DE60108528T2

DE60108528T2 - Verfahren zur herstellung von distamycinderivaten

Info

Publication number: DE60108528T2
Application number: DE60108528T
Authority: DE
Inventors: Francesco Caldarelli; Lucio Ceriani; Ilaria Candiani
Original assignee: Pharmacia Italia SpA
Current assignee: Nerviano Medical Sciences SRL
Priority date: 2000-11-28
Filing date: 2001-11-07
Publication date: 2006-03-23
Anticipated expiration: 2021-11-08
Also published as: MXPA03004679A; AU2069602A; NO20032297L; PL205821B1; SK286610B6; NZ525230A; PE20020551A1; EP1347958A1; AU2002220696B2; PL362179A1; EE200300204A; GB0029004D0; NO20032297D0; DE60108528D1; CN1190418C; US6906199B2; JP2004517830A; BR0115351A; EE05218B1; WO2002044147A1

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Distamycinderivaten und, insbesondere, betrifft sie ein Verfahren zur Herstellung von Acryloyl-Distamycin-Guanidino-Derivaten, bekannt dafür, daß sie eine bemerkenswerte Antitumorwirksamkeit besitzen.
Distamycin A, dessen Formel unten gezeigt ist
gehört zu der Familie der Pyrrolamidinantibiotika und es wird berichtet, daß es reversibel und selektiv mit DNA-AT-Sequenzen wechselwirkt, wobei somit sowohl die Replikation als auch die Transkription gestört wird. Siehe, als eine Referenz, Nature 203, 1064 (1964); FEBS Letters, 7 (1970) 90; Prog. Nucleic Acids Res. Mol. Biol., 15, 285 (1975).
Verschiedene Analoge zu Distamycin sind im Fachgebiet als Antitumorwirkstoffe bekannt.
Als ein Beispiel offenbart die internationale Patentanmeldung WO 98/04524 in dem Namen des Anmelders selbst, Distamycinderivate, die wertvolle biologische Eigenschaften als Antitumorwirkstoffe haben, worin die Distamycinformylgruppe durch einen Acryloylanteil ersetzt ist, und die Amidinogruppe durch verschiedene Stickstoff-enthaltende Endgruppen ersetzt ist, unter denen Guanidino ist.
Spezifische Beispiele dieser Klasse von Aryloyl-Distamycin-Guanidino-Derivaten, wahlweise in der Form von pharmazeutisch verträglichen Salze, zum Beispiel als Hydrochloridsalze, sind folgende:
N-(5-{[(5-{[(5-{[(2-{[Amino(imino)methyl]amino}ethyl)amino]carbonyl}-1-methyl-1H-pyrrol-3-yl)amino]carbonyl}-1-methyl-1H-pyrrol-3-yl)amino]carbonyl}-1-methyl-1H-pyrrol-3-yl)-4-[(2-bromacryloyl)amino]-1-methyl-1H-pyrrol-2-carboxamid (interner Code PNU 166196); und
N-(5-{[(5-{[(5-{[(2-{[Amino(imino)methyl]amino}ethyl)amino]carbonyl}-1-methyl-1H-pyrrol-3-yl)amino]carbonyl}-1-methyl-1H-pyrrol-3-yl)amino]carbonyl}-1-methyl-1H-pyrrol-3-yl)-4-[(2-chloracryloyl)amino]-1-methyl-1H-pyrrol-2-carboxamid.
Diese Derivate werden gemäß einem chemischen Verfahren hergestellt, das im wesentlichen die Kondensationsreaktion zwischen einem passend aktivierten Carbonsäurederivat mit einem Poly-pyrrolamidogerüst, das die gewünschte Stickstoff-enthaltende Endgruppe trägt, zum Beispiel die Guanidinogruppe, umfaßt.
Dieses letztere Guanidinointermediat wird wiederum hergestellt gemäß einem eher problematischen Schritt-für-Schritt-Verfahren, das im wesentlichen verschiedene Acylierungsreaktionen von 2-Carboxy-4-amino-pyrrolen beinhaltet, welche durch Reduktionen der entsprechenden Nitroderivate, in einer aufeinanderfolgenden Art und Weise, erhalten werden.
