[go: up one dir, main page]

EA025598B1 - Active organic coating for application to titanium implants and method for producing the same - Google Patents

Active organic coating for application to titanium implants and method for producing the same Download PDF

Info

Publication number
EA025598B1
EA025598B1 EA201500036A EA201500036A EA025598B1 EA 025598 B1 EA025598 B1 EA 025598B1 EA 201500036 A EA201500036 A EA 201500036A EA 201500036 A EA201500036 A EA 201500036A EA 025598 B1 EA025598 B1 EA 025598B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
extract
liquid
nettle
implant
organic coating
Prior art date
Application number
EA201500036A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
EA201500036A1 (en
Inventor
Михаил Григорьевич Ясинов
Валерия Вячеславна Сидько
Сергей Александрович Киселев
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью "Альфа Биотех"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью "Альфа Биотех" filed Critical Общество с ограниченной ответственностью "Альфа Биотех"
Priority to EA201500036A priority Critical patent/EA025598B1/en
Publication of EA201500036A1 publication Critical patent/EA201500036A1/en
Publication of EA025598B1 publication Critical patent/EA025598B1/en

Links

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Dental Preparations (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)

Abstract

The invention is related to the field of medicine, in particular, to dentistry, and can be used as a coating for dental implants. The organic coating for titanium implants comprises, as a base, polysaccharides sodium alginate and calcium alginate, and as anti-inflammatory and anti-microbial components it includes dense oak bark extract and liquid extracts of nettle, milfoil and St.John's wort in the following proportion (% by mass): sodium alginate - 30-35; calcium alginate - 25-30; dense oak bark extract - 10-15; liquid nettle extract - 8-10; liquid milfoil extract - 8-10; liquid St.John's wort extract - 8-10. The proposed material makes it possible to reduce the period and to increase the degree of implant survival by stimulation of osteoblast proliferative activity and, therefore, activation of reparative osteogenesis processes, and suppression of pathogenic microorganisms activity at the place of implant introduction.

Description

Изобретение относится к области медицины, а именно к стоматологии, и может быть использовано в качестве покрытия стоматологических имплантатов.The invention relates to medicine, namely to dentistry, and can be used as a coating for dental implants.

Уровень техникиState of the art

На сегодняшний день широко распространены имплантаты из титана и его сплавов.Today, implants made of titanium and its alloys are widespread.

Одним из способов повышения прочности соединения костной ткани с имплантатом является нанесение на него покрытий, состоящих из родственных организму материалов. Для придания имплантатам биоактивных свойств они должны содержат на своей поверхности покрытия, способствующие остеоинтеграции и эффективному функционированию имплантатов. Известны средства, содержащие как основные компоненты костной ткани, так и биоактивные субстанции. К последним относятся факторы роста, костные морфогенетические белки и протеины и другие компоненты костного матрикса. Биоактивным субстанциям отводят роль активаторов и регуляторов физиологической регенерации тканей.One of the ways to increase the bond strength of bone tissue with an implant is to apply coatings on it consisting of materials related to the body. To impart bioactive properties to implants, they must contain coatings on their surface that facilitate osseointegration and the effective functioning of implants. Known agents containing both the main components of bone tissue and bioactive substances. The latter include growth factors, bone morphogenetic proteins and proteins, and other components of the bone matrix. Bioactive substances play the role of activators and regulators of physiological tissue regeneration.

Из уровня техники известно, что в силу сходства химического состава соединения на основе фосфатов кальция находят широкое применение при создании покрытий для имплантатов (КИ 2291918, С25И11/26, Л61Р2/02., опубл. 20.01.2007). В частности, физические, химические и биологические свойства гидроксиапатита, Са30(РО4)6(ОН)2, обеспечивают его высокую биосовместимость и способность активно стимулировать остеогенез и восстановливать костную ткань (КИ 2472532, Л61Б27/30. А61К6/04, А61Б27/32. опубл. 20.01.2013). Однако известные средства не всегда обеспечивают оптимальные условия течения регенеративных процессов и остеоинтеграции.The prior art it is known that due to the similarity of the chemical composition of the compounds based on calcium phosphates are widely used in the creation of coatings for implants (KI 2291918, C25I11 / 26, L61R2 / 02., Published on 01.20.2007). In particular, the physical, chemical and biological properties of hydroxyapatite, Ca 30 (PO 4 ) 6 (OH) 2 , provide its high biocompatibility and the ability to actively stimulate osteogenesis and restore bone tissue (KI 2472532, L61B27 / 30. A61K6 / 04, A61B27 / 32. publ. 01.20.2013). However, the known means do not always provide optimal conditions for the course of regenerative processes and osseointegration.

Раскрытие изобретенияDisclosure of invention

Задачей (техническим результатом) настоящего изобретения является создание биокомпозиционного материала (многослойного покрытия) для нанесения на титановый имплантат, обеспечивающего условия для оптимального течения регенеративных процессов и остеоинтеграции, и предотвращающего аккумулирование и персистирование патогенной микрофлоры.The objective (technical result) of the present invention is the creation of a biocomposite material (multilayer coating) for application to a titanium implant, providing conditions for the optimal flow of regenerative processes and osseointegration, and preventing the accumulation and persistence of pathogenic microflora.

