DK149476B - Fremgangsmaade og reagens til bestemmelse af urinsyre i biologiskmateriale - Google Patents
Fremgangsmaade og reagens til bestemmelse af urinsyre i biologiskmateriale Download PDFInfo
- Publication number
- DK149476B DK149476B DK172678AA DK172678A DK149476B DK 149476 B DK149476 B DK 149476B DK 172678A A DK172678A A DK 172678AA DK 172678 A DK172678 A DK 172678A DK 149476 B DK149476 B DK 149476B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- atoms
- alkyl group
- nad
- serum
- acid
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 41
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 25
- TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N Uric acid Natural products N1C(=O)NC(=O)C2NC(=O)NC21 TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 25
- 229940116269 uric acid Drugs 0.000 title claims description 25
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims description 18
- 239000012620 biological material Substances 0.000 title claims description 5
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical class NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 82
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N NAD zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N 0.000 claims description 47
- 229950006238 nadide Drugs 0.000 claims description 47
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 24
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 17
- WTKZEGDFNFYCGP-UHFFFAOYSA-N Pyrazole Chemical compound C=1C=NNC=1 WTKZEGDFNFYCGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 14
- 108010092464 Urate Oxidase Proteins 0.000 claims description 13
- WFKAJVHLWXSISD-UHFFFAOYSA-N isobutyramide Chemical class CC(C)C(N)=O WFKAJVHLWXSISD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N thiourea Chemical class NC(N)=S UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 102000005369 Aldehyde Dehydrogenase Human genes 0.000 claims description 9
- 108020002663 Aldehyde Dehydrogenase Proteins 0.000 claims description 9
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 claims description 9
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 claims description 9
- SIOXPEMLGUPBBT-UHFFFAOYSA-N picolinic acid Chemical group OC(=O)C1=CC=CC=N1 SIOXPEMLGUPBBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 8
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 6
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 6
- 229940047889 isobutyramide Drugs 0.000 claims description 6
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims description 5
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 claims description 5
- 239000008139 complexing agent Substances 0.000 claims description 4
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 claims description 3
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000003217 pyrazoles Chemical class 0.000 claims description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 2
- 150000003222 pyridines Chemical class 0.000 claims description 2
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims 1
- KKZGDLIHIDYQIY-UHFFFAOYSA-N ethanol ethene Chemical compound C(C)O.C=C.C=C.C=C KKZGDLIHIDYQIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 47
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 38
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 24
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 16
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 13
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 11
- XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N [[(2r,3r,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3-hydroxy-4-phosphonooxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [(2s,3r,4s,5s)-5-(3-carbamoylpyridin-1-ium-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl phosphate Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N 0.000 description 10
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 10
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 5
- LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthine Chemical compound O=C1NC(=O)NC2=C1NC=N2 LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 4
- 229940039748 oxalate Drugs 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- -1 monoethyl ester Chemical class 0.000 description 3
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 3
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 3
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- POJWUDADGALRAB-UHFFFAOYSA-N allantoin Chemical compound NC(=O)NC1NC(=O)NC1=O POJWUDADGALRAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 125000002485 formyl group Chemical class [H]C(*)=O 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- MGFYIUFZLHCRTH-UHFFFAOYSA-N nitrilotriacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CC(O)=O MGFYIUFZLHCRTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940075420 xanthine Drugs 0.000 description 2
