DE69332770T2

DE69332770T2 - Sulfonylalkanoylaminohydroxyethylaminosulfamidsäuren verwendbar als retrovirale Proteasehemmer

Info

Publication number: DE69332770T2
Application number: DE69332770T
Authority: DE
Inventors: Michael L. Baldwin Vazquez; Richard A. Glencoe Mueller; John J. St. Louis Talley; Daniel P. Chesterfield Getman; Gary A. Decrescenzo; Eric T. San Diego Sun
Original assignee: Monsanto Co; GD Searle LLC
Current assignee: Monsanto Co; GD Searle LLC
Priority date: 1992-10-30
Filing date: 1993-10-29
Publication date: 2004-02-12
Anticipated expiration: 2013-10-30
Also published as: US5583132A; AU5665194A; ATE183499T1; ES2196436T3; ES2134924T3; EP0885880A2; EP0885881B1; DK0885881T3; EP1462443A1; ATE234279T1; DE69332770D1; DE69326077T2; EP0666843B1; GR3031646T3; EP0885881A3; EP0885880A3; WO1994010136A1; EP0885881A2; CA2143191A1; DK0666843T3

Description

HINTERGRUND DER ERFINDUNG
1. Gebiet der Erfindung
Die vorliegende Erfindung betrifft retrovirale Proteaseinhibitoren und insbesondere betrifft sie neue Verbindungen, eine Zusammensetzung und ein Verfahren zur Inhibierung retroviraler Proteasen. Diese Erfindung betrifft insbesondere sulfamidsäurehaltige Hydroxyethylaminprotease-Inhibitor-Verbindungen, eine Zusammensetzung und ein Verfahren zur Inhibierung von retroviralen Proteasen wie die Protease des menschlichen Immunschwäche-Virus (HIV) und zur Behandlung einer retroviralen Infektion, z. B. einer HIV-Infektion. Der Gegenstand der Erfindung betrifft sowohl Verfahren zur Herstellung solcher Verbindungen als auch in solchen Verfahren nützliche Zwischenstufen.
2. Stand der Technik
Während des Replikationszyklus von Retroviren werden die Transkriptionsprodukte der gag- und gag-pol-Gene in Proteine translatiert. Diese Proteine werden anschließend durch eine virus-codierte Protease (oder Proteinase) prozessiert, um die viralen Enzyme und Strukturproteine des Viruskerns zu ergeben. Üblicherweise wird der gag-Precursor zu den Kernproteinen und die Pol-Precursor-Proteine zu den viralen Enzymen, z. B. der reversen Transkriptase und der retroviralen Protease prozessiert. Es wurde gezeigt, dass korrekte Prozessierung der Precursorproteine durch die retrovirale Protease für den Zusammenbau der infektiösen Virionen erforderlich ist. Zum Beispiel wurde gezeigt, dass Mutationen im Leseraster innerhalb der Proteaseregion des pol-Gens von HIV die Prozessierung des gag-Precursor-Proteins verhindern. Es wurde auch durch stellenspezifische Mutagenese am Asparaginsäurerest im aktiven Bereich der HIV-Protease gezeigt, dass die Prozessierung des gag-Precursor-Proteins verhindert wird. Daher wurde versucht, die virale Replikation durch Inhibierung der retroviralen Proteasen zu inhibieren.
Retrovirale Protease-Inhibierung kann typischerweise eine Übergangsstadiums-Nachahmung umfassen, wodurch die retrovirale Protease einer nachgeahmten Verbindung exponiert wird, die kompetitiv mit den gag- und gag-pol-Proteinen an das Enzym bindet, um dadurch die Replikation der Strukturproteine und noch wichtiger die retrovirale Protease selbst zu inhibieren. Auf diese Weise können retrovirale Replikationsproteasen wirksam inhibiert werden.
Mehrere Klassen von Verbindungen sind, insbesondere zur Hemmung von Proteasen, wie zum Beispiel zur Hemmung der HIV-Protease, vorgeschlagen worden. Solche Verbindungen umfassen Hydroxyethylamin-Isostere und reduzierte Amid-Isostere. Vergleiche zum Beispiel EP 0 346 847 , EP 0 342 541, Roberts et al., "Rational Design of Peptide-Based Proteinase Inhibitors", Science, 248, 358 (1990) und Erickson et al, "Design Activity, and 2,8A Crystal Structure of a C₂ Symmetric Inhibitor Complexed to HIV-1 Protease", Science, 249, 527 (1990).
Mehrere Klassen von Verbindungen sind dafür bekannt, als Inhibitoren des proteolytischen Enzyms Renin nützlich zu sein. Vergleiche zum Beispiel US Nr. 4 599 198, UK 2 184 730, GB 2 209 752, EP 0 264 795 , GB 2 200 115 und US SIR H725. Davon offenbaren die GB 2 200 115, GB 2 209 752, EP 0 264 795, US SIR H725 und US 4 599 198 harnstoffenthaltende Hydroxyethylamin-Renin-Inhibitoren. Die GB 2 200 115 offenbart auch sulfamidsäureenthaltende Hydroxyethylamin-Renin-Inhibitoren und die EP 0 264 795 offenbart gewisse sulfamidsäureenthaltende Hydroxyethylamin-Renin-Inhibitoren. Es ist jedoch bekannt, dass, obwohl Renin- und HIV-Proteasen beide als Aspartyl-Proteasen klassifiziert werden, für Verbindungen, die wirksame Renin-Inhibitoren sind, im allgemeinen nicht vorhergesagt werden kann, dass sie wirksame HIV-Protease-Inhibitoren sind.
KURZBESCHREIBUNG DER ERFINDUNG
Die vorliegende Erfindung ist auf Virus inhibierende Verbindungen und Zusammensetzungen gerichtet. Insbesondere ist die vorliegende Erfindung auf retrovirale Protease inhibierende Verbindungen und Zusammensetzungen, auf ein Verfahren zur Inhibierung retroviraler Proteasen, auf Verfahren zur Herstellung der Verbindungen und auf in diesen Verfahren nützliche Zwischenstufen gerichtet. Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind als Sulfonylalkanoylaminohydroxyethylaminosulfamidsäure enthaltende Inhibitorverbindungen charakterisiert.
DETAILLIERTE BESCHREIBUNG DER ERFINDUNG
Gemäß der vorliegenden Erfindung wird eine retrovirale Protease inhibierende Verbindung der Formel

oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz, ein Pro-Arzneimittel oder ein Ester davon bereitgestellt, worin
R C₁-C₁₀-Alkyl bedeutet,
R² Reste von C₁-C₁₀-Alkyl, Aryl, C₃-C₈-Cycloalkyl, C₃-C₈-Cycloalkyl-C₁-C₁₀-alkyl und Aryl-C₁-C₁₀-alkyl bedeutet, wobei diese Reste gegebenenfalls mit einer aus Alkyl- und Halogenresten, -NO₂, -CN, -CF₃ -OR⁹ und -SR⁹ ausgewählten Gruppe substituiert sind, worin R⁹ Wasserstoff und C₁-C₁₀-Alkyl-Reste bedeutet, R³ Reste von C₄-C₅-Alkyl, Cyclohexyl, Cyclohexylmethyl, Benzyl, p-Fluorbenzyl und C(CH₃)₂C0₂CH₃ bedeutet,
R⁴ und R⁵ jeweils unabhängig voneinander Wasserstoff, C₁-C₅-Alkyl, Phenyl, Cyclohexyl und (CH₂)₂0CH₂C₂H₅ bedeuten oder zusammen mit einem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen Rest von Pyrrolidinyl, Piperidinyl, Morpholinyl, Piperazinyl oder N-Methylpiperazinyl bilden,
R⁶ Wasserstoff und Reste von C₁-C₁₀-Alkyl bedeutet, worin Aryl gegebenenfalls mit einem oder mehreren aus C₁-C₁₀-Alkyl, C₁-C₁₀-Alkoxy, Halogen, Hydroxy, Amino, Nitro, Cyano, Halogen, C₁-C₁₀-Alkyl ausgewählten Substituenten substituiertes Phenyl oder Naphthyl bedeutet.
Weiterhin sind bei der vorliegenden Erfindung pharmazeutische Zusammensetzungen eingeschlossen, die eine Verbindung wie zuvor angeführt und einen pharmazeutisch annehmbaren Träger umfassen, sowie die Verwendung einer solchen Zusammensetzung zur Herstellung eines Arzneimittels zur Inhibierung einer retroviralen Protease, insbesondere der HIV-Protease, oder zur Behandlung einer retroviralen Infektion, insbesondere einer HIV-Infektion wie AIDS.
Wie hierin allein oder in Kombination verwendet, bedeutet der Ausdruck "Alkyl" einen geradkettigen oder verzweigtkettigen Alkylrest, der 1 bis 10, vorzugsweise 1 bis 8 Kohlenstoffatome enthält. Beispiele solcher Reste beinhalten Methyl, Ethyl, n-Propyl, Isoproypl, n-Butyl, Isobutyl, sec-Butyl, tert-Butyl, Pentyl, Isoamyl, Hexyl, Octyl und dergleichen.
Der Begriff "Alkoxy" allein oder in Kombination bedeutet einen Alkyletherrest, worin der Begriff Alkyl wie oben definiert ist. Beispiele geeigneter Alkyletherreste beinhalten Methoxy, Ethoxy, n-Propoxy, Isopropoxy, n-Butoxy, Isobutoxy, sec-Butoxy, tert-Butoxy und dergleichen. Der Begriff "Cyloalkyl" allein oder in Kombination bedeutet einen gesättigten oder teilweise gesättigten monocyclischen, bicyclischen oder tricyclischen Alkylrest, worin jeder cyclische Anteil etwa 3 bis 8 Kohlenstoffatome enthält und cyclisch ist. Der Begriff "Cycloalkylalkyl" bedeutet einen wie oben definierten Alkylrest, der mit einem Cycloalkylrest, der etwa 3 bis 8, vorzugsweise 3 bis 6 Kohlenstoffatome enthält, substituiert ist. Beispiele von solchen Cycloalkylresten beinhalten Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl, Cyclohexyl und dergleichen. Der Begriff "Aryl" allein oder in Kombination bedeutet einen Phenyl- oder Naphthyl-Rest, der gegebenenfalls einen oder mehrere aus Alkyl, Alkoxy, Halogen, Hydroxy, Amino, Nitro, Cyano, Halogenalkyl und dergleichen ausgewählte(n) Substituenten trägt, wie Phenyl, p-Tolyl, 4-Methoxyphenyl, 4-(tert-Butoxy)phenyl, 4-Fluorphenyl, 4-Chlorphenyl, 4-Hydroxyphenyl, 1-Naphthyl, 2-Naphthyl und dergleichen. Der Begriff "Aralkyl" allein oder in Kombination bedeutet einen wie oben definierten Alkyl-Rest, in dem ein Wasserstoffatom durch einen wie oben definierten Arylrest wie Benzyl, 2-Phenylethyl oder dergleichen ersetzt ist.
Der Begriff "Halogen" bedeutet Fluor, Chlor, Brom oder lod.
Die W0-A-9 208 701 offenbart Carbonylalkanoylaminohydroxyethylaminosulfamidsäuren, die als retrovirale Protease-Inhibitoren nützlich sind. Diese offenbart nicht oder macht es offensichtlich, dass das Ersetzen der Carbamoyl-Gruppe durch eine Sulphamoyl-Gruppe Verbindungen mit verbesserter Aktivität ergeben würde.
Verfahren zur Herstellung von Verbindungen nach Formel I werden im folgenden aufgeführt. Es ist anzumerken, dass das allgemeine Verfahren gezeigt wird, wie es die Herstellung von Verbindungen mit einer spezifischen Stereochemie betrifft, worin zum Beispiel die absolute Stereochemie bezüglich der Hydroxylgruppe, die die bevorzugte Stereochemie für die erfindungsgemäßen Verbindungen ist, als (R) bezeichnet wird. Solche Verfahren sind jedoch auch allgemein auf die Verbindungen der entgegengesetzten Konfiguration anwendbar, z. B. auf die, bei denen die Stereochemie bezüglich der Hydroxylgruppe (S) ist. Außerdem können die Verbindungen, die die (R)-Stereochemie haben, verwendet werden, um diejenigen mit (S)-Stereochemie herzustellen.
Zum Beispiel kann eine Verbindung, die die (R)-Stereochemie hat, unter Verwendung gut bekannter Verfahren zu der (S)-Stereochemie umgewandelt werden.
Herstellung der Verbindungen der Formel I
Die durch die obige Formel I dargestellten erfindungsgemäßen Verbindungen können unter Verwendung des folgenden allgemeinen Verfahrens hergestellt werden. Dies Verfahren ist in den folgenden Schemata I und II schematisch gezeigt: Schema I

a) Amin b) Sulfamoylchlorid R⁴R⁵NSO₃Cl (oder Anhydrid) + Säurefänger d) Kupplung Schema II

a) Amin b) Sulfamoylchlorid R⁴R⁵NSO₃Cl (oder Anhydrid) + Säurefänger d) Kupplung
Ein N-geschütztes Chlorketon-Derivat einer Aminosäure mit der Formel

