 (д, J=6,7 Гц, 3H).1H NMR (400 MHz, CDCI3/CD3OD): δ9.45 (s, 1H), 8.23 (d, J=8.3 Hz, 2H), 7.59 (d, J=8.5 Hz, 2H ), 7.35 (d, J=8.3 Hz, 2H), 7.34 (d, J=8.5 Hz, 2H), 6.65 (s, 2H), 5.20 (s, 2H ), 4.56 (dt, J=10.5, 5.4 Hz, 1H), 4.15 (d, J=7.2 Hz, 1H), 3.46 (dd, J=8.0, 6.4 Hz, 2H), 3.16-2.89 (m, 2H), 2.21 (dd, J=8.3, 6.6 Hz, 2H), 2.06-1.97 (m , 1H), 1.901.83 (m, 1H), 1.73-1.46 (m, 7H), 1.34-1.20 (m, 2H), 0.91 (d, J=6.7 Hz, 3H), 0.90 (d, J=6.7 Hz, 3H).

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl3/CD3OD) δ 174,4, 172,4, 171,1, 170,6, 160,5, 155,5, 152,5, 145,3, 138,7, 134,1, 129,9, 129,5, 125,2, 121,8, 120,0, 70,6, 59,0, 53,2, 37,5, 35,8, 30,6, 29,6, 29,3, 28,1, 26,2, 26,2, 25,1, 19,1, 18,1. ¹³ C NMR (125 MHz, CDCl3/CD3OD) δ 174.4, 172.4, 171.1, 170.6, 160.5, 155.5, 152.5, 145.3, 138.7, 134, 1, 129.9, 129.5, 125.2, 121.8, 120.0, 70.6, 59.0, 53.2, 37.5, 35.8, 30.6, 29.6, 29.3, 28.1, 26.2, 26.2, 25.1, 19.1, 18.1.

ИЭР-МС m/z: Рассч. для C35H43N7O11: 737,3. Найдено: 738,3 (M+H)+.ESI-MS m/z: Calc. for C35H43N7O11: 737.3. Found: 738.3 (M+H)+.

Получение LIN-2: MC2-PEG4-Val-Cit-PABC-PNP.Preparation of LIN-2: MC2-PEG4-Val-Cit-PABC-PNP.

Схема реакцииReaction scheme

- 141 046742 .- Fmoc-Cit-OH 2 .- Fmcc-Val-OH 3 .- Fmoc-PEG4-OH £^--CI ⁴ ~ ^MC2~^OH , MC₂-PEG₄-Val-Cit-OH- 141 046742 .- Fmoc-Cit-OH 2 .- Fmcc-Val-OH 3 .- Fmoc-PEG4-OH £^--CI ⁴ ~ ^MC2 ~ ^OH , MC ₂ -PEG ₄ -Val-Cit-OH

ДИПКДИ, HOBt, ДМФDIPCDI, HOBt, DMF

Хоротритиловая смола LIN 2-1Chorotrityl resin LIN 2-1

87%87%

PABOHPABOH

ДИПКДИDIPKDI

HOBtHOBt

CH₂CI₂, ДМФ >100%CH ₂ CI ₂ , DMF >100%

Бис-PNP ДИПЭАBis-PNP DIPEA

MC2-PEG4-Val-Cit- _{AtJ m} ’ MC2-PEG4-Val-Cit-PABC-PNPMC2-PEG4-Val-Cit- _{AtJ m} ' MC2-PEG4-Val-Cit-PABC-PNP

PABOH CH₂CI_2j ДМФPABOH CH ₂ CI _2j DMF

LIN 2-2 45% LIN-2LIN 2-2 45% LIN-2

a) Получение LIN 2-1: MC2-PEG4-Val-Cit-OHa) Obtaining LIN 2-1: MC2-PEG4-Val-Cit-OH

LIN 2-1LIN 2-1

Cl-TrtCl-смолу (5 г, 1,49 ммоль/г) помещают на пластину фильтрпресса. К смоле добавляют CH2C12 (25 мл) и смесь перемешивают в течение 1 ч при 23°C. Растворитель удаляют фильтрацией в вакууме. Раствор Fmoc-Cit-OH (2,95 г, 7,44 ммоль) и ДИПЭА (4,29 мл, 24,61 ммоль) в CH₂Cl₂ (20 мл) добавляют и смесь перемешивают в течение 10 мин при 23°C. Добавляют еще ДИПЭА (8,70 мл, 49,99 ммоль) и смесь перемешивают в течение 1 ч при 23°C. Реакцию останавливают добавлением MeOH (10 мл) и перемешивают 15 мин при 23°C. Fmoc-Cit-O-TrtCl-смолу подвергают следующим промывкам/обработкам: CH2C12 (5x15 млх0,5 мин), ДМФ (5x15 млх0,5 мин), пиперидин:ДМФ (1:4, 15 мл, 1^χ1 мин, 2x10 мин), ДМФ (5x15 млх0,5 мин), CH2C12 (5x15 млх0,5 мин). Рассчитывают нагрузку: 1,17 ммоль/г.Cl-TrtCl resin (5 g, 1.49 mmol/g) was placed on a filter press plate. CH2C12 (25 ml) was added to the resin and the mixture was stirred for 1 hour at 23°C. The solvent is removed by vacuum filtration. A solution of Fmoc-Cit-OH (2.95 g, 7.44 mmol) and DIPEA (4.29 ml, 24.61 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (20 ml) was added and the mixture was stirred for 10 min at 23° C. More DIPEA (8.70 mL, 49.99 mmol) was added and the mixture was stirred for 1 hour at 23°C. The reaction is stopped by adding MeOH (10 ml) and stirring for 15 min at 23°C. The Fmoc-Cit-O-TrtCl resin is subjected to the following washes/treatments: CH2C12 (5x15 mlx0.5 min), DMF (5x15 mlx0.5 min), piperidine:DMF (1:4, 15 ml, 1 ^x 1 min, 2x10 min), DMF (5x15 mlx0.5 min), CH2C12 (5x15 mlx0.5 min). Calculate the load: 1.17 mmol/g.

ИН₂-Сй-О-Т11С1-смолу промывают ДМФ (5x15 млх0,5 мин) и добавляют раствор Fmoc-Val-OH (7,80 г, 22,99 ммоль) и HOBt (2,80 г, 24,5 ммоль) в ДМФ (25 мл) к НН2-Сл1-О-Тг1С.'1-смоле. затем добавляют ДИПКДИ (3,56 мл, 24,5 ммоль) при 23°C. Реакционную смесь перемешивают в течение 1,5 ч при 23°С. Реакцию останавливают промыванием ДМФ (5x15 млх0,5 мин). Fmoc-Val-Cit-O-TrtCl-смолу обрабатывают пиперидином:ДМФ (1:4, 15 мл, 1x1 мин, 2x10 мин) и промывают ДМФ (5x15 млх0,5 мин).The IN ₂ -Cd-O-T11Cl resin is washed with DMF (5x15 mlx0.5 min) and a solution of Fmoc-Val-OH (7.80 g, 22.99 mmol) and HOBt (2.80 g, 24.5 mmol) is added ) in DMF (25 ml) to HH2-Cl1-O-Tg1C.'1-resin. then add DIPKDI (3.56 ml, 24.5 mmol) at 23°C. The reaction mixture is stirred for 1.5 hours at 23°C. The reaction is stopped by washing with DMF (5x15 mlx0.5 min). The Fmoc-Val-Cit-O-TrtCl resin is treated with piperidine:DMF (1:4, 15 ml, 1x1 min, 2x10 min) and washed with DMF (5x15 mlx0.5 min).

Раствор 15-(9-флуоренилметилоксикарбонил)амино-4,7,10,13-тетраоксапентадекановой кислоты (Fmoc-NH-PEG4-OH) (4,27 г, 8,75 ммоль) и HOBt (1,18 г, 8,72 ммоль) в ДМФ (30 мл) добавляют к NH₂Val-Cit-O-TrtCl-смоле, затем добавляют ДИПКДИ (1,35 мл, 8,72 ммоль) при 23°С. Реакционную смесь перемешивают в течение 24 ч при 23°С. Реакцию останавливают промыванием ДМФ (5x15 млх0,5 мин). Fmoc-NH-PEG4-Va1-Cit-O-TrtC1-смолу обрабатывают пиперидином:ДМФ (1:4, 15 мл, 1x1 мин, 2x10 мин) и промывают ДМФ (5x15 млх0,5 мин).A solution of 15-(9-fluorenylmethyloxycarbonyl)amino-4,7,10,13-tetraoxapentadecanoic acid (Fmoc-NH-PEG4-OH) (4.27 g, 8.75 mmol) and HOBt (1.18 g, 8. 72 mmol) in DMF (30 ml) was added to NH ₂ Val-Cit-O-TrtCl resin, then DIPKDI (1.35 ml, 8.72 mmol) was added at 23°C. The reaction mixture is stirred for 24 hours at 23°C. The reaction is stopped by washing with DMF (5x15 mlx0.5 min). The Fmoc-NH-PEG4-Va1-Cit-O-TrtC1 resin was treated with piperidine:DMF (1:4, 15 ml, 1x1 min, 2x10 min) and washed with DMF (5x15 mlx0.5 min).

Раствор 3-(малеимидо)пропионовой кислоты (MC2-OH) (3,95 г, 23,35 ммоль) и HOBt (3,16 г, 23,37 ммоль) в ДМФ (30 мл) добавляют к NH₂-PEG4-Va1-Cit-O-TrtC1-смоле, затем добавляют ДИПКДИ (3,62 мл, 23,37 ммоль) при 23°С. Реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч при 23°С. Реакцию останавливают промыванием ДМФ (5x15 млх0,5 мин) и CH₂Cl₂ (5x15 млх0,5 мин).A solution of 3-(maleimido)propionic acid (MC2-OH) (3.95 g, 23.35 mmol) and HOBt (3.16 g, 23.37 mmol) in DMF (30 ml) was added to NH ₂ -PEG4- Va1-Cit-O-TrtC1-resin, then add DIPKDI (3.62 ml, 23.37 mmol) at 23°C. The reaction mixture is stirred for 2 hours at 23°C. The reaction is stopped by washing with DMF (5x15 mlx0.5 min) and CH ₂ Cl ₂ (5x15 mlx0.5 min).

Пептид отщепляют от смолы обработками ТФ^ОТгС^ (1:99, 5x50 мл). Смолу промывают CH₂Cl₂(7x50 млх0,5 мин). Объединенные фильтраты выпаривают досуха при пониженном давлении, полученное твердое вещество растирают с Et₂O и фильтруют с получением LIN 2-1 (4,59 г, 87% выход) в виде белого твердого вещества.The peptide is cleaved from the resin by treatments with TP^OTgC^ (1:99, 5x50 ml). The resin is washed with CH ₂ Cl ₂ (7x50 mlx0.5 min). The combined filtrates were evaporated to dryness under reduced pressure and the resulting solid was triturated with Et ₂ O and filtered to give LIN 2-1 (4.59 g, 87% yield) as a white solid.

1H ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ 7,67-7,57 (м, 1H), 7,44 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,11 (т, J=5,4 Гц, 1H), 6,73 (с, 2H), 4,49 (д, J=7,2 Гц, 1H), 4,35 (т, J=7,7 Гц, 1H), 3,82 (т, J=7,0 Гц, 2H), 3,74 (т, J=6,2 Гц, 2H), 3,68-3,56 (м, 13H), 3,56-3,45 (м, 2H), 3,39 (кв, J=5,4 Гц, 2H), 3,17 (с, 2H), 2,55 (кв, J=7,0, 6,0 Гц, 4H), 2,16-1,99 (м, 1H), 1,91 (с, 1H), 1,75 (с, 1H), 1,43 (с, 2H), 0,94 (д,=9,7 Гц, 3H), 0,93 (д,=9,7 Гц, 3H).1H NMR (300 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.67-7.57 (m, 1H), 7.44 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.11 (t, J=5, 4 Hz, 1H), 6.73 (s, 2H), 4.49 (d, J=7.2 Hz, 1H), 4.35 (t, J=7.7 Hz, 1H), 3.82 (t, J=7.0 Hz, 2H), 3.74 (t, J=6.2 Hz, 2H), 3.68-3.56 (m, 13H), 3.56-3.45 ( m, 2H), 3.39 (kv, J=5.4 Hz, 2H), 3.17 (s, 2H), 2.55 (kv, J=7.0, 6.0 Hz, 4H), 2.16-1.99 (m, 1H), 1.91 (s, 1H), 1.75 (s, 1H), 1.43 (s, 2H), 0.94 (d, = 9.7 Hz, 3H), 0.93 (d,=9.7 Hz, 3H).

ИЭР-МС m/z: 673,3 (M+H)+.ESI-MS m/z: 673.3 (M+H)+.

(b) Получение LIN 2-2: MC2-PEG4-Val-Cit-PABOH.(b) Preparation of LIN 2-2: MC2-PEG4-Val-Cit-PABOH.

LIN 2-2LIN 2-2

- 142 046742- 142 046742

К раствору LIN 2-1 (1,5 г, 2,22 ммоль) и 4-аминобензилового спирта (PABOH) (0,55 г, 4,45 ммоль) в CHft (60 мл) добавляют раствор HOBt (0,60 г, 4,45 ммоль) в ДМФ (5 мл), затем добавляют ДИПКДИ (0,69 мл, 4,45 ммоль) при 23°C. Реакционную смесь перемешивают в течение 5 ч при 23°C, добавляют Et2O (150 мл) и полученное твердое вещество фильтруют в вакууме с получением неочищенного LIN 22(2,37 г, >100% выход) который применяют на следующей стадии без дальнейшей очистки.To a solution of LIN 2-1 (1.5 g, 2.22 mmol) and 4-aminobenzyl alcohol (PABOH) (0.55 g, 4.45 mmol) in CHft (60 ml) add a solution of HOBt (0.60 g , 4.45 mmol) in DMF (5 ml), then add DIPKDI (0.69 ml, 4.45 mmol) at 23°C. The reaction mixture was stirred for 5 hours at 23°C, Et2O (150 ml) was added and the resulting solid was vacuum filtered to give crude LIN 22 (2.37 g, >100% yield) which was used in the next step without further purification.

¹H ЯМР (500 МГц, ДМСО-06): δ 7,57 (д, J=8,6 Гц, 2H), 7,30 (д, J=8,6 Гц, 2H), 6,81 (с, 2H), 4,58 (с, 1H), 4,56 (с, 2H), 4,50 (дд, J=9,1, 5,1 Гц, 1H), 4,21 (д, J=7,0 Гц, 1H), 3,80-3,68 (м, 4H), 3,65-3,59 (м, 12H), 3,55-3,47 (м, 1H), 3,20 (дд, J=13,6, 6,9 Гц, 1H), 3,12 (дт, J=13,5, 6,7 Гц, 1H), 2,55 (тд, J=6,1, 2,1 Гц, 2H), 2,46 (т, J=6,9 Гц, 2H), 2,15-2,07 (м, 1H), 1,95-1,88 (м, 1H), 1,79-1,70 (м, 1H), 1,67-1,50 (м, 2H), 0,99 (д, J=7,0 Гц, 3H), 0,98 (д, J=7,0 Гц, 3H). ¹ H NMR (500 MHz, DMSO-06): δ 7.57 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.30 (d, J=8.6 Hz, 2H), 6.81 (s , 2H), 4.58 (s, 1H), 4.56 (s, 2H), 4.50 (dd, J=9.1, 5.1 Hz, 1H), 4.21 (d, J= 7.0 Hz, 1H), 3.80-3.68 (m, 4H), 3.65-3.59 (m, 12H), 3.55-3.47 (m, 1H), 3.20 (dd, J=13.6, 6.9 Hz, 1H), 3.12 (dt, J=13.5, 6.7 Hz, 1H), 2.55 (td, J=6.1, 2 ,1 Hz, 2H), 2.46 (t, J=6.9 Hz, 2H), 2.15-2.07 (m, 1H), 1.95-1.88 (m, 1H), 1 .79-1.70 (m, 1H), 1.67-1.50 (m, 2H), 0.99 (d, J=7.0 Hz, 3H), 0.98 (d, J=7 ,0 Hz, 3H).

ИЭР-МС m/z: 778,4 (M+H)+.ESI-MS m/z: 778.4 (M+H)+.

(c) Получение LIN 2:MC2-PEG4-Val-Cit-PABC-PNP.(c) Preparation of LIN 2:MC2-PEG4-Val-Cit-PABC-PNP.

К раствору LIN 2-2 (1,73 г, 2,22 ммоль) и бис(4-нитрофенил) карбоната (бис-PNP) (3,38 г, 11,12 ммоль) в ДХМ:ДМФ (8:2, 75 мл) добавляют ДИПЭА (1,16 мл, 6,07 ммоль) при 23°C. Реакционную смесь перемешивают в течение 19 ч при 23°C и выливают на колонку с силикагелем (С^С^СНзОН, от 50:1 до 10:1) с получением чистого LIN 2(945 мг, 45% выход).To a solution of LIN 2-2 (1.73 g, 2.22 mmol) and bis(4-nitrophenyl) carbonate (bis-PNP) (3.38 g, 11.12 mmol) in DCM:DMF (8:2, 75 ml) add DIPEA (1.16 ml, 6.07 mmol) at 23°C. The reaction mixture was stirred for 19 hours at 23°C and poured onto a silica gel column (C^C^CH3OH, 50:1 to 10:1) to obtain pure LIN 2 (945 mg, 45% yield).

1H ЯМР (500 МГц, CD3OD): δ 8,22 (д, J=9,2 Гц, 2H), 7,61 (д, J=8,6 Гц, 2H), 7,34 (д, J=9,2 Гц, 2H), 7,33 (д, J=8,6 Гц, 2H), 6,67 (с, 2H), 4,57-4,47 (м, 1H), 4,23-4,12 (м, 1H), 3,78-3,76 (м, 12H), 3,63-3,50 (м, 16H), 3,49-3,41 (м, 2H), 3,34-3,25 (м, 2H), 3,18-3,03 (м, 2H), 2,51 (т, J=5,9 Гц, 2H), 2,45 (т, J=7,2 Гц, 2H), 2,13-1,99 (м, 1H), 1,92-1,84 (м, 1H), 1,73-1,62 (м, 1H), 1,55-1,45 (м, 2H), 0,92 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,90 (д, J=6,8 Гц, 3H).1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 8.22 (d, J=9.2 Hz, 2H), 7.61 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.34 (d, J= 9.2 Hz, 2H), 7.33 (d, J=8.6 Hz, 2H), 6.67 (s, 2H), 4.57-4.47 (m, 1H), 4.23- 4.12 (m, 1H), 3.78-3.76 (m, 12H), 3.63-3.50 (m, 16H), 3.49-3.41 (m, 2H), 3. 34-3.25 (m, 2H), 3.18-3.03 (m, 2H), 2.51 (t, J=5.9 Hz, 2H), 2.45 (t, J=7, 2 Hz, 2H), 2.13-1.99 (m, 1H), 1.92-1.84 (m, 1H), 1.73-1.62 (m, 1H), 1.55-1 .45 (m, 2H), 0.92 (d, J=6.8 Hz, 3H), 0.90 (d, J=6.8 Hz, 3H).

¹³C ЯМР (75 МГц, CDQ3/CD3OD): δ 174,4, 172,9, 172,4, 172,4, 171,6, 170,9, 170,8, 170,7, 163,7, 155,8, 155,7, 152,5, 145,4, 138,8, 134,1, 131,3, 130,4, 129,2, 128,7, 125,7, 124,9, 121,8, 119,8 (x2), 115,1, 70,2 (x2), 70,1 (x2), 70,0, 69,9, 69,8, 69,0, 66,9, 59,2, 53,5, 39,0, 36,0, 34,4, 34,1, 30,4, 29,0, 18,5, 17,5. ¹³ C NMR (75 MHz, CDQ3/CD3OD): δ 174.4, 172.9, 172.4, 172.4, 171.6, 170.9, 170.8, 170.7, 163.7, 155 ,8, 155.7, 152.5, 145.4, 138.8, 134.1, 131.3, 130.4, 129.2, 128.7, 125.7, 124.9, 121.8 , 119.8 (x2), 115.1, 70.2 (x2), 70.1 (x2), 70.0, 69.9, 69.8, 69.0, 66.9, 59.2, 53.5, 39.0, 36.0, 34.4, 34.1, 30.4, 29.0, 18.5, 17.5.

ИЭР-МС m/z: 943,4 (M+H)⁺.ESI-MS m/z: 943.4 (M+H) ⁺ .

Rf= 0,20 (СН2С12:СНзОН, 9:1).Rf = 0.20 (CH2C12:CH3OH, 9:1).

Получение LIN 3: MC2-PEG4-Val-Ala-PABC-PNP.Obtaining LIN 3: MC2-PEG4-Val-Ala-PABC-PNP.

Схема реакцииReaction scheme

.- Fmoc-Ala-OH .- Fmoc-Val-OH .- Fmoc-PEG4-OH .- MC2-OH.- Fmoc-Ala-OH .- Fmoc-Val-OH .- Fmoc-PEG4-OH .- MC2-OH

PABOHPABOH

ДИПКДИ HOBt ^Cl ----------------► MC2-PEG4-Val-Ala-OH ------*ДИПКДИ, HOBt, ДМФ CH₂CI₂, ДМФDIPCDI HOBt ^Cl ----------------► MC2-PEG4-Val-Ala-OH ------*DIPCDI, HOBt, DMF CH ₂ CI ₂ , DMF

Хоротритиловая смола 87%Chorotrityl resin 87%

LIN 3-1LIN 3-1

81%81%

MC2-PEG4-ValAla-PABOHMC2-PEG4-ValAla-PABOH

LIN 3-2LIN 3-2

Бис-PNPBis-PNP

ДИПЭАDIPEA

MC2-PEG4--Val-Ala-PABC-PNPMC2-PEG4--Val-Ala-PABC-PNP

CH₂CI₂. ДМФCH ₂ CI ₂ . DMF

59%59%

LIN 3 (a) Получение LIN 3-1: MC2-PEG4-Val-Ala-OH. LIN 3-1LIN 3 (a) Preparation of LIN 3-1: MC2-PEG4-Val-Ala-OH. LIN 3-1

- 143 046742- 143 046742

Cl-TrtCl-смолу (5 г, 1,49 ммоль/г) помещают на пластину фильтрпресса. К смоле добавляют CH2C12 (25 мл) и смесь перемешивают в течение 1 ч при 23°C. Растворитель удаляют фильтрацией в вакууме. Раствор Fmoc-Ala-OH (2,31 г, 7,41 ммоль) и ДИПЭА (4,28 мл, 24,61 ммоль) в CH₂Cl₂ (20 мл) добавляют, и смесь перемешивают в течение 10 мин при 23°C. Добавляют еще ДИПЭА (8,60 мл, 49,37 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч при 23°C. Реакцию останавливают добавлением MeOH (10 мл) и перемешивают 15 мин при 23°C. Fmoc-Ala-O-TrtCl-смолу подвергают следующим промывкам/обработкам: CH₂Cl₂ (5x15 млх0,5 мин), ДМФ (5x15 млх0,5 мин), пиперидин:ДМФ (1:4, 15 мл, 1x1 мин, 2x10 мин), ДМФ (5x15 млх0,5 мин), CH₂Cl₂ (5x15 млх0,5 мин). Рассчитывают нагрузку: 1,34 ммоль/г.Cl-TrtCl resin (5 g, 1.49 mmol/g) was placed on a filter press plate. CH2C12 (25 ml) was added to the resin and the mixture was stirred for 1 hour at 23°C. The solvent is removed by vacuum filtration. A solution of Fmoc-Ala-OH (2.31 g, 7.41 mmol) and DIPEA (4.28 ml, 24.61 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (20 ml) was added and the mixture was stirred for 10 min at 23 °C. More DIPEA (8.60 mL, 49.37 mmol) was added and the reaction mixture was stirred for 1 hour at 23°C. The reaction is stopped by adding MeOH (10 ml) and stirring for 15 min at 23°C. The Fmoc-Ala-O-TrtCl resin is subjected to the following washes/treatments: CH ₂ Cl ₂ (5x15 mlx0.5 min), DMF (5x15 mlx0.5 min), piperidine:DMF (1:4, 15 ml, 1x1 min, 2x10 min), DMF (5x15 mlx0.5 min), CH ₂ Cl ₂ (5x15 mlx0.5 min). Calculate the load: 1.34 mmol/g.

КН^-Ак-О-ТИО-смолу промывают ДМФ (5x15 млх0,5 мин) и раствор Fmoc-Val-OH (9,09 г, 26,79 ммоль) и HOBt (3,62 г, 26,79 ммоль) в ДМФ (25 мл) добавляют к ХЩ-Ак-О-ТИО-смоле, затем добавляют ДИПКДИ (4,14 мл, 26,79 ммоль) при 23°C. Смесь перемешивают в течение 1,5 ч при 23°C. Реакцию останавливают промыванием ДМФ (5x15 млх0,5 мин). Fmoc-Val-Ala-O-TrtCl-смолу обрабатывают пиперидином:ДМФ (1:4, 15 мл, 1x1 мин, 2x10 мин) и промывают ДМФ (5x15 млх0,5 мин).The KH^-Ak-O-THIO resin is washed with DMF (5x15 mlx0.5 min) and a solution of Fmoc-Val-OH (9.09 g, 26.79 mmol) and HOBt (3.62 g, 26.79 mmol) in DMF (25 ml) is added to CAS-Ak-O-THIO-resin, then DIPCDI (4.14 ml, 26.79 mmol) is added at 23°C. The mixture is stirred for 1.5 hours at 23°C. The reaction is stopped by washing with DMF (5x15 mlx0.5 min). The Fmoc-Val-Ala-O-TrtCl resin is treated with piperidine:DMF (1:4, 15 ml, 1x1 min, 2x10 min) and washed with DMF (5x15 mlx0.5 min).

Раствор 15-(9-флуоренилметилоксикарбонил)амино-4,7,10,13-тетраоксапентадекановой кислоты (Fmoc-NH-PEG4-OH) (4,90 г, 8,75 ммоль) и HOBt (1,35 г, 9,98 ммоль) в ДМФ (30 мл) добавляют к NH2Val-Ala-O-TrtCl-смоле, затем добавляют ДИПКДИ (1,55 мл, 10,0 ммоль) при 23°C. Реакционную смесь перемешивают в течение 22 ч при 23°C. Реакцию останавливают промыванием ДМФ (5x15 млх0,5 мин). Fmoc-NH-PEG4-Va1-A1a-O-TrtC1-смолу обрабатывают пиперидином:ДМФ (1:4, 15 мл, 1x1 мин, 2x10 мин) и промывают ДМФ (5x15 млх0,5 мин).A solution of 15-(9-fluorenylmethyloxycarbonyl)amino-4,7,10,13-tetraoxapentadecanoic acid (Fmoc-NH-PEG4-OH) (4.90 g, 8.75 mmol) and HOBt (1.35 g, 9. 98 mmol) in DMF (30 ml) was added to NH2Val-Ala-O-TrtCl resin, then DIPKDI (1.55 ml, 10.0 mmol) was added at 23°C. The reaction mixture is stirred for 22 hours at 23°C. The reaction is stopped by washing with DMF (5x15 mlx0.5 min). The Fmoc-NH-PEG4-Va1-A1a-O-TrtC1 resin was treated with piperidine:DMF (1:4, 15 ml, 1x1 min, 2x10 min) and washed with DMF (5x15 mlx0.5 min).

Раствор 3-(малеимидо)пропионовой кислоты (MC2-OH) (4,53 г, 26,78 ммоль) и HOBt (3,62 г, 26,77 ммоль) в ДМФ (30 мл) добавляют к NH₂-PEG4-Va1-A1a-O-TrtC1-смоле, затем добавляют ДИПКДИ (4,15 мл, 26,80 ммоль) при 23°C. Реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч при 23°C. Реакцию останавливают промыванием ДМФ (5x15 млх0,5 мин) и CH₂Cl₂ (5x15 млх0,5 мин).A solution of 3-(maleimido)propionic acid (MC2-OH) (4.53 g, 26.78 mmol) and HOBt (3.62 g, 26.77 mmol) in DMF (30 ml) was added to NH ₂ -PEG4- Va1-A1a-O-TrtC1-resin, then add DIPKDI (4.15 ml, 26.80 mmol) at 23°C. The reaction mixture is stirred for 2 hours at 23°C. The reaction is stopped by washing with DMF (5x15 mlx0.5 min) and CH ₂ Cl ₂ (5x15 mlx0.5 min).

Пептид отщепляют от смолы обработками ТФК:СН₂С1₂ (1:99, 5x50 мл). Смолу промывают CH₂Cl₂(7x50 млх0,5 мин). Объединенные фильтраты выпаривают досуха при пониженном давлении, полученное твердое вещество растирают с Et₂O и фильтруют с получением L 3-1 (4,73 г, 87% выход) в виде белого твердого вещества.The peptide is cleaved from the resin by treatments with TPA:CH ₂ C1 ₂ (1:99, 5x50 ml). The resin is washed with CH ₂ Cl ₂ (7x50 mlx0.5 min). The combined filtrates were evaporated to dryness under reduced pressure and the resulting solid was triturated with Et ₂ O and filtered to give L 3-1 (4.73 g, 87% yield) as a white solid.

1Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ 7,67 (шс, 1Н), 7,31 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 7,17 (д, J=7,0 Гц, 1Н), 6,85 (т, J=5,6 Гц, 1Н), 6,72 (с, 2Н), 4,51 (кв, J=7,1 Гц, 1Н), 4,38 (дд, J=8,9, 6,9 Гц, 1Н), 3,84 (т, J=7,1 Гц, 2Н), 3,75 (т, J=5,9 Гц, 2Н), 3,69-3,59 (м, 12Н), 3,55 (т, J=5,1 Гц, 2Н), 3,41 (квд, J=5,0, 1,7 Гц, 2Н), 2,62-2,49 (м, 4Н), 2,19-2,01 (м, 1Н), 1,44 (д, J=7,2 Гц, 3Н), 0,95 (д, J=11,9 Гц, 1Н), 0,94 (д, J=11,9 Гц, 1Н).1H NMR (500 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.67 (brs, 1H), 7.31 (d, J=8.9 Hz, 1H), 7.17 (d, J=7.0 Hz, 1H ), 6.85 (t, J=5.6 Hz, 1H), 6.72 (s, 2H), 4.51 (kv, J=7.1 Hz, 1H), 4.38 (dd, J =8.9, 6.9 Hz, 1H), 3.84 (t, J=7.1 Hz, 2H), 3.75 (t, J=5.9 Hz, 2H), 3.69-3 .59 (m, 12H), 3.55 (t, J=5.1 Hz, 2H), 3.41 (kvd, J=5.0, 1.7 Hz, 2H), 2.62-2, 49 (m, 4H), 2.19-2.01 (m, 1H), 1.44 (d, J=7.2 Hz, 3H), 0.95 (d, J=11.9 Hz, 1H ), 0.94 (d, J=11.9 Hz, 1H).

(b) Получение LIN 3-2: MC2-PEG4-Val-Ala-PABOH(b) Preparation of LIN 3-2: MC2-PEG4-Val-Ala-PABOH

LIN 3-2LIN 3-2

К раствору LIN 3-1 (1,84 г, 3,13 ммоль) и 4-аминобензилового спирта (PABOH) (0,77 г, 6,27 ммоль) в CH₂Cl₂ (70 мл) добавляют раствор HOBt (0,84 г, 6,27 ммоль) в ДМФ (5 мл) затем добавляют ДИПКДИ (0,97 мл, 6,27 ммоль) при 23°C. Реакционную смесь перемешивают в течение 5 ч при 23°C, добавляют Et₂O (150 мл) и полученное твердое вещество фильтруют в вакууме с получением неочищенного LIN 32(1,74 г, 81% выход) который применяют на следующей стадии без дальнейшей очистки.To a solution of LIN 3-1 (1.84 g, 3.13 mmol) and 4-aminobenzyl alcohol (PABOH) (0.77 g, 6.27 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (70 ml) add a solution of HOBt (0 .84 g, 6.27 mmol) in DMF (5 ml) then add DIPKDI (0.97 ml, 6.27 mmol) at 23°C. The reaction mixture was stirred for 5 hours at 23°C, Et ₂ O (150 ml) was added and the resulting solid was vacuum filtered to give crude LIN 32 (1.74 g, 81% yield) which was used in the next step without further purification .

1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-ф,): δ 7,58 (д, J=8,5 Гц, 2Н), 7,30 (д, J=8,5 Гц, 2Н), 6,81 (с, 2Н), 4,56 (с, 2Н), 4,52-4,41 (м, 1Н), 4,21 (д, J=6,7 Гц, 1Н). 3,91 (п, J=6,5 Гц, 1Н), 3,81-3,67 (м, 4Н), 3,65-3,54 (м, 12Н), 3,49 (т, J=5,5 Гц, 2Н), 2,56 (дд, J=6,6, 5,5 Гц, 2Н), 2,46 (т, J=6,9 Гц, 2Н), 2,12 (г, J=6,8 Гц, 1Н), 1,45 (д, J=7,2 Гц, 3Н), 1,00 (д, J=12,1 Гц, 3Н), 0,98 (д, J=12,1 Гц, 3Н).1H NMR (500 MHz, DMSO-ph): δ 7.58 (d, J=8.5 Hz, 2H), 7.30 (d, J=8.5 Hz, 2H), 6.81 (s , 2H), 4.56 (s, 2H), 4.52-4.41 (m, 1H), 4.21 (d, J=6.7 Hz, 1H). 3.91 (p, J=6.5 Hz, 1H), 3.81-3.67 (m, 4H), 3.65-3.54 (m, 12H), 3.49 (t, J= 5.5 Hz, 2H), 2.56 (dd, J=6.6, 5.5 Hz, 2H), 2.46 (t, J=6.9 Hz, 2H), 2.12 (g, J=6.8 Hz, 1H), 1.45 (d, J=7.2 Hz, 3H), 1.00 (d, J=12.1 Hz, 3H), 0.98 (d, J= 12.1 Hz, 3H).

(c) Получение LIN 3: MC2-PEG4-Val-Ala-PABC-PNP.(c) Preparation of LIN 3: MC2-PEG4-Val-Ala-PABC-PNP.

LIN 3LIN 3

- 144 046742- 144 046742

К раствору LIN 3-2 (1,74 г, 2,51 ммоль) и бис(4-нитрофенил) карбоната (бис-PNP) (3,82 г, 12,57 ммоль) в СН₂С1₂:ДМФ (8:1, 70 мл) добавляют ДИПЭА (1,31 мл, 7,54 ммоль) при 23°C. Реакционную смесь перемешивают в течение 20 ч при 23°C и выливают на колонку с силикагелем (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 50:1 до 10:1) с получением чистого LIN 3 (1,26 г, 59% выход).To a solution of LIN 3-2 (1.74 g, 2.51 mmol) and bis(4-nitrophenyl) carbonate (bis-PNP) (3.82 g, 12.57 mmol) in CH ₂ C1 ₂ : DMF (8 :1, 70 ml) add DIPEA (1.31 ml, 7.54 mmol) at 23°C. The reaction mixture was stirred for 20 hours at 23°C and poured onto a silica gel column (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 50:1 to 10:1) to obtain pure LIN 3 (1.26 g, 59% yield ).