- OGTLYUDOIVBATN-UHFFFAOYSA-N 1-bromopyrazole Chemical compound BrN1C=CC=N1 OGTLYUDOIVBATN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGEJKWOVQAWKGQ-UHFFFAOYSA-N 1-chloropyrazole Chemical compound ClN1C=CC=N1 RGEJKWOVQAWKGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FLNMQGISZVYIIK-UHFFFAOYSA-N 1-ethylpyrazole Chemical compound CCN1C=CC=N1 FLNMQGISZVYIIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IMRWILPUOVGIMU-UHFFFAOYSA-N 2-bromopyridine Chemical compound BrC1=CC=CC=N1 IMRWILPUOVGIMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NRGGMCIBEHEAIL-UHFFFAOYSA-N 2-ethylpyridine Chemical compound CCC1=CC=CC=N1 NRGGMCIBEHEAIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BSKHPKMHTQYZBB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpyridine Chemical compound CC1=CC=CC=N1 BSKHPKMHTQYZBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DFUAIALZXKLUQU-UHFFFAOYSA-N 4,5-dibromo-1h-pyrazole Chemical compound BrC=1C=NNC=1Br DFUAIALZXKLUQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WVGCPEDBFHEHEZ-UHFFFAOYSA-N 4-bromo-1h-pyrazole Chemical compound BrC=1C=NNC=1 WVGCPEDBFHEHEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BADSZRMNXWLUKO-UHFFFAOYSA-N 4-chloro-1h-pyrazole Chemical compound ClC=1C=NNC=1 BADSZRMNXWLUKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VJXRKZJMGVSXPX-UHFFFAOYSA-N 4-ethylpyridine Chemical compound CCC1=CC=NC=C1 VJXRKZJMGVSXPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LLNQWPTUJJYTTE-UHFFFAOYSA-N 4-iodopyrazole Chemical compound IC=1C=NNC=1 LLNQWPTUJJYTTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YAXKXMVDJJMGRY-UHFFFAOYSA-N 4-propyl-1h-pyrazole Chemical compound CCCC=1C=NNC=1 YAXKXMVDJJMGRY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical group [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- POJWUDADGALRAB-PVQJCKRUSA-N Allantoin Natural products NC(=O)N[C@@H]1NC(=O)NC1=O POJWUDADGALRAB-PVQJCKRUSA-N 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 150000001447 alkali salts Chemical class 0.000 description 1
- 229960000458 allantoin Drugs 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Chemical class 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000010580 coupled enzyme reaction Methods 0.000 description 1
- UZBQIPPOMKBLAS-UHFFFAOYSA-N diethylazanide Chemical compound CC[N-]CC UZBQIPPOMKBLAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001177 diphosphate Substances 0.000 description 1
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000013213 extrapolation Methods 0.000 description 1
- RIKMMFOAQPJVMX-UHFFFAOYSA-N fomepizole Chemical compound CC=1C=NNC=1 RIKMMFOAQPJVMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004285 fomepizole Drugs 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003367 kinetic assay Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 150000003891 oxalate salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000007430 reference method Methods 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- ZNCPFRVNHGOPAG-UHFFFAOYSA-L sodium oxalate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)C([O-])=O ZNCPFRVNHGOPAG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940039790 sodium oxalate Drugs 0.000 description 1
- 238000012289 standard assay Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/62—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving uric acid
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
149476
Opfindelsen angår en fremgangsmåde og et reagens til forstyrrelsesfri bestemmelse af urinsyre .i biologisk materiale, især i serum og plasma, ved hjælp af uricase/katalase/aldehyddehydrogenasesystemet.
Et forhøjet urinsyrespejl i serum (plasma) udgør et vigtigt indicium for forekomsten af en gigtsygdom. Den kvantitative analyse af urinsyre i serum hører derfor til de hyppigste undersøgelser, der skal udføres i det klinisk-kemiske laboratorium.
2 U9m
Til den enzymatiske bestemmelse af urinsyre har der hidtil i praksis været benyttet hovedsagelig to metoder, der kendes som uricase-meto= den og urica-kvant-metoden (se "Methoden der enzymatischen Analyse" (Bergmeyer, H.U., Ed.), bind 2, (1974) 1999 til 2005, Verlag Chemie).
5 i den senere tid er en ny enzymatisk fremgangsmåde blevet kendt (DE offentliggørelsesskrift nr. 24 50 726 (Haeckel)), der.bygger på følgende princip:
Uricase
Urinsyre + 2 H20 + 02 (EC 1.7.3.3)^ allantoin + co^ + h202 10
Katalase H202 + alkohol (EC 1·11·1-·62> aldehyd + 2 H20
Aldehyd-dehydrogenase
Aldehyd + NAD(P) + (EC lm~ 1,4 ------- 1 carboxylsyre + I5 i) nikotinamid-adenin-dinucleotidphosphat NAD(P)H + H+
Dannelsen af NRD(P)H, der måles san ékstinktionsforøgelsen ved 340 nm, ved •334 nm eller 365 nnrunder anvendelse af en.-kviksølvlampe som lyskilde, er proportional msd urinsyremaaigden.
20
Sammenlignet ned den son referencsnetode betragtede uricase-metode, udmærker denne fremgangsmåde ifølge Haeckel sig ved en mindre forstyrrelsestilbøjelighed scm følge af forureninger i analysemængden, da målingen gennemføres i UV-cmrådet med længere bølgelængde (334 til 365 nm i stedet for 293 til 297 nm). I sammenligning med 25 urica-kvant-metoden er tidsforløbet pr. analyse væsentligt mindre, hvorved denne metode er særlig godt egnet til hurtigt arbejdende analyseautomater.
Ved anvendelse af den ovenfor beskrevne urinsyreprøve ifølge Haeckel 30 viste det sig, at der i mange tilfælde, især i tilfælde af sera fra nyrepatienter eller leverpatienter, optrådte betydelige forstyrrelser af prøven som følge af blindreaktioner. Ved at arbejde ifølge slutværdimetoden finder man allerede før tilsætning af den som starter eller igangsætter tjenende uricaseopløsning en NAD(P)H-forøgelse el-35 ler NADH-formindskelse. Endvidere kommer reaktionen heller ikke efter omsætning af den samlede mængde urinsyre til stilstand, men der dannes stadigvæk NAD(P)H. Hastigheden af denne blindreaktion andrager ved 25°C ca. 0,001 til 0,004 ΔΕ/min., idet hastighederne før starten og efter forløbet af urinsyrereaktionen yderligere også ofte er ind-40 byrdes forskellige. Dette vanskeliggør den nøjagtige bedømmelse af 149476 3 måleresultaterne meget, da man kun unøjagtigt kan fastslå den til den omsatte urinsyremængde svarende ekstinktionsforskel. Ud fra denne ekstinktionsforskel, analysemængden og den molære ekstinktionskoefficient af NADH skal analyseresultatet imidlertid beregnes.
