DK159205B

DK159205B - Bis(triazol)alkanol-forbindelser, anvendelse af disse, farmaceutiske praeparater og landbrugsfungicider indeholdende disse og fremgangsmaade til behandling af planter eller froe, som har en svampeinfektion

Info

Publication number: DK159205B
Application number: DK135084A
Authority: DK
Inventors: Kenneth Richardson; Subramaniyan Narayanaswami
Original assignee: Pfizer
Priority date: 1983-03-16
Filing date: 1984-02-29
Publication date: 1990-09-17
Also published as: FI841056L; ES530587A0; PL143223B1; PH21437A; PL246664A1; IE57100B1; NO841017L; HU194838B; GR81884B; KR880002275B1; EP0122056A1; DK135084D0; AU2563684A; PT78243B; DD224850A5; DK135084A; IE840652L; DK159205C; FI841056A0; YU45684A

Description

DK 159205B

i

Opfindelsen angår hidtil ukendte bis-triazol-forbindelser, som har antifungal virkning, og som kan anvendes ved behandling af svampeinfektioner hos dyr, herunder mennesker, samt som landbrugsfungicider. Opfindelsen angår også farma-5 ceutiske præparater og landbrugsfungicider indeholdende forbindelserne og en fremgangsmåde til behandling af planter eller frø, som har en svampeinfektion. Opfindelsen angår . endvidere anvendelsen af forbindelserne til fremstilling af et lægemiddel mod svampeinfektioner.

10 Forbindelserne ifølge opfindelsen er bis(triazol)alkanol-forbindelser med formlen: OH R1

1 I

W XN-CH -C-C-4J N

\ / 2 i I \ / 111 hvori R betyder 2,4-difluorphenyl, 2,4-dichlorphenyl eller 5-chlorpyrid-2-yl, og R1 betyder H eller CH3, idet R1 er CH3, når R er dichlorphenyl, og farmaceutisk og 15 landbrugsmæssigt acceptable salte deraf.

Opfindelsen tilvejebringer også farmaceutiske præparater indeholdende en, forbindelse med formlen (I) eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf sammen med et farmaceutisk acceptabelt fortyndingsmiddel eller bærestof.

20 Endvidere tilvejebringer opfindelsen forbindelserne med formlen (I) og farmaceutisk acceptable salte deraf til anvendelse inden for medicinen, specielt til behandling af svampinfektioner hos dyr, herunder mennesker.

Endvidere tilvejebringer opfindelsen svampebekæmpende 25 midler til anvendelse i landbruget (herunder i havebru- 2

DK 159205 B

get), som indeholder en forbindelse med formlen (I) eller et landbrugsmæssigt acceptabelt salt deraf sammen med et landbrugsmæssigt acceptabelt fortyndingsmiddel eller bærestof.

5

Desuden tilvejebringer opfindelsen en fremgangsmåde til behandling af planter eller frø, som har en svampeinfektion, hvorved planten eller frøet eller stedet, hvor planten vokser, bringes i kontakt med en svampedræbende .10 effektiv mængde af en forbindelse med formlen (I) eller et landbrugsmæssigt acceptabelt salt deraf.

Forbindelserne med formlen (I) kan fremstilles på sædvanlig måde efter følgende reaktionsskema: 15 1,2,4-triazol, fortrinsvis i nær-C_CH, værelse af en base, såsom K2C03' \ /il 2 ·--^ \-RI R eller et basesalt af 1,2,4-triazol 2 0 (II)

CH- OH

ja 1 i

25 N-C C-CH--N N

\ / 11 1 (D

30

Ved en typisk omsætning opvarmes ethoxidet (il), 1,2,4-35 triazol og vandfrit kaliumcarbonat sammen ved f.eks. 40-120 °C i et passende opløsningsmiddel, f.eks. vandfrit 3

DK 159205 B

dimethylformamid, indtil reaktionen er løbet til ende, fortrinsvis i løbet af 2-16 timer. Forbindelsen (I) kan -derefter- isoleres-og renses på-sædvanlig måde.

5 Dersom der anvendes et basesalt af 1,2,4-triazol- er dette fortrinsvis et alkalimetalsalt.

Udgangsmaterialerne med formlen (II) kan fås på sædvanlig måde, f.eks.: 10

i) NaH CEL

I J

-C-R «> <^1 γ

w S WH

15 (III)

Dimethyloxosulfonium- 20 methylid

O

t [(cs3)2s=ch23.

25 ^ CH3 o N-C— C--CH, w i· i 30 (Π) 35 4

DK 159205 B

I første trin i ovennævnte skema anvendes ca. et ækvivalent natriumhydrid og ca. et ækvivalent methyliodid, dersom der ønskes monomethylering, og mindst to ækvivalenter af hver, dersom dimethylering er ønsket.

5

Trimethylsulfoxoniumiodid og enten natriumhydrid eller natriumhydroxid/cetrimid kan anvendes til at danne dime-thyloxosulfoniummethylid in situ. Dersom R betegner en phenylgruppe, der ikke indeholder nogen orthosubsti-10 tuent, bør cetrimid/NaOH-ruten anvendes.

Ketonerne (III) er enten kendte forbindelser (se f.eks.

EP offentliggørelsesskrift nr. 0 044 605 eller 6B patentskrift nr. 2 099 818A) eller kan fremstilles ved 15 metoder, der er analoge med tidligere kendte metoder.

