[go: up one dir, main page]

DE60017259T2 - Modulation der CPG-Oligonukleotid-vermittelten Immunstimulation durch Positionsbedingte Modifikation von Nukleosiden - Google Patents

Modulation der CPG-Oligonukleotid-vermittelten Immunstimulation durch Positionsbedingte Modifikation von Nukleosiden Download PDF

Info

Publication number
DE60017259T2
DE60017259T2 DE60017259T DE60017259T DE60017259T2 DE 60017259 T2 DE60017259 T2 DE 60017259T2 DE 60017259 T DE60017259 T DE 60017259T DE 60017259 T DE60017259 T DE 60017259T DE 60017259 T2 DE60017259 T2 DE 60017259T2
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
nucleoside
cpg
cpg dinucleotide
oligonucleotide
oligo
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
DE60017259T
Other languages
English (en)
Other versions
DE60017259D1 (de
Inventor
Sudhir Agrawal
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Aceragen Inc
Original Assignee
Hybridon Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hybridon Inc filed Critical Hybridon Inc
Publication of DE60017259D1 publication Critical patent/DE60017259D1/de
Application granted granted Critical
Publication of DE60017259T2 publication Critical patent/DE60017259T2/de
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A61K31/7115—Nucleic acids or oligonucleotides having modified bases, i.e. other than adenine, guanine, cytosine, uracil or thymine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A61K31/711—Natural deoxyribonucleic acids, i.e. containing only 2'-deoxyriboses attached to adenine, guanine, cytosine or thymine and having 3'-5' phosphodiester links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A61K31/712—Nucleic acids or oligonucleotides having modified sugars, i.e. other than ribose or 2'-deoxyribose
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A61K31/7125—Nucleic acids or oligonucleotides having modified internucleoside linkage, i.e. other than 3'-5' phosphodiesters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/117—Nucleic acids having immunomodulatory properties, e.g. containing CpG-motifs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55561—CpG containing adjuvants; Oligonucleotide containing adjuvants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/10—Type of nucleic acid
    • C12N2310/18—Type of nucleic acid acting by a non-sequence specific mechanism
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
    • C12N2310/315—Phosphorothioates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
    • C12N2310/321—2'-O-R Modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
    • C12N2310/346—Spatial arrangement of the modifications having a combination of backbone and sugar modifications