¹Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ 8,82 (с, 1H), 8,27 (д, J=9,2 Гц, 2H), 7,73 (д, J=8,6 Гц, 2H), 7,38 (д, J=9,1 Гц, 4H), 7,15 (дд, J=21,8, 7,2 Гц, 2H), 6,69 (с, 2H), 6,62 (т, J=5,7 Гц, 1H), 5,24 (с, 2H), 4,67 (п, J=7,2 Гц, 1H), 4,24 (дд, J=6,8, 5,7 Гц, 1H), 3,91-3,76 (м, 2H), 3,71 (ддд, J=10,1, 6,1, 4,3 Гц, 1H), 3,66-3,54 (м, 14H), 3,53 (т, J=5,1 Гц, 1H), 3,46-3,33 (м, 2H), 2,76-2,57 (м, 1H), 2,57-2,42 (м, 2H), 2,33-2,19 (м, 1H), 1,46 (д, J=7,1 Гц, 3H), 1,01 (д, J=12,1 Гц, 3H), 1,00 (д, J=12,1 Гц, 3H). ¹ H NMR (500 MHz, CDCl ₃ ): δ 8.82 (s, 1H), 8.27 (d, J=9.2 Hz, 2H), 7.73 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.38 (d, J=9.1 Hz, 4H), 7.15 (dd, J=21.8, 7.2 Hz, 2H), 6.69 (s, 2H), 6, 62 (t, J=5.7 Hz, 1H), 5.24 (s, 2H), 4.67 (p, J=7.2 Hz, 1H), 4.24 (dd, J=6.8 , 5.7 Hz, 1H), 3.91-3.76 (m, 2H), 3.71 (ddd, J=10.1, 6.1, 4.3 Hz, 1H), 3.66- 3.54 (m, 14H), 3.53 (t, J=5.1 Hz, 1H), 3.46-3.33 (m, 2H), 2.76-2.57 (m, 1H) , 2.57-2.42 (m, 2H), 2.33-2.19 (m, 1H), 1.46 (d, J=7.1 Hz, 3H), 1.01 (d, J =12.1 Hz, 3H), 1.00 (d, J=12.1 Hz, 3H).

¹³C ЯМР (75 МГц, CD3OD): δ 173,0, 172,1, 171,6 (x2), 170,7, 163,8, 155,7, 152,5, 145,4, 140,3, 138,9, 134,1, 130,4, 129,1, 125,6, 124,8, 121,9, 119,7, 115,1, 70,2, 70,1 (x3), 70,0, 69,9, 69,8, 69,0, 66,9, 59,1, 53,4, 49,7, 39,0, 36,0, 34,3, 34,1, 30,4, 18,3, 17,3, 16,6. ¹³ C NMR (75 MHz, CD3OD): δ 173.0, 172.1, 171.6 (x2), 170.7, 163.8, 155.7, 152.5, 145.4, 140.3, 138.9, 134.1, 130.4, 129.1, 125.6, 124.8, 121.9, 119.7, 115.1, 70.2, 70.1 (x3), 70.0 , 69.9, 69.8, 69.0, 66.9, 59.1, 53.4, 49.7, 39.0, 36.0, 34.3, 34.1, 30.4, 18 ,3, 17.3, 16.6.

ИЭР-МС m/z: 857,3 (M+H)+.ESI-MS m/z: 857.3 (M+H)+.

Rf=0,45 (CH2Cl2:CH₃OH, 9:1).Rf=0.45 (CH2Cl2:CH ₃ OH, 9:1).

Пример 1:Синтез соединения формулы D-X-(AA)_w-(T)g-L1.Example 1: Synthesis of the compound of formula DX-(AA) _w -(T)g-L1.

Получение соединения DL-1Getting a DL-1 connection

К раствору 11-R (100 мг, 0,12 ммоль) и LIN 1(465 мг, 0,63 ммоль) в №Метил-2-пирролидоне (NMP) (15 мл) добавляют КН-диизопропилэтиламин (ДИПЭА) (111 мл, 0,63 ммоль) при 23°C. Реакционную смесь перемешивают в течение 3 дней при 23°C, разбавляют EtOAc (50 мл) и промывают H2O (4*30 мл) и насыщенным водным раствором NaCl (30 мл). Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Остаток очищают флэш-хроматографией на силикагеле (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 90:10) с получением DL 1, который очищают препаративной ВЭЖХ с получением чистого DL 1 (69 мг, 40% выход).To a solution of 11-R (100 mg, 0.12 mmol) and LIN 1 (465 mg, 0.63 mmol) in Na-Methyl-2-pyrrolidone (NMP) (15 ml) add KH-diisopropylethylamine (DIPEA) (111 ml , 0.63 mmol) at 23°C. The reaction mixture was stirred for 3 days at 23°C, diluted with EtOAc (50 ml) and washed with H2O (4 * 30 ml) and saturated aqueous NaCl (30 ml). The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The residue was purified by flash chromatography on silica gel (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 90:10) to give DL 1, which was purified by preparative HPLC to give pure DL 1 (69 mg, 40% yield).

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD/CDC13): δ 7,85 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,59 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,36 (д, J=8,2 Гц, 2H), 7,30 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,22 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,01 (т, J=7,6 Гц, 1H), 6,91 (т, J=7,5 Гц, 1H), 6,72 (с, 2H), 6,58 (с, 1H), 6,26 (с, 1H), 6,07 (с, 1H), 5,25-5,14 (м, 2H), 5,14-5,01 (м, 2H), 4,67 (шс, 1H), 4,51 (д, J=6,7 Гц, 2H), 4,28 (дд, J=16,2, 7,1 Гц, 4H), 4,21-4,05 (м, 3H), 3,71 (с, 3H), 3,51-3,40 (м, 2H), 3,36-3,32 (м, 2H), 3,232,99 (м, 2H), 2,99-2,72 (м, 2H), 2,65 (д, J=14,9 Гц, 2H), 2,28 (с,-3Н), 2,25 (с,-3Н), 2,10 (с,-3Н), 2,04 (с,-3Н), 1,96-1,83 (м, 1H), 1,80-1,68 (м, 2H), 1,65-1,50 (м, 10H), 1,35-1,23 (м, 2H), 0,95 (д, >6,8Гц, 3H), 0,94 (д, Т=6,8Гц, 3H).1H NMR (400 MHz, CD3OD/CDC13): δ 7.85 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.59 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.36 (d, J=8.2 Hz, 2H), 7.30 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.22 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.01 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 6.91 (t, J=7.5 Hz, 1H), 6.72 (s, 2H), 6.58 (s, 1H), 6.26 (s, 1H) , 6.07 (s, 1H), 5.25-5.14 (m, 2H), 5.14-5.01 (m, 2H), 4.67 (shs, 1H), 4.51 (d , J=6.7 Hz, 2H), 4.28 (dd, J=16.2, 7.1 Hz, 4H), 4.21-4.05 (m, 3H), 3.71 (s, 3H), 3.51-3.40 (m, 2H), 3.36-3.32 (m, 2H), 3.232.99 (m, 2H), 2.99-2.72 (m, 2H) , 2.65 (d, J=14.9 Hz, 2H), 2.28 (s, -3H), 2.25 (s, -3H), 2.10 (s, -3H), 2.04 (s,-3H), 1.96-1.83 (m, 1H), 1.80-1.68 (m, 2H), 1.65-1.50 (m, 10H), 1.35- 1.23 (m, 2H), 0.95 (d, >6.8Hz, 3H), 0.94 (d, T=6.8Hz, 3H).

¹³C ЯМР (75 МГц, CD₃OH/CDCl₃): δ 174,9, 172,5, 171,5, 171,1, 170,7, 169,5, 160,8, 157,4, 148,6, 146,1, 143,6, 141,1, 140,9, 138,0, 136,8, 133,9, 132,6, 130,5, 129,8, 129,6, 128,6, 126,0, 121,6, 120,4, 119,8, 119,0, 118,6, 118,0, 117,8, 116,7, 113,5, 112,8, 110,9, 109,1, 102,3, 66,0, 63,1, 62,9, 61,6, 60,2, 59,9, 59,2, 59,1, 58,9, ¹³ C NMR (75 MHz, CD ₃ OH/CDCl ₃ ): δ 174.9, 172.5, 171.5, 171.1, 170.7, 169.5, 160.8, 157.4, 148, 6, 146.1, 143.6, 141.1, 140.9, 138.0, 136.8, 133.9, 132.6, 130.5, 129.8, 129.6, 128.6, 126.0, 121.6, 120.4, 119.8, 119.0, 118.6, 118.0, 117.8, 116.7, 113.5, 112.8, 110.9, 109, 1, 102.3, 66.0, 63.1, 62.9, 61.6, 60.2, 59.9, 59.2, 59.1, 58.9,

- 145 046742- 145 046742

54,6, 54,6, 53,5, 50,7, 45,3, 42,1, 40,5, 37,1, 35,3, 30,3, 29,1, 27,9, 26,3, 26,0, 25,0, 24,5, 23,6, 19,4, 18,6, 17,7, 15,1, 8,6.54.6, 54.6, 53.5, 50.7, 45.3, 42.1, 40.5, 37.1, 35.3, 30.3, 29.1, 27.9, 26, 3, 26.0, 25.0, 24.5, 23.6, 19.4, 18.6, 17.7, 15.1, 8.6.

ИЭР-МС m/z: 1391,4 (M+H)+.ESI-MS m/z: 1391.4 (M+H)+.

Rj=0,40 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 9:1).Rj=0.40 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 9:1).

Получение соединения DL 2Getting a DL 2 connection

DL 2DL 2

К раствору 11-R (50 мг, 0,063 ммоль) и LIN 2 (118 мг, 0,12 ммоль) в CH₂Cl₂ (2 мл) добавляют N,Nдиизопропилэтиламин (ДИПЭА) (22 мл, 0,12 ммоль) при 23°C. Реакционную смесь перемешивают в течение 18 ч при 23°C и выливают на колонку с силикагелем (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 90:10) с получением DL 2, который очищают препаративной ВЭЖХ с получением чистого DL 2 (30 мг, 30% выход).To a solution of 11-R (50 mg, 0.063 mmol) and LIN 2 (118 mg, 0.12 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (2 ml) add N,Ndiisopropylethylamine (DIPEA) (22 ml, 0.12 mmol) at 23°C. The reaction mixture is stirred for 18 hours at 23°C and poured onto a silica gel column (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 90:10) to obtain DL 2, which is purified by preparative HPLC to obtain pure DL 2 (30 mg, 30% yield).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,63 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,59 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,39 (д, J=8,2 Гц, 2H), 7,30 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,23 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,01 (т, J=7,6 Гц, 1H), 6,92 (т, J=7,5 Гц, 1H), 6,76 (с, 2H), 6,58 (с, 1H), 6,28 (с, 1H), 6,09 (с, 1H), 5,25-5,14 (м, 2H), 5,14-5,01 (м, 2H), 4,67 (шс, 1H), 4,51 (д, J=6,7 Гц, 2H), 4,36-4,24 (м, 4H), 4,23-4,15 (м, 3H), 3,73 (с, 3H), 3,75-3,69 (м, 3H), 3,58-3,50 (м, 14H), 3,51-3,40 (м, 2H), 3,36-3,32 (м, 2H), 3,23-3,05 (м, 2H), 2,99-2,88 (м, 2H), 2,68 (д, J=14,9 Гц, 2H), 2,56-2,41 (м, 2H), 2,29 (с,-3П), 2,27 (с,-3П), 2,10 (с,-3П), 2,05 (с,-3П), 1,96-1,83 (м, 1H), 1,80-1,68 (м, 2H), 1,65-1,50 (м, 10H), 1,351,23 (м, 2H), 0,96 (д, 3=6,8Гц, 3H), 0,95 (д, >6,8Гц, 3H). ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 7.63 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.59 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.39 (d, J=8.2 Hz, 2H), 7.30 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.23 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.01 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 6.92 (t, J=7.5 Hz, 1H), 6.76 (s, 2H), 6.58 (s, 1H), 6.28 (s, 1H) , 6.09 (s, 1H), 5.25-5.14 (m, 2H), 5.14-5.01 (m, 2H), 4.67 (shs, 1H), 4.51 (d , J=6.7 Hz, 2H), 4.36-4.24 (m, 4H), 4.23-4.15 (m, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.75- 3.69 (m, 3H), 3.58-3.50 (m, 14H), 3.51-3.40 (m, 2H), 3.36-3.32 (m, 2H), 3. 23-3.05 (m, 2H), 2.99-2.88 (m, 2H), 2.68 (d, J=14.9 Hz, 2H), 2.56-2.41 (m, 2H), 2.29 (s, -3P), 2.27 (s, -3P), 2.10 (s, -3P), 2.05 (s, -3P), 1.96-1.83 (m, 1H), 1.80-1.68 (m, 2H), 1.65-1.50 (m, 10H), 1.351.23 (m, 2H), 0.96 (d, 3=6 .8Hz, 3H), 0.95 (d, >6.8Hz, 3H).

¹³C ЯМР (75 МГц, CD3OD): δ 173,0, 172,34, 171,6, 171,5 (x2), 170,8 (x2), 170,7, 169,4, 160,8, 157,4, 155,8, 148,7, 148,5, 146,2, 146,1, 143,7, 141,2, 141,1, 140,9, 138,4, 136,9, 134,0, 131,3, 129,8, 128,7, 128,5, 126,0, 121,5, 120,5, 119,9, 119,7, 118,5, 117,7, 112,7, 102,4, 70,1 (x5), 70,0 (x2), 69,9, 69,8, 69,7, 69,0, 68,9, 66,8, 61,6, 59,9, 59,2, 54,6, 54,0, 53,5, 40,4, 40,0, 39,0, 36,0, 35,1, 34,4, 34,1, 30,4, 29,0, 26,4, 24,6, 23,6, 19,3, 18,5, 17,4, 15,1, 8,4. ¹³ C NMR (75 MHz, CD3OD): δ 173.0, 172.34, 171.6, 171.5 (x2), 170.8 (x2), 170.7, 169.4, 160.8, 157 ,4, 155.8, 148.7, 148.5, 146.2, 146.1, 143.7, 141.2, 141.1, 140.9, 138.4, 136.9, 134.0 , 131.3, 129.8, 128.7, 128.5, 126.0, 121.5, 120.5, 119.9, 119.7, 118.5, 117.7, 112.7, 102 ,4, 70.1 (x5), 70.0 (x2), 69.9, 69.8, 69.7, 69.0, 68.9, 66.8, 61.6, 59.9, 59 ,2, 54.6, 54.0, 53.5, 40.4, 40.0, 39.0, 36.0, 35.1, 34.4, 34.1, 30.4, 29.0 , 26.4, 24.6, 23.6, 19.3, 18.5, 17.4, 15.1, 8.4.

ИЭР-МС m/z: 1596,6 (M+H)+.ESI-MS m/z: 1596.6 (M+H)+.

Rj=0,48 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 9:1).Rj=0.48 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 9:1).

Получение соединения DL 3Getting a DL 3 connection

DL 3DL 3

К раствору 11-R (50 мг, 0,063 ммоль) и LIN 3 (108 мг, 0,12 ммоль) в CH₂Cl₂ (2 мл) добавляют N,NTo a solution of 11-R (50 mg, 0.063 mmol) and LIN 3 (108 mg, 0.12 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (2 ml) add N,N

- 146 046742 диизопропилэтиламин (ДИПЭА) (22 мл, 0,12 ммоль) при 23°C. Реакционную смесь перемешивают в течение 18 ч при 23°C и выливают на колонку с силикагелем (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 90:10) с получением DL 3, который очищают препаративной ВЭЖХ с получением чистого DL 3 (25 мг, 26% выход).- 146 046742 diisopropylethylamine (DIPEA) (22 ml, 0.12 mmol) at 23°C. The reaction mixture is stirred for 18 hours at 23°C and poured onto a silica gel column (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 90:10) to obtain DL 3, which is purified by preparative HPLC to obtain pure DL 3 (25 mg, 26% yield).

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7,64 (д, J=8,2 Гц, 2H), 7,39 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,30 (дт, J=7,8, 1,0 Гц, 1H), 7,23 (дт, J=8,4, 0,9 Гц, 1H), 7,01 (ддд, J=8,2, 7,0, 1,2 Гц, 1H), 6,91 (ддд, J=7,9, 7,0, 1,0 Гц, 1H), 6,76 (с, 2H), 6,61 (с, 1H), 6,28 (с, 1H), 6,10 (с, 1H), 5,26-5,15 (м, 1H), 5,07 (дд, J=12,1, 4,7 Гц, 2H), 4,66 (с, 1H), 4,57 (с, 1H), 4,47 (т, J=7,1 Гц, 1H), 4,36 (с, 1H), 4,32-4,22 (м, 2H), 4,18 (д, J=6,5 Гц, 2H), 3,75-3,68 (м, 6H), 3,72 (с, 3H), 3,59-3,46 (м, 8H), 3,44 (т, J=5,3 Гц, 2H), 3,33-3,25 (м, 10H), 3,15 (дд, J=9,7, 5,0 Гц, 1H), 2,95 (д, J=17,9 Гц, 1H), 2,81 (дд, J=18,0, 9,9 Гц, 2H), 2,73-2,59 (м, 2H), 2,52 (т, J=6,1 Гц, 2H), 2,43 (т, J=6,9 Гц, 2H), 2,29 (с, 3H), 2,27 (с, 3H), 2,11 (с, 3H), 2,05 (с, 3H), 1,45 (т, J=8,7 Гц, 2H), 0,99 (д, J=9,9 Гц, 3H), 0,97 (д, J=9,9 Гц, 3H).1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.64 (d, J=8.2 Hz, 2H), 7.39 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.30 (dt, J= 7.8, 1.0 Hz, 1H), 7.23 (dt, J=8.4, 0.9 Hz, 1H), 7.01 (ddd, J=8.2, 7.0, 1, 2 Hz, 1H), 6.91 (ddd, J=7.9, 7.0, 1.0 Hz, 1H), 6.76 (s, 2H), 6.61 (s, 1H), 6, 28 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 5.26-5.15 (m, 1H), 5.07 (dd, J=12.1, 4.7 Hz, 2H), 4 .66 (s, 1H), 4.57 (s, 1H), 4.47 (t, J=7.1 Hz, 1H), 4.36 (s, 1H), 4.32-4.22 ( m, 2H), 4.18 (d, J=6.5 Hz, 2H), 3.75-3.68 (m, 6H), 3.72 (s, 3H), 3.59-3.46 (m, 8H), 3.44 (t, J=5.3 Hz, 2H), 3.33-3.25 (m, 10H), 3.15 (dd, J=9.7, 5.0 Hz, 1H), 2.95 (d, J=17.9 Hz, 1H), 2.81 (dd, J=18.0, 9.9 Hz, 2H), 2.73-2.59 (m , 2H), 2.52 (t, J=6.1 Hz, 2H), 2.43 (t, J=6.9 Hz, 2H), 2.29 (s, 3H), 2.27 (s , 3H), 2.11 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.45 (t, J=8.7 Hz, 2H), 0.99 (d, J=9.9 Hz , 3H), 0.97 (d, J=9.9 Hz, 3H).

¹³C ЯМР (75 МГц, CD₃OD): δ 173,1, 172,1, 172,1, 171,6, 171,5, 170,7, 169,4, 148,7, 146,1, 143,6, 140,9, 138,1, 136,9, 135,7, 134,0, 134,0, 132,7, 127,1, 126,0, 121,5, 120,5, 119,8, 119,7, 119,1, 118,5, 117,6, 113,4, 110,8, 105,8, 102,4, 99,9, 86,9, 70,1, 70,1, 70,1, 70,0, 70,0, 69,9, 69,8, 69,0, 67,7, 66,8, 65,9, 63,0, 62,0, 61,6, 60,1, 59,9, 59,2, 59,1, 54,7, 54,6, 50,8, 49,6, 42,1, 40,3, 40,0, 39,0, 36,0, 34,3, 34,1, 30,4, 28,8, 23,6, 19,2, 18,4, 17,3, 16,6, 14,9, 8,4. ¹³ C NMR (75 MHz, CD ₃ OD): δ 173.1, 172.1, 172.1, 171.6, 171.5, 170.7, 169.4, 148.7, 146.1, 143 ,6, 140.9, 138.1, 136.9, 135.7, 134.0, 134.0, 132.7, 127.1, 126.0, 121.5, 120.5, 119.8 , 119.7, 119.1, 118.5, 117.6, 113.4, 110.8, 105.8, 102.4, 99.9, 86.9, 70.1, 70.1, 70 ,1, 70.0, 70.0, 69.9, 69.8, 69.0, 67.7, 66.8, 65.9, 63.0, 62.0, 61.6, 60.1 , 59.9, 59.2, 59.1, 54.7, 54.6, 50.8, 49.6, 42.1, 40.3, 40.0, 39.0, 36.0, 34 ,3, 34.1, 30.4, 28.8, 23.6, 19.2, 18.4, 17.3, 16.6, 14.9, 8.4.

ИЭР-МС m/z: 1511,2 (M+H)+.ESI-MS m/z: 1511.2 (M+H)+.

Rj=0,50 (CH₂Cl₂:CH₃OH, 9:1).Rj=0.50 (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 9:1).

Получение соединения DL 4Getting a DL 4 connection

46-R LIN 146-R LIN 1

□L4□L4

К раствору 46-R (26 мг, 0,032 ммоль) и LIN 1 (48 мг, 0,64 ммоль) в ДМФ (2 мл) добавляют N,Nдиизопропилэтиламин (ДИПЭА) (12 мл, 0,64 ммоль) при 23°C. Реакционную смесь перемешивают в течение 18 ч при 23°C, разбавляют EtOAc (50 мл) и промывают H2O (4*30 мл) и насыщенным водным раствором NaCl (30 мл). Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ с получением чистого DL 4 (14 мг, 31% выход).To a solution of 46-R (26 mg, 0.032 mmol) and LIN 1 (48 mg, 0.64 mmol) in DMF (2 ml) add N,Ndiisopropylethylamine (DIPEA) (12 ml, 0.64 mmol) at 23°C . The reaction mixture was stirred for 18 hours at 23°C, diluted with EtOAc (50 ml) and washed with H2O (4 * 30 ml) and saturated aqueous NaCl (30 ml). The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The residue was purified by preparative HPLC to give pure DL 4 (14 mg, 31% yield).

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7,88 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,60 (д, J=8,2 Гц, 2H), 7,39-7,36 (м, 3H), 7,207,11 (м, 3H), 6,74 (с, 2H), 6,57 (с, 1H), 6,24 (с, 1H), 6,08 (с, 1H), 5,30-5,05 (м, 2H), 4,64 (с, 1H), 4,50 (д, J=6,1 Гц, 2H), 4,34-4,27 (м, 4H), 4,21-4,13 (м, 3H), 3,70 (с, 3H), 3,45 (т, J=7,2 Гц, 2H), 3,19-3,06 (м, 4H), 2,93-2,76 (м, 2H), 2,70-2,56 (м, 2H), 2,29-2,19 (м, 4H), 2,25 (с, 3H), 2,29-2,11 (м, 2H), 2,11 (с, 3H), 2,06 (с, 3H), 1,931,72 (м, 2H), 1,64-1,52 (м, 9H), 1,32-1,26 (м, 3H), 0,96-0,93 (м, 8H).1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.88 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.60 (d, J=8.2 Hz, 2H), 7.39-7.36 ( m, 3H), 7.207.11 (m, 3H), 6.74 (s, 2H), 6.57 (s, 1H), 6.24 (s, 1H), 6.08 (s, 1H), 5.30-5.05 (m, 2H), 4.64 (s, 1H), 4.50 (d, J=6.1 Hz, 2H), 4.34-4.27 (m, 4H) , 4.21-4.13 (m, 3H), 3.70 (s, 3H), 3.45 (t, J=7.2 Hz, 2H), 3.19-3.06 (m, 4H ), 2.93-2.76 (m, 2H), 2.70-2.56 (m, 2H), 2.29-2.19 (m, 4H), 2.25 (s, 3H), 2.29-2.11 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 1.931.72 (m, 2H), 1.64-1.52 (m, 9H), 1.32-1.26 (m, 3H), 0.96-0.93 (m, 8H).

¹³C ЯМР (100 МГц, CD3OD): δ 173,4, 171,1, 169,7, 169,3, 169,1, 167,7, 159,3, 155,9, 153,5, 147,2, 147,1, 144,3, 142,1, 139,6, 139,2, 136,6, 132,5, 131,1, 129,1, 128,3, 127,2, 125,6, 122,7, 121,0, 119,2 (x2), 118,3, 117,5, 117,4, 112,2, 112,1, 111,7, 109,7, 100,8, 97,0, 64,6, 61,7, 60,0, 58,9, 58,4, 57,7 (x2), 57,4, 53,2, 53,1, 52,0, 48,9, 43,6, 40,5, 39,0, 35,6, 33,8, 28,8, 28,1, 27,6, 26,5, 24,6, 23,6, 22,6, 22,2, 21,5, 17,9, 17,1, 16,2, 13,6, 7,1. ¹³ C NMR (100 MHz, CD3OD): δ 173.4, 171.1, 169.7, 169.3, 169.1, 167.7, 159.3, 155.9, 153.5, 147.2 , 147.1, 144.3, 142.1, 139.6, 139.2, 136.6, 132.5, 131.1, 129.1, 128.3, 127.2, 125.6, 122 ,7, 121.0, 119.2 (x2), 118.3, 117.5, 117.4, 112.2, 112.1, 111.7, 109.7, 100.8, 97.0, 64.6, 61.7, 60.0, 58.9, 58.4, 57.7 (x2), 57.4, 53.2, 53.1, 52.0, 48.9, 43.6 , 40.5, 39.0, 35.6, 33.8, 28.8, 28.1, 27.6, 26.5, 24.6, 23.6, 22.6, 22.2, 21 .5, 17.9, 17.1, 16.2, 13.6, 7.1.

ИЭР-МС m/z: 1392,4 (M+H)+.ESI-MS m/z: 1392.4 (M+H)+.

Получение соединения DL 5Getting a DL 5 connection

- 147 046742- 147 046742

DL3DL3

AgNO₃ _AgNO3

CH₃CN:H₂O _CH3CN : _H2O

DL 5DL 5

К раствору DL 3 (30 мг, 0,026 ммоль) в CH₃CN:H₂O (1,39:1, 6 мл, 0,015 M) добавляют AgNO₃ (132 мг, 0,79 ммоль). Через 18 ч при 23°C, реакционную смесь гасят водным раствором NaHCO₃ и экстрагируют CH₂Cl₂ (x3). Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают в автоматической системе для флэшхроматографии (SiO₂, CH₂Cl₂:CH₃OH, от 95:5 до 50:50) с получением чистого DL 5 (34 мг, 87%).To a solution of DL 3 (30 mg, 0.026 mmol) in CH ₃ CN:H ₂ O (1.39:1, 6 ml, 0.015 M) add AgNO ₃ (132 mg, 0.79 mmol). After 18 h at 23°C, the reaction mixture is quenched with aqueous NaHCO ₃ and extracted with CH ₂ Cl ₂ (x3). The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by an automated flash chromatography system (SiO ₂ , CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 95:5 to 50:50) to obtain pure DL 5 (34 mg, 87%).

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): 7,64 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,38 (д, J=8,3 Гц, 2H), 7,29 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,22 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,00 (ддд, J=8,2, 7,0, 1,2 Гц, 1H), 6,91 (ддд, J=8,0, 7,0, 1,1 Гц, 1H), 6,75 (с, 2H), 6,64 (с, 1H), 6,25 (д, J=1,4 Гц, 1H), 6,06 (д, J=1,4 Гц, 1H), 5,23-5,06 (м, 3H), 4,60 (с, 1H), 4,47 (кв, J=7,1 Гц, 1H), 4,31 (дд, J=16,3, 4,1 Гц, 2H), 4,18 (д, J=6,6 Гц, 1H), 4,12 (д, J=11,6 Гц, 1H), 3,76-3,66 (м, 2H), 3,61 (д, J=5,3 Гц, 1H), 3,57-3,48 (м, 16H), 3,44 (т, J=7,2 Гц, 4H), 3,27 (т, J=5,3 Гц, 3H), 3,13 (дд, J=13,4, 6,7 Гц, 1H), 2,96 (д, J=18,0 Гц, 1H), 2,85 (дд, J=18,1, 9,3 Гц, 1H), 2,75-2,61 (м, 2H), 2,56-2,48 (м, 2H), 2,43 (т, J=6,9 Гц, 2H), 2,28 (с, 6H), 2,24 (с, 1H), 2,14 (с, 3H), 2,12-2,05 (м, 2H), 2,04 (с, 3H), 1,43 (д, J=7,2 Гц, 3H), 0,99 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,96 (д, J=6,8 Гц, 3H).1H NMR (400 MHz, CD3OD): 7.64 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.38 (d, J=8.3 Hz, 2H), 7.29 (d, J=7 .8 Hz, 1H), 7.22 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.00 (ddd, J=8.2, 7.0, 1.2 Hz, 1H), 6.91 (ddd, J=8.0, 7.0, 1.1 Hz, 1H), 6.75 (s, 2H), 6.64 (s, 1H), 6.25 (d, J=1.4 Hz, 1H), 6.06 (d, J=1.4 Hz, 1H), 5.23-5.06 (m, 3H), 4.60 (s, 1H), 4.47 (sq, J =7.1 Hz, 1H), 4.31 (dd, J=16.3, 4.1 Hz, 2H), 4.18 (d, J=6.6 Hz, 1H), 4.12 (d , J=11.6 Hz, 1H), 3.76-3.66 (m, 2H), 3.61 (d, J=5.3 Hz, 1H), 3.57-3.48 (m, 16H), 3.44 (t, J=7.2 Hz, 4H), 3.27 (t, J=5.3 Hz, 3H), 3.13 (dd, J=13.4, 6.7 Hz, 1H), 2.96 (d, J=18.0 Hz, 1H), 2.85 (dd, J=18.1, 9.3 Hz, 1H), 2.75-2.61 (m , 2H), 2.56-2.48 (m, 2H), 2.43 (t, J=6.9 Hz, 2H), 2.28 (s, 6H), 2.24 (s, 1H) , 2.14 (s, 3H), 2.12-2.05 (m, 2H), 2.04 (s, 3H), 1.43 (d, J=7.2 Hz, 3H), 0, 99 (d, J=6.8 Hz, 3H), 0.96 (d, J=6.8 Hz, 3H).

¹³C ЯМР (100 МГц, CD3OD): δ 173,1, 172,1, 171,7, 171,6, 171,5, 170,7, 169,3, 162,5, 157,5, 148,9, 146,1, 144,1, 141,4, 140,9, 138,2, 136,9, 134,0, 132,7, 131,2, 129,7, 128,4, 126,0, 121,4, 120,1, 119,8, 119,7, 118,5, 117,6, 114,3, 112,5, 110,8, 102,3, 90,5, 70,1 (x2), 70,0 (x2), 69,9, 69,8, 69,0, 66,8, 65,9, 63,1, 60,2, 59,2, 59,1, 57,9, 55,6, 55,1, 53,6, 50,8, 49,6, 45,4, 42,1, 40,3, 39,5, 39,0, 35,9, 34,3, 34,0 (x2), 29,3, 24,7, 23,2, 19,1, 18,3, 17,3, 16,5, 15,0, 8,2. ¹³ C NMR (100 MHz, CD3OD): δ 173.1, 172.1, 171.7, 171.6, 171.5, 170.7, 169.3, 162.5, 157.5, 148.9 , 146.1, 144.1, 141.4, 140.9, 138.2, 136.9, 134.0, 132.7, 131.2, 129.7, 128.4, 126.0, 121 ,4, 120.1, 119.8, 119.7, 118.5, 117.6, 114.3, 112.5, 110.8, 102.3, 90.5, 70.1 (x2), 70.0 (x2), 69.9, 69.8, 69.0, 66.8, 65.9, 63.1, 60.2, 59.2, 59.1, 57.9, 55.6 , 55.1, 53.6, 50.8, 49.6, 45.4, 42.1, 40.3, 39.5, 39.0, 35.9, 34.3, 34.0 (x2 ), 29.3, 24.7, 23.2, 19.1, 18.3, 17.3, 16.5, 15.0, 8.2.

ИЭР-МС m/z: 1483,4 (M-H₂O+H)+.ESI-MS m/z: 1483.4 (MH ₂ O+H)+.

Получение соединения DL 6Getting a DL 6 connection

- 148 046742- 148 046742

К раствору DL 1 (50 мг, 0,035 ммоль) в CH₃CN:H2O (1,39:1, 2,39 мл, 0,015 M) добавляют AgNO₃(181 мг, 1,07 ммоль). Через 18 ч при 23°C, реакционную смесь гасят водным раствором NaHCO₃:NaCl (1:1) и экстрагируют CH₂Cl₂ (x3). Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают препаративной ВЭЖХ с получением чистого DL 6 (23 мг, 47% выход).To a solution of DL 1 (50 mg, 0.035 mmol) in CH ₃ CN:H2O (1.39:1, 2.39 ml, 0.015 M) add AgNO ₃ (181 mg, 1.07 mmol). After 18 h at 23°C, the reaction mixture is quenched with an aqueous solution of NaHCO ₃ :NaCl (1:1) and extracted with CH ₂ Cl ₂ (x3). The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by preparative HPLC to give pure DL 6 (23 mg, 47% yield).

¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD): δ 7,62 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,41 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,39 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,29 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,12 (ддд, J=8,0, 7,0, 0,9 Гц, 1H), 7,01 (ддд, J=8,0, 7,0, 0,9 Гц, 1H), 6,82 (с, 1H), 6,75 (с, 2H), 6,32 (д, J=1,3 Гц, 1H), 6,12 (д, J=1,3 Гц, 1H), 5,32 (д, J=11,8 Гц, 1H), 5,24-5,12 (м, 3H), 4,81 (м, 2H), 4,65 (с, 1H), 4,47 (с, 1H), 4,31 (д, J=11,6 Гц, 1H), 4,18 (д, J=9,0 Гц, 1H), 4,12 (д, J=7,4 Гц, 1H), 3,93-3,83 (м, 2H), 3,76 (с, 3H), 3,65 (д, J=12,3 Гц, 1H), 3,44 (т, J=7,1 Гц, 2H), 3,23-2,99 (м, 2H), 2,92 (д, J=15,9 Гц, 1H), 2,62 (с, 3H), 2,45 (д, J=15,5 Гц, 1H), 2,35 (с, 3H), 2,30 (с, 3H), 2,28 (д, J=13,3 Гц, 6H), 2,07 (с, 3H), 2,13-2,00 (м, 2H), 1,90 (м, 1H), 1,80-1,70 (м, 2H), 1,65-1,50 (м, 4H), 1,34-1,22 (м, 2H), 0,96 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,95 (д, J=6,8 Гц, 3H). ¹ H NMR (400 MHz, CD ₃ OD): δ 7.62 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.41 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.39 (d , J=8.2 Hz, 1H), 7.29 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.12 (ddd, J=8.0, 7.0, 0.9 Hz, 1H) , 7.01 (ddd, J=8.0, 7.0, 0.9 Hz, 1H), 6.82 (s, 1H), 6.75 (s, 2H), 6.32 (d, J =1.3 Hz, 1H), 6.12 (d, J=1.3 Hz, 1H), 5.32 (d, J=11.8 Hz, 1H), 5.24-5.12 (m , 3H), 4.81 (m, 2H), 4.65 (s, 1H), 4.47 (s, 1H), 4.31 (d, J=11.6 Hz, 1H), 4.18 (d, J=9.0 Hz, 1H), 4.12 (d, J=7.4 Hz, 1H), 3.93-3.83 (m, 2H), 3.76 (s, 3H) , 3.65 (d, J=12.3 Hz, 1H), 3.44 (t, J=7.1 Hz, 2H), 3.23-2.99 (m, 2H), 2.92 ( d, J=15.9 Hz, 1H), 2.62 (s, 3H), 2.45 (d, J=15.5 Hz, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.30 ( s, 3H), 2.28 (d, J=13.3 Hz, 6H), 2.07 (s, 3H), 2.13-2.00 (m, 2H), 1.90 (m, 1H ), 1.80-1.70 (m, 2H), 1.65-1.50 (m, 4H), 1.34-1.22 (m, 2H), 0.96 (d, J=6 .8 Hz, 3H), 0.95 (d, J=6.8 Hz, 3H).

