DE69033915T2

DE69033915T2 - Xanthinderivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre pharmazeutische Anwendung

Info

Publication number: DE69033915T2
Application number: DE69033915T
Authority: DE
Inventors: Harald Maschler; Harry Smith; Barbara Ann Spicer
Original assignee: SmithKline Beecham Pharma GmbH and Co KG; Beecham Group PLC
Current assignee: SmithKline Beecham Pharma GmbH and Co KG; Beecham Group PLC
Priority date: 1989-03-23
Filing date: 1990-03-22
Publication date: 2002-10-10
Anticipated expiration: 2010-03-23
Also published as: ZA902170B; DE69033915D1; HK1040392A1; CN1031641C; PT93527A; EP0389282A2; NO901300L; US6531600B1; CA2012686A1; EP1120417A3; HUT54155A; US6180791B1; EP0389282A3; MA21800A1; JP2510889B2; ES2173074T3; DK0389282T3; SA90100215B1; CZ391891A3; NO175592B

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft 8-Aminoxanthinderivate mit pharmakologischer Wirksamkeit, ein Verfahren zur Herstellung dieser Verbindungen, Arzneimittel, die diese Verbindungen enthalten, und die Verwendung dieser Verbindungen und Mittel in der Medizin.
Molecular Pharmacology, Band 6, Nr. 6, 1970, S. 597-603, offenbart 1,3-Dimethyl- 8-nitroxanthin. Von dieser Verbindung ist offenbart, dass sie eine lipolytische Wirksamkeit aufweist.
Annalen der Chemie, 47, 362-365 (1957), offenbart 1,3-Dimethyl-8-aminoxanthin und ein Verfahren, durch das es hergestellt werden kann. Für diese Verbindung ist kein pharmakologischer Nutzen offenbart.
Drug Res. 27(1), Nr. 19, 1977, S. 4-14, Van K. H. Klingler, offenbart bestimmte 1,3-dimethyl-8-substituierte Xanthine als Zwischenverbindungen ausschließlich in der Synthese von Phenylethylaminoalkylxanthinen.
Drug Res. 31(11), Nr. 12, 1981, R. G. Werner et al., S. 2044-2048, offenbart bestimmte 1,3-dimethyl-8-substituierte Xanthine. Für diese Verbindung ist keine pharmakologische Wirksamkeit offenbart.
Biochemistry 16 (1977), 3316-3321, bezieht sich auf bestimmte Analoga von 1- Methyl-3-isobutylxanthin.
J. Med. Chem. 24 (1981), 954-958, bezieht sich auf bestimmte 1,3-disubstituierte und 1,3,8-trisubstituierte Xanthine.
WO-A-86/06724 offenbart substituierte 2,3-Dihydro-6-hydroxypyrimido-[2,1-1]- purin-4,8(1H,9H)-dione und ihre Verwendung als entzündungshemmende und antiallergische Mittel.
EP-A-0152944 offenbart bestimmte Adenosinderivate und ihre Verwendung als antiallergische Mittel und Bronchodilatatoren.
EP-A-0267676 offenbart die Verwendung von 1,3-Di-n-butyl-7-(2-oxopropyl)xanthin bei der Behandlung von inter alia zerebrovaskulären Erkrankungen.
Es wurde nun gefunden, dass bestimmte 8-substituierte Xanthine eine Schutzwirkung gegenüber den Folgen einer Hemmung des Hirnstoffwechsels aufweisen. Die Verbindungen verbessern die Erfassung oder Wiedergewinnung von Daten nach einer vorübergehenden Vorderhirnischämie und sind daher zur Behandlung von zerebralen, vaskulären und neuronalen, degenerativen Erkrankungen verwendbar, die mit dem Lernen, Gedächtnis und kognitiven Funktionsstörungen verbunden sind, einschließlich zerebraler Senilität, Multiinfarktdemenz, seniler Demenz vom Alzheimertyp, mit dem Alter verbundener Gedächtnisverschlechterung und bestimmter Erkrankungen, die mit der Parkinson-Krankheit verbunden sind.
Es zeigte sich auch, dass diese Verbindungen eine Nervenschutzwirkung aufweisen. Sie sind daher zur Prophylaxe von Störungen verwendbar, die mit aus ischämischen Vorfällen resultierender neuronaler Degeneration verbunden sind, einschließlich zerebraler Ischämie aufgrund von Herzstillstand, Schlaganfall und auch nach zerebralen ischämischen Vorfällen, wie denen aus chirurgischen Eingriffen und/oder während einer Geburt resultierenden. Ferner zeigte sich, dass die Behandlung mit der Verbindung bei der Behandlung von funktionellen Störungen von Nutzen ist, die aus einer gestörten Hirnfunktion nach einer Ischämie resultieren.
Diese Verbindungen bewirken auch eine Erhöhung der Sauerstoffanspannung im ischämischen Skelettmuskel. Diese Eigenschaft hat eine Zunahme des Nährblutflusses durch den ischämischen Skelettmuskel zur Folge, was wiederum zeigt, dass die Verbindungen der Erfindung als Mittel zur Behandlung von peripherer Verschlusskrankheit, wie intermittierendem Hinken, von möglichem Nutzen sind.
Diese Verbindungen wirken auch als Phosphodiesteraseinhibitoren und erhöhen die Konzentrationen von cyclischem AMP und sind daher zur Behandlung von wuchernden Hautkrankheiten bei Menschen oder nicht-humanen Säugern von möglichem Nutzen.
Es zeigte sich auch, dass diese Verbindungen eine bronchodilatatorische Wirksamkeit aufweisen und somit zur Behandlung von Erkrankungen der Atemwege, wie reversibler Atemwegsobstruktion und Asthma, von möglichem Nutzen sind.
Es wurde nun auch überraschenderweise gefunden, dass diese Verbindungen gute Inhibitoren einer induzierten Eosinophilie im Blut sind, und dass sie daher möglicherweise zur Behandlung und/oder Prophylaxe von mit einer erhöhten Anzahl von Eosinophilen verbundenen Störungen, wie Asthma, und mit Atopie verbundenen allergischen Leiden, wie Urtikaria, Ekzemen und Rhinitis, verwendbar sind.
Es zeigte sich auch, dass bestimmte der neuen Verbindungen eine nützliche antagonistische Wirksamkeit gegenüber Adenosin-A&sub1; besitzen.
Schließlich zeigen die vorliegenden Verbindungen auch eine gute Stoffwechselstabilität.
Folglich stellt die Erfindung eine Verbindung der Formel (IA):
oder, falls zweckmäßig, ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon bereit, in der R¹ und R² jeweils unabhängig eine Einheit der Formel (a) darstellen;
-CH&sub2;-A (a),
in der A einen unsubstituierten C&sub3;&submin;&sub8;-Cycloalkylrest mit einem einzigen Ring bedeutet. Im besonderen stellt A eine unsubstituierte Cyclopropyl-, Cyclobutyl-, Cyclopentyl- oder Cyclohexylgruppe dar.
Vorteilhafterweise bedeutet A eine Cyclopropylgruppe oder eine Cyclobutylgruppe.
Bevorzugt stellt A eine Cyclopropylgruppe dar.
Geeignete pharmazeutisch verträgliche Salze sind pharmazeutisch verträgliche Basensalze und pharmazeutisch verträgliche Säureadditionssalze.
Die Verbindungen der Formel (IA) bilden Säureadditionssalze, wobei geeignete Säureadditionssalze der Verbindungen der Formel (IA) die Säureadditionssalze sind, die pharmazeutisch verträgliche anorganische Salze, wie Sulfat, Nitrat, Phosphat, Borat, Hydrochlorid und Hydrobromid, und pharmazeutisch verträgliche organische Säureadditionssalze, wie Acetat, Tartrat, Maleat, Citrat, Succinat, Benzoat, Ascorbat, Methansulfat, α-Ketoglutarat, α-Glycerophosphat und Glucose-1-phosphat, umfassen. Das Säureadditionssalz ist bevorzugt ein Hydrochloridsalz.