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Description

  • HINTERGRUND DER ERFINDUNG
  • GEBIET DER ERFINDUNG
  • Die Erfindung betrifft die therapeutische Verwendung von Oligonukleotiden sowohl im Antisense-Verfahren als auch als immunstimulatorische Agenzien.
  • ZUSAMMENFASSUNG DES STANDS DER TECHNIK
  • Oligonukleotide sind nicht mehr wegzudenkende Werkzeuge in der modernen Molekularbiologie, die für eine Vielzahl von Techniken eingesetzt werden, beginnend von diagnostischen Sondenverfahren über PCR bis hin zur Antisense-Inhibition der Genexpression. Diese breite Verwendung von Oligonukleotiden führte zu einer gestiegenen Nachfrage an schnellen, billigen und effizienten Verfahren zur Synthese von Oligonukleotiden. Die Synthese von Oligonukleotiden für Antisense- und diagnostische Anwendungen kann nun routinemäßig durchgeführt werden. Siehe z.B. Methods in Molecular Biology, Band 20: Protocols for Oligonukleotides and Analogs Seiten 165–189 (S. Agrawal, Ed., Humana Press, 1993); Oligonukleotides and Analogues: A Practical Approach, Seiten 87–108 (F. Eckstein, 1991); und Uhlmann und Peyman, supra. Agrawal und Iyer, Curr. Op. in Biotech. 6: 12 (1995); und Antisense Research and Applications (Crooke und Lebleu, Eds., CRC Press, Boca Raton, 1993). Frühere synthetische Verfahren schlossen chemische Phosphodiester- und Phosphotriester-Verfahren ein. Khorana et al., J. Molec. Biol. 72: 209 (1972) offenbart ein chemisches Phosphodiester-Verfahren zur Oligonukleotidsynthese. Reese, Tetrahedron Lett. 34: 3143–3179 (1978) offenbart ein chemisches Phosphotriester-Verfahren zur Synthese von Oligonukleotiden und Polynukleotiden. Diese früheren Verfahren eröffneten zum großen Teil die effizienteren Phosphoramidit- und H-Phosphonat-Synthese-Verfahren. Beaucage und Caruthers, Tetrahedron Lett. 22: 1859–1862 (1981), offenbaren die Verwendung von Desoxynukleosid-Phosphoramiditen in der Polynukleotidsynthese. Agrawal und Zamecnik, U. S. Patent Nr. 5,149,798 (1992), offenbaren eine optimierte Synthese von Oligonukleotiden durch das H-Phosphonat-Verfahren.
  • Beide dieser modernen Verfahren wurden verwendet, um Oligonukleotide mit einer Vielzahl von modifizierten Internukleotidverknüpfungen zu synthetisieren. Agrawal und Goodchild, Tetrahedron Lett. 28: 3539–3542 (1987), offenbaren die Synthese von Oligonukleotidmethylphosphonaten bei Verwendung eines chemischen Phosphoramidit-Verfahrens. Connolly et al., Biochemistry 23: 3443 (1984), offenbaren die Synthese von Oligonukleotidphosphorothioaten bei Verwendung eines chemischen Phosphoramidit-Verfahrens. Jager et al., Biochemistry 27: 7237 (1988), offenbaren die Synthese von Oligonukleotid-Phosphoramidaten bei Verwendung eines chemischen Phosphoramidit-Verfahrens. Agrawal et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 7079–7083 (1988), offenbaren die Synthese von Oligonukleotid-Phosphoramidaten und - Phosphorothioaten bei Verwendung eines chemischen H-Phosphonat-Verfahrens.
  • Kürzlich haben mehrere Forscher die Gültigkeit des Antisense-Verfahrens zur therapeutischen Behandlung einer Erkrankung gezeigt. Crooke, Antisense Nucleic Acid Drug Dev. 8: vii-viii, offenbart die erfolgreiche Marktzulassung eines Phosphorothioatoligonukleotids zur Behandlung einer humanen Cytomegalovirus-induzierten Retinitis. Leider wurde die Verwendung von Phosphorothioatoligonukleotiden komplexer als ursprünglich erwartet. Bestimmte Wirkungen, die durch Phosphorothioatoligonukleotide verursacht werden, konnten nicht anhand des erwarteten Antisense-Mechanismus erklärt werden. Zum Beispiel lehren McIntyre et al., Antisense Res. Dev. 3: 309–322 (1993), dass ein „Sinn" Phosphorothioatoligonukleotid eine spezifische Immunstimulation verursacht. Diese und andere Nebenwirkungen haben das Bild von Phosphorothioatoligonukleotiden verkompliziert. Zhao et al., Biochemical Pharmacology 51: 173–182 (1996) offenbaren eine Immunstimulation die durch 2'-CpG-enthaltenden Oligonukleotide vermittelt wurde, wobei eines davon komplementär zu dem gag-Gen von HIV-1 (5'-CTCTCGCACCCATCTCTCTCCTTCT-3') ist und das andere komplementär zu dem rev-Gen von HIV-1 (5'-TCGTCGCTGTCTCCGCTTCTTCTTGCC-3') ist.
  • Andererseits hat die Beobachtung, dass Phosphodiester- und Phosphorothioatoligonukleotide eine Immunstimulation induzieren können, Interesse für die Weiterentwicklung dieser Nebenwirkung als ein therapeutisches Werkzeug geweckt. Diese Anstrengungen zielen auf Phosphorothioatoligonukleotide, die das Dinukleotid CpG enthalten. Kuramoto et al., Jpn. J. Cancer Res. 83: 1128–1131 (1992) lehren, dass Phosphodiesteroligonukleotide, die ein Palindrom enthalten, welches ein CpG-Dinukleotid einschließt, eine Interferon-alpha und -gamma-Synthese induzieren können und eine natürliche Killeraktivität verstärken können. Krieg et al., Nature 371: 546–549 (1995) offenbaren, dass die CpG-enthaltende Phosphorothioatoligonukleotide immunstimulatorisch sind. Liang et al., J. Clin. Invest. 98: 1119–1129 (1996) offenbaren, dass solche Oligonukleotide humane B-Zellen aktivieren. Moldoveanu et al., Vaccine 16: 1216–124 (1998) lehren, dass CpG-enthaltende Phosphoroatoligonukleotide die Immunantwort gegenüber dem Influenzavirus verstärken. McCluskie und Davis, The Journal of Immunology 161: 4463–4466 (1998) lehren, dass CpG-enthaltende Oligonukleotide als potentielle immunstimulatorische Agenzien wirken und die Immunantwort gegenüber dem Oberflächenantigen von Hepatitis B verstärken. Agrawal, U. S. Patent Nr. 5,968,909, offenbart, dass eine Modifikation von C oder G des Gerüsts diese Wirkung unterdrückt.
  • Diese Berichte machen klar, dass ein Bedarf vorhanden ist, um in der Lage zu sein, die Immunantwort, die durch CpG-enthaltende Oligonukleotide verursacht wird, zu modulieren. Idealerweise sollte eine solche Modulation sowohl das Absenken der immunstimulatorischen Wirkung für Antisense-Anwendungen als auch das Verstärken der immunstimulatorischen Wirkung für immuntherapeutische Anwendungen einschließen.
  • KURZE ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG
  • Die Erfindung stellt Verfahren zum Modulieren der durch CpG-enthaltenden Oligonukleotide verursachten Immunantwort zur Verfügung. Die erfindungsgemäßen Verfahren ermöglichen das Verstärken der immunstimulatorischen Wirkung für immuntherapeutische Anwendungen. Daher stellt die Erfindung weiter Oligonukleotide zur Verfügung, die optimale Level einer immunstimulatorischen Wirkung für eine beliebige Anwendung aufweisen, sowie Verfahren zur Verwendung solcher Oligonukleotide.
  • Der Erfinder hat überraschenderweise festgestellt, dass eine positionsbedingte Modifikation von CpG-enthaltenden Oligonukleotiden deren immunstimulatorische Fähigkeiten dramatisch beeinflusst.
  • Insbesondere verstärkt oder erniedrigt eine 2'-Alkylierung oder -Alkoxylierung von Oligonukleotiden an bestimmten Positionen 5' oder 3' zu dem CpG-Dinukleotid deren immunstimulatorische Wirkung.
  • In einem ersten Aspekt stellt die Erfindung ein Verfahren zum Verstärken der immunstimulatorischen Wirkung eines CpG-enthaltenden Oligonukleotids bereit, wobei das Oligonukleotid kein Antisense-Oligonukleotid ist, das komplementär ist zu Ha-ras oder dem gag- oder rev-Gen des humanen Immundefizienzvirus Typ 1. Das Verfahren gemäß diesem Aspekt der Erfindung umfasst das Einführen eines 2'-substituierten Nukleosids in das Oligonukleotid an einer Position ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus zweites Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, drittes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, viertes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, fünftes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, sechstes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, erstes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, zweites Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, drittes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, viertes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, fünftes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, sechstes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid und Kombinationen davon oder vier kontinuierliche Nukleoside an dem siebten bis zehnten Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid. In bestimmten bevorzugten Ausführungsformen ist das Oligonukleotid kein Antisense-Oligonukleotid. In alternativen Ausführungsformen kann das Oligonukleotid ein Antisense-Oligonukleotid sein.
  • In einem weiteren Aspekt stellt die Erfindung CpG-enthaltende Oligonukleotide bereit, die verstärkte immunstimulatorische Wirkungen aufweisen, wobei das Oligonukleotid ein 2'-substituiertes Nukleosid an einer Position umfasst ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus zweites Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, drittes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, viertes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, fünftes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, sechstes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, erstes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, zweites Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, drittes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, viertes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, fünftes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, sechstes Nukleosid 3' zu dem CpG- Dinukleotid und Kombinationen davon oder vier kontinuierliche Nukleoside an dem siebten bis zehnten Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, wobei das Oligonukleotid kein Antisense-Oligonukleotid ist, das komplementär zu Ha-ras oder dem gag- oder rev-Gen des humanen Immundefizienzvirus Typ 1 ist. In bestimmten bevorzugten Ausführungsformen ist das Oligonukleotid kein Antisense-Oligonukleotid.
  • In einem weiteren Aspekt stellt die Erfindung eine Zusammensetzung zur pharmazeutischen Verwendung bereit, umfassend ein erfindungsgemäßes CpG-enthaltendes Oligonukleotid.
  • KURZE BESCHREIBUNG DER ZEICHNUNGEN
  • 1 zeigt die Ergebnisse eines Proliferationsassays von Milzzellen der Maus in der Gegenwart von keinem Oligonukleotid (C), Lipopolysaccharid (LPS) oder verschiedenen Oligonukleotiden.
  • 2 zeigt die Vergrößerung der Milz in Mäusen, denen kein Oligonukleotid oder verschiedene Oligonukleotide verabreicht wurden.
  • 3 zeigt bevorzugte Ausführungsformen von modifizierten Basen.
  • DETAILLIERTE BESCHREIBUNG DER BEVORZUGTEN AUSFÜHRUNGSFORM