Указанный технический результат достигается путем создания материала для нанесения на титановый имплантат, содержащего биологические составляющие, такие как соли альгината кальция, альгината натрия и растительные экстракты, позволяющие стимулировать рост остеобластов и способствовать интеграции имплантата с костью, за счет формирования оптимальной среды для остеогенных клеток - остеобластов, стимулируя процесс костного ремоделирования. Данный эффект достигается за счет способности материала сорбировать белки, индуцирующие остеогенез - костные морфогенетические протеины, осуществляющие остеоиндуктивную и остеокондуктивную функции. Активные компоненты растительных экстрактов коры дуба, тысячелистника, крапивы и зверобоя, входящие в состав материала, воздействуют на бактерии и вирусы, предотвращая воспалительные процессы в ране (месте вживления имплантата).The specified technical result is achieved by creating a material for application to a titanium implant containing biological components such as salts of calcium alginate, sodium alginate and plant extracts, which can stimulate the growth of osteoblasts and facilitate the integration of the implant with bone, due to the formation of an optimal environment for osteogenic cells - osteoblasts by stimulating the bone remodeling process. This effect is achieved due to the ability of the material to sorb proteins that induce osteogenesis - bone morphogenetic proteins that perform osteoinductive and osteoconductive functions. The active components of plant extracts of oak bark, yarrow, nettle and St. John's wort, which are part of the material, act on bacteria and viruses, preventing inflammatory processes in the wound (the site of implant implantation).

Подробное описание изобретенияDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

Предлагаемый материал для нанесения на стоматологический имплантат в качестве основы содержит полисахариды натрия альгинат и кальция альгинат, стимулирующие остеогенез, а в качестве противовоспалительных и антибактериальных компонентов - экстракт коры дуба густой, экстракты крапивы, тысячелистника и зверобоя жидкие в следующем соотношении (мас.%):The proposed material for application to a dental implant as a base contains polysaccharides of sodium alginate and calcium alginate, stimulating osteogenesis, and as anti-inflammatory and antibacterial components - dense oak bark extract, nettle, yarrow and hypericum extracts in the following ratio (wt.%):

натрия альгинат - 30-35; кальция альгинат - 25-30; экстракт коры дуба густой - 10-15; экстракт крапивы жидкий- 8-10; экстракт тысячелистника жидкий - 8-10; экстракт зверобоя жидкий - 8 -10.sodium alginate - 30-35; calcium alginate - 25-30; thick oak bark extract - 10-15; nettle extract liquid - 8-10; liquid yarrow extract - 8-10; St. John's wort extract liquid - 8 -10.

Альгинаты стимулируют фагоцитоз, стимуляция фагоцитарной защиты обеспечивает антимикробную, противогрибковую и противовирусную активность.Alginates stimulate phagocytosis, stimulation of phagocytic defense provides antimicrobial, antifungal and antiviral activity.

Приготовление предлагаемого материала включает следующие этапы: готовят смесь экстрактов коры дуба, крапивы, тысячелистника, зверобоя в установках реакторного типа с рубашкой, якорной мешалкой при температуре 40°С в течении 1 ч до создания равномерной суспензии. Смесь высушивают при температуре 80°С в вакуумных установках до относительной влажности не более 5%. В качестве основы материал содержит биополимеры, которые является солями альгиновой кислоты, полисахаридом бурых морских водорослей. Гидрогели являются гидрофильными поперечно-сшитыми полимерами, которые способны набухать в воде и формировать нерастворимую объемную сеть. Нерастворимое строение и объемная структура являются результатом поперечных сшивок полимеров. Сеть остается в равновесии с водным окружением, при этом наблюдается баланс эластичных сил поперечно-сшитых полимеров с осмотическими силами раствора. Химический состав и молекулярный вес определяют плотность поперечных сшивок, которая, в свою очередь, влияет на набухание и величину пор геля. Кроме того, именно перекрестные сшивки определяют характеристики гидрогелей как твердого вещества, а не раствора, определяя эластичный ответ на натяжение. В реакции, происходящей при комнатной температуре и физиологическом значении рН, ионы кальция взаимодействуют с альгинатом и формируют ионные мостики между цепочками полимеров. На процесс формирования структуры материала влияют: температура, давление, рН раствора, состав электролитов, состав растворителя, условия электролиза и электромагнитныеThe preparation of the proposed material includes the following steps: prepare a mixture of extracts of oak bark, nettle, yarrow, St. John's wort in reactor-type plants with a jacket, an anchor stirrer at a temperature of 40 ° C for 1 h until a uniform suspension is created. The mixture is dried at a temperature of 80 ° C in vacuum installations to a relative humidity of not more than 5%. As a basis, the material contains biopolymers, which are salts of alginic acid, a polysaccharide of brown seaweed. Hydrogels are hydrophilic cross-linked polymers that can swell in water and form an insoluble bulk network. The insoluble structure and bulk structure are the result of cross-linking of the polymers. The network remains in equilibrium with the water environment, while there is a balance of the elastic forces of cross-linked polymers with the osmotic forces of the solution. The chemical composition and molecular weight determine the density of cross-linking, which, in turn, affects the swelling and pore size of the gel. In addition, it is cross-linking that determines the characteristics of hydrogels as a solid, not a solution, determining the elastic response to tension. In a reaction that occurs at room temperature and physiological pH, calcium ions interact with alginate and form ionic bridges between polymer chains. The process of forming the structure of the material is affected by: temperature, pressure, pH of the solution, composition of electrolytes, composition of the solvent, electrolysis conditions and electromagnetic