5
Ved urinsyrebestemmelsen på kinetisk basis gør disse blindreaktioner sig langt mere bemærket på forstyrrende måde end det er tilfældet med bestemmelsen ifølge slutværdi-metoden. Ved den kinetiske metode skal man som bekendt med henblik på den altid nødvendige kalibrering gen-10 nemføre en standardbestemmelse, hvortil man i almindelighed anvender en vandig standard (J. Ziegenhorn i "Grundlagen der enzymatischen Analyse" H. Bergmeyer, side 81 til 85, Verlag Chemie (1977)). Da ingen blindreaktioner optræder ved denne standardanalyse, opnår man ved analysen af de ovennævnte sera, hvori blindreaktioner optræder, for-15 kerte positive eller negative resultater, eftersom reaktionen, der går tilbage til urinsyreomsætningen, overlejres med blindreaktionen.
De kinetiske prøver er imidlertid af stor betydning for det automatiserede laboratorium. De gør det muligt drastisk at formindske tidsforbruget pr. analyse og udnytter således analyseautomaterne bedre.
20 Derudover er de i almindelighed mindre ustabile i tilfælde af forstyrrelser som følge af uklarheder eller egenfarve af prøven end tilfældet er for slutværdi-metoden.
Ligesom ved slutværdi-metoden kan der ganske vist også ved de kinetiske 25 metoder tages hensyn til de af blindreaktioner betingede forstyrrelser indtil en vis grad véd hjælp af bestemmelsen af prøve-blindværdier. Dette har imidlertid ulemper, eftersom prøve-blindværdi-bestemmelser altid betyder en fordobling af tids- og reagensforbruget ved analysens gennemførelse. Frem for alt på moderne, hurtigt arbejdende analyseautoma-30 ter (Centrifugal Fast Analyzer og lignende apparater) påvirker prøve-blindværdi-analyser den optimale udnyttelse af apparaterne meget.
Alt efter omfanget af blindreaktionen blev der fastslået fejl på 5 til 20% på analyseresultaterne. Dette betyder en kraftig begrænsning 35 af anvendeligheden af Haeckel's metode til urinsyrebestemmelse inden for rutinediagnostikken, hvor urinsyreprøver som bekendt ofte skal foretages på sera fra nyrepatienter. Netop i tilfælde af gigt er en nyresygdom overordentlig hyppigt forekommende.
40 Opfindelsen tager sigte på at angive en fremgangsmåde, med hvilken 149476 4 de omtalte forstyrrelser ved urinsyrebestemmelsesmetoden ifølge Haeckel kan undgås.
Dette opnås ved hjælp af fremgangsmåden ifølge opfindelsen til bestem-5 melse af urinsyre i biologisk materiale ved hjælp af uricase, katala-se og aldehyddehydrogenase i nærværelse af alkohol og nikotinamid-adenin-dinucleotid eller -phosphat (NAD(P)), som er ejendommelig ved, at mindst én forbindelse valgt blandt oxalat, malonsyremonoalkylester, hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer, trihalogenethanol, pyrazol eller pyridin, der 10 eventuelt begge er substitueret med en eller flere alkylgrupper, hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer, eller halogenatcmer, pyridincarboxylsyre, der eventuelt er substitueret med en alkylgruppe, hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer, amidet eller en alkylester, hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer, af den eventuelt substituerede pyridincarboxylsyre, thiourinstof, isobutyramid og chelatdannende kcnpléksdannelses-15 midler, såsom nitrilotrieddikesyre eller ethylendiamintetraeddikesyre, tilsættes.
Son biologisk materiale korener navlig serum og blod på tale, men også urin og legemsvæske, der opnås ved oplukning af heterogent cellemateriale (f. eks. lever og nyre) ved hjælp af kendte oplukningsmetoder (f .eks. ekstraktion, ultralyd og French-presse), kan benyttes som udgangsmateriale..
20
Med lavere alkylgrupper forstås indenfor opfindelsens rammer sådanne grupper med 1-4 carbonatomer. Halogenatomer skal inden for opfindelsens rammer være chlor-, brom- og jodatomer. I tilfælde af pyrazol-derivater foretrækkes sådanne, hvori en substituent står i 4-stillingen. 25 I tilfælde af pyridincarboxylsyrer er carboxylgruppen placeret i 3-stillingen. Typiske eksempler på egnede forbindelser er pyrazol, 4-brompyrazol, 4-jodpyrazol, 4-chlorpyrazol, 4-methylpyrazol, 4-ethyl= pyrazol, 4-propylpyrazol, 3,4-dibrompyrazol, pyridin og N-iriethylni= kotinamid.