  • Die Erfindung betrifft die therapeutische Verwendung von Oligonukleotiden sowohl im Antisense-Verfahren als auch als immunstimulatorische Agenzien. Die hier zitierten Patentschriften und Publikationen geben den Wissensstand auf dem Gebiet wieder und sind hier unter Bezugnahme in ihrer Gesamtheit eingeschlossen. Im Falle eines Konfliktes zwischen einer Lehre einer beliebigen hier zitierten Referenz und der vorliegenden Beschreibung, soll die letztere für die Zwecke der Erfindung herangenommen werden.
  • Die Erfindung stellt Verfahren zum Modulieren der Immunantwort bereit, welche durch CpG-enthaltende Oligonukleotide verursacht wurde. Die Verfahren gemäß der Erfindung ermöglichen das Verstärken der immunstimulatorischen Wirkung für Antisense-Anwendungen als auch das Verstärken der immunstimulatorischen Wirkung für immuntherapeutische Anwendungen. Somit stellt die Erfindung weiter Oligonukleotide bereit, die optimale Spiegel einer immunstimulatorischen Wirkung für eine beliebige Anwendung aufweisen und Verfahren zur Verwendung solcher Oligonukleotide.
  • Der Erfinder hat überraschender Weise festgestellt, das eine positionsbedingte Modifikation von CpG-enthaltenden Oligonukleotiden dramatisch deren immunstimulatorischen Fähigkeiten beeinflusst. Insbesondere verstärkt eine 2'-Substitution, einschließlich und ohne Beschränkung einer Alkylierung oder Alkoxylierung von Oligonukleotiden, an bestimmten Positionen 5' oder 3' zu dem CpG-Dinukleotid deren immunstimulatorischen Wirkung.
  • In einem ersten Aspekt stellt die Erfindung ein Verfahren zum Verstärken der immunstimulatorischen Wirkung eines immunstimulatorischen Motivs (z.B. CpG)-enthaltenden Oligonukleotids bereit, wobei das Oligonukleotid kein Antisense-Oligonukleotid ist, das komplementär ist zu Ha-ras oder dem gag- oder rev-Gen des humanen Immundefizienzvirus Typ 1. Das Verfahren gemäß diesem Aspekt der vorliegenden Erfindung umfasst das Einführen eines 2'-substituierten Nukleosids in das Oligonukleotid an einer Position ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus zweites Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, drittes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, viertes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, fünftes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, sechstes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, erstes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, zweites Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, drittes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, viertes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, fünftes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, sechstes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid und Kombinationen davon oder vier kontinuierliche Nukleoside an dem siebten bis zehnten Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid. In bestimmten bevorzugten Ausführungsformen ist das Oligonukleotid kein Antisense-Oligonukleotid.
  • Das Verfahren gemäß diesem Aspekt der Erfindung kann ohne weiteres durch Verwendung einer beliebigen etablierten Synthesetechnik ausgeführt werden, indem einfach das geeignete 2' substituierte Monomersynthon in dem Zyklus des Syntheseverfahrens verwendet wird, der unmittelbar nach der Einführung des CpG-Dinukleotids folgt. Bevorzugte Monomere schließen Phosphoramidite, Phosphotriester und H-Phosphonate ein. Daher bedeutet im Sinne der Erfindung „Einführen eines 2'-substituierten Nukleosids in das Oligonukleotid an einer Position ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus zweites Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, drittes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, viertes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, fünftes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, sechstes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, erstes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, zweites Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, drittes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, viertes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, fünftes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, sechstes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid und Kombinationen davon oder vier kontinuierliche Nukleoside an dem siebten bis zehnten Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid" einfach das Synthetisieren eines Oligonukleotids mit einem 2-substituierten Nukleosid an einer solchen Position oder Positionen.
  • Im Sinne all dieser Aspekte der Erfindung bezeichnet ein „Antisense-Oligonukleotid" ein Oligonukleotid, das exakt komplementär ist zu einem Gen oder Gentranskript und das zur Reduktion der Expression des Gens oder Gentranskripts, zu dem es exakt komplementär ist, fähig ist.
  • In einem zweiten Aspekt stellt die Erfindung immunstimulatorisches Motiv (CpG)-enthaltende Oligonukleotide mit verstärkten immunstimulatorischen Wirkungen bereit, wobei ein Oligonukleotid ein 2'-substituiertes Nukleosid an einer Position umfasst, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus zweites Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, drittes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, viertes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, fünftes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, sechstes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, erstes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, zweites Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, drittes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, viertes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, fünftes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, sechstes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid und Kombinationen davon oder vier kontinuierliche Nukleoside an dem siebten bis zehnten Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, wobei das Oligonukleotid kein Antisense-Oligonukleotid ist, das komplementär ist zu Ha-ras oder dem gag- oder rev-Gen des humanen Immundefizienzvirus Typ 1. In bestimmten bevorzugten Ausführungsformen ist das Oligonukleotid kein Antisense-Oligonukleotid. Bevorzugte Oligonukleotide gemäß all den Aspekten der Erfindung haben eine Länge von ungefähr 6 bis ungefähr 50 Nukleotiden und können weiter modifizierte Internukleotidverknüpfungen oder modifizierte Zucker umfassen, um die Stabilität zu verbessern.
  • In einem weiteren Aspekt stellt die Erfindung eine Zusammensetzung zur pharmazeutischen Verwendung, umfassend ein erfindungsgemäßes CpG-enthaltendes Oligonukleotid zur Induktion einer Immunantwort in einem Säugetier bereit. Die Zusammensetzung umfasst ein immunstimulatorisches Motiv (z.B. CpG)-enthaltendes Oligonukleotid, umfassend ein 2'-substiuiertes Nukleosid an einer Position, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus zweites Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, drittes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, viertes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, fünftes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, sechstes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, erstes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, zweites Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, drittes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, viertes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, fünftes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, sechstes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid und Kombinationen davon oder vier kontinuierliche Nukleoside an dem siebten bis zehnten Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, wobei das Oligonukleotid kein Antisense-Oligonukleotid ist, das komplementär ist zu Ha-ras oder dem rev- oder gag -Gen des humanen Immundefizienzvirus Typ 1. In bestimmten bevorzugten Ausführungsformen dieses Aspekts der Erfindung ist das Oligonukleotid kein Antisense-Oligonukleotid.
  • In der Verwendung gemäß diesem Aspekt der Erfindung sollte die Verabreichung der Oligonukleotide bevorzugt parenteral, oral, sublingual, transdermal, topisch, internasal, intravitreal oder intrarektal erfolgen. Eine Verabreichung der therapeutischen Zusammensetzungen kann durch Anwendung bekannter Verfahren mit Dosierungen und Zeiträumen durchgeführt werden, die wirksam sind, um die Symptome oder Nebenerscheinungen der Erkrankung zu lindern. Bei einer systemischen Verabreichung wird die therapeutische Zusammensetzung vorzugsweise bei einer geeigneten Dosierung verabreicht, um einen Blutspiegel des Oligonukleotids von ungefähr 0,01 Mikromolar bis ungefähr 10 Mikromolar zu erreichen. Für eine lokalisierte Verabreichung können viel geringere Konzentrationen als diese wirksam sein und es können viel höhere Konzentrationen toleriert werden. Vorzugsweise wird die Gesamtdosierung des Oligonukleotids im Bereich von 0,01 mg Oligonukleotid pro Patient pro Tag bis ungefähr 200 mg Oligonukleotid pro kg Körpergewicht pro Tag betragen. Es kann wünschenswert sein, eine therapeutisch wirksame Menge einer oder mehrerer der erfindungsgemässen therapeutischen Zusammensetzungen gleichzeitig oder nacheinander an ein Individuum in Form einer Einzelbehandlung zu verabreichen. In einer bevorzugten Ausführungsform wird eine oder mehrere Messungen von den biologischen Wirkungen ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus IL-12-Induktion und Mytogenese von Immunzellen vorgenommen, nachdem die Stoffzusammensetzung verabreicht worden ist. Die Oligonukleotide können alleine oder in Kombination mit spezifischen Antigenen verabreicht werden, welche physikalisch an das Oligonukleotid verbunden sein können oder nicht. Eine solche Verabreichung kann gegebenenfalls die Verwendung von Adjuvanzien einschließen.
  • Die Zusammensetzung gemäß diesem Aspekt der Erfindung ist nützlich für Modelluntersuchungen des Immunsystems und ist desweiteren zur therapeutischen Behandlung einer humanen Erkrankung nützlich.
