DK158316B - Fremgangsmaade til fremstilling af 3-substituerede 7-amino-3-cephem-4-carboxylsyrederivater - Google Patents
Fremgangsmaade til fremstilling af 3-substituerede 7-amino-3-cephem-4-carboxylsyrederivater Download PDFInfo
- Publication number
- DK158316B DK158316B DK18375A DK18375A DK158316B DK 158316 B DK158316 B DK 158316B DK 18375 A DK18375 A DK 18375A DK 18375 A DK18375 A DK 18375A DK 158316 B DK158316 B DK 158316B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- compound
- amino
- carboxylic acid
- cephem
- culture
- Prior art date
Links
- -1 3-SUBSTITUTED 7-AMINO-3-CEPHEM-4-CARBOXYLIC ACID Chemical class 0.000 title claims description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 12
- 241001478312 Comamonas sp. Species 0.000 claims description 7
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims description 7
- 241000589776 Pseudomonas putida Species 0.000 claims description 5
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 4
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 claims description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 3
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 claims description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 3
- FQHYDHFHBZOWGN-UHFFFAOYSA-N (3-hydroxypyridin-2-yl) acetate Chemical compound C(C)(=O)OC1=NC=CC=C1O FQHYDHFHBZOWGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 claims description 2
- 238000005947 deacylation reaction Methods 0.000 description 19
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 19
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 17
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 16
- HTSGKJQDMSTCGS-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(4-chlorophenyl)-2-(4-methylphenyl)sulfonylbutane-1,4-dione Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)C(C(=O)C=1C=CC(Cl)=CC=1)CC(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 HTSGKJQDMSTCGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 12
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 12
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 230000020176 deacylation Effects 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 6
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- 241000589519 Comamonas Species 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 5
- QITDACOZCQXYQY-BAFYGKSASA-N (6r)-7-amino-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-8-one Chemical class S1CC=CN2C(=O)C(N)[C@H]21 QITDACOZCQXYQY-BAFYGKSASA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HOKIDJSKDBPKTQ-GLXFQSAKSA-N cephalosporin C Chemical compound S1CC(COC(=O)C)=C(C(O)=O)N2C(=O)[C@@H](NC(=O)CCC[C@@H](N)C(O)=O)[C@@H]12 HOKIDJSKDBPKTQ-GLXFQSAKSA-N 0.000 description 4
- NLFBCYMMUAKCPC-KQQUZDAGSA-N ethyl (e)-3-[3-amino-2-cyano-1-[(e)-3-ethoxy-3-oxoprop-1-enyl]sulfanyl-3-oxoprop-1-enyl]sulfanylprop-2-enoate Chemical compound CCOC(=O)\C=C\SC(=C(C#N)C(N)=O)S\C=C\C(=O)OCC NLFBCYMMUAKCPC-KQQUZDAGSA-N 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 3
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 3
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 3
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical group C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 3
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 3
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 3
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 3
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 3
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 3
- GTFMAONWNTUZEW-UHFFFAOYSA-N glutaramic acid Chemical compound NC(=O)CCCC(O)=O GTFMAONWNTUZEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 3
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 3
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 2
- RTBFRGCFXZNCOE-UHFFFAOYSA-N 1-methylsulfonylpiperidin-4-one Chemical compound CS(=O)(=O)N1CCC(=O)CC1 RTBFRGCFXZNCOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HSHGZXNAXBPPDL-HZGVNTEJSA-N 7beta-aminocephalosporanic acid Chemical compound S1CC(COC(=O)C)=C(C([O-])=O)N2C(=O)[C@@H]([NH3+])[C@@H]12 HSHGZXNAXBPPDL-HZGVNTEJSA-N 0.000 description 2
- 238000009631 Broth culture Methods 0.000 description 2
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 2
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 2
- 229930186147 Cephalosporin Natural products 0.000 description 2
- 102000004674 D-amino-acid oxidase Human genes 0.000 description 2
- 108010003989 D-amino-acid oxidase Proteins 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 2
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 241001480015 Trigonopsis variabilis Species 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N anhydrous glutaric acid Natural products OC(=O)CCCC(O)=O JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940124587 cephalosporin Drugs 0.000 description 2
- 150000001780 cephalosporins Chemical class 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 2
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- UKRMDFPJXIVYCZ-SBXXRYSUSA-N (6R)-3-(acetyloxymethyl)-7-[(5-carboxy-5-oxopentanoyl)amino]-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid Chemical compound C(C)(=O)OCC=1CS[C@H]2N(C=1C(=O)O)C(C2NC(CCCC(=O)C(=O)O)=O)=O UKRMDFPJXIVYCZ-SBXXRYSUSA-N 0.000 description 1
- KFAZOAVBYQAACA-FFFFSGIJSA-N (6R)-7-(4-carboxybutanoylamino)-3-methyl-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid Chemical compound CC=1CS[C@H]2N(C=1C(=O)O)C(C2NC(CCCC(=O)O)=O)=O KFAZOAVBYQAACA-FFFFSGIJSA-N 0.000 description 1