- 1 025598 воздействия. Известно, что все поверхности твердых тел, в нашем случае твердого гидрогеля, энергетически неоднородны, т.е. они состоят из участков, которые отличаются по силе, с которой они могут взаимодействовать с молекулами. При адсорбции самыми сильными являются участки поверхности, заполняющиеся в первую очередь; более слабые участки поверхности заполняются только после насыщения более сильных (энергетически). Когда взаимодействие между поверхностью и адсорбатом относительно слабо (даже в самых сильных участках), имеет место только физическая адсорбция. Физически адсорбированные молекулы имеют тенденцию формировать поверхностный слой (монослой), который может взаимодействовать далее, хотя и более слабо, с дополнительными молекулами адсорбата, для формирования слоев более высокого уровня. С другой стороны, хемосорбция имеет место, когда поверхность содержит участки, настолько энергетически сильные, что они могут сформировать химические соединения с молекулами адсорбата.- 1,025,598 exposure. It is known that all surfaces of solids, in our case a solid hydrogel, are energetically heterogeneous, i.e. they consist of sites that differ in the strength with which they can interact with molecules. During adsorption, the strongest are surface areas that are filled in the first place; weaker surface areas are filled only after saturation of the stronger ones (energetically). When the interaction between the surface and the adsorbate is relatively weak (even in the strongest areas), only physical adsorption takes place. Physically adsorbed molecules tend to form a surface layer (monolayer), which can interact further, albeit more weakly, with additional adsorbate molecules to form layers of a higher level. Chemisorption, on the other hand, occurs when the surface contains sites so energetically strong that they can form chemical compounds with adsorbate molecules.

Всё это позволяет сформировать объёмную структуру матрикса, имеющего внутренние микрополости и поры различного размера, включая наноразмеры, и создать оптимальную поверхность для сорбции активных наноцастиц, определяющих его специфические свойства.All this allows us to form the bulk structure of the matrix, which has internal microcavities and pores of various sizes, including nanoscale, and to create the optimal surface for sorption of active nanoparticles, which determine its specific properties.

Предлагаемый материал создает условия для оптимального течения регенеративных процессов, предотвращает аккумулирование и персистирование патогенной микрофлоры. Материал обладает остеоидуктивными свойствами, то есть направленно стимулирует остеобласты и, возможно, другие мезенхимальные клетки к формированию кости. В ходе экспериментов было установлено, что добавление материала к нормальной плазме крови приводит к очень быстрому образованию протеиновой сетчатой структуры. Формирование протеиновой сетчатой структуры обеспечивает создание координационных центров агрегации тромбоцитов и эритроцитов. Структура материала делает возможной абсорбцию крови немедленно после установки имплантата, непосредственно в ее микропорах.The proposed material creates the conditions for the optimal flow of regenerative processes, prevents the accumulation and persistence of pathogenic microflora. The material has osteoinductive properties, that is, it stimulates osteoblasts and, possibly, other mesenchymal cells to bone formation. During the experiments, it was found that the addition of material to normal blood plasma leads to a very rapid formation of a protein network. The formation of a protein network ensures the creation of focal points for platelet and erythrocyte aggregation. The structure of the material makes possible the absorption of blood immediately after installation of the implant, directly in its micropores.

Благодаря структурной и биологической схожести, остеобласты определяют материал как аутогенную структуру и не проявляют реакции отторжения инородного тела. Материал, наносимый на поверхность имплантата, способен сорбировать белки, которые индуцируют остеогенез. В результате образуются сложные соединения - протеогликаны.Due to structural and biological similarity, osteoblasts define the material as an autogenic structure and do not exhibit a foreign body rejection reaction. The material applied to the surface of the implant is capable of sorbing proteins that induce osteogenesis. As a result, complex compounds are formed - proteoglycans.

Все эти свойства материала обеспечивают гарантированное приживление имплантата в оптимально кроткие сроки.All these material properties provide guaranteed implant engraftment in an optimally short time.

Пример 1. Получение материала состава:Example 1. Obtaining material composition:

натрия альгинат 1,750 г кальция альгинат 1,750 г коры дуба экстракт 0,375 г крапивы экстракт 0,375 г тысячелистника экстракт 0,375 г зверобоя экстракт 0,375 гsodium alginate 1.750 g calcium alginate 1.750 g oak bark extract 0.375 g nettle extract 0.375 g yarrow extract 0.375 g St. John's wort extract 0.375 g

Сухие альгинаты кальция и натрия в равных количествах перемешивают, приливая водноспиртовую 40% смесь до полного смачивания. Процесс сушки полуфабриката (смешанные в равных пропорциях альгинаты кальция и натрия) проходит в вакуумном ротационном испарителе при 110°С в течении 2-х ч. Смесь экстрактов коры дуба, крапивы, тысячелистника, зверобоя готовят в эмалированных реакторах с рубашкой, якорной мешалкой при температуре 40°С в течении 1 ч до создания равномерной смеси. Далее полуфабрикат высушивают при температуре 80°С в вакуумных установках роторного типа до относительной влажности не более 5%. В полуфабрикат (смешанные в равных пропорциях альгинаты кальция и натрия) приливают смесь экстрактов в пропорции 1/3, сушат в установках роторного типа при температуре 40°С. Полученный материал фасуют в герметичную тару, стерилизуют в установках гамма излучения.Dry calcium and sodium alginates are mixed in equal amounts, pouring 40% water-alcohol mixture until completely wetted. The drying process of the semi-finished product (calcium and sodium alginates mixed in equal proportions) takes place in a vacuum rotary evaporator at 110 ° C for 2 hours. A mixture of extracts of oak bark, nettle, yarrow, St. John's wort is prepared in enameled reactors with a jacket and an anchor stirrer at a temperature 40 ° C for 1 h until a uniform mixture is created. Next, the semi-finished product is dried at a temperature of 80 ° C in rotary-type vacuum plants to a relative humidity of not more than 5%. A mixture of extracts in a proportion of 1/3 is poured into the semi-finished product (mixed in equal proportions of calcium and sodium alginates), dried in rotary-type plants at a temperature of 40 ° C. The resulting material is Packed in sealed containers, sterilized in gamma radiation units.