  • Für die Zwecke all dieser Aspekte der Erfindung umfasst der Ausdruck „Oligonukleotid" Polymere von zwei oder mehreren Desoxyribonukleotiden oder ein beliebiges modifiziertes Nukleosid, einschließlich 2'-Halo-Nukleoside, 2'-O-substituierte Nukleoside, Ribonukleoside, Deazanukleoside oder eine beliebige Kombination davon. Solche Monomere können aneinander durch eine beliebige der zahlreich bekannten Internukleosidverknüpfungen gekoppelt sein. In bestimmten bevorzugten Ausführungsformen können diese Internukleosidverknüpfungen nicht ionische, Boron-, Phosphodiester-, Phosphotriester-, Phosphorothioat- oder Phosphoramidat-Verknüpfungen 2'-5'-, 3'-5'-, 3'-3'-Verknüpfungen von einer der vorausgehenden Verknüpfungen oder Kombinationen davon sein. Der Ausdruck Oligonukleotid umfasst auch solche Polymere, die chemisch modifizierte Basen oder Zucker und/oder zusätzliche Substituenten aufweisen, einschließlich aber ohne Beschränkung lipophile Gruppen interkalierende Agenzien, Diamine und Adamantan.
  • Für die Zwecke der Erfindung bedeutet der Ausdruck „2'-O-substituiertes Mittel" die Substitution der 2'-Position des Pentoserestes mit einem Halogen (vorzugsweise Cl, Br, oder F) oder eine -O-niedere Alkylgruppe, die 1 bis 6 gesättigte oder ungesättigte Kohlenstoffatome enthält, oder mit einer O-Aryl- oder -Allylgruppe mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen, wobei eine solche Alkyl-, Aryl- oder Allylgruppe nicht substituiert oder substituiert sein kann, z.B. mit Halogen-, Hydroxy-, Trifluormethyl-, Cyan-, Nitro-, Acyl-, Acyloxy-, Alkoxy-, Carboxyl-, Carbaloxyl- oder Aminogruppen oder eine solche 2'-Substitution kann mit einer Hydroxygruppe (um ein RiboNukleosid zu erzeugen) einer Amino- oder einer Halogengruppe, nicht aber mit einer 2'-H-Gruppe durchgeführt werden. Solche Oligonukleotide schließen Oligonukleotide mit modifizierten Zuckern (z.B. Arabinose, Hexose) und andere Modifikationen des Gerüsts ein wie z.B. in Peptidnukleinsäure und geschlossene Nukleinsäure. Solche Oligonukleotide können auch natürlich vorkommende Basen oder modifizierte heterozyklische Ringe sein, einschließlich aber ohne Beschränkung von jenen, die in der 3 gezeigt sind. Für die Zwecke all dieser Aspekte der Erfindung bedeuten die Ausdrücke „CpG-" oder CpG-Dinukleotid" das Dinukleotid 5'-Cytidin-Guanidin-3', wobei p eine Internukleotidverknüpfung darstellt und wobei das Zuckergerüst der Dinukleotiddesoxyribose ein modifizierter Zucker oder Kombination davon darstellt. In bevorzugten Ausführungsformen der ersten drei Aspekte der Erfindung ist p ausgewählt aus beliebigen der oben genannten kovalenten Phosphodiester, Phosporothioat, Phosphordithioat stereospezifisches (Rp oder Sp) Phosphorothioat-Verknüpfungen. Die Nicht-Phosphodiester-, Nicht-Phosphorothioat-Ausführungsformen werden weiter die immunstimulatorischen Wirkungen reduzieren. In bestimmten Ausführungsformen der Aspekte der Erfindung ist p ausgewählt aus Phosphodiester, Phosphorothioat und Phosphordithioat.
  • Die vorliegenden Beispiele beabsichtigen bestimmte bevorzugte Ausführungsformen der Erfindung zu veranschaulichen und sollen nicht den Umfang der Erfindung beschränken.
  • BEISPIEL 1
  • MODULATION DER IMMUNSTIMULATORISCHEN WIRKUNG IN VITRO
  • Um die Bedeutung der Stelle der chemischen Modifikation von PS-Oligos, die ein CpG-Motiv enthalten, zu untersuchen, haben wir zwei Oligonukleotide ausgewählt. Oligo 1 das ein CpG-Motiv enthält und Oligo 2 das zwei CpG-Motive enthält. Beide Oligos wurden früher untersucht und es wurde gezeigt, dass sie immunstimulatorisch sind. Um die immunstimulatorische Aktivität der Oligonukleotide in der vorliegenden Studie zu bewerten, haben wir einen Proliferationsassay von Milz-Zellen der Maus verwendet.
  • TABELLE 1 OLIGODESOXYNUKLEOTID-PHOSPHOROTHIOATE UND STELLE DER MODIFIKATION:
    Figure 00110001
  • Milz-Lymphozyten der Maus wurden mit den Oligonukleotiden bei Konzentrationen von 0,1, l und 10 μg/ml kultiviert. Oligo 1 induzierte eine dosisabhängige Wirkung auf die Zellproliferation. Bei 0,1 μg/ml betrug der Proliferationsindex 2,87 (1). Eine Substitution von 5'-flankierenden GA-Desoxynukleosiden des CpG-Motivs von Oligo 1 mit 2'-OMe, (Oligo 2) ergab eine vollständige Suppression der Zellproliferation bei allen verwendeten Konzentrationen (1). Bei 0,1 μg/ml war der Proliferationsindex ähnlich dem für das Medium alleine. Eine Substitution der 3'-flankierenden TT-Desoxynukleosiden des CpG-Motivs von Oligo 1 mit 2'-OMe (Oligo 6) zeigte keine derartige Auswirkung auf die Zellproliferation. Der Proliferationsindex mit Oligo 6 betrug 2,07 (1). Um weiter zu verstehen, ob eine Substitution von zwei Desoxyribonukleosiden in der 5'-flankierenden Region mit 2'-OMe in Entfernung zum CpG-Motiv eine Auswirkung auf die induzierte Zellproliferation haben könnte, haben wir Oligos 3, 4 und 5 synthetisiert (Tabelle 1). Zwei Desoxynukleoside wurden mit 2'-OMe substituiert, wobei ein, zwei bzw. drei Desoxyribonukleoside zwischen der Substitutionsstelle und dem CpG-Motiv gelassen wurden. Der Proliferationsindex von Oligo 3, 4 und 5 betrug 3,42, 8,44, bzw. 10,38, was einen Anstieg von 29,297 bzw. 400% im Vergleich zu Oligo 1 entspricht (1). Eine Substitution der verbleibenden Desoxynukleoside weiter zum 5'-Ende als in Oligo 5, zeigte keinen weiteren Anstieg beim Proliferationsindex (Daten nicht gezeigt).
  • Ähnliche Substitutionen wurden in Oligo 1 in der 3'-flankierenden Region zum CpG-Motiv durchgeführt. Oligo 7, 8, 9, 10 und 11 wurden synthetisiert, in denen zwei Desoxynukleoside mit 2-OMe substituiert wurden, wobei eins, zwei, drei, vier bzw. fünf Desoxynukleoside zwischen dem CpG-Motiv und der 2-OMe Substitution gelassen wurden. Der Proliferationsindex von Oligo 7, 8 , 9, 10 und 11 betrug 3,63, 7,22, 7,01, 8,85 bzw. 9,24. Im Vergleich zu Oligo 1 hatte die Zunahme beim Proliferationsindex für Oligo 7, 8, 9, 10 und 11 einen Wert von 39, 231, 221, 317 bzw. 338%.
  • Aus diesen Ergebnissen geht hervor, dass eine Substitution von zwei Desoxynukleotiden entweder am 5'-Ende oder am 3'-Ende des CpG-Motivs (z.B. Oligo 5 oder 9) die immunstimulatorische Aktivität erhöht. Ist es möglich, dass eine Substitution, die in Oligo 5 oder 9 gemacht wurde, weitere Wirkungen bezüglich einer Zunahme der immunstimulatorischen Aktivität hat? Wir synthetisierten Oligo 12, das zwei Desoxynukleoside hatte welche mit 2-OMe sowohl am 3'-Ende als auch am 5'-Ende substituiert waren. Oligo 12 zeigte keinen weiteren Anstieg beim Proliferationsindex im Vergleich zu Oligo 5, jedoch hatte es einen höheren Proliferationsindex im Vergleich zu Oligo 9.
  • Um festzustellen, ob die oben genannten Beobachtungen, die bei der Verwendung von Oligos 3 bis 5 und Oligos 7 bis 11 gewonnen wurden, sequenzspezifisch oder allgemein gültig sind, haben wir dieselben Modifikationen an Oligo 15 durchgeführ, welches zwei CpG-Motive enthält.
  • Oligo 15 hatte einen Proliferationsindex von 5,83 bei einer Konzentration von 0,1 g/ml. Eine Substitution von zwei Desoxynukleosiden an den 5'-Enden der einzelnen CpG-Motive lässt zwei Desoxynukleoside zwischen dem CpG-Motiv und der Substitution mit 2'-OMe, wobei Oligo 16 und 17 einen Proliferationsindex von 7,34 bzw. 7,13 aufwiesen, was einem Anstieg von 20% im Vergleich zu Oligo 15 entspricht. Eine Substitution von zwei Desoxynukleosiden in der 5'-flankierenden Region von beiden CpG-Motiven (Oligo 18) ergab einen höheren Proliferationsindex von 10,62, was einem Anstieg von ungefähr 50% im Vergleich zu Oligo 15 entspricht.
  • BEISPIEL 2
  • WIRKUNG DER NUKLEASESTABILITÄT AUF DIE IMMUNSTIMULATORISCHE AKTIVITÄT
  • Neben einer stellenspezifischen Substitution fragten wir auch, ob eine erhöhte metabolische Stabilität eines CpG-Motiv-enthaltenden PS-Oligos eine erhöhte Zellproliferation bewirkt und ob diese mit 5'-Substitutionen kombiniert werden kann, um die Aktivität der Zellproliferation weiter zu erhöhen. Oligo 13 wurde synthetisiert, beidem vier kontinuierliche Desoxyribonukleoside an dem 3'-Ende von Oligo 1 mit 2'-OMe substituiert wurde, was einen signifikanten Anstieg an Stabilität gegenüber Nukleasen bewirkt. Oligo 13 hatte einen Proliferationsindex von 11,92, was einem Anstieg von 480% im Vergleich zu Oligo 1 entspricht (1). Eine weitere Modifikation von Oligo 13 durch Substitution von zwei Desoxynukleosiden an dem 5'-Ende (Oligo 14), ergab keinen weiteren Anstieg beim Proliferationsindex.
  • Nach der Feststellung dass die oben genannten Substitutionen in den PS-Oligos, deren immunstimulatorische Aktivität auf der Basis eines Zellkulturassays modulieren, verabreichten wir die in Tabelle 1 aufgeführten Oligonukleotide intraperitoneal an Mäusen und haben die Milzgewichte gemessen, um nachzuweisen, ob die Substitutionen dieselbe Wirkung in vivo besitzen. Eine Verabreichung von Oligo 1 verursachte einen ungefähr 50%igen Anstieg bei dem Milzgewicht (2). Oligo 2, das keine immunstimulatorische Aktivität in dem Zellkulturassay zeigte, zeigte keinen Anstieg bei den Milzgewichten (2). Eine Substitution von zwei Desoxynukleotiden entfernt zum CpG-Motiv in Richtung 5'-Ende, zeigte bei Oligo 3, 4 und 5 einen progressiven Zuwachs bei den Milzgewichten, welche 67, 95 bzw. 157%, im Vergleich zu den Mäusen die mit Oligo 1 behandelt worden waren (2) betrugen, was einen Anstieg in deren immunstimulatorischen Aktivität bestätigt. Substitutionen von zwei Desoxynukleosiden mit 2'-OMe zum 3'-Ende des CpG-Motivs wies im Allgemeinen einen weniger signifikanten Anstieg beim Milzgewicht auf. Lediglich Oligo 6 und 11 verursachten einen Anstieg beim Milzgewicht um 97 und 95% im Vergleich zu Oligo 1. Oligo 12, welches Substitutionen, die sowohl an dem 3'- Ende als auch an dem 5'-Ende gemacht wurden, zeigte einen Anstieg beim Milzgewicht um 95% im Vergleich zu Oligo 1 (2).
  • Oligos 15, 16, 17 und 18, die alle jeweils zwei CpG-Motive enthalten, zeigten einen Anstieg beim Milzgewicht nach Verabreichung einer Dosis mit 5 mg/kg. Oligo 15 verursachte eine Zunahme beim Milzgewicht um 175% im Vergleich zu unbehandelten Mäusen. Oligo 16, bei dem zwei der CpG-Motive des 5'-Endes mit 2-OMe substituiert waren, verursachte eine Zunahme beim Milzgewicht um 93% im Vergleich zu Oligo 15 (2). Oligo 17, welches zwei Substitutionen am 5'-Ende von einem CpG hat (aber am 3'-Ende des anderen CpG-Motivs), zeigte keine weitere Zunahme beim Milzgewicht. Eine Substitution am 5'-Ende beider CpG-Motive ergab keine weitere Zunahme beim Milzgewicht im Vergleich zu Oligo 16, jedoch hatten sie lediglich eine Zunahme von ungefähr 60% gegenüber dem Oligo 15 (2).
  • Oligo 13, das metabolisch stabil ist im Vergleich zu Oligo 1, zeigte eine Zunahme beim Milzgewicht um 114% im Vergleich zu Oligo 1 und stimmte mit den Zellproliferationsdaten überein. Ähnliche Ergebnisse wurden mit Oligo 14 gewonnen, welches eine erhöhte metabolische Stabilität aufwies und an dem 5'-Ende des CpG-Motivs substituiert war (2).