- XVIKCSXFXGSKIU-FFFFSGIJSA-N (6R)-7-[(5-carboxy-5-oxopentanoyl)amino]-3-(hydroxymethyl)-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid Chemical compound OCC1=C(N2[C@H](SC1)C(NC(=O)CCCC(=O)C(O)=O)C2=O)C(O)=O XVIKCSXFXGSKIU-FFFFSGIJSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VMZCDNSFRSVYKQ-UHFFFAOYSA-N 2-phenylacetyl chloride Chemical compound ClC(=O)CC1=CC=CC=C1 VMZCDNSFRSVYKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N Butyl acetate Natural products CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 241001453268 Comamonas terrigena Species 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N D-Fructose Natural products OC[C@H]1OC(O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M D-gluconate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 1
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 241001149959 Fusarium sp. Species 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 238000003794 Gram staining Methods 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N L-arabinopyranose Chemical compound O[C@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 230000006181 N-acylation Effects 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 1
- 125000003668 acetyloxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(=O)O[*] 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 238000010531 catalytic reduction reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003093 cationic surfactant Substances 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- YMKDRGPMQRFJGP-UHFFFAOYSA-M cetylpyridinium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+]1=CC=CC=C1 YMKDRGPMQRFJGP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960001927 cetylpyridinium chloride Drugs 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000003245 coal Substances 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M hydrogensulfate Chemical compound OS([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000011093 media selection Methods 0.000 description 1
- 230000029052 metamorphosis Effects 0.000 description 1
- CEQFOVLGLXCDCX-WUKNDPDISA-N methyl red Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1\N=N\C1=CC=CC=C1C(O)=O CEQFOVLGLXCDCX-WUKNDPDISA-N 0.000 description 1
- 238000013048 microbiological method Methods 0.000 description 1
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KELXKDDAALYTDI-BTVCFUMJSA-N nitric acid;(2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound O[N+]([O-])=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O KELXKDDAALYTDI-BTVCFUMJSA-N 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004627 regenerated cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000009938 salting Methods 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- WBWWGRHZICKQGZ-HZAMXZRMSA-N taurocholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 WBWWGRHZICKQGZ-HZAMXZRMSA-N 0.000 description 1
- ILJSQTXMGCGYMG-UHFFFAOYSA-N triacetic acid Chemical group CC(=O)CC(=O)CC(O)=O ILJSQTXMGCGYMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P35/00—Preparation of compounds having a 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring system, e.g. cephalosporin
- C12P35/02—Preparation of compounds having a 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring system, e.g. cephalosporin by desacylation of the substituent in the 7 position
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Cephalosporin Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
- 1 -
DK 158316 B
Opfindelsen angår en fremgangsmåde til ud fra cephalospo-rinanaloge at fremstille 7-aminocephemforbindelser. Nærmere angivet vedrører opfindelsen mikrobiologisk fremstilling af 3-substituerede 7-amino-3-cephem-4-carboxylsyre-5 derivater med den almene formel I
S
Η .N-/ \ 2 10 CHX· c.n
COOH
hvor X betyder et hydrogenatom, en hydroxy-, acetoxy-, pyridin- eller (5-methyl-l,3,4-thiadiazol-2-yl)-thiogruppe, ^ hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved det i kravets kendetegnende del anførte.
Det har vist sig, at en mikroorganisme tilhørende slægten Comamonas af stammen SY-77-1 isoleret fra jordprøver har evne til at fremstille 7-aminocephemforbindelser ud fra en forbindelse med formlen II
s JR-CCH ) -comi-( A/ cn o Y ch2x
25 COOH
hvor R betyder -COOH eller -COCOOH, og X har samme betydning som ovenfor, ved spaltning af amidbindingen deri.
2Q Den ovennævnte mikroorganisme har følgende taksonomiske egenskaber: A. Morphologi
Iagttagelserne foretages ved hjælp af optisk eller elek-__ trisk mikroskop på agarbouillonskråfladekultur ved 30°C.
OD
1) Form og størrelse: Kort stav, rund ende, 0,1-0,3 x 0,3-0,5 u.
2) Metamorfose: enkelt eller kort kæde, ingen kapsel.
DK 158316B
- 2 - 3) Motilitet: Ja, flagellat.
4) Spore: Ingen sporedannelse.
5) Gram-farvning: Negativ.
6) Syrefasthed: Negativ.
5 B. Vækstbetingelser på forskellige medier 1) Agarbouillonplade (30°C, 24 timer):
Koloni rund, konveks hævning, glat overflade, bølget kant, hvid til svagt gullighvid, svagt klæbende, gen-10 nemskinnelig til opak, ingen dispersion.
2) Agarbouillonskråflade (30°C, 24 timer):
God vækst, lineær vækst, glat overflade, glansfuld, fugtig, opalescerende til svagt gullighvid overflade, gennemskinnelig til opak, medium ingen farveændring.
15 3) Bouillon (30°C, 1-3 dage):
Homogent uklar, sporudfældning, trådagtig suspension ved rystning, ingen film og ring.
4) Gelatinebouillonstikkultur (30°C, 24 timer):
Lineær vækst langs stiklinien, især fra midten til bun-20 den.