Пример 2. Исследование бактерицидности (антибактериальной активности).Example 2. The study of bactericidal activity (antibacterial activity).

Методика проведения исследования.Research Methodology.

Для жидких питательных сред: стерильный исследуемый материал в количестве 2,5 г помещают в плоскодонную колбу объемом 50 мл, стерильной серологической пипеткой на 25 мл вносят в колбу 15 мл питательной среды, соответствующей типу тестируемой бактериальной культуры, ставят на магнитную мешалку и перемешивают в течение 5 мин. Затем стерильной серологической пипеткой производят забор и перенос содержимого колбы на стерильную чашку Петри.For liquid culture media: a sterile test material in an amount of 2.5 g is placed in a 50 ml flat-bottomed flask, a 15 ml sterile serological pipette is introduced into a flask of 15 ml of culture medium corresponding to the type of bacterial culture tested, put on a magnetic stirrer and stirred for 5 minutes. Then a sterile serological pipette is used to collect and transfer the contents of the flask to a sterile Petri dish.

Полученную взвесь подсушивают в чашке Петри и помещают в инкубатор.The resulting suspension is dried in a Petri dish and placed in an incubator.

Для готовых питательных сухих сред в чашках Петри: стерильный исследуемый материал в количестве 2,5 г помещают в плоскодонную колбу объемом 50 мл, стерильной серологической пипеткой объемом 25 мл вносят в колбу 15 мл дистиллированной воды, ставят на магнитную мешалку и перемешивают в течение 10 мин, снимают и переносят на подготовленную питательную среду, инкубируют.For ready-made nutrient dry media in Petri dishes: a sterile test material in an amount of 2.5 g is placed in a flat-bottomed flask with a volume of 50 ml, a sterile serological pipette with a volume of 25 ml is introduced into a flask of 15 ml of distilled water, placed on a magnetic stirrer and stirred for 10 min , removed and transferred to the prepared nutrient medium, incubated.

После инкубации оценивают результаты микроскопированием по критериям: обладает выраженной бактерицидной активностью, обладает слабовыраженной бактерицидной активностью, не обладает бактерицидной активностью.After incubation, the results are evaluated by microscopy according to the criteria: it has a pronounced bactericidal activity, has a mild bactericidal activity, does not have bactericidal activity.

- 2 025598- 2 025598

Таблица 1. Определение бактерицидных свойств материалаTable 1. Determination of the bactericidal properties of the material

1 one 2 2 3 3 Культура Culture Особенности культивирования Cultivation Features Режим культивирования Mode cultivating 51хер1ососсиз руодепез’ 51her1ossoss ruodepez ’ Жидкая тиогликолевая среда (агар Коламбия или ГРМ-агар №1) -требует повышенного содержания нативного животного белка (достигается добавлением 5% дефибринизированной крови КРС, но не человека, из-за содержания в ней антител кМ-белку, стрептолизину, гиалуронидазе и другим факторам вирулентности) и высокого содержания аминного азота. Liquid thioglycol medium (Columbia agar or GRM agar No. 1) - requires an increased content of native animal protein (achieved by adding 5% defibrinated blood of cattle, but not human blood, because of the content of antibodies to it to the M protein, streptolysin, hyaluronidase and other virulence factors) and a high content of amine nitrogen. 37’С; 24 часа 37’s; 24 hours $1гер1ососсиз запдшз $ 1ger1ossoss zapdshz 5% кровяной гемин-агар 5% blood hemin agar 37аС, 7 суток37 a C, 7 days 51арКу1ососсиз аигеиз’ 51arKu1ossoss igeeiz ’ Желточно-соляной агар Yolk-Salt Agar 37°С, 7 суток 37 ° C, 7 days 1_ас1оЬасШи5 1_ac1obacb5 Кровяной агар Blood agar 37ОС, 7 суток37 ° C, 7 days Сап01с1а а1Ысапз Sap01s1a a1Ysapz Жидкая соево-казеиновая среда с полимиксином Liquid soya casein medium with polymyxin 23’С, 5 суток 23’s, 5 days Еп1егососси$ ГаесаНз’ En1gossossi $ GaesNz ’ Среда Эндо Wednesday Endo 37ОС, 18-20 часов37 ° C, 18-20 hours Асйпотусез паез1ипсИГ Asypotuses paez Среда Вильсона-Блера Wilson-Blair Wednesday 37°С, 7 суток 37 ° C, 7 days УеП1опе11а рап/и1а‘ UeP1ope11a rap / u1a ‘ Строгий анаэроб, среда ВильсонаБлера, рН среды обязателен в пределах 6,5-8,0; необходима система для анаэробного культивирования Strict anaerobic, Wilson-Blair medium, pH of the medium is required in the range of 6.5-8.0; a system for anaerobic cultivation is needed 30-37°С, 7 суток 30-37 ° C, 7 days ЕизоЬасТепит пис!еа1ит’ EisobasTepit piss! Ea1it ’ Кровяной агар, например, среда Китта-Тароцци; анаэроб, необходима система для анаэробного культивирования Blood agar, e.g. medium Kitta-Tarozzi; anaerobic needed system for anaerobic cultivating 37°С, 7 суток 37 ° C, 7 days 2 2 3 3 РогрЬуготопаз д1пд1УаНз’ Rogrugotopaz d1pd1Uanz ’ Кровяной гемин-агар Blood hemin agar 37°С, 7 суток 37 ° C, 7 days Вас1егой -ГгадШз Vas1egoy -GgadShz 20% желчно-эскулиновый агар 20% gall esculin agar 37’С, 5 суток 37’s, 5 days Ргеуо1е11а‘ Rgeuo1e11a ‘ Жидкая соево-казеиновая среда Liquid Soya Casein Medium 37°С, 7 суток 37 ° C, 7 days