De forbindelser med formlen (I), hvori R1 er H, kan fremstilles ved, at man omsætter en forbindelse med formlen: 20

OH

x-chJ-ch-ς1 m XCH3 25 hvori X og X1 hver for sig betyder en fraspaltelig gruppe, fortrinsvis Cl, Br eller I, og R er som defineret 30 for formel (I), med enten 1,2,4-triazol, fortrinsvis i nærværelse af en base, f.eks. kaliumcarbonat, eller med et basesalt, fortrinsvis et alkalimetalsalt af 1,2,4-triazol.

35 Fortrinsvis er X og X1 det samme og foretrukket Br.

5

DK 159205 B

Typisk opvarmes forbindelsen (V), 1,2,4-triazol og ka-liumcarbonat sammen ved f.eks. 40-120 ®C i et passende organisk opløsningsmiddel, f.eks. dimethylformamid, indtil reaktionen er løbet til ende. Forbindelsen kan iso-5 leres og renses på sædvanlig måde.

Udgangsmaterialerne (V) kan opnås på sædvanlig måde, f.eks.: 10 ii Γ R.MgBr + Br-CH2-C-CH-Br Br.CH2-C-CH-Br ' (VAj CH_ R CH_ -3__^ 3 15

Det er ikke nødvendigt at isolere mellemproduktet (V).

20 Det kan anvendes direkte.

Farmaceutisk acceptable syreadditionssalte af forbindelserne med formlen (I) er de, der dannes med stærke syrer, som danner ikke-toxiske syreadditionssalte, f.eks.

25 saltsyre, hydrogenbromidsyre, svovlsyre, oxalsyre og me-thansulfonsyre.

Saltene kan fås på sædvanlig måde, f.eks. ved at blande opløsninger indeholdende omtrent ækvimolære mængder af 30 den fri base og den pågældende syre, og det fremstillede salt kan opsamles ved filtrering, dersom det er uopløseligt, eller ved inddampning af opløsningen.

De omhandlede forbindelser har vist sig at være i besid-35 delse af uventet god virkning over for infektioner forårsaget af de klinisk betydningsfulde Aspergillus svam-

DK 159205 B

s pe.

- Forbindelserne med formlen (I) og deres salte er svampe-bekæmpende midler, der anvendes til bekæmpelse af svam-5 peinfektioner hos dyr, herunder mennesker. F.eks. kan de anvendes til at behandle topiske svampeinfektioner hos mennesker, forårsaget af organismer af arterne Candida, Trichophyton, Microsporum eller Epidermophyton eller slimhindeinfektioner forårsaget af Candida albicans 10 (f.eks. trøske og vaginal candidiasis). De kan også anvendes ved behandlingen af systemiske svampeinfektioner, f.eks. forårsaget af Candida albicans; Cryptococcus neoformans, Aspergillus flavus, Aspergillus fumigatur, Coccidioides, Paracoccidioides, Histoplasma eller 15 Blastomyces.

In vitro-bedømmelse af forbindelsernes svampebekæmpende virkning kan udføres ved at bestemme de minimale inhibe-rende koncentrationer (m.i.c.) af prøveforbindelserne i 20 et passende substrat, ved hvilken der ikke sker vækst af den bestemte mikroorganisme. I praksis tilsås en række agarplader, der hver især har prøveforbindelsen indarbejdet i en bestemt koncentration, med en standardkultur af f.eks. Candida albicans, og derpå inkuberes hver pla-25 de ved 37 °C i 48 timer. Herefter undersøges pladerne for mulig vækst af svampe, og de pågældende m.i.c.-værdier noteres. Andre mikroorganismer, der anvendes ved disse forsøg, kan f.eks. være Candida albicans,

Aspergillus fumigatus, Trichophyton spp; Microsporum 30 ssp; Epidermophyton floccosum, Coccidioides immitis og Torulopsis glabrata.

In vivo-bedømmelsen af forbindelserne kan udføres ved en række dosisniveauer ved intraperitoneal eller intravenøs 35 indsprøjtning eller ved peroral administrering i mus, der er podet f.eks. med en stamme af Candida albicans 7

DK 159205 B

eller Aspergillus flavus. Aktiviteten er baseret på overlevelse af en behandlet gruppe mus, efter at de ubehandlede mus er døde. Det dosisniveau,·hvorved forbindelsen giver 50 % beskyttelse mod dødelig virkning af 5 infektionen (PD50) bestemmes.

Til humanmedicinsk brug kan de svampebekæmpende midler med formlen (I) og deres salte administreres alene, men sædvanligvis administreres de sammen med et farmaceutisk 10 bærestof, der er udvalgt med henblik på den påtænkte administreringsvej, samt hvad der er almindeligt inden for farmaceutisk praksis. F.eks. kan de administreres peroralt i form af tabletter indeholdende hjælpestoffer, som f.eks. lactose, eller i kapsler eller lignende, en-15 ten alene eller blandet med hjælpestoffer eller i form af elixirer eller suspensioner indeholdende smagsmidler eller farvemidler. De kan indsprøjtes parenteralt, f.eks. intravenøst, intramusculært eller subcutant.

20 Til parenteral administrering anvendes de bedst i form af en steril vandig opløsning, der kan indeholde andre forbindelser, som f.eks. nok salte eller glucose til at gøre opløsningen isotonisk med blod.