worin P eine Aminoschutzgruppe darstellt und R² wie oben definiert ist, wird unter Verwendung eines passenden Reduktionsmittels zu dem entsprechenden Alkohol reduziert. Geeignete Aminoschutzgruppen sind aus dem Stand der Technik gut bekannt und beinhalten Carbobenzoxy, t-Butoxycarbonyl und dergleichen. Eine bevorzugte Aminoschutzgruppe ist Carbobenzoxy. Ein bevorzugtes N-geschütztes Chlorketon ist N-Benzyloxycarbonyl-L-phenylalaninchlorethylketon. Ein bevorzugtes Reduktionsmittel ist Natriumborhydrid. Die Reduktionsreaktion wird bei Temperaturen von -10°C bis etwa 25°C, vorzugsweise bei etwa 0°C, in einem geeigneten Lösungsmittelsystem wie zum Beispiel Tetrahydrofuran und dergleichen durchgeführt. Die N-geschützten Chlorketone sind handelsüblich erhältlich, zum Beispiel von Bachem, Inc., Torrance, Kalifornien. Alternativ können die Chlorketone nach einem in S. J. Fittkau, J. Prakt. Chem., 315, 1037 (1973) dargelegten Verfahren hergestellt werden und die anschließenden Verfahren mit Ngeschützten Verbindungen sind aus dem Stand der Technik gut bekannt.
Der Halogenalkohol kann wie unten beschrieben direkt verwendet werden oder er wird vorzugsweise bei Raumtemperatur mit einer geeigneten Base in einem geeigneten Lösungsmittelssystem zur Herstellung eines N-geschützten Aminoepoxids der Formel

umgesetzt, worin P und R² wie oben definiert sind. Geeignete Lösungsmittelsysteme zur Herstellung des Aminoepoxids beinhalten Ethanol, Methanol, Isopropanol, Tetrahydrofuran, Dioxan und dergleichen einschließlich Mischungen davon. Geeignete Basen zur Herstellung des Epoxids aus dem reduzierten Chlorketon beinhalten Kaliumhydroxid, Natriumhydroxid, Kalium-t-butoxid, DBU und dergleichen. Eine bevorzugte Base ist Kaliumhydroxid.
Alternativ kann die geschützte Aminosäure ausgehend von einer L-Aminosäure hergestellt werden, die mit einer geeigneten Aminoschutzgruppe in einem geeigneten Lösungsmittel zur Herstellung eines amingeschützten L-Aminosäureesters der Formel

umgesetzt wird, worin P¹ und P² unabhängig voneinander Wasserstoff, Benzyl und Aminoschutzgruppen (wie oben definiert) darstellen, vorausgesetzt das P¹ und P² nicht beide Wasserstoff sind, P³ eine Carboxyl-Schutzgruppe, zum Beispiel Methyl, Ethyl, Benzyl, tert-Butyl und dergleichen darstellt, und R² wie oben definiert ist.
Der aminogeschützte L-Aminosäureester wird dann zu dem entsprechenden Alkohol. reduziert. Zum Beispiel kann der aminogeschützte L-Aminosäureester mit Düsobutylaluminumhydrid bei -78°C in einem geeigneten Lösungsmittel wie Toluol reduziert werden. Der resultierende Alkohol wird dann zum Beispiel durch Swern-Oxidation in den entsprechenden Aldehyd der Formel

umgewandelt, worin P¹, P² und R² wie oben definiert sind. Dann wird eine Dichlormethanlösung des Alkohols zu einer gekühlten (-75 to -68°C) Oxalylchlorid-Lösung in Dichlormethan und DMSO in Dichlormethan gegeben und während 35 min gerührt.
Der aus der Swern-Oxidation resultierende Aldehyd wird dann mit einem Halogenmethyllithiumreagenz umgesetzt, wobei das Reagenz in situ durch Umsetzung einer Alkyllithium- oder Aryllithiumverbindung mit einem Dihalogenmethan, dargestellt durch die Formel X¹CH₂X², worin X₁ und X² unabhängig voneinander I, Br oder Cl darstellen, erzeugt wird. Beispielsweise wird eine Lösung des Aldehyds und Chloriodmethan in THF auf -78°C abgekühlt und eine Lösung von n-Butyllithium in Hexan zugegeben. Das resultierende Produkt ist eine Diastereomeren-Mischung der entsprechenden aminogeschützten Epoxide der Formeln:
Die Diastereomere können zum Beispiel durch Chromatographie getrennt werden oder es können alternativ die diastereomeren Produkte nach Umsetzung in den folgenden Schritten getrennt werden. Für Verbindungen, die die (S)-Stereochemie haben, kann eine D-Aminosäure anstelle einer L-Aminosäure verwendet werden.
Das Aminoepoxid wird dann mit einer äquivalenten Menge oder vorzugsweise mit einem Überschuss eines geeigneten Lösungsmittels eines gewünschten Amins der Formel R³NH₂
umgesetzt, worin R³ Wasserstoff oder wie oben definiert ist. Die Reaktion kann über einen weiten Temperaturbereich z. B. zwischen etwa 10°C bis etwa 100°C durchgeführt werden, wird aber bevorzugt, aber nicht notwendigerweise, bei einer Temperatur durchgeführt, bei der der Rückfluss des Lösungsmittels beginnt. Geeignete Lösungsmittelsysteme beinhalten protische, nicht protische und dipolar aprotische organische Lösungsmittel wie zum Beispiel solche, worin das Lösungsmittel ein Alkohol wie Methanol, Ethanol, Isopropanol oder dergleichen, ein Ether wie Tetrahydrofuran, Dioxan oder dergleichen, und Toluol, N,N-Dimethylformamid, Dimethylsulfoxid und Mischungen davon ist. Ein bevorzugtes Lösungsmittel ist Isopropanol. Beispielhafte Amine entsprechend der Formel R³NH₂ beinhalten Benzylamin, Isobutylamin, n-Butylamin, Isopentylamin, Isoamylamin, Cyclohexanmethylamin, Naphthylenmethylamin und dergleichen. Das resultierende Produkt ist ein 3-(N-geschütztes Amino)-3-(R²)-1-(NHR³)-propan-2-ol-Derivat (nachfolgend als Aminoalkohol bezeichnet) und kann durch die Formel

dargestellt werden, worin P, P¹, P², R² und R³ wie oben beschrieben sind. Alternativ kann ein Halogenalkohol anstelle des Aminoepoxids verwendet werden.
Der oben definierte Aminoalkohol wird dann in einem geeigneten Lösungsmittel mit einem Sulfamoylhalid, z. B. Sulfamoylchlorid (R⁴R⁵NS0₂Cl oder R⁴HNS0₂Cl) oder Sulfamoylanhydrid in Gegenwart eines Säurefängers umgesetzt. Geeignete Lösungsmittel, in denen die Reaktion durchgeführt werden kann, beinhalten Methylenchlorid, Tetrahydrofuran und dergleichen. Geeignete Säurefänger beinhalten Triethylamin, Pyridin und dergleichen. Das resultierende Sulfamidsäurederivat kann in Abhängigkeit vom verwendeten Epoxid durch die Formeln

dargestellt werden, worin P¹, P², R², R³, R⁴ und R⁵ wie oben definiert sind. Diese Zwischenstufen sind zur Herstellung der erfindungsgemäßen Inhibitorverbindungen nützlich und sind auch aktive Inhibitoren retroviraler Proteasen.
Die Sulfamoylhalide der Formel R⁴NHSO₂X können durch die Umsetzung eines geeigneten Isocyanats der Formel R⁴NC0 mit rauchender Schwefelsäure hergestellt werden, um das entsprechende Sulfamat herzustellen, das dann durch gut bekannte Verfahren, wie das durch Behandlung des Sulfamats mit PCl₅, in das Halid umgewandelt wird. Alternativ kann das Isocyanat mit Chlorsulfonsäure behandelt werden, um das entsprechende Sulfamoylchlorid direkt herzustellen.
Die Sulfamoylhalide der Formel R⁴R⁵NS0₂Cl können durch Umsetzung eines Amins der Formel R⁴R⁵NH, vorzugsweise als Salz wie Hydrochlorid, mit Sulfurylchlorid in einem geeigneten Lösungsmittel wie Acetonitril hergestellt werden. Die Reaktionsmischung wird nach und nach bis zur Rückflusstemperatur erwärmt und bei Rückflusstemperatur gehalten, bis die Reaktion vollständig ist. Alternativ können Sulfamoylhalide der Formel R⁴R⁵NS0₂Cl durch Umsetzung eines Amins der Formel R⁴R⁵NH mit Sulfurylchloiid in kochendem MeCN hergestellt werden, wie in Matier et al., J. Med. Chem., 15, Nr. 5, S.538 (1972) offenbart.
Im Anschluss an die Herstellung des Sulfamidsäurederivats werden die Aminoschutzgruppe P oder die P1- und P2-Aminoschutzgruppen unter Bedingungen entfernt, die keine Auswirkungen auf den restlichen Anteil des Moleküls haben. Diese Verfahren sind aus dem Stand der Technik gut bekannt und beinhalten Säurehydrolyse, Hydrogenolyse und dergleichen. Ein bevorzugtes Verfahren betrifft die Entfernung der Schutzgruppe, zum Beispiel der Carbobenzoxy-Gruppe, durch Hydrogenolyse unter Verwendung von auf Kohlenstoff getragenem Palladium in einem geeigneten Lösungsmittel wie einem Alkohol, Essigsäure oder dergleichen oder Mischungen davon. Wenn die Schutzgruppe eine t-Butoxycarbonylgruppe ist, kann sie unter Verwendung einer anorganischen oder organischen Säure, z. B. HCl oder Trifluoressigsäure, in einem geeigneten Lösungsmittel, z. B.Dioxan oder Methylenchlorid, entfernt werden. Das resultierende Produkt ist ein Aminsalzderivat. Wenn die Schutzgruppe ein Benzylrest ist, kann sie durch Hydrogenolyse entfernt werden. Im Anschluss an die Neutralisation des Salzes wird das Amin mit einem Sulfon der Formel

umgesetzt, worin R und t wie oben definiert sind. Die Sulfone werden gemäß dem folgenden Verfahren hergestellt, um die erfindungsgemäßen antiviralen Verbindungen mit der Formel

herzustellen, worin R, R², R³, R⁴, R⁵ und t wie oben definiert sind. Die Sulfone werden gemäß dem folgenden Verfahren hergestellt.
Mercaptan der Formel RSH wird mit substituiertem Methacrylat der Formel

durch Michael-Addition umgesetzt. Die Michael-Addition wird in einem geeigneten Lösungsmittel durchgeführt und in Gegenwart einer geeigneten Base, um das entsprechende Thiol-Derivat, dargestellt durch die Formel

bereitzustellen, worin R einen wie oben definierten Rest darstellt und R²² eine Carboxyl-Schutzgruppe wie Methyl, Ethyl, Benzyl, t-Butyl oder dergleichen. Geeignete Lösungsmittel, in denen die Michael-Addition durchgeführt werden kann, beinhalten sowohl protische, nicht protische und dipolare aprotische organische Lösungsmittel, z. B. Alkohole wie Methanol, Ethanol, Butanol und dergleichen, als auch Ether, z. B. THF und Acetonitril, DMF, DMSO und dergleichen, einschließlich Mischungen davon. Geeignete Basen beinhalten sowohl Gruppe I Metallalkoxide wie zum Beispiel Natriummethoxid, Natriumethoxid, Natriumbutoxid und dergleichen, als auch Gruppe I Metallhydride, wie Natriumhydrid, einschließlich Mischungen davon.
Das Thiol-Derivat wird durch Oxidation mit einem geeigneten Oxidationsreagenz in einem geeigneten Lösungsmittel in die entsprechenden Sulfone oder Sulfoxide der Formel

umgewandelt. Geeignete Oxidationsreagenzien beinhalten zum Beispiel Wasserstoffperoxid, Natriummetaperborat, Oxon (Kaliumperoxymonosulfat), Metachlorperoxybenzoesäure, Periodsäure und dergleichen, einschließlich Mischungen davon. Geeignete Lösungsmittel beinhalten Essigsäure (für Natriummetaperborat) und für andere Persäuren, Ether wie THF und Dioxan und Acetonitril, DMF und dergleichen, einschließlich Mischungen davon.
Das Sulfon wird dann in die entsprechende freie Säure der Formel

umgewandelt.
Ein Verfahren betrifft die Verwendung einer geeigneten Base, z. B. Lithiumhydroxid, Natriumhydroxid und dergleichen, einschließlich Mischungen davon in einem geeigneten Lösungsmittel wie zum Beispiel THF, Wasser, Acetonitril, DMF, DMSO, Methylenchlorid und dergleichen, einschließlich Mischungen davon. Andere Verfahren, die zur Entschützung verwendet werden können, sind abhängig von der Beschaffenheit von R²². Wenn zum Beispiel R²² ein tert-Butyl-Gruppe ist, kann man eine starke Säure wie Salzsäure oder Trifluoressigsäure verwenden. Wenn R²² eine Benzyl-Gruppe ist, kann sie durch Hydrogenolyse entfernt werden.
Die freie Säure wird dann unter Verwendung von aus dem Stand der Technik gut. bekannten Verfahren an das Sulfamat-Derivat eines Aminoalkohols oder ein Analogon davon, wie oben beschrieben, gekuppelt. Das resultierende Produkt ist eine durch Formel I dargestellte Verbindung.
Alternativ kann das Sulfamat-Isoster an die handelsüblich erhältliche Säure

gekuppelt werden, die Thioacetyl-Gruppe mit einer geeigneten Base wie Hydroxid oder einem Amin wie Ammoniak entfernt und anschließend das resultierende Thiol mit einem Alkylierungsreagenz wie einem Alkylhalid, Tosylat oder Mesylat umgesetzt werden, um Verbindungen der folgenden Struktur bereitzustellen:
Der Schwefel kann dann wie oben beschrieben unter Verwendung eines geeigneten Oxidationreagenzs zu dem entsprechenden Sulfon oder Sulfoxid oxidiert werden, um die gewünschten Verbindungen der folgenden Struktur bereitzustellen:
Alternativ kann zur Herstellung der Verbindungen der Formel I ein substituiertes Methacrylat der Formel