Для этих культур исследование проводились в бескислородных условиях: в анаэростате с газовой средой, содержащей азот 80%, водород 10% и углекислый газ 10%.For these crops, the study was conducted under oxygen-free conditions: in an anaerostat with a gaseous medium containing 80% nitrogen, 10% hydrogen and 10% carbon dioxide.

Результат проведения исследования: исследуемый материал обладает выраженной бактерицидной активностью в отношении данных культур микроорганизмов.The result of the study: the test material has a pronounced bactericidal activity against these cultures of microorganisms.

Пример 3. Специфическая активность материала.Example 3. The specific activity of the material.

Контроль качества материала проводился по параметру специфической (гемостатической) активности препарата в 2-х сериях.Quality control of the material was carried out according to the parameter of specific (hemostatic) activity of the drug in 2 series.

0,01 г исследуемого материала помещают в пробирку, добавляют 0,4 мл контрольной плазмы (с нормальным уровнем системы гемостаза, предназначенной для определения тромбинового времени лиофильно высушенной пулированной донорской), приготовленной в соответствии с инструкцией производителя, и ставят точно на 5 мин на водяную баню при температуре 37°С. По истечении времени прогрева плазмы туда же добавляют 0,4 мл 0,05 %-го рабочего раствора тромбина (приготовленного по инструкции производителя и не прогретого при температуре 37°С) и быстро включают секундомер.0.01 g of the test material is placed in a test tube, 0.4 ml of control plasma is added (with a normal level of hemostasis system, designed to determine the thrombin time of lyophilized dried donated donor), prepared in accordance with the manufacturer's instructions, and placed exactly 5 min in water bath at a temperature of 37 ° C. After the plasma heating time has elapsed, 0.4 ml of the 0.05% thrombin working solution (prepared according to the manufacturer's instructions and not warmed up at 37 ° C) is added to the same and the stopwatch is quickly turned on.

При равномерном перемешивании раствора пластиковой микробиологической петлей момент образования сгустка фиксируется остановкой секундомера.When the solution is uniformly mixed with a plastic microbiological loop, the moment of clot formation is fixed by stopping the stopwatch.

В контроле время образования сгустка регистрируется при смешивании плазмы в тех же условиях с раствором тромбина. Уменьшение времени свертывания плазмы в опыте по сравнению с контролем определяют гемостатическую активность материала активного покрытия.In the control, the time of clot formation is recorded when plasma is mixed under the same conditions with a thrombin solution. The decrease in plasma coagulation time in the experiment compared with the control determines the hemostatic activity of the active coating material.

Согласно проведенным исследованиям, материал покрытия уменьшает время свертывания плазмы не менее чем на 20% по сравнению с контролем.According to studies, the coating material reduces the clotting time of plasma by at least 20% compared with the control.

Результаты исследований приведены в табл. 2.The research results are given in table. 2.

Таблица 2. Оценка специфической активности материалаTable 2. Assessment of the specific activity of the material

- 3 025598- 3 025598

Пример 4. Токсикологические исследования и определение гемолитических свойств материала.Example 4. Toxicological studies and determination of hemolytic properties of the material.

Для проведения токсикологических исследований материал готовили в стерильном физиологическом растворе в соотношении 1 г материала к 100 мл физиологического раствора. Длительность экспозиции составила 3 суток.For toxicological studies, the material was prepared in sterile saline in the ratio of 1 g of material to 100 ml of saline. The exposure duration was 3 days.

В токсикологическом эксперименте препарат вводили внутрибрюшинно (1) и внутрижелудочно (2) по 1 мл в течение 5 дней. Контрольным животным вводили физиологический раствор в аналогичных условиях.In a toxicological experiment, the drug was administered intraperitoneally (1) and intragastrically (2), 1 ml for 5 days. Control animals were injected with saline under similar conditions.

Исследования были проведены в соответствии с документами:The studies were carried out in accordance with the documents:

ГОСТ Р ИСО 10993-2009 Оценка биологического действия медицинских изделий: 4.2. Требования к обращению с животными;GOST R ISO 10993-2009 Assessment of the biological effects of medical devices: 4.2. Animal handling requirements;

Стандарты серии ГОСТ Ι3Ο 10993-2011 Оценка биологического действия медицинских изделий: 4.1. Оценка и исследования; 4.4. Исследование изделий, взаимодействующих с кровью; 4.9. Основные принципы идентификации и количественного определения потенциальных продуктов деградации; 4.10. Исследование раздражающего и сенсибилизирующего действия; 4.11. Исследование общетоксического действия; 4.12. Приготовление проб и контрольные образцы;Standards of the GOST Ι3Ο 10993-2011 series. Assessment of the biological effect of medical devices: 4.1. Assessment and research; 4.4. Research products interacting with blood; 4.9. Basic principles for the identification and quantification of potential degradation products; 4.10. Study of irritating and sensitizing effects; 4.11. Study of general toxic effects; 4.12. Sample preparation and control samples;

ГОСТ Р 52770-2007 Изделия медицинские. Требования безопасности. Методы санитарнохимических и токсикологических испытаний.GOST R 52770-2007 Medical devices. Safety requirements. Methods of sanitary-chemical and toxicological tests.