Claims (4)

  1. CpG enthaltendes Oligonukleotid mit verstärkten immunstimulatorischen Wirkungen, wobei das Oligonukleotid ein 2'-substituiertes Nukleosid an einer Position umfasst, die ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus zweites Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, 3tes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, 4tes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, 5tes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, 6tes Nukleosid 5' zu dem CpG-Dinukleotid, 1tes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, 2tes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, 3tes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, 4tes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid, 5tes Nukleosid 3' zu der CpG-Dinukleotid, 6tes Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid und Kombinationen davon, oder vier kontinulierliche Nukleoside an dem 7tem bis 10tem Nukleosid 3' zu dem CpG-Dinukleotid.
  2. Oligonukleotid nach Anspruch 1, wobei das Oligonukleotid eine Länge von ungefähr 6 bis ungefähr 50 Nukleotiden hat.
  3. Oligonukleotid nach Anspruch 1, wobei das Oligonukleotid weiter modifizierte Internukleotid-Verknüpfungen, modifizierte Basen oder modifizierte Zucker umfasst.
  4. Zusammensetzung zur pharmazeutischen Verwendung, umfassend ein CpG enthaltendes Oligonukleotid nach einem der Ansprüche 1–3.
DE60017259T 1999-08-13 2000-08-14 Modulation der CPG-Oligonukleotid-vermittelten Immunstimulation durch Positionsbedingte Modifikation von Nukleosiden Expired - Lifetime DE60017259T2 (de)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US14879899P 1999-08-13 1999-08-13
US148798P 1999-08-13
PCT/US2000/022284 WO2001012804A2 (en) 1999-08-13 2000-08-14 MODULATION OF OLIGONUCLEOTIDE CpG-MEDIATED IMMUNE STIMULATION BY POSITIONAL MODIFICATION OF NUCLEOSIDES

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE60017259D1 DE60017259D1 (de) 2005-02-10
DE60017259T2 true DE60017259T2 (de) 2005-12-08

Family

ID=22527436

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE60017259T Expired - Lifetime DE60017259T2 (de) 1999-08-13 2000-08-14 Modulation der CPG-Oligonukleotid-vermittelten Immunstimulation durch Positionsbedingte Modifikation von Nukleosiden

Country Status (13)

Country Link
US (1) US6476000B1 (de)
EP (2) EP1200580B1 (de)
JP (2) JP5268214B2 (de)
KR (1) KR100651294B1 (de)
AT (1) ATE286534T1 (de)
AU (2) AU783745B2 (de)
CA (2) CA2381993A1 (de)
DE (1) DE60017259T2 (de)
DK (1) DK1200580T3 (de)
ES (1) ES2233426T3 (de)
MX (1) MXPA02001610A (de)
PT (1) PT1200580E (de)
WO (1) WO2001012804A2 (de)

