DE850527C

DE850527C - Method of observation with phase contrast

Info

Publication number: DE850527C
Application number: DEP28255A
Authority: DE
Inventors: Frits Dr Zernike
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1947-11-25
Filing date: 1948-12-31
Publication date: 1952-09-25

Description

Verfahren zur Beobachtung mit Phasenkontrast Die Erfindung betrifft eine Weiterbildung des von 7. e r n i k e abgegebenen Verfahrens zur Beobachtung mit Phasenkontrast von nicht oder wenig absorbierenden Objekten, insbesondere von mikroskopischen Objekten.Method of observation with phase contrast The invention relates to a further development of the procedure for observation given by 7. e r n i k e with phase contrast of no or little absorbing objects, in particular of microscopic objects.

Um derartige Objekte sichtbar zu machen, war man früher gezwungen, sie zu färben, wodurch die Beobachtung lebender Objekte erschwert war. Die ungefärbten Objekte beeinflussen meistens nicht die Amplituden des sie durchsetzenden Lichtes, wohl aber in an sich nicht sichtbarer Weise die Phasen desselben. Sie bilden eine Phasenstruktur im Gegensatz zu der Amplitudenstruktur absorbierender Objekte.In the past, in order to make such objects visible, one was forced to coloring them, making it difficult to observe living objects. The uncolored Objects mostly do not influence the amplitudes of the light passing through them, but in a way that is not in itself visible the phases of the same. They form one Phase structure in contrast to the amplitude structure of absorbing objects.

Durch das Phasenkontrastverfahren gelingt es, Phasenstrukturen in derselben Weise sichtbar zu machen wie Amplitudenstrukturen. Das Verfahren beruht bekanntlich darauf, daß ein Teil des das Objekt durchlaufenden Lichtes eine Phasetvänderung von vorzugsweise 9o° gegenüber den vom Objekt abgebeugten anderen Teil ,des Lichtes erhält, indem es eine sogenannte Phasenschicht durchläuft, welche ihm einePha@senänderung erteilt. Auf diese Weise erscheint eine Phasenstruktur wie eine Amplitudenstruktur und umgekehrt.The phase contrast method makes it possible to create phase structures in in the same way as amplitude structures. The procedure is based It is well known that part of the light passing through the object has a phase change of preferably 90 ° with respect to the other part of the light that is diffracted from the object obtained by going through a so-called phase shift, which gives it a phase change granted. In this way a phase structure appears like an amplitude structure and vice versa.

Bezeichnet man den Brechungsindex der Phasenschicht mit rt, ihre Dicke mit d, so wird die Schicht so ausgebildet, daß ist.The refractive index of the phase layer is denoted by rt, its thickness with d, the layer is formed so that is.

Diese Bedingung ist mit einer bestimmten Schicht nur für eine Wellenlänge genau erfüllbar, weil der Brechungsindex im Falle normaler Dispersion mit wachsender Wellenlänge abnimmt. Daher überlagern sich dem Phasenkontrastbild in der einen Farbe Bilder in anderen Farben, für welche der Kontrast schwächer ist.This condition is can only be fulfilled precisely for one wavelength with a certain layer, because the refractive index decreases with increasing wavelength in the case of normal dispersion. For this reason, images in other colors for which the contrast is weaker are superimposed on the phase contrast image in one color.

Ferner sind bei Beschränkung auf einen kleinen Spektralbereich, für den die obige Bedingung ausreichend erfüllt ist, kleine Strukturunterschiede des Objekts nur als Änderung der Helligkeit erkennbar. Daher besteht der Wunsch, auch Farbunterschiede zur Ausdeutung des Bildes wirksam zu machen.Furthermore, when restricted to a small spectral range, for the above condition is sufficiently fulfilled, small structural differences of the Object only recognizable as a change in brightness. Hence, there is a desire, too To make color differences effective for the interpretation of the picture.