Als eine allgemeine Referenz zu dem obigen Verfahren zur Herstellung von Acryloyl-Distamycin-Derivaten, auch einschließlich Acryloyl-Distamycin-Guanidino-Derivaten, siehe zum Beispiel die zuvor genannte WO 98/04524.
In dieser Hinsicht haben wir überraschenderweise herausgefunden, daß die genannten Acryloyl-Distamycin-Guanidine in vorteilhafter Weise hergestellt werden können durch ein chemisches Verfahren, das es erlaubt, die gewünschten Produkte in hoher Ausbeute und Reinheit und in einer beschränkten Anzahl von Schritten zu erhalten.
Deshalb ist eine erste Aufgabe der vorliegenden Erfindung ein Verfahren zur Herstellung eines Distamycinderivats der Formel
worin R ein Brom- oder Chloratom ist; oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon;
wobei das Verfahren folgendes umfaßt:

a) Reagieren, unter basischen Bedingungen, von 2-Amino-ethylguanidin mit einer Verbindung der Formel
worin X Hydroxy oder eine geeignete Abgangsgruppe ist, um eine Verbindung der Formel
zu erhalten.
b) Reduzieren des Nitro-Derivats der Formel (III) zu dem entsprechenden Aminoderivat und, daraufhin, Reagieren des resultierenden Aminoderivats mit der obigen Verbindung der Formel (II), unter basischen Bedingungen, um eine Verbindung der folgenden Formel zu erhalten
c) Reduzieren des Nitro-Derivats der Formel (IV) zu dem entsprechenden Aminoderivat und, darauf folgend, Reagieren des resultierenden Aminoderivats in der Anwesenheit eines geeigneten Kondensationsmittels und unter basischen Bedingungen mit einer Verbindung der Formel
worin R ein Brom- oder Chloratom ist; um eine Verbindung der Formel (I) zu erhalten und, wahlweise, Umwandeln dieser in ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.

Das Verfahren als Gegenstand der vorliegenden Erfindung erlaubt es, die Verbindungen von Formel (I) unter milden operativen Bedingungen in hohen Ausbeuten und Reinheit zu erhalten.
Zusätzlich erlaubt es die Herstellung der zuvor genannten Verbindungen ohne die Notwendigkeit, bestimmte Schritte auszuführen und/oder viele Intermediate zu isolieren, was zu unerwünschten Nebenprodukten führen könnte.
Vorzugsweise ist das Verfahren der Erfindung auf die Herstellung der Verbindung von Formel (I) gerichtet, worin R ein Bromatom ist, was die Verbindung ist, die zuvor als PNU 166196 bezeichnet wurde. In dieser Hinsicht ist es jemandem, der im Fachgebiet bewandert ist, klar, daß innerhalb der allgemeinen Formel (I) bei Verbindungen, die so hergestellt wurden, die Möglichkeit für die R-Gruppe Brom oder Chlor zu sein, von der Verbindung von Formel (V) abhängen wird, die in Schritt c) verwendet wurde.
Gemäß dem Verfahren als Gegenstand der Erfindung wird die Reaktion von Schritt a) zwischen 2-Amino-ethylguanidin, wahlweise in der Form eines pharmazeutisch verträglichen Salzes, vorzugsweise als 2-Amino-ethylguanidindihydrochlorid, und einem leichten Überschuß, zum Beispiel von 1 bis 2 Äquivalenten, der Verbindung von Formel (II) ausgeführt.
Innerhalb der Verbindungen von Formel (II) stellt die X-Gruppe Hydroxy oder eine geeignete Abgangsgruppe dar, wie zum Beispiel Brom, Chlor, 2,4,5-Trichlorphenoxy, 2,4-Dinitrophenoxy, Succinimido-N-oxy oder Imidazolyl.
Vorzugsweise ist die X-Gruppe ein Brom oder Chloratom.
Die Reaktion wird unter basischen Bedingungen durchgeführt mit von 1 bis 4 Äquivalenten einer organischen oder anorganischen Base, wie zum Beispiel Natrium- oder Kaliumhydroxid, -carbonat oder -bicarbonat, oder mit einem organischen Amin, wie zum Beispiel Triethylamin, Ethyldiisopropylamin, Piperidin und dergleichen.
