DK169127B1

DK169127B1 - 3-Desmethyl-mevalonsyrederivater, fremgangsmåde til fremstilling deraf og farmaceutisk præparat indeholdende disse forbindelser

Info

Publication number: DK169127B1
Application number: DK409986A
Authority: DK
Inventors: Gerhard Beck; Bela Kerekjarto; Hans-Hermann Lau; Guenther Wess
Original assignee: Hoechst Ag
Priority date: 1985-08-29
Filing date: 1986-08-28
Publication date: 1994-08-22
Also published as: FI90868C; NO171108C; US4914127A; NO171108B; EP0217092A3; JPH0830027B2; IE59312B1; IE862302L; NO863461D0; GR862210B; FI863471A; PT83269A; CA1294284C; FI90868B; HUT41757A; HU195799B; PT83269B; IL79855A0; NO863461L; AU583943B2

Description

i DK 169127 B1

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte 3-desmethyl-mevalonsyrederivater, en fremgangsmåde til fremstilling deraf og farmaceutisk præparat indeholdende disse derivater. De nye forbindelser er nyttige ved behandling af 5 arteriosclerose og hypercholesterolæmi.

Derivater af 3-hydroxy-3-methyl-glutarsyre (HMG) og mevalonsyre er beskrevet som hæmmere af cholesterolbiosyn-tesen (M.T. Boots med flere, J. Pharm. Sci. 69, 306 (1980), F.M. Singer med flere, Proc. Soc. Exper. Biol. Med. 102, 10 270 (1959), H. Feres, Tetrahedron Lett. 24, 3769 (1983)).

3-Hydroxy-3-methyl-glutarsyre alene udviser i humanforsøg og på rotter betydelig cholesterolnedsættende virkning (Z. Beg, Experientia 23, 380 (1967), ibid 24, 15 (1968), P.J. Lupien med flere, Lancet 1978, 1, 283)).

15 Endo med flere (Febs. Letter 72, 323 (1976), J. Biol.

Chem. 253, 1121 (1978)) beskriver hæmningen af 3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-coenzym-A-reduktase (HMG-CoA-reduktase) , det hastighedsbestemmende enzym ved cholesterolbiosyntesen, ved hjælp af fermenteringsproduktet "Compactin".

20 Brown med flere (J. Chem. Soc. 1165 (1976)) har be stemt den kemiske struktur og den absolutte konfiguration af "Compactinet" ved en kombination af kemiske, spektro-skopiske og radiokrystallografiske metoder og har kunnet vise, at "Compactin'1 er et derivat af 3-desmethyl-mevalon-25 syrelacton.

"Compactin"-derivater, som hæmmer aktiviteten af HMG-CoA-reduktase, er allerede beskrevet (G.E. Stokker med flere, J. Med. Chem. 28, 347-358 (1985)).

I US-patentskrift nr. 4.440.927 og i EP nr. 0.164.049-30 Al er der beskrevet "Compactin'·-analoge, som har den i nedenstående formel (I) viste grundstruktur. I 2-stillingen i den aromatiske ring bærer de dog ikke en cycloalkylgruppe tilknyttet via en -CH2- eller -CH2-CH2“bro. Der findes ingen eksakte angivelser af deres hæmningsvirkning over for HMG-35 CoA-reduktase.

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte, syntetiske analoge forbindelser til "Compactin'1, og de her DK 169127 B1 2 omhandlede 3-desmethyl-mevalonsyrederivater er ejendommelige ved, at de har formlen (I) (6-lacton) eller (la) (tilsvarende dihydroxycarboxylsyrederivat) 5 HO HOa5/\COOR4 SGf " .'V “

IH 4 C) * H

B —R^OH/Hpy 1 S "hS 1 k hvori 15 A-B betyder en gruppe med formlen -CH=CH- eller -CH2-CH2-, Z betyder en -CH2- eller -CH2-CH2-gruppe, R1 betyder et cycloaliphatisk carbonhydrid med 3-7 car-bonatomer, som eventuelt er substitueret med 1 eller 20 2 methylgrupper, R2 og R3 betyder hydrogen, halogen, trifluormethyl eller alkyl eller alkoxy med hver især 1-6 carbonatomer, R4 betyder hydrogen eller en ligekædet eller forgrenet C1-C5-alkylgruppe, benzyl, 1 eller 2 gange med 25 C4-alkyl eller halogen substitueret benzyl, et alka limetal, ammonium (NH4+) eller en med C1-C4-alkyl eller hydroxy-C2~C4-alkyl substitueret ammoniumion. Opfindelsen angår de rene enatiomere med den i den almene formel (I) angivne absolutte konfiguration 4R, 6S, 30 idet de åbenkædede carboxylsyrer eller estere og salte har den absolutte konfiguration 3R, 5S.

Blandt substituenterne R1 foretrækkes cyclopentyl og cyclohexyl.

Blandt substituenterne R2 og R3 foretrækkes hydrogen, 35 halogen, trifluormethyl, alkyl eller alkoxy med hver især 1-4 carbonatomer.

3 DK 169127 B1

Blandt substituenterne R4 foretrækkes hydrogen, methyl, ethyl, isopropyl, isobutyl, benzyl, natrium, kalium, ammonium og tris-hydroxymethyl-methylamin.

Blandt substituenterne R1 er cyclopentyl og cyclohexyl 5 særlig foretrukne.

Blandt substituenterne R2 og R3 er de særlig foretrukne hydrogen, 2-methyl, 2-trifluormethyl, 2,4-dimethyl, 2-methyl-4-chlor, 2-chlor-4-methyl, 2,4-bis-trifluormethyl, 2-ethyl, 2-isopropyl, 2-isobutyl, 2-chlor, 2-fluor, 2-brom, 10 2,4-dichlor, 2,4-difluor, 2-methoxy, 4-methoxy og 4-dimeth-oxy.

Blandt substituenterne R4 er de særlig foretrukne hydrogen, methyl, ethyl, benzyl, natrium, kalium, ammonium og tris-hydroxymethyl-methylamin.

15 Opfindelsen angår endvidere en fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med formlerne (I) og (la), hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved, at man a) omsætter phosphoniumsaltene med formlen (II) 20 ch2-p®(c6h5)3 X®

R1-Z I

Xb*2 25 hvori R1, R2, R3 og Z har den til formlen (I) angivne betydning, og X betyder Cl, Br eller I, med det chirale aldehyd med formlen (III) 30 y CH=0 35 hvori R5 betyder en mod baser og svage syrer stabil beskyttelsesgruppe, til en forbindelse med formlen (IV) DK 169127 B1 4 5 o0CH3 ""4,' "

10 R

hvori R1, R2, R3 og Z har den til formlen (I) og R5 den til formlen (III) angivne betydning (og AB betyder en -CH=CH-gruppe), b) i en forbindelse med den almene formel (IV) hydrolyserer 15 methylacetalfunktionen surt til en lactol med formlen (V)

_5_ OH

R

20 ^ R1-Z J (V) Ί>,-

R

25 hvori R1, R2, R3 og Z har den til formlen (I) og R5 den til formlen (III) angivne betydning (og A-B betyder en -CH=CH-gruppe), c) oxiderer forbindelsen med den almene formel (V) til en lacton med formlen (VI) 30 RS0 J ,VI) R3 DK 169127 Bl 5 hvor R1, R2, R3 og Z har den til formlen (I) og R5 den til formlen (III) angivne betydning (og A-B betyder en -CH=CH-gruppe), d) i en forbindelse med den almene formel (VI) fraspalter 5 beskyttelsesgruppen R5 til en forbindelse med formlen (I), hvori R1, R2, R3 og Z har den til formlen (I) angivne betydning, og A-B betyder en -CH=CH-gruppe, eventuelt hydrogenerer en forbindelse med den almene formel (I), hvor A-B betyder en -CH=CH-grupppe, til en forbindelse 10 med den almene formel (I), hvor A-B betyder en -CH2-CH2-gruppe, hvorhos hydrogeneringen også kan ske ved forbindelserne med formlerne (IV), (V) eller (VI) til tilsvarende forbindelser, hvori A-B betyder en -CH2-CH2-gruppe, eventuelt overfører en hydroxylacton (I) i de tilsvarende frie 15 hydroxysyrer (la) eller deres salte eller eventuelt fremstiller den tilsvarende ester ud fra de frie hydroxysyrer (la) eller ud fra hydroxylactonen (I).

De ved den her omhandlede fremgangsmåde som udgangsmateriale anvendte phosphoniumsalte med den almene formel 20 (II), hvor Z betyder CH2, og R1, R2 og R3 har den til den almene formel (I) angivne betydning, fås f.eks. ved omsætning af de tilsvarende substituerede benzylhalogenider med den almene formel (XIII) (se skema 1) CH2X X=C1, Br, I. 1 3 med triphenylphosphin i acetonitril, toluen eller andre 30 sammenlignelige opløsningsmidler. Til fremstilling af de substituerede benzylhalogenider (XIII) kan man, når R1, R2 og R3 har den til den almene formel (I) angivne betydning, arbejde analogt med fremgangsmåden, som er beskrevet af L.A. Walter med flere, J. Heterocycl. Chem. 14, 47 (1977) 35 (skema 1-vej A) . Afhængig af R1 er det fordelagtigt til fremstillingen af forbindelsen med den almene formel (xui) (skema 1) at vælge syntesevej B (se også eks. 1, 4, 5 og 6).

1“

O

6 DK 169127 B1 tn 0\° 5 2

'ST

< m •ri -n l> !> g"

10 S'4 m -¾ X

p δ“X / Bl-1 af "« 1 / O I Xrj "1 \ . g

'"θ' CM

. w as f« - r/ \ί III 1/ « ; Λ Sr1 — —

K S dl<f CN T

&>·+)1 ro , O rf tu -q1 BB 1- m 1 Y ^ £ r- Π S η B S n $ bT/4v 2l |. /=4=01 ®

25 ΒΊ»β S_^ 3 8-Λ I

? B ~\ . \ - “ Ϊ -3· \ § / psi 30 „1 ^ 1 \ % ^ g ff S \ B/ S -A S g” N« ¢= I 5 si

35 X «V V_U

CO « g r—

Pi

O

7 DK 169127 B1 5 u i o n 3° "cm 33 33 O u n Η CM II Γ'

10 + 0, Βί S

tpr' § 3 15 & i k

20 Z

u ro « u ro '“tn «Ό u 25 * + ™ Col 5 t 1> B i 30 I S-p 5 Ϊ T- r- cd e O) λ; 35 ω

O

8 DK 169127 B1

De ved den her omhandlede fremgangsmåde som udgangsmateriale anvendte phosphoniumsalte med den almene formel (II), hvor Z betyder CH2-CH2, og og R3 har den til den almene formel (I) angivne betydning, fremkommer ved at gå 5 frem som gengivet i skema 2 (se også eksemplerne 8-11).

10 15 20 25 30 35

Skema 2

O

9 DK 169127 B1 1 ® θ

5 R1-CH2-X + iC6H5)3P -► * -CH2“P(C6H5}3 X

(XIV) (XV) (eks. 8) X=Br, Cl -— 10

CH2X

. ~ "ό* ”

^' 3 CH~X

R X (C6B5>3P

I») -► E1-CH=CH—S%_ 2 toluen Γ

BuLi/THF toluen ' 3

20 R

(xvii) (eks· 9V

25 ø ©

CH2P(C6H5)3 X CH2P(C6H5)3 X

R1-CH=CH^J^ r1"CH2”CH2>>JL

3° T>H2 M/C/CH3OH YJl·*2 5 atm ^^-3

R R

(tt) (eks. 11) (XVIII) (eks. 10) VI1 -- 35 (Z=-CH2-CH2-) 10 DK 169127 B1

Det ved den har omhandlede fremgangsmåde som udgangsmateriale materiale anvendte, chirale aldehyd med formlen (III) fås ved en fra litteraturen kendt fremgangsmåde (Yuh Lin, J.R. Falck, Tetrahedron Letters 23, 4305-4308 (1982)) 5 ud fra den tilsvarende alkohol ved oxidation med f.eks. Cr03.

Omsætningen af det chirale aldehyd med formlen (III) med et phosphoniumsalt med formlen (II) ifølge Wittig (f.eks. Wittig, Haag, Chem. Ber. 88, 1654 (1955)) giver forbindelserne med formlen (IV), hvor en foretrukken udførelsesform 10 består i, at man opløser eller suspenderer phosphoniumsaltene med formlen (II) i et opløsningsmiddel, såsom tetrahydrofuran, dimethylsulfoxid eller DME, og med en egnet stærk base, såsom natriumhydrid, kalium-tert.butylat, Li-ethylat eller buityllithium, frigør de tilsvarende phosphoraner og derefter 15 tilsætter aldehydet med formlen (III) og lader det reagere ved fra -10°C til +50°C i 1-6 timer.

Forbindelserne med formlen (IV) fremkommer derved overvejende i form af blandingen af E/Z-olefiner. Blandinger af E/Z-olefiner kan eventuelt adskilles chromatografisk. De 20 rene Z-olefiner kan også, som beskrevet af G. Drefahl, Chem. Ber. 94, 907 (1961), fremkomme ved belysning af E/Z-blan-dingen i opløsninger, såsom toluen og nitrobenzen.

De tilsvarende rene E-olefiner kan, som beskrevet af De Tar med flere i J. Amer. Chem. Soc. 78, 474 (1955), frem-25 komme ved opvarmning af E/Z-blandingerne i opløsning i nærværelse af iod.

I forbindelserne med formlen (IV) kan methylacetal-beskyttelsesgruppen fraspaltes selektivt på almindelig kendt måde ved sur hydrolyse, fortrinsvis med en blanding af is-30 eddike, tetrahydrofuran, vand i forholdet 3:2:2 ved 20-90°c i løbet af 6-24 timer.

Oxidationen af forbindelserne med formlen (V) til en lacton med formlen (VI) kan ske ved hjælp af sådanne oxidationsmidler som Cr03x2Pyr eller pyridiumchlorchromat i in-35 differente opløsningsmidler, såsom methylenchlorid eller chloroform. En yderligere mulighed for oxidation består i 11 DK 169127 B1 reaktion med thioanisol/cl2/NEt3 i carbontetrachlorid eller i omsætningen med DMS0/oxalylchlorid/NEt3 ved -20°C.

Til fremstilling af forbindelserne med formlen (I) fraspaltes beskyttelsesgruppen R5 i forbindelserne med form-5 len (VI). Dette kan ske såvel med stærke syrer som med 5 normal saltsyre eller svovlsyre ved fra -10°c til +30°c eller med fluoridioner, fortrinsvis ved opløsning af forbindelserne med formlen (VI) i tetrahydrofuran eller di-ethylether og tilsætning af en blanding af tetrabutylam-10 moniumfluorid og iseddike med efterfølgende omrøring ved 0 til 40°C i løbet af mellem 1 og 12 timer.

Forbindelserne med formlen (I) , hvor A-B udgør en (CH=CH)-gruppe, hydrogeneres ved en alment gængs metode, hensigtsmæssigt ved en temperatur på mellem 20 og 40°C, med 15 hydrogen i nærværelse af en metal-katalysator, fortrinsvis palladium, platin, Pt02 eller Pd02, til forbindelser med formlen (I), hvor A-B betyder en -CH2-CH2-gruppe. Derved kan man hydrogenere ved normalt tryk i gængse opløsningsmidler, såsom tetrahydrofuran, ethylacetat, methanol, lavmole-20 kylære alkoholer, iseddike eller chloroform, eller i autoklav ved forhøjet tryk på 2-50 atm. Hydrogeneringen af -CH=CH-gruppen kan også ske ved forbindelserne med formlen (IV), (V) eller (VI).

De resulterende forbindelser med formlen (I) kan 25 isoleres på enkel måde ved inddampning af opløsningsmidlet, eventuelt efter chromatografisk rensning.

Forbindelserne med formlen (I) fås i optisk ren form.

Med hensyn til konfigurationen af dobbeltbindingen (A-B) = -CH=CH- fås E/Z-blandinger, som kan adskilles chromatografisk 30 på alle syntesetrin, eller isomeriseres til E-form (se De Tar med flere, J. Amer. Chem. Soc. 78, 475 (1955)).

Forbindelser med formlen (I) , i form af 5-lactonen, kan forsæbes i alkalisk medium til de tilsvarende salte af dihydroxysyrer, f.eks. med NaOH eller KOH i en lavmolekylær 35 alkohol, såsom methanol, eller i ethere, såsom dimethoxyethan eller THF, eventuelt i nærværelse af vand. I de fremkomne 12 DK 169127 B1 salte af dihydroxysyrerne kan alkalimetalkationen efter syrning i ionbyttere på gængs måde erstattes af vilkårlige kationer. Dertil lader man f.eks. dihydroxysyrerne løbe gennem en med en kationbytter, såsom på basis af polystyren-5 /divinylbenzen ("Amberlite®CG-150,, eller "Dowex®-CCR-2") fyldt søjle. Kationbytteren er ladet med den ønskede kation, f.eks. med ammoniumioner, som er afledt af en primær, sekundær eller tertiær amin. Det ønskede salt fås ved inddampning af eluatet.

10 Ammoniumsalte af dihydroxysyrerne, som er afledt af en primær, sekundær eller tertiær amin, kan også fremstilles ved, at man til de fire dihydroxysyrer i en alkoholisk opløsning sætter en ækvimolær mængde af den tilsvarende amin og inddamper opløsningsmidlet.

15 De frie dihydroxysyrer (la) af 6-laetonerne (I) kan forestres ved gængse metoder, f.eks. med en diazoalkan. Således kan man f.eks. forestre forbindelser med formlen (I), hvor R1 betyder H, ved temperaturer på mellem -40°C og +20°C med en diazoalkan, hvor de gængse opløsningsmidler, 20 såsom diethylether, tetrahydrofuran, chloroform eller lavmolekylære alkoholer, såsom methanol, kan anvendes. De resulterende estere kan isoleres på enkel måde ved inddampning af opløsningsmidlet og eventuelt renses chromatografisk. En yderligere forestringsmetode består i, at man omsætter salte 25 af dihydroxysyrer (la) med et alkyleringsmiddel i nærværelse af en base, såsom et metalalkoholat eller metalcarbonat, i et egnet opløsningsmiddel. Som metalalkoholater kan f.eks. nævnes natriummethylat, natriumethylat eller kaliumtert.bu-tylat. Som egnet opløsningsmiddel kan nævnes alkoholer, 30 såsom methanol eller tert.butanol, ethere, såsom tetrahydrofuran eller 1,2-dimethoxyethan, og især dipolære, aprotiske opløsningsmidler, såsom dimethylformamid, dimethylsulfoxid, acetonitril eller N-methylpyrrolidon. Til fremstilling af estere af dihydroxysyrer er metoden til omestring med over-35 skud af alkoholer, såsom methanol, ethanol eller isopropanol, også egnet.

13 DK 169127 B1 Såfremt de enkelte reaktionsprodukter ikke straks fås i tilstrækkelig ren form, således at de kan anvendes til det følgende reaktionstrin, anbefales en rensning ved hjælp af krystallisation eller søjle-, tyndtlags- eller høj-5 tryksvæskechromatogra fi.

Såfremt aldehydet med formlen (III) ikke foreligger som ren enantiomer, kan der også fremkomme blandinger af de enantiomere slutprodukter, som kan adskilles ved alment gængse fremgangsmåder.

10 Foruden de i eksemplerne beskrevne forbindelser kan man ved den her omhandlede fremgangsmåde fremstille følgende forbindelser: ( + ) -E-6S- [2-(2-(2- (Cyclohexyl) -ethyl) -6-chlorphenyl) -ethe-15 nyl]-4R-hydroxy-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-on (+)-E-6S-[2-(2-(2-(Cyclohexyl)-methyl)-6-chlorphenyl)-ethe-nyl]-4R-hydroxy-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-on (+) -E-6S- [ 2- (2- (2- (Cyclohexyl) -methyl) -6-chlorphenyl) -ethyl]-4R-hydroxy-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-on 20 (+)-E-6S-[2-(2-(2-(Cyclohexyl)-methyl)-4,6-dimethylphenyl)- ethenyl]-4R-hydroxy-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-on (+)-E-6S-[2-(2-(2-(Cyclohexyl)-methyl)-4-methyl-6-chlorphe-nyl) -ethenyl ] -4R-hydroxy-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran- 2-on 25 (+)-E-6S-[2-(2-(2-(Cyclohexyl)-methyl)-4-chlor-6-methylphe- nyl) -ethenyl ] -4R-hydroxy-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran- 2-on ( + )-E-6S-[2 -(2-(2-(4,4-Dimethylcyclohexyl)-methyl) -4,6-dimethylphenyl ) -ethenyl ] -4R-hydroxy-3,4,5,6-tetrahydro-30 2H-pyran-2-on (+) -E-6S-[2- (2- (2-(4,4-Dimethylcyclohexyl) -methyl)-4-methyl- 6-chlorphenyl) -ethenyl ] -4R-hydroxy-3,4,5,6-tetrahydro-2 H-pyran-2-on (+)-E-6S-[2-(2-(2-(4,4-Dimethylcyclohexyl)-methyl)-4-chlor-35 6-methylphenyl)-ethenyl]-4R-hydroxy-3,4,5,6-tetrahy- dro-2H-pyran-2-on 14 DK 169127 B1

Biologiske forsøgssystemer: 1. HMG-CoA-reduktase-aktivitet i enzvmoræparater HMG-CoA-reduktase-aktiviteten måles på solubilisrede enzympræparater af levermikrosomer fra rotter, som efter 5 omstilling i dag-nat-rytme induceres med cholestyramin ("Cue-mid"). Som substrat tjener (S,R) 14c-hmg-CoA, og koncentrationen af NADPH opretholdes under inkubationen ved hjælp af et regenererende system. Fraskillelsen af 14C-mevalonat fra substrat og andre produkter (f.eks. 14C-HMG) sker ved søjle-10 eluering, hvor elueringsprofilen af hver enkelt prøve bestemmes. Der afstås fra den stadige medførsel af 3H-mevalo-nat, eftersom det ved bestemmelsen handler om relativangivelsen af hæmningsvirkningen. I en forsøgsrække behandles hver gang den enzymfrie kontrol, den enzymholdige normalan-15 sats (= 100%) og sådanne med præparattilsætninger, slutkon-centration 10-5 til ΙΟ-9 M, sammen. Hver enkelt værdi dannes som middelværdi af 3 parallelprøver. Signifikansen af middelværdiforskellene mellem præparatfrie og præparatholdige prøver bedømmes efter t-testen.

20 Ved den ovenfor beskrevne metode fremkommer af de her omhandlede forbindelser f.eks. følgende hæmningsværdier på HMG-CoA-reduktase:

Eksempel 25 (tabel VIII) R1 R2 R3 Z IC50-værdi [M] 16 b \£=?\ H H ch2 9,0 x 10-8 30 16 f °-Cl P"cl ch2 1,9 x ΙΟ"8 3 5 16 c -/ 0-CH3 H CH2CH2 6,5 x 10“7 40 16 h \P?\ O—Cl H CH2 7,1 x 10-8 5 15 DK 169127 B1 2. Supprimerinq eller inhiberinq af HMG-CoA-reduktasen i cellekulturer af fibroblaster._

Monolag af fibroblaster (L-celler) i lipoproteinfrit næringsmedium inkuberes med tilsvarende koncentrationer af forsøgssubstanser i et bestemt tidsrum (f.eks. 3 timer), og derefter bestemmes HMG-CoA-reduktaseaktiviteten af cellerne, 10 modificeret ifølge Chang med flere (J. Biol. Chem. 256, 6174 (1981)). Dertil inkuberes celleekstrakterne med D,L-[3H]-HMG-CoA, og det under indflydelse af den forhåndenværende HMG-CoA-reduktase-aktivitet af cellerne dannede produkt, [3H]-mevalonat, skilles efter cyclisering til [3H]-15 mevalonolacton tyndtlagschromatografisk fra udgangsproduktet, og under anvendelse af en intern standard af [-^C] -mevalonat bestemmes mængden af det pr. tidsenhed dannede [3H]-mevalonat, beregnet på celleproteinmængden. Den under tilsætning af en bestemt koncentration af et prøvepræparat 20 fundne HMG-CoA-reduktaseaktivitet af cellekulturen beregnes som en procent af aktiviteten af en på samme måde behandlet kultur uden prøvepræparat, men med samme opløsningsmiddelkoncentration .

16 DK 169127 B1 o

Afprøvning af stoffer for HÆMNING AF HMG-C oA-REDUKTASE I CELLEKULTURER

5 konfluent cellekultur (monolag) af HEP-G2-celler 1. ) Lipoproteinfrit 10 medium (DMEM) 24 timer ,Λ 2. ) Inkubation med prøvepræparater 2 timer 15 3.) Cytolyse — * f 4. ) Aktivering af den forhåndenværende HMG-CoA- io min.

reduktase af cellelys a te t -.. . - . o 20 ®

5. ) Inkubation af celle- ]_ time H

lysatet med D,L- (3H)-HMG-CoA g rt

-- O

-- μ.

6. ) Reaktionsstop og cycli- ]_ time Λ H 8* 25 sering af r aktions- i- d ro produktet ( H)-mevalono- o* ro ct lacton γ ΰ 2 é B 1 ____ ro ω ro

< rt H

7. ) TLC-fraskillelse af reak- ro j“ g tionsproduktet (3H)-meva- ^ time 0 ^ lonolacton ^ $ 30 rt ii 3 ” 8. ) Isolering af ( H)-mevalono- lactonen 9. ) Scintillationsmåling og be- 35 regning af konversionsgra- \/ \ / den af D ,L-(3H)-HMG-CoA til ^ (3h)-mevalonolacton

10. ) RESULTAT: V

I nmol (3H)-mevalonat/mg celleprotein i forhold til opløsningsmiddelkontrollen 17 DK 169127 B1

Ved den ovenfor beskrevne metode bestemmes af de her omhandlede forbindelser f.eks. følgende hæmningsværdier for HMG-CoA-reduktase (i HEP-G2-celler) (IC50-værdien (M) er den koncentration af forbindelsen, som bevirker en 50%'s 5 hæmning af HMG-CoA-reduktase-aktiviteten):

Eksempel (tabel VIII) R1 R2 R3 Z IC50-værdi [M] 10------ 16 b Η H CH2 3,8 X 10”4 15 16 f LC/H Ο-Cl p-Cl CH2 1,9 x 10“6 20 16 c o-ch3 h ch2ch2 2,0 X 10-4 16 h o-Cl H ch2 3,2 x 10"6 25 ^

Mevinolin 6,0 x 10-6 30

Forbindelserne med den almene formel (I) eller (la) udmærker sig ved stærk hæmning af HMG-CoA-reduktase, det hastighedsbestemmende enzym for cholesterolbiosyntesen. Enzymet HMG-CoA-reduktase er vidt udbredt i naturen. Det 35 katalyserer dannelsen af mevalonsyre ud fra HMG-CoA. Denne reaktion er et centralt skridt i cholesterolbiosyntesen (se J.R. Sabine i. CRC Series in Enzyme Biology: 3-Hydroxy-3-methylgluraryl Coenzym A Reduktase, CRC Presse Inc., Boca Raten, Florida 1983 (ISBN 0-8493-6551-1)).

40 Høje cholesterolniveauer sættes i forbindelse med en række sygdomme, såsom coronar hjertesygdom eller arterio-sclerose. Derfor er sænkningen af forhøjet cholesterolniveau til forebyggelse og behandling af sådanne sygdomme et terapeutisk mål.

45 18 DK 169127 B1

Udgangspunktet ligger i hæmningen eller formindskelsen af den endogene cholesterolbiosyntese. Hæmmende stoffer for HMG-CoA-reduktase blokerer cholesterolbiosyntesen på et tidligt trin. Forbindelserne med den almene formel (I) eller 5 (la) egner sig således som hypolipidemika og til behandling eller prophylakse af arteriosclerotiske ændringer.

Opfindelsen angår i overensstemmelse hermed også et pharmaceutisk præparat, som er ejendommeligt ved, at det indeholder en forbindelse med formel (I) eller (la).

10 Anvendelse af forbindelserne med formlen (I) eller (la) som hypolipidemika eller anti-arteriosclerotika sker i orale doser på 3 til 2.500 mg, fortrinsvis dog i dosisområdet på 10-500 mg. Disse dagsdoser kan efter behov også opdeles i to til fire enkeltdoser eller forarbejdes til retardform.

15 Doseringsskemaet kan afhænge af patientens art, alder, vægt, køn og medicinske tilstand.

En yderligere cholesterolsænkende virkning opnås ved indgift af de her omhandlede forbindelser samtidig med gallesy reb indende stoffer, såsom anionbytterharpikser. Den 20 forhøjede gallesyreudskillelse fører til en forstærket nysyntese og dermed til en forhøjet cholesterolnedbrydning (se M.S. Brown, P.T. Koranen og J.C. Goldstein, Science 212, 628 (1981), M.S. Brown, J.C. Goldstein, Spektrum der Wissenschaft 1985, 1, 96).

25 De her omhandlede forbindelser med formlen (I) eller (la) kan anvendes i form af δ-lactonerne, som frie syrer eller i form af deres fysiologisk uskadelige, uorganiske eller organiske salte eller som estere. Syrer og salte eller estere kan anvendes i form af deres vandige opløsninger 30 eller suspensioner eller opløst eller suspenderet i farmakologisk uskadelige organiske opløsningsmidler, såsom mono- eller polyvalente alkoholer, såsom ethanol, ethylen-glycol eller glycerol, i triacetin, i alkohol-acetaldehyd-diacetalblandinger, olier, såsom solsikkeolie og levertran, 35 19 DK 169127 B1 ethere, såsom diethylenglycoldimethylether, eller polyethere, såsom polyethylenglycol, eller i nærværelse af andre phar-makologisk uskadelige polymerbærere, såsom polyvinylpyr-rolidon, eller i faste præparater.

5 Til forbindelserne med formlen (I) eller (la) fore trækkes faste, oralt indgivelige præparatformer, som kan indeholde de gængse hjælpestoffer. De fremstilles ved gængse metoder.

Som præparater til oral anvendelse egner sig især 10 tabletter, dragéer og kapsler. En doseringsenhed indeholder fortrinsvis 10 til 500 mg virksomt stof.

Forbindelserne med formlerne (II), (III), (IV), (V) og (Vi) er hidtil ukendte og udgør værdifulde mellemprodukter til fremstillingen af forbindelser med formlen (I).

15 Fremstilling af udgangsforbindelserne (II) (Skema 1. Z = -CHo-)_

Eksempel 1

Almen forskrift til fremstilling af forbindelserne 20 med den almene formel (IX) (se L.A. Walter med flere, J. Heterocycl. Chem. 14, 47 (1977)).

Eksempel la (R2, R3 = H, R1 = cyclohexyl) 25 Cvclohexvl-2-(methoxymethyl)-phenvl-methanol (IX)

Til 6,34 g (0,26 mol) magnesiumspåner, som er ætset med etherisk saltsyre og derefter godt tørret, sættes en iodkrystal, og der overhældes med 60 ml absolut THF.

50 g (0,25 mol) 2-methoxymethy 1-brombenzen (2-brom-30 benzylmethylether (VII)) i 500 ml absolut THF dryppes langsomt dertil. Efter endt Grignard-reaktion tildryppes ved 50°C langsomt 28,1 g (0,25 mol) cyclohexylaldehyd (VIII) i 200 ml absolut THF. Derefter omrøres der i 2 timer ved tilbagesvaling. Derefter afdestilleres tetrahydrofuranet i vakuum.

35 De organiske faser forenes, tørres med MgSC>4 og filtreres og inddampes i vakuum.

20 DK 169127 B1

Udbytte: 49 g (84% af det teoretiske) (IX).

Rf = 0,25, elueringsmiddel: cyclohexan/-ethylacetat 9:1.

5 Eksempel 2

Forskrift til fremstilling af forbindelserne med den almene formel (X) - vej A.

Eksempel 2a 10 (R2, R3 = H, R1 = cyclohexyl)

Cvclohexvl-2-(methoxvmethvl)-phenvl-keton (Xa) 47 g (0,2 mol) cyclohexyl-2-(methoxymethyl)-phenyl-methanol (eksempel la) opløses i 380 ml dioxan, 572 ml H2O og med tilsætning af 5,72 g KOH og opvarmes til 40°C. Til 15 denne blanding tilsættes under omrøring 24,94 g (0,157 mol) kaliumpermanganat i mindre portioner, hver gang indtil der sker affarvning. Efter endt tilsætning omrøres der i yderligere 45 minutter ved 90°C. Der afkøles og ekstraheres med 4 x 200 ml ether. De organiske faser forenes, vaskes med 20 H20 og tørres med MgSC^, inddampes i vakuum, og derefter filtreres der over kiselgel med cyclohexan/ethylacetat = 1:1. Udbytte: 40 g (68% af det teoretiske) (Xa).

Rf = 0,42, elueringsmiddel: cyclohexan/-ethylacetat 1:1).

25

Eksempel 3

Forskrift til fremstilling af forbindelserne med den almene formel (XII) - vej A

30 Eksempel 3a (R2, R3 = H, R1 = cyclohexyl) 2-Methoxymethvl-(cvclohexvlmethvl)-benzen CXIIa)

34,5 g (0,146 mol) cyclohexyl-2-(methoxymethyl)-phe-nyl-keton (eksempel 2a) opløses sammen med 41,1 g KOH i 232 35 ml triethylenglycol. Derefter tilsættes 24,68 ml 91%'s hydrazin, og der opvarmes under omrøring i 1 time til 100° C

21 DK 169127 B1 og i 5 timer til 180"C. Derefter afkøles der, der tilsættes 400 ml isvand, og der ekstraheres 4 gange med 250 ml ether.

De forenede etherfaser vaskes med mættet NaCl-opløsning, og der tørres og inddampes i vakuum. Der filtreres over Si02 5 med cyclohexan/ethylacetat 9:1.

Udbytte: 22,9 g (72% af det teoretiske) (Xlla).

Rf = 0,48.

Elueringsmiddel: chloroform.

10 Eksempel 4

Forskrift til fremstilling af forbindelserne med den almene formel (XI) - vej B.

Eksempel 4a 15 (R·*· = cyclohexyl, R2, R3 = H) (2-Methoxvmethvl)-phenvlcyclohexvl-acetvloxv-methan (Xla) 16,8 g (0,072 mol) (2-methoxymethyl)-phenyl-cyclohe-xyl-methanol (eksempel la) opløses under nitrogen ved 0-5'C i 230 ml absolut CH2Cl2 og blandes med 34,9 g (=,43 mol) 20 absolut pyridin. Under isafkøling tildryppes derefter i løbet af 3/4 time 10,17 ml (0,144 mol) acetylchlorid under afkøling. Der omrøres i en halv time.

Derefter sættes reaktionsblandingen på is og ekstraheres med CH2C12. Den organiske fase inddampes. Remanensen 25 blandes tre gange med toluen, og restrne af pyridin af destilleres azeotropt. Derefter tørres der i højvakuum.

Udbytte: 19,1 g (96% af det teoretiske) (Xla).

Rf = 0,19.

Elueringsmiddel: chloroform.

30

Eksempel 5

Forskrift til fremstilling af forbindelserne med den almene formel (XII) - vej B

22 DK 169127 B1

Eksempel 5a (R1 = cyclohexyl, R2, R3 = H) 2-Methoxvmethyl-(cyclohexyl^-benzvl-benzen fXIIa) 6 g palladium-bariumsulfat forhydrogeneres i 200 ml 5 absolut methanol. Derefter tilsættes 19,9 g (0,072 mol) (2-methoxymethyl)-phenyl-cyclohexyl-acetyloxy-methan (eksempel 4a) + 5,92 g (0,072 mol) natriumacetat, og der hydrogeneres. Efter 2 timer er H2-optagelsen afsluttet. Det aktive kul fraskilles ved sugning over et klarlagsfilter med kiselgel 10 under N2.

Filtratet inddampes i vakuum, og remanensen filtreres over kiselgel med cyclohexyn/ethylacetat 9:1.

Udbytte: 8,8 g (56% af det teoretiske) (Xlla).

Rf = 0,48.

15 Elueringsmiddel: chloroform.

Eksempel 6

Forskrift til fremstilling af forbindelserne med den almene formel (XIII).

20

Eksempel 6a (R1 = cyclohexyl, R2, R3 = H) 2-Cvclohexvlmethvl-benzvlbromid fXIIIa) 12,9 g (0,059 mol) 2-methoxymethyl-(cyclohexylmethyl)-25 benzen (eksempel 3a) opløses i 130 ml 48%'s vandig hydrogen-bromidsyre, og der omrøres i 3 timer under tilbagesvaling. Efter afkøling tilsættes 200 ml toluen, og blandingen gen-nemrøres kraftigt. Toluenfasen fraskilles, og den vandige fase ekstraheres 2 gange med toluen. De forenede organiske 30 faser vaskes 1 gang med isvand, 1 gang med mættet NaHC03-opløsning og 1 gang med mættet NaCl-opløsing, og derefter tørres der med MgS04 og inddampes i vakuum. Remanensen filtreres over kiselgel med cyclohexyn/ethylacetat 9:1.

Udbytte: 14,6 g (93% af det teoretiske) (Xllla).

35 Rf = 0,8.

Elueringsmiddel: cyclohexan/ethylacetat 4:1.

Eksempel 7

Forskrift til fremstilling af forbindelserne med den almene formel (II) (Z = CH2) 23 DK 169127 B1 5 Eksempel 7a (R^ = cyclohexyl, Z = CH2, R2, R3 = H) 2-Cvclohexvlmethvl-benzvl-triphenvlphosphonium-bromid 14,9 g (0,056 mol) 2-cyclohexylmethyl-benzylbromid (eksempel 6a) opløses i 150 ml absolut toluen, blandes med 10 16,18 g (0,062 mol) triphenylphosphin og opvarmes i 3 timer til tilbagesvaling. Efter afkøling fraskilles den dannede krystalgrød ved sugning over et sugefilter. Filterremanensen vaskes efter tre gange med toluen og to gange med diisopro-pylether, og derefter tørres krystallerne i et vakuumtørre-15 skab ved 100°c.

Udbytte: 28,1 g (95% af det teoretiske) (Ila).

c32H34PBr' m: 529,48.

Smp.: 196-198“C.

Eksempel 7b 20 Forbindelsen (lib) (Z = CH2) fremstilles på en med den i eksempel 7a beskrevne analog måde (se tabel I).

Tabel I

R3 = H +

25 CH2-P(C6H5)3 X

R -CH2 Λ R2 (II) (Z=CH2)

V

30 R1 R2 X Eks. 7 Smp. °C Udbytte % £—o-Cl Cl b 205 70 24 DK 169127 B1

Fremstilling af udgangsforbindelserne (II) (skema 2, Z,..= -CH2=m2=}_

Eksempel 8 5 Arbejdsforskrift til fremstilling af phosphoniumsalte med den almene formel (XV)

Eksempel 8a (R1 = cyclohexyl, X = Br) (XVa)

Cvclohexvlmethvl-triphenvl-phosphoniumbromid 10 92f0 g (0,52 mol) cyclohexylmethylbromid (XIV, R1 = cyclohexyl, X = Br) og 136,7 g (0,52 mol) triphenylphosphin koges i 400 ml acetonitril i 6 timer under tilbagesvaling. Eftr afkøling inddampes der til det halve volumen i vakuum, der afkøles i isbad, og de udfældede krystaller fraskilles 15 ved sugning og vaskes efter med koldt acetonitril og di-ethylether. Krystallerne tørres omhyggeligt i vakuum ved 100°C.

Udbytte: 84,1 g hvide krystaller (45% af det teoretiske) (XVa).

20 Smp.: 216-217°C.

Eksempel 9

Arbejdsforskrift til fremstilling af de substituerede benzylhalogenider med den almene formel (XVII) (tabel II) 25

Eksempel 9a (R1 = cyclohexyl, X = Cl) (XVIIa) 2-(2-fCvclohexvll-ethenyl)-benzvlchlorid 57,5 g (0,16 mol) cyclohexylmethyl-triphenylphospho-30 niumbromid (eksempel 8a) opslæmmes i 300 ml absolut tetra-hydrofuran under N2 ved 0°C. Ved denne temperatur tildryppes 101 ml (0,16 mol) BuLi i hexan. Derved dannes et mørkerødt phosphorylid. Der omrøres i endnu ca. 15 minutter, og der tildryppes derefter 27,21 g (0,16 + 0,016 mol) 2-chlormethyl-35 benzaldehyd (XVI) (fremstillet ifølge G. Dreyfahl og G. Plotner, Chem. Ber. 94, 907 (1961)) opløst i 20 ml absolut 25 DK 169127 B1 THF i løbet af 30 minutter. Der omrøres endnu ca. 1 time, tetrahydrofuranet fjernes i vakuum, remanensen ekstraheres flere gange med en blanding af 500 ml pentan og 300 ml H20.

De forenede pentanekstrakter tørres med MgS04 og inddampes.

5 Remanensen blandes under tilsætning af aktivt kul med 300 ml ether, og der ekstraheres igen. Etherekstrakten fraskilles og opbevares natten over i køleskab. Etheren fradekanteres fra det uopløste, filtreres og inddampes i vakuum. Der bliver en lysegul olie tilbage.

10 Udbytte: 21,3 g (57% af det teoretiske) (XVIIa).

Rf-værdi: 0,51 (E/Z-blanding) i cyclohexan: ethylacetat = 4:1

Eksempel 9b 15 Ifølge den i eksempel 9a angivne forskrift fremstilles det i tabel II anførte, substituerede benzylhalogenid med den almene formel (XVIIb).

Tabel II

20

R3 = H CH2-X

R1-C„E!ch-A_r2 <XVII) 25

Smp. °c

Rf-værdi R1 R2 X Eks. 9 CH/EA=s4:1 Udbytte %

30 /—T

£,-' o-Cl Cl b 0,91 42

Eksempel 10

Arbejdsforskrift til fremstilling af phosphoniumsal- tene med den almene formel (XVIII) (tabel III) 26 DK 169127 B1 5

Eksempel 10a (R1 = cyclohexyl, X = Cl) (XVIIIa) 2-(2-( Cvclohexvl^ -ethenyll -benzvl-triphenvl-phosphoniumbromid 35,1 g (0,15 mol) 2-(2-(cyclohexyl)-ethenyl)-ben-10 zylchlorid (eksempel 9a) opløses sammen med 39,3 g (0,15 mol) triphenylphosphin i 220 ml xylen og opvarmes under tilbagesvaling i ca. 3-6 timer. Efter ca. en halv time begynder det dannede, uopløselige phosphoniumsalt at udfælde. Reaktionsforløbet følges ved tyndtlagschromatografi i 15 CH3OH/CH2Cl2 = 1/1 på kiselgelplader. Efter endt reaktion afkøles der, det faste salt fraskilles ved sugning, og der vaskes med diethylether og tørres i vakuum ved 150"C.

Udbytte: 48,5 g hvide krystaller (65% af det teoretiske) (XVIIIa).

20 Smp.: 282“C.

Eksempel 10b

Ifølge den i eksempel 10a angivne forskrift fremstilles det i tabel III anførte phosphoniumsalt med formlen (XVIIIb).

25 Tabel III

R3 = H ♦ - E/Z CH2-p*W3 X (XVIII) R3 30 R1 R2 X Eks. 10 Smp. eC Udbytte % 35 o-Cl Cl b 215 66

Eksempel 11

Arbejdsforskrift til fremstilling af phosphoniumsal- tene med den almene formel (II) (Z=CH2-CH2-) 27 DK 169127 B1 5 Eksempel 11a (Ri = 4-cyclohexyl, X = Cl, Z = CH2-CH2) 2-(2-(Cyclohexyl)-ethyl)-benzyl-triphenylphosphoniumchlo- rid (Ilal_ 24,08 g (0,05 mol) 2-(2-(cyclohexyl)-ethenyl)-ben-10 zyltriphenylphosphoniumbromid (eksempel 10a) opløses i 300 ml absolut methanol, under nitrogen tilsættes 5 g 10%'s palladiumbenkul, og der hydrogeneres i en rystebeholder i ca. tre timer indtil den teoretiske H2-optagelse (0,05 mol H2). Der filtreres over et klarlagsfilter med kiselgel, og 15 der vaskes efter med methanol. Filtratet inddampes i vakuum.

Den resterende olie opløses i 50 ml isopropanol, og phos-phoniumsaltet udfældes ved tilsætning af diethylether og fraskilles ved sugning, og der tørres derefter i vakuum ved 150 °C.

20 Udbytte: 20,9 g hvide krystaller (84% af det teoretiske) (Ila) (Z=CH2-CH2).

Smp.: 241“C.

Eksempel 11b 25 Ifølge den i eksempel 11a angivne forskrift fremstil les det i tabel IV anførte phosphoniumsalt med formlen (Ilb) (Z = -ch2-ch2-).

Tabel IV

r3 “ h 30 CH2"P(C6H5^3 X <i]c^Zs"ch2"CH2"* R1-CHj-Ch2-^.r2 r1 r2 x Eks. 11 Smp. °C Udbytte % ^^ o-Cl Cl b 225 80 28 DK 169127 B1

Fremstilling af det chirale aldehyd fill)

Eksempel 12 5 6S-Formyl-4R- (tert.-butyldiphenyl) -silyloxy-2-methoxy-3,4- 5,6-tetrahydro-2,4-pyran, (III)

. I

(r5=c6h5-si-c6h5) 10 C(CH5)3 10 g (24,96 mmol) optisk aktivt "Compactinal-kohol" ((+) -6S-hydroxy-methyl-4R- (tert.-butyldiphenyl) -silyl-oxy-2-methoxy-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran (fremstillet ifølge 15 Yuh-Ling Yang og J.R. Falck, Tetrahedron Letters, bd. 23, 4305 (1982)) dryppes under omrøring ved stuetemperatur til en ved 0DC tilberedt blanding af 25 g (0,125 mol) chromtri-oxid i 965 ml absolut CH2CH2 og 39,5 g (0,5 mol) absolut pyridin i løbet af 30 minutter, og der omrøres i endnu 30 20 minutter. Derefter frasuges kolbeindholdet hurtigt over et klaringslag af kiselgel. Det klare filtrat inddampes i vakuum.

Udbytte: 9,46 g (95% af det teoretiske) (III).

Rf-værdi: 0,10.

25 Elueringsmiddel: cyclohexan:ethylacetat = 4:1.

C23H3oSi04 (398,6).

^H-60MHz-NMR: -CH=0 δ = 9,65 ppm, i CDCI3 -OCH3 S =3,5 ppm.

30 Fremstilling af slutprodukterne fil eller fla)

Eksempel 13 E/Z-epimere 6S-[2-(2-(2-(Cyclohexyl)-ethyl)-phenyl)-etheny1]-4R-(tert.-butyldiphenyl) -silyloxy-2-methoxy-3,4,5,6-tetrahydro-2H-35 pyran, (IVa) (tabel V) 29 DK 169127 B1 (R^cyclohexyl, R2, R3 = H, R5 - C6H5-Si-C6H5, Z=(CH2)2) C(CH3)3 5 _ 7,7 g (15,5 mol) 2-(2-(cyclohexyl)-ethyl)-benzyl-triphenylphosphoniumchlorid (eksempel 11a) tørres ved 100°C i højvakuum og opslæmmes under fugtighedsudeluk-10 kelse i 67 ml absolut THF. Ved 0°C tildryppes 9,7 ml (15,5 mmol) butyllithium i hexan. Der omrøres i ca. 30 minutter ved 0ec. Derefter tildryppes der ligeledes ved 0°C 6,12 g (15,35 mmol) 6S-formyl-4R-(tert.-butyldiphenyl)-silyloxy-2-methoxy-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran (eksempel 12) i 15 ml 15 absolut tetrahydrofuran. Efter 1 times omrøring ved stuetemperatur fjernes THF i vakuum, remanensen optages i ethyl-acetat, og der ekstraheres flere gange med vand og tørres over MgS04, og der filtreres og inddampes. Remanensen adskilles på en kiselgelsøjle (f.eks. Merck "Lobar®", størrelse 20 C) med cyclohexan-ethylacetat 40:1 chromatografisk i de rene E- eller Z-epimere.

Udbytte: 1. fraktion 31-184 = 5,9 g E-epimer 2. fraktion 185-212 = 2.1 g Z-epimere 8,0 g lys olie 25 (90% af det teoretiske) IVa E-epimer af IVa: Rf = 0,74 cyclohexan:ethylacetat = 4:1. Z-epimer af IVa: Rf = 0,69 cyclohexan:ethylcetat.

C3gH5Q03Si MV: 582,8.