Families Citing this family (115)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6207646B1 (en) 1994-07-15 2001-03-27 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
US20030026782A1 (en) 1995-02-07 2003-02-06 Arthur M. Krieg Immunomodulatory oligonucleotides
US6239116B1 (en) 1994-07-15 2001-05-29 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
US20030022854A1 (en) 1998-06-25 2003-01-30 Dow Steven W. Vaccines using nucleic acid-lipid complexes
US6558951B1 (en) * 1999-02-11 2003-05-06 3M Innovative Properties Company Maturation of dendritic cells with immune response modifying compounds
US6977245B2 (en) 1999-04-12 2005-12-20 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Oligodeoxynucleotide and its use to induce an immune response
US6949520B1 (en) 1999-09-27 2005-09-27 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Methods related to immunostimulatory nucleic acid-induced interferon
DE60131430T2 (de) 2000-01-14 2008-10-16 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Oligodeoxynukleotide und ihre verwendung zur induktion einer immunreaktion
EP1278761B1 (de) 2000-05-01 2005-04-06 Hybridon, Inc. Modulation von oligonukleotid cpg-vermittelter immunstimulation durch modifikation der nucleoside
CA2598144A1 (en) * 2000-12-08 2006-08-31 3M Innovative Properties Company Compositions and methods for targeted delivery of immune response modifiers
US7105495B2 (en) 2001-04-30 2006-09-12 Idera Pharmaceuticals, Inc. Modulation of oligonucleotide CpG-mediated immune stimulation by positional modification of nucleosides
US7176296B2 (en) 2001-04-30 2007-02-13 Idera Pharmaceuticals, Inc. Modulation of oligonucleotide CpG-mediated immune stimulation by positional modification of nucleosides
KR100985457B1 (ko) * 2001-06-21 2010-10-06 다이나박스 테크놀로지 코퍼레이션 키메라 면역조절 화합물 및 그것들의 사용 방법
US7785610B2 (en) * 2001-06-21 2010-08-31 Dynavax Technologies Corporation Chimeric immunomodulatory compounds and methods of using the same—III
JP4607452B2 (ja) * 2001-08-07 2011-01-05 ダイナバックス テクノロジーズ コーポレイション 免疫調節性組成物、製剤およびその使用方法
AU2002361468A1 (en) 2001-08-14 2003-03-18 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of Health And Human S Method for rapid generation of mature dendritic cells
US7276489B2 (en) 2002-10-24 2007-10-02 Idera Pharmaceuticals, Inc. Modulation of immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds by optimal presentation of 5′ ends
EP1719511B1 (de) * 2001-11-16 2008-12-10 3M Innovative Properties Company N-[4-(4-Amino-2-ethyl-1H-imidazo[4,5-c]chinolin-1-yl)butyl]methanesulfonamide, diese enthaltende pharmazeutische Zusammensetzung und deren Verwendung
AU2002366710A1 (en) 2001-12-20 2003-07-09 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of USE OF CpG OLIGODEOXYNUCLEOTIDES TO INDUCE ANGIOGENESIS
CA2365732A1 (en) * 2001-12-20 2003-06-20 Ibm Canada Limited-Ibm Canada Limitee Testing measurements
CA2474709A1 (en) 2002-02-04 2003-08-14 Biomira, Inc. Immunostimulatory, covalently lipidated oligonucleotides
BR0307788A (pt) * 2002-02-22 2006-04-04 3M Innovative Properties Co método de redução e tratamento de imunossupressão induzida por uv-b
CA2388049A1 (en) 2002-05-30 2003-11-30 Immunotech S.A. Immunostimulatory oligonucleotides and uses thereof
ES2355819T3 (es) 2002-08-15 2011-03-31 3M Innovative Properties Company Composiciones inmunoestimuladoras y métodos para estimular una respuesta inmune.
AR040996A1 (es) 2002-08-19 2005-04-27 Coley Pharm Group Inc Acidos nucleicos inmunoestimuladores
AU2003287324A1 (en) * 2002-12-11 2004-06-30 3M Innovative Properties Company Gene expression systems and recombinant cell lines
AU2003287316A1 (en) * 2002-12-11 2004-06-30 3M Innovative Properties Company Assays relating to toll-like receptor activity
CA2502015A1 (en) * 2002-12-11 2004-06-24 Coley Pharmaceutical Group, Inc. 5' cpg nucleic acids and methods of use
EP1575977B1 (de) 2002-12-23 2009-09-09 Dynavax Technologies Corporation Oligonukleotide mit einer immunsystemstimulierenden sequenz und verfahren zu deren anwendung
US8158768B2 (en) 2002-12-23 2012-04-17 Dynavax Technologies Corporation Immunostimulatory sequence oligonucleotides and methods of using the same
WO2004060319A2 (en) 2002-12-30 2004-07-22 3M Innovative Properties Company Immunostimulatory combinations
CA2512484A1 (en) 2003-01-16 2004-05-08 Hybridon, Inc. Modulation of immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds by utilizing modified immunostimulatory dinucleotides
US7354907B2 (en) 2003-02-07 2008-04-08 Idera Pharmaceuticals, Inc. Short immunomodulatory oligonucleotides
EP1592302A4 (de) * 2003-02-13 2007-04-25 3M Innovative Properties Co Verfahren und zusammensetzungen, die mit irm-verbindungen und dem toll-like rezeptor 8 in zusammenhang stehen
WO2004074454A2 (en) 2003-02-20 2004-09-02 University Of Connecticut Health Center Methods and compositions for the treatment of cancer and infectious disease using alpha (2) macroglobulin-antigenic molecule complexes
US7485432B2 (en) * 2003-02-27 2009-02-03 3M Innovative Properties Company Selective modulation of TLR-mediated biological activity
KR100681470B1 (ko) * 2003-03-03 2007-02-12 연세대학교 산학협력단 면역반응 증진용 올리고뉴크레오타이드
WO2004078138A2 (en) 2003-03-04 2004-09-16 3M Innovative Properties Company Prophylactic treatment of uv-induced epidermal neoplasia
WO2004080292A2 (en) 2003-03-13 2004-09-23 3M Innovative Properties Company Method of tattoo removal
NZ567227A (en) * 2003-03-13 2010-01-29 3M Innovative Properties Co Methods of improving skin quality through topical application of an immune response modifier such as imiquimod
US20040192585A1 (en) 2003-03-25 2004-09-30 3M Innovative Properties Company Treatment for basal cell carcinoma
US20040265351A1 (en) * 2003-04-10 2004-12-30 Miller Richard L. Methods and compositions for enhancing immune response
US20040202720A1 (en) * 2003-04-10 2004-10-14 3M Innovative Properties Company Delivery of immune response modifier compounds using metal-containing particulate support materials
AU2004241093B2 (en) 2003-05-16 2009-08-27 Idera Pharmaceuticals, Inc. Synergistic treatment of cancer using immunomers in conjunction with chemotherapeutic agents
AU2004259204B2 (en) * 2003-07-15 2010-08-19 Idera Pharmaceuticals, Inc. Synergistic stimulation of the immune system using immunostimulatory oligonucleotides and/or immunomer compounds in conjunction with cytokines and/or chemotherapeutic agents or radiation therapy
WO2005012488A2 (en) * 2003-07-31 2005-02-10 3M Innovative Properties Company Compositions for encapsulation and controlled release
JP2007501252A (ja) * 2003-08-05 2007-01-25 スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー 免疫応答調整剤を含有する製剤
US7648997B2 (en) 2003-08-12 2010-01-19 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Hydroxylamine substituted imidazoquinolines
AU2004266162A1 (en) * 2003-08-25 2005-03-03 3M Innovative Properties Company Immunostimulatory combinations and treatments
AU2004268616B2 (en) 2003-08-25 2010-10-07 3M Innovative Properties Company Delivery of immune response modifier compounds
JP5128815B2 (ja) 2003-08-27 2013-01-23 スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー アリールオキシ置換およびアリールアルキレンオキシ置換イミダゾキノリン
AU2004268665A1 (en) * 2003-09-02 2005-03-10 3M Innovative Properties Company Methods related to the treatment of mucosal associated conditions
CA2537763A1 (en) 2003-09-05 2005-03-17 3M Innovative Properties Company Treatment for cd5+ b cell lymphoma
JP4989225B2 (ja) 2003-09-25 2012-08-01 コーリー ファーマシューティカル グループ，インコーポレイテッド 核酸親油性接合体
CA2540541C (en) 2003-10-03 2012-03-27 3M Innovative Properties Company Alkoxy substituted imidazoquinolines
US7544697B2 (en) 2003-10-03 2009-06-09 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Pyrazolopyridines and analogs thereof
NZ546275A (en) 2003-10-30 2009-05-31 Coley Pharm Gmbh C-class oligonucleotides analogs with enhanced immunostimulatory potency
EP1680080A4 (de) * 2003-10-31 2007-10-31 3M Innovative Properties Co Neutrophilen-aktivierung durch verbindungen zur modifizierung der immunantwort
WO2005048933A2 (en) 2003-11-14 2005-06-02 3M Innovative Properties Company Oxime substituted imidazo ring compounds
CN1906192A (zh) 2003-11-14 2007-01-31 3M创新有限公司 羟胺取代的咪唑环化合物
US8691837B2 (en) 2003-11-25 2014-04-08 3M Innovative Properties Company Substituted imidazo ring systems and methods
US8940755B2 (en) * 2003-12-02 2015-01-27 3M Innovative Properties Company Therapeutic combinations and methods including IRM compounds
US20050226878A1 (en) * 2003-12-02 2005-10-13 3M Innovative Properties Company Therapeutic combinations and methods including IRM compounds
WO2005060377A2 (en) 2003-12-08 2005-07-07 Hybridon, Inc. Modulation of immunostimulatory properties by small oligonucleotide-based compounds
JP2007517035A (ja) 2003-12-29 2007-06-28 スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー アリールアルケニルおよびアリールアルキニル置換されたイミダゾキノリン
JP2007517055A (ja) * 2003-12-30 2007-06-28 スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー 免疫応答の増強
AU2004312508A1 (en) 2003-12-30 2005-07-21 3M Innovative Properties Company Imidazoquinolinyl, imidazopyridinyl, and imidazonaphthyridinyl sulfonamides
AU2005228150A1 (en) 2004-03-24 2005-10-13 3M Innovative Properties Company Amide substituted imidazopyridines, imidazoquinolines, and imidazonaphthyridines
CN101426524A (zh) * 2004-04-28 2009-05-06 3M创新有限公司 用于粘膜接种疫苗的组合物和方法
US20050267145A1 (en) * 2004-05-28 2005-12-01 Merrill Bryon A Treatment for lung cancer
AU2005294805B2 (en) 2004-05-28 2012-02-16 Oryxe A mixture for transdermal delivery of low and high molecular weight compounds
AU2005326144A1 (en) * 2004-06-08 2006-08-03 Coley Pharmaceutical Gmbh Abasic oligonucleotide as carrier platform for antigen and immunostimulatory agonist and antagonist
US8017779B2 (en) 2004-06-15 2011-09-13 3M Innovative Properties Company Nitrogen containing heterocyclyl substituted imidazoquinolines and imidazonaphthyridines
US7915281B2 (en) 2004-06-18 2011-03-29 3M Innovative Properties Company Isoxazole, dihydroisoxazole, and oxadiazole substituted imidazo ring compounds and method
US8026366B2 (en) 2004-06-18 2011-09-27 3M Innovative Properties Company Aryloxy and arylalkyleneoxy substituted thiazoloquinolines and thiazolonaphthyridines
WO2006038923A2 (en) 2004-06-18 2006-04-13 3M Innovative Properties Company Aryl substituted imidazonaphthyridines
EP1786450A4 (de) * 2004-08-27 2009-11-11 3M Innovative Properties Co Hiv-immunstimulatorische zusammensetzungen
EP1804583A4 (de) * 2004-10-08 2009-05-20 3M Innovative Properties Co Adjuvans für dna-impfstoffe
WO2006074003A2 (en) 2004-12-30 2006-07-13 3M Innovative Properties Company CHIRAL FUSED [1,2]IMIDAZO[4,5-c] RING COMPOUNDS
JP2008526765A (ja) 2004-12-30 2008-07-24 スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー 皮膚転移の処置
WO2006083440A2 (en) 2004-12-30 2006-08-10 3M Innovative Properties Company Substituted chiral fused [1,2]imidazo[4,5-c] ring compounds
CA2597092A1 (en) 2005-02-04 2006-08-10 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Aqueous gel formulations containing immune reponse modifiers
AU2006213746A1 (en) 2005-02-11 2006-08-17 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Oxime and hydroxylamine substituted imidazo(4,5-c) ring compounds and methods
EP1869043A2 (de) 2005-04-01 2007-12-26 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Pyrazolopyridin-1,4-diamine und analoge davon
WO2006107851A1 (en) 2005-04-01 2006-10-12 Coley Pharmaceutical Group, Inc. 1-substituted pyrazolo (3,4-c) ring compounds as modulators of cytokine biosynthesis for the treatment of viral infections and neoplastic diseases
ES2542989T3 (es) * 2005-10-12 2015-08-13 Idera Pharmaceuticals, Inc. Compuestos oligonucleótidos inmuno reguladores (IRO) para modular la respuesta inmune basada en receptor semejante a Toll
EP2371956A3 (de) 2005-11-07 2012-01-04 Idera Pharmaceuticals Immunostimulatorische Eigenschaften von Oligonukleotid-basierten Verbindungen mit modifizierten immunostimulatorischen Dinukleotiden
US7776834B2 (en) * 2005-11-07 2010-08-17 Idera Pharmaceuticals, Inc. Immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds comprising modified immunostimulatory dinucleotides
US7470674B2 (en) 2005-11-07 2008-12-30 Idera Pharmaceuticals, Inc. Immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds comprising modified immunostimulatory dinucleotides
EP3085373A1 (de) 2006-02-22 2016-10-26 3M Innovative Properties Company Konjugate zur modifizierung von immunreaktionen
WO2008008432A2 (en) 2006-07-12 2008-01-17 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Substituted chiral fused( 1,2) imidazo (4,5-c) ring compounds and methods
CN101517082B (zh) 2006-09-27 2014-01-22 科勒制药有限责任公司 具有增强的免疫刺激活性的含疏水性T类似物的CpG寡聚核苷酸类似物
US20080149123A1 (en) 2006-12-22 2008-06-26 Mckay William D Particulate material dispensing hairbrush with combination bristles
WO2009023819A2 (en) * 2007-08-15 2009-02-19 Idera Pharmaceuticals, Inc. Toll like receptor modulators
CA2738816A1 (en) * 2008-10-06 2010-04-15 Idera Pharmaceuticals, Inc. Use of inhibitors of toll-like receptors in the prevention and treatment of hypercholesterolemia and hyperlipidemia and diseases related thereto
EP2451974A2 (de) * 2009-07-08 2012-05-16 Idera Pharmaceuticals, Inc. Oligonukleotidbasierte verbindungen als toll-like-rezeptorhemmer
US20110033515A1 (en) * 2009-08-04 2011-02-10 Rst Implanted Cell Technology Tissue contacting material
MX340363B (es) 2010-11-19 2016-07-06 Idera Pharmaceuticals Inc Compuestos de oligonucleotidos inmuno-reguladores (iro) que modulan la respuesta inmune basada en receptores tipo toll.
CA2838023C (en) 2011-06-03 2019-08-13 3M Innovative Properties Company Hydrazino 1h-imidazoquinolin-4-amines and conjugates made therefrom
CN103582496B (zh) 2011-06-03 2016-05-11 3M创新有限公司 具有聚乙二醇链段的异双官能连接基以及由其制成的免疫应答调节剂缀合物
US20130023736A1 (en) 2011-07-21 2013-01-24 Stanley Dale Harpstead Systems for drug delivery and monitoring
EP3632458B1 (de) 2013-07-26 2025-03-19 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Verbindungen und pharmazeutische zusammensetzungen zur behandlung von bakterieninfektionen
WO2016180852A1 (en) 2015-05-12 2016-11-17 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for preparing antigen-specific t cells from an umbilical cord blood sample
CN108024914A (zh) 2015-09-17 2018-05-11 Jrx生物技术有限公司 改善皮肤的水合作用或润湿作用的方法
US10940201B2 (en) 2015-09-30 2021-03-09 Shionogi & Co., Ltd. Nucleic acid derivative having immunostimulatory activity
WO2017057540A1 (ja) * 2015-09-30 2017-04-06 塩野義製薬株式会社 免疫賦活活性を有する核酸誘導体
WO2017059280A1 (en) 2015-10-02 2017-04-06 The University Of North Carolina At Chapel Hill Novel pan-tam inhibitors and mer/axl dual inhibitors
AU2017325981A1 (en) 2016-09-15 2019-04-11 Idera Pharmaceuticals, Inc. Immune modulation with TLR9 agonists for cancer treatment
IL268983B2 (en) * 2017-03-29 2024-07-01 Shionogi & Co Nucleic acid derivative having immunostimulatory activity
BR112020016859A2 (pt) 2018-02-28 2020-12-29 Pfizer Inc. Variantes de il-15 e usos da mesma
JP7057843B2 (ja) 2018-05-23 2022-04-20 ファイザー・インク ＧＵＣＹ２ｃに特異的な抗体及びその使用
US11434292B2 (en) 2018-05-23 2022-09-06 Pfizer Inc. Antibodies specific for CD3 and uses thereof
WO2020128893A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Pfizer Inc. Combination treatments of cancer comprising a tlr agonist
PH12022551298A1 (en) 2019-12-17 2023-11-20 Pfizer Antibodies specific for cd47, pd-l1, and uses thereof
KR20230022246A (ko) 2020-07-17 2023-02-14 화이자 인코포레이티드 치료 항체 및 그의 용도