25 Til peroral og parenteral administrering til patienter udgør den daglige dosis af det svampebekæmpende middel med formlen (I) og salte deraf fra 0,1 til 10 mg/kg (i opdelte doser). Således kan tabletter eller kapsler af forbindelserne indeholde fra 5 mg til 0,5 g aktiv for-30 bindelse til administrering alene eller to eller flere ad gangen, afhængigt af hvad der er passende. Den behandlende læge vil i hvert enkelt tilfælde bestemme den aktuelle dosis, der er mest velegnet til den enkelte patient, og denne vil variere med den bestemte patients 35 alder, vægt og respons på behandlingen. De nævnte doser er eksempler på gennemsnitstilfælde; der kan naturligvis 8

DK 159205 B

være enkelte tilfælde, hvor højere eller lavere doser er af værdi, og disse falder også inden for den foreliggende opfindelses rammer.

5 Alternativt kan de svampebekæmpende midler med formlen (I) administreres i form af et suppositorie eller pessar, eller de kan anvendes topisk i form af lotioner, opløsninger, cremer, salver eller puddere. De kan f.eks. indarbejdes i en creme, der består af en vandig emulsion 10 ... af polyethylenglycoler eller flydende paraffin; eller de kan indarbejdes i en koncentration på mellem 1 og 10 % i en salve, der består af en hvid voks eller hvid, blød paraffinbase sammen med stabilisatorer og konserveringsmidler, afhængigt af hvad der er nødvendigt.

15

Forbindelserne med formlen (I) og salte deraf har også virkning over for en hel række plantepatogene svampe, herunder f.eks. forskellige rustarter, meldugarter og skimmelsvampe, og forbindelserne er værdifulde til be-20 handling af planter og frø for at udrydde eller forhindre disse sygdomme.

In vitro bedømmelsen af de omhandlede forbindelsers virkning over for plantesvampe kan bestemmes ved måling 25 af deres minimale inhiberende koncentrationer således som beskrevet tidligere, bortset fra at pladerne inkuberes ved 30 °C i 48 timer eller længere, inden de undersøges for mulig vækst.

30 Mikroorganismer, der anvendes i disse forsøg, omfatter Cochliobolus carbonum, Fyricularia oryzae, Glomerella cingulata, Penicillium digitatum, Botrytis cinerea og Rhizoctonia solani.

35 Til anvendelse inden for landbruget og havebruget bruges de omhandlede forbindelser og deres landbrugsmæssigt ac-

DK 159205 B

9 ceptable salte fortrinsvis som præparater, der er sammensat afhængigt af det specielle formål, hvortil de skal anvendes. Forbindelserne kan således påføres i form af puddere eller granulater, frøbehandlingsmidler, van-5 dige opløsninger, dispersioner eller emulsioner, dyppeopløsninger, sprays, aerosoler eller røg. Præparaterne kan også anvendes i form af dispergerbare pulvere, granulater eller korn eller koncentrater, der fortyndes inden anvendelsen. Sådanne præparater kan indeholde almin-10 delige bærestoffer, fortyndingsmidler eller hjælpestoffer, der er velkendte inden for landbruget og havebruget, og de fremstilles, således som det er almindeligt inden for disse områder. Præparaterne kan også omfatte andre aktive bestanddele, som f.eks. herbicider eller 15 insekticider eller andre fungicider. Forbindelserne og præparaterne kan anvendes på en hel række måder. F.eks. kan de direkte påføres planternes blade, stilke, grene, frø eller rødder, eller de kan påføres jorden eller et andet vækstsubstrat, og de kan anvendes ikke alene for 20 at udslette sygdommen, men også profylaktisk for at beskytte planterne eller frøene mod svampeangreb.

Følgende eksempler illustrerer opfindelsen nærmere.

25 30 35

DK 159205 B

ίο

Eksempel 1 ly3-bis(lH-lf2,4-triazol-l-yl)-2-(2,4-difluorphenyl)-3-methylbutan-2-ol 5

ηττ f) CHn OH

I 3 / \ _ I 3 I

h—N-C-C- CH9 1,2,4-triazol K N-C—C-CH^N \N

I -Vkl pY

10 K2C03 ® 1[T

* 15 Til en opløsning af 2-(2f4-difluorphenyl)-2-(2-(1H- l,2,4-triazol-l-yl)prop-2-yl]oxiran (0,49 g, 1/8 mmol) i dimethylformamid (20 ml) sattes 1/2,4-triazol (0,25 g, 3/6 mmol) og vandfrit kaliumcarbonat (0/25 gf 1,8 mmol).

Der opvarmedes under omrøring ved 80 °C i 4 timer. Her-20 efter afdampedes opløsningsmidlet, der tilsattes vand (100 ml), og blandingen ekstraheredes med methylenchlo-rid (3 x 30 ml). De forenede organiske ekstrakter blev vasket med vand (3 x 20 ml), tørret over vandfrit magnesiumsulfat og inddampet til et urent fast stof, der ve-25 jede 0,73 g.

Rensning udførtes under anvendelse af en lynsøjle af Merck "Kieselgel 60" (handelsnavn) siliciumdioxid med partikelstørrelse svarende til maskevidde 38-63 ym, idet 30 der elueredes med methylenchlorid indeholdende gradvis stigende mængder methanol (fra 1 til 5 %). De passende fraktioner gav ved inddampning en olie, der blev krystalliseret fra diisopropylether, hvorved der blev opnået 0,36 g af titelforbindelsen, smeltepunkt 155-157 °C 35 (60 % udbytte).