Natriumcarbonat oder -bicarbonat werden vorzugsweise verwendet.
Die Reaktion findet in der Anwesenheit eines geeigneten Lösungsmittels statt, wie zum Beispiel Dioxan, Tetrahydrofuran, Dimethylsulfoxid, Dimethylformamid, Wasser und Beimischungen davon.
Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform des Verfahrens wird Schritt a) vorzugsweise in der Anwesenheit von Dioxan, Tetrahydrofuran, Wasser oder Beimischungen davon durchgeführt.
Die Reaktionstemperatur kann von ungefähr 0°C bis ungefähr 50°C variieren und in die Zeit variiert von ungefähr 1 bis ungefähr 24 Stunden. Die intermediäre Nitro-Verbindung von Formel (III) kann isoliert werden, entweder als solche oder in der Form eines pharmazeutisch verträglichen Salzes, zum Beispiel als Hydrochloridsalz, oder kann weiter verarbeitet werden, ohne isoliert zu werden, unter reduktiven Bedingungen, wie durch Schritt b) des Verfahrens.
Die Reduktion der Verbindung von Formel (III), wie durch Schritt b) des Verfahrens, wird gemäß wohl bekannten Verfahren zur Reduktion von Nitro-Derivaten in Aminoderivate durchgeführt.
Typische reduktive Bedingungen schließen die Verwendung von konventionellen Reduktionsmitteln ein, wie zum Beispiel Natriumhypophosphit, Hydrazin, Sulfiden, Polysulfiden und dergleichen, oder die katalytische Hydrierung.
Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung wird die Verbindung von Formel (III) unter heterogenen katalytischen Bedingungen in der Anwesenheit von Platin oder Palladiumkatalysatoren, zum Beispiel Palladium auf Kohle (Pd/C) hydriert.
Die Hydrierungsreaktion wird vorzugsweise in der Anwesenheit eines geeigneten Lösungsmittels durchgeführt, zum Beispiel Dioxan, Tetrahydrofuran, Dimethylsulfoxid, Dimethylformamid, Wasser und Beimischungen davon, bei Temperaturen, die von ungefähr 0°C bis ungefähr 50°C variieren, für einen Zeitraum von ungefähr 1 bis ungefähr 24 Stunden, und durch Verwendung von ungefähr 1 bis ungefähr 10 Bar (1 Bar = 10⁵ Pa) Wasserstoffdruck. Das so erhaltene Aminoderivat wird weiter reagiert ohne isoliert zu werden, mit der Verbindung von Formel (II). Die Reaktion findet statt unter den oben angegebenen Bedingungen wie durch Schritt a) des Verfahrens, das heißt in der Anwesenheit einer Base und eines geeigneten Lösungsmittels.
Wie zuvor angegeben, kann die intermediäre Nitro-Verbindung von Formel (IV) entweder als solche isoliert werden, oder in der Form eines pharmazeutisch verträglichen Salzes, zum Beispiel als Hydrochloridsalz, oder kann weiter verarbeitet werden ohne isoliert zu werden, in Schritt c) des Verfahrens.
In Schritt c) wird die Reduktion der Verbindung von Formel (IV) ausgeführt gemäß wohl bekannten Verfahren für die Reduktion von Nitro-Derivaten zu Aminoderivaten, wie oben berichtet. Vorzugsweise wird die Reaktion unter katalytischen Hydrierungsbedingungen in der Anwesenheit von Palladium oder Platinkatalysatoren, wie oben angegeben, ausgeführt.
Das resultierende Aminoderivat wird dann, ohne isoliert zu werden, mit einer Verbindung von Formel (V) gemäß konventionellen Verfahren für die Acylierung von Aminoderivaten reagiert.
Insbesondere wird die Reaktion in der Anwesenheit eines Lösungsmittels durchgeführt, wie zum Beispiel Dioxan, Tetrahydrofuran, Wasser, Dimethylsulfoxid, Dimethylformamid oder Beimischungen davon in der Anwesenheit eines konventionellen Kodensationsmittels und einer anorganischen oder organischen Base, wie zum Beispiel Natrium- oder Kaliumhydroxid, -carbonat oder -bicarbonat oder mit einem organischen Amin, wie zum Beispiel Triethylamin, Ethyldiisopropylamin, Piperidin und dergleichen.