Die pharmazeutisch verträglichen Salze der Verbindungen der Formel (IA) werden unter Verwendung herkömmlicher Verfahren hergestellt.
Der hier verwendete Begriff "cyclischer Kohlenwasserstoffrest" umfasst cyclische Kohlenwasserstoffe mit einem einzigen Ring, die bis zu 8 Kohlenstoffatome in dem Ring, geeigneterweise bis zu 6 Kohlenstoffatome, zum Beispiel 3, 4, 5 oder 6 Kohlenstoffatome, enthalten.
Der hier verwendete Ausdruck "wuchernde Hautkrankheiten" bedeutet benigne und maligne "wuchernde Hautkrankheiten", die durch beschleunigte Zellteilung in der Epidermis, Dermis oder Anhangsgebilden dazu gekennzeichnet sind, die mit einer unvollständigen Gewebedifferenzierung verbunden ist. Diese Krankheiten umfassen: Psoriasis, atopische Dermatitis, unspezifische Dermatitis, nicht-allergische Kontaktdermatitis, allergische Kontaktdermatitis, Basalzellenkarzinom und Plattenepithelkarzinom der Haut, lamelläre Ichthyosis, epidermolytische Hyperkeratose, durch Sonne induzierte prämaligne Keratose, nicht-maligne Keratose, Akne und seborrhoische Dermatitis bei Menschen und atopische Dermatitis und Räude bei Haustieren.
Die Verbindungen der Formel (IA) liegen bevorzugt in pharmazeutisch verträglicher Form vor. Pharmazeutisch verträgliche Form bedeutet inter alia einen pharmazeutisch annehmbaren Reinheitsgrad, ausgenommen pharmazeutische Standardzusätze, wie Verdünnungsmittel und Träger, und einschließlich keines Materials, das in Standarddosierungshöhen als toxisch angesehen wird. Ein pharmazeutisch annehmbarer Reinheitsgrad beträgt im allgemeinen mindestens 50%, bevorzugt 75%, besonders bevorzugt 90% und insbesondere bevorzugt 95%, ausgenommen pharmazeutische Standardzusätze.
In einer anderen Ausführungsform stellt die Erfindung die Verwendung einer Verbindung der Formel (IA) oder, falls zweckmäßig, eines pharmazeutisch verträglichen Salzes davon zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von zerebrovaskulären Erkrankungen und/oder mit zerebraler Senilität verbundenen Erkrankungen und/oder Prophylaxe von Störungen, die mit aus ischämischen Vorfällen resultierender neuronaler Degeneration verbunden sind, und/oder peripherer Verschlusskrankheit und/oder wuchernden Hautkrankheiten und/oder Erkrankungen der Atemwege und/oder zur Behandlung oder Prophylaxe von mit einer erhöhten Anzahl von Eosinophilen verbundenen Störungen und mit Atopie verbundenen allergischen Leiden bereit.
Die vorliegende Erfindung stellt auch ein Arzneimittel, umfassend eine Verbindung der Formel (IA) oder, falls zweckmäßig, ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon und einen pharmazeutisch verträglichen Träger dafür, bereit.
In einer weiteren Ausführungsform stellt die Erfindung eine Verbindung der Formel (IA) oder, falls zweckmäßig, ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon zur Verwendung als therapeutischen Wirkstoff bereit.
Die Verbindungen der Formel (IA) werden durch Umsetzen einer Verbindung der Formel (II):
in der R1a für R¹, wie mit Bezug auf Formel (IA) definiert, oder einen in R¹ umwandelbaren Rest steht, und R2a für R², wie mit Bezug auf Formel (IA) definiert, oder einen dazu umwandelbaren Rest steht, mit einem Reagenz, welches das C&sub8;-Wasserstoffatom der Verbindung der Formel (II) durch einen Rest R3b substituieren kann, wobei R3b für eine Aminogruppe oder einen dazu umwandelbaren Rest steht; und, falls erforderlich, das anschließende Durchführen mindestens eines der folgenden fakultativen Schritte hergestellt:
(i) Umwandeln eines Restes R1a in R¹ und/oder eines Restes R2a in R²;
(ii) wenn R3b keine Aminogruppe bedeutet, Umwandeln von R3b in eine Aminogruppe;
(iii) Umwandeln einer Verbindung der Formel (IA) in eine weitere Verbindung der Formel (IA);
(iv) Umwandeln einer Verbindung der Formel (IA) in ein pharmazeutisch verträgliches Salz.
Ein bevorzugter Rest R3b ist eine Nitrogruppe, die dann in eine Aminogruppe umgewandelt werden kann.
Zur Substitution des C&sub8;-Wasserstoffatoms der Verbindung der Formel (II) durch einen Rest R3b geeignete Reagenzien sind die zweckmäßigen, herkömmlichen Reagenzien.
Die Reaktionsbedingungen für die Substitution des C&sub8;-Wasserstoffatoms der Verbindung der Formel (II) hängt natürlich von dem speziellen gewählten Reagenz ab, und im allgemeinen sind die angewendeten Bedingungen diejenigen, die für das verwendete Reagenz üblich sind.
Ein besonders geeignetes Reagenz ist ein Nitrierungsmittel.
In einer geeigneten Form des vorstehend erwähnten Verfahrens wird die Verbindung der Formel (II) mit einem geeigneten Nitrierungsmittel umgesetzt, um eine Verbindung der Formel (IA) bereitzustellen, in der R3a eine Nitrogruppe darstellt, und dann die Nitrogruppe in ein Halogenatom oder eine Aminogruppe umgewandelt.
Eine Verbindung der Formel (II) kann durch die dehydratisierende Cyclisierung einer Verbindung der Formel (III):
in der R1a für R¹, wie mit Bezug auf Formel (IA) definiert, oder einen in R¹ umwandelbaren Rest steht, und R2a für R², wie mit Bezug auf Formel (IA) definiert, oder einen dazu umwandelbaren Rest steht, A¹ eine -NO- oder -NH-CHO-Gruppe bedeutet, und A² eine -NH-CH&sub3;- oder -NH&sub2;-Gruppe darstellt, mit der Maßgabe, dass, wenn A¹ eine -NO-Gruppe bedeutet, dann A² eine -NH-CH&sub3;-Gruppe darstellt, und wenn A¹ eine -NH-CHO-Gruppe bedeutet, dann A² eine NH&sub2;-Gruppe darstellt; und, falls erforderlich, das anschließende Umwandeln eines Restes R1a in R¹ und/oder R2a in R² hergestellt werden.
Die dehydratisierende Cyclisierung einer Verbindung der Formel (III) kann unter beliebigen geeigneten Bedingungen durchgeführt werden. Vorteilhafterweise sind die gewählten Bedingungen die, in denen das gebildete Wasser aus dem Reaktionsgemisch entfernt wird, und somit wird die Reaktion im allgemeinen bei einer erhöhten Temperatur im Bereich von 100ºC bis 200ºC, wie im Bereich von 180ºC bis 190ºC, durchgeführt.
In einer Ausführungsform des Verfahrens, insbesondere wenn A¹ eine -NO-Gruppe bedeutet, und A² eine -NH-CH&sub3;-Gruppe darstellt, wird die Reaktion in einem mit Wasser nicht- mischbaren Lösungsmittel, wie Toluol, bei der Rückflusstemperatur des Lösungsmittels durchgeführt, wobei das Wasser unter Verwendung eines Wasserabscheiders entfernt wird.
Geeignete Werte für R1a und R2a umfassen R¹ beziehungsweise R² oder Stickstoffschutzgruppen, wie Benzylgruppen.