11

DK 159205 B

Analyse %:

Beregnet for C15H16F2N6O: C 53,9, H 4,8, N 25,1, 5 Fundet: C 53,6, H 4,8, N 24,9.

NMR-, IR- og massespektrometriske data for forbindelsen var i overensstemmelse med den angivne struktur.

10 Eksempel 2 1,3-bis(1H-1,2,4-triazol-l-yl)-2-(2,4-difluorphenyl)-bu-tan-2-ol

ch3 o 1¾ °H

N 'N-CH—C-— CK 1,2,4-trxazol , N N-CH-C-CH2-N

V > V. Λ^ν

u o O

i t 25 Til en opløsning af 2-(2,4-difluorphenyl)-2-[1-(1H- l,2,4-triazol-l-yl)ethyl]oxiran (0,5 g, 1,9 mmol) i di-methylformamid (20 ml) sattes 1,2,4-triazol (0,27 g, 3,8 mmol) og vandfrit kaliumcarbonat (0,27 g, 1,9 mmol). Opvarmning under omrøring ved 85 °C udførtes i 3 timer.

30 Opløsningsmidlet blev afdampet, der tilsattes vand (100 ml), og blandingen blev derefter extraheret med methy-lenchlorid (3 x 30 ml). De forenede organiske extrakter blev vasket med vand (3 x 20 ml), tørret over vandfrit magnesiumsulfat og inddampet til opnåelse af et urent 35 fast materiale, der vejede 0,6 g.

12

DK 159205 B

Rensning udførtes på en lynsøjle af Merck "Kieselgel 60" siliciumdixoid (maskevidde 38-63 μπι), idet der elueredes med methylenchlorid indeholdende gradvis stigende mængder methanol (fra 1 til 5 %). De passende fraktioner gav 5 ved inddampning et fast materiale, der blev omkrystalliseret fra isopropylalkohol, hvorved der blev opnået 0,42 g af den rene titelforbindelse med smeltepunkt 186-188 °C (60 % udbytte).

10 Analyse %:

Beregnet for Ci4H14F2N60: C 52,5, H 4,4, N 26,2,

Fundet: C 52,4, H 4,5, N 26,5.

15 NMR-, IR- og massespektrometriske data for forbindelsen var i overensstemmelse med den angivne struktur.

Eksempel 3 20 1,3-bis(IH—1,2,4-triazol-l-yl)-2-(5-chlorpyrid-2-yl)-butan-2-ol

„ CH, 0V CK, OH

I / \ I l

N N-CH—C-CH. 1,2,4-triazol , N H-CH—C-CH N

v φ w -> v .W

30 Cl Cl

Til en opløsning af 2-[5-chlorpyrid-2-yl]-2-[1-(1H- l,2,4-triazol-l-yl)ethyl]oxiran (70 mg, 0,28 mmol) i 35 dimethylformamid (5 ml) sattes 1,2,4-triazol (39 mg, 0,56 mmol) og vandfrit kaliumcarbonat (39 mg, 0,28

DK 159205 B

13 mmol).

Opvarmning under omrøring udførtes i 3 timer ved 80 eC.

Herefter blev opløsningsmidlet afdampet, der tilsattes 5 vand (20 ml), og blandingen blev extraheret med methy-lenchlorid (3 x 10 ml). De forenede organiske extrakter blev vasket med vand (3 x 5 ml), tørret over vandfrit magnesiumsulfat og inddampet til en olie (100 mg). Rensning udførtes under anvendelse af en lynsøjle fra Merck 10 "Kieselgel 60" siliciumdioxid maskevidde (38-63 ym), idet der elueredes med methylenchlorid indeholdende gradvis stigende mængder af methanol (fra 1 til 5 %). De passende fraktioner gav ved inddampning 25 mg af den rene titelforbindelse med smeltepunkt 156-157 °C (28,1 % 15 udbytte).

NMR- og IR-data for forbindelsen var i overensstemmelse med den angivne struktur.

20 25 30 35 14

DK 159205 B

Referenceeksempel A

Fremstilling af 1,3-bis-(lH-l,2,4-triazol-l-yl)-2-(4-chlorphenyl)butan-2-ol 5

Vej (a)

MgBr A . ?h + BrCH_CCCH (CH ) Br -> BrCH9-C-CH(C5.)Br 10 2 3 k 9

Cl 15

Λ OH

AA .