Bevorzugte Kondensationsmittel sind zum Beispiel N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid (DCC) oder (N'-(3-Dimethylaminopropyl)-N-ethylcarbodiimid)hydrochlorid (EDC).
Die Reaktionstemperatur kann von ungefähr –10°C bis ungefähr 50°C variieren, und für einen Zeitraum variierend von ungefähr 1 bis ungefähr 24 Stunden erfolgen. Wie zuvor angegeben, wird die Herstellung der Verbindung von Formel (I), worin R ein Bromatom ist (PNU 166196), wie durch Schritt c) mit einer Verbindung von Formel (V) ausgeführt, worin R ein Bromatom ist.
Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung kann das ganze Verfahren in der Anwesenheit eines einzigartigen Reaktionslösungsmittels durchgeführt werden, zum Beispiel Dioxan, Tetrahydrofuran, Wasser oder Beimischungen davon.
So ist es klar, daß durch Ausführen des gesamten Verfahrens in demselben Reaktionslösungsmittel die Volumina, und daher große Mengen an wiederzugewinnenden Lösungsmitteln, dramatisch reduziert sind.
Gemäß einer besonders bevorzugten Ausführungsform der Erfindung können alle Reaktionsschritte von a) bis c) in einem Gefäß ausgeführt werden, ohne die Notwendigkeit irgendein Intermediat zu isolieren.
In dieser Hinsicht wird jede der Reaktionen, die in Schritten von a) bis c) definiert sind, wie folgt durchgeführt: zuerst Reagieren einer Verbindung von Formel (II) mit 2-Amino-ethylguanidindihydrochlorid, um eine Verbindung von Formel (III) zu ergeben, Reduzieren der Verbindung von Formel (III) zu dem entsprechenden Aminoderivat und nachfolgend Reagieren desselben mit wiederum der Verbindung von Formel (II), um die Verbindung von Formel (IV) zu erhalten, und letztlich, Reduzieren zu dem Aminoderivat und Reagieren von letzterem mit der Verbindung von Formel (V).
Obiges vorausgesetzt, ist es auch klar für jemanden, der im Fachgebiet bewandert ist, daß, wenn immer gewünscht, jede, oder mindestens einige der oben genannten Reaktionen alterntiv durch Abtrennen von irgendeiner intermediären Verbindung bewerkstelligt werden kann.
So weit sind alle der zuvor genannten Angänge des Verfahrens zur Herstellung der Verbindungen von Formel (I) innerhalb des Schutzumfang der vorliegenden Erfindung.
Letztlich kann die Umwandlung des Distamycinderivats von Formel (I) in ein pharmazeutisch verträgliches Salz oder, auf der anderen Seite, die Umwandlung eines Salzes davon in die freie Verbindung, gemäß den wohl bekannten Techniken ausgeführt werden.
Beispiele für pharmazeutisch verträgliche Salze der Verbindungen von Formel (I) sind die Säureadditionssalze mit pharmazeutisch verträglichen Säuren, wie zum Beispiel Chlorwasserstoff-, Bromwasserstoff-, Schwefel-, Salpeter-, Essig-, Trifluoressig-, Propion-, Bernstein-, Malon-, Zitronen-, Wein-, Methansulfon-, p-Toluensulfonsäure und dergleichen.
Die Verbindung 2-Ethyl-aminoguanidin, zum Beispiel als Dihydrochloridsalz, ist eine bekannte Verbindung, welche entsprechend bekannten Verfahren hergestellt werden kann. Siehe zum Beispiel Synthethic Communications 20(16), 2559–2564 (1990).
Die Verbindung von Formel (II) ist bekannt oder kann leicht gemäß bekannten Verfahren hergestellt werden; als eine Referenz für die Herstellung der Verbindung von Formel (II), worin X Hydroxy ist, siehe beispielsweise US 4,942,227 .
Die Verbindung von Formel (V) ist wiederum eine kommerziell erhältliche Verbindung.