30
De til anvendelse ved frangangsmåden ifølge opfindelsen benyttede tilsætningsmidler kan tilsættes enkeltvis eller i kombination. Selv cm et enkelt tilsætningsmiddel i mange tilfælde er tilstrækkeligt til fulstændig at undertrykke en blindreaktion, foretrækkes dog tilsætning af mindst to af midlerne. Især fo- .
35 retrækkes anvendelse af et middel valgt ' blandt oxalat og malon- syremonoalkylester, hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer, sammen med et eller flere af tilsætningsmidlerne valgt blandt thiourinstof, isobutyramid, kompleksdannere, henholdsvis substituerede pyrazoler, pyridiner og pyridincarboxylsyrer. Blandt oxalater foretrækkes alkalisaltene.
149476 5
Fremgangsmåden kan gennemføres ved slutværdi-metoden, ved hvilken koncentrationen af urinsyre efter reaktionens forløb fastslås ud fra den målte ekstinktionsforskel. Endvidere kan kinetiske metoder anvendes, ved hvilke hastigheden af reaktionen tjener som målestørrelse.
5 Den tekniske lære, som sådanne kinetiske prøvesystemer med forekomst af koblede enzymreaktioner bygger, på, er kendt fra DE offentliggørelsesskrift nr.
25 58 536. Fra DE patentskrift nr. 24 40 011 er det endvidere allerede kendt, at de til anvendelse af kinetiske metoder i og for sig for lave Michaelis-konstan-ter for uricase med hensyn til urinsyre tilsyneladende kan forøges 10 ved tilsætning af en konkurrerencb inhibitor, så at kinetiske måleprincipper kan benyttes. En sådan konkurrerende inhibitor er f.eks. xanthin.
Forbindelserne, der skal tilsættes ifølge opfindelsen, anvendes i sådanne mængder, at forekommende blindreaktioner undertrykkes fuldstæn-15 digt. De nødvendige mængder kan let bestemmes ved hjælp af et simpelt forforsøg. I almindelighed er imidlertid tilsætninger mellem 0,005 og 0,5 mol tilsætningsforbindelse pr. liter reagens fuldstændig tilstrækkeligt. I enkelte tilfælde kan større eller mindre mængder komme i betragtning.
20
Fremgangsmådebetingelserne i henseende til pH-værdi, tid, temperatur og lignende svarer til det fra DE offentliggørelsesskrift' nr.. 24 50 726 kendte. Fortrinsvis·arbejdes der ved pH 8,0 til 9,0 „under anvendelse af en puffer, som· i dette område har sin maksimale kapacitet. Særligt gode resultater 25 opnås med diphosphatpuffer (K4P2O7/HCI). Bestemmelsen foregår hensigtsmæssigt ved stuetemperatur.
Opfindelsen angår endvidere et reagens til bestormelse af urinsyre ved den omhandlede frargangsmåde og indeholdende uricase, katalase, aldéhyddéhydrogenase, alkohol, NAD(P) 3Q og puffer, som er ejendommeligt ved, at det er tilsat mindst én forbindelse valgt blandt oxalat, malonsyremonoalkylester, hvor alkylgruppen har 1-4 C-atcmer, trihalo-' genethanol, pyrazol eller pyridin, der eventuelt begge er substitueret med en eller flere alkylgrupper, hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer, eller halogenatomar, pyridin-carboxylsyre, scm eventuelt er substitueret med en alkylgruppe, hvor alkylgruppen 35 har 1-4 C-atcmer, amidet eller en alkylester, hvor alkylgruppen har 1-4 C-atcmer, af den eventuelt substituerede pyridincarboxylsyre, thiourinstof, isobutyramid og chelatdannende kcmpléksdannelsesmidler, såsom nitrilotrieddikesyre eller ethylen-diamintetraeddikesyre.
40 Et foretrukket reagens af den ovennævnte art indeholder lx 102 til 1 x 103 U/L uricase, 500 til 1500 kU/1 katalase, 500 til 1000 6 U9476 ϋ/l aldehyddehydrogenase, 0,3 til 2 mol/1 ethanol, 0,5 til 1,5 mmol/1 NAD+ eller NADP+, 20 til 100 mmol/1 puffer med pH 8,0 til 9,0 og 0,005 til 0,5 mol/1 tilsætningsmiddel, hvor ku står for kilo internationale enzymenheder.
5 Ifølge opfindelsen lykkes det som ovenfor beskrevet at udelukke generende blindreaktioner ved bestemmelsen og dermed at forbedre nøjagtigheden af fremgangsmåden samt nedsætte tids- og reagensforbruget ved undværelse af en prøve-blindværdi-bestemmelse.
10 De efterfølgende eksempler belyser opfindelsen yderligere.
Eksempel 1 til 27.
De nedenfor beskrevne eksempler blev gennemført ved slutværdi-metoden 15 under anvendelse af følgende reagenser:
Reagens 1.
K4P2°7/HCl-Puffer (30 til 50 mmol/1, pH 8,0 til 9,0), ethanol (0,3 20 til 2 mol/1) , NAD+ (^0,5 mmol/1) , katalase fra okselever (- 500 kO/1), aldehyddehydrogenase fra gær (- 500 U/l).