ГОСТ Р 51148-98 Изделия медицинские. Требования к образцам и документации, представляемым на токсикологические, санитарно-химические испытания, испытания на стерильность и пирогенность.GOST R 51148-98 Medical Products. Requirements for samples and documentation submitted for toxicological, sanitary and chemical tests, sterility and pyrogenicity tests.

Проверяемые характеристики и используемые средства испытаний: а) ТоксикологическиеChecked characteristics and test means used: a) Toxicological

- Общая токсичность при в/брюшинном введении вытяжки (1)- General toxicity with intraperitoneal administration of an extract (1)

-клинические симптомы интоксикации: (есть нет)-clinical symptoms of intoxication: (there is no)

-смертность (есть-нет)mortality (yes or no)

-изменение морфоструктуры внутренних органов (есть-нет)-changing the morphological structure of internal organs (yes or no)

-весовые коэффициенты внутренних органов (наличие достоверных изменений): (есть-нет) Стеклянные шпатели-weighing coefficients of internal organs (the presence of significant changes): (yes-no) Glass spatulas

Белые мышиWhite mice

Весы электронные модели ВСТ 1,2к/0,02Scales electronic VST 1,2k / 0,02 models

Шприцы объемом 1; 2 млSyringes with a volume of 1; 2 ml

Общая токсичность при в/желудочном введении вытяжки (2) клинические симптомы интоксикации: (естьнет)General toxicity in case of intravenous administration of an extract (2) clinical symptoms of intoxication: (no)

-смертность (есть-нет) изменение морфоструктуры внутренних органов (есть-нет)-mortality (yes-no) change in the morphostructure of internal organs (yes-no)

-весовые коэффициенты внутренних органов (наличие достоверных изменений): (есть-нет) Кролики-weighing coefficients of internal organs (the presence of significant changes): (yes-no) Rabbits

Лупа, пинцеты анатомическиеMagnifier, anatomical tweezers

Центрифуга 1,5-2,5 тыс. об/мин Фотометр Стат Факс 1904 Плюс Весы электронные ВСЛ-200/0,1 А Посуда мерная лабораторная Химические реактивыCentrifuge 1,5-2,5 thousand rpm Photometer Stat Fax 1904 Plus Scales electronic VSL-200 / 0.1 A Measured glassware Laboratory chemicals

б) Гемолитическое действиеb) Hemolytic effect

- 4 025598- 4,025598

Таблица 3. Результаты проведенных испытанийTable 3. The results of the tests

Наименование показателя Name indicator Допустимое значение Allowable value Результаты испытаний results test Выводы conclusions Изменение рН вытяжки Changing the pH of the hood ±1,00 ± 1.00 0.34 0.34 Соответствует Compliant Токсикологические: Toxicological: - Общая токсичность при в/брюшинном введении вытяжки (1) - General toxicity with in / peritoneal injection (1) -клинические симптомы - clinical symptoms - нет not нет not Соответствует Compliant интоксикации: (есть-нет) intoxication: (yes-no) нет not нет not Соответствует Compliant -смертность (есть-нет) mortality (yes or no) -изменение -change нет not нет not Соответствует Compliant морфоструктуры внутренних органов (есть- нет) morphostructures internal organs (there is- not) нет not нет not Соответствует Compliant -весовые коэффициенты внутренних органов (наличие достоверных изменений): (есть-нет) -weighing coefficients internal organs (presence of significant changes): (yes-no) нет not нет not Соответствует Compliant Общая токсичность при General toxicity with нет not нет not Соответствует Compliant в/желудочном введении вытяжки (2, in / gastric administration hoods (2, нет not нет not Соответствует Compliant клинические симптомы clinical symptoms интоксикации: (есть-нет) intoxication: (yes-no) -смертность (есть-нет) mortality (yes or no) нет not нет not Соответствует Compliant изменение change морфоструктуры внутренних органов (есть- нет) -весовые коэффициенты внутренних органов (наличие достоверных изменений): (есть-нет) morphostructures internal organs (there is- not) -weighing coefficients internal organs (availability of reliable changes): (yes-no) Гемолитическое Hemolytic <2,0 <2.0 менее 0,05 less than 0.05 Соответствует Compliant действие (%) action (%)

Токсикологические исследования показали:Toxicological studies have shown:

1. Согласно принятой классификации токсичности веществ, материал можно отнести к VI классу Относительно безвредные вещества.1. According to the accepted classification of toxicity of substances, the material can be attributed to class VI Relatively harmless substances.

2. В результате проведенных исследований установлено, что материал в условиях пятикратного подкожного введения кроликам обладает слабым общерезорбтивным действием.2. As a result of the studies, it was found that the material under the conditions of five times subcutaneous administration to rabbits has a weak general resorptive effect.

3. Материал не токсичен, не оказывает гемолитического действия в опытах ίη νίίτο с эритроцитами кроликов.3. The material is not toxic, does not have a hemolytic effect in experiments ίη νίίτο with rabbit erythrocytes.

Пример 5. Исследование водопоглощения материала.Example 5. The study of water absorption of the material.

Чтобы достичь наилучших показателей по гидрофильности поверхности имплантата, необходимо, чтобы материал обладал максимальной способностью поглощения выделяемых жидкостей при проведении операционного вмешательства.In order to achieve the best hydrophilicity of the implant surface, it is necessary that the material has the maximum ability to absorb the released fluids during surgery.