Aus dem obigen sollte festgehalten werden, daß das Verfahren der Erfindung es erlaubt, einen Satz an aufeinanderfolgenden Reaktionen durchzuführen unter Verwendung einer beschränkten Anzahl von reaktiven Derivaten. Die Verbindung von Formel (II) wird in der Tat sehr günstigerweise in zwei unterschiedlichen Reaktionen des Verfahrens verwendet: zuerst als ein Ausgangsmaterial mit zwei Aminoethylguanidindihydrochlorid, in Schritt a), und darauf folgend als ein reaktives Intermediat in Schritt b).
Die intermediäre Verbindung von Formel (IV) ist neu und stellt folglich einen weiteren Gegenstand dieser Erfindung dar.
Wie zuvor angegeben, sind die Verbindungen von Formel (I) nützlich in der Therapie als Antitumorwirkstoffe.
Als eine allgemeine Referenz für die Antitumorwirksamkeit der Verbindungen von Formel (I), siehe die zuvor genannte WO 98/04524.
Gemäß einer praktischen Ausführungsform des Verfahrens der Erfindung für die Herstellung der Verbindung von Formel (I), worin R ein Bromatom ist (PNU 166196), wird eine geeignete Menge von 2-Amino-ethylguanidindihydrochlorid in einem Lösungsmittelsystem, das vorzugsweise Dioxan, Tetrahydrofuran, Wasser oder Beimischungen davon umfaßt, und in der Anwesenheit einer Base, zum Beispiel einer anorganischen Base, wie zum Beispiel Natriumcarbonat oder -bicarbonat, mit einer geeigneten Menge, vorzugsweise einem leichten Überschuß, der Verbindung von Formel (II) reagiert.
Die Reaktion wird unter milden operativen Bedingungen ausgeführt und das resultierende Nitroderivat der Formel (III) wird zuerst unter heterogenen katalytischen Bedingungen hydriert, in der Anwesenheit von Palladium auf Kohle, und wird danach mit einer geeigneten Menge, vorzugsweise einem leichten Überschuß, der Verbindung von Formel (II) unter basischen Bedingungen reagiert. Die resultierende Verbindung von Formel (IV) wird dann wie oben beschrieben zu dem entsprechenden Aminoderivat hydriert, welches weiter in der Anwesenheit einer Base und eines Kondensationsmittels, zum Beispiel EDC, mit α-Bromacrylsäure der Formel (V) reagiert wird.
Die gewünschte Verbindung von Formel (I), die somit erhalten wird, wird dann in hohen Ausbeuten und Reinheit isoliert, entsprechend konventionellen Verfahren.
Mit dem Ziel, die vorliegende Erfindung zu veranschaulichen, ohne irgendeine Einschränkung daran zu legen, werden nun die folgenden Beispiele gegeben.
Beispiel 1
Herstellung von tert-Butyl-N-(2-aminoethyl)carbamat
Ethylendiamin (7 Mol) wurde in einen Reaktionskolben, der Dioxan (2,7 l) enthielt, geladen. Di-tert-Butyl-dicarbonat (1,0 Mol) in Dioxan (270 ml) wurde daraufhin hinzugefügt.
Die Reaktionsmischung wurde bei Raumtemperatur für einen Tag gerührt und das Lösungsmittel wurde dann unter Vakuum entfernt.
Wasser (1,8 l) wurde zu dem rohen Stoff hinzugefügt und die Mischung wurde mit Dichlormethan extrahiert. Das organische Lösungsmittel wurde von der organischen Phase abdestilliert, was somit zur Titelverbindung führte (145 g; 90% Ausbeute).
Beispiel 2
Hergestellung von 2-Aminoethyl-guanidindihydrochlorid
Tert-Butyl-N-(2-aminoethyl)carbamat (0,4 Mol), O-Methylisoharnstoffhydrogensulphat (0,8 Mol) und Triethylamin (2,5 Mol) wurden in einen Reaktionskolben, der eine Methanol:Wasser = 1:1 Mischung (3 l) enthielt, geladen.
Die Reaktionsmischung wurde bei Raumtemperatur für einen Tag gerührt und das Lösungsmittel wurde dann unter Vakuum entfernt. Der rohe Stoff wurde mit Ethanol (2 l) und gasförmiger Chlorwasserstoffsäure (3,5 M) bei 20°C für 4 Stunden behandelt und danach filtriert und getrocknet, was somit die Titelverbindung ergab (55 g; 74% Ausbeute).