5) Sojabønneagarskråflade (30°C, 24 timer):
God vækst, den samme som på agarbouillon, glat overflade, glansfuld.
6) Kartoffelagarskråflade: 25 God vækst, hvid kolonioverflade, glat vækst, svagt klæbrig, gennemskinnelig til opak, fugtig, glansfuld, ingen pigmentdannelse.
7) Lakmusmælk (30°C, 25 dage): Næsten ingen flydendegørelse.
30 8) Glucosebouillonagarskråflade (30°C, 24 timer):
Bedre vækst i sammenligning med agarbouillonskråflade, svagt klæbrig.
9) Glucosenitratagarskråflade (30°C, 1-3 dage): Næsten ingen vækst.
35 10) Tyrosinagarskråflade (30°C, 48 timer): Vækst, mediet bliver svagt brunligt.
- 3 -
DK 158316 B
11) Manitolgærekstraktagarplade (30°C, 48timer):
God vækst, hvid til svagt gul, glat overflade, fugtig, konveks, ingen farveændring af mediet.
12) Bouillonagarplade tilsat 7% NaCl (30°C, 10 dage): 5 Næsten ingen vækst.
13) Glycerinpeptonagarplade 30°C, 3 dage):
God vækst, glat overflade, glartsfuld, konveks, mediet bliver brunt.
14) Mælkeagarplade (30°C, 5 dage): 10 Ingen caseinhydrolyse.
15) Taurocholatagarplade (30°C, 15 dage):
Ingen vækst.
C. Fysiologiske egenskaber 15 1) Nitratreduktion: 2) Denitrificering: 3) Methylrødtprøve: - (gul) 4) Voges-Proskauer's reaktion: + 5) Indoldannelse: 20 6) Hydrogensulfatdannelse: 7) Stivelsehydrolyse: 8) Citratudnyttelse: + 9) Udnyttelse af uorganisk nitrogenkilde: ingen udnyttelse af nitrat 25 10) Pigmentdannelse: afhænger af medium 11) Urease: 12) Oxidase: + 13) Catalase: + 14) Gelatineforflydning: 30 15) Argininhydrolyse: 16) Gluconatoxidation: 17) Vækstområde: vækst: pH 5-12, 5-42°C, optimal vækst: pH 7,0-8,5, 28-35°C.
^ 18) Aerob eller anaerob: aerob - 4 -
DK 158316 B
19) O-F-prøve: ingen ændring ved O-type- og F-type-prøve 20) Forgæring af carbohydrat: 5 syredannelse gasdannelse L-arabinose D-xylose D-glucose D-mannose 10 D-fructose D-galactose
Maltose - -
Saccharose
Lactose 15 Treharose
Sorbitol -
Mannitol
Inositol
Stivelse 20
Ved undersøgelse af den taksononomiske situation for mikroorganismen af stammen SY-77-1 med ovennævnte mykologiske egenskaber med reference til "Manual for the Identification of Medical Bacteria" af Cowan og Steel 25 (udgave 1965) og "Bergey's Manual of Determinative Bacteri ology" (7. udgave 1961) under sammenligning med typekulturer af beslægtede stammer identificeres den som tilhørende slægten Comamonas. Følgelig har man sammenlignet stammen SY-77-1 med typekulturen fra American Type Cul-30 ture Collection (ATCC) og erkendt, at stammen ligner Coma monas terrigena, men adskiller sig fra denne ved, at stammen SY-77-1 har en kraftigere aktivitet til spaltning af amidbindingen i forbindelsen II.
35 Af ovenstående fremgår det, at stammen SY-77-1 er en ny stamme tilhørende slægten Comamonas og betegnet Comamonas sp. SY-77-1. Denne stamme er blevet deponeret under numme- ret "FERM-P 2410" i Research Institute for Microbiological
Industry and Technology, Agency of Industrial Science and
Technology, Japan.
, DK 158316 B
- 5 - 5 Det har også vist sig, at Pseudomonas ovalis ATCC 950 har samme virkning.
Således angår den foreliggende opfindelse en fremgangsmåde til fremstilling af 7-aminocephemforbindelser med formlen lø Ir i det følgende kaldet aminoforbindelsen I, bestående i deacylering af forbindelsen II ved behandling i nærværelse af et vandigt medium med mikrobekultur eller et præparat deraf med evne til deacylering af forbindelsen II til dannelse af forbindelsen I, hvilket præparat er afledt fra 15 dyrkningen af en mikrobestamme, som danner deacylerings- enzym.
Formålet med opfindelsen er således at anvise en ny mikrobiologisk fremgangsmåde til fremstilling af 7-aminocephem-20 forbindelser ud fra analoge forbindelser af cephalospo rin C.
Aminoforbindelsen I er vigtige mellemprodukter til fremstilling af farmaceutisk værdifulde cephalosporinderivater.
25
Ved deacyleringsreaktionen ifølge den foreliggende opfindelse kan der benyttes mikroorganismer tilhørende stammen Comamonassp. SY-77-1 FERM-P 2410 eller stammen Pseudomonas ovalis ATCC 950 til dannelse af forbindelsen I ud fra 3ø forbindelsen II.