1,2,4-Triazol , ** N-CH2-C-CH(CH^)N N

„ ό w

Cl ! 4-chlorphenylmagnesiumbromid i ether (80 ml) (fremstillet ud fra 4-chlorbrombenzen (15/2 g) og magnesiumspåner (2,8 g)] sattes under en nitrogenatmosfære i løbet af 30 25 minutter med en dobbeltnål til en opløsning af 1,3-di-brombutan-2-on (9,2 g) (Org. Synthesis, 53^, 123) i tør ether (50 ml) ved -78 °C. Efter omrøring 1 time ved -78 °C blev den resulterende blanding udslukt med mættet am-moniumchloridopløsning og fik lov til at nå til stuetempe-30 ratur. Etherlaget blev skilt fra, det vandige lag blev ex-traheret med ether (3 x 20 ml), og de forenede etherextrak— ter blev vasket med saltopløsning og tørret (MgS04). Efter fjernelse af etheren sattes remanensen til en blanding af 1,2,4-triazol (8 g), kaliumcarbonat (20 g) og dime-35 thylformamid (50 ml) under en nitrognatmosfære, og blan dingen opvarmedes natten over ved 70 °C. Den afkølede 15

DK 159205 B

opløsning filtreredes, det faste materiale vaskedes med xylen (50 ml), og de forenede filtrater inddampedes i vakuum. De sidste spor af dimethylformamid fjernedes med azeotropisk destillation med xylen (2 x 30 ml). Den 5 urensede remanens udrystedes mellem methylenchlorid (200 ml) og vand (100 ml), og methylenchloridextrakten vaskedes med vand og tørredes (MgS04). Efter fjernelse af methylenchlorid i vakuum lynkromatograferedes remanensen på siliciumoxid (150 g), idet der anvendtes methylen-10 chlorid indeholdende 8 rumfangsprocent methanol til eluering. De passende fraktioner (dvs. fraktionerne 29-39, 50 ml af hver) sloges sammen og gav ved inddampning 1,1 g af en blanding af diastereomere par. De isomere par adskiltes ved lynkromatografi på siliciumoxid (100 15 g), der elueredes med ethylacetat:diethylamin:methanol (80:20:2 rumfang). Fraktionerne 13-16 (25 ml af hver) sloges sammen og inddampedes, hvorved der opnåedes det isomere par 1 (114 mg), smeltepunkt 112-113 °C fra ethylacetat/hexan. (Massespektral-resultat m/e 318 (M+); 20 beregnet for C14H15CIN6O: M+ = 318. Inddampning af fraktionerne 31-49 (igen 25 ml af hver) efterfulgt af omkrystallisation med ethylacetat/hexan gav det isomere par 2 (246 mg), smeltepunkt 50-51 °C (massespektral-resultat m/e 318 (M+); beregnet for C14H15CIN6O: M+ = 318.

25

Eksempel 4 l,3-bis(1H-1,2,4-triazol-l-yl)-2-(2,4-difluorphenyl)bu-tan-2-ol blev fremstillet og adskiltes i forbindelsens 30 to diastereomere par ved en metode mage til den, der er angivet i referencceeksempel A, idet der naturligvis anvendtes passende udgangsmaterialer. Det isomere par 1 blev karakteriseret og viste sig at være identisk med forbindelsen fremstillet i eksempel 2. Det isomere par 2 35 havde smeltepunktet 123-125 °C og gav følgende mikroana-lyse: 16

DK 159205 B

Analyse %:

Pundet: C 52,55, H 4,5, N 26,1,

5 Beregnet for C14H14F2N6O: C 52,5, H 4,4, N 26,2. Referenceeksempel B

Fremstilling af l,3-bis(lH-l,2,4-triazol-l-yl)-2-(4-10 fluorphenyl)-3-methylbutan-2-ol

rn o CH

\3 A \ 1 •jj—u \-_c__H F c-c-ch9-n »

- V>\ Vil V

Q 9 r * 20 Til en opløsning af 2-(4-fluorphenyl)-2-[2-(lH-l,2,4- triazol-l-yl)prop-2-yl]oxiran (1,0 g, 4,0 iranol) i dime-thylformamid (50 ml) sattes 1,2,4-triazol (0,56 g, 8,0 mmol) og vandfrit kaliumcarbonat (0,56 g, 4,0 mmol). Opvarmning til 80 °C under omrøring udførtes i 19 timer.

25 Dernæst blev opløsningsmidlet afdampet, der tilsattes vand (75 ml), og blandingen blev extraheret med methy-lenchlorid (3 x 50 ml). De forenede organiske extrakter blev vasket med vand (3 x 30 ml), tørret over vandfrit magnesiumsulfat og inddampet til en urenset gummi (1,15 30 g). Rensning af gummien udførtes under anvendelse af en lynsøjle af Merck "Kieselgel 60" siliciumdioxid (maskevidde 38-63 μιη), der elueredes med methylenchlorid og 5 % methanol i methylenchlorid. Passende fraktioner gav ved inddampning et fast materiale, der blev omkrystalli-35 seret fra diisopropylether og isopropylalkohol, hvorved der blev opnået 0,4 g af titelforbindelsen med smelte-

DK 159205 B

17 punkt 156-158 °C (31f9 % udbytte).

Analyse %: 5 Fundet: C 56,9, H 5,4, N 26,6,

Beregnet for CisHxyFNgO: C 57,1, H 5,3, N 26,4.

NMR- og massespektraldata for forbindelsen var i over-10 ensstemmelse med den almene formel.