Beispiel 3
Herstellung von N-Methyl-4-aminopyrrol-2-carbonsäure
N-Methyl-4-nitropyrrol-2-carbonsäure (0,58 Mol), Chlorwasserstoffsäure 2 N (350 ml) und Pd/C (5 g) wurden zu einer Dioxan:Wasser = 2:1 Mischung (1,2 l) hinzugefügt.
Die Mischung wurde in einem 2 l Hydrierungsreaktor bei Raumtemperatur für 4 Stunden hydriert. Der Katalysator wurde abfiltriert, das Lösungsmittel unter Vakuum konzentriert und die resultierende Suspension wurde filtriert.
Der rohe Stoff wurde getrocknet, was die Titelverbindung (94 g; 92% Ausbeute) als ein weißes Pulver ergab.
Beispiel 4
Herstellung von N-Methyl-4-nitropyrrol-2-carbonsäurechlorid
Thionylchlorid (3,16 Mol) wurde in einen Reaktionskolben geladen, der N-Methyl-4-nitropyrrol-2-carbonsäure (1,17 Mol) in Toluen (1,5 l) enthielt.
Die Reaktionsmischung wurde für 3 Stunden bei 100°C gerührt, abgekühlt und danach unter Vakuum konzentriert.
Die resultierende Suspension wurde mit Cyclohexan für 2 Stunden bei Raumtemperatur behandelt, dann filtriert und getrocknet, was die Titelverbindung (200 g; 96% Ausbeute) ergab.
Beispiel 5
Herstellung von N-Methyl-4-[(N'-methyl-4-nitro-pyrrolyl-2-yl)carbonylamino]pyrrol-2-carbonsäure
N-Methyl-4-aminopyrol-2-carbonsäure (0,56 Mol), hergestellt wie in Beispiel 3 beschrieben, und Natriumbicarbonat (2 Mol) wurden in einen Reaktionskolben geladen, der eine Dioxan:Wasser = 1:1 Beimischung (300 ml) enthielt.
Eine Lösung von N-Methyl-4-nitropyrrol-2-carbonsäurechlorid (0,62 Mol), hergestellt wie in Beispiel 4 beschrieben, in Dioxan (350 ml) wurde dann darin hinzugefügt.
Die Reaktionsmischung wurde für 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt, dann wurde Wasser (100 ml) hinzugefügt.
Eine Lösung von 2 N Chlorwasserstoffsäure wurde dann hinzugefügt bis zu einem pH von 3, und die organische Lösung wurde unter Vakuum konzentriert, bis Dioxan komplett entfernt war.
Die Suspension wurde filtriert, was die Titelverbindung (147 g; 90% Ausbeute) ergab.
Beispiel 6
Herstellung von N-Methyl-4-[(N'-methyl-4-nitro-pyrrolyl-2-yl)carbonylamino]pyrrol-2-carbonsäurechlorid
N-Methyl-4-[(N'-methyl-4-nitro-pyrrolyl-2-yl)carbonylamino]pyrrol-2-carbonsäure (0,45 Mol), hergestellt wie in Beispiel 5 beschrieben, Dimethylformamid (3 ml) und Thionylchlorid (2,3 Mol) wurden in einen Reaktionskolben geladen, der Dichlormethan (2,5 l) enthielt.
Die resultierende Suspension wurde für 6 Stunden bei Rückflußtemperatur gerührt, dann auf Raumtemperatur gekühlt und filtriert.
Der rohe Stoff wurde mit Hexan (1 l) behandelt, dann filtriert und getrocknet, was die Titelverbindung (163 g; 90% Ausbeute) ergab.
Beispiel 7
Herstellung von N-Methyl-4-[(N'-methyl-4-nitro-pyrrolyl-2-yl)carbonylamino]pyrrol-2-carbonsäurechlorid Ethylguanidinhydrochlorid
N-methyl-4-[(N'-methyl-4-nitro-pyrrolyl-2-yl)carbonylamino]pyrrol-2-carbonsäurechlorid (0,057 Mol), hergestellt wie in Beispiel 6 beschrieben, wurde in einen Reaktionskolben geladen, der Dioxan (300 ml) enthielt.