¹³C ЯМР (100 МГц, CD3OD): δ 175,0, 172,6, 171,1, 170,9, 169,2, 169,1, 160,9, 157,7, 149,5, 147,0, 146,0, 144,8, 141,7, 141,2, 137,3, 136,8, 133,9, 132,5, 130,5, 129,8, 129,6, 128,5, 127,9, 122,6, 120,3, 119,8, 119,2, 118,4, 117,9, 116,7, 113,1, 112,8, 111,1, 108,4, 102,7, 101,5, 89,1, 66,2, 63,1, 62,9, 61,6, 59,3, 56,9, 56,1, 55,5, 54,7, 53,6, 50,7, 45,3, 42,2, 39,0, 38,9, 37,0, 35,1, 30,1, 29,3, 27,9, 26,5, 26,3, 26,0, 25,0, 23,1, 19,1, 18,4, 17,6, 15,2, 8,3. ¹³ C NMR (100 MHz, CD3OD): δ 175.0, 172.6, 171.1, 170.9, 169.2, 169.1, 160.9, 157.7, 149.5, 147.0 , 146.0, 144.8, 141.7, 141.2, 137.3, 136.8, 133.9, 132.5, 130.5, 129.8, 129.6, 128.5, 127 ,9, 122.6, 120.3, 119.8, 119.2, 118.4, 117.9, 116.7, 113.1, 112.8, 111.1, 108.4, 102.7 , 101.5, 89.1, 66.2, 63.1, 62.9, 61.6, 59.3, 56.9, 56.1, 55.5, 54.7, 53.6, 50 ,7, 45.3, 42.2, 39.0, 38.9, 37.0, 35.1, 30.1, 29.3, 27.9, 26.5, 26.3, 26.0 , 25.0, 23.1, 19.1, 18.4, 17.6, 15.2, 8.3.

ИЭР-МС m/z: 1364,4 (M-H₂O+H)+.ESI-MS m/z: 1364.4 (MH ₂ O+H)+.

Получение соединения DL 7Receiving a DL 7 connection

- 149 046742- 149 046742

ДИПЭАDIPEA

ДМФDMF

DL7DL7

К раствору 12-R (100 мг, 0,12 ммоль) и LIN 2 (180 мг, 0,19 ммоль) в диметилформамиде (ДМФ) (2 мл, 0,06 M) добавляют Ν,Ν-диизопропилэтиламин (ДИПЭА) (90 мл, 0,51 ммоль) при 23°C. Через 18 ч реакционную смесь очищают препаративной ВЭЖХ с получением чистого DL 7 (125 мг, 62% выход).To a solution of 12-R (100 mg, 0.12 mmol) and LIN 2 (180 mg, 0.19 mmol) in dimethylformamide (DMF) (2 ml, 0.06 M) add N,N-diisopropylethylamine (DIPEA) ( 90 ml, 0.51 mmol) at 23°C. After 18 h, the reaction mixture was purified by preparative HPLC to obtain pure DL 7 (125 mg, 62% yield).

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7,65 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,41 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,39 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,29 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,13 (ддд, J=8,2, 7,0, 1,1 Гц, 1H), 7,01 (ддд, J=8,2, 7,0, 1,1 Гц, 1H), 6,82 (с, 1H), 6,76 (с, 2H), 6,32 (д, J=1,3 Гц, 1H), 6,12 (д, J=1,3 Гц, 1H), 5,32 (д, J=11,8 Гц, 1H), 5,18 (д, J=5,7 Гц, 2H), 4,82 (м, 2H), 4,64 (д, J=2,8 Гц, 1H), 4,47 (с, 1H), 4,33 (дд, J=12,0, 2,1 Гц, 1H), 4,22-4,12 (м, 2H), 3,96 (шс, 1H), 3,88 (д, J=5,0 Гц, 1H), 3,78-3,67 (м, 8H), 3,60-3,52 (м, 14H), 3,56-3,41 (м, 3H), 3,27 (т, J=5,4 Гц, 2H), 3,22-3,04 (м, 4H), 2,93 (д, J=16,0 Гц, 1H), 2,70-2,58 (м, 3H), 2,55 (т, J=6,9 Гц, 2H), 2,43 (т, J=6,9 Гц, 2H), 2,36 (с, 3H), 2,30 (с, 3H), 2,15-2,07 (м, 1H), 2,06 (с, 3H), 2,02 (с, 2H), 1,95-1,87 (м, 1H), 1,80-1,70 (м, 1H), 1,65-1,50 (м, 2H), 0,97 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,96 (д, J=6,8 Гц, 3H).1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.65 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.41 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.39 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.29 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.13 (ddd, J=8.2, 7.0, 1.1 Hz, 1H), 7, 01 (ddd, J=8.2, 7.0, 1.1 Hz, 1H), 6.82 (s, 1H), 6.76 (s, 2H), 6.32 (d, J=1, 3 Hz, 1H), 6.12 (d, J=1.3 Hz, 1H), 5.32 (d, J=11.8 Hz, 1H), 5.18 (d, J=5.7 Hz , 2H), 4.82 (m, 2H), 4.64 (d, J=2.8 Hz, 1H), 4.47 (s, 1H), 4.33 (dd, J=12.0, 2.1 Hz, 1H), 4.22-4.12 (m, 2H), 3.96 (shs, 1H), 3.88 (d, J=5.0 Hz, 1H), 3.78- 3.67 (m, 8H), 3.60-3.52 (m, 14H), 3.56-3.41 (m, 3H), 3.27 (t, J=5.4 Hz, 2H) , 3.22-3.04 (m, 4H), 2.93 (d, J=16.0 Hz, 1H), 2.70-2.58 (m, 3H), 2.55 (t, J =6.9 Hz, 2H), 2.43 (t, J=6.9 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 2.15-2.07 (m, 1H), 2.06 (s, 3H), 2.02 (s, 2H), 1.95-1.87 (m, 1H), 1.80-1.70 (m, 1H), 1.65-1.50 (m, 2H), 0.97 (d, J=6.8 Hz, 3H), 0.96 (d, J=6.8 Hz, 3H).

¹³C ЯМР (125 МГц, CD3OD): δ 173,1, 172,5, 171,6, 171,0, 170,7 (x2), 169,3, 168,5, 160,9, 160,0, 149,6, 147,1, 144,9, 141,8, 141,3, 138,2, 137,4, 134,1, 132,4, 128,6, 127,9, 125,2, 122,9, 120,2, 119,9, 119,4, 118,1 (x2), 117,1, 114,8, 113,2, 112,7, 111,3, 108,3, 102,7, 89,0, 70,2, 70,1 (x2), 70,0, 69,9, 69,8, 69,0, 66,9, 66,3, 65,5, 65,4, 61,9, 59,4, 56,9, 56,1, 55,4 (x2), 54,6, 53,7, 43,7, 42,4, 39,1, 39,0, 36,0, 34,4, 34,1, 31,4, 30,3, 28,9, 26,5, 23,1, 22,3, 19,2, 18,5, 17,5, 15,3, 13,2, 8,5. ¹³ C NMR (125 MHz, CD3OD): δ 173.1, 172.5, 171.6, 171.0, 170.7 (x2), 169.3, 168.5, 160.9, 160.0, 149.6, 147.1, 144.9, 141.8, 141.3, 138.2, 137.4, 134.1, 132.4, 128.6, 127.9, 125.2, 122, 9, 120.2, 119.9, 119.4, 118.1 (x2), 117.1, 114.8, 113.2, 112.7, 111.3, 108.3, 102.7, 89 ,0, 70.2, 70.1 (x2), 70.0, 69.9, 69.8, 69.0, 66.9, 66.3, 65.5, 65.4, 61.9, 59.4, 56.9, 56.1, 55.4 (x2), 54.6, 53.7, 43.7, 42.4, 39.1, 39.0, 36.0, 34.4 , 34.1, 31.4, 30.3, 28.9, 26.5, 23.1, 22.3, 19.2, 18.5, 17.5, 15.3, 13.2, 8 ,5.

ИЭР-МС m/z: 1570,4 (M-H₂O+H)+.ESI-MS m/z: 1570.4 (MH ₂ O+H)+.

Получение соединения DL 8Receiving a DL 8 connection

- 150 046742- 150 046742

DL 8DL 8

К раствору 11-S (30 мг, 0,037 ммоль) и LIN 1 (56 мг, 0,075 ммоль) в диметилформамиде (ДМФ) (2 мл, 0,018 M) добавляют N.N-диизопропилэтиламин (ДИПЭА) (26 мл, 0,15 ммоль) и 1гидроксибензотриазол (HOBt, 10 мг, 0,075 ммоль) при 23°C. Через 18 ч реакционную смесь очищают препаративной ВЭЖХ с получением чистого DL 8 (30 мг, 58% выход).To a solution of 11-S (30 mg, 0.037 mmol) and LIN 1 (56 mg, 0.075 mmol) in dimethylformamide (DMF) (2 ml, 0.018 M) add N.N-diisopropylethylamine (DIPEA) (26 ml, 0.15 mmol) and 1hydroxybenzotriazole (HOBt, 10 mg, 0.075 mmol) at 23°C. After 18 h, the reaction mixture was purified by preparative HPLC to obtain pure DL 8 (30 mg, 58% yield).

1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7,59 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,36 (д, J=8,2 Гц, 2H), 7,28 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,23 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,00 (т, J=7,6 Гц, 1H), 6,91 (т, J=7,5 Гц, 1H), 6,74 (с, 2H), 6,50 (с, 1H), 6,27 (с, 1H), 6,09 (с, 1H), 5,20-5,03 (м, 2H), 4,65 (шс, 1H), 4,54-4,46 (м, 1H), 4,43-4,37 (м, 1H), 4,34-4,30 (м, 1H), 4,174,12 (м, 1H), 3,75 (с, 3H), 3,45 (т, J=7,0 Гц, 4H), 3,32-3,23 (м, 2H), 3,38 (д, J=7,6 Гц, 2H), 3,23-2,99 (м, 2H), 3,21-2,97 (м, 3H), 2,94-2,83 (м, 3H), 2,61-2,53 (м, 2H), 2,48-2,34 (м, 2H), 2,28 (с,-3Н), 2,27-2,22 (м, 1H), 2,21 (с,-3Н), 2,11 (с,-3Н), 2,08-2,02 (м, 1Н), 1,99 (с,-3Н), 1,91-1,82 (м, 1Н), 1,77-1,68 (м, 1Н), 1,65-1,50 (м, 6Н), 1,31-1,24 (м, 2Н), 0,94 (д, 1=6,8Гц, 3Н), 0,93 (д, >6,8Гц 3Н).1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.59 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.36 (d, J=8.2 Hz, 2H), 7.28 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.23 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.00 (t, J=7.6 Hz, 1H), 6.91 (t, J=7, 5 Hz, 1H), 6.74 (s, 2H), 6.50 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 6.09 (s, 1H), 5.20-5.03 ( m, 2H), 4.65 (shs, 1H), 4.54-4.46 (m, 1H), 4.43-4.37 (m, 1H), 4.34-4.30 (m, 1H), 4.174.12 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.45 (t, J=7.0 Hz, 4H), 3.32-3.23 (m, 2H), 3.38 (d, J=7.6 Hz, 2H), 3.23-2.99 (m, 2H), 3.21-2.97 (m, 3H), 2.94-2.83 ( m, 3H), 2.61-2.53 (m, 2H), 2.48-2.34 (m, 2H), 2.28 (s, -3H), 2.27-2.22 (m , 1H), 2.21 (s, -3H), 2.11 (s, -3H), 2.08-2.02 (m, 1H), 1.99 (s, -3H), 1.91 -1.82 (m, 1H), 1.77-1.68 (m, 1H), 1.65-1.50 (m, 6H), 1.31-1.24 (m, 2H), 0 .94 (d, 1=6.8Hz, 3H), 0.93 (d, >6.8Hz 3H).

¹³C ЯМР (100 МГц, CD3OD): δ 174,9, 174,8, 172,5, 172,0, 171,2, 170,8, 169,4, 160,8, 157,5, 148,6, 146,0, 143,6, 140,9, 140,8, 138,0, 136,6, 136,5, 134,0, 132,7, 130,2, 129,9, 129,7, 128,7, 128,4, 126,3, 121,6, 120,5, 120,0, 119,8, 119,3, 118,7, 118,0, 117,7, 113,5, 112,9, 111,0, 107,8, 102,4, 65,9, 63,5, 61,4, 60,6, 59,7, 59,3, 59,2, 59,1, 58,8, 54,6, 54,6, 53,4, 44,8, 42,3, 40,6, 38,3, 37,1, 35,3 (x2), 30,3, 29,1, 28,0, 26,3, 26,0, 25,1, 24,0, 23,7, 19,5, 18,6, 17,7, 15,2, 8,6. ¹³ C NMR (100 MHz, CD3OD): δ 174.9, 174.8, 172.5, 172.0, 171.2, 170.8, 169.4, 160.8, 157.5, 148.6 , 146.0, 143.6, 140.9, 140.8, 138.0, 136.6, 136.5, 134.0, 132.7, 130.2, 129.9, 129.7, 128 .7, 128.4, 126.3, 121.6, 120.5, 120.0, 119.8, 119.3, 118.7, 118.0, 117.7, 113.5, 112.9 , 111.0, 107.8, 102.4, 65.9, 63.5, 61.4, 60.6, 59.7, 59.3, 59.2, 59.1, 58.8, 54 ,6, 54.6, 53.4, 44.8, 42.3, 40.6, 38.3, 37.1, 35.3 (x2), 30.3, 29.1, 28.0, 26.3, 26.0, 25.1, 24.0, 23.7, 19.5, 18.6, 17.7, 15.2, 8.6.

ИЭР-МС m/z: 1391,4 (М+Н)+.ESI-MS m/z: 1391.4 (M+H)+.

Получение соединения DL 9Receiving a DL 9 connection

- 151 046742- 151 046742

DL9DL9

К раствору 11-S (110 мг, 0,13 ммоль) и LIN-3 (119 мг, 0,13 ммоль) в диметилформамиде (ДМФ) (4 мл, 0,032 M) добавляют N.N-диизопропилэтиламин (ДИПЭА) (97 мл, 0,55 ммоль) и 1гидроксибензотриазол (HOBt, 38 мг, 0,27 ммоль) при 23°C. Через 18 ч реакционную смесь очищают препаративной ВЭЖХ с получением чистого DL 9 (120 мг, 57% выход).N.N-Diisopropylethylamine (DIPEA) (97 mL, 0.55 mmol) and 1hydroxybenzotriazole (HOBt, 38 mg, 0.27 mmol) at 23°C. After 18 h, the reaction mixture was purified by preparative HPLC to obtain pure DL 9 (120 mg, 57% yield).

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7,62 (д, J=8,6 Гц, 2H), 7,36 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,28 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,23 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,00 (ддд, J=8,2, 7,0, 1,2 Гц, 1H), 6,91 (тд, J=7,5, 7,0, 1,1 Гц, 1H), 6,75 (с, 2H), 6,50 (с, 1H), 6,26 (д, J=1,3 Гц, 1H), 6,08 (д, J=1,4 Гц, 1H), 5,19 (д, J=11,4 Гц, 1H), 5,09 (д, J=10,4 Гц, 2H), 4,65 (с, 1H), 4,48 (п, J=6,9 Гц, 1H), 4,42-4,38 (м, 2H), 4,34-4,30 (м, 2H), 4,22-4,14 (м, 1H), 3,78-3,64 (м, 5H), 3,613,50 (м, 8H), 3,45 (т, J=5,4 Гц, 2H), 3,38 (д, J=5,1 Гц, 1H), 3,33-3,23 (м, 3H), 3,02 (дд, J=13,5, 5,5 Гц, 1H), 2,89 (д, J=9,4 Гц, 2H), 2,62-2,33 (м, 7H), 2,27 (с, 3H), 2,22 (с, 3H), 2,12 (с, 3H), 2,15-2,05 (м, 1H), 1,99 (м, 3H), 1,42 (д, J=7,1 Гц, 3H), 0,97 (дд, J=6,8 Гц, 3H), 0,95 (дд, J=6,8 Гц, 3H).1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.62 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.36 (d, J=8.5 Hz, 2H), 7.28 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.23 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.00 (ddd, J=8.2, 7.0, 1.2 Hz, 1H), 6, 91 (td, J=7.5, 7.0, 1.1 Hz, 1H), 6.75 (s, 2H), 6.50 (s, 1H), 6.26 (d, J=1, 3 Hz, 1H), 6.08 (d, J=1.4 Hz, 1H), 5.19 (d, J=11.4 Hz, 1H), 5.09 (d, J=10.4 Hz , 2H), 4.65 (s, 1H), 4.48 (p, J=6.9 Hz, 1H), 4.42-4.38 (m, 2H), 4.34-4.30 ( m, 2H), 4.22-4.14 (m, 1H), 3.78-3.64 (m, 5H), 3.613.50 (m, 8H), 3.45 (t, J=5, 4 Hz, 2H), 3.38 (d, J=5.1 Hz, 1H), 3.33-3.23 (m, 3H), 3.02 (dd, J=13.5, 5.5 Hz, 1H), 2.89 (d, J=9.4 Hz, 2H), 2.62-2.33 (m, 7H), 2.27 (s, 3H), 2.22 (s, 3H ), 2.12 (s, 3H), 2.15-2.05 (m, 1H), 1.99 (m, 3H), 1.42 (d, J=7.1 Hz, 3H), 0 .97 (dd, J=6.8 Hz, 3H), 0.95 (dd, J=6.8 Hz, 3H).

¹³C ЯМР (100 МГц, CD₃OD): δ 173,1 (x2), 172,1, 171,9, 171,6, 171,5, 171,5, 170,7, 169,3, 148,6, 146,0, 143,6, 140,9, 140,8, 138,1, 136,5, 134,1, 132,8, 130,3, 129,8, 128,4, 126,3, 121,6, 120,5, 120,0, 119,7, 119,3, 118,7, 118,0, 117,7, 113,5, 112,9, 111,0, 107,8, 102,4, 70,2, 70,1 (x2), 70,0 (x2), 69,8, 69,1, 66,9, 65,9, 63,5, 61,4, 60,6, 59,7, 59,3, 59,2, 59,1, 58,8, 54,7, 54,6, 49,6, 42,3, 40,5, 39,1, 39,0, 36,0, 34,4 (x2), 34,1, 30,4, 24,0, 23,7, 19,4, 18,5, 17,4, 16,8, 15,1, 8,5. ¹³ C NMR (100 MHz, CD ₃ OD): δ 173.1 (x2), 172.1, 171.9, 171.6, 171.5, 171.5, 170.7, 169.3, 148, 6, 146.0, 143.6, 140.9, 140.8, 138.1, 136.5, 134.1, 132.8, 130.3, 129.8, 128.4, 126.3, 121.6, 120.5, 120.0, 119.7, 119.3, 118.7, 118.0, 117.7, 113.5, 112.9, 111.0, 107.8, 102, 4, 70.2, 70.1 (x2), 70.0 (x2), 69.8, 69.1, 66.9, 65.9, 63.5, 61.4, 60.6, 59, 7, 59.3, 59.2, 59.1, 58.8, 54.7, 54.6, 49.6, 42.3, 40.5, 39.1, 39.0, 36.0, 34.4 (x2), 34.1, 30.4, 24.0, 23.7, 19.4, 18.5, 17.4, 16.8, 15.1, 8.5.

ИЭР-МС m/z: 1511,4 (M+H)+.ESI-MS m/z: 1511.4 (M+H)+.

Получение соединения DL 10Receiving a DL 10 connection

- 152 046742- 152 046742

12-S LIN 112-S LIN 1

ДИПЭА NMPDIPEA NMP

DL10DL10

К раствору 12-S (30 мг, 0,058 ммоль) и LIN 1 (98 мг, 0,13 ммоль) в Н-метил-З-пирролидоне (NMP) (4 мл, 0,014 M) добавляют Ν,Ν-диизопропилэтиламин (ДИПЭА) (83 мл, 0,13 ммоль) при 23°C. Через 18 ч реакционную смесь разбавляют EtOAc (25 мл) и промывают H₂O (4^χ25 мл) и водным насыщенным раствором NaCl. Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Остаток очищают флэш-хроматографией на силикагеле (CH₂Cl₂:CH₃OH, от 99:1 до 90:10) и полученное соединение очищают препаративной ВЭЖХ с получением чистого DL 10 (11 мг, 21% выход).To a solution of 12-S (30 mg, 0.058 mmol) and LIN 1 (98 mg, 0.13 mmol) in N-methyl-3-pyrrolidone (NMP) (4 ml, 0.014 M) add N,N-diisopropylethylamine (DIPEA ) (83 ml, 0.13 mmol) at 23°C. After 18 h, the reaction mixture is diluted with EtOAc (25 ml) and washed with H ₂ O (4 ^x 25 ml) and aqueous saturated NaCl solution. The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The residue was purified by silica gel flash chromatography (CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 99:1 to 90:10) and the resulting compound was purified by preparative HPLC to give pure DL 10 (11 mg, 21% yield).

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7,61 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,39 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,35 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,29 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,08 (ддд, J=8,0, 7,0, 0,9 Гц, 1H), 6,98 (ддд, J=8,0, 7,0, 0,9 Гц, 1H), 6,76 (с, 2H), 6,66 (с, 1H), 6,29 (д, J=1,3 Гц, 1H), 6,14 (д, J=1,3 Гц, 1H), 5,13 (кв, J=12,3 Гц, 2H), 4,93 -,4,81 (м, 3H), 4,69 (с, 1H), 4,48 (с, 1H), 4,23 (д, J=10,0 Гц, 1H), 4,13 (дд, J=7,5, 4,0 Гц, 1H), 3,90 (д, J=5,0, 1H), 3,76 (с, 3H), 3,493,41 (м, 2H), 3,40-3,27 (м, 1H), 3,28-3,24 (м, 4H), 3,22-3,05 (м, 4H), 2,80-2,65 (м, 3H), 2,63 (с, 3H), 2,29 (с, 3H), 2,28 (с, 3H), 2,13-2,00 (м, 2H), 2,03 (с, 3H), 1,93-1,83(м, 1H), 1,79-1,69 (м, 2H), 1,65-1,51 (м, 6H), 1,341,22 (м, 2H), 0,96 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,95 (д, J=6,8 Гц, 3H).1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.61 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.39 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.35 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.29 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.08 (ddd, J=8.0, 7.0, 0.9 Hz, 1H), 6, 98 (ddd, J=8.0, 7.0, 0.9 Hz, 1H), 6.76 (s, 2H), 6.66 (s, 1H), 6.29 (d, J=1, 3 Hz, 1H), 6.14 (d, J=1.3 Hz, 1H), 5.13 (kv, J=12.3 Hz, 2H), 4.93 -.4.81 (m, 3H ), 4.69 (s, 1H), 4.48 (s, 1H), 4.23 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.13 (dd, J=7.5, 4, 0 Hz, 1H), 3.90 (d, J=5.0, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.493.41 (m, 2H), 3.40-3.27 (m, 1H ), 3.28-3.24 (m, 4H), 3.22-3.05 (m, 4H), 2.80-2.65 (m, 3H), 2.63 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.13-2.00 (m, 2H), 2.03 (s, 3H), 1.93-1.83 (m, 1H), 1.79-1.69 (m, 2H), 1.65-1.51 (m, 6H), 1.341.22 (m, 2H), 0.96 (d, J=6.8 Hz , 3H), 0.95 (d, J=6.8 Hz, 3H).

¹³C ЯМР (100 МГц, CD₃OD): δ 174,9, 172,7, 172,6, 171,1, 170,8 (x2), 169,1, 160,9, 149,4, 146,6, 144,7, 142,3, 141,5, 141,0, 138,1, 136,8, 133,9, 133,5, 132,6, 128,5, 127,5, 125,9, 122,2, 120,9, 119,8, 117,8, 113,2, 113,0, 111,2, 107,3, 102,6, 89,2, 66,2, 61,7, 61,3, 60,2, 59,4, 59,3, 57,4, 56,9, 55,8, 55,7, 55,2, 54,8, 53,5, 42,0, 39,1, 37,1, 35,2, 31,7, 30,2, 29,4, 29,1, 29,0 (x2), 27,9, 26,4, 26,0, 25,0, 23,3, 22,4, 19,2, 18,5, 17,7, 15,2, 13,2, 8,5. ¹³ C NMR (100 MHz, CD ₃ OD): δ 174.9, 172.7, 172.6, 171.1, 170.8 (x2), 169.1, 160.9, 149.4, 146, 6, 144.7, 142.3, 141.5, 141.0, 138.1, 136.8, 133.9, 133.5, 132.6, 128.5, 127.5, 125.9, 122.2, 120.9, 119.8, 117.8, 113.2, 113.0, 111.2, 107.3, 102.6, 89.2, 66.2, 61.7, 61, 3, 60.2, 59.4, 59.3, 57.4, 56.9, 55.8, 55.7, 55.2, 54.8, 53.5, 42.0, 39.1, 37.1, 35.2, 31.7, 30.2, 29.4, 29.1, 29.0 (x2), 27.9, 26.4, 26.0, 25.0, 23.3 , 22.4, 19.2, 18.5, 17.7, 15.2, 13.2, 8.5.

ИЭР-МС m/z: 1364,4 (M-H₂O+H)+.ESI-MS m/z: 1364.4 (MH ₂ O+H)+.

Получение соединения DL 11Receiving a DL 11 connection

- 153 046742- 153 046742

DL 9DL 9

AgNO₃ _AgNO3

CH₃CN:H₂O _CH3CN : _H2O

DL 11DL 11

К раствору DL 9 (90 мг, 0,059 ммоль) в CH₃CN:H2O (1,39:1, 4 мл, 0,015 M) добавляют AgNO₃ (298 мг, 1,78 ммоль). Через 21 ч при 23°C, реакционную смесь гасят водным раствором NaHCO₃:NaCl (1:1) и экстрагируют CH₂Cl₂ (x3). Объединенные органические слои сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют под вакуумом. Полученный остаток очищают в автоматической системе для флэшхроматографии (SiO₂, CH₂Cl₂:CH₃OH, от 95:5 до 50:50) с получением чистого DL 11 (65 мг, 73% выход).To a solution of DL 9 (90 mg, 0.059 mmol) in CH ₃ CN:H2O (1.39:1, 4 ml, 0.015 M) add AgNO ₃ (298 mg, 1.78 mmol). After 21 h at 23°C, the reaction mixture is quenched with an aqueous solution of NaHCO ₃ :NaCl (1:1) and extracted with CH ₂ Cl ₂ (x3). The combined organic layers are dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting residue was purified by an automated flash chromatography system (SiO ₂ , CH ₂ Cl ₂ :CH ₃ OH, 95:5 to 50:50) to obtain pure DL 11 (65 mg, 73% yield).

¹H ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7,62 (д, J=8,6 Гц, 1H), 7,37 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,28 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,23 (д, J=8,2 Гц, 1H),6,99 (ддд, J=8,2, 7,0, 1,2 Гц, 1H), 6,90 (ддд, J=8,0, 7,0, 1,1 Гц, 1H), 6,76 (с, 2H), 6,52 (с, 1H), 6,25 (д, J=1,3 Гц, 1H), 6,06 (д, J=1,3 Гц, 1H), 5,28 (д, J=11,4 Гц, 1H), 5,09 (д, J=10,4 Гц, 1H), 4,59 (с, 1H), 4,47 (кв, J=7,1 Гц, 1H), 4,33 (дд, J=11,5, 1,9 Гц, 1H), 4,33-4,25 (м, 2H), 4,19 (д, J=6,6 Гц, 1H), 3,75 (с, 3H), 3,75-3,67 (м, 3H), 3,61 (д, J=5,3 Гц, 1H), 3,58-3,51 (м, 12H), 3,45 (дд, J=10,6, 5,2 Гц, 2H), 3,34 (с, 3H), 3,27 (т, J=5,5 Гц, 3H), 3,04 (дд, J=13,4, 6,7 Гц, 1H), 2,88-2,82 (м, 3H), 2,64-2,35 (м, 7H), 2,27 (с, 3H), 2,23 (с, 3H), 2,17-2,04 (м, 1H), 2,09 (с, 3H), 2,01 (д, J=7,2 Гц, 1H), 1,98 (с, 3H), 1,42 (д, J=7,2 Гц, 3H), 0,98 (дд, J=6,8 Гц, 3H), 0,95 (дд, J=6,8 Гц, 3H). ^1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.62 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.37 (d, J=8.5 Hz, 2H), 7.28 (d, J =7.8 Hz, 1H), 7.23 (d, J=8.2 Hz, 1H), 6.99 (ddd, J=8.2, 7.0, 1.2 Hz, 1H), 6 .90 (ddd, J=8.0, 7.0, 1.1 Hz, 1H), 6.76 (s, 2H), 6.52 (s, 1H), 6.25 (d, J=1 .3 Hz, 1H), 6.06 (d, J=1.3 Hz, 1H), 5.28 (d, J=11.4 Hz, 1H), 5.09 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.47 (kv, J=7.1 Hz, 1H), 4.33 (dd, J=11.5, 1.9 Hz, 1H), 4.33-4.25 (m, 2H), 4.19 (d, J=6.6 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.75-3.67 (m, 3H) , 3.61 (d, J=5.3 Hz, 1H), 3.58-3.51 (m, 12H), 3.45 (dd, J=10.6, 5.2 Hz, 2H), 3.34 (s, 3H), 3.27 (t, J=5.5 Hz, 3H), 3.04 (dd, J=13.4, 6.7 Hz, 1H), 2.88-2 .82 (m, 3H), 2.64-2.35 (m, 7H), 2.27 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 2.17-2.04 (m, 1H ), 2.09 (s, 3H), 2.01 (d, J=7.2 Hz, 1H), 1.98 (s, 3H), 1.42 (d, J=7.2 Hz, 3H ), 0.98 (dd, J=6.8 Hz, 3H), 0.95 (dd, J=6.8 Hz, 3H).

¹³C ЯМР (100 МГц, CD3OD): δ 173,1, 172,1, 172,0, 171,6, 171,5, 170,7, 169,4, 157,6, 148,6, 145,8, 143,7, 141,1, 140,8, 138,1, 136,5, 134,1, 132,8, 130,4, 130,0, 129,8, 128,4, 126,4, 126,2, 121,5, 120,9, 120,1, 119,8, 118,6, 117,7, 114,9, 112,4, 111,0, 107,7, 102,1, 91,0, 70,2, 70,1 (x2), 70,0 (x2), 69,8, 69,1, 66,9, 65,9, 63,5, 60,5, 59,3, 59,1, 58,2, 55,2, 54,7, 52,9, 49,6, 44,9, 42,6, 40,0, 39,0, 38,3, 36,0, 34,4, 34,1, 30,4, 29,4, 24,0, 23,3, 19,4, 18,5, 17,4, 16,8, 15,1, 8,4. ¹³ C NMR (100 MHz, CD3OD): δ 173.1, 172.1, 172.0, 171.6, 171.5, 170.7, 169.4, 157.6, 148.6, 145.8 , 143.7, 141.1, 140.8, 138.1, 136.5, 134.1, 132.8, 130.4, 130.0, 129.8, 128.4, 126.4, 126 ,2, 121.5, 120.9, 120.1, 119.8, 118.6, 117.7, 114.9, 112.4, 111.0, 107.7, 102.1, 91.0 , 70.2, 70.1 (x2), 70.0 (x2), 69.8, 69.1, 66.9, 65.9, 63.5, 60.5, 59.3, 59.1 , 58.2, 55.2, 54.7, 52.9, 49.6, 44.9, 42.6, 40.0, 39.0, 38.3, 36.0, 34.4, 34 ,1, 30.4, 29.4, 24.0, 23.3, 19.4, 18.5, 17.4, 16.8, 15.1, 8.4.

ИЭР-МС m/z: 1483,4 (M-H₂O+H)+.ESI-MS m/z: 1483.4 (MH ₂ O+H)+.

Пример 2. Получение конъюгатов антитело-лекарственное средство (ADC).Example 2: Preparation of Antibody-Drug Conjugates (ADCs).

В этом примере описан синтез конъюгатов антитело-лекарственное средство по настоящему изобретению. Следует отметить, что эти синтезы являются типовыми, и что описанные процессы могут применяться ко всем соединениям и антителам, описанным в настоящем документе.This example describes the synthesis of the antibody-drug conjugates of the present invention. It should be noted that these syntheses are exemplary and that the processes described can be applied to all compounds and antibodies described herein.

Пример 2a. Получение анти-CD13 моноклонального антитела.Example 2a. Preparation of anti-CD13 monoclonal antibody.

Ahtu-CD13 моноклональные антитела получают хорошо известными методами, широко применяемыми в данной области техники. Коротко, мышей BALB/c иммунизируют эндотелиальными клетками человека, выделенными из пуповины. Для этого 1,5E7 клеток вводят инъекцией мышам внутрибрюшинно в дни -45 и -30 и внутривенно в день -3. В день 0 селезенку этих животных вынимают, и клетки селезенки сливают с SP2 клетками миеломы мыши в отношении 4:1 согласно стандартной методике получения гибридомы, и распределяют по 96-луночному планшету для культивирования ткани (Costar Corp., Cambridge, MA). Через 2 недели супернатанты культуры гибридомы собирают, и их реакционную способность в отношении клеточной линии, использованной на стадии иммунизации, тестируют проточной цитометрией. Положительные супернатанты анализируют иммунофлуоресцентным окрашиванием соответствующих клеток, применяемых в качестве антигенов. Гибридомы, демонстрирующие специфическое окрашивание, шаблон иммунопреципитации и распределение клеток выбирают и клонируют и субклонируют предельным разведением.Ahtu-CD13 monoclonal antibodies are produced by well known methods widely used in the art. Briefly, BALB/c mice are immunized with human endothelial cells isolated from the umbilical cord. To do this, 1.5E7 cells are injected into mice intraperitoneally on days -45 and -30 and intravenously on day -3. On day 0, the spleens of these animals were removed and the spleen cells were fused with SP2 mouse myeloma cells in a 4:1 ratio according to standard hybridoma preparation procedures and distributed into a 96-well tissue culture plate (Costar Corp., Cambridge, MA). After 2 weeks, hybridoma culture supernatants were collected and their reactivity against the cell line used in the immunization step was tested by flow cytometry. Positive supernatants are analyzed by immunofluorescent staining of the corresponding cells used as antigens. Hybridomas exhibiting specific staining, immunoprecipitation pattern, and cell distribution are selected and cloned and subcloned by limiting dilution.

- 154 046742- 154 046742

Как только клоны выбраны, клетки культивируют в среде RPMI-1640 с добавлением 10% об./об. фетальной телячьей сыворотки, 2 мМ глутамина, 100 Ед/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина при 37°C в течение 3-4 дней до тех пор, пока среда не станет бледно-желтой. На этой стадии две трети объема среды удаляют, центрифугируют при 1000xg в течение 10 мин для осаждения клеток, и супернатант либо центрифугируют снова для дальнейшей очистки при 3000xg в течение 10 мин, либо фильтруют через мембраны с размером пор 22 мкм. Очищенный супернатант подвергают преципитации с 55% насыщением сульфатом аммония, и полученный пеллет ресуспендируют в 100 мМ Трис-HCl pH 7,8 (1 мл на 100 мл исходного очищенного супернатанта) и диализируют при 4°C в течение 16-24 ч против 5 л 100 мМ Трис-HCl pH 7,8 с 150 мМ NaCl, меняя диализирующий раствор, по меньшей мере, три раза. Диализированный продукт наконец загружают в колонку Protein A-Sepharose, и соответствующее моноклональное антитело элюируют с 100 мМ цитрата натрия при pH 3,0 или, альтернативно, с 1M глицином при pH 3,0. Фракции, содержащие антитело, нейтрализуют с 2M ТрисHCl pH 9,0 и затем диализируют против ФРФБ и хранят при -80°C до применения.Once clones are selected, cells are cultured in RPMI-1640 medium supplemented with 10% v/v. fetal bovine serum, 2 mM glutamine, 100 U/ml penicillin and 100 µg/ml streptomycin at 37°C for 3-4 days until the medium turns pale yellow. At this stage, two-thirds of the medium volume is removed, centrifuged at 1000xg for 10 min to pellet cells, and the supernatant is either centrifuged again for further purification at 3000xg for 10 min or filtered through 22-μm pore size membranes. The clarified supernatant is precipitated with 55% saturation with ammonium sulfate and the resulting pellet is resuspended in 100 mM Tris-HCl pH 7.8 (1 ml per 100 ml of original clarified supernatant) and dialyzed at 4°C for 16-24 h against 5 l 100 mM Tris-HCl pH 7.8 with 150 mM NaCl, changing the dialysate at least three times. The dialyzed product is finally loaded onto a Protein A-Sepharose column and the corresponding monoclonal antibody is eluted with 100 mM sodium citrate at pH 3.0 or alternatively with 1 M glycine at pH 3.0. Fractions containing antibody were neutralized with 2M TrisHCl pH 9.0 and then dialyzed against PBS and stored at -80°C until use.