Til opnåelse af højere aktivitet til dannelse af aminoforbindelsen I ud fra forbindelsen II (i det følgende skal denne aktivitet betegnes som N-deacyleringsaktivitet) kan 35 der med fordel anvendes kendte mutationsmetoder til behand ling af bakterier såsom selektiv behandling af stammer med ultraviolet lys, røntgenstråler og mutagene midler og ud-
DK 158316B
- 6 - vælgelse af medier og forgæringsbetingelser.
Dyrkningen af mikroorganismerne kan med fordel udføres ved aerobe betingelser, fortrinsvis ved submers dyrkning med 5 luftning. Næringsmedierne kan omfatte en assimilerbar car- bonkilde, en assimilerbar nitrogenkilde og salte. Dyrkningstemperaturen er fortrinsvis 25-37°C, og dyrkningsperioden er normalt 2-10 dage, og på det tidspunkt, hvor N-dea-cyleringsaktiviteten når maksimum, bør dyrkningen naturlig-10 vis afsluttes.
Den således opnåede mikrobekultur eller et præparat deraf kan benyttes til N-deacyleringsreaktion af forbindelsen II. Præparat af mikrobekulturen vil sige den dyrkede 15 masse, som behandles således, at N-deacyleringsaktiviteten til fortrinsvis fremstilling af aminoforbindelsen I forøges, og den omfatter fx som følge af en endoenzymatisk egenskab af N-deacyleringsaktiviteten, vaskede mikrobeceller indsamlet fra dyrkningsmassen, cellefri ekstrakt 20 såsom formalede eller ultralydbehandlede celler, celle- lysat behandlet med stødpudeopløsning eller cetyl- pyridiniumchlorid, renset eller delvis renset N-deacyle-ringsenzym opnået fra cellefri ekstrakt ved kendte metoder såsom udsaltning, chromatografi eller lignende, immobo-25 liseret enzympræparat eller mikrokapsel indeholdende mikrobeceller eller et præparat deraf med N-deacylerings aktivitet.
Mikrokapslen kan fortrinsvis være en tredimensional struk-30 tur (gelstruktur) bestående af polymer med semipermeabel membranvæg, som ikke inaktiverer N-deacyleringsaktivi- teten, og som indeslutter en kernesubstans af det N-deacy1eringsaktive præparat.
35 Eksempler på indkapslingsmetoder er fx mundingsmetoden, hvor kernesubstansen opløses eller dispergeres i et med vand blandbart opløsningsmiddel, som opløser den semiperme-
DK 158316 B
- 7 - able membran, som danner vægpolymeren i vandigt medium (japansk offentliggørelsesskrift nr. 49-25128); kompleksemulsionsmetoden i vandigt medium som består i opløsning af vægpolymeren i et med vand ikke-blandbart opløsningsmiddel, 5 som har et lavere kogepunkt end vand og et større damptryk end vand, og som ikke inaktiverer N-deacyleringsaktiviteten, efterfulgt af dispergering af en kernesubstans deri og uddrypning af den dispergerede opløsning til suspendering i vandig opløsning indeholdende overfladeaktivt 10 stof eller beskyttelseskolloid og fjernelse af opløsnings midlet fra mikrokapslen (offentliggjort japansk patent-ans.nr. 47-43803, japansk offentliggørelsesskrift nr. 49-49679); mikrokapseldannelse ved opløsningsmiddelfjernelse ved ikke-opløsningsmiddelemulsion, fx dispergering 15 eller opløsning af kernesubstans i et organisk opløsnings middel indeholdende opløst vægpolymer, emulgering af opløsningen i et bærestof, som er dårligt blandbart med opløsningsmidlet for vægpolymeropløsningen, tilsætning til emulsionen af et ikke-opløsningsmiddel for vægpolymeren, idet 20 ikke-opløsningsmidlet er blandbart med opløsningsmidlet for vægpolymeren, men dårligt blandbart eller vanskeligt blandbart med bærestoffet og som ikke modvirker N-deacy-leringsaktiviteten, til dannelse af mikrokapsler (fransk patentskrift nr. 2.166.062) og kompleksemulsionsmetoden i 25 et lipofilt bærestof, fx opløsning af vægpolymeren i et opløsningsmiddel, idet opløsningsmidlet er dårligt blandbart med bærestoffet, men blandbart med vand og har et kogepunkt under vands kogepunkt og ikke har indflydelse på N-deacyleringsaktiviteten. Derefter opløses eller disper-30 geres en kernesubstans i opløsningen, emulgerer den fremkomne opløsning i et bærestof indeholdende flydende paraffin eller en siliconeolie og fjernelse af det organiske opløsningsmiddel til dannelse af en mikrokapsel (USA patentskrift nr. 3.714.065).
N-deacyleringsreaktionen af forbindelsen II foretages normalt i vandigt medium, fortrinsvis ved en pH-værdi på 6-8.