Dann wurden eine Lösung von 2-Aminoethyl-guanidindihydrochlorid (0,057 Mol), hergestellt wie in Beispiel 2 beschrieben, und Natriumbicarbonat (0,17 Mol) in Wasser (100 ml) darin hinzugefügt.
Die Suspension wurde für 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Eine Lösung 2 N von Chlorwasserstoffsäure (60 ml) und Pd/C (3 g) wurden danach hinzugefügt.
Die Mischung wurde dann in einem 2 l Hydrierungsreaktor bei Raumtemperatur für 3 Stunden hydriert und dann filtriert.
Die resultierende Lösung wurde dann zu einer Suspension von N-Methyl-4-[(N'-methyl-4-nitro-pyrrolyl-2-yl)carbonylamino]pyrrol-2-carbonsäurechlorid (0,057 Mol) in Dioxan (120 ml) hinzugefügt. Natriumbicarbonat (0,17 mol) wurde dann hinzugefügt und die Suspension wurde bei Raumtemperatur für 4 Stunden gerührt.
Die Mischung wurde dann unter Vakuum konzentriert, bis eine Suspension erhalten wurde, und die resultierende Suspension wurde auf Raumtemperatur gekühlt und filtriert.
Der nasse rohe Stoff wurde mit Aceton behandelt, filtriert und getrocknet, was somit die Titelverbindung (30 g; 85% Ausbeute) ergab.
Beispiel 8
Herstellung von 2-[1-Methyl-4-[1-methyl-4-[1-methyl-4-(1-methylaminopyrrol-2-carboxamido)pyrrol-2-carboxamido]pyrrol-2-carboxamido]pyrrol-2-carboxamido]ethylguanidin Hydrochlorid
Die Verbindung von Beispiel 7 (0,067 Mol), Dioxan (550 ml), Wasser (450 ml), eine Lösung 2 N von Chlorwasserstoffsäure (120 ml) und Pd/C (13 g) wurden in einen Hydrierungsreaktor geladen. Die Suspension wurde bei Raumtemperatur für 3 Stunden hydriert, dann wurde die Mischung filtriert.
Die resultierende Lösung wurde mit Aceton (1300 ml) behandelt, über Nacht auf 4°C gekühlt und filtriert.
Der rohe Stoff wurde getrocknet, was somit die Titelverbindung (40 g; 90% Ausbeute) ergab.
Beispiel 9
Herstellung von N-(5-{[(5-{[(5-{[(2-{[Amino(imino)methyl]amino}ethyl)amino]carbonyl}-1-methyl-1H-pyrrol-3-yl)amino]carbonyl}-1-methyl-1H-pyrrol-3-yl)amino]carbonyl}-1-methyl-1H-pyrrol-3-yl)-4-[(2-bromacryloyl)amino]-1-methyl-1H-pyrrol-2-carboxamid Hydrochlord (interner Code PNU 166196A).
Bromacrylsäure (7,56 mmol), EDC (7,56 mmol), Natriumbicarbonat (14,3 mmol) und Dioxan (60 ml) wurden in einen Reaktionskolben geladen.
Die Verbindung von Beispiel 8 (2 mmol) und eine Mischung von Dioxan:Wasser 2:1 (30 ml) wurden dann hinzugefügt.
Die Mischung wurde für 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt und eine Lösung 2 N von Chlorwasserstoffsäure wurde dann hinzugefügt bis zu einem pH von 4,5.
Das Lösungsmittel wurde dann unter Vakuum konzentriert, die Suspension wurde filtriert und der resultierende rohe Stoff wurde getrocknet, was die Titelverbindung (1,3 g; 85% Ausbeute; HPLC Fläche > 98%) ergab.

Claims

Ein Verfahren zur Herstellung eines Distamycinderivats der Formel:
worin R ein Brom- oder Chloratom ist; oder eines pharmazeutisch verträglichen Salzes davon; wobei das Verfahren folgendes umfaßt: a) Reagieren, unter basischen Bedingungen, von 2-Aminoethylguanidin mit einer Verbindung der Formel:
worin X Hydroxy oder eine geeignete Abgangsgruppe ist, um eine Verbindung der Formel
zu erhalten; b) Reduzieren des Nitro-Derivats der Formel (III) zu dem entsprechenden Aminoderivat und, darauf folgend, Reagieren des resultierenden Aminoderivats mit der obigen Verbindung von Formel (II) unter basischen Bedingungen, um eine Verbindung der Formel
zu erhalten; c) Reduzieren des Nitro-Derivats der Formel (IV) zu dem entsprechenden Aminoderivat und, darauf folgend, Reagieren des resultierenden Aminoderivats in der Anwesenheit eines geeigneten Kodensationsmittels und unter basischen Bedingungen, mit einer Verbindung der Formel
worin R ein Brom- oder Chloratom ist; um die Verbindung von Formel (I) zu erhalten und, wahlweise, Umwandeln dieser in ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.