Eksempel 13b 30 På analog måde, som beskrevet for forbindelsen (IVa) i eksempel 13, fremstilles forbindelsen (IVb) (tabel V, Z=CH2) ud fra aldehydet (III) (eks. 12) og phosphonium-saltene (II) (tabel I).

35 30 DK 169127 B1

Tabel V

R2, R3*H nQT (IV) 5 r’-vC'T e/z

Xc6H5 R

Rf-værdi 10 r! Z Eks. 13 E/Z Udbytte % /=r CH2 b 0,27/0,184 77 15 ----- 4) Toluen 20 Eksempel 14 E/Z-epimere 6S-[2-(2-(2-(Cyclohexyl)-ethyl)-phenyl)-ethenyl]-4R- (tert.-butyldiphenyl) -silyloxy-2-hydroxy-3,4,5,6-tetrahydro-2H-25 pyran (Va) (tabel VI).

(R1 = cyclohexyl, R2, R3=H, R5 = C6H5SiC6H5, Z = (CH2)2) 30 C(CH3)3 3,72 g (6,4 mmol) af forbindelsen (IVa) (eksempel 13a) opløses i 13 ml tetrahydrofuran, og derefter tilsættes 13 ml vand og 19 ml iseddike. Der omrøres i ca. 5 timer ved 70°C, tetrahydrofuranet fjernes i vakuum, remanen-35 sen blandes med 30 ml toluen, og der inddampes på ny i vakuum til azeotrop fjernelse af den resterende iseddike.

Udbytte: 3,2 g (89% af det teoretiske) (Va).

C37H48O3S1, MV: 568,8.

Rf = 0,36 E-epimer. Elueringsmiddel: cyclohexan/ 40 ethylacetat = 4:1.

Rf = 0,25 Z-epimer.

31 DK 169127 B1

Eksempie 14b På analog måde, som beskrevet i eksempel 14 for (Va), fremstilles forbindelsen (Vb) (tabel VI). Som udgangsforbindelse kan anvendes den tilsvarende forbindelse 5 (IVb) (tabel V) i form af de rene E- eller Z-epimere eller som E/Z-epimerblandinger.

Tabel VI

*Vy“ ·* r3

15 R

Rf-værdi R1 Z Eks. 14 E Udbytte % 20 CH2 b 0/26 75 25 Eksempel 15 E/Z-epimere 6S-[2 -(2-(2-(Cyclohexyl)-ethyl)-phenyl-ethenyl]-4R-(tert.-butyldiphenyl) -silyloxy-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-on rvia) (tabel VII)_ 30 (R1 = cyclohexyl, R2, R3 = H, R5 = C6H5SiC6H5, Z = (CH2)2) C(CH3)3 35 2,88 g (28,8 mmol) chromtrioxid blandes med 306 ml absolut methylenchlorid og omrøres ved 0°C, indtil der opnås en finpulveriseret opslæmning. Derefter tildryppes 4,55 g (57,6 mmol) absolut pyridin i 10 ml absolut methylen-40 chlorid. Den orangegule opløsning omrøres i 20 minutter.

32 DK 169127 B1

Derefter tilsættes dråbevis 1,64 g (2,88 mmol) af forbindelsen (Va) (eksempel 14) opløst i 10 ml absolut methylenchlo-rid. Der omrøres i endnu 30 minutter ved steuetemperatur. Reaktionsblandingen fraskilles ved sugning over et klarings-5 lag af kiselgel og MgS04 og inddampes i vakuum.

Udbytte: 1,14 g (70% af det teoretiske) (E/Z-epimere) (Via). C37H4603Si, MV: 566,8.

Rf = 0,34 E-epimer, Elueringsmiddel: cyclohexan/ ethylacetat 4:1.

10 Rf = 0,30 Z-epimer.

Til fremstilling af den rene E- (trans) -epimer af forbindelsen (Via) opløses 0,52 g af E/Z-epimerblandingen af (Via) i 10 ml toluen og blandes med 52 mg iod, og der opvarmes derefter i 48 timer under tilbagesvaling. Efter fjernelse 15 af toluenet i vakuum og filtrering af remanensen over kiselgel (elueringsmiddel:cyclohexan/ethylacetat = 4:1) fås E-epimeren (Via).

Udbytte: 0,42 g (Via)-E-epimer (81% af det teore tiske) .

20 Rf = 0,33 (cyclohexan/ethylacetat 4:1).

Eksempel 15b På analog måde, som beskrevet i eksempel 15 for forbindelsen (Via), fremstilles forbindelsen VIb (tabel VII) .

25 Som udgangsforbindelse kan anvendes den tilsvarende forbindelse (Vb) (tabel VI) i form af de rene E- eller Z-epimere eller som E/Z-epimerblandinger. De rene E-epimere fås som beskrevet ovenfor let ved isomerisering af E/Z-epimerblandinger i nærværelse af iod eller ved chromatografisk adskil-30 lelse.

33 DK 169127 B1

Tabel VII

r5oa o

VY

R2, R3=H j

5 Λ·5 X

R = -Si ,4- R1-Z “ifS- R2 XC6H5 *#1 (VI)

RJ

10

Rf-værdi *) R1 Z Eks. 15 E/Z Udbytte %

is p^r CH2 I b I 0,261 I 68 I

Cyclohexan/ethylacetat 4:1 20 Eksempel 16

Fremstilling af optisk rene forbindelser med den almene formel (I): f+)-E-6S-r2-(2-(2-(cvclohexvl)-ethvl)-phenyl- ethenvl 1 -4R-hvdroxv-3.4.5.6-tetrahvdro-2H-pyran-2-on (I) (tabel VIII) 25 (R1=cyclohexyl, R2, R3=H, A-B = CH=CH, Z=CH2-CH2) 0,47 g (0,83 mmol) af forbindelsen Via (E-epimer) (eksempel 15a) opløses i 50 ml tetrahydrofuran blandet med 0,1 ml (1,7 mmol) iseddike og 0,39 g (1,24 mmol) 30 tetrabutylammoniumfluorid,3H20. Der omrøres ved 20“C i ca.

5 timer. Derefter fjernes opløsningsmidlet i vakuum, og remanensen optages med diethylether. Den organiske fase ekstraheres 1 gang med vand og 1 gang med mættet NaHC03-opløsning, og derefter tørres der over MgS04, og der fil-35 treres og inddampes i vakuum. Chromatograferet over en kisel-gelsøjle (f.eks. Merck "Lobar®") og cyclohexan/ethylacetat = 1:1 fås:

Udbytte: 0,19 g (72% af det teoretiske) (la), C2iH2g03: MV: 328.

40 Rf-værdi « 0,18 (cyclohexan/ethylacetat 1:1) l-H 270 MHz NMR: <S-værdier i ppm: (se tabel VIII) .

34 DK 169127 B1

Eksempel 16a-16i På analog måde, som beskrevet i eksempel 16 for forbindelsen (la), fremstilles forbindelserne (Ib-Ii) (tabel VIII)

5 Såfremt forprodukterne af de i tabel VIII

anførte slutprodukter ikke er beskrevet, fås de analogt med den i de foregående eksempler beskrevne måde.

35 DK 169127 B1 o §

-P OC0 O

X com 0) ogn ^ ™ Λ X ® „ ifl HH O 11 _ Q) CM , Γ1 5 ω u g o 2 in ns

S

• fc V S

••»O N Ί* e wu~s - s a oowvogp

10 SO. S W Η H <D

,u s U U - II m C

I -H N b - O

cm WKW ^·Ρ

S P Η H vo T3 I O

£J <D - H P

•H g g II in -ft 0 Ό '—•'-'i-a cn > Γ' p If) ^ · cm « - -Ό vo il +> 1 > ^ mu and

— Si i i w ·» U S

15 " - - -S S P

<i in io U n id 0)

•P

p >ioV> CM -tf Λ r* σι Ό 20 c. & s

N P CO CO

• « W Η H

-« >

I O O

(l_l 25 « in vo m λ

(¾ H W

CM

30 K

0 CM

1 a

N CM O

S O

Si! ^ u

EH

36 DK 169127 B1 o o σ tvj o 10 ^ . CO J-5 CO P^ ' 1 o, o·® o in ° m 5 O ro r^· * ® S Dl ro«-·® CM ro 10 ω sc ro 3=10” tn CSJ · »“ CO · m cm & cm & 5 - » I_» I_ ° . »s « 5 U S E ^ " tT * o 7 m «·» - ° 6 — in ^ m en " = ft = N æ Λ * ίί m ^ * rr IT * £ ~ * - n » 3 « ^ φ S .. .. g .. = ® io i g e = « - - - § - * =rs s ~ b 0 ^ 3 ° « ^ « · ^ 5 E‘ ° ~ i J ~ r^H N * · c m ϊ * 0

CM I ~ ~CM ^ .. <J £ u CM CM- p = S

1 l CM ^ ,. ·· O ^ u ft CM ?T ® « ;E ·— - « “ « ~U ϊ Ξ « U “ E . „ N £ 1 “ πΓ^ 2C O j= · «Μ « _ — g " . C!