Wenn R1a oder R2a nicht R¹ beziehungsweise R² bedeutet, können die vorstehend erwähnten Umwandlungen von R1a in R¹ und R2a in R² unter Verwendung des zweckmäßigen, herkömmlichen Verfahrens durchgeführt werden. Wenn zum Beispiel R1a (oder R2a) eine Stickstoffschutzgruppe, wie eine Benzylgruppe, darstellt, kann die Schutzgruppe unter Verwendung des zweckmäßigen, herkömmlichen Verfahrens, wie katalytischer Hydrierung, entfernt werden, und das resultierende Produkt mit einer Verbindung der Formel (IV) umgesetzt werden:
X-CH&sub2;-A (IV),
in der A wie mit Bezug auf Formel (IA) definiert ist, und X eine Abgangsgruppe, wie ein Halogenid, zum Beispiel ein Bromid oder Iodid, bedeutet.
Der Schutz einer beliebigen reaktiven Gruppe oder Atoms, wie des Stickstoffatoms des Xanthins, kann in einer beliebigen zweckmäßigen Stufe des vorstehend erwähnten Verfahrens durchgeführt werden. Geeignete Schutzgruppen umfassen die herkömmlicherweise in dem Fachgebiet für die spezielle zu schützende Gruppe oder Atom verwendeten, wobei zum Beispiel für die Stickstoffatome des Xanthins geeignete Schutzgruppen Benzylgruppen sind.
Schutzgruppen können unter Verwendung der zweckmäßigen, herkömmlichen Verfahren hergestellt und entfernt werden.
N-Benzylschutzgruppen können zum Beispiel durch Behandeln der zweckmäßigen Verbindung der Formel (II) mit Benzylchlorid in Gegenwart einer Base, wie Triethylamin, hergestellt werden. Die N-Benzylschutzgruppen können durch katalytische Hydrierung über einem geeigneten Katalysator, wie Palladium auf Aktivkohle, in einem geeigneten Lösungsmittel, wie Ethanol, geeigneterweise bei einer erhöhten Temperatur oder durch Behandlung mit wasserfreiem Aluminiumchlorid in trockenem Benzol bei Umgebungstemperatur entfernt werden.
Eine Verbindung der Formel (III), in der A¹ eine -NH-CHO-Gruppe bedeutet, und R² eine -NH&sub2;-Gruppe darstellt, kann geeigneterweise aus einem 6-Aminouracil der Formel (A) nach dem folgenden Reaktionsschema hergestellt werden:
in dem R1a und R2a wie mit Bezug auf Formel (II) definiert sind.
Geeigneterweise sind die in dem vorstehend erwähnten Reaktionsschema verwendeten Reaktionsbedingungen zweckmäßige, herkömmliche Bedingungen. In einer bevorzugten Ausführungsform des Verfahrens werden die Umwandlung des 6-Aminouracils (A) über (B) und (C) in die entsprechende Verbindung der Formel (III) und die Cyclisierung der Verbindung der Formel (III) zu der Verbindung der Formel (II) alle in situ, geeigneterweise unter Verwendung eines zu dem von H. Bredereck und A. Edenhofer, Chem. Berichte 88, 1306- 1312 (1955), analogen Verfahrens, durchgeführt.
Die 6-Aminouracile der Formel (A) können selbst durch das Verfahren von V. Papesch und E. F. Schroder, J. Org. Chem. 16, 1879-90 (1951), oder Yozo Ohtsuka, Bull. Chem. Soc. Jap., 1973, 46(2), 506-9, hergestellt werden.
Eine Verbindung der Formel (III), in der A¹ eine -NO-Gruppe bedeutet, und A² eine -NH-CH&sub3;-Gruppe darstellt, kann geeigneterweise aus einem 6-Chloruracil der Formel (D) nach dem folgenden Reaktionsschema hergestellt werden:
in dem R1a und R2a wie mit Bezug auf Formel (II) definiert sind.
Geeigneterweise sind die in dem letzten vorstehend erwähnten Schema angewendeten Reaktionsbedingungen die zweckmäßigen, herkömmlichen Bedingungen, zum Beispiel die in dem Verfahren von H. Goldner, G. Dietz und E. Carstens, Liebigs Annalen der Chemie, 691, 142-158 (1965), angewendeten. Das 6-Chloruracil der Formel (D) kann auch nach dem Verfahren von Dietz et al. hergestellt werden.
Eine Nitrogruppe kann durch herkömmliche Reduktionsverfahren, zum Beispiel unter Verwendung von Zinnpulver und konzentrierter Salzsäure bei Umgebungstemperatur oder unter Verwendung von Natriumdithionit in wässrigem Methanol bei Umgebungstemperatur, geeigneterweise in eine Aminogruppe umgewandelt werden.
Zur Verwendung in den vorstehend erwähnten Umwandlungen geeignete Alkylierungsverfahren umfassen die herkömmlicherweise in dem Fachgebiet verwendeten, zum Beispiel Verfahren unter Verwendung von Halogeniden, bevorzugt Iodiden, in Gegenwart einer Base, wie Kaliumcarbonat, in einem beliebigen geeigneten Lösungsmittel, zum Beispiel Acetonitril oder Toluol.
Zur Verwendung in den vorstehend erwähnten Umwandlungen geeignete Acylierungsverfahren umfassen die herkömmlicherweise in dem Fachgebiet verwendeten, und somit kann unter Verwendung eines zweckmäßigen Acylierungsmittels eine Aminogruppe in einen Alkylcarbonylaminorest umgewandelt werden, zum Beispiel kann unter Verwendung von Essigsäureanhydrid bei erhöhter Temperatur eine Aminogruppe in eine Acetylaminogruppe umgewandelt werden.
Die Verbindungen der Formel (IA) können nach den vorstehend erwähnten Verfahren oder, falls zweckmäßig, durch die Verfahren der vorstehend erwähnten Veröffentlichungen hergestellt werden.
Der Wirkstoff kann auf einem beliebigen geeigneten Weg zur Verabreichung formuliert werden, wobei der bevorzugte Weg von der Erkrankung abhängt, für die die Behandlung erforderlich ist, und er liegt bevorzugt in einer Einheitsdosierungsform oder in einer Form vor, die sich ein menschlicher Patient in einer Einzeldosierung selbst verabreichen kann. Vorteilhafterweise ist die Zusammensetzung zur oralen, rektalen, topischen, parenteralen, intravenösen oder intramuskulären Verabreichung oder durch die Atemwege geeignet. Die Zubereitungen können für eine langsame Freisetzung des Wirkstoffes bestimmt sein.
Die Zusammensetzungen der Erfindung können in Form von Tabletten, Kapseln, Briefchen, Phiolen, Pulvern, Granulaten, Pastillen, Suppositorien, Trockensäften oder flüssigen Zubereitungen, wie oralen oder sterilen, parenteralen Lösungen oder Suspensionen, vorliegen. Topische Formulierungen sind, wo es zweckmäßig ist, ebenfalls beabsichtigt.
Um eine konsistente Verabreichung zu erzielen, liegt eine Zusammensetzung der Erfindung bevorzugt in Form einer Einheitsdosis vor.
Darreichungsformen der Einheitsdosis zur oralen Verabreichung können Tabletten und Kapseln sein und können herkömmliche Excipientien, wie Bindemittel, zum Beispiel Sirup, Gummi arabicum, Gelatine, Sorbit, Tragant oder Polyvinylpyrrolidon; Füllstoffe, zum Beispiel Lactose, Zucker, Maisstärke, Calciumphosphat, Sorbit oder Glycin; Tablettiergleitmittel, zum Beispiel Magnesiumstearat; Sprengmittel, zum Beispiel Stärke, Polyvinylpyrrolidon, Natriumstärkeglycolat oder mikrokristalline Cellulose; oder pharmazeutisch verträgliche Benetzungsmittel; wie Natriumlaurylsulfat, enthalten.