Получение конъюгата антитело-лекарственное средство ADC1 с трастузумабом и DL 1.Preparation of the antibody-drug conjugate ADC1 with trastuzumab and DL 1.

(a) Частичное восстановление трастузумаба с получением частично восстановленного трастузумаба.(a) Partial reconstitution of trastuzumab to produce partially reconstituted trastuzumab.

Трастузумаб (трастузумаб, купленный у Roche, белый лиофилизированный порошок для получения концентрированного раствора для инфузий) растворяют в 5 мл фосфатного буфера (50 мМ, pH 8,0) и очищают обессоливанием с применением колонок Sephadex G25 PD-10 в фосфатном буфере (50 мМ, pH 8,0). Концентрацию трастузумаба (13,9 мг/мл) определяют через измерение абсорбции при 280 нм.Trastuzumab (trastuzumab, purchased from Roche, white lyophilized powder to prepare a concentrated solution for infusion) is dissolved in 5 ml phosphate buffer (50 mM, pH 8.0) and purified by desalting using Sephadex G25 PD-10 columns in phosphate buffer (50 mM , pH 8.0). The concentration of trastuzumab (13.9 mg/ml) was determined by measuring absorbance at 280 nm.

Раствор трастузумаба (0,33 мл, 4,6 мг, 30,6 нмоль) разводят до концентрации 10 мг/мл фосфатным буфером (50 мМ, pH 8). Частичное восстановление дисульфидных связей в антителе проводят добавлением 5,0 мМ раствора гидрохлорида трис[2-карбоксиэтил]фосфина (ТКЭФ) (17,5 мл, 87,6 нмоль, 3 экв.). Реакцию восстановления перемешивают в течение 90 мин при 20°C. Сразу после восстановления, проводят анализ Эллмана с получением отношения свободного тиола к антителу (FTAR) 4,0.Trastuzumab solution (0.33 ml, 4.6 mg, 30.6 nmol) is diluted to a concentration of 10 mg/ml with phosphate buffer (50 mM, pH 8). Partial reduction of disulfide bonds in the antibody is carried out by adding a 5.0 mM solution of tris[2-carboxyethyl]phosphine hydrochloride (TCEP) (17.5 ml, 87.6 nmol, 3 eq.). The reduction reaction is stirred for 90 minutes at 20°C. Immediately after reconstitution, an Ellman assay was performed to obtain a free thiol to antibody ratio (FTAR) of 4.0.

(b) Получение ADC 1.(b) Receipt of ADC 1.

К раствору частично восстановленного трастузумаба (140 мл, 1,4 мг, 9 нмоль), добавляют N,Nдиметилацетамид (ДМА) (28,2 мл) затем добавляют свежеприготовленный раствор DL 1 (10 мМ в ДМА, 6,8 мл, 67,5 нмоль, 7,5 экв.). При добавлении DL 1, раствор становится мутным. Реакцию конъюгирования перемешивают в течение 30 мин при 20°C, и мутность исчезает во время реакции конъюгирования. Избыток лекарственного средства гасят добавлением N-ацетилцистеина (NAC) (10 мМ, 6,8 мл, 67,5 нмоль), с последующим перемешиванием раствора в течение 20 мин. Погашенную реакцию конъюгирования очищают обессоливанием с применением колонок Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере. Конечный целевой продукт ADC 1 концентрируют до конечной концентрации 6,05 мг/мл по данным УФ, и получают 232 мл (1,4 мг, 9,3 нмоль, 103%) раствора ADC. ГИХ ВЭЖХ проводят для определения доли реакции конъюгирования (89%).To a solution of partially reduced trastuzumab (140 ml, 1.4 mg, 9 nmol), add N,Ndimethylacetamide (DMA) (28.2 ml) then add a freshly prepared solution of DL 1 (10 mM in DMA, 6.8 ml, 67. 5 nmol, 7.5 eq.). When DL 1 is added, the solution becomes cloudy. The conjugation reaction is stirred for 30 min at 20°C, and the turbidity disappears during the conjugation reaction. Excess drug is quenched by adding N-acetylcysteine (NAC) (10 mM, 6.8 ml, 67.5 nmol), followed by stirring the solution for 20 min. The quenched conjugation reaction is purified by desalting using Sephadex G25 NAP-5 columns in PBS buffer. The final target product ADC 1 was concentrated to a final concentration of 6.05 mg/mL by UV to yield 232 mL (1.4 mg, 9.3 nmol, 103%) of ADC solution. GIC HPLC was carried out to determine the proportion of conjugation reaction (89%).

Получение конъюгата антитело-лекарственное средство ADC 2 с трастузумабом и DL 2.Preparation of antibody-drug conjugate ADC 2 with trastuzumab and DL 2.

Раствор Трастузумаба (0,33 мл, 4,6 мг, 30,6 нмоль) разводят до концентрации 10 мг/мл фосфатным буфером (50 мМ, pH 8). Частичное восстановление дисульфидных связей в антителе проводят добавлением 5,0 мМ раствора гидрохлорида трис[2-карбоксиэтил]фосфин (ТКЭФ) (17,5 мл, 87,6 нмоль, 3 экв.) Реакцию восстановления перемешивают в течение 90 мин при 20°C. Сразу после восстановления, проводят анализ Эллмана с получением отношения свободного тиола к антителу (FTAR) 3,9.Trastuzumab solution (0.33 ml, 4.6 mg, 30.6 nmol) is diluted to a concentration of 10 mg/ml with phosphate buffer (50 mM, pH 8). Partial reduction of disulfide bonds in the antibody is carried out by adding a 5.0 mM solution of tris[2-carboxyethyl]phosphine hydrochloride (TCEP) (17.5 ml, 87.6 nmol, 3 eq.) The reduction reaction is stirred for 90 min at 20°C . Immediately after reconstitution, an Ellman assay was performed to obtain a free thiol to antibody ratio (FTAR) of 3.9.

(b) Получение ADC 2.(b) Receipt of ADC 2.

К раствору частично восстановленного трастузумаба (140 мл, 1,4 мг, 9 нмоль), добавляют N,Nдиметилацетамид (ДМА) (28,2 мл) затем добавляют свежеприготовленный раствор DL 2 (10 мМ в ДМА, 6,8 мл, 67,5 нмоль, 7,5 экв.). При добавлении DL 2 раствор перемешивают в течение 30 мин при 20°C. Избыток лекарственного средства гасят добавлением N-ацетилцистеина (NAC) (10 мМ, 6,8 мл, 67,5 нмоль) с последующим перемешиванием раствора в течение 20 мин. Погашенную реакцию конъюгирования очищают обессоливанием с применением колонок Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере. Конечный целевой продукт ADC 2 концентрируют до конечной концентрации 5,19 мг/мл по данным УФ и получают 270 мл (1,4 мг, 9,3 нмоль, 103%) раствора ADC. ГИХ ВЭЖХ проводят для определения доли реакции конъюгирования (65%).To a solution of partially reduced trastuzumab (140 ml, 1.4 mg, 9 nmol), add N,Ndimethylacetamide (DMA) (28.2 ml) then add a freshly prepared solution of DL 2 (10 mM in DMA, 6.8 ml, 67. 5 nmol, 7.5 eq.). When adding DL 2, the solution is stirred for 30 minutes at 20°C. Excess drug is quenched by adding N-acetylcysteine (NAC) (10 mM, 6.8 ml, 67.5 nmol) followed by stirring the solution for 20 min. The quenched conjugation reaction is purified by desalting using Sephadex G25 NAP-5 columns in PBS buffer. The final target product ADC 2 was concentrated to a final concentration of 5.19 mg/mL by UV to yield 270 mL (1.4 mg, 9.3 nmol, 103%) of ADC solution. GC HPLC is carried out to determine the proportion of conjugation reaction (65%).

Получение конъюгата антитело-лекарственное средство ADC 3 с трастузумабом и соединением DL 3.Preparation of the antibody-drug conjugate ADC 3 with trastuzumab and compound DL 3.

Раствор трастузумаба (0,33 мл, 4,6 мг, 30,6 нмоль) разводят до концентрации 10 мг/мл фосфатным буфером (50 мМ, pH 8). Частичное восстановление дисульфидных связей в антителе проводят добавлением 5,0 мМ раствора гидрохлорида трис[2-карбоксиэтил]фосфина (ТКЭФ) (17,5 мл, 87,6 нмоль, 3 экв.) Реакцию восстановления перемешивают в течение 90 мин при 20°C. Сразу после восстановления, проводят анализ Эллмана с получением отношения свободного тиола к антителу (FTAR) 3,9.Trastuzumab solution (0.33 ml, 4.6 mg, 30.6 nmol) is diluted to a concentration of 10 mg/ml with phosphate buffer (50 mM, pH 8). Partial reduction of disulfide bonds in the antibody is carried out by adding a 5.0 mM solution of tris[2-carboxyethyl]phosphine hydrochloride (TCEP) (17.5 ml, 87.6 nmol, 3 eq.) The reduction reaction is stirred for 90 min at 20°C . Immediately after reconstitution, an Ellman assay was performed to obtain a free thiol to antibody ratio (FTAR) of 3.9.

(b) Получение ADC 3.(b) Receipt of ADC 3.

- 155 046742- 155 046742

К раствору частично восстановленного трастузумаба (140 мл, 1,4 мг, 9 нмоль), добавляют N,Nдиметилацетамид (ДМА) (28,2 мл) затем добавляют свежеприготовленный раствор DL 3 (10 мМ в ДМА, 6,8 мл, 67,5 нмоль, 7,5 экв.) При добавлении DL 3 раствор перемешивают в течение 30 мин при 20°C. Избыток лекарственного средства гасят добавлением N-ацетилцистеина (NAC) (10 мМ, 6,8 мл, 67,5 нмоль) с последующим перемешиванием раствора в течение 20 мин. Погашенную реакцию конъюгирования очищают обессоливанием с применением колонок Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере. Конечный целевой продукт ADC 3 концентрируют до конечной концентрации 5,15 мг/мл по данным УФ и получают 280 мл (1,44 мг, 9,6 нмоль, 107%) раствора ADC. ГИХ ВЭЖХ проводят для определения доли реакции конъюгирования (93%).To a solution of partially reduced trastuzumab (140 ml, 1.4 mg, 9 nmol), add N,Ndimethylacetamide (DMA) (28.2 ml) then add a freshly prepared solution of DL 3 (10 mM in DMA, 6.8 ml, 67. 5 nmol, 7.5 eq.) Upon addition of DL 3, the solution is stirred for 30 min at 20°C. Excess drug is quenched by adding N-acetylcysteine (NAC) (10 mM, 6.8 ml, 67.5 nmol) followed by stirring the solution for 20 min. The quenched conjugation reaction is purified by desalting using Sephadex G25 NAP-5 columns in PBS buffer. The final target product ADC 3 was concentrated to a final concentration of 5.15 mg/mL by UV to yield 280 mL (1.44 mg, 9.6 nmol, 107%) of ADC solution. GC HPLC was carried out to determine the proportion of conjugation reaction (93%).

Получение конъюгата антитело-лекарственное средство ADC 4 м Трот-модифицированным трастузумабом и соединением DL 1 (a) Реакция трастузумаба с гидрохлоридом 2-иминотиолана (реагент Трота) с получением тиолактивированного трастузумаба.Preparation of antibody-drug conjugate ADC 4 m with Trot-modified trastuzumab and compound DL 1 (a) Reaction of trastuzumab with 2-iminothiolane hydrochloride (Trot reagent) to produce thioactivated trastuzumab.

Раствор трастузумаба (0,65 мл, 9 мг, 60 нмоль) разводят до концентрации 10 мг/мл с применением фосфатного буфера (50 мМ фосфата, 2 мМ ЭДТК, pH 8). Добавляют реагент Трота (64,4 мл, 900 нмоль, 15 экв.), и реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч при 25°C. Меняют буфер смеси с применением двух колонок Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере и концентрируют до объема 1,2 мл (7,5 мг/мл). Сразу же после проводят анализ Эллмана с получением отношения свободного тиола к антителу (FTAR) 7,9.Trastuzumab solution (0.65 ml, 9 mg, 60 nmol) is diluted to a concentration of 10 mg/ml using phosphate buffer (50 mM phosphate, 2 mM EDTA, pH 8). Trotha's reagent (64.4 mL, 900 nmol, 15 eq.) was added and the reaction mixture was stirred for 2 hours at 25°C. Change the buffer mixture using two Sephadex G25 NAP-5 columns in PBS buffer and concentrate to a volume of 1.2 ml (7.5 mg/ml). The Ellman assay was performed immediately afterwards to obtain a free thiol to antibody ratio (FTAR) of 7.9.

(b) Получение ADC 4.(b) Receipt of ADC 4.

К раствору тиол-активированного трастузумаба (300 мл, 2,25 мг, 15 нмоль) добавляют ДМА (59,8 мл), затем добавляют свежеприготовленный раствор DL 1 (10 мМ в ДМА, 22,5 мл, 225 нмоль, 15 экв.). При добавлении DL 1, раствор становится мутным. Реакцию конъюгирования перемешивают в течение 2 ч при 25°C и очищают обессоливанием с применением колонки Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере. Конечный целевой продукт ADC 4 концентрируют до конечной концентрации 3,49 мг/мл по данным УФ и получают 252 мл (0,88 мг, 5,86 нмоль, 39%) раствора ADC.To a solution of thiol-activated trastuzumab (300 ml, 2.25 mg, 15 nmol) add DMA (59.8 ml), then add a freshly prepared solution of DL 1 (10 mM in DMA, 22.5 ml, 225 nmol, 15 eq. ). When DL 1 is added, the solution becomes cloudy. The conjugation reaction is stirred for 2 hours at 25°C and purified by desalting using a Sephadex G25 NAP-5 column in PBS buffer. The final target product ADC 4 was concentrated to a final concentration of 3.49 mg/mL by UV to yield 252 mL (0.88 mg, 5.86 nmol, 39%) of ADC solution.

Получение конъюгата антитело-лекарственное средство ADC 5 с трастузумабом и соединение DL 4.Preparation of antibody-drug conjugate ADC 5 with trastuzumab and compound DL 4.

Трастузумаб (трастузумаб, купленный у Roche, белый лиофилизированный порошок для получения концентрированного раствора для инфузий) растворяют в 5 мл фосфатного буфера (50 мМ, pH 8,0) и очищают обессоливанием с применением колонок Sephadex G25 PD-10 в фосфатном буфере (50 мМ, pH 8,0). Концентрацию трастузумаба (17,1 мг/мл) определяют через измерение абсорбции при 280 нм.Trastuzumab (trastuzumab, purchased from Roche, white lyophilized powder to prepare a concentrated solution for infusion) is dissolved in 5 ml phosphate buffer (50 mM, pH 8.0) and purified by desalting using Sephadex G25 PD-10 columns in phosphate buffer (50 mM , pH 8.0). The concentration of trastuzumab (17.1 mg/ml) was determined by measuring absorbance at 280 nm.

Раствор трастузумаба (0,5 мл, 8,55 мг, 57 нмоль) разводят до концентрации 10 мг/мл фосфатным буфером (50 мМ, pH 8). Частичное восстановление дисульфидных связей в антителе проводят добавлением 5,0 мМ раствора гидрохлорида трис[2-карбоксиэтил]фосфина (ТКЭФ) (24,5 мл, 122,4 нмоль, 2,2 экв.) Реакцию восстановления перемешивают в течение 90 мин при 20°C. Сразу после восстановления, проводят анализ Эллмана с получением отношения свободного тиола к антителу (FTAR) 3,4.Trastuzumab solution (0.5 ml, 8.55 mg, 57 nmol) is diluted to a concentration of 10 mg/ml with phosphate buffer (50 mM, pH 8). Partial reduction of disulfide bonds in the antibody is carried out by adding a 5.0 mM solution of tris[2-carboxyethyl]phosphine hydrochloride (TCEP) (24.5 ml, 122.4 nmol, 2.2 eq.) The reduction reaction is stirred for 90 min at 20 °C. Immediately after reconstitution, an Ellman assay was performed to obtain a free thiol to antibody ratio (FTAR) of 3.4.

(b) Получение ADC 5.(b) Receipt of ADC 5.

К раствору частично восстановленного трастузумаба (200 мл, 1,9 мг, 13,2 нмоль), добавляют N,Nдиметилацетамид (ДМА) (42,1 мл), затем добавляют свежеприготовленный раствор DL 4 (10 мМ в ДМА, 7,9 мл, 79,2 нмоль, 6 экв.). При добавлении DL 4, раствор становится мутным. Реакцию конъюгирования перемешивают в течение 30 мин при 20°C и мутность исчезает во время реакции конъюгирования. Избыток лекарственного средства гасят добавлением N-ацетилцистеина (NAC) (10 мМ, 7,9 мл, 79,2 нмоль) с последующим перемешиванием раствора в течение 20 мин. Погашенную реакцию конъюгирования очищают обессоливанием с применением колонок Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере. Конечный целевой продукт ADC 5 концентрируют до конечной концентрации 5,30 мг/мл по данным УФ и получают 290 мл (1,54 мг, 1,0 нмоль, 81%) раствора ADC. ГИХ ВЭЖХ проводят для определения доли реакции конъюгирования (91%).To a solution of partially reduced trastuzumab (200 ml, 1.9 mg, 13.2 nmol), add N,Ndimethylacetamide (DMA) (42.1 ml), then add a freshly prepared solution of DL 4 (10 mM in DMA, 7.9 ml , 79.2 nmol, 6 equiv.). When adding DL 4, the solution becomes cloudy. The conjugation reaction is stirred for 30 min at 20°C and the turbidity disappears during the conjugation reaction. Excess drug is quenched by adding N-acetylcysteine (NAC) (10 mM, 7.9 ml, 79.2 nmol) followed by stirring the solution for 20 min. The quenched conjugation reaction is purified by desalting using Sephadex G25 NAP-5 columns in PBS buffer. The final target product ADC 5 was concentrated to a final concentration of 5.30 mg/mL by UV to yield 290 mL (1.54 mg, 1.0 nmol, 81%) of ADC solution. GIC HPLC was carried out to determine the proportion of conjugation reaction (91%).

Получение конъюгата антитело-лекарственное средство ADC 6 с трастузумабом и соединением DL 5.Preparation of the antibody-drug conjugate ADC 6 with trastuzumab and compound DL 5.

Трастузумаб (трастузумаб, купленный у Roche, белый лиофилизированный порошок для получения концентрированного раствора для инфузий) растворяют в 5 мл фосфатного буфера (50 мМ, pH 8,0) и очищают обессоливанием с применением колонок Sephadex G25 PD-10 в фосфатном буфере (50 мМ, pH 8,0). Концентрацию Трастузумаба (17,6 мг/мл) определяют через измерение абсорбции при 280 нм.Trastuzumab (trastuzumab, purchased from Roche, white lyophilized powder to prepare a concentrated solution for infusion) is dissolved in 5 ml phosphate buffer (50 mM, pH 8.0) and purified by desalting using Sephadex G25 PD-10 columns in phosphate buffer (50 mM , pH 8.0). The concentration of Trastuzumab (17.6 mg/ml) was determined by measuring absorbance at 280 nm.

Раствор трастузумаба (0,55 мл, 9,7 мг, 64,6 нмоль) разводят до концентрации 12,8 мг/мл фосфатным буфером (50 мМ, pH 8). Частичное восстановление дисульфидных связей в антителе проводят добавлением 5,0 мМ раствора гидрохлорида трис[2-карбоксиэтил]фосфина (ТКЭФ) (29,2 мл, 146 нмоль, 2,2 экв.) Реакцию восстановления перемешивают в течение 90 мин при 20°C. Сразу после восстановления, проводят анализ Эллмана с получением отношения свободного тиола к антителу (FTAR) 3,4.Trastuzumab solution (0.55 ml, 9.7 mg, 64.6 nmol) is diluted to a concentration of 12.8 mg/ml with phosphate buffer (50 mM, pH 8). Partial reduction of disulfide bonds in the antibody is carried out by adding a 5.0 mM solution of tris[2-carboxyethyl]phosphine hydrochloride (TCEP) (29.2 ml, 146 nmol, 2.2 eq.) The reduction reaction is stirred for 90 min at 20°C . Immediately after reconstitution, an Ellman assay was performed to obtain a free thiol to antibody ratio (FTAR) of 3.4.

- 156 046742 (b) Получение ADC 6.- 156 046742 (b) Receipt of ADC 6.

К раствору частично восстановленного трастузумаба (140 мл, 1,8 мг, 12 нмоль), добавляют N,Nдиметилацетамид (ДМА) (28,2 мл) затем добавляют свежеприготовленный раствор DL 5 (10 мМ в ДМА, 6,8 мл, 67,5 нмоль, 5,6 экв.). При добавлении DL 5 раствор перемешивают в течение 30 мин при 20°C. Избыток лекарственного средства гасят добавлением N-ацетилцистеин а(NAC) (10 мМ, 6,8 мл, 67,5 нмоль) с последующим перемешиванием раствора в течение 20 мин. Погашенную реакцию конъюгирования очищают обессоливанием с применением колонок Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере. Конечный целевой продукт ADC 6 концентрируют до конечной концентрации 4,29 мг/мл по данным УФ и получают 320 мл (1,37 мг, 9,1 нмоль, 76%) раствора ADC. ГИХ ВЭЖХ проводят для определения доли реакции конъюгирования (83%).To a solution of partially reduced trastuzumab (140 ml, 1.8 mg, 12 nmol), add N,Ndimethylacetamide (DMA) (28.2 ml) then add a freshly prepared solution of DL 5 (10 mM in DMA, 6.8 ml, 67. 5 nmol, 5.6 eq.). When adding DL 5, the solution is stirred for 30 minutes at 20°C. Excess drug is quenched by adding N-acetylcysteine a(NAC) (10 mM, 6.8 ml, 67.5 nmol) followed by stirring the solution for 20 minutes. The quenched conjugation reaction is purified by desalting using Sephadex G25 NAP-5 columns in PBS buffer. The final target product ADC 6 was concentrated to a final concentration of 4.29 mg/mL by UV to yield 320 mL (1.37 mg, 9.1 nmol, 76%) of ADC solution. GIC HPLC was carried out to determine the proportion of conjugation reaction (83%).

Получение конъюгата антитело-лекарственное средство ADC 7 с hhtu-CD13 и соединением DL 1.Preparation of the antibody-drug conjugate ADC 7 with hhtu-CD13 and compound DL 1.

(a) Частичное восстановление анти-CD13 с получением частично восстановленного анти-CD13.(a) Partial reduction of anti-CD13 to obtain partially reduced anti-CD13.

Раствор анти-CD13 (0,5 мл, 8,2 мг, 54,6 нмоль) разводят до концентрации 10 мг/мл фосфатным буфером (50 мМ, pH 8). Частичное восстановление дисульфидных связей в антителе проводят добавлением 5,0 мМ раствора гидрохлорида трис[2-карбоксиэтил]фосфина (ТКЭФ) (31,9 мл, 159 нмоль, 3 экв.). Реакцию восстановления перемешивают в течение 90 мин при 20°C. Сразу после восстановления, проводят анализ Эллмана с получением отношения свободного тиола к антителу (FTAR) 4,7.Anti-CD13 solution (0.5 ml, 8.2 mg, 54.6 nmol) is diluted to a concentration of 10 mg/ml with phosphate buffer (50 mM, pH 8). Partial reduction of disulfide bonds in the antibody is carried out by adding a 5.0 mM solution of tris[2-carboxyethyl]phosphine hydrochloride (TCEP) (31.9 ml, 159 nmol, 3 eq.). The reduction reaction is stirred for 90 minutes at 20°C. Immediately after reconstitution, an Ellman assay was performed to obtain a free thiol to antibody ratio (FTAR) of 4.7.

(b) Получение ADC 7.(b) Receipt of ADC 7.

К раствору частично восстановленного анти-CD13 (200 мл, 2,0 мг, 13,3 нмоль), добавляют N,Nдиметилацетамид (ДМА) (40 мл), затем добавляют свежеприготовленный раствор DL 1 (10 мМ в ДМА, 10 мл, 100 нмоль, 7,5 экв.) При добавлении DL 1 раствор перемешивают в течение 30 мин при 20°C. Избыток лекарственного средства гасят добавлением N-ацетилцистеина (NAC) (10 мМ, 10 мл, 100 нмоль) с последующим перемешиванием раствора в течение 20 мин. Погашенную реакцию конъюгирования очищают обессоливанием с применением колонок Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере. Конечный целевой продукт ADC 7 концентрируют до конечной концентрации 5,58 мг/мл по данным УФ и получают 350 мл (1,95 мг, 13 нмоль, 98%) раствора ADC. ГИХ ВЭЖХ проводят для определения доли реакции конъюгирования (90%).To a solution of partially reduced anti-CD13 (200 ml, 2.0 mg, 13.3 nmol), add N,Ndimethylacetamide (DMA) (40 ml), then add a freshly prepared solution of DL 1 (10 mM in DMA, 10 ml, 100 nmol, 7.5 eq.) Upon addition of DL 1, the solution is stirred for 30 min at 20°C. Excess drug is quenched by adding N-acetylcysteine (NAC) (10 mM, 10 ml, 100 nmol) followed by stirring the solution for 20 min. The quenched conjugation reaction is purified by desalting using Sephadex G25 NAP-5 columns in PBS buffer. The final target product ADC 7 was concentrated to a final concentration of 5.58 mg/mL by UV to yield 350 mL (1.95 mg, 13 nmol, 98%) of ADC solution. GIC HPLC is carried out to determine the proportion of conjugation reaction (90%).

Получение конъюгата антитело-лекарственное средство ADC 8 с анти-CD13 и соединением DL 3.Preparation of the antibody-drug conjugate ADC 8 with anti-CD13 and compound DL 3.

Раствор анти-CD13 (0,5 мл, 8,2 мг, 54,6 нмоль) разводят до концентрации 10 мг/мл фосфатным буфером (50 мМ, pH 8). Частичное восстановление дисульфидных связей в антителе проводят добавлением 5,0 мМ раствора гидрохлорида трис[2-карбоксиэтил]фосфина (ТКЭФ) (31,9 мл, 159 нмоль, 3 экв.) Реакцию восстановления перемешивают в течение 90 мин при 20°C. Сразу после восстановления, проводят анализ Эллмана с получением отношения свободного тиола к антителу (FTAR) 4,7.Anti-CD13 solution (0.5 ml, 8.2 mg, 54.6 nmol) is diluted to a concentration of 10 mg/ml with phosphate buffer (50 mM, pH 8). Partial reduction of disulfide bonds in the antibody is carried out by adding a 5.0 mM solution of tris[2-carboxyethyl]phosphine hydrochloride (TCEP) (31.9 ml, 159 nmol, 3 eq.) The reduction reaction is stirred for 90 min at 20°C. Immediately after reconstitution, an Ellman assay was performed to obtain a free thiol to antibody ratio (FTAR) of 4.7.

(b) Получение ADC 8.(b) Receipt of ADC 8.

К раствору частично восстановленного анти-CD13 (200 мл, 2,0 мг, 13,3 нмоль), добавляют N,Nдиметилацетамид (ДМА) (40 мл), затем добавляют свежеприготовленный раствор DL 3 (10 мМ в ДМА, 10 мл, 100 нмоль, 7,5 экв.). При добавлении DL 3 раствор перемешивают в течение 30 мин при 20°C. Избыток лекарственного средства гасят добавлением N-ацетилцистеина (NAC) (10 мМ, 10 мл, 100 нмоль) с последующим перемешиванием раствора в течение 20 мин. Погашенную реакцию конъюгирования очищают обессоливанием с применением колонок Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере. Конечный целевой продукт ADC 8 концентрируют до конечной концентрации 5,83 мг/мл по данным УФ и получают 380 мл (2,21 мг, 14,7 нмоль, 111%) раствора ADC. ГИХ ВЭЖХ проводят для определения доли реакции конъюгирования (94%).To a solution of partially reduced anti-CD13 (200 ml, 2.0 mg, 13.3 nmol), add N,Ndimethylacetamide (DMA) (40 ml), then add a freshly prepared solution of DL 3 (10 mM in DMA, 10 ml, 100 nmol, 7.5 eq.). When adding DL 3, the solution is stirred for 30 minutes at 20°C. Excess drug is quenched by adding N-acetylcysteine (NAC) (10 mM, 10 ml, 100 nmol) followed by stirring the solution for 20 min. The quenched conjugation reaction is purified by desalting using Sephadex G25 NAP-5 columns in PBS buffer. The final target product ADC 8 was concentrated to a final concentration of 5.83 mg/mL by UV to yield 380 mL (2.21 mg, 14.7 nmol, 111%) ADC solution. GIC HPLC was carried out to determine the proportion of conjugation reaction (94%).

Получение конъюгата антитело-лекарственное средство ADC 9 с анти-CD13 и соединением DL 5 (a) Частичное восстановление анти-CD13 с получением частично восстановленного анти-CD13.Preparation of Antibody-Drug Conjugate ADC 9 with Anti-CD13 and Compound DL 5 (a) Partial reduction of anti-CD13 to produce partially reduced anti-CD13.

(b) Получение ADC 9.(b) Receipt of ADC 9.

К раствору частично восстановленного анти-CD13 (200 мл, 2,0 мг, 13,3 нмоль), добавляют N,Nдиметилацетамид (ДМА) (40 мл), затем добавляют свежеприготовленный раствор DL 5 (10 мМ в ДМА, 10 мл, 100 нмоль, 7,5 экв.). При добавлении DL 5 раствор перемешивают в течение 30 мин при 20°C. Избыток лекарственного средства гасят добавлением N-ацетилцистеина (NAC) (10 мМ, 10 мл, 100 нмоль) с последующим перемешиванием раствора в течение 20 мин. Погашенную реакцию конъюгирования очищают обессоливанием с применением колонок Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере. Конечный целевой продукт ADC 9 концентрируют до конечной концентрации 5,82 мг/мл по данным УФ и получают 380 мл (2,21 мг, 14,7 нмоль, 111%) раствора ADC. ГИХ ВЭЖХ проводят для определения доли реакции конъюгирования (89%).To a solution of partially reduced anti-CD13 (200 ml, 2.0 mg, 13.3 nmol), add N,Ndimethylacetamide (DMA) (40 ml), then add a freshly prepared solution of DL 5 (10 mM in DMA, 10 ml, 100 nmol, 7.5 eq.). When adding DL 5, the solution is stirred for 30 minutes at 20°C. Excess drug is quenched by adding N-acetylcysteine (NAC) (10 mM, 10 ml, 100 nmol) followed by stirring the solution for 20 min. The quenched conjugation reaction is purified by desalting using Sephadex G25 NAP-5 columns in PBS buffer. The final target product ADC 9 was concentrated to a final concentration of 5.82 mg/mL by UV to yield 380 mL (2.21 mg, 14.7 nmol, 111%) ADC solution. GIC HPLC was carried out to determine the proportion of conjugation reaction (89%).

Получение конъюгата антитело-лекарственное средство ADC 10 с анти-CD13 и соединением DL 2.Preparation of the antibody-drug conjugate ADC 10 with anti-CD13 and compound DL 2.

- 157 046742 (a) Частичное восстановление aHTu-CD13 с получением частично восстановленного aHTu-CD13.- 157 046742 (a) Partial reduction of aHTu-CD13 to produce partially reduced aHTu-CD13.

Раствор анти-CD13 (0,5 мл, 8,2 мг, 54,6 нмоль) разводят до концентрации 10 мг/мл фосфатным буфером (50 мМ, pH 8). Частичное восстановление дисульфидных связей в антителе проводят добавлением 5,0 мМ раствора гидрохлорида трис[2-карбоксиэтил]фосфина (ТКЭФ) (31,9 мл, 159,6 нмоль, 3 экв.). Реакцию восстановления перемешивают в течение 90 мин при 20°C. Сразу после восстановления, проводят анализ Эллмана с получением отношения свободного тиола к антителу (FTAR) 4,7.Anti-CD13 solution (0.5 ml, 8.2 mg, 54.6 nmol) is diluted to a concentration of 10 mg/ml with phosphate buffer (50 mM, pH 8). Partial reduction of disulfide bonds in the antibody is carried out by adding a 5.0 mM solution of tris[2-carboxyethyl]phosphine hydrochloride (TCEP) (31.9 ml, 159.6 nmol, 3 eq.). The reduction reaction is stirred for 90 minutes at 20°C. Immediately after reconstitution, an Ellman assay was performed to obtain a free thiol to antibody ratio (FTAR) of 4.7.

(b) Получение ADC 10.(b) Obtaining ADC 10.

К раствору частично восстановленного анти-CD13 (200 мл, 2 мг, 13,3 нмоль), добавляют ДМА (40 мл), затем добавляют свежеприготовленный раствор DL 2 (10 мМ в ДМА, 10 мл, 100 нмоль, 7,5 экв.). При добавлении DL 2, раствор становится мутным. Реакцию конъюгирования перемешивают в течение 30 мин при 20°C. Избыток лекарственного средства гасят добавлением N-ацетилцистеина (NAC) (10 мМ, 10 мл, 100 нмоль) с последующим перемешиванием раствора в течение 20 мин. Погашенную реакцию конъюгирования очищают обессоливанием с применением колонок Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере. Конечный целевой продукт ADC 10 концентрируют до конечной концентрации 6,61 мг/мл по данным УФ и получают 250 мл (1,65 мг, 11 нмоль, 85%) раствора ADC. ГИХ ВЭЖХ проводят для определения доли реакции конъюгирования (23%).To a solution of partially reduced anti-CD13 (200 ml, 2 mg, 13.3 nmol), add DMA (40 ml), then add a freshly prepared solution of DL 2 (10 mM in DMA, 10 ml, 100 nmol, 7.5 eq. ). When DL 2 is added, the solution becomes cloudy. The conjugation reaction is stirred for 30 min at 20°C. Excess drug is quenched by adding N-acetylcysteine (NAC) (10 mM, 10 ml, 100 nmol) followed by stirring the solution for 20 min. The quenched conjugation reaction is purified by desalting using Sephadex G25 NAP-5 columns in PBS buffer. The final target product ADC 10 was concentrated to a final concentration of 6.61 mg/mL by UV to yield 250 mL (1.65 mg, 11 nmol, 85%) of ADC solution. GIC HPLC was carried out to determine the proportion of conjugation reaction (23%).

Получение конъюгата антитело-лекарственное средство ADC 11 с трастузумабом и соединением DL 6.Preparation of the antibody-drug conjugate ADC 11 with trastuzumab and compound DL 6.

(b) Получение ADC 11.(b) Receipt of ADC 11.

К раствору частично восстановленного трастузумаба (140 мл, 1,4 мг, 9 нмоль), добавляют ДМА (28,2 мл), затем добавляют свежеприготовленный раствор DL 6 (10 мМ в ДМА, 6,8 мл, 67,5 нмоль, 7,5 экв.). При добавлении DL 6, раствор становится мутным. Реакцию конъюгирования перемешивают в течение 30 мин при 20°C. Избыток лекарственного средства гасят добавлением N-ацетилцистеина (NAC) (10 мМ, 6,8 мл, 67,5 нмоль) с последующим перемешиванием раствора в течение 20 мин. Погашенную реакцию конъюгирования очищают обессоливанием с применением колонок Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере. Конечный целевой продукт ADC 11 концентрируют до конечной концентрации 6,14 мг/мл по данным УФ и получают 218 мл (1,33 мг, 8,9 нмоль, 99%) раствора ADC. ГИХ ВЭЖХ проводят для определения доли реакции конъюгирования (38%).To a solution of partially reduced trastuzumab (140 ml, 1.4 mg, 9 nmol), add DMA (28.2 ml), then add a freshly prepared solution of DL 6 (10 mM in DMA, 6.8 ml, 67.5 nmol, 7 .5 eq.). When adding DL 6, the solution becomes cloudy. The conjugation reaction is stirred for 30 min at 20°C. Excess drug is quenched by adding N-acetylcysteine (NAC) (10 mM, 6.8 ml, 67.5 nmol) followed by stirring the solution for 20 min. The quenched conjugation reaction is purified by desalting using Sephadex G25 NAP-5 columns in PBS buffer. The final target product ADC 11 was concentrated to a final concentration of 6.14 mg/mL by UV to yield 218 mL (1.33 mg, 8.9 nmol, 99%) ADC solution. GIC HPLC was carried out to determine the proportion of the conjugation reaction (38%).

Получение конъюгата антитело-лекарственное средство ADC12 с трастузумабом и соединением DL7 (a) Частичное восстановление трастузумаба с получением частично восстановленного трастузумаба.Preparation of Antibody-Drug Conjugate ADC12 with Trastuzumab and Compound DL7 (a) Partial reconstitution of trastuzumab to produce partially reconstituted trastuzumab.

Раствор трастузумаба (0,5 мл, 8,5 мг, 57 нмоль) разводят до концентрации 10 мг/мл фосфатным буфером (50 мМ, pH 8). Частичное восстановление дисульфидных связей в антителе проводят добавлением 5,0 мМ раствора гидрохлорида трис[2-карбоксиэтил]фосфина (ТКЭФ) (24,5 мл, 122,4 нмоль, 2,2 экв.) Реакцию восстановления перемешивают в течение 90 мин при 20°C. Сразу после восстановления, проводят анализ Эллмана с получением отношения свободного тиола к антителу (FTAR) 3,4.Trastuzumab solution (0.5 ml, 8.5 mg, 57 nmol) is diluted to a concentration of 10 mg/ml with phosphate buffer (50 mM, pH 8). Partial reduction of disulfide bonds in the antibody is carried out by adding a 5.0 mM solution of tris[2-carboxyethyl]phosphine hydrochloride (TCEP) (24.5 ml, 122.4 nmol, 2.2 eq.) The reduction reaction is stirred for 90 min at 20 °C. Immediately after reconstitution, an Ellman assay was performed to obtain a free thiol to antibody ratio (FTAR) of 3.4.

(b) Получение ADC 12.(b) Receipt of ADC 12.

К раствору частично восстановленного трастузумаба (200 мл, 2 мг, 13,2 нмоль), добавляют ДМА (42,1 мл), затем добавляют свежеприготовленный раствор DL 7 (10 мМ в ДМА, 7,9 мл, 79 нмоль, 6 экв.). При добавлении DL 7, раствор становится мутным. Реакцию конъюгирования перемешивают в течение 30 мин при 20°C. Избыток лекарственного средства гасят добавлением N-ацетилцистеина (NAC) (10 мМ, 7,9 мл, 79 нмоль) с последующим перемешиванием раствора в течение 20 мин. Погашенную реакцию конъюгирования очищают обессоливанием с применением колонок Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере. Конечный целевой продукт ADC 12 концентрируют до конечной концентрации 5,38 мг/мл по данным УФ и получают 270 мл (1,45 мг, 9,6 нмоль, 72%) раствора ADC. ГИХ ВЭЖХ проводят для определения доли реакции конъюгирования (76%).To a solution of partially reduced trastuzumab (200 ml, 2 mg, 13.2 nmol), add DMA (42.1 ml), then add a freshly prepared solution of DL 7 (10 mM in DMA, 7.9 ml, 79 nmol, 6 eq. ). When adding DL 7, the solution becomes cloudy. The conjugation reaction is stirred for 30 min at 20°C. Excess drug is quenched by adding N-acetylcysteine (NAC) (10 mM, 7.9 ml, 79 nmol) followed by stirring the solution for 20 min. The quenched conjugation reaction is purified by desalting using Sephadex G25 NAP-5 columns in PBS buffer. The final target product ADC 12 was concentrated to a final concentration of 5.38 mg/mL by UV to yield 270 mL (1.45 mg, 9.6 nmol, 72%) of ADC solution. GIC HPLC was carried out to determine the proportion of conjugation reaction (76%).

- 158 046742- 158 046742

Получение конъюгата антитело-лекарственное средство ADC13 с Трот-модфицированным трастузумабом и соединением DL 2.Preparation of the antibody-drug conjugate ADC13 with Trot-modified trastuzumab and compound DL 2.

(a) Взаимодействие трастузумаба с 2-иминотиоланом (реагент Трота) с получением тиолактивированного трастузумаба.(a) Reaction of trastuzumab with 2-iminothiolane (Trota reagent) to produce thioactivated trastuzumab.

Трастузумаб (трастузумаб, купленный у Roche, белый лиофилизированный порошок для получения концентрированного раствора для инфузий) растворяют в 5 мл фосфатного буфера (50 мМ, pH 8,0) и очищают обессоливанием с применением колонок Sephadex G25 PD-10 в фосфатном буфере (50 мМ, pH 8,0). Концентрацию трастузумаба (16,1 мг/мл) определяют через измерение абсорбции при 280 нм.Trastuzumab (trastuzumab, purchased from Roche, white lyophilized powder to prepare a concentrated solution for infusion) is dissolved in 5 ml phosphate buffer (50 mM, pH 8.0) and purified by desalting using Sephadex G25 PD-10 columns in phosphate buffer (50 mM , pH 8.0). The concentration of trastuzumab (16.1 mg/ml) was determined by measuring absorbance at 280 nm.

Раствор трастузумаба (0,5 мл, 8,0 мг, 53,7 нмоль) разводят до концентрации 10 мг/мл с применением фосфатного буфера (50 мМ фосфат, 2 мМ ЭДТК, pH 8). Реагент Трота добавляют (14 мМ, 46,0 мкл, 644 нмоль, 12 экв.) и реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч при 20°C. Буфер в смеси меняют с применением колонок Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере и концентрируют до объема 0,8 мл. Сразу же после, проводят анализ Эллмана с получением отношения свободного тиола к антителу (FTAR) 4,4.Trastuzumab solution (0.5 ml, 8.0 mg, 53.7 nmol) is diluted to a concentration of 10 mg/ml using phosphate buffer (50 mM phosphate, 2 mM EDTA, pH 8). Troth's reagent was added (14 mM, 46.0 μl, 644 nmol, 12 eq.) and the reaction mixture was stirred for 2 h at 20°C. The buffer in the mixture is changed using Sephadex G25 NAP-5 columns in PBS buffer and concentrated to a volume of 0.8 ml. Immediately after, the Ellman assay was performed to obtain a free thiol to antibody ratio (FTAR) of 4.4.

(b) Получение ADC 13.(b) Preparation of ADC 13.

К раствору тиол-активированного трастузумаба (200 мл, 2,0 мг, 13 нмоль), добавляют ДМА (37 мл), затем добавляют свежеприготовленный раствор DL 2 (10 мМ в ДМА, 13 мл, 130 нмоль, 10 экв.). При добавлении DL 2, раствор становится мутным. Реакцию конъюгирования перемешивают в течение 2 ч при 25°C и очищают обессоливанием с применением колонки Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере. Конечный целевой продукт ADC 13 концентрируют до конечной концентрации 2,83 мг/мл по данным УФ и получают 340 мл (0,96 мг, 6,4 нмоль, 49%) раствора ADC.To a solution of thiol-activated trastuzumab (200 ml, 2.0 mg, 13 nmol), add DMA (37 ml), then add a freshly prepared solution of DL 2 (10 mm in DMA, 13 ml, 130 nmol, 10 eq.). When DL 2 is added, the solution becomes cloudy. The conjugation reaction is stirred for 2 hours at 25°C and purified by desalting using a Sephadex G25 NAP-5 column in PBS buffer. The final target product ADC 13 was concentrated to a final concentration of 2.83 mg/mL by UV to yield 340 mL (0.96 mg, 6.4 nmol, 49%) of ADC solution.

Получение конъюгата антитело-лекарственное средство ADC14 с Трот-модфицированным трастузумабом и соединением DL 3.Preparation of the antibody-drug conjugate ADC14 with Trot-modified trastuzumab and compound DL 3.

Раствор трастузумаба (0,5 мл, 8,0 мг, 53,7 нмоль) разводят до концентрации 10 мг/мл с применением фосфатного буфера (50 мМ фосфат, 2 мМ ЭДТК, pH 8). Добавляют реагент Трота (14 мМ, 46,0 мкл, 644 нмоль, 12 экв.) и реакцию перемешивают в течение 2 ч при 20°C. Буфер в смеси меняют с применением колонок Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере и концентрируют до объема 0,8 мл. Сразу же после, проводят анализ Эллмана с получением отношения свободного тиола к антителу (FTAR) 4,4.Trastuzumab solution (0.5 ml, 8.0 mg, 53.7 nmol) is diluted to a concentration of 10 mg/ml using phosphate buffer (50 mM phosphate, 2 mM EDTA, pH 8). Trot's reagent (14 mM, 46.0 μL, 644 nmol, 12 equiv) was added and the reaction was stirred for 2 h at 20°C. The buffer in the mixture is changed using Sephadex G25 NAP-5 columns in PBS buffer and concentrated to a volume of 0.8 ml. Immediately after, the Ellman assay was performed to obtain a free thiol to antibody ratio (FTAR) of 4.4.

(b) Получение ADC 14.(b) Preparation of ADC 14.

К раствору тиол-активированного трастузумаба (200 мл, 2,0 мг, 13 нмоль), добавляют ДМА (37 мл), затем добавляют свежеприготовленный раствор DL 3 (10 мМ в ДМА, 13 мл, 130 нмоль, 10 экв.). При добавлении DL 3, раствор становится мутным. Реакцию конъюгирования перемешивают в течение 2 ч при 25°C и очищают обессоливанием с применением колонки Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере. Конечный целевой продукт ADC 14 концентрируют до конечной концентрации 0,75 мг/мл по данным УФ и получают 380 мл (0,28 мг, 1,9 нмоль, 15%) раствора ADC.To a solution of thiol-activated trastuzumab (200 ml, 2.0 mg, 13 nmol), add DMA (37 ml), then add a freshly prepared solution of DL 3 (10 mm in DMA, 13 ml, 130 nmol, 10 eq.). When DL 3 is added, the solution becomes cloudy. The conjugation reaction is stirred for 2 hours at 25°C and purified by desalting using a Sephadex G25 NAP-5 column in PBS buffer. The final target product ADC 14 was concentrated to a final concentration of 0.75 mg/mL by UV to yield 380 mL (0.28 mg, 1.9 nmol, 15%) of ADC solution.

Получение конъюгата антитело-лекарственное средство ADC15 с Трот-модфицированным трастузумабом и соединением DL 5.Preparation of the antibody-drug conjugate ADC15 with Trot-modified trastuzumab and compound DL 5.

Раствор трастузумаба (0,5 мл, 8,0 мг, 53,7 нмоль) разводят до концентрации 10 мг/мл с применением фосфатного буфера (50 мМ фосфат, 2 мМ ЭДТК, pH 8). Реагент Трота добавляют (14 мМ, 46,0 мл, 644 нмоль, 12 экв.) и реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч при 20°C. Буфер в смеси меняют с применением колонок Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере и концентрируют до объема 0,8 мл. Сразу же после, проводят анализ Эллмана с получением отношения свободного тиола к антителу (FTAR) 4,4.Trastuzumab solution (0.5 ml, 8.0 mg, 53.7 nmol) is diluted to a concentration of 10 mg/ml using phosphate buffer (50 mM phosphate, 2 mM EDTA, pH 8). Troth's reagent (14 mM, 46.0 mL, 644 nmol, 12 eq.) was added and the reaction mixture was stirred for 2 hours at 20°C. The buffer in the mixture is changed using Sephadex G25 NAP-5 columns in PBS buffer and concentrated to a volume of 0.8 ml. Immediately after, the Ellman assay was performed to obtain a free thiol to antibody ratio (FTAR) of 4.4.

(b) Получение ADC 15.(b) Receipt of ADC 15.

К раствору тиол-активированного трастузумаба (200 мл, 2,0 мг, 13 нмоль) добавляют ДМА (37 мл) затем добавляют свежеприготовленный раствор DL 5 (10 мМ в ДМА, 13 мл, 130 нмоль, 10 экв.). При добавлении DL 5, раствор становится мутным. Реакцию конъюгирования перемешивают в течение 2 ч при 25°C и очищают обессоливанием с применением колонки Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере. Конечный целевой продукт ADC 15 концентрируют до конечной концентрации 1,79 мг/мл по данным УФ и получают 440 мл (0,79 мг, 5,2 нмоль, 40%) раствора ADC.DMA (37 ml) was added to a solution of thiol-activated trastuzumab (200 ml, 2.0 mg, 13 nmol), then a freshly prepared solution of DL 5 (10 mM in DMA, 13 ml, 130 nmol, 10 eq.) was added. When adding DL 5, the solution becomes cloudy. The conjugation reaction is stirred for 2 hours at 25°C and purified by desalting using a Sephadex G25 NAP-5 column in PBS buffer. The final target product ADC 15 was concentrated to a final concentration of 1.79 mg/mL by UV to yield 440 mL (0.79 mg, 5.2 nmol, 40%) of ADC solution.

- 159 046742- 159 046742

Получение конъюгата антитело-лекарственное средство ADC16 с Трот-модфицированным трастузумабом и соединением DL 6.Preparation of the antibody-drug conjugate ADC16 with Trot-modified trastuzumab and compound DL 6.

(a) Реакция трастузумаба с гидрохлоридом 2-иминотиолана (реагент Трота) с получением тиолактивированного трастузумаба.(a) Reaction of trastuzumab with 2-iminothiolane hydrochloride (Trot's reagent) to produce thioactivated trastuzumab.

Раствор трастузумаба (0,25 мл, 4,3 мг, 28,5 нмоль) разводят до концентрации 10 мг/мл с применением фосфатного буфера (50 мМ фосфат, 2 мМ ЭДТК, pH 8). Добавляют реагент Трота (14 мМ, 24,4 мл, 342 нмоль, 12 экв.) и реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч при 20°C. Буфер в смеси меняют с применением колонок Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере и концентрируют до объема 0,43 мл. Сразу же после, проводят анализ Эллмана с получением отношения свободного тиола к антителу (FTAR) 4,6.Trastuzumab solution (0.25 ml, 4.3 mg, 28.5 nmol) is diluted to a concentration of 10 mg/ml using phosphate buffer (50 mM phosphate, 2 mM EDTA, pH 8). Trotha's reagent (14 mM, 24.4 mL, 342 nmol, 12 equiv) was added and the reaction mixture was stirred for 2 hours at 20°C. The mixture is buffer changed using Sephadex G25 NAP-5 columns in PBS buffer and concentrated to a volume of 0.43 ml. Immediately after, the Ellman assay was performed to obtain a free thiol to antibody ratio (FTAR) of 4.6.

(b) Получение ADC 16.(b) Preparation of ADC 16.

К раствору тиол-активированного трастузумаба (200 мл, 2,0 мг, 13 нмоль), ДМА добавляют (37 мл) затем добавляют свежеприготовленный раствор DL 6 (10 мМ в ДМА, 13 мл, 130 нмоль, 10 экв.). При добавлении DL 6, раствор становится мутным. Реакцию конъюгирования перемешивают в течение 2 ч при 25°C и очищают обессоливанием с применением колонки Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере. Конечный целевой продукт ADC 16 концентрируют до конечной концентрации 5,63 мг/мл по данным УФ и получают 230 мл (1,29 мг, 8,6 нмоль, 66%) раствора ADC.To a solution of thiol-activated trastuzumab (200 ml, 2.0 mg, 13 nmol), DMA was added (37 ml), then a freshly prepared solution of DL 6 (10 mM in DMA, 13 ml, 130 nmol, 10 eq.) was added. When adding DL 6, the solution becomes cloudy. The conjugation reaction is stirred for 2 hours at 25°C and purified by desalting using a Sephadex G25 NAP-5 column in PBS buffer. The final target product ADC 16 was concentrated to a final concentration of 5.63 mg/mL by UV to yield 230 mL (1.29 mg, 8.6 nmol, 66%) of ADC solution.

Получение конъюгата антитело-лекарственное средство ADC17 с Трот-модфицированным трастузумабом и соединением DL 8.Preparation of the antibody-drug conjugate ADC17 with Trot-modified trastuzumab and compound DL 8.

Трастузумаб (трастузумаб, купленный у Roche, белый лиофилизированный порошок для получения концентрированного раствора для инфузий) растворяют в 5 мл фосфатного буфера (50 мМ, pH 8,0) и очищают обессоливанием с применением колонок Sephadex G25 PD-10 в фосфатном буфере (50 мМ, pH 8,0). Концентрацию трастузумаба (17,7 мг/мл) определяют через измерение абсорбции при 280 нм.Trastuzumab (trastuzumab, purchased from Roche, white lyophilized powder to prepare a concentrated solution for infusion) is dissolved in 5 ml phosphate buffer (50 mM, pH 8.0) and purified by desalting using Sephadex G25 PD-10 columns in phosphate buffer (50 mM , pH 8.0). The concentration of trastuzumab (17.7 mg/ml) was determined by measuring absorbance at 280 nm.

Раствор трастузумаба (1,5 мл, 26,5 мг, 177 нмоль) разводят до концентрации 10 мг/мл с применением фосфатного буфера (50 мМ фосфат, 2 мМ ЭДТК, pH 8) и фракционируют в две пробирки (1,3 мл каждая). Добавляют реагент Трота (14 мМ, 61,8 мл, 866 нмоль, 10 экв.) в каждую пробирку, и реакционные смеси перемешивают в течение 2 ч при 20°C. Реакционные смеси смешивают и меняют буфер с применением колонок Sephadex G25 NAP-10 в ФРФБ буфере и концентрируют до объема 2,6 мл. Сразу же после, проводят анализ Эллмана с получением отношения свободного тиола к антителу (FTAR) 5,6.Trastuzumab solution (1.5 ml, 26.5 mg, 177 nmol) is diluted to a concentration of 10 mg/ml using phosphate buffer (50 mM phosphate, 2 mM EDTA, pH 8) and fractionated into two tubes (1.3 ml each ). Add Trot's reagent (14 mM, 61.8 mL, 866 nmol, 10 equiv.) to each tube and the reaction mixtures are stirred for 2 hours at 20°C. The reaction mixtures are mixed and buffer exchanged using Sephadex G25 NAP-10 columns in PBS buffer and concentrated to a volume of 2.6 ml. Immediately after, the Ellman assay was performed to obtain a free thiol to antibody ratio (FTAR) of 5.6.

(b) Получение ADC 17.(b) Preparation of ADC 17.

К раствору тиол-активированного трастузумаба (500 мл, 5,0 мг, 33 нмоль), добавляют ДМА (98,6 мл), затем добавляют свежеприготовленный раствор DL 8 (10 мМ в ДМА, 26,4 мл, 264 нмоль, 8 экв.). При добавлении DL 8, раствор становится мутным. Реакцию конъюгирования перемешивают в течение 2 ч при 25°C и очищают обессоливанием с применением колонки Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере. Конечный целевой продукт ADC 17 концентрируют до конечной концентрации 3,21 мг/мл по данным УФ и получают 390 мл (1,25 мг, 8,3 нмоль, 25%) раствора ADC.To a solution of thiol-activated trastuzumab (500 ml, 5.0 mg, 33 nmol), add DMA (98.6 ml), then add a freshly prepared solution of DL 8 (10 mM in DMA, 26.4 ml, 264 nmol, 8 equiv .). When adding DL 8, the solution becomes cloudy. The conjugation reaction is stirred for 2 hours at 25°C and purified by desalting using a Sephadex G25 NAP-5 column in PBS buffer. The final target product ADC 17 was concentrated to a final concentration of 3.21 mg/mL by UV to yield 390 mL (1.25 mg, 8.3 nmol, 25%) of ADC solution.

Получение конъюгата антитело-лекарственное средство ADC18 с Трот-модфицированным Трастузумабом и соединением DL 9.Preparation of the antibody-drug conjugate ADC18 with Trot-modified Trastuzumab and compound DL 9.

(b) Получение ADC 18.(b) Preparation of ADC 18.

К раствору тиол-активированного трастузумаба (500 мл, 5,0 мг, 33 нмоль) добавляют ДМА (98,6 мл), затем добавляют свежеприготовленный раствор DL 9 (10 мМ в ДМА, 26,4 мл, 264 нмоль, 8 экв.). При добавлении DL 9, раствор становится мутным. Реакцию конъюгирования перемешивают в течение 2To a solution of thiol-activated trastuzumab (500 ml, 5.0 mg, 33 nmol) add DMA (98.6 ml), then add a freshly prepared solution of DL 9 (10 mm in DMA, 26.4 ml, 264 nmol, 8 eq. ). When adding DL 9, the solution becomes cloudy. The conjugation reaction is stirred for 2

- 160 046742 ч при 25°C и очищают обессоливанием с применением колонки Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере. Конечный целевой продукт ADC 18 концентрируют до конечной концентрации 3,16 мг/мл по данным УФ и получают 390 мл (1,23 мг, 8,2 нмоль, 25%) раствора ADC.- 160 046742 h at 25°C and purified by desalting using a Sephadex G25 NAP-5 column in PBS buffer. The final target product ADC 18 was concentrated to a final concentration of 3.16 mg/mL by UV to yield 390 mL (1.23 mg, 8.2 nmol, 25%) of ADC solution.

Получение конъюгата антитело-лекарственное средство ADC19 с Трот-модфицированным Трастузумабом и соединением DL 10.Preparation of the antibody-drug conjugate ADC19 with Trot-modified Trastuzumab and compound DL 10.

(b) Получение ADC 19.(b) Preparation of ADC 19.

К раствору тиол-активированного трастузумаба (500 мл, 5,0 мг, 33 нмоль) добавляют ДМА (98,6 мл), затем добавляют свежеприготовленный раствор DL 10 (10 мМ в ДМА, 26,4 мл, 264 нмоль, 8 экв.). При добавлении DL 10, раствор становится мутным. Реакцию конъюгирования перемешивают в течение 2 ч при 25°C и очищают обессоливанием с применением колонки Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере. Конечный целевой продукт ADC 19 концентрируют до конечной концентрации 11,3 мг/мл по данным УФ и получают 290 мл (3,2 мг, 21,3 нмоль, 64%) раствора ADC.To a solution of thiol-activated trastuzumab (500 ml, 5.0 mg, 33 nmol) add DMA (98.6 ml), then add a freshly prepared solution of DL 10 (10 mM in DMA, 26.4 ml, 264 nmol, 8 eq. ). When adding DL 10, the solution becomes cloudy. The conjugation reaction is stirred for 2 hours at 25°C and purified by desalting using a Sephadex G25 NAP-5 column in PBS buffer. The final target product ADC 19 was concentrated to a final concentration of 11.3 mg/mL by UV to yield 290 mL (3.2 mg, 21.3 nmol, 64%) of ADC solution.

Получение конъюгата антитело-лекарственное средство ADC20 с Трот-модфицированным Трастузумабом и соединением DL 11.Preparation of the antibody-drug conjugate ADC20 with Trot-modified Trastuzumab and compound DL 11.

(b) Получение ADC 20.(b) Preparation of ADC 20.

К раствору тиол-активированного трастузумаба (500 мл, 5,0 мг, 33 нмоль) добавляют ДМА (98,6 мл), затем добавляют свежеприготовленный раствор DL 11 (10 мМ в ДМА, 26,4 мл, 264 нмоль, 8 экв.). При добавлении DL 11, раствор становится мутным. Реакцию конъюгирования перемешивают в течение 2 ч при 25°C и очищают обессоливанием с применением колонки Sephadex G25 NAP-5 в ФРФБ буфере. Конечный целевой продукт ADC 20 концентрируют до конечной концентрации 3,73 мг/мл по данным УФ и получают 440 мл (1,6 мг, 10,6 нмоль, 32%) раствора ADC.To a solution of thiol-activated trastuzumab (500 ml, 5.0 mg, 33 nmol) add DMA (98.6 ml), then add a freshly prepared solution of DL 11 (10 mM in DMA, 26.4 ml, 264 nmol, 8 eq. ). When adding DL 11, the solution becomes cloudy. The conjugation reaction is stirred for 2 hours at 25°C and purified by desalting using a Sephadex G25 NAP-5 column in PBS buffer. The final target product ADC 20 was concentrated to a final concentration of 3.73 mg/mL by UV to yield 440 mL (1.6 mg, 10.6 nmol, 32%) of ADC solution.

Пример 3. Демонстрация цитотоксичности конъюгатов антитело-лекарственное средство настоящего изобретения.Example 3 Demonstration of cytotoxicity of the antibody-drug conjugates of the present invention.

Биоанализы для определения противоопухолевой активности.Bioassays to determine antitumor activity.

Клеточные линии и клеточная культура.Cell lines and cell culture.

Следующие клеточные линии человека получают от American Type Culture Collection (ATCC): SKBR-3 (ATCC HB-30), HCC-1954 (ATCC CRL-2338) (Рак груди, HER2+); MDA-MB-231 (ATCC HTB-26) и MCF-7 (ATCC HTB-22) (Рак груди, HER2-), HT-1080 (ATCC CCL-121, фибросаркома, CD13+), Raji (ATCC CCL-86, лимфома Буркитта, CD13-) и RPMI 8226 (ATCC CRM-CCL-155, миелома, CD13-). Клеточную линию острого промиелоцитарного лейкоза человека NB 4 (ACC 207, CD13+) получают от Leibniz-Institut DSMZ (Braunschweig, Germany). Клетки выдерживают при 37°C, 5% CO₂ и 95% влажности в среде Игла, модифицированной по Дульбекко (DMEM) (для SK-BR-3, MDA-MB-231 и MCF-7 клеток), Минимальной эссенциальной среде Игла (EMEM) (для HT-1080 клеток) или RPMI-1640The following human cell lines are obtained from the American Type Culture Collection (ATCC): SKBR-3 (ATCC HB-30), HCC-1954 (ATCC CRL-2338) (Breast Cancer, HER2+); MDA-MB-231 (ATCC HTB-26) and MCF-7 (ATCC HTB-22) (Breast cancer, HER2-), HT-1080 (ATCC CCL-121, fibrosarcoma, CD13+), Raji (ATCC CCL-86, Burkitt's lymphoma, CD13-) and RPMI 8226 (ATCC CRM-CCL-155, myeloma, CD13-). The human acute promyelocytic leukemia cell line NB 4 (ACC 207, CD13+) was obtained from Leibniz-Institut DSMZ (Braunschweig, Germany). Cells are maintained at 37°C, 5% CO ₂ and 95% humidity in Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) (for SK-BR-3, MDA-MB-231 and MCF-7 cells), Eagle's minimal essential medium ( EMEM) (for HT-1080 cells) or RPMI-1640

- 161 046742 (для остальных клеточных линий), все среды с добавлением 10% фетальной телячьей сыворотки (ФТС), 2 мМ L-глутамина и 100 единиц/мл пенициллина и стрептомицина.- 161 046742 (for other cell lines), all media supplemented with 10% fetal bovine serum (FCS), 2 mM L-glutamine and 100 units/ml penicillin and streptomycin.

Анализ цитотоксичности.Cytotoxicity assay.

Для SK-BR-3, HCC-1954, MDA-MB-231 и MCF-7 клеток, колориметрический анализ с применением Сульфородамина B (SRB) адаптируют для количественного измерения роста клеток и цитотоксичности, как описано у V. Vichai и K. Kirtikara. Sulforhodamine B colorimetric assay for cytotoxicity screening. Nature Protocols, 2006, 1, 1112-1116. Коротко, клетки высевают в 96-луночные титровальные микропланшеты и выдерживают в течение 24 ч в среде без лекарственного средства, затем обрабатывают только носителем или тестируемыми веществами в течение 72 ч. Для количественного анализа, клетки промывают дважды физиологическим раствором с фосфатным буфером (ФРФБ), фиксируют в течение 15 мин в 1% растворе глутаральдегида, промывают дважды ФРФБ, окрашивают в 0,4% мас./об. SRB с 1% об./об. раствором уксусной кислоты в течение 30 мин, промывают несколько раз 1% раствором уксусной кислоты и сушат на воздухе. Затем SRB экстрагируют в 10 мМ раствора основания Trizma, и оптическую плотность измеряют при 490 нм в микропланшетном спектрофотометре.For SK-BR-3, HCC-1954, MDA-MB-231 and MCF-7 cells, a colorimetric assay using Sulforhodamine B (SRB) is adapted to quantitatively measure cell growth and cytotoxicity as described by V. Vichai and K. Kirtikara . Sulforhodamine B colorimetric assay for cytotoxicity screening. Nature Protocols, 2006, 1, 1112-1116. Briefly, cells are seeded in 96-well microtiter plates and incubated for 24 h in drug-free medium, then treated with vehicle or test substances alone for 72 h. For quantitative analysis, cells are washed twice with phosphate buffered saline (PBSA). fixed for 15 min in 1% glutaraldehyde solution, washed twice with PBS, stained in 0.4% w/v. SRB with 1% v/v solution of acetic acid for 30 minutes, washed several times with a 1% solution of acetic acid and dried in air. SRB was then extracted into 10 mM Trizma base solution and the absorbance was measured at 490 nm in a microplate spectrophotometer.

Для HT-1080, NB 4, Raji и RPMI-8226 клеток, применяют альтернативный колориметрический анализ на основе восстановления бромида 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия (MTT) для количественного измерения жизнеспособности клеток, как описано у T. Mosmann в Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays, J Immunol Methods, 1983, 65: 55-63. Коротко, клетки высевают в 96-луночные планшеты и обрабатывают, как описано выше, и через 72 ч воздействия тестируемых соединений оценивают жизнеспособность клеток из превращения MTT (Sigma, St Louis, MO, USA) в его окрашенный продукт реакции, MTT-формазан, который растворяют в ДМСО для измерения его абсорбции при 540 нм в микропланшетном спектрофотометре.For HT-1080, NB 4, Raji and RPMI-8226 cells, use an alternative colorimetric assay based on 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) reduction to quantitatively measure cell viability , as described by T. Mosmann in Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays, J Immunol Methods, 1983, 65: 55-63. Briefly, cells are seeded in 96-well plates and treated as described above, and after 72 h of exposure to test compounds, cell viability is assessed from the conversion of MTT (Sigma, St Louis, MO, USA) to its colored reaction product, MTT-formazan, which dissolved in DMSO to measure its absorbance at 540 nm in a microplate spectrophotometer.

Выживаемость клеток выражают как долю от выживания контрольных необработанных клеток. Все оценки проводят трижды, и полученные данные подгоняют с помощью нелинейной регрессии к четырехпараметрической логистической кривой, по которой рассчитывают значение IC₅₀ (концентрация соединения, вызывающая 50% гибель клеток по сравнению с выживаемостью контрольных клеток).Cell survival is expressed as a proportion of the survival of control untreated cells. All assessments are performed in triplicate and the data are fitted using nonlinear regression to a four-parameter logistic curve from which the IC ₅₀ value (the concentration of compound that causes 50% of cell death compared to control cell survival) is calculated.

Пример биоактивности 1 - цитотоксичность конъюгата ADC 1 и родственных реагентов против HER2 положительных и отрицательных клеток рака груди.Bioactivity Example 1 - Cytotoxicity of ADC conjugate 1 and related reagents against HER2 positive and negative breast cancer cells.

In vitro цитотоксичность ADC 1 вместе с исходными цитотоксическими соединениями DL 1 и 11-R и Трастузумабом оценивают против четырех разных клеточных линий рака груди человека, сверхэкспрессирующих или нет HER2 рецептор, включая SK-BR-3, HCC-1954 (HER2-положительные клетки), а также MDA-MB-231 и MCF-7 (ИБЖ.2-отрицтельные клетки). Получают стандартные дозозависимые кривые (ДЗ) для 72-часового инкубирования с тестируемыми соединениями.In vitro cytotoxicity of ADC 1 along with the parent cytotoxic compounds DL 1 and 11-R and Trastuzumab was evaluated against four different human breast cancer cell lines, overexpressing or not the HER2 receptor, including SK-BR-3, HCC-1954 (HER2 positive cells) , as well as MDA-MB-231 and MCF-7 (IBZh.2-negative cells). Standard dose-response (DZ) curves are obtained for 72-hour incubation with test compounds.

Цитотоксичность ТрастузумабаCytotoxicity of Trastuzumab

In vitro цитотоксичность Трастузумаба оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 50 до 0,01 мкг/мл (3,33E-078,74E-11 M). Трастузумаб был полностью неактивным, не достигал IC50 в любых из тестированных клеточных линий, независимо от их HER 2 статуса, как показано в табл. 10, где представлены результаты среднего геометрического значений IC₅₀, полученных в трех независимых экспериментах.In vitro cytotoxicity of Trastuzumab is assessed against different tumor cell lines by obtaining triple DZ curves of 10-point, 2.5-fold dilutions from 50 to 0.01 μg/ml (3.33E-078.74E-11 M). Trastuzumab was completely inactive and did not reach the IC50 in any of the cell lines tested, regardless of their HER 2 status, as shown in Table 1. 10, which presents the results of geometric mean IC ₅₀ values obtained in three independent experiments.

Таблица 10Table 10

Краткое описание in vitro цитотоксичности трастузумабаSummary of in vitro cytotoxicity of trastuzumab

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB-231 MDA-MB-231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀, мкг/мл IC ₅₀ , µg/ml > 50 > 50 > 50 > 50 > 50 > 50 > 50 > 50 IC50, M IC50, M > 3,4E-07 > 3.4E-07 > 3,4E-07 > 3.4E-07 > 3,4E-07 > 3.4E-07 > 3,4E-07 > 3.4E-07

Цитотоксичность 11-R.Cytotoxicity 11-R.

Цитотоксичность промежуточного соединения 11-R оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 100 до 0,03 нг/мл (1,26E-07-3,3E-11 M).The cytotoxicity of intermediate 11-R was assessed against different tumor cell lines by generating triple DZ curves of 10-point, 2.5-fold dilutions from 100 to 0.03 ng/ml (1.26E-07-3.3E-11 M) .

Как показано в табл. 11, где представлены результаты среднего геометрического значений IC₅₀полученных в трех независимых экспериментах, цитотоксичность этого соединения была аналогичной во всех линиях опухолевых клеток независимо от их экспрессии HER 2, со значениями IC₅₀ в нижнем наномолярном диапазоне, от 0,4 до 1,4 нг/мл (5,04E-10 до 1,70E-09 M). Средние геометрические значения IC₅₀ по всей клеточной панели составляют 0,79 нг/мл (9,94E-10 M), при стандартном геометрическом отклонении, составляющем 1,8 в соответствии с гомогенностью результатов для четырех клеточных линий.As shown in table. 11, which presents the results of geometric mean IC ₅₀ values obtained in three independent experiments, the cytotoxicity of this compound was similar in all tumor cell lines regardless of their HER 2 expression, with IC ₅₀ values in the low nanomolar range, from 0.4 to 1.4 ng/ml (5.04E-10 to 1.70E-09 M). The geometric mean IC ₅₀ values across the entire cell panel were 0.79 ng/mL (9.94E-10 M), with a geometric standard deviation of 1.8 consistent with homogeneity of the results across the four cell lines.

- 162 046742- 162 046742

Таблица 11Table 11

Краткое описание in vitro цитотоксичности 11-RSummary of in vitro cytotoxicity of 11-R

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB-231 MDA-MB-231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀, мкг/мл IC ₅₀ , µg/ml 5,76E-04 5.76E-04 1,35E-03 1.35E-03 3,99E-04 3.99E-04 1,24E-03 1.24E-03 IC50, M IC50, M 7,27E-10 7.27E-10 1,70E-09 1.70E-09 5,04E-10 5.04E-10 1,57E-09 1.57E-09

Цитотоксичность DL 1.Cytotoxicity of DL 1.

Цитотоксичность промежуточного соединения DL 1 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 10 мкг/мл до 2,6 нг/мл (7,58E-06-1,99E-09 M).The cytotoxicity of the DL 1 intermediate was assessed against different tumor cell lines by generating triple DZ curves of 10-point, 2.5-fold dilutions from 10 μg/ml to 2.6 ng/ml (7.58E-06-1.99E-09 M).

Как показано в табл. 12, где представлены результаты среднего геометрического значений IC₅₀полученных в трех независимых экспериментах, цитотоксичность этого соединения была аналогичной во всех линиях опухолевых клеток независимо от их экспрессии HER 2, со значениями IC₅₀ в высоком наномолярном диапазоне, от 0,07 до 0,43 мкг/мл (5,23E-08 до 3,11E-07 M). Средние геометрические значения IC₅₀ по всей клеточной панели составляли 0,16 мкг/мл (1,15E-07 M), при стандартном геометрическом отклонении, составляющем 2,1 в соответствии с гомогенностью результатов для четырех клеточных линий.As shown in table. 12, which presents the results of geometric mean IC ₅₀ values obtained in three independent experiments, the cytotoxicity of this compound was similar in all tumor cell lines regardless of their HER 2 expression, with IC ₅₀ values in the high nanomolar range, from 0.07 to 0.43 µg/ml (5.23E-08 to 3.11E-07 M). The geometric mean IC ₅₀ values across the entire cell panel were 0.16 μg/ml (1.15E-07 M), with a geometric standard deviation of 2.1 consistent with homogeneity of the results across the four cell lines.

Таблица 12Table 12

Краткое описание in vitro цитотоксичности DL 1Summary of in vitro cytotoxicity of DL 1

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB-231 MDA-MB-231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀, мкг/мл IC ₅₀ , µg/ml 1,16E-01 1.16E-01 1,80E-01 1.80E-01 7,28E-02 7.28E-02 4,33E-01 4.33E-01 IC50, M IC50,M 8,31E-08 8.31E-08 1,29E-07 1.29E-07 5,23E-08 5.23E-08 3,11E-07 3.11E-07

Цитотоксичность ADC 1.Cytotoxicity of ADC 1.

Цитотоксичность ADC 1 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 100 мкг/мл до 26 нг/мл (6,67E-07-1,75E-10 M). Оценку проводят в трех независимых экспериментах, на фиг. 3 показана типовая ДЗ кривая, соответствующая одному из этих трех экспериментов, и в табл. 13 суммированы результаты, соответствующие средним геометрическим значениям значений IC₅₀, полученных в трех независимых экспериментах.The cytotoxicity of ADC 1 was assessed against different tumor cell lines by obtaining triple DZ curves of 10-point, 2.5-fold dilutions from 100 μg/ml to 26 ng/ml (6.67E-07-1.75E-10 M). The evaluation is carried out in three independent experiments, in Fig. Figure 3 shows a typical DS curve corresponding to one of these three experiments, and table. Figure 13 summarizes the results corresponding to the geometric mean IC ₅₀ values obtained in three independent experiments.

Как показано в табл. 13, ADC 1 показал цитотоксичность, аналогичную исходному лекарственному средству 11-R только в HER2-положительных клетках. Однако в HER2-отрицательных клетках такая токсичность значительно меньше: около 40 раз ниже согласно индексу селективности, полученному делением среднего значения IC₅₀ в HER2-отрицательных клетках на таковое в HER2-положительных клетках. Такая селективность позволяет сделать вывод, что конъюгат действует через взаимодействие антитела с мембраноассоциированным HER2 рецептором на опухолевых клетках, с последующей внутриклеточной доставкой цитотоксического лекарственного средства.As shown in table. 13, ADC 1 showed cytotoxicity similar to the parent drug 11-R only in HER2-positive cells. However, in HER2-negative cells such toxicity is much less: about 40 times lower according to the selectivity index obtained by dividing the average IC ₅₀ value in HER2-negative cells by that in HER2-positive cells. This selectivity allows us to conclude that the conjugate acts through the interaction of the antibody with the membrane-associated HER2 receptor on tumor cells, followed by intracellular delivery of a cytotoxic drug.

Таблица 13Table 13

Краткое описание in vitro цитотоксичности ADC 1Summary of in vitro cytotoxicity of ADC 1

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative IC50 в HER2+ (ср. геом.) IC50 in HER2+ (cf. geom.) IC50 в HER2(ср. геом. IC50 in HER2(cf. geom. Индекс селект. Select index. SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB231 MDA-MB231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀ (мкг/мл) IC ₅₀ (µg/ml) 3,20E-01 3.20E-01 1,38E+00 1.38E+00 1,36E+01 1.36E+01 4,90E+01 4.90E+01 6,64E-01 6.64E-01 2,58E01 2.58E01 38,8 38.8 IC50(M) IC50(M) 2,14E-09 2.14E-09 9,20E-09 9.20E-09 9,04E-08 9.04E-08 3,27E-07 3.27E-07 4,44E-09 4.44E-09 1,72E-07 1.72E-07

Для графического сравнения цитотоксичности моноклонального антитела Трастузумаба отдельно с таковой для конъюгата ADC 1, гистограммы, показывающие долю выживания клеток после обработки разных клеточных линий отдельным моноклональным антителом (20 мкг/мл) или ADC 1 в дозе 16 или 2,5 мкг/мл, показаны на фиг. 4. По наблюдениям, при аналогичных концентрациях (20 к 16 мкг/мл) Трастузумаб демонстрирует незначительную цитотоксичность независимо от уровней экспрессии HER2 клеточными линиями (выживаемость клеток от 68 до 100%), в то время как ADC 1 демонстрируетTo graphically compare the cytotoxicity of the monoclonal antibody Trastuzumab alone with that of the ADC 1 conjugate, histograms showing the proportion of cell survival after treatment of different cell lines with the individual monoclonal antibody (20 μg/ml) or ADC 1 at a dose of 16 or 2.5 μg/ml are shown. in fig. 4. At similar concentrations (20 to 16 μg/ml), Trastuzumab was observed to exhibit negligible cytotoxicity regardless of HER2 expression levels by cell lines (68 to 100% cell survival), while ADC 1 demonstrated

- 163 046742 значительное антипролиферативное действие против НЕК2-экспрессирующих клеток HCC-1954 и SKBR-3 (выживаемость клеток 23% и 8% соответственно) и незначительное против НЕК2-отрицательных клеточных линий MCF-7 (100% выживаемость клеток). Действие ADC на MDA-MB-231 заметно при этой концентрации (22% выживаемость клеток), но является очень умеренным при низких концентрациях (83% выживаемость клеток при 2,5 мкг/мл), в то время как оно довольно значительно в HER2-экспрессирующих клетках (30% выживаемость клеток для обеих SK-BR-3 и HCC-1954).- 163 046742 significant antiproliferative effect against HEK2-expressing HCC-1954 and SKBR-3 cells (cell survival 23% and 8%, respectively) and insignificant against HEK2-negative cell lines MCF-7 (100% cell survival). The effect of ADC on MDA-MB-231 is noticeable at this concentration (22% cell survival) but is very modest at low concentrations (83% cell survival at 2.5 μg/ml), while it is quite significant in HER2- expressing cells (30% cell survival for both SK-BR-3 and HCC-1954).

Эти результаты ясно демонстрируют значительную цитотоксичность и специфичность ADC 1 против HER2-экспрессирующих опухолевых клеток человека in vitro.These results clearly demonstrate the significant cytotoxicity and specificity of ADC 1 against HER2-expressing human tumor cells in vitro.

Пример биоактивности 2 - цитотоксичность конъюгата ADC 2 и родственных реагентов против HER2 положительных и отрицательных клеток рака груди.Bioactivity Example 2 - Cytotoxicity of ADC 2 conjugate and related reagents against HER2 positive and negative breast cancer cells.

In vitro цитотоксичность ADC2 вместе с исходным цитотоксическим соединением DL 2 оценивают против четырех разных клеточных линий рака груди, сверхэкспрессирующих или нет HER2 рецептор, включая SK-BR-3, HCC-1954 (HER2 положительные клетки), а также MDA-MB-231 и MCF-7 (HER2 отрицательные клетки). Получают стандартные дозозависимые (ДЗ) кривые для 72 инкубирования с тестируемыми соединениями. Результаты также сравнивают с исходным цитотоксическим соединением 11-R и моноклональным антителом трастузумабом, описанным выше.The in vitro cytotoxicity of ADC2, together with the parent cytotoxic compound DL 2, was evaluated against four different breast cancer cell lines, whether or not to overexpress the HER2 receptor, including SK-BR-3, HCC-1954 (HER2 positive cells), and MDA-MB-231 and MCF-7 (HER2 negative cells). Standard dose-response (DZ) curves are obtained for 72 incubations with test compounds. The results are also compared with the parent cytotoxic compound 11-R and the monoclonal antibody trastuzumab described above.

Цитотоксичность DL 2.Cytotoxicity DL 2.

Цитотоксичность промежуточного соединения DL 2 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 10 мкг/мл до 2,6 нг/мл (6,26E-06-1,64E-09 M).The cytotoxicity of the DL 2 intermediate was assessed against various tumor cell lines by generating triple DZ curves of 10-point, 2.5-fold dilutions from 10 μg/ml to 2.6 ng/ml (6.26E-06-1.64E-09 M).

Как показано в табл. 14, цитотоксичность этого соединения была аналогичной во всех линиях опухолевых клеток независимо от их экспрессии HER 2, со значениями IC₅₀ в субмикромолярном диапазоне, от 0,2 до 0,47 мкг/мл (1,25E-07 до 2,94E-07 M). Средние геометрические значения IC₅₀ по всей клеточной панели составляют 0,28 мкг/мл (1,73E-07 M), при стандартном геометрическом отклонении, составляющем 1,5 в соответствии с гомогенностью результатов для четырех клеточных линий.As shown in table. 14, the cytotoxicity of this compound was similar in all tumor cell lines regardless of their HER 2 expression, with IC ₅₀ values in the submicromolar range, from 0.2 to 0.47 μg/ml (1.25E-07 to 2.94E-07 M). The geometric mean IC ₅₀ values across the entire cell panel were 0.28 μg/ml (1.73E-07 M), with a geometric standard deviation of 1.5 consistent with the homogeneity of the results across the four cell lines.

Таблица 14Table 14

Краткое описание in vitro цитотоксичность DL 2Brief description of in vitro cytotoxicity of DL 2

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB-231 MDA-MB-231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀, мкг/мл IC ₅₀ , µg/ml 2,00E-01 2.00E-01 3,10E-01 3.10E-01 2,00E-01 2.00E-01 4,69E-01 4.69E-01 IC50, M IC50,M 1,25E-07 1.25E-07 1,94E-07 1.94E-07 1,25E-07 1.25E-07 2,94E-07 2.94E-07

Цитотоксичность ADC 2.Cytotoxicity of ADC 2.

Цитотоксичность ADC 2 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 100 мкг/мл до 26 нг/мл (6,67E-07-1,75E-10 M). На фиг. 5 показана ДЗ кривая, соответствующая этому эксперименту, и в табл. 15 суммированы полученные значения IC₅₀.The cytotoxicity of ADC 2 is assessed against different tumor cell lines by obtaining triple DZ curves with 10-point, 2.5-fold dilutions from 100 μg/ml to 26 ng/ml (6.67E-07-1.75E-10 M). In fig. Figure 5 shows the DS curve corresponding to this experiment, and table. Figure 15 summarizes the obtained IC ₅₀ values.

Как видно из табл. 15, ADC 2 показал более высокую цитотоксичность в HER2-положительных клетках, чем в HER2-отрицательных клетках: ADC почти в 10 раз эффективнее в первых, согласно индексу селективности, полученному делением среднего значения IC₅₀ в HER2-отрицательных клетках на таковое в HER2-положительных клетках. Хотя указанная селективность довольно умеренная, все еще можно сделать вывод, что конъюгат действует через взаимодействие антитела с мембраноассоциированным HER2 рецептором на опухолевых клетках, с последующей внутриклеточной доставкой цитотоксического лекарственного средства.As can be seen from table. 15, ADC 2 showed higher cytotoxicity in HER2-positive cells than in HER2-negative cells: ADC is almost 10 times more effective in the former, according to the selectivity index obtained by dividing the average IC ₅₀ value in HER2-negative cells by that in HER2- positive cells. Although this selectivity is quite moderate, it can still be concluded that the conjugate acts through the interaction of the antibody with the membrane-associated HER2 receptor on tumor cells, followed by intracellular delivery of the cytotoxic drug.

Таблица 15Table 15

Краткое описание in vitro цитотоксичности ADC 2Summary of in vitro cytotoxicity of ADC 2

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative ^IC50 ^в HER2+ (ср. геом.) ^IC 50 ⁱⁿ HER2+ (geom. average) ^IC50 ^в HER2(ср. геом. ^IC 50 ⁱⁿ HER2 (compare geom. Индекс селект. Select index. SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB- 231 MDA-MB- 231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀ (мкг/мл) IC ₅₀ (µg/ml) 2,00E+00 2.00E+00 5,60E+00 5.60E+00 1,70E+01 1.70E+01 4,01E+01 4.01E+01 3,34E+00 3.34E+00 2,61E+01 2.61E+01 7,8 7.8 IC5o(M) IC5o(M) 1,33E-08 1.33E-08 3,73E-08 3.73E-08 1,13E-07 1.13E-07 2,67E-07 2.67E-07 2,23E-08 2.23E-08 1,74E-07 1.74E-07

Для графического сравнения цитотоксичности моноклонального антитела Трастузумаба отдельно с таковой для конъюгата ADC 2, гистограммы, показывающие долю выживания клеток после обработки разных клеточных линий отдельным моноклональным антителом (20 мкг/мл) или ADC 2 в дозе 16 или 2,5 мкг/мл, показаны на фиг. 6. По наблюдениям, при аналогичных концентрациях (20 к 16 мкг/мл)To graphically compare the cytotoxicity of the monoclonal antibody Trastuzumab alone with that of the ADC 2 conjugate, histograms showing the proportion of cell survival after treatment of different cell lines with the individual monoclonal antibody (20 μg/ml) or ADC 2 at a dose of 16 or 2.5 μg/ml are shown. in fig. 6. According to observations, at similar concentrations (20 to 16 μg/ml)

- 164 046742- 164 046742

Трастузумаб демонстрирует незначительную цитотоксичность независимо от уровней экспрессии HER2 клеточными линиями (выживаемость клеток от 68% до 100%), в то время как ADC 2 демонстрирует значительное антипролиферативное действие против HER2-экспрессирующих клеток HCC-1954 и SKBR-3 (выживаемость клеток 31% и 40%, соответственно), где такое действие является незначительным против HER2-отрицательной клеточной линии MCF-7 (94% выживаемость клеток). Действие ADC на HER2-отрицательную клеточную линию MDA-MB-231 также является значительными в этой концентрации (58% выживаемость клеток), но практически нулевым при более низких концентрациях (100% выживаемость клеток при 2,5 мкг/мл), в то время как она остается все еще заметной в HER2экспрессирующих клетках (63% выживаемость клеток для HCC-1954 и 51% for SK-BR-3).Trastuzumab exhibits negligible cytotoxicity regardless of HER2 expression levels by cell lines (68% to 100% cell survival), while ADC 2 exhibits significant antiproliferative effects against HER2-expressing HCC-1954 and SKBR-3 cells (31% and 100% cell survival). 40%, respectively), where such effect is negligible against the HER2-negative cell line MCF-7 (94% cell survival). The effect of ADC on the HER2-negative cell line MDA-MB-231 is also significant at this concentration (58% cell survival), but virtually nil at lower concentrations (100% cell survival at 2.5 μg/ml), while how it remains still prominent in HER2-expressing cells (63% cell survival for HCC-1954 and 51% for SK-BR-3).

Пример биоактивности 3 - цитотоксичность конъюгата ADC 3 и родственных реагентов против HER2 положительных и отрицательных клеток рака груди.Bioactivity Example 3 - Cytotoxicity of ADC 3 conjugate and related reagents against HER2 positive and negative breast cancer cells.

In vitro цитотоксичность ADC 3 вместе с исходным цитотоксическим соединением DL 3 оценивают против четырех разных клеточных линий рака груди, сверхэкспрессирующих или нет HER2 рецептор, включая SK-BR-3, HCC-1954 (HER2 положительные клетки) а также MDA-MB-231 и MCF-7 (HER2 отрицательные клетки). Получают стандартные дозозависимые (ДЗ) кривые для 72 инкубирования с тестируемыми соединениями. Результаты также сравнивают с исходным цитотоксическим соединением 11-R и моноклональным антителом трастузумаб, описанным выше.The in vitro cytotoxicity of ADC 3, together with the parent cytotoxic compound DL 3, was evaluated against four different breast cancer cell lines, overexpressing or not the HER2 receptor, including SK-BR-3, HCC-1954 (HER2 positive cells) and MDA-MB-231 and MCF-7 (HER2 negative cells). Standard dose-response (DZ) curves are obtained for 72 incubations with test compounds. The results are also compared with the parent cytotoxic compound 11-R and the monoclonal antibody trastuzumab described above.

Цитотоксичность DL 3.Cytotoxicity DL 3.

Цитотоксичность промежуточного соединения DL 3 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 10 мкг/мл до 2,6 нг/мл (6,62E-06-1,74E-09 M).The cytotoxicity of the DL 3 intermediate was assessed against different tumor cell lines by generating triple DZ curves of 10-point, 2.5-fold dilutions from 10 μg/ml to 2.6 ng/ml (6.62E-06-1.74E-09 M).

Как показано в табл. 16, цитотоксичность этого соединения была аналогичной во всех линиях опухолевых клеток независимо от их экспрессии HER 2, со значениями IC₅₀ в субмикромолярном диапазоне, от 0,15 до 0,28 мкг/мл (9,93E-08 до 1,85E-07 M). Средние геометрические значения IC₅₀ по всей клеточной панели составляют 0,2 мкг/мл (1,33E-07 M), при стандартном геометрическом отклонении, составляющем 1,4 в соответствии с гомогенностью результатов для четырех клеточных линий.As shown in table. 16, the cytotoxicity of this compound was similar in all tumor cell lines regardless of their HER 2 expression, with IC ₅₀ values in the submicromolar range, from 0.15 to 0.28 μg/ml (9.93E-08 to 1.85E-07 M). The geometric mean IC ₅₀ values across the entire cell panel were 0.2 μg/ml (1.33E-07 M), with a geometric standard deviation of 1.4 consistent with the homogeneity of the results across the four cell lines.

Таблица 16Table 16

Краткое описание in vitro цитотоксичности DL 3Summary of in vitro cytotoxicity of DL 3

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB-231 MDA-MB-231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀, мкг/мл IC ₅₀ , µg/ml 1,60E-01 1.60E-01 2,40E-01 2.40E-01 1,50E-01 1.50E-01 2,79E-01 2.79E-01 IC50, M IC50, M 1,06E-07 1.06E-07 1,59E-07 1.59E-07 9,93E-08 9.93E-08 1,85E-07 1.85E-07

Цитотоксичность ADC 3.Cytotoxicity of ADC 3.

Цитотоксичность ADC3 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 50 мкг/мл до 13 нг/мл (3,33E-07-8,74E-11 M). На фиг. 7 показана ДЗ кривая, соответствующая этому эксперименту, и в табл. 17 суммированы полученные значения IC₅₀.The cytotoxicity of ADC3 was assessed against different tumor cell lines by generating triple DZ curves with 10-point, 2.5-fold dilutions from 50 μg/ml to 13 ng/ml (3.33E-07-8.74E-11 M). In fig. 7 shows the DS curve corresponding to this experiment, and table. Figure 17 summarizes the obtained IC ₅₀ values.

Как видно из табл. 17, ADC 3 демонстрирует цитотоксичность, которая только в HER2положительных клетках аналогична таковой, показанной исходным лекарственным средством 11-R. Однако в HER2-отрицательных клетках такая цитотоксичность значительно ниже: в 23 раза ниже согласно индексу селективности, полученному делением среднего значения IC₅₀ в HER2-отрицательных клетках на таковое в HER2-положительных клетках. Такая селективность позволяет сделать вывод, что конъюгат действует через взаимодействие антитела с мембраноассоциированным HER2 рецептором на опухолевых клетках, с последующей внутриклеточной доставкой цитотоксического лекарственного средства, как ранее установлено для ADC 1 и ADC 2.As can be seen from table. 17, ADC 3 exhibits cytotoxicity that is only in HER2-positive cells similar to that shown by the parent drug 11-R. However, in HER2-negative cells such cytotoxicity is significantly lower: 23 times lower according to the selectivity index obtained by dividing the average IC ₅₀ value in HER2-negative cells by that in HER2-positive cells. This selectivity suggests that the conjugate acts through the interaction of the antibody with the membrane-associated HER2 receptor on tumor cells, followed by intracellular delivery of a cytotoxic drug, as previously established for ADC 1 and ADC 2.

Таблица 17Table 17

Краткое описание in vitro цитотоксичности ADC 3Summary of in vitro cytotoxicity of ADC 3

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative ^IC50 ^в HER2+ (ср. геом.) ^IC 50 ⁱⁿ HER2+ (geom. average) ^IC50 ^в HER2(ср. геом. ^IC 50 ⁱⁿ HER2 (compare geom. Индекс селект. Select index. SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB- 231 MDA-MB- 231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀ (мкг/мл) IC ₅₀ (µg/ml) 6,71E-01 6.71E-01 8,10E-01 8.10E-01 1,30E+01 1.30E+01 2,21E+01 2.21E+01 7,37E-01 7.37E-01 1,70E+01 1.70E+01 23,0 23.0 IC5o(M) IC5o(M) 4,47E-09 4.47E-09 5,40E-09 5.40E-09 8,67E-08 8.67E-08 1,47E-07 1.47E-07 4,91E-09 4.91E-09 1,13E-07 1.13E-07

Для графического сравнения цитотоксичности моноклонального антитела трастузумаба отдельно сTo graphically compare the cytotoxicity of the monoclonal antibody trastuzumab alone with

- 165 046742 таковой для конъюгата ADC 3, гистограммы, показывающие долю выживания клеток после обработки разных клеточных линий отдельным моноклональным антителом (20 мкг/мл) или ADC 3 в дозе 20 или 3 мкг/мл, показаны на фигуре 8. Как видно, при 20 мкг/мл Трастузумаб показал незначительную цитотоксичность независимо от уровней экспрессии HER2 у клеточных линиях (выживаемость клеток от 68% до 100%), в то время как ADC 3 демонстрирует мощное антипролиферативное действие против HER2-экспрессирующих клеток HCC-1954 и SK-BR-3 (выживаемость клеток 23% и 32%, соответственно) и только незначительное против HER2-отрицательной клеточной линии MCF-7 (88% выживаемость клеток). Действие ADC на MDA-MB-231 заметно в этой концентрации (32% выживаемость клеток), но незначительно при более низких концентрациях (91% выживаемость клеток при 3 мкг/мл) в то время как, она остается все еще заметной в HER2-экспрессирующих клетках (34% выживаемость клеток для HCC-1954 и 45% для SK-BR-3).- 165 046742 that for the ADC 3 conjugate, histograms showing the proportion of cell survival after treatment of different cell lines with a separate monoclonal antibody (20 μg/ml) or ADC 3 at a dose of 20 or 3 μg/ml are shown in figure 8. As can be seen, when 20 μg/ml Trastuzumab showed negligible cytotoxicity regardless of HER2 expression levels in cell lines (68% to 100% cell survival), while ADC 3 demonstrated potent antiproliferative effects against HER2-expressing HCC-1954 and SK-BR- cells. 3 (23% and 32% cell survival, respectively) and only nonsignificant against the HER2-negative cell line MCF-7 (88% cell survival). The effect of ADC on MDA-MB-231 is noticeable at this concentration (32% cell survival) but is negligible at lower concentrations (91% cell survival at 3 μg/ml) while it is still noticeable in HER2-expressing cells (34% cell survival for HCC-1954 and 45% for SK-BR-3).

Пример биоактивности 4 - цитотоксичность конъюгата ADC 4 против HER2 положительных и отрицательных клеток рака груди.Bioactivity Example 4 - Cytotoxicity of ADC Conjugate 4 against HER2 positive and negative breast cancer cells.

In vitro цитотоксичность ADC ADC 4 оценивают против четырех разных клеточных линий рака груди сверхэкспрессирующих или нет HER2 рецептор, включая SK-BR-3, HCC-1954 (HER2 положительные клетки) а также MDA-MB-231 и MCF-7 (HER2 отрицательные клетки). Получают стандартные дозозависимые (ДЗ) кривые для 72 инкубирования с ADC. Результаты также сравнивают с исходными цитотоксическими соединениями 11-R и DL 1 а также моноклональным антителом Трастузумабом, описанным выше.The in vitro cytotoxicity of the ADC ADC 4 was evaluated against four different breast cancer cell lines overexpressing or not the HER2 receptor, including SK-BR-3, HCC-1954 (HER2 positive cells) and MDA-MB-231 and MCF-7 (HER2 negative cells ). Standard dose-response (DZ) curves are obtained for 72 incubation with ADC. The results are also compared with the parent cytotoxic compounds 11-R and DL 1 and the monoclonal antibody Trastuzumab described above.

Цитотоксичность ADC 4.Cytotoxicity of ADC 4.

Цитотоксичность ADC 4 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 50 мкг/мл до 13 нг/мл (3,33E-07-8,74E-11 M). На фигуре 9 показана ДЗ кривая, соответствующая этому эксперименту, и в таблице 18 суммированы полученные значения IC₅₀.The cytotoxicity of ADC 4 was assessed against different tumor cell lines by obtaining triple DZ curves with 10-point, 2.5-fold dilutions from 50 μg/ml to 13 ng/ml (3.33E-07-8.74E-11 M). Figure 9 shows the DS curve corresponding to this experiment, and Table 18 summarizes the obtained IC ₅₀ values.

Как видно из таблицы 18, ADC 4 демонстрирует цитотоксичность, которая только в HER2положительных клетках аналогична таковой, показанной исходным лекарственным средством 11-R. Однако в HER2-отрицательных клетках такая цитотоксичность практически в 100 раз ниже согласно индексу селективности, полученному делением среднего значения IC₅₀ в HER2-отрицательных клетках на таковое в HER2-положительных клетках. Как уже установлено для ADC 1, такая селективность позволяет сделать вывод, что конъюгат действует через взаимодействие антитела с мембраноассоциированным HER2 рецептором на опухолевых клетках, с последующей внутриклеточной доставкой цитотоксического лекарственного средства. Более того, эти результаты, полученные с ADC 4, демонстрируют, что противоопухолевый потенциал, обеспечиваемый полезной нагрузкой, является аналогичным независимо от остатка антитела, вовлеченного в ковалентную связь, либо Cys, либо Lys.As can be seen from Table 18, ADC 4 exhibits cytotoxicity that is only in HER2 positive cells similar to that shown by the parent drug 11-R. However, in HER2-negative cells such cytotoxicity is almost 100-fold lower according to the selectivity index obtained by dividing the average IC ₅₀ value in HER2-negative cells by that in HER2-positive cells. As already established for ADC 1, this selectivity suggests that the conjugate acts through the interaction of the antibody with the membrane-associated HER2 receptor on tumor cells, followed by intracellular delivery of the cytotoxic drug. Moreover, these results obtained with ADC 4 demonstrate that the antitumor potential provided by the payload is similar regardless of the antibody residue involved in the covalent bond, either Cys or Lys.

Таблица 18Table 18

Краткое описание in vitro цитотоксичности ADC 4Summary of in vitro cytotoxicity of ADC 4

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative ^IC50 ^в HER2+ (ср. геом.) ^IC 50 ⁱⁿ HER2+ (geom. average) ^IC50 ^в HER2(ср. геом. ^IC 50 ⁱⁿ HER2 (compare geom. Индекс селект. Select index. SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB- 231 MDA-MB- 231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀ (мкг/мл) IC ₅₀ (µg/ml) 3,20E-02 3.20E-02 1,50E-01 1.50E-01 3,50E+00 3.50E+00 8,10E+00 8.10E+00 6,92E-02 6.92E-02 5,32E+00 5.32E+00 76,86 76.86 IC5o(M) IC5o(M) 2,13E-10 2.13E-10 1,00E-09 1.00E-09 2,33E-08 2.33E-08 5,40E-08 5.40E-08 4,62E-10 4.62E-10 3,55E-08 3.55E-08

Для графического сравнения цитотоксичности моноклонального антитела трастузумаба отдельно с таковой для конъюгата ADC 4, гистограммы, показывающие долю выживания клеток после обработки разных клеточных линий отдельным моноклональным антителом в дозе 3 мкг/мл или с ADC в дозе 3 или 0,2 мкг/мл, показаны на фиг. 10. Как можно увидеть, при 3 мкг/мл трастузумаб показал недостаточную цитотоксичность независимо от уровней экспрессии HER2 в клеточных линиях (выживаемость клеток от 60% до 90%), в то время как ADC 4 показан мощное антипролиферативное действие против HER-2 экспрессирующих клеток HCC-1954 и SK-BR-3 (выживаемость клеток 11% и 23%, соответственно) и практически отсутствие действия на HER2-отрицательную клеточную линию MCF-7. Действие ADC на клеточную линию MDA-MB-231 было заметным в этой концентрации (55% выживаемость клеток), но незначительно при более низких концентрациях (97-100% выживаемость клеток при 0,2 мкг/мл), в то время как оно явно заметно в HER2-экспрессирующих клетках (38% выживаемость клеток для HCC-1954 и 26% для SK-BR-3).To graphically compare the cytotoxicity of the monoclonal antibody trastuzumab alone with that of the ADC 4 conjugate, histograms showing the proportion of cell survival after treatment of different cell lines with the individual monoclonal antibody at a dose of 3 μg/ml or with ADC at a dose of 3 or 0.2 μg/ml are shown in fig. 10. As can be seen, at 3 μg/ml trastuzumab showed insufficient cytotoxicity regardless of HER2 expression levels in cell lines (60% to 90% cell survival), while ADC 4 showed potent antiproliferative activity against HER-2 expressing cells HCC-1954 and SK-BR-3 (11% and 23% cell survival, respectively) and virtually no effect on the HER2-negative cell line MCF-7. The effect of ADC on the MDA-MB-231 cell line was noticeable at this concentration (55% cell survival) but negligible at lower concentrations (97-100% cell survival at 0.2 μg/ml), while it clearly noticeable in HER2-expressing cells (38% cell survival for HCC-1954 and 26% for SK-BR-3).

Пример биоактивности 5 - цитотоксичность конъюгата ADC 6 и родственных реагентов против HER2 положительных и отрицательных клеток рака груди.Bioactivity Example 5 - Cytotoxicity of ADC conjugate 6 and related reagents against HER2 positive and negative breast cancer cells.

In vitro цитотоксичность ADC 6 вместе с исходными цитотоксическими соединениями DL 5 и 12 R оценивают против четырех разных клеточных линий рака груди, сверхэкспрессирующих или нет HER2 рецептор, включая SK-BR-3, HCC-1954 (HER2-πоложительные клетки) а также MDA-MB-231 и MCF-7The in vitro cytotoxicity of ADC 6, along with the parent cytotoxic compounds DL 5 and 12 R, was assessed against four different breast cancer cell lines, whether or not to overexpress the HER2 receptor, including SK-BR-3, HCC-1954 (HER2-positive cells), and MDA- MB-231 and MCF-7

- 166 046742 (НЕК2-отрицательные клетки). Получают стандартные дозозависимые (ДЗ) кривые для 72 инкубирования с тестируемыми соединениями.- 166 046742 (HEK2-negative cells). Standard dose-response (DZ) curves are obtained for 72 incubations with test compounds.

Цитотоксичность 12-R.Cytotoxicity of 12-R.

Цитотоксичность промежуточного соединения 12-R оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 100 до 0,03 нг/мл (1,28E-07-3,83E-11 M).The cytotoxicity of intermediate 12-R was assessed against different tumor cell lines by generating triple DZ curves of 10-point, 2.5-fold dilutions from 100 to 0.03 ng/ml (1.28E-07-3.83E-11 M) .

Как показано в табл. 19, где представлены результаты среднего геометрического значений IC₅₀полученных в трех независимых экспериментах, цитотоксичность этого соединения была аналогичной во всех линиях опухолевых клеток независимо от их экспрессии HER 2, со значениями IC50 в нижнем наномолярном диапазоне, от 0,4 до 1,3 нг/мл (5,62E-10 до 1,62E-09 M). Средние геометрические значения IC50 по всей клеточной панели составляют 0,71 нг/мл (9,06E-10 M), при стандартном геометрическом отклонении, составляющем 1,7 в соответствии с гомогенностью результатов для четырех клеточных линий.As shown in table. 19, which presents geometric mean IC ₅₀ values obtained from three independent experiments, the cytotoxicity of this compound was similar in all tumor cell lines regardless of their HER 2 expression, with IC 50 values in the low nanomolar range, from 0.4 to 1.3 ng /ml (5.62E-10 to 1.62E-09 M). The geometric mean IC50 values across the entire cell panel were 0.71 ng/mL (9.06E-10 M), with a geometric standard deviation of 1.7 consistent with the homogeneity of the results across the four cell lines.

Таблица 19Table 19

Краткое описание in vitro цитотоксичности 12-RSummary of in vitro cytotoxicity of 12-R

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB-231 MDA-MB-231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀, мкг/мл IC ₅₀ , µg/ml 4,41E-04 4.41E-04 1,27E-03 1.27E-03 4,93E-04 4.93E-04 9,24E-04 9.24E-04 IC50, M IC50, M 5,62E-10 5.62E-10 1,62E-09 1.62E-09 6,29E-10 6.29E-10 1,18E-09 1.18E-09

Цитотоксичность DL 5.Cytotoxicity DL 5.

Цитотоксичность промежуточного соединения DL 5 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 10 мкг/мл до 2,6 нг/мл (6,66E-06-1,73E-09 M).The cytotoxicity of the DL 5 intermediate was assessed against various tumor cell lines by generating triple DZ curves of 10-point, 2.5-fold dilutions from 10 μg/ml to 2.6 ng/ml (6.66E-06-1.73E-09 M).

Как показано в табл. 20, цитотоксичность этого соединения была аналогичной во всех линиях опухолевых клеток независимо от их экспрессии HER 2, со значениями IC50 в высоком наномолярном диапазоне, от 0,10 до 0,19 мкг/мл (6,53E-08 до 1,27E-07 M). Средние геометрические значения IC₅₀ по всей клеточной панели составляют 0,13 мкг/мл (8,84E-08 M), при стандартном геометрическом отклонении, составляющем 1,4 в соответствии с гомогенностью результатов для четырех клеточных линий.As shown in table. 20, the cytotoxicity of this compound was similar in all tumor cell lines regardless of their HER 2 expression, with IC50 values in the high nanomolar range, from 0.10 to 0.19 μg/ml (6.53E-08 to 1.27E-07 M). The geometric mean IC ₅₀ values across the entire cell panel were 0.13 μg/ml (8.84E-08 M), with a geometric standard deviation of 1.4 consistent with the homogeneity of the results across the four cell lines.

Таблица 20Table 20

Краткое описание in vitro цитотоксичности DL 5Summary of in vitro cytotoxicity of DL 5

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB-231 MDA-MB-231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀, мкг/мл IC ₅₀ , µg/ml 9,81E-02 9.81E-02 1,91E-01 1.91E-01 9,81E-02 9.81E-02 1,70E-01 1.70E-01 IC50, M IC50, M 6,53E-08 6.53E-08 1,27E-07 1.27E-07 6,53E-08 6.53E-08 1,13E-07 1.13E-07

Цитотоксичность ADC 6.Cytotoxicity of ADC 6.

Цитотоксичность ADC 6 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 100 мкг/мл до 26 нг/мл (6,67E-07-1,75E-10 M). На фиг. 11 показана полученная ДЗ кривая, и в таблице 21 суммированы выведенные значения IC₅₀.The cytotoxicity of ADC 6 was assessed against different tumor cell lines by obtaining triple DZ curves with 10-point, 2.5-fold dilutions from 100 μg/ml to 26 ng/ml (6.67E-07-1.75E-10 M). In fig. Figure 11 shows the resulting DS curve, and Table 21 summarizes the derived IC ₅₀ values.

Как видно из табл. 21, цитотоксичность ADC 6 сравнима с той, которую показывает исходное лекарственное средство 12-R только в HER2-положительных клетках. Однако в HER2-отрицательных клетках такая токсичность ниже: почти в 10 раз ниже, согласно индексу селективности, полученному делением среднего значения IC₅₀ в HER2-отрицательных клетках на таковое в HER2-положительных клетках. Эти данные позволяют сделать вывод, что конъюгат действует через взаимодействие антитела с мембраноассоциированным HER2 рецептором на опухолевых клетках, с последующей внутриклеточной доставкой цитотоксического лекарственного средства.As can be seen from table. 21, the cytotoxicity of ADC 6 is comparable to that exhibited by the parent drug 12-R only in HER2-positive cells. However, in HER2-negative cells such toxicity is lower: almost 10 times lower, according to the selectivity index obtained by dividing the average IC ₅₀ value in HER2-negative cells by that in HER2-positive cells. These data allow us to conclude that the conjugate acts through the interaction of the antibody with the membrane-associated HER2 receptor on tumor cells, followed by intracellular delivery of a cytotoxic drug.

- 167 046742- 167 046742

Таблица 21Table 21

Краткое описание in vitro цитотоксичности ADC 6Summary of in vitro cytotoxicity of ADC 6

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative IC50 в HER2+ (ср. геом.) IC50 in HER2+ (cf. geom.) IC50 в HER2(ср. геом. IC50 in HER2(cf. geom. Индекс селект. Select index. SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB231 MDA-MB231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀ (мкг/мл) IC ₅₀ (µg/ml) 6,50E-01 6.50E-01 4,10E+00 4.10E+00 1,20E+01 1.20E+01 1,70E+01 1.70E+01 1,63E00 1.63E00 1,43E01 1.43E01 8,8 8.8 IC50(M) IC50(M) 4,33E-09 4.33E-09 2,73E-08 2.73E-08 8,00E-08 8.00E-08 1,13E-07 1.13E-07 1,08E-08 1.08E-08 9,51E-08 9.51E-08

Пример биоактивности 6 - цитотоксичность конъюгата ADC 11 и родственных реагентов против HER2 положительных и отрицательных клеток рака груди.Bioactivity Example 6 - Cytotoxicity of ADC conjugate 11 and related reagents against HER2 positive and negative breast cancer cells.

In vitro цитотоксичность ADC 11 вместе с исходными цитотоксическими соединениями DL 6 и 12 R оценивают против четырех разных клеточных линий рака груди сверхэкспрессирующих или нет HER2 рецептор, включая SK-BR-3, HCC-1954 (HER2-πоложительные клетки) а также MDA-MB-231 и MCF-7 (HER2-оmрицательные клетки). Получают стандартные дозозависимые (ДЗ) кривые для 72 инкубирования с тестируемыми соединениями.The in vitro cytotoxicity of ADC 11, along with the parent cytotoxic compounds DL 6 and 12 R, was evaluated against four different breast cancer cell lines overexpressing or not the HER2 receptor, including SK-BR-3, HCC-1954 (HER2-positive cells), and MDA-MB -231 and MCF-7 (HER2-negative cells). Standard dose-response (DZ) curves are obtained for 72 incubations with test compounds.

Цитотоксичность DL 6.Cytotoxicity DL 6.

Цитотоксичность промежуточного соединения DL 6 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 1 мкг/мл до 0,26 нг/мл (7,23E-07-1,88E-10 M).The cytotoxicity of intermediate DL 6 was assessed against different tumor cell lines by generating triple DZ curves of 10-point, 2.5-fold dilutions from 1 μg/ml to 0.26 ng/ml (7.23E-07-1.88E-10 M).

Как показано в табл. 22, цитотоксичность этого соединения была аналогичной во всех линиях опухолевых клеток независимо от их экспрессии HER 2, со значениями IC₅₀ в высоком наномолярном диапазоне, от 0,04 до 0,3 мкг/мл (3,1E-08 до 1,97E-07 M). Средние геометрические значения IC₅₀ по всей клеточной панели составляют 0,11 мкг/мл (7,89E-08 M), при стандартном геометрическом отклонении, составляющем 2,31 в соответствии с гомогенностью результатов для четырех клеточных линий.As shown in table. 22, the cytotoxicity of this compound was similar in all tumor cell lines regardless of their HER 2 expression, with IC ₅₀ values in the high nanomolar range, from 0.04 to 0.3 μg/ml (3.1E-08 to 1.97E- 07 M). The geometric mean IC ₅₀ values across the entire cell panel were 0.11 μg/ml (7.89E-08 M), with a geometric standard deviation of 2.31 consistent with homogeneity of the results across the four cell lines.

Таблица 22Table 22

Краткое описание in vitro цитотоксичности DL 6Summary of in vitro cytotoxicity of DL 6

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB-231 MDA-MB-231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀, мкг/мл IC ₅₀ , µg/ml 7,09E-02 7.09E-02 1,71E-01 1.71E-01 4,29E-02 4.29E-02 2,73E-01 2.73E-01 IC50, M IC50, M 5,13E-08 5.13E-08 1,24E-07 1.24E-07 3,10E-08 3.10E-08 1,97E-07 1.97E-07

Цитотоксичность ADC 11.Cytotoxicity of ADC 11.

Цитотоксичность ADC 11 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 50 мкг/мл до 13 нг/мл (3,33E-07-8,74E-11 M). В табл. 23 суммированы выведенные значения IC₅₀.The cytotoxicity of ADC 11 was assessed against different tumor cell lines by obtaining triple DZ curves of 10-point, 2.5-fold dilutions from 50 μg/ml to 13 ng/ml (3.33E-07-8.74E-11 M). In table 23 summarizes the derived IC ₅₀ values.

Таблица 23Table 23

Краткое описание in vitro цитотоксичности ADC 11Summary of in vitro cytotoxicity of ADC 11

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative IC50 в HER2+ (ср. геом.) IC50 in HER2+ (cf. geom.) IC₅₀ в HER2(ср. геом. IC ₅₀ in HER2 (compare geom. Индекс селект. Select index. SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB- 231 MDA-MB- 231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀ (мкг/мл) IC ₅₀ (µg/ml) 1,10E+01 1.10E+01 3,60E+01 3.60E+01 > 5,00E+01 > 5.00E+01 > 5,00E+01 > 5.00E+01 1,99E+01 1.99E+01 > 5,00E+01 > 5.00E+01 > 2,5 > 2.5 IC50(M) IC50(M) 7,33E-08 7.33E-08 2,40E-07 2.40E-07 > 3,33E-07 > 3.33E-07 > 3,33E-07 > 3.33E-07 1,33E-07 1.33E-07 > 3,33E-07 > 3.33E-07

Пример биоактивности 7 - цитотоксичность конъюгата ADC 12 против HER2 положительных и отрицательных клеток рака грудиBioactivity Example 7 - Cytotoxicity of ADC Conjugate 12 against HER2 Positive and Negative Breast Cancer Cells

In vitro цитотоксичность ADC 12 оценивают против четырех разных клеточных линий рака груди сверхэкспрессирующих или нет HER2 рецептор, включая SK-BR-3, HCC-1954 (HER2-положительные клетки) а также MDA-MB-231 и MCF-7 (HER2-оmрицательные клетки). Получают стандартные дозозависимые (ДЗ) кривые для 72 инкубирования с тестируемыми соединениями.The in vitro cytotoxicity of ADC 12 was assessed against four different breast cancer cell lines overexpressing or not the HER2 receptor, including SK-BR-3, HCC-1954 (HER2-positive cells), and MDA-MB-231 and MCF-7 (HER2-negative cells). cells). Standard dose-response (DZ) curves are obtained for 72 incubations with test compounds.

Цитотоксичность ADC 12 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 100 мкг/мл до 26 нг/мл (6,67E-07-1,75E-10 M). В таблице 24 суммированы выведенные значения IC₅₀. Как можно увидеть, ADC 12 значительно более активен в HER2-положительных клетках, давая заметный индекс селективности выше 20.The cytotoxicity of ADC 12 was assessed against different tumor cell lines by obtaining triple DZ curves with 10-point, 2.5-fold dilutions from 100 μg/ml to 26 ng/ml (6.67E-07-1.75E-10 M). Table 24 summarizes the derived IC ₅₀ values. As can be seen, ADC 12 is significantly more active in HER2-positive cells, giving a noticeable selectivity index above 20.

- 168 046742- 168 046742

Таблица 24Table 24

Краткое описание in vitro цитотоксичности ADC 12Summary of in vitro cytotoxicity of ADC 12

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative IC50 в HER2+ (ср. геом.) IC50 in HER2+ (cf. geom.) IC50 в HER2- (ср. геом. IC50 in HER2- (cf. geom. Индекс селект. Select index. SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB231 MDA-MB231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀ (мкг/мл) IC ₅₀ (µg/ml) 1,80E-01 1.80E-01 2,90E-01 2.90E-01 1,91E+00 1.91E+00 1,30E+01 1.30E+01 2,28E-01 2.28E-01 4,98E+00 4.98E+00 21,8 21.8 IC5o(M) IC5o(M) 1,20E-09 1.20E-09 1,93E-09 1.93E-09 1,27E-08 1.27E-08 8,67E-08 8.67E-08 1,52E-09 1.52E-09 3,32E-08 3.32E-08

Пример биоактивности 8 - Цитотоксичность конъюгата ADC 13 против HER2 положительных и отрицательных клеток рака грудиBioactivity Example 8 - Cytotoxicity of ADC Conjugate 13 against HER2 Positive and Negative Breast Cancer Cells

Цитотоксичность ADC 13 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 100 мкг/мл до 26 нг/мл (6,67E-07-1,75E-10 M). В таблице 25 суммированы выведенные значения IC₅₀. Как можно увидеть, ADC 13 значительно более активен в HER2-положuтельных клетках, давая превосходный индекс селективности, близкий к 100.The cytotoxicity of ADC 13 was assessed against different tumor cell lines by obtaining triple DZ curves with 10-point, 2.5-fold dilutions from 100 μg/ml to 26 ng/ml (6.67E-07-1.75E-10 M). Table 25 summarizes the derived IC ₅₀ values. As can be seen, ADC 13 is significantly more active in HER2-positive cells, giving an excellent selectivity index close to 100.

Таблица 25Table 25

Краткое описание in vitro цитотоксичности ADC 13Summary of in vitro cytotoxicity of ADC 13

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative ^IC50 ^в HER2+ (ср. геом.) ^IC 50 ⁱⁿ HER2+ (geom. average) ^IC50 ^в HER2- (ср. геом. ^IC 50 ⁱⁿ HER2- (cf. geom. Индекс селект. Select index. SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB- 231 MDA-MB- 231 MCF-7 MCF-7 IC50 (мкг/мл) IC50 (µg/ml) 1,50E-01 1.50E-01 2,60E-01 2.60E-01 1,10E+01 1.10E+01 2,90E+01 2.90E+01 1,97E-01 1.97E-01 1,78E+01 1.78E+01 90,43 90.43 IC5o(M) IC5o(M) 1,00E-09 1.00E-09 1,73E-09 1.73E-09 7,33E-08 7.33E-08 1,93E-07 1.93E-07 1,32E-09 1.32E-09 1,19E-07 1.19E-07

Пример биоактивности 9 - цитотоксичность конъюгата ADC 14 против HER2 положительных и отрицательных клеток рака груди.Bioactivity Example 9 - Cytotoxicity of ADC conjugate 14 against HER2 positive and negative breast cancer cells.

Цитотоксичность ADC 14 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 100 мкг/мл до 26 нг/мл (6,67E-07-1,75E-10 M). В таблице 26 суммированы выведенные значения IC₅₀. Примечательно, что ADC 14 показал цитотоксическую активность в низком нМ диапазоне по сравнению с исходным лекарственным средством 11R, но только в HER2-эксnрессирующих клетках, в то время как он не смог показать никакой активности в HER2-оmрицательных клетках в пределах диапазона тестированных концентраций, тем самым подтверждая выдающуюся селективность.The cytotoxicity of ADC 14 was assessed against different tumor cell lines by obtaining triple DZ curves with 10-point, 2.5-fold dilutions from 100 μg/ml to 26 ng/ml (6.67E-07-1.75E-10 M). Table 26 summarizes the derived IC ₅₀ values. Notably, ADC 14 showed cytotoxic activity in the low nM range compared to the parent drug 11R, but only in HER2-expressing cells, while it failed to show any activity in HER2-negative cells within the concentration range tested, however thereby confirming outstanding selectivity.

Таблица 26Table 26

Краткое описание in vitro цитотоксичности ADC 14Summary of in vitro cytotoxicity of ADC 14

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative ^IC50 ^в HER2+ (ср. геом.) ^IC 50 ⁱⁿ HER2+ (geom. average) ^IC50 ^в HER2- (ср. геом. ^IC 50 ⁱⁿ HER2- (cf. geom. Индекс селект. Select index. SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB- 231 MDA-MB- 231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀ (мкг/мл) IC ₅₀ (µg/ml) 1,10E-01 1.10E-01 1,80E-01 1.80E-01 > 2,51E+01 > 2.51E+01 > 2,51E+01 > 2.51E+01 1,41E-01 1.41E-01 > 2,51E+01 > 2.51E+01 >178 >178 IC5o(M) IC5o(M) 7,33E-10 7.33E-10 1,20E-09 1.20E-09 > 1,67E-07 > 1.67E-07 > 1,67E-07 > 1.67E-07 9,38E-10 9.38E-10 > 1,67E-07 > 1.67E-07

Пример биоактивности 10 - цитотоксичность конъюгата ADC 15 против HER2 положительных и отрицательных клеток рака груди.Bioactivity Example 10 - Cytotoxicity of ADC conjugate 15 against HER2 positive and negative breast cancer cells.

Цитотоксичность ADC 15 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 50 мкг/мл до 13 нг/мл (3,33E-07-8,74E-11 M). В таблице 27 суммированы выведенные значения IC₅₀. Как можно увидеть, ADC 15 значительно более активен в HER2-положительных клетках, давая превосходный индекс селективности, близкий к 200.The cytotoxicity of ADC 15 was assessed against different tumor cell lines by obtaining triple DZ curves of 10-point, 2.5-fold dilutions from 50 μg/ml to 13 ng/ml (3.33E-07-8.74E-11 M). Table 27 summarizes the derived IC ₅₀ values. As can be seen, ADC 15 is significantly more active in HER2-positive cells, giving an excellent selectivity index of close to 200.

Таблица 27Table 27

Краткое описание in vitro цитотоксичности ADC 15Summary of in vitro cytotoxicity of ADC 15

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative IC50 в HER2+ (ср. геом.) IC50 in HER2+ (cf. geom.) IC50 в HER2- (ср. геом. IC50 in HER2- (cf. geom. Индекс селект. Select index. SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB- 231 MDA-MB- 231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀ (мкг/мл) IC ₅₀ (µg/ml) 8,00E-02 8.00E-02 1,80E-01 1.80E-01 2,10E+01 2.10E+01 2,21E+01 2.21E+01 1,20E-01 1.20E-01 2,15E+01 2.15E+01 179,4 179.4

- 169 046742- 169 046742

IC5o(M) IC5o(M) 5,33E-10 5.33E-10 1,20E-09 1.20E-09 1,40E-07 1.40E-07 1,47E-07 1.47E-07 8,00E-10 8.00E-10 1,43E-07 1.43E-07

Пример биоактивности 11 - цитотоксичность конъюгата ADC 16 против HER2 положительных и отрицательных клеток рака груди.Bioactivity Example 11 - Cytotoxicity of ADC conjugate 16 against HER2 positive and negative breast cancer cells.

Цитотоксичность ADC 16 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 100 мкг/мл до 26 нг/мл (6,67E-07-1,75E-10 M). В табл. 28 суммированы выведенные значения IC₅₀. Как можно увидеть, ADC 16 значительно более активен в HER2-положuтельных клетках, давая превосходный индекс селективности, выше 100.The cytotoxicity of ADC 16 was assessed against different tumor cell lines by obtaining triple DZ curves with 10-point, 2.5-fold dilutions from 100 μg/ml to 26 ng/ml (6.67E-07-1.75E-10 M). In table 28 summarizes the derived IC ₅₀ values. As can be seen, ADC 16 is significantly more active in HER2-positive cells, giving an excellent selectivity index above 100.

Таблица 28Table 28

Краткое описание in vitro цитотоксичности ADC 16Summary of in vitro cytotoxicity of ADC 16

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative ^IC50 ^в HER2+ (ср. геом.) ^IC 50 ⁱⁿ HER2+ (geom. average) ^IC50 ^в HER2- (ср. геом. ^IC 50 ⁱⁿ HER2- (cf. geom. Индекс селект. Select index. SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB- 231 MDA-MB- 231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀ (мкг/мл) IC ₅₀ (µg/ml) 4,01E-02 4.01E-02 8,00E-01 8.00E-01 1,30E+01 1.30E+01 2,70E+01 2.70E+01 1,79E-01 1.79E-01 1,87E+01 1.87E+01 104,7 104.7 IC5o(M) IC5o(M) 2,67E-10 2.67E-10 5,33E-09 5.33E-09 8,67E-08 8.67E-08 1,80E-07 1.80E-07 1,19E-09 1.19E-09 1,25E-07 1.25E-07

Пример биоактивности 12 - цитотоксичность конъюгата ADC 17 против HER2 положительных и отрицательных клеток рака груди.Bioactivity Example 12 - Cytotoxicity of ADC conjugate 17 against HER2 positive and negative breast cancer cells.

Цитотоксичность ADC 17 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 100 мкг/мл до 26 нг/мл (6,67E-07-1,75E-10 M). В табл. 29 суммированы выведенные значения IC₅₀.The cytotoxicity of ADC 17 was assessed against different tumor cell lines by obtaining triple DZ curves with 10-point, 2.5-fold dilutions from 100 μg/ml to 26 ng/ml (6.67E-07-1.75E-10 M). In table 29 summarizes the derived IC ₅₀ values.

Таблица 29Table 29

Краткое описание in vitro цитотоксичности ADC 17Summary of in vitro cytotoxicity of ADC 17

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative IC50 в HER2+ (ср. геом.) IC50 in HER2+ (cf. geom.) IC50 в HER2- (ср. геом. IC50 in HER2- (cf. geom. Индекс селект. Select index. SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB- 231 MDA-MB- 231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀ (мкг/мл) IC ₅₀ (µg/ml) 7,40E+00 7.40E+00 1,40E+01 1.40E+01 4,40E+01 4.40E+01 4,20E+01 4.20E+01 1,02E+01 1.02E+01 4,30E+01 4.30E+01 4,22 4.22 IC50(M) IC50(M) 4,93E-08 4.93E-08 9,33E-08 9.33E-08 2,93E-07 2.93E-07 2,80E-07 2.80E-07 6,78E-08 6.78E-08 2,86E-07 2.86E-07

Пример биоактивности 13 - цитотоксичность конъюгата ADC 18 против HER2 положительных и отрицательных клеток рака груди.Bioactivity Example 13 - Cytotoxicity of ADC conjugate 18 against HER2 positive and negative breast cancer cells.

Цитотоксичность ADC 18 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 100 мкг/мл до 26 нг/мл (6,67E-07-1,75E-10 M). В табл. 30 суммированы выведенные значения IC₅₀.The cytotoxicity of ADC 18 was assessed against different tumor cell lines by obtaining triple DZ curves with 10-point, 2.5-fold dilutions from 100 μg/ml to 26 ng/ml (6.67E-07-1.75E-10 M). In table 30 summarizes the derived IC ₅₀ values.

Таблица 30Table 30

Краткое описание in vitro цитотоксичности ADC 18Summary of in vitro cytotoxicity of ADC 18

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative IC50 в HER2+ (ср. геом.) IC50 in HER2+ (cf. geom.) IC50 в HER2- (ср. геом. IC50 in HER2- (cf. geom. Индекс селект. Select index. SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB231 MDA-MB231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀ (мкг/мл) IC ₅₀ (µg/ml) 4,40E+00 4.40E+00 2,21E+01 2.21E+01 4,31E+01 4.31E+01 9,71E+01 9.71E+01 9,84E+00 9.84E+00 6,46E+01 6.46E+01 6,57 6.57 IC5o(M) IC5o(M) 2,93E-08 2.93E-08 1,47E-07 1.47E-07 2,87E-07 2.87E-07 6,47E-07 6.47E-07 6,56E-08 6.56E-08 4,31E-07 4.31E-07

Пример биоактивности 14 - цитотоксичность конъюгата ADC 19 против HER2 положительных и отрицательных клеток рака груди.Bioactivity Example 14 - Cytotoxicity of ADC conjugate 19 against HER2 positive and negative breast cancer cells.

Цитотоксичность ADC19 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 100 мкг/мл до 26 нг/мл (6,67E-07-1,75E-10 M). В табл. 31 суммированы выведенные значения IC₅₀.The cytotoxicity of ADC19 was assessed against different tumor cell lines by generating triple DZ curves with 10-point, 2.5-fold dilutions from 100 μg/ml to 26 ng/ml (6.67E-07-1.75E-10 M). In table 31 summarizes the derived IC ₅₀ values.

Таблица 31Table 31

Краткое описание in vitro цитотоксичности ADC 19Summary of in vitro cytotoxicity of ADC 19

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative ^IC50 ^в HER2+ (ср. геом.) ^IC 50 ⁱⁿ HER2+ (geom. average) ^IC50 ^в HER2- (ср. геом. ^IC 50 ⁱⁿ HER2- (cf. geom. Индекс селект. Select index. SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB- 231 MDA-MB- 231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀ (мкг/мл) IC ₅₀ (µg/ml) 8,30E+00 8.30E+00 3,41E+01 3.41E+01 > 1,00E+02 > 1.00E+02 > 1,00E+02 > 1.00E+02 1,68E+01 1.68E+01 > 1,00E+02 > 1.00E+02 >5,95 >5.95

- 170 046742- 170 046742

IC5o(M) IC5o(M) 5,53E-08 5.53E-08 2,27E-07 2.27E-07 > 6,67E-07 > 6.67E-07 > 6,67E-07 > 6.67E-07 1,12E-07 1.12E-07 > 6,67E-07 > 6.67E-07

Пример биоактивности 15 - цитотоксичность конъюгата ADC 20 против HER2 положительных и отрицательных клеток рака груди.Bioactivity Example 15 - Cytotoxicity of ADC Conjugate 20 against HER2 positive and negative breast cancer cells.

Цитотоксичность ADC20 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 100 мкг/мл до 26 нг/мл (6,67E-07-1,75E-10 M). В табл. 32 суммированы выведенные значения IC₅₀.The cytotoxicity of ADC20 was assessed against different tumor cell lines by generating triple DZ curves with 10-point, 2.5-fold dilutions from 100 μg/ml to 26 ng/ml (6.67E-07-1.75E-10 M). In table 32 summarizes the derived IC ₅₀ values.

Таблица 32Table 32

Краткое описание in vitro цитотоксичности ADC 20Summary of in vitro cytotoxicity of ADC 20

HER2 положительные HER2 positive HER2 отрицательные HER2 negative ^IC50 ^в HER2+ (ср. геом.) ^IC 50 ⁱⁿ HER2+ (geom. average) ^IC50 ^в HER2- (ср. геом. ^IC 50 ⁱⁿ HER2- (cf. geom. Индекс селект. Select index. SK-BR-3 SK-BR-3 HCC-1954 HCC-1954 MDA-MB- 231 MDA-MB- 231 MCF-7 MCF-7 IC₅₀ (мкг/мл) IC ₅₀ (µg/ml) 2,21E+00 2.21E+00 1,61E+01 1.61E+01 5,40E+01 5.40E+01 4,01E+01 4.01E+01 5,95E+00 5.95E+00 4,65E+01 4.65E+01 7,82 7.82 IC5o(M) IC5o(M) 1,47E-08 1.47E-08 1,07E-07 1.07E-07 3,60E-07 3.60E-07 2,67E-07 2.67E-07 3,97E-08 3.97E-08 3,10E-07 3.10E-07

Пример биоактивности 16- цитотоксичность конъюгата ADC 7 и родственных реагентов против CD13 положительных и отрицательных раковых клеток.Example of bioactivity 16 - cytotoxicity of ADC conjugate 7 and related reagents against CD13 positive and negative cancer cells.

Цитотоксичность 11-R.Cytotoxicity 11-R.

Цитотоксичность промежуточного соединения 11-R оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 100 мкг/мл до 0,03 нг/мл (1,26E-07-3,3E-11 M).The cytotoxicity of intermediate 11-R was assessed against different tumor cell lines by generating triple DZ curves of 10-point, 2.5-fold dilutions from 100 μg/ml to 0.03 ng/ml (1.26E-07-3.3E- 11 M).

Как показано в табл. 33, где представлены результаты среднего геометрического значений IC₅₀, полученные в трех разных экспериментах, цитотоксичность этого соединения была аналогичной во всех линиях опухолевых клеток, независимо от их экспрессии CD13, со значениями IC₅₀ в нижнем наномолярном диапазоне, от 0,5 до 1,2 нг/мл (5,8E-10 до 1,51E-09 M). Средние геометрические значения IC₅₀ по всей клеточной панели составляют 0,84 нг/мл (1,06E-09 M) при стандартном геометрическом отклонении, составляющем 1,5 в соответствии с гомогенностью результатов для четырех клеточных линий.As shown in table. 33, which presents results of geometric mean _IC50 values obtained in three different experiments, the cytotoxicity of this compound was similar in all tumor cell lines, regardless of their CD13 expression, with _IC50 values in the low nanomolar range, from 0.5 to 1. 2 ng/ml (5.8E-10 to 1.51E-09 M). The geometric mean IC ₅₀ values across the entire cell panel were 0.84 ng/mL (1.06E-09 M) with a geometric standard deviation of 1.5 consistent with the homogeneity of the results across the four cell lines.

Таблица 33Table 33

CD13 положительные CD13 positive CD13 отрицательные CD13 negative HT-1080 HT-1080 NB-4 NB-4 Raji Raji RPMI8226 RPMI8226 IC₅₀, мкг/мл IC ₅₀ , µg/ml 1,20E-03 1.20E-03 4,60E-04 4.60E-04 9,67E-04 9.67E-04 9,28E-04 9.28E-04 IC50, M IC50, M 1,51E-09 1.51E-09 5,80E-10 5.80E-10 1,22E-09 1.22E-09 1,17E-09 1.17E-09

Цитотоксичность ADC 7.Cytotoxicity of ADC 7.

Цитотоксичность ADC 7 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 100 мкг/мл до 26 нг/мл (6,67E-07-1,75E-10 M). В табл. 34 суммированы выведенные значения IC50. Примечательно, что ADC 7 показал цитотоксическую активность в низком нМ диапазоне по сравнению с таковой исходного лекарственного средства 11-R, но только в CD13-эксnрессирующих клетках, в то время как его активность в CD13отрицательных клетках довольно умеренная. Следовательно, выдающаяся селективность значительно выше 100 может наблюдаться как функция от экспрессии CD13.The cytotoxicity of ADC 7 was assessed against different tumor cell lines by obtaining triple DZ curves with 10-point, 2.5-fold dilutions from 100 μg/ml to 26 ng/ml (6.67E-07-1.75E-10 M). In table Figure 34 summarizes the derived IC50 values. Notably, ADC 7 showed cytotoxic activity in the low nM range compared to that of the parent drug 11-R, but only in CD13-expressing cells, while its activity in CD13-negative cells is quite moderate. Therefore, outstanding selectivity well above 100 can be observed as a function of CD13 expression.

Таблица 34Table 34

Краткое описание in vitro цитотоксичности ADC 7Summary of in vitro cytotoxicity of ADC 7

CD13 положительные CD13 positive CD13 отрицательные CD13 negative IC50 в CD13+ (ср. геом.) IC50 in CD13+ (average geom.) IC50 в CD13- (ср. геом. IC50 in CD13- (cf. geom. Индекс селект. Select index. HT-1080 HT-1080 NB-4 NB-4 Raji Raji RPMI8226 RPMI8226 IC₅₀ (мкг/мл) IC ₅₀ (µg/ml) 1,30E-01 1.30E-01 2,70E-01 2.70E-01 2,21E+01 2.21E+01 4,10E+01 4.10E+01 1,87E-01 1.87E-01 3,00E+01 3.00E+01 160,4 160.4 IC5o(M) IC5o(M) 8,67E-10 8.67E-10 1,80E-09 1.80E-09 1,47E-07 1.47E-07 2,73E-07 2.73E-07 1,25E-09 1.25E-09 2,00E-07 2.00E-07

Пример биоактивности 17 - цитотоксичность конъюгата ADC 8 против CD13 положительных и отрицательных раковых клеток.Bioactivity Example 17 - Cytotoxicity of ADC conjugate 8 against CD13 positive and negative cancer cells.

Цитотоксичность ADC 8 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получениеThe cytotoxicity of ADC 8 was assessed against different tumor cell lines by obtaining

- 171 046742 тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 100 мкг/мл до 26 нг/мл (6,67E-07-1,75E-10 M). В табл. 35 суммированы выведенные значения IC₅₀. ADC 8 показал цитотоксическую активность в низком нМ диапазоне по сравнению с таковой для исходного лекарственного средства 11-R, но только в CD13-экспрессирующих клетках, в то время как его активность в CD13-отрицательных клетках довольно умеренная. Следовательно, выдающуюся селективность, близкую к 200, получают как функцию от экспрессии CD13.- 171 046742 triple DZ curves of 10-point, 2.5-fold dilution from 100 μg/ml to 26 ng/ml (6.67E-07-1.75E-10 M). In table 35 summarizes the derived IC ₅₀ values. ADC 8 showed cytotoxic activity in the low nM range compared to that of the parent drug 11-R, but only in CD13-expressing cells, while its activity in CD13-negative cells is quite moderate. Therefore, outstanding selectivity close to 200 is obtained as a function of CD13 expression.

Таблица 35Table 35

Краткое описание in vitro цитотоксичности ADC 8Summary of in vitro cytotoxicity of ADC 8

CD13 положительные CD13 positive CD13 отрицательные CD13 negative ^IC50 ^в CD13+ (ср. геом.) ^IC 50 ⁱⁿ CD13+ (geom. average) ^IC50 ^в CD13- (ср. геом. ^IC 50 ⁱⁿ CD13- (cf. geom. Индекс селект. Select index. HT-1080 HT-1080 NB-4 NB-4 Raji Raji RPMI8226 RPMI8226 IC₅₀ (мкг/мл) IC ₅₀ (µg/ml) 1,61E-01 1.61E-01 2,51E-01 2.51E-01 4,31E+01 4.31E+01 3,30E+01 3.30E+01 2,01E-01 2.01E-01 3,77E+01 3.77E+01 188 188 IC5o(M) IC5o(M) 1,07E-09 1.07E-09 1,67E-09 1.67E-09 2,87E-07 2.87E-07 2,20E-07 2.20E-07 1,34E-09 1.34E-09 2,51E-07 2.51E-07

Пример биоактивности 18 - цитотоксичность конъюгата ADC 9 и родственных реагентов против CD13 положительных и отрицательных раковых клеток.Bioactivity Example 18 - Cytotoxicity of ADC conjugate 9 and related reagents against CD13 positive and negative cancer cells.

Цитотоксичность 12-R.Cytotoxicity of 12-R.

Как показано в табл. 36, где представлены результаты среднего геометрического значений IC₅₀полученных в трех независимых экспериментах, цитотоксичность этого соединения была аналогичной во всех линиях опухолевых клеток, независимо от их экспрессии CD13, со значениями IC₅₀ в нижнем наномолярном диапазоне, от 0,3 до 1,1 нг/мл (4,21E-10 до 1,40E-09 M). Средние геометрические значения IC₅₀ по всей клеточной панели составляют 0,6 нг/мл (7,8E-10 M), при стандартном геометрическом отклонении, составляющем 1,7 в соответствии с гомогенностью результатов для четырех клеточных линий.As shown in table. 36, which presents the results of geometric mean IC ₅₀ values obtained in three independent experiments, the cytotoxicity of this compound was similar in all tumor cell lines, regardless of their CD13 expression, with IC ₅₀ values in the low nanomolar range, from 0.3 to 1.1 ng/ml (4.21E-10 to 1.40E-09 M). The geometric mean IC ₅₀ values across the entire cell panel were 0.6 ng/ml (7.8E-10 M), with a geometric standard deviation of 1.7 consistent with homogeneity of the results across the four cell lines.

Таблица 36Table 36

CD13 положительные CD13 positive CD13 отрицательные CD13 negative HT-1080 HT-1080 NB-4 NB-4 Raji Raji RPMI8226 RPMI8226 IC₅₀, мкг/мл IC ₅₀ , µg/ml 1,10E-03 1.10E-03 3,30E-04 3.30E-04 4,70E-04 4.70E-04 8,30E-04 8.30E-04 IC50, M IC50, M 1,40E-09 1.40E-09 4,21E-10 4.21E-10 6,00E-10 6.00E-10 1,06E-09 1.06E-09

Цитотоксичность ADC-9.Cytotoxicity of ADC-9.

Цитотоксичность ADC 9 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 100 мкг/мл до 26 нг/мл (6,67E-07-1,75E-10 M). В табл. 37 суммированы выведенные значения IC50. ADC 9 показал цитотоксическую активность в низком нМ диапазоне по сравнению с таковой для исходного лекарственного средства 12-R, но только в CD13-экспрессирующих клетках, в то время как его активность в CD13-оmрицательных клетках довольно умеренная. Следовательно, выдающийся индекс селективности, выше 200, получают как функцию от экспрессии CD13.The cytotoxicity of ADC 9 was assessed against different tumor cell lines by obtaining triple DZ curves with 10-point, 2.5-fold dilutions from 100 μg/ml to 26 ng/ml (6.67E-07-1.75E-10 M). In table Figure 37 summarizes the derived IC50 values. ADC 9 showed cytotoxic activity in the low nM range compared to that of the parent drug 12-R, but only in CD13-expressing cells, while its activity in CD13-negative cells is quite moderate. Therefore, an outstanding selectivity index, above 200, is obtained as a function of CD13 expression.