Методика поглощения послеоперационных выделяемых жидкостей состоит в следующем.The technique for absorbing postoperative excreted fluids is as follows.

Методика разработана на тестовый параметр \Ув - водопоглощения в % и пересчитывается для выделяемых из раны жидкостей исходя из их коэффициентов плотности:The technique was developed for the test parameter \ Uv - water absorption in% and is recalculated for fluids released from the wound based on their density coefficients:

где т1 - масса поглощенной жидкости;where t1 is the mass of the absorbed liquid;

т2 - масса сухого вещества;T2 - dry matter mass;

Р1 - плотность воды при 20°С;P1 is the density of water at 20 ° C;

Р2 - плотность жидкости.P2 is the density of the liquid.

Исследование.Study.

Влажность определяют на образцах материала весом 5 г.Humidity is determined on samples of material weighing 5 g.

Образцы материала в количестве 10 ед. высушивают до постоянной массы, а затем взвешивают сSamples of material in the amount of 10 units. dried to constant weight and then weighed with

- 5 025598 точностью до 0,01 г.- 5,025598 accurate to 0.01 g.

Взвешенный образец или пробу помещают в воду, налитую в мерный стакан, установленный в термостат, в котором поддерживают температуру 20±3°С.A suspended sample or sample is placed in water poured into a measuring cup installed in a thermostat, in which a temperature of 20 ± 3 ° C is maintained.

Предварительно определяется время способности образца к полному (избыточному) смачиванию. Через определенное время (для воды 1 ч) образец или пробу вынимают из мерного стакана и взвешивают с точностью до 0,01 г.Preliminarily, the time of the ability of the sample to complete (excess) wetting is determined. After a certain time (for water 1 h), the sample or sample is removed from the measuring cup and weighed to the nearest 0.01 g.

Производят расчет по формуле:They calculate according to the formula:

определяют водопоглощение жидкости.determine the water absorption of the liquid.

Перед испытаниями элементарные пробы, должны быть выдержаны в климатических условиях по ГОСТ 10681 не менее 24 ч.Before testing, elementary samples must be aged in climatic conditions according to GOST 10681 for at least 24 hours.

Отбор образцов) проб.Sampling)

Образцы\пробы отбирают по 50 г для высушивания в вакуумном ротационном испарителе или массой 5 г для высушивания в сушильном шкафу или сушильной камере.Samples / samples are taken of 50 g each for drying in a vacuum rotary evaporator or weighing 5 g for drying in an oven or oven.

Весы лабораторные аналитические 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания до 200 г.Laboratory analytical scales of the 2nd accuracy class with the largest weighing limit up to 200 g.

Подготовка материала для исследования.Preparation of material for research.

Образцы в количества -10 ед. взвешивают с точностью до 0,01 г.Samples in the amount of -10 units. weighed to the nearest 0.01 g.

Взвешенный образец помещают в воду, налитую в мерный стакан, установленный в термостат, в котором поддерживают температуру 20±3°С.A weighted sample is placed in water poured into a measuring cup installed in a thermostat, in which a temperature of 20 ± 3 ° C is maintained.

Время способности образца к полному (избыточному) смачиванию составляет не более 1 ч.The time of the ability of the sample to complete (excess) wetting is not more than 1 hour.

Через 1 ч (для воды) образец вынимают из мерного стакана и взвешивают с точностью до 0,01 г. Расчет водопоглощения жидкости по формуле:After 1 h (for water), the sample is removed from the measuring cup and weighed to the nearest 0.01 g. Calculation of the water absorption of the liquid according to the formula:

т1 - масса поглощенной жидкости (вода) = 3,2 г (среднее значение); т2 - масса сухого вещества (материала) = 5 г;T1 - mass of absorbed liquid (water) = 3.2 g (average value); T2 - mass of dry matter (material) = 5 g;

Р1 - плотность воды при 20°С = 0,99823 г/см3;P1 is the density of water at 20 ° C = 0.99823 g / cm 3 ;

Р2 - плотность жидкости (раствор Хартмана) = 1,01 г/см3;P2 is the density of the liquid (Hartman's solution) = 1.01 g / cm 3 ;

Коэффициент Р1\Р2 - 0,998\1,01 = 0,988.The coefficient P1 \ P2 is 0.998 \ 1.01 = 0.988.

Межклеточная жидкость сопоставима по составу и плотности раствору Хартмана.Intercellular fluid is comparable in composition and density to Hartman's solution.

Поглощение материалом жидкости (по раствору Хартмана) составляет кВ = 3,2\5х0,988х 100 = 63,23%The absorption of liquid by the material (according to Hartman's solution) is kV = 3.2 \ 5x0.988x 100 = 63.23%

Claims (1)

Органическое покрытие для титановых имплантатов, содержащее полисахариды натрия альгинат и кальция альгинат, экстракт коры дуба густой и экстракты крапивы, тысячелистника и зверобоя жидкие в следующем соотношении, мас.%:Organic coating for titanium implants containing polysaccharides of sodium alginate and calcium alginate, thick oak bark extract and nettle, yarrow and hypericum extracts in liquid in the following ratio, wt.%: натрия альгинат - 30-35; кальция альгинат - 25-30; экстракт коры дуба густой - 10-15; экстракт крапивы жидкий - 8-10; экстракт тысячелистника жидкий - 8-10; экстракт зверобоя жидкий - 8-10.sodium alginate - 30-35; calcium alginate - 25-30; thick oak bark extract - 10-15; nettle extract liquid - 8-10; liquid yarrow extract - 8-10; Hypericum extract liquid - 8-10.
EA201500036A 2015-01-22 2015-01-22 Active organic coating for application to titanium implants and method for producing the same EA025598B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EA201500036A EA025598B1 (en) 2015-01-22 2015-01-22 Active organic coating for application to titanium implants and method for producing the same