Die festen oralen Zusammensetzungen können durch herkömmliche Verfahren des Die festen oralen Zusammensetzungen können durch herkömmliche Verfahren des Mischens, Füllens, Tablettierens oder dergleichen hergestellt werden. Wiederholte Mischvorgänge können angewendet werden, um den Wirkstoff überall in den Zusammensetzungen zu verteilen, die große Mengen an Füllstoffen verwenden.
Diese Vorgänge sind natürlich in dem Fachgebiet üblich. Die Tabletten können nach Verfahren, die in der pharmazeutischen Standardpraxis allgemein bekannt sind, im besonderen mit einem magensaftresistenten Überzug, dragiert werden.
Orale flüssige Zubereitungen können in Form von zum Beispiel Emulsionen, Sirupen oder Elixieren vorliegen oder können als Trockenprodukt zur Rekonstitution mit Wasser oder einem anderen geeigneten Träger vor der Verwendung vorgelegt werden. Diese flüssigen Zubereitungen können herkömmliche Zusätze, wie Suspendiermittel, zum Beispiel Sorbit, Sirup, Methylcellulose, Gelatine, Hydroxyethylcellulose, Carboxymethylcellulose, Aluminiumstearatgel oder hydrierte Speisefette; Emulgatoren, zum Beispiel Lecithin, Monoölsäuresorbitanester oder Gummi arabicum; nicht-wässrige Träger (die Speiseöle umfassen können), zum Beispiel Mandelöl, fraktioniertes Kokosnussöl, ölige Ester, wie Ester des Glycerins, Propylenglycols oder Ethylalkohols; Konservierungsmittel, zum Beispiel p-Hydroxybenzoesäureinethyl- oder -propylester oder Sorbinsäure; und, falls erwünscht, herkömmliche Geschmacksstoffe oder farbgebende Stoffe enthalten.
Die Zusammensetzungen können auch geeigneterweise zur Verabreichung an die Atemwege als Schnupfmittel oder Aerosol oder Lösung für einer Zerstäuber oder als mikrofeines Pulver zur Insufflation allein oder in Kombination mit einem inerten Träger, wie Lactose, vorgelegt werden. In diesem Fall weisen die Teilchen des Wirkstoffes geeigneterweise einen Durchmesser von weniger als 50 um, wie 0,1 bis 50 um, bevorzugt weniger als 10 um, zum Beispiel 1 bis 10 um, 1 bis 5 um oder 2 bis 5 um, auf. Wenn es zweckmäßig ist, können kleine Mengen anderer Antiasthmatika und Bronchodilatatoren, zum Beispiel sympathikomimetische Amine, wie Isoprenalin, Isoetharin, Salbutamol, Phenylephrin und Ephedrin; Xanthinderivate, wie Theophyllin und Aminophyllin; und Corticosteroide, wie Prednisolon; und adrenale Stimulanzien, enthalten sein.
Für die parenterale Verabreichung werden flüssige Einheitsdosierungsformen unter Verwendung der Verbindung und eines sterilen Trägers hergestellt, und sie kann, abhängig von der verwendeten Konzentration, in dem Träger entweder suspendiert oder gelöst sein. Bei der Herstellung von Lösungen kann die Verbindung in Wasser zur Injektion gelöst und mit einem Filter sterilisiert werden, bevor sie in eine geeignete Phiole oder Ampulle gefüllt und diese verschlossen wird.
Vorteilhafterweise können Adjuvantien, wie ein Lokalanästhetikum, ein Konservierungsmittel und Puffer in dem Träger gelöst werden. Zur Erhöhung der Stabilität kann die Zusammensetzung nach dem Einfüllen in die Phiole eingefroren und das Wasser unter Vakuum entfernt werden. Parenterale Suspensionen werden im wesentlichen auf dieselbe Art und Weise hergestellt, außer dass die Verbindung in dem Träger suspendiert anstatt gelöst wird, und die Sterilisation nicht durch Filtration erfolgen kann. Die Verbindung kann sterilisiert werden, indem sie vor dem Suspendieren in dem sterilen Träger Ethylenoxid ausgesetzt wird. Vorteilhafterweise ist in der Zusammensetzung ein grenzflächenaktives Mittel oder Benetzungsmittel enthalten, um eine gleichmäßige Verteilung der Verbindung zu erleichtern.
Die Zusammensetzungen können, abhängig von dem Verabreichungsverfahren, 0,1 bis 99 Gew.-%, bevorzugt 10 bis 60 Gew.-%, des Wirkstoffes enthalten.
Die Verbindungen der Formel (IA), oder, falls zweckmäßig, ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon können auch als topische Formulierung in Kombination mit herkömmlichen topischen Excipientien verabreicht werden.
Topische Formulierungen können zum Beispiel als Salben, Cremes oder Lotionen, imprägnierte Verbände, Gele, Gelstifte, Spray und Aerosole vorgelegt werden und können zweckmäßige, herkömmliche Zusätze, wie Konservierungsmittel, Lösungsmittel, um das Eindringen des Arzneistoffes zu unterstützen, und Emollienzien in Salben und Cremes, enthalten. Die Formulierungen können auch kompatible, herkömmliche Träger, wie Creme- oder Salbengrundstoffe und Ethanol oder Oleylalkohol für Lotionen, enthalten.
Geeignete Creme-, Lotion-, Gel-, Stift-, Salben-, Spray- oder Aerosolformulierungen, die für Verbindungen der Formel (JA) oder, falls zweckmäßig, ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon verwendet werden können, sind herkömmliche Formulierungen, die in dem Fachgebiet allgemein bekannt sind, zum Beispiel wie in den Standardtextbüchern von Pharmazeutika und Kosmetika, wie Harry's Cosmeticology, veröffentlicht von Leonard Hill Books; Remington's Pharmaceutical Sciences, und die britische und U.S.-Pharmakopoe, beschrieben.
Geeigneterweise umfasst die Verbindung der Formel (IA), oder, falls zweckmäßig, ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon 0,5 bis 20 Gew.-% der Formulierung, vorteilhafterweise 1 bis 10%, zum Beispiel 2 bis 5%.
Die Dosis der Verbindung, die in der Behandlung der Erfindung verwendet wird, variiert auf die übliche Art mit der Schwere der Erkrankungen, dem Gewicht des Patienten und der relativen Wirksamkeit der Verbindung. Als allgemeine Richtlinie können jedoch geeignete Einheitsdosen 0,1 bis 1000 mg, wie 0,5 bis 200, 0,5 bis 100 oder 0,5 bis 10 mg, zum Beispiel 0,5, 1,2, 3,4 oder 5 mg, betragen; und diese Einheitsdosen können mehrmals pro Tag, zum Beispiel 2-, 3-, 4-, 5- oder 6-mal pro Tag, jedoch bevorzugt 1- oder 2-mal pro Tag, verabreicht werden, so dass die tägliche Gesamtdosis für einen Erwachsenen mit 70 kg in dem Bereich von etwa 0,1 bis 1000 mg, das heißt in dem Bereich von etwa 0,001 bis 20 mg/kg/Tag, liegt, wie 0,007 bis 3, 0,007 bis 1,4, 0,007 bis 0,14 oder 0,01 bis 0,5 mg/kg/Tag, zum Beispiel 0,01, 0,02, 0,04, 0,05, 0,06, 0,08, 0,1 oder 0,2 mg/kg/Tag; und diese Therapie kann sich über mehrere Wochen oder Monate erstrecken.
Der hier verwendete Begriff "pharmazeutisch verträglich" umfasst Materialien, die für die Verwendung sowohl bei Menschen als auch Tieren geeignet sind.
In den vorstehend erwähnten Dosierungsbereichen wurden für die Verbindungen der Formel (IA) keine toxikologischen Wirkungen nachgewiesen.
Die folgenden pharmakologischen Daten und Beispiele veranschaulichen die Erfindung. Die folgenden Herstellungen veranschaulichen die Herstellung von Zwischenverbindungen der neuen Verbindungen der Formel (IA).