Eksempel 5 og 6 Følgende forbindelser blev fremstillet på samme måde som 15 beskrevet i referenceeksempel B ud fra passende udgangsmaterialer :

CH„ OH

Ul,! W

25 30 35 18

DK 159205 B

Analyse %

Eks. -n Snip. (Teoretisk værdi i parentes)

nr. " (°C) C Η N

5 .A,, 5 - f j ' 153-155 41,3 4,4 23,7 . (41,35 4,5 24,1) I -

Cl 10 iTS^01 1 6 Η J j 156-158 48,9 4,5 22,5 (49,0 4,4 22,9) Følgende præparationer, hvor alle temperaturer er angi-15 vet i °C, angiver fremstillingen af visse af udgangsmaterialerne:

Præparation 1 20 (A) 2'f4,-difluor-2-methyl-2-(lH-l,2,4-triazol-l-vl)- propiophenon /. _r»7'·

25 K-N-CHn-C i) NaH ^ $ »"C C

V X-. VLj, u I f

F F

30

En omrørt opløsning af 2',4'-difluor-2-(lH-l,2,4-tria-35 zol-l-yl)acetophenon (3,7 g, 16,6 mmol) i tetrahydrofu-ran (70 ml) blev afkølet til 5 ®C, hvorefter der tilsat-

DK 159205 B

19 tes natriumhydrid i form af en 50 % dispersion i olie (1,58 g dispersion, der indeholdt 33,2 mmol natriumhy-drid). 30 minutter senere tilsattes i løbet af 5 minutter methyliodid (5,2 g, 36,5 mmol). Omrøringen fortsatte 5 ved stuetemperatur i 20 timer.

Herefter udhældtes blandingen i vand (150 ml), og der extraheredes med ethylacetat (3 x 50 ml). De organiske extrakter blev slået sammen, vasket med vand (3 x 20 ml) 10 og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Inddampning gav et urenset fast materiale, der vejede 4,6 g.

Rensning udførtes ved lynsøjlekromatografi under ringe tryk, 13,8 kPa (2 p.s.i.), på en Merck "Kieselgel 60" 15 (maskevidde 38-63 μπι) siliciumdioxid-søjle, der eluere-des med ether.

Passende fraktioner gav ved inddampning et fast materiale, som efter omkrystallisation fra cyclohexan/n-pentan 20 gav 1,5 g af den rene titelforbindelse med smeltepunkt 45-47 °C (36,3 % udbytte).

Analyse %: 25 Beregnet for C12H11F2N3O: C 57,4, H 4,4, N 16,7,

Fundet: C 57,6, H 4,1, N 16,4.

NMR-, IR- og massespektraldata for forbindelsen var i 30 overensstemmelse med den angivne formel.

35 20

DK 1592Q5B

(B) 2-{2,4,-difluorphenyl)-2-f 2-(1H-1,2 y 4-triazol-1- yl)-prop-2-yl]oxiran CH~ 0 CH., O I 3 / \ 5 i il ^—u-C—C--CH? V LI =S=-> V LJ-.

U V

10 F . F

Til 2' ,4'-difluor-2-methyl-2-(lH-l,2,4-triazol-l-yl)pro-piophenon (1,45 g, 5f8 mmol), trimethylsulfoxoniumiodid (2,10 g, 9,6 mmol) og cetrimid (0,16 g) sattes 1,1,1-15 trichlorethan (50 ml) og 20 % vandig natriumhydroxidopløsning (50 ml). Der blev opvarmet i 3 timer med tilbagesvaling under kraftig omrøring. Det organiske lag skiltes fra og blev vasket med vand (3 x 30 ml), tørret over vandfrit magnesiumsulfat og derpå inddampet til en 20 gummi, som vejede 2,25 g. Rensning blev foretaget ved hjælp af en 15 g Merck "Kieselgel 60" (maskevidde 38-63 μιη) siliciumdioxid-lynkromatografisøjle, der elueredes med n-pentan indeholdende gradvis stigende mængder af methylenchlorid (fra 0 til 50 %) under let tryk, 13,8 25 kPa (2 p.s.i.). Passende fraktioner gav ved inddampning et fast materiale, der efter omkrystallisation fra cyc-lohexan-n-pentan gav 0,52 g af titelforbindelsen med smeltepunkt 76-78 °C (33,8 S udbytte).

30 Analyse %:

Beregnet for C13H13F2N3O: C 58,8, H 4,9, N 15,8,

Fundet: C 58,9, H 4,9, N 15,8.

35 21

DK 159205 B

NMR- og massespektraldata for forbindelsen var i overensstemmelse med den angivne formel.

Præparation 2 5 (A) 2',4'-difluor-2-(lH,1,2,4-triazol-l-yl)propiophe-non-hydrochlorid

o CH O

10 H _ i fi

N, N-CH_-C i) NaH K N-CH C

^ Ar'F U> ®3r fSfF

1^1 iii) Kl KJ

15 F f -HC1

En omrørt opløsning af 2',4'-difluor-2-(lH-l,2,4-tria-zol-l-yl)acetophenon (4 g, 17,9 mmol) i tetrahydrofuran (75 ml) blev afkølet til 5 °C, hvorefter der tilsattes 20 natriumhydrid som en 50 % dispersion i olie (0,86 g dispersion, der indeholdt 17,9 mmol natriumhydrid). 20 minutter senere tilsattes i løbet af 5 minuttér methylio-did (2,8 g, 19,7 mmol). Omrøringen fortsatte i 19 timer ved stuetemperatur. Herefer udhældtes blandingen i is-25 vand (100 ml), og der extraheredes med methylenchlorid (3 x 30 ml). De forenede organiske extrakter blev vasket med vand (3 x 40 ml) og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Ved inddampning opnåedes en olie, der vejede 4,7 g. Rensning udførtes ved lynsøjlekromatografi under let 30 tryk, 13,8 kPa (2 p.s.i), på en Merck "Kieselgel 60" (maskevidde 38-63 μπι) siliciumoxidsøjle, der elueredes med ether. Passende fraktioner blev slået sammen og reduceret i rumfang (til 50 ml) ved inddampning, hvorefter der blev behandlet med gasformigt hydrogenchlorid. Det 35 fremstillede hydrochloridsalt blev frafiltreret og omkrystalliseret fra isopropylalkohol, hvilket gav 1,66 g 22

DK 159205 B

af den rene titelforbindelse med smeltepunkt 147-150 ®C som fine krystaller (33,9 % udbytte).