worin L eine Abgangsgruppe wie zuvor beschrieben darstellt, und R³⁵ und R³⁶ Wasserstoff und Reste wie für R¹ beschrieben darstellen, und R³⁷ Reste von Alkyl, Aralkyl, Cycloalkyl und Cycloalkylalkyl darstellt, mit einem geeigneten Sulfonierungsreagenz, wie zum Beispiel einer durch die Formel RS0₂M dargestellten Sulfinsäure, worin R einen wie oben beschriebenen Rest und M ein an die Bildung eines Salzes mit einer Säure angepasstes Metall, z. B. Natrium, darstellt, umgesetzt werden, um die entsprechenden durch die Formel

dargestellten Sulfone bereitzustellen, worin R, R³⁵, R³⁶und R³ ⁷ wie oben definiert sind. Das Sulfon wird dann in Gegenwart einer geeigneten Base wie Lithiumhydroxid, Natriumhydroxid oder dergleichen zu der durch die Formel

dargestellten Verbindung hydrolisiert, worin R, R³⁵ Und R³⁶ Reste wie oben definiert darstellen. Die resultierende Verbindung wird dann unter Verwendung eines asymmetrischen Hydrierungskatalysators, wie zum Beispiel eines Ruthenium-BINAP-Komplexes, asymmetrisch hydriert, um das durch die Formel

dargestellte, wesentlich mit dem aktiven Isomer angereicherte, reduzierte Produkt bereitzustellen, worin R, R³⁵ und R³⁶ Reste wie oben definiert darstellen. Wenn das aktivere Isomer die R-Stereochemie hat, kann ein Ru(R-BINAP) asymmetrischer Hydrierungskatalysator verwendet werden. Umgekehrt kann, wenn das aktivere Isomer die S-Stereochemie hat, ein Ru(S-BINAP)-Katalysator verwendet werden. Wenn beide Isomere aktiv sind oder wenn es wünschenswert ist, eine Mischung von zwei Diasteromeren zu haben, kann ein Hydrierungskatalysator wie Platin oder Palladium auf Kohlenstoff verwendet werden, um die obige Verbindung zu reduzieren. Die reduzierte Ver bindung wird dann wie oben beschrieben an das Sulfamat-Isoster gekuppelt, um Verbindungen der Formel II bereitzustellen.
Alternativ kann eine Säure oder ein Säurederivat, das mit einer geeigneten Abgangsgruppe (oben besprochen) substituiert ist, mit einem Mercaptan und einer Base (siehe oben) behandelt werden, um ein organisches Sulfid bereitzustellen. Säurederivate sind oben definiert. Das resultierende Sulfid kann durch zuvor besprochene Verfahren zu dem entsprechenden Sulfoxid oder Sulfon oxidiert werden.
Ein zur Herstellung von 2(S)-Methyl-3-(Methylsulfonyl)propionsäure bevorzugtes Verfahren ist wie folgt. Es wird von einer handelsüblich erhältlichen Verbindung der folgenden Struktur

ausgegangen, worin P³ eine Schutzgruppe für Schwefel, vorzugsweise ein Benzoyl oder Acetyl und P⁴ entweder Wasserstoff oder eine Carbonsäure-Schutzgruppe wie Methyl, Ethyl, tert-Butyl, Benzyl und dergleichen ist. Vorzugsweise ist P⁴ tert-Butyl. Die Schwefel-Schutzgruppe P³ kann unter Verwendung von dem Fachmann gut bekannten Verfahren selektiv entfernt werden. Wenn P³ zum Beispiel entweder Benzoyl oder Acetyl ist, kann dieses durch Behandlung mit einer anorganischen Base oder einem Amin, vorzugsweise Ammoniak, in einem geeigneten Lösungsmittel wie Methanol, Ethanol, Toluol oder Tetrahydrofuran entfernt werden. Das bevorzugte Lösungsmittel ist Methanol. Dies stellt eine Verbindung der folgenden Struktur
bereit, die am Schwefel mit einer Verbindung der Struktur
RX
alkyliert werden kann, worin R wie oben definiert und X eine bestimmte Abgangsgruppe wie ein Halid (Chlorid, Bromid, lodid), Mesylat, Tosylat oder Triflat ist. Die Reaktion wird in Gegenwart einer geeigneten Base wie Triethylamin, Diisopropylethylamin, 1,8-Diazabicyclo(5.4.0]undec-7-en (DBU) oder dergleichen in einem geeigneten Lösungsmittel wie Toluol, Tetrahydrofuran oder Methylenchlorid durchgeführt. Die bevorzugte Base ist DBU und das bevorzugte Lösungsmittel ist Toluol. Wenn R eine Methylgruppe ist, kann RX Methylchlorid, Methylbromid, Methyliodid oder Dimethylsulfat sein. Vorzugsweise ist RX Methyliodid. Das Produkt der Reaktion ist eine Verbindung der Struktur
Der Schwefel kann dann unter Verwendung von dem Fachmann gut bekannten Verfahren entweder zu Sulfoxid oder Sulfon oxidiert werden. Geeignete Oxidationsreagenzien sind Metachlorperbenzoesäure, Wasserstoffperoxid, Natriumperborat und dergleichen. Passende Lösungsmittel sind Methylenchlorid, Toluol, Essigsäure, Propionsäure oder dergleichen. Das bevorzugte Verfahren ist die Verwendung von Wasserstoffperoxid oder Natriumperborat in Essigsäure. Das Sulfon-Produkt hat die Struktur
Die Carbonsäure-Schutzgruppe P⁴ kann dann unter Verwendung von dem Fachmann gut bekannten Verfahren entfernt werden. Wenn P⁴ zum Beispiel eine tert-Butyl-Gruppe ist, kann sie durch Behandlung mit einer Säure wie Salzsäure oder Trifluoressigsäure entfernt werden. Das bevorzugte Verfahren ist die Verwendung von 4N Salzsäure in Dioxan. Dies stellt das gewünschte Endprodukt der Struktur

bereit.
Alternativ kann der geschützte Aminoalkohol aus der Epoxidöffnungsreaktion an einer neu eingeführten Aminogruppe mit einer Schutzgruppe P', die nicht entfernt wird, wenn die erste Schutzgruppe P entfernt wird, weiter geschützt werden. Der Fachmann kann geeignete Kombinationen von P und P' auswählen. Eine geeignete Auswahl ist P = Cbz und P' = Boc. Die resultierende Verbindung dargestellt durch die Formel