Demonstrationsbeispiel 1

1,3-Di-n-butyl-8-nitroxanthin

23 g (0,28 mol) 1,3-Di-n-butylxanthin wurden in 120 ml Essigsäure gelöst und dann mit 49 g konzentrierter Salpetersäure bei 87ºC behandelt. Nach 1 Stunde wurde das Gemisch auf 5ºC abgekühlt, und der entstandene gelbe Niederschlag wurde abfiltriert und mit 50 ml Wasser gewaschen. Die gelben Kristalle wurden in Dichlormethan gelöst und zweimal mit Wasser gewaschen. Die abgetrennte organische Schicht wurde dann getrocknet (wasserfreies Natriumsulfat) und konzentriert, wobei sich ein kristallines Produkt ergab, Ausbeute 73 g (86%), Smp. 168ºC.

¹H-NMR (CDCl&sub3;)/DMSO:

ppm: 0,93 (t, J = 6,3 Hz, 6H), 1,1-2,0 (m, 8H), 3,8-4,25 (m, 4H).

Demonstrationsbeispiel 2

1,3-Dicyclopropylmethyl-8-nitroxanthin

20 g (0,076 mol) 1,3-Dicyclopropylmethylxanthin wurden in 33 ml Essigsäure gelöst und dann mit 13,2 g konzentrierter Salpetersäure bei 87ºC behandelt. Nach 1 Stunde wurde das Gemisch auf 5ºC abgekühlt, und der entstandene gelbe Niederschlag wurde abfiltriert. Die gelben Kristalle wurden in Dichlormethan gelöst und mit Wasser gewaschen. Die abgetrennte organische Schicht wurde dann über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum konzentriert. Das Produkt kristallisierte aus dem Konzentrat, wobei sich ein gelbes, kristallines Produkt ergab, Ausbeute 12,2 g (56,5%), Smp. 207ºC (mit Zersetzung).

¹H-NMR (CDCl&sub3;):

ppm: 0,35-0,7 (m, 8H), 1,1-1,7 (m, 2H), 3,95-4,2 (m, 4H), 9,0-11,0 (br, Austausch mit D&sub2;O, 1H).
Die folgenden Verbindungen wurden unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem in Demonstrationsbeispiel 1 beschriebenen analog ist. Die zweckmäßigen 1,3-Dicycloalkylmethylxanthinsubstrate wurden nach den hier und in GB-A-8826595.4 beschriebenen Verfahren hergestellt. Tabelle 1

Demonstrationsbeispiel 7

1,3-Di-n-butyl-8-aminoxanthinhydrochlorid

8,5 g 1,3-Di-n-butyl-8-nitroxanthin aus Beispiel 1 wurden in 85 ml konzentrierter Salzsäure suspendiert und dann bei Raumtemperatur in kleinen Portionen mit 14,5 g Zinnpulver behandelt. Nach 10-minütigem Rühren verschwand die gelbe Farbe der Suspension. Danach wurde der Niederschlag abfiltriert und zweimal aus Ethanol umkristallisiert. Das Produkt bildete farblose Kristalle, Ausbeute 5,5 g (63%), Smp. > 250ºC.

¹H-NMR (DMSO):

ppm: 0,90 (t, J = 6,1 Hz, 6H), 1,05-1,9 (m, 8H), 3,65-4,15 (m, 4H), 6,9 (br, Austausch mit D&sub2;O, 4H).

Beispiel 1

1,3-Dicyclopropylmethyl-8-aminoxanthin

4 g (0,014 mol) 1,3-Dicyclopropylmethyl-8-nitroxanthin, das in 50 ml konzentrierter Salzsäure suspendiert war, wurden bei Raumtemperatur in kleinen Portionen mit 8 g Zinn behandelt. Das Gemisch wurde dann zwei Stunden bei Raumtemperatur gerührt.
Der entstandene Niederschlag wurde abfiltriert und kristallisierte aus Ethanol, wobei sich weiße Kristalle des Titelprodukts ergaben, Ausbeute 0,9 g (23%), Smp. 281ºC.
In einem alternativen Verfahren wurde Natriumdithionit als Reduktionsmittel (in einem Methanol-Wasser-Gemisch) verwendet. Die Ausbeute betrug 36% (Vergleich mit Demonstrationsbeispiel 8).

¹H-NMR (CDCl&sub3;):

ppm: 0,3-0,6 (m, 8H), 1,0-1,6 (m, 2H), 3,7-4,0 (m, 4H), 5,75 (br, 2H), 10,84 (br, Austausch mit D&sub2;O, 1H):

Beispiele 2 bis 4

Die folgenden Verbindungen wurden unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem vorstehend für die Herstellung einer Verbindung von Demonstrationsbeispiel 1 beschriebenen analog ist. Tabelle 2

Herstellung 1

1,3-Dicyclopropylmethylxanthin

1,3-Dicyclopropylmethylxanthin wurde unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem in Chem. Berichte 88, 1306-1312, 1955, beschriebenen analog ist: 20,2 g (0,0855 mol) 1,3-Dicyclopropylmethyl-6-aminouracil wurden in 100 ml Formamid gelöst, dann wurden 5,9 g Natriumnitrit zugegeben, und bei 60ºC wurden 13,4 ml Ameisensäure unter Rühren langsam zugegeben. Nach der Änderung der Farbe von gelb in violett wurde das Gemisch auf 1000C erhitzt, und 3,1 g Natriumdithionit (Na&sub2;S&sub2;O&sub4;) wurden in kleinen Portionen zugegeben.
Dann wurde das Gemisch auf 180-190ºC erhitzt und 30 Minuten bei dieser Temperatur gehalten.
Nach dem Abkühlen wurde der Niederschlag abgesaugt, mit 50 ml Wasser gewaschen und aus Toluol umkristallisiert. Ausbeute: 22,5 g, Smp. 203ºC.

¹H-NMR (CDCl&sub3;):

ppm: 0,44-0,54 (8H, q), 1,18-1,57 (2H, m), 3,98-4,12 (4H, 2d), 7,81 (1H, s), 12,8-13,2 (1H, s, Austausch mit D&sub2;O).

Herstellung 2

1,3-Dicyclobutylmethylxanthin

1,3-Dicyclobutylmethylxanthin wurde aus 1,3-Dicyclobutylmethyl-6-aminouracil unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem in Herstellung 1 beschriebenen analog ist. Die Titelverbindung wurde als kristalliner Feststoff isoliert, Smp. 191ºC.

¹H-NMR (CDCl&sub3;):

ppm: 1,6-2,3 (12H, m), 2,4-3,2 (2H, m), 4,16 (2H, d, J = 7,0 Hz), 4,21 (2H, d, J = 7,3 Hz), 7,76 (1H, d, J = 1,3 Hz, Austausch mit D&sub2;O, wobei sich s ergibt), 12,7 (1H, br.s, Austausch mit D&sub2;O).

Herstellung 3

1,3-Dicyclopentylmethylxanthin

1,3-Dicyclopentylmethylxanthin wurde aus 1,3-Dicyclopentylmethyl-6-aminouracil unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem in Herstellung 1 beschriebenen analog ist. Die Titelverbindung wurde als kristalliner Feststoff isoliert, Smp. 208ºC.

¹H-NMR (CDCl&sub3;):

ppm: 1,0-2,0 (16H, m), 2,2-2,9 (2H, m), 4,0-4,3 (4H, m), 7,78 (1H, d, J = 1,2 Hz, Austausch mit D&sub2;O, wobei sich s ergibt), 12,9 (1H, br.s, Austausch mit D&sub2;O).

Herstellung 4

1,3-Dicyclohexylmethylxanthin

1,3-Dicyclohexylmethylxanthin wurde aus 1,3-Dicyclohexylmethyl-6-aminouracil unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem in Herstellung 1 beschriebenen analog ist. Die Titelverbindung wurde als kristalliner Feststoff isoliert, Smp. 237ºC.

¹H-NMR (CDCl&sub3;):

ppm: 0,8-2,2 (22H, m), 3,85-4,15 (4H, m(dd)), 7,73 (1 H, s), 13,1 (1H, br.s, Austausch mit D&sub2;O).

Herstellung 5

1,3-Dicyclopropylmethyl-6-aminouracil

1,3-Dicyclopropylmethyl-6-aminouracil wurde unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem in J. Org. Chem. 16, 1879-1890 (1951), beschriebenen analog ist:
22,6 g (0,13 8 mol) N,N'-Dicyclopropylmethylharnstoff (aus Herstellung 1) wurden 2 Stunden bei 700C mit 44 ml (0,43 mol) Essigsäureanhydrid und 14 g (0,165 mol) Cyanoessigsäure behandelt.
Nach dem Abkühlen und der Zugabe von 15 ml Wasser wurden 40 ml einer 50 %igen NaOH/Wasser-Lösung bei 45ºC unter Rühren langsam auf das Gemisch getropft.
Nach 1-stündigem Rühren bei Raumtemperatur wurde die stark alkalische Lösung abgetrennt, und der ölige Rückstand wurde sorgfältig mit 60 ml Wasser gewaschen.
Der halbfeste Rückstand wurde in 220 ml Methanol gelöst und unter Rühren in 1 l Wasser getropft. Dadurch kristallisierte das Produkt. Ausbeute: 25,5 g, ungefähr 78,5%, Smp. 85-95ºC (wachsartig).

Herstellung 6

1,3-Dicyclopentylmethyl-6-aminouracil

1,3-Dicyclopentylmethyl-6-aminouracil wurde aus N,N'-Dicyclopentylmethylharnstoff unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem in Herstellung 5 beschriebenen analog ist. Die Titelverbindung wurde als kristalliner Feststoff isoliert, Smp. 108ºC.

¹H-NMR (CDCl&sub3;):

ppm: 1,0-2,6 (18H, m), 3,86 (4H, d, J = 7,4 Hz), 4,98 (3H, m, 2H, Austausch mit D&sub2;O).

Herstellung 7

1,3-Dicyclohexylmethyl-6-aminouracil

1,3-Dicyclohexylmethyl-6-aminouracil wurde aus N,N'-Dicyclohexylmethylharnstoff unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem in Herstellung 5 beschriebenen analog ist. Die Titelverbindung wurde als kristalliner Feststoff isoliert, Smp. 185ºC.