Reagens 2.
25 Uricase fra svinelever (^ 1,6 x 10^ ϋ/l).
Bestemmelsesforløb.
Målestråling: Ekstinktion måles ved 334 nm, 340 nm og 365 nm under anvendelse af en 30 kviksølvlampe son lyskilde; Kuvettens lagtykkelse: 1 cm; inkubationstenperatur: Stuetemperatur.
2,0 ml af reagens 1 afpipetteres i kuvetten, 0,1 ml prøve tilsættes, og der blandes. Ekstinktionen registreres i ca. 3 minutter, der ekstrapoleres til tidspunktet for tilsætningen af reagens l, og E^ bestemmes. 35 10 μΐ af reagens 2 iblandes. Ekstinktionen registreres i ca. 2 til 10 minutter, og E2 konstateres ved ekstrapolation til tidspunktet for tilsætning af reagens 2.
Beregnet af koncentrationen (c) af urinsyre i serum: 40 7 149476 c = (E2-E1) . 3,41 mmol/1 (λ = 334 ran, kviksølvlampe scan lyskilde) c = (E2“E1) . 3,35 mmol/1 (λ = 340 ran, kviksølvlampe som lyskilde) c - (E2~E^) . 6>20 mmol/1 (λ = 365 ran, kviksølvlampe som lyskilde, NAD) c = (E2“E1) . 6,03 mmol/1 (λ = 365 ran, kviksølvlampe sonlyddlde, NADP) 5
Prøvemateriale.
Serum, plasma, fortyndet urin.
10 Ved den som ovenfor beskrevet gennemførte fremgangsmåde blev de i nedenstående 'tabel anførte4 tilsætningsmidler benyttet. Tabellen angiver arten af det benyttede prøvemateriale. Det benyttede coenzym, anvendelsen af tilsætningsmidlet samt den uspecifikke ekstinktionsændring (blindreaktion) i E pr. minut. Eksempler-15 ne 1, 4, 6, 8, 10, 13, 17, 22, 24 og 26 er sammenligningseksempler, medens de øvrige eksempler belyser opfindelsen.
Eksempel Prøve Coenzym Tilsætnings- Blindreaktion nr._____middel (mol/1) AE/minut_ 1 Uræmikerserum nr.l NAD - +0,004 20 2 Uræmikerserum nr.l NAD Pyrazol 0,000 (0,05-0,3) 3 Uræmikerserum nr.l NAD Pyridin 0,000 (0,05-0,20) 4 Uræmikerserum nr.2 NAD - + 0,002 25 5 Uræmikerserum nr.2 NAD 4-methylpyri= 0,000 din (0,1-0,3) 6 Uræmikerserum nr.3 NAD - + 0,003 7 Uræmikerserum nr.3 NAD a) Pyrazol 0,001 (0,05-0,15) b) Natrium- 0,000 oxalat 30 (0,05-0,15) 8 Uræmikerserum nr.4 NAD - + 0,002 9 Uræmikerserum nr.4 NAD Trichloretha= 0,000 nol (0,01-0,07) 10 Uræmikerserum nr.5 NAD - - 0,003 35 11 Uræmikerserum nr.5 NAD Natriumoxalat 0,000 (0,05-0,15) 12 Uræmikerserum nr.5 NAD Malonsyre- 0,000 monoethyl-ester (K-salt] (0,05-0,15) . 13 Uræmikerserum nr.6 NAD - + 0,003' 14 Uræmikerserum nr.6 NAD a) Pyrazol 0,001 (0,005-0,15) 40 149476 8
Eksempel ' Prøve Coenzym Tilsætnings- Blindreaktion f nr.______middel (mol/1) ΔΕ/minut_ b) Malonsyre- 0/000 monoethyl- ester (K-salt) 5 (0,05-0,15) 15 Uræmikerserum nr.6 NAD a) Pyrazol 0,001 (0,05-0,15) b) Pyridin 0,000 (0,05-0,10) 16 Uræmikerserum nr.6 NAD Thiourinstof 0,000 10 (0,1-0,2) 17 Uræmikerserum nr.6 NADP - + 0,002 18 Uræmikerserum nr.6 NADP Trichloretha= 0,000 nol (0,01-0,07) .19 Uræmikerserum nr.6 NADP a) Pyrazol 0,001 (0,05-0,15) . b) Malonsyre- 0,000 monoethyl-ester (K-salt) (0,05-0,15) 20 Uræmikerserum nr.6 NADP a) Pyrazol 0,001 (0,05-0,15) b) Natriumoxa- 0,000 2q lat (0,05-0,15) 21 Uræmikerserum nr.6 NADP a) Pyrazol 0,001 (0,05-0,15) b) Pyridin 0,000 (0,05-0,10) 22 Uræmikerserum nr.7 NADP - + 0,003 23 Uræmikerserum nr.7 NADP a) Trichlor- 0,001 25 ethanol (0,01-0,07) b) Malonsyre- 0,000 monoethylester K-salt (0,05-0,10) 24 Uræmikerserum nr.8 NAD - + 0,002 30 25 Uræmikerserum nr.8 NAD EDTA (0,05-0,20) 0,000 26 Serum nr.9 NAD - + 0,001 27 Serum nr. 9 NAD Isobutyramid 0,000 (0,1-0,3) + = ekstinktionsforøgelse - = ekstinktionsformindskelse.