kann durch den Rest der Synthese geführt werden, um eine Verbindung der Formel

bereitzustellen und die neue Schutzgruppe P' wird selektiv entfernt und nach Entschützen wird das resultierende Amin zur Bildung des Sulfamidsäurederivates wie oben beschrieben umgesetzt. Dieses selekive Entschützen und Umwandeln zu einer Sulfamidsäure kann entweder am Ende der Synthese oder wenn gewünscht bei jedem passenden Zwischenschritt durchgeführt werden.
Es wird daran gedacht, dass zur Herstellung von Verbindungen der Formeln, die R6 enthalten, die Verbindungen nach dem oben dargelegten Verfahren hergestellt werden können und das Sulfamat-Derivat und dessen Analogon vor der Kupplung, z. B. der Kupplung an die Aminosäure PNH(CH₂)_tCH(R¹)COOH, einem im Stand der Technik als reduktive Aminierung bezeichneten Verfahren unterzogen werden. Daher können Natriumcyanoborhydrid und ein geeigneter Aldehyd oder Keton mit einer Sulfamat-Derivat-Verbindung oder einem passenden Analogon bei Raumtemperatur umgesetzt werden, um jede der Verbindungen der Formeln I-IV reduktiv zu aminieren. Es wird auch daran gedacht, dass, wenn R³ der Aminoalkohol-Zwischenstufe Wasserstoff ist, die erfindungsgemäßen Inhibitorverbindungen, worin R³ Alkyl ist oder andere Substituenten, worin das α-C mindestens einen Wasserstoff enthält, durch reduktive Aminierung des Endproduktes der Reaktion von Aminoalkohol und Amin, oder auf jeder anderen Synthesestufe zur Herstellung der Inhibitor-Verbindungen, hergestellt werden können.
In Betracht gezogene Äquivalente der allgemeinen oben aufgeführten Formeln antiviraler Verbindungen und Derivate sowie auch Zwischenstufen sind Verbindungen, die diesen ansonsten entsprechen und dieselben allgemeinen Eigenschaften haben, wie sowohl Tautomere davon, als auch Verbindungen, worin eine oder mehrere der verschiedenen R-Gruppen einfache Varianten der oben definierten Substituenten sind, z. B. worin R eine höhere Alkyl-Gruppe als angegeben ist. Außerdem ist, wenn ein Substituent, der als Wasserstoff bezeichnet wird oder dies sein kann, die exakte chemische Natur des Substituenten, der an dieser Position von Wasserstoff abweicht, z. B. ein Hydrocarbyl-Rest oder eine funktionelle Gruppe wie Halogen, Hydroxy, Amino oder dergleichen ist, solange nicht kritisch ist, wie dies keine nachteiligen Auswirkungen auf die Gesamtaktivität und/oder das Syntheseverfahren hat.
Die oben beschriebenen chemischen Reaktionen werden im Hinblick auf ihre breiteste Anwendung zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen im allgemeinen offenbart. Gelegentlich kann es sein, dass Reaktionen nicht wie beschrieben auf jede Verbindung innerhalb des offenbarten Schutzumfangs anwendbar sind. Die Verbindun gen, bei denen dies auftritt, werden vom Fachmann leicht erkannt. In all diesen Fällen können die Reaktionen entweder durch. konventionelle Modifikationen, die einem Fachmann bekannt sind, erfolgreich durchgeführt werden, z. B. durch geeignetes Schützen von störenden Gruppen, durch Wechseln zu alternativen herkömmlichen Reagenzien, durch übliche Veränderung der Reaktionsbedingungen und dergleichen, oder es sind andere hierin offenbarte oder andere herkömmliche Reaktionen geeignet zur Herstellung der entsprechenden erfindungsgemäßen Verbindungen. In allen präparativen Verfahren sind alle Ausgangsmaterialien bekannt oder leicht aus bekannten Ausgangsmaterialien herzustellen.
Ohne nähere Erläuterungen wird angenommen, dass der Fachmann unter Verwendung der vorangegangenen Beschreibung die vorliegenden Erfindung in ihrem weitesten Umfang nutzen kann. Die folgenden bevorzugten Ausführungsformen sind deshalb als rein veranschaulichend und in keiner Weise als einschränkend für den Rest des Offenbarten aufzufassen.
Alle Reagenzien wurden wie erworben ohne Reinigung verwendet. Alle Protonen- und Kohlenstoff-NMR-Spektren wurden entweder mit einem Varian VXR-300 oder einem VXR-400 NMR-Spektrometer erhalten.
Die folgenden Beispiele 1 bis 9 illustrieren die Herstellung von Zwischenstufen. Diese Zwischenstufen sind zur Herstellung der Inhibitor-Verbindungen der vorliegenden Erfindung nützlich wie unten gezeigt. BEISPIEL 1
Herstellung von N[3(S)-Benzyloxycarbonylamino-2(R)-hydroxy-4-phenylbutyl]-N-isoamylamin
Teil A:
Zu einer Lösung von 75,0 g (0,226 Mol) N-Benzyloxycarbonyl-L-phenylalaninchlormethylketon in einer Mischung von 807 ml Methanol und 807 ml Tetrahydrofuran bei -2°C wurden 13,17 g (0,348 Mol, 1,54 Äquiv.) festes Natriumborhydrid während 100 min zugegeben. Die Lösungsmittel wurden unter reduziertem Druck bei 40°C entfernt und der Rückstand in Ethylacetat (etwa 1 l) gelöst. Die Lösung wurde nacheinander mit 1 M Kaliumhydrogensulfat-, gesättiger Natriumbicarbonat- und dann mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen. Nach Trocknen über wasserfreiem Magnesiumsulfat und Abfiltrieren wurde das Lösungsmittel unter reduziertem Druck entfernt. Zu dem resultierenden Öl wurde Hexan (etwa 1 l) gegeben und die Mischung unter Wirbeln auf 60°C erwärmt. Nach Abkühlen auf Raumtemperatur wurden die Feststoffe vereinigt und mit 2 l Hexan gewaschen. Der resultierende Feststoff wurde aus heißem Ethylacetat und Hexan umkristallisiert, wodurch 32,3 g (43% Ausbeute) N-Benzyloxycarbonyl-3(S)amino-1-chlor-4-phenyl-2(S)-butanol, Smp 150–151°C und M+Li+ = 340 erhalten wurden.
Teil B:
Zu einer Lösung von 6,52 g (0,116 Mol, 1,2 Äquiv.) Kaliumhydroxid in 968 ml wasserfreiem Ethanol bei Raumtemperatur wurden 32,3 g (0,097 Mol) N-CBZ-3(S)-amino-1-chlor-4-phenyl-2(S)-butanol gegeben. Nach Rühren während 15 min wurde das Lösungsmittel unter reduziertem Druck entfernt und der Feststoff in Methylenchlorid gelöst. Nach Waschen mit Wasser, Trocknen über Magnesiumsulfat, Filtrieren und Abziehen wurden 27,9 g eines weißen Feststoffs erhalten. Durch Umkristallisieren aus heißen Ethylacetat und Hexan wurden 22,3 g (77% Ausbeute) N-Benzyloxycarbonyl-3(S)-amino-1,2(S)-epoxy-4-phenylbutan, Smp 102–103°C und MH⁺ 298 erhalten.
Teil C:
Eine Lösung von N-Benzyloxycarbonyl-3(S)-amino-1,2-(S)-epoxy-4-phenylbutan (1,00 g, 3,36 mMol) und Isoamylamin (4,90 g, 67,2 mMol, 20 Äquiv.) in 10 ml Isopropylalkohol , wurde unter Rückfluss während 1,5 h erhitzt. Die Lösung wurde auf Raumtemperatur abgekühlt, im Vakuum eingeengt und dann in 100 ml gerührtes Hexan geschüttet, worauf das Produkt aus der Lösung auskristallisierte. Das Produkt wurde durch Filtration isoliert und luftgetrocknet, wodurch 1,18 g, 95% N=[[3(S)-Phenylmethylcarbamoyl)amino-2(R)-hydroxy-4-phenylbutyl]N-[(3-methylbutyl)Jamin erhalten wurden, Smp 109,5°C, MH⁺ m/z = 371. Beispiel 2
Herstellung von N,N-Dibenzyl-3(S)-amino-1,2-(S)-epoxy-4-phenylbutan
Schritt A:
Eine Lösung von L-Phenylalanin (50,0 g, 0,302 Mol), Natriumhydroxid (24,2 g, 0,605 Mol) und Kaliumcarbonat (83,6 g, 0,605 Mol) in Wasser (500 ml) wurde auf 97°C erwärmt. Benzylbromid (108,5 ml, 0,912 Mol) wurde dann langsam zugegeben (Zugabe zeit ca. 25 min). Die Reaktionsmischung wurde dann bei 97°C während 30 min gerührt. Die Lösung wurde auf Raumtemperatur abgekühlt und mit Toluol extrahiert (2 x 250 ml). Die vereinigten organischen Phasen wurden dann mit Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt, wodurch ein öliges Produkt erhalten wurde. Die Rohprodukt wurde dann ohne weitere Reinigung im nächsten Schritt verwendet.
Schritt B:
Das benzylierte Rohprodukt aus dem obigen Schritt wurde in Toluol (750 ml) gelöst und auf -55°C abgekühlt. Eine 1,5 M DIBAL-H-Lösung in Toluol (443,9 ml, 0,666 Mol) wurde dann in einem Ausmaß zugegeben, dass die Temperatur zwischen -55°C und -50°C gehalten wurde (Zugabezeit ca. 1 h). Die Mischung wurde während 20 min bei -55°C gerührt. Die Reaktionsmischung wurde durch langsame Zugabe von Methanol (37 ml) auf -55°C abgekühlt. Die kalte Lösung wurde dann in kalte (5°C) 1,5 N HCI-Lösung geschüttet. Der präzipitierte Feststoff (etwa 138 g) wurde abfiltriert und mit Toluol gewaschen. Das feste Material wurde in einer Mischung aus Toluol (400 ml) und Wasser (100 ml) suspendiert. Die Mischung wurde auf 5°C abgekühlt, mit 2,5 N NaOH (186 g) behandelt und dann bei Raumtemperatur gerührt, bis der Feststoff gelöst war. Die Toluolphase wurde von der wässrigen Phase abgetrennt und mit Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und auf ein Volumen von 75 ml (89 g) eingeengt. Ethylacetat (25 ml) und Hexan (25 ml) wurden zu dem Rückstand gegeben, worauf das alkoholische Produkt auszukristallisieren begann. Nach 30 min wurden weitere 50 ml Hexan zugegeben, um die Kristallisation weiter zu fördern. Der Feststoff wurde abfiltriert und mit 50 ml Hexan gewaschen, wodurch etwa 35 g des Produktes erhalten wurden. Eine zweite Kristallernte kann durch Refiltration der Mutterlauge isoliert werden. Die Feststoffe wurden vereinigt und aus Ethylacetat (20 ml) und Hexan (30 ml) umkristallisiert, wodurch in zwei Kristallernten annähernd 40 g (40% des L-Phenylalanins) des analytisch reinen alkoholischen Produktes erhalten wurden. Die Mutterlaugen wurden vereinigt und eingeengt (34 g). Der Rückstand wurde mit Ethylacetat und Hexan behandelt, wodurch zusätzlich 7 g (∼7% Ausbeute) des leicht ver unreinigten Feststoffes bereitgestellt wurden. Weitere Optimierung bezüglich der Rückgewinnung aus der Mutterlauge ist wahrscheinlich.
Schritt C:
Eine Lösung von Oxalylchlorid (8,4 ml, 0,096 Mol) in Dichlormethan (240 ml) wurde auf -74°C abgekühlt. Eine Lösung von DMSO (12,0 ml, 0,155 Mol) in Dichlormethan (50 ml) wurde dann langsam in einem solchen Ausmaß zugegeben, dass die Temperatur bei -74°C gehalten wurde (Zugabezeit ca. 1,25 h). Die Mischung wurde während 5 min gerührt, anschließend eine Lösung des Alkohols (0,074 Mol) in 100 ml Dichlormethan (Zugabezeit 20 min, Temperatur -75°C bis -68°C) zugegeben. Die Lösung wurde bei -78°C während 35 min gerührt. Triethylamin (41,2 ml, 0,295 Mol) wurde dann während 10 min (Temperatur -78°C bis -68°C) zugegeben, worauf das Ammoniumsalz ausfiel. Die kalte Mischung wurde während 30 min gerührt und dann Wasser (225 ml) zugegeben. Die Dichlormethanphase wurde von der wässrigen Phase abgetrennt, mit Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mit Ethylacetat und Hexan verdünnt und dann filtriert, um weiteres Ammoniumsalz zu entfernen. Das Filtrat wurde eingeengt, wodurch das gewünschte Aldehyd-Produkt erhalten wurde. Der Aldehyd wurde ohne Reinigung für den nächsten Schritt übernommen.
In der Literatur sind Temperaturen oberhalb von -70°C für die Swern-Oxidation berichtet worden. Andere Swern-Modifikationen und Alternativen zur Swern-Oxidation sind auch möglich.
Eine Lösung aus dem Rohaldehyd (0,74 Mol) und Chloriodmethan (7,0 ml, 0,096 Mol) in Tetrahydrofuran wurde auf -78°C abgekühlt. Eine 1,6 M N-Butyllithium-Lösung in Hexan (25 ml, 0,040 Mol) wurde dann in einem Ausmaß zugegeben, um die Temperatur von -75°C aufrechtzuerhalten (Zugabezeit 15 min). Nach der ersten Zugabe wurde weiteres Chloriodmethan (1,6 ml, 0,022 Mol) zugegeben, gefolgt von N-Butyllithium (23 ml, 0,037 Mol), wobei die Temperatur bei -75°C gehalten wurde. Die Mischung wurde während 15 min gerührt. Jedes der Reagenzien, Choriodmethan (0,70 ml, 0,010 Mol) und N-Butyl-lithium (5 ml, 0,008 Mol), wurde während 45 min 4 weitere Male bei -75°C zugegeben. Das Kältebad wurde dann entfernt und die Lösung während 1,5 h auf 22°C erwärmt. Die Mischung wurde in 300 ml gesättigte, wässrige Ammoniumchloridlösung gegossen. Die Tetrahydrofuranphase wurde abgetrennt. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat extrahiert (1 × 300 ml). Die vereinigten organischen Phasen wurden mit Kochsalzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt, wodurch ein braunes Öl erhalten wurde (27,4 g). Das Produkt konnte ohne weitere Reinigung im nächsten Schritt verwendet werden. Das gewünschte Diastereomer kann im einem nächsten Schritt durch Umkristallisieren gereinigt werden.
Alternativ könnte das Produkt chromatographisch gereinigt werden. Beispiel 3
Herstellung von N[3(S)-Benzyloxycarbonylamino-2(R)-hydroxy-4-phenyl]N-isobutylamin
Eine Lösung von N-Benzyloxycarbonyl-3(S)-amino-1,2-(S)-epoxy-4-phenylbutan (50,0 g, 0,168 Mol) und Isobutylamin (246 g, 3,24 g, 20 Äquiv.) in 650 ml Isopropylalkohol wurde unter Rückfluss während 1,25 h erwärmt. Die Lösung wurde auf Raumtemperatur abgekühlt, im Vakuum eingeengt und dann in 1 l gerührtes Hexan gegossen, woraufhin das Produkt aus der Lösung auskristallisierte. Das Produkt wurde durch Filtration isoliert und luftgetrocknet, wodurch 57,56 g, 92% N[3(S)-Benzyloxycarbonylamino-2-(R)-hydroxy-4-phenyl]N-isobutylamin erhalten wurden, Smp 108,5–109,5°C, MH+, m/z = 371. Beispiel 4
Herstellung von Phenylmethyl[2R-hydroxy-3-[[(dimethylamino)sulfonyl](2-methylpropyl)-amino]-1S-(phenylmethyl)propyl]carbamat
Teil A:
Das in Beispiel 3 beschriebene Verfahren wurde verwendet, um N[3(S)-Benzyloxycarbonylamino-2(R)-hydroxy-4-phenylbutyl]-N-isobutylamin herzustellen.
Teil B:
Das Produkt aus Teil A (740 mg, 2,0 mMol) und Diisopropylethylamin (382 μl, 2,2 mMol) wurde bei Raumtemperatur in Dichlormethan (1,5 ml) gelöst. Dazu wurde Dimethyl-. sulfamoylchlorid (354 μl, 3,3 mMol) gegeben. Die Reaktionsmischung wurde während 24 h gerührt. Die Reaktionsmischung wurde über Kieselgel (50 g) unter Verwendung von 1 Ethanol in Chloroform chromatographisch aufgetrennt. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen wurden vereinigt und zu einem öl eingeengt. Analyse berechnet für C₂₄H₃₅(N₃ O₅S: C 60,35, N 7,39, N 8,80, gefunden C 60,18, H 7,40, N 8,55. Beispiel 5
Herstellung von Phenylmethyl[2R-hydroxy-3-[[(dimethylamino)sulfonyl](3-methylbutyl)amino]-1S-(phenylmethyl)propyl]carbamat
Teil A:
Das in Beispiel 1 beschriebene Verfahren wurde verwendet, um N[3(S)-Benzyloxycarbonylamino-2-(R)-hydroxy-4-phenylbutyl]-N-[(3-methylbutyl)]amin herzustellen.
Teil B:
Das Produkt aus Teil A (192 mg, 0,5 mMol) und Diisopropylethylamin (96 μl, 0,55 mMol)wurde bei Raumtemperatur in Dichlormethan (10 ml) gelöst. Dazu wurde Dimethylsulfamoylchlorid (59 μl, 0,55 mMol) gegeben. Die Reaktionsmischung wurde während 120 h gerührt, dann in einem Rotationsverdampfer eingeengt. Der Rückstand wurde über Kieselgel (50 g) unter Verwendung von 2% Methanol in Dichlormethan chromatographisch aufgetrennt. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen wurden vereinigt und zu einem Öl eingeengt, das sich verfestigte, während man es stehen ließ. Analyse berechnet für C₂₅H₃₇N₃0₅S•0,9 H₂0: C 59,13, H 7,64, N 8,27, S 6,31, gefunden: C 58,81, N 7,38, N 8,62, S 6,70. Beispiel 6