Der Erfindung liegt also die neue Aufgabe zugrunde, die Wellenabhängigkeit im Phasenkontrastverfahren zu beherrschen, um dadurch die Möglichkeit zu gewinnen, erstens den Farbenkontrast zwischen den Bildern der zu untersuchenden Objekte und denen ihrer Umgebung zu steigern oder zweitens, um das Phasenkontrastbild zu achromatisieren.The invention is therefore based on the new object, the wave dependency to master the phase contrast method in order to gain the possibility of firstly the color contrast between the images of the objects to be examined and to increase those of their surroundings or, secondly, to achromatize the phase contrast image.

Die Farbenkontraststeigenung bewirkt, daß sehr kleine Unterschiede der optischen Eigenschaften der Objekte, z. B. geringeUnterschiede ihrer Dicke oder ihres Brechnungsindexes, sich nicht nur als Änderung der Helligkeit, sondern in kontrastierenden Farben bemerkbar machen, so daß dadurch die Deutung -der Bilder erleichtert wird. Man gewinnt dabei die Möglichkeit, durch unterschiedliche Färbung Strukturen voneinander zu unterscheiden, die in dem früheren Phasenkontrastverfahren gleich erscheinen. -Der wesentliche Vorteil liegt in der Unterscheidung der Wirkungen der Zerstreuung und -der Absorption von derWirkung kleiner Unterschiede in den Dicken und Brechungsindizes der Objekte.The increase in color contrast causes very small differences the optical properties of the objects, e.g. B. small differences in their thickness or their refractive index, not only as a change in brightness, but in make contrasting colors noticeable, so that the interpretation of the pictures is facilitated. You gain the opportunity by different coloring To distinguish structures from one another in the earlier phase contrast method appear the same. -The main advantage lies in the differentiation of the effects the scattering and absorption of the effect of small differences in thicknesses and refractive indices of the objects.

Es besteht daher die Aufgabe, der Phasenänderung eine anomale Wellenlängenabhängigkeit zu erteilen. Man kann dies erreichen durch Benutzung eines hierfür geeigneten anomal dispergierenden Stoffes oder durch die Kombination mehrerer Stoffe mit normaler Dispersion.There is therefore the task of giving the phase change an abnormal wavelength dependency granted. One can achieve this by using an anomalous suitable for this purpose dispersing substance or by combining several substances with normal Dispersion.

Die Erfindung besteht darin, daß die Farben des Phasenkontrastbildes durchAbstimmung der Dicke, der Dispersionen und gegebenenfalls ,der Absorption der Phasenschicht und des diese Schicht umgebenden Mediums beeinflußt werden.The invention consists in that the colors of the phase contrast image by adjusting the thickness, the dispersions and, if necessary, the absorption of the Phase layer and the medium surrounding this layer are influenced.

Insbesondere werden die Farben so beeinflußt, daß farblose Objekte farbig auf andersfarbigem Untergrund erscheinen (Farbphasenkontrast), oder daß der Phrasenkontrast achromatisch .ist.In particular, the colors are so influenced that colorless objects appear in color on a differently colored background (color phase contrast), or that the Phrase contrast is achromatic.

Das Mittel zur Abstimmung besteht nach der Erfindung insbesondere in der Einbettung der Phasenschicht in ein anderes Medium. Da alsdann der Brechungsindex der Schicht n, sieh nur wenig von dem des Mediums nm unterscheidet, so können die Dicken d, und dm der Schicht und des Mediums wesentlich größer gemacht werden, als wenn die Schicht in Luft eingebettet ist, sie können ein Vielfaches der Lichtwellenlängen betragen.According to the invention, the means for voting consists in particular in the embedding of the phase layer in another medium. Then there is the refractive index of the layer n, see only slightly different from that of the medium nm, the Thicknesses d, and dm of the layer and the medium are made much larger than When the layer is embedded in air, it can use a multiple of the wavelengths of light be.

Die von der eingebetteten Phasenschicht erzeugte Phasenänderung p ist Wenn d, = d," ist, so ist Die Achromatisierung der Phasenänderung erhält man, wenn p für alle Wellenlängen gleich ist. Wählt man dagegen zum Erzeugen von Farbenkontrast die Substanzen der Phasenschicht und des Mediums derart, daß' für eine Farbe die Phasenänderung 9o°, für eine andere Farbe o° ist, so erhält man in der ersten Farbe ein Phasenkontrastbild, in der zweiten Farbe ein Hellfeldbild. IMan kann die Bilder entweder durch eingeschaltete Farbfilter einzeln betrachten oder bei einfallendem weißen Licht in Überlagerung. Dann erscheint das Objekt z. B. in der Farbe des Hellfeldbildes auf einem Untergrund aus der Mischfarbe. Erzeugt man für eine dritte Farbe die Phasenänderung von minus 9o°, so erhält man in dieser Farbe ein positives Kontrastbild (Umkehrfarbenkontrast).The phase change p is generated by the embedded phase layer If d, = d, "then is The achromatization of the phase change is obtained when p is the same for all wavelengths. If, on the other hand, the substances of the phase layer and the medium are selected to generate color contrast so that 'the phase change is 90 ° for one color and 0 ° for another color, a phase contrast image is obtained in the first color and a bright field image in the second color . IMan can either view the images individually through activated color filters or overlaying them with incident white light. Then the object appears z. B. in the color of the bright field image on a background from the mixed color. If a phase change of minus 90 ° is generated for a third color, a positive contrast image is obtained in this color (reverse color contrast).

Die Substanzen, welche die zur Erfüllung der angegebenen Bedingungen erforderlichen Dispersionen besitzen, lassen sich aus den bekannten Substanzen .auswählen, insbesondere aber lassen sie sich dadurch gewinnen, daß man Stoffe mit verschiedenen Brechungseigenschaften mischt.The substances that are necessary to meet the specified conditions have the necessary dispersions, can be selected from the known substances, In particular, however, they can be obtained by using substances with different Refractive properties mixes.

.Man kann diesen Stoffen Farbstoffe beifügen, welche .nur -die zu benutzenden diskreten Farben durchlassen.You can add dyes to these substances, which using discrete colors.

In der Zeichnung bedeutet Fig. i eine Darstellung, welche die des Brechungsindizes als Ordinaten und die Wellenlänge als Abszissen enthält. Diese Stoffe sind für achromatischen Phasenkontrast bestimmt; Fig. 2 stellt die .Dispersionen der Stoffe für eine Anordnung zur Herstellung von Umkehrfarbphasenkontrasten dar; Fig. 3 .stellt die Dispersionen der Stoffe für eine Anordnung dar, bei welcher Farbphasenkontrast erzeugt wird; Fig.4 ist ein Grundriß einer Phasenplatte nach der Erfindung; Fig.5 ist ein Schnitt nach der Linie V-V in F ig. 4.In the drawing, Fig. I means a representation which that of the Contains indices of refraction as ordinates and wavelength as abscissas. These Fabrics are intended for achromatic phase contrast; Fig. 2 shows the .Dispersionen the fabrics for an arrangement for producing reversed color phase contrasts; Fig. 3 .shows the dispersions of the substances for an arrangement in which color phase contrast is produced; Fig. 4 is a plan view of a phase plate according to the invention; Fig. 5 is a section along the line V-V in F ig. 4th

Die praktische Bedeutung der oben besprochenen Möglichkeiten sei nunmehr an Hand von drei Spezialfällen besprochen.The practical significance of the possibilities discussed above is now discussed on the basis of three special cases.

Der erste Fall ist derjenige, bei welchem die Phasendifferenz unabhängig von der Wellenlänge ist, der als achromatischer Phasenkontrast bezeichnet wird. Ein Objektiv eines Mikroskops für achromatischen Phasenkontrast ist allgemein verwendbar. Insbesondere lassen sich Einzelheiten in stark gefärbten Objekten beobachten. Ein solches Objektiv gibt auch die beste Möglichkeit, Strukturen an der Grenze zweier Medien von nahezu gleicher Brechung sichtbar zu machen. Bei der Mikrophotographie hat der achromatische Phasenring den Vorteil, daß beliebige Farbenfilter mit ihm zusammen verwendet werden können.The first case is the one in which the phase difference is independent is of the wavelength referred to as achromatic phase contrast. An objective of a microscope for achromatic phase contrast is generally usable. In particular, details can be observed in strongly colored objects. A Such a lens also gives the best possibility of structures on the border of two To make media of almost the same refraction visible. In the case of photomicrographs the achromatic phase ring has the advantage that any color filter can be used with it can be used together.

Fig. i zeigt beispielsweise die Dispersionskurven eines Paares von Substanzen, deren Brechungsindizes für alle Wellenlängen eine der Wellenlänge proportionale Differenz haben. Die Phasendifferenz ist demnach bei gleicher Schichtdicke der Phasenschicht undi ihrer Umgebung achromatisch. In diesem Beispiel besteht die Phasenschicht n. aus Nitrocellulose gemischt mit 35 Gewichtsprozent Cinnamalacetophenon, während das Einbettungsmedium n", aus Daniniarliarz mit 40% Bromnaphthalin besteht.For example, Fig. I shows the dispersion curves of a pair of Substances whose refractive indices are proportional to the wavelength for all wavelengths Have difference. The phase difference is accordingly with the same layer thickness of the phase layer and their surroundings are achromatic. In this example the phase layer consists of n. the end Nitrocellulose mixed with 35 percent by weight cinnamalacetophenone, while the embedding medium n "consists of Daniniarliarz with 40% bromonaphthalene.

Eine zur Herstellung einer solchen Farbenplatte geeignete Anordnung ist in den Fig. d und 5 dargestellt. :Auf einen Glaskörper i ist ein ringförmiger Phasenstreifen 2 aufgebracht, der z. B. eine Dicke d = 5 Mikron besitzt.An arrangement suitable for making such a color plate is shown in Figs. : On a vitreous body i is an annular one Phase strips 2 applied, the z. B. has a thickness d = 5 microns.

Zur Herstellung des Phasenstreifens kann von bekannten Verfahren, z. B. Aufdampfen oder Lackieren, Gebrauch gemacht werden. Insbesondere wird vorteilhaft zuerst ein dünner Film von Cellulosenitrat oder einem ähnlichen Material hergestellt, etwa durch .Auflösen von Cellulosenitrat in einem üblichen Lösungsmittel und Ausbreiten der Lösung in einer gleichmäßigen Schicht auf einer Glasplatte. Nach dem Trocknen soll der erhaltene Film eine Dicke zwischen 2 und io @Mikron haben. In dem Beispiel nach Fig. i soll seine Dicke 5 Mikron betragen. Zu der Lösung werden Stoffe hinzugefügt, welche die optischen und mechanischen Eigenschaften des Films beeinflussen, z. B. Weichmacher, Farbstoffe oder feinverteilte Pigmente und Substanzen mit hoher optischer Dispersion. Stoffe, welche zu den folgenden Gruppen gehören und mehr oder weniger die Eigenschaften von Weichmachern haben, wurden als zweckmäßig zur Beeinflussung derDispersionen befunden: Naphthalinderivate, wie Naphthole und substituierte Naphthylamine, Ester und Amide und deren Derivate von ungesättigten aromatischen Säuren, wie Zimtsäure.For the production of the phase strip, known methods, z. B. vapor deposition or painting, use can be made. In particular it will be advantageous first made a thin film of cellulose nitrate or a similar material, for example by dissolving cellulose nitrate in a common solvent and spreading it of the solution in an even layer on a glass plate. After drying the film obtained should have a thickness between 2 and io @ microns. In the example according to Fig. i, its thickness should be 5 microns. Substances are added to the solution, which affect the optical and mechanical properties of the film, e.g. B. Plasticizers, dyes or finely divided pigments and substances with high optical properties Dispersion. Substances which belong to the following groups and more or less the properties of plasticizers have been considered useful for influencing of the dispersions found: naphthalene derivatives, such as naphthols and substituted naphthylamines, Esters and amides and their derivatives of unsaturated aromatic acids such as cinnamic acid.

Der so gebildete Film wird von (lern Glas abgezogen. und seine Dicke tttid optischen Eigenschaften werden geprüft. Der Phasenring oder Phasenstreifen z wird dann aus dem Film ausgeschnitten und auf der Oberfläche des Glaskörpers i befestigt.The film thus formed is peeled from (learn glass. And its thickness tttid optical properties are tested. The phase ring or phase strip z is then cut out of the film and placed on the surface of the glass body i attached.

Schließlich wird der Phasenring oder Phasenstreifen in eine dünne Schicht eines Kittes eingeschlossen, .der zur Erzielung des Achromatismus einen höheren Brechungsindex und eine geringere Dispersion hat. Obwohl die Brechungsindizes des Films und .des Kittes mit abnehmender Wellenlänge zunehmen, nimmt ihre Differenz ab und kann so eingestellt werden, daß ihre Differenz der Wellenlänge proportional ist.Eventually the phase ring or phase strip turns into a thin one A layer of putty included, the one to achieve achromatism has a higher index of refraction and less dispersion. Although the refractive indices of the film and the cement increase with decreasing wavelength, their difference increases and can be adjusted so that their difference is proportional to the wavelength is.

Für den Kitt können insbesondere verwendet werden Mischungen von Harzen, z. B. Kanadabalsam, mit Stoffen von hohem Brechungsindex und niedriger Dispersion, z. B. mit gechlorten oder bromierten aromatischen Kohlenwasserstoffeh (Bromnaplitlialinen).In particular, mixtures of resins can be used for the putty, z. B. Canada balsam, with substances of high refractive index and low dispersion, z. B. with chlorinated or brominated aromatic hydrocarbons (Bromnaplitlialinen).

Ein weiteres vorteilhaftes Verfahren besteht darin, die beschriebene Lösung von Cellulosenitrat mit den Zusätzen unmittelbar auf .die zu verwendende Glasoberfläche, z. 13. eine der zu kittenden Linsenflächen aufzubringen, etwa durch Spritzen oder andere geeignete Verfahren. In diesem Falle kann eine Schablone verwendet werden, so daß nur der Ringteil mit der Lösung bedeckt wird, oder es kann die zuerst die ganze Oberfläche bedeckende Schicht nachträglich mit Ausnahnie des Ringes entfernt werden. Die Einbettung in den Kitt erfolgt wie oben beschrieben.Another advantageous method is that described Solution of cellulose nitrate with the additives immediately on .the to be used Glass surface, e.g. 13. to apply one of the lens surfaces to be cemented, for example through Syringes or other suitable method. In this case a stencil can be used so that only the ring part is covered with the solution, or it may be the first the entire surface covering layer subsequently removed with the exception of the ring will. The embedding in the putty is carried out as described above.

Man kann auch wie in Fig. d und 5 dargestellt den Phasenring und die Kittschicht zwischen Glasplatten einlagern.You can also as shown in Fig. D and 5, the phase ring and the Store the cement layer between the glass plates.

In Fig.3 sind die Di,spersionskurven für eine Phasenplatte dargestellt, welche Yarbpliasenkontrast ergibt. Hier soll für eine Farbe die Phasendifferenz go°, für die Komplementärfarbe o° betragen. In dem dargestellten Beispiel ist angenominen, daß die Phasenschicht und das sie umgebende Medium gleiche Dicke haben.The dispersion curves for a phase plate are shown in FIG. which results in Yarbpliasenkontrast. Here, the phase difference should be for a color go °, for the complementary color o °. In the example shown, it is assumed that the phase layer and the medium surrounding it have the same thickness.

Ein Objektiv mit Farbphasenring ist besonders zweckmäßig für Objekte, , die Phasenstrukturen sowie Amplitudenstrukturen haben. Beispielsweise möge die Phasenplatte eine Differenz von go° für orangefarbiges Licht und von o° für blaugrünes Licht erzeugen. Eine Phasenstruktur wird dann dunkle Einzelheiten auf einem fhellen Hintergrund im Orange und eine gleichmäßige Beleuchtung im Blaugrünen zeigen (blaugrünes Hellfeld). Beide Bilder zusammen erheben dann blaugrüne Strukturen. Für Amplitudenstrukturen gilt das Umgekehrte, d. h. ihre Einzelheiten stellen sich in einer Orangefarbe dar. Die Wirkung wird am klarsten, wenn der Beleuchtungsapparat nur die zwei benutzten Farben ausstrahlt.A lens with a color phase ring is particularly useful for objects that have phase structures as well as amplitude structures. For example, may the Phase plate a difference of go ° for orange light and of o ° for blue-green Generate light. A phase structure then becomes dark details on a light one Background in orange and a uniform lighting in blue-green show (blue-green Brightfield). Both images together then raise blue-green structures. For amplitude structures the reverse is true, i.e. H. their details are shown in an orange color. The effect is clearest when only the two use the lighting apparatus Emits colors.

In dem Beispiel, das in Fig.3 dargestellt ist, beträgt die .Dicke @6 Mikron. Die Phasenschicht besteht aus Nitrocellulose mit 40% harzigem Clophen (hochchloriertes Diphenyl) . und der Kitt .aus Polvvitiylacetat mit i50/0 Kanadabalsam. Für Licht derWellenlänge o,485 ist die Phasendifferenz Null, für Licht der Wellenlänge o,6io gleich minus 9o°.In the example shown in Figure 3, the thickness is @ 6 microns. The phase layer consists of nitrocellulose with 40% resinous clophen (highly chlorinated diphenyl). and the putty made from polyvinyl acetate with 150/0 Canada balsam. For light of wavelength 0.485 the phase difference is zero, for light of wavelength o.6io equals minus 9o °.

F ig. 2 zeigt die Dispersionskurven für eine Phasenplatte, die zum Umkehrfarbphasenkontrast dient. Hier ist die Phasendifferenz plus 9o° für eine Farbe, o° für eine andereFarbe und minusgo° für eine dritte Farbe. Ein Objektiv mit Umkehrfarbphasenring ist geeignet für Objekte, welche Phasenstrukturen und Amplitudenstrukturen besitzen, ferner insofern, als durch die Verwendung eines nur die erste Farbe durchlassenden Filters gewisse Teile des Objekts, deren Untersuchung erwünscht ist, dutikel gegen einen hellen Hintergrund alwebildet werden können (positiver Phasenkontrast). Dies ist für die Untersuchung des Wachstums oder der Bewegung derartiger Objekte geeignet. Bei Verwendung eines die dritte Farbe durchlassenden Filters erscheinen .diese Strukturen hell auf einem dunklen Hintergrund (negativer Phasenkontrast). Dies kann für genaue Messungen solcher Teile geeigneter sein. Gleichzeitig vorhandene Amplitudenstrukturen lassen sich beobachten unter Verwendung eines Filters, welches nur die Farbe hindurchläBt, für welche die Phasendifferenz Null erzeugt wird.Fig. 2 shows the dispersion curves for a phase plate used for Reverse color phase contrast is used. Here is the phase difference plus 9o ° for a color, o ° for another color and minusgo ° for a third color. A lens with a reversed color phase ring is suitable for objects that have phase structures and amplitude structures, furthermore inasmuch as through the use of one which only allows the first color to pass through Filters certain parts of the object that it is desired to examine against a light background can be formed (positive phase contrast). this is suitable for studying the growth or movement of such objects. When using a filter that allows the third color to pass, these structures appear bright on a dark background (negative phase contrast). This can be for exact Measurements of such parts may be more appropriate. Simultaneously existing amplitude structures can be observed using a filter that only lets the color through for which the phase difference zero is generated.