Af eksemplerne 1 til 27 fremgår det, at en forstyrrende blindreaktion ifølge opfindelsen kan undertrykkes fuldstændigt, uanset om der er 40 tale om en ekstinktionsforøgelse eller en ekstinktionsformindskelse.
9 149476
Eksempel 28.
Til urinsyrebestemmelse på kinetisk basis kan følgende reagens anvendes : 5
Reagens.
K4P20^/HCl-puffer (30 til 50 mmol/1, pH 8,0 til 9,0), ethanol (0,3 til 2 mol/1), NAD+ (^ 0,5 mmol/1), katalase fra kvæglever (^ 500 kU/1), 10 aldehyddehydrogenase fra gær (- 500 U/l), uricase (470 til 710 U/l), xanthin, K-salt (180 til 240 ymol/1).
Bestemmelsesforløb.
15 Analysen gennemføres ved hjælp af den kinetiske "fixed-time-Verfahren" (se DE offentliggørelsesskrift nr. 25 58 536) under anvendelse af en GEMSAEC Fast Analyzers.
Målestråling: 340 nm; inkubationstemperatur: 25°C.
20 Prøve eller standard 50 yl
NaCl-opløsning, 0,9% 200 yl
Reagens 500 yl
Den første aflæsning E^ foretages 35 til 100 sekunder efter reak-25 tionens begyndelse, medens den anden aflæsning E2 foretages 150 til 200 sekunder senere. Under antagelse af et standardforløb beregner automatens computer urinsyrekoncentrationen (cprøve) ifølge formlen: _ cstandard·^E2~E1^prøve 30 P1*™ (E2-e1> standard
Prøvemateriale.
Serum, plasma, fortyndet urin.
35
Gennemførelsen af forsøget skete analogt med eksemplerne 1 til 27 med og uden tilsætningsmidlet ifølge opfindelsen. Resultaterne svarer derfor fuldstændig til de resultater, som blev opnået med de tilsvarende tilsætninger i eksemplerne 1 til 27.
40 149476 ίο
Eksempel 29-41.
Man gik frem på samme måde som i eksemplerne 1-27 under anvendelse af de tilsætningsmidler, der fremgår af den efterfølgende tabel.
5 Koncentrationen af det pågældende tilsætningsmiddel var mellem 0,05 og 0,15 mol/1. De opnåede resultater svarer til de resultater, der opnåedes med tilsætningerne i eksemplerne 1-27.
10 [Eksempel Prøve Coenzym Tilsætnings- Blindreaktion nr.___middel (mol/1) /E/minut_ 29 Uræmikerserum nr. 1 NAD 2-methyl- 0,000 pyrazol ^5 30 Uræmikerserum nr. 1 NAD 2-chlor- 0,000 pyridin 31 Uræmikerserum nr. 1 NAD 2,4-diethyl- 0,000 pyrazol 32 Uræmikerserum nr. 1 NAD 2-brompyrazol 0,000 33 Uræmikerserum nr. 1 NAD Pyridin-3- 0,001 2q carboxylsyre- ethylester 34 Uræmikerserum nr. 2 NAD Pyridin-3- 0,000 carboxylsyre- diethylamid 35 Uræmikerserum nr. 2 NAD Pyridin-3- 0,000 carboxylsyre 25 36 Uræmikerserum nr. 2 NAD 3-carboxy-2- 0,001 methylpyridin 37 Uræmikerserum nr. 1 NAD 2-ethyl-pyrazol 0,000 38 Uræmikerserum nr. 1 NAD 2-chlorpyrazol 0,000 39 Uræmikerserum nr. 1 NAD 2-brompyridin 0,000 30 40 Uræmikerserum nr. 2 NAD 2-carboxy-4- 0,001 ethylpyridin 41 Uræmikerserum nr. 2 NAD 4-ethylpyridin 0,001 i
Claims (5)
1. Fremgangsmåde til bestemmelse af urinsyre i biologisk materiale ved hjælp af uricase, katalase og aldehyddehydrogenase i nærværelse af alkohol og nikotinamid-adenin-dinucleotid eller -phosphat (NAD(P)), kendetegnet ved, at mindst én forbindelse valgt blandt oxalat, malonsyremonoalkylester, hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer, 10 trihålogenethanol, pyrazol eller pyridin, der eventuelt begge er substitueret med en eller flere alkylgrupper, hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer, eller halogenatomer, pyridincarboxylsyre, der eventuelt er substitueret med en alkylgruppe, hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer, amidet eller en alkylester, hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer, af 15 den eventuelt substituerede pyridincarboxylsyre, thiourinstof, iso-butyramid og chelatdannende kompleksdannelsesmidler, såsom nitrilo-trieddikesyre eller ethylendiamintetraeddikesyre, tilsættes.
2. Fremgangsmåde ifølge kr^v 1, kendetegnet ved, at der 20 anvendes 0,005 til 0,5 mol/1 tilsætningsmiddel.
3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at mindst ét tilsætningsmiddel valgt blandt oxalat og malonsyremonoalkylester, hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer, tilsættes sammen med 25 et eller flere af tilsætningsmidlerne valgt blandt thiourinstof, iso-butyramid, kompleksdannere, henholdsvis substituerede pyrazoler, pyridiner og pyridincarboxylsyrer.
4. Fremgangsmåde ifølge ethvert af de foregående krav, kende-30 tegnet ved, at der arbejdes ved pH-værdier fra 8,0 til 9,0.
5. Reagens til bestemmelse af urinsyre ved fremgangsmåden ifølge krav 1 og indeholdende uricase, katalase, aldehyddehydrogenase, alkohol, NAD(P) og puffer, kendetegnet ved, at det er tilsat 35 mindst en forbindelse valgt blandt oxalat, malonsyremonoalkylester, hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer, trihålogenethanol, pyrazol eller pyridin, der eventuelt begge er substitueret med en eller flere alkyl- ' grupper, hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer, eller halogenatomer, 40
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE2718588 | 1977-04-26 | ||
| DE2718588A DE2718588C3 (de) | 1977-04-26 | 1977-04-26 | Verfahren und Reagens zur Bestimmung von Harnsäure |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK172678A DK172678A (da) | 1978-10-27 |
| DK149476B true DK149476B (da) | 1986-06-23 |
| DK149476C DK149476C (da) | 1986-12-01 |
Family
ID=6007336
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK172678A DK149476C (da) | 1977-04-26 | 1978-04-20 | Fremgangsmaade og reagens til bestemmelse af urinsyre i biologiskmateriale |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4247630A (da) |
| JP (1) | JPS53135390A (da) |
| AT (1) | AT354642B (da) |
| AU (1) | AU511846B2 (da) |
| BE (1) | BE866414A (da) |
| CA (1) | CA1098013A (da) |
| CH (1) | CH643661A5 (da) |
| DE (1) | DE2718588C3 (da) |
| DK (1) | DK149476C (da) |
| FR (1) | FR2389135A1 (da) |
| GB (1) | GB1578176A (da) |
| IT (1) | IT1095369B (da) |
| NL (1) | NL179145C (da) |
| SE (1) | SE432949B (da) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6031472B2 (ja) * | 1978-12-14 | 1985-07-22 | 協和醗酵工業株式会社 | 酸性ウリカ−ゼ |
| DE3025170A1 (de) * | 1980-07-03 | 1982-01-28 | C.H. Boehringer Sohn, 6507 Ingelheim | Verfahren und reagenz zur bestimmung von harnsaeure |
| DE3743405A1 (de) * | 1987-05-14 | 1988-11-24 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zur bestimmung von fructosamin |
| IT1247946B (it) * | 1991-05-17 | 1995-01-05 | Instrumentation Lab Srl | Stabilizzazione in forma liquida dell'enzima urato ossidasi |
| US5265301A (en) * | 1992-11-02 | 1993-11-30 | Lawrence Irwin F | Drain cleaning apparatus |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3411887A (en) * | 1964-06-15 | 1968-11-19 | Miles Lab | Diagnostic composition |
| US3335069A (en) * | 1964-12-14 | 1967-08-08 | Miles Lab | Composition and method for determining uric acid |
| US3536448A (en) * | 1967-07-28 | 1970-10-27 | Miles Lab | Uric acid detection |
| DE2237940C3 (de) * | 1972-08-02 | 1980-12-11 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren zur quantitativen Bestimmung von Harnsäure |
| JPS53711B2 (da) * | 1973-01-16 | 1978-01-11 | ||
| JPS5013356A (da) * | 1973-06-08 | 1975-02-12 | ||
| US3956069A (en) * | 1974-04-29 | 1976-05-11 | Abbott Laboratories | Enzymatic assays for glucose, creatine phosphokinase or plasma ammonia |
| JPS5123294A (en) * | 1974-08-19 | 1976-02-24 | Seishin Seiyaku Kk | Nyosanno anteikaho |
| DE2450726C3 (de) * | 1974-10-25 | 1981-02-19 | Rainer Prof. Dr.Med. Haeckel | Verfahren zur enzymatischen quantitativen Bestimmung von Wasserstoffperoxid |
-
1977
- 1977-04-26 DE DE2718588A patent/DE2718588C3/de not_active Expired
-
1978
- 1978-01-31 AT AT65778A patent/AT354642B/de not_active IP Right Cessation
- 1978-02-03 CA CA296,266A patent/CA1098013A/en not_active Expired
- 1978-03-02 AU AU33786/78A patent/AU511846B2/en not_active Expired
- 1978-03-16 SE SE7803056A patent/SE432949B/sv not_active IP Right Cessation
- 1978-03-24 IT IT7821633A patent/IT1095369B/it active
- 1978-03-30 NL NLAANVRAGE7803366,A patent/NL179145C/xx not_active IP Right Cessation
- 1978-03-31 US US05/892,360 patent/US4247630A/en not_active Expired - Lifetime
- 1978-03-31 FR FR7809688A patent/FR2389135A1/fr active Granted
- 1978-04-20 DK DK172678A patent/DK149476C/da active IP Right Grant
- 1978-04-20 JP JP4713878A patent/JPS53135390A/ja active Granted
- 1978-04-21 CH CH434578A patent/CH643661A5/de not_active IP Right Cessation
- 1978-04-21 GB GB15854/78A patent/GB1578176A/en not_active Expired
- 1978-04-26 BE BE187138A patent/BE866414A/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE2718588A1 (de) | 1978-11-09 |
| FR2389135A1 (fr) | 1978-11-24 |
| SE7803056L (sv) | 1978-10-27 |
| CA1098013A (en) | 1981-03-24 |
| ATA65778A (de) | 1979-06-15 |
| US4247630A (en) | 1981-01-27 |
| NL179145C (nl) | 1986-07-16 |
| DE2718588C3 (de) | 1979-11-08 |
| DK172678A (da) | 1978-10-27 |
| IT7821633A0 (it) | 1978-03-24 |
| JPS5643240B2 (da) | 1981-10-09 |
| NL7803366A (nl) | 1978-10-30 |
| AU511846B2 (en) | 1980-09-11 |
| AT354642B (de) | 1979-01-25 |
| AU3378678A (en) | 1979-09-06 |
| BE866414A (fr) | 1978-10-26 |
| DE2718588B2 (de) | 1979-03-08 |
| NL179145B (nl) | 1986-02-17 |
| CH643661A5 (de) | 1984-06-15 |
| JPS53135390A (en) | 1978-11-25 |
| FR2389135B1 (da) | 1981-02-13 |
| SE432949B (sv) | 1984-04-30 |
| DK149476C (da) | 1986-12-01 |
| GB1578176A (en) | 1980-11-05 |
| IT1095369B (it) | 1985-08-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4242446A (en) | Method for determining a substance in a biological fluid and reagent combination for use in the method | |
| Noma et al. | Polarographic method for rapid microdetermination of cholesterol with cholesterol esterase and cholesterol oxidase. | |
| WO1987005113A1 (en) | Glucose reference control for glucose test strips | |
| EP0149853B1 (en) | Process for measuring activity of dehydrogenase | |
| WO1980000259A1 (en) | Semi-quantitative assay of metabolic acids | |
| JPS5814200B2 (ja) | グルコ−ス・デヒドロゲナ−ゼによるグルコ−ス濃度の反応速度論的測定法 | |
| EP0490286B1 (en) | Enzymatic composition for ethanol assay | |
| DK149476B (da) | Fremgangsmaade og reagens til bestemmelse af urinsyre i biologiskmateriale | |
| Petrarulo et al. | Assay of plasma oxalate with soluble oxalate oxidase | |
| EP0140589B1 (en) | Enzymatic determination of d-3-hydroxybutyric acid or acetoacetic acid, and reagents therefor | |
| Laursen et al. | A fluorimetric method for measuring the activity in serum of the enzyme glutamic pyruvic transaminase | |
| EP0396584B1 (en) | Assay of salicylates or reduced pyridine nucleotides | |
| Pesce et al. | Rapid kinetic measurement of lactate in plasma with a centrifugal analyzer | |
| CA2024052C (en) | Enzymatic method for determining analyte concentrations | |
| Bacon et al. | Kinetic study of the Jaffé reaction for quantifying creatinine in serum: 2. Evaluation of buffered reagent and comparison of different data-processing options. | |
| EP0076478B1 (en) | Linear kinetic determination of bicarbonate in body fluids | |
| Bartl et al. | Improved automated kinetic determination of uric acid in serum by use of uricase/catalase/aldehyde dehydrogenase. | |
| JPH0635966B2 (ja) | チオール化合物を検出するのに有用な分析試薬、及びそれを用いた検出方法 | |
| JP2000262299A (ja) | グルコースデヒドロゲナーゼによるグルコースの定量方法およびグルコース定量用試薬 | |
| Bonvicini et al. | Kinetic enzymatic determination of creatinine by a rapid semiautomated procedure | |
| DiCesare | Optimum kinetic enzymatic procedures for glucose and triglycerides in plasma and serum | |
| JPH02142498A (ja) | 体液中のカルシウム測定方法 | |
| US7407774B2 (en) | Method for reducing influence of hemoglobin with albumin in an assay | |
| US4207203A (en) | Uric acid standard solutions | |
| CN119331951A (zh) | 一种镁离子检测试剂、试剂盒及检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| B1 | Patent granted (law 1993) |