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EA201500036A EA025598B1 (en) 2015-01-22 2015-01-22 Active organic coating for application to titanium implants and method for producing the same

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201500036A1 EA201500036A1 (en) 2016-07-29
EA025598B1 true EA025598B1 (en) 2017-01-30

Family

ID=56550577

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201500036A EA025598B1 (en) 2015-01-22 2015-01-22 Active organic coating for application to titanium implants and method for producing the same

Country Status (1)

Country Link
EA (1) EA025598B1 (en)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN119345456B (en) * 2024-12-26 2025-03-14 四川大学华西医院 An orthopedic implant with antibacterial and osteogenesis properties and a preparation method thereof

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2194536C2 (en) * 1999-11-17 2002-12-20 Институт физики прочности и материаловедения СО РАН Method for producing biologically active implant coating
EA200701423A1 (en) * 2004-12-30 2007-12-28 Синвеншен Аг COMBINATION, INCLUDING AGENT, PROVIDING SIGNAL, IMPLANTABLE MATERIAL AND MEDICINE
RU2314787C1 (en) * 2006-09-12 2008-01-20 Евгений Яковлевич Малорян Method for coating bone implant

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2194536C2 (en) * 1999-11-17 2002-12-20 Институт физики прочности и материаловедения СО РАН Method for producing biologically active implant coating
EA200701423A1 (en) * 2004-12-30 2007-12-28 Синвеншен Аг COMBINATION, INCLUDING AGENT, PROVIDING SIGNAL, IMPLANTABLE MATERIAL AND MEDICINE
RU2314787C1 (en) * 2006-09-12 2008-01-20 Евгений Яковлевич Малорян Method for coating bone implant

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ПОПОВ В.П. и др. Использование биоактивных и биоинертных имплантатов при лечении переломов. Фундаментальные исследования, №8, 2012, с. 135-139 *

Also Published As

Publication number Publication date
EA201500036A1 (en) 2016-07-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Vaidhyanathan et al. Fabrication and investigation of the suitability of chitosan-silver composite scaffolds for bone tissue engineering applications
Jiang et al. Bio-inspired natural platelet hydrogels for wound healing
Yan et al. Vascularized 3D printed scaffolds for promoting bone regeneration
Dhivya et al. Nanohydroxyapatite-reinforced chitosan composite hydrogel for bone tissue repair in vitro and in vivo
Rahman et al. Fabrication of biocompatible porous scaffolds based on hydroxyapatite/collagen/chitosan composite for restoration of defected maxillofacial mandible bone
Parisi et al. Incorporation of collagen from marine sponges (spongin) into hydroxyapatite samples: characterization and in vitro biological evaluation
Öfkeli et al. Biomimetic mineralization of chitosan/gelatin cryogels and in vivo biocompatibility assessments for bone tissue engineering
Liu et al. Chemical modification of chitosan film via surface grafting of citric acid molecular to promote the biomineralization
Clauss et al. Biofilm formation on bone grafts and bone graft substitutes: comparison of different materials by a standard in vitro test and microcalorimetry
Zang et al. A comparison of physicochemical properties of sterilized chitosan hydrogel and its applicability in a canine model of periodontal regeneration
Mao et al. Construction of a multifunctional 3D nanofiber aerogel loaded with ZnO for wound healing
Wang et al. Root-shaped antibacterial alginate sponges with enhanced hemostasis and osteogenesis for the prevention of dry socket
Ding et al. Fabrication of strontium-incorporated protein supramolecular nanofilm on titanium substrates for promoting osteogenesis
Xiong et al. The fabrication of a highly efficient hydrogel based on a functionalized double network loaded with magnesium ion and BMP2 for bone defect synergistic treatment
Gonzalez et al. Composite gels based on poly (vinyl alcohol) for biomedical uses
Maulida et al. Injectable bone substitute paste based on hydroxyapatite, gelatin and streptomycin for spinal tuberculosis
Priddy‐Arrington et al. Characterization and Optimization of Injectable In Situ Crosslinked Chitosan‐Genipin Hydrogels
Ghavimi et al. Effect of dibasic calcium phosphate incorporation on cellulose nanocrystal/chitosan hydrogel properties for the treatment of vertebral compression fractures
Arumugam et al. Scalable novel PVDF based nanocomposite foam for direct blood contact and cardiac patch applications
Şeker et al. Autologous protein-based scaffold composed of platelet lysate and aminated hyaluronic acid
Doğan et al. Synthesis, characterization and some biological properties of PVA/PVP/PN hydrogel nanocomposites: antibacterial and biocompatibility
EA025598B1 (en) Active organic coating for application to titanium implants and method for producing the same
RU2473352C2 (en) Intra-articular fluid simulator formulation and method for preparing intra-articular fluid additive
CN105797211A (en) Preparation method of hydrogel, osteoblast containing hydrogel and preparation method of osteoblast containing hydrogel
CN107227453A (en) The preparation of AZ31 Mg alloy surface Zn MMT coatings and assay method

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM RU

NF4A Restoration of lapsed right to a eurasian patent

Designated state(s): RU

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU