DE69929440T2

DE69929440T2 - Zusammensetzungen zur behandlung chronischer lymphatischer leukämie

Info

Publication number: DE69929440T2
Application number: DE69929440T
Authority: DE
Inventors: Francis A. Scottsdale Nardella
Original assignee: Cephalon LLC
Current assignee: Cephalon LLC
Priority date: 1998-07-09
Filing date: 1999-07-08
Publication date: 2006-08-17
Anticipated expiration: 2019-07-09
Also published as: US6921772B2; AU767586B2; ATE315392T1; EP1104297A1; ES2255287T3; WO2000002555A1; NZ509376A; JP2002520282A; CA2336932A1; US6573292B1; PT1104297E; DK1104297T3; DE69929440D1; US20030232874A1; EP1104297B8; US20050261356A1; EP1104297A4; EP1104297B1; AU5209899A

Description

Gebiet der Erfindung
Die vorliegende Erfindung betrifft die Verwendung von Indolderivaten, die dadurch gekennzeichnet sind, dass sie ein 1,3,4,9-Tetrahydropyrano[3,4-b]-indol, 1,3,4,9-Tetrahydrothiopyrano[3,4-b]-indol, 1,2,3,4-Tetrahydro-4H-carbazol oder 2,3,4,9-Tetrahydro-1H-carbazolnukleus, wie beispielsweise Etodolac, aufweisen, zur Behandlung von chronischer lymphozytischer Leukämie und B-Zell- und T-Zelllymphomen.
Hintergrund der Erfindung
Bei der chronischen lymphatischen Leukämie (CLL) handelt es sich um eine heterogene Gruppe von Krankheiten, die durch unterschiedliche Reifungszustände der B-Zellen und T-Zellen gekennzeichnet sind, die mit der Aggressivität der Erkrankung in Beziehung stehen. Demgemäß wird die CLL üblicherweise in verschiedene Kategorien unterteilt, einschließlich chronische B-Zelllymphozytenleukämie vom klassischen und gemischten Typ, B-Zell- und T-Zellprolymphozytenleukämie, Haarzellleukämie und Haarzellvariante, Milzlymphom mit zirkulierenden villösen Lymphozyten, große granuläre Lymphozytenleukämie, Erwachsenen-T-Zellleukämie/Lymphomsyndrom und leukämische Phasen von malignen Lymphomen sowohl vom B-Zell- als auch T-Zelltyp.
Die chronische B-Zell-Lymphozytenleukämie (B-CLL) ist durch die Proliferation und Anhäufung von B-Lymphozyten gekennzeichnet, die morphologisch reif erscheinen, aber biologisch unreif sind. Die B-CLL tritt typischerweise bei Personen im Alter über 50 Jahre auf. Auf diese Erkrankung entfallen 30 % der Leukämien in den westlichen Ländern, und 10.000 neue Fälle werden jährlich allein in den Vereinigten Staaten diagnostiziert. Die Erkrankung ist durch die Proliferation von biologisch unreifen Lymphozyten (Lymphozytose) gekennzeichnet, die typischerweise niedrige Niveaus an Oberflächenimmunglobulinen exprimieren, die nach Organinfiltration eine Lymphknotenvergrößerung und eine Hepatosplenomegalie verursachen. In den fortgeschrittenen Stadien der Erkrankung bewirkt eine Knochenmarksbelegung durch die abnormalen Lymphozyten ein Knochenmarksversagen, was zu einer Anämie und Thrombozytopenie führt.
Die B-Zellen in der CLL besitzen Rezeptoren für Mauserythrozyten, einen Marker von unreifen B-Zellen. Über eine erhöhte Anzahl von T-Zellen bei dieser Erkrankung und einem Anstieg der T-Suppressorzellzahlen ist berichtet worden. Typischerweise resultiert eine Umkehrung des T-Helfer/Suppressor-Verhältnisses, wobei die Suppressor-T-Zellen erhöht und die Helfer-T-Zellen erniedrigt sind. Die absolute Anzahl von natürlichen Killerzellen kann auch erhöht sein. Darüber hinaus stellt eine Chromosomenanalyse zusätzlich zu den klinischen Daten von Patienten mit B-Zell-CLL prognostische Informationen über die Gesamtüberlebenszeit zur Verfügung.
Es ist darauf hingewiesen worden, dass bestimmte nicht steroidale, entzündungshemmende Medikamente (NSAID) chemopräventive und antineoplastische Eigenschaften aufweisen können. Zum Beispiel offenbart Piazza u.a., Cancer Research 57: 2452–2459 (1997), dass Sulindac (ein NSAID, das als Cyclooxygenasehemmer wirkt) eine Regression von Kolonadenomen bei Patienten mit familiärer adenomatöser Polypose bewirkt und deren Wiederauftreten in einer Weise verhindert, die unabhängig von der Cyclooxygenasehemmungswirkung des Medikaments zu sein scheint. Obwohl die Induktion einer Apoptose vorgeschlagen wurde, wird der eigentliche Wirkmechanismus dieser NSAID bei der Hemmung des Zellwachstums kaum verstanden.
Die Verbindung Etodolac, 1,8-Diethyl-1,3,4,9-tetrahydro[3,4-b]-indol-1-essigsäure, gehört generell zur Klasse der NSAID und ist ein Cyclooxygenasehemmer. Etodolac wird verwendet, um leichten bis mäßigen Schmerz, Osteoarthritis und rheumatoide Arthritis zu behandeln. Andere verwandte Indolverbindungen besitzen, wie gezeigt wurde, eine ähnliche Wirkung. Zum Beispiel offenbaren die US-Patente Nr. 3 843 681, 3 939 178, 3 974 179 und 4 686 213 Indolderivate auf der Grundlage des 1,3,4,9-Tetrahydropyrano[3,4,-b]-indol-1-essigsäurenukleus, die nach den Berichten eine entzündungshemmende, analgetische, antibakterielle und/oder antifungale Wirkung aufweisen. Ähnliche 1,2,3,4-Tetrahydro-4H-carbazol- und 2,3,4,9-1H- Carbazolverbindungen und ihre Verwendung als Cyclooxygenase-2(COX-2)-Hemmer für antiarthritische, kolorektale Krebs- und Alzheimer-Therapie werden auch in den US-Patenten Nr. 5 776 967, 5 824 699 und 5 830 911 offenbart.
Zusammenfassung der Erfindung
Es ist nun überraschenderweise festgestellt worden, dass die Anzahl von zirkulierenden leukämischen Lymphozyten bei Patienten, die an einer chronischen lymphozytischen Leukämie (CLL) leiden, wie beispielsweise einer B-Zell-CLL, durch die Verabreichung von bestimmten Indolverbindungen, wie beispielsweise dem nicht steroidalen entzündungshemmenden Medikament Etodolac oder verwandten Indolverbindungen, in vivo, in vitro und in situ verringert wird.
Daher betrifft gemäß einem Aspekt die vorliegende Erfindung die Entdeckung, dass Etodolac oder verwandte Indolverbindungen die Konzentration von leukämischen Lymphozyten bei Patienten mit CLL reduziert.
Die vorliegende Erfindung betrifft auch die Verwendung von Etodolac, verwandten Etodolacverbindungen und/oder Salzen oder funktionellen Derivaten davon, zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Behandlung von CLL oder B-Zell-Lymphomen.
Es wird ins Auge gefasst, dass wirksame Indolverbindungen der vorliegenden Erfindung dadurch gekennzeichnet sind, dass sie ein Pyrano[3,4-b]-indol, ein Thiophyrano[3,4-b]-indol oder einen in der Position 1 einen Substituenten tragenden Carbazolnukleus aufweisen, wobei der Substituent eine Säure-, Ester- oder Amidfunktion einschließt. Diese Derivate können durch die Formel I dargestellt werden:
in der R₁ aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, Niederalkyl, Niederalkenyl, Niederalkynyl, Alkoxyniederalkyl, Niedercycloalkyl, Phenyl, Benzyl und 2-Thienyl ausgewählt ist; R₂ und R₃ gleich oder unterschiedlich und jeweils aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff und Niederalkyl ausgewählt sind; R₄ und R₅ gleich oder unterschiedlich und jeweils aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, Niederalkyl, -NH₂, -NHCHO, -NHCONH₂, =NW, Oxo, -OH und -OCH₃ ausgewählt sind, wobei W Hydroxy, Alkoxy, Aryloxy, Carboxyalkyloxy, Arylamino oder Alkylsulfonylamino ist; R₆ aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, Niederalkyl, Niederalkenyl, Niederalkynyl, Trifluormethyl, Hydroxy, Niederalkoxy, Trifluorniederalkoxy, Benzyloxy, Niederalkanoyloxy, Acyl, Amino, Nitro, Cyano, Alkylimido, Halogen, Mercapto, Niederalkylthio, Alkylsulfinyl, Alkylsulfonyl, Alkylsulfonamido und Sulfamoyl ausgewählt ist; R₇ aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, Niederalkyl und Niederalkenyl ausgewählt ist; X aus der Gruppe bestehend aus Kohlenstoff, Oxy und Thio ausgewählt ist; Y aus der Gruppe bestehend aus Carbonyl,
ausgewählt ist, in denen R₈, R₉, R₁₀, R₁₁, R₁₂ und R₁₃ jeweils Wasserstoff oder Niederalkyl ist; und Z aus der Gruppe bestehend aus Hydroxy, Niederalkoxy, Amino, Niederalkylamino, Di(nieder)alkylamino und Phenylamino ausgewählt ist.
Pyrano[3,4-b]-indol- und Thiopyrano[3,4-b]-indolderivate der Formel I, in denen R₆ 1 bis 4 Substituenten darstellt, die gleichzeitig in den Position 5, 6, 7 und 8 vorhanden sein können, sind auch vom Umfang der vorliegenden Erfindung erfasst. Demgemäß werden die Indolderivate der vorliegenden Erfindung auch durch die allgemeine Formel Ia vertreten:
in der R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₇, X, Y und Z wie oben definiert sind und R_6a, R_6b, R_6c und R_6d gleich oder unterschiedlich sind und jeweils aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, Niederalkyl, Niederalkenyl, Niederalkynyl, Trifluormethyl, Hydroxy, Niederalkoxy, Trifluorniederalkoxy, Benzyloxy, Araloxy, Niederalkanoyloxy, Acyl, Amino, Nitro, Cyano, Alkylimido, Halogen, Mercapto, Niederalkylthio, Alkylsulfinyl, Alkylsulfonyl, Alkylsulfonamido und Sulfamoyl ausgewählt sind.
Gemäß noch weiteren Aspekten der Erfindung werden Verfahren zur Behandlung von CLL und anderen Lymphomen durch Verabreichung einer die Lymphozyten reduzierenden Menge einer Verbindung der Formel I oder Ia an einen Patienten, der diese benötigt, entweder allein oder zusammen mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger zur Verfügung gestellt.
Kurze Beschreibung der Zeichnungen
Die vorstehenden Aspekte und viele der begleitenden Vorteile dieser Erfindung werden durch Bezug auf die nachfolgende ausführliche Beschreibung in Verbindung mit den beigefügten Zeichnungen leichter einschätzbar, worin:
1 eine graphische Darstellung der Leukozytenzahl (WBC, schwarze Kreise), Lymphozytenzahl (LYC, schwarze Dreiecke) und Neutrophilenzahl (NC, schwarze Quadrate) im Zeitablauf nach der Verabreichung von verschiedenen nicht steroidalen, entzündungshemmenden Medikamenten (NSAID) an einen an CLL leidenden Patienten zu den Zeiten ist, die als dunkle Rauten gezeigt sind, wie im Beispiel 1 beschrieben. Die verabreichten NSAID waren Etodolac (E, 300 mg, zweimal täglich × 3–6 Tage), Naproxen (N, 250 mg, dreimal täglich × 4 Tage), Diclofenac (D, 50 mg, dreimal täglich × 4 Tage), Sulindac (S, 200 mg, zweimal täglich × 4 Tage), Nabumeton (R, 500 mg, zweimal täglich × 6 Tage), Oxaprozin (O, 600 mg, zweimal täglich × 4 Tage), Piroxicam (P, 20 mg, einmal täglich × 3 Tage), Indomethacin (I, 25 mg dreimal täglich × 3 Tage), Tolmetin (T, 400 mg, zweimal täglich × 3 Tage) und Ibuprofen (M, 400 mg, dreimal täglich × 3 Tage). Die Dosis und Dauer der Verabreichung sind in der 1 gezeigt;
2 eine graphische Darstellung der Leukozytenzahl (WBC, schwarze Kreise), Lymphozytenzahl (LYC, schwarze Dreiecke) und Neutrophilenzahl (NC, schwarze Quadrate) im Zeitablauf nach der Verabreichung der nicht steroidalen, entzündungshemmenden Medikamente (NSAID), die in der 1 beschrieben sind, an einen an CLL leidenden Patienten zu den Zeiten ist, die als umgekehrte Dreiecke gezeigt sind, wie in der 1 veranschaulicht, und zwar unter Hinzufügung der Blutplättchenzahl (PLTCT, dunkle Rauten) des Patienten.
Ausführliche Beschreibung der bevorzugten Ausführungsform
In Übereinstimmung mit der vorliegenden Erfindung wird ein Verfahren zur Prophylaxe oder Behandlung einer chronischen lymphozytischen Leukämie (CLL) bei einem Patienten zur Verfügung gestellt, umfassend die Verabreichung einer therapeutisch wirksamen Menge an Indolderivat der Formel:
an den Patienten, in der R₁ aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, Niederalkyl, Niederalkenyl, Niederalkynyl; Alkoxyniederalkyl, Niedercycloalkyl, Phenyl, Benzyl und 2-Thienyl ausgewählt ist; R₂ und R₃ gleich oder unterschiedlich und jeweils aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff und Niederalkyl ausgewählt sind; R₄ und R₅ gleich oder unterschiedlich und jeweils aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, Niederalkyl, -NH₂, -NHCHO, -NHCONH₂, =NW, Oxo, -OH und -OCH₃ ausgewählt sind, wobei W Hydroxy, Alkoxy, Aryloxy, Carboxyalkyloxy, Arylamino oder Alkylsulfonylamino ist; R₆ aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, Niederalkyl, Niederalkenyl, Niederalkynyl, Trifluormethyl, Hydroxy, Niederalkoxy, Trifluorniederalkoxy, Benzyloxy, Niederalkanoyloxy, Acyl, Amino, Nitro, Cyano, Alkylimido, Halogen, Mercapto, Niederalkylthio, Alkylsulfinyl, Alkylsulfonyl, Alkylsulfonamido und Sulfamoyl ausgewählt ist; R₇ aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, Niederalkyl und Niederalkenyl ausgewählt ist; X aus der Gruppe bestehend aus Kohlenstoff, Oxy und Thio ausgewählt ist; Y aus der Gruppe bestehend aus Carbonyl,
ausgewählt ist, in denen R₈, R₉, R₁₀, R₁₁, R₁₂ und R₁₃ jeweils Wasserstoff oder Niederalkyl ist; und Z aus der Gruppe bestehend aus Hydroxy, Niederalkoxy, Amino, Niederalkylamino, Di(nieder)alkylamino und Phenylamino ausgewählt ist, oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.
Pyrano[3,4-b]-indol- und Thiopyrano[3,4-b]-indolderivate der Formel I, in denen R₆ ein bis vier Substituenten darstellt, die gleichzeitig in den Positionen 5, 6, 7 und 8 vorhanden sein können, sind auch vom Umfang der vorliegenden Erfindung umfasst. Demgemäß werden die Indolderivate der vorliegenden Erfindung auch durch die allgemeine Formel Ia vertreten:
in der R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₇, X, Y und Z wie oben definiert sind und R_6a, R_6b, R_6c und R_6d gleich oder unterschiedlich sind und jeweils aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, Niederalkyl, Niederalkenyl, Niederalkynyl, Trifluormethyl, Hydroxy, Niederalkoxy, Trifluorniederalkoxy, Benzyloxy, Araloxy, Niederalkanoyloxy, Acyl, Amino, Nitro, Cyano, Alkylimido, Halogen, Mercapto, Niederalkylthio, Alkylsulfinyl, Alkylsulfonyl, Alkylsulfonamido und Sulfamoyl ausgewählt sind, oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.
Die Herstellung von Verbindungen der Formeln 1 und 1a ist in den US-Patenten Nr. 3 843 681, 3 939 178, 3 974, 179, 4 686 213, 4 748 252, 5 776 967, 5 824 699 und 5 830 911 offenbart.
In einer gegenwärtig bevorzugten Ausführungsform der Erfindung ist die Indolverbindung der Formel I Etodolac mit der Formel
oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon. Verfahren zur Synthese von Etodolac sind in den US-Patenten Nr. 4 585 877 und 5 599 946 offenbart. Etodolac ist im Handel unter dem Handelsnamen Lodine^®, Wyeth-Ayerst Laboratories, Division of American Home Products Corporation, Philadelphia, Pennsylvania, USA, erhältlich. Die Isomere der Verbindungen der Formel I, die aus den darin enthaltenen asymmetrischen Zentren resultieren, sind auch vom Umfang der vorliegenden Erfindung umfasst. Das im Handel erhältliche Etodolac-Produkt ist ein razemisches Gemisch. Das US-Patent Nr. 5 561 151 offenbart die Trennung eines Gemischs aus den Enantiomeren von Etodolac mittels herkömmlicher Mittel und die Verwendung des abgetrennten R(-)-Isomers als Analgetikum. Es wird daher weiter ins Auge gefasst, dass die (R)- und (S)-Isomere von Etodolac getrennt werden und bei der Durchführung der Erfindung separat verwendet werden können.
Wie hier in Verbindung mit den Indolderivaten der Erfindung verwendet, fasst der Begriff „Niederalkyl" sowohl geradkettige als auch verzweigte Alkylradikale mit ein bis sechs Kohlenstoffatomen ins Auge und umfasst Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, Isobutyl, 2-Methylpentyl.
Wie hier verwendet fasst der Begriff „Niederalkenyl" sowohl geradkettige als auch verzweigte Alkenylradikale mit zwei bis sechs Kohlenstoffatomen ins Auge und umfasst Vinyl, Allyl, 1-Propenyl, Methallyl, 2-Ethyl-3-butenyl.
Wie hier verwendet fasst der Begriff „Niederalkynyl" sowohl geradkettige als auch verzweigte Alkynylradikale mit zwei bis sechs Kohlenstoffatomen ins Auge und umfasst Ethynyl, Propargyl, 1,1-Dimethylpropargyl.
Wie hier verwendet umfasst der Begriff „Niedercycloalkyl" gesättigte cyclische Kohlenwasserstoffradikale mit drei bis sechs Kohlenstoffatomen ins Auge und umfasst Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl.
Wie hier verwendet fasst der Begriff „Niederalkoxy" sowohl geradkettige als auch verzweigte Alkoxyradikale mit ein bis vier Kohlenstoffatomen ins Auge und umfasst Methoxy, Ethoxy, Isopropoxy.
Wie hier verwendet umfasst der Begriff „Niederalkanoxyloxy" sowohl geradkettige als auch verzweigte Alkanoyloxyradikale mit zwei bis sechs Kohlenstoffatomen ins Auge und umfasst Acetoxy, Propionyloxy, Hexanoyloxy.
Wie hier verwendet betrifft der Begriff „Acyl" die divalente Gruppe -C(O)-.
Der Begriff „Aryl", wie er hier verwendet wird, betrifft cyclische aromatische Kohlenwasserstoffketten mit zwanzig oder weniger Kohlenstoffatomen, z.B. Phenyl, Naphthyl, Biphenyl und Anthracenyl. Ein oder mehr Kohlenstoffatome der Arylgruppe können auch substituiert sein, z.B. mit: Alkyl; Aryl; Heterocyclus; Halogen, Nitro; Cyano; Hydroxyl, Alkoxyl oder Aryloxyl; Thio oder Mercapto, Alkyl- oder Arylthio; Amino, Alkylamino, Arylamino, Dialkyl-, Diaryl- oder Arylalkylamino; Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl, Arylaminocarbonyl, Dialkylaminocarbonyl, Diarylaminocarbonyl oder Arylalkylminocarbonyl; Carboxyl oder Alkyl- oder Aryloxycarbonyl; Carboxaldehyd oder Aryl- oder Alkylcarbonyl; Iminyl oder Aryl- oder Alkyliminyl; Sulfo; Alkyl- oder Arylsulfonyl; Hydroximinyl oder Aryl- oder Alkoximinyl; Carbamido; oder Thiocarbamido. Darüber hinaus können zwei oder mehr Alkyl- oder Heteroalkylsubstituenten einer Arylgruppe zu kondensierten Aryl-Alkyl- der Aryl-Heteroalkyl-Ringsystem (z.B. Tetrahydronaphthyl) kombiniert werden. Substituenten mit heterocyclischen Gruppen (z.B. Heterocyclusoxy, Heteroaryloxy und Heteroaralkylthio) sind in Analogie zu den oben beschriebenen Begriffen definiert.
Die Begriffe „Aralkyl" oder „Aralkoxy", wie hier verwendet, betreffen eine Arylgruppe, die durch eine Alkyl- oder Alkoxygruppe, wie oben beschrieben, zu einem Stammaufbau verbunden sind, z.B. Benzyl, α-Methylbenzyl, Phenethyl.
Wie hier verwendet fasst der Begriff „Halogen" Halogene ins Auge und umfasst Fluor, Chlor, Brom und Iod.
Wenn der Begriff „Nieder" hier als Teil der Beschreibung eines Alkylamino und Dialkylamino verwendet wird, fasst er ein bis sechs Kohlenstoffatome jeder Alkylgruppe eines solchen Radikals ins Auge und umfasst ein Methylamino, n-Hexylamino, Dimethylamino, Diethylamino.
Wenn die vorliegenden Indolderivate der Erfindung bei Warmblütern, z.B. Mäusen, Ratten oder Menschen, gemäß der Erfindung verwendet werden, können sie oral als solches oder in Dosisformen, d.h. Kapseln oder Tabletten, in Kombination mit pharmakologisch verträglichen Trägern oder sonstigen Bestandteilen, wie beispielsweise Stärke, Milchzucker und so weiter, verabreicht werden. Sie können auch oral in Form von Lösungen in geeigneten Vehikeln, wie beispielsweise pflanzlichen Ölen, verabreicht werden oder parenteral injiziert werden. Für die parenterale Verabreichung können sie in Form einer sterilen Lösung, die andere gelöste Stoffe enthält, beispielsweise ausreichend Kochsalzlösung oder Glucose, um die Lösung isotonisch einzustellen, verwendet werden.
Die Dosis der Indolderivate der Erfindung variiert je nach der bestimmten gewählten Verbindung und Verabreichungsform. Weiterhin variiert sie je nach dem bestimmten behandelten Wirt. Das Verhältnis der Verbindung wird durch die Löslichkeit und chemische Natur der Verbindung, den gewählten Verabreichungsweg und die übliche biologische Praxis bestimmt. Im Allgemeinen werden die Verbindungen der Erfindung in einer Konzentration verabreicht, die die Vorteile der Erfindung ohne die schädlichen Nebenwirkungen hervorbringt. Wirksame Konzentrationen werden üblicherweise in einem therapeutischen Bereich von 1,0 mg bis 500 mg einer Indolverbindung der Erfindung pro kg Körpergewicht des Patienten pro Tag erhalten, wobei ein bevorzugter Bereich 10 bis 100 mg/kg pro Tag ist.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können in Form von Salzen verwendet werden, die aus anorganischen oder organischen Säuren stammen. Diese Salze umfassen folgendes, ohne darauf beschränkt zu sein: Acetat, Adipat, Alginat, Citrat, Aspartat, Benzoat, Benzolsulfonat, Bisulfat, Butyrat, Camphorat, Camphorsulfonat, Digluconat, Cyclopentanpropionat, Dodecylsulfat, Ethansulfonat, Glucoheptanoat, Glycerophosphat, Hemisulfat, Heptanoat, Hexanoat, Fumarat, Hydrochlorid, Hydrobromid, Hydroiodid, 2-Hydroxyethansulfonat, Lactat, Maleat, Methansulfonat, Nicotinat, 2-Naphthalensulfonat, Oxalat, Pamoat, Pectinat, Sulfat, 3-Phenylpropionat, Pikrat, Pivalat, Propionat, Succinat, Tartrat, Thiocyanat, p-Toluolsulfonat und Undecanoat. Auch können die basischen Stickstoff enthaltenden Gruppen mit solchen Mitteln, wie Niederalkylhalogenide, wie beispielsweise Methyl-, Ethyl-, Propyl- und Butylchloride, -bromide und -iodide; Dialkylsulfate, wie Dimethyl-, Diethyl-, Dibutyl- und Diamylsulfate, langkettige Halogenide, wie beispielsweise Decyl-, Lauryl-, Myristyl- und Stearylchloride, -bromide und -iodide, Aralkylhalogenide, wie Benzyl- und Phenethylbromide quaternisiert werden, um so wasserlösliche oder in Öl lösliche dispergierbare Produkte zu erhalten.
Beispiele für Säuren, die zur Bildung von pharmazeutisch verträglichen Säureadditionssalzen verwendet werden können, umfassen anorganische Säuren, wie Chlorwasserstoffsäure, Schwefelsäure und Phosphorsäure, und organische Säuren, wie Oxalsäure, Maleinsäure, Bernsteinsäure und Zitronensäure. Basische Additionssalze können in situ während der abschließenden Isolation und Reinigung der Verbindungen der Formel (I) oder getrennt durch Reaktion von Carbonsäureanteilen mit einer geeigneten Base, wie beispielsweise das Hydroxid, Carbonat oder Bicarbonat eines pharmazeutisch verträglichen Metallkations, oder mit Ammoniak oder einem organischen primären, sekundären oder tertiären Amin hergestellt werden. Pharmazeutisch verträgliche Salze umfassen Katione auf der Grundlage der Alkali- und Erdalkalimetalle, wie beispielsweise Natrium-, Lithium-, Kalium-, Calcium-, Magnesium-, Aluminiumsalze und dergleichen sowie nicht toxische Ammonium-, quaternäre Ammonium- und Aminkationen, einschließlich Ammonium, Tetramethylammonium, Tetraethylammonium, Methylamin, Dimethylamin, Trimethylamin, Triethylamin, Ethylamin. Weitere repräsentative organische Amine, die zur Bildung der Basenadditionssalze von Nutzen sind, umfassen Diethylamin, Ethylendiamin, Ethanolamin, Diethanolamin, Piperazin.
Pharmazeutische Zusammensetzungen, die mindestens eine Indol- oder Carbazolverbindung der Formel I oder Formel Ia umfassen, können auch geeignete Lösungen zur intravenösen, subkutanen, dermalen, oralen, mukosalen oder rektalen Verabreichung umfassen und können durch Injektion oder oral gegeben werden und 0,01 bis 99 Prozent, vorzugsweise 20 bis 75 Prozent, aktive Komponente zusammen mit den sonstigen Bestandteilen enthalten. Pharmazeutische Zusammensetzungen für die orale Verabreichung umfassen Tabletten und Kapseln. Zusammensetzungen, die rektal verabreicht werden können, umfassen Suppositorien. Pharmazeutische Zusammensetzungen gemäß der Erfindung können auf herkömmlichen Verabreichungswegen gegeben werden. Bevorzugte Verabreichungswege sind oral, intravenös, intramuskulär oder subkutan. Die pharmazeutischen Zusammensetzungen können auch kontinuierlich, d.h. über eine Infusion, verabreicht werden. Die Formulierung und Dosis hängt von der zu behandelnden Erkrankung, dem Verabreichungsweg und dem Zustand und Körpergewicht des zu behandelnden Patienten ab. Die genaue Dosis wird durch den behandelnden Arzt festgelegt.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen gemäß der Erfindung werden auf übliche Weise hergestellt, zum Beispiel durch Mischen des Wirkstoffs mit pharmazeutisch und physiologisch verträglichen Trägern und/oder Stabilisatoren und/oder sonstigen Bestandteilen oder dergleichen, und werden in Dosisform, z.B. durch Lyophilisierung in Dosisampullen hergestellt. Wie hier verwendet betrifft der Begriff „pharmazeutisch verträglich" ein Trägermedium, das die Wirksamkeit der biologischen Aktivität der Wirkstoffe nicht stört und das für die Wirte, an die es verabreicht wird, nicht toxisch ist.
Die in diesen Therapien verwendete Zusammensetzung kann in einer Auswahl von Formen vorliegen. Diese umfassen zum Beispiel feste, halbfeste und flüssige Dosisformen, wie beispielsweise Tabletten, Pillen, Pulver, Flüssigkeitslösungen oder -suspensionen, Liposome, und injizierbare und infusionsfähige Lösungen. Die bevorzugte Form hängt von der geplanten Verabreichungsart und der therapeutischen Anwendung ab. Die Zusammensetzungen umfassen auch vorzugsweise herkömmliche pharmazeutisch verträgliche Träger und Hilfsstoffe, wie dem Fachmann bekannt ist. Siehe beispielsweise REMINGTON'S PHARMACEUTICAL SCIENCES, Mack Publishing Co.: Easton, Pa., 17. Ausg. (1985). Vorzugsweise erfolgt die Verabreichung auf oralem oder parenteralem (einschließlich subkutanem, intramuskulärem, intravenösem und intradermalem) Weg. Besonders bevorzugt ist der Verabreichungsweg oral. Die therapeutischen Verfahren und Mittel der Erfindung können natürlich gleichzeitig oder in Kombination mit anderen Verfahren und Mittel zur Behandlung von CLL verwendet werden.
Obwohl es möglich ist, den Wirkstoff der Erfindung allein zu verabreichen, ist es bevorzugt, ein therapeutisches Mittel als Teil einer pharmazeutischen Formulierung oder Zusammensetzung zu präsentieren. Die Formulierungen der vorliegenden Erfindung umfassen mindestens eine Verbindung der Erfindung in einer therapeutisch oder pharmazeutisch wirksamen Dosis zusammen mit einem oder mehr pharmazeutisch oder therapeutisch verträglichen Trägern und wahlweise weiteren therapeutischen Bestandteilen. Es werden verschiedene Erwägungen zur Herstellung von solchen Formulierungen beschrieben, z.B. in Gilman u.a. (Hrsg.) GOODMAN AND GILMAN'S: THE PHARMACOLOGICAL BASES OF THERAPEUTICS, 8. Ausg, Pergamon Press (1990); und REMINGTON'S, supra, von denen jede hier durch Bezugnahme für alle Zwecke aufgenommen wird. Verfahren zur Verabreichung werden hier erörtert, z.B. für die orale, intravenöse, intraperitoneale, intramuskuläre und andere Verabreichungsformen. Typischerweise sind Verfahren zur Verabreichung von pharmazeutischen Zusammensetzungen entweder topische, parenterale oder orale Verabreichungsverfahren für die prophylaktische und/oder therapeutische Behandlung. Die orale Verabreichung ist bevorzugt. Die pharmazeutischen Zusammensetzungen können in einer Auswahl von Dosiseinheitsformen verabreicht werden, je nach dem Verabreichungsverfahren. Wie oben angegeben, umfassen Dosiseinheitsformen, die für die orale Verabreichung geeignet sind, Pulver, Tabletten, Pillen und Kapseln.
Die topische Verabreichung kann dazu verwendet werden, um eine Verbindung der Erfindung durch perkutanen Durchgang des Medikaments der systemischen Zirkulation des Patienten zuzuführen. Die Hautstellen umfassen anatomische Bereiche für die transdermale Verabreichung des Medikaments, wie beispielsweise den Unterarm, den Bauch, die Brust, den Rücken, das Gesäß und den mastoidalen Bereich. Die Verbindung wird auf die Haut durch Platzieren entweder einer topischen, die Verbindung umfassenden Formulierung oder einer transdermalen Medikamentenabgabevorrichtung, die die Verbindung verabreicht, auf die Haut appliziert. In jeder Ausführungsform wird das Abgabevehikel aufgebaut, geformt, abgemessen und auf leichte Anordnung und bequeme Retention auf der Haut angepasst.
Eine Auswahl von transdermalen Medikamentenabgabevorrichtungen kann mit den Verbindungen der Erfindung verwendet werden. Zum Beispiel kann ein einfaches anhaftendes Pflaster aus einem Trägermaterial und einem Acrylatkleber hergestellt werden. Das Medikament und jeder Penetrationsverbesserer können zu der adhäsiven Gießlösung formuliert werden. Die adhäsive Gießlösung kann direkt auf das Trägermaterial gegossen werden oder auf die Haut appliziert werden, um einen anhaftenden Überzug zu bilden. Siehe zum Beispiel US-Patente Nr. 4 310 509, 4 560 555 und 4 542 012.
In weiteren Ausführungsformen wird die Verbindung der Erfindung mittels einer Medikamentenabgabevorrichtung mit Flüssigkeitsreservoirsystem abgegeben. Diese Systeme umfassen typischerweise ein Trägermaterial, eine Membran, einen Klebstoff auf Acrylatbasis und eine Freigabe-Decklage. Die Membran ist mit der Trägerschicht zur Bildung eines Reservoirs versiegelt. Das Medikament oder die Verbindung und alle Vehikel, Verstärker, Stabilisatoren, Geliermittel und dergleichen werden dann in das Reservoir integriert. Siehe zum Beispiel die US-Patente Nr. 4 597 961; 4 485 097; 4 608 249; 4 505 891; 3 843 480; 3 948 254; 3 948 262; 3 053 255 und 3 993 073.
Matrixpflaster, die eine Trägerschicht, eine Medikamenten/Penetrationsverbesserungsmatrix, eine Membran und einen Klebstoff umfassen, können auch zur transdermalen Abgabe einer Verbindung der Erfindung verwendet werden. Das Matrixmaterial umfasst typischerweise einen Polyurethanschaum. Das Medikament, alle Verstärker, Vehikel und Stabilisatoren werden mit den Schaumvorläufern kombiniert. Der Schaum wird aushärten gelassen, um eine klebrige, elastomere Matrix zu erzeugen, die direkt auf dem Trägermaterial angebracht werden kann. Siehe zum Beispiel die US-Patente Nr. 4 542 013; 4 460 562; 4 466 953; 4 482 534 und 4 533 540.
Die Erfindung beinhaltet auch Präparate für die topische Applikation auf die Haut, die eine Verbindung der Erfindung, typischerweise in Konzentrationen im Bereich von etwa 0,001 % bis 10 %, zusammen mit einem nicht toxischen, pharmazeutisch verträglichen topischen Träger umfasst. Diese topischen Präparate können durch Kombination eines Wirkstoffs gemäß der Erfindung mit herkömmlichen pharmazeutischen Verdünnungsmitteln und Trägern, die üblicherweise in topischen trockenen, flüssigen und cremigen Formulierungen verwendet werden, hergestellt werden. Salben und Cremes können zum Beispiel mit einer wässrigen oder öligen Base unter Hinzufügen von geeigneten Verdickungs- und/oder Geliermitteln formuliert werden. Solche Basen können Wasser und/oder ein Öl, wie beispielsweise flüssiges Paraffin, oder ein pflanzliches Öl, wie beispielsweise Erdnussöl oder Rizinusöl, aufweisen. Verdickungsmittel, die gemäß der Beschaffenheit der Base verwendet werden können, umfassen weiches Paraffin, Aluminiumstearat, Cetostearylalkohol, Propylenglycol, Polyethylenglycole, Wollfett, hydriertes Lanolin, Bienenwachs.
Lotionen können mit einer wässrigen oder öligen Base formuliert werden und umfassen im Allgemeinen auch ein oder mehrere der folgenden Mittel: Stabilisierungsmittel, Emulgatoren, Dispergiermittel, Suspensionsmittel, Verdickungsmittel, Farbmittel, Parfums und dergleichen. Pulver können mit Hilfe einer jeden geeigneten Pulverbase gebildet werden, zum Beispiel Talk, Laktose, Stärke. Tropfen können mit einer wässrigen Base oder nicht wässrigen Base formuliert werden, die auch ein oder mehr Dispergiermittel, Suspensionsmittel, Lösungsvermittler und dergleichen umfasst. Die topische Verabreichung von Verbindungen der Erfindung kann auch für die Behandlung von Erkrankungen, wie beispielsweise Hautkrebs und Pilzinfektionen der Haut (pathogene Pilze exprimieren typischerweise ausdrückliche Telomeraseaktivität) bevorzugt sein.
Die topischen pharmazeutischen Zusammensetzungen gemäß der Erfindung können auch ein oder mehr Konservierungsstoffe oder bakteriostatische Mittel enthalten, zum Beispiel Methylhydroxybenzoat, Propylhydroxybenzoat, Chlorkresol, Benzalkoniumchloride. Die topischen pharmazeutischen Zusammensetzungen können auch weitere Wirkstoffe enthalten, wie beispielsweise antimikrobielle Mittel, insbesondere Antibiotika, Anästhetika, Analgetika und antipruritische Mittel.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können auch durch mukosale Membranen abgegeben werden. Die transmukosale (d.h. sublinguale, bukkale und vaginale) Medikamentenabgabe sieht einen wirksamen Eintritt von Wirkstoffen in die systemische Zirkulation vor und reduziert den sofortigen Metabolismus durch die Leber und Darmwandflora. Transmukosale Medikamentendosierungsformen (z.B. Tablette, Suppositorium, Salbe, Pessar, Membran und Pulver) werden typischerweise mit der mukosalen Membran in Kontakt gehalten und zerfallen schnell und/oder lösen sich schnell auf, um eine umgehende systemische Absorption zu ermöglichen. Es ist zu beachten, dass bestimmte Wege selbst dann verwendet werden können, wenn der Patient nicht in der Lage ist, eine Behandlungszusammensetzung oral einzunehmen. Es ist auch zu beachten, dass, wenn die Abgabe eines Telomerasehemmers der Erfindung erhöht ist, eine Zusammensetzung zur Abgabe an eine mukosale Membran gewählt werden kann, z.B. in den Fällen eines Kolonkrebses kann ein Suppositorium zur Abgabe des Telomerasehemmers verwendet werden.
Zur Abgabe an die bukkalen oder sublinualen Membranen wird typischerweise eine orale Formulierung, wie beispielsweise eine Pastille, Tablette oder Kapsel verwendet. Das Herstellungsverfahren für diese Formulierungen ist auf dem Fachgebiet bekannt und umfasst die Zugabe des pharmakologischen Mittels zu einer vorgefertigten Tablette, die Kaltkompression eines inerten Füllstoffs, eines Bindemittels und entweder eines pharmakologischen Mittels oder einer Substanz, die das Mittel enthält (wie im US-Patent Nr. 4 806 356 beschrieben) und die Verkapselung-_; ist aber nicht darauf beschränkt. Eine weitere orale Formulierung kann mit einem Klebstoff, wie beispielsweise Cellulosederivathydroxypropylcellulose, auf die Mundschleimhaut appliziert werden, zum Beispiel wie im US-Patent Nr. 4 940 587 beschrieben. Diese bukkale Klebstoffformulierung ermöglicht, wenn sie auf die Mundschleimhaut appliziert wird, die kontrollierte Freisetzung des pharmakologischen Mittels in den Mund und durch die bukkale Mukosa.
Die parenterale Verabreichung ist generell durch Injektion, entweder subkutan, intramuskulär oder intravenös, gekennzeichnet. Daher stellt die Erfindung Zusammensetzungen zur intravenösen Verabreichung zur Verfügung, die eine Lösung einer Verbindung der Erfindung umfassen, die in einem verträglichen Träger gelöst oder suspendiert ist. Injizierbare Mittel können in herkömmlichen Formen hergestellt werden, entweder als Flüssigkeitslösungen oder Suspensionen, feste Formen, die für die Lösung oder Suspension in Flüssigkeit vor der Injektion geeignet sind, oder als Emulsionen. Geeignete sonstige Bestandteile sind zum Beispiel Wasser, gepuffertes Wasser, Kochsalzlösung, Dextrose, Glycerol, Ethanol. Diese Zusammensetzungen werden durch herkömmliche, bekannte Sterilisationsverfahren sterilisiert, wie beispielsweise Sterilfiltration. Die sich ergebenden Lösungen können zur Verwendung so wie sie sind verpackt oder lyophilisiert werden, wobei das lyophilisierte Präparat vor der Verabreichung mit einer sterilen Lösung kombiniert wird. Darüber hinaus können, falls gewünscht, die zu verabreichenden pharmazeutischen Zusammensetzungen auch geringe Mengen an nicht toxischen Hilfsstoffen enthalten, wie beispielsweise Netzmittel oder Emulgatoren, pH-Puffermittel, wie beispielsweise Natriumacetat, Sorbitanmonolaurat, Triethanolaminoleat usw.
Ein weiteres Verfahren zur parenteralen Verabreichung verwendet die Implantation eines Systems mit langsamer Freisetzung oder verzögerter Freisetzung, so dass ein konstantes Dosierungsniveau aufrechterhalten wird. Siehe zum Beispiel das US-Patent Nr. 3 710 795.
Zum Beispiel können flüssige pharmazeutisch verabreichbare Zusammensetzungen durch Lösung, Dispersion usw. eines Wirkstoffs, wie oben definiert, und von wahlweisen pharmazeutischen Hilfsstoffen in einem sonstigen Bestandteil, wie beispielsweise Wasser, Kochsalzlösung, wässrige Dextrose, Glycerol, Ethanol, Olivenöl und anderen lipophilen Lösungsmitteln, hergestellt werden, um eine Lösung oder Suspension zu bilden. Falls gewünscht, kann die zu verabreichende pharmazeutische Zusammensetzung auch kleinere Mengen an nicht toxischen Hilfsstoffen enthalten, wie beispielsweise Netzmittel oder Emulgatoren, pH-Puffermittel, zum Beispiel Natriumacetat, Sorbitanmonolaurat, Triethanolaminnatriumacetat, Triethanolaminoleat usw. Die eigentlichen Verfahren zur Herstellung von solchen Dosisformen sind dem Fachmann bekannt und offensichtlich; siehe zum Beispiel REMINGTON'S PHARMACEUTICAL SCIENCES, supra. Die zu verabreichende Zusammensetzung oder Formulierung enthält eine wirksame Menge an aktiver Verbindung der Erfindung.
Für feste Zusammensetzungen können herkömmliche, nicht toxische feste Träger verwendet werden, die zum Beispiel pharmazeutische Sorten von Mannit, Laktose, Stärke, Magnesiumstearat, Natriumsaccharin, Talk, Cellulose, Glucose, Saccharose, Magnesiumcarbonat enthalten. Für die orale Verabreichung wird eine pharmazeutische verträgliche, nicht toxische Zusammensetzung durch Einfügen von einem der normalerweise verwendeten sonstigen Bestandteile, wie beispielsweise die zuvor angeführten Träger, und generell 0,1–95 % Wirkstoff, vorzugsweise etwa 20 %, gebildet.
Die Zusammensetzungen, die die Verbindungen der Erfindung enthalten, können zur prophylaktischen und/oder therapeutischen Behandlung verabreicht werden. Bei therapeutischen Anwendungen werden die Zusammensetzungen einem bereits an einer CLL leidenden Patienten wie oben beschrieben, verabreicht, und zwar in einer Menge, die ausreicht, um die Symptome der Krankheit und deren Komplikationen zu heilen oder zumindest teilweise zu stoppen. Eine zu diesem Zweck ausreichende Menge wird als „therapeutisch wirksame Menge oder Dosis" definiert. Mengen, die für diese Verwendung wirksam sind, hängen von der Schwere der Krankheit und dem Gewicht und Allgemeinzustand des Patienten ab.
Zusätzlich zu der internen (in vivo) Verabreichung können die Verbindungen und Zusammensetzungen der Erfindung ex vivo angewendet werden, um therapeutische Wirkungen zu erzielen. Bei einer solchen Anwendung werden zu behandelnde Zellen, z.B. Blut- oder Knochenmarkszellen, einem Patienten entnommen und mit einer pharmazeutisch wirksamen Menge an einer Verbindung der Erfindung behandelt. Der Patient erhält die Zellen nach der Behandlung wieder zurück. Ein solches Verfahren kann berücksichtigen, dass die Zellen Konzentrationen eines therapeutischen Mittels über längere Zeiträume oder bei höheren Konznetrationen als sonst verfügbar ausgesetzt werden.
Sobald sich der Zustand des Patienten verbessert hat, wird, falls notwendig, eine Erhaltungsdosis verabreicht. Anschließend kann die Dosis oder Häufigkeit der Verabreichung oder beides abhängig von den Systemen auf ein Niveau reduziert werden, auf dem der verbesserte Zustand gehalten wird. Wenn die Symptome im gewünschten Umfang gelindert wurden, kann die Behandlung beendet werden.
Patienten können aber eine zusätzliche Behandlung nach einem Wiederauftreten der Krankheitssymptome benötigen.
Bei prophylaktischen Anwendungen (z.B. Chemoprävention) werden Zusammensetzungen, die die Verbindungen der Erfindung enthalten, einem Patienten verabreicht, der für eine CLL empfänglich ist oder in anderer Weise das Risiko einer CLL in sich birgt. Eine solche Menge ist definitionsgemäß eine „prophylaktisch wirksame Menge oder Dosis". Bei dieser Verwendung, hängen die genauen Mengen wiederum vom Gesundheitszustand und Gewicht des Patienten ab.
Beispiel 1
Verabreichung in vivo
Ein Patient hatte, wie durch Lymphozytentypisierung und Knochenmarksstudien bestätigt war, eine B-Zell-CLL. Der Patient wurde gemäß dem Rai-Klassifizierungssystem bei 0 eingestuft. Der Lymphozytenphänotyp des Patienten war CD5+, CD19+, CD20+, CD25+ und FMC7+. Am 23. Okt. 1997 war die Leukozytenzahl des Patienten 34,3 × E3 und die Lymphozytenzahl betrug 27,44 × E3. Vom 25. Okt. 1997 bis 27. Okt. 1997 erhielt der Patient 300 mg Etodolac zweimal täglich für die Nackenschmerzen verabreicht. Am 28. Okt. 1997 entwickelte der Patient Petechien (Blutung aus den Kapillaren) an den Schienbeinen. Eine vollständige Blutzahl zeigte, dass die Blutplättchenzahl des Patienten normal war, aber dass sowohl die Leukozytenzahl (13,40 × E3) als auch die Lymphozytenzahl (6,70 × E3) signifikant verringert waren, wie in der 1 gezeigt.
Anschließend wurde dem Patienten Etodolac in einer Dosis von 300 mg zweimal täglich über die Zeiträume vom 5. Nov. 1997 bis 9. Nov. 1997, 21. Jan. 1998 bis 25. Jan. 1998, 26. Feb. 1998 bis 2. März 1998 und 8. Apr. 1998 bis 13. Apr. 1998 verabreicht. Die Ergebnisse sind in den 1 und 2 gezeigt, wobei die Wirkung auf die Blutplättchenzahl auch in der 2 gezeigt ist, und werden mit den Ergebnissen für die Verabreichung der NSAID Naproxen (N), Diclofenac (D), Sulindac (S), Nabumeton (R), Oxaprozin (O), Piroxicam (P), Indomethacin (I), Tolmetin (T) und Ibuprofen (M) an denselben Patienten während der Zwischenzeiten verglichen. Die Ergebnisse der Etodolac-Verabreichung werden gemittelt und mit den Daten für Naproxin, Diclofenac, Sulindac, Nabumeton, Oxaprozin, Piroxicam, Indomethacin, Tolmetin und Ibuprofen in der nachfolgenden Tabelle 1 verglichen.
Tabelle 1

* Mittel +/- Standardabweichung von 3 Experimenten

Wie ohne weiteres aus dem Vorstehenden ersichtlich ist, führte die Etodolacbehandlung zu wesentlichen Reduzierungen der Leukozytenzahl und Lmyphozytenzahl des Patienten, während die Behandlung mit den NSAID Naproxen, Diclofenac, Sulindac, Nabumeton, Oxaprozin, Piroxicam, Indomethacin, Tolmetin und Ibuprofen einen relative geringen Einfluss auf diese Faktoren zeigte. Die Blutplättchenzahl stieg mit Etodolac auch signifikant an.
Um die Möglichkeit zu untersuchen, dass ein Metabolit von Etodolac oder ein Serumfaktor notwendig sein kann, um die klinische Wirkung zu erzielen, wurden die prozentualen In-vivo-Anteile von lebensfähigen, apoptotischen und späten apoptotischen oder nekrotischen Zellen von isolierten mononukleären Zellen durch Durchflusszytometrie mittels FITC-Annexin und Propidiumiodid-Assay gemessen. Während der frühen Apoptose und vorangehenden DNA-Fragmentierung wird Phosphatidylserin exponiert und durch Annexin V gebunden. Später in der Apoptose und in der Zellnekrose werden die Zellen auch für Propidiumiodid permeabel. FITC-markiertes Annexin B und Propidiumiodid werden leicht durch Durchflusszytometrie erfasst. Mononukleäre Zellen wurden aus dem peripheren Blut des Patienten durch Differentialzentrifugation auf Ficoll-Hypaque an der Grundlinie und dann täglich noch weitere drei Tage nach der Verabreichung von Etodolac isoliert. Als die Lymphozytenzahl nach der Verabreichung von Etodolac fiel, blieb der prozentuale Anteil von apoptotischen Zellen gleich. Allerdings stieg der prozentuale Anteil von lebensfähigen Zellen und der prozentuale Anteil von späten apoptotischen oder nekrotischen Zell fiel. Dieses Ergebnis legt nahe, dass Etodolac nicht die Reduzierung von Lymphozyten durch direktes Töten erreichte, sondern wahrscheinlich die Clearance von leukämischen Zellen jederzeit in das phagozytische System erhöht oder sie zu verschiedenen Gewebeabteilen umleitet.
Um die Möglichkeit zu untersuchen, dass Etodolac die Clearance von leukämischen Lymphozyten durch Verstärken der Phagozytose mittels Makrophagen erhöhen könnte, wurden mittels TAMRA gefärbte, isolierte mononukleäre Zellen vom Patienten mit normalen humanen anhaftenden mononukleären Zellen in Gegenwart von Naproxen oder Etodolac in vitro inkubiert. Nach einer Inkubation über Nacht wurden die anhaftenden Zellen isoliert und mittels Durchflusszytometrie auf Aufnahme von mittels TAMRA gefärbten Zellen vom Patienten analysiert. Kein Anstieg der Aufnahme der gefärbten leukämischen mononukleären Zellen durch die normalen anhaftenden Zellen konnte für Etodolac im Vergleich zu Naproxen festgestellt werden. Um die Möglichkeit zu testen, dass ein Metabolit von Etodolac für die Wirkung verantwortlich sein könnte, wurde Serum vom Patienten nach der Verabreichung von Naproxen von 375 mg zweimal täglich für zwei Tage und nach der Verabreichung von Etodolac von 400 mg zweimal täglich für zwei Tage frei von Medikament gesammelt und auf die obige Weise getestet. Es war keine Erhöhung der Phagozytose von Lymphozyten mit Etodolacserum festzustellen. Obwohl es nicht wünschenswert ist, durch irgendeine bestimmte Theorie gebunden zu sein, legen diese Daten nahe, dass Etodolac seine Wirkung höchstwahrscheinlich durch einen neuen Mechanismus zum Ändern der Kompartimentierung von leukämischen Lymphozyten der B-Zell-CLL erzielt.

Claims

Verwendung eines Indol- oder Carbazoiderivats der Formel:
in der R₁ aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, (1-6)C-Alkyl, (2-6)C-Alkenyl, (2-6)C-Alkynyl, Alkoxy(1-6)C-alkyl, (3-6)C-Cycloalkyl, Phenyl, Benzyl und 2-Thienyl ausgewählt ist; R₂ und R₃ gleich oder unterschiedlich und jeweils aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff und (1-6)C-Alkyl ausgewählt sind; R₄ und R₅ gleich oder unterschiedlich und jeweils aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, (1-6)C-Alkyl, -NH₂, -NHCHO, -CHCONH₂, =NW, Oxo, -OH und -OCH₃ ausgewählt sind, wobei W Hydroxy, Alkoxy, Aryloxy, Carboxyalkyloxy, Arylamino oder Alkylsulfonylamino ist; R₆ aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, (1-6)C-Alkyl, (2-6)C-Alkenyl, (2-6)C-Alkynyl, Trifluormethyl, Hydroxy, (1-4)C-Alkoxy, Trifluor(1-4)C-alkoxy, Benzyloxy, (2-6)C-Alkanoyloxy, Acyl, Amino, Nitro, Cyno, Alkylimido, Halogen, Mercapto, (1-6)C-Alkylthio, Alkylsulfinyl, Alkylsulfonyl, Alkylsulfonamido und Sulfamoyl ausgewählt ist; R₇ aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, (1-6)C-Alkyl und (2-6)C-Alkenyl ausgewählt ist; X aus der Gruppe bestehend aus Kohlenstoff, Oxy und Thio ausgewhält ist; Y aus der Gruppe bestehend aus Carbonyl,
ausgewählt ist, in denen R₈, R₉, R₁₀, R₁₁, R₁₂ und R₁₃ jeweils Hydroxy oder (1-6)C-Alkyl ist; und Z aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, (2-6)C-Alkoxy, Amino, (1-6)C-Alkylamino, Di(1-6)C-alkylamino und Phenylamino ausgewählt ist, oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon, zur Herstellung eines Medikaments für die Behandlung von chronischer lymphatischer Leukämie (CLL).
Verwendung nach Anspruch 1, wobei das Medikament so angewendet wird, dass eine therapeutisch wirksame Menge der Indol- oder Carbazolverbindung, die zur Verringerung der Konzentration von leukämischen Lymphozyten in einem Patienten ausreichend ist, zugeführt wird.
Verwendung nach Anspruch 1 und 2, wobei das Medikament ferner einen pharmazeutisch verträglichen Träger oder ein pharmazeutisch verträgliches Verdünnungsmittel umfasst.
Verwendung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, wobei das Indol- oder Carbazolderivat Etodolac ist.
Verwendung nach Anspruch 4, wobei das Medikament so angewendet wird, dass 1,0 mg bis 500 mg Etodolac pro kg Körpergewicht des Patienten pro Tag zugeführt werden.
Verwendung nach Anspruch 5, wobei das Medikament für die orale Verabreichung angewendet wird.