Herstellung von Phenylmethyl[3-[[(butylamino)sulfonyl](2-methylpropyl)amino]-2Rhydroxy-1S-(phenylmethyl)propyl]carbamat
Teil A:
Das in Beispiel 3 beschriebene Verfahren wurde verwendet, um N[3(S)-Benzyloxycarbonylamino-2(R)-hydroxy-4-phenylbutyl]-N-isobutylamin herzustellen.
Teil B:
Zu einer gerührten Lösung von 3,88 g (2 ml) 30% rauchender Schwefelsäure in Nitromethan (10 ml) wurde bei 0°C tropfenweise N-Butylisocyanat (3,83 ml, 34 mMol) gegeben. Nach vollständiger Zugabe wurde die Suspension in einem Ölbad auf 120°C während 30 min erhitzt. Die Reaktion wurde abgekühlt und filtriert. Die gesammelten Sulfamidsäurekristalle wurden luftgetrocknet. Gew. 4,73 g(91%).
Teil C:
Eine Suspension von n-Butylsulfamidsäure (1,92 g, 12,53 mMol) und Phosphorpentachlorid (2,61 g, 12,53 mMol) in Benzol (20 ml) wurde zur Gasbildung schonend erwärmt. Die Reaktionsmischung wurde bei Raumtemperatur während 0,5 h gerührt, wobei in dieser Zeit eine trübe Lösung entstand. Die trübe Lösung wurde unter Rückfluss während 0,5 h erwärmt, dann eingeengt. Das Produkt n-Butylsulfamoylchlorid wurde durch Vakuumdestillation isoliert (120°C, 300 mTorr, 730 mg (liq.) (34%).
Teil D:
Der Aminoalkohol aus Teil A (370 mg, 1 mMol) wurde in 3 ml Dichlormethan gelöst und mit Diisopropylethylamin (278 μl, 2 mMol) und anschließend mit Chlortrimethylsilan (126 μl, 1 mMol) behandelt. Die Reaktionsmischung wurde bei Raumtemperatur während 1 h gerührt, n-Butylsulfamoylchlorid aus Teil C (171 mg, 1 mMol) zugegeben und die Reaktionsmischung über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Nach Entfernen des Dichlormethans wurde der ölige Rückstand in Ethylacetat aufgenommen, nacheinander mit 5% Zitronensäure-, gesättigter Natriumbicarbonat- und Kochsalzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und das Lösungsmittel verdampft, wodurch 512 mg des Produktes ((Öl) erhalten wurden.
Das ölige Produkt (510 mg) wurde in Dichlormethan (3 ml) gelöst und mit 2 ml 4N HCl in Dioxan behandelt. Nach 15 min wurde Methanol (5 ml) zugegeben und die Lösung während weiterer 15 min gerührt. Lösungsmittel und überschüssiges Reagenz wurden verdampft. Das Produkt wurde über Kieselgelchromatographie isoliert, wodurch 357 mg Phenylmethyl[3-[[(butylamino)sulfonyl](2-methylpropyl)amino]-2R-hydroxy-1S-(phenylmethyl)propyl]carbamat erhalten wurden. Analyse berechnet für C₂₆H₃₉N₃0₅S: C 61,76, H 7,77, N 8,31, gefunden: C 61,89, H 7,66, N 8,18. Beispiel 7
Herstellung von Phenylmethyl[2R-hydroxy-3-[[(4-methyl-1-piperazinyl)sulfonyl](2-methylpropyl)amino]-1S-(phenylmethyl)propyl]carbamat
Teil A:
1-Methylpiperazinhydrochlorid (3,46 g, 20 mMol) wurde portionsweise während 15 min zu einer gerührten Sulfunlchlorid-Lösung (8,99 g, 67 mMol) in Acetonitril (40 ml) gegeben. Die Lösung wurde nach und nach bis zur Rückflusstemperatur erwärmt und über Nacht bei dieser Temperatur gelassen. Es entstand eine braune Lösung. Nach Abkühlen auf Raumtemperatur wurden die Kristalle durch Filtration geerntet, Gew. 2,3 g. Eine Probe des 4-Methyl-1-piperazinsulfamoylchlorid•HCl wurde aus Methanol umkristallisiert. Analyse berechnet für C₅H₁₂N₂0₂Cl₂S: C 25,54, N 5,14, N 11,91, Cl 30,16. Gefunden: C 25,54, N 4,91, N 11,91, Cl 29,88.
Teil B:
Gemäß dem Verfahren in Beispiel 3 hergestelltes N[3(S)-Benzyloxycarbonylamino-2(R)hydroxy-4-phenylbutyl]-N-isobutylamin (370 mg, 1,0 mMol) wurde mit DIEA (280 μl, 2,0 mMol) und 4-Methyl-1-piperazinsulfamoylchlorid•HCl (240 mg, 1,0 mMol) in 6 ml Dichlormethan gemischt. Die Reaktionsmischung wurde während 5 Tagen gerührt. Nach Filtration wurde das Filtrat zu einem Öl konzentriert, das in Ethylacetat aufgenommen wurde. Die Ethylacetatlösung wurde mit Natriumbicarbonat- und Kochsalzlösung gewaschen und über Natriumsulfat getrocknet. Nach Verdampfen wurde Phenylmethyl[2Rhydroxy-3-[[(4-methyl-1-piperazinyl)sulfonyl](2-methylpropyl)amino]-1S-(phenylmethyl)propyl]carbamat erhalten (412 mg). Beispiel 8
Herstellung von Phenylmethyl-[2R-hydroxy-3-[[(1,1-dimethyl)amino)]ulfonyl](2-methylpropyl)amino]-1S-(phenylmethyl)propyl]carbamat
Teil A:
Ein mit einem Rückflusskühler und einem Tropftrichter ausgestatteter und unter Stickstoffatmosphäre gesetzter 25 ml R.B.-Zweihalskolben wurde mit t-Butanol (207 μl, 2,2 mMol) und 5 ml Hexan beladen. Chlorsulfonylisocyanat (192 μl, 2,2 mMol) in 3 ml Hexan wurde tropfenweise zugegeben. Unter Erwärmung wurde eine homogene Lösung erhalten. Die Lösung wurde unter mildem Rückfluss während 45 min erwärmt, dann auf Raumtemperatur abgekühlt. Das Lösungsmittel wurde unter einem ständigen Stickstoffstrom entfernt. Das rohe t-Butylsulfamoylchlorid (flüssig) wurde ohne weitere Reinigung verwendet.
Teil B:
Das gemäß dem in Beispiel 3 beschriebenen Verfahren hergestellte N[3(S)-Benzyloxycarbonylamino-2(R)-hydroxy-4-phenylbutyl)]-N-isobutylamin (370 mg, 1,0 mMol) wurde mit DIEA (139 μl, 1 mMol) in 5 ml Dichlormethan gemischt. Chlortrimethylsilan (126 μl, 1 mMol) wurde zugegeben. Nach 1 h wurde zusätzliches DIEA (160 μl) und anschließend eine Dichlormethanlösung (5 ml), die 1,1 mMol t-Butylsulfamoylchlorid aus Teil A enthielt, zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde während 2 Tagen gerührt. Das Lösungsmittel wurde mit Hilfe einer Saugflasche entfernt. Der ölige Rückstand wurde in Ethylacetat aufgenommen und mit 5% Zitronensäure-, gesättigter Natriumbicarbonatund Kochsalzlösung gewaschen und durch Verdampfen zu einem öligen Rückstand eingeengt (380 mg).
Das Rohprodukt wurde in 4N HCl in Dioxan (6 ml) während 15 min gerührt. Nach Zugabe von 4 ml Methanol zu der Reaktionsmischung wurde die Lösung während weiterer 15 min gerührt, anschließend zu einem öligen Rückstand eingeengt. Das Produkt Phenylmethyl[2R-hydroxy-3-[[(1,1-dimethylethyl)amino]sulfonyl](2-methylpropyl)amino]-1S-(phenylmethyl)propyl]carbamat wurde nach chromatographischer Auftrennung über Kieselgel erhalten (188 mg, 37%). MS (MH)⁺ = 506
Teil C:
Die Carbobenzyloxy-Schutzgruppe des Produkts aus Teil B wurde durch Hydrogenolyse entfernt. Dann wurden 1,3 g des Produkts aus Teil B in 50 ml Methanol unter 50 psig Wasserstoff unter Verwendung von 0,7 g eines 10%igen, auf Kohlenstoff getragenen Palladium-Katalysators während 18 h hydriert. Der Katalysator wurde durch Filtration und das Lösungsmittel im Vakuum entfernt, wodurch 0,75 g des freien Amins erhalten wurden.
Beispiel 9
Phenylmethyl[2R-hydroxy-3-[[(piperidyl)sulfonyl](2-methylpropyl)aminol-1S-(phenylmethyl)propyl]carbamat
Teil A:
Das Produkt aus Beispiel 3 (750 mg, 2,02 mMol) und Triethylamin (280 μl, 2,02 mMol) wurden in Dichlormethan (8,0 ml) bei Raumtemperatur gelöst. Piperidinsulfamoylchlorid (371 mg, 2,02 mMol) wurde zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde während 72 h gerührt und dann eingeengt. Der Rückstand wurde unter Verwendung von 5% Methanol in Dichlormethan über Kieselgel (50 g) chromatographisch aufgetrennt. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen wurden vereinigt und zu einem Öl eingeengt (945 mg). Dünnschichtchromatographie (Kieselgel/5% MeOH in CH₂Cl₂) zeigte zwei Flecken. Es wurde eine zweite Chromatographie durchgeführt. Analyse berechnet für C₂₇H₃₉N₃O₅S: C 62,63, N 7,51, N 8,0.6, gefunden: C 62,64, H 7,59, N 8,12.
Teil B:
Das Produkt aus Teil A (430 mg) wurde mit 10% Pd/C in Methanol (10 ml) zusammengegeben und bei 5 psi während 1,4 h bei Raumtemperatur hydriert. Der Katalysator wurde durch Filtration entfernt und das Lösungsmittel durch Verdampfen entfernt, wodurch 305 mg des Produktes als Öl erhalten wurden.
Teil C:
Zu einer Lösung von Cbz-L-t-Leucin (236 mg, 0,89 mMol) in DMF (2 ml) wurden HOBT (115 mg, 0,85 mMol) und EDC (163 mg, 0,85 mMol) gegeben. Die Reaktionsmischung wurde während 1 h bei Raumtemperatur gerührt und dann eine Lösung des Produkts aus Teil B (305 mg, 0,79 mMol) in DMF (2 ml) zugegeben. Das Reaktionsgemisch wurde während 18 h gerührt, dann eingeengt. Der Rückstand wurde in Ethylacetat aufgenommen und mit 0,5% HCI-Lösung, gesättigtem wässrigen NaHC0₃ und gesättigtem wässrigen NaCl (jeweils 50 ml) gewaschen. Die organische Lösung wurde getrocknet (Na₂S0₄), filtriert und zu einem Schaum eingeengt (410 mg). ¹H-NMR-Analyse bestätigte das Produkt.
Teil D:
Das Produkt aus Teil C (410 mg) wurde mit 10% Pd/C in Methanol (10 ml) zusammengegeben und bei 5 psi während 2 h bei Raumtemperatur hydriert. Der Katalysator wurde durch Filtration entfernt, wodurch das Produkt (320 mg) als Schaum erhalten wurde.
Teil E:
Zu einer Lösung des Produkts aus Teil D (310 mg, 0,62 mMol) in Dichlormethan (10 ml) wurden Diisopropylethylamin (130 μl, 0,75 mMol) und Chloressigsäureanhydrid (117 mg, 0,68 mMol) bei 0°C gegeben. Die Reaktionsmischung wurde zur Erwärmung auf Raumtemperautur stehengelassen und während 1 h gerührt. Das Lösungsmittel wurde entfernt und der Rückstand in Ethylacetat aufgenommen (50 ml). Die organische Lösung wurde mit 5% Zitronensäure-, gesättigter NaHC0₃- und gesättigter NaCl-Lösung (jeweils 50 ml) gewaschen. Die Lösung wurde getrocknet (Na₂SO₄), filtriert und eingeengt, wodurch ein Feststoff erhalten wurde (350 mg).
Teil F:
Das Produkt aus Teil E (350 mg, 0,61 mMol) wurde mit 40% wässrigem Dimethylamin (380 μl, 3,05 mMol) in Isopropanol (10 ml) zusammengegeben. Die Reaktionsmischung wurde während 18 h gerührt, dann eingeengt. Der Rückstand wurde in Ethylacetat (50 ml) aufgenommen und mit Wasser, gesättigter NaHC0₃- und gesättigter NaCl-Lösung (jeweils 50 ml) gewaschen. Die Lösung wurde getrocknet (Na₂S0₄), filtriert und zu einem Feststoff eingeengt. Der Feststoff wurde über Kieselgel unter Verwendung von 2% MeOH in Dichlormethan chromatographisch aufgetrennt. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen wurden vereinigt und eingeengt, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wurde. Analyse berechnet für C₂₉H₅₁N₅O₅S•0,25 H₂O: C 59,41, H 8,77, N 11,94, gefunden: C 59,35, H 8,78, N 11,63.
Beispiel 10
Gemäß den Verfahren der vorigen Beispiele 1–9 wurden die in den Tabellen 1A, 1B und 1C aufgeführten Zwischenverbindungen hergestellt. TABELLE 1A
TABELLE 1B
TABELLE 1C
Die folgenden Beispiele 11–14 veranschaulichen die Herstellung von Sulfonylalkanoyl-Verbindungen, die zur Herstellung der erfindungsgemäßen Inhibitor-Verbindung an die Zwischenverbindungen der Beispiele 1–10 gekuppelt werden können. Beispiel 11
Herstellung von 2-(S)-Methyl-3-(methylsulfonyl)propionsäure
Eine Lösung von 10 g D-(-)-S-Benzoyl-b-mercaptoisobuttersäure-t-butylester in 20 ml Methanol wurde bei 0°C mit gasförmigem Ammoniak durchperlt. Die Reaktion wurde dann zur Erwärmung auf Raumtemperatur stehengelassen, über Nacht gerührt und dann unter reduziertem Druck eingeengt. Die resultierende Mischung eines Feststoffs (Benzamid) und einer Flüssigkeit wurde filtriert, wodurch 5,21 g eines blassen Öls erhalten wurden, das sich dann verfestigte. Dieses wurde als 2(S)-Methyl-3-mercaptopropionsäure-t-butylester identifiziert.
Zu einer Lösung von 5,21 g 2(S)-Methyl-3-mercaptopropionsäure-t-butylester in 75 ml Toluol bei 0°C wurden 4,50 g 1,8-Diazabicyclo[5.40]undec-7-en und 1,94 ml Methyliodid gegeben. Nach Rühren bei Raumtemperatur während 2,5 h wurden die flüchtigen Bestandteile entfernt, Ethylacetat zugegeben, mit verdünnter Salzsäure, Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet und die Lösung eingeengt, wodurch 2,82 g eines blassen Öls erhalten wurden, das als 2(S)-Methyl-3-(thiomethyl)propionsäure-tbutylester identifiziert wurde.
Zu einer Lösung von 2,82 g 2(S)-Methyl-3-(thiomethyl)propionsäure-t-butylester in 50 ml Essigsäure wurden 5,58 g Natriumperborat gegeben und die Reaktionsmischung während 17 h auf 55°C erwärmt. Die Reaktionsmischung wurde in Wasser geschüttet, mit Methylenchlorid extrahiert, mit wässrigem Natriumbicarbonat gewaschen, getrocknet und eingeengt, wodurch 2,68 g 2(S)-Methyl-3-(methylsulfonyl)propionsäure-t-butylester als weißer Feststoff erhalten wurden.
Zu 2,68 g 2(S)-Methyl-3-(methylsulfonyl)propionsäure-t-butylester wurden 20 ml 4N Salzsäure/Dioxan gegeben und die Mischung während 19 h bei Raumtemperatur gerührt. Das Lösungsmittel wurde unter reduziertem Druck entfernt, wodurch 2,18 g des Rohproduktes erhalten wurden, das aus Ethylacetat/Hexan umkristallisiert. wurde, wodurch 1,44 g 2(S)-Methyl-3-(methylsulfonyl)propionsäure in Form weißer Kristalle erhalten wurden.
Beispiel 12
Teil A:
Eine Lösung aus Methylmethacrylat (7,25 g, 72,5 mMol) und Phenethylmercaptan (10,0 g, 72,5 mMol) in 100 ml Methanol wurde im Eisbad abgekühlt und mit Natriummethoxid (100 mg, 1,85 mMol) behandelt. Die Lösung wurde unter Stickstoff während 3 h gerührt und dann im Vakuum eingeengt, wodurch ein Öl erhalten wurde, das in Ether aufgenommen, mit 1 M wässriger Kaliumhydrogensulfat- und gesättigter wässriger Natriumchloridlösung gewaschen, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt wurde, wodurch 16,83 g, 97,5% Methyl-2-(R,S)-methyl-4-thia-6-phenylhexanoat als Öl erhalten wurden. Dünnschichtchromatographie über Siliciumdioxid mit Hexan/Ethylacetat 20 : 1 (v/v) als Laufmittel ergab einen R_f-Wert von 0,41. Alternativ kann 3-Brom-2-methylpropionat anstelle von Methylmethacrylat verwendet werden.
Teil B:
Eine Lösung von Methyl-2-(R,S)-methyl-4-thia-6-phenylhexanoat (4,00 g, 16,8 mMol) in 100 ml Dichlormethan wurde bei Raumtemperatur gerührt und portionsweise mit Metachlorperoxybenzoesäure (7,38 g, 39,2 mMol) während etwa 40 min behandelt. Die Lösung wurde während 16 h bei Raumtemperatur gerührt, dann filtriert und das Filtrat mit gesättigtem wässrigen Natriumbicarbonat, 1 N Natriumhydroxid und gesättigtem wässrigen Natriumchlorid gewaschen, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt, wodurch 4,50 g, 99% des gewünschten Sulfons erhalten wurden. Das ungereinigte Sulfon wurde in 100 ml Tetrahydrofuran gelöst und mit einer Lösung von Lithiumhydroxid (1,04 g, 24,5 mMol) in 40 ml Wasser behandelt. Die Lösung wurde während 2 min bei Raumtemperatur gerührt und dann im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde mit 1 N wässrigem Kaliumhydrogensulfat auf pH = 1 angesäuert und dann dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten Ethylacetatphasen wurden mit gesättigtem wässrigen Natriumchlorid gewaschen und eingeengt, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wurde. Der Feststoff wurde in kochendem Ethylacetat/Hexan aufgenommen und ungestört stehengelassen, worauf sich weiße Nadeln bildeten, die durch Filtration isoliert und luftgetrocknet wurden, wodurch 3,38 g, 79%, 2-(R,S)-Methyl-3(β-phenethylsulfonyl)propionsäure, Smp. 91–93°C erhalten wurden.