Ein Verfahren gemäß Anspruch 1 für die Herstellung der Verbindung von Formel (I), oder eines pharmazeutisch verträglichen Salzes davon, worin R ein Bromatom ist.
Ein Verfahren gemäß Anspruch 1, worin Schritte von a) bis c) in einem Gefäß ausgeführt werden, ohne die Notwendigkeit irgendein Reaktionsintermediat zu isolieren.
Ein Verfahren gemäß Anspruch 1, worin in Schritt a) 2-Amino-ethylguanidin in der Form seines Dihydrochloridsalzes vorliegt.
Ein Verfahren gemäß Anspruch 1, worin, innerhalb der Verbindung von Formel (II) von Schritt a), X Hydroxy oder eine Gruppe ist, die gewählt ist aus Brom, Chlor, 2,4,5-Trichlorphenoxy, 2,4-Dinitrophenoxy, Succinimido-N-oxy oder Imidazolyl.
Ein Verfahren gemäß Anspruch 5, worin X ein Brom- oder Chloratom ist.
Ein Verfahren gemäß Anspruch 1, worin die reduktiven Schritte unter b) oder c) in der Anwesenheit von geeigneten Reduktionsmitteln durchgeführt werden, einschließlich Natriumhypophospit, Hydrazin, Sulfiden, Polysulfiden oder als katalytische Hydryierungsreaktionen.
Ein Verfahren gemäß Anspruch 7, worin die reduktiven Schritte b) oder c) als katalytische Hydrierungsreaktionen in der Anwesenheit von Palladium oder Platinhydrierungskatalysatoren durchgeführt werden.
Ein Verfahren gemäß Anspruch 1, worin, in Schritt c), die Reaktion zwischen dem resultierenden Aminoderivat und der Verbindung von Formel (V) in der Anwesenheit eines geeigneten Kondensationsmittels durchgeführt wird, das gewählt ist aus der Gruppe bestehend aus N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid (DCC) oder (N'-(3-Dimethylaminopropyl)-N-ethylcarbodiimid) Hydrochlorid (EDC).
Ein Verfahren gemäß Anspruch 1, worin jegliche Reaktion, die unter basischen Bedingungen durchgeführt wird, in der Anwesenheit einer geeigneten anorganischen oder organischen Base durchgeführt wird.
Ein Verfahren gemäß Anspruch 10, worin die Base gewählt ist aus Natrium- oder Kaliumhydroxid, Carbonat oder Bicarbonat, Triethylamin, Ethyldiisopropylamin oder Piperidin.
Ein Verfahren gemäß Anspruch 1, worin die Reaktionen der Schritte von a) bis c) des Verfahrens jeweils unabhängig in der Anwesenheit eines geeigneten Reaktionslösungsmittels durchgeführt werden, das gewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Dioxan, Tetrahydrofuran, Dimethylsulfoxid, Dimethylformamid, Wasser oder Mischungen davon.
Ein Verfahren gemäß Anspruch 12, worin das Reaktionslösungsmittel gewählt ist aus Dioxan, Tetrahydrofuran, Wasser oder Mischungen davon.
Ein Verfahren gemäß Anspruch 1, worin pharmazeutisch verträgliche Salze der Verbindungen der Formel (I) die Säureadditionssalze mit pharmazeutisch verträglichen Säuren sind, einschließlich Chlorwasserstoff-, Bromwasserstoff-, Schwefel-, Salpeter-, Essig-, Trifluoressig-, Propion-, Bernstein-, Malon-, Citronen-, Wein-, Methansulfon- und p-Toluensulfonsäure.
Die Verbindung von Formel (IV) unten