Herstellung 8

N,N'-Dicyclopropylmethylharnstoff

N,N'-Dicyclopropylmethylharnstoff, Smp. 124ºC, wurde unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem in J. Org. Chem. 16, 1879-1890 (1951), beschriebenen analog ist:
68,2 g (0,634 mol) Cyclopropylmethylaminhydrochlorid in 800 ml Wässer wurden mit 25 g Natriumhydroxid, das in 100 ml Wasser gelöst war, behandelt, und das Gemisch wurde auf -15ºC abgekühlt.
33 g Phosgen wurden dann unter Rühren langsam durch ein Kapillarröhrchen eingetragen. Danach wurde das Gemisch 1 Stunde gerührt und, falls notwendig, wurde das Produkt nach dem Ansäuern mit 0,1 N HCl mit Dichlormethan extrahiert.
Nach dem Waschen mit Wasser und Trocknen über wasserfreiem Natriumsulfat wurde das Produkt nach dem Abdampfen des Lösungsmittels erhalten, Ausbeute: 21 g, ungefähr 40%.
Aus der wässrigen Phase können 20 g des nicht-umgesetzten Addukts (Cyclopropylmethylaminhydrochlorid) erhalten werden.

¹H-NMR (CDCl&sub3;):

ppm: 0,06-0,59 (8H, m), 0,72-1,06 (2H, m), 3,01-3,09 (4H, d), 4,66 (1H, br.s, Austausch mit D&sub2;O).

Herstellung 9

N,N'-Dicyclobutylmethylharnstoff

N,N'-Dicyclobutylmethylharnstoff wurde aus Cyclobutylmethylamin unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem in Herstellung 8 beschriebenen analog ist.
Die Titelverbindung wurde als kristalliner Feststoff isoliert, Smp. 155ºC.

¹H-NMR (CDCl&sub3;):

ppm: 1,4-2,8 (14H, m), 3,0-3, 3 (4H, m), 4,59 (2H, br.s, Austausch mit D&sub2;O).

Herstellung 10

N,N'-Dicyclopentylmethylharnstoff

N,N'-Dicyclopentylmethylharnstoff wurde aus Cyclopentylmethylamin unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem in Herstellung 8 beschriebenen analog ist. Die Titelverbindung wurde als kristalliner Feststoff isoliert, Smp. 150ºC.

¹H-NMR (CDCl&sub3;):

ppm: 1,0-2,2 (18H, m), 2,9-3,2 (4H, m), 4,59 (2H, br.s, Austausch mit D&sub2;O).

Herstellung 11

N,N'-Dicyclohexylmethylharnstoff

N,N'-Dicyclohexylmethylharnstoff wurde aus Cyclohexylmethylamin unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem in Herstellung 8 beschriebenen analog ist. Die Titelverbindung wurde als kristalliner Feststoff isoliert, Smp. 159ºC.

PHARMAKOLOGISCHE DATEN

a) Hemmung der Phosphodiesterase von cyclischem AMP

Verfahren

Das verwendete Verfahren war das von Arch, J. R. s. und Newsholme, E. A. in Biochem. J. 158, 603 (1976) beschriebene:
Erythrozyten wurden durch wiederholte Zentrifugation unter Entfernung der Leukozytenmanschette und Waschen mit einem isotonen Puffer (Zusammensetzung in mM: NaCl 13,7, KCl 4, CaCl&sub2;·2H&sub2;O 1,8, Na&sub2;HPO&sub4;·12H&sub2;O 0,8, NaH&sub2;PO&sub4; 0,2, MgSO&sub4;·7H&sub2;O 0,7, Hepes 3,4; pH 7,4) aus mit 0,1 ml 16 mM Na-Citrat/ml Blut antikoaguliertem Blut erhalten.
Die Phosphodiesterase wurde durch Mischen der Erythrozyten mit 4 Volumina 7 mM Phosphatpuffer, pH 7,4, gefolgt von Beschallung (3 · 10 sec; 100 W) und anschließend 30-minütigem Zentrifugieren mit 4200 · g extrahiert.
Alle Überstände wurden mit dem Extraktionsmedium verdünnt und innerhalb von 6 Stunden nach der Herstellung unter Verwendung des radiochemischen Verfahrens, das in der vorstehend erwähnten Druckschrift beschrieben wurde, auf die Phosphodiesteraseaktivität untersucht.

Ergebnisse

Beispiel Nr. Ki[uM] der c-AMP-Phosphodiesterase (Erythrozyten)

1 1,6
2 0,53
3 0,57

b) Induktion einer Eosinophilie im Blut und die Arzneistoffwirkungen

Tiere

Männliche Charles-River-Sprague-Dawley-Ratten mit einem Gewicht zwischen 250 und 300 g wurden verwendet.
Das verwendete Verfahren war eine Modifikation des von Laycock et al. (Int. Arch. Appl. Immunol. (1986) 81, 363) beschriebenen.
Sephadex G200 mit einer Teilchengröße von 40 bis 120 um wurde mit 0,5 mg/ml in isotoner Salzlösung suspendiert und 48 h bei 4ºC gelagert. 1 ml der Suspension wurde den Ratten am 0., 2. und 5. Tag intravenös verabreicht. Eine Kontrollgruppe erhielt Salzlösung. Die Testverbindung wurde vor dem Sephadex bei jeder Gelegenheit mit einer Kontaktzeit verabreicht, von der erwartet wurde, dass sie eine maximale Wirksamkeit zum Zeitpunkt der Sephadexverabreichung ergibt. Am 7. Tag wurde zur Bestimmung der Gesamtzahl und der differentiellen Zahl an Leukozyten aus der Schwanzvene der Ratten Blut entnommen.
Eine Kontrollgruppe aus mindestens 6 Tieren war zu jedem Zeitpunkt, an dem eine Verbindung beurteilt wurde, eingeschlossen. Die Kontrollgruppe erhielt Sephadex und den Träger ohne Testverbindung. Die Ergebnisse in den mit Arzneistoff behandelten Tieren wurden mit der Kontrollgruppe verglichen. In einer anderen Ausführungsform wurden dann, wenn sich der Mittelwert für die Kontrollgruppe aus einem beliebigen Experiment nicht von dem Mittelwert der Summe aller Kontrollgruppen statistisch unterschied, die Ergebnisse der behandelten Tiere aus diesem Experiment mit dem Mittelwert der Summe aller Kontrollgruppen verglichen.

Gesamtzahl und differentielle Zahl an Leukozyten

Blutproben mit 20 ul, die aus der Schwanzvene der Ratten entnommen wurden, wurden zu 10 ml Isoton II gegeben, und innerhalb von 30 min wurden 3 Tropfen Zaponin zugegeben, um die Erythrozyten zu lysieren. Fünf Minuten später wurde die Gesamtzahl der Zellen unter Verwendung eines Zählers Modell DN von Coulter bestimmt. Die differentiellen Zahlen der Leukozyten wurden durch Fixieren und Anfärben eines Blutausstriches auf einem Mikroskopobjektträger mit Färbemitteln nach May-Grunwald und Giemsa bestimmt. Ein Minimum von 400 Zellen wurde auf jedem Objektträger gezählt.