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5149798A (en) 1989-04-06 1992-09-22 Worcester Foundation For Experimental Biology Process for synthesizing oligonucleotides and their analogs adaptable to large scale syntheses
US6153595A (en) * 1990-08-16 2000-11-28 Isis Pharmaceuticals Inc. Composition and method for treatment of CMV infections
EP0644889A4 (de) * 1991-12-24 1996-01-10 Isis Pharmaceuticals Inc ZUSAMMENSETZUNGEN UND VERFAHREN ZUR MODULATION VON-g(b)-AMYLOID.
US6235723B1 (en) * 1992-03-16 2001-05-22 Isis Pharmaceuticals , Inc. Antisense oligonucleotide modulation of human protein kinase C-δ expression
US6207646B1 (en) * 1994-07-15 2001-03-27 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
US5591721A (en) * 1994-10-25 1997-01-07 Hybridon, Inc. Method of down-regulating gene expression
US5968909A (en) 1995-08-04 1999-10-19 Hybridon, Inc. Method of modulating gene expression with reduced immunostimulatory response
US5652356A (en) * 1995-08-17 1997-07-29 Hybridon, Inc. Inverted chimeric and hybrid oligonucleotides
US5856462A (en) * 1996-09-10 1999-01-05 Hybridon Incorporated Oligonucleotides having modified CpG dinucleosides
US5886165A (en) * 1996-09-24 1999-03-23 Hybridon, Inc. Mixed backbone antisense oligonucleotides containing 2'-5'-ribonucleotide- and 3'-5'-deoxyribonucleotides segments
ES2255732T3 (es) * 1997-08-19 2006-07-01 Idera Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotidos especificos de vih y procedimientos para su utilizacion.
US6228642B1 (en) * 1998-10-05 2001-05-08 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense oligonucleotide modulation of tumor necrosis factor-(α) (TNF-α) expression