•-Ptos: *>.« «·— Ξ 3-3·'· O

m ^ » υ N N £ m ^ in · in -U

oo x *“» CM—» s £· § co x -inS-oOO

* v z x : io is i. » o» e « . ό ·> pi OJZrocjr— —-i— « O Sz — »C lo — r»~ q, 15 --—----

JJ

ij co » ►>, ** *s· co . >^nr~.- = I M*d ^ m 'd M “ _ —* i \ ω σ» a: r— f- . j· i? ro cm o m “ -«S *. * =” " ^ ^ O Π CJ « o ftj c ·—>

> Ή S

I c — M-l P4 25 _____ r—1

(D

ft — S _

+j o)iDo TJ

cd ui H

W X

-P H _ 30° x~

H ° S

H ----—-

H

^ «* ^ = =

rH

<D

Λ --—-- Π) m 35 Eh s

CM t_J

0=7 V

T °_o_ i Hi 5

O

37 DK 169127 B1

CM

\ H

S U

I C n cm

0 ί-ι * O O

ω +j ft <o U) ,Μ g CM 00 <a a) w tu σι S ft Η n tn cm

U

5__ ** ·* t"3 - B - N - i-)

KcMg-tfOiGO B Ό O)

g CDawBHO—VO'-'C

o ~ tf ft HU ~ U -—'II H O

* S ft ^ <ί N g W me 4J

/ °\ - o: S g -ΙΛ B t" U II O cm O

( W. ol*/ “ I -H WH -ua 00 - - P

\ / \v // λ n >icm h in -B b r- ft 1 o V— —v / *· a P cm X i - -^r in h - 1U tf \=/ S <U - <U to cm g - V.....

s j -π cm a -a - -w ii — -p M o ό ionu ion a a a I inn voaUBcoUH-g —· cm« co o — ^innO®in« ‘-0 “ i > ^aa - -an -aόa p a i ooO'f'finuiiOH^Hid H *0

<D

+j 15 +) >io\° in

A

Ό a \ \ m w •H tjl 20 Ό C vf

M -H -H

«CO O > -η P

1 d) « — > H Pi Ti *** •P ~

m M 10 W

$ * H

nc S-J H

25 q m--

H ~ NU

H 5 " i -- A “ Ή

30 ctj «c n U

H — Pi I

ft

CM H

a u o 35 ' « ft DK 169127 B1 * 38

O

r>

O

\ CM U

β rH

3 U n CM

I }-( · -tf II O

O) p ft cm m H

a oo · i ω α) ω o n a o c λ a μ ε o

5 g 03 CJ M H

•V > vo O n b cm i g . ^ u a » * o aa a - ii a - o ό tj - i r- p go, nx ^ ^ g i an^n o ft s η o a b * ^mu ap — ·

I -H - cm - cm " t n cn --* II co O cd P P

o n g - -OaS - -a in (D cd io V-o i a p «Hg^u'-'finHb -a a c ε

/ V **> g 0) J*'- I »O Η H O O

\ /""‘w °Λ-τ/ *H co X tn —. σι «ϋ* ·- ·> Ό - P P

\_/ _// x. o τι ·* cd cm -a » *a βΰ ·' o ιβ

y \ /*· t'* P η χί ^ cm cm cm O II n ^ P

o \=/ cm æ i o cm i a a a a a p — j i > ion i ·» »in ·Όΐη«ου«Ό ·η o

tv) a I CO ϋ m NU Ό CM—W CO —»H O p - C

i h«o -aa -aa ^ -a - cd τι o

0 ϋΗϋΜΜϋΗΐίΙΐηΗ II r^g —-P

15 Φ

P

>io\° CO

P 00

TJ

D

» I i—I

\ CM 0) O

I v g c 20 \ M W 01 (0 -H CM H *- p

Ό Π CM + Η P

P -Η -H -

— « fi TI O II II

P > -m P

cd 10)« ω ,-s pp > e p h a τι —<

P

o--

P

ok " ’ 03 Ό

H W Η P

H W

£__

iH

0 N CM

λ -* a

cd » O

^ δ 3° g “

H

" ro O

? « I

< ft

<N H

« O

35 O

H« /7

O

39 DK 169127 B1

g" M U

2 O

I P · Μ (Ί H

0) +J ft CM ^ ·· O

in X g κ » · h mom h co a i C (0 ft N N gu 0 S 0) O ro rø o -» n r» a o ™ g S il m »h II ~p

\ K ft »in K <D

/”°. S ft B B S b ^ » b ··* cn fi ( >|«|A o I-g/ “ a H o CM - » I ·» N II »o

\ / \ //Xk i-h » »inb*»»moB» g-P

J ^—(/ ya. n g »g^'-Ng'iUiO'tiB^O

io ,-7 \—/ kp —h — K'-'^oh'-o p s i k q) >, σ\ σι u ^ K —»in ft

fo ·Η co X cm cm -tf cn O II b B H

i O T3 ^ i» H v (

— b P rlXlNMNHN cmB b VO b -P

06 CM« ΙΟΙ IBH »1(0 I ;> in <-) in ·» ·» »in u » ·* n in g

Kl co o σ» cm con io *-». »τί II K σι 0

H <o » >1 »K B K »B g Ό B «3 » P

O OHUUMNM^^UHii (0 15 0)

•P

-P

>io\° n Λ cn

TI

P

20 \B1B

•P O’

TJ G CM

P -P -P

SCO O

> -η P

— Id)« •P -» IHP >

(0 H pi TI

in P · pc O in <o O’

P X H

w Η T-- H ar H o

> M N

ar CM

H O K

CD " U

n cn cd i--

30 B S

η K

B

r>

CM K

B U

35 O

“ ji 0 40 DK 169127 B1 \ n

g O

B iH

IP· ϋ vo ID +> ft W CO

U) ^ g og c in 0) in w co 5 <u ft o ^ g in cn r>

o CM

\ a£-- y ^ I ch \ 01 s — —»H J> — —^ ii p \-f \—// Pift K -K - ojK «> W H — 0)

▼ \ / S ft NBNbNMH'a' b KC

o N= Jg H o ·· * CJ ·> «. ·- - - ·- m 0 — I i -η v g φ ·«· g w o n Φ ιι *·4-> 10 N g rg^w I o >u w-u g o

_l tB 5-i —·iH KK m O ό O'-'M

ec S <u ^iininUMnnKHtn^ ft -Η co X og in in »u vo K m o Ό -d) » -K ·. -in II - H - ·

r-M ΗίΜΝΗ S'# ίο r- -P

oo B ιοί >— i ·» tu *“d fci«J

i> in h in ·«· » in w h * ·- n in g

Kl co Udi NH0\<i o -O li B o o h«o w>,waæ v -K g ό k vo - ρ O OHUf-og'tfU^^-'UHr" (tf 15

<D

+>

-P

>ioNP CO

Λ σ\ Ό

D

\

20 I

\ w w •H tji • Ti β oo n P -Η -H *.

m « C Φ O

W >-nfci M 10)« t >

0 H ft TI

IH__ 25 H T ffl® i

Hi * H

H δ W

> »·__

X

tH CJ

φ « n eo og

fl i N K

e3 S ° 30-- m

PS K

og H

PS O

35 I

* J?

O

41 DK 169127 B1

CM

\ H

g o 3 co in i P · o co <D -P ft co

W ffi g cm H

m φ w w h

Id ft CM ^

s m CM

5 o CM - ·- in g O b io

g Λ CMS —· O - - CM

Pift ffi CM CM ffi CM O N ΰ ·- ‘ så o-q υ cMiaw—'iir'·

S H cm - ·-‘in n u ίο as -P

i -Η - i o mffi g -n^.Hr-U*-<d cm g σ> £C cm -ffi II in — — g ® ^ ffi P -— - ·· u i in η b - ffi ffi o

-, n \_o i _ S Φ H *10 rl -VO Η Η P

10 / \ Ή CO ffiffiNOO·«* — -ffi -(dp ( /""“w Vrs/ o ffi - — u vo æ - - ffi g ffi - -ffi <d \_/ \_// f- p H ffi *~* r> CM’d* O II CM '£

> v U CM fu I O ffi - II I ffi ffiffiffiO

ο ψ=- I > co -cMinb^^U'tfr-UvovoH.p = I ffi I CO CM - - M5 CM--. M1 C0^>H O - 0

rvi HK) -ffi g cm ffi -ffiffi - -ffi -ffi P

0 U w —wfM UH1010H II Γ-—'ft ac___________ 0) 15 Ϊ >ιΛ° σι Λ cd ffi ffi \

V»B

ΟΛ -H CP

20 ffi C cm P -Η Ή -

« Π ffi O

> -η P

i φ « — <hp > H ffi ffi

H

I .1 I ..... I- - III— . .1—. I II I ··

• H

— ω vd ·ρ

+J ffi Η II

25 3 H n +>--0) P -μ

0 W

Μ-c N Φ

—' CM H

ffi ><

Hi U ffi H ffi ffi H u-- Q) > «I Q)

ο n ?r Η P

30 H η O >i g " ffi i ω S “ ft a> (d «a· Λί

Eh Ξ---H

ffi ffi

CM H <U

« O \ 1 c o (d

X

35--Q)

ti I

5> H

42 DK 169127 B1

Eksempel 17 (-6S-Γ2-<2-(2-(Cyclohexyl)-ethyls-phenvl)-ethyl1-4R-hy-droxy-3.4.5.6-tetrahvdro-2H-Pvran-2-on fl'a) tabel IX 5 (R1 = cyclohexyl, R2, R3 = Η, A-B = CH2-CH2, Z = CH2-CH2) 1 g 10%'s Pd/C forhydrogeneres i 20 ml absolut CH3OH i en rystebeholder. Derefter tilsættes 0,12 g (0,38 mmol) 10 af forbindelsen (la) (eksempel 16) opløst i 10 ml absolut methanol. Der hydrogeneres ved stuetemperatur. Efter optagelse af 10 ml H2 (109,0) afbrydes hydrogeneringen, katalysatoren fraskilles ved sugning, og filtratet inddampes i vakuum.

15 Udbytte: 0,11 g (91% af det teoretiske) (I'a) (A-B=CH2-CH2).

Rf = 0,30 (elueringsmiddel: cyclohexan/ethylacetat 1:1).