Teil C:
Eine Lösung von 2-(R,S)-Methyl-3(β-phenethylsulfonyl)propionsäure (166,1 mg, 0,65 mMol), N-Hydroxybenzotriazol (HOBT) (146,9 mg, 0,97 mMol) und 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimidhydrochlorid (EDC) (145,8 mg, 0,75 mMol) in 4 ml wasserfreiem Dimethylformamid (DMF) wurde auf 0°C abgekühlt und unter Stickstoff während 0,5 h gerührt. Diese Lösung wurde dann mit dem gewünschten Sulfonamid-Isoster behandelt und während 16 h bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wurde in 30 ml einer 60% gesättigten wässrigen Natriumbicarbonat-Lösung gegossen. Die wässrige Lösung wurde dann von dem organischen Rückstand abdekantiert. Der organische Rückstand wurde in Dichlormethan aufgenommen, mit 10% wässriger Zitronensäureund Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und eingeengt. Auftrennung des Reaktionsgemisches durch Flash-Chomatographie über Kieselgel mit Hexan/Ethylacetat (1 : 1) als Elutionslösung kann verwendet werden und ergibt die getrennten Diastereomere.
Beispiel 13
Teil A:
Eine Lösung von Methyl-2-(brommethyl)acrylat (26,4 g, 0,148 Mol) in 100 ml Methanol wurde portionsweise während 10 min bei Raumtemperatur mit Methansulfinat (15,1 g, 0,148 Mol) behandelt. Die Lösung wurde dann für einen Zeitraum von 1,25 h bei Raumtemperatur gerührt und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde dann in Wasser aufgenommen und vier Mal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten Ethylacetat-Phasen wurden mit gesättigtem Natriumchlorid gewaschen, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt, wodurch ein weißer Feststoff erhalten wurde. 20,7 g wurden in kochendem Aceton/Methyl-tert-butylether aufgenommen und stehengelassen, woraufhin sich Kristalle von reinem Methyl-2-(methylsulfonylmethyl)acrylat 18,0 g, 68% bildeten, Smp. 65–68 bei 0°C.
Teil B:
Eine Lösung von Methyl-2-(methylsulfonylmethyl)acrylat (970 mg, 5,44 mMol) in 15 ml Tetrahydrofuran wurde mit einer Lösung von Lithiumhydroxid (270 mg, 5,4 mMol) in 7 ml Wasser behandelt. Die Lösung wurde während 5 min bei Raumtemperatur gerührt, dann auf pH = 1 mit 1 N wässrigem Kaliumhydrogensulfat angesäuert und die Lösung drei Mal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten Ethylacetat-Phasen wurden über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt, wodurch 793 mg, 89% 2-(Methylsulfonylmethyl)acrylsäure erhalten wurden, Smp. 147–149 bei 0°C.
Teil C:
Eine Fisher-Porter-Flasche wurde unter Stickstoff-Atmosphäre mit einer Lösung von 2-(Methylsulfonylmethyl)acrylsäure (70.0 mg, 4,26 mMol) in 20 ml Methanol sowie mit 10% auf Kohlenstoff getragenem Palladium-Katalysator beladen. Das Reaktionsgefäß wurde versiegelt und fünfmal mit Stickstoff und dann fünfmal mit Wasserstoff durchspült. Der Druck wurde während 16 h bei 50 psig aufrechterhalten und dann der Wasserstoff durch Stickstoff ersetzt, die Lösung zum Entfernen des Katalysators durch ein Kieselgur- Kissen filtriert und das Filtrat im Vakuum eingeengt, wodurch 682 mg, 96%, 2-(R,S)-Methyl-3-methylsulfonylpropionsäure erhalten wurden.
Teil D:
Eine Lösung von 2-(R,S)-Methyl-3-(methylsulfonyl)propionsäure (263,5 mg, 1,585 mMol), N-Hydroxybenzotriazol (HOBT) (322,2 mg, 2,13 mMol) und 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodümidhydrochlorid (EDC) (339,1 mg, 1,74 mMol) in 4 ml wasserfreiem Dimethylformamid (DMF) wurde auf 0°C abgekühlt und während 0,5 h unter Stickstoff gerührt. Die Lösung wurde dann mit dem gewünschten Sulfonamid behandelt und während .16 h bei Raumtemperatur gerührt. Die wässrige Lösung wurde dann aus dem organischen Rückstand dekantiert. Der organische Rückstand wurde in Dichlormethan aufgenommen und mit 10% wässriger Zitronensäure- und Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt, wodurch das gewünschte Produkt erhalten wird.
Beispiel 14
Herstellung von Sulfon-Inhibitoren aus L-(+)-S-Acetyl-β-mercaptoisobuttersäure
Teil A:
Ein Rundkolben wird mit dem gewünschten Sulfamidsäure-Isoster (2,575 mMol) beladen, zum Beispiel dem Amin aus Beispiel 8, Teil C, kann in Gegenwart von 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodümidhydrochlorid (EDC) (339,1 mg, 1,74 mMol) an L-(+)-S-Acetyl-β-mercaptobuttersäure in 10 ml CH₂Cl₂ gekuppelt werden, und wird während 16 h bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wird im Vakuum eingeengt, der Rückstand in Ethylacetat aufgenommen, mit 1 N KHS0₄-, gesättigter wässriger NaHC0₃- und Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt, wodurch ein Öl erhalten wurde, das durch Radialchromatographie auf Siliciumdioxid mit Ethylacetat als Elutionslösung gereinigt werden kann, wodurch das Reinprodukt erhalten wird.
Teil B:
Eine Lösung des Produkts aus Teil A (0,85 mMol) in 10 ml Methanol wird mit wasserfreiem Ammoniak während ca. 1 min bei 0°C behandelt. Die Lösung wird während 16 h bei dieser Temperatur gerührt und dann im Vakuum eingeengt, wodurch das gewünschte Produkt, das direkt ohne weitere Reinigung im nächsten Schritt verwendet werden kann, erhalten wird.
Teil C:
Eine Lösung des Produkts aus Teil B (0,841 mMol) in 10 ml trockenem Toluol wird unter Stickstoff in rascher Folge mit 1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-en (DBU) (128,1 mg, 0,841 mMol) und Iodmethan (119,0 mg, 0,841 mMol) behandelt. Nach 0,5 h bei Raumtemperatur wird die Reaktionsmischung mit Ethylacetat verdünnt, dann mit 1 N KHS0₄, gesättigter, wässriger NaHC0₃-Lösung und Kochsalzlösung gewaschen. Nachdem die Lösung über wasserfreiem MgS0₄ getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt wurde, wird das gewünschte Produkt erhalten und kann direkt im nächsten Schritt verwendet werden.
Teil D:
Eine Lösung des Produkts aus Teil C (0,73 mMol) und Natriumperborat (500 mg, 3,25 mMol) in 30 ml Eisessig wird während 16 h auf 55°C erwärmt. Die Lösung wird im Vakuum eingeengt, dann der Rückstand in Ethylactat aufgenommen, mit Wasser und gesättigter, wässriger NaHC0₃- und Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem MgS0₄ getrocknet, filtriert und eingeengt, wodurch das gewünschte Produkt erhalten wird.
Repräsentative Sulfone, die nach dem oben beschriebenen allgemeinen Verfahren hergestellt wurden, sind in Tabelle 2 gezeigt. TABELLE 2
Allgemeines Verfahren zur Kupplung von Sulfonylalkanoyl-Verbindungen an Sulfamid säure-Verbindungen
Eine Mischung aus der Sulfonylalkanoyl-Verbindung (etwa 1 mMol), N-Hydroxybenzotriazol (1,5 mMol) und 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodümidhydrochlorid (EDC) (1,2 mMol) wird in einem geeigneten Lösungsmittel wie DMF gelöst und während etwa 30 min bei 0°C umgesetzt. Die Sulfamidsäure-Verbindungen, zum Beispiel das Amin aus Beispiel 8, Teil C (1,05 mMol), werden in DMF gelöst, zu der obigen Mischung gegeben und bei Raumtemperatur während eines Zeitraums gerührt, der ausreichend ist, damit die Reaktion stattfinden kann. Die Lösung wird dann in gesättigte, wässrige NaHC0₃-Lösung geschüttet und zum Beispiel mit Ethylacetat extrahiert. Die extrahierten Phasen werden gewaschen, getrocknet, filtriert und eingeengt. Das resultierende Material wird dann aus einem geeigneten Lösungsmittel oder Lösungsmittelgemisch wie Hexan und Ethylacetat umkristallisiert, um das gewünschte Produkt zu erhalten, oder alternativ durch Chromatographie gereinigt.
Allgemeines Verfahren zur Herstellung von Sulfamoylchloriden
A. Zu einer Lösung von 547 mMol Sulfurylchlorid in 100 ml wasserfreiem Acetonitril wurden unter Stickstoffatmosphäre 136 mMol Aminhydrochlorid gegeben und die Mischung unter Rückfluss während 24 bis 48 h erhitzt. Die Lösung wurde abgekühlt und im Vakuum eingeengt, wodurch ein halbfester Stoff bereitgestellt wurde. Wasserfreier Diethylether wurde zugegeben, die Feststoffe durch Filtration entfernt und das Filtrat eingeengt, wodurch das rohe Sulfamoylchlorid bereitgestellt wurde. Dies kann wie es ist verwendet oder, falls gewünscht, durch Umkristallisation oder Destillation gereinigt werden.
B. Herstellung von Sulfamoylchloriden
Verfahren A:
Aminosäuresterhydrochlorid (1 mMol) wird in einem geeigneten Lösungsmittel wie Hexan, Dichlormethan, Toluol oder dergleichen, ganz besonders bevorzugt aber in. Acetonitril, suspendiert. Zu der gut gerührten Mischung wird in einem geeigneten Lösungsmittel oder unverdünnt tropfenweise während mehrerer Minuten Sulfurylchlorid (3 mMol) gegeben. Das Reaktionsgemisch wird bei 0°C bis Rückflusstemperatur, vorzugsweise bei Rückflusstemperatur, während 1 bis 48 h, vorzugsweise während 24 h, gerührt. Das Lösungsmittel wird entfernt und der Rückstand mit einem geeigneten Lösungsmittel wie Hexan, Pentan, Toluol, ganz besonders bevorzugt aber mit Diethylether, trituriert. Das Lösungsmittel wird dekantiert und eingeengt. Das Produkt kann dann wie es ist verwendet oder durch Destillation oder, wenn es sich um Feststoffe handelt, durch Umkristallisieren aus einem passenden Lösungsmittel gereinigt werden.
Verfahren B:
Ein alpha-Hydroxyester (1 mMol) wird in einem geeigneten Lösungsmittel wie Acetonitril, Dichlormethan, Toluol oder dergleichen, aber ganz besonders bevorzugt in Hexan, gelöst. Chlorsulfonylisocyanat (1 mMol) wird unverdünnt oder in einem Lösungsmittel, vorzugsweise in Hexan, tropfenweise zugegeben. Die Reaktionsmischung wird zwischen 0°C und Rückflusstemperatur, vorzugsweise bei Rückflusstemperatur, während 5 min bis mehreren Stunden, vorzugsweise während 1 h, gerührt: Das Lösungsmittel wird dann entfernt und der Rückstand so wie er ist verwendet oder in einem passenden Lösungsmittel, insbesondere in Dichlormethan, aufgenommen und zum Entfernen von Verunreinigungen filtriert. Das Produkt kann durch Destillation oder, falls es sich um Feststoffe handelt, durch Umkristallisieren aus passenden Lösungsmitteln gereinigt werden.
C. Herstellung von Sulfamaten
Ein Aminoalkohol wie in Beispiel 3 (1 mMol) hergestellt und eine geeignete Base wie Triethylamin, Pyridin, Natriumcarbonat oder dergleichen, vorzugsweise Diisopropylethylamin (1 mMol), werden in einem geeigneten Lösungsmittel wie Ether, Chloroform, Acetonitil oder dergleichen, vorzugsweise aber in Dichlormethan, gelöst. Das Sulfamoylchlorid aus Teil A oder B von Beispiel 4 wird unverdünnt oder in einem geeigneten Lösungsmittel gelöst zu der obigen Lösung gegeben. Die Reaktionsmischung wird von 0°C bis Rückflusstemperatur, vorzugsweise aber bei Raumtemperatur, während 1 bis 48 h gerührt. Das Produkt kann chromatographisch über Kieselgel oder durch Extraktionsaufarbeitung, gefolgt von Umkristallisieren gereinigt werden.
Eine repräsentative Verbindung, die gemäß diesen allgemeinen Verfahren hergestellt wurde, ist im folgenden Beispiel gezeigt. Beispiel 15
Herstellung von N-[3-[[[(1 1-Dimethylethyl)amino]sulfonyl](2-methylpropyl)amino]-2Rhydroxy-1S-(phenylmethyl)propyl]-2S-methyl-3-(methylsulfonyl)propanamid
Zu einer Lösung von 52 mg (0,31 mMol) 2(S)-Methyl-3-(methylsulfonyl)propionsäure und 71 mg (0,46 mMol) N-Hydroxybenzotriazol in 2 ml N,N-Dimethylformamid (DMF) bei 0°C wurden 65 mg (0,34 mMol) 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodümidhydrochlorid gegeben. Nach Rühren bei 0°C während 1 h wurde eine Lösung von 104 mg (0,28 mMol) des freien Amins aus Beispiel 8, Teil C, in 1,5 ml DMF zugegeben. Nach 2 h bei 0°C und 16 h bei Raumtemperatur wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt, der Rückstand in Ethylacetat gelöst und der Reihe nach mit gesättigter, wässriger Natriumbicarbonat-Lösung, 5% wässriger Zitronensäure- und gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, filtriert und eingeengt, um 140 g des Rohproduktes bereitzustellen. Dies wurde über Kieselgel unter Verwendung von 3–5% Isopropanol/Methylenchlorid chromatographisch aufgetrennt, wodurch 45 mg des gewünschten Produktes erhalten wurden, m/e = 520 (M + H) Unter Verwendung der zuvor aufgeführten Verfahren können die in Tabelle 3–13 gezeigten Verbindungen hergestellt werden. Auf diese Weise können unter Verwendung der Zwischenstufen aus den Beispielen 1–10 und durch Kupplung dieser Zwischenstufen an die Sulfonylalkanoyl-Verbindungen der Beispiele 11–14 gemäß dem in Beispiel 15 veranschaulichten Verfahren die in den Tabellen 3–16 gezeigten Verbindungen hergestellt werden. TABELLE 3
TABELLE 3 (Fortsetzung)
TABELLE 3 (Fortsetzung)
TABELLE 3 (Fortsetzung)
TABELLE 3 (Fortsetzung)
TABELLE 4
TABELLE 5
TABELLE 6
TABELLE 7
TABELLE 8
Beispiel 16
Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind wirksame HIV-Protease-Inhibitoren. Unter Verwendung eines wie unten beschriebenen Enzym-Assays hemmen die in den hier offenbarten Beispielen aufgeführten Verbindungen das HIV-Enzym. Die bevorzugte Verbindung der vorliegenden Erfindung und deren berechnete IC₅₀-Werte (Inhibiting Concentration 50%, d. h. die Konzentration, bei der die Inhibitor-Verbindung die Enzymaktivität um 50% reduziert) sind in Tabelle 17 gezeigt. Das enzymatische Verfahren wird unten beschrieben. Die Positivkontrolle ist MVT-101 (Miller, M. et al, Science, 246, 1149 (1989).
Die Assay-Bedingungen sind die folgenden: Assay-Puffer: 20 mM Natriumphosphat, pH 6,4
20% Glycerin
1 mM EDTA
1 mM DTT
0,1% CHAPS
Das oben beschriebene Substrat wird in DMSO gelöst, dann 10fach in Assay-Puffer verdünnt. Endkonzentration des Substrats im Assay ist 80 μM.
Die HIV-Protease wird im Assay-Puffer bis zu einer Endkonzentration von 12,3 nMol, bezogen auf ein Molekulargewicht von 10.780, verdünnt.
Die Endkonzentration an DMSO ist 14% und die Endkonzentration an Glycerin 18%. Die Testverbindung wird in DMSO gelöst und in DMSO auf 10x der Testkonzentration verdünnt. 10 μl der Enzymzubereitung wird zugegeben, die Materialien gemischt und die Mischung bei Raumtemperatur während 15 min inkubiert. Die Enzymreaktion wird durch Zugabe von 40 μl Substrat in Gang gesetzt. Die Fluoreszenzzunahme wird über 4 Zeitpunkte (0, 8, 16 und 24) bei Raumtemperatur verfolgt. Jeder Assay wird in zwei Parallelcavitäten durchgeführt.
Die vorstehenden Beispiele können mit ähnlichem Erfolg durch Ersetzen der in dieser Erfindung vorstehend im allgemeinen oder im besonderen beschriebenen Reaktionsteilnehmer oder Reaktionsbedingungen durch die in den vorstehenden Beispielen beschriebenen wiederholt werden.
TABELLE 9