35
DK 158316B
- 8 -
Alternativt benyttes vanduopløselige mikrobeceller eller præparater deraf i form af en suspension eller i form af en søjle, hvori forbindelsen II N-deacyleres medens en vandig opløsning af forbindelsen II passerer gennem søjlen.
5
Reaktionsperioden er normalt 3-30 timer, og den bør afsluttes, når produktionen af aminoforbindelsen I har nået maksimum. Reaktionstemperaturen kan ligge ved 20-45°C, fortrinsvis 30-37°C. Substratkoncentration afhænger af N-acy-10 leringsaktiviteten, og den er normalt 0,1-5%.
Udgangsmaterialet, forbindelserne II, ifølge den foreliggende opfindelse kan fremstilles ved kendte processer. Fx kan forbindelsen II hvori R betyder -C00H fremstilles ud 15 fra forbindelsen med formlen III
-00C >. % / s \ +/ ch(ch2)3.conh i i i [m] K3N * *—N X^·
C00II
20 hvor X har samme betydning som ovenfor, eller salte deraf ved indvirkning af D-aminosyreoxidase afledt af mikroorganismer Trigonopsis variabilis osv. under aerobe betingelser (engelsk patentskrift nr. 1.272.769). Forbindelsen III eller et salt deraf behandles med aktiverede celler af 25 Trigonopsis variabilis eller Fusarium sp. (japansk offent liggørelsesskrift nr. 47-39595 og japansk patentansøgning nr. 49-117205). Forbindelsen II hvori R betyder -COCOOH kan fremstilles ud fra forbindelsen III i nærværelse af catalaseaktivitet og D-aminosyreoxidaseaktivitet.
30
Substituenten X i formlen II betyder et hydrogenatom, en hydroxygruppe, en acetoxygruppe en pyridingruppe eller en (5-methyl-l,3,4-theadiazol-2-yl)-thio-gruppe, hvilken gruppe kan være dannet ud fra cephalosporin C ved en kendt 35 metode. Fx kan en forbindelse III, hvori X betyder et hydrogenatom fremstilles ved katalytisk reduktion i nærværelse af palladiumkul (USA patentskrift nr. 3.124.576).
- 9 -
DK 158316 B
En forbindelse III, hvori X betyder en hydroxygruppe i gruppen X kan fremstilles ved indvirkning af esterase (offentliggjort japansk patentansøgning nr. 42-7553).
5 Forbindelsen II kan benyttes i form af vandopløseligt salt såsom natrium-, kalium eller ammoniumsaltet.
Den således dannede aminoforbindelse I kan isoleres og renses ved kendte metoder såsom søjlechromatografi, ionbyt-10 ning, udfældning eller lignende.
Nedenstående eksempler illustrerer opfindelsen.
Forsøgsmetode for aminoforbindelse I: 15
En portion af reaktionsblandingen indstilles til pH 2,5 med 1 N saltsyre, og efter at opløsningen er vasket 3 gange med det halve rumfang butylacetat, indstilles den til pH 7,5 med 1 N natriumhydroxidopløsning. Yderligere en portion 20 deraf omsættes med phenylacetylchlorid og prøves på Bacil lus subtilis PI 211 i 16 timer ved 37°C.
Tyndtlagschromatografi (TLC): Bærer: Pre-coated silicagel.
25 Fremkalder I: n-butylalkohol, eddikesyre og vand 3:1:1.
Fremkalder II: n-butylalkohol, eddikesyre, pyridin og vand 15:3:10:12.
Fremkalder III:n-butylalkohol, eddikesyre, formaldehyd og vand 3:1:5:1.
30
Eksempel 1-5 100 ml af et vandigt medium (pH-værdi 10,0) bestående af kødekstrakt 0,5%, pepton 1%, gærekstrakt 0,1%, glutarsyre 0,05% og NaCl 0,5% indføres i en 500 ml Erlenmeier kolbe, 35 · steriliseres ved 120°C i 15 minutter, podes med Comamonas sp. SY-77-1 FERM-P 2410 og dyrkes i roterende rystekultur ved 30°C i 8 dage. Efter dyrkning centrifugeres dyrknings-
DK 158316 B
- ίο - væsken ved 12000 omdrejninger pr. minut i 10 minutter under afkøling til samling af bakterieceller. Massen suspenderes i 50 ml 0,1 mol phosphatstødpudeopløsning (pH-værdi 7,0).
Der tilsættes 50 ml 0,1 mol phosphatstødpude (pH-værdi 7,0) 5 hver indeholdende 3% 3-acetoxymethyl-7-(4-carboxybutan amid )-ceph-3-em-4-carboxylsyre og inkuberes ved 37°C i 10 timer til opnåelse af aminoforbindelsen I. Dyrkning af bakterier på samme måde gentages, og hver følgende substans inkuberes dermed: 3-methyl-7-(4-carboxybutanamid)-ceph-3- 10 em-4-carboxylsyre, 3-hydroxymethyl-7-(4-carboxybutanamid)- ceph-3-em-4-carboxylsyre, N-(7-(4-carboxybutanamid)-ceph-3-em-3-yl-methyl)-pyridinium-4-carboxylat og 7-(4-carboxybutanamid) -3- (5-methyl-l,3,4-thiadiazol-2-yl)-thiomethyl-ceph-3-em-4-carboxylsyre.