Таблица 37Table 37

Краткое описание in vitro цитотоксичности ADC 9Summary of in vitro cytotoxicity of ADC 9

CD13 положительные CD13 positive CD13 отрицательные CD13 negative IC50 в CD13+ (ср. геом.) IC50 in CD13+ (average geom.) IC50 в CD13- (ср. геом. IC50 in CD13- (cf. geom. Индекс селект. Select index. HT-1080 HT-1080 NB-4 NB-4 Raji Raji RPMI8226 RPMI8226 IC₅₀ (мкг/мл) IC ₅₀ (µg/ml) 1,20E-01 1.20E-01 5,21E-02 5.21E-02 1,70E+01 1.70E+01 1,70E+01 1.70E+01 7,90E-02 7.90E-02 1,70E+01 1.70E+01 214 214 IC5o(M) IC5o(M) 8,00E-10 8.00E-10 3,47E-10 3.47E-10 1,13E-07 1.13E-07 1,13E-07 1.13E-07 5,27E-10 5.27E-10 1,13E-07 1.13E-07

Пример биоактивности 19 - Цитотоксичность конъюгата ADC 10 против CD13 положительных и отрицательных раковых клеток.Bioactivity Example 19 - Cytotoxicity of ADC Conjugate 10 against CD13 Positive and Negative Cancer Cells.

Цитотоксичность ADC 10 оценивают против разных линий опухолевых клеток через получение тройных ДЗ кривых 10-точечного, 2,5-кратного разведения от 100 мкг/мл до 26 нг/мл (6,67E-07-1,75E-10The cytotoxicity of ADC 10 is assessed against different tumor cell lines by obtaining triple DZ curves of 10-point, 2.5-fold dilution from 100 μg/ml to 26 ng/ml (6.67E-07-1.75E-10

- 172 046742- 172 046742

M). В табл. 38 суммированы выведенные значения IC₅₀. ADC 10 показал цитотоксическую активность в низком нМ диапазоне по сравнению с таковой для исходного лекарственного средства 11-R, но только в CD13-экспрессирующих клетках, в то время как его активность в CD13-отрицательных клетках довольно умеренная. Следовательно, выдающуюся селективность, близкую к 100, получают как функцию от экспрессии CD13.M). In table 38 summarizes the derived IC ₅₀ values. ADC 10 showed cytotoxic activity in the low nM range compared to that of the parent drug 11-R, but only in CD13-expressing cells, while its activity in CD13-negative cells is quite moderate. Therefore, outstanding selectivity close to 100 is obtained as a function of CD13 expression.

Таблица 38Table 38

Краткое описание in vitro цитотоксичности ADC 10Summary of in vitro cytotoxicity of ADC 10

CD13 положительные CD13 positive CD13 отрицательные CD13 negative IC50 в CD13+ (ср. геом.) IC50 in CD13+ (average geom.) IC50 в CD13- (ср. геом. IC50 in CD13- (cf. geom. Индекс селект. Select index. HT-1080 HT-1080 NB-4 NB-4 Raji Raji RPMI8226 RPMI8226 IC₅₀ (мкг/мл) IC ₅₀ (µg/ml) 9,71E-02 9.71E-02 9,71E-01 9.71E-01 3,30E+01 3.30E+01 2,81E+01 2.81E+01 3,07E-01 3.07E-01 3,04E+01 3.04E+01 99,14 99.14 IC5o(M) IC5o(M) 6,47E-10 6.47E-10 6,47E-09 6.47E-09 2,20E-07 2.20E-07 1,87E-07 1.87E-07 2,05E-09 2.05E-09 2,03E-07 2.03E-07

Пример 4. Демонстрация in vivo эффективности конъюгатов антитело-лекарственное средство настоящего изобретения.Example 4 Demonstration of in vivo effectiveness of the antibody-drug conjugates of the present invention.

Конъюгат антитело-лекарственное средство на основе трастузумаба ADC 1 тестируют в нескольких моделях in vivo. Партии ADC-1, применяемые в этих исследованиях, получают с применением 2,2 экв. ТКЭФ (ADC 1 2,2 ТКЭФ) или 3 экв. ТКЭФ (ADC-1). Эти партии производят с применением методик, описанных выше, за исключением того, что конечную очистку эксклюзионной хроматографией по размеру (ЭХР) проводят с применением колонки Hi Load 26/600 SuperdexTM 200 пг и ФРФБ (pH 7,4) в качестве элюента.The trastuzumab-based antibody-drug conjugate ADC 1 is being tested in several in vivo models. The ADC-1 batches used in these studies were prepared using 2.2 eq. TKEF (ADC 1 2.2 TKEF) or 3 eq. TKEF (ADC-1). These batches were produced using the procedures described above, except that final size exclusion chromatography (SEC) purification was performed using a Hi Load 26/600 SuperdexTM 200 pg column and PBS (pH 7.4) as eluent.

ADC-1 и ADC 1 2,2 ТКЭФ оценивают в модели HER2 положительного рака груди, BT-474, вместе с их полезной нагрузкой, соединением 11-R. Следует отметить, что, несмотря на низкую дозу (субоптимальную), вводимую мышам с опухолями в этом эксперименте, были получены обнадеживающие положительные результаты (см. фигуру 12). Поэтому был проведен ряд новых экспериментов, направленных на оценку противоопухолевой активности на моделях Her2 положительного и не Her2 положительного рака груди. ADC-1 оценивают при более высоком уровне дозы в модели опухоли груди, JIMT-1 (см. фигуру 13), в модели опухоли яичников, SK-OV-3 (фиг. 14) и в модели опухоли ЖКТ, Gastric-008, на полученном у пациента ксенотрансплантате (PDX), (фиг. 16). Дополнительно, ADC-1 2,2 ТКЭФ) оценивают в другой модели опухоли ЖКТ, N87 (фиг. 15).ADC-1 and ADC 1 2,2 TCEF are evaluated in a HER2 positive breast cancer model, BT-474, along with their payload, compound 11-R. It should be noted that despite the low dose (suboptimal) administered to tumor-bearing mice in this experiment, encouraging positive results were obtained (see Figure 12). Therefore, a number of new experiments were conducted to evaluate antitumor activity in Her2 positive and non-Her2 positive breast cancer models. ADC-1 was evaluated at a higher dose level in a breast tumor model, JIMT-1 (see Figure 13), an ovarian tumor model, SK-OV-3 (Figure 14), and a gastrointestinal tumor model, Gastric-008, at xenograft obtained from the patient (PDX), (Fig. 16). Additionally, ADC-1 2,2 TCEF) was evaluated in another GI tumor model, N87 (Fig. 15).

Коротко, бестимусным nu/nu (N87, Gastric-008 или SK-OV-3) или SCID (BT-474 или JIMT-1) мышам в возрасте 4-6 недель подкожно имплантируют либо суспензию опухолевых клеток (JIMT-1 или N87), либо фрагменты опухоли (BT-474, Gastric-008 или SK-OV3),ранее созданные у донорных мышей.Briefly, athymic nu/nu (N87, Gastric-008 or SK-OV-3) or SCID (BT-474 or JIMT-1) mice at 4-6 weeks of age are subcutaneously implanted with either a tumor cell suspension (JIMT-1 or N87) , or tumor fragments (BT-474, Gastric-008 or SK-OV3) previously created in donor mice.

Размеры опухоли и массу тела записывают 3 раза в неделю, начиная с первого дня лечения (день 0). Лечение, вызывающее >20% летальность и/или 20% чистую потерю массы тела считают токсичным. Объем опухоли рассчитывают с применением уравнения (;-rb^:)/2. где a и b являются самым длинным и самым коротким диаметрами, соответственно. Животных умерщвляет, когда их опухоли достигают около 2000 мм³ и/или наблюдается тяжелый некроз. Медиану рассчитывают для объема опухоли в каждый день измерения. Полную регрессию опухоли (ПР) определяют, когда объем опухоли достигает <63 мм³ для 2 или более последовательных измерений.Tumor size and body weight are recorded 3 times a week, starting on the first day of treatment (day 0). Treatments causing >20% mortality and/or 20% net body weight loss are considered toxic. Tumor volume is calculated using the equation (;-rb ^: )/2. where a and b are the longest and shortest diameters, respectively. Animals are sacrificed when their tumors reach approximately 2000 mm ³ and/or severe necrosis is observed. The median is calculated for the tumor volume on each measurement day. Complete tumor regression (CR) is defined when tumor volume reaches <63 mm ³ for 2 or more consecutive measurements.

Животных имплантируют, как описано выше, и когда опухоли достигают около 150-200 мм³, мышей, имеющих опухоли (Н=8-10/группу) произвольно распределяют на группы лечения согласно следующему дизайну эксперимента:___________________________________________________________Animals are implanted as described above, and when tumors reach approximately 150-200 mm ³ , tumor-bearing mice (H = 8-10/group) are randomly assigned to treatment groups according to the following experimental design: ___________________________________________________________

Опухоль Tumor Группа Group Доза (мг/кг) Dose (mg/kg) JIMT-1 JIMT-1 Контроль Control 0,0 0.0 11-R 11-R 5,0 5.0 ADC-1 ADC-1 30,0 30.0 ADC-1 ADC-1 10,0 10.0 ADC-1 ADC-1 5,0 5.0 N87 N87 Контроль Control 0,0 0.0 11-R 11-R 5,0 5.0 ADC-1 (2,2 ТКЭФ) ADC-1 (2.2 TKEF) 30,0 30.0 ADC-1 (2,2 ТКЭФ) ADC-1 (2.2 TKEF) 10,0 10.0 ADC-1 (2,2 ТКЭФ) ADC-1 (2.2 TKEF) 5,0 1 5.0 1 SK-OV-3 SK-OV-3 Контроль Control 0,0 0.0 11-R 11-R 5,0 5.0 ADC-1 ADC-1 30,0 30.0 ADC-1 ADC-1 10,0 10.0

- 173 046742- 173 046742

Опухоль Tumor Группа Group Доза (мг/кг) Dose (mg/kg) ADC-1 ADC-1 5,0 5.0 Gastric-008 Gastric-008 Контроль Control 0,0 0.0 11-R 11-R 5,0 5.0 ADC-1 ADC-1 30,0 30.0 ADC-1 ADC-1 10,0 10.0 ADC-1 ADC-1 5,0 5.0 BT-474 BT-474 Контроль Control 0,0 0.0 11-R 11-R 5,0 5.0 ADC-1 (2,2 ТКЭФ) ADC-1 (2.2 TKEF) 6,5 6.5 ADC-1 ADC-1 2,24 2.24 ADC-1 (2,2 ТКЭФ) ADC-1 (2.2 TKEF) 1,6 1.6

Claims

1. A drug conjugate containing a drug moiety covalently attached to a drug conjugate moiety, wherein the drug conjugate has the formula [D-(X) _b -(AA) _w -(T)g-(L)-]n- Ab, where:

D is a drug group having the following formula (I), or a pharmaceutically acceptable salt, tautomer or stereoisomer thereof, ^R 3

where: D is covalently attached via a hydroxy or amino group to (X) _b , if present, or (AA) _w , if present, or to (T) _g , if present, or (L);

Y is -NH- or -O-;

R ₁ is -OH or -CN;

R2 is a -C(=O)R _a group;

R3 is hydrogen or an -ORb group;

R ₄ is selected from -CH2O- and -CH2NH-;

Ra is selected from C^C ₁₂ alkyl;

Rb is selected from C^C ₁₂ alkyl;

X is an extension group selected from:

when D is covalently attached via the -NH- group:

- COO-(C1-C6alkylene)NH-;

- COO-CH ₂ -(phenylene)-NH-;

- COO-(C ₁ -C ₆ alkylene)NH-COO-CH ₂ -(phenylene)-NH-;

- COCH2NH-COCH2-NH-;

- COCH2NH-;

- COO-(C ₁ -C ₆ alkylene)S-;

- COO-(C ₁ -C ₆ alkylene)NHCO(C ₁ -C ₆ alkylene)S-; and when D is covalently attached through the -O- group:

- CONH-(C ₁ -C ₆ alkylene)NH-;

- COO-CH2-(phenylene)-NH-;

- CONH-(C ₁ -C ₆ alkylene)NH-COO-CH ₂ -(phenylene)-NH-;

- COCH2NH-COCH2-NH-;

- COCH2NH-;

- CONH-(C ₁ -C ₆ alkylene e)S-;

- CONH-(C1-C6alkylene)NHCO(C1-C6alkylene)S-;

T is an extension group selected from the group consisting of: -CO-(C ₁ -C ₆ alkylene)-NH-, -CO-(C ₁ -C ₆ alkylene)-[O-(C ₂ -C ₆ alkylene) ]j-NH-, -COO-(C ₁ -C ₆ alkylene)-[O-(C ₂ -C ₆ alkylene)]j-NH-;

where j is an integer from 1 to 25;

- 174 046742 (AA) _w has formula (II):

where the wavy lines indicate the point of covalent attachment to (X)b, if any, or to the drug moiety (wavy line on the left) and (T) _g , if any, or to the linker (wavy line on the right); And

R ₂₁ in each case is selected from the group consisting of hydrogen, methyl, isopropyl, isobutyl, sec-butyl, benzyl, p-hydroxybenzyl, -CH2OH, -CH(OH)CH3, CH2CH2SCH3, -CH2CONH2, -CH2COOH, -CH2CH2CONH2, -CH2CH2COOH, -(CH ₂ ) ₃ NHC(=NH)NH ₂ , -(CH ₂ )3NH ₂ , -(CH ₂ )3NHCOCH3, -(CH ₂ ) ₃ NHCHO, (CH2)4NHC(=NH)NH2, -(CH2)4NH2, -(CH2)4NHCOCH3,

-(CH2)4NHCHO, -(CH2)3NHCONH2,

3-pyridylmethyl-, 4-pyridylmethyl-,

2-pyridylmethyl-,

-(CH ₂ ) ₄ NHCONH ₂ , -CH ₂ CH ₂ CH(OH)CH ₂ NH ₂ , phenyl, cyclohexyl,

ABOUT,

About and

ABOUT

NH w is an integer from 0 to 12;

L is a linker group selected from the group consisting of:

О О ¹¹ ь 1-м-с—|

Ο\ ^s11 /

5 C-Rw-N.

where the wavy lines indicate the points of covalent attachment to Ab (wavy line on the right) and to (T)g, if any, or (AA) _w , if any, or to (X) _b (wavy line to the left);

R ₁₉ is selected from -C1-C ₁₂ alkylene-, -O-(-C ₁ -C ₁₂ alkylene), -phenylene-, -C ₁ -C ₁₂ alkylene-phenylene-, -phenyleneC1-C ₁₂ alkylene-, -C5 -C ₁₂ heterocyclo-, where said heterocyclo group may be a saturated or unsaturated group, -C ₁ -C ₁₂ alkylene-(-C5-C ₁₂ heterocyclo)-, where said heterocyclo group may be a saturated or unsaturated group, -(C5- C ₁₂ heterocyclo)-C1C ₁₂ alkylene-, where said heterocyclogroup may be a saturated or unsaturated group -(OCH ₂ CH ₂ ) _G - and -CH2-(OCH2CH2)g;

R ₃₀ represents a -^-^alkylene group;

M is selected from the group consisting of -^-^alkylene-, -C ₁ -C ₆ alkylene-(C ₃ -C ₈ carbocyclo)- and phenylene;

where heterocyclogroups are heterocyclic groups containing from 1 to 3 separated or fused rings having from 5 to 14 ring atoms and including one heteroatom selected from oxygen, nitrogen and sulfur, where there are two covalent bonds at any position of the ring system;

r is an integer from 1 to 6;

b is an integer 0 or 1;

g is an integer 0 or 1;

Ab is a monoclonal antibody or an antigen-binding fragment thereof; and n is the ratio of the group [D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -(L)-] to the group Ab, and is an integer from 1 to 20;

- 175 046742 where the drug group D is conjugated through the R4 position.

2. A drug conjugate according to claim 1, wherein D is selected from formula Ia or Ib, or a pharmaceutically acceptable salt thereof:

O. r ₂ o where: Y is -NH- or -O-;

R1 is -OH or -CN;

R ₂ is a -C(=O)R _a group;

R3 is hydrogen or an -OR _b group;

R4 is selected from -CH ₂ O- and -CH2NH-;

R _a represents C ₁ -C ₁₂ alkyl; And

R _b represents C1-C12 alkyl;

3. Drug conjugate according to claim 1 or 2, where R ₄ is -CH2O-.

4. Drug conjugate according to claim 1 or 2, where R ₄ is -CH2NH-.

5. Drug conjugate according to claim 1, where D is a compound of the formula:

- 176 046742

- 177 046742

- 178 046742

or a pharmaceutically acceptable salt thereof;

where the wavy line indicates the point of covalent attachment to (X) _b , if any, or (AA) _w , if any, or to (T)g, if any, or (L).

6. Drug conjugate according to claim 1, where D is a compound of the formula:

- 179 046742 or a pharmaceutically acceptable salt thereof;

where the wavy line indicates the point of attachment to (X)b, if present, or (AA) _w , if present, or to (T)g, if present, or (L); or where D is a compound of the formula:

ABOUT/:·

ASO

Ome

Ί BUT... ,.X_.Me or its pharmaceutically acceptable salt;

where the wavy line indicates the point of attachment to (X) _b , if present, or (AA) _w , if present, or to (T)g, if present, or (L); or where D is a compound of the formula:

ABOUT/;

ASO

Ome

BUT. ^Me or a pharmaceutically acceptable salt thereof;

0¾

ASO

Ome

BUT... A... Me or a pharmaceutically acceptable salt thereof;

where the wavy line indicates the point of attachment to (X)b, if present, or (AA)w, if present, or to (T)g, if present, or (L); or where D is a compound of the formula:

- 180 046742

or a pharmaceutically acceptable salt thereof;

where the wavy line indicates the point of attachment to (X)b, if present, or (AA) _w , if present, or to (T) _g , if present, or (L).

7. Drug conjugate according to claim 1, where:

D is a drug group having the following formula (IH), or a pharmaceutically acceptable salt, tautomer or stereoisomer thereof:

where: the wavy line indicates the point of covalent attachment to (X)b, if present, or (AA) _w , if present, or to (T)g, if present, or (L);

each Y and Z are independently selected from -NH- and -O-;

R ₁ is -OH or -CN;

R2 is a -C(=O)Ra group;

R ₃ is hydrogen or an -ORb group;

Ra represents ^-^alkyl; And

Rb is ^-^alkyl.

8. The drug conjugate according to claim 7 or a pharmaceutically acceptable salt, tautomer or stereoisomer thereof, where D is a drug group selected from formulas (IHa) and (IHb):

where the wavy lines, R1, R2, R3, Y and Z are as defined for formula (IH).

9. Drug conjugate according to any one of claims 1-4, 7 or 8, where Y is -NH-.

10. Drug conjugate according to any one of claims 1-4, 7 or 8, where Y is -O-.

11. Drug conjugate according to any one of claims 1-4 or 7-10, where R1 is -OH.

12. Drug conjugate according to any one of claims 1-4 or 7-10, where R ₁ is -CN.

13. Drug conjugate according to any one of claims 1-4 or 7-12, where R2 is a -C(=O)R _a group, where Ra is C1-C ₆ alkyl.

- 181 046742

14. The drug conjugate according to claim 13, wherein R2 is acetyl.

15. Drug conjugate according to any one of claims 1-4 or claims 7-14, where R ₃ is hydrogen or -ORb, where Rb is C1-C ₆ alkyl.

16. The drug conjugate according to claim 15, wherein R ₃ is hydrogen.

17. The drug conjugate according to claim 15, wherein R ₃ is methoxy.

18. A drug conjugate according to any one of claims 1 to 17, where the salt is selected from hydrochloride, hydrobromide, hydroiodide, sulfate, nitrate, phosphate, acetate, trifluoroacetate, maleate, fumarate, citrate, oxalate, succinate, tartrate, malate, mandelate, methanesulfonate, p-toluenesulfonate, sodium, potassium, calcium, ammonium, ethylenediamine, ethanolamine, X,X-dialkylenthanolamine, triethanolamine and basic amino acids.

19. Drug conjugate according to any one of claims 1 to 18, selected from formulas (IV), (V) and (VI):

(VI) where: R ₁₉ is selected from -C1-C ₈ alkylene-, -O-CC'gC'alkylene), -C ₁ -C ₈ alkylenephenylene and phenylene-C1C ₈ alkylene;

R ₃₀ is a -C ₂ -C ₄ alkylene group; And

M is selected from the group consisting of -C1-C ₃ alkylene- and -C1-C ₃ alkylene-(C5-C7carbocyclo)-; or selected from formulas (IV), (V) and (VI):

(VI) where: R ₁₉ is selected from -C1-C ₆ alkylene-, phenylene-C1-C ₆ alkylene;

R ₃₀ is a -C ₂ -C ₄ alkylene group; And

M is -C1-C ₃ alkylene-(C ₅ -C ₇ carbocyclo)-.

20. Drug conjugate according to any one of claims 1 to 19, where (AA) _w has formula (II):

where the wavy lines indicate the point of covalent attachment to (X)b, if present, or to the drug group (wavy line to the left) and to (T) _g , if present, or to the linker (wavy line to the right); And

R21 in each case is selected from the group consisting of hydrogen, methyl, isopropyl, sec-butyl, benzyl, indolylmethyl, -(CH2) ₃ NHCONH2 -(CH ₂ ) ₄ NH ₂ , -(CH ₂ ) ₃ NHC(=NH) NH ₂ and -(CH ₂ ) ₄ NHC(=NH)NH ₂ ;

and w is an integer from 0 to 6.

- 182 046742

21. The drug conjugate according to any one of claims 1 to 20, where w is 0 or 2, and if w is 2, then (AA) _w has formula (III):

(III) where: the wavy line indicates the point of covalent attachment to (X) _b , if present, or to the drug group (wavy line to the left) and to (T) _g , if present, or to the linker (wavy line to the right);

R ₂₂ is selected from methyl, benzyl, isopropyl, sec-butyl and indolylmethyl; And

R23 is selected from methyl, -(CH ₂ ) ₄ NH ₂ , -(CH ₂ )3NHCONH ₂ and -(CH ₂ )3NHC(=NH)NH ₂ .

22. A drug conjugate according to any one of claims 1 to 21, where X is an extension group selected from:

if D is covalently attached via -NH-:

- COO-(C2-C4alkylene^-;

- COO-CH2-phenylene-NH-;

- COO-(C2-C4alkylene^-COO-CH2-(phenylene)OT-;

- COCH2NH-COCH2-NH-;

- COO-(C ₂ -C4alkylene)8-;

- COO-(C ₂ -C ₄ alkylene)NHCO(C ₁ -C ₃ alkylene)S-; or where D is covalently attached via -O-:

- CONH-(C ₂ -C ₄ alkylene)NII-;

- COO-CH2-phenylene-NH-;

- CONH-(C ₂ -C ₄ alkylene)NH-COO-CH ₂ -(phenylene)-NH-;

- COCH2NH-COCH2-NH-;

- CONH-(C2-C4alkylene)S-;

- CONH-(C2-C4alkylene)NHCO(C1-Calkylene)S-; and b is 0 or 1; or where X is an extension group selected from the group consisting of:

if D is covalently attached via -NH-:

- COO-CH2-phenylene-NH-;

- C00(CH2)3NHC00CH2-phenylene-NH-;

- COO(CH2)3NH-;

- COO(CH2)3-S-;

- COO(CH2)3NHCO(CH2)2S-; or if D is covalently attached via -O-:

- COO-CH2-phenylene-NH-;

- CONH(CH ₂ ) ₃ NHCOOCH ₂ -phenylene-NH-;

- CONH(CH2)3NH-;

- CONH(CH2)3-S-;

- CONH(CH2)3NHCO(CH2)2S-; and b is 0 or 1.

23. Drug conjugate according to claim 22, where b is equal to 0 or 1.

24. Drug conjugate according to any one of claims 1 to 23, where T is an extension group selected from the group consisting of -CO-(C ₁ -C ₄ alkylene)NH-, -CO-(C1-C ₄ alkylene) -[O-(C ₂ -C ₄ alkyleneDNH-, -COO-(C ₁ -C ₄ alkylene)-[O-(C ₂ -C ₄ alkylene)]j-NH-, where j is an integer from 1 to 10; and g is 0 or 1; or where T is an extension group selected from the group consisting of -CODCx-C^lkyl^NII-, -CO-(Cl-C ₄ alkylene)-[O-(C ₂ - C ₄ alkylene)]j-NH-, -COO-(Cl-C ₄ alkylene)-[O-(C ₂ -C ₄ alkylene)]j-NH-;

where j is an integer from 1 to 5; and g is 0 or 1.

25. A drug conjugate according to any one of claims 7 to 24, wherein D is a drug group of formula (IHa) or formula (IHb), or a pharmaceutically acceptable salt, tautomer or stereoisomer thereof, where:

R1 is CN or OH;

R2 is C(=O)R _a , where R _a is C _G C ₆ alkyl;

R3 is hydrogen or -OR _b group, where R _b is a C1-C ₆ alkyl group,

Y is -NH- or -O-; And

Z is -NH- or -O-; or where D is a group of a drug of formula (IHa) or formula (IHb) or a pharmaceutical thereof

- 183 046742 cetically acceptable salt, tautomer or stereoisomer, where:

R1 is CN or OH;

R2 is acetyl;

R3 is hydrogen or methoxy;

Y is -NH- or -O-; And

Z is -NH- or -O-; or wherein D is a drug group of formula (IHa) or formula (IHb) or a pharmaceutically acceptable salt, tautomer or stereoisomer thereof, wherein:

R1 is CN;

R2 is acetyl:

R ₃ is hydrogen;

Y is -NH- or -O-; And

Z is -NH-.

26. The drug conjugate of claim 25, wherein R3 is hydrogen.

27. Drug conjugate according to any one of claims 1, 3, 4, 7 or claims 9-26, where D is selected from:

or a pharmaceutically acceptable salt, tautomer or stereoisomer thereof, wherein the wavy line denotes the point of covalent attachment to (X) _b , if present, or (AA) _w , if present, or to (T)g, if present, or to (L) ; or where D is

or a pharmaceutically acceptable salt, tautomer or stereoisomer thereof, wherein the wavy line represents

- 184 046742 identifies the point of covalent attachment to (X)b, if present, or (AA) _w , if present, or to (T)g, if present, or to (L).

28. A drug conjugate according to any one of claims 1 to 27, where the Ab group is an antibody selected from the group consisting of abciximab, alemtuzumab, anetumab, atezolizumab, avelumab, basiliximab, bevacizumab, blinatomumab, brentuximab, catumaxomab, cetuximab, coltuximab, daclizumab, daratumumab, denintuzumab, denosumab, depatuxizumab, dinutuximab, durvalumab, elotuzumab, enfortumab, glembatumumab, gemtuzumab, ibritumomab, indatuximab, indusatumab, inotuzumab, ipilimumab, labetuzumab, ladiratuzumab, , lifastuzumab, lorvotuzumab, milatuzumab, mirvetuximab, naratuximab, necitumumab, nimotuzumab, nivolumab, obinutuzumab, ofatumumab, olaratumab, omalizumab, palivizumab, panitumumab, pembrolizumab, pertuzumab, pinatuzumab, polatuzumab, ramucirumab, rovalpituzumab, sasituzumab, siltuximab, sirtratumab, sophytuzumab, vadastuximab, vorsetuzumab, trastuzumab, anti-CD4 antibodies, anti-CD5 antibodies, anti-CD13 antibodies and hhtu-CD30 antibodies or an antigen-binding fragment or immunologically active part thereof; or wherein the Ab group is an antibody selected from the group consisting of abciximab, alemtuzumab, anetumab, atezolizumab, avelumab, basiliximab, bevacizumab, blinatomumab, brentuximab, catumaxomab, cetuximab, daclizumab, daratumumab, denintuzumab, denosumab, depatuxizumab, maba, durvalumab, elotuzumab , enfortumab, glembatumumab, gemtuzumab, ibritumomab, indatuximab, indusatumab, inotuzumab, iplimumab, labetuzumab, ladiratuzumab, laprituximab, mirvetuximab, naratuximab, necitumumab, nimotuzumab, nivolumab, obinutuzumab, ofatumumab, umab, omalizumab, palivizumab, panitumumab, pembrolizumab, pertuzumab, polatuzumab , ramucirumab, rovalpituzumab, sacituzumab, siltuximab, sirtatumab, vadastuximab, vorsetuzumab, trastuzumab, anti-CD4 antibody, anti-CD5 antibody, anti-CD13 antibody and anti-CD30 antibody or an antigen-binding fragment or immunologically active portion thereof; or wherein the Ab group is an antibody selected from the group consisting of abciximab, alemtuzumab, atezolizumab, avelumab, basiliximab, bevacizumab, blinatomumab, brentuximab, catumaxomab, cetuximab, daclizumab, daratumumab, denosumab, dinutuximab, durvalumab, elotuzumab, ba, ibritumomab, inotuzumab , iplimumab, labetuzumab, necitumumab, nimotuzumab, nivolumab, obinutuzumab, ofatumumab, olaratumab, omalizumab, palivizumab, panitumumab, pembrolizumab, pertuzumab, ramucirumab, rovalpituzumab, siltuximab, trastuzumab, anti-CD4 antibodies, anti-CD5 antibodies, anti-CD13 antibodies and an anti-CD30 antibody or an antigen-binding fragment or immunologically active portion thereof, or wherein the Ab group is an antibody selected from the group consisting of brentuximab, gemtuzumab, inosutumab, rovalpituzumab, trastuzumab, anti-CD4 antibody, anti-CD5 antibody, anti-CD13 antibody and an anti-CD30 antibody or an antigen-binding fragment or an immunologically active portion thereof, or wherein the Ab group is an antibody selected from the group consisting of trastuzumab and an anti-CD13 antibody or an antigen-binding fragment or an immunologically active portion thereof, or wherein the Ab group is trastuzumab or its antigen-binding fragment or immunologically active part.

29. The drug conjugate according to claim 1, which is an antibody-drug conjugate selected from the group consisting of:

- 185 046742

- 186 046742

gemtuzumab, inosutumab, rovalpituzumab, trastuzumab, hhtu-CD4 antibody, hhtu-CD5 antibody, anti-CD13 antibody and anti-CD30 antibody or an antigen-binding fragment or immunologically active portion thereof; or a drug conjugate selected from the group consisting of:

- 187 046742

- 188 046742

- 189 046742

S-HN wherein n is from 2 to 6 and each ^and independently selected from brentuximab, gemtuzumab, inosutumab, rovalpituzumab, trastuzumab, anti-CD4 antibody, anti-CD5 antibody, anti-CD13 antibody and anti-CD30 antibody or an antigen binding fragment thereof, or immunologically active part; or a drug conjugate of the formula

where n is from 2 to 6, and is an anti-CD13 antibody or an antigen-binding fragment or immunologically active part thereof.

30. The drug conjugate according to claim 29, wherein the Ab group containing at least one antigen binding site is selected from trastuzumab and an anti-CD13 antibody or an antigen binding fragment or an immunologically active portion thereof; or wherein the Ab group containing at least one antigen binding site is selected from trastuzumab or an antigen binding fragment or immunologically active portion thereof.

31. The drug conjugate according to claim 29, where n is 3, 4 or 5.

32. The drug conjugate according to any one of claims 1 to 31, which is an antibody-drug conjugate in isolated or purified form.

33. A compound of the formula D-(X) _b -(AA) _w -(T) _g -L1, where:

L1 is a linker selected from the group of formulas consisting of:

- 190 046742 where each of the wavy lines indicates a point of covalent attachment to (T) _g , if present, or (AA) _w , if present, or to (X) b, if present, or to D;

R ₁₉ is selected from -Q-^alkylene-, -O-(C ₁ -C ₁₂ alkylene), -^-^alkylene-phenylene, phenylene-C ₁ C ₁₂ alkylene-, -C5-C ₁₂ heterocyclo-, where indicated the heterocyclo group may be a saturated or unsaturated group, -C ₁ -C ₁₂ alkylene-(C5-C ₁₂ heterocyclo)-, where said heterocyclo group may be a saturated or unsaturated group, -(OCH ₂ CH ₂ ) _g- and -CH ₂ -( OCH ₂ CH ₂ ) _g ;

where heterocyclo groups are heterocyclic groups containing from 1 to 3 separated or fused rings having from 5 to 14 ring atoms and including one heteroatom selected from oxygen, nitrogen and sulfur, where there are two covalent bonds at any position of the ring system of these heterocyclic groups ;

r is an integer from 1-10;

b is an integer 0 or 1;

g is an integer 0 or 1;

w is an integer from 0 to 12;

each of D, X, T and AA is as defined in any of paragraphs 1 to 30; or a compound of formula DX-(AA) _w -(T) _g -L ₁ is selected from:

- 191 046742

- 192 046742

- 193 046742

34. A compound of the formula D-(X)b-(AA) _w -(T)gL ₁ , where each of D, X, AA, T, L1, b, g and w is as defined in any of claims 1 -31.

35. Drug conjugate according to any one of paragraphs. 1 - 32, where b+g+w is not equal to 0; or where b+w is not equal to 0; or where if w is not equal to 0, then b is equal to 1.

36. The connection according to claim 33 or 34, where b+g+w is not equal to 0; or where b+w is not equal to 0; or where, when w is not 0, b is 1.

37. Use of drug moiety D as described in any one of claims 1 to 18 as a payload in an antibody-drug conjugate.

38. Use of drug moiety D as described in any one of claims 1 to 18 to produce an antibody-drug conjugate.

39. Use of a drug conjugate according to any one of claims 1 to 32 as a drug for the treatment of cancer.

40. Use according to claim 39, wherein the cancer is selected from lung cancer, colorectal cancer, breast cancer, pancreatic carcinoma, kidney cancer, leukemia, multiple myeloma, lymphoma, gastrointestinal and ovarian cancer.

41. A pharmaceutical composition containing a drug conjugate according to any one of claims 1 to 32 and a pharmaceutically acceptable carrier.

42. A method of preventing or treating cancer, comprising administering an effective amount of a drug conjugate according to any one of claims 1 to 32 to a patient in need thereof.

43. The method of treating cancer according to claim 42, wherein the cancer is selected from lung cancer, colorectal cancer, breast cancer, pancreatic carcinoma, kidney cancer, leukemia, multiple myeloma, lymphoma, gastrointestinal and ovarian cancer.

44. Use of a drug conjugate according to any one of claims 1 to 32 for the production of a drug for the treatment of cancer.

45. Use according to claim 44, wherein the cancer is selected from lung cancer, colorectal cancer, breast cancer, pancreatic carcinoma, kidney cancer, leukemia, multiple myeloma, lymphoma, gastrointestinal and ovarian cancer.

46. A kit containing a therapeutically effective amount of a drug conjugate according to any one of claims 1 to 32 and a pharmaceutically acceptable carrier for use in the treatment of cancer.

47. The kit of claim 46, wherein the cancer is selected from lung cancer, colorectal cancer, breast cancer, pancreatic carcinoma, kidney cancer, leukemia, multiple myeloma, lymphoma, gastrointestinal and ovarian cancer.

48. Drug conjugate according to any one of claims 1 to 28, where n is in the range from 1-12, 1-8, 3-8, 3-6, 3-5, 1, 2, 3, 4, 5 or 6.

49. The drug conjugate according to claim 48, where n is 3, 4 or 5.

50. The drug conjugate according to claim 49, where n is 4.

51. A method for producing a drug-antibody conjugate according to any one of claims 1 to 32, where the method includes conjugating an Ab group containing at least one antigen binding site and a drug D, where Ab and D are as defined in any from paragraphs 1-32; wherein the preparation of a drug-antibody conjugate of formula (G) or (G'):

- 194 046742

includes the following stages:

(i) drug interactions D-H of formula (IH)-H:

wherein the substituents in the definitions (IH)-H are as defined in any of claims 1 to 32, with a compound of formula (D') or (E):

to obtain a compound of formula (F) or (F'), respectively:

- 195 046742

(ii) partially reducing one or more disulfide bonds in the conjugated antibody, producing a reduced Ab-SH antibody having free thiol groups:

AB recovery / \ --------► Ab-SH

S--S disulfide bonds; and (iii) reacting the partially reduced Ab-SH antibody having free thiol groups with the compound of formula (F) or (F') obtained in step (i) to obtain the desired drug-drug conjugate antibody of formula (G) or (G'), respectively:

(G')