Verbindung des Beispiels Nr. IC_5O (nanomolar)

15 140
Beispiel 17
CEM-Zellassay
Die Wirksamkeit der Verbindungen kann auch durch einen CEM-Zellassay bestimmt werden.
Das HIV-Inhibierungs-Assay-Verfahren bei akut infizierten Zellen ist ein automatisierter Assay auf der Grundlage von Tetrazolium wie er im wesentlichen von Pauwles et al, J. Virol. Methods, 20, 309–321 (1988) beschrieben wurde. Die Assays können in Gewebekulturplatten mit 96 Cavitäten durchgeführt werden. CEM-Zellen, eine CD4⁺-Zell-Linie, werden in RPMI-1640 (Gibco)-Medium supplementiert mit 10% fötalem Kälberserum kultiviert und dann mit Polybrene (2 μg/ml) behandelt. 80 μl Kulturmedium, das 1 x 10⁴ Zellen enthält, wird in jede Cavität der Gewebekulturschale gegeben. Zu jeder Cavität wird in 100 μl Gewebekulturmedium gelöste Testverbindung (oder Medium ohne Testverbindung als Kontrolle) gegeben, um die gewünschte Endkonzentration zu erreichen, und die Zellen werden bei 37°C während 1 h inkubiert. Eine tiefgefrorene HIV-1-Kultur wird in Kulturmedium auf eine Konzentration von 5 × 10⁴ TCID₅ ₀ pro ml verdünnt (TCID₅₀ ist die Virus-Dosis, bei der 50% der Zellen in der Gewebekultur infiziert werden) und 20 μl der Virusprobe (enthaltend 1000 TCID₅ ₀ Virus) werden in die Testverbindung enthaltenden Cavitäten und in die nur Medium enthaltenden Cavitäten (infizierte Kontrollzellen) gegeben. Mehrere Cavitäten werden nur mit Kulturmedium ohne Virus versehen (nicht infizierte Kontrollzellen). Genauso wird die intrinsische Toxizität der Testverbindung durch Zugabe von Medium ohne Virus zu einigen, die Testverbindungen enthaltenden Cavitäten festgestellt. Zusammenfassend enthalten die Gewebekulturplatten die folgenden Testansätze:
In den Experimenten 2 und 4 betragen die Endkonzentrationen der Testverbindungen 1, 10, 100 und 500 μg/ml. Als Arzneimittel-Positivkontrolle wurde entweder Azidothymidin (AZT) oder Dideoxyinosin (ddl) eingeschlossen. Die Testverbindungen wurden in DMSO gelöst und so in Gewebekulturmedium verdünnt, dass die DMSO-Endkonzentration auf keinen Fall 1,5% überschritt. DMSO wurde allen Kontrollcavitäten in einer entsprechenden Konzentration zugesetzt.
Nach der Zugabe von Virus wurden die Zellen bei 37°C in einer befeuchteten, 5%igen C0₂-Atmosphäre während 7 Tagen inkubiert. Testverbindungen konnten wenn gewünscht an den Tagen 0, 2 und 5 zugegeben werden. An Tag 7 nach Infektion wurden die Zellen in jeder Cavität resuspendiert und eine 100 μl-Probe jeder Zellsuspension als Probe für den Assay entnommen. 20 μl einer Lösung von 5 mg/ml 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromid (MTT) werden zu den jeweils 100 μl-Zellsuspension gegeben und die Zellen während 4 h bei 27°C in einer 5%igen C0₂- Umgebung inkubiert. Während dieser Inkubation wird MTT von lebenden Zellen metabolisch reduziert, wodurch in den Zellen ein gefärbtes Formazan-Produkt entsteht. Zu jeder Probe werden dann 100 μl 10% Natriumdodecylsulfat in 0,01 N HCl gegeben, um die Zellen zu lysieren, und die Proben werden über Nacht inkubiert. Die Absorption bei 590 nm wird dann in einem Mikroplatten-Lesegerät (Molecular Devices) bestimmt. Die Absorptionswerte für die Cavitäten jedes Versuchsansatzes werden verglichen, um die Virus-Kontroll-Infektion, die Reaktion der nicht infizierten Kontrollzellen sowie die Testsubstanzen hinsichtlich Zytotoxizität und antiviraler Wirksamkeit zu beurteilen.
Die in Tabelle 10 gezeigten biologischen Daten wurden mit der Verbindung aus Beispiel 15 erhalten. Tabelle 10
Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind wirksame antivirale Verbindungen und sind insbesondere wie oben gezeigt wirksame retrovirale Inhibitoren. Daher sind die erfindungsgemäßen Verbindungen wirksame HIV-Protease-Inhibitoren. Es wird daran gedacht, dass die erfindungsgemäßen Verbindungen auch anderen Retroviren hemmen könnten wie zum Beispiel andere Lentiviren, insbesondere andere HIV-Stämme z. B. HIV-2, humanes T-Zell-Leukämie-Virus, Katzen-Leukämie-Virus, Katzen-Immunschwäche-Virus, Hepadna-Virus, Cytomegalo-Virus und Picorna-Virus. Somit sind die erfindungsgemäßen Verbindungen wirksam bei der Behandlung und/oder Prophylaxe retroviraler Infektionen.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können ein oder mehr asymmetrische Kohlenstoffatome aufweisen und können daher in Form von optischen Isomeren als auch in Form von racemischen oder nicht-racemischen Mischungen davon vorkommen. Die optischen Isomere können durch Auftrennung der racemischen Mischungen gemäß herkömmlichen Verfahren erhalten werden, beispielsweise durch Bildung von diastereoisomeren Salzen durch Behandlung mit einer optisch aktiven Säure oder Base. Beispiele für geeignete Säuren sind Wein-, Diacetylwein-, Dibenzoylwein-, Ditoluoylwein- und Kampfersulfonsäure, und anschliessender Auftrennung der Diastereoisomer-Mischung durch Kristallisation, gefolgt von der Freisetzung der optisch aktiven Basen aus diesen Salzen. Ein anderes Verfahren zur Auftrennung von optischen Isomeren beruht auf der Verwendung von chiralen Chromatographiesäulen, die optimal gewählt sind, um die Auftrennung der Enantiomere zu maximieren. Ein anderes verfügbares Verfahren beruht auf der Synthese von kovalenten diastereoisomeren Molekülen durch Umsetzung von Verbindungen der Fomel I mit einer optisch reinen Säure in einer aktivierten Form oder mit einem optisch reinen Isocyanat. Die synthetisierten Diastereoisomere können durch herkömmliche Mittel, wie Chromatographie, Destillation, Kristallisation oder Sublimation, aufgetrennt und dann hydrolysiert werden, wodurch die enantiomerreine Verbindung erzeugt wird. Die optisch aktiven Verbindungen der Formel I können auf eine ähnliche Art und Weise erhalten werden, indem optisch aktive Ausgangsmaterialien verwendet werden. Diese Isomere können in Form einer freien Säure, einer freien Base, eines Esters oder eines Salzes vorliegen.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können in Form von Salzen verwendet werden, die sich von anorganischen oder organischen Säuren ableiten. Diese Salze beinhalten die folgenden, sind jedoch nicht darauf beschränkt: Acetat, Adipat, Alginat, Citrat, Aspartat, Benzoat, Benzolsulfonat, Bisulfat, Butyrat, Kampferat, Kampfersulfonat, Digluconat, Cyclopentanpropionat, Dodecylsulfat, Ethansulfonat, Glucoheptanoat, Glycerophosphat, Hemisulfat, Heptanoat, Hexanoat, Fumarat, Hydrochlorid, Hydrobromid, Hydroiodid, 2-Hydroxyethansulfonat, Lactat, Maleat, Methansulfonat, Nicotinat, 2-Naphthalinsulfonat, Oxalat, Palmoat, Pectinat, Persulfat, 3-Phenylpropionat, Pikrat, Pivalat, Propionat, Succinat, Tartrat, Thiocyanat, Tosylat, Mesylat und Undecanoat. Zudem können die basischen Stickstoff enthaltenden Gruppen mit solchen Agenzien wie Niederalkylhalogenid, z. B. Methyl-, Ethyl-, Propyl- und Butylchlorid, -bromid, und -iodid, Dialkylsulfate, wie Dimethyl-, Diethyl-, Dibutyl- und Diamylsulfate, langkettige Halogenide, wie Decyl-, Lauryl-, Myristyl- und Stearylchlorid, -bromid und -iodid, Aralkylhalogenide, wie Benzyl- und Phenethylbromid, und anderen in quartäre Aminogruppen umgewandelt werden. Dabei werden wasserlösliche oder öllösliche oder dispergierbare Produkte erhalten.
Beispiele für Säuren, die verwendet werden können, um pharmazeutisch annehmbare Säureadditionssalze zu bilden, beinhalten anorganische Säuren, wie Salzsäure, Schwefelsäure und Phosphorsäure, und organische Säuren, wie Oxalsäure, Maleinsäure, Bernsteinsäure und Zitronensäure. Andere Beispiele beinhalten Salze mit Alkalimetallen oder Erdalkalimetallen, wie Natrium, Kalium, Calcium oder Magnesium oder mit organischen Basen.
Die tägliche Gesamtdosis, die dem Patienten als Einzeldosis oder in geteilter Dosierung verabreicht wird, kann zum Beispiel in Mengen zwischen 0,001 bis 50 mg/kg Körpergewicht täglich liegen und liegt gewöhnlich zwischen 0,01 bis 1 mg. Einzeldosiszusammensetzungen können entsprechende Teilmengen davon enthalten, um die Gesamttagesdosis zu ergeben.
Die Wirkstoffmenge, die zur Herstellung einer Einzeldosisform mit einem Trägermaterial kombiniert sein kann, hängt vom zu behandelnden Patienten und vom speziellen Verabreichungsmodus ab.
Das Dosierungsschema zur Behandlung einer Krankheit mit den erfindungsgemäßen Verbindungen und/oder Zusammensetzungen wird gemäß einer Vielzahl von Faktoren ausgewählt, die beinhalten: den Typ, das Alter, das Gewicht, das Geschlecht, die Ernährung und die medizinische Verfassung des Patienten, die Schwere der Erkrankung, die Art der Verabreichung, pharmakologische Gesichtspunkte wie Aktivität, Wirksamkeit, pharmakokinetische und toxikologische Profile der speziellen verwendeten Verbindung, ob ein Arzneimittelfreisetzungsystem verwendet wird und ob die Verbindung als Teil einer Arzneimittel-Kombination verabreicht wird. Daher kann das tatsächlich verwendete Dosierungsschema stark variieren und kann deshalb vom oben aufgeführten bevorzugten Dosierungsschema abweichen.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können oral, parenteral, als Inhalationspray, rektal oder lokal in Einzeldosisrezepturen, die je nach Wunsch herkömmliche, nicht toxische, pharmazeutisch annehmbare Trägerstoffe, Adjuvantien und Transportmittel enthalten, verabreicht werden. Lokale Verabreichungen können auch die transdermale Verabreichung wie transdermale Pflaster oder lontophoresevorrichtungen beinhalten. Der Ausdruck parenteral, wie er hierin verwendet wird, beinhaltet subkutane Injektionen, intravenöse, intramuskuläre und intrasternale Injektions- oder Infusionsverfahren.
Injizierbare Zubereitungen, zum Beispiel sterile, injizierbare, wässrige oder ölige Suspensionen, können gemäß aus dem Stand der Technik bekannten Rezepturen unter Verwendung geeigneter Befeuchtungs- und Suspensionmittel hergestellt werden. Die sterile injizierbare Zubereitung kann auch eine sterile injizierbare Lösung oder Suspension in einem nicht toxischen parenteral annehmbaren Verdünnungs- oder Lösungsmittel, zum Beispiel 1,3-Butandiol sein. Unter den annehmbaren Transport- und Lösungsmitteln, die verwendbar sind, sind Wasser, Ringer-Lösung und isotonische Natriumchlorid-Lösung. Zusätzlich werden sterile, nicht flüchtige Öle herkömmlich als Lösungs- und Suspensionsmittel verwendet. Zweckmäßigerweise kann hierzu jedes milde, nicht flüchtige Öl einschließlich Mono- oder Diglyceriden als Lösungsmittel oder Suspensionsmedium verwendet werden. Zusätzlich finden Fettsäuren wie Ölsäure in der Zubereitung von Injektionslösungen Verwendung.
Suppositorien zur rektalen Verabreichung des Arzneimittels können hergestellt werden, indem der Wirkstoff mit einem geeigneten, nicht reizenden Arzmittelträgerstoff wie Kakaobutter und Polyethylenglykol vermischt wird, der bei normalen Temperaturen fest, bei der Temperatur im Rektum aber flüssig ist und der deshalb im Rektum schmilzt und das Arzneimittel freisetzt.
Feste Dosisformen für die orale Verabreichung können Kapseln, Tabletten, Pillen, Pulver und Granula umfassen. In solchen festen Dosisformen kann der Wirkstoff mit wenigstens einem inerten Verdünnungsmittel, wie Saccharose, Lactose oder Stärke, vermischt sein. Solche Dosisformen können auch, wie dies üblicherweise der Fall ist, neben dem inerten Verdünnungsmittel, weitere Substanzen enthalten, z. B. Gleitmittel, wie Magnesiumstearat. Im Fall von Kapseln, Tabletten und Pillen können die Dosisformen auch Puffersubstanzen umfassen. Tabletten und Pillen können zusätzlich mit dünndarmlöslichen Beschichtungen hergestellt werden.
Flüssige Dosisformen für die orale Verabreichung können pharmazeutisch annehmbare Emulsionen, Lösungen, Suspensionen, Sirupe und Elixiere, die im Stand der Technik herkömmlich verwendete Verdünnungsmittel, wie Wasser, enthalten, umfassen. Solche Zusammensetzungen können auch Zusatzstoffe, wie Benetzungsmittel, Emulgier- und Suspensionsmittel und Süß-, Geschmacks- und Duftstoffe enthalten.
Obwohl die erfindungsgemäßen Verbindungen als einziger pharmazeutischer Wirkstoff verabreicht werden können, können diese auch in Verbindung mit einem oder mehreren Immunmodulatoren, antiviralen Mitteln oder anderen antiinfektiösen Mitteln verwendet werden. Beispielsweise können die erfindungsgemäßen Verbindungen für die Vorbeugung und/oder Behandlung von AIDS in Verbindung mit AZT, DDI, DDC oder Glucosidase-Inhibitoren, wie N-Butyl-1-desoxynojirimycin oder Pro-Arzneimitteln davon, verabreicht werden. Bei einer kombinierten Verabreichung können die Therapeutika als getrennte Zusammensetzungen, die gleichzeitig oder zu unterschiedlichen Zeitpunkten verabreicht werden, formuliert sein, oder die Therapeutika können in Form einer einzigen Zusammensetzung verabreicht werden.