270 MHz NMR, δ-værdier i ppm: (se tabel IX).

Eksempel 17a-17b 20 På analog måde, som beskrevet i eksempel 17 for for bindelsen (I'a), kan forbindelserne (I) (A-B=-CH=CH-) hydrogeneres til forbindelserne (I1) (A-B=CH2-CH2) (tabel IX)

O

43 DK 169127 B1 g g

Μ M

-p η Η n X O o n O vo

Φ o η II co H

a η η O Μ n

W K MK

C 0) Η II K o || ϋ ω μ i μ Μ Ο g g Ug (tf g

M ·*· I

“ K o λ O ** I < ^ ^ r—*

n -W ·«· O Hinn —K

10 h no OM - > i in co <i U KlUOi ΚΝΦΊ· - ·-

Og UWO U ·' - g _ Uft-UI· *K m «a* I ^ o '“'ft K I K -P NO ·* I in M u

/ \ m U — U (tf K min vo - <D

VJ-v ? nK ft'H —Kie U *·Κη ^ g j-' \ JL, g K h o ^ nu --a· i o

* wfNf gM -=f^KM K K ~ ^ H-P

c id) m g h (tf mug K - 0 * I N-H ---- - »/nN •O t' m KTigvog— g K - MK - Qa

1C; ,J gM^-a·'—K wh n K U O

15 K « o - co <a· η Η K U U · 0 > - *3< *- «- ' -ΟΟλλΟ-Ρ r^l η I "d* w M HgHKWKftf Μ <o I CO I 0» l"-'H'd<HUg

1 Mnt^Hg CTi O ^ >.->* O

K ' - ' - O - -Ό g g K M

H H«d*'d'Cs'-P OM w '—’ H (tf Φ

-P

20 -P

>κλβ h r- Λ σ> σν Ό Κ Η η •Η οκ Ό ο σ> 25 ^ ^ Μ ο Η Η Η * « W - " Μ Ο > Ο Ο Η ill Η Η “ -Γ* (μ -Ρ ·· Φ ro U Κ (tf Η £> Κ » -Ρ ctf . 4--α) -ρ η ι Ό (tf « £. . (0-Ρ 01 ΐ'* ιΗ 0) X Η (tf Λ ·*£ 30 W Λ Φ Φ >ι -- C -Ρ I (tf Φ Μ X \ a φ c U Μ Λ g

ι κ 0 X

Ν Μ U Η Φ a ο κ

or U >1 I

35 ι U fi Η η '“ti ^ 44 DK 169127 B1

Eksempel 18

Fremstilling af saltene af de frie dihydroxysyrer af forbindelserne med den almene formel (la) 5 (+)-)E)-(3R,5S)-7-[2-(2-(Cyclohexy1)-ethyl)-phenyl]-3,5-di- hydroxy-6-heptensyre-kaliumsalt (R1=cyclohexyl, Z=CH2-CH2, R2, R3=H, R4=K+), A-B = -CH=CH- 10 0,1 g af forbindelsen (la) (eks. 16) opløses i 5 ml absolut ethanol. Til denne opløsning sættes ved stuetemperatur 2,9 ml af en 0,1 molær opløsning af KOH i ethanol.

Efter ca. 3 timer er der i tyndtlagschromatogrammet (elue-15 ringsmiddel: cyclohexan/ethylacetat 1:1) ingen ester tilbage. Den ethanoliske opløsning inddampes i vakuum. Tilbage bliver den ovenfor anførte forbindelse.

Udbytte: 119 mg hvide krystaller af K-saltet.

IR: C=0 bånd 1608/1572 cm _1.

20 På analog måde fås, som beskrevet i eksempel 18, kaliumsaltene af de tilsvarende frie dihydroxysyrer af forbindelser med den almene formel (la).

Eksempel 19 25 Fremstilling af methylesteren af de frie dihydroxy syrer med den almene formel (la) (+¾ -(E) -f3R. 5S)-7-(2-(2-(Cvclohexvl)-ethvl) -phenvl 1 -3.5-di-30 hvdroxv-6-heptensvre-methvlester (R1=cyclohexyl, Z=-CH2-CH2, R2, R3=H, R4=CH3), A-B=-CH=CH- 35 0,4 g af forbindelsen (la) (eksempel 16) opløses i 10 45 DK 169127 B1 ml absolut methanol. Til denne opløsning sættes ved stuetemperatur 1,3 ml af en 0,1 molær opløsning af NaOCH3 i absolut methanol, og der omrøres i ca. 1 time. Derefter fjernes opløsningsmidlet i vakuum, og remanensen optages i vand, og 5 der indstilles ved 0°C til pH = 7, og der ekstraheres hurtigt med ethylacetat, der tørres med MgS04 og filtreres, og opløsningsmidlet fjernes i vakuum. Tilbage bliver den i overskriften nævnte forbindelse.

Udbytte: 0,35 g methylester.

10 Rf = 0,21 (elueringsmiddel: cyclohexan/ethylacetat = 1:1). 1H-60MHz-NMR 5-værdi i ppm.

3,69 (s, 3H)-OCH3.

På analog måde kan, som beskrevet i eksempel 19, methylesterne af de frie dihydroxysyrer med den almene formel 15 (la) fremstilles. Ved erstatning af methanol med andre alkoholer (R4-0H) kan der også let fremstilles tilsvarende andre estere (la) (R4 = C2H5, i-C3H7, benzyl etc.).

Claims

46 DK 169127 B1 Patentkrav. 1. 3-Desmethyl-mevalonsyrederivater, kendetegnet ved, at de har formlen (I) (5-lacton) eller (la) (tilsvarende dihydroxycarboxylsyrederivat) 5 H° H%if\COOR4 /'V .-V "·’ S H 4 ø 5i^H B --·ΚΟΗ/ΗΟϋ B ” ^ A ΐί -o/ 15 hvori A-B betyder en gruppe med formlen -CH=CH- eller -CH2- ch2-, Z betyder en -CH2- eller -CH2_CH2-gruppe, R1 betyder et cycloaliphatisk carbonhydrid med 3-7 car-20 bonatomer, som eventuelt er substitueret med 1 eller 2 methylgrupper, R2 og R3 betyder hydrogen, halogen, trifluormethyl eller alkyl eller alkoxy med hver især 1-6 carbonatomer, R4 betyder hydrogen eller en ligekædet eller forgrenet 25 C^-Cs-alkylgruppe, benzyl, 1 eller 2 gange med Ci~ C4-alkyl eller halogen substitueret benzyl, et alkalimetal, ammonium (NH4+) eller en med C^-C4-alkyl eller hydroxy-C1-C4-alkyl substitueret ammoniumion.
2. Forbindelser ifølge krav 1, kendetegnet 30 ved, at i formlen (I) eller (la) betyder r! cyclopentyl eller cyclohexyl, R2 og R3 hydrogen, halogen, trifluormethyl eller alkyl eller alkoxy med hver især 1-4 carbonatomer, og R4 hydrogen, methyl, ethyl, isopropyl, isobutyl, benzyl, 35 natrium, kalium, ammonium eller tris-hydroxymethyl- methylamin. 47 DK 169127 B1
3. Forbindelser ifølge krav 1, kendetegnet ved, at i formlen (I) eller (la) betyder r! cyclopentyl eller cyclohexyl, R2 og R3 hydrogen, 2-methyl, 2-trifluormethyl, 2,4-dimethyl, 5 2-methyl-4-chlor, 2-chlor-4-methyl, 2,4-bis-trifluor- methyl, 2-ethyl, 2-isopropyl, 2-isobutyl, 2-chlor, 2-fluor, 2-brom, 2,4-dichlor, 2,4-difluor, 2-methoxy, 4-methoxy eller 2,4-dimethoxy, og R4 hydrogen, methyl, ethyl, benzyl, natrium, kalium, 10 ammonium elle·: tris-hydroxymethyl-methylamin.
4. Fremgangsmå e til fremstilling af forbindelser med formlen (I) og ixa), kendetegnet ved, at man a) omsætter phosphoniumsaltene med formlen (II) CH2~P (C6H5)3 x

15 R1«Z ] (II) "ér R hvori R1, R2, R3 og Z har den til formlen (I) angivne betyd-20 ning, og X betyder Cl, Br eller I, med det chirale aldehyd med formlen (III) r5°Y^Y 1^0 (III)

25 I CH=0 hvori R5 betyder en mod baser og svage syrer stabil beskyttelsesgruppe, til en forbindelse med formlen (IV) 30 r5°4^nyjs0CH3 N^-0 (ly)

35 R1-Z. I Xl··1 V 48 DK 169127 B1 hvori R1, R2, R3 og Z har den til formlen (I) og R5 den til formlen (III) angivne betydning (og AB betyder en -CH=CH-gruppe), b) i en forbindelse med den almene formel (IV) hydrolyseer 5 methylacetalfunktionen surt til en lactol med formlen (V) RS0 . « χτ 10 hi-2 r4 (v) xr RJ 15 hvori R1, R2, R3 og Z har den til formlen (I) og R5 den til formlen (III) angivne betydning (og A-B betyder en -CH=CH-gruppe), c) oxiderer forbindelsen med den almene formel (V) til en lacton med formlen (VI) (VI)

25 R1-Z I R hvori R1, R2, R3 og Z har den til formlen (I) og R5 den til 30 formlen (III) angivne betydning (og A-B betyder en -CH=CH-gruppe), d) i en forbindelse med den almene formel (VI) fraspalter beskyttelsesgruppen R5 til en forbindelse med formlen (I), hvori R1, R2, R3 og Z har den til formlen (I) angivne betyd- 35 ning, og A-B betyder en -CH=CH-gruppe, eventuelt hydrogenerer en forbindelse med den almene formel 49 DK 169127 B1 (I), hvor A-B betyder en -CH=CH-gruppe, til en forbindelse med den almene formel (I), hvor A-B betyder en -CH2-CH2-gruppe, hvorhos hydrogeneringen også kan ske ved forbindelserne med formlerne (IV), (V) eller (VI) til tilsvarende 5 forbindelser, hvori A-B betyder en -CH2-CH2-gruppe, eventuelt overfører en hydroxylacton (I) i de tilsvarende frie hydr-oxysyrer (la) eller deres salte eller eventuelt fremstiller den tilsvarende ester ud fra de frie hydroxysyrer (la) eller ud fra hydroxylactonen (I).
5. Pharmaceutisk præparat, kendetegnet ved, at det indeholder en forbindelse ifølge krav 1.