DK164169B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af 7-alfa-methoxycephalosporiner eller farmaceutisk acceptable salte deraf samt et mellemprodukt til anvendelse herved - Google Patents

Description

i

DK 164169 B

Denne opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte 7e-methoxycephalosporiner med den i krav 1's indledning angivne almene formel (I) eller farmaceutisk acceptable salte deraf samt forbindelser med 5 den i krav 2 angivne almene formel (VI) eller salte deraf til anvendelse som udgangsmateriale ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen.

Forbindelserne med formlen (I) er karakteriseret ved at 10 have et bredt antibakterielt spektrum over for Gram-positive og Gram-negative bakterier, især ved at have en udmærket antibakteriel aktivitet over for Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae og Proteus arter, der er kendte som årsager til klinisk alvorlige infektionssyg-15 domme, og ved at være stabile over for 0-lactamase dannet af bakterier. De er derfor meget nyttige til behandling af forskellige infektionssygdomme.

Selv om konventionelle 7a-methoxycephalosporiner er kend-20 te for at have antibakteriel aktivitet over for Gram-positive bakterier, har de mangler ved ikke at udvise en effektiv antibakteriel aktivitet over for Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae og Proteus arter, som frembringer klinisk alvorlige infektionssygdomme, og ved 25 at være ustabile over for /5-lactamase.

Cephalosporiner indeholdende en 2,3-dioxo-piperazincar-boxamidogruppe er kendt fra DE offentliggørelsesskrift nr. 2 600 880, som blandt andet angiver forbindelser re-30 præsenteret ved formlen 35

DK 164169 B

2 o o y—^ s

CHoCHo-N N-CONH-CH-CONH—i—< ""i N *N

, Λ

X'X COOR1 I

OH CH3 10 hvori R1 betyder et hydrogenatom eller en ikke-toxisk kation. Det har vist sig, at de hidtil ukendte forbindelser med formlen (I), der fremstilles ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, har en kraftigere antibakteriel aktivitet over for en række forskellige bakterier, incl. de oven-15 nævnte, end disse kendte forbindelser.

I denne beskrivelse skal betegnelsen '’alkyl" betyde ligekædet eller forgrenet alkyl med 1-14 carbonatomer, såsom methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, pentyl, hexyl,heptyl, octyl, dodecyl 20 og lignende, betegnelsen "alkoxy" skal betyde monovalent -0-al-kyl, hvori alkyl er defineret som ovenfor, betegnelsen "lavere a] kyl" skal betyde ligekædet alkyl med 1-5 carbonatomer, såsom methyl, ethyl, propyl, butyl eller pentyl, betegnelsen "lavere alkoxy" skal betyde monovalent -0-lavere-alkyl, hvor lavere alkyl 25 er defineret ovenfor, betegnelsen "acyl" skal betyde acyl med Ι-ΙΟ carbonatomer, som acetyl, propionyl, butyryl, benzoyl, naphoy] pentancarbonyl, cyclohexancarbonyl, furoyl, thenoyl og lignende, og betegnelsen "acyloxy"' skal betyde monovalent -0-acyl, hvor a- cyl er som defineret ovenfor. Når betegnelserne "acyl" og "acyl-3° 0xy" betyder sådanne grupper dannet ud fra en heterocyclisk ring indeholdende N, 0 og/eller S i et hvert antal i en hver stilling i ringen, medregnes heteroatomet eller -atomerne i antallet af carbonatomer.

35

DK 164169 B

3 I de heri angivne almene formler betyder R"^ hydrogen eller en car-boxylbeskyttende gruppe. De carboxylbeskyttende grupper er sådanne, som konventionelt er blevet anvendt inden for penicillin- og cephalosporinområdet, og inkluderer esterdannende grupper, som 5 kan fjernes ved katalytisk reduktion, kemisk reduktion eller andre behandlinger under milde betingelser, esterdannende grupper, som let kan fjernes i levende kroppe, og andre kendte esterdannende grupper, som let kan fjernes ved behandling med vand eller en alkohol, såsom organiske silylgrupper, organiske phosphorholdige 10 grupper, organiske tinholdige grupper og lignende.

Eksempler på egnede carboxylbeskyttende grupper er: (a) alkylgruoper, 15 (b) substituerede lavere alkylgrupper, hvori mindst én af sub-stituenterne er chlor, brom, fluor, nitro, carboalkoxy, acyl, lavere alkoxy, oxo, cyan, lavere alkylthio, lavere alkylsulfinyl, lavere alkylsulfonyl, lavere alkoxycarbonyl, 1-indanyl, 2-indanyl, 20 furyl, pyridyl, 4-imidazolyl, phthalimido, acetidino, aziridino, pyrrolidinyl, piperidino, morpholino, thiomorpholino, N-lavere-alkylpiperazino, 2,5-dimethylpyrrolidinyl, 1,4,5,6-tetrahydropy-rimidinyl, 4-methylpiperidino, 2,6-dimethylpiperidino, lavere al-kylamino, di-lavere-alkylamino, acyloxy, acylamino, di-lavere-al-25 kylaminocarbonyl, lavere alkoxycarbonylamino, lavere alkoxycarbo-nyloxy, lavere alkylanilino eller lavere alkylanilino substitueret med chlor, brom, lavere alkyl eller lavere alkoxy; (c) cycloalkylgrupper med 5 til 7 carbonatomer, lavere-alkyl-suh-3Q stituerede C^_y cycloalkylgrupper eller [2,2-di(lavere-alkyl)-l,3- dioxolan-4-yljmethylgrupper; (d) alkenylgrupper med op til 10 carbonatomer; 35 4

DK 164169 B

(e) alkynylgrupper med op til 10 carbonatomer; (f) phenylgrupper, substituerede phenylgrupper, hvor mindst én af substituent erne er udvalgt blandt de substituenter, der er eksemplificeret ovenfor under (b), eller arylgrupper med den al- 5 mene formel:

-CG

10 hvori X betyder -CH=CH-0-, -CH=CH-S-, -CH2CH2S-, -CH=N-CH=N-, -CH=CH-CH=CH-, -C0-CH=CH-C0- eller -C0-C0-CH=CH-, eller substituerede derivater deraf, hvor substituenterne er udvalgt blandt de substituenter, der er eksemplificeret ovenfor under (b), eller med den almene formel: 15 <c hvori Y betyder en lavere alkylengruppe, såsom -(CH2)·^- og -(CH2)^-, eller substituerede derivater deraf, hvor substituenterne er udvalgt blandt de substituenter, der er eksemplificeret ovenfor under (b); (g) aralkylgrupper såsom benzylgruppen eller substituerede ben-25 zylgrupper, hvor mindst én af substituenterne er udvalgt blandt de substituenter, der er eksemplificeret ovenfor under (b); (h) heterocycliske grupper, såsom furyl, quinolyl, methyl-substitueret quinolyl, phenazinyl, 1,3-benzodioxylanyl, 3-(2-methyl- 30 4-pyrrolinyl), 3-(4-pyrrolinyl) og N-(methyl-pyridyl), eller substituerede heterocycliske grupper, hvor mindst én af substituenterne er udvalgt blandt de substituenter, der er eksemplificeret ovenfor under (b); 1 (i) alicycliske indanyl- eller phtahalidylgrupper eller substituerede derivater deraf, hvor substituenten er methyl, chlor, brom eller fluor, en alicyclisk tetrahydronaphtylgruppe eller substituerede derivater deraf, hvor substituenten er methyl, 5

DK 164169 B

chlor, brom eller fluor, tritylgruppen, cholesterylgruppen og bicyclo[4,4,0]decylgruppen.

De: ovenfor anførte carboxylbeskyttende grupper er typiske eksemp-5 ler, og der kan anvendes en hver gruppe udvalgt blandt dem, der er angivet i US patentskrifterne nr. 3499909, 3573296 og 3641018 og DE offentliggørelsesskrifterne.nr. 2301014, 2253287 og 2337105 2 R i de almene formler er Men organisk gruppe forbundet gennem p 10 et oxygen- eller svovlatam". Eksempler på R er lavere-alkoxygrup per, lavere-alkylthiogrupper, acyloxygrupper, carbamoyloxygrup-per og heterocyclisk-thiogrupper indeholdende 0, S og N alene eller i en hver kombination i en hvilken som helst stilling, såsom oxazolylth'io., thiazolyl thio, isoxazolyl thio, isothiazolylthio, 15 imidazolylthio,pyrazolylthio, pyridylthio, pyrazinylthio, pyri-midinylthio, pyridazinylthio, quinolylthio, isoquinolylthio, quinazolylthio, indolylthio, indazolylthio, oxadiazolylthio, thia diazolylthio, triazolylthio, tetrazolylthio, triazinylthio, benz-imidazolylthio, benzoxazolylthio, benzthiazolylthio, triazolopy-20 ridylthio, purinylthio og pyridin-l-oxid-2-ylthio.

2

Endvidere kan de ovennævnte R -grupper være substitueret med halogen, alkyl.,i phenyl, C2_^alkenyl, hydroxy, alkoxy, alkylthio, nitro, cyan, alkylamino, dialkylamino, acylamino, acyl, acyloxy, 25 acylalkyl, carboxyl, carbamoyl, aminoalkyl, N-alkylaminoalkyl, N,N-di-alkylaminoalkyl, hydroxyalkyl, hydroxyiminoalkyl, alkoxy-alkyl, carboxyalkyl, sulfoalkyl, sulfo, sulfamoyl-alkyl, sulfamo-yl, carbamoylalkyl, carbamoyl-C2_^-alkenyl, N-hydroxycarbamoylal-kyl eller lignende, hvor alkyl og alle alkyldele kan indeholde 30 1-5 carbonatomer.

A i de almene formler er et hydrogenatom eller en eventuelt substitueret alkylgruppe. Eksempler på alkylgrupper er anført ovenfor ved definitionen af alkyl. Eksempler på substituenter i de 35 substituerede alkylgrupper inkluderer halogen, alkoxy med 1-5 carbonatomer, cyan, nitro, carboxyl, alkoxycarbonyl med 1-5 carbon-atomer i alkoxydelen, hydroxy, alkylthio med 1-5 carbonatomer, acyl og N,N-disubstitueret amino.

6

DK 164169 B

B i de almene formler er eventuelt substitueret alkyl, cycloal-kyl, cycloalkenyl, cycloalkadienyl eller en heterocyclisk gruppe. Eksempler på alkylgruppen er anført ovenfor ved definitionen ' af alkyl. Eksempler på cycloalkylgruppen er cyclopentyl, cyclo-5 hexil og lignende. Cycloalkenylgruppen inkluderer f.eks. cyclo-pentenyl, cyclohexenyl og lignende. Eksempler på cycloalkadienyl-gruppen er cyclopentadienyl, cyclohexadienyl og lignende. De he-terocycliske grupper er sådanne grupper, der indeholder S, 0 og N alene eller i en hver kombination i hvilken som helst stilling, 10 såsom furyl, thienyl, oxazolyl, thiazolyl, isoxazolyl, isothiazo-lyl, imidazolyl, pyrazolyl, pyridyl, pyrazinyl, pyrimidinyl, py-ridazinyl, quinolyl, isoquinolyl, quinazolyl, indolyl, indazolyl, l,3j4-oxadiazolyl, 1,2,4-oxadiazolyl, 1,3,4-rthiadiazolyl og 1,2,4-thiadiazolyl.

15

Hver gruppe repræsenteret ved B inkluderer stillingsisomere (f.ekf inkluderer thienylgruppen 2-thienyl og 3-thienyl). Substituenterne på grupperne repræsenteret ved B inkluderer halogen, alkyl, alkoxy, hydroxy, acyl, acyloxy, mercapto, alkylthio, nitro, ami-20 no, beskyttet amino, imino, beskyttet imino, carboxyl og lignende, hvor alkyl og alle alkyldele kan indeholde 1-5 carbonatomer.

Når der vides at forekomme tautomeri i nogen af grupperne re-præsenteret ved B, omfattes de tautomere af opfindelsen. F.eks. forekommer 2-(substitueret)-aminothiazolyl. i tautomere former, der er i ligevægt som vist ved de følgende ligevægtsformler: Έ π---'> HIT—Zl 30 ./-fr «— As^ R5 4 5 hvori R betyder amino eller beskyttet amino, og er K betyder imino eller beskyttet imino.

7

DK 164169 B

De farmaceutisk acceptable salte af 7^-methoxycephalosporinerne med den almene formel (I) inkluderer dem, som er dannet ved den sure gruppe, og dem, som er dannet ved den basiske gruppe, hvilket er velkendt inden for penicillin- og cephalosporinområdet. g Saltene dannet ved den sure gruppe inkluderer salte med alkalimetaller, såsom natrium og kalium, jordalkalimetaller, såsom calcium og magnesium, ammonium og nitrogenholdige organiske baser, såsom procain, dibenzylamin, N-benzyl-^-phenethylamin, 1-ephenamin, Ν,Ν-dibenzylethylen-diamin, trimethylamin, triethyl-10 amin, tributylamin, pyridin, dimethylanilin, N-methylpiperidin, N-methylmorpholin, diethylamin og dicyclohexylamin.

Saltene dannet ved den basiske gruppe inkluderer salte med mineralsyrer, såsom saltsyre og svovlsyre, organiske carboxylsyrer, 15 såsom oxalsyre, myresyre, trichloreddikesyre,og trifluoreddike-syre, og organiske sulfonsyrer, såsom methansulfonsyre, toluen-sulfonsyre og naphthalensulfonsyre.

Alle optiske isomere og racemiske forbindelser og alle krystalformer og hydrater af 7a-methoxycephalosporinerne med den almene formel (I) og salte deraf er omfattet af opfindelsen.

Forbindelserne med den almene formel (i) eller saltene deraf frem-stilles ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, som er ejendommelig ved det i kravets kendetegnende del anførte.

De organiske silylgrupper og de organiske phosphorholdige grupper repræsenteret ved i de i kravet anførte almene formler inkluderer de grupper, som konventionelt anvendes som amino-eller carboxylbeskyttende gruppe ved synteser inden for penicillin- og cephalosporinområdet, såsom LO ÅOv /P-, /P-, (c2h5o)2p- og (C2Hg)2P-, der let fjernes ved behandling med f.eks. vand eller en alkohol.

7

DK 164169 B

8

Grupperne repræsenteret ved R , der let udskiftes med et nucleo-philt reagens, inkluderer halogen, såsom chlor og brom, lavere alkanoyloxy, såsom formyloxy, acetoxy, propionyloxy, butyryloxy og pivaloyloxy, arylcarbonyloxy, såsom benzoyloxy og naphthoyl-5 oxy, arylthiocarbonyloxy, såsom thiobenzoyloxy og thionaphthoyl-oxy, arylcarbonylthio, såsom benzoylthio og naphthoylthio, aryl-thiocarbonylthio, såsom thiobenzoylthio og thionaphthoylthio, carbamoyloxy, thiocarbamoyloxy, pyridin-N-oxid-2-yl og pyridazin-N-oxid-6-yl. Disse grupper repræsenteret ved R kan yderligere 2Q indeholde substituenter som f.eks. halogen, nitro, lavere alkyl, lavere alkoxy, lavere alkylthio og acyl.

Forbindelsen med den almene formel (V) opnås let ved omsætning af et alkalimetal- eller jordalkalimetalsalt eller et· organisk 15 basesalt af en forbindelse med den almene formel':

HoN-CH-C00H

2 I (X)

B

hvori B har den i kravets indledning angivne betydning, med et 20 reaktivt derivat i carboxylgruppen af en forbindelse med den almene formel (III) i nærvær af et syrebindende middel i et inert opløsningsmiddel.

Forbindelserne med de almene formler (II) og (IV) kan syntetise-25 res på kendt måde, f.eks. den som er beskrevet i the Journal of Synthetic Organic Chemistry, Japan, Vol. 35, 568-574 (1977).

Praktiske udførelsesformer af de i kravets kendetegnende del anførte metoder (1), (2), (3) og (4) er beskrevet nedenfor.

30

Metoderne (1) og (2) kan udføres under næsten de samme betingelser. Forbindelsen (II) eller (IV) opløses eller suspenderes i et inert opløsningsmiddel,som f.eks. vand, acetone, tetrahydro- furan, dioxan, acetonitril, dimethylformamid, dimethylacetamid, 35 9

DK 164169 B

methanol, ethanol, methoxyethanol, diethylether, diisopropyl-ether, benzen, toluen, methylenchlorid, chloroform, ethylacetat eller methylisobutylketon, hver for sig eller i blanding af to eller flere. Til den resulterende opløsning eller suspension 5 sættes et reaktivt derivat i carboxylgruppen af forbindelsen (III) eller forbindelsen (V) eller et reaktivt derivat i carboxylgruppen af forbindelsen (V). Blandingen får lov at reagere i nærvær eller fravær af en base ved mellem -60°C og 80°C, fortrinsvis mellem -40°C og 30°C. En reaktionstid på fra 5 min. til 10 5 timer er almindeligvis tilfredsstillende.

De baser, som anvendes ved den ovenstående reaktion, inkluderer uorganiske baser, såsom alkalimetalhydroxider, alkalimetalhydro-gencarbonater, alkalimetalcarbonater og alkalimetalacetater, ter-15 tiære aminer, såsom trimethylamin, triethylamin, tributylamin, pyridin, N-methylpiperidin, N-methylmorpholin, lutidin,og colli-din, og sekundære aminer, såsom dicyclohexylamin og diethylamin.

Når forbindelsen (V) eller et salt deraf anvendes som udgangs-2o materiale i metode (2), kan reaktionen gennemføres i nærvær af et dehydratiserings/kondensationsmiddel, som f.eks. Ν,Ν’-dicyc-lohexylcarbodiimid, N-cyclohexyl-N' -morpholinoethylcarbodiimid, NjN’-diethylcarbodiimid, N,NT-carbonyl-bis(2-methylimidazol), trialkylphosphiter, ethylpolyphosphat, phosphoroxychlorid, phos-25 phortrichlorid, 2-chlor-l,3>2-dioxaphospholan, oxazolylchlorid, dimethylchloroforrniniumchlorid og dimethylethoxyforminiumchlo-rid.

Metoden (3) udføres på følgende måde: en cephalosporin med 30 formlen (VI) opnået på kendt måde [japansk offentliggjort patentansøgning nr. 70 788/76 og 113 890/76] opløses eller suspenderes i et inert opløsningsmiddel som f.eks. tetrahydrofuran, di-oxan, ethylenglycol-dimethylether, methylenchlorid, chloroform, dimethylformamid, dimethylacetamid, acetonitril eller methanol 35 eller en blanding af to eller flere af disse opløsningsmidler.

Til den resulterende opløsning eller suspension sættes et alkali-metalmethanolat (VII) sammen med methanol. Den resulterende bian-

DK 164169 B

10 ding får lov at reagere, og reaktionsblandingen omsættes derpå med et halogeneringsmiddel. Ved denne reaktion anvendes methanol i overskud, og den anvendte mængde alkalimetalmethanolat (VII) er sædvanligvis 2-6 ækvivalenter per ækvivalent af den anvendte 5 cephalosporin (VI). Betegnelsen "i overskud" betyder en mængde på mere end 1 ækvivalent per ækvivalent af cephalosporinen (VI). Alle de ovenstående reaktioner gennemføres ved mellem -120 °C og -10 °C, fortrinsvis mellem -100 °C og -50 °C. En reaktionstid på 5-30 minutter er tilstrækkelig, og reaktionen afsluttes ved syr-10 ning af reaktionssystemet.

Det halogeneringsmiddel, som anvendes ved denne metode, er almindeligt kendt som en kilde for positivt halogen, såsom Cl+, Br+ eller I+. Eksempler på sådanne halogeneringsmidler inkluderer ha-15 logener, såsom chlor og brom, N-halogenimider, såsom N-chlorsuc-cinimidjOg N-bromsuccinimid, N-halogenamider, såsom N-chloracet-amid og N-bromacetamid, N-halogensulfonamider, såsom N-chlorben-zensulfonamid og N-chlor-p-toluensulfonamid, 1-halogeribenzotria-zoler, 1-halogentriaziner, organisk hypohalogenit, såsom tert.-20 butylhypochlorit og tert.-butylhypoiodit, og halogenhydantoiner, såsom Ν,Ν-dibromhydantoin. Af disse halogeneringsmidler foretrækkes tert.-butylhypochlorit. Halogeneringsmidlet anvendes i tilstrækkelig mængde til at levere positivt halogen i en mængde ækvivalent me mængden af cephalosporinen med den almene formel (VI).

25

Egnede syrer til afslutning af reaktionen er sådanne, som, når de sættes til en kold reaktionsblanding, ikke vil forårsage størkning af reaktionsblandingen eller frysning af reaktionsblandingen til en tung viskos blanding. Eksempler på egnede syrer er 9Q% myre 30 syre, iseddikesyre, trichloreddikesyre og methansulfonsyre.

Efter reaktionens afslutning kan overskuddet af halogeneringsmidlet fjernes ved behandling med et reduktionsmiddel, såsom trial-kylphosphit eller natriumthiosulfat.

35 11

DK 164169 B

Ved udførelse af metode (4) under anvendelse af en anden forbindel-se med formlen (VIII) end de, hvori R' er en heterocyclisk aromatisk amin-N-oxidthiogruppe med en thiogruppe på carbonatomet op til N-oxidgruppen, omsættes denne forbindelse med en forbindelse, med 5 formlen (IX) i et inert opløsningsmiddel som f.eks. vand, methanol, ethanol, propanol, isopropanol, butanol, acetone, methylethylketon, methylisobutylketon, tetrahydrofuran, dioxan, acetonitril, ethylace-tat, 2-methoxyethanol, dimethoxyethan, dimethylformamid, dimethyl-sulfoxid, dimethylacetamid, dichlorethan, chloroform,og dichlorme-1,P than, alene eller i blanding af to eller flere.

Den ovenstående reaktion gennemføres fortrinsvis i et stærkt polært opløsningsmiddel, såsom vand. Det er fordelagtigt at holde reaktionsopløsningsmidlets pH-værdi på 2-10, fortrinsvis 4-8. Reaktionen fremis bringes efter tilsætningen af en puffer, såsom natriumphosphat, for at indstille pH til en ønsket værdi. Selv om reaktionsbe tingel seme ikke er kritiske, udføres reaktionen almindeligvis ved 0-100°C i fra nogle timer til nogle titaltimer. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 Når der anvendes en forbindelse med den almene formel (VIII), hvor- 2 i R er en heterocyclisk aromatisk amin-N-oxidthiogruppe med en 3 thiogruppe på carbonatomet op til N-oxidgruppen, omsættes forbindel 4 sen med den almene formel (VIII) med en forbindelse: med den almene 5 formel (IX) i det ovennævnte inerte opløsningsmiddel i nærvær af 6 en divalent kobberforbindelse.. .Denne procedure er særlig nyttig, 7 når forbindelsen med den almene formel (IX) er en alkohol, såsom 8 methylalkohol, ethylalkohol, propylalkohol, isopropylalkohol, n-bu- 9 tylalkohol, benzylalkohol eller ethylenglycol. I dette tilfælde 10 går reaktionen glat ved anvendelse af et overskud af alkoholen som 11 opløsningsmiddel. De divalente kobberforbindelser, som anvendes ved 12 denne procedure er uorganiske eller organiske divalente kobber 13 forbindelser, såsom cuprichlorid, cupribromid, cuprifluorid, cu- 14 prinitrat, cuprisulfat, cupriborat, cupriphosphat, cupricyanid, 15 cupriformiat, cupriacetat, cupripropionat, cupricitrat, cupritar- 16 12

DK 164169 B

trat, cupribenzoat,og cupri salicylat. Den anvendte mængde af den divalente kobberforbindelse er fortrinsvis 0,5 mol eller mere per mol af forbindelsen med den almene formel (VIII). Selv om de afhænger af de anvendte typer forbindelse med den almene formel 5 (VIII), divalent kobberforbindelse og forbindelse med den almene formel (IX), er reaktionstemperaturen almindeligvis 0-100°C, og reaktionstiden fra nogle minutter til nogle dage.

Omdannelse af en forbindelse med den almene formel (I), hvori 10 R"*· er en carboxylbeskyttende gruppe, til en forbindelse med den almene formel (I), hvori er hydrogen, eller et salt af den sidstnævnte forbindelse, omdannelse af en forbindelse med den -almene formel (i), hvori R er hydrogen, til et salt eller til en forbindelse med den almene formel (I), hvor R1 er en carbo-15 xylbeskyttende gruppe, eller omdannelse af et salt af en forbindelse med den almene formel (i) til dens frie syre kan udføres på konventionel måde.

2

Ved omsætning af en forbindelse, hvori gruppen A, B eller R er 20 reaktiv, kan den reaktive gruppe beskyttes med en beskyttende gruppe, som sædvanligvis anvendes til beskyttelse af en carboxyl-, amino- eller hydroxygruppe. Efter omsætningen kan en sådan beskyttende gruppe fjernes nå konventionel måde til gendannelse af 2 gruppen A, B eller R .

25

Betingelserne for fremstillingen er ikke begrænset til de. ovenfor beskrevne, men kan modificeres passende i overensstemmelse med den bestemte anvendte type reagens.

30 Isolering af en 7a-methoxycephalosporin (i) eller et salt deraf fra reaktionsblandingen kan udføres på konventionel måde.

Fremgangsmåden til fremstilling af 7a-methoxycephalosporiner med den almene formel (I) eller salte deraf er ikke begrænset til 35 de ovenfor beskrevne. Disse forbindelser kan også fremstilles 13

DK 164169 B

ved andre kendte metoder.

De således fremstillede 7a-methoxyc.ephalosporiner med den almene formel (I) og salte deraf er meget nyttige til terapi af mennes-5 ke- og dyresygdomme på grund af deres brede antibakterielle spektrum over for Gram-positive bakterier og Gram-negative bakterier, deres udmærkede antibakterielle aktivitet over for Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae og Protius arter, og deres stabilitet over for β-lactamase.

10

Blandt de forskellige 7a-methoxycephalosporiner, som fremstilles ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, foretrækkes dem med den følgende formel (la) og saltene deraf: 0 0 15 y/ A-Ή F-C0M-CH-C033H—j-(la).

B / 0 CQOR1 20 hvori A betyder hydrogen eller en lavere alkylgruppe, B betyder thienyl, furyl, eller dens tautomer R4 (hvor R^ betyder amino eller beskyttet amino, og imino eller beskyttet imino), alkyl med 1-4 carbonatomer eller 1,4-cyclohexa-dienyl, og R og R har den i kravets indledning angivne betydning. Af 7a-methoxycephalosporinerne med den ovenstående formel (la) og saltene deraf er de mest foretrukne dem, hvori B er thienyl, furyl eller eller dens tautomer -jj— 35 . i/ /

DK 164169 B

14 J. c 2 (hvor k og har den ovenstående "betydning)især de, hvori R er acetoxy, substitueret 5-(l>2,3j4-tetrazolyl)thio eller 2-(l,35 4-thiadiazolyl)thio.

5 (1A) Antibakterielle aktiviteter af en række 7cc-methoxycephalo- sporiner med den nedenstående formel (Ib), fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, er anført i den følgende tabel 1.

.» V ?*>, CH-CHo-ΪΓ IT-COMi-CH-COm-^ x (Ib)

B /—Ch2R

0 COOH

15

De i tabel 1 angivne tal repræsenterer den minimale inhiberende koncentration (MIC) i pg/ml af hver forbindelse, som blev bestemt ifølge den metode, som er beskrevet i "Chemotherapy (So-20 ciety of Chemotherapy, Japan), Vol. 16, 98-99 (1968)": En kultur opnået ved dyrkning af prøvebakterien i en hjerteinfusionsvæske (Eiken Kagaku Co.) blev indpodet i et hjerteinfusionsagarmedium (Eiken Kagaku Co.). Efter 20 timers inkubation ved 37°C blev bakteriens vækst undersøgt for at bestemme den minimale inhibe-25 rende koncentration (MIC i ^ig/ml). Indpodningsmængden af bakterien var 10^ celler/plade (10^ celler/ml).

Tilsvarende antibakterielle aktiviteter af en række 7a-methoxy-cephalosporiner med den tidligere angivne formel (la), fremstil-30 let ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, er anført i den efterfølgende tabel 1’.

35

15 DK 164169 B

TABEL 1 (MIC i pg/ml) -- - . ______ _ _ _ — ----------

Forbindelse „ H—il

X (Ib) B -UJ

Xv ' ' CS-1170 b

X. (kontrol] N—N — N

X. R2

CH* CEL COOK

Bakterie_X^ S. aureus F-19 (penicillinaseprodu- 1,56 3,13 6,25 cerende bakterie) g. coli NIHJ__0,39 ύ 0,1__4 0,1 K. pneumoniae Y-50 o,39 0,39 6,25

Prot. vulgaris GN-76 3,13 o,2 0,78 < 1-ΙΓ-1—1 - .. - T1_l Tm· "" - -- --ΓΠ -I - ιτη T-r.r-.i-, -

Ps. aeruginosa IF 0-3&5 - l200 12’5 25

Ser, marcescens W-8 £200 25 50__

Acineto.bacter caloaceticus A-6 50 12,5 25

C. freundii GN-346 I

(cephalosporinasepro- >pnn og cn

ducerende bakterie) 5=5 0 D

Ent. cloacae IID977 ^200 25 25_

Citrobacter N-7 25 0,78 1,56

Ser, marcescens IIP 620__3,13__0,78__0,78

Klebsiella spp. Y-72 12,5 6,25 25_

Ser, marcescens ¥-35 100 6,25 100

Ps. aeruginosa S-68 2200 12,5 50 OCH-z ; 3 ej jf-

Note: CS-1170 betyder ITCCH^SCHgCClTH-j-f Ί j ^ 0 COOH “

16 DK 164169 B

TABEL 1 (fortsat)

Jp IT — IT IT—Ή 1Τ=ϋΤ -OCOCEj S-ΚχΛ -SÅ^ir-CH2CH2lT(CE3)2

CE2COimo CHgCHgOE

6,25 3,13 3,13 6,25 <0,1 ^ 0,1 £ 0,1 <0,1 1.56 0,59 0,39 0,76 1.56 0,78 0,39 3,13 50 12,5 12,5 50 100 25 50 50 25 6,25 6,25 25 100 12,5 25 50 I 12,5 25 I 25 3.13 _5,13 [ 1,56 [_5,15 3.13 0,2 0,2 0,2 6,251 1,56 I 1,56 |__ 50 j 12,5 I 12,5 I _ 50 12,5 I 12,5 I__

17 DK 164169 B

TABEL 1 (fortsat) ϊρ Ν— Ν' τ\τ_τντ Ν —Ν Ν —Ν

-sXNJ _gj jl -si^J

I S I I

ch2 ch2n (CH3) 2 CH=CH2 ch2 CH2M2 6.25 6,25 3,13 6,25 ______ £0,1 £0,1 <0,1 I <0,1 0,78 0,39 0,39 0,78 1,56 0,78 0,78 0,78 50 25 25 12,5 50 25 25 50 12.5 12,5 12,5 12,5 25 100 12,5 25 25 100 25 50 6.25 12,5 I 3,13 3,13 0,39 0,78 0,2 0,2 12.5 1,56 6,25 | 3,13 50 12,5 12,5 I 6,25 25 25 I 12,5 12,5

is DK 164169 B

TABEL 1 (fortsat) ' -P 6

? f IT— IT IT—IT IT—IT

-sX^it -sA^J· -sA^Jr

CHpC=ITOH I I I

CH3 GH2C0CH3 GBgOQHHDH GH^ 3,13 6,25 25 3,13 l0,l £ 0,1 10,1 10,1 0,78 0,39 1,56 0,78 0,78 0,78 0,78 3,13 25 25 12,5 12,5 50 50 100 100 12.5 25 1,56 6,25 50 25 2200 25 25 50 200 25 6.25 6,25 -| 50 6,25 0,2 0,2 0,78 0,78 6.25 6,25 100 12,5 25 25 200 j 50 12.5 25 j 25 I 25

^ DK 164169B

TABEL 1 (fortsat) -Φ li—li ϋ — ϋ ϋ—li li ϋ -sA^Jr -sA^ir CH5 CSgCOKHp CE2CH20H ch=ch2 6.25 6,25 6,25 3,13 <0,1 40,1 40,1 I 40,1 0,2 0,2 0,2 0,2 0,78 1,56 1,56 3,13 12.5 12,5 12,5 j 25 100 j 12.5 ί ___!_ 25 25 25 25 I 25 10,1 10,1 10,1 <0,1 6.25 I 1_ 12.5 I I _ 25 I _I__

20 DK 164169 B

TABEL 1 (fortsat)

F — IT F— F F — IT

-sAjjJi -S -i -ococh^ -S-C g J~CH- CH3 ch2com2 3,13 3,13 6,25 6,25 <0,1 10,1 10,1 I 10,1 0,2___ 0,78 1,56 3,13 3,13_ 12,5 12,5 25 25 100 25 12,5 25 25 50 25 1.56 <0,1 <0,1 0,39 0,39 1.56 __ 6,25 I_I__ 25 I _ 21

DK 164169 B

TABEL 1* (MIC i jig/ml) NXbrbindelse B CH,- ClCHp-

X\(lk) mT μ JT

X CS-1170 Ϊ J ff il

x. (kontrol) R2 -S/XN'/N

X · 1 X ch3 ch3

Bakterie \. A CpH^- ^2^5" E. coli NIHJ 0,39 έΟ,Ι é:0,l

Kl. pneumonieae Y-50 0,39 0,39 0,2

Ser, marcescens W-35 100 25 12,5

Ser, marcescens IID620 3»13 ' 0,78 0,39

Pro-.- morganii T-216 12,5 6,25 6,25

Aci. calcoaceticus A-6 50 50 50 E. coli TK-g Tpenicillinaseproduce- rende baterie) 1,56 0,2 0,39

Kl. pneumoniae Y-4

Tpenicillinaseproduce- 1,56 1,56 1,56 rende bakterie

Klebsiella spp. Y-72 12,5 6,25 6,25

Pro, vulgaris GN-76 (cephalo sporinasepro- 3,13 3»13 1,56 ducerende bakterie)

Ser. marcescens W-8 (cephalosporinasepro- ^200 200 50 ducerende bakterie)

Ent. cloacae IID977 ^200 200 100 E, coli GN-5482 (cephalosporinasepro- 50 25 12,5 ducerende bakterie) 22

DK 164169 B

TABEL 1* (fortsat) (S) (S) (S) (S) CH3CH- CH3CH- ch3ch- ch^h-

Ah Ah Ah oh

N-N N-N N-N

-S^N^ -S^N*^ -S^S^ -OCOCH3

0H3 0H2CH20H

' C2H5- C2H5- «0,1 60,1 «0,1 0,2 «6,25 6,25 6,25 50 0,2 0,2 0,2 1,56 1,56 5,13 3,13__12^5_ 12,5 50 50 50 ' «0,1 0,2 0,39 0,39 0,39 0,39 0,78 0,78 0,39 0,78 1,56 12,5 1.,56 1,56 3,13 3,15 50 50 100 200 50 50 100 200 6,25 6,25 12,5 12,5 23

DK 164169 B

TABEL 1» (fortsat) (S) (R) CH3CH- hoch2- ch^ch-

OH OH

N-N N-N N-N

./tn -s -M

ch3 CH3 Ch3 n-C^- C2H5- C2H5- #0,1 0,2 § 0,1 0,2 0,39 0,2 6,25 25 6,25 0,39 1,56 0,78 3.13 12,5 3,13 25 50 12,5 é 0,1 0,78 0,39 0,78 0,78 3.13 6,25 0,78 3.13 3,13 6,25 12,5 200 100 50 50 50 3.13 25 24

DK 164169 B

TABEL 1» (fortsat) (S) (S) CH^CH- CH^H-

6ch3 OCHO

N - N N - N

-sV Jr* ch3 ch3

c2h5-__caV

é 0,1 0,2 0,2 <0,1 3.13 3,13 0,39 é 0,1 12,5 1,56 50 50 é 0,1 0,1 0,78 0,39 0,78 1,56 3.13 1,56 25 25 25 25 6,25 6,25

DK 164169 B

25 (IB) Antibakterielle aktiviteter af repræsentative 7a-me-thoxycephalosporiner med formlen (I) fremstillet ved 5 fremgangsmåden ifølge opfindelsen og sammenligningsforbindelsen (T-1551) angivet i DE offentliggørelsesskrift nr. 2 600 880 er anført i Tabel 1 og 2.

0 0 OCHo io y—^ ; ch3ch2-n n-conh-ch-conh--^ (1) W b CH2r2

C00H

15

Tallene anført i Tabel 1 og 2 repræsenterer den minimale inhiberende koncentration (MIC i ug/ml) af hver forbindelse, bestemt ifølge den metode, der er 20 25 30 1

DK 164169 B

_ 26

J 04 OT CO LO CO lo CO CO

, CO —h CO 04 —‘ lO CJ «— Γ- , ^ ,«-« o o O CO CO 04 CO CO o to

; ti- vil ~ M

C !evj 05 oo co in co eo co dj,« — eocjt—ioej—· c— c— “!— o o d o — co co o o io ^ i i vil 04 Q) E—· Vl* -3 ------------ C ! CO 05 CO CO LO OO CO 05 •H ,K) — oo (NI c— LO 04 — c— 00 n i i ''i* ···«··· · · TTli—«OOOO^COCO o o o g*:^. vii I ........ I - — — . . i , ----------- —----- I i . I III Il I — i

Qj i C— 05 00 CO 00 .05 03 O') i CO *—« CO 04 *—* »—» ΙΛ *—* ·—» O'· —ιι*^ ······· ·

ni*-* o O O CO CO OO CO CO O LO

®\t- VII

*H * t—— — ' — ......—·' " ———.....

! —i CO OT CO CO CO

C i CO C*» CO ·—» LO **h ·—« LO

ni i CO · · * · · jr!«— o o o co cvj lo o co — o I§ ·**. vii . - n vii lo S i-----------

CO !<J} CO CO CO CO CO CO OT

CT»,LO ·—« LO C*- C“— LO to LO LO CO

c ,co ......

&!*!- vil - Ξ g,----------- co co co co co co co co ί-i , LO —I LO t" C— LO ΙΛ LO LO t— l4_|.jCO .......

11 — O '—»O O —> OJ — — o o £ «o.'i vu Ξ X. (D||-----------

co «<3 LO CO CO

-> .Jo —· C— N — N U3 N — r~~ \ 4J’|C^- *······ · ·

fliijr-i O O O CO CO 04 O co O O

VII

** |“l i ---- -. -. . .

H y *rJ:J OT OT CO LO OT CO CO

LJ -P.JoO —« CO CVJ —i 04 CO LO

lJ 2 CQ.fCO · · · · ·

M e O O O CO CO LO O *-» O O

§ §.;,l vii «* *° < n L_-----------

^ ico CO CO LO 05 CO OO

J CO — t>» CCI — <M LO CO — Γ- M ,CO ......

m J— ooocoeoe^o co o o S Li w pH j --- ------ *. — _____ - -- ----- — - -

! —* OT CO CO CO CO CO CO

Ό CO ^ CO ^ ΙΟ lO C- *-« O-

C

._j , «-t o . O CO —< «— LO o «o o o A\l· VU : w Ξ Μ I_ I M ------ , ---- .. M - - . ... —_

P ίχρ OT co CO CO CO CO

—« CO O- LO tO LO —« LO

O O O —« —< 04 CO ^ O LO

i i vi ~ N

.... , -=s= , .— , ;'Γ~Γ·ί·.·; ---' - - - ===== ι'ίΐ, .i;

7> OT CO CO

·-* V —* CO C^· LO LO

LO H · · · ·

LO-yOOO—<OOLO 04 LO O

—i C ini O LO 00 — N O

I O »II — 00

(— W

__ ^ — « i Λ _ ·§ « 1/ -! i i ' ! £ / || I l

I o co g ^ S W

I co —< r ' η o »3 / o q ^ > _3 cc a æ n / ?ov “

I >- t- — O a>-&2:i I

/ « i — ViPjc3<awe) / α) c: o cq .la;1. co c co / <aa>—· a> a> <s <u co <a ω oj / >~3 — o — co o coco —co — c oe I <U ss c to — — « i as co c ·— co — /-pH — O 05 Λ — O trie OC Sjt. 1) C.

/ i. =s a o ej <u o f— — s— ω o o o ly, 3 C-. C O — — 3 — — Q. t. O.

Id) 05 O — 05 CO — — 05— 3C0 O 01

I Jj — C S3 B 03 O — —* C— > O BO

f O O. *f- O O CL O — — I tn . L-| ol - —I c . c o|jc -c I bi I Ξΰ| co| βΰ! -<1 bi|(£ ^1 cu cSJ| & wl & I w v o o I V_y

27 DK 164169 B

f CV3 LO OT CO CO CO

,CO Od Od Od CO — C- Od CO

]Ξ OCOOOCOO O O o I Ή ___________

®! Jo CO CT OTOT CO

»1 ]u5 CJ lo CO LO CO CO c— m|2 oo — dcod d d o

tQ l < LO —' CO

C ,'f- •H ____________

o O LO CO CO CO CO *-« CO

j—i cm cj oo t*- —> —< ^ QJ ! L d d d o co co wii o lo cr> · Ϊ— 11 • r-H I--------—- s! ^ [n CO CO LO y? J o ·—11 to co LO co LO co

ClTdcodddOT d d d s —----------

c ! CO to OT CO co CO

K I CO ·—' Cd OO CO LO C- —' CO

tO: 05······ · * tn -< o co o o — o o σ o c *L vil vil fO ; ___ ___ . ____________ ____„. .......... — C1! 03 OT OT to CO OT CD « S — od lo co co od —i co *a c- CU.co ****** * * cOC^OOCOCO o *-* ° ^1(1. ~ _______ Ό 1 1-1 (D ' _ S > !n ο co ot co co co

Cd \ I o co to co to to r- r~ o j ^ m !T dio-^dd’-· d d co £ \ i ,r - " 03 ,---------- *£ ! O OT CO CO lO tO Cg _ E~i * +J | c- co r- c- od co ej to o

h cl'-' o to d o d d d W

S %\L A> ,-...—— —----- —----

Jco to CO CO OT

, LO Od C*J *—1 Od lO ·—* —· CO

^!~dddddd d d o

S li Vil VI

r—l i «___ - - - - -- i .ni····· -·—— 111 ““mtmm <1> ! ot tO CO 00 Ό cd to ·—< cd cd —i —l n-

,j o cd d o d co d d LO

Jq — VII Vil V-l I.............. i — i il·· i" " ' - “ ' " '

Pi—, OO »CD LO LO

ϋ· I _ p- C- LO Cd Cd Cd

i ~ d o d d tg d d d O

[ I to Cd LO

i t-* __«. ___________

«—< 'o co co CO

lO ^ CO lO r— —* *—1 ^ ΐ o co od co o LO CJ Jg

-Lo ~ VII Ξ ~ N

Λ ~ i o I I 1 0) J CM t D d ro -p ml lo co co rn rn jo i.

d/ocoooco o —.0 ^ i Cl - P< ω ^ P· α· = S ^ 'w / fΛ -- (_η r t I ·W I -r* Φ 5 C / cicc co V U u Φ ί c Jc •h / g S S w — ω ω <a tn Q. — -h ni __ O O — — w cofQ+J ·— f0+ "bi®'

•H / t= w co t- c — i c ^ 5 G .V ^ 0 TI

" / o a> ω co co ·— «·Η(3 2 *"· G. EQtC

0,Λ, m o o ω to es t— r-l X) Er-cX P. VI <D

^ g I g = O S = o, I .71a £ 5 fe / ^ “ Ϊ-3Ϊ g . I = /ti -i fej 2| Z\ h . § u -η S i ο’Έ / I CO I tO I CL,| O-l < { tO|iliQJ ^ I 04 a ul U fe /03 ^ 0 ^ L u,

Ir jsJ__————---

28 DK 164169 B

μ ro -;---------- CO I I 09 09 ot CO oo !η,ΙΟΜ^-<Μ—«U5U5 —· C- h J I— o co o o oJ * o o o ° l ! L VII - VII 1/3 W 5 !*" :----------

^ 3 Si CO CO CO CO CO

P 05| ·“»«·—«—< LO tO —I CO

m i JU’’-' o co o o ~ ^ o o o S ti Ή; VII Vil Vil VII *° < P-! 3 ipi*- 64 £ 3 er----------- p i |N lo co coco ot co c· g gig co co r— —i —< —i co r- rl T5{| — O co* d d co co o o o - SI: - ™ ξ

O ffl jH

H ffi Ci________________ •S* τί JD.| CO LO CO CO CO OT co

g*p, COC'JCqCvJt'-^f- CO

B »{-* o co o o co o o o o

§ K L CO

^ Or t— I--1--------

DK 164169 B

29 T-1551 o. o y—\ * (D)

C2H5N Ni-CONH-CHCONH—r-YSv| _N

w fol

COOH I

OH CH^ T- 1 4 1 4

Ov O

och3 c2h5n n-conh -chco nh——lt kl sh o^t^ch2sAn,n COOH < CH3 T- 1 4 6 1 0X /0 ^ * (D) OCH3 c2h5n n-conh-chconh——rSv! v_/ L, L, λ s O NTVCH20C0CH3

^ COOH

T- 1 688

Ov y~^ *(D) 0CH3 c2h5n n-conh-chconh—I—rSxi

\ / I 1 N—N

sQ

C00H ch2-c=noh * i T - 1 6 8 9

DK 164169 B

30 * (D) 9CH3 s C2H5N N-CONH - C HCO NH t ζ Ί N-g N“ COOH ch2coch3 T-1701 °M° fHs s c2h5n n-conh-chconh-4—( ^ μ—y w «>] qZ-n^ch,5-*.^ ^ C°°H CH2CH2NH2 T - 1 6 5 8 °y~^ *(d> 9CH3 s

C2H5N N-CONH-CHCONH—j ( } N N

w -o^T^ch.s-Vn

N=1 COOH CH2CONHOH

T - 1 6 5 9 V_4^ .(D) ocn*s

C,H5N N-CONH-CHCONH—T—( "Ί N—N

W Λ o^_nT'ch2sAn,n

N“ C00H CH2C00H

T - 1 6 6 1

DK 164169 B

31 *(D) 9CH3 $

CjHjN n-COHH-CHCONH 1 f" ] K—» W 5¾ /CHs V=J COOH CH2CH2N\CH3 T- 1487 \__jZ5 *(D) 9ch3s c2h5n N-CONH-CHCONH-W } N—tf

v-/ g/H

\=J COOH CH=CHZ

T-\488 °·λ /ς .(D) 9c^3 5 C2H5N N-CONH-CHCONH—j ( } N—tf

W g/H 0>-N>^CHgS-^N,N

W COOH CH2CH20H

X - 1 4 8 2 °V_/) .(D) 9CH3 5 C,H5N N-CONH-CHCONH-f-( Ί N—tf

W S'h 0^NT"CH2sJ.rN

V=i COOH CH2CONH2 T- 1 4 6 2 32

DK 164169E

O, /0 ^^ * (D) och3 c2h5n n-conh-chconh—f— w <h

COOH

T- 1 7 1 t Οχ o y—^ *(D) ogh3 C2H5N N-CONH-CHCONH—!—r'5'']

\ / 1 i N—N

f) COOH 1 OH3 T-1719 °v /° /—{ * (DL) 0CH3 C2H5N N-CONH-CHCONH—j—

QJ= 0j_NY^CH2sArN

COOH -Hj T-1753 o, o * (DL) 0CH3 c2h5n n-conh-chconh—I—rSvi

\_/ ,_ 1 ^ H—N

sH (/-Nf’Vs-V

nh>n cooh ^

DK 164169 B

33 T-1770 O P /m OCH3 *(D) I ySs. 11

H 'Vconh-chconh-H' N—J

Cz5V_/ ch3 0^n^ch2s-Vn COOH cH3 γ I -- 1 0 29 O 0 0CH3

UU *<ϋί I ySv, M

CH5M N-røNH-CHCONH-j-lT J, JpJ

* V-/ ch2oh COOH CH3 T-1818 o o , 0CH3

Vj .(DU ;J,S

Γ H.N N-C0NH-CHC0NH-4--f Λ j jj

Ca5vJ V o^r^-V

COOH øH3 γ j - 1 0 26 O ,0 ,m 0CH3 \JI *iD) !,Sv ..

c h r^-CONH-CHCONH-+-f jt ^

CeH,7W (S), chch3 M C0°H CH3

DK 164169 B

34 T ] - 1 o 4 1 O. .0 *(D) OCH3 C4H0N N-CONH-CHCONH-4—r"SN!

\—/ i 1 . N N

(S> * chch3 o^Nf^CH2s-ILNi

OH COOH I

ch3 T i - 1 o 50

O, O

*(D) OCH3 c2h5n n-conh-chconh—1

(S) * CHCH3 0 NY^CH20C0CH3 OH COOH

Tr106 2

o O

/“\ * (D) OCH3 c2h5n n-conh-chconh——

\—/ i I N N

(S)*CHCH3.

OH COOH !

CH2CH2OH

T ! - 1 O 6 3 y~\ * (D) OCH3 C2H5N N-CONH-CHCONH—I—

\—/ i 1 J N N

(S).chch3 0>-Ny<CH2Sj^sJ OH COOH

35 DK 164169 T, - 1052 °^_/) * (0) 9CH3 g c2h5n n-conh-chconh j f" } N—8 ^ (R).GHCHj 0^NY^CH2sA.n,n m co°H ch3 Τ,-1115 °H° .(D, 9CHa g C2H5N N-CONH "CHCO NH T~~f } «J g V-/ ί5,.ΟΗθΟΗ00>-ΝγίνοΗ25Λ.Ν,Ν CH, C00H CH3 T i - t O 5 3 y#° »π» 9CH3s C2H5N N-CONH-CHCONH-+-f 'λ N—8

v-/ (S) »CHOCH3 cf N

k C00H CH, T-1982 y/ .«) 9cH3s C2HsN N-CONH-CHCONH-f-f 'l N—8 w (si*chch3 o^N'/'W-Vn OH COOH CH3

DK 164169 B

36 (2) Stabilitet over for β-lactamase.

Stabiliteten over for β-lactamase blev undersøgt ved iodometri ved 30°C ved Perret's metode [Perret, C. J., "Iodometric assay of penicillinase", Nature, 174, 1012 - 1013 (1954)], undtagen at 5 der anvendtes en 0,1 M phosphatpuf feropløsning (pH 7,0) i stedet for den angivne 0,2 M phosphatpuf fer opløsning (pH 6,5). Stabiliteten af hver forbindelse er vist i tabel 2 som en relativ hydrolysegrad, idet stabiliteten af cephaloridin (CER) over for cephalosporinase sættes til 100, og stabiliteten af penicillin 10 G (PC-G) over for penicillinase sættes til 100.

15 20 25 1 35

DK 164169 B

37

Szs-B

.....— - III I i . \ i—( ΚΛ s— o <r cm o σ\ ιλ 1 / Η H O O O O S=f ·> - ~ ·> » h o o o o o ca

i C\J

(Λ k B s ------ . g N O <1· Η <Τ CM t \\ g p£| fT\ CTi CM «Λ y- ^

0 H

g o _I

I g B § S S S °"i^o CO O Η Η H g I “ 7 Ijj

O CM CM O O O W

k ft Η Η H jg

O O

<H-------O

Φ Φ £r ηΓ ] > ta »Ή o cd ^ « 0? ^ !S.

-P Ή I 1^0 ί

Φ H CO ^ rH CS

-P H 00 m 5 S

•Η ·Η <J· CO Φ CO ·Η O

Η o m fi m co «ι h tc\ •H -H I ω I ’d 2 2 r3

cd φ O w Ε-» g 'rf, tS

+3 ft Φ 6 <30 HH

03 ·ΗΟ·Η33Φ ^ 1 Η k Η Φ k O Φ ΦίπΟ Cd O C φ ΊΞ* . Η Φ O B O PJ CO ^ >>

CM H-H 0) -P

mLj* · · · · Ό Q)

Φ ptj| W| Wl «I ft tQ

g iS_J__L__ t 3 < W CO ·° EH cd .o .,5 c φ £3 r? •η Φ ω W Λ

Sh -d cd o Μ o C β Φ ft CD ·Η φ · · w in u 3 ?>

O Φ O C -P

H O ft O

CO ^ CO H S

id o H

ft O Η -H

ω P co φ o ft x: *d

ft S

φ Φ O ft —-——I——-

38 DK 164169 B

(3) inhiberende dosis overfor β-lactamase.

Den inhiberende dosis (ID^q) af T-1414 overfor β-lactamase er anført i tabel 3» som prøvet ved Perret’s iodometriske metode un-5 der anvendelse af cefazolin som substrat.

TABEL 3 Inhiberende dosis overfor β-lactamase 10 Cephalosporinase- ID^Q (. ^ug/ml) producerende bakterie EL coli GN-5482 0,82 15 __ S. marcescens ¥-8 0,54 C. freundii GN-346 1,7 20 ____J_ (4) Infektions-beskyttende 'aktivitet.

Fire uger gamle hanmus af ICR stamme i grupper på hver fem mus 25 blev indpodet intraperitonealt med en fore skreven mængde af en patogenbakterie suspenderet i 5% mucin. En time efter indpodningen blev musene subcutant indgivet prøvepræparatet for at bestemme dennes infektionsbeskyttende aktivitet. De opnåede resultater var som anført i tabel 4. Tallene i tabel 4 repræsenterer 30 den beskyttende aktivitet som ED^q.

35

39 DK 164169 B

---j O

^ [>

Cl ^ s r—I H

cd ω i -P 3 D3 m 3 s o h o\ ,Q HO —---- 3 6 <r

tow H

w <i- OH <]- in i co a o ΐ s S “88 S--- « 3 ^ 8 3 3 3 " 5 4 ώ H o'

+> bO

t 5__.

10 0) o

6 H

w S

β C*

O H

•Η i 6 .p -p φ \ X φ η β φ xj β φ φ <H O Φ Td H CO vo

C ft -p bD H O O

H -d Λ G CD Η H

S S S-

·* _ HH

J -—--φ QJ

M flt & S cd cd

5} -P -P

^ Η -H

co *-n -P -P

•H CO 0) 0) co 3 β β OS in φ φ d o β β W β Η ·Η Η Η Φ Ή Ή Φ Η Μ jj jj W Η Ό Ό 3 φ m

β Ο - Ε S

PH w C\] O O

ω ω ____ β β Φ φ Ο t> <Τ

W HH

β Η -d; φ I Η

Ο W I

ω Ο Η Φ Ο Φ β 3d S cd β i e in ffi cd . ^ s p · li Φ m w| is pp 40

DK 164169 B

De ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede 7a-me-thoxycephalosporiner har lav toxicitet. F. Eks. viste T-1414 en LDj^q på 5 g/kg eller mere (mus af ICR-stamme, intravenøst).

5 7a-methoxycephalosporinerne med den almene formel (i) og saltene deraf indgives mennesker og dyr i form af fri syre eller farmaceutisk acceptabelt salt eller ester. Forbindelsen sammensættes i forskellige doseringsformer, som er sædvanlige for penicillin-eller cephalosprinpræparater, f. eks. kapsler, si-10 rupper og injektionsopløsninger, og indgives enten oralt eller parenteralt.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen belyses nærmere ved de efterfølgende eksempler, hvori alle procenter er beregnet på vægt, 15 med mindre andet er anført.

EKSEMPEL 1 (1) I en blanding af 20 ml vandfri chloroform og 5 ml vandfrit 20 tetrahydrofuran opløstes 0,80 g diphenylmethyl-7p-[D(-l)-a-(4-ethyl- 2,3-dioxo-l-piperazin-carboxamido ) - a- ( 2-thienyl) -acetamido ] - 3- [5- (1-methyl-l ,2,3,4-1 etraz ozyl) thi omethyl ]-A c ephem-4-carboxylat. Opløsningen blev afkølet til -70°C, og medens temperaturen holdtes ved -70°C tilsattes 3,5 ml af en methanolop-25 løsning af lithiummethoxid (1,425 mmol/ml). Til den resulterende blanding sattes efter tre minutters omrøring 0,18 ml tert.-bu-tylhypochlorit, og der omrørtes i 15 minutter ved den samme temperatur, hvorefter der tilsattes 0,29 ml eddikesyre og 0,1 ml triethylphosphit i denne rækkefølge. Derefter blev reaktions-30 systemet temperatur hævet til stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev hældt ud i 25 ml af en citratpufferopløsning (pH 7,0). Det organiske lag blev skilt fra og vasket med vand, tørret over magnesiumsulfat og befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk. Remanensen blev ren-35 set ved søjlechromatografi (stationær fase: silica gel, elu-

DK 164169B

41 eringsmiddel: en blanding af benzen og ethylacetat i volumen-forholdet 1:1), hvorved der blev opnået 0,50 g diphenylmethyl-7β- [D (-) -a- (4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamid)-α- (2-thienyl )-acetamido ]-7cc-methoxy-5- [5-(1-methyl-l,2,3» 4-tetrazolyl)-5 thiomethvl 1- /V-cephem-4.carbxylat, udbytte 60,2%.

i IR (KBr) cm"1: ^0=0 1775, 1705, 1675 NMR (CDCl^) cT værdier: 1,09 (3H, t, -CH^), 3,20 - 3,65 (6H, m x 3), 1 3,46 (3H, s, -CH3), 3,65 - 4,65 (2H, m, /CH2), 3,75 (3H, s, -CH3), 4,31 (2H, ABq ^0¾), 4,97 (IH, s, ^CH), 5,88 (IH, d, /CH), 6,80 -

^rH

7,47 (14H, -C6H5 x 2, S , \CH), 8,12 (IH, s, >NH), 9,72 (IH, d, ^MH). 1 2 3 4 5 6 35 (2) I 2,0 ml anisol opløstes 0,3 g diphenylmethyl-7p-[D(-)-a-(4-ethyl- 2 2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido) -a- (2-thienyl) -acetamido ]-7a- 3 methoxy- 3- [5- (1-methyl-l ,2,3,4-1 etraz olyl) thi omethyl ] - /\^~ 4 cephem-4-carboxylat. Til denne opløsning sattes under isafkø 5 ling 2,0 ml tr if luor eddike syre, og blandingen blev omrørt i 30 6 minutter ved den samme temperatur. Efter fuldførelse af reaktionen blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation ved formindsket tryk. Til remanensen sattes 5 ml ethylacetat og 5 ml vand, og opløsningen pH-værdi blev indstillet til 7,0 med en vandig natriumhydrogencarbonatopløsning. Det vandige lag blev 3Q skilt fra og blandet med 10 ml methylacetat, hvorefter blandingens pH-værdi blev indstillet til 2,0 med 2N saltsyre. Det organiske lag blev skilt fra, vasket med vand, tørret over magnesiumsulfat og befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk. Remanensen blev vasket med diethylether, , λ DK 164169 Β 42 hvorved der blev opnået 0,20 g hvid 7p-[D(-)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-a-(2-thienyl)-acetamido]-7a-metho-xy-3- [5- (1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]- /\?-cephem- 4-carboxylsyre, udbytte 83,3%.

5 IR (KBr) cm”1:/C=0 1770, 1705, 1695, 1675 NMR (DMSO-dg) £ værdier: 1,12 (3H, t, -CH3), 3,20 - 3,70 (6H, m, >CH2 x 3), 3,46 (3H, s, -CH3), 3,70 - 4,35 (4H, m, /0¾ x 2), 10 3,95 (3H, s, -CH3), 5,03 (IH, s, ^CH), 5,80 (IH, d, ^CH), 6,95 - 7,30 (2H, m,

H

)=/ 15 S ), 7,40 - 7,55 (IH, m, ), 9,70 - 9,90 (2H, m, /NH x 2).

20 På lignende måde fremstilledes de følgende forbindelser: 7β-[ϋ(-)-α-(4-ethyl-2,3-di oxo-1-piperazincarboxamido)-a-(2-thienyl )acetamido ]-7a-methoxy-3- [5-(l-carboxymethyl-1,2,3,4-tetra-zolyl)thiomethvl1-/\^-cenhem-4-carboxvlsvre, smp. 160°C. (dekomp.)· 25 IR (KBr) cm-1: γθ=0 1770, 1705, 1670 NMR (DMSO - dg) værdier: 1,09 (3H, t, -CH3), 3,11 - 3,72 (6H, m, >CH2 x 3), 3,41 (3H, s, -CH3), 3,76 - 4,60 (4H, m, >CH2 x 2), 30 5,04 (IH, s, ->CH), 5,26 (2H, s, >CH2), 5,90 (IH, d, ->CH), 6,92 - 7,26 (2H, m, \-/H ru Q ), 7,39 - 7,50 (IH, m, ''''S J H ), 9,68 - 1 9,79 (2H, m, ^;MH x 2).

43

DK 164169 B

7β- [D(-)-oc- (4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-a- (2thi-enyl)-acetamido ] -7a-methoxy- 3-acet oxyme thyl -/\ ^-cephem-4-car-boxylsyre, smp. 150° - 165° C. (dekomp.) IR (KBr) cm"1 : / C=0 1775, 1720, 1705, 1675 5 MR (DMSO - dg) ίværdier: 1,07 (3H, t, -CH3), 2,00 (3H, s, -CH^), 3,19 - 3,72 (6H, m, >CH2 x 3), 3,42 (3H, s, -CH3), 3,74 - 4,12 (2H, m, >CH2), 4,75 (2H, ABq, >CH2), 5,10 (IH, s, >CH), 5,89 (IH, d, ->CH), 6,89 - 7,22 10 H rj v Jl _ (2H, »JCT ), 7,40 - 7,51 (IH, m,-CsJ-H ), 9,65 (IH,d, >NH), 9,81 (IH, s, >NH).

15 EKSEMPEL 2 35 15 ml vand suspenderedes 1 g af den i eksempel 1 fremstillede 7β- [D(-)-a- (4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-a- (2-20 thienyl)-acetamido ]-7a-methoxy-3-acetoxymethyl- Λ ^-cephem-4-carboxylsyre og 0,34 g 5-mercapto-l-carbamoylraethyl-l,2,3,4-tetrazol. Til suspensionen sattes 0,28 g natriumhydrogencarbo-nat under omrøring. Den resulterende opløsning fik lov at reagere ved 55 - 60° C i 20 timer, medens reaktions systemets pH-25 værdi blev indstillet til 6,0 - 6,3. Efter fuldførelse af reaktionen sattes 20 ml methylacetat til reaktionsblandingen, og opløsningens pH-værdi blev indstillet til 2 ved dråbevis tilsætning 2Nsaltsyre. Methylacetatlaget blev skilt fra, og det vandige lag blev extraheret tre gange med 15 ml portioner me-30 thylacetat. De organiske lag blev kombineret, tørret over vandfrit magnesiumsulfut og inddampet til tørhed. Remanensen blev opløst i 20 ml acetone. Der sattes dråbevis diphenyldiazomethan til den resulterende opløsning under omrøring, indtil farven forblev. Opløsningen blev befriet for opløsningsmidlet ved de-

DK 164169 B

44 stillation under formindsket tryk, og remanensen blev renset ved søjlechromatografi (stationær fase: silica gel, eluerings-middel: en blanding af benzen og ethylacetat i volumenforholdet 1: 3) til opnåelse af diphenylmethyl-7P-[D(-)-a-(4-ethyl-2,3-5 dioxo-l-piperazincarboxamido)-a- (2-thienyl) -acetamido ]-7a-me- thoxy-3- [5- (l-carbamoylmethyl-1,2,3,4-tetrazolyl) thiomethyl-//N^-cephem-4-carboxylat i form et svagt gult pulver. Til denne forbindelse sattes under isafkøling 3 ml anisol og 3 ml tri-fluoreddikesyre. Blandingen fik lov at reagere i 60 minutter 10 under isafkøling. Efter fuldførelse af reaktionen blev reaktionsblandingen befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk. Til remanensen sattes 10 ml ethylacetat, og de udfældede krystaller blev opsamlet ved filtrering, hvorved der blev opnået 0,32 g 7P-[D(-)-a-(4-ethyl-2,3-<iioxo-l-pi-15 perazinocarboxamido)-a- ( 2-thienyl) -acetamido ]-7a-methoxy- 3- [5- (l-carbamoylmethyl-1,2,3,4-tetrazolyl )thiomethyl]-/\^-cephem- 4-carboxyl syre, smp. 145 - 150°C. (dekomp.), udbytte 27,6%.

IR (KBr) cm”1: /c=0 1775, 1670 - 1720 NMR (DMSO - dg) værdier: 20 1,10 (3H, t, -CH3), 3,20 - 4,10 (8H, m, x 4), 3,44 (3H, s, CH30— ), 4,34 (2H, ABq, >CH2), 5,10 (2H, s, >CH2), 5,19 (IH, s, >CH), 5,95 (IH, d, 25 -/CH), 6,91 - 7,88 (5H, m, H I I} , -C0MH2), 9,70 (IH, d,>HH), 9,85 (IH, d, 30 >NH).

På lignende måde fremstilledes de følgende forbindelser: 35 45

DK 164169 B

7β_ [d(- )-α- (4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido )-oc- (2-thi-enyl)-acetamido]-7a-methoxy-3-{5-[l-(2-hydroxyethyl)-l, 2,3,4-tetraznl.ylHhiomethvl 1-A^-cephem-4-carboxylsyre, smp. 125 -130° C. (dekomp.).

5 IR (KBr) cm"·1 : /c=0 1770, 1720 - 1670 MR (DMSO - dg) $ værdier: 1,12 (3H, t, -CH3), 3,20 - 4,50 (14H, m, x 7), 3.40 (3H, s, CH30-), 5,00 (IH, s, >CH), 5,85 (IH, d, CH), 6,85 - 7,60 (3H, m,

10 H ^H

hT~T )» 9,70 (IH, d, ^>NH), 9,85 (IH, s, >NH) 7β_ [D( -)-a- (4-ethyl- 2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido) -a- (2thie-15 nyl) -acetamido ]-7a-methoxy-3- C 3- (6-hydroxy-pyridazinyl) thio- methylj-Δ ^-cephem-4-carboxylsyre, smp. 155 - 160° C. (dekomp.).

IR (KBr) cm”1:/ C=0 1765, 1700, 1665 NMR (DMSO - dg) $ værdier: 2Q 1,10 (3H, t, -CH3), 3,20 - 4,30 (10H, m, >CH£ x 5), 3.41 (3H, s, CHjO-), 5,02 (IH, s, ->CH), 5,85 (IH, d,^CH), 6,70 - 7,50 (5H, m, 5,70 (1H> d> ^NH)> 5,85 (IH, s,>nh) 25 7β-[D(- )-α- (4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-a- (2-thienyl)-acetamido ]-7a-methoxy -3- [5- (2-methyl-l ,2,3,4-tetra- zolyl)thiomethyl]-/\p~cephem-4-carboxylsyre, smp. 165 - 174°C. (dekomp.).

IR (KBr) cm”1 :'/c=0 1770, 1710, 1670 NMR (DMSO - dg)^ værdier: 35

DK 164169 B

46 1,07 (3H, t, -CH3), 3,20 - 3,76 (6H, m, x 3), 3,41 (3H, s, CH30-), 3,76 - 4,20 (4H, m,>CH2 x 2), 4,39 (3H, s,>N-CH3), 5,04 (IH, s,-^CH), 5,90 (IH, d,-*CH), 6,89 - 7,25 (2H, m, ^ΓΤΗ ), 7,35 - 7,48 (IH, m, JT^l^ ), 9,60 - 9,77 (2H, m, >NH x 2).

7β-[ϋ(-)-α-( 4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido) - a- ( 2-thienyl) -^ 0 acetamido ] -7oc-methoxy- 3- [5- (1,3,4-thiadiazolyl) thiomethyl ]-4 ^-cephem- 4-carboxylsyre, smp. 160-175°C (dekomp.).

IR Ckbp) om’1: ^ C=0 ^ Wi NMR (DMSO - dg) <£ værdier: 15 1,09 (3H, t, -CH3), 3,21 - 3,75 (6H, m,^CH2 x 3), 3,43 (3H, s, CH30-), 3,75 - 4,10 (2H, m,->CH2), 4,40 (2H, ABq, >CH2), 5,14 (IH, s, ->CH), 5,94 (IH, d, -»CH), 6,91 - 7,39 (2H, m, ), 7,40 - 7,53 (IH, m, JCpLH ), 9,53 (IH, S, JT.H ) 20 9,65 - 9,84 (2H, m, >MH x 2) 7β- [D(- )-α- (4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido )-a- (2-thienyl)-acetamido ]-7a-methoxy-3- [5-(1-vinyl-l,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl ]-/V-cephem-4-carboxylsyre , smp. 150 - 153° C. (dekomp.) IR (KBr) cm”1:YC=0 1770, 1710, 1700, 1665 NMR (DMSO - dg) værdier: 1,10 (3H, t, -CH3), 3,20 - 3,70 (6H, m >CH2 x 3), 3,43 (3H, s, -CH3), 3,80 - 4,55 (4H, m, /0¾ x 2), 5,10 (IH, s, 5>CH) 5,46 (IH, df =CH-), 5,83 (IH, d, =CH-), 5,94 (IH, d, ^CH), 6,90- 30 7,52 (4H, m, , =CH-), 9,70 (IH, d, >NH), 9,86

Η H

(IH, s, >NH).

»X£ 35

DK 164169B

47 7β - [D (-) - a- (4- ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido) - α- (2-thienyl ) -acetamido ]-7a-methoxy-3-{5- [l- (2-hydroxy- iminopropyl) - 1,2,3,4-tetrazolyl]thiomethyl}-/V-cephem-4-carboxylsyre, smp.

165 - 172°C. (dekomp.) 5 IR (KBr) cm-1: / C=0 1775, 1705, 1675 NMR (DMSO - dg) værdier: 1.09 (3H, t, -CH3), 1,58 (1,7H, s, -01¾). 1,76 (l,3H, s, -CH3), 3,18 - 3,69 (6H, m, >CH2 x 3), 3,49 (3H, s, -(2¾), 3,77 - 4,20 (4H, m, >CH2 x 2), 5,05 (3H, m, ^CH, >CH2), 10 8,57 (1H, d,

Η H

pCH), 6,85 - 7,25 (2H, m| jj ), 7,40 - 7,44 (lH,m, —S3 15 O n ), 9,60 (1H, d, >NH), 9,65 (1H, s, ^>NH).

7β- [D(-)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-a-(2-thienyl)-acetamido]-7a-methoxy-3-[5-(l-acetylmethyl-l, 2,3,4-tetrazolvlHhiomethvl 1-/V-cephem-4-carboxylsyre, smp. 164 -20 175° C. (dekomp.).

IR (KBr) cm"1:Y'c=0 1775, 1720, 1705, 1675 NMR (DMSO - dg) J værdier: 1.10 (3H, t, -CH3), 2,27 (3H, s, -CH3), 3,10 - 3,70 (6H, 25 m, CH2 x 3), 3,43 (3H, s, -01¾), 3,75 - 4,20 (4H, m, ^>CH2 x 2), 4,40 (2H, s, ^>CH2), 5,00 ( 1H, s, -^CH), 5,45 w (1H, d,-5>CH), 6,95 - 7,32 (2H, m, A*/ ), 7,40 - 7,47 (1H, m, 30

JyL H ), 9,45 - 9,67 (2H, m, ^NH x 2).

7β-[ϋ(-)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-a-(2-35 thienyl)-acetamido ]-7a-methoxy-3-{5-[l-(hydroxy aminocarbonyl-methyl )-1,2,3,4-tetrazolyl Jthiomethyl }-/\ cephem-4-carboxylsyre, smp. 160 - 170°C. (dekomp.) 48

DK 164169 B

IR (KBr) cm -1:/c*0 1770, 1710, 1700, 1665 NMR (DMSO - dg) værdier: 1,11 (3H, t, -CH3), 3,20 - 3,70 (6H, m, ^CH£ x 3) 3,40 (3H, s, -CH3), 3,80 - 4,65 (4H, m, >CH2 x 2), 5,07 (IH, s, ^CH), 5,28 (2H, s, >CH2), 5,90 (IH, d, ^CH), 6,90 -5 7,50 (3H, m, \—β ), 9.67 (IH, d, >NH), 9,81 (IH, s, H —'—S—*— >NH).

EKSEMPEL 3 10 I 10 ml af en vandig opløsning indeholdende0,27 g natriumhydro-gencarbonat opløstes 1 g 70-[D(-)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-pipe-razincarboxamido) -a- ( 2-thienyl)-acetamido]-7a-methoxy-3-ace-toxymethyl-/\^-cephem-4-carboxylsyre og 0,17 g 5-mercapto-15 1,2,3,4-tetrazol. Efter at opløsningen pH-værdi var blevet ind stillet til 6,4, fik opløsningen lov at reagere ved 60°C i 20 timer. Til reaktionsblandingen sattes 10 ml methylacetat og 5 ml ethylacetat. Efter at blandingens pH-værdi var indstillet til 2,2 med 2Nsaltsyre, blev det organiske lag vasket to gange 20 10 ml portioner vand, tørret over magnesiumsulfat og befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk. Remanensen blev renset ved søjlechromatografi (stationær fase: silica gel, elueringsmiddel: en blanding af benzen og acetylacetat i volumenforholdet 1:2), hvorved der blev opnået 0,39 g 25 7p-[D(-)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-a-(2-thienyl)-acetamido]-7a-methoxy-3-[5-(1,2,3,4-tetrazolyl)thio-methyl]-/\p~cephem-4-carboxylsyre, smp. 178 - 183°C. (dekomp.), udbytte 36,48%.

IR (KBr) cm"1: /C=0 1770, 1690, 1670 30 NMR (DMSO - dg) værdier: 1,08 (3H, t, -CH3), 3,18 - 3,70 (6H, m, > 0¾ x 3), 3,40 (3H, s, CH30-), 3,70 - 4,10 (4H, m, >CH2 x 2), 5,07 (IH, s, >CH), 5,89 (IH, d, ^CH), 6,87 - 7,20 (2H, m, V-/ ), 7,39 - 7,50 (IH, m, JCsXh ), 9,65 (IH, d, >NH) , 9,81 (IH, s, >NH).

35

DK 164169 B

49 På lignende måde fremstilledes de følgende forbindelser: 7β-[D( -)-a~(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-a- (2-thienyl) -acetamido ]-7oc-methoxy-3-[ 5-(1,2,3, -1 r iaz oly 1) thi ome -5 thyl]-/\^-cephem-4-carboxylsyre, smp. 178 - 190°C. (dekomp.) IR (KBr) cm“1:fc=0 1770, 1695, 1680 NMR (DMSO - dg) J' værdier: 1,10 (3H, t, -CH3) 3,20 - 3,70 (6H, m, >CH2 x 3), 3,40 (3H, s, CH,0-), 3,80 - 4,20 (4H, m, >CH~ x 2), 5,10 (IH, 10 \ J ' C- s, /CH), 5,91 (IH, d, -ΧΉ), 6,88 - 7,20 (2H, m, jfTl ). 7,37 - 7,50 (IH, m, JTjLH )> 7>90 S s 15 H \ (IH, s, \-N ), 9,58 - 9,74 (2H, m, ^NH x 2).

-U

20 EKSEMPEL 4 I 10 ml af en vandig opløsning indeholdende 0,27 g natriumhy-drogencarbonat opløstes 1 g 7P-[D(-)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-a-(2-thienyl)-acetamido ]-7a-methoxy-3-25 acetoxymethyl-/\^-cephem-4-carboxylsyre og 0,32 g natriumsalt 1-(2-dimethylaminoethyl)-5-niercapto-l,2,3,4-tetrazol. Medens pH-værdien holdtes ved 6,2 - 6,5, fik opløsningen lov at reagere ved 60°C i 16 timer. Reaktionsblandingen blev renset ved søjlechromatografi (stationær fase: 20 g "Amberlite^XAD-2"; 30 elueret med 100 ml vand og derpå med 100 ml med 50% opløsning af metanol). Eluatet blev inddampet til tørhed, hvorved der blev opnået 0,32 g natrium 7p-[D(-)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-a-(2-thienyl)-acetamido]-7a-methoxy-3-{ 5- [l- ( 2-dimethylaminoethyl )-1,2,3,4-t etrazolyl }thi omethyl 35 cephem-4-carboxylat i form af et hvidt pulver, smp. 166 - 175 C (dekomp,) udbytte 26,17%.

IR (KBr) cm_1:fc=0 1760, 1705, 1670, 1610 NMR (DMSO - d/-) S' værdier:

DK 164169B

50 1.10 (3H, t, -CH3), 2,20 (6H, m, -CH^ x 2), 2,68 (2H, t, >CH2), 3,20 - 3,70 (6H, m, >CH2 x 3), 3,40 (3H, s, CH30-), 3,72 - 4,30 (6H, m, >CH2 x 3), 5,05 (IH, s,^CH),

Η H

5,91 (IH, d,^CH), 6,90 - 7,30 (2H, m, J| f ), 5 7,40 - 7,51 (IH, m, ^ JTjL ), 9,6 - 9,75 (2H, m, >NH x 2).

S^H

10 På lignende måde fremstilledes de følgende forbindelser:

Natrium-7 β-[0(-)-<*-( 4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido )-oc-(2-thienyl) -acetamido ] -7a-me thoxy- 3-{ 5- [2- (2-dimethylaminoethyl) - 1,2,3,4-tetrazolyl jthiomethyl }-Δ cephem- 4- carboxylat, smp.

15 175 - 183°C (dekomp.) IR (KBr) cm"1: / 0=0 1760, 1705, 1670, 1615 NMR (DMS0 - dg) værdier: 1.11 (3H, t, -CH3), 2,24 (6H, m, -CH3 x 2), 2,83 (2H, t, ^CH2), 3,20 - 3,70 (6H, m, ^CH2 x 3), 3,42 (3H, s, 20 CH^O-), 3,70 - 4,20 (4H, m, x 2) 4,60 (2H, t, >CH2), 5,0 (IH, s, ;>CH), 5,92 (IH, d, >CH), 6,90 - 7,30 (2H, m,

Hs._ H

I! I) ), 7,37 - 7,48 (IH, m, |j Π „ )» 9,6 - 25 1—S— — 9,75 (2H, m, >NH x 2).

Natrium-7p- [D(-)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-30 a- (2-thienyl)-acetamido ]-7a-methoxy-3-i 5- [l- (2-aminoethyl)- 1,2,3,4-tetrazolyl ]thiomethylcephem-4-carboxylat, smp.

180 - 187° C. (dekomp.)„ IR (KBr) cm"1: / C=0 1765, 1705, 1670, 1600 NMR (DMSO - dg) £ værdier: 1,10 (3H, t, -CH3), 3,23 - 3,74 (6H, m, >CH2 x 3), 3,45 (3H, s, -CH3), 3,77 - 4,87 (6H, m, > 0¾ X 3), 4,81 (2H, t, >CH2), 5,07 (IH, s, ~ CH), 5,45 (IH, d, ^CH), 6,95 - 51 7,25 (2H, m, ^^ ), 7,40 - 7,52 (lH,m, j 9,61 - 9,80 (2H, m, NH x 2).

5 EKSEMPEL 5 (1) Til en isafkølet suspension 2,55 g DL-a-amino-2-furyleddike-syre i 35 ml methylenchlorid sattes 4,81 ml trimethylchlorsilan. Til den resulterende blanding sattes dråbevis 5,04 ml triethylamin 10 i løbet af 10 minutter ved 5 - 10°C. Reaktionen fik lov at . foregå ved 15 - 20°C i en time. Til reaktionsblandingen sattes i løbet af 15 minutter ved 5 - 10°C 7,01 g af en blanding af 4-ethyl-2,3-dioxo- 1-piperazincarbonylchlorid og triethylamin-hydrochlorid, indeholdende 58,02% af den førstnævnte forbindelse.

15 Reaktionen fik lov ar foregå ved 10 - 15° C i en time. Efter tilsætning af 20 ml vand blev reaktionsblandingen omrørt ved stuetemperatur i en time og derpå ved 5 - 7° C i 30 minutter.

De udfældede krystaller blev opsamlet ved filtrering, vasket med 5 ml ethylenchlorid og 5 ml vand i denne rækkefølge og 20 derpå tørret, hvorved der blev opnået 4,75 g DL-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-2-furyleddikesyre, smp. 179 -181° C (dekomp.), udbytte 85,6%.

IR (KBr) cm-1:C=0 1735, 1709, 1650 NMR (DMSO - dg) værdier: 25 s.

1,09 (3H, t, ~CH3), 3,18 - 3,71 (4H, m, ^CH2 x 2), 3,78 - 4,09 (2H, m, /CH2), 5,53 (IH, d, $CH), 6,44 (2H, m, )» 7,61 (IH, s,J[^X_H ), 9,69 30 (IH, d, >NH).

35

DK 164169 B

52 (2) I 15 ml vandfrit methylenchlorid suspenderedes 0,94 g DL-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-pierazincarboxamido)-2-furyleddikesyre. Til suspensionen sattes 0,35 ml N-methylmorpholin under isafkøling til dannelse af en homogen opløsning. Til opløsningen, afkølet 5 til -20°C, sattes dråbevis i løbet af 5 minutter en opløsning af 0,32 ml ethylchlorcarbonat i 2 ml vandfrit methylenchlorid. Blandingen blev omrørt ved -15°C i 60 minutter. Til blandingen, igen afkølet til -20°C, sattes dråbevis i løbet af 10 minutter en opløsning af 1,50 g diphenylmethyl-7-amino-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-10 tetrazolyl) thiomethyl ]-4^-cephem-4-carboxylat i 15 ml vandfrit methylenchlorid. Blandingen blev yderligere omrørt ved -10°C i 90 minutter. Efter at reaktionsblandingens temperatur var blevet hasvet til stuetemperatur, blev reaktionsblandingen hældt ud i 10 ml vand, og det organiske lag skilt fra og tilsat 10 ml frisk vand, 15 hvorefter blandingens pH-værdi blev indstillet til 6,5 med en vandig opløsning af natriumhydrogencarbonat. Det organiske lag blev skilt fra, vasket med 10 ml vand og 10 ml mættet natriumchloridopløsning i denne rækkefølge og tørret over magnesiumsulfat. Efter fjernelse af opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk blev 20 remanensen behandlet med diethylether til opnåelse af 2,0 g af et hvidt pulver. Ved tyndtlagschromatografi (udviklingsmiddel: en blanding af benzen og ethylacetat i volumenforholdet 1:3) fandtes det, at dette bestod af to komponenter (Rf: 0,28 og 0,24). Det hvide pulver blev underkastet søjlechromatografi (stationær fase: 25 silicagel, elueringsmiddel: en blanding af benzen og ethylacetat i volumenforholdet 2:1) for at isolere en komponent svarende til komponenten i den øvre zone ved tyndtlagschromatografien og en komponent svarende til komponenten i den nedre zone ved tyndtlagschromatografi, hvorved den isolerede mængde af de to komponenter 30 var ialt 1,1 g.

Komponenten i den øvre zone (antageligt diphenylmethyl-7-[D-oc-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-pierazincarboxamido)-a-(2-furyl)-acetamido]-3-[5-(1-methyl-l,2,3» 4-tetrazolyl)-thiomethyl]-4^-cephem-4-carboxylat), 35 smp. 128-138°C (dekomp.).

IR (KBr) cm”1: / C=0 1800, 1705, 1680 NMR (CDCl·^) S værdier: 53 1,11 (3H, t, -CH3), 3,30 - 4,30 (10H, m, :>CH2 x 5), 3,76 (3H, s, -CH3), 4,91 (1H, d, =>CH), 5,72 - 5,93 (2H, m, ^CH x 2), 6,25 (2H, m,

Vlf ^ 6,82 (1H’ s’ ^CH)’ 7,20 ” 7,53 5 (12H, m, -C6H5 x 2, JTj^NH), 9,80 (1H, d, >NH)

Komponenten i den nedre zone (antageligt diphenylmethyl-7-[L-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido ) - a- (2-furyl) -acetamido ] -3-[ 5- (1-methyl-l, 2,3,4-tetrazolyl) -thiomethyl ] -£?-cephem-4-carboxylat) ^ smp. 128 - 136°C (dekomp.)· IR (KBr) cm”1 C=0 1800, 1705, 1680 NMR (CDCl^) S værdier: 1,08 (3H, t, -CH^), 3,20 - 4,30 (10H, m, i>CH2 15 x 5), 3,86 (3H, s, -CH3), 5,00 (1H, d, ^CH), 5,61 - 5,98 (2H, m, CH x 2), 6,31 (2H, m,

Jy-j ), 6,83 (1H, s,>CH), 7,29 (11H, m, -C6H5 x 2,JHLh ), 7,94 (1H, d, ^>NH), 9,88 (1H, d, ->NH).

(3)· I en blanding af 14 ml vandfrit chloroform'og 3,5 ml vandfrit tetrahydrofuran opløstes 0,86 g af øvre-zone-komponenten i (2). Til opløsningen, afkølet til -75°C, sattes 1,97 ml af en op-25 løsning af lithiummethoxid (1,948 mmol/ml) i methanol, og den resulterende blanding blev omrørt i 3 minutter ved -75°C. Efter tilsætning af 0,20 ml tert.-butylhypochlorit blev blandingen omrørt ved mellem -70 og -65°C i 15 minutter. Efter tilsætning af 0,20 ml eddikesyre blev reaktionssystemets temperatur hævet til 30 stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk, og remanensen blev opløst i en blanding af 10 ml ethylacetat og 10 ml vand. Det organiske lag blev skilt fra og tilsat 10 ml vand, hvorefter blandingens pH-værdi blev indstillet til 2,5 med 2N saltsyre. Det orga-35 niske lag blev skilt fra, vasket to gange med 10 ml portioner mættet natriumchloridopløsning, tørret over magnesiumsulfat og befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk. Remanensen blev renset ved søjlechromatografi (stationær fase: 15 g silicagel, elueringsmiddel: en blanding af benzen og ethylacetat i volumenforholdet (2:1)), hvorved der blev opnået 0,30 g af et hvidt pulver.

DK 164169B

54

Det hvide pulver blev opløst i 3,0 ml anisol, og der sattes 3,0 g 5 trifluoreddikesyre til opløsningen under isafkøling. Den resulterende blanding blev omrørt i 30 minutter ved den samme temperatur. Efter fjernelse af opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk sattes 5 ml ethylacetat og 5 ml vand til remanensen, og derpå tilsattes mættet natriumhydrogencarbonatopløsning under . 10 omrøring til indstilling af blandingens pH-værdi til 6,5, hvorpå remanensen opløstes. Det vandige lag blev skilt fra og tilsat 10 ml methylacetat, hvorefter blandingens pH-værdi blev indstillet til 2,0 med 2N saltsyre, og det organiske lag blev skilt fra. Det vandige lag blev yderligere extraheret med 10 ml methylacetat, og ex-15 trakten blev kombineret med det ovenfor opnåede organiske lag. Det kombinerede organiske lag blev vasket to gange med 10 ml portioner mættet natriumchloridopløsning, tørret over magnesiumsulfat og befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk. Remanensen blev behandlet med diethylether, hvorved der 20 blev opnået 0,17 g 7β“[D-α-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarbox-amido)-a-(2-furyl)-acetamido]-7a-methoxy-3-[5-(1-nrethyl-l,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]-Δ^-cephem-4-carboxylsyre i form af et hvidt pulver, smp. 130 - 138°C (dekomp.), udbytte 70,8%.

25 IR (KBr)VJcm"1: C=0 1770, 1700, 1670 NMR (DMS0 - dg) S værdier: 1,07 (3H, t, -0¾), 3,28 - 4,01 (8H, m, ^0¾ x 4), 3,38 (3H, s, -CH3), 3,88 (3H, s, -0¾), 30 4,10 - 4,45 (2H, m, >CH2), 5,03 (IH, s, ^CH), 5,73 (IH, d,^CH), 6,39, (2H, m, ^ ), 7,54 (IH, bs, JT)lH) 9,51 - 9,70 35 (2H, m,>NH x 2) 55 På lignende måde fremstilledes de følgende forbindelser: 7β-[D-α-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-a-(2-fury1)-acetamido]-7a-methoxy-3- [5- (l-carbamoylmethyl-1,2,3» 4-tetrazolyl )-5 thiomethyl]cephem-4-carboxylsyre.

7β- [D-α- (4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido )-a-( 2-fury 1) -acetamido ]-7oc-methoxy-3- {5- [1- ( 2-hydroxyethyl )-1,2,3,4-tetrazolyl ] -thiomethyl} -A^-cephem-4-carboxylsyre.

10 73- [D-oc- (4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido) -a- (2-furyl) -acetamido ]-7a-methoxy-3- [ 5- (1-vinyl-l ,2,3,4-tetrazolyl) thiomethyl ]-A^-cephem-4-carboxylsyre.

. „ EKSEMPEL 6 ij (1) Til en suspension af 2,5 g D(-)-oc-amino-l,4-cyclohexadienyl-eddikesyre i 20 ml vand sattes dråbevis under isafkøling 2,3 ml triethylamin til dannelse af en opløsning. Til opløsningen ved 2Q 5-10°C sattes dråbevis 6,3 g 4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarbonyl-chlorid (58,02% renhed) i løbet af 30 minutter, medens pH-værdien blev indstillet til 6,5-8,0 med 2,5 ml triethylamin. Blandingen blev omrørt ved 10-15°C i yderligere 30 minutter. Reaktionsblandingen blev vasket med 20 ml ethylacetat, og der tilsattes 30 ml frisk ethylacetat, hvorpå blandingens pH-værdi blev indstillet til 2,2 med 6N saltsyre. Det organiske lag blev skilt fra, og det vandige lag blev yderligere extraheret med 15 ml ethylacetat. Ex-trakten blev kombineret med det ovennævnte organiske lag, vasket to gange med 20 ml portioner vand og derpå med 20 ml mættet vandig natriumchloridopløsning. Det vaskede organiske lag blev tørret over magnesiumsulfat og befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk, hvorved der blev opnået 4,2 g D( -) -oc- (4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido) -1,4-cyclohexa-dienyleddikesyre i form af et hvidt pulver, smp. 104 - 108°C, udbytte 80,0%.

35

DK 164169 B

56 IR (KBr) cm”1:V C=0 1705, 1670 NMR (DMSO-dg) 8 værdier: 5 1,10 (3H, t, -CHj), 2,61 (4H, mx 2), 3,18 - 3,69 (4H, m, >CH2 x 2), 3,70 - 4,13 (3H, m,>CH2,^CH), 4,56 (IH, d,>CH), 5,60 (2H, i,^CHx 2), 5,70 (IH, s,>CH), 9,49 (IH, d,>NH).

10 (2) Til en opløsning af 2,3 g D(-)-oc-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazin-carboxamido)-l,4-cyclohexadienyleddikesyre i 20 ml vandfrit methylen-chlorid sattes ved -20°C 0,79 ml N-methylmorpholin. Til blandingen sattes dråbevis 0,75 ml ethylchlorcarbonat i løbet af 5 minutter 15 ved mellem -20 og -15°C. Efter omrøring af blandingen i yderligere 60 minutter ved mellem -20 og -15°C tilsattes dråbevis i løbet af 15 minutter ved -20°C en opløsning af 3,0 g diphenylmethyl-7-amino- 3- [5- (1-methyl-l ,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]-A^-cephem-4-carboxylat i 30 ml vandfrit methylenchlorid. Blandingen blev omrørt i yder-20 ligere 120 minutter ved -10 °C. Reaktionsblandingen blev hældt ud i 50 ml vand, og det organiske lag blev skilt fra. Til det organiske lag sattes 30 ml vand, og blandingens pH-værdi blev indstillet til 7,0 med mættet vandig natriumhydrogencarbonåtopløsning. Derefter blev det organiske lag skilt fra, vasket med 30 ml vand og 25 30 ml mættet vandig natriumchloridopløsning i denne -rækkefølge, tørret over magnesiumsulfat og befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk. Til remanensen sattes 30 ml benzen, og de udfældede krystaller opsamledes ved filtrering, hvorved der blev opnået 3,9 g diphenylmethyl-7β-[D(-)-α-(4-ethyl-2,3-30 dioxo-l-piperazincarboxamido) -a- (1,4-cyclohexadienyl) -acetamido-3-[ 5- (1-methyl-l ,2,3,4-tetrazolyl) thiomethyl ]-^-cephem--4-carboxy-lat, smp. 151 - 155^0, udbytte 80,7%.

IR (KBr) cm”1: f* C=0 1770, 1700, 1665 35 NRM (CDC13) S værdier: 57 1,15 (3H, t, ~CHj), 2,52 (4H, in, ^CH2 x 2), 3,23 - 3,70 (6H, m,>CH2 x 3), 3,71 (3H, s, -CH3), 3,70 - 4,35 (4H, m, =-0¾ x 2), 4,92 - 5,28 (2H, m,^CH x 2), 5,57 (2H, m,^>CH x 2), 5 5,75 - 5,97 (2H, m,-^CH x 2), 6,78 (1H, s,->CH), 7,75 (11H, m, -C6H5 x 2,>NH), 9,57 (1H, d,>NH).

(3) I en blanding af 15 ml vandfrit chloroform og 4 ml vandfrit tetrahydrofuran opløstes 0,80 g άίρ1ιβ^1ιηβΐϊ^1-7β'-[0(-)-α-(4-βΐ1^1-10 2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-α-(1,4-cyclohexadienyl)-acetamido]- 3- [ 5- (1-methyl-l ,2,3,4-tetrazolyl) thiomethyl ] -^-cephem-4- carboxylat. Efter tilsætning af 1,0 g "molekylsi 3A" blev opløsningen afkølet til -70°C. Der tilsattes 1,8 ml af en opløsning af „lithiummethoxid (1,948 mmol/ml) i methanol, og blandingen blev omrørt i 3 minutter 15 ved -70°C. Derefter tilsattes på én gang 0,18 ml tert.-butylhypo-chlorit, og blandingen blev omrørt i 15 minutter ved mellem -70 og -65°C, hvorefter der tilsattes 0,2 ml eddikesyre, og blandingens temperatur blev hævet til stuetemperatur. Efter fjernelse af molekyl-sien ved filtrering blev reaktionsblandingen befriet for opløsnings-20 midlet ved destillation under formindsket tryk. Remanensen blev opløst ved tilsætning af 20 ml ethylacetat og 10 ml vand, og opløsningens pH-værdi blev indstillet til 6,5 med mættet vandig natrium-hydro gencarbonatopløsning. Det organiske lag blev skilt fra, og tilsat 10 ml vand, hvorefter blandingens pH-værdi belv indstillet 25 til 2,5 med 6N saltsyre. Det organiske lag blev igen skilt fra, vasket med 10 ml vand og 10 ml mættet vandig natriumchloridopløs-ning i denne rækkefølge og befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk. Remanensen blev renset ved søjle-chromatografi (stationær fase: silicagel, elueringsmiddel: en blan-30 ding af benzen og ethylacetat i volumenforholdet 2:1). Efter fjernelse af opløsningsmidlet fra eluatet ved destillation under formindsket tryk blev remanensen behandlet med diethylether, hvorved der blev opnået 0,5 g diphenylmethyl-7P-[D(-)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-a-(l,4-cyclohexadienyl)-acetamido]-35 7a-methoxy-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]-Zi^-cephem- 4-carboxylat i form af et hvidt pulver, udbytte 60,3%.

DK 164169B

58 IR (KBr) cm-1 :V C=0 1775, 1710, 1675 NMR (CDCl^) S værdier: 5 1,17 (3H, t, -CH3), 2,75 (4H, m,>CH2 x 2), 3,29 - 3,68 (6H, m,>*CH2 x 3), 3,47 (3H, s, -CH3), 3,77 (3H, s, -CH3), 3,80 - 4,89 (4H, m, ^CH2 x 2), 4,99 (IH, s,-^CH), 5,61 (2H, m, 10 >CHx 2), 5,95 (IH, S,-^CH), 6,87 (IH, s,^CH), 7,28 - 7,45 (11H, in, -C6H5 x 2,>NH), 955 (IH, d,r>NH).

(4) I 5 ml anisol apløstes 0,4 g diphenylmethyl-7P-[D(-)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-a- (1,4-cyclohexadienyl) -15 acetamido ]-7a-methoxy-3- [5-(l-methyl-l ,2,3,4-tetrazolyl) thiomethyl ]- & -cephem-4-carboxylat. Til opløsningen sattes 5 ml trifluoreddike-syre under isafkøling, og blandingen blev omrørt i 30 minutter ved den samme temperatur. Efter fjernelse af opløsningsmidlet fra reaktionsblandingen sattes 10 ml methylacetat og 10 ml vand til rema- 90 nensen, ogcblandingens pH-værdi blev indstillet til 6,5 ved tilsætning af mættet vandig natriumhydrogencarbonatopløsning under omrøring. Det vandige lag blev skilt fra og tilsat 5 ml methylacetat, hvorefter blandingens pH-værdi blev indstillet til 2,2 med 6N saltsyre, og blandingen fik lov at stå natten over i køle-25 skab. De udfældede krystaller blev opsamlet ved filtrering, vasket to gange med 5 ml portioner vand og derpå med 3 ml methylacetat og tørret, hvorved der blev opnået 0,2 g 7P-[D(-)-cc-(4-ethyl-2,3-dioxo- 1-piperazincarboxamido)-α-(1,4-cyclohexadienyl)-acetamido]-7a-methoxy-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]-4 ^-cephem-30 4-carboxylsyre, smp. 177 - 178°C (dekomp.), udbytte 62,7$.

IR (KBr) cm”1:"{C=0 1770, 1710, 1685 NMR (DMSO - d^) S værdier: 35 59 1,10 (3H, t, -0¾), 2,18 (4H, m, >CH2 x 2), 3,34 - 3,73 (6H, m,^CH2 x 3), 3,41 (3H, s, -(3¾), 3,79 - 4,37 (4H, m,>CH2 x 2), 3,93 (3H, s, -CH,), 4,97 (1H, d,-^CH), 5,06 (1H, 5 ^ s,-^CH), 5,61 (2H, m,^CH x 2), 5,87 (1H, s, -X3H), 9,38 (1H, d,>NH), 9,53 (1H, s,:>NH).

På lignende måde fremstilledes de følgende forbindelser: 10 7β- [D(-)-a-(4-ethyl~2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido )-a-(l, 4-cyclohexadienyl)-acetamido]-7a-methoxy-3-acetoxymethyl- Δ5-cephem-4-carboxylsyre.

15 7β-[D(-)-oc-( 4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-a- (1,4- cyclohexadienyl) -acetamido ]-7a-methoxy-3- [2- (5-methyl-l ,3,4-thiadiazolyl) thiomethyl ] - A^-cephem-4-carboxvlsvre.

EKSEMPEL 7 20 (1) I 15 ml vandfrit methylenchlorid opløstes 2,0 g a-(4-ethyl- 2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido) -a- (2-trichlorethoxycarbonyl-amino-4-thiazolyl)-eddikesyre. Til opløsningen sattes ved -20°C 0,43 ml N-methylmorpholin. Til den resulterende blanding sattes 25 dråbevis i løbet af 5 minutter en opløsning af 0,41 ml ethylchlor-earbonat i 2 ml methylenchlorid, medens temperaturen holdtes mellem -20 og -25 °C. Reaktionen fik lov at foregå i 1,5 timer ved den samme temperatur. Til reaktionsblandingen sattes dråbevis ved mellem -15 og -20°C i løbet af 15 minutter en opløsning af 2,0 g 30 diphenylmethyl-7-amino-3- [ 5- (1-methyl-l ,2,3,4-te trazolyl) thiome thyl ]-2^-cephem-4-carboxylat i 30 ml vandfrit methylenchlorid. Reaktionen fik lov at foregå i 2 timer ved mellem -10 og -15 °C. Efter at reaktionsblandingens temperatur var hævet til stuetemperatur, blev reaktionsblandingen hældt ud i 30 ml vand, og blan- 35 60

DK 164169 B

dingens pH-værdi indstillet til 6,5 med mættet vandig natrium-hydrogencarbonatopløsning. Det organiske lag blev skilt fra og tilsat 50 ml frisk vand, hvorefter blandingens pH-værdi blev indstillet til 2,0 med 6N saltsyre. Det organiske lag blev skilt fra, 5 vasket med 30 ml vand og 30 ml mættet vandig natriumchloridop-løsning i den rækkefølge, tørret over magnesiumsulfat og befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk, hvorved der blev opnået 3,3 g hvidt skum som remanens. Ved tyndt-lagschromatografi (udviklingsmiddel: en blanding af benzen og 10 ethylacetat i volumenforholdet 1:3) fandtes det, at remanensen bestod af to komponenter. Det hvide skum blev underkastet søjle-chromatografi (stationær fase: silicagel, elueringsmiddel: en blanding af benzen og ethylacetat i volumenforholdet 3:2) til opnåelse af 1,3 g af et hvidt pulver med smp. 166-179°C (dekomp.), 15 som svarede til øvre-zone-komponenten ved tyndtlagschromatografien, og 1,4 g hvidt pulver med smp. 180-190°C (dekomp.), som svarede til nedre-zone-komponenten ved tyndtlagschromatografien.

Komponenten i den øvre zone: antageligt diphenylmethyl-7-[D-a-20 (2-trichlorethoxycarbonylamino-4-thiazolyl)-a-(4-ethyl-2,3- dioxo-l-piperazincarboxamido) -acetamido) -3- [ 5- (1-methyl-l ,2,3,4-tetrazolyl) thiomethyl ]- A^-cephem-4-carboxylat.

IR (KBr) cm"1: ^ C=0 1780, 1710, 1685 25 NMR (CDCl^) S værdier: 1,12 (3H, t, -CH3), 2,90 - 3,87 (8H, m, >CH2 x 4), 3,47 (3H, s, >N-CH3), 4,12, 4,20 (2H, ABq, >CH2), 4,24, 4,90 (2H, ABq, >CH2), 5,04 (IH, d, >CH), 5,56 (IH, d, ^CH), 5,98 (IH, d, 30 d, ^CH), 6,76 (IH, s, ^CH), 6,89 (IH, s, $>CH), 7,26 (11H, m, -C6H5 x 2, >NH), 8,62 (IH, bs, >NH), 9,70 (IH, d, >NH).

35 61

Komponenten i den nedre zone: antageligt diphenylmethyl-7-[L-a-(2-trichlorethoxycarbonylamino-4-thiazolyl) -a- (4-ethyl-2,3-dioxo- 1-piperazincarboxamido) -acetamido ]-3- [5- (1-methyl-l ,2,3,4-tetra-zolyl)thiomethyl]-Δ^-cephem-4-carboxylat.

5 IR (KBr) cm"1: /c=0 1780, 1710, 1685 NMR (CDC13) S værdier: 1,05 (3H, t, -CH3), 3,12 - 4,10 (8H, m, >CH2 x 4), 3,81 (3H, s, -CH3), 4,16, 4,23 (2H, ABq, >CH2), 4,84 (2H, bs, >CH2), 4,97 10 (IH, d, >CH), 5,67 (IH, d, d, >CH), 6,12 (IH, d, >CH), 6,75 (IH, s, >CH), 6,84 (IH, s, >CH), 7,23 (10H, s, -CgH5 x 2), 7,90 - 8,30 (2H, m, >NH x 2), 9,79 (IH, d, >NH).

(2) I en blanding af 15 ml vandfrit chloroform og 5 ml vandfrit 15 ' tetrahydrofuran opløstes 1,2 g af øvre-zone-komponenten fra (1). Til denne opløsning sattes ved -75°C 2,17 ml af en opløsning af lithiummethoxid (1,948 mmol/ml) i methanol, og den resulterende blanding blev omrørt ved -75°C i 3 minutter. Til blandingen sattes ved -75°C 0,22 ml tert-butylhypochlorit på én gang, og den resul-2Q terende blanding blev omrørt i 15 minttter ved -75°C. Efter til sætning af en opløsning af 0,2 ml eddikesyre i 2 ml chloroform blev reaktionssystemets temperatur hævet til stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk, og remanensen blev opløst __ ved tilsætning af 20 ml ethylacetat og 20 ml vand og indstil- 25 ling af blandingens pH-værdi til 6,5 med mættet vandig natri-umhydrogencarbonatopløsning. Det organiske lag blev skilt fra og tilsat 20 ml vand, hvorefter blandingens pH-værdi blev indstillet til 2,0 med 2N saltsyre. Det organiske lag blev igen skilt fra, vasket med 10 ml vand og 10 ml mættet natriumchloridopløs-ning i denne rækkefølge, tørret over magnesiumsulfat og befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk. Remanensen blev renset ved søjlechromatografi (stationær fase: silicagel, elueringsmiddel: en blanding af benzen og ethylacetat i volumenforholdet 3:2), hvorved der blev opnået 0,45 g diphenyl-35

DK 164169 B

62 methyl-7p- [D-α- ( 2-trichlorethoxycarbonylamino-4-thiazolyl) -a-( 4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido) -acetamido ]-7a-methoxy- 3- [ 5- (1-methyl-l,2,3, 4-tetrazolyl) thiomethyl ] - ephem-4- carboxylat i form af et hvidt pulver, smp. 155-177°C (dekomp.), 5 udbytte 36 ,4%.

IR (KBr) cm-1: VC=0 1785, 1710, 1685 MR (CDCl^) cf værdier: 10 1,10 (3H, t, -CH3), 3,20 - 4,30 (10H, m, >CH2 x 5), 3,41 (3H, s, -CH3), 3,73 (3H, s, -CHj), 4,73, 4,79 (2H, ÅBq, >CH2), 4.92 (IH, s, >CH), 5,74 (IH, d, >CH), 6,74 (IH, s, ->CH), 7,04 (IH, s, >CH), 7,20 (11H, m, -C6H5 x 2, >NH), 8,34 (IH, bs, 15 >NH), 9,78 (IH, d, >NH).

(3) I 7 ml 85% myresyre opløstes 0,4 g diphenylmethyl-7P-[D-a-(2-trichlorethoxycarbonylamino-4-thiazolyl)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-20 1-piperazincarboxamido ) -acetamido ] -7a-methoxy-3- [ 5- (1-methyl- 1,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl ] - ^^-cephem-4-carboxylat fremstillet i (2). Til opløsningen sattes 0,4 g zinkstøv under isafkøling, og blandingen blev omrørt i 3 timer ved den samme temperatur. Det uopløselige materiale blev fjernet ved filtrering, og filtratet 25 blev befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk. Remanensen opløstes ved tilsætning af 7 ml methylen-chlorid, 3 ml acetone og 10 ml vand og indstilling af opløsningens pH-værdi til 7,0 med mættet vandig natriumhydrogencarbonatopløs-ning. Det organiske lag blev skilt fra, vasket med mættet van-dig natriumchloridopløsning, tørret over magnesiumsulfat og befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk til opnåelse af 0,21 g af et hvidt pulver. Det hvide pulver blev opløst i 2ml anisol, og der tilsattes 2 ml trifluoreddike-syre under isafkøling, hvorefter opløsningen blev omrørt ved den samme temperatur i 30 minutter. Det uopløselige materiale blev fjernet ved filtrering, og filtratet blev befriet for opløsnings- o 5 63 midlet ved destillation under formindsket tryk. Remanensen blev behandlet med 5 ml ethylacetat, hvorved der blev opnået 0,19 g trifluoreddikesyresaltet 7β-[D-α-(2-amino-4-thiazolyl)-a-(4-ethyl- 2.3- dioxo-l-piperazincarboxamido)-acetamido]-7a-methoxy-3-[5-(1-5 methyl-1,2,3,4-tetrazolyl) thiomethyl ] - A^-cephem-4-carboxylsyre, smp. 175-190°C (dekomp.), udbytte 60,9%.

IR (KBr) cm"1: ^0=0 1765, 1700, 1675.

10 På lignende måde fremstilledes følgende forbindelser:

Trifluoreddikesyresaltet af 7β- [D-α-(2-amino-4-thiazolyl)-a-(4-ethy] 2.3- dioxo-l-piperazincarboxamido) acetamido ]-7a-methoxy- 3- [5- (1-carbamoylmethyl-1,2,3,4-tetrazolyl) thiomethyl-A?-cephem-4-carboxyl- 15 syre.

Tri fluoreddike syre saltet af 7β-[ΰ-α-(2^ιηίηο-4-ΐ]Ήηζο^1-α-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido) acetamido ]-7a-methoxy- 3-acetoxymethyl-A -cephem-4- carboxyl syre.

20

Trifluoredikesyresaltet af 7β-[ϋ-α-(2-3ΐηίηο-4-ΐ1^ζο^1)-α-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)acetamido]-7a-methoxy- 3-[2-(5-methyl-l,3,4-thiadiazolyl)-thiomethyl] -^-cephem-4-carboxylsyre.

25 (4) I 3 ml vandholdigt acetone opløstes 0,16 g af det ovenfor under (3) trifluoreddikesyresalt 7β-[ϋ-α-(2-3ΐηίηο-4-ΐϊτΐηζο^1)-α-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido) -acetamido ] -7a-methoxy- 3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)-thiomethyl]-A^-cephem-4-30 carboxylsyre, og der tilsattes 0,0197 g (ækvimolær mængde) pyridin, hvorefter opløsningen blev befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk. Der sattes vand til remanensen, og krystallerne blev opsamlet ved filtrering til opnåelse af 7β-[D-α-(2-amino-4-thiazolyl)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarbox-3 5 amido)-acetamido]_ 7a-methoxy-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)-thiomethyl ] - A^-cephem-4-carboxylsyre.

64

DK 164169 B

EKSEMPEL 8 (1) Til en suspension af 5,0 g D(-)-alanin i 50 ml methylen-chlorid sattes 14,9 ml trimethylchlorsilan. Til blandingen sattes dråbevis ved 0-5°C 15,6 ml triethylamin. Den resulterende blandings temperatur blev gradvis hævet, og reaktionen fik lov at foregå ved 20°C i 1,5 timer. Til reaktionsblandingen sattes derpå ved 5-10°C 20 g af en blanding af 4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazin-carbonylchlorid og triethylamin-hydrochlorid, (hvori 58,02% var den førstnævnte komponent). Efter 2 timers reaktion ved 20°C blev reaktionsblandingen befriet for opløsningsmidlet ved destillation. Til remanensen sattes 50 ml vand, blandingens pH-værdi blev indstillet til 7,5 med natriumhydrogencarbonat, blandingen blev vasket med 50 ml ethylacetat og tilsat 50 ml acetonitril, hvorefter blandingens pH-værdi blev indstillet til 1,5 med 2N saltsyre. Acetonitrillaget blev skilt fra, og det vandige lag blev yderligere ekstraheret to gange med 50 ml portioner af acetonitril. Ac etonitr illagene blev vasket med mættet vandig natrium-chloridopløsning og derpå kombineret. Det kombinerede acetonitril lag blev tørret over vandfrit magnesiumsulfat og befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk. Remanensen blev omkrystalliseret fra n-butanol, hvorved der blev opnået 10,8 g D(-)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)propion-syre, smp. 164-168°C, udbytte 75%.

25 IR (KBr) cm-1: / C=0 1710, 1660 NMR (DMS0 - dg) cf værdier: 1,11 (3H, t, -CH^), 1,39 (3H, d, -CH3), 3,2 - 4,1 (6H, m, >CH2 x 3), 4,3 (IH, m, >CH), 9,22 (IH, d, >NH). 1 35 (2) Til en suspension af 1,5 g D(-)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l- piperazincarboxamido)propionsyre i 15 ml methylenchlorid sattes 0,64 ml 1-methylmorpholin til dannelse af en opløsning. Medens temperaturen holdtes mellem -15 og -20°C, sattes 0,58 ml- ethyl- chlorcarbonat til opløsningen, og blandingen fik lov at reagere 65 i 1,5 timer. Derefter sattes 2,88 g diphenylmethyl-7P-amino-3-[5-(1- methyl-1,2,3,4-tetrazolyl) thiomethyl ] - ^^-cephem-4-carboxylat til opløsningen, og reaktionen fik lov at foregå i 1 time ved mellem -15 og -20°C og derpå i 1,5 timer ved mellem -10 og 0°C. Efter 5 fjernelse af opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk sattes 30 ml vand og 30 ml ethylacetat til remanensen, og blandingen blev omrørt grundigt. De udfældede hvide krystaller blev opsamlet ved filtrering, hvorved der blev opnået 4,0 g diphenylmethyl-73- [D(-) -a-( 4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxa-l g mido) -propionamido ]-3- [ 5- (1-methyl-l ,2,3,4-tetrazolyl) -thiomethyl ]- A^-cephem-4-carboxvlat. smp. 150-154°C (dekomp.), udbytte 93,6%.

IR (KBr) cm"1: / C=0 1780, 1720, 1680 NMR (CDC13) (Γ værdier: 1,08 (3H, t, -CH^), 1,36 (3H, d, -CH3), 15 3,25 - 4,0 (8H, m, >CH2 x 4), 3,8 (3H, s, -CHj), 4,3 (2H, q, >CH2), 4,55 (IH, m, >CH), 4,99 (IH, d, >CH), 5,8 (IH, m, ->CH), 6,85 (IH, s, >CH), 7,2 - 7,4 (10H, s, -C6H5 x 2), 7,7 (IH, s, >CH), 9,3 (IH, s, >NH). 1 2 3 4 5 6 35 (3) I en blanding af 20 ml chloroform og 6 ml vandfrit tetrahydro- 2 furan opløstes 1,26 g diphenylmethyl-7P-[D(-)-a-(4-ethyl-2,3- 3 dioxo-l-piperazincarboxamido)-propionamido ] -3- [ 5- (1-methyl-l ,2,3,4- 4 tetrazolyl)-thiomethyl]-A^-cephem-4-carboxylat. Medens tempera 5 turen holdtes ved -70°C tilsattes 2,75 ml af en opløsning af li- 6 thiummethoxid (2,184 mmol/ml) i methanol. Den resulterende opløsning blev omrørt i 3 minutter, der tilsattes 0,31 ml tert-butyl-hypochlorit, og opløsningen blev omrørt i 15 minutter ved den samme temperatur. Efter tilsætning af 0,4 ml eddikesyre blev reaktionssystemets temperatur hævet til stuetemperatur. Reaktions-3Q blandingen blev hældt ud i 30 ml af en citratpufferopløsning (pH 7,0). Det organiske lag blev skilt fra, vasket med vand, tørret over magnesiumsulfat og befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk. Remanensen blev renset ved søjle-chromatografi (stationær fase: silicagel, elueringsmiddel: en 66

DK 164169 B

blanding af benzen og ethylacetat i volumenforholdet 1:3)» hvorved der blev opnået 0,6 g diphenylmethyl-7P-[D(-)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido) -propionamido ]-7a-methoxy-3- [5-(l-methyl-1,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]- £?-cephem-4-carboxylat, 5 udbytte 45,8%.

IR (KBr) cm”1: x* C=0 1770, 1700, 1670 NMR (CDCl^) cTværdier: 1Q 1,1 (3H, t, -CH3), 1,5 (3H, d, -CH^), 3,5 (3H, s, -CH3), 3,3 - 4,2 (8H, m, >CH2 x 4), 3,8 (3H, s, -0¾), 4,35 (2H, q, >CH2), 4,6 (IH, m, >CH), 5,03, (IH, s, >CH), 6,88 (IH, s, >CH), 7,2 - 7,4 (10H, s, -C6H5 x 2), 8,0 (IH, s, >NH), 9,25 (IH, d, >NH).

(4) I 8 ml anisol opløstes 1,2 g diphenylmethyl-7p-[D(-)-a-(4-

1 V

ethyl-2,3-di oxo-1 -pip er azinc arboxami do) -propionamido ]-7a-methoxy-3“ [5-(l-methyl-l ,2,3,4-tetr azolyl) thiomethyl ] - Δ^-c ephem-4-carboxylat, og der sattes 5 ml trifluor eddike syre til opløsningen under isafkøling. Opløsningen blev omrørt ved den samme tempera-tur i 30 minutter. Efter fuldførelse af reaktionen blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation under formindsket tryk. Remanensen blev opløst ved tilsætning af 30 ml ethylacetat og 30 ml vand, og opløsningens pH-værdi blev indstillet til 7,0 med vandig natriumhydrogencarbonatopløsning. Det vandige lag blev skilt fra og tilsat 30.ml acetonitril, hvorefter blandingens pH-værdi blev indstillet til 2,0 med 2N saltsyre. Acetonitrillaget blev skilt fra, og det vandige lag ekstraheret to gange med 30 ml portioner af acetonitril. Ac etonitr ilekstrakt erne blev vasket med mættet vandig natriumchloridopløsning og derpå kombineret med det ovennævnte ac etonitr illag. Det kombinerede ac etonitr illag blev tør-30 ret over vandfrit magnesiumsulfat og befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk, hvorved der blev opnået 0,5 g 7β-[D(-)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-propionamido ]-7a-methoxy-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]- A^-cephem-4-carboxylsyre, smp. 165°C (dekomp.), udbytte 53,2%.

35 67 IR (KBr) cm"1: V C=0 1770, 1705, 1670, 1650 MR (DMSO - dg) & værdier: 1,12 (3H, t, -CH3), 1,40 (3H, d, -CH^), 3,44 (3H, s, -CH3), 5 3,4 - 4,2 (8H, m, >CH2 x 4), 3,99 (3H, s, -CH3), 4,3 (2H, q, >CH2), 4,5 (1H, m, >CH), 5,1 (1H, s,>CH), 9,13 (1H, d, >NH), 9,40 (1H, s, >NH).

På lignende måde fremstilledes de følgende forbindelser: 10 7β- [DL-oc-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piper.azincarboxamido) -a-(chlormethyl) -acetamido ] -7oc-methoxy-3- [ 5- (1-methyl-l ,2,3,4-tetr azolyl) thiomethyl 1-^ ^-cephem-4-carboxylsyre, smp. 143 - 146°C (dekomp.)· 15 i , IR (KBr) cm"·1·: Y C=0 1775, 1730 - 1650 MR (DMSO-dg) S værdier: l, 15 (3H, t, -CH3), 3,45 (3H, s, -0CH3), 3,97 (3H, s, -CH3), 20 3,30 - 4,10 (10H, m, >CH2 x 5), 4,30 (2H, bs, >CH2), 4,95 (IH, m, ·>0Η), 5,05 (IH, s, >CH), 9,45 (IH, d, >NH), 9,60 (IH, s, >NH).

7P^[DL-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-a-(hydroxymethyl 25 ac etamido ] -7a-methoxy-3- [ 5- (1-methyl-l ,2,3,4-t etrazolyl) thiomethyl]-Ap-cephem-4-carboxylsyre, smp. 108 - 110°C (dekomp.).

IR (KBr) cm"1: / C=0 1765, 1720 - 1650 30 7β- [DL-α- (2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido )propionamido ]-7a-methoxy- 3-[5-( 1-methyl-l ,2,3,4-tetrazolyl) -thiomethyl ] - A^-ceohem-4-carboxvl syre.

EKSEMPEL 9 35 På samme måde som i eksempel 1 fremstilledes de følgende forbindelser:

DK 164169 B

68 7β-[D(-)-a-(2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-a-(2-thienyl)-acet-amido]-7a-methoxy-3-[3-(1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]-^^-cephem-4-carboxylsyre.

5 7β- [D( -) -a-(2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido) -a- (2-thienyl) -acet- amido ]-7a-methoxy-3-acetoxymethyl- ^^“Cephem-4-carboxylsyre.

EKSEMPEL 10 10 (1) I 50 ml methylenchlorid opslæmmes 2,0 g D-threonin, og 6,58 ml trimethylchlorsilan tilsættes til den fremkomne opløsning, hvorefter 7,01 ml triethylamin tildryppes ved 0 - 5°C. Temperaturen af suspensionen hæves gradvis, og reaktionen udføres ved 20°C i 1,5 timer, hvorefter 5,9 g af en blanding af 4-ethyl-15 2,3-dioxo-l-piperazincarbonylchlorid og triethylamin-hydrochlorid (indholdet af 4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarbonylchlorid var 58,55 vægtprocent) sættes til reaktionsblandingen. Den herved fremkomne blanding underkastes reaktion i 1 time ved 20 °C, hvorefter der destilleres under reduceret tryk for at fjerne 20 opløsningsmiddel. Til remanensen sættes 30 ml vand, og pH af den herved fremkomne opløsning indstilles til 7,5 med natrium-hydrogencarbonat, hvorefter opløsningen vaskes med 50 ml ethylacetat, og derefter tilsættes 50 ml acetonitril til opløsningen. pH-værdien af den herved fremkomne blanding indstilles 25 til 1,5 med 2N saltsyre. Natriumchlorid sættes til blandingen for at mætte denne, og acetonitrillaget adskilles herefter.

Det vandige lag ekstraheres med fire 50 ml portioner acetonitril, og de fire ekstraherede acetonitrillag slås sammen med 30 det ovenfor nævnte acetonitrillag, og herefter vaskes alle acetonitrillagene med mættet natriumchloridopløsning. Aceto-nitrillagene med mættet natriumchloridopløsning. Acetonitrillaget tørres over vandfrit magnesiumsulfat, og herefter destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel. Re-35 manensen omkrystalliseres med n-butanol, hvorved man får 3,6 g 69 (udbytte 75 ptc.) D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazin-.carboxamido )-/*-( S )hydroxysmørsyre, der har et smeltepunkt på 164 - 166 °C.

5 IR (KBr) cm"1: » C=Q 1740, 1710, 1670 NMR (CD^SOCDg) ppm værdier: 1,11 (3H, t, CHg) 10 1,13 (3H, d, CH3) 3,28-3,75 (4H, m, CH2 x 2) 3,78-4,30 (4H, m, CH2, CH x 2) (2) I 15 ml methylenchlorid opslæmmes 1,0 g D-«-(4-ethyl-15 2,3-dioxo-piperazincarboxamido)-0-(S)-hydroxysmørsyre, og 0,38 ml 1-methylmorpholin sættes til for at omdanne suspensionen til en opløsning. Til opløsningen sættes 0,35 ml ethylchlorcarbonat ved -15 - -20 °C, og opløsningen underkastes reaktion ved samme temperatur i 15 timer.

20 Herefter sættes 1,67 diphenylmethyl-70-amino-3-[5-(l-me- 3 thyl-1,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]-Δ -cephem-4-carboxy-lat til reaktionsblandingen, og den herved fremkomne blanding underkastes reaktion ved samme temperatur i 1 time og derefter ved -10 - 0 °C i 1,5 timer. Reaktions-25 blandingen destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel, og til remanensen sættes 30 ml vand og 30 ml ethylacetat. Herefter omrøres opløsningen. De udfældede hvide krystaller opsamles ved filtrering, hvorved man får 2,5 g (udbytte 95%) diphenylmethyl-70-[D-a-(4-me-30 thyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamino )-0-(S) -hydroxy- butanamido] -3- [ 5- (1-methyl-l, 2,3,4-tetrazolyl) -thio- 3 methyl]-δ -cephem-4-carboxylat, der har et smeltepunkt på 121 - 125 °C (dekomponering). 1 IR (KBr) cm"1: v C=Q 1785, 1720, 1680

DK 164169 B

70 NMR (CDgSOCDg) ppm værdier: 1,00 (3H, t, CH3) 1,16 (3H, d, CH3) 5 3,48-4,05 (10H, m, CH2 x 4, CH x 2) 3,85 (3H, s, CH3) 4.25 (2H, q, CH2) 5,10 (IH, d, CH) 7,2-7,45 (10H, s, CgHg x 2) 10 8,91 (IH, s, NH) 9.26 (IH, s, NH) (3) I en blanding af 30 ml tør methylenchlorid og 2 ml tør tetrafuran opløses 1,0 g diphenylmethyl-75-[D-a-(4-15 ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamid)-5-( S)-hydroxy- butanamido]-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)thio- 3 methyl]-Δ -cephem-4-carboxylat, og den fremkomne opløsning afkøles til -70 °C. Til den afkølede opløsning sættes 3,55 ml (1,66 mM/ml) methanolisk opløsning af li-20 thiummethoxid ved samme temperatur, og den fremkomne blanding omrøres i 3 minutter, hvorefter 0,18 ml tert.-butylhypochlorit tilsættes. Den fremkomne blanding omrøres ved samme temperatur i 15 minutter, hvorefter 0,3 ml eddikesyre tilsættes, og temperaturen af opløsningen 25 hæves til stuetemperatur. Opløsningen destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmidlet, og til remanensen sættes 20 ml ethylacetat og 20 ml vand for at opløse remanensen, hvorefter pH-værdien af den fremkomne opløsning indstilles til 6,5 med vandig natriumbicarbo-30 natopløsning. Det organiske lag fraskilles, vaskes med vand og tørres over vandfrit magnesiumsulfat, hvorefter der destillerres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmidlet. Remanensen renses ved søjlekromatografi [Wako silicagel, "C-200"; der elueres med en blanding af 35 benzen og ethylacetat (1:2 pr. rumfang)], hvorved man får 0,6 g (udbytte 40,8%) diphenylmethyl-75-[D-<r-(4-ethyl- 2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-5-(S)-hydroxybutanami- 71 do]-7o-methoxy-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)thio- 3 methyl]-δ -cephem-4-carboxylat.

IR (KBr) cm-1: v C=Q 1780, 1710, 1670 5 NMR (CDC13) ppm værdier: 1,20 (3H, t, CH3) 1,25 (3H, d, CH3) 10 3,5 (3H, s, CH3) 3,79 (3H, s, CH3) 3.2- 4,0 (8H, m, CH2 x 4) 4.3- 4,6 (4H, m, CH2, CH x 2) 5,02 (IH, s, CH) 15 6,85 (IH, s, NH) 7,2-7,4 (10H, s, CgHg x 2) 8,52 (IH, s, NH) 9,55 (1H, d, NH) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 (4) I 5 ml anisol opløses 0,5 g diphenylmethyl-70-[D-a- 2 (4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-/)-(S )-hy- 3 droxybutanamido]-7«-methoxy-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-te- 4 3 5 trazolyl)thiomethyl]-Δ -cephem-4-carboxylat, og 5 ml tri-fluoreddikesyre tilsættes til opløsningen under isafkø- 6 ling, hvorefter den fremkomne opløsning omrøres ved samme 7 temperatur i 30 minutter. Reaktionsblandingen destilleres 8 under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel, og 9 til remanensen sættes 10 ml ethylacetat og 10 ml vand, 10 hvorefter mættet natriumhydrogencarbonatopløsning tilsæt- 11 tes under omrøring for at indstille opløsningens pH til 12 6,5, hvorved remanensen opløses. Det vandige lag fraskil 13 les, hvorefter 10 ml methylacetat sættes til dette. pH af 14 den fremkomne blanding indstilles til 2,0 med 2 N salt 15 syre. Det organiske lag fraskilles. Det vandige lag eks- 16 traheres med to 10 ml portioner methylacetat, og de to ekstrakter slås sammen med det ovenfor nævnte organiske lag, hvorefter de forenede organiske lag vaskes med en

DK 164169 B

72 mættet vandig natriumchloridopløsning.

Efter tørring over vandfrit magnesiumsulfat destilleres det organiske lag under reduceret tryk for at fjerne op-5 løsningsmidlet, og remanensen behandles med diethylether, hvorved man får 0,25 g (udbytte 63,3%) 70-[D-a-(4-ethyl- 2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-β-(S)-hydroxybutanami-do]-7a-methoxy-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)thio- 3 methyl]-Δ -cephem-4-carboxylsyre med smeltepunkt 118 - 10 120 °C (dekomp.)· IR (KBr) cm-1: » C=Q 1770, 1705, 1675 NMR (CDgSOCDg) ppm værdier: 15 1,10 (3H, t, CHg) 1,15 (3H, d, CH3) 3,40 (3H, s, CH3) 3,93 (3H, s, CH3) 20 3,5-4,0 (8H, m, CH2 x 4) 4,1-4,4 (4H, m, CH2, CH x 2) 5,03 (IH, s, CH) 9,2 (2H, d, NH x 2) 25 På samme måde som ovenfor fremstilledes følgende forbindelser: 7Æ-[D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-0-(S)- hydroxybutanamido]-7«-methoxy-3-[2-(1,3,4-thiadiazolyl)-3 30 thiomethyl]-δ -cephem-4-carboxylsyre: smeltepunkt 108 -112 0 C (dekomp.).

IR (KBr) cm"1 » C=Q 1780, 17,20, 1680 35 NMR (CDgSOCDg) + D20) ppm værdier: 73 1.02- 1,39 (6H, m, CH3 x 2) 3,50 (3H, s, CH3) 3.3- 4,5 (12H, m, CH2 x 5, CH x 2) 5,05 (IH, s, CH) 5 9,42 (1H, s, CH) 7/5-[D-e-( 4-n-octyl - 2,3 -dioxo-1 -piperazincarboxamido )-/5- (S)-hydroxybutanamido]-7«-methoxy-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4- 3 tetrazolyl)thiomethyl]-δ -cephem-4-carboxylsyre, smelte-10 punkt: 113 - 115 °C (dekomp.).

IR (KBr) cm-1: v C_Q 1780, 1660 - 1720 NMR (CD^COCDg) ppm værdier: 15 0,80-1,60 (18H, m, CH2 x 6, CHg x 2) 3,30-4,50 (12H, m, CH2 x 5, CH x 2) 3,48 (3H, s, CH3) 3,95 (3H, s, CH3) 20 5,00 (1H, s, CH) 8,37 (IH, s, NH) 9,40 (IH, d, NH) 7/5-[D-e-(4-n-butyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido )-0-25 (S)-hydroxybutanamido]-7«-methoxy-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4- 3 tetrazolyl)thiomethyl]-Δ -cephem-4-carboxylsyre, smeltepunkt: 125 - 133 °C (dekomp.).

IR (KBr) cm-1 » 1785, 1710, 1680 30 NMR (CDgSOCDg) ppm værdier: 0,80-1,60 (10H, m, CH2 x 2, CH3 x 2) 3,20-4,40 (12H, m, CH2 x 5, CH x 2) 35 3/41 (3H, s, CH3) 3,94 (3H, s, CH3) 5,08 (1H, s, CH)

DK 164169 B

74 9,27 (IH, s, NH) 9,30 (IH, d, NH) 7 0-[D-a -(4-ethyl-2,3-dioxo-1-piperazincarboxamido) - 0 - (R) -5 hydroxybutanamido]-7 a-methoxy-3-[5-(1-methyl-1,2,3,4-te- 3 trazolyl)thiomethyl]-δ -cephem-4-carboxylsyre, smeltepunkt: 144 - 150 °C (dekomp.).

IR (KBr) cm"1: » c=0 1780, 1735, 1660 10 NMR (CD^COCD^.CD^SOCD^) = 4 : rumfang ppm værdier: 0,96-1,37 (6H, m, CH3 x 2) 15 3,30-4,92 (12H, m, CH2 x 5, CH x 2) 3,54 (3H, s, CH3) 4,04 (3H, s, CH3) 5,10 (IH, s, CH) 9,23 (IH, bs, NH) 20 9,46 (IH, d, NH) EKSEMPEL 11 (1) I 45 ml methylenchlorid opslæmmes 4,5 g D-a-(4-ethyl-25 2,3-dioxo-1-piperazincarboxamido)-0-(S)-hydroxysmørsyre, og 1,60 g N-methylmorpholin tilsættes den fremkomne suspension for at omdanne suspensionen til en opløsning. Opløsningen afkøles til -20 °C, og 1,78 g ethylchlorcarbo-nat tilsættes. Herefter underkastes den fremkomne opløs-30 ning en reaktion ved -13 - -16 °C i 1,5 timer. Herefter tilsættes 6,50 g diphenylmethyl-70-amino-3-acetoxymethyl- 3 δ -cephem-4-carboxylat til reaktionsblandingen ved -30 °C. Reaktionen udføres ved -10 - -15 °C i 30 minutter, og herefter udføres den ved -10 - 0 °C i 30 minutter.

35 Herefter destilleres reaktionsblandingen under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel. Til remanensen sættes 50 ml ethylacetat, 50 ml methylacetat og 40 ml vand 75 for at opløse remanensen. Det organiske lag fraskilles, tørres over vandfrit magnesiumsulfat, hvorefter der dekanteres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel. Remanensen renses ved søjlekromatografi (Wako 5 silicagel "C-200"; der elueres med en blanding af chloroform og ethanol (60 : 1 rumfang)], hvorved man får 8,2 g (udbytte 78,2%) af et hvidt pulver bestående af diphenyl-methyl-70-[D-a~(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxami-do )-/*-( S) -hydroxybutanamido] - 3 - acetoxymethy1-Δ -cephem-4-10 carboxylat.

IR (KBr) cm"1: i» c=0 1780, 1705, 1670.

I 80 ml methylenchlorid opløses 8,0 g diphenylmethyl-70-15 [D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-0-(S)- 3 hydroxybutanamido]-3-acetoxymethyl-Δ -cephem-4-carboxylat fremstillet ovenfor under (1), og til opløsningen sættes 26 ml methanolisk opløsning af lithiummethoxid (lithium-methoxidindhold 1,51 mM/ml) ved -70 °C. Opløsningen om-20 røres i 3 minutter ved -65 - -70 °C, og herefter tilsættes 1,60 g tert.-butylhypochlorit til opløsningen, hvorefter reaktionen udføres ved samme temperatur i 15 minutter. Til reaktionsblandingen sættes 3 ml eddikesyre, og temperaturen hæves gradvis til 0 °C, hvorefter blandingen 25 destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel. Til remanensen sættes 100 ml ethylacetat og 50 ml vand for at opløse remanensen, og det organiske lag fraskilles, tørres over vandfrit magnesiumsulfat, hvorefter der destilleres under reduceret tryk for at fjerne 30 opløsningsmiddel. Remanensen renses ved søjlekromatografi (Wako silicagel "C 200"; der elueres med ethylacetat), hvorved der opnås 2,65 g (udbytte 31,8%) af et hvidt pulver bestående af diphenylmethyl-75-[D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l -piperazincarboxamido )-0-(S)-hydroxybutanamido]-7a- 3 35 methoxy-3-acetoxymethyl-Δ -cephem-4-carboxylat.

DK 164169 B

76 IR (KBr) cm-1: » C=Q 1780, 1740, 1710, 1680.

(3) Til 2,65 g diphenylmethyl-7Æ[D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo- 1-piperazincarboxamido) - /5 - (S) -hydroxybutanamido] -7a-3- 3 5 methoxy-Δ -cephem-4-carboxylat fremstillet som omtalt ovenfor under (2) sættes 26 ml anisol og 26 ml trifluor-eddikesyre under isafkøling. Den fremkomne blanding underkastes reaktion ved samme temperatur i 30 minutter, hvorefter reaktionsblandingen destilleres under reduceret 10 tryk for at fjerne opløsningsmiddel. Diethylether tilsættes remanensen for at vaske denne, hvorved man får 2,0 g (udbytte 97,6%) af et hvidt pulver bestående af 70-[D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-0-( S)-hydroxy- 3 butanamido]-7a-methoxy-3-acetoxymethyl-A -cephem-4-car-15 boxylsyre, smeltepunkt: 142 - 145 °C (dekomp.).

IR (KBr) cm"1: » C_Q 1780, 1705, 1670 NMR (CDgCOCDg : CD^SOCD^ =4:1 rumfang) ppm værdier: 20 0,85-1,45 (6H, m, CH3 x 2) 2,03 (3H, s, CH3) 3,15-4,95 (12H, m, CH2 x 5, CH x 2) 3,48 (3H, s, CHg) 25 5,06 (IH, s, CH) 8,84 (IH, s, NH) 9,34 (IH, d, NH) EKSEMPEL 12 30 I 24 ml nitromethan opløses 0,71 g 70-[D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-0-(S)-hydroxybutanamido]- 3 7a-methoxy-3-acetoxymethy1-Δ -cephem-4-carboxylsyre og 0,22 g l-(2-hydroxyethyl)-5-mercapto-lH-tetrazol, og den 35 fremkomne opløsning underkastes reaktion ved 80 "C i 5 timer, hvorefter reaktionsblandingen destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel. Til rema- 77 nensen sættes 20 ml ethylacetat og 20 ml acetone for at opløse remanensen. Den fremkomne opløsning tilsættes herefter diphenyldiazomethan, indtil en rødlig-violet farve forbliver uden at forsvinde, og den fremkomne blanding 5 destilleres herefter under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel. Den fremkomne remanens renses ved søjlekromatografi (Wako Silicagel "C-200", der elueres med en blanding af chloroform og ethanol (20:1 rumfang)], hvorved man får et svagt gult pulver. Til pulveret sættes 10 3,5 ml anisol og 3,5 ml trichloreddikesyre under isafkø ling, og den fremkomne blanding underkastes reaktion ved samme temperatur i 30 minutter, hvorefter reaktionsblandingen destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel. Ethylacetat tilsættes remanensen for at 15 vaske denne, hvorved man får 0,28 g (udbytte 34%) af et svagt gult pulver bestående af 70-[D-a-(4-ethyl-2,3-di-oxo-2,3-1-piperazincarboxamido)-0-(S)-hydroxybutanamido]-7a-methoxy-3-{5-[1-(2-hydroxyethyl)-1,2,3,4-tetrazolyl]- 3 thiomethyl}-A -cephem-4-carboxylsyre med smeltepunkt: 128 20 - 135 °C (dekomp.).

IR (KBr) cm-1: » C=Q 1780, 1710, 1675 NMR (CDgCOCDg : CD^SOCD^ =4:1 (rumfang)) ppm værdier: 25 0,9-1,4 (6H, m, CH3 x 2) 3,47 (3H, s, CH3) 3,20-4,60 (16H, m, CH2 x 7, CH2 X 2) 5,03 (IH, s, CH) 30 9,01 (IH, s, NH) 9,31 (IH, d, NH)

Den samme fremgangsmåde, som ovenfor gentages, bortset fra at l-methyl-5-mercapto-lH-tetrazol erstatter l-(2-hy-35 droxyethyl)-5-mercapto-lH-tetrazolen, hvorved man får 70-[D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-0-(S)-hy-droxybutanamido]-7a-methoxy-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-tetra- 3

DK 164169 B

78 zolyl)-thiomethyl]-Δ -cephem-4-carboxylsyre.

Smeltepunktet, IR-spektret og NMR-spektret af denne forbindelse var identisk med de opnåede resultater for for-5 bindeisen fra eksempel 10.

EKSEMPEL 13 I 7 ml vandfrit methylenchlorid opløses 0,20 g D-a-(4-10 ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-0-(S)-tert.-but- oxysmørsyre, hvorefter 0,10 g oxalylchlorid og 1 dråbe dimethylformamid sættes til den fremkomne opløsning i den angivne rækkefølge under isafkøling. Den fremkomne blanding underkastes reaktion ved stuetemperatur i 30 minut-15 ter. Reaktionsblandingen destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel. Den opnåede remanens opløses i 8 ml vandfrit methylenchlorid, og den fremkomne opløsning afkøles til -50 °C. Til opløsningen sættes 0,3 g diphenylmethyl-70-amino-7a-methoxy-3-[5-(1-methyl- 3 20 1,2,3,4-tetrazolyl)-thiomethyl]-δ -cephem-4-carboxylat og 0,1 ml dimethylanilin i nævnte rækkefølge, hvorefter den fremkomne blanding underkastes reaktion natten over ved -20 °C. Reaktionsblandingen destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel, og den opnåede re-25 manens opløses i en blanding af 10 ml vand og 15 ml ethylacetat, hvorefter ethylacetatlaget fraskilles, vaskes grundigt med vand, og der destilleres for at fjerne opløsningsmiddel. Den fremkomne remanens renses ved søjlekromatografi. [Wako silicagel "C-200"; der elueres 30 med en blanding af benzen og ethylacetat (2:1 rumfang)], hvorved man får 0,31 g (udbytte 63%) af diphenylmethyl-7 0-[D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-1-piperazincarboxamido)-0-(S)-tert.-butoxybutanamido]-7a-methoxy-3-[5-(1-methyl- 3 1,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl-δ -cephem-4-carboxylat med 1 smeltepunkt 109 - 115 °C (dekomp.).

79 IR (KBr) cm"1 v C=Q 1780, 1720-1680 NMR (CDgClg) ppm værdier: 5 1,30 (9H, s, CH3 x 3) 1,03-1,55 (6H, m, CH3 x 2) 3,51 (3H, s, CH3) 3,72 (3H, s, CH3) 3,18-4,68 (12H, m, CS2 x 5, CH x 2) 10 4,98 (IH, s, CH) 6,76 (IH, s, CH) 7,22 (10H, bs, CgHg x 2) 8,04 (IH, bs, NH) 9,50 (IH, d, NH) 15

Det ovenfor nævnte produkt opløses i en blanding af 2 ml anisol og 2 ml trifluoreddikesyre, og den fremkomne opløsning underkastes reaktion i 30 minutter ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen tørres under reduceret tryk 20 til tørhed, hvorefter 10 ml ethylacetat tilsættes remanensen, og den resulterende blanding omrøres i 1 time. De udfældede krystaller opsamles ved filtrering, og der tørres, hvorved man får 0,21 g (udbytte 55,7%) 7/J-[D-«-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-/)-(S) -hydroxy-25 butanamido]-7a-methoxy-3-[5-(l-methyl-l,2,3,4-tetrazo- 3 lyl)thiomethyl]-Δ -cephem-4-carboxylsyre. Smeltepunktet (dekomp.)., IR-spektret og NMR-spektret af denne forbindelse er identisk med de opnåede resultater for forbindelsen fremstillet i eksempel 10.

30 EKSEMPEL 14 I en blanding af 40 ml vandfrit methylenchlorid og 20 ml vandfrit methanol opløses 1 g 70-[D-«-(4-ethyl-2,3-dioxo-35 1-piperazincarboxamido)-0-(S)-hydroxybutanamidoj-3-[5-(1- 3 methyl-1,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]-Δ -cephem-4-carboxylsyre, og den fremkomne opløsning afkøles til -75

DK 164169 B

80 °C. Til opløsningen sættes dråbevis 3,7 ml lithium-methoxidopløsning i methanol (9,2 mM lithiummethoxid i denne), og opløsningen underkastes reaktion ved -75 - -70 °C i 3 minutter. Herefter tilsættes 0,22 ml tert.-butyl-5 hydrochlorit, og den fremkomne blanding underkastes reaktion i 15 minutter. Til reaktionsblandingen sættes 0,28 ml myresyre, og blandingens temperatur hæves til stuetemperatur. Blandingen destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel, og 4 ml vand, 4 ml mættet 10 vandig natriumchloridopløsning og 20 ml acetonitril sættes til den fremkomne remanens for at opløse denne. Til opløsningen sættes dråbevis N-saltsyre for at indstille opløsningens pH til 1,2. Det organiske lag fraskilles, og der tørres over vandfrit natriumsulfat, hvorefter der de-15 stilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel. Til den fremkomne remanens sættes 14 ml acetone, og den fremkomne blanding omrøres. De udfældede krystaller opsamles ved filtrering, og man får 0,71 g af et acetone-reaktionsprodukt af 70-[D-α-(4-methyl-2,3-dioxo-l- 20 piperazincarboxamido)-0-(S)-hydroxybutanamido]-7a-meth- 3 oxy-3-[5-(1-methyl-1,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]-Δ -ce-phem-4-carboxylsyre.

Dette additionsprodukt opslæmmes i 4,3 ml 20% vandig ace-25 tone, og der tilsættes natriumhydrogencarbonat til suspensionen for at indstille pH-værdien af denne til 5,0.

Til suspensionen sættes 70 mg aktiv carbon, og blandingen omrøres i 3-4 minutter, hvorefter man filtrerer gennem celite for at fjerne det aktive kul. Filtratets pH ind-30 stilles til 1,5 ved 6 N saltsyre. Herefter omrøres filtratet i 30 minutter ved stuetemperatur, og derefter afkøles der med is i 3 timer. Herefter udskiller der krystaller, der opsamles ved filtrering, og der tørres, hvorved man får 0,5 g (udbytte 45%) 70-[D-e-(4-ethyl-2,3-35 dioxo-l-piperazincarboxamido)-0-(S)-hydroxybutanamido]- 7a-methoxy-3-[5-(1-methyl-1,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]- 3 a -cephem-4-carboxylsyre-dihydrat, der har et smeltepunkt 81 på 173-175 °C (dekomponering).

IR (KBr) cm"1: » C=Q 1775, 1710, 1675, 1660 5 NMR-spektret af denne forbindelse var identisk med værdierne fra forbindelsen i eksempel 10.

EKSEMPEL 15 10 I 20 ml vandfrit methylenchlorid opløses 1 g 70-[D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-3-(S)-hydroxybu-tanamido]-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]- 3 Δ -cephem-4-carboxylsyre, og til opslæmningen sættes 0,8 ml vinylethylether og 42 mg pyridinium-p-toluensulfonat. 15 Den fremkomne blanding underkastes reaktion under tilbagesvaling i 50 minutter, hvorved man får 70-{D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-Æ-(S)-[l-(l-ethoxyethyl)oxy]butanamido}-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-tetra- 3 zolyl)thiomethyl]-δ -cephem-4-carboxylsyre. Reaktions-20 blandingen afkøles til -75 °C, og der tilsættes 0,5 ml vandfrit methanol, hvorefter 2,87 ml methanolisk lithium-methoxid (7,52 mmol lithiummethoxid findes i denne) til-dryppes. Den fremkomne blanding underkastes reaktion ved -75 til -70 "C i 3 minutter, hvorefter 3 ml vandfrit me-25 thylenchlorid indeholdende 0,25 ml tert.-butylhypochlorit tilsættes dråbevis i løbet af 10 minutter. Den fremkomne blanding underkastes reaktion ved samme temperatur i yderligere 5 minutter, hvorefter 0,34 ml eddikesyre tilsættes, og temperaturen af den fremkomne blanding hæves 30 til 0 °C. Til reaktionsblandingen sættes 5 ml vand, og den fremkomen blanding omrøres, hvorefter det organiske lag fraskilles, og der destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel. Den fremkomne remanens (70{D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-1-piperazincarboxamido)-0-(S)-35 [l-(1-ethoxyethyl)oxy]butanamido}-7a-methoxy-3-[5-(1-me- 3 thyl-1,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]-Δ -cephem-4-carboxyl-syre fandtes i denne) opløstes i 15 ml acetone, og der

DK 164169 B

82 tilsattes 30 mg p-toluensulfonsyre-monohydrat til opløsningen. Opløsningen omrørtes ved stuetemperatur i 2 timer, hvorefter den henstod natten over ved 5 °C. De udfældede krystaller opsamledes ved filtrering, og der vas-5 kedes med vand, hvorved man fik 0,85 g af et acetoneadditionsprodukt bestående af 70-[D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-0-(S)-hydroxybutanamido]-7a-meth- 3 oxy-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]-Δ -ce-phem-4-carboxylsyre.

10

Dette additionsprodukt opslæmmes i 5 ml 20% vandfrit acetone, og pH-værdien heraf indstilles til 5,0 ved at tilsætte natriumhydrogencarbonat. Herefter tilsættes 85 g aktiv carbon, og den fremkomne blanding omrøres i 3-4 mi-15 nutter, hvorefter man filtrerer gennem celite for at fjerne det aktive kul. Til filtratet sættes 6N saltsyre for at indstille filtratets pH til 1,5, hvorefter filtratet omrøres ved stuetemperatur i 30 minutter, og herefter omrøres der under isafkøling i 3 timer. De udfældede kry-20 staller opsamles ved filtrering, hvorved man får 0,66 g (udbytte 60%) 70-[D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazin-carboxamido) - /5 - (S) -hydroxybutanamido] -7a-methoxy-3- [ 5—(1— 3 methyl-1,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]-Δ -cephem-4-carboxylsyre-dihydrat med smeltepunkt 173 - 175 °C (de-25 komp.).

IR (KBr) cm-1 » C=Q 1775, 1710, 1675, 1660.

NMR-spektret af denne forbindelse var identisk med værdi-30 erne for forbindelsen i eksempel 10.

EKSEMPEL 16 (1) i 50 ml vandfrit methylenchlorid opløses 2,5 g diphe-35 nylmethyl-D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)- 0-(S)-hydroxybutyrat, og til opløsningen sættes ved -40 °C borontrifluoriddiethyletherkompleks (BF^ indhold: 47 83 vægtprocent) og 50 ml diethyletheropløsning af diazome-than (diazomethanindholdet: cirka 1,4 g) i nævnte rækkefølge. Blandingen underkastes reaktion. Temperaturen af reaktionsblandingen hæves herefter gradvis til stuetempe-5 ratur, og 20 ml vand sættes til blandingen. Herefter fraskilles det organiske lag, der vaskes med mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over vandfrit magnesiumsulfat, og derefter destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel. Den fremkomne remanens renses 10 ved søjlekromatografi [Wako silicagel ”0200", eluering med en blanding af benzen og ethylacetat (5:1 rumfang)], hvorved man får 0,68 g (udbytte 26,4%) diphenylmethyl-D-e - (4-ethyl -2,3 -dioxo-1 -piperazincarboxamido) - /5 - (S) -meth-oxybutyrat.

15 (2) I en blanding af 5 ml anisol og 5 ml trifluoreddike-syre opløses 0,6 g diphenylmethyl-D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo- 1-piperazincarboxamido)-/>-(S)-methoxybutyrat fremstillet ovenfor under (1), og den fremkomne opløsning reageres 20 under isafkøling i 30 minutter. Reaktionsblandingen destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel, og til remanensen sættes 10 ml diethylether og 10 ml diisopropylether, og den fremkomne blanding omrøres i 1 time. De udfældede krystaller opsamles ved filtrering, 25 hvorved man får 0,37 g (udbytte 95,8%) D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-1-piperazincarboxamido)-0-(S)-methoxysmørsyre, der har smeltepunktet 132 - 133 °C.

(3) I 3 ml vandfrit methylenchlorid opslæmmes 0,18 g D-a- 30 (4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido) -i- (S) -methoxy smørsyre, der er fremstillet under (2) ovenfor, og hertil sættes 0,1 g oxalylchlorid. En dråbe N,N-dimethylformamid sættes til suspensionen, og suspensions temperatur hæves til stuetemperatur, hvorefter suspensionen reagerer i 1 35 time. Reaktionsblandingen destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel, og den fremkomne remanens opløses i 5 ml vandfrit methylenchlorid, hvorefter

DK 164169 B

84 der til den fremkomen opløsning sættes 0,28 g diphenyl-methyl-70-amino-7a-methoxy-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-tetra- 3 zolyl)thiomethyl]-Δ -cephem-4-carboxylat ved -30 til -40 °C, og herefter tilsættes 0,086 g dimethylanilin. Den 5 fremkomne blanding reageres ved -20 til -10 °C i 12 timer, og der destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel. Remanensen opløses i en blanding af 5 ml vand og 10 ml ethylacetat. Det organiske lag fraskilles, der vaskes med mættet vandig natriumchloridop-10 løsning, hvorefter der tørres over vandfrit magnesiumsulfat. Det organiske lag destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel, og den fremkomne remanens renses ved søjlekromatografi [Wako silicagel "C-200"; der elueres med en blanding af benzen og ethylace-15 tat (1:1 rumfang)], hvorved man får 0,28 g (udbytte 67,8%) diphenylmethyl-70-[D-α-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-pipe-razincarboxamido)-0-(S)-methoxybutanamido]-7a-methoxy-3- 3 15-(1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]-Δ -cephem-4-carboxylat.

20 (4) I en blanding af 2 ml anisol og 2 ml trifluoreddikesyre opløses 0,18 g diphenylmethyl-70-[D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-1-piperazincarboxamido)—d—(S)-methoxybutanamido]-7a-methoxy-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]- 3 25 δ -cephem-4-carboxylat, og opløsningen reageres i 30 minutter under isafkøling. Reaktionsblandingen destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel, og den fremkomne remanens tilsættes 10 ml ethylacetat, hvorefter blandingen omrøres i 30 minutter. De udfældede kry-30 staller frafiltreres, hvorved man får 0,1 g (udbytte 79%) 7β-[D-α-(4-ethy1-2,3-dioxo-1-piperazincarboxamido)-β-(S)-methoxybutanamido]-7a-methoxy-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-te- 3 trazolyl)thiomethyl]-δ -cephem-4-carboxylsyre, smeltepunkt: 130 - 136 °C (dekomp.).

IR (KBr) cm-1: C=Q 1790, 1720 - 1680.

35

DK 164169 B

85 NMR (CD^COCDg : CD^SOCD^ =4:1 rumfang) ppm værdier: 1,17 (3H, t, CHg) 1,23 (3H, d, CH3) 5 3,33 (3H, s, CHg) 3,45 (3H, s, CH3) 3,96 (3H, s, CH3) 3,25-4,60 (12H, m, CH2 x 5, CH x 2) 5,08 (IH, s, CH) 10 8,97 (IH, s, NH) 9,31 (IH, d, NH) På samme måde som ovenfor fremstilledes følgende forbindelser: 15

Tb-[D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-Æ-(S)~ ethoxybutanamido]-7 e-methoxy-3-[5-(1-methyl-1,2,3,4-te- 3 trazolyl)thiomethyl-A -cephem-4-carboxylsyre, smeltepunkt 110 - 119 °C (dekomp.).

20 IR (KBr) cm"1: » C_Q 1780, 1720 - 1670.

NMR (CDgCOCDg : CDgSOCDg =4:1 rumfang) ppm værdier: 25 1,10-1,35 (9H, m, CH3 x 3) 3,50 (3H, s, CH3) 3,98 (3H, s, CHg) 3,30-4,70 (14H, m, CH2 x 6, CH x 2) 5,03 (IH, s, CH) 30 8,95 (IH, s, NH) 9,40 (IH, d, NH) 7/5- [D-a-(4-ethyl~2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-/J-(S)-tert.-butoxybutanamido]-7«-methoxy-3-[5-(1-methyl- 3 35 l,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl-A -cephem-4-carboxylsyre, smeltepunkt 110 - 115 °C (dekomp.).

DK 164169 B

86 IR (KBr) cm"1: » c=0 1780, 1730, 1680 NMR (CDgCOCDg) ppm værdier: 5 0,82-1,42 (15H, m, CH3 x 5) 3,50 (3H, s, CH3) 3,94 (3H, s, CH3) 3,22-4,58 (12H, m, CH2 x 5, CH x 2) 5,04 (IH, s, CH) 10 8,48 (IH, s, NH) 9,40 (IH, d, NH).

EKSEMPEL 17 15 (1) Til 0,5 g D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarbox- amido)-Æ-(S)-hydroxysmørsyre sættes 5 ml myresyre, og den fremkomne blanding reageres i 2 timer ved 50 °C, hvorefter reaktionsblandingen destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel. Til remanensen sættes 5 20 ml ethylacetat, og de udfældede krystaller opsamles ved filtrering, hvorved man får 0,45 g (udbytte 82%) D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-0-(S)-formyloxy-smørsyre med smeltepunkt 170 - 175 °C.

25 IR (KBr) cm"1: v ^_0 1740 - 1710, 1660.

NMR (CDgSOCDg) ppm værdier: 1.15 (3H, t, CH3) 30 1/35 (3H, d, CH3) 3,10-3,72 (4H, m, CH2 x 2) 3,72-4,10 (2H, m, CH2) 4,40-4,70 (IH, m, CH) 5,28-5,64 (IH, m, CH) 35 0 8.15 (IH, s, C-H)

DK 164169 B

87 9,41 (IH, d, NH) (2) I 5 ml vandfrit methylenchlorid opslæmmes 0,3 g D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-0-(S)-formyl-5 oxysmørsyre, og 0,14 g oxalylchlorid sættes til suspensionen under isafkøling, hvorefter en dråbe dimethylformamid tilsættes. Suspensionens temperatur hæves til stuetemperatur, og suspensionen reagerer i 30 minutter. Reaktionsblandingen destilleres herefter under reduceret tryk 10 for at fjerne opløsningsmiddel. Den fremkomne remanens opløses i 5 ml vandfrit methylenchlorid, og opløsningen afkøles til -40 °C. Opløsningen tilsættes 0,4 g diphenyl-methyl-7/5-amino-7a-methoxy-3-[5-( 1-methyl-l, 2,3,4-tetra- 3 zolyl)thiomethyl]-A -cephem-4-carboxylat, hvorefter 0,12 15 ml Ν,Ν-dimethylanilin tilsættes. Den fremkomne blanding reagerer natten over ved -20 °C. Reaktionsblandingen destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel, og 10 ml vand og 20 ml ethylacetat sættes til den fremkomne remanens for at opløse denne, hvorefter det or-20 ganiske lag fraskilles, der vaskes med mættet vandig na-triumchloridopløsning og tørres herefter over vandfrit magnesiumsulfat. Herefter destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel. Den fremkomne remanens renses ved søjlekromatografi [Wako silicagel "C-25 200"; eluering med en blanding af chloroform og acetone (10:1 rumfang)], hvorved man får 0,5 g (udbytte 64%) di-phenylmethyl-7/J-[D-α-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido )-b-(S)-formyloxybutanamido]-7 a-methoxy-3-[5- 3 (1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]-Δ -cephem-4-30 carboxylat.

(3) I en blanding af 2 ml anisol og 2 ml trifluoreddike-syre opløses 0,2 g diphenylmethyl-70-[D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido) -0- (S) -f ormyloxybutanamido] -35 7a-methoxy-3- [ 5- (1-methyl-l ,2,3,4-tetrazolyl) thiomethyl] - 3 δ -cephem-4-carboxylat, og den fremkomne opløsning reageres i 15 minutter under isafkøling. Reaktionsblandingen

DK 164169 B

88 destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel, og 10 ml ethylacetat sættes til remanensen, hvorefter den fremkomne blanding omrøres i 30 minutter.

De udfældede krystaller opsamles herefter ved filtrering, 5 hvorved man får 0,15 g (udbytte 94%) 75-[D-a-(4-ethyl- 2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-5-(S)-formyloxybutan-amido]-7a-methoxy-3-[5—(1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)thio- 3 methyl-Δ -cephem-4-carboxylsyre med smeltepunkt 147 - 155 0 C (dekomp.).

10 IR (KBr) cm"1: v C=Q 1780, 1720 - 1680.

NMR (CDgSOCDg) ppm værdier: 15 0,90-1,45 (6H, m, CHg x 2) 3.20- 3,80 (6H, m, CH2 x 3) 3,40 (3H, s, CHg) 3,80-4,10 (2H, m, CH2) 3,94 (3H, s, CH3) 20 4,20-4,4/ (2H, m, CH2) 4,50-4,90 (IH, m, CH) 5,07 (IH, s, CH) 5.20- 5,50 (IH, m, CH) 0 25 8,20 (IH, s, C-H) 9,43 (IH, s, NH) 9,54 (IH, d, NH) På samme måde som ovenfor fremstilledes følgende forbin-30 delse: 75-[D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-5-(S)-acetoxybutanamido]-7a-methoxy-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-te- 3 trazolyl]-Δ -cephem-4-carboxylsyre, smeltepunkt 136 - 142 1 °c (dekomp.).

DK 164169B

89 NMR (CDgCOCDg : CD^SOCDg =4:1 rumfang) ppm værdier: 1,06-1,35 (6H, m, CH3 x 2) 2.01 (3H, s, CH3) 5 3,45 (3H, s, CH3) 3,98 (3H, s, CH3) 3,35-5,00 (12H, m, CH2 x 5, CH x 2) 5.02 (IH, s, CH) 9,37 (IH, s, NH) 10 9,45 (IH, d, NH) EKSEMPEL 18 I 10 ml 80% vandig tetrahydrofuran opslæmmes 0,58 g 7 b-15 [D-a-amino-b-(S)-hydroxybutanamido]-7 a-methoxy-3- [ 5 - (1 - 3 methyl-1,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]-δ -cephem-4-carboxylsyre, hvorefter triethylamin sættes til opslæmningen for at indstille pH til 7,0 - 7,5. Til den fremkomne opløsning sættes 0,48 g af en blanding af 4-ethyl-20 2,3-dioxo-l-piperazincarbonylchlorid og triethylaminhy- drochlorid (indhold af 4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazinchlo-rid (58 vægtprocent) ved 3-5 °C, medens man tilsætter triethylamin for at indstille pH til 7,0 - 7,5. Ved samme temperatur udføres reaktionen i 1 time, hvorefter pH ind-25 stilles til 5,5 med 6N saltsyre. Reaktionsblandingen destilleres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmiddel, og 4 ml 20% vandig acetone sættes til remanensen for at opløst denne, hvorefter pH af opløsningen indstilles til 1,5 med 6N saltsyre ved 3-5 °C. Herefter omrøres 30 opløsningen i 5 timer, og de udfældede krystaller opsamles ved filtrering, hvorved man får 0,54 g (udbytte 65,1%) 70-[D-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxami-do)-b-(S)-hydroxybutanamido]-7a-methoxy-[5-(1-methyl- 3 1,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]-Δ -cephem-4-carboxylsyre- 1 dihydrat med smeltepunkt 173 - 175 °C (dekomp.).

DK 164169 B

90 IR (KBr) cm"1: v C=Q 1775, 1710, 1657, 1660.

NMR-spektret af forbindelsen var identisk med spektret af forbindelsen i eksempel 10.

5 10 15 20 25 30 35

DK 164169 B

91

Eksempel 19 (1) I 15 ml 85% myresyre opløstes 0,8 g af den øvre komponent fra eksempel 7(1).Efter tilsætning af 0,4 g Zn-pulver til denne opløsning under isafkøling blev reaktionsblandingen omrørt i 3 timer ved den samme temperatur. Det uopløselige materiale blev frafiltreret, og filtratet befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk. Til remanensen sattes 10 ml methylenchlorid, 5 ml acetone og 10 ml vand, og pH-værdien blev indstillet til 7,0 med mættet vandig natrium-hydrogencarbonatopløsning. Det organiske lag blev skilt fra, vasket med mættet vandig natriumchloridopløsning, tørret over magnesiumsulfat og befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk, hvorved der blev opnået .0,45 g diphenylmethyl-7-[ D-α-(2-amino-4-thiazolyl)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-1-piperazincarboxamido)acetamido]-3-[5-(1-metnyl-l,2,3,4-tetra- 3 zolyl)thiomethylj-Λ -cephem-4-carboxylat i form af hvidt pulver, smp. 185 - 192 °C (dekomp.), udbytte 67,5 %.

IR(KBr) cm'1; 'i 1770, 1700, 1675 C=0 NMR (CDCl^^ værdier: 1,11 (3H, t, -CH3), 3,20 - 3,99 (8H, m, >CH2x4) 3,76 (3H, s, -CH3), 4,21 - 4,26 (2H, ABq, >CH2), 3,81 (IH, d,^CH), 5,49 (IH, d,->CH), 5,73 (IH, dd, <>CH), 6,37 (IH, s,^CH), 6,85 (IH, s,^tCH), 7,29 (10H, s, -C6H5x2), 8,07 (IH, bs, >NH), 9,70 (IH, d, >NH).

(2) Under anvendelse af 0,8 g af komponenten fra den nedre zone eksenpel 7 (1) gentoges den samme operation som under (1) ovenfor, hvorved der blev opnået 0,4 g diphenylmethyl-7-[L-α- (2-amino-4-thiazolyl) -a- (4-ethyl-2,3-dioxo~l-piperazin-carboxamido)acetamido]-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)- 3 thiomethyl]-^ -cephem-4-carboxylat i form af hvidt pulver smp. 175 - 180 °C (dekomp.), udbytte 60,0 %.

DK 164169 B

92 IR(KBr) cm”1; J 1770, 1700, 1675 C=0 NMR (CDC13) S værdier: 1,05 (3H, t, -CH3), 3,10 - 4,30 QOH, m, XH2 x 5), 3,75 (3H, s, ~CH3), 4,90 (IH, d, ^CH), 5,60 - 5,85 (2H, m, ^CH x 2), 6,37 (IH, s, 5CH), 6,79 (IH, s, ^CH), 7,30 (11H, m, -Cg^ x 2 >NH), 8,10 (IH, bs, ^NH), 9,68 (IH, d, iNH).

(3) I 2,0 ml anisol opløstes 0,2 g diphenylmethyl-7-[D-a-(2-amino-4-thiazolyl)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincar-boxamido)acetamido]-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl] -Δ -cephem-4-carboxylat fra (1) ovenfor. Til denne opløsning sattes 2,0 ml trifluoreddikesyre under isafkøling, og reaktionsblandingen blev omrørt i 20 minutter ved samme temperatur.

Det uopløselige materiale blev frafiltreret, og filtratet befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk. Remanensen blev behandlet med 5 ml ethylacetat, hvorved der blev opnået 0,17 g trifluoreddikesyresalt af 7-[D-a-(2-amino-4-thiadiazolyl)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarbox-amido)acetamido]-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]--^-cephem-4-carboxylsyre i form af hvidt pulver, smp. 185 - 195 °C (dekomp.), udbytte 90,4 %.

IR (KBr) cm”1; ^ Q=Q 1765, 1700, 1670 NMR (DMSO-dg) § værdier: 1,08 (3H, t, -CH3), 3,21 - 4,07 (8H, m, ^CH2 x 4), 3,92 (3H, s, -CH3), 4,24, 4,80 (2H, ABq, ^CH2), 5,00 (IH, d, ^CH), 5,48 (IH, d, -$CH), 5,72 (IH, dd, ^CH), 6,75 (IH, bs, -C00H), 6,61 (IH, s, ^CH), 9,12 (IH, d, —NH), 9,61 (IH, d,^NH), (4) Under anvendelse af 0,2 g diphenylmethyl-7-[L-a-2-amino-4-thiazolyl)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarboxamido)acet-amido]-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]-rY^-cephem 4-carboxylat fra (2) ovenfor, gennemførtes den samme operation

DK 164169 B

93 som under (3), hvorved der blev opnået 0,16 g trifluor-eddikesyresalt af 7-[L-α-(2-amino-4-thiazolyl)~a- (4-ethyl- 2.3- dioxo-l-piperazincarboxamido}acetamido]—3—[5—(1-methyl- 1,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]-Δ -cephem-4-carboxylsyre i form af hvidt pulver, smp. 183 - 189 °C (dekomp.).

IR (KBr) cm_1;V 1765, 1700, 1670 NMR (DMSO-dg) 5 værdier: 1,11 (3H, t, ~CH3), 3,30 - 4,10 (8H, m, x 4), 3,94 (3H, s, -CH3), 4,28, 4,33 (2H, Abq, ^CH2), 5,08 (IH, d, ^CH), 5,48 (IH, d, ^CH) , 5,65 (IH, dd, $CH), 6,60 (IH, s, $CH), 6,80 (IH, bs, COOH), 9,26 (IH, d, ^NH), 9,64 (IH, d, >NH) (5) I 3 ml 50 % vandig acetone opløstes 0,15 g trifluor-eddikesyresalt af 7-[D-a-(2-amino-4-thiazolyl)~a-(4-ethyl- 2.3- dioxo-l-piperazincarboxamido]-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4- 3 tetrazolyl) thiomethyl ]-ri -cephem-4-carboxylsyre fra (3) ovenfor. Efter tilsætning af 0,018 g (ækvimolsr mængde) pyridin til denne opløsning blev blandingen befriet for opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk. Ved filtrering med vand blev der opsamlet krystaller af 7-[D-a-(2-amino-4-thiazolyl)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazincarbox-amido)acetamido]-3-[5-(1-methyl-l,2,3,4-tetrazolyl)thiomethyl]-Δ -cephem-4-carboxylsyre. IR (KBr) cm : V c=0 1765, 1700, 1670, 1625.

På lignende måde fremstilledes de følgende forbindelser: 7-[D-a-(2-amino-4-thiazolyl)-a-(4-ethyl-2,3-dicxo-l-piperazin- carboxamido)acetamido]-3-[5-(1-carbamoylmethyl-l,2,3,4-tetra-

3 —I

zolyl)thiomethyl -Λ -cephem-4-carboxylsyre. IR (KBr) cm :^q~q 1765, 1700, 1670, 1630.

7-[D-a-(2-amino-4-thiazolyl)(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazin- 3 carboxamido)acetamido]-3-acetoxymethyl-Δ -cephem-4-carboxylsyre.

IR (KBr) cm-1: \) Q=Q 1765, 1720-1620.

DK 164169B

94 7-[D-a-{2-amino-4-thiazolyl)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazin-carboxamido)acetamido]-3-[2-(5-methyl-l,3,4-thiadiazolyl)- 3 ~1 thiomethyl]-A -cephem-4-carboxylsyre. IR (KBr) cm : q-q 1765, 1710, 1630.

Claims (4)

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af 7a-methoxyce-5 phalosporiner repræsenteret ved den almene formel ?ch3 A-N N-CONH-CH-CONH-1—(I) “ ^ i COOH 2 15 hvori R betyder en C1_1Qacyloxy-, pyridazinylthio-, thia-diazolylthio-, triazolylthio- eller tetrazolylthiogruppe, som eventuelt er substitueret med en C^,-alkyl-, carboxyl-C1_galkyl-, carbamoyl-C.^ ^alkyl-, hydroxy-C^^alkyl-, hydroxy-, C2_5alkenyl-, hydroxyimino-C1_5alkyl-, C1_10acyl-20 C1_5alkyl-, N-hydroxycarbamoy1-C^ _ g alkyl-, di-C^ _ galkyl-amino-C^_galkyl- eller amino-C^_galkylgruppe; A betyder et hydrogenatom eller en C^^alkylgruppe; og B betyder en C^_^alkyl-, C__gCycloalkadienyl-, thiazolyl-, thienyl- eller furylgruppe, som eventuelt er substitueret med et ha-25 logenatom eller en ,-alkoxy-, hydroxy, c1_1Qacyloxy-, ethoxyethoxy-, 2-tetrahydropyranyloxy-, amino-, trichlor-ethoxycarbonylamino-, imino- eller trichlorethoxycarbonyl-iminogruppe, eller farmaceutisk acceptable salte deraf, kendetegnet ved, at 30 1 DK 164169 B (1) en forbindelse repræsenteret ved den almene formel OCH3

5 R6-NH-CH-C0NH-l—r^S\ nn I IJ J (l,) B 0^-NY^CH2R2 COOR1 10 i hvori R betyder et hydrogenatom eller en carboxylbeskyt- 2. tende gruppe, R og B er som defineret ovenfor, og R° betyder et hydrogenatom, en organisk silylgruppe eller en organisk phosphorholdig gruppe, omsættes med et reaktivt 15 derivat i carboxylgruppen af en forbindelse repræsenteret ved den almene formel 20

20 A-N N-C00H (III) \_/ hvori A er som defineret ovenfor, eller 25 (2) en forbindelse repræsenteret ved den almene formel och3 R6-NH-f—<IV) “ TY'«*.* COOR1 12 6 35 hvori R , R og R er som defineret ovenfor, omsættes med en forbindelse repræsenteret ved den almene formel DK 164169 B 0 ,P A-N N-CONH-CH-COOH (V) V-/ I B 5 hvori A og B er som defineret ovenfor, eller et reaktivt derivat i carboxylgruppen, eller 10 (3) en cephalosporin repræsenteret ved den almene formel H A-N N-C0NH-CH-C0NH 1—(VI)

15 N_J' B o^Y^CHjR2 C00R1 1 2 hvori R , R , A og B er som defineret ovenfor, omsættes i nærvær af methanol med et alkalimetalmethanolat med den 20 almene formel M1+-0CH3 (VII) hvori M1 betyder et alkalimetal, og derpå omsættes med et 25 halogeneringsmiddel, eller (4) en 7a-methoxycephalosporin repræsenteret ved den almene formel

30. Q ?ch3 A-N N-C0NH-CH-C0NH--(VI ID C00R1 35 1 7 hvori R , A og B er som defineret ovenfor, og R betyder DK 164169 B en gruppe, der let erstattes af et nucleophilt reagens, omsættes med en forbindelse repræsenteret ved den almene formel

5 R2M2 (IX) 2. hvori R er som defineret ovenfor, og M betyder hydrogen, alkalimetal eller jordalkalimetal, 10 hvorpå, om ønsket, en under (1)-(4) dannet forbindelse med formlen (I) omdannes til et farmaceutisk acceptabelt salt deraf, eller, om ønsket, et dannet salt af en forbindelse med formlen (I) omdannes til den frie syre.

2. Cephalosporiner repræsenteret ved den almene formel A-N 'J-C0NH-CH-C0NH 1—(VI) W B /“»ΥΝη^2 20 1 , C00R1 1 2 hvori R , R og A er som defineret i krav 1, og B betyder 25 IP eller dens tautomer _ iP-J 1 2 3 4 5 6 2 4 3 hvor R betyder en aminogruppe eller trichlorethoxycarbo- 4 5 5 nylaminogruppe, og R betyder en iminogruppe eller tri-chlorethoxycarbonyliminogruppe, og salte deraf til anvendelse som udgangsmateriale ved fremgangsmåden ifølge krav 6 DK 164169B

3. Cephalosporiner og salte deraf ifølge krav 2, k e n - 2 detegnet ved, at R er acetoxy, 5-(l-methyl- 1,2,3,4-tetrazolyl)thio eller 2-(5-methyl-l,3,4-thiadia-zolyl)thio. 5

4. Cephalosporiner og salte deraf ifølge krav 3, k e n - 4 5 detegnet ved, at R er amino, og R er imino. 10 15 20 25 30 1