Analyse %; 5

Beregnet for CHH9F2N3O: C 48,3, H 3,7, N 15,4,

Fundet: C 48,1, H 3,5, N 15,7.

10 NMR-, IR- og massespektraldata for forbindelsen var i overensstemmelse med den angivne formel.

(B) 2-(2,4-difluorphenyl)-2-(1-(1H-1,2,4-triazol-l-yl)- ethyl]oxiran 15 CH, 0 CH3 0 j 3 / \ R—R-CH—/ Dimethyloxosulfonium- ^ ? methylid ^ f ' 20 f T >f

.HC1 I

F

25

Til 2',4'-difluor-2-(1H-1,2,4-triazol-l-yl)propiophenon-hydrochlorid (1,36 g, 5,0 mmol), trimethylsulfoxonium-iodid (1,32 g, 6,0 mmol) og cetrimid (0,15 g) sattes 1,1,1-trichlorethan (25 ml) og 20 % vandig natriumhydro-30 xidopløsning (25 ml). Der blev opvarmet i 1,5 timer med tilbagesvaling under kraftig omrøring. Den fraskilte organiske fase blev vasket med vand (3 x 10 ml) og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Ved inddampning opnåedes en gummi, der vejede 1,6 g. Rensning blev foretaget ved 35 lynsøjlekromatografi under et let tryk, 13,8 kPa (2 p.s.i.), på Merck "Kieselgel 60" siliciumdixoid (maske- 23

DK 159205 B

vidde 38-63 μια), der elueredes med ether indeholdende gradvis stigende mængder ethanol (fra 1 til 5 %). Passende fraktioner gav ved inddampning et fast materiale, som ved omkrystallisation fra cyclohexan gav 0,6 g af 5 titelforbindelsen med smeltepunkt 85-87 »C (39,5 % udbytte) .

Analyse %: 10 Beregnet for C 57,4, H 4,4, N 16,7,

Pundet: C 57,3, H 4,4, N 16,8.

NMR-, IR- og massespektraldata for forbindelsen var i 15 overensstemmelse med den angivne formel.

Præparation 3 (A) 2-[2-(1H-1,2,4-triazol-l-yl)acetyl]-5-chlorpyridin 20

Dette mellemprodukt fremstilledes på sædvanlig måde efter følgende skema: i) n-BuLi/-78°C,_C^

25 I Ji' ii) CH-CGN (CH_) „/0°C I J

^ 3 J 1 \ CCCH_, DJZ j

6^/48% vandig HBr/100°C

30 1/2 time

V

y-s. 2 1,2,4-Triazol , N ^ . N - CHj" C 4--- Cl v/^ 35 \ / j K2CO3, 0 c, 2 dage J| ·[

Wk \ -^C0CH,3r 0 . cl 24

DK 159205 B

(B) 2-[2-(1H-1, 2,4-triazol-l-yl)propionyl]-5-chlorpyr i- din

n CH, O

/ '·3 / 5 K— N-CH,-C i) M f- s-æ—1f V fw ^ φ 10

En omrørt opløsning af 2-[2-(1H-1,2,4-triazol-l-yl)acetyl] -5-chlorpyridin (1 g, 4,5 mmol) i tetrahydrofuran {60 ml) blev afkølet til 5 °C, hvorefter der tilsattes natriumhydrid som en 50 % dispersion i olie (0,32 g dis-15 persion indeholdende 6,7 mmol natriumhydrid). 40 minutter senere tilsattes i løbet af 5 minutter methyliodid (0,7 g, 4,9 mmol). Der omrørtes yderligere 20 timer ved stuetemperatur. Herefter udhældtes reaktionsblandingen i isvand (100 ml), og der extraheredes med ethylacetat (3 20 x 30 ml). De forenede organiske extrakter blev vasket med vand (3 x 30 ml), tørret over vandfrit magnesiumsulfat og inddampet til en olie (1,2 g).

Rensning udførtes ved lynsøjlekromatografi under let 25 tryk, 13,8 kPa (2 p.s.i.), på en Merck "Kieselgel 60" (maskevidde 38-63 μπι) siliciumdioxidsøjle, der elueredes med ether. Passende fraktioner gav ved inddampning 0,22 g af titelforbindelsen som et krystallinsk fast materiale med smeltepunkt 99-101 °C (20,7 % udbytte).

30

Analyse %:

Beregnet for C10H9CIN4O: C 50,8, H 3,8, N 23,7, 35 Fundet: C 50,7, H 3,8, N 23,8.