15
Resultaterne fremgår af følgende tabel.
20 25 30 35 - 11 -
DK 158316 B
Aminoforbindelse I (R = -COOH)
Tyndtlagschromatografi
Eksem- dannelses- opløsningsmiddel- pel _X_ forhold, % Rf__system_
51 H 72 0,32 I
2 -OCOCH3 53 i0,,15 I
3 -OH ی (0,3 3 II
4 \ 58 ©,23 III
10 ^
'Jf-rJST
5 -S-il II 50 0,17 I
S/XCH3 15
Aminoforbindelserne identificeres ved tyndtlagschromatografi med ninhydrinfremkalder, ultraviolet og biologiske forsøg.
20 Eksempel 6-9 I eksempel 1-5 erstattes 3-acetoxymethyl-7-(4-carboxybutan-amid)-ceph-3-em-4-carboxylsyre og øvrige med følgende forbindelser, og der fås de nedenfor angivne resultater: 3-methy1-7-(5-carboxy-5-oxopentanamido)-ceph-3-em-4-carb-25 oxylsyre, 3-acetoxymethyl-7-(5-carboxy-5-oxopentanamido)-ceph-3-em-4- carboxylsyre, 3-hydroxymethyl-7-(5-carboxy-5-oxopentanamido)-ceph-3-em-4-carboxlsyre og 30 N- (7- (5-carboxy-5-oxopentanamido) -ceph-3-em—3-yl-methyl) - pyridinium-4-carboxylat.
35 - 12 -
DK 158316 B
Aminoforbindelse I (R = -COCOOH)
Tyndtlagschromatografi
Eksem- dannelses- opløsningsmiddel- pel_X_forhold, % Rf_system_
5 6 H 65 0,32 I
7 -OCOCH3 50 0,15 I
8 -OH 58 0,34 II
j~\ 10 9 \ / 52 0,23 111
Eksempel 10-13 100 ml af et vandigt medium (pH-værdi 7,0) bestående af kødekstrakt 0,5%, pepton 1%, gærekstrakt 0,1%, glutarsyre 15 0,05% og NaCl 0,5% indføres i en 500 ml Erlenmeier kolbe, steriliseres ved 120°C i 15 minutter, podes med Pseudomonas ovalis ATCC 950 og dyrkes i roterende rystekultur ved 30°C i 8 dage. Efter dyrkningen centrifugeres dyrkningsvæsken ved 2000 omdrejninger pr.minut i 10 minutter under afkøling 20 til samling af' bakteriecellerne. De dyrkede celler suspen deres i 50 ml 0,1 mol phosphatstødpude (pH-værdi 7,0). Dyrkningen gentages på samme måde, og dyrkede celler suspenderes. Cellesuspensionerne inkuberes ved 37°C i 10 timer med hvert stof (2% i 0,1 mol phosphatstødpudeopløsning) 25 som vist i tabellen nedenfor, og resultaterne fremgår af den efterfølgende tabel:
Forbindelse II: 3-methyl-7-(4-carboxybutanamido)-ceph-3-em-4-carboxylat, 3-hydroxymethyl-7-(4-carboxybutanamido)-ceph-3-em-4-carb-30 oxylat, 3-acetoxymethyl-7-(4-carboxybutanamido)-ceph-3-em-4-carb-oxylat, og N-(7-{4-carboxybutanamido)-ceph-3-em-3-yl-methyl)-pyridi-nium-4-carboxylat.
35 - 13 -
DK 158316 B
Aminoforbindelse I
Eksempel_X_Rf ved tyndtlaqschromatograf i_ 10 H 0,33 (opløsningsmiddelsystem I) 11 -OH 0,33 (opløsningsmiddelsystera II) 5 12 -OCOCH^ 0,15 (opløsningsmiddelsystem I) Γ~\ 13 j 0,22 (opløsningsmiddelsystem III)
Eksempel 14 10 Comamonas sp. SY-77-1 FERM-P 2410 dyrkes på samme måde som i eksempel 4 til opnåelse af 6 liter dyrkningsvæske. Cel lerne samles ved centrifugering ved 12000 omdrejninger pr. minut i 10 minutter og vaskes. De således opnåede celler suspenderes i 0,1 mol phosphatstødpude (pH 7,0) til frem- 15 stilling af 300 ml suspension. Der tilsættes 15 ml kation- overfladeaktivt stof, omrøres ved stuetemperatur i 30 minutter og centrifugeres ved 10000 omdrejninger pr. minut i 10 minutter til opnåelse af 288 ml overlejret væske.
20 Den overlejrede væske dialyseres i 0,1 ml phosphatstødpude opløsning (pH-værdi 7,0) under anvendelse af et rør af regenereret cellulose ved 4°C i 48 timer. Der fås 300 ml dialysat med N-deacyleringsaktivitet.