Also Published As

Publication number Publication date
EP2314693A2 (de) 2011-04-27
EP1200580B1 (de) 2005-01-05
ES2233426T3 (es) 2005-06-16
US6476000B1 (en) 2002-11-05
JP2011019527A (ja) 2011-02-03
WO2001012804A3 (en) 2001-09-07
WO2001012804A2 (en) 2001-02-22
EP2314693A3 (de) 2012-11-28
KR20020059586A (ko) 2002-07-13
ATE286534T1 (de) 2005-01-15
EP1200580A2 (de) 2002-05-02
AU6772000A (en) 2001-03-13
CA2784789A1 (en) 2001-02-22
PT1200580E (pt) 2005-03-31
AU2005242217A1 (en) 2006-01-12
AU783745B2 (en) 2005-12-01
DK1200580T3 (da) 2005-04-11
CA2381993A1 (en) 2001-02-22
DE60017259D1 (de) 2005-02-10
JP5268214B2 (ja) 2013-08-21
KR100651294B1 (ko) 2006-11-28
JP2003526628A (ja) 2003-09-09
MXPA02001610A (es) 2003-07-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE60017259T2 (de) Modulation der CPG-Oligonukleotid-vermittelten Immunstimulation durch Positionsbedingte Modifikation von Nukleosiden
DE60132170T2 (de) MODULIERUNG DER DURCH CpG-OLIGONUKLEOTIDE VERURSACHTEN IMMUNSTIMULIERUNG DURCH POSITIONSBEDINGTE VERÄNDERUNG VON NUKLEOSIDEN
DE60109916T2 (de) MODULATION EINER OLIGONUKLEOTID- CpG-VERMITTELTEN IMMUNSTIMULATION DURCH POSITIONELLE MODIFIKATION VON NUKLEOSIDEN
DE60132471T2 (de) Modulation der immunostimulatorischen aktivität von immunostimulierenden oligonukleotidanaloga durch positionelle chemische veränderungen
DE69929444T2 (de) Cpg-zusammensetzungen, saponin-adjuvantien und verfahren zu deren verwendung
DE69736331T2 (de) Immunstimulierende nukleinsaeuremolekuele
DE69233117T2 (de) In sich geschlossende "sens-" und "antisense"-oligonukleotide und deren verwendungen
EP2216027B1 (de) Immunstimulation durch chemisch modifizierte rna
EP0726274B1 (de) G-Cap stabilisierte Oligonucleotide
EP0653439B1 (de) Stabilisierte Oligonucleotide und deren Verwendung
DE60131430T2 (de) Oligodeoxynukleotide und ihre verwendung zur induktion einer immunreaktion
EP1349927B1 (de) Verfahren zur hemmung der expression eines zielgens und medikament zur therapie einer tumorerkrankung
DE19935756A1 (de) Kovalent geschlossenes Nukleinsäuremolekül zur Immunstimulation
EP0666317B1 (de) Antisense-Oligonucleotide gegen HSV-1 sowie deren Herstellung
DE69501081T2 (de) Oligonukleotide mit anti-cytomegalovirus wirkung
EP1030914A2 (de) Antisense oligonukleotide gegen tenascin zur behandlung von vitiligo
WO2003008595A2 (de) Neue oligoribonucleotid-derivate zur gezielten hemmung der genexpression
DE60030754T2 (de) Potenzierung der wirksamkeit von sn-38-prodrogen

Legal Events

Date Code Title Description
8364 No opposition during term of opposition