DK 159205 B

25 NMR- og massespektraldata for forbindelsen var i overensstemmelse med den angivne formel.

(C) 2-(5-chlorpyrid-2-yl)-2-(l-(lH-l,2,4-triazol-l-yl)-5 ethylloxiran

Λ CEL O

f5 / I3 / V, . jj—u-CH— C Diiaethyloxosul fonium- ^ ^ 9 2 10 methylid ^

X C

Cl 15 Til 2-[2-(lH-l,2,4-triazol-l-yl)propionyl]-5-chlorpyri- din (0,17 g, 0,71 mmol), trimethylsulfoxoniumiodid (0,19 g, 0,85 mmol) og cetrimid (0,02 g) sattes 1,1,1-tri-chlorethan (10 ml) og 20 % vandig natriumhydroxidopløsning (10 ml). Der blev opvarmet i 1,5 timer med tilbage-20 svaling under kraftig omrøring. Den fraskilte organiske fase blev vasket med vand (3 x 5 ml) og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Ved inddampning opnåedes 0,13 g af en gummi.

25 Rensning blev foretaget ved lynsøjlekromatografi under let tryk, 13,8 kPa (2 p.s.i.), på Merck "Kieselgel 60" (maskevidde 38-63 μιη) siliciumdioxid, idet der elueredes med ether indeholdende gradvis stigende mængder ethanol (fra 1 til 5 %). Passende fraktioner gav 0,07 g af ti-30 telforbindelsen som et fint, krystallinsk, fast materiale med smeltepunkt 101-104 °C (39,5 % udbytte).

NMR og IR var i overensstemmelse med den angivne formel.

35 26

DK 159205 B

Biologisk afprøvning in vivo PD5ø-værdier (orale) for forbindelserne med formlen (I) over for C. albicans i mus opnået ved den prøvningsmeto-5 de, som er beskrevet foran, var følgende:

Forbindelse PDt^n (mg/kg)

Produkt fra eksempel 1 0,4 10 Produkt fra eksempel 2 0,1

Produkt fra eksempel 3 0,2

Produkt fra eksempel 4 (diastereomer-par 2) 0,5

Produkt fra eksempel 5 0,5

Produkt fra eksempel 6 1,6 15

Ved prøvninger for virkning over for systemisk aspergillosis hos mus inficeredes mus med en Pfizer-dyrket stamme af Aspergillus flavus ved intravenøs injektion via halevenen, ubehandlede (kontrol) mus dør normalt inden 20 for 5-10 dage fra injektion med A. flavus. Hver prøveforbindelse indgives til en gruppe inficerede mus i en oral dosis på 20 mg/kg 1 time og 4 timer efter infektionen, og herefter 2 gange dagligt de næste 4 dage. Herefter bestemtes forøgelsen i gennemsnitlig overlevelsestid 25 (MST) af de behandlede mus i forhold til overlevelsestiden af kontrolmusene inficeret med samme stamme på samme tid.

Forbindelserne med formlen (I) har vist sig at være 30 uventet aktive over for den vigtige stamme A. flavus, og nedenstående resultater sammenligner disse forbindelser med deres analoge, der har (se GB 2078719A) i stedet 35 R1 l for "-C-" i kæden.

£h3 27

DK 159205 B

5 OH R1 i 1 N X N-CH0-*C— C-H N '

V / 2 I I2\ J

1=N R R *1=7 10 1 2

r R_ R_ Forøgelse i MST

(dage) (fV (Produkt fra H CH3 + 20

V

JL f ‘ 20 Π J (Produkt fra CH3 CH3 T 13 eksempel 1) 25 H h + 4,5

F

3^ (Produkt fra K €H3 + 7 H J eksempel 3) cl

35 ! A

y * * __; _L_____:-

Claims

1. Bis(triazol)alkanol-forbindelser med formlen: 5 OS R1 I I ϊΤ TT-CH2-C— c-s j (I) \==rl R CH^ N--* hvori R betyder 2,4-difluorphenyl, 2,4-dichlorphenyl el-15 ler 5-chlorpyrid-2-yl, og R^· betyder H eller CH3, idet R1 er CH3, når R er 2,4-dichlorphenyl, og farmaceutisk eller landbrugsmæssigt acceptable salte deraf.

2. Farmaceutiske præparater, kendetegnet ved, 20 at de indeholder en forbindelse med formlen (I) eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf ifølge krav 1, sammen med et farmaceutisk acceptabelt fortyndingsmiddel eller bærestof.

3. Svampebekæmpende midler til landbrug (herunder til havebrug), kendetegnet ved, at de indeholder en forbindelse med formlen (I) eller et landbrugsmæssigt acceptabelt salt deraf ifølge krav 1 sammen med et landbrugsmæssigt acceptabelt fortyndingsmiddel eller bære-30 stof.

4. Forbindelser med formlen (I) og farmaceutisk accep table salte deraf ifølge krav 1 til anvendelse som lægemiddel, specielt til behandling af svampeinfektioner hos 35 mennesker. DK 159205 B

5. Anvendelse af en forbindelse med formlen (I) eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf ifølge krav 1 til fremstilling af et lægemiddel til behandling af svampeinfektioner hos mennesker. 5

6. Fremgangsmåde til behandling af planter eller frø, som har svampeinfektioner, kendetegnet ved, at planten eller frøet eller plantens voksested bringes i kontakt med en svampedræbende effektiv mængde af en for- 10 bindelse med formlen (I) eller et landbrugsmæssigt acceptabelt salt deraf ifølge krav 1. 15 20 25 30 35