Claims

Verbindung, dargestellt durch die Formel
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz, ein pharmazeutisch annehmbarer Wirkstoffvorläufer oder Ester davon, worin: R C₁-C₁₀-Alkyl darstellt; R² C₁-C₁₀-Alkyl-, Aryl-, C₃-C₈-Cycloalkyl-, C₃-C₈-Cycloalkyl-C₁-C₁₀-alkyl- und Aryl-C₁-C₁₀-alkyl-Reste darstellt, wobei die Reste gegebenenfalls mit einer aus Alkyl- und Halogenresten, -NO₂, -CN, -CF₃, -0R⁹ und -SR⁹ ausgewählten Gruppe substituiert sind, wobei R⁹ Wasserstoff und C₁-C₁₀-Alkyl-Reste darstellt; R³ C₄-C₅-Alkyl, Cyclohexyl, Cyclohexylmethyl, Benzyl, p-Fluorbenzyl und C(CH₃)₂C0₂CH₃ darstellt; R⁴ und R⁵ jeweils unabhängig voneinander Wasserstoff, C₁-C₅-Alkyl, Phenyl, Cyclohexyl und (CH₂)₂O-CH₂C₂H₅ darstellen; oder zusammen mit einem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen Pyrrolidinyl-, Piperidinyl-, Morpholinyl-, Piperazinyl- oder n-Methylpiperazinyl-Rest bilden; R⁶ Wasserstoff und C₁-C₁₀-Alkylreste darstellt, worin Aryl Phenyl oder Naphthyl bedeutet, die gegebenenfalls durch einen oder mehrere aus C₁-C₁₀-Alkyl, C₁-C₁₀-Alkoxy, Halogen, Hydroxy, Amino, Nitro, Cyano, Halogen-C₁-C₁₀-alkyl ausgewählten Substituenten substituiert sind.
Verbindung nach Anspruch 1, worin R C₁-C₁₀-Alkyl, C₂-C₁₀-Alkenyl, C₂-C₁₀-Alkinyl, Hydroxy-C₁-C₁₀-alkyl, C₁-C₁₀-Alkoxy-C₁-C₁₀-alkyl, Amino-C₁-C₁₀-alkyl darstellt; worin R⁶ Wasserstoff ist und alle anderen Substituenten wie oben definiert sind.
Verbindung nach Anspruch 2, worin R C₁-C₁₀-Alkyl-Reste darstellt.
Verbindung nach Anspruch 2, worin R einen Methyl-Rest darstellt.
Verbindung nach Anspruch 2, worin R² C₁-C₁₀-Alkyl-, C₃-C₈-Cycloalkyl-C₁-C₁₀alkyl- und Aryl-C₁-C₁₀-alkyl-Reste darstellt, worin die Reste gegebenenfalls mit Halogen-Resten und mit durch die Formeln -0R⁹ und -SR⁹ dargestellten Resten substituiert sind, worin R⁹ Wasserstoff und C₁-C₁₀-Alkyl-Reste darstellt.
Verbindung nach Anspruch 2, worin R² C₁-C₁₀-Alkyl-, C₃-C₈-Cycloalkyl-C₁-C₁₀alkyl- und Aryl-C₁-C₁₀-alkyl-Reste darstellt.
Verbindung nach Anspruch 2, worin R² CH₃SCH₂CH₂-, iso-Butyl-, n-Butyl-, Benzyl-, 4-Fluorbenzyl-, 2-Naphthylmethyl- und Cyclohexylmethyl-Reste darstellt.
Verbindung nach Anspruch 2, worin R⁵ Wasserstoff ist und R³ C₄-C₅-Alkyl-, Cyclohexyl-, Cyclohexylmethyl- und Benzyl-Reste darstellt.
Verbindung nach Anspruch 2, worin R³ C₄-C₅-Alkyl-Reste darstellt.
Verbindung nach Anspruch 2, worin R³ n-Butyl- oder Isoamyl-, Cyclohexyl-, Cyclohexylmethyl-, Benzyl- und Pyridylmethyl-Reste darstellt.
Verbindung nach Anspruch 2, worin R⁵ Wasserstoff, R³ ein Isobutyl- oder Isoamyl-Rest und R⁴ ein tertiär-Butyl-Rest ist.
Verbindung nach Anspruch 2, worin R⁵ Wasserstoff, R³ ein Cyclohexyl- oder Cyclohexylmethyl-Rest und R⁴ ein tertiär-Butyl-Rest ist.
Verbindung nach Anspruch 2, worin R⁴ und R⁵ unabhängig voneinander Wasserstoff, C₁-C₅-Alkyl und Cyclohexyl darstellen.
Verbindung nach Anspruch 2, worin R⁴ und R⁵ unabhängig voneinander Wasserstoff, C₁-C₅-Alkyl- und Phenyl-Reste darstellen.
Verbindung nach Anspruch 2, worin R⁴ und R⁵ unabhängig voneinander Wasserstoff, Methyl-, Ethyl-, Isopropyl-, Propyl-, n-Butyl-, t-Butyl-, 1,1-Dimethylpropyl-, Cyclohexyl- und Phenyl-Reste darstellen.
Verbindung nach Anspruch 2, worin R⁴ und R⁵ zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen Pyrrolidinyl-, Piperidinyl-, Morpholinyl-, Piperazinyloder N-Methylpiperazinyl-Rest bilden.
Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 16 und einen pharmazeutisch annehmbaren Träger.
Verwendung einer Zusammensetzung nach Anspruch 17 zur Herstellung eines Arzneimittels zur Inhibierung einer retroviralen Protease.
Verwendung nach Anspruch 18, worin die retrovirale Protease die HIV-Protease ist.
Verwendung einer Zusammensetzung nach Anspruch 17 zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung einer retroviralen Infektion.
Verwendung nach Anspruch 20, worin die retrovirale Infektion eine HIV-Infektion ist.
Verwendung einer Zusammensetzung nach Anspruch 17 zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung von AIDS.