25 Det således opnåede dialysat omfattes under fremstillingen af mikrobiel kultur ifølge den foreliggende opfindelse og kan fremstilles som mikrokapselpræparat, pulverpræparat ved . tørring, lyofilisering eller ammoniumsulfatfældning 30 Eksempel 15 3 g celluloseacetat (triacetatform) opløses i 100 ml methy-lenchlorid. 3 g dyrkede celler af Comamonas sp. SY-77-1 FERM-P 2410, fremstillet på samme måde som i eksempel 1, suspenderes i destilleret vand og emulgeres dispergerbart 35 deri. Den således opnåede emulsion omrøres, dispergeres i - 14 -
DK 158316 B
800 ml 2%'s vandig gelatineopløsning ved stuetemperatur og omrøres yderligere indtil afdampning af methylenchloridet til opnåelse af mikrokapsler (diameter 0/1-0,3 mm) indeholdende Comamonas sp. SY-77-1 FERM-P 2410. Disse mikrokaps-5 ler kan bruges til fremstilling af aminoforbindelsen I som eksemplificeret nedenfor.
Eksempel 16
Eksempel 15 gentages, idet der dog bruges 2 g celluloseace-10 tat, 70 ml methylenchlorid og 2 g Pseudomonas bvalis ATCC 950. Der fås mikrokapsler indeholdende bakterien.
Eksempel 17
Eksempel 15 gentages, idet der dog bruges 20 ml overlejret 15 væske med N-deacyleringsaktivitet fra eksempel 14 i stedet for 3 g Comamonas-celler suspenderet i 20 ml vand til opnåelse af mikrokapslerne med samme størrelse.
Eksempel 18 20 21,9 g (våd vægt) mikrokapsler fra eksempel 15 pakkes i en søjle med kappe (2 x 9,6 cm, V = 30 ml) og vaskes med 0,1 mol phosphatstødpude (pH-værdi 7,0). 840 ml opløsning 3-acetoxymethyl-7-(4-carboxybutanamid)-3-cephem-4-carboxyl-syre i 0,1 mol phosphatstødpude (9,92 mg/ml) tilføres ved 25 SV ca. 0,4. 865 ml eluat indeholdende 7-ACA fås (dannel sesforhold 84,5%), og man inddamper til 80 ml efter indstilling til en pH-værdipå 3,2. Koncentratet henstår natten over til udfældning af 7-ACA ved 4°C. Udbytte 4,6 g, renhed 86,2%.
30
Eksempel 19
Eksempel 18 gentages, men mikrokapslerne indeholdende Comamonas sp. SY-77-1 FERM-P 2410 erstattes med mikrokapsler indeholdende Pseudomonas ovalis ATCC 950 fra eksempel 16, 35 og der benyttes en 1% opløsning af stofferne angivet nedenfor i stedet for substratet i eksempel 18 til opnåelse af aminoforbindelse I nedenfor:
DK 158316B
- 15 -
Stof_ Udbytte af forbindelse I
3-methyl-7-(4-carboxybutanamid)--3-cephem-4-carboxylat 84,2% 3- hydroxymethyl-7-(4-carboxybutanamid) -3-cephem-4-carboxylat 83,1% N-(7-(4-carboxybutananmid)-3--cephem-yl-methyl)-pyridinium- -4-carboxylat 79,2%
Eksempel 20 10 I eksempel 18 erstattes mikrokapslerne indeholdende Comamo- nas sp. SY-77-1 FERM-P 2410 med mikrokapslerne indeholdende overlejret væske med N-deacyleringsaktivitet fra eksempel 17, og substratet erstattes med 1%'s opløsinger af 3-acet-oxymethyl-7-(4-carboxybutanamid)-3-cephem-4-carboxylat, 3- 15 methyl-7-(5-carboxy-5-oxo-pentanamid)-3-cephem-4-carboxylat og 3-hydroxymethy1-7-(5-carboxy-5-oxopentanamid)-3-cephem- 4- carboxylat til opnåelse af aminoforbindelse 1 med udbytter på henholdsvis 87,5%, 78,8% og 79,5%.