In dem Beispiel nach Fig. z ist für die Wellenlänge o,-16; die Phasendifferenz plus go°, für die Wellenlänge 0,55o gleich Null und für die Wellenlän2e 0,700 gleich minus go°, wobei die Dicke 5,Mikron beträgt. Wenn gewünscht, kann bei der Erzielung von Farbphasenkontrasten auch bewirkt werden, daB sich der Unterschied der Brechungsindizes wesentlich mehr 'ändert als in dem in Fig. 3 dargestellten Fall, beispielsweise so, daß die Bedingung für Farbphasenkontrast erfüllt ist, indem die Phasen: änderung 9o° für eine Wellenlänge gemacht wird, während für die komplementäre Wellenlänge die Indizes von Film und Kitt gleich sind. In manchen Fällen kann es zweckmäßig sein, zwei komplementäre Farbp'hasendifferenzen von 270 und 36o° zu erzeugen.In the example according to FIG. Z, for the wavelength o, -16; the phase difference plus go °, for the wavelength 0.55o equal to zero and for the wavelength 0.700 equal to minus go °, the thickness being 5.5 microns. If desired, the achievement of color phase contrasts can also have the effect that the difference in the refractive indices changes significantly more than in the case shown in FIG ° is made for one wavelength, while for the complementary wavelength the indices of film and cement are the same. In some cases it can be useful to generate two complementary color phase differences of 270 ° and 360 °.

Das beschriebeme Verfahren hat den weiteren Vorteil, daß die Stärke des durch die Phasenplatte direkt durchgehenden Lichtes innerhalb weiter Grenzen durch Zufügung absorbierender Stoffe geregelt werden kann.The method described has the further advantage that the strength of the light passing directly through the phase plate within wide limits can be regulated by adding absorbent substances.

Auf diese Weise können achromatische Phasenstreifen von neutraler grauer Farbe oder auch von stark selektiver Absorption hergestellt werden. Schließlich können auch Ringe hergestellt werden, die nur einzelne diskrete Farben durchlassen, denen gleichzeitig verschiedene Phasenänderungen erteilt werden.In this way, achromatic phase stripes can be more neutral gray color or also from highly selective absorption. In the end rings can also be produced that only allow individual discrete colors to pass through, to which various phase changes are granted at the same time.

Im vorstehenden sind die nach Auffassung des Erfinders besten Ausführungsformen derErfindung beschrieben. Die Erfindung ist jedoch nicht auf diese Ausführungsformen beschränkt.The foregoing are the best modes believed by the inventor of the invention. However, the invention is not limited to these embodiments limited.

Claims

PATENT CLAIMS: i. Method for observation with phase contrast, characterized in that the colors of the phase contrast are influenced by adjusting the thickness, the dispersion and, if necessary, the absorption of the phase layer and the medium surrounding this layer.

2. The method according to claim i, characterized in that the colors are influenced in such a way that colorless objects appear in color on a differently colored background.

3. The method according to claim i characterized in that the colors are influenced so that the phase contrast image is achromatic.

4. Apparatus for performing the method according to claim i, characterized characterized in that the phase plate has a phase layer which is in a Layer surrounding medium is embedded.

5. Apparatus according to claim 4, characterized characterized, @ that the thickness of the phase layer is a multiple of the generation the required phase change and that its refractive index is almost the same as that of the embedding medium.

6. Apparatus according to claim 4,: characterized in that the phase layer is light of different wavelengths absorbed to varying degrees.

7. Apparatus according to claim q, characterized in that that at least one of the media is a mixture of substances with different refractive properties which are combined to achieve the desired dispersion. B. Device for performing the method according to claim 3, characterized in that the media are chosen so that the difference in their indices of refraction is proportional to the wavelength is (achromatic phase contrast). G. Device for carrying out the procedure according to claim 2, characterized in that the media with regard to their refractive properties and the thickness of the first medium are chosen so that the optical phase difference for a certain wavelength o ° and for another wavelength within the visible spectrum is go ° (color phase contrast). ok Device for exercising of the method according to claim 2, characterized in that the media with respect to their refractive properties and the thickness of the first transparent medium selected are that the phase difference between both media for a given wavelength o ° (bright field), for another wavelength plus 9o ° (negative phase contrast) and for a third wavelength minus go ° (positive phase contrast). I i. contraption according to one of claims to io, characterized in that the phase layer or the embedding medium or both only allow individual discrete colors to pass through.