Statistik

Wahrscheinlichkeitswerte wurden unter Verwendung des Student-t-Tests berechnet.

Ergebnisse

Die Wirkung der Testverbindung auf eine durch Sephadex induzierte Eosinophilie in Ratten ist in Tabelle 3 angegeben. Die Testverbindung wurde 30 Minuten vor jeder Injektion von Sephadex oral verabreicht. Die Ergebnisse zeigen, dass die Testverbindung in einer dosisabhängigen Art und Weise die induzierte Eosinophilie hemmt. Tabelle 3
Anmerkungen:
** p < 0,01
*** p < 0,001

c) Untersuchungen der Ligandenbindung am Adenosinrezeptor

Verfahren

Die Untersuchung der Bindung von [³H]-CHA an A&sub1; wurde, wie von Bruns et al. in Mol. Pharm. 29, 331-346 (1986), beschrieben, durchgeführt.
Versuchstiere: Wistar-Ratten, ca. 250 g.
Die Gehirne wurden entfernt, und 1 g der relevanten Gewebe (Gesamthirn minus Kleinhirn für das [³H]-CHA) wurde in 50 mM Tris-HCl (pH 7,4), das mit 10 uM PMSF (Phenylmethansulfonylfluorid) ergänzt war, 30 Sekunden mit einem Homogenisator Potter 5 mit 10 Takten und 1500 UpM homogenisiert. Das Homogenisat wurde verdünnt und 18 Minuten bei 42.000 · g zentrifugiert. Das Pellet wurde mit dem Homogenisator Potter S erneut in Tris- HCl-Puffer suspendiert, und der Zentrifugationsschritt wurde wiederholt. Das Pellet wurde dann erneut in Tris-HCl-Puffer, der 1 mM EDTA enthielt, suspendiert und in Kunststoffphiolen in flüssigem Stickstoff gelagert. Die Membranen wurden innerhalb von einer Woche verwendet.
Alle Inkubationen wurden in Polycarbonatröhrchen mit 12 · 75 mm in einem Schüttelwasserbad in dreifacher Ausfertigung durchgeführt. Die Röhrchen enthielten 1 ml 50 mM Tris-HCl (pH 7,4) und 2,5 oder 0,1 Einheiten·ml&supmin;¹ Adenosindeaminase. Die aus 2 mg Gewebe in 400 ul Puffer erhaltenen Membranen wurden in der [³H]-CHA-Untersuchung verwendet. Die Konzentrationen des radioaktiv markierten Liganden betrugen 2,5 nM [³H]-CHA. Die nicht-spezifische Bindung wurde durch die Zugabe von 50 uM PIA bestimmt.
Die Inkubationen für die [³H]-CHA-Untersuchung betrugen 90 Minuten bei 37ºC. Die Inkubationen wurden durch die Zugabe von 3,8 ml eiskaltem Puffer (50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl&sub2;; pH 7,4) beendet, gefolgt von schneller Filtration durch GF/B-Filter mit 2,4 cm unter reduziertem Druck und Verwendung eines Probenverteilers 1225 von Millipore. Die Filter wurden mit 3 Portionen à 3,8 ml Puffer gewaschen. Die feuchten Filter wurden in Szintillationsphiolen gegeben, und 5 ml Aqualuma wurden zugegeben. Die Phiolen wurden über Nacht belassen, geschüttelt, und die Radioaktivität wurde in einem Flüssigszintillationszähler gezählt. Alle Untersuchungen wurden mindestens dreimal wiederholt.

Ergebnisse

Beispiel Nr. Hemmung von Adenosin-A&sub1; Ki[uM]

1 5
2 7,2
3 4,6

Claims

1. Verbindung der Formel (IA):

oder, falls zweckmäßig, ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon, dadurch gekennzeichnet, daß:

R¹ und R² jeweils unabhängig eine Einheit der Formel (a) darstellen:

-CH&sub2;-A (a)

in der A einen unsubstituierten C&sub3;&submin;&sub8;-Cycloalkylrest mit einem einzigen Ring bedeutet.

2. Verbindung nach Anspruch 1, wobei A eine unsubstituierte Cyclopropyl-, Cyclobutyl-, Cyclopentyl- oder Cyclohexylgruppe ist.

3. Verbindung nach Anspruch 1 oder Anspruch 2, wobei A eine Cyclopropyl- oder eine Cyclobutylgruppe bedeutet.

4. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, wobei A eine Cyclopropylgruppe bedeutet.

5. Verbindung nach Anspruch 1, ausgewählt aus:

1,3-Dicyclopropylmethyl-8-aminoxanthin;

1,3-Dicyclobutylmethyl-8-aminoxanthin;

1,3-Dicyclopentylmethyl-8-aminoxanthin; und

1,3-Dicyclohexylmethyl-8-aminoxanthin; oder, falls zweckmäßig, einem pharmazeutisch verträglichen Salz davon.

6. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel (IA) nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Verfahren das Umsetzen einer Verbindung der Formel (II):

in der R1a für R¹ wie mit Bezug auf Formel (IA) definiert, oder einen in R¹ umwandelbaren Rest steht, und R2a für R², wie mit Bezug auf Formel (IA) definiert, oder einen dazu umwandelbaren Rest steht, mit einem Nitrierungsmittel, wodurch das C&sub8;-Wasserstoffatom der Verbindung der Formel (II) durch eine Nitrogruppe substituiert wird und die Nitrogruppe anschließend in ein Amin umgewandelt wird; und, falls erforderlich, das anschließende Durchführen mindestens eines der folgenden fakultativen Schritte umfaßt:

(i) Umwandeln eines Rests R1a in R¹ und/oder eines Rests R2a in R²;

(ii) Überführen einer Verbindung der Formel (IA) in ein pharmazeutisch verträgliches Salz.

7. Arzneimittel umfassend eine Verbindung der Formel (IA) nach Anspruch 1 oder, falls zweckmäßig, ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon und einen pharmazeutisch verträglichen Träger dafür.

8. Verbindung der Formel (IA) nach Anspruch 1 oder, falls zweckmäßig, ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon zur Verwendung als therapeutischen Wirkstoff.

9. Verwendung einer Verbindung der Formel (IA) nach Anspruch 1 zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von zerebrovaskulären Erkrankungen und/oder mit zerebraler Senilität verbundenen Erkrankungen und/oder Prophylaxe von Störungen, die mit aus ischämischen Vorfällen resultierender neuronaler Degeneration verbunden sind, und/oder peripherer Verschlußkrankheit und/oder wuchernden Hautkrankheiten und/oder Erkrankungen der Atemwege und/oder zur Behandlung oder Prophylaxe von mit einer erhöhten Anzahl von Eosinophilen verbundenen Störungen und mit Atopie verbundenen allergischen Leiden.

10. Verbindung nach Anspruch 1, bei welcher es sich um 1,3-Dicyclopropylmethyl- 8-aminoxanthin handelt; oder, falls zweckmäßig, ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.

11. Arzneimittel umfassend eine Verbindung nach Ansprüch 10.