20 25 30 35
Claims (1)
- DK 158316 B - 16 - Fremgangsmåde til fremstilling af 3-substituerede 7-amino- 3-cephem-4-carboxylsyrederivater med den almene formel I 5 /Sv b2n——r Λ o CUZK [τ) COOH 10 hvor X betyder et hydrogenatom, en hydroxy-, acetoxy-, py-ridin- eller (5-methyl-l,3,4-thiadiazol-2-yl)-thiogruppe, kendetegnet ved, at man behandler en vandig opløsning af en forbindelse med formlen II 15 h-(chz)3-c°nh-r ^ o^"hY^ch2x (I11 COOH hvor R betyder -COOH eller -COCOOH og X har den ovenfor 20 angivne betydning, med en mikrobekultur eller et præparat deraf afledt af Comamonas sp. SY-77-1 FERM-P 2410 eller Pseudomonas ovalis ATCC 950 i et vandigt medium. *25 30 35
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1047174A JPS5417032B2 (da) | 1974-01-23 | 1974-01-23 | |
| JP1047174 | 1974-01-23 | ||
| JP14276174A JPS5170884A (en) | 1974-12-12 | 1974-12-12 | 77 amino sefuemukagobutsuno seizohoho |
| JP14276174 | 1974-12-12 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK18375A DK18375A (da) | 1975-09-22 |
| DK158316B true DK158316B (da) | 1990-04-30 |
| DK158316C DK158316C (da) | 1990-10-08 |
Family
ID=26345754
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK18375A DK158316C (da) | 1974-01-23 | 1975-01-22 | Fremgangsmaade til fremstilling af 3-substituerede 7-amino-3-cephem-4-carboxylsyrederivater |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| CA (1) | CA1041447A (da) |
| DK (1) | DK158316C (da) |
| FR (1) | FR2258448A1 (da) |
| NL (1) | NL186525C (da) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0150378B1 (en) * | 1984-01-23 | 1990-03-28 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Cephem compounds and their production |
| IT1252308B (it) * | 1990-12-21 | 1995-06-08 | Antibioticos Spa | Procedimento enzimatico per la produzione di acido 7- amminocefalosporanico e derivati |
| IT1250698B (it) * | 1991-07-24 | 1995-04-21 | Mini Ricerca Scient Tecnolog | Processo per la preparazione enzimatica di acidi 7-ammino-cefalosporanici. |
| JPH0646835A (ja) * | 1992-04-29 | 1994-02-22 | Lonza Ag | マロニル−７−アミノセファロスポラン酸誘導体の微生物学的製造方法 |
| IT1286520B1 (it) * | 1996-12-03 | 1998-07-15 | Antibioticos Spa | Procedimento per la preparazione di intermedi utili nella sintesi di cefalosporine |
| DE19652284A1 (de) * | 1996-12-16 | 1998-06-18 | Hoechst Schering Agrevo Gmbh | Neue Gene codierend für Aminosäure-Deacetylasen mit Spezifität für N-Acetyl-L-Phosphinothricin, ihre Isolierung und Verwendung |
-
1975
- 1975-01-22 DK DK18375A patent/DK158316C/da not_active IP Right Cessation
- 1975-01-22 CA CA218,401A patent/CA1041447A/en not_active Expired
- 1975-01-23 NL NL7500801A patent/NL186525C/xx not_active IP Right Cessation
- 1975-01-23 FR FR7502131A patent/FR2258448A1/fr active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FR2258448A1 (en) | 1975-08-18 |
| NL186525C (nl) | 1990-12-17 |
| FR2258448B1 (da) | 1978-06-30 |
| NL7500801A (nl) | 1975-07-25 |
| DK18375A (da) | 1975-09-22 |
| CA1041447A (en) | 1978-10-31 |
| NL186525B (nl) | 1990-07-16 |
| DK158316C (da) | 1990-10-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPH0527395B2 (da) | ||
| US3960662A (en) | Process for the production of 7-amino-cephem compounds | |
| DK158316B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af 3-substituerede 7-amino-3-cephem-4-carboxylsyrederivater | |
| JPS589680B2 (ja) | アミノカゴウブツノ セイホウ | |
| US4141790A (en) | Process for the preparation of 7-amino-cephem compounds using mold fungi | |
| US3821081A (en) | Process for producing 7-amino desacetoxy cephalosporanic acid | |
| US4062731A (en) | Production of uricase from micrococcus luteus | |
| CN110564649A (zh) | 一株产脂肪酶菌株及其应用 | |
| JP3235904B2 (ja) | 耐熱性マンノースイソメラーゼ及びその製造法並びにこれを用いたマンノースの製造法 | |
| JPH0369278B2 (da) | ||
| US3804718A (en) | Method of producing beta-amylase by bacterial fermentation | |
| JPS5920360B2 (ja) | ７−アミノセフアロスポラン酸および其の誘導体の製造法 | |
| JP2837624B2 (ja) | 天然紫色色素の製造方法 | |
| US4061541A (en) | Preparation of alkaline alpha-amylase | |
| CA1159783A (en) | Process for producing 6-aminopenicillanic acid and 6-aminopenicillanic acid s-oxide | |
| JP3026312B2 (ja) | キチン分解物の製造法 | |
| FI89077B (fi) | Foerfarande foer erhaollande av termostabila -amylaser genom odling av superproduktiva mikroorganismer vid hoeg temperatur | |
| JP4443708B2 (ja) | ミゾリビンの生産方法 | |
| SU1645293A1 (ru) | Штамм бактерий SтRертососсUS FaecaLIS - продуцент рестриктазы SFa N @ | |
| JP3858065B2 (ja) | 新規ｎ−アセチルキトオリゴ糖デアセチラーゼ及びその製造法 | |
| KR930008972B1 (ko) | 신균주 슈도모나스속 y-132 및 이로부터 생산되는 글루타릴-7-아미노세팔로스포린산 아실라아제 | |
| JPH08275776A (ja) | 新規キチナーゼ及びその製造方法 | |
| JP4752024B2 (ja) | 細胞壁分解酵素と産生する微生物、並びにそれを用いたプロトプラスト調製法 | |
| JPH0127714B2 (da) | ||
| JPH0144721B2 (da) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